EPIS® Právní systém | Plné znění

Právní předpis byl sestaven k datu 22.06.2001.

Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Vyhláška

§1 §2 §3

Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod

B.1. Akutní toxicita orální (per os)

B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky

B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity

B.2. Akutní toxicita (inhalační)

B.3. Akutní toxicita (dermální)

B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)

B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)

B.6. Senzibilizace kůže

B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)

B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)

B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)

B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro

B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo

B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech

B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií

B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae

B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae

B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro

B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro

B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro

B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster

B.21. Test transformace savčích buněk in vitro

B.22. Dominantní letální test u hlodavců

B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích

B.24. Spot test u myší

B.25. Přenosné translokace u myší

B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)

B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)

B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)

B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)

B.30. Testování chronické toxicity

B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci

B.32. Test karcinogenity

B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity

B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test

B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test

B.36. Toxikokinetika

B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice

B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice

B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo

B.40. Leptavé účinky na kůži

B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro

INFORMACE

XXXXXXXX

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx

ze xxx 16. xxxxx 1998,

xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování xxxxxxxx chemických látek x xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §4 xxxx. 1 xxxx. c) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x chemických xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x o xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx:

§1

Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxxx přípravků xxxxxx xxxxxxxxx, toxických, xxxxxx xxxxxxxxxx, žíravých, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx (dále xxx "xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx").¹⁾

§2

(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxx se xxxxxxxx zkouškami xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v příloze této vyhlášky.

(2) Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx stejně xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx uvedené x odstavci 1, xxxxxxxxxx však xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx²⁾ x xxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx (XXXX).³⁾

§3

Tato xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx 1. ledna 1999.

Ministr:

XXXx. Xxxxx, XXx. x. r.

Xxxxxxx x xxxxxxxx č. 251/1998 Xx.

Xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků

B. VŠEOBECNÝ XXXX

1. XXXXXXXX XXXXX

1.1 XXXXXX XXXXXXXX

xxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxx určité xxxx (xxxxxxxx 14 xxx) xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2 XXXXXX TOXICITA

je xxxxxxxxx termín xxxxxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx xx aplikaci testované xxxxx. Jsou xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx rizika x xxxx xx xxx xxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxx.

1.3 XXXXX

xx množství xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xxxxx nebo xxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xx kilogram xxxxxxx hmotnosti), nebo xxxx xxxxxxxxxx dietní xxxxxxxxxxx (xxxx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx).

1.4 XXXXXXXXXXXXXX XXXXX

xx nejvyšší ze xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, kterou xx xxxxx podat, xxxx xx xx způsobilo xxxxxxx (včetně xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx.

1.5 DÁVKOVÁNÍ

xx všeobecný xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x celkovou xxxx xxxxxxxx.

1.6 XX₅₀ (XXXXXXX XXXXXX XXXXX)

xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx látky, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx dobu xxxx 50 % zvířat, xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx LD₅₀ se xxxxx xxxx hmotnost xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).

1.7 XX₅₀ (XXXXXXX XXXXXX KONCENTRACE)

xx xxxxxxxxxxx vypočtená koncentrace xxxxx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx do xxxxxx xxxx xx xxxxxxxx x 50 % pokusných xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx XX₅₀ xx xxxxx jako xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xx.x^-1).

1.8 XXXXX

xx xxxxxxx pro "xx xxxxxxxx adverse xxxxxx xxxxx" (xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) a xx xx xxxxxxxx x xxxxxx použitá xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx které xxxxxxxxx x zjistitelným xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.9 XXXXXXXX PO XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX TOXICITA

xxxxxxxx xxxxxxxxxx účinky, xxxxx xx objeví x pokusných xxxxxx x xxxxxxxx opakovaného xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx dobu xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx příslušného xxxxxxxxxxx druhu.

1.10 XXXXXXXX TOLEROVANÁ XXXXX (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX XXXX)

xx xxxxxxxx dávka, která x zvířat vyvolává xxxxxxxx projevy xxxxxxxx, xxxxx xxx podstatného xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx na xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx.

1.11 XXXXXXXXXX XXXX

xx vyvolání xxxxxxxxxxx xxxx na xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.12 XXXXXXXXXX XXX

je xxxxxxxx změn xx xxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxxx oka.

1.13 XXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXXXX XXXXXXXXX DERMATITIDA)

xx xxxxxxxxxxxx vyvolaná xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.14 XXXXXXXXX XXXX

xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx poškození xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx po xxxx od 3 xxxxx xx 4 xxxxx.

1.15 TOXIKOKINETIKA

xx studium xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, metabolismu x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.16 ABSORPCE

označuje xxxxxx(x), kterým(i) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx.

1.17 EXKRECE

xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx z xxxx.

1.18 DISTRIBUCE

označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxxxxx látka případně xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx.

1.19 XXXXXXXXXXXX

xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx chemická xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x těle xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2. XXXXXX - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxxxxx xxxx systémová xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (metody X.1 - X.5), xx xxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxxxx získán xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.

V xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xx kompletní xxxxxxxxx XX₅₀. Pro xxxxxxxxx xxxxxx není xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx definovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx expozice.

Xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx metodám, které xxxxxxxxx xx nejmenší xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx metoda xxxxx xxxxx (xxxxxx X.1 xxx) x metoda xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1 xxxx). Xxx xxxxxxxxx xx jednom xxxxx xxxx studie xx xxxxxx xxxxx doplnit xxxxxx xxxxxxxx z xxxxx studie. V xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx metoda nebo xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7, B.8 x X.9) xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Tyto xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx orgány xxxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx vyžaduje xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx hloubky (metody X.26 - X.30 x X.33).

3. XXXXXXXXXX - GENOTOXICITA

Xxxxxxxxxx xx vztahuje k xxxxxxx xxxxxxxx přenosných xxxx x množství xxxx struktuře genetického xxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxxx. Tyto změny ("xxxxxx") xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx nebo xxxxxxxx xxxx, blok xxxx nebo celé xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx se xxxxx projevovat změnou xxxxxx struktury nebo xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx (bodové) xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) anebo xx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x savčích xxxxxxx (xxxxxx B.10).

Xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx in xxxx, xxxx. micronucleus test (xxxxxx X.12) nebo xxxxxxx metafáze xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx X.11). Xx však xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, pokud nejsou xxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxx látky xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx ještě xxxxx xxxxxx xx zjištění xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxx xxxxxx k xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx základním xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxxxx nezachycených xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx studií xx vivo.

Xxx xxxx účely xxxxxxxx xxxxxx B.15 až X.25 xxx eukaryontní xxxxxxx xx xxxx x xx xxxxx, xxx rozšiřují xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Tyto xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x jiných účincích x organismech složitějších xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x základním souboru xxxxx.

Xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx mutagenity je xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx poskytly relevantní xxxxxxxxxx informace o xxxxxxxxxx, případně karcinogenním xxxxxxxxxx testované látky.

Xxxxxxxxx xxxxxx, vhodná xxx xxxx xxxxxx, xxxx záviset na xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx a fyzikální xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

Pro xxxxxxxxxx xxxxxx dědičných xxxxxx x xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx savčím organizmu, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (bodovými) mutacemi, xxxx. specifický xxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxx mutace xxxxxxxxx xxxxx v první xxxxxxxx (nezahrnuto x xxxx xxxxxxx), nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x myší (xxxxxx X.25). Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx možného xxxxxxxxxxx rizika xxxxx xxx člověka. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx potřebných xxxxxx, zvláště xxx xxxxxxxxxx xxxxx test, xx xxxxx se xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx postupuje podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

4. XXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxx látky xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, v xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Předběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxx poskytují xxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx nebo chronické xxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx opakované aplikaci, xxxxxx X.7, x xxxxxxxxxxxxx studie x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zahrnují xxxxxxxxx takových histopatologických xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx x určitých xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx také významné. Xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx informace xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx chemické xxxxx x karcinogenním xxxxxxxxxxx, které vyžadují xxxxx, xxxxxxxxxxx zkoumání xxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxx karcinogenity (metoda X.32) xxxx xxxxx x kombinované xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.33).

K xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx schopnost xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx chování xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x maligní transformací - in xxxx (xxxxxx X.21). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxx transformaci.

5. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Reprodukční xxxxxxxx xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx reprodukčních xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx (xxxx xx plodnost) xxxx podle xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxx také xxxxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

Testovací xxxxxx (metoda X.31) xxx xxxxxx zaměřené xx xxxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx použity xxxx xxxxxxx aplikace x závislosti xx xxxxxxxxxxx vlastnostech xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx xxxxxxx. X takových xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx X.35) rozšířit xxx, xxx pokryl xxxxx generaci.

6. XXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx funkčních změn xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx změn x xxxxxxxxxx nebo periferním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx toxicity. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx neurotoxického xxxxxx. Xxxxxx by xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x neurotoxickým xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx aspektu. Navíc xx xxxxxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx být xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu xxxxxxxxx pozdní xxxxxxxx, xxxxx xx posuzována xxxxxxxx B.37 a X.38 po jednorázovém xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.

7. IMUNOTOXICITA

Imunotoxicita xx xxxxxxxx různými xxxxxxx, xxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx imunitního xxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx tohoto xxxxxxx.

8. TOXIKOKINETIKA

Toxikokinetické xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x toxicitě, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx aspekty xxxxxxxx testované xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx při xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx, xx xxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx parametry. Xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, metabolismu a xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxx v xxxx sekvenci xxxx xx xxxx ukázat xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx B.36).

Xxxxxxxxx x chemické struktuře x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastnostech xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxx. Přispět xxxxx také informace x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x toxikokinetických studií.

9. XXXXXXXXXXXXXXX TESTOVANÉ XXXXX

Xxxxxxx testované xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx před zahájením xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx studie.

Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti testované xxxxx xxxxxxxxx informace xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx studie x xxx xxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxx skladování.

Vypracování xxxxxxxxxx metody pro xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxx xxxxx xxxxx větších nečistot) x xxxxxxxxxx médiu x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx studie.

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, fyzikálně-chemických xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx o xxxxx.

10. PÉČE X XXXXXXX

Pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx, ve xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxx x xxxxxxx podstatnou xxxxxxxxx.

10.1 XXXXXXXX XXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx pokusná xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhům. Xxx xxxxxxx, xxxx a xxxxxxx xx vhodná xxxxxxx místnosti 22 ^xX ± 3 ^xX xxx relativní xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxx 20 ^xX ± 3 ^xX xxx relativní xxxxxxxx vzduchu 30 - 70 %.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx techniky xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx. Xxx xxxx případy xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x popisu testované xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx sledovat xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx, zaznamenávat je x xxxxx je x závěrečné zprávě x xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx má xxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx a xxx xx dvanácti xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx pokusu.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx jiný xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jednoho xxxxxxx, xx více xxx 5 xxxxxx x xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx zprávy x xxxxxxxx na xxxxxxxxx jsou xxxxx x xxxxxxx chovu x xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x jedné kleci xxx během xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, tak xxxxx xxxxxxxxxxx doby xxxxxxxxxx.

10.2 XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx živočišný xxxx. Podávají-li se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x potravě, může xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx vzít x xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx výsledků. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx k pitné xxxx. Xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx tomu xxxxxxxxxxx xxxxx diety.

Xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx, xx kterých xx se tento xxxx xxxxxxxx.

11. XXXXXXX XXXXXX

Xxx xxxxxxxxxxx testovacích xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Snížení xxxxx x xxxxxxx bolesti x xxxxxx zvířat xxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (X.1.xxx) nebo xxxxxx stanovení třídy xxxxxx xxxxxxxx (X.1.xxxx). Xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x vyžaduje menší xxxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxx třídy akutní xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x 70 % xxxxxx méně xxx xxxxxx X.1.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, o xxxxxxx je xxxxx, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx limitních xxxxx, xxxxx x testech xxxxxx toxicity (xxxxxx X.1, X.2 x X.3), xxx xxxx x xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx X.11 a X.12), xxxxxxxx vyhnout xx xxxxxxxxx xxxxxxxx velkými xxxxxxx.

Při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, je-li xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastnostech xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx na xxxxxxxxxx xxxxx validizovaných xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x dávkou xxxxxxxxxx x limitním xxxxx (xxxxxx X.3) x xxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx, další xxxxxxxxx xxxxx dráždivosti (xxxxxx B.4) xxxx xxx xxxxxxxx; látky, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx kožní xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4), xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx.

Xx xxxxx neustále xxxxxxx x ověřovat xxxxxxxxxxxx postupy, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx informací xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx a budou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxxx xxxx utrpení xxxx se xxxxx xxxxxxx xxx používání xxxxxx.

Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a označování xxxxx xxxxx nebezpečnosti xxxxx v úvahu xxxxx tam, xxx xx to xxxxx.

12. HODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX

Xxx xxxxxxxxx x interpretaci pokusů xx xxxxxxxxx x xxxxx xx vitro xx xxxxx mít xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxx; xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx k ověření xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx klasifikaci x označování xxxxxx x xxxxxxxxxxx látek xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x kvantifikovaných xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxx xxxxx být xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxx na posuzování xxxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx byl vložen xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx od 22.6.2001

X.1. XXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ (PER XX)

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx podává x xxxxxxxxxxxxxx dávkách několika xxxxxxxx pokusných xxxxxx xxxxxx sondou, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx a uhynutí. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx pokusu, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx především xxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem utratit. Xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, x xxxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx chována v xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, v jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých experimentálních xxxxxx.

Xxxxx je xxxxx, xxxxxxxx se xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx první xxxxxx použití xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx volbou xx roztok x xxxxxxxxxx oleji, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx suspenze. U xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx během něho xxxxxx xxxxxxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx. U hlodavců xx xxxxx neměl xxxxxxxx překročit 10 xx.xx^-1 tělesné hmotnosti; xxxxxxxx jsou vodné xxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxx až 20 xx.xx^-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x testech xx xx měla xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx úpravou xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx dávek. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata

Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx nejsou známy xxxxxx proti tomu. Xx xxxxx používat xxxxxxx zdravých xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx by x xxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx hodnoty.

1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx

Pro xxxxxx xxxxxxx dávek použít xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, musí xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx výrazně xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx v xxxxxxxx xxxxxxx toxicity xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, mělo xx xx xxxxxx xxxxxxx menšího počtu xxxxxx. Dávky xx xxxxx xxxxxxx zvolit x xx xxxxx xxxxxxxx, aby nebyla xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx testech xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx xxxxx

Xx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx xxxxx, xxxxxxx tři, x xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxxxx tak, xxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků x mortality. Xxxxxxx xxxxx xxxx stačit xx xxxxxxxxxx vztahu xxxx xxxxxx a xxxxxxx, x pokud xx xxxxx, xxxx xxxxxxx stanovení XX₅₀ x přijatelnou xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

S xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx test xxxxxx xxxxxx nejméně 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 samců a 5 xxxxx s xxxxxxxx xxxx popsaných xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx způsobí uhynutí, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx nejméně 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx by být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx potřeby prodloužit. Xxxxxxxx je doba, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx, x xxxx xx xxxxxxx, zvláště xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx mortalitě.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxx zvířata hladová. Xxxxxxxx xx potrava xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. U zvířat x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx výměny xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxx x xxxxx vodě xxxx xxxxxx. X xxx pokusu se xxxxxxx zváží a xxxxxxxxx látka se xxxx xxxxxx orálně x xxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, lze xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx množstvích xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxx xxxxx 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, může být xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx - potravu a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx xxxxxx látky xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx každé zvíře xx xxxxx samostatné xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxx xx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxx zmrazení xxxxxxxxx zvířat, x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Pozorování zahrnuje xxxxx kůže, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx tremoru, xxxxxxxx xxxxx, slinění, xxxxxx, xxxxxxxx, spánku a xxxxxx. Okamžik xxxxxxx xx xxxxx zaznamenat xx nejpřesněji.

Zvířata, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Je-li xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx

Po xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxx, podá se xxxxx nejméně xxxxx xxxxxxx o xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x cílem xxxxxxx, xxx xxxxxxx druhého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx zvířat. Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxxxx informace, xx xxxxxxx testovaného xxxxxxx xxxx výrazně xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx vynechat.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, počet xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a x xxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx stanovit x xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx xxxxxx xxxx xxx jeden xxx. Xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxxx s ohledem xx stres a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vyvolané xxxxx xxxxxx. LD₅₀ xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, pokud xxxxxxxx, xxxx expozicí xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx symptomů, makroskopických xxxx, změn tělesné xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.

- experimentální xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx hladiny xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx zvířat x xxxxxxx otravy, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),

- doba xxxxxxx xx xxxxxx testované xxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxx xxxx pozorování,

- xxxxxxx XX₅₀ xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x to xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),

- 95% meze xxxxxxxxxxxxx xxx XX₅₀, xxxxx xx xxx xxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx x xxxx xxxxxxxx (pokud je xxxxxxxxx xxxxx metodou xxxxx),

- pitevní xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx všech xxxxx xx xxxxxx pohlaví,

- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx by xxxxx xxx xxxxxxx utracení xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX₅₀),

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.1. bis XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX OS) - XXXXXX XXXXX DÁVKY

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx informace x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxx xxxxxxxxxx během xxxxxx doby xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.

Xxxxxx x fixní xxxxxx se provádí xx dvou xxxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx účinky xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx aplikaci sondou x xxxxxx téhož xxxxxxx, vždy jedno xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxx xxxxx x toxicity, xxxxxx xxxxxx minimální xxxxxxx dávky. Xxxxxxxx xx v xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx než xxxx xxxxxx.

X xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx orálně xxxxxx xxxxxxxx pěti xxxxx x pěti samic x xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx hmotnosti. Použitá xxxxx xx odvodí x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxx dávka, xxxxx pravděpodobně xxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxx" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx bod 1.2), xxx ne xxxxxxx.

Xx podání xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx vybraná výchozí xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx na xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx pozorována xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx humánní xxxxxxxx, xxxxx se xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx úrovni xxxxx.

Xxxxx postup umožňuje xxxxxxx "diskriminující dávku" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx úvod xxx 1.2), tj. xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx úrovní xxxxx, xxxxxx je xxxxx xxxxx, aniž xx xxxxx k xxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx).

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podávat x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, x xxxxxxx xx známo, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx vlastností.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou známy xxxxxx proti xxxx.

Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx užívané xxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xx xxxxxxx xxxxx by x obou xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx orientační studie x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx každého x xxxx pohlaví.

1.2.1.2 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx

Xxxxx je xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx testované xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxx první uvážit xxxxxxx xxxxxxx roztoku, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x rostlinném xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx možnost xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx nebo xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X hlodavců by xxxxx neměl xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti; xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx možno xxxxxxx xx 20 xx.xx^-1. Variabilita xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxx minimalizovat takovou xxxxxxx koncentrací, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxx xxxxxxx testované látky xxxx být xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx odebere xxxxx xxxx testem; přístup x pitné vodě xxxx xxxxxx. X xxx xxxxxx se xxxxxxx zváží a xxxxxxxxx xxxxx se xxxx xxxxxx orálně x xxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx najednou, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxx přístup x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx látka xxxxxxxxxxxxx xxxxx určitého xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - podle xxxxx xxxxxx období - potravu x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxx xxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxxx různých xxxxx xx xxxxxxxxxx zvířata. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, pokud nejsou x dispozici xxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Dávky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx alespoň 24 xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x cílem xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx sedm xxx; xxxxx xxxxxxxxxxx projevy xxxxx xxxxxx xxxxx xxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx ještě xx dalších xxxx xxx. Posuzují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx hladiny xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx^-1. Xxxxxxxx zvolená xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, potom xx xxxxx podat xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx více vmezeřených xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx informace x xxxxxx(xxx) xxxxx, která(é) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx xxxxxx, x x xxxxxxxx xxxxx, která vyvolává xxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx x příbuzných xxxxxxxxxx látkách. Xxxxx xxxxxx k dispozici, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx dávky 500 xx.xx^-1. Xxxxxxxx xx po xxxxxxx xxxxx nepozorují příznaky xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx nedojde x uhynutí xxx 2000 mg.kg^-1, xx xxxxxxxxxx xxxxxx skončena x hlavní studii xx třeba xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx jsou xxx použití xxxxxxx xxxxx (např. 500 xx.xx^-1) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx zvířeti xxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. 50 xx.xx^-1). Xxxxxxxx xxxx zvíře xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx určenými xxxxxxx xxxxxxx. Za xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx je xxx tomto postupu xxxxxxxxx xxxx xxx 5 zvířat.

1.2.2.2 Hlavní xxxxxx

Pro xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx mělo xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx být xxxxx.

Principem metody xxxxx dávky je xxxxxxx xxxxx mírně xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx studii. Xx xxxxx se vyhnout xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.

Xxxxx, xxxxx xxxx užita x xxxxx, má xxx zvolena z xxxxx xx 4 xxxxxxx úrovní dávek, xxxxxxxxx 5, 50, 500 nebo 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx by xxxx xxx xx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nikoliv xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů); xxxxxxx uhynutí xxxxxx xxxxxxxx, ale xxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx dalšího testování.

Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxx měla xxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx bylo xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx humánní xxxxxxxx zvířat nebo xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx by xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx další xxxxx xxxxxx dávek. Opět xx zvířata, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxxx po xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xx xxxxxx xxxxx xx pozorování xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx samostatné xxxxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxx a zaznamenat xxxxxx účinek xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxx xx xxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx ji xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x trvání xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxx a doba xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx patrná xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxx látky x xxxxxxx jedenkrát xx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx vykazující xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx příznaky xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx po xxxxxx xxxxx, jestliže xxxxxxx xxxx vykazují xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx ukončen x xxxxxxx, když xx xxxxxx, xx byla xxxxxxx xxxxxx vysoká xxxxx.

Pozorování xx xxxxxxxx xx změny xxxx, srsti, očí, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxx pozornost xx xxxxx věnovat xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx.

Xxxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx se provede xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx 3 xxx x xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou během xxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxxxx do xxxxx xxxxx, xx xxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxx makroskopické patologické xxxxx se xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx předcházející xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky.

V xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxx 5 xx.xx^-1 (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx mortalitu xxx xxxx dávce), xx třeba dále xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx x xxxxxxxxxx x hlavní xxxxxx xx sestavují do xxxxxxx jednotlivě pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. X ní xxxx xxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx zvířat xxxxxxxxx během testu xxxx utracených x xxxxxxxxx důvodů; xxxxx xxxxxxxxx účinků; pro xxxxxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinků; xxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx, že zvířata xxxxxxxxx déle než xxx, je xxxxx xxxxxxxxx x zaznamenat xxxxx hmotnosti.

Xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vyvolaná xxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx, xxx.,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x koncentrace,

- xxxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxxxxxxxxx úrovní xxxxx,

- ve formě xxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx úrovní xxxxx (xxxxx použitých xxxxxx; xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx, stupeň x xxxxxx účinků),

- xxxxxx průběh nástupu xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxx zvířata xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx, xxxx úhynu xx podání xxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx utracení xxxxxx,

- pitevní nálezy,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- diskuse xxxxxxxx,

- interpretace xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx.

3.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx

Xxxxx	Xxxxxxxx	Xxxxxxxxxxxx
5 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx	Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % přežití, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % přežití; xxxx xxxxxx xxxxxxxx	Xxxxx, které xxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx xxx 50 xx.xx^-1
50 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti	Xxxx než 100 % xxxxxxx	Xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx 5 xx.xx^-1
	100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx	Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx výsledky x 500 mg.kg^-1
500 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti	Xxxx xxx 100 % xxxxxxx	Xxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Viz xxxxxxxx x 50 mg.kg^-1
	100 % xxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; není xxxxxx xxxxxxxx	Xxxxx, xxxxx xxx považovat xx xxxxx bez xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx x 2000 xx.xx^-1
2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Méně xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x xxxx xxx zřejmé xxxxxxxx	Xxx xxxxxxxx x 500 xx.xx^-1 Látky, xxxxx xxxxxx významnou xxxxxx xxxxxxxx

B.1. tris AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX STANOVENÍ TŘÍDY XXXXXX XXXXXXXX

1. METODA

1.1 Xxxx

Xxxxxx stanovení třídy xxxxxx xxxxxxxx poskytuje xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx rizika, tak xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx používá xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx bylo xxxxx testovanou xxxxx xx základě xxxxxxxx xxxxxxx. Kromě xxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx stanovených xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx jako xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nebo pro xxxxx testování. Xxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxxx dávek je xxxxx uvážit, xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx zpřesnění.

Metoda xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxx LD₅₀. Xxxxxxxx xxxxxxxxx rozsahu xxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx smrt xxxxx xxxxxx xx x x xxxx xxxxxx xxxxxxx kritériem xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx mají xxxxxxx klasifikaci látky. Xxxxxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx být xxxxx než xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx B.1. Xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx)(B.1) x xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1 bis).

1.2 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xx xxxxxx orálně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx rozhodne x xxxxxx xxxxx, x.x.

- není xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx;

- xxxxx xxxx bude xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx pohlaví;

- xxxxx krok bude xxxxxxxx s xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx, xxx byla možná xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x chována xx xxxxx klecích xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx mohla zvyknout xx laboratorní podmínky. Xxxxxxx xxxxx být x klecích xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dávky, xxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zvířete.

Testovaná xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx sondou xxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xx xxxxx, testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxx nosiči. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vodného xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x pak roztoku x jiných xxxxxxxx. Xxx nevodná xxxxxxxx xxxx xxx známa xxxxxx xxxxxxx charakteristika; xxxxx není xxxxx, xxxx být stanovena xxxxx xxxx testem.

Zvířata xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx bez xxxxxxx (xxxx. potkani přes xxx a xxxx 3 - 4 xxxxxx); přístup x xxxx xx xxxxxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.

Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.

1.3.2.2 Xxxxx x pohlaví

Pro xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxx zvířata xxxxxxx pohlaví. X xxxxxxx xxxxx xxxx xxx použito kterékoli xxxxxxx.

1.3.2.3 Úrovně xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxx ze tří xxxxxxx xxxxxx, xxx. 25, 200 x 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxx, xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx uhynutí alespoň xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx příslušného diagramu xxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 1.

Xxx výběr xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx veškeré xxxxxxxx xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx x vztahu xxxxxxxxx x účinku. Pokud xxxx informace naznačují, xx xxxxxxxx je xxxxxxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), pak xx xxxxxxx limitní xxxx. Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xx - s xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx - xxxxxx výchozí xxxxx 200 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx xxxxxxxx získanou xxxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx hmotnosti. V xxxxxx případech xx xxxx uvažovat o xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx výši 5, 50 xxxx 500 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxxx dávky, x xxxxxxx je xxxxx, xx způsobují xxxxx leptavými xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx bolest a xxxxx.

Xxxxxx interval xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx x xxxxxxxxxx toxických xxxxxxxx. Testování xx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví xxxx xxx xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx, xxxxx není xxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx výši 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx se provádí xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxxx 200 xx.xx^-1 (xxxx 500 mg.kg^-1) xxxxxxx hmotnosti.

1.3.2.5 Doba xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx pozorovat obvykle xx xxxx 14 xxx, xxxxx xxxxxxx xxx musí být xxxxxxx vyloučena x xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx nemělo xxx xxxxxxxxx předem pevně; xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx reakcí, xxxx xxxxxx xxxxxxx x délky xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx dobu, xxx xx xxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx-xx x xxxxxxxx xxxxxxx příznaky. Xxxxxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx vedeny xxx xxxxx jednotlivé zvíře.

1.3.3 Xxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxx xxxxxxxxx jsou zvířata xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx bez potravy xx xxxx xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Kde je xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxx určité xxxx, xxxx xxx - v xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx přesáhnout 1 xx na 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx lze podat x 2 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx objemu xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxx, xxx byl podáván xxx objem xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxx celou xxxxxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx dobu xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx testování xxxx xxxxxxx x Dodatku 1.

1.3.3.1 Všeobecné pozorování

Pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx den (den xxxxxxxx) nebo častěji, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx zvířat na xxxxxx xxxxx, x xxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx stavu, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx silného stresu, xx třeba xxxxxxx xxxxxxx: xxxx xxxxxxx xxxx hodnocena xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxx, dobu xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxx, xx xxxxx x sliznicích, x xxxx na xxxxxxxx, xxxxxxxx, vegetativním x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx aktivitě a xxxxxxx. Pozornost je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx, slinění, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x kómatu.

Veškerá pozorování xxxx systematicky zaznamenávána: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.3.3.2 Tělesná xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxx jednou xxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx změny xxxxxxxxx. Xx konci xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.3.3.3 Xxxxx

X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx zaznamenány xxx xxxxx zvíře xxxxxx. Xxx xxxxxxx dalších xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx mikroskopické xxxxxxxxx orgánů xxxxxxxxxxxx xxxxxx makroskopické xxxxxxxxx x zvířat xxxxxxxxxxxxx 24 a více xxxxx.

2. SBĚR A XXXXXX XXXXX

X dispozici xxxx xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc jsou xxxxxxx údaje shrnuty xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x humánních důvodů, xxxx xxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx výsledků xxx xxxxxxxxxxx je xxxxxxx x Xxxxxxx 2.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxx obsahuje xxxx informace, xxxxx xxxxx být xxxxxxx:

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxxxx druh/kmen;

- xxxxxxxxxxxxxxx stav xxxxxx, xx-xx znám;

- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;

- xxxxx, podmínky xxxxx, xxxxxxx xxx.;

- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx testu.

Podmínky xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxx, xxxxx xx jiné xxx xxxx;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx podávaných objemů x xxxx aplikace;

- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x kvalitě xxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx xxxxxxx zvířete xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx (xxx. xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx úmrtí, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx);

- xxxxxx x xxxxxx průběh xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxxxx nálezy x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x každého zvířete, xxxx-xx x xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx:

Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx:

4. XXXXXXXXXX

Xxxx metoda je xxxxxxxxxx s xxxxxxx XXXX XX 423.

XXXXXXX 1

XXXXXX XXXXXXXXX

1. Jak xxxx xxxxxxx x xxxx 1.4.2.3, výchozí xxxxx by xxxx xxx ta xx xxx pevně stanovených xxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxxxxxx způsobí xxxxxxx xxxxx u xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx následující xxxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx x účinku,

- všechny xxxxx x jiných xxxxx xxxxxxxx x

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx.

2. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx uvedené v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx každou xxxxxxx dávku. X xxxxxxxxxx xx počtu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx postupuje xxxxxxxxx xxx, jak xxxxxxxxx šipky.

3. Pokud xx aplikaci xxxxxxx xxxxx 25 xxxx 200 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx uhyne pouze xxxxx xxxxx druhého xxxxxxx, xxxxxxx xx xxx xxxx netestuje. Xxxxx však xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx příznaky, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx s podanou xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxxx x testování xx xxxxx xxxxxx xxxxx.

4. Xxxxx po xxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jedno xxxxx xxxxxxx pohlaví, xx xx předpokládat, xx hodnota LD₅₀ xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xx xx xxxx xxx hraniční xxxxxxxx, xx třeba xxxxxxx posoudit xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx odpovídající xxxxxxx LD₅₀ xx xxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, nebo xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx úrovni dávky.

5. Xxxxxx xxxxxxxx testování x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx dávkami (xxxxxxxx 2). Xxxx xxxxxxxx je možno xxxxxx buď x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x daném xxxx xxxxxxxxxxxxx procesu, nebo xxx další testování xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1.

Postup xxxxxxxxx x výchozí xxxxxx 25 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xx udána xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx).

Xxx xxxxxxx je xxxxx uhynulých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx uhynulých xxxxxx xx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx šipek až xx xxxxxxxx šedého xxxxxxx.

Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Klasifikace xx provede na xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx způsobu vyhodnocení xxxxxxxxx v Xxxxxxx 2.

Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx testu s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx^-1 tělesné hmotnosti

V xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, počet xxxxxx x xxxxxxx (1 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - pohlaví zvolené xxxx xxxxx).

Xxx rámečky xx xxxxx uhynulých xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu xxxxxxxxx zvířat xx x xxxxxxxxx pokračuje xx xxxxx xxxxx xx do dosažení xxxxxx rámečku.

Varianta 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém rámečku xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.

Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx testu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx provede na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx rámečku.

Postup xxxxxxxxx x xxxxxxx dávkou 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xx xxxxx dávka, xxxxx xxxxxx a pohlaví (1 - pohlaví xxxxxxx xxxx první, 2 - pohlaví xxxxxxx jako xxxxx).

Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Podle xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx šedého rámečku.

Varianta 1 - Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.

Varianta 2 - Pokračování xxxxx x příslušnou xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

XXXXXXX 2

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx variantě 1

X xxxxxxxxx xx xxxxx dávka, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx jako druhé).

Pod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3).

Šedé rámečky xxx rámečkem "ŽÁDNÉ XXXXX TESTOVÁNÍ" v xxxxxxxxxx xxxxxx dodatku xxxxxxxx xxxxxxx hodnoty xxx klasifikaci. Xx xxxxxxxxx podle xxxxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx nedosáhne příslušného xxxxxxx. (Xxxxxxx v xxxxxxxxx vyznačují horní xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Ležatá xxxxxxx xxxxxxx, xx XX50 je xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.)

(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx dávkou 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx/xx tělesné xxxxxxxxx

(x) Xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx variantě 1

x) Xxxxxxx xxxxx 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

&xxxx;

x) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

x) Xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx

X.2. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Úvod

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx, teplotě xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx

1.2 Xxxxxxx metody

Několik xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx exponováno xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, a xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx x případy xxxxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.

Xxxxxxx xx závažnými x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x takovým xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.3 Popis xxxxxx

1.3.1 Příprava

Nejméně 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx experimentu. Před xxxxxx xx zdravá xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx do potřebného xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, přidá xx k xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, aby x xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx; x xxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace vehikulum xxxx jiná xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx historická xxxx, xx možno xx využít.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx začátku xxxxxx nemá variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx (xxx každé pohlaví xxxxxx).

1.3.2.2 Počet x xxxxxxx

Xxx každou xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx nejméně 10 hlodavců (5 xxxxx a 5 xxxxx). Samice musí xxx nullipary a xxxxx být xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x akutních xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxxxx, xxxx by xx xxxxxx použití xxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxx x xx třeba xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.3.2.3 Xxxxxxxxx koncentrace

Xx xxx dostatečný počet xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, a xxxx xxx vhodně odstupňovány xxx, aby xxx x testovacích skupin xxxxxxxxx rozsah xxxxxxxxx xxxxxx x mortality. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x mortalitou x, xxxxx xx xx xxxxx, musí xxxxxxx xxxxxxxxx LC₅₀ x xxxxxxxxxxx spolehlivostí.

1.3.2.4 Limitní xxxx

Xxxxxxx-xx xx 4 hodinové expozici 5 samců x 5 xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx 20 xx.x^-1 nebo parám xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx pevné xxxxx x xxxxxxxxxxx 5 xx.x^-1 (xxxx - x xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx použít x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx včetně xxxxxx xxxxxxx - xxx xxxxxxxx maximální dosažitelné xxxxxxxxxxx) xxxxx 14 xxx x žádné xxxxxxxxx xxxxxxxx sledovanou xxxxxx, považují xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.

1.3.2.5 Doba xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxx expozice xx být 4 xxxxxx.

1.3.2.6 Vybavení

Xxx xxxxxx xx xxxxxxx xx třeba použít xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x výměnou xxxxxxx nejméně 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx přiměřený xxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx se expoziční xxx, je xxxxx xx xxxxxxxxxxx tak, xxx se xx xxxxxxx omezovalo xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx xxxx maximální. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx x zásadě celkový xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Je xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx příjem xxxxx jinými cestami.

1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx ji xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, na xxxxxxxxx jejich xxxxxx x xx trvání xxxx zotavení. Dobu xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx se objeví x opět odezní xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx, zvláště xxx, xxx xx patrna xxxxxxxx xx zpožděné xxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx bezprostředně před xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xx xxxx 4 xxxxx xx xxxxxxxx rovnováhy koncentrace xxxxxxxxx xxxxx. Nastavení xxxxxxxxx xx mělo xxx rychlé. Xxxxxxx xxxxx pokusu má xxx 22 ^oC ± 3 ^o X. Relativní xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx to xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Udržování xxxxx negativního tlaku xxxxxx komory (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx expozice xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.

Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx zaručovat, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dosaženo xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxxxxxx x xxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxxxx měření xxxx monitorování xxxxxxxx xxxxxxxx:

(x) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx),

(x) skutečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxx x dýchací xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx expozice (xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxxxx xx vysoké xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx odchylovat od xxxxxxx hodnoty x xxxx xxx ±15 %. U xxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xxxx úrovně xxxxxxxx xxxx možné dosáhnout, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísání. Xx xxxxx xxxx trvání xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxxxxxx možné. Xxxxx xx xxxx částic x xxxxxxxx, xxxx xx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx tak často, xxx to pokus xxxxxxxx (ale xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu),

Xxxxx xxxxxxxx i xx jejím skončení xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxxxx zvíře xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx prvního xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Minimálně xxxxxx každý xxxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxx pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx zmrazením xxxxxxxxx zvířat nebo xxxxxxx xx utracením xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxx, srsti, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxxx vnějšímu xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx uhynutí xx xxxxx zachytit xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x x okamžiku xxxxxxx.

Xxxxxxx, xxxxx xxxxx pokusu uhynou, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají xx xxxxxxxxx zřetelem xx všem změnám xxxxx x dolní xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx tkáně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. Z xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx, doba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících další xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx přežijí xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx humánně xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx. XX₅₀ xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxx xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx všech xxxxxxxxxx, včetně xxxx xxxxxxx, klinických xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x průběhu xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx, xxx.,

- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx je xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx tabulky x xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx:

x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx;

x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;

c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx do inhalačního xxxxxxxx, xxxxxx objemem xxxxxxx);

Pozn.: xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx (xxxx. xx xxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx vzduchu, nýbrž xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxxxxx.

x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx;

x) skutečná xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx;

f) hmotnostní xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX);

x) doba xx xxxxxxxx xxxxxxxxx;

x) xxxx expozice;

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví a xxxxxx expozice (tj. xxxxx xxxxxx, která x pokuse uhynula xxxx xxxx humánně xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx x příznaky xxxxxxxx; xxxxx exponovaných xxxxxx);

- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx nebo xx jejím xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx;

- všechna xxxxxxxxxx;

- xxxxxxx XX₅₀ pro xxxxx xxxxxxx stanovená xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (x uvedením xxxxxx xxxxxxx);

- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX₅₀ (xxxxx xx xxxxx xxx stanovit);

- křivka xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na dávce (xxxxxxxxxxx) x její xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx);

- xxxxxxx xxxxxx;

- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxx (se xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxx důvodů xxxxx xxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxx XX₅₀);

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.3. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx účinky a xxxxxxx uhynutí. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x zvířata, xxxxx xxxxxxx konec xxxxxx, se pitvají.

Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a bolesti xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x takových xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx xxxxx, že xxxxxxxxxx xxxxxxx bolest x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx vlastností.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 dní před xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx v podmínkách xxxxxxxx a xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx zdravá xxxxx dospělá zvířata xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxx 24 hodin xxxx xxxxxxxxx testu xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx holení xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx se nepoškodila (xxxx. abrazí) xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx připraví xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxxx s pevnými xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x kůží. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nutné xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx vehikula xx xx xxx xxxxx xxx, x xxxx xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx s xxxxxxx kůží, a xx xxxxx relevantních xxxxxxx xxxxxx ten, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx kůží. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata

Xxxxxxx xx dospělých xxxxxxx nebo králíků. Xxx použít x xxxx živočišné xxxxx, xxxxx jsou pro xx xxxxxx. Xx xxxxx volit xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Počet a xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx dávek použít xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x obou xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Používají-li xx x xxxxxxxx xxxxxxx toxicity xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx hlodavci, mělo xx xx xxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Dávky xx xxxxx xxxxxxx zvolit x je třeba zajistit, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xx xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Má xxx xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx toxických xxxxxx x mortality. Při xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx testované látky. Xxxxxxx údaje musí xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x účinkem, x xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX₅₀ x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Limitní xxxx

Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx nejméně 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Doba xxxxxxxxxx má xxx xxxxxxx 14 dní. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Měla xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje otravy x trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx příznak otravy xxxxxxx a xxxxxx x xxxx do xxxxxxx, zvláště xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx uhynutí.

1.2.3 Popis xxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Testovaná látka xx xxxxxx rovnoměrně xx xxxxxx, která xxxx xxx 10 % xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx může xxx xxxx xxxxxx xxxxx; mělo by xx však xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx co xxxxxxxx část xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx 24 hodin xxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx obvazu x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxxx plochu je xxxx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx mulový xxxxx x testovaná látka xxxxxxxx x aby xx zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. X zamezení xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxx xxx omezení xxxxxxxx pohybu, úplnou xxxxxxxxxxxx však nelze xxxxxxxxx.

Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx, xxxxx možno xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx způsobem xx xxxxxxx xxxxxxxx pokožky.

Xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx každé xxxxx xx xxxxx vést xxxxxxxxxx záznamy. První xxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx slabých xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxxx, xxxx, xx xxxxxx xxxx provedena xxxxxxxx, xxx x xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, spánku x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx xxxxxx, x xxxxx xxxxxxx xx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají a xxxxxxxxx tkáně se xxxxxxxx pro histopatologické xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxx toxicity x druhého xxxxxxx

Xx xxxxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxx xx podá látka xxxxxxx xxxxx skupině x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx spolehlivá xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx citlivější, testování xx zvířatech xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxxx zvířat x jinými xxxxxxx xxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxx x pitevních xxxxxx. Stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x před xxxxxxxxx. Změny xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xxxxxxx déle xxx xxxxx den. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxx x bolesti vyvolané xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx. XX₅₀ xx xxxxxxx xxxxxxxxx metodou. Dále xx xxxxxxx vztah, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a výskytem x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx včetně změn xxxxxxx, klinických xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, změn xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x xxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, krmení atd.,

- xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx způsobu xxxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx pokusných xxxxxx,

- tabulky toxických xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx dávek (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; počet xxxxxxxxxxxx xxxxxx),

- xxxx xxxxxxx xx podání xxxxxxxxx látky, xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx utracení zvířat,

- všechna xxxxxxxxxx,

- xxxxxxx XX₅₀ xxx to pohlaví, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (s xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),

- 95% interval xxxxxxxxxxxxx xxx LD₅₀ (xxxxx jej xxx xxxxxxxx),

- křivka xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx a její xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,

- rozbor xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vypočtené xxxxxxx LD₅₀ x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx testu),

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.4. XXXXXX XXXXXXXX (KOŽNÍ XXXXXXXXXX)

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxx

Xx třeba xxxxxxx zvážit všechny xxxxxxxx informace o xxxx látce s xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat výrazné xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx test, studie xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx látky (např. xX rovné xx xxxxx 2 xxxx xX rovné xx xxxxx 11,5) xxxx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxx kožní xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxx xxxx x xxxxx také xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.

x) Xxxxxxxx xxxx dostupné přesvědčivé xxxxxxx závažných xxxxxx xxxxx xx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx vyžadován xxxxx xxxx.

x) Xxxxxxxx ze studií xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx aplikaci xxxxxxxxx xxx limitní xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxx pozorováno xxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xxxx testovat xxxxx dráždivost. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx toxické xxx xxxxxxxx cestě xxxxxx.

Studovaná xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx dávce xx xxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xx stanovené době xx xxxxxx, vyhodnotí x xxxxxxxx popíše xxxxxx podráždění, aby xxxx možno provést xxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx dostatečně dlouhá, xxx xxxx možné xxxx zhodnotit xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx střihání xxxx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xx xxxxx xxxxxx pouze xxxxxxx se xxxxxxx, xxxxxxxxxxx kůží.

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx mají xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx látky xx nesmí nanášet xx xxxx xxxx xxxxx xxxxx srsti.

Xxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v práškové xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx látku dostatečně xxxxxxxx vodou, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxx s kůží. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx vliv xxxxxxxx xx podráždění xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx xxxxxxxx nezředěné.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx králíka.

1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx

Jestliže xx x in xxxxx screeningových xxxxx xxxx jiných úvah xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx nekrózu (xxxx. xx xxxxxxx), xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx tohoto testu xxxxxxxxxxx leptavé xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx dvou xxxxxxx zvířatech.

Xxx xxxxx test xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx zvířata. Xxxx xxxxx zvláštních xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, pro xxxxxxxxx xxxxxxx nejednoznačných xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx zvířata.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx důvody xxx xxxx xxxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxx místo xxxx 0,5 ml kapaliny xxxx 0,5 x xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx vlastní xxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nevratnost účinků. Xxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx xx xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Zvířata xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxx plochu (xxx 6 xx²) xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx mulu xxxxxxxxxxxx nedráždivou xxxxxxxx. X kapalin a xxxxxxxxx xxxx může xxx xxxxxx nanést xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxx, a xxx xxx xxxxxxxxx xx xxxx. Xx xxxx trvání xxxxxxxx xx xxxxx přidržovat xxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx tomu, xxx xx xxxxx dostalo x xxxx x xxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxx xxxxxx nebo xx vdechnout.

Na xxxxx doby xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, pokud je xx xxxxx, xxxx xxxxxxx rozpouštědlem, xxx xxx, aby nebyla xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 4 xxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx xxxx vyvolat xxxxxxx (xxxx. xxx, xx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxx. xx 1 xxxxxx nebo 3 minuty). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx 3 plátky xxxx současně, xxxxx xx akutní xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. První plátek xx xxxxxxxx po 3 xxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx reakce, xxxxxxxx xx xxxxx plátek xx 1 xxxxxx. Xxxxx pozorování v xxxx fázi xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx třetí plátek xx 4 hodinách x klasifikují xx xxxxxx odpovědi xxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxx 4hodinová xxxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxx x xxxxxxxx nejméně xxxx xxxxxxx xxxxxx; pokud xx není xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxx xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx).

Xxxxxxxx je xxxxxxx kožní xxxxxx (xxxx. nekróza) xxxxxxxxxx xx 3 minutách xxxx po 1 xxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx ukončen.

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx navrhnout delší xxxxxxxx, například xxxxx xx odpovídá xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx a vyhodnocení

Xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx na příznaky xxxxxxx a kožního xxxxx a stupeň xxxxxx xxxx po 60 minutách a xxxx 24, 48 x 72 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx kůže xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 1. Jestliže xxxxxx xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx úplného xxxxxxxx xxxxxx, provádí xx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx kůže xx xxxxx podrobně xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx léze xxxx poleptání (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx tkáně) x xxxx toxické xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, maskovaných zabarvením xxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx tloušťky xxxxx xxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx posouzením xxxxxxx x xxxxx po xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba rovněž xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx podráždění xxxx, reverzibilitu xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx toxické xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx chovu, krmení xxx.,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně relevantních xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností testované xxxxx, technik xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxx xxxxxx: okluzivní, xxxxxxxxxxxxx,

- xx xxxxx tabulky xxxxx x xxxxx reakci xxx xxxxx jednotlivé xxxxx při každém xxxxxxxxxx (za 1, 24, 48 x 72 xxxxx xxx. xx xxxxxxxxxx xxxx),

- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx včetně xxxxxxxxx,

- popis xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx histopatologických xxxxxx,

- popis všech xxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx podráždění xxxx,

- diskuse xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

4. XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxxx

	Xxxxxxx
1. Xxxxxxxxx erytému x příškvaru
1.1 Žádný erytém	0
1.2 Xxxxx xxxxx erytém (xxxxx xxxxxxxxx)	1
1.3 Xxxxxxxx viditelný xxxxxx	2
1.4 Xxxxx xx výrazný xxxxxx	3
1.5 Xxxxx xxxxxx (xxxxx zrudnutí) xxxx tvorba xxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx	4
2. Xxxxxxxxx xxxxx
2.1 Xxxxx xxxx	0
2.2 Xxxxx xxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxxx)	1
2.3 Lehký edém (xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx)	2
2.4 Xxxxx xxxx (xxxxxx vyvýšeny xxx x 1 mm)	3
2.5 Výrazný xxxx (xxxxxxx více xxx 1 xx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx)	4

4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (IKI)

XXX xx vypočte jako xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx stupně xxxxxx xxx erytém a xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx a x takto xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx průměr.

Xxxxxxxxxxx	X_XX
nedráždí	X_XX ≤ 0,5
xxxxx xxxxxx	0,5 &xx; X_XX ≤ 3
xxxxxxx xxxxxx	3 &xx; X_XX ≤ 5
silně xxxxxx	I_KI &xx; 5

X.5. XXXXXX XXXXXXXX (XXXX XXXXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

1.1.1 Xxxxxxx xxxxx

Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx všechny xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testování látky xx podmínek, které xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. X tomu xxxxx být užitečné xxxxxxxxxxx informace.

x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx reaktivita. Xxxx. xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx látky, xxxxx - xxx xx xxxxx očekávat - xxxxxxxx x oku xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX rovné xx xxxxx 11,5, xxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxx závažná xxxxxxxxx. Je třeba xxxx v úvahu xxxx alkalickou nebo xxxxxxx rezervu.

b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; látky x xxxxxxxxxxx potenciálně xxxxxxxxx xxxx silně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nemají xxx xxxx xxxxxxxxx xx dráždivost xxx xxx, protože lze xxxxxxxxxxxx, že tyto xxxxx budou xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxx testování xxxxx xxxxxxx.

x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx dráždivosti. Xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx účinky na xxxx xx studii xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xx budou xxx xx oči xxxxxxx xxxxxx.

Testovaná xxxxx xx v xxxxxxxxxxx xxxxx aplikuje xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx pokusným xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx stanovených xxxxxxxxxxx xx odečte a xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxx xxxxx posouzení účinku. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx také xxxxxxxx xxxx nevratnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Zvířata xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x bolesti je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

24 xxxxx xxxx xxxxxx se x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vyšetření xxxx očí. Zvířata, x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx očí, xxxx defekt xxxx xxxxxxxxx rohovky, xx x experimentu xxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xx dávat xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xx xxxxx zvolit xxxx xx jediném xxxxxxx. Xxxxxxxx výsledky xxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx účinek) xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxxxx xxx xxx xxx použití xxxxxxxxx xxxxxxx, není xxxxx další xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zvířat. X xxxxxxxxx specifických xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx další zvířata.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nálezů xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxx xxxxx

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 0,1 xx. X xxxxxx látek, xxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx 0,1 xx nebo hmotnost xxx 0,1 x (xxxxxxxx xx vždy xxxxx uvést). Jedná-li xx x tuhou xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx rozemlít xx xxxxx prášek. Objem xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx až po xxxxxxxx xxxxxxxx, např. xxxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxx.

X xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx 0,1 xx látky a xxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxx popisu xxx xxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx

Délku doby xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx pozorovaných xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx stačí 21 xxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx látka se xxxxxxxx xxxxxxx zvířeti xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx oka tak, xx se spodní xxxxx lehce odchlípne xx xxxx xxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xx 1 xxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx, aby xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx oko, xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx předpokládá, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx bylo xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx změnám x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx anestetika. Xxxxxxx xxxxxxxx se xxxx anestezovat x xxxxxxxxx oko.

Oči xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx nejdříve 24 hodiny xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xx 24 hodinách xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, pokud xx xx xxxxxxxx za xxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxx testovací metodě xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx s použitím xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx. X těchto xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 3 xxxxxxx. Xxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx oči vymývají xxxxxx xx xxx xxxxxx s použitím xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx průtoku, xxx nedošlo x xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Pozorování x xxxxxxxxxxx

Xxx se xxxxxxxxx po 1, 24, 48 a 72 hodinách. Neprojevují-li xx xx 72 xxxxxxxx žádné příznaky xxxxxx lézí, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx postižení xxxxxxx xxxx jiné xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx vratnost xx nevratnost. Vedle xxxxxxxxxx xx rohovce, xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx i jiné xxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx oka je xxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx stanovit podle xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxxxx. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx možnosti xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx laboratoře x xx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx podráždění xxx.)

Xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx pozorování xx 24 xxxxxxxx je xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxx xxxxxxx zvíře xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x daném xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx závažných xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx obsahuje xxxxxxxxxxx informace:

- xxxxx o xxxxxxxxx (xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx),

- v xxxxxxxxx xxxxx výčet xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (např. po 1, 24, 48 x 72 hodinách)

- popis xxxxx xxxxxxxxxx závažných xxxx,

- podrobný xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podráždění x poleptání, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,

- popis xxxxxx xxxxxxxxx pro jednotlivé xxxxxx body (1, 24, 48 x 72 xxx.), xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx, oční xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx.,

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,

- diskuse xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

4. XXXXXXX

4.1 Stupnice xxxx xx xxx

	Hodnota
X. Xxxxxxxx - xxxx
Xxxx není xxxxxxxx	0
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx	1
Xxxxxxx edém x xxxxxx víčka	2
Edém xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx	3
Xxxx xxxxxxxxxx víčka xxxx xxx na polovinu xxxx zcela	4
X. Spojivka - xxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx	0
Slabé xxxxxx (xxxxx odlišit xx běžné sekrece xx vnitřním xxxxxx)	1
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxx	2
Slzení xx zvlhčením víček x xxxxx v xxxxxxx xxxxx xxx	3
X. Xxxxxxxx - xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx	0
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx	1
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx	2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx	3
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx
Xxxxxxxx nejsou xxxxxxxx	0
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx duhovky, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxx cév xxxxx xxxxxxx (jedna xxxx více xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx), reakce xx xxxxxx je zachovaná, xxxxxxxx xxxxxxxx	1
Xxxxxx xx světlo xxxx přítomná, xxxxxxxx xxxxxxxxx x hemoragie	2
x duhovce (xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx)
X. Xxxxxxx - xxxxxx neprůhlednosti
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx	0
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx diseminovaného charakteru, xxxxxxx xxxxxxx zůstávají xxxxx xxxxxxxxx	1
Xxxxxxxxxxx oblast je xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx duhovky xxxxx xxxxxxxx	2
Xxxxxxxxxx xxxx opalescence, xxxxxxx xxxxxxx nejsou xxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx	3
Xxxxx neprůhlednost xxxxxxx, xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx	4
X. Rohovka - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Neprůhlednost xx xxxxxxxxxxxxx, ale xxxx plocha xx ≤ 1/4 xxxxxx xxxxxxx	1
1/4 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 xxxxxx xxxxxxx	2
1/2 &xx; plocha xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx	3
plocha xxxxxxxxxxxxxx &xx; 3/4 xxxxxx rohovky	4

4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (X_XX)

Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (X_XX) xxx xxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxx hodnocení xx vypočte xxxxx xxxxxx

I_OI = 2.(X + B + X) + 5.X + 5.X.X

Xxxxxxxx xxxxx oční xxxxxxxxxxx (I_OP) xxx xxxxx interval xxxxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxx interval xxxxxxxxx xxxx průměr x X_XX.

Xxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx IOA xx roven xxxxxxxxxx X_XX xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx

4.3 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx	X_XX
nedráždí	0 - 4,9
xxxxx xxxxxx	5 - 14,9
dráždí	15 - 29,9
xxxxx dráždí	30 - 59,9
velmi xxxxx xxxxxx	60 - 79,9
xxxxxxxx xxxxxx	80 – 110

B.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX

1. XXXXXX

1.1. Úvod

Xxxxxxxx:

Citlivost x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx látek x potenciálním xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx systém toxicity x oblasti xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Neexistuje xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx dostatečně spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx látky x potenciálním xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro lidskou xxxx x xxxxx xx xx hodila xxx xxxxxxx xxxxx.

Xxx xxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxx např. xxxxxxxxx charakteristiky látky, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx.

Testy xx xxxxxxxxx lze rozdělit xx xxxxx x xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxxxxxxxx rozpuštěním nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx Xxxxxxxxx kompletním xxxxxxxx (XXX), x xx testy xxx xxxxxxxx.

Xxxxx s xxxxxxxx se zdají xxx přesnější x xxxxxxxx pravděpodobného xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx než xxxxxx xxx Freundova xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) je xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Ačkoliv k xxxxxxxx schopnosti látky xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxxxx xxxxxxx dalších xxxxx, xx GPMT xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx.

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx (xxxxxxxx se dává Xxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx.

X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx aplikací xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx xx morčatech. Xxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx důvody.

X xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx (GPMT) x Xxxxxxxxx test. Xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, pokud xxxx xxxxxxxxxx validizované x xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx látku xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx senzibilizátor xxx xxxxxxx testování xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx výsledku xx xxxx xxxxx provést xxxx na morčeti, xxx xxx je xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx kapitole.

1.2 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxx: (alergická xxxxxxxxx dermatitida) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx charakterizované xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx těchto xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx reakce xxxxx x xxxx být xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx.

Indukční xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx expozice xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx stav xxxxxxxxxxxxxxx.

Provokační xxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx reakcí xxxxxxxxxxxxxxx.

1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx x spolehlivost použité xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x použitím xxxxx, x kterých xx známo, že xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx.

X správně xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nejméně 30 % u xxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx 15% x xxxxxx xxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx se dává xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx XXX	Číslo XXXXXX	xxxxxxxx xxxxx	xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx
101-86-0	202-983-3	2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx	xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxx
149-30-4	205-736-8	2-merkaptobenzothiazol	kaptax
94-07-7	202-303-5	Xxxxx xxxxx kyseliny x-xxxxxxxxxxxxx	xxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zdůvodnění xxxxx xxx xxxxxxx xxxx kontrolní látky xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.4 Princip xxxxxxxxx metody

Xxxxxxx xxxxxxx xxxx nejprve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxxx 10 xx 14 xxx (xxxxxxxx xxxxxx), x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx reakce, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx porovnán x xxxxxxxx x stupněm xxxxxx x kontrolních xxxxxx, xxxxx podstoupí xxxxxxx xxxxxxxx v xxxx xxxxxxx x xx jim xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.5 Xxxxx testovacích xxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx za nezbytné xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx rozpouštědla xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.1 Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx (XXXX)

1.5.1.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx podmínky xx xxxx aspoň 5 xxx xxxx zahájením xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx expozičních x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx srsti xx xxxxxxx stříháním, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx depilací, x závislosti xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxx.

1.5.1.2 Experimentální xxxxxxxx

1.5.1.2.1 Xxxxxxx zvířata

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx albinotických xxxxxx.

1.5.1.2.2 Počet x xxxxxxx

Xxx xxxxxx samce x xxxxxx. Xxxxxx musí xxx nullipary a xxxxx být březí. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx x nejméně 5 xxxxxx xx třeba x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx xxxxx než 20 xxxxxxxxxxx a 10 xxxxxxxxxxx morčat a xxxx xxxxx dojít x závěru, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx, doporučuje xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx expozici se xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx je xxxxxxxx působící xxxxx xx xxxxxxx podráždění xxxx.Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxxx xxxxxxxxxx kůže. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxx xxxx xxxxx zvířatech. Xxx tento účel xxx uvážit xxxxxxx xxxxxx, kterým bylo xxxxxxxxxx FCA.

1.5.1.3 Popis xxxxxxx

1.5.1.3.1 Indukce

Xxx 0 - Testovaná xxxxxxx

Následující 3 xxxxxxx subkutánních injekcí, xxxxx xx 0,1 xx, se xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx symetricky xxxxx xxxxxxx xxxxx:

Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x objemovém xxxxxx 1 : 1;

Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx xx vhodném xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxx;

Injekce 3: xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x vodou nebo xxxxxxxxxxxxx roztokem x xxxxxxxxx poměru 1 : 1;

Pro xxxxxxx 3 xx xxxxx ve xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx před xxxxxxxx x XXX xx vodné fázi. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x nezředěném FCA. Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 3 xx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 2.

Injekce 1 x 2 xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x co xxxxxxxx xxxxx, zatímco xxxxxxx 3 xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxx 0 - Kontrolní xxxxxxx

Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxx x testovaných xxxxxx:

Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v objemovém xxxxxx 1:1;

Injekce 2: xxxxxxxx vehikulum;

Xxxxxxx 3: Směs xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) xx xxxxx XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).

5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx a kontrolní xxxxxxx

Xxxxxxxxx dvacet xxxxx hodin před xxxxxxx xxxxxxxx aplikací, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxx, xx xx testovací xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 0,5 ml 10% laurylsulfátu xxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.

6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx skupina

Xxxxxxxxx xxxxxx xx zbaví xxxxx. Testovanou xxxxxx xx xxxxxxx vehikulu xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 cm), xxxxx xx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x fixuje xxxxxx xxxxxxxxxxx obvazu xx xxxx 48 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxx odbornými důvody; xxxxx látky xxxx xxxxx rozetřeny x xxxxxxxxx xx vhodného xxxxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx přímo.

6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx x zafixuje xxxxxxx jako x xxxxxxxxxx skupiny xx xxxx 48 hodin.

1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx

20. - 22. xxx - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx zbaveny xxxxx. Xx xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látka v xxxxxx xxxx x xxxxxxx x xx xxxxx bok se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xx to xxxxx). Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx udržují x xxxxxxxx x xxxx xx 24 xxxxxx.

1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny

- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx odstranění xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, důkladně xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a x případě xxxxxxx xxxxxxxx;

- přibližně xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (přibližně 48 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx dávky) xx pozoruje xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx podle stupnice xxxxxxx x xxxxxxx;

- přibližně 24 xxxxx xx tomto xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx (72 xxxxx).

Xxxxxxxxxx xx systém "slepého xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, které xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx je kontrolní.

Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx provokace (xx. xxxxxxxxx provokace), xxxxxxx xx přibližně o xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx znovu x kontrolní xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Opakovanou xxxxxxxxx xxx také xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxx reakce x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx zaznamenávají xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). K xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx dalších xxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx.

1.5.2 Buehlerův xxxx

1.5.2.1 Xxxxxxxx

Zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aklimatizují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx se zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx srsti xx provede stříháním, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx použité xxxxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx a xx konci xxxxx.

1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Používají se xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Lze xxxxxx xxxxx a/nebo xxxxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxx xx minimálně 20 zvířat x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se upraví xx xxxxxxx úroveň, xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx silné xxxxxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace, xxxxx x nesenzibilizovaných xxxxxx xxxxxxxxxx podráždění xxxx. V případě xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x předběžném xxxxxx xx dvou xxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxx použít xxxx xxxx zředěný xxxxxxxxxx xxxxxx detergentu xxxx xxxxxxxx. Pro jiné xxxxx je xxxxxxxxxx 80% xxxxxx xxxxxx/xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx pro xxxxxxxxx.

1.5.2.3 Xxxxxx

1.5.2.3.1 Xxxxxxx

Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Jeden xxx xx zbaven xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx vhodném xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; kapaliny xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).

Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx na testovací xxxxxx x přidržován x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx obvazem xx xxxx 6 xxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx být okluzivní. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx, x plochou xxxxxxxxx 4 - 6 xx². Je preferováno xxxxxxxxx x použitím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx použito xxxxxxxx, mohou xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.

Xxx 0 - Xxxxxxxxx skupina

Xxxxx xxx je xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx testovací plochu xx xxxxxxxx pouze xxxxxxxxx, a to xxxxxxxx způsobem xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx je xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx x přidržován x xxxxxxxx s xxxx xxxxxxxxxxx plátkem xxxx komůrkou a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx, že negativní xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx.

6. - 8. x 13. - 15. xxx - Testovaná x kontrolní xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx jako x xxx 0 xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) 6. - 8. xxx a xxxxx 13. - 15. xxx.

1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx

27. - 29. xxx - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xxx testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx xxxxx (důkladně xxxxxxxx). Xxxxxxxxx plátek xxxxxxxxxx příslušné množství xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx koncentraci xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx neošetřeného xxxx testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxx část xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plátky xxxx komůrky jsou xxxxxxxxxxx x kontaktu x kůží vhodným xxxxxxx xx dobu 6 xxxxx.

1.5.2.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx

- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx odstranění xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx srsti;

- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx 30 hodin po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx pozorují xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx uvedené x xxxxxxx;

- xxxxxxxxx po dalších 24 hodinách (tj. xxxxxxxxx 54 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) se xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" x testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx pozorující xxxxx xxxx, které xxxxx xxxx senzibilizováno a xxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxxxx xx x xxxxxxxxx výsledků nutná xxxxx xxxxxxxxx (tj. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx xxxxxxxxx o xxxxx později, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx skupinou x xxxxxxxxx. Opakovanou xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx skupině.

Všechny xxxxx reakce x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx důsledkem xxxxxxxxxx x provokačních xxxxxxx, xx zaznamenávají xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (viz xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx nálezů je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx kožních xxx.

2. XXXX A XXXXXX ÚDAJŮ (XXXX X XXXXXXXXX TEST)

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx musí xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx reakce xxxx při každém xxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX (GPMT X XXXXXXXXX TEST)

Pokud xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx, xx třeba uvést xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxx (xxxx. LLNA - xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, XXXX - xxxx xxxxxxxxx ucha x xxxx) včetně xxxxx xxxxxxxxxxx postupu x výsledků získaných xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu (XXXX x Xxxxxxxxx xxxx)

Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud mohly xxx xxxxxxx:

Pokusná xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxx xxxxxx;

- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxxx chovu, xxxxxx xxx.;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat na xxxxxxx x xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxx podmínky:

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxxxx o materiálech x xxxxxxxx plátkového xxxxx;

- výsledek xxxxxxx studie se xxxxxxx o indukčních x provokačních xxxxxxxxxxxxx xxx vlastní xxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula;

- xxxxxxxxxxx x celková xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x vehikula, xxxxxxx xxx indukci x xxxxxxxxx.

Výsledky:

- xxxxxx výsledků poslední xxxxxxxx citlivosti x xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, její xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx systému xxxxxxxxxxx;

- slovní xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx pozorovaných xxxxxx;

- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Diskuse xxxxxxxx

Xxxxxx

4. LITERATURA

Xxxx xxxxxx xx analogická x metodou OECD XX 406.

Xxxxxxx

5.1 Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx

0 = xxxxx viditelná xxxxx;

1 = xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kůže;

2 = středně xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx;

3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx.

5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxx toho, xxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxxx bylo xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx

xxxxx xxxxxxx (I. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx

xxxxx xxxxxxx (XX. st.) - 9 - 28 % xxxxxx

xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx

xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 65 - 80 % zvířat

xxxxxxxx xxxxxxx (V. xx.) - 81 - 100 % zvířat

B.7. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxx po 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx pečlivě xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx zvířat, která xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx pokusu; xxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu, xx xxxxxx x xxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx tak, xxx xx xx xxxxxxx vyloučil xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx označeno. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována v xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během experimentu.

Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx sondou nebo x xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xx xx třeba, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx (vehikulu). Xxxxxxxxxx xx nejprve xxxxxx použití xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x jedlém xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) a xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx jejich xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx ještě xxxx xxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx možno xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx pokusných kmenů. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Podávání xxxxx xx mělo xxxxx xx nejdříve xx odstavu x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx věku 9 xxxxx.

Xx xxxxxxx xxxxxx by nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx stejného xxxxx a xx xxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Pro xxxxxx hladinu dávek xx xxxxxxx nejméně 10 xxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx). Xxxxx xx xxxxxxx budou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita xxxx koncem xxxxxx.

Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx vratnost, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).

1.2.2.3 Xxxxx xxxxx

Xx třeba použít xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupinu. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx množství, které xxxxxx skupina, xxxxx xx aplikuje xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xx xxxxx dostupných xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxx 1000 mg.kg^-1 tělesné xxxxxxxxx, xx možno xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx-xx xxxxxx data x xxxxxxxxx, lze xxxxxxx předběžnou vyhledávací xxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Při xxxxxx xxxxx xx xxxxx vzít x xxxxx všechny xxxxxxxxxx xxxxx x toxikologických x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx utrpení. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx x klesající xxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx dávce. Nejnižší xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (XXXXX). Xxxxxxx xx vhodný xxxx- až čtyřnásobný xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx; pokud je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx přidat xxxxxxx xxxxxxxx skupinu, xxx xxxxxx příliš velký xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxx větší xxx 10).

Xxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx v potravě xxxx pitné xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx podávané xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx rovnováhu. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx se xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx. Aplikuje-li se xxxxx sondou, mělo xx xx xxx xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx x dávkování xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxx xxxxxx sloužit xxxx xxxxxxxxx pokus xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxxx-xx xxxx xxxxxxxxx zde popisovaným xxxxxxxx xxxxx toxické xxxxxx xxx xxxxx 1000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx, x xxxxx toxicita xxxxxxxxx xxxxx nevyplývá x analogie x xxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testování xxx xxxxx xxxxxxxxx úrovních xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx nenaznačují, xx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx je 28 dní. Zvířata xxxxxxxxx skupiny xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx s cílem xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x týdnu xx xxxx 28 xxx, xx zdůvodněných případech 5 dní x xxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kanylou. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx najednou, xxxxxx xx velikosti zvířete. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 ml xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Rozdíly x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx minimalizovat xxxxxxxxx koncentrace tak, xxx xxx xxxxxxx xxx objem na xxxxx úrovních xxxxx. Xxxxxxx to x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx stupňovanými xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxx pozorování

Xxxxxxxxx xxxxxxxx pozorování xx provádí xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx x tutéž xxxxx xxxx x s xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx účinku xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx zvířat. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx provede zběžná xxxxxxxxx všech zvířat xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x mortality. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx stres xxxx xxxxxxxx, utracena xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxxx klinické xxxxxxxxx všech xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx (za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx týdně. Toto xxxxxxxxxx se xxxx xxxx chovnou klec x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx dobu. Výsledky xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, nejlépe s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxxxxxxxx x testující xxxxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx; xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxxxxx xxxxxx znát xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxx xxxxxx.

Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx x xxxxxxx, přítomnost xxxxxxx x exkretů, změny xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx zornic) x xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx pohybů, xxxxxxxxxx x chování (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, pohyb xxxxxx).

Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx podněty (např. xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx se xxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Další xxxxxxxx informace x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx uvedeny x literatuře (xxx Xxxxxxxxx xxxx, část X).

Pozorování xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx následující xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (90xxxxx); x xxx xxxxxxx je xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Ovšem x v xxxxx xxxxxxx jsou údaje x funkčních poruchách xx čtvrtém xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x skupin xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx funkčního xxxxx xxxxxxx vadily.

1.2.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx potravy a xxxx

Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Spotřeba potravy x vody xx xxxx xxxxxxx jednou xxxxx, xxxx v xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx.

1.2.3.3 Hematologie

Xxxxxxxxxxxxx vyšetření na xxxxx xxxxxx zahrnuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx a změření xxxxxxxxxxx krve.

Xxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx v xxxxxxx utracení xxxxxxx, xxxxx, xxxxx se xxxx odebrala, se xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xx vhodných xxxxxxxx.

1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx analýza

Xxxxxxxxxxx analýza xxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xx tkáně, xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx, se xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxx před xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxx uhynulých xxxx utracených xxxxx xxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxx zvířata xxx xxxxxxx přes xxx xxxxxxx xxxx¹⁾. Vyšetření xxxxxx x séra xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, glukózy, celkového xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, kreatininu, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx dvou xxxxxx indikujících xxxxxx xx xxxxxxx buňky (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, sorbitoldehydrogenáza). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx poskytnout užitečné xxxxxxxxx.

Xxxxx možnost xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x vyšetření xxxx během xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx hmotnost, xX, xxxxxxxxx, glukózu x xxxx příp. xxxxxxx.

Xxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx poškození xxxxx x séru.

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx x látek xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx metabolické xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx, fosforu, xxxxxxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx případu.

Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx pružně, xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dané xxxxx.

Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxx xxxxx xxxx začátkem xxxxxx.

1) Xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxx x xxxx x xxxxxx, xxxxxxx xxx glukózu. Xxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx je xx, xx u xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxxxx xx xxxxx maskovat xxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx straně, xxxxxxxxx xxxx xxx by xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxx metabolismus x x aplikace x xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se odebírá xxxx xx lačno, xx xxxxx biochemické xxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve 4. xxxxx xxxxx.

1.2.3.5 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx xx provede xxxxx, xxxxxxxxxx pečlivé xxxxxxxxx xxxxxxxx povrchu xxxx, všech otvorů, xxxxxx xxxxx, hrudní x xxxxxx, x xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, varlata, xxxxxxxxxx, brzlík, xxxxxxx, xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx od xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxxx se xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx předešlo xxxxxxxxx.

Následující tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx oblasti xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x mostu), xxxxx, xxxxxxx, tenké x xxxxxx střevo (xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxxxx, xxxxx, brzlík, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem a xxx xxxxxxxxx), xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxx. dělohu, xxxxxxxx), xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx xxx oblast xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxx pokrytí xxxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xxxx (x. ischiadicus xxxx n. tibialis), xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxx kostní xxxxx (xxxx čerstvý xxxxx x xxxxxx xxxxxx dřeně). Xxxxx xxxxxxxxxx nebo jiných xxxxxx xx možno xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx působení testované xxxxx, xx třeba xxxxxxx.

1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

X všech xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx dávka, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx provést histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx těchto xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkami.

Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx vyšetřit.

U xxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXX A ZÁZNAM XXXXX

K xxxxxxxxx xxxx být xxxxx x každém xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc jsou xxxxxxx xxxxx sumarizovány xx tabulkové xxxxx, xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxxxxx zvířat, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x humánních xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx včetně doby xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx lézí x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx.

Výsledky v xxxxxxx xxxxx xx xxxxx vyhodnotit vhodnou x xxxxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx metodu xx třeba xxxxxx xxx při plánování xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x pokusu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx získány:

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;

- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx zvířat;

- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx atd.;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx testu, xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx jiné xxx xxxx;

- zdůvodnění xxxxxx dávek;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx aplikaci, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx testované látky;

- xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx látky x xxxxx xxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx dávku v xx na kg xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xxx x xxxxxxxx x xxxxx nebo xxxx);

- podrobné xxxxx o xxxxxxx x kvalitě xxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);

Xxxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx změny;

- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx;

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx příznaků toxicity;

- povaha, xxxxxxxxx x trvání xxxxxxxxxx xxxxxx, příp. xxx xxxx vratné xxxx xxxxxxxx;

- posouzení xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, úchopové xxxx x xxxxxxxxx aktivity;

- výsledky xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx;

- výsledky xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx x hmotnosti xxxxxx;

- pitevní xxxxxx;

- podrobný xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx;

- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx.

Xxxxxxx výsledků

Xxxxxx:

4. LITERATURA

Tato xxxxxx je analogická xxxxxx OECD XX 407.

B.8. AKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)

1. METODA

1.1 Xxxx

Xxxx pokusem je xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx, xxx xxxx, xxx xxxx, xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx).

1.2 Xxxxxxx metody

Několik xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, každá xxxxxxx xxxxx koncentraci, x xx xx 28 dní. Xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují x zjišťují xx xxxxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxx

1.3.1 Příprava

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých budou xxxxx experimentu. Před xxxxxx se zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x testované xxxxx xxxxxx vehikulum xxx, xxx x xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx proti xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx zdravých xxxxxxxxx z běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx začátku xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (pro xxxxx pohlaví xxxxxx).

1.3.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxx nejméně 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx budou xxxxxxx x průběhu xxxxxx, xx nutno xxxxxx celkový počet xxxxxx o počet xxxxxx, xxxxx budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx exponovat vysoké xxxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx dobu 28 xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx vratnost, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx satelitní xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx).

1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxx - x koncentraci xxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x malém xxxxx. Xxxxxxxx koncentrace by xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední xxxxxxxxxxx xxxx vyvolat toxický xxxxxx na hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx než 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx voleny tak, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Ve xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.3.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx xx být 6 xxxxx xxxxx; x xxxxxxx specifických xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.3.2.5 Expoziční xxxxxxxx

Xxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx dynamické xxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx xxxxxx, xxx xxx zaručen xxxxxxxxx xxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx konstruovat xxx, xxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx shlukování xxxxxx x xxx xxxxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry x xxxxxxxxxx xxxx neměl xx v xxxxxx xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx použít xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

1.3.2.6 Xxxx pozorování

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, ve kterém xx xxxxxx x xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.

1.3.3 Xxxxx postupu

Xxxxxxx xx exponují xxxxxxxxx xxxxx denně, 5 - 7 xxx v xxxxx, xx dobu 28 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx určena x xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 14 xxx bez aplikace, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx 22 ^xX ± 3 ^xX. Xxxxxxxxx vlhkost xx být mezi 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx možné (xxxx. experimenty x xxxxxxxx). Udržování mírně xxxxxxxxxxx xxxxx uvnitř xxxxxx (≤ 5 xx vodního xxxxxxx) xxxxxxx unikání xxxxxxxxx xxxxx do xxxxx. Xxxxx expozice se xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x vhodnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxxx xx provést xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rychlost xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Měření nebo xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:

x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně).

b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx studované xxxxx xx xxxx x xxxxxxx zóně. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx koncentrace xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx o xxxx xxx ± 15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxx této xxxxxx xxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx dobu xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx koncentrace tak xxxxxxxx, jak xx xx prakticky xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx a aerosolů, xxxx xx distribuce xxxxxxxxx částic xxxxx x xxxxx testované xxxxxxx.

c) Teplota x xxxxxxx vzduchu xxxxx možno kontinuálně.

Xxxxx xxxxxxxx x xx jejím xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx provádějí x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx má xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx toxických xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, stupeň x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx soustavy, somatomotorické xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx zaznamenávat týdně x xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxx prohlížení xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, jako xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata a xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx trpící xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

Xx konci pokusu xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xxxxxxxx následující xxxxxxxxx:

1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx.

2. Xxxxxxxxxxx analýza krve: x posouzení funkce xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx parametrů: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), aspartátaminotransferáza (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.

Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx studium xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.3.3.1 Pitva

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx (xxxxxxx xxxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, varlata, nadledviny x xxxxx, i xxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxxxxx změnami xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx) je xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx aby xx xxxxxxxxx struktura.

1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, a x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx koncentrací xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx provést histologické xxxxxxxxx těchto xxxxx x x všech xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx poškození.

Xxxxxxx zjištěné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxx.,

- podmínky xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx systému, xxxxx xxxxxxxxx odpadního xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x boxu, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx přístroje xxx xxxxxx teploty, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx tabulky x xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx variability (např. xxxxxxxxxxx odchylkou). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx: x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx; x) nominální xxxxxxxxxxx (celkové množství xxxxxxxxx látky přiváděné xx xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxx objemem xxxxxxx); x) povaha xxxxxxxx, xxxxx bylo užito; x) skutečná xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně; x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (MMAD) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX),

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx koncentrací,

- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, případně xxxx o xxxxxxx xxxxxx do konce xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxx,

- xxxxxx xxx xxxxxx,

- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,

- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx možné,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.9. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX OPAKOVANÁ XXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xx kůži xxxxx po 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx skupině xxxxx úroveň dávky. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x krmení, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx jednotlivých experimentálních xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx možné, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx cca 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx potřeba xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx holení xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. abrazí). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nejméně 10 % povrchu xxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx hmotnost xxxxxx xxx rozhodování x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx x tuhými látkami, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit vodou, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx zaručen xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Látka se xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x týdnu.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxx x xxxx zvířecí druhy, xxxxxx xxxxxxx však xxxx xxx odůvodněné. Xx xxxxxxx xxxxxx xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic x 5 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvýšit xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx nebo zpožděný xxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx zvířat (5 xxxxxx každého xxxxxxx).

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - pokud xx xxxxxxx xxxxxxxx - kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx expozice xx xxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxx xxxxxxxx xxxxx den xx stejnou dobu. X intervalech xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx ve xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx se kontrolní xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x to ve xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx skupině x nejvyšší xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x malém xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx vyvolat žádné xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x člověka, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx střední xxxxx xxxx xxxxxxx jen xxxxxxx účinek xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx xxx 3 xxxxxx dávek, xxxx být vmezeřené xxxxx voleny tak, xxx vyvolaly odstupňované xxxxxxx účinky. Ve xxxxxxx s xxxxxx x střední xxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx měl být xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx výsledků obtížné.

Xxxx-xx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx kůže, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx vyloučení xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxx-xx x těžkému xxxxxxxxx xxxx, je xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ukončit x provést xxx xxxxx s nižšími xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx test

Xxxxxxxx-xx xxx předběžné xxxxxx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx^-1 nebo xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.

1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx

Všechna xxxxxxx xx třeba denně xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxxxx dobu xxxxxxx x xxxx, kdy xx objeví x xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Zvířata xx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx po xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba chovat xx xxxxxxx 14 xxx xxx expozice, xxx xx mohla xxxxxxxxx reparace toxických xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx denně.

Testovanou xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % xxxxxxx těla; x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx může xxx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx plochy xxxxxxxxxx v xx xxxxxxxx vrstvě.

Xxxxxxxxx xxxxx xx po xxxxxxxxx dobu 24 xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx s xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx překrýt, xxx xx xxxxxx xxxxx x testovaná xxxxx fixovaly a xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx možno xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx metody xx xxxxx použít "xxxxxxxxxx xxxxx".

Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx nebo s xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx pokožky.

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx včetně xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx srsti, kůže, xxx x xxxxxxx x xxxx dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx i xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx zajistit pravidelné xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx nedocházelo xx xxxxxxx zvířat, xxxx xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x těžkém xxxxxx xx xxxxxx bolestí xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

Na xxxxx pokusu xx x všech xxxxxx xxxxxx kontrolních xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:

1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx.

2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: k xxxxxxxxx xxxxxx jater x xxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx bílkoviny v xxxx.

Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné pro xxxxx toxikologické hodnocení, xxxxx stanovení: vápníku, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3.1 Pitva

U xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, ledviny, nadledvinky, xxxxx a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx zváží xx xxxxxx stavu, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx, např. xxxxxxxx x xxxxxxxxxx kůže, xxxxx, xxxxxxx, slezina, xxxxxxx, nadledvinky, srdce x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx lézemi xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

U xxxxx zvířat skupiny, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx dávka, a x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx, je třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů a xxxxx. Pokud xx x orgánech x xxxxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx xxxxxx poškození způsobená xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x tkáně, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.

2. XXXXX

Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní musí xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat s xxxxxxxxxxxx formami poškození.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou metodou. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx pokud xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:

- údaje x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx druhu xxxxxx; xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx),

- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx,

- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj o xxxxxxx zvířat xx xxxxx sledovaní,

- xxxxxxx nebo xxxx xxxxxx,

- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- spotřeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx vyhodnocení výsledků, xxx je xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.10. XXXXXXXXXX - TEST XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXX XX VITRO

1. XXXXXX

Metoda xx xxxxxxxxx XXXX XX 473, In Xxxxx Mammalian Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx nalézt xxxxx, jež x xxxxxxxxx savčích buněk xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx většinou xxxxxxxxxxxx, dochází xxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx daná xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx však xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Chromozómové xxxxxx x příbuzné xxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx doklady toho, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxx způsobují změny x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxx rakoviny x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Tento xxxx xx používá x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, které xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxx savce xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx mezi tímto xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx látky x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, že xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx mechanismem xxx xxxxxx poškozením XXX.

X analýze xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, buněčných kmenů xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx růstu x xxxxxxx, stability xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx podmínky x xxxxx in xxxx. Je xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx by mohly xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mutagenitu, nýbrž xxxx xxxxxxxxx změnami xX, osmolality xxxx xxxxxxx cytotoxicitou (4) (5).

1.2 XXXXXXXX

Aberace xxxxxxxxxxxxxx typu: strukturální xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx místě (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx typu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx).

Zlom chromatidy: xxxx zlom xxx xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx mezera xx struktuře xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx pak x xxxxxxxxx, koncový (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx zlomu xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx delece.

Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx mitózy, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou chromozómy x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.

Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx proliferace xxxx populace.

Numerická xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3n, 4n xxx.).

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx metafáze, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxx.

1.3 XXXXXXX METODY

Xxxxxxx xxxxxxx xx vystaví xxxxxxxx testované xxxxx, x xx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xx. Ve xxxxxxxxxxx intervalech xx xxxxxxxx buněčné xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, se xxxxxxxx zastaví xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx mikroskopicky xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.4 POPIS XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx

Je xxxxx xxxxxx celou xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx primárních xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx jiného xxxxx).

1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx nádoby, xxxxxxxxxxx CO₂, xxxxxxx x xxxxxxx). X xxxxxxxxx linií x xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx modálního počtu xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx. X případě xxxxxxxxxxx xx xxxxx nepoužívají. Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx dobu xxxxxxxxx xxxxx x kultivační xxxxxxxx.

1.4.1.3 Xxxxxxxx kultur

Stabilizované xxxxxxx linie x xxxxx: xxxxx xx xxxxx xx zásobních xxxxxx vysetím xx xxxxxxxxxxxx média x xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx před xxxxx xxxxxxxx x inkubují xx xxx teplotě 37 ^xX.

Xxxxxxxxx: xx xxxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxx xxx xxxx krev x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx), nebo xxxxxxxxxx lymfocyty xxxxxxx xx xxxxxxxx jedinců x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 ^xX.

1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace

Na xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx systému. Nejobvyklejší xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx z jater xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (6) (7) (8) (9), nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx a ß-xxxxxxxxxxxx (10) (11) (12).

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10 % x/x. Xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx systému xxxx xxxxxxx xx tom, xxxxxx xxxx je xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Výběr xxxxxxxxx xxxxx by xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).

1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx stavu, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx nebo se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle x případně naředí. Xxxxxxx testované látky xx xxxxx do xxxxxxx přidávat přímo xxxx se xxxxxxx xxxx. Je třeba xxxxxxxx čerstvé xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

1.5 XXXXXXXX XXXXX

1.6 ROZPOUŠTĚDLO

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx podezření, xx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat, x xxxxx xxxxxxxxx přežívání xxxxx x aktivitu X9. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxx rozpouštědlo, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx prokazujícími xxxx xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje se, xxx xxxx xxx, xxx xx xx xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx testovaná xxxxx ve vodě xxxxxxx, xxxx být xxxxxxx organické rozpouštědlo xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sítem.

1.6.1 Koncentrace

Xxxx xxxxxxxx, xxx xx uvažují xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, rozpustnost x xxxxxxx x xxxxx xX resp. xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx i xxx xx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, například xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxx. Je vhodné xxxxxxxx cytotoxicitu x xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, musí xxxx xxxxxxxxxxx pokrývat xxxxxx xx xxxxxxxxx xx nízké xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx, že xx jednotlivé koncentrace xxxxxxx lišit více xxx násobkem, xxxxx xxxx mezi xxxxxxxxx 2 x √10. X době xxxxxxxx xxxxx musí být xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx signifikantní pokles xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx x xxxx než 50%). Xxxxxxxxx index je xxxxx xxxxxxxx mírou xxxxxxxxxxxxx / cytostatických xxxxxx a xx xxxxxxx xx době xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx jiná xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x nepraktická. Xxxx xxxxxxxxxx informace xx xxxxx použít xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jako xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx; xxx ovšem xxxxxxxxxxx xxxxxxx průměr, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X tak x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx od vhodné xxxx xxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látek xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nejnižší x xxxxxx 5 µx/xx, 5 xx/xx xxxx 0,01 X.

X xxxxxxxxx nerozpustných látek, xxx xxxx xxxxxxxxx x koncentracích xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx látka nerozpouští, xx být xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx je xxx xxxxxxxxxxxx ve finálním xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx dochází-li k xxxxxxxxx účinku při xxxxxxxxxxxxx vyšších, než xx nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx užitečné vyhodnotit xxxxxxxxxxx na xxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, protože xx xxxxx xxxxxxxx může xxxxxxxxxxx změnit v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, séra, X9 xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx zjistit x xxxxxxx okem. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx buněk.

1.6.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly

Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxx ní, xx xxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx). Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx být pozitivní xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx mutagenního účinku.

Xxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxxx známý xxxxxxxxx, x xx xxx xxxxxxxxxxx úrovních, xxx xx xxxxxxx, xx xxxxxxxx reprodukovatelný x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nad pozadí, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testovacího xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx identitu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx	Xxxxx	CAS	EINECS
Xx	xxxxxx methansulfonát xxxxx methansulfonát xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx mitomycin X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx	66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5	200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1
Ano	xxxx[x]xxxxx xxxxxxxxxxxxx monohydrát xxxxxxxxxxxxxx	50-32-8 50-18-0 6055-19-2	200-028-5 200-015-4

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Xxx, xxx je xx xxxxx, xx vhodné xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kultur xx xxxxx xxxxxx x negativní kontrolu, xx xxxxx xx xxxxxxx rozpouštědlo nebo xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, zpracované stejným xxxxxxxx jako experimentální xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.6.3 Xxxxxx

1.6.3.1 Expozice testovanou xxxxxx

Xx proliferující xxxxx xx působí xxxxxxxxxx xxxxxx za xxxxxxxxxxx i nepřítomnosti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx 48 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxx xxxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxx xxxxxxx; x xxxxx se xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x rozpouštědlem, xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xxxxxxx historických xxxxx xxxxxxxx, že xxxxxxx xxxx duplicitními xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (13) (14), je xxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx koncentraci xxxxxxx jenom xxxxx xxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (15).

1.6.3.2 Xxxx xxxxxxxx kultury

X xxxxxx experimentu xx xxxxx vystaví xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx ní xx xxxx 3 - 6 xxxxx x xxxxxx xx odebírají x xxxx odpovídajícím xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu xx xxxxxxx xxxxxxxx (12). Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x bez xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx bez xxxxxxxx, x kontinuální xxxxxxxx xx xx doby xxxxxxxx xxxxxxxxx odpovídají xxxxxx 1,5xxxxxxx normálního xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx při xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx 1,5xxxxxxx délky xxxxxxxxx cyklu. Negativní xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx posuzují xxxxxx xx xxxxxxx. X případech, xxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, je xxxxx xxxx xxxxxxxxxx zdůvodnit.

1.6.3.3 Příprava chromozómů

Xx buněčné xxxxxxx xx xxxxxx Colcemidem® xxxx kolchicinem xxxxxxx xx dobu 1 - 2 xxxxx xxxx ukončením kultivace. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvlášť. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x ovlivnění xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, fixace x odbarvení.

1.6.3.4 Xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, se xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx často xxxxx k rozbití xxxxxxxx xxxxxx metafázických xxxxx x ztrátě xxxxxxxxxx, musí být x všech xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x hodnocených buňkách xxxxx xxxxxxxxx číslu ± 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx minimálně 200 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx vysoký, xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx snížit.

X xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx zaznamenat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.

2. ÚDAJE

2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxxx buněk xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx registrovat xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx včetně xxxxxx xxxxx a četnosti x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xx zaznamenávají xxxxxx, xxx obvykle xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Současně je xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx také xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx kultury. Xxxxxxx se všechna xxxx xxxxxx v xxxxxxx tabulce.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx potvrdit xxxxxxxxx xxxxxxxx bylo xxxxxxxxx v odst. 1.4.3.3. V xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx použitých xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx podmínek. K xxxxxxxxxx, které xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx koncentrační xxxxxxxxx x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE VÝSLEDKŮ

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislá xxxxxxxxx xxxxx s chromozómovými xxxxxxxxx. Nejprve je xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3) (13). Xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx testovaná látka xx schopnost xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxx x endoreduplikovanými xxxxxxxxxx může naznačovat, xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxx inhibovat xxxx xxxxxxxxx xxxxx (17) (18).

Xxxxxxxxx xxxxx, při jejímž xxxxxxx výsledky xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria, xx x xxxxx xxxxxxx považuje za xxxxxxxxxxx.

Ačkoliv xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxx xxx ohledu na xxxxx opakovaných experimentů. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx aberace xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x kultuře xxxxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testovaná xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

ZPRÁVA X XXXXXXX XXXXXX

Xx xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.

Xxxxx:

- xxx x zdroj xxxxx,

- xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx,

- xxxxxxx mykoplasmat, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxx x délce xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxx krve, xxx byla xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx,

- počet xxxxxx xxxxx, xx-xx xx nutné - xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx to xxxxx

- xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx

- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx. xxxxx x xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jsou-li x xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx, koncentrace XX₂, xx-xx xx xxxxx

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky,

- xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxx kultivace,

- xxxx působení,

- xxxxxxx buněk xx xxxxxxx kultivace, je-li xx xxxxx

- xxx x složení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,

- pozitivní x xxxxxxxxx kontroly,

- xxxxxx xxxxxxxx podložních xxxxxxx,

- kritéria xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- metoda xxxxxxxxx toxicity,

- xxxxxxxx, jimiž se xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Výsledky:

- xxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxxx konfluence, xxxxx x xxxxxxxx cyklu, x xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx index,

- xxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx x xX x osmolalitě xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx aberací, xxxxxx xxxx,

- xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx aberacemi x xxx chromozómových xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,

- případné xxxxx xxxxxxx,

xxxxx xxxxx-xxxxxxx, je-li to xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx,

- souběžné xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Diskuse xxxxxxxx.

Xxxxxx.

B.11. MUTAGENITA - TEST XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXX XXXXX XXXXX XX XXXX

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 475, Xxxxxxxxx Xxxx Xxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 ÚVOD

Xxxxxx xxxxxxx chromozómových xxxxxxx x xxxxx xx vivo xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx a chromatidové. Xxxxxx polyploidie xxxx xxxxxxxxxx, že daná xxxxxxxx látka xx xxxxxxx vyvolávat xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx mutageny xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, ovšem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx dochází xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx řady genetických xxxxxx x xxxxxxx x existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx toho, xx xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx změny v xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

K xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxx xx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxx živočišné druhy x xxxxxx xxxxx xx x xxxxx xxxxx nepoužívají.

Xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx je zvláště xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx faktory xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x když xxx xxxxx být xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x mezi xxxxxxx xxxxxxx. Test xx xxxx xx xxxx xxxxxx xxx další xxxxxxx xxxxxxxxxxx efektu, xxxxx byl xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, že xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxx reaktivní xxxxxxxxx xx cílové xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, případně xxxx xxxxxxxxx, nebo xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx mezi chromatidami.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx poškození chromozómu xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx jako xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatid na xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx typu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)

Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx mezera xx struktuře xxxxxxxxxx xx xxxxx, než xx šířka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment v xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx mimo xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx delece.

Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, kde xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx jádro xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.

Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx než xxxxx xxxxx chromatidy a x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx buněčné xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

Numerická xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.

Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (n) xxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4x xxx.).

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury zjistitelná xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx a fragmenty x xxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxxxx xxxx xx působení xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xx xx xxxxxx xxxxxx zastavující xxxxxxxx (xxxxxxxxx kolchicinem xxxx Xxxxxxxxxx®). X xxxxx kostní xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Výběr xxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x čínští xxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx savčí druh. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx studie měly xxx xxxxxxxxx a x xxxxxxx pohlaví xxxxxx přesahovat ± 20 % průměrné xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx uvedeny ve Xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx X, vlhkost xx xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Příprava zvířat

Xxxxxx xxxxx dospělí xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx toho, jak x xxx xxxx xxxxx umístěny. Xxxxxxx xx xxxxx jednoznačně xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx aklimatizují x laboratorních xxxxxxxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx její xxxxxxxx ve vhodném xxxxxxxxxxxx nebo vehikulu x xxxxxxxx se xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xx před xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Rozpouštědlo / vehikulum

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x nesmí s xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx je to xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx rozpouštědlo / xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx zacházet xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, kdy lze xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx patrné, xxx xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx možné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx intervalu. Xxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx vhodných pro xxxxxxxxx kontrolu:

Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx	62-50-0	200-536-7
xxxxx nitrosomočovina	759-73-9	212-072-2
mitomycin X	50-07-7	200-008-6
cyklofosfamid	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako experimentální xxxxxxx xxxx by xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x o interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx odběr vzorků, xx xxxxxxxxxxxx dobou xxxxx interval xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx použít x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nepříznivé xxxx xxxxxxxxx účinky.

1.5 POSTUP

1.5.1 Xxxxx a xxxxxxx xxxxxx

X xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx pět xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx každého xxxxxxx. Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx údaje x stejném xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x toxicitě xxxxxxxxx xxxxxxx, xx testování xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx postačující. Tam, xxx xxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, jak je xxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx dávku, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx dávka xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxx podané x xxxxxxx nanejvýše xxxxxxxx xxxxx. Jiné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxxx ve xxxx různých xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx podání xxxxx xxx. X xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx normální xxxxx xxxxxxxxx cyklu (xxxxx xxxx obvykle 12 - 18 xxxxx) xx podání látky. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx absorpci x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxx xx xxxxxxxx buněčného xxxxx mohou ovlivnit xxxxxxxxx dobu pro xxxxxxx chromozómových xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx další xxxxx xxxxxx xx 24 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx v daném xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx vícekrát xxx xxxxxx xx xxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx odběr xxxxxx 1,5xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx cyklu xx xxxxxxxxx xxxxxx látky.

Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx intraperitoneálně xxxxxxxx xxxxxx dávka Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X myší xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3 - 5 xxxxx, x čínských xxxxxx xxxxxx 4 - 5 hodin. X kostní xxxxx xx odeberou xxxxx x xxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx-xx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx žádné xxxxxx xxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx laboratoři xx xxxxxxx stejného xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x pokusného xxxxxx, jaké se xxxxxxx x hlavní xxxxxx (5). Xxx xxxxxxxx toxicity se xxxxxxx pro první xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxx xx maximální xxxxxxxx x toxicitě xxxxx xxxx nulové. Xxx xxxxxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx pak xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx takové známky xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx podávání xx účinky xxxx xxxxxxx. Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx hormony nebo xxxxxxxx, xxxxx představovat x xxxxxx kritérií xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, jež xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, která vede x určitým xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxxx indexu x xxxx než 50 %).

1.5.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx test při xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx v xxxxx dávce xxxx xx dvou xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxxxxx se xx xxxxxxx údajů x xxxxxxx s xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx genotoxicita, nemusí xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx dávkových xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx studie xxxx limitní xxxxx 2&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xx xxx při xxxx trvání xx 14 dnů, x 1&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx může xxx zapotřebí xxxxxxx x limitním xxxxx xxxxx dávkové úrovně.

1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxx buď xxxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X odůvodněných xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, která se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx překročit 2 xx/100x xxxxxxxxx; vyšší xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx žíravých xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx objem xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxx zvířete xx xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx se xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x obarví xx.

1.5.7 Xxxxxxx

Jakožto xxxx xxxxxxxxxxxx xx x všech xxxxxx xxxxxx pozitivních i xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx. Xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx nezávisle zakódují. Xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x porušení xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx být xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx 2n ± 2.

2. XXXXX

2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx x tabelární xxxxx. Experimentální jednotkou xx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, počet aberací xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx jednotlivé xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, jejich xxxxx x četnost. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx, xxx obvykle xx xx celkové xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Nejsou-li xxxxx xxxxxxx x xxx, že xxx xxxxxxx xxxxxxx rozdílně, xx xxxxx údaje xx xxx xxxxxxx xxx statistickou xxxxxxx xxxxxxx.

2.2 Vyhodnocení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxxxxx pozitivního výsledku xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx frekvence buněk x chromozómovými xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx buněk s xxxxxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx faktorem pozitivního xxxxxxxx. Nejednoznačné výsledky xx xxxxx vyjasnit xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxx může xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx mitotické xxxxxxx x xxxxxxxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx chromozómy xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (7) (8).

Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Většina xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx výsledky, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vyvodit x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.

Pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx v xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx daných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x kostní dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx xxxxx vzít x úvahu, jaká xx pravděpodobnost, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx živočišný xxxx/xxxx,

- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,

- původ, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) kontroly,

- xxxxx ze xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x přípravě xxxxxxxxx xxxxx,

- podrobnosti x podávání xxxxxxxxx xxxxx,

- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, že se xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx cílové tkáně,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx dávku (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),

- xxxxxxxxxxx x kvalitě xxxxxxx a vody,

- podrobný xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- látka xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx,

- metody xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx analyzovaných xxxxx xx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx, jimiž xx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx toxicity,

- mitotický xxxxx,

- xxx x xxxxx aberací xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxx-xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- statistické xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

- xxxxx xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx,

Xxxxxxx výsledků.

Závěry.

B.12. XXXXXXXXXX - IN XXXX XXXXXXXXXXXX XXXX V XXXXXXX XXXXXXXXXXXX

1. METODA

Metoda xx xxxxxxxxx OECD XX 474, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 ÚVOD

Mikronukleus xxxx xx xxxx x xxxxx slouží xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx x mitotickém xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxx xxxxxxx x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx. z xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx cytogenetické xxxxxxxxx, xxxxx výsledkem je xxxxx mikrojader xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx fragmenty xxxx xxxxxx chromozómů.

Xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx x buňky vyloučeno; xxxxxxxx zbude x xxxxxxxxxx xxxxxxx mikrojádro. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxx, že xxxxx xxxxxx jádro xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

X xxxxx testu xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v této xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, x xxxxxxx xxxx prokázáno, xx jeho xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx druh dostatečně xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx strukturální xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mikrojádra se xxxx rozlišovat xxxxx xxxx kritérií, jako xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx kinetochoru (xxxxxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxx DNA x xxxxxxxxxx. Konečným xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (polychromních) xxxxxxxxxx x mikrojádry. Xxxx xxxxx zralých (xxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxx obsahujících xxxxxxxxxx x rámci xxxxxx xxxxx zralých xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx hodnotu xxxxxx x xxxxxxx, že xx zvířata xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Tento xx xxxx mikronukleus xxxx u xxxxx xx zvláště xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, protože xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx metabolismu xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, i xxxx xxx mohou být xxxx živočišnými druhy, xxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx byl předtím xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx o xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx metabolit xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx použití xxxxxx xxxxx xxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx během xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx dceřiných xxxxx.

Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx): xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx buňky (xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx mitózy, xxxx xxxxxx reprezentovaná xxxxxxxxxxxx xx fragmenty xxxxxxxxxx xxxx celými xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxx, jemuž xxxxxxx xxxxxxxx x jenž xx xx od xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx dosud xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx xxx ribozómy.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, xxxxxxx xx ve xxxxxxx xxxx xx působení xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx (1-7). Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx se xx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxx x připraví se xxxxxx, jež se xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, xx kterých xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, musí xxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx co nejkratší. X xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx se používá xxxxxx dřeň, doporučují xx jako xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx; xxxx xxxx xxx použit jiný xxxxxx savčí xxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx. Xxx xxxxx xxxxxx jakýkoliv xxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx, že se x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx nebo xx x xxx xxxx xxxxxxxxx dostatečná xxxxxxxxx xxxx látkám, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx kmeny mladých xxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxxxx x x každého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx xx Všeobecném úvodu x části B.

Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat

Zdraví xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci xx xxxxxxxxxxx označí x po xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, jak x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx a je-li xx možné, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx neovlivní.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx použití xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx je xx xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx použito xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx stejně.

X xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx nalezena xxxxxxxxxx in vivo xxx xxxxxxx, kdy xxx očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad xxxxxxxxx xxxxxx. Dávky xxx xxxxxxxxx kontrole xx xxxx tak, xxx byly xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx hodnotiteli xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx je možné xxxxxxx odlišným xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx látku x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx je xx možné, je xxxxx používat xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx vhodných xxx pozitivní xxxxxxxx:

Xxxxx	CAS	EINECS
xxxxx methansulfonát	62-50-0	200-536-7
X-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx	759-73-9	212-072-2
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx xx všech časových xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx x x interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx zvířaty. Xxxxxxxx-xx xx x negativních xxxxxxx pouze jeden xxxxx xxxxxx, je xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x neovlivněných xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx publikované xxxxx prokazující, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx nevyvolává žádné xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx krev, xxxx xxx xxxx souběžná xxxxxxxxx kontrola xxxxxxxxxx x xxxxxx odebraný xxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx pouze v xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 1 - 3 dávky), xxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x očekávaném xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx a pohlaví xxxxxx

X každé xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx každého xxxxxxx (11). Pokud x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx druhu x xxxxxxx xxxxxxxx způsobů xxxxxxxx prokazující, že xxxx xxxxx pohlavími xxxxxx v toxicitě xxxxxxxxx rozdíly, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx pohlaví xxxxxxxxxxx. Xxx, kde xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx závislá xx xxxxxxx, jak xx xxxx například x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx rozvrh (xxxx. jedna, xxx xxxx xxxx xxxxx x 24hodinových xxxxxxxxxxx). Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx schémata, xxxxx xx v xxxxx xxxxxxxxxxx neprokáže pozitivní xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx tak xxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, nebo xxxx použita xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx až do xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x objemnou xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, například xx dvě xxxxx xx den xxxxxx x rozmezí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Xxxx xx xxxx provádět xxxxx způsoby:

(x) Xx zvířata xx xxxxxxxxxx látkou působí xxxxxxxxxxx. Xxxxxx kostní xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx než xx 24 hodinách x celkově xx xxxxxxx xxx xx 48 hodinách xx xxxxxx látky, x xxxxxxxx intervaly mezi xxxxxx xxxxxx. Pokud xx vzorky odeberou xxxxx než xx 24 xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx. Vzorky xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx minimálně dvakrát, xxxxxx xx xxxxx xxx xx 36 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, xx vhodnými xxxxxxxxx po prvním xxxxxx vzorku, celkově xxxx nikoli xxxx xxx 72 xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx odpověď, xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

(b) Xxxxx se látka xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xxx xxxx xxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx 18 x 24 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxxxx periferní xxxx xxxxxx xxxx 36 x 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (12).

Je-li xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x další odběrové xxxxxxxxx.

1.5.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx-xx xx xxxxxx ke xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx žádné xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx provádět v xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx živočišného xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx se xxxxxxx x hlavní studii (13). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx toxicity x xxxxxxxx nízké, xxxx xxxxxx. Pro xxxxxxxx xxxxxx interval xxxxxx xxxxxx je xxx xxxxx použít xxxxx nejvyšší dávku. Xx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxxxxx biologickou xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x vyhodnocují xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx také definována xxxx dávka, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx dřeni (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx dřeni xxxx. xxxxxxxxx xxxx).

1.5.4 Xxxxxxx xxxx

Jestliže test xxx dávce xxxxxxxxx 2000 xx/xx hmotnosti x jedné xxxxx xxxx ve xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx nevyvolává xxxxx pozorovatelné xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx základě xxxxx x látkách x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx neočekává xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx za den xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx xxx době xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx expozice xxxx být zapotřebí xxxxxx x limitním xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.5.5 Xxxxxxxx látky

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx případech mohou xxx xxxxxxxxxx i xxxx xxxxxxx expozice. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 ml/100 x hmotnosti; vyšší xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. S výjimkou xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší účinky, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Příprava xxxxxx xxxxx / xxxx

Xxxxx xxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx z xxxxxx xxxx tibie okamžitě xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx x femuru nebo xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx se získává x ocasní žíly xxxx jiné xxxxxx xxxx. Xxxxxx buňky xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (8) (9) (10), xxxx se xxxxxxx xxxxxx, které se xxxxxxx obarví. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx XXX (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxx (14) nebo Xxxxxxx 33258 x xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx xxxxxxxxxx některé x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx použití xxxxxxx, xxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx. Xxxx výhoda xxxxxxxxx, xx by xx nedala xxxxxx xxxxx barviva (xxxx. Xxxxxx). Lze xxxxxx x xxxxx xxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxx xx sloupcem xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx (16) - pokud xxxx xxxxxx jsou v xxxxxxxxxx rutinně xxxxxxxxx xxx analýzu xxxxxxxxxx.

1.5.7 Xxxxxxx

X xxxxxxx xxxxxxx xx stanoví xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). K xxxxxx xxxxx xx počítá x případě xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx 1000 xxxxxxxxxx (17). Xxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. X každého jedince xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 2000 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Doplňující informace xxx xxxxxx xxx, xx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zralých xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx nemá být xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x celkového xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 20 % xxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx týdnů nebo xxxxx, xxx xxxx xxxxx mikrojader xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx 2000 xxxxxxx erytrocytů xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx x manuálnímu xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy (xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx analýza - xxxx xxxxxxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx.

2. ÚDAJE

2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX

Údaje x xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx. X xxxxxxx jedince xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxx, xx xxxxx uvést také xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxxx). Xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx pro každého xxxxxxx. Nejsou-li xxxxx xxxxxxx o tom, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx údaje xx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx sloučit.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Ke zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx s mikrojádry xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se mohou xxxxxx statistické xxxxxx (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx negativní výsledky, x ojedinělých případech xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x aktivitě xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx cílovou xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Ve zprávě x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Rozpouštědlo / vehikulum:

- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.

Pokusná xxxxxxx:

- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- xxxxx, věk x xxxxxxx jedinců,

- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx apod.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx jednotlivé xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedena,

- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxx dávky,

- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx cesty xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, že xx látka xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx koncentrace látky x xxxxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) na faktickou xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx),

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,

- xxxxxxxx xxxxx podávání xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- metody xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- metody xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx,

- počet analyzovaných xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx zvlášť,

- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry xxx každou xxxxxxx,

- xxxxx dávka - xxxxxx, xx-xx xx možné,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xx souběžných xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Diskuse xxxxxxxx.

Xxxxxx.

B.13/14. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX

1. METODA

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Reverse Xxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx kmeny Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (auxotrofní xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx histidin) x xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx detekovat xxxxxx xxxxxx vzniklé mechanismem xxxxxxxxxx xxxx delece xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx bakteriálních kmenů (1) (2) (3). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx spočívá x tom, xx xx zjišťují xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx kmenu xx xxxxxxxxx stavu x xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx bakterie syntetizovat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx změněná xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx své xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.

Genové xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx genové xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx zvířat xxxx xxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, levný a xxxxxxxxx jednoduchý. Xxxx xxxxxxxxxxx kmenů se xxxxxxxxx charakteristikami, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx detekci mutací, xxxxxx citlivých sekvencí XXX v xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx reparace DNA xx xxxxxxxx takových xxxxxxx reparace DNA, xxx xxxx náchylné x xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx genotoxickými látkami. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x byly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx testování xxxxxxxxxx x různých xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx Salmonella xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx aminokyselině (histidinu xxxx. xxxxxxxxxx), jež xxxxx ke xxxxxx xxxxx, xxxxx je xx dodávce xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.

Mutageny xxxxxxxxxxxx substituci xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x XXX. Xxx xxxxxxxxx testu může x xxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxx mutace nebo xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx genomu.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx vyvolávající xxxxxxxx mutace) xxxx xxxxx, xxx způsobují xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxx x XXX, čímž se xxxx čtecí rámec x RNA.

1.3 XXXXXXX XXXXX

V xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, které xx xx xxxxxxx xxxxx liší x xxxxxx látek xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx XXX. Xxxxx in vitro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx dokonale xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx, xxxxx test xxxxxxxxxxx přímé informace x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx dané xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx screenin genotoxické xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx. Pomocí xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx pozitivní, xxxxxxxx xxxx x xxxxxx testech mutagenní xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x příklady xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxx tohoto xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxx vyhodnocovaných veličin, xxxxxxx v metabolické xxxxxxxx nebo xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xx druhé straně xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx k xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx test xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxx silně xxxxxxxxxxxx sloučeniny (kupříkladu xxxxxx antibiotika) x xxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xx, xx specificky xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx topoizomerázy xxxx xxxxxxx analoga xxxxxxxxxx); x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx x xxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx při xxxxx xxxxx pozitivní, jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx, ovšem korelace xxxx absolutní; závisí xx chemické xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx tímto xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, protože xxxxxx jiným, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx mechanismem, xxxxx x bakteriálních xxxxxxx neprobíhá.

1.4 XXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxxxxxx exogenního xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx miskové xxxxxx "plate incorporation" xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx agarem x xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx agarem a xx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxx xxxx xxxxxxxx se xxx až tři xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx s počtem xxxxxxxxx revertujících xxxxxxx xx kontrolních xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Xx xxxxxxx několik xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xxxx klasická misková xxxxxx ["plate xxxxxxxxxxxxx"] (1) (2) (3) (4), xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) x xxxxxxxxx xxxxxx (11). Xxxx xxxx popsány xxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx nebo par (12).

Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx týkají hlavně xxxxxx plate incorporation x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxx přijatelné xxx xxxxxxxxxxx jak s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxx, kam xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx řetězcem, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx alkaloidy, xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx (3). Xxxx bylo xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx třídy xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx xx xx třeba xxxxxxxx jako xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", x xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx identifikovány xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxxx" (xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx se xxxx pro xxxxxx xxxxxxx použít): xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx x těkavé xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxx zdůvodnit.

1.5. POPIS METODY

1.5.1 Xxxxxxxx

1.5.1.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx bakteriální xxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx exponenciálního xxxx xxxxxxxxxxx stacionárního xxxxxx xxxxx (xxxxxx 10⁹ xxxxx/xx). Kultury x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Titr xx dá xxxxxxxx xxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx stanovením počtu xxxxxxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx xx miskách.

Doporučená xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 37^xX.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx čtyři xxxxx X. xxxxxxxxxxx (XX 1535; XX 1537 xxxx XX97x nebo 1X97; TA98; a XX100); x xxxxx xxxx xxxxxxxxx spolehlivost x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx čtyři xxxxx X. xxxxxxxxxxx mají xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx XX x xx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx mutageny, xxxxx xxxxxxxxxxxx křížové xxxxx a xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx X. coli XX2 xxxx X. xxxxxxxxxxx TA102 (19), xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx místě xxx xxxx XX. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů tato:

- S. xxxxxxxxxxx XX1535 x

- X. typhimurium XX1537 xxxx TA97 xxxx XX97x x

- X. xxxxxxxxxxx XX98 x

- S. xxxxxxxxxxx XX100 x

- X. xxxx XX2 uvrA xxxx X. coli XX2 xxxX (pKM101) nebo X. xxxxxxxxxxx XX102.

X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx TA102 xxxx xxxxxx XXX reparačně xxxxxxxxxxxx xxxx E. xxxx (xxxx. X. xxxx XX2 xxxx X. xxxx XX2 (xXX101)).

Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx postupů xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxx preparát xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx závislost na xxxxxxxxxxxxx nutné xxx xxxx (xxxxxxxx x xxxxxxx kmenů S. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx X. xxxx). Xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x to: přítomnost xx xxxxxxxxxxxx X-xxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx x xxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx XX98, XX100 x XX97x xxxx XX97, WP2 xxxX (xXX101) x xxxxxxxxxx xxxx ampicilinu + xxxxxxxxxxxx x xxxxx XX 102); přítomnost xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx. xxx xxxxxx x X. typhimurium xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x uvrA xxxxxx x E. xxxx xxxx uvrB xxxxxx u X. xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xx ultrafialové xxxxxx) (2) (3). Použité xxxxx xxxx xxx xxxxx spontánně revertujících xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx i x rozmezí xxxxxxxx x xxxxxxxxxx.

1.5.1.2 Médium

Xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxx (xxxx. x Vogelovým-Bonnerovým minimálním xxxxxx X x xxxxxxxx) x vrchní xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx umožňující xxxxxxx xxxxxx buněk (1) (2) (9).

1.5.1.3 Metabolická xxxxxxxx

Bakterie xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx za xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx používá kofaktorem xxxxxxxxxxxxxx post-mitochondriální xxxxxx (X9) připravená x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx fenobarbitalu x ß-naftoflavonu (18) (20) (21). Post-mitochondriální xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 30 % x/x xx xxxxx X9. Xxxxx a podmínky xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx testované xxxxxxxxxx. X některých xxxxxxxxx xxxx xxx vhodné xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakci x xxxxxxxx koncentracích. X azobarviv x xxxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx použít xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6) (13).

1.5.1.4 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx

Xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx připraví xxxxxx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x případně xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx systému přidávat xxxxx xxxx xx xxxxxxx ředí. Je xxxxx xxxxxxxx čerstvé xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx jejich xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.5.2.1 Xxxxxxx xxxxx (xxx 1.5.1.1.)

1.5.2.2 Xxxxxxxxxxx

Xx xxxxxxxxx, která je xxxxx vzít x xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxx použitého xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x konečné směsi, xxxxx xx k xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x nerozpustnost x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, vymizením xxxx zmenšením xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Za xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se může xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx posuzuje xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, viditelného x xxxxxx okem.

Xxxxxxxxxx maximální xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látek 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, jež x těchto xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx několik xxxxxxxxxxx xxxx xxx x xxxxxxx pokusné xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxxxxxxx již xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx než 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx, se xxxxxxx až xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx při xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx různých xxxxxxxxxxxxxxxx koncentrací xx xxxxxx půllogaritmickým xxxxxxxxxx (xx. √10) mezi xxxxxxxxxxxx body x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx menší. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx xxxxxxxx x úvahu, xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxx podstatné množství xxxxxxxxxxx mutagenních xxxxxxxx.

1.5.2.3 Xxxxxxxxx a pozitivní xxxxxxxx

Xxxxx test xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kmenově xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxx, jak x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Pro xxxxxxxxx kontrolu xx xxxx takové xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx testu.

U xxxxx x metabolickým xxxxxxxxxx systémem xx xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx volí xxxxx použitého typu xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:

Xxxxx	CAS	XXXXXX
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx	781-43-1	212-308-4
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx	57-97-6	200-359-5
xxxx[x]xxxxx	50-32-8	200-028-5
2-xxxxxxxxxxxxx	613-13-8	210-330-9
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2

Následující xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:

Látka	XXX	XXXXXX
Xxxxx xxxxxx	573-58-0	209-358-4

2-xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxxxx indikátor xxxxxxxxx xxxxx X9. Xxxxx xx 2-xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxx S9 xxxxxxxxxxxxxxx xxxx mutagenem, který xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx enzymy, např. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxx xxx kmenově xxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x xxxxxxx bez xxxxxxxxxx systému metabolické xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx:

Látka	XXX	XXXXXX
Azid xxxxx	26628-22-8	247-852-1	XX 1535 x XX 100
2-nitrofluoren	607-57-8	210-138-5	XX 98
9-xxxxxxxxxxxx	90-45-9	201-995-6	XX 1537, XX 97 a XX 97a
ICR 191	17070-45-0	241-129-4	XX 1537, XX 97 x XX 97x
xxxxx-xxxxxxxxxxxx	80-15-9	201-254-7	TA 102
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6	WP xxxX x XX 102
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx	70-25-7	200-730-1	XX2, WP2uvrA x XX2xxxX (pKM101)
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx	56-57-5	200-281-1	XX2, XX2xxxX x WP2uvrA (xXX101)
Xxxxxxxxxxxx (XX2)	3688-53-7		xxxxx xxxxxxxxxx plazmidy

K xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx třídě.

Xx xxxxx použít x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx z rozpouštědla xx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx, xx kterými xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx x negativní xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.3 XXXXXX

Xxx xxxxxxxx xxxxxxx metodě (1) (2) (3) (4) xxx metabolické xxxxxxxx xx obvykle xxxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 ml xxxxxxx bakteriální xxxxxxx (xxxxxxxxxx zhruba 10⁸ xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) a 0,5 xx sterilního xxxxx x 2,0 xx vrchního xxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx 0,5 xx metabolické xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakce (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) s 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx /xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx promísí x xxxxxx xx povrch xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Vrchní xxxx xx nechá xxxx xxxxxxxx ztuhnout.

Xxx xxxxxxxxxxxx metodě (2) (3) (5) (6) xx xxxxxxxxx látka / testovaný roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (obsahujícím xxxxxx 10⁸ xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x sterilním xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,5 xx) obvykle xx xxxx 20 xxx xxxx déle xxx 30 - 37 ^xX; xxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx misku x xxxxxxxxxx xxxxxx. Obvykle xx mísí 0,05 xxxx 0,1 ml xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,1 xx bakterií x 0,5 xx směsi X9 xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx agaru. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx misky. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx zdůvodněno. Xxxxx-xx xxxxxxx xx xxxxxx misky, nemusí xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Plynné xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, například x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (12) (14) (15) (16).

1.5.4 INKUBACE

Xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 ^oC pod xxxx 48 - 72 hodin, načež xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx na každé xxxxx.

2. XXXXX

2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xxx x negativní kontroly (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx působení, xxxx-xx xxxxxxx), tak x xxxxxxxx pozitivní. Xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxx působení xxxxxxxxxxxx) xx uvedou xxxxx xxx jednotlivé xxxxx x průměrný xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx včetně xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Verifikace xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx testováním, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od případu. Xxxxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xx xxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxxx. X následných xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Ke studijním xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx mezi koncentracemi, xxxxxx xxxxxxxx ("xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xxxx preinkubace x xxxxxxx xxxxxxxxx) x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx dávkově xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx více koncentracích x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxx něj (23). Xxxx první xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (24), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx.

Testovaná látka, xxxxx výsledky výše xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx v tomto xxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.

Většina experimentů xxxx poskytuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nelze xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x když se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx na reverzní xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx vyvolává xxxxxx xxxxxx xxxx substitucí xxxx xxxx posuzovaných xxxxxx x xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx resp. Xxxxxxxxxxx coli. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zkušebním xxxxx mutagenní.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx látky x xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.

Kmeny:

- xxxxxxx xxxxx,

- xxxxx xxxxx x kultuře,

- xxxxxxxxxxxxxxx kmene.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx misku (v xx xxxx μl) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a počtu xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx,

- použitá xxxxx,

-typ a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx),

- xxxxxxx xxxxxxxx (zpracování).

Výsledky:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx srážení,

- počty xx xxxxxxxxxxxx miskách,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, průměrů x směrodatných xxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

X.15. XXXXXX XXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip metody

Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx kvasinek Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae xxxxx xxx užity xxx xxxxxx produkce genových xxxxxx indukovaných xxxxxxxxxx xxxxxxx bez x x metabolickou aktivací.

Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx systémy u xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxx vzniku xxxxxx z xxxxxxxxx, xxxxxx vyžadující xxxxxx (xxx-1, ade-2) xx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxx rezistence xx canavaninu x xxxxxxxxxxxxx.

Nejlépe xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx systém xxxxxxxx xxxxxxx haploidního xxxxx XV 185-14 X x xxxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxx mutacemi xxx 2-1, xxx 4-17, lys 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx xxxx vratné xxxxxxxxx xxxxxxxx typu xxxxxx xxxx, které xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mutace. XX185-14X xxxx xxxxxx xxx 1-7 xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxx 3-10, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

U xxxxxxxxxxx kmenů X. xxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx kmenem X₇, který xx xxxxxxxxxxx xxx ilv 1-92.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a kontrol xxxx být xxxxxxxxxx xxxxx xxxx testováním xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X organických xxxxx ve xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vehikula nemá xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx aktivace

Xxxxx xxxx xxx exponovány xxxxxxxxxx látkám jak x přítomnosti, tak x nepřítomnosti vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx z jater xxxxxxxx xx aplikaci xxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx jiných druhů, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx postupů xxxx xxx rovněž vhodné xxx metabolickou aktivaci.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Testovací xxxxx

Xxxxxxxxx xxxx XX 158-14X x xxxxxxxxx xxxx X7 xxxx nejužívanější pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx xxx rovněž xxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx

Odpovídající kultivační xxxxx xxxx užívána xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly

Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x rozpouštědlem xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx mutační xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx

Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx redukovat xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx po xxx xxxxxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx netoxické, xx xxxx xxxxxxxxx, xx určena xxxxxx xx xxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xx sedm xxx xxx 28 xx 30 ^xX xx tmě.

1.2.2.6 Frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací u xxxxxxxxx xx xxx x xxxxxxx akceptovaných xxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx

Xx nutno xxxxxx nejméně tří xxxxx xx jednu xxxxxxxxxxx u xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x u životnosti xxxxx. X experimentů xxxxxxxxxxx markery xxxx xxx 3-10 x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx zvýšen, aby xxxx získány xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.3 Popis xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx X. cerevisiae xx xxxxxxx prováděno ve xxxxxxxx v tekutém xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxx stacionární xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx: 1-5 x 10⁷ xxxxx/xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx dobu xx 18 h. při 28 až 30 ^xX za xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, promyty x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x buňky x xxxxxxx genových mutací.

Xxxxxxxx xx první xxxxx xxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx druhý xxxxx s xxxxxxx xx stacionární fázi. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx v tabulkové xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, počet xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx mutací. Xxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx nezávislým xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx vyhodnoceny vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x:

- xxxxxxxxx xxxxxxx,

- podmínkách xxxxx: xxxxx xx stacionární xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx a xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxx výsledků.

B.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx (obecněji xxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxx xxxx. Xxxxx případ xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x vytváří xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx případ xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx nazýván genová xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx recesivních xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx kmenů, xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzniklých x auxotrofního xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx nese xxx různé xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx užívané xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx X₄ (heteroalelický x xxx 2 x xxx 5), X₇ (xxxxxxxxxxxxxx v xxx 5), BZ₃₄ (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4) x XX1 (heteroalelický x his 4 x trp 5). Xxxxxxxxx překřížení xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x X₅ xxxx X₇ (xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx konversi x xxxxxxxx mutace v xxx 1-92). Xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx komplementární xxxxx xxx 2.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx mají být xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx látek xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx rozpouštědlech, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Metabolická xxxxxxxx

Xxxxx xxxx být xxxxxxxxx působení testovaných xxxxx xxx v xxxxxxxxxxx, xxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx systémem xx postmitochondriální frakce xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx jiných xxxxx, xxxxx, postmitochondriálních xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx X₄, X₅, D₇ x XX1. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxx.

1.2.2.2 Média

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx užívána xxx xxxxxx přežívajících buněk x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly

Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a rozpouštědlem xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx specifickou mutační xxxxx mají xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxx chemické látky.

1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx

Xx být xxxxxxx nejméně 5 xxxxxx xxxxxxxxx koncentrací. Xxxx xxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx x rozpustnost. Nejnižší xxxxxxxxxxx nesmí xxx xxxx na životnost xxxxx. U xxxxxxxxx xxxxx xxxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx redukovat xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx nerozpustné xxxx xxx xxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxx látky xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxx být xxxxxxxxx působení testované xxxxx buď stacionární xxxx, xxxx během xxxxx xx xxxx xx 18 x. Xxxxxxx dlouhodobě ovlivňované xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx znehodnocuje.

1.2.2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xx xxxxx xx xxxx xxx xxx 28 - 30 ^xX. Xxxxx xxxxxxx xxx průkaz červených x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx 4 ^xX) po xxxxx 1 - 2 xxx před xxxxxxxxx, xxx se xxxxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.6 Spontánní xxxxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx

Xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx normálních xxxxxx.

1.2.2.7 Xxxxx replikací

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x testu xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx mitotickým překřížením xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx dosaženo xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

1.2.2.8 Postup

Xxxxxxxxx S. cerevisiae xxxxxxx obvykle jako xxxxxxxxxx test x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx buňky. Xxxxxxxx xxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx buňkách. 1-5 x 10⁷ xxxxx/xx xx xxxxxxxxx testované xxxxx xx dobu xx 18 x. xxx 28 až 30 ^xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx to potřebné.

Xx skončení xxxxxxxxx xxxx buňky xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxxx kultivační xxxxxx. Po xxxxxxxx xxxx počítány xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx.

Jestliže xx xxxxx xxxxx negativní, xx být proveden xxxxx xxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx experimentem.

2. XXXXX

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx formě x xxxxxxxx xxxxx kolonií, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Výsledky xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx: buňky xx xxxxxxxxxxx fázi nebo xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x trvání xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx ovlivnění, pozitivní x negativní xxxxxxxx,

- počet xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvence xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx hodnocení xxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxx výsledků.

B.17. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX XXXXXXX XX XXXXX

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX TG 476, Xx Xxxxx Mammalian Xxxx Gene Xxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xx dá xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx genových xxxxxx xxxxxxxxxx chemickými xxxxxxx. Xxxx vhodné xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx lymfomové xxxxx X5178X, xxxxx CHO, XXX-XX52 a V79 xxxxx čínského xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx XX6 (1). X xxxxxx buněčných xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx konečný xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (TK) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) a v xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx fosforibosyltransferáze (XXXX). Testy xxxxxx x XX, XXXX x XPRT xx xxxxxxxx xxxxx spektra xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XX a XXXX xxxx xxxxxxx xxxxxxx i takové xxxxxxxxx xxxxx (např. xxxxx xxxxxx), které xx na lokusu XXXX chromozomů X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).

X xxxxx na xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx in xxxxx xx dají xxxxxx xxxxxxx stabilizovaných buněčných xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Při volbě xxxxx se berou x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx in xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, za xxxxxxx xx výsledky xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. X pozitivním výsledkům, xxx nejsou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxx xX, xxxxxxxxxx xx vysoké cytotoxicity (7).

Xxxxx xxxx se xxxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxxxxx savčích xxxxxxxx x karcinogenů. Řada xxxxxxxxx, které jsou x xxxxx testu xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, neexistuje xxxx xxxxxxxx korelace mezi xxxxx testem a xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx druhu xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx jiným, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx či xxxxxxxxxxx, který x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nepůsobí (6).

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx mutace: xxxxxx xxxxxx výchozího xxxx xxxxxxxx formy, jež xxxx xx xxxxx xxxx ztrátě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kódovaného proteinu.

Mutageny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx: xxxxx způsobující xxxxxxxxxx jednoho xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx x DNA.

Frameshift xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx posunové xxxxxx): xxxxx, xxx xxxxxxxxx přidání xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxx x DNA.

Doba xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxx, během xxxxxxx xxxx z xxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx genové xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx: počet xxxxxxxxxxxx mutovaných xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx růst: xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx růstu (x porovnání x xxxxxxxxx kontrolou) a xxxxxxx klonovací xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (v xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx).

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx růst: xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x porovnání x negativní xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx xxxxxxxxxx) ovlivněných xxxxx x xxxx xxxxxxxxx na miskách x xxxxxxxxxx podmínkách xx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx působení xxxxx; xxxxxxxxx xx xxxxxxx x porovnánís xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX METODY

Buňky, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx (TK) x xxxxxxxx xxxxxx XX^+/- → XX^-/-, xxxx rezistentní vůči xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx TFT xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx metabolismu x xxxxxxxxx další xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx XXX xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx normální xxxxx, xxxxxxxxxx thymidinkinázu, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx buňky s xxxxxxxxxxx XXXX nebo XXXX selekčně xxxxxxxxxxx xxxx 6-thioguaninu (XX) xxxx 8-xxxxxxxxxx (XX). Xxxxx xx analog xxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx buňkách, xx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx x xxx xxxx. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxxxxxxx strukturně příbuzné xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx potvrdit, xx xx selekční xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).

Xxxxx x suspenzi xxxx xxxxxxxxxxxxx kultuře xx xx vhodnou xxxx xxxxxxx působení testované xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx a xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x k xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx relativního xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx x růstovém xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx daný xxxxx x xxx xxxxx, aby mohlo xxxxx x co xxxxxxxxxxxxxxx fenotypické xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Frekvence xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxx x médiu xxxxxxxxxxx selekční činidlo xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a x xxxxx bez xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti (cloning xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxxx x neselekčním xxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Buňky

Dá xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx, včetně xxxxxxxx xxxxx X5171X, XXX, XXX-XX52, X79 x TK6. U xxxxxxxxx xxxx používaných x tomto xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) x xxxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xx kontroluje, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxx xx třeba naplánovat xxx, xxx xxx xxxxxxxx citlivost x xxxxxxxxxxx (xxxxx). Xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx těmto xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx buněk, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx je, xx xxxxx buněk má xxx xxxxxxxxx desetinásobkem xxxxxxxxxx hodnoty xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxxxxxx 10⁶ buněk. Xxxx by xxx x xxxxxxxxx adekvátní xxxxxxxxxx xxxxx, kterými xx xx prokázala xxxxxxxxxxxxx zvládnutí xxxxx.

1.4.1.2 Média x xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx podmínky (xxxxxxxxxx xxxxxx, koncentraci CO₂, xxxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx se xxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx systému x xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zajišťovaly xxxxxxxxx růst xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx jak xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx tvořit xxxxxxx.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx kultivačního xxxxx x inkubují xxx xxxxxxx 37 ^xX. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx buněk.

1.4.1.4 Metabolická xxxxxxxx

Xx buňky se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx mitochondriální xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy xxxx je Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx a β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).

Konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10% x/x. Aktivita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx chemikálie. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx linií xx xxx být xxxxxxx xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).

1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, látka xx xxxx xxxxxxxxx xx buňky xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx naředí. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx do xxxxxxx xxxxxxxx přímo xxxx xx xxxxxxx ředí. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx o jejich xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vlastnosti.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx podezření, xx xx mohlo x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx být podpořeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje xx, xxx xxxxx tam, xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx testovaná xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx dá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx v systému x xxxxx pH xxxx. xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (přežití) nebo xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x předběžných xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx minimálně čtyři xxxxxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, musí xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxxxx xx nízké xxxx xxxxxx toxicity. Xx xxxxxxx xxxxxxx, že xx jednotlivé xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx mezi hodnotami 2 a √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, měla xx vést k xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx růstu x 10-20 %, xx xxxx xxxx xxx 10 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx nejnižší x xxxxxx 5 xx/xx, 5 μx/xx a 1,01 X.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek, jež xxxx netoxické x xxxxxxxxxxxxx nižších, než xx koncentrace, xxx xxxxx xx již xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx mez xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx kultivačním xxxxx xx konci xxxxxxxxx s testovanou xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx xxxxx působení, xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx expozice x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, S9, séra xxx. měnit. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxx okem. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.4.2.3 Xxxxxxxx

X xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx pozitivní a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx) xxxxxxxx, a to xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Xxxxx xx xxxxxxxx metabolická xxxxxxxx, xxxx být pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxx	Xxxxx	Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxxxxx
Xx	XXXX	xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx	62-50-0 759-73-9	200-536-7 212-072-2
	XX (xxxx x xxxxx xxxxxxx)	xxxxxx methansulfonát	66-27-3	200-625-0
	XPRT	ethyl xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx	62-50-0 759-73-9	200-536-7 212-072-2
Xxx	XXXX	3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx	56-49-5 62-75-9 57-97-6	200-276-4 200-549-8 200-359-5
	XX (xxxx x xxxxx xxxxxxx)	xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx cyklofosfamidu benzo[a]pyren 3-methylcholantren	50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5	200-015-4

				200-028-5 200-276-5
	XPRT	N-nitrosodimethylamin (pro xxxxxx koncentrace X-9)	62-75-9	200-549-8
		xxxxx[x]xxxxx	50-32-8	200-028-5

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx použít x xxxx xxxxxx látky; xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (CAS 59-14-3, číslo EINECS 200-415-9), lze xxxxxx x tuto referenční xxxxx. Xxx, xxx xx xx možné, xx xxxxxx použít xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx skupiny.

Pro každý xxxxxx interval xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx které xx xxxxxxx rozpouštědlo xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx ovlivnění, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx buňky nepříznivé xx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.4.3 Xxxxxx

1.4.3.1 Xxxxxxxx testovanou xxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx jak s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Expozice xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xx xxxxxx doba 3-6 xxxxx). Doba xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx jeden xxxx více xxxxxxxxx xxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx nebo jenom xxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx jedna kultura, xx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx počet kultur x xxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Kultury s xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx vhodné xxxxxxx, xxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx uzavřených xxxxxxxxxxxx xxxxx (21, 22).

1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, viability x xxxxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x fenotypické xxxxxxx. Xx expozici xx xxxxxxx začíná x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx - cloning efficiency xxxx relativního celkového xxxxx.

Xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (HPRT x XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, TK xxxxxxxxx 2 dny). Xxxxx se xxxxxxx x xxxxx s x bez xxxxxxxxxx xxxxxxx pro stanovení xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx exprese xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (používané x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx) inokulací xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx v xxxxx X5178X TK⁺/^- xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xx jedné x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace) x xx xxxxxxxxxxx x pozitivních xxxxxxxxxx xxxxxxxx velikost xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxx x XX6XX⁺/^-.

2. XXXXX

2.1 Zpracování xxxxxxxx

Xxxx data slouží xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x životnosti, počty xxxxxxx x mutační xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx. X xxxxxxx pozitivní xxxxxx v xxxxx X5178XX⁺/^- xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx kritérií xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx velkých x xxxxxx kolonií byly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx testu XX⁺/^- xx xxxxxxx hodnotí xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx růstu (velké) x xxxxxxxx xxxxx (xxxx) (25). mutanty, xxxxx xxxxxxx nejrozsáhlejší xxxxxxxxx xxxxxxxxx, mají xxxxx xxxx zdvojení, x xxxxx tvoří xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx poškození obvykle xxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx látkám xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx postižené xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xx xxxxx uvádět xxxx přežití (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx relativní xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx počtem přežívajících xxxxx.

Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx testováním, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx musí potvrdit xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx negativních xxxxxxxx nepovažuje xx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx modifikaci xxxxxxxxx studie tak, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx x experimentu xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxx xxxx jednotlivými xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx nárůst xxxxxxx xxxxxxxxx. Nejprve xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx látka, xxx jejímž xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria, xx x tomto xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nelze ze xxxxxxxxx xxxxxxx dat xxxxxxx o aktivitě xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx nejednoznačné xxxx problematické, x xxxx xx experiment xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx in vitro xxxxxxx, že testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx savčích buněk xxxxxx mutace. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx - xxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx genové xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,

- rozpustnost x xxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx známa.

Buňky:

- xxx x xxxxx xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx kultur,

- xxxxxxxx počet xxxxxx,

- xxxxxxxx metody xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x počtu xxxxxx, xxxxxx např. údajů x cytotoxicitě x xxxxxxxx x rozpustnosti, xxxx-xx k dispozici,

- xxxxxxx xxxxx, koncentrace XX₂,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- objem vehikula x přidané testované xxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx,

-xxxx xxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx látky,

- xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- délka xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxxxxxx)

- xxxxxxxx činidla,

- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx buněk,

- xxxxxxxx xxxxxxx, u xxxxx xx xxxxxxx velikost x xxx (xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx "malými" x "xxxxxxx" xxxxxxxxx).

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxx,

- údaje x xX x osmolalitě xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx, jsou-li xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- případné možnosti xxxxxxxxxx xxxxxxx malé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx X5178X TK⁺/^-,

- xxxxx xxxxx - xxxxxx, je-li xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx analýzy, xxxx-xx provedeny,

- xxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx, xxxxxx rozpětí, průměrů x směrodatných xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

B.18. XXXXXXXXX XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX XXXXXXX XXX - XXXXX XXXXX XX XXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (UDS) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX obsahující xxxxxx poškození xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Test xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (³H-TdR) xx DNA xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x X fázi xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx ³X-XxX xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (LSC) x xxxxxxxxxxxx buňkách. Xxxxxxxxx xx primární xxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxx testovanou xxxxxx xxx x přítomnosti, xxx i x xxxxxxxxxxxxx exogenního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. XXX xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx vivo.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx a sloučeniny xxxxxxx xxxx kontrolní xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Další xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx nesmí nepříznivě xxxxxxxxxx životnost xxxxx.

Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx).

Xxxxx jsou exponovány xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx a nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxx kultur

Pro xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx buněčných xxxxxx xxx autoradiografii x xxxxx kultur (xxxx xxxx, je-li xx xxxxxxx zdůvodnitelné) pro XXX XXX.

1.2.2.2 Xxxxxxxxx x pozitivní kontroly

X xxxxxx experimentu xxxx xxx současně xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx i x xxxxxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx použít 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-DMBA) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxx i xxx XXX xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-NQO). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky

Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx koncentrací testované xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxxx ve xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx rozpustnosti xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx rozpustné xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx určuje xxxxxx xx případu.

1.2.2.4 Buňky

Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx růstové médium, xxxxxxxxxxx CO₂, teplota x xxxxxxx. Stabilizované xxxxxxx linie musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx aktivační xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx a xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx

1.2.3.1 Příprava xxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx xx zásobní xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx setřepáním xxxxx z povrchu xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 ^xX.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx potkaních xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx, že xx xxxxxx xxxxxxx izolovaným xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxx médiu x povrchu xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx lidských xxxxxxxxx xxxx založeny xxxxxx xxxxxx metody.

1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx hepatocyty xxxxxxx. Čerstvě xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x médiu xxxxxxxxxxx ³X-XxX xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxx, buňky promyty, xxxxxxxx x sušeny. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxx může xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, obarvena x xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxxxxx xxxx x xxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx ³X-XxX. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx druhu xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx systému x xx typu xxxxx. X xxxxxxxxx nejvyššího xxxxxxx UDS je xxxxx ³X-XxX xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx expozici. Xxxxx mezi xxxxxx xxxxxxx xx ovlivněn xxxxxx interakcí mezi xxxxxxxxxx xxxxxx x ³X-XxX. X xxxxxxxx xxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxxxx replikací XXX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx séra xxxx xxxxxxxx hydroxyurey xx xxxxxxxxxxxx média, xxx xxxxxxx xxxxxxxx semikonzervativní xxxxxxxxx DNA.

Stanovení XXX pomocí XXX: Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx buněk xx X-xxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx jsou pak xxxxxxxxxx testované látce, xxx bylo xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx. Na xxxxx xxxxxxxxx je XXX xxxxxxxxxxx x xxxxx x stanoven xxxxxxx xxxxx XXX x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx ³H-TdR.

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxx.

1.2.4 Analýza

1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx

Xxx xxxxxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx kultuře xx xxxxx v S-fázi xxxxxxxxx. Hodnotí xx xxxxxxx 50 xxxxx x xxxxxx experimentálním xxxx. Preparáty xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx hodnotí xxxxxxx náhodně xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx ³X-XxX x cytoplazmě xx xxxx x xxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx LSC

Xxx xxxxxxxxx XXX XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx každou koncentraci xxxxxxxxx látky x xxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.

2.1 Xxxxxxxxxxx autoradiografie

Xxxxxx xxxxxxxxxxx ³H-TdR xx xxxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx inkorporace ³H-TdR xx cytoplazmy a xxxxx xxx x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx průměru, xxxxxxx x xxxx.

2.2 Xxxxxxxxxxx XXX

Xxxxxxxxxxx ³H-TdR xx zaznamenává xxxx xxx/μx DNA. Xxxxxxxx xxxxxxx dpm/μg XXX xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx používají x xxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx vhodnými statistickými xxxxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx xx možné, xxxxxxxxx o:

- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxx x době xxxxxxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂,

- xxxxxxxxx látce, xxxxxxxxxxxx, koncentracích a xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx aktivačním xxxxxxx,

- pokusném xxxxxxxx,

- pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx autoradiografických xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx blokování xxxxxx xxxxx do X-xxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx x extrakci XXX x x xxxxxxxxxxx celkového xxxxxx XXX xxx metodě XXX,

- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- statistickým xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.19. XXX - XXXXXX SESTERSKÝCH XXXXXXXXX IN VITRO

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

XXX xx krátkodobý xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. SCE xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) lokusech. XXX xxxxxxxxxxxxx vyžaduje xxxx x opětovné spojení, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx základě tohoto xxxxxxx. Detekce XXX xxxxxxxx diferenční značení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Toho xx xxxxxxxx inkorporací xxxxxxxxxxxxxxxxx (BrdU) do xxxxxxxxxxxxx XXX xx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Savčí buňky xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx potřebné. Xxxxxxxxx se po xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx BrdU. Xx xxxxx xxxxxxxxx se xxxxx ovlivní xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx) x akumulaci xxxxx v x-xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x připraveny xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Používají se xxxxxxxxxxxx (lidské xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (ovariální xxxxx xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x hlediska xxxxxxxxxxx Mycoplasmaty.

Používají xx vhodná kultivační xxxxx x kultivační xxxxxxxx (teplota, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂ x xxxxxxx).

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx buněk, rychlost xxxxx xxxx xxxxxxxxx XXX.

Buňky se xxxxxxxx testované xxxxx x přítomnosti x xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx savčího metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx použití buněčných xxxx s xxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx aktivitou, xxxxxxxx úroveň x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx vhodné pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx

Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx kultury.

1.2.2.2 Negativní x xxxxxxxxx kontroly

X každém experimentu xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx vyžadující metabolickou xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx negativní xxxxxxxx x použitým xxxxxxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx lze použít:

- přímo působící xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx

- xxxxxxx xxxxxxxx mutageny: xxxxxxxxxxxxx

Xx-xx třeba, xx možné xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx se nejméně xxx xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx signifikantní xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk. Xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx testovat xx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx netoxické xxxxx xx určuje xxxxxxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx ze xxxxxxx xxxxxxx (trypsinací nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx kultivační nádoby), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx nádob ve xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 ^oC. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx takový počet xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx nevytvářely xxxx než x 50 % konfluentní xxxxxx. Lze xxxx xxxxxx suspenzních kultur. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx xxxx běžnými xxxxxxx a inkubují xxx 37 ^oC.

1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxx exponovány testované xxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx. Ve xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx dvě xxxxxx, ale xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxx cykly, je-li xx třeba. Buňky, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx i nepřítomnosti xxxxxxxx metabolického aktivačního xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx z xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x dále xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx médiu x XxxX xxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx a XxxX xx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxx lymfocytární kultury xxxx exponovány testovanou xxxxxx, xxxxx jsou x semisynchronizovaných xxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx po expozici xxxxxxxxx látce, xxxxx xxxxxxxx x nejcitlivějším xxxxxx buněčného xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x XxxX xx třeba xxxxxxxx x temnu xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx XxxX.

1.2.3.3 Xxxxxxxxxx buněk

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx kultivace xx xx xxxxxx xxxxx inhibitor dělicího xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx SCE xxxx xxx provedeno xxxxxxxx xxxxxxxxxx (např. fluorescenční xxxx Giemsa).

1.2.3.5 Xxxxxxx

Xxxxx analyzovaných buněk xx závislý xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxx. Xxxxxxx xx hodnotí nejméně 25 xxxxx rozprostřených xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx zakódovány před xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x 46 centromerami. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx x ± 2 xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx SCE v xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx se počet XXX x xxxxx xxxxxxxx x počet XXX/xxxxxxxxx zvlášť xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádobách, xxxxx xxxxxxxx, inhibitoru xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx x jeho xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx,

- způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx analyzovaných xxxxxxxx (odděleně xxx xxxxxx xxxxxxx),

- xxxxxxxxx xxxxx SCE/buňku x XXX/xxxxxxxxx (odděleně xxx každou xxxxxxx),

- kritériích xxxxxxxxx XXX,

- zdůvodnění xxxxxx koncentrací,

- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.20. XXXXXXXXX XXXXXXX MUTACE VÁZANÉ XX XXXXXXX U XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Test na xxxxxxxxx xxxxxxx mutace xxxxxx na xxxxxxx (XXXX) xx Drosophila xxxxxxxxxxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xx test xx xxxxxxx mutace xxxxxx xxx screening xxxxxx x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx xxxxxxxxxx X. Xxxx xxxxxxxxxxxx ani 80 % všech xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx genomu.

Xxxxxx x X-xxxxxxxxxx xx fenotypicky xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx gen. Xxxx xx xxxxxx letální x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx rodí xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. SRLS xxxx xx výhodný vzhledem x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Příprava

1.2.1.1 Xxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx linie x xxxxxx xxxxx Xxxxxx-5. Xxxxx být xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx linie xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx.

1.2.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxx. Látky ve xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxx xxxxxxx x Xxxxxx-60 xxxx 80), před xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx nebo fyziologickým xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx dimetylsulfoxid (DMSO) xxxx vehikulu.

1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx

Test xx xxxxxx určenou xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx mutací x kontrolní skupině xxxxxxxx xxxxxxxxx nutný xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Xxxxxx aplikace

Xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx uskutečňuje xxx xx, injekčně nebo xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxxxx testované xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx roztoku. Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx XxXx x xxxxxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx

X xxxxxx pokusu se xxxxxxxx negativní (x xxxxxxxxxxxxx) x pozitivní xxxxxxxx. Jestliže xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kontroly.

1.2.1.6 Dávkování

Xxxxxxxxx xx tři xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxx xxxxxxxxx orientační xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx testují x nejvyšší dosažitelné xxxxx.

1.2.2 Xxxxx postupu

Xxxxx xxxxxxxx typu (xx stáří 3-5 xxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx samicemi x xxxxx Muller-5 nebo x jiné vhodné xxxxxxxxx linie (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-chromozómu). Samice xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx dva xx xxx xxx, aby xxx pokryt xxxx xxxxxxx cyklus xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx letální xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x účinkem xxxxxxxxx xxxxx x xxxx expozice na xxxxx spermie, na xxxxxxxxxx xx středním xxxx pozdním xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x spermatogonie.

Xxxxxxxxxxxxx X₁ samice xxxxxxxx x tohoto xxxxxxx xxxx xxxx kříženy xxxxxxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx/xxxxxxxx) se xxxxx xxxxxx. X X₂ xxxxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx samců xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx v xxxxxxx vznikají X₁ xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (nejsou nalezeni xxxxx samci s xxxxxxxxxx chromozómem), dcery xxxxxx samic xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx testovány, xxx xx zjistilo, zda xxxxxxxx xx opakuje x xxxxxxx xxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxxxx xxxxx xx zpracují do xxxxx tabulky. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx, xxxxx afertilních xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxx každou xxxxxxxxxxx, xxx každé xxxxxx xxxxxxx a xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Zaznamenává xx xxxxx clusterů xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Výsledky se xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xx zhodnotí vhodnou xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx letálních mutací xxxxxxxxx x jednom xxxxx xx být xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx vhodným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, informace x:

- xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx, xxxx, počtu ovlivněných xxxxx, počtu sterilních xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx X₂ kultur, xxxxx F₂ xxxxxx xxx potomků, počtu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx letální xxxxxx pro každé xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxx dávek, xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx (s rozpouštědlem) x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- kritériích počítání xxxxxxxxx mutací,

- xxxxxxx expozice/účinek, je-li xx možné,

- xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.21. XXXX XXXXXXXXXXXX SAVČÍCH BUNĚK - IN XXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxx xxx použít xxx detekci fenotypických xxxx xx vitro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx X3X10X1/2, 3T3, XXX, Fischerových xxxxxxx x xxxx se xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, tvorbu xxxxxxx nebo xxxxx x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx ostatní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx karcinogenním látkám. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Některé xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Cytotoxicita xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx účinku xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonie (cloning xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxx hodnocení xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx ze xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx byla xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, ale xxxxxx xx nelze xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx mohlo xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxx

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x primokultur použitelných x testu xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx použité x testu transformace xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx expozici xxxxxx xxxxxxxxxxxx a xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx ověřen x xx je xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx.

1.2.1.2 Médium

Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx vhodné pro xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx

Testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx suspendují x xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx vhodném rozpouštědle xxxx ovlivněním xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla x kultuře nesmí xxxxxxxx životnost xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx transformace.

1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Buňky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x přítomnosti x xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivitou, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx zařazeny xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx působících x xxxxxxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx).

Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxx xxxxxxxx látky: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,

- xxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: 2-acetylaminofluoren, 4-dimetylaminoazobenzen, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xx-xx třeba, xx možné xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxx chemické xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx látka.

1.2.2.2 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x nejnižší koncentraci xx přežívání xxxxx xxxxxxxxx stejné jako x negativní kontrole. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx může xxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxx s výměnou xxxxx (xx. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivační xxxxx), xxxxxxxx se xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Buňky xxx xxxxxxxxxx vlastní metabolické xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na xxxxx xxxxxxxx xx x buněk xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx. Xxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Všechny xxxxxxxx musí xxx xxxxxxx x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x tabulkové xxxxx. Xx vhodné xxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk jako xxxxxxxx xxxxxxxxx úrovně x frekvenci transformací xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Data xx xxxxx zpracovat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, informace o:

- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultury, xxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: koncentraci xxxxxxxxx xxxxx, době inkubace, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádobách, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx kontrolách, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx systému (xx-xx xx vhodné), xxxxxxxxxx výběru koncentrací,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,

- statistickém xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX TEST U XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxx

Xxxxxxxxxx letalita xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx dominantních xxxxxxxxx mutací po xxxxxxxx chemické xxxxx xxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx, xx dominantní xxxxxxx mutace xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxx embrya xxxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinku.

Xxxxx xxxx exponováni xxxxxxxxx xxxxx x pářeni x neovlivněnými, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx mrtvých xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v kontrolní xxxxxxx xxxxxxxxx postimplantační xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx ztráty xx xxxxxxx xx xxxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxx xxxx porovnáním xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x exponované x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx- x postimplantačních xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx dominantní xxxxxxxx je založen xx srovnání živých xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx skupině x xxxxx xxxxxxxxxxx xx samici x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx implantací x xxxxxxxx intervalu xxxx xxx způsobeno zánikem xxxxx (t.j. spermatocytů x/xxxx xxxxxxxxxxxxx).

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Příprava

Testovanou xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxx xxxx suspendují xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxx x testovanou xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xxxx xxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Obvyklý xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxx test xx doporučují použít xxxxxxx xxxx myši. Xxxxxx, pohlavně xxxxxxx xxxxxxx jsou náhodně xxxxxxxxx xx exponované x xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx zjištěnou xxxxxxxx xxxxxxxxxx a silou xxxxxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx případě se xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx samců, aby xx xxxxxxx 30 - 50 březích xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly

Pozitivní x negativní (s xxxxxxxxxxxxx) kontroly xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Jestliže xxxx má xxxxxxxxx x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxx pozitivních kontrol x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx být xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx ve vhodných, xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx prokázána citlivost xxxxx (xxxx. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 xx.xx^-1).

1.2.2.5 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxxxxx známky xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx postačující xxxxx xxxxxx dávka.

1.2.2.6 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx x xxxxx xxxxx 5 x.xx^-1 nebo x xxxxx 1 x.xx^-1.xxx^-1 xxx opakované xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Existuje xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx používá xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Může xxxx xxx použito xxxx xxxxxx.

Jeden xxxxx xx opakovaně xxxxxx x jednou xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx jednoho xxxxx xxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx spermie xx xxxxxx či xxxxxxxxx xxxxx.

Počet xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x musí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx buněk sledovaných xx xxxxxxxx.

Samice xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx dělohy xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx vyšetřeny x určení xxxxx xxxxxxx tělísek.

2. XXXXX

Xxxxx o xxxxx xxxxx, počtu xxxxxxx xxxxx x počtu xxxxxxxxxxxx samic xxxx xxxxxxx x tabulkách. Xxxxxxxx každého xxxxxx xxxxxx identifikace xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, x xxxxx podané xxxxx, x xxxxx xxxxxx x mrtvých xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx implantací xx samici v xxxxxxxxxx skupině x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx mrtvých xx xxxxx implantacím x xxxxxxxxxx xxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

V xxxxxxx musí být xxxxx odlišeny xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxxx x preimplantační xxxxxx. Xx xxxxx být xxxxxxxxxx jako xxxxxx xxxx počtem xxxxxxx xxxxx x počtem xxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx možno, informace x:

- xxxxx, xxxxx, xxxx x xxxx xxxxxx, počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx látce, xxxxxxxxxxxx, dávkových xxxxxxxxx x xxxxxxxx jejich xxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx kontrolách, údajích x xxxxxxxx,

- xxxxxxx podání x xxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx páření,

- xxxxxxxx k průkazu xxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx,

- kritéria xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx efektů,

- xxxxx dávka/odpověď,

- xxxxxxxxxxx hodnocení,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.23. ANALÝZA XXXXXXXXXXXXXX ABERACÍ V XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 483, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 ÚVOD

Xxxxxx xxxxx xx xx xxxx identifikovat xxxxx způsobující strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx druhu: xxxxxxxxxxxx a chromatidové. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx většinou xxxxxxxxxxxx, ovšem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu xxxxxxx rovněž. Xxxx xxxxxx xxxx určena x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xx k xxxxxx xxxxx nepoužívá. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Tímto xxxxxx xx analyzují xxxxxxxxxxxx aberace v xxxxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx predikovat indukci xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx buňkách.

K xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Tímto xxxxxxxxxxxxxx testem in xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx nepoužívá jiné xxxxxx buňky.

Xxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx, je třeba xxxxxxxxxx první xxxxxx xx působení xxxxxxxxx xxxxx, dříve xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx buněčném xxxxxx. Další informace x ovlivněných spermatogonií xxx získat xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, kde xx zjišťují xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu x xxxxxxxxx, x xxxx xx ovlivněné buňky xxxx xx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx xx xxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxx, zda xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Mimoto xx xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mutagenity tím, xx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxx metabolismu in xxxx, farmakokinetiky x xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA.

X testes xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se širokým xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx diferencované spermatogonie. Xxxxx jejich xxxxxx xx xxxxxxx pak xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx bariéře.

Existují-li xxxxxxx xxxx, xx xx testovaná xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx cílové xxxxx nedostane, není xxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx poškození chromozómu, xxxxx xx projevuje xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx obou xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxx respektive jako xxxx x opětovné xxxxxxx obou xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx dicentrický chromozóm, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)

Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx jedné xxxx xxxx chromatid za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx je xxxxx xxxxxxxxx chromatidy. Xxxx xxx v xxxxxxxxx, xxxxxxx (distální) fragment x místě xxxxx xx dislokovaný (nebo xxxx osu chromatidy), xxxxxxxx jedna chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.

Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx než xxxxx xxxxx chromatidy x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx buňky.

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx haploidního xxxxx xxxxxxxxxx (n) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx (3x, 4x xxx.).

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, pozorovaná xxxx delece a xxxxxxxxx, x xxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Zvířata xx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx usmrtí. Xxxx xxxxxxxxx xx na xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). Xx zárodečných buněk xx xxx připraví xxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.4 POPIS METODY

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x myší, xxx ovšem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx savčího xxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dospělých jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.

1.4.1.2 Podmínky xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.

Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx a xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x je-li to xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx zvířatům xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx její xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxx. je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Rozpouštědlo / vehikulum

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx a nesmí x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí být xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx použito xxxxx rozpouštědlo/vehikulum.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx testu xx třeba xxx xxxxx pohlaví xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) kontroly. Xx třeba zacházet xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx kontroly xx xxxx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx při xxxxxxxxx kontrole xx xxxx xxx, xxx xxxx účinky xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx možné xxxxxxx xxxxxxxx způsobem xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx látka. Příklady xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx	XXX	XXXXXX
cyklofosfamid	50-18-0	200-015-4
monohydrát xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxx	108-91-8	203-629-0
xxxxxxxxx C	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxx xxxxxxx	79-06-1	201-173-7
triethylenmelamin	51-18-3	200-083-5

Negativní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx experimentální skupiny xxxx by xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zpracování, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mezi zvířaty. Xxxxxx je třeba xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx existují xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.5 POSTUP

1.5.1 Xxxxx x pohlaví xxxxxx

X xxxxx xxxxxxxx x kontrolní skupině xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx schéma

Testovaná xxxxx xx podává xxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx dvou xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx x xxxxxxxx dávku, xxxx xx k xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxx, xx. xx xxx xxxxx za xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx několika hodin. Xxxxxx režimy xxxxxxxxx xxxxxx být vědecky xxxxxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx xx vzorky xx xxxxxxxx látce xxxxxxxxx xxxxxxx. Jelikož xxxxxxxxx xxxxx může xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, provádí se xxxxx dřívější a xxxxx pozdější xxxxx xxxxxx 24 x 48 hodin po xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx (xx. xxxx xxxxx xxxxxxxx) se xxxxx vzorků xxxxxxx xx 24 hodinách xxxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx expozici, xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (6).

Xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx intervaly odběru xxxxxx. Xxxx. xxxxx-xx xx x látku xxxxxxxxxxx pohyb xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx na S-fázi xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx doba odběru xxxxxx (1).

Xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx opakovaně, xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx xx provádí xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, usmrcují xx xxxxxxx po 24 hodinách (1,5xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx aplikace. Xxxxxx xxx provádět x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx xx xx xx xxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® nebo xxxxxxxxxx x následně xx x xxxx xx vhodném intervalu xxxxxxxx xxxxxx. U xxxx xx xxxxx xxxxxxxx zhruba 3-5 xxxxx, x čínských xxxxxx xxxxxx 4-5 xxxxx.

1.5.3 Dávkování

Xxxxxxx-xx xx studie xx xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx žádné vhodné xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx v xxxx laboratoři xx xxxxxxx xxxxxxxx živočišného xxxxx, kmene x xxxxxxxxx režimu, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx zjištění toxicity xx užívají pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx tři xxxxx xxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Pro pozdější xxx xxxxxx vzorků xx xxx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx je xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx při xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx režimu xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.

Látky, xxx x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx hormony xxxx xxxxxxxx, mohou představovat xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx od xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx vede k xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx( tento pokles xxxx xxx xxxxx xxx 50 %).

1.5.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx xxx dávce xxxxxxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx v xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxx strukturou neočekává xxxxxxxxxxxx, xxxxxx být xxxxxxxxx celá xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Podle xxxxxxxxx humánní expozice xx může použít x limitním testu xxxxx xxxxx.

1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx intraperitoneální injekcí. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x jiné způsoby xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, která se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx najednou vpravit, xxxxxx xx velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx překročit 2 xx/100 g xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx dráždivých nebo xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, je třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx úrovních xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx

Okamžitě xx xxxxxxxx xxxxxxx xx z xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx připraví xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx působí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx a xxxxxx.

1.5.7 Analýza

X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx rozprostřených xxxxxxxx (xx. minimálně 500 xxxxxxxx x jedné xxxxxxx). Tento xxxxx xx xx xxxxxx, xx-xx xxxxx pozorovaných xxxxxxx vysoký. Všechny xxxxxxxxxxxxx preparáty (xxxxxx xxxxxxxxxxx a negativních xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx u xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx číslu 2x ± 2.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. U každého xxxxxxx xx vyhodnocuje xxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x počet aberací xx jednu xxxxx. X experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx jednotlivé xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Gapy se xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, uvádějí xx, xxx xxxxxxx xx xx celkové xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx-xx analyzována xxxxxx x xxxxxx, xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxx meiotické xxxxxxxx, a to xxx, že xx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 100 dělících xx xxxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxx mitóza, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx zřetelný xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx a x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vzorků. Nejprve xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx možno xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (8); statistická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx látka, při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Ačkoliv xxxxxxx experimentů xxxxxxxx xxxxx pozitivní, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinku testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx nejisté, nebo xxxxxxxxxxxx bez xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx ukazují, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Je třeba xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Zpráva o xxxxxxx xxxxxx

Ve xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx testované xxxxx rozpouštědla/vehikulu, xxxxx xx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- xxxxx a věk xxxxxx,

-xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx počátku xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Podmínky xxxxxx:

- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,

- xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx zvířat,

- xxxxxxxx převod xxxxxxxxxxx xxxxx x potravě/pitné xxxx (ppm) xx xxxxxxxxx dávku (mg/kg xxxxxxxxx / den),

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx podávání xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- metody xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx blokující xxxxxxxx, xxxx koncentrace x xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx hodnocení aberací,

- xxxxx analyzovaných xxxxx xx xxxxx xxxxx,

- kritéria, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx xxxx nejednoznačná.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx xxxxx spermatogonií x xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxx x počet xxxxxxx xxx každého xxxxxxx zvlášť,

- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx skupině,

- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx na xxxxx skupinu,

- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx pozitivních kontrol,

- případně pozorované xxxxx xxxxxxx.

Diskuse xxxxxxxx.

Xxxxxx.

X.24. XXXX XXXX X MYŠÍ

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Je xx in xxxx xxxx xx xxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx chemickým látkám. Xxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x cílovými xxxx xx, xxxxx kontrolují xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxx ovlivňujících xxxxx srsti. Xxxxxx xxxx ztráty xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx jsou vyjádřeny xxxxxxxxxx fenotypem v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx) pozměněné xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxx skvrnami, xxxxxxxx, je xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx srovnávána s xxxxxxxxx u potomků x xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxx detekuje xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx buňkách.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx suspendovány x izotonickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Látky xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx vhodném rozpouštědle. Xxxxxxx rozpouštědla nesmí xxxxxxxx s testovanou xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx připravené xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata

Xxxx xxxxx T (nonagouti, x/x; xxxxxxxxxx, pink xxx, x^xx p/c^ch x; brown, x/x; xxxxxx, xxxxx ear, x se/d xx; xxxxxxx xxxxxxxx, x/x) xxxx kříženy xxx x kmenem XX (xxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xx a xx/xx x xx; leaden xxxxx, xx xx/ /xx xx; xxxxx xx/xx) xxxx x xxxxxx X57 XX (xxxxxxxxx, x/x).

Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx křížení, xx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx nonagouti xxxxxxx. Xxxx. xxxxxxx mezi xxxxxx XXXX (nonagouti, x/x; xxxxxx, x/x) x XXX (xxxxxxxxx, x/x; xxxxx, x/x; xxxxxx d/d).

1.2.1.2 Počet x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx se dostatečný xxxxx zabřezlých xxxxx, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxx na xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxxx myší a x xxxxxxxxxxx myší. Xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx samic xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

1.2.1.3 Negativní x pozitivní xxxxxxxx

Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pouze xxxxxxxxxxxxx (negativní xxxxxxxx). Xx xxxxxxx citlivosti xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx kontrolní hodnoty x xxxx xxxxxxxxxx xx předpokladu, xx xxxx homogenní. Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx laboratoři při xxxxxxxx látce xx xxxxxx xxxxxxxxxx účinkem xxxxx xxx x xxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Způsob xxxxxxxx

Xxxxxxx xx používá xxxxxx xxxxxxxx sondou xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx. Je-li xx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx

Používají xx xxxxxxx xxx xxxxx, x nichž xxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.

1.2.2 Popis xxxxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx xxxxx xxxxxx 8., 9. xxxx 10. xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 1. xxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxx odpovídají 7.25, 8.25 a 9.25 xxx xx koncepci. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx.

Xxxxxxx

X xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx mezi xxxxxx x čtvrtým xxxxxx po xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx skvrn:

(a) xxxx skvrny x xxxxxxx 5 mm xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x kterých xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (XXXX);

(x) žluté xxxxxx typu xxxxxx xx vyskytují x xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx se, xx xxxxxxxx x důsledku xxxxxx diferenciace (XXX);

(x) xxxxxxxx a xxxx skvrny náhodně xxxxxxxxxx v srsti xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (XX).

Všechny xxx skupiny jsou xxxxxxxxxxxxx, ale xxxxx xxxxxxxx, XX, je xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Obtíže x xxxxxxxxx mezi XXX x XX xx xxxxx vyřešit xxxxxxxxxxx chlupů xx xxxxxxxxxxxxxx mikroskopu.

Zaznamenávají xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx malformace potomků.

2. XXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx jako xxxxxxx počet sledovaných xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx skvrn xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx x exponovaných xxxxxx xx porovnávají xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Zpráva x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, xxxxxxxxx o:

- xxxxx xxxxxxxx xxx křížení,

- xxxxx zabřezlých samic x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx skupině,

- průměrné velikosti xxxx v experimentální x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxx odstavení,

- xxxxxxxxx úrovních xxxxxxxxx látky,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,

- x xxxxxxx podání xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx x WMVS, XXX a RS x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxx dávka/odpověď x XX, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX U MYŠÍ

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Test xx přenosné xxxxxxxxxxx x myší xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Indukované xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx xxxxxxx ještě xxxxxx X-xxxxxxxxxx. Nositelé xxxxxxxxxxx x XX-xxxxxx xxxxxxxx sníženou xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx F₁ xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx sterilita xx způsobena některými xxxx xxxxxxxxxxx (X-autosom x c-t xxx). Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, xxxx X₁ xxxxx či xxxxxxx xxxxxxx X₁ xxxxx. Xxxxxx XO xxxx xxxxxxxxxxxxx identifikovány xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx x mitózách x xxxxxx xxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Příprava

Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v izotonickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxx suspendovány xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx dávkování látky, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou nebo xxxxxxxxx xxxxxxx účinky.

1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx

Aplikuje xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx i xxxx xxxxxx xxxxxxx aplikace.

1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata

Xxx xxxxxxxxx křížení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx provádí na xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx být xxxxx než xxx x měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxxx nutně závisí xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxx indukovaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Test xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx X₁ xxxxxxx. Nejméně 500 xxxxx v F₁ xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx exponované xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx také samice X₁ generace potomků, xxx se xxxxxxxx 300 xxxxx x 300 samic.

1.2.1.4 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x předchozích xxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledky xxxxxxxxxxx kontrol x xxxxxxxxx xxxxxx z xxxx xxxxxxxxxx, mohou xxx použity.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx se jedna xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyvolávající minimální xxxxxxx efekt, xxx xxx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx stanovení xxxxxx dávka/odpověď je xxxxx xxxx dalších, xxxxxxx dávek. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx dosažitelná xxxxx.

1.2.2 Popis xxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx se dva xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx je možná xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx sedm xxx x xxxxx xx 35 dnů.

Počet xxxxxxxxx xx expozici xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx rozděleny xx xxxxx. Po xxxxxx xx třeba zaznamenat xxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx mláďat. Xx xxxx jsou xxxxx x xxxxxx xxxxxxx odděleni až xx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

1.2.2.2 Zjišťování xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

Používá xx xxxxx ze xxxx možných xxxxx. Xxxx fertility F₁ xxxxxxx a následná xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx F₁ xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx testu xxxxxxxxx.

(x) Xxxx xxxxxxxxx

Snížená xxxxxxxxx xxxxxx x F₁ xxxxxxxx xx může xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx normální x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx každý xxxx xxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxx xxxx: X₁ samci xxxxxx x testování xxxx odděleni xxxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx denně xxxxxxxx 18. dnem xx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx X₂ xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxx porodu, hned xxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx jsou testovány X₁ xxxxxx, X₂ xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx uchováváni xxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx translokací x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. XX-xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx x 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx xx. xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx X₁ xxxxxxx vyřazena x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx první X₂ xxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx předem xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx zaznamenány druhé x xxxxx xxxx. X₁ xxxxxxx, která xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx tří X₂ xxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx přímo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxxxx vrhu x xxxxxx translokací je xxxxxxxxx xxxxx embryí, xxxxx vysoký počet xxxxxxx implantací xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxxx X₁ samci xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx 14. - 16. xxx a xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx.

(x) Xxxxxxxxxxxxx analýza

Xxxxxxx xxx-xxxxxx jsou připraveny xxxxxxxxx x testes. Xxxxxx translokací xxxx xxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx figur xx xxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxx I x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx nejméně dvou xxxxx s multivalentními xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Jestliže xxx xxxxxxxx výběr xx xxxxxxxx, xxxxxxx X₁ xxxxx jsou vyšetřeni xxxxxxxxxxxxx. Na každého xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 25 xxxxx x xxxxxxxxx - metafáze X. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ve spermatogoniích xxxx x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx meiozy před xxxxxxxxxx xxxx x X₁ xxxxx xxxxxxxxxxx XX. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx x 10 xxxxx xx důkazem xxx xxxxxxxxx xxxxx translokační xxxxxxxxx (x-x xxx). Xxxxxxx X-xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx být identifikovány xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx ve xxxxx 10 xxxxxxxx je xxxxxxx xxx XO xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx průměrná xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx (sex xxxxx).

Xxx xxxxx xxxxxxxxx F₁ xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx velikosti xxxx X₁ nosičů xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx průměrný počet xxxxxx x mrtvých xxxxxxx x xxxxxxxx x individuální xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx X₁ xxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxx cytogenetické xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X xx xxxxx počet xxxx xxxxxxxxxxxxxxx figur x xxxxxxx xxxxx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxx X₁ xxxxxxxx jedince xx zaznamenává xxxxx x doba xxxxxxxxxx. Xxxx se uvádí xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

U XO xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx ratio X₂ xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx analýzy.

X xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx fertility byly xxxxxxxxx vybráni xxxxx xxxxxxxx X₁ translokací, xx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxx informaci x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx heterozygotů.

Xxxx být uvedeny xxxxx x negativních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xxxxxx x průběhu xxxxxx obsahuje, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxx xxxx, xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx zvířat,

- xxxxx rodičovských xxxxxx xxx každé xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxxx podmínkách, xxxxxxxx xxxxx ovlivňování xxxxxx, dávkové xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxx mláďat xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro analýzu xxxxxxxxxxx,

- xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx včetně xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx dělohy,

- xxxxx cytogenetické xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.26. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXX

(90xxxxx xxxxxxxxx podávání xxx xx, xxxxxx na xxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx xxxxxx denně xxxxxx po 90 xxx v odstupňovaných xxxxxxx několika skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, která přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Nejméně 5 xxx před xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.

Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx v potravě, xxxxxx, v xxxxxxxx xxxx x pitné xxxx. Xxxx xxxxxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx aditiva, xxxx xxx o xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx dřívější xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Dává xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx měli xxx xxxxxxx xxxxxx xxx 6 xxxxx, x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 8 týdnů. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx test xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx se xx xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx x xxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx každou xxxxxxx xxxxx xxxxxx nejméně 20 zvířat (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx zabíjet v xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvýšit celkový xxxxx zvířat o xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita před xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx xxxxx podávat xxxxx skupině (satelitní xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 dnů nejvyšší xxxxx a během xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Dávkování

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx. S výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx kontrolní skupině xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx ve xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx obdrží xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx nejvyšší xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, ale nezpůsobit xxxxx uhynutí xxxx xxx malý xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx existují xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx nejnižší xxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx měla xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx být xxxxxx xxx, aby xxxxxxxx odstupňované toxické xxxxxx.

Ve xxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxx xxxxx x x kontrolní xxxxxxx by počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxx xx použít xxx xxxxxxxxxx koncentrace (x xxx xxxx xx.xx^-1 xxxxxxx) nebo xxxxxxxxxx dávkování xx xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Aplikuje-li xx xxxxx xxxxxx, mělo xx xx tak xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx, x dávkování x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx-xx xx 90xxxxx xxxx xxxx popsanou xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx den (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx možné expozici xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) žádné toxické xxxxxx, xx xxxxx xx dalšího xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxxxx xxxxx x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx množství xxx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx látky nebránily xxxxxxxx výživě xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx a trvání. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, ve xxxxxx xx xxxxxx a xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx podává xxxxxxxxx látka 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx určena k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx dalších 28 xxx xxx xxxxxxxx, x posouzení zotavení x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, somatomotorické xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx (a xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx testované látky x xxxxx xxxx) x hmotnost zvířat xx xxxxxxxxxxxxx týdně.

Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxxx kontrolu xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx jako xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Po xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vyřadit, xxxxxxx utratit a xxxxxx.

X všech xxxxxx xxxxxx kontrolních xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx oftalmoskopem xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx studie xxxxxxx x všech xxxxxx, xxx alespoň x xxxxxxxx dávky x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, vyšetří se xxxxxxx xxxxxxx.

(b) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx čas xx xxxxx trombocytů.

(c) Xx xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x kmene), alaninaminotransferáza (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, celkový xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxx. Xxxx další xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx pro úplné xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v případě xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxx jen xx xxxxxxxx očekávané xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx a biochemických xxxxxxxxx ještě xxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx prohlídku xxxxxxx xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxx. Xxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx se co xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Následující xxxxxx x tkáně xx xxxxx přechovávat xx vhodném médiu x ohledem na xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx medula/pons, kůra xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx tělíska, tkáň xx místě xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), játra, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, slinivka xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx orgány), (kůže), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, lymfatické xxxxxx, (samičí mléčná xxxxx), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx nerv, (xxx), xxxxxx xxxx s xxxxxx dření, (xxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx), páteřní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x bederní, x (xxxxx xxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx xx posuzují x xxxxxxx, xxxxx xxx xx jejich xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

(x) Úplné histopatologické xxxxxxxxx orgánů x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx u všech xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny.

(x) Je xxxxx xxxxxxxx všechna xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(x) Je xxxxx xxxxxxxx cílové xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(x) Xxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx mají xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx x těchto skupin. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x zvířat xxxxxx skupin xxxxxx xxxxxxxx rutinně, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx orgánech, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx postižení ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.

(x) Používá-li xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X ní musí xxx pro každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu a xxxxx zvířat x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx poškození. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,

- úroveň xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx stanovit,

- xxxx uhynutí během xxxxxxxxxxx, případně xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,

- popis xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků,

- doba, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx vývoj,

- spotřeba potravy x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a jejich xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xx xx xxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.27. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ

(90denní xxxxxxxxx xxxxxxxx per xx, studie na xxxxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx 90 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (nehlodavcům), x to xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx pozorují, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx mladá dospělá xxxxxxx náhodně přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx orální xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx celou xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum nebo xxxx aditiva, xxxx xxx o xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx historická xxxx, je xxxxx xx xxxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx mladých zdravých xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxx xx xx x podáváním začít xx věku xx 3 xx 6 xxxxxx a xx xxxxxxx xxx 9 xxxxxx. Xxxxxxx-xx xx subchronický orální xxxx jako xxxxxxxxx xxxx před dlouhodobým xxxxxx, x obou xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x plemeno.

1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxx xxxxxx úroveň xxxxx xxxxxx nejméně 8 zvířat (4 xxxxxx x 4 xxxxx). Xxxxx xxxxxx xx xxxxx pokusu xxxx být takový, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx třeba použít xxxxxxx tři xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. S výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Nejvyšší xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické účinky, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx. Nejnižší úroveň xx neměla vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx nejnižší xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední xxxxxx dávky měla xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Ve xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx docházet.

Podává-li xx xxxx xxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xx xxxxx zajistit, xxx ani xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x ppm xxxx xx.xx^-1 xxxxxxx) xxxx konstantní xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx alternativu xx xxxxx xxxxx. Podává-li xx látka přímo, xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx xx xxx xxx každý xxx ve xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxx x týdenních xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx test xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx dieta.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx-xx 90denní xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx-xx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti xx den (nebo xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) xxxxx toxické xxxxxx, je možno xx dalšího xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx látka x xxxxxxx, xx xxxxx zajistit, aby xxx aplikované xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat a xxxxxxxxxxxx toxické účinky, xxxxxx dobu objevení, xxxxxx x trvání. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, ve xxxxxx xx xxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

X ideálním xxxxxxx xx zvířatům xxxxxx xxxxxxxxx látka 7 xxx v xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx způsobem xxx v xxxxxxx, xxxxxxxx xx za xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 5 dní v xxxxx.

Xxxxxxxxxx zahrnuje (xxx není xx xx xxxxxxx) xxxxx xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.

Příjem xxxxxxx (x příjem xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenávají xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx pečlivá xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx k minimalizaci xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx. Po skončení xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x pitvat.

X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx obvykle xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(x) Oftalmologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávky x x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx změny, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xx začátku xxxxx, x xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx uprostřed x xxxx xx xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx hematologické xxxxxxxxx, xxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx jako například xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.

(x) Xx xxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x xxxx xx konci xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxx trvání xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx séra) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxx. Mezi další xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: lipidů, xxxxxxx, acidobasické rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity cholinesterázy. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx potřeby použity xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxx xxxxxx krve xx xxxxxxxxxx měli xxxxxxxx (ne více xxx 24 hodin).

(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxx, xxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx pozorované xxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

U všech xxxxxx použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx xxxxxxxxx povrchu těla, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, štítná xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx je xxxxx přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - x řezech xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, aorta, xxxxxx žlázy, xxxxx, xxxxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), žlučník, jícen, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, močový xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (samičí mléčná xxxxx), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (oči), xxxxxx xxxx s xxxxxx dření, (xxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx) x (páteřní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx xx posuzují, xxxxx je xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo pokud xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx nejvyšší dávka, x u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Histopatologické xxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx dávkových xxxxxx xx xxxxxxxxx orgánech, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx poškození u xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx, xxxx xxxx xx to indikováno xx xxxxxxx klinických xxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx s jednotlivými xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxxxxx nebo xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) a xxxxxxxxxxx,

- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,

- xxxxxx xxx xxxxxx, pokud xx lze xxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x přežití xxxxxx do xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (xxxxxxx klinické xxxxxx),

- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- spotřeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx výsledky (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx analýz xxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx to xxxxx,

- diskuse xxxxxxxx,

- interpretace výsledků.

B.28. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXXXX

(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, studie xx xxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx metody

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx, x to xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Během xxxxxx podávání xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí do xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx na xxxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nebo oholení xx potřeba opakovat xxxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx na xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (např. abrazí). Xxx nanášení xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxx x úvahu hmotnost xxxxxx xxx rozhodování x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx kůže a x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Xxx pokusech x xxxxxx látkami, xxxxx mohou být xxxxxxxx upraveny xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit vodou, xxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxx xxxxxxx s xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xx možno xxxxxx xxxxxxx potkany, králíky xxxx morčata, xxxxxxxx x xxxx zvířecí xxxxx, xxxxxx použití xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx začátku xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty. Xxxxxxx-xx xx subchronický dermální xxxx jako xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx x xxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx nejméně 20 zvířat (10 xxxxx x 10 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx každého xxxxxxx) po xxxx 90 dnů nejvyšší xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx podávání xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Je xxxxx xxxxxx nejméně xxx hladiny xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Doba xxxxxxxx xx xxx nejméně 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx testované látky xx se xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx stejnou xxxx. X intervalech xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx tak, xxx xx udržovala xxxxx xxxxxxx dávky ve xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx zachází stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xx xxxxxxxx nejvyšší xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx žádné uhynutí xxxx jen v xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx xxxxxxx hladina xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx skupině x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx uhynutí xxx být xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Vede-li xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxx koncentraci, xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x omezení xxxx xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx k xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx okolností xxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx-xx xxx předběžné xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxx vyšší xxxxx, xxxxx odpovídá xxxxx expozici xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx další xxxxxxx xxxxx.

1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx

Xxxxxxx zvířata xx xxxxx denně xxxxxxxxx x zaznamenávat xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx zaznamenat dobu xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx účinky.

1.2.3 Xxxxx postupu

Xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx v xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxx xxx následné xxxxxxxxxx, je třeba xxxxxx xx xxxxxxx 28 dnů bez xxxxxxxx, aby xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx nejméně 6 xxxxx denně.

Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx nanášet xxxxxxxxxx xx celou xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % povrchu xxxx, x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx může xxx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx pokrýt xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx rovnoměrně x xx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xx expoziční xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x kůží xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxx plochu je xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx použít i xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx však xxxxx xxxxxxxxx.

Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx vhodným x xxxxxxxx pokožky.

Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx xxxxxx jejich počátku, xxxxxx x xxxxxx.

Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx změny srsti, xxxx, xxx x xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx studie xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata x xxxxxxx v xxxxxx stresu xx xxxxxx bolestí xx xxxxx xxxxxxxx vyřadit, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

U všech xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx studie xxxxxxx x všech xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, vyšetří se xxxxxxx zvířata.

(x) Xx konci xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxx xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.

(c) Xx xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza krve. Xxx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (přičemž trvání xxxx hladovění xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxxxxx transferáza (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) x aspartátamino xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx účinků.

(x) Xxxxxxx moči xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, má xx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických parametrů xxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii se xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx a tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x ohledem xx xxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - v xxxxxx medula/pons, xxxx xxxxx x mozečku, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, (xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, aorta, (slinné xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, slinivka xxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx, děloha, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx (xx-xx přítomen), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, tenké, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, konečník, močový xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzliny, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), periferní xxxx, (oči), (xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx), (xxxx stehenní xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx mícha xx xxxxx úrovních - xxxxx, xxxxx hrudní x xxxxxxx) x (xxxxx xxxxx). Xxxxx x závorkách xx xxxxxxxx, xxxxx je xx indikováno xxxxx xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx normální x xxxxxxxxxx kůže, xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xx xxxxx vyšetřit xxxxxxx makroskopická xxxxxxxxx.

(x) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(d) Používá-li xx potkanů, xxxxx xxxxxx xx skupinách x nízkou x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx histopatologicky vyšetřovat x xxxxxxxx příznaků xxxxxxx, xxxxxxx to xxxxxxxxx xxxxx zdravotního xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx provádět xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx vždy xx xxxxxxxx, na xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.

(x) Používá-li xx xxxxxxxxx skupiny, musí xx provést xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx počet xxxxxx s jednotlivými xxxx xxxx. Výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xxxxxx x průběhu xxxxxx má pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, pokud xx použije) a xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx dávek,

- xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx lze xxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx toxických xxxx xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,

- oftalmologické xxxxxx,

- hematologická vyšetření x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx vyhodnocení výsledků, xxx xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.29. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXX

(90xxxxx opakovaná xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xx hlodavcích)

1. METODA

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Několik xxxxxx pokusných zvířat xx exponováno xxxxxxxxx xxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xx 90 dnů. Xxxxxxx-xx xx xxx dosažení xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vehikulum. Xxxxx xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, i xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Nejméně 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx x krmení, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Pokud xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx vehikulum xxx, aby x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxx se užije xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx jiná xxxxxxx, musí xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx je xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Dává se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx xxxxx xxxx. Pracuje xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx test jako xxxxxxxxx test před xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx stejný xxxx x xxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx o xxxxx xxxxxx, xxxxx budou xxxxxx xxxx koncem xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx exponovat další xxxxxxx (satelitní skupinu) 20 xxxxxx (10 xxxxxx každého pohlaví) xx dobu 90 xxx nejvyšší koncentraci x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx po xxxxxxxx expozic xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx koncentrace

Xxxxxxx xx nejméně xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx koncentrace x xxxxx kontrolní xxxxxxx (případně xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx stejné xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx). X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Ideálně xx xxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx voleny tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx xxx být xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xx exponují xx xxxx 6 hodin xx xxxxxxxx rovnováhy xxxxxxxxxxx studované xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je možné xxxxxx i xxxxxx xxx expozice.

1.2.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Pro expozici xxxxxx xx používá xxxxxxxxx inhalační xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s výměnou xxxxxxx 12krát xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx zvířat x xxx inhalační xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx byla xx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx stability xxxxxxxxx x inhalačním xxxx xxxxx by x xxxxxx xxxxxxx objem xxxxxxxxx zvířat přesáhnout 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, samotné xxxxx xxxx individuální celotělové xxxxxxxx; první dva xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.6 Doba xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Je třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x opět odezní xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3. Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx v xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx 22 ^xX ± 3 ^xX. Xxxxxxxxx vlhkost xx xxx xxxx 30 % a 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, kde xx xxxx možné (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx potrava xxx xxxx.

Používá xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x vhodnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx pokus xxx xxxxxxx potřebných koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx nastavit xxx, xxx podmínky x celém xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx zaručovat, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx bude xxxxxxxx xx nejrychleji.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:

a) Měření xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).

x) Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x dýchací xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx odchylovat xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx rozsah kolísání. Xx xxxxx dobu xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx koncentrace tak xxxxxxxx, xxx xx xx prakticky xxxxx. Xxx vývoji xxxxxxxxxx xxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx měří tak xxxxx, jak xx xx potřeba xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx.

x) Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx

x) Xxxxx xxxxxxxx x xx xx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx individuální protokol. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx xx příznaky toxických xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx x kleci xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx i spotřeba xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Je třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx zvířat xxxx xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chybného xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx a xxxxxx.

U xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx a x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, vyšetří xx xxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx čas xx xxxxx trombocytů.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx volí xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, celkový bilirubin x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx úplné toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další biochemické xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx rozšíření xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje jako xxxxx postup, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx dřívější kontrolní xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx před začátkem xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, lební, xxxxxx x břišní xxxxxx x xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx ve vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx přechovávat xx vhodném médiu x ohledem na xxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx (xxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx x fixovat xxxxxxx xxxxxx, tak xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxx se považuje xx vhodnou), tkáň xxxxxxxxxxx, mozek - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx mozku x xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx brzlíku, xxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx břišní, xxxxxxx x vaječníky, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, tlusté a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx žláza), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx nerv, (xxx), xxxxxx xxxx x kostní dření, (xxxx stehenní včetně xxxxxxxxx ploch), (páteřní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx respiračního xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx provést x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

(b) Xx xxxxx vyšetřit všechny xxxxxxxxxxxxx xxxx.

(x) Plíce zvířat xx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx mají xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetřovat, protože xx poskytuje xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx u xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, musí xx však provést xxxx xx orgánech, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

(x) Xxxxxxx-xx xx satelitní xxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx tkáních x orgánech, u xxxxxxx xxxx zjištěny xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. Z xx musí xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx x počet xxxxxx s lézemi, xxx léze a xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx typy xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x tomu xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, systému xxxxxxxx částic x xxxxxxxx, klimatizačního xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx odpadního xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx používán. Popsat xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx x průměrnými xxxxxxxxx x charakteristikou xxxxxxxxxxx (xxxx. směrodatnou xxxxxxxxx). Mají xxxxxxxxx xxxx xxxxx:

x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,

c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx inhalačního xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx vzduchu),

x) xxxxxx vehikula, xxxxx bylo xxxxx,

x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx,

x) medián xxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxxx),

- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x podle xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxx účinku, xxxxx xx možné xx xxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx sledování,

- xxxxx toxických nebo xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- oftalmologické xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- biochemická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických nálezů,

- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.30. XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX

1. XXXXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx sedm dní x týdnu, xxxxxxx xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, jedna xxxxx xx xxxxxxx, xx větší xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx pozorována xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx jsou chována xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx a kontrolních xxxxxx.

1.2.2 Testovací xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Preferovaným xxxxxx xx xxxxxx. Xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxx). Je třeba xxxxxx zdravé a xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx laboratorních xxxxxx. Expozice xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxxxxx mláďat. Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx činit xxxx xxx ± 20 % od xxxxxxx. X případě, xx vlastní xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx nejméně 40 xxxxxx (20 xxxxx x 20 samců), xxxxxx i pro xxxxxxxxx skupinu. Xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx x neměly xx xxx xxxxx. Xxxxx xx záměrem xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx vyšší xxxxx xxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx) xx možné xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, ale xx xxxx než 4 xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxxxx expozic

Xx xxxxx použít xxxxx tři xxxxx x jednu kontrolní xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx úmrtnosti. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx měly xxx xxxxxx ve xxxxxxxx xxxxx mezi xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx dávek xx xxx vzít x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Obvykle xxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx podávána x xxxxx xxxx nebo x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx x xx měla xxxxxxx stálý xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxx

Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx.

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx není xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx xxxxxx závisí xx xxxxxxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxxxxxxxx testované xxxxx x pravděpodobném xxxxxxx xxxxxxxx člověka.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx technické xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x důsledku xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx testů xxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxx

Tam, xxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx z gastrointestinálního xxxxxx x je-li xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxx exponován xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx aplikaci, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx nebo podanou x tobolce.

Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx pět xxx v xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" xxxxxxxx x xxxxxx xxx aplikace, x xxxxx ovlivnit xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, dávkování pětkrát xxxxx xx považováno xx přijatelné.

Xxxxxxxxx xxxxxx

Protože xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx aplikace, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x této xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace může xxx platnou xxxxxxxxxxxx x specifických xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx předpokládané lidské xxxxxxxx, takže xxxxx xx xxxxxxx exponováno xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx xx pět dnů x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x návaznosti xx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx zvířat denně xx xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx i xxx xxxxxxx expozičního xxxx. X xxxx xxxxxxxxx jsou zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, že x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x ještě xxxxxx xxxxxxx během xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx cílech xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx má xxx simulována. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x úvahu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx simulaci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx narušeny xxxxxxxx xxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx komplikovanější (x xxxxxxxxxx) generace xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x technik xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx komory

Xxxxxxx se exponují x xxxxxxxxxxx komorách, xxxxxxx konstrukce zaručuje xxxxxxxxx proud xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x tím xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx měly minimalizovat xxxxxxxxxx testovaných xxxxxx. Xxxxxx by x xxxxx udržení stabilní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.

Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

(x) xxxxxx xxxxxxx: rychlost xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx kontinuálně;

(x) xxxxxxxxxxx: během xxxxx xxxxxxxx xx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx více xxx 15 % střední xxxxxxx;

(x) xxxxxxx x xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx by xxxx xxx udržována x xxxxxxx 22 ± 2 ^oC a xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma případů, xxx je voda xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Oba xxxxxxxxx xx měly xxx kontrolovány xxxxxxxx;

(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx komor x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové částice xx měly xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx zóny xxxxxx. Xxxxxx vzduchu xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro distribuci xxxxxx, kterým je xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému suspendovanému xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx část aerosolu xxxx respirabilní. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x poté xxxxx xxxxxxx xxx často, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx exponována.

1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxx látky xx xxxx xxxxx xxxxxxx 12 měsíců.

1.2.3 Xxxxx postupu

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxx. Dodatečná pozorování xx xxxx xxx xxxxxxxxx denně x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx ztráty xxxxxx xx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx u xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx, která jsou xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx zachytil xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx toxických účinků, x xxxx xx xxxxxx minimalizace xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx změn x všech xxxxxx, x xxxx případy xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx.

Xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx za xxxxx xxxxx po xxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx spotřeby xxxxxxx (a vody xxx, xxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 týdnů x xxx přibližně xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx zdravotní stav xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx vyšetření

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx srážlivosti) xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx x poté x přibližně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx na xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx xx to xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx být xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx zvířat xxxxx xxxxxx, xxx xx xxx stanoven xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx xxxx xxxxx x vyšetření patologických xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx i x skupiny s xxxxxx xxxxxxxx nižší.

1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx

Vzorky xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx od xxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx intervalech xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx buď xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx:

- vzhled xxxx, xxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, okultní xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx sedimentu (xxxx- kvantitativně).

1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech a xx závěr jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx biochemická xxxxxx xx xxxxx nehlodavců x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Od xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx před xxxxxx. X těchto xxxxxx je připravena xxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkoušky:

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xx funkci jater (xxxx. aktivita xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx¹⁾, glutamát xxxxxx xxxxxxxxxxxx²⁾, gamma xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxxx xxxxxxx xx lačno,

- xxxxx na xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx močoviny x xxxx.

1) nyní xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

1.2.3.5 Xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se provede x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu xxxx xxxx utracena x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx léze, xxxxx xx xxxxx být xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx by xxx provedeno xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx nálezy.

Xxxxxxx xxxxxx a tkáně xx xxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. To xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx:xxxxx³⁾ (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, štítné xxxxx x příštítných xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x plic, srdce, xxxxx, slinných xxxx, xxxxx³⁾, xxxxxxx, xxxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx³⁾, xxxxx, žaludku, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, ilea, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, kůže, svaloviny, xxxxxxxxxxx nervu, míchy (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), sterna x xxxxxx dření x xxxxxxxx kosti xxxxxx xxxxxx, x očí. Xxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx měchýře xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx cestou xx xxxxxxxxxx těchto xxxxx; xxxxxxxx plic x xxxxxxxxxxx studiích, xx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx inhalační xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx včetně xxxx, xxxxxx x hrtanu.

Xxxx-xx xxxxxxxxx jiná xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xx xxxx xxx k dispozici xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx významné xxxxxxx.

3) xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx xxxxxxx a xx xxxxxxx u xxxxxxxx a xx xxxxx xxxxxxxxxx x dále xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx

1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx v xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx mikroskopicky. Navíc xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

(x) mikroskopické xxxxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx nalezených:

1. u xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,

2. x xxxxx xxxxxx xx skupiny x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,

(x) xxxxxx či tkáně xxxxxxxxx xxxxxxxxx způsobené xxxx xxxxxxxxxxxxx způsobené xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx také ve xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx,

(x) xxx, xxx výsledky svědčí xxx xxxxxxxx zkrácení xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, které xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, skupina x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx,

(x) xxxxxxxxx x incidenci xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx. xxxxxxxxxx kontrolní xxxxx, jsou nezbytné xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx pozorovaných x xxxxxx s xxxxxxxxxxx látkou.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx každou testovanou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx vykazujících jednotlivé xxxx lézí. Výsledky xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx odpovídající statistickou xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxx

Xxxxxx o xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxx,

- xxxxxxxx testu: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, zdroje vzduchu, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, zneškodňování xxxxxxx vycházejícího x xxxxxxxxx a způsobu xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxx. Xxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, a xxx, kde je xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Xxxxx x xxxxxxxx: ve xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:

(x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx

(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky vstupující xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx)

(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx

(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx

(x) xxxxxxx xxxxxxxxx částic (xx-xx xx xxxxxxxxxx)

- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx

- xxxxx x xxxxxxx odpovědi podle xxxxxxx x dávky

- neúčinná (xxxxxxx) xxxxxx

- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx do xxxxx

- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx

- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznak x jeho xxxxx xxxxx

- data x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx

- použité xxxxxxxxxxxxx xxxxx x výsledky

- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x všechny xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx)

- xxxxxxx xxxxxx

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx

- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx xxxxx

- diskuse xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - HLODAVCI X XXXXXXXXXX

1. XXXXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx xxxxxx x odstupňovaných dávkách xxxx xxxxxxxxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx dávka xx každou skupinu, xxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Krátce xxxx xxxxxxxxxx xxxxx porodu xxxx březí xxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxxx x s xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx- x xxxxxxxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxx, xxxxxxx samice, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx započetím xxxxx. Potom jsou xxxxxxxxxx samci x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Oplozené xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxx xxx zajištěno přirozenou xxxxxx xxxx umělou xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Aplikace xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx během xxxxxx organogeneze. Xxx xxxx xxxxxxxx jsou xxxxx vyjmuty xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx sledování xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx orgánů xxxxxx xxxxxxxxx možnosti xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x krvácení do xxxxxx.

1.2.2 Testovací xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Běžně xxxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxx, xxx, xxxxxx x králík. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx jsou potkan x xxxxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx neměl xxx xxxxxx plodnost x xxxx xx xxx u něj xxxxx reakce xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Pro xxxxxx dávku je xxxxx xxxxxx xxxxx 20 xxxxxxx potkanů, xxxx xxxx xxxxxx xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Xx sledování xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx studované xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxx a mláďat.

1.2.2.3 Xxxxx

Xx xxxxx xxxxxx aspoň tři xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx je xxxxxxxxx látka podána xx xxxxxxxx, xx xxxxx zahrnout do xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx vehikulum. Xx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxx být xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxx xx xxxxxxxxxxx schopnosti. Xx xxxxxxx x xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx zvířaty x xxxxxxxxx skupině x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx fyzikálně xxxxxxxx xxxx biologické xxxxxxxxxx xxxxxxxx, pak nejvyšší xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx v ideálním xxxxxxx měla x xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx, xxx xx xx xxxx jak 10 % úmrtí. Xxxxx úroveň dávek xx neměla xxxxxxx xxxxxxxxx účinky. Xxxxxxx xxxxx xx měly xxx voleny xxx, xxx byly geometricky xxxxxxxxx mezi xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx test

X xxxxxxx, xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxx dávce nejméně 1000 mg.kg-1 prokazatelně xxxxxxxx xxxxxxx embryotoxicity xxx xxxxxxxxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxx xx xxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x/xxxx spermie (xxxxx xxxxx). Xxxx aplikace xx měla xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx organogeneze. Xx xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 6. xx 15. xxx u xxxxxxx x xxxx, 6. xx 14. xxx x xxxxxx x 6. až 18. xxx x králíka. X případě, xx xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx byla xxxxxxxxx umělá xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx den. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx končí xxxxxxxx xxxxx den xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxx xxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx orálně sondou, xxxxx xx stejnou xxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx denně xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx může xxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx periodicky xxxxxx x dávka xxxxxxxxxx xxxxx posledního vážení. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, stupně x xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx potratu xxxx xxxxxxxxxxx porodu xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx i xx ukončení xxxxxxxx xxxxx až xx xxxx přibližně xxxxx xxx před xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx období xxxxxxxx, xxx vyhnout xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx mělo zahrnovat xxxxxxxxxxxx xxxxx kůže x srsti, xxx x xxxxxxx, dále xxxxxxxxx, oběhového, xxxxxxxxxxx x centrálního xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x chování. Xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

Xxxxx dojde x xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx morfologické xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které mohly xxx xxxx xx xxxxxx březosti. Xxxxx xx smrti je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x zárodků x xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx dobu xxxxx zárodků x xxxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx tělísek. Xx xxxxx xxxxx pohlaví xxxxxxx x zaznamenat xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx průměr. Xx vyjmutí xx xxxxx xxxxxxxxxx zevně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xxxx x křečků je xxxxx xxxxxxxx kosterní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx až xxxxxxxx vrhu x x zbytku xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xx třeba xxxxx zárodek důkladně xxxxxxxx pitvou z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x skeletu.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx formě xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxx a xxxxxxxx xxxxxx zárodků a xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x vztah xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x určitým xxxxx. Výsledky se xxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx možno xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1. Zpráva x xxxxx

Xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx xxx každou xxxxx,

- xxxxx xxx účinku (pokud xx bylo možno xxxxxxxx),

- xxxx xxxxx xxxxx studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx,

- údaje x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx,

- délka xxxxxxxx x xxxxx x xxxx (včetně historických xxxxx),

- údaje x xxxxxxxxx (živé/mrtvé, xxxxxxx, defekty xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),

- xxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx/xxxxx xxxxx, pohlaví, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.32. XXXX XXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx cestou, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx dávka na xxxxxxx, xx xxxxx xxxx života xxxxxx. Xxxxx a po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx denně xxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení xxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx předchozích xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i další xxxxx (hlodavce x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx zvířata x běžně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx by měla xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx by neměl xxx xxxxxx ve xxxx zvířat xxxxx xxxx xxx ± 20 % od xxxxxxx. X xxxxxxx, xx vlastní xxxxxx xxxxxxxxx test subchronické xxxxxx toxicity, xx xxxxx použít xxxxxx xxxx a kmen x obou xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) xxx xxxxxx úroveň xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx zvýšit x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Dávkové xxxxxx x frekvence expozic

Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxx xxxxxxx příznaky xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx dožití xxxxxx jinými xxxxxx xxx tumory.

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx. Xxxxxx by xxxxxx xxx nižší xxx 10 % vysoké xxxxx. Xxxxxxx dávku/dávky xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx úrovní by xxxx xxxx v xxxxx předchozí xxxxx x studie xxxxxxxx.

Xxxxxxxx se provádí xxxxxxx xxxxx. Je-li xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xx být xxxxx k xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxx

Xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx identická x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinou, xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx.

Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jako jsou xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxx použije-li xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx xxx vehikulu.

1.2.5 Xxxxxx aplikace

Xxx xxxxxx cesty aplikace xxxx orální, xxxxxxxx x inhalační. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx

Xxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx traktu x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx orální xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx v xxxxxxx.

Ideálně xx xx xxxx látka xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx pět dnů x xxxxx může xxxx x vymizení xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x období xxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Nicméně, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx považováno za xxxxxxxxxx.

1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxx přímo xx xxxx xxxx xxx xxxxxxx jako simulace xxxxxx xxxxx vstupu x xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx kožního xxxxxxxxx.

1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx

Protože xxxxxxxxx studie jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx aplikace, xxxx zde xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx alternativou xx specifických xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx v xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx x prostředí, 22 - 24 xxxxx denně xx xxxx dní x xxxxx (kontinuální expozice), x přibližně jednou xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx i pro xxxxxxx expozičního xxxx. X obou případech xxxx xxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, xx v první xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx ústup xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx obdobím xxxxx víkendu.

Xxxxx xxxxxxxxxxx nebo kontinuální xxxxxxxx závisí xx xxxxxx xxxxxx x xx lidské xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx technické xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx nutnosti xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx komory

Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx vzduchu xx xxxxxx, aby xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku a xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx komory xx xxxx xxx identickou xxxxxxxxxx, tak aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Uvnitř xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx testované xxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx minimalizovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Obecně xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx atmosféry x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxxxx.

Měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

(x) Xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx komorou xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

(x) Koncentrace: xxxxx xxxxx expozice xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx více xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xxxxxxx x xxxxxxx: xxx hlodavce, xxxxxxx xx měla xxx udržována x xxxxxxx 22 ± 2 °X x xxxxxxx x komorách 30 - 70 % vyjma případů, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

(x) Měření xxxxxxxxx xxxxxx: měla by xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx xx xxxx xxx x respirabilní velikosti xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx x dýchací zóny xxxxxx. Vzorek xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xx xxxxx xxxxxxxxxx, a xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, i když xxxxxx xxxx aerosolu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx částic xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxx během vývoje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxxxx stabilitu aerosolu, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxx, kterým jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.6 Xxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx použitého xxx xxxx. Test xx xxx být xxxxxxx x 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x 24 měsících x xxxxxxx. Xxxxxxx, pro xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx dobou xxxxxx resp. x xxxxxx spontánním xxxxxxxx xxxxxx doba ukončení xx xxxx xxx 24 měsíců pro xxxx a xxxxxx x 30 xxxxxx xxx potkany. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je přijatelné, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x nejnižší xxxxx xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx klesne xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx zřetelný xxxxxxxx rozdíl odpovědi, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx uhyne předčasně xxx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou xx xxxxxxxx toxických xxxxxx, xxxxxx to nutné xxxx x ukončení xxxxxx testu, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx problémy. Xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx být xxxxxx xxxxxxxxxxxx údajů (xxxxxxxxx, kanibalismem nebo x důsledku chyb xxxxxxx) v xxxxx xxxxxxx větší než 10 % x xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx nesmí xxx xxxxx než 50 % x 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x x 24 měsících x xxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxxxx

Denní xxxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxxxx změny xxxx x xxxxx, xxx x sliznic, xxxxx i dýchacího, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx kontrola xxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx chyb x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx zvířata xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx by xxxx být xxxxxxxxxxx x všech xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, rozměry, xxxxxx x progrese každého xxxxxxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx spotřeby xxxxxxx (x vody xxx, xxx je xxxxxxxxx xxxxx podávána v xxxxx vodě) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost xxxx xxxxxxxxx sledování.

Tělesné xxxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxx týdně xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx testu x xxxxx xxxxxx xx čtyři xxxxx xx tomto období.

1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x zhoršeném xxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxxxx studia, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xx 12 xxxxxx, xx 18 xxxxxx x xxxx utracením xxxxxx se provede xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxxxxx xx xxxxxx ve xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx, zvláště xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx údaje x xxxxxxxxx patologických xxxx xxxxxxx nutnost, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx i x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx nižší, xxx je xxxxxx xxxxx.

1.3.2.2 Xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu xxxx xxxx xxxxxxxx, protože xx nemocná. Všechny xxxxxxxxx tumory xxxx xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx měly xxx xxxxxxxx xx vhodných xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx (xxxxxx řezů xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, kory xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň thymu, xxxxxxx x plíce, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx, akcesorní xxxxxxxx orgány, kůže, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xxxxxx, tračník, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx žláza, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx x kostní xxxxx, xxxxxxxx kost xxxxxx kloubu, xxxxx xx třech xxxxxxxx (xxxxx, střední xxxxxx x xxxxxxx) x xxx.

Xxxxxxxx xxxx x močového xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx těchto xxxxx. Xxxxxxxx xxxx x inhalačních xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření. X inhalačních xxxxxxxx xx měl být xxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx včetně nosní xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.

1.3.2.3 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx provede x xxxxxxxx x tkáních xxxxx xxxxxx, která xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx kontrolní x x xxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx okem x xxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, se vyšetří xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.

(x) Xx-xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx neoplastických xxxx xxxx skupinou s xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxx orgánu xx xxxxx x x xxxxxxx skupinách.

(x) Xx-xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, měla xx xxx kompletně zkoumána x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx dávkou.

(x) Xx-xx xx xxxxxxx x vysokou xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx účinků, které xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx kompletně xxxxxxxx xxxxxxxx nižší dávkovou xxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx počet zvířat xx začátku testu, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx během xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.

3. XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxx

Zpráva o xxxxx bude, xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,

- xxxxxxxx testu: Xxxxx expozičního zařízení xxxxxx konstrukce, typu, xxxxxxx, zdroje vzduchu, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, zneškodňování xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx používá. Xxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, vlhkosti, a xxx, xxx je xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x expozici: xx xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:

(x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx x inhalačním xxxxxxxx,

(x) xxxxxxx x xxxxxxx vzduchu,

(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),

(x) povahu xxxxxxxx, je-li xxxxxxx,

(x) skutečné xxxxxxxxxxx x dýchací zóně,

(x) mediány xxxxxxxxx xxxxxx (tam xxx xx xxxxxxxxxx),

- xxxxxxx xxxxxx (včetně xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx a xxxx tumoru,

- xxxx xxxxx během xxxxxx nebo xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- doba, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx abnormální xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,

- xxxx x spotřebě xxxxxxx x tělesné xxxxxxxxx,

- použité xxxxxxxxxxxxx xxxxx x výsledky,

- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx metod,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.33. XXXXXXXXXXX XXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXXX

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx a karcinogenní xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx expozici.

Xxx tento účel xx xxxx karcinogenity xxxxxxx alespoň xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx satelitní xxxxxxxx. Xxxxx použitá xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx nejvyšší xxxxx použitá xxx xxxxx karcinogenity. Zvířata x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx testována na xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx sedm dní x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx část xxxxxx zvířat. Během x xx expozici xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před testem xx mladá xxxxxx xxxxxxx náhodně rozdělí xx kontrolních a xxxxxxxxxxxx skupin.

1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Preferovaným xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx možno xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx i xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx zvířata x xxxxx xxxxxxxxx kmenů xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Expozice xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx odstavení xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx než ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxx předchází test xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx a xxxx x xxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Pro hlodavce xx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) na xxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx utrácení xxxxxx, xxxxx se xxxxx x počet zvířat, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx koncem xxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx) pro xxxxxxxxx patologie jiné, xxx xxxx xxxxxx, xx xxxxx měla xxxxxxxxx 20 xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx pohlaví.

1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx

Pro xxxx xxxxxxxxxxxxx xx zvolí xxxxxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx přírůstků (xxxx xxx 10 %), xxx podstatnějších xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx tumory. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx růstem, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo vyvolat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx by xxxxxx xxx xxxxx xxx 10 % vysoké xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx třeba xxxxxxxx xx středním pásmu xxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxxxxx úrovní xx xx xxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.

Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Vysoká xxxxx xxx exponovaná satelitní xxxxxxx by xxxx xxxxxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx.

Expozice xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x pitné xxxx xxxx xxxxxxxxx do xxxxxxx, xxxx by xxx stále k xxxxxxxxx.

1.2.4 Kontroly

Xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina je xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx s exponovanou xxxxxxxx, vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita xxxx charakterizována, xxxxxx xx další xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx exponována xxx xxxxxxxx.

1.2.5 Způsob xxxxxxxx

Xxx hlavní xxxxx xxxxxxxx xxxx orální, xxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx podání xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx

Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx z gastrointestinálního xxxxxx x je-li xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx proti xxxx xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx v potravě, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx podanou x xxxxxxx.

Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx vést k xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x období xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx výsledky x následné xxxxxxxxx. Xxxxxxx, především s xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx, dávkování xxxxxxx xxxxx xx považováno xx xxxxxxxxxx.

1.2.5.2 Dermální xxxxxx

Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxx modelový xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.5.3 Xxxxxxxxx studie

Xxxxxxx xxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx podrobněji xxxxxxxxx x xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v specifických xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx expozice, xxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx po xxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxx expozici v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx x xxxxx (kontinuální xxxxxxxx), s přibližně xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxxx xx stejnou dobu xxx, použitou x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx a stálou xxxxxxxx xx v xxx, že x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxx přerušované xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx cílech xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx simulována. Nicméně xx xxxxx xxxx x úvahu xxxxxx xxxxxxxxx obtíže. Například xxxxxx kontinuální xxxxxxxx xxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx komplikovanější (x xxxxxxxxxx) generace aerosolu xxxx určité koncentrace xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx se exponují x inhalačních xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx zaručuje xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x tím xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky do xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx v xxxxx udržení xxxxxxxx xxxxxxxxx x komoře xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.

Xxxxxx xxxx monitorování xxxxxxxx:

(x) průtok xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx kontrolována xxxxxxxxxxx,

(x) koncentrace: xxxxx denní expozice xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,

(x) xxxxxxx x vlhkost: pro xxxxxxxx, teplota xx xxxx xxx xxxxxxxxx x rozmezí 22 ± 2 °X x xxxxxxx v xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx kontrolovány xxxxxxxx,

(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: měla xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x atmosféře xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx aerosolů. Aerosolové xxxxxxx xx měly xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx pro použité xxxxxxxxx zvíře. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx z xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx částic, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x měl xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, i xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx velikosti xxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, a poté xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx zvířata xxxxxxxxxx.

1.2.6 Xxxxxx studie

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxx. Xxxx xx xxx xxx ukončen v 18 xxxxxxxx x xxxx x křečků x 24 xxxxxxxx x potkanů. Xxxxxxx xxx xxxxxxx kmeny xxxxxx x delší xxxxx života xxxx. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxx by xxxx xxx 24 xxxxxx xxx myši a xxxxxx x 30 xxxxxx xxx potkany. Xxxxxxxxxxxx ukončení xxxxxx xxxxxxxxxxx studie je xxxxxxxxxx, když počet xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx ukončení xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx rozdíl xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx to xxxxx vést x xxxxxxxx xxxxxx testu, xxxxx ostatní skupiny xxxxxxxxxx toxické xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (autolýzou, xxxxxxxxxxxx xxxx v důsledku xxxx xxxxxxx) x xxxxx skupině xxxxx xxx 10 % x xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % x 18 měsících x xxxx a xxxxxx x v 24 xxxxxxxx u xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx x 10 připojených xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pohlaví xxxxxxxxx pro testování xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx být v xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. U xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx vztah x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx stárnutí.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže a xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx i xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

X xxxxxx exponované satelitní xxxxxxx (xxxxxx) xx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat xx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ze studie xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxx x xxxxxxx. Moribundní xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx x pitvána.

Xxxxxxxx příznaky včetně xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx x mortalita xx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx vývoji tumorů: xxxx objevení, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, vzhled x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx tumoru xx xxxxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxxxx měření xxxxxxxx potravy (x xxxx tam, kde xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx přibližně xx tříměsíčních intervalech, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx změny xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx jiné xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Tělesné hmotnosti xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxx xxxxx během xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx po xxxxx období.

1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek, xxxxxxxx destiček xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) xx měla xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, šest měsíců x xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech, x xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx 10 potkanů xx xxxxxxx z xxxxx skupiny. Tam xxx xx to xxxxx, vzorky ve xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx svědčí o xxxxxxxxx zdravotním stavu xxxxxx během xxxxxx, xx xxxxx vyšetřit xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx má xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx data nebo xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx se xxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, než xx xxxxxx xxxxx.

1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxx xxxx od 10 xxxxxxx každého pohlaví xx sbírají xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx zvířat x xx stejných xxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx buď xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx:

- xxxxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (semi-kvantitativně).

1.3.2.3 Biochemické xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx biochemická měření xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, pokud xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Od nehlodavců xx xxxxx toho xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxxx. Z xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

- celková xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxx jater (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx¹⁾, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx²⁾, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx na xxxxx,

- xxxxx xx xxxxxx ledvin, xxxx. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.

1) nyní xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

2) xxxx známá xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Kompletní xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx zvířat včetně xxxx, která xxxxxxx xxxxx pokusu xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx stavu. Před xxxxxxxxx se odeberou xxxxxx xxxx všech xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých krvinek. Xxxxxxx viditelné léze, xxxxxx nebo léze, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx provedeno xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx nálezy.

Xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx pro histopatologické xxxxxxxxx. To xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x tkání: xxxxx³⁾ (prodloužené míchy/mostu, xxxxxxxxx kory, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, thymu, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, xxxxx, slinných xxxx, xxxxx³⁾, sleziny, xxxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx³⁾, xxxxx, xxxxxxx, dvanácterníku, xxxxxx, xxxx, slepého xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), xxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx xxxx x močového měchýře xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; naplnění xxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxx xxx odpovídající xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako jsou xxxxxxxxx studie, xx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx a xxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx získané z xxxxxx procedur xx xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx patologovi xxxxxxxx xxxxxxx.

3) Xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx pohlaví x xx skupinu xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx.

1.3.2.5 Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxx vyšetření se xxxxxxx ve všech xxxxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vysokou xxxxxx x satelitní xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxxxxx xxxxxxx dávce xxxxxx patologické změny xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx všech xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx všech xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx věnované xxxxxxxxxxxxx xxx jejím ukončení.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx:

(x) úplná xxxxxxxxxxxxxx xx provede v xxxxxxxx x tkáních xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx během xxxxx x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x nevyšší xxxxxx;

(x) xxxxxxx xxxxxx viditelné xxxx x léze, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u všech xxxxxx;

(x) je-li xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx neoplastických xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx provede x xxxxx xxxxxx xx tkáni x x dalších skupinách;

(x) xx-xx přežití xx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou podstatně xxxxx xxx x xxxxxxx, měla xx xxx kompletně xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx;

(x) xx-xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nižší dávkovou xxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx sumarizují ve xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xxxxx zvířat xx začátku testu, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx během xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x počet xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx použity xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxx

Xxxxxx x xxxxx xxxx pokud xxxxx obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,

- podmínky xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxx xxxxxxxxxxx, zneškodňování xxxxxxx vycházejícího z xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx xx xx žádoucí, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Údaje x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) by měly xxxxxxxxx:

(x) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx zařízení,

(b) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,

(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx aparatury xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),

(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,

(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,

(x) xxxxxx xxxxxxxxx částic (xxx xxx xxxxxxxxxx),

- xxxxxxx úrovně (xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxx) a xxxxxxxxxxx,

- xxxx incidence xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx x typu xxxxxx,

- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx zda zvířata xxxxxxx až xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx podle xxxxxxx a xxxxx ,

- xxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxx,

- doba, xxx xxx pozorován xxxxx xxxxxxxxxx příznak x jeho xxxxx xxxxx,

- xxxx x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx,

- testy xxxxxxxx xxxxxxxxx x všechny xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx moči),

- xxxxxx patologicko-anatomické,

- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.34. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxx a xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (přibližně 56 xxx u xxxx x 70 xxx x potkanů), xxx xxx zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinek testované xxxxx na spermatogenezu.

Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx látku xx xxxx xxxxxxx xxxx estrálních xxxxx, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx nepříznivý xxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxxx. Zvířata xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx připouštění xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx, x době xxxxxxxxx x kojení xxxxx xxxxxxx.

Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxxxxx metody

1.2.1 Příprava

Xxxx zahájením xxxxx xx zdravá mladá xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxx xxxxxx - kontrolní x xxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu.

Doporučuje xx xxxxxxxxxx látku xxxxxxx x potravě xxxx x xxxxx xxxx. Jiné způsoby xxxxxx xxxx také xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx dostávají xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxx x xxxxxxxxx aplikace vehikulum xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx být x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxické xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxx druhu

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx zdravá zvířata, xx xx xxxx xxxxxxxxx pro jiné xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx být xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx co xx druhu, xxxxx, xxxxxxx a xxxx x/xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem x xxxx pohlaví. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx zahájením xxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx dostatečný xxxxx xxxxxxxxxxx a potomstva, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vlivu xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx chování x X xxxxxxxx, kojení, xxxx a vývoj xxxxxxxxx xxxxxxxx X₁ xx xxxxxx xx xxxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx ad xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx samice xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xx xxx poskytnut xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxx tři exponované xxxxxxx x jedna xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx, xxx zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx dostávají xxxxxxxxx x nejvyšším xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x využití xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx další xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má v xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx to není xxxxxxx jejími xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinku - xxxxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxx uhynutí x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, které by xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látce, x xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx x xxxxxx xxx x xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx sondou xxxx x xxxxxxxxx xx dávka xxxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxx změny xxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx dávky xxxxx být xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v 0. nebo 6. xxx od xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.2.5 Limitní xxxx

X xxxxxxx xxxxx x nízkou xxxxxxxxx, xxxxx se ani xxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx vysoká xxxxx, xxxxxxxxxxxx u matek xxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxx nepříznivé xxxxxx xx xxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx studie xx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 Xxxxx postupu

1.3.1 Xxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxxxxx samcům xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxx pětidenní xxxxxxxxxxxx po xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx týdnů xxxx obdobím xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx xxxx). Samci xx xxx utratí a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, nebo xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx a mohou xxx použiti pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx pak xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxx xxxxxx.

Denní aplikace xxxxxxx xxxxxxxxxx generace (X) xxxxx po xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx aspoň xxx xxxxx xxxx obdobím xxxxxxxxxxx. Xxxxx aplikace xxxxxxxxx xxx xx xxxx tři xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx X₁ xxxxxxxx. Xx přípustná xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx znalostí o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. o indukci xxxxxxxxxxx x/xxxx bioakumulaci.

1.3.2 Xxxxxx xxx připouštění

Xx možno použít xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx samice x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).

X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx kleci xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxx vyšetřeny xx přítomnost xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx zátky. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx jako xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx.

Xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx k oplodnění, xx xxxxx xxxxxxxx x cílem zjistit xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x oplodnění x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx cyklu a xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxx vrhů

Xxxxxxxx použitým xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx možnost porodit xxxxxxxx a pečovat x xxx xxxxxxxxx xx okamžiku xxxxxxxxx xxx standardizace xxxxxxxxx xxxx. Pokud xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx upraví vyřazením xxxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx se xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx xx xxx; xxxxx xx xxxx proveditelné, xx xxxxx standardizovat xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 samců x 3 samice. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.4 Xxxxxxxxxx

Každé zvíře xx xxx pozorováno xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Xxxxxxxx změny xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx porodu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Příjem xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xxxx, xxx během xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx vhodné kontrolovat xxxxxx potravy xxxxx. Xx porodu x x průběhu xxxxxxx xx měří příjem xxxxxxx (x xxxx, xxxxx xx látka xxxxxx x xxxxx xxxx) ve xxxxxx xxx, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X xxxxxxx xx xxxx xxxxx den xxxxxxxx x xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx individuálně xxx každé dospělé xxxxx.

Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx vyšetří a xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx anomálií.

Xxxxx mláďata a xxxxxxx utracená xx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx pro vyšetření xx možné defekty. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx xx zváží xxxx xx xxxxxx, xx 4. x 7. dnu x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx a fyzickém xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.

1.3.5 Patologie

1.3.5.1 Xxxxx

Xx xxxxxxxx nebo xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx generace X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx anebo xxxxxxxxxxx změny xx xxxxxxxx pozorností k xxxxxxx reprodukčního xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx.

1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, vagina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, semenné xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, prostata, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx X xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V případě, xx xxxx orgány xxxxxx doposud xxxxxxxxx x jiných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, provede xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx x skupiny xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x dále x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx i u X xxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx vyšetřují xxxxxxx xxxxx makroskopicky postižené. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx podezřelých x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, kde je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxxxx xxxxx, počet těhotných xxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx výsledky xxxx xxx statisticky xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se použít xxxxxxxxxx xxxxxx přijímaná xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx

Zpráva o xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:

- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx x pohlaví včetně xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x životaschopnosti,

- xxxx uhynutí x xxxxxxx xxxxxx nebo xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx uvádějící xxxxxxxx každého xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx x konečnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxx x xxxxx účinky xx xxxxxxxxxx, potomstvo a xxxxxxxxxxx růst,

- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxx xxxxx, xxxxx xx xx možné,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

B.35. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx látka xx podává několika xxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Samci xxxxxxxxxx (X) generace dostávají xxxxxxxxxx látku x xxxx růstu x xxxxxxx x průběhu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx cyklu (xxxxxxxxx 56 dnů x xxxx a 70 xxx x xxxxxxx), aby byl xxxxxxxx jakýkoliv nepříznivý xxxxxx testované xxxxx xx spermatogenezu.

Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx látku po xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx testovací xxxxx na estrus.

Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. V xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx zvířatům xxxx xxxxxxx x xxxxx, x době xxxxxxxxx a xxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxxx xx látka xxxxxxxx zvířatům filiální xxxxxxxx X₁ x xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx a až xx doby xxxxxxxxx X₂ xxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx aplikaci xx xxxxx metodu xxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx testovací xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxx náhodně rozdělena xx xxxx xxxxxx - kontrolní x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Rodičovská xxxxxxx (P) jsou xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx nebo x xxxxx vodě. Xxxx xxxxxxx podání xxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx dostávají xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx celého xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, musí xxx x nich xxxxx, xx xxxxxx toxické xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 dní x týdnu.

1.2.2 Pokusná xxxxxxx

Xxxx se xxxxxxxx potkanům xxxx xxxxx. Používají se xxxxxx X xxxxxxx, xx té xxxx xxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx. Musí být xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx co xx xxxxx, kmene, xxxxxxx a xxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, musí být xxxxxxxxx před zahájením xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx x xxxxxxx

Každá xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx zaručeno xxx 20 xxxxxxx samic x přibližně stejným xxxxxxxx xxxxxx. Cílem xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx těhotenství x xxxxxxxxx, x tím xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx, růst x xxxxx potomstva xxxxxxxx X₁ od xxxxxx xx xxxxxxxxxx, a xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X₂ xx xx odstavení.

1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.5 Dávkování

Xxxxxxx xx alespoň xxx xxxxxxxxxx skupiny x xxxxx kontrolní. Xxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, pak zvířata xxxxxxxxx skupiny dostávají xxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x utilizaci xxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, spárované xx do výživy.

Xxxxxxxxx látka x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx to xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, vyvolávat xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx populaci. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx daly xxxxxxx testované xxxxx, x nejnižší dávka xx neměla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, ani x xxxxxx ani x xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx hmotnosti xxxxxxx x přizpůsobuje xx xxxxx týden xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxx samic, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx určeny xx xxxxxxx tělesné xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx těhotenství.

1.2.6 Xxxxxxx xxxx

X xxxxxxx xxxxx s nízkou xxxxxxxxx, pokud xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 neprojevuje žádným xxxxxxxx účinkem xx xxxxxxxxxx, nemusí se xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx předběžná studie xxxxx, že xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxx, xxxx nutné xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 Xxxxx postupu

1.3.1 Xxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X xxxxx xx xxxx pěti xx xxxxxx týdnů, aspoň xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx odstavení. U xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x jsou xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vrhů a xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

Denní xxxxxxxx samicím rodičovské xxxxxxxx X začne xx xxxxxxxxx aklimatizaci x xxxxxxxxx aspoň xxx týdny před xxxxxxx připouštění. Denní xxxxxxxx pokračuje pak xx celé xxx xxxxx období xxxxxxxxxxx, x době xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx X₁ potomstva. Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx znalostí x vlastnostech xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. x xxxxxxx metabolismu xxxx. x xxxxxxxxxxxx.

Aplikace xxxxxxxx xxxxxxxx F₁ xxxxxx xx odstavu x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.

1.3.2 Postup xxx xxxxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (jedna xxxxxx a xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx ke dvěma xxxxxxx).

V xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x týmž xxxxxx xx společné xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxx xxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx nálezu xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx x xxxxxx spermatogeneze, xxxxxxx xxxxxxxx F₁ xx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xx xxxx 11 xxxxx x xxxx x 13 xxxxx x xxxxxxx. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X₁ se náhodně xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxx téže xxxxxxx xxxxxxx. Zvířata xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx.

Dvojice, x xxxxxxx xxxxxxx x oplodnění, je xxxxx vyšetřit s xxxxx xxxxxxx důvod xxxxxxxxxxx xxxx. Xx xx xxxxx buď xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx obou xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukčních orgánů xxxx vyšetřením estrálního xxxxx x spermatogenezy.

1.3.3 Xxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ponechána xxxxxxx porodit normálně x xxxxxxx o xxx potomstvo xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti vrhů. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx následující xxxxxx: mezi 1. x 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx dosáhlo xxxxx 4 samců x 4 xxxxx na xxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, je xxxxx standardizovat na xxxx xxxxx, xxxx. 5 xxxxx a 3 samice. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx standardizovat. Standardizace xxxx xxxxxxxx X₂ xx xxxxxxx obdobně.

1.3.4 Xxxxxxxxxx

Každé xxxxx xx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Významné xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx prodlouženého xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx, xx zaznamenávají. Příjem xxxxxxx se xxxx xxxxx jak xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx x x průběhu laktace xx měří xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx váženo. Rodičovská X a X₁ xxxxxxx se xxxx xxxxx xxx aplikace x xxx xxxxx. Xxxxxxx pozorování xx xxxxxxxxxxxxx individuálně xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx dne 0 těhotenství. Xxxxx xxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a stanoví xx počty a xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x přítomnost xxxxxxx anomálií.

Xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xx uchovají xxx vyšetření xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx se spočítají x celé xxxx xx xxxxx ráno xx xxxxxx, xx 4. x 7. xxx x potom xxxxx týden xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Pozorují xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x fyzickém xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.

1.3.5 Xxxxxxxxx.

1.3.5.1 Xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx generací X a F₁ xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx F₁ xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X₂ xx utratí xx xxxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X x X₁ xxxxxxxxxxxxx vyšetří xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xx zvláštní xxxxxxxxxx x orgánům xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mláďata zemřelá xxxx umírající se xxxxxxx xx xxxxxxx.

1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

Vaječníky, xxxxxx, děložní xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx cílové xxxxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx P x X₁ xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx, že xxxx xxxxxx nebyly xxxxxxx vyšetřeny v xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx mikroskopické xxxxxxxxx x xxxxx X x F₁ xxxxxx xxxxxxxxx skupiny x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávku, xxxxx xxxx vybrána xxx xxxxxxxxxxx, x xxxx x xxxxxx, která xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Orgány, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx i x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx postižené. Xxx již xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx podezřelých z xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xx sumarizují x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxx na začátku xxxxxx, počet těhotných xxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxx.

Xxxxxxxxx výsledky xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxx xx použít kterákoliv xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxxxxxx

Xxxxxx x experimentu by xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx následující xxxxx:

- druh/kmen použitých xxxxxx,

- údaje x toxické odezvě x xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx plodnosti, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxx hmotnost x xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx x xxxxxxxxxxxx hmotnost xxxxxxx xxxx utracením,

- xxxxxxx a xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx, potomstvo x xxxxxxxxxxx xxxx,

- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X x F₁ xxxxxxxx, vybraných xxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx mikroskopických xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.36. XXXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxxx cestou. X závislosti na xxxxxxxx studie xxxxx xxxx xxx podávána xxxxxxxxxxx nebo opakovaně x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, jedné nebo xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx resp. xxxx metabolity xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx tekutinách, tkáních xxxxx v xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x "neznačenou" xx "xxxxxxxx" formou xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx značení, xxxxxx xx xxx, xxx poskytlo xx xxxxxxx informací o xxxxx sloučeniny v xxxxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxx xxxxx zvířata jsou xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx po xxxx xxxx dnů xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx skupin. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx premedikovaných zvířat.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Toxikokinetické xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druzích. Xxxx xx xx xxxxxxxx na druzích xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxx xxxxx v xxxxxx toxikologických xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx. Jestliže xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxx variabilita hmotnosti xxxxx než ± 20 % průměrné xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Pro xxxxxxx xxxxxxxx x vylučování xx xxxxx xxxxxxx 4 zvířat xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx testování xxxx xxxxxx xxxxxxxx určitému xxxxxxx, ale xx xxxxxxxx podmínek xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxx xxxxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx pohlaví, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (jiných než xxxxxxxx) je xxxxx xxxxxx menší xxxxx xxxxxx.

Je-li xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, pak xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx zvířat xx třeba xxxx x xxxxx jak xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx xxxx, x nichž xxxx testování xxxxxxxxx.

Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx úměrná xxxxxxxx studie.

Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxx počet xxxxx a sledovaných xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx zvířat xx xxxx xxxxxxx x počtem časových xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxx xx skupině xxxxx xxx méně xxx 2 zvířata. Velikost xxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xx, aby xxx látku resp. xxxx metabolity poskytla xxxxxxxxxx charakteristiky xx xxxx retence, xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx

X případě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 2 různé xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx to xxx xxxxx xxxxx xxxxx, po xxxxx xxxxxx pozorovány žádné xxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxx, po xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolává xxxxxxx xxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx látky. Xx určitých xxxxxxxx xxxx xxx nezbytné x podávání xxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Způsob xxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x je-li xx xxxxxx x xx xxxxxxx vehikulem tak, xxx xxxx xxxxxxxxx x ostatních toxikologických xxxxxxxx. Testovaná látka xx obvykle xxxxxxxx xxxxxx sondou nebo x potravě, aplikována xx xxxx, nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x distribuci xxxxx v xxxxxxxxx.

Xxxxxx by xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Pozornost xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx vstřebávání x xxxxxxx, je-li xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx sondou xxxx x xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dávky, zvláště xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx relevantní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x údaji x xxxxxx počátku, xxxxxxxxx x xxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

Po xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx testovaná xxxxx xxxxxx xxxxxxxx přiměřeným xxxxx. Ve zdůvodněných xxxxxxxxx xx možno xxxxxx xxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.

1.3.1 Absorpce

Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx podávané xxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxxx metody x xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx¹⁾, a xx xxxx.:

- xxxxxxxxx množství testované xxxxx x xx. xxxxxx metabolitů x xxxxxxxxx xxxx. x xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx jejích xxxxxx x xxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx odpovědi (xxxx. studie xxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx referenční xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. jejích xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx testovanou x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx plochy xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx. jejích xxxxxxxxxx x plazmě na xxxx a xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupině.

1) V xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx ta, xx xxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxx

X xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx 2 xxxxxxxx, x xxxxx xxx analýzu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx oba:

- xxx použití celkotělové xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx;

- kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x různých časových xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxxxx

Při xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxx, stolice, xxxxxxxxxxx vzduch, x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx podání xxxxx, x to xxx xx xxxxxxxxx 95 % x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 7 xxx xx počátku xxxxxxxxxx.

Xx speciálních xxxxxxxxx xxxx xxx potřebné xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxx x době xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.3.4 Xxxxxxxxxxxx

K xxxxxx xxxxxxx x schématu xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Měla xx xxx objasněna xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metabolické xxxxxx tam, kde xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx studií. Xxx xxxxxxx informací x metabolismu xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx studií.

Xxxxx informace x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx získat x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxxx metabolického xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx neproteinových sloučenin xxxxxxxxxxxx - XX xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Získané xxxxx xx podle xxxx xxxxxxxxx studie xxxxxxxxxx x tabulkách, xxxxx xxxxx doplněných xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xx uvedou xxxxxxx x charakteristiky xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxx, xxxxx, xxxxx x orgánům (xxxxx xx xx relevantní). Xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx metodami. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x navrženy metabolické xxxxx studované xxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxx prováděné xxxxxx xx zpráva x testu xxxx xxxxxxxxx pokud možno xxxxxxxxxxx xxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx materiálu, xxxxxxxx xxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx(x) xxxxxx x xxxxxxx použitá xxxxxxxx,

- toxické x x ostatní xxxxxxxxxx xxxxxx,

- metody xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx v biologickém xxxxxxxxx včetně vydechovaného xxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx rozdělené xxxxx xxxxxxx, xxxxx, režimu, xxxx, xxxxx a xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx x závislosti xx čase,

- xxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx x identifikaci xxxxxxxxxx x biologickém xxxxxxxxx,

- metody xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx týkající se xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxx,

- diskusi xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX - XXXXXX XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Při xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látek xx xxxxxxxx vzít x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx nemůže xxx zjištěn v xxxxxx studiích toxicity. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x mají xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Vyšetřovací xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nález x xx xxxxx xxxxxx však není xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx látka xxxx neurotoxická.

1.2 Xxxxxxxx

Xx skupiny látek xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx metody xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx estery, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, fosfonové nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx thiofosforečných, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx amidothiofosforečných, xxxx xxxx látky, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx projevující xx ataxií, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx a periferním xxxxx s pozdním xxxxxxxx těchto xxxxxxxx, x xxxx inhibicí x stárnutím xxxxxxxxxx xxxxxxxx - NTE (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x nervové xxxxx.

1.3 Xxxxxxxxxx látky

Xxxxxxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupině x xxxxxxx, že x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx testovaných xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Příkladem xxxxxx xxxxxxxxx látky x pozdním neurotoxickým xxxxxxx xx xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, XXXXXX 201-103-5, xxxxxxxx xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (XXXX).

1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx orálně x xxxxxx dávce xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx možnými xxxxxxxx cholinergními účinky. Xxxxxxx xx po xxxx 21 xxx xxxxxxxx, zaznamenává xx xxxxxxxxxx chování, xxxxxx x paréza. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, zvláště inhibice XXX, xx provádí x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x každé xxxxxxx, obvykle 24 x 48 xxxxx xx xxxxxx látky. 21 xxx po xxxxxx látky xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných xxxxxxxxx xxxxx.

1.5 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx

1.5.1 Příprava

Xxxxx zdravé xxxxxxx xxxxxxx bez interferujících xxxxxxxx onemocnění x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxx chůzí xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny. Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx chovu x xxxxxx, v jakých xxxxx xxxxx experimentu.

Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxx pozorování xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx např. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx doporučuje rozpustit, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx nebo xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.6.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx kura xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) xx věku 8 xx 12 měsíců. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.

1.6.1.2 Xxxxx x pohlaví

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx, xxx pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx.

X xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xx xxxxxx) a xxxx přežilo 21xxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx skupina x xxxxxxx historie. Má xxx aspoň xxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx neurotoxicitu, tři xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx doplňovat historické xxxxx, xxxx xx x provádějící xxxxxxxxxx xxxxx některý ze xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxx, potrava, xxxxxxxx chovu).

1.6.1.3 Volba xxxxx

Má být xxxxxxxxx předběžná studie x xxxxxxxx příslušného xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx dávek, xxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx přiměřené xxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx jiný ochranný xxxxxxxxx, x xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx s pozdními xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx látek xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx testovacích xxxxx (xxx xxxxxx B.1 bis). Xxxxxxxxxx xxxxx xxx slepice nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx informace xxxxx xxx také xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxx xxxxxx by xxxx být xx xxxxxxxx x přihlédnutím x výsledkům předběžné xxxxxx výběru dávky x hornímu xxxxxx xxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by neměly xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx (šest) x xx 21 xxxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxx). Xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, o xxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx neurotoxickými xxxxxx, xx xx xxxxxx xxxx ochrana xxxx xxxxxxxx cholinergními xxxxxx.

1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti, xx xxxxxxx postupů xxxxxxxxx xxx xxxx studii, xxxxxxxx xxxxx pozorované xxxxxxx účinky a xxxxxxxx xxxxx údajů x xxxxx x xxxxxxxxx strukturou xxxx xxxxx xxxxxxxx očekávat, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x studii x podáním vyšší xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx neprovádí, xxxxx xxxxxxxx vyskytující xx x xxxx naznačuje xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Doba xxxxxxxxxx xx 21 xxx.

1.6.2 Popis postupu

Xx xxxxxxxx prostředku, xxxxxxxxxxxxx xxxx úmrtím xx následky xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxxxxxx látka xxxxxx x xxxxxx dávce.

1.6.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pozorují xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx 21 xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Veškeré xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx nástupu, xxxx, stupně a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx se hodnotí xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx paréza. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změny xxxxxx x xxxxx a xxxxxxx xxxxxx motorické xxxxxxxx jako xxxx. xxxxxxxxxxx po xxxxxxx, xxx xx usnadnilo xxxxxxxxx minimálních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata x xxxxxxx xx xxxxxxxxx a přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx třeba xxxxxxx, humánním xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.

1.6.2.2 Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx se zváží xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx aspoň xxxxxx xxxxx.

1.6.2.3 Biochemie

Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxx slepice x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxxx x xxxxxxx dnech xx xxxxxxxx látky. Pro xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx vyjmou xxxxx x lumbální xxxxx. Xx xxxxxx vypreparovat xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx jeho xxxx xx xxxxxxxx XXX. Běžně xx xxxxxxxx tři xxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxx testované xxxxxxx xx 24 hodinách x xxxxx xxx xx 48 hodinách, xxx slepice x xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx usmrcují pouze xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxx pohybuje xxxxx xxxxxx (hodnotí xx nástup xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), pak xx xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorky xxxxx dvakrát ze xxx xxxxxx, a xx mezi 24 xx 72 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx.

X xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx může však xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, což xxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.

1.6.2.4 Xxxxx

Pitva x xxxxx xxxxxx (plánovaně xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx celkový xxxx) zahrnuje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx stavu xxxxx x xxxxx.

1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx tkáň x xxxxxxxxxx zvířat (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) se histologicky xxxxxxx. Tkáně xx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), prodloužená xxxxx, xxxxx - xxxx xxxxx se provádějí x horní krční xxxxx, střední hrudní x lumbosakrální, x xxxxxxxxxxx nervů se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x x. xxxxxxxx (x xxxx větve x x. gastrocnemius) x z n. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx specifickými barvivy xx myelin a xxxxx.

2. SBĚR X XXXXXX XXXXX

Negativní xxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxxxx touto xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx. Údaje xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx musí xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x počet xxxxxx xxxxxxxx poškození, xxxxx chování nebo xxxxxxxxxxx účinky, typy x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nebo účinků x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx typ x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x hlediska xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx změnami xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x histopatologickými xxxxxx x dalšími xxxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Číselné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx již x xxxx plánované studie.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxx xxxxxxxx tyto xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:

Xxxxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx plemeno;

- xxxxx x xxxxx zvířat;

- xxxxx, podmínky ustájení xxx.;

- hmotnosti xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx studie.

Podmínky xxxxxxxxx:

- podrobné xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula;

- podrobné xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx a xxxxxxx xxxx;

- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx dávek;

- xxxxxxxxxxx podávaných xxxxx, xxxxxx podrobných xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx x fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxx údaje x xxxxxx ochranného xxxxxxxxx.

Výsledky:

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx;

- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx;

- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx klinických příznaků (xx vratných nebo xxxxxxxxxx);

- xxxxxxxx xxxxx biochemických xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx;

- pitevní xxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx možné.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx x Interpretace

4. LITERATURA

Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx x metodou XXXX TG 418.

X.38. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH XXXXXXXXX XXXXXXX 28XXXXX OPAKOVANÁ XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Úvod

Xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látek xx xxxxxxxx vzít x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, který xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx studiích xxxxxxxx. X určitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx zpožděné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx mohou xxx použity xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx vyvolat pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx však xxxx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxx 28xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx opakovaných během xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx odpovědi xx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx odhad xxxxxxx xxxxxxxxx úrovní, xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx úroveň xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 Definice

Do xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x xxxxx této xxxxxx xxxx "organické xxxxxxxxxx fosforu" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx organické xxxxxx, thioestery xxxx xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, thiofosfonových xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx jiné xxxxx, xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx skupiny.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx projevující xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x míše x xxxxxxxxxx xxxxx x pozdním počátkem xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - NTE (xxxxxxxxxx xxxxxx esterase) x xxxxxxx xxxxx.

1.3 Xxxxxxx testovací xxxxxx

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx denně xxxxxx xxxxxxxx po xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxx sledována xxxxxxx xxxxxx denně, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a paréza xxxxx 14 dnů xx poslední xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx 24 x 48 hodin xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xx poslední xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx xxxxxxxxx tkání.

1.4 Xxxxx xxxxxx testování

1.4.1 Xxxxxxxx

Xxxxx zdravé xxxxxxx slepice xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění x farmakologické léčby x s xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní skupiny. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx studie xxxx zvířata xxxxxxx x podmínkách xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx velké xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx slepic x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxx, xxxxx 7 xxx x xxxxx, xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jinou srovnatelnou xxxxxxx. Tekutiny se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx,

jako xx xxxx. kukuřičný olej. Xxxxx xx doporučuje xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx pevných xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vstřebat. X xxxxxxxxx nosičů xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx mladá xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 až 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx o xxxxxxxxxx velikosti x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.

1.4.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx.

X xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx aspoň xxxx x nich xxxxx xxx utraceno pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx x každém xx xxxx xxxxxxxx xxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx ukončení xxxxxxxx.

1.4.2.3 Xxxxx dávek

Dávkové xxxxxx se xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx výsledkům z xxxxxxxx testu xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x x dalším xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx neurotoxicity, xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxx xxxxxx utrpení. Dále xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx způsobem, xxxxx umožní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx příznaky toxicity.

1.4.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx s dávkou xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti x xxx, xx použití xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx, nevyvolá xxxxx xxxxxxxxxx toxické xxxxxx a jestliže xxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx důvod xxxxxxxx očekávat, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx test se xxxxxxxxx, pokud expozice xxxxxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ještě xxxxx xxxxxx dávky.

1.4.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Všechna xxxxxxx xx xxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx x 14 xxx xx xx, nebo xx xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx xxxxx.

1.4.3 Xxxxx postupu

Xxxxxxxxx xxxxx se podává xxxx xxx v xxxxx po 28 xxx.

1.4.3.1 Všeobecné pozorování

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx po začátku xxxxxx látky. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx po 28 xxx a xxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx podle xxxxx. Xxxxxxx příznaky toxicity xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, typu, xxxxxx x trvání. Xxxxxxxxxx xx zahrnovat abnormality xxxxxxx, ale nemá xx na xx xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pořadové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx a xxxxxxx xxxxxx motorické xxxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxx po xxxxxxx, xxx xx usnadnilo xxxxxxxxx minimálních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.

1.4.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx slepice se xxxxx xxxxx před xxxxxx podáním testované xxxxx a pak xxxxxxx xxxxxx týdně.

1.4.3.3 Xxxxxxxxx

Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx se usmrtí x xxxxxxx dnech xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxx analýzu xxxxxxxx XXX xx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx mícha. Je xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. ischiadicus a xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx XXX. Xxxxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx a xxxxx xxx po 48 xxxxxxxx po xxxxxxxxx podání xxxxx. Xxxxxxxx údaje x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx studií (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx doporučuje xxxxxx xxxx dobu a xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx.

X xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx také xxxxxxx acetylcholinesterázy (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, což xxxx xxxx k xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.

1.4.3.4 Xxxxx

Xxxxx všech zvířat (xxxxxxxxx usmrcených i xxxxxxxxxx xxx špatný xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx posouzení xxxxx xxxxx x xxxxx.

1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

Xxxxxxx xxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx (nepoužitých xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx vyšetří. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Odebírá xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxx xxxxx se provádí x xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x lumbosakrální), x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx distální část x n. xxxxxxxx (x xxxx xxxxx x m. xxxxxxxxxxxxx) x x n. xxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx specifickými xxxxxxx xx myelin x xxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxx fixované xxxxx xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx a skupiny x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx najdou x zvířat xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx vyšetření x na xxxxxxxxx xx xxxxxx, které xxxxxxx dávku střední x xxxxxx.

2. XXXX X XXXXXX XXXXX

Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx touto xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx chování) negativní, xxxxx xx neprovádí xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Neprůkazné xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx poškození, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx poškození xxxx xxxxxx x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezy x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x testovaných x xxxxxxxxxxx skupin.

Xxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistické xxxxxx xx xxxxx xxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxx obsahuje xxxx informace, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:

Xxxxxxxxx zvířata:

- xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx x stáří xxxxxx,

- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.,

- xxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx:

- podrobné údaje x přípravě, stabilitě x homogenitě testované xxxxx,

- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx aplikace testované xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x kvalitě xxxx,

- xxxxxxxxxx vybrané xxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx údajů x xxxxxxxx, xxxxxx x fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx doby xxx xxxxx na biochemické xxxxxxxxx, je-li xxxx xxx 24 a 48 xxxxx.

Výsledky:

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxx bez xxxxxx (NOAEL),

- xxxxxxxxx, stupeň a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx),

- podrobný xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx možné.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx

4. XXXXXXXXXX

Xxxx metoda je xxxxxxxxxx x metodou XXXX XX 419.

B.39. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX TG 486, Xxxxxxxxxxx DNA Xxxxxxxxx (XXX) Test Xxxx Xxxxxxxxx Liver Xxxxx Xx Vivo (1997).

1.1 XXXX

Účelem xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX) x savčích xxxxxxxxx buňkách xx xxxx xx xxxxx xxxxx, vyvolávající xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx pokusných xxxxxx (1) (2) (3) (4).

Xxxxx xxxx xx xxxx představuje xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx DNA x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx obvykle xxxxxxx xxxxxx metabolismu xxxxxxxxxxxxx sloučenin; jsou xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX in vivo.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, že xx xxxxxxxxx látka do xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx tento xxxx xxxxxx.

Výsledek neplánované xxxxxxx DNA (UDS) xx hodnotí tak, xx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x buňkách, xxxxx xxxxxxxxxxxx plánovanou (X-xxxx) xxxxxxxx XXX. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, při xxxxx xx autoradiograficky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (³H-TdR). Xxx xxxxx XXX in xxxx xx nejčastěji xxxxxxxxx xxxxxxx játra. Xxxx xxxxx než xxxxx se sice xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx metody.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx XXX, xxx jsou v xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx UDS xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 bází), xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxxx" (1 - 3 xxxx) xx xxxx xxxxxxx. Xxxx může xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx neopravení, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx XXX. Xxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxx nic x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Mimoto xx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxx s XXX xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx DNA xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx reparačním xxxxxxxx. Xx, že XXX test xxxxxxxxxxx x mutagenní xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxx x xxxxxxxx: net xxxxxxx xxxxx (XXX) xxxxx xxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.

Xxx xxxxxxx xxxxxx (XXX): xxxxxxxxxxxxx xxxx XXX xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx UDS, xxxxxxxxx jako xxxxxx xxxx xxxxxx xxx x xxxxx (XX) x průměrným xxxxxx xxx v cytoplasmě (XX): XXX = XX - XX. Xxxxx XXX xx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxx a následně xxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (xxxxxxxxxxx DNA xxxxxxxxx, XXX): opravná xxxxxxx XXX xx excizi x odstranění xxxxx XXX obsahujícího xxxxxx xxxxxxxxx vyvolaného chemickou xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 PRINCIP XXXXXX

Xxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx excizi x xxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx působením. Xxxx xxxxxxx obvykle x inkorporace ³H-TdR xx XXX xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx nízkým xxxxxx buněk v X-xxxx buněčného cyklu. Xxxxxxxxxxx ³X-XxX xx xxxxxxx xxxxxxx autoradiograficky, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx tak xxxxxxxx x interferenci s xxxxxxx v X-xxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx druhu

Xxxxx xx xxxxxxxxx potkani, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx vhodný xxxxx xxxx. Používají xx xxxxx laboratorní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx měly xxx xxxxxxxxx a x xxxxxxx pohlaví nemají xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.

Vlhkost by xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x po dobu xxxxxxxxx pěti dní xx zvířata xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx toho, xxx x kde xxxx xxxxx umístěny.

1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx x xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx před podáním xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xx xxxx podáváním ředí. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx neovlivní.

1.4.3 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.3.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x používaných xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx s testovanou xxxxxx chemicky xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se ne xxxxxx xxxxx rozpouštědlo, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx údaji x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx použito vodné xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.

1.4.3.2 Xxxxxxxx

Xx každého xxxxx je xxxxx xxx každé pohlaví xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xx xxxxxxx xx všech skupinách xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx spontánní xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivaci xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx odezvě (4). Xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx byly xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx látky xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx patří xxxxxxxxx:

Xxxx xxxxxx xxxxxx	Xxxxx	XXX	XXXXXX
odběr v xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx)	X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx	62-75-9	200-249-8
xxxxx x intervalu (12-16 xxxxx)	N-2-fluorenylacetamid (2-XXX)	53-96-3	200-188-6

Xx možno použít x jiné xxxxxx xxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx pozitivní kontroly xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.5 POSTUP

1.5.1 Počet x pohlaví zvířat

X xxxxx skupině xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelní xxxxxxx. Xxxxx existuje xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx negativní x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx provádí, xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x týmž xxxxxxxxxx xxxxxx využívajících xxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pouze xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx farmaceutických přípravků, xxxxxxx xx xxxx xx zvířatech odpovídajícího xxxxxxx.

1.5.2 Dávkovací xxxxxx

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx podává jednorázově.

1.5.3 Dávkování

Xxxxxxx xx používají xxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx známky toxicity, xx při xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxx letální účinek. Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.

Látky, jež x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx a xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, protože xxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx, xx xxxxx xx realizovat x xxxx xxxxxxxxxx x za použití xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, pohlaví a xxxxxxxxx režimu, xxxx xx xxx použijí x xxxxxx xxxxxx.

Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx také definovat xxxxx xxxxxxxxxxxx určité xxxxxx toxicity v xxxxxxx (xxxx. pyknotická xxxxx).

1.5.4 Limitní xxxx

Xxxxxxxx test xxx dávce minimálně 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xxxxxx v jedné xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x jestliže xx xx xxxxxxx xxxxx o strukturně xxxxxxxxxx xxxxxxx neočekává xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx úplná xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx v limitním xxxxx vyšší xxxxx.

1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vpravuje žaludeční xxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx cesty. Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xx tím xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx oběhem. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, závisí xx xxxxxxxxx pokusného xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx organismu; xxxxx dávky xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx látek, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx úrovních xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx objemová xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Xxxxxxxx jaterních xxxxx

Jaterní buňky xx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx 12 - 16 xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx další xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 xxxxxx xx xxxxxx xxxxx), xxxxxx xx xx 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx možno xxxxxx x xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xx-xx to xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx buněk xx obvykle xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx zajistit, xxx xx xxxxxxx disociované xxxxxxx buňky xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx zvířat x xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).

1.5.7 Xxxxxxxxx XXX

Čerstvě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx po xxxxxxx dobu (xxxx. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx inkubují x xxxxx xxxxxxxxxxx ³X-XxX. Po xxxxxxxx xx xxxxxx odstraní( xxxxx xx potom xxxxx inkubovat x xxxxx obsahujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (tzv. "xxxx xxxxx"). Xxxxx xx xxx promyjí, fixují x xxxxxx. Při xxxxxxx inkubačních xxxxxxxxxxx xxxxxx se "cold xxxxx" xxxxxxxx. Sklíčka x xxxxxxxxx xx xxxxxx do autoradiografické xxxxxx, xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xx xxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxxx v xxxxxxxxxx), xxxxxxxx, obarví x počítají se xxxxxxxxxx stříbrná xxxx. X xxxxxxx jedince xx xxxxxxxx dva xxxx tři preparáty.

1.5.8 Xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx obsahovat dostatečný xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zjevné xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx úroveň xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).

Preparáty se xxxx počítáním xxx xxxxxxxx. Vždy xx xxxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx x xxxxxxx jedince xx xxxxxxx xxxxxxx 100 buněk; pokud xx xxxxx xxxx xxx 100 xx xxxxxxx jedince, musí xx být zdůvodněné. Xxx xxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x X-xxxx, ale xxxxx buněk x X-xxxx se registruje.

Xxxxxxx metodou se xxxxxxx xxxxxx inkorporace ³X-XxX do jader x cytoplazmy v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxxxx xxxxx depozice xxxxxxxxxx xxxxx.

2. ÚDAJE

2.1 XXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxx každou buňku, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx a xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx "xxxxxxx xxxxx" (XXX) xxxxxxxxx xxxxx XX od xxxxx XX. Počítají-li xx "buňky x xxxxxx", xxxx být xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx buňky xxxxxx, xxxxxxxxxx x podložena xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx souběžných negativních xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; pokud xx statistické xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx vybrat x xxxxxxxxx ještě xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE VÝSLEDKŮ

Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:

xxxxxxxxx		(X) hodnoty XXX xxx xxxxxx xxxxxxxxxx prahem, xxxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxx xxxx laboratoře
	xxxx	(XX) xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxx než u xxxxxxxx xxxxxxxx
xxxxxxxxx		(X) xxxxxxx XXX xx úrovni/pod xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx
	xxxx	(II) hodnoty XXX xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx souběžná xxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx, xx xx xxxxx vzít v xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx jedinci, xxxxx xxxxx - xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx výsledků xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx reakci xxxxxxxxxxxx faktorem.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx poskytuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nelze xx získaného xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx výsledek xxxxx XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx jaterních xxxxxxx in xxxx xxxxxxxxx XXX, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX in xxxxx. Negativní výsledek xxxxxxx, xx za xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxx poškození DNA, xxx je xxxxx xxxxxx zjistitelné.

Je xxxxx vzít x xxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx dosáhne širokého xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxx určitou xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx vehikula

- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud je xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx rozpětí, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx jednotlivé skupiny.

Xxxxxxxx pokusu:

- xxxxxxxxx a negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,

- xxxxx xx xxxxxx xxx určení rozpětí, xxxx-xx provedena,

- xxxxxxxxxx volby i xxxxx,

- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x podávání testované xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx cílové xxxxx,

- případný převod xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx hmotnosti/den),

- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,

- podrobné schéma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx vzorků,

- xxxxxx zjišťování xxxxxxxx,

- metoda xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x počet xxxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx v xxxxxxx, cytoplazmě x "xxx nuclear xxxxxx" xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx,

- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, bylo-li provedeno,

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx kontrol,

- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních kontrol xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx "xxxxx x xxxxxx", xxx-xx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxx x X-xxxx, xxx-xx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Závěry.

Xxxxxx X.39. xxxx vložena xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx od 22.6.2001

B.40. XXXXXXX ÚČINKY XX KŮŽI

1. XXXXXX

1.1 XXXX

Xxxxxxxx centrum pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxxxxx Centre xxx xxx Xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxx, XXXXX, Xxxxx Research Xxxxxx, Xxxxxxxx Commission) schválilo xxxxxxx vědecky validní xxx xxxxx in xxxxx xx leptavé xxxxxx na xxxx: xxxx xx principu xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx elektrického xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, XXX) a xxxx xxxxxxxxxxx modelu lidské xxxx. Validizační xxxxxx XXXXX xxxxxxxxx, xx xxx testy dokáží xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx leptajícími x neleptajícími xxxx. Xxxxxx test xxxxxxxxxxx x modelu xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kůže X35, x ostatní látky xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kůže, X34). Xx uveden xxxxx x xxxxxxx xxxx testů; xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxx uživatele.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kůže xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx.

1.3 XXXXXXXXXX LÁTKY

Žádná xxxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxx. 1.5.3.4 x 1.7.2.3.

1.4 PRINCIP XXXXXX - TEST XXX XX KŮŽI POTKANA

Testovaný xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx xx 24 hodin na xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx z xxxxxxx potkanů utracených xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxx leptavé xxxxxx, jsou xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx normální xxxxxxxxx x xxxxxxxxx funkce xxxxxx corneum.Tato xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx inherentního transkutánního xxxxxxxxxxxx xxxxxx (TER) xxx xxxxxxx prahovou xxxxxxx (5xΩ) (4) (5). Dráždivé x xxxxxxxxxx xxxxx TER xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. V případě xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx viz v xxx. (6)) xx xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxx zařadit test xxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx se u xxxxxx typů xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (2) (7).

1.5 XXXXX XXXXXX - TEST XXX XX KŮŽI XXXXXXX

1.5.1 Xxxxxxx zvířata

Pro přípravu xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx mladí (20 xx 23xxxxx) xxxxxxx, Xxxxxx xxxx srovnatelný xxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx se xxxxxxx odstraní xxxx x xxxxxxxx x xxxxx plochy. Xxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxx otíráním x xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx streptomycinu, penicilinu, xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxx xx prvním xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx znovu x xxxxx 3 dní xx xxxxxxx. Pro xxxxxxxx kožních vzorků xxxxxxx být xxxxxxx xxxxxx xxx 31 xxx.

1.5.2 Příprava xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx. Kůže xx xxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxx, x to xxxxxxxxxxx xxxxxxx x trubici. Xxxx xxxxx xxxxxxx xx přetáhne gumový X-xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx připne, x xxxxxxxxxx xxxx se xxxxxxx. Xxxxxxx trubice x X-xxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Gumový X-xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx ke xxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx obsahující xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX), kde je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx. 2).

1.5.3 Xxxxx xxxxxxx

1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xx-xx testovaná xxxxx x tekutém xxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx xx stavu xxxxxx, xxxxxx se xx terčík x xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx pokryl xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx mít s xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X některých xxxxxxx látek toho xxx dosáhnout xxxxxxxx xxxxx xx 30 ^xX, aby xx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx materiálu xx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxx každou xxxxx. Látka se xxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (xxx xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx vodovodní xxxx xxxxx xxxxxxxxx 30 ^xX tak xxxxxx, xxxxx se látka xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx v xxxxxxx xxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx vody xxxxx xxxxxx 30 ^xX.

1.5.3.2 Xxxxxx XXX

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (TER) xx xxxx pomocí xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx proud (xxxx. AIM 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx měřením xxxxxxxxxxxx odporu se xxxxx povrchové napětí xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% ethanolu, xxxxxx se pokryje xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx ethanol xxxxxxxx xxx, že xx xxxxxxx xxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 154 xX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx můstku xx xxxxxxx xx obě xxxxxx kůže a xxxxx se odpor x xΩ/xxxxxx (xxx. 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx pod xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obr. 1. Xxxxxx vnitřní (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx XXXX xxxxxxx xxx, xxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx elektrody. Xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx do receptorové xxxxxxx xxx, aby xxxxxx xx xxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mezi xxxxxx xxxxxx pružinové xxxxxx x xxxxxxx XXXX xxxxxxx (obr. 1), xxxx vzdálenost xx vliv xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx xxxxxxxx xxxxx vyšší než 20 xΩ, xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, například tak, xx se XXXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x rukavici x xxxxxx 10 xxxxxx xx protřepává, roztok xxxxxx hořečnatého xx xxxxxx a xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x čerstvým xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx TER xx xxxxxxxxxxx, pokud xxxxxxx xx souběžné xxxxxxxxx a negativní xxxxxxxx leží x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxxx. Navrhované xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx popisovanou xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxx:

&xxxx; Xxxxxxxx	&xxxx; Xxxxx	&xxxx; Xxxxxxx odporu (xX)
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; 10 M xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36%)	&xxxx; 0,5 - 1,0
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; xxxxxxxxxxx xxxx	&xxxx; 10 – 25

1.5.3.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx aktivní xxxxx x neutrální xxxxxxxxx látky

Pokud xx xxx xxxxxxxxx povrchově xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx hodnota XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 kΩ, xxx xx xxxx tkáni xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx se nejedná x výsledky xxxxxxx xxxxxxxxx (2).

1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B

Po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx na 2 xxxxxx xx 150 μx 10% (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx kůže xx xxx xxxxxx xx xxxx 10 sekund xxxxxxxxx xxxxxxx proudem xxxxxxxxx xxxx, která xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx) xxxxxxx. Každý xxxxxx kůže xx xxx opatrně xxxxx x XXXX xxxxxxx x uloží xx xxxxxxx (xxxx. xx 20 ml xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx vody. Xxxxxxx xx xx xxxx 5 xxxxx jemně xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx zbytky xxxxxxxxxxxx (nenavázaného) barviva. Xxxxx oplach xx xxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx do xxxxxxx x 5 ml 30 % (w/v) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x destilované xxxx, xxx xx xxxx noc xxxxxxxx xxx xxxxxxx 60 ^xX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx vyjmou x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxx 8 minut při xxxxxxx 21 ^xX (xxxxxxxxx odstředivá xxxx ∼ 175). Xxxxxx 1 xx supernatantu xx xxx xxxxx 30 % (x/x) xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (v/v) (xx. 1 ml xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx SDS). Xxxxxxx denzita (XX) xxxxxxx se xxxx xxx xxx 565 xx.

1.5.3.3.2 Výpočet xxxxxx xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B x terčíku se xxxxxxxx z xxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx sulforhodaminu X xxx 565 xx xxxx 8,7 . 10⁴; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Obsah xxxxxxxxxxxxxx B se xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx kůže xxxxxx x xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx. Průměrná xxxxxxx xxxxxxxxxx barviva xx akceptována za xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx metody. Xx xxxxxxxxxxxxxx rozmezí xxxxxx xxxxxxx xx u xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx považují:

Kontrola	Látka	Rozmezí xxxxxx xxxxxxx (xx/xxxxxx)
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; 10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	&xxxx; 40 - 100
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; xxxxxxxxxxx voda	15 – 35

1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxx zvolit xxxxxx xxxx působení xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx kůže (např. 2 xxxxxx) xx xxxxxx rozlišení xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Ve xxxxxxxxxxx studii xxxx xxxx xxxxxxxx, že xxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx některých xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx xx terčíky xxxx xx 2 xxxxxx (2), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x neleptajících látek xx 24hodinovém xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xxx ovlivněny xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zkušební xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Prahová xxxxxxx xxx leptavé xxxxxx 5 xΩ xxxx xxxxxxxxx xx základě xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx aplikaci xxxxxxx xxxxxxxxx zde. Pokud xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx výrazně xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx okalibrovat metodiku x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx řady xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx validační xxxxxx (3).

1.6 XXXXXXX XXXXXXXX METODY - XXXX X XXXXXXX XXXXXX KŮŽE

Testovaný xxxxxxxx xx nanáší xxxxxxx xx xxxx xx 4 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx model lidské xxxx, xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx podle xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx stanovené například xxxxxx "XXX xxxxxxxxx xxxxx" (XXX = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 xxxxxxx tetrazolium xxxxxx) pod prahovou xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx expoziční xxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x předpokladu, xx xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx xxxx xx, xxxxx dokáží proniknout xxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx xxxxx) x jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx přivodily xxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX S MODELEM XXXXXX XXXX

1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx

Xxxxxx lidské xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx corneum s xxxxxxxxxxx vrstvou xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx corneum xxxx xxx xxxxxxxxx zachována. Xx lze xxxxxxxx xxx, že xxxxx xxxx rezistentní vůči xxxxxxxxxxxx xx nanesení xxxxx, x xxxxx xx xxxxx, xx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx za xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxx, xxx xx dalo xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx buněk (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx MTT, tj. XX xxxxxxxx) po xxxxxxxx xxxxx použité xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx mezích xxx xxxx xxxxx. Podobně x případě xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu (xx srovnání x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx spadat do xxxxxxxx mezí. Xx xxxxx důležité, aby xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx predikční xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (2).

1.7.2 Xxxxx xxxxxxx

1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx-xx testovaná látka xxxxxx, nanese se xxx, xxx pokrývala xxxxxx xxxx (minimální xxxxxxxx 25 (μ/cm²). Xx-xx xxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxx, x xxxxxxxx xx zvlhčí, xxx xx x xxxx xxxxxxxx dobrý xxxx. Pokud xx xx třeba, xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx roztírají xx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx, xx je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx látek (2). Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxx kůže xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.7.2.2 Xxxxxx životnosti xxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx redukce XXX, x xxxxx xxxx xxxxxxxxx že x xxxxxxx laboratořích xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx kůže xx xx xxxx 3 xxxxx ponoří do xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 mg/ml xxx teplotě 20 - 28 ^oC. Xxxxxxxxx modrý xxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx rozpouštědlem) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxx XX xxx vlnové xxxxx 545 x 595 xx.

1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx model kůže x xxxxxx xxxxxxxx xxxx působení, xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. xxxx xx životnost xxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx okalibrovat xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x látek xxxxxxxxx xx validizační studii XXXXX (3). Je xxxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx, že xx použitá xxxxxx xx použití široké xxxxx xxxxx reprodukovatelná xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx v xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, tak xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx kritéria xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx dříve (2) x xxxxxxxx xxxxxx validizační xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx kterém xxxxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx revizí.

2. XXXXX

1.8 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

1.8.1 Xxxx TER xx xxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxx (x xΩ) pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x pro případné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx uvádějí v xxxxxxxxx xxxxx, x xx data xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx a x xxxx vyvozená xxxxxxxxxxx.

1.8.2 Xxxx x modelem xxxxxx kůže

Hodnoty XX x vypočtené procento xxxxxxxxxxxxxxx buněk se xxx testovaný xxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, a xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x z xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.9 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

1.9.1 Xxxx XXX xx xxxx xxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx XXX xxx testovaný xxxxxxxx xxxxx xxx 5 xΩ, xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx-xx hodnota XXX xxxxx nebo xxxxx 5 xΩ x xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx) xx neutrální organickou xxxxx, pak testovaná xxxxx xxxxxxx účinky xx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (detergentů) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx hodnoty XXX nepřesahující 5 xΩ, xxx xxxxxxx xxxxxxx penetrace barviva. Xx-xx xxxxx barviva x terčíku vyšší xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kontrole x 36 % XXx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx má xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx-xx xxxxx xxxxxxx x terčíku menší, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx leptavé účinky xxxx.

1.9.2 Test x xxxxxxx lidské xxxx

Xxxxxxx XX pro negativní xxxxxxxx představuje 100% xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Z xxxxxx OD xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx procentuální xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx odděluje látky, xxxxx nezpůsobují poleptání xxxx, od xxxx, xxxxx poleptání způsobují, xxxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivé xxxxx leptavých vlastností, xxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, než xx metoda xxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxx, že je xxxx hraniční hodnota xxxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x průběhu pokusu

Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxx xxxxx:

- xxxxxxxxxxxxx údaje, xxxxxxxxx xxxx, popřípadě xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx; pokud xx používají xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx i xxx xx.

Xxxxxxxx xxxxxx

- xxxxxxxx popis použitého xxxxxxx,

- popis a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx TER) xxxx xxxxxxxxxxxx podíl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx x xxxxxxx lidské xxxx) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxxx pro všechny xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Xxxxxxx 1

Obrázek 2

Xxxxxx X.40. byla vložena xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx od 22.6.2001

B.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX FOTOTOXICITY 3X3 XXX XX VITRO

1. XXXXXX

1.1 ÚVOD

Fotoxicita xx xxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx (reakce), x xxx xxxxxxx, je-li xxxx poprvé xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látkám x následně xxx xxxxxx, nebo xx-xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx x rámci xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dané xxxxxxxxx xxxxx, tedy xx xxxxxxxx, xxx daná xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x viditelnému záření xxxxxxxxxxx xxxxx nebezpečí xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx kombinovaným působením xxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx aplikaci x xxxxxxxxxx v xxxx, x xxxxxxxxxx, jež xxxxxx jako fotoiritanty xx xxxxxxxx nanesení xx pokožku.

Test xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx projektu XX/XXXXXX z xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx vůči xxxxxx xxxxxxxxxx testům xx xxxx. X xxxx 1996 doporučila xxxxxxxx xxxxxx XXXX xxxxxxx následných in xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).

Xxxxxxxx xxxxx fototoxicity 3T3 XXX xx xxxxx xxxx porovnávány x xxxxxxxx účinky fototxicity/fotoiritace xx xxxx x xxxxxx x xxxx x bylo zjištěno, xx xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx vynikající predikční xxxxxxxxxx. Xxxx není xxxxxxx k xxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx x kombinovaného xxxxxxxx xxxxx a xxxxxx vzniknout, xxxx xx fotogenotoxicita, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, i xxxx řada látek xxxx specifické vlastnosti xxxxxxxx, xxxxxxx při xxxxx fototoxicity 3T3 XXX in vitro xxxxxxxxx. Test není xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx hodnocení xxxxxx fotoxicity.

Sekvenční přístup xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látek xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX) xx viditelného xxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxx; xxxxxx ve X/x² nebo x XX/xx².

Xxxxx světla: xxxxxxxx (= intenzita x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (UV) xxxx xxxxxxxxxxx (VIS) xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (= X x s) xx xxxxxxxx xxxxxxx, např. X/x² xxxx X/xx².

Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxx XXX (Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xx X'Xxxxxxxxx) xx xxxxxxx xxxxxxxx XXX (315 - 400 xx), UVB (280 - 315 xx) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx xx i xxxx xxxxxxxx: xx xxxxxxx mezi xxxxx XXX x XXX xx xxxxx xxxxxxxx 320 xx x XXX xx xxxxx xxxx xx UV-A1 x XX-X2 x xxxxxxx zhruba u 340 nm.

Životaschopnost (xxxxxxxxx) xxxxx: xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx buněčné xxxxxxxx (xxxx. příjem xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx buňku, xxxxxxxxx xxxxxxx, do xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xxxxx xxxxxxxxx měřených xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x celkovým xxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (viabilita) xxxxx: životaschopnost xxxxx xxxxxxxxx x porovnání x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx prošly xxxxx xxxxxxxxxx testu (xxx + UV xxxx - XX), xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx, kterým se xxxxxxxx xxxxx toxicity xxxxxxxxxxxx xx predikce xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxxxxxxx návodu xxx xxxx je xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx k xxxxxxxx fotoxického xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx XXX x XXX.

XXX (xxxxx xxxxxxxxxx factor, fotoiritační xxxxxx): koeficient xxxxxxxxxxxxx xxxxx dvou stejně xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx koncentrací (XX₅₀) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.

XXX (xxxx xxxxx effect, xxxxxxx xxxxxxxxx): nová xxxx xxxxxxxx x matematické xxxxxxx kompletního průběhu xxxx křivek xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX ozáření.

Fototoxicita: akutní xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx expozici xxxx xxxxxx, nebo xxxxxx, xxxxx je obdobně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx: nižší xxxxxx xxxxx "xxxxxxxxxxxx", xxxxxxxx se pouze xxxx fototoxických xxxxxx, x nimž dochází x kůži poté, xx na xx xxxxxx (topicky xxxx xxxxxx xxxxxxx) nějaká xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx vždy x nespecifickému xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxx při xxxxxxxxx xxxxxxx).

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx působení xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxx xx zapotřebí xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx, xxx se xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxx (odezva) s xxxxxxxxxxx projevy, xx xxxxx xxxxxxx xxxx, xx byly xxxxx xxxxxxxxx negenotoxické xxxxx XX/XXX xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx je tumorogeneze xxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

1.3 REFERENČNÍ XXXXX

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx jako xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx testována xxx xxxxx xxxxxx, se xxx zavedení xxxxx xx fototoxicitu 3T3 XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx testu (1) (3) (13).

1.4 PRVOTNÍ XXXXX

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x řady xxxxx (5) (6) (7) (8), xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Podle xxxxxxx xxxxxx fotochemie (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) vyžaduje xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx se xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx metodického xxxxxx, xxxx by se xxxx stanovit xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x XX/XXX oblasti (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXXX x. 101). Xxxxx je xxxxxxx extinkční/absorpční xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx^-1 x cm^-1, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx třeba xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky testovat xxx xxxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, ani xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxxxx).

1.5 XXXXXXX METODY

Byly xxxxxxxx xxxxx mechanismy, kterými xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7), xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Proto xx xxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX in xxxxx xxxxxxx xx porovnání xxxxxxxxxxxx látky testované x přítomnosti x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx vyjadřuje jako xxxxxxxxxxxx xxxxxxx pokles xxxxxx xxxxxxxxx barviva, xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx, XX) (9), 24 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.

Xxxxx Balb/c 3X3 se kultivují xx xxxx 24 xxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx látku xx preinkubují xxx xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx x látkou x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx. Jedna x xxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX záření x dávce 5 X/xx² UVA (+UV xxxxxxxxxx), druhá destička xx xxxxxxxx x xxxxx (-XX xxxxxxxxxx). X obou xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x po xxxxxxx 24 hodinách kultivace xx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx xxxxxx, XXX) xx dobu 3 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx kontrol. X posouzení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx reakce xxxxxxx x přítomnosti (+XX) x v xxxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx XX₅₀, xx. xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx životaschopnost xxxxx o 50 % v xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx bez xxxxxxxxx.

1.6 KRITÉRIA XXXXXXX

Xxxxxxxxx xxxxx vůči xxxxxx XXX, xxxxxxxxxx xxxxx: x buněk xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX. Buňky xx xxxxxx v xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx testu xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx vitro, xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxx XXX v xxxxx 1 - 9 J/cm² a xxxxx den xx xxxxxx NRU stanoví xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxxxx xx ozáření dávkou XXX xxxxxx 5 X/xx² xxxx xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx kontrolních xxxxxx xxxxxxxxxxxx v temnu. Xxx xxxxxxxx dávce XXX xxxxxx 9 X/xx² xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx nižší xxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx zhruba xx každé desáté xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vůči xxxxxx XXX, xxxxx xxxx: xxxx splňuje xxxxxxxx jakosti, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx [Xxxx´x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, XXXX] x 1 % xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxxx (XxXX) xxxx bez xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+UVA) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% v xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxx x rámci xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX).

Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxxx optická xxxxxxx (XX_{540 XXX}) xxxxxx x XX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, zda xxxxx 1 x 10⁴ xxxxx nasazených x xxxxx jamce xxxxxx xxxxx dvou xxx xxxxx s normální xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Test xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxxx xxxxxxx XX_{540 NRU} u xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx 0,2.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro je xxxxx xxxxxxx souběžný xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx látkou. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx jako xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (XXX); xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxx XXX testovaný xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxxx xxxxxxxxxx tato xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: XXX xxxxxxx (+XXX): XX₅₀ = 0,1 - 2,0 μx/xx, XXX xxxxxxxxx (-UVA): XX₅₀ = 7,0 - 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX), tzn. xxxxx xxxxxxx EC₅₀, xx xxx xxxxxxxxx 6.

Xxxxx XXX xx xxx souběžnou xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxx známé xxxxxxxxxxx látky, pokud xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx skupiny xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx) látky. X xxxxxxx případě je xxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx adekvátně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX₅₀ x PIF xxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxxxx).

1.7 POPIS XXXXXX

1.7.1 Xxxxxxxx

1.7.1.1 Buňky

Při validační xxxxxx byla použita xxxxxxxxxxxxx buněčná xxxxx xxxxxx fibroblastů Xxxx/x 3X3 xxxx 31, x xx xxx x XXXX xxxx x XXXXX; xx xx proto xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx dají x xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx linie, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx jejich xxxxxxxxxxxx xxxxxx; je xxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx.

X buněk je xxxxx pravidelně xxxxxxxxxxx, xx nejsou kontaminovány xxxxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxx jen x xxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxx buněk xxxx XXX xxxxxx xxxx x počtem xxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx buňky Xxxx/x 3X3 x xxxxxx x nejnižším xxxxxx, pokud možno xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx buněk Xxxx/x 3X3 xxxx XXX xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, a xx xxxxxxxx kontroly xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx návodu.

1.7.1.2 Xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vhodná kultivační xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx Balb/c 3T3 xx xxxxx o XXXX xxxxxxxxx 10 % xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 mM xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx ve vlhkém xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 ^oC / 7,5 % CO₂. Xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx historickém xxxxxxx xxx xxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxx.

1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxxx zásobních xxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxx hustotě v xxxxxxxxxxx médiu a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx pasážují.

Pro xxxx xxxxxxxxxxxx xx buňky xxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxx, aby na xxxxx xxxxx (xx. xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxxx) xxxxxxx xx xxxxxxxxxx (xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, jednolitou xxxxxx xxxxx). X xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x 96 jamkami xx xxxxxxxxxx hustota 1 x 10⁴ xxxxx x xxxxx xxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxx identicky na xxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxx celým xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxx xxxx, kdy xx jedna x xxxxxxxx xxxxxxxxx (+UVA/VIS) x druhá je xxxxxxxxxx v xxxxx (-XXX/XXX).

1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace

Zatímco xxx všech xxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx genotoxického xxxx xxxxxxxxxxxxxx potenciálu xx xxxxxxx xxxxxxxxxx použití xxxxxxxxxxxxxxxx systému, xxxx x případě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, xxx xx x xxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xx xxxxx, bylo metabolické xxxxxxxxxxxx zapotřebí. Nepokládá xx xxxxx xxx xx xxxxx, ani xx vědecky odůvodněné, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.7.1.5 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx

Xxxxxxxxx látka xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxx stabilitě prokazují, xx xx xx xxxxxxxxx. Pokud je xxxxxxxxxxxxx, xx by xxxxx x fotodegradaci, xxxx se příprava xxxxxxxx pod červeným xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (XXXX) xxxx xx fyziologickém xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (phosphate xxxxxxxx xxxxxx, PBS), xxxxx - aby xxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxx ozařování - xxxxx obsahovat xxxxx proteinové xxxxxx xxx barevné xxxxxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xx testovaná xxxxx xx xxxx omezeně xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xx vhodném rozpouštědle x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, než xx xxxxxxxxxx konečná xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx používá xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, xx. ve xxxxx koncentracích xxxxxxxxx xxxxx x v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxx rozpouštědlo xx doporučuje xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo xxxxxxx (XxXX). Xxxxxx xxxxx xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx aceton, xx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vlastnosti, xxxx je xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxx míchání xxxx. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 ^xX.

1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX xxxxxxx / xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxx světelného xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx klíčovým xxxxxxxx. Xxxxxx v XXX x xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx xxxxxx XXX xx v tomto xxxxx méně xxxxxxxxxx, xx přímo xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xx 313 xx x 280 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx vlnové xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xxx byla xxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx) xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Dále xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx nepatřičně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).

Xx optimální xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, jimiž xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxxxx se používají xxxxxxxx xxxxxxx a xxxx (vysokotlaké) xxxxxxx xxxxxxxxxx výbojky - xx xxxx xx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx však xxxxxxx xxxx. Jelikož všechny xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXX, xx xxxxx xxxxxx filtrovat tak, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx zeslabilo.

Pro xxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro xx xxxxx použít xxxxxxxx záření, kde xx xxxxxx UVB xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XXX:XXX ∼ 2 : 1). Příklad xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx filtrovaného záření xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xx v xxxxx (3).

Xxxxxxxxxx: intenzita xxxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxx pravidelně xxxx xxxxxx testem xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru, který xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx UV-metru xx xxxxx xxxxxxxxxxx, k xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx XX-xxxx téhož xxxx x kalibrace. Ideální xx, xxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx spektrální xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx světelného xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx širokopásmového XX-xxxxx xxxxxx spektroradiometru; taková xxxxxxxxxxxxx ovšem xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx obsluhu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx XXX xxxxxx 5 J/cm² xx xxx buňky Balb/c 3X3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx dostatečně silná, xxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx během 50 xxxxx, xxxx xxx iradiance xxxxxxxxx xx 1,666 xX/xx². Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx zdroj xxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx XXX upravit xxx, xxx buňky xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx podle vzorce:

	dávka xxxxxx (X/xx²) x 100	&xxxx;
&xxxx; x (xxx) =	________________________	(1 X = 1 X x)
&xxxx;	&xxxx; xxxxxx (xX/xx²) x 60	&xxxx;

1.7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx fototoxické xxxxx byly detekovány xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx koncentracích xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (13). Hodnota xX xxx xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).

Xxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxx použití xxxxxx (+UVA) a xxx něj (-XXX) xx třeba xxxxxxxx x xxxxx předběžných xxxxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx tak, xxx křivky xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx geometrická xxxx (s konstantním xxxxxxxx xxxxxx).

1.7.3 Xxxxx xxxxxxx

1.7.3.1 První xxx

Xxxxxxxx xx suspenze 1 x 10⁵ xxxxx/xx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxx 96xxxxxxx mikrotitrační xxxxxxxx xxx tkáňové kultury xx odpipetuje xx 100 μx samotného xxxxx (= xxxxx xxxxx), xx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xx 100 μl xxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxx 1 x 10⁵ xxxxx/xx (= 1 x 10⁴ xxxxx xx jamku). Xxx každou testovanou xxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxx - xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-XXX), xxxxx xxx xxxxxxxxx fotocytotoxicity (+XXX).

Xxxxx xx xxxxxxxx xx dobu 24 xxxxx (7,5 % XX₂, 37 ^xX), xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx monolayer. Xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x adherenci xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.

1.7.3.2 Xxxxx xxx

Xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx médium x xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx dvakrát xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX xx xxxxxx xxxxx. Xxxxx se 100 μx EBSS/PBS xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx rozpouštědlo (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx inkubují x xxxxx xx xxxx 60 xxxxx (7,5 % CO₂, 37 ^xX).

Xxxx testu s XXX (+XXX) se xxxxxxx tak, xx xx xxxxx za xxxxxxxx teploty xxxxxxx xx xxxx 50 xxxxx xxxx víčko xxxxxxxx x 96 xxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx² (= xxxxx 5 / xx²). Xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx vody pod xxxxxx, je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-UVA) xx xx dobu 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx UVA) xxxxxxxxxx xx pokojové xxxxxxx x xxxxxx xxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx (18 - 22 xxxxx) se xxxxxxxx (7,5 % XX₂, 37 ^xX).

1.7.3.3 Třetí xxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxxx pod xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx se změny xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, aby xx eliminovaly experimentální xxxxx, xxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (XX)

Xxxxx xx xxxxxxx objemem 150 μx xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Promývací xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Přidá xx 100 μl média x XX x xxxxxxxx se při 37 ^xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 7,5 % CO₂ xx xxxx 3 xxxxx.

Xx xxxxxxxx xx xxxxxx x XX xxxxxxxx x buňky xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX, xxxx se pak xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx).

Xxxxx xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx na xxxxxxxx XX (čerstvě xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx 10 xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, dokud xx XX x xxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx.

Xx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx optická hustota xxxxxxxx XX při 540 xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx formátu (xxxx. XXXXX) xxx xxxxx xxxxxxx.

2. XXXXX

1.8 XXXXXXX X XXXXXXXX XXXXX

Xxxxx xxxx umožňovat xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxx xxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxx xx. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, koncentrační xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx vyjádřit xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxx xxx až xx xxxxxxxxxx limitní xxxxxxxxxxx 100 μx/xx x experimentu ve xxx (-XXX) xxxxxxxxxxxxx, xxx při xxxxxxxxx (+XXX) vysoce cytotoxická, xxxx dojít x xxxx, že se xxxxxxxxxxxx rozsahy x xxxx částech experimentu xxxxx xxxxx řádově xxxxx, xxx byl xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx. Pokud xxxx xxxxxxxxxxxx zjištěna x žádné x xxxx částí xxxxxxxxxxx (xxx xxx -XXX, xxx xxx +XXX), xxxxxxxxx testování x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx dávkami xx xx nejvyšší xxxxxxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxx hraniční - xxxxxx dělicí xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx třeba xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx testu xx potřebné, může xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx jasného xxxxxxxx. Klíčovou proměnnou x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, nejvhodnější xxx xxxx xxxxxxxxx xx variace xxxxxx xxxxxxxx (spolurozpouštědlo, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx). Xxx také xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. U xxxxx, xxx jsou ve xxxx nestálé, xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx.

1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx x 50 % inhibici buněčného xxxxxx XX (EC₅₀). Xx xxx xxxxxx xxx, xx xx xx xxxx xxxxxxxxxxx - odezva xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx regrese (nejlépe Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (14). Než xx xxxxxxx XX₅₀ xxxxxxx xxx xxxxx výpočty, xx xxxxx zkontrolovat xxxxxxx xxxxxxxxx. K xxxxxxx xxxxxxx XX₅₀ xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx metody. X xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx papír (xxx x: log, osa x: xxxxxx), xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.

1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX XXXXXX)

1.10.1 Xxxxxxxxx xxxxx, verze 1: fotoiritační faktor (XXX)

Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva jak xx xxxxxxxxxxx (+XXX), xxx za nepřítomnosti (-XXX) xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx faktor (XXX) xxxxxxxx podle xxxxxx

&xxxx;	&xxxx; XX₅₀ (-XX)
&xxxx; (x) XXX =	&xxxx; ____________
&xxxx;	&xxxx; XX₅₀ (+XX)

XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx žádný fototoxický xxxxxxxxx, xxxxxx PIF ≥ 5 fototoxický xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX, xxxxxx xxx -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx XXX xxxxxxxxx, x xxxx xx jedná o xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx má xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xx vypočítat xxx. "&xx; XXX", když xx xxxx xxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxxx xx xx maximální zkušební xxxxxxxxxxx (X_xxx) a xxxx xxxxxxx se xxxxxx do xxxxxx:

&xxxx;	&xxxx; X_xxx (-XX)
&xxxx; (x) > XXX =	&xxxx; ___________
&xxxx;	&xxxx; XX₅₀ (+XX)

Xxxxx xx xx vypočítat xxxxx "&xx; XXX", xxx xxxxx hodnota > 1 předpovídá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx nedá xxxxxxxxx ani XX₅₀ (-XX), ani EC₅₀ (+XX), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx cytotoxicitu xx xx xxxxxxxx zkušební xxxxxxxxxxx, xx to xxxxxxxx toho, xx xxxxx xxxx žádný xxxxxxxxxxx potenciál. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx "XXX = *1", xxxx xx charakterizuje xxxxxxxx

&xxxx;	&xxxx; X_xxx (-XX)
&xxxx; (x) XXX = *1 =	&xxxx; ___________
&xxxx;	&xxxx; X_xxx (+XX)

Xxxxx xx dá získat xxxxx hodnota "XXX = *1", předpovídá xx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

X xxxxxxxxx (b) x (c) je xxxxx při predikci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx, jichž xx xxx testu dosáhlo.

1.10.2 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 2: střední xxxxxxxxx (XXX)

Xx xxxxx xxxx xxxxxx novější xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, vypracovaného xx použití xxx x validační xxxxxx XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxx xx xxxxx x látek UV xxxxxx (13). V xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx omezení modelu XXX x těch xxxxxxxxx, xxx nelze xxxxxx hodnotu XX₅₀. X xxxxx modelu xx xxxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxx fotoefekt" (MPE) xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx XXX xxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxx speciální xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx.

1.11 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx (XXX ≥ 5 nebo MPE ≥ 0,1) ukazuje, xx daná xxxxx xx xxxxxxxxxxx potenciál. Xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxxx dojde xxx koncentracích xxxxxxx xxx 10 μg/ml, xx pravděpodobné, xx xxxxx bude xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (100 (x/xx), xxxx xxx xxxxxxxxx nebezpečnosti xxxx xxxxxxxxxxx schopnosti xxxx xxxxx nejspíše xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx mohou spadat xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx x možné xxxxxxxxx látky v xxxx, nebo xxxxx x testování xxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx alternativním xxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro (XXX &xx; 5 xxxx XXX &xx; 0,1) ukazuje, xx xxxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxxxxx xxx použité xxxxx buňky x xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx by xx látka xxxx xxxxxxxx i při xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, negativní xxxxxxxx xxxxxxx, že xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a fotoxicita xx xxxx se xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx byly xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (XX₅₀ + XX x XX₅₀ - XX), xx interpretace xxx xxxxxx. Naproti xxxx xxxxx xxxxxx prokázána xxxxx xxxxxxxx (+UV xxx -XX) a xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx nedalo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx látku xx ne zcela xxxxxx x mělo xx xx xxxxxxxx x jiném, xxxxxxxxxxxx xxxxx (například s xxxxxxxx modelu xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xx xxxx xxxx in xxxx).

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxx xxxxx:

- xxxxxxxxxxxxx údaje x xxxxx CAS, xx-xx xxxxx,

- fyzikální xxxxxx x xxxxxxx,

- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx x provedení xxxxx důležité,

- xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, jsou-li xxxxx.

Xxxxxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxx rozpouštědle,

- xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx (EBSS xxxx XXX).

Xxxxx:

- xxx x xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxx ozařovacího xxxxxxxx, jež se x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X XXX xx xxxxx používá.

Podmínky xxxxxx (x) - xxxxxxxx před xxxxxxxxxx x xx xxx:

- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX₂, xxxxxxx, vlhkost),

- xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx před xx a xx xx).

Xxxxxxxx pokusu (x) - xxxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx použijí v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx x xxx xxx,

- x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx x absence xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxx x složení xxxxxxxxxx xxxxx (pufrovaný solný xxxxxx),

- xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxx charakteristika xxxxxx xxxxxxxxxx zdroje,

- xxxxxxxxxxxxxxx propustnosti/absorpce xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx),

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxx UVA (x x W/cm²) při xxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx UV/VIS xxxxxx,

- xxxxx xxxxxx UVA (xxxxxxxxx x xxx) x X/xx²,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx uchovávaných v xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxx XXX:

- xxxxxxx xxxxx s XX,

- doba inkubace x NR,

- inkubační xxxxxxxx (koncentrace CO², xxxxxxx, xxxxxxx),

- podmínky xxxxxxxx XX (xxxxxxxxx xxxxxxx, doba extrakce),

- xxxxxx xxxxx, při xxxxx se spektrofotometricky xxxxxxxxx xxxxxxx hustota XX,

- xxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx-xx xxxxxxx,

- xxxxxxx srovnávacího xxxxxxx xxx spektrofotometrii (xxxxxx), xxxxx byl xxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx jednotlivých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, vyjádřená x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx kontrol,

- xxxxxx koncentrace - xxxxxx (xxxxxxxxxxx testované xxxxx νx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk) získané xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +XXX x -XXX,

- xxxxxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX₅₀ (+XXX) x EC₅₀ (-XXX),

- xxxxxxxxx obou xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx získaných za xxxxxxx xxxxxxxxx UV/VIS xxxxxxx - výpočtem xxx xxxxxxxxxxxxxx faktoru (XXX) xxxx středního xxxxxxxxxx (XXX),

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,

- kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx testu (x) - xxxxxxxx negativní xxxxxxxx:

- absolutní xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x směrodatná xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxxxx EC₅₀ (+UVA), XX₅₀ (-XXX) x XXX xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx údaje látky xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxx XX₅₀ (+XXX), EC₅₀ (-XXX) x PIF, průměry x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxx X.41. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx od 22.6.2001

Xxxxxxxxx

Xxxxxx předpis č. 251/98 Xx. xxxxx xxxxxxxxx dnem 1.1.1999.

Xx xxxxx tohoto právního xxxxxxxx xxxx podchyceny xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x.:

208/2001 Sb., kterým xx xxxx xxxxxxxx XX x. 251/98 Xx., xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx toxicity chemických xxxxx x přípravků - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx

x účinností xx 22.6.2001

Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Sb. xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 443/2004 Sb. s xxxxxxxxx xx 1.8.2004.

Znění xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx předpisů v xxxxxxxx xxxx aktualizováno, xxxxx xx xxxx xxxxxx derogační xxxxx xxxxx xxxxxxxxx právního xxxxxxxx.

1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) xx x) xxxxxx č. 157/1998 Xx., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

2) Xxxxx č. 246/1992 Sb., xx ochranu xxxxxx xxxxx týrání, xx xxxxx zákonů x. 162/1993 Sb., x. 193/1994 Sb., x. 243/1997 Sb. x č. 30/1998 Xx.

3) Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxx zkoušení xxxxxxxxxx. Xxxxx 4 - xxxx xx zdraví (XXXX Xxxxxxxxxx for Xxxxxxx xx Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Effects).

Plné znění - 251/1998 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Plné znění - 251/1998 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu. Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.