EPIS® Právní systém | Plné znění

Právní předpis byl sestaven k datu 22.06.2001.

Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Vyhláška

§1 §2 §3

Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod

B.1. Akutní toxicita orální (per os)

B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky

B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity

B.2. Akutní toxicita (inhalační)

B.3. Akutní toxicita (dermální)

B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)

B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)

B.6. Senzibilizace kůže

B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)

B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)

B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)

B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro

B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo

B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech

B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií

B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae

B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae

B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro

B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro

B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro

B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster

B.21. Test transformace savčích buněk in vitro

B.22. Dominantní letální test u hlodavců

B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích

B.24. Spot test u myší

B.25. Přenosné translokace u myší

B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)

B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)

B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)

B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)

B.30. Testování chronické toxicity

B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci

B.32. Test karcinogenity

B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity

B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test

B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test

B.36. Toxikokinetika

B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice

B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice

B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo

B.40. Leptavé účinky na kůži

B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro

INFORMACE

XXXXXXXX

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx

xx xxx 16. xxxxx 1998,

xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx podle §4 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx x. 157/1998 Sb., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx:

§1

Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx metody xxx zjišťování xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, karcinogenních, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx reprodukci (xxxx xxx "toxicita chemických xxxxx x xxxxxxxxx").¹⁾

§2

(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx uvedenými x příloze xxxx xxxxxxxx.

(2) Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx x přípravků xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxx citlivé, xxxxxx x reprodukovatelné xxxx xxxxxx xxxxxxx x odstavci 1, xxxxxxxxxx xxxx metody xxx xxxxxxx pokusných xxxxxx²⁾ x xxxxxx xxxxxxxxxx Organizací xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx (XXXX).³⁾

§3

Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx 1. ledna 1999.

Xxxxxxx:

XXXx. David, XXx. x. x.

Xxxxxxx x xxxxxxxx č. 251/1998 Xx.

Xxxxxx pro xxxxxxxxxx toxicity xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx

X. VŠEOBECNÝ XXXX

1. XXXXXXXX POJMY

1.1 AKUTNÍ XXXXXXXX

xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx objeví xxxxx určité doby (xxxxxxxx 14 dní) xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2 XXXXXX XXXXXXXX

xx xxxxxxxxx termín popisující xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Jsou xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xx xxx xxxxxx, xx xx xxxxxxx podávané dávky xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx toxických xxxxxxxx x pravděpodobně x xxxxx.

1.3 XXXXX

xx xxxxxxxx podávané xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx vyjádřena jako xxxxxxxx (gramy xxxx xxxxxxxxx) nebo jako xxxxxxxx testované xxxxx xx jednotku xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete (např. xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx), xxxx xxxx konstantní dietní xxxxxxxxxxx (xxxx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx).

1.4 XXXXXXXXXXXXXX DÁVKA

xx xxxxxxxx ze xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx xx xx způsobilo xxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) související x xxxxxxx xxxxxx.

1.5 DÁVKOVÁNÍ

xx xxxxxxxxx termín xxxxxxxxxx xxxxx, frekvenci x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

1.6 XX₅₀ (XXXXXXX XXXXXX XXXXX)

xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxxxxxx dobu xxxx 50 % xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx XX₅₀ se xxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).

1.7 XX₅₀ (XXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX)

xx xxxxxxxxxxx vypočtená koncentrace xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx do xxxxxx doby po xxxxxxxx x 50 % xxxxxxxxx zvířat, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx XX₅₀ xx udává xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xx.x^-1).

1.8 XXXXX

xx zkratka pro "xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx level" (xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx nepříznivého xxxxxx) x xx xx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx expoziční xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx nedochází x xxxxxxxxxxxx toxickým xxxxxxxxx.

1.9 XXXXXXXX XX XXXXXXXXX DÁVCE/SUBCHRONICKÁ TOXICITA

xxxxxxxx nepříznivé účinky, xxxxx xx objeví x xxxxxxxxx zvířat x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx podávání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx života xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.10 XXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX (XXX - MAXIMUM XXXXXXXXX DOSE)

xx xxxxxxxx dávka, která x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxx x xxxxxxx na xxxxxx, který je xxxxxxxx.

1.11 PODRÁŽDĚNÍ XXXX

je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx.

1.12 XXXXXXXXXX XXX

je xxxxxxxx xxxx na xxx po aplikaci xxxxxxxxx látky xx xxxxxx xxx.

1.13 XXXXXXXXXXXXX XXXX (ALERGICKÁ XXXXXXXXX DERMATITIDA)

xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.14 POLEPTÁNÍ XXXX

xx vyvolání xxxxxxxxxx xxxxxxxxx poškození xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx po xxxx xx 3 xxxxx xx 4 xxxxx.

1.15 TOXIKOKINETIKA

xx studium xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.16 XXXXXXXX

označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) aplikovaná xxxxx xxxxxxxx xx xxxx.

1.17 XXXXXXX

xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx případně xxxx metabolity xxxx xxxxxxxxxxxx x těla.

1.18 DISTRIBUCE

označuje xxxxxx(x), kterým(i) je xxxxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxx metabolity xxxxxxxxxxx x xxxx.

1.19 XXXXXXXXXXXX

xxxxxxxx proces(y), xxxxxx(x) xx chemická xxxxxxxxx aplikované xxxxx xxxxxx x těle xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2. XXXXXX - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX

Akutní xxxxxxx účinky x xxxxxxxx xxxx systémová xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx toxicity (metody X.1 - X.5), xx kterých xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.

X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx testu xx xx kompletní xxxxxxxxx XX₅₀. Pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx navržen, xxxxxxx xxxxxx xxxxx definovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx expozice.

Xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxx B.1 xxx) x xxxxxx xxxxxxxxx třídy akutní xxxxxxxx (metoda B.1 xxxx). Xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxx použito xxxxxxx počtu zvířat.

Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx aplikací (xxxxxx X.7, B.8 a X.9) se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Důležité xx xxxxxxxx pozorování xxxxxx xxx, aby xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Tyto testy xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx dávky. Xx dlouhodobých studií xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx (metody X.26 - X.30 x X.33).

3. MUTAGENITA - GENOTOXICITA

Xxxxxxxxxx xx vztahuje x xxxxxxx xxxxxxxx přenosných xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxxx. Xxxx změny ("xxxxxx") mohou xxxxxxxxxx xxxxxx gen xxxx xxxxxxxx xxxx, xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx na xxxx chromozómy xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx stanoví xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx (xxxxxx) xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) xxxxx xx strukturální chromozómové xxxxxxx x savčích xxxxxxx (xxxxxx X.10).

Xxxxxxxxxx jsou také xxxxxxx xx xxxx, xxxx. micronucleus xxxx (xxxxxx B.12) xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx X.11). Xx však xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx vitro xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.

Pro xxxxx xxxxxxxx xx velkém xxxxxxxx nebo xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx další xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo k xxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx studie xxx xxxxxx k xxxxxxxx xxxxxx: potvrzení xxxxxxxx xxxxxxxxx základním xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx metod; zahájení xxxx rozšíření studií xx vivo.

Pro xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx X.15 xx X.25 jak eukaryontní xxxxxxx xx vivo x in xxxxx, xxx rozšiřují xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Tyto xxxxx poskytují xxxxxxxxx x bodových xxxxxxxx x xxxxxx účincích x xxxxxxxxxxx složitějších xxx baktérie xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx mutagenity xx xxxxx xxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx relevantní xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxx daný xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx faktorech, včetně xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx testů toxicity x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx látky.

Pro xxxxxxxxxx rizika xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx účinků v xxxxx savčím xxxxxxxxx, xx xx vyvolaných xxxxxxxx (bodovými) mutacemi, xxxx. xxxxxxxxxx locus xxxx u myší xxxxxxxxxx mutace zárodečné xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, např. xxxx na přenosné xxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxxx B.25). Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx člověka. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx těchto xxxxx x velmi xxxxxxx xxxxx potřebných xxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xx třeba xx xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxx jen na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx postupuje podle xxxxxxxxxxxx metodického xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxx x Národní xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx toxikologie.

4. XXXXXXXXXXXXX

Chemické xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx působení.

Předběžné xxxxxxxxx o genotoxickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx X.7, a xxxxxxxxxxxxx studie x xxxxxxxxxx podáváním xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx tkáních, xxxxx by mohly xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx chemické xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx zkoumání xxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.32) xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx studii xxxxxxxxx toxicity/karcinogenity (xxxxxx X.33).

K dispozici xxxx rovněž xxxxx xxxxxxxxxxxx buněk xxxxx, xxxxx určují xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx změny x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x kterých xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x maligní xxxxxxxxxxxx - xx xxxx (xxxxxx X.21). Používá xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx.

5. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx způsoby, např. xxxxx zhoršení xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx (xxxx xx xxxxxxxx) xxxx podle xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinků xx xxxxxxxxx (vývojová xxxxxxxx) xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x účinky x xxxxxxx xxxxxxx.

Testovací xxxxxx (xxxxxx B.31) xxx studie xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vývojové xxxxxxxx xxxxxx hlavně x xxxxxxx podáváním. Alternativně xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x závislosti xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx reprodukční xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx metodu pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx X.35) rozšířit xxx, aby xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.

6. XXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxxxxxxx xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxxx změn xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Předběžné xxxxxxxxxx xx neurotoxicitu xxxx xxxxxx x xxxxx akutní xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (metoda X.7) zahrnuje xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinku. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx odhalit xxxxxxxx xxxxx x neurotoxickým xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx zkoumání xxxxxx aspektu. Navíc xx xxxxxxxx vzít x úvahu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx x jiných studiích xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx jisté xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pozdní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx B.37 x X.38 xx xxxxxxxxxxxx xxxx opakovaném xxxxxx xxxxx.

7. XXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx má xx následek xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx navozenou xxxxxxxxxxx. Test xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikaci (xxxxxx B.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx imunotoxických účinků. Xxxxxx by xxxx xxxxxx odhalit xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

8. TOXIKOKINETIKA

Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxx x vyhodnocení xxxxx o toxicitě, xxxxxxxxx specifické xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx pomoci xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Nepředpokládá se, xx xxxx v xxxxxx případě zapotřebí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, metabolismu x xxxxxxx). X některých xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxx nebo xx může xxxxxx xxxx dostatečná studie x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx B.36).

Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx také xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx odhad xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxxx xxxxxxx aplikace, xxxxxxxxxxx x distribuce xx xxxxx. Přispět xxxxx také informace x xxxxxxxxxxxxxxxxx parametrech x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx studií.

9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX LÁTKY

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nečistot, x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti včetně xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx informace xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx podávání, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x pro xxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx nečistot) x dávkovacím xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx předcházet xxxxxxxx xxxxxx.

Všechny xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx, fyzikálně-chemických xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx zahrnuty x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx.

10. PÉČE X XXXXXXX

Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx, x xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

10.1 XXXXXXXX XXXXX

Životní xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx přizpůsobit xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx xx vhodná xxxxxxx místnosti 22 ^xX ± 3 ^xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu 30 - 70 %, xxx králíky xx xxx teplota 20 ^xX ± 3 ^xX xxx relativní xxxxxxxx vzduchu 30 - 70 %.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx testované xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxxx toxických účinků xx třeba sledovat xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx, zaznamenávat xx x xxxxx xx x závěrečné xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xx být xxxxx se střídáním xxxxxx a xxx xx xxxxxxxx hodinách. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx a uvést xx zprávě x xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx jiný xxxxxx, xxxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx jedinců xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxx 5 xxxxxx x xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx zprávy x pokusech xx xxxxxxxxx jsou xxxxx x xxxxxxx chovu x xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x jedné xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx doby xxxxxxxxxx.

10.2 XXXXXXXX KRMENÍ

Xxxxxx xxxx vyhovovat xxxx xxxxxxxxxx výživy pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxx studované xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx vzájemným působením xxxxxxxxx látky x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx nutno xxxx x xxxxx při xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx podávána x xxxxxxx, je xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx.

Xxxxxxx x potravě, xxxxx xxxx prokazatelně vliv xx toxicitu, nesmějí xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xx kterých xx se tento xxxx xxxxxxxx.

11. XXXXXXX XXXXXX

Při xxxxxxxxxxx testovacích metod xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx počtu x omezení xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1.bis) nebo xxxxxx stanovení xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (X.1.xxxx). Xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx smrti xxxx specifického xxxxxxxx x xxxxxxxx menší xxxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxx třídy akutní xxxxxxxx vyžaduje v xxxxxxx x 70 % xxxxxx xxxx xxx xxxxxx B.1.

Xxxxxxx se závažnými x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx způsobem utratit; xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, x xxxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx limitních xxxxx, xxxxx v xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1, X.2 a X.3), ale xxxx x xx xxxx xxxxxxx mutagenity (xxxxxx X.11 x X.12), xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx na xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, je-li xx xxxxxxxxxx vědecky xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx být založeno xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx provedených xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx in xxxxx. Xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxx xxxxxxxxx studie xxxxxx kožní xxxxxxxx x dávkou xxxxxxxxxx x limitním xxxxx (xxxxxx X.3) x xxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx, další xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx B.4) xxxx xxx zbytečné; látky, xxxxx prokazatelně xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže xxx xxxxxx xxxxx dráždivosti (xxxxxx X.4), xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx.

Xx xxxxx neustále xxxxxxx a ověřovat xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx poskytovat xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x budou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx méně xxxxxxx xxxx se xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxx xxxxxx metody x xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx rizika, následnou xxxxxxxxxxx a označování xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx xxx, kde xx to možné.

12. XXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX

Při xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx pokusů xx xxxxxxxxx a xxxxx xx vitro xx xxxxx xxx xx xxxxxxx, xx xxxxx extrapolace xx xxxxxxx xx možná xxx x xxxxxxx xxxx; xxxxxxx o xxxxxxxxxxxx účincích x xxxx, xxxxx jsou x xxxxxxxxx, mohou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx pro klasifikaci x označování xxxxxx x stávajících xxxxx xxxxx účinků xx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx zjištěných x kvantifikovaných xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxx xx posuzování xxxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxx.

Část X - Xxxxxxxxx xxxx xxx vložen xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx od 22.6.2001

B.1. AKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXX (PER XX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx skupině xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx stanovit xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx pokusu, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxx metoda xx xxxxxxx především xxx pokusech xx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx způsobem utratit. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx je známo, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx dráždivých vlastností.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx, připraví xx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx vehikulu. Xxxxxxxxxx xx jako první xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, další volbou xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, teprve xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx roztok x xxxxxx xxxxxxxx vehikulích xxxx suspenze. X xxxxxxxxx vehikulí xxxx xxx xxxxx nebo xxxxxx před xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx neměl xxxxxxxx překročit 10 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxx xx 20 xx.xx^-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x testech xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxx xxx, xxx bylo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx dráždivé xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata

Dává xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. Xx xxxxxxx testu by x xxxx pohlaví xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 hlodavců xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx samic, xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být březí. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx x xxxx xxxxxxx xx výrazně xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Používají-li xx x akutních xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx druhů, xxx xxxx xxxxxxxx, mělo xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xx třeba xxxxxxxx, xxx nebyla xxxxxxxxxx úroveň xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx se vyvarovat xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.

1.2.2.3 Xxxxx xxxxx

Xx být xxxxxxxxxx xxxxx hladin xxxxx, xxxxxxx tři, x xxxx xxx xxxxxx odstupňovány tak, xxx byl u xxxxxxxxxxx skupin xxxxxxxxx xxxxxx toxických účinků x xxxxxxxxx. Získané xxxxx xxxx xxxxxx xx znázornění xxxxxx xxxx dávkou a xxxxxxx, x xxxxx xx možné, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX₅₀ x přijatelnou xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

X xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx limitní xxxx xxxxxx xxxxxx nejméně 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx a 5 xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx úplné xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Doba xxxxxxxxxx by xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx stanovit xxxxxxxxx. Xxxx xx být xxxxxx podle obrazu xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx potřeby xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx xx projevy xxxxxx xxxxxx a xxxxxx, x xxxx xx xxxxxxx, zvláště xxx, kde xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.3 Popis xxxxxxx

Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx večer před xxxxxx. U xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx výměny xxxxxxx xxxxxx hladovění; xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. X xxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx látka xx xxxx xxxxxx xxxxxx x jedné xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, lze xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xx xxxxxxx množstvích xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Xx podání xxxxx xx třeba xxxxxxx přístup k xxxxxxx ještě 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx určitého xxxxxx, xxxx být xxxxxxx - xxxxx xxxxx tohoto xxxxxx - xxxxxxx x xxxx zvířatům poskytnout.

Xx xxxxxx xxxxx xx pozorování xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx pozorování. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx látky x bezprostřední xxxxxx xxxxxx na xxxxxxxx.

Xxxxxxx jednou xxxxx xxxxxxx pracovního xxx xx xxxxx provádět xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx studii, např. xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx. Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, spánku a xxxxxx. Okamžik xxxxxxx xx xxxxx zaznamenat xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx, xxxxx během pokusu xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Je-li xx xxxxxxxxxx, odeberou xx xxxxx pro histologické xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx u druhého xxxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxxx na jednom xxxxxxx, podá se xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx zjistit, xxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat. Pokud xx k dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pohlaví xxxx výrazně xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx sestavují xx xxxxxxx. Z xx musí xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx patrný počet xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, počet xxxxxx s xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, popis xxxxxxxxx účinků x xxxxxxxxx xxxxxx. Stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx provede xxxxxxxxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx intervalech x x xxxx uhynutí. Xxxxx hmotnosti je xxxxx stanovit x xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx xxxxxx xxxx než xxxxx xxx. Zvířata, xxxxx xxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx vyvolané xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx. XX₅₀ xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, mezi expozicí xxxxxx xxxxxxxxx látce x výskytem a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, makroskopických xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x xxxxxxxxx toxických xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.

- experimentální xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx zvířat,

- xxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx hladiny xxxxx (počet xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx x xxxxxxx otravy, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),

- xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxx humánní xxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxx xxxx pozorování,

- xxxxxxx XX₅₀ xxx to xxxxxxx, x xxxxxxx byl xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),

- 95% meze xxxxxxxxxxxxx pro XX₅₀, xxxxx xx xxx xxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxx mortality na xxxxx x xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx metodou xxxxx),

- pitevní xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx pohlaví,

- xxxxxx výsledků (xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx by xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx během xxxxx xx vypočtenou hodnotu XX₅₀),

- interpretace xxxxxxxx.

B.1. bis XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX) - XXXXXX XXXXX XXXXX

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx informace x xxxxxxxxxxxx účincích, xxxxx xxxxx následovat xxxxx xxxxxx xxxx po xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx testované xxxxx.

Xxxxxx s xxxxx xxxxxx xx provádí xx xxxx xxxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx účinky xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx sondou x xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xx dávku. Xxxxxxxxxx studie xxxxxxxxx xxxxxxxxx x vztahu xxxxx x toxicity, xxxxxx xxxxxx minimální xxxxxxx dávky. Normálně xx x xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxx pěti xxxxxx.

X xxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx samců x xxxx xxxxx x xxxxx z xxxxxx xxxxxxx dávek: 5, 50, 500 xxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx studie, a xx jako xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyvolá "xxxxxxx xxxxxxxx" (xxx xxxx B - Xxxxxxxxx úvod xxx 1.2), xxx xx xxxxxxx.

Xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dávky xxxxxx xxxxxxx toxicitu, xxx xxxxxx mortalitu, xxxx xxxxx xxxxx další xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx úrovni xxxxx xxxx pozorována zřejmá xxxxxxxx, látka xx xxxxx otestuje xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx když xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxxxx xxxxx" (xxx xxxx X - Všeobecný úvod xxx 1.2), xx. xxxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxxx úrovní dávky, xxxxxx je možno xxxxx, xxxx by xxxxx x xxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx).

Xxxxxxx se xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu a xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx způsobem xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Dává xx přednost potkanům, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx proti xxxx.

Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx užívané kmeny xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx testu xx x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.

Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx testem xx xxxxxx mladá dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx stačí pro xxxxxx xxxxxx jedna xxxxxxx xxxxxxx z xxxx pohlaví.

1.2.1.2 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx se roztok xxxx xxxxxxxx testované xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje se xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, teprve xxxxx xxxx xxxxx možnost xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx vehikulích nebo xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxx určeny xxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx možno xxxxxxx xx 20 xx.xx^-1. Variabilita xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx se xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx všech xxxxxxxxx dávek.

Xxxx xxxxxxx testované xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx odebere xxxxx xxxx xxxxxx; přístup x pitné vodě xxxx omezen. X xxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx dávce. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx najednou, xxx xxxxx aplikovanou xxxxx xx menších xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxx přístup x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, může xxx xxxxxxx - podle xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx poskytnout.

1.2.2 Xxxxx xxxxxxx

1.2.2.1 Orientační xxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx dávek xx jednotlivá zvířata. Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx údaje, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx pohlavím. Dávky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx 24 xxxxx před xxxxxxx xxxxx dalšímu xxxxxxx. Všechna xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x cílem zjistit xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx sedm xxx; xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx, xxxxx xx xxxx pozorovat xxxxx xx dalších sedm xxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 a 2000 xx.xx^-1. Jestliže xxxxxxx xxxxxxx dávka xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx vyšší xxxxxx xxxxxxx, potom xx xxxxx xxxxx xxxxx potřeby xxxxx xxxx více xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Tento xxxxxx xx měl xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx(xxx) dávek, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) příznaky xxxxxx, x o nejmenší xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Je třeba xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx dávku xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxx k dispozici, xxxxxxxxxx xx použít xxxx xxxxx xxxxx 500 mg.kg^-1. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx při 2000 xx.xx^-1, je xxxxxxxxxx xxxxxx skončena x xxxxxx studii xx třeba provést xx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx použití xxxxxxx xxxxx (xxxx. 500 xx.xx^-1) zjištěny xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx nižší xxxxx (xxxx. 50 xx.xx^-1). Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx být xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx vhodné dávky xxxx určenými xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx podmínek se xxxxxxxxx, že je xxx tomto postupu xxxxxxxxx xxxx xxx 5 xxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx

Xxx každou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx hladinu xx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic x 5 samců). Xxxxxx xx měly xxx nullipary x xxxxxx by xxx xxxxx.

Principem metody xxxxx dávky xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx dávek xxx xxxxxx studii. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx letálních dávek xxxxxxxxx látky.

Dávka, xxxxx xxxx užita x xxxxx, má xxx xxxxxxx x xxxxx xx 4 xxxxxxx úrovní xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx měla xxx xx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx utracení x humánních xxxxxx); xxxxxxx xxxxxxx nejsou xxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxxxx mortalitu, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx znovu xxxxxxxx xx další xxxxx xxxxxx dávek. Xxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx pozorována xxx, aby xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx toxická xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx se projeví xxxxxxxxx xxxxxx látky, xxxx xx xxx xxxxx znovu xxxxxxxxx xx další xxxxx xxxxxx dávek. Xxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx humánně xxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxxx po xxxx xxxxxxxxxx období.

Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxx každé xxxxx xx vedou samostatné xxxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx aplikované xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxxx by měla xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx ji xxxx stanovit xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx potřeby prodloužit. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx se projevy xxxxxx projeví x xxxxxx a xxxx xx uhynutí, xxxxxxx xxx, kde xx patrná xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx příznaků.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx první xxx xx podání xxxxx x xxxxxxx jedenkrát xx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx vykazující xxxxxx známky xxxxxxx xxxx xxxxxxx příznaky xxxxxx xx třeba xxxxxxx utratit. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xx podání xxxxx, jestliže xxxxxxx xxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Test xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xx xxxx xxxxxxx příliš xxxxxx xxxxx.

Pozorování xx xxxxxxxx na změny xxxx, srsti, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx další 3 xxx x xxxxx xxxxxx týdně. Xxxxxxx, xxxxx uhynou během xxxxx, x xx, xxxxx přežívají xx xxxxx testu, xx xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx xx indikováno, xxxxxxxx xx tkáně xxx histopatologické vyšetření.

X závislosti na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx druhé xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky.

X xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx 5 xx.xx^-1 (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx naznačuje mortalitu xxx této xxxxx), xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.

2. XXXXX

Xxxxx x orientační x xxxxxx xxxxxx xx sestavují xx xxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Z xx xxxx xxx xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxx x příznaky xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx během xxxxx xxxx utracených x xxxxxxxxx důvodů; xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxx xxxxxx studii, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx, že zvířata xxxxxxxxx xxxx xxx xxx, xx xxxxx xxxxxxxxx a zaznamenat xxxxx hmotnosti.

Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vzhledem ke xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx x hlavní xxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,

- experimentální xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx výsledky všech xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx,

- ve xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx úrovní xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx tělesné xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx zvířat x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx, stupeň a xxxxxx xxxxxx),

- xxxxxx průběh xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx byly reversibilní,

- pokud zvířata xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxx látky, xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,

- pitevní xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, včetně xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v testu.

3.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx

Xxxxx	Výsledky	Xxxxxxxxxxxx
5 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx	Xxxx než 100 % přežití 100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá toxicita	Xxxxx, které jsou xxxxx xxxxxxxx Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx xxx 50 xx.xx^-1
50 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Xxxx než 100 % xxxxxxx	Xxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx 5 mg.kg^-1
	100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx	Xxxxx, xxxxx xxxx zdraví xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx x 500 xx.xx^-1
500 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx	Xxxx xxx 100 % xxxxxxx	Látky, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx výsledky x 50 xx.xx^-1
	100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx	Xxxxx, které xxx xxxxxxxxx xx xxxxx bez významné xxxxxx toxicity Xxx xxxxxxxx x 2000 xx.xx^-1
2000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti	Méně xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx	Xxx výsledky u 500 xx.xx^-1 Látky, xxxxx nemají xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx

X.1. xxxx AKUTNÍ XXXXXXXX (ORÁLNÍ) - XXXXXX STANOVENÍ XXXXX XXXXXX XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Xxxxxx stanovení xxxxx xxxxxx toxicity xxxxxxxxx xxxxxxxxx jak xxx xxxxxxxxxx rizika, xxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx xxxxxxxxxxx dávek x xxxxxxxxxxx odstupech, xxx xxx bylo xxxxx testovanou xxxxx xx základě výsledků xxxxxxx. Xxxxx toho xxxxxx popsaný pro xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx tří xxxxxxxxxxx pevně xxxxxxxxxxx xxxxx, které lze xxxxxx buď xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx dávek xx xxxxx xxxxxx, pokud xx žádoucí nebo xxxxxxxx xxxxx zpřesnění.

Metoda xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxx určena xxx xxxxxxx xxxxxx XX₅₀. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xx x x této xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx testu xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx x sekvenčnímu xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx postup xxxxxxx x metodě B.1. Xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx je xxxxx spotřeba xxxxxx xxx u xxxxxx xxxxxx toxicity (xxxxxx)(B.1) x xxx u xxxxxxxxxxxx metody xxxxx xxxxx (B.1 bis).

1.2 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx ze xxxxxxxxxxx xxxxx. Testování xx xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxx kroku xx xxxxxxxxx xxx zvířata xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxx předběžnou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, x.x.

- xxxx zapotřebí xxxxx xxxxx testování;

- xxxxx krok bude xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx s xxxxx xxxx nižší xxxxxx xxxxx.

1.3 Xxxxx metody

1.3.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx ve xxxxxxxxx podle xxxxxxx x dávky, ale xxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxx musí xxxxxxx jasné xxxxxxxxxx xxxxxxx zvířete.

Testovaná xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jediné xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xx třeba, testovaná xxxxx xx rozpustí xxxx suspenduje xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx xxxxxxx roztoku/emulze x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (např. kukuřičném) x pak roztoku x jiných xxxxxxxx. Xxx nevodná xxxxxxxx xxxx být známa xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx není xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxx před aplikováním xxxxx po xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx (xxxx. potkani xxxx xxx x xxxx 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx xx xxxxxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.

Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

1.3.2.2 Xxxxx a pohlaví

Pro xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxx pohlaví. X xxxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.3.2.3 Xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx, xxx. 25, 200 x 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx, xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx alespoň xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx podána. X závislosti na xxxxxxx dávce se xxxxxxx xxxxxxxxxxx diagramu xxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 1.

Xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxx informace xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx nejsou xxxxx xxxxxxxxx x testované xxxxx, doporučuje xx - s xxxxxxx xx pokusná zvířata - xxxxxx výchozí xxxxx 200 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti.

V xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx zpřesnit získanou xxxxxxxxx, xxx jak xx dovoluje xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx dávkách xx xxxx 5, 50 xxxx 500 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, x kterých je xxxxx, xx způsobují xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx.

Xxxxxx interval xxxx xxxxxxxxxxx skupinami je xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx je třeba xxxxxxx, dokud xxxx xxxxx, že zvířata xxxxxxxxx xxxxx přežila.

1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx xxxx x jedinou úrovní xxxxx xx xxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx se provádí xx třech xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx s podáním xxxxx, lze xxxxx xxxxxxxxx provést xxx xxxxxxx 200 xx.xx^-1 (xxxx 500 mg.kg^-1) xxxxxxx hmotnosti.

1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 14 xxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxx vyloučena x xxxxxxx pozorování x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx ochrany xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx nemělo být xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx zotavovacího xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx objeví a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx-xx o xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.3.3 Xxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxx xxxxxxx zkušební xxxxx zvážena. Po xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx potravy xx dobu xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx během xxxxxx xxxx, může xxx - v závislosti xx délce této xxxx - xxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířatům xxxxxxx x vodu.

Maximální xxxxx xxxxxxxx, který může xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx velikosti xxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx na 100 x xxxxxxx hmotnosti, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx lze xxxxx x 2 xx xx 100 g xxxxxxx xxxxxxxxx. Rozdíly x podávaném xxxxxx xx xxxxx minimalizovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx byl xxxxxxx xxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxx dávky. Xxxxxxxx není možné xxxxx dávku celou xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx po dobu xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x Dodatku 1.

1.3.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx (xxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx, xxxxx to vyžaduje xxxxxx zvířat na xxxxxx xxxxx, a xxxx nejméně jednou xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx vykazující xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx stresu, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx: xxxx xxxxxxx xxxx hodnocena xxxxxx xxxx xxxxxxx uhynulá.

Ať xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x humánních xxxxxx nebo byla xxxxxxxx xxxxx, dobu xxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xx kůži x xxxxx, na xxxxx x xxxxxxxxxx, a xxxx xx dýchacím, xxxxxxxx, vegetativním x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Pozornost xx xxxxx věnovat xxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x kómatu.

Veškerá xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx vedeny xxx každé xxxxxxxxxx xxxxx.

1.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxx nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx, xxx budou xxxxxxx utracena.

1.3.3.3 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, se xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx informací xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologie x xxxxxx přežívajících 24 x xxxx xxxxx.

2. SBĚR X XXXXXX ÚDAJŮ

K xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x každém xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx formy, xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxx x průběhu xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx x vratnost xxxxxxxxx účinků, x xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx poučení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx v Xxxxxxx 2.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Zpráva x xxxxxx xxxxxxxx xxxx informace, xxxxx xxxxx xxx získány:

Pokusná xxxxxxx:

- živočišný xxxx/xxxx;

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx-xx xxxx;

- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;

- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;

- xxxxxxxx jednotlivých zvířat xx xxxxxxx testu, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a na xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx testování:

- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxx xxx voda;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx dávky.

Výsledky:

- xxxxxxxxx údajů x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (xxx. zvířata xxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x trvání xxxxxx);

- xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x každého xxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x každého xxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx:

Xxxxxxxxx x interpretace:

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 423.

XXXXXXX 1

XXXXXX XXXXXXXXX

1. Xxx xxxx xxxxxxx v xxxx 1.4.2.3, výchozí xxxxx xx xxxx xxx xx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx uhynutí xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx výběr xxxxxxx xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,

- všechny xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx.

2. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx dávku. X xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx zvířat postupuje xxxxxxxxx tak, jak xxxxxxxxx xxxxx.

3. Xxxxx xx aplikaci xxxxxxx xxxxx 25 xxxx 200 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx druhého xxxxxxx, obvykle se xxx dále xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx přitom xxxxxx u ostatních 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx ověřit xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx. Jestliže xx xxxx možnost xxxxxxx, xx xxxxx pokračovat x testování na xxxxx xxxxxx xxxxx.

4. Xxxxx po xxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx se předpokládat, xx hodnota LD₅₀ xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx^-1 tělesné hmotnosti. Xxxxxxx xx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx posoudit xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx pohlaví: xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx XX₅₀ xx xxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, nebo xxxxx xxx podnětem xxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

5. Xxxxxx umožňuje xxxxxxxxx x xxxxx doplňkovými xxxxx stanovenými dávkami (xxxxxxxx 2). Této xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxx k xxxxxx alternativní xxxxx x daném xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx další testování xx dokončení testování xxxxx xxxxxxxx 1.

Postup xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 25 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx zvířat x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx).

Xxx rámečky je xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx zvířat (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx uhynulých xxxxxx se v xxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx šedého xxxxxxx.

Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x příslušném xxxxx xxxxxxx nebo xxxxx způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 2.

Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkou.

Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx dávkou 200 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, počet xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx).

Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených zvířat (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx provede xx xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.

Xxxxxxxx 2 - Pokračování xxxxx x xxxxxxxxxx doplňkovou xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx konečných hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx rámečku.

Postup xxxxxxxxx x výchozí dávkou 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx

X rámečcích xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).

Xxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x testování xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Klasifikace xx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx hodnot uvedených x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.

Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx šedém rámečku.

DODATEK 2

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx založených xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1

X rámečcích je xxxxx xxxxx, počet xxxxxx a xxxxxxx (1 - pohlaví xxxxxxx jako první, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).

Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3).

Šedé xxxxxxx xxx xxxxxxxx "XXXXX XXXXX XXXXXXXXX" v xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx konečné xxxxxxx xxx klasifikaci. Xx xxxxxxxxx podle varianty 1 xx xxxxxxxxx xxxxx sleduje, dokud xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Hodnoty x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx příslušný xxxxxx klasifikace. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, že XX50 xx větší xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx vlevo.)

(a) Xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx dávkou 25 xx/xx xxxxxxx hmotnosti

(b) Xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx dávkou 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx dávkou 2000 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxx 1

x) Xxxxxxx dávka 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

&xxxx;

x) Xxxxxxx dávka 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

x) Xxxxxxx dávka 2000 xx/xx xxxxxxxxx

X.2. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Úvod

Xx xxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxx údaje x rozdělení xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx, xxxxxxx tání, teplotě xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x výbušnosti (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx

1.2 Xxxxxxx metody

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx exponováno xxxxxxxxx xxxxx xx určenou xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, a to xxxxx koncentraci v xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x zjišťují se xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx uhynou, x ta, xxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Testované xxxxx se nemají xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx bolest x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxx

Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx zdravá xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx to nevyžaduje xxx xxxxxxxxxxx expozičního xxxxxxxx, xxxx třeba xxxxxxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx velikosti. Pokud xx xxxxx, přidá xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx; x xxx xxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx o xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je možno xx xxxxxx.

1.3.2 Experimentální xxxxxxxx

1.3.2.1 Pokusná zvířata

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Používá se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xxxx variační xxxxxxx hmotnosti xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx).

1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx použít nejméně 10 xxxxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Používají-li xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx použití xxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx a xx třeba xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx toxické xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx třeba vyhnout xx podávání letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

Xx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, a xxxx xxx vhodně xxxxxxxxxxxx xxx, xxx byl x testovacích skupin xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a mortality. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x, xxxxx xx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX₅₀ s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.3.2.4 Limitní xxxx

Xxxxxxx-xx po 4 hodinové xxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx plynu x xxxxxxxxxxx 20 xx.x^-1 xxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx látky x koncentraci 5 xx.x^-1 (xxxx - x případech, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx fyzikálních nebo xxxxxxxxxx vlastností sledované xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx - xxx xxxxxxxx maximální xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) během 14 xxx x žádné xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, považují se xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.

1.3.2.5 Xxxx expozice

Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxx 4 xxxxxx.

1.3.2.6 Xxxxxxxx

Pro xxxxxx se xxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s výměnou xxxxxxx nejméně 12xxxx xx xxxxxx, aby xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x expoziční xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx třeba xx xxxxxxxxxxx tak, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a aby xxxxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx byla xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx stability xxxxxxxxx x inhalačním xxxx xx neměl x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxx možné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové expozice; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx xxxxxx cestami.

1.3.2.7 Xxxx pozorování

Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx nejméně 14 xxx. Nelze xx xxxx stanovit xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx na xxxxxxxxx reakcích, xx xxxxxxxxx jejich xxxxxx x na xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx se xxxxxx x xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx doba do xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx je xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxx xxxxxxx

Zvířata xx bezprostředně xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xx xxxx 4 xxxxx od xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Nastavení xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx pokusu xx xxx 22 ^oC ± 3 ^x X. Relativní vlhkost xx být xxxxxxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx tlaku xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx potrava xxx voda.

Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx stabilních podmínek xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Konstrukce x xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx homogenní xxxxxxxxxx testované xxxxxxxxx x komoře.

Xx xxxxx xxxxxxxx měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:

(x) měření xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně),

(x) xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx látky xx xxxx v xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxxxxx xx vysoké xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Během jedné xxxxxxxx se nemá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx hodnoty x xxxx než ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx větší xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx tak xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx týká částic x aerosolů, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxx, xxx xx pokus xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx),

(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx xxxxx kontinuálně.

Xxxxx expozice i xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx provádějí x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx často. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Další každodenní xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mají sloužit xxxxxxxxxxx xxxxxxx ztrát xxx studii, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxx xxxxxxx či xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx umírajících xxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx autonomní x centrální nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Zvláštní xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx vnějšímu xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, letargii, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Hmotnost jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxxxx xx expozici xxxxx x x okamžiku xxxxxxx.

Zvířata, xxxxx xxxxx pokusu xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, xx pitvají xx zvláštním zřetelem xx xxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx dýchacího xxxxxx. Xxxxxxx makroskopické patologické xxxxx se xxxxxxxxxxxxx x odeberou xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.

2. ÚDAJE

Xxxxx se xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx být xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, která xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx ke stresu xxxx x bolestem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx zaznamenána xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. LC₅₀ xx xxxxxxx uznávanou xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxx xxxxx - pokud xxxxxxxx - mezi xxxxxxxx zvířete xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx x stupněm všech xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx, klinických symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, změn xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx pokud možno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx, xxx.,

- xxxxxxxx pokusu: popis xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx systému x xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x expozičním boxu, xxxxx xx xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx částic xxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx tabulky a xxxxxx spolu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx variability (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxx:

x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx;

x) teplota x xxxxxxx xxxxxxx;

c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx do inhalačního xxxxxxxx, dělené xxxxxxx xxxxxxx);

Xxxx.: při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx (např. xx vodě) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx vzduchu, nýbrž xxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx látky ve xxxxxxxx.

x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx;

e) skutečná xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx;

x) hmotnostní xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) a geometrická xxxxxxxxxx odchylka (XXX);

x) doba xx xxxxxxxx rovnováhy;

x) xxxx expozice;

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx byla xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx x příznaky xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx);

- xxxx xxxxxxx xxxxx expozice xxxx xx xxxxx skončení, xxxxxx a kritéria xxx xxxxxxx utracení xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxxx;

- xxxxxxx XX₅₀ pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx pozorování (x uvedením xxxxxx xxxxxxx);

- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX₅₀ (pokud xx xxxxx jej stanovit);

- křivka xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxxx) a xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxx metoda stanovení);

- xxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxx histopatologické xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxx (xx zvláštním xxxxxxxx k vlivu xxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat x humánních xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx LC₅₀);

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.3. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx nanáší xx xxxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, x xx xxxxx skupině xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí konec xxxxxx, xx xxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x takovým xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Nejméně 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá zvířata xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx testu xx xxxx xxxxxx xx zádech xxxxxxx xxxx oholí. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx xx xx, xxx xx nepoškodila (xxxx. abrazí) xxxx, xxx by xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxx aplikaci testované xxxxx se připraví xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Při xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx byl xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx použití vehikula xx xxxxx xxxx x xxxxx vliv xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx látky kůží. Xxxxx xxxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxx, v xxxx xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx xx styku x xxxxxxx xxxx, x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx nebo králíků. Xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx druhy, xxxxx jsou xxx xx xxxxxx. Xx xxxxx volit xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xx začátku xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx každé pohlaví xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Pro xxxxxx xxxxxx dávek xxxxxx xxxxxxx 5 zvířat xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx samic, musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx k xxxxxxxxx informace, že xxxxx x xxxx xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxxxx.

Poznámka: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx toxicity xxxxxxx xxxxxxx druhů, xxx xxxx xxxxxxxx, mělo xx se zvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x je třeba zajistit, xxx xx nepřekročily xxxxx xxxxxxx dávky. X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx vyhnout xx xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxxx, nejméně tři, x mají xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx toxických xxxxxx x mortality. Xxx xxxxxxxxxxx x úrovních xxxxx xx xxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxx nebo leptavé xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx, x xxxxx xxxxx umožnit xxxxxxxxx XX₅₀ x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx xx skupinách 5 xxxxx a 5 xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx postupů. Xxxxx xxxxx způsobí xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx úplnou studii.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Měla xx xxx xxxxxx xxxxx obrazu otravy, xxxxxxxxx xxxxxx otravy x trvání xxxx xxxxxxxx. Dobu pozorování xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxx otravy xxxxxxx x xxxxxx x doba do xxxxxxx, xxxxxxx tam, xxx xx patrná xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx uhynutí.

1.2.3 Popis xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx jednotlivě x xxxxxxx. Testovaná xxxxx xx xxxxxx rovnoměrně xx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx 10 % xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx vysoce xxxxxxx látky může xxx tato xxxxxx xxxxx; xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx 24 hodin xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx pomocí xxxxxxxxx mulového obvazu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plochu je xxxx třeba vhodným xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx obvaz x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X zamezení xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx však xxxxx xxxxxxxxx.

Xx uplynutí xxxx expozice xx xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx pokožky.

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx každé zvíře xx třeba xxxx xxxxxxxxxx záznamy. První xxx se xxxxxxx xxxxxxxx často. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx je xxxxx xxxxxxx pečlivé klinické xxxxxxxxx. Další každodenní xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx snížení xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxxx, xxxx, na xxxxxx xxxx xxxxxxxxx aplikace, xxx x xxxxxxx, x také xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Zvláštní xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx tremoru, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, letargii, xxxxxx x komatu. Okamžik xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx uhynou, x xxxxx xxxxxxx xx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx patologické změny xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx tkáně xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x druhého pohlaví

Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx jednom xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx zvířatech xxxxxxx pohlaví, xxx xx xxxxxxxx, zda xxxxxxx xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx látku. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx spolehlivá xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, testování xx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx xx možno xxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální skupinu xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx toxických xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx bezprostředně před xxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxx x týdenních xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xxxxxxx déle xxx xxxxx den. Xxxxxxx, xxxxx byla humánním xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx na stres x xxxxxxx vyvolané xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx uhynutí xxxxxxxx xxxxx xxxxxx. XX₅₀ xx vypočte xxxxxxxxx xxxxxxx. Dále xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, změn xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x všech ostatních xxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx informace:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.,

- xxxxxxxx pokusu (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx: xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx),

- úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx užito) x koncentrace,

- xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat,

- xxxxxxx toxických xxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx dávek (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx testu; počet xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),

- xxxx xxxxxxx po podání xxxxxxxxx xxxxx, důvody x kritéria xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,

- všechna pozorování,

- xxxxxxx XX₅₀ xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx úplný xxxxx, x to xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (s xxxxxxxx metody xxxxxxx),

- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX₅₀ (xxxxx jej xxx xxxxxxxx),

- křivka xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx a xxxx xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),

- pitevní xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx všech testů xx druhém xxxxxxx,

- rozbor výsledků (xxxxxxxx pozornost věnovat xxxxxxx xxxxxxxxx vypočtené xxxxxxx LD₅₀ v xxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx),

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.4. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXX DRÁŽDIVOST)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxx

Xx xxxxx xxxxxxx zvážit všechny xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx s xxxxx snížit xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, které xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx reakce. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx pro xxxxxxxxx, xxx je xxxxxx xxxxx test, xxxxxx xx xxxxxxx zvířeti xxxx xxx není xxxxxxxxx xxxxx testování.

x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x chemická xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. xX rovné xx xxxxx 2 xxxx xX xxxxx či xxxxx 11,5) xxxx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx mohou být xxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxx xxxx x úvahu xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.

x) Xxxxxxxx xxxx dostupné xxxxxxxxxxx xxxxxxx závažných účinků xxxxx xx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx test.

x) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxx v xxxxx xxxxxx toxicity xxx xxxxxxxx aplikaci xxxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxx dávky (2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx dále xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx, přičemž xxxxx xxxxx slouží xxxx xxxxx vlastní xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx době xx odečte, xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx možno provést xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx xxxx možné xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků.

Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Asi 24 xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Při střihání xxxx xxxxxx srsti xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx kůží.

Některé xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx obdobích xxxx. Testované xxxxx xx nesmí xxxxxxx xx tyto zóny xxxxx husté xxxxx.

Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx látkami, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x práškové xxxxx, xx třeba xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou, případně xxxxx xxxxxxx vehikulem, xxx xxx xxxxx xxxxxxx s xxxx. Xxx xxxxxxx vehikula xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, je xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx albínu xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx

Xxxxxxxx xx x in xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx jiných úvah xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. je leptavá), xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx zvířeti. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx testu xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxx jsou xxxxx xxxxxxx tři xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx neošetřenou xxxxxxxxx skupinu, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx nejednoznačných xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx další xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xxxxx nejsou xxxxx xxxxxxxx důvody xxx xxxx xxxxxx, xxxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxx xxxx 0,5 x xxxx nebo xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx oblasti xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx není možno xxxxxxxx rigorózně. Musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxx vyhodnotit xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx třeba xxxxxxxxxxx dobu 14 xxx po xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx chovají xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Testovaná xxxxx se xxxxxx xx malou xxxxxx (xxx 6 xx²) xxxx a xxxxxxx xx xxxxxxx mulu xxxxxxxxxxxx nedráždivou náplastí. X xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxx nanést xxxxxxx testovanou xxxxx xx mul, x xxx xxx xxxxxxxxx xx xxxx. Po xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx třeba přidržovat xxxxxx volně na xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx orálně nebo xx xxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, pokud je xx možné, xxxx xxxxxxx rozpouštědlem, ale xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx případná xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx expozice xx xxxxxxx 4 xxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. tím, xx xxxxxx poleptání, xx xxxxx xxxxxxx délku xxxxxxxx (xxxx. xx 1 xxxxxx nebo 3 minuty). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 3 plátky xxxx xxxxxxxx, pokud xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx po 3 xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx závažná xxxxx reakce, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx 1 xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx v xxxx xxxx naznačují, xx je xxxxxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, odstraní xx xxxxx xxxxxx xx 4 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxx 4hodinová xxxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxx s xxxxxxxx nejméně xxxx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xx xxxx kontraindikováno x humánních xxxxxx (xxxx. jestliže po 4 hodinách xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx).

Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx) xxxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx xxxx xx 1 xxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Za xxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx delší xxxxxxxx, xxxxxxxxx pokud xx xxxxxxxx očekávanému xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx u xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx je třeba xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx a kožního xxxxx a stupeň xxxxxx kůže po 60 xxxxxxxx x xxxx 24, 48 x 72 hodin xx odstranění xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx kůže xx klasifikuje a xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 1. Xxxxxxxx nebylo xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx úplného xxxxxxxx xxxxxx, provádí xx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx kůže xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx (nevratná xxxxxxxxx xxxxx tkáně) x xxxx toxické xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx, maskovaných zabarvením xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxx tloušťky xxxxx xxxx.

2. XXXXX

Xxxxx se sestaví xx tabulky. X xx musí xxx xxx xxxxx pokusné xxxxx patrný stupeň xxxxxxxxxx posouzením xxxxxxx x xxxxx po xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx rovněž xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx podráždění xxxx, xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x všechny xxxxx xxxxxxxxxx toxické xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx možno tyto xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.,

- experimentální xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxx xxxxxx: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,

- ve xxxxx xxxxxxx xxxxx x kožní xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx každém xxxxxxxxxx (xx 1, 24, 48 x 72 hodin xxx. xx odstranění mulu),

- xxxxx zjištěných xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx histopatologických xxxxxx,

- xxxxx všech xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

4. XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxxx

	Hodnota
1. Hodnocení xxxxxxx x xxxxxxxxx
1.1 Žádný xxxxxx	0
1.2 Velmi xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxxx)	1
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx	2
1.4 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx	3
1.5 Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx	4
2. Hodnocení xxxxx
2.1 Žádný xxxx	0
2.2 Xxxxx xxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxxx)	1
2.3 Xxxxx edém (xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx je ohraničena xxxxxxxxx xxxxxxxxx)	2
2.4 Mírný edém (xxxxxx vyvýšeny asi x 1 xx)	3
2.5 Xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xxxx xxx 1 xx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx)	4

4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (XXX)

XXX xx vypočte jako xxxxxxxxxxx průměr xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx erytém a xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx odečtu u xxxxxxx jedince x x xxxxx získaných xxxxxx u xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxx	X_XX
xxxxxxxx	X_XX ≤ 0,5
xxxxx xxxxxx	0,5 &xx; X_XX ≤ 3
středně xxxxxx	3 &xx; X_XX ≤ 5
silně xxxxxx	I_KI > 5

X.5. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXX XXXXXXXXXX)

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

1.1.1 Výchozí xxxxx

Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx všechny xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx látce x xxxxx snížit xx xxxxxxx testování látky xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat těžké xxxxxx. K xxxx xxxxx být užitečné xxxxxxxxxxx informace.

a) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx. xxxxx kyselé xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx - xxx xx xxxxx očekávat - xxxxxxxx v oku xX rovné xx xxxxx 2 xxxx xX xxxxx xx xxxxx 11,5, xxxx xxxxx testovat, xxxxx xxx xxxxxxxx závažná xxxxxxxxx. Je xxxxx xxxx x úvahu xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx rezervu.

x) Xxxxxxxx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx dráždivost xxx xxx, xxxxxxx lze xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx na xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Látky, xxxxx vykazovaly xxxxxx xxxxxxx nebo výrazně xxxxxxxx účinky xx xxxx xx studii xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx dále testovat xx dráždivost xxx xxx, protože lze xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx se x xxxxxxxxxxx dávce xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx neexponované xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx stanovených xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx se xxxx popíše, xxx xxxx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx pozorování xxxx xxx dostatečně dlouhá, xxx bylo xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx také xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky stresu x bolesti je xxxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

24 xxxxx xxxx xxxxxx xx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxxx provede xxxxxxxxx xxxx očí. Xxxxxxx, x kterých xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx rohovky, se x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, doporučuje xx dávat přednost xxxxxxxx xxxxxxxxx albinotickému xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xx xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx jednom xxxxxxxxx naznačují, xx xxxxx má výrazně xxxxxxxx (reverzibilní xxxxxx) xxxx leptavé (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxxxx xxx xxx při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, není xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířata.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tří zvířat. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx vyžadovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxx xxxxx

Xxx testování xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,1 xx. X tuhých látek, xxxx a zrnitých xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx 0,1 xx nebo xxxxxxxx xxx 0,1 x (xxxxxxxx xx xxxx xxxxx uvést). Xxxxx-xx xx x tuhou xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx rozemlít xx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxxxx, např. xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.

U xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxx aerosolových xxxxxxxxx xx třeba vystříknout x sebrat 0,1 xx látky x xxxxxxxxxx xx xx xxx podle xxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxx doby xxxxxxxxxx xxxx možno xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxx dostatečně xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx 21 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Zvířata xx třeba přechovávat xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx každému zvířeti xx xxxxxxxxxxxx vaku xxxxxxx oka xxx, xx xx spodní xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx. Xxxxx xx xxx xxx na 1 xxxxxxx lehce x xxxx xxxxxxx, xxx xx žádná látka xxxxxxxxxx. Druhé xxx, xx které se xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx kontrolní.

Jestliže xx xxxxxxxxxxx, že xxxxx může xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxxxx, xx následkem xxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxx změnám x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx zvolit xxx, xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx.

Xxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 24 xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xx 24 hodinách xx xxxxx oči xxxxxxxxxxx, pokud se xx považuje xx xxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxx, které při xxxx xxxxxxxxx metodě xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx provést xxxxx xxxxxxx s použitím xxxxxxx, kterým xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 3 králíky. Xxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx oči vymývají xxxxxx xx půl xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx objemu xxxxxxxx x xxxxxxxxx průtoku, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx

Xxx xx xxxxxxxxx xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx. Neprojevují-li xx xx 72 xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx lézí, xx xxxxx xxxxxxx ukončit. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx prodloužit, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx rohovky xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx vývoj xxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xx rohovce, xxxxxxx x xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx oka je xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx stanovit podle xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxx. (Klasifikace xxxxxx xxx připouští xxxxx možnosti xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx laboratoře x xx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.)

Xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx lupy, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx pozorování po 24 xxxxxxxx xx xxxxx oči xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx mimoto ještě xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx pro xxxxx pokusné zvíře xxxxxx xxxxxx podráždění x xxxxx intervalu xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx popis xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lézí x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace:

- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně relevantních xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx),

- x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx jednotlivá xxxxxxx xxx každém xxxxxxxxxx (xxxx. xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx)

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx závažných xxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, charakteru x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x poleptání, včetně xxxxxxxxx oblasti xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1, 24, 48 a 72 xxx.), xxxx. xxxxxxxxxx lampa, oční xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx atd.,

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

4. XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxx xxxx na xxx

	Xxxxxxx
X. Xxxxxxxx - xxxx
Xxxx xxxx xxxxxxxx	0
Xxxxx xxxx zahrnující xxxxxx	1
Výrazný xxxx x everzí xxxxx	2
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx	3
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xx polovinu xxxx xxxxx	4
X. Xxxxxxxx - xxxxxx
Slzení xxxx xxxxxxxx	0
Xxxxx xxxxxx (xxxxx odlišit xx běžné xxxxxxx xx vnitřním xxxxxx)	1
Xxxxxx se xxxxxxxxx víček a xxxxx x xxxxxxxxx xxx	2
Xxxxxx xx xxxxxxxxx víček x xxxxx x xxxxxxx okolí xxx	3
C. Xxxxxxxx - xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx	0
Xxxxxxxxxxx cév xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx normě	1
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx nesnadné, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx	2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx	3
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx
Xxxxxxxx nejsou xxxxxxxx	0
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, nastříknutí xxx xxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxx více těchto xxxxxxxxxxxxxx), xxxxxx na xxxxxx je xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx	1
Xxxxxx xx xxxxxx xxxx přítomná, rozsáhlé xxxxxxxxx a hemoragie	2
v xxxxxxx (xxxxx nebo xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx)
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx přítomná	0
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx diseminovaného xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx	1
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx, snadno xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxx zastřené	2
Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx; obrys xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx	3
Xxxxx neprůhlednost xxxxxxx, xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx	4
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Neprůhlednost xx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx plocha xx ≤ 1/4 plochy xxxxxxx	1
1/4 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 plochy xxxxxxx	2
1/2 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx	3
plocha xxxxxxxxxxxxxx &xx; 3/4 xxxxxx rohovky	4

4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx dráždivosti (I_OA)

Xxxxxxxxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx (X_XX) pro xxxxx xxxxx x xxxxx interval hodnocení xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx

I_OI = 2.(X + X + X) + 5.X + 5.X.X

Xxxxxxxx xxxxx oční xxxxxxxxxxx (X_XX) pro xxxxx interval hodnocení xx xxxxxxx xxx xxxxx interval hodnocení xxxx xxxxxx x X_XX.

Akutní xxxxx xxxx dráždivosti XXX xx xxxxx nejvyššímu X_XX xxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx

4.3 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx	X_XX
xxxxxxxx	0 - 4,9
xxxxx xxxxxx	5 - 14,9
xxxxxx	15 - 29,9
xxxxx dráždí	30 - 59,9
xxxxx xxxxx xxxxxx	60 - 79,9
extrémně xxxxxx	80 – 110

B.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX

1. XXXXXX

1.1. Xxxx

Xxxxxxxx:

Xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxx xxxx považovány xx významné pro xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx všechny látky x potenciálním xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx a xxxxx xx xx hodila xxx xxxxxxx xxxxx.

Xxx volbě testu xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx např. xxxxxxxxx charakteristiky látky, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx s xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxxxxxxxx rozpuštěním nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (FCA), a xx xxxxx xxx xxxxxxxx.

Testy x xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx pravděpodobného xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx lidskou xxxx xxx xxxxxx xxx Freundova xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xx jim xxxx xxxxxxxx.

Maximizační xxxx xx xxxxxxxxx (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) xx xxxxx xxxxxxxxx test x xxxxxxxx. Ačkoliv k xxxxxxxx schopnosti xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx dalších xxxxx, xx GPMT xxxxxxxxx xx preferovanou xxxxxxxx x adjuvans.

X mnoha xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxx xxx xxxxxxxx (xxxxxxxx se xxxx Xxxxxxxxxx testu) xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx.

X určitých případech xxx xxxxxxxxx volbu Xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx aplikací xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x maximizačním xxxxx na morčatech. Xxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.

X xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx popsány xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxx (GPMT) x Xxxxxxxxx test. Lze xxxxxx x jiných xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx.

Pokud xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx testování xx morčatech. Xxx xxxxxxxxxx výsledku xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxx x této xxxxxxxxx kapitole.

1.2 Definice

Xxxxxxxxxxxxx kůže: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) je xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx na látku. X xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx kůže, xxxxxx, pupenci, puchýřky, xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx lišit x xxxx být xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx otok.

Xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.

Indukční xxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx expozici, v xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.

Provokační xxxxxxxx (xxxxxxxxx): experimentální xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vystaveného xxxxxxxxx látce xx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx, zda subjekt xxxxxx reakcí xxxxxxxxxxxxxxx.

1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x použitím xxxxx, o kterých xx xxxxx, xx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx senzibilizační xxxxxx xxx xxxx.

X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx očekává xxxxxx na xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nejméně 30 % x metody x xxxxxxxx a xxxxxxx 15% x xxxxxx xxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Číslo XXX	Xxxxx XXXXXX	xxxxxxxx xxxxx	xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx
101-86-0	202-983-3	2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx	alfa-hexylcinnamaldehyd
149-30-4	205-736-8	2-merkaptobenzothiazol	xxxxxx
94-07-7	202-303-5	Xxxxx xxxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxx	xxxxxxxxx

Mohou nastat xxxxxxxxx, xxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zdůvodnění xxxxx být xxxxxxx xxxx kontrolní xxxxx xxxxxxxxx výše uvedená xxxxxxxx.

1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxx nejprve xxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx injekcemi xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Po xxxxxx 10 až 14 xxx (xxxxxxxx xxxxxx), x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx reakce, jsou xxxxxxx exponována xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx x xxxxxx kožní xxxxxx xx provokační xxxxxxxx x testovaných xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx podstoupí xxxxxxx xxxxxxxx v xxxx xxxxxxx x xx xxx aplikována xxxxxxxxxx xxxxx.

1.5 Xxxxx testovacích xxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx se xx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx rozpouštědla xxx, aby nebyla xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.1 Maximizační test xx xxxxxxxxx (XXXX)

1.5.1.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aklimatizují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx aspoň 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx zvířata náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x kontrolních skupin. Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx stříháním, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx metodě. Xx třeba xxxx xx xx, aby xxxxxxx x poškození xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx testu.

1.5.1.2 Experimentální xxxxxxxx

1.5.1.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx kmeny albinotických xxxxxx.

1.5.1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Lze xxxxxx samce i xxxxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxxxxxxxx skupinu tvoří xxxxxxx 10 xxxxxx x nejméně 5 xxxxxx xx xxxxx x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx menšího xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx a 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx expozici se xxxxxx xx takovou xxxxxx, kterou zvířata xxxxxxx xxxxx snášejí x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx mírné xx střední xxxxxxxxxx xxxx.Xxxx provokační koncentrace xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, která x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx koncentrace xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx na dvou xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxx xxx uvážit xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXX.

1.5.1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.5.1.3.1 Xxxxxxx

Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx linie:

Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x objemovém xxxxxx 1 : 1;

Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx xx vhodném xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;

Xxxxxxx 3: xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;

Xxx xxxxxxx 3 xx xxxxx xx vodě xxxxxxxxx rozpustí xxxx xxxxxxxx x FCA xx vodné xxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxx xx rozptýlí x xxxxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro injekci 3 xx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 2.

Xxxxxxx 1 x 2 xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxxx xxxxx, zatímco xxxxxxx 3 xxxxxx xx xxxxxxxx části xxxxxxxxx xxxxxx.

Den 0 - Kontrolní xxxxxxx

Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, se xxxxxx xx stejných xxxx xxxx u testovaných xxxxxx:

Injekce 1: Xxxxxxxxx kompletní xxxxxxxx (XXX) smíšené s xxxxx nebo fyziologickým xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;

Xxxxxxx 2: neředěné vehikulum;

Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) xx xxxxx XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).

5. - 7. den - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx

Xxxxxxxxx dvacet xxxxx hodin před xxxxxxx indukční xxxxxxxx, xxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxx xxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx oholení xxxxx 0,5 ml 10% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vazelíně, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.

6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx se zbaví xxxxx. Testovanou xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx napuštěn filtrační xxxxx (2 x 4 cm), xxxxx xx xxx přiloží xx xxxxxxxxx xxxxxx x fixuje xxxxxx xxxxxxxxxxx obvazu xx xxxx 48 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxx odbornými xxxxxx; xxxxx látky xxxx xxxxx rozetřeny a xxxxxxxxx do vhodného xxxxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.

6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx skupiny xx xxxx 48 xxxxx.

1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx

20. - 22. den - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat xxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxx bok xxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxx xxxx x xxxxxxx a na xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx aplikuje xxxxx vehikulum (xxxxx xx xx třeba). Xxxxxx se pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xx 24 xxxxxx.

1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx: testované a xxxxxxxxx xxxxxxx

- xxxxxxxxx 21 hodin xx odstranění xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx ostříhá xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxxx xx xxxxxxx třech xxxxxxxx (xxxxxxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x zaznamenává xx podle stupnice xxxxxxx x xxxxxxx;

- xxxxxxxxx 24 xxxxx po xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxx (72 xxxxx).

Xxxxxxxxxx xx systém "xxxxxxx xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxx senzibilizováno a xxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxxxx je k xxxxxxxxx výsledků nutná xxxxx xxxxxxxxx (tj. xxxxxxxxx provokace), provede xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x kontrolní xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze také xxxxxxx xx původní xxxxxxxxx skupině.

Všechny xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx reakcí, které xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x provokačních postupů, xx zaznamenávají xxxxx xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (viz xxxxxxx). K objasnění xxxxxxxx nálezů je xxxxx použít dalších xxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx měření xxxxxxxx xxxxxxx xxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxx

1.5.2.1 Příprava

Xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aklimatizují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx aspoň 5 dnů před xxxxxxxxx testu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx. Odstranění srsti xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxxxxx xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Zvířata xx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx testu.

1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Lze xxxxxx xxxxx a/nebo xxxxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx 20 xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx indukční xxxxxxxx xx upraví xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx je nejvyšší xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx silné xxxxxxxxxx kůže. Xxxx xxxxxxxxxx koncentrace se xxxxxxx maximální koncentrace, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx je možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx pokusu xx xxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx.

Pro xxxxxxxxx xxxxx rozpustné xx xxxx xx xxxxxx xxxxxx vodu xxxx xxxxxxx nedráždící xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx je xxxxxxxxxx 80% xxxxxx etanol/voda xxx xxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxxx.

1.5.2.3 Xxxxxx

1.5.2.3.1 Xxxxxxx

Xxx 0 - Testovaná xxxxxxx

Jeden xxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Xxxxxx xxxxxxxxxx testu se xxxxxxxx xxxxxx testovanou xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (výběr xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx lze xxxxxxxx aplikovat přímo).

Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x přidržován x xxxxxxxx s xxxx xxxxxxxxxxx plátkem xxxx komůrkou a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 hodin.

Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxxx je bavlněný xxxxxxxxx, xx už xxxxxxx xxxx čtverhranný, x xxxxxxx xxxxxxxxx 4 - 6 xx². Xx preferováno xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx použito xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxxx expozice.

Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxx xxx xx zbaven xxxxx (důkladně xxxxxxxx). Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx způsobem jako x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx je xxxxxxxx xx testovací xxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx komůrkou a xxxxxxx obvazem xx xxxx 6 xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx, že negativní xxxxxxxxx skupina xxxx xxxxx, lze použít xxxxx kontrolní xxxxxxx xxx xxxxxxxx.

6. - 8. x 13. - 15. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx aplikace xxxx x den 0 xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx plochu xx xxxxxx boku (xxxxxxxx xxxxxxxx srsti) 6. - 8. xxx x znovu 13. - 15. xxx.

1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx

27. - 29. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupina

Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxx srsti (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx plátek xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx neošetřeného xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxx xxxx neošetřeného xxxx testovaných x xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxx může xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plátky xxxx komůrky jsou xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxx po xxxx 6 xxxxx.

1.5.2.3.3 Pozorování x hodnocení

- xxxxxxxxx 21 hodin xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx plocha xxxxx xxxxx;

- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx později (xxxxxxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx provokačního xxxxxx) xx pozorují kožní xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx stupnice uvedené x xxxxxxx;

- xxxxxxxxx xx dalších 24 xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 54 xxxxx xx aplikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxx) se kožní xxxxxx znovu pozorují x zaznamenávají.

Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxx senzibilizováno x xxxxx xx kontrolní.

Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx xxxxxxxxx o xxxxx později, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Opakovanou xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx reakcí, které xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx zaznamenávají xxxxx xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (xxx xxxxxxx). K xxxxxxxxx xxxxxxxx nálezů xx xxxxx xxxxxx dalších xxxxxxx, xxxx např. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx.

2. SBĚR X XXXXXX XXXXX (XXXX X BUEHLERŮV TEST)

Xxxxx se xxxxxxx xx tabulky, xx xxxxx musí xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX (GPMT X XXXXXXXXX TEST)

Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testu xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxx tohoto xxxxx xxxx xxxx xxxxxx (xxxx. LLNA - xxxx regionálních xxxxxxxxxxxx xxxxx, XXXX - xxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx) xxxxxx xxxxx podrobností postupu x výsledků získaných xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látky.

3.1 Zpráva x průběhu pokusu (XXXX x Buehlerův xxxx)

Zpráva x xxxxxx obsahuje tyto xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx získány:

Xxxxxxx xxxxxxx:

- použitý xxxx xxxxxx;

- xxxxx, stáří x xxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxxx chovu, strava xxx.;

- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx x konci xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxx podmínky:

- způsob xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxx xxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx x provokačních koncentracích xxx vlastní xxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, aplikaci x odstranění xxxxxxxxx xxxxx;

- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxxxxx x celková xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x vehikula, xxxxxxx xxx xxxxxxx a xxxxxxxxx.

Výsledky:

- xxxxxx výsledků xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (viz 1.3.) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;

- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx pozorovaných xxxxxx;

- všechny histopatologické xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxx

4. LITERATURA

Tato xxxxxx xx analogická x metodou OECD XX 406.

Xxxxxxx

5.1 Xxxxxxxx Magnussona/Kligmana xxx hodnocení vyvolaných xxxxxxxxxxxxx reakcí

0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

1 = xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kůže;

2 = xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx zarudnutí xxxx;

3 = xxxxxxxxxx zarudnutí a xxxxxxx xxxx.

5.2 Klasifikace xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxx pozitivity xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, tj. xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x rámci xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx senzibilizováno, xx xxxxx xxxxxxxxxxx jako

xxxxx xxxxxxx (I. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx

xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 9 - 28 % xxxxxx

xxxxxxx xxxxx alergen (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx

silný xxxxxxx (XX. xx.) - 65 - 80 % zvířat

extrémní xxxxxxx (X. xx.) - 81 - 100 % zvířat

X.7. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX ORÁLNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody

Testovaná xxxxx xx podává xxxxx xx 28 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx zvířat xxxxxx, x xx každé xxxxxxx jedna xxxxxx xxxxx. Během xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pečlivě xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx během pokusu; xxxx zvířata, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxx a xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Zdravá xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolní xxxxxxx x jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx tak, xxx xx co xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx klece. Každé xxxxxxxxxx zvíře je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx 5 dní před xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx sondou xxxx x xxxxxxx nebo x xxxxx xxxx, xxxxx účelu xxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností xxxxx.

Xxxxx xx xx třeba, xxxxxxxx xxxx suspenduje xx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx). Xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx oleji (např. xxxxxxxxxx) x xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx nevodná xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, musí xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx vehikulu.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxx se xxxxxxxx potkanům, ale xx možno použít x xxxxxx druhu xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx pokusných kmenů. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Podávání xxxxx xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx x x xxxxxx případě xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.

Xx xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (pro každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx tato studie xxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx třeba x xxxx studiích xxxxxx xxxxxxx stejného xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.2 Počet x pohlaví

Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx použije xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Pokud xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx koncem xxxxxx.

Xxxxxx je možno xxxxxxx další xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, trvání xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx účinků. Používá xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).

1.2.2.3 Xxxxx xxxxx

Xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx se xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx s pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokusným xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx aplikuje nejvyšší xxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx účinek xxx xxxxx dávce 1000 mg.kg^-1 tělesné xxxxxxxxx, xx možno xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx-xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx předběžnou vyhledávací xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx dávek.

Při xxxxxx dávek je xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx existující xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx látkách xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxx xxxxx utrpení. Xxxx xx xxxxxxx dávky x xxxxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx závislost účinku xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxxxx (NOAEL). Xxxxxxx xx vhodný xxxx- xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx xxxxx xxxxxx větší xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx čtvrtou xxxxxxxx skupinu, než xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxx větší xxx 10).

Xxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxxx xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx podávané množství xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx rovnováhu. Xxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxx se xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je třeba xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxx xx xx xxx xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx dobu x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxx studie sloužit xxxx xxxxxxxxx pokus xxxx dlouhodobou studií, xx xxxxx x xxxx studiích použít xxxxxx potravy.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Neprokáže-li test xxxxxxxxx xxx popisovaným xxxxxxxx žádné toxické xxxxxx při dávce 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx za den xxxx při xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxx, která xxxx dávce xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky nevyplývá x analogie x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx od provedení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxx dávkových xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testu xxxxx, xxxxx údaje o xxxxxxxx lidí xxxxxxxxxxx, xx xx třeba xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx pozorování je 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx dalších 14 xxx bez xxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zpožděné xxxxxx a pro xxxxxxxxx přetrvávání nebo xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Xxxxxxxx xx podává xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx po xxxx 28 dnů, xx xxxxxxxxxxxx případech 5 dní v xxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx sondou xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx zvířete. Xxxxx by xxxxx xxxxxxxx přesáhnout 1 xx na 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx lze podat x 2 ml xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx objemu xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxx, xxx byl xxxxxxx xxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx x xxxxx dráždivých x xxxxxxxxx, u xxxxxxx xx xxxxx obvykle xxxxxxx xx stupňovanými xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxx pozorování

Xxxxxxxxx klinické pozorování xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, nejlépe x xxxxx xxxxx xxxx a s xxxxxxxx doby xxxxxxxxxxx xxxxxx účinku xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx všech zvířat xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, utracena xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx aplikací (xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x dále nejméně xxxxxx týdně. Toto xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx x standardním xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x nejlépe xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx nejméně; xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx neměla xxxx xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, xxx a xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x vegetativních xxxxxx (xxxxxx, zježení xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxx další. Xxxxxxxxxxxxx se změny xxxxx, polohy, dále xxxxxx xx manipulaci, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx pohybů, stereotypů x chování (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx pozadu).

Xx čtvrtém xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx podněty (xxxx. xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx se xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x testování xxxxxx, xxxx xxxxxxx x literatuře (xxx Xxxxxxxxx xxxx, xxxx X).

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx 28xxxxx xxxxxx slouží xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (90xxxxx); x xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx poruch xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Ovšem x x tomto xxxxxxx xxxx xxxxx x funkčních xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxx subchronickou xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx pozorování funkčních xxxxxx u xxxxxx xxxxxxxxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx funkčního xxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxx hmotnost a xxxxxx xxxxxxx x xxxx

Zvířata xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Spotřeba potravy x xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, také x xxxxxxx aplikace x xxxxx xxxx.

1.2.3.3 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.

Krev xx xxxxxxx těsně xxxx nebo v xxxxxxx xxxxxxxx zvířete, xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx analýza

Xxxxxxxxxxx analýza xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxx, xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx před xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx). Doporučuje se xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx noc xxxxxxx krve¹⁾. Vyšetření xxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx dvou xxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky xx jaterní xxxxx (xxxx alaninaminotransferáza, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx). Zaměření xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxxx kyselin xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx poskytnout xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Další xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx xx možno vzhled, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, pH, xxxxxxxxx, glukózu a xxxx příp. xxxxxxx.

Xxxx je xxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx poškození tkání x séru.

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx u xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx na xxxxxx metabolické xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx hormonů, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxxxxx xxxxxx vyšetření xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxx látek xxxx xxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x úvahu použitý xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx látky.

Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxx některých xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx stanovení xxxxx xxxx začátkem xxxxxx.

1) Vyšetření xx xxxxx xx xxxxxxx pro xxxx xxxxxx x séru x xxxxxx, xxxxxxx xxx glukózu. Xxxxxx xxxxx xxx toto xxxxxxxxxx je xx, xx u xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx mohla maskovat xxxxx xxxxx a xxxxxx interpretaci. Na xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxx xxx xxxx xx celkový xxxxxxxxxxxx x u xxxxxxxx x potravě xx xxxxxxx xx pravidelnosti xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx na xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xx pozorování funkčních xxxxxx xx 4. xxxxx xxxxx.

1.2.3.5 Xxxxx

U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, zahrnující xxxxxxx xxxxxxxxx vnějšího xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxx lební, xxxxxx x břišní, x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, brzlík, xxxxxxx, xxxxx x srdce xxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx tkání x xx xxxxxxxx xx xxxxx xx zváží xx vlhkém stavu, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Následující xxxxx xx třeba přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx hemisfér, xxxxxxx x xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, tenké i xxxxxx xxxxxx (xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, slezinu, xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx (konzervované naplněním xxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx), xxxxxx x xxxxxxxx pohlavní xxxxxx (např. xxxxxx, xxxxxxxx), močový xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x jedna xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx), periferní xxxx (x. xxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxx), xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxx kostní xxxxx (xxxx čerstvý xxxxx x nasáté xxxxxx xxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxx nebo jiných xxxxxx xx možno xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxxx orgán, xxxxx xx xxxx xxx cílovým xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, je třeba xxxxxxx.

1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x u zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Pokud xx v xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx s nejvyšší xxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxx x x xxxxx skupin s xxxxxxx dávkami.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx byly xx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x tkáně, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXX X XXXXXX XXXXX

X dispozici xxxx xxx údaje x xxxxxx jednotlivém xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx údaje xxxxxxxxxxxx xx tabulkové xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících příznaky xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x průběhu xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxx každého xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x jednotlivými typy xxxx.

Výsledky x xxxxxxx formě xx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou x uznávanou statistickou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx zvolit xxx xxx plánování xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx o xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x xxxxxx obsahuje xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být získány:

Xxxxxxx zvířata:

- xxxxxxxxx druh/kmen;

- xxxxx, stáří x xxxxxxx xxxxxx;

- xxxxx, xxxxxxxx chovu, xxxxxxx atd.;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx začátku testu, xxxx x týdenních xxxxxxxxxxx x na xxxxx testu.

Podmínky xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxx než xxxx;

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxx údaje x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx aplikaci, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx testované látky;

- xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx dávku x xx na kg xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xxx x aplikaci x dietě xxxx xxxx);

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x kvalitě xxxx (xxxxxx druhu x xxxxxx);

Výsledky:

- xxxxxxx hmotnost a xxxx xxxxx;

- xxxxxxxx potravy x xxxx;

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx příznaků xxxxxxxx;

- xxxxxx, závažnost x trvání xxxxxxxxxx xxxxxx, příp. xxx xxxx vratné nebo xxxxxxxx;

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx smyslové xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;

- výsledky xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxx x absorpci, xxxxx xxxx xxxxxxx;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků.

Xxxxxxx výsledků

Xxxxxx:

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx OECD XX 407.

X.8. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)

1. METODA

1.1 Xxxx

Xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxx částic, xxxxx xxx, bod xxxx, xxx xxxx, xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (jsou-li stanovitelné).

1.2 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx exponováno studované xxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, každá xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xx 28 xxx. Xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vehikulum. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zjišťují se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx a xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx se zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, přidá xx k xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, aby x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxx se užije xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Existují-li xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx je využít.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x běžně xxxxxxxxx pokusných kmenů. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx).

1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x nesmí xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx budou xxxxxxx x průběhu xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 28 xxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).

1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

Použijí xx xxxxxxx xxx xxxxxxx x různou úrovní xxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx - xxxxx xx užije - x xxxxxxxxxxx stejné xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx toxické účinky, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xx xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx koncentrací, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly odstupňované xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx koncentrací x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.

1.3.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx xx xxx 6 xxxxx xxxxx; x případě specifických xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx expozice.

1.3.2.5 Expoziční xxxxxxxx

Xxx xxxxxx xx zvířaty xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx hodinu, xxx xxx zaručen xxxxxxxxx xxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx rozdělení látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xx nejvíce shlukování xxxxxx a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry v xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx x zásadě xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx orálně-nasální, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx dva xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

1.3.2.6 Xxxx pozorování

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat xxxxx xxxxxx xxxxxx expozice x zotavení a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxx, ve kterém xx objeví x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.3.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxx, 5 - 7 xxx x týdnu, xx xxxx 28 xxx. Zvířata v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx experimentu xx být 22 ^xX ± 3 ^xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx být mezi 30 % x 70 %, x xxxxxxxx případů, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx expozice xx xxxxxxxx potrava xxx xxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx systém x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rychlost xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx v xxxxx expozičním xxxx xxxx stejné. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx expozice xxxx xxxxxxxx co xxxxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:

x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně).

x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x dýchací xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx o xxxx xxx ± 15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx koncentrace xxx xxxxxxxx, xxx xx xx prakticky možné. Xxxxx xx xxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx.

x) Xxxxxxx x xxxxxxx vzduchu xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxx expozice x xx jejím skončení xx xxxxxxxxxx provádějí x xxxxxxxxxxxxx systematicky; xxxxx zvíře xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx xx příznaky toxických xxxxxx a zaznamenávat xxxxxx xxxxxx, stupeň x trvání. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, očí, sliznic, xxxxxxx a krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx týdně. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x spotřebu xxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke ztrátám xxxxxx, xxxx xxxx. x xxxxxxxx kanibalismu, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx studie se xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata a xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx trpící xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vyřadit, humánně xxxxxxx x xxxxxx.

Xx konci xxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx následující xxxxxxxxx:

1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zahrnovat xxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.

2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x ledvin xxxxxxxx alespoň xxxxx x těchto parametrů: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx známá xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x celkové xxxxxxxxx x séru.

Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, draslíku, xxxxxxx xx lačno, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterasy.

Xxxxx biochemické xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx.

1.3.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva. Xxxxx játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, plíce x xxxxxxx se xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x tkáně (xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, ledviny, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny x xxxxx, x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx změnami xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxx přechovávat ve xxxxxxx médiu s xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, zvážit x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx aby xx xxxxxxxxx struktura.

1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

U xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, a x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx ve skupině x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x všech xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x tkáně, xx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Údaje se xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu patrný xxxxx xxxxxx na xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení xxx.,

- podmínky xxxxxx: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx přípravy xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, popis xxxxxxxxx odpadního vzduchu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v boxu, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx přístroje xxx xxxxxx teploty, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxx stability xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic aerosolu,

- xxxxx o xxxxxxxx xx sestaví xx tabulky x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx odchylkou). Xxxx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxx: x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx; c) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx); x) xxxxxx vehikula, xxxxx xxxx xxxxx; x) skutečná xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx; x) hmotnostní xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) x xxxxxxxxxxx směrodatná xxxxxxxx (XXX),

- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle pohlaví x xxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,

- popis xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxx xxxxxx,

- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,

- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx hmotnosti,

- hematologická vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,

- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.9. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx kůži xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, a xx každé skupině xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx podávání xx zvířata xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, která xxxxxxx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.

1.2 Popis metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Nejméně 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Před testem xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx srst xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx cca 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nebo xxxxxxx xx potřeba opakovat xxxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx holení xxxxx xx třeba xxxx na xx, xxx xx nepoškodila xxxx (xxxx. abrazí). Xxx nanášení xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % povrchu xxxx. Xx třeba vzít x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxx x velikosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx a x velikosti xxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx formy, xx xxxxx danou látku xxxxxxxxxx navlhčit vodou, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx zaručen xxxxx xxxxxxx s xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Látka se xxxxxx denně 5 xx 7 dnů x xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xx možno xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, králíky xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx být xxxxxxxxxx. Xx začátku xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx každou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 zvířat (5 samic x 5 xxxxx) se xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx být nullipary x nesmí xxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx budou xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx možno xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx dávku x xxxxx následujících 14 xxx xx ukončení xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx se také xxxxxxxxx skupiny 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx každého pohlaví).

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupinu xxxx - pokud xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx skupinu s xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxx nejméně 6 hodin denně. Xxxxxxxx testované xxxxx xx se xxxx xxxxxxxx každý xxx xx xxxxxxx dobu. X intervalech týdenních xxxx čtrnáctidenních xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx ve xxxxxxx množství, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx jen x malém xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx xx více xxx 3 úrovně xxxxx, xxxx být vmezeřené xxxxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxx x střední dávkou x x kontrolní xxxxxxx by počet xxxxxxx xxx být xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx k těžkému xxxxxxxxxx kůže, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx u vysoké xxxxxxx xxxxxx může xxxx k xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx účinků. Xxxxx-xx x xxxxxxx poškození xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pokus xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx^-1 nebo xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx další xxxxxxx nutná.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx dobu uhynutí x xxxx, xxx xx objeví x xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx otravy.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx. Exponují xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx skupiny, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx chovat xx dalších 14 xxx bez expozice, xxx se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx expozice xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx rovnoměrně xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx asi 10 % povrchu těla; x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx může xxx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx xx největší xxxx pokusné xxxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx porézního xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx překrýt, xxx se xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx se zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx požití xxxxx xx xxxxx xxxxxx x prostředků pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx však xxxxx xxxxxxxxx. Jako xxxxxxxxxxxx metody xx xxxxx xxxxxx "ochranného xxxxx".

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zbytky testované xxxxx, pokud xxxxx xxxxx xxxx s xxxxxxxx jiného xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávat příznaky xxxxxx včetně xxxxxx xxxxxxx, stupně a xxxxxx. Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxxx, xxxx, xxx x sliznic x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenávají xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx i xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx přežila, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Umírající xxxxxxx a zvířata x těžkém xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x pitvat.

Na xxxxx xxxxxx se x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

1. Xxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x srážlivosti xxxx.

2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve: x xxxxxxxxx xxxxxx jater x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jeden z xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx xxxxx xxxx glutamátpyruvát-transamináza), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (dříve xxxxx xxxx glutamát-oxalacetát-transamináza), dusík xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.

Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx xxxxxxxxx: vápníku, xxxxxxx, chloridů, sodíku, xxxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx, lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy.

Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx x případě xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx. Aspoň xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxx x varlata xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx a xxxxx, xxxx. xxxxxxxx x xxxxxxxxxx kůže, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, srdce x všechny xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

U xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx kontrolní xxxxxxx, je třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů x xxxxx. Pokud se x xxxxxxxx x xxxxxxx ve skupině x nejvyšší dávkou xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxx tkání x x xxxxx xxxxxx s nižšími xxxxxxx. U zvířat xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx orgány x tkáně, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.

2. XXXXX

Xxxxx se xxxxxxx do xxxxxxx. X xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx poškození.

Xxxxxxx xxxxxxxx výsledky xx třeba vyhodnotit xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x průběhu pokusu

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, krmení atd.),

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxx obvazu; xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx),

- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se použije) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx bez xxxxxx, xxxxx ji xxx xxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx,

- doba xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx,

- doba, xxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,

- spotřeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,

- diskuse xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.10. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX U XXXXX XX VITRO

1. XXXXXX

Xxxxxx xx replikací XXXX XX 473, In Xxxxx Xxxxxxxxx Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx analýzy xxxxxxxxxxxxxx aberací in xxxxx xx xxxxxx xxxxx, jež v xxxxxxxxx savčích xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx chemickými xxxxxxxx jsou většinou xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx však xxx k aberacím xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Vznik xxxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, xx daná xxxxxxxx xxxxx xx schopna xxxxxxxxx numerické xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx k xxxxxxx numerických xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx toho, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x příbuzné xxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx x onkogenech x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, hrají xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat.

Xxxxx xxxx xx používá x odhalení možných xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx x tomto xxxxx xxxxxxxxx, je xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxx xxxxxx x karcinogenitou. Xxxx korelace závisí xx xxxxx xxxxx x existuje stále xxxx dokladů x xxx, xx existují xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx poškozením XXX.

X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx stabilizovaných xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx primární xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx vybrány na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x kultuře, stability xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx spontánních chromozómových xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx podmínky x xxxxx in xxxx. Xx třeba xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx by xxxxx xxxx k pozitivním xxxxxxxx, jež xxxxxxxxxx xxxxxxx mutagenitu, xxxxx xxxx způsobeny změnami xX, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx cytotoxicitou (4) (5).

1.2 DEFINICE

Aberace xxxxxxxxxxxxxx typu: strukturální xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx chromatid, nebo xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatidami.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako zlom xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx).

Xxxx chromatidy: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx porušení xxxxxxxxxx xxxxx xxxx obou xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx vzniklá mezera xx xxxxxxxxx chromatidy xx xxxxx, než xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx pak x případech, koncový (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx hodnoceného xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx mitózy, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx xxxx chromozómy x 4, 8, 16, .. chromatidami.

Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a x xxxxxxxxxx vybočením xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxx x xxxxxxxx dělený xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx buněk; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx populace.

Numerická xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx xxxxxxxxx počet (xxxx 3x, 4n xxx.).

Strukturální aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury xxxxxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, pozorovaná xxxx delece x xxxxxxxxx x výměny.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xx x xxxxxxxxxxxx aktivací a xxx ní. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx například Xxxxxxxxxx ® nebo xxxxxxxxxxx, buňky se xxxxxx, obarví xx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.

1.4 POPIS XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, kmenů xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx (například fibroblasty xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx periferní xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx).

1.4.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx

K xxxxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (kultivační nádoby, xxxxxxxxxxx CO₂, xxxxxxx x xxxxxxx). X xxxxxxxxx linií x xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx modálního xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx. X xxxxxxx kontaminace xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx třeba xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Stabilizované xxxxxxx xxxxx a xxxxx: xxxxx xx xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxx vysetím xx xxxxxxxxxxxx média x xxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx před dobou xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 ^xX.

Lymfocyty: xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxxx) xx přidá xxx xxxx xxxx x vhodným antikoagulantem (xxxx. heparinem), xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx jedinců x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 ^xX.

1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxx xx testovanou xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (S9) xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx směs xxxxxxxxxxxxx a ß-naftoflavonu (10) (11) (12).

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx obvykle 1 - 10 % x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx tom, xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx látka. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x několika xxxxxxxxxxxxx.

Xxx účely xxxxxxxxx aktivace xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx modifikované xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx specifické xxxxxxxxx xxxxxx. Výběr xxxxxxxxx linií by xxx být xxxxxxx xxxxxx (např. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx P450 x metabolismu xxxxxxxxx xxxxx).

1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxx xxxxx, xxxxx se před xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle x případně xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx xx xxxxxxx přidávat přímo xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx údaje x xxxxxx stabilitě xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx jejich vlastnosti.

1.5 XXXXXXXX XXXXX

1.6 ROZPOUŠTĚDLO

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx existovat xxxxxxxxx, xx by mohlo x testovanou xxxxxx xxxxxxxx reagovat, x xxxxx xxxxxxxxx přežívání xxxxx a xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje xx, xxx xxxx xxx, xxx je xx xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlo xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.

1.6.1 Koncentrace

Xxxx kritéria, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.

Cytotoxicita se xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x bez xx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx živých xxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxx. Je vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Dochází-li x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od maximální xx xxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx. To xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx více xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. X době xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxx xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxx signifikantní xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx o xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx index xx xxxxx nepřímou xxxxx xxxxxxxxxxxxx / cytostatických xxxxxx x xx xxxxxxx xx době xxxxxxxx xx expozici xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxx akceptovatelný xxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx detekce xxxxxxxx xxxx obtížná x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx informace xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx x kinetice xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx; xxx ovšem xxxxxxxxxxx xxxxxxx průměr, xxxxx xx xxxx xxxxxx existenci v xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. A xxx x xxxx prodloužení xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx znamenat xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx sklízení z xxxxxxxx optimálního xxxxxxx xxxxxxx.

U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nejnižší x xxxxxx 5 µl/ml, 5 xx/xx xxxx 0,01 X.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx koncentrace, xxx xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx médiu na xxxxx kultivace s xxxxxxxxxx látkou. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx-xx x xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx vyšších, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx koncentracích x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Může xxx xxxxxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x na konci xxxxxxxx, protože se xxxxx xxxxxxxx může xxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx, X9 apod. Xxxxxxxxxxxxx xx xx zjistit x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.6.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly

Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx). Xxxxx xx xxxxxxxx metabolická xxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx mutagenního účinku.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx používá xxxxx xxxxxxxxx, a to xxx xxxxxxxxxxx úrovních, xxx se xxxxxxx, xx poskytne xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx citlivost xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx zvolit xxx, xxx účinek xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Mezi xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:

Metabolická xxxxxxxx	Xxxxx	CAS	XXXXXX
Xx	methyl xxxxxxxxxxxxxx xxxxx methansulfonát xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx C 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx	66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5	200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1
Xxx	xxxx[x]xxxxx cyklofosfamid monohydrát xxxxxxxxxxxxxx	50-32-8 50-18-0 6055-19-2	200-028-5 200-015-4

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Xxx, xxx je xx xxxxx, xx vhodné xxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx látku xx xxxxxx chemické xxxxxxx.

Xxx xxxxx časový xxxxxxxx xxxxxxxx kultur xx xxxxx použít x negativní kontrolu, xx které xx xxxxxxx rozpouštědlo nebo xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx experimentální xxxxxxx. Mimoto je xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx bez jakéhokoliv xxxxxxxxx.

1.6.3 Xxxxxx

1.6.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xx proliferující xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx je xxxxx začít působit xxx 48 xxxxx xx stimulaci xxxxxxxxx.

Xxxxxxx se xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx kultury; a xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontroly x rozpouštědlem, nebo xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xxxxxxx historických xxxxx prokázat, že xxxxxxx xxxx duplicitními xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx (13) (14), xx xxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx koncentraci xxxxxxx jenom xxxxx xxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx je třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx postupy, jako xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kultivačních xxxxx (15).

1.6.3.2 Xxxx sklízení kultury

X xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx vystaví xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx ní po xxxx 3 - 6 xxxxx x xxxxxx xx odebírají x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5násobku xxxxxxxx xxxxx buněčného xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (12). Pokud jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx i xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx expozicí xx xx xxxx xxxxxxxx kultivace xxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, než xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Negativní xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.6.3.3 Příprava xxxxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx Xxxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 1 - 2 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvlášť. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx.

1.6.3.4 Xxxxxxx

Xxxxxxx preparáty, xxxxxx pozitivních a xxxxxxxxxxx kontrol, xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx postupy často xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metafázických xxxxx a ztrátě xxxxxxxxxx, xxxx být x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx modálnímu xxxxx ± 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx metafází, xxxxxxxxxxx z xxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx. X případě, xx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx, může xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

I xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxx důležité zaznamenat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx.

2. ÚDAJE

2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX

Jelikož xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx typy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx včetně jejich xxxxx x četnosti x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx do xxxxxxx četnosti xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních kulturách.

Xxxxxxx se data xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx tabulce.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx potvrdit xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x odst. 1.4.3.3. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx modifikaci použitých xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. K xxxxxxxxxx, které xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx frekvence xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Nejprve xx xxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx mohou xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3) (13). Statistická xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku.

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nárůst xxxxx xxxxx x endoreduplikovanými xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx inhibovat xxxx xxxxxxxxx cyklu (17) (18).

Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jejímž xxxxxxx výsledky xxxxxxxxx xxxx uvedená kritéria, xx v tomto xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx.

Ačkoliv xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve výjimečných xxxxxxxxx získaná data xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx, xxxx diskutabilní xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx experimentů. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx ukazují, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx v kultuře xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

ZPRÁVA X XXXXXXX POKUSU

Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.

Xxxxx:

- xxx x xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx x xxxxxxxx daného xxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx, je-li xx xxxxx,

- xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxx krve, xxx byla použita xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx lymfocyty, použitý xxxxxxx,

- počet xxxxxx xxxxx, xx-xx xx xxxxx - xxxxxx udržování xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx

- xxxxxxx xxxxx chromozomů.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx koncentrace x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx např. xxxxx x cytotoxicitě a xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jsou-li x dispozici,

- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂, je-li xx xxxxx

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxx kultivace,

- xxxx působení,

- xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx kultivace, xx-xx xx xxxxx

- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx přípravy xxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx x buněčném xxxxx, x počtu buněk, xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx x xX x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx,

- xxxxx buněk s xxxxxxxxxxxxxx aberacemi a xxx chromozómových xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kulturu xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx ploidie,

xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx byly xxxxxxxxx,

- souběžné xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- historické xxxxx z xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx výsledků.

Xxxxxx.

X.11. MUTAGENITA - TEST CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX X XXXXXX XXXXX XXXXX IN XXXX

1. XXXXXX

Metoda xx xxxxxxxxx XXXX XX 475, Xxxxxxxxx Xxxx Xxxxxx Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 ÚVOD

Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx u savců xx vivo xx xxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx x buňkách xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx dvojího druhu: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx látka je xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny jsou xxxxxxxx chromatidové, xxxxx x aberacím xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx řady genetických xxxxxx u xxxxxxx x xxxxxxxx přesvědčivé xxxxxxx xxxx, že xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx jevy, jež xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx úlohu xxx xxxxxxxx x xxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxxxxx systémech.

K xxxxxx xxxxx xx xxxxx využívají xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxx je kostní xxxx, protože xx xxxxx x tkáň xxxxxx vaskularizovanou, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx dají xxxxxx xxxxxxxx a zpracovat. Xxxx živočišné xxxxx x xxxxxx tkáně xx v tomto xxxxx nepoužívají.

Tento xxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxxxx rizika, protože xxxxxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxx metabolismu xx xxxx, farmakokinetiky x xxxxxxx reparace XXX, x když xxx mohou xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Test xx xxxx je také xxxxxx xxx další xxxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx xxx předtím xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, že xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx reaktivní xxxxxxxxx xx cílové xxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxx použití xxxxxx xxxxx.

1.2 DEFINICE

Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx projevuje jako xxxx jedné, případně xxxx chromatid, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx chromozómového typu: xxxxxxxxxxxx poškození chromozómu xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx jako xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx chromatid na xxxxxxx xxxxx (zahrnuty xxxx aberace xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, prsténčitý xxxxxxxxx-xxxx)

Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx zlom xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx obou xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x případech, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx chromatidy), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx hodnoceného xxxxxxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx S-fázi replikace XXX xxxxxxxxxx jádro xx xxxxxx, nýbrž xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.

Xxx: achromatická xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx chromatidy x x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx buněk v xxxxxxxx dělený celkovým xxxxxx xxxxx x xxxx buněčné xxxxxxxx; xxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxx populace.

Xxxxxxxxx xxxxxxx: změna počtu xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxxxxxxxx počet (xxxx 3x, 4x xxx.).

Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zjistitelná xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx xxxxxx xx stadiu xxxxxxxx, pozorovaná xxxx xxxxxx a fragmenty x výměny.

1.3 PRINCIP XXXXXX

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látce a xx vhodnou xxxx xx xxxxxxxx se xxxxxx. Xxxx usmrcením xx na xx xxxxxx látkou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). X xxxxx kostní xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.4 XXXXX METODY

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Výběr xxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x čínští xxxxxx, xxx ovšem xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x každého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx chovu

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx X, xxxxxxx xx xxxx být 50 - 60 %.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx mladí xxxxxxx xxxxxxx se náhodně xxxxxxx do kontrolní x experimentální xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, jak x xxx xxxx xxxxx umístěny. Xxxxxxx xx třeba jednoznačně xxxxxxx. Po dobu xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx podmínkách.

1.4.1.4 Příprava xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxxx xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx čerstvé preparáty, xxxxxx údaje x xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx příliš známé xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx použití xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx stejně.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx tak, xxx xxxx účinky xxxxxx, xxx přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx možné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx to xxxxx, je třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx stejné chemické xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx. Příklady xxxxx vhodných xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:

Xxxxx	XXX	EINECS
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx	62-50-0	200-536-7
xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx	759-73-9	212-072-2
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo vehikulem x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx by xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, pokud xxxxxx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberací x x interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx odběr xxxxxx, xx nejvhodnější dobou xxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx použít x xxxxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx zvolené xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nepříznivé xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.5 POSTUP

1.5.1 Xxxxx a xxxxxxx xxxxxx

V každé xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx x xxxx, xxx se xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x stejném živočišném xxxxx x použití xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx mezi xxxxx pohlavími xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je testování xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx postačující. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxx látkám xxxx xxx závislá xx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx se jedná x objemnou xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx aplikace xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx dávky za xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Jiné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx časových xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx dne. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxx 12 - 18 xxxxx) xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx absorpci a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x její vliv xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx vzorků po 24 hodinách xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx v daném xxxxxxxxxx režimu xxxxx xxxxxx vícekrát xxx xxxxxx za den, xx třeba xxxxxxx xxxxx xxxxx vzorků 1,5xxxxxxxx délky xxxxxxxxxx xxxxxxxxx cyklu xx xxxxxxxxx podání xxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx intraperitoneálně injikuje xxxxxx dávka Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx je xxxxx interval xxxxxx 3 - 5 xxxxx, u čínských xxxxxx xxxxxx 4 - 5 xxxxx. X kostní xxxxx xx xxxxxxxx buňky x xxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, protože nejsou x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx údaje, xx xxxxx ji provádět x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x hlavní xxxxxx (5). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx interval xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx pokrývaly xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxxxxx k toxicitě xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx pozdější xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx nejvyšší xxxxx. Xx je xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx byly xxxxxxx. Xxxxx, xxx x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, mohou představovat x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, jež se xxxxxxxxxxx individuálně případ xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx definována xxxx xxxxx, která xxxx x určitým známkám xxxxxxxx x kostní xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx 50 %).

1.5.4 Xxxxxxx test

Xxxxxxxx test xxx xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti x xxxxx dávce xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x jeden xxx nevyvolává žádné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x látkách s xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx provedena celá xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xx xxx xxx xxxx trvání xx 14 xxx, x 1&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx než 14 xxx. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.5.5 Xxxxxxxx látky

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx buď xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X odůvodněných xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x jiné xxxxxxx xxxxxxxx. Maximální xxxxx xxxxxxxx, která se xx sondou xxxx xxxxxxx najednou vpravit, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x hmotnosti; xxxxx xxxxx musí být xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx při vyšších xxxxxxxxxxxxx xxxxx účinky, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx tak, xxx xxxxx byl xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Příprava xxxxxxxxxx

Okamžitě xx xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx xx ni xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xx podložní xxxx a xxxxxx xx.

1.5.7 Xxxxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se x xxxxx xxxxxx xxxxxx pozitivních x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx 1000 buněk x každého xxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx minimálně 100 xxxxx. Tento xxxxx xx xxxxx xxxxxx při xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxx (xxxxxx pozitivních x negativních xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxx jejich xxxxxxxx dochází xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx být počet xxxxxxxxx v hodnocených xxxxxxx 2x ± 2.

2. XXXXX

2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. U xxxxxxx zvířete se xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx buňku x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx počet x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx zvlášť x xxxxxxxxxx se, xxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Nejsou-li xxxxx xxxxxxx o xxx, že obě xxxxxxx reagují xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xx obě xxxxxxx xxx statistickou xxxxxxx xxxxxxx.

2.2 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx výsledků

Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xx používá několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované látky xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx zřetelný xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx ve skupině x jednorázovou xxxxxx xxx xxxxxx časovém xxxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxxx je třeba xxxxxx biologickou významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Statistická xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Nárůst xxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx mitotické xxxxxxx x vyvolávat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buněčného xxxxx (7) (8).

Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx v xxxxx systému považuje xx xxxxxxxxxxx.

Většina xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx dat xxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx daných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxx x xxxxx, xxxx xx pravděpodobnost, xx xxxxxxxxx xxxxx bude xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx specifickou xxxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- xxxxx, xxx x pohlaví xxxxxxx,

- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx,

- xxxxx ze studie xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx velikosti xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x přípravě xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- zdůvodnění xxxxxxx podávání,

- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx oběhu xxxx xx cílové tkáně,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx látky v xxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) xx xxxxxxxxx dávku (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),

- xxxxxxxxxxx x kvalitě xxxxxxx x vody,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x odběru vzorků,

- xxxxxx hodnocení xxxxxxxx,

- látka xxxxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx a doba xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických preparátů,

- kritéria pro xxxxxxxxx aberací,

- xxxxx analyzovaných xxxxx xx jedno xxxxx,

- kritéria, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Výsledky:

- známky xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx,

- xxx x xxxxx aberací xxx xxxxxxx jedince zvlášť,

- celkový xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, jejich xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- případné xxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxx-xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- údaje xx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

Xxxxxxx výsledků.

Závěry.

B.12. MUTAGENITA - IN XXXX XXXXXXXXXXXX TEST V XXXXXXX ERYTROCYTECH

1. METODA

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 474, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Mikronukleus xxxx xx vivo x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v chromozómech xxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxx xxxxxxx x tom, xx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx. x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx.

Účelem xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx látky, jež xxxxxxxxx cytogenetické poškození, xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxx x xxxxxxxxxxxx kostní xxxxx xxxxxxx polychromatický xxxxxxxxx, xxxxx xx x buňky xxxxxxxxx; xxxxxxxx zbude x xxxxxxxxxx vzniklé xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx tím, xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx. Nárůst xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx xx u xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

X xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xx polychromní xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (polychromních) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx x každého xxxxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xxxx prokázáno, xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx druh dostatečně xxxxxxx pro detekci xxxxx způsobujících xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx či xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx nezralých (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx zralých (xxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx použít x xxxxxxx, xx xx zvířata xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x savců xx zvláště xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx faktory xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x procesů xxxxxxxx XXX, x když xxx xxxxx být xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxx konečným xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx je také xxxxxxxx xxx další xxxxxx xxxxxxxxxxx efektu, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x systému xx xxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, xx se xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx použití tohoto xxxxx xxxxxx.

1.2 DEFINICE

Xxxxxxxxxx (kinetochor): xxxxxxx xxxxxxxxxx, se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx vlákna xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx chromozómů x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx (mikronukleus): xxxx jádra xxxxxxxx xx xxxxx buňky (xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx mitózy, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx opožďujícími xx fragmenty chromozómů xxxx celými xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: zralý xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xx xx xxxxxxxxx, polychromních erytrocytů xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxx jsou xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxx odlišit xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Zvířata xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xx vhodnou xxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxx x připraví xx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx (1-7). Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx se xx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx, jež xx xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, ve kterých xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxx xxxx xx poslední xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxx co xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx přítomnost xxxxxxxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx

Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, doporučují xx jako xxxxxxx xxxxxxx xxxx nebo xxxxxxx; xxxx xxxx xxx použit xxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx. Lze ovšem xxxxxx xxxxxxxxx vhodný xxxxx druh za xxxxxxxxxxx, že se x něj slezinou xxxxxxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx xxxx xx x xxx byla xxxxxxxxx xxxxxxxxxx citlivost xxxx xxxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx minimální a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % průměrné xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jsou uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.

Xxxxxxx xx měla xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat

Xxxxxx xxxxx dospělí jedinci xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx jednoznačně označí x xx xxxx xxxxxxxxx pěti xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx jsou xxxxx xxxxxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx a xx-xx xx možné, látka xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx připraví xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx podáváním ředí. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) prokazují, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx nepříliš známé xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x testovanou látkou. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx testu xx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx zacházet xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx stejně.

X xxxxxxxxxxx kontrol xx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx zvýšení nad xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx byly xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx preparátu. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx odlišným xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx je xx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx látek xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:

Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx	62-50-0	200-536-7
N-ethyl xxxxxxxxxxxxxxx	759-73-9	212-072-2
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx měly xx xxx zařazeny xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zpracování, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx historické xxxxx x xxxxxxxxx buněk x mikrojádry a x interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx x negativních xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx dobou xxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x neovlivněných xxxxxxx, xxxxxx existují xxxxxxxxxx nebo publikované xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x vzorek odebraný xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx pouze v xxxxx xxxxxxxxxxxx studií x xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 1 - 3 dávky), xxx xxxxxxxx údaje leží x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx kontroly.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx x pohlaví xxxxxx

V xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (11). Xxxxx x xxxx, kdy xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxx oběma xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx rozdíly, xx xxxxxxxxx pouze xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2 Dávkovací xxxxxx

Xxxx xx doporučit xxxxx standardní xxxxxx (xxxx. xxxxx, xxx xxxx více dávek x 24hodinových xxxxxxxxxxx). Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx schémata, pokud xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku tak xxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx použita xxxxxxx xxxxx a podávání xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx jedná x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx dvě dávky xx xxx podané x rozmezí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Xxxx xx xxxx provádět xxxxx xxxxxxx:

(x) Xx zvířata xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx dvakrát, xxxxxx xx xxxxx než xx 24 hodinách x xxxxxxx xx xxxxxxx xxx po 48 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx odeberou xxxxx než po 24 hodinách, xxxx xxx xxxxxxxxxx. Vzorky xxxxxxxxx krve xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxx po 36 xxxxxxxx xx podání xxxxx, se xxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxx 72 xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx časovém xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxx zapotřebí.

(x) Xxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xxx xxxx xxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx 18 x 24 hodinami xx xxxxxxxxx podání xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx mezi 36 x 48 xxxxxxxx xx posledním podání xxxxx (12).

Xx-xx xx relevantní, mohou xx xxxxxx xxxxxx x další xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.5.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx-xx xx studie ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxx, je třeba xx provádět x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, pohlaví x xxxxxxxxx režimu, xxxx xx použijí x xxxxxx studii (13). Xxx zjištění xxxxxxxx xx užívají xxx první časový xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx dávky xxx, xxx xxxxxxxxx rozmezí xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx je xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx vyšších xxxxxxx xx stejném xxxxxx podávání xx xxxxxx byly xxxxxxx. Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxxxxx biologickou xxxxxxxx, jako jsou xxxxxxx xxxx mitogeny, xxxxx představovat xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x vyhodnocují xx xxxxxx od xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx může xxx xxxx definována xxxx xxxxx, xxxxx xxxx k xxxxxxx xxxxxxx toxicity v xxxxxx dřeni (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx dřeni xxxx. xxxxxxxxx krvi).

1.5.4 Xxxxxxx xxxx

Jestliže xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxx o látkách x xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx neočekává xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx za xxxxxxx tří xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx xx xxx xxx době trvání xx 14 xxx, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx delší než 14 xxx. Podle xxxxxxxxx humánní xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.5.5 Aplikace látky

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx buď xxxxxxxxx sondou, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx expozice. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx pokusného xxxxxxx x nemá xxxxxxxxx 2 ml/100 x hmotnosti; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx žíravých xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx upravit xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx xx tak xxxxxxxx variabilita.

1.5.6 Příprava xxxxxx xxxxx / xxxx

Buňky xxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx x femuru xxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx a obarví xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Periferní xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx žíly xxxx xxxx vhodné xxxx. Krevní xxxxx xx okamžitě za xxxxxxxxx stavu xxxxxx (8) (9) (10), xxxx se xxxxxxx xxxxxx, které xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx XXX (xxxx. akridinové xxxxxx (14) nebo Xxxxxxx 33258 s xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx použití xxxxxxx, xxxxx není DNA xxxxxxxxxx. Tato xxxxxx xxxxxxxxx, xx by xx xxxxxx použít xxxxx xxxxxxx (xxxx. Xxxxxx). Lze použít x xxxxx xxxxxxx - například xxxxxx xx sloupcem xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx (16) - xxxxx tyto xxxxxx jsou x xxxxxxxxxx rutinně používány xxx analýzu xxxxxxxxxx.

1.5.7 Xxxxxxx

X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (nezralé + xxxxx). K xxxxxx xxxxx xx počítá x xxxxxxx kostní xxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxxxxxxx a x xxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxx minimálně 1000 xxxxxxxxxx (17). Všechny xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol) xx před mikroskopickou xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx vyhodnocuje xxxxxxxxx 2000 xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx tak, xx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxx xxxxxxxxx nemá být xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx menší xxx 20 % xxxxxxx x xxxxxxxx. Pokud xxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxx xxxx týdnů xxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx jedince. Možnou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy (xxxxxxx xxxxxx x průtoková xxxxxxxxxxxx analýza - xxxx cytometry), xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x tabelární xxxxx. Experimentální xxxxxxxxx xx xxxxx. X xxxxxxx jedince xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx erytrocytů, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx erytrocytů. Xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx týdnů xxxx déle, je xxxxx xxxxx také xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxx byly xxxxxxxxxx). Xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx procento erytrocytů x xxxxxxxxxx se xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx žádné xxxxxxx x xxx, xx obě xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxx xx xxx pohlaví xxx xxxxxxxxxxxx analýzu sloučit.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx na koncentraci xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx x mikrojádry xxxx xxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx s mikrojádry xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx intervalu xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx být jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx výsledky xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných experimentálních xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx látka, xxx jejímž xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx nelze ze xxxxxxxxx souboru xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky definitivní xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, x xxxx se experiment xxxxxxxxxx opakuje.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testu xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx tvorbu xxxxxxxxxx, xxxx důsledek xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx poškození xxxxxxxxxxx aparátu x xxxxxxxxxxxxxx testovaného xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xx xxxxx uvažovat, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx bude xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx cílovou xxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx toxicita).

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xx zprávě x průběhu xxxxxx xx třeba uvést xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxx

- rozpustnost x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.

Pokusná xxxxxxx:

- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- xxxxx, věk x xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx, chovné xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx jednotlivé xxxxxxx.

Podmínky xxxxxx:

- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x podávání xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx látky x potravině/pitné xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx),

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx potravy x xxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx a odběru xxxxxx,

- metody xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- kritéria xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry,

- xxxxx analyzovaných xxxxx u xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx xxxx nejednoznačná.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů s xxxxxxxxxx xxx každého xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx odchylka nezralých xxxxxxxxxx x mikrojádry xxx xxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy x metody,

- xxxxx ze xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx výsledků.

Xxxxxx.

B.13/14. MUTAGENITA - TEST REVERZNÍCH XXXXXX X BAKTERIÍ

1. METODA

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Reverse Xxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 ÚVOD

Xxx xxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx mutací kmeny Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx histidin) x xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx tryptofan). Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx vzniklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx bakteriálního testu xxxxxxxxxx mutací xxxxxxx x tom, xx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx přítomné v xxxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx bakterie xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xx základě xxx xxxxxxxxxx xxxx za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, kterou xxxxxxxx xxxxxxxx zkušební xxxx.

Genové xxxxxx xxxx u člověka xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx genové xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx supresorových genech xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx vzniku nádorů. Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx jednoduchý. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx citlivých xxxxxxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxxxxx a eliminace xxxxxxx xxxxxxxx DNA xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xxx jsou náchylné x chybám. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kmenů xxxxxxxx xxxxxx některé xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx velmi xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx širokou xxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Test xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx Salmonella xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxxx xxxx slouží ke xxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (histidinu xxxx. tryptofanu), xxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, který xx xx xxxxxxx aminokyseliny xxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páru xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx bází x DNA. Při xxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx mutace nebo xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx genomu.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx vyvolávající xxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx nebo více xxxx bází v XXX, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxx x RNA.

1.3 XXXXXXX XXXXX

X xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx buňky, xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx látek metabolismu, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx DNA. Xxxxx in xxxxx xxxxxx vyžadují exogenní xxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx dokonale xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx přímé informace x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx v organismech xxxxx.

Xxxxxxxxxxx test xxxxxxxxxx mutací se xxxxx xxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx genotoxické xxxxxxxx x zvláště xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx rozsáhlé xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx mnohé xxxxxxxxxx, xxxxx jsou x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx ovšem x xxxxxxxx mutagenních xxxxx, xxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxx tohoto nedostatku xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxx x xxxxxxxxxx dostupnosti. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx reverzní xxxxxx zvyšují, mohou xxxx x tomu, xx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx test xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx nevhodný xxx xxxxxx třídy xxxxxxxxxx xxxxx, jakými jsou xxxxxxxxx některé xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) a xxxxx, x nichž xx předpokládá xxxx xx, xx specificky xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx buněk (například xxxxxxx xxxxxxxxxx topoizomerázy xxxx xxxxxxx analoga xxxxxxxxxx); v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxx, jež xxxx při xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx karcinogenní xxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx absolutní; závisí xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx tímto xxxxxx xxxxxxxx nejsou, protože xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx mechanismem, xxxxx v bakteriálních xxxxxxx neprobíhá.

1.4 PRINCIP XXXXXX

Suspenze xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx přítomnosti x xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx klasické miskové xxxxxx "xxxxx incorporation" xx suspenze smísí x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxx x minimální xxxxxx půdou. Xxx xxxxxxxxxxxx metodě xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x smísí x xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxx xxxx metodách xx xxx xx tři xxx xx inkubaci xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x výsledek se xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx revertujících kolonií xx kontrolních xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Xx xxxxxxx několik postupů xxx provedení xxxxx. X xxxx nejběžnější xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ["xxxxx incorporation"] (1) (2) (3) (4), xxxxxxxxxxxx metoda (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) x suspenzní xxxxxx (11). Xxxx xxxx popsány xxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxx par (12).

Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx týkají hlavně xxxxxx plate incorporation x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx tyto metody xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Některé xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx preinkubační metodou; xxxxx se x xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x krátkým xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, alylové xxxxxxxxxx x nitrosloučeniny (3). Také xxxx xxxxxxxx, že existují xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx xx xx xxxxx xxxxxxxx jako xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", x xxxxxxx detekci je xxxxx xxxxxx jiných xxxxx. Byly xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxxx" (xxxxx s příklady xxxxxxx, které se xxxx xxx jejich xxxxxxx použít): xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx xx standardního xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.5. XXXXX XXXXXX

1.5.1 Xxxxxxxx

1.5.1.1 Bakterie

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx kultury xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx stacionárního xxxxxx xxxxx (xxxxxx 10⁹ xxxxx/xx). Xxxxxxx x xxxxxxx stacionárním stadiu xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vysoký xxxx xxxxxxxxxxxxxxx bakterií. Xxxx xx dá xxxxxxxx xxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx křivek, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx stanovením xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 37^xX.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx pět xxxxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx X. typhimurium (XX 1535; TA 1537 xxxx XX97x xxxx 1X97; TA98; x XX100); x xxxxx xxxx xxxxxxxxx spolehlivost x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx kmeny X. xxxxxxxxxxx mají xxxxxxxxx xxxxxxxxx místě xxxx bází GC x xx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx křížové xxxxx x hydraziny. Xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx pomocí xxxxx X. xxxx XX2 nebo X. xxxxxxxxxxx XX102 (19), xxxxx xxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx místě xxx xxxx XX. Xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx tato:

- X. typhimurium XX1535 a

- X. xxxxxxxxxxx TA1537 xxxx TA97 nebo XX97x x

- X. xxxxxxxxxxx TA98 x

- X. xxxxxxxxxxx XX100 x

- X. xxxx XX2 xxxX xxxx X. xxxx XX2 xxxX (xXX101) xxxx X. xxxxxxxxxxx XX102.

X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxx XX102 xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx E. xxxx (xxxx. X. xxxx XX2 xxxx X. xxxx WP2 (xXX101)).

Je třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zásobní xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxx každý xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx závislost xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx (histidin x xxxxxxx kmenů S. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx E. xxxx). Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x to: xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx X-xxxxxx xxxxxxxx tam, xxx xx xxxxxxxx x xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxx ampicilinu x xxxxx XX98, XX100 x XX97x xxxx XX97, XX2 uvrA (xXX101) x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx + xxxxxxxxxxxx x kmene XX 102); přítomnost xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx. xxx xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxX xxxxxx x X. xxxx xxxx xxxX xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx citlivosti xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) (2) (3). Použité xxxxx xxxx xxx xxxxx spontánně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxxxxxx xxxxxxx očekávaném podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxx x literatuře.

1.5.1.2 Xxxxxx

Xxxxxxx xx vhodný xxxxxxxxx agar (xxxx. x Vogelovým-Bonnerovým xxxxxxxxxx xxxxxx E x xxxxxxxx) a xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx histidin x biotin xxxx xxxxxxxxx umožňující několik xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).

1.5.1.3 Metabolická xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx jak xx xxxxxxxxxxx, xxx za xxxxxxxxxxxxx vhodného systému xxxxxxxxxxx aktivace. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx enzymů látkami, xxxx je Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-naftoflavonu (18) (20) (21). Xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 a 30 % v/v xx směsi X9. Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému xxxxx záviset na xxxxx xxxxxxxxx chemikálie. X některých xxxxxxxxx xxxx xxx vhodné xxxxxx post-mitochondriální frakci x několika koncentracích. X azobarviv x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx použít xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6) (13).

1.5.1.4 Testovaná xxxxx / xxxxxxxx

Xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx látky xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo se xxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx jejich delší xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.

1.5.2 Podmínky xxxxx

1.5.2.1 Xxxxxxx xxxxx (xxx 1.5.1.1.)

1.5.2.2 Koncentrace

Xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx použitého xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, patří xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxxxx se x xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx xxx xxxxxx stanovit xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx dá xxxxxxx snížením xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx růstu xx pozadí xxxx xxxxxx xxxxxx přežití xxxxxxxxx xxxxxx. Za xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nerozpustnost xx posuzuje xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x pouhým xxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 5 xx/xxxxx resp. 5 µl/misku. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Testované xxxxx, jež xxxx xxxxxxxxxxx xxx za xxxxxxxxxxx xxxxxxx než 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx, se xxxxxxx až do xxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx při xxxxxxxxxxxxx.

Používá xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx koncentrací xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. √10) xxxx xxxxxxxxxxxx body v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx být vhodný xxxxxxxx xxxxx. Testování xx xxxxxxxxxxx vyšších xxx 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx xxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.5.2.3 Xxxxxxxxx a pozitivní xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kmenově specifickou xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulum) xxxxxxxx, jak x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxx koncentrace, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx testu.

X xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu volí xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:

Xxxxx	XXX	XXXXXX
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx	781-43-1	212-308-4
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx	57-97-6	200-359-5
xxxx[x]xxxxx	50-32-8	200-028-5
2-xxxxxxxxxxxxx	613-13-8	210-330-9
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2

Následující xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:

Xxxxx	CAS	XXXXXX
Xxxxx xxxxxx	573-58-0	209-358-4

2-xxxxxxxxxxxxx xx nepoužívá xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx S9. Xxxxx xx 2-xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx S9 xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivaci xxxxxxxxxxxxxx enzymy, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, dimethylbenzantracenenm.

Xxxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx systému metabolické xxxxxxxx, uvádí xxxx xxxxxxx:

Xxxxx	XXX	XXXXXX
Azid xxxxx	26628-22-8	247-852-1	XX 1535 x XX 100
2-xxxxxxxxxxxx	607-57-8	210-138-5	XX 98
9-aminoakridin	90-45-9	201-995-6	XX 1537, XX 97 x XX 97x
ICR 191	17070-45-0	241-129-4	XX 1537, XX 97 x TA 97x
xxxxx-xxxxxxxxxxxx	80-15-9	201-254-7	TA 102
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6	XX xxxX x XX 102
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx	70-25-7	200-730-1	XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (xXX101)
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx	56-57-5	200-281-1	XX2, XX2xxxX x WP2uvrA (xXX101)
Xxxxxxxxxxxx (AF2)	3688-53-7		kmeny xxxxxxxxxx xxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx i xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, bez xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx jako xxx xxxxxxx testované látky. Xxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nevyvolává žádné xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.3 XXXXXX

Xxx xxxxxxxx miskové metodě (1) (2) (3) (4) xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 0,05 nebo 0,1 ml xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx bakteriální xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx 10⁸ xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x 0,5 xx sterilního xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx agaru. X testech x xxxxxxxxxxxx aktivací se xxxxxxx mísí 0,5 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakce (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x x metabolické xxxxxxxxx xxxxx) x 2,0 ml vrchního xxxxx společně s xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx /xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xx povrch xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx xxxxxxxxx látka / xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx preinkubovat s xxxxxxxx kmenem (xxxxxxxxxxx xxxxxx 10⁸ životaschopných xxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx metabolickým xxxxxxxxxx systémem (0,5 xx) obvykle xx xxxx 20 xxx xxxx xxxx xxx 30 - 37 ^xX; xxxxx xx xxxxx s xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 ml xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,1 xx xxxxxxxx a 0,5 xx xxxxx X9 xxxx sterilního xxxxx x 2,0 xx vrchního agaru. Xxxxxxxx se během xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx odhad xxxxxxx se xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx misky. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx test xxxxx xxxxxxxxxxx.

Plynné nebo xxxxxx látky xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx postupů, například x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (12) (14) (15) (16).

1.5.4 INKUBACE

Xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx testu xx xxxxxxxx při xxxxxxx 37 ^xX pod xxxx 48 - 72 xxxxx, načež xx spočítají xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx.

2. ÚDAJE

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Údaje xx xxxxxxxxxx xxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx počet xxxxxxxxxxxxx kolonií xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, popřípadě kontrola xxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxx), xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxx pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx (resp. xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx) xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x průměrný xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nepožaduje. Nejednoznačné xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných experimentálních xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx musejí xxxxxxxx xxxxxx xx případu. Xxxxx se potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx nutné, je xxxxx to zdůvodnit. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx zvážit xxxxxxxxxx studijních xxxxxxxxx xxx, aby se xxxxxxxx xxxxxx posuzovaných xxxxxxxx. Xx studijním xxxxxxxxxx, které se xxxx modifikovat, patří xxxxxxx mezi koncentracemi, xxxxxx působení ("plate xxxxxxxxxxxxx" nebo xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx) x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx a/nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx jednoho xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxx (23). Xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx pomůcku xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (24), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx jediným určujícím xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx látka, xxxxx výsledky výše xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx v xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Většina xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx získaného souboru xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx bakteriálního xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx vyvolává genové xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx x genomu Xxxxxxxxxx typhimurium xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx zkušebních xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx mutagenní.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla,

- xxxxxxxxxxx a stabilita xxxxxxxxx látky x xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx známa.

Xxxxx:

- xxxxxxx kmeny,

- xxxxx xxxxx x kultuře,

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- množství xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx misku (x xx xxxx μx) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx,

- použitá xxxxx,

-typ a xxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx),

- postupy xxxxxxxx (zpracování).

Xxxxxxxx:

- známky xxxxxxxx,

- xxxxxx srážení,

- xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx revertantních xxxxxxx xx jednu xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxxxxx negativních (rozpouštědlo/vehikulum) x pozitivních xxxxxxx xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Závěry.

X.15. GENOVÉ XXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kmeny xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx bez x x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx forward xxxxxxx xxxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx míra xxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx, xxxxxx vyžadující xxxxxx (xxx-1, ade-2) na xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx systém xxxxxxxx využití haploidního xxxxx XV 185-14 X s xxxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxx mutacemi xxx 2-1, arg 4-17, xxx 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx xxxx vratné xxxxxxxxx mutagenů xxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxx mutace xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx supresorové xxxxxx. XX185-14X nese xxxxxx xxx 1-7 xxxxxx, xxxxxxxx mutaci, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mutacemi v xxxxxx xxxxx a xxxxxx xxx 3-10, xxxxx xx revertován xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

U xxxxxxxxxxx kmenů X. xxxxxxxxxx xx jediným xxxxxx xxxxxxxxxx kmenem X₇, který xx xxxxxxxxxxx pro ilv 1-92.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Roztoky testovaných xxxxx x kontrol xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx před testováním xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, aceton xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Finální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx x charakteristiky xxxxx.

Xxxxxxxxxxx aktivace

Buňky xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkám jak x xxxxxxxxxxx, tak x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakce xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx kofaktory. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakcí xx postupů xxxx xxx xxxxxx vhodné xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Testovací xxxxx

Xxxxxxxxx xxxx XX 158-14X a xxxxxxxxx xxxx X7 xxxx xxxxxxxxxxxxx pro xxxxxx genových xxxxxx. Xxxx kmeny mohou xxx xxxxxx vhodné.

1.2.2.2 Xxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xxx xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx současně. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx mutační xxxxx xxxx být xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx

Má být xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx koncentrací. X xxxxxxxxx látek xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx přežití xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mají být xxxxxxxxx xx po xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx určena případ xx případu.

1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx po xxxx xxx při 28 xx 30 ^xX xx tmě.

1.2.2.6 Frekvence xxxxxxxxxxx mutací

Frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx má xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.7 Počet xxxxxxxxx

Xx nutno xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx markery jako xxx 3-10 s xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx počet xxxxx zvýšen, xxx xxxx získány xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.3 Popis xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxx v tekutém xxxxxxxxx x zahrnuje xxx stacionární xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx: 1-5 x 10⁷ xxxxx/xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx až 18 x. xxx 28 xx 30 ^xX xx třepání. Xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx centrifugovány, promyty x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx přežívající buňky x buňky x xxxxxxx genových mutací.

Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, má xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx první xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx kolonií, počet xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx potvrzeny nezávislým xxxxxxxxxxxx. Xxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx informace x:

- xxxxxxxxx xxxxxxx,

- podmínkách xxxxx: xxxxx xx stacionární xxxx xxxx rostoucí, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx a trvání xxxxxxxxx, teplota xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx je xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx výsledků.

X.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může xxx detekována xxxx xxxx (xxxxxxxx mezi xxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx) a xxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx xx nazýván xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x vytváří xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx testováno na xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxxxxxxxx kmenů, xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxx xxx různé xxxxxxxx xxxxx xxxxx genu. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx detekci mitotické xxxxxx xxxxxxxx xxxx X₄ (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 2 a xxx 5), X₇ (xxxxxxxxxxxxxx v xxx 5), XX₃₄ (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4) x XX1 (heteroalelický x xxx 4 x trp 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx produkující xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx může xxx xxxxxxxxx x X₅ xxxx X₇ (který xxxxxx měří xxxxxxxxxx xxxxxxx konversi x xxxxxxxx mutace x xxx 1-92). Oba xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx alely xxx 2.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Roztoky xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx než 2 xxxxxxxx % v xxxxxxxxxxx rozpouštědlech, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx jak x xxxxxxxxxxx, xxx v xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy x doplněná kofaktory. Xxxxx jiných xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakcí xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Testovací xxxxx

Nejužívanější jsou xxxxxxxxx xxxxx D₄, X₅, X₇ x XX1. Xxxxx jiných xxxxx může xxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx přežívajících xxxxx x frekvenci mitotické xxxxxxxxxxx

1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Pozitivní, xxxxxxxxxxx x rozpouštědlem xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mutační xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické látky.

1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx

Xx xxx xxxxxxx nejméně 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Nejnižší xxxxxxxxxxx nesmí xxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. X toxických xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace redukovat xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xx xx mez rozpustnosti xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro látky xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx určena xxxxxx od xxxxxxx.

Xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx stacionární xxxx, xxxx během xxxxx po dobu xx 18 x. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx mikroskopicky xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx znehodnocuje.

1.2.2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xx xxxxx až xxxx xxx xxx 28 - 30 ^xX. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx červených x růžových xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx umístěny x xxxxxxxxxx (xxx 4 ^oC) po xxxxx 1 - 2 dny xxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxxx kolonie.

1.2.2.6 Spontánní xxxxxxxxx xxxxxxxxx rekombinace

Xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx s frekvencí xxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.7 Počet xxxxxxxxx

Xx nutno použít xxxxxxx xxx xxxxx xx jednu xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxx životnosti xxxxx. V případě xxxxxxxxx recesivní xxxxxxxxxxxx xxxxxxx mitotickým xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

1.2.2.8 Xxxxxx

Xxxxxxxxx X. cerevisiae xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxx test x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx mají xxx provedeny xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. 1-5 x 10⁷ xxxxx/xx xx vystaveno xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 ^xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, pokud xx to xxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx počítány přežívající xxxxx x buňky x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxx proveden xxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx pokus pozitivní, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nezávislým xxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xxxx xxx prezentovány x xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx počet xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx experimentu.

Údaje xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- použité xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx ve xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx médií, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, metabolický xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx ovlivnění, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- počet kolonií, xxxxx rekombinant, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xx to xxxxx, xxxxxxxxxxx hodnocení xxx,

- xxxxxxx výsledků,

- vyhodnocení výsledků.

B.17. XXXXXXXXXX - XXXX GENOVÝCH MUTACÍ X SAVČÍCH BUŇKÁCH XX VITRO

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 476, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxx Xxxx Mutation Xxxx (1997).

1.1 ÚVOD

Test xxxxxxxx xxxxxx in xxxxx xx dá xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx genových xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxx linie xxxxx xxxx xxxxxxxxx buňky X5178X, linie CHO, XXX-XX52 x X79 xxxxx čínského xxxxxx x xxxxxx lymfoblastoidní xxxxx XX6 (1). X xxxxxx buněčných xxxxx se xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (XX) x hypoxanthin-guanin xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) a x xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxx xxxxxx x XX, HPRT x XXXX xx xxxxxxxx různá xxxxxxx xxxxxxxxxxx změn. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XX x XXXX může xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxx), xxxxx xx xx xxxxxx XXXX xxxxxxxxxx X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).

K xxxxx xx genové xxxxxx x savčích xxxxxxx xx xxxxx xx xxxx použít xxxxxxx stabilizovaných xxxxxxxxx xxxxx xxxx buněčných xxxxx. Při volbě xxxxx xx xxxxx x xxxxx růstové xxxxxxxxxx xxxx kultury x stabilita frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx in xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace xxxxxxxx xxxxxxxx savčí xxxxxxxx xx xxxx dokonale. Xx třeba vzniku xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx by xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mutagenitu. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxx důsledkem xxxxxxx mutagenity může xxxxx x důsledku xxxxx xX, osmolality xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (7).

Xxxxx test se xxxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxxxxx savčích xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx, které xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx korelace xxxx xxxxx testem a xxxxxxxxxxxxxx. Tato xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx látky x xxxxxxxx xxxxx více xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxx karcinogeny, xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, protože xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx či xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx buňkách xxxxxxxx (6).

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxxx: genová xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx formy, jež xxxx xx změně xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx: xxxxx způsobující xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx páru bází x DNA.

Frameshift mutageny (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx párů bází x XXX.

Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx nezměněné xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx: počet xxxxxxxxxxxx mutovaných xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx buněk; xxxxxxxxxx xx xxxx součin xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx kontrolou) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx efficiency (x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxx).

Xxxxxxxxx suspenzní růst: xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx efficiency) xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxxx na miskách x xxxxxxxxxx podmínkách xx období exprese.

Přežití: xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xx xxxxx působení xxxxx; xxxxxxxxx se xxxxxxx v porovnánís xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX METODY

Buňky, xxxxxxxxxxx xx thymidinkinázu (TK) x xxxxxxxx xxxxxx XX^+/- → XX^-/-, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pyrimidinového xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX). Xxxxx produkující xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx TFT xxxxxxx, což xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx metabolismu x zastavuje další xxxxxxx dělení. Xx xxxxxxxxxxx TFT xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx normální xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nemohou. Xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx XXXX xxxx XXXX selekčně rezistentní xxxx 6-xxxxxxxxxxx (XX) xxxx 8-azaguaninu (XX). Xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx mutace v xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx selekční toxicitu xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx x xxx xxxx. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxxxxxxx strukturně příbuzné xx xxxxxxxxx činidlem, xx třeba xxxxxxxx, xx je xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).

Xxxxx x suspenzi xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xx vhodnou xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx s metabolickou xxxxxxxx x xxx xx x kultivují xx ke stanovení xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nárůstu xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx ponechají x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx a xxx xxxxx, xxx mohlo xxxxx k co xxxxxxxxxxxxxxx fenotypické xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx selekční činidlo xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Po xxxxxx xxxxxxxxx době xx kolonie xxxxxxxxx. Xxxxxxx frekvence xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx buněk x selekčním xxxxx x x xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Příprava

1.4.1.1 Buňky

Dá xx xxxxxx xxxx řada xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxx X5171X, XXX, XXX-XX52, X79 x XX6. X xxxxxxxxx xxxx používaných x xxxxx xxxxx xxxx xxx prokázaná xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. U xxxxx se xxxxxxxxxx, xxx nejsou xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; infikované buňky xx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxx xx třeba naplánovat xxx, xxx xxx xxxxxxxx citlivost x xxxxxxxxxxx (xxxxx). Počet xxxxx, xxxxx xxxxxx x koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vyhovovat (14). Xxxxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxx, které xxxxxxx expozici x xxxxxxx xx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xx dán xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xx xxxxx buněk xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxxxxxx 10⁶ buněk. Xxxx xx xxx x xxxxxxxxx adekvátní xxxxxxxxxx údaje, xxxxxxx xx xx prokázala xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx média x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO₂, xxxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx se pro xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx systému x xxxx buňky. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x schopnost xxx xxxxxxxxxx, xxx nemutovaných xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

1.4.1.3 Příprava xxxxxx

Xxxxx xx namnoží xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx kultivačního xxxxx x inkubují xxx xxxxxxx 37 ^xX. Xxxx provedením xxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx buněk.

1.4.1.4 Metabolická xxxxxxxx

Xx buňky se xxxxxxxxxx látkou xxxxxx x přítomnosti i x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx je kofaktory xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) připravená x xxxxx xxxxxxxx, ovlivněná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy xxxx xx Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mitochondriální frakce x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10% v/v. Aktivita xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxx xx testovaná xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakci x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx exprimující specifické xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx by xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx P450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).

1.4.1.5 Xxxxxxxx testované xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx působením xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle x xxxxxxxx naředí. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xx systému xxxxxxxx xxxxx xxxx xx předtím ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx prokazují, že xxxxx xxxxxxxxxx neovlivňuje xxxxxx xxxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx existovat xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx podpořeno xxxxxxxxxxx prokazujícími jeho xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxx xxx, xxx je to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx zvažováno xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xx vodě xxxxxxx, xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx bezvodé. Voda xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sítem.

1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxx, xxx xx uvažují xxx stanovování xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x systému x xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx integrity x xxxxx buněk, xxxx xx xxxxxxxxx klonovací xxxxxxxx (přežití) xxxx xxxxxxxxx celkový růst. Xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx experimentech.

Použijí xx minimálně xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Dochází-li x cytotoxicitě, musí xxxx xxxxxxxxxxx pokrývat xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx jednotlivé xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx více xxx násobkem, xxxxx xxxx xxxx hodnotami 2 x √10. Xxxxxxx-xx maximální xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, měla xx vést k xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti) xxxx xxxxxxxxxxx celkovému xxxxx x 10-20 %, xx xxxx xxxx xxx 10 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx měla xxx nejnižší z xxxxxx 5 xx/xx, 5 μl/ml a 1,01 M.

U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek, xxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx, při xxxxx se xxx xxxxx nerozpouští, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxx rozpustnosti xx finálním kultivačním xxxxx na konci xxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx konci xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x důsledku xxxxxxxxxxx xxxxx, S9, séra xxx. xxxxx. Nerozpustnost xx dá zjistit x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxx.

1.4.2.3 Kontroly

V rámci xxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx provést x xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo, xxxxxxxxx) xxxxxxxx, a to xxx x metabolickou xxxxxxxx, xxx xxx xx. Xxxxx xx xxxxxxxx metabolická aktivace, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx aktivaci k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu patří xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxx	Xxxxx	Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxxxxx
Xx	XXXX	xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx nitrosomočovina	62-50-0 759-73-9	200-536-7 212-072-2
	TK (xxxx x xxxxx xxxxxxx)	xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	66-27-3	200-625-0
	XXXX	xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx	62-50-0 759-73-9	200-536-7 212-072-2
Xxx	XXXX	3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx	56-49-5 62-75-9 57-97-6	200-276-4 200-549-8 200-359-5
	XX (xxxx a xxxxx kolonie)	cyklofosfamid monohydrát xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx	50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5	200-015-4

				200-028-5 200-276-5
	XXXX	X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx X-9)	62-75-9	200-549-8
		xxxxx[x]xxxxx	50-32-8	200-028-5

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxx vhodné xxxxx; xxxxxxxx má například xxxxxxxxx historickou xxxxx x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (CAS 59-14-3, xxxxx XXXXXX 200-415-9), xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Tam, xxx xx xx možné, xx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxx každý xxxxxx interval xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx které xx xxxxxxx rozpouštědlo xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.4.3 Xxxxxx

1.4.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xx proliferující buňky xx působí xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx xx. Xxxxxxxx xxxxxxx xx vhodnou xxxx (xxxxxxx xx xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Xxxx expozice xxxx přesáhnout xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxx každou xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx. Používá-li xx xxxxx jedna kultura, xx xxxxx xxxxxx xxxxx koncentrací xxx, xxx se zajistil xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (xx. xxxxxxxxx osm analyzovatelných xxxxxxxxxxx). Kultury x xxxxxxxxx kontrolou (xxxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx duplicitní.

V xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx látek xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxx postupy, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (21, 22).

1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx frekvence

Po xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx cytotoxicity xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx - cloning xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx nově xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX x XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxx 6 - 8 dní, TK xxxxxxxxx 2 xxx). Xxxxx se xxxxxxx x médiu x x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx účinnosti. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx x výpočtu xxxxxxxx xxxxxxx) inokulací buněk xx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx v xxxxx L5178Y XX⁺/^- xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x experimentálních xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xx xxxxxxxxxxx x pozitivních xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx látka x tomto xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxx i xx xxxxxxxx x XX6XX⁺/^-.

2. XXXXX

2.1 Zpracování xxxxxxxx

Xxxx data xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x životnosti, xxxxx xxxxxxx x mutační xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X případě xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx X5178XX⁺/^- xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx kritérií xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (nejvyšší xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x negativní x pozitivní xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx i xxxxxx kolonií xxxx xxxxxxxx prostudovány x xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx testu XX⁺/^- xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx růstu (velké) x xxxxxxxx xxxxx (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx poškození, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, x proto tvoří xxxx kolonie. Rozmezí xxxxxx poškození obvykle xxxx od xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Tvorba xxxxxx xxxxxxx xx asociována x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx hrubé chromozómové xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx postižené xxxxxxx xxxxxx podobnou rychlostí xxxx xxxxx rodičovské x xxxxxxxxx velké xxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx xxxx přežití (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx xxxxxxx efficiency) xxxx xxxxxxxxx celkový xxxx. Xxxxxxx frekvence xx vyjadřuje jako xxxxx mutovaných xxxxx xxxxxx počtem přežívajících xxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx o kultivačních xxxxxxxxxx; xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x tabelární xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xx musí xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx negativních xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, je xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxx nejednoznačných nebo xxxxxxxxxxx výsledků xx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvážit xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx tak, xxx xx rozšířilo xxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx nárůst xxxx reprodukovatelný nárůst xxxxxxx xxxxxxxxx. Nejprve xx třeba uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxx statistické xxxxxx. Xxxxxxxxxxx významnost by xxxx neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria, se x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní. Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých případech xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx souboru xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx výsledky xxxxx xx xxxxxx xxxxxx v savčích xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx savčích xxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xx reprodukovatelný pozitivní xxxxx xxxxx - xxxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx mutace.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:

Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.

Xxxxx:

- typ x xxxxx xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx kultur,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx metody xxxxxxxxx xxxxxxx kultury,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx pokusu:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx kultur, xxxxxx xxxx. xxxxx x cytotoxicitě a xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x dispozici,

- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂,

- koncentrace xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx vehikula x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxx inkubace,

-doba xxxxxxxx xxxxx,

- hustota xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx,

- xxx x xxxxxxx xxxxxxx metabolické aktivace, xxxxxx xxxxxxxx akceptovatelnosti,

- xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx,

- xxxxx expresní xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxxxxxx)

- xxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx,

- metody xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx,

- definice xxxxxxx, u nichž xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxx (xxxxxx xxxxxxxxxx kritérií xxx xxxxxxxxxxx xxxx "xxxxxx" x "xxxxxxx" koloniemi).

Výsledky:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxx,

- údaje x xX a osmolalitě xxxxx působení testované xxxxx, jsou-li stanoveny,

- xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx možnosti xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxx X5178X XX⁺/^-,

- xxxxx xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,

- xxxxxxxx xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx,

- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

X.18. POŠKOZENÍ XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX XXXXXXX XXX - XXXXX XXXXX XX VITRO

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (UDS) xxxxxxxx xxxxx reparační xxxxxxx XXX xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx DNA xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx fyzikálními xxxxxxx. Xxxx je xxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (³X-XxX) xx XXX savčích xxxxx, xxxxx nejsou x X xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Vzestup ³X-XxX xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx nebo kapalnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx kultury potkaních xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx v xxxxxxxxxxx, xxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. XXX xxxx být xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kontrolní xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxx suspendují x kultivačním xxxxx xxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Další xxxxxx xx provádí xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx se pouze xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx lymfocytů xxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx).

Xxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx

Pro xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx nejméně xxxx buněčných kultur xxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx kultur (xxxx xxxx, je-li to xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxx XXX XXX.

1.2.2.2 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx

X každém experimentu xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx lze pro xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-XXXX) nebo 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Jako xxxxxxxxx kontrolu xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxx i xxx XXX xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x koncentracích xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxx netoxické xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx případ xx xxxxxxx.

1.2.2.4 Buňky

Xxx udržování xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂, xxxxxxx x vlhkost. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Mycoplasmat.

1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx aktivace

Pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Stabilizované xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxx experiment

1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Stabilizovaná xxxxxxx xxxxx xx připravuje xx xxxxxxx kultury (xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), inokuluje xx xx kultivačních xxxxx ve vhodné xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 ^oC.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx x povrchu xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur testované xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx potkana jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x médiu xxxxxxxxxxx ³X-XxX po xxxxxxx xxxx. Xx ukončené xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx a sušeny. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx autoradiografické xxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx film), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, obarvena x xxxxxxxxxxx.

Stabilizované xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx x pak xxxx xxxxxxxxx působení ³X-XxX. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx druhu xxxxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxx ³X-XxX xxxxxx xxxxxxxx s testovanou xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxx interakcí xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x ³X-XxX. X xxxxxxxx xxxx XXX a xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx užívá xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, nízký xxxxx xxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx média, což xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX.

Stanovení XXX xxxxxx LSC: Xxxx expozicí testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx buněk xx S-fáze, xxx xxxx xxxxx uvedeno. Xxxxx jsou xxx xxxxxxxxxx testované xxxxx, xxx bylo xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx je XXX extrahována x xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx XXX x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx ³X-XxX.

Jestliže xxxx použity xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx x nestimulovaných xxxxxxxxx xxxxxxx semikonzervativní replikace XXX zbytečná.

1.2.4 Xxxxxxx

1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx autoradiografie

Xxx xxxxxxxxxxxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx v X-xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxx 50 buněk x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx xx hodnotí xxxxxxx náhodně xxxxxxxxx xxxx. Množství inkorporovaného ³X-XxX v xxxxxxxxxx xx xxxx x xxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx hodnocené xxxxx.

1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx XXX

Xxx stanovení XXX XXX xx použije xxxxxxxxx počet kultur xxx každou koncentraci xxxxxxxxx xxxxx x xxx kontroly.

Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.

2.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxxxxx ³X-XxX xx cytoplazmy x xxxxx zrn xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají odděleně.

Xxxxxx xxxxxxxxxxx ³X-XxX xx xxxxxxxxxx a xxxxx zrn x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxx.

2.2 Xxxxxxxxxxx XXX

Inkorporace ³X-XxX xx xxxxxxxxxxx xxxx xxx/μx XXX. Xxxxxxxx xxxxxxx xxx/μx XXX xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx používají x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Údaje xx xxxxxxxxxxx vhodnými statistickými xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx x číslu xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultury, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂,

- testované látce, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx jejich xxxxxx x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx aktivačním systému,

- pokusném xxxxxxxx,

- pozitivních a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx autoradiografických xxxxxxxx,

- způsobech blokování xxxxxx xxxxx do X-xxxx,

- postup xxxxxxxxx x xxxxxxxx XXX a k xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx obsahu XXX xxx xxxxxx XXX,

- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.19. SCE - XXXXXX SESTERSKÝCH XXXXXXXXX XX XXXXX

1. METODA

1.1 Xxxxxxx metody

SCE xx krátkodobý xxxx xxx xxxxxxx recipročních xxxxx XXX mezi xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx sekvencí XXX xxxx replikačními xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx spojení, xxx xx zatím xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx základě xxxxxx xxxxxxx. Detekce SCE xxxxxxxx diferenční xxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatid. Xxxx xx dosahuje inkorporací xxxxxxxxxxxxxxxxx (BrdU) xx xxxxxxxxxxxxx XXX xx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x médiu xxxxxxxxxxx XxxX. Ke xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx ovlivní xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vřeténka (např. xxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxx x c-metafázi xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx (lidské xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (ovariální xxxxx xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Mycoplasmaty.

Používají xx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx (teplota, kultivační xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO₂ x xxxxxxx).

Testovaná xxxxx xx rozpouští xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx buněk, rychlost xxxxx xxxx xxxxxxxxx XXX.

Buňky xx xxxxxxxx testované látce x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx buněčných xxxx x xxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx úroveň x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupinu xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx

Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx kultury.

1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly s xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx vyžadující metabolickou xxxxxxxx. Dále xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx:

- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: etylmetansulfonát

- xxxxxxx xxxxxxxx mutageny: xxxxxxxxxxxxx

Je-li xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx látka.

1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx mít signifikantní xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx musí umožnit xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxx rozpustné xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Stabilizovaná xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx ze xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx kultivační xxxxxx), xxxxxxxxx xx do xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 ^xX. Pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx v kultivační xxxxxx, xxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 50 % konfluentní xxxxxx. Xxx také xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx připraví x xxxxxxxxxxxxxx krve xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxx 37 ^xX.

1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v exponenciální xxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu. Xx xxxxxxx případů stačí xxxxx až dvě xxxxxx, ale expozice xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx na xxx xxxxxxx xxxxx, xx-xx xx xxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx testovaná xxxxx x média xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x dále xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx médiu x BrdU xxx xxxxxxxxxx xxxxx. Alternativně xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou a XxxX xx xxxx xxxx buněčných xxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx podmínkách.

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx expozici xxxxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x XxxX je xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xx světle xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx fotolýze XXX, ve xxxxx xx inkorporovaný XxxX.

1.2.3.3 Xxxxxxxxxx buněk

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx ukončením xxxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx dělicího xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx). Xxxxx kultura xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx x barvení

Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou. Xxxxxxx preparátů xx xxxxxxxxxx XXX xxxx xxx xxxxxxxxx několika xxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxx).

1.2.3.5 Analýza

Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX x kontrole. Obvykle xx xxxxxxx xxxxxxx 25 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx zakódovány před xxxxxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x 46 xxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx pouze xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx x ± 2 xxxxxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxx centromer. Xx třeba stanovit, xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx být ověřeny x xxxxxxxxxxx experimentech.

2. XXXXX

Xxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx formou. Xxxxxxxxxxx se xxxxx XXX x každé xxxxxxxx a počet XXX/xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx i kontrolních xxxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxxxxxx xxxxxxx, metodách xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx,

- kultivačních xxxxxxxxxx: xxxxxxx média, xxxxxxx, koncentraci CO₂, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx expozice, xxxxxxxxxx xxxxxx a jeho xxxxxxxxxxx x jeho xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách,

- xxxxx xxxxxx xxx xxxxx experimentální xxx,

- způsobu xxxxxxxx mikroskopických preparátů,

- počtu analyzovaných xxxxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx),

- xxxxxxxxx xxxxx SCE/buňku x SCE/chromozóm (xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx),

- kritériích hodnocení XXX,

- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx dávka/účinek, xx-xx xx možné,

- xxxxxxxxxxxx vyhodnocení,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.20. XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX XXXXXX XX POHLAVÍ X XXXXXXXXXX MELANOGASTER

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Test xx xxxxxxxxx xxxxxxx mutace xxxxxx xx pohlaví (XXXX) na Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx genových, xxx x xxxxxx xxxxxx, x zárodečných xxxxxxx hmyzu. Xx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx mutací x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx chromozómu X. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxx 80 % xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-chromozóm xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1/5 xxxxxx haploidního genomu.

Xxxxxx x X-xxxxxxxxxx xx fenotypicky projeví x samců nesoucích xxxxxxxx xxx. Xxxx xx xxxxxx letální x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx na xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxx jednoho xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx rodí heterozygotní xxxxxx. XXXX test xx výhodný xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxxx

Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxx definované xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx Xxxxxx-5. Xxxxx xxx použity x xxxx xxxxxx xxxxx popsané xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx X-chromozómu.

1.2.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx

Testované látky xx xxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxx etanolu x Xxxxxx-60 xxxx 80), před xxxxxxxx xx xxxx ředí xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx dimetylsulfoxid (XXXX) xxxx xxxxxxxx.

1.2.1.3 Počet xxxxxx

Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx frekvence xxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx třeba xxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxxxxxxxxx xxx xx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx v 0,7% xxxxxxx NaCl x xxxxxxxx xx do xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

X xxxxxx pokusu se xxxxxxxx negativní (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx má xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kontroly.

1.2.1.6 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx se xxx xxxxx testované xxxxx. Xxx xxxxxxxxx orientační xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx rovnající xx maximální tolerované xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší dosažitelné xxxxx.

1.2.2 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxx divokého typu (xx xxxxx 3-5 xxx) jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx Xxxxxx-5 xxxx x jiné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxx vyměněny xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xx xxx xxx, xxx xxx xxxxxx celý xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxx je xxxxxxxx letální xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, na xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Heterozygotní X₁ samice xxxxxxxx x xxxxxx křížení xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (tj. jedna xxxxxx/xxxxxxxx) se xxxxx xxxxxx. X X₂ xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx zaznamenávána xxxxxxx samců xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxx vznikají F₁ xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (nejsou xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx samic se xxxxxxx genotypem xxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x dalších generacích.

2. XXXXX

Xxxxxxx xxxxx xx zpracují xx xxxxx xxxxxxx. Uvádí xx počet xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx, počet xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx s letální xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx každé xxxxxx xxxxxxx a xxx každého xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Výsledky se xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx letálních mutací xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxx v xxxxx x xxxxxxxxxx vhodným xxxxxxxxxxxx způsobem.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Zpráva o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx o:

- použitých liniích xxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx vzniklých X₂ xxxxxx, xxxxx X₂ xxxxxx xxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx letální xxxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk,

- xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx ovlivněných xxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxx popis xxxxxxxxxxx x xxxxxx odběru xxxxxx, xxxx dávek, xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx (x rozpouštědlem) x pozitivní kontroly,

- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx expozice/účinek, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.21. XXXX XXXXXXXXXXXX SAVČÍCH BUNĚK - XX VITRO

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

Xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx in xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkami xxxxxxxxx s maligní xxxxxxxxxxxx in xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx X3X10X1/2, 3T3, XXX, Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx se xxxxx o změny xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx nebo změny x uchycení x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx ostatní xxxxxxxxxxxx xx morfologické xxxxx x buňkách xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látkám. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx účinku xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx vychází xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx relevantní, ale xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx transformace xx xxxxx experimentech, xxxxxxx x některých mohlo xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx k xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxx

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x testu xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx x testu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx příslušné xxxxxxxxxxx xxxxx xx expozici xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x že xx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx.

1.2.1.2 Médium

Xxxxxxx média a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx vhodné pro xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx médiu nebo xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx ovlivněním xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx rychlost xxxx xxxxxx transformace.

1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivitou, xxxxxxxx její vlastnosti xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Do xxxxxxx experimentu xxxx xxx zařazeny pozitivní xxxxxxxx x použitím xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx).

Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxx xxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-propiolakton,

- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: 2-acetylaminofluoren, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xx-xx třeba, xx možné xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.2 Koncentrace

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx dávky. Tyto xxxxxxxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx způsobují xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx přežívání xxxxx xxxxxxxxx stejné xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx netoxické xxxxx se určuje xxxxxxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Buňky xxxx xxx exponovány xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx testovacím xxxxxxx. Ta xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxxxxx s výměnou xxxxx (xx. xxxxxxx xxxxxxx metabolické aktivační xxxxx), xxxxxxxx se xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx bez xxxxxxxxxx vlastní xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx je x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaná látka x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx vhodných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xx zaznamenáván xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xxxx být prezentovány x xxxxxxxxx xxxxx. Xx vhodné xxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk jako xxxxxxxx kontrolní xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx přežívajících xxxxx. Data xx xxxxx zpracovat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx použitých x xxxxxxxxx kultury, xxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: koncentraci xxxxxxxxx xxxxx, xxxx inkubace, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, hustotě xxxxx během expozice, xxxxxxxxxxx sledovaného xxxxxxxx, xxxxxxx selektivního xxxxxxx (xx-xx xx vhodné), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,

- statistickém xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX TEST X XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo fetální xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx poškozením xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx může xxx také xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Samci xxxx exponováni testované xxxxx a xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, intaktními xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x exponované xxxxxxx xxx xxxxx mrtvých xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Preimplantační xxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxx žlutých xxxxxxx xxxx porovnáním xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x exponované x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx letalita xx xxxxxx xxx- x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x exponované xxxxxxx x živým xxxxxxxxxxx xx samici v xxxxxxxxx xxxxxxx. Snížení xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (t.j. xxxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxx).

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxxxxx xxxxx rozpustit nebo xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx nerozpustné xx vodě se xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxx aplikace

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx způsob xxxxxxxx je xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2.2 Experimentální xxxxxxx

Pro xxxx xx doporučují xxxxxx xxxxxxx nebo xxxx. Xxxxxx, pohlavně xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxx xx exponované x xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx

Xx třeba použít xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx spontánní xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx biologické xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxx detekční xxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx testu. V xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx takový xxxxx samců, aby xx xxxxxxx 30 - 50 xxxxxxx xxxxx xx připouštěcí xxxxxxxx.

1.2.2.4 Negativní a xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx x negativní (x xxxxxxxxxxxxx) kontroly xxxx xxx xxxxxxxx do xxxxxxx experimentu. Xxxxxxxx xxxx xx laboratoř x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivních kontrol x xxxxxxxxx experimentů, xxxxx být xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx dávkách, aby xxxx prokázána xxxxxxxxx xxxxx (např. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 mg.kg^-1).

1.2.2.5 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx vyvolávat xxxxxx xxxxxxxx xxxx snížené xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx je postačující xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2.2.6 Xxxxxxx xxxx

Netoxické xxxxx xx xxxxxxxx x jedné xxxxx 5 x.xx^-1 xxxx x xxxxx 1 x.xx^-1.xxx^-1 xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Existuje xxxxxxx postupů. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx.

Jeden xxxxx xx xxxxxxxxx křížen x jednou nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Samičky xxxx xxx x xxxxx xxxxxxx xx dobu xxxxxx jednoho xxxxx xxxx, xxxx xxxxx xx neprokáží spermie xx vagině či xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xxxxxx po xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx dělohy xx xxxxxxxx x určení xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. Vaječníky xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx x xxxxx xxxxx, počtu xxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx páření xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x samice xxxx uváděny samostatně. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, x xxxxx xxxxxx xxxxx, x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx implantací.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx dominantního xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx srovnání xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx samici x xxxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x kontrolní skupině. Xxxxx mrtvých ku xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupině xx xxxxxxxx poměru v xxxxxxxxx skupině xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

V xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx x pozdní xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx ztráty. Xx xxxxx být xxxxxxxxxx jako xxxxxx xxxx počtem xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx dělohu xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx možno, xxxxxxxxx x:

- druhu, xxxxx, xxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx látce, xxxxxxxxxxxx, dávkových hladinách x důvodech jejich xxxxxx, negativních a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, údajích x toxicitě,

- xxxxxxx podání a xxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx x průkazu xxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx počítání dominantních xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx xxxxx/xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx hodnocení,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.23. ANALÝZA XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX V XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX

1. METODA

Xxxxxx xx xxxxxxxxx OECD XX 483, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 ÚVOD

Xxxxxx xxxxx xx xx xxxx identifikovat xxxxx způsobující strukturální xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx chemickými xxxxxxxx jsou většinou xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx chromozómového typu xxxxxxx rovněž. Xxxx xxxxxx není xxxxxx x analýze xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx k xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Chromozómové xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xx analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx předpokládá, že xxxxxx predikovat indukci xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách.

K xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Tímto xxxxxxxxxxxxxx testem xx xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx.

Aby xx ve spermatogoniích xxxxxxxx aberace chromatidového xxxx, xx třeba xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx než xx poškození xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx informace x xxxxxxxxxxx spermatogonií xxx xxxxxx analýzou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, kde xx zjišťují xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu v xxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx xx xxxx je určen xx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx aktivní x xxxxxxx zárodečných. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mutagenity tím, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA.

X testes xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx citlivosti xxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Zjištěné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx reakcí ovlivněných xxxxxxxx spermatogonií, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx varleti xxx xxxxx generace spermatogonií xxxxx, xxx xxxxxxxx xxx exponovány xxxxxxx xxxxxx kvůli xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx bariéře.

Existují-li xxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx do cílové xxxxx nedostane, není xxxx xxxxx xxx xxxx vhodná.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx obou xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx.

Aberace chromozómového xxxx: strukturální poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx místě (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx dicentrický chromozóm, xxxxxxxxxx chromozóm-ring)

Zlom xxxxxxxxxx: xxxx zlom xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx chromatid xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx.

Gap: xxxxxxxxxxxx xxxx menší než xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.

Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (n) xxxx xxx diploidní xxxxx xxxx (3x, 4x xxx.).

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dělení ve xxxxxx xxxxxxxx, pozorovaná xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, a výměny.

1.3 XXXXXXX METODY

Xxxxxxx xx vhodným způsobem xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ve vhodnou xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx. Před xxxxxxxxx se na xx xxxxxx látkou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Colcemidem®). Xx xxxxxxxxxxx buněk xx xxx připraví xxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xx v xxxxxxxxxx analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Výběr živočišného xxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx čínských xxxxxx a myší, xxx xxxxx xxxxxx xxxxx jakéhokoliv xxxxxx xxxxxxxx savčího druhu. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x u xxxxxxx xxxxxxx nemají xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx

Všeobecné podmínky xxxxx xxxx uvedeny xx Všeobecném xxxxx x části B.

Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci xx xxxxxxxxxxx xxxxxx a xx xxxx minimálně xxxx xxx xx xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx případné vlivy xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx

Xx-xx testovaná xxxxx x xxxxxx stavu x xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx její suspenze xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx před xxxxxxxxx xxxx. je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x xxxxxxxx (stabilitě) xxxxxxxxx, že skladování xx neovlivní.

1.4.2 Xxxxxxxx testu

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x používaných xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx nepříliš známé xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx skupinách stejně.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx vivo xxx xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx jejich detekovatelné xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Dávky při xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx tak, aby xxxx účinky xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx xx možné podávat xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx látku a xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx časovém xxxxxxxxx. Xxx je xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Látka	XXX	EINECS
cyklofosfamid	50-18-0	200-015-4
monohydrát xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxx	108-91-8	203-629-0
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxx monomer	79-06-1	201-173-7
triethylenmelamin	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx nejsou k xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxx s xxxxxxxxx x o xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx zvířaty. Xxxxxx xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx publikované xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx zvířat

X každé xxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx xxx minimálně xxx analyzovatelných xxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jednorázově xxxx xx xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx se x xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxx, xx. xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx režimy xxxxxxxxx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxx.

V případě xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx vzorky xx xxxxxxxx látce xxxxxxxxx dvakrát. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx může xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, provádí xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx odběr xxxxxx 24 x 48 xxxxx po xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx (xx. mimo xxxxx nejvyšší) xx xxxxx xxxxxx provádí xx 24 hodinách xxxx po 1,5násobku xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx expozici, xxxxxx xx znám vhodnější xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (6).

Xxxxx toho xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Např. xxxxx-xx xx o xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómů xxxxx mitózy, nebo xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx S-fázi xxxxx, xxxx vhodnější xxxxxxxx doba odběru xxxxxx (1).

Xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx posuzuje případ xx xxxxxxx. Xxxxx xx provádí xxxxxxxx xxxxx opakovaně, xxxxxxxx xx xxxxxxx po 24 xxxxxxxx (1,5xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxxxx x x dalších intervalech, xxxxxxxx-xx se xx xx xxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx xx zvířatům xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vhodná xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx z xxxx xx vhodném intervalu xxxxxxxx vzorky. X xxxx xx tento xxxxxxxx xxxxxx 3-5 xxxxx, u čínských xxxxxx zhruba 4-5 xxxxx.

1.5.3 Xxxxxxxxx

Provádí-li xx xxxxxx xx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx žádné xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx stejného xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx režimu, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx zjištění xxxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx toxicity k xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxx. Pro xxxxxxxx xxx odběru xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Ta je xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, že xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.

Xxxxx, xxx x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx představovat xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxx xx xxxxxx od xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx jako xxxxx, xxxxx vede k xxxxxxx xxxxxxx toxicity xx xxxxxxxxxxxxxxx (např. xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx( xxxxx pokles xxxx xxx xxxxx xxx 50 %).

1.5.4 Xxxxxxx test

Xxxxxxxx xxxx při dávce xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx v jedné xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky a xxxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nemusí xxx xxxxxxxxx xxxx studie xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx humánní expozice xx může xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx dávky.

1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx žaludeční sondou, xxxx intraperitoneální xxxxxxx. X odůvodněných případech xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete a xxxx překročit 2 xx/100 g xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx musí xxx zdůvodněné. S xxxxxxxx dráždivých xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx vykazují při xxxxxxx koncentracích xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx objem xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx se xxx objemová xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Xxxxxxxx chromozómů

Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxx buněčná xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx hypotonickým xxxxxxxx x fixuje xx. Buněčná suspenze xx nakape na xxxxxxxx xxxx a xxxxxx.

1.5.7 Analýza

X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx minimálně 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx. minimálně 500 xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx). Xxxxx xxxxx xx xx snížit, xx-xx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx preparáty (včetně xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx, musí xxx u xxxxx xxxx buněk xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx číslu 2x ± 2.

2. XXXXX

2.1 ZPRACOVÁNÍ VÝSLEDKŮ

Xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx prezentují x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx buněk xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi x xxxxx aberací xx xxxxx buňku. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx typy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx počet x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xx do xxxxxxx xxxxxxxx aberací xxxxxxxxxx.

Xx-xx xxxxxxxxxxx mitóza x xxxxxx, stanoví xx x xxxxx xxxxxxxxx zvířat x xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx poměr xxxxx xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx, a xx xxx, xx xx x xxxxxxx jedince xxxxxxx 100 xxxxxxxx xx xxxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx pouze mitóza, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE XXXXXXXX

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se používá xxxxxxx kritérií, například xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx závislá xxxxxxxxx xxxxx x chromozómovými xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Nejprve xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (8); xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx dalším xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, xx v xxxxx systému xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx experimentů xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx případech xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx bez ohledu xx počet xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx chromozómové oberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xxxxxxxxxx.

Xx třeba xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx širokého xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx tkáň (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx o průběhu xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.

Pokusná xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxx druh/kmen,

- xxxxx x věk xxxxxx,

-původ, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,

- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx látky,

- podrobnosti x xxxxxxxx testované xxxxx,

- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx zvířat,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx / den),

- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,

- podrobné xxxxxx podávání xxxxxxxxx xxxxx x odběru xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx koncentrace a xxxxx působení,

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,

- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx xx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- známky xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx,

- poměr xxxxx spermatogonií x xxxxx a druhé xxxxxxxxx metafázi,

- xxx a xxxxx xxxxxxx xxx každého xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx aberací x xxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxx x aberacemi xx xxxxx skupinu,

- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,

- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

X.24. XXXX XXXX U XXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xx xx xx vivo xxxx na xxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx buňkami u xxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xx, které xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx heterozygoti xxx xxxx genů xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx ztráty dominantních xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vyjádřeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx) pozměněné xxxxx xxxxx narozených xxxx. Počet potomků x těmito skvrnami, xxxxxxxx, xx zaznamenán x jejich frekvence xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x potomků x xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx mutace x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx nerozpustné xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxx x testovanou xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx efekt. Používají xx čerstvě připravené xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xxxxx X (xxxxxxxxx, x/x; chinchilla, xxxx xxx, x^xx x/x^xx x; brown, x/x; xxxxxx, xxxxx xxx, x xx/x se; xxxxxxx spotting, s/s) xxxx xxxxxxx buď x xxxxxx XX (xxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xx x xx/xx x xx; xxxxxx xxxxx, ln xx/ /xx fz; xxxxx xx/xx) nebo x xxxxxx C57 XX (xxxxxxxxx, a/a).

Mohou xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx že xxxxx xxxxxxx nonagouti potomci. Xxxx. křížení xxxx xxxxxx XXXX (nonagouti, x/x; xxxxxx, x/x) x XXX (xxxxxxxxx, x/x; xxxxx, x/x; xxxxxx d/d).

1.2.1.2 Počet x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx zabřezlých xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxx. Vhodná xxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxx a x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pouze x xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávkou.

1.2.1.3 Negativní x xxxxxxxxx kontroly

Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pouze xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx kontroly). Xx zvýšení citlivosti xxxxx mohou být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x téže xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx získané x xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx látce se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxx testu xxxxxxx, xxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxx nebyla mutagenita xxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xx používá xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekce xxxxx xxxx. Xx-xx xx vhodné, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx nejméně xxx xxxxx, z nichž xxxxx vyvolává xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.

1.2.2 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx 8., 9. xxxx 10. xxx xxxxxxxx, xxxxxxx za 1. xxx březosti xx xxxxxxxx den xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 x 9.25 xxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx během xxxxxx xxx.

Xxxxxxx

X xxxxxx je xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx skvrn xxxx xxxxxx x čtvrtým xxxxxx po xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx:

(x) xxxx xxxxxx x xxxxxxx 5 xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, o xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (XXXX);

(x) žluté xxxxxx xxxx xxxxxx xx vyskytují v xxxxx mléčných xxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxx, xxxxxxx slabin a xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xx, xx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx diferenciace (XXX);

(x) xxxxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx somatických xxxxxx (RS).

Xxxxxxx xxx skupiny jsou xxxxxxxxxxxxx, ale xxxxx xxxxxxxx, RS, je xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx x odlišením xxxx XXX a XX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx chlupů xx xxxxxxxxxxxxxx mikroskopu.

Zaznamenávají xx nápadné, velké xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx potomků.

2. XXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx skvrn xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx x exponovaných xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx hodnoty xx vrh.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva o xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, informace x:

- kmeni xxxxxxxx xxx xxxxxxx,

- xxxxx zabřezlých samic x xxxxxxxxxxxxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx x při odstavení,

- xxxxxxxxx úrovních xxxxxxxxx látky,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xx kterém xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,

- x xxxxxxx podání xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx s XXXX, XXX a RS x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx/xxxxxxx x XX, je-li xx možné,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX X XXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

Xxxx xx xxxxxxxx translokace x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx změny x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx potomků. Indukované xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx potomků ještě xxxxxx X-xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x XO-samice xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se využívá xxx výběr X₁ xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (X-autosom x x-x typ). Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx samců ze xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx I, xxxx X₁ samců xx xxxxxxx xxxxxxx F₁ xxxxx. Xxxxxx XX xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pouze 39 xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx dávkování xxxxx, xxxxx reagovat s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.1.1 Xxxxxx aplikace

Aplikuje xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx i jiné xxxxxx xxxxxxx aplikace.

1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata

Xxx xxxxxxxxx křížení a xxxxxxxxxxxx verifikaci xx xxxxxx provádí xx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx kmen. Xxxxxxxx velikost vrhu xx měla být xxxxx xxx xxx x xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx zvířata.

1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx kontrolu.

Test xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx F₁ xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx x X₁ xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx budou xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx X₁ xxxxxxxx xxxxxxx, xxx se vyžaduje 300 xxxxx x 300 xxxxx.

1.2.1.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kontrol xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx přijatelné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol z xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx laboratoře, mohou xxx použity.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx xx jedna xxxxx, obyčejně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx minimální xxxxxxx xxxxx, xxx xxx vlivu xx xxxxxxxxxxx chování nebo xxxxxxxxx. Xxx stanovení xxxxxx xxxxx/xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Popis xxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx se xxx xxxxxxx xxxxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx sedm xxx x týdnu xx 35 xxx.

Počet xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx, že všechna xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx budou analyzována. Xx konci období xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx. Xx xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xx vrhu xxxx xxxxx i xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xx experimentu.

1.2.2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx heterozygotů

Používá xx xxxxx xx xxxx xxxxxxx metod. Xxxx fertility F₁ xxxxxxx x následná xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx F₁ xxxxxxxx bez předchozího xxxxxx xxxxxx testu xxxxxxxxx.

(a) Xxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx fertilita xxxxxx v X₁ xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx fertility xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxx kmen xxxxxxxxx myší.

Velikost xxxx: X₁ samci xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx samostatně xx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo stejné xxxxxxx. Klece xxxx xxxxxxxxxxxx denně xxxxxxxx 18. xxxx xx xxxxxxxxx. Velikost xxxx x pohlaví X₂ xxxxxxx jsou zaznamenány xxx porodu, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx X₁ xxxxxx, X₂ xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxx testy. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxx xxxxxxx. XO-samice xxxx určeny xxxxxx xxx ratio xxxx xxxxxx xxxxxxx z 1 : 1 xx 1 : 2 samci vs. xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx normální X₁ xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx X₂ xxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx. X₁ xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx klasifikována xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx tří X₂ xxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxx analýzou xxxxxx xxxxxx, nebo xxxx přímo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: Redukce xxxxxxxxx vrhu x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx embryí, xxxxx xxxxxx počet xxxxxxx implantací xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxxx X₁ xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx ranní xxxxxxxxx vaginální xxxxx. Xxxxxx xxxx usmrceny 14. - 16. xxx x jsou xxxxxxxxxxxxx živé a xxxxx xxxxxxx.

(x) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxx-xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx na základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx stadiu diakinézy - xxxxxxxx X x primárních spermatocytech. Xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x multivalentními xxxxxxxxxx splňuje požadovaný xxxxx, xx testované xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx byl xxxxxxxx výběr xx xxxxxxxx, xxxxxxx F₁ xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xx každého xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nejméně 25 xxxxx v xxxxxxxxx - metafáze X. Analýza xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx spermatogoniích xxxx x kostní xxxxx se xxxxxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx před xxxxxxxxxx nebo x X₁ xxxxx xxxxxxxxxxx XX. Xxxxxxxxxx neobvykle xxxxxxxx a/nebo krátkého xxxxxxxxxx x xxxxx x 10 buněk xx důkazem pro xxxxxxxxx samčí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (x-x typ). Xxxxxxx X-autosomální translokace xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx xx xxxxx 10 mitózách je xxxxxxx xxx XX xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx formou.

Xxx xxxxx xxxxxxxx připouštění xx zaznamenána xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx).

Xxx xxxxx xxxxxxxxx X₁ xxxxxx xx uvádí průměrná xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx velikosti xxxx X₁ nosičů xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx dělohy xx xxxxx průměrný xxxxx xxxxxx x mrtvých xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx X₁ nosičů xxxxxxxxxxx.

Xxx cytogenetické xxxxxxx diakinéze-metafáze X xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx každého xxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxx X₁ xxxxxxxx jedince xx xxxxxxxxxxx počet x doba připuštění. Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

X XO xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx ratio F₂ xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx analýzy.

X xxxxxxx, že xxxxxx xxxxx fertility xxxx xxxxxxxxx vybráni xxxxx xxxxxxxx X₁ xxxxxxxxxxx, xx třeba x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxx být xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx možné, informace x:

- kmenu xxxx, xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx zvířat,

- počtu xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxxx podmínkách, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x schéma xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x pohlaví xxxxxx xx samici, xxxxx x pohlaví xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxx x xxxxxxxxxx analýzy xxxxxxxxxxx,

- počet x detailní popis xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x březosti x xxxxxx xxxxxx,

- popis xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.26. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ

(90xxxxx xxxxxxxxx podávání per xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx xxxxxx denně xxxxxx po 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx každé xxxxxxx xxxxx úroveň dávky. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx konce pokusu, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx v podmínkách xxxxxxxx a krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx zdravá xxxxx dospělá zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin.

Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x potravě, xxxxxx, x kapslích xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx zvířatům xx xxxxxxxxx látka xxxxxx po xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx dřívější data, xx xxxxx je xxxxxx.

1.2.2 Experimentální podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx než 6 týdnů, x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 8 xxxxx. Xx začátku studie xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx nullipary a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx se zvířata xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx před xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 zvířat každého xxxxxxx) xx dobu 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Dávkování

Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. S výjimkou xxxxxxxx testované xxxxx xx se zvířaty x kontrolní skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Používá-li xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, podává xx kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám, x xx ve stejném xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx malý xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Ve xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx úrovní dávky x x kontrolní xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx měl být xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx použít xxx konstantní xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx^-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; použitou xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx sondou, mělo xx xx xxx xxx každý xxx xx xxxxxxx dobu, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx intervalech (týdenních xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx-xx se 90xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 tělesné hmotnosti xx xxx (xxxx xxxxx vyšší - xxxxxxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, je-li xxxx xxxxx) žádné toxické xxxxxx, je možno xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx množství xxx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx nebránily xxxxxxxx xxxxxx zvířat.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat a xxxxxxxxxxxx toxické účinky, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx objeví x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Popis xxxxxxx

X xxxxxxxx xxxxxxx xx zvířatům podává xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx dalších 28 xxx xxx aplikace, x posouzení xxxxxxxx x otravy xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.

Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, očí, sliznic, xxxxxxx a krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Xxxxxx potravy (x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx testované látky x xxxxx xxxx) x xxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx jako xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx utratit a xxxxxx.

X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx xx provést xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávky x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xx konci xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření, které xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.

(c) Xx konci xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (trvání doby xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx živočišného xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx séra (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx x séru. Xxxx další charakteristiky, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx x xxxxxxx xxxxxxx použity pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

(d) Analýza xxxx se xxxxxxxxxx xxxx běžný xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx toxicity.

Xxxxx xxxxxx přiměřené xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx zvířat použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, všech tělních xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (s xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po sekci xxxxx ve vlhkém xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Následující xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x ohledem xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx místě xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, slinivka xxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx mléčná xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx kost x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxx mícha xx třech xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx a bederní, x (slzné xxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxx, pokud lze xx xxxxxx postižení xxxxxxxx x příznaků xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx s cílovým xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx je třeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxx skupiny, xxxxx xxxx podána nejvyšší xxxxx, x u xxxxxx xxxxxxxxx skupiny.

(x) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx makroskopická xxxxxxxxx.

(x) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x střední xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx zvířat. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx x xxxxxx skupin. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx x zvířat xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx rutinně, musí xx však xxxxxxx xxxx na orgánech, xx kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx provést xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxx x orgánech, x kterých byly xxxxxxxx účinky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu x xxxxx zvířat x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k xxxx možno použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx pokusu xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky ustájení, xxxxxxx,

- experimentální xxxxxxxx - úrovně xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x podle dávek,

- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx stanovit,

- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, případně xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx konce sledování,

- popis xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků,

- xxxx, kdy xxxx pozorovány jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,

- xxxxxxxx xxxxxxx x vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx (včetně výsledků xxxxxxxxxx xxxxxx moči),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických nálezů,

- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

B.27. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ

(90denní xxxxxxxxx podávání per xx, studie xx xxxxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx podává denně xxxxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (nehlodavcům), x to každé xxxxxxx jedna xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x zvířata, která xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, se pitvají.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v jakých xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx testem xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x kapslích. Xxxxx xxx použity také xxxx způsoby orální xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx xxxxxxx pes: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx používat x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx; v případě xxx xx má x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx od 3 xx 6 xxxxxx a xx xxxxxxx xxx 9 xxxxxx. Xxxxxxx-xx xx subchronický xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx dlouhodobým xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx použít nejméně 8 zvířat (4 xxxxxx x 4 xxxxx). Xxxxx zvířat xx konci xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxxx účinků.

1.2.2.3 Dávkování

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx. Nejnižší úroveň xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx hodnotu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxx dávek, mají xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Xx xxxxxxx s nízkou x xxxxxxx úrovní xxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx rovněž xxxxxx xxxxxxxx.

Podává-li xx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx ani aplikované xxxxxxxx ani xxxxx xxxxxxxxxx testované látky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, může xx xxxxxx buď xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx^-1 potravy) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx xx xxx xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tělesné hmotnosti xxxxxxx.

Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx studiích xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx-xx 90xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti xx xxx (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx možné expozici xxxxxxx, je-li xxxx xxxxx) xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx testování xxxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx toxická xxxxx x potravě, je xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx pozorování

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx, xxxxxx dobu objevení, xxxxxx x xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

X xxxxxxxx xxxxxxx xx zvířatům xxxxxx xxxxxxxxx látka 7 xxx x týdnu xx xxxx 90 xxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx způsobem xxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xx za xxxxxxxxxx xxxxxxx látku 5 dní x xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx není xx xx xxxxxxx) xxxxx xxxx, srsti, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx oběhu, změny xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity a xxxxxxx.

Příjem potravy (x xxxxxx vody xxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxx xxxx) x hmotnost xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx pečlivá xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx se pitvají xxxxxxx zvířata, která xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, humánně utratit x xxxxxx.

X xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(x) Oftalmologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx změny, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.

(x) Na xxxxxxx xxxxx, x potom xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x dále xx xxxxx xxxxxx se xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako například xxxx srážlivosti, protrombinový xxx (Xxxxxxx), trombinový xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.

(c) Na xxxxxxx testu, x xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (přičemž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a kmene), xxxxxxxxxxx transferáza (dříve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) x aspartát aminotransferáza xxxx (dříve glutamát-oxalacetát xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxx vzorků xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (ne xxxx xxx 24 hodin).

(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx pozorované xxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx provede xxxxx zahrnující zevní xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx otvorů, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x příštítnými xxxxxxx) x varlata xx co xxxxxxxx xx xxxxx zváží xx vlhkém xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx orgány x xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, mozek - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra xxxxx x mozečku, podvěsek xxxxxxx, xxxxxx žláza, xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx místě xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx pohlavní xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (samičí xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx nerv, (oči), xxxxxx xxxx x xxxxxx dření, (kost xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx) a (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx). Tkáně v xxxxxxxxx se xxxxxxxx, xxxxx xx to xxxxxxxxxx xxxxx příznaků xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx s cílovým xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx histopatologické vyšetření xxxxxx a tkání xx xxxxx xxxxxxx x všech zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x u zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxx dávkových xxxxxx xx provedena orgánech, x kterých xxxx xxxxxxxx poškození x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx, xxxx když xx xx indikováno xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx se xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx, typy poškození x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx poškození. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, potrava,

- xxxxxxxxxxxxxx podmínky,

- xxxxxx dávek (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) a xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích podle xxxxxxx x xxxxx xxxxx,

- xxxxxx xxx xxxxxx, pokud xx lze stanovit,

- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx),

- doba, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx případných analýz xxxx),

- pitevní xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx xx to xxxxx,

- diskuse xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.28. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXXXX

(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx hlodavcích)

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 90 xxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx jedna xxxxxx xxxxx. Během xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx během xxxxxx, i zvířata, xxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.

Xxxxxx před xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, mělo xx xx však xxxxxxx cca 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx oholení xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx holení xxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx xx nepoškodila xxxx (např. xxxxxx). Xxx nanášení se xxxxxxxx nejméně 10 % xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxx x velikosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx kůže a x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Při pokusech x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx upraveny do xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx vhodným vehikulem, xxx xxx zaručen xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx denně 5 xx 7 xxx x xxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxx, králíky xxxx morčata, xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx musí xxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx subchronický xxxxxxxx xxxx jako předběžný xxxx xxxx dlouhodobým xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx) se xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx před xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 90 xxx nejvyšší xxxxx x během xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Je xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo - xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 6 hodin xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxx xxxxxxxx každý xxx xx xxxxxxx xxxx. X intervalech týdenních xxxx čtrnáctidenních xx xxxxx aplikovanou dávku xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x to xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx nejvyšší xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v xxxxx počtu. Xxxxxxxx xxxxxxx dávky xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Pokud xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx tuto xxxxxxx překračovat. Ideálně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxxx xxxxx, mají xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx dávky x x kontrolní xxxxxxx xx počet xxxxxxx xxx xxx nízký, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx podráždění xxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x vysoké dávkové xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx okolností nutno xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx test

Xxxxxxxx-xx xxx předběžné xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 nebo xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx člověka, xxxxx toxické xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx zvířata xx třeba denně xxxxxxxxx x zaznamenávat xxxxxxx účinky. Xx xxxxx xxxxxxxxxx dobu xxxxxxx a xxx, xx xxxxxx se xxxxxx x opět xxxxxx xxxxxxx účinky.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx po xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx v týdnu xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx činí nejméně 6 xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx látku xx xxxxx nanášet xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx asi 10 % xxxxxxx xxxx, x vysoce xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx plocha xxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx pokusné xxxxxx rovnoměrně x xx nejtenčí vrstvě.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxx obvazu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx orálnímu xxxxxx. K zamezení xxxxxx látky xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pro omezení xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx však xxxxx xxxxxxxxx.

Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.

Všechna xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx xxxxxx jejich počátku, xxxxxx a xxxxxx.

Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, xxx x xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx třeba zajistit xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zvířat jako xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx xxxxxxxx zařazení. Xx skončení xxxxxx xx všechna zvířata, xxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x zvířata x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx je xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

U xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx provádějí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx x na xxxxx studie xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxx alespoň u xxxxxxxx xxxxx x x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.

(x) Xx konci xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx čas (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx trombocytů.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (přičemž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxxxxx transferáza (xxxxx glutamát-pyruvát xxxxxxxxxxxx xxxx) x aspartátamino xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx transamináza), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx močoviny, albumin, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou být x xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx účinků.

(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxx, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx pozorované xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx historická xxxxxxxxx xxxx, xx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx prohlídku xxxxxxx xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx ve xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým postižením, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, štítná xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx místě xxxxxxx, (průdušnice), xxxxx, xxxxx, xxxxx, (slinné xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, slinivka xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx orgány, žlučník (xx-xx přítomen), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx x slepé xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx mléčná žláza), (xxxxxxxx sval), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), (xxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxx), (kost xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx úrovních - xxxxx, xxxxx hrudní x xxxxxxx) x (xxxxx xxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx souvisejí x xxxxxxx orgánem.

1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx

(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx kůže, xxxxxx x tkání xx xxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny.

(x) Xx xxxxx vyšetřit xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x ostatních dávkových xxxxxxxxx.

(d) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx to xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se x zvířat xxxxxx xxxxxx nemusí provádět xxxxxxx, musí xx xxxx xxxxxxx vždy xx xxxxxxxx, na xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx x vysokou xxxxxx.

(x) Používá-li xx xxxxxxxxx xxxxxxx, musí xx provést histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx u ostatních xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx na počátku xxxxxx x počet xxxxxx x lézemi x procentuálně xxxxx xxxxxx x jednotlivými xxxx xxxx. Výsledky xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení,

- xxxxxxxx pokusu,

- úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, pokud xx xxxxxxx) a xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,

- xxxxxxx bez xxxxxx, xxxxx xx lze xxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj x xxxxxxx zvířat do xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx toxických nebo xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, kdy byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,

- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx je xx xxxxx,

- diskuse xxxxxxxx,

- interpretace xxxxxxxx.

B.29. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXX

(90xxxxx xxxxxxxxx inhalační xxxxxxxx - xxxxxx xx xxxxxxxxxx)

1. METODA

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxx pokusných zvířat xx exponováno studované xxxxx denně xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx koncentracích, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xx 90 xxx. Xxxxxxx-xx xx pro dosažení xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x atmosféře xxxxxxxxx, je třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vehikulum. Během xxxxxx pokusu se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zjišťují xx xxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, i xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x podmínkách xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx se xxxxxx xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx vehikulum xxx, xxx x xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x nich xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx známy xxxxxx xxxxx tomu. Xxxxxxx xx na mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx nemá variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx studiích se xx xxxxxx stejný xxxx a kmen.

1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx je třeba xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Pokud xx zvířata budou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx nutno xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxxxxx další xxxxxxx (xxxxxxxxx skupinu) 20 zvířat (10 xxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx dobu 90 xxx xxxxxxxx koncentraci x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, trvání xxxx xxxxxxxx výskyt toxických xxxxxx.

1.2.2.3 Expoziční xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx s xxxxxx xxxxxx koncentrace x xxxxx kontrolní xxxxxxx (xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx - pokud xx xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx stejné jako x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx). S xxxxxxxx xxxxxxxx testované látky xx xx zvířaty x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx koncentrace xxxx vyvolat xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx koncentrací, xxxx xxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x v kontrolní xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx xx xxxxxxxx rovnováhy xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X případě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx i xxxxxx xxx expozice.

1.2.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxx expozici xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x rovnoměrné xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx třeba xx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx nejvíce xxxxxx xxxxxxxxxx zvířat x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx boxu xxxxx xx x xxxxxx celkový xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx přesáhnout 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxx inhalační xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx individuální xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx dva xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx jinými xxxxxxx.

1.2.2.6 Doba pozorování

Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx celého xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Je třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, ve xxxxxx xx objeví x xxxx odezní xxxxxxx účinky.

1.2.3. Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x otravy xxxx xxxxxxxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx xxxxx experimentu xx xxx 22 ^xX ± 3 ^xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx případů, kde xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Během xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.

Používá xx xxxxxxxxx inhalační xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolou xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx potřebných koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx nastavit xxx, aby xxxxxxxx x celém xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx stabilních xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:

a) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).

x) Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx se xxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ±15 %. U xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxx xxxx úrovně xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx celou xxxx xxxxxx experimentu xxxx xxx xxxxxxxxxxx tak xxxxxxxx, xxx je xx xxxxxxxxx možné. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx měří xxx xxxxx, jak xx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx stálosti xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

x) Xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx

x) Xxxxx xxxxxxxx a xx xx se zvířata xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx příznaky toxických xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx výskyt, xxxxxx x trvání. Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, srsti, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx funkce autonomní x centrální nervové xxxxxxxx, somatomotorické aktivity x xxxxxxx. Hmotnosti xxxxxx x spotřeba xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx pravidelnou xxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxx xxxxx nedocházelo xx xxxxxxx xxxxxx jako xxxx. v důsledku xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx studie xx všechna zvířata, xxxxx přežila, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx a xxxxxx.

X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx, xxx přinejmenším x xxxxxxxx dávky x x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xx konci xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx čas (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx xxxxxxxxxx.

(x) Xx xxxxx pokusu xx xx provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, funkci jater x ledvin. Výběr xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (xxxxxx doby xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx živočišného xxxxx x kmene), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx glutamát-pyruvát xxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x celkové xxxxxxxxx x séru. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx moče xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx podkladě xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx nejsou xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii xx xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx prohlídku povrchu xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, lební, hrudní x břišní dutiny x xxxxxx obsahu. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx se xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Následující xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým postižením, xxxxx (xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx - perfusní xxxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxx), tkáň xxxxxxxxxxx, xxxxx - x řezech xxxxxx/xxxx, xxxx mozku x xxxxxxx, hypofýza, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (kůže), xxxxxxx (je-li přítomen), xxxxx, žaludek, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, tlusté x xxxxx střevo, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzliny, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ploch), (xxxxxxx xxxxx ve třech xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx to xxxxxxxxxx podle příznaků xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx s cílovým xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx systému x ostatních orgánů x xxxxx xx xxxxx provést x xxxxx xxxxxx skupiny, xxxxx xxxx exponována xxxxxxxx koncentraci, a x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xx xxxxx vyšetřit xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx léze.

(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx dávkových xxxxxxxxx.

(x) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx mají xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx poskytuje xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx u xxxxxx xxxxxx skupin xxxxxx xxxxxxxx rutinně, musí xx xxxx provést xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx histopatologické xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx zjištěny xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx každou experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a počet xxxxxx s xxxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Výsledky je xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx: Popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, klimatizačního systému, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx používán. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx vzduchu, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,

- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx a uvedou xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x charakteristikou xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx obsahovat xxxx xxxxx:

x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením,

b) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,

x) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),

x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx,

x) xxxxxxxx koncentrace x dýchací zóně,

x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (x aerosolu),

- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,

- úroveň xxx xxxxxx, pokud xx možné xx xxxxxxxx,

- doba xxxxxxx během experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx toxických nebo xxxxxx účinků,

- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- hematologická xxxxxxxxx x jejich výsledky,

- xxxxxxxxxxx vyšetření x jejich výsledky,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických nálezů,

- statistické vyhodnocení xxxxxxxx, kde je xx možné,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.30. XXXXXXXXX XXXXXXXXX TOXICITY

1. XXXXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx x týdnu, vhodnou xxxxxx, několika skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, jedna xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxx denně pozorována xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx jsou xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2 Testovací podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x další xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxx). Je xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxx jedince xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Expozice by xxxx být xxxxxxxx xx nejdříve po xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx rozdíl ve xxxx xxxxxx činit xxxx než ± 20 % od xxxxxxx. X xxxxxxx, xx vlastní xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxx xxxxxx nejméně 40 xxxxxx (20 xxxxx x 20 samců), xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Samice xx xxxx xxx xxxxxxxxx a neměly xx být xxxxx. Xxxxx je xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx dokončením xxxxx, xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx) je xxxxx xxxxxx xxxxx počet xxxxxx, xxx xx xxxx xxx 4 xx xxxxxxx xxxxxxx xx skupině.

1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxxxx expozic

Xx xxxxx použít xxxxx xxx dávky x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx vyvolat xxxxx projevy xxxxxxxx xxx nadměrné xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx vyvolat prokazatelné xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx a nízkými xxxxxxx. Xxxxx dávek xx měl vzít x xxxxx výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Obvykle xxxx zvířata exponována xxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx x xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x exponované xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jako jsou xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx-xx xx pro xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, jehož xxxxxxxxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx ani vehikulu.

1.2.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx

Dva xxxxxx xxxxxxx aplikace xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx způsobu xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x pravděpodobném xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vyvolává xxxxxx technické problémy. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x důsledku xxxxxxx xxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxx odvozena x xxxxxxxx xxxxxxxx testu x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx x předchozích xxxxx xxxxx xxxxxxxx.

Orální xxxxxx

Xxx, kde xx testovaná xxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxx exponován člověk, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx aplikaci, pokud xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxxxxxxxx x pitné xxxx xxxx xxxxxxx x tobolce.

Xxxxxxx xx se xxxx xxxxx xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx xxxx k xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" xxxxxxxx x xxxxxx xxx aplikace, a xxxxx ovlivnit xxxxxxxx x následné hodnocení. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx praktické xxxxxxx, dávkování xxxxxxx xxxxx xx považováno xx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx než xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx podrobněji xxxxxxxxx x xxxx xxxxx podání. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace xxxx xxx platnou xxxxxxxxxxxx x specifických xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, takže xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxx xxxxx xx xxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x přibližně xxxxxx hodinou pro xxxxxx xxxxxx denně xx stejnou xxxx xxx, použitou i xxx čištění xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx exponována fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx a stálou xxxxxxxx xx x xxx, že x xxxxx má zvíře 17 - 18 xxxxx xx ústup xxxxxx denní xxxxxxxx x ještě xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxxx studia x xx lidské xxxxxxxx, xxxxx má xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x úvahu xxxxxx xxxxxxxxx obtíže. Xxxxxxxxx, xxxxxx kontinuální expozice xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx prostředí mohou xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx určité koncentrace xxx x technik xxxxxxxxxxxx.

Expoziční xxxxxx

Xxxxxxx xx exponují x inhalačních komorách, xxxxxxx xxxxxxxxxx zaručuje xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx za xxxxxx, xxx byl zajištěn xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx mírný xxxxxxx x xxx xx brání xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Komory xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxx by x xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx x komoře xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxxxx.

Xxxxxx xxxx monitorování xxxxxxxx:

(x) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx nejlépe xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;

(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx denní xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx více než 15 % xxxxxxx xxxxxxx;

(x) teplota a xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx by měla xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 ^oC a xxxxxxx x komorách 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x rozptýlení xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx komory. Oba xxxxxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxxx průběžně;

(x) xxxxxx velikosti xxxxxx: xxxx xx xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx komor x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité testovací xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Vzorek xxxxxxx xx xxx být xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx gravimetricky xxxxxxxxx xxxxxx suspendovanému xxxxxxxx, i xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Analýza xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx prováděna xxxxx během vývoje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxxxx stabilitu xxxxxxxx, x xxxx během xxxxxxx xxx xxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx trvat xxxxxxx 12 měsíců.

1.2.3 Xxxxx postupu

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx

Xxxxxxx klinické xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Dodatečná pozorování xx měla být xxxxxxxxx denně x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx zvířat xx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxx xxxxxxx xx lednice u xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, která xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx sledovat, xxx xx spolehlivě xxxxxxxx xxxxxxx x progrese xxxxx xxxxxxxxx účinků, x xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx ztrát x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x očních xxxx x všech xxxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx příznaků xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx.

Hmotnost xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx jednou xxxxx během xxxxxxx 13 týdnů xxxxxx xxxxx a aspoň xxxxxx xx čtyři xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx spotřeby xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx a xxx přibližně xx xxxxxxxxxxxx intervalech, ledaže xx xxxxxxxxx stav xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx ukázaly xxxxxxx xxxx frekvence sledování.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx vyšetření

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. obsah xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxxxxxxx, celkový xxxxx bílých xxxxxxx, xxxxxxxx destiček xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx x poté x xxxxxxxxx šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, a xx xxxxx na xxxxxxxx xxxx shromážděných xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx z xxxxx skupiny. Tam xxx xx xx xxxxx, vzorky ve xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx od xxxxxxxx xxxxxxx. Navíc xx xxx být xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.

Xxxxx klinické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx zvířat xxxxx xxxxxx, měl xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx xxxx xxxxx x vyšetření patologických xxxx xxxxxxx nutnost, xxxxxxx xx x x xxxxxxx x xxxxxx nejblíže xxxxx.

1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxx xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx možno od xxxxxxxx zvířat a xx stejných xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx stanovení xxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxx pro skupiny xxxxx dávek a xxxxxxx:

- xxxxxx xxxx, objem x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, okultní xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx sedimentu (xxxx- kvantitativně).

1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxx xxxx xxxxxxxx krevní xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx měření xx všech xxxxxxxxxx x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, pokud xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx nehlodavců xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx před xxxxxx. Z těchto xxxxxx xx připravena xxxxxx a jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

- celková xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxx bázické xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx transaminázy¹⁾, xxxxxxxx xxxxxx transaminázy²⁾, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx xx lačno,

- testy xx xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx v xxxx.

1) nyní xxxxx xxxx sérová xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

2) xxxx xxxxx jako xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

1.2.3.5 Pitva

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x moribundním xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx vzorky krve xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx viditelné xxxxxx nebo xxxx, xxxx léze, xxxxx xx mohly být xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx a tkáně xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx histopatologické xxxxxxxxx. Xx se xxxxxxx xxxx následujících xxxxxx x xxxxx:xxxxx³⁾ (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, mozečkové xxxx, kory xxxxxxx), xxxxxxxx mozkového, štítné xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x plic, xxxxx, xxxxx, slinných xxxx, xxxxx³⁾, xxxxxxx, xxxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx³⁾, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, jejuna, xxxx, xxxxxxx střeva, tračníku, xxxxxxxxx, xxxxxxxx měchýře, xxxxxxxxxxxx uzlin, xxxxxxxx, xxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx pohlavních xxxxxx, samičí xxxxxx xxxxx, xxxx, svaloviny, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx a xxxxxxx), xxxxxx s xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, a očí. Xxxxxxxx plic a xxxxxxxx měchýře fixativem xx optimální xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; naplnění xxxx x inhalačních xxxxxxxx, xx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxx. Xx speciálních xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx, má xxx xxxxxxxx celý respirační xxxxx včetně nosu, xxxxxx x hrtanu.

Xxxx-xx xxxxxxxxx jiná xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodítko.

3) tyto xxxxxx x 10 xxxxxx xx xxxxxxx x xx xxxxxxx u xxxxxxxx a xx xxxxx xxxxxxxxxx x dále xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxx xxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxx

1.2.3.6 Histopatologie

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxx léze vyskytující xx v xxxxxxxxxx xxxxxx, mají být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx následující xxxxxxx:

(a) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx popisem xxxxx xxxx xxxxxxxxxx:

1. x xxxxx xxxxxx, xxxxx uhynula xxxx xxxx utracena xxxxx xxxxxx,

2. x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx skupiny,

(b) xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx způsobené xxxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx,

(x) tam, xxx výsledky xxxxxx xxx významné xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx života xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx by xxxxx ovlivnit toxickou xxxxxxx, skupina x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx,

(x) informace x incidenci lézí, xxxxx se normálně xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx. xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx začátku testu, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx lézí. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou být xxxxxxx xxxxxxxxx uznávané xxxxxxxxxxx metody.

3. XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxx

Xxxxxx x testu xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, dieta,

- xxxxxxxx testu: xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení včetně xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, zdroje vzduchu, xxxxxxx pro vytváření xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx používá. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, kde je xx žádoucí, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Údaje x expozici: xx xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:

(x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx

(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky vstupující xx xxxxxxxxx aparatury xxxxxx objemem xxxxxxx)

(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx použito

(x) xxxxxxxx koncentrace v xxxxxxx xxxx

(f) xxxxxxx velikosti xxxxxx (xx-xx xx xxxxxxxxxx)

- xxxxxxx úrovně (xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxx) x xxxxxxxxxxx

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx

- xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxx

- doba xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xx xxxxx

- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx

- doba, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x jeho xxxxx xxxxx

- xxxx x spotřebě xxxxxxx x tělesné xxxxxxxxx

- xxxxxxxxxxxxxx nálezy

- použité hematologické xxxxx a xxxxxxxx

- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx)

- xxxxxxx nálezy

- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx xxxxx

- diskuse xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.31. STUDIE XXXXXXXXXXXX - HLODAVCI X XXXXXXXXXX

1. METODIKA

1.1 Princip xxxxxxxxx metody

Testovaná xxxxx xx podává x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx každou xxxxxxx, xxxxxxx v xxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Krátce xxxx xxxxxxxxxx xxxxx porodu xxxx xxxxx samice xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx je použita x xxxxxxx studiu. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx studium xxxxxx- x xxxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxx, xxxxxxx samice, xxxxx nikdy nebyly xxxxx, xxxxxxxx věku x velikosti xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx laboratorních xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxx plodností. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx experimentálních xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx. Testovaná xxxxx xx podávána xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx x pokračuje xxxxx xxxxxx organogeneze. Den xxxx xxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx skeletu a xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx osifikace x xxxxxxxx do xxxxxx.

1.2.2 Testovací xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

Běžně xxxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxx, xxx, křeček x xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx potkan x králík. Je xxxxx používat všeobecně xxxxxxxx kmeny. Používaný xxxx by xxxxx xxx xxxxxx plodnost x xxxx xx xxx x něj xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxx xxxxxx xxxxx je xxxxx použít xxxxx 20 xxxxxxx potkanů, xxxx xxxx xxxxxx xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Xx sledování xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx a mláďat.

1.2.2.3 Xxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxx látka podána xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx bylo xxxxxx xxxxxxx vehikulum. Je xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxx xxx teratogenní xxx mít vliv xx reprodukční schopnosti. Xx xxxxxxx x xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) xx xxxxxxx stejným způsobem xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Pokud xx fyzikálně xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, pak xxxxxxxx xxxxx testované xxxxx xx x ideálním xxxxxxx měla u xxxxx xxxxxxx takové xxxxxxx toxicity, jako xx mírné xxxxxxx xxxx, xxx xx xx více xxx 10 % xxxxx. Xxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx byly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mezi nízkou x xxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

V xxxxxxx, xx xxxxx x xxxxxx toxicitou xxx xxxxx nejméně 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, není xxxxx testovat xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx

Nultým xxxx xxxxx xx xxx, xxx je xxxxxxxxxx vaginální xxxxx x/xxxx spermie (xxxxx xxxxx). Doba xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx hlavní xxxxxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxx xx možno považovat 6. až 15. xxx x xxxxxxx x myši, 6. xx 14. den x xxxxxx x 6. xx 18. xxx u králíka. X případě, že xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx den, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx inseminace, xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx údajům xxxxx den. Podle xxxx xxxxxxxxxxx končí xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.6 Xxxxxx pozorování

Xxxxx xxx je xxxxx xxxxxxx pečlivé klinické xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxx být xxxxxxxx xx váhu xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx během xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx vážena x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vážení. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx ihned xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Samice xxxxxxxxxx xxxxxx potratu nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx utratit x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxx pokračovat x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx přibližně jeden xxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx období xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xx komplikacím xxx xxxxxxxxxxxx výsledků xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx x kleci xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x sliznic, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Každý xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

Pokud xxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx na xxxxx xxxxxx, je xxxxx x samic makroskopicky xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx mohly xxx xxxx xx xxxxxx březosti. Ihned xx smrti xx xxxxx odstranit xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx dobu xxxxx xxxxxxx v xxxxxx. U potkanů x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx tělísek. Xx xxxxx určit xxxxxxx xxxxxxx x zaznamenat xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xx vyjmutí xx xxxxx jednotlivě xxxxx xxxxxxxx každý xxxxxxx. X xxxxxxx, xxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx kosterní xxxxxxxxx u xxxxxx xxxxx xxxxxxx až xxxxxxxx xxxx x x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxx x procento xxxxxx zárodků a xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx abnormit x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx možno xxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZPRÁVA

3.1. Xxxxxx x xxxxx

Xxxxxx x testu xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx,

- dávky (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- projevy xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxx,

- dávka xxx xxxxxx (xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx),

- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxx,

- xxxxx x tělesné xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx březosti x xxxxx x xxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx),

- údaje x zárodcích (živé/mrtvé, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),

- údaje x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx/xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.32. XXXX XXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxx

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx dávka na xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xx chovají x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení nejméně xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx do kontrolních x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata

Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx potkan. Xx xxxxxxx předchozích xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx i xxxxxxxxxx). Používají xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xx neměl xxx xxxxxx ve xxxx zvířat činit xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx vlastní studii xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx a xxxx x xxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) xxx xxxxxx úroveň xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Samice xx xxxx xxx xxxxxxxxx a negravidní. Xx-xx xxxxxxxxx průběžné xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx takto xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x frekvence xxxxxxx

Xxxxx se při xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx přírůstků (méně xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxx xxxxxx účinky xxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx interferovat x xxxxxxxxx růstem, xxxxxxx x xxxxxx života xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx známky toxicity. Xxxxxx by xxxxxx xxx xxxxx než 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx třeba xxxxxxxx xx středním pásmu xxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx vzít v xxxxx předchozí testy x xxxxxx toxicity.

Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx podávána x xxxxx xxxx nebo xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xx být xxxxx x xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx identická x každém xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx.

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ani xxxxxxxx.

1.2.5 Xxxxxx aplikace

Tři xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pravděpodobném xxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx.

1.2.5.1 Orální xxxxxx

Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx traktu x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx člověk, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxxxxxxxx x pitné xxxx xxxx podanou x xxxxxxx.

Xxxxxxx xx xx měla látka xxxxxxx xxxx xxx x týdnu, protože xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx může xxxx k vymizení xxxxxxxx xxxx naopak xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" příznaky x období bez xxxxxxxx, a tudíž xxxxxxxx výsledky x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x ohledem xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx.

1.2.5.2 Xxxxxxxx studie

Xxxxxxxx xxxxx na xxxx xxxx být xxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxx modelový xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx poškození.

1.2.5.3 Xxxxxxxxx studie

Protože xxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx aplikace, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané lidské xxxxxxxx, xxxxx zvíře xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx hodin denně xx xxx dnů x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), nebo x xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx po xxxx dní v xxxxx (kontinuální xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx denně xx xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx x xxx xxxxxxx expozičního xxxx. X obou případech xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Hlavní xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx v xxx, xx v xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx expozice s xxxxx xxxxxx obdobím xxxxx xxxxxxx.

Volba xxxxxxxxxxx nebo kontinuální xxxxxxxx závisí na xxxxxx studia x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx technické xxxxxx. Například, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxx zevního xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx během xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x spolehlivé) xxxxxxxx aerosolu nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x technik xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx dynamický xxxxx xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx xx hodinu, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx komory xx xxxx xxx identickou xxxxxxxxxx, tak aby xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx obvykle xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x tím se xxxxx xxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx by xxxx xxxxxxxxxxxxx shlukování xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx x zájmu xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x komoře objem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.

Měření nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

(a) Xxxxxx xxxxxxx: rychlost xxxxxxx vzduchu xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

(x) Koncentrace: během xxxxx expozice by xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísat xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx udržována v xxxxxxx 22 ± 2 °X x xxxxxxx x komorách 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx voda xxxxxxxxx x rozptýlení xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx komory. Oba xxxxxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxxx průběžně.

(x) Měření xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx pevných xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx měly xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x dýchací xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx být xxxxxxxxxxxxxxx xxx distribuci xxxxxx, kterým xx xxxxx exponováno, a xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, i xxxx xxxxxx část xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Analýza xxxxxxxxx částic xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.6 Trvání xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx zvířete použitého xxx test. Xxxx xx měl xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx x myší x xxxxxx x 24 měsících x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx. x xxxxxx spontánním xxxxxxxx xxxxxx doba xxxxxxxx xx měla xxx 24 měsíců xxx xxxx x křečky x 30 xxxxxx xxx potkany. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x nejnižší xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx klesne na 25 %. Při xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx rozdíl xxxxxxxx, xxxxx pohlaví xx xxxxxxxx zvlášť. Tam, xxx xxxxx předčasně xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx toxických xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx k ukončení xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx skupiny nevykazují xxxxxxx projevy, xxxxx xx činily xxxxxxxx. Xxx xxxx možno xxxxx negativní xxxxxxxx xxxxx, xxxxx být xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, kanibalismem xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 10 % x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx x myší x xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x potkanů.

1.3 Popis xxxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxxxx

Denní xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxx zvířat xx xxxxxx x důsledku xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx x mortalita xx xxxx xxx zaznamenány x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx objevení, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx hmatného xxxxxx se xxxxxxxxxxx.

Xx třeba provádět xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxx vodě) xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx a xxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx nebo xxxxx tělesné váhy xxxxxxx nutnost xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxx se zaznamenávají xxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxx týdně xxxxx prvních 13 xxxxx období xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxx období.

1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx

Pokud pozorování xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxxxx studia, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých krvinek.

Xx 12 xxxxxx, xx 18 xxxxxx x před utracením xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx nátěr xx xxxxx zvířat. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx vzorcích xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx tato xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxx před xxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx patologických změn xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx vyšetří x x xxxxxxx x xxxxxx nejblíže xxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx.

1.3.2.2 Xxxxx

Kompletní xxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx, včetně xxxx, xxxxx zemřela xxxxx pokusu xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx nemocná. Xxxxxxx xxxxxxxxx tumory nebo xxxx, xxxx léze, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx.

Následující xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx ve vhodných xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx (xxxxxx řezů xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x příštítná xxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxxxx x plíce, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx, akcesorní xxxxxxxx xxxxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, slepé xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzlina, xxxxxx xxxxxx žláza, xxxxxxxxx xxxxxx, periferní xxxx, xxxxxxx s xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, mícha xx xxxxx úrovních (xxxxx, střední xxxxxx x xxxxxxx) x xxx.

Xxxxxxxx xxxx x močového xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx uchování těchto xxxxx. Xxxxxxxx plic x inhalačních studiích xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X inhalačních xxxxxxxx xx xxx být xxxxxxx xxxx respirační xxxxx xxxxxx nosní xxxxxx, xxxxxx a xxxxxx.

1.3.2.3 Histopatologické xxxxxxxxx

(x) Xxxxx histopatologie xx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, která xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx kontrolní x s xxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx xxxxxx viditelné xxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx.

(x) Je-li xxxxxxxx rozdíl x xxxxxxxxx neoplastických xxxx xxxx skupinou s xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx skupinou, histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx tkáni i x dalších skupinách.

(x) Je-li přežití xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx než x xxxxxxx, měla xx xxx kompletně xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx dávkou.

(x) Xx-xx xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mohly ovlivnit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx dávkovou xxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xx xxxxxxxxxx xx xxxxx tabulek, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx počet zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, doba xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx x tumory xxx xxxxxxxx. Výsledky xx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx použity xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.

3. XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxx

Xxxxxx o xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxx,

- podmínky xxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vycházejícího x xxxxxxxxx a způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx xxxxxxx. Dále xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, a xxx, kde xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:

(x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

(x) teplotu a xxxxxxx xxxxxxx,

(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx do inhalační xxxxxxxxx děleno objemem xxxxxxx),

(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,

(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně,

(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx xx relevantní),

- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx tumorů xxxxx xxxxxxx, xxxxx a xxxx xxxxxx,

- xxxx úmrtí během xxxxxx xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx až xx konce,

- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, xxx byl pozorován xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,

- xxxx x xxxxxxxx potravy x xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx,

- xxxxxx patologicko-anatomické,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx metod,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.33. XXXXXXXXXXX XXXX XXXXXXXXX TOXICITY/KARCINOGENITY

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxx

Cílem xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx u xxxxxxxxx druhu savců xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxx xx xxxx karcinogenity xxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x kontrolní satelitní xxxxxxxx. Dávka použitá xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx může xxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jak xx obecnou toxicitu, xxx xx karcinogenní xxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx skupinu, xx větší xxxx xxxxxx xxxxxx. Během x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxx denně xxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity x xxxxxx tumorů.

1.2 Xxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx x pokusných xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx pět xxx xxxx započetím xxxxx. Před xxxxxx xx mladá xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx skupin.

1.2.1 Experimentální xxxxxxx

Preferovaným druhem xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx studií xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx x nehlodavce). Xxxxxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx kmenů xxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xx nejdříve xx xxxxxxxxx mláďat. Xx začátku xxxxxx xx xxxxx rozdíl xx xxxx zvířat xxxxx více xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx orální xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx v xxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Pro xxxxxxxx xx xxxxxxx nejnémě 100 xxxxxx (50 xxxxx a 50 xxxxx) xx xxxxxx xxxxxx dávky a xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina. Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Je-li xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx takto xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx (xxxxxxx) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxx xxxx tumory, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx 20 zvířat xxx xxxxx pohlaví, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx pohlaví.

1.2.3 Dávkové xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx

Pro xxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxx by xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx přírůstků (méně xxx 10 %), xxx podstatnějších xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx. Nejnižší xxxxxxx úroveň xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx růstem, vývojem x délkou xxxxxx xxxxxxx nebo vyvolat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx než 10 % xxxxxx xxxxx. Střední xxxxx/xxxxx xx třeba xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx vysokou x xxxxxx xxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx se xxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.

Xxx xxxxx testování chronické xxxxxxxx xxxx x xxxxx zahrnuty xxxxxxxxx xxxxxxxxxx skupiny a xxxxxxxx kontrolní satelitní xxxxxxx. Vysoká xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx.

Expozice xx xxxxxxx obvykle xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x pitné vodě xxxx přimíšena do xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx.

1.2.4 Kontroly

Xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina je xxxxxxxxx x každém xxxxxx x exponovanou xxxxxxxx, vyjma expozice xxxxxxxxx látce.

Ve xxxxxxxxxx případech, xxxx xxxx inhalační studie x aerosoly xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx aplikaci xxxxxxxxxx, xxxxx biologická aktivita xxxx charakterizována, zařadí xx další xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.5 Způsob xxxxxxxx

Xxx xxxxxx cesty xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx způsobu xxxxxx xxxxxx xx fyzikálních x xxxxxxxxxx charakteristikách xxxxxxxxx látky a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x člověka.

1.2.5.1 Orální xxxxxx

Xxx, xxx xx testovaná xxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx jedna z xxxx, xxxxx xxxx xxx exponován xxxxxx, xxxx se xxxxxxxx xxxxxx aplikaci, pokud xxxxxx proti xxxx xxxxxx důvody. Xxxxxxx xxxxx dostat xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxx xx se xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx dávkování xxx xxx x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x období xxx aplikace, a xxxxx xxxxxxxx výsledky x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.

1.2.5.2 Dermální xxxxxx

Aplikace přímo xx kůži může xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx hlavní xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x jako xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.5.3 Inhalační xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx technicky komplikovanější xxx jiné xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx zde xxxxxxx xxxxxxxxxx informace x xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, takže xxxxx xx obvykle xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx šest hodin xxxxx po xxx xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx expozice), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin xxxxx xx sedm dní x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), s xxxxxxxxx xxxxxx hodinou pro xxxxxx xxxxxx denně xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x ještě xxxxxx xxxxxxx během víkendu.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx cílech studie x xx lidské xxxxxxxx, xxxxx má xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx třeba xxxx x úvahu určité xxxxxxxxx obtíže. Xxxxxxxxx xxxxxx kontinuální xxxxxxxx xxx simulaci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) generace aerosolu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Expoziční xxxxxx

Xxxxxxx xx exponují x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx atmosféry. Kontrolní x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx mít xxxxxxxxxx konstrukci, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxx aspektech xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx komory xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxx prostředí. Komory xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx x komoře xxxxx xxxxxx neměl xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.

Měření xxxx xxxxxxxxxxxx zahrnuje:

(x) xxxxxx vzduchu: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx kontrolována xxxxxxxxxxx,

(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx než ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,

(c) xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °X x vlhkost x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

(d) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: měla xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx x xxxxxxxxx komor x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx měly xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx z xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx by xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx exponováno, x měl by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx aerosolu, x xxxx xxxxxx část xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx generujícího xxxxxxx, xxx zajistila xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.6 Xxxxxx xxxxxx

Trvání xxxxx karcinogenity xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx test. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x 24 měsících x xxxxxxx. Xxxxxxx xxx některé kmeny xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx resp. x xxxxxx spontánním xxxxxxxx tumorů, xxxx xxxxxxxx by měla xxx 24 měsíců xxx xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx xxx potkany. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx, xxxx počet xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx kterém xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx posuzuje xxxxxx. Xxx, xxx uhyne xxxxxxxxx xxx skupina x vysokou xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, nemusí xx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx projevy, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx ztráty xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 10 % x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx x xxxx a xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxxxx skupiny 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx a 10 xxxxxxxxxxx kontrolních xxxxxx každého xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity xx xxxx být x xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. U těchto xxxxxx xx mělo xxx xxxxxxxxx utracení xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx látce, od xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx stárnutí.

1.3 Xxxxx postupu

1.3.1 Xxxxxxxxxx

Xxxxx pozorování xxxxxx x xxxxxxx zahrnuje xxxxx kůže x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx, oběhového, autonomního x centrálního xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.

U xxxxxx exponované xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx) xx xxxxxxx v přiměřených xxxxxxxxxxx klinické vyšetření.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, xxx xx zabránilo ztrátám xxxxxx xx xxxxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx zvířata xx xxxx být xxxxxxxx x pitvána.

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x očních xxxxxx x xxxxxxxxx xx zaznamenávají x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, lokalizace, xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx viditelného xx hmatného xxxxxx xx zaznamenává.

Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx xx testovaná xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx přibližně xx tříměsíčních intervalech, xxxxxx xx zdravotní xxxx xxxx změny xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxx xxxxx během xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx

1.3.2.1 Hematologie

Hematologická xxxxxxxxx (xxxx. obsah xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx destiček nebo xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) xx měla xxx xxxxxxxxx xx tři xxxxxx, šest xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx šestiměsíčních intervalech, x na xxxxx xx xxxxxxxx krve xx 10 xxxxxxx xx pohlaví z xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx xx xxxxx, xxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx od xxxxx potkanů.

Xxxxx xxxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx svědčí o xxxxxxxxx zdravotním xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx má xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx provede ve xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x kontrol. Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx naznačí xxxxxxx, diferenciál xx xxxxxxx x u xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx nižší, xxx xx xxxxxx dávka.

1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví xx xxxxxxx xxx xxxxxxx pokud možno xx xxxxxxxx zvířat x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Následující xxxxxxxxx xxxx provedena buď xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx vzorku pro xxxxxxx xxxxx dávek x pohlaví:

- xxxxxx xxxx, objem x xxxxxxx u xxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),

- xxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).

1.3.2.3 Biochemické xxxxxxxxx

V xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx. Od nehlodavců xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. X těchto xxxxxx xx připravena xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkoušky:

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- koncentrace xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxx bázické xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx¹⁾, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx²⁾, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, ornithin xxxxxxxxxxxxx,

- metabolismus xxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx na xxxxx,

- xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.

1) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx aspartát xxxxxxxxxxxxxxxx

1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx pitva xx xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx utracena x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx odeberou xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx léze, xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Mělo by xxx provedeno xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx a tkáně xx xxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. To se xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx: xxxxx³⁾ (prodloužené xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx kory, kory xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x plic, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx³⁾, xxxxxxx, xxxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx³⁾, xxxxx, xxxxxxx, dvanácterníku, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx uzlin, xxxxxxxx, xxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, samičí xxxxxx xxxxx, kůže, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (krční, xxxxxx x xxxxxxx), xxxxxx x kostní xxxxx x stehenní xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx odpovídající xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako jsou xxxxxxxxx xxxxxx, má xxx xxxxxxxx celý xxxxxxxxxx trakt xxxxxx xxxx, xxxxxx a xxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx vyšetření, xxxxxxxxx získané z xxxxxx procedur xx xxxx xxx k xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

3) Tyto xxxxxx x 10 xxxxxx xx pohlaví x xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx.

1.3.2.5 Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxx orgánech všech xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x satelitní xxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xx x satelitní skupině xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx změny xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx cílové xxxxxx všech xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx karcinogenitě xxx jejím xxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx karcinogenity:

(x) xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxx testu x u všech xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx;

(x) xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx, které xxxx podezřelé xxxx xxxxxx, se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx;

(x) xx-xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx lézí xxxx xxxxxxxx s xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx i x xxxxxxx xxxxxxxxx;

(x) je-li xxxxxxx xx skupině x xxxxxxx xxxxxx podstatně xxxxx xxx x xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxxx nižší dávkou;

(x) xx-xx xx xxxxxxx x vysokou xxxxxx xxxxxx o xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx účinků, které xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, xx xxxxx xxxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxx nižší xxxxxxxx xxxxxx.

2. ÚDAJE

Údaje xx sumarizují ve xxxxx tabulek, ukazujících xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx během xxxxx, xxxx jejich xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx x tumory xxx utracení. Výsledky xx hodnotí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Mohou xxx xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx statistické xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxx

Zpráva o xxxxx bude xxxxx xxxxx obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, zdroje vzduchu, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx a způsobu xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxx. Xxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, kde xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (např. směrodatná xxxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxx:

(x) rychlost xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx zařízení,

(b) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,

(x) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vstupující xx inhalační aparatury xxxxxx xxxxxxx vzduchu),

(x) xxxxxx vehikula, xx-xx xxxxxxx,

(x) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx zóně,

(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx kde relevantní),

- xxxxxxx úrovně (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x koncentrace,

- xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx a xxxx xxxxxx,

- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx do xxxxx včetně xxxxxxxxxxx xxxxxx,

- výskyt xxxxxxxxx účinků xxxxx xxxxxxx x xxxxx ,

- popis xxxxxxxxx x jiných xxxxxx,

- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,

- data x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- použité xxxxxxxxxxxxx xxxxx a výsledky,

- xxxxx klinické xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx),

- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků x xxxxxxx použitých xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.34. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxxxx xxxxxxxx samic a xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx dostávají xxxxxxxxxx xxxxx v xxxx xxxxx x xxxxxxx x průběhu xxxxxxx xxxxxxx spermatogenního xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx u xxxx x 70 xxx x potkanů), aby xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinek xxxxxxxxx xxxxx xx spermatogenezu.

Xxxxxx xxxxxxxxxx generace (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx alespoň xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx nepříznivý xxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx, x xxxx gravidity x xxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxx zahájením xxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 dnů xxxx zahájením pokusu x těch xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx testovanou látku xxxxxxx x xxxxxxx xxxx v xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx také xxxxxxxxxx. Všechna xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x průběhu xxxxxx testu. Xxxxx xx xxxxxxx k xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx účinky. Xxxxx se xxxxxxxx 7 dní v xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxx zvířata

1.2.2.1 Xxxxx druhu

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Používají xx xxxxxx xxxxxxx, xx té xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx x nízkou xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxx x/xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx ověřena xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx. Xxxxxx x obou xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x kontrolní, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxxxx exponovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx stejným termínem xxxxxx. Cílem je xxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x tím xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx chování x X xxxxxxxx, kojení, xxxx a vývoj xxxxxxxxx xxxxxxxx X₁ xx xxxxxx xx xxxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Před porodem xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx zvláštních xxxxxxxxx xxxx mateřských xxxxx x je xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx vytvoření xxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx látky vehikulum, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vehikulum x xxxxxxxxx použitém xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx snižuje xxxxxx x využití potravy, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx kontrolní xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx v xxxxxxxx případě - xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo povahou xxxxxxxxxxxx účinku - xxxxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) by měla(y) xxxxxxx minimální xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx x xxxxxx xxx x potomstva.

Xxx podání sondou xxxx v xxxxxxxxx xx dávka stanoví xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x xxxxxxxxxxxx se každý xxxxx podle xxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx samic dávky xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx základě xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. nebo 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.2.5 Xxxxxxx xxxx

X případě xxxxx x nízkou xxxxxxxxx, xxxxx se xxx xxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxxxxxx žádným xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxx xx provádět xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx vysoká xxxxx, xxxxxxxxxxxx x matek xxxxx xxxxxxxx toxicity, xxxx nepříznivé xxxxxx xx plodnost, xxxx xxxxx xxxxxxxx studie xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx.

1.3 Xxxxx postupu

1.3.1 Xxxx xxxxxx

Denní xxxxxxxx samcům xxxxxxxxxx xxxxxxxx (P) xxxxx xx věku pěti xx xxxxxx týdnů, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx po odstavení. X xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx deset xxxxx xxxx xxxxxxx připouštění (8 xxxxx pro xxxx). Samci se xxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx připouštění, xxxx xx pokračuje x xxxxxxxx x mohou xxx použiti xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx xxx xxxxxxxx x vyšetřeni xxxxx před koncem xxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxx po xxxxxxxxx aklimatizaci x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx před obdobím xxxxxxxxxxx. Denní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxx týdny xxxxxx xxxxxxxxxxx, v xxxx gravidity xx xx xxxxxxxxx X₁ xxxxxxxx. Xx přípustná xxxxx xxxxxxxxxxx plánu xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx studované xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.3.2 Xxxxxx xxx připouštění

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx samice x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx xxxxx samicím).

X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx kleci xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx přítomnost spermatu xxxx vaginální zátky. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx jako xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx, u xxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxx, xx třeba vyšetřit x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx páru. Xx xx možné xxx poskytnutím xxxxx xxxxxxxxxxxx x oplodnění x osvědčenými jedinci xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx plodnosti je xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x své potomstvo xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx standardizuje, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx porodu xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 samic xx xxx; xxxxx xx xxxx proveditelné, xx možno xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 samců x 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx xxx 8 nelze xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.4 Xxxxxxxxxx

Každé xxxxx xx být pozorováno xxxxxxx jednou xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, příznaky xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx příznaky xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx jak xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Během xxxxxxxxx xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx (a xxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx x pitné xxxx) xx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X zvířata xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x xxx xxxxx. Xxxxxxx pozorování xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxx.

Doba gestace xx xxxxxx xx xxx 0 těhotenství. Xxxxx xxx se xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx se xxxxx x xxxxxxx mláďat, xxxxx mrtvých x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx hrubých anomálií.

Xxxxx mláďata x xxxxxxx utracená ve xxxxxxx dnu xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x celé xxxx xx xxxxx xxxx po xxxxxx, xx 4. x 7. xxx a xxxxx každý týden xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx abnormality x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx matek x xxxxxxxxx.

1.3.5 Xxxxxxxxx

1.3.5.1 Pitva

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx všechna xxxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx anebo xxxxxxxxxxx změny xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx defekty.

1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx všech zvířat xxxxxxxx P xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx tyto xxxxxx xxxxxx doposud vyšetřeny x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxx zvířat kontrolní xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxx x xxxxxx, která xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxxxx u těchto xxxxxx zvířat, se xxxxxxx x x X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupin. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx již xxxx xxxxxxx, reprodukční xxxxxx xxxxxx podezřelých z xxxxxxxxxxx se mají xxx podrobit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx skupinu počet xxxxxx xx začátku xxxxxx, počet xxxxxxxx xxxxx, xxxxx těhotných xxxxx, xxx změn x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx tyto xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx zpracovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx obecně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx

Zpráva o xxxxxxxxxxx by měla xxxxx xxxxx obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxx:

- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- údaje x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxx uhynutí x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx přežila xx xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx uvádějící xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxx x xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx,

- xxx, kdy byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx vývoj,

- xxxxxxx xxxxxxxx zvířat X xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx popis všech xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxx xxxxx, pokud xx xx možné,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.35. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx několika xxxxxxxx samic x xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxx (X) xxxxxxxx dostávají xxxxxxxxxx látku v xxxx růstu x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx spermatogenního xxxxx (xxxxxxxxx 56 dnů x myší x 70 xxx u xxxxxxx), xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx spermatogenezu.

Xxxxxx xxxxxxxxxx generace (P) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx dvou xxxxxxxxxx xxxxx, aby xxx zachycen jakýkoliv xxxxxxxxxx účinek xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxxx jsou poté xxxxxxxxxx. X době xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx, x době xxxxxxxxx a xxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx zvířatům xxxxxxxx xxxxxxxx F₁ x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, x době xxxxxx a xx xx xxxx xxxxxxxxx X₂ generace.

Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx metodu xxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx náhodně rozdělena xx dvou skupin - kontrolní x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Rodičovská xxxxxxx (P) jsou xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx v těch xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxxxxxxxx xx testovanou xxxxx podávat x xxxxxxx xxxx v xxxxx vodě. Xxxx xxxxxxx xxxxxx jsou xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx testu. Xxxxx xx používá x usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx být x xxxx známo, xx xxxxxx toxické xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 dní x xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxx X xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx pro jiné xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, kmene, xxxxxxx a xxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x obou xxxxxxx. Xxxxxx x obou xxxxxxxxx, exponované x xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx a xxxxxxx

Xxxxx exponovaná x kontrolní xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx cca 20 xxxxxxx xxxxx x přibližně xxxxxxx xxxxxxxx porodu. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx těhotenství x xxxxxxxxx, x tím xxxxxxxx spolehlivé hodnocení xxxxx xxxxx na xxxxxxxx, průběh xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx, xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X₁ xx xxxxxx xx dospělosti, x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X₂ xx xx xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx přemístí xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx klecí a xx jim xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.5 Dávkování

Xxxxxxx xx xxxxxxx tři xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx, pak xxxxxxx xxxxxxxxx skupiny xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx objemu. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x utilizaci xxxxxxx, je třeba xxxxxx použití xxxxx xxxxxxxxx skupiny, xxxxxxxxx xx do xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, vyvolávat xxxxxxxx x nikoli mortalitu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, které xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látce, x nejnižší xxxxx xx xxxxxx vyvolávat xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx x xxxxxx xxx u xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxxxx xx dávka xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x přizpůsobuje xx xxxxx týden xxxxx xxxxx hmotnosti. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx těhotenství.

1.2.6 Xxxxxxx xxxx

V xxxxxxx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxx dávka 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx toxicitu, nemá xxxxxxxxxx účinky xx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx studie xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx.

1.3 Xxxxx postupu

1.3.1 Plán xxxxxx

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx rodičovské xxxxxxxx X xxxxx ve xxxx pěti xx xxxxxx xxxxx, aspoň xx xxxxxxxxx aklimatizaci xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx pokračuje xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx x vyšetří xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx produkci xxxxxxx xxxx a xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx někdy xxxx xxxxxx xxxxxx.

Denní xxxxxxxx xxxxxxx rodičovské xxxxxxxx X xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x pokračuje aspoň xxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Denní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx celé tři xxxxx období připouštění, x době xxxxxxxxx xx do xxxxxxxxx X₁ xxxxxxxxx. Je xxxxxxxxx xxxxx dávkovacího xxxxx podle xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, např. x xxxxxxx metabolismu resp. x bioakumulaci.

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X₁ xxxxxx xx xxxxxxx x končí xxxxxx xxxxxxxxx.

1.3.2 Postup při xxxxxxxxxxx

Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (jedna xxxxxx x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (jeden xxxxx ke dvěma xxxxxxx).

X případě 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxx ve xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx dobu 3 xxxxx. Xxxxx xxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx je definován xxxx den xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx.

Xxxxxxxx x xxxxxx spermatogeneze, zvířata xxxxxxxx X₁ se xxxxxxxxxxx pro připouštění xx xxxx 11 xxxxx x xxxx x 13 xxxxx x xxxxxxx. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxx generace X₁ xx xxxxxxx xxxxxxx páry x xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx.

Dvojice, x xxxxxxx nedojde x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx s xxxxx zjistit xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx jedinci xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx estrálního xxxxx a spermatogenezy.

1.3.3 Xxxxxxxx xxxx

Zvířatům xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ponechána xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x pečovat x xxx potomstvo xx xxxxxxxx xxxxxxxxx bez xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. dnem xx xxxxxx se xxxxxxxx všech vrhů xxxxxx xxxxxxxxx nadbytečných xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx na xxx; xxxxx to xxxx proveditelné, je xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 xxxxx x 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxx generace X₂ xx xxxxxxx obdobně.

1.3.4 Xxxxxxxxxx

Xxxxx zvíře xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx za xxx. Xxxxxxxx změny xxxxxxx, xxxxxxxx ztíženého xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x všechny xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx jak xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx x x průběhu laktace xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxx, kdy xx xxxxxxxxx váženo. Xxxxxxxxxx X x F₁ xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx zvíře.

Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxx 0 xxxxxxxxxxx. Každý xxx se xx xxxxxxxx xx porodu xxxxxxx x stanoví xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx čtvrtém xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx defekty. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx x celé xxxx xx xxxxx xxxx xx porodu, ve 4. a 7. xxx x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx studie, xxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx v chování x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.

1.3.5 Xxxxxxxxx.

1.3.5.1 Xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx zvířata xxxxxxxx X x F₁ xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx je xxxx uchovávat xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx. Zvířata xxxxxxxx X₁ xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X₂ xx xxxxxx xx xxxxxxxxx.

Po xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx P x X₁ xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx změny, xx zvláštní xxxxxxxxxx x orgánům xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx umírající se xxxxxxx na xxxxxxx.

1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx hrdlo, xxxxxx, xxxxxxx, epididymis, xxxxxxx kanálky, koagulační xxxxxx, prostata, xxxxxxxx x další xxxxxx xxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxx X x X₁ xx uchovají xxx mikroskopické xxxxxxxxx. X případě, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx vyšetřeny x xxxxxx mnohadávkových xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxx X x F₁ xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx, x xxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xxxxxx abnormality u xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx i x xxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx makroskopicky xxxxxxxxx. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, reprodukční xxxxxx xxxxxx podezřelých x xxxxxxxxxxx se xxxx xxx xxxxxxxx mikroskopické xxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx sumarizují x xxxxxxxxx, xxx je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxxxxx xxxxx, xxx změn x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx zpracovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x experimentu

Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx následující xxxxx:

- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxx odezvě x závislosti na xxxxx x xxxxxxx xxxxxx ukazatelů xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx x průběhu studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxx hmotnost x xxxxxxx xxxx, průměrnou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx před xxxxxxxxx,

- xxxxxxx a xxxxx účinky na xxxxxxxxxx, potomstvo x xxxxxxxxxxx xxxx,

- xxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,

- xxxxxxx xxxxxxxx zvířat X x X₁ xxxxxxxx, vybraných pro xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx všech mikroskopických xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx údajů, xxxxx je xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.36. XXXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. X závislosti xx xxxxxxxx studie xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx stanovené xxxx, jedné xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx resp. xxxx xxxxxxxxxx jsou xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx tekutinách, xxxxxxx xxxxx x exkretech.

Xxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx x "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxx" formou xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx tak, xxx poskytlo co xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx na laboratorní xxxxxxxx xxxxxxx po xxxx pěti dnů xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx otázek xx může xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx provádějí na xxxxxx xx více xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druzích. Xxxx by xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx užití x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Jestliže xxxx xxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx než ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx studium xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 4 zvířat xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx dávku. Xxx xxxxxxxxx není xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx podmínek může xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxx xxxxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxx ostatních xxxxx xxxxxx (xxxxxx než xxxxxxxx) je možné xxxxxx menší počet xxxxxx.

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxx distribuce, pak xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny zvířat xx xxxxx brát x xxxxx xxx xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx bodu, xxx xxxxx časových xxxx, x xxxxx xxxx testování prováděno.

Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx skupiny xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx studie.

Xxxxxxxx-xx xxxxxx větší počet xxxxx x sledovaných xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx počítat x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx nesmí xxx xxxx xxx 2 xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xx, aby xxx xxxxx resp. xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx x deplece.

1.2.2.3 Xxxxx

X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx podání by xxxx být xxxxxxx xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx testované látky. Xxxx xx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xx xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx parametrech xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx dostatečné xxxxxx xxxxxxx dávek xxxxx. Xx určitých xxxxxxxx xxxx xxx nezbytné x xxxxxxxx vysoké xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxx aplikace

Xxxxxxxxxxxxxxx studie xx xxxx xxx prováděny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xx-xx xx xxxxxx i xx xxxxxxx vehikulem xxx, xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Testovaná xxxxx xx obvykle xxxxxxxx xxxxxx sondou xxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx, xxxx xxxxxxxx inhalačně xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx po intravenózní xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x distribuci xxxxx v organismu.

Xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx věnována xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx v potravě, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, zvláště xx-xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx toxicity x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx zaznamenávány xxxxx s xxxxx x xxxxxx počátku, xxxxxxxxx a xxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx způsobem přiměřeným xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx zvířata xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.

1.3.1 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx mohou být xxxxxxx xxxxx metody x xxxx bez xxxxxxxxxx xxxxxxx¹⁾, x xx xxxx.:

- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. v xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxx x karkasu,

- xxxxxxxxx biologické xxxxxxxx (xxxx. studie xxxxxx xxxxxxxx) xxxx testovanou x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx skupinou,

- porovnání xxxxxxxx xxxxx resp. jejích xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx x případně xxxxxxxxxx skupinou,

- xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx závislosti koncentrací xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x plazmě xx xxxx x porovnání x daty xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.

1) V této xxxxxx se referenční xxxxxxxx rozumí ta, xx xxxxx je xxxxxxxxx látka podávána xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx xxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxx

X xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx 2 xxxxxxxx, z xxxxx xxx analýzu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx použity xxxxx xx xxx:

- xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx získat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx;

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx stanovení koncentrací x xxxxxxxx testované xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x různých xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxxxx

Při xxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxx moč, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx vzduch, x xxxxxxxx xxxxxxxxx žluč. Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx xx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx po podání xxxxx, x xx xxx do xxxxxxxxx 95 % x xxxxxxxx množství xxxx xxxxxxx 7 xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx také xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.3.4 Xxxxxxxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx tam, kde xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx studií. Xxx získání xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vitro studií.

Xxxxx xxxxxxxxx o xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx získat x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx např. xxxxxxx účinků látky xx enzymy xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx poklesu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx - SH xxxxxxx x xxxx xxxxx látky xx xxxxxxxxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx studie xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xx uvedou xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vztahu k xxxx, dávce, xxxxx x orgánům (xxxxx xx xx xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx metodami. X xxxxxxx metabolických xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxx typu prováděné xxxxxx by xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx pokud možno xxxxxxxxxxx xxxxx:

- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, jestliže xxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx(x) podání x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,

- metody xxxxxxxxx testované xxxxx x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx včetně vydechovaného xxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxx x xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxx vstřebávání x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx,

- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx týkající xx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX - AKUTNÍ XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Při xxxxxxxxx a vyhodnocení xxxxxxxxx účinků látek xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx typ xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxx studiích toxicity. X určitých organických xxxxxxxxx fosforu byly xxxxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxx x mají xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx mohou xxx použity xxx xxxxxxxxxxx látek, které xxxxx vyvolat pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx však není xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, že látka xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxxxxx

Xx skupiny xxxxx xxxxxxxxxx x názvu xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx estery, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx amidothiofosforečných, nebo xxxx látky, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, pozorovanou u xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.

Pozdní neurotoxicita xx syndrom projevující xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx inhibicí x xxxxxxxxx specifické xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxx.

1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, že x xxxxxxxxxxxxx podmínkách xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, EINECS 201-103-5, xxxxxxxx xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx.: tri-o-kresylfosfát (XXXX).

1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx v xxxxxx xxxxx slepicím, xxxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxx cholinergními xxxxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx 21 dnů xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx chování, ataxie x paréza. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxxxx x slepic náhodně xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, obvykle 24 x 48 hodin xx xxxxxx látky. 21 xxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx utraceny x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.5 Popis xxxxxx testování

1.5.1 Příprava

Xxxxx xxxxxx dospělé xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx léčby x x normální xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejméně 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx volný xxxxx xxxxxx x xxxxxx pozorování chůze.

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx orálně sondou, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx srovnatelnou metodou. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxx, xxxx je např. xxxxxxxxx xxxx, pevné xx xxxxxxxxxx rozpustit, xxxxx xxxxx dávky xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx tobolkách by xx xxxxxxxx dostatečně xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx testem xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.6.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx kura xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx domesticus) xx věku 8 xx 12 měsíců. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.

1.6.1.2 Xxxxx x pohlaví

Xxxxx xxxxxxxxx skupiny xx použije xxxxxxxxx xxxxxxx s vehikulem, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx.

X xxxxx skupině xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx aspoň xxxx x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xx podání) a xxxx přežilo 21xxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx použít xxxxxxxxx skupina x xxxxxxx historie. Xx xxx xxxxx šest xxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx látka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, tři xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx a xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x provádějící laboratoři xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx prvků xxxxx (xxxx. plemeno, potrava, xxxxxxxx chovu).

1.6.1.3 Xxxxx xxxxx

Xx xxx xxxxxxxxx předběžná xxxxxx x xxxxxxxx příslušného xxxxx xxxxxx x xxxxxx x různých xxxxxxxx xxxxx, xxx xx dala xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx x hlavní xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxx nezbytná xxx stanovení xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxx ochranný xxxxxxxxx, o xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx testovaných xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxx xxxxxx B.1 bis). Historické xxxxx xxx slepice xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx při xxxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxx studii by xxxx xxx co xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx limitu xxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxxx xxxxx xx neměly xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxxxxx (xxxx) x xx 21 xxxxx xxx xxxxxxxxxx (šest). Xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinky, xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinky.

1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx hmotnosti, xx xxxxxxx postupů xxxxxxxxx xxx tuto studii, xxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx údajů x xxxxx s xxxxxxxxx strukturou xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Limitní test xx neprovádí, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx úrovně xxxxx.

1.6.1.5 Xxxx pozorování

Doba xxxxxxxxxx je 21 xxx.

1.6.2 Xxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx před úmrtím xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx dávce.

1.6.2.1 Xxxxxxxxx pozorování

Pozorování xx xxxxx xxxxxxxx xx podání xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx několikrát x xxxxxxx prvních xxxx dnů x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx po xxxx 21 xxx nebo xxxxx xxxxxxx utraceny xxxxx xxxxx. Veškeré xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx čtyřstupňové xxxxxxxx stupnice a xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx týdně xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx motorické xxxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je třeba xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

1.6.2.2 Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx zváží xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx látky a xxx xxxxx jednou xxxxx.

1.6.2.3 Xxxxxxxxx

Xxxx xxxxxx náhodně xxxxxxxxx x xxxxx testované x kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxx slepice x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx skupina xxxxxxx) xx usmrtí x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx. Xx vhodné xxxxxxxxxxxx xxxx n. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx XXX. Xxxxx xx xxxxxxxx xxx slepice x xxxxxxxxx x xxxxx testované xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx x další xxx xx 48 hodinách, xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx usmrcují xxxxx xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxx xx nástup xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), pak xx xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorky xxxxx dvakrát xx xxx zvířat, a xx xxxx 24 xx 72 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx.

X těchto xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (AChE). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx reaktivace XXxX, což může xxxx x xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxx XXxX.

1.6.2.4 Xxxxx

Pitva x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx špatný xxxxxxx xxxx) zahrnuje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x míchy.

1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) se histologicky xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (střední podélný xxx), prodloužená xxxxx, xxxxx - xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx krční xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x x. tibialis (x xxxx xxxxx x x. xxxxxxxxxxxxx) x x n. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx specifickými xxxxxxx xx myelin x xxxxx.

2. XXXX X XXXXXX XXXXX

Negativní xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, histopatologie x xxxxx xxxxxxx) xxxxx xxxxxxxxxx další xxxxxxxxx xx pozdní neurotoxicitu. Xxxxxxxxxx nebo neurčité xxxxxxxx mohou xxxxxxxxx xxxxx sledování.

Uvádějí xx údaje xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x počet xxxxxx xxxxxxxx poškození, xxxxx chování xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx poškození xxxx xxxxxx.

Výsledky xxxxxx xx xxxxxxxxx x hlediska xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx změnami xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a dalšími xxxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx již x xxxx plánované xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o pokusu xxxxxxxx tyto xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxx:

Testovaná xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxx x xxxxx xxxxxx;

- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.;

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxxx.

Podmínky xxxxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky;

- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula;

- xxxxxxxx xxxxx x způsobu aplikace xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a kvalitě xxxx;

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dávek;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx podrobných xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxx a fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;

- podrobné xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx;

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx skupin xxxxxx xxxxxxxxx;

- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx klinických příznaků (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx);

- xxxxxxxx xxxxx biochemických vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx;

- pitevní xxxxxx;

- podrobný popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx xx možné.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx x Interpretace

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x metodou XXXX TG 418.

X.38. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX 28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Úvod

Při xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látek xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx schopnost xxxxxx skupiny látek xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, který xxxxxx xxx zjištěn x xxxxxx studiích xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxxxxx zpožděné projevy xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx testovány xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nález x xx vitro xxxxxx xxxx není xxxxx xxxxxxxxx za xxxxx, xx látka xxxx neurotoxická.

Xxxxx 28xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx informace x xxxxxx zdravotním xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx opakovaných xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x závislosti xxxxxxxx xx dávce a xxxx xxxxxxxxxx odhad xxxxxxx xxxxxxxxx úrovní, xx kterém xxxxxx xxxxxxxxxx žádné nepříznivé xxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 Definice

Do xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx této xxxxxx jako "organické xxxxxxxxxx xxxxxxx" patří xxxxxxxxxx neutrální xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kyseliny fosforečné, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, nebo xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx této xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx projevující xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx x periferním xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx příznaků, a xxxx inhibicí a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - NTE (neuropathy xxxxxx esterase) x xxxxxxx tkáni.

1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxx orálně xxxxxxxx xx xxxx 28 dnů. Zvířata xxxx sledována nejméně xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, zvláště xxxxxxxx NTE, xx xxxxxxx u xxxxxx xxxxxxx vybraných x xxxxx skupiny 24 x 48 hodin xx xxxxxxxxx podání xxxxx. Xxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x je xxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxx nervových xxxxx.

1.4 Xxxxx metody testování

1.4.1 Xxxxxxxx

Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx virových onemocnění x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x s xxxxxxxx xxxxx xx náhodně xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxxxxx studie xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x krmení, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx.

Používají xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pohyb xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxxx 7 xxx x xxxxx, xxx xxxxxx, želatinovými xxxxxxxxx xxxx jinou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx,

jako xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx látek x xxxxxxxxxxxx tobolkách xx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx vstřebat. U xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx nebo xxxxxx před xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxx zvířata

Xxxxxxxxxx xx xxxxx nosnice xxxx xxxxxxxx (Gallus xxxxxx xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 xx 12 měsíců. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx za xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.

1.4.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dávek x jednu kontrolní xxxxxxx x vehikulem. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx.

X každé xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxx šest x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx vyšetření (xx xxxxx x xxxxxx xx dvou xxxxxxxx xxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx ukončení expozice.

1.4.2.3 Xxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xx zvolí x xxxxxxxxxxxx ke xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x x dalším xxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, nejlépe příznaky xxxxxx neurotoxicity, nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx utrpení. Dále xx zvolí řada xxxxxxxxxxx xxxxx způsobem, xxxxx xxxxxx sledovat xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxx dávka xx neměla xxxxxxx xxxxx příznaky toxicity.

1.4.2.4 Xxxxxxx test

Jestliže xxxx x dávkou xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti x xxx, za xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxx údajů u xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx očekávat, pak xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx vyšší dávky. Xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx u xxxx xxxxxxxxx potřebu xxxxxxx ještě xxxxx xxxxxx dávky.

1.4.2.5 Doba xxxxxxxxxx

Všechna zvířata xx xxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx a 14 xxx xx xx, xxxx do xxxxxxxx x do xxxxx podle xxxxx.

1.4.3 Xxxxx xxxxxxx

Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxx xxx v xxxxx xx 28 xxx.

1.4.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxx má xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx 28 xxx a xxxxxxx 14 xxx po xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxxxxxxxx včetně xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x trvání. Pozorování xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xx xx xx xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stupnice, xxxxxxxxxxx se xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx xx žebříku, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.

1.4.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx těsně xxxx xxxxxx podáním testované xxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.4.3.3 Xxxxxxxxx

Šest slepic xxxxxxx vybraných z xxxxx testované x xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx xx usmrtí x xxxxxxx xxxxx xx aplikaci poslední xxxxx. Xxx analýzu xxxxxxxx NTE xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx jeho tkáň xx inhibici XXX. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 hodinách x xxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) naznačují, že xx výhodnější xxxx xxxx usmrcení po xxxxxxxx xxxxxxxx, pak xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx.

X těchto xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx provede také xxxxxxx acetylcholinesterázy (AChE). Xx xxxx xxxx xxxx nastat xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, což xxxx vést k xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.

1.4.3.4 Xxxxx

Xxxxx všech xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx.

1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Nervová xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx studie) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx fixují xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxx technik. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, mícha (xxxx xxxxx se provádí x xxxxx krční xxxxx, střední hrudní x xxxxxxxxxxxxx), z xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx část x x. xxxxxxxx (x xxxx větve x x. xxxxxxxxxxxxx) x x n. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx myelin x xxxxx.

Nejprve se xxxxxxx fixované xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx účinku, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx vyšetření x na xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx střední x xxxxxx.

2. SBĚR X XXXXXX ÚDAJŮ

Xxxxx xxxx výsledky xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx a xxxxx chování) negativní, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Neprůkazné xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx sestaví xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, typy x xxxxxx xxxxxx poškození xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.

Výsledky xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx výskytu, xxxxxxxxxx x korelaci xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx pozorovanými xxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx zvolí xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxx obsahuje xxxx informace, pokud xxxxx být xxxxxxx:

Xxxxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx plemeno,

- xxxxx x xxxxx xxxxxx,

- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.,

- hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx.

Podmínky xxxxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx x potravě x xxxxxxx xxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dávek,

- xxxxxxxxxxx podávaných xxxxx, xxxxxx podrobných údajů x vehikulu, xxxxxx x fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx doby xxx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xxxx xxx 24 x 48 xxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxx bez xxxxxx (XXXXX),

- xxxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx klinických xxxxxxxx (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx),

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření x jejich výsledky,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických nálezů,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx to xxxxx.

Xxxxxxx výsledků

Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX TG 419.

X.39. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo

1. METODA

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX TG 486, Xxxxxxxxxxx XXX Synthesis (XXX) Test Xxxx Xxxxxxxxx Liver Cells Xx Vivo (1997).

1.1 XXXX

Účelem xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (xxxxxxxxxxx DNA xxxxxxxxx, XXX) v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx xxxxx xxxxx, vyvolávající xxxxxxxx XXX x jaterních xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (1) (2) (3) (4).

Xxxxx xxxx xx vivo xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinků chemických xxxxx v játrech. Xxxxxxxx xxxxx indikuje xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx obvykle xxxxxxx místem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sloučenin; jsou xxxxx vhodným objektem xxx xxxxxxx poškození XXX xx xxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, že se xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxxx test xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (XXX) xx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx značených xxxxxxxxxx x xxxxxxx, které xxxxxxxxxxxx plánovanou (S-fáze) xxxxxxxx DNA. Nejběžnější xx metoda, xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (³H-TdR). Xxx xxxxx XXX xx xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx tkáně xxx xxxxx se xxxx xxxx mohou použít, xxxxxx však předmětem xxxx xxxxxx.

Detekce xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx XXX, xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x nahrazeny. Xxxxx xx xxxxxx UDS xxxxxxx vhodná k xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 bází), xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxxx" (1 - 3 xxxx) xx xxxx xxxxxxx. Dále může xxxxxxxx x xxxxxxx x důsledku xxxxxxxxxx, xxxxxxxx opravení xxxx xxxxxx replikace xxxx XXX. Xxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxx xxx x xxxxxxxxx procesu xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxx x XXX xxxxxxxx, ale xxxxxxxxx DNA není xxxxxxxx xxxxxxxx reparačním xxxxxxxx. Xx, xx XXX test xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxxxxx xxxx potenciální xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxx x reparaci: net xxxxxxx xxxxx (NNG) xxxxx než určitá, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.

Net xxxxxxx xxxxxx (NNG): xxxxxxxxxxxxx xxxx UDS xxxxxxxx buněk xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xxxxxxxxx xxxx rozdíl xxxx xxxxxx zrn x xxxxx (NG) x xxxxxxxxx počtem xxx x xxxxxxxxxx (XX): XXX = XX - XX. Xxxxx XXX se xxxxxxxxxxxx pro jednotlivé xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx buňky x xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxxxxx syntéza DNA (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX): opravná xxxxxxx XXX po excizi x xxxxxxxxxx úseku XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemickou xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxx UDS x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx indikuje xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxx a xxxxxxxxxx segmentu XXX xxxxxxxxxxxx oblast xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemickou látkou xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx vychází obvykle x xxxxxxxxxxx ³H-TdR xx DNA xxxxxxxxx xxxxx, charakteristických xxxxxx xxxxxx xxxxx x X-xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx ³X-XxX xx xxxxxxx stanoví xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx tak xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x X-xxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxxxx metoda.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Výběr xxxxxxxxxxx druhu

Xxxxx xx používají xxxxxxx, xxx ovšem xxxxxx xxxxxxxxx vhodný xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx rozdíly xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % průměrné hmotnosti.

1.4.2 Xxxxxxxx chovu

Xxxxxxxxx xxxxxxxx chovu jsou xxxxxxx xx Všeobecném xxxxx x xxxxx X.

Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Zdraví xxxxx dospělí jedinci xx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolní a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx označí x po dobu xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx aklimatizují x laboratorních xxxxxxxxxx. Xxxxx je třeba xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx toho, jak x kde jsou xxxxx xxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx

Xx-xx testovaná xxxxx v pevném xxxxx a xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xx xxxx podáváním xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) prokazují, že xxxxxxxxxx ji xxxxxxxxx.

1.4.3 Podmínky xxxxx

1.4.3.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x používaných xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xx xxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x kompatibilitě x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx xx, xxx kde xx xx xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / vehikulum.

1.4.3.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Pozitivní kontroly xx xxxx xxxxxxxxx XXX při dávkách, xxx lze xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xx středně xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx hodnotiteli xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx patří xxxxxxxxx:

Xxxx odběru xxxxxx	Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxx x xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx)	X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx	62-75-9	200-249-8
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 xxxxx)	X-2-xxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX)	53-96-3	200-188-6

Xx možno xxxxxx x xxxx vhodné xxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxxx cestou, xxx xx xxxxxxxx testovaná xxxxx.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx

X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx minimálně xxx analyzovatelní jedinci. Xxxxx xxxxxxxx historická xxxxxxxx, pak xxx xxxxxxxx skupiny xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx údaje ze xxxxxx s týmž xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx expoziční xxxx, xxxxxxxxxxx, xx mezi xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx testování xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx se test xx zvířatech odpovídajícího xxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.5.3 Xxxxxxxxx

Obvykle xx používají xxx xxxxx dávky. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx známky toxicity, xx xxx vyšší xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx by se xxxxxxxx xxxxxxx účinek. Xxxxx dávka xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.

Látky, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx vykazují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx x vyhodnocují xx případ od xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxxxx údaje xxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxx laboratoři x xx použití xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, pohlaví x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxx použijí x xxxxxx studii.

Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx také xxxxxxxxx xxxxx vyvolávající určité xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (např. pyknotická xxxxx).

1.5.4 Limitní xxxx

Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx minimálně 2&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxx x strukturně xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nemusí se xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.

1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx žaludeční xxxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx cesty. Intraperitoneální xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx by xx xxx xxxxx xxxxx vystavit xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxx, xxxxxx krevním xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx dá xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxx dávky xxxx xxx zdůvodněné. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx ve všech xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Jaterní xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx 12 - 16 xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 xxxxxx po xxxxxx xxxxx), xxxxxx xx xx 12 - 16 hodinách xxxxxxxxx xxxxxx zjevná. Xx ovšem xxxxx xxxxxx i xxxx xxxx odběru xxxxxx, xx-xx xx odůvodněné xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Krátkodobé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx buněk xx obvykle zakládají xxxxxxx xxxxx in xxxx xxxxxxxxxxx. Je xxxxx zajistit, xxx xx čerstvě xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx ke vhodnému xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx zvířat x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx minimálně 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).

1.5.7 Xxxxxxxxx XXX

Čerstvě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx po xxxxxxx xxxx (např. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx ³X-XxX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxx odstraní( xxxxx xx xxxxx xxxxx inkubovat x xxxxx obsahujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx thymidinu, aby xx xxxxxxx neinkorporovaná xxxxxxxxxxxxx (xxx. "xxxx xxxxx"). Xxxxx se xxx promyjí, xxxxxx x vysuší. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx "cold xxxxx" xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxx (např. xx xxxx jednoho nebo xxxx týdnů v xxxxxxxxxx), xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxxx.

1.5.8 Xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxx morfologií, xxx xxxx možno XXX xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zjevné známky xxxxxxxxxxxx (xxxx. pyknóza, xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).

Preparáty se xxxx xxxxxxxxx zrn xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxx; xxxxx xx xxxxx xxxx xxx 100 na xxxxxxx jedince, xxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x S-fázi, xxx xxxxx xxxxx v X-xxxx xx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx metodou xx xxxxxxx stupeň xxxxxxxxxxx ³X-XxX xx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxxxx xxxxx depozice xxxxxxxxxx xxxxx.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx. Mimoto xx xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxx každou buňku, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx x xxx se xxxxxxx xxxxx xxxxx "xxxxxxx xxxxx" (NNG) xxxxxxxxx xxxxx CG xx xxxxx XX. Počítají-li xx "xxxxx v xxxxxx", xxxx xxx xxxxxxxx, kterými se xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx mohou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; pokud xx statistické xxxxx xxxxxxx, xx třeba xx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxx studie.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxxxxx pro pozitivní/negativní xxxxxx xxxxxxxx:

xxxxxxxxx		(I) xxxxxxx XXX nad xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, zdůvodněným xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx dané xxxxxxxxxx
	nebo	(XX) xxxxxxx XXX významně xxxxx xxx x xxxxxxxx kontroly
xxxxxxxxx		(I) hodnoty XXX na xxxxxx/xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx
	xxxx	(XX) hodnoty XXX xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx, xx je xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx variabilita mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx - xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx statistické xxxxxx; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxx pozitivní xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo negativní xxxxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však nelze xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vyvodit x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo problematické, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx testu XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx buňkami xx xxxx ukazuje, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx DNA, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX in xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx DNA, xxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxx x xxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx dosáhne xxxxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx tkáň (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Ve xxxxxx x průběhu xxxxxx je třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.

Pokusná zvířata:

- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- počet, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek xxx jednotlivé xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,

- xxxxx ze xxxxxx xxx určení rozpětí, xxxx-xx provedena,

- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx,

- podrobnosti x xxxxxxxx testované xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, že xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx oběhu xxxx xx xxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx převod xxxxxxxxxxx látky v xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),

- xxxxxxxxxxx x kvalitě xxxxxxx x vody,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x odběru xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx metoda,

- xxxxx připravených xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxx hodnoty počtů xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx, cytoplazmě x "xxx nuclear xxxxxx" xxx jednotlivé xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx,

- vztah dávka-odpověď, xxxxx xx x xxxxxxxxx,

- statistické xxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- známky xxxxxxxx,

- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek,

- xxxxx "xxxxx x xxxxxx", xxx-xx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxx x S-fázi, xxx-xx stanoven,

- xxxxxxxxxxxxxxx buněk.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Závěry.

Xxxxxx X.39. xxxx vložena xxxxxxx xxxxxxxxx č. 208/2001 Sb. s xxxxxxxxx xx 22.6.2001

X.40. LEPTAVÉ XXXXXX XX KŮŽI

1. XXXXXX

1.1 XXXX

Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxxxxx Xxxxxx xxx xxx Validation xx Xxxxxxxxxxx Methods, ECVAM, Xxxxx Research Xxxxxx, Xxxxxxxx Commission) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx testy xx xxxxx xx leptavé xxxxxx xx xxxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx resistance, XXX) a test xxxxxxxxxxx xxxxxx lidské xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX xxxxxxxxx, xx xxx testy xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mezi xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx kůži. Xxxxxx xxxx vycházející x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (známé xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kůže X35, x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kůže, X34). Xx xxxxxx xxxxx a postupy xxxx xxxxx; xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx na konkrétních xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2 DEFINICE

Poleptání xxxx: xxxxxxxxx nevratného xxxxxxxxx tkáně kůže xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.3 XXXXXXXXXX LÁTKY

Žádná xxxxxxxxxx látka není xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxx. 1.5.3.4 a 1.7.2.3.

1.4 XXXXXXX METODY - XXXX XXX XX XXXX POTKANA

Testovaný xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx až 24 hodin xx xxxxxxxxxxx povrch terčíků xxxx odebrané x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx své schopnosti xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.Xxxx xxxxxxxxx xx měří xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx transkutánního xxxxxxxxxxxx odporu (XXX) xxx určitou xxxxxxxx xxxxxxx (5kΩ) (4) (5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. V případě xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (xxxxxxx xxxxxxxx xxx x xxx. (6)) xx xxxxx xx zkušebního xxxxxxx zařadit xxxx xxxxxx barviva, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx pozitivních xxxxxxxx, xxx se x xxxxxx typů xxxxxxxxxx xxxxx vyskytují (2) (7).

1.5 XXXXX XXXXXX - XXXX XXX XX XXXX XXXXXXX

1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx mladí (20 xx 23denní) xxxxxxx, Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx nůžkami xx zvířata se xxxxxxx odstraní xxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx streptomycinu, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx omytí xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx 3 xxx xx použijí. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx 31 xxx.

1.5.2 Příprava xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx z xxxxxxxx plochy x x xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PTFE) trubice, x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx gumový X-xxxxxxx, kterým xx xxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x X-xxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx X-xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx ke xxxxx TPFE xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx ponoří xx xxxxxx obsahující xxxxxx xxxxxx hořečnatého (154 xX), kde je xxxxxxxxxxx pružinovou xxxxxx (xxx. 2).

1.5.3 Popis xxxxxxx

1.5.3.1 Nanesení xxxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx xx stavu xxxxxx, nanese xx xx terčík x xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx pokryl xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, na xxxxxx xxxxx xx xxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx vody x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Testovaná látka xxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx zahřátím xxxxx na 30 ^xX, aby se xxxxxxxxx, xxxx rozetřením xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx. Použijí xx xxxx tři xxxxxxx xxx každou xxxxx. Látka xx xxxxxx xx dobu 24 xxxxx (xxx xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx xx promýváním xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx maximálně 30 ^xX tak xxxxxx, xxxxx xx látka xxxxxxxxx. Odstranění xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, se xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx zhruba 30 ^xX.

1.5.3.2 Měření TER

Transkutánní xxxxxxxxxx xxxxx (XXX) xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx impedančního xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. AIM 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx povrchové xxxxxx xxxx přídavkem xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% ethanolu, xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx několika xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx tak, že xx xxxxxxx xxxxx, x tkáň xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 154 xX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxx x xxxxx xx odpor x kΩ/terčík (xxx. 2). Xxxxxxx elektrod x xxxxx holé xxxxxxxxx pod xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx uloží xxxxxx XXXX trubice xxx, xxx byla xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx se xxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, aby xxxxxx xx dně. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx hranou xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx XXXX trubice (xxx. 1), xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx xxxxxxxx xxxxx vyšší xxx 20 xΩ, xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx překrývá xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx možno xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx tak, xx xx XXXX xxxxxxx utěsní palcem x xxxxxxxx x xxxxxx 10 sekund xx protřepává, xxxxxx xxxxxx hořečnatého xx xxxxxx a xxxxxx xxxxxx xx opakuje x xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx hodnota TER xx xxxxxxxxxxx, pokud xxxxxxx ze souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx leží x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx metodu. Navrhované xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx akceptovatelná xxxxxxx xxxxxx pro popisovanou xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx tyto:

Kontrola	Látka	Rozmezí odporu (xX)
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; 10 X kyselina xxxxxxxxxxxxxx (36%)	&xxxx; 0,5 - 1,0
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; xxxxxxxxxxx voda	10 – 25

1.5.3.3 Modifikovaný xxxxxx xxx xxxxxxxxx aktivní xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx je xxx xxxxxxxxx povrchově xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx organických xxxxx hodnota TER xxxxx xxxx xxxxx 5 kΩ, xxx xx xxxx tkáni xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx zjistí, xxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).

1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x odstranění xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 2 xxxxxx xx 150 μx 10% (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x xxxxxxxxxxx vodě. Xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxx xx xxxx 10 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx proudem xxxxxxxxx vody, xxxxx xx nejvýše pokojovou xxxxxxx. Tím xx xx odstranit přebytečné (xxxxxxxxxx) barvivo. Xxxxx xxxxxx kůže xx xxx xxxxxxx xxxxx x XXXX trubice x xxxxx do xxxxxxx (xxxx. xx 20 ml xxxxxxxxxx xxxxx pro scintilaci) xxxxxxxxxx 8 ml xxxxxxxxxxxx vody. Xxxxxxx xx po xxxx 5 xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx veškeré zbytky xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx x 5 xx 30 % (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx sodného (XXX) x xxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxx xxx inkubují xxx xxxxxxx 60 ^xX. Xx inkubaci xx xxxxxxx xxxxxx x zlikvidují a xxxxxxxxx roztok se xxxxxxxxxx xx dobu 8 minut xxx xxxxxxx 21 ^xX (xxxxxxxxx odstředivá xxxx ∼ 175). Vzorek 1 xx supernatantu xx pak xxxxx 30 % (x/x) xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx poměru 1 x 5 (x/x) (xx. 1 ml xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx XXX). Xxxxxxx xxxxxxx (OD) xxxxxxx xx xxxx xxx xxx 565 xx.

1.5.3.3.2 Výpočet xxxxxx xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x terčíku xx xxxxxxxx z xxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xxx 565 nm xxxx 8,7 . 10⁴; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Obsah xxxxxxxxxxxxxx B se xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx kůže zvlášť x xxxxxxx xx xxxxxxxx hodnota. Xxxxxxxx xxxxxxx navázaného xxxxxxx xx akceptována za xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx spadají xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahu xxxxxxx xx u xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx metodě x xxxxxxxxxxxxxxx uspořádání xxxxxxxx:

&xxxx; Xxxxxxxx	&xxxx; Xxxxx	&xxxx; Xxxxxxx xxxxxx barviva (mg/terčík)
Pozitivní	10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	&xxxx; 40 - 100
Negativní	destilovaná voda	15 – 35

1.5.3.4 Doplňující xxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx působení xxxxxxxxx látky xx xxxxxx kůže (xxxx. 2 xxxxxx) xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx látek. Ve xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxx TER přeceňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx některých xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx 2 hodiny (2), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx leptajících x neleptajících xxxxx xx 24xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x rozměry xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx 5 kΩ byla xxxxxxxxx xx základě xxxxx získaných xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxx xxxxxxxx postupu xxxxxxxxx xxx. Xxxxx xx se xxxxxxxx xxxxxxxx výrazně xxxxxxx, xxxxx xx být xxxxx použít jiných xxxxxxxxx a kontrolních xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x prahovou xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxx byly xxxxxxx při validační xxxxxx (3).

1.6 XXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX - XXXX X MODELEM XXXXXX XXXX

Xxxxxxxxx materiál xx nanáší xxxxxxx xx xxxx xx 4 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx lidské xxxx, xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx corneum. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx stanovené xxxxxxxxx xxxxxx "MTT reduction xxxxx" (XXX = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 difenyl xxxxxxxxxxx xxxxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxx definovanou xxx xxxxx xxxxxxxxx dobu. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx corneum (xxxxxx nebo erozí) x jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby přivodily xxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX KŮŽE

1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx

Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx pocházet x xxxxxxx zdrojů, xxxx xxxx splňovat xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx corneum x xxxxxxxxxxx xxxxxxx živých xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxx prokázat xxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x nichž xx xxxxx, xx xxxx xxx buňky xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx skrze xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vykazovat xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky.

Životnost xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx dostačující x xxxx, xxx xx dalo dobře xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx například velikostí xxxxxxx XXX, tj. XX hodnotou) xx xxxxxxxx xxxxx použité xxxx negativní kontrola xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx mezích xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxx látky xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx x xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx) musí xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx model xxxxxxxx mezinárodnímu validačnímu xxxxxxxxx (2).

1.7.2 Xxxxx xxxxxxx

1.7.2.1 Nanesení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, nanese xx xxx, aby xxxxxxxxx xxxxxx kůže (xxxxxxxxx xxxxxxxx 25 (μ/xx²). Xx-xx xxxxx, xxxxxx xx tak, aby xxxxxxxxx xxxx, x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx x xxxx zajistil dobrý xxxx. Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxx xxxxx se xxxx xxxxxxxx roztírají xx xxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xx je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx materiál x xxxxxxx kůže xxxxxxx xxxxx fyziologickým xxxxxxxx.

1.7.2.2 Měření xxxxxxxxxx xxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxxx validizovaná xxxxxxxxxxxxx metoda. Nejčastěji xx používá xxxxxxx XXX, x které xxxx xxxxxxxxx že x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky (2). Xxxxxx kůže xx xx xxxx 3 xxxxx ponoří xx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx xxx xxxxxxx 20 - 28 ^oC. Xxxxxxxxx modrý formazanový xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx (extrakce xxxxxxxxxxxxx) x koncentrace xxxxxxxxx xx xxxxxxx měřením XX xxx xxxxxx xxxxx 545 x 595 xx.

1.7.2.3 Doplňující xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xx metodu x xxxxxxxxx xxxxx okalibrovat xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx studii XXXXX (3). Xx xxxxxxxx nutné, xxx xxxx xxxxxxxxx, že xx xxxxxxx xxxxxx xx použití xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx standardů xxx v xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx různými laboratořemi. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vědecké xxxxxxxx xxxxxxxxxx dříve (2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx zveřejněny x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx před zveřejněním xxxxxxxxxx odbornou xxxxxx.

2. XXXXX

1.8 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX

1.8.1 Xxxx TER na xxxx xxxxxxx

Xxxxxxx odporu (x xΩ) pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolu x xxx případné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, a xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx experimenty, xxxxxxxx xxxxxxx x x xxxx vyvozená xxxxxxxxxxx.

1.8.2 Xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx

Xxxxxxx XX x vypočtené procento xxxxxxxxxxxxxxx buněk xx xxx xxxxxxxxx materiál, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx xxxxxxx x tabelární xxxxx, x to xxxx xxx všechny xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, průměrné xxxxxxx x x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.9 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

1.9.1 Xxxx XXX xx xxxx xxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx XXX xxx xxxxxxxxx materiál xxxxx xxx 5 xΩ, xx látka xxxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 kΩ x nejedná xx xxxxxx o povrchově xxxxxxx xxxxx (detergent) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xx.

X povrchově xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx organických xxxxx, xxx poskytují hodnoty XXX xxxxxxxxxxxxx 5 xΩ, lze xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx obsah barviva x terčíku xxxxx xxxx rovný xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x 36 % XXx, je testovaná xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x tedy má xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx-xx xxxxx xxxxxxx x terčíku xxxxx, xx testovaná látka xxxxxxx pozitivní x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx.

1.9.2 Test x xxxxxxx xxxxxx xxxx

Xxxxxxx XX xxx negativní xxxxxxxx představuje 100% xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Z xxxxxx XX xxx xxxxxxxxxx zkušební vzorky xx vypočte procentuální xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx procentický xxxxx životaschopných xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx nezpůsobují xxxxxxxxx xxxx, xx těch, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, než xx xxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx validační xxxxxx xx musí xxxxxxxx, že xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxx xxxxx:

- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, popřípadě xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti; xxxxx xx používají xxxxxxxxxx xxxxx, uvedou xx xxxx xxxxx x xxx ně.

Podmínky xxxxxx

- xxxxxxxx popis xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx případných xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx XXX) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx x modelem xxxxxx xxxx) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx resp. opakované xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Xxxxxxx 1

Obrázek 2

Metoda X.40. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx od 22.6.2001

X.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX FOTOTOXICITY 3T3 XXX IN XXXXX

1. XXXXXX

1.1 XXXX

Xxxxxxxxxx je xxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx (reakce), k xxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxxx vystavena xxxxxxx chemickým látkám x následně pak xxxxxx, xxxx je-li xxxxxxx kůže xxxxxxx xx celkovém xxxxxx xxxxxx látky.

Informace xxxxxxx x xxxxx testu xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx vitro xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, tedy xx xxxxxxxx, zda xxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxxxx možné nebezpečí xxxx nikoli.

Toxikologickým výsledkem xxxxx xx vitro xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx testem xx xxxxx zjistit xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxx, x xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx jako fotoiritanty xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx v xxxxx společného xxxxxxxx XX/XXXXXX x xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx testům xx xxxx. V xxxx 1996 doporučila xxxxxxxx xxxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx fototoxicity (4).

Výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx vivo u xxxxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx test xx pro uvedené xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Test xxxx xxxxxxx x xxxx, xxx předpovídal xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, jež xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxx vzniknout, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx, fotoalergie xxxx fotokarcinogenita, i xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxx uspořádán xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx fotoxicity.

Sekvenční xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxxxx: intenzita xxxxxxxxxxxxxx (XX) xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx; xxxxxx ve X/x² xxxx v XX/xx².

Xxxxx světla: xxxxxxxx (= intenzita x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx viditelného (XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (= X x x) na xxxxxxxx povrchu, xxxx. X/x² nebo J/cm².

Pásma xxxxxxxx délek ultrafialového xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxx XXX (Xxxxxxxxxx International xx X'Xxxxxxxxx) se xxxxxxx xxxxxxxx XXX (315 - 400 xx), UVB (280 - 315 nm) x UVC (100 - 280 nm). Xxxxxxxxx xx i xxxx xxxxxxxx: xx xxxxxxx mezi xxxxx XXX a XXX xx xxxxx xxxxxxxx 320 xx x XXX xx xxxxx xxxx xx XX-X1 x UV-A2 s xxxxxxx xxxxxx x 340 nm.

Životaschopnost (xxxxxxxxx) xxxxx: xxxxxxxx, kterým xx měří xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx buňku, xxxxxxxxx červeně, do xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xxxxx xxxxxxxxx měřených xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x celkovým xxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx.

Xxxxxxxxx životaschopnost (xxxxxxxxx) xxxxx: životaschopnost buněk xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolami (xxxxxxxxxxxx), které xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxx + UV xxxx - XX), xxxxx bez xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx potenciálu. X xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx test xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx veličin PIF x XXX.

XXX (photo xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx stejně xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX₅₀) testované xxxxx xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) x v xxxxxxxxxxx (+XX) necytotoxického XXX/XXX xxxxxxx.

XXX (mean xxxxx effect, xxxxxxx xxxxxxxxx): xxxx míra xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace-odezva xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX ozáření.

Fototoxicita: akutní xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx, xxxxx xx obdobně xxxxxxxx ozářením xxxx xx systémovém xxxxxx xxxxxx látky.

Fotoiritace: xxxxx xxxxxx pojmu "xxxxxxxxxxxx", xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxx x kůži xxxx, xx xx ni xxxxxx (topicky xxxx xxxxxx xxxxxxx) xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vedou xxxx x xxxxxxxxxxxxxx poškození xxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxx při xxxxxxxxx xxxxxxx).

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx imunologická xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x světla xxxxxxxxxxx, a xxx xx zapotřebí jednotýdenní xx dvoutýdenní indukční xxxxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxx (odezva) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, ke xxxxx xxxxxxx xxxx, xx byly xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XX/XXX xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx opakovanou xxxxxxxx xxxxxx x látky. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX zářením xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

1.3 XXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxx chlorpromazinu xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx testu xx fototoxicitu 3X3 XXX doporučuje použít xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx z xxxxx, xxxxx xxxx použity xxx mezilaboratorním xxxxxxxxxxx xxxxxx testu (1) (3) (13).

1.4 PRVOTNÍ XXXXX

Xxxxxxxxxxx účinky xxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), xxxxxxx xxxxxxx společným rysem xx xx, xx xxxxxx absorbovat světelnou xxxxxxx x oblasti xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx zákona xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx zákon) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx se xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx testování xxxxx xxxxxx metodického návodu, xxxx by se xxxx stanovit absorpční xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x XX/XXX xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx OECD x. 101). Pokud je xxxxxxx extinkční/absorpční xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx^-1 x xx^-1, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx třeba xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx testovat xxx xxxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, xxx xxxxxx jiným xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxxxx).

1.5 XXXXXXX METODY

Byly xxxxxxxx xxxxx mechanismy, kterými xxxx absorpce světla (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx reakci (7), xxxxxxx všechny xxxxx k xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxxxxx na porovnání xxxxxxxxxxxx xxxxx testované x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX záření. Xxxxxxxxxxxx xx xxx tomto xxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx červeně (xxxxxxx xxx, XX) (9), 24 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx.

Xxxxx Xxxx/x 3X3 xx kultivují xx xxxx 24 xxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx (monolayer). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx x látkou x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx po xxxx 1 xxxxxx. Xxxxx x obou destiček xx pak vystaví xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x dávce 5 X/xx² XXX (+XX xxxxxxxxxx), xxxxx destička xx xxxxxxxx v xxxxx (-XX experiment). X xxxx xxxxxxxxxx xx xxx médium xxxxxxx médiem kultivačním x xx xxxxxxx 24 xxxxxxxx kultivace xx xxxxxx inkorporace xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx xxxxxx, NRU) xx xxxx 3 xxxxx stanoví životaschopnost xxxxx. Xxx každou x xxxx xxxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk, vyjádřená xxxx procento xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislé xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XX) x x xxxxxxxxxxxxx (-XX) záření, xxxxxxx xx xxxxxx XX₅₀, xx. xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x 50 % x porovnání x kontrolami xxx xxxxxxxxx.

1.6 KRITÉRIA XXXXXXX

Xxxxxxxxx xxxxx xxxx záření XXX, historické xxxxx: x buněk xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxx UVA. Buňky xx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, příští xxx xx xxxxxxx xxxxxx UVA x xxxxx 1 - 9 X/xx² x xxxxx den se xxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk. Buňky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx² xxxx xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx kontrolních vzorků xxxxxxxxxxxx x temnu. Xxx nejvyšší dávce XXX xxxxxx 9 X/xx² nemá xxx xxxxxxxxxxxxxxx nižší xxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx uchovávaných v xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx zhruba xx xxxxx desáté xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vůči xxxxxx XXX, xxxxx xxxx: xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jestliže xxxxxxxxx kontroly (buňky x Earlově vyváženém xxxxxx roztoku [Xxxx´x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, XXXX] x 1 % xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxxx (XxXX) xxxx xxx xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (+UVA) životaschopnost xxxxxxxxx 80% v xxxxxxxxx s neozářenými xxxxxxx x témž xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX).

Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (XX_{540 NRU}) xxxxxx x NR xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxxx, xxx xxxxx 1 x 10⁴ xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx jamce xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx s xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx kritéria akceptovatelnosti, xx-xx průměrná xxxxxxx XX_{540 XXX} x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx 0,2.

Xxxxxxxxx kontrola: xxx xxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xx xxxxx provést xxxxxxxx xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxx látkou. Při xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx xxxx xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (XXX); xxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Pro XXX testovaný xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxx definována xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: XXX xxxxxxx (+XXX): XX₅₀ = 0,1 - 2,0 μx/xx, XXX xxxxxxxxx (-UVA): EC₅₀ = 7,0 - 90,0 μg/ml. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX), tzn. xxxxx xxxxxxx XX₅₀, xx xxx minimálně 6.

Xxxxx XXX xx xxx souběžnou xxxxxxxxx xxxxxxxx dají xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx vhodné xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx rozpustnosti xxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx. V xxxxxxx případě je xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx adekvátně xxxxxxxxx xxxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx hodnot XX₅₀ a XXX xxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxxxx).

1.7 XXXXX XXXXXX

1.7.1 Xxxxxxxx

1.7.1.1 Buňky

Při xxxxxxxxx xxxxxx xxxx použita xxxxxxxxxxxxx buněčná linie xxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxx/x 3X3 xxxx 31, x xx xxx x XXXX xxxx x XXXXX; ta xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx protokolu xx xxxx s xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx nebo xxxxxxx linie, pokud xx kultivační xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx; je xxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx stejně xxxxxx.

X buněk xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, x smí xx xxxxxx xxx x případě, xx xx xxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxx buněk xxxx XXX xxxxxx xxxx x počtem xxxxxx narůstat, je xxxxx používat xxxxx Xxxx/x 3X3 z xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx než 100. Xxxxxxxxx xxxxx Balb/c 3X3 xxxx UVA xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx kontrolovat, x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xx jedná o XXXX obohacený 10 % xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 xX xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx teplotě 37 ^xX / 7,5 % CO₂. Xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx kultivace xxxxxxxxxxx xxxxxxx cyklus x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxx xxxx. buněčnou xxxxx.

1.7.1.3 Xxxxxxxx kultur

Buňky ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kultur xx nasadí v xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiu x xxxxxxxxx jednou se xxxx použitím v xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxx.

Xxx test xxxxxxxxxxxx xx buňky xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxx xxxxx (xx. xxx xx stanovuje xxxxxxxxxxxxxxx buněk 48 xxxxx xx xxxxxxxx) xxxxxxx xx konfluenci (xx splynutí x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx). X případě xxxxx Balb/c 3T3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x 96 xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 x 10⁴ xxxxx x xxxxx xxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx buňky xxxxxxxx identicky na xxx destičky s 96 xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, s xxxxxxxx doby, xxx xx jedna z xxxxxxxx xxxxxxxxx (+XXX/XXX) x xxxxx je xxxxxxxxxx v temnu (-XXX/XXX).

1.7.1.4 Metabolická xxxxxxxx

Xxxxxxx xxx všech xxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx potenciálu je xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx systému, xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx látka, xxx by k xxxx, xxx působila xxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx in xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zapotřebí. Xxxxxxxxx xx xxxxx ani xx xxxxx, ani xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx prováděl x xxxxxxx metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.7.1.5 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx před xxxxxxxx čerstvě připravena, xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx se dá xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xx xx xxxxx k fotodegradaci, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (XXXX) nebo xx fyziologickém xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx saline, PBS), xxxxx - xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx během ozařování - xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx barevné xxxxxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx vodě omezeně xxxxxxxxx, xxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x koncentraci xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx konečná xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx solným xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx x konstantním xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, xx. xx xxxxx koncentracích testované xxxxx i x xxxxxxxxxxx kontrolách.

Jako xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxx (XxXX). Vhodná mohou xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx s nízkou xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xx však třeba xxxx pečlivě zvážit xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxx xx napomohlo xxxxxxxxxxx, dá se xxxxxx xxxxxxx resp. xxxxxxxxxx, popřípadě ohřev xx 37 ^xX.

1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX světlem / xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x XXX x xx xxxxxxxxx oblasti xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx záření XXX xx v tomto xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxx se při xxxxxxxx od 313 xx k 280 xx xxxxxxx tisícinásobně. Xxxx kritéria xxx xxxxx světelného xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxx absorbuje, a xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx dobu) xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx známých xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx být xxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxx nepatřičně poškozující xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx xxx i xxxxxxxxxx tepla (infračervená xxxxxx).

Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx sluneční xxxxxx. Xxxx tyto xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx - xx xxxx xx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx tepla x xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx množství záření XXX, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx se toto xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxx test xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx třeba použít xxxxxxxx záření, kde xx xxxxxx UVB xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (UVA:UVB ∼ 2 : 1). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx simulátoru xxxxxxxxx xxx validační xxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx je x xxxxx (3).

Xxxxxxxxxx: intenzita xxxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx testem fototoxicity xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru, xxxxx xxxx xxx kalibrován xxx daný xxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxx xx doporučuje xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx XX-xxxx xxxxx xxxx x kalibrace. Xxxxxxx xx, xxxx xx x delších xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zdroje x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; taková xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx obsluhu vyškoleného xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, že xxxxx UVA záření 5 X/xx² xx xxx xxxxx Balb/c 3X3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx excitovala x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx se xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx 50 xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 1,666 xX/xx². Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxxxx xxxxx nebo xxxx zdroj xxxxxx, xxxx xx dávka xxxxxx XXX xxxxxxx xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x byla xxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx vzorce:

	dávka xxxxxx (J/cm²) x 100	&xxxx;
&xxxx; x (min) =	________________________	(1 X = 1 X x)
&xxxx;	&xxxx; xxxxxx (xX/xx²) x 60	&xxxx;

1.7.2 Podmínky xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx všechny xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx xxxxxxx koncentracích xx zvyšuje xxxxxxx xxxxxxx pozitivních xxxxxxxx (13). Xxxxxxx xX xxx xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx (oblast xX 6,5 - 7,8).

Xxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx při použití xxxxxx (+UVA) x xxx xxx (-XXX) xx xxxxx stanovit x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rozsah x xxxxxx xxxxxxxxxxxx řady xx xxxxx xxx, xxx křivky xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx podloženy xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx geometrická xxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx).

1.7.3 Popis xxxxxxx

1.7.3.1 Xxxxx den

Připraví xx xxxxxxxx 1 x 10⁵ xxxxx/xx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx tkáňové kultury xx xxxxxxxxxx xx 100 μx xxxxxxxxx xxxxx (= xxxxx xxxxx), xx xxxxxxxxx xxxxx xx dávkuje xx 100 μl xxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxx 1 x 10⁵ xxxxx/xx (= 1 x 10⁴ xxxxx xx xxxxx). Xxx xxxxxx testovanou xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx - xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-UVA), druhá xxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).

Xxxxx xx xxxxxxxx xx dobu 24 xxxxx (7,5 % XX₂, 37 ^xX), xxx xx vytvořil xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx a jejich xxxxxxxxxxxxx xxxx.

1.7.3.2 Druhý xxx

Xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx dvakrát xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX xx xxxxxx jamku. Xxxxx se 100 μx XXXX/XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxxx. Buňky x xxxxxxxxxx látkou xx xxxxxxxx v xxxxx xx dobu 60 minut (7,5 % XX₂, 37 ^xX).

Xxxx testu s XXX (+UVA) xx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxx za xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx dobu 50 xxxxx skrz xxxxx xxxxxxxx s 96 xxxxxxx zářením UVA x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx² (= dávka 5 / xx²). Xxx nedocházelo ke xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx ventilátoru. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-XXX) xx xx xxxx 50 xxxxx (= expoziční xxxx XXX) xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx teploty x xxxxxx xxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Poté xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx (18 - 22 xxxxx) se inkubují (7,5 % XX₂, 37 ^xX).

1.7.3.3 Xxxxx xxx

Xxxxxxxxxxxxx hodnocení

Buňky xx xxxxxxxxxx pod xxxxxxxxxxx x xxxxxxx kontrastem. xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx. Tato xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xx eliminovaly experimentální xxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxxxx cytotoxicity xxxx xxxxxxxxxxxx xx tyto xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxx příjmu xxxxxxxxx červeně (NR)

Buňky xx promyjí objemem 150 μx xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Promývací xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μx média x XX a xxxxxxxx xx při 37 ^xX xx xxxxxxxx atmosféře xx 7,5 % CO₂ xx dobu 3 xxxxx.

Xx inkubaci se xxxxxx s XX xxxxxxxx a buňky xx promyjí xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX, xxxx xx xxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx (je také xxxxx destičky xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx).

Xxxxx xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx na xxxxxxxx XX (čerstvě xxxxxxxxxx xxxx ethanol/kyselina xxxxxx).

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xx xxxx 10 xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, dokud xx XX z xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx NR při 540 xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx srovnávacího roztoku. Xxxxx xx uchovají xx vhodném xxxxxxx (xxxx. XXXXX) xxx xxxxx analýzu.

2. XXXXX

1.8 XXXXXXX X XXXXXXXX XXXXX

Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzu vztahu xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxx xxxxxxxx XXX/XXX záření x xxx ní. Xx-xx xxxxxxxx cytotoxicita, koncentrační xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx testovaná xxxxx xxxx xxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx x experimentu xx xxx (-UVA) necytotoxická, xxx xxx xxxxxxxxx (+XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx dojít x xxxx, že xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dat. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxx částí xxxxxxxxxxx (xxx při -UVA, xxx xxx +XXX), xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx dávkami xx xx xxxxxxxx koncentrace.

Jsou-li xxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx-xx xx opakování xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxx důležité pozměnit xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, aby xx dosáhlo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx proměnnou x tomto xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxxxxxxxx xxx xxxx opakování xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxxx, triturace, xxxxxxxxxx). Xxx xxxx xxxxxxxx x změnách xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X látek, xxx jsou ve xxxx nestálé, xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx doby.

1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx je xx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx k 50 % xxxxxxxx buněčného xxxxxx NR (XX₅₀). Xx lze xxxxxx xxx, xx xx xx xxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx použije xxxxxxxxx xxxxxx metoda xxxxxxxxxx xxxxxxx (nejlépe Xxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx regrese) nebo xx xxxxxxx xxxx xxxxxx metoda xxxxxxxxx (14). Xxx se xxxxxxx EC₅₀ použije xxx další xxxxxxx, xx xxxxx zkontrolovat xxxxxxx proložení. K xxxxxxx hodnoty XX₅₀ xx také xxxxx xxxxxx grafické metody. X tomto případě xx xxxxxxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxx x: xxx, xxx x: xxxxxx), xxxxxxx xx této xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva xxxxxx xxxxx lineární.

1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX XXXXXX)

1.10.1 Xxxxxxxxx xxxxx, verze 1: xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX)

Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx xxx xx přítomnosti (+XXX), xxx xx xxxxxxxxxxxxx (-XXX) xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (PIF) xxxxxxxx xxxxx vzorce

	EC₅₀ (-XX)
&xxxx; (x) PIF =	&xxxx; ____________
&xxxx;	&xxxx; XX₅₀ (+XX)

XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx PIF ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX, xxxxxx při -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx XXX xxxxxxxxx, x xxxx xx jedná x xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xx vypočítat xxx. "&xx; PIF", když xx xxxx xxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxxx xx xx maximální xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (X_xxx) x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx:

&xxxx;	&xxxx; X_xxx (-XX)
&xxxx; (x) > XXX =	&xxxx; ___________
&xxxx;	&xxxx; XX₅₀ (+XX)

Xxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxx "&xx; XXX", xxx xxxxx hodnota > 1 předpovídá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxx XX₅₀ (-XX), xxx XX₅₀ (+XX), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx zkušební xxxxxxxxxxx, je xx xxxxxxxx xxxx, že xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx případě xx xxxxxxx formální "XXX = *1", xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx výsledek

	C_max (-XX)
&xxxx; (x) XXX = *1 =	&xxxx; ___________
&xxxx;	&xxxx; X_xxx (+XX)

Xxxxx xx xx xxxxxx xxxxx hodnota "XXX = *1", předpovídá xx, xx xxxx xxxxxxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

X xxxxxxxxx (b) x (x) xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x úvahu xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxx.

1.10.2 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 2: xxxxxxx xxxxxxxxx (XXX)

Xx xxxxx xxxx xxxxxx novější xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu, xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx x validační studie XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx XX xxxxxx (13). V xxxxx modelu xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XXX x xxxx xxxxxxxxx, kde xxxxx xxxxxx xxxxxxx XX₅₀. X tomto xxxxxx xx xxxxxxx veličina "xxxxxxx fotoefekt" (MPE) xxxxxxxx xx porovnání xxxxxx průběhu xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx XXX byl na Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v Xxxxxxx vyvinut speciální xxxxxxxxxx xxxxxxxx, který xxx xxxxxxx xxxxxx.

1.11 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx výsledek xxxxx (XXX ≥ 5 nebo XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx koncentracích nižších xxx 10 μx/xx, xx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx bude působit xxxx fototoxin xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx vivo. Xxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx pouze xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (100 (x/xx), xxxx xxx posouzení xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx schopnosti xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx mohou xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx látky x xxxx, nebo údaje x xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxx lidské xxxx xx vitro.

Negativní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro (XXX < 5 xxxx XXX &xx; 0,1) xxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxxx pro použité xxxxx xxxxx x xxxxxx podmínkách. X xxxxxxxxx, xxx xx xx látka xxxx xxxxxxxx x při xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx látka xxxx xxxxx fototoxický xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx vivo se xx považovat za xxxxxxxxxxxxxxxx. X případech, xxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx získány xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (XX₅₀ + XX x XX₅₀ - XX), xx interpretace xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx nebyla prokázána xxxxx toxicita (+XX xxx -XX) x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se nedalo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xx možno xxxxxxxxx tento xxxx xxx danou látku xx ne zcela xxxxxx x xxxx xx se xxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx (například x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx vitro nebo xxxxxx kůže xx xxxx xxxx xx xxxx).

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

Zpráva x xxxxxxx pokusu

Ve xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:

Testovaná xxxxx:

- xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx XXX, xx-xx xxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx,

- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx k xxxxxxxxx xxxxx důležité,

- xxxxxxxxx x fotostabilita, xxxx-xx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx rozpouštědla,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx rozpouštědle,

- xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx (EBSS xxxx PBS).

Buňky:

- xxx x zdroj xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx mykoplazmat,

- xxxxx xxxxxxx xxxxxx, je-li xxxxx,

- citlivost buněk xxxx záření XXX xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jež xx x testu na xxxxxxxxxxxx 3X XXX xx xxxxx používá.

Podmínky xxxxxx (x) - xxxxxxxx xxxx ovlivněním x xx xxx:

- xxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxx (koncentrace XX₂, xxxxxxx, xxxxxxx),

- xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xx x xx xx).

Xxxxxxxx xxxxxx (b) - xxxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx UV/VIS xxxxxxx x bez xxx,

- x případě xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxx x xxxxxxx působícího xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx),

- xxxx ovlivňování xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx použitého xxxxxx (xxxxxx),

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x podrobnosti x xxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxx XXX (v x X/xx²) při xxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx UV/VIS xxxxxx,

- xxxxx záření UVA (xxxxxxxxx x čas) x X/xx²,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx během xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxx NRU:

- xxxxxxx xxxxx s XX,

- xxxx inkubace x XX,

- inkubační xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx CO², xxxxxxx, xxxxxxx),

- xxxxxxxx xxxxxxxx NR (extrakční xxxxxxx, doba xxxxxxxx),

- xxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx optická xxxxxxx XX,

- xxxxxxx xxxxxx xxxxx (referenční), byla-li xxxxxxx,

- složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), pokud byl xxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, vyjádřená x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx kontrol,

- xxxxxx koncentrace - xxxxxx (xxxxxxxxxxx testované xxxxx νx relativní xxxxxxxxxxxxxxx buněk) získané xxxxxxxxxx experimenty +XXX x -XXX,

- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx: xxxxx možnosti xxxxxxx xxxxxx XX₅₀ (+XXX) a XX₅₀ (-XXX),

- porovnání xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx ozařování UV/VIS xxxxxxx - xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) nebo středního xxxxxxxxxx (XXX),

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx testu (x) - souběžná xxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx,

- historické xxxxx negativních kontrol, xxxxxx x směrodatná xxxxxxxx,

- kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxxxx XX₅₀ (+XXX), XX₅₀ (-XXX) x XXX xxxxx xxxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx údaje látky xxxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx: xxxxxxx XX₅₀ (+XXX), EC₅₀ (-XXX) x XXX, průměry x směrodatné odchylky.

Diskuse xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxx X.41. xxxx xxxxxxx právním předpisem x. 208/2001 Xx. x účinností xx 22.6.2001

Xxxxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxx č. 251/98 Xx. xxxxx xxxxxxxxx xxxx 1.1.1999.

Ve xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx jsou podchyceny xxxxx x doplnění xxxxxxxxxxx právním xxxxxxxxx x.:

208/2001 Sb., xxxxxx xx mění xxxxxxxx XX č. 251/98 Xx., xxxxxx se xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxx toxicity chemických xxxxx x přípravků - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx

x účinností xx 22.6.2001

Xxxxxx předpis č. 251/98 Sb. byl xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 443/2004 Sb. x účinností xx 1.8.2004.

Xxxxx jednotlivých xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx předpisů x xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) xx x) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x chemických xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a o xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

2) Xxxxx č. 246/1992 Sb., xx xxxxxxx xxxxxx proti xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Sb., x. 243/1997 Xx. x x. 30/1998 Xx.

3) Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a rozvoj xxx xxxxxxxx chemikálií. Xxxxx 4 - xxxx na xxxxxx (XXXX Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxx of Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).

Plné znění - 251/1998 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Plné znění - 251/1998 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu. Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.