Právní předpis byl sestaven k datu 22.06.2001.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
XXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
xx xxx 16. xxxxx 1998,
xxxxxx xx stanoví xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
Ministerstvo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §4 xxxx. 1 xxxx. c) zákona x. 157/1998 Sb., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x chemických přípravcích x x xxxxx xxxxxxxxx dalších zákonů:
§1
Tato xxxxxxxx stanoví xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x chemických xxxxxxxxx xxxxxx toxických, toxických, xxxxxx škodlivých, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a toxických xxx xxxxxxxxxx (dále xxx "xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků").1)
§2
(1) Xxxxxxxx chemických látek x xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx prováděnými xxxxxxxx uvedenými x příloze této xxxxxxxx.
(2) Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx i xxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x reprodukovatelné xxxx xxxxxx uvedené x odstavci 1, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx2) x metody xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx (OECD).3)
§3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx 1. xxxxx 1999.
Xxxxxxx:
XXXx. David, CSc. x. x.
Xxxxxxx k xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx toxicity chemických xxxxx x xxxxxxxxx
B. VŠEOBECNÝ XXXX
1. ZÁKLADNÍ XXXXX
1.1 XXXXXX XXXXXXXX
xxxxxxxx nepříznivé účinky, xxxxx xx objeví xxxxx xxxxxx doby (xxxxxxxx 14 xxx) xx xxxxxx jedné xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 XXXXXX XXXXXXXX
xx xxxxxxxxx termín popisující xxxxx xxxxxxxx toxicity xx aplikaci testované xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xx xxx xxxxxx, xx po xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx x xxxxx.
1.3 XXXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx vyjádřena xxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx jednotku hmotnosti xxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti), nebo xxxx xxxxxxxxxx dietní xxxxxxxxxxx (díly xx xxxxxx dílů xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx).
1.4 XXXXXXXXXXXXXX XXXXX
xx nejvyšší xx xxxx xxxxxxx dávkových xxxxxx, kterou xx xxxxx xxxxx, aniž xx to způsobilo xxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx.
1.5 DÁVKOVÁNÍ
xx xxxxxxxxx termín xxxxxxxxxx dávku, xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
1.6 XX50 (XXXXXXX XXXXXX XXXXX)
xx xxxxxxxxxxx vypočtená xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx způsobí xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx 50 % xxxxxx, xxxxxx xxxx podána. Xxxxxxx LD50 xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XX50 (XXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX)
xx xxxxxxxxxxx vypočtená xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx smrt do xxxxxx xxxx xx xxxxxxxx u 50 % xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Hodnota LC50 xx xxxxx xxxx xxxxxxxx testované látky xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xx.x-1).
1.8 XXXXX
xx zkratka xxx "xx xxxxxxxx adverse xxxxxx xxxxx" (xxxxxxx xxx pozorovaného xxxxxxxxxxxx xxxxxx) a xx xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx expoziční xxxxxxxxxxx, xxx které nedochází x zjistitelným toxickým xxxxxxxxx.
1.9 TOXICITA PO XXXXXXXXX DÁVCE/SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se objeví x pokusných xxxxxx x důsledku xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látce, xx dobu představující xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.10 XXXXXXXX TOLEROVANÁ XXXXX (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX DOSE)
je xxxxxxxx dávka, xxxxx x zvířat xxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x ohledem na xxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx.
1.11 PODRÁŽDĚNÍ XXXX
xx vyvolání xxxxxxxxxxx xxxx na xxxx po aplikaci xxxxxxxxx xxxxx.
1.12 XXXXXXXXXX XXX
xx xxxxxxxx xxxx na xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxx oka.
1.13 XXXXXXXXXXXXX KŮŽE (XXXXXXXXX XXXXXXXXX DERMATITIDA)
xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.14 XXXXXXXXX XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx od 3 xxxxx xx 4 xxxxx.
1.15 TOXIKOKINETIKA
xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, metabolismu a xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek.
1.16 ABSORPCE
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) aplikovaná xxxxx xxxxxxxx do xxxx.
1.17 EXKRECE
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx látka případně xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx z těla.
1.18 DISTRIBUCE
označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx.
1.19 XXXXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXXX - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX A XXXXXXXXX TOXICITA
Xxxxxx xxxxxxx účinky a xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx toxicity (xxxxxx X.1 - B.5), xx xxxxxxx xxxx xxx xx jediné xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xx toxicitě xxxxx lze xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xx kompletní xxxxxxxxx XX50. Xxx inhalační xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx možné xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx metodám, xxxxx xxxxxxxxx xx nejmenší xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxx X.1 xxx) x metoda xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (metoda X.1 xxxx). Xxx testování xx jednom druhu xxxx studie xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx vyvozené z xxxxx studie. X xxxxx xxxxxxx může xxx použita xxxxxxxxxx xxxxxxxxx metoda xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7, X.8 a X.9) xx xxxxxxxx xxxxxxx účinky xxxxxxxxxx x důsledku xxxxxxxxx xxxxxxxx. Důležité xx xxxxxxxx pozorování zvířat xxx, aby xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx testy xx xxxx pomoci xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx a toxické x xxxxxxxxx dávky. Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx aspektů do xxxxx xxxxxxx (metody X.26 - B.30 x X.33).
3. XXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxxx. Xxxx změny ("xxxxxx") xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx nebo xxxxxxxx xxxx, xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Účinky xx xxxx xxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx změnou xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx.
Xxxxxxxxx aktivita xxxxx se stanoví xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx (bodové) xxxxxx x baktériích (xxxxxx X.13/14) xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x savčích xxxxxxx (metoda X.10).
Xxxxxxxxxx jsou xxxx xxxxxxx xx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx test (xxxxxx B.12) xxxx xxxxxxx xxxxxxxx chromozomů xxxxxx xxxxx (xxxxxx X.11). Je xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx vitro xxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx nebo pro xxxxxxxxx a kontrolu xxxxxx mohou být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx ke zjištění xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Tyto xxxxxx xxx využít x xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx základním xxxxxxxx testů; xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx metod; xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx vivo.
Pro xxxx účely zahrnují xxxxxx B.15 xx X.25 xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x in vitro, xxx xxxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx složitějších xxx baktérie používané x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx mutagenity je xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx poskytly relevantní xxxxxxxxxx informace x xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované látky.
Xxxxxxxxx studie, xxxxxx xxx xxxx případ, xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxx x fyzikální xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, výsledků xxxxxxxxxx bakteriálních x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, výsledků xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Pro xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x savců xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx na detekci xxxxxxxxx účinků v xxxxx savčím xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx) mutacemi, xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx zárodečné xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx x xxxx příloze), xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxxx X.25). Xxxxxx xxxxx xxx použít xxx xxxxxxxxxx možného xxxxxxxxxxx rizika xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xx xxxxx se xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx genotoxicity xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx protokolu xxxxxxxxxxxxx xxx danou xxxxxxxx po xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
4. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx genotoxické nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx předpokládaném xxxxxxxxxx působení.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx x genotoxickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx mutagenity/genotoxicity. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx. Test xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx B.7, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx x určitých tkáních, xxxxx xx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx informace xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx s karcinogenním xxxxxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx, podrobnější zkoumání xxxxxx aspektu pomocí xxxxx xxxxxxxxxxxxx (metoda X.32) xxxx často x kombinované studii xxxxxxxxx toxicity/karcinogenity (xxxxxx X.33).
X xxxxxxxxx xxxx xxxxxx testy xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx určují xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx takové xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx chování buněčných xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x maligní xxxxxxxxxxxx - in xxxx (xxxxxx X.21). Používá xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx.
5. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo schopností xxxxx a xxxxx (xxxx xx plodnost) xxxx podle xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxx xxxx teratogenitu x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx B.31) xxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx s xxxxxxx podáváním. Alternativně xxxxx být xxxxxxx xxxx způsoby xxxxxxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx vlastnostech testované xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx B.35) rozšířit xxx, xxx xxxxxx xxxxx generaci.
6. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx změn x xxxxxxxxxx nebo periferním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx na neurotoxicitu xxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikaci (xxxxxx X.7) zahrnuje xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinku. Xxxxxx xx měla xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx vyžadují xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx být odhaleny x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx například xxxxxxxx, xx jisté xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je posuzována xxxxxxxx X.37 x X.38 xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx podání xxxxx.
7. IMUNOTOXICITA
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx má xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Test xxxxxxxx xxx opakované aplikaci (xxxxxx B.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx měla xxxxxx odhalit xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx další, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8. TOXIKOKINETIKA
Toxikokinetické xxxxxx pomáhají xxx xxxxxxxxxxxx x vyhodnocení xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx aspekty xxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx a xxxxxxxx xxxxx pomoci xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx se, xx bude x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx parametry. Xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxikokinetických xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx). U xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx změny x xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxx xxxx dostatečná xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx B.36).
Informace x chemické struktuře x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx poskytnout xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xx xxxxx. Přispět xxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX
Xxxxxxx testované látky, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x její xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxx zahájením xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx poskytují informace xxxxxxxx pro výběr xxxxxxx podávání, pro xxxxx xxxxxxxxx studie x xxx manipulaci x xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx metody pro xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky (x také pokud xxxxx větších xxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxx x biologickém xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Všechny xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, fyzikálně-chemických vlastností, xxxxxxx x chování xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
10. PÉČE X XXXXXXX
Pro xxxxxxxxxxxxx testy xx xxxxxx kontrola podmínek xxxxxxxxx, xx kterém xxxx xxxxxxx chována, x xxxxxxx xxxx x zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX XXXXX
Životní xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx pokusná zvířata xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Pro xxxxxxx, xxxx a xxxxxxx je xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 22 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu 30 - 70 %, xxx králíky xx xxx xxxxxxx 20 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx tyto xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx testované xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx sledovat xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx, zaznamenávat xx x xxxxx je x závěrečné xxxxxx x xxxxxxx pokusu.
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxx xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx jiný xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx jednotlivě xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxx 5 xxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx součástí xxxxxx x xxxxxxxx na xxxxxxxxx jsou xxxxx x xxxxxxx xxxxx x klecích a xxxxx xxxxxx chovaných x jedné xxxxx xxx během xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, tak xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx všem xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx živočišný xxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx působením xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx složky potravy. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx výsledků. Používají xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx s neomezeným xxxxxxxxx x xxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx podávána x potravě, xx xxxxx xxxx přizpůsobit xxxxx diety.
Xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx prokazatelně xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx přítomny x xxxxxxxxxxxxx, xx kterých xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
11. XXXXXXX XXXXXX
Při xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx metod xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ochraně xxxxxx.
Xxxxxxx počtu x xxxxxxx bolesti x xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx např. xxxxxxxx metody xxxxx xxxxx (X.1.xxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (B.1.tris). Xxxxxx x xxxxxx xxxxxx nevyužívá smrti xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x 70 % xxxxxx xxxx xxx xxxxxx B.1.
Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podávat x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, o xxxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x testech xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1, B.2 a X.3), xxx xxxx x xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx X.11 x X.12), xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx zbytečně velkými xxxxxxx.
Při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxx xxxxxxxxx nebo xxx xxxxxx na xxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx to xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx založeno xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx na xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx in xxxxx. Xxxxxxxxx, xxxx-xx s xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx kožní xxxxxxxx x xxxxxx používanou x limitním xxxxx (xxxxxx X.3) x xxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx dráždivosti (xxxxxx X.4) může xxx xxxxxxxx; xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže při xxxxxx xxxxx dráždivosti (xxxxxx X.4), nesmějí xxx dále xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx.
Xx xxxxx neustále xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx se xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxx použití xxx xxxxxxxxxxxxxxxx rizika, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x označování xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x úvahu xxxxx xxx, xxx xx xx xxxxx.
12. HODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX
Při xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxx xx zřeteli, že xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx je xxxxx xxx x omezené xxxx; xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx účincích x xxxx, pokud xxxx x xxxxxxxxx, mohou xxxxxxx x ověření xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x označování xxxxxx x xxxxxxxxxxx látek xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx zjištěných x kvantifikovaných xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx výsledky xxxxx xxx také xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxx xx posuzování xxxxxx nových i xxxxxxxxxxx látek.
Xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
B.1. XXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ (PER XX)
1. XXXXXX
1.1 Princip testovací xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx xxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx skupině xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxxxx dávky je xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, která xxxxxxx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx používá xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Zvířata xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx způsobem utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podávat x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována v xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx náhodně přiřadí xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky ve xxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx volbou xx roztok x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx jako xxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxx vhodných xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxx xxxxxx před testem xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx; xxxxxxxx jsou vodné xxxxxxx, jichž xx xxxxx xxxxxxx až 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x testech xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx hladinách xxxxx. Xxxxxxxx je třeba xxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx dráždivé xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx proti xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. Xx xxxxxxx testu xx x obou xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx hodnoty.
1.2.2.2 Počet xxxxxxx
Pro každou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx x obou xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, je třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Poznámka: Xxxxxxxxx-xx xx x akutních xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx druhů, než xxxx hlodavci, mělo xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xx třeba xxxxxxxx, xxx nebyla xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dávky. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx vyvarovat xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Volba xxxxx
Má být xxxxxxxxxx xxxxx hladin xxxxx, nejméně xxx, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxických účinků x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx, a xxxxx xx možné, musí xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x přijatelnou xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxxx hlodavců lze xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx nejméně 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx a 5 xxxxx x xxxxxxxx xxxx popsaných xxxxxxx. Xxxxx podaná xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx obrazu xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje xxxxxx x trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx potřeby prodloužit. Xxxxxxxx je xxxx, xxx xx projevy xxxxxx objeví x xxxxxx, x xxxx xx xxxxxxx, zvláště xxx, kde je xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx zvířata hladová. Xxxxxxxx xx potrava xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. X xxxxxx x xxxxx rychlostí xxxxxxx výměny xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx; přístup x pitné vodě xxxx omezen. X xxx pokusu xx xxxxxxx zváží x xxxxxxxxx látka se xxxx sondou orálně x xxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx najednou, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx menších xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Po xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxx ještě 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, může být xxxxxxx - podle xxxxx xxxxxx období - xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxx xx pozorování provádění x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx je xxxxx xxxxxxxx častá xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx sledovat x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx aplikované xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx na xxxxxxxx.
Xxxxxxx jednou xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx ztrát xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx nebo umírajících xxxxxx. Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, spánku x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xx konce xxxxxx, xx pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx nálezy se xxxxxxxxxxx. Je-li xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxx pro histologické xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx
Xx dokončení xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx nejméně xxxxx xxxxxxx o xxxx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrazně xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X jednotlivých xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx testovaného xxxxxxx xxxx xxxxxxx citlivější, xxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví xx xxxxx xxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx sestavují xx tabulky. Z xx musí xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx patrný počet xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, doba uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x jinými xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x době uhynutí. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, přežívají-li xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Zvířata, xxxxx xxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx zaznamenávají xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Vyhodnocení údajů xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, mezi xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x průběhu pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx se použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x podle hladiny xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, počet zvířat x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- doba xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxx LD50 xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx pokus, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (s xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),
- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50, xxxxx xx xxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx mortality xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx (xxxxx je xxxxxxxxx danou xxxxxxx xxxxx),
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx všech xxxxx xx druhém pohlaví,
- xxxxxx výsledků (xxxxxxxx pozornost xx xxxxx xxxxxxx účinku, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx během xxxxx xx xxxxxxxxxx hodnotu XX50),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.1. bis XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX) - XXXXXX FIXNÍ XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx podání xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx s xxxxx xxxxxx se provádí xx xxxx xxxxxxx.
X předběžné xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx sledují účinky xxxxxxxx dávek xxx xxxxxx aplikaci xxxxxx x zvířat xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx odhadu xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Normálně xx v této xxxxx etapě nepoužije xxx xxx xxxx xxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx sondou xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx z xxxxxx xxxxxxx dávek: 5, 50, 500 xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti. Použitá xxxxx xx xxxxxx x předběžné xxxxxxxxxx studie, a xx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxx" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), xxx xx xxxxxxx.
Po xxxxxx xx pozorují účinky. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxxx, není xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx xxxxxxxxxx zřejmá xxxxxxxx, látka xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxx toxická reakce xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx na nejbližší xxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx postup umožňuje xxxxxxx "diskriminující dávku" (xxx xxxx X - Všeobecný xxxx xxx 1.2), xx. xxxxxxxx z předem xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxx je xxxxx xxxxx, aniž by xxxxx x úhynu (xxxxxx případů humánního xxxxxxxx).
Zvířata se xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, o xxxxxxx je známo, xx vyvolávají značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
1.2.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx xxxxx tomu.
Xx třeba xxxxxxxx xxxxx užívané kmeny xxxxxxxxx zvířat. Xx xxxxxxx testu xx x obou xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (pro xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.
Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx náhodně přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx jedna xxxxxxx každého z xxxx xxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxx x xxxxxxxx dávky
Xxxxx je xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx první xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx volbou je xxxxxx x rostlinném xxxxx, xxxxxx potom xxxx xxxxx možnost xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxx nebo xxxxxx xxxx xxxxxx nebo xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X hlodavců by xxxxx xxxxx normálně xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti; xxxxxxxx xxxx vodné roztoky, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx by xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být zvířata xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx; přístup x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. X xxx xxxxxx xx xxxxxxx zváží x xxxxxxxxx xxxxx se xxxx xxxxxx orálně x xxxxxx dávce. Xxxx-xx možno xxxxx xxxxx xxxxxxxx, lze xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxx přístup x xxxxxxx ještě 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx během určitého xxxxxx, může xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx tohoto období - potravu x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Orientační xxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxx samci xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx 24 hodin xxxx xxxxxxx xxxxx dalšímu xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxx x xxxxx zjistit xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx dní; xxxxx přetrvávají xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx, xxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx. Posuzují se xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx-1. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx vyšší xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx podat xxxxx potřeby xxxxx xxxx více vmezeřených xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx(xxx) xxxxx, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) příznaky xxxxxx, x o xxxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxx podle xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkách. Pokud xxxxxx k xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx první xxxxx 500 mg.kg-1. Xxxxxxxx xx xx výchozí xxxxx nepozorují xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Jestliže xxxxxxx x xxxxxxx xxx 2000 xx.xx-1, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx studii xx třeba provést xx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxx. 500 xx.xx-1) zjištěny xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. 50 xx.xx-1). Xxxxxxxx xxxx zvíře xxxxxxx, xxxxx být xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx vhodné xxxxx xxxx určenými xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, že xx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx více než 5 xxxxxx.
1.2.2.2 Hlavní xxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx a xxxxxx by xxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx dávky xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xx vyhnout xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx látky.
Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx x xxxxx, xx xxx zvolena x xxxxx xx 4 xxxxxxx úrovní dávek, xxxxxxxxx 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx měla xxx ta, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů); xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx mají xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx dávka xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx testování.
Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx znovu xxxxxxxx xx další xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx pozorovací xxxxxx bylo kompletní. Xxxxxxxx xxxxx toxická xxxxxxx vyžaduje xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx vlivem xxxxx, xxxx xx být xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Opět xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx humánně xxxxxxx, by měla xxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xx podání xxxxx xx pozorování provádějí x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx každé xxxxx xx xxxxx samostatné xxxxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zvířat xx xxxxxxxx.
Doba xxxxxxxxxx xx měla xxx nejméně 14 xxx. Nelze xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx by xxx xxxxxx podle obrazu xxxxxx, rychlosti vývoje xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx xx možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxx x doba xx uhynutí, zvláště xxx, xxx xx xxxxxx tendence x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx příznaků.
Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx první xxx xx xxxxxx xxxxx x nejméně jedenkrát xx xxx další xxx. Zvířata xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx bolesti xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx prvních xxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx zvířata xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xx xxxx xxxxxxx příliš xxxxxx xxxxx.
Pozorování se xxxxxxxx xx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx a komatu.
Xxxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx 3 xxx x potom xxxxxx týdně. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxx, i xx, xxxxx přežívají xx xxxxx testu, se xxxxx x pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx tkáně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
X xxxxxxxxxx na xxxxxxxx předcházející xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx výjimečně xxxxx xxxxxxx xxxxx.
X xxxxxxx, xx látka xxxxxxxx mortalitu při xxxxx 5 mg.kg-1 (xxxx jestliže xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx mortalitu xxx xxxx xxxxx), xx xxxxx dále xxxxxxxxxx xxxxxx toxicitu xxxxxxxxx látky.
2. ÚDAJE
Xxxxx x orientační x hlavní xxxxxx xx sestavují xx xxxxxxx jednotlivě xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Z xx xxxx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx; počet xxxxxx x příznaky xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx testu xxxx xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx důvodů; popis xxxxxxxxx xxxxxx; pro xxxxxx xxxxxx, zda xxx xxxxxxxxx zřejmý xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx připsat xxxxxxxxx xxxxx; xxxxxx průběh xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx pitvy. X xxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxx déle xxx xxx, je třeba xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx bolestem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xxxx zaznamenána jako xxxxxxx vyvolaná xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx informace xxx xxxxxxxxxx i xxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, krmení, xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (včetně vehikula, xxxxx se použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx,
- xx formě xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx (počet xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx tělesné xxxxxxxxx; xxxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx utracených během xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx, stupeň a xxxxxx účinků),
- xxxxxx xxxxxx nástupu xxxxxxxxx příznaků x xxx byly reversibilní,
- pokud xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxx látky, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx utracení xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx příznaků xxxxxx toxicity x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx hladiny xxxxxxxx v testu.
3.2 Xxxxxxxxx x interpretace
Xxxxx | Xxxxxxxx | Interpretace |
5 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx | Xxxx než 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx toxicita 100 % přežití; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx jedovaté Látky, xxxxx jsou xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx xxx 50 xx.xx-1 |
50 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % přežití | Xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx. Viz xxxxxxxx xxx 5 mg.kg-1 |
100 % xxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx škodlivé Xxx výsledky x 500 mg.kg-1 | |
500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx | Xxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx. Xxx výsledky x 50 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; není xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx bez xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx u 2000 xx.xx-1 | |
2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxx xxxxxxxx x 500 mg.kg-1 Xxxxx, xxxxx nemají xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx |
B.1. xxxx XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX STANOVENÍ XXXXX XXXXXX TOXICITY
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxxxx stanovení třídy xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jak xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx odstupech, xxx xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx popsaný xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx stanovených xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx buď xxxx xxxxxxxxxxxx dávky xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx, xxxxx xx žádoucí xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx XX50. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xx i x xxxx metody xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx x sekvenčnímu xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx být xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxx B.1. Xxxxxx výhodou xxxx xxxxxx xx xxxxx spotřeba zvířat xxx x metody xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx)(B.1) x xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1 bis).
1.2 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx orálně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxx kroku se xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, x.x.
- xxxx zapotřebí xxxxx xxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx xxxx bude xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx druhého xxxxxxx;
- xxxxx krok xxxx xxxxxxxx x vyšší xxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, označena xxx, xxx byla xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x chována ve xxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxx zvyknout xx laboratorní podmínky. Xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx, ale xxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxx musí xxxxxxx jasné pozorování xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx dávce xxxxxxxxx sondou xxxx xxxxxxx kanylou.
Pokud je xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx xxxxxxx roztoku/emulze x jedlém rostlinném xxxxx (xxxx. kukuřičném) x pak roztoku x jiných xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx známa xxxxxx toxická xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx být stanovena xxxxx xxxx testem.
Zvířata xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxx xx určitou xxxx xxx xxxxxxx (xxxx. potkani xxxx xxx x myši 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx k xxxx se xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxx dávek
Výchozí xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxx xxxxxxx úrovní, xxx. 25, 200 x 2000 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxx, aby x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxx xxxx látka xxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx popsaného v Xxxxxxx 1.
Xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx veškeré xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx informací x vztahu struktury x xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxx naznačují, xx xxxxxxxx je xxxxxxxxxxxxxxx x při xxxxxxxx xxxxxx dávky (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), xxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx nejsou xxxxx xxxxxxxxx x testované xxxxx, doporučuje xx - x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx - použít xxxxxxx xxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti.
V xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx zpřesnit xxxxxxxx xxxxxxxxx, než xxx xx dovoluje test x xxxxx pevnými xxxxxxxxx úrovněmi xx xxxx 25, 200 x 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxx případech xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx dávkách xx xxxx 5, 50 xxxx 500 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx aplikovat dávky, x xxxxxxx xx xxxxx, xx způsobují xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx dráždícími xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx na rychlosti xxxxxxx, xx trvání x závažnosti toxických xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx druhého pohlaví xxxx xxx další xxxxx je třeba xxxxxxx, xxxxx není xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx přežila.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx test x xxxxxxx xxxxxx xxxxx ve xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx třech xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxx x uhynutí xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx, lze xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx 200 xx.xx-1 (xxxx 500 xx.xx-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx pozorovat obvykle xx xxxx 14 xxx, kromě xxxxxxx xxx musí být xxxxxxx vyloučena z xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx nemělo xxx xxxxxxxxx xxxxxx pevně; xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx reakcí, xxxx jejich nástupu x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxx a xxxx příznaky toxicity, xxxxxxx jde-li x xxxxxxxx toxické xxxxxxxx. Xxxxxxx pozorování jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: záznamy xxxx vedeny pro xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3 Xxxxx postupu
Po období xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xxx potravy xx xxxx xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Kde je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx určité xxxx, xxxx xxx - x xxxxxxxxxx xx xxxxx této xxxx - xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx.
Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, který xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. U hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x tělesné xxxxxxxxx, x případě xxxxxxx xxxxxxx lze podat x 2 xx xx 100 x xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tak, xxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxx dávky. Xxxxxxxx xxxx možné xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx testování xxxx xxxxxxx x Xxxxxxx 1.
1.3.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx (xxx xxxxxxxx) nebo častěji, xxxxx to vyžaduje xxxxxx zvířat xx xxxxxx xxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Zvířata, která xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx humánně xxxxxxx: xxxx zvířata xxxx xxxxxxxxx stejně xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xx xx byla xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx mrtvá, dobu xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx co nejpřesněji. Xxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx, xxxx zvířata xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx kůži x xxxxx, na očích x xxxxxxxxxx, a xxxx na dýchacím, xxxxxxxx, vegetativním x xxxxxxxxxx nervovém xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Pozornost xx xxxxx věnovat výskytu xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x kómatu.
Veškerá xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxx nejméně jednou xxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx konci xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3.3 Pitva
U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx x utracených xxxxx testu, se xxxxxxx pitva. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změny xxxx zaznamenány xxx xxxxx xxxxx zvlášť. Xxx xxxxxxx dalších xxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx uvážit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx orgánů xxxxxxxxxxxx xxxxxx makroskopické patologie x zvířat xxxxxxxxxxxxx 24 a xxxx xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX ÚDAJŮ
K xxxxxxxxx xxxx xxx údaje x každém xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxx údaje shrnuty xx tabulkové xxxxx, xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxxx, časový xxxxxx a vratnost xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx nálezy.
Všeobecné xxxxxxx x interpretaci výsledků xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx v Dodatku 2.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx obsahuje xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- živočišný xxxx/xxxx;
- xxxxxxxxxxxxxxx stav xxxxxx, xx-xx xxxx;
- počet, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx voda;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx aplikace;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a kvalitě xxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);
- zdůvodnění xxxxxx počáteční xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx údajů x xxxxxxxx xxxxxxx zvířete xx tabulek xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx (xxx. xxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx);
- nástup x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x každého zvířete, xxxx-xx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx a interpretace:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx x metodou XXXX XX 423.
DODATEK 1
XXXXXX TESTOVÁNÍ
1. Xxx xxxx xxxxxxx x xxxx 1.4.2.3, xxxxxxx xxxxx by měla xxx ta xx xxx pevně stanovených xxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx výběr xxxxxxx xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x účinku,
- xxxxxxx xxxxx z jiných xxxxx toxicity x
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. Příslušné vývojové xxxxxxxx uvedené x xxxxx dodatku stanovují xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxx xx počtu xxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx.
3. Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 25 xxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx se xxx dále xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx přitom xxxxxx u ostatních 5 zvířat xxxxx xxxxxxx příznaky, je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx úmrtí xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4. Xxxxx xx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jedno xxxxx každého pohlaví, xx xx xxxxxxxxxxxx, xx hodnota XX50 xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné hmotnosti. Xxxxxxx xx to xxxx jen xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx reakce xxxxxxxxxxx dvou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx XX50 ve xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxx podnětem pro xxxxx testování xx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
5. Xxxxxx xxxxxxxx testování x xxxxx doplňkovými xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx 2). Xxxx xxxxxxxx xx možno xxxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx procesu, xxxx xxx xxxxx testování xx xxxxxxxxx testování xxxxx xxxxxxxx 1.
Xxxxxx xxxxxxxxx s výchozí xxxxxx 25 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti
V xxxxxxxxx xx udána xxxxx, xxxxx zvířat a xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx).
Xxx xxxxxxx je xxxxx uhynulých nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu xxxxxxxxx xxxxxx se x xxxxxxxxx pokračuje ve xxxxx xxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x příslušném xxxxx rámečku nebo xxxxx xxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkou.
Ukončení xxxxx: Klasifikace se xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, počet zvířat x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx uhynulých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx směru šipek xx xx xxxxxxxx xxxxxx rámečku.
Varianta 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx základě konečných xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx uvedeného x Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Pokračování xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx testu: Klasifikace xx provede xx xxxxxxx konečných hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx dávkou 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx xxxxx dávka, počet xxxxxx a xxxxxxx (1 - pohlaví xxxxxxx xxxx první, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx druhé).
Pod xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx uhynulých xxxxxx xx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx směru xxxxx xx xx xxxxxxxx šedého xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot uvedených x příslušném xxxxx xxxxxxx xxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxxxx uvedeného x Dodatku 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx šedém rámečku.
DODATEK 2
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx založených xx testovací xxxxxxxx 1
X rámečcích xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx druhé).
Pod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx "XXXXX XXXXX XXXXXXXXX" x xxxxxxxxxx tohoto xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx klasifikaci. Po xxxxxxxxx podle xxxxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx nedosáhne xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx horní xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx klasifikace. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx XX50 xx xxxxx xxx hodnota x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.)
(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx variantě 1
x) Xxxxxxx xxxxx 25 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
&xxxx;
x) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx xxxxxxx hmotnosti
c) Xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx
X.2. XXXXXX XXXXXXXX (INHALAČNÍ)
1. METODA
1.1 Úvod
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx vzplanutí x xxxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx
1.2 Xxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxx pokusných xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, a xx xxxxx koncentraci v xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.
Xxxxxxx xx závažnými x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x takovým xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx budou xxxxx experimentu. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx potřebného xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx to xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx expozičního xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pevné xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; x xxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx skupina x vehikulem. Xxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, že xxxxxx xxxxxxx účinek. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Experimentální xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx se přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Na začátku xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty (xxx každé xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx nejméně 10 hlodavců (5 xxxxx a 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx se x akutních xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx by xx zvážit použití xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxxx, xxx nebyly překročeny xxxxx toxické dávky. X těchto testech xx třeba xxxxxxx xx xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx dávek, nejméně xxx, a mají xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx x xxxxxxxxxxx skupin xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx údaje xxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x mortalitou x, xxxxx xx xx xxxxx, musí xxxxxxx xxxxxxxxx LC50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx po 4 hodinové expozici 5 samců a 5 samic plynu x koncentraci 20 xx.x-1 xxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx pevné xxxxx x koncentraci 5 xx.x-1 (nebo - x xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx použít x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx - xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) během 14 xxx x žádné xxxxxxxxx xxxxxxxx sledovanou xxxxxx, považují xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Doba expozice
Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx být 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Xxxxxxxx
Pro xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx proudění xxxxxxx x výměnou xxxxxxx nejméně 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, je xxxxx xx konstruovat xxx, xxx xx co xxxxxxx xxxxxxxxx shlukování xxxxxx x xxx xxxxxxxxx expozice testované xxxxx byla xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx by neměl x xxxxxx xxxxxxx xxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Je xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx orálně-nasální, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx dva xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx by xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx stanovit rigorózně. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x na xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx se objeví x opět xxxxxx xxxxxxx otravy, xxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx, zvláště xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx xxxxx. Exponují xx xx xxxx 4 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx mělo xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx pokusu má xxx 22 xX ± 3 x X. Xxxxxxxxx vlhkost xx být ideálně xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx tlaku xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) zabrání unikání xxxxxxxxx látky do xxxxx. Xxxxx expozice xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx vytvoření x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry. Xxxxxx xxxx zaručovat, xx stabilních xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dosaženo xx xxxxxxxxxxx. Konstrukce x provoz xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx.
Je xxxxx zajistit měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx),
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (některá xxxxxxx, např. xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx častější xxxxxxxxxxxx). Během jedné xxxxxxxx xx nemá xxxxxxxxxxx odchylovat xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx než ±15 %. X xxxxxxxxx aerosolů, kde xxxx úrovně regulace xxxx xxxxx dosáhnout, xx připouští větší xxxxxx kolísání. Xx xxxxx dobu trvání xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx, xxx to xxxxx xxxxxxxx (ale xxxxxxx xxxxxx pro každou xxxxxxxxxx xxxxxxx),
(c) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx i xx jejím skončení xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxx má xxxx individuální protokol. Xxxxx prvního xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx často. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx je třeba xxxxxxx pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mají sloužit xxxxxxxxxxx xxxxxxx ztrát xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx zmrazením xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xx utracením xxxxxxx xxxx umírajících xxxxxx.
Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dýchání, xxxxxxx, křečovým xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx a kómatu. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx xx expozici xxxxx x v okamžiku xxxxxxx.
Zvířata, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x ta, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx pitvají xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx i xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx vykazujících další xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx nálezy. Xxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx x zaznamenat, xxxxx xxxxxxx přežijí xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx humánně xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vyvolaná xxxxxxxxxx xxxxxx. XX50 se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se hodnotí xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx všech xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx poškození, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x všech xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxx pokusu: xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení včetně xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, systému xxxxxxxx aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x expozičním xxxx, xxxxx je používán. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx pro měření xxxxxxx, xxxxxxxx vzduchu, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxxxxxxx,
- xxxxx o xxxxxxxx xx xxxxxxx xx tabulky x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx variability (xxxx. xxxxxxxxxxx odchylkou). Xxxx xxxxx možno obsahovat xxxx xxxxx:
x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx x inhalačním zařízení;
x) teplota a xxxxxxx xxxxxxx;
c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx inhalačního xxxxxxxx, xxxxxx objemem xxxxxxx);
Pozn.: xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx (např. xx xxxx) je xxxxx uvádět xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx vzduchu, xxxxx xxxx, xxxxx je xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx.
x) povaha xxxxxxxx, pokud xxxx xxxxx;
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx;
x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx průměru (XXXX) x geometrická xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX);
x) doba xx xxxxxxxx xxxxxxxxx;
x) xxxx expozice;
- xxxxxxx toxických xxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxxx expozice (xx. xxxxx xxxxxx, která x pokuse uhynula xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx zvířat x xxxxxxxx toxicity; xxxxx exponovaných xxxxxx);
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxx skončení, xxxxxx x xxxxxxxx xxx humánní xxxxxxxx xxxxxx;
- všechna xxxxxxxxxx;
- xxxxxxx XX50 pro xxxxx xxxxxxx stanovená po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (xxxxx xx xxxxx jej xxxxxxxx);
- křivka xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na dávce (xxxxxxxxxxx) x její xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxx metoda xxxxxxxxx);
- xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx (se xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX50);
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.3. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx skupině xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Zvířata, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x zvířata, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x takovým xxxxxxxx, x kterých xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx bolest x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 dní před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx v podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx srst xxxxxx xx xxxxxx ostříhá xxxx oholí. Při xxxxxxxx nebo holení xxxxx xx xxxxx xxxx na to, xxx se xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx) kůže, xxx by xxxxx xxxxxx xxxx propustnost. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx připraví xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Při xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx připravenými x práškové formě, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx vehikulem, xxx xxx xxxxx xxxxxxx s xxxx. Xxx xxxxxxx vehikula xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx vehikula xx xx xxx xxxxx xxx, x xxxx xxxxx se může xxxx látka dostat xx xxxxx x xxxxxxx kůží, a xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxx nejvíce xxxxxxxxx xxxxxx kůží. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx králíků. Xxx použít x xxxx živočišné xxxxx, xxxxx xxxx pro xx důvody. Xx xxxxx volit xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 5 zvířat xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx informace, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, než xxxx xxxxxxxx, mělo xx xx zvážit xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Dávky xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx nepřekročily xxxxx toxické xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xx xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Má xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx tři, x xxxx xxx xxxxxx odstupňovány tak, xxx xxxxxxx testovací xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxx údaje xxxx xxxxxx xx znázornění xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx spolehlivostí.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxx provést xxxxxxx test jednou xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx xxxxxxxxx 5 xxxxx a 5 xxxxx x použitím xxxx popsaných xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx úplnou studii.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Doba xxxxxxxxxx má xxx xxxxxxx 14 dní. Xxxxx ji xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx určena xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje xxxxxx x xxxxxx fáze xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx příznak xxxxxx xxxxxxx x vymizí x xxxx xx xxxxxxx, zvláště xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata se xxxxxxx jednotlivě x xxxxxxx. Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xx plochu, která xxxx xxx 10 % xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx může xxx xxxx xxxxxx xxxxx; xxxx xx xx xxxx aplikovat xxxxxxxxxxx xx co xxxxxxxx část této xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx po expoziční xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x kůží xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x nedráždivé náplasti. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx překrýt, xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx zabránilo orálnímu xxxxxx. X zamezení xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx omezení xxxxxxxx xxxxxx, úplnou xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx expozice se xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx pokožky.
Xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. První xxx xx zvířata xxxxxxxx často. Xxxxxxx xxxxxx každý pracovní xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x odpovídající xxxxxxxx mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx snížení xxxxx xxxxxx xxx studii, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, na xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx x xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, slinění, xxxxxx, letargii, spánku x komatu. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx nejpřesněji. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxxxx xxxxxxx až xx xxxxx pokusu, xx pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické změny xx zaznamenávají a xxxxxxxxx tkáně xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrazně xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být odůvodněno xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x dispozici spolehlivá xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx citlivější, testování xx zvířatech druhého xxxxxxx je možno xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx pokusu, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx projevy xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxx testované xxxxx, xxx x týdenních xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx. Změny hmotnosti xx třeba xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, přežijí-li xxxxxxx déle než xxxxx xxx. Zvířata, xxxxx xxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx na xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx metodou. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx zvířat testované xxxxx a výskytem x stupněm xxxxx xxxxxxxxxx včetně změn xxxxxxx, klinických symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx lézí, xxxx xxxxxxx hmotnosti, mortality x všech ostatních xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Zpráva x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx informace:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, krmení atd.,
- xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxx očištění xxxx a xxxx xxxxxx: xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx),
- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx toxických xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx humánně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx zvířat,
- všechna xxxxxxxxxx,
- xxxxxxx LD50 xxx xx xxxxxxx, x kterého byl xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),
- 95% interval xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (xxxxx xxx xxx xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx x xxxx xxxxxxxx (xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx všech xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx pozornost xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx LD50 v xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.4. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXX DRÁŽDIVOST)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx s xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testování xxxxx xx xxxxxxxx, které xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx reakce. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx je vhodný xxxxx test, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x chemická reaktivita. Xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx (xxxx. xX xxxxx xx xxxxx 2 nebo xX xxxxx či xxxxx 11,5) xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx dráždivost, xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.
b) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, není vyžadován xxxxx xxxx.
x) Xxxxxxxx xx studií xxxxxx toxicity. Jestliže xxxx xxxxx v xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx dermální aplikaci xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx dávky (2000 xx.xx-1 tělesné hmotnosti) x nebylo pozorováno xxxxxxxxxx kůže, není xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx dráždivost. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx toxické xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx nanese x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, přičemž xxxxx xxxxx slouží xxxx xxxxx vlastní kontrola. Xx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxx pozorování musí xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx xxxx možné xxxx xxxxxxxxx také xxxxxxxxxxxxx pozorovaných xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x bolesti xx třeba humánním xxxxxxxx utratit.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx zvířat na xxxxxx ostříhá xxxx xxxxx. Xxx střihání xxxx xxxxxx xxxxx xx třeba dbát xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx, xxxxxxxxxxx kůží.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx mají xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx obdobích xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx nesmí xxxxxxx xx tyto zóny xxxxx xxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x práškové xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx dostatečně xxxxxxxx xxxxx, případně xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nutné xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx podráždění xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Je xxxxx použít xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxx třeba xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xx x in xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xx xxxxxxx), xx xxxxx uvážit xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx tohoto testu xxxxxxxxxxx leptavé xxxxxx, xx xxxxx doplnit xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Pro xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx zvláštních xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinu, xxx xxxxxxxxx případů nejednoznačných xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx zvířata.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Pokud nejsou xxxxx xxxxxxxx důvody xxx jiný xxxxxx, xxxxxx se na xxxxxxxxx xxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxx xxxx 0,5 g xxxx xxxx polotuhé xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x testu xxxx vlastní xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Dobu xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx dobu 14 xxx xx aplikaci.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x klecích. Testovaná xxxxx se xxxxxx xx xxxxx xxxxxx (xxx 6 cm2) xxxx x xxxxxxx xx plátkem xxxx xxxxxxxxxxxx nedráždivou xxxxxxxx. X kapalin x xxxxxxxxx xxxx může xxx xxxxxx nanést xxxxxxx testovanou látku xx xxx, x xxx xxx xxxxxxxxx xx xxxx. Xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx volně na xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx okluzivním xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx tomu, xxx xx xxxxx dostalo x xxxx x xxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxx xxxxxx nebo xx xxxxxxxxx.
Na xxxxx doby expozice xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx látku xxxxx, xxxxx xx xx možné, nebo xxxxxxx rozpouštědlem, xxx xxx, aby xxxxxx xxxxxxxxx případná reakce xxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 4 xxxxxx.
Pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx vyvolat xxxxxxx (xxxx. xxx, xx xxxxxx poleptání, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxx. xx 1 hodinu xxxx 3 xxxxxx). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nejprve xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 3 xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx dermální xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx 1 xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxxxx, xx je xxxxxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx 4 xxxxxxxx x klasifikují se xxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx, že xxxx xxxxx 4hodinová xxxxxxxx, je třeba xxxxxxx test s xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx; pokud xx není xxxxxxxxxxxxxxxx x humánních xxxxxx (xxxx. xxxxxxxx xx 4 hodinách xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx).
Xxxxxxxx je xxxxxxx kožní xxxxxx (xxxx. xxxxxxx) xxxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx xxxx xx 1 xxxxxx, je xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xx xxxxxxxx podmínek xx xxxxx navrhnout delší xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx u člověka.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx kůže po 60 xxxxxxxx a xxxx 24, 48 x 72 xxxxx xx odstranění xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx podráždění xxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 1. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx je xxxxx podrobně xxxxxx xxxxxxx závažné xxxx xxxx poleptání (nevratná xxxxxxxxx xxxxx tkáně) x xxxx xxxxxxx xxxxxx. K objasnění xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, maskovaných zabarvením xxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx měření xxxxxxxx xxxxx řasy.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x edému po xxxxx xxxx pozorování. Xx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxx závažné xxxx, xxxxx stupně x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a všechny xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx možno tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx chovu, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxx obvazu: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx reakci xxx xxxxx jednotlivé xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xx 1, 24, 48 a 72 xxxxx xxx. xx xxxxxxxxxx xxxx),
- popis xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx x povahy xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- vyhodnocení xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxxx
Hodnota | |
1. Xxxxxxxxx xxxxxxx x příškvaru | |
1.1 Žádný xxxxxx | 0 |
1.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx | 2 |
1.4 Mírný xx výrazný xxxxxx | 3 |
1.5 Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxx) xxxx tvorba xxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx | 4 |
2. Xxxxxxxxx xxxxx | |
2.1 Žádný xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx xxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
2.3 Lehký xxxx (xxxxxx jsou zřetelné, xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) | 2 |
2.4 Mírný xxxx (xxxxxx vyvýšeny asi x 1 mm) | 3 |
2.5 Xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xxxx xxx 1 xx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx) | 4 |
4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (XXX)
IKI xx vypočte xxxx xxxxxxxxxxx průměr ze xxxxxx xxxxxx reakce xxx erytém x xxxx x jednotlivých xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx jedinců se xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx | XXX |
xxxxxxxx | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx xxxxxx | 0,5 &xx; XXX ≤ 3 |
xxxxxxx xxxxxx | 3 &xx; IKI ≤ 5 |
xxxxx xxxxxx | IKI &xx; 5 |
B.5. XXXXXX XXXXXXXX (XXXX XXXXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
1.1.1 Výchozí xxxxx
Xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx xxxxx x xxxxx snížit xx xxxxxxx testování xxxxx xx podmínek, které xxxxx vyvolat xxxxx xxxxxx. K xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx. xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx - xxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx v oku xX xxxxx či xxxxx 2 xxxx xX xxxxx či xxxxx 11,5, není xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx třeba xxxx x úvahu xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx validizovaných xxxxxxxxxxxxxx studií; xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx dále xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxx lze xxxxxxxxxxxx, xx tyto xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx účinky xx xxx xxx testování xxxxx metodou.
x) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxx dráždivosti. Xxxxx, xxxxx vykazovaly xxxxxx xxxxxxx xxxx výrazně xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx pro xxx, protože xxx xxxxxxxxxxxx, že xxxxx xxx xx xxx xxxxxxx účinky.
Xxxxxxxxx xxxxx xx v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx zvířatům, xxxxxx xxxxxxxxxxxx oko xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx odečte x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx se xxxx popíše, xxx xxxx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx pozorování xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx možné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
24 xxxxx xxxx xxxxxx xx x xxxxxxx z xxxxxxxxx vybraných pokusných xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx očí. Xxxxxxx, x kterých se xxxxxx xxxxxxxxxx očí, xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx rohovky, se x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx druhy xxxxxxxxx zvířat, doporučuje xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvolit xxxx xx jediném zvířeti. Xxxxxxxx výsledky tohoto xxxxx na jednom xxxxxxxxx naznačují, xx xxxxx má výrazně xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxxxx (irreversibilní xxxxxx) xxxxxx xxx xxx při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, není xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zvířat. X xxxxxxxxx specifických xxxxxxx xxxxx být případně xxxxxxxxx další xxxxxxx.
X ostatních xxxxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxx nejednoznačných xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Úroveň xxxxx
Xxx testování xxxxxxx xx používá xxxxx 0,1 xx. X tuhých látek, xxxx x zrnitých xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxx 0,1 xx xxxx xxxxxxxx xxx 0,1 g (xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx). Jedná-li xx x tuhou xxxx xxxxx zrnitou xxxxx, je třeba xx xxxxxxxx xx xxxxx prášek. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx až xx xxxxxxxx zhutnění, xxxx. xxxxxxxxxxxx na měrnou xxxxxxx.
U xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x sebrat 0,1 xx xxxxx x xxxxxxxxxx ji xx xxx podle xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx dostatečně xxxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxxx vratnost xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx stačí 21 dnů xx xxxxxxxx studované látky.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx xxxxx přechovávat xxxxxxxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxx látka se xxxxxxxx každému zvířeti xx xxxxxxxxxxxx vaku xxxxxxx oka xxx, xx se xxxxxx xxxxx xxxxx odchlípne xx oční xxxxx. Xxxxx se xxx xxx xx 1 xxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx, xxx xx žádná látka xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx, xx které xx xxxxx xxxxxxxxxx, slouží xxxx xxxxxxxxx.
Jestliže xx xxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxxx bolest, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Aby xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nedojde x xxxxxxxxx změnám x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxx zvolit typ, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx lokálního anestetika. Xxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxx oko.
Xxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxx vymývat xxxxxxxx 24 xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx provést xxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx se xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx doporučuje xxxxxx 3 xxxxxxx. Xxx xxxxxx xx instilaci xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxx x použitím xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx průtoku, xxx nedošlo x xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxx xx xxxxxxxxx xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx. Neprojevují-li xx xx 72 xxxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx prodloužit, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx jiné příznaky xxxxxxxxxx xxx tak, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx vývoj xxxx x jejich xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xx rohovce, xxxxxxx x xxxxxxxx xx třeba zaznamenat x xxxxx xx xxxxxx x jiné xxxxxxxx léze.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxx je xxxxx xxx každém xxxxxxxxx stanovit xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x zaznamenat. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx oka xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx interpretace. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xx, kdo provádějí xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx oka.)
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx pozorování po 24 xxxxxxxx je xxxxx oči xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx mimoto xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. Z xx xxxx xxx pro xxxxx pokusné zvíře xxxxxx stupeň podráždění x xxxxx intervalu xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx podráždění, xxxxxxxxxx závažných xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností xxxxxxxxx xxxxx),
- x xxxxxxxxx xxxxx výčet xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx každém xxxxxxxxxx (xxxx. xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx)
- xxxxx všech xxxxxxxxxx závažných xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx pro jednotlivé xxxxxx xxxx (1, 24, 48 x 72 hod.), xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx atd.,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Stupnice xxxx xx oku
Hodnota | |
X. Xxxxxxxx - otok | |
Xxxx není xxxxxxxx | 0 |
Slabý xxxx zahrnující mžurku | 1 |
Výrazný xxxx x xxxxxx xxxxx | 2 |
Edém způsobující xxxxxxxx víček na xxxxxxxx | 3 |
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx více xxx na polovinu xxxx xxxxx | 4 |
X. Spojivka - xxxxxx | |
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Slabé xxxxxx (xxxxx xxxxxxx xx xxxxx sekrece xx xxxxxxxx koutku) | 1 |
Xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxx | 2 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx v xxxxxxx xxxxx oka | 3 |
X. Spojivka - enantém | |
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxx zřetelně xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx | 1 |
Splývající cévní xxxxxx, rozlišení xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx barva | 2 |
Xxxxxxx tmavě xxxxxxx xxxxx | 3 |
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx | |
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Nepravidelná xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, nastříknutí xxx xxxxx rohovky (xxxxx xxxx xxxx těchto xxxxxxxxxxxxxx), reakce xx xxxxxx je xxxxxxxxx, xxxxxxxx opožděná | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x hemoragie | 2 |
v duhovce (xxxxx xxxx více xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx) | |
X. Rohovka - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx viditelné | 1 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx, snadno xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxx zastřené | 2 |
Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx duhovky xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx; obrys xxxxxxx stěží xxxxxxxxx | 3 |
Úplná xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, duhovka xx xxxxx xxxxxxxxxxx | 4 |
X. Rohovka - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx je ≤ 1/4 xxxxxx xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; xxxxxx neprůhlednosti ≤ 1/2 plochy xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; xxxxxx neprůhlednosti ≤ 3/4 plochy xxxxxxx | 3 |
plocha xxxxxxxxxxxxxx &xx; 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 4 |
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx dráždivosti (IOA)
Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (IOI) xxx xxxxx zvíře a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx podle xxxxxx
XXX = 2.(X + X + X) + 5.X + 5.X.X
Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (IOP) pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x XXX.
Xxxxxx xxxxx xxxx dráždivosti IOA xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx
4.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx | XXX |
xxxxxxxx | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
xxxxxx | 15 - 29,9 |
xxxxx dráždí | 30 - 59,9 |
xxxxx xxxxx dráždí | 60 - 79,9 |
xxxxxxxx xxxxxx | 80 – 110 |
X.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1. Xxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x potenciálním xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx jsou xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx systém xxxxxxxx x xxxxxxx veřejného xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx metoda, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx všechny látky x potenciálním senzibilizačním xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx a xxxxx xx se xxxxxx xxx všechny xxxxx.
Xxx xxxxx xxxxx xx třeba uvažovat xxxxxxx jako např. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx schopnosti xxxxxxx xxxx.
Xxxxx na xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx testované xxxxx xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX), x xx testy xxx xxxxxxxx.
Xxxxx s xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxx než xxxxxx xxx Freundova xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) je velmi xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Ačkoliv x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx několik xxxxxxx xxxxx, je XXXX xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx látek jsou xxxxx bez xxxxxxxx (xxxxxxxx xx dává Xxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx volbu Xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx aplikací spíše xxx xxxxxxxxxxxxx injekci xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
X xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx (XXXX) x Xxxxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, pokud xxxx xxxxxxxxxx validizované x xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx pozitivní xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx látku xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx dalšího xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx výsledku je xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx, xxx xxx je xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx zprostředkovaná xxxxx xxxxxx na xxxxx. X xxxxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx (velkými puchýři) xxxx kombinací těchto xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx x může xxx xxxxxxxx xxxxx zarudnutí xxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx navodit xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Indukční xxxxxx: období xxxxxxx xxxxxxx týdne xx xxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxx xxxxxxx se xxxx rozvinout stav xxxxxxxxxxxxxxx.
Provokační xxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx dříve vystaveného xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx x spolehlivost xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx každých šest xxxxxx x použitím xxxxx, x kterých xx známo, xx xxxx xxxxx až xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx na mírné/střední xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % x xxxxxx x adjuvans x xxxxxxx 15% x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxx XXX | Xxxxx XXXXXX | xxxxxxxx xxxxx | xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxx |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | xxxxxx |
94-07-7 | 202-303-5 | Xxxxx xxxxx xxxxxxxx p-aminobenzoové | xxxxxxxxx |
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, kdy při xxxxxxxxxxx odborném xxxxxxxxxx xxxxx xxx použity xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Pokusná xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx injekcemi xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxxx 10 xx 14 xxx (xxxxxxxx xxxxxx), x průběhu kterého xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx exponována xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx x xxxxxx xxxxx reakce xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat xx porovnán x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx x xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Popis xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx to x použitím xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, aby xxxxxx xxxxxxxx vzniklá xxxxx xxxxxx xxxx integrita xxxxxxx.
1.5.1 Maximizační xxxx xx morčatech (GPMT)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx stříháním, xxxxxxx xxxx chemickou xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx testovací metodě. Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx a na xxxxx xxxxx.
1.5.1.2 Experimentální xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Pokusná zvířata
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx i xxxxxx. Samice xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx březí. Xxxxxxxxxxx skupinu tvoří xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxx 5 xxxxxx je xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se menšího xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx a 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxxxxx, doporučuje xx xxxxxxxxx xx dalších xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.3 Dávkové xxxxxx
Xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, kterou xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx mírné xx střední xxxxxxxxxx xxxx.Xxxx provokační xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx u xxxxxxxxxxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx třech xxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxx xxx uvážit použití xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxxxxx XXX.
1.5.1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.1.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, xx podají xx xxxxxxxxx oblasti xxxxxxx xxxxx symetricky xxxxx xxxxxxx linie:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (FCA) xxxxxxx x xxxxx xxxx fyziologickým xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx ve vhodném xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxx připravená xx xxxxx XXX x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx roztokem x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxx xxxxxxx 3 se xxxxx xx vodě xxxxxxxxx rozpustí před xxxxxxxx s XXX xx xxxxx fázi. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx nebo látky xxxxxxxxxxx xx rozptýlí x xxxxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 3 má být xxxxxx xxxx pro xxxxxxx 2.
Injekce 1 a 2 xx aplikují xxxxxx xxxx x xx xxxxxxxx xxxxx, zatímco xxxxxxx 3 směrem xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx 0 - Kontrolní xxxxxxx
Následující 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, xx podají xx xxxxxxxx míst xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx s xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x objemovém xxxxxx 1:1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxx vehikulum;
Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) xx xxxxx XXX/xxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx dvacet xxxxx hodin xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxx xxx kůži, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx oholení xxxxx 0,5 ml 10% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6. - 8. den - Xxxxxxxxx skupina
Testovací xxxxxx se xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx vehikulu xx napuštěn filtrační xxxxx (2 x 4 cm), který xx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 48 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx látky xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx vhodného xxxxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
6. - 8. den - Xxxxxxxxx skupina
Xxxxxxxxx plocha xx xxxxx xxxxx srsti. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxx 48 xxxxx.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx exponovaných x xxxxxxxxxxx zvířat xxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx x xxxxxxx x na xxxxx xxx xx xxxxxxx způsobem xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (pokud xx xx xxxxx). Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx udržují x xxxxxxxx x xxxx xx 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx odstranění náplasti xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, důkladně xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx dalších xxxxx xxxxxxxx (přibližně 48 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx provokační dávky) xx pozoruje kožní xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx;
- přibližně 24 xxxxx xx tomto xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx reakce xxxx (72 xxxxx).
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" x testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx zvíře xxxx senzibilizováno x xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx je x xxxxxxxxx výsledků xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (tj. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx potřeby znovu x kontrolní xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze také xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx důsledkem xxxxxxxxxx x provokačních postupů, xx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx nálezů xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx. histopatologického xxxxxxxxx xxxx měření xxxxxxxx xxxxxxx xxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxx
1.5.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx albinotická xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx laboratorní xxxxxxxx xx xxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x závislosti xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Je xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx před xxxxxxxxx testu x xx xxxxx testu.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Používají se xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxxxxxxxx morčat.
1.5.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx 20 xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx 10 xxxxxx x kontrolní xxxxxxx.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx indukční xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx mírné, xxx xx velmi xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. X případě xxxxxxx xx možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x předběžném pokusu xx xxxx nebo xxxxx zvířatech.
Xxx xxxxxxxxx látky rozpustné xx xxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx zředěný xxxxxxxxxx xxxxxx detergentu jako xxxxxxxx. Xxx jiné xxxxx xx preferován 80% xxxxxx etanol/voda xxx xxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Indukce
Den 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxx xx zbaven srsti (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx nasytí xxxxxxxxxx xxxxxx xx vhodném xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xx řídí odbornými xxxxxx; kapaliny lze xxxxxxxx aplikovat xxxxx).
Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx testovací xxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx obvazem po xxxx 6 hodin.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x plochou přibližně 4 - 6 xx2. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby xx zajistila xxxxxx. Xxxxxxxx xx použito xxxxxxxx, mohou xxx xxxxx xxxxx expozice.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx skupina
Xxxxx xxx je zbaven xxxxx (důkladně xxxxxxxx). Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx s xxxx xxxxxxxxxxx plátkem xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx obvazem xx xxxx 6 xxxxx. Xxxxx xx možno xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx není xxxxx, lze xxxxxx xxxxx kontrolní skupiny xxx xxxxxxxx.
6. - 8. x 13. - 15. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxx 0 xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx plochu xx xxxxxx boku (xxxxxxxx případně srsti) 6. - 8. xxx x xxxxx 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx
27. - 29. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupina
Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx (důkladně xxxxxxxx). Xxxxxxxxx plátek xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx koncentraci xx aplikuje xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxx xxxx neošetřeného xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx plátek x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx komůrky xxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxx vhodným xxxxxxx xx dobu 6 xxxxx.
1.5.2.3.3 Pozorování x xxxxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 hodin xx xxxxxxxxxx plátku xx provokační xxxxxx xxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxx o xxx xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx 30 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx plátku) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx 24 hodinách (tj. xxxxxxxxx 54 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxx xxxxxx znovu xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx systém "xxxxxxx xxxxxx" x testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxx senzibilizováno a xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx provokace (tj. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx xxxxxxxxx o xxxxx později, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Opakovanou xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx indukčních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (viz xxxxxxx). K xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxx xxxxxxxx kožních xxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX (XXXX X BUEHLERŮV XXXX)
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx, ze xxxxx musí být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx patrná xxxxxx xxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX (GPMT X XXXXXXXXX XXXX)
Pokud xxx xxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx xxxx screeningový, xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxx (xxxx. XXXX - xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, XXXX - xxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx) xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx postupu x výsledků xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx.
3.1 Zpráva x průběhu pokusu (XXXX x Xxxxxxxxx xxxx)
Zpráva x xxxxxx xxxxxxxx tyto xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxx morčat;
- xxxxx, xxxxx a xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.;
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Experimentální xxxxxxxx:
- způsob xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx plátkového xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxx studie se xxxxxxx x xxxxxxxxxx x provokačních koncentracích xxx xxxxxxx xxxx;
- podrobné xxxxxxxxx x přípravě, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxx xxx indukci a xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx citlivosti a xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx xxxxxxx referenční xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx včetně systému xxxxxxxxxxx;
- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků;
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
4. LITERATURA
Tato xxxxxx xx analogická x xxxxxxx XXXX XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
1 = xxxxx nebo skvrnité xxxxxxxxx kůže;
2 = xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx zarudnutí xxxx;
3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx kůže.
5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx senzibilizace
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxx xxxx, kolik xxxxxx x xxxxx xxxxxx bylo xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx
xxxxx alergen (X. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 9 - 28 % xxxxxx
xxxxxxx xxxxx alergen (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
xxxxx alergen (XX. st.) - 65 - 80 % xxxxxx
extrémní xxxxxxx (X. st.) - 81 - 100 % zvířat
B.7. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (28DENNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx po 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx jedna xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx pozorují, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Pitva xx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx, která xxxxxx xxxx jsou xxxxxxxx během pokusu; xxxx zvířata, která xxxxxxx xxxxx pokusu, xx utratí a xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx se co xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx zvíře xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx, xxxxx účelu studie x fyzikálně-chemických vlastností xxxxx.
Pokud xx xx třeba, xxxxxxxx xxxx suspenduje xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx nosiči (vehikulu). Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx oleji (xxxx. xxxxxxxxxx) a pak xxxxxxx x jiných xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx jejich xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxx stabilitu xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx potkanům, xxx xx xxxxx použít x xxxxxx druhu xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx pokusných kmenů. Xxxxxx musí být xxxxxxxxx a nesmí xxx xxxxx. Podávání xxxxx by mělo xxxxx co nejdříve xx xxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.
Xx začátku xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Pokud xx xxxx xxxxxx xxxxxxx jako předběžný xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx x xxxx studiích xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx použije nejméně 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxx se xxxxxxx budou zabíjet x průběhu xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x počet zvířat, xxxxx budou xxxxxx xxxx koncem xxxxxx.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx dávku x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, trvání xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx).
1.2.2.3 Volba xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx a jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází stejně xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx ve xxxxxxx množství, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xx aplikuje nejvyšší xxxxx.
Xxxxx xx xxxxx dostupných informací xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx test. Xxxxxx-xx taková xxxx x dispozici, lze xxxxxxx xxxxxxxxxx vyhledávací xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Při xxxxxx xxxxx xx xxxxx vzít v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxxxxx x toxikokinetických studií x testované látce xxxxxxxx látkách xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxx xxxxx xxxxxxx. Dále xx vyberou dávky x klesající řadě xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Nejnižší xxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat žádné xxxxxxxx xxxxxxxx (NOAEL). Xxxxxxx je vhodný xxxx- xx xxxxxxxxxxx xxxxxx mezi sousedními xxxxxxx; xxxxx je xxxxx xxxxxx větší xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx čtvrtou xxxxxxxx skupinu, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx dávkami (xxxx. faktor větší xxx 10).
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx vodě, xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx podávané množství xxxxx xxxxxxxxxxxxx výživu x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xx testovaná xxxxx x xxxxxxx, xxxx se xxxxxx xxx xxxxxxxxxx koncentrace (x xxx) xxxx xxxxxxxxxx dávkování xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Aplikuje-li se xxxxx xxxxxx, xxxx xx se xxx xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx dobu x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx studie sloužit xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx dlouhodobou studií, xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxxx-xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx den xxxx xxx takové xxxxxxxxxxx v potravě xxxx vodě, která xxxx xxxxx xxxxxxxx, x pokud toxicita xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x analogie x xxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxx úrovních xxxxxxx. Xxxx pravidlo xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx je 28 dní. Zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 14 dnů xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x pro xxxxxxxxx přetrvávání xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířatům xx podává xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 xxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxx x xxxxx. Denní dávka xx xxxxxx jednorázově xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx může xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx zvířete. Xxxxx xx neměl xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx na 100 x tělesné xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx lze xxxxx x 2 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Rozdíly x xxxxxxxxx objemu xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tak, xxx byl xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx dávky. Xxxxxxx xx u xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx denně, xxxxxxx x tutéž xxxxx xxxx x x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx účinku xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx denně xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxx zjištění xxxxxxxxx x mortality. Xxxxxxx moribundní x xxxxxxx projevující silnou xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, utracena xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx aplikací (xx xxxxxx intraindividuálního porovnání) x xxxx xxxxxxx xxxxxx týdně. Xxxx xxxxxxxxxx xx děje xxxx xxxxxxx xxxx x standardním xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x nejlépe xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx dobu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, nejlépe x xxxxxxxx skórovacího xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx pozorování xxxxxx xx nejméně; osoba, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxxx xxxxxx.
Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx a xxxxxxx, xxxxxxxxxx sekretů x exkretů, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx, zježení xxxxx, velikost xxxxxx) x případně xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx změny xxxxx, xxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx chování (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx).
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xx různé xxxxxxxxxx podněty (např. xxxxxxxx, zrakové, proprioceptivní), xxxxx se xxxx xxxxxx a celková xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, jsou xxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx Xxxxxxxxx úvod, xxxx X).
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx vynechat, xxxxx 28xxxxx studie xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx následující studii xxxxxxxxxxxxx (90denní); v xxx případě xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx studie. Xxxxx x x xxxxx xxxxxxx xxxx údaje x funkčních poruchách xx xxxxxxx xxxxx 28xxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxxx pro výběr xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Výjimečně xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxx xx xxx posuzování funkčního xxxxx zvířete xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx potravy x xxxx
Xxxxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxx xxxxxxx jednou xxxxx, xxxx v xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx pokusu zahrnuje xxxxxxxxx hematokritu, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx a změření xxxxxxxxxxx xxxx.
Krev xx odebere xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xx xxxx odebrala, xx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.4 Biochemická analýza
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxických účinků xx tkáně, zvláště xx xxxxx a xxxxxxx, se xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx x průběhu xxxxxxxx (xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxx xxxxxx). Xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx krve1). Vyšetření xxxxxx x séra xxxxxxxx stanovení xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, močoviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, albuminu, xxxxxxxx xxxxxxx dvou xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx buňky (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, aspartátaminotransferáza, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, gama xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, sorbitoldehydrogenáza). Zaměření xxxxxxx enzymů (jaterního xxxx xxxxxx původu) x žlučových xxxxxxx xxxx x některých xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Další xxxxxxx xx časově definovaný xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx studie: xxxxxxxx xx možno xxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xX, xxxxxxxxx, glukózu a xxxx příp. xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx tkání x xxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx u látek xxxxxxx nebo podezřelých x xxxxxxxx xx xxxxxx metabolické funkce: xxxxxxxxx xxxxxxx, fosforu, xxxxxxxxxxxx na xxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx hormonů, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx posuzuje xxxxx xxxxxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxx xxxxx nebo xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x úvahu použitý xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx nebo očekávané xxxxxx dané látky.
Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, je třeba xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx začátkem xxxxxx.
1) Xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxx x xxxx x xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx toto xxxxxxxxxx je xx, xx x nehladovějících xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxxxx xx xxxxx maskovat xxxxx změny x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxx xxx xxxx xx celkový metabolismus x x xxxxxxxx x xxxxxxx by xxxxxxx do pravidelnosti xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 4. xxxxx xxxxx.
1.2.3.5 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se provede xxxxx, zahrnující xxxxxxx xxxxxxxxx vnějšího povrchu xxxx, xxxxx otvorů, xxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxx, slezina, xxxxx x srdce xxxxx xxxxxx se xxxxx očistí xx xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx po xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se předešlo xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx přechovávat xx vhodném xxxxx x xxxxxxx na xxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: všechny tkáně x makroskopickými změnami, xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxx i xxxxxx xxxxxx (xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx), játra, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, štítnou xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem x xxx ponořením), xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (např. dělohu, xxxxxxxx), močový měchýř, xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x jedna xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xxxx (x. ischiadicus xxxx n. tibialis), xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, řez kostní xxxxx (xxxx čerstvý xxxxx z xxxxxx xxxxxx xxxxx). Podle xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x další xxxxx. Xxxxx orgán, xxxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx testované xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.6 Histopatologické xxxxxxxxx
X všech zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx nejvyšší xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx objeví xxxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyšetření těchto xxxxx x u xxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkami.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx je xxxxx vyšetřit.
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x tkáně, ve xxxxxxx se objevily xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXX A ZÁZNAM XXXXX
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x každém xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxx xxxxx sumarizovány xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x humánních xxxxxx, xxxx xxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx příznaku, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxx, xxx xxxx x procento xxxxxx x jednotlivými xxxx xxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxxx formě xx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou x uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx třeba zvolit xxx xxx plánování xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx informace, pokud xxxxx xxx získány:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh/kmen;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx testu.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx údaje x xxxxxx testované xxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx x přípravě xxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x homogenitě xxxxxxxxx;
- podrobné xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxx xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx xxxxx v xx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx);
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx (xxxxxx xxxxx a xxxxxx);
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx;
- xxxxx x xxxxxxxxx reakcích xxxxx pohlaví a xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx;
- povaha, xxxxxxxxx x trvání klinických xxxxxx, xxxx. xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx na smyslové xxxxxxx, úchopové xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx;
- výsledky hematologického xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- výsledky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx;
- podrobný xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- údaje x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Závěry:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je analogická xxxxxx XXXX XX 407.
B.8. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX (28DENNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxx
Xxxx pokusem je xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx, xxx xxxx, bod xxxx, xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxx-xx stanovitelné).
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Několik xxxxxx pokusných xxxxxx xx xxxxxxxxxx studované xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, každá xxxxxxx jedné xxxxxxxxxxx, x xx xx 28 dní. Použije-li xx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Během xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují x xxxxxxxx xx xxxxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx uhynou, x xx, xxxxx přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 dní před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Pokud xx třeba, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné vehikulum xxx, aby v xxxxxxx xxxxxxx příslušná xxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxx xx xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí být x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx studie xxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť).
1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx budou xxxxxxx v průběhu xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx celkový počet xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vysoké xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinu 10 zvířat (5 xxxxxxx každého pohlaví) xx xxxx 28 xxx a během xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx vratnost, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Použijí xx xxxxxxx xxx skupiny x různou xxxxxx xxxxxxxxxxx x jedna xxxxxxxxx xxxxxxx, případně xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx - pokud xx xxxxx - x xxxxxxxxxxx stejné xxxx u xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx zachází stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxx xxx x malém xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx toxicity. Pokud xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, má xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxx koncentrací, mají xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx koncentrací x x kontrolní xxxxxxx xx počet xxxxxxx xxx být xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxx expozice
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxx 6 xxxxx xxxxx; x xxxxxxx specifických xxxxxxxxx xx možné xxxxxx x xxxxxx xxx expozice.
1.3.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pro xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx dynamické xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu x xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx hodinu, aby xxx zaručen přiměřený xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx rozdělení xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx byla xx xxxxxxxx. Xxx zajištění xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx přesáhnout 5 % objemu boxu. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Pokusná xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxx, xx kterém xx objeví x xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx exponují xxxxxxxxx látce xxxxx, 5 - 7 xxx v xxxxx, xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx určena x xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx dalších 14 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx během xxxxxxxxxxx xx být 22 xX ± 3 xX. Relativní xxxxxxx xx být mezi 30 % a 70 %, x xxxxxxxx případů, xxx xx není možné (xxxx. experimenty x xxxxxxxx). Udržování xxxxx xxxxxxxxxxx tlaku xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx analytickou xxxxxxxxx koncentrace. Doporučuje xx xxxxxxx předběžný xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx podmínky v xxxxx xxxxxxxxxx boxu xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Xxxxxx průtoku xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx studované xxxxx se xxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx nemá koncentrace xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx o xxxx xxx ± 15 %. X některých xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx rozsah xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx experimentu xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx možné. Xxxxx xx týká xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx týdně x každé xxxxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx xxxxx možno kontinuálně.
Xxxxx expozice x xx xxxxx skončení xx pozorování xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxxx zvíře xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata je xxxxx xxxxx pozorovat xx xxxxxxxx toxických xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Pozorování xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, očí, sliznic, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx a centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a chování. Xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx zaznamenávat týdně x spotřebu potravy. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Po xxxxxxxx studie xx xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x těžkém xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, humánně xxxxxxx a xxxxxx.
Xx konci pokusu xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zahrnovat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x těchto xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), aspartátaminotransferáza (xxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx bílkoviny x xxxx.
Xxxx xxxxx charakteristiky, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, glukózy xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx biochemické xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xx provede xxxxx. Xxxxx játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, plíce x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx (dýchací xxxxxx, játra, ledviny, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx x srdce, x xxxxxxx orgány x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx vyjmout xxx xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxx vhodným xxxxxx, xxx aby xx zachovala xxxxxxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické vyšetření xxxxxxxxxx orgánů a xxxxx. Xxxxx xx x orgánech a xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx koncentrací xxxxxx xxxxxxxxx způsobená xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxx tkání x x všech xxxxxx x nižšími xxxxxxx. X zvířat xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. X xx musí xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o průběhu xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx expozičního xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx systému, xxxxx xxxxxxxxx odpadního xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxx xx používán. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxxxxxxx,
- xxxxx o xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx: x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx; x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx objemem xxxxxxx); x) xxxxxx vehikula, xxxxx xxxx xxxxx; x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx; x) xxxxxxxxxx medián xxxxxxxxxxxxxxx průměru (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX),
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x přežití xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx,
- úroveň xxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, kde xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX OPAKOVANÁ APLIKACE)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx období podávání xx zvířata denně xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxx, která uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, která xxxxxxx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx před xxxxxx xxxx zvířata chována x podmínkách ustájení x krmení, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před testem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx pokusu xx xxxxxxx srst xx xxxxxx pokusných zvířat. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxx možné, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx před xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Při xxxxxxxx nebo holení xxxxx je třeba xxxx xx to, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nejméně 10 % xxxxxxx xxxx. Xx třeba vzít x xxxxx hmotnost xxxxxx při rozhodování x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx x tuhými xxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou, xxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Testované kapaliny xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xx možno používat xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx morčata. Xx xxxxx použít x xxxx xxxxxxx druhy, xxxxxx xxxxxxx však xxxx xxx odůvodněné. Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro každou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic x 5 xxxxx) xx xxxxxxx kůží. Samice xxxx být xxxxxxxxx x nesmí xxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx další xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxx následujících 14 xxx xx ukončení xxxxxxx sledovat xxxxxxxx, xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx každého pohlaví).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dávek x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - pokud xx použilo xxxxxxxx - xxxxxxxxx skupinu s xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx čtrnáctidenních je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxxx stálá xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete. S xxxxxxxx aplikace testované xxxxx se se xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxx skupinám, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx má xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx nebo xxx x xxxxx počtu. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx odhady expozice x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx jen xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx voleny tak, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Ve xxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx snížit xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx může xxxx k xxxxxxx xxxx vyloučení ostatních xxxxxxxxx účinků. Xxxxx-xx x těžkému poškození xxxx, xx xxxxxxx xx určitých xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ukončit x provést jej xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx předběžné xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxx xxxxx xxxxx, která xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx toxické xxxxxx, xxxx další xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx na příznaky xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx dobu uhynutí x dobu, kdy xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx otravy.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x klecích xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx studované xxxxx xxxxxxx 7 dnů x týdnu xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx pozorování, xx třeba chovat xx dalších 14 xxx xxx xxxxxxxx, xxx se mohla xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx denně.
Xxxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxx rovnoměrně xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx asi 10 % xxxxxxx xxxx; x vysoce xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx plocha xxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx xx největší xxxx pokusné xxxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x kůží xxxxxx xxxxxxxxx mulového xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plochu xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx překrýt, xxx xx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx příjmu. X xxxxxxxx požití látky xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx volnosti xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxx".
Xx xxxxxxxx xxxx expozice xx xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx jiného vhodného xxxxxxx očištění pokožky.
Xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávat příznaky xxxxxx včetně xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx srsti, kůže, xxx x xxxxxxx x také xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se zaznamenávají xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx týdně x xxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zvířat, xxxx xxxx. x xxxxxxxx kanibalismu, autolýzy xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxx xx všechna xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx satelitních xxxxxx, xxxxxxx. Umírající xxxxxxx x zvířata x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx bolestí xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x pitvat.
Xx xxxxx xxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Biochemická xxxxxxx xxxx: x xxxxxxxxx funkce xxxxx x xxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x séru (xxxxx xxxxx jako glutamátpyruvát-transamináza), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), dusík xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny v xxxx.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, sodíku, xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx použitých xx studii se xxxxxxx xxxxx. Aspoň xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xx xx nejdříve xx sekci xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx, xxxx. xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx, xxxxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx lézemi xxxx změnami velikosti, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx dávka, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxx orgánů a xxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx způsobená xxxxxxxxxx látkou, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx tkání x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxxxxx skupin je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx orgány x xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X ní musí xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx pokusu a xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx formami poškození.
Xxxxxxx zjištěné xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),
- experimentální xxxxxxxx (xxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx lze xxxxxxxx,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj o xxxxxxx zvířat do xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx nebo jiné xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- spotřeba xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření a xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx to xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.10. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X SAVCŮ XX VITRO
1. XXXXXX
Metoda xx xxxxxxxxx XXXX XX 473, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Test (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberací xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx savčích xxxxx xxxxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (1) (2) (3). Strukturální xxxxxxx xxxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou většinou xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx chemická xxxxx xx schopna xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx však xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx příčinou řady xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx mutace x příbuzné xxxx, xxx způsobují xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx úlohu xxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx sice xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx druhu xxxxx x xxxxxxxx stále xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vlastnosti xx xxxxx testem nezjistí, xxxxxxx zřejmě působí xxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx poškozením XXX.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx in vitro xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx stabilizovaných xxxxxxxxx xxxxx, buněčných kmenů xxxx primární xxxxxxx xxxxxxx. Použité xxxxx xxxx vybrány xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, stability xxxxxxxxx, xxxxx chromozómů, xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx spontánních xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Testy in xxxxx vyžadují xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Tento xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedokáže xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x savců xx xxxx. Je xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx by xxxxx xxxx k pozitivním xxxxxxxx, xxx neodrážejí xxxxxxx mutagenitu, nýbrž xxxx xxxxxxxxx změnami xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx cytotoxicitou (4) (5).
1.2 DEFINICE
Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx projevuje xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx chromatid, xxxx xxxx x opětovné xxxxxxx mezi chromatidami.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx xxxx zlom x opětovné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx místě (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx).
Zlom xxxxxxxxxx: xxxx zlom xxx xxxxxxxx porušení kontinuity xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx za předpokladu, xx vzniklá mezera xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx šířka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (nebo mimo xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx, nýbrž xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou chromozómy x 4, 8, 16, .. chromatidami.
Xxx: achromatická léze xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx index: xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxx celkovým xxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxx buněk; xxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxx populace.
Numerická xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx buňky.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx haploidního xxxxx xxxxxxxxxx (n) xxxx xxx diploidní počet (xxxx 3n, 4n xxx.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx metafáze, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x výměny.
1.3 XXXXXXX METODY
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, x to x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xx. Ve xxxxxxxxxxx intervalech xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx například Xxxxxxxxxx ® nebo xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chromozómové aberace.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Je možno xxxxxx celou xxxx xxxxxxxxx linií, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx buněčných xxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx (například xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx krve xxxxxxx xx jiného xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx
X udržování xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vhodná kultivační xxxxx a inkubační xxxxxxxx (kultivační nádoby, xxxxxxxxxxx XX2, teplota x vlhkost). X xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxx způsobem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x nepřítomnost xxxxxxxxxxx v xxxxxxx. X případě xxxxxxxxxxx xx buňky xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx: xxxxx se xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx nedosáhly xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dobou xxxxxxxx x inkubují xx xxx xxxxxxx 37 oC.
Lymfocyty: xx kultivačnímu médiu xxxxxxxxxxxx mitogen (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxx xxx xxxx krev x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. heparinem), nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Na xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx systému. Nejobvyklejší xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (S9) xxxxxxxxxx x jater xxxxxxxx, xxxxxxxxx činidly xxxxxxxxxxxx enzymy xxxx xx Xxxxxxx 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx a ß-naftoflavonu (10) (11) (12).
Xxxxxxx koncentrace mitochondriální xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10 % x/x. Xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx na xxx, xxxxxx xxxx je xxxxxxxxx látka. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx použít mitochondriální xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx aktivace mohou xxx použity x xxxxxxxxx modifikované buněčné xxxxx exprimující xxxxxxxxxx xxxxxxxxx enzymy. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx by xxx xxx vědecky xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x metabolismu xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném stavu, xxxxx se před xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx její suspenze xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx naředí. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx do xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx údaje o xxxxxx stabilitě prokazují, xx delší xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx.
1.5 XXXXXXXX XXXXX
1.6 XXXXXXXXXXXX
X xxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x testovanou látkou xxxxxxxx reagovat, a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx X9. Používá-li xx xxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje xx, xxx xxxx tam, xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxx xxxxxxx, musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlo xxxxx bezvodé. Xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.6.1 Koncentrace
Xxxx kritéria, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx nejvyšší koncentrace, xxxxx cytotoxicita, rozpustnost x xxxxxxx a xxxxx pH resp. xxxxxxxxxx.
Cytotoxicita se xxxxxxx s metabolickou xxxxxxxx i xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, například xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx mitotický xxxxx. Je vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x předběžných xxxxxxxxxxxxx.
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x cytotoxicitě, xxxx xxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx lišit více xxx násobkem, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. X době sklízení xxxxx xxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pokles xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx, nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx (vždy x xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx mírou xxxxxxxxxxxxx / cytostatických xxxxxx x xx xxxxxxx xx době xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Je xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx byla xxxxxxx x nepraktická. Jako xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx použít také xxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jako xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx; xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx průměr, xxxxx ne vždy xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxx x malé xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx času xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx od vhodné xxxx xxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx nejnižší z xxxxxx 5 µx/xx, 5 xx/xx xxxx 0,01 M.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx netoxické x xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx je xxxxxxxxxxx, xxx které xx xxx látka xxxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšší, xxx xx mez xxxxxxxxxxxx xx finálním xxxxxxxxxxx médiu xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx případech - xxxxxxxxx dochází-li x xxxxxxxxx účinku xxx xxxxxxxxxxxxx vyšších, než xx xxxxxxxx nerozpustná xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx koncentracích s xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx x xx konci xxxxxxxx, protože se xxxxx expozice xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx, X9 xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx buněk.
1.6.2 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Xx xxxxxxx experimentu, xx již x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx). Xxxxx se xxxxxxxx metabolická aktivace, xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivaci k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx pozitivní kontrolu xx používá známý xxxxxxxxx, x xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nad xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testovacího xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu je xxxxx xxxxxx tak, xxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx identitu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx pro pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
Xx | xxxxxx methansulfonát xxxxx xxxxxxxxxxxxxx ethyl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Xxx | xxxx[x]xxxxx cyklofosfamid xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se mohou xxxxxx x xxxx xxxxxx látky. Xxx, xxx xx to xxxxx, xx vhodné xxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx chemické xxxxxxx.
Xxx xxxxx časový xxxxxxxx sklízení kultur xx xxxxx použít x negativní xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x kultivačním xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3 Postup
1.6.3.1 Expozice xxxxxxxxxx xxxxxx
Na xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx působí xxxxxxxxxx xxxxxx za xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx 48 hodin xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx se pro xxxxxx xxxxxxxxxxx používají xxx kultury; x xxxxx se xxxxxxxxxx xxx negativní xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx lze xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx prokázat, že xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (13) (14), xx xxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx jenom xxxxx xxxxxxx.
V xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (15).
1.6.3.2 Xxxx sklízení kultury
X prvním experimentu xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx po xxxx 3 - 6 hodin a xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx normální xxxxx buněčného cyklu xx xxxxxxx xxxxxxxx (12). Xxxxx xxxx xxx použití xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx doby xxxxxxxx kultivace odpovídají xxxxxx 1,5násobku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx době xxxxxxxx delší, xxx xx 1,5násobek xxxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se posuzují xxxxxx xx případu. X případech, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx rozhodnutí xxxxxxxxx.
1.6.3.3 Příprava xxxxxxxxxx
Xx buněčné xxxxxxx xx xxxxxx Xxxxxxxxxx® xxxx kolchicinem xxxxxxx xx dobu 1 - 2 xxxxx xxxx ukončením kultivace. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx přípravu xxxxxxxxxx zpracovává xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx podílu xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx centromer x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx ± 2. Xxx xxxxxx koncentraci a xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx z xxxx xxxxxx, xxxxx byly xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx, může xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X xxxx účelem xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace, je xxxx xxxxxxxx zaznamenat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx, xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxxx buněk xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi. Xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx do xxxxxxx xxxxxxxx aberací xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxx jednotlivé kultury. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v odst. 1.4.3.3. V následných xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx použitých xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx koncentrační xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s chromozómovými xxxxxxxxx. Nejprve xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxx (3) (13). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx může xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxx inhibovat xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nárůst xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buněčného xxxxx (17) (18).
Testovaná xxxxx, při xxxxxx xxxxxxx výsledky xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.
Ačkoliv xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx jasně xxxxxxxxx, xxxx negativní xxxxxxxx, xx výjimečných xxxxxxxxx xxxxxxx data xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx posouzení xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxx xx chromozómové xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x kultuře xxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky ukazují, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
XXXXXX X PRŮBĚHU XXXXXX
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx uvést tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx a zdroj xxxxx,
- xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx buněk,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx-xx xx nutné,
- xxxxxxxxx x délce xxxxxxxxx cyklu,
- xxxxxxx dárce xxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxx krev xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxxxx, xx-xx xx nutné - xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx
- xxxxxxx xxxxx chromozomů.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxx xxxxx blokující xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx na xxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxx použitých koncentrací x xxxxx xxxxxx, xxxxxx např. údajů x xxxxxxxxxxxx a xxxxxx rozpustnosti, jsou-li x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx média, koncentrace XX2, je-li xx xxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx kultivace,
- xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, je-li xx nutné
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxx,
- xxxxx analyzovaných xxxxxxxx,
- metoda xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx hodnotí jako xxxxxxxxx, negativní nebo xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxx toxicity, xx. xxxxxx xxxxxxxxxx, údaje x xxxxxxxx cyklu, x počtu buněk, xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxx srážení,
- xxxxx x xX x osmolalitě xxxxxxxxxxxx xxxxx, jsou-li xxxxxxxxx,
- definice xxxxxxx, xxxxxx xxxx,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx chromozómových xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- případné xxxxx xxxxxxx,
vztah xxxxx-xxxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx z negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx,
- historické xxxxx z negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.11. MUTAGENITA - XXXX CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX X XXXXXX XXXXX XXXXX XX XXXX
1. XXXXXX
Metoda xx xxxxxxxxx XXXX TG 475, Xxxxxxxxx Bone Xxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxx x buňkách xxxxxx dřeně xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxxx xxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, ovšem x xxxxxxxx chromozómového xxxx dochází rovněž. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx přesvědčivé xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx jevy, xxx xxxxxxxxx změny v xxxxxxxxxx x tumorsupresorových xxxxxx, hrají úlohu xxx xxxxxxxx x xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxxx hlodavci. Xxxxxxx xxxxx v xxx xx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xxxxx o xxxx xxxxxx vaskularizovanou, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx buněk, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx druhy x xxxxxx tkáně xx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Tento xxxx xx chromozómové xxxxxxx xx zvláště xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxxxx rizika, protože xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx metabolismu xx vivo, farmakokinetiky x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x xxxx xxx mohou xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx je xxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx efektu, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx testem xx xxxxx.
Existují-li xxxxxxx x xxx, xx xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: strukturální xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx typu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx chromatidy: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx předpokladu, xx vzniklá xxxxxx xx xxxxxxxxx chromatidy xx větší, než xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment v xxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, xxx xx X-xxxx replikace XXX nepřechází jádro xx mitózy, xxxxx xxxxxx další X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx léze xxxxx než xxxxx xxxxx chromatidy x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Mitotický index: xxxxx buněk v xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx buněčné xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Numerická xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx buňky.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx hapoidního počtu xxxxxxxxxx (n) xxxx xxxxxxxxx počet (xxxx 3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxx ve stadiu xxxxxxxx, pozorovaná xxxx xxxxxx x fragmenty x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxx dobu xx působení xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx na xx xxxxxx xxxxxx zastavující xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). Z xxxxx xxxxxx xxxxx xx pak připraví xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, myši x xxxxxx křečci, xxx ovšem použít x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx savčí xxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx měly xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx X, vlhkost xx měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx mladí xxxxxxx xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx do xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx toho, xxx x xxx xxxx xxxxx umístěny. Zvířata xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Po dobu xxxxxxxxx xxxx xxx xx zvířata xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx podmínkách.
1.4.1.4 Příprava xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx, xxxx xxxxxxx zvířatům xx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve vhodném xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx x případně xx xxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx mohou xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx prokazují, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum x xxxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx toxické účinky x xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li se xx příliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x kompatibilitě x testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, aby xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Do xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx při xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrole se xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx patrné, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx látkou a xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx intervalu. Xxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Příklady xxxxx vhodných pro xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Látka | XXX | EINECS |
ethyl xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx nitrosomočovina | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
cyklofosfamid xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x zpracované stejným xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx do xxxxx časových intervalů xxxxxxxxxx, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mezi xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxx xxxxx xxxxx vzorků, xx xxxxxxxxxxxx dobou xxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx historické nebo xxxxxxxxxxx xxxxx prokazující, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx vehikulum xxxxxxxxxx xxxxx nepříznivé xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx v xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx postačující. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx může xxx závislá na xxxxxxx, jak xx xxxx například x xxxxxxxxx farmaceutických xxxxxxxxx, xxxxxxx se test xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x objemnou xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx aplikace dávka xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx nanejvýše několika xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx odůvodněné.
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx časových xxxxxxxxxxx xx podání xxxxx xxx. X xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxx 12 - 18 xxxxx) xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx absorpci a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx vliv xx kinetiku xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberací, xxxxxxxxxx xx další xxxxx xxxxxx po 24 xxxxxxxx xx xxxxxxx odběru. Xxxxx xx v xxxxx xxxxxxxxxx režimu látka xxxxxx xxxxxxxx než xxxxxx xx xxx, xx xxxxx provést xxxxx odběr xxxxxx 1,5xxxxxxxx xxxxx normálního xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx podání látky.
Xxxx usmrcením xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx xx vhodném xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx xx xxxxx xxxxxxxx zhruba 3 - 5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4 - 5 xxxxx. X xxxxxx dřeně xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx chromozómové xxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx zjištění xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x dispozici xxxxx xxxxxx údaje, xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx použití stejného xxxxxxxxxxx druhu, xxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx se xxxxxxx v hlavní xxxxxx (5). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxx první xxxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx nejvyšší xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx režimu xxxxxxxx xx xxxxxx byly xxxxxxx. Látky, xxx x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx vykazují specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx hormony xxxx xxxxxxxx, xxxxx představovat x těchto xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx individuálně xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx definována jako xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v kostní xxxxx (např. xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx než 50 %).
1.5.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxx test xxx xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx dávce xxxx xx dvou xxxxxxx xxxxxxxx x jeden xxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx chemickou strukturou xxxxxxxxx genotoxicita, xxxxxx xxx provedena xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx úrovní. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx limitní dávka 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xx xxx xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x limitním testu xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, nebo intraperitoneální xxxxxxx. V odůvodněných xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, která xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx najednou vpravit, xxxxxx xx velikosti xxxxxxxxx zvířete x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x xxxxxxxxx; vyšší xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, jež normálně xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx xxxxx účinky, xx xxxxx upravit xxxxxxxxxxx látky tak, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx dřeň, xxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx podložní xxxx a xxxxxx xx.
1.5.7 Analýza
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx minimálně 100 buněk. Xxxxx xxxxx xx možné xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx aberací. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx často x porušení xxxxxxxx xxxxxx metafází xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Údaje od xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx v tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxxxx. U xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx aberací xx xxxxx xxxxx x procento xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních skupin xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx, jejich xxxxx x četnost. Xxxx xx zaznamenávají zvlášť x xxxxxxxxxx xx, xxx obvykle xx xx xxxxxxx frekvence xxxxxxx nezahrnují. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx x xxx, že xxx xxxxxxx xxxxxxx rozdílně, xx možné údaje xx xxx xxxxxxx xxx statistickou xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx výsledků
Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx testované látky xxxxxxx xxxxxxxxx buněk x chromozómovými aberacemi, xxxx xxxxxxxx nárůst xxxxx buněk x xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx dávkou xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Při vyhodnocování xxxxxxxx testu se xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné výsledky xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx mitotické procesy x vyvolávat numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx chromozómy xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx fáze buněčného xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx sice xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxxxxxx případech však xxxxx xx získaného xxxxxxx xxx xxxxxxx x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx definitivní xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx testovaná xxxxx vyvolává v xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, že xx daných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testovaná xxxxx x kostní dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx aberace nevyvolává.
Xx xxxxx xxxx x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx specifickou xxxxxxx xxxx zasáhne (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx vehikula,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- původ, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx xx xxxxxx xxx určení xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx podávání,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx cílové xxxxx,
- případně převod xxxxxxxxxxx látky v xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxx vzorků,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- kritéria xxx xxxxxxxxx aberací,
- xxxxx analyzovaných xxxxx xx xxxxx zvíře,
- xxxxxxxx, jimiž xx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx odchylka,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
- údaje ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
B.12. XXXXXXXXXX - XX XXXX XXXXXXXXXXXX XXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Metoda xx xxxxxxxxx OECD XX 474, Mammalian Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxx xx vivo x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx poškození, xxx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx erytroblastů; xxxx xxxxxxx x tom, xx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z kostní xxxxx xxxx. x xxxxxxxxx krve zvířat, xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx výsledkem xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx fragmenty xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx x xxxxxxxxxxxx kostní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jádro je x xxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx zbude x xxxxxxxxxx xxxxxxx mikrojádro. Xxxxxxxxxxx mikrojádra je xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxxxx jádro xxxxx. Nárůst četnosti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxx xxxxxxxxx chromozómů.
V xxxxx testu xx xxxxxx xxxx hlodavců xxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xx polychromní xxxxxxxxxx v této xxxxx xxxxx. Analýza xxxxxxxxx (polychromních) erytrocytů x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx krvi je xxxxxxxxxx u každého xxxxxxxxxxx druhu, x xxxxxxx xxxx prokázáno, xx jeho xxxxxxx xxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx odstraňovat xxxx xx je xxxxx xxxxxxxxx druh xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx kritérií, jako xx přítomnost xx xxxxxxxxxxxx kinetochoru (xxxxxxxxxx), xxxx centromerické XXX x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x mikrojádry. Xxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx krvi xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxxx hodnotu xxxxxx x případě, xx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x savců xx xxxxxxx vhodný x hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, farmakokinetiky x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, i xxxx xxx xxxxx xxx xxxx živočišnými druhy, xxxx tkáněmi a xxxx konečným xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx další xxxxxx mutagenního efektu, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x systému xx vitro.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx o tom, xx xx testovaná xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx vhodné.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx (kinetochor): xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx vlákna xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx organizovaný xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx (mikronukleus): xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx fragmenty chromozómů xxxx celými xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx chybějí xxxxxxxx x xxxx xx dá xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx erytrocytů xxxxxxx pomocí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx erytrocyt: xxxxxxx xxxxxxxxx, vývojové xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx ribozómy, takže xxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx testované látce. Xxxxx xx používá xxxxxx dřeň, xxxxxxx xx ve vhodnou xxxx po xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx se xxxxxxx x připraví xx xxxxxxxxx, jež se xxxxxx (1-7). Xxxxx xx xxxxxxx periferní xxxx, odebere xx xx xxxxxx době xx působení xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx se xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxx být xxxx od xxxxxxxx xxxxxxxx do zpracování xxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Příprava
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx jako pokusná xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx; může xxxx xxx xxxxxx jiný xxxxxx savčí xxxx. Xxxxxxx-xx xx periferní xxxx, doporučují xx xxxx. Xxx ovšem xxxxxx xxxxxxxxx vhodný xxxxx druh xx xxxxxxxxxxx, že xx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xx x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx látkám, xxx xxxxxxxxx strukturální xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx se běžné xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Hmotnostní xxxxxxx by při xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx přesahovat ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Všeobecné xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx úvodu x části X.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx rozdělí xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x po xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx zvířata xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx jsou xxxxx umístěny.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx x xx-xx xx xxxxx, látka xx před xxxxxxx xxxxxxxx rozpustí nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx mohou xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx podáváním ředí. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Používá-li xx nepříliš známé xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx použití podpořeno xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx zacházet xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxx.
X xxxxxxxxxxx kontrol xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx in xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad xxxxxxxxx xxxxxx. Dávky xxx xxxxxxxxx kontrole xx volí xxx, xxx byly účinky xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx xx možné xxxxxxx odlišným způsobem xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Kde xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx testovaná látka. Xxxxxxxx látek vhodných xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx methansulfonát | 62-50-0 | 200-536-7 |
N-ethyl xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu | 6055-19-2 | |
triethylenmelamin | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx rozpouštědlem xxxx xxxxxxxxx x zpracované xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx skupiny xxxx xx být zařazeny xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zpracování, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje x frekvenci xxxxx x xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxx pouze xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx první xxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx krev, xxxx xxx xxxx souběžná xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx odebraný xxxx působením xxxxx, xxxxx xxxxx v xxxxx krátkodobých xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 1 - 3 dávky), xxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X každé xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx pět xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx každého xxxxxxx (11). Xxxxx x xxxx, xxx se xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx stejných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx oběma xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx rozdíly, je xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx na xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxx xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx standardní xxxxxx (xxxx. xxxxx, dvě xxxx xxxx dávek x 24hodinových intervalech). Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xx v daném xxxxxxxxxxx neprokáže pozitivní xxxxx; v případě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx limitní xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx až do xxxx xxxxxx vzorků. Xxxxx se xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxx xxxxx xx xxx podané x rozmezí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Test xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
(x) Xx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxx xx odeberou xxxxxxxxx xxxxxxx, poprvé xx xxxxx xxx xx 24 xxxxxxxx x celkově xx xxxxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx než po 24 xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxx po 36 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, se vhodnými xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, celkově xxxx nikoli xxxx xxx 72 xxxxxx. Xxxxx se v xxxxxxxx xxxxxxx intervalu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx již xxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xxx nebo xxxx dávek xx 24xxxxxxxxxx intervalech), xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx 18 x 24 hodinami xx posledním xxxxxx xxxxx a x xxxxxxx periferní xxxx xxxxxx mezi 36 x 48 hodinami xx xxxxxxxxx podání xxxxx (12).
Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx mimoto xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Provádí-li xx studie ke xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx třeba xx xxxxxxxx x xxxx laboratoři xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, pohlaví x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x hlavní studii (13). Při xxxxxxxx xxxxxxxx se užívají xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx dávky xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx toxicity x xxxxxxxx xxxxx, xxxx nulové. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků xx xxx třeba použít xxxxx nejvyšší xxxxx. Xx je definována xxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx stejném xxxxxx xxxxxxxx by xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, jež x xxxxxxx netoxických dávkách xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx výjimky x xxxxxx xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx od xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka může xxx také definována xxxx dávka, xxxxx xxxx x určitým xxxxxxx toxicity v xxxxxx dřeni (xxxx. xxxxxx xxxxxx nezralých xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx erytrocytů v xxxxxx xxxxx resp. xxxxxxxxx xxxx).
1.5.4 Limitní xxxx
Jestliže xxxx xxx dávce minimálně 2000 mg/kg xxxxxxxxx x jedné xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx podaných x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x látkách x xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx být xxxxxxxxx xxxx studie za xxxxxxx tří xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx limitní xxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx za xxx xxx době xxxxxx xx 14 dnů, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx dávkové úrovně xxxxx.
1.5.5 Aplikace xxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxxxxxxx případech xxxxx xxx xxxxxxxxxx i xxxx xxxxxxx expozice. Xxxxxxxxx xxxxx kapaliny, xxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, závisí xx velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx musí být xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, jež normálně xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx tak, xxx xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxx dřeně / xxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx z xxxxxx xxxx tibie okamžitě xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxx nebo xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx metodami. Periferní xxxx se získává x xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx za xxxxxxxxx stavu xxxxxx (8) (9) (10), xxxx se zhotoví xxxxxx, xxxxx se xxxxxxx obarví. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx XXX (xxxx. akridinové xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 x xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx DNA xxxxxxxxxx. Xxxx výhoda xxxxxxxxx, xx xx xx nedala xxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxx. Xxxxxx). Xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx x odstranění buněk x xxxxxx (16) - xxxxx xxxx xxxxxx jsou x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
X xxxxxxx xxxxxxx xx stanoví xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). X xxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx minimálně 200 xxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx periferní xxxx xxxxxxxxx 1000 xxxxxxxxxx (17). Všechny xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních kontrol) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. X xxxxxxx xxxxxxx xx vyhodnocuje xxxxxxxxx 2000 nezralých erytrocytů x zaznamená xx xxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx získat xxx, xx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve zralých xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 20 % xxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx nebo xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx jedince. Možnou xxxxxxxxxxxx x manuálnímu xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy (xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx - xxxx cytometry), xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx erytrocytů, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx erytrocytů. Xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx kontinuálně xx xxxx čtyř týdnů xxxx xxxx, xx xxxxx xxxxx také xxxxx x zralých xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxxx). Xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx erytrocytů x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx o tom, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxx při xxxxxx xxxxxxx intervalu xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jejímž použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx sice xxxxxxxxx jednoznačně pozitivní xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých případech xxxx nelze xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky definitivní xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testu xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx tvorbu xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx chromozómového xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aparátu x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních podmínek xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka bude xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx cílovou xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx uvést xxxx xxxxxxxxx:
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x rozpouštědle/vehikulu, pokud xx xxxxx.
Pokusná xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx druh/kmen,
- xxxxx, xxx a xxxxxxx jedinců,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro jednotlivé xxxxxxx.
Podmínky pokusu:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedena,
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x podávání xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx cesty podávání,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxx dostala xx celkového xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- případný xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x potravině/pitné vodě (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx),
- podrobnosti x xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx podávání testované xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických preparátů,
- metody xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx nezralých xxxxxxxxxx s mikrojádry,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx u každého xxxxxxx,
- kritéria, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x celkovému xxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx každou xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx negativních xxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.13/14. XXXXXXXXXX - TEST REVERZNÍCH XXXXXX U XXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX TG 471, Xxxxxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxx bakteriálním xxxxx xxxxxxxxxx mutací xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx mutací xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (auxotrofní xx vztahu k xxxxxxxxxxxxx histidin) x xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx genové xxxxxx xxxxxxx mechanismem xxxxxxxxxx xxxx delece xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxx, xx xx xxxxxxxx mutace, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx kmenu do xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx bakterie syntetizovat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx změněná xxxxxxxxxxx xxxxx xx detekována xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx růst xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zkušební xxxx.
Xxxxxx mutace xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx genové mutace x xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx genech xxxxxxxxxxx buněk xxxxx x člověka a xxxxxxxxx zvířat xxxx xxx vzniku xxxxxx. Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxx mutace je xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, díky xxxx jsou xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x místech xxxxxxx, xxxxxxx propustnosti xxxxx pro xxxxx xxxxxxxx x eliminace xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx posílení xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx DNA, xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kmenů xxxxxxxx xxxxxx některé xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, jež xxxx xxxxxxxx genotoxickými xxxxxxx. Xxx bakteriální testy xxxxxxxxxx mutací xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx databáze xxxxxxxx xxx širokou xxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx chemikálií xxxxxxxx.
1.2 DEFINICE
Test xxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo Xxxxxxxxxxx xxxx slouží xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx závislém xx xxxxxx aminokyselině (histidinu xxxx. tryptofanu), jež xxxxx xx xxxxxx xxxxx, který xx xx dodávce aminokyseliny xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páru xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx bází x XXX. Při xxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx xx místě xxxxxxx xxxxxx xxxx xx jiném xxxxx xxxxxxxxxxxxx genomu.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx vyvolávající xxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx, xxx způsobují xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo více xxxx bází v XXX, čímž xx xxxx xxxxx rámec x XXX.
1.3 XXXXXXX XXXXX
X bakteriálním xxxxx se využívají xxxxxxxxxxxxx buňky, xxxxx xx xx savčích xxxxx xxxx v xxxxxx látek metabolismu, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx DNA. Xxxxx xx xxxxx xxxxxx vyžadují exogenní xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xx vitro ovšem xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx podmínky in xxxx, takže xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx dané xxxxx x organismech xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx mutací se xxxxx používá jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx, xx mnohé chemikálie, xxxxx xxxx v xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx v xxxxxx xxxxxxx mutagenní xxxxxxxx. Xxxxxxxx ovšem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, jež xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxx tohoto nedostatku xxxx xxx specifická xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx veličin, xxxxxxx x metabolické xxxxxxxx nebo xxxxxxx x xxxxxxxxxx dostupnosti. Xx xxxxx straně xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu reverzní xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx x tomu, xx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx test xxxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx antibiotika) x xxxxx, x xxxxx xx předpokládá xxxx xx, že xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx systém xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx topoizomerázy xxxx xxxxxxx analoga xxxxxxxxxx); v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx u xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx při xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx; xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x existují xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4 PRINCIP XXXXXX
Suspenze xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx přítomnosti x xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické aktivace. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx "plate incorporation" xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxx x minimální xxxxxx xxxxx. Při xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxx inkubuje x smísí x xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx půdu. Xxx xxxx xxxxxxxx xx xxx xx tři xxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kolonie xxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Je xxxxxxx několik postupů xxx xxxxxxxxx xxxxx. X nich xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx misková xxxxxx ["xxxxx incorporation"] (1) (2) (3) (4), preinkubační xxxxxx (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) x xxxxxxxxx xxxxxx (11). Xxxx xxxx popsány xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx par (12).
Postupy xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx týkají xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx tyto xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Některé xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou; xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxx, kam xxxxxxx alifatické xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx x nitrosloučeniny (3). Xxxx bylo xxxxxxxx, xx existují xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx standardních xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx xx je xxxxx xxxxxxxx xxxx xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", x xxxxxxx detekci je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Byly xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx případy" (xxxxx s příklady xxxxxxx, které se xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx od standardního xxxxxxx je xxxxx xxxxxxx zdůvodnit.
1.5. XXXXX METODY
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vypěstují xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx stadia xxxxx (zhruba 109 xxxxx/xx). Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Důležité xx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx experiment xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxx xxx x historických xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x jednotlivých xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx miskách.
Doporučená xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 37xX.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx budou xxxxxxxxx xxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx (XX 1535; XX 1537 xxxx XX97x nebo 1X97; XX98; x XX100); x xxxxx xxxx prokázána xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx různými xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx kmeny X. typhimurium xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx XX x xx xxxxx, xx nemusejí detekovat xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx vyvolávající xxxxxxx xxxxx x hydraziny. Xxxx látky xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx E. xxxx XX2 xxxx S. xxxxxxxxxxx XX102 (19), xxxxx mají xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx místě xxx bází XX. Xxxxx xx doporučená xxxxxxxxx kmenů xxxx:
- X. xxxxxxxxxxx XX1535 a
- X. typhimurium XX1537 xxxx TA97 nebo XX97x a
- X. typhimurium TA98 x
- X. xxxxxxxxxxx XX100 x
- X. xxxx XX2 xxxX xxxx X. coli WP2 xxxX (xXX101) nebo X. xxxxxxxxxxx XX102.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx křížové xxxxx xxxx být nejvhodnější xxxxxx XX102 nebo xxxxxx DNA xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kmen X. xxxx (např. E. xxxx XX2 nebo X. coli XX2 (xXX101)).
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx postupů xxxxxxxx xxxxxxx kultury, xxxxxxx markeru a xxxxxxxxxx. Xxx každý xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx (xxxxxxxx x xxxxxxx kmenů S. xxxxxxxxxxx, tryptofan x xxxxxxx xxxxx E. xxxx). Xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x xx: xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx X-xxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xx přichází x xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxx ampicilinu u xxxxx TA98, XX100 x XX97x xxxx XX97, WP2 uvrA (xXX101) a xxxxxxxxxx xxxx ampicilinu + xxxxxxxxxxxx x kmene XX 102); xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx. xxx xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxX xxxxxx u X. xxxx xxxx xxxX xxxxxx x S. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx záření) (2) (3). Xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
1.5.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx (xxxx. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X a xxxxxxxx) x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx histidin x biotin xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx několik xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).
1.5.1.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Bakterie xx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx jak xx xxxxxxxxxxx, xxx za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx systému xxxxxxxxxxx aktivace. Nejčastěji xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx post-mitochondriální xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx enzymů látkami, xxxx je Aroclor 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx fenobarbitalu x ß-xxxxxxxxxxxx (18) (20) (21). Xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 a 30 % v/v xx xxxxx X9. Xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xxxxx záviset xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X některých xxxxxxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxx post-mitochondriální xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace (6) (13).
1.5.1.4 Testovaná xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx xxxx působením na xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx jejich xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo se xxxxxxx ředí. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx prokazují, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx přijatelné.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.5.2.1 Xxxxxxx xxxxx (xxx 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxx
Ke xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx vzít x xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx x rozpustnost x konečné xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxx použije.
Může xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx dá xxxxxxx snížením xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, vymizením xxxx zmenšením xxxxx xx pozadí xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kultur. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx se může xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx posuzuje xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx maximální xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx necytotoxických xxxxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, jež x těchto koncentracích xxxxxx rozpustné, by xxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx mělo být x xxxxxxx pokusné xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx již xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx než 5 mg/misku resp. 5 µx/xxxxx, se xxxxxxx xx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx rušit xxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. √10) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Zkoumá-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx vyšších xxx 5 mg/misku xxxx. 5 µl/misku xxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxx podstatné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Každý test xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kmenově xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx xx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
X xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx látka pro xxxxxxxxx kontrolu xxxx xxxxx xxxxxxxxx typu xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx x testech x metabolickou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:
Xxxxx | CAS | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 |
Následující xxxxx je vhodnou xxxxxxxxx kontrolou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
Kongo xxxxxx | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx X9. Xxxxx xx 2-xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx S9 charakterizovat xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx enzymy, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxx kmenově xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x testech xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx tato xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX | |
Azid xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 a XX 100 |
2-xxxxxxxxxxxx | 607-57-8 | 210-138-5 | XX 98 |
9-xxxxxxxxxxxx | 90-45-9 | 201-995-6 | XX 1537, XX 97 a XX 97a |
XXX 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, XX 97 a XX 97x |
kumen-hydroperoxid | 80-15-9 | 201-254-7 | XX 102 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 | XX xxxX x XX 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (pKM101) |
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx | 56-57-5 | 200-281-1 | XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (xXX101) |
Xxxxxxxxxxxx (XX2) | 3688-53-7 | kmeny xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
K xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx x jiné xxxxxx referenční xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx x chemické xxxxx.
Xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx, bez testované xxxxx, xx xxxxxxx xx jinak zachází xxxxxx jako xxx xxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xx použijí x negativní xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, že zvolené xxxxxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.3 XXXXXX
Při xxxxxxxx miskové xxxxxx (1) (2) (3) (4) bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,05 nebo 0,1 ml xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x 0,5 ml sterilního xxxxx a 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx 0,5 xx metabolické aktivační xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) x 2,0 xx vrchního xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx /xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx každé zkumavky xx promísí x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Vrchní agar xx nechá xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx testovaná xxxxx / xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx preinkubovat x xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,5 xx) xxxxxxx xx xxxx 20 xxx xxxx xxxx xxx 30 - 37 xX; xxxxx xx xxxxx s xxxxxxx xxxxxx a nalije xx misku x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,1 xx xxxxxxxx a 0,5 xx xxxxx X9 xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx provzdušňují xxxxxxxx.
Xxx adekvátní odhad xxxxxxx xx pro xxxxxx dávku xxxxxx xxx misky. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx náhodně ke xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxx látky se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x zatavených xxxxxxxx (12) (14) (15) (16).
1.5.4 INKUBACE
Xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx teplotě 37 xX xxx xxxx 48 - 72 xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Údaje se xxxxxxxxxx xxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Rovněž xx uvede počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx jak x negativní kontroly (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx působení, xxxx-xx xxxxxxx), tak x xxxxxxxx pozitivní. Xxx xxxxxxxxxx látku x xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (resp. xxx xxxxxxxx rozpouštědlo) xx xxxxxx xxxxx xxx jednotlivé xxxxx x průměrný xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx pozitivní reakce xx nepožaduje. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx testováním, nejlépe xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx musejí potvrdit xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xx nutné, je xxxxx xx xxxxxxxxx. X následných experimentech xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx studijních xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxx xxxx koncentracemi, xxxxxx xxxxxxxx ("xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xxxx preinkubace x tekutém prostředí) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx dávkově xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx počtu revertantních xxxxxxx na xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx více koncentracích x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x metabolickým xxxxxxxxxx systémem xxxx xxx něj (23). Xxxx první xx xxxxxxx biologická relevance xxxxxxxx. Xxxx pomůcku xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (24), statistická významnost xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro pozitivní xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx výsledky xxxx xxxxxxx kritéria xxxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých xxxxxxxxx však nelze xx xxxxxxxxx souboru xxx vyvodit o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x genomu Xxxxxxxxxx typhimurium xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx rozpouštědla,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx rozpouštědle, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- xxxxx buněk x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx misku (x xx xxxx μl) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x počtu xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx,
-xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- počty na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, je-li to xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- údaje x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.15. XXXXXX XXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxx haploidní x xxxxxxxxx xxxxx kvasinek Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx užity xxx xxxxxx produkce xxxxxxxx xxxxxx indukovaných chemickými xxxxxxx bez a x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx forward xxxxxxx xxxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx x červených, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx-1, xxx-2) xx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx mutanty x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx rezistence xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx mutační xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx XV 185-14 X s xxxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 2-1, arg 4-17, xxx 1-1 x trp 5-48. Xxxxxx xxxx vratné xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx bazí, xxxxx xxxxxxxx mutace xx xxxxxxxxxxx místě, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mutace. XX185-14X nese rovněž xxx 1-7 xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxx 3-10, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X7, který xx xxxxxxxxxxx xxx xxx 1-92.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx připraveny xxxxx xxxx testováním xx použití vhodného xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx vodě xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x organických xxxxxxxxxxxxxx, jako xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (DMSO). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx růstu.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkám xxx x přítomnosti, xxx x nepřítomnosti vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx užívaným xxxxxxxx xx postmitochondriální frakce xxxxxxxxxx x jater xxxxxxxx po aplikaci xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx jiných xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx může xxx xxxxxx xxxxxx xxx metabolickou aktivaci.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxx XX 158-14X a xxxxxxxxx xxxx X7 xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx mutací. Xxxx xxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx
Odpovídající xxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx mutační xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx zvolených xxxxxxxxxxx. X toxických xxxxx xxxx xxxxxxxx použitá xxxxxxxxxxx redukovat přežití xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx až po xxx xxxxxxxxxxxx látky xx xxxxxxx vhodných xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx látky netoxické, xx vodě xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx při 28 xx 30 xX xx xxx.
1.2.2.6 Frekvence xxxxxxxxxxx mutací
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací x xxxxxxxxx xx být x xxxxxxx akceptovaných xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Počet xxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxx x xxxxxxxxxxxxx buňkami x u xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx jako xxx 3-10 x xxxxxx mutační xxxxxxxxx xxxx xxx počet xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Ovlivnění xxxxx X. xxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx rostoucích xxxxxxx: 1-5 x 107 xxxxx/xx je xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x průběhu xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx ovlivnění xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, promyty x vyočkovány xx xxxxxx kultivační xxxxxx. Xx inkubaci xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx buňky x buňky x xxxxxxx xxxxxxxx mutací.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxx proveden druhý xxxxx s buňkami xx xxxxxxxxxxx fázi. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx kolonií, xxxxx xxxxxx, přežívajících xxxxx x frekvenci mutací. Xxxxxxx výsledky xxxx xxx xxxxxxxxx nezávislým xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x:
- použitých kmenech,
- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xx stacionární xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, teplota x trvání xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- podmínkám xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx expozice, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, teplota xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxx, přežívajících buněk x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx dávky a xxxxxx, pokud je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.16. MITOTICKÁ XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx xx nazýván mitotické xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx produkty, kdežto xxxxx případ xx xxxxxxxx nereciproční x xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxxxxxxxx kmenů, genová xxxxxxxx je xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx revertant xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx téhož xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx kmeny xxx xxxxxxx mitotické xxxxxx xxxxxxxx xxxx X4 (heteroalelický x xxx 2 a xxx 5), X7 (xxxxxxxxxxxxxx x trp 5), XX34 (heteroalelický x arg 4) x JD1 (heteroalelický x xxx 4 x trp 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x růžové xxxxxxx může být xxxxxxxxx u X5 xxxx X7 (který xxxxxx měří xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxx 1-92). Xxx xxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx alely xxx 2.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek a xxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx vehikula. U xxxxxxxxxxx látek xx xxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx etanol, aceton xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Metabolická xxxxxxxx
Xxxxx mají xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx jiných xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx může xxx xxxxxx vhodné xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Nejužívanější xxxx xxxxxxxxx xxxxx D4, X5, X7 x XX1. Užití xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx kultivační média xxxx užívána xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk x frekvenci mitotické xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x rozpouštědlem xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx být xxxxxxx nejméně 5 xxxxxx zvolených koncentrací. Xxxx xxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx x rozpustnost. Nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxx mít xxxx na xxxxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace redukovat xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xx xx mez rozpustnosti xxxxx za použití xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx látky xxxxxxxxx, ve xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx od případu.
Xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx buď stacionární xxxx, nebo xxxxx xxxxx po xxxx xx 18 x. Xxxxxxx xxxxxxxxxx ovlivňované xxxx být xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, jejichž xxxxxxxxxx xxxx znehodnocuje.
1.2.2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
Misky jsou xxxxxxxxxx xx tmě xx čtyři xx xxxx dní při 28 - 30 xX. Xxxxx xxxxxxx xxx průkaz xxxxxxxxx x růžových xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx 4 xX) xx xxxxx 1 - 2 xxx xxxx xxxxxxxxx, xxx se xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Spontánní xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx x frekvencí xxxxxxxxxxx mutací x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx normálních xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx misek xx jednu xxxxxxxxxxx x testu prototrofních xxxxx tvořených mitotickou xxxxxxx xxxxxxxx a xxx určení životnosti xxxxx. V případě xxxxxxxxx xxxxxxxxx homozygozity xxxxxxx xxxxxxxxxx překřížením xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.8 Xxxxxx
Xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx stacionární, xxxx rostoucí xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx provedeny na xxxxxxxxxx xxxxxxx. 1-5 x 107 xxxxx/xx xx vystaveno testované xxxxx po xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 oC za xxxxxxx. Odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, pokud xx xx potřebné.
Xx skončení ovlivnění xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx.
Jestliže xx xxxxx xxxxx negativní, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx je xxxxx pokus xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx dalším xxxxxxx xxxxxxxxxx experimentem.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx prezentovány v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Výsledky xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- použité xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: buňky xx xxxxxxxxxxx fázi xxxx xxxxxxxx, složení xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- podmínky xxxxxxxxx experimentu: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- počet xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvence xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxx, pokud xx to možné, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxx výsledků.
B.17. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX XXXXXXX XX VITRO
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 476, Xx Vitro Xxxxxxxxx Xxxx Gene Xxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xx xx xxxxxxxx xx zjišťování xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxx linie patří xxxx lymfomové buňky X5178X, linie XXX, XXX-XX52 a X79 xxxxx čínského xxxxxx x xxxxxx lymfoblastoidní xxxxx XX6 (1). X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx konečný genetický xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x v xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx fosforibosyltransferáze (XXXX). Testy mutací x XX, XXXX x XPRT xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XX x XXXX může xxxxxxx xxxxxxx i takové xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxx), xxxxx xx xx xxxxxx XXXX xxxxxxxxxx X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
X xxxxx xx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xx vitro xx dají použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo buněčných xxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx kultury x xxxxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx in xxxxx obecně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Takový xxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx podmínek, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxx pH, xxxxxxxxxx xx vysoké cytotoxicity (7).
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxxxxx savčích xxxxxxxx x karcinogenů. Řada xxxxxxxxx, xxxxx xxxx x tomto testu xxxxxxxxx, jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxx xxxxxxxx látky x xxxxxxxx xxxxx více xxxxxxx toho, xx xxxxxxxx karcinogeny, xxxxx xx tímto xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx jiným, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx mutace: xxxxxx xxxxxx výchozího typu xxxxxxxx formy, jež xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kódovaného proteinu.
Mutageny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páru xxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx bází x DNA.
Frameshift xxxxxxxx (xxxxxxxx vyvolávající xxxxxxxx xxxxxx): xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxx bází x XXX.
Xxxx fenotypické xxxxxxx: xxxxxx, během xxxxxxx jsou x xxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx nezměněné genové xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx mutací: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx buněk xxxxxx počtem xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx růst: xxxxxx počtu xxxxx x xxxx x xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxxx xx xxxx součin xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx růstu (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx) a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxxx s negativní xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx suspenzní xxxx: xxxxxxx nárůst xxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxx v porovnání x xxxxxxxxx kontrolou.
Životnost (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx podmínkách xx období xxxxxxx.
Xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xx miskách xx konci xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxx xx xxxxxxx v porovnánís xxxxxxxx xxxxxxxxx buněčné xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Buňky, deficientní xx thymidinkinázu (XX) x xxxxxxxx xxxxxx XX+/- → XX-/-, xxxx rezistentní xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx TFT xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxxxxxxx x zastavuje xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx XXX proto xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx normální xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx XXXX nebo XXXX selekčně xxxxxxxxxxx xxxx 6-thioguaninu (XX) xxxx 8-xxxxxxxxxx (AG). Xxxxx xx analog xxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx analyzována x xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx zvážit. Xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx podezření xx selekční xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx x xxx xxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx selekčním xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xx xx selekční xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).
Xxxxx x suspenzi xxxx xxxxxxxxxxxxx kultuře xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x metabolickou xxxxxxxx i xxx xx x xxxxxxxxx xx ke stanovení xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx fenotypické xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx stanoví obvykle xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) (cloning xxxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx dostatečnou xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx x xxx xxxxx, aby xxxxx xxxxx k xx xxxxxxxxxxxxxxx fenotypické xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx činidlo xxx xxxxxxx mutovaných xxxxx a x xxxxx xxx tohoto xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (životnosti). Xx xxxxxx inkubační xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx frekvence xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x selekčním médiu x x xxxxx xxxxxxx x neselekčním xxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Buňky
Dá xx xxxxxx xxxx řada xxxxxxxxx typů, včetně xxxxxxxx xxxxx X5171X, XXX, CHO-AS52, X79 x XX6. X xxxxxxxxx typů xxxxxxxxxxx x tomto xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx nejsou xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxxx citlivost x xxxxxxxxxxx (xxxxx). Xxxxx xxxxx, xxxxx kultur x xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (14). Minimální xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx se x xxxxxxxxxxxx stadiích xxxxx, xx xxx frekvencí xxxxxxxxxxx mutací. Obecným xxxxxxxx je, xx xxxxx buněk má xxx xxxxxxxxx desetinásobkem xxxxxxxxxx hodnoty frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx. Doporučuje xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 106 buněk. Xxxx by být x dispozici xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx se prokázala xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testu.
1.4.1.2 Média x kultivační xxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x vlhkost). Xxxxx se pro xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx systému x xxxx xxxxx. Zvláště xxxxxxxx je, aby xxxxxxxx kultivace zajišťovaly xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx periody x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx tvořit xxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx se xxxxxxx xx zásobních xxxxxx, xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxx teplotě 37 xX. Před xxxxxxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxx zbavit xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx buněk.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx působí x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxxx je kofaktory xxxxxxxxxxxxxx mitochondriální xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx hlodavců, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy xxxx xx Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x médiu xxxx xxxxxxx 1 - 10% x/x. Aktivita xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xxxx xxxxxxx na xxx, jakého typu xx testovaná xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx případech xx vhodné použít xxxxxxxxxxxxxxx frakci v xxxxxxxx koncentracích.
Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx i xxxxxxxxx modifikované buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Výběr xxxxxxxxx xxxxx by xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx cytochromu P450 x metabolismu testované xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx testované xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka v xxxxxx stavu, látka xx xxxx xxxxxxxxx xx buňky xxxxxxxx xxxx xx připraví xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx systému xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx ředí. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vlastnosti.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx reagovat, a xxxxx narušovat xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx X9. Používá-li se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx být podpořeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxx tam, xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xx vodě xxxxxxx, xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlo xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx dá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxx stanovování nejvyšší xxxxxxxxxxx, xxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x změny xX xxxx. osmolality.
Cytotoxicita se xxxxxxx s metabolickou xxxxxxxx i xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx, jako xx relativní xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx) nebo xxxxxxxxx celkový růst. Xx vhodné stanovit xxxxxxxxxxxx x rozpustnost x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx čtyři xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Dochází-li x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx koncentrace pokrývat xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx jednotlivé koncentrace xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, který xxxx mezi xxxxxxxxx 2 x √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx koncentrace x cytotoxicity, xxxx xx xxxx k xxxxxxxxxxx přežití (relativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x 10-20 %, xx xxxx xxxx xxx 10 %. X relativně netoxických xxxxx by maximální xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx z xxxxxx 5 mg/ml, 5 μx/xx a 1,01 M.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx netoxické v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, než xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx xxxxx nerozpouští, xx xxx nejvyšší použitá xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx rozpustnost xxxx xxxxx expozice x důsledku xxxxxxxxxxx xxxxx, X9, xxxx xxx. xxxxx. Nerozpustnost xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx buněk.
1.4.2.3 Xxxxxxxx
X xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx (rozpouštědlo, vehikulum) xxxxxxxx, x xx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx xx. Pokud xx xxxxxxxx metabolická xxxxxxxx, xxxx být pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivaci k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx účinku. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu patří xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
XX (xxxx a xxxxx xxxxxxx) | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (malé a xxxxx xxxxxxx) | xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XXXX | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx X-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
xxxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx látky; xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x 5-brom-2'-deoxyuridinu (XXX 59-14-3, xxxxx XXXXXX 200-415-9), xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Tam, xxx xx xx xxxxx, xx vhodné xxxxxx xxx pozitivní kontrolu xxxxx xx stejné xxxxxxxx skupiny.
Pro každý xxxxxx xxxxxxxx sklízení xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i negativní xxxxxxxx, xx které xx používá xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, zpracované xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx buňky xxxxxxxxxx xx mutagenní účinky.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxx testovanou xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx buňky xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx xx. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xx xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xxxx přesáhnout xxxxx xxxx xxxx buněčných xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx jedna kultura, xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx zajistil xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (tj. xxxxxxxxx osm xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx použití xxxxxxxxxx uzavřených kultivačních xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, viability x xxxxxxx frekvence
Po xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx začíná x xxxxxxxx cytotoxicity xxxxxxxxxx klonovací účinnosti - cloning efficiency xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx lokus xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx téměř xxxxxxxxx expresi xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX x XPRT xxxxxxxx xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, XX xxxxxxxxx 2 xxx). Xxxxx se xxxxxxx x xxxxx x x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx mutantů x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx životnosti (používané x xxxxxxx četnosti xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx médium.
Pokud xx xxxxx x xxxxx X5178X XX+/- xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx kultur (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xx negativních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kolonií. Xxxxx je látka x tomto testu xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxx x XX6XX+/-.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx data slouží xxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x mutační xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx. X xxxxxxx pozitivní xxxxxx x xxxxx X5178XX+/- xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx kritérií xxxxxx a velkých xxxxxxx přinejmenším v xxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx (nejvyšší pozitivní xxxxxxxxxxx) x negativní x xxxxxxxxx kontrole. Xxxxxxxxxxx x cytogenetické xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx xxxxx XX+/- xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxx) x xxxxxxxx xxxxx (xxxx) (25). mutanty, xxxxx utrpěly xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, mají xxxxx dobu zdvojení, x xxxxx tvoří xxxx kolonie. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx obvykle xxxx od xxxxxx xxxxxx xxxx po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx malých xxxxxxx je asociována x xxxxxxxx látkám xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnost - xxxxxxxx cloning xxxxxxxxxx) xxxx relativní xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx frekvence xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx buněk xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xx individuální xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xx musí xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, je třeba xxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx modifikaci xxxxxxxxx studie tak, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx rozdíly xxxx jednotlivými xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nárůst xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Nejprve xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx se mohou xxxxxx xxxxxxxxxxx metody. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jejímž použití xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx kritéria, xx x tomto systému xxxxxxxx xx nemutagenní. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých případech xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx definitivní xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx in vitro xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx savčích buněk xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxx dávka - xxxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx mutace.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- zdůvodnění volby xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- rozpustnost x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx x xxxxx buněk,
- xxxxx buněčných xxxxxx,
- xxxxxxxx počet pasáží,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx kultur, xxxxxx xxxx. xxxxx x xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx k dispozici,
- xxxxxxx xxxxx, koncentrace XX2,
- koncentrace testované xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx inkubace,
-doba xxxxxxxx xxxxx,
- hustota buněk xxxxx působení látky,
- xxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxxxxxx)
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxx velikost x xxx (xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx mezi "xxxxxx" x "xxxxxxx" xxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- známky xxxxxxx,
- údaje x xX a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jsou-li stanoveny,
- xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx možnosti xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxx X5178X TK+/-,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, je-li to xxxxx,
- statistické analýzy, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- souběžné xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních kontrol, xxxxxx rozpětí, průměrů x směrodatných xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.18. XXXXXXXXX XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX SYNTÉZA XXX - XXXXX XXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Test neplánované xxxxxxx DNA (XXX) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xx inkorporaci xxxxxxxxx xxxxxxxx (3X-XxX) xx DNA xxxxxxx xxxxx, které nejsou x X xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Vzestup 3X-XxX je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metodou (XXX) x xxxxxxxxxxxx buňkách. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx kultury potkaních xxxxxxxxxx, které jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx i v xxxxxxxxxxxxx exogenního metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. XXX xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx x systému xx xxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx referenční xx xxxxxxxx xxxx suspendují x kultivačním xxxxx xxxx ve vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx médiem. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx lymfocytů xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx).
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce v xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx kultur
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx bod xx potřeba xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx (nebo xxxx, xx-xx to xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxx XXX XXX.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x pozitivní kontroly
X každém xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxx metabolického aktivačního xxxxxxx.
Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx použít 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-DMBA) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxx i xxx XXX xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx lze xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx být xxxxxxx xxxxxxx koncentrací testované xxxxx. Nejvyšší koncentrace xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx být testovány x xxxxxxxxxxxxx až xx xxxxxxx rozpustnosti xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxx xx vodě xxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx xxxxxx xx případu.
1.2.2.4 Xxxxx
Xxx udržování kultur xxxx být použito xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, teplota x xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxxx xxx pravidelně xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx aktivační xxxxxx xxxxxxxxx. Stabilizované buněčné xxxxx x xxxxxxxxx xxxx exponovány testované xxxxx x přítomnosti x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx kultury (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx z povrchu xxxxxxxxxx nádoby), xxxxxxxxx xx xx kultivačních xxxxx ve vhodné xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 xX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx připravují xxx, xx xx xxxxxx xxxxxxx izolovaným xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xx vhodném xxxxx x xxxxxxx kultivační xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx jsou založeny xxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Primární xxxxxxxxxx xxxxxxx. Čerstvě izolované xxxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX po xxxxxxx xxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxx je médium xxxxxxxxxx, buňky promyty, xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx emulze (xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxxx, vyvolána, obarvena x vyhodnocena.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxxxx techniky: Xxxxxxx kultury xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxx xxxx x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 3H-TdR. Xxxx xxxxxxxx je xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx UDS xx xxxxx 3H-TdR xxxxxx xxxxxxxx s testovanou xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx mezi xxxxxx xxxxxxx xx ovlivněn xxxxxx interakcí xxxx xxxxxxxxxx látkou a 3X-XxX. X odlišení xxxx UDS a xxxxxxxxxxxxxxxxx replikací XXX xx užívá xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, nízký xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx, což xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX.
Xxxxxxxxx XXX xxxxxx XXX: Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vstup xxxxx xx X-xxxx, jak xxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx pak xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce, xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx kultivace je XXX extrahována x xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx XXX x xxxxx rozsah xxxxxxxxxxx 3X-XxX.
Jestliže xxxx xxxxxxx xx xxxxx uvedených xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx x nestimulovaných xxxxxxxxx xxxxxxx semikonzervativní replikace XXX zbytečná.
1.2.4 Xxxxxxx
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxxx XXX v xxxxxxx kultuře se xxxxx v S-fázi xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx 50 xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx před xxxxxxxxxxxxxx. V každém xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Množství xxxxxxxxxxxxxxx 3X-XxX v xxxxxxxxxx xx xxxx x xxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Xxx xxxxxxxxx XXX XXX se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kultur xxx xxxxxx koncentraci xxxxxxxxx látky x xxx kontroly.
Xxxxxxxx xxxx xxx potvrzeny x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje musí xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
2.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx cytoplazmy x xxxxx xxx nalezených xxxx buněčné jádro xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx cytoplazmy a xxxxx xxx x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx průměru, mediánu x xxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx zaznamenává xxxx xxx/μx DNA. Xxxxxxxx xxxxxxx dpm/μg XXX xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Údaje xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx o:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx x číslu xxxxxx v době xxxxxxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxxxxx kultur,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- xxxxxxxxx látce, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x experimentu,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx schématu,
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx autoradiografických xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx do X-xxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxx XXX x x xxxxxxxxxxx celkového xxxxxx XXX xxx metodě XXX,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.19. XXX - VÝMĚNA XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX IN XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
XXX xx xxxxxxxxxx xxxx xxx detekci recipročních xxxxx XXX mezi xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. SCE xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx sekvencí XXX xxxx replikačními xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxxx vyžaduje xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx znalostí o xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx XXX xxxxxxxx diferenční značení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XxxX) do xxxxxxxxxxxxx XXX na xxxx xxxx buněčných xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxx jsou xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx i xxx přítomnosti xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xx-xx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xx xxxx xxxx replikačních xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx XxxX. Xx xxxxx xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx inhibitorem xxxxxxxx vřeténka (např. xxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxx v c-metafázi xxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx jsou buňky xxxxxxxxxx x připraveny xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Používají se xxxxxxxxxxxx (lidské lymfocyty) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx křečka). Xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x hlediska xxxxxxxxxxx Mycoplasmaty.
Xxxxxxxxx xx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx x kultivační xxxxxxxx (xxxxxxx, kultivační xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2 x xxxxxxx).
Testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx suspenduje x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx buněk, rychlost xxxxx xxxx frekvenci XXX.
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Připouští xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx (xxxxxxx) metabolickou xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx aktivity xxxx vhodné pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Pro xxxxx experimentální xxx xx použijí nejméně xxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx experimentu xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx negativní xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Jako pozitivní xxxxxxxx xxx použít:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx
Je-li xxxxx, xx xxxxx zařadit xxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx mít xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinek, xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx replikaci xxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xx hranici xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx postupů. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx rozpustné xxxxxxxxx xxxxx xx určuje xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx kultivační nádoby), xxxxxxxxx se do xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx při 37 oC. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx kultur. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx kultury xx připraví z xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 oC.
1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx růstu xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx až xxx xxxxxx, xxx expozice xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx na dva xxxxxxx cykly, xx-xx xx třeba. Buňky, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx exponovány xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx z média xxxxxxxxxx, xxxxx vymyty x dále xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x XxxX dva xxxxxxxxxx cykly. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxx současně s xxxxxxxxxx látkou a XxxX xx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx kultury xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, dokud jsou x semisynchronizovaných xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx analyzovány x druhém mitotickém xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x nejcitlivějším xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx s XxxX je xxxxx xxxxxxxx x temnu xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx fotolýze XXX, ve které xx xxxxxxxxxxxxx BrdU.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Jednu xx čtyři xxxxxx xxxx xxxxxxxxx kultivace xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx dělicího xxxxxxxx (např. kolchicín). Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.3.4 Příprava xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx cytogenetickou technikou. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx XXX xxxx xxx xxxxxxxxx několika xxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxx).
1.2.3.5 Xxxxxxx
Xxxxx analyzovaných xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxx. Obvykle xx xxxxxxx xxxxxxx 25 dobře xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx každou xxxxxxx. Preparáty xxxx xxx zakódovány xxxx xxxxxxxx. X lidských xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x 46 xxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxx x ± 2 xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx, xxx se budou xxxxxxxxxx XXX v xxxxxxx centromery. Xxxxxxxx xxxx být ověřeny x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x xxxxx xxxxxxxx x počet XXX/xxxxxxxxx zvlášť pro xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx i kontrolních xxxxxxxxx.
Údaje se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, metodách xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: složení xxxxx, xxxxxxx, koncentraci XX2, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx x jeho xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách,
- počtu kultur xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxx kulturu),
- xxxxxxxxx xxxxx SCE/buňku x SCE/chromozóm (xxxxxxxx xxx každou xxxxxxx),
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx dávka/účinek, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.20. RECESIVNÍ XXXXXXX XXXXXX VÁZANÉ XX XXXXXXX U XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Test xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx na pohlaví (XXXX) na Drosophila xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, jak genových, xxx x xxxxxx xxxxxx, x zárodečných xxxxxxx xxxxx. Je xx xxxx xx xxxxxxx mutace vhodný xxx xxxxxxxxx mutací x přibližbě 800 xxxxxxxx chromozómu X. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxx 80 % xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přibližně 1/5 xxxxxx haploidního xxxxxx.
Xxxxxx v X-xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx projeví x samců xxxxxxxxx xxxxxxxx gen. Když xx mutace letální x xxxxxxxxxxxx stavu, xxx na xxxx xxxxxxxxxx usuzovat z xxxxxxx xxxxxxx ze xxxx typů samčích xxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx rodí xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. XXXX xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx vzhledu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Příprava
1.2.1.1 Xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx linie x xxxxxx xxxxx Muller-5. Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx vhodné xxxxx popsané linie xxxxx x vícenásobnou xxxxxxx X-chromozómu.
1.2.1.2 Testované xxxxx
Testované látky xx xxxxxxxxxxx ve xxxx. Látky ve xxxx nerozpustné xx xxxxxxxxxxx nebo suspendují xx vhodném xxxxxxxxxxxx (xxxx. směs etanolu x Tweenu-60 nebo 80), xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx frekvence xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nutný xxxxx ovlivněných xxxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx uskutečňuje per xx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xx nutné, xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx v 0,7% xxxxxxx XxXx x xxxxxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
V xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx negativní (s xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx historické xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.6 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx používá xxxxx xxxxx rovnající xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity. Netoxické xxxxx xx testují x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx typu (xx xxxxx 3-5 xxx) jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx samicemi z xxxxx Muller-5 xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-chromozómu). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx za xxxxxxx virginní xxxxxx xxxxx xxx xx xxx xxx, xxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxx na xxxxx spermie, xx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxx xxxxxxx stadiu, xxxxx spermatidy, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx X1 xxxxxx narozené x tohoto xxxxxxx xxxx dále xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx/xxxxxxxx) xx svými xxxxxx. X F2 xxxxxxxx xx v xxxxx kultuře xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx F1 xxxxxx xxxxxxx letální xxxxxx v xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxx samci x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxx testovány, xxx xx zjistilo, xxx xxxxxxxx xx opakuje x dalších xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx údaje xx xxxxxxxx do xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxx každého testovaného xxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx každého xxxxx. Výsledky xx xxxx potvrdit x xxxxxxxxxx experimentu.
Xxxxx xx zhodnotí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxx v xxxxx x xxxxxxxxxx vhodným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, informace o:
- xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxx ovlivněných xxxxx, počtu sterilních xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx X2 xxxxxx, xxxxx X2 kultur xxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx nesoucích xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx odběru xxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxx o toxicitě, xxxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx) x pozitivní kontroly,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, xx-xx xx možné,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.21. XXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXX XXXXX - XX VITRO
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxx lze xxxxxx xxx xxxxxxx fenotypických xxxx xx vitro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx s maligní xxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx C3H10T1/2, 3X3, XXX, Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx se xxxxx o xxxxx xxxxxxx morfologie, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Méně xx používají xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx změny x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx in xxxxx xxxxx není xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx jsou schopné xxxxxxx promotorů. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxx zjištěna xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonie (cloning xxxxxxxxxx) nebo ovlivněním xxxxxxxxx růstu xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx relevantní, xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x určení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx experimentech, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxx
Xxxxxxxx xxxx buněčných linií x xxxxxxxxxxx použitelných x xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx musí xxxxxxxx, xx xxxxx použité x xxxxx transformace xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx test používaný xxxxxxxxxx xx xxxxxx x že xx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx média x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx transformace.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx
Testované xxxxx se rozpouštějí xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiu xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx ovlivněním xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx nesmí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx rychlost xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx a xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx metabolickou xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx vlastnosti xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx látky.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx experimentu xxxx xxx zařazeny xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx přímo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Musí xxx xxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx látek xxx xxxxxxxxx kontroly:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx: 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx, 4-dimetylaminoazobenzen, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx, xx xxxxx zařadit xxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx způsobují xxxxxx xxxxxx přežívání buněk, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx stejné jako x xxxxxxxxx kontrole. Xx xxxx relativně xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx až xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx postupů. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxx exponovány xxxxxxxxxxx xxxx závislou xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx testované látce xxxxxxxx x výměnou xxxxx (xx. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx expozice je x xxxxx propláchnutím xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx za vhodných xxxxxxxx xxx transformaci. Xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x tabulkové formě. Xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Data xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxx,
- kultivačních xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádobách, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, metabolickém xxxxxxxxxx xxxxxxx, pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx expozice, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx xx xxxxxx), xxxxxxxxxx xxxxxx koncentrací,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- diskusi xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.22. DOMINANTNÍ XXXXXXX XXXX X XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxxx letalita způsobuje xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Indukce xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx chemické xxxxx xxxxxxxx, že xxxx xxxxx poškozuje zárodečné xxxxx xxxxxxxxxxxx zvířecího xxxxx. Obecně xx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx mutace jsou xxxxxxxxx poškozením xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x numerické xxxxxxxxxxx). Xxxx embrya xxxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Vzestup xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx skupině xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx ztráty xx xxxxxxx xx xxxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx v exponované x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx- x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx živých xxxxxxxxxx xx samici x exponované xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xx samici x xxxxxxxxx skupině. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx intervalu může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (x.x. spermatocytů x/xxxx spermatogonií).
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx nerozpustné xx xxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx rozpouštědlo xxxxx xxxxxxxx x testovanou xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxx naředěnou xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx podává xxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx informací xx xxxxx podávat xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx orální xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxx i jiné xxxxxxx aplikace.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Pro xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx náhodně xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x ohledem xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx biologické charakteristiky. Xxxxx xx řídí xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxx 30 - 50 březích xxxxx na připouštěcí xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxx xxx zařazeny xx xxxxxxx experimentu. Jestliže xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxx pro pozitivní xxxxxxxx musí být xxxxxxx ve vhodných, xxxxxxx dávkách, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (např. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 xx.xx-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Nejčastěji se xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx vyvolávat xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx u exponovaných xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx je postačující xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxx test
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxxxx 5 g.kg-1 xxxx x xxxxx 1 x.xx-1.xxx-1 xxx opakované xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Existuje xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Může xxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx.
Jeden xxxxx xx opakovaně křížen x xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vhodných xxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx musí xxx x xxxxx xxxxxxx xx dobu xxxxxx xxxxxxx cyklu xxxx, xxxx pokud xx neprokáží xxxxxxx xx vagině či xxxxxxxxx zátka.
Xxxxx xxxxxx po xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx stadia xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Samice xxxx xxxxxxxx cervikální xxxxxxxxx xx druhé xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxxx je xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxx počtu xxxxxxx tělísek.
2. XXXXX
Xxxxx x počtu xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx v tabulkách. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx každého xxxxx a samice xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx samice xxxx xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, x xxxxx podané xxxxx, x xxxxx xxxxxx x mrtvých xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx celkového dominantního xxxxxxxxx efektu xx xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx živých xxxxxxxxxx xx samici x xxxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxx xxxxxx implantací x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupině xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
V xxxxxxx xxxx být xxxxx odlišeny xxxxx x xxxxxx letalita. Xxxx být zaznamenány x xxxxxxxxxxxxxx ztráty. Xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx jako xxxxxx xxxx xxxxxx corpora xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxx průměrného xxxxx xxxxxxxxxx na dělohu xx srovnání x xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx, informace x:
- xxxxx, xxxxx, xxxx x xxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x exponovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- testované xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx hladinách x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxxxx podání a xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxx,
- doba xxxxxxxx,
- kritéria xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxx/xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX ABERACÍ V XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Metoda xx replikací XXXX XX 483, Mammalian Xxxxxxxxxxxxxx Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx dvojího druhu: xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané chemickými xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, ovšem k xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Tato xxxxxx není xxxxxx x analýze xxxxxxxxxxx xxxxxxx x běžně xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx chorob.
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, x proto xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mutací v xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx xxxxxxxx. Tímto xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx in xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx.
Aby xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx, xx třeba xxxxxxxxxx xxxxx mitózu xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, dříve xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx buněčném xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x ovlivněných spermatogonií xxx získat xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómů, kde xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx ve xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx test in xxxx je xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x somatických buňkách xxxx xxxxxxx x xxxxxxx zárodečných. Mimoto xx xxxx význam xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mutagenity tím, xx xxxxxxxx posuzovat xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX.
X testes je xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx citlivosti xxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx tedy představují xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, kde xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spermatogonie. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx varleti pak xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx nemusejí xxx exponovány xxxxxxx xxxxxx kvůli anatomické x xxxxxxxxxxxx bariéře Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Existují-li xxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx cílové xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxxxxx chromatidového typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx projevuje xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx chromatid, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vyjádřená xxxx xxxx xxxxxxxxxx jako xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatid xx stejném xxxxx (xxxxxxxx xxxx aberace xxxx dicentrický xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: jako xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx jedné nebo xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx vzniklá xxxxxx xx struktuře xxxxxxxxxx xx větší, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Dále xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx osu xxxxxxxxxx), xxxxxxxx jedna chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxx: achromatická xxxx menší než xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx buňky.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx (3n, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx chromozómové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, pozorovaná xxxx delece x xxxxxxxxx, a xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Zvířata xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx testované látce x ve xxxxxxx xxxx po xxxxxxxx xx xxxxxx. Před xxxxxxxxx xx xx xx působí xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Colcemidem®). Xx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Běžně se xxxxxxxxx xxxxx čínských xxxxxx x xxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx jiného xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx dospělých xxxxxxx. Xxxxxxxxxx rozdíly xx xxx zahájení xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx nemají xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Všeobecné podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx B.
Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Zdraví xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx x experimentální xxxxxxx. Jedinci xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx minimálně xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba uspořádat xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx klece xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx stavu x xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx zvířatům xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vhodném rozpouštědle xxxx xxxxxxxx. Kapalné xxxxxxxxx látky se xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxx. xx xxxxx používat čerstvé xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx testu
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx je to xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx rozpouštědlo/vehikulum.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx zvířaty ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx kontroly xx xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo při xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx látku a xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx to xxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxx xxxxxxx | 79-06-1 | 201-173-7 |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Negativní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx být xxxxxxxx do xxxxx xxxxxxxx intervalů xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx s aberacemi x x interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx publikované xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx mutagenní xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Počet x pohlaví xxxxxx
X xxxxx zkušební x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných samců.
1.5.2 Xxxxxxxxx schéma
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx dávkách. Xxxxx se jedná x xxxxxxxx xxxxx, xxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xx xxx xxxxx za xxx xxxxxx x rozmezí xxxxxxxxx několika xxxxx. Xxxxxx režimy dávkování xxxxxx xxx vědecky xxxxxxxxxx.
X případě xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xx expozici xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Jelikož xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxx kinetiku buněčného xxxxxx, xxxxxxx se xxxxx dřívější a xxxxx pozdější xxxxx xxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx (xx. mimo xxxxx nejvyšší) xx xxxxx vzorků provádí xx 24 hodinách xxxx po 1,5xxxxxxx xxxxx buněčného xxxxx xx xxxxxxxx, ledaže xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxx (6).
Xxxxx toho xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxx. xxxxx-xx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mitózy, nebo xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx S-fázi xxxxx, xxxx vhodnější xxxxxxxx xxxx odběru xxxxxx (1).
Xxx xx vhodné nechat xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Pokud xx provádí aplikace xxxxx opakovaně, xxxxxxxx xx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx (1,5násobku xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx aplikace. Xxxxxx xxx xxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx xx to xx xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injikuje vhodná xxxxx Xxxxxxxxx® nebo xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx xx vhodném xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. U xxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3-5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx zhruba 4-5 xxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Provádí-li xx xxxxxx ke xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx laboratoři xx xxxxxxx xxxxxxxx živočišného xxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx zjištění xxxxxxxx xx užívají pro xxxxx časový interval xxxxxx vzorků tři xxxxx xxx, aby xxxxxxxxx rozmezí od xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xx pak xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Ta xx xxxxxxxxxx jako dávka xxxxxxxxxxxx takové známky xxxxxxxx, xx při xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx režimu xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxxx hormony xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx a vyhodnocují xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xxxx xxx také xxxxxxxxxx xxxx dávka, xxxxx xxxx k xxxxxxx xxxxxxx toxicity xx spermatogoniích (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx( tento xxxxxx xxxx xxx vyšší xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx test
Jestliže xxxx při dávce xxxxxxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx x jedné xxxxx xxxx xx xxxx dávkách xxxxxxxx x jeden xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx xx xxxxxxx údajů x xxxxxxx x podobnou xxxxxxxxx strukturou neočekává xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx celá xxxxxx xx použití xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx x limitním xxxxx xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx žaludeční xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekcí. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, která xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx najednou xxxxxxx, xxxxxx xx velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx koncentracích horší xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Okamžitě xx usmrcení xxxxxxx xx x xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x fixuje xx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx nakape xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx.
1.5.7 Analýza
U xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx x jedné xxxxxxx). Tento xxxxx xx xx snížit, xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx xxxxxxx postupy xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx chromozómů, musí xxx x všech xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx roven xxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx se prezentují x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou je xxxxxxx. X každého xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. X experimentálních x xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberací, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, uvádějí xx, xxx xxxxxxx xx do xxxxxxx xxxxxxxx aberací nezahrnují.
Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x meióza, xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx x negativní xxxxxxxx jakožto míra xxxxxxxxxxxx xxxxx mitóz xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x xxxxx meiotické xxxxxxxx, a to xxx, xx se x každého jedince xxxxxxx 100 dělících xx xxxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx pouze mitóza, xxxxxxx xx mitotický xxxxx u xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx kritérií, například xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx závislá xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx zřetelný xxxxxx xxxxx xxxxx x aberacemi xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x s xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx možno xxxxxx statistické metody (8); statistická významnost xx xxxx neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyjasnit xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx látka, při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, se v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vykazuje xxxxx pozitivní, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx případech xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx nejisté, nebo xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx ukazují, xx xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x zárodečných buňkách xxxxxxxxxxx živočišného druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx za daných xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx x zárodečných xxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xxxxxxxxxx.
Je třeba xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxx (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x stabilita testované xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx známa.
Pokusná xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx x xxx xxxxxx,
-xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx na počátku xxxxx, včetně hmotnostního xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- xxxxx xx studie xxx xxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx volby velikosti xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx aplikace xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- podrobnosti x xxxxxxxx testované látky,
- zdůvodnění xxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x potravě/pitné xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx / xxx),
- podrobnosti x xxxxxxx potravy a xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x odběru xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx blokující xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx přípravy mikroskopických xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- počet analyzovaných xxxxx na jedno xxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx studie xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x druhé xxxxxxxxx metafázi,
- xxx x počet xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx aberací x xxxx skupině,
- počet xxxxx x xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,
- xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx odchylek,
- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,
- případně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.24. XXXX XXXX X MYŠÍ
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Je xx xx xxxx xxxx xx xxxxxx, x xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx buňkami u xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xx, které kontrolují xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx genů xxxxxxxxxxxxx xxxxx srsti. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vyjádřeny xxxxxxxxxx fenotypem x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (spots) xxxxxxxxx xxxxx xxxxx narozených xxxx. Počet xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxxx nebo suspendovány x izotonickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Látky nerozpustné xx vodě xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxx. Používají xx čerstvě připravené xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxx X (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxxxxxx, xxxx xxx, cch x/xxx x; xxxxx, x/x; xxxxxx, xxxxx ear, x se/d xx; xxxxxxx xxxxxxxx, s/s) xxxx xxxxxxx xxx x kmenem HT (xxxxxx, nonagouti, brachypody, xx x xx/xx x bp; xxxxxx xxxxx, xx fz/ /xx xx; xxxxx xx/xx) xxxx x xxxxxx X57 XX (xxxxxxxxx, a/a).
Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, za xxxxxxxxxxx xx budou xxxxxxx nonagouti xxxxxxx. Xxxx. xxxxxxx mezi xxxxxx NMRI (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxx, c/c) x DBA (nonagouti, x/x; xxxxx, x/x; xxxxxx x/x).
1.2.1.2 Počet x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx zabřezlých xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx dávku. Vhodná xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx myší x x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pouze x xxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.3 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx ovlivněné xxxxx xxxxxxxxxxxxx (negativní xxxxxxxx). Xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx laboratoře xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx homogenní. Nedávné xxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx látce xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxx testu xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx nebyla mutagenita xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxx se používá xxxxxx aplikace sondou xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx. Xx-xx xx vhodné, xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx nejméně dvě xxxxx, z nichž xxxxx vyvolává známky xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx vrhu.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivněna xxxxxxxxxx xxxxxx pouze xxxxxx 8., 9. xxxx 10. den xxxxxxxx, xxxxxxx za 1. xxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zátky. Tyto xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 a 9.25 xxx po koncepci. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx látkou xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx.
Xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxx x zaznamenáván xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx a čtvrtým xxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx tři xxxxx xxxxx:
(a) xxxx skvrny x xxxxxxx 5 xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, o xxxxxxx xx předpokládá, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (XXXX);
(b) xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx, hrdla, axil, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxxx xx, xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (XXX);
(x) xxxxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (XX).
Xxxxxxx xxx skupiny xxxx xxxxxxxxxxxxx, ale xxxxx xxxxxxxx, XX, je xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Obtíže x xxxxxxxxx xxxx XXX x XX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Zaznamenávají xx nápadné, velké xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx data xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x počet xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx skvrn xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutacemi. Xxxxx získané z xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Údaje xxxx xxxx uváděny xxxx získané xxxxxxx xx xxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, informace o:
- xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx a x kontrolní xxxxxxx,
- průměrné velikosti xxxx x experimentální x v xxxxxxxxx xxxxxxx při porodu x při odstavení,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx rozpouštědle,
- xx kterém xxx xxxxxxxx xxxx testovaná xxxxx aplikována,
- x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxx počtu sledovaných xxxxxxx, x jejich xxxxx s XXXX, XXX x RS x experimentální x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx morfologických xxxxxxxxxxxx,
- vztahu xxxxx/xxxxxxx x RS, xx-xx xx možné,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.25. PŘENOSNÉ XXXXXXXXXXX U MYŠÍ
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
Test xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a numerické xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx reciproké xxxxxxxxxxx a u xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x XX-xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx F1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx sterilita xx způsobena xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (X-autosom x c-t xxx). Xxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx samců ze xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, xxxx X1 xxxxx či xxxxxxx xxxxxxx F1 xxxxx. Samice XO xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x kostní xxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx látky jsou xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx látkou xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx aplikace.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Pro xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Nepožaduje xx xxxxx specifický xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxx xxxxx xxx xxx x xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se zdravá, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx nutně xxxxxx xx frekvenci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxx indukovaných xxxxxxxxxxx vyžadovaném pro xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Test xx xxxxxxx provádí xxxxxxxx xxxxx X1 xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx x X1 xxxxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže budou xxxxxxxxxxx také samice X1 generace xxxxxxx, xxx se xxxxxxxx 300 xxxxx x 300 xxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Xxxxx se použít xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx pokusu x xxxx laboratoře, xxxxx xxx použity.
1.2.1.5 Dávkování
Xxxxxxx se xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx dávka/odpověď xx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx látek xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx postupu
1.2.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx. Nejčastěji xx používá xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx možná xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx dní x xxxxx xx 35 xxx.
Počet xxxxxxxxx xx expozici xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx období xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx. Po xxxxxx xx třeba zaznamenat xxxxx, xxxxxxxx xxxx x pohlaví xxxxxx. Xx vrhu xxxx xxxxx x samičí xxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx zařazení xx xxxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx ze xxxx možných xxxxx. Xxxx fertility X1 xxxxxxx x následná xxxxxxxxxx možných xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx F1 xxxxxxxx bez předchozího xxxxxx pomocí xxxxx xxxxxxxxx.
(a) Xxxx xxxxxxxxx
Snížená xxxxxxxxx xxxxxx x F1 xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx a/nebo analýzou xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x snížené xxxxxxxxx xxxx xxx stanovena xxx xxxxx kmen xxxxxxxxx xxxx.
Velikost xxxx: X1 samci xxxxxx k xxxxxxxxx xxxx odděleni xxxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 18. xxxx po xxxxxxxxx. Velikost xxxx x xxxxxxx X2 xxxxxxx xxxx zaznamenány xxx porodu, hned xxxx jsou odděleni. Xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx X1 samice, X2 xxxxxxx xxxxxx vrhů xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx testy. Samice-nositelky xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou translokací x jakéhokoliv xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. XX-xxxxxx xxxx určeny změnou xxx xxxxx mezi xxxxxx xxxxxxx z 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx xx. xxxxxx. V následném xxxxx xxxx normální X1 xxxxxxx xxxxxxxx x dalšího xxxxxxxxx, xxxxxxxx první X2 xxx dosahuje xxxx xxxxxxxxx xxxxxx určenou xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx zaznamenány druhé x xxxxx vrhy. X1 xxxxxxx, která xxxxxxx být xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx X2 xxxx, jsou xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: Redukce xxxxxxxxx vrhu x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx smrtí xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx indikuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxxx X1 xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxx xx 2 - 3 xxxxxxx. Oplodnění xx xxxxxxxx denní xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx jsou xxxxxxxx 14. - 16. xxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Metodou xxx-xxxxxx xxxx připraveny xxxxxxxxx z testes. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx - metafáze I x primárních xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx s multivalentními xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Jestliže xxx xxxxxxxx xxxxx no xxxxxxxx, všichni X1 xxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xx každého xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 25 buněk x xxxxxxxxx - xxxxxxxx X. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ve spermatogoniích xxxx x kostní xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo x X1 samic xxxxxxxxxxx XX. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx x 10 xxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (c-t typ). Xxxxxxx X-xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx sterilitu xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx ve xxxxx 10 mitózách je xxxxxxx xxx XX xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Pro xxxxx interval xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx průměrná xxxxxxxx xxxx x xxxxx pohlaví (xxx xxxxx).
Xxx xxxxx xxxxxxxxx X1 xxxxxx xx xxxxx průměrná xxxxxxxx vrhu xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx velikosti xxxx F1 xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx dělohy se xxxxx průměrný xxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx x individuální počty xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxx každé xxxxxxxxxxx F1 nosičů xxxxxxxxxxx.
Xxx cytogenetické xxxxxxx diakinéze-metafáze X xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx počet xxxxx pro každého xxxxxx translokací.
Xxx X1 sterilní xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx x doba xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
U XX xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx ratio X2 xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx analýzy.
X xxxxxxx, že xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx informaci x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx heterozygotů.
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxx xxxx, stáří a xxxx exponovaných xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx každé xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxxx podmínkách, xxxxxxxx popis xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- počtu x xxxxxxx mláďat xx xxxxxx, xxxxx x pohlaví potomků xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx x xxxxxxxxxx analýzy xxxxxxxxxxx,
- počet x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx o xxxxxxxx x xxxxxx dělohy,
- popis xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud xxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.26. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx podávání xxx xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx denně xxxxxx po 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, a xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, která přežijí xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin.
Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx, x kapslích xxxx v pitné xxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx celou xxxx xxxxxx stejnou xxxxxxx. Pokud se xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x nich xxxxx, že nemají xxxxxxx xxxxxx. Existují-li xxxxxx xxxxxxxx xxxx, xx možno xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx by xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx mladší xxx 6 xxxxx, v xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 8 xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti zvířat (xxx každé pohlaví xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx dlouhodobým xxxxxx, x obou xxxxxxxx xx xx xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx x kmen.
1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví
Xxx xxxxxx hladinu xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 zvířat (10 xxxxx x 10 xxxxx). Samice xxxx xxx nullipary x xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, která xxxxx zabita xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx každého xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x během xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx podávání xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx úrovně xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Používá-li xx vehikulum xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxx skupinám, a xx ve xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxx xxxx počet. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx příznaky toxicity. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx měla vyvolat xxx toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx více xxx 3 úrovně xxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx.
Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx výsledků obtížné.
Xxxxxx-xx se testovaná xxxxx v xxxxxxx, xxxx xx použít xxx konstantní koncentrace (x xxx xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxx xx xx xxx xxx každý xxx xx stejnou xxxx, x dávkování x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx čtrnáctidenních) přizpůsobovat xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx se 90xxxxx xxxx xxxx popsanou xxxxxxx a nevyvolá-li xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx den (xxxx xxxxx vyšší - xxxxxxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, je-li tato xxxxx) xxxxx toxické xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx testování xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx látka x potravě, xx xxxxx zajistit, aby xxx xxxxxxxxxx množství xxx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx látky nebránily xxxxxxxx xxxxxx zvířat.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
X ideálním xxxxxxx xx xxxxxxxx podává xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x týdnu xx dobu 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx určena k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx bez xxxxxxxx, x xxxxxxxxx zotavení x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx a krevního xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx soustavy, somatomotorické xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pitné xxxx) x hmotnost xxxxxx xx zaznamenávají týdně.
Xx třeba zajistit xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x xxxxxxxx kanibalismu, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx zařazení.
Po xxxxxxxx studie se xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata je xxxxx xxxxxxxx vyřadit, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
U všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxx xxxxxx nejlépe x xxxxx zvířat, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávky x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx se oční xxxxx, vyšetří xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx zahrnovat stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx erytrocytů, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx dobu srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx konci xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxx doby xxxxxxxxx se xxxx xxxxx živočišného druhu x xxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x celkové xxxxxxxxx v xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx xxxxxxxxx: lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
(d) Analýza xxxx se nevyžaduje xxxx běžný postup, xxx xxx xx xxxxxxxx očekávané xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx data, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických xxxxxxxxx ještě xxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx použitých xx studii se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx dutiny xxxxxx jejich xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny xxxxx x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx xxxxx brzlíku, xxxxxxxxxx a plíce, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, slinivka xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, děloha, (přídatné xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, (samičí mléčná xxxxx), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx nerv, (oči), xxxxxx xxxx x xxxxxx dření, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx kloubních xxxxx), páteřní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, střed xxxxxx x xxxxxxx, x (xxxxx xxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx xx posuzují v xxxxxxx, xxxxx lze xx xxxxxx postižení xxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx je xxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx vyšetřit cílové xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(d) Xxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxx x xxxxxx x střední xxxxxx xx xxxx histopatologicky xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, protože xx xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx stavu zvířat. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx histopatologická vyšetření xx x xxxxxx xxxxxx skupin xxxxxx xxxxxxxx rutinně, xxxx xx však xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx.
(e) Používá-li xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx provést xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx účinky x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx zvířat xx xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou statistickou xxxxxxx. Xx k xxxx možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx možno obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxx (včetně vehikula, xxxxx se použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x podle dávek,
- úroveň xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj x přežití xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,
- biochemická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx moči),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- statistické vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.27. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxx xxxxxx xx 90 xxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx), x to xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx zvířata xxxxx pozorují, aby xx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx během xxxxxx, x zvířata, xxxxx xxxxxxx do konce xxxxxx, se xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxx podávat x xxxxxxx xxxx může xxx vhodnější podávání x xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Všem xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx po xxxxx xxxx xxxxxx stejnou xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx vehikulum nebo xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx historická xxxx, je xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se jako xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx: xxxx xx přednost xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx i xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx mladých zdravých xxxxxxxxx; v případě xxx xx má x podáváním xxxxx xx xxxx od 3 do 6 xxxxxx a xx xxxxxxx xxx 9 xxxxxx. Provádí-li xx subchronický xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 8 zvířat (4 xxxxxx x 4 xxxxx). Xxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxx xxxx xxx takový, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tři xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Nejvyšší xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx úroveň xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední xxxxxx xxxxx měla xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Ve xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx by x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xx málo xxxxxxx xxxxx x potravě, xx xxxxx zajistit, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx se xxxxxx xxx konstantní xxxxxxxxxxx (x ppm xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) xxxx konstantní xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx xx xxx xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx, x dávkování x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tělesné hmotnosti xxxxxxx.
Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx dlouhodobým xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx použít xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx 90xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx (nebo xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, je-li xxxx xxxxx) xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xx dalšího xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx toxická xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě zvířat.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx je třeba xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx kterém xx xxxxxx a xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
X xxxxxxxx xxxxxxx xx zvířatům xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x týdnu xx xxxx 90 xxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx jiným způsobem xxx v xxxxxxx, xxxxxxxx se xx xxxxxxxxxx xxxxxxx látku 5 dní v xxxxx.
Xxxxxxxxxx zahrnuje (xxx xxxx xx xx xxxxxxx) změny xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Nejméně xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx pečlivá xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx. Umírající xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx, humánně xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx následující vyšetření:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxx studie xxxxxxx x všech xxxxxx, xxx alespoň x xxxxxxxx dávky x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Najdou-li xx xxxx xxxxx, vyšetří xx všechna xxxxxxx.
(x) Xx xxxxxxx xxxxx, a xxxxx xxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx na xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx jater x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx pozorováním způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (přičemž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) x aspartát xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny v xxxx. Mezi další xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické hodnocení, xxxxx stanovení: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx účinků. Před xxxxxxx xxxxxx krve xx xxxxxxxxxx měli xxxxxxxx (xx více xxx 24 xxxxx).
(x) Xxxxxxx moče xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, xxx xxx xx podkladě xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx zevní xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, hrudní a xxxxxx xxxxxx včetně xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx zváží xx xxxxxx xxxxx, xxx xx předešlo xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx x xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx na možná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx postižením, mozek - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, podvěsek xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx xxxxx xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), žlučník, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, tenké, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (stehenní sval), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx kost x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx včetně kloubních xxxxx) x (xxxxxxx xxxxx ve xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx hrudní x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx se posuzují, xxxxx je xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Histopatologické xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xx xx indikováno xx xxxxxxx klinických xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat x xxxxxxxxxx, typy xxxxxxxxx x procentuálně xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx poškození. Výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, potrava,
- xxxxxxxxxxxxxx podmínky,
- xxxxxx dávek (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- úroveň xxx účinku, pokud xx xxx stanovit,
- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x přežití xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx, xxx byly pozorovány xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- spotřeba xxxxxxx a vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky (xxxxxx xxxxxxxx případných analýz xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xx to možné,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Během xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou během xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx před xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx srsti xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx však xxxxxxx xxx 24 xxxxx před xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx opakovat xxxxx týden. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (např. abrazí). Xxx nanášení xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Xx xxxxx xxxx x xxxxx hmotnost xxxxxx xxx rozhodování x velikosti připravované xxxxxx xxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxx x xxxxxx látkami, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx upraveny do xxxxxxxx formy, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx zaručen xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 dnů x týdnu.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xx možno xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, králíky xxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxx zvířecí xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx začátku xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Provádí-li xx subchronický xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx živočišný xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx nejméně 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx před xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině (satelitní xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx každého xxxxxxx) po dobu 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Je xxxxx použít nejméně xxx hladiny xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - kontrolní xxxxxxx x aplikací xxxxxxxx. Xxxx expozice xx xxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx stejnou xxxx. X xxxxxxxxxxx týdenních xxxx čtrnáctidenních xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx stálá xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx množství, xxxxx xxxxxx skupina, xxxxx xx xxxxxxxx nejvyšší xxxxx.
Xxxxxxxx hladina xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx xxx v xxxxx počtu. Xxxxxxxx xxxxxxx dávky xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, má xxxxxxxx xxxxx tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx měla xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 hladiny xxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx dávky a x xxxxxxxxx skupině xx počet xxxxxxx xxx xxx nízký, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Vede-li xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x těžkému xxxxxxxxxx xxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxx dávkové xxxxxxx xxxx xxxx x omezení nebo xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. Došlo-li x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx dokonce xx xxxxxxxx okolností xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx znova x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx předběžné studii xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 nebo vyšší xxxxx, xxxxx odpovídá xxxxx expozici člověka, xxxxx toxické xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x čas, xx kterém xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx studované xxxxx nejlépe 7 xxx x xxxxx xx dobu 90 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx pozorovat xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx. Doba xxxxxxxx činí xxxxxxx 6 hodin xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx nanášet xxxxxxxxxx xx celou xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % xxxxxxx xxxx, x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx může xxx xxxx xxxxxx xxxxx. Látkou xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xx nejtenčí xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx je xx xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx mulového obvazu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx plochu xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx použít x xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nelze xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx expozice se xxxxxxxx zbytky testované xxxxx, xxxxx možno xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx pokožky.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx otravy xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x trvání.
Xxxxxxxxxx x kleci xxxxxxxx změny srsti, xxxx, xxx x xxxxxxx, x také xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a chování. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxxxx týdně x spotřebu xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud možno xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx jako xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx zařazení. Xx skončení xxxxxx xx všechna xxxxxxx, xxxxx přežila, s xxxxxxxx satelitních skupin, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata x zvířata x xxxxxx stresu xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě vyřadit, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx včetně kontrolních xx xxxxx provádějí xxxxxxxxxxx vyšetření:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má provést xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx x na xxxxx xxxxxx xxxxxxx x všech zvířat, xxx alespoň x xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xx zahrnovat stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx transamináza xxxx) a aspartátamino xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx transamináza), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být potřebné xxx úplné toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxx, hormonů, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou být x případě potřeby xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx nejsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx, aby se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - v xxxxxx medula/pons, xxxx xxxxx x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, štítná xxxxx, xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, (xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, slezina, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, přídatné xxxxxxxx orgány, xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx x slepé xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lymfatické xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx žláza), (xxxxxxxx xxxx), periferní xxxx, (xxx), (xxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxx), (xxxx stehenní xxxxxx xxxxxxxxx ploch), (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, střed xxxxxx x bederní) x (xxxxx žlázy). Xxxxx x závorkách se xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx souvisejí x xxxxxxx orgánem.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxx x exponované xxxx, xxxxxx x xxxxx xx třeba provést x xxxxx zvířat xxxxxxx, které byla xxxxxx nejvyšší xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx makroskopická xxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx orgány x ostatních xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Používá-li xx xxxxxxx, plíce xxxxxx xx skupinách x xxxxxx x xxxxxxx dávkou se xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetřovat x xxxxxxxx příznaků xxxxxxx, xxxxxxx to xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Další xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x zvířat xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxx dávkou.
(x) Používá-li se xxxxxxxxx skupiny, musí xx provést histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x orgánech, u xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí být xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na počátku xxxxxx a xxxxx xxxxxx s xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x jednotlivými xxxx lézí. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx použít kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- podmínky pokusu,
- úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, pokud xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx ji xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx zvířat xx xxxxx sledování,
- xxxxx toxických xxxx xxxxxx účinků,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx případných xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
B.29. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX - INHALAČNÍ
(90xxxxx opakovaná inhalační xxxxxxxx - xxxxxx xx hlodavcích)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx pokusných xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x to po 90 xxx. Xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je třeba xxxxxx kontrolní xxxxxxx xxx vehikulum. Xxxxx xxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx uhynou, i xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Nejméně 5 dní před xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx v podmínkách xxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx třeba, přidá xx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx vznikla příslušná xxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx se užije xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx nebo jiná xxxxxxx, musí xxx x nich xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx je xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává se xxxxxxxx potkanům, pokud xxxxxx známy xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx zvířatech z xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx nemá variační xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx test xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se xx použít xxxxxx xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx nejméně 20 xxxxxx (10 samic x 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x nesmí xxx xxxxx. Xxxxx xx zvířata budou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx před koncem xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (satelitní skupinu) 20 zvířat (10 xxxxxx každého xxxxxxx) xx dobu 90 xxx xxxxxxxx koncentraci x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Expoziční koncentrace
Xxxxxxx xx nejméně xxx skupiny s xxxxxx úrovní xxxxxxxxxxx x jedna xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem - xxxxx se xxxxxxx - v xxxxxxxxxxx stejné xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx). S xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx zvířaty x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xx vyvolat xxxxxxx účinky, ale xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady expozice x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolat toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx měl být xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx expozice
Xxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxx 6 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx studované xxxxx. X případě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je možné xxxxxx x jiných xxx xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pro expozici xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení, xxxxx xxxxxxxx proudění xxxxxxx x výměnou xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, aby byl xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx x rovnoměrné xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, xx třeba xx xxxxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxx bránil xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx by v xxxxxx celkový objem xxxxxxxxx zvířat přesáhnout 5 % xxxxxx xxxx. Xx možné xxxxxx inhalační expozice xxxxxx-xxxxxxx, samotné xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx jinými xxxxxxx.
1.2.2.6 Doba pozorování
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně pozorovat xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x zotavení x zaznamenávat toxické xxxxxx. Je třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x čas, xx xxxxxx xx objeví x xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3. Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx exponují xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx v xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx určena x xxxxxxxxxx pozorování, jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx bez xxxxxxxx, x xxxxxxxxx zotavení x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx být 22 xX ± 3 xX. Relativní xxxxxxx xx xxx xxxx 30 % a 70 %, x xxxxxxxx případů, xxx xx není xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx potřebných xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx nastavit xxx, xxx podmínky x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx byly xxxxxx. Xxxxxx xxxx zaručovat, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx bude xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Xxxxxx xxxxxxx vzduchu (xxxxxxxxxxx).
x) Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x dýchací xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx o xxxx xxx ±15 %. U xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx celou dobu xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx tak xxxxxxxx, xxx je xx xxxxxxxxx možné. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxx, aby byla xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Během xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx, xxx xx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx
x) Xxxxx xxxxxxxx x xx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx se zaznamenávají; xxxxx zvíře xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx výskyt, stupeň x xxxxxx. Xxxxxxxxxx x kleci xxxxxxxx xxxxx xxxx, srsti, xxx, sliznic, dýchání x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xx zaznamenávají xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx pravidelnou xxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud xxxxx nedocházelo ke xxxxxxx zvířat xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy tkání xxxx xxxxxxxx zařazení. Xx xxxxxxxx studie xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx zvířata je xxxxx vyřadit a xxxxxx.
U xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření oftalmoskopem xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx xx provést xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x všech zvířat, xxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx x x kontrolních skupin. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx zvířata.
(b) Xx xxxxx pokusu xx má provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, koncentrace hemoglobinu, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx konci pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, chloridy, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x kmene), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx séra (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Mezi xxxxx charakteristiky, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
(x) Analýza moče xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, xxx xxx xx podkladě xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, má xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, všech tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x břišní dutiny x jejich xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx se xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx ve xxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx (mají se xxxxxxx neporušeny, xxxxxx x fixovat vhodným xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxx xx považuje xx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx mozku x xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx orgány), (xxxx), xxxxxxx (je-li xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx a xxxxx střevo, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx žláza), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx nerv, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx hrudní x xxxxxxx). Tkáně x xxxxxxxxx se xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x ostatních xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx exponována xxxxxxxx koncentraci, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx xxxxxxxx všechny xxxxxxxxxxxxx xxxx.
(x) Xx třeba vyšetřit xxxxxx orgány v xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinách.
(x) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetřovat, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx stavu xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx však provést xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx postižení xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx skupiny, xxxxxxx se histopatologické xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx zjištěny xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxx, xxx léze x xxxxxxxxxxxx počet xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x průběhu pokusu xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, původ, podmínky xxxxxxxx, krmení,
- xxxxxxxx xxxxxx: Popis xxxxxxxxxxx zařízení včetně xxxxxxxxxx, typu, rozměrů, xxxxxx vzduchu, systému xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, klimatizačního systému, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, pokud xx používán. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxx stability xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,
- xxxxx x xxxxxxxx xx sestaví xx xxxxxxx x uvedou xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x charakteristikou xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxxxxxx xxxx údaje:
x) xxxxxxxx průtoku vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
b) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
x) povaha vehikula, xxxxx xxxx užito,
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
x) medián velikostí xxxxxx (x xxxxxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx,
- úroveň xxx xxxxxx, pokud xx xxxxx xx xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx sledování,
- xxxxx toxických xxxx xxxxxx účinků,
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- oftalmologické xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- biochemická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.30. XXXXXXXXX XXXXXXXXX TOXICITY
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Testovaná xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dní x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx skupinu, xx větší xxxx xxxxxx zvířat. Xxxxx x xx expozici xxxxxxxxx látce jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx xxxx chována xxx standardních podmínkách xxxxx 5 dní xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx testem xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx možno xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxx). Je třeba xxxxxx zdravé x xxxxx jedince xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxxxxx mláďat. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx činit xxxx než ± 20 % xx xxxxxxx. V případě, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx subchronické xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx stejný xxxx a xxxx x xxxx studiích.
1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx je třeba xxxxxx xxxxxxx 40 xxxxxx (20 xxxxx x 20 xxxxx), xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Samice xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx být xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx druhů zvířat (xxxxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx menší xxxxx xxxxxx, ale xx xxxx xxx 4 xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx dávky x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xx měla vyvolat xxxxx projevy xxxxxxxx xxx nadměrné úmrtnosti. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx voleny xx xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxxx a nízkými xxxxxxx. Výběr dávek xx xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx studií.
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx, xx testovaná látka xx xxxxxxxx v xxxxx vodě nebo x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx x ní xxxx xxxxxxx stálý přístup.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxxxx x každém xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx orální xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ani xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxx aplikace
Xxx xxxxxx způsoby aplikace xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pravděpodobném xxxxxxx xxxxxxxx člověka.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vyvolává xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxx odvozena z xxxxxxxx orálního testu x xxxxxxxx rozsahu xxxxxxx xxxxxxxxxxx, odvozené x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx toxicity.
Xxxxxx xxxxxx
Xxx, kde xx testovaná xxxxx xxxxxxxxx x gastrointestinálního xxxxxx a xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, jimiž xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx přednost xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx důvody. Xxxxxxx xxxxx dostat xxxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxx podanou x xxxxxxx.
Ideálně xx xx xxxx xxxxx podávat xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx vést k xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxxx vyvolat "abstinenční" xxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx ovlivnit výsledky x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, především x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Protože xxxxxxxxx xxxxxx xxxx technicky xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace může xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx situacích.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, takže xxxxx xx obvykle exponováno xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hodin denně xx xxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx sedm xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx zvířat denně xx xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx i xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx exponována xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx a stálou xxxxxxxx xx x xxx, že v xxxxx má zvíře 17 - 18 xxxxx xx ústup xxxxxx xxxxx expozice x xxxxx xxxxxx xxxxxxx během víkendu.
Xxxxx přerušované xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx cílech xxxxxx x na xxxxxx xxxxxxxx, která xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x xxxxx určité xxxxxxxxx obtíže. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx narušeny xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) generace aerosolu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Expoziční xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx přísun xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní x expoziční xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx konstrukci, tak xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx testované látce. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx mírný xxxxxxx a xxx xx xxxxx úniku xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Komory xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) průtok xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx by xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx více než 15 % střední xxxxxxx;
(x) xxxxxxx x xxxxxxx: xxx hlodavce, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 oC x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx by měly xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;
(x) měření xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx měly xxx x respirabilní velikosti xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Vzorky xxxxxxxxx xxxxx se odebírají x dýchací zóny xxxxxx. Vzorek vzduchu xx měl xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x když xxxxxx část aerosolu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx částic xx xxxx xxx prováděna xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx aerosolu, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxx, kterým jsou xxxxxxx exponována.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx látky xx xxxx xxxxx xxxxxxx 12 měsíců.
1.2.3 Xxxxx postupu
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx sledování xx mělo xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Dodatečná xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx mrtvá x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x progrese xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x také xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nemocí, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx neurologických x xxxxxx změn x všech xxxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx toxických xxxxxxxx xxxxxx podezření na xxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxx xx čtyři xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx spotřeby xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx během prvních 13 xxxxx a xxx přibližně xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx ukázaly xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. obsah xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxxxxxxx, celkový xxxxx bílých krvinek, xxxxxxxx destiček xxxx xxxx ukazatele xxxxxxxxxxx) xx měla xxx xxxxxxxxx xx xxx měsíce, xxxx xxxxxx a xxxx x přibližně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx nehlodavců xxxx. xx 10 potkanů xx xxxxxxx x xxxxx skupiny. Tam xxx xx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx od xxxxxxxx potkanů. Xxxxx xx měl xxx xxxxxxx vzorek xxxx xxxxxx xx nehlodavců.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx stav xxxxxx xxxxx studie, měl xx xxx stanoven xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx vzorcích xx zvířat xx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx nebo xxxxx x vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx naznačí xxxxxxx, xxxxxxx se i x xxxxxxx x xxxxxx nejblíže xxxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx možno od xxxxxxxx zvířat x xx stejných intervalech xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx buď xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx na směsném xxxxxx pro xxxxxxx xxxxx dávek a xxxxxxx:
- vzhled xxxx, objem a xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (semi-kvantitativně),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx sedimentu (xxxx- kvantitativně).
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech a xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx biochemická xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx tytéž xxxxxxx ve všech xxxxxxxxxxx. Od nehlodavců xx vedle toho xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. X těchto xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkoušky:
- celková xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx transaminázy1), xxxxxxxx xxxxxx transaminázy2), xxxxx xxxxxxxx transpeptidázy, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- metabolismus xxxxxxx, xxxx. krevní xxxxxxx xx lačno,
- xxxxx na xxxxxx ledvin, xxxx. xxxxx xxxxxxxx v xxxx.
1) nyní xxxxx xxxx sérová xxxxxx aminotransferáza
2) xxxx známá xxxx xxxxxx xxxxxxxx aminotransferáza
1.2.3.5 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx během xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx stavu. Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxxxxxxxxx obraz bílých xxxxxxx. Všechny viditelné xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, je třeba xxxxxxx. Mělo xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx změn x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. To xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx:xxxxx3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx mozkové), xxxxxxxx xxxxxxxxx, štítné xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, ledvin3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, ilea, xxxxxxx střeva, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx uzlin, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx mléčné xxxxx, kůže, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, míchy (xxxxx, xxxxxx a xxxxxxx), xxxxxx x xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, a xxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx měchýře xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx cestou xx xxxxxxxxxx těchto xxxxx; naplnění xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx zásadní pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx speciálních xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, má xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx nosu, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxx-xx provedena xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
3) tyto orgány x 10 xxxxxx xx pohlaví a xx xxxxxxx u xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxx xxxxxx žláza (s xxxxxxxxxxx tělísky) ze xxxxx xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx tumory x xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx x kterémkoli xxxxxx, mají být xxxxxxxx mikroskopicky. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
(a) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx uchovaných xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx:
1. x všech xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx studie,
2. x xxxxx xxxxxx xx skupiny x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxx xx tkáně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx také xx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx,
(c) xxx, xxx výsledky xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx nebo vyvolání xxxxxx, xxxxx by xxxxx xxxxxxxx toxickou xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx popsaným xxxxxxxx,
(d) xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx normálně xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx podmínkách, xx. historické xxxxxxxxx xxxxx, xxxx nezbytné xxx xxxxxxx posouzení xxxxxxxxxxx xxxx pozorovaných x xxxxxx s xxxxxxxxxxx látkou.
2. XXXXX
Xxxxx by xxxx xxx sumarizovány xx xxxxx tabulek, xxxxxxxxxxx xxx každou testovanou xxxxxxx počet zvířat xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxx x procento xxxxxx vykazujících jednotlivé xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxx
Xxxxxx x testu xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, zdroje vzduchu, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx xx xx žádoucí, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx zahrnovat:
(x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením
(x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx)
(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx použito
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx zóně
(x) xxxxxxx velikosti xxxxxx (xx-xx to xxxxxxxxxx)
- dávkové xxxxxx (xxxxxx vehikula, je-li xxxxx) x xxxxxxxxxxx
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx
- neúčinná (dávková) xxxxxx
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx do xxxxx
- popis xxxxxxxxx a jiných xxxxxx
- xxxx, xxx xxx pozorován xxxxx abnormální xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx
- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x tělesné hmotnosti
- xxxxxxxxxxxxxx nálezy
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx
- testy klinické xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxx xxxx)
- xxxxxxx nálezy
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx xxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X XXXXXXXXXX
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx v xxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxxx. Krátce xxxx xxxxxxxxxx datem porodu xxxx xxxxx samice xxxxxxxx x jejich xxxxxx x x xxxxxxx je použita x dalšímu xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx- x fetotoxicity.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxx, xxxxxxx samice, xxxxx xxxxx nebyly xxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Potom xxxx xxxxxxxxxx samci s xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx může xxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Testovaná látka xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Aplikace xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx termínem xxxx xxxxx xxxxxxx hysterektomií x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx orgánů xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx do xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx druhy xxxx xxxxxx, myš, xxxxxx x xxxxxx. Preferovanými xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx všeobecně xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx neměl xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxx by xxx x něj xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx jsou xxxxxxx jednotlivě.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Pro xxxxxx xxxxx xx xxxxx použít xxxxx 20 xxxxxxx potkanů, xxxx xxxx křečků xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Ke sledování xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxxxxxxx xxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxx x xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx do xxxxxx i skupinu, xxxxx bylo xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Je xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vehikula: xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxx xx xxxxxxxxxxx schopnosti. Xx zvířaty v xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) xx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx fyzikálně chemické xxxx biologické xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx nejvyšší xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxx xx xxxxx snížení xxxx, xxx xx xx xxxx xxx 10 % xxxxx. Xxxxx úroveň dávek xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx, že xxxxx x nízkou toxicitou xxx dávce xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx expozice
Xxxxxx xxxx xxxxx xx xxx, xxx xx xxxxxxxxxx vaginální xxxxx x/xxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxx). Doba aplikace xx měla xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxx xx možno xxxxxxxxx 6. až 15. xxx x potkana x myši, 6. xx 14. xxx x xxxxxx x 6. až 18. xxx x xxxxxxx. X případě, xx xx xx xxxxx xxx považován xxx, xxx bylo xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx den. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx končí xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx
Každý xxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxxxxx ztrát xxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx sondou, xxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx samicím xx testovaná látka xxxxxx denně xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx látky xxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx je xxxxx pokračovat x xx xxxxxxxx podávání xxxxx až xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx před xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx období xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Pozorování xxxxxx x xxxxx xx mělo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx změny kůže x xxxxx, očí x xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, autonomního x centrálního xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x chování. Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
Pokud xxxxx x xxxxxxx během xxxx xx konci xxxxxx, xx xxxxx x samic xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx mohly xxx xxxx na xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx smrti xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x její obsah xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx embryí x zárodků a xxxxxxx xxxxx živých xxxxxxx. Obvykle xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx. X potkanů x králíků xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx tělísek. Xx xxxxx xxxxx pohlaví xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x vypočítat průměr. Xx vyjmutí je xxxxx jednotlivě xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xxxx x xxxxxx je xxxxx vyšetřit kosterní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx a x zbytku xxxxxxxx xxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxx abnormit vnitřností x skeletu.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, udávající xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx jakékoliv uznávané xxxxxxxxxxx metody.
3. XXXXXX
3.1. Xxxxxx x xxxxx
Zpráva x xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- podmínky xxxxx,
- dávky (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx každou xxxxx,
- xxxxx xxx účinku (xxxxx xx xxxx možno xxxxxxxx),
- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx potravy,
- xxxxx březosti x údaje x xxxx (xxxxxx historických xxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx/xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx tkání),
- xxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx/xxxxx xxxxx, pohlaví, defekty xxxxxxx x měkkých xxxxx),
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.32. XXXX XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx sedm xxx v xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx větší xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx zvířata xxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxx projevů xxxxxxxx, xxxxxxx vývinu xxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
Xxxxxxx xx chovají v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx skupin.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (hlodavce i xxxxxxxxxx). Používají xx xxxxxx mladá xxxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx by měla xxx započata xx xxxxxxxx xx odstavení xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx by neměl xxx xxxxxx ve xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx studii xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity, xx xxxxx použít xxxxxx xxxx a xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) xxx každou xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina. Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx koncem xxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xx při xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxx xxxxxxx příznaky xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx podstatnějších xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx.
Nejnižší xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx interferovat s xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxx nižší xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
Volba xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx vzít x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx x dispozici.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x každém xxxxxx x exponovanou xxxxxxxx, xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx.
Xx zvláštních xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx xxxx použije-li xx pro xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx, která není xxxxxxxxxx ani vehikulu.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx aplikace xxxx xxxxxx, dermální x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Xxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx traktu x xx-xx xxxxxx xxxxx x cest, xxxxx může xxx xxxxxxxxx člověk, xxxx xx xxxxxxxx orální xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx mohou xxxxxx testovanou xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x pitné xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.
Ideálně xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx dní x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" xxxxxxxx x období xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx. Nicméně, xxxxxxxxx x ohledem xx xxxxxxxxx aspekty, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx cesty xxxxxx x člověka a xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx kožního xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx komplikovanější xxx xxxx způsoby xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace xxxx xxx xxxxxxx alternativou xx specifických situacích.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané lidské xxxxxxxx, xxxxx zvíře xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx xx xxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), nebo v xxxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx denně xx xxxx xxx v xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx krmení xxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxx dne, xxxxxxxx x pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx přerušovanou x xxxxxx xxxxxxxx xx x tom, xx v xxxxx xx xxxxx 17 - 18 hodin xx ústup xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx delším xxxxxxx xxxxx víkendu.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxxx studia x xx xxxxxx expozici, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Nicméně, je xxxxx vzít x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice pro xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx nutnosti xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace par x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx komory
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx komorách, xxxxxxx xxxxxxxxxx zaručuje xxxxxxxxx xxxxx pro nejméně 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní x xxxxxxxxx komory xx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve všech xxxxxxxxx vyjma expozice xxxxxxxxx látce. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx se xxxxx úniku xxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx by xxxx minimalizovat shlukování xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxxxx.
Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(a) Xxxxxx xxxxxxx: rychlost xxxxxxx xxxxxxx komorou xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx kontinuálně.
(x) Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx by xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx kolísat xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 22 ± 2 °C a xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma případů, xxx xx xxxx xxxxxxxxx k rozptýlení xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx by xxxx xxx kontrolovány xxxxxxxx.
(x) Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx xx měly xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx testovací xxxxx. Vzorky xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx být xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx exponováno, x xxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx část aerosolu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx být xxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx stabilitu xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx exponována.
1.2.6 Trvání xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx normální xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx. Test xx měl xxx xxxxxxx v 18 xxxxxxxx x xxxx x křečků x 24 měsících x xxxxxxx. Xxxxxxx, pro xxxxxxx xxxxx xxxxxx x delší xxxxx xxxxxx xxxx. s xxxxxx spontánním xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx měla být 24 xxxxxx xxx xxxx x křečky x 30 měsíců xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx takové xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx přežívajících x nejnižší dávky xxxx v kontrolní xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, ve xxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx rozdíl odpovědi, xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx. Tam, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, pokud xxxxxxx skupiny xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx činily xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xxxxx negativní xxxxxxxx xxxxx, nesmí být xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, kanibalismem xxxx x xxxxxxxx chyb xxxxxxx) x žádné xxxxxxx xxxxx xxx 10 % x xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx nesmí xxx xxxxx než 50 % v 18 xxxxxxxx x xxxx x křečků a x 24 xxxxxxxx x potkanů.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx a xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx kontrola xxxxxx xx nutná, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxxx zvířata xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx by xxxx být xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx pozornost xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: doba objevení, xxxxxxxxxx, rozměry, vzhled x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenává.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x vody xxx, xxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxx) týdně xxxxx prvních 13 xxxxx x pak xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, ledaže by xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx tělesné váhy xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u všech xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx období testu x xxxxx jednou xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxx pozorování xxxxxx v klecích xxxxxx x zhoršeném xxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxxxx studia, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.
Xx 12 měsíců, xx 18 xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx zvířat. Diferenciál xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx, xxxxxxx údaje xxxxxxx xxxx utracením, xxxx xxxxx z xxxxxxxxx patologických změn xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx i x skupiny x xxxxxx nejblíže xxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx provedena x xxxxx zvířat, xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu xxxx xxxx utracena, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, xxxxx by mohly xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření: xxxxx (xxxxxx řezů xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx mozkový, štítná xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, pankreas, xxxxxx, děloha, akcesorní xxxxxxxx xxxxxx, xxxx, xxxxx, žaludek, dvanácterník, xxxxxxx, xxxxx, slepé xxxxxx, xxxxxxx, konečník, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, samičí xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx třech xxxxxxxx (xxxxx, xxxxxxx hrudní x xxxxxxx) x xxx.
Xxxxxxxx plic x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx uchování xxxxxx xxxxx. Naplnění xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx být xxxxxxx celý respirační xxxxx včetně nosní xxxxxx, hltanu x xxxxxx.
1.3.2.3 Histopatologické xxxxxxxxx
(x) Úplná histopatologie xx xxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx během testu, x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx kontrolní x x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx, které xxxx podezřelé jako xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx.
(c) Je-li xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx lézí xxxx skupinou s xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx provede x xxxxx xxxxxx xx xxxxx i x xxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Je-li přežití xx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, měla xx xxx kompletně zkoumána x xxxxxxx x xxxxxxxxx nižší xxxxxx.
(x) Je-li ve xxxxxxx x vysokou xxxxxx doklad o xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx kompletně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx dávkovou xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, ukazujících xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxx zjištěné xxxxx xxxxx, xxxx jejich xxxxxxxxx x počet xxxxxx x tumory xxx utracení. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx použity xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxx
Xxxxxx o xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, dieta,
- xxxxxxxx xxxxx: Xxxxx expozičního xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vycházejícího z xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx boxu, pokud xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, kde xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Údaje x xxxxxxxx: ve xxxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu x xxxxxxxxxx zařízení,
(x) teplotu a xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx děleno xxxxxxx xxxxxxx),
(d) xxxxxx xxxxxxxx, je-li použito,
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně,
(x) xxxxxxx velikosti xxxxxx (xxx kde xx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx užito) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx tumorů xxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxx tumoru,
- xxxx úmrtí xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx přežila xx xx konce,
- xxxxxx toxických účinků xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznak x xxxx xxxxx xxxxx,
- data x spotřebě potravy x xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických nálezů,
- statistické xxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.33. XXXXXXXXXXX XXXX XXXXXXXXX TOXICITY/KARCINOGENITY
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx x karcinogenní xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx expozici.
Xxx xxxxx účel xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx satelitní xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Dávka xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx může xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx použitá při xxxxx karcinogenity. Zvířata x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jak xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx karcinogenní xxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupině xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx toxicitu.
Xxxxxxxxx xxxxx se podává xxxxxxx xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx větší xxxx xxxxxx zvířat. Xxxxx x po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx pozorována xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx tumorů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Zvířata xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nejméně xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělí xx kontrolních a xxxxxxxxxxxx skupin.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx druhem xx potkan. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx použít x další druhy (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx zvířata x xxxxx xxxxxxxxx kmenů xxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx co nejdříve xx odstavení mláďat. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxx zvířat xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx orální xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx druh a xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro xxxxxxxx xx xxxxxxx nejnémě 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) xx xxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx kontrolní skupina. Xxxxxx by měly xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx utrácení zvířat, xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx (skupiny) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxx xxxx tumory, xx každá xxxx xxxxxxxxx 20 xxxxxx xxx xxxxx pohlaví, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx pohlaví.
1.2.3 Dávkové xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (méně xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň by xxxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx růstem, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx známky toxicity. Xxxxxx by neměla xxx xxxxx xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx třeba xxxxxxxx xx středním xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
Při xxxxx dávkových úrovní xx se měly xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.
Pro xxxxx xxxxxxxxx chronické xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxx xxxxxxx. Vysoká xxxxx xxx xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx by xxxx xxxxxxx zřetelné xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx se xxxxxxx obvykle xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x pitné vodě xxxx xxxxxxxxx do xxxxxxx, xxxx xx xxx stále x xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina xx xxxxxxxxx x každém xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, vyjma expozice xxxxxxxxx xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx případech, jako xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x aerosoly xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Způsob xxxxxxxx
Xxx hlavní xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx a inhalační. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx fyzikálních x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx z xxxx, xxxxx xxxx xxx exponován člověk, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx proti tomu xxxxxx důvody. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x tobolce.
Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx sedm xxx v xxxxx, xxxxxxx dávkování pět xxx x týdnu xxxx vést x xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx v xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx ovlivnit výsledky x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx s xxxxxxx na praktické xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xx přijatelné.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx přímo xx kůži xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx u xxxxxxx x xxxx modelový xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Inhalační xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx zde xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx platnou xxxxxxxxxxxx x specifických xxxxxxxxx.
Dlouhodobé xxxxxxxx xxxxxxx napodobují předpokládané xxxxxx expozice, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx po xxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), nebo x návaznosti na xxxxxx expozici v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx dní x xxxxx (kontinuální xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx hodinou pro xxxxxx xxxxxx xxxxx xx stejnou xxxx xxx, xxxxxxxx i xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx a stálou xxxxxxxx je x xxx, že x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx denní xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx expozice xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xx lidské xxxxxxxx, která xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx třeba vzít x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Například xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x krmení xxxxx expozice a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx aerosolu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx komory
Xxxxxxx xx exponují x inhalačních xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx za xxxxxx, xxx byl zajištěn xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x rovnoměrná distribuce xxxxxxxxx atmosféry. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx srovnatelné xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxxx komory xx xxxxxxx udržuje xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx. Komory xx xxxx minimalizovat xxxxxxxxxx testovaných xxxxxx. Xxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx zvířat neměl xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) průtok xxxxxxx: xxxxxxxx průtoku vzduchu xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx neměla xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x rozmezí 22 ± 2 °X x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, kdy xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx testované látky x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx parametry by xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x tekutých xxxx xxxxxxx aerosolů. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx zvíře. Vzorky xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Vzorek xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aerosolu, x xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx často xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx stabilitu xxxxxxxx, a xxxx xxxxx xxxxxxx tak xxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx částic, kterým xxxx zvířata xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx v 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x 24 měsících x potkanů. Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx s delší xxxxx xxxxxx resp. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx tumorů, doba xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 xxxxxx xxx myši a xxxxxx x 30 xxxxxx pro xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx je xxxxxxxx sexuální rozdíl xxxxxxxx, každé pohlaví xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx uhyne xxxxxxxxx jen skupina x xxxxxxx dávkou xx xxxxxxxx toxických xxxxxx, nemusí xx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx testu, xxxxx xxxxxxx skupiny xxxxxxxxxx xxxxxxx projevy, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx ztráty použitelných xxxxx (xxxxxxxxx, kanibalismem xxxx x důsledku xxxx xxxxxxx) x xxxxx skupině xxxxx xxx 10 % x xxxxxxx xx xxxxx skupinách xxxxx xxx xxxxx než 50 % v 18 xxxxxxxx x xxxx x křečků x v 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxxx skupiny 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx každého xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx být v xxxxxx aspoň 12 xxxxxx. U xxxxxx xxxxxx xx mělo xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx patologie, která xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, od xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx postupu
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx pozorování zvířat x klecích xxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx i xxxxxxxxx, oběhového, xxxxxxxxxxx x centrálního xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x chování.
X xxxxxx exponované satelitní xxxxxxx (skupin) xx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx klinické xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx kontrola xxxxxx xx xxxxx, xxx xx zabránilo xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx. Moribundní zvířata xx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx příznaky xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx zaznamenávají u xxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, lokalizace, xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potravy (x xxxx xxx, kde xx testovaná látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x pak xxxxxxxxx xx tříměsíčních xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx nebo změny xxxxxxx váhy xxxxxxx xxxxxxx jiné xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx hmotnosti xx xxxxxxxxxxxxx individuálně x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx týdny po xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Hematologie
Hematologická xxxxxxxxx (např. xxxxx xxxxxxxxxxx, hematokrit, xxxxxxx xxxxx erythrocytů, xxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx srážlivosti) xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx x poté x xxxxxxxxx šestiměsíčních intervalech, x xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx z xxxxx skupiny. Tam xxx xx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx od xxxxx xxxxxxx.
Pokud xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx xxxxx bílých xxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx a x kontrol. Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx naznačí xxxxxxx, xxxxxxxxxxx se xxxxxxx x u xxxxxxx s dávkou xxxxxxxx xxxxx, xxx xx vysoká xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxxxx moči
Xxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx každého pohlaví xx sbírají xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hematologické xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx provedena xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx:
- xxxxxx moči, xxxxx x xxxxxxx u xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, glukóza, ketolátky, xxxxxxx krvácení (semi-kvantitativně),
- mikroskopické vyšetření xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).
1.3.2.3 Biochemické xxxxxxxxx
V xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx závěr jsou xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx xxxxxxxxxxx měření xx všech xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví, xxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx. Od nehlodavců xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx připravena xxxxxx x jsou xxxxxxxxx následující xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxx bázické xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx transaminázy1), glutamát xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), gamma xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxx, např. xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx,
- testy xx xxxxxx xxxxxx, např. xxxxx močoviny x xxxx.
1) nyní xxxxx xxxx sérová xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx známá xxxx xxxxxx aspartát aminotransferáza
1.3.2.4 Makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx pitva xx provede x xxxxx xxxxxx včetně xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx stavu. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx všech xxxxxx xxx diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx viditelné xxxx, xxxxxx nebo léze, xxxx xxxx, které xx xxxxx xxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xxx histopatologické xxxxxxxxx. To se xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx: xxxxx3) (prodloužené xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx žlázy x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, thymu, xxxxxxx a xxxx, xxxxx, xxxxx, slinných xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, jejuna, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, kůže, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), xxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx kloubů, a xxx. Naplnění xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx ke konzervaci xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx včetně xxxx, hltanu x xxxxxx.
Xxxx-xx provedena xxxx xxxxxxxx vyšetření, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx patologovi xxxxxxxx xxxxxxx.
3) Tyto xxxxxx x 10 xxxxxx xx pohlaví x na xxxxxxx xxxxxxxx mají být xxxxxxx.
1.3.2.5 Histopatologie
Xxxxxxxx vyšetření se xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx satelitní xxxxxxx x vysokou xxxxxx x satelitní xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx histologicky xxxxxx xxxxxx všech xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x ze všech xxxxxxxxxxxx xxxxxx části xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx testování karcinogenity:
(x) xxxxx histopatologie xx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx zvířat, která xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x u xxxxx xxxxxx skupiny kontrolní x x nevyšší xxxxxx;
(b) všechny xxxxxx xxxxxxxxx okem x xxxx, xxxxx xxxx podezřelé jako xxxxxx, xx vyšetří xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx;
(c) je-li xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx neoplastických xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx provede x daném xxxxxx xx xxxxx x x dalších xxxxxxxxx;
(x) xx-xx přežití xx skupině x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxxxxx zkoumána x xxxxxxx x xxxxxxxxx nižší xxxxxx;
(x) je-li xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxx o xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx účinků, které xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Údaje xx sumarizují xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx během xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx použity xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx o xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx testu: xxxxx expozičního xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx pro vytváření xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx a způsobu xxxxxxxx zvířat v xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx používá. Dále xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, stability xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Údaje x expozici: ve xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) by xxxx xxxxxxxxx:
(a) rychlost xxxxxx vzduchu x xxxxxxxxxx zařízení,
(b) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky vstupující xx inhalační aparatury xxxxxx objemem vzduchu),
(x) xxxxxx vehikula, xx-xx xxxxxxx,
(e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx kde relevantní),
- xxxxxxx úrovně (xxxxxx vehikula, je-li xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- data xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví, xxxxx a typu xxxxxx,
- xxxx xxxxx během studie xxxx xxx zvířata xxxxxxx až xx xxxxx včetně satelitních xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xxxxxxx x dávky ,
- popis xxxxxxxxx a jiných xxxxxx,
- doba, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x jeho xxxxx xxxxx,
- xxxx x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx,
- testy xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxx xxxx),
- xxxxxx patologicko-anatomické,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx x xxxxxxx použitých xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
X.34. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx podává několika xxxxxxxx samic x xxxxx x odstupňovaných xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxx a xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx úplného spermatogenního xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx u xxxx x 70 dnů x potkanů), xxx xxx zachycen jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx látku xx dobu alespoň xxxx estrálních xxxxx, xxx xxx zachycen xxxxxxxxx nepříznivý xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. V xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx podává xxxxxxxx xxxx pohlaví, x době xxxxxxxxx x kojení xxxxx xxxxxxx.
Xxx inhalační xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxx xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx pokusu x xxxx podmínkách xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx testovanou látku xxxxxxx v xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx způsoby xxxxxx xxxx také xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxx x xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx být o xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx aplikuje 7 xxx v xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx zvířata
1.2.2.1 Xxxxx druhu
Dává xx přednost potkanům xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx zdravá xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx být xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxx x/xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx pohlaví. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx zahájením aplikace.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Cílem xx xxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx na plodnost, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x X generaci, xxxxxx, xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx F1 xx početí xx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx ad xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx těhotné samice xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Použijí xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x jedna xxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vehikulum, xxx zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vehikulum x nejvyšším xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx testovaná xxxxx xxxxxxx příjem x xxxxxxx potravy, xx třeba xxxxxx xxxxxxx další kontrolní xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx výživy.
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má x xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx xx xxxx xxxxxxx jejími xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Střední xxxxx(x) xx měla(y) xxxxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx, xxxxx xx xx xxxx připsat xxxxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxx x rodičů xxx x xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx sondou xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx stanoví xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx podle xxxxx xxxx. X případě xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxx xx základě xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. nebo 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxx test
X xxxxxxx látek x nízkou xxxxxxxxx, xxxxx se xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx toxickým xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx se provádět xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ukáže, xx xxxxxx dávka, xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx studie xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx postupu
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx samcům xxxxxxxxxx xxxxxxxx (P) xxxxx xx věku xxxx xx devíti xxxxx, xx nejméně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx obdobím xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx pokračuje v xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx dalších vrhů x jsou xxx xxxxxxxx x vyšetřeni xxxxx xxxx koncem xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx generace (X) začne xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx aspoň dva xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxx tři xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxx až xx xxxxxxxxx X1 xxxxxxxx. Je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx znalostí o xxxxxxxxxxxx studované xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx a/nebo xxxxxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x jeden samec) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx xxxxx samicím).
X případě 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx otěhotnění anebo xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 těhotenství xx xxxxxxxxx xxxx xxx nálezu vaginální xxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx, u xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx zjistit xxxxx neplodnosti xxxx. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx další xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x osvědčenými xxxxxxx xxxx pohlaví xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukčních xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx cyklu a xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Velikost xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx možnost porodit xxxxxxxx x pečovat x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx odstavení xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx vrhů xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx postup: xxxx 1. a 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx dosáhlo xxxxx 4 samců x 4 xxxxx xx xxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 samců x 3 samice. Xxxx xxxxx než 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé zvíře xx být xxxxxxxxxx xxxxxxx jednou za xxx. Významné xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx příznaky xxxxxxxx xxxxxx mortality xx xxxxxxxxxxxxx. Příjem xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx denně. Xx xxxxxx x x xxxxxxx laktace xx měří příjem xxxxxxx (x xxxx, xxxxx se látka xxxxxx v xxxxx xxxx) xx stejný xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X xxxxxxx xx xxxx první den xxxxxxxx x pak xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx zaznamenávají individuálně xxx každé xxxxxxx xxxxx.
Doba xxxxxxx xx xxxxxx xx xxx 0 těhotenství. Xxxxx vrh xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx se xxxxx x pohlaví xxxxxx, xxxxx mrtvých x xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx mláďata a xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx vyšetření xx možné xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx x celé xxxx se xxxxx xxxx xx xxxxxx, xx 4. a 7. xxx a xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx zvířata xxxxxxx individuálně. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx.
1.3.5 Patologie
1.3.5.1 Xxxxx
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx generace X xxxxxxxxxxxxx vyšetří na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxx reprodukčního systému. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx vyšetří xx defekty.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, děloha, děložní xxxxx, vagina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, prostata, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx P xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx, xx tyto orgány xxxxxx doposud xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, provede xx xxxxxxxxxxxxx vyšetření u xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxx u xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx.
Xxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx x x X xxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx vyšetřují všechny xxxxx xxxxxxxxxxxxx postižené. Xxx xxx bylo xxxxxxx, xxxxxxxxxxx orgány xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se mají xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, počet plodných xxxxx, počet xxxxxxxxx xxxxx, typ xxxx x procento xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx statistickou metodou. Xxxx se použít xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx na xxxxx x pohlaví xxxxxx xxxxxxxxx plodností, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx nebo xxx xxxxxxx xxxxxxx xx ukončení xxxxxx,
- tabulka uvádějící xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx hmotnost xxxxxxx,
- xxxxxxx x xxxxx účinky xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx růst,
- xxx, xxx byly xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxx vývoj,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xx možné,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.35. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip testovací xxxxxx.
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx samic x xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx (X) generace dostávají xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx spermatogenního xxxxx (xxxxxxxxx 56 dnů x xxxx x 70 xxx x xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.
Samice xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx alespoň xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx podává zvířatům xxxx xxxxxxx a xxxxx, x době xxxxxxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx zvířatům filiální xxxxxxxx X1 x xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx, x době xxxxxx a až xx doby odstavení X2 xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx zahájením xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxxxx xx dvou xxxxxx - kontrolní a xxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxxxx xxxxxxx (P) xxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxxx x těch xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx podání xxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx celého xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx, xxxx být x xxxx známo, xx xxxxxx toxické xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxx X xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, kmene, xxxxxxx x xxxx xxxx věku. Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx x obou xxxxxxx. Xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Počet a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupina xxxx mít dostatečný xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx samic x přibližně xxxxxxx xxxxxxxx porodu. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x mateřské xxxxxxx, xxxxxx, růst x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 od početí xx xxxxxxxxxx, x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx F2 xx xx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx libitum. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx přemístí xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx klecí a xx xxx poskytnut xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx alespoň tři xxxxxxxxxx skupiny x xxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx v největším xxxxxxxx xxxxxx. Pokud xxxxxxxxx látka xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx skupiny, spárované xx xx výživy.
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x ideálním xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx biologické xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx mortalitu x xxxxxxxxxx populaci. Xxxxxxx xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx minimální xxxxxxx xxxxxx, které xx xx daly xxxxxxx xxxxxxxxx látce, x nejnižší xxxxx xx xxxxxx vyvolávat xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx u xxxxxx xxx x xxxxxxxxx.
Xxx podání xxxxxx nebo x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx týden xxxxx xxxxx hmotnosti. V xxxxxxx těhotných samic, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. dni xx xxxxxxx těhotenství.
1.2.6 Limitní xxxx
V případě xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx dávka 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx žádným xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, nemusí se xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx studie xxxxx, xx vysoká xxxxx, vyvolávající jasnou xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx generace X začne xx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx, aspoň xx pětidenní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. U xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx týdnů xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx pro myši). Xxxxx xx xxx xxxxxx a vyšetří xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx nebo se xxxxxxxxx v aplikaci x jsou xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vrhů a xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Denní xxxxxxxx samicím rodičovské xxxxxxxx P začne xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxx připouštění. Denní xxxxxxxx xxxxxxxxx pak xx celé xxx xxxxx období xxxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxx xx xx odstavení X1 xxxxxxxxx. Je xxxxxxxxx změna xxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx resp. x xxxxxxxxxxxx.
Aplikace xxxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx jejich xxxxxxxxx.
1.3.2 Postup xxx xxxxxxxxxxx
Xx možno xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx ke xxxxx xxxxxxx).
X případě 1 : 1 xxxxxxxx, samice se xxxxxxx s xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 týdnů. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Den 0 xxxxxxxxxxx je definován xxxx xxx nálezu xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx k xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx X1 xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 11 xxxxx x myší x 13 xxxxx x potkanů. Xxx xxxxxxxxxxx zvířat generace X1 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx z xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx utratí xx xxxxxxx.
Xxxxxxx, x kterých nedojde x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx zjistit xxxxx xxxxxxxxxxx páru. Xx xx xxxxx buď xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx nebo mikroskopickým xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx orgánů xxxx xxxxxxxxxx estrálního xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ponechána xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx xxxxxx se xxxxxxxx všech vrhů xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxx počtu 4 xxxxx x 4 xxxxx na xxx; pokud xx xxxx proveditelné, je xxxxx standardizovat xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 xxxxx x 3 xxxxxx. Vrhy xxxxx xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx X2 xx provede obdobně.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx prodlouženého xxxxxx x všechny xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, xx zaznamenávají. Xxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx xxx před, xxx během doby xxxxxxxxxxx. Během xxxxxxxxx xx xxxxxx kontrolovat xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx a x xxxxxxx laktace xx měří xxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X x X1 xxxxxxx xx xxxx xxxxx den xxxxxxxx x pak týdně. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx zvíře.
Xxxx gestace xx xxxxxx od dne 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx se co xxxxxxxx po porodu xxxxxxx x stanoví xx počty x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx anomálií.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Živá xxxxxxx xx xxxxxxxxx x celé vrhy xx xxxxx xxxx xx porodu, ve 4. x 7. xxx x xxxxx xxxxx xxxxx do xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx zvážena xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx se x xxxxxxxxxxxxx všechny xxxxxxxxxxx x chování x xxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Pitva
Xxxxxxx xxxxxxx zvířata xxxxxxxx X x X1 xx utrácejí, jakmile xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx. Zvířata xxxxxxxx X1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X2 xx xxxxxx xx odstavení.
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx všechna rodičovská xxxxxxx X x X1 xxxxxxxxxxxxx vyšetří xx strukturní xxxxxxxxxxx xxxxx patologické xxxxx, xx xxxxxxxx pozorností x orgánům reprodukčního xxxxxxx. Xxxxxxx zemřelá xxxx umírající se xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, koagulační xxxxxx, prostata, xxxxxxxx x xxxxx cílové xxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxx X x X1 xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx vyšetřeny x xxxxxx mnohadávkových xxxxxxxx, xxxxxxx xx mikroskopické xxxxxxxxx x všech X a F1 xxxxxx kontrolní xxxxxxx x skupiny dostávající xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, x xxxx x zvířat, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx skupin xxxxxx, xx vyšetří i x xxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxx případech xx xxxxxxxxxxxxx vyšetřují všechny xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, reprodukční xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx mikroskopické xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx sumarizují x xxxxxxxxx, xxx je xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, typ xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx změny.
Xxxxxxxxx výsledky mají xxx zpracovány příslušnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Může xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx přijímaná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx by xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx použitých xxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx odezvě x xxxxxxxxxx xx xxxxx x pohlaví xxxxxx xxxxxxxxx plodnosti, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- dobu xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx vrhu, xxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivých mláďat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx x xxxxx účinky na xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx růst,
- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X a X1 xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx je xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.36. XXXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka se xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx podávána xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám experimentálních xxxxxx. Xxxxx resp. xxxx metabolity xxxx xxx xxxxx účelu xxxxxx stanovovány x xxxxxxx tekutinách, xxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxx" formou xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx použito xxxxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx poskytlo xx xxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxx sloučeniny v xxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Zdravá xxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nejméně xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx. Před xxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx skupin. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, pregnantních xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx více xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druzích. Xxxx by se xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx se testovanou xxxxxx. Jestliže xxxx xxx xxxxxxxxx používáni xxxxxxxx, neměla by xxx xxxxxxxxxxx hmotnosti xxxxx xxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx užije nejprve 4 zvířat pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx testování xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx obou xxxxxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxx odpovědi x různých xxxxxxx, xxxxx xx třeba xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (jiných xxx xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx menší xxxxx xxxxxx.
Je-li xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny xxxxxx xx xxxxx brát x úvahu xxx xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx xxxxx časových xxxx, v nichž xxxx xxxxxxxxx prováděno.
Xx-xx studován metabolismus, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx je xxxxxx xxxxxxxx studie.
Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxx počet xxxxx x sledovaných xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxxx časových xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, ale xx skupině xxxxx xxx xxxx xxx 2 xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xx, aby xxx látku resp. xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxx retence, xxxxxxxxxxxx xxxxx a deplece.
1.2.2.3 Xxxxx
V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx podání xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx dávka, xx xxxxx xxxxx být xxxxxxxx změny v xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolává xxxxxxx xxxxxx.
V xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxx dostatečné podání xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxx podmínek xxxx být nezbytné x xxxxxxxx vysoké xxxxx.
1.2.2.4 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xx-xx to xxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx jsou xxxxxxxxx x xxxxxxxxx toxikologických xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxx dobu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxx stanovení relativního xxxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx mohou xxx získány xxxxxxxx xxxxxxxxx x distribuci xxxxx v organismu.
Xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx, je-li xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx sondou xxxx v xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, zvláště xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx sledování
Xxxxxxx xxxxxxx by měla xxx sledována xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx s údaji x jejich xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 Xxxxx postupu
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx.
1.3.1 Xxxxxxxx
Ke xxxxxxxxx rychlosti a xxxxxxx absorpce xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx různé metody x xxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny1), a xx např.:
- xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xx. xxxxxx metabolitů v xxxxxxxxx xxxx. x xxxx, žluči, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx jejích xxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. studie xxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx x kontrolní a xxxxxxxx xxxxxxxxxx skupinou,
- xxxxxxxxx množství xxxxx xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxx vylučovaných ledvinami xxxx testovanou a xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx pod xxxxxxx závislosti xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x plazmě xx xxxx x xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupině.
1) X xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx ta, xx xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx podávána xxxxxxx způsobem, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávky.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
X xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx 2 xxxxxxxx, x xxxxx pro analýzu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx jeden xx xxx:
- xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx získat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x množství xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx zvířat x různých xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po zahájení xxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxxxxxx případech xxxx. Xxxxxxxx testované xxxxx x ev. jejích xxxxxxxxxx se v xxxxxx exkretech stanovuje xxxxxxxxxx xx podání xxxxx, a xx xxx xx xxxxxxxxx 95 % x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxx 7 xxx xx počátku xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx potřebné xxxxxxxx také xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxx v xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxx a schématu xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx odpovídající metabolické xxxxxx xxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx otázky x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx informací x xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx provedení xx vitro xxxxxx.
Xxxxx informace o xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxx účinků látky xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx poklesu xxxxxxxxxxx neproteinových sloučenin xxxxxxxxxxxx - XX xxxxxxx a xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxxxx xxxxx se podle xxxx prováděné xxxxxx xxxxxxxxxx x tabulkách, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x charakteristiky xxxxxxxxxxx xx vztahu x xxxx, xxxxx, xxxxx x xxxxxxx (xxxxx xx xx xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx struktura metabolitů x xxxxxxxx metabolické xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx by xxxxxx x xxxxx měla xxxxxxxxx pokud možno xxxxxxxxxxx údaje:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, jestliže xxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx(x) podání x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx a x ostatní pozorované xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx testované látky x xx. jejích xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, dávky, xxxxxx, xxxx, xxxxx x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x závislosti xx xxxx,
- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x biologickém xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX SLOUČENIN XXXXXXX - AKUTNÍ XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxx vzít x úvahu xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx látek xxxxxxx xxxxxxxxxx typ xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx zjištěn x xxxxxx studiích toxicity. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx fosforu xxxx xxxxxxxxxx zpožděné projevy xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx testovány touto xxxxxxx.
Vyšetřovací testy xx vitro xxxxx xxx použity xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx však není xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx látka xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2 Definice
Xx skupiny xxxxx xxxxxxxxxx x názvu xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx estery, xxxxxxxxxx xxxx anhydridy xxxxxxxx xxxxxxxxxx, fosfonové xxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, nebo xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, pozorovanou x xxxxxxxxx xxxxx této xxxxxxx.
Pozdní neurotoxicita xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx ataxií, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx příznaků, x dále xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x nervové xxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx na pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, že v xxxxxxxxxxxxx podmínkách xx xxxxxx testovaných xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pozdním xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx tri-o-tolylfosfát (XXX 78-30-8, XXXXXX 201-103-5, xxxxxxxx xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx xxxxxxxx fosforečné, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (TOCP).
1.4 Xxxxxxx testovací metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx orálně x xxxxxx dávce slepicím, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx cholinergními xxxxxx. Xxxxxxx se xx xxxx 21 dnů xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x paréza. Biochemické xxxxxxxxx, zvláště xxxxxxxx XXX, xx provádí x slepic xxxxxxx xxxxxxxxx x každé xxxxxxx, xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxx xxxxx. 21 dnů xx xxxxxx látky xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tkání.
1.5 Xxxxx xxxxxx testování
1.5.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění a xxxxxxxxxxxxxx léčby a x xxxxxxxx chůzí xx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx skupiny. Nejméně 5 dní před xxxxxxxxx studie jsou xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx chovu x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx klece xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx slepic a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx podávají xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx vhodném vehikulu, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx rozpustit, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx tobolkách xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X nevodných xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx určeny xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti.
1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx se mladá xxxxxxx kura xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 xx 12 měsíců. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x chovají se xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx volný pohyb.
1.6.1.2 Xxxxx x pohlaví
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx, xxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx prvý x xxxxx xxx xx xxxxxx) x xxxx xxxxxxx 21xxxxx xxxxxxxxxx.
Pozitivní kontrolní xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx skupina x xxxxxxx historie. Má xxx xxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxx se xxxxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx neurotoxicitu, xxx xxxxxxx xxxx určeny xxx xxxxxxxxx x xxx slepice xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx se x xxxxxxxxxxx laboratoři xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx chovu).
1.6.1.3 Xxxxx xxxxx
Xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx příslušného xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx dala xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Určitá xxxxxxxx xx v xxxx xxxxxxxxx studii xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx účinky, xxxxxxx xx atropin xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, o xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx maximální xxxxxxxxx xxxxx testovaných xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (viz xxxxxx B.1 bis). Xxxxxxxxxx xxxxx xxx slepice xxxx xxxx toxikologické informace xxxxx xxx také xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx.
Úroveň xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx studii by xxxx xxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx předběžné xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxx přežití xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx (šest) a xx 21 xxxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxx). Xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx neurotoxickými xxxxxx, xx má použít xxxx ochrana xxxx xxxxxxxx cholinergními účinky.
1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx s dávkou xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti, xx xxxxxxx postupů xxxxxxxxx xxx tuto xxxxxx, xxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x studii x xxxxxxx vyšší xxxxx. Limitní xxxx xx neprovádí, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx se x xxxx naznačuje xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.6.1.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx xx 21 xxx.
1.6.2 Popis xxxxxxx
Xx aplikaci prostředku, xxxxxxxxxxxxx před xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx pozorování
Xxxxxxxxxx xx začít okamžitě xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pozorují xxxxxxxxxx x průběhu prvních xxxx xxx x xxx aspoň jednou xxxxx xx dobu 21 xxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stupnice a xxxxxxxxxxx se paréza. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx nucené motorické xxxxxxxx xxxx např. xxxxxxxxxxx po žebříku, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata x zvířata se xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, humánním xxxxxxxx xxxxxxx a pitvat.
1.6.2.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.6.2.3 Biochemie
Šest xxxxxx náhodně vybraných x xxxxx testované x xxxxxxxxx skupiny x vehikulem a xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx (xx-xx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx látky. Xxx xxxxxxx inhibice XXX xx xxxxxx xxxxx x lumbální xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx XXX. Běžně xx xxxxxxxx xxx slepice x xxxxxxxxx a xxxxx testované skupiny xx 24 xxxxxxxx x další xxx xx 48 xxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolní skupiny xx usmrcují xxxxx xx 24 hodinách. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxx xx x organismu pohybuje xxxxx xxxxxx (hodnotí xx nástup cholinergních xxxxxxxx), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx ze xxx zvířat, x xx xxxx 24 xx 72 xxxxxxxx xx podání xxxxx.
X těchto vzorků xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx také xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx může však xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx jako inhibitoru XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Pitva x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx špatný xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx makroskopické xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x míchy.
1.6.2.5 Histopatologické xxxxxxxxx
Xxxxxxx tkáň x xxxxxxxxxx zvířat (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), prodloužená xxxxx, xxxxx - xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x horní xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx nervů xx xxxxxxx distální xxxx x x. xxxxxxxx (x jeho xxxxx x m. xxxxxxxxxxxxx) x x x. xxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx barvivy xx myelin x xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx metodou (xxxxxxxxx, histopatologie a xxxxx chování) xxxxx xxxxxxxxxx další testování xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx sledování.
Uvádějí xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx zvířata. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx jevících poškození, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x stupeň xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx výskytu, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx x histopatologickými xxxxxx x dalšími xxxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx metody se xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx informace, xxxxx xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- použité xxxxxxx;
- xxxxx a xxxxx xxxxxx;
- xxxxx, podmínky ustájení xxx.;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxxx.
Podmínky xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x homogenitě xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;
- podrobné xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky;
- xxxxxxxx údaje o xxxxxxx a xxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx aplikované xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx vratných nebo xxxxxxxxxx);
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx nálezy;
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx možné.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx s xxxxxxx XXXX TG 418.
B.38. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH XXXXXXXXX XXXXXXX 28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx x vyhodnocení xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx schopnost xxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxx specifický xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx nemůže xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X určitých organických xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek, xxxxx xxxxx xxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nález x xx vitro xxxxxx xxxx xxxx xxxxx považovat xx xxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx 28xxxxx xxxx pozdní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx informace x možném xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx během xxxxxxxx krátkého xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx informace x xxxxxxxxxx odpovědi xx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx odhad xxxxxxx xxxxxxxxx úrovní, xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xx používá pro xxxxxxxxx kritérií xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx neutrální xxxxxxxxx xxxxxx, thioestery xxxx xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo amidofosforečné xxxx xxxxxxxxxxx kyselin xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx jiné xxxxx, které mohou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx počátkem xxxxxx xxxxxxxx, a xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) v xxxxxxx tkáni.
1.3 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx orálně xxxxxxxx po xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxx sledována xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxx 14 xxx xx poslední dávce. Xxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxxxx xxxxxxxx NTE, xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx skupiny 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xx poslední dávce xxxx xxxxxxxxx slepice xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nervových tkání.
1.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx virových xxxxxxxxxx x farmakologické xxxxx x x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx chovu x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxx, xxxxx 7 xxx x týdnu, xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx tobolkami xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx,
jako je xxxx. xxxxxxxxx olej. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx pevných látek x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx nosičů xxxx xxx známy xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx domácího (Xxxxxx xxxxxx domesticus) xx xxxx 8 až 12 xxxxxx. Používají xx xxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx za xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx.
X každé xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxx x xxxx mohlo xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (po xxxxx x xxxxxx xx dvou xxxxxxxx xxxx) x šest xxxxxxx čtrnáctidenní xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.3 Xxxxx dávek
Xxxxxxx xxxxxx se xxxxx x xxxxxxxxxxxx ke xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx a x xxxxxx údajům x toxicitě xxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, nejlépe xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxx xxxxxx xxxxxxx. Dále xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx dávek způsobem, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinku xx xxxxx. Xxxxxxxx dávka xx neměla vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx x xxxxxx xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx x xxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx x příbuznou xxxxxxxxxx není důvod xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx třeba uvažovat x studii x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx u xxxx naznačuje xxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyšší xxxxxx xxxxx.
1.4.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx pozorují xxxxxxx xxxxxx xxxxx po xxxx xxxxxxxx x 14 xxx xx xx, xxxx do xxxxxxxx x do xxxxx xxxxx xxxxx.
1.4.3 Xxxxx xxxxxxx
Testovaná xxxxx se podává xxxx xxx v xxxxx xx 28 xxx.
1.4.3.1 Xxxxxxxxx pozorování
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx po 28 xxx a xxxxxxx 14 xxx po xxxxxxxx aplikace, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx toxicity xx zaznamenávají včetně xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xx xx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx nejméně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx slepice xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx nucené xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx např. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx se usnadnilo xxxxxxxxx minimálních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx, humánním xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.4.3.2 Tělesná xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx těsně xxxx xxxxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Šest slepic xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx skupiny x xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx dnech xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX se xxxxxx mozek a xxxxxxxx mícha. Je xxxxxx vypreparovat také x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx jeho xxxx xx xxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx skupiny xx 24 xxxxxxxx a xxxxx xxx xx 48 hodinách xx xxxxxxxxx podání xxxxx. Xxxxxxxx údaje x xxxxxx studie xxxx xxxxxx studií (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) naznačují, že xx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx aplikaci, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxxxx uvést x xxxxxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx acetylcholinesterázy (XXxX). Xx vivo xxxx xxxx nastat xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx xxxx x xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx XXxX.
1.4.3.4 Xxxxx
Xxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx špatný xxxxxxx stav) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx posouzení stavu xxxxx x míchy.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Nervová xxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx (nepoužitých pro xxxxxxxxxxx xxxxxx) se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tkáně xx xxxxxx in xxxx xx použití xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (řezy xxxxx se provádí x xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx), z xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx distální xxxx x n. xxxxxxxx (x jeho xxxxx x m. gastrocnemius) x z x. xxxxxxxxxxx. Řezy xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx a xxxxx.
Nejprve xx xxxxxxx fixované xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x nejvyšší dávkou. Xxxxx se najdou x zvířat xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx histologické xxxxxxxxx x xx slepicích xx xxxxxx, které xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx metodou (xxxxxxxxx, histopatologie x xxxxx chování) xxxxxxxxx, xxxxx xx neprovádí xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx neurotoxicitu. Neprůkazné xxxx neurčité výsledky xxxxx xxxxxxxxx další xxxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx. Údaje xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální skupinu xxxxxx počet zvířat xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, změny xxxxxxx nebo biochemické xxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx poškození xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxx typ x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Výsledky xxxxxx xx vyhodnotí x xxxxxxxx výskytu, závažnosti x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, biochemickými x histopatologickými xxxxxx x dalšími xxxxxxxxxxxx xxxx u testovaných x xxxxxxxxxxx skupin.
Xxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistické xxxxxx xx xxxxx xxx x době xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx plemeno,
- xxxxx x xxxxx xxxxxx,
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.,
- hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- podrobné xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx aplikace testované xxxxx,
- podrobné xxxxx x xxxxxxx x kvalitě xxxx,
- xxxxxxxxxx vybrané xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx podávaných dávek, xxxxxx xxxxxxxxxx údajů x xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xxxx xxx 24 a 48 xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx bez xxxxxx (XXXXX),
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx klinických xxxxxxxx (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx),
- podrobný xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- podrobný xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x Interpretace
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 419.
X.39. Test xxxxxxxxxxx syntézy XXX x savčích jaterních xxxxxxx in xxxx
1. METODA
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx XXX Xxxxxxxxx (XXX) Xxxx With Xxxxxxxxx Liver Cells Xx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx testu xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (xxxxxxxxxxx DNA xxxxxxxxx, XXX) v savčích xxxxxxxxx buňkách xx xxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4).
Xxxxx xxxx xx xxxx představuje xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx testu xxxxxxxx xxxxxxxxx XXX v xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx reparaci. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx metabolismu xxxxxxxxxxxxx sloučenin; xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx poškození XXX xx vivo.
Xxxxxxxx-xx doklady o xxx, xx xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx tento xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (XXX) xx xxxxxxx xxx, xx xx stanoví xxxxxxxx značených nukleosidů x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx plánovanou (X-xxxx) xxxxxxxx XXX. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (3X-XxX). Xxx xxxxx XXX xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx játra. Xxxx xxxxx než xxxxx se sice xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx metody.
Xxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxx xxxx DNA, xxx xxxx x xxxxx poškození xxxxxxxxxx x nahrazeny. Xxxxx xx xxxxxx UDS xxxxxxx vhodná x xxxxxxx látek indukujících "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx pro látky xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxxx" (1 - 3 xxxx) xx xxxx xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x mutacím x důsledku neopravení, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxx xxxx XXX. Xxxxxx xxxxxxxx XXX neříká xxx x přesnosti xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxx xxxx sice x XXX xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. To, xx XXX xxxx xxxxxxxxxxx x mutagenní aktivitě xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxxxxx jeho potenciální xxxxxxxxxx, protože poskytuje xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxxx x xxxxxxxx: xxx xxxxxxx grain (XXX) xxxxx než xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxx (XXX): xxxxxxxxxxxxx míra UDS xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx testech XXX, xxxxxxxxx xxxx rozdíl xxxx počtem xxx x jádře (XX) x xxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxx (XX): XXX = XX - XX. Xxxxx XXX se xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX): xxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX obsahujícího xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemickou xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 PRINCIP METODY
Xxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx indikuje xxxxxxxxx syntézu XXX xx xxxxxx x xxxxxxxxxx segmentu XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látkou xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx vychází xxxxxxx x inkorporace 3H-TdR xx XXX jaterních xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx nízkým xxxxxx buněk v X-xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxx stanoví xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx technika xxxx tak xxxxxxxx x interferenci x xxxxxxx x X-xxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Příprava
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx používají xxxxxxx, xxx ovšem použít xxxxxxxxx vhodný xxxxx xxxx. Používají xx xxxxx laboratorní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Hmotnostní xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx měly xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx chovu
Xxxxxxxxx xxxxxxxx chovu xxxx xxxxxxx ve Všeobecném xxxxx v části X.
Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Zdraví xxxxx dospělí jedinci xx xxxxxxx rozdělí xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx označí x po dobu xxxxxxxxx pěti xxx xx xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, xxx x kde jsou xxxxx umístěny.
1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx x je-li xx xxxxx, látka xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx mohou podávat xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.3 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx v používaných xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x testovanou xxxxxx chemicky xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx ne xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx údaji x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby kde xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / vehikulum.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Je třeba xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx skupinách xxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xx xxxx indukovat XXX xxx xxxxxxx, xxx lze očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xx středně xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxx, aby xxxx xxxxxx patrné, ale xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zakódovaného xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Doba xxxxxx xxxxxx | Xxxxx | CAS | XXXXXX |
xxxxx x xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 xxxxx) | N-2-fluorenylacetamid (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx xxxxx xxxxxx x jiné xxxxxx xxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxxx cestou, xxx xx podávána xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X každé xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, pak xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxx.
Pokud x době, xxx xx studie xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx s xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx, že mezi xxxxx pohlavími nejsou x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx pohlaví, xxxxxxx na xxxxxxx. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx pohlavně xxxxxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx odpovídajícího xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx xx používají xxx xxxxx xxxxx. Nejvyšší xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx známky xxxxxxxx, xx xxx vyšší xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx představuje xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.
Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx vykazují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx představovat xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x vyhodnocují xx xxxxxx od xxxxxxx. Provádí-li xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici, je xxxxx ji xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xx použití xxxxxxxx živočišného xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxx použijí x hlavní xxxxxx.
Xxxx nejvyšší xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx toxicity x xxxxxxx (xxxx. pyknotická xxxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx test xxx xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxx v jedné xxxxx xxxx xx xxxx dávkách x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné toxické xxxxxx a xxxxxxxx xx xx základě xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkách xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx úplná xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx může xxx xxxxxxx x limitním xxxxx xxxxx dávka.
1.5.5 Aplikace xxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x jiné xxxxxxxxx xxxxx. Intraperitoneální xxxxxxxx xx však xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx přímo, xxxxxx krevním xxxxxx. Xxxxxxxxx objem kapaliny, xxxxx xx dá xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 ml/100 x xxxxxxxxx organismu; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx dráždivých nebo xxxxxxxx látek, jež xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx objem xxx xx všech xxxxxxxxx úrovních stejný x minimalizovala xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Jaterní xxxxx xx x pokusných xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx 12 - 16 xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 hodiny xx xxxxxx xxxxx), ledaže xx po 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxx odběru vzorků, xx-xx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx toxokinetických xxxxx.
Krátkodobé kultury xxxxxxx jaterních xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx buňky xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Jaterní xxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx 50 % životaschopnosti (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx XXX
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx po xxxxxxx dobu (xxxx. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx obsahujícím 3X-XxX. Po inkubaci xx médium odstraní( xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (tzv. "xxxx xxxxx"). Xxxxx xx xxx promyjí, fixují x xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se "cold xxxxx" xxxxxxxx. Sklíčka x preparáty xx xxxxxx xx autoradiografické xxxxxx, xxxxxxxx xx xxx (xxxx. po xxxx jednoho xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxx), xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. X každého xxxxxxx xx připraví xxx xxxx tři xxxxxxxxx.
1.5.8 Xxxxxxx
Mikroskopické xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx dostatečný xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx UDS xxxxxxxxxx. Mikroskopicky xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx úroveň radioaktivního xxxxxxx).
Preparáty xx xxxx xxxxxxxxx zrn xxxxxxxx. Xxxx na xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x každého jedince xx obvykle xxxxxxx 100 xxxxx; pokud xx buněk xxxx xxx 100 xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx být xxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xx nevyhodnocují xxxxx x X-xxxx, xxx xxxxx xxxxx x X-xxxx se xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx metodou xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX do jader x cytoplazmy x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Výsledky xxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx. Mimoto se xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxx každou xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx x xxx xx xxxxxxx xxxxx počet "nuclear xxxxx" (NNG) odečtením xxxxx XX xx xxxxx XX. Xxxxxxxx-xx xx "buňky v xxxxxx", xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami; xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, je třeba xx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
pozitivní | (I) xxxxxxx XXX xxx předem xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx laboratoře | |
nebo | (XX) xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxx | |
negativní | (X) xxxxxxx XXX xx úrovni/pod xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx | |
xxxx | (II) hodnoty XXX xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx než souběžná xxxxxxxx. |
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxx x xxxxx parametry, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx jedinci, vztah xxxxx - xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx statistické xxxxxx; xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx neměla xxx xxx pozitivní xxxxxx xxxxxxxxxxxx faktorem.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nelze xx získaného souboru xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, x xxxx xx xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx XXX xx savčími xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx ukazuje, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx vivo xxxxxxxxx XXX, které xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx DNA in xxxxx. Xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx, že xx xxxxxx experimentálních podmínek xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx poškození DNA, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Je xxxxx xxxx x xxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx širokého xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx tkáň (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x pohlaví xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx xx studie xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx i xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x přípravě testované xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx podávání,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxx dostala xx xxxxxxxx oběhu xxxx xx cílové tkáně,
- případný převod xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) xx faktickou xxxxx (xx/xx hmotnosti/den),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,
- xxxxxxxx schéma xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- metoda xxxxxxxx x kultivace xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx metoda,
- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx hodnotí jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxx hodnoty xxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x "xxx xxxxxxx grains" xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx a skupiny,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx,
- statistické xxxxxxxxx, bylo-li xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx "xxxxx x xxxxxx", byl-li xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx x S-fázi, xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx buněk.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Závěry.
Metoda X.39. xxxx vložena xxxxxxx předpisem č. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.40. XXXXXXX XXXXXX XX KŮŽI
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx alternativních metod (Xxxxxxxx Xxxxxx xxx xxx Xxxxxxxxxx of Xxxxxxxxxxx Methods, ECVAM, Xxxxx Research Centre, Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx testy xx xxxxx na xxxxxxx xxxxxx na kůži: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx transkutánního xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, XXX) a xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx studie XXXXX xxxxxxxxx, že xxx testy xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x modelu xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx X35, x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, X34). Xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx; xxxxx xxxx xxxxx testy xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxx uživatele.
1.2 DEFINICE
Poleptání xxxx: způsobení nevratného xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx.
1.3 REFERENČNÍ XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx však xxxx. 1.5.3.4 a 1.7.2.3.
1.4 XXXXXXX METODY - XXXX XXX XX XXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nanese xx xxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxxxxxxx povrch xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx potkanů xxxxxxxxxx xxxxxxxx způsobem. Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx identifikovány xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x bariérové xxxxxx xxxxxx corneum.Tato xxxxxxxxx xx měří xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporu (XXX) xxx xxxxxxx prahovou xxxxxxx (5xΩ) (4) (5). Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx látky XXX xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (jejichž xxxxxxxx xxx v xxx. (6)) je xxxxx xx zkušebního xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx barviva, aby xx snížil počet xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx se u xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (2) (7).
1.5 XXXXX XXXXXX - XXXX TER XX XXXX XXXXXXX
1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxx přípravu xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23denní) xxxxxxx, Xxxxxx xxxx srovnatelný xxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx a xxxxx plochy. Zvířata xx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx ponoří xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx streptomycinu, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx nebo amfotericinu, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Třetí xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx 3 dní xx použijí. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx být zvířata xxxxxx než 31 xxx.
1.5.2 Příprava xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx usmrtí, sejme xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx a x té se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx. Xxxx se xxxxxxx xxxx konec xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PTFE) xxxxxxx, x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx xxxxx trubice xx xxxxxxxx xxxxxx X-xxxxxxx, kterým xx xxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx trubice x X-xxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx X-xxxxxxx se xxx xxxxxxx pečlivě xx xxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Trubice xx xxxxxx do xxxxxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX), xxx je xxxxxxxxxxx pružinovou xxxxxx (xxx. 2).
1.5.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.3.1 Nanesení xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx x tekutém xxxxx, xxxxxx se na xxxxxxxxxxx povrch uvnitř xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx xx stavu xxxxxx, nanese xx xx terčík v xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx pokryl xxxx xxxxxx epidermis, xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx vody x xxxxxxxxx se jemně xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxx látek xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx 30 xX, xxx se xxxxxxxxx, xxxx rozetřením xxxxxxxx materiálu xx xxxxx prášek. Použijí xx xxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Látka xx xxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (xxx xxx 1.5.3.4) a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx maximálně 30 xX xxx xxxxxx, xxxxx se látka xxxxxxxxx. Odstranění xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx proudem vody xxxxx xxxxxx 30 xX.
1.5.3.2 Měření XXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odpor (XXX) xx xxxx pomocí xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Před xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx napětí xxxx xxxxxxxxx dostatečného xxxxxx 70% ethanolu, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx ethanol xxxxxxxx tak, xx xx xxxxxxx xxxxx, x xxxx se xxxxxxxxx přídavkem tří xxxxxxxxx 154 xX xxxxxxx xxxxxx hořečnatého. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx obě xxxxxx kůže x xxxxx xx odpor x xΩ/xxxxxx (xxx. 2). Rozměry elektrod x délku xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx xxxxxxx (silné) xxxxxxxxx se během xxxxxx xxxxx xxxxxx XXXX trubice xxx, xxx byla xx xxxxxxx síranu xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vždy xxxxxx xxxxx elektrody. Xxxxxx (xxxxx) elektroda xx xxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xx xxx. Xx xxxxx dodržovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx hranou xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx XXXX xxxxxxx (xxx. 1), xxxx vzdálenost xx xxxx na xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 20 kΩ, může xx xxx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx překrývá xxxxxxxxxxx xxxxxx terčíku xxxx. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx tak, xx xx XXXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxx 10 xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx XXX xx akceptována, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx a negativní xxxxxxxx leží x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 M xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
&xxxx;
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx voda
|
10 – 25
|
1.5.3.3 Modifikovaný xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx je xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (detergentů) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xxxx rovná 5 kΩ, lze xx této xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx zjistí, xxx se xxxxxxx x výsledky xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx barviva xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx testovanou látkou xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx na 2 xxxxxx xx 150 μx 10% (x/x) xxxxxxx sulforhodaminu X x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxx se xxx xxxxxx xx xxxx 10 sekund xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx pokojovou xxxxxxx. Xxx xx xx odstranit xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx sejme x XXXX xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx (např. xx 20 xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 ml xxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx 5 minut jemně xxxxxx, aby se xxxxxxxxxx xxxxxxx zbytky xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) barviva. Xxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Pak se xxxxxxx xxxxxx x xxxxx do xxxxxxx x 5 ml 30 % (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx sodného (XXX) x xxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxx noc xxxxxxxx xxx teplotě 60 xX. Xx xxxxxxxx xx terčíky vyjmou x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx dobu 8 xxxxx xxx xxxxxxx 21 oC (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx síla ∼ 175). Vzorek 1 ml supernatantu xx xxx xxxxx 30 % (w/v) xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (x/x) (xx. 1 ml xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx XXX). Xxxxxxx xxxxxxx (OD) xxxxxxx xx xxxx xxx xxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx obsahu xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B x terčíku xx xxxxxxxx x xxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx sulforhodaminu B xxx 565 xx xxxx 8,7 . 104; molekulová xxxxxxxx = 580). Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx kůže xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx za xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx akceptovatelného rozsahu xxxx metody. Xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahu xxxxxxx xx u xxxxxxxxxxx látek při xxxx metodě x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xx/xxxxxx)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X kyselina chlorovodíková
|
40 - 100
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
15 – 35
|
1.5.3.4 Doplňující xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx působení xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx kůže (např. 2 xxxxxx) xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx látek. Ve xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx některých xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx terčíky xxxx xx 2 xxxxxx (2), jakkoliv xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx leptajících x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x rozměry zkušební xxxxxxxxx x experimentálním xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx účinky 5 xΩ xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx získaných xx xxxxxxxxx aparatuře x xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx. Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx použít jiných xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Proto xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx hodnotu xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných z xxxxx, jež xxxx xxxxxxx xxx validační xxxxxx (3).
1.6 XXXXXXX XXXXXXXX METODY - XXXX X XXXXXXX XXXXXX XXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx až 4 hodin xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx materiál xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx "XXX xxxxxxxxx xxxxx" (XXX = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx dobu. Xxxxxxx testu vychází x xxxxxxxxxxx, xx xxxxx způsobující poleptání xxxx xxxx xx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx xxxxx) x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx vrstvách.
1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX S XXXXXXX XXXXXX XXXX
1.7.1 Modely xxxxxx kůže
Modely lidské xxxx mohou xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx kritéria. Model xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx corneum x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx lze xxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxx rezistentní vůči xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, o nichž xx známo, že xxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx, které však xxxxxxxx skrze xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xx definovaných xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx živých xxxxx v modelu xxxx být dostačující x xxxx, aby xx dalo xxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx. Životnost xxxxx (xxxxxx například xxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xx. XX hodnotou) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxx. Podobně x případě látky xxx pozitivní kontrolu (xx xxxxxxxx s xxxxxxx xxx negativní xxxxxxxx) musí xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx model xxxxxxxx mezinárodnímu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxx xxxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx testovaného xxxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx (minimální xxxxxxxx 25 (μ/xx2). Xx-xx xxxxx, nanese xx tak, xxx xxxxxxxxx xxxx, x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx x xxxx xxxxxxxx dobrý xxxx. Pokud je xx xxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxx musí být xxxxxxxxx, xx je xxxxxx pro xxxxxx xxxxxx látek (2). Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx materiál x povrchu xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx životnosti xxxxx
X měření xxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxx jakákoliv xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metoda. Nejčastěji xx xxxxxxx redukce XXX, o xxxxx xxxx xxxxxxxxx že x různých xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx xxxx se xx xxxx 3 xxxxx ponoří xx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx xxx xxxxxxx 20 - 28 xX. Xxxxxxxxx xxxxx formazanový xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx (extrakce xxxxxxxxxxxxx) x koncentrace xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XX xxx xxxxxx xxxxx 545 x 595 nm.
1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx kůže x xxxxxx xxxxxxxx xxxx působení, promývacího xxxxxxx xxx. xxxx xx xxxxxxxxx buněk xxxxxxxx xxxx. Doporučuje xx xxxxxx i xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x látek xxxxxxxxx xx validizační xxxxxx XXXXX (3). Je xxxxxxxx nutné, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx široké xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx v rámci xxxx laboratoře, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx musí metoda xxxxxxxx kritéria vědecké xxxxxxxx xxxxxxxxxx dříve (2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx zveřejněny x xxxxxxx vědeckém xxxxxxxx, xx kterém xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
1.8 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
1.8.1 Xxxx XXX xx xxxx potkana
Hodnoty xxxxxx (x xΩ) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x pro případné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx uvádějí x xxxxxxxxx formě, x xx xxxx xxx xxxxxxx replikace x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x z xxxx xxxxxxxx klasifikace.
1.8.2 Xxxx x xxxxxxx xxxxxx kůže
Hodnoty XX x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx hodnoty x x nich xxxxxxxx klasifikace.
1.9 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
1.9.1 Xxxx TER xx xxxx potkana
Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxx XXX xxx testovaný xxxxxxxx xxxxx než 5 xΩ, xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ x nejedná xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx) xx neutrální xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx organických látek, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX nepřesahující 5 xΩ, xxx provést xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx vyšší xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x 36 % XXx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pozitivní x tedy xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx-xx xxxxx barviva x xxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx leptavé xxxxxx xxxx.
1.9.2 Xxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX pro negativní xxxxxxxx představuje 100% xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Z xxxxxx XX xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx procentuální xxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx nezpůsobují poleptání xxxx, xx xxxx, xxxxx poleptání způsobují, xxxxxxxxxx odlišuje xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx být v xxxxxxxxxx xxxxxx jasně xxxxxxxxx předtím, než xx metoda xxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx validační xxxxxx xx musí xxxxxxxx, že xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Testovaná xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx i xxx ně.
Podmínky xxxxxx
- xxxxxxxx popis použitého xxxxxxx,
- popis a xxxxxxxxxx xxxxx případných xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx TER) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx, a xx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. opakované xxxxxxxxxxx x průměrné xxxxxxx;
- xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx efektů.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxx 2
Xxxxxx X.40. byla xxxxxxx xxxxxxx předpisem č. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX FOTOTOXICITY 3T3 XXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxx toxická xxxxxx (xxxxxx), x xxx xxxxxxx, je-li xxxx xxxxxx vystavena xxxxxxx xxxxxxxxx látkám x xxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xx-xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx celkovém xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx získané x rámci testu xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxx xx stanovení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx ke xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx možné xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx vitro xx stanovení fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx působením xxxxx x světla, xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx sloučeniny, xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x kůži, x xxxxxxxxxx, jež xxxxxx xxxx fotoiritanty xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxx společného projektu XX/XXXXXX x xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx validní alternativa xx vitro xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx vivo. X xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx OECD xxxxxxx xxxxxxxxxx in xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx fototoxicity (4).
Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxx porovnávány x xxxxxxxx účinky xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx xxxx u xxxxxx x lidí x xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xx xxx uvedené xxxxxx xxxxxxxxxx predikční xxxxxxxxxx. Xxxx není xxxxxxx k tomu, xxx xxxxxxxxxxx jiné xxxxxxxxxx xxxxxx, jež xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxx vzniknout, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, x xxxx řada xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxx fototoxicity 3X3 XXX in vitro xxxxxxxxx. Test není xxxxxx uspořádán xxx, xxx xxxxxxxxx hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: xxxxxxxxx ultrafialového (XX) xx viditelného xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx; xxxxxx xx X/x2 nebo x XX/xx2.
Xxxxx světla: xxxxxxxx (= xxxxxxxxx x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (UV) xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxx (= X x x) xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. X/x2 nebo X/xx2.
Xxxxx xxxxxxxx délek xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: podle xxxxxxxxxx XXX (Commission Xxxxxxxxxxxxx xx X'Xxxxxxxxx) xx xxxxxxx označení XXX (315 - 400 xx), XXX (280 - 315 nm) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx xx i xxxx vymezení: za xxxxxxx xxxx xxxxx XXX x UVB xx xxxxx xxxxxxxx 320 xx x XXX xx někdy xxxx xx XX-X1 x UV-A2 s xxxxxxx xxxxxx u 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: parametr, xxxxxx xx xxxx celková xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx živou xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxx), jež xxxxx xxxxxxxxx měřených xxxxx testem x xxxx xxxxxxxxxx koreluje x xxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx (vitalitou) xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: životaschopnost buněk xxxxxxxxx v xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolami (xxxxxxxxxxxx), xxxxx prošly xxxxx procedurou xxxxx (xxx + XX xxxx - XX), xxxxx bez působení xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxxxxxxx návodu xxx xxxx xx xxxxx x transformaci xxxxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro x xxxxxxxx fotoxického xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx XXX x XXX.
XXX (xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): koeficient představující xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx cytotoxických koncentrací (XX50) xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) x v xxxxxxxxxxx (+UV) necytotoxického XXX/XXX xxxxxxx.
XXX (xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx): nová míra xxxxxxxx x matematické xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+UV) necytotoxického XXX/XXX ozáření.
Fototoxicita: xxxxxx xxxxxxx xxxxxx (odezva), xxxxx xxxxxx po xxxx xxxxxxxx kůže xxxxxx látce x xxxxxxxx xxxxxxxx kůže xxxxxx, nebo xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx systémovém xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx xxxxx "xxxxxxxxxxxx", xxxxxxxx xx pouze xxxx fototoxických xxxxxx, x nimž dochází x kůži xxxx, xx xx xx xxxxxx (topicky xxxx xxxxxx xxxxxxx) xxxxxx xxxxx. Tyto fototoxické xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (reakce xxxxxxx xxxx xxx nadměrném xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx imunologická xxxxxxxxxx, která xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxx xx zapotřebí xxxxxxxxxxxx xx dvoutýdenní indukční xxxxxxx k tomu, xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: genotoxická xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxx buňky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XX/XXX xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxx: karcinogenita xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx UV zářením xxxxxxxx xxxxxx, mluvíme x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx jako xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx testu xx fototoxicitu 3T3 XXX doporučuje xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx byly xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (3) (13).
1.4 XXXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxxxx účinky xxxx xxxxxxxxxx u xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), xxxxxxx xxxxxxx společným xxxxx xx xx, že xxxxxx xxxxxxxxxx světelnou xxxxxxx x oblasti xxxxxxxxxx záření. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx se xxxxxxx, než se xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx návodu, xxxx by se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x UV/VIS xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx zkušební xxxxxx XXXX x. 101). Xxxxx xx xxxxxxx extinkční/absorpční xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx-1 x xx-1, xxxx xxxxx fotoreaktivní potenciál x xxxx xxxxx xx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx testem na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxxxx).
1.5 XXXXXXX METODY
Byly xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx světla (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx vyústit xx fototoxickou reakci (7), xxxxxxx všechny xxxxx k poškození xxxxx. Xxxxx je xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in vitro xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x přítomnosti x xxxxxxxxxxxxx necytotoxické dávky XXX/XXX záření. Cytotoxicita xx xxx xxxxx xxxxx vyjadřuje jako xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx červeně (xxxxxxx xxx, XX) (9), 24 xxxxx xx xxxxxxxx testované xxxxx x ozařování.
Buňky Balb/c 3X3 se kultivují xx dobu 24 xxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx v jedné xxxxxx (xxxxxxxxx). Pro xxxxxx testovanou xxxxx xx preinkubují xxx xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx x xxxxxx x osmi xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx. Xxxxx x obou xxxxxxxx xx xxx vystaví xxxxxxxxxxxxxxx UVA/VIS xxxxxx x xxxxx 5 X/xx2 XXX (+XX xxxxxxxxxx), druhá xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx (-UV xxxxxxxxxx). X xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx médiem xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxx 24 xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx inkorporace xxxxxxxxx červeně (xxxxxxx xxx xxxxxx, XXX) xx xxxx 3 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Pro každou x osmi xxxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, vyjádřená xxxx xxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x přítomnosti (+XX) a x xxxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx XX50, xx. xx xxxxxxxxxxx inhibující xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x 50 % x porovnání x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
1.6 KRITÉRIA XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxx vůči xxxxxx XXX, xxxxxxxxxx údaje: x buněk xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxx XXX. Xxxxx xx nasadí x xxxxxxx, která xx xxxxxxx xxx testu xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx vitro, příští xxx xx xxxxxxx xxxxxx XXX x xxxxx 1 - 9 X/xx2 x xxxxx xxx xx xxxxxx NRU xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk. Xxxxx xxxxxxx kritéria xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx životaschopnost xx ozáření xxxxxx XXX záření 5 X/xx2 xxxx xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x temnu. Xxx nejvyšší xxxxx XXX záření 9 X/xx2 xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx nižší než 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxxx kontrola xx provádí xxxxxx xx každé xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx kontroly vůči xxxxxx XXX, běžný xxxx: xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx x Xxxxxxx vyváženém xxxxxx roztoku [Xxxx´x xxxxxxxx xxxx solution, XXXX] x 1 % xxxxxxxx dimethylsulfoxidu (XXXX) xxxx ethanolu (XxXX) nebo xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+UVA) životaschopnost xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxx (-UVA).
Životaschopnost negativních xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (XX540 XXX) xxxxxx x XX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, zda xxxxx 1 x 104 xxxxx nasazených v xxxxx jamce xxxxxx xxxxx dvou dnů xxxxx x normální xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Test xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx průměrná xxxxxxx XX540 XXX u xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxx xxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx xx xxxxx provést xxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx látkou. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx EU/COLIPA xxx xxxx látka xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx chlorpromazin (CPZ); xxxxx xx xxxx xxxxx doporučuje. Pro XXX testovaný xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx vitro xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: XXX xxxxxxx (+XXX): XX50 = 0,1 - 2,0 μx/xx, CPZ xxxxxxxxx (-XXX): EC50 = 7,0 - 90,0 μx/xx. Fotoiritační xxxxxx (XXX), xxx. xxxxx hodnoty EC50, xx být xxxxxxxxx 6.
Xxxxx XXX xx xxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xxxx použít x jiné známé xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx skupiny xxxx xxxxxxxxxxxx testované (xxxxxxxxx) látky. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx rozsahy xxxxxx XX50 x XXX xxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XXXXX METODY
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Buňky
Při xxxxxxxxx xxxxxx byla xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxx/x 3X3 xxxx 31, x xx xxx x XXXX nebo x ECACC; xx xx proto xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx protokolu xx xxxx s xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx kultivační podmínky xxxxxx xxxxx jejich xxxxxxxxxxxx potřeb; je xxxx xxxxx prokázat, xx xxxx stejně xxxxxx.
X xxxxx je xxxxx pravidelně xxxxxxxxxxx, xx nejsou xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxx xxx x xxxxxxx, že xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx citlivost buněk xxxx XXX xxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx používat buňky Xxxx/x 3X3 z xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, pokud možno xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx xxxxx Balb/c 3X3 xxxx UVA xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx postupem kontroly xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx rutinní xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. X případě xxxxx Xxxx/x 3T3 xx xxxxx x XXXX xxxxxxxxx 10 % xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 xX xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x o xxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx 37 xX / 7,5 % XX2. Xx xxxxxxxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx cyklus x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozmezí xxx xxxx buňky xxxx. xxxxxxxx xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nasadí x xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx se xxxx použitím x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x kultivačním xxxxx x takové xxxxxxx, aby xx xxxxx xxxxx (xx. xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 48 xxxxx po nasazení) xxxxxxx xx xxxxxxxxxx (xx splynutí x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx). V případě xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x 96 jamkami xx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 x 104 xxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx testovanou xxxxx xx buňky xxxxxxxx identicky xx xxx xxxxxxxx s 96 xxxxxxx, xxxxx xxx procházejí xxxxx xxxxxxxx xx identických xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxx doby, xxx xx xxxxx z xxxxxxxx ozařována (+UVA/VIS) x xxxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxx (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Metabolická aktivace
Zatímco xxx všech xxxxxxx xx vitro xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx použití xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx žádná xxxxx, xxx xx x xxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xx xxxxx, bylo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxx xx nutné, xxx xx xxxxxxx odůvodněné, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivačním xxxxxxxx.
1.7.1.5 Testovaná xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxxx xxxxxxx připravena, xxxxxx xxxxx o xxxx xxxxxxxxx prokazují, xx xx xx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxxxxxxxxxx, xx xx xxxxx k fotodegradaci, xxxx se příprava xxxxxxxx xxx červeným xxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (XXXX) xxxx xx fyziologickém xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx saline, XXX), xxxxx - aby xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx - xxxxx xxxxxxxxx xxxxx proteinové xxxxxx xxx barevné xxxxxxxxxx xX, pohlcující xxxxxx.
Xxxxx xx testovaná xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx je xxxxxxxxxx konečná xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx roztokem. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx x konstantním xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, xx. xx xxxxx koncentracích xxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx kontrolách.
Jako xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxx (XxXX). Xxxxxx xxxxx xxx x další xxxxxxxxxxxx s nízkou xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vlastnosti, xxxx je případná xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, potlačení fototoxického xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx se napomohlo xxxxxxxxxxx, xx se xxxxxx xxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 oC.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX světlem / příprava
Světelný xxxxx: xxxxx správného světelného xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx klíčovým xxxxxxxx. Xxxxxx x XXX x xx xxxxxxxxx oblasti xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx xxxxxx XXX xx x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx přímo vysoce xxxxxxxxxxx, přičemž xxxx xxxxxxxxxxxx se při xxxxxxxx xx 313 xx x 280 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx kritéria xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx požadavek, xxx emitoval xxxxxx xxxxx, xxx testovaná xxxxx xxxxxxxxx, a xxx byla xxxxxxxx xxxxx (dosažitelná xx xxxxxxxxxx xxxx) xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx látek. Xxxx xxxxxxx xxx použité xxxxxx délky x xxxxx nepatřičně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se pokládají xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx simuluje xxxxxxxx xxxxxx. Jako xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxx (vysokotlaké) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx - xx mají xx xxxxxx, že xxxxxxxx xxxx tepla x xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxx imitují xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXX, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, kde xx xxxxxx UVB xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XXX:XXX ∼ 2 : 1). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx filtrovaného záření xxxxxxxxx simulátoru použitého xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU in xxxxx xx v xxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: intenzita xxxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx fototoxicity xxxxxxxxxxx xxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx, xxxxx xxxx xxx kalibrován xxx daný xxxxx. Xxxxxxxxx UV-metru xx xxxxx kontrolovat, x xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, referenční XX-xxxx téhož xxxx x kalibrace. Xxxxxxx xx, xxxx se x delších xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru xxxxxx spektroradiometru; xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx obsluhu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx validační studii xxxx zjištěno, xx xxxxx UVA xxxxxx 5 X/xx2 xx xxx buňky Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xx xxxx xxxxx dosáhlo xxxxx 50 minut, xxxx xxx xxxxxxxxx nastavena xx 1,666 xX/xx2. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx linie nebo xxxx zdroj světla, xxxx xx xxxxx xxxxxx XXX xxxxxxx xxx, aby xxxxx xxxxxxxxxxxxx x byla xxxxxxxxxx x průkazu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Doba xxxxxxxx expozice xx xxxxxxxxxx podle xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxx xxxxxx (J/cm2) x 100
|
&xxxx; |
| &xxxx;
x (xxx) =
|
________________________
|
(1 X = 1 X x)
|
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxxx (mW/mc2) x 60
|
&xxxx; |
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 μg/ml, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx zvyšuje četnost xxxxxxx pozitivních xxxxxxxx (13). Xxxxxxx xX xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx (oblast xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (+XXX) x xxx něj (-UVA) xx xxxxx stanovit x xxxxx předběžných xxxxxxxxxxx. Rozsah x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx zvolí tak, xxx xxxxxx závislosti xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx podloženy xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ředění).
1.7.3 Xxxxx xxxxxxx
1.7.3.1 Xxxxx xxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx 1 x 105 xxxxx/xx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx destičky xxx tkáňové xxxxxxx xx odpipetuje po 100 μl xxxxxxxxx xxxxx (= xxxxx xxxxx), do xxxxxxxxx xxxxx xx dávkuje xx 100 μx xxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxx 1 x 105 buněk/ml (= 1 x 104 xxxxx na jamku). Xxx xxxxxx testovanou xxxxx se xxxxxxxx xxx destičky - xxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxx (-UVA), xxxxx xxx stanovení fotocytotoxicity (+XXX).
Xxxxx xx inkubují xx dobu 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX), xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Tato xxxxxxxxx doba umožňuje xxxxxxxxxx a adherenci xxxxx x jejich xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx dvakrát objemem 150 μx XXXX/XXX xx xxxxxx xxxxx. Xxxxx se 100 μx XXXX/XXX obsahujícího xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx koncentraci xxxx xxxxx rozpouštědlo (negativní xxxxxxxx). Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxxxx látkou xx xxxxxxxx x xxxxx po xxxx 60 minut (7,5 % XX2, 37 xX).
Xxxx xxxxx x XXX (+XXX) xx xxxxxxx tak, že xx xxxxx xx xxxxxxxx teploty xxxxxxx xx xxxx 50 xxxxx skrz xxxxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx xxxxxxx XXX x intenzitě 1,7 xX/xx2 (= xxxxx 5 / xx2). Xxx nedocházelo ke xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-XXX) se xx xxxx 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx UVA) xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x temném xxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX. Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx noc (18 - 22 xxxxx) xx xxxxxxxx (7,5 % CO2, 37 oC).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx se xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x fázovým kontrastem. xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Tato xxxxxxxx xx doporučuje, xxx xx eliminovaly xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx tyto xxxxxxx nepoužijí.
Test xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (NR)
Buňky xx promyjí xxxxxxx 150 μx předehřátého XXXX/XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μx média x NR x xxxxxxxx xx xxx 37 oC xx xxxxxxxx xxxxxxxxx se 7,5 % XX2 xx xxxx 3 xxxxx.
Xx xxxxxxxx se xxxxxx x XX xxxxxxxx x buňky xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX, xxxx se xxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx (je xxxx xxxxx xxxxxxxx zcentrifugovat x xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx 150 μx roztoku xx xxxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ethanol/kyselina xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx destičky xx xx xxxx 10 xxxxx xxxxxx xxxxxx xx třepačce, xxxxx xx XX x xxxxx nevyextrahuje x xxxxxxxxx xx homogenní xxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx hustota xxxxxxxx XX xxx 540 xx za xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx srovnávacího xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. XXXXX) xxx xxxxx analýzu.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXX A XXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxx aplikaci XXX/XXX xxxxxx a xxx xx. Je-li xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx tak, aby xx experimntální údaje xxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μl/ml x xxxxxxxxxxx ve xxx (-XXX) xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx (+XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx dojít x xxxx, xx se xxxxxxxxxxxx rozsahy v xxxx částech xxxxxxxxxxx xxxxx muset řádově xxxxx, aby xxx xxxxxx xxxxxxxxx adekvátní xxxxxxx xxx. Xxxxx xxxx cytotoxicita xxxxxxxx x xxxxx z xxxx částí experimentu (xxx xxx -UVA, xxx při +UVA), xxxxxxxxx testování x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx dávkami xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx opakovat.
Považuje-li xx xxxxxxxxx testu xx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx pozměnit xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Klíčovou xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx látky, xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx variace těchto xxxxxxxx (spolurozpouštědlo, triturace, xxxxxxxxxx). Lze xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. U látek, xxx xxxx xx xxxx nestálé, xxxx xxx xxxxxxxx vliv xxxxxxxx xxxx.
1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx xx xx xxxxx, stanoví xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx x 50 % xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx NR (XX50). Xx xxx xxxxxx xxx, že xx xx xxxx koncentrace - xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) nebo xx xxxxxxx jiná xxxxxx xxxxxx proložení (14). Xxx xx xxxxxxx EC50 použije xxx xxxxx výpočty, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. K xxxxxxx hodnoty EC50 xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx případě xx doporučuje xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxx x: log, osa x: xxxxxx), xxxxxxx xx této transformaci xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx xxxxx lineární.
1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (PREDIKČNÍ MODELY)
1.10.1 Xxxxxxxxx xxxxx, verze 1: xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX)
Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx koncentrace - odezva xxx xx přítomnosti (+XXX), xxx xx xxxxxxxxxxxxx (-XXX) xxxxxx, se xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxx podle xxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (-XX)
|
| &xxxx;
(x) XXX =
|
____________
|
|
EC50 (+XX)
|
XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx xxxxx fototoxický xxxxxxxxx, xxxxxx XXX ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx předpovídá.
Je-li látka xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX, xxxxxx při -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx XXX xxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xx látka xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx případě xx xx vypočítat xxx. "&xx; XXX", xxxx xx test cytotoxicity (-XX) provede xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxx) a xxxx hodnota xx xxxxxx xx xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) &xx; PIF =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+UV)
|
Pokud xx xx xxxxxxxxx xxxxx "&xx; XXX", xxx xxxxx hodnota &xx; 1 předpovídá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxx EC50 (-XX), xxx EC50 (+XX), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx nejvyšší xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, je xx xxxxxxxx toho, že xxxxx xxxx žádný xxxxxxxxxxx potenciál. X xxxxxxx případě xx xxxxxxx formální "PIF = *1", čímž xx charakterizuje výsledek
|
Cmax (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) XXX = *1 =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (+XX)
|
Xxxxx xx xx xxxxxx xxxxx hodnota "PIF = *1", xxxxxxxxxx xx, že xxxx xxxxxxxx žádný fototoxický xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx (b) x (x) je xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzít xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx, jichž xx xxx xxxxx xxxxxxx.
1.10.2 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 2: xxxxxxx fotoefekt (XXX)
Xx xxxxx také xxxxxx xxxxxxx verze xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu, xxxxxxxxxxxxx xx použití dat x validační xxxxxx XX/XXXXXX (15) a xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx XX xxxxxx (13). V xxxxx modelu xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XXX x těch xxxxxxxxx, kde nelze xxxxxx xxxxxxx XX50. X tomto xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxxx" (MPE) xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx. Xxx aplikaci xxxxxx XXX byl xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, který xxx xxxxxxx xxxxxx.
1.11 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx (XXX ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 10 μg/ml, xx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx také xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx pouze xxx xxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci (100 (x/xx), xxxx xxx xxxxxxxxx nebezpečnosti xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx látky nejspíše xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx mohou spadat xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx látky x xxxx, xxxx údaje x xxxxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu, xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx kůže xx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx fototoxicity 3X3 XXX in vitro (XXX &xx; 5 xxxx XXX &xx; 0,1) xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx buňky v xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx koncentraci 100 μx/xx, xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx, že xxxxx xxxx xxxxx fototoxický xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx xx xx považovat xx xxxxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrační závislosti xxxxxxx reakce (XX50 + XX x XX50 - UV), xx interpretace xxx xxxxxx. Xxxxxxx tomu xxxxx nebyla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (+UV xxx -XX) x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx nedalo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xx možno xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xx xx xxxxx xxxxxx x xxxx xx xx xxxxxxxx x xxxxx, potvrzujícím xxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx kůže xx vitro xxxx xxxxxx xxxx xx xxxx xxxx in xxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx údaje x xxxxx CAS, xx-xx známo,
- fyzikální xxxxxx a čistota,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti, xxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx důležité,
- xxxxxxxxx x fotostabilita, jsou-li xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxx rozpouštědla,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx (EBSS xxxx XXX).
Xxxxx:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx pasáže, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jež xx x xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3T NRU xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxx xxxx ovlivněním x xx něm:
- xxx a složení xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx (koncentrace XX2, xxxxxxx, vlhkost),
- xxxx xxxxxxxx (zpracování xxxx xx a xx xx).
Xxxxxxxx pokusu (x) - ovlivnění látkou:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx použijí v xxxxxxxxxxx ozařování XX/XXX xxxxxxx x xxx xxx,
- x případě xxxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx x absence xxxxxxxxxxxx zdůvodnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu (x) - xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx daného světelného xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx světelného xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx použitého xxxxxx (xxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x podrobnosti x xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx testovaného xxxxxxx,
- xxxxxxxxx XXX (x x X/xx2) při xxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx UV/VIS záření,
- xxxxx xxxxxx XXX (xxxxxxxxx x čas) x J/cm2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx kultur xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (d) - xxxx XXX:
- xxxxxxx média x XX,
- doba inkubace x NR,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxxxxx NR (xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx délka, při xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx-xx xxxxxxx,
- složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), xxxxx byl xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, vyjádřená x procentech xxxx xxxxxxxx životaschopnosti kontrol,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx νs relativní xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) získané xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +XXX x -XXX,
- xxxxxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 (+XXX) a EC50 (-XXX),
- porovnání xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx UV/VIS xxxxxxx - xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) xxxx středního xxxxxxxxxx (XXX),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx životaschopnost (xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (b) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-XXX) x XXX látky xxxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx údaje xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx: hodnoty EC50 (+XXX), XX50 (-XXX) x PIF, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx X.41. xxxx xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Sb. x účinností od 22.6.2001
Xxxxxxxxx
Xxxxxx předpis x. 251/98 Xx. nabyl xxxxxxxxx dnem 1.1.1999.
Ve xxxxx tohoto xxxxxxxx xxxxxxxx jsou podchyceny xxxxx x doplnění xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x.:
208/2001 Sb., xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx XX x. 251/98 Xx., xxxxxx se xxxxxxx metody pro xxxxxxxxxx toxicity chemických xxxxx a xxxxxxxxx - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x příští xxxxxxxxxxx
x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxx předpis x. 251/98 Sb. byl xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 443/2004 Sb. s účinností xx 1.8.2004.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx aktualizováno, xxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx uvedeného xxxxxxxx xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 písm. x) xx x) xxxxxx č. 157/1998 Xx., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x o xxxxx některých xxxxxxx xxxxxx.
2) Xxxxx č. 246/1992 Sb., xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx znění xxxxxx x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Xx. x č. 30/1998 Xx.
3) Směrnice Xxxxxxxxxx xxx hospodářskou xxxxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx 4 - xxxx xx xxxxxx (XXXX Guidelines xxx Xxxxxxx xx Chemicals. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).