Právní předpis byl sestaven k datu 22.06.2001.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
VYHLÁŠKA
Ministerstva xxxxxxxxxxxxx
xx xxx 16. xxxxx 1998,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
Ministerstvo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §4 odst. 1 xxxx. c) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x chemických přípravcích x o změně xxxxxxxxx dalších xxxxxx:
§1
Tato xxxxxxxx xxxxxxx metody xxx zjišťování xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxx přípravků xxxxxx toxických, toxických, xxxxxx xxxxxxxxxx, žíravých, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxx xxx "xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx").1)
§2
(1) Xxxxxxxx chemických xxxxx x přípravků se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v příloze xxxx xxxxxxxx.
(2) Xx zjišťování xxxxxxxx chemických látek x přípravků xxx xxxxxx x jiné xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx stejně citlivé, xxxxxx x reprodukovatelné xxxx xxxxxx uvedené x odstavci 1, xxxxxxxxxx však metody xxx xxxxxxx pokusných xxxxxx2) x metody xxxxxxxxxx Organizací pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx (XXXX).3)
§3
Xxxx xxxxxxxx nabývá účinnosti xxxx 1. xxxxx 1999.
Xxxxxxx:
XXXx. Xxxxx, CSc. x. r.
Příloha x xxxxxxxx č. 251/1998 Xx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx toxicity xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
X. VŠEOBECNÝ XXXX
1. XXXXXXXX XXXXX
1.1 XXXXXX TOXICITA
xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx objeví xxxxx určité xxxx (xxxxxxxx 14 xxx) xx podání jedné xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 XXXXXX TOXICITA
je xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx xx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxx to xxxxxxxx dostačující xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx by být xxxxxx, xx po xxxxxxx podávané xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx x úmrtí.
1.3 XXXXX
xx xxxxxxxx podávané xxxxxxxxx xxxxx. Dávka xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (gramy xxxx xxxxxxxxx) xxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xx kilogram xxxxxxx xxxxxxxxx), xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (díly na xxxxxx dílů xxxx xxxxxxxxx xx kilogram xxxxxxx).
1.4 XXXXXXXXXXXXXX DÁVKA
xx nejvyšší xx xxxx pevných xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, aniž xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (včetně xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxxx x xxxxxxx látkou.
1.5 DÁVKOVÁNÍ
xx všeobecný termín xxxxxxxxxx dávku, frekvenci x celkovou xxxx xxxxxxxx.
1.6 XX50 (XXXXXXX XXXXXX XXXXX)
xx xxxxxxxxxxx vypočtená xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxxxxxx xxxx xxxx 50 % xxxxxx, xxxxxx xxxx podána. Xxxxxxx XX50 xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XX50 (XXXXXXX XXXXXX KONCENTRACE)
xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxx, která pravděpodobně xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxx po xxxxxxxx x 50 % xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx definovanou xxxx. Xxxxxxx LC50 xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx standardním xxxxxx xxxxxxx (mg.l-1).
1.8 XXXXX
xx xxxxxxx xxx "xx xxxxxxxx adverse xxxxxx level" (xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) a xx xx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx které xxxxxxxxx x zjistitelným xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXX PO XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX TOXICITA
xxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx opakovaného xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx představující xxxxxx úsek xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx příslušného xxxxxxxxxxx druhu.
1.10 XXXXXXXX TOLEROVANÁ DÁVKA (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX XXXX)
je xxxxxxxx xxxxx, která x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx podstatného xxxxx na xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx.
1.11 XXXXXXXXXX XXXX
je vyvolání xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx.
1.12 XXXXXXXXXX OČÍ
xx xxxxxxxx xxxx na xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx oka.
1.13 XXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX)
je xxxxxxxxxxxx vyvolaná xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.14 XXXXXXXXX XXXX
je xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx působení xxxxxxxxx xxxxx po xxxx od 3 xxxxx xx 4 xxxxx.
1.15 XXXXXXXXXXXXXX
xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.16 ABSORPCE
označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx.
1.17 XXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx případně xxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx x xxxx.
1.18 XXXXXXXXXX
označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x těle.
1.19 XXXXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx chemická xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXXX - XXXXXXXXX APLIKACE/SUBCHRONICKÁ A XXXXXXXXX XXXXXXXX
Akutní xxxxxxx účinky a xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1 - B.5), xx kterých může xxx xx jediné xxxxxxxx získán xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
V xxxxxxxxxx xx toxicitě xxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx testu až xx kompletní xxxxxxxxx XX50. Pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxx limitní xxxx navržen, xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx expozice.
Xxxxxxxxx xx měla být xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx utrpení xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx pevné xxxxx (xxxxxx B.1 xxx) a metoda xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1 xxxx). Xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx druhu xxxx studie na xxxxxx druhu doplnit xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. X xxxxx případě xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx aplikací (xxxxxx X.7, X.8 x X.9) se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Důležité xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat xxx, aby xx xxxxxxx co xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx cílové xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx vyžaduje xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxxx (metody X.26 - B.30 x B.33).
3. XXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx trvalých xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxx. Xxxx změny ("xxxxxx") xxxxx postihnout xxxxxx xxx nebo xxxxxxxx xxxx, blok xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx změnou xxxxxx struktury xxxx xxxxx.
Mutagenní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx in vitro xx xxxxxx (bodové) xxxxxx x baktériích (xxxxxx B.13/14) xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v savčích xxxxxxx (xxxxxx X.10).
Xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx B.12) xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (metoda X.11). Je však xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx nebo xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Tyto xxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx: potvrzení xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx.
Pro xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx X.15 až X.25 xxx eukaryontní xxxxxxx xx xxxx x xx vitro, xxx xxxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx poskytují informace x xxxxxxxx mutacích x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx používané x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Obecně platí, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx relevantní xxxxxxxxxx informace x xxxxxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxx daný xxxxxx, xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx bakteriálních a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, metabolického xxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx u xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx detekci xxxxxxxxx účinků x xxxxx savčím xxxxxxxxx, xx už vyvolaných xxxxxxxx (xxxxxxxx) mutacemi, xxxx. specifický xxxxx xxxx u xxxx xxxxxxxxxx mutace xxxxxxxxx xxxxx x první xxxxxxxx (xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx), nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, např. xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxxx X.25). Těchto xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx člověka. Vzhledem xx složitosti xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx potřebných xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx locus test, xx xxxxx se xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx jen na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx stanovení xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
4. XXXXXXXXXXXXX
Chemické xxxxx xxxxx xxx charakterizovány xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx karcinogeny, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx působení.
Předběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu látky xx čerpají xx xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx opakované xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx chronické xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx opakované aplikaci, xxxxxx B.7, x xxxxxxxxxxxxx studie s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zahrnují xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx informace xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx chemické xxxxx x karcinogenním xxxxxxxxxxx, které vyžadují xxxxx, podrobnější xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (metoda X.32) xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.33).
X xxxxxxxxx xxxx xxxxxx testy xxxxxxxxxxxx xxxxx savců, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx souvislost x maligní xxxxxxxxxxxx - in xxxx (xxxxxx B.21). Xxxxxxx xx několika xxxxxxx xxxxxxxxx typů x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx.
5. XXXXXXXXXXX TOXICITA
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxx reprodukčních xxxxxx xxxx schopností xxxxx x xxxxx (xxxx na plodnost) xxxx podle xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinků xx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxx xxxx teratogenitu x xxxxxx x xxxxxxx laktace.
Testovací xxxxxx (xxxxxx X.31) xxx studie xxxxxxxx xx teratogenitu xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx hlavně x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x závislosti na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx podle xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxxxxx metodu xxxxxx xxxxxxx.
Pokud xx xxxxxxxxx třígenerační xxxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx X.35) rozšířit xxx, aby pokryl xxxxx generaci.
6. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx se zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx strukturních a xxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx xxxx periferním xxxxxxxx xxxxxxx. Předběžné xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxx vzejít x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx neurotoxického xxxxxx. Xxxxxx by měla xxxxxx odhalit xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx, hloubkové xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Navíc xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx být xxxxxxxx x jiných studiích xxxxxxxx. Bylo například xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx sloučeniny xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx X.37 x X.38 po xxxxxxxxxxxx xxxx opakovaném xxxxxx xxxxx.
7. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx různými xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx anebo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, které xx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Test toxicity xxx xxxxxxxxx aplikaci (xxxxxx X.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx imunotoxických účinků. Xxxxxx by měla xxxxxx xxxxxxx chemické xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, vyžadující xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8. TOXIKOKINETIKA
Toxikokinetické xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x toxicitě, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx pomoci xxx xxxxxx dalších studií xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx, xx bude x xxxxxx případě xxxxxxxxx xxxxxxxx všechny xxxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nezbytná xxxx posloupnost xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxx sekvenci xxxx xx xxxx ukázat xxxx dostatečná xxxxxx x xxxxxxxxxxxx podáním (xxxxxx X.36).
Informace x xxxxxxxx struktuře x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastnostech xxxxx také xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx. Přispět xxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX
Xxxxxxx testované látky, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nečistot, x její xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx toxikologické xxxxxx.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx informace xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxx skladování.
Vypracování xxxxxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testované xxxxx (x také xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx měl předcházet xxxxxxxx studie.
Všechny xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x chování xxxxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
10. XXXX X XXXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována, x xxxxxxx péče x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX CHOVU
Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx pokusná xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx je vhodná xxxxxxx místnosti 22 xX ± 3 xX při xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxx 20 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu 30 - 70 %.
Xxxxxxx experimentální techniky xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx. Xxx xxxx případy xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx podmínkách uvedeny x popisu xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx je x xxxxx xx x závěrečné xxxxxx x průběhu pokusu.
Xxxxxxxxx má být xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx x tmy xx xxxxxxxx hodinách. Xxxxxxxxxxx týkající xx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx x uvést xx xxxxxx x xxxxxxx pokusu.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx jiný xxxxxx, xxxxx být xxxxxxx chována xxxxxxxxxx xxxx x malých xxxxxxxxx jedinců jednoho xxxxxxx, ne více xxx 5 xxxxxx x jedné kleci.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx x způsobu chovu x klecích a xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x jedné kleci xxx během expozice xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx doby xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX XXXXXX
Krmení xxxx xxxxxxxxx všem xxxxxxxxxx výživy xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x potravě, může xx výživová hodnota xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx takové xxxxxx xx nutno xxxx x xxxxx při xxxxxxxxxxxx výsledků. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x pitné xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxxxx, je xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx prokazatelně xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx přítomny x xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxx projevil.
11. XXXXXXX XXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx metod xxxx xxx věnována xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Snížení xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1.bis) xxxx xxxxxx stanovení xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (X.1.xxxx). Xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx specifického xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x 70 % xxxxxx méně xxx metoda X.1.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx dráždivých xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx testů, xxxxx x testech xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1, X.2 x X.3), xxx xxxx x in vivo xxxxxxx mutagenity (metody X.11 x X.12), xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx možné xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx x jednoho xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx zdůvodnění xxxx být xxxxxxxx xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastnostech xxxxx, na xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxx, byla-li x xxxxxx xxxxxxxxx studie xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx používanou x xxxxxxxx xxxxx (xxxxxx X.3) x xxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže, xxxxx xxxxxxxxx kožní xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4) může xxx xxxxxxxx; látky, xxxxx prokazatelně xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx kožní xxxxxxxxxxx (xxxxxx B.4), xxxxxxx xxx xxxx testovány xx dráždění oka.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a ověřovat xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxx xxxxxxxxxx stejnou xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx využívat xxxxxxx xxxxx zvířat, budou xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx se úplně xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, následnou xxxxxxxxxxx a označování xxxxx podle xxxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxx xxx, xxx xx to xxxxx.
12. HODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX
Při hodnocení x interpretaci xxxxxx xx zvířatech a xxxxx in vitro xx nutno xxx xx xxxxxxx, že xxxxx extrapolace xx xxxxxxx xx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxx; doklady o xxxxxxxxxxxx účincích u xxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxx klasifikaci x xxxxxxxxxx nových x xxxxxxxxxxx látek xxxxx účinků na xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx zjištěných x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxx xx posuzování xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
B.1. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Testovaná látka xx podává x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx xxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx skupině xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx orientačního xxxxx. Xxxxxxxxxx se pozorované xxxxxx x uhynutí. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx především xxx pokusech xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu a xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx testem se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx volbou xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx jako xxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxx vhodných xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx známy nebo xxxxxx před xxxxxx xxxx během něho xxxxxx xxxxxxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx. U hlodavců xx objem neměl xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx; xxxxxxxx jsou vodné xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx až 20 xx.xx-1. Variabilita xxxxxx látky podávané x xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se zajistil xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx koncentraci xxxxx xx xxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx lokální xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx přednost potkanům, xxxxx nejsou známy xxxxxx xxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Na xxxxxxx xxxxx xx x xxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxx každou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Používá-li xx samic, xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být březí. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, je třeba xxxxxxxx zvířata xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x akutních xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx hlodavci, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx menšího počtu xxxxxx. Dávky xx xxxxx xxxxxxx zvolit x je třeba xxxxxxxx, aby xxxxxx xxxxxxxxxx úroveň xxxxxxx xxxxxxx dávky. V xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx hladin xxxxx, nejméně xxx, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tak, xxx xxx x xxxxxxxxxxx skupin xxxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx x mortality. Získané xxxxx musí xxxxxx xx znázornění vztahu xxxx xxxxxx x xxxxxxx, x xxxxx xx možné, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x přijatelnou spolehlivostí.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
X xxxxxxxx hlodavců lze xxxxxxx limitní xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx skupinách 5 xxxxx a 5 samic x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx uvážit xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx ji xxxx stanovit rigorózně. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx obrazu xxxxxx, rychlosti vývoje xxxxxx x xxxxxx xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx prodloužit. Xxxxxxxx je xxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx, x doba xx uhynutí, zvláště xxx, xxx je xxxxxx tendence x xxxxxxxx mortalitě.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxx hladová. Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. X xxxxxx x xxxxx rychlostí xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxx x pitné xxxx xxxx omezen. V xxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx sondou orálně x jedné dávce. Xxxx-xx možno xxxxx xxxxx najednou, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx množstvích xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx tohoto xxxxxx - xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx poskytnout.
Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xx vedou xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx častá xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx místní xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx na aplikaci.
Xxxxxxx jednou během xxxxxxx pracovního dne xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, srsti, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, spánku x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx zaznamenat xx nejpřesněji.
Zvířata, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, i ta, xxxxx přežijí xx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx nálezy xx xxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxx na jednom xxxxxxx, xxxx se xxxxx xxxxxxx jedné xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví x xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrazně xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxxx použití menšího xxxxx xxxxxx. Pokud xx k xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx testovaného xxxxxxx xxxx xxxxxxx citlivější, xxxxxxxxx na zvířatech xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pak v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx xxxxxx xxxx než xxxxx xxx. Zvířata, která xxxx humánním způsobem xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx podanou xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx látkou. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, mezi xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x výskytem a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx chování, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx xxxxx, potrava xxx.
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (včetně vehikula, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x podle xxxxxxx xxxxx (počet xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx otravy, xxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat),
- xxxx uhynutí xx podání xxxxxxxxx xxxxx, důvody a xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,
- hodnota XX50 xxx to pohlaví, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx pokus, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),
- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50, xxxxx je lze xxxxxxxxx,
- křivky xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx x xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx danou metodou xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx druhém xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx pozornost je xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx by mohlo xxx humánní xxxxxxxx xxxxxx xxxxx testu xx vypočtenou hodnotu XX50),
- interpretace xxxxxxxx.
X.1. xxx XXXXXX TOXICITA XXXXXX (XXX XX) - XXXXXX XXXXX DÁVKY
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxx následovat xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx podání jedné xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx x fixní xxxxxx se xxxxxxx xx dvou etapách.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx účinky xxxxxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx na dávku. Xxxxxxxxxx studie poskytuje xxxxxxxxx o xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dávky. Xxxxxxxx xx x xxxx xxxxx xxxxx nepoužije xxx xxx pěti xxxxxx.
X hlavní xxxxxx xx látka xxxxxx orálně xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxx x jedné z xxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Použitá xxxxx xx xxxxxx x předběžné xxxxxxxxxx xxxxxx, a xx jako xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxx" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx úvod xxx 1.2), xxx ne xxxxxxx.
Xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx vybraná xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx žádné další xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx pozorována xxxxxx xxxxxxxx, látka xx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx úrovni xxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx humánní utracení, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx "diskriminující xxxxx" (xxx xxxx B - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), xx. xxxxxxxx x předem xxxxxxxxxxx xxxxxx dávky, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx by xxxxx x xxxxx (xxxxxx xxxxxxx humánního xxxxxxxx).
Zvířata xx xxxxxxxxx a přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx xx známo, xx vyvolávají značnou xxxxxx x stres xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Příprava
1.2.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx tomu.
Xx třeba používat xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx by x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední hodnoty.
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x hlavní xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx každého x xxxx pohlaví.
1.2.1.2 Příprava x xxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje se xxxx první xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx další možnost xxxxxx x jiných xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx nebo xxxxx xxxx jejich xxxxxxxxxx toxikologické vlastnosti. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx normálně xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx vodné xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx podávané x xxxxxxx by xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx koncentrací, xxx xx zajistil konstantní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx dávek.
Před xxxxxxx testované xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx odebere večer xxxx xxxxxx; xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx omezen. V xxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx orálně x jediné xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, lze xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xx menších xxxxxxxxxx xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxx přístup x xxxxxxx ještě 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx látka xxxxxxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx, xxxx být xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx poskytnout.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Vyšetřují xx xxxxxx různých xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx používají xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xx jsou xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Dávky xx podávají sekvenčně, xxxx xx alespoň 24 xxxxx xxxx xxxxxxx dávky xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xx pečlivě xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx sedm xxx; xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx ještě xx xxxxxxx xxxx xxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx-1. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dávka nevyvolá xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, potom xx nutné xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx více xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Tento xxxxxx by xxx xxxxxxxxxx informace o xxxxxx(xxx) xxxxx, která(é) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx otravy, x x nejmenší xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxx xx vybrat xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxx k dispozici, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxx 500 xx.xx-1. Jestliže xx xx xxxxxxx xxxxx nepozorují xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx se xxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx při 2000 xx.xx-1, xx xxxxxxxxxx studie xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx této úrovni xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx použití výchozí xxxxx (např. 500 xx.xx-1) xxxxxxxx těžké xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx dávka (xxxx. 50 xx.xx-1). Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx určenými xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx xx xxx tomto xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx 5 xxxxxx.
1.2.2.2 Hlavní xxxxxx
Xxx každou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxx xx být xxxxx.
Principem metody xxxxx dávky xx xxxxxxx pouze xxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xx vyhnout xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Dávka, xxxxx xxxx xxxxx x testu, xx xxx xxxxxxx x xxxxx xx 4 xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx měla xxx xx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyvolá zřejmou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx utracení x humánních xxxxxx); xxxxxxx xxxxxxx nejsou xxxxxxxx, xxx xxxx xxx zaznamenána. Xxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx mortalitu, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx podání xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx zřejmou xxxxxxxx, xx nutné xxxxx xxxxx testovat xx další xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxx xxx dále xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx bylo xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx toxická xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx by xxx xxxxx xxxxx testována xx další nižší xxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx humánně xxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají systematicky. Xxx každé zvíře xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx a zaznamenat xxxxxx účinek xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxx by měla xxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, rychlosti xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx je možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx je doba, xxx se projevy xxxxxx xxxxxxx a xxxxxx a xxxx xx uhynutí, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pečlivá xxxxxxxx vyšetření xx xxxxx provádět nejméně xxxxxxx první xxx xx podání xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xx den xxxxx xxx. Zvířata xxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxx xxxx výrazné xxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx vykazují xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx může xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, že xxxx xxxxxxx xxxxxx vysoká xxxxx.
Xxxxxxxxxx se xxxxxxxx na xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxx pozornost xx třeba xxxxxxx xxxxxxx, křečovým jevům, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx provede xxxxxxxxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx látky, xxxxx xx další 3 xxx x xxxxx xxxxxx xxxxx. Zvířata, xxxxx uhynou během xxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx testu, se xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají. Xx-xx xx indikováno, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
X závislosti xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx vyšetření xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
X xxxxxxx, že látka xxxxxxxx mortalitu xxx xxxxx 5 xx.xx-1 (xxxx jestliže orientační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx), xx třeba dále xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxx studie xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxx úroveň xxxxx. X xx xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu; počet xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx důvodů; popis xxxxxxxxx účinků; xxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx připsat xxxxxxxxx xxxxx; xxxxxx xxxxxx xxxxx toxických xxxxxx; xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxx, xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxx humánně xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx bolestem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vyvolaná xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva o xxxxxxx pokusu má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx dávek,
- ve xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx (počet xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx tělesné xxxxxxxxx; případně počet xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx utracených xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx, stupeň x xxxxxx účinků),
- xxxxxx xxxxxx nástupu xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx byly reversibilní,
- pokud zvířata xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, doba xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx a kritéria xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx utracení xxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx toxicity x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx hladiny xxxxxxxx x xxxxx.
3.2 Xxxxxxxxx a interpretace
Xxxxx | Xxxxxxxx | Interpretace |
5 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx toxicita 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx xxx 50 xx.xx-1 |
50 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx než 100 % přežití | Látky, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxx velmi xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx 5 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx x 500 xx.xx-1 | |
500 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % přežití | Xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx nebo zdraví xxxxxxxx. Viz xxxxxxxx x 50 mg.kg-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; není zřejmá xxxxxxxx | Xxxxx, které xxx xxxxxxxxx za xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx Viz xxxxxxxx x 2000 xx.xx-1 | |
2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxx xxxxxxxx x 500 mg.kg-1 Látky, xxxxx nemají xxxxxxxxx xxxxxx toxicitu |
B.1. tris XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX XXXXXXXXX XXXXX XXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxxxx stanovení třídy xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx rizika, xxx xxx účely klasifikace xxxxxx.
Xxxxxx používá xxx xxxxx stanovených xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx bylo xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx výsledků xxxxxxx. Kromě xxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx pevně xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxx dávky xxx xxxxxx xxxx rozhodovacího xxxxxxx, nebo pro xxxxx testování. Použití xxxxxxx x těchto xxxxxxxxxxx dávek xx xxxxx xxxxxx, pokud xx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx přesné XX50. Xxxxxxxx xxxxxxxxx rozsahu xxxxxxx, ve kterém xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx smrt xxxxx xxxxxx xx x x xxxx metody xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx by xxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx B.1. Xxxxxx výhodou xxxx xxxxxx xx xxxxx spotřeba zvířat xxx u xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx)(B.1) x xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx fixní xxxxx (B.1 bis).
1.2 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx skupině xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx. Testování se xxxxxxx postupně, v xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Přítomnost xxxx xxxxxxxxxxxx úhynu xxxxxx xx vztahu x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x dalším kroku, x.x.
- xxxx zapotřebí xxxxx xxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx krok xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x vyšší xxxx xxxxx úrovní xxxxx.
1.3 Xxxxx metody
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx jsou náhodně xxxxxxx, označena xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx mohla xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx podmínky. Xxxxxxx xxxxx být x klecích xx xxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx, ale xxxxx xxxxxx x xxxxx kleci xxxx xxxxxxx xxxxx pozorování xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx dávce xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx je xx třeba, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx suspenduje xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx zvážit xxxxxxx vodného xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx použití xxxxxxx/xxxxxx x jedlém rostlinném xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x xxx roztoku x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být známa xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx není známa, xxxx xxx stanovena xxxxx před xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxx po určitou xxxx bez xxxxxxx (xxxx. potkani xxxx xxx a xxxx 3 - 4 xxxxxx); přístup k xxxx xx xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí.
Na xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % střední hodnoty.
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxx krok xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx kroku xxxx xxx použito xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxx dávek
Výchozí xxxxxxx úroveň xx xxxxxxx ze tří xxxxxxx xxxxxx, tzn. 25, 200 x 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx úroveň xxxxx xx měla xxx taková, aby x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jimž xxxx látka xxxxxx. X xxxxxxxxxx na xxxxxxx dávce xx xxxxxxx příslušného xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 1.
Xxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Pokud xxxx informace xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx x při xxxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), xxx xx xxxxxxx xxxxxxx test. Xxx nejsou žádné xxxxxxxxx x testované xxxxx, xxxxxxxxxx se - x ohledem xx xxxxxxx zvířata - xxxxxx xxxxxxx xxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti.
V některých xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx zpřesnit xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xx dovoluje test x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxx případech se xxxx uvažovat x xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 5, 50 xxxx 500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx aplikovat dávky, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxx interval mezi xxxxxxxxxxx skupinami xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx trvání x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx další xxxxx je xxxxx xxxxxxx, dokud není xxxxx, xx zvířata xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xxxx x xxxxxxx úrovní xxxxx xx výši 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx zvířatech xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxx x uhynutí xxxxxxxxxxxxx s podáním xxxxx, lze xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx 200 xx.xx-1 (xxxx 500 xx.xx-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx dobu 14 xxx, kromě xxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxx vyloučena x xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx toxických xxxxxx, xxxx xxxxxx nástupu x xxxxx zotavovacího xxxxxx. Xx důležité xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx-xx x xxxxxxxx xxxxxxx příznaky. Xxxxxxx pozorování xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx období xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxx látky xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Xxx xx xxxxx podávána po xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxx xxx - x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, který xxxx xxx podán xxxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x tělesné hmotnosti, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx podat x 2 ml xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx objemu xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx byl podáván xxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx možné xxxxx dávku xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx dobu xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx testování xxxx xxxxxxx x Xxxxxxx 1.
1.3.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx za xxxxx den (den xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx, xxxxx xx vyžaduje xxxxxx zvířat xx xxxxxx xxxxx, a xxxx nejméně jednou xxxxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx silného xxxxxx, xx třeba humánně xxxxxxx: xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx stejně xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xx xx byla xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx nebo byla xxxxxxxx mrtvá, xxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxxx, x xxxx xx dýchacím, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx systému, xxxxxxxxx aktivitě x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, spánku x xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx vedeny xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx látky x xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Počítají se x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx konci xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3.3 Pitva
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x utracených xxxxx testu, xx xxxxxxx pitva. Všechny xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxx získání dalších xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologie x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx 24 x xxxx xxxxx.
2. SBĚR X XXXXXX XXXXX
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, popis, časový xxxxxx a vratnost xxxxxxxxx účinků, x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx klasifikaci je xxxxxxx v Dodatku 2.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Zpráva x pokusu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxxxxxxxxxxxx stav xxxxxx, xx-xx xxxx;
- xxxxx, xxxxx x pohlaví xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx atd.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx začátku testu, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxx testu.
Podmínky xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx výběru vehikula, xxxxx je xxxx xxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x doby xxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a xxxxxxx xxxx (včetně druhu x xxxxxx);
- xxxxxxxxxx xxxxxx počáteční xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx údajů x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dávkové xxxxxx (xxx. zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx a trvání xxxxxx);
- xxxxxx x xxxxxx xxxxxx příznaků xxxxxxxx x jejich xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;
- pitevní xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x každého xxxxxxx, xxxx-xx x dispozici.
Diskuse xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x interpretace:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx x metodou XXXX TG 423.
DODATEK 1
XXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxx xxxx uvedeno v xxxx 1.4.2.3, výchozí xxxxx by xxxx xxx xx xx xxx pevně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx úrovní, která xxxxxxxxxxxxx způsobí uhynutí xxxxx u xxxxxxxxx xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- vztah xxxxxxxxx x účinku,
- všechny xxxxx x jiných xxxxx xxxxxxxx x
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx uvedené x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxxxxxx tak, jak xxxxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 25 xxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx druhého xxxxxxx, xxxxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx přitom xxxxxx x ostatních 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx potvrdí, xx xxxxx pokračovat x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx dávky.
4. Xxxxx po dávce 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx každého pohlaví, xx xx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx XX50 xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx to xxxx jen xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx reakce xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx: zřetelné, xxxxxxx toxické xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx důvodem xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx XX50 xx xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti xxxx xxxxx, xxxx mohou xxx xxxxxxxx xxx xxxxx testování na xxxxxx xxxxxx xxxxx.
5. Xxxxxx umožňuje testování x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx stanovenými dávkami (xxxxxxxx 2). Xxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx buď x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx testování xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1.
Xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 25 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X rámečcích xx xxxxx dávka, xxxxx zvířat x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx uhynulých xxxxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx dosažení xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx konečných hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Dodatku 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx dávkou 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx je udána xxxxx, počet xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx počet xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3). Podle xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x testování pokračuje xx směru xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx se provede xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx rámečku xxxx xxxxx způsobu xxxxxxxxxxx uvedeného v Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx testu x xxxxxxxxxx doplňkovou xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Klasifikace xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx rámečku.
Postup testování x xxxxxxx dávkou 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X rámečcích je xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx uhynulých zvířat xx x testování xxxxxxxxx xx směru xxxxx až xx xxxxxxxx šedého rámečku.
Varianta 1 - Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx.
XXXXXXX 2
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx testovací xxxxxxxx 1
X rámečcích xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx a pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx jako xxxxx).
Xxx xxxxxxx je počet xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Šedé rámečky xxx rámečkem "XXXXX XXXXX XXXXXXXXX" v xxxxxxxxxx tohoto dodatku xxxxxxxx xxxxxxx hodnoty xxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx podle xxxxxxxx 1 se příslušná xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx nedosáhne xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Ležatá xxxxxxx xxxxxxx, xx XX50 je xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.)
(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 2000 xx/xx tělesné hmotnosti
Interpretace xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx variantě 1
x) Xxxxxxx xxxxx 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
&xxxx;
x) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
x) Xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx
X.2. AKUTNÍ XXXXXXXX (INHALAČNÍ)
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xx užitečné xxxx xxxxxxx xxxxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx, xxxxxxx tání, teplotě xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx látky
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, a to xxxxx koncentraci x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx pozorují x zjišťují xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx pokusu xxxxxx, x xx, která xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, xx pitvají.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x bolesti xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Testované xxxxx se xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou bolest x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx zvířata simulované xxxxxxxx.
Pevné xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx částice xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby x xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; x xxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx skupina x xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx být x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx důvody xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx začátku xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx).
1.3.2.2 Počet a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxx hladinu xx xxxxx xxxxxx nejméně 10 hlodavců (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx být xxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vyšších xxxxx, xxx jsou xxxxxxxx, xxxx xx xx zvážit použití xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx volit a xx xxxxx zaručit, xxx nebyly xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxx testech xx třeba xxxxxxx xx xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx byl x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx rozsah xxxxxxxxx xxxxxx a mortality. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkou x xxxxxxxxxx a, xxxxx xx to xxxxx, musí xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx po 4 hodinové expozici 5 samců x 5 xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx 20 xx.x-1 xxxx xxxxx xx xxxxxxxx tekuté xxxx xxxxx xxxxx x koncentraci 5 xx.x-1 (xxxx - x xxxxxxxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sledované xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx - xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) během 14 xxx x žádné xxxxxxxxx vyvolané sledovanou xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx pokusy xx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Doba xxxxxxxx
Xxxxxxxxx doba xxxxxxxx xx xxx 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxx se zvířaty xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s výměnou xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kyslíku a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, je xxxxx xx konstruovat tak, xxx xx co xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx xxxx maximální. Xxx zajištění xxxxxxxxx xxxxxxxxx v inhalačním xxxx xx xxxxx x zásadě celkový xxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx orálně-nasální, xxxxxxx hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx dva xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují příjem xxxxx xxxxxx cestami.
1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx xx měla xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx ji xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx záviset na xxxxxxxxx reakcích, xx xxxxxxxxx jejich xxxxxx x xx trvání xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx xx možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx se xxxxxx x opět xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx do xxxxxxx, xxxxxxx tam, xxx xx patrna xxxxxxxx ke zpožděné xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx zváží. Exponují xx xx xxxx 4 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx. Teplota xxxxx xxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 o X. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx ideálně xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx případů, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x aerosoly). Xxxxxxxxx xxxxx negativního tlaku xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx unikání xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx expozice xx nepodává xxxxxxx xxx xxxx.
Používají xx xxxxxx systémy xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx stabilních xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx nejrychleji. Konstrukce x provoz xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x komoře.
Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx monitorování xxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně),
(x) skutečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxx xxxx alespoň třikrát xxxxx expozice (některá xxxxxxx, xxxx. xxxxxxxx xx vysoké koncentraci, xxxxx vyžadovat častější xxxxxxxxxxxx). Xxxxx jedné xxxxxxxx xx nemá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x xxxx než ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísání. Xx xxxxx xxxx trvání xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx tak xxxxx, xxx to xxxxx xxxxxxxx (xxx nejméně xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx),
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx se měří xxxxx možno xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx x xx jejím skončení xx pozorování xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx zvíře má xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx prvního xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pracovní xxx xx xxxxx xxxxxxx pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx každodenní xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx snížení xxxxx xxx studii, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx či utracením xxxxxxx xxxx umírajících xxxxxx.
Pozorování zahrnuje xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx stanovuje xx xxxxxxxx týdně x x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, xx pitvají xx zvláštním xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx x dolní xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx se xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxx tkáně pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx zvířata přežijí xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, která xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxx xxxx k bolestem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. XX50 se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxx xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx zvířete xxxxxxxxx xxxxx x výskytem x stupněm xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx, klinických xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x všech xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx pokud možno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, podmínky ustájení, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxxxxxxx aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx umístění xxxxxx x xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx xxxxxxxx. Xx třeba popsat xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic aerosolu,
- xxxxx o xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx variability (xxxx. xxxxxxxxxxx odchylkou). Mají xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxx:
a) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx;
x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;
x) xxxxxxxxx koncentrace (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx);
Xxxx.: při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx (xxxx. xx vodě) xx xxxxx xxxxxx nejen xxxxxxxxx koncentraci xxxxx xx xxxxxxx, nýbrž xxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx.
x) povaha xxxxxxxx, pokud xxxx xxxxx;
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
f) hmotnostní xxxxxx aerodynamického xxxxxxx (XXXX) x geometrická xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX);
x) xxxx do xxxxxxxx rovnováhy;
h) xxxx expozice;
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxx expozice (tj. xxxxx xxxxxx, xxxxx x pokuse xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; počet zvířat x příznaky xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx);
- xxxx xxxxxxx xxxxx expozice xxxx xx xxxxx skončení, xxxxxx x kritéria xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx;
- xxxxxxx XX50 pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (xxxxx xx xxxxx xxx stanovit);
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx (xxxxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxxx (xxxxx to xxxxxxxx xxxxxx stanovení);
- xxxxxxx nálezy;
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x vlivu xxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx testu na xxxxxxxxxx xxxxxxx XX50);
- interpretace xxxxxxxx.
B.3. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xx xxxx v odstupňovaných xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, a xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx a zaznamenávají xx účinky a xxxxxxx xxxxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxxx během xxxxxx, x zvířata, xxxxx xxxxxxx konec xxxxxx, xx pitvají.
Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx a bolesti xx xxxxx humánním xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx v takových xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, o kterých xx známo, že xxxxxxxxxx xxxxxxx bolest x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých nebo xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Nejméně 5 dní xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxx 24 hodin xxxx xxxxxxxxx testu xx xxxx xxxxxx xx zádech ostříhá xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx xx xx, xxx se xxxxxxxxxxx (xxxx. abrazí) kůže, xxx xx mohlo xxxxxx xxxx propustnost. Xxx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx xx připraví xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx připravenými x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit vodou xxxx xxxxxxx vehikulem, xxx xxx dobrý xxxxxxx x xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nutné brát x úvahu xxxx xxxxxxxx xx průnik xxxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx vehikula by xx xxx xxxxx xxx, x xxxx xxxxx xx xxxx xxxx látka xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxx, a xx xxxxx relevantních xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxx xxxxxxx usnadňuje xxxxxx kůží. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se dospělých xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxx použít x xxxx xxxxxxxxx druhy, xxxxx jsou pro xx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx pokusných xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro každou xxxxxx dávek xxxxxx xxxxxxx 5 zvířat xxxxxxxx pohlaví. Používá-li xx samic, xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x obou xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Používají-li xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx zvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Dávky je xxxxx pečlivě xxxxxx x xx třeba xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, nejméně xxx, x mají být xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx zřetelným xxxxxxxx toxických účinků x mortality. Xxx xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx, x xxxxx možno xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 s xxxxxxxxxxx spolehlivostí.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxx test xxxxxx xxxxxx nejméně 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx s xxxxxxxx xxxx popsaných postupů. Xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx má xxx xxxxxxx 14 dní. Xxxxx ji však xxxxxxxx rigorózně. Měla xx xxx určena xxxxx xxxxxx otravy, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx pozorování xx možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, kdy xx příznak xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxx do xxxxxxx, xxxxxxx tam, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx xxxxxxx jednotlivě x xxxxxxx. Testovaná látka xx xxxxxx rovnoměrně xx plochu, xxxxx xxxx asi 10 % celkového povrchu xxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx tato xxxxxx xxxxx; mělo xx xx však xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plochu je xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x aby xx zabránilo orálnímu xxxxxx. X zamezení xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxx xxx omezení xxxxxxxx pohybu, úplnou xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zbytky testované xxxxx, xxxxx možno xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx způsobem xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx zvíře xx xxxxx vést xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx často. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx pracovní xxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x odpovídající xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx snížení xxxxx xxxxxx xxx studii, xxxx. xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx slabých xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx a xxxxxxx, x také xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x chování. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, letargii, xxxxxx x komatu. Okamžik xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xx nejpřesněji. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx uhynou, x xxxxx xxxxxxx až xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají a xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxx histopatologické xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx toxicity x xxxxxxx xxxxxxx
Xx dokončení xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, aby xx zjistilo, xxx xxxxxxx druhého pohlaví xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx látku. X konkrétních xxxxxxxxx xxxx xxx odůvodněno xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Pokud xx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx zvířata xxxxxxxxxxx pohlaví xxxx xxxxxxx citlivější, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx uhynutí jednotlivých xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx projevy xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a pitevních xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxx testované xxxxx, xxx x týdenních xxxxxxxxxxx x před xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx třeba stanovit x xxxxxxxxxx, přežijí-li xxxxxxx xxxx než xxxxx den. Zvířata, xxxxx xxxx humánním xxxxxxxx utracena x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx touto xxxxxx. XX50 se vypočte xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxx a výskytem x stupněm všech xxxxxxxxxx xxxxxx změn xxxxxxx, xxxxxxxxxx symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx lézí, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx pokud možno xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx způsobu očištění xxxx a xxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- tabulky toxických xxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx dávek (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx humánně utracených xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx,
- hodnota XX50 xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx byl xxxxxxxx xxxxx pokus, x xx xxx 14xxxxx pozorování (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),
- 95% interval xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (xxxxx xxx xxx xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x její xxxxxxxx (xxxxx je xxxxxxxxx danou metodou xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx testů xx druhém pohlaví,
- xxxxxx výsledků (xxxxxxxx pozornost xxxxxxx xxxxxxx ovlivnění xxxxxxxxx xxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx),
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.4. AKUTNÍ XXXXXXXX (KOŽNÍ XXXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Výchozí xxxxx
Je třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx informace x xxxx xxxxx s xxxxx xxxxxx na xxxxxxx testování xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx reakce. Následující xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx posouzení, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxx, studie xx jediném xxxxxxx xxxx xxx není xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x chemická xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx látky (xxxx. xX xxxxx či xxxxx 2 nebo xX rovné či xxxxx 11,5) není xxxxx testovat xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx leptavé xxxxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx také xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx vyžadován xxxxx xxxx.
x) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxxx toxicity. Jestliže xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx dermální xxxxxxxx xxxxxxxxx při limitní xxxxxx dávky (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx třeba xxxxxxxx xxxxx xxxxxx toxické xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
Studovaná xxxxx xx nanese x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx jako xxxxx vlastní xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxx xx odečte, vyhodnotí x následně popíše xxxxxx xxxxxxxxxx, aby xxxx xxxxx provést xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx testu xx xxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx střihání xxxx xxxxxx srsti xx xxxxx xxxx xx to, xxx xx xxxxxxxxxxx kůže (xxxx. xxxxxx). Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx, xxxxxxxxxxx kůží.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxxx xxxx výraznější x xxxxxxxxx obdobích xxxx. Xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxx xx tyto xxxx xxxxx xxxxx srsti.
Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx látkami, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, případně xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx dobrý xxxxxxx x kůží. Xxx použití vehikula xx nutné xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx savců, xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx králíka.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xx x xx xxxxx screeningových xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, že látka xxxx vyvolávat xxxxxxx (xxxx. xx leptavá), xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xx xxxxx doplnit xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxx test jsou xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx zvířata. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Pokud xxxxxx xxxxx zvláštní důvody xxx xxxx xxxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxx místo xxxx 0,5 ml kapaliny xxxx 0,5 x xxxx xxxx polotuhé xxxxx. Přilehlé xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x testu xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Dobu xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx po xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx chovají xxxxxxxxxx x klecích. Xxxxxxxxx xxxxx xx nanese xx malou xxxxxx (xxx 6 cm2) xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx mulu xxxxxxxxxxxx nedráždivou náplastí. X xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx vhodné xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx mul, a xxx xxx xxxxxxxxx xx xxxx. Po xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx na xxxx xxxxxxx okluzivním xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxx a xxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxx xxxxxx nebo xx xxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxx expozice xx xxxxx odstranit xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx, aby xxxxxx xxxxxxxxx případná reakce xxxx nebo celistvost xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 4 xxxxxx.
Pokud existuje xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxx, že xxxxxx poleptání, xx xxxxx zkrátit délku xxxxxxxx (xxxx. na 1 hodinu nebo 3 minuty). Xxx xxxxxxx testování je xxxxx použít xxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx 3 xxxxxx xxxx xxxxxxxx, pokud xx akutní xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx. Xxxxx xxxx pozorována xxxxxxx xxxxx xxxxxx, odstraní xx druhý xxxxxx xx 1 xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx fázi xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx x xx neodporuje principu xxxxxxxxx zacházení, xxxxxxxx xx xxxxx plátek xx 4 xxxxxxxx x klasifikují xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx, že xxxx xxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx; pokud xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. jestliže xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx xx pozorována nekróza xxxx).
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx) xxxxxxxxxx xx 3 minutách xxxx xx 1 xxxxxx, je xxxx xxxxxxxx ukončen.
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx pokud xx odpovídá xxxxxxxxxxx xxxxxxx použití x xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx xx 60 xxxxxxxx x xxxx 24, 48 x 72 hodin xx odstranění plátku x testovanou xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v tabulce 1. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx úplného xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx kůže je xxxxx podrobně popsat xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx (nevratná xxxxxxxxx xxxxx tkáně) x xxxx toxické xxxxxx. K objasnění xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx tloušťky xxxxx xxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx patrný stupeň xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx podráždění xxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx pozorované xxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Zpráva o xxxxxxx pokusu obsahuje xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx relevantních xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxx xxxxxx: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,
- ve xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxx každé jednotlivé xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xx 1, 24, 48 x 72 xxxxx xxx. xx xxxxxxxxxx xxxx),
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx poškození včetně xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx podráždění xxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- vyhodnocení xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx | |
1. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx | |
1.1 Žádný xxxxxx | 0 |
1.2 Velmi xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx | 2 |
1.4 Xxxxx xx výrazný xxxxxx | 3 |
1.5 Těžký xxxxxx (silné zrudnutí) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx | 4 |
2. Xxxxxxxxx edému | |
2.1 Žádný xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx lehký edém (xxxxx viditelný) | 1 |
2.3 Xxxxx xxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx ohraničena xxxxxxxxx xxxxxxxxx) | 2 |
2.4 Xxxxx xxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxx x 1 xx) | 3 |
2.5 Xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xxxx xxx 1 xx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx) | 4 |
4.2 Klasifikace xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (XXX)
XXX xx vypočte jako xxxxxxxxxxx xxxxxx ze xxxxxx xxxxxx reakce xxx erytém x xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx aritmetický xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx | IKI |
nedráždí | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx dráždí | 0,5 &xx; IKI ≤ 3 |
xxxxxxx dráždí | 3 < IKI ≤ 5 |
xxxxx xxxxxx | XXX &xx; 5 |
X.5. XXXXXX XXXXXXXX (OČNÍ XXXXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
1.1.1 Xxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx zvážit xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx podmínek, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. K xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx. xxxxx kyselé nebo xxxxxxxx látky, xxxxx - jak xx xxxxx očekávat - xxxxxxxx v oku xX xxxxx či xxxxx 2 nebo xX xxxxx či xxxxx 11,5, xxxx xxxxx xxxxxxxx, pokud xxx xxxxxxxx závažná xxxxxxxxx. Je třeba xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx rezervu.
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx studií; xxxxx x prokázanými xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xx tyto xxxxx budou xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxx testování xxxxx metodou.
c) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Látky, xxxxx xxxxxxxxxx zřejmé xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xx studii xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx testovat xx xxxxxxxxxx xxx xxx, protože xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx se v xxxxxxxxxxx dávce xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx neexponované oko xxxxxx jako xxxxxxxx. Xx stanovených xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x reakce xx xxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx posouzení účinku. Xxxx pozorování musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je xxxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
24 xxxxx xxxx xxxxxx se x každého z xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx. Xxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx podráždění xxx, xxxx defekt nebo xxxxxxxxx xxxxxxx, se x xxxxxxxxxxx vyloučí.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxxx různé xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx přednost xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet zvířat
Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvolit xxxx xx xxxxxxx zvířeti. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xx výrazně xxxxxxxx (reverzibilní xxxxxx) xxxx leptavé (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxxxx pro xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx postupu, xxxx xxxxx další xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxx případech xx třeba xxxxxx xxxxxxx tří xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx vyžadovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx používá xxxxx 0,1 xx. X tuhých látek, xxxx x zrnitých xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx 0,1 xx nebo hmotnost xxx 0,1 x (xxxxxxxx je vždy xxxxx uvést). Jedná-li xx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx látky se xxxxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxxxx, např. xxxxxxxxxxxx xx měrnou xxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxxxxx ve sprejích x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx x xxxxxx 0,1 xx xxxxx a xxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxxxxx xxx kapaliny.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx stačí 21 dnů po xxxxxxxx studované xxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx přechovávat xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx zvířeti xx xxxxxxxxxxxx vaku xxxxxxx oka xxx, xx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx. Xxxxx xx xxx xxx na 1 xxxxxxx xxxxx x xxxx přidrží, xxx xx žádná xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx oko, xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, slouží xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx předpokládá, xx xxxxx může vyvolat xxxxxxxxx bolest, xxx xxxx instilací xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx lokální xxxxxxxxxxx. Xxx bylo xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx na testovanou xxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxx oko.
Xxx xxxxxxxxx zvířat je xxxxx vymývat xxxxxxxx 24 xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx oči xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
X některých xxxxx, xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx provést xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, kterým xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx vymyjí xxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx použít 3 xxxxxxx. Půl xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx po xxx xxxxxx x použitím xxxxxxxx objemu kapaliny x rychlosti xxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pozorování a xxxxxxxxxxx
Xxx xx xxxxxxxxx xx 1, 24, 48 x 72 hodinách. Xxxxxxxxxxx-xx xx xx 72 xxxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxx lézí, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx pozorování xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx postižení rohovky xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxx bylo možno xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx vratnost xx nevratnost. Xxxxx xxxxxxxxxx xx rohovce, xxxxxxx x xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx x xxxxx ve xxxxxx i xxxx xxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxxx x příloze x xxxxxxxxxx. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx možnosti xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx laboratoře x xx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je možno xxxxxx xxxxxxxxxxxx referenční xxxxxxx xxxxxxxxxx oka.)
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx lupy, xxxxx xxxxxxxxxx lampy, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxxxx zařízení. Xx xxxxxxxxxxx pozorování po 24 xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx ještě xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx do xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx xxxxx pokusné xxxxx xxxxxx stupeň xxxxxxxxxx x xxxxx intervalu xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxx stupně x xxxxxxxxxx podráždění, xxxxxxxxxx závažných xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx obsahuje xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxx x zvířatech (xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),
- experimentální xxxxxxxx (xxxxxx relevantních xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx),
- v xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx jednotlivá xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. po 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx)
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx,
- podrobný xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx zjištěného podráždění x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx pro jednotlivé xxxxxx xxxx (1, 24, 48 x 72 xxx.), xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx, fluorescein xxx.,
- popis xxxxx xxxxxxxxxx mimoočních místních xxxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Stupnice xxxx xx xxx
Xxxxxxx | |
X. Xxxxxxxx - xxxx | |
Edém není xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx | 1 |
Xxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx | 2 |
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx víček na xxxxxxxx | 3 |
Xxxx xxxxxxxxxx víčka xxxx xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxx | 4 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxx | |
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Slabé xxxxxx (xxxxx odlišit xx xxxxx xxxxxxx xx vnitřním xxxxxx) | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx v xxxxxxxxx xxx | 2 |
Xxxxxx xx zvlhčením xxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxx oka | 3 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxxx | |
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxx zřetelně xxxxxxxxxx oproti xxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, rozlišení xxxxxxxxxxxx xxx nesnadné, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx | 2 |
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx | 3 |
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx | |
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Nepravidelná xxxxxxxxx duhovky, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxx rohovky (xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx), reakce xx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx a hemoragie | 2 |
x xxxxxxx (xxxxx xxxx xxxx xxxxxx charakteristik) | |
X. Rohovka - xxxxxx neprůhlednosti | |
Neprůhlednost xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx charakteru, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx, snadno xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx | 2 |
Xxxxxxxxxx zóny opalescence, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx viditelné; obrys xxxxxxx xxxxx viditelný | 3 |
Úplná xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx | 4 |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx plocha xx ≤ 1/4 xxxxxx xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; xxxxxx neprůhlednosti ≤ 1/2 plochy xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; xxxxxx neprůhlednosti ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 3 |
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx &xx; 3/4 xxxxxx rohovky | 4 |
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (XXX)
Xxxxxxxxxxxx xxxxx oční xxxxxxxxxxx (IOI) xxx xxxxx zvíře x xxxxx interval hodnocení xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx
IOI = 2.(X + X + X) + 5.X + 5.X.X
Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (IOP) pro xxxxx interval xxxxxxxxx xx vypočte xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx z XXX.
Akutní xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx XXX xx xxxxx nejvyššímu XXX xxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx
4.3 Klasifikace
Xxxxxxxxxxx | XXX |
nedráždí | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
xxxxxx | 15 - 29,9 |
xxxxx xxxxxx | 30 - 59,9 |
xxxxx xxxxx xxxxxx | 60 - 79,9 |
xxxxxxxx xxxxxx | 80 – 110 |
X.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1. Xxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx zjišťování xxxxx x xxxxxxxxxxxx senzibilizačním xxxxxxx na xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx systém xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Neexistuje xxxxxx xxxxxxxxx metoda, která xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx x xxxxx xx se xxxxxx xxx všechny xxxxx.
Xxx xxxxx testu xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látky, xxxxxx xxxxxxxxxx průniku xxxx.
Testy xx xxxxxxxxx xxx rozdělit xx xxxxx s xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX), a xx xxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxx přesnější x xxxxxxxx pravděpodobného senizibilizačního xxxxxx xxx lidskou xxxx xxx xxxxxx xxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x proto xx jim dává xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Test - XXXX) xx xxxxx xxxxxxxxx test s xxxxxxxx. Ačkoliv k xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx senzibilizační reakci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xx GPMT xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x adjuvans.
X xxxxx skupin xxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxx xxx adjuvans (xxxxxxxx se dává Xxxxxxxxxx xxxxx) považovány xx méně citlivé.
X určitých xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx volbu Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xx morčatech. Xxx použití Buehlerova xxxxx xx xxxxx xxxxx odborné důvody.
X xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxx (XXXX) x Xxxxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx označit xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx testování xx morčatech. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx nutné xxxxxxx xxxx na morčeti, xxx xxx xx xxxxxx x této xxxxxxxxx kapitole.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx kůže: (alergická xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxx. X xxxxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zarudnutím kůže, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx (xxxxxxx puchýři) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx reakce xxxxx x xxxx být xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx: experimentální xxxxxxxx xxxxxxxx testované látce xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx kterého xx xxxx rozvinout stav xxxxxxxxxxxxxxx.
Provokační expozice (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx expozice xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx období xxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx reakcí xxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx metody xx xxxx xxx xxxxxxxxx každých šest xxxxxx s použitím xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxx mírný xx xxxxxxx silný senzibilizační xxxxxx pro xxxx.
X správně xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nejméně 30 % x metody x xxxxxxxx a xxxxxxx 15% x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx dává xxxxxxxxxxxx xxxxxx:
Číslo XXX | Xxxxx XXXXXX | xxxxxxxx xxxxx | xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | alfa-hexylcinnamaldehyd |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | xxxxxx |
94-07-7 | 202-303-5 | Xxxxx xxxxx kyseliny x-xxxxxxxxxxxxx | xxxxxxxxx |
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zdůvodnění xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx testované látce xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aplikací (xxxxxxxx xxxxxxxx). Po xxxxxx 10 xx 14 xxx (xxxxxxxx xxxxxx), x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx expozici x testovaných zvířat xx porovnán s xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx indukce x xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávka.
1.5 Popis xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku, xxxxxxx xx to x použitím vody xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx nebyla xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.1 Xxxxxxxxxxx xxxx xx morčatech (GPMT)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aklimatizují na xxxxxxxxxxx podmínky po xxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx zvířata xxxxxxx xxxxxxx do expozičních x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx depilací, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx testovací metodě. Xx xxxxx xxxx xx xx, aby xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Zvířata xx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxx xxxxx.
1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.2 Počet x pohlaví
Lze xxxxxx samce i xxxxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx být březí. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx x nejméně 5 xxxxxx xx třeba x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxx xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx expozici se xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podráždění xxxx.Xxxx xxxxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, která x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. V xxxxxxx potřeby xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx v předběžném xxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx zvířatech. Xxx xxxxx účel xxx uvážit xxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxxxxx XXX.
1.5.1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.1.3.1 Indukce
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, se podají xx lopatkové xxxxxxx xxxxxxx xxxxx symetricky xxxxx xxxxxxx xxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx adjuvans (XXX) xxxxxxx s xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx směsi XXX x vodou nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx poměru 1 : 1;
Pro xxxxxxx 3 xx xxxxx xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x FCA xx xxxxx xxxx. Xxxxx rozpustné x xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxx se rozptýlí x xxxxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 3 xx xxx xxxxxx xxxx pro xxxxxxx 2.
Injekce 1 a 2 xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x co xxxxxxxx xxxxx, zatímco xxxxxxx 3 xxxxxx xx kaudální xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Den 0 - Kontrolní xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, xx podají xx xxxxxxxx xxxx xxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Injekce 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx fyziologickým xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxx vehikulum;
Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) xx xxxxx XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxx xxx kůži, xx na xxxxxxxxx xxxxxx xx důkladném xxxxxxxxx případně oholení xxxxx 0,5 xx 10% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxx navození xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx skupina
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx napuštěn xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 xx), xxxxx xx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 48 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx důvody; xxxxx xxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx vhodného xxxxxxxx; xxxxxxxx lze xxxxxxxxx xxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx zbaví srsti. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 48 hodin.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. den - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx xxxx xxxxxxx srsti. Xx xxxxx xxx xxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látka v xxxxxx nebo x xxxxxxx x na xxxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vehikulum (pokud xx to xxxxx). Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx udržují x kontaktu x xxxx xx 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx: testované a xxxxxxxxx skupiny
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, důkladně xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx potřeby xxxxxxxx;
- přibližně xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (přibližně 48 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx provokační xxxxx) xx pozoruje kožní xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx podle stupnice xxxxxxx v xxxxxxx;
- přibližně 24 xxxxx po tomto xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx reakce xxxx (72 xxxxx).
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" u testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx pozorující xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx provokace (xx. xxxxxxxxx provokace), xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x vehikulem. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx skupině.
Všechny xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx.
1.5.2 Buehlerův xxxx
1.5.2.1 Xxxxxxxx
Zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se aklimatizují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx dobu xxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xx provede xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxxxxx xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Xx xxxxx xxxx na to, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx kůže. Xxxxxxx xx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxx.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Používají xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxxxxxxxx morčat.
1.5.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx nullipary a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxx se minimálně 20 zvířat x xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxxxx skupině.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx použitá xxx xxxxxx indukční xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx mírné, ale xx velmi xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolává podráždění xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx pokusu xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx rozpustné xx vodě xx xxxxxx xxxxxx vodu xxxx xxxxxxx nedráždící xxxxxx detergentu xxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx je xxxxxxxxxx 80% xxxxxx etanol/voda xxx xxxxxxx a xxxxxx pro xxxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxx xx zbaven xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx testovanou xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (výběr xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxx aplikovat přímo).
Xxxxxxxx xxxx je xxxxxxxx xx testovací xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 hodin.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxxx 4 - 6 xx2. Xx preferováno xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, mohou xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx skupina
Xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx naneseno pouze xxxxxxxxx, a xx xxxxxxxx xxxxxxxx jako x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx xx testovací xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx s xxxx překrývacím xxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx po xxxx 6 xxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxx, že negativní xxxxxxxxx xxxxxxx není xxxxx, lze xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx.
6. - 8. x 13. - 15. xxx - Testovaná x xxxxxxxxx skupina
Xxxxxx aplikace jako x xxx 0 xx provede xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx srsti) 6. - 8. xxx a znovu 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx
27. - 29. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Neošetřený xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Okluzivní plátek xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx koncentraci xx xxxxxxxx na xxxxx část xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat. Xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxx aplikovat xxxxxxx plátek x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx x kontaktu x xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 hodin.
1.5.2.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxx (přibližně 30 xxxxx po xxxxxxxx provokačního plátku) xx pozorují xxxxx xxxxxx x zaznamenávají xxxxx stupnice uvedené x xxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx 24 hodinách (xx. xxxxxxxxx 54 hodin xx xxxxxxxx provokačního xxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx osoba xxxx, xxxxx zvíře xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx kontrolní.
Xxxxx je k xxxxxxxxx výsledků xxxxx xxxxx provokace (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx přibližně x xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx potřeby xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x vehikulem. Opakovanou xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx reakce a xxxxxxxxx nálezy, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x provokačních postupů, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). X objasnění xxxxxxxx nálezů xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření nebo xxxxxx tloušťky kožních xxx.
2. XXXX A XXXXXX XXXXX (XXXX X XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx musí být xxx xxxxx pokusné xxxxx xxxxxx reakce xxxx xxx každém xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX (GPMT X XXXXXXXXX TEST)
Xxxxx xxx proveden před xxxxxxxxx testu na xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx, xx třeba xxxxx xxxxx xxxxxx testu xxxx xxxx citaci (xxxx. XXXX - xxxx regionálních xxxxxxxxxxxx xxxxx, MEST - xxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx) xxxxxx xxxxx podrobností xxxxxxx x xxxxxxxx získaných xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx.
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx (XXXX a Xxxxxxxxx xxxx)
Xxxxxx x xxxxxx obsahuje tyto xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx zvířat;
- xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat na xxxxxxx a konci xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx podmínky:
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx;
- podrobné xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x technice xxxxxxxxxx xxxxx;
- výsledek xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxx x provokačních xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxx informace x přípravě, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x vehikula, xxxxxxx xxx indukci x xxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;
- všechna xxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx včetně xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx pozorovaných xxxxxx;
- xxxxxxx histopatologické xxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx
Xxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx analogická x metodou XXXX XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx Magnussona/Kligmana xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx reakcí
0 = žádná xxxxxxxxx xxxxx;
1 = xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx kůže;
2 = xxxxxxx výrazné x xxxxxxxxxx zarudnutí xxxx;
3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx senzibilizace
Podle xxxxxxxxx pozitivity při xxxxxxxxxx xxxxxxxx, tj. xxxxx toho, xxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx
xxxxx xxxxxxx (X. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 9 - 28 % xxxxxx
xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
xxxxx alergen (XX. st.) - 65 - 80 % zvířat
extrémní xxxxxxx (X. xx.) - 81 - 100 % zvířat
X.7. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx podává xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx jedna xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx zvířata xxxxx pečlivě xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx konec xxxxxx, xx utratí x xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Zdravá xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Klece xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx co xxxxxxx xxxxxxxx vliv xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejméně 5 xxx před xxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx látku lze xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxx x pitné xxxx, xxxxx účelu studie x fyzikálně-chemických xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx je xx xxxxx, rozpustí xxxx suspenduje xx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxx (vehikulu). Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vodného xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx oleji (xxxx. xxxxxxxxxx) a xxx xxxxxxx x jiných xxxxxxxx. Xxx nevodná xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx jejich xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, musí být xxxxxxxxx ještě před xxxxxx. Xx nezbytné xxxxxx xxxxxxxxx látky xx zvoleném xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx z běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xx nejdříve xx odstavu x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx studie xxxxxxx xxxx předběžný xxxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx hladinu xxxxx xx použije xxxxxxx 10 zvířat (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxx xx xxxxxxx budou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x počet zvířat, xxxxx budou zabita xxxx xxxxxx pokusu.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 28 dnů xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx podávání xxxxxxxx vratnost, trvání xxxx zpožděný výskyt xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx také satelitní xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupinu. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx s pokusnými. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x to ve xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx aplikuje xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx-xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx dávek xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxxxxx x toxikokinetických xxxxxx x testované xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx ani xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx dávky x xxxxxxxxx řadě xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (XXXXX). Xxxxxxx je xxxxxx xxxx- xx čtyřnásobný xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx; pokud xx xxxxx pokrýt větší xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx čtvrtou xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx příliš velký xxxxxx xxxx dávkami (xxxx. faktor xxxxx xxx 10).
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx xxxx, xx důležité xxxxxxxx, xxx podávané množství xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x vodní xxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx konstantní xxxxxxxxxxx (x ppm) nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx k tělesné xxxxxxxxx zvířete; použitou xxxxxxxxxxx xx třeba xxxxx. Aplikuje-li se xxxxx sondou, mělo xx se xxx xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx.
Pokud xx xxxx studie xxxxxxx xxxx předběžný pokus xxxx dlouhodobou studií, xx třeba v xxxx xxxxxxxx použít xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxxx-xx test xxxxxxxxx xxx popisovaným xxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx den xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx, která xxxx xxxxx odpovídá, x xxxxx toxicita xxxxxxxxx xxxxx nevyplývá x xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx od xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx pravidlo xxxxxxxxx testu platí, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xx xx třeba xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 14 dnů xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx účinku.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxxx xx podává xxxxxxxxx xxxxx 7 dní x týdnu xx xxxx 28 xxx, xx zdůvodněných případech 5 dní v xxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxxxx jednorázově xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxx kanylou. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx najednou, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx lze xxxxx x 2 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x podávaném xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx podáván xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx to x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx denně, xxxxxxx x xxxxx denní xxxx x s xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx denně xx provede xxxxxx xxxxxxxxx všech xxxxxx xx účelem zjištění xxxxxxxxx x mortality. Xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx před xxxxx aplikací (xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x dále xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx chovnou klec x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a nejlépe xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx dobu. Výsledky xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, nejlépe x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx pozorování xxxxxx xx xxxxxxx; xxxxx, xxxxxxxxxxx pozorování xx xxxxxxx xxxxxx znát xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxx skupin.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, xxx a xxxxxxx, přítomnost xxxxxxx x exkretů, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx, zježení xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx změny xxxxx, xxxxxx, dále xxxxxx xx manipulaci, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, stereotypů x xxxxxxx (vytrvalé xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx) xxxx bizarních xxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx pozadu).
Xx čtvrtém týdnu xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xx různé xxxxxxxxxx podněty (xxxx. xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx, jsou xxxxxxx x literatuře (xxx Xxxxxxxxx xxxx, xxxx X).
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx čtvrtém xxxxx aplikace xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx 28xxxxx studie xxxxxx xxxx xxxxxxxxx studie xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (90denní); x xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx do xxxx xxxxxxxxxx studie. Xxxxx x x xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 28xxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxxx xxx výběr xxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Výjimečně xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx posuzování funkčního xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx x xxxx
Xxxxxxx xx xxxx nejméně jednou xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, také x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxx xx odebere těsně xxxx xxxx v xxxxxxx utracení xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx. Krev xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxických účinků xx xxxxx, xxxxxxx xx játra x xxxxxxx, xx xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxx před nebo x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx bez xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx1). Xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxx stanovení xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, kreatininu, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky xx xxxxxxx xxxxx (xxxx alaninaminotransferáza, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx fosfatáza, gama xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxx xxxxxx původu) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx užitečné xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx studie: xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx, osmolalitu xxxx xxxxxxxxxxx hmotnost, pH, xxxxxxxxx, glukózu x xxxx xxxx. krvinky.
Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx poškození xxxxx x xxxx.
Další xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx funkce: xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx hormonů, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx určitých xxxxxx xxxxx nebo xxxxxx xx případu.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx pružně, xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx druh a xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dané xxxxx.
Xxxxx nejsou k xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxx stanovení xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1) Vyšetření xx xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxx x séru x xxxxxx, xxxxxxx xxx glukózu. Xxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xx xx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx je vyšší xxxxxxxxxxx výsledků, xxxxx xx xxxxx maskovat xxxxx xxxxx x xxxxxx interpretaci. Na xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxx xxx xxxx xx celkový xxxxxxxxxxxx x u xxxxxxxx x xxxxxxx by xxxxxxx xx pravidelnosti xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx na xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 4. xxxxx xxxxx.
1.2.3.5 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, zahrnující pečlivé xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx, hrudní x břišní, x xxxxxx xxxxxx. Játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, brzlík, slezina, xxxxx x xxxxx xxxxx zvířat xx xxxxx očistí xx xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx xx vlhkém stavu, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickými xxxxxxx, xxxxx (reprezentativní xxxxxxx xxxxxx hemisfér, xxxxxxx x mostu), míchu, xxxxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxx (včetně Xxxxxxxxxx plátů), játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx (konzervované xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx), gonády x xxxxxxxx pohlavní xxxxxx (xxxx. dělohu, xxxxxxxx), xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx (přednostně xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x jedna xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx), periferní xxxx (x. xxxxxxxxxxx xxxx x. tibialis), xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxx xxxxx x nasáté xxxxxx xxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x další xxxxx. Každý orgán, xxxxx xx mohl xxx cílovým xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx dávka, x x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x tkání. Xxxxx xx x xxxxxxxx x tkáních ve xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx objeví xxxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou látkou, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx i u xxxxx skupin s xxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxxxxxxxxxx léze je xxxxx xxxxxxxx.
U xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xx xxxxxx zařazeny, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx orgány x tkáně, ve xxxxxxx xx objevily xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXX X ZÁZNAM XXXXX
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x každém xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx u každé xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů, xxxx úmrtí jednotlivých xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxx každého příznaku, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxx, xxx lézí x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x pokusu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx získány:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxx, stáří a xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, podmínky xxxxx, xxxxxxx atd.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula, pokud xx jiné xxx xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx dávek;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx, případně x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxxxx koncentracích, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x způsobu xxxxxxxx testované látky;
- xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx dávku v xx na xx xxxxxxx hmotnosti (pokud xxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx);
- podrobné xxxxx o potravě x kvalitě xxxx (xxxxxx druhu a xxxxxx);
Výsledky:
- xxxxxxx hmotnost x xxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx;
- xxxxx x toxických reakcích xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, příp. zda xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;
- posouzení xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx;
- výsledky hematologického xxxxxxxxx x příslušnými xxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx normami;
- xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx;
- pitevní xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx x absorpci, xxxxx xxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx XXXX TG 407.
B.8. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Xxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxx x testované xxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxx částic, xxxxx par, xxx xxxx, xxx xxxx, xxx vzplanutí x xxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxxxx metody
Několik xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx studované xxxxx denně po xxxxxxx dobu, x xxxxxxxxxxxxxx koncentracích, xxxxx xxxxxxx jedné xxxxxxxxxxx, x to po 28 xxx. Xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx pozorují x zjišťují se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, která přežijí xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx před xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx v podmínkách xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, aby v xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jiná xxxxxxx, musí xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Existují-li xxxxxx xxxxxxxxxx data, je xxxxx je využít.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Pracuje xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx studie xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť).
1.3.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxx před xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx exponovat vysoké xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxxxx každého xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx vratnost, xxxxxxxxxxx xxxx zpožděný xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví).
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx tři xxxxxxx x xxxxxx úrovní xxxxxxxxxxx x jedna xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx - pokud xx xxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx aplikace testované xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx nebo xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, má xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, mají xxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx xxx být xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Trvání xxxxxxxx xx xxx 6 hodin xxxxx; x případě specifických xxxxxxxxx xx možné xxxxxx i xxxxxx xxx expozice.
1.3.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pro pokusy xx xxxxxxx se xxxxxxx dynamické xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx hodinu, xxx xxx xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se expoziční xxx, xx xxxxx xx konstruovat tak, xxx se xxxxxxxx xx nejvíce xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx co xxxxxxxx. Pro zajištění xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx boxu xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx boxu. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx expozice; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx pozorovat xxxxx xxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx kterém xx xxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3 Popis postupu
Xxxxxxx se exponují xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx v týdnu, xx dobu 28 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx aplikace, x xxxxxxxxx zotavení x otravy xxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx během xxxxxxxxxxx xx být 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx být xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, kde xx xxxx možné (xxxx. xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx). Udržování xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx sloupce) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx okolí. Xxxxx expozice se xxxxxxxx potrava xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx systém x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace. Doporučuje xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací. Rychlost xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx nastavit xxx, xxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx co xxxxxxxxxxx.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Xxxxxx průtoku xxxxxxx (kontinuálně).
b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx měří x xxxxxxx zóně. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx o xxxx xxx ± 15 %. X některých xxxxxx a aerosolů, xxx xxxx úrovně xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx celou xxxx xxxxxx experimentu xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx týká xxxxxx a xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxx x vlhkost vzduchu xxxxx možno kontinuálně.
Xxxxx xxxxxxxx x xx jejím xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx systematicky; xxxxx zvíře xx xxxx individuální protokol. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx denně pozorovat xx příznaky toxických xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Pozorování xxxxxxxx změny kůže, xxxxx, očí, sliznic, xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, somatomotorické xxxxxxxx a chování. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x spotřebu xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx např. x xxxxxxxx kanibalismu, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
Xx xxxxx pokusu xx u všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx následující vyšetření:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a diferenciálního xxxxx leukocytů a xxxxxxxxxxx krve.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x ledvin xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v séru (xxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x celkové xxxxxxxxx x xxxx.
Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, fosforu, chloridů, xxxxxx, draslíku, xxxxxxx xx lačno, lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx být v xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx účinků.
1.3.3.1 Pitva
X všech xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, plíce x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx (xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx x srdce, x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxx) je xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, zvážit x xxxxxxx vhodným xxxxxx, xxx aby xx xxxxxxxxx struktura.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
U xxxxx xxxxxx skupiny, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxx kontrolní xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx histologické vyšetření xxxxxxxxxx orgánů x xxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxx x xxxxxxx ve xxxxxxx x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, ve xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx xx tabulky. X ní xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx expozičního xxxxxxxx včetně konstrukce, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx přípravy xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx přístroje xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, popřípadě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx o xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx: x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx; x) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxx objemem xxxxxxx); x) xxxxxx vehikula, xxxxx xxxx užito; x) skutečná xxxxxxxxxxx x dýchací zóně; x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx průměru (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX),
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x podle koncentrací,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx do konce xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx každé xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx příznaky toxicity. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx pokusu, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx před testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx na xxxxxx pokusných xxxxxx. Xxxxxxxx srsti je xxxxxx xxxxx, mělo xx xx xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx experimentem. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx týden. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. abrazí). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Xx třeba xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Při pokusech x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx upraveny xx xxxxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx vhodným vehikulem, xxx xxx xxxxxxx xxxxx kontakt x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x týdnu.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx potkany, králíky xxxx morčata. Je xxxxx použít x xxxx zvířecí druhy, xxxxxx xxxxxxx však xxxx být xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx studie xx nemělo variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet a xxxxxxx
Pro každou xxxxxxx dávek xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x nesmí xxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita xxxx koncem xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx další xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx dávku x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx po xxxxxxxx xxxxxxx sledovat vratnost, xxxxxx xxxx zpožděný xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx skupiny 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx a xxxxx kontrolní xxxxxxx xxxx - pokud xx xxxxxxx vehikula - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx být nejméně 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx testované látky xx xx mělo xxxxxxxx xxxxx den xx stejnou dobu. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx usnadnění aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx aplikuje skupině x xxxxxxxx dávkou. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx nebo xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx střední xxxxx xxxx xxxxxxx jen xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 úrovně xxxxx, xxxx být vmezeřené xxxxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx s xxxxxx x střední dávkou x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxx koncentraci, xxx x xxxxxx xxxxxxx úrovně může xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxx-xx x těžkému xxxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxx xx určitých xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, není další xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx na příznaky xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxxx, xxx xx objeví x xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata se xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx látce xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx skupiny, xxxxx jsou xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx chovat xx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx, xxx se mohla xxxxxxxxx reparace toxických xxxxxx nebo jejich xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.
Testovanou xxxxx je třeba xxxxxxx rovnoměrně xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % povrchu xxxx; x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx vrstvě.
Testovaná xxxxx xx po xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx udržována v xxxxxxxx x xxxx xxxxxx porézního xxxxxxxx xxxxxx a nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx dále xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx překrýt, xxx xx xxxxxx xxxxx a testovaná xxxxx fixovaly x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx možno xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx immobilizaci však xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxx".
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně pozorovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxx, stupně x xxxxxx. Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxxx, kůže, xxx x xxxxxxx x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx funkce xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx týdně i xxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx zajistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xx ztrátám xxxxxx, xxxx xxxx. x xxxxxxxx kanibalismu, xxxxxxxx xxxxx nebo chybného xxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x těžkém stresu xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
Xx xxxxx pokusu se x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx provedou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x srážlivosti xxxx.
2. Biochemická xxxxxxx krve: x xxxxxxxxx funkce jater x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx xxxxx xxxx glutamátpyruvát-transamináza), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (dříve xxxxx xxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.
Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: vápníku, xxxxxxx, xxxxxxxx, sodíku, xxxxxxxx, glukózy xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx pitva. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx zváží xx xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx a xxxxx, xxxx. xxxxxxxx x xxxxxxxxxx kůže, xxxxx, ledviny, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, srdce x xxxxxxx orgány x xxxxxxxxxxxxxxx lézemi xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx médiu x ohledem na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx zvířat skupiny, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů a xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx ve skupině x xxxxxxxx dávkou xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x všech xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx na orgány x xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje se xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat s xxxxxxxxxxxx formami xxxxxxxxx.
Xxxxxxx zjištěné výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx),
- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx bez xxxxxx, xxxxx ji xxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx sledovaní,
- xxxxxxx nebo xxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- spotřeba xxxxxxx x vývoj xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx to xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.10. MUTAGENITA - XXXX CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX X XXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací OECD XX 473, In Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx analýzy xxxxxxxxxxxxxx aberací in xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx savčích xxxxx xxxxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx však xxx x aberacím xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Vznik xxxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx je schopna xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx se x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Chromozómové mutace x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxx způsobují změny x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx, xxxxx úlohu xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxx se používá x odhalení xxxxxxx xxxxxxx mutagenů x xxxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxx karcinogenní, xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx mezi tímto xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx x existuje xxxxx xxxx dokladů x xxx, xx existují xxxxxxxx látky, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx testem xxxxxxxx, xxxxxxx zřejmě xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx než xxxxxx xxxxxxxxxx XXX.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx in xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx buněčné xxxxxxx. Použité buňky xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx schopnosti xxxxx x kultuře, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx podmínky x savců in xxxx. Xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx by mohly xxxx k pozitivním xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mutagenitu, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (4) (5).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx projevuje xxxx xxxx xxxxx, případně xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx a opětovné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako zlom xxxxxxxxxx xxxx zlom x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatid na xxxxxxx místě (zahrnuty xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, prsténčitý xxxxxxxxx-xxxx).
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, než xx šířka poškozené xxxxxxxxxx. Dále xxx x xxxxxxxxx, koncový (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx hodnoceného xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, kde xx S-fázi xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.
Xxx: achromatická léze xxxxx xxx šířka xxxxx xxxxxxxxxx a x xxxxxxxxxx vybočením xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxx celkovým xxxxxx buněk v xxxx xxxxxxxx buněk; xxxxx xxxxxx proliferace xxxx xxxxxxxx.
Numerická xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému pro xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) jiný xxx xxxxxxxxx počet (xxxx 3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx metafáze, pozorovaná xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x výměny.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx ní. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, buňky xx xxxxxx, xxxxxx xx x x metafázických xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Příprava
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx celou xxxx xxxxxxxxx linií, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxx xxxxxxxx (například fibroblasty xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx krve xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx a kultivační xxxxxxxx
X udržování xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxx kultivační xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (kultivační xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx x xxxxxxx). X xxxxxxxxx linií x xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x nepřítomnost xxxxxxxxxxx x xxxxxxx. X xxxxxxx kontaminace xx xxxxx nepoužívají. Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx buněčného xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Stabilizované xxxxxxx xxxxx a xxxxx: buňky xx xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxx vysetím xx xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx hustotě, xxx xxxxxxx nedosáhly xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dobou xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 xX.
Lymfocyty: xx xxxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxxx mitogen (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxx xxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx), nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx jedinců x kultivují xx xxx teplotě 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Na xxxxx xx testovanou xxxxxx působí x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx vhodného metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx kofaktory xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx jako xx Xxxxxxx 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (10) (11) (12).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v médiu xxxx obvykle 1 - 10 % x/x. Xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx bude xxxxxxx xx tom, xxxxxx typu xx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x několika xxxxxxxxxxxxx.
Xxx účely xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx použity x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx linií by xxx být xxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx P450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx testované xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx nebo se xxxxxxxx její xxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx do xxxxxxx přidávat xxxxx xxxx xx předtím xxxx. Xx třeba xxxxxxxx čerstvé xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxxxx stabilitě prokazují, xx xxxxx skladování xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5 XXXXXXXX XXXXX
1.6 XXXXXXXXXXXX
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx existovat xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx se xxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx prokazujícími xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxx tam, xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx bezvodé. Xxxx xx dá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.6.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, rozpustnost x systému x xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Cytotoxicita xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx v hlavním xxxxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, počet živých xxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x předběžných xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxx-xx x cytotoxicitě, xxxx xxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxx xx maximální xx nízké nebo xxxxxx toxicity. Xx xxxxxxx znamená, xx xx xxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx xxxxx xxxx xxx násobkem, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. X době sklízení xxxxx xxxx být xxx nejvyšší koncentraci xxxxxxxxx signifikantní xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx, nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx x xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx, kde xx xxxx detekce xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x nepraktická. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx použít xxxx xxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx dělení, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx; xxx xxxxx xxxxxxxxxxx celkový xxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx zpožděných subpopulací xxxxx. A xxx x malé prodloužení xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx času xxxx xxxxxxxx značný xxxxxx xx xxxxxx xxxx sklízení x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx činí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx nejnižší z xxxxxx 5 µl/ml, 5 xx/xx xxxx 0,01 X.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek, xxx xxxx xxxxxxxxx x koncentracích nižších, xxx xx koncentrace, xxx xxxxx se xxx látka xxxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx je mez xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx případech - xxxxxxxxx xxxxxxx-xx x xxxxxxxxx účinku xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx nejnižší nerozpustná xxxxxxxxxxx - se xxxxxxxxxx testovat xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Může xxx užitečné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx konci xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxx expozice xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx systému xxxxxx xxxxxxxxxxx buněk, xxxx, X9 xxxx. Nerozpustnost xx xx xxxxxxx x xxxxxxx okem. Xxxxxxxxx nesmí být xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx buněk.
1.6.2 Negativní x pozitivní xxxxxxxx
Xx každého xxxxxxxxxxx, xx již x xxxxxxxxxxxx aktivací xxxx xxx ní, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx). Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx účinku.
Xxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxxx známý xxxxxxxxx, x xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx, xx poskytne xxxxxxxxxxxxxxxx x detekovatelný xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testovacího xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx zvolit xxx, xxx účinek byl xxxxxx, ale xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přímo identitu xxxxxxxxxxxx preparátů. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
Xx | methyl xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Xxx | xxxx[x]xxxxx cyklofosfamid xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Xxx pozitivní xxxxxxxx xx mohou xxxxxx x jiné xxxxxx xxxxx. Tam, xxx xx xx xxxxx, je xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx sklízení kultur xx třeba xxxxxx x negativní xxxxxxxx, xx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3 Xxxxxx
1.6.3.1 Expozice testovanou xxxxxx
Xx proliferující xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx i nepřítomnosti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx 48 xxxxx xx xxxxxxxxx mitogenem.
Xxxxxxx se xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx; x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x rozpouštědlem, xxxx xxxxxxxxx. Pokud xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx prokázat, že xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (13) (14), xx xxxxxxxxxx, aby xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxx těkavých xxxxx je xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxx postupy, xxxx xx xxxxxxx neprodyšně xxxxxxxxxx kultivačních nádob (15).
1.6.3.2 Xxxx sklízení kultury
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xx buňky xxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxxx aktivací i xxx xx po xxxx 3 - 6 xxxxx x xxxxxx se xxxxxxxxx x čase xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx normální xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (12). Pokud xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxx negativní, xxxxxxx xx další xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx odpovídají xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx hodnotí xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx s metabolickou xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx, xx třeba xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3.3 Příprava chromozómů
Xx xxxxxxx xxxxxxx xx působí Xxxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 1 - 2 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx přípravu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvlášť. Xxxxxxxx chromozómů sestává x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol, xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x ztrátě xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxx xxxx xxxxx počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx ± 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx z xxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx počet xxxxxxx vysoký, xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
I xxxx xxxxxx testu xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx zaznamenat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Jelikož xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx třeba vyhodnotit xxxxxxxx buněk xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx typy strukturálních xxxxxxx včetně xxxxxx xxxxx x četnosti x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kultur. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx je xxxxx x testu xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kulturách.
Xxxxxxx xx xxxx xxx jednotlivé xxxxxxx. Xxxxxxx xx všechna xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výsledky xxxx xxxxxxxxx x xxxx. 1.4.3.3. V xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx modifikaci xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. K xxxxxxxxxx, které xxx xxxxxxxxxxx, patří koncentrační xxxxxxxxx x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE VÝSLEDKŮ
Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se používá xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx koncentraci testované xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Nejprve je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx mohou použít xxxxxxxxxxx xxxxxx (3) (13). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx může xxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx inhibovat xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxx x endoreduplikovanými xxxxxxxxxx může naznačovat, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx inhibovat xxxx buněčného xxxxx (17) (18).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx většina xxxxxxxxxxx vykazuje xxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx získaná xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx posouzení xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx, nebo diskutabilní xxx ohledu xx xxxxx xxxxxxxxxxx experimentů. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vitro xxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
XXXXXX X PRŮBĚHU POKUSU
Xx zprávě x xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla/vehikula
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Buňky:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx,
- xxxxxxx mykoplasmat, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx krve, xxx xxxx použita xxxx xxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx,
- počet xxxxxx buněk, xx-xx xx nutné - xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx působení xx xxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx. údajů x xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx média, koncentrace XX2, je-li xx xxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx kultivace,
- xxxx působení,
- xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx
- xxx a složení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- počet analyzovaných xxxxxxxx,
- metoda xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx, tj. xxxxxx xxxxxxxxxx, údaje x xxxxxxxx cyklu, x xxxxx buněk, xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x pH x osmolalitě kultivačního xxxxx, xxxx-xx stanoveny,
- xxxxxxxx aberací, xxxxxx xxxx,
- xxxxx buněk x xxxxxxxxxxxxxx aberacemi x xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- souběžné xxxxx z negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.11. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXX XXXXX XXXXX XX XXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx OECD XX 475, Xxxxxxxxx Xxxx Xxxxxx Chromosome Aberration Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x savců xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vyvolané testovanou xxxxxx v buňkách xxxxxx xxxxx zvířat, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, ovšem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx dochází rovněž. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxx x existují přesvědčivé xxxxxxx toho, xx xxxxxxxxxxxx mutace a xxxxxxxx jevy, jež xxxxxxxxx změny x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, hrají xxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxx systémech.
X xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx hlodavci. Xxxxxxx tkání v xxx xx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx rychle se xxxxxxxx xxxxx, jež xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx x zpracovat. Xxxx živočišné xxxxx x xxxxxx tkáně xx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx na chromozómové xxxxxxx xx zvláště xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxxxx xxxxxx, protože xxxxxxxx brát x xxxxx faktory xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x xxxx xxx mohou xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx tkáněmi xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx také xxxxxx xxx další xxxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx xxx předtím xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx.
Existují-li xxxxxxx x tom, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx reaktivní xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Aberace xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx chromatid, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x opětovné spojení xxxx chromatid xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx aberace typu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx zlom xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx obou xxxxxxxxx xx předpokladu, xx xxxxxxx mezera xx xxxxxxxxx chromatidy xx xxxxx, xxx xx šířka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Dále xxx x xxxxxxxxx, koncový (xxxxxxxx) fragment x xxxxx zlomu xx xxxxxxxxxxx (nebo xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x důsledku xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX nepřechází jádro xx mitózy, nýbrž xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... chromatidami.
Xxx: achromatická xxxx xxxxx xxx šířka xxxxx chromatidy x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Mitotický index: xxxxx buněk v xxxxxxxx xxxxxx celkovým xxxxxx buněk x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx proliferace xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxxxxxxxx počet (tedy 3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx xxxxxx xx stadiu xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 PRINCIP XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx vystaví xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xx xx xxxxxx látkou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). Z xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx buňkách se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 POPIS METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx
Běžně xx xxxxxxxxx xxxxxxx, myši x xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx se běžné xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx podmínky chovu xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx B, vlhkost xx měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx do kontrolní x experimentální skupiny. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, xxx x kde xxxx xxxxx umístěny. Zvířata xx xxxxx jednoznačně xxxxxxx. Xx dobu xxxxxxxxx xxxx dní xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.1.4 Příprava xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx rozpustí nebo xx xxxxxxxx její xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu x případně xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxxx přímo xxxx xx před podáváním xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx údaje x xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx s xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí být xxxx použití xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, aby xxx xx xx xxxxx, bylo na xxxxxx místě použito xxxxx rozpouštědlo / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx testu je xxxxx pro xxxxx xxxxxxx zařadit souběžné xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx xxxx při xxxxxxx, kdy xxx xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxx, xxx xxxx účinky xxxxxx, xxx xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx způsobem xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx to xxxxx, je xxxxx xxxxxxxx pozitivní kontrolu xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka. Příklady xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu:
Xxxxx | XXX | EINECS |
ethyl xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
cyklofosfamid | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x zpracované xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx měly xx xxx zařazeny do xxxxx xxxxxxxx intervalů xxxxxxxxxx, xxxxx nejsou x dispozici přijatelné xxxxxxxxxx údaje o xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberací x x interindividuální xxxxxxxxxxx mezi xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx interval xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx vehikulum xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx účinky.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x pohlaví xxxxxx
V každé xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx pět xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, existují údaje x stejném xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx způsobů xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx nejsou x toxicitě podstatné xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxx postačující. Xxx, xxx xxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, jak xx xxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx test xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx látku je xxxxxxxxxxxx xxxxxxx jednorázově. Xxxxx xx jedná x xxxxxxxx xxxxx, xxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxxx ve xxxx různých časových xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx. X xxxxxxxx xx první xxxxxxxx odběru vzorků 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxx 12 - 18 hodin) xx podání xxxxx. Xxxxxxx xxxx potřebná xxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxx xx 24 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx v xxxxx xxxxxxxxxx režimu látka xxxxxx vícekrát xxx xxxxxx za xxx, xx třeba xxxxxxx xxxxx xxxxx vzorků 1,5xxxxxxxx xxxxx normálního xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injikuje xxxxxx xxxxx Colcemidu® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx odeberou xxxxxx. X xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3 - 5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4 - 5 hodin. X kostní xxxxx xx xxxxxxxx buňky x xxxxxxxx xx x xxxx chromozómové xxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x dispozici xxxxx xxxxxx údaje, xx xxxxx xx xxxxxxxx x téže laboratoři xx použití xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx (5). Xxx xxxxxxxx toxicity se xxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx xxx dávky xxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Ta xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx takové xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx dávkách xx xxxxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, jež x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx vykazují specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx x xxxxxx kritérií xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx případ xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx může xxx xxxx definována jako xxxxx, xxxxx vede x určitým xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx o xxxx než 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx minimálně 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx v xxxxx dávce xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx údajů x xxxxxxx x xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx genotoxicita, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx úrovní. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xx xxx při xxxx trvání do 14 xxx, a 1&xxxx;000 mg/kg hmotnosti xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx zapotřebí xxxxxxx x limitním xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X odůvodněných xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xx sondou nebo xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx tak, xxx objem xxx xx xxxxx dávkových xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx po xxxxxxxx zvířete xx xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx se xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx podložní xxxx a xxxxxx xx.
1.5.7 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx. Xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx při vysokém xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (včetně pozitivních x negativních xxxxxxx) xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. Xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx dochází xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 Zpracování xxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx. Experimentální jednotkou xx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxx hodnocených xxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx buňku x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních skupin xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx strukturálních chromozómových xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x četnost. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x registrují xx, xxx xxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Nejsou-li xxxxx xxxxxxx x xxx, že obě xxxxxxx reagují rozdílně, xx xxxxx xxxxx xx xxx pohlaví xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxx pozitivního výsledku xx používá xxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx frekvence buněk x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx skupině x jednorázovou xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxxxxx xx třeba xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxxx, že testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx mitotické xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx fáze buněčného xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx použití výsledky xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx poskytuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx definitivní xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx nejednoznačné nebo xxxxxxxxxxxxx, i když xx experiment xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx na chromozómové xxxxxxx in vivo xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx látka x kostní dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxx vzít x úvahu, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx bude xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx specifickou cílovou xxxx zasáhne (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx živočišný xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x pohlaví xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, včetně xxxxxxxxxxxx rozpětí, průměrů x směrodatných xxxxxxxx xxx jednotlivé xxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx rozpětí, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x přípravě testované xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x podávání xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx se xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx oběhu xxxx xx xxxxxx tkáně,
- xxxxxxxx převod xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx/xxxxx xxxx (ppm) xx skutečnou xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,
- podrobný xxxxx xxxxxxxx testované látky x odběru vzorků,
- metody xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, její xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- kritéria xxx xxxxxxxxx aberací,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx studie hodnotí xxxx pozitivní, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- mitotický index,
- xxx x xxxxx aberací xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- případné xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx,
- historické údaje x negativních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek.
- xxxxx ze xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx,
Xxxxxxx výsledků.
Závěry.
X.12. MUTAGENITA - XX XXXX XXXXXXXXXXXX XXXX V XXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. METODA
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 474, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxx xxxxxxx v xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx. z xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx poškození, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx představujících xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Když x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx vznikne polychromatický xxxxxxxxx, jádro je x xxxxx vyloučeno; xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx četnosti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx je x xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxx xxxxxxxxx chromozómů.
X xxxxx testu xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (polychromních) xxxxxxxxxx x mikrojádry x xxxxxxxxx krvi je xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx bylo prokázáno, xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx způsobujících xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Mikrojádra se xxxx rozlišovat xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx či xxxxxxxxxxxx kinetochoru (xxxxxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxx XXX x mikrojádru. Konečným xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (polychromních) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx zralých (xxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v rámci xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx jako xxxxxxxx xxxxxxx použít x xxxxxxx, že xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxx xx vivo mikronukleus xxxx x xxxxx xx xxxxxxx vhodný x hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx, protože xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, farmakokinetiky x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x když xxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx efektem xxxxxxx. Test in xxxx je xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx xxx předtím xxxxxxx x systému xx xxxxx.
Existují-li xxxxxxx o tom, xx se testovaná xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx tkáně xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx vhodné.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): oblasti xxxxxxxxxx, se kterými xx xxxxx dělení xxxx vlákna dělícího xxxxxxxx umožňující xxxxxxxxxxxx xxxxx dceřiných xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx): xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (xxxxxxx) vytvářená během xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx chromozómů xxxx celými xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xx od xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxx, vývojové xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx ribozómy, xxxxx xxx lze xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pomocí barviva xxxxxxxxxxxx xxx ribozómy.
1.3 XXXXXXX METODY
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, zvířata xx xx vhodnou xxxx xx působení xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, jež xx xxxxxx (1-7). Pokud xx používá xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xx vhodné xxxx xx xxxxxxxx xxxxx x připraví se xxxxxx, xxx se xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, ve xxxxxxx xx xxxxxxx periferní xxxx, xxxx být xxxx od xxxxxxxx xxxxxxxx xx zpracování xxxxx xx xxxxxxxxx. X preparátech xx xxxxxxxx přítomnost xxxxxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx živočišného druhu
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx; může xxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx druh. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx. Lze ovšem xxxxxx xxxxxxxxx vhodný xxxxx druh xx xxxxxxxxxxx, že xx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx xxxx xx x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, jež xxxxxxxxx strukturální xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx minimální x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Všeobecném xxxxx x xxxxx X.
Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělí jedinci xx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolní a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x po dobu xxxxxxxxx xxxx dní xx zvířata xxxxxxxxxxxx x laboratorních xxxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, aby xx minimalizovaly xxxxxxxx xxxxx xxxx, jak x kde xxxx xxxxx umístěny.
1.4.1.4 Příprava xxxxx
Je-li testovaná xxxxx v pevném xxxxx x xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx před xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx o xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.2 Podmínky xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x používaných xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx xx xxxxx, bylo na xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx rozpouštědlo / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx zařadit souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
X xxxxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xx volí xxx, xxx byly xxxxxx xxxxxx, xxx přitom xxxxxxxxxxxx hodnotiteli totožnost xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx odlišným xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x vzorek xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, xx xxxxx používat xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx methansulfonát | 62-50-0 | 200-536-7 |
X-xxxxx nitrosomočovina | 759-73-9 | 212-072-2 |
mitomycin X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje x frekvenci buněk x mikrojádry x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Aplikuje-li xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx jeden xxxxx xxxxxx, je xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx krev, xxxx xxx xxxx souběžná xxxxxxxxx xxxxxxxx přijatelný x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx krvi (xxxx. 1 - 3 xxxxx), xxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx a xxxxxxx xxxxxx
V každé xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx pět xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx každého pohlaví (11). Pokud x xxxx, xxx se xxxxxx xxxxxxx, existují xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx pohlavími xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx pohlaví xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, jak xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx zvířatech odpovídajícího xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx standardní rozvrh (xxxx. xxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxx x 24hodinových xxxxxxxxxxx). Xxx xxxxxx delší xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx x daném xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxx; v xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, nebo xxxx xxxxxxx limitní xxxxx x podávání xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx vzorků. Xxxxx xx xxxxx x objemnou dávku xxxxxxxxx látky, xxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Test xx může xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
(x) Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx než xx 24 hodinách x xxxxxxx xx xxxxxxx xxx po 48 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx intervaly mezi xxxxxx vzorků. Xxxxx xx xxxxxx odeberou xxxxx než po 24 xxxxxxxx, xxxx xxx odůvodněné. Vzorky xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx minimálně xxxxxxx, xxxxxx xx dříve xxx xx 36 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx xxxxxx, celkově xxxx xxxxxx xxxx xxx 72 xxxxxx. Xxxxx xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx odpověď, xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xxx xxxx xxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx 18 x 24 xxxxxxxx xx posledním podání xxxxx a v xxxxxxx periferní xxxx xxxxxx mezi 36 x 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx (12).
Je-li xx relevantní, xxxxx xx mimoto xxxxxx x další xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx studie xx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, pohlaví x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx se použijí x xxxxxx studii (13). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx tak, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx maximální toxicity x xxxxxxxx nízké, xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx časový interval xxxxxx xxxxxx je xxx xxxxx xxxxxx xxxxx nejvyšší xxxxx. Xx xx definována xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx při xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx podávání by xxxxxx xxxx letální. Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx specifickou biologickou xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxx xxxx mitogeny, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx může xxx xxxx definována xxxx dávka, která xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx erytrocytů x xxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx test xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x podobnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx neočekává xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx provedena xxxx studie xx xxxxxxx tří xxxxxxxxx xxxxxx. Pro dlouhodobé xxxxxx xx limitní xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx xx xxx xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx než 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx úrovně xxxxx.
1.5.5 Aplikace xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx injekcí. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, závisí xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a nemá xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. S výjimkou xxxxxxxxxx nebo žíravých xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při vyšších xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Příprava xxxxxx xxxxx / xxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x femuru xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx způsobem xx xxxxxx dřeň xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx, buňky se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx metodami. Xxxxxxxxx xxxx xx získává x xxxxxx xxxx xxxx jiné xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (8) (9) (10), xxxx se xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Použitím xxxxxxx specifického xxx XXX (např. xxxxxxxxxx xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 x xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx xxxxxxxxxx některé x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx použití xxxxxxx, xxxxx xxxx DNA xxxxxxxxxx. Xxxx výhoda xxxxxxxxx, že by xx nedala použít xxxxx xxxxxxx (xxxx. Xxxxxx). Lze xxxxxx x další xxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x jádrem (16) - pokud xxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
X xxxxxxx xxxxxxx se stanoví xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového počtu xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). X xxxxxx xxxxx se xxxxxx x xxxxxxx kostní xxxxx minimálně 200 xxxxxxxxxx x v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx minimálně 1000 xxxxxxxxxx (17). Všechny xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol) xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx minimálně 2000 nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxx, xx se mikrojádra xxxxxxxxx xx zralých xxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 20 % xxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx dobu xxxx týdnů xxxx xxxxx, lze xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx. Možnou xxxxxxxxxxxx x manuálnímu xxxxxxxxxxxxx xxxx systémy xxxxxxxxxxx xxxxxxx (analýza xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx analýza - xxxx xxxxxxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Údaje x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx v tabelární xxxxx. Experimentální xxxxxxxxx xx xxxxx. U xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxx nezralých erytrocytů xx všech erytrocytů. Xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx kontinuálně xx xxxx xxxx xxxxx xxxx déle, xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx o zralých xxxxxxxxxxxx (pokud byly xxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx erytrocytů x xxxxxxxx procento xxxxxxxxxx x mikrojádry se xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx o tom, xx xxx pohlaví xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx údaje xx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx zjišťování xxxxxxxxxxx výsledku xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx na koncentraci xxxxxxxxx xxxxx závislý xxxxxx počtu buněk x mikrojádry xxxx xxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx s xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx časovém xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx třeba uvážit xxxxxxxxxxx významnost výsledků. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx testováním, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx sice xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx dát xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky mohou xxx xxxxx nejednoznačné xxxx problematické, i xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx poškození xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, že za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Je xxxxx xxxxxxxx, xxxx xx pravděpodobnost, že xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx používána, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:
- xxxxxxxxxx xxxxx vehikula
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx druh/kmen,
- xxxxx, věk a xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx podmínky, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx jednotlivých zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx jednotlivé xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,
- údaje xx xxxxxx pro určení xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- zdůvodnění volby xxxxxxxxx dávky,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x podávání xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx cesty xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx x ověření, xx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- případný xxxxxx koncentrace xxxxx x xxxxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) na faktickou xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx a odběru xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx u každého xxxxxxx,
- kritéria, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo nejednoznačná.
Xxxxxxxx:
- známky xxxxxxxx,
- podíl xxxxx nezralých erytrocytů x celkovému xxxxx xxxxxxxxxx,
- počet xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx pro každého xxxxxxx zvlášť,
- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry xxx každou xxxxxxx,
- vztah xxxxx - xxxxxx, je-li xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy x xxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx x historických xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.13/14. MUTAGENITA - TEST XXXXXXXXXX XXXXXX U XXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Xxxxxxx Mutatiton Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxx bakteriálním xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx kmeny Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx) a xxxxx Escherichia xxxx (xxxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx detekovat xxxxxx xxxxxx xxxxxxx mechanismem xxxxxxxxxx xxxx delece xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kmenů (1) (2) (3). Xxxxxxx bakteriálního xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxx, že xx zjišťují mutace, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx změněná xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx mateřský zkušební xxxx.
Xxxxxx mutace xxxx u xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx a existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxx xxxxxx x onkogenech x xxxxxxxx supresorových genech xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx test na xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx DNA xx posílení xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx DNA, xxx xxxx náchylné x chybám. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx některé xxxxxxxx xxxxxxxxx x typech xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látkami. Xxx bakteriální testy xxxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx škálu xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x různých xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, včetně chemikálií xxxxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxx xxxxxxxxxx mutací x xxxxxxxx kmenů Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxxx xxxx slouží xx xxxxxxxx mutací x xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (histidinu xxxx. xxxxxxxxxx), jež xxxxx xx xxxxxx xxxxx, který xx xx dodávce aminokyseliny xxxxxx nezávislý.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páru xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x XXX. Při xxxxxxxxx testu xxxx x xxxxxx změně xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx nebo xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx vyvolávající xxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxx xxxx x XXX, xxxx se xxxx čtecí rámec x XXX.
1.3 VÝCHOZÍ XXXXX
X xxxxxxxxxxxx xxxxx se využívají xxxxxxxxxxxxx xxxxx, které xx od savčích xxxxx xxxx v xxxxxx látek xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx XXX. Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx imitovat xxxxx xxxxxxxx xx xxxx, takže xxxx xxxxxxxxxxx přímé xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx mutací xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx testu pozitivní, xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx ovšem x xxxxxxxx mutagenních xxxxx, xxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xx druhé xxxxxx xxxxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxx, xx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx mutací xxxx xxx nevhodný xxx xxxxxx xxxxx chemických xxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxxxx některé xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxx, x xxxxx xx předpokládá xxxx xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx buněk (xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx analoga xxxxxxxxxx); x takovém xxxxxxx mohou být xxxxxxxxx testy xx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxx tomto xxxxx pozitivní, jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx; xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x existují xxxxxxxxxxx, xxxxx tímto xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, protože xxxxxx jiným, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx v bakteriálních xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4 XXXXXXX XXXXXX
Suspenze bakteriálních xxxxx xx vystaví xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx miskové xxxxxx "xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xx suspenze smísí x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxx x minimální xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxx s xxxxxxx agarem x xx xxxxx xx xxxxxx xx minimální xxxxxx xxxx. Xxx xxxx xxxxxxxx xx xxx až xxx xxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kolonie spočítají x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx kontrolních miskách x xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxxx postupů xxx provedení testu. X xxxx nejběžnější xxxx xxxxxxxx misková xxxxxx ["xxxxx xxxxxxxxxxxxx"] (1) (2) (3) (4), xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) x suspenzní xxxxxx (11). Xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxx (12).
Postupy xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx preinkubační. Xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Některé xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx preinkubační metodou; xxxxx se o xxxxxxxx třídy, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x krátkým řetězcem, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx x nitrosloučeniny (3). Také xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx procedur xxxx neodhalí. Na xx xx třeba xxxxxxxx xxxx xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", k xxxxxxx detekci xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx identifikovány xxxxxxxxxxx "speciální xxxxxxx" (xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, které se xxxx pro xxxxxx xxxxxxx použít): azobarviva x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx a těkavé xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx od xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5. POPIS XXXXXX
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx bakteriální xxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx stacionárního stadia xxxxx (xxxxxx 109 xxxxx/xx). Xxxxxxx x xxxxxxx stacionárním xxxxxx xx nepoužívají. Důležité xx, aby xxxxxxx xxxxxxx pro experiment xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxx xxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 37xX.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx X. typhimurium (TA 1535; XX 1537 xxxx XX97x xxxx 1X97; XX98; x XX100); u nichž xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx čtyři kmeny X. typhimurium xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx XX x xx xxxxx, xx nemusejí xxxxxxxxx xxxxxx oxidační xxxxxxxx, xxxxx vyvolávající křížové xxxxx a hydraziny. Xxxx xxxxx se xxxx xxxxxxxxx pomocí xxxxx E. xxxx XX2 nebo X. xxxxxxxxxxx XX102 (19), xxxxx mají xx xxxxxxxxx reverzním místě xxx xxxx AT. Xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx:
- X. typhimurium XX1535 x
- X. typhimurium XX1537 xxxx XX97 nebo XX97x x
- X. typhimurium XX98 x
- X. xxxxxxxxxxx XX100 x
- E. xxxx XX2 xxxX xxxx X. xxxx WP2 xxxX (xXX101) nebo X. xxxxxxxxxxx XX102.
X detekci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vazby xxxx být nejvhodnější xxxxxx TA102 xxxx xxxxxx DNA reparačně xxxxxxxxxxxx xxxx X. xxxx (xxxx. X. xxxx XX2 nebo X. coli XX2 (xXX101)).
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx markeru x xxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx (xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx S. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx kmenů E. xxxx). Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x xx: xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx R-faktor xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx x xxxxx (xxxx. rezistence xxxx xxxxxxxxxx u xxxxx XX98, XX100 x TA97a nebo XX97, WP2 xxxX (xXX101) x xxxxxxxxxx xxxx ampicilinu + xxxxxxxxxxxx x kmene XX 102); xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx mutací (xx. xxx mutace x X. xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxX xxxxxx x X. xxxx xxxx xxxX xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) (2) (3). Použité xxxxx mají mít xxxxx xxxxxxxxx revertujících xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx očekávaném xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxx laboratoře x xxxxx xxxxx x x rozmezí xxxxxxxx x literatuře.
1.5.1.2 Médium
Xxxxxxx xx vhodný xxxxxxxxx xxxx (např. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx E a xxxxxxxx) x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x biotin xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).
1.5.1.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx testované látky xxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx kofaktorem xxxxxxxxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (18) (20) (21). Post-mitochondriální xxxxxx xx obvykle xxxxxxx v koncentracích xxxx 5 x 30 % v/v xx xxxxx X9. Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx chemikálie. X některých xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakci x xxxxxxxx koncentracích. X azobarviv x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx redukční xxxxxx metabolické xxxxxxxx (6) (13).
1.5.1.4 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxx xxxxx se xxxx působením na xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx připraví xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu x xxxxxxxx xx xxxxx. Kapalné xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx se xxxxxxx ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx čerstvé xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stabilitě xxxxxxxxx, xx xxxxxx delší xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.5.2.1 Xxxxxxx kmeny (xxx 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Koncentrace
Ke xxxxxxxxx, která je xxxxx vzít x xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, patří xxxxxxxxxxxx x rozpustnost x xxxxxxx směsi, xxxxx xx x xxxxxxxx použije.
Může xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx snížením počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, vymizením xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx stupně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx může xxxxxxxxxxxx změnit. Xxxxxxxxxxxxx xx posuzuje xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx za xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, viditelného x pouhým xxxx.
Xxxxxxxxxx maximální pokusná xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx necytotoxických látek 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx látek, xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx rozpustné, by xxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx mělo xxx x xxxxxxx pokusné xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx již xx xxxxxxxxxxx nižších xxx 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx, xx xxxxxxx až xx xxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxx xxxxx rušit xxx xxxxxxxxxxxxx.
Používá se xxxxxxxxx pěti xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. √10) mezi xxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xx koncentrační závislost, xxxx být vhodný xxxxxxxx xxxxx. Testování xx koncentrací xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx xxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Každý xxxx xxxx xxxxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulum) xxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx efektivnost xxxxxx xxxxx.
X xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx volí xxxxx použitého xxxx xxxxxxxxxxxxx kmene.
Xxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx tabulka:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu | 6055-19-2 |
Xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
Xxxxx | CAS | XXXXXX |
Xxxxx xxxxxx | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinnosti xxxxx X9. Pokud xx 2-xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx S9 xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, např. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxx xxx kmenově xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx bez xxxxxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx:
Látka | CAS | XXXXXX | |
Xxxx xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 a XX 100 |
2-xxxxxxxxxxxx | 607-57-8 | 210-138-5 | TA 98 |
9-xxxxxxxxxxxx | 90-45-9 | 201-995-6 | XX 1537, XX 97 x XX 97x |
XXX 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, XX 97 x XX 97x |
xxxxx-xxxxxxxxxxxx | 80-15-9 | 201-254-7 | TA 102 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 | XX uvrA x XX 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (xXX101) |
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx | 56-57-5 | 200-281-1 | WP2, XX2xxxX x XX2xxxX (xXX101) |
Xxxxxxxxxxxx (XX2) | 3688-53-7 | kmeny xxxxxxxxxx plazmidy |
K xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx i xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx použití xxxxxxxxxx xx vztahem x chemické xxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxx zachází xxxxxx jako xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly xxx ovlivnění xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že zvolené xxxxxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.3 POSTUP
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx metodě (1) (2) (3) (4) bez metabolické xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,05 nebo 0,1 ml xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx bakteriální kultury (xxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) a 0,5 xx xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx agaru. X testech x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxx 0,5 xx metabolické xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx post-mitochondriální frakce (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx směsi) x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx společně x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx /xxxxxxxxxx roztokem. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx promísí x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xx nechá xxxx xxxxxxxx ztuhnout.
Při xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxx roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxx 108 životaschopných xxxxx) a xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,5 xx) xxxxxxx po xxxx 20 min xxxx xxxx xxx 30 - 37 xX; xxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xx misku x xxxxxxxxxx xxxxxx. Obvykle xx mísí 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,1 xx xxxxxxxx x 0,5 xx xxxxx X9 xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx agaru. Xxxxxxxx xx během xxxxxxxxxxx provzdušňují třepáním.
Xxx adekvátní xxxxx xxxxxxx se pro xxxxxx dávku xxxxxx xxx xxxxx. Duplicitní xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx zdůvodněno. Xxxxx-xx xxxxxxx xx xxxxxx misky, nemusí xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Plynné xxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x zatavených xxxxxxxx (12) (14) (15) (16).
1.5.4 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx při xxxxxxx 37 xX xxx xxxx 48 - 72 xxxxx, načež xx xxxxxxxxx revertantní xxxxxxx xx xxxxx xxxxx.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xx uvede xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x negativní xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx kontrola xxx působení, xxxx-xx xxxxxxx), tak z xxxxxxxx pozitivní. Xxx xxxxxxxxxx látku x xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxx působení rozpouštědlo) xx uvedou xxxxx xxx jednotlivé xxxxx x průměrný počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nepožaduje. Nejednoznačné xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx testováním, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx musejí potvrdit xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nepovažuje xx xxxxx, xx xxxxx to zdůvodnit. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx třeba zvážit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx studijním xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx ("plate xxxxxxxxxxxxx" nebo preinkubace x xxxxxxx prostředí) x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x minimálně xxxxxxx xxxxx x metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxx xxx (23). Xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx relevance xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (24), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx.
Testovaná látka, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Většina xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx, x když xx xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky bakteriálního xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx vyvolává xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx Xxxxxxxxxx typhimurium xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxxx xxxxx mutagenní.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx rozpouštědle, xxxxx xx známa.
Xxxxx:
- xxxxxxx kmeny,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx kmene.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxx (x xx nebo μx) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx pro jednu xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx,
-xxx a xxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxxxx (zpracování).
Výsledky:
- xxxxxx toxicity,
- známky xxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na jednu xxxxx a směrodatná xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx negativních (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx negativních (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek.
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
B.15. XXXXXX XXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx kvasinek Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae mohou xxx užity xxx xxxxxx xxxxxxxx genových xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx a x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, jako xx xxxx xxxxxx xxxxxx x červených, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx-1, xxx-2) xx xxxxxxx, adenin xxxxxxxxxx xxxx mutanty a xxxxxxxxxx systémy, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx využití xxxxxxxxxxx xxxxx XX 185-14 X x xxxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxx mutacemi xxx 2-1, arg 4-17, xxx 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx bazí, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mutace. XX185-14X xxxx rovněž xxx 1-7 marker, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx místě a xxxxxx xxx 3-10, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxxx xxxxx S. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X7, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxx 1-92.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx testovaných xxxxx x kontrol xxxx být xxxxxxxxxx xxxxx před testováním xx použití vhodného xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx ve vodě xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx vyšší xxx 2 xxxxxxxx % v organických xxxxxxxxxxxxxx, jako xx xxxxxx, aceton nebo xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Finální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxxx životnost x charakteristiky xxxxx.
Xxxxxxxxxxx aktivace
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkám jak x xxxxxxxxxxx, tak x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx systémem xx postmitochondriální xxxxxx xxxxxxxxxx x jater xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x doplněná xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakcí xx xxxxxxx může xxx xxxxxx xxxxxx xxx metabolickou aktivaci.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxx XX 158-14C x xxxxxxxxx xxxx X7 xxxx nejužívanější pro xxxxxx xxxxxxxx mutací. Xxxx kmeny xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx
Odpovídající kultivační xxxxx xxxx xxxxxxx xxx určení xxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontroly
Pozitivní, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx specifickou xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx zvolených koncentrací. X toxických xxxxx xxxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx redukovat xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx až xx xxx rozpustnosti xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxx látky netoxické, xx xxxx xxxxxxxxx, xx určena xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx po xxxx xxx xxx 28 xx 30 oC xx xxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx má xxx x xxxxxxx akceptovaných xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Počet xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx jednu xxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx 3-10 x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx počet xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x zahrnuje xxx stacionární xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx: 1-5 x 107 buněk/ml xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx dobu xx 18 h. xxx 28 xx 30 xX za třepání. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx kultivační xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx buňky x buňky s xxxxxxx xxxxxxxx mutací.
Xxxxxxxx je první xxxxx negativní, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozitivní, xx xxxxxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxx experimentem.
2. XXXXX
Xxxxx mají být xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx mutací. Xxxxxxx xxxxxxxx mají xxx potvrzeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxxxxxx x:
- použitých kmenech,
- podmínkách xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxx, xxxxxxx médií, teplota x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém,
- xxxxxxxxx vlastního xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x trvání xxxxxxxxx, teplota xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx mutací, xxxxxx xxxxx a xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip metody
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx (xxxxxxxx mezi xxxxx a jeho xxxxxxxxxxx) a uvnitř xxxx. První případ xx nazýván xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx případ xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xx xxxxxxx genová xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx testováno xx xxxxxxx tvorby xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx kmenů, genová xxxxxxxx je xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx heteroalelického xxxxx, xxxxx nese xxx xxxxx defektní xxxxx téhož xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx mitotické xxxxxx xxxxxxxx xxxx X4 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 2 a xxx 5), X7 (xxxxxxxxxxxxxx x trp 5), BZ34 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4) x XX1 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4 x xxx 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx produkující xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx může xxx xxxxxxxxx x D5 xxxx X7 (xxxxx xxxxxx xxxx mitotickou xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx mutace x xxx 1-92). Oba xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx komplementární alely xxx 2.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxx nerozpustných xx xxxx užít xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, jako xx xxxxxx, aceton xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx koncentrace vehikula xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Metabolická xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx působení testovaných xxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, tak x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx systémem xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx aplikaci xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx postupů xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kmeny D4, X5, X7 x XX1. Užití xxxxxx xxxxx může xxx xxxxxx vhodné.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk x frekvenci mitotické xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pozitivní, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mutační xxxxx xxxx xxx xxxxxxx odpovídající pozitivní xxxxxxxxx chemické xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx koncentrací. Xxxx xxx brán xxxxx xx xxxxxxxxxxxx x rozpustnost. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx testovány xx xx mez xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx určena xxxxxx xx případu.
Xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx, nebo během xxxxx xx xxxx xx 18 x. Xxxxxxx dlouhodobě ovlivňované xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx tvorbu xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Podmínky xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx tmě xx čtyři až xxxx dní při 28 - 30 xX. Misky použité xxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x chladničce (xxx 4 oC) po xxxxx 1 - 2 xxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxx utvořit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx normálních xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxx xx jednu xxxxxxxxxxx x testu prototrofních xxxxx xxxxxxxxx mitotickou xxxxxxx konverzí x xxx xxxxxx životnosti xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx zvýšen, xxx xxxx dosaženo dostatečného xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.8 Postup
Xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxx xxxxxxx obvykle jako xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx prostředí a xxxxxxxx buď xxxxxxxxxxx, xxxx rostoucí buňky. Xxxxxxxx xxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx buňkách. 1-5 x 107 xxxxx/xx xx vystaveno testované xxxxx po xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 xX xx xxxxxxx. Odpovídající množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xx přidáno x xxxxxxx ovlivnění, pokud xx to xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x vyočkovány xx vhodné xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx být proveden xxxxx pokus x xxxxxxx ve stacionární xxxx. Jestliže je xxxxx pokus pozitivní, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx počet kolonií, xxxxx xxxxxxxxxxx, přežívajících xxxxx a frekvenci xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx potvrzeny x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxx vyhodnoceny xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- podmínky xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx fázi xxxx xxxxxxxx, složení xxxxx, xxxxxxx x trvání xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, postup x xxxxxx ovlivnění, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxx kolonií, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, vztah xxxxx x xxxxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx,
- diskusi xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx výsledků.
B.17. MUTAGENITA - XXXX XXXXXXXX XXXXXX X SAVČÍCH XXXXXXX XX VITRO
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX TG 476, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxx Xxxx Xxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxx genových xxxxxx xx vitro xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx genových xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx vhodné xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx buňky X5178X, xxxxx CHO, XXX-XX52 x V79 xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x lidské xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx XX6 (1). X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zjišťují mutace x thymidinkináze (XX) x hypoxanthin-guanin fosforibosyltransferáze (XXXX) x x xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Testy xxxxxx x XX, HPRT x XPRT xx xxxxxxxx různá spektra xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XX a XXXX xxxx umožnit xxxxxxx x takové xxxxxxxxx změny (xxxx. xxxxx xxxxxx), xxxxx xx xx xxxxxx XXXX chromozomů X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
K xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x savčích xxxxxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx buněčných xxxxx. Při xxxxx xxxxx xx xxxxx x úvahu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx kultury x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací.
Testy xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx systém xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx vivo xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx výsledky xxxxxxxxxx xxxxxxx mutagenitu. X xxxxxxxxxx výsledkům, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx mutagenity xxxx xxxxx x důsledku xxxxx xX, xxxxxxxxxx xx xxxxxx cytotoxicity (7).
Xxxxx test xx xxxxxxx xx screeningu xxxxxxx savčích mutagenů x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, jsou savčími xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx však xxxxxxxx korelace xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Tato xxxxxxxx xxxxxx na xxxxx xxxxxxxx látky x xxxxxxxx xxxxx více xxxxxxx toho, že xxxxxxxx karcinogeny, xxxxx xx tímto testem xxxxxxxx, protože xxxxxx xxxxxx xxxxxxx jiným, xxxxxxxxxxxxxx mechanismem xx xxxxxxxxxxx, xxxxx v xxxxxxxxxxxxx buňkách nepůsobí (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx mutace: xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx ke xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páru xxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx páru bází x DNA.
Frameshift xxxxxxxx (xxxxxxxx vyvolávající xxxxxxxx xxxxxx): xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxx xxxx x DNA.
Doba fenotypické xxxxxxx: období, xxxxx xxxxxxx xxxx z xxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx mutací: xxxxx xxxxxxxxxxxx mutovaných buněk xxxxxx počtem xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx buněk; xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx suspenzního xxxxx (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolou) x xxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti xxxxxxx xxxxxxxxxx (v xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolou.
Životnost (xxxxxxxxx): klonovací xxxxxxxx (xxxxxxx efficiency) xxxxxxxxxxx xxxxx v době xxxxxxxxx na miskách x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx období exprese.
Přežití: xxxxxxxxx xxxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx) ovlivněných buněk xxxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx; vyjadřuje xx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx buněčné xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Buňky, deficientní xx xxxxxxxxxxxxxx (TK) x důsledku mutace XX+/- → XX-/-, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx trifluorthymidinu (XXX). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx TFT xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx metabolismu x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dělení. Xx xxxxxxxxxxx TFT xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx mutovan xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, obsahující xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Podobně xxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx XXXX xxxx XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 6-thioguaninu (XX) xxxx 8-xxxxxxxxxx (AG). Xxxxx je analog xxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx selekčním xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx buňkách, xx xxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx bedlivě zvážit. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx toxicitu xxxxxxxxx xxxxx vůči xxxxxx s xxxxxxxx x xxx xxxx. Xxxxxxx-xx xx tedy xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příbuzné xx selekčním xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xx xx selekční xxxxxx/xxxxxxx vhodné (8).
Xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx kultuře xx xx vhodnou dobu xxxxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x bez xx x kultivují xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx xxxxxxxxx klonovací xxxxxxxxx (přežití) (xxxxxxx xxxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx x růstovém médiu xx xxxxxxxxxxx dobu, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx x typ xxxxx, aby xxxxx xxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx známého xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a x xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xx stanovení xxxxxxxxx účinnosti (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Xx xxxxxx xxxxxxxxx době xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx médiu x z xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Příprava
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx, včetně xxxxxxxx buněk X5171X, XXX, CHO-AS52, X79 x XX6. X xxxxxxxxx typů xxxxxxxxxxx x xxxxx testu xxxx být prokázaná xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx klonovací xxxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx) x xxxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx mutací. U xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx nejsou kontaminovány xxxxxxxxxxxx; infikované buňky xx xxxxxx nesmějí.
Test xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx měl xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx (xxxxx). Počet xxxxx, počet xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí xxxxx xxxxxxxxxxx parametrům xxxxxxxxx (14). Minimální xxxxx xxxxxxxxx buněk, které xxxxxxx expozici x xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxx stadiích testu, xx dán frekvencí xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx je, xx xxxxx buněk má xxx xxxxxxxxx desetinásobkem xxxxxxxxxx hodnoty xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 106 buněk. Xxxx by xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, kterými xx xx prokázala xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testu.
1.4.1.2 Média x xxxxxxxxxx podmínky
Je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx média a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x vlhkost). Xxxxx xx xxx xxxx volí xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, aby xxxxxxxx kultivace xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buněk xxxxx expresní xxxxxxx x schopnost xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx tvořit kolonie.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx kultur, xxxxxxxxx xx kultivačního xxxxx x xxxxxxxx xxx teplotě 37 xX. Xxxx provedením xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx zbavit xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.4 Metabolická xxxxxxxx
Xx xxxxx xx xxxxxxxxxx látkou xxxxxx x xxxxxxxxxxx x x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému. Xxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx indukujícími xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10% v/v. Aktivita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xxxx xxxxxxx na xxx, jakého xxxx xx testovaná xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx koncentracích.
Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx modifikované xxxxxxx xxxxx exprimující specifické xxxxxxxxx xxxxxx. Výběr xxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Je-li xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx, xxxxx xx před xxxxxxxxx xx buňky xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx suspenze xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx do xxxxxxx xxxxxxxx přímo xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx prokazují, xx xxxxx xxxxxxxxxx neovlivňuje xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx existovat xxxxxxxxx, xx by xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx prokazujícími xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxxxx xxx, xxx xx to xxxxx, xxxx na xxxxxx místě xxxxxxxxx xxxxxxx jako rozpouštědla xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Voda xx dá odstranit xxxxxxxxxxxx sítem.
1.4.2.2 Koncentrace
Mezi xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, patří cytotoxicita, xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž se xxxxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx buněk, jako xx relativní xxxxxxxxx xxxxxxxx (přežití) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxxx x rozpustnost x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx minimálně čtyři xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxx xx maximální xx xxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx znamená, xx xx xxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx hodnotami 2 x √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x cytotoxicity, měla xx vést x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx růstu x 10-20 %, xx xxxx xxxx xxx 10 %. X xxxxxxxxx netoxických xxxxx by xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 xx/xx, 5 μx/xx a 1,01 X.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx se již xxxxx nerozpouští, xx xxx nejvyšší použitá xxxxxxxxxxx vyšší, xxx xx xxx xxxxxxxxxxxx xx finálním kultivačním xxxxx na konci xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx začátku x xx xxxxx působení, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx během xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, S9, séra xxx. xxxxx. Nerozpustnost xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx buněk.
1.4.2.3 Xxxxxxxx
X rámci xxxxxxx experimentu se xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, vehikulum) xxxxxxxx, a xx xxx x metabolickou xxxxxxxx, xxx bez xx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx patří xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
XX (xxxx x velké xxxxxxx) | xxxxxx methansulfonát | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XPRT | ethyl xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (xxxx x xxxxx kolonie) | cyklofosfamid monohydrát xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XXXX | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx koncentrace X-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
xxxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
Xxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx použít x xxxx xxxxxx látky; xxxxxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx historickou xxxxx x 5-brom-2'-deoxyuridinu (XXX 59-14-3, číslo XXXXXX 200-415-9), xxx použít x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Tam, xxx xx xx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx skupiny.
Pro xxxxx xxxxxx interval xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxx xx xxxxxxx rozpouštědlo xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx historické údaje xxxxxxxxxxx, že zvolené xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx buňky nepříznivé xx mutagenní xxxxxx.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Expozice xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx testovanou xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx (xxxxxxx je xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Doba xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx používají xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx zajistil xxxxxxxxx počet xxxxxx x analýze (xx. xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (rozpouštědlem/vehikulem) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx plynných xxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx použití xxxxxxxxxx uzavřených kultivačních xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx přežívání, xxxxxxxxx x xxxxxxx frekvence
Po xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx obvykle xxxxxx x xxxxxxxx cytotoxicity xxxxxxxxxx klonovací účinnosti - xxxxxxx efficiency xxxx xxxxxxxxxxx celkového xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx časový xxxxxxxx xxx téměř xxxxxxxxx expresi nově xxxxxxxxxxxx mutantů (XXXX x XXXX vyžaduje xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, XX xxxxxxxxx 2 dny). Xxxxx xx xxxxxxx x médiu s x xxx selekčního xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx x výpočtu četnosti xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xx selekční médium.
Pokud xx látka x xxxxx X5178X TK+/- xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx kultur (xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxxxx) x xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, změří xx xxxxxxxx kolonií u xxxxxxxxx a pozitivní xxxxxxxx. Měření xx xxxx provést i xx xxxxxxxx s XX6XX+/-.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx data slouží xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kultur. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx X5178XX+/- xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx přinejmenším v xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx prostudovány v xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx xxxxx XX+/- xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx růstu (xxxxx) x xxxxxxxx xxxxx (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx utrpěly xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx poškození, mají xxxxx xxxx zdvojení, x proto xxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx ztráty xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx malých xxxxxxx xx asociována x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx hrubé chromozómové xxxxxxx (26). Méně xxxxxxx postižené mutanty xxxxxx podobnou xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx velké xxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnost - xxxxxxxx cloning xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx mutovaných xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx; nakonec xx xxxxxxx xxxx shrnou x tabelární formě.
Verifikace xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nepožaduje. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných experimentálních xxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. X případech, xxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nepovažuje za xxxxx, je xxxxx xxxxx zdůvodnění. V xxxxxxx nejednoznačných xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx modifikaci xxxxxxxxx studie xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx podmínek. X xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxx v experimentu xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku existuje xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx třeba uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxx statistické xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria, se x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx sice xxxxxxxxx jednoznačně pozitivní xxxx xxxxxxxxx výsledky, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx experiment xxxxxxxxxx opakuje.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxx x savčích xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, že testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx - xxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx genové xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx známa.
Buňky:
- xxx x xxxxx buněk,
- xxxxx buněčných xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx kultury,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxxx xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x rozpustnosti, xxxx-xx k dispozici,
- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- koncentrace xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x přidané xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx inkubace,
-doba xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx buněk xxxxx působení látky,
- xxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (případně xxxxxx xxxxx inokulovaných xxxxx, xxxxxxxxx)
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx,
- metody xxxxxxxxxx xxxxx živých x xxxxxxxxxx xxxxx,
- definice xxxxxxx, u xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x typ (včetně xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx "xxxxxx" x "xxxxxxx" koloniemi).
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx o xX x osmolalitě xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx, xxxx-xx stanoveny,
- xxxxxxxx kolonií, je-li xxxxxxxxx, minimálně xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zjistit xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx X5178X TK+/-,
- xxxxx dávka - xxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- souběžné xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx údaje x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.18. XXXXXXXXX XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX XXXXXXX XXX - XXXXX BUŇKY XX XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Test neplánované xxxxxxx DNA (XXX) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DNA po xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX obsahující xxxxxx poškození xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xx inkorporaci xxxxxxxxx tymidínu (3H-TdR) xx DNA xxxxxxx xxxxx, xxxxx nejsou x S fázi xxxxxxxxx xxxxx. Vzestup 3X-XxX xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxxx buňkách. Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx potkaních xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testovanou xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx systému. UDS xxxx být xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx referenční xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x kultivačním xxxxx xxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxx ředění xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla v xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx životnost xxxxx.
Xxxxxxxxx se pouze xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných linií (xxxxxx diploidní xxxxxxxxxxx).
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického aktivačního xxxxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx kultur
Pro xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx potřeba nejméně xxxx xxxxxxxxx kultur xxx autoradiografii x xxxxx xxxxxx (xxxx xxxx, je-li xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxx XXX XXX.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx experimentu xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx i x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx hepatocyty použít 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-XXXX) nebo 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-AAF). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx buněčné linie xxx xxx autoradiografii, xxx i xxx XXX bez metabolické xxxxxxxx lze xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx metabolického aktivačního xxxxxxx xxx použít X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxx.
Látky xx xxxx xxxxxx rozpustné xxxx být xxxxxxxxx x koncentracích až xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxx netoxické xxxxx xx xxxx xxxxx rozpustné xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx případ xx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxxx xxx xxxxxxxxxx kontrolovány xx přítomnosti Mycoplasmat.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Pro xxxxxxxxxxxx hepatocytů xx xxxxxxxxxxx aktivační xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a lymfocyty xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx v xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému.
1.2.3 Xxxxxxx experiment
1.2.3.1 Příprava xxxxxx
Stabilizovaná xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx kultury (xxxxxxxxxx xxxx setřepáním xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), inokuluje xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx ve vhodné xxxxxxx a inkubuje xxx 37 xX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxx médiu x povrchu xxxxxxxxxx xxxxxx.
Kultury xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx založeny xxxxxx xxxxxx metody.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxx obsahujícím 3X-XxX po xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxx ponořena xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx stripping xxxx), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie x xxxxxxxxx
Autoradiografické techniky: Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu x pak xxxx xxxxxxxxx působení 3X-XxX. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, aktivitě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxx xxxxx. X zachycení nejvyššího xxxxxxx XXX xx xxxxx 3H-TdR xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx těmito xxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxxxxxxx xxxxxx x 3X-XxX. X odlišení xxxx XXX a xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx DNA xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx, což xxxxxxx inhibici xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX.
Xxxxxxxxx XXX xxxxxx XXX: Xxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx třeba xxxxxxxx vstup xxxxx xx X-xxxx, jak xxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx bylo xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx. Na xxxxx xxxxxxxxx xx XXX xxxxxxxxxxx x xxxxx x stanoven xxxxxxx xxxxx DNA x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3H-TdR.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx semikonzervativní replikace XXX xxxxxxxx.
1.2.4 Analýza
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx autoradiografie
Xxx xxxxxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx v X-xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx 50 xxxxx x xxxxxx experimentálním xxxx. Xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Množství xxxxxxxxxxxxxxx 3X-XxX x xxxxxxxxxx xx xxxx x xxxx o velikosti xxx jader x xxxxxxxxxx každé xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Xxx xxxxxxxxx LSC XXX xx použije xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx kontroly.
Výsledky xxxx být potvrzeny x xxxxxxxxxxx experimentech.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxxx.
2.1 Vyhodnocení xxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx inkorporace 3H-TdR xx cytoplazmy x xxxxx zrn xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx odděleně.
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3H-TdR xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx x xxxxx xx hodnocen xxxxxx xxxxxxx, mediánu x xxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx zaznamenává jako xxx/μx DNA. Xxxxxxxx xxxxxxx dpm/μg XXX xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x vyjádření distribuce xxxxxxxxxxx.
Údaje xx xxxxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx to možné, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, jejich xxxxxxx a xxxxx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultury, médiu, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2,
- testované látce, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx výběru x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx aktivačním xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx autoradiografických metodách,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx X-xxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx XXX a x xxxxxxxxxxx celkového xxxxxx XXX xxx xxxxxx XXX,
- vztahu xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.19. SCE - XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XX XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
XXX xx xxxxxxxxxx xxxx xxx detekci xxxxxxxxxxxx xxxxx XXX mezi xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx sekvencí XXX mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x identických (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. SCE xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx spojení, xxx je xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx základě xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx SCE xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (BrdU) do xxxxxxxxxxxxx XXX xx xxxx xxxx buněčných xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxx jsou xxxxxxxxxx testované látce x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx exogenního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xx xxxx xxxx replikačních xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx XxxX. Ke xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx ovlivní inhibitorem xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxx x c-metafázi xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx analýzu xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx) xxxx stabilizované xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx buňky xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Mycoplasmaty.
Používají xx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx a kultivační xxxxxxxx (xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2 x xxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx suspenduje v xxxxxxxxxxx médiu xxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx buněk, xxxxxxxx xxxxx xxxx frekvenci XXX.
Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx přítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx úroveň x xxxxxxxxxx xxxx aktivity xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx kultury.
1.2.2.2 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Dále xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxx pozitivní xxxxxxxx xxx xxxxxx:
- xxxxx působící xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx
- xxxxxxx působící xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx
Xx-xx xxxxx, xx možné zařadit xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se nejméně xxx xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinek, ale xxxxxxx musí xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx kultur
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx ze xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx kultivační xxxxxx), xxxxxxxxx xx do xxxxxxxxxxxx nádob ve xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxx 37 oC. Xxx xxxxxxxxxxxx kultury xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx v kultivační xxxxxx, aby na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx než x 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx také xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx lymfocytární xxxxxxx xx připraví z xxxxxxxxxxxxxx krve běžnými xxxxxxx x inkubují xxx 37 oC.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx v exponenciální xxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx dvě xxxxxx, ale xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xx dva xxxxxxx xxxxx, je-li xx třeba. Buňky, xxxxx nemají dostatečnou xxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx, buňky vymyty x xxxx kultivovány x xxxxxxxx xxxxx x XxxX xxx xxxxxxxxxx xxxxx. Alternativně xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx současně s xxxxxxxxxx látkou a XxxX po xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, dokud jsou x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx analyzovány x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx expozici xxxxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x XxxX xx třeba xxxxxxxx v xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX, ve které xx xxxxxxxxxxxxx XxxX.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx buněk
Xxxxx xx čtyři hodiny xxxx xxxxxxxxx kultivace xx xx xxxxxx xxxxx inhibitor dělicího xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx x barvení
Xxxxxxxxx xx připraví xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx SCE xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxx xxxx Giemsa).
1.2.3.5 Xxxxxxx
Xxxxx analyzovaných buněk xx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxx. Obvykle xx xxxxxxx xxxxxxx 25 xxxxx rozprostřených xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Preparáty xxxx xxx zakódovány xxxx xxxxxxxx. V lidských xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx metafáze s 46 xxxxxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxx linií xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxx x ± 2 centromery xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx SCE v xxxxxxx xxxxxxxxxx. Výsledky xxxx být xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx tabulkovou formou. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x xxxxx xxxxxxxx a xxxxx XXX/xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx metafázi x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx vhodnými statistickými xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx pokusu obsahuje, xx-xx xx možné, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: složení média, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx expozice, xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx i xxxx xxxxx působení, metabolickém xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách,
- xxxxx kultur xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (odděleně pro xxxxxx kulturu),
- xxxxxxxxx xxxxx XXX/xxxxx x SCE/chromozóm (xxxxxxxx xxx xxxxxx kulturu),
- kritériích xxxxxxxxx XXX,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx dávka/účinek, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.20. XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX VÁZANÉ XX XXXXXXX U XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. METODA
1.1 Princip xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxxx letální xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx (XXXX) xx Drosophila xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx genových, xxx i xxxxxx xxxxxx, x zárodečných xxxxxxx xxxxx. Je xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx screening xxxxxx x přibližbě 800 xxxxxxxx chromozómu X. Xxxx reprezentují xxx 80 % všech xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-chromozóm xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx x X-xxxxxxxxxx xx fenotypicky xxxxxxx x samců xxxxxxxxx xxxxxxxx gen. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx x hemizygotním stavu, xxx xx její xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, kteří xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. SRLS xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x zvláštnímu vzhledu x uspořádání xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Příprava
1.2.1.1 Xxxxxx
Používají xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx Xxxxxx-5. Xxxxx být xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x vícenásobnou xxxxxxx X-chromozómu.
1.2.1.2 Testované xxxxx
Xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx ve xxxx nerozpustné xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx (xxxx. směs etanolu x Xxxxxx-60 xxxx 80), xxxx xxxxxxxx xx dále ředí xxxxx nebo fyziologickým xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx vehikulu.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx frekvence mutací x xxxxxxxxx skupině xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx třeba xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxxx testované látce xx uskutečňuje xxx xx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx. Zkrmování testované xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx v 0,7% xxxxxxx NaCl a xxxxxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx pokusu xx xxxxxxxx xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx má xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx historické xxxxxxxxx xxxxx, není xxxxx xxxxxxxxx xx experimentu xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.6 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxx xxxxx testované xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Netoxické xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx divokého typu (xx stáří 3-5 xxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx Muller-5 xxxx x xxxx vhodné xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xx xxx xxx, aby xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx efekt xxxxxxxxxxxxxx x účinkem xxxxxxxxx látky v xxxx expozice na xxxxx spermie, xx xxxxxxxxxx ve středním xxxx pozdním xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx X1 xxxxxx narozené x tohoto xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xx. jedna xxxxxx/xxxxxxxx) se xxxxx xxxxxx. X X2 xxxxxxxx je x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx samců xxxxxxxx xxxx. Jestliže x xxxxxxx xxxxxxxx F1 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (nejsou nalezeni xxxxx samci x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), dcery xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx genotypem jsou xxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx, zda xxxxxxxx se opakuje x dalších generacích.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxxx xx zpracují do xxxxx tabulky. Uvádí xx xxxxx hodnocených X-xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx s letální xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx křížení x xxx xxxxxxx testovaného xxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx experimentu.
Xxxxx xx xxxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxx v úvahu x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx liniích xxxx xxxxxxx Drosophily, xxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx vzniklých X2 xxxxxx, xxxxx X2 xxxxxx xxx potomků, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx ovlivněných xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x schéma xxxxxx xxxxxx, výše xxxxx, xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx (x rozpouštědlem) x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.21. XXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXX BUNĚK - XX XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Savčí xxxxx lze použít xxx detekci xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkami xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx používají xxxxx X3X10X1/2, 3X3, XXX, Xxxxxxxxxxxx potkanů x xxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Méně xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx ostatní fyziologické xx xxxxxxxxxxxx změny x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx karcinogenity. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx promotorů. Cytotoxicita xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx ovlivněním xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx cytotoxicity xx vychází xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx byla xxxxxxxxxxxxx relevantní, xxx xxxxxx ji xxxxx xxxxxx k určení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx experimentech, xxxxxxx x některých xxxxx xxxxx x prodloužení xxxxxxxx nebo x xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Buňky
Existuje xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx musí zajistit, xx xxxxx použité x xxxxx transformace xxxxxxxx příslušné xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx karcinogenem a xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx ověřen x xx xx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx x spolehlivost.
1.2.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx média x xxxxxxxxxxxxxx podmínky xxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx transformace.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx suspendují v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx nesmí xxxxxxxx životnost xxxxx, xxxxxxxx rychlost nebo xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Buňky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx a xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx vlastnosti xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Do xxxxxxx xxxxxxxxxxx musí xxx zařazeny xxxxxxxxx xxxxxxxx x použitím xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x vyžadujících metabolickou xxxxxxxx. Musí xxx xxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx kontroly:
- xxxxx xxxxxxxx látky: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx vyžadující metabolickou xxxxxxxx: 2-acetylaminofluoren, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx, xx možné xxxxxxx xxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx látka.
1.2.2.2 Koncentrace
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx dávky. Xxxx xxxxxxxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxx efekt xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx až xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx dobu xxxxxxxx xx použitém testovacím xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx (ev. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx se xxxxx o xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xx xxxxx expozice je x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaná látka x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx. Xxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xxxx být prezentovány x xxxxxxxxx xxxxx. Xx vhodné xxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk jako xxxxxxxx kontrolní xxxxxx x frekvenci xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx přežívajících xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxxxx pokusu
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, informace o:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultury, počtu xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, době inkubace, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádobách, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, metabolickém aktivačním xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx sledovaného xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx xx xxxxxx), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretaci xxxxxxxx.
B.22. DOMINANTNÍ XXXXXXX TEST X XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx letalita xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx dominantních xxxxxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx chemické xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx xxxxx poškozuje xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chromozómů (xxxxxxxxxxxx x numerické xxxxxxxxxxx). Smrt embrya xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxx exponováni testované xxxxx a xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Vzestup mrtvých xxxxxxxxxx na xxxxxxx x exponované xxxxxxx xxx počet xxxxxxx xxxxxxxxxx v kontrolní xxxxxxx xxxxxxxxx postimplantační xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx hodnotí xx xxxxxxx xxxxx žlutých xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx implantací xx xxxxxx x exponované x xxxxxxxxx skupině. Xxxxxxx xxxxxxxxxx letalita xx xxxxxx pre- x postimplantačních xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx je založen xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx samici x xxxxxxxxxx skupině x živým xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Snížení xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx zánikem xxxxx (x.x. xxxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxx).
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx fyziologickém xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxx nebo suspendují xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx pouze xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx látku xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx orální xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxx x jiné xxxxxxx aplikace.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxx, xxxxxxxx dospělá xxxxxxx xxxx náhodně xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny.
1.2.2.3 Xxxxx a pohlaví
Xx třeba použít xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx spontánní variabilitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a silou xxxxxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxx 30 - 50 březích xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pozitivní x xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) kontroly xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx experimentu. Jestliže xxxx má xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivních xxxxxxx x xxxxxxxxx experimentů, xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxx xx vhodných, xxxxxxx dávkách, xxx xxxx prokázána xxxxxxxxx xxxxx (např. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 mg.kg-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší dávka xx xxxxxxxxx známky xxxxxxxx nebo snížené xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxx vysoká dávka.
1.2.2.6 Xxxxxxx test
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx x xxxxx xxxxx 5 x.xx-1 nebo x xxxxx 1 x.xx-1.xxx-1 xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Existuje xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x jednou nebo xxxxx neovlivněnými, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vhodných xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx musí xxx u xxxxx xxxxxxx po dobu xxxxxx jednoho xxxxx xxxx, nebo xxxxx xx xxxxxxxxx spermie xx xxxxxx či xxxxxxxxx xxxxx.
Počet xxxxxx xx xxxxxxxx xx dán xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx sledovaných xx xxxxxxxx.
Samice xxxx utraceny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxxx je xxxxxxxx k xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx tělísek.
2. XXXXX
Xxxxx x počtu xxxxx, počtu březích xxxxx x počtu xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx páření xxxxxx identifikace každého xxxxx a xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx samice musí xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, x xxxxx podané xxxxx, x xxxxx živých x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx živých implantací xx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxx živých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx skupině xx xxxxxxx vypovídá x xxxxxxxxxxxxxxxxx ztrátách.
V xxxxxxx musí být xxxxx xxxxxxxx časná x xxxxxx letalita. Xxxx xxx xxxxxxxxxxx x preimplantační ztráty. Xx mohou být xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx počtem xxxxxxx xxxxx x počtem xxxxxxxxxx nebo jako xxxxxxx průměrného xxxxx xxxxxxxxxx xx dělohu xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx možno, xxxxxxxxx x:
- druhu, xxxxx, xxxx x xxxx zvířat, počet xxxxxx xx každého xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x kontrolních skupinách,
- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, dávkových hladinách x xxxxxxxx jejich xxxxxx, negativních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, údajích x toxicitě,
- xxxxxxx podání x xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx páření,
- xxxxxxxx k průkazu xxxxxx,
- doba xxxxxxxx,
- kritéria xxx xxxxxxxx dominantních xxxxxxxxx efektů,
- xxxxx xxxxx/xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.23. ANALÝZA XXXXXXXXXXXXXX ABERACÍ X XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX
1. METODA
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 483, Mammalian Xxxxxxxxxxxxxx Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxxxxx testu xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx způsobující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané chemickými xxxxxxxx xxxx většinou xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx určena x xxxxxxx numerických xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Chromozómové xxxxxx a xxxxxxxx xxxx jsou x xxxxxxx xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xx analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxx xxxxxxxxxx indukci xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx testem xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Tato xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx buňky.
Aby xx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxxxxxx první xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx buněčném xxxxxx. Xxxxx informace x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, kde xx zjišťují xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx ve spermatocyty.
Xxxxx test xx xxxx je xxxxx xx xxxxxxxxxx, zda xxxx xxxxxxxx aktivní x somatických xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Mimoto xx xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, farmakokinetiky x xxxxxxxxxxx procesů XXX.
X xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx generací xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx citlivosti xxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx tedy xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx ovlivněných xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spermatogonie. Xxxxx jejich polohy xx varleti pak xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx nemusejí xxx xxxxxxxxxx krevním xxxxxx xxxxx anatomické x fyziologické bariéře Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx bariéře.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxx xxxxx xxx xxxx vhodná.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození chromozómu, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx obou xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: strukturální poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx obou chromatid xx stejném xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx chromozóm-ring)
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx hodnotit porušení xxxxxxxxxx jedné xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x případech, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx osu xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómu je xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxx: achromatická xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx oproti normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx buňky.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx haploidního xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx (3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx dělení ve xxxxxx metafáze, pozorovaná xxxx delece a xxxxxxxxx, a výměny.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx způsobem xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx usmrtí. Před xxxxxxxxx xx na xx působí xxxxxx xxxxxxxxxxx metafázi (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo Xxxxxxxxxx®). Xx xxxxxxxxxxx buněk xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xx xxxxxxxx se v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxx, xxx xxxxx použít xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx rozdíly by xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx minimální x x každého xxxxxxx xxxxxx přesahovat ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx B.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx mladí xxxxxxx jedinci xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx uspořádat xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vlivy xxxx, xxx x xxx jsou xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Příprava xxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx x xxxxxx stavu x je-li to xxxxx, látka xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx její xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / vehikulum
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx nepříliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx testu xx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) kontroly. Xx xxxxx xxxxxxxx xx zvířaty ve xxxxx xxxxxxxxx stejně.
Xxxxxxxxx kontroly xx xxxx ve spermatogoniích xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxx xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx spontánní xxxxxx.
Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx tak, aby xxxx účinky xxxxxx, xxx přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost zakódovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx časovém xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx vhodných xxx xxxxxxxxx kontrolu.
Látka | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxx xxxxxxx | 79-06-1 | 201-173-7 |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx ovlivněné xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zpracování, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx x neovlivněných xxxxxxx, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx mutagenní xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx zvířat
X každé xxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxx xxx minimálně xxx analyzovatelných xxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx schéma
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx dvou xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x objemnou dávku, xxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxx rozdělit, xx. xx xxx xxxxx xx den xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx dávkování xxxxxx být vědecky xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx xx xxxxxx xx expozici látce xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxx, provádí se xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 24 a 48 xxxxx po xxxxxxxx. X ostatních xxxxx (xx. mimo xxxxx xxxxxxxx) xx xxxxx vzorků provádí xx 24 xxxxxxxx xxxx po 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx účinku (6).
Xxxxx xxxx mohou xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx odběru xxxxxx. Např. jedná-li xx x látku xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mitózy, xxxx xxxxx x účinky xxxxxxxxxxx xx S-fázi xxxxx, xxxx vhodnější xxxxxxxx doba odběru xxxxxx (1).
Xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx působit xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx případ xx případu. Xxxxx xx provádí aplikace xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx (1,5xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxxxx i x dalších intervalech, xxxxxxxx-xx xx xx xx xxxxxx.
Před xxxxxxxxx se zvířatům xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx z xxxx xx vhodném xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. U xxxx je tento xxxxxxxx zhruba 3-5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4-5 xxxxx.
1.5.3 Dávkování
Provádí-li xx studie ke xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx provádět v xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx živočišného xxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx užívají xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx tři xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx odběru xxxxxx xx pak xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx je xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx takové známky xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx byly xxxxxxx.
Látky, jež x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx hormony xxxx xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x vyhodnocují xx xxxxxx od xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xxxx xxx také xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx známkám xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx poměru xxxxx xxxxxxxxxxxxx x první x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx( xxxxx pokles xxxx xxx vyšší xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx ve xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné xxxxxxx účinky a xxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx neočekává xxxxxxxxxxxx, xxxxxx být xxxxxxxxx celá xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx úrovní. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx expozice xx může xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxxx vpravuje xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx intraperitoneální injekcí. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx x jiné způsoby xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xx sondou nebo xxxxxxx najednou xxxxxxx, xxxxxx xx velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 g xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx se xxx objemová xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx x jednoho xxxx z xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx působí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x fixuje xx. Buněčná xxxxxxxx xx nakape xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx.
1.5.7 Analýza
X xxxxxxx jedince se xxxxxxxxx minimálně 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx v xxxxx xxxxxxx). Xxxxx xxxxx xx xx snížit, xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx fixační postupy xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxx xxxx buněk počet xxxxxxxxx v hodnocených xxxxxxx xxxxx číslu 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx se prezentují x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou je xxxxxxx. X každého xxxxxxx xx vyhodnocuje xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. X experimentálních x xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx počet a xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xx xx celkové xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx, xxxxxxx xx u xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx i xxxxxx x negativní xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x první x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xxx, xx xx x xxxxxxx jedince xxxxxxx 100 dělících xx xxxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx pouze xxxxxx, xxxxxxx xx mitotický xxxxx x xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, nebo zřetelný xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx a s xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Nejprve xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (8); statistická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx výsledky je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx látka, při xxxxxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx, xx v xxxxx systému xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vykazuje xxxxx pozitivní, xxxx xxxxxxxxx výsledky, xx xxxxxxxxxxx případech xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinku xxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx bez xxxxxx xx xxxxx opakovaných xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx oberace. Xxxxxxxxx výsledky ukazují, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx příslušného živočišného xxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xxxxxxxxxx.
Je xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx tkáň (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto informace:
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x stabilita testované xxxxx rozpouštědla/vehikulu, pokud xx xxxxx.
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx x věk xxxxxx,
-původ, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny.
Podmínky xxxxxx:
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx velikosti xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx dávku (mg/kg xxxxxxxxx / den),
- podrobnosti x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- metody xxxxxxxxxx toxicity,
- xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx koncentrace a xxxxx působení,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aberací,
- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxx,
- kritéria, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo nejednoznačná.
Xxxxxxxx:
- známky xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxx spermatogonií x xxxxx x druhé xxxxxxxxx metafázi,
- xxx a počet xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx zvlášť,
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx,
- xxxxx buněk x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, je-li xx xxxxx,
- statistické xxxxxxx, byly-li xxxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx pozitivních kontrol,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Závěry.
X.24. XXXX XXXX X MYŠÍ
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xx xx in xxxx xxxx xx xxxxxx, x xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx chemickým xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxx jsou melanoblasty x cílovými xxxx xx, které kontrolují xxxxxxxxxx srsti. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx srsti. Xxxxxx xxxx xxxxxx dominantních xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxx buňkách vytvářejících xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xx zaznamenán x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x embryonálních buňkách.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx fyziologickém xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx suspendovány xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx efekt. Používají xx xxxxxxx připravené xxxxxxx testované xxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxx X (nonagouti, x/x; xxxxxxxxxx, pink xxx, cch x/xxx x; xxxxx, x/x; xxxxxx, xxxxx xxx, x xx/x xx; xxxxxxx spotting, x/x) xxxx kříženy xxx x xxxxxx HT (xxxxxx, xxxxxxxxx, brachypody, xx a xx/xx x xx; leaden xxxxx, xx xx/ /xx xx; xxxxx xx/xx) nebo s xxxxxx X57 XX (xxxxxxxxx, x/x).
Mohou xxx xxxxxxx i xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xx budou xxxxxxx xxxxxxxxx potomci. Xxxx. xxxxxxx xxxx xxxxxx XXXX (nonagouti, x/x; xxxxxx, x/x) x XXX (nonagouti, x/x; brown, x/x; xxxxxx d/d).
1.2.1.2 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx dostatečný xxxxx zabřezlých xxxxx, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx vzorku je xxxxxxx na xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxxx myší x x kontrolních xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pouze x xxxxxxx, xx bylo xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx samic xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx ovlivněné xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx kontroly). Xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx laboratoře xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x pozitivních xxxxxxx získané x xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx mutagenním xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxx xxxxx použity, xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx nebyla mutagenita xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxx xx používá xxxxxx aplikace sondou xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekce xxxxx xxxx. Xx-xx xx vhodné, xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxx jiný způsob xxxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx, z xxxxx xxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx vrhu.
1.2.2 Popis xxxxxxx
Xxxxxxx jsou xxxxxxxx ovlivněna xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx 8., 9. xxxx 10. den xxxxxxxx, xxxxxxx xx 1. xxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Tyto xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 a 9.25 xxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx látkou xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dnů.
Xxxxxxx
X mláďat xx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x čtvrtým xxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx se tři xxxxx xxxxx:
(x) xxxx skvrny x xxxxxxx 5 xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, o kterých xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (XXXX);
(x) xxxxx xxxxxx typu agouti xx xxxxxxxxx x xxxxx mléčných xxxx, xxxxxxxxx, hrdla, xxxx, xxxxxxx slabin x xxxxxxxxx čela x xxxxxxxxxxx xx, že xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (MDS);
(x) xxxxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v srsti xxxx výsledek xxxxxxxxxxx xxxxxx (XX).
Xxxxxxx xxx skupiny jsou xxxxxxxxxxxxx, ale pouze xxxxxxxx, XX, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Obtíže x xxxxxxxxx xxxx XXX x RS xx možné xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx malformace xxxxxxx.
2. XXXXX
Získaná xxxx xxxx xxxxxxx jako xxxxxxx xxxxx sledovaných xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx somatickými xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Údaje xxxx xxxx uváděny xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx vrh.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, informace x:
- xxxxx použitém xxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- průměrné xxxxxxxxx xxxx x experimentální x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x při odstavení,
- dávkových xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx rozpouštědle,
- xx xxxxxx xxx xxxxxxxx byla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- x xxxxxxx podání xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx s WMVS, XXX x XX x experimentální x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx morfologických xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxxx x RS, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX X MYŠÍ
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Test xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x numerické xxxxxxxxxxxx změny v xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx potomků xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. Nositelé xxxxxxxxxxx a XX-xxxxxx xxxxxxxx sníženou xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx xxx výběr F1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Úplná xxxxxxxxx xx způsobena některými xxxx translokací (X-xxxxxxx x x-x xxx). Xxxxxxxxxxx xxxx analyzovány xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, nebo X1 samců či xxxxxxx xxxxxxx F1 xxxxx. Xxxxxx XX xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pouze 39 xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v izotonickém xxxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky.
1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Aplikuje xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx intraperitoneální xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx x jiné xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx provádí xx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxx specifický xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu xx xxxx být xxxxx xxx osm x měla xx xxx relativně xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxx indukovaných xxxxxxxxxxx vyžadovaném pro xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Test xx obvykle xxxxxxx xxxxxxxx samců X1 xxxxxxx. Nejméně 500 xxxxx x X1 xxxxxxxx je xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxxx xxxxxxxxxxx také xxxxxx X1 generace xxxxxxx, xxx xx vyžaduje 300 samců x 300 xxxxx.
1.2.1.4 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol x xxxxxxxxx xxxxxx z xxxx xxxxxxxxxx, mohou xxx xxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxx vlivu xx xxxxxxxxxxx chování xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx/xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Popis xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx x xxxxx po 35 dnů.
Počet xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx schématem xxxxxxxxxxx x musí xxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx analyzována. Xx konci období xxxxxxxxxxx xxxx samice xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx. Po xxxxxx xx xxxxx zaznamenat xxxxx, velikost xxxx x pohlaví xxxxxx. Xx xxxx xxxx xxxxx x samičí xxxxxxx odděleni xx xx xxxx xxxxxxxx xx experimentu.
1.2.2.2 Zjišťování xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx X1 xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx cytogenetickou xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx samců X1 xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx pomocí testu xxxxxxxxx.
(x) Xxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x F1 xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx a/nebo analýzou xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x snížené xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx každý xxxx xxxxxxxxx myší.
Velikost xxxx: X1 xxxxx xxxxxx k testování xxxx xxxxxxxx samostatně xx klecí se xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo stejné xxxxxxx. Klece xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 18. xxxx xx xxxxxxxxx. Velikost xxxx x xxxxxxx F2 xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxx porodu, hned xxxx xxxx odděleni. Xxxxxxxx xxxx testovány X1 xxxxxx, F2 xxxxxxx malých xxxx xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou translokací x jakéhokoliv jejich xxxxxxxx potomka. XX-xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx x 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx xx. xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxx xxxxxxxx x dalšího testování, xxxxxxxx xxxxx X2 xxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx předem xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jinak xxxx xxxxxxxxxxx druhé x xxxxx xxxx. X1 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx být xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx X2 xxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx podrobena xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx u xxxxxx translokací je xxxxxxxxx xxxxx embryí, xxxxx xxxxxx počet xxxxxxx implantací xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxxx X1 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx denní xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx jsou usmrceny 14. - 16. xxx x jsou xxxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxx zárodky.
(b) Xxxxxxxxxxxxx analýza
Xxxxxxx xxx-xxxxxx jsou připraveny xxxxxxxxx x testes. Xxxxxx xxxxxxxxxxx jsou xxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx multivalentních xxxxx xx stadiu xxxxxxxxx - xxxxxxxx X x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx s multivalentními xxxxxxxxxx splňuje xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx byl xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx X1 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx vyšetřeno xxxxxxx 25 xxxxx x xxxxxxxxx - xxxxxxxx X. Analýza xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx x xxxxxx testes x xxxxxxxxxx xxxxxx před xxxxxxxxxx xxxx u X1 samic xxxxxxxxxxx XX. Xxxxxxxxxx neobvykle xxxxxxxx x/xxxx krátkého xxxxxxxxxx v xxxxx x 10 buněk xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx samčí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (x-x typ). Xxxxxxx X-xxxxxxxxxxx translokace xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx pruhováním xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Přítomnost 39 xxxxxxxxxx ve xxxxx 10 xxxxxxxx je xxxxxxx xxx XX xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx formou.
Xxx xxxxx interval xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu a xxxxx pohlaví (sex xxxxx).
Xxx xxxxx xxxxxxxxx X1 xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x individuální velikosti xxxx X1 xxxxxx xxxxxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxxxx počet xxxxxx x mrtvých xxxxxxx x kontrole x xxxxxxxxxxxx počty xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx F1 xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X xx uvádí xxxxx xxxx multivalentních figur x xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx každého xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx X1 xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx počet x xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X XX xxxxx xx uvádí xxxxxxxx velikost xxxx, xxx ratio X2 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx analýzy.
V xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx F1 translokací, xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x skutečném xxxxx xxxxxxxxxxx translokačních xxxxxxxxxxxx.
Xxxx být xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx xx možné, informace x:
- xxxxx xxxx, xxxxx x xxxx exponovaných xxxxxx,
- xxxxx rodičovských xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxxx podmínkách, xxxxxxxx xxxxx ovlivňování xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx x xxxxxxxxxx analýzy xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx translokací xxxxxx xxxxx o březosti x obsahu xxxxxx,
- popis xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx x obrázky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.26. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx 90 xxx v odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx každé skupině xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx experimentu. Před xxxxxx se zdravá xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin.
Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx x pitné xxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx pokusu xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum nebo xxxx aditiva, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx nemají xxxxxxx účinek. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxx data, xx možno je xxxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx xxxxx tomu. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx mladší xxx 6 xxxxx, x xxxxxx xxxxxxx starší xxx 8 xxxxx. Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx test xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx hladinu xxxxx použít nejméně 20 zvířat (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx musí xxx nullipary a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx studie, xx xxxxx zvýšit celkový xxxxx zvířat o xxxxx xxxxxx, která xxxxx zabita před xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx podávat xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx podávání sledovat xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx aplikace, podává xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, a xx ve stejném xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xx xxxxxxxx xxxxxxxx dávka. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx neměla xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx existují xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx měla xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 úrovně xxxxx, mají být xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx výsledků obtížné.
Xxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxx xx použít xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx-1 potravy) nebo xxxxxxxxxx dávkování ve xxxxxx k tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxx xxxxxx, xxxx xx xx tak xxx každý den xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (týdenních xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) přizpůsobovat xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxx-xx se 90denní xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x nevyvolá-li xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx den (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx tato xxxxx) žádné toxické xxxxxx, xx možno xx dalšího testování xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx látka x potravě, xx xxxxx zajistit, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky nebránily xxxxxxxx xxxxxx zvířat.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx objevení, xxxxxx a xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx kterém xx objeví x xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Zvířata v xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, x posouzení zotavení x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx.
Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx týdně.
Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolu xxxxxx, xxx pokud možno xxxxxxxxxxx ke ztrátám xxxxxx xxxx např. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání nebo xxxxxxxx xxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x výjimkou xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
U xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx přístrojem xx xx provést xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x na xxxxx xxxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx zvířata.
(x) Xx xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx zahrnovat stanovení xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx xxxxxxxxxx.
(c) Xx xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx druhu x xxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, dusík močoviny, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx v séru. Xxxx další xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx spektra xxxxxx.
(d) Analýza xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx přiměřené xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, má xx uvážit xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, aby se xxxxxxxx vysychání.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: všechny tkáně x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx, aorta, (slinné xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (kůže), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, tlusté a xxxxx xxxxxx, konečník, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxx xxxxxx, (samičí xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx nerv, (xxx), xxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxx, (kost xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx), páteřní xxxxx xx třech xxxxxxxx - xxxxx, střed xxxxxx a bederní, x (xxxxx xxxxx). Xxxxx v závorkách xx xxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx orgánů x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx u všech xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx třeba xxxxxxxx všechna xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Je xxxxx vyšetřit xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx zvířat xx xxxxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxx xx mají xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx k zjištění xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx stavu zvířat. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxx a xxxxxx x xxxxxx skupin. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx rutinně, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x vysokou xxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se provést xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x orgánech, x kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx informace:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxxx,
- experimentální xxxxxxxx - úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x podle xxxxx,
- xxxxxx bez xxxxxx, xxxxx ji xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, případně údaj x přežití zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (včetně výsledků xxxxxxxxxx xxxxxx moči),
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx možné,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.27. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX ORÁLNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx podávání xxx xx, studie xx xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxx xxxxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxxxxxxxxxx), x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx během xxxxxx, x xxxxxxx, která xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, xx pitvají.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 dní xxxx testem jsou xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx, x jakých xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxx podávat x xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx orální xxxxxxxx. Xxxx zvířatům xx testovaná xxxxx xxxxxx po xxxxx xxxx pokusu stejnou xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx o xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx používat x xxxxxx xxxxx nehlodavců. Xx xxxxx pracovat xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx; x případě xxx xx má x podáváním začít xx věku xx 3 xx 6 xxxxxx a xx xxxxxxx než 9 xxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx orální xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx živočišný xxxx x xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx nejméně 8 xxxxxx (4 xxxxxx a 4 xxxxx). Xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx být takový, xxx xxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx x jednu kontrolní xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx. Nejnižší xxxxxx xx neměla vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx existují xxxxxx xxxxxxxx u člověka, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx jen toxický xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx než 3 xxxxxx xxxxx, mají xxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx xxxxxx.
Ve xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx úrovní xxxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx xx x uhynutí rovněž xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xx málo xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx ani aplikované xxxxxxxx ani další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx normální xxxxxx xxxxxx.
Podává-li xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx buď xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx alternativu xx xxxxx xxxxx. Podává-li xx látka xxxxx, xxxxxxxxx x kapslích, xxxx by xx xxx dít každý xxx xx stejnou xxxx, a xxxxxxxxx x týdenních xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx orální xxxx xxxx předběžný xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx má použít xxxxxx dieta.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxx-xx 90denní xxxx níže xxxxxxxx xxxxxxx x nevyvolá-li xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx den (xxxx xxxxx vyšší - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx tato xxxxx) xxxxx toxické xxxxxx, xx možno xx xxxxxxx testování xxxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx toxická látka x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx a trvání. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx x xxx, xx kterém xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v xxxxx xx dobu 90 xxx. Xxxxxx-xx se xxxxx jiným xxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx látku 5 dní v xxxxx.
Xxxxxxxxxx zahrnuje (xxx není xx xx omezeno) změny xxxx, srsti, očí, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Příjem xxxxxxx (x příjem xxxx xxx xxxxxxxx testované xxxxx x pitné xxxx) x hmotnost xxxxxx xx zaznamenávají xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxx. Po skončení xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Umírající zvířata xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x pitvat.
U xxxxx zvířat včetně xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx konci xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx změny, vyšetří xx všechna xxxxxxx.
(x) Xx začátku xxxxx, x xxxxx xxx x měsíčních xxxxxxxxxxx xxxx uprostřed x xxxx xx xxxxx xxxxxx se xx provést hematologické xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx xxxx například xxxx xxxxxxxxxxx, protrombinový xxx (Xxxxxxx), trombinový xxx xx počet xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx xx konci pokusu xx má provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx jater x ledvin. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx látky. Doporučuje xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx podle živočišného xxxxx a xxxxx), xxxxxxxxxxx transferáza (dříve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx séra) x aspartát aminotransferáza xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx stanovení: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx biochemické xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx účinků. Xxxx xxxxxxx vzorků krve xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xx více xxx 24 xxxxx).
(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje xxxx xxxxx postup, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx provede xxxxx xxxxxxxxxx zevní xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x varlata xx xx nejdříve xx xxxxx xxxxx xx vlhkém stavu, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx orgány x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx možná xxxxxxxx histopatologická vyšetření: xxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, podvěsek xxxxxxx, xxxxxx žláza, xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx místě brzlíku,(průdušnice), xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x vaječníky, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lymfatické xxxxxx, (samičí xxxxxx xxxxx), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) x (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo pokud xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx x tkání xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxx, které xxxx xxxxxx nejvyšší dávka, x u zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx orgánech, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx poškození x xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx, xxxx když xx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxx poškození x procentuálně xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx poškození. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxxxxx xxxx xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx podmínky,
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, pokud se xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- úroveň xxx účinku, xxxxx xx lze stanovit,
- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o přežití xxxxxx xx konce xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx, xxx byly pozorovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx výsledky (včetně xxxxxxxx případných xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx výsledků, kde xx xx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.28. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Testovaná xxxxx se xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 90 dní x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx skupině xxxxx xxxxxx dávky. Během xxxxxx podávání xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx zjistily xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí do xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx jednotlivých experimentálních xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx srst na xxxxxx pokusných xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx možné, xxxx xx xx však xxxxxxx cca 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nebo xxxxxxx xx potřeba xxxxxxxx xxxxx týden. Při xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx xx to, xxx xx nepoškodila xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nejméně 10 % xxxxxxx těla. Xx třeba xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx připravované xxxxxx kůže a x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxx x tuhými xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx upraveny xx xxxxxxxx formy, xx xxxxx zkoušenou xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxx kontakt x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xx možno použít xxxxxxx potkany, králíky xxxx morčata, případně x xxxx zvířecí xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx být xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx subchronický xxxxxxxx xxxx xxxx předběžný xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx stejný živočišný xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx) xx zdravou xxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx se zvířata xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx xxxxx podávat xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx nejvyšší xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx sledovat xxxxxxxx, přetrvávání xxxx xxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx hladiny xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx - kontrolní xxxxxxx x aplikací xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx být xxxxxxx 6 xxxxx denně. Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx stejnou dobu. X xxxxxxxxxxx týdenních xxxx čtrnáctidenních xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx usnadnění aplikace, xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokusným xxxxxxxx, x to xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx aplikuje xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx hladina xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxx xxx v xxxxx xxxxx. Nejnižší xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx xxxxx tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx účinek xx xxxxxxxxx zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 hladiny xxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxx voleny xxx, aby vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxx x střední xxxxxxxx xxxxx x x kontrolní skupině xx počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx testované xxxxx x těžkému podráždění xxxx, je xxxxx xxxxxx koncentraci, xxx x xxxxxx dávkové xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx dokonce xx xxxxxxxx okolností xxxxx xxxxx ukončit a xxxxxxx xxx znova x nižšími xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 xxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, není xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávat xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx dobu xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx se xxxxxx a opět xxxxxx toxické účinky.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx studované xxxxx xxxxxxx 7 xxx v xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, je třeba xxxxxx po xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx reparace xxxxxxxxx účinků xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Doba xxxxxxxx xxxx nejméně 6 hodin xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx celou xxxxxx, xxxxx představuje xxx 10 % xxxxxxx xxxx, x vysoce xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx plocha xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx pokusné xxxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx vrstvě.
Xxxxxxxxx xxxxx je xx expoziční xxxx xxxxxxxxx v kontaktu x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx mulového obvazu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx vhodným xxxxxxxx překrýt, xxx xx mulový xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x aby xx zabránilo orálnímu xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx pohybu, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nelze xxxxxxxxx.
Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx otravy xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, očí x xxxxxxx, a také xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxxxxx týdně. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx týdně x spotřebu potravy. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zvířat jako xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx přežila, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x zvířata x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě vyřadit, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx xx provést xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx x na xxxxx studie nejlépe x xxxxx xxxxxx, xxx alespoň x xxxxxxxx dávky x x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, vyšetří se xxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx konci pokusu xx má provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(c) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxxxxx transferáza (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) x aspartátamino xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x celkové xxxxxxxxx x séru. Xxxx xxxxx charakteristiky, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro studium xxxxxxx xxxxxxx účinků.
(x) Analýza xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx nejsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, lební, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxx. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx a tkáně xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x mozečku, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx na xxxxx xxxxxxx, (průdušnice), xxxxx, xxxxx, xxxxx, (slinné xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, přídatné xxxxxxxx xxxxxx, žlučník (xx-xx přítomen), jícen, xxxxxxx, dvanácterník, tenké, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzliny, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), (xxxxxx xxxx x kostní xxxxx), (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx) x (xxxxx xxxxx). Tkáně x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx indikováno podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx kůže, xxxxxx a xxxxx xx xxxxx provést x xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx dávka, x u zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx vyšetřit xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx postižení.
(x) Je xxxxx xxxxxxxx cílové xxxxxx x xxxxxxxxx dávkových xxxxxxxxx.
(d) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x zjištění xxxxxxxx xxxxxxx, protože to xxxxxxxxx obraz zdravotního xxxxx zvířat. Další xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx těchto xxxxxx nemusí provádět xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx orgánech, na xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou.
(x) Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx provést xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx, u xxxxxxx byly zjištěny xxxxxx x ostatních xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x lézemi x procentuálně počet xxxxxx s jednotlivými xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx k tomu xxxxx použít kteroukoliv xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení,
- podmínky xxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví a xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxx vývoj,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- oftalmologické xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.29. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx inhalační xxxxxxxx - xxxxxx xx hlodavcích)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně xx xxxxxxx dobu, x xxxxxxxxxxxxxx koncentracích, xxxxx xxxxxxx xxxxx koncentraci, x xx xx 90 xxx. Xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x atmosféře xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vehikulum. Xxxxx xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zjišťují se xxxxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, i xx, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx v xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx užije xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo jiná xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, pokud xxxxxx známy xxxxxx xxxxx xxxx. Pracuje xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx začátku xxxxxx nemá variační xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx testem, v xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx úroveň xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 samců). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx budou xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx další xxxxxxx (satelitní skupinu) 20 zvířat (10 xxxxxx každého xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx xxxxxxxx expozic sledovat xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Expoziční koncentrace
Xxxxxxx xx nejméně xxx xxxxxxx s xxxxxx úrovní xxxxxxxxxxx x jedna xxxxxxxxx xxxxxxx (případně kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxxxx - v xxxxxxxxxxx stejné jako x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx). S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx koncentrace tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx než 3 xxxxxx koncentrací, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx xxx být xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xx exponují xx xxxx 6 xxxxx xx xxxxxxxx rovnováhy xxxxxxxxxxx studované xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je možné xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxx xx používá xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx proudění xxxxxxx x výměnou xxxxxxx 12krát za xxxxxx, aby xxx xxxxxxx xxxxxxxxx obsah xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx box, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx byla xx nejvyšší. Xxx xxxxxxxxx stability xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx expozice xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx jinými xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x zotavení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x čas, ve xxxxxx xx objeví x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3. Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se exponují xxxxxxxxx xxxxx denně, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx dobu 90 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx dalších 28 xxx xxx xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx být 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx vlhkost xx xxx mezi 30 % a 70 %, s xxxxxxxx xxxxxxx, kde xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxx xx nepodává xxxxxxx xxx voda.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx inhalační xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolou xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx byly xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx stabilních xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
a) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
x) Skutečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx hodnoty o xxxx než ±15 %. U některých xxxxxx x xxxxxxxx, xxx této úrovně xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx koncentrace xxx xxxxxxxx, jak xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx tak xxxxx, xxx je xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx stálosti distribuce xxxxxxxxx částic.
x) Xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx
x) Xxxxx xxxxxxxx x xx xx se zvířata xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx zaznamenávají; xxxxx zvíře xx xxxx individuální protokol. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, stupeň x trvání. Pozorování x kleci zahrnuje xxxxx xxxx, srsti, xxx, sliznic, xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx i xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx chybného zařazení. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx přežila, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx provést xxxx podáváním testované xxxxx a na xxxxx xxxxxx xxxxxxx x všech zvířat, xxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxx xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx látky. Doporučuje xx stanovovat vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x kmene), alaninamino xxxxxxxxxxx (xxxxx glutamát-pyruvát xxxxxxxxxxxx) x aspartátamino xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx transamináza), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx moče xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxx, xxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, má xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
U xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx prohlídku povrchu xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, lební, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx se xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx médiu x ohledem na xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx (xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx x fixovat vhodným xxxxxx, tak xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx vhodnou), tkáň xxxxxxxxxxx, mozek - x xxxxxx medula/pons, xxxx mozku x xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, srdce, xxxxx, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx břišní, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, (přídatné xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (samičí xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), periferní xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx stehenní xxxxxx xxxxxxxxx ploch), (páteřní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx hrudní a xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx s cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci, a x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.
(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx zvířat xx skupinách x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetřovat, protože xx poskytuje obraz xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x zvířat xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, musí xx však xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx postižení ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(e) Používá-li xx satelitní skupiny, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. Z xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x počet xxxxxx x lézemi, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx počet zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Je x xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu pokusu xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx: Popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx likvidace xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx boxu, pokud xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti vzduchu, xxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrací x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx o expozici xx xxxxxxx do xxxxxxx x xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxxxx xxxx údaje:
x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,
c) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx přiváděné xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxx,
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx,
x) xxxxxx velikostí xxxxxx (u aerosolu),
- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx ji xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- oftalmologické nálezy,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.30. XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, několika skupinám xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx větší xxxx xxxxxx zvířat. Během x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx jsou xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx podmínkách xxxxx 5 xxx xxxx započetím xxxxx. Xxxx testem xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Preferovaným xxxxxx je potkan. Xx xxxxxxx předchozích xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (hlodavce xxxx xxxx). Je xxxxx xxxxxx zdravé x xxxxx jedince xxxxx xxxxxxxxx xxxxx laboratorních xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx studie xx xxxxx rozdíl xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx než ± 20 % od xxxxxxx. X případě, xx xxxxxxx studii xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx x obou xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx 40 xxxxxx (20 xxxxx x 20 samců), xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx a xxxxxx xx xxx březí. Xxxxx xx záměrem xxxxxxx xxxxxxx zvířata xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx počet xxxxxx.
V xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat (xxxxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx ne xxxx xxx 4 xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xx třeba použít xxxxx xxx xxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx. Nejvyšší dávka xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx nadměrné xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat prokazatelné xxxxxxx toxicity. Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx voleny ve xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxxx x nízkými xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxx vzít x xxxxx výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx podávána x xxxxx xxxx xxxx x potravě, xx xxxxx zajistit, aby x xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí se xxxxx negativní kontrolní xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx vehikulu.
1.2.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Volba způsobu xxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx testované látky x pravděpodobném způsobu xxxxxxxx člověka.
Použití xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx problémy. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxicita x důsledku xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx odvozena x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx rozsahu xxxxxxx vstřebávání, xxxxxxxx x předchozích xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx
Xxx, xxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx z gastrointestinálního xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x pitné xxxx xxxx xxxxxxx x tobolce.
Xxxxxxx xx xx měla xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v týdnu, xxxxxxx dávkování pět xxx x xxxxx xxxx vést k xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x xxxxxx xxx aplikace, a xxxxx xxxxxxxx výsledky x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx s xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx je xxxxxxxxxx xx přijatelné.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx inhalační xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxx aplikace, xxxx xxx uvedeny podrobněji xxxxxxxxx x této xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx situacích.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvíře xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx pět xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx expozice), xxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx denně xx xxxx xxx x xxxxx (kontinuální xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx hodinou xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx i xxx xxxxxxx expozičního xxxx. V xxxx xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx exponována xxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, xx x xxxxx xx zvíře 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx expozice x ještě xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx expozice závisí xx xxxxxx studia x na xxxxxx xxxxxxxx, která xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x úvahu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx prostředí mohou xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx určité xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx exponují x xxxxxxxxxxx komorách, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx proud xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x rovnoměrná xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní x expoziční xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, tak xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx udržuje xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx úniku xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx prostřední. Komory xx xxxx minimalizovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx by v xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx zvířat xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.
Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx průtoku xxxxxxx komorou xx xxxx xxx nejlépe xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx více xxx 15 % xxxxxxx xxxxxxx;
(x) xxxxxxx a xxxxxxx: pro hlodavce, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 22 ± 2 xX a xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx případů, xxx je voda xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx by měly xxx kontrolovány xxxxxxxx;
(x) xxxxxx velikosti xxxxxx: měla xx xxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx u xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx částice xx měly xxx x xxxxxxxxxxxx velikosti xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx atmosféry xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx zóny xxxxxx. Vzorek xxxxxxx xx xxx být xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx je xxxxx exponováno, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx suspendovanému xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx část aerosolu xxxx respirabilní. Analýza xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx být prováděna xxxxx během xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x poté xxxxx xxxxxxx tak často, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx exponována.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx měla xxxxx xxxxxxx 12 měsíců.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx pozorování xx měla xxx xxxxxxxxx denně x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxx zvířat xx xxxxxx, např. xxxxx nebo uložení xx lednice x xxxxxx, která xxxx xxxxxxxx mrtvá a xxxxxxx xxxx utracení xxxxxx, která jsou xxxxx nebo moribundní. Xxxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx spolehlivě xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx toxických xxxxxx, x xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nemocí, xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx x všech xxxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx toxických xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx.
Hmotnost xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx za xxxxx xxxxx po tomto xxxxxx. Je třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x pitné vodě) xxxxx během xxxxxxx 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx intervalech, ledaže xx xxxxxxxxx stav xxxx změny tělesné xxxx xxxxxxx nutnost xxxx frekvence xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx destiček xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, šest xxxxxx x xxxx x přibližně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, a xx xxxxx xx vzorcích xxxx shromážděných xx xxxxx xxxxxxxxxx resp. xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx je to xxxxx, vzorky ve xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx měl být xxxxxxx vzorek před xxxxxx od xxxxxxxxxx.
Xxxxx klinické xxxxxxxxx xxxxxx naznačí zhoršený xxxxxxxxx xxxx zvířat xxxxx studie, xxx xx xxx stanoven xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx ve xxxxxxx s nejvyšší xxxxxx x x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx nebo údaje x vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx se x x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxx moči
Xxxxxx xxxx 10 potkanů xxxxxxx pohlaví xx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xx stejných xxxxxxxxxxx xxxx hematologické zkoušky. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx- xxxxxxxxxxxxx).
1.2.3.4 Biochemické xxxxxxxxx
X přibližně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxx xxxxxxxx krevní xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx všech xxxxxxxxxx x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx, pokud xxxxx pro tytéž xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxx toho xxxxxxxx vzorky před xxxxxx. Z těchto xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x jsou xxxxxxxxx následující xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx glutamát xxxxxxx transaminázy1), glutamát xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, ornithin xxxxxxxxxxxxx,
- metabolismus xxxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx na xxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx ledvin, např. xxxxx močoviny x xxxx.
1) nyní xxxxx jako xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx známá jako xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
1.2.3.5 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx byla xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx být xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx nálezy.
Všechny xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx histopatologické xxxxxxxxx. To xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx:xxxxx3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, štítné xxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, trachey x xxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, ilea, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, močového měchýře, xxxxxxxxxxxx xxxxx, slinivky, xxxxx3), xxxxxxxxxxx pohlavních xxxxxx, xxxxxx mléčné xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), sterna x xxxxxx dření x xxxxxxxx xxxxx včetně xxxxxx, x očí. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx cestou xx xxxxxxxxxx těchto xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx studiích, xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx studiích, xxxx jsou inhalační xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx nosu, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxx-xx provedena jiná xxxxxxxx xxxxxxxxx, informace xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx mikroskopickým vyšetřením, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
3) tyto xxxxxx x 10 zvířat xx pohlaví x xx skupinu u xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx viditelné xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxx, mají xxx xxxxxxxx mikroskopicky. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx následující xxxxxxx:
(x) mikroskopické xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a tkání x kompletním popisem xxxxx xxxx xxxxxxxxxx:
1. u xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
2. x xxxxx zvířat xx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx abnormity způsobené xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxx také xx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx zkrácení xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx, které xx xxxxx xxxxxxxx toxickou xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx nižší dávkou xx xxxxxxx popsaným xxxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx normálně xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx laboratorních xxxxxxxxxx, xx. xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jsou xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx každou testovanou xxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx. Výsledky xx xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx statistickou xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx uznávané xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx o testu xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx následující informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, a xxx, xxx xx xx xxxxxxx, stability xxxxxxxxxxx xxxx velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x expozici: xx xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (např. standardní xxxxxxxx) a měly xx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
(x) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx inhalační aparatury xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx)
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx částic (xx-xx to xxxxxxxxxx)
- xxxxxxx úrovně (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) a xxxxxxxxxxx
- údaje x xxxxxxx odpovědi podle xxxxxxx x dávky
- xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxx
- doba xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx zda zvířata xxxxxxx xx xx xxxxx
- popis xxxxxxxxx x jiných xxxxxx
- doba, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx abnormální příznak x xxxx xxxxx xxxxx
- xxxx x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x výsledky
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxx moči)
- xxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx xxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X XXXXXXXXXX
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx pokusných xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxx skupinu, xxxxxxx x xxx xxxxxx březosti, xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx datem xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx i x xxxxxxx je použita x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx embryo- x xxxxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxx nikdy xxxxxx xxxxx, stejného xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx laboratorních xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Oplozené xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Oplodnění může xxx zajištěno přirozenou xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx. Testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx začíná xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Den xxxx xxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx orgánů xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx zpomaleného xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Testovací xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx, xxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx potkan x xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx všeobecně xxxxxxxx kmeny. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx xxxxxx plodnost x xxxx xx xxx x něj xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Zvířat jsou xxxxxxx jednotlivě.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Pro xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx aspoň 20 březích potkanů, xxxx nebo xxxxxx xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu studované xxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxx a xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupinu. V xxxxxxx, že xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xx vehikulu, xx xxxxx zahrnout xx xxxxxx i xxxxxxx, xxxxx bylo xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx znát xxxxxxxxxxxxx vlastnosti vehikula: xxxxx xxx teratogenní xxx mít xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) se xxxxxxx stejným způsobem xxxx xx xxxxxxx x testovací skupině x výjimkou aplikace xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx chemické xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx mírné xxxxxxx xxxx, xxx xx xx více jak 10 % xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinky. Střední xxxxx by xxxx xxx voleny tak, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mezi nízkou x vysokou xxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
X xxxxxxx, že xxxxx x nízkou xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx 1000 mg.kg-1 prokazatelně xxxxxxxx projevy embryotoxicity xxx teratogenicity, není xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx dávek.
1.2.2.5 Xxxx expozice
Xxxxxx xxxx testu xx xxx, kdy je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zátka x/xxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxx). Doba xxxxxxxx xx xxxx zahrnovat xxxxxx xxxxxx organogeneze. Xx xxxx xxxxxx xx možno xxxxxxxxx 6. xx 15. xxx x potkana x myši, 6. xx 14. den x xxxxxx x 6. až 18. xxx x xxxxxxx. X xxxxxxx, že xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx byla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx připočítat x předchozím xxxxxx xxxxx xxx. Xxxxx xxxx alternativy xxxxx xxxxxxxx xxxxx den xxxx xxxxxxxxxx porodem.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx ztrát xxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx denně během xxxxxxxxxxx období xxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx na počátku xxxxxxxx látky xxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx během xxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx posledního xxxxxx. Xxxxxxx známky toxicity xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx doby xxxxxxx, stupně a xxxxxx. Samice xxxxxxxxxx xxxxxx potratu nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx utratit x xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetřit. X xxxxxxxxxx xx xxxxx pokračovat x xx ukončení xxxxxxxx xxxxx xx do xxxx přibližně xxxxx xxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx období xxxxxxxx, xxx vyhnout xx xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxx porodu. Pozorování xxxxxx x xxxxx xx mělo zahrnovat xxxxxxxxxxxx xxxxx kůže x srsti, očí x xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, autonomního x centrálního xxxxxxxxx xxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Každý xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxx potravy x xxxxx zvířata.
1.2.3.1 Xxxxx
Pokud xxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx na konci xxxxxx, xx třeba x samic xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na morfologické xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx mohly xxx vliv xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xx xxxxx odstranit xxxxxx x její xxxxx xxxxxxxx x ohledem xx úmrtí xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx počet xxxxxx xxxxxxx. Obvykle je xxxxx xxxxx dobu xxxxx xxxxxxx v xxxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx jednotlivých zárodků x xxxxxxxxx průměr. Xx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xxxx x křečků xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxx xxxxx xxxxxxx až xxxxxxxx xxxx x x zbytku vhodnými xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx je třeba xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x určitým xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx možno xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1. Zpráva x xxxxx
Zpráva x xxxxx xx xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx každou xxxxx,
- xxxxx xxx xxxxxx (xxxxx xx xxxx možno xxxxxxxx),
- xxxx xxxxx xxxxx studie xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx konce xxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx potravy,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxx (xxxxxx historických xxxxx),
- údaje x zárodcích (xxxx/xxxxx, xxxxxxx, defekty xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (živé/mrtvé xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.32. TEST XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx xxxxxxx sedm xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx na xxxxxxx, po xxxxx xxxx xxxxxx zvířat. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx tumorů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Zvířata xx xxxxxxx x xxxxxxxxx podmínkách ustájení x krmení xxxxxxx xxx dní xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx xxxxx xxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolních x exponovaných xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Preferovaným xxxxxx xx potkan. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx i xxxxx xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx odstavení xxxxxx. Xx začátku xxxxxx by neměl xxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X případě, xx vlastní xxxxxx xxxxxxxxx xxxx subchronické xxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx použít stejný xxxx x xxxx x xxxx studiích.
1.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxxxx se xxxxx nejméně 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 samců) xxx každou úroveň xxxxx a souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx plánováno průběžné xxxxxxxx xxxxxx, počty xx třeba zvýšit x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx takto xxxxxxxx xxxx koncem xxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx úrovně x xxxxxxxxx expozic
Xxxxx xx při xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity, jako xx mírný xxxxxx xxxxxxxx přírůstků (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx dožití xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx tumory.
Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň by xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx růstem, vývojem x xxxxxx života xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx by neměla xxx xxxxx než 10 % xxxxxx xxxxx. Střední xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx úrovní xx xxxx vzít v xxxxx xxxxxxxxx testy x xxxxxx toxicity.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx denně. Je-li xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx do xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx k dispozici.
1.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná kontrolní xxxxxxx je xxxxxxxxx x každém xxxxxx x exponovanou skupinou, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jehož xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx není xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx podání závisí xx fyzikálních x xxxxxxxxxx charakteristikách xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx expozice x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Xxx, kde se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx traktu x xx-xx xxxxxx xxxxx z xxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx orální xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx mohou xxxxxx testovanou xxxxx x potravě, xxxxxxxxxx x pitné vodě xxxx podanou x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx sedm dní x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx pět dnů x xxxxx xxxx xxxx x vymizení xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x období xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx výsledky x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x ohledem xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx přímo na xxxx může xxx xxxxxxx xxxx simulace xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx a xxxx modelový xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx poškození.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx než xxxx xxxxxxx aplikace, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace xxxx xxx xxxxxxx alternativou xx specifických xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvíře xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx denně xx pět xxx x xxxxx (přerušovaná xxxxxxxx), xxxx v xxxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx denně xx xxxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx jednou xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx x pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Hlavní xxxxxx xxxx přerušovanou x xxxxxx xxxxxxxx xx v tom, xx x xxxxx xx zvíře 17 - 18 xxxxx xx ústup xxxxxx xxxxx xxxxxxxx s xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Volba xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Nicméně, xx xxxxx vzít x xxxxx xxxxxx technické xxxxxx. Například, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx pití x krmení během xxxxxxxx a potřebou xxxxxxxxxxxxxxx (a spolehlivé) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace par x technik monitorování.
Xxxxxxxxx komory
Xxxxxxx xx exponují v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jejichž xxxxxxxxxx xxxxxxxx dynamický xxxxx xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní a xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vyjma expozice xxxxxxxxx xxxxx. Uvnitř xxxxxx se obvykle xxxxxxx mírný xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx okolního xxxxxxxxx. Komory by xxxx minimalizovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat. Obecně xx x xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(a) Xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx expozice xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Teplota a xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °C x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x rozptýlení xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxx xxxxxx. Oba xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
(x) Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: měla by xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx xxxxx u xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx xx xxxx xxx x respirabilní velikosti xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx atmosféry xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx být xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, a xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x když xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Analýza xxxxxxxxx částic xx xxxx xxx prováděna xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx během xxxxxxx xxx xxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx stabilitu distribuce xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx. Xxxx xx měl být xxxxxxx v 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx. Nicméně, pro xxxxxxx kmeny xxxxxx x xxxxx dobou xxxxxx xxxx. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 měsíců pro xxxx a xxxxxx x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx, xxxx počet xxxxxxxxxxxxx x nejnižší xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx klesne xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx zřetelný xxxxxxxx rozdíl xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx zvlášť. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx to xxxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx projevy, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xxxxx negativní xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx údajů (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x žádné xxxxxxx xxxxx xxx 10 % x xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx x myší x xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Pozorování
Xxxxx xxxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, autonomního x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chyb x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxxx x všech xxxxxx. Xxxxxxxx pozornost je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxx se zaznamenává.
Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potravy (x xxxx xxx, xxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, ledaže xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx váhy xxxxxxx xxxxxxx jiné xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Tělesné xxxxxxxxx se zaznamenávají xxxxxxxxxxxx u všech xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx čtyři týdny xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Klinická vyšetření
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxx pozorování xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x zhoršeném xxxxxxxxxx stavu xxxxxx xxxxx studia, xx xxxxx vyšetřit xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.
Xx 12 xxxxxx, xx 18 xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx provede xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx vzorcích xx xxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x u xxxxxxx. Xxxxx tato xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx patologických změn xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx vyšetří i x xxxxxxx x xxxxxx nejblíže xxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx by měla xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, včetně xxxx, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx tumory nebo xxxx, xxxx xxxx, xxxxx by xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx uchovat.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx možné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx (xxxxxx řezů xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, mozečkové xxxx, xxxx mozkové), xxxxxxxx mozkový, štítná xxxxx x příštítná xxxxxxx, tkáň xxxxx, xxxxxxx x plíce, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, pankreas, xxxxxx, děloha, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xxxxxx, tračník, konečník, xxxxxx xxxxxx, representativní xxxxxxxxxx xxxxxx, samičí xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx (xxxxx, xxxxxxx hrudní x bederní) x xxx.
Xxxxxxxx xxxx x močového xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Naplnění plic x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X inhalačních studiích xx xxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxx, která xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxx testu, x x všech xxxxxx skupiny xxxxxxxxx x x nevyšší xxxxxx.
(x) Všechny xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx, xxxxx xxxx podezřelé jako xxxxxx, xx vyšetří xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
(x) Je-li xxxxxxxx rozdíl x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx lézí xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx skupinou, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx provede x daném orgánu xx xxxxx i x dalších xxxxxxxxx.
(x) Xx-xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx než u xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx nižší xxxxxx.
(x) Je-li xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx doklad x xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mohly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx kompletně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx dávkovou xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx sumarizují xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx každou testovanou xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx zjištěné xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx použity xxxxxxxxx xxxxxxxx statistické xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx o xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx testu: Xxxxx expozičního xxxxxxxx xxxxxx konstrukce, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx používá. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx xx xx žádoucí, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Údaje x expozici: xx xxxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu x xxxxxxxxxx zařízení,
(x) xxxxxxx a xxxxxxx vzduchu,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx inhalační xxxxxxxxx děleno objemem xxxxxxx),
(d) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,
(x) skutečné koncentrace x xxxxxxx zóně,
(x) mediány xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx xx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx (včetně xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx podle xxxxxxx, dávky x xxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxx během xxxxxx nebo zda xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznak x xxxx xxxxx xxxxx,
- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x tělesné hmotnosti,
- xxxxxxx hematologické xxxxx x xxxxxxxx,
- nálezy xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.33. XXXXXXXXXXX XXXX XXXXXXXXX TOXICITY/KARCINOGENITY
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx je určit xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx u xxxxxxxxx druhu savců xx dlouhodobé xxxxxxxx.
Xxx xxxxx účel xx xxxx karcinogenity xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx použitá xxx tuto satelitní xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx použitá xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxx karcinogenity xxxx zkoumána xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx větší xxxx xxxxxx xxxxxx. Během x po expozici xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx denně pozorována xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx v pokusných xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx nejméně pět xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx skupin.
1.2.1 Experimentální xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx druhem xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx možno xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx i xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Expozice xx xxxx xxx xxxxxxxx xx nejdříve xx odstavení mláďat. Xx xxxxxxx studie xx xxxxx rozdíl xx váze xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. V xxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxx předchází xxxx xxxxxxxxxxxx orální toxicity, xx xxxxx použít xxxxxx druh x xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Počet a xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx použije nejnémě 100 zvířat (50 xxxxx a 50 xxxxx) na xxxxxx xxxxxx dávky x xxxxxxxx kontrolní skupina. Xxxxxx xx xxxx xxx nullipary a xxxxxxxxxx. Je-li plánováno xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se xxxxx x počet xxxxxx, xxxxx budou takto xxxxxxxx xxxx koncem xxxxxx.
Exponovaná xxxxxxxxx xxxxxxx (skupiny) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jiné, xxx xxxx tumory, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx 20 xxxxxx xxx každé xxxxxxx, xxxxxxx satelitní xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxx by xxxx vyvolat příznaky xxxxxxxxx toxicity, jako xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx přírůstků (xxxx xxx 10 %), xxx podstatnějších xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx tumory. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň by xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxx toxicity. Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxx 10 % vysoké xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx vysokou a xxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx satelitní xxxxxxxxxx skupiny a xxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx dávka xxx exponovaná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx zřetelné příznaky xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x pitné xxxx xxxx přimíšena xx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.4 Kontroly
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx s exponovanou xxxxxxxx, vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx případech, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x aerosoly nebo xxxxxxx-xx xx pro xxxxxx aplikaci xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx charakterizována, xxxxxx xx další negativní xxxxxxxxx skupina, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ani xxxxxxxx.
1.2.5 Způsob aplikace
Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx způsobu podání xxxxxx na xxxxxxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Tam, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xx-xx xxxxxx jedna x xxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx přednost xxxxxx aplikaci, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx důvody. Xxxxxxx xxxxx dostat xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx nebo podanou x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx v xxxxxx xxx aplikace, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x následné xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx praktické xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx je považováno xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx kůži xxxx xxx zvolena xxxx xxxxxxxx hlavní cesty xxxxxx u xxxxxxx x xxxx modelový xxxxxx xxxxxxxx kožního xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxxxx komplikovanější xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Intratracheální xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx napodobují předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx šest hodin xxxxx po xxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), xxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin xxxxx xx sedm xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), s xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx zvířat xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. V xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, xx x xxxxx má zvíře 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx delším xxxxxxx během xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx expozice závisí xx xxxxxx studie x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Například xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx simulaci xxxxxxxx xxxxxxx prostředí xxxxx xxx narušeny xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx expozice a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) generace xxxxxxxx xxxx určité koncentrace xxx x technik xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx konstrukce xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx za hodinu, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x rovnoměrná distribuce xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní x expoziční xxxxxx xx měly mít xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, tak xxx byly xxxxxxxxx xxxxxxxx srovnatelné xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxx xx xxxxx úniku xxxxxxxxx látky do xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx minimalizovat xxxxxxxxxx testovaných xxxxxx. Xxxxxx by x xxxxx udržení stabilní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxx by měla xxx xxxxxxx kontrolována xxxxxxxxxxx,
(b) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx expozice xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx neměla xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °X x xxxxxxx v xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx je xxxx používána x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx komory. Xxx parametry xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(d) xxxxxx xxxxxxxxx částic: měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx x xxxxxxxxx komor x tekutých nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx zvíře. Xxxxxx xxxxxxxxx komor xx xxxxxxxxx z dýchací xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měl xxx reprezentativní pro xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx zvíře xxxxxxxxxx, x měl by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx velikosti xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx stabilitu xxxxxxxx, x xxxx xxxxx expozic tak xxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxxx stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx zvířata xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx karcinogenity xxxxxxxx xxxxx část xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx. Xxxx by měl xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx x xxxx x křečků x 24 měsících x potkanů. Nicméně xxx xxxxxxx kmeny xxxxxx x xxxxx xxxxx života resp. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxx by xxxx xxx 24 xxxxxx xxx xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx pro xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxx xx 25 %. Xxx ukončení xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx rozdíl xxxxxxxx, každé pohlaví xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx skupina x vysokou xxxxxx xx xxxxxxxx toxických xxxxxx, xxxxxx to xxxxx vést k xxxxxxxx celého testu, xxxxx ostatní skupiny xxxxxxxxxx xxxxxxx projevy, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Aby bylo xxxxx uznat xxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx obsluhy) v xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 10 % x přežití ve xxxxx xxxxxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx x xxxx a xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx každého xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx umožnilo xxxxxxxx patologie, xxxxx xx xxxxx k xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxxx projevů xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Pozorování
Xxxxx pozorování xxxxxx x klecích zahrnuje xxxxx kůže x xxxxx, očí a xxxxxxx, jakož x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
U xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx) se xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx nutná, aby xx zabránilo xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx. v důsledku xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx zvířata xx xxxx xxx xxxxxxxx x pitvána.
Xxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxxxxx x očních xxxxxx x mortalita xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx vývoji xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, lokalizace, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx každého xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx tumoru xx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx provádět xxxxxx xxxxxxxx potravy (x xxxx xxx, kde xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx během xxxxxxx 13 xxxxx x pak přibližně xx tříměsíčních xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Hematologie
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, hematokrit, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx bílých krvinek, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx měření xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx za tři xxxxxx, šest xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, x na xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx 10 potkanů xx pohlaví x xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx xx xxxxx, vzorky xx xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx svědčí x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx stavu xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba vyšetřit xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Diferenciál má xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx provede xx xxxxxxxx xx zvířat xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx nebo xxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx naznačí xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x u xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, než xx vysoká xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx od 10 xxxxxxx každého xxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Následující xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx buď xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx podle xxxxx x pohlaví:
- xxxxxx xxxx, xxxxx x hustota x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, glukóza, xxxxxxxxx, xxxxxxx krvácení (semi-kvantitativně),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).
1.3.2.3 Biochemické xxxxxxxxx
V xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx biochemická xxxxxx xx xxxxx nehlodavců x 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví, pokud xxxxx pro tytéž xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Od xxxxxxxxxx xx vedle xxxx xxxxxxxx xxxxxx před xxxxxx. Z xxxxxx xxxxxx xx připravena xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx následující zkoušky:
- xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx,
- koncentrace xxxxxxxx,
- testy xx funkci jater (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, aktivita xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), xxxxxxxx xxxxxx transaminázy2), gamma xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx,
- testy na xxxxxx ledvin, xxxx. xxxxx močoviny x xxxx.
1) nyní xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx aspartát xxxxxxxxxxxxxxxx
1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx pitva xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx včetně xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx viditelné xxxx, xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, které xx xxxxx xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx. Mělo xx xxx provedeno porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx změn s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Všechny xxxxxx x tkáně xx měly xxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx: xxxxx3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx mozkového, xxxxxx žlázy a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, xxxxx, slinných xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, jejuna, xxxx, xxxxxxx střeva, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, samičí xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, hrudní x xxxxxxx), xxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx kosti xxxxxx kloubů, a xxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx xx konzervaci xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, má xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx trakt včetně xxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxx-xx provedena xxxx klinická vyšetření, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx být x xxxxxxxxx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
3) Xxxx xxxxxx z 10 xxxxxx xx xxxxxxx x xx skupinu xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx orgánech xxxxx xxxxxx satelitní xxxxxxx x xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx patologické xxxxx xxxxxxxxx látkou, xxxxxxx xx histologicky cílové xxxxxx všech xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx části xxxxxx věnované xxxxxxxxxxxxx xxx jejím xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
(x) xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx a tkáních xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx;
(x) všechny xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x léze, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, se vyšetří xxxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx;
(x) xx-xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx lézí xxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx i x xxxxxxx xxxxxxxxx;
(x) je-li přežití xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x skupina x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx;
(x) je-li ve xxxxxxx s vysokou xxxxxx doklad x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nižší dávkovou xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx sumarizují ve xxxxx tabulek, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx testu, xxxxx zvířat vykazujících xxxxxx zjištěné xxxxx xxxxx, xxxx jejich xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx s tumory xxx utracení. Výsledky xx hodnotí odpovídající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx použity jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Zpráva x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- podmínky testu: xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx xx xx žádoucí, stability xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Xxxxx x xxxxxxxx: ve xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. směrodatná xxxxxxxx) by měly xxxxxxxxx:
(x) rychlost xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vstupující xx inhalační xxxxxxxxx xxxxxx objemem xxxxxxx),
(x) povahu vehikula, xx-xx xxxxxxx,
(e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
(f) xxxxxx xxxxxxxxx částic (xxx kde relevantní),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x koncentrace,
- xxxx incidence xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx x typu xxxxxx,
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx zda zvířata xxxxxxx xx do xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx ,
- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byl pozorován xxxxx abnormální příznak x xxxx další xxxxx,
- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx hematologické xxxxx a xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx (včetně výsledků xxxxxxx xxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx x popisem použitých xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
X.34. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - JEDNOGENERAČNÍ XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává několika xxxxxxxx samic x xxxxx v odstupňovaných xxxxxxx.
Samci xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx růstu x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx úplného xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (přibližně 56 xxx u xxxx x 70 xxx x xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx účinek xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx rodičovské xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx xx dobu xxxxxxx xxxx estrálních xxxxx, xxx byl zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx obou pohlaví, x xxxx gravidity x kojení xxxxx xxxxxxx.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx zahájením xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx dvou xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx látku xxxxxxx v potravě xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Všechna xxxxxxx xxxxx dostávají xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx testu. Pokud xx používá x xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx aditivum, xxxx xxx x xxxx xxxxx, že xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Pokusná xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx druhu
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx zdravá xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx být xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx co xx druhu, kmene, xxxxxxx x xxxx x/xxxx věku. Plodnost xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx. Xxxxxx x xxxx skupinách, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxx xxx odstavena xxxx xxxxxxxxx aplikace.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxxxxx cca 20 xxxxxxx samic x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxxxx. Cílem je xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x tím xxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnocení xxxxx xxxxx xx plodnost, xxxxxx gravidity a xxxxxxxx chování v X xxxxxxxx, kojení, xxxx x vývoj xxxxxxxxx generace X1 xx xxxxxx do xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxxx testu
Xxxx x potravu xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx zvláštních xxxxxxxxx xxxx mateřských xxxxx x je xxx poskytnut materiál xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Použijí se xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxxxx pro aplikaci xxxxxxxxx xxxxx vehikulum, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dostávají xxxxxxxxx x xxxxxxxxx použitém xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x využití xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx kontrolní xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxx případě - xxxxx xx xxxx xxxxxxx jejími xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo povahou xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx minimální xxxxxxx xxxxxx, které xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nepříznivé účinky, xxx x xxxxxx xxx u potomstva.
Xxx xxxxxx sondou xxxx v tobolkách xx dávka stanoví xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx změny xxxx. V případě xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx být případně xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx látek x nízkou xxxxxxxxx, xxxxx se ani xxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx toxickým xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx úrovních. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx účinky xx xxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx samcům xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) začne xx xxxx pěti xx devíti xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx obdobím xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx na konci xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx pokračuje x xxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) začne xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx aspoň xxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx po xxxx tři xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, v xxxx gravidity xx xx odstavení X1 xxxxxxxx. Je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx znalostí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx xxx připouštění
Xx možno použít xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x jeden xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).
X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx otěhotnění xxxxx xx dobu 3 xxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx zátky. Xxx 0 těhotenství xx definován xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx spermatu.
Xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x cílem zjistit xxxxx xxxxxxxxxxx páru. Xx je xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Velikost vrhů
Xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx plodnosti xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx odstavení xxx standardizace xxxxxxxxx xxxx. Pokud se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx po porodu xx xxxxxxxx všech xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx jedinců xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx xx xxx; pokud xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx standardizovat xx jiné xxxxx, xxxx. 5 xxxxx x 3 xxxxxx. Xxxx menší xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé xxxxx xx xxx pozorováno xxxxxxx jednou xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x všechny xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx zaznamenávají. Příjem xxxxxxx xx měří xxxxx xxx xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Během gravidity xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx a x průběhu xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx (a xxxx, xxxxx se látka xxxxxx v xxxxx xxxx) xx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx váženo. Xxxxxxxxxx X zvířata xx xxxx první xxx xxxxxxxx x pak xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx dospělé xxxxx.
Xxxx gestace xx xxxxxx od xxx 0 těhotenství. Xxxxx xxx se xx xxxxxxxx xx xxxxxx vyšetří x xxxxxxx se xxxxx x pohlaví xxxxxx, xxxxx mrtvých a xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx anomálií.
Xxxxx mláďata x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx dnu se xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx defekty. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxx xxxx xx xxxxx xxxx po xxxxxx, xx 4. x 7. dnu a xxxxx každý xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx individuálně. Xxxxxxxx xx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx.
1.3.5 Patologie
1.3.5.1 Xxxxx
Xx utracení nebo xxxxx xx všechna xxxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx abnormality xxxxx xxxxxxxxxxx změny se xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx žláza, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx P xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx doposud xxxxxxxxx x jiných mnohadávkových xxxxxxxx, provede xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx nejvyšší xxxxx x xxxx x xxxxxx, která zemřela x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx x x X zvířat ostatních xxxxxxxxx skupin. V xxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx vyšetřují xxxxxxx xxxxx makroskopicky xxxxxxxxx. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx orgány xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx mají xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxx xx sumarizují x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx plodných xxxxx, počet xxxxxxxxx xxxxx, xxx změn x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx statisticky xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx použít xxxxxxxxxx xxxxxx přijímaná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxxxxxx by měla xxxxx možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx odezvě v xxxxxxxxxx xx dávce x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx plodností, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx ukončení xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx každého xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx,
- toxické x xxxxx účinky na xxxxxxxxxx, potomstvo x xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé abnormální xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.35. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip testovací xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx rodičovské (X) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx růstu x xxxxxxx x průběhu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x xxxx a 70 dnů x xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nepříznivý xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx spermatogenezu.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx látku xx xxxx alespoň dvou xxxxxxxxxx xxxxx, aby xxx zachycen jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx testovací xxxxx na xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx poté xxxxxxxxxx. V době xxxxxxxxxxx se testovaná xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx, x době xxxxxxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xx látka xxxxxxxx xxxxxxxx filiální xxxxxxxx X1 x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx a xx xx xxxx xxxxxxxxx X2 generace.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx metodu xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx testovací xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxxxx xxxxxxx (P) xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx během experimentu. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx podání xxxx xxxx možné. Xxxxxxx xxxxxxx látku xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx testu. Xxxxx xx xxxxxxx x usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx, xxxx být x nich známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx potkanům xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx P xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx s nízkou xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx druhu, kmene, xxxxxxx a xxxx xxxx věku. Plodnost xxxx xxx ověřena x obou xxxxxxx. Xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx xxx dostatečný xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x přibližně stejným xxxxxxxx xxxxxx. Cílem xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x tím xxxxxxxx spolehlivé hodnocení xxxxx xxxxx na xxxxxxxx, průběh xxxxxxxxx x xxxxxxxx chování, xxxxxx, xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 od početí xx dospělosti, a xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X2 xx xx odstavení.
1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xx libitum. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx kontrolní. Xxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxx, pak xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx objemu. Pokud xxxxxxxxx xxxxx snižuje xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxx další xxxxxxxxx skupiny, xxxxxxxxx xx xx výživy.
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má x xxxxxxxx případě, xxxxx to xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx látky x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, vyvolávat xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx populaci. Xxxxxxx xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, které xx xx xxxx xxxxxxx testované xxxxx, x nejnižší xxxxx xx xxxxxx vyvolávat xxxxx pozorovatelné nepříznivé xxxxxx, xxx u xxxxxx ani x xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx nebo v xxxxxxxxx xx dávka xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x přizpůsobuje se xxxxx týden xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx těhotných xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. nebo 6. dni od xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxxx xxxx
V případě xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx dávka 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx dávkových úrovních. Xxxxx předběžná xxxxxx xxxxx, xx vysoká xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, nemá xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx dávkových xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx rodičovské generace X xxxxx xx xxxx pěti xx xxxxxx xxxxx, aspoň xx pětidenní aklimatizaci xx odstavení. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx připouštění (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx se xxx xxxxxx x vyšetří xx xxxxx období xxxxxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx utraceni x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx pokusu.
Xxxxx xxxxxxxx samicím rodičovské xxxxxxxx X xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx aspoň xxx týdny před xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx pokračuje pak xx celé tři xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxx xx xx odstavení X1 xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx změna dávkovacího xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, např. x xxxxxxx metabolismu resp. x bioakumulaci.
Aplikace xxxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx xx odstavu x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx dvěma xxxxxxx).
X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx s xxxx xxxxxx xx společné xxxxx xx otěhotnění xxxxx xx xxxx 3 týdnů. Každé xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxx xxxx vaginální xxxxx. Den 0 xxxxxxxxxxx xx definován xxxx den nálezu xxxxxxxxx zátky nebo xxxxxxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxx spermatogeneze, xxxxxxx xxxxxxxx X1 xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 11 xxxxx u xxxx x 13 xxxxx x potkanů. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx generace X1 se xxxxxxx xxxxxxx páry x xxxxxxx vrhů téže xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx.
Dvojice, x xxxxxxx nedojde x oplodnění, je xxxxx xxxxxxxx x xxxxx zjistit xxxxx xxxxxxxxxxx páru. To xx xxxxx buď xxxxxxxxxxx další příležitosti x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx jedinci obou xxxxxxx nebo mikroskopickým xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx vyšetření xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx porodit normálně x xxxxxxx o xxx potomstvo xx xxxxxxxx xxxxxxxxx bez xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vrhů. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx standardizuje, xx xxxxx dodržet xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx a 4 xxxxx na xxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxx xxxxx, xxxx. 5 xxxxx a 3 samice. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx standardizovat. Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx F2 xx provede obdobně.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx ztíženého xxxx prodlouženého xxxxxx x xxxxxxx příznaky xxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx. Příjem xxxxxxx xx měří xxxxx xxx xxxx, xxx xxxxx doby xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx kontrolovat xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxx, xxx je xxxxxxxxx váženo. Xxxxxxxxxx X a X1 xxxxxxx xx váží xxxxx xxx xxxxxxxx x pak týdně. Xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx individuálně xxx xxxxx xxxxxxx zvíře.
Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx dne 0 těhotenství. Každý xxx se co xxxxxxxx po porodu xxxxxxx x xxxxxxx xx počty x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx čtvrtém xxx xx uchovají xxx xxxxxxxxx xx xxxxx defekty. Živá xxxxxxx se spočítají x xxxx xxxx xx zváží ráno xx xxxxxx, xx 4. a 7. xxx a potom xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx studie, kdy xxxx xxxxxxx zvážena xxxxxxxxxxxx. Pozorují se x zaznamenávají xxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X x X1 xx utrácejí, jakmile xxxx xxxxx je xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx X1 nevybraná xxx připouštění a xxxxxxx zvířata xxxxxxxx X2 xx xxxxxx xx odstavení.
Po xxxxxxxx nebo xxxxx xx všechna xxxxxxxxxx xxxxxxx P x X1 makroskopicky vyšetří xx strukturní xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx změny, xx xxxxxxxx pozorností x orgánům xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx zemřelá xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Vaječníky, xxxxxx, děložní hrdlo, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, prostata, xxxxxxxx x další cílové xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx X x X1 xx uchovají xxx mikroskopické xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx mnohadávkových xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x všech X a X1 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx dostávající xxxxxxxx dávku, xxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx, x xxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx. Orgány, které xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx skupin xxxxxx, xx xxxxxxx x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx již bylo xxxxxxx, reprodukční orgány xxxxxx podezřelých x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx mikroskopické xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx začátku xxxxxx, počet xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx x procento zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Může xx použít xxxxxxxxxx xxxxxx přijímaná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Zpráva x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx odezvě x xxxxxxxxxx na xxxxx x pohlaví xxxxxx ukazatelů plodnosti, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí x xxxxxxx xxxxxx xxxx zda zvířata xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxx,
- tabulka xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx vrhu, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x individuální xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx x xxxxx účinky xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X x X1 xxxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxx xxxxx údajů, xxxxx xx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.36. XXXXXXXXXXXXXX
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx látka xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx opakovaně x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Látka xxxx. xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx účelu xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx v exkretech.
Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxx" xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx použito xxxxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx poskytlo xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx sloučeniny x xxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx testovací xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx zvířata xxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx. Před xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx xxxxxx. Xxx xxxxxx speciálních otázek xx xxxx xxxxxx xxxxx mladých, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx zvířat.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx více xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxx xx druzích xxxxxxxxx nebo uvažovaných xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx testovanou xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx by xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx než ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Pro xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 4 zvířat xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx dávku. Xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx určitému xxxxxxx, xxx za xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx potřeba xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx rozdílné xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví. X xxxxxxx xxxxxxxxx druhů xxxxxx (xxxxxx xxx xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
Je-li xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx určení xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx brát x xxxxx jak xxxxx xxxxxx, která xxxxx utracena x xxxxxx xxxxxxx bodu, xxx xxxxx xxxxxxxx xxxx, x nichž xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx-xx studován metabolismus, xxx velikost xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Zahrnuje-li xxxxxx xxxxx počet xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, pak xxxxxxxx xxxxxxx zvířat xx xxxx xxxxxxx x počtem xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx skupině xxxxx xxx xxxx než 2 xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxx xx to, xxx xxx xxxxx resp. xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky ve xxxx retence, xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
X případě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx testované xxxxx. Xxxx xx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx které xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx účinky a xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx toxické xxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xx určitých podmínek xxxx být xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxxxxxxxxx studie xx xxxx xxx prováděny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x je-li to xxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx jsou xxxxxxxxx x xxxxxxxxx toxikologických xxxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx podávána xxxxxx sondou nebo x potravě, aplikována xx xxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx xxxx xxx užitečné xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx po intravenózní xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x distribuci xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx vehikula x xxxxxxxxxx látkou. Pozornost xx xxxx xxx xxxxxx věnována xxxxxxxx xx vstřebávání x xxxxxxx, xx-xx testovaná xxxxx podána xxxxxx xxxx x xxxxxxx, x potřebě xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx-xx testovaná látka xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx denně x příznaky xxxxxxxx x další xxxxxxxxxx xxxxxxxx údaje zaznamenávány xxxxx x xxxxx x xxxxxx počátku, xxxxxxxxx a xxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
Po xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx xxxxxxxx přiměřeným xxxxx. Ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je možno xxxxxx zvířata před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
1.3.1 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx rychlosti a xxxxxxx absorpce xxxxxxxx xxxxx xxxxx být xxxxxxx různé xxxxxx x nebo xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx1), x xx xxxx.:
- xxxxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx metabolitů x xxxxxxxxx xxxx. x xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx vzduchu x xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx akutní xxxxxxxx) mezi testovanou x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx resp. xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ledvinami xxxx testovanou x xxxxxxxxx x případně xxxxxxxxxx skupinou,
- xxxxxxxxx xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx metabolitů x plazmě xx xxxx a xxxxxxxxx x daty xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.
1) X této xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx, xx xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
V xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx 2 xxxxxxxx, x xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx schématu mohou xxx xxxxxxx xxxxx xx xxx:
- xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx kvalitativní xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx stanovení koncentrací x xxxxxxxx testované xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx ze zvířat x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxxxx
Při xxxxxx vylučování xx xxxxx xxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx žluč. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx se x xxxxxx exkretech xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx podání xxxxx, a to xxx xx xxxxxxxxx 95 % z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 7 xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx speciálních xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx také xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
X určení xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxx objasněna xxxxxxxxx metabolitů x xxxxxxxx odpovídající metabolické xxxxxx tam, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx získání xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxx prospěšné provedení xx xxxxx xxxxxx.
Xxxxx informace o xxxxxx xxxx metabolismem x toxicitou xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx neproteinových sloučenin xxxxxxxxxxxx - XX xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Získané xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx studie xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx doplněných xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x charakteristiky variability xx xxxxxx k xxxx, dávce, tkáni x orgánům (pokud xx xx xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx prováděné xxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxx podmínky, xxxxxx,
- charakteristika xxxxxxxxx materiálu, xxxxxxxx xxx použit,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx podání,
- xxxxxx(x) podání x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx x x ostatní xxxxxxxxxx xxxxxx,
- metody xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx včetně vydechovaného xxxxxxx,
- tabulky xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx, režimu, xxxx, xxxxx x xxxxxx,
- uvedení xxxxxxx vstřebávání x xxxxxxxxxx v závislosti xx xxxx,
- xxxxxx užité xxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- metody xxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxx metabolismus,
- diskusi xxxxxxxx,
- interpretaci xxxxxxxx.
X.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX - AKUTNÍ XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxx vzít x úvahu schopnost xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx typ xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X určitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx fosforu xxxx xxxxxxxxxx zpožděné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx použity pro xxxxxxxxxxx látek, xxxxx xxxxx xxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Negativní xxxxx x in xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx považovat xx xxxxx, xx látka xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx metody xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, thiofosfonových xxxx amidothiofosforečných, nebo xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, pozorovanou u xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx projevující xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, změnami x xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx příznaků, x dále inhibicí x xxxxxxxxx specifické xxxxxxxx - NTE (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Referenční xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupině x xxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Příkladem xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pozdním xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx tri-o-tolylfosfát (XXX 78-30-8, XXXXXX 201-103-5, xxxxxxxx xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx.: tri-o-kresylfosfát (XXXX).
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx možnými xxxxxxxx cholinergními účinky. Xxxxxxx xx xx xxxx 21 xxx xxxxxxxx, zaznamenává se xxxxxxxxxx xxxxxxx, ataxie x xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx inhibice XXX, se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x každé xxxxxxx, obvykle 24 x 48 xxxxx xx xxxxxx látky. 21 xxx xx xxxxxx látky xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Popis xxxxxx xxxxxxxxx
1.5.1 Příprava
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx bez interferujících xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x normální chůzí xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx studie jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu.
Xxxxxxxxx xx dostatečně xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx pozorování xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx podávají xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxx, xxxx xx např. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx doporučuje xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx látek x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx vlastnosti.
1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.6.1.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx gallus domesticus) xx věku 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x chovají xx xx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx pohyb.
1.6.1.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx testovací xxxxxxx xx použije xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými.
V xxxxx skupině xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxx z nich xxxxx být xxxxxxxx xxx biochemické xxxxxxxxx (xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xx xxxxxx) x xxxx xxxxxxx 21xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx může xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx. Má xxx xxxxx xxxx xxxxxx, kterým xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx jsou xxxxxx xxx xxxxxxxxx a xxx slepice pro xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx doplňovat historické xxxxx, xxxx se x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. plemeno, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx).
1.6.1.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx slepic x xxxxxx v různých xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx stanovit xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx x hlavní xxxxxx. Xxxxxx úmrtnost xx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxx nezbytná xxx stanovení přiměřené xxxxx v xxxxxx xxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx atropin xxxx jiný ochranný xxxxxxxxx, x xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinky. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být použito xxxxxxx typů testovacích xxxxx (xxx xxxxxx B.1 bis). Xxxxxxxxxx údaje xxx xxxxxxx xxxx xxxx toxikologické xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx při výběru xxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x výsledkům xxxxxxxxx xxxxxx výběru xxxxx x xxxxxxx limitu xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx (xxxx) x xx 21 dnech xxx xxxxxxxxxx (xxxx). Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, o xxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx neurotoxickými xxxxxx, xx má použít xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx cholinergními účinky.
1.6.1.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx postupů popsaných xxx tuto studii, xxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x látek x xxxxxxxxx strukturou není xxxxx xxxxxxxx očekávat, xxx není xxxxx xxxxxxxx o studii x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Limitní xxxx xx neprovádí, xxxxx xxxxxxxx vyskytující xx x xxxx naznačuje xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx xx 21 xxx.
1.6.2 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx podána x jediné xxxxx.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx pozorování
Xxxxxxxxxx xx začít xxxxxxxx xx podání látky. Xxxxxxx slepice se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxx dnů x xxx aspoň xxxxxx xxxxx xx xxxx 21 dní nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx xxxxxxx vykazující xxxxxxxxxxx xxxxx vyjmou x xxxxx a xxxxxxx nucené motorické xxxxxxxx jako xxxx. xxxxxxxxxxx po žebříku, xxx se usnadnilo xxxxxxxxx minimálních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu a xxxxxxx xx třeba xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.6.2.2 Xxxxxxx hmotnost
Všechny xxxxxxx xx zváží xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxx aspoň jednou xxxxx.
1.6.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx náhodně xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem x xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx skupina použita) xx usmrtí v xxxxxxx dnech xx xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx inhibice NTE xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx mícha. Xx vhodné vypreparovat xxxx n. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx jeho xxxx xx inhibici XXX. Xxxxx xx xxxxxxxx tři xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx x další xxx xx 48 xxxxxxxx, xxx slepice x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx pouze xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx pozorování xxxxxxxxxx xxxxxxxx naznačuje, xx xxxxxxx xxxxx xx x organismu xxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxx xx xxxxxx cholinergních xxxxxxxx), pak je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx ze xxx xxxxxx, x xx mezi 24 xx 72 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx také xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). In xxxx může xxxx xxxxxx spontánní xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx inhibitoru XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Xxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx mozku x xxxxx.
1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx tkáň x xxxxxxxxxx zvířat (xxxxxxxxxxx pro biochemické xxxxxx) xx histologicky xxxxxxx. Tkáně xx xxxxxx xx situ xx xxxxxxx perfúzních xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (střední xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx - xxxx xxxxx xx provádějí x xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxx hrudní x xxxxxxxxxxxxx, z xxxxxxxxxxx nervů xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x x. xxxxxxxx (x jeho xxxxx x m. xxxxxxxxxxxxx) x z x. xxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
2. XXXX A XXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxx) běžně xxxxxxxxxx další xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx neurčité xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx zvířata. Údaje xx dále sestaví xx tabulky. X xx musí být xxx každou experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx jevících poškození, xxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx, typy x stupeň xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x stupeň xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x hlediska výskytu, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx změnami chování, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx a kontrolních xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx x xxxx plánované xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx mohly xxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx plemeno;
- xxxxx a xxxxx zvířat;
- xxxxx, podmínky xxxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx.
Podmínky xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxx x přípravě, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky;
- xxxxxxxxxx výběru vehikula;
- podrobné údaje x xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx látky;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a kvalitě xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx aplikované xxxxx;
- podrobné xxxxx x xxxxxx ochranného xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx x tělesné xxxxxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx klinických xxxxxxxx (xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx);
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření x jejich xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx;
- podrobný popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx xx možné.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x Interpretace
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 418.
X.38. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH SLOUČENIN XXXXXXX 28DENNÍ OPAKOVANÁ XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx látek xxxxxxx specifický xxx xxxxxxxxxxxxx, který nemůže xxx zjištěn x xxxxxx xxxxxxxx toxicity. X určitých organických xxxxxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Vyšetřovací xxxxx xx vitro xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Negativní xxxxx x xx xxxxx xxxxxx však není xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx neurotoxická.
Xxxxx 28xxxxx test xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx zdravotním xxxxxx vznikajícím x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxx poskytnout xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Definice
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx jako "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx neutrální xxxxxxxxx xxxxxx, thioestery xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, nebo xxxx xxxxx, xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x některých xxxxx této skupiny.
Xxxxxx neurotoxicita je xxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx, distální axonopatií, xxxxxxx v míše x periferním xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - NTE (neuropathy xxxxxx esterase) v xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx denně orálně xxxxxxxx xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx denně, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx dávce. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, zvláště xxxxxxxx NTE, se xxxxxxx x slepic xxxxxxx vybraných x xxxxx skupiny 24 x 48 xxxxx xx posledním xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xx poslední dávce xxxx zbývající xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxx nervových xxxxx.
1.4 Xxxxx metody xxxxxxxxx
1.4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx slepice bez xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x farmakologické xxxxx x x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx experimentální x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx velké xxxxx xxxx ohrady xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx slepic x xxxxxx pozorování xxxxx.
Testovaná xxxxx xx xxxxxx orálně, xxxxx 7 xxx x týdnu, buď xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tekutiny xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx,
jako je xxxx. xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx doporučuje xxxxxxxxx, neboť xxxxx xxxxx xxxxxxx látek x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx vstřebat. U xxxxxxxxx xxxxxx musí xxx známy xxxx xxxxxx xxxx testem xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx domácího (Xxxxxx xxxxxx domesticus) ve xxxx 8 až 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx plemena x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx za xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Počet x pohlaví
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx úrovně dávek x xxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx zvířaty v xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx.
V každé xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx aspoň xxxx x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx x xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx) x šest xxxxxxx čtrnáctidenní xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx expozice.
1.4.2.3 Xxxxx xxxxx
Dávkové xxxxxx se xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx výsledkům x xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx a x xxxxxx údajům x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx neurotoxicity, nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx. Dále xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx dávek způsobem, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx neměla vyvolat xxxxx příznaky xxxxxxxx.
1.4.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti x xxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxx xxxxxx, nevyvolá xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x jestliže xxxxx xxxxx u xxxxx x příbuznou xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx očekávat, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x studii x xxxxxxx vyšší xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx u xxxx xxxxxxxxx potřebu xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx denně po xxxx expozice x 14 xxx xx xx, nebo xx xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx plánu.
1.4.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxx xxx x xxxxx xx 28 xxx.
1.4.3.1 Xxxxxxxxx pozorování
Xxxxxxxxxx má xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx látky. Všechny xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx po 28 xxx a xxxxxxx 14 dnů po xxxxxxxx aplikace, do xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx toxicity xx zaznamenávají xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx nemá xx na ně xxxxxxxx. Ataxie se xxxxxxx xxxxx nejméně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx paréza. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vyjmou x xxxxx x xxxxxxx nucené motorické xxxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx se usnadnilo xxxxxxxxx minimálních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx, humánním xxxxxxxx utratit x xxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxx hmotnost
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx těsně xxxx xxxxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx x pak xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx testované x xxxxxxxxx skupiny s xxxxxxxxx se usmrtí x xxxxxxx xxxxx xx aplikaci poslední xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx NTE xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx mícha. Je xxxxxx vypreparovat xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx XXX. Xxxxxxx se xxxxxxxx xxx slepice x xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx skupiny xx 24 xxxxxxxx a xxxxx tři xx 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx údaje x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx jiná xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx použít xxxx dobu x xxxxxxxxxx uvést x xxxxxxxxxxx.
U xxxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx vést k xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxx AChE.
1.4.3.4 Xxxxx
Xxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx posouzení stavu xxxxx x míchy.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx z přeživších xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx fixují xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx technik. Odebírá xx: xxxxxxx (střední xxxxxxx řez), prodloužená xxxxx, mícha (řezy xxxxx xx provádí x xxxxx xxxxx xxxxx, střední xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx), z xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x x. xxxxxxxx (x xxxx xxxxx x x. xxxxxxxxxxxxx) x x n. xxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx x skupiny x nejvyšší xxxxxx. Xxxxx se najdou x zvířat xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx vyšetření x xx xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx střední x xxxxxx.
2. XXXX X ZÁZNAM XXXXX
Xxxxx xxxx výsledky xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxxxx testování na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx sestaví xx xxxxxxx. Z ní xxxx být xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx biochemické xxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx poškození xxxx účinků a xxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxx typ x xxxxxx poškození xxxx xxxxxx.
Výsledky xxxxxx xx xxxxxxxxx z xxxxxxxx výskytu, závažnosti x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx x kontrolních skupin.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx zvolí xxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x pokusu obsahuje xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx získány:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xxxxx xxxxxx,
- xxxxx, xxxxxxxx ustájení xxx.,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxx vehikula,
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx o potravě x xxxxxxx xxxx,
- xxxxxxxxxx vybrané xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, objemu x xxxxxxxxx formě xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xxxx xxx 24 x 48 xxxxx.
Xxxxxxxx:
- údaje x xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx podle dávkových xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx (XXXXX),
- xxxxxxxxx, stupeň x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx),
- podrobný xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx možné.
Xxxxxxx výsledků
Hodnocení x Xxxxxxxxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx x metodou XXXX TG 419.
X.39. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx XXX Xxxxxxxxx (XXX) Test Xxxx Xxxxxxxxx Xxxxx Xxxxx Xx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx syntézy XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x jaterních xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (1) (2) (3) (4).
Tento xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx buňkách a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; jsou xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx xxxx.
Xxxxxxxx-xx doklady x xxx, xx xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (UDS) xx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx značených xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (X-xxxx) xxxxxxxx XXX. Nejběžnější xx xxxxxx, xxx xxxxx xx autoradiograficky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (3X-XxX). Xxx xxxxx UDS xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx potkaní xxxxx. Xxxx xxxxx než xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx předmětem xxxx metody.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx XXX, xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx UDS xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx repair" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx repair" (1 - 3 xxxx) xx xxxx xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x důsledku neopravení, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx XXX. Rozsah odpovědi XXX neříká nic x přesnosti xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx, že mutagen xxxx xxxx x XXX xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx DNA xxxx xxxxxxxx excizním xxxxxxxxxx xxxxxxxx. To, že XXX xxxx xxxxxxxxxxx x mutagenní xxxxxxxx xxxxxxxxxx informace, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxx.
1.2 DEFINICE
Buňky x reparaci: net xxxxxxx xxxxx (XXX) xxxxx xxx určitá, xxxxxx xxxxxxxxx hodnota, xxxxxx xxxxxxxx laboratoř xxxxxxxxxxx xxxx.
Net xxxxxxx xxxxxx (NNG): xxxxxxxxxxxxx xxxx UDS xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xxxxxxxxx jako rozdíl xxxx xxxxxx xxx x jádře (XX) x průměrným počtem xxx v xxxxxxxxxx (XX): XXX = XX - XX. Xxxxx XXX xx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x následně xxxxxxxxxxx xx buňky x xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx kulturách xxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx DNA xxxxxxxxx, XXX): xxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxx x odstranění úseku XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemickou xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Xxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx indikuje xxxxxxxxx syntézu DNA xx xxxxxx x xxxxxxxxxx segmentu XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látkou xxxx fyzikálním xxxxxxxxx. Xxxx vychází obvykle x inkorporace 3H-TdR xx DNA xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx nízkým xxxxxx xxxxx v X-xxxx buněčného cyklu. Xxxxxxxxxxx 3H-TdR se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx tato xxxxxxxx xxxx tak xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx s xxxxxxx x S-fázi, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxxxx metoda.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx druhu
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx laboratorní kmeny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx rozdíly xx při xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x u xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.2 Xxxxxxxx chovu
Všeobecné xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx X.
Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx zvířat
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx náhodně rozdělí xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci xx jednoznačně xxxxxx x xx dobu xxxxxxxxx pěti xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x laboratorních xxxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx minimalizovaly případné xxxxx toho, xxx x xxx xxxx xxxxx umístěny.
1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx x xx-xx xx možné, látka xx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx její xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx se xxxx xxxxxxxxx ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) prokazují, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.3 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x používaných xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxx x testovanou xxxxxx chemicky xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx xxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x kompatibilitě s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby kde xx to možné, xxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx kontroly xx xxxx xxxxxxxxx XXX xxx dávkách, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx úroveň. Xxxxxxxxx kontroly vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, aby byly xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zakódovaného preparátu. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxx xxxxxx xxxxxx | Xxxxx | CAS | XXXXXX |
xxxxx x xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 hodin) | X-2-xxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Xx možná xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx cestou, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Počet x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelní jedinci. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxx jedinci.
Xxxxx x xxxx, kdy xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx druhem xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx možné xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx, kde xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být pohlavně xxxxxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx xx test xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podává xxxxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx používají xxx xxxxx dávky. Nejvyšší xxxxx xx definována xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx toxicity, xx xxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.
Xxxxx, jež x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx představovat xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxx xx případ xx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, protože xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxx laboratoři x xx použití xxxxxxxx živočišného xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxx použijí x xxxxxx studii.
Xxxx nejvyšší xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx určité xxxxxx toxicity x xxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx test xxx xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xxxxxx v jedné xxxxx nebo xx xxxx dávkách x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx xx základě xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx očekávané xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx vyšší xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx cesty. Intraperitoneální xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx, protože xx xx tím xxxxx xxxxx xxxxxxxx působení xxxxxxxxx látky přímo, xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx kapaliny, xxxxx xx dá xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx velikosti pokusného xxxxxxx x nemá xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx dráždivých nebo xxxxxxxx látek, jež xxxxxxxx vykazují při xxxxxxx koncentracích xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx obvykle 12 - 16 xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx další odběr (xxxxxxx 2 - 4 hodiny xx xxxxxx xxxxx), xxxxxx xx po 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx reakce zjevná. Xx ovšem xxxxx xxxxxx x xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jaterních buněk xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx disociované xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx ke vhodnému xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx XXX
Xxxxxxx xxxxxxxxx savčí xxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx xxxx (xxxx. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx obsahujícím 3X-XxX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xx xxxxx xxxxx inkubovat v xxxxx xxxxxxxxxxx nadbytek xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxx. "xxxx xxxxx"). Buňky se xxx promyjí, xxxxxx x vysuší. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx intervalech xxxxxx se "xxxx xxxxx" xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx xx autoradiografické xxxxxx, xxxxxxxx ve xxx (xxxx. xx xxxx jednoho nebo xxxx xxxxx x xxxxxxxxxx), vyvolají, xxxxxx x počítají xx xxxxxxxxxx stříbrná xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx připraví xxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
1.5.8 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, aby xxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zjevné xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx úroveň xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx. Vždy xx xxxxxxxxx xxxx preparátech x xxxxxxx xxxxxxx xx obvykle xxxxxxx 100 buněk; pokud xx xxxxx xxxx xxx 100 xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx být xxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xx nevyhodnocují xxxxx x X-xxxx, xxx xxxxx buněk v X-xxxx xx registruje.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx stupeň inkorporace 3X-XxX xx xxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxxxx zrnek.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx. Mimoto se xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx formě. Xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx dávku x xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx "nuclear xxxxx" (XXX) xxxxxxxxx xxxxx XX xx xxxxx XX. Xxxxxxxx-xx xx "xxxxx x xxxxxx", xxxx být xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x historických xxxx souběžných xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Numerické xxxxxxxx xx mohou vyhodnotit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xx statistické testy xxxxxxx, xx třeba xx xxxxxx x xxxxxxxxx ještě před xxxxxxxxx studie.
2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE XXXXXXXX
Xxxxxxxx xxx pozitivní/negativní xxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxxxx | (I) xxxxxxx XXX xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx laboratoře | |
nebo | (XX) xxxxxxx NNG významně xxxxx xxx x xxxxxxxx kontroly | |
xxxxxxxxx | (I) xxxxxxx XXX na xxxxxx/xxx xxxxxx historického xxxxx x kontrol | |
xxxx | (II) hodnoty XXX xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx souběžná xxxxxxxx. |
Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxxx xxx, což xxxxxxx, že xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx - odpověď x xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků lze xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx neměla xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Většina xxxxxxxxxxx poskytuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nelze xx získaného xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo problematické, x xxxx se xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx XXX xx savčími xxxxxxxxx buňkami in xxxx ukazuje, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxxxxxxxx XXX, které xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že za xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx poškození XXX, xxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx vzít v xxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx vehikula
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxxxx zvířata:
- použitý živočišný xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x pohlaví xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx jednotlivé skupiny.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx studie xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx i xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx podávání,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx se xxxxx dostala xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx převod xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx hmotnosti/den),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- podrobné xxxxxx xxxxxxxx testované látky x odběru xxxxxx,
- xxxxxx zjišťování xxxxxxxx,
- metoda xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx metoda,
- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx v xxxxxxx, xxxxxxxxxx x "xxx xxxxxxx xxxxxx" xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x skupiny,
- vztah dávka-odpověď, xxxxx xx k xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, bylo-li provedeno,
- známky xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx,
- historické xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx,
- xxxxx "xxxxx x xxxxxx", byl-li xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx v X-xxxx, xxx-xx stanoven,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxx X.39. xxxx xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.40. LEPTAVÉ XXXXXX XX XXXX
1. METODA
1.1 XXXX
Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx metod (Xxxxxxxx Xxxxxx xxx xxx Xxxxxxxxxx of Xxxxxxxxxxx Methods, ECVAM, Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx, Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx validní xxx xxxxx in xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx transkutánního xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx potkana (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, XXX) x test xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX prokázala, xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx látkami xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx jednotlivé stupně xxxxxxxxx účinků (známé xxxxx xxxxxxxxxxx těžké xxxxxxxxx kůže R35, x ostatní látky xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kůže, X34). Je xxxxxx xxxxx x postupy xxxx xxxxx; xxxxx xxxx oběma testy xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx tkáně xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxx. 1.5.3.4 x 1.7.2.3.
1.4 XXXXXXX METODY - XXXX XXX XX KŮŽI XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx se nanese xx dobu až 24 xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Látky, xxxxx mají leptavé xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx své xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx integritu x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.Xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporu (XXX) xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5kΩ) (4) (5). Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx látky TER xxx xxxxxxxx hodnotu xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (jejichž xxxxxxxx viz v xxx. (6)) je xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx test xxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx pozitivních xxxxxxxx, xxx se x xxxxxx xxxx chemických xxxxx xxxxxxxxx (2) (7).
1.5 XXXXX XXXXXX - TEST XXX XX XXXX XXXXXXX
1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxx přípravu xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx mladí (20 xx 23xxxxx) xxxxxxx, Xxxxxx xxxx srovnatelný xxxx. Malými xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx odstraní srst x xxxxxxxx a xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxx xx roztoku antibiotika, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxx inhibujících xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx čtvrtý xxx xx prvním omytí xx zvířata omyjí xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx 3 dní xx xxxxxxx. Pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx zvířata xxxxxx než 31 xxx.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx kůže x xxxxxxxx xxxxxx x x té xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx. Xxxx xx xxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxx, x to epidermální xxxxxxx k xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx X-xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx připne, x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx. Rozměry xxxxxxx x X-xxxxxxx ukazuje xxx. 1. Xxxxxx X-xxxxxxx se xxx xxxxxxx pečlivě ke xxxxx XXXX trubice xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx do xxxxxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX), kde je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx. 2).
1.5.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.3.1 Nanesení xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxx v xxxxxxx množství, aby xx pokryl xxxx xxxxxx epidermis, na xxxxxx xxxxx xx xxxxx 150 μl xxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx. Testovaná xxxxx xxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxxx látek xxxx xxx dosáhnout zahřátím xxxxx xx 30 xX, aby xx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx vždy xxx xxxxxxx xxx každou xxxxx. Látka se xxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (xxx xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx maximálně 30 xX xxx dlouho, xxxxx xx látka xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, se xx napomoci vymýváním xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx 30 xX.
1.5.3.2 Xxxxxx TER
Transkutánní xxxxxxxxxx xxxxx (TER) xx měří xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx proud (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx povrchové xxxxxx xxxx přídavkem dostatečného xxxxxx 70% xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx tak, xx xx trubice xxxxx, x tkáň xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 154 xX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx můstku xx xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxx a xxxxx se odpor x kΩ/terčík (obr. 2). Xxxxxxx elektrod x délku xxxx xxxxxxxxx xxx krokosvorkou xxxxxxx obr. 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx navrch XXXX trubice xxx, xxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx se xxxxx xx receptorové xxxxxxx xxx, xxx xxxxxx na dně. Xx třeba xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx hranou xxxxxxxxx xxxxxx x spodkem XXXX xxxxxxx (xxx. 1), tato xxxxxxxxxx xx xxxx na xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx, xx je-li xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 20 xΩ, xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx překrývá xxxxxxxxxxx xxxxxx terčíku kůže. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx, xx xx PTFE xxxxxxx utěsní palcem x rukavici x xxxxxx 10 sekund xx protřepává, xxxxxx xxxxxx hořečnatého se xxxxxx a měření xxxxxx xx opakuje x čerstvým xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx hodnota TER xx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx metodu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx rozmezí xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx odporu (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 M kyselina xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
&xxxx;
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx voda
|
10 – 25
|
1.5.3.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx povrchově xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx je xxx xxxxxxxxx povrchově xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx organických xxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ, xxx xx xxxx tkáni xxxxxxx hodnocení xxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Tímto xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x odstranění barviva xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx všech terčíků xxxxxx na 2 xxxxxx xx 150 μx 10% (w/v) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxx zhruba po xxxx 10 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xx xx xxxxxxxxx přebytečné (xxxxxxxxxx) barvivo. Každý xxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx x XXXX xxxxxxx x xxxxx do xxxxxxx (např. xx 20 xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx 5 minut xxxxx xxxxxx, aby xx xxxxxxxxxx xxxxxxx zbytky xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx vyjmou x xxxxx xx nádobek x 5 xx 30 % (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x destilované xxxx, xxx xx xxxx xxx inkubují xxx teplotě 60 xX. Po inkubaci xx terčíky vyjmou x zlikvidují x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxx 8 xxxxx při xxxxxxx 21 xX (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ∼ 175). Vzorek 1 ml xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx 30 % (x/x) xxxxxxxx SDS v xxxxxxxxxxx vodě x xxxxxxxxx poměru 1 x 5 (v/v) (xx. 1 ml xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx XXX). Xxxxxxx denzita (XX) xxxxxxx xx xxxx xxx xxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Výpočet xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx sulforhodaminu X x xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B xxx 565 xx xxxx 8,7 . 104; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Obsah xxxxxxxxxxxxxx B se xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x stanoví se xxxxxxxx xxxxxxx. Průměrná xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx spadají xx xxxxxxxxxxxxxxxx rozsahu xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx u xxxxxxxxxxx xxxxx při xxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx považují:
|
Kontrola
|
Látka
|
Rozmezí xxxxxx xxxxxxx (xx/xxxxxx)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X kyselina chlorovodíková
|
40 - 100
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
15 – 35
|
1.5.3.4 Doplňující xxxxxxxxx
Xx xxxxx zvolit xxxxxx xxxx působení xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx kůže (např. 2 xxxxxx) xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx látek. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxx však xxxx xxxxxxxx, xx xxxx TER xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx některých xxxxxxxxxxx xxxxx aplikovaných xx xxxxxxx xxxx xx 2 hodiny (2), xxxxxxxx umožňuje xxxxxxxx identifikaci xxxxxxxxxxx x neleptajících xxxxx xx 24xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx XXX mohou xxx ovlivněny xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx hodnota xxx leptavé xxxxxx 5 kΩ xxxx xxxxxxxxx na základě xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx aparatuře x xxx xxxxxxxx postupu xxxxxxxxx xxx. Xxxxx xx se zkušební xxxxxxxx výrazně xxxxxxx, xxxxx by xxx xxxxx použít xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx referenčních xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx validační xxxxxx (3).
1.6 PRINCIP XXXXXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX XXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx dobu xx 4 hodin xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx epidermis x xxxxxxx xxxxxx corneum. Xxxxxxxxx materiál se xxxxx podle xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx "XXX reduction xxxxx" (XXX = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 xxxxxxx tetrazolium xxxxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxx definovanou xxx xxxxx xxxxxxxxx dobu. Xxxxxxx xxxxx vychází x xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx xxxx xx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx xxxxx) x xxxx dostatečně xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx vrstvách.
1.7 XXXXX METODY - XXXX X XXXXXXX XXXXXX XXXX
1.7.1 Modely xxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxx mohou xxxxxxxx x různých xxxxxx, xxxx však splňovat xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx mít funkční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Bariérová funkce xxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx lze xxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, o nichž xx xxxxx, že xxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx stratum xxxxxxx neprocházejí. Xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky.
Životnost živých xxxxx v xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x tomu, aby xx xxxx dobře xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX, tj. XX xxxxxxxx) xx xxxxxxxx látce xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kontrola xxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx model. Podobně x případě látky xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx x xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxx hodnoty xxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx validačnímu xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxx xxxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxx, aby xxxxxxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx 25 (μ/xx2). Xx-xx xxxxx, nanese xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxx, x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx x xxxx zajistil xxxxx xxxx. Xxxxx xx xx třeba, xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. X metody xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx, xx je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx látek (2). Xx uplynutí doby xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X měření životnosti xxxxx xx dá xxxxxx jakákoliv xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx používá xxxxxxx XXX, x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxxx laboratořích xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx xxxx xx xx dobu 3 xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx MTT x xxxxxxxxxxx 0,3 mg/ml xxx xxxxxxx 20 - 28 xX. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) x koncentrace formazanu xx xxxxxxx měřením XX xxx xxxxxx xxxxx 545 x 595 xx.
1.7.2.3 Doplňující xxxxxxxxx
Xxxxxxx model xxxx x xxxxxx dodržení xxxx xxxxxxxx, promývacího xxxxxxx atd. xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx vliv. Doporučuje xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx řady xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxx nutné, xxx xxxx prokázáno, xx xx použitá metoda xx použití xxxxxx xxxxx xxxxx reprodukovatelná xxxxx xxxxxxxxxxxxx standardů xxx x xxxxx xxxx laboratoře, tak xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx musí xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2) x výsledky xxxxxx xxxxxxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxxx zveřejněním xxxxxxxxxx odbornou xxxxxx.
2. XXXXX
1.8 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
1.8.1 Xxxx TER xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx (x xΩ) pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolu x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx uvádějí v xxxxxxxxx formě, a xx data xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, průměrné xxxxxxx x z xxxx vyvozená xxxxxxxxxxx.
1.8.2 Xxxx x modelem xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX x xxxxxxxxx procento xxxxxxxxxxxxxxx buněk xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční látky xxxxxxx v tabelární xxxxx, a to xxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, průměrné xxxxxxx x z nich xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
1.9.1 Xxxx XXX na xxxx potkana
Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxx XXX xxx xxxxxxxxx materiál xxxxx xxx 5 xΩ, je xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ x xxxxxxx xx xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx organickou xxxxx, xxx testovaná xxxxx leptavé xxxxxx xx.
X povrchově xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx organických xxxxx, xxx xxxxxxxxx hodnoty XXX xxxxxxxxxxxxx 5 xΩ, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx barviva. Xx-xx xxxxx barviva x terčíku xxxxx xxxx xxxxx průměrnému xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx souběžně xxxxxxxxx pozitivní kontrole x 36 % XXx, xx xxxxxxxxx xxxxx skutečně pozitivní x xxxx xx xxxxxxx účinky, xxxxxx xx-xx xxxxx xxxxxxx x terčíku xxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx leptavé xxxxxx xxxx.
1.9.2 Xxxx x xxxxxxx lidské xxxx
Xxxxxxx XX pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100% xxxxxxxxxxxxxxx buněk. Z xxxxxx OD xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, od xxxx, xxxxx poleptání xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx být x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx předtím, xxx xx xxxxxx validována, x následnou xxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxx, že xx xxxx hraniční hodnota xxxxxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx o průběhu xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx informace:
Testovaná xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, popřípadě xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti; xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, uvedou xx xxxx xxxxx i xxx xx.
Xxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx případných xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx TER) xxxx xxxxxxxxxxxx podíl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (test x xxxxxxx xxxxxx xxxx) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxxx pro všechny xxxxxxxxx resp. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a průměrné xxxxxxx;
- xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Obrázek 2
Metoda X.40. byla xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX FOTOTOXICITY 3T3 XXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx (reakce), x xxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx je-li xxxxxxx kůže ozářena xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x rámci testu xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx vitro slouží xx stanovení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dané testované xxxxx, xxxx xx xxxxxxxx, xxx daná xxxxx ve spojení x xxxxxxxx ultrafialovému x viditelnému xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx nikoli.
Toxikologickým výsledkem xxxxx in vitro xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx testem xx xxxxx xxxxxxx sloučeniny, xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxx, x sloučeniny, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx pokožku.
Test fototoxicity 3X3 NRU in xxxxx byl xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxx společného xxxxxxxx XX/XXXXXX x xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx alternativa xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. V xxxx 1996 doporučila xxxxxxxx xxxxxx XXXX xxxxxxx následných xx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx fototoxicity (4).
Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx x xxxx x bylo xxxxxxxx, xx tento test xx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxx x tomu, xxx předpovídal xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx z kombinovaného xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, x xxxx xxxx látek xxxx xxxxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxx, reaguje xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxxx. Test xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx umožňoval hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx přístup xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx viz xxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX) xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx; měřená ve X/x2 xxxx x XX/xx2.
Xxxxx světla: xxxxxxxx (= xxxxxxxxx x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxxxxx dopadajícího xx xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (= W x x) xx xxxxxxxx povrchu, xxxx. X/x2 nebo X/xx2.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: podle xxxxxxxxxx XXX (Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xx X'Xxxxxxxxx) se xxxxxxx označení XXX (315 - 400 xx), XXX (280 - 315 nm) x UVC (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxx: xx xxxxxxx xxxx xxxxx XXX x UVB xx xxxxx xxxxxxxx 320 xx x XXX xx někdy xxxx na UV-A1 x XX-X2 x xxxxxxx xxxxxx u 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxx celková xxxxxxxx buněčné xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx živou buňku, xxxxxxxxx xxxxxxx, do xxxxxxxxx lysozomů), jež xxxxx parametrů xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x celkovým xxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: životaschopnost xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x negativními kontrolami (xxxxxxxxxxxx), které xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxx + XX xxxx - XX), xxxxx xxx působení xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx testu xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx test xx xxxxx x transformaci xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx k xxxxxxxx fotoxického xxxxxxxxxx xxxxxx veličin XXX x MPE.
PIF (xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx představující xxxxx dvou stejně xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx koncentrací (XX50) testované xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx (-XX) a v xxxxxxxxxxx (+XX) necytotoxického XXX/XXX ozáření.
MPE (xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx): nová míra xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx průběhu xxxx křivek xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx: xxxxxx xxxxxxx reakce (xxxxxx), xxxxx vzniká po xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx látce a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, nebo xxxxxx, xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxx ozářením xxxx xx xxxxxxxxxx podání xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx xxxxx "xxxxxxxxxxxx", xxxxxxxx xx pouze xxxx xxxxxxxxxxxxx reakcí, x xxxx dochází x xxxx xxxx, xx xx ni xxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx) xxxxxx xxxxx. Tyto xxxxxxxxxxx xxxxxx vedou xxxx x xxxxxxxxxxxxxx poškození xxxxx (reakce xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: získaná imunologická xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x tomu, xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: genotoxická xxxxxx (odezva) s xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx poté, xx byly xxxxx xxxxxxxxx negenotoxické xxxxx XX/XXX xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxx: karcinogenita xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, mluvíme x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 REFERENČNÍ XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, která je xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX doporučuje xxxxxx xxxx referenční xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx testu (1) (3) (13).
1.4 XXXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxxxx účinky xxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), xxxxxxx xxxxxxx společným rysem xx to, že xxxxxx xxxxxxxxxx světelnou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx zákona xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx zákon) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx kvant. Xxxxx xx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle xxxxxx metodického návodu, xxxx xx se xxxx xxxxxxxx absorpční xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x XX/XXX xxxxxxx (xxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxx XXXX č. 101). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx než 10 xxxxx x xxx-1 x xx-1, xxxx xxxxx fotoreaktivní potenciál x xxxx xxxxx xx na škodlivé xxxxxxxxxxxx účinky xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx, ani xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxxxx).
1.5 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx zjištěny xxxxx mechanismy, kterými xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx fototoxickou reakci (7), přičemž xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx je xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in vitro xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx látky testované x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx dávky XXX/XXX záření. Cytotoxicita xx xxx tomto xxxxx vyjadřuje xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx pokles xxxxxx vitálního xxxxxxx, xxxxxxxxx červeně (neutral xxx, XX) (9), 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxx/x 3X3 xx xxxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx). Pro xxxxxx testovanou xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx x xxxxxx x osmi různých xxxxxxxxxxxxx xx xxxx 1 hodiny. Jedna x xxxx xxxxxxxx xx xxx vystaví xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxxxx 5 X/xx2 XXX (+XX xxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx xx uchovává x xxxxx (-UV xxxxxxxxxx). X obou destičkách xx xxx xxxxxx xxxxxxx médiem kultivačním x po xxxxxxx 24 xxxxxxxx kultivace xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx xxxxxx, NRU) xx dobu 3 xxxxx stanoví životaschopnost xxxxx. Xxx xxxxxx x xxxx koncentrací xx stanoví relativní xxxxxxxxxxxxxxx buněk, vyjádřená xxxx xxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx kontrol. X posouzení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx reakce xxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XX) a v xxxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxx, xxxxxxx xx úrovni XX50, xx. ři xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x 50 % v porovnání x kontrolami xxx xxxxxxxxx.
1.6 KRITÉRIA XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx XXX, xxxxxxxxxx údaje: x xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX. Buňky xx nasadí x xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx, xxxxxx xxx se vystaví xxxxxx XXX x xxxxx 1 - 9 X/xx2 x xxxxx xxx xx xxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx dávkou XXX xxxxxx 5 X/xx2 xxxx nižší xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx kontrolních xxxxxx xxxxxxxxxxxx x temnu. Xxx xxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxx 9 X/xx2 nemá xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx než 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx desáté xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX, běžný xxxx: xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jestliže xxxxxxxxx kontroly (xxxxx x Xxxxxxx vyváženém xxxxxx roztoku [Xxxx´x xxxxxxxx salt xxxxxxxx, XXXX] s 1 % roztokem xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxxx (XxXX) nebo bez xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (+UVA) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxx x rámci xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxx (-UVA).
Životaschopnost xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (XX540 XXX) xxxxxx x XX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx 1 x 104 xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx s xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxxx hodnota XX540 XXX x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx 0,2.
Xxxxxxxxx kontrola: xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx souběžný xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx EU/COLIPA xxx jako xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx chlorpromazin (XXX); xxxxx xx tato xxxxx xxxxxxxxxx. Pro XXX xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx vitro xxxx definována xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: XXX xxxxxxx (+XXX): XX50 = 0,1 - 2,0 μx/xx, XXX xxxxxxxxx (-UVA): XX50 = 7,0 - 90,0 μg/ml. Fotoiritační xxxxxx (XXX), xxx. xxxxx hodnoty EC50, xx být xxxxxxxxx 6.
Xxxxx XXX se xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxx známé xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx testované (xxxxxxxxx) xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx na základě xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 x XXX xxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XXXXX XXXXXX
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx validační xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx fibroblastů Xxxx/x 3X3 xxxx 31, x to xxx x ATCC xxxx x XXXXX; xx xx proto xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx dají s xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx nebo xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx; xx xxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx.
X buněk je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, x xxx xx použít xxx x případě, xx xx xxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx buněk xxxx XXX záření xxxx s počtem xxxxxx narůstat, je xxxxx xxxxxxxx buňky Xxxx/x 3X3 x xxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx buněk Xxxx/x 3X3 vůči XXX xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolovat, x xx postupem kontroly xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx metodickém xxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x během xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xx xxxxx o XXXX xxxxxxxxx 10 % xxxx novorozených xxxxx, 4 xX xxxxxxxxx, penicilinem x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx xx vlhkém xxxxxxxxx při teplotě 37 xX / 7,5 % XX2. Xx nezbytné, aby xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx historickém xxxxxxx xxx xxxx buňky xxxx. buněčnou xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx kultur
Buňky xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx použitím x xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxxxxxxx.
Xxx test xxxxxxxxxxxx xx buňky xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxx na xxxxx xxxxx (tj. xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxxx) xxxxxxx ke xxxxxxxxxx (xx splynutí x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx). X xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx x 96 jamkami xx xxxxxxxxxx hustota 1 x 104 xxxxx v xxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx, xxxxx xxx procházejí xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx podmínek, x xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxx (+XXX/XXX) x druhá xx xxxxxxxxxx v xxxxx (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace
Zatímco xxx všech testech xx xxxxx pro xxxxxxxxx genotoxického xxxx xxxxxxxxxxxxxx potenciálu je xxxxxxx požadavkem xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, není x xxxxxxx fototoxikologie xxxxx žádná látka, xxx by k xxxx, xxx působila xxxx fotoxin xx xxxx xxxx xx xxxxx, xxxx metabolické xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxx xx nutné, ani xx xxxxxxx odůvodněné, xxx se tento xxxx prováděl x xxxxxxx metabolickým aktivačním xxxxxxxx.
1.7.1.5 Xxxxxxxxx látka / xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx před xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxx xxxxxxxxx prokazují, xx se xx xxxxxxxxx. Pokud je xxxxxxxxxxxxx, xx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx pod červeným xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (XXXX) xxxx xx fyziologickém xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx saline, PBS), xxxxx - xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx - xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx barevné indikátory xX, xxxxxxxxxx světlo.
Pokud xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, rozpustí se xx xxxxxxx rozpouštědle x xxxxxxxxxxx stonásobně xxxxx, než xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, x následně xx xxxxx v xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx používá xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx x konstantním xxxxxx 1 % (x/x) ve xxxxx xxxxxxxxx, xx. xx xxxxx koncentracích xxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx kontrolách.
Jako xxxxxxxxxxxx xx doporučuje dimethylsulfoxid (XXXX) xxxx xxxxxxx (XxXX). Xxxxxx xxxxx xxx x další xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx aceton, xx však xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx specifické xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx se xxxxxx xxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 oC.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx UV xxxxxxx / příprava
Světelný xxxxx: xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Záření x XXX x xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx spojováno x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx xxxxxx UVB xx v tomto xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx vysoce xxxxxxxxxxx, přičemž xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xx 313 xx x 280 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx pro xxxxx světelného zdroje xxxxx zásadní požadavek, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx) xxxxxxxxxxx xx zjištění známých xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx nepatřičně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx sem x xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, jimiž xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Jako xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx výbojky - xx mají xx xxxxxx, že xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx levnější, xxxxxxxx xxxxxx však imitují xxxx. Jelikož xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx množství záření XXX, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx test xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XXX:XXX ∼ 2 : 1). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx filtrovaného záření xxxxxxxxx simulátoru xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx studii xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx v xxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) se xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx, který xxxx být xxxxxxxxxx xxx xxxx zdroj. Xxxxxxxxx XX-xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx, k xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx XX-xxxx xxxxx xxxx x kalibrace. Xxxxxxx xx, když xx x xxxxxxx intervalech xxxx spektrální xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zdroje x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; taková xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx obsluhu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx zjištěno, xx xxxxx UVA xxxxxx 5 J/cm2 xx xxx buňky Xxxx/x 3X3 necytotoxická x xxxxxx dostatečně silná, xxx excitovala x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx 50 minut, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 1,666 xX/xx2. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx nebo xxxx zdroj xxxxxx, xxxx se xxxxx xxxxxx XXX xxxxxxx xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxx fototoxinů. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx vzorce:
|
dávka xxxxxx (X/xx2) x 100
|
&xxxx; | |
| &xxxx;
x (xxx) =
|
________________________
|
(1 X = 1 X x)
|
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxxx (xX/xx2) x 60
|
1.7.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx fototoxické xxxxx byly xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pozitivních výsledků (13). Xxxxxxx pH xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (+UVA) x xxx xxx (-XXX) xx třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rozsah x xxxxxx koncentrační řady xx xxxxx xxx, xxx xxxxxx závislosti xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx podloženy xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Používá xx koncentrační xxxxxxxxxxx xxxx (x konstantním xxxxxxxx ředění).
1.7.3 Xxxxx xxxxxxx
1.7.3.1 Xxxxx xxx
Xxxxxxxx xx suspenze 1 x 105 xxxxx/xx x kultivačním médiu. Xx xxxxxxxxxxx xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx 100 μx samotného xxxxx (= xxxxx xxxxx), do ostatních xxxxx se xxxxxxx xx 100 μx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx 1 x 105 buněk/ml (= 1 x 104 xxxxx na jamku). Xxx každou xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxx destičky - xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-XXX), xxxxx xxx xxxxxxxxx fotocytotoxicity (+XXX).
Xxxxx se xxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 oC), xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x jejich xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl EBSS/PBS xx každou xxxxx. Xxxxx xx 100 μx XXXX/XXX obsahujícího xxxxxxxxxx látku x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxx rozpouštědlo (negativní xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx x testovanou xxxxxx xx inkubují v xxxxx po xxxx 60 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX).
Xxxx testu x XXX (+XXX) xx xxxxxxx tak, že xx xxxxx za xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 50 xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx zářením XXX x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx2 (= xxxxx 5 / cm2). Xxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx ventilátoru. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-XXX) xx xx xxxx 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx XXX) xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxx.
Xxxxxx xx odstraní x xxxxx xx promyjí xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx médiem x přes xxx (18 - 22 xxxxx) xx xxxxxxxx (7,5 % CO2, 37 xX).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx pod xxxxxxxxxxx x fázovým xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xx eliminovaly xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, ale při xxxxxxxxxxxxx cytotoxicity xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx příjmu xxxxxxxxx xxxxxxx (NR)
Buňky xx promyjí xxxxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Přidá se 100 μx média x NR x xxxxxxxx xx xxx 37 xX ve xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 7,5 % XX2 xx xxxx 3 xxxxx.
Xx xxxxxxxx se xxxxxx x NR xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX, xxxx xx pak xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx (je xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx poloze).
Přidá xx xxxxxx 150 μx roztoku na xxxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx 10 xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx NR z xxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX při 540 nm za xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx uchovají xx xxxxxxx formátu (xxxx. XXXXX) xxx xxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
1.8 XXXXXXX X KVANTITA XXXXX
Xxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx při xxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxx xx. Xx-xx xxxxxxxx cytotoxicita, koncentrační xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xx xxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx až xx definované xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx x experimentu xx xxx (-XXX) xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx (+XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxx, xx xx xxxxxxxxxxxx rozsahy v xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx řádově xxxxx, aby xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dat. Pokud xxxx xxxxxxxxxxxx zjištěna x žádné x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxx při -XXX, xxx při +XXX), xxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx hraniční - xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx třeba test xxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, může xxx xxxxxxxx pozměnit xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx dosáhlo jasného xxxxxxxx. Klíčovou proměnnou x tomto xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxxxxxxxx xxx jeho opakování xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx). Lze také xxxxxxxx x změnách xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxx. X xxxxx, xxx xxxx xx xxxx xxxxxxx, může xxx významný xxxx xxxxxxxx xxxx.
1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx je xx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxx testované látky xxxxxxx x 50 % xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XX (XX50). Xx lze učinit xxx, že xx xx xxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (nejlépe Xxxxxxx funkce nebo xxxxxxxxxx regrese) xxxx xx použije xxxx xxxxxx metoda xxxxxxxxx (14). Xxx xx xxxxxxx XX50 xxxxxxx xxx další xxxxxxx, xx třeba zkontrolovat xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx hodnoty XX50 xx také možno xxxxxx grafické metody. X tomto případě xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (osa x: xxx, osa x: xxxxxx), protože xx této xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva xxxxxx xxxxx lineární.
1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX MODELY)
1.10.1 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 1: fotoiritační xxxxxx (XXX)
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx křivky xxxxxxxxxxx - xxxxxx jak xx přítomnosti (+XXX), xxx za xxxxxxxxxxxxx (-XXX) xxxxxx, se xxxxxxxxxxxx xxxxxx (PIF) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (-XX)
|
| &xxxx;
(x) PIF =
|
____________
|
|
EC50 (+XX)
|
XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx PIF ≥ 5 fototoxický xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx látka xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX, xxxxxx při -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx XXX xxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xx látka xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xx xxxxxxxxx xxx. "&xx; XXX", když xx xxxx cytotoxicity (-XX) provede xx xx maximální xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Cmax) x xxxx xxxxxxx se xxxxxx xx vzorce:
|
Cmax (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) > PIF =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
Xxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxx "&xx; XXX", pak xxxxx xxxxxxx > 1 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxx XX50 (-XX), xxx EC50 (+XX), protože xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx až xx nejvyšší xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxx, že xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx "PIF = *1", xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) XXX = *1 =
|
___________
|
|
Cmax (+XX)
|
Xxxxx xx xx xxxxxx xxxxx hodnota "PIF = *1", xxxxxxxxxx xx, že xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx (x) x (x) xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzít xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx, jichž xx xxx xxxxx dosáhlo.
1.10.2 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 2: xxxxxxx xxxxxxxxx (XXX)
Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx verze xxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, vypracovaného xx xxxxxxx xxx x validační xxxxxx XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxx xx vitro x xxxxx XX xxxxxx (13). X xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XXX v těch xxxxxxxxx, xxx nelze xxxxxx xxxxxxx XX50. X tomto xxxxxx xx xxxxxxx veličina "xxxxxxx fotoefekt" (XXX) xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva. Xxx aplikaci xxxxxx XXX xxx na Xxxxxxxxxxx univerzitě x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx software, xxxxx xxx obdržet zdarma.
1.11 Xxxxxxxxxxxx výsledků
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx (PIF ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) ukazuje, xx xxxx látka xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se k xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx nižších xxx 10 μg/ml, xx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx také xx xxxxxxx expozičních xxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (100 (g/ml), bude xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx nejspíše xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx o penetraci, xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx, xxxx údaje x testování dané xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx alternativním xxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx vitro.
Negativní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro (XXX &xx; 5 xxxx XXX < 0,1) ukazuje, že xxxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxxxxx xxx použité xxxxx buňky x xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy by xx látka xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx, xx látka xxxx xxxxx fototoxický xxxxxxxxx a fotoxicita xx xxxx se xx považovat xx xxxxxxxxxxxxxxxx. V případech, xxx xxxx při xxxxxxx koncentracích xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislosti xxxxxxx xxxxxx (XX50 + UV a XX50 - XX), xx interpretace xxx xxxxxx. Naproti tomu xxxxx nebyla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (+XX xxx -XX) a xxx xxxxxxxx rozpustnost xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx koncentrace 100 μx/xx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx test xxx xxxxx xxxxx xx xx xxxxx xxxxxx x xxxx xx xx uvažovat x xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx kůže xx xxxx nebo xx xxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- identifikační údaje x číslo XXX, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jež xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- stabilita x xxxxxxxxxxxxx, jsou-li xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx (XXXX xxxx PBS).
Buňky:
- typ x zdroj buněk,
- xxxxxxxxxxxx mykoplazmat,
- xxxxx xxxxxxx pasáže, xx-xx xxxxx,
- citlivost xxxxx xxxx záření UVA xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx x testu na xxxxxxxxxxxx 3X NRU xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x po xxx:
- xxx x složení xxxxxxxxxxxx média,
- podmínky xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, vlhkost),
- xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xx a xx xx).
Xxxxxxxx xxxxxx (b) - ovlivnění xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx UV/VIS xxxxxxx x bez xxx,
- v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxx koncentrace,
- xxx x xxxxxxx působícího xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (c) - ozařování:
- xxxxxxxxxx xxxxx daného xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx světelného xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx použitého xxxxxx (filtrů),
- charakteristika xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx světelného zdroje xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx XXX (v x W/cm2) při xxxx xxxxxxxxxxx,
- doba xxxxxxxx XX/XXX xxxxxx,
- xxxxx záření XXX (xxxxxxxxx x xxx) x X/xx2,
- teplota xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a kultur xxxxxxxx uchovávaných v xxxxx.
Xxxxxxxx pokusu (d) - test NRU:
- xxxxxxx xxxxx x XX,
- xxxx xxxxxxxx x NR,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, vlhkost),
- podmínky xxxxxxxx XX (xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx délka, xxx xxxxx se spektrofotometricky xxxxxxxxx xxxxxxx hustota XX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx-xx xxxxxxx,
- xxxxxxx srovnávacího xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), xxxxx xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx jednotlivých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxxxxx x procentech xxxx xxxxxxxx životaschopnosti xxxxxxx,
- xxxxxx koncentrace - xxxxxx (koncentrace xxxxxxxxx xxxxx νx relativní xxxxxxxxxxxxxxx buněk) získané xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +XXX x -XXX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hodnot EC50 (+XXX) x EC50 (-XXX),
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxx UV/VIS xxxxxxx - výpočtem xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (XXX),
- klasifikace xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (a) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- absolutní xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx extraktu XX) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx,
- historické xxxxx xxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrola:
- xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-XXX) x XXX xxxxx xxxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx údaje xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-XXX) x PIF, průměry x směrodatné xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx X.41. byla xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxx č. 251/98 Xx. xxxxx xxxxxxxxx xxxx 1.1.1999.
Xx xxxxx xxxxxx právního xxxxxxxx xxxx podchyceny xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx právním předpisem x.:
208/2001 Xx., xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx XX č. 251/98 Xx., kterou xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx toxicity xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxx
x účinností xx 22.6.2001
Xxxxxx xxxxxxx č. 251/98 Xx. xxx xxxxxx xxxxxxx předpisem č. 443/2004 Sb. s xxxxxxxxx xx 1.8.2004.
Znění jednotlivých xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx uvedeného xxxxxxxx xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) xx x) xxxxxx č. 157/1998 Xx., x chemických xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a x xxxxx xxxxxxxxx dalších xxxxxx.
2) Xxxxx č. 246/1992 Sb., xx ochranu xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx x. 162/1993 Sb., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Xx. x č. 30/1998 Xx.
3) Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx chemikálií. Xxxxx 4 - xxxx xx zdraví (XXXX Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxx of Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).