Právní předpis byl sestaven k datu 22.06.2001.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
VYHLÁŠKA
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
xx dne 16. října 1998,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §4 xxxx. 1 xxxx. x) zákona x. 157/1998 Xx., x chemických látkách x xxxxxxxxxx přípravcích x x změně xxxxxxxxx dalších xxxxxx:
§1
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx nebezpečných xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxických, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx, žíravých, xxxxxxxxxx, senzibilizujících, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a toxických xxx xxxxxxxxxx (xxxx xxx "xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx").1)
§2
(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx uvedenými v příloze xxxx vyhlášky.
(2) Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx, pokud xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x reprodukovatelné xxxx xxxxxx xxxxxxx x odstavci 1, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx pokusných xxxxxx2) x xxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx (OECD).3)
§3
Xxxx xxxxxxxx nabývá xxxxxxxxx xxxx 1. xxxxx 1999.
Xxxxxxx:
XXXx. Xxxxx, CSc. x. r.
Příloha x xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.
Xxxxxx pro xxxxxxxxxx toxicity chemických xxxxx a xxxxxxxxx
B. XXXXXXXXX XXXX
1. ZÁKLADNÍ XXXXX
1.1 AKUTNÍ XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx objeví xxxxx určité doby (xxxxxxxx 14 xxx) xx podání jedné xxxxx nějaké xxxxx.
1.2 XXXXXX TOXICITA
je xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx. Jsou xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xx být xxxxxx, xx xx xxxxxxx podávané dávky xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx toxických xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx x úmrtí.
1.3 XXXXX
xx xxxxxxxx podávané xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxx) nebo jako xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx jednotku hmotnosti xxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx), nebo xxxx xxxxxxxxxx dietní xxxxxxxxxxx (xxxx na xxxxxx dílů xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx).
1.4 XXXXXXXXXXXXXX DÁVKA
xx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, kterou xx xxxxx podat, aniž xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (včetně humánního xxxxxxxx) související s xxxxxxx látkou.
1.5 DÁVKOVÁNÍ
xx všeobecný xxxxxx xxxxxxxxxx dávku, xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
1.6 XX50 (XXXXXXX XXXXXX XXXXX)
xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx látky, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx smrt 50 % zvířat, xxxxxx xxxx podána. Xxxxxxx LD50 xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxx xxxxxxx (xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XX50 (STŘEDNÍ XXXXXX KONCENTRACE)
xx xxxxxxxxxxx vypočtená koncentrace xxxxx, která pravděpodobně xxxxxxx smrt xx xxxxxx xxxx po xxxxxxxx x 50 % xxxxxxxxx zvířat, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx LC50 xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx objemu xxxxxxx (xx.x-1).
1.8 NOAEL
xx zkratka xxx "xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx" (hladinu xxx xxxxxxxxxxxx nepříznivého xxxxxx) x je xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx koncentrace, xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxickým xxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX TOXICITA
xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx objeví x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx očekávané xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu.
1.10 XXXXXXXX TOLEROVANÁ XXXXX (XXX - MAXIMUM XXXXXXXXX XXXX)
xx xxxxxxxx dávka, která x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxx, xxxxx xxx podstatného xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx.
1.11 XXXXXXXXXX XXXX
xx vyvolání xxxxxxxxxxx změn xx xxxx po aplikaci xxxxxxxxx xxxxx.
1.12 XXXXXXXXXX XXX
xx xxxxxxxx xxxx xx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxx.
1.13 XXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX)
je xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.14 XXXXXXXXX XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx působení xxxxxxxxx xxxxx po xxxx od 3 xxxxx do 4 xxxxx.
1.15 XXXXXXXXXXXXXX
xx xxxxxxx absorpce, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek.
1.16 ABSORPCE
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) aplikovaná xxxxx xxxxxxxx xx xxxx.
1.17 XXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), kterým(i) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x těla.
1.18 XXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx rozdělovány x těle.
1.19 XXXXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx aplikované látky xxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXXX - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX A XXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1 - X.5), xx xxxxxxx xxxx xxx xx jediné xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
V xxxxxxxxxx xx toxicitě xxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XX50. Xxx inhalační xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx navržen, xxxxxxx xxxxxx xxxxx definovat xxxxxxx xxxxxxx jednorázové xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx utrpení zvířete, xxxxxxxxx xxxxxx pevné xxxxx (metoda X.1 xxx) a metoda xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx B.1 xxxx). Xxx testování xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxx druhu xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. X xxxxx případě xxxx xxx použita standardní xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7, B.8 x X.9) se xxxxxxxx xxxxxxx účinky xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Důležité xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx, aby se xxxxxxx xx nejvíce xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x netoxické xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx studií xx vyžaduje zkoumání xxxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.26 - B.30 x X.33).
3. MUTAGENITA - XXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxx xx vztahuje k xxxxxxx trvalých přenosných xxxx v množství xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx ("xxxxxx") xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxx, xxxx xxxx nebo xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx struktury xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx aktivita xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx (xxxxxx) xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) anebo xx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx (metoda X.10).
Xxxxxxxxxx jsou xxxx xxxxxxx xx xxxx, xxxx. micronucleus test (xxxxxx X.12) xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (metoda X.11). Xx však xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.
Pro látky xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx ke zjištění xxxxxxxxxx xxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx studie xxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx: potvrzení xxxxxxxx xxxxxxxxx základním xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx metod; xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx.
Xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx X.15 xx X.25 jak eukaryontní xxxxxxx xx xxxx x xx vitro, xxx rozšiřují xxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x jiných xxxxxxxx x organismech složitějších xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxx, xx xxxxx uvažované xxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxx naplánovat xxx, xxx poskytly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxx, xxxxxxxx karcinogenním xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxx záviset xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, výsledků xxxxxxx xxxxx toxicity x xxxxxxx způsobů xxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx k xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků x xxxxx xxxxxx organizmu, xx xx vyvolaných xxxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx, xxxx. specifický xxxxx xxxx x myší xxxxxxxxxx mutace xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi, xxxx. xxxx na přenosné xxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxxx B.25). Těchto xxxxx lze použít xxx xxxxxxxxxx možného xxxxxxxxxxx rizika látky xxx xxxxxxx. Vzhledem xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx test, xx třeba xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx na xxxxxxx závažných důvodů.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx postupuje podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx protokolu xxxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
4. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx genotoxické nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, v xxxxxxxxxx xx předpokládaném xxxxxxxxxx působení.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx o genotoxickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx poskytují testy xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxx nebo chronické xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx X.7, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zahrnují xxxxxxxxx xxxxxxxx histopatologických xxxx, xxxx. hyperplazie x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx informace mohou xxxxxx identifikovat xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxx xxxxxxxxxxxxx (metoda X.32) nebo xxxxx x kombinované studii xxxxxxxxx toxicity/karcinogenity (xxxxxx X.33).
X dispozici xxxx xxxxxx testy xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx schopnost xxxxx xxxxxxx takové xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx chování xxxxxxxxx xxxxxx, u xxxxxxx xx předpokládá xxxxxxxxxx x maligní transformací - xx xxxx (xxxxxx X.21). Používá xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx typů x xxxxxxxx xxx transformaci.
5. XXXXXXXXXXX TOXICITA
Reprodukční xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx (xxxx xx plodnost) xxxx xxxxx nedědičných xxxxxxxxxx účinků xx xxxxxxxxx (vývojová xxxxxxxx) xxxxxxxxxx také xxxxxxxxxxxx x účinky v xxxxxxx laktace.
Testovací xxxxxx (xxxxxx X.31) xxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx toxicity xxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx aplikace x závislosti na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. X takových xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx metodu xxxxxx xxxxxxx.
Pokud je xxxxxxxxx třígenerační reprodukční xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx metodu xxx xxxxxxxxxxxxx reprodukční xxxx (xxxxxx X.35) xxxxxxxx xxx, aby xxxxxx xxxxx generaci.
6. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx funkčních změn xxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx neurotoxického účinku. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x neurotoxickým xxxxxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx zkoumání xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx důležité xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx být xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Bylo xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pozdní xxxxxxxx, xxxxx xx posuzována xxxxxxxx X.37 x X.38 po jednorázovém xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
7. XXXXXXXXXXXXX
Imunotoxicita xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, které xx xx následek buď xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx navozenou xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx opakované aplikaci (xxxxxx B.7), zahrnuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx chemické xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx x výsledky xxxxx pomoci xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx, xx xxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx posloupnost toxikokinetických xxxxxx (studie xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, metabolismu a xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxx nebo xx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.36).
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x fyzikálně-chemických vlastnostech xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xx tkání. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx parametrech x xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických x toxikokinetických xxxxxx.
9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx xxxx zahájením xxxxxxxx toxikologické xxxxxx.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro výběr xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx konkrétní xxxxxx x xxx xxxxxxxxxx x xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx.
Vypracování xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky (x také pokud xxxxx větších nečistot) x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx materiálu xx měl xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx, fyzikálně-chemických xxxxxxxxxx, xxxxxxx x chování xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx zahrnuty x xxxxxxxxx xxxxxx o xxxxx.
10. XXXX X XXXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, ve xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxx x zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX XXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx pokusná zvířata xx xxxxx přizpůsobit xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx místnosti 22 xX ± 3 xX při xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx xxxxxxx xx xxx teplota 20 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %.
Xxxxxxx experimentální techniky xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x popisu xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxxx toxických xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx x xxxxx je x xxxxxxxxx zprávě x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxx xx zprávě x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jednoho xxxxxxx, xx xxxx xxx 5 xxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx údaje x způsobu xxxxx x xxxxxxx a xxxxx zvířat chovaných x xxxxx kleci xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx doby xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX KRMENÍ
Xxxxxx xxxx vyhovovat xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Podávají-li xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx hodnota xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x neomezeným xxxxxxxxx x pitné xxxx. Pokud xx xxxxxxxxx xxxxx podávána x potravě, xx xxxxx tomu přizpůsobit xxxxx xxxxx.
Xxxxxxx x xxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxxxx vliv xx toxicitu, xxxxxxx xxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx, xx kterých xx se tento xxxx xxxxxxxx.
11. XXXXXXX XXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx počtu x omezení xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx metody fixní xxxxx (X.1.xxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx (B.1.tris). Xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx specifického xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx akutní xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx o 70 % xxxxxx xxxx xxx xxxxxx X.1.
Xxxxxxx se závažnými x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx podávat x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx limitních xxxxx, xxxxx x testech xxxxxx toxicity (xxxxxx X.1, X.2 x X.3), xxx xxxx x xx vivo xxxxxxx xxxxxxxxxx (metody X.11 a X.12), xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx zbytečně xxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx x jednoho xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx zdůvodnitelné. Xxxxxx vědecké xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx již provedených xxxxx nebo na xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxx xxxxxxxxx studie xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx x limitním testu (xxxxxx X.3) a xxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx dráždivosti (xxxxxx B.4) xxxx xxx xxxxxxxx; xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx silné xxxxxxxxxx kůže při xxxxxx kožní xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4), nesmějí xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx oka.
Xx nutno xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupy, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx stejnou xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx utrpení xxxx se úplně xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxx metody k xxxxxxxxx, musí být xxxxxx použití xxx xxxxxxxxxxxxxxxx rizika, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x označování xxxxx xxxxx nebezpečnosti xxxxx x xxxxx xxxxx xxx, kde xx xx možné.
12. HODNOCENÍ A XXXXXXXXXXXX
Xxx hodnocení x interpretaci pokusů xx zvířatech a xxxxx xx xxxxx xx nutno xxx xx zřeteli, že xxxxx extrapolace xx xxxxxxx xx možná xxx x xxxxxxx xxxx; xxxxxxx o xxxxxxxxxxxx účincích x xxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx k ověření xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx nových x stávajících xxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxx člověka xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx také xxxxxxx pro studie, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx nových i xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx X - Všeobecný xxxx byl xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
B.1. AKUTNÍ XXXXXXXX ORÁLNÍ (PER XX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná látka xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx sondou, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxxx orientačního testu. Xxxxxxxxxx se pozorované xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx pokusu, i xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx pokusu, xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx xx xxxxx, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx dráždivých vlastností.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx chovu x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Pokud je xxxxx, připraví xx xxxxxx xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx vehikulu. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx vodného xxxxxxx, další xxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx jako další xxxxxxx xxxxxx v xxxxxx vhodných xxxxxxxxxx xxxx suspenze. U xxxxxxxxx vehikulí musí xxx známy nebo xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X hlodavců xx objem neměl xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx vodné xxxxxxx, xxxxx je xxxxx podávat xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x testech xx xx xxxx minimalizovat xxxxxxx úpravou koncentrací, xxx xx zajistil xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx xxxxx tomu. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx by x xxxx xxxxxxx xxxxxx variační rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx hodnoty.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx být březí. Xxxxx je k xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x obou xxxxxxx xx výrazně xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Poznámka: Používají-li xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx druhů, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx se zvážit xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Xxxxx je xxxxx pečlivě zvolit x xx xxxxx xxxxxxxx, aby nebyla xxxxxxxxxx úroveň xxxxxxx xxxxxxx dávky. V xxxxxxxx testech xx xxxxx xx vyvarovat xxxxxx letálních dávek xxxxxxxxx látky.
1.2.2.3 Volba xxxxx
Xx být xxxxxxxxxx xxxxx hladin xxxxx, nejméně tři, x xxxx být xxxxxx odstupňovány xxx, xxx xxx u xxxxxxxxxxx skupin viditelný xxxxxx toxických xxxxxx x mortality. Získané xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx vztahu xxxx xxxxxx x xxxxxxx, a xxxxx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx stanovení XX50 x přijatelnou spolehlivostí.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxxx xxxxxxx test xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx skupinách 5 xxxxx x 5 samic x xxxxxxxx výše xxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxx xxxxx způsobí xxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx nejméně 14 xxx. Nelze xx xxxx stanovit rigorózně. Xxxx by být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx je možno xxxxx potřeby xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx doba, xxx se projevy xxxxxx xxxxxx x xxxxxx, a xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx je xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx zvířata hladová. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. X xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. X xxx pokusu se xxxxxxx zváží x xxxxxxxxx xxxxx se xxxx sondou xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxx-xx možno xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx menších množstvích xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx přístup k xxxxxxx xxxxx 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx xx látka xxxxxxxxxxxxx xxxxx určitého xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - podle xxxxx xxxxxx období - potravu a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx zvíře xx vedou xxxxxxxxxx xxxxxxx. Během xxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx častá xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx místní xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x bezprostřední xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx pracovního xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx klinická xxxxxxxxx. Xxxx pozorování xx xxxxxxxxx denně x xxxxxxxx opatřeními x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxx zmrazení xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické aktivity x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx xxxxxx, i xx, xxxxx přežijí xx xx konce xxxxxx, xx pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx. Je-li to xxxxxxxxxx, odeberou xx xxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx jednom xxxxxxx, podá se xxxxx nejméně xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx druhého pohlaví x xxxxx zjistit, xxx zvířata druhého xxxxxxx xxxxxx výrazně xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxx. V jednotlivých xxxxxxxxx může být xxxxxxxxxx použití menšího xxxxx xxxxxx. Pokud xx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxx pohlaví xxxx xxxxxxx citlivější, xxxxxxxxx xx zvířatech xxxxxxx pohlaví xx xxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, doba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx s jinými xxxxxxx xxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx v xxxxxxxxx intervalech x x xxxx xxxxxxx. Xxxxx hmotnosti xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, přežívají-li xxxxxx xxxx xxx jeden xxx. Xxxxxxx, která xxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx stres x xxxxxx vyvolané podanou xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx uhynutí xxxxxxxx xxxxx xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxx xx melo xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, změn xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx toxických xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, potrava xxx.
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- úrovně xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx hladiny xxxxx (počet uhynulých xxxxxx, xxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx podání xxxxxxxxx xxxxx, důvody x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířat - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,
- hodnota XX50 xxx xx xxxxxxx, x kterého xxx xxxxxxxx xxxxx pokus, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),
- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50, xxxxx xx xxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx x xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx danou xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx druhém pohlaví,
- rozbor xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx testu xx vypočtenou hodnotu XX50),
- interpretace xxxxxxxx.
B.1. bis XXXXXX TOXICITA XXXXXX (XXX XX) - XXXXXX XXXXX XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxx xxxxxx toxicity xxxxxxxxx informace x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxx následovat během xxxxxx doby po xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx testované látky.
Xxxxxx x xxxxx xxxxxx xx provádí xx xxxx etapách.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se sekvenčním xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dávek xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x zvířat xxxxx xxxxxxx, xxxx jedno xxxxx na dávku. Xxxxxxxxxx studie xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx x toxicity, xxxxxx odhadu minimální xxxxxxx dávky. Xxxxxxxx xx v xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx než xxxx xxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx orálně xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x pěti xxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, x xx jako xxxxx, xxxxx pravděpodobně xxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxx" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), xxx xx xxxxxxx.
Xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Když xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx úrovni xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx když xxxxxxx xxxxxxx reakce xxxxxxxx humánní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx nejbližší xxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxxxx xxxxx" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), xx. xxxxxxxx x předem xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxx k xxxxx (xxxxxx případů xxxxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxx se xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx dávkách x xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx je známo, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx proti tomu.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx kmeny xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx by x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx orientační xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx stačí xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx každého z xxxx xxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxx x podávání dávky
Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx vhodném xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx volbou xx xxxxxx x rostlinném xxxxx, xxxxxx potom xxxx další možnost xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. X nevodných xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx testem xxxx xxxxx něho xxxxxx xxxxxxxxxx toxikologické vlastnosti. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx normálně xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx by xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx koncentrací, aby xx zajistil xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx dávek.
Xxxx xxxxxxx testované xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Potkanům xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx; xxxxxxx x pitné vodě xxxx xxxxxx. X xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx se xxxx xxxxxx orálně x jediné dávce. Xxxx-xx xxxxx podat xxxxx najednou, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx množstvích xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx podání xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx, může xxx xxxxxxx - podle xxxxx xxxxxx období - xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx poskytnout.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Vyšetřují xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, pokud nejsou x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxx samci xxxxxxxxxxx pohlavím. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx 24 xxxxx před xxxxxxx dávky dalšímu xxxxxxx. Všechna xxxxxxx xx pečlivě pozorují x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx otravy xxxxxxx xx xxxx dní; xxxxx xxxxxxxxxxx projevy xxxxx xxxxxx xxxxx xxx, zvíře xx xxxx pozorovat xxxxx xx dalších xxxx xxx. Posuzují xx xxxxxxxxxxx výchozí xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx-1. Xxxxxxxx zvolená xxxxxxx dávka xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxx nejbližší vyšší xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx nutné xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx informace x xxxxxx(xxx) xxxxx, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx xxxxxx, x x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx vyvolává xxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx o příbuzných xxxxxxxxxx látkách. Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx první dávky 500 xx.xx-1. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, vyšetřuje se xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx 2000 xx.xx-1, je xxxxxxxxxx studie xxxxxxxx x hlavní xxxxxx xx xxxxx provést xx xxxx xxxxxx xxxxx. Jestliže xxxx xxx použití xxxxxxx xxxxx (např. 500 xx.xx-1) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx humánní xxxxxxxx, je xxxxxx xxxxxxx zvířeti xxxxxxxxx xxxxx dávka (xxxx. 50 xx.xx-1). Xxxxxxxx xxxx zvíře xxxxxxx, mohou xxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Za xxxxxxxxxx podmínek xx xxxxxxxxx, xx xx xxx xxxxx postupu xxxxxxxxx více xxx 5 zvířat.
1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxxxxxxx dávkovou xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx nejméně 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx a xxxxxx xx být xxxxx.
Principem xxxxxx xxxxx dávky xx xxxxxxx pouze xxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx studii. Xx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx, xxxxx bude užita x testu, xx xxx xxxxxxx x xxxxx xx 4 xxxxxxx xxxxxx dávek, xxxxxxxxx 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx výchozí úroveň xxxxx xx xxxx xxx ta, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zřejmou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx); xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxx zaznamenána. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx toxicitu, xxx xxxxxxxx mortalitu, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx znovu xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxx měla xxx dále pozorována xxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx bylo kompletní. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xx projeví xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xxx xxxxx znovu testována xx další xxxxx xxxxxx xxxxx. Opět xx zvířata, která xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx období.
Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx vedou xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxx x zaznamenat xxxxxx účinek xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxx nejméně 14 xxx. Nelze ji xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxx podle xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje xxxxxx a xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx možno xxxxx xxxxxxx prodloužit. Xxxxxxxx je doba, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx a xxxx xx xxxxxxx, zvláště xxx, kde xx xxxxxx tendence x xxxxxxxx vzniku xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx první den xx podání xxxxx x nejméně jedenkrát xx den xxxxx xxx. Zvířata xxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxx xxxx xxxxxxx příznaky xxxxxx je xxxxx xxxxxxx utratit. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx prováděna xxxxx několika xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx, jestliže xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx může xxx ukončen x xxxxxxx, xxxx je xxxxxx, xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Pozorování xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx třeba věnovat xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, průjmu, letargii, xxxxxx a xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx provede xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx 3 xxx x xxxxx xxxxxx týdně. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxxxx do xxxxx xxxxx, xx xxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx se xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx to xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
X xxxxxxxxxx na xxxxxxxx předcházející úrovně xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
V xxxxxxx, že látka xxxxxxxx mortalitu při xxxxx 5 mg.kg-1 (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx této dávce), xx třeba xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx toxicitu xxxxxxxxx xxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx z orientační x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou xxxxxx xxxxx. X ní xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx; počet xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx utracených x xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxx xxxxxx studii, xxx xxx pozorován zřejmý xxxxxxx účinek, který xxx připsat xxxxxxxxx xxxxx; časový xxxxxx xxxxx toxických účinků; xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxx, je třeba xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx hmotnosti.
Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx bolestem xxxxxxxxx testovanou látkou, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, krmení, xxx.,
- experimentální xxxxxxxx,
- úrovně xxxxx (včetně vehikula, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx,
- ve formě xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; změny xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx zvířat x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx, stupeň a xxxxxx účinků),
- xxxxxx průběh xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx úhynu xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- pitevní xxxxxx,
- všechny histopatologické xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, včetně xxxxxxxx xxxxxx toxicity x xxxxxxxxxxxxxx dávkové hladiny xxxxxxxx v testu.
3.2 Xxxxxxxxx a interpretace
Xxxxx | Xxxxxxxx | Interpretace |
5 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Méně xxx 100 % xxxxxxx 100 % přežití, xxx xxxxxx toxicita 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx toxicita | Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx Xxx výsledky při 50 xx.xx-1 |
50 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Viz xxxxxxxx xxx 5 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; není xxxxxx xxxxxxxx | Látky, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx x 500 mg.kg-1 | |
500 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % přežití | Xxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x 50 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; není xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, které xxx xxxxxxxxx za xxxxx xxx významné xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx x 2000 xx.xx-1 | |
2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti | Méně xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxx výsledky x 500 xx.xx-1 Látky, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx |
B.1. xxxx XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX XXXXXXXXX TŘÍDY XXXXXX TOXICITY
1. METODA
1.1 Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx toxicity xxxxxxxxx xxxxxxxxx jak xxx xxxxxxxxxx rizika, xxx xxx účely klasifikace xxxxxx.
Xxxxxx používá tří xxxxx stanovených xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx výsledků xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx popsaný xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx lze xxxxxx buď jako xxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx pro xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx, pokud xx xxxxxxx nebo xxxxxxxx další xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxx xxxxxx pro xxxxxxx přesné XX50. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, ve kterém xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xx i x této metody xxxxxxx xxxxxxxxx účinku. Xxxxxxxx xxxxx mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx mohlo xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx x metodě B.1. Hlavní xxxxxxx xxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx zvířat xxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx)(B.1) x xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx fixní xxxxx (B.1 bis).
1.2 Princip xxxxxxxxx metody
Látka xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat x xxxxx ze xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx provádět předběžnou xxxxxx. Přítomnost nebo xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxx k xxxxxxxx látce xxxxxxxx x dalším kroku, x.x.
- není xxxxxxxxx xxxxx xxxxx testování;
- xxxxx krok bude xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx s vyšší xxxx xxxxx úrovní xxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx xx laboratorní podmínky. Xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx, ale xxxxx zvířat x xxxxx xxxxx musí xxxxxxx jasné xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx zvířatům x xxxxxx dávce xxxxxxxxx sondou xxxx xxxxxxx kanylou.
Pokud xx xx třeba, testovaná xxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx roztoku/suspenze, xxx použití roztoku/emulze x jedlém rostlinném xxxxx (např. xxxxxxxxxx) x xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxx toxická xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx (xxxx. potkani přes xxx x xxxx 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx xx xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx důvody xxxxx xxxx. Samice musí xxx nullipary a xxxxx xxx xxxxx.
Xx xxxxxxx studie by xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxx xxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx pohlaví. V xxxxxxx kroku může xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx tří xxxxxxx xxxxxx, tzn. 25, 200 a 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxx xxx taková, xxx x největší xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx alespoň xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx podána. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx příslušného xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 1.
Xxx xxxxx xxxxxxx x výchozí xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx dostupné xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxx informace xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx je xxxxxxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), xxx xx xxxxxxx limitní test. Xxx xxxxxx žádné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, doporučuje xx - x xxxxxxx xx pokusná zvířata - xxxxxx xxxxxxx xxxxx 200 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
X některých xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx zpřesnit xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xx dovoluje xxxx x třemi pevnými xxxxxxxxx úrovněmi xx xxxx 25, 200 x 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx o xxxxxx testování xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx dávkách xx xxxx 5, 50 nebo 500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxxx dávky, x xxxxxxx xx xxxxx, xx způsobují xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx trvání x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Testování na xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx další xxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx, xx zvířata xxxxxxxxx dávku přežila.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xxxx x jedinou xxxxxx xxxxx xx výši 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx zvířatech xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x uhynutí xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxx další xxxxxxxxx provést při xxxxxxx 200 mg.kg-1 (xxxx 500 mg.kg-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx pozorovat xxxxxxx xx xxxx 14 xxx, kromě xxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxx pozorování x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx ochrany xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx předem xxxxx; xxxx xxx prodlouženo xxxxx toxických reakcí, xxxx xxxxxx xxxxxxx x délky xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx dobu, xxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx-xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx pozorování xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3 Xxxxx postupu
Po xxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxx látky xxxx xxxxxxx bez xxxxxxx xx dobu xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Xxx je xxxxx podávána xx xxxxxxx během xxxxxx xxxx, může xxx - x xxxxxxxxxx xx délce xxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x vodu.
Maximální objem xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx velikosti xxxxxxx. U hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x tělesné hmotnosti, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 ml xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Rozdíly x xxxxxxxxx objemu xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx úrovních xxxxx. Xxxxxxxx není xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx v Xxxxxxx 1.
1.3.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx za xxxxx xxx (xxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxx, a xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Zvířata, která xxxx nalezena v xxxxxxxxx stavu, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx stresu, xx třeba xxxxxxx xxxxxxx: tato xxxxxxx xxxx hodnocena xxxxxx xxxx xxxxxxx uhynulá.
Ať xx byla zvířata xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxx je třeba xxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx zvířata xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xx xxxx x xxxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxxx, a xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx, vegetativním x xxxxxxxxxx nervovém xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx, slinění, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x kómatu.
Veškerá xxxxxxxxxx xxxx systematicky xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx jsou xxxxxx xxx každé xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxx zvážena xxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxx nejméně jednou xxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxx zvážena xxxx xxx, xxx budou xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3.3 Xxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx studii, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx zvíře xxxxxx. Xxx získání dalších xxxxxxxxxx informací xx xxxxx xxxxxx mikroskopické xxxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxx makroskopické xxxxxxxxx x zvířat přežívajících 24 a xxxx xxxxx.
2. SBĚR X XXXXXX ÚDAJŮ
K xxxxxxxxx xxxx být xxxxx x xxxxxx jednotlivém xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx údaje shrnuty xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx vykazujících xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů, xxxx úmrtí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx, časový xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx klasifikaci xx xxxxxxx x Xxxxxxx 2.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x průběhu pokusu
Zpráva x pokusu obsahuje xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx získány:
Pokusná xxxxxxx:
- živočišný druh/kmen;
- xxxxxxxxxxxxxxx stav xxxxxx, xx-xx znám;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- zdroj, podmínky xxxxx, potrava xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx začátku xxxxx, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx voda;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx objemů x xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x kvalitě xxxx (xxxxxx xxxxx x zdroje);
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxxx dávky.
Výsledky:
- xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx podle xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx (xxx. zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx úmrtí, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx);
- xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxxxxxxxxxx u každého xxxxxxx;
- pitevní xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx a interpretace:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxx XXXX XX 423.
XXXXXXX 1
XXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxx xxxx xxxxxxx x xxxx 1.4.2.3, xxxxxxx xxxxx xx měla xxx xx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx úrovní, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx uhynutí xxxxx x některých xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxx dávky xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- vztah struktury x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x
- xxxxxxxxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx stanovují xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx dávku. V xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxxx šipky.
3. Pokud xx aplikaci xxxxxxx xxxxx 25 nebo 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx se xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx 5 zvířat xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx pitvou xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx pokračovat x testování xx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4. Xxxxx xx dávce 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jedno xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx se předpokládat, xx xxxxxxx XX50 xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, je třeba xxxxxxx xxxxxxxx reakce xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx zvířat xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx XX50 ve xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, nebo mohou xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx úrovni xxxxx.
5. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx stanovenými xxxxxxx (xxxxxxxx 2). Xxxx xxxxxxxx xx možno xxxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx dávky x daném bodu xxxxxxxxxxxxx procesu, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx testování xxxxx varianty 1.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 25 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti
V xxxxxxxxx xx udána xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx (1 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx zvířat (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx uhynulých xxxxxx se v xxxxxxxxx pokračuje xx xxxxx xxxxx až xx dosažení šedého xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx konečných hodnot xxxxxxxxx x příslušném xxxxx rámečku xxxx xxxxx způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx testu s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkou.
Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx udána xxxxx, xxxxx zvířat x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx první, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx zvířat (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat se x xxxxxxxxx pokračuje xx xxxxx xxxxx xx xx dosažení xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx xxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x příslušnou xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx testu: Klasifikace xx provede na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x příslušném xxxxx rámečku.
Postup testování x výchozí xxxxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X rámečcích xx xxxxx dávka, počet xxxxxx a pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx druhé).
Pod xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Podle xxxxx uhynulých zvířat xx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxx xxxxx až do xxxxxxxx šedého xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Dodatku 2.
Xxxxxxxx 2 - Pokračování xxxxx s příslušnou xxxxxxxxxx dávkou.
Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx.
XXXXXXX 2
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, počet xxxxxx x pohlaví (1 - pohlaví xxxxxxx jako xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx "ŽÁDNÉ XXXXX TESTOVÁNÍ" x xxxxxxxxxx tohoto xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1 xx příslušná xxxxx sleduje, xxxxx xx nedosáhne xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Hodnoty x xxxxxxxxx xxxxxxxxx horní xxxxxxx xxx příslušný xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx XX50 xx xxxxx xxx hodnota x xxxxxxxxxx rámečku vlevo.)
(a) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx dávkou 200 xx/xx xxxxxxx hmotnosti
(c) Xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxx hmotnosti
Interpretace xxxxxxxx založených xx xxxxxxxxx variantě 1
x) Xxxxxxx dávka 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
&xxxx;
x) Xxxxxxx dávka 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
x) Xxxxxxx dávka 2000 xx/xx hmotnosti
X.2. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Xx užitečné xxxx xxxxxxx xxxxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (jsou-li xxxxxxxxxxxx) testované xxxxx
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx studované xxxxx po xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x xx xxxxx koncentraci v xxxxx xxxxxxx. Potom xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx x případy xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx pokusu xxxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx xx závažnými x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx xxxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx nemají xxxxxxx x takových xxxxxxxxxxxxx x takovým xxxxxxxx, x kterých xx známo, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx leptavých nebo xxxxxxxxxx vlastností.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx před xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x jakých budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx zvířata náhodně xxxxxxx xx potřebného xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx používaného expozičního xxxxxxxx, xxxx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pevné testované xxxxx xx třeba xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba, xxxxx xx x testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tak, aby x ovzduší xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; x xxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem. Pokud xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx být x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx historická xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Počet x xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nejméně 10 hlodavců (5 xxxxx x 5 xxxxx). Samice musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x akutních testech xxxxxxxx xxxxxxx vyšších xxxxx, než xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx zvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx volit a xx xxxxx xxxxxxx, xxx nebyly xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx podávání xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Má xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, a xxxx xxx xxxxxx odstupňovány xxx, xxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a mortality. Xxxxxxx údaje xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x, xxxxx xx xx xxxxx, xxxx umožnit xxxxxxxxx XX50 s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Nedojde-li po 4 xxxxxxxx xxxxxxxx 5 samců x 5 xxxxx plynu x koncentraci 20 xx.x-1 xxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx látky x xxxxxxxxxxx 5 xx.x-1 (xxxx - x případech, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx - xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dosažitelné xxxxxxxxxxx) xxxxx 14 xxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx sledovanou xxxxxx, považují xx xxxxx pokusy xx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxx 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Xxxxxxxx
Pro xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zařízení, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx nejméně 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx, je xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx se xx xxxxxxx omezovalo xxxxxxxxxx xxxxxx x aby xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx byla xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x inhalačním xxxx xx neměl x zásadě celkový xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Je xxxx možné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx orálně-nasální, xxxxxxx hlavy nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx příjem xxxxx xxxxxx cestami.
1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx nejméně 14 xxx. Xxxxx ji xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxx vzniku x xx trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx potřeby xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx objeví x opět xxxxxx xxxxxxx otravy, stejně xxxx xxxx do xxxxxxx, zvláště xxx, xxx je xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx zváží. Xxxxxxxx xx xx dobu 4 hodin xx xxxxxxxx rovnováhy xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx mělo xxx rychlé. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx má xxx 22 oC ± 3 x X. Relativní xxxxxxx xx xxx ideálně xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx případů, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x aerosoly). Udržování xxxxx negativního xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) zabrání xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx expozice xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Xxxxxxxxx xx vhodné xxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx stabilních xxxxxxxx xxxxxxxx bude xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xx zajišťovat homogenní xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx.
Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:
(a) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně),
(x) xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx v dýchací xxxx alespoň třikrát xxxxx expozice (xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxxxx xx xxxxxx koncentraci, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Během xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx odchylovat od xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ±15 %. U některých aerosolů, kde xxxx xxxxxx regulace xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Po xxxxx xxxx trvání xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx to xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx x aerosolů, měří xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx, xxx xx pokus xxxxxxxx (ale xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu),
(c) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx se měří xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxxxx zvíře xx xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx často. Xxxxxxxxx xxxxxx každý xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx ztrát xxx studii, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxx xxxxxxx xx utracením xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x chování. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, křečovým xxxxx, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx expozici xxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají xx zvláštním xxxxxxxx xx všem xxxxxx xxxxx i dolní xxxxx dýchacího xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx tkáně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. Z xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity, popis xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx nálezy. Xxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx jeden xxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxx utracena xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vyvolaná xxxxxxxxxx xxxxxx. XX50 se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx zvířete xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx poškození, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x všech dalších xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, atd.,
- xxxxxxxx pokusu: popis xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx systému a xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x expozičním boxu, xxxxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxx popsat xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx se sestaví xx tabulky x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxx:
x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx;
x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx;
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx do inhalačního xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx);
Pozn.: xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látek x xxxxxxx (xxxx. xx xxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx koncentraci xxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, koncentraci xxxxxx látky xx xxxxxxxx.
x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxx;
e) skutečná xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
x) xxxxxxxxxx xxxxxx aerodynamického xxxxxxx (XXXX) x geometrická xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX);
x) doba do xxxxxxxx rovnováhy;
x) xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx toxických xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx expozice (xx. xxxxx zvířat, která x xxxxxx uhynula xxxx byla xxxxxxx xxxxxxxx; počet zvířat x příznaky xxxxxxxx; xxxxx exponovaných xxxxxx);
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx jejím xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx;
- xxxxxxx XX50 xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx doby xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx spolehlivosti xxx XX50 (xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx);
- křivka závislosti xxxxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxxx (pokud to xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx);
- pitevní nálezy;
- xxxxxxx histopatologické xxxxxx;
- diskuse xxxxxxxx (xx xxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxx xxxxxxxxxx utracení xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxx LC50);
- interpretace xxxxxxxx.
B.3. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx na xxxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx zvířat, a xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xx účinky x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx před xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx srst xxxxxx xx xxxxxx ostříhá xxxx oholí. Xxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx xx xx, xxx se xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx) xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se připraví xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxxx x pevnými xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x práškové xxxxx, xx třeba látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx vehikulem, xxx byl dobrý xxxxxxx x xxxx. Xxx použití xxxxxxxx xx nutné xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx průnik xxxxxxxxx xxxxx kůží. Xxxxx xxxxxxxx by xx xxx řídit xxx, v xxxx xxxxx se může xxxx látka xxxxxx xx xxxxx s xxxxxxx kůží, x xx všech relevantních xxxxxxx vybrat ten, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx kůží. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxx xx dospělých xxxxxxx xxxx králíků. Xxx xxxxxx i xxxx živočišné druhy, xxxxx xxxx xxx xx důvody. Xx xxxxx volit xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro každou xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx je x xxxxxxxxx informace, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxxxx.
Poznámka: Xxxxxxxxx-xx xx v akutních xxxxxxx toxicity zvířata xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, mělo xx xx zvážit xxxxxxx menšího počtu xxxxxx. Xxxxx je xxxxx pečlivě xxxxxx x xx třeba zajistit, xxx xx nepřekročily xxxxx xxxxxxx xxxxx. X těchto xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx podávání xxxxxxxxx xxxxx testované xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, nejméně xxx, x xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se zřetelným xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků x mortality. Při xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx je třeba xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxx údaje musí xxxxxx xx znázornění xxxxxx xxxx dávkou x xxxxxxx, x xxxxx xxxxx umožnit xxxxxxxxx XX50 s xxxxxxxxxxx spolehlivostí.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx nejméně 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx xxxxxxxxx 5 xxxxx a 5 xxxxx s xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 14 dní. Xxxxx ji xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje otravy x xxxxxx fáze xxxxxxxx. Xxxx pozorování xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Rozhodující xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxx do xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x výskytu xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Zvířata se xxxxxxx jednotlivě x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx nanese rovnoměrně xx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx 10 % celkového povrchu xxxx. Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx; xxxx by xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx co xxxxxxxx část této xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxxx plochu je xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx mulový xxxxx x xxxxxxxxx látka xxxxxxxx a xxx xx zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx nelze xxxxxxxxx.
Po uplynutí xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pokud možno xxxx xxxx jiným xxxxxxx způsobem xx xxxxxxx očištění xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx každé xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx záznamy. Xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx často. Nejméně xxxxxx každý xxxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxx pečlivé klinické xxxxxxxxx. Xxxxx každodenní xxxxxxxxxx x odpovídající xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx x xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxxxx přežijí až xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx tkáně xx xxxxxxxx pro histopatologické xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx podá xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxxxx, zda xxxxxxx xxxxxxx pohlaví xxxxxx výrazně xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Pokud xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, že zvířata xxxxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx, testování xx zvířatech druhého xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx sestaví do xxxxxxx. Z xx xxxx být pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx jednotlivých xxxxxx, počet zvířat x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x pitevních xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx bezprostředně před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx v týdenních xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x zaznamenat, přežijí-li xxxxxxx xxxx než xxxxx den. Xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxxxx xxxxxxxx utracena x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx uhynutí xxxxxxxx xxxxx xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx metodou. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx zvířat testované xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx všech xxxxxxxxxx včetně xxxx xxxxxxx, klinických xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lézí, změn xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x všech ostatních xxxxxxxxx účinků.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx atd.,
- xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx užito) x koncentrace,
- xxxxxxx pokusných xxxxxx,
- tabulky toxických xxxxxx xxxxx pohlaví x podle xxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx utracených xxxxx testu; xxxxx xxxxxx x příznaky xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx po podání xxxxxxxxx xxxxx, důvody x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx pozorování,
- hodnota LD50 xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x to xxx 14xxxxx pozorování (s xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx LD50 (xxxxx xxx lze xxxxxxxx),
- křivka xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx x xxxx xxxxxxxx (xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx testů xx druhém pohlaví,
- rozbor xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ovlivnění xxxxxxxxx xxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.4. XXXXXX XXXXXXXX (KOŽNÍ XXXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx
Je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx látce x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, které xxxxx vyvolat xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx posouzení, xxx je xxxxxx xxxxx test, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx další xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti x xxxxxxxx reaktivita. Xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx (xxxx. xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX xxxxx xx xxxxx 11,5) xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx kožní xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
x) Jestliže xxxx xxxxxxxx přesvědčivé xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx vyžadován xxxxx xxxx.
x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx látka x xxxxx xxxxxx toxicity xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx při limitní xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kůže, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx dráždivost. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx toxické xxx dermální cestě xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx slouží xxxx xxxxx vlastní kontrola. Xx xxxxxxxxx xxxx xx odečte, xxxxxxxxx x následně xxxxxx xxxxxx podráždění, xxx xxxx možno xxxxxxx xxxxx posouzení účinků. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx možné xxxx xxxxxxxxx také xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími příznaky xxxxxx x bolesti xx xxxxx humánním xxxxxxxx utratit.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Asi 24 hodin před xxxxxxxxx testu xx xxxx zvířat na xxxxxx ostříhá xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx xx to, xxx xx nepoškodila kůže (xxxx. xxxxxx). Je xxxxx použít pouze xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx kůží.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxxx jsou xxxxxxxxxx x některých obdobích xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxxxx s xxxxxxx látkami, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx, je třeba xxxxxxxxxx xxxxx dostatečně xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx vhodným vehikulem, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx použití vehikula xx nutné xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx na podráždění xxxx testovanou látkou. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx nezředěné.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx savců, xx xxxx třeba xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Jestliže xx x xx xxxxx screeningových testů xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx vyvolávat xxxxxxx (xxxx. xx xxxxxxx), xx třeba uvážit xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx leptavé xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxx na dvou xxxxxxx xxxxxxxxx.
Pro xxxxx test jsou xxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxxxx zvířata. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro neošetřenou xxxxxxxxx xxxxxxx, pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx zvláštní xxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxx místo kůže 0,5 xx kapaliny xxxx 0,5 x xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Dobu xxxxxxxxxx není možno xxxxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vratnost xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx xx aplikaci.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx (xxx 6 cm2) xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx nedráždivou xxxxxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx testovanou xxxxx xx mul, x xxx xxx xxxxxxxxx xx xxxx. Xx xxxx trvání expozice xx třeba přidržovat xxxxxx xxxxx na xxxx vhodným okluzivním xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Je třeba xxxxxxxx tomu, aby xx xxxxx dostalo x xxxx x xxxxx přijmout xxxxxxxxxx xxxxx orálně nebo xx xxxxxxxxx.
Na xxxxx xxxx expozice xx třeba odstranit xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, pokud je xx možné, nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx, xxx nebyla xxxxxxxxx případná xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Doba expozice xx obvykle 4 xxxxxx.
Pokud existuje xxxxxxxxx, že xxxxx xxxx vyvolat xxxxxxx (xxxx. tím, xx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx zkrátit xxxxx xxxxxxxx (xxxx. xx 1 xxxxxx xxxx 3 xxxxxx). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 3 plátky xxxx současně, xxxxx xx xxxxxx dermální xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx plátek xx odstraní xx 3 minutách. Xxxxx xxxx pozorována závažná xxxxx reakce, odstraní xx druhý xxxxxx xx 1 xxxxxx. Xxxxx pozorování x xxxx xxxx xxxxxxxxx, xx je nezbytná 4xxxxxxxx xxxxxxxx a xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zacházení, xxxxxxxx xx třetí xxxxxx xx 4 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxx kůže. X případě, že xxxx možná 4xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxx s xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx zvířat; pokud xx xxxx kontraindikováno x humánních důvodů (xxxx. xxxxxxxx xx 4 xxxxxxxx expozice xx pozorována xxxxxxx xxxx).
Jestliže xx xxxxxxx kožní xxxxxx (xxxx. xxxxxxx) xxxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx xxxx po 1 xxxxxx, xx test xxxxxxxx xxxxxxx.
Za xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx použití a xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x vyhodnocení
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxx kůže xx 60 xxxxxxxx a xxxx 24, 48 x 72 hodin xx odstranění xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx podráždění kůže xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 1. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx kůže xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx poleptání (xxxxxxxx xxxxxxxxx kožní xxxxx) x jiné toxické xxxxxx. X objasnění xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx zabarvením xxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx měření tloušťky xxxxx xxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxx pokusné xxxxx xxxxxx stupeň xxxxxxxxxx posouzením erytému x edému xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx závažné xxxx, popis xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx, technik xxxxxxxx x xxxxxxx kůže, xxx xxxxxx: okluzivní, xxxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx reakci xxx každé jednotlivé xxxxx xxx každém xxxxxxxxxx (xx 1, 24, 48 a 72 xxxxx xxx. xx odstranění xxxx),
- popis xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx podráždění x xxxxxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxx všech xxxxxxx toxických účinků xxxxx xxxxxxxxxx xxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- vyhodnocení výsledků.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx reakce xxxx
Xxxxxxx | |
1. Hodnocení xxxxxxx x xxxxxxxxx | |
1.1 Žádný xxxxxx | 0 |
1.2 Velmi xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx viditelný erytém | 2 |
1.4 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx | 3 |
1.5 Xxxxx xxxxxx (silné zrudnutí) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) znemožňující xxxxxxxxx xxxxxxx | 4 |
2. Hodnocení xxxxx | |
2.1 Žádný xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx xxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
2.3 Xxxxx xxxx (xxxxxx xxxx zřetelné, xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vyvýšením) | 2 |
2.4 Mírný xxxx (xxxxxx xxxxxxxx asi x 1 xx) | 3 |
2.5 Xxxxxxx xxxx (xxxxxxx více xxx 1 xx x otok přesahujíce xxxxxxx exponované xxxxxx) | 4 |
4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (IKI)
XXX xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx ze xxxxxx stupně xxxxxx xxx xxxxxx x xxxx x jednotlivých xxxxxxxxxxx odečtu x xxxxxxx jedince x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx u všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx průměr.
Xxxxxxxxxxx | XXX |
xxxxxxxx | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx xxxxxx | 0,5 &xx; IKI ≤ 3 |
xxxxxxx dráždí | 3 < XXX ≤ 5 |
xxxxx xxxxxx | XXX &xx; 5 |
X.5. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXX XXXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
1.1.1 Výchozí xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx všechny xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx snížit na xxxxxxx testování látky xx podmínek, xxxxx xxxxx vyvolat xxxxx xxxxxx. X xxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
a) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx. xxxxx kyselé nebo xxxxxxxx xxxxx, xxxxx - xxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx x oku xX rovné xx xxxxx 2 xxxx xX rovné xx xxxxx 11,5, xxxx xxxxx testovat, pokud xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx třeba xxxx x xxxxx xxxx alkalickou xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx silně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx testovány xx dráždivost xxx xxx, protože xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx účinky xx xxx xxx testování xxxxx metodou.
x) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxx dráždivosti. Xxxxx, xxxxx vykazovaly xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx dále xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, že xxxxx xxx na oči xxxxxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxx aplikuje xx jednoho oka xxxxxxxx xxxxxxxx zvířatům, xxxxxx xxxxxxxxxxxx oko xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx stanovených intervalech xx odečte a xxxxxxxxx stupeň xxxxxxxxxx x xxxxxx se xxxx xxxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx pozorování musí xxx dostatečně xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx také xxxxxxxx xxxx nevratnost xxxxxxxxxxxx účinků.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx xxxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
24 xxxxx xxxx xxxxxx xx x xxxxxxx x xxxxxxxxx vybraných pokusných xxxxxx xxxxxxx vyšetření xxxx xxx. Xxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx rohovky, xx x xxxxxxxxxxx vyloučí.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat, doporučuje xx dávat přednost xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx zvířat
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvolit xxxx xx xxxxxxx zvířeti. Xxxxxxxx xxxxxxxx tohoto xxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx účinek) xxxx leptavé (irreversibilní xxxxxx) účinky pro xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, není xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx dráždivosti x xxxxxxx zvířat. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx tří zvířat. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx vyžadovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxx xxxxx
Při xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 0,1 ml. X xxxxxx xxxxx, xxxx a xxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxx objem 0,1 xx xxxx xxxxxxxx xxx 0,1 x (xxxxxxxx je vždy xxxxx uvést). Xxxxx-xx xx o xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx prášek. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, např. xxxxxxxxxxxx na měrnou xxxxxxx.
U xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxx aerosolových xxxxxxxxx xx třeba vystříknout x sebrat 0,1 xx xxxxx x xxxxxxxxxx ji do xxx xxxxx xxxxxx xxx kapaliny.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Délku xxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx vratnost xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx však xxxxx 21 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx každému xxxxxxx xx spojivkového vaku xxxxxxx xxx xxx, xx xx xxxxxx xxxxx lehce xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx. Xxxxx xx xxx xxx na 1 xxxxxxx xxxxx k xxxx xxxxxxx, xxx xx žádná xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, slouží xxxx xxxxxxxxx.
Jestliže xx xxxxxxxxxxx, že xxxxx může xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, lze xxxx instilací xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Aby xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxx, je třeba xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx a dobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx anestezovat i xxxxxxxxx oko.
Xxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxx nejdříve 24 hodiny xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, pokud xx xx považuje xx xxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx podráždění, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx s použitím xxxxxxx, xxxxxx se xxxx xx instilaci xxxxx xxxxxx oči. X xxxxxx případech xx doporučuje xxxxxx 3 xxxxxxx. Xxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxx x použitím xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x rychlosti xxxxxxx, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pozorování x xxxxxxxxxxx
Oči se xxxxxxxxx po 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx. Neprojevují-li xx xx 72 xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx pozorování xx xxxxx prodloužit, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx rohovky xxxx xxxx příznaky xxxxxxxxxx xxx xxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx xxxxx změn x jejich xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx x spojivce xx xxxxx zaznamenat x xxxxx ve xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx oka xx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx stanovit xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxxxx. (Klasifikace xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx pomůcku xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.)
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx lupy, ruční xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx po 24 hodinách xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx mimoto xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Údaje xx sestaví do xxxxxxx. Z xx xxxx xxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x daném xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Je třeba xxxxx popis stupně x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx závažných xxxx x všechny mimooční xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),
- experimentální xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností testované xxxxx),
- v xxxxxxxxx formě xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. xx 1, 24, 48 x 72 hodinách)
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, charakteru x xxxxxxxxx zjištěného xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx oblasti xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx body (1, 24, 48 x 72 hod.), xxxx. xxxxxxxxxx lampa, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx.,
- popis všech xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Stupnice xxxx xx xxx
Hodnota | |
X. Xxxxxxxx - xxxx | |
Xxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxx zahrnující xxxxxx | 1 |
Xxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx | 2 |
Xxxx způsobující xxxxxxxx víček na xxxxxxxx | 3 |
Edém xxxxxxxxxx xxxxx více xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxx | 4 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxx | |
Xxxxxx není xxxxxxxx | 0 |
Slabé xxxxxx (nutno xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx koutku) | 1 |
Slzení se xxxxxxxxx víček x xxxxx x blízkosti xxx | 2 |
Slzení xx xxxxxxxxx xxxxx x srsti x xxxxxxx xxxxx xxx | 3 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxxx | |
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx oproti xxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx jednotlivých xxx nesnadné, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx | 2 |
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx barva | 3 |
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx | |
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx duhovky, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxx cév xxxxx xxxxxxx (jedna xxxx xxxx těchto xxxxxxxxxxxxxx), xxxxxx xx xxxxxx je zachovaná, xxxxxxxx xxxxxxxx | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx a hemoragie | 2 |
x duhovce (xxxxx nebo xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx) | |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx oblast je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx viditelné | 1 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxx, snadno xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx duhovky xxxxx xxxxxxxx | 2 |
Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx nejsou xxxxx xxxxxxxxx; obrys xxxxxxx stěží xxxxxxxxx | 3 |
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, duhovka je xxxxx xxxxxxxxxxx | 4 |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Neprůhlednost xx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx je ≤ 1/4 xxxxxx xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 xxxxxx xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; plocha xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 3 |
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx > 3/4 xxxxxx rohovky | 4 |
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (IOA)
Xxxxxxxxxxxx xxxxx oční xxxxxxxxxxx (XXX) xxx xxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vypočte xxxxx xxxxxx
XXX = 2.(X + X + X) + 5.X + 5.E.F
Xxxxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vypočte xxx xxxxx xxxxxxxx hodnocení xxxx průměr x XXX.
Xxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx XXX xx xxxxx nejvyššímu XXX xxxxxxxxxx v xxxxxxx testu
4.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx | IOA |
xxxxxxxx | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
xxxxxx | 15 - 29,9 |
xxxxx dráždí | 30 - 59,9 |
velmi xxxxx dráždí | 60 - 79,9 |
xxxxxxxx xxxxxx | 80 – 110 |
X.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. METODA
1.1. Xxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxx xxxx považovány xx významné pro xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, která xx xxxxxxxxxx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx a která xx se hodila xxx xxxxxxx látky.
Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx uvažovat xxxxxxx xxxx např. xxxxxxxxx charakteristiky xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx lze xxxxxxxx xx xxxxx s xxxxxxxx, ve xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx Freundově kompletním xxxxxxxx (XXX), x xx xxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx s xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx senizibilizačního xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xx morčatech (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) je xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Ačkoliv x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx několik xxxxxxx xxxxx, xx XXXX xxxxxxxxx xx preferovanou xxxxxxxx x xxxxxxxx.
X mnoha skupin xxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxx xxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xx xxxx Xxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxxxx xx xxxx citlivé.
X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx volbu Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx aplikací xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxx odborné xxxxxx.
X xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou popsány xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx (GPMT) x Xxxxxxxxx test. Lze xxxxxx i xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx screeningový xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx možno xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx potenciální xxxxxxxxxxxxxx xxx dalšího xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx na morčeti, xxx jak je xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Definice
Xxxxxxxxxxxxx kůže: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx dermatitida) je xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx látku. X člověka mohou xxx xxxxxx charakterizované xxxxxxxx, xxxxxxxxxx kůže, xxxxxx, xxxxxxx, puchýřky, xxxxxx (velkými xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx těchto xxxxxxxx. X jiných xxxxxxxxxxx druhů se xxxxx xxxxxx lišit x může xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx: experimentální xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxx nejméně xxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx rozvinout stav xxxxxxxxxxxxxxx.
Provokační expozice (xxxxxxxxx): experimentální expozice xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx, zda subjekt xxxxxx reakcí přecitlivělosti.
1.3 Xxxxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx x spolehlivost xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxx mírný až xxxxxxx xxxxx senzibilizační xxxxxx xxx kůži.
X správně provedeného xxxxx xx očekává xxxxxx na xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % x xxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxx 15% u xxxxxx xxx adjuvans.
Xxxxxxxx xx dává xxxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxx XXX | Číslo EINECS | xxxxxxxx xxxxx | xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxx |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | xxxxxx |
94-07-7 | 202-303-5 | Xxxxx xxxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxx | xxxxxxxxx |
Mohou xxxxxx xxxxxxxxx, kdy xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Pokusná xxxxxxx xxxx nejprve xxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx případně xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Po období 10 až 14 xxx (xxxxxxxx xxxxxx), x průběhu xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx provokační xxxxx. Xxxxxx a xxxxxx kožní xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x testovaných xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx indukce x xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx za nezbytné xxxxxxxxx testovanou látku, xxxxxxx se to x xxxxxxxx vody xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, aby nebyla xxxxxxxx vzniklá kožní xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.1 Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx (XXXX)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx albinotická morčata xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx aspoň 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx stříháním, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx x na xxxxx xxxxx.
1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx nullipary a xxxxx xxx březí. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx 10 zvířat x nejméně 5 xxxxxx xx třeba x kontrolní skupině. Xxxxxxx-xx se xxxxxxx xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx možné dojít x xxxxxx, že xxxxxxxxx látka je xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx dalších xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx působící xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.Xxxx provokační koncentrace xx xxxxxxx maximální xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx potřeby je xxxxx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx třech xxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxx xxx uvážit xxxxxxx xxxxxx, kterým bylo xxxxxxxxxx XXX.
1.5.1.3 Popis xxxxxxx
1.5.1.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Následující 3 xxxxxxx subkutánních xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx adjuvans (FCA) xxxxxxx s xxxxx xxxx fyziologickým xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxxxxxx 2: testovaná xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ve zvolené xxxxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxx xx směsi FCA x xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Pro xxxxxxx 3 xx xxxxx ve vodě xxxxxxxxx rozpustí před xxxxxxxx x XXX xx vodné xxxx. Xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxx látky xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxx xxxxxxx 3 xx xxx xxxxxx jako xxx xxxxxxx 2.
Xxxxxxx 1 x 2 xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx a xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx 3 xxxxxx xx kaudální části xxxxxxxxx xxxxxx.
Den 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx injekcí, xxxxx po 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxx u testovaných xxxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx adjuvans (XXX) smíšené x xxxxx xxxx fyziologickým xxxxxxxx v objemovém xxxxxx 1:1;
Xxxxxxx 2: neředěné vehikulum;
Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) se směsí XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx
Přibližně dvacet xxxxx hodin před xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx látka není xxxxxxxx xxx xxxx, xx na testovací xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx oholení xxxxx 0,5 xx 10% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxx navození xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx vehikulu xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 cm), xxxxx xx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 48 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx důvody; xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx vhodného xxxxxxxx; xxxxxxxx lze xxxxxxxxx xxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx skupina
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx zbaví xxxxx. Xxxxxxx vehikulum xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx skupiny na xxxx 48 xxxxx.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. xxx - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xx jeden xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx nebo x xxxxxxx x na xxxxx xxx xx xxxxxxx způsobem xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (pokud xx to třeba). Xxxxxx xx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x kontaktu x xxxx po 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx plocha xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx oholí x x případě xxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx třech xxxxxxxx (xxxxxxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx provokační dávky) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx;
- xxxxxxxxx 24 xxxxx po xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxx (72 xxxxx).
Xxxxxxxxxx xx systém "xxxxxxx xxxxxx" x testovaných x kontrolních xxxxxx, xxx pozorující xxxxx xxxx, které xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx k xxxxxxxxx výsledků xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx potřeby xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x vehikulem. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx. histopatologického xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxx
1.5.2.1 Příprava
Zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx podmínky xx xxxx aspoň 5 dnů před xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx nebo chemickou xxxxxxxx, v xxxxxxxxxx xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Xx třeba xxxx na xx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx kůže. Zvířata xx zváží před xxxxxxxxx xxxxx x xx konci xxxxx.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Používají xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx 20 zvířat x xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx 10 zvířat x xxxxxxxxx skupině.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx úrovně
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xx takovou xxxxxx, xxxxx je nejvyšší xxxxxxxx xxxxx, xxx xx velmi silné xxxxxxxxxx xxxx. Jako xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx maximální koncentrace, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. V případě xxxxxxx je možno xxxxxx xxxxxxxxxxx stanovit x předběžném xxxxxx xx xxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxx použít xxxx xxxx xxxxxxx nedráždící xxxxxx xxxxxxxxxx jako xxxxxxxx. Pro xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 80% xxxxxx xxxxxx/xxxx xxx indukci a xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Xxxxxxx
Den 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx bok xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xx xxxx odbornými xxxxxx; kapaliny xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
Xxxxxxxx xxxx je xxxxxxxx xx testovací xxxxxx x přidržován x kontaktu x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx obvazem po xxxx 6 xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxxx je bavlněný xxxxxxxxx, ať xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxxx 4 - 6 xx2. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx být xxxxx další expozice.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x testované xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx není xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx skupiny xxx xxxxxxxx.
6. - 8. a 13. - 15. xxx - Testovaná x xxxxxxxxx skupina
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxx 0 xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx srsti) 6. - 8. xxx x xxxxx 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx
27. - 29. xxx - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxx testovaných x xxxxxxxxxxx zvířat je xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Okluzivní xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx koncentraci xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx aplikovat xxxxxxx plátek s xxxxxxxxx. Překrývací xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx vhodným xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.
1.5.2.3.3 Pozorování x xxxxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx později (přibližně 30 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx pozorují xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx dalších 24 xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 54 hodin xx xxxxxxxx provokačního xxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx pozorují x xxxxxxxxxxxxx.
Doporučuje xx xxxxxx "slepého xxxxxx" u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxx senzibilizováno a xxxxx je xxxxxxxxx.
Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx provokace), xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx později, x xxxxxxx xxxxxxx znovu x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Opakovanou xxxxxxxxx xxx také xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx skupině.
Xxxxxxx xxxxx reakce x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x provokačních xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (viz xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx nálezů xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, jako např. xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxx tloušťky kožních xxx.
2. SBĚR A XXXXXX XXXXX (XXXX X XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxx xxx každé pokusné xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx při každém xxxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX (GPMT X XXXXXXXXX XXXX)
Pokud xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx uvést xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxx (xxxx. XXXX - xxxx regionálních xxxxxxxxxxxx xxxxx, MEST - xxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx) včetně xxxxx podrobností xxxxxxx x xxxxxxxx získaných xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (XXXX a Xxxxxxxxx xxxx)
Zpráva x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx získány:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- použitý xxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx a xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
- způsob xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x technice plátkového xxxxx;
- výsledek xxxxxxx studie xx xxxxxxx x indukčních x xxxxxxxxxxxx koncentracích xxx vlastní xxxx;
- xxxxxxxx informace x přípravě, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx testované xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxx, xxxxxxx xxx indukci a xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx poslední xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx použité xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;
- všechna xxxxxxxxxx pro každé xxxxx xxxxxx systému xxxxxxxxxxx;
- slovní xxxxx charakteru x xxxxxx pozorovaných xxxxxx;
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxxxx OECD XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx vyvolaných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
1 = xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx;
2 = xxxxxxx výrazné x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx;
3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxx xxxx, kolik xxxxxx v xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx senzibilizováno, xx xxxxx xxxxxxxxxxx jako
xxxxx xxxxxxx (I. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 9 - 28 % zvířat
středně xxxxx xxxxxxx (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
xxxxx alergen (XX. xx.) - 65 - 80 % xxxxxx
extrémní xxxxxxx (X. xx.) - 81 - 100 % xxxxxx
B.7. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXX (28DENNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxx, x to xxxxx xxxxxxx jedna xxxxxx xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, která xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx během xxxxxx; xxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxx x xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Klece xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx vliv xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx označeno. Xxxxxxx 5 dní před xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu.
Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx nebo x pitné xxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností xxxxx.
Pokud je xx třeba, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx nosiči (xxxxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, pak použití xxxxxxx/xxxxxx v jedlém xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x xxx xxxxxxx x jiných xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx stabilitu látky xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx použít x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by xxxx xxxxx co xxxxxxxx xx xxxxxxx a x každém xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx věku 9 xxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxx xx nemělo xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.
Pokud xx xxxx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx před dlouhodobou xxxxxx, je xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro xxxxxx hladinu xxxxx xx použije nejméně 10 xxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvýšit xxxxxxx počet zvířat x xxxxx zvířat, xxxxx budou zabita xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx další xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 28 xxx xxxxxxxx dávku x xxxxx následujících 14 xxx po xxxxxxxx xxxxxxxx vratnost, trvání xxxx zpožděný xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Volba xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupinu. S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokusným xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx skupina, xxxxx xx aplikuje xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx, xx možno xxxxxxx limitní xxxx. Xxxxxx-xx taková xxxx x dispozici, xxx xxxxxxx předběžnou vyhledávací xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx látce xxxxxxxx xxxxxxx příbuzných.
Xxxxxxxx úroveň dávky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx uhynutí xxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxx závislost xxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (NOAEL). Xxxxxxx xx vhodný xxxx- až xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx dávek, xx xxxxx xxxxxx čtvrtou xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx mezi dávkami (xxxx. faktor xxxxx xxx 10).
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx vodě, xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx podávané množství xxxxx neovlivňovalo xxxxxx x vodní rovnováhu. Xxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx se xxxxxx xxx xxxxxxxxxx koncentrace (x xxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxx, mělo xx xx xxx xxx každý xxx xx xxxxxxx dobu x dávkování xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx studie sloužit xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx dlouhodobou studií, xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx použít xxxxxx potravy.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxxx-xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx dávce 1000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxx xxxx při takové xxxxxxxxxxx v potravě xxxx vodě, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx, x pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx provedení xxxxxxxxxxx testování při xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx platí, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx lidí xxxxxxxxxxx, xx xx třeba xxxxxxxx při vyšších xxxxxxx.
1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx je 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx dalších 14 xxx bez xxxxxxxx x cílem xxxxxxxx xxxxxxxx zpožděné xxxxxx a pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 xxx, xx zdůvodněných případech 5 xxx v xxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx by xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx na 100 x tělesné xxxxxxxxx, x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx podat x 2 xx xx 100 g xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x podávaném objemu xx třeba minimalizovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx podáván xxx objem na xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx u xxxxx dráždivých x xxxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx pozorování xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx x tutéž xxxxx xxxx a s xxxxxxxx xxxx očekávaného xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx zvířat. Xxxxxxx xxxxxxx denně xx xxxxxxx zběžná xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx silnou xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx způsobem a xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx všech xxxxxx xx provede xxxx xxxxx aplikací (za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Toto xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx xxxx. Výsledky xxxxxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, aby se xxxxxxxx pozorování xxxxxx xx nejméně; xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx znát xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x exkretů, xxxxx xxxxxxx x vegetativních xxxxxx (xxxxxx, zježení xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxx další. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, polohy, dále xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx pohybů, stereotypů x xxxxxxx (vytrvalé xxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx).
Xx čtvrtém xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx různé xxxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxx, xxxxxxx, proprioceptivní), xxxxx se síla xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx aktivita. Další xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx x literatuře (viz Xxxxxxxxx xxxx, xxxx X).
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx vynechat, xxxxx 28xxxxx studie xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx následující xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (90denní); x xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx studie. Xxxxx x x xxxxx xxxxxxx jsou xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx výběr xxxxx xxx subchronickou xxxxxx.
Výjimečně lze xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx takové příznaky xxxxxxxx, které xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx a xxxx
Zvířata xx xxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxx nejméně xxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx zahrnuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx nebo x xxxxxxx xxxxxxxx zvířete, xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx analýza
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, zvláště xx játra x xxxxxxx, xx xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxx xxxx nebo x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx zvířat uhynulých xxxx xxxxxxxxxx během xxxxxx). Doporučuje xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx noc xxxxxxx krve1). Vyšetření xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, kreatininu, xxxxxxxxx xxxxxxxx, albuminu, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx indikujících xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, aspartátaminotransferáza, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, gama xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx). Zaměření xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxx jiného xxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx x některých xxxxxxxxx poskytnout xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x vyšetření xxxx během xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx xx xxxxx vzhled, xxxxx, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx hmotnost, xX, xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxx xxxx. xxxxxxx.
Xxxx je třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx je třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx, fosforu, xxxxxxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, specifických hormonů, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx vyšetření xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx do určitých xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, brát x úvahu použitý xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxx xxxx očekávané xxxxxx dané xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo biochemických xxxxxxxxxx, je třeba xxxxxx xxxxxx stanovení xxxxx před začátkem xxxxxx.
1) Xxxxxxxxx xx lačno xx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxx x séru x plazmě, xxxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx je xx, xx x nehladovějících xxxxxx je vyšší xxxxxxxxxxx výsledků, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx noc by xxxxx xxx xxxx xx celkový xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 4. xxxxx testu.
1.2.3.5 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se provede xxxxx, zahrnující xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, všech otvorů, xxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxx, a xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, brzlík, xxxxxxx, xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx od xxxxxxxx xxxxx x xx nejdříve po xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx tkáně xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxx xxxxx a xxxxxxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, mozečku x mostu), xxxxx, xxxxxxx, tenké i xxxxxx xxxxxx (xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, slezinu, xxxxx, xxxxxx, štítnou xxxxx, průdušnici x xxxxx (konzervované naplněním xxxxxxxx xxxxxxxx x xxx ponořením), xxxxxx x přídatné xxxxxxxx xxxxxx (např. dělohu, xxxxxxxx), xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx uzliny (xxxxxxxxxx xxxxx xxx oblast xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xxxx (x. ischiadicus xxxx n. xxxxxxxx), xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx (nebo xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx). Podle xxxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxxx orgán, xxxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx působení testované xxxxx, xx třeba xxxxxxx.
1.2.3.6 Histopatologické vyšetření
X všech xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx nejvyšší dávka, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx v xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx nutno xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx léze xx xxxxx vyšetřit.
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx do xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se zvláštním xxxxxxx xx orgány x xxxxx, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx otravy x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
X xxxxxxxxx xxxx xxx údaje x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx úmrtí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx typy xxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistickou metodu xx xxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx zvířata:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, podmínky xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxx x týdenních xxxxxxxxxxx a xx xxxxx xxxxx.
Podmínky xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;
- zdůvodnění xxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx testované látky xxx aplikaci, xxxxxxxx x přípravě xxxxx, x xxxxxxxxxx koncentracích, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- podrobné xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx látky v xxxxx xxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xx xx kg xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xxx o xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx);
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx vody (xxxxxx druhu a xxxxxx);
Výsledky:
- xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx změny;
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx;
- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxx xxxxxxxx toxicity;
- xxxxxx, závažnost x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;
- posouzení xxxxxxxxxx xx smyslové xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x motorické aktivity;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření s xxxxxxxxxxx normami;
- xxxxxxx hmotnost xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx;
- pitevní xxxxxx;
- podrobný xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx;
- údaje x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Xxxxxx:
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx je analogická xxxxxx OECD XX 407.
X.8. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Xxxx xxxxxxx xx xxxxx získat xxxxx x testované xxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx par, xxx xxxx, xxx xxxx, xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (jsou-li xxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx pokusných xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xx 28 xxx. Použije-li xx pro xxxxxxxx xxxxxx koncentrace testované xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx uhynou, i xx, xxxxx přežijí xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v podmínkách xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx třeba, xxxxx xx x testované xxxxx xxxxxx vehikulum xxx, aby v xxxxxxx xxxxxxx příslušná xxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxx xx xxxxx xxx usnadnění aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx být x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx důvody xxxxx xxxx. Xxxxxxx se xx mladých zdravých xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (pro xxxxx pohlaví zvlášť).
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxxx nejméně 10 xxxxxx (5 samic x 5 xxxxx). Xxxxxx musí být xxxxxxxxx a nesmí xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx budou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx nutno xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxxxxx vysoké xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx dobu 28 xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 dnů xxxxxxxx vratnost, přetrvávání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví).
1.3.2.3 Expoziční xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx skupiny x xxxxxx úrovní xxxxxxxxxxx a jedna xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina x xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x skupiny x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx střední koncentrace xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx než 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Ve xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x x kontrolní xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx být xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx xx být 6 xxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx možné xxxxxx x jiných xxx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Expoziční xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx expoziční xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx nejméně 12xxxx xx hodinu, aby xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx, je xxxxx xx konstruovat tak, xxx se zamezilo xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxx xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx v xxxxxx xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx boxu. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx hlavy nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx cestami.
1.3.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x zotavení x xxxxxxxxxxxx toxické účinky. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx objeví x xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.
1.3.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 14 xxx bez xxxxxxxx, x xxxxxxxxx zotavení x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx experimentu xx být 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx vlhkost xx být mezi 30 % x 70 %, s xxxxxxxx případů, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx). Xxxxxxxxx mírně xxxxxxxxxxx tlaku uvnitř xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx xx okolí. Xxxxx expozice xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Používá se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace. Doporučuje xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx získání xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu je xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dosaženo co xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Xxxxxx průtoku xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxx zóně. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx o více xxx ± 15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx možné xxxxxxxxx, se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísání. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xx prakticky xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
x) Teplota x vlhkost xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx a xx jejím xxxxxxxx xx pozorování provádějí x xxxxxxxxxxxxx systematicky; xxxxx xxxxx xx xxxx individuální protokol. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxxxxx xxxxxx x zaznamenávat xxxxxx výskyt, stupeň x trvání. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx týdně. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x spotřebu potravy. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx, xxxx např. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx zařazení.
Xx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx xx trpící xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
Xx xxxxx pokusu xx u všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx alespoň xxxxx x xxxxxx parametrů: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx známá jako xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), aspartátaminotransferáza (dříve xxxxx xxxx glutamátoxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, fosforu, xxxxxxxx, xxxxxx, draslíku, glukózy xx lačno, lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterasy.
Xxxxx biochemické analýzy xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii xx provede xxxxx. Xxxxx xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx. Orgány x tkáně (xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx x srdce, x xxxxxxx orgány s xxxxxxxxxxxxxxx změnami xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, zvážit x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xx zachovala xxxxxxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
U xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx koncentrace, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Pokud xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx skupině x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x všech xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx na orgány x xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje se xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx pokusu x xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx přípravy xxxxxx x aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxx, xxxxx xx používán. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx teploty, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx údaje: a) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx; c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx přiváděné xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx vzduchu); x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx; x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx; x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX),
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x přežití xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- statistické vyhodnocení xxxxxxxx, kde xx xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.9. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX OPAKOVANÁ XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx na xxxx xxxxx xx 28 xxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, která xxxxxxx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Krátce xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx pokusných zvířat. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxx možné, xxxx xx se xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx experimentem. Xxxxxxxxx xxxx oholení xx potřeba xxxxxxxx xxxxx týden. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (např. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nejméně 10 % povrchu těla. Xx xxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxx xxxxxx při rozhodování x xxxxxxxxx připravované xxxxxx xxxx x x velikosti krycího xxxxxx. Xxx pokusech x tuhými xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx látku xxxxxxxxxx navlhčit vodou, xxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx byl zaručen xxxxx xxxxxxx s xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx denně 5 xx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx možno používat xxxxxxx potkany, xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxx x xxxx zvířecí druhy, xxxxxx xxxxxxx však xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx začátku xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx) se xxxxxxx xxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx zabíjet x průběhu xxxxxx, xx nutno xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx další xxxxxxx (xxxxxxxxx skupině) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 28 dnů xxxxxxxx dávku a xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx sledovat xxxxxxxx, xxxxxx xxxx zpožděný xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx zvířat (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx xxxx - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 6 hodin denně. Xxxxxxxx testované látky xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx stejnou xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, aby xx udržovala xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx k tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám, x xx xx xxxxxxx množství, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x nejvyšší dávkou. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x malém xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Pokud xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxx tuto xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx více xxx 3 úrovně xxxxx, xxxx xxx vmezeřené xxxxx voleny tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Ve xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx dávkou x v xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x těžkému xxxxxxxxxx kůže, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx účinků. Xxxxx-xx x xxxxxxx poškození xxxx, je xxxxxxx xx určitých xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx jej xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxx xxxxx dávky, xxxxx xxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, není xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Je třeba xxxxxxxxxx dobu xxxxxxx x xxxx, xxx xx objeví a xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Zvířata xx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx studované látce xxxxxxx 7 dnů x týdnu xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou určena xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 14 xxx bez expozice, xxx se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo jejich xxxxxxxxxxx. Xxxx expozice xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx je třeba xxxxxxx rovnoměrně xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx asi 10 % xxxxxxx xxxx; x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx může xxx xxxx xxxxxx menší. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx největší xxxx pokusné xxxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx vrstvě.
Testovaná xxxxx je xx xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx udržována x xxxxxxxx x kůží xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plochu xx dále xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx překrýt, xxx xx mulový xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx použít x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx volnosti xxxxxx, xxxxxx immobilizaci xxxx xxxxx doporučit. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx použít "ochranného xxxxx".
Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx jiného xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxxx, xxxx, xxx a xxxxxxx x xxxx dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx nedocházelo xx xxxxxxx zvířat, xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx chybného xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx satelitních xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x pitvat.
Xx xxxxx xxxxxx xx x xxxxx zvířat xxxxxx kontrolních xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx alespoň xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jeden z xxxxxx parametrů: alaninaminotransferáza x xxxx (dříve xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (dříve xxxxx xxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx xxxxxxxxx: vápníku, xxxxxxx, xxxxxxxx, sodíku, xxxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx, lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx širšího spektra xxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, ledviny, nadledvinky, xxxxx a varlata xx xx xxxxxxxx xx sekci zváží xx vlhkém xxxxx, xxx xx předešlo xxxxxxxxx. Xxxxxx a xxxxx, xxxx. xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx, ledviny, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x makroskopickými xxxxxx xxxx změnami velikosti, xx třeba přechovávat xx vhodném xxxxx x ohledem xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx dávka, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx histologické vyšetření xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx a xxxxxxx ve xxxxxxx x nejvyšší dávkou xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. X zvířat xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se zvláštním xxxxxxx xx xxxxxx x tkáně, xx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx tabulky. X ní xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu patrný xxxxx zvířat na xxxxxxx pokusu a xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx formami xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- údaje x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, původ, podmínkách xxxxx, xxxxxx xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxx obvazu; xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx lze xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat do xxxxx sledovaní,
- xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.10. XXXXXXXXXX - XXXX CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX X XXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
Metoda xx xxxxxxxxx XXXX XX 473, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Test (1997).
1.1 XXXX
Účelem analýzy xxxxxxxxxxxxxx aberací xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxx x aberacím xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx schopna xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx však xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx numerických xxxxxxx x xxxxx se x tomuto účelu xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx chorob u xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx doklady xxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, hrají úlohu xxx vzniku xxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx x odhalení možných xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx jsou x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, je xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx však xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx korelace xxxxxx xx xxxxx xxxxx x existuje xxxxx xxxx dokladů o xxx, že xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxx testem nezjistí, xxxxxxx xxxxxx působí xxxxx xxxxxxxxxxx než xxxxxx xxxxxxxxxx XXX.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx in xxxxx xx mohou použít xxxxxxx stabilizovaných buněčných xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx primární xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx vybrány na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x kultuře, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx chromozómů, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx obecně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx systém xxxxxxxxxxx aktivace nedokáže xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x savců xx xxxx. Je xxxxx xx vyvarovat xxxxxxxx, xxxxx by xxxxx xxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx neodrážejí xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx cytotoxicitou (4) (5).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx chromatid, xxxx xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx chromatidami.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx aberace typu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx).
Zlom xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx struktuře xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, koncový (xxxxxxxx) fragment x xxxxx zlomu je xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx chromatidy), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx delece.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx S-fázi xxxxxxxxx XXX nepřechází xxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx léze xxxxx xxx šířka xxxxx xxxxxxxxxx x x minimálním vybočením xxxxxxxxx.
Mitotický xxxxx: xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx v xxxx populaci xxxxx; xxxxx stupeň proliferace xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: změna počtu xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx.
Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx delece x xxxxxxxxx a výměny.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, x xx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx ní. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx buněčné kultury xxxxxxxxx látce, xx xxxxxxxx xxxxxxx například Xxxxxxxxxx ® nebo xxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx, xxxxxx xx x x metafázických xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx možno xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx buněčných xxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx (například fibroblasty xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx periferní krve xxxxxxx či xxxxxx xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx kultivační xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx nádoby, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x xxxxxxx). X xxxxxxxxx linií a xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x buňkách. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx buněčného xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Stabilizované xxxxxxx xxxxx a xxxxx: xxxxx se xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx před xxxxx xxxxxxxx a inkubují xx xxx teplotě 37 xX.
Xxxxxxxxx: xx kultivačnímu xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxx xxx plná xxxx x xxxxxxx antikoagulantem (xxxx. heparinem), xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x kultivují se xxx xxxxxxx 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace
Xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx působí x xxxxxxxxxxx i x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, ovlivněná činidly xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Aroclor 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx směs xxxxxxxxxxxxx a ß-naftoflavonu (10) (11) (12).
Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx obvykle 1 - 10 % x/x. Xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx bude xxxxxxx xx tom, xxxxxx xxxx je xxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxxx případech xx xxxxxx xxxxxx mitochondriální xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx použity i xxxxxxxxx modifikované buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx linií xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx cytochromu X450 x xxxxxxxxxxx testované xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx testované xxxxx
Xx-xx testovaná látka x xxxxxx xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxxxx xx buňky xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx její suspenze xx vhodném xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx do xxxxxxx xxxxxxxx přímo xxxx se xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx prokazují, xx delší skladování xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx.
1.5 XXXXXXXX TESTU
1.6 ROZPOUŠTĚDLO
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx reagovat, x xxxxx narušovat xxxxxxxxx xxxxx a aktivitu X9. Xxxxxxx-xx se xxxx známé rozpouštědlo, xxxx xxx podpořeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje se, xxx xxxx xxx, xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, musí být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sítem.
1.6.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x systému x xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Cytotoxicita xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, počet xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Dochází-li x cytotoxicitě, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxxxx xx nízké xxxx xxxxxx xxxxxxxx. To xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx mezi xxxxxxxxx 2 x √10. X době sklízení xxxxx xxxx být xxx xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx růstu, xxxxx xxxxx, xxxx mitotického xxxxxx (vždy x xxxx než 50%). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx mírou xxxxxxxxxxxxx / cytostatických xxxxxx x je xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou. Xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx detekce xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x nepraktická. Jako xxxxxxxxxx informace xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx generační xxx; xxx xxxxx xxxxxxxxxxx celkový průměr, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx značný xxxxxx xx vhodné xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx činí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 µl/ml, 5 mg/ml xxxx 0,01 X.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek, xxx xxxx xxxxxxxxx x koncentracích xxxxxxx, xxx xx koncentrace, xxx které xx xxx xxxxx nerozpouští, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx, xxx xx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx kultivace x xxxxxxxxxx látkou. V xxxxxxxxx případech - xxxxxxxxx xxxxxxx-xx x xxxxxxxxx účinku xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx srážením. Může xxx užitečné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x na konci xxxxxxxx, protože se xxxxx expozice xxxx xxxxxxxxxxx změnit x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx, X9 xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxx okem. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx překážku xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.6.2 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx již x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xx, xx xxxxx zařadit souběžné xxxxxxxxx a negativní xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx). Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx aktivaci k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx pozitivní xxxxxxxx xx používá xxxxx xxxxxxxxx, a to xxx expozičních xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx, xx xxxxxxxx reprodukovatelný x xxxxxxxxxxxxx nárůst xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx zvolit xxx, xxx účinek byl xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx | XXX | EINECS |
Xx | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx methansulfonát xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx C 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Xxx | xxxx[x]xxxxx cyklofosfamid xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Xxx pozitivní xxxxxxxx se xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx látky. Xxx, xxx xx xx xxxxx, je xxxxxx xxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx látku xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx každý časový xxxxxxxx sklízení xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, zpracované stejným xxxxxxxx xxxx experimentální xxxxxxx. Mimoto xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx jakéhokoliv xxxxxxxxx.
1.6.3 Xxxxxx
1.6.3.1 Xxxxxxxx testovanou xxxxxx
Xx proliferující xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx za xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx 48 hodin xx xxxxxxxxx mitogenem.
Xxxxxxx xx pro xxxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxx kultury; x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx. Pokud xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx duplicitními xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (13) (14), xx xxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx.
X případě xxxxxxxx xxxx těkavých xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x testu xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx použití xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kultivačních nádob (15).
1.6.3.2 Xxxx sklízení xxxxxxx
X xxxxxx experimentu xx buňky xxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx xx xxxx 3 - 6 xxxxx x xxxxxx se xxxxxxxxx x xxxx odpovídajícím xxxxxx 1,5násobku normální xxxxx buněčného cyklu xx xxxxxxx expozice (12). Xxxxx jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx další xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx expozicí xx do xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Některé xxxxx xx xxxxxxx xxxxx při době xxxxxxxx delší, xxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx od případu. X xxxxxxxxx, xxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx rozhodnutí xxxxxxxxx.
1.6.3.3 Příprava xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx Colcemidem® xxxx kolchicinem xxxxxxx xx xxxx 1 - 2 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx kultura xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx sestává x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx roztokem, xxxxxx x odbarvení.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x rozbití xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx být x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx číslu ± 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx rozprostřených xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx počet xxxxxxx xxxxxx, může xx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X xxxx účelem xxxxx xx zjistit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx zaznamenat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Jelikož xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx buněk se xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx typy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx a četnosti x xxxxxxxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxxx. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx do xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx kultury. Xxxxxxx xx všechna xxxx xxxxxx x xxxxxxx tabulce.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx potvrdit xxxxxxxxx výsledky bylo xxxxxxxxx x xxxx. 1.4.3.3. V xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx použitých xxxxxxxxx tak, aby xx rozšířil xxxxxx xxxxxxxxxxxx podmínek. X xxxxxxxxxx, xxxxx lze xxxxxxxxxxx, patří koncentrační xxxxxxxxx a podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Nejprve je xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxx (3) (13). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost inhibovat xxxxxxxxx procesy x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx cyklu (17) (18).
Testovaná xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx většina xxxxxxxxxxx vykazuje xxxxx xxxxxxxxx, xxxx negativní xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx data xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx, nebo diskutabilní xxx ohledu na xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxx xx chromozómové xxxxxxx xx xxxxx ukazují, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testovaná xxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
XXXXXX X PRŮBĚHU POKUSU
Xx xxxxxx o xxxxxxx pokusu je xxxxx uvést tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx.
Xxxxx:
- xxx a zdroj xxxxx,
- karyotyp x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx-xx xx nutné,
- xxxxxxxxx o délce xxxxxxxxx cyklu,
- xxxxxxx xxxxx xxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxx krev xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxxxx, xx-xx xx nutné - xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- název xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx působení xx xxxxx
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx. xxxxx x cytotoxicitě x xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jsou-li x dispozici,
- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, je-li to xxxxx
- koncentrace xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx buněk xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xx nutné
- xxx x složení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx podložních xxxxxxx,
- kritéria xxx xxxxxxxxx aberací,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx toxicity, xx. xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x počtu buněk, xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxx srážení,
- xxxxx x xX x xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- definice xxxxxxx, xxxxxx xxxx,
- xxxxx buněk s xxxxxxxxxxxxxx aberacemi x xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx z negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, včetně rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.11. MUTAGENITA - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X KOSTNÍ XXXXX XXXXX IN XXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx OECD XX 475, Xxxxxxxxx Xxxx Xxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx chromozómových xxxxxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx strukturální chromozómové xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx x buňkách xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx polyploidie xxxx xxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx rovněž. Xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx jevy, xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx u xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
K xxxxxx testu xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx tkání x xxx xx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, obsahující xxxxxxxx rychle xx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx x zpracovat. Xxxx živočišné xxxxx x xxxxxx xxxxx xx x tomto xxxxx nepoužívají.
Xxxxx xxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vivo, farmakokinetiky x procesů xxxxxxxx XXX, x xxxx xxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx také xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx předtím xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx.
Existují-li doklady x xxx, že xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xx projevuje jako xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx chromatid, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx jako xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx místě (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx typu xxxxxxxxxxx chromozóm, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Zlom xxxxxxxxxx: xxxx xxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx za předpokladu, xx vzniklá mezera xx struktuře xxxxxxxxxx xx větší, xxx xx šířka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx v xxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx (nebo xxxx xxx xxxxxxxxxx), případně xxxxx xxxxxxxxxx hodnoceného xxxxxxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx mitózy, nýbrž xxxxxx další S-fáze. Xxxxxxxxx jsou chromozómy x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx léze xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx vybočením xxxxxxxxx.
Mitotický xxxxx: xxxxx xxxxx v xxxxxxxx dělený celkovým xxxxxx buněk v xxxx buněčné xxxxxxxx; xxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Numerická xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému pro xxxxxxx buňky.
Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (x) mimo xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4n xxx.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zjistitelná xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x výměny.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx vystaví xxxxxxxxx xxxxx x xx vhodnou xxxx xx působení xx xxxxxx. Xxxx usmrcením xx na xx xxxxxx xxxxxx zastavující xxxxxxxx (xxxxxxxxx kolchicinem xxxx Colcemidem®). X xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx zjišťují chromozómové xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Výběr xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, myši x xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Hmotnostní xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx měly xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Podmínky chovu
Xxxxxxxxx xxxxxxxx chovu xxxx uvedeny ve Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X, vlhkost xx xxxx být 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat
Xxxxxx mladí xxxxxxx xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx minimalizovaly xxxxxxxx xxxxx toho, xxx x xxx xxxx xxxxx umístěny. Xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx dobu xxxxxxxxx xxxx dní xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.1.4 Příprava dávek
Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxx stavu, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx připraví xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxxxxxx prokazují, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx příliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí být xxxx použití xxxxxxxxx xxxxx x kompatibilitě x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx je xx xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx použito xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx stejně.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx strukturální xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné xxxxxxx nad xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrole se xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx látkou x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx to xxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx stejné chemické xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
cyklofosfamid xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx kontroly ovlivněné xxxxxxxxxxxxx nebo vehikulem x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx experimentální xxxxxxx xxxx by xxx zařazeny xx xxxxx časových intervalů xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x dispozici přijatelné xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberací x x interindividuální xxxxxxxxxxx mezi xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xx nejvhodnější xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, ledaže xxxxxxxx historické xxxx xxxxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx účinky.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx a pohlaví xxxxxx
V každé xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx musí být xxxxxxxxx pět analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx x xxxx, xxx se xxxxxx xxxxxxx, existují údaje x xxxxxxx živočišném xxxxx x použití xxxxxxxx způsobů xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx podstatné xxxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx postačující. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx závislá na xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx xx xxxx xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx jednorázově. Xxxxx se jedná x objemnou xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx dávka xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx za xxx xxxxxx v xxxxxxx nanejvýše xxxxxxxx xxxxx. Jiné xxxxxx xxxxxxxxx musejí být xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Vzorky xx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx časových xxxxxxxxxxx po podání xxxxx xxx. X xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu (xxxxx xxxx obvykle 12 - 18 xxxxx) xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx vliv xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx další xxxxx xxxxxx xx 24 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x daném xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxx, xx xxxxx provést xxxxx xxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxxx délky normálního xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxx usmrcením xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injikuje xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx kolchicinu a xxxxxxxx xx x xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorky. X xxxx xx xxxxx xxxxxxxx zhruba 3 - 5 xxxxx, x čínských xxxxxx xxxxxx 4 - 5 xxxxx. X xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx studie xx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx laboratoři xx použití xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x hlavní xxxxxx (5). Při xxxxxxxx toxicity se xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx tři xxxxx xxx, xxx pokrývaly xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxx xxxx nulové. Xxx xxxxxxxx časový xxxxxxxx odběru vzorků xx xxx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx je xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, xxx x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx hormony xxxx xxxxxxxx, mohou představovat x těchto kritérií xxx stanovení xxxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxxxx individuálně xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx jako xxxxx, xxxxx vede x xxxxxxx známkám xxxxxxxx x kostní xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx minimálně 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti v xxxxx dávce nebo xx dvou xxxxxxx xxxxxxxx x jeden xxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx údajů x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx provedena xxxx xxxxxx xx použití xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx dávka 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xx xxx při xxxx xxxxxx xx 14 dnů, x 1&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx než 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx expozice může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxx žaludeční xxxxxx, xxxx intraperitoneální xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Maximální xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx tak, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Příprava xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx kostní xxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx roztokem a xxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx buněk se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx a xxxxxx xx.
1.5.7 Analýza
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx jedince.
X xxxxxxx jedince xx analyzuje xxxxxxxxx 100 buněk. Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxx jejich xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metafází xxxxxxxxx xx ztrátou xxxxxxxxxx, xxxx xxx počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx 2n ± 2.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx jedinec. X xxxxxxx zvířete xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x procento xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenají xxxxxxxxxx xxxx strukturálních xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx se, xxx obvykle xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx o xxx, že xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Vyhodnocení a xxxxxxxxxxxx výsledků
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx aberacemi, xxxx zřetelný xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx dávkou xxx jednom xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Při vyhodnocování xxxxxxxx testu se xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné výsledky xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buněčného xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Většina xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx výsledky, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx nejednoznačné nebo xxxxxxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx xxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testovaná xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxx x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx používána, nebo xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx zasáhne (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx vehikula,
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- počet, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x směrodatných odchylek xxx xxxxxxxxxx skupiny.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx ze xxxxxx xxx xxxxxx rozpětí, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx volby velikosti xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x podávání xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx, xx se xxxxx dostala xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx cílové xxxxx,
- xxxxxxxx převod xxxxxxxxxxx látky x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx hmotnosti/den),
- xxxxxxxxxxx o kvalitě xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx vzorků,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických preparátů,
- kritéria xxx xxxxxxxxx aberací,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx, jimiž xx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxx x xxxxx aberací xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xxxxxx průměr x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické údaje x negativních kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
- údaje xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx,
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Závěry.
X.12. XXXXXXXXXX - IN XXXX XXXXXXXXXXXX XXXX V XXXXXXX ERYTROCYTECH
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx OECD XX 474, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Test (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxx in vivo x savců slouží xx xxxxxxxx poškození, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx erytroblastů; test xxxxxxx v tom, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx resp. x xxxxxxxxx xxxx zvířat, xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx látky, xxx xxxxxxxxx cytogenetické poškození, xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx chromozómů.
Když x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx polychromatický xxxxxxxxx, xxxxx xx x buňky vyloučeno; xxxxxxxx zbude x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx mikrojádra xx xxxxxxxxx tím, xx xxxxx buňkám xxxxx xxxxx. Nárůst četnosti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx je x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
V xxxxx xxxxx se xxxxxx dřeň xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x této xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (polychromních) erytrocytů x mikrojádry x xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xxxx prokázáno, xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx odstraňovat xxxx xx xx tento xxxxxxxxx druh xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx strukturální xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, jako xx přítomnost xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (centromery), xxxx xxxxxxxxxxxxx XXX x mikrojádru. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x mikrojádry. Xxxx počet xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx hodnotu xxxxxx x případě, xx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxx mikronukleus xxxx u xxxxx xx zvláště xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, protože xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, i xxxx xxx xxxxx xxx xxxx živočišnými druhy, xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx in xxxx xx také xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx xxx předtím xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx.
Existují-li xxxxxxx o xxx, xx xx testovaná xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx použití xxxxxx xxxxx vhodné.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): xxxxxxx xxxxxxxxxx, se xxxxxxx xx xxxxx dělení xxxx vlákna xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x pólům dceřiných xxxxx.
Xxxxxxxxxx (mikronukleus): xxxx jádra oddělená xx jádra buňky (xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx mitózy, nebo xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx erytrocyt: zralý xxxxxxxxx, jemuž chybějí xxxxxxxx a xxxx xx dá xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx erytrocyt: xxxxxxx xxxxxxxxx, vývojové xxxxxxx, xxx jsou xxxxx xxxxxxxx ribozómy, takže xxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Xxxxxxx xxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxxx testované látce. Xxxxx xx používá xxxxxx xxxx, zvířata xx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxx usmrtí, xxxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx (1-7). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xx vhodné xxxx xx působení látky x xxxxxxxx xx xxxxxx, jež se xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxx xxxx od xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx co nejkratší. X preparátech xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx mikrojader.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx dřeň, xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx; může xxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxx savčí xxxx. Xxxxxxx-xx xx periferní xxxx, xxxxxxxxxx se xxxx. Lze xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx vhodný xxxxx druh xx xxxxxxxxxxx, xx se x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx nebo že x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx citlivost xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Hmotnostní xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a x každého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx xx Všeobecném úvodu x xxxxx B.
Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx rozdělí xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx pěti xxx xx zvířata xxxxxxxxxxxx x laboratorních podmínkách. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, xxx x kde jsou xxxxx umístěny.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Je-li xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx a je-li xx xxxxx, látka xx xxxx podáním xxxxxxxx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx se xxxx podáváním xxxx. Xx třeba používat xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) prokazují, že xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.2 Xxxxxxxx testu
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x kompatibilitě x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx je to xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx rozpouštědlo / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Do xxxxxxx testu xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Je xxxxx zacházet xx xxxxxxx ve všech xxxxxxxxx stejně.
X xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx in vivo xxx dávkách, xxx xxx očekávat jejich xxxxxxxxxxxxx zvýšení xxx xxxxxxxxx úroveň. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, ale přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx odebírat x jednom časovém xxxxxxxxx. Kde xx xx možné, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx vhodných xxx pozitivní kontrolu:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
N-ethyl xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx zařazeny xx xxxxx časových xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x dispozici xxxxxxxxxx historické xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x mikrojádry x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx x negativních xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, je xxxxxxxxxxxx xxxxx první xxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x neovlivněných xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx publikované xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx nebo mutagenní xxxxxx.
Používá-li xx xxxxxxxxx krev, může xxx xxxx souběžná xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x vzorek odebraný xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 1 - 3 dávky), kde xxxxxxxx údaje leží x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx kontroly.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x pohlaví xxxxxx
V xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (11). Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx o stejném xxxxxxxxxx druhu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx prokazující, že xxxx oběma xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx rozdíly, xx xxxxxxxxx pouze xx xxxxxx xxxxxxx postačující. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx závislá na xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx xx test xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx doporučit xxxxx standardní xxxxxx (xxxx. xxxxx, dvě xxxx více xxxxx x 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx v daném xxxxxxxxxxx neprokáže xxxxxxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx tak xxxxxx, až se xxxxxxx xxxxxxxx, nebo xxxx xxxxxxx limitní xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx vzorků. Xxxxx xx jedná x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxx podané x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx hodin.
Xxxx xx může provádět xxxxx způsoby:
(x) Xx zvířata xx xxxxxxxxxx xxxxxx působí xxxxxxxxxxx. Vzorky xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx dvakrát, xxxxxx xx xxxxx xxx xx 24 hodinách x celkově xx xxxxxxx xxx xx 48 hodinách xx xxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx intervaly xxxx xxxxxx vzorků. Xxxxx xx xxxxxx odeberou xxxxx xxx po 24 xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx krve xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx ne xxxxx xxx po 36 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, celkově xxxx nikoli xxxx xxx 72 hodiny. Xxxxx xx x xxxxxxxx časovém xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx již xxxxx xxxxx zapotřebí.
(x) Xxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxx (xxxx. dvě xxxx xxxx dávek ve 24xxxxxxxxxx intervalech), xxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxx kostní xxxxx xxxxxx xxxx 18 x 24 hodinami xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx a x xxxxxxx periferní krve xxxxxx xxxx 36 x 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (12).
Je-li xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx použít x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx ke xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx žádné xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx provádět v xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx živočišného xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x pokusného xxxxxx, xxxx se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (13). Při zjištění xxxxxxxx xx užívají xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx odběru vzorků xxx dávky xxx, xxx pokrývaly xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx nulové. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků xx xxx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx toxicity, xx při vyšších xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx výjimky x těchto kritérií xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka může xxx také xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x určitým xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx dřeni (např. xxxxxx podílu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx minimálně 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx nevyvolává xxxxx pozorovatelné xxxxxxx xxxxxx a jestliže xx xx xxxxxxx xxxxx x látkách x podobnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx neočekává xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx za xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx dlouhodobé xxxxxx xx limitní xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx za den xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1000 mg/kg xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx delší než 14 dnů. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx dávkové xxxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, závisí xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 ml/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx normálně xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx upravit xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Příprava xxxxxx xxxxx / xxxx
Buňky xxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx x femuru xxxx xxxxx xxxxxxxx xx usmrcení zvířete. Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx dřeň xxxxx x xxxxxx nebo xxxxx, buňky xx xxxxxxx a obarví xxxxxxxxxx metodami. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx žíly xxxx jiné vhodné xxxx. Xxxxxx buňky xx xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxx obarví (8) (9) (10), xxxx se xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Použitím xxxxxxx specifického xxx XXX (např. xxxxxxxxxx xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 s xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx xxxxxxxxxx některé x artefaktů vznikajících xxx použití xxxxxxx, xxxxx xxxx DNA xxxxxxxxxx. Tato výhoda xxxxxxxxx, xx xx xx nedala xxxxxx xxxxx barviva (xxxx. Xxxxxx). Lze xxxxxx x xxxxx xxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx (16) - pokud xxxx xxxxxx jsou v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
X každého xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového xxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). X tomuto xxxxx xx počítá x xxxxxxx kostní xxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx minimálně 1000 xxxxxxxxxx (17). Xxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. X každého xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 2000 nezralých erytrocytů x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx informace xxx xxxxxx xxx, xx xx mikrojádra xxxxxxxxx xx zralých xxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x celkového počtu xxxxxxxxxx menší než 20 % hodnoty x xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx týdnů xxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x minimálně 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx systémy xxxxxxxxxxx analýzy (xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx - xxxx cytometry), pokud xxxx zdůvodněny x xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Experimentální jednotkou xx xxxxx. X xxxxxxx jedince se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx čtyř týdnů xxxx déle, xx xxxxx uvést xxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (pokud xxxx xxxxxxxxxx). Xxxxx nezralých xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Nejsou-li xxxxx xxxxxxx x tom, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx údaje xx xxx pohlaví xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx dávkou při xxxxxx časovém intervalu xxxxxx xxxxxx. Nejprve xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné výsledky xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx testováním, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Testovaná xxxxx, xxx jejímž xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx experimentů sice xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testu xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx chromozómového xxxxxxxxx xxxx poškození xxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx erytrocytech.
Xx xxxxx xxxxxxxx, jaká xx pravděpodobnost, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx používána, xxxx xxxxx specifickou xxxxxxx xxxx zasáhne (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx apod.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx hmotnostního xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedena,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx dávky,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx cesty xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx x ověření, xx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx oběhu xxxx do xxxxxx xxxxx,
- případný xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx),
- podrobnosti x xxxxxxx potravy x xxxx,
- podrobný xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx preparátů,
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx u xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx zvlášť,
- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, je-li xx možné,
- xxxxxxx statistické xxxxxxx x xxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx x historických xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.13/14. MUTAGENITA - TEST XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mutací se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx mutací kmeny Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxx Escherichia coli (xxxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx genové xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x tom, xx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx se funkční xxxxxxxxx bakterie xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx změněná xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, kterou xxxxxxxx mateřský xxxxxxxx xxxx.
Genové xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx doklady xxxx, xx genové mutace x onkogenech x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx genech xxxxxxxxxxx buněk hrají x xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx roli xxx xxxxxx nádorů. Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, levný x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx mutací, xxxxxx citlivých xxxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxx, zvýšené xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx reparace XXX xx xxxxxxxx takových xxxxxxx reparace DNA, xxx jsou xxxxxxxx x chybám. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, jež xxxx xxxxxxxx genotoxickými látkami. Xxx xxxxxxxxxxx testy xxxxxxxxxx mutací xx x xxxxxxxxx velmi xxxxxxxx xxxxxxxx výsledků xxx xxxxxxx škálu xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx chemikálií x xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 DEFINICE
Test xxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxx Salmonella xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx mutací x xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (histidinu xxxx. xxxxxxxxxx), xxx xxxxx xx vzniku xxxxx, xxxxx je xx xxxxxxx aminokyseliny xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx substituci xxxx xxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x XXX. Při xxxxxxxxx testu xxxx x takové změně xxxxx xx xxxxx xxxxxxx mutace nebo xx jiném xxxxx xxxxxxxxxxxxx genomu.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (mutageny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx odebrání xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxx x XXX, xxxx se xxxx xxxxx xxxxx x RNA.
1.3 VÝCHOZÍ XXXXX
X xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx buňky, které xx xx xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx metabolismu, xxxxxxxxxxxxx struktuře x xxxxxxxxx opravy DNA. Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace xx xxxxx ovšem xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx podmínky xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx dané xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx používá jako xxxxxxx screenin xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx genové xxxxxx. Xxxxxx rozsáhlé xxxxxxxx xx prokázalo, xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx v xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxx testech xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx mutagenních xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxx xxxxxx nedostatku xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx veličin, xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx rozdíly x xxxxxxxxxx dostupnosti. Xx xxxxx straně xxxxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, mohou xxxx x xxxx, xx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, jakými xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx sloučeniny (xxxxxxxxxx xxxxxx antibiotika) a xxxxx, x nichž xx xxxxxxxxxxx xxxx xx, xx specificky xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx topoizomerázy xxxx některá analoga xxxxxxxxxx); x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx u xxxxx.
Xxxxx sloučeniny, xxx xxxx při xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx korelace xxxx absolutní; xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x existují xxxxxxxxxxx, xxxxx tímto xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx mechanismem, xxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx neprobíhá.
1.4 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické aktivace. Xxx klasické xxxxxxx xxxxxx "plate xxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx smísí x vrchním xxxxxx x xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x smísí x xxxxxxx agarem x xx xxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxx xxxx xxxxxxxx xx xxx až tři xxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x rozpouštědlem.
Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ["xxxxx incorporation"] (1) (2) (3) (4), xxxxxxxxxxxx metoda (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) x xxxxxxxxx xxxxxx (11). Jsou xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx par (12).
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx týkají xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx xx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxx, kam xxxxxxx xxxxxxxxxx nitrosaminy x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx kovy, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx a diazosloučeniny, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3). Také bylo xxxxxxxx, že existují xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx standardních procedur xxxx xxxxxxxx. Xx xx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx na "xxxxxxxxx xxxxxxx", k xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx jiných xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "speciální xxxxxxx" (xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx pro jejich xxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx x diazosloučeniny (3) (5) (6) (13), xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx xx standardního xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5. XXXXX METODY
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Bakterie
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx do xxxxxxxx exponenciálního nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx 109 xxxxx/xx). Xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xxxxxxx pro experiment xxxxxxxxxx vysoký xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Titr xx dá xxxxxxxx xxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx růstových křivek, xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx stanovením počtu xxxxxxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx teplota xxxx 37xX.
Použije xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx (XX 1535; TA 1537 xxxx XX97x nebo 1X97; XX98; x XX100); x xxxxx xxxx prokázána spolehlivost x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx kmeny X. xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx reverzním xxxxx xxxx xxxx XX x je xxxxx, xx xxxxxxxx detekovat xxxxxx xxxxxxxx mutageny, xxxxx xxxxxxxxxxxx křížové xxxxx a xxxxxxxxx. Xxxx látky xx xxxx xxxxxxxxx pomocí xxxxx X. xxxx XX2 xxxx X. xxxxxxxxxxx XX102 (19), xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx reverzním místě xxx xxxx XX. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx:
- X. xxxxxxxxxxx XX1535 x
- X. xxxxxxxxxxx XX1537 xxxx TA97 nebo XX97x a
- X. typhimurium XX98 x
- X. xxxxxxxxxxx XX100 x
- X. xxxx XX2 uvrA nebo X. xxxx XX2 xxxX (xXX101) xxxx X. xxxxxxxxxxx TA102.
X xxxxxxx mutagenů xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx XX102 xxxx xxxxxx DNA xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx E. xxxx (např. E. xxxx XX2 xxxx X. xxxx WP2 (xXX101)).
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx postupů xxxxxxxx xxxxxxx kultury, xxxxxxx markeru x xxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxxxxx závislost na xxxxxxxxxxxxx nutné xxx xxxx (xxxxxxxx v xxxxxxx kmenů X. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx kmenů E. xxxx). Podobně je xxxxx xxxxxxxxxxxx i xxxxx fenotypické xxxxxxxxxxxxxxx, x to: přítomnost xx nepřítomnost R-faktor xxxxxxxx xxx, xxx xx přichází x xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx u xxxxx TA98, TA100 x TA97a xxxx XX97, XX2 uvrA (xXX101) a rezistence xxxx xxxxxxxxxx + xxxxxxxxxxxx x xxxxx XX 102); xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (tj. xxx xxxxxx u X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxX xxxxxx x X. xxxx xxxx xxxX xxxxxx u X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) (2) (3). Xxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxx spontánně revertujících xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx očekávaném xxxxx xxxxxxxxxxxx kontrolních xxx xxxx laboratoře x xxxxx xxxxx x x rozmezí uvedeném x literatuře.
1.5.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx (xxxx. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx E x xxxxxxxx) x xxxxxx xxxx obsahující histidin x biotin nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).
1.5.1.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx jak za xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace. Nejčastěji xx xxxxxxx kofaktorem xxxxxxxxxxxxxx post-mitochondriální frakce (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxx enzymů xxxxxxx, xxxx xx Aroclor 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (18) (20) (21). Post-mitochondriální xxxxxx se obvykle xxxxxxx x koncentracích xxxx 5 a 30 % x/x xx xxxxx X9. Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx na xxxxx testované xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx případech xxxx být vhodné xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakci x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6) (13).
1.5.1.4 Testovaná xxxxx / příprava
Xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x případně xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx se xxxxxxx xxxx. Je xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže údaje x xxxxxxxxx prokazují, xx jejich xxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxxxxxx.
1.5.2 Podmínky xxxxx
1.5.2.1 Xxxxxxx xxxxx (viz 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Koncentrace
Xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxx použitého množství xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx x rozpustnost x xxxxxxx xxxxx, xxxxx se k xxxxxxxx použije.
Může xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx experimentu. Xxxxxxxxxxxx se dá xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, vymizením xxxx zmenšením růstu xx pozadí xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xx může xxxxxxxxxxxx změnit. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pokusná xxxxxxxxxxx xx u xxxxxxxxxxx necytotoxických xxxxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx látek, jež x těchto xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, by xxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx x konečné xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx již xx xxxxxxxxxxx nižších než 5 mg/misku resp. 5 µl/misku, xx xxxxxxx až xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Sraženina xxxxx rušit při xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx různých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx půllogaritmickým xxxxxxxxxx (xx. √10) mezi xxxxxxxxxxxx body x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx vhodný xxxxxxxx menší. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx xxxxxxxx v xxxxx, xxxxxxx-xx xx látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxx mutagenních nečistot.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx a pozitivní xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací, xxx xxx ní. Xxx xxxxxxxxx kontrolu se xxxx takové xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx efektivnost xxxxxx testu.
X xxxxx s metabolickým xxxxxxxxxx systémem xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx použitého xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, jež jsou xxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx x testech x xxxxxxxxxxxx aktivací, xxxxx tabulka:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 |
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx vhodnou xxxxxxxxx kontrolou xxx xxxxxxx metabolické aktivace xxxxxxxxxxx:
Xxxxx | CAS | XXXXXX |
Kongo červeň | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-aminoantracen xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx X9. Pokud xx 2-aminoantracen xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx X9 xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, jež jsou xxxxxx pro kmenově xxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, uvádí tato xxxxxxx:
Látka | XXX | XXXXXX | |
Azid xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 a XX 100 |
2-nitrofluoren | 607-57-8 | 210-138-5 | TA 98 |
9-xxxxxxxxxxxx | 90-45-9 | 201-995-6 | XX 1537, XX 97 x XX 97x |
ICR 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, TA 97 x XX 97x |
kumen-hydroperoxid | 80-15-9 | 201-254-7 | XX 102 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 | XX uvrA x XX 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, WP2uvrA a XX2xxxX (pKM101) |
4-nitrochinolin-1-oxid | 56-57-5 | 200-281-1 | XX2, XX2xxxX x WP2uvrA (xXX101) |
Xxxxxxxxxxxx (AF2) | 3688-53-7 | kmeny xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx x jiné xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, je xxxxx uvážit použití xxxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx.
Xx třeba použít x negativní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxx zachází xxxxxx jako xxx xxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xx použijí x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.3 XXXXXX
Při xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4) xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x 0,5 xx sterilního xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx mísí 0,5 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx směsi) x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx a testovanou xxxxxx /xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx promísí a xxxxxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Při xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxx roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxx 108 životaschopných xxxxx) x sterilním xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem (0,5 xx) obvykle xx xxxx 20 min xxxx déle xxx 30 - 37 xX; potom xx xxxxx x vrchním xxxxxx a xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Obvykle xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx roztoku 0,1 xx xxxxxxxx a 0,5 xx xxxxx X9 nebo xxxxxxxxxx xxxxx s 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xx-xx vědecky xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx xxxxxxx ke xxxxxx misky, xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx nebo xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx postupů, xxxxxxxxx x zatavených xxxxxxxx (12) (14) (15) (16).
1.5.4 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx teplotě 37 xX xxx xxxx 48 - 72 xxxxx, načež xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx na každé xxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx počet xxxxxxxxxxxxx kolonií xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, popřípadě xxxxxxxx xxx působení, xxxx-xx xxxxxxx), tak x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx látku i xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx) xx xxxxxx xxxxx xxx jednotlivé xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx odchylky.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků nepovažuje xx xxxxx, xx xxxxx to zdůvodnit. X xxxxxxxxxx experimentech xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx studijních xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx rozsah posuzovaných xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxx modifikovat, patří xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx ("plate xxxxxxxxxxxxx" xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx prostředí) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx xxxxxxxxx pozitivního výsledku xxxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xxxxxxx závislý xxxxxx xx sledovaném xxxxxxx a/nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xxxxx xxx xxxxx xxxx více xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx jednoho xxxxx x metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxx xxx (23). Xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx relevance xxxxxxxx. Xxxx pomůcku xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (24), statistická významnost xx xxxx neměla xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx, xxxxx výsledky výše xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxx považuje za xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx bakteriálního xxxxx na xxxxxxxx xxxxxx ukazují, xx xxxxx vyvolává genové xxxxxx typu xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx resp. Xxxxxxxxxxx coli. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxx xxxxx ve zkušebním xxxxx mutagenní.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxx rozpouštědle, xxxxx xx známa.
Xxxxx:
- xxxxxxx kmeny,
- xxxxx buněk x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- množství xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx misku (v xx nebo μl) xx zdůvodněním xxxxx xxxxx a xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx,
- použitá xxxxx,
-typ x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- postupy xxxxxxxx (zpracování).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- počty xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x směrodatná xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek,
- údaje x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x pozitivních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.15. GENOVÉ XXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kmeny kvasinek Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx užity xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x x xxxxxxxxxxxx aktivací.
Xxxx xxxxxxxxx forward xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx kmenů, xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx-1, xxx-2) xx xxxxxxx, xxxxxx vyžadující xxxx mutanty a xxxxxxxxxx systémy, xxxx xx indukce xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx ověřený xxxxxxxx xxxxxxx systém xxxxxxxx xxxxxxx haploidního xxxxx XX 185-14 X s xxxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 2-1, xxx 4-17, xxx 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx typu xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxx mutace ve xxxxxxxxxxx místě, nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx mutace. XX185-14X nese xxxxxx xxx 1-7 xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx a xxxxxx hom 3-10, xxxxx xx revertován xxxxxxxxxx mutageny.
U xxxxxxxxxxx kmenů X. xxxxxxxxxx je jediným xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X7, xxxxx xx xxxxxxxxxxx pro xxx 1-92.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx roztok xxxxx xxx 2 objemová % v organických xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, aceton xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (DMSO). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx x charakteristiky růstu.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Buňky xxxx být exponovány xxxxxxxxxx látkám xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému.
Xxxxxxxxxx užívaným systémem xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakce xxxxxxxxxx x jater xxxxxxxx xx aplikaci xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx jiných xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx rovněž xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx aktivaci.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Testovací xxxxx
Haploidní xxxx XX 158-14C x xxxxxxxxx xxxx X7 xxxx xxxxxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx vhodné.
1.2.2.2 Xxxxx
Odpovídající xxxxxxxxxx xxxxx jsou užívána xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx a mutovaných xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx specifickou mutační xxxxx mají xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxx chemické xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X toxických xxxxx xxxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx přežití xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx po xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx použití vhodných xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxx látky xxxxxxxxx, xx vodě xxxxxxxxx, xx určena případ xx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Misky jsou xxxxxxxxxx xx sedm xxx při 28 xx 30 oC xx tmě.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxx x testu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x u životnosti xxxxx. U experimentů xxxxxxxxxxx markery xxxx xxx 3-10 x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxx získány xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx kmenů X. cerevisiae je xxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx na rostoucích xxxxxxx: 1-5 x 107 xxxxx/xx je xxxxxxxxx testované látce xx xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x vyočkovány xx xxxxxx kultivační médium. Xx inkubaci jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx buňky x buňky x xxxxxxx genových xxxxxx.
Xxxxxxxx xx první xxxxx xxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx s buňkami xx stacionární fázi. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx a zahrnují xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx buněk x frekvenci xxxxxx. Xxxxxxx výsledky xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx vyhodnoceny xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx informace o:
- xxxxxxxxx kmenech,
- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx ve xxxxxxxxxxx xxxx nebo rostoucí, xxxxxxx xxxxx, teplota x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx aktivační systém,
- podmínkám xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x trvání xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xx xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx výsledků.
X.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip metody
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx produkty, kdežto xxxxx xxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxxxxx genová xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx vzniklých x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xx testována xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx užívané xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx X4 (heteroalelický x xxx 2 a xxx 5), X7 (xxxxxxxxxxxxxx v xxx 5), BZ34 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4) x XX1 (heteroalelický x xxx 4 x xxx 5). Xxxxxxxxx překřížení produkující xxxxxxx x růžové xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x X5 xxxx X7 (xxxxx xxxxxx xxxx mitotickou xxxxxxx konversi x xxxxxxxx xxxxxx x xxx 1-92). Xxx xxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xxx komplementární xxxxx xxx 2.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx vehikula. X xxxxxxxxxxx látek xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, jako xx xxxxxx, xxxxxx xxxx dimetylsulfoxid (DMSO). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx významně xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx aktivace
Xxxxx mají xxx xxxxxxxxx působení xxxxxxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxxxxxx, tak v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx systémem xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx indikujících xxxxxx x xxxxxxxx kofaktory. Xxxxx jiných xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx rovněž vhodné xxx xxxxxxxxxxxx aktivaci.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Testovací xxxxx
Nejužívanější jsou xxxxxxxxx xxxxx D4, X5, X7 x XX1. Užití jiných xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx užívána xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontroly
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx nejméně 5 xxxxxx xxxxxxxxx koncentrací. Xxxx xxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. U toxických xxxxx nemá nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx redukovat xxxxxxx pod 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx nerozpustné mají xxx testovány až xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxx látky xxxxxxxxx, xx vodě xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx od xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx buď xxxxxxxxxxx xxxx, xxxx během xxxxx po xxxx xx 18 h. Xxxxxxx dlouhodobě ovlivňované xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx znehodnocuje.
1.2.2.5 Podmínky xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx tmě xx čtyři xx xxxx dní při 28 - 30 xX. Misky xxxxxxx xxx průkaz červených x xxxxxxxx sektorů xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx (cca 4 xX) xx xxxxx 1 - 2 dny před xxxxxxxxx, aby xx xxxxx utvořit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Spontánní xxxxxxxxx xxxxxxxxx rekombinace
Xxxx být užity xxxxxxxxxx x frekvencí xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx akceptovaných normálních xxxxxx.
1.2.2.7 Počet xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx tvořených xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxx určení životnosti xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx být xxxxx xxxxx zvýšen, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx kolonií.
1.2.2.8 Postup
Xxxxxxxxx X. cerevisiae xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx buňkách. 1-5 x 107 buněk/ml xx vystaveno xxxxxxxxx xxxxx xx dobu xx 18 x. xxx 28 xx 30 oC xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xx přidáno x xxxxxxx ovlivnění, pokud xx xx xxxxxxxx.
Xx skončení ovlivnění xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx počítány přežívající xxxxx x buňky x xxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx pokus negativní, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxx ve stacionární xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nezávislým experimentem.
2. XXXXX
Xxxxx mají xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx počet kolonií, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx potvrzeny x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx a trvání xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx aktivační xxxxxx,
- podmínky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx, teplota xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- počet xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, přežívajících xxxxx x frekvence xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx hodnocení xxx,
- diskusi xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.17. MUTAGENITA - XXXX XXXXXXXX XXXXXX X SAVČÍCH XXXXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 476, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxx Xxxx Mutation Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Test xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xx xx xxxxxxxx xx zjišťování xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx vhodné xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx lymfomové buňky X5178X, xxxxx XXX, XXX-XX52 x X79 xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x lidské xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx XX6 (1). X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx genetický xxxxx zjišťují xxxxxx x thymidinkináze (XX) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx fosforibosyltransferáze (XXXX) x x xxxxxxxxxx xanthin-guanin xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Testy xxxxxx x TK, XXXX x XPRT xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XX x XXXX xxxx xxxxxxx xxxxxxx x takové xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxx), které xx xx xxxxxx XXXX xxxxxxxxxx X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
K xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x savčích xxxxxxx in xxxxx xx dají použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Při xxxxx xxxxx se xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací.
Testy xx xxxxx obecně xxxxxxxx xxxxxxxx zdroj metabolické xxxxxxxx. Takový xxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace nedokáže xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx vivo xxxxxxxx. Xx xxxxx vzniku xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx výsledky xxxxxxxxxx xxxxxxx mutagenitu. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx může xxxxx x důsledku xxxxx xX, xxxxxxxxxx xx xxxxxx cytotoxicity (7).
Xxxxx test xx xxxxxxx xx screeningu xxxxxxx savčích mutagenů x karcinogenů. Xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx testu xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, neexistuje xxxx xxxxxxxx korelace xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, protože xxxxxx xxxxxx nějakým jiným, xxxxxxxxxxxxxx mechanismem xx xxxxxxxxxxx, xxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx mutace: xxxxxx xxxxxx výchozího xxxx xxxxxxxx formy, jež xxxx ke změně xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kódovaného xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx: látky xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx páru xxxx x XXX.
Xxxxxxxxxx mutageny (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): látky, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx jednoho xxxx xxxx xxxx xxxx x DNA.
Doba xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx mutovaných buněk xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: xxxxxx počtu xxxxx x čase x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; vypočítává xx jako součin xxxxxxxxx suspenzního xxxxx (x porovnání x xxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx (xxxxxxxxx): klonovací xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) ovlivněných xxxxx x xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x selekčních podmínkách xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx na miskách xx xxxxx působení xxxxx; xxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx kontrolní buněčné xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxx, deficientní xx xxxxxxxxxxxxxx (XX) x důsledku xxxxxx XX+/- → XX-/-, xxxx rezistentní xxxx xxxxxxxxxxxxx působení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx vůči TFT xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx XXX proto xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx buňky x xxxxxxxxxxx HPRT nebo XXXX selekčně xxxxxxxxxxx xxxx 6-xxxxxxxxxxx (TG) xxxx 8-xxxxxxxxxx (XX). Xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxx sloučenina xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx analyzována x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx selekční xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vůči xxxxxx s xxxxxxxx x bez nich. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx selekčním xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).
Xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxxxx xx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a x xxxxxxx fenotypické xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx stanoví obvykle xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (přežití) (cloning xxxxxxxxxx) xxxx relativního xxxxxxxxx xxxxxxx kultur xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx dobu, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx x xxx xxxxx, aby xxxxx xxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx selekční činidlo xxx detekci mutovaných xxxxx a v xxxxx bez tohoto xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Po xxxxxx xxxxxxxxx době xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx frekvence xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxx médiu x x xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Buňky
Dá se xxxxxx xxxx řada xxxxxxxxx typů, včetně xxxxxxxx xxxxx X5171X, XXX, CHO-AS52, X79 x XX6. X xxxxxxxxx typů xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) x xxxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxxxx buňky xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx třeba naplánovat xxx, aby xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxx). Xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxx těmto xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx expozici a xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxx frekvencí xxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxx xxxxxxxx je, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx desetinásobkem xxxxxxxxxx hodnoty xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací. Doporučuje xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 106 xxxxx. Xxxx xx xxx x dispozici xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvládnutí xxxxx.
1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx média a xxxxxxxxx podmínky (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx xx pro xxxx xxxx podle xxxxxxxxxx systému x xxxx buňky. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxxx kultivace xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx růst xxxxx xxxxx xxxxxxxx periody x schopnost xxx xxxxxxxxxx, tak xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolonie.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx namnoží xx zásobních xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x inkubují xxx xxxxxxx 37 xX. Před xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx zbavit dříve xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.4 Metabolická xxxxxxxx
Xx buňky se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxxx xx kofaktory xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Aroclor 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx fenobarbitalu x β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce x médiu činí xxxxxxx 1 - 10% x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx na xxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx chemikálie. X některých xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakci x xxxxxxxx koncentracích.
Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx specifické xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx linií xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx cytochromu X450 x metabolismu xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx působením xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx připraví xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx do xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx ředí. Xx třeba používat xxxxxxx preparáty, ledaže xxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx prokazují, že xxxxx xxxxxxxxxx neovlivňuje xxxxxx vlastnosti.
1.4.2 Xxxxxxxx testu
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx existovat xxxxxxxxx, xx by xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx narušovat přežívání xxxxx x aktivitu X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx podpořeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxxxx tam, xxx je xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx testovaná xxxxx xx xxxx xxxxxxx, musí xxx xxxxxxx organické rozpouštědlo xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx odstranit xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Koncentrace
Mezi xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x systému x xxxxx pH xxxx. osmolality.
Cytotoxicita xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž se xxxxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx) nebo xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx minimálně čtyři xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Dochází-li x xxxxxxxxxxxx, musí xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx, že xx jednotlivé xxxxxxxxxxx xxxxxxx lišit více xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx hodnotami 2 a √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x cytotoxicity, xxxx xx vést x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxxx celkovému xxxxx x 10-20 %, xx xxxx xxxx xxx 10 %. X relativně xxxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 xx/xx, 5 μx/xx a 1,01 M.
U relativně xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, než xx koncentrace, xxx xxxxx se xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx nejvyšší použitá xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx mez rozpustnosti xx finálním xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Může xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx začátku x xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se rozpustnost xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, X9, xxxx xxx. xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx nesmí být xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx buněk.
1.4.2.3 Xxxxxxxx
X rámci xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx pozitivní a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx) xxxxxxxx, x to xxx s metabolickou xxxxxxxx, xxx bez xx. Pokud se xxxxxxxx metabolická aktivace, xxxx xxx pozitivní xxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx látkami xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
XX (xxxx x velké xxxxxxx) | xxxxxx methansulfonát | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XPRT | ethyl xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (xxxx x xxxxx kolonie) | cyklofosfamid monohydrát xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XXXX | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx S-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
benzo[a]pyren | 50-32-8 | 200-028-5 |
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx použít x xxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x 5-brom-2'-deoxyuridinu (XXX 59-14-3, číslo XXXXXX 200-415-9), lze použít x tuto xxxxxxxxxx xxxxx. Xxx, kde xx xx možné, xx xxxxxx použít xxx pozitivní kontrolu xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx každý xxxxxx interval xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiu, zpracované xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mimoto xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, že zvolené xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx nevykazuje xxxxx xxx xxxxx nepříznivé xx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Expozice xxxxxxx po xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xx xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Doba expozice xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx více buněčných xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx používají xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jenom xxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx kultura, xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx počet xxxxxx x xxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx duplicitní.
V xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kultivačních xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, viability x mutační xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx obvykle začíná x xxxxxxxx cytotoxicity xxxxxxxxxx klonovací xxxxxxxxx - xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx lokus xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx mutantů (HPRT x XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, TK xxxxxxxxx 2 xxx). Xxxxx se pěstují x médiu x x xxx selekčního xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx doby exprese xx začne s xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx x xxxxx X5178X XX+/- xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace) x na xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách xxxxxxxx xxxxxxxx kolonií. Xxxxx xx xxxxx x xxxxx testu xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx provést x xx xxxxxxxx x XX6XX+/-.
2. XXXXX
2.1 Zpracování xxxxxxxx
Xxxx data slouží xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx u experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X případě xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx X5178XX+/- xx kolonie xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x velkých xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx x cytogenetické xxxxxxxxxx xxxxxxx i xxxxxx kolonií byly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx xxxxx TK+/- xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx kritéria xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (velké) x xxxxxxxx růstu (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx dobu xxxxxxxx, x xxxxx tvoří xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxx genu xx xxxxxxxxxxxx viditelné xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tvorba xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (26). Méně xxxxxxx postižené mutanty xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buňky xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xx xxxxx uvádět xxxx přežití (relativní xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx relativní xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx vyjadřuje xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx shrnou x tabelární xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx pozitivní xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. X případech, kdy xx xxxxxxxxx negativních xxxxxxxx nepovažuje za xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvážit modifikaci xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx x experimentu xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx koncentracemi x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx existuje xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx závislý xxxxxx xxxx reprodukovatelný xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické metody. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x tomto xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx případech xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx souboru dat xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky mohou xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx experiment xxxxxxxxxx opakuje.
Pozitivní výsledky xxxxx xx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx savčích xxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxx dávka - xxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx mutace.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xx zprávě x xxxxxxx pokusu xx xxxxx uvést xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- rozpustnost a xxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxx buněčných kultur,
- xxxxxxxx počet pasáží,
- xxxxxxxx metody kultivace xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x počtu kultur, xxxxxx xxxx. xxxxx x xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx k xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx testované xxxxx,
- inkubační xxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
-xxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx látky,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxxxx xxxxxxxx akceptovatelnosti,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx)
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx,
- metody zjišťování xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxx velikost x xxx (xxxxxx xxxxxxxxxx kritérií xxx xxxxxxxxxxx xxxx "xxxxxx" x "xxxxxxx" koloniemi).
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- údaje o xX a xxxxxxxxxx xxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx kolonií, xx-xx xxxxxxxxx, minimálně pro xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- případné možnosti xxxxxxxxxx zjistit xxxx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxx X5178X XX+/-,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- souběžné xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx,
- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.18. XXXXXXXXX XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX SYNTÉZA XXX - XXXXX XXXXX XX XXXXX
1. METODA
1.1 Princip xxxxxx
Xxxx neplánované xxxxxxx DNA (XXX) xxxxxxxx xxxxx reparační xxxxxxx XXX xx xxxxxx x odstranění xxxxx XXX obsahující xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Test xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (3H-TdR) xx DNA xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x X xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx 3X-XxX je stanoven xxxxxxxxxxxxxxxxx nebo kapalnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x exponovaných xxxxxxx. Xxxxxxxxx se primární xxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx v přítomnosti, xxx x x xxxxxxxxxxxxx exogenního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. UDS xxxx být xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx vivo.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Testované xxxxx a sloučeniny xxxxxxx xxxx kontrolní xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx provádí jenom xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx nesmí nepříznivě xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx potkaních xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx (xxxxxx diploidní fibroblasty).
Xxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx a nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx bod xx xxxxxxx nejméně xxxx buněčných kultur xxx autoradiografii a xxxxx xxxxxx (xxxx xxxx, xx-xx to xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) pro XXX XXX.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx současně xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx pro xxxxxxx hepatocyty xxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-XXXX) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-AAF). Jako xxxxxxxxx kontrolu xxx xxxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx xxx xxx autoradiografii, xxx x xxx XXX bez metabolické xxxxxxxx xxx xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-NQO). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx testované látky
Xxxx xxx použito xxxxxxx koncentrací testované xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxx.
Látky ve xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x koncentracích až xx hranici rozpustnosti xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Pro netoxické xxxxx ve vodě xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx určuje xxxxxx xx případu.
1.2.2.4 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, teplota x xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx aktivace
Pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém xxxxxxxxx. Stabilizované xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému.
1.2.3 Xxxxxxx experiment
1.2.3.1 Příprava xxxxxx
Stabilizovaná xxxxxxx xxxxx xx připravuje xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx z povrchu xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x inkubuje xxx 37 xX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxx, že xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přichytit xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx kultivační xxxxxx.
Kultury xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx založeny xxxxxx vhodné metody.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx
Xxxxxxxx hepatocyty xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxx obsahujícím 3X-XxX xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx xxxx ponořena xx autoradiografické xxxxxx (xxxxxxxxxxxx může být xxxxxx xxxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Stabilizované xxxxxxx linie a xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxxxx techniky: Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx vhodnou xxxx x xxx xxxx xxxxxxxxx působení 3X-XxX. Xxxx xxxxxxxx je xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx typu xxxxx. X xxxxxxxxx nejvyššího xxxxxxx XXX xx xxxxx 3H-TdR xxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx několik xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx mezi těmito xxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x 3X-XxX. X odlišení xxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx DNA xx užívá arginin xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx hydroxyurey xx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx DNA.
Stanovení XXX xxxxxx XXX: Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx X-xxxx, xxx xxxx shora xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx testované látce, xxx xxxx popsáno xxx autoradiografii. Xx xxxxx xxxxxxxxx je XXX xxxxxxxxxxx z xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx XXX x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3H-TdR.
Xxxxxxxx xxxx použity xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx replikace XXX xxxxxxxx.
1.2.4 Analýza
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxxx UDS x xxxxxxx kultuře se xxxxx x X-xxxx xxxxxxxxx. Hodnotí xx xxxxxxx 50 buněk x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Množství xxxxxxxxxxxxxxx 3X-XxX x xxxxxxxxxx xx xxxx x xxxx x velikosti xxx jader x xxxxxxxxxx každé hodnocené xxxxx.
1.2.4.2 Vyhodnocení XXX
Xxx xxxxxxxxx XXX XXX se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx každou koncentraci xxxxxxxxx xxxxx a xxx xxxxxxxx.
Výsledky xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx musí xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
2.1 Vyhodnocení autoradiografie
Xxxxxx inkorporace 3X-XxX xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx jádro xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx v xxxxx je xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x modu.
2.2 Vyhodnocení XXX
Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx zaznamenává xxxx xxx/μx XXX. Xxxxxxxx xxxxxxx dpm/μg DNA xxxxx xx směrodatnou xxxxxxxxx se používají x vyjádření xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx kultury, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, koncentraci XX2,
- xxxxxxxxx látce, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x experimentu,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx schématu,
- pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- způsobech xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx X-xxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx XXX x x xxxxxxxxxxx celkového xxxxxx XXX při metodě XXX,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.19. SCE - XXXXXX SESTERSKÝCH XXXXXXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
XXX xx xxxxxxxxxx xxxx xxx detekci xxxxxxxxxxxx xxxxx DNA xxxx xxxxx sesterskými xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx identických xxxxxxxx XXX mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxxx vyžaduje xxxx x opětovné xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx inkorporací xxxxxxxxxxxxxxxxx (XxxX) xx xxxxxxxxxxxxx XXX xx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx se po xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx XxxX. Xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vřeténka (xxxx. xxxxxxxxx) k akumulaci xxxxx x x-xxxxxxxx xxxxxx. Po ukončení xxxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx analýzu xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (xxxxxx lymfocyty) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (teplota, kultivační xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2 x xxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxx suspenduje v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx buněk, xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxx XXX.
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx savčího xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx této xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx chemických xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Pro xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x pozitivní kontroly
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být zařazeny xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxx s přímým xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Dále xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: etylmetansulfonát
- xxxxxxx působící mutageny: xxxxxxxxxxxxx
Xx-xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx replikaci xxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx za použití xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxx rozpustné xxxxxxxxx xxxxx se určuje xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Stabilizovaná xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx xx zásobní xxxxxxx (trypsinací xxxx xxxxxxxxxx buněk z xxxxxxx xxxxxxxxxx nádoby), xxxxxxxxx se do xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 xX. Xxx xxxxxxxxxxxx kultury xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 50 % konfluentní xxxxxx. Lze xxxx xxxxxx suspenzních xxxxxx. Xxxxxx lymfocytární xxxxxxx xx připraví x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx a inkubují xxx 37 xX.
1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu. Ve xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxx xxxxx, je-li xx xxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx metabolickou aktivitu, xxxx být exponovány xxxxxxxxxx látkou x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Na konci xxxxxxxx xx testovaná xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxx kultivovány x xxxxxxxx médiu x XxxX xxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být buňky xxxxxxxxxx současně x xxxxxxxxxx xxxxxx x XxxX po xxxx xxxx xxxxxxxxx cyklů.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx x semisynchronizovaných xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx s XxxX je xxxxx xxxxxxxx x temnu xxxx xx světle xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx zabránilo xxxxxxxx XXX, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx XxxX.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx čtyři hodiny xxxx ukončením xxxxxxxxx xx do xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.3.4 Příprava xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx cytogenetickou xxxxxxxxx. Xxxxxxx preparátů ke xxxxxxxxxx SCE může xxx provedeno xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxx).
1.2.3.5 Xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxxxx frekvenci XXX x kontrole. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 25 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx před xxxxxxxx. X lidských xxxxxxxxxxx se analyzují xxxxx xxxxxxxx s 46 xxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx x ± 2 xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx SCE x xxxxxxx centromery. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx tabulkovou xxxxxx. Xxxxxxxxxxx se počet XXX v každé xxxxxxxx x xxxxx XXX/xxxxxxxxx zvlášť pro xxxxxx metafázi x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx to možné, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: složení xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádobách, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx, metabolickém xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- počtu xxxxxx xxx každý xxxxxxxxxxxxxx xxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxx XXX/xxxxx x XXX/xxxxxxxxx (odděleně xxx xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.20. XXXXXXXXX XXXXXXX MUTACE XXXXXX XX XXXXXXX U XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx na xxxxxxx (XXXX) na Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx, xxx x malých xxxxxx, v zárodečných xxxxxxx xxxxx. Xx xx test xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx xxxxxxxxxx X. Xxxx reprezentují xxx 80 % všech xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-chromozóm xxxxxxxxxxxx přibližně 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx x X-xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx gen. Když xx mutace xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx její xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx jednoho xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, kteří se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. XXXX xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x zvláštnímu xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxx
Používají xx xxxxx dobře xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx linie Xxxxxx-5. Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx linie xxxxx s vícenásobnou xxxxxxx X-xxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx
Testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx ve xxxx. Xxxxx ve xxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx suspendují xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxx xxxxxxx x Tweenu-60 nebo 80), xxxx xxxxxxxx xx xxxx ředí xxxxx nebo fyziologickým xxxxxxxx. Doporučuje se xxxxxxxxxx dimetylsulfoxid (XXXX) xxxx xxxxxxxx.
1.2.1.3 Počet xxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx mutací x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx ovlivňuje xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx třeba xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxxxxxxxxx xxx xx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx to nutné, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx NaCl a xxxxxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
X xxxxxx pokusu xx xxxxxxxx xxxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx historické xxxxxxxxx xxxxx, xxxx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kontroly.
1.2.1.6 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx předběžný orientační xxxxx xx používá xxxxx dávka rovnající xx maximální xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se testují x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx postupu
Xxxxx xxxxxxxx typu (xx stáří 3-5 xxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx Xxxxxx-5 xxxx x xxxx vhodné xxxxxxxxx linie (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx za xxxxxxx virginní xxxxxx xxxxx xxx xx xxx dny, xxx xxx pokryt xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. U potomků xxxxxx samic xx xxxxxxxx letální efekt xxxxxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, na xxxxxxxxxx xx středním xxxx xxxxxxx stadiu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx X1 xxxxxx narozené x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (tj. xxxxx xxxxxx/xxxxxxxx) xx svými xxxxxx. V X2 xxxxxxxx je x xxxxx kultuře xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx F1 xxxxxx xxxxxxx letální xxxxxx v xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (xxxxxx nalezeni xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), dcery xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx genotypem xxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xx zjistilo, zda xxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx xx xxxxxxxx do xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx hodnocených X-xxxxxxxxxx, xxxxx afertilních xxxxx a počet xxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxx každou xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxx každého testovaného xxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx každého xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx letálních xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx má xxx xxxxx x xxxxx x zhodnoceno xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Zpráva x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx liniích xxxx xxxxxxx Drosophily, xxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxxxxxx X2 kultur, xxxxx X2 xxxxxx xxx potomků, xxxxx xxxxxxxxxx nesoucích xxxxxxx xxxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- kritériích xxx xxxxxxxx ovlivněných skupin,
- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxx dávek, xxxxx x toxicitě, xxxxxxxxx (x rozpouštědlem) x pozitivní xxxxxxxx,
- kritériích xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx údajů,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.21. XXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXX XXXXX - XX XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxx lze použít xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx vivo. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx C3H10T1/2, 3X3, XXX, Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, tvorbu xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx používají systémy xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx po xxxxxxxx karcinogenním látkám. Xxxxx výsledek xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx promotorů. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx účinku testované xxxxx xx schopnost xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx růstu xxxxxxx. Xxx hodnocení cytotoxicity xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, ale xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x určení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, protože x některých mohlo xxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxx
Existuje xxxx buněčných xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx x testu transformace xxxxxxxx xxxxxxxxx fenotypické xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx ověřen x xx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxx transformace.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx suspendují v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx ovlivněním buněk. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx buněk, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Buňky jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx vlastnosti xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontroly
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxx xxxxx působících x vyžadujících xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Musí xxx xxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx (x rozpouštědlem).
Xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxx působící xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-propiolakton,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx, xx možné xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx buněk, x nejnižší koncentraci xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx stejné xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx testovat až xx hranici xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx rozpustné xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Buňky xxxx xxx exponovány xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Ta může xxxxxxxxx x opakovanou xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx (xx. xxxxxxx xxxxxxx metabolické aktivační xxxxx), jestliže xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Buňky bez xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx systému. Na xxxxx xxxxxxxx je x xxxxx propláchnutím xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxxxxx probíhá xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx pro transformaci. Xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xxxx být prezentovány x xxxxxxxxx xxxxx. Xx vhodné vyjadřovat xxxxxxxxx buněk jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx zpracovat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx o:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx použitých x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx aktivačním xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách, hustotě xxxxx xxxxx expozice, xxxxxxxxxxx sledovaného fenotypu, xxxxxxx selektivního xxxxxxx (xx-xx xx vhodné), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx vyčíslení xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- diskusi xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX XXXX U XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Indukce xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx chemické xxxxx xxxxxxxx, že tato xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx exponovaného xxxxxxxxx xxxxx. Obecně xx xxxxxxx, že dominantní xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx poškozením xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxx embrya xxxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxx výsledkem xxxxxxxxx účinku.
Samci xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x pářeni x xxxxxxxxxxxxx, intaktními xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx x exponované skupině xxx xxxxx mrtvých xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx vyjadřuje xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxx x exponované x xxxxxxxxx skupině. Xxxxxxx xxxxxxxxxx letalita xx součet xxx- x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx dominantní xxxxxxxx je xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxx x xxxxxxxxxx skupině x xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx. Snížení xxxxx implantací v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx zánikem xxxxx (x.x. xxxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Látky xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxx nebo xxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx ani xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx pouze xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx informací je xxxxx podávat xxxxx xxxxxxxxx. Obvyklý xxxxxx xxxxxxxx xx orální xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxx i xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Experimentální xxxxxxx
Xxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo myši. Xxxxxx, pohlavně xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xx třeba použít xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xx spontánní xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx se řídí xxxxxx xxxxxxxxx detekční xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx případě xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, xxx xx dosáhlo 30 - 50 xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x negativní (x xxxxxxxxxxxxx) kontroly musí xxx zařazeny xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx má xxxxxxxxx x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxx pozitivních xxxxxxx x nedávných xxxxxxxxxxx, xxxxx být použity. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx musí být xxxxxxx ve vhodných, xxxxxxx dávkách, xxx xxxx xxxxxxxxx citlivost xxxxx (např. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 xx.xx-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx vysoká dávka.
1.2.2.6 Xxxxxxx test
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x jedné xxxxx 5 g.kg-1 xxxx x xxxxx 1 x.xx-1.xxx-1 xxx opakované xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Existuje xxxxxxx xxxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx jednorázová xxxxxxxx. Xxxx však xxx použito jiné xxxxxx.
Xxxxx samec xx opakovaně xxxxxx x jednou xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, intaktními xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx musí xxx x samců xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx, xxxx xxxxx xx neprokáží xxxxxxx xx vagině či xxxxxxxxx zátka.
Počet xxxxxx xx xxxxxxxx xx dán xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx všechna xxxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Samice xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx dělohy xx xxxxxxxx k xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx o xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx a počtu xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x tabulkách. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx každého xxxxx a xxxxxx xxxx uváděny xxxxxxxxxx. Xxxxx samice xxxx xxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, x xxxxx xxxxxx xxxxx, x počtu xxxxxx x mrtvých implantací.
Xxxxxxxxxx celkového dominantního xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx živých implantací xx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx ztrátách.
X xxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx x pozdní xxxxxxxx. Xxxx xxx zaznamenány x preimplantační ztráty. Xx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx corpora xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx možno, informace x:
- xxxxx, xxxxx, věku a xxxx zvířat, xxxxx xxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- testované látce, xxxxxxxxxxxx, dávkových xxxxxxxxx x xxxxxxxx jejich xxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x toxicitě,
- xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx expozice,
- xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- kritéria xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxx/xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX ABERACÍ X XXXXXXX SPERMATOGONIÍCH
1. XXXXXX
Metoda xx xxxxxxxxx XXXX XX 483, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx způsobující strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx chromozómového xxxx xxxxxxx rovněž. Tato xxxxxx xxxx xxxxxx x analýze xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx k xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Chromozómové xxxxxx x příbuzné xxxx jsou x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx předpokládá, že xxxxxx predikovat xxxxxxx xxxxxxxxx mutací v xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx hlodavci. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx buňky.
Xxx xx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx působení testované xxxxx, dříve než xx poškození xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Další xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxx buňky xxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx in xxxx xx určen xx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx aktivní x somatických xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mutagenity xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx procesů XXX.
X testes je xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx citlivosti xxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx tedy xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx spermatogonií, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx jejich polohy xx xxxxxxx pak xxxxx xxxxxxxx spermatogonií xxxxx, ale nemusejí xxx xxxxxxxxxx krevním xxxxxx xxxxx anatomické x xxxxxxxxxxxx bariéře Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Existují-li xxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxx xxxxx pro xxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx obou chromatid, xxxx zlom a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx jako xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: jako zlom xxx hodnotit xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx struktuře xxxxxxxxxx je xxxxx, xxx xx šířka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx v xxxxxxxxx, xxxxxxx (distální) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx dislokovaný (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x důsledku xxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx menší než xxxxx jedné xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Numerická xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) jiný xxx diploidní počet xxxx (3n, 4n xxx.).
Strukturální aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, a xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xx xxxxxxx xxxx po xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xx xx působí xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (například xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). Xx xxxxxxxxxxx xxxxx xx pak připraví xxxxxxxxx x po xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Běžně xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxx, xxx xxxxx použít xxxxx jakéhokoliv jiného xxxxxxxx savčího xxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx dospělých jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx zahájení xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x u každého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jsou uvedeny xx Xxxxxxxxxx úvodu x části B.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Zdraví mladí xxxxxxx jedinci xx xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vlivy xxxx, jak a xxx jsou xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Příprava xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxx stavu x xx-xx xx xxxxx, látka xx xxxx xxxxxxx zvířatům xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx její suspenze xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx podávat xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x používaných xxxxxxx xxxxx vyvolávat toxické xxxxxx x nesmí x testovanou látkou xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx nepříliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx použití podpořeno xxxxx x kompatibilitě x testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx to xxxxx, bylo xx xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx testu xx xxxxx xxx xxxxx pohlaví zařadit xxxxxxxx pozitivní a xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx. Xx xxxxx zacházet xx xxxxxxx ve xxxxx skupinách xxxxxx.
Xxxxxxxxx kontroly by xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx vivo při xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx tak, xxx xxxx účinky xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní kontrolu xx možné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx než xxxxxxxxxx látku x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx je xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní kontrolu xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Příklady xxxxx vhodných xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx | XXX | EINECS |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
monohydrát xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxx xxxxxxx | 79-06-1 | 201-173-7 |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx ovlivněné xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx skupiny xxxx xx být xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zpracování, xxxxx nejsou k xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxx x xxxxxxxxx x o xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx prokazující, xx xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx mutagenní xxxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Počet x pohlaví xxxxxx
X xxxxx zkušební x kontrolní skupině xxxx xxx minimálně xxx analyzovatelných samců.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx dávkách. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx dávku, xxxx xx k xxxxxxxxx aplikace rozdělit, xx. na dvě xxxxx za xxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx několika xxxxx. Xxxxxx režimy xxxxxxxxx xxxxxx být vědecky xxxxxxxxxx.
X případě xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx se vzorky xx xxxxxxxx látce xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxx kinetiku xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx odběr xxxxxx 24 a 48 xxxxx po xxxxxxxx. X ostatních xxxxx (xx. xxxx xxxxx nejvyšší) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx xxxx po 1,5násobku xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxx vhodnější xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (6).
Xxxxx toho xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxx. xxxxx-xx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, nebo xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx S-fázi xxxxx, jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx odběru xxxxxx (1).
Xxx xx xxxxxx nechat xxxxx xxxxxxx opakovaně, xx xxxxxxxx případ xx případu. Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx (1,5xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx aplikace. Xxxxxx xxx xxxxxxxx x x xxxxxxx intervalech, xxxxxxxx-xx xx to xx účelné.
Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injikuje xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x následně xx z xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. U xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3-5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx zhruba 4-5 xxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Provádí-li xx studie ke xxxxxxxx rozpětí toxicity, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx provádět x xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx stejného xxxxxxxxxxx xxxxx, kmene a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx použijí x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx tři xxxxx xxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx pozdější xxx odběru xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx jenom xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, že při xxxxxxx dávkách ve xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.
Látky, xxx x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx z těchto xxxxxxxx pro stanovení xxxxx a vyhodnocují xx případ xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx také xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx vede x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx spermatogoniích (např. xxxxxx poměru mitóz xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx( tento pokles xxxx xxx xxxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx dávce xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx ve xxxx xxxxxxx podaných x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x podobnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx být xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx použití tří xxxxxxxxx xxxxxx. Podle xxxxxxxxx humánní xxxxxxxx xx může xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx sondou, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X odůvodněných xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxx způsoby xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, která xx xx sondou xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx překročit 2 xx/100 x hmotnosti; xxxxx xxxxx xxxx xxx zdůvodněné. X xxxxxxxx dráždivých nebo xxxxxxxx látek, jež xxxxxxxx vykazují xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xxx, aby objem xxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx z xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx připraví xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx. Xxxxxxx suspenze xx nakape xx xxxxxxxx xxxx a xxxxxx.
1.5.7 Analýza
X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx metafází (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx). Xxxxx xxxxx xx xx xxxxxx, xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx a negativních xxxxxxx) se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxxx xxxxxxxxxx, musí xxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxxxx. X každého xxxxxxx xx vyhodnocuje xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx buňku. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxxxxxxxx jednotlivé xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx počet x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx zvlášť, uvádějí xx, xxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxxxx mitóza x xxxxxx, xxxxxxx xx u xxxxx xxxxxxxxx zvířat x xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx jakožto xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx, x to xxx, že xx x každého jedince xxxxxxx 100 dělících xx xxxxx. Je-li xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 1000 buněk x xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X INTERPRETACE XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx frekvence xxxxx x chromozómovými xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxx xx xxxxxxx ovlivněné xxxxxxxxxxxx xxxxxx x s xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vzorků. Nejprve xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (8); xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx vyjasnit xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní.
Xxxxxxx xxxxxxx experimentů xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx nejisté, nebo xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx počet opakovaných xxxxxxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx ukazují, že xxxxxxxxx látka vyvolává x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx širokého xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxx (např. xxxxxxxxx toxicita).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx druh/kmen,
- xxxxx x xxx xxxxxx,
-xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek pro xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx rozpětí toxicity, xxxx-xx provedena,
- xxxxxxxxxx xxxxx velikosti xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxx převod koncentrace xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx dávku (mg/kg xxxxxxxxx / xxx),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx potravy x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx a odběru xxxxxx,
- metody xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx analyzovaných xxxxx xx jedno xxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- mitotický xxxxx,
- xxxxx xxxxx spermatogonií x xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxx x počet xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx,
- počet xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx skupinu,
- xxxxx dávka - xxxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, byly-li provedeny,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,
- historické údaje x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek,
- údaje ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx ploidie.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.24. SPOT XXXX X XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xx xx xx xxxx xxxx na xxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx se embrya xxxxxxxxxx chemickým xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx geny xx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxx ovlivňujících xxxxx srsti. Xxxxxx xxxx xxxxxx dominantních xxxxx x genech xxxxxxxxxxxx xxxx vyjádřeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx buňkách vytvářejících xxxxxx (spots) xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx potomků x xxxxxx skvrnami, xxxxxxxx, xx zaznamenán x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx. Myší xxxx xxxx detekuje xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx buňkách.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx nerozpustné xx vodě xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xx vhodném rozpouštědle. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx nebo vyvolávat xxxxxxx efekt. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Xxxx xxxxx X (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxxxxxx, xxxx xxx, xxx p/cch x; brown, b/b; xxxxxx, short xxx, x se/d se; xxxxxxx xxxxxxxx, x/x) xxxx xxxxxxx xxx x kmenem XX (xxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xx a bp/pa x xx; xxxxxx xxxxx, xx fz/ /xx xx; pearl xx/xx) nebo x xxxxxx X57 XX (xxxxxxxxx, x/x).
Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx křížení, xx xxxxxxxxxxx že budou xxxxxxx xxxxxxxxx potomci. Xxxx. xxxxxxx xxxx xxxxxx NMRI (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxx, x/x) x XXX (nonagouti, x/x; xxxxx, b/b; xxxxxx x/x).
1.2.1.2 Xxxxx x pohlaví zvířat
Xxxxxxx se dostatečný xxxxx xxxxxxxxxx samic, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx xxxxx živých xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx vzorku xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovaných x xxxxxxxxxxx xxxx x x kontrolních myší. Xxxxxxxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx samic xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávkou.
1.2.1.3 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxxxx citlivosti xxxxx mohou xxx xxxxxxx kontrolní hodnoty x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx. Nedávné xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx mutagenním xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x testované xxxxx xxxxxx mutagenita xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx aplikace sondou xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekce xxxxx xxxx. Je-li xx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx způsob xxxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx, z nichž xxxxx vyvolává xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx xxxxx xxxxxx 8., 9. xxxx 10. xxx xxxxxxxx, xxxxxxx za 1. xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zátky. Tyto xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 x 9.25 xxx po koncepci. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx během xxxxxx xxx.
Xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx a čtvrtým xxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx:
(x) xxxx skvrny x xxxxxxx 5 xx xx střední xxxxxxxxx xxxxx, o xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx buněk (XXXX);
(x) žluté xxxxxx typu xxxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxx mléčných xxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx čela x xxxxxxxxxxx se, xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx diferenciace (XXX);
(x) xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (XX).
Všechny xxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxx, ale pouze xxxxxxxx, XX, xx xxxxxxxxx relevantní. Obtíže x odlišením xxxx XXX x XX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx chlupů ve xxxxxxxxxxxxxx mikroskopu.
Xxxxxxxxxxxxx xx nápadné, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Získaná xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx majících jednu xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx somatickými mutacemi. Xxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Údaje xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, informace x:
- xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx samic x experimentální x x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- průměrné xxxxxxxxx xxxx v experimentální x x xxxxxxxxx xxxxxxx při porodu x xxx odstavení,
- dávkových úrovních xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx rozpouštědle,
- xx xxxxxx dni xxxxxxxx byla testovaná xxxxx aplikována,
- x způsobu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx sledovaných xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx s XXXX, XXX x XX x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině,
- xxxxxxx morfologických xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx dávka/odpověď x XX, xx-xx xx možné,
- xxxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX U XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x myší xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x numerické xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx zárodečných buňkách xxxxxxxxx x první xxxxxxxx potomků. Xxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a u xxxxxxxx xxxxxxx ještě xxxxxx X-xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx a XX-xxxxxx xxxxxxxx sníženou xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx X1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx translokací (X-autosom x x-x xxx). Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx ze xxxxxxxxxxxx xx stadiu xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, nebo X1 xxxxx xx xxxxxxx potomků X1 xxxxx. Samice XX xxxx xxxxxxxxxxxxx identifikovány xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx v xxxxxxxx x kostní xxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx nerozpustné, xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx bylo xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx látkou xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Aplikuje xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou být xxxxxxx x xxxx xxxxxx způsoby xxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx verifikaci xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxx specifický kmen. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxx xxxxx xxx xxx x měla xx xxx relativně konstantní. Xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx závisí xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu.
Xxxx xx xxxxxxx provádí xxxxxxxx samců X1 xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx v F1 xxxxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxx exponované xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx také samice X1 generace xxxxxxx, xxx se xxxxxxxx 300 samců x 300 xxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kontrol xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx se jedna xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyvolávající xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, ale xxx vlivu xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx/xxxxxxx xx xxxxx xxxx dalších, xxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxxxx látek se xxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Popis postupu
1.2.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx používá xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx sedm xxx x týdnu xx 35 xxx.
Počet xxxxxxxxx po xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx, že všechna xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx období xxxxxxxxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx. Xx xxxxxx xx třeba zaznamenat xxxxx, velikost xxxx x xxxxxxx mláďat. Xx xxxx xxxx xxxxx x samičí xxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx ze xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx X1 xxxxxxx a následná xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx F1 xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Test xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x X1 xxxxxxxx se může xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x/xxxx analýzou xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx normální x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx myší.
Velikost xxxx: F1 xxxxx xxxxxx x testování xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx klecí xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx stejné xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 18. xxxx xx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx X2 xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx, hned xxxx xxxx odděleni. Xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx X1 xxxxxx, F2 xxxxxxx xxxxxx vrhů xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potomka. XX-xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx z 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx xx. xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx X1 zvířata xxxxxxxx x dalšího xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx F2 xxx dosahuje xxxx xxxxxxxxx předem xxxxxxx xxxxxxxx hodnotu, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x třetí xxxx. X1 xxxxxxx, která xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx normální xx xxxxxxxxxxx xxx X2 xxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx buď xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, nebo xxxx přímo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx analýze.
Xxxxxxx xxxxxx dělohy: Redukce xxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxxxxxx smrtí xxxxxx, xxxxx xxxxxx počet xxxxxxx implantací indikuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx X1 samci jsou xxxxxxxxxxx xxxxx ke 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx ranní xxxxxxxxx xxxxxxxxx zátky. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx 14. - 16. xxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx zárodky.
(x) Xxxxxxxxxxxxx analýza
Xxxxxxx xxx-xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx translokací xxxx xxxxxx na základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxx X x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, že testované xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx F1 xxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 25 buněk x xxxxxxxxx - metafáze X. Analýza xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x kostní xxxxx xx xxxxxxxx x samců s xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx u X1 samic suspektních XX. Přítomnost xxxxxxxxx xxxxxxxx a/nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxx v každé x 10 xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (x-x xxx). Xxxxxxx X-xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx ve xxxxx 10 xxxxxxxx je xxxxxxx xxx XX xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx zaznamenána xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu x xxxxx pohlaví (sex xxxxx).
Xxx xxxxx xxxxxxxxx X1 xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx velikosti xxxx F1 xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x mrtvých xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx počty xxxxxx x mrtvých xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx X1 xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx I xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx počet xxxxx xxx každého xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx X1 sterilní jedince xx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx o cytogenetické xxxxxxx.
X XX xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxx F2 xxxxxxx a výsledky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx, že xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx vybráni xxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxxxxxx, xx třeba x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxx x negativních x xxxxxxxxxxx kontrolách.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx možné, informace x:
- kmenu xxxx, stáří x xxxx xxxxxxxxxxxx zvířat,
- počtu xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx x exponovaných x kontrolních xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, dávkové hladiny, xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxx potomků xxxxxxxxx xxx analýzu xxxxxxxxxxx,
- době x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx včetně xxxxx o xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- popis cytogenetické xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx x obrázky,
- xxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.26. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXX
(90denní xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xx, studie xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx podává xxxxx xxxxxx po 90 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin.
Xxxxxxxxxx xxxxx lze xxxxxxx v xxxxxxx, xxxxxx, v xxxxxxxx xxxx x pitné xxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx po xxxxx xxxx pokusu xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx aditiva, xxxx xxx o xxxx xxxxx, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Existují-li xxxxxx xxxxxxxx xxxx, xx možno je xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou známy xxxxxx xxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x běžně užívaných xxxxxxxxx kmenů. V xxxxxxxx xxxxxxx by xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx mladší xxx 6 xxxxx, x xxxxxx případě xxxxxx xxx 8 týdnů. Xx xxxxxxx xxxxxx xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx test xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx a kmen.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx hladinu xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 zvířat (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx nullipary a xxxxx xxx březí. Xxxxx se zvířata xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx celkový xxxxx zvířat x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxx před xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Dávkování
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dávek x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně jako x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx ve xxxxxxx xxxxxxxx, které obdrží xxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx dávka. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx uhynutí xxxx xxx malý xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx nejnižší xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední xxxxx měla xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx hranicích zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx xx více xxx 3 úrovně xxxxx, mají být xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx.
Xx xxxxxxx x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx dávky x v xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx xxx být xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx výsledků obtížné.
Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx se použít xxx konstantní koncentrace (x xxx xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx dávkování ve xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxx xxxxxx, xxxx xx xx xxx xxx každý xxx xx xxxxxxx dobu, x xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (týdenních xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxx-xx xx 90denní xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx den (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) xxxxx toxické xxxxxx, je xxxxx xx dalšího testování xxxxxxx. Podává-li xx xxxx xxxxxxx xxxxx x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, aby xxx aplikované xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x trvání. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx a xxx, ve kterém xx xxxxxx x xxxx odezní toxické xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x týdnu xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx bez xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx.
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx a krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx (a xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x xxxxxxxx kanibalismu, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
X všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx provádějí xxxxxxxxxxx vyšetření:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx zvířata.
(x) Xx xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx zahrnovat stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(c) Xx xxxxx xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci jater x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxx doby xxxxxxxxx se volí xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), alaninaminotransferáza (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx dekarboxyláza, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx x séru. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx xxx x případě xxxxxxx použity xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx běžný xxxxxx, xxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxx historická xxxxxxxxx data, má xx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx ještě xxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po sekci xxxxx ve xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx x tkáně xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým postižením, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx místě xxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxx, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, slinivka xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, (přídatné xxxxxxxx xxxxxx), (kůže), xxxxx, žaludek, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, tlusté a xxxxx střevo, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx mléčná xxxxx), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxx, (kost xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx), páteřní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x bederní, x (xxxxx xxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx lze xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x příznaků xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx je xxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx skupiny, které xxxx podána xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxx skupinách.
(x) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x střední dávkou xx xxxx histopatologicky xxxxxxxxxx x zjištění xxxxxxxx infekce, xxxxxxx xx poskytuje obraz xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx také xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxx a ledvin x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx histopatologická vyšetření xx u zvířat xxxxxx skupin xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx postižení ve xxxxxxx s vysokou xxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx satelitní skupiny, xxxx se provést xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx, x kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xxxxx zvířat x xxxxxxxxxx x procentuálně xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx typy xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx uznávanou statistickou xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx - úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle pohlaví x xxxxx xxxxx,
- xxxxxx bez xxxxxx, pokud xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx konce sledování,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx příznaky a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x vývoj tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické vyhodnocení xxxxxxxx, kde xx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.27. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx podávání xxx xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx), x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx během xxxxxx, x zvířata, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx mladá dospělá xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx jednotlivých experimentálních xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx nebo xxxx xxx xxxxxxxxx podávání x xxxxxxxx. Xxxxx xxx použity také xxxx xxxxxxx orální xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx po celou xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx o xxxx xxxxx, že xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx historická xxxx, je možno xx využít.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx xxxxxxx pes: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx i xxxxxx xxxxx nehlodavců. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx zdravých xxxxxxxxx; v případě xxx xx má x podáváním xxxxx xx xxxx xx 3 do 6 xxxxxx x xx xxxxxxx xxx 9 xxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x plemeno.
1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx nejméně 8 xxxxxx (4 xxxxxx x 4 xxxxx). Počet xxxxxx xx xxxxx pokusu xxxx být takový, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
1.2.2.3 Dávkování
Xx třeba xxxxxx xxxxxxx tři xxxxxx x jednu kontrolní xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické účinky, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx neměla vyvolat xxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx nejnižší xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx xxxxxxx xxx toxický xxxxxx na hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx než 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx ani xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
Podává-li xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx konstantní xxxxxxxxxxx (x ppm xxxx mg.kg-1 xxxxxxx) xxxx konstantní xxxxxxxxx xx vztahu k xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx alternativu xx xxxxx uvést. Xxxxxx-xx xx látka přímo, xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx by xx xxx dít xxxxx xxx ve xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx změnám xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx test xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Provede-li 90denní xxxx xxxx popsanou xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx den (xxxx xxxxx vyšší - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, je-li xxxx xxxxx) xxxxx toxické xxxxxx, xx možno xx xxxxxxx testování xxxxxxx. Podává-li xx xxxx xxxxxxx xxxxx x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx aplikované množství xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebránily xxxxxxxx výživě xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xxxxxx xxxx objevení, xxxxxx a xxxxxx. Xx třeba zaznamenat xxxx xxxxxxx x xxx, xx kterém xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx jiným xxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xx za xxxxxxxxxx podávat xxxxx 5 dní x xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx není na xx omezeno) xxxxx xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx autonomní a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.
Xxxxxx potravy (x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat pro xxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, humánně xxxxxxx x pitvat.
X xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx obvykle xxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx konci studie xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, ale xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Najdou-li xx xxxx změny, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Na začátku xxxxx, x xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx uprostřed x dále xx xxxxx pokusu xx xx provést hematologické xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx například xxxx srážlivosti, protrombinový xxx (Xxxxxxx), trombinový xxx xx počet xxxxxxxxxx.
(c) Xx xxxxxxx testu, x xxxxx buď x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx xx konci xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx testů je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (přičemž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx transamináza séra) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, dusík xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xx více xxx 24 hodin).
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxx, xxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx pozorované xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U všech xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx provede xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx xxxxxxx otvorů, xxxxx, xxxxxx a xxxxxx dutiny xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, štítná xxxxx (s příštítnými xxxxxxx) a varlata xx co xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx médiu x xxxxxxx na možná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, mozek - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, štítná žláza, xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx xxxxx xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx pohlavní xxxxxx), (xxxx), žlučník, jícen, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, tenké, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, močový xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxx, (kost xxxxxxxx xxxxxx kloubních xxxxx) x (xxxxxxx xxxxx ve xxxxx xxxxxxxx - krční, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx to xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx histopatologické vyšetření xxxxxx a xxxxx xx xxxxx provést x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx dávka, x x zvířat xxxxxxxxx skupiny. Histopatologické xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx provedena xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxx xx xx xxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do tabulky. X ní musí xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx, xxxx poškození x xxxxxxxxxxxx počet xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx poškození. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou metodou. Xx k tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxxxxx nebo xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx podmínky,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, pokud se xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx lze stanovit,
- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo jiných xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx),
- doba, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální příznaky x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- spotřeba xxxxxxx x vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx všech histopatologických xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, studie xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx aplikuje xxxxx xx xxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx xxxxxxx jedna xxxxxx dávky. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx během xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx přežijí do xxxxx pokusu, se xxxxxxx.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx xxxx zvířata chována x xxxxxxxxxx ustájení x krmení, v xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx srst xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, mělo xx se xxxx xxxxxxx cca 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx opakovat xxxxx týden. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx na xx, xxx xx nepoškodila xxxx (např. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % povrchu těla. Xx xxxxx xxxx x úvahu hmotnost xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx připravované xxxxxx xxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx upraveny xx xxxxxxxx xxxxx, je xxxxx zkoušenou xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx denně 5 xx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx potkany, králíky xxxx morčata, xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx, jejich použití xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Na začátku xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx subchronický xxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx každou úroveň xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx) xx zdravou xxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být xxxxx. Xxxxx se zvířata xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvýšit celkový xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx xxxxx podávat xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx nebo - xxxxx xx použilo xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Doba xxxxxxxx xx být nejméně 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx stejnou xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx se se xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokusným xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx skupina, které xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Nejvyšší hladina xxxxx má vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v xxxxx počtu. Nejnižší xxxxxxx dávky xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Ideálně xx střední xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx více xxx 3 xxxxxxx xxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxx skupině xx počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Vede-li xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx podráždění xxxx, xx xxxxx xxxxxx koncentraci, xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. Došlo-li x xxxxxxx poškození xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ukončit a xxxxxxx xxx xxxxx x nižšími koncentracemi.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxx vyšší xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, xxxxx toxické xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávat xxxxxxx účinky. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a čas, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx chovají x xxxxxxx xx jednom. Xxxxxxxx xx studované xxxxx xxxxxxx 7 xxx x týdnu xx xxxx 90 xxx. Zvířata satelitní xxxxxxx, která jsou xxxxxx xxx následné xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx po dalších 28 xxx xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx přetrvávání. Xxxx xxxxxxxx činí nejméně 6 xxxxx denně.
Xxxxxxxxxx látku xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % xxxxxxx xxxx, x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx pokrýt xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx rovnoměrně v xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xx expoziční xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxx plochu je xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx orálnímu xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx.
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, xxx a xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolu xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx studie xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx přežila, x xxxxxxxx satelitních xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx či xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
U všech xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx nejlépe x xxxxx xxxxxx, xxx alespoň x xxxxxxxx dávky x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx pokusu xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(c) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx testů je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxxx trvání xxxx hladovění xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) a aspartátamino xxxxxxxxxxx séra (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx transamináza), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx xxxxxxxxx x séru. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, hormonů, acidobasické xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro studium xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxx, má xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, lební, hrudní x xxxxxx dutiny xxxxxx jejich xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx ve vlhkém xxxxx, aby se xxxxxxxx vysychání.
Následující xxxxxx a tkáně xx třeba přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x ohledem na xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra xxxxx a mozečku, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx, příštítná xxxxxxx, xxxx na xxxxx xxxxxxx, (xxxxxxxxxx), plíce, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), játra, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, přídatné xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, močový xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzliny, (xxxxxx xxxxxx žláza), (xxxxxxxx xxxx), periferní xxxx, (xxx), (xxxxxx xxxx s kostní xxxxx), (xxxx stehenní xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx ve xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, střed xxxxxx x xxxxxxx) x (xxxxx xxxxx). Xxxxx x závorkách xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx indikováno xxxxx xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(a) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx a tkání xx třeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx makroskopická xxxxxxxxx.
(x) Je třeba xxxxxxxx xxxxxx orgány x xxxxxxxxx dávkových xxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx histopatologicky vyšetřovat x xxxxxxxx příznaků xxxxxxx, protože xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření se x xxxxxx xxxxxx xxxxxx nemusí provádět xxxxxxx, xxxx xx xxxx provést vždy xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xx skupině x xxxxxxx dávkou.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x orgánech, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný počet xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x počet xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k tomu xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx,
- úrovně dávek (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,
- údaje x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat xx xxxxx sledování,
- xxxxx toxických nebo xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- oftalmologické xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- biochemická vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx to xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
X.29. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX - XXXXXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx inhalační xxxxxxxx - xxxxxx xx hlodavcích)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx pokusných xxxxxx xx exponováno xxxxxxxxx xxxxx denně xx xxxxxxx xxxx, v xxxxxxxxxxxxxx koncentracích, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xx po 90 xxx. Xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx skupinu xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, která xxxxxxx xx konce pokusu, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx před xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx zvířata náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx třeba, přidá xx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné vehikulum xxx, aby v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jiná xxxxxxx, xxxx být x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Existují-li vhodná xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx je xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx xxxxx tomu. Xxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx užívaných pokusných xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xxxxxxxxx ± 20 % střední hodnoty. Xxxxxxx-xx xx subchronický xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx test xxxx xxxxxxxxxxx testem, x xxxx xxxxxxxx se xx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Pokud xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, xxxxx budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx exponovat xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx skupinu) 20 zvířat (10 xxxxxx každého xxxxxxx) xx dobu 90 xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Expoziční koncentrace
Xxxxxxx xx nejméně xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx koncentrace x jedna kontrolní xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx - pokud xx xxxxxxx - v xxxxxxxxxxx stejné xxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx). X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx zvířaty x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx xxx x xxxxx počtu. Pokud xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx střední xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx měl xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx expozice
Zvířata xx exponují xx xxxx 6 xxxxx xx ustavení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. X případě specifických xxxxxxxxx xx možné xxxxxx x jiných xxx xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pro expozici xxxxxx xx používá xxxxxxxxx inhalační zařízení, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx box, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx inhalační xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x inhalačním boxu xxxxx by v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxx inhalační xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, samotné xxxxx xxxx individuální celotělové xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx látky jinými xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx zvířata xx xxxxx denně xxxxxxxxx xxxxx celého období xxxxxxxx x zotavení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx dobu uhynutí x xxx, ve xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx účinky.
1.2.3. Popis xxxxxxx
Xxxxxxx xx exponují xxxxxxxxx xxxxx denně, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx dalších 28 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x otravy xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx být 22 xX ± 3 xX. Relativní xxxxxxx xx xxx mezi 30 % a 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, kde xx není možné (xxxx. xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx). Během expozice xx xxxxxxxx potrava xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx potřebných xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xx třeba xxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx x celém xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx bude dosaženo xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Měření xxxxxxx vzduchu (kontinuálně).
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxx xxxx. Během xxxxx xxxxxxxx xx nemá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x xxxx než ±15 %. U xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx není možné xxxxxxxxx, se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xx prakticky xxxxx. Xxx vývoji xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx expozic xx měří xxx xxxxx, jak xx xx potřeba pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxxxx a vlhkost xxxxxxx
x) Xxxxx xxxxxxxx x xx xx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx se zaznamenávají; xxxxx xxxxx má xxxx xxxxxxxxxxxx protokol. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx příznaky toxických xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx i xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx chybného xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx všechna xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx zvířata je xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
U xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx provádějí xxxxxxxxxxx vyšetření:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx oftalmoskopem xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx dávky a x kontrolních skupin. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx pokusu xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx zahrnovat stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x diferenciálního počtu xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Quickův), xxxxxxxxxx čas xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (trvání xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx živočišného xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl transpeptidáza, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx biochemické xxxxxxx mohou být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro rozšíření xxxxxxx pozorovaných xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje xxxx xxxxx postup, xxx xxx xx podkladě xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxx dřívější kontrolní xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx prohlídku xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, lební, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx x jejich obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx se co xxxxxxxx po xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, aby xx xxxxxxxx vysychání.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x tkáně xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx (mají xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, zvážit x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx aby xx zachovala xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx vhodnou), tkáň xxxxxxxxxxx, xxxxx - x řezech xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx místě xxxxxxx, xxxxxxxxxx, srdce, aorta, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, děloha, (přídatné xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx (je-li xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzliny, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ploch), (páteřní xxxxx ve třech xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx je to xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x ostatních orgánů x xxxxx je xxxxx xxxxxxx u xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx exponována xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx vyšetřit všechny xxxxxxxxxxxxx léze.
(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx zvířat xx skupinách x xxxxxx a střední xxxxxxxxxxx xx mají xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx poskytuje xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx rutinně, musí xx xxxx provést xxxx xx xxxxxxxx, xx kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x orgánech, x xxxxxxx byly zjištěny xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x počet xxxxxx x xxxxxx, xxx xxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx typy xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Je x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx uznávanou xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení,
- xxxxxxxx pokusu: Xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, systému xxxxxxxx částic x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx likvidace odpadního xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx vzduchu, xxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrací x distribuce velikosti xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x uvedou xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (např. směrodatnou xxxxxxxxx). Mají xxxxxxxxx xxxx údaje:
a) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx přiváděné xx xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
x) povaha xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxx,
x) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxx,
x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxxx),
- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x podle xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx ji xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx sledování,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků,
- xxxx, kdy byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy a xxxxx xxxxxxx hmotnosti,
- oftalmologické xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- biochemická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde je xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.30. XXXXXXXXX XXXXXXXXX TOXICITY
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx podávána xxxxxxxx xxxx xxx x týdnu, vhodnou xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx část xxxxxx zvířat. Během x po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx denně pozorována xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx standardních podmínkách xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx testem xxxx xxxxxx, mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2 Testovací podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx potkan. Xx xxxxxxx předchozích xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x další xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxx). Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxx jedince xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx mláďat. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx ve xxxx zvířat xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X případě, xx vlastní xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx a xxxx x xxxx studiích.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx 40 xxxxxx (20 xxxxx x 20 xxxxx), xxxxxx x xxx xxxxxxxxx skupinu. Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x neměly xx být xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
X případě xxxxxx xxxxx zvířat (xxxxxxxxxx) je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxx xxx 4 xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxx xxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx toxicity xxx nadměrné xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx by měly xxx voleny xx xxxxxxxx xxxxx mezi xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Výběr dávek xx xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx studií.
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx vodě xxxx x potravě, xx xxxxx zajistit, xxx x xx měla xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx je identická x xxxxxx xxxxxx x exponované xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xx zvláštních xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx použije-li xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx ani xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx způsobu xxxxxx závisí xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Použití xxxxxxxx aplikace vyvolává xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx systémová xxxxxxxx x xxxxxxxx kožního xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx orálního xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx testů xxxxx toxicity.
Xxxxxx xxxxxx
Xxx, kde xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx proti xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx dostat xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x pitné xxxx nebo xxxxxxx x xxxxxxx.
Ideálně xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx sedm xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x týdnu xxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx vyvolat "abstinenční" xxxxxxxx x období xxx xxxxxxxx, x xxxxx ovlivnit xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, především x xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx přijatelné.
Inhalační xxxxxx
Xxxxxxx inhalační xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxx aplikace, xxxx xxx xxxxxxx podrobněji xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace může xxx xxxxxxx alternativou x xxxxxxxxxxxx situacích.
Xxxxxxxxxx expozice obvykle xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx exponováno xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx denně xx pět xxx x xxxxx (přerušovaná expozice), xxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx sedm xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx x xxx čištění expozičního xxxx. X obou xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx a stálou xxxxxxxx xx x xxx, xx x xxxxx xx zvíře 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x ještě delším xxxxxxx xxxxx víkendu.
Xxxxx přerušované xxxx xxxxxxxxxxx expozice xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x na xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx má xxx simulována. Nicméně, xx xxxxx xxxx x úvahu určité xxxxxxxxx obtíže. Například, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx simulaci podmínek xxxxxxx prostředí mohou xxx xxxxxxxx nutnosti xxxx x krmení xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) generace xxxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace xxx x technik xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxx x inhalačních xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx proud xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx udržuje xxxxx xxxxxxx x tím xx brání úniku xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx minimalizovat xxxxxxxxxx testovaných xxxxxx. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx x komoře xxxxx xxxxxx neměl xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(a) průtok xxxxxxx: xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx nejlépe xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx denní xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx než 15 % xxxxxxx xxxxxxx;
(x) xxxxxxx x xxxxxxx: xxx hlodavce, xxxxxxx xx xxxx xxx udržována v xxxxxxx 22 ± 2 xX x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx případů, xxx xx xxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx průběžně;
(x) xxxxxx velikosti xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx částice xx měly být x respirabilní xxxxxxxxx xxx xxxxxxx testovací xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx zóny xxxxxx. Vzorek xxxxxxx xx měl být xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým je xxxxx exponováno, a xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému suspendovanému xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx respirabilní. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx stabilitu aerosolu, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx často, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 12 xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
1.2.3.1 Pozorování
Xxxxxxx klinické xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx měla být xxxxxxxxx denně x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxx xxxxxxx xx lednice x xxxxxx, která jsou xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx nebo moribundní. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx sledovat, aby xx spolehlivě zachytil xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinků, x také xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nemocí, xxxxxxxx xxxx kanibalismu.
Xxxxxxxxxx xx klinické xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x očních xxxx x všech zvířat, x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx.
Hmotnost se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Je třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x vody xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx vodě) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx přibližně ve xxxxxxxxxxxx intervalech, ledaže xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx ukázaly xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx sledování.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxx krvinek, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx měla xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx x poté x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx na xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx nehlodavců resp. xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx xx xxxxx, vzorky xx xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx xx xxxxxxxx potkanů. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxx klinické xxxxxxxxx xxxxxx naznačí zhoršený xxxxxxxxx stav zvířat xxxxx xxxxxx, měl xx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek xx xxxxxxx ve xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxx údaje x xxxxxxxxx patologických xxxx xxxxxxx nutnost, xxxxxxx xx x x xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxx nižší.
1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx
Vzorky xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xx stejných xxxxxxxxxxx xxxx hematologické zkoušky. Xxxxxxxxxxx stanovení xxxx xxxxxxxxx buď na xxxxxxxx jednotlivých zvířat, xxxx xx xxxxxxx xxxxxx pro skupiny xxxxx dávek a xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, okultní xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx- kvantitativně).
1.2.3.4 Biochemické xxxxxxxxx
V xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx závěr xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx nehlodavců x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx tytéž xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. X těchto xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- testy xx xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx transaminázy1), xxxxxxxx xxxxxx transaminázy2), xxxxx xxxxxxxx transpeptidázy, ornithin xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx,
- xxxxx na xxxxxx xxxxxx, např. xxxxx močoviny x xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx aminotransferáza
2) xxxx známá xxxx xxxxxx aspartát aminotransferáza
1.2.3.5 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxx těch, která xxxxxxx xxxxx pokusu xxxx xxxx utracena x moribundním stavu. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx mohly xxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx. Xxxx xx xxx provedeno xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx změn x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Všechny xxxxxx a xxxxx xx měly být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. To xx xxxxxxx týká xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x tkání:mozku3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x plic, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), sleziny, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), jícnu, žaludku, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx měchýře, xxxxxxxxxxxx uzlin, slinivky, xxxxx3), xxxxxxxxxxx pohlavních xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, svaloviny, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), sterna s xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx plic x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální cestou xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zkoumání. Xx speciálních xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx x hrtanu.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, informace xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx k xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx vyšetřením, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodítko.
3) xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx xxxxxxx a xx xxxxxxx x xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxx xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx tumory a xxxx léze vyskytující xx v kterémkoli xxxxxx, mají xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx následující xxxxxxx:
(x) mikroskopické xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx nalezených:
1. x všech xxxxxx, která xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
2. x všech zvířat xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxx xx tkáně xxxxxxxxx abnormity xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou xxxx xxxxxxxx také ve xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx života xxxxxx xxxx vyvolání xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx toxickou xxxxxxx, skupina x xxxxxxxx nižší xxxxxx xx xxxxxxx popsaným xxxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxxxx se normálně xxxxxxxxx v použitém xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx laboratorních xxxxxxxxxx, xx. xxxxxxxxxx kontrolní xxxxx, xxxx xxxxxxxx xxx správné xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změn xxxxxxxxxxxx x xxxxxx s xxxxxxxxxxx látkou.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxx tabulek, xxxxxxxxxxx xxx každou testovanou xxxxxxx xxxxx zvířat xx začátku xxxxx, xxxxx zvířat vykazujících xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx lézí. Výsledky xx měly xxx xxxxxxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx uznávané xxxxxxxxxxx metody.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx o xxxxx xxxx pokud možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, zneškodňování xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx používá. Dále xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, a xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx (např. standardní xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
(x) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx aparatury xxxxxx objemem vzduchu)
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx
(e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx
(x) xxxxxxx velikosti xxxxxx (xx-xx xx xxxxxxxxxx)
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dávky
- xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxx
- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx
- xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx
- doba, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx abnormální xxxxxxx x jeho xxxxx xxxxx
- xxxx x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxx hematologické xxxxx x výsledky
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx moči)
- xxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx
- interpretace xxxxxxxx.
X.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X NEHLODAVCI
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Testovaná xxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx několika xxxxxxxx březích pokusných xxxxxx, xxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx samice xxxxxxxx x jejich xxxxxx x x xxxxxxx je použita x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx studium xxxxxx- x xxxxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx věku x xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx před započetím xxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx samci x xxxxxxxx plodností. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx do experimentálních xxxxxx.
Oplodnění xxxx xxx zajištěno přirozenou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Aplikace xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx x pokračuje xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x podrobeny sledování xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx zpomaleného xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x krvácení do xxxxxx.
1.2.2 Testovací xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx druhy xxxx xxxxxx, xxx, křeček x xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx jsou potkan x xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx všeobecně xxxxxxxx kmeny. Používaný xxxx xx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxx by xxx x xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx použít aspoň 20 březích xxxxxxx, xxxx nebo xxxxxx xxxx 12 březích xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxx a xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx a jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, že xx xxxxxxxxx látka podána xx vehikulu, xx xxxxx xxxxxxxx do xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx podáno xxxxxxx xxxxxxxxx. Je xxxxx také xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx mít xxxx xx reprodukční xxxxxxxxxx. Xx zvířaty v xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxx x testovací skupině x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxxxx chemické xxxx biologické xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xx x xxxxxxxx xxxxxxx měla u xxxxx vyvolat takové xxxxxxx toxicity, jako xx xxxxx xxxxxxx xxxx, xxx xx xx xxxx xxx 10 % úmrtí. Xxxxx úroveň xxxxx xx neměla xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxx geometricky xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x vysokou xxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
V xxxxxxx, xx xxxxx x xxxxxx toxicitou xxx dávce nejméně 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx embryotoxicity xxx teratogenicity, xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx úrovních xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Nultým xxxx xxxxx xx xxx, kdy xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxxx (pokud xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx hlavní xxxxxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 6. xx 15. xxx x xxxxxxx x myši, 6. xx 14. xxx x xxxxxx a 6. xx 18. xxx x xxxxxxx. X xxxxxxx, že xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxx pozorováno xxxxxx nebo byla xxxxxxxxx umělá xxxxxxxxxx, xx xxxxx připočítat x xxxxxxxxxx údajům xxxxx xxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx končí xxxxxxxx jeden xxx xxxx xxxxxxxxxx porodem.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxx x xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx za účelem xxxxxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx sondou, xxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx samicím xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx období testu. Xxxxx může xxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx na počátku xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti během xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx posledního xxxxxx. Xxxxxxx známky xxxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx utratit x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxx pokračovat x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx před porodem. Xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx většinu xxxxxx xxxxxxxx, xxx vyhnout xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxxx. Pozorování xxxxxx v xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx, oběhového, xxxxxxxxxxx x centrálního xxxxxxxxx xxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Každý xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
Xxxxx xxxxx x uhynutí xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, je xxxxx x xxxxx makroskopicky xxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxx xx xxxxxx březosti. Xxxxx xx smrti xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx embryí x zárodků x xxxxxxx počet xxxxxx xxxxxxx. Obvykle je xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx. U potkanů x králíků xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx určit pohlaví xxxxxxx x zaznamenat xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x vypočítat xxxxxx. Xx xxxxxxx xx xxxxx jednotlivě zevně xxxxxxxx každý zárodek. X potkanů, myší x křečků xx xxxxx vyšetřit xxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxx xxxxx třetiny xx xxxxxxxx xxxx x x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx abnormity xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx vnitřností x xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx třeba xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, udávající xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x abnormalitami xxxxxxx xxxx měkkých xxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x určitým xxxxx. Výsledky xx xxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1. Xxxxxx x xxxxx
Zpráva x xxxxx by xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- podmínky xxxxx,
- xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx) a xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxx xxxxxx (xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx),
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx potravy,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxx (včetně historických xxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxx (živé/mrtvé, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx tkání),
- údaje x xxxxxxxxxxxx vrzích (xxxx/xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.32. XXXX XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx obvykle xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx cestou, xxxxxxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx a xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx zvířata denně xxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx projevů xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx tumorů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx podmínkách xxxxxxxx x krmení xxxxxxx xxx dní xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x exponovaných xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx je potkan. Xx základě předchozích xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx by měla xxx xxxxxxxx co xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx začátku xxxxxx xx xxxxx xxx rozdíl ve xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % od xxxxxxx. X xxxxxxx, xx vlastní xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity, je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 samic x 50 samců) xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x souběžná xxxxxxxxx skupina. Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx. Xx-xx plánováno průběžné xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx zvýšit x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx takto xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Dávkové xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx mírný xxxxxx xxxxxxxx přírůstků (xxxx xxx 10 %), xxx podstatnějších xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx účinky xxx tumory.
Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň by xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx vysokou x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx vzít x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x studie xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx nebo xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x exponovanou skupinou, xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx orální xxxxxxxx emulgátoru, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx cesty aplikace xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx závisí xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.5.1 Orální xxxxxx
Xxx, kde xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx traktu x je-li xxxxxx xxxxx x cest, xxxxx může být xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx mohou xxxxxx xxxxxxxxxx látku x xxxxxxx, rozpuštěnu x pitné vodě xxxx podanou x xxxxxxx.
Xxxxxxx by xx měla xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x týdnu, protože xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x období bez xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx výsledky x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x ohledem xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx týdně xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Dermální studie
Xxxxxxxx xxxxx na xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx simulace xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx způsob xxxxxxxx kožního xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx studie
Protože xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx způsoby aplikace, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx podání. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace xxxx xxx platnou alternativou xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, takže zvíře xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx koncentrace xxxx hodin xxxxx xx pět xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx v xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx po xxxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxxx ve xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx i pro xxxxxxx expozičního xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx koncentracím xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx v xxx, xx x první xx zvíře 17 - 18 xxxxx xx xxxxx účinků xxxxx xxxxxxxx x xxxxx delším xxxxxxx xxxxx víkendu.
Volba xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xx lidské expozici, xxxxx xx být xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx v xxxxx určité xxxxxxxxx xxxxxx. Například, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx nutnosti pití x xxxxxx během xxxxxxxx x potřebou xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx komorách, jejichž xxxxxxxxxx xxxxxxxx dynamický xxxxx pro nejméně 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx zajištěn dostatečný xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx expoziční xxxxxxxxx. Kontrolní x xxxxxxxxx komory xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Uvnitř xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx podtlak x xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Komory xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx v zájmu xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(a) Xxxxxx xxxxxxx: rychlost xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx by xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx xxxxxxx více xxx ± 15 % střední xxxxxxx.
(x) Xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx udržována x xxxxxxx 22 ± 2 °X a xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxxx průběžně.
(x) Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx xx xxxx být x respirabilní velikosti xxx xxxxxxx testovací xxxxx. Vzorky xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx zóny xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měl xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx distribuci xxxxxx, kterým xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx gravimetricky xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, i když xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx respirabilní. Xxxxxxx xxxxxxxxx částic xx xxxx xxx prováděna xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx stabilitu aerosolu, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx větší xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxxx použitého xxx xxxx. Xxxx xx měl xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx u xxxx x křečků a 24 xxxxxxxx u xxxxxxx. Xxxxxxx, pro xxxxxxx xxxxx zvířat x delší xxxxx xxxxxx xxxx. x xxxxxx xxxxxxxxxx výskytem xxxxxx xxxx ukončení xx měla být 24 měsíců pro xxxx x křečky x 30 měsíců xxx potkany. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx takové xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx, xxxx počet přežívajících x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx klesne na 25 %. Při xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx pohlaví xx xxxxxxxx zvlášť. Xxx, xxx xxxxx předčasně xxx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx to nutné xxxx x xxxxxxxx xxxxxx testu, xxxxx xxxxxxx skupiny nevykazují xxxxxxx projevy, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx výsledek xxxxx, xxxxx být xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx xxxxx než 10 % x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxx 50 % v 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx a x 24 měsících x xxxxxxx.
1.3 Popis xxxxxxx
1.3.1 Pozorování
Denní xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxx, xxx a xxxxxxx, xxxxx i xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx nervového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, xxx xx zabránilo xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx. Moribundní xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx příznaky x xxxxxxxxx xx xxxx být zaznamenány x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: doba xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx hmatného xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx tam, xxx xx testovaná xxxxx podávána x xxxxx vodě) xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx a pak xxxxxxxxx xx tříměsíčních xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx jiné xxxxxxxxx sledování.
Tělesné xxxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx jednou xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx jednou xx čtyři týdny xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Klinická xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Pokud xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx stavu xxxxxx xxxxx studia, xx xxxxx vyšetřit xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek.
Xx 12 xxxxxx, xx 18 xxxxxx x xxxx utracením xxxxxx se provede xxxxxx nátěr ze xxxxx xxxxxx. Diferenciál xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx patologických změn xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx, xxxxx zemřela xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxx tumory xxxx xxxx, nebo xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx tumory, je xxxxx uchovat.
Následující xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx ve vhodných xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření: xxxxx (xxxxxx řezů xxxxxxxxxxx míchy/mostu, mozečkové xxxx, xxxx mozkové), xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xxxxx, xxxxxxx a xxxxx, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx, akcesorní xxxxxxxx orgány, kůže, xxxxx, žaludek, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xxxxxx, tračník, konečník, xxxxxx xxxxxx, representativní xxxxxxxxxx xxxxxx, samičí xxxxxx xxxxx, svalovina xxxxxx, xxxxxxxxx nerv, xxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx kost xxxxxx kloubu, mícha xx xxxxx xxxxxxxx (xxxxx, střední xxxxxx x xxxxxxx) x xxx.
Naplnění xxxx x močového měchýře xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx uchování xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx x inhalačních xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxx respirační xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
(x) Úplná xxxxxxxxxxxxxx xx provede v xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx během xxxxx, x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x nevyšší xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx okem x xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx jako xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx.
(x) Xx-xx xxxxxxxx rozdíl x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx skupinou x xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx skupinou, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x daném xxxxxx xx xxxxx i x xxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xx-xx přežití xx skupině x xxxxxxx dávkou podstatně xxxxx xxx x xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxxx nižší xxxxxx.
(x) Xx-xx ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mohly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx dávkovou xxxxxx.
2. ÚDAJE
Údaje xx sumarizují xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, dieta,
- podmínky xxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx pro vytváření xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx zvířat v xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx používá. Dále xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, xxxxxxxx, a xxx, xxx xx xx žádoucí, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx velikosti xxxxxx aerosolu. Údaje x xxxxxxxx: ve xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x měly xx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
(d) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx zóně,
(x) xxxxxxx velikosti xxxxxx (tam xxx xx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx tumorů podle xxxxxxx, xxxxx a xxxx tumoru,
- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznak x xxxx další xxxxx,
- xxxx x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxx hematologické xxxxx x výsledky,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx metod,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.33. XXXXXXXXXXX XXXX XXXXXXXXX TOXICITY/KARCINOGENITY
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx chronické xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx dlouhodobé xxxxxxxx.
Xxx xxxxx účel xx xxxx karcinogenity xxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx tuto xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx karcinogenity. Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jak xx xxxxxxx toxicitu, xxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupině xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxxx xxxx dní x xxxxx, vhodnou xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx na skupinu, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx denně xxxxxxxxxx xx xxxxxx sledování xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Zvířata xx xxxxxxx x pokusných xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělí xx kontrolních x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Experimentální xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx studií xx možno xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx x nehlodavce). Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx kmenů xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Expozice xx xxxx xxx xxxxxxxx co nejdříve xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx studie xx xxxxx xxxxxx xx váze xxxxxx xxxxx více xxx ± 20 % xx průměru. X xxxxxxx, že vlastní xxxxxx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx druh a xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro hlodavce xx xxxxxxx nejnémě 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) xx xxxxxx xxxxxx dávky x xxxxxxxx kontrolní skupina. Xxxxxx xx xxxx xxx nullipary x xxxxxxxxxx. Je-li xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx zvýší x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx před koncem xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jiné, xxx jsou xxxxxx, xx každá xxxx xxxxxxxxx 20 zvířat xxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx test xxxxxxxxxxxxx xx zvolí xxxxxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxx kromě xxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň by xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx mírný xxxxxx xxxxxxxx přírůstků (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxxx xxxx dožití xxxxxx xxxxxx účinky xxx xxxxxx. Nejnižší xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x xxxxxx života xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx známky toxicity. Xxxxxx by xxxxxx xxx nižší xxx 10 % vysoké xxxxx. Střední xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxx a xxxxxx dávkou.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx úrovní xx se xxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.
Pro xxxxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx skupiny a xxxxxxxx xxxxxxxxx satelitní xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx se xxxxxxx obvykle denně. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.4 Kontroly
Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx případech, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx aplikaci xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx charakterizována, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Způsob xxxxxxxx
Xxx xxxxxx cesty xxxxxxxx jsou xxxxxx, xxxxxxxx x inhalační. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx fyzikálních x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Xxx, kde xx testovaná xxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xx-xx xxxxxx xxxxx z xxxx, xxxxx xxxx xxx exponován xxxxxx, xxxx se xxxxxxxx xxxxxx aplikaci, pokud xxxxxx proti xxxx xxxxxx důvody. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x tobolce.
Ideálně xx xx měla xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx vést x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" xxxxxxxx v xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, především x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx je považováno xx přijatelné.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx může xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx u xxxxxxx x jako xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx inhalační studie xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx jiné způsoby xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx informace x této xxxxx xxxxxx. Intratracheální xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx po ustálení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), nebo x návaznosti xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin denně xx xxxx xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x přibližně xxxxxx hodinou xxx xxxxxx zvířat xxxxx xx xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx i xxx xxxxxxx expozičního xxxx. X xxxx xxxxxxxxx jsou zvířata xxxxxxx exponována xxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, xx x xxxxx xx zvíře 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx denní xxxxxxxx x ještě xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx studie x na xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx má xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx určité xxxxxxxxx obtíže. Například xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx simulaci xxxxxxxx xxxxxxx prostředí xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx a xxxxxx xxxxx expozice x xxxxxxxx komplikovanější (x xxxxxxxxxx) generace aerosolu xxxx určité xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x inhalačních komorách, xxxxxxx konstrukce zaručuje xxxxxxxxx proud xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxx prostředí. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx v xxxxx udržení xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx neměl xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxx xx měla xxx nejlépe xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
(b) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx než ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x rozmezí 22 ± 2 °X x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx kontrolovány xxxxxxxx,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx stanovena xxxxxxxxxx velikosti částic x atmosféře xxxxx x tekutých xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by měly xxx x respirabilní xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx by xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx částic, xxxxxx xx xxxxx exponováno, x měl xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, i xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx není respirabilní. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx generujícího xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx bylo xxxxx posoudit xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx karcinogenity zahrnuje xxxxx xxxx normální xxxx xxxxxx zvířete xxxxxxxxx xxx xxxx. Xxxx by měl xxx xxxxxxx v 18 měsících x xxxx x xxxxxx x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx. Nicméně xxx xxxxxxx kmeny xxxxxx s xxxxx xxxxx života resp. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, doba xxxxxxxx by měla xxx 24 xxxxxx xxx xxxx x xxxxxx a 30 xxxxxx xxx potkany. Xxxxxxxxxxxx ukončení xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, když xxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx ukončení xxxxx, xx kterém xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx zvlášť. Xxx, kde xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxx testu, xxxxx ostatní xxxxxxx xxxxxxxxxx toxické projevy, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Aby bylo xxxxx uznat xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx použitelných xxxxx (autolýzou, kanibalismem xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) v xxxxx skupině větší xxx 10 % x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x x 24 xxxxxxxx u potkanů.
Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity by xxxx xxx x xxxxxx aspoň 12 xxxxxx. U xxxxxx xxxxxx xx mělo xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, která xx vztah x xxxxxxxxx xxxxx, od xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx stárnutí.
1.3 Xxxxx postupu
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, autonomního x centrálního xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x chování.
U xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx) se xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx klinické vyšetření.
Xxxxxxxxxx kontrola xxxxxx xx nutná, aby xx zabránilo xxxxxxx xxxxxx xx studie xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a očních xxxxxx x mortalita xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx vývoji tumorů: xxxx xxxxxxxx, lokalizace, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx viditelného xx hmatného xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Je xxxxx provádět xxxxxx xxxxxxxx potravy (x xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) týdně xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x pak přibližně xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx zdravotní xxxx nebo změny xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx jiné frekvence xxxxxxxxx.
Tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx během xxxxxxx 13 týdnů xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx týdny xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Hematologie
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. obsah xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, celkový xxxxx erythrocytů, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx srážlivosti) xx xxxx být xxxxxxxxx za xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx x poté v xxxxxxxxx šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, x na xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx xx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx zvířat v xxxxxxx svědčí x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx studia, xx třeba vyšetřit xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx.
Diferenciál xx xxxxx xxxxxx krvinek xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx xxxx xxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxx xxxxxxx, diferenciál xx xxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxx dávka.
1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx od 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx stanovení xxxx provedena xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xx xxxxxxx vzorku xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, xxxxx x hustota x xxxxxxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx krvácení (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech x xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx všech nehlodavců x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, pokud xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Z xxxxxx xxxxxx xx připravena xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkoušky:
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- koncentrace xxxxxxxx,
- testy xx funkci xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, aktivita glutamát xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), xxxxx xxxxxxxx transpeptidázy, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx v xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx sérová xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx xxxxx jako xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx zemřela xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx stavu. Před xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx všech xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx viditelné léze, xxxxxx xxxx léze, xxxx léze, xxxxx xx mohly být xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Mělo xx xxx xxxxxxxxx porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx nálezy.
Xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx měly xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x tkání: xxxxx3) (xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx kory, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x plic, xxxxx, aorty, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), sleziny, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), jícnu, xxxxxxx, dvanácterníku, xxxxxx, xxxx, slepého střeva, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, lymfatických xxxxx, xxxxxxxx, gonád3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, periferního xxxxx, xxxxx (krční, xxxxxx x xxxxxxx), xxxxxx x kostní xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx xxxx x močového xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx trakt včetně xxxx, hltanu a xxxxxx.
Byla-li xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx vyšetření, xxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx k xxxxxxxxx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
3) Xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx pohlaví x xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx.
1.3.2.5 Histopatologie
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx orgánech xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx nevyšší dávce xxxxxx patologické změny xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx histologicky xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
(x) xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx xxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx skupiny xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx;
(x) všechny xxxxxx viditelné okem x léze, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx vyšetří xxxxxxxxxxxxx u všech xxxxxx;
(x) xx-xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx neoplastických xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx skupinou, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxx orgánu xx tkáni i x dalších skupinách;
(x) je-li přežití xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx podstatně xxxxx xxx x xxxxxxx, měla by xxx xxxxxxxxx zkoumána x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx dávkou;
(x) xx-xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx doklad x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, které xx mohly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, je xxxxx kompletně vyšetřit xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx jejich xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx x tumory xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx statistické xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxx,
- podmínky testu: xxxxx expozičního xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, zneškodňování xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Údaje x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. směrodatná xxxxxxxx) by xxxx xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx xxxxxx vzduchu v xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vstupující xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx vehikula, je-li xxxxx) x koncentrace,
- xxxx xxxxxxxxx xxxxxx podle xxxxxxx, xxxxx x xxxx xxxxxx,
- doba xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx satelitních xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx účinků podle xxxxxxx x xxxxx ,
- xxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxx,
- xxxx, xxx xxx pozorován xxxxx abnormální příznak x jeho xxxxx xxxxx,
- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x tělesné xxxxxxxxx,
- oftalmologické nálezy,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.34. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - JEDNOGENERAČNÍ XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná látka xx xxxxxx několika xxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Samci dostávají xxxxxxxxxx látku x xxxx xxxxx x xxxxxxx v průběhu xxxxxxx úplného xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (přibližně 56 xxx u myší x 70 xxx x xxxxxxx), xxx xxx zachycen jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx rodičovské xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx xx dobu xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx cyklů, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx nepříznivý xxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxxx. Zvířata xxxx xxxx xxxxxxxxxx. V xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxxxxx xxxx pohlaví, x xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx modifikovat.
1.2 Popis xxxxxxxxx metody
1.2.1 Příprava
Xxxx zahájením xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx zvířata náhodně xxxxxxx xx xxxx xxxxxx - kontrolní x xxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xxxx chována xxxxxxx 5 dnů xxxx zahájením xxxxxx x xxxx podmínkách xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx.
Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Jiné způsoby xxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxxx. Všechna zvířata xxxxx xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Pokud xx používá k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jiné xxxxxxxx, xxxx xxx o xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxické xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 dní x xxxxx.
1.2.2 Pokusná xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx zdravá xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, kmene, xxxxxxx x xxxx x/xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx být ověřena xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx pohlaví. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x kontrolní, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx zahájením xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx termínem xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx a potomstva, x tím xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx na plodnost, xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx x X xxxxxxxx, xxxxxx, xxxx x vývoj xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 xx početí xx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxxx testu
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xx xxxxxxx. Xxxx porodem xx těhotné xxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx, xxx zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x nejvyšším xxxxxxxx xxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxx snižuje xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx uvážit xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx co xx výživy.
Testovaná xxxxx x nejvyšší xxxxxxxxxxx má v xxxxxxxx případě - xxxxx xx není xxxxxxx xxxxxx fyzikálně-chemickými xxxxxxxxxxx xxxx povahou xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx minimální xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx daly xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx u xxxxxx xxx x xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx stanoví xxxxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxx zvířete x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx změny xxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxx samic dávky xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx hmotnosti v 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx látek x xxxxxx toxicitou, xxxxx xx ani xxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx reprodukci, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxx dávka, xxxxxxxxxxxx u matek xxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx účinky xx plodnost, není xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx.
1.3 Popis xxxxxxx
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxx xxxx xx xxxxxx týdnů, xx xxxxxxx pětidenní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X potkanů xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx obdobím připouštění (8 xxxxx pro xxxx). Samci xx xxx xxxxxx x xxxxxxx na konci xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x mohou xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx vrhů x xxxx xxx xxxxxxxx a vyšetřeni xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx generace (X) xxxxx po xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Denní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, v xxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx X1 xxxxxxxx. Je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx
Xx možno použít xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x jeden xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx dvěma samicím).
X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx ponechá x týmž samcem xx xxxxxxxx kleci xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxx ráno xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 těhotenství xx xxxxxxxxx xxxx xxx nálezu xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx.
Xxxxxxx, u xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x cílem zjistit xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xx xx možné xxx poskytnutím xxxxx xxxxxxxxxxxx x oplodnění x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx vyšetřením xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx porodit xxxxxxxx a xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xx okamžiku odstavení xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Pokud xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx postup: mezi 1. x 4. xxxx xx porodu xx velikost všech xxxx upraví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx xx xxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx počty, xxxx. 5 samců x 3 samice. Xxxx menší než 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé zvíře xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx ztíženého xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x všechny xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Příjem xxxxxxx se xxxx xxxxx xxx xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx xxxxxx kontrolovat xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx x x průběhu xxxxxxx xx xxxx příjem xxxxxxx (a xxxx, xxxxx se xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx) ve xxxxxx xxx, kdy xx xxxxxxxxx váženo. Xxxxxxxxxx X xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x xxx xxxxx. Všechna pozorování xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxx.
Xxxx gestace xx počítá od xxx 0 těhotenství. Xxxxx xxx se xx xxxxxxxx po xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx se xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx mrtvých x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx utracená ve xxxxxxx dnu xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx možné xxxxxxx. Xxxx mláďata xx xxxxxxxxx x celé xxxx xx zváží xxxx xx porodu, xx 4. a 7. dnu x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Pozorují xx x zaznamenávají xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx
1.3.5.1 Xxxxx
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx se všechna xxxxxxx generace X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx abnormality xxxxx xxxxxxxxxxx změny se xxxxxxxx pozorností x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx zemřelá xxxx xxxxxxxxx xx vyšetří xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Histopatologická vyšetření
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, semenné xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, prostata, xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxx X xx xxxxxxxx pro mikroskopické xxxxxxxxx. V xxxxxxx, xx tyto orgány xxxxxx xxxxxxx vyšetřeny x jiných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx vyšetření u xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx x skupiny xxxxxxxxxxx nejvyšší dávku x dále u xxxxxx, xxxxx zemřela x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxxxx x těchto xxxxxx zvířat, xx xxxxxxx i u X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupin. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx vyšetřují xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx postižené. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx mikroskopické xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxx xx sumarizují x xxxxxxxxx, kde xx xxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx plodných xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx statisticky zpracovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se použít xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje:
- xxxx/xxxx použitých zvířat,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx dávce x xxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx ukončení pokusu,
- tabulka xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx,
- toxické a xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx hmotnost xxxxxx X generace,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxx xxxxx, xxxxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.35. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx několika xxxxxxxx xxxxx x xxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Samci xxxxxxxxxx (X) generace xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku x xxxx růstu a xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx cyklu (xxxxxxxxx 56 xxx x myší x 70 dnů u xxxxxxx), xxx byl xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.
Samice xxxxxxxxxx xxxxxxxx (P) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx alespoň xxxx xxxxxxxxxx cyklů, aby xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx estrus.
Xxxxxxx xxxx poté xxxxxxxxxx. V době xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx pohlaví x xxxxx, v xxxx xxxxxxxxx a xxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xx látka xxxxxxxx zvířatům filiální xxxxxxxx X1 x xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx x až xx xxxx xxxxxxxxx X2 generace.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx testovací metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx zahájením xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx dvou skupin - kontrolní x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx (X) xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx před zahájením xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxxxxxxxx xx testovanou xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx podání jsou xxxx xxxxx. Všechna xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx testu. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx potkanům xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx X xxxxxxx, xx xx doby xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Musí být xxxx charakterizována co xx xxxxx, kmene, xxxxxxx x váhy xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx být ověřena x xxxx xxxxxxx. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Každá xxxxxxxxxx x kontrolní skupina xxxx xxx dostatečný xxxxx zvířat, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx spolehlivé hodnocení xxxxx látky na xxxxxxxx, xxxxxx gravidity x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx, xxxx x xxxxx xxxxxxxxx generace X1 od xxxxxx xx xxxxxxxxxx, a xxxxx jejich xxxxxxxxx xxxxxxxx X2 až xx odstavení.
1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx
Vodu x xxxxxxx dostávají zvířata xx xxxxxxx. Před xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro vytvoření xxxxxx.
1.2.5 Dávkování
Xxxxxxx xx alespoň xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx kontrolní. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx, pak zvířata xxxxxxxxx skupiny xxxxxxxxx xxxxxxxxx x největším xxxxxxxx xxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxx snižuje xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx skupiny, xxxxxxxxx xx xx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxx případě, xxxxx to xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti látky x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, vyvolávat toxicitu x nikoli xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx populaci. Xxxxxxx xxxxx(x) xx xxxx(x) vyvolat xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, které xx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x nejnižší dávka xx neměla vyvolávat xxxxx pozorovatelné xxxxxxxxxx xxxxxx, ani x xxxxxx ani u xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx podle xxxxx hmotnosti. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. dni od xxxxxxx těhotenství.
1.2.6 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx studie xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx jasnou xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx účinky xx xxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx studie na xxxxxx dávkových úrovních.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx rodičovské xxxxxxxx X začne xx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. U xxxxxxx xxxxxxxx pokračuje xxxxx xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x jsou xxxxxxx xxx případnou xxxxxxxx xxxxxxx vrhů x xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx někdy xxxx xxxxxx pokusu.
Xxxxx xxxxxxxx samicím xxxxxxxxxx xxxxxxxx X xxxxx xx pětidenní xxxxxxxxxxxx x pokračuje xxxxx xxx týdny xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pak xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxx xx do xxxxxxxxx X1 xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx studované xxxxx, např. x xxxxxxx metabolismu xxxx. x xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx xx odstavu x končí xxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx a jeden xxxxx) xxxxx 1 : 2 (jeden xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).
V xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x týmž xxxxxx xx společné xxxxx xx otěhotnění xxxxx xx dobu 3 xxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Den 0 xxxxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx F1 se xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xx xxxx 11 xxxxx x xxxx x 13 xxxxx x xxxxxxx. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X1 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx vrhů xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Zvířata xxxxxxxxx xx utratí xx xxxxxxx.
Xxxxxxx, x kterých nedojde x oplodnění, je xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. To xx xxxxx buď xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x oplodnění s xxxxxxxxxxx xxxxxxx obou xxxxxxx nebo mikroskopickým xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx orgánů xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx vrhů
Zvířatům xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxx potomstvo xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vrhů. Xxxxx xx velikost xxxx standardizuje, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx porodu xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx dosáhlo xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx xx xxx; xxxxx xx xxxx proveditelné, je xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxx počty, xxxx. 5 samců x 3 samice. Xxxx xxxxx než 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx F2 xx xxxxxxx xxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx být pozorováno xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x všechny příznaky xxxxxxxx, xxxxxx mortality, xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx vhodné kontrolovat xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx porodu x x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx stejný xxx, kdy je xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X a F1 xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x xxx xxxxx. Xxxxxxx pozorování xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxx gestace se xxxxxx xx xxx 0 xxxxxxxxxxx. Každý xxx xx xx xxxxxxxx xx porodu xxxxxxx x xxxxxxx xx počty x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx čtvrtém xxx se uchovají xxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x celé xxxx xx xxxxx xxxx xx porodu, ve 4. x 7. xxx a xxxxx xxxxx týden xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx zvážena xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx x zaznamenávají všechny xxxxxxxxxxx x chování x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Pitva
Všechna xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X x X1 xx utrácejí, jakmile xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx reprodukci. Zvířata xxxxxxxx X1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X2 xx xxxxxx xx xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx nebo xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X a X1 makroskopicky xxxxxxx xx strukturní xxxxxxxxxxx xxxxx patologické xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx reprodukčního xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x další xxxxxx xxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxx X x X1 xx uchovají xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx mikroskopické xxxxxxxxx x xxxxx X x X1 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx dostávající xxxxxxxx dávku, xxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx, a xxxx x zvířat, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx skupin xxxxxx, xx vyšetří i x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx vyšetřují xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx již xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx orgány xxxxxx podezřelých x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx mikroskopické xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Údaje xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx je xxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx těhotných xxxxx, xxx změn x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx změny.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxx příslušnou xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxx xx xxxxxx kterákoliv xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x experimentu
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x závislosti xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx x průběhu studie xxxx xxx zvířata xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx vrhu, xxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx x xxxxxxxxxxxx hmotnost xxxxxxx před xxxxxxxxx,
- xxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx růst,
- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx zvířat X a F1 xxxxxxxx, vybraných xxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxx všech xxxxx, xxxxx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- interpretace výsledků.
B.36. TOXIKOKINETIKA
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx látka xxxx xxx podávána xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxx nebo xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx resp. xxxx metabolity jsou xxx xxxxx xxxxx xxxxxx stanovovány v xxxxxxx tekutinách, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx s "neznačenou" xx "xxxxxxxx" xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx značení, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxx co xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
1.2 Popis testovací xxxxxx
1.2.1 Příprava
Zdravá xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, pregnantních xx premedikovaných xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx studie xx xxxxxxxxx na xxxxxx či xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx se xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx testovanou xxxxxx. Jestliže xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx užije nejprve 4 zvířat pro xxxxxx jednotlivou xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx za xxxxxxxx xxxxxxxx může xxxxxxxxx potřeba xxxxxxxx xxxxxx xx obou xxxxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx pohlaví, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx 4 zvířata xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx ostatních druhů xxxxxx (xxxxxx než xxxxxxxx) je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
Je-li studována xxxxxxx distribuce, xxx xxx určení xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxx zvířat, která xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx časovém xxxx, xxx xxxxx časových xxxx, x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx úměrná xxxxxxxx studie.
Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx skupiny zvířat xx xxxx počítat x počtem časových xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx nesmí xxx xxxx než 2 zvířata. Velikost xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx to, xxx xxx xxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky xx xxxx xxxxxxx, rovnovážného xxxxx x deplece.
1.2.2.3 Xxxxx
V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx xx xxx nízká xxxxx xxxxx, po xxxxx xxxxxx pozorovány xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxx vyvolává toxické xxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxx podávání xx xxxxxxxx dostatečné xxxxxx xxxxxxx dávek xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx nezbytné x podávání vysoké xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx studie by xxxx být prováděny xxxxxxx xxxxxxxx aplikace x xx-xx xx xxxxxx i xx xxxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xxxx používány x xxxxxxxxx toxikologických xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx sondou xxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx kůži, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat. Intravenózní xxxxxx testované látky xxxx xxx užitečné xxx stanovení relativního xxxxxxxxxxx xxx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx. Navíc xxxxxx po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx v organismu.
Xxxxxx xx xx xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx věnována xxxxxxxx xx vstřebávání x xxxxxxx, xx-xx testovaná xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx v potravě, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx toxicity x další xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx zaznamenávány xxxxx x xxxxx x jejich xxxxxxx, xxxxxxxxx a trvání.
1.3 Xxxxx postupu
Xx xxxxxxx pokusných zvířat xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx testované látky xxxxxxxxxx.
1.3.1 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxxx metody x xxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny1), a xx xxxx.:
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxx. v xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx vzduchu x xxxx jejích xxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx odpovědi (xxxx. studie xxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx skupinou,
- porovnání xxxxxxxx xxxxx resp. jejích xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx testovanou x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx látky x xx. xxxxxx metabolitů x plazmě na xxxx a xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupině.
1) X této xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx rozumí ta, xx xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx podávána xxxxxxx způsobem, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
X xxxxxxxx xxxx jsou dostupné 2 xxxxxxxx, x xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx použity xxxxx xx xxx:
- xxx použití xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx kvalitativní xxxxxxxxx;
- kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x množství xxxxxxxxx xxxxx x ev. xxxxxx metabolitů x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx ze zvířat x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ev. jejích xxxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx po xxxxxx xxxxx, a to xxx xx xxxxxxxxx 95 % z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 7 xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx potřebné xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx x době xxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxx x schématu xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx metabolitů a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metabolické xxxxxx tam, xxx xx xxxxx odpovědět xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických xxxxxx. Xxx získání informací x xxxxxxxxxxx xxxx xxx prospěšné xxxxxxxxx xx xxxxx studií.
Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx mezi metabolismem x toxicitou látky xxx získat x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx poklesu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx sloučenin xxxxxxxxxxxx - XX xxxxxxx a nebo xxxxx látky xx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxxx se podle xxxx prováděné xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx doplněných xxxxxxxxx znázorněním.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx průměry x xxxxxxxxxxxxxxx variability xx xxxxxx k xxxx, xxxxx, xxxxx x orgánům (xxxxx xx xx relevantní). Xxxxxx vstřebávání x xxxxxxxx a rychlost xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx metodami. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx prováděné xxxxxx xx xxxxxx x testu xxxx xxxxxxxxx pokud možno xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, jestliže xxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx(x) xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx vehikula,
- toxické x x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx vydechovaného xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx rozdělené xxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxx x xxxxxx,
- uvedení xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx v závislosti xx čase,
- xxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- metody xxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxx,
- diskusi výsledků,
- interpretaci výsledků.
B.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX - XXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xx důležité xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx látek xxxxxxx specifický xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx zjištěn x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X určitých organických xxxxxxxxx fosforu xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx testy xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x in xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx považovat xx xxxxx, xx xxxxx xxxx neurotoxická.
1.2 Definice
Xx skupiny xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx jako "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx elektricky neutrální xxxxxxxxx xxxxxx, thioestery xxxx xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, fosfonové xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx thiofosforečných, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx amidothiofosforečných, xxxx xxxx látky, xxxxx xxxxx xxxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx této xxxxxxx.
Pozdní xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx projevující xx xxxxxx, distální xxxxxxxxxx, xxxxxxx v xxxx a xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx těchto xxxxxxxx, x xxxx inhibicí x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - NTE (xxxxxxxxxx target xxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxx, xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx testovaných druhů xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky x pozdním xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, EINECS 201-103-5, chemický název: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (XXXX).
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx orálně x xxxxxx xxxxx slepicím, xxxxxxxxx xxxx možnými xxxxxxxx cholinergními xxxxxx. Xxxxxxx se xx xxxx 21 dnů xxxxxxxx, zaznamenává se xxxxxxxxxx xxxxxxx, ataxie x xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x každé xxxxxxx, xxxxxxx 24 x 48 hodin xx xxxxxx látky. 21 xxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Popis xxxxxx xxxxxxxxx
1.5.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx dospělé xxxxxxx xxx interferujících xxxxxxxx onemocnění x xxxxxxxxxxxxxx léčby x x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx experimentální x xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx umožňující volný xxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx sondou, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx olej, xxxxx xx doporučuje xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx dávky xxxxxxx látek x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx by xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X nevodných xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.6 Experimentální xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxx xx mladá xxxxxxx kura xxxxxxxx (Xxxxxx gallus domesticus) xx xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx podmínek, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.6.1.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx skupiny xx xxxxxxx kontrolní xxxxxxx s vehikulem, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx testované látky xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx stejně xxxx x pokusnými.
X xxxxx skupině má xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxxx xxxx x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx vyšetření (xx třech prvý x xxxxx den xx xxxxxx) a xxxx přežilo 21denní xxxxxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxx xxxxx xxxx xxxxxx, kterým se xxxxxx látka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx jsou určeny xxx xxxxxxxxx x xxx slepice pro xxxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x provádějící xxxxxxxxxx xxxxx některý xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. plemeno, potrava, xxxxxxxx xxxxx).
1.6.1.3 Volba xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx slepic x xxxxxx v různých xxxxxxxx xxxxx, xxx xx dala xxxxxxxx xxxxxx, která xxxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx studii nezbytná xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxx xx známo, že xxxxxxxxxxxxx x pozdními xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx maximální neletální xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx použito xxxxxxx xxxx testovacích xxxxx (xxx xxxxxx B.1 bis). Historické údaje xxx slepice xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx.
Úroveň xxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx studii xx xxxx být xx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx výběru xxxxx x hornímu xxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx přežití dostatečného xxxxx zvířat xxx xxxxxxxxx (xxxx) x xx 21 xxxxx xxx histologii (xxxx). Xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx přípravek, x xxxxxx je známo, xx xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx neurotoxickými účinky, xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinky.
1.6.1.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx podle xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx není třeba xxxxxxxx x studii x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx neprovádí, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxx naznačuje xxxxxxx použití xxxxx xxxxx xxxxxx dávky.
1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx je 21 xxx.
1.6.2 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxxx prostředku, xxxxxxxxxxxxx xxxx úmrtím xx následky xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x jediné xxxxx.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx okamžitě xx podání xxxxx. Xxxxxxx slepice xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx prvních xxxx xxx a xxx aspoň jednou xxxxx xx xxxx 21 dní nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx plánu. Veškeré xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx chování. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx nejméně čtyřstupňové xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx paréza. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změny xxxxxx x klecí a xxxxxxx nucené xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx po xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Umírající zvířata x xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, humánním xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
1.6.2.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Všechny xxxxxxx xx zváží xxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx x xxx aspoň xxxxxx xxxxx.
1.6.2.3 Biochemie
Xxxx xxxxxx náhodně xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx x kontrolní skupiny x xxxxxxxxx x xxx slepice x xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny (xx-xx skupina použita) xx usmrtí x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx mícha. Xx vhodné xxxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxx na xxxxxxxx XXX. Xxxxx se xxxxxxxx tři xxxxxxx x kontrolní x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxx tři xx 48 hodinách, xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny xx usmrcují pouze xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx pozorování xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx látka xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx (hodnotí xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), pak xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx dvakrát xx xxx xxxxxx, x xx xxxx 24 xx 72 xxxxxxxx xx podání xxxxx.
X těchto xxxxxx xxxxx se případně xxxxxxx také analýza xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx může xxxx xxxxxx xxxxxxxxx reaktivace XXxX, xxx xxxx xxxx k xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Xxxxx x xxxxx xxxxxx (plánovaně xxxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) zahrnuje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx mozku x xxxxx.
1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Nervová tkáň x přeživších xxxxxx (xxxxxxxxxxx pro biochemické xxxxxx) xx histologicky xxxxxxx. Tkáně xx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx - xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx krční xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x x. xxxxxxxx (x xxxx xxxxx x m. xxxxxxxxxxxxx) x x x. xxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx touto metodou (xxxxxxxxx, histopatologie x xxxxx xxxxxxx) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx pozdní xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxxx zvířata. Údaje xx dále xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx jevících poškození, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx účinky, typy x xxxxxx těchto xxxxxxxxx xxxx účinků x procento zvířat xxxxxxxxxxxx každý xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Výsledky xxxxxx se xxxxxxxxx x hlediska xxxxxxx, xxxxxxxxxx x korelace xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx metody xx xxxxx xxx v xxxx plánované studie.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o pokusu xxxxxxxx tyto xxxxxxxxx, xxxxx mohly být xxxxxxx:
Testovaná xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx x xxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx ustájení xxx.;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx.
Podmínky xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;
- podrobné xxxxx x způsobu aplikace xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx a xxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dávek;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x vehikulu, xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;
- podrobné xxxxx x podání xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx);
- podrobný xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx nálezy;
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx xxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Xxxxxxxxx x Interpretace
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxx XXXX TG 418.
B.38. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX SLOUČENIN XXXXXXX 28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Při xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látek xx xxxxxxxx vzít x úvahu schopnost xxxxxx xxxxxxx látek xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx zjištěn v xxxxxx studiích toxicity. X určitých organických xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x mají xxx testovány xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx použity pro xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Negativní xxxxx x xx vitro xxxxxx však xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx neurotoxická.
Xxxxx 28xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx informace x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxx opakovaných xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx informace x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxx poskytnout xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx úrovní, xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx žádné nepříznivé xxxxxx. Tato xxxxxx xx používá pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx této xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx fosforečné, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx, xxxxx mohou xxxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx této xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx je xxxxxxx projevující xx xxxxxx, distální axonopatií, xxxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxx nervu x pozdním počátkem xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx specifické xxxxxxxx - NTE (xxxxxxxxxx xxxxxx esterase) v xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx po xxxx 28 dnů. Xxxxxxx xxxx sledována nejméně xxxxxx denně, zaznamenává xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx NTE, xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx posledním xxxxxx xxxxx. Dva xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a je xxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxx nervových tkání.
1.4 Xxxxx metody xxxxxxxxx
1.4.1 Xxxxxxxx
Mladé xxxxxx xxxxxxx slepice xxx xxxxxxxxxxxxxxx virových onemocnění x xxxxxxxxxxxxxx léčby x x xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx do experimentální x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx 5 dní xxxx zahájením xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Používají xx xxxxxxxxxx velké xxxxx xxxx ohrady xxxxxxxxxx xxxxx pohyb xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxxx 7 xxx x týdnu, buď xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jinou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxx neředěné nebo xxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx,
jako xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx pevných xxxxx x xxxxxxxxxxxx tobolkách xx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx známy xxxx xxxxxx před xxxxxx xxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.4.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx nosnice xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 až 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx o xxxxxxxxxx velikosti x xxxxxxx se za xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky se xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx.
V xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx aspoň xxxx x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx vyšetření (xx xxxxx v xxxxxx xx dvou xxxxxxxx xxxx) x xxxx xxxxxxx čtrnáctidenní pozorování xx ukončení expozice.
1.4.2.3 Xxxxx xxxxx
Dávkové xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx výsledkům x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx neurotoxicitu x x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, nejlépe xxxxxxxx xxxxxx neurotoxicity, nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx. Dále xx xxxxx řada xxxxxxxxxxx dávek xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinku xx xxxxx. Xxxxxxxx dávka xx neměla xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx x xxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx studii, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx u xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx očekávat, xxx xxxx třeba xxxxxxxx x xxxxxx s xxxxxxx vyšší dávky. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxx naznačuje potřebu xxxxxxx ještě vyšší xxxxxx xxxxx.
1.4.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx denně xx xxxx xxxxxxxx x 14 dnů xx xx, nebo do xxxxxxxx x do xxxxx xxxxx xxxxx.
1.4.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxx x xxxxx xx 28 xxx.
1.4.3.1 Všeobecné pozorování
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx začátku xxxxxx látky. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx po 28 xxx x dalších 14 xxx xx xxxxxxxx aplikace, xx xxxxxxxx xxxxx plánu. Xxxxxxx příznaky xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx nemá xx na xx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pořadové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát týdně xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx a xxxxxxx nucené xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx např. xxxxxxxxxxx po xxxxxxx, xxx se usnadnilo xxxxxxxxx minimálních toxických xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx xxxxx vyloučit, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Šest slepic xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx testované x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx usmrtí x prvních xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX se xxxxxx mozek a xxxxxxxx mícha. Je xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. ischiadicus x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxx xxx po 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx údaje z xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx studií (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) naznačují, xx xx xxxxxxxxxx jiná xxxx usmrcení xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx použít xxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx.
U těchto xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx také xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (AChE). Xx xxxx může xxxx nastat spontánní xxxxxxxxxx AChE, což xxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.
1.4.3.4 Xxxxx
Xxxxx xxxxx zvířat (xxxxxxxxx usmrcených x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx stav) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx posouzení xxxxx xxxxx x xxxxx.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Nervová xxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx (nepoužitých xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxx technik. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, mícha (xxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx), z xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x n. tibialis (x xxxx xxxxx x x. xxxxxxxxxxxxx) x x x. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx specifickými xxxxxxx xx myelin x xxxxx.
Nejprve se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx dávkou. Xxxxx se xxxxxx x zvířat xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xx skupin, xxxxx xxxxxxx dávku střední x nízkou.
2. SBĚR X XXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx výsledky xxxxxxx xxxxx metodou (xxxxxxxxx, histopatologie a xxxxx xxxxxxx) negativní, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx další xxxxxxxxx.
Uvádějí xx xxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx být xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx biochemické xxxxxx, xxxx x xxxxxx těchto xxxxxxxxx xxxx účinků a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x dalšími xxxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx studie.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx obsahuje xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x stáří xxxxxx,
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.,
- xxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- podrobné údaje x přípravě, stabilitě x homogenitě xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobné xxxxx o potravě x xxxxxxx xxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávek, xxxxxx xxxxxxxxxx údajů x xxxxxxxx, xxxxxx x fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxx pro xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xxxx xxx 24 a 48 xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx bez xxxxxx (XXXXX),
- xxxxxxxxx, stupeň x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx vratných xxxx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Hodnocení x Interpretace
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxx XXXX XX 419.
B.39. Xxxx xxxxxxxxxxx syntézy XXX x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx
1. METODA
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx DNA Synthesis (XXX) Xxxx Xxxx Xxxxxxxxx Xxxxx Xxxxx Xx Vivo (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx testu xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX) v savčích xxxxxxxxx buňkách in xxxx xx xxxxx xxxxx, vyvolávající xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4).
Xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování xxxxxxxxxxxxx xxxxxx chemických xxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxx testu xxxxxxxx xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; jsou xxxxx vhodným objektem xxx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx xxxx.
Xxxxxxxx-xx doklady x xxx, že xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx tkáně nedostane, xxxx xxxxx test xxxxxx.
Výsledek neplánované xxxxxxx XXX (XXX) xx xxxxxxx xxx, xx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x buňkách, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (S-fáze) xxxxxxxx XXX. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxxxx xx autoradiograficky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (3X-XxX). Pro xxxxx XXX xx xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx potkaní játra. Xxxx xxxxx xxx xxxxx se sice xxxx mohou použít, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx metody.
Xxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxx xxxx XXX, xxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x nahrazeny. Xxxxx xx xxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx repair" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx xxx látky xxxxxxxxxx "shortpatch xxxxxx" (1 - 3 xxxx) je xxxx xxxxxxx. Xxxx může xxxxxxxx k xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx opravení xxxx xxxxxx replikace lézí XXX. Xxxxxx odpovědi XXX xxxxxx xxx x xxxxxxxxx procesu xxxxxxxx. Mimoto xx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxx x XXX xxxxxxxx, ale xxxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxx excizním reparačním xxxxxxxx. Xx, že XXX test xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx aktivitě xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxxx x xxxxxxxx: xxx xxxxxxx xxxxx (XXX) xxxxx xxx určitá, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx zdůvodní xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx test.
Xxx xxxxxxx xxxxxx (XXX): xxxxxxxxxxxxx míra XXX xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx testech UDS, xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxx x xxxxx (XX) x xxxxxxxxx xxxxxx xxx x cytoplasmě (XX): XXX = XX - XX. Xxxxx XXX se xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx, v xxxxxxxxxxx kulturách xxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx XXX synthesis, XXX): xxxxxxx syntéza XXX xx xxxxxx x xxxxxxxxxx úseku XXX obsahujícího xxxxxx xxxxxxxxx vyvolaného chemickou xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo indikuje xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxx x xxxxxxxxxx segmentu DNA xxxxxxxxxxxx oblast xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemickou látkou xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx XXX xxxxxxxxx xxxxx, charakteristických xxxxxx xxxxxx buněk v X-xxxx buněčného cyklu. Xxxxxxxxxxx 3X-XxX se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx v X-xxxx, xxxx je xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx používají xxxxxxx, xxx ovšem xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při zahájení xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.
Xxxxxxx by xxxx být 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx zvířat
Zdraví xxxxx dospělí jedinci xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xx jednoznačně xxxxxx x po dobu xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x laboratorních podmínkách. Xxxxx je třeba xxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx umístěny.
1.4.2.2 Testovaná xxxxx/xxxxxxxx
Je-li testovaná xxxxx x xxxxxx xxxxx x xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx její xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx podávat xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxxxx ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx ji xxxxxxxxx.
1.4.3 Podmínky xxxxx
1.4.3.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx xxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Doporučuje xx, aby xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx vodné xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx pohlaví xxxxxxx souběžné pozitivní x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx všech skupinách xxxxxx.
Pozitivní kontroly xx xxxx indukovat XXX xxx dávkách, xxx xxx očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvýšení xxx xxxxxxxxx úroveň. Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x dávkách xxxxxxxxx xx středně xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx patrné, xxx xxxxxx nenapovídaly hodnotiteli xxxxxxxxx zakódovaného preparátu. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Doba xxxxxx xxxxxx | Látka | CAS | XXXXXX |
xxxxx x xxxxxxxxx (2-4 hodiny) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx v xxxxxxxxx (12-16 hodin) | N-2-fluorenylacetamid (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx xxxxx použít x jiné xxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx testovaná xxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Počet x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx skupině xxxx xxx minimálně xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx existuje xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx pro xxxxxxxx xxxxxxx negativní x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxx.
Pokud x xxxx, xxx xx xxxxxx provádí, xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x týmž xxxxxxxxxx xxxxxx využívajících xxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx, xx mezi xxxxx xxxxxxxxx nejsou x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pouze xx jednom pohlaví, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx látkám xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx se xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx dvě xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxx letální účinek. Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.
Xxxxx, jež x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx hormony xxxx xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx pro stanovení xxxxx x vyhodnocují xx xxxxxx xx xxxxxxx. Provádí-li xx xxxxxx ke zjištění xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nejsou x dispozici, xx xxxxx ji xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx režimu, xxxx xx xxx použijí x xxxxxx studii.
Xxxx xxxxxxxx dávku xxx také definovat xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx dávce minimálně 2&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxx x jedné xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxx v xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx a jestliže xx xx základě xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkách xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nemusí xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx očekávané xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx vpravuje xxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou být xxxxxxxxxx i jiné xxxxxxxxx xxxxx. Intraperitoneální xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xx xxx mohla xxxxx vystavit xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx přímo, xxxxxx xxxxxxx oběhem. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, závisí xx velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx zdůvodněné. X xxxxxxxx dráždivých xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx objemová xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Jaterní buňky xx x pokusných xxxxxx xxxxxxxxxxxx obvykle 12 - 16 xxxxx po xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxx odběr (xxxxxxx 2 - 4 hodiny xx xxxxxx xxxxx), xxxxxx xx po 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx reakce zjevná. Xx xxxxx možno xxxxxx x xxxx xxxx odběru xxxxxx, xx-xx to xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx kolagenázou. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx buňky xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx XXX
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx se po xxxxxxx xxxx (např. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX. Xx xxxxxxxx xx médium odstraní( xxxxx xx potom xxxxx inkubovat x xxxxx obsahujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx thymidinu, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (tzv. "xxxx xxxxx"). Xxxxx xx xxx xxxxxxx, xxxxxx x vysuší. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se "xxxx xxxxx" xxxxxxxx. Xxxxxxx x preparáty xx xxxxxx xx autoradiografické xxxxxx, xxxxxxxx xx xxx (např. po xxxx xxxxxxx xxxx xxxx týdnů v xxxxxxxxxx), xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx zrna. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxx xxx preparáty.
1.5.8 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx dostatečný xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, aby xxxx možno XXX xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zjevné známky xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).
Preparáty se xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx. Vždy xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx jedince xx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxx; xxxxx xx xxxxx xxxx xxx 100 xx xxxxxxx jedince, xxxx xx xxx zdůvodněné. Xxx počítání xxx xx xxxxxxxxxxxxx jádra x X-xxxx, xxx xxxxx xxxxx x X-xxxx xx registruje.
Xxxxxxx metodou xx xxxxxxx xxxxxx inkorporace 3X-XxX xx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx normálních buňkách, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Výsledky xxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx. Mimoto xx xxxxxxx xxxx shrnou x tabelární formě. Xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx "xxxxxxx xxxxx" (NNG) xxxxxxxxx xxxxx XX xx xxxxx NG. Xxxxxxxx-xx xx "buňky v xxxxxx", musí xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx a podložena xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxxxx metodami; pokud xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxxx ještě xxxx xxxxxxxxx studie.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx zahrnují:
xxxxxxxxx | (X) xxxxxxx XXX xxx předem xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx dané xxxxxxxxxx | |
nebo | (XX) xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxx než x xxxxxxxx xxxxxxxx | |
negativní | (X) xxxxxxx XXX na xxxxxx/xxx xxxxxx historického xxxxx x xxxxxxx | |
xxxx | (II) xxxxxxx XXX xxxxxx signifikantně xxxxx xxx souběžná xxxxxxxx. |
Xx třeba xxxxxx biologickou významnost xxxxxxxxx xxx, což xxxxxxx, že je xxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx variabilita xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx - odpověď x xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx být xxx pozitivní xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Většina xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx získaného souboru xxx xxxxxxx o xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, x když se xxxxxxxxxx několikrát opakuje.
Xxxxxxxxx výsledek xxxxx XXX se xxxxxxx xxxxxxxxx buňkami xx xxxx xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x savčích jaterních xxxxxxx in vivo xxxxxxxxx DNA, xxxxx xxx xxxxxxx neplánovanou xxxxxxxx DNA xx xxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních podmínek xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx poškození XXX, xxx xx tímto xxxxxx zjistitelné.
Je xxxxx vzít v xxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxx (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx a stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx zvířata:
- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- počet, xxx x pohlaví xxxxxxx,
- původ, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných xxxxxxxx xxx jednotlivé skupiny.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx rozpětí, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx volby x xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx podávání,
- xxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx oběhu nebo xx cílové xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (ppm) xx faktickou xxxxx (xx/xx hmotnosti/den),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- podrobné schéma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx zjišťování xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxx autoradiografická xxxxxx,
- počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxxxx hodnoty xxxxx xxxxxxxxxx zrn x xxxxxxx, cytoplazmě x "xxx nuclear xxxxxx" xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- známky xxxxxxxx,
- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx kontrol,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx odchylek,
- počet "xxxxx x xxxxxx", byl-li xxxxxxxx,
- počet xxxxx x S-fázi, xxx-xx stanoven,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxx X.39. xxxx xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx od 22.6.2001
B.40. XXXXXXX ÚČINKY XX XXXX
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxx centrum xxx xxxxxxxxxx alternativních metod (Xxxxxxxx Xxxxxx for xxx Xxxxxxxxxx of Xxxxxxxxxxx Methods, XXXXX, Xxxxx Xxxxxxxx Centre, Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xx leptavé xxxxxx xx xxxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx transkutánního xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx potkana (xxxxxxxxxxxxxx electrical xxxxxxxxxx, XXX) x test xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx. Validizační xxxxxx XXXXX xxxxxxxxx, že xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx rozlišovat mezi xxxxxxx xxxxxxx leptajícími x xxxxxxxxxxxxx kůži. Xxxxxx xxxx vycházející x xxxxxx xxxxxx xxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků (xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx X35, x ostatní xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, X34). Xx uveden xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx; xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx konkrétních xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX LÁTKY
Žádná xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx však xxxx. 1.5.3.4 a 1.7.2.3.
1.4 XXXXXXX XXXXXX - TEST XXX XX XXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nanese xx xxxx xx 24 hodin na xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx odebrané z xxxxxxx xxxxxxx utracených xxxxxxxx způsobem. Látky, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, jsou identifikovány xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx integritu x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.Xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5kΩ) (4) (5). Dráždivé a xxxxxxxxxx xxxxx TER xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. X případě xxxxxxxxxx a neutrálních xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxx x xxx. (6)) xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx, aby xx snížil xxxxx xxxxxxxxx pozitivních výsledků, xxx xx x xxxxxx typů xxxxxxxxxx xxxxx vyskytují (2) (7).
1.5 XXXXX XXXXXX - TEST XXX XX KŮŽI XXXXXXX
1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxx přípravu xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23xxxxx) xxxxxxx, Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Malými nůžkami xx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx a xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxx omyjí xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx ponoří xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx streptomycinu, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx bakterií. Xxxxx xxxx čtvrtý den xx prvním xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx znovu x xxxxx 3 dní xx xxxxxxx. Pro xxxxxxxx kožních xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx 31 xxx.
1.5.2 Příprava xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xx humánním xxxxxxxx usmrtí, sejme xx kůže x xxxxxxxx xxxxxx a x xx xx xxxxxxx sloupne xxxxxxxxxx xxx. Kůže se xxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PTFE) trubice, x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx konec xxxxxxx xx přetáhne gumový X-xxxxxxx, kterým xx xxxx připne, x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x X-xxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx X-xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx TPFE xxxxxxx xxxxxx vazelínou. Xxxxxxx xx ponoří xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX), xxx xx xxxxxxxxxxx pružinovou sponou (xxx. 2).
1.5.3 Popis xxxxxxx
1.5.3.1 Nanesení xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx xxxxx, xxxxxx se xx xxxxxxxxxxx xxxxxx uvnitř xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx ve stavu xxxxxx, xxxxxx se xx terčík v xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxx celý xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx mít s xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx toho xxx xxxxxxxxx zahřátím xxxxx xx 30 xX, xxx xx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx prášek. Použijí xx xxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx dobu 24 xxxxx (viz xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx xx promýváním xxxxxxx vodovodní xxxx xxxxx xxxxxxxxx 30 xX xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx. Odstranění testované xxxxx, která x xxxxxxx ztuhla, se xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx proudem xxxx xxxxx xxxxxx 30 xX.
1.5.3.2 Xxxxxx XXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odpor (XXX) xx měří xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx proud (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Před měřením xxxxxxxxxxxx odporu se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx se ethanol xxxxxxxx xxx, xx xx trubice xxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 154 xX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxx xxxxxx kůže x xxxxx xx xxxxx x kΩ/terčík (obr. 2). Xxxxxxx elektrod x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx se během xxxxxx xxxxx xxxxxx XXXX xxxxxxx xxx, xxx byla xx xxxxxxx síranu xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vždy xxxxxx xxxxx elektrody. Xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx se xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xx xxx. Xx třeba dodržovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx pružinové xxxxxx x spodkem XXXX xxxxxxx (xxx. 1), tato xxxxxxxxxx xx vliv na xxxxxxxx hodnotu xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 20 xΩ, může xx xxx xxxxxxxx xxxx, že testovaná xxxxx překrývá xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx možno xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx, xx xx XXXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x rukavici a xxxxxx 10 sekund xx protřepává, roztok xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxxx. Navrhované xxxxxxxxx látky a xxxxxxxxx akceptovatelná xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
&xxxx;
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
10 – 25
|
1.5.3.3 Modifikovaný postup xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx je xxx testování povrchově xxxxxxxxx xxxxx (detergentů) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx hodnota XXX xxxxx nebo rovná 5 kΩ, xxx xx xxxx tkáni xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx) barviva. Xxxxx xxxxxxxx xx zjistí, xxx se xxxxxxx x výsledky falešně xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Nanesení x xxxxxxxxxx barviva xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xx epidermální xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx na 2 xxxxxx po 150 μx 10% (w/v) xxxxxxx sulforhodaminu X x xxxxxxxxxxx vodě. Xxxxxxx kůže xx xxx xxxxxx xx xxxx 10 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx proudem xxxxxxxxx vody, která xx xxxxxxx pokojovou xxxxxxx. Xxx xx xx odstranit xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx x XXXX xxxxxxx x uloží do xxxxxxx (xxxx. xx 20 xx xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx vody. Xxxxxxx xx xx xxxx 5 minut jemně xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx oplach se xxxxxxx. Pak xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx x 5 xx 30 % (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 60 xX. Po xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx po xxxx 8 minut při xxxxxxx 21 oC (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ∼ 175). Xxxxxx 1 xx supernatantu xx xxx zředí 30 % (x/x) xxxxxxxx SDS x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (v/v) (xx. 1 xx xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx XXX). Xxxxxxx denzita (XX) xxxxxxx xx xxxx xxx cca 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B xxx 565 xx xxxx 8,7 . 104; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B xx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Průměrná xxxxxxx navázaného xxxxxxx xx akceptována xx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx metody. Xx xxxxxxxxxxxxxx rozmezí xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx barviva (xx/xxxxxx)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X kyselina xxxxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
40 - 100
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
15 – 35
|
1.5.3.4 Doplňující xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx (např. 2 xxxxxx) za xxxxxx xxxxxxxxx silně xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxx XXX přeceňuje xxxxxxx schopnosti některých xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx xx terčíky kůže xx 2 xxxxxx (2), xxxxxxxx umožňuje xxxxxxxx identifikaci xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx látek xx 24xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx XXX mohou xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x rozměry xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Prahová hodnota xxx xxxxxxx xxxxxx 5 kΩ byla xxxxxxxxx xx základě xxxxx získaných xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx. Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx výrazně změnily, xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Proto xx xxxxxxxxxx okalibrovat xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných x xxxxx, xxx xxxx xxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxx (3).
1.6 PRINCIP XXXXXXXX METODY - XXXX S XXXXXXX XXXXXX KŮŽE
Testovaný xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx 4 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx lidské xxxx, xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx corneum. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx "MTT reduction xxxxx" (XXX = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) pod xxxxxxxx xxxxxxx definovanou xxx xxxxx expoziční dobu. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x předpokladu, xx xxxxx způsobující xxxxxxxxx xxxx xxxx xx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx corneum (xxxxxx nebo erozí) x jsou dostatečně xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX X MODELEM XXXXXX XXXX
1.7.1 Modely xxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxx však xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx mít xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx vrstvou xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx funkce xxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx lze prokázat xxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xx známo, xx xxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx neprocházejí. Xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxx xxx dostačující x xxxx, xxx xx dalo xxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx buněk (xxxxxx například xxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xx. XX hodnotou) po xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx negativní kontrola xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxx. Podobně x xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx mezí. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx prokázáno, že xxxxxxx predikční xxxxx xxxxxxxx mezinárodnímu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxx xxxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx testovaného xxxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx kůže (xxxxxxxxx xxxxxxxx 25 (μ/xx2). Xx-xx xxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxx, a xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx s xxxx xxxxxxxx dobrý xxxx. Xxxxx xx xx xxxxx, pevné xxxxx xx před xxxxxxxx roztírají xx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, že xx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se materiál x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X měření životnosti xxxxx xx dá xxxxxx xxxxxxxxx validizovaná xxxxxxxxxxxxx metoda. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XXX, x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx přesné x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx xxxx se xx xxxx 3 xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx MTT x xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx xxx xxxxxxx 20 - 28 xX. Xxxxxxxxx modrý formazanový xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) x koncentrace formazanu xx xxxxxxx měřením XX xxx vlnové xxxxx 545 a 595 nm.
1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx působení, xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. xxxx xx životnost buněk xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx okalibrovat xx použití xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných x xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx metoda xx použití široké xxxxx látek xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx v xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, tak xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx musí metoda xxxxxxxx xxxxxxxx vědecké xxxxxxxx definované xxxxx (2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx zveřejněny x takovém xxxxxxxx xxxxxxxx, ve kterém xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odbornou revizí.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.8.1 Xxxx XXX na xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx (x kΩ) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx experimenty, průměrné xxxxxxx x z xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.8.2 Xxxx s modelem xxxxxx xxxx
Xxxxxxx OD x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, a xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x opakované xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x z xxxx xxxxxxxx klasifikace.
1.9 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.9.1 Xxxx TER xx xxxx xxxxxxx
Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx XXX xxx testovaný xxxxxxxx xxxxx xxx 5 xΩ, je látka xxxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ x xxxxxxx se xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (detergent) xx neutrální organickou xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx účinky xx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx hodnoty XXX xxxxxxxxxxxxx 5 xΩ, xxx provést xxxxxxx penetrace barviva. Xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx vyšší xxxx rovný průměrnému xxxxxx barviva x xxxxxxx při souběžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x 36 % XXx, xx testovaná xxxxx skutečně xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx-xx xxxxx xxxxxxx x terčíku xxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx.
1.9.2 Test x xxxxxxx xxxxxx kůže
Hodnota XX pro negativní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100% xxxxxxxxxxxxxxx buněk. X xxxxxx XX xxx xxxxxxxxxx zkušební xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx životaschopných xxxxx, xxxxx xxxxxxxx látky, xxxxx nezpůsobují xxxxxxxxx xxxx, xx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx odlišuje xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx být x xxxxxxxxxx xxxxxx jasně xxxxxxxxx xxxxxxx, než xx metoda validována, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx, že je xxxx xxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
Zpráva x průběhu xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, popřípadě xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxx xx používají referenční xxxxx, uvedou se xxxx xxxxx i xxx xx.
Xxxxxxxx pokusu
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx hodnot xxxxxx (xxxx XXX) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (test x modelem xxxxxx xxxx) pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx standardní referenční xxxxx, x xx xxxxx xxx všechny xxxxxxxxx resp. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx všech xxxxxx pozorovaných efektů.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxx 2
Metoda X.40. byla vložena xxxxxxx xxxxxxxxx č. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx xx 22.6.2001
B.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 XXX IN XXXXX
1. XXXXXX
1.1 ÚVOD
Fotoxicita xx xxxxxxxxxx jako toxická xxxxxx (xxxxxx), k xxx xxxxxxx, je-li xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x následně xxx xxxxxx, nebo xx-xx xxxxxxx kůže xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx látky.
Informace xxxxxxx x rámci xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx testované xxxxx, tedy ke xxxxxxxx, zda daná xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx ultrafialovému x viditelnému záření xxxxxxxxxxx možné nebezpečí xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx výsledkem xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx vivo xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x kůži, x xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx pokožku.
Test fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xxx vypracován x validován x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX/XXXXXX x xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vitro xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx vivo. X xxxx 1996 doporučila xxxxxxxx xxxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxxxxxx in xxxxx trestů xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Výsledky xxxxx fototoxicity 3T3 XXX xx xxxxx xxxx porovnávány s xxxxxxxx účinky xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx xxxx u xxxxxx x lidí x xxxx zjištěno, xx tento xxxx xx xxx uvedené xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx není xxxxxxx x xxxx, xxx xxxxxxxxxxx jiné xxxxxxxxxx xxxxxx, jež xxxxx x kombinovaného xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx vzniknout, xxxx xx fotogenotoxicita, xxxxxxxxxxx xxxx fotokarcinogenita, i xxxx xxxx látek xxxx specifické vlastnosti xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxxxxxxx. Test xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx umožňoval xxxxxxxxx xxxxxx fotoxicity.
Sekvenční xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx dodatek.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX) xx viditelného xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx; xxxxxx ve X/x2 xxxx x XX/xx2.
Xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx (= xxxxxxxxx x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx viditelného (XXX) xxxxxx dopadajícího na xxxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxx (= X x x) na xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. X/x2 xxxx J/cm2.
Pásma xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: podle xxxxxxxxxx XXX (Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xx X'Xxxxxxxxx) xx xxxxxxx označení XXX (315 - 400 xx), XXX (280 - 315 nm) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxx: xx xxxxxxx mezi xxxxx XXX x UVB xx často xxxxxxxx 320 nm a XXX se xxxxx xxxx na UV-A1 x UV-A2 x xxxxxxx xxxxxx u 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx (viabilita) xxxxx: parametr, xxxxxx xx xxxx celková xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx živou xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx lysozomů), xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx koreluje x xxxxxxxx počtem xxxx. xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (viabilita) xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxx + UV xxxx - XX), xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
Predikční xxxxx: xxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx testu toxicity xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx potenciálu. V xxxxx metodickém xxxxxx xxx xxxx xx xxxxx x transformaci xxxxxxxx testu na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx veličin XXX x XXX.
XXX (xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx dvou xxxxxx xxxxxxxx cytotoxických xxxxxxxxxxx (XX50) xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.
XXX (xxxx xxxxx effect, xxxxxxx xxxxxxxxx): nová míra xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx křivek koncentrace-odezva xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) x v xxxxxxxxxxx (+XX) necytotoxického XXX/XXX xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx: akutní xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, nebo reakce, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ozářením kůže xx xxxxxxxxxx podání xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx xxxxx "fototoxicita", xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x nimž xxxxxxx x kůži xxxx, xx na xx xxxxxx (xxxxxxx nebo xxxxxx přijatá) nějaká xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx vždy x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx podobné xxxx při xxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx imunologická xxxxxxxxxx, která xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x tomu, xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxxxxxxx projevy, xx xxxxx xxxxxxx xxxx, xx byly buňky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XX/XXX xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxx: karcinogenita xxxxxxxx xxxxxxxxxx aplikací xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx tumorogeneze xxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx látkou, mluvíme x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, se xxx zavedení xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (3) (13).
1.4 PRVOTNÍ XXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x řady xxxxx (5) (6) (7) (8), jejichž xxxxxxx společným xxxxx xx xx, že xxxxxx absorbovat xxxxxxxxx xxxxxxx v oblasti xxxxxxxxxx záření. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx fotochemie (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx zákon) vyžaduje xxxxx fotoreakce xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx se xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx metodického xxxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x UV/VIS xxxxxxx (xxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxx XXXX x. 101). Xxxxx xx xxxxxxx extinkční/absorpční xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx-1 x cm-1, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciál x není třeba xx na škodlivé xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx testem na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, xxx xxxxxx jiným xxxxxxxxxxx xxxxxx (viz xxxxxxx).
1.5 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxx mechanismy, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx fototoxickou reakci (7), přičemž všechny xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Proto xx xxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx dávky XXX/XXX záření. Cytotoxicita xx při tomto xxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx vitálního xxxxxxx, xxxxxxxxx červeně (xxxxxxx xxx, NR) (9), 24 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxx/x 3X3 xx xxxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxx kultura xxxxx x jedné xxxxxx (monolayer). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx s xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx dobu 1 xxxxxx. Xxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxx vystaví xxxxxxxxxxxxxxx UVA/VIS záření x dávce 5 X/xx2 XXX (+UV xxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx (-XX experiment). X xxxx destičkách xx xxx xxxxxx xxxxxxx médiem kultivačním x xx dalších 24 xxxxxxxx kultivace xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx xxxxxx, XXX) xx dobu 3 xxxxx stanoví xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol. X posouzení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx porovnají xxxxxxxxxxxx závislé reakce xxxxxxx x přítomnosti (+XX) x v xxxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxx, xxxxxxx xx úrovni XX50, tj. xx xxxxxxxxxxx inhibující xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x 50 % x xxxxxxxxx x kontrolami xxx xxxxxxxxx.
1.6 XXXXXXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxx vůči xxxxxx XXX, xxxxxxxxxx xxxxx: x xxxxx xx xxxxx pravidelně xxxxxxxx xxxxxxxx citlivosti xxxx xxxxxx UVA. Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, xxxxxx xxx se xxxxxxx xxxxxx XXX x xxxxx 1 - 9 J/cm2 x xxxxx xxx xx xxxxxx XXX stanoví xxxxxxxxxxxxxxx buněk. Xxxxx xxxxxxx kritéria xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx ozáření dávkou XXX záření 5 X/xx2 není nižší xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxx 9 X/xx2 nemá být xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx než 50 % životaschopnosti xxxxxx uchovávaných x xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx provádí zhruba xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX, běžný xxxx: xxxx xxxxxxx xxxxxxxx jakosti, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx [Xxxx´x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, XXXX] x 1 % roztokem dimethylsulfoxidu (XXXX) nebo xxxxxxxx (XxXX) xxxx bez xxxx vykazují x xxxxxxxxxxx (+XXX) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-UVA).
Životaschopnost xxxxxxxxxxx xxxxxxx: absolutní xxxxxxx xxxxxxx (XX540 XXX) xxxxxx v XX xxxxxxxx negativních kontrol xxxxxxx, xxx oněch 1 x 104 xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxx rostlo xxxxx dvou dnů xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx kritéria akceptovatelnosti, xx-xx xxxxxxxx xxxxxxx XX540 NRU x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx rovna 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxx xxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx xx xxxxx provést souběžný xxxx xx známou xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Při xxxxxxxxx xxxxxx EU/COLIPA xxx xxxx xxxxx xxx pozitivní kontrolu xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (XXX); xxxxx xx xxxx xxxxx doporučuje. Xxx XXX xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx vitro xxxx xxxxxxxxxx tato xxxxxxxx akceptovatelnosti: XXX xxxxxxx (+XXX): XX50 = 0,1 - 2,0 μx/xx, CPZ xxxxxxxxx (-UVA): EC50 = 7,0 - 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX), xxx. xxxxx hodnoty EC50, xx xxx xxxxxxxxx 6.
Xxxxx CPZ se xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dají xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx vhodné pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx skupiny xxxx rozpustnosti testované (xxxxxxxxx) xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 x XXX xxxx MPE (xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 POPIS XXXXXX
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Buňky
Při xxxxxxxxx xxxxxx byla použita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx Balb/c 3X3 xxxx 31, x xx buď x XXXX xxxx x XXXXX; ta xx proto doporučuje. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx; je xxxx xxxxx prokázat, xx xxxx xxxxxx xxxxxx.
X xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx kontaminovány xxxxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxx jen x případě, že xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX záření xxxx x xxxxxx xxxxxx narůstat, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3T3 x xxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxx UVA xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolovat, x xx postupem xxxxxxxx xxxxxxx popsaným x xxxxx metodickém xxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx
Xxx rutinní xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x inkubační xxxxxxxx. X případě xxxxx Balb/c 3T3 xx xxxxx x XXXX xxxxxxxxx 10 % xxxx novorozených xxxxx, 4 xX xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx xx vlhkém xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 xX / 7,5 % CO2. Xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx dané xxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx se xxxx použitím x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxx se buňky xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x takové xxxxxxx, xxx xx xxxxx testu (xx. xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk 48 xxxxx po xxxxxxxx) xxxxxxx ke konfluenci (xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, jednolitou xxxxxx xxxxx). V xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x 96 xxxxxxx xx xxxxxxxxxx hustota 1 x 104 xxxxx x jedné xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx identicky xx xxx xxxxxxxx s 96 jamkami, xxxxx xxx xxxxxxxxxx celým xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx podmínek, s xxxxxxxx doby, kdy xx jedna x xxxxxxxx xxxxxxxxx (+UVA/VIS) x xxxxx xx xxxxxxxxxx x temnu (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxx xxxxx testech xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx požadavkem xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, není x případě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx látka, xxx by x xxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx in xxxx nebo xx xxxxx, xxxx metabolické xxxxxxxxxxxx zapotřebí. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxx xx xxxxx, ani xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.1.5 Testovaná xxxxx / příprava
Testovaná xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx se xx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxxxxxxxxxx, že xx xxxxx k xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx rozpustí x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx v Xxxxxxx vyváženém xxxxxx xxxxxxx (EBSS) xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx fosfátem (phosphate xxxxxxxx xxxxxx, XXX), xxxxx - aby xxxxxxx dojít x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx - xxxxx xxxxxxxxx xxxxx proteinové xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xx vhodném rozpouštědle x xxxxxxxxxxx stonásobně xxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx koncentrace, x xxxxxxxx xx xxxxx v xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx solným xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, xx. ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxxx xx doporučuje xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxx (XxXX). Xxxxxx xxxxx xxx i xxxxx xxxxxxxxxxxx x nízkou xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx aceton, xx xxxx xxxxx xxxx pečlivě zvážit xxxxxx specifické vlastnosti, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xx napomohlo xxxxxxxxxxx, xx se xxxxxx xxxxxxx resp. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 xX.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX xxxxxxx / příprava
Světelný zdroj: xxxxx xxxxxxxxx světelného xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx je při xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x XXX x xx xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx záření XXX xx x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx vysoce xxxxxxxxxxx, přičemž jeho xxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xx 313 xx x 280 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx kritéria pro xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx zásadní xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xxx byla xxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx dobu) postačující xx zjištění xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Dále xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx nepatřičně poškozující xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).
Xx optimální světelný xxxxx xx pokládají xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx sluneční xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxxxx se používají xxxxxxxx výbojky a xxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx - xx xxxx tu xxxxxx, že vyzařují xxxx tepla a xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxx imitují xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx simulátory xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx záření XXX, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx toto xxxxxx xxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxx xx fototoxicitu 3X3 XXX xx vitro xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, kde xx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (UVA:UVB ∼ 2 : 1). Příklad xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx validační xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx x xxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxx pravidelně xxxx xxxxxx xxxxxx fototoxicity xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx druhý, referenční XX-xxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx, xxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx iradiance xxxxxxxxxxxx světelného xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx XXX záření 5 J/cm2 xx xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx silná, xxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx látky. Xxx xx této xxxxx xxxxxxx xxxxx 50 minut, xxxx xxx xxxxxxxxx nastavena xx 1,666 mW/cm2. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx linie nebo xxxx zdroj xxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx XXX xxxxxxx xxx, xxx buňky xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxx fototoxinů. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx podle vzorce:
|
dávka xxxxxx (J/cm2) x 100
|
&xxxx; | |
| &xxxx;
x (min) =
|
&xxxx;
________________________
|
&xxxx;
(1 X = 1 X s)
|
|
záření (xX/xx2) x 60
|
1.7.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx koncentrace testované xxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx všechny fototoxické xxxxx byly xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx zvyšuje xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (13). Xxxxxxx xX xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx přijatelná (oblast xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx při použití xxxxxx (+UVA) x xxx xxx (-XXX) xx třeba xxxxxxxx x xxxxx předběžných xxxxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxx koncentrační xxxx xx zvolí xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx podloženy xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Používá xx koncentrační geometrická xxxx (x konstantním xxxxxxxx ředění).
1.7.3 Xxxxx xxxxxxx
1.7.3.1 První xxx
Xxxxxxxx xx suspenze 1 x 105 xxxxx/xx x kultivačním xxxxx. Xx periferních xxxxx 96xxxxxxx mikrotitrační xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx 100 μx xxxxxxxxx xxxxx (= xxxxx xxxxx), xx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xx 100 μx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx 1 x 105 xxxxx/xx (= 1 x 104 xxxxx na xxxxx). Xxx každou xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxx destičky - xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-UVA), xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx se inkubují xx xxxx 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 oC), xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx monolayer. Xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxxx růst.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx objemem 150 μx XXXX/XXX xx každou jamku. Xxxxx se 100 μx EBSS/PBS xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx koncentraci nebo xxxxx rozpouštědlo (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Testovaná xxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx. Buňky x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxx po xxxx 60 xxxxx (7,5 % CO2, 37 xX).
Xxxx xxxxx x XXX (+XXX) xx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxx xx xxxxxxxx teploty ozařují xx xxxx 50 xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx zářením XXX x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx2 (= xxxxx 5 / xx2). Xxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-UVA) xx xx dobu 50 xxxxx (= expoziční xxxx XXX) xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx boxu.
Roztok xx xxxxxxxx a xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx (18 - 22 xxxxx) xx inkubují (7,5 % XX2, 37 oC).
1.7.3.3 Třetí xxx
Xxxxxxxxxxxxx hodnocení
Buňky xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx kontrastem. xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xx eliminovaly experimentální xxxxx, ale při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se tyto xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (XX)
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx předehřátého XXXX/XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx xx odstraní xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μl xxxxx x XX x xxxxxxxx se xxx 37 oC xx xxxxxxxx atmosféře xx 7,5 % XX2 xx dobu 3 xxxxx.
Xx inkubaci xx xxxxxx x XX xxxxxxxx a xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX, xxxx xx xxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx (je také xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x obrácené xxxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx 150 μx roztoku xx xxxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx dobu 10 xxxxx rychle xxxxxx xx třepačce, xxxxx xx XX x xxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxx optická xxxxxxx xxxxxxxx NR xxx 540 nm xx xxxxxxx xxxxxxx pokusu xxxx srovnávacího roztoku. Xxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxx formátu (xxxx. ASCII) xxx xxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXX X XXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzu xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxx xxxxxxxx XXX/XXX záření x xxx ní. Xx-xx xxxxxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxxx xxxxxx a postup xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx křivkou. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx až xx xxxxxxxxxx limitní xxxxxxxxxxx 100 μx/xx x xxxxxxxxxxx xx xxx (-XXX) xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx (+XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx dojít x xxxx, xx se xxxxxxxxxxxx rozsahy x xxxx částech xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxx byl xxxxxx xxxxxxxxx adekvátní xxxxxxx dat. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x žádné x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxx xxx -XXX, xxx při +XXX), xxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx dávkami až xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx hraniční - xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx modelu - xx třeba xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xx opakování xxxxx xx potřebné, může xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podmínky, aby xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x tomto testu xx xxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx xxxxx, nejvhodnější xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx těchto xxxxxxxx (spolurozpouštědlo, triturace, xxxxxxxxxx). Lze také xxxxxxxx o změnách xxxxxxxxx doby xxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx, xxx jsou xx xxxx xxxxxxx, může xxx xxxxxxxx vliv xxxxxxxx xxxx.
1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx je xx xxxxx, stanoví xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x 50 % xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XX (XX50). Xx xxx xxxxxx xxx, xx se xx data koncentrace - xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) nebo xx xxxxxxx jiná xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxx xx xxxxxxx XX50 použije xxx xxxxx výpočty, xx třeba zkontrolovat xxxxxxx xxxxxxxxx. K xxxxxxx xxxxxxx XX50 xx také xxxxx xxxxxx xxxxxxxx metody. X tomto xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (osa x: xxx, xxx x: probit), protože xx xxxx transformaci xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx xxxxx lineární.
1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (PREDIKČNÍ XXXXXX)
1.10.1 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 1: xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX)
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva xxx xx xxxxxxxxxxx (+XXX), xxx xx nepřítomnosti (-XXX) světla, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxx xxxxx vzorce
|
EC50 (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) XXX =
|
&xxxx;
____________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx XXX ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx předpovídá.
Je-li látka xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX, xxxxxx xxx -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx XXX xxxxxxxxx, x když xx jedná o xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xx látka má xxxxxxxxxxx potenciál. X xxxxxxx případě xx xx xxxxxxxxx xxx. "&xx; XXX", xxxx xx test xxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx zkušební xxxxxxxxxxx (Cmax) x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx vzorce:
|
Cmax (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) &xx; PIF =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+UV)
|
Pokud xx xx xxxxxxxxx pouze "&xx; PIF", xxx xxxxx hodnota &xx; 1 předpovídá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx ani XX50 (-XX), xxx EC50 (+XX), protože xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx nemá xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx případě xx xxxxxxx formální "XXX = *1", čímž xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) XXX = *1 =
|
___________
|
|
Cmax (+UV)
|
Pokud xx xx získat xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", xxxxxxxxxx xx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx (x) x (c) je xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx, jichž xx xxx xxxxx xxxxxxx.
1.10.2 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 2: xxxxxxx xxxxxxxxx (XXX)
Xx xxxxx xxxx xxxxxx novější verze xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxx studie stanovení xxxxxxxxxxxx in xxxxx x xxxxx XX xxxxxx (13). X xxxxx modelu xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XXX v xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx hodnotu EC50. X tomto xxxxxx xx používá xxxxxxxx "xxxxxxx fotoefekt" (XXX) xxxxxxxx xx porovnání xxxxxx xxxxxxx křivek xxxxxxxxxxx - xxxxxx. Xxx aplikaci modelu XXX xxx na Xxxxxxxxxxx univerzitě v Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx.
1.11 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx (XXX ≥ 5 nebo MPE ≥ 0,1) xxxxxxx, xx daná xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx k xxxxxx výsledku xxxxx xxx koncentracích xxxxxxx xxx 10 μx/xx, xx pravděpodobné, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx fototoxin xxxx xx xxxxxxx expozičních xxxxxxxx xx vivo. Xxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci (100 (x/xx), xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx látky nejspíše xxxxxxxxx xxxxxxx informací. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx látky x xxxx, nebo xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx vitro.
Negativní výsledek xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx (XXX < 5 xxxx XXX &xx; 0,1) xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx podmínkách. X xxxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxx fototoxický xxxxxxxxx x fotoxicita xx vivo xx xx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxxxxxx. V xxxxxxxxx, xxx byly při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (EC50 + XX x XX50 - XX), xx interpretace dat xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx prokázána xxxxx xxxxxxxx (+XX xxx -UV) x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xx možno xxxxxxxxx tento test xxx xxxxx látku xx ne xxxxx xxxxxx x xxxx xx xx xxxxxxxx x xxxxx, potvrzujícím xxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx kůže xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xx xxxx xxxx xx xxxx).
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx x průběhu xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- identifikační xxxxx x číslo CAS, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx x čistota,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- rozpustnost xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx médiu (XXXX xxxx XXX).
Xxxxx:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxx,
- citlivost buněk xxxx xxxxxx UVA xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx se x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X NRU xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (a) - xxxxxxxx před xxxxxxxxxx x xx něm:
- xxx x složení xxxxxxxxxxxx média,
- xxxxxxxx xxxxxxxx (koncentrace CO2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx před xx a xx xx).
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - ovlivnění xxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx a xxx xxx,
- x případě xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zdůvodnění xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (pufrovaný solný xxxxxx),
- xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - ozařování:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx charakteristika xxxxxx xxxxxxxxxx zdroje,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zdroje xx xxxxxxxxxxx systému,
- xxxxxxxxx UVA (v x X/xx2) xxx xxxx xxxxxxxxxxx,
- doba xxxxxxxx XX/XXX xxxxxx,
- xxxxx xxxxxx XXX (xxxxxxxxx x čas) x X/xx2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx během xxxxxxxxx a kultur xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxxx pokusu (x) - xxxx XXX:
- xxxxxxx xxxxx x XX,
- doba inkubace x XX,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- podmínky xxxxxxxx XX (xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx extrakce),
- xxxxxx xxxxx, při xxxxx xx spektrofotometricky xxxxxxxxx optická hustota XX,
- druhová vlnová xxxxx (xxxxxxxxxx), byla-li xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), xxxxx xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- životaschopnost xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx koncentracích xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx koncentrace - xxxxxx (koncentrace xxxxxxxxx xxxxx νs xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) získané xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +XXX x -UVA,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx: xxxxx možnosti xxxxxxx hodnot XX50 (+XXX) a XX50 (-XXX),
- porovnání xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx ozařování XX/XXX xxxxxxx - výpočtem xxx fotoiritačního xxxxxxx (XXX) xxxx středního xxxxxxxxxx (MPE),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx negativní xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX) ozářených x xxxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- kritéria akceptovatelnosti xxxxx (b) - xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx:
- xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-XXX) a XXX xxxxx použité xxx pozitivní xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx: xxxxxxx EC50 (+XXX), XX50 (-UVA) x XXX, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx B.41. byla xxxxxxx právním xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxxxxx
Xxxxxx předpis č. 251/98 Xx. nabyl xxxxxxxxx xxxx 1.1.1999.
Xx xxxxx tohoto xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx podchyceny xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx předpisem x.:
208/2001 Xx., xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx XX č. 251/98 Xx., xxxxxx xx xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx x přípravků - novela bude xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx
x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Sb. byl xxxxxx xxxxxxx předpisem č. 443/2004 Sb. s účinností xx 1.8.2004.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx norem jiných xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxx změna xxxxx uvedeného xxxxxxxx xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) xx n) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
2) Xxxxx č. 246/1992 Sb., na xxxxxxx xxxxxx xxxxx týrání, xx xxxxx zákonů x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Xx. x x. 30/1998 Xx.
3) Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a rozvoj xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx 4 - xxxx na zdraví (XXXX Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxx of Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).