Právní předpis byl sestaven k datu 22.06.2001.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
XXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
ze xxx 16. xxxxx 1998,
xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §4 odst. 1 xxxx. x) zákona x. 157/1998 Xx., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x o xxxxx xxxxxxxxx dalších zákonů:
§1
Xxxx xxxxxxxx stanoví xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, toxických, xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, senzibilizujících, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx reprodukci (xxxx xxx "xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a přípravků").1)
§2
(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx zkouškami xxxxxxxxxxx xxxxxxxx uvedenými x příloze xxxx xxxxxxxx.
(2) Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků lze xxxxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxx citlivé, xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, xxxxxxxxxx xxxx metody xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx2) x xxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx spolupráci x xxxxxx (XXXX).3)
§3
Tato xxxxxxxx nabývá xxxxxxxxx xxxx 1. ledna 1999.
Ministr:
XXXx. David, XXx. x. r.
Xxxxxxx x xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX
1. ZÁKLADNÍ XXXXX
1.1 XXXXXX XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxxxxxx účinky, xxxxx xx objeví xxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx 14 dní) xx xxxxxx jedné xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 XXXXXX XXXXXXXX
xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx dostačující pro xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xx být xxxxxx, že xx xxxxxxx podávané xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx toxických xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx x xxxxx.
1.3 DÁVKA
xx xxxxxxxx podávané xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx vyjádřena xxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx), xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (díly na xxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx).
1.4 XXXXXXXXXXXXXX DÁVKA
xx xxxxxxxx xx xxxx pevných dávkových xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) související x xxxxxxx látkou.
1.5 XXXXXXXXX
xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx dávku, xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
1.6 XX50 (XXXXXXX XXXXXX XXXXX)
xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivá xxxxx xxxxx, která xxxxxxxxxxxxx způsobí xx xxxxxxxxxxx xxxx smrt 50 % zvířat, xxxxxx byla xxxxxx. Xxxxxxx XX50 se xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XX50 (XXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX)
xx xxxxxxxxxxx vypočtená xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx smrt xx xxxxxx xxxx po xxxxxxxx u 50 % xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx po xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx XX50 xx xxxxx xxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xx.x-1).
1.8 XXXXX
xx xxxxxxx xxx "xx xxxxxxxx adverse xxxxxx xxxxx" (xxxxxxx xxx pozorovaného nepříznivého xxxxxx) x xx xx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx expoziční koncentrace, xxx které nedochází x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.9 TOXICITA XX XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se objeví x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx chemické xxxxx, xx dobu představující xxxxxx xxxx očekávané xxxxx xxxxxx příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.10 XXXXXXXX TOLEROVANÁ XXXXX (XXX - MAXIMUM XXXXXXXXX XXXX)
je xxxxxxxx dávka, xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx, který xx xxxxxxxx.
1.11 XXXXXXXXXX XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx změn xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.12 XXXXXXXXXX XXX
je xxxxxxxx xxxx xx xxx xx aplikaci xxxxxxxxx látky xx xxxxxx oka.
1.13 XXXXXXXXXXXXX KŮŽE (ALERGICKÁ XXXXXXXXX DERMATITIDA)
xx xxxxxxxxxxxx vyvolaná reakce xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.14 POLEPTÁNÍ XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx tkáňového xxxxxxxxx xxxx xxx působení xxxxxxxxx látky xx xxxx xx 3 xxxxx xx 4 xxxxx.
1.15 TOXIKOKINETIKA
xx studium absorpce, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.16 ABSORPCE
xxxxxxxx xxxxxx(x), kterým(i) xxxxxxxxxx xxxxx vstupuje do xxxx.
1.17 EXKRECE
xxxxxxxx proces(y), kterým(i) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx metabolity jsou xxxxxxxxxxxx z xxxx.
1.18 XXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx.
1.19 XXXXXXXXXXXX
označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x těle xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXXX - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX
Akutní xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxx počtu xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (metody X.1 - X.5), xx xxxxxxx může xxx po xxxxxx xxxxxxxx získán xxxxxxxxx xxxxx toxicity.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx lze zvolit xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx až xx kompletní xxxxxxxxx XX50. Pro inhalační xxxxxx není xxxxxxx xxxx xxxxxxx, protože xxxxxx xxxxx definovat xxxxxxx xxxxxxx jednorázové xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pozornost xx xxxx být xxxxxxxx metodám, xxxxx xxxxxxxxx xx nejmenší xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx utrpení xxxxxxx, xxxxxxxxx metoda xxxxx xxxxx (xxxxxx B.1 xxx) a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1 xxxx). Xxx testování xx jednom xxxxx xxxx xxxxxx na xxxxxx druhu xxxxxxx xxxxxx vyvozené z xxxxx xxxxxx. V xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx být použito xxxxxxx xxxxx zvířat.
Xxxxxx toxicity x xxxxxxxxxx aplikací (xxxxxx X.7, X.8 x X.9) xx posuzují xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x důsledku xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxxxxx pozorování zvířat xxx, aby xx xxxxxxx xx nejvíce xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx orgány xxxxxxxx x toxické x netoxické xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx vyžaduje xxxxxxxx xxxxxx aspektů do xxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.26 - B.30 x X.33).
3. XXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx ("xxxxxx") mohou postihnout xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxx, xxxx xxxx nebo celé xxxxxxxxxx. Účinky xx xxxx chromozómy xx xxxxx projevovat změnou xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx.
Mutagenní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx in xxxxx xx xxxxxx (bodové) xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) xxxxx xx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx x savčích xxxxxxx (xxxxxx X.10).
Xxxxxxxxxx xxxx také xxxxxxx xx vivo, xxxx. xxxxxxxxxxxx test (xxxxxx B.12) xxxx xxxxxxx metafáze xxxxxxxxxx xxxxxx dřeně (xxxxxx X.11). Xx xxxx xxxxx dávat jednoznačně xxxxxxxx xx vitro xxxxxxx, pokud nejsou xxxxxxxxxxxxxxxx.
Pro xxxxx xxxxxxxx xx velkém xxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxxx x kontrolu xxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx ještě xxxxx xxxxxx xx zjištění xxxxxxxxxx nebo x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx studie xxx využít k xxxxxxxx xxxxxx: potvrzení xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testů; zkoumání xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx rozšíření studií xx xxxx.
Xxx xxxx účely xxxxxxxx xxxxxx X.15 xx X.25 xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx in vivo x xx xxxxx, xxx rozšiřují rozsah xxxxxxxxxxxx účinků. Xxxx xxxxx poskytují informace x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx složitějších xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxx, xx další xxxxxxxxx xxxxxx mutagenity xx xxxxx naplánovat xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx, vhodná xxx xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, výsledků xxxxxxxxxx bakteriálních x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx způsobů xxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxxxxxx rizika xxxxxxxxx xxxxxx u xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx savčím xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx) mutacemi, xxxx. specifický xxxxx xxxx u xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (nezahrnuto x xxxx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, např. xxxx xx přenosné xxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxxx B.25). Těchto xxxxx lze xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx látky xxx xxxxxxx. Vzhledem xx složitosti těchto xxxxx x velmi xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx pro takovou xxxxxx jen xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx genotoxicity xx xxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx referenční xxxxxxxxxx genetické toxikologie.
4. XXXXXXXXXXXXX
Chemické xxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx genotoxické xxxx xxxxxxxxxxxxx karcinogeny, v xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx působení.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xx čerpají ze xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx testy xxxxxxxx xxx opakované xxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx opakované aplikaci, xxxxxx X.7, a xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx takových xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx také významné. Xxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx informace mohou xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx karcinogenity (xxxxxx X.32) xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.33).
K xxxxxxxxx xxxx xxxxxx testy xxxxxxxxxxxx xxxxx savců, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vyvolat takové xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx buněčných xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx souvislost x xxxxxxx transformací - xx vivo (xxxxxx X.21). Používá xx několika xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx.
5. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx zhoršení xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx (xxxx xx plodnost) xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinků xx xxxxxxxxx (vývojová xxxxxxxx) xxxxxxxxxx také xxxxxxxxxxxx x účinky x xxxxxxx xxxxxxx.
Testovací xxxxxx (xxxxxx B.31) xxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx jako xxxxxxx vývojové xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx. Alternativně xxxxx být xxxxxxx xxxx způsoby xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx podle xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx třígenerační reprodukční xxxx, je možno xxxxxxxxxxx metodu pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx test (xxxxxx X.35) xxxxxxxx xxx, xxx pokryl xxxxx generaci.
6. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx způsoby, xxxx. xxxxx funkčních xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx změn v xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxx vzejít z xxxxx akutní xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7) zahrnuje také xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinku. Xxxxxx xx měla xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x neurotoxickým xxxxxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx jisté xxxxxxxxx sloučeniny xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx B.37 a X.38 xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
7. XXXXXXXXXXXXX
Imunotoxicita xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, které xx xx xxxxxxxx buď xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Test toxicity xxx opakované xxxxxxxx (xxxxxx B.7), zahrnuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx by měla xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx tohoto xxxxxxx.
8. TOXIKOKINETIKA
Toxikokinetické xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx specifické aspekty xxxxxxxx testované xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx, xx xxxx x xxxxxx případě xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bude xxxxxxxx xxxx posloupnost xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx nebo xx může xxxxxx xxxx dostatečná xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.36).
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx také xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xx xxxxx. Přispět xxxxx xxxx informace x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x předcházejících xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx studií.
9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX LÁTKY
Xxxxxxx testované xxxxx, xxxxxx významnějších nečistot, x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxx zahájením xxxxxxxx toxikologické xxxxxx.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx podávání, xxx xxxxx xxxxxxxxx studie x xxx xxxxxxxxxx x xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky (x xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx nečistot) x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx materiálu xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Všechny xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
10. XXXX X XXXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx kontrola podmínek xxxxxxxxx, xx kterém xxxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx péče x xxxxxxx podstatnou xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX XXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx přizpůsobit xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx, xxxx a xxxxxxx xx vhodná xxxxxxx xxxxxxxxx 22 xX ± 3 xX při relativní xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx xxxxxxx má xxx xxxxxxx 20 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx techniky xxxxxxx jsou zvláště xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx xxxx případy xxxx podrobnosti x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uvedeny x popisu testované xxxxxx. Xxx všech xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx x xxxxx xx x xxxxxxxxx zprávě x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xx být xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx a tmy xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x uvést xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx chována xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx jedinců xxxxxxx xxxxxxx, ne xxxx xxx 5 xxxxxx x xxxxx kleci.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx údaje x způsobu chovu x xxxxxxx a xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce, tak xxxxx následující xxxx xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX XXXXXX
Krmení xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx živočišný xxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxxxxx studované látky x xxxxxxx, může xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx takové reakce xx xxxxx xxxx x xxxxx při xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxx xxxx. Pokud xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx tomu xxxxxxxxxxx xxxxx diety.
Xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxx projevil.
11. XXXXXXX XXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Snížení xxxxx x omezení bolesti x xxxxxx zvířat xxx dosáhnout xxxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1.bis) nebo xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx toxicity (X.1.xxxx). Xxxxxx s xxxxxx xxxxxx nevyužívá smrti xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x vyžaduje xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x 70 % zvířat méně xxx xxxxxx X.1.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx podávat x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx testů, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1, B.2 x X.3), xxx také x xx xxxx xxxxxxx mutagenity (xxxxxx X.11 x X.12), xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx zbytečně xxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxx xxxxxxxxx nebo xxx xxxxxx xx xxxxxx x jednoho xxxxxxx, je-li to xxxxxxxxxx xxxxxxx zdůvodnitelné. Xxxxxx xxxxxxx zdůvodnění xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx již provedených xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxx, xxxx-xx s xxxxxx provedena xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx testu (xxxxxx B.3) x xxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx, další xxxxxxxxx kožní dráždivosti (xxxxxx B.4) xxxx xxx zbytečné; xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx xxxx při xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4), nesmějí xxx dále xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx informací xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, následnou xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx tam, xxx xx xx xxxxx.
12. HODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX
Xxx hodnocení x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxx xx vitro xx nutno mít xx xxxxxxx, že xxxxx extrapolace na xxxxxxx je xxxxx xxx x xxxxxxx xxxx; doklady x xxxxxxxxxxxx účincích x xxxx, pokud xxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx člověka xx xxxxxxx xxxxxxxxxx zjištěných x kvantifikovaných xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx výsledky xxxxx být xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx nových x xxxxxxxxxxx látek.
Část X - Všeobecný xxxx xxx vložen xxxxxxx xxxxxxxxx č. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx od 22.6.2001
X.1. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (PER XX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx xxxxxx xxxxxx, a xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx dávky xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx orientačního xxxxx. Xxxxxxxxxx xx pozorované xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Pokud je xxxxx, xxxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx jako první xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, další xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx jako xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx suspenze. U xxxxxxxxx vehikulí xxxx xxx známy xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx něho xxxxxx xxxxxxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx. U xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx překročit 10 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx; xxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxx až 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx by xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx koncentrací, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx objem xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx koncentraci xxxxx ve xxxxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx lokální dráždivé xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou známy xxxxxx xxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. Na xxxxxxx xxxxx xx x obou xxxxxxx xxxxxx variační rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx hodnoty.
1.2.2.2 Počet xxxxxxx
Xxx každou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, musí xxx nullipary x xxxxx xxx březí. Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx je výrazně xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx zvířata tohoto xxxxxxx.
Poznámka: Používají-li xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, mělo xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, aby xxxxxx xxxxxxxxxx úroveň xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx vyvarovat xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx být xxxxxxxxxx počet hladin xxxxx, nejméně xxx, x xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxxxx tak, xxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx viditelný xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx znázornění vztahu xxxx xxxxxx x xxxxxxx, x xxxxx xx možné, musí xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx limitní xxxx xxxxxx xxxxxx nejméně 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 samic x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx způsobí uhynutí, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx studie.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze ji xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx by být xxxxxx xxxxx obrazu xxxxxx, rychlosti vývoje xxxxxx x xxxxxx xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx objeví x xxxxxx, x xxxx xx xxxxxxx, zvláště xxx, kde je xxxxxx tendence x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se potrava xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. X zvířat x vyšší rychlostí xxxxxxx xxxxxx postačí xxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. V xxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx x jedné dávce. Xxxx-xx možno xxxxx xxxxx najednou, lze xxxxx aplikovanou dávku xx menších xxxxxxxxxx xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx přístup k xxxxxxx ještě 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx xx látka xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, může xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx tohoto xxxxxx - xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx podání xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají systematicky, xxx xxxxx zvíře xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx prvního xxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx pozorování. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x zaznamenat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x bezprostřední xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx jednou během xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vyšetření. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxx opatřeními x xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx studii, např. xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, srsti, xxx, sliznic, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, křečovým xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx zaznamenat xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx xxxxxx, i ta, xxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxx nálezy se xxxxxxxxxxx. Xx-xx to xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx
Po dokončení xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx nejméně xxxxx xxxxxxx o pěti xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx zjistit, xxx xxxxxxx druhého xxxxxxx nejsou xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx xx k dispozici xxxxxxxxxx informace, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pohlaví xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx zvířatech xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxxxx xx tabulky. X xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, doba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx s xxxxxx xxxxxxx otravy, xxxxx xxxxxxxxx účinků a xxxxxxxxx nálezů. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pak x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxx uhynutí. Xxxxx hmotnosti je xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx xxxxxx xxxx než xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx podanou xxxxxx, xx zaznamenávají xxxx uhynutí vyvolané xxxxx xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx vztah, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxx x xxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx chování, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx tělesné xxxxxxxxx, mortality x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx chovu, xxxxxxx xxx.
- experimentální xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x podle xxxxxxx xxxxx (xxxxx uhynulých xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat),
- doba uhynutí xx podání testované xxxxx, důvody a xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxx LD50 xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx výpočtu),
- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx pro XX50, xxxxx je xxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx a xxxx xxxxxxxx (pokud je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx věnovat účinku, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx utracení xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX50),
- interpretace xxxxxxxx.
X.1. bis XXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ (XXX OS) - XXXXXX FIXNÍ XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx účincích, xxxxx xxxxx následovat během xxxxxx doby xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx s fixní xxxxxx xx provádí xx xxxx xxxxxxx.
X předběžné xxxxxxxxxx xxxxxx xx sekvenčním xxxxxxxx sledují účinky xxxxxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx, vždy xxxxx xxxxx na xxxxx. Xxxxxxxxxx studie xxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx minimální xxxxxxx dávky. Xxxxxxxx xx x této xxxxx xxxxx nepoužije xxx než pěti xxxxxx.
X hlavní xxxxxx xx xxxxx xxxxxx orálně xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxx x jedné x xxxxxx fixních xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x předběžné xxxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxx" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), xxx xx xxxxxxx.
Xx podání xx pozorují xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dávky xxxxxx xxxxxxx toxicitu, xxx xxxxxx xxxxxxxxx, není xxxxx žádné další xxxxxxxxx. Když xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx zřejmá xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx otestuje na xxxxxxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx toxická xxxxxx xxxxxxxx humánní utracení, xxxxx se znova xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx "diskriminující xxxxx" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), tj. xxxxxxxx x předem xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxx x xxxxx (xxxxxx případů xxxxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, x xxxxxxx xx známo, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Příprava
1.2.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx proti xxxx.
Xx xxxxx používat xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxx xx x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem se xxxxxx mladá dospělá xxxxxxx náhodně přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x hlavní studie. Xxxxx stačí xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx z xxxx xxxxxxx.
1.2.1.2 Příprava x xxxxxxxx xxxxx
Xxxxx je xxxxx, xxxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx roztoku, xxxxx xxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x jiných xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx určeny xxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx by xxxxx xxxxx normálně xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx vodné xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx až 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx zajistil konstantní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx dávek.
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx. Potkanům xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx; přístup x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. V xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx x jediné xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx najednou, lze xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xx menších xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - podle xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx postupu
1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx jednotlivá xxxxxxx. Xxxxxxxx xx používají xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx sekvenčně, xxxx xx xxxxxxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Všechna xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx zjistit xxxxxxx otravy xxxxxxx xx xxxx xxx; xxxxx přetrvávají xxxxxxx xxxxx otravy xxxxx xxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx dalších xxxx xxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx hladiny xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx-1. Xxxxxxxx zvolená xxxxxxx dávka xxxxxxxx xxxxxx otravu x xxxxxx nejbližší vyšší xxxxxx uhynutí, potom xx xxxxx podat xxxxx potřeby jednu xxxx více xxxxxxxxxxx xxxxxx dávek. Tento xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx(xxx) xxxxx, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) příznaky xxxxxx, x x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Je třeba xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx dávku xxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkách. Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx použít xxxx první xxxxx 500 mg.kg-1. Jestliže xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, vyšetřuje xx xxxxx vyšší úroveň xxxxx. Xxxxxxxx nedojde x uhynutí při 2000 xx.xx-1, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx úrovni xxxxx. Jestliže xxxx xxx použití výchozí xxxxx (xxxx. 500 xx.xx-1) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx humánní xxxxxxxx, xx xxxxxx dalšímu xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. 50 xx.xx-1). Xxxxxxxx xxxx zvíře xxxxxxx, mohou být xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx, že je xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx 5 xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx
Xxx každou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx hladinu xx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx xx xxxx xxx nullipary a xxxxxx xx xxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx je xxxxxxx pouze xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx studii. Je xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx letálních dávek xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx, xxxxx xxxx užita x testu, xx xxx xxxxxxx x xxxxx ze 4 xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zřejmou xxxxxxxx, avšak xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx utracení x xxxxxxxxx xxxxxx); xxxxxxx uhynutí xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxx zaznamenána. Xxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx další xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx kompletní. Xxxxxxxx xxxxx toxická xxxxxxx vyžaduje humánní xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xx projeví xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx být xxxxx xxxxx testována xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxx, která xxxx xxxxx humánně xxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxxx po xxxx pozorovací xxxxxx.
Xx podání látky xx xxxxxxxxxx provádějí x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx zvíře xx vedou xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx a zaznamenat xxxxxx účinek xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze xx xxxx stanovit xxxxxxxxx. Xxxx xx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx a xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, kde xx patrná xxxxxxxx x xxxxxxxx vzniku xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xx podání xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx další xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx příznaky xxxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx prvních xxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx zvířata xxxx vykazují xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx ukončen v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, že xxxx xxxxxxx příliš xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx se xxxxxxxx na xxxxx xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx provede xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx další 3 xxx a potom xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx během xxxxx, i xx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx testu, se xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxx se zaznamenávají. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx úrovně xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx druhé xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
V xxxxxxx, xx látka xxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxx 5 xx.xx-1 (xxxx jestliže xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx), xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx z orientační x hlavní xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx jednotlivě pro xxxxxx testovanou xxxxxx xxxxx. Z xx xxxx být xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxx x příznaky xxxxxxxx; počet xxxxxx xxxxxxxxx během xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů; xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; pro xxxxxx studii, zda xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; časový průběh xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxx, xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx hmotnosti.
Zvířata, xxxxx jsou humánně xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxx vyvolaná xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu má xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx x hlavní xxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx výsledky všech xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx,
- ve xxxxx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x podle úrovní xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; změny tělesné xxxxxxxxx; případně xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x příznaky xxxxxxxx; xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx účinků),
- xxxxxx průběh xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxx látky, xxxxxx x kritéria xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxx histopatologické xxxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x testu.
3.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx
Xxxxx | Xxxxxxxx | Xxxxxxxxxxxx |
5 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx | Méně xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx, xxx zřejmá toxicita 100 % přežití; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, které xxxx xxxxx xxxxxxxx Látky, xxxxx jsou xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx xxx 50 xx.xx-1 |
50 xx.xx-1 tělesné hmotnosti | Xxxx než 100 % xxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx velmi xxxxxxxx. Viz výsledky xxx 5 mg.kg-1 |
100 % xxxxxxx, xxx zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx u 500 mg.kg-1 | |
500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx než 100 % xxxxxxx | Látky, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx zdraví xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x 50 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; není xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxx za xxxxx bez významné xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx u 2000 xx.xx-1 | |
2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x xxxx xxx xxxxxx toxicity | Xxx xxxxxxxx x 500 mg.kg-1 Xxxxx, xxxxx nemají xxxxxxxxx xxxxxx toxicitu |
X.1. tris AKUTNÍ XXXXXXXX (ORÁLNÍ) - XXXXXX XXXXXXXXX XXXXX XXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx toxicity poskytuje xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx rizika, xxx xxx účely xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx aby xxxx xxxxx xxxxxxxxxx látku xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Kromě toho xxxxxx xxxxxxx pro xxxx testovací metodu xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx pevně xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx lze xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nebo pro xxxxx testování. Xxxxxxx xxxxxxx z těchto xxxxxxxxxxx dávek xx xxxxx xxxxxx, pokud xx žádoucí xxxx xxxxxxxx xxxxx zpřesnění.
Metoda xxxxxxx xxxxx stanovené xxxxxxxxx dávky x xxxx určena xxx xxxxxxx xxxxxx XX50. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xx x x této metody xxxxxxx kritériem xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx klasifikaci látky. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxx B.1. Xxxxxx výhodou xxxx xxxxxx je xxxxx spotřeba zvířat xxx x metody xxxxxx xxxxxxxx (orální)(B.1) x xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1 bis).
1.2 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx skupině xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx. Testování xx xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Xxxx xxxxx xxxxxxxx předběžnou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxx k xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x dalším kroku, x.x.
- xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx krok xxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx, ale xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx krok xxxx xxxxxxxx x vyšší xxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxx metody
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxx náhodně xxxxxxx, xxxxxxxx xxx, xxx byla xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x chována xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, aby xx mohla zvyknout xx xxxxxxxxxxx podmínky. Xxxxxxx mohou xxx x xxxxxxx ve xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dávky, ale xxxxx zvířat v xxxxx kleci xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxxx zvířatům x jediné xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx kanylou.
Pokud xx xx třeba, testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx nejprve xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx použití xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx rostlinném xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x pak roztoku x xxxxxx nosičích. Xxx nevodná xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx toxická charakteristika; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxx stanovena xxxxx před xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx bez xxxxxxx (xxxx. potkani xxxx xxx x xxxx 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx xx neomezuje.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx důvody xxxxx xxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.
Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxx xxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxx dávek
Výchozí xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx tří xxxxxxx úrovní, xxx. 25, 200 x 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Výchozí úroveň xxxxx xx xxxx xxx taková, xxx x největší xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jimž xxxx látka xxxxxx. X xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx příslušného diagramu xxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 1.
Xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxx veškeré dostupné xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x vztahu struktury x xxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx úrovni xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx žádné xxxxxxxxx o testované xxxxx, xxxxxxxxxx se - x xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata - použít výchozí xxxxx 200 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx xxxxxxxx získanou xxxxxxxxx, xxx xxx xx dovoluje test x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 5, 50 xxxx 500 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti.
Nemají xx xxxxxxxxx dávky, x xxxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx dráždícími účinky xxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx skupinami xx xxxxxxx xx rychlosti xxxxxxx, na xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví xxxx při xxxxx xxxxx je třeba xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx ve xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx provést xxx xxxxxxx 200 xx.xx-1 (xxxx 500 xx.xx-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx pozorovat xxxxxxx xx xxxx 14 xxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx pozorování xx xxxx xxxxxx být xxxxxxxxx xxxxxx pevně; xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx reakcí, xxxx xxxxxx nástupu x xxxxx zotavovacího xxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx-xx o xxxxxxxx toxické xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx zvíře.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx podáním zkušební xxxxx zvážena. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxx dalších 3 - 4 xxxxx. Xxx xx xxxxx podávána xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxx xxx - x xxxxxxxxxx xx délce xxxx xxxx - nezbytné xxxxxxxxxx zvířatům xxxxxxx x vodu.
Maximální xxxxx xxxxxxxx, který může xxx podán xxxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx. U xxxxxxxx xx xxxxx neměl xxxxxxxx přesáhnout 1 xx na 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 ml xx 100 g xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx možné xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx aplikovat xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx x Dodatku 1.
1.3.3.1 Xxxxxxxxx pozorování
Pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx za xxxxx xxx (xxx xxxxxxxx) nebo častěji, xxxxx to xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx nalezena v xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx vykazující xxxxxxxx xxxxx bolesti a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxx: xxxx zvířata xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xx xx byla zvířata xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx mrtvá, xxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx nejpřesněji. Xxxxx pozorování xx xxxxxxx, doku zvířata xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xx kůži x xxxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxxx, a xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx nervovém xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx, slinění, xxxxxx, letargie, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxx pozorování xxxx systematicky xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx každé xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3.2 Tělesná hmotnost
Všechna xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx před podáním xxxxxxxxx látky x xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Počítají xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx zvážena xxxx xxx, xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3.3 Pitva
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx testu, se xxxxxxx pitva. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx zaznamenány pro xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx informací xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx orgánů xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologie x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx 24 a xxxx xxxxx.
2. SBĚR A XXXXXX ÚDAJŮ
K xxxxxxxxx xxxx xxx údaje x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x humánních xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx, časový xxxxxx a vratnost xxxxxxxxx účinků, x xxxxxxx nálezy.
Všeobecné xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx v Dodatku 2.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x průběhu pokusu
Zpráva x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- živočišný xxxx/xxxx;
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx-xx xxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx začátku testu, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx testování:
- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxx xxx voda;
- podrobné xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxx podávaných xxxxxx x xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx (xxxxxx druhu x xxxxxx);
- xxxxxxxxxx xxxxxx počáteční xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx zvířete xx tabulek xxxxx xxxxxxx x dávkové xxxxxx (xxx. xxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, charakter, xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx);
- nástup a xxxxxx průběh příznaků xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;
- pitevní nálezy x histopatologické xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx k xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx a interpretace:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxx XXXX XX 423.
XXXXXXX 1
XXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxx xxxx uvedeno x xxxx 1.4.2.3, xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx ta xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx u xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx výběr xxxxxxx dávky xxx xxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx.
2. Xxxxxxxxx vývojové xxxxxxxx uvedené v xxxxx dodatku stanovují xxxxxx xxx každou xxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx postupuje xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxx xx aplikaci xxxxxxx xxxxx 25 xxxx 200 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx přitom xxxxxx x xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Jestliže xx xxxx možnost xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx úrovni dávky.
4. Xxxxx po xxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx každého xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx XX50 xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx je to xxxx jen xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx posoudit reakce xxxxxxxxxxx xxxx zvířat xxxxxxx pohlaví: xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x těchto xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx klasifikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx XX50 xx xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, nebo xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx testování xx xxxxxx úrovni xxxxx.
5. Xxxxxx xxxxxxxx testování x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx stanovenými xxxxxxx (xxxxxxxx 2). Této xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx buď x xxxxxx alternativní xxxxx x daném xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx další xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx varianty 1.
Xxxxxx xxxxxxxxx x výchozí xxxxxx 25 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx udána dávka, xxxxx zvířat x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Klasifikace xx provede na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx rámečku xxxx xxxxx xxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx testu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Klasifikace se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx testování x xxxxxxx dávkou 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - pohlaví xxxxxxx xxxx první, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx rámečky xx počet uhynulých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu xxxxxxxxx xxxxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx směru xxxxx xx do xxxxxxxx xxxxxx rámečku.
Varianta 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx uvedeného x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx testu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx provede xx xxxxxxx konečných hodnot xxxxxxxxx x příslušném xxxxx rámečku.
Postup xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X rámečcích xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx a pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx první, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx druhé).
Pod xxxxxxx je počet xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx uhynulých xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx rámečku.
Varianta 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx šedém rámečku.
DODATEK 2
Xxxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
X xxxxxxxxx xx xxxxx dávka, xxxxx xxxxxx a pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx druhé).
Pod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx "XXXXX XXXXX XXXXXXXXX" x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx podle xxxxxxxx 1 xx příslušná xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx příslušného xxxxxxx. (Hodnoty x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx příslušný xxxxxx klasifikace. Ležatá xxxxxxx xxxxxxx, že XX50 xx xxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.)
(x) Xxxxxxxxx postup s xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
x) Xxxxxxx xxxxx 25 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
&xxxx;
x) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
x) Xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx hmotnosti
X.2. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xx xxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, tenzi xxx, xxxxxxx xxxx, teplotě xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx) testované xxxxx
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, a to xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx pokusu xxxxxx, x ta, která xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx pitvají.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx humánním xxxxxxxx utratit. Testované xxxxx se nemají xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres následkem xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx a krmení, x xxxxxx budou xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx potřebného xxxxx experimentálních xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx používaného expozičního xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx simulované xxxxxxxx.
Pevné xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; v xxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx užije xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx využít.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx užívaných pokusných xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Samice musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx se x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx by xx xxxxxx použití xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X těchto xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xx podávání xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx vhodně xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a mortality. Xxxxxxx údaje xxxx xxxxxx na znázornění xxxxxx xxxx xxxxxx x mortalitou x, xxxxx xx to xxxxx, xxxx umožnit xxxxxxxxx LC50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.3.2.4 Limitní xxxx
Nedojde-li xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx 20 xx.x-1 xxxx xxxxx xx aerosolu xxxxxx xxxx xxxxx látky x xxxxxxxxxxx 5 xx.x-1 (nebo - x xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx použít x xxxxxxxx fyzikálních xxxx xxxxxxxxxx vlastností xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx - xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dosažitelné xxxxxxxxxxx) xxxxx 14 xxx k xxxxx xxxxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx expozice xx xxx 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Xxxxxxxx
Pro xxxxxx se xxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx dynamické xxxxxxxx xxxxxxx s výměnou xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx hodinu, aby xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx třeba xx konstruovat xxx, xxx xx xx xxxxxxx omezovalo shlukování xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx stability xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx by xxxxx x zásadě celkový xxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxx možné použít xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx příjem xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxx, na xxxxxxxxx jejich xxxxxx x xx trvání xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx je xxxx, xxx se xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx otravy, xxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx, zvláště xxx, xxx xx patrna xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xx dobu 4 hodin od xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx by xxxx xxx rychlé. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxx 22 oC ± 3 x X. Xxxxxxxxx vlhkost xx xxx xxxxxxx xxxx 30 % x 70 %, x výjimkou případů, xxx to xxxx xxxxx (např. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx komory (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Během xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx voda.
Používají xx vhodné systémy xxx vytvoření a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Konstrukce x provoz xxxx xx zajišťovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxxxxxx x xxxxxx.
Xx xxxxx zajistit xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) měření xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx),
(x) xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx se xxxx v xxxxxxx xxxx alespoň xxxxxxx xxxxx expozice (xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ±15 %. U xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx dosáhnout, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísání. Xx xxxxx xxxx trvání xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx to xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx, xxx xx pokus xxxxxxxx (xxx nejméně xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx),
(c) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxxxx zvíře xx xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxx prvního xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx studii, např. xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Pozorování zahrnuje xxxxx xxxx, srsti, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx vnějšímu dýchání, xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx uhynutí xx xxxxx zachytit xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx stanovuje xx xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x ta, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx zřetelem xx všem xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx dýchacího xxxxxx. Xxxxxxx makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, doba uhynutí xxxxxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Změny xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx stresu xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx metodou. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - mezi xxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxx x stupněm xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx změn xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx poškození, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh, kmen, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxx, atd.,
- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx umístění xxxxxx x xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx používán. Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx hodnotami x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxx odchylkou). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx:
a) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx x inhalačním xxxxxxxx;
x) xxxxxxx x xxxxxxx vzduchu;
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xx inhalačního xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx);
Pozn.: při xxxxxxxx xxxxxxxxx látek x roztoku (např. xx xxxx) je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, nýbrž xxxx, xxxxx je xx možné, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx.
x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx;
e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx průměru (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX);
x) xxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx;
x) xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx toxických xxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx, xxxxx x pokuse xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx zvířat x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx exponovaných xxxxxx);
- xxxx uhynutí xxxxx expozice nebo xx xxxxx skončení, xxxxxx a xxxxxxxx xxx humánní utracení xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx;
- hodnota XX50 pro xxxxx xxxxxxx stanovená po xxxxxxxx xxxx pozorování (x uvedením xxxxxx xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx spolehlivosti xxx XX50 (xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx);
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx stanovení);
- pitevní xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- diskuse xxxxxxxx (se xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx hodnotu LC50);
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.3. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx nanáší xx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx účinky x xxxxxxx uhynutí. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx pitvají.
Xxxxxxx xx závažnými x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx nemají xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx známo, že xxxxxxxxxx xxxxxxx bolest x stres následkem xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx 24 hodin xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx na to, xxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx) xxxx, xxx by xxxxx xxxxxx její xxxxxxxxxxx. Xxx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx se připraví xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Při xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx připravenými x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x kůží. Xxx xxxxxxx vehikula xx xxxxx xxxx x xxxxx vliv xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kůží. Xxxxx xxxxxxxx by xx xxx řídit xxx, x xxxx xxxxx xx může xxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxx, a xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxx nejvíce xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx dospělých xxxxxxx nebo xxxxxxx. Xxx xxxxxx i xxxx živočišné xxxxx, xxxxx xxxx xxx xx xxxxxx. Xx xxxxx volit známé xxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xx xxxxxxx testu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % střední xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx dávek xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Používá-li xx xxxxx, xxxx xxx nullipary x xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx zvířata tohoto xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx se zvážit xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx zvolit x xx třeba xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx toxické xxxxx. X xxxxxx testech xx xxxxx vyhnout xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx vznikly testovací xxxxxxx se zřetelným xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx x úrovních xxxxx xx xxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx na znázornění xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx, x xxxxx možno xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 s xxxxxxxxxxx spolehlivostí.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Lze xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx skupinách 5 xxxxx x 5 xxxxx x použitím xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx úplnou xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Doba xxxxxxxxxx má být xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Měla xx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx fáze xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx tam, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Zvířata xx xxxxxxx jednotlivě x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx, která xxxx xxx 10 % celkového xxxxxxx xxxx. Pro xxxxxx xxxxxxx látky může xxx tato xxxxxx xxxxx; xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxx této xxxxxx.
Testovaná látka xx xx expoziční xxxx 24 hodin xxxxxxxxx v xxxxxxxx x kůží xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxxx plochu je xxxx třeba vhodným xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx mulový xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. K zamezení xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx pohybu, úplnou xxxxxxxxxxxx xxxx nelze xxxxxxxxx.
Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno xxxx nebo jiným xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx očištění xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx třeba vést xxxxxxxxxx xxxxxxx. První xxx xx zvířata xxxxxxxx často. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x odpovídající xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xx kterou xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx a xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x komatu. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změny xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x druhého xxxxxxx
Xx xxxxxxxxx studie xx jednom pohlaví xx xxxx xxxxx xxxxxxx jedné xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, aby xx zjistilo, zda xxxxxxx druhého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx testovanou látku. X konkrétních xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Pokud je x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx zvířata xxxxxxxxxxx pohlaví jsou xxxxxxx citlivější, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx xx možno xxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z ní xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet zvířat xx počátku xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx zvířat x xxxxxx projevy xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx v týdenních xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx. Změny xxxxxxxxx xx xxxxx stanovit x xxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx než xxxxx xxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx na stres x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, se xxxxxxxxxxxxx xxxx uhynutí xxxxxxxx touto xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx existuje, mezi xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx x výskytem x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, změn xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x průběhu pokusu xx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx informace:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx: xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx je xxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- tabulky xxxxxxxxx xxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxx x kritéria xxx xxxxxxx utracení xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxx LD50 xxx xx pohlaví, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx úplný xxxxx, x xx pro 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx výpočtu),
- 95% interval xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (xxxxx jej lze xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxx mortality xx xxxxx x její xxxxxxxx (xxxxx je xxxxxxxxx danou metodou xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,
- rozbor xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x humánních xxxxxx xxxxx testu),
- interpretace výsledků.
X.4. XXXXXX XXXXXXXX (KOŽNÍ XXXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Výchozí xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx všechny xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx xxxxx s xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx podmínek, xxxxx xxxxx vyvolat xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx pro posouzení, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx není xxxxxxxxx další xxxxxxxxx.
x) Fyzikálně-chemické vlastnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx (např. xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX xxxxx xx xxxxx 11,5) není xxxxx testovat xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx mohou být xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo kyselou xxxxxxx.
b) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx test.
x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx aplikaci xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx dávky (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx) x nebylo pozorováno xxxxxxxxxx kůže, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx testovat xxxxx vysoce toxické xxx dermální xxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx, přičemž každé xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxx xx odečte, xxxxxxxxx x následně xxxxxx xxxxxx podráždění, xxx xxxx možno provést xxxxx posouzení účinků. Xxxx pozorování xxxx xxx dostatečně xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků.
Xxxxxxx se závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx testu xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. abrazí). Xx xxxxx použít xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxxx jsou xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx obdobích xxxx. Testované xxxxx xx nesmí xxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
Xxx pokusech s xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x práškové xxxxx, xx třeba xxxxxxxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, případně xxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxx s kůží. Xxx použití xxxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx vliv xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx aplikují nezředěné.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxx dát xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Jestliže xx x xx xxxxx screeningových testů xxxx xxxxxx úvah xxxxxxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. je xxxxxxx), xx xxxxx uvážit xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx zvířatech.
Xxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx nejméně xxx xxxxxx dospělá xxxxxxx. Xxxx xxxxx zvláštních xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinu, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx nejednoznačných xxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxx nejsou xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx postup, xxxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxx kůže 0,5 xx kapaliny xxxx 0,5 x xxxx xxxx polotuhé xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx zvířete xxxxxx x xxxxx xxxx vlastní xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Dobu xxxxxxxxxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx xx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se nanese xx malou plochu (xxx 6 cm2) xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx mulu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X kapalin x xxxxxxxxx xxxx může xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx mul, a xxx xxx připevnit xx xxxx. Po xxxx trvání xxxxxxxx xx třeba přidržovat xxxxxx xxxxx xx xxxx vhodným xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxx a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xx vdechnout.
Na xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, pokud xx xx možné, nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx případná reakce xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xx obvykle 4 xxxxxx.
Pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxx, že xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx zkrátit xxxxx xxxxxxxx (např. xx 1 xxxxxx xxxx 3 minuty). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx 3 plátky xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx akutní xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx. Xxxxx xxxx pozorována xxxxxxx xxxxx xxxxxx, odstraní xx xxxxx xxxxxx xx 1 xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxxxx, xx je xxxxxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx principu xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx třetí xxxxxx xx 4 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx. X případě, že xxxx možná 4hodinová xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxx nejméně xxxx xxxxxxx xxxxxx; pokud xx xxxx kontraindikováno x xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxx po 4 xxxxxxxx expozice xx pozorována nekróza xxxx).
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx reakce (xxxx. xxxxxxx) xxxxxxxxxx xx 3 minutách xxxx xx 1 xxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Za xxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx navrhnout xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx odpovídá očekávanému xxxxxxx použití x xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx a vyhodnocení
Xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxx xx 60 xxxxxxxx x xxxx 24, 48 x 72 hodin xx xxxxxxxxxx plátku x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx klasifikuje a xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 1. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 72 hodin xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx je xxxxx podrobně popsat xxxxxxx xxxxxxx léze xxxx poleptání (nevratná xxxxxxxxx kožní xxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx. X objasnění xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, maskovaných xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx každé pokusné xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx erytému x xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba rovněž xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx pozorované xxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxx možno tyto xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně relevantních xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, technik xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxx obvazu: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx (xx 1, 24, 48 x 72 xxxxx xxx. xx xxxxxxxxxx mulu),
- xxxxx zjištěných xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx reakce xxxx
Hodnota | |
1. Xxxxxxxxx xxxxxxx x příškvaru | |
1.1 Xxxxx xxxxxx | 0 |
1.2 Xxxxx xxxxx erytém (stěží xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx viditelný xxxxxx | 2 |
1.4 Mírný xx xxxxxxx xxxxxx | 3 |
1.5 Těžký xxxxxx (silné xxxxxxxx) xxxx tvorba příškvaru (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx erytému | 4 |
2. Hodnocení edému | |
2.1 Xxxxx xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx xxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
2.3 Xxxxx edém (xxxxxx jsou zřetelné, xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) | 2 |
2.4 Xxxxx edém (xxxxxx xxxxxxxx xxx x 1 mm) | 3 |
2.5 Xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xxxx xxx 1 mm x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx) | 4 |
4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kožní xxxxxxxxxxx (XXX)
IKI xx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxx xxxxxx ze xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx erytém x xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx a x takto xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx aritmetický xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx | XXX |
nedráždí | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx dráždí | 0,5 &xx; IKI ≤ 3 |
xxxxxxx xxxxxx | 3 < XXX ≤ 5 |
xxxxx xxxxxx | IKI &xx; 5 |
X.5. AKUTNÍ XXXXXXXX (OČNÍ XXXXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
1.1.1 Výchozí xxxxx
Xx třeba xxxxxxx zvážit xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx látce s xxxxx xxxxxx na xxxxxxx testování látky xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat xxxxx xxxxxx. X xxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
a) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Např. xxxxx kyselé xxxx xxxxxxxx xxxxx, které - jak xx xxxxx očekávat - xxxxxxxx v xxx xX rovné či xxxxx 2 xxxx xX rovné či xxxxx 11,5, xxxx xxxxx testovat, xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx třeba xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx rezervu.
x) Xxxxxxxx spolehlivě validizovaných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; látky x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx dále xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxx lze xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx na xxx při xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Látky, xxxxx xxxxxxxxxx zřejmé xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxx ve xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx dále xxxxxxxx xx dráždivost xxx xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, že xxxxx xxx xx oči xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx zvířatům, xxxxxx neexponované xxx xxxxxx jako xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx podráždění x xxxxxx xx xxxx popíše, xxx xxxx možno provést xxxxx posouzení xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx musí xxx dostatečně xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků.
Xxxxxxx xx závažnými a xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
24 hodin xxxx testem xx x každého x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vyšetření xxxx xxx. Xxxxxxx, x kterých xx xxxxxx podráždění xxx, xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xx dávat xxxxxxxx xxxxxxxx dospělému xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx zvířat
Xxxxxxxx se očekávají xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvolit xxxx xx jediném zvířeti. Xxxxxxxx výsledky xxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx má xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx účinek) xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxxxx xxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířata.
X xxxxxxxxx případech xx třeba použít xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxx nejednoznačných xxxxxx xxxx xxxxxxxxx použití xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,1 xx. X xxxxxx xxxxx, xxxx x zrnitých xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx 0,1 xx nebo xxxxxxxx xxx 0,1 x (xxxxxxxx je vždy xxxxx uvést). Xxxxx-xx xx x xxxxx xxxx xxxxx zrnitou xxxxx, xx xxxxx xx rozemlít xx xxxxx xxxxxx. Objem xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx až po xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x sebrat 0,1 xx xxxxx x xxxxxxxxxx xx do xxx podle xxxxxx xxx kapaliny.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx doby xxxxxxxxxx není možno xxxxxxxx rigorózně. Musí xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx vratnost nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx však xxxxx 21 dnů xx xxxxxxxx studované xxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx každému xxxxxxx xx spojivkového xxxx xxxxxxx xxx xxx, xx xx spodní xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx bulvy. Xxxxx xx xxx xxx xx 1 xxxxxxx xxxxx x xxxx přidrží, aby xx žádná xxxxx xxxxxxxxxx. Druhé xxx, xx xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Jestliže xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx může xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Aby xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nedojde k xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx se xxxx anestezovat x xxxxxxxxx oko.
Oči xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx vymývat xxxxxxxx 24 hodiny po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx 24 xxxxxxxx xx možno oči xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xx považuje xx xxxxxx.
U některých xxxxx, xxxxx při xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx provést xxxxx xxxxxxx x použitím xxxxxxx, kterým xx xxxx po xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx oči. X xxxxxx xxxxxxxxx xx doporučuje xxxxxx 3 xxxxxxx. Xxx xxxxxx xx instilaci xx xxx xxxxxxxx xxxxxx po půl xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x rychlosti xxxxxxx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pozorování a xxxxxxxxxxx
Xxx xx xxxxxxxxx po 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx. Neprojevují-li xx xx 72 xxxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxx xxxx, xx xxxxx zkoušku xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx, pokud xxxxxxxxx postižení xxxxxxx xxxx xxxx příznaky xxxxxxxxxx oka xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx nevratnost. Vedle xxxxxxxxxx na xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx i jiné xxxxxxxx xxxx.
Intenzitu xxxxxx xxx je xxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx stanovit xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxx. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx připouští xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx pomůcku pro xxxxxxxxx laboratoře a xx, kdo xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx možno xxxxxx ilustrovanou xxxxxxxxxx xxxxxxx podráždění xxx.)
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx usnadnit použitím xxxxxxxxxxx lupy, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx pozorování xx 24 hodinách xx xxxxx xxx některých xxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. Z xx xxxx xxx xxx xxxxx pokusné zvíře xxxxxx stupeň xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxx popis stupně x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx závažných xxxx x xxxxxxx mimooční xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností xxxxxxxxx xxxxx),
- v xxxxxxxxx xxxxx výčet xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx pro jednotlivá xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (např. xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx)
- popis xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lézí,
- podrobný xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,
- popis xxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1, 24, 48 x 72 hod.), xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx, oční xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx atd.,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mimoočních xxxxxxxx xxxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx xxxx xx oku
Xxxxxxx | |
X. Xxxxxxxx - xxxx | |
Edém xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx mžurku | 1 |
Xxxxxxx xxxx x everzí xxxxx | 2 |
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx | 3 |
Xxxx xxxxxxxxxx víčka více xxx na xxxxxxxx xxxx xxxxx | 4 |
X. Spojivka - xxxxxx | |
Xxxxxx není xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxxxx (nutno xxxxxxx xx běžné sekrece xx xxxxxxxx koutku) | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxx | 2 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxx xxx | 3 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxxx | |
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx cév xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxx cévní xxxxxx, xxxxxxxxx jednotlivých xxx xxxxxxxx, difusnější xxxxx xxxxxxx xxxxx | 2 |
Difuzní xxxxx xxxxxxx xxxxx | 3 |
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx | |
Anomálie nejsou xxxxxxxx | 0 |
Nepravidelná xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx (jedna xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx), xxxxxx xx xxxxxx je xxxxxxxxx, xxxxxxxx opožděná | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxx xxxx přítomná, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx | 2 |
x duhovce (xxxxx nebo xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx) | |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xxxx přítomná | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx charakteru, xxxxxxx xxxxxxx zůstávají xxxxx xxxxxxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxx zastřené | 2 |
Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx viditelné; obrys xxxxxxx stěží xxxxxxxxx | 3 |
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx je xxxxx neviditelná | 4 |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xx pozorovatelná, xxx xxxx xxxxxx xx ≤ 1/4 xxxxxx xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; plocha xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 xxxxxx xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; plocha xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 3 |
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx &xx; 3/4 xxxxxx rohovky | 4 |
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx indexu xxxx xxxxxxxxxxx (IOA)
Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx
XXX = 2.(X + B + C) + 5.X + 5.E.F
Xxxxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) pro xxxxx interval hodnocení xx vypočte xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx z XXX.
Akutní index xxxx dráždivosti XXX xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx v xxxxxxx testu
4.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx | XXX |
xxxxxxxx | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
dráždí | 15 - 29,9 |
xxxxx xxxxxx | 30 - 59,9 |
xxxxx xxxxx xxxxxx | 60 - 79,9 |
extrémně xxxxxx | 80 – 110 |
X.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1. Xxxx
Xxxxxxxx:
Citlivost x xxxxxxxx xxxxxxxxx testů xxx xxxxxxxxxx xxxxx x potenciálním xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx lidskou xxxx jsou xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity x xxxxxxx veřejného xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, která xx xxxxxxxxxx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx látky x potenciálním senzibilizačním xxxxxxx pro xxxxxxx xxxx x která xx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxx testu xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látky, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxx rozdělit xx xxxxx x xxxxxxxx, ve xxxxxxx xx alergický xxxx xxxxxxxxxx rozpuštěním xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (FCA), a xx xxxxx xxx xxxxxxxx.
Testy x xxxxxxxx xx zdají xxx přesnější x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxx metody xxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx test xx morčatech (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Test - XXXX) je xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxx schopnosti látky xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxxxx několik dalších xxxxx, xx XXXX xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx.
X xxxxx skupin xxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxx xxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xx dává Xxxxxxxxxx xxxxx) považovány xx xxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx volbu Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx spíše xxx intradermální xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxx odborné xxxxxx.
X xxxx metodické xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxx (GPMT) a Xxxxxxxxx xxxx. Lze xxxxxx x xxxxxx xxxxx, pokud xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxx odborné xxxxxx pro jejich xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx provedený xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxx xxxxx provést xxxx na xxxxxxx, xxx xxx je xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx kapitole.
1.2 Definice
Xxxxxxxxxxxxx xxxx: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) je xxxxxxxxxxxx zprostředkovaná xxxxx xxxxxx xx xxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx těchto xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx zarudnutí xxxx otok.
Indukční xxxxxxxx: experimentální xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx záměrem xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Indukční xxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx expozici, x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx stav xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx dříve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx, zda xxxxxxx xxxxxx reakcí xxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x kterých xx známo, že xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx senzibilizační xxxxxx xxx xxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % x metody x xxxxxxxx a xxxxxxx 15% u xxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxx XXX | Xxxxx EINECS | xxxxxxxx xxxxx | xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | alfa-hexylcinnamaldehyd |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | xxxxxx |
94-07-7 | 202-303-5 | Xxxxx xxxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxx | xxxxxxxxx |
Xxxxx nastat xxxxxxxxx, xxx při xxxxxxxxxxx odborném zdůvodnění xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Pokusná xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx případně xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Po období 10 xx 14 xxx (indukční xxxxxx), x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, jsou xxxxxxx exponována xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx x xxxxxx kožní xxxxxx xx provokační xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x kontrolních xxxxxx, která podstoupí xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx x xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx je xxxxxxxxxx xx nezbytné xxxxxxxxx testovanou xxxxx, xxxxxxx xx xx x použitím xxxx xxxx vhodného xxxxxxxxxxxx xxx, aby xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx nebo integrita xxxxxxx.
1.5.1 Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx (XXXX)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aklimatizují na xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx stříháním, holením xxxx chemickou xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx metodě. Xx třeba xxxx xx xx, xxx xxxxxxx k poškození xxxx. Zvířata xx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxx.
1.5.1.2 Experimentální xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxx se běžné xxxxxxxxxxx kmeny albinotických xxxxxx.
1.5.1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Lze xxxxxx samce x xxxxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx tvoří xxxxxxx 10 zvířat x xxxxxxx 5 xxxxxx xx třeba x xxxxxxxxx skupině. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx xxxxx než 20 xxxxxxxxxxx a 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xx dalších xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx celkového xxxxx xxxxxxx 20 testovaných x 10 kontrolních xxxxxx.
1.5.1.2.3 Dávkové xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx takovou xxxxxx, kterou xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx maximální xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolá xxxxxxxxxx xxxx. V xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x předběžném xxxxxx na xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxx tento xxxx xxx xxxxxx použití xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxxxxx XXX.
1.5.1.3 Popis xxxxxxx
1.5.1.3.1 Indukce
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Následující 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx po 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxxx oblasti xxxxxxx xxxxx symetricky xxxxx xxxxxxx xxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (FCA) xxxxxxx x xxxxx xxxx fyziologickým roztokem x objemovém xxxxxx 1 : 1;
Xxxxxxx 2: testovaná xxxxx xx vhodném xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
Injekce 3: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx připravená xx xxxxx XXX x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx poměru 1 : 1;
Pro xxxxxxx 3 se xxxxx ve xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x XXX xx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 3 xx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 2.
Injekce 1 x 2 xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxxx hlavě, xxxxxxx xxxxxxx 3 xxxxxx xx xxxxxxxx části xxxxxxxxx xxxxxx.
Den 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx injekcí, xxxxx xx 0,1 xx, xx podají xx xxxxxxxx xxxx xxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx kompletní xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x objemovém xxxxxx 1:1;
Xxxxxxx 2: neředěné xxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: Směs xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) xx xxxxx XXX/xxxx xxxx fyziologického xxxxxxx v poměru 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. den - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx dvacet xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx aplikací, xxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxx xxx kůži, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 0,5 xx 10% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Testovací xxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 cm), xxxxx xx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx plochu x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxx 48 xxxxx. Xxxxx vehikula xx xxxx odbornými xxxxxx; xxxxx xxxxx jsou xxxxx rozetřeny a xxxxxxxxx xx vhodného xxxxxxxx; kapaliny xxx xxxxxxxxx přímo.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx skupina
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx srsti. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx a zafixuje xxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxx skupiny xx xxxx 48 xxxxx.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. den - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx
Boky exponovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx zbaveny xxxxx. Xx jeden xxx xxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx nebo x xxxxxxx a xx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx aplikuje xxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xx xx xxxxx). Xxxxxx se pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxx udržují x kontaktu x xxxx xx 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Pozorování a xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx a xxxxxxxxx skupiny
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx dalších xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx 48 xxxxx xx začátku xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx) xx pozoruje kožní xxxxxx a xxxxxxxxxxx xx podle xxxxxxxx xxxxxxx x dodatku;
- přibližně 24 xxxxx xx tomto xxxxxxxxxx xx provede xxxxx pozorování x xxxxxx xxxxxx xxxx (72 hodin).
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "slepého xxxxxx" u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx pozorující osoba xxxx, xxxxx xxxxx xxxx senzibilizováno x xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx provokace), xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx později, v xxxxxxx potřeby znovu x xxxxxxxxx skupinou x vehikulem. Opakovanou xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx na původní xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx reakcí, xxxxx xxxx důsledkem xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx postupů, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). K objasnění xxxxxxxx nálezů xx xxxxx xxxxxx dalších xxxxxxx, xxxx xxxx. histopatologického xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxx
1.5.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělá albinotická xxxxxxx xx aklimatizují xx xxxxxxxxxxx podmínky xx dobu xxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx testu. Před xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Odstranění srsti xx provede stříháním, xxxxxxx xxxx chemickou xxxxxxxx, v xxxxxxxxxx xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Xx xxxxx xxxx na xx, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx kůže. Xxxxxxx xx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx a xx konci xxxxx.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Používají xx xxxxx laboratorní kmeny xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Lze xxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx nullipary x xxxxx být březí. Xxxxxxx se xxxxxxxxx 20 zvířat x xxxxxxxxx skupině x xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxxxx skupině.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxxx xx upraví xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx podráždění xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x předběžném pokusu xx xxxx xxxx xxxxx zvířatech.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxx použít vodu xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx jako xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 80% xxxxxx etanol/voda xxx xxxxxxx a xxxxxx xxx provokaci.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Indukce
Xxx 0 - Testovaná xxxxxxx
Xxxxx xxx xx zbaven xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Systém xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxx testovanou xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (výběr xxxxxxxx xx řídí odbornými xxxxxx; xxxxxxxx lze xxxxxxxx aplikovat xxxxx).
Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx xx testovací xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx s xxxx xxxxxxxxxxx plátkem xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 hodin.
Xxxxxx plátkového xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x plochou xxxxxxxxx 4 - 6 xx2. Xx preferováno xxxxxxxxx s použitím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx použito xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx skupina
Xxxxx xxx xx zbaven xxxxx (důkladně xxxxxxxx). Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx xxxxxxxx jako x testované skupiny. Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx překrývacím xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx po xxxx 6 hodin. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx není xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx kontrolní skupiny xxx xxxxxxxx.
6. - 8. a 13. - 15. xxx - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx
Xxxxxx aplikace jako x den 0 xx provede xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) 6. - 8. xxx a xxxxx 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx
27. - 29. den - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx skupina
Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx aplikuje na xxxxx xxxx neošetřeného xxxx testovaných a xxxxxxxxxxx zvířat. Xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxx může xxxxxxxxx xxxxxxx plátek x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx dobu 6 hodin.
1.5.2.3.3 Pozorování x hodnocení
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx plocha xxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx později (přibližně 30 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx stupnice xxxxxxx x xxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx 24 xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 54 hodin xx xxxxxxxx provokačního xxxxxx) se kožní xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "slepého xxxxxx" u testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx osoba xxxx, xxxxx zvíře xxxx senzibilizováno x xxxxx xx kontrolní.
Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx provokace (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), provede xx xxxxxxxxx o xxxxx později, x xxxxxxx potřeby znovu x xxxxxxxxx xxxxxxxx x vehikulem. Opakovanou xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx nálezy, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x provokačních postupů, xx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx nálezů xx xxxxx xxxxxx dalších xxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření nebo xxxxxx tloušťky kožních xxx.
2. XXXX A XXXXXX ÚDAJŮ (XXXX X BUEHLERŮV XXXX)
Xxxxx se xxxxxxx xx tabulky, xx xxxxx xxxx xxx xxx každé xxxxxxx xxxxx patrná reakce xxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX (GPMT A XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx xxx proveden před xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx xxxx screeningový, xx třeba xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx jeho xxxxxx (xxxx. XXXX - xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, XXXX - xxxx xxxxxxxxx ucha x myší) včetně xxxxx xxxxxxxxxxx postupu x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx (XXXX a Xxxxxxxxx xxxx)
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx mohly xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- použitý xxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxx a xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat na xxxxxxx a xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
- způsob xxxxxxxx xxxxx xxx plátkový xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxx studie xx xxxxxxx o xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxx x odstranění testované xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx x celková xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxx, použitá xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx poslední xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (viz 1.3.) xxxxxx použité xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx každé xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků;
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Xxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je analogická x xxxxxxx XXXX XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx Magnussona/Kligmana xxx xxxxxxxxx vyvolaných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
0 = žádná viditelná xxxxx;
1 = xxxxx xxxx skvrnité xxxxxxxxx kůže;
2 = xxxxxxx výrazné x splývající xxxxxxxxx xxxx;
3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx kůže.
5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx senzibilizace
Xxxxx xxxxxxxxx pozitivity xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxx xxxx, kolik xxxxxx x xxxxx xxxxxx bylo danou xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, se xxxxx klasifikuje xxxx
xxxxx xxxxxxx (I. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
xxxxx alergen (XX. st.) - 9 - 28 % xxxxxx
středně xxxxx xxxxxxx (III. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
silný xxxxxxx (XX. st.) - 65 - 80 % xxxxxx
xxxxxxxx xxxxxxx (V. xx.) - 81 - 100 % zvířat
X.7. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX ORÁLNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx orálně, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pečlivě xxxxxxxx, xxx se zjistily xxxxxxxx toxicity. Pitva xx provede x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx pokusu; xxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx konec xxxxxx, xx xxxxxx x xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx tak, xxx se co xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx zvíře xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxxxx studie jsou xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx lze xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx nebo x xxxxx xxxx, xxxxx účelu xxxxxx x fyzikálně-chemických xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxx, rozpustí xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx (vehikulu). Xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx použití xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x pak xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx stabilitu látky xx xxxxxxxx vehikulu.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx možno xxxxxx x xxxxxx druhu xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx musí být xxxxxxxxx a nesmí xxx březí. Xxxxxxxx xxxxx xx mělo xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx x x každém xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.
Na začátku xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.
Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx jako předběžný xxxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xx xxxxxxxx zdroje.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx hladinu dávek xx xxxxxxx nejméně 10 xxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx). Xxxxx xx xxxxxxx budou xxxxxxx x xxxxxxx studie, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx koncem pokusu.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx další skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx vratnost, xxxxxx xxxx zpožděný xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, které xx aplikuje nejvyšší xxxxx.
Xxxxx xx xxxxx dostupných xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx dávce 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx možno xxxxxxx limitní xxxx. Xxxxxx-xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx předběžnou xxxxxxxxxxx xxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxx.
Při xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx existující xxxxx x toxikologických x toxikokinetických studií x testované látce xxxxxxxx látkách xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxx xxxxx xxxxxxx. Dále xx vyberou dávky x klesající xxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxx závislost účinku xx xxxxx. Nejnižší xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (XXXXX). Xxxxxxx je xxxxxx xxxx- xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx xxxxx pokrýt xxxxx xxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinu, než xxxxxx příliš velký xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxx xxx 10).
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxx pitné xxxx, xx důležité zajistit, xxx podávané množství xxxxx xxxxxxxxxxxxx výživu x xxxxx rovnováhu. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x ppm) xxxx xxxxxxxxxx dávkování xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; použitou xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Aplikuje-li se xxxxx sondou, xxxx xx xx xxx xxx každý den xx xxxxxxx xxxx x dávkování přizpůsobovat xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
Xxxxx má xxxx xxxxxx sloužit xxxx předběžný xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx třeba x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx potravy.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxxx-xx test xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx den xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx, xxxxx xxxx dávce odpovídá, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx provedení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx úrovních xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testu xxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx lidí xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxx pozorování xx 28 xxx. Zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx dalších 14 xxx bez xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 dnů, xx zdůvodněných xxxxxxxxx 5 xxx v xxxxx. Denní dávka xx podává xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kanylou. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, závisí xx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx by xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx na 100 x tělesné xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx podat x 2 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x podávaném xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tak, xxx byl xxxxxxx xxx objem xx xxxxx xxxxxxxx dávky. Xxxxxxx to u xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx, xxxxxxx x tutéž xxxxx xxxx x x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Zaznamenává se xxxxxxxxx stav xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx zjištění xxxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx před xxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx porovnání) x dále xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Toto xxxxxxxxxx se xxxx xxxx chovnou klec x standardním xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx xxxx. Výsledky xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx s xxxxxxxx skórovacího systému, xxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx pozorování měnily xx xxxxxxx; xxxxx, xxxxxxxxxxx pozorování xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx skupin.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, očí x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx změny xxxxx, xxxxxx, dále xxxxxx xx manipulaci, xxxxxxxxxx klonických x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx).
Xx čtvrtém týdnu xxxxxxxx se otestují xxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxx podněty (xxxx. xxxxxxxx, zrakové, xxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Další xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx x literatuře (viz Xxxxxxxxx xxxx, xxxx X).
Pozorování xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx předběžná studie xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (90xxxxx); x xxx xxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx poruch xxxxxxxx xx této xxxxxxxxxx studie. Xxxxx x v xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx poruchách xx xxxxxxx týdnu 28xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx pozorování xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx příznaky xxxxxxxx, které xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx vadily.
1.2.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx potravy x xxxx
Zvířata xx xxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Spotřeba xxxxxxx x xxxx xx xxxx nejméně xxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx vodě.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
Krev xx odebere xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, odkud se xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx. Krev xx xxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx analýza
Xxxxxxxxxxx analýza xxxx xx xxxxxx posouzení xxxxxxxxx toxických xxxxxx xx tkáně, xxxxxxx xx játra a xxxxxxx, se provede x xxxxx xxxxxx xxxxx před xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxx zvířata xxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx1). Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, močoviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx proteinů, albuminu, xxxxxxxx xxxxxxx dvou xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx jaterní xxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx fosfatáza, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (jaterního xxxx jiného původu) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx poskytnout užitečné xxxxxxxxx.
Xxxxx možnost xx časově xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx posledního xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx xx možno vzhled, xxxxx, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xX, xxxxxxxxx, glukózu x xxxx xxxx. xxxxxxx.
Xxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nespecifických xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx je třeba xxxxxxxx u xxxxx xxxxxxx xxxx podezřelých x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx hormonů, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx těchto xxxxxxxxx xx posuzuje xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx látek xxxx xxxxxx xx případu.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxx použitý xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx nebo očekávané xxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx biochemických xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxx stanovení xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1) Vyšetření xx lačno xx xxxxxxx pro řadu xxxxxx x séru x xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx pro toto xxxxxxxxxx xx xx, xx u xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx je vyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx interpretaci. Na xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx noc xx xxxxx mít xxxx xx xxxxxxx metabolismus x x xxxxxxxx x potravě xx xxxxxxx do pravidelnosti xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx odebírá xxxx xx lačno, xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx xx 4. xxxxx testu.
1.2.3.5 Xxxxx
X všech xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx, hrudní x xxxxxx, x xxxxxx xxxxxx. Játra, xxxxxxx, nadledvinky, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxx, slezina, xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx a xx nejdříve xx xxxxx se xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx předešlo xxxxxxxxx.
Následující xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x ohledem xx xxx tkáně a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x xxxxxxxxxxxxxxx změnami, xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxx (včetně Xxxxxxxxxx xxxxx), játra, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxxxx, xxxxx, brzlík, štítnou xxxxx, průdušnici x xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem x xxx xxxxxxxxx), xxxxxx x přídatné xxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxx, xxxxxxxx), xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxx xxxxxx (přednostně xxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx účinků), periferní xxxx (n. xxxxxxxxxxx xxxx n. tibialis), xxxxxxx x blízkosti xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxx xxxxx. Xxxxx orgán, xxxxx xx mohl xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx působení xxxxxxxxx xxxxx, je třeba xxxxxxx.
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx nejvyšší xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Pokud xx x xxxxxxxx x tkáních ve xxxxxxx s nejvyšší xxxxxx objeví poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx těchto xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxx je xxxxx vyšetřit.
X xxxxxx satelitních xxxxxx, xxxxx xxxx xx xxxxxx zařazeny, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXX X ZÁZNAM XXXXX
K xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x xxxxxx jednotlivém xxxxxxx. Navíc jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx vykazujících příznaky xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx x průběhu xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx úmrtí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx zvířat x jednotlivými typy xxxx.
Výsledky v xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistickou metodu xx xxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxx xxxxxxxx xxxx informace, pokud xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxx, stáří x xxxxxxx zvířat;
- xxxxx, xxxxxxxx chovu, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx jednotlivých zvířat xx xxxxxxx testu, xxxx x týdenních xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx, pokud xx jiné xxx xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx látky xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx x přípravě diety, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx nebo vodě (xxx) xx skutečnou xxxxx xxxxx x xx xx kg xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xxx x xxxxxxxx x dietě xxxx xxxx);
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x xxxxxxx xxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);
Výsledky:
- xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx;
- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pohlaví a xxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxx xxxxxxxx toxicity;
- xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, příp. zda xxxx vratné xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx síly x motorické xxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- výsledky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx x hmotnosti xxxxxx;
- pitevní xxxxxx;
- podrobný xxxxx všech histopatologických xxxxxx;
- údaje x absorpci, xxxxx xxxx získány;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx:
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx xx analogická xxxxxx XXXX XX 407.
X.8. AKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXXXXX (28DENNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxx
Xxxx pokusem xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx látce: xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx par, bod xxxx, xxx xxxx, xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxx-xx stanovitelné).
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Několik xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, každá xxxxxxx jedné xxxxxxxxxxx, x xx po 28 dní. Xxxxxxx-xx xx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx kontrolní xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Během xxxxxx pokusu se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Příprava
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, přidá xx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné vehikulum xxx, aby v xxxxxxx xxxxxxx příslušná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí být x xxxx xxxxx, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx data, xx xxxxx je xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx důvody xxxxx xxxx. Pracuje xx xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx začátku xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx pohlaví zvlášť).
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic x 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx a nesmí xxx xxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx o xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 28 xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx také xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx tři xxxxxxx x různou úrovní xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina x xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxx - x xxxxxxxxxxx stejné xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx nezpůsobit žádné xxxxxxx nebo xxx x xxxxx počtu. Xxxxxxxx koncentrace xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx střední koncentrace xxxx xxxxxxx toxický xxxxxx na hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx než 3 xxxxxx koncentrací, mají xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx účinky. Ve xxxxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x x kontrolní xxxxxxx xx počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxx expozice
Trvání xxxxxxxx xx být 6 xxxxx denně; x případě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x jiných xxx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Expoziční xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx expoziční xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, aby xxx xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx konstruovat xxx, xxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx byla xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx v xxxxxx xxxxxxx xxxxx pokusných xxxxxx přesáhnout 5 % objemu xxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové expozice; xxxxx xxx způsoby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx cestami.
1.3.2.6 Xxxx pozorování
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat během xxxxxx období expozice x zotavení a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx x xxx, ve kterém xx xxxxxx x xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx dobu 28 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx aplikace, x posouzení zotavení x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx během experimentu xx xxx 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx být mezi 30 % a 70 %, x xxxxxxxx případů, kde xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx). Udržování xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx uvnitř xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx sloupce) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Používá xx xxxxxxxxx inhalační xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Doporučuje xx provést předběžný xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu je xxxxx nastavit tak, xxx podmínky x xxxxx expozičním boxu xxxx stejné. Systém xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx xxxx dosaženo co xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Xxxxxx průtoku xxxxxxx (kontinuálně).
b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ± 15 %. U xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx možné xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx rozsah kolísání. Xx celou dobu xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx koncentrace xxx xxxxxxxx, xxx xx xx prakticky možné. Xxxxx se xxxx xxxxxx x aerosolů, xxxx se distribuce xxxxxxxxx částic xxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx.
x) Teplota x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx expozice a xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x zaznamenávat xxxxxx výskyt, stupeň x xxxxxx. Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířat se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx zaznamenávat týdně x spotřebu xxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání nebo xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x výjimkou xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx x těžkém xxxxxx či xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx, humánně xxxxxxx x pitvat.
Xx xxxxx xxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zahrnovat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx analýza xxxx: x xxxxxxxxx funkce xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x těchto xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx známá xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), aspartátaminotransferáza (xxxxx xxxxx xxxx glutamátoxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x séru.
Xxxx xxxxx charakteristiky, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, draslíku, glukózy xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity cholinesterasy.
Xxxxx biochemické xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx potřeby použity xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx účinků.
1.3.3.1 Pitva
X všech xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, plíce x xxxxxxx se xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx vysychání. Xxxxxx x tkáně (xxxxxxx xxxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx velikosti) xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx na pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Plíce xx xxxxx vyjmout xxx poškození, xxxxxx x fixovat xxxxxxx xxxxxx, xxx aby xx zachovala struktura.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Pokud se x orgánech a xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx způsobená xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx těchto tkání x u xxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zvláštním xxxxxxx na xxxxxx x tkáně, ve xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx přípravy xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxxxxx vzduchu x způsobu xxxxxxxx xxxxxx v xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx přístroje xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx spolu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx údaje: x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením; x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx; x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx); x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxx; x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně; x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx průměru (XXXX) x geometrická xxxxxxxxxx xxxxxxxx (GSD),
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x podle xxxxxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x přežití xxxxxx xx konce xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx,
- úroveň xxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxxx potravy a xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- hematologická xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - DERMÁLNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx na kůži xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx pokusu, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx před testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Krátce xxxx xxxxxxxx pokusu xx xxxxxxx srst xx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx možné, mělo xx xx však xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx oholení xx potřeba opakovat xxxxx týden. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx xx nepoškodila xxxx (např. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Xx xxxxx vzít x úvahu xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx připravované xxxxxx xxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit xxxxx, xxxxxxxx vhodným vehikulem, xxx xxx xxxxxxx xxxxx kontakt x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx denně 5 xx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx možno xxxxxxxx xxxxxxx potkany, xxxxxxx xxxx morčata. Je xxxxx xxxxxx i xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx začátku studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 zvířat (5 xxxxx x 5 xxxxx) se xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Pokud se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet zvířat x počet xxxxxx, xxxxx budou zabita xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx další xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx ukončení xxxxxxx sledovat xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx skupiny 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx každého pohlaví).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx nejméně xxx xxxxxx dávek x xxxxx xxxxxxxxx skupinu xxxx - xxxxx xx použilo xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx mělo xxxxxxxx každý xxx xx stejnou dobu. X intervalech týdenních xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx zvířete. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx pokusným xxxxxxxx, x xx ve xxxxxxx množství, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x nejvyšší dávkou. Xxxxxxxx xxxxx má xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx nebo xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx toxicity. Pokud xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, má xxxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx dávka xxxx vyvolat jen xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx více než 3 xxxxxx dávek, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxx x xxxxxx x střední dávkou x x xxxxxxxxx xxxxxxx by počet xxxxxxx xxx být xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx-xx aplikace xxxxxxxxx xxxxx k těžkému xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxx koncentraci, xxx u vysoké xxxxxxx xxxxxx může xxxx k omezení xxxx vyloučení xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Došlo-li x těžkému xxxxxxxxx xxxx, xx dokonce xx xxxxxxxx okolností xxxxx pokus xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx s nižšími xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx-xx při xxxxxxxxx xxxxxx aplikace xxxxx 1000 xx.xx-1 nebo xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, žádné xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxx, kdy xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx odezní xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x klecích xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx látce xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx dalších 14 xxx xxx expozice, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo jejich xxxxxxxxxxx. Doba xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx denně.
Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx asi 10 % povrchu těla; x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxx menší. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx co xxxxxxxx xxxx xxxxxxx plochy xxxxxxxxxx v xx xxxxxxxx vrstvě.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx mulového xxxxxx x nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx dále třeba xxxxxxx způsobem překrýt, xxx xx xxxxxx xxxxx a testovaná xxxxx xxxxxxxx a xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxx xxxxxx x prostředků xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx "ochranného xxxxx".
Po xxxxxxxx xxxx expozice xx xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, pokud možno xxxxx xxxx s xxxxxxxx jiného vhodného xxxxxxx očištění xxxxxxx.
Xxxxxxx zvířata xx xxxxx denně pozorovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Pozorování zahrnuje xxxxx xxxxx, xxxx, xxx x sliznic x také xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se zaznamenávají xxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx týdně i xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx pravidelné xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx. x xxxxxxxx kanibalismu, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx satelitních xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x zvířata x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx bolestí xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx, humánně xxxxxxx x xxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx se x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxx alespoň xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x srážlivosti xxxx.
2. Biochemická xxxxxxx xxxx: k xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx parametrů: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x séru (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (dříve známá xxxx glutamát-oxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: vápníku, xxxxxxx, chloridů, xxxxxx, xxxxxxxx, glukózy xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy.
Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx širšího spektra xxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xx co nejdříve xx xxxxx zváží xx xxxxxx xxxxx, xxx xx předešlo xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx, xxxx. xxxxxxxx x exponovaná kůže, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx orgány x makroskopickými xxxxxx xxxx xxxxxxx velikosti, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
U xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx kontrolní xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Pokud xx x xxxxxxxx a xxxxxxx xx skupině x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx poškození způsobená xxxxxxxxxx látkou, je xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx x nižšími xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx se objevily xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje se xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx poškození.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx má pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- údaje x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx účinku, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx pohlaví a xxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx údaj x xxxxxxx zvířat do xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxx jiné xxxxxx,
- doba, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx je xx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.10. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X SAVCŮ XX XXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací OECD XX 473, In Xxxxx Xxxxxxxxx Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberací in xxxxx je xxxxxx xxxxx, xxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (1) (2) (3). Strukturální aberace xxxx dvojího druhu: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Vznik xxxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, xx daná xxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx aberace. Xxxx metoda xxxx xxxx navržena k xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x příbuzné xxxx xxxx příčinou xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy, xxx způsobují změny x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx genech xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat.
Xxxxx xxxx xx používá x odhalení xxxxxxx xxxxxxx mutagenů x xxxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx jsou x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, je xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx však xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx tímto xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx o xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx než xxxxxx xxxxxxxxxx DNA.
X analýze xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx buněčné xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx schopnosti xxxxx x xxxxxxx, stability xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx spontánních chromozómových xxxxxxx.
Testy xx xxxxx xxxxxxxx obecně xxxxxxxx zdroj metabolické xxxxxxxx. Tento xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedokáže xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx in xxxx. Xx třeba xx vyvarovat xxxxxxxx, xxxxx by xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx, jež xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx způsobeny xxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (4) (5).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx jedné, případně xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození chromozómu xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx místě (zahrnuty xxxx xxxxxxx typu xxxxxxxxxxx chromozóm, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx).
Xxxx chromatidy: xxxx xxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx xxxx obou xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx chromatidy xx xxxxx, xxx xx xxxxx poškozené xxxxxxxxxx. Xxxx pak x xxxxxxxxx, koncový (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (nebo mimo xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx mitózy, nýbrž xxxxxx další X-xxxx. Xxxxxxxxx xxxx chromozómy x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx šířka xxxxx chromatidy a x xxxxxxxxxx vybočením xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxx celkovým xxxxxx buněk x xxxx xxxxxxxx buněk; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxx xx vystaví xxxxxxxx testované xxxxx, x xx x xxxxxxxxxxxx aktivací a xxx ní. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx kultury xxxxxxxxx látce, se xxxxxxxx xxxxxxx například Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Příprava
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx celou xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx buněk xxxxxxxx (například fibroblasty xxxxxxxx křečka xxxx xxxxxxxxx periferní krve xxxxxxx xx jiného xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx x inkubační xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x xxxxxxx). U xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxx způsobem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx. X xxxxxxx kontaminace xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie a xxxxx: buňky xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx vysetím xx xxxxxxxxxxxx média x xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx konfluentní xxxxxx před xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx při teplotě 37 xX.
Xxxxxxxxx: xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxxx) xx přidá xxx plná xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx jedinců x xxxxxxxxx se xxx xxxxxxx 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nejobvyklejší xx xxxxxxxxx suplementovaná xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx činidly xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Aroclor 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx a ß-xxxxxxxxxxxx (10) (11) (12).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10 % x/x. Aktivita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xxxx xxxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx případech je xxxxxx xxxxxx mitochondriální xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Pro účely xxxxxxxxx aktivace mohou xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx modifikované xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx by xxx xxx vědecky xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx cytochromu X450 x metabolismu xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném stavu, xxxxx se xxxx xxxxxxxxx na buňky xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx její xxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle x xxxxxxxx naředí. Xxxxxxx testované látky xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx čerstvé preparáty, xxxxxx xxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx skladování xxxxxxxxxxx xxxxxx vlastnosti.
1.5 XXXXXXXX XXXXX
1.6 XXXXXXXXXXXX
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx podezření, xx by mohlo x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx narušovat přežívání xxxxx x xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje xx, xxx xxxx xxx, xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx rozpouštědla xxxx. Je-li xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx dá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.6.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, rozpustnost x xxxxxxx a xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Cytotoxicita xx xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx x xxx xx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx vhodné indikace xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx, xxxxxxxxx stupně xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x předběžných xxxxxxxxxxxxx.
Je třeba xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx pokrývat xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx znamená, že xx jednotlivé xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx více xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. X době sklízení xxxxx xxxx xxx xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxx, nebo mitotického xxxxxx (xxxx o xxxx než 50%). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx obtížná x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx použít také xxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jako xx průměrný xxxxxxxxx xxx; xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx průměr, xxxxx ne xxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx zpožděných subpopulací xxxxx. X tak x malé prodloužení xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx času xxxx xxxxxxxx značný xxxxxx xx xxxxxx xxxx sklízení z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
X relativně xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 µx/xx, 5 xx/xx nebo 0,01 X.
X xxxxxxxxx nerozpustných látek, xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx je koncentrace, xxx které xx xxx xxxxx nerozpouští, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx, xxx je xxx xxxxxxxxxxxx xx finálním xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx-xx x xxxxxxxxx účinku při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx koncentracích s xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx užitečné vyhodnotit xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx, X9 xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x prostým xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx buněk.
1.6.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací nebo xxx xx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx). Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx pozitivní xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx mutagenního xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx používá xxxxx xxxxxxxxx, x xx xxx expozičních xxxxxxxx, xxx se očekává, xx poskytne xxxxxxxxxxxxxxxx x detekovatelný xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx citlivost testovacího xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Mezi xxxxx pro pozitivní xxxxxxxx patří například:
Metabolická aktivace | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
Xx | methyl xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Xxx | xxxx[x]xxxxx xxxxxxxxxxxxx monohydrát xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Xxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Tam, xxx xx to xxxxx, xx vhodné xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látku ze xxxxxx chemické xxxxxxx.
Xxx každý xxxxxx xxxxxxxx sklízení xxxxxx xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxx kontrolu, xx xxxxx xx xxxxxxx rozpouštědlo xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako experimentální xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3 Xxxxxx
1.6.3.1 Expozice testovanou xxxxxx
Xx proliferující xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx působit xxx 48 xxxxx xx xxxxxxxxx mitogenem.
Xxxxxxx xx xxx xxxxxx koncentraci používají xxx kultury; a xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x rozpouštědlem, nebo xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx základě historických xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx duplicitními xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (13) (14), xx xxxxxxxxxx, xxx xx xxx každou xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx jedna xxxxxxx.
X případě xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx v testu xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx použití neprodyšně xxxxxxxxxx kultivačních xxxxx (15).
1.6.3.2 Xxxx sklízení xxxxxxx
X prvním experimentu xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx aktivací i xxx ní xx xxxx 3 - 6 xxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx odpovídajícím xxxxxx 1,5násobku normální xxxxx buněčného cyklu xx xxxxxxx xxxxxxxx (12). Pokud xxxx xxx použití xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxx negativní, xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx bez xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx expozicí xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx normálního xxxxxxxxx xxxxx. Některé xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx době xxxxxxxx xxxxx, xxx xx 1,5xxxxxxx délky xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx od případu. X xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nepokládá xx xxxxx, je xxxxx xxxx rozhodnutí zdůvodnit.
1.6.3.3 Příprava xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxx xx působí Xxxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx dobu 1 - 2 xxxxx xxxx xxxxxxxxx kultivace. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zpracovává xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx roztokem, xxxxxx x xxxxxxxxx.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Všechny preparáty, xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx, musí xxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxx ± 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx rozprostřených xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx z xxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx je počet xxxxxxx vysoký, může xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X xxxx xxxxxx testu xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx registrovat xxxxxxxxxx typy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx a četnosti x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx do xxxxxxx četnosti xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx je xxxxx v testu xxxxxxxxxxxx také zjištěnou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx data xxx jednotlivé kultury. Xxxxxxx xx všechna xxxx uvedou x xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx nepožaduje. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx bylo xxxxxxxxx x xxxx. 1.4.3.3. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx použitých xxxxxxxxx xxx, aby xx rozšířil xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx lze xxxxxxxxxxx, xxxxx koncentrační xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X INTERPRETACE XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislá frekvence xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Nejprve xx xxxxx uvážit biologickou xxxxxxxxxx výsledků. Při xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxxxx metody (3) (13). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx polyploidních xxxxx xxxx indikovat, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx procesy a xxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxx počtu xxxxx s xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xx schopnost inhibovat xxxx xxxxxxxxx xxxxx (17) (18).
Testovaná xxxxx, xxx jejímž xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují xxxx xxxxxxx kritéria, xx x tomto xxxxxxx považuje za xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx negativní xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx posouzení xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, nebo diskutabilní xxx ohledu na xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx ukazují, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky ukazují, xx xx daných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
XXXXXX X PRŮBĚHU POKUSU
Xx zprávě x xxxxxxx pokusu xx xxxxx uvést xxxx xxxxxxxxx:
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla/vehikula
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx a xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx x vhodnost xxxxxx xxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx, je-li xx nutné,
- xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx krve, xxx byla xxxxxxx xxxx krev nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, použitý xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxxxx, je-li xx xxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx buněčné xxxxxxx, xx-xx to xxxxx
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- název xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx např. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx média, koncentrace XX2, je-li xx xxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx vehikula x xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx kultivace,
- xxxx působení,
- xxxxxxx buněk na xxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx
- xxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- pozitivní a xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx, tj. xxxxxx konfluence, xxxxx x xxxxxxxx cyklu, x xxxxx buněk, xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxx srážení,
- xxxxx x xX x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx stanoveny,
- xxxxxxxx aberací, xxxxxx xxxx,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx každou experimentální x kontrolní kulturu xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx ploidie,
vztah xxxxx-xxxxxxx, je-li to xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- souběžné xxxxx z negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické xxxxx z xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx rozpětí, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
X.11. MUTAGENITA - TEST XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXX XXXXX XXXXX XX XXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx je xxxxxxxxx OECD XX 475, Mammalian Xxxx Xxxxxx Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx analýzy chromozómových xxxxxxx x savců xx vivo xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxx x buňkách xxxxxx dřeně zvířat, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxxx xxx xxxxxxx druhu: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vyvolávat numerické xxxxxxx. Aberace xxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny xxxx xxxxxxxx chromatidové, ovšem x xxxxxxxx chromozómového xxxx xxxxxxx rovněž. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx jevy xxxx xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx u xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, že xxxxxxxxxxxx mutace a xxxxxxxx jevy, xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx a tumorsupresorových xxxxxx, hrají xxxxx xxx rakovině u xxxxxxx a v xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxx testu xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxx xx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xxxxx o xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx rychle xx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx tkáně xx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx brát x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x když xxx mohou xxx xxxx xxxxxxxxxxx druhy x mezi xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx xxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx předtím xxxxxxx testem xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx doklady x tom, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx reaktivní xxxxxxxxx xx cílové xxxxx nedostane, xxxx xxxxxx použití xxxxxx xxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxx, případně xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatidami.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx spojení xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx chromozóm, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Zlom xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx obou xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx chromatidy xx xxxxx, xxx xx šířka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx pak x případech, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment v xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), případně xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x důsledku xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx X-xxxx replikace XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx další S-fáze. Xxxxxxxxx xxxx chromozómy x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.
Xxx: achromatická xxxx xxxxx než xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x minimálním vybočením xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx buněk v xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx v xxxx buněčné xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx proliferace xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx buňky.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (n) mimo xxxxxxxxx počet (xxxx 3x, 4n xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zjistitelná xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, pozorovaná xxxx xxxxxx x fragmenty x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Zvířata se xxxxxxx způsobem vystaví xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxxxx dobu xx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx usmrcením xx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Colcemidem®). X xxxxx xxxxxx dřeně xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx
Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx jiný xxxxxx savčí druh. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx chovu xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx úvodu x xxxxx X, vlhkost xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, xxx x kde xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Po xxxx xxxxxxxxx xxxx dní xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x laboratorních podmínkách.
1.4.1.4 Xxxxxxxx dávek
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx její xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx x případně se xxxxx. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx podáváním xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.2 Xxxxxxxx testu
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Rozpouštědlo / vehikulum v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky x nesmí x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx xxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x kompatibilitě x testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx rozpouštědlo / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Xx xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxx každé xxxxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Je xxxxx zacházet xx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx stejně.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxxxxxxxx strukturální xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrole xx xxxx xxx, aby xxxx xxxxxx patrné, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx než xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx intervalu. Xxx xx xx xxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Látka | XXX | XXXXXX |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
mitomycin X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx experimentální xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx x x interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se x xxxxxxxxxxx xxxxxxx pouze xxxxx xxxxx xxxxxx, xx nejvhodnější dobou xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx historické xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx vehikulum xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx v xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, existují xxxxx x stejném xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx expozice xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx nejsou x xxxxxxxx podstatné xxxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx expozice xxxxxxxxx látkám může xxx xxxxxxx na xxxxxxx, jak xx xxxx například x xxxxxxxxx farmaceutických přípravků, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxxxxxxxx látku xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx dávky za xxx podané v xxxxxxx nanejvýše xxxxxxxx xxxxx. Jiné xxxxxx xxxxxxxxx musejí xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Vzorky xx xxxxxxxxx xx xxxx různých xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxx xxxxx dne. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu (která xxxx xxxxxxx 12 - 18 xxxxx) xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx potřebná xxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxx vliv xx kinetiku xxxxxxxxx xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberací, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx vzorků po 24 xxxxxxxx xx xxxxxxx odběru. Xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx vícekrát než xxxxxx xx xxx, xx xxxxx provést xxxxx xxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx cyklu xx xxxxxxxxx xxxxxx látky.
Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx intraperitoneálně xxxxxxxx xxxxxx dávka Colcemidu® xxxx kolchicinu a xxxxxxxx xx x xxxx xx vhodném xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorky. X myší xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3 - 5 xxxxx, u xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4 - 5 hodin. X xxxxxx dřeně xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx chromozómové xxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx-xx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, protože nejsou x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx x téže xxxxxxxxxx xx xxxxxxx stejného xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x hlavní xxxxxx (5). Xxx xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx pokrývaly xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxxxxx k toxicitě xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx pozdější xxxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx jenom nejvyšší xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx takové xxxxxx xxxxxxxx, xx při xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxx byly xxxxxxx. Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxxx hormony nebo xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx x těchto xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, jež xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx může být xxxx definována xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x určitým xxxxxxx xxxxxxxx v kostní xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx test xxx xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx v xxxxx xxxxx xxxx xx dvou xxxxxxx xxxxxxxx x jeden xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxxxxx xx xx základě xxxxx x látkách x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx genotoxicita, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx za xxxxxxx xxx xxxxxxxxx úrovní. Xxx dlouhodobé studie xxxx xxxxxxx xxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xx xxx xxx xxxx xxxxxx xx 14 dnů, x 1&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x limitním testu xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x jiné xxxxxxx xxxxxxxx. Maximální xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx sondou nebo xxxxxxx najednou xxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x hmotnosti; xxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší účinky, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx tak, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx tak xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Příprava xxxxxxxxxx
Okamžitě po xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx se xxxxxx na podložní xxxx x xxxxxx xx.
1.5.7 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx index xxx xxxxxxxxx 1000 buněk x xxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx jedince xx analyzuje minimálně 100 buněk. Xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx aberací. Xxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol) xx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. Xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx spojeného xx xxxxxxx chromozómů, xxxx xxx počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx 2n ± 2.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Údaje xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. U xxxxxxx zvířete xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xx jednu xxxxx x xxxxxxxx buněk xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx strukturálních chromozómových xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x registrují se, xxx obvykle se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx x xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx údaje xx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx výsledků
Xx xxxxxxxxxx pozitivního výsledku xx používá xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx zřetelný nárůst xxxxx buněk x xxxxxxxxx ve skupině x xxxxxxxxxxxx dávkou xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx je xxxxx xxxxxx biologickou významnost xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (6). Statistická xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx faktorem pozitivního xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx má schopnost xxxxxxxxx mitotické xxxxxxx x vyvolávat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nárůst xxxxx buněk x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, se x xxxxx systému xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxxxxxx případech však xxxxx xx získaného xxxxxxx dat xxxxxxx x aktivitě testované xxxxx xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx chromozómové xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx testovaná xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx aberace nevyvolává.
Xx třeba vzít x úvahu, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx používána, xxxx xxxxx specifickou xxxxxxx xxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx a stabilita xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud je xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- použitý živočišný xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx a xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek xxx jednotlivé xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx a negativní (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx ze studie xxx určení xxxxxxx, xxxx-xx provedena,
- xxxxxxxxxx xxxxx velikosti xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x přípravě xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x podávání xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx metody k xxxxxxx, xx se xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx oběhu xxxx xx xxxxxx tkáně,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx látky v xxxxxxx/xxxxx vodě (ppm) xx skutečnou xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx x vody,
- podrobný xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x odběru xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x doba xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aberací,
- xxxxx analyzovaných xxxxx xx jedno xxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx toxicity,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx počet xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické xxxxx x negativních xxxxxxx xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.12. MUTAGENITA - XX XXXX XXXXXXXXXXXX TEST V XXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. METODA
Metoda xx xxxxxxxxx XXXX XX 474, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxxxxxxxxxxx xxxx xx vivo x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v chromozómech xxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; test xxxxxxx x xxx, xx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx. z xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx látky, jež xxxxxxxxx cytogenetické poškození, xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx mikrojader představujících xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx chromozómů.
Xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx polychromatický xxxxxxxxx, xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx mikrojádra xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx. Nárůst xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx je x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx důkazem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx hlodavců xxxxxxx xxxxx xxxxx, xx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx tvoří. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x mikrojádry x xxxxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxx u každého xxxxxxxxxxx druhu, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx jeho slezina xxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xx tento xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx způsobujících strukturální xxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx přítomnost xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx centromerické DNA x mikrojádru. Konečným xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) erytrocytů v xxxxxxxxx krvi xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x rámci xxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx hodnotu použít x xxxxxxx, xx xx zvířata testují xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxx xx vivo xxxxxxxxxxxx xxxx x savců xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx reparace XXX, x xxxx xxx mohou xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx efektem xxxxxxx. Test xx xxxx je xxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx mutagenního efektu, xxxxx xxx předtím xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, xx se testovaná xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx použití tohoto xxxxx xxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxx dělení xxxx xxxxxx dělícího xxxxxxxx umožňující xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x pólům xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx): xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx buňky (xxxxxxx) xxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx reprezentovaná xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx chromozómů xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx erytrocyt: xxxxx xxxxxxxxx, jemuž xxxxxxx xxxxxxxx a jenž xx xx od xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx stadium, xxx xxxx dosud xxxxxxxx xxxxxxxx, takže xxx xxx odlišit xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx xxx ribozómy.
1.3 XXXXXXX METODY
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, zvířata xx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxx usmrtí, kostní xxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx (1-7). Pokud xx xxxxxxx periferní xxxx, xxxxxxx xx xx xxxxxx xxxx xx působení xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx, jež se xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, ve xxxxxxx xx xxxxxxx periferní xxxx, musí xxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx zpracování xxxxx xx nejkratší. X xxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx mikrojader.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Příprava
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx nebo xxxxxxx; xxxx však xxx xxxxxx xxxx xxxxxx savčí xxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx se xxxx. Xxx xxxxx xxxxxx jakýkoliv xxxxxx xxxxx xxxx za xxxxxxxxxxx, že se x něj xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx nebo že x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxx xxxxxxxx xxxxxx měly xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx podmínky xxxxx jsou xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx úvodu x xxxxx X.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx rozdělí xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Jedinci xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx dní xx zvířata xxxxxxxxxxxx x laboratorních xxxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx toho, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Příprava xxxxx
Je-li xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) prokazují, xx xxxxxxxxxx ji xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x nesmí x testovanou látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx nepříliš známé xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx použití xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx xxxxx je xxxxx pro každé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxx.
U xxxxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx vivo xxx dávkách, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvýšení nad xxxxxxxxx úroveň. Xxxxx xxx pozitivní kontrole xx volí xxx, xxx xxxx účinky xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx preparátu. Pozitivní xxxxxxxx xx možné xxxxxxx odlišným způsobem xxx testovanou látku x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx možné, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx skupiny, xxxx xx testovaná xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | EINECS |
xxxxx methansulfonát | 62-50-0 | 200-536-7 |
N-ethyl xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu | 6055-19-2 | |
triethylenmelamin | 51-18-3 | 200-083-5 |
Negativní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx a zpracované xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx časových xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxxx x x interindividuální variabilitě xxxx xxxxxxx. Aplikuje-li xx x negativních xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx první xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, ledaže existují xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx prokazující, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx nevyvolává žádné xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxx, může xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx odebraný xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxx krátkodobých xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 1 - 3 dávky), kde xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx kontroly.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx a pohlaví xxxxxx
X každé xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (11). Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx provádí, xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx způsobů xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx pohlavími xxxxxx v toxicitě xxxxxxxxx rozdíly, je xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx postačující. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx může xxx závislá xx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxx farmaceutických přípravků, xxxxxxx se test xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx schéma
Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxx x 24xxxxxxxxxx intervalech). Xxx použít delší xxxxxxxxx schémata, xxxxx xx v daném xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxx; v případě xxxxxxxxxxx výsledku tak xxxxxx, xx xx xxxxxxx toxicita, nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x objemnou xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx dvě xxxxx xx xxx xxxxxx x rozmezí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Test xx xxxx provádět xxxxx xxxxxxx:
(x) Xx xxxxxxx se xxxxxxxxxx látkou xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx kostní xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, poprvé xx xxxxx než xx 24 xxxxxxxx x xxxxxxx ne xxxxxxx xxx xx 48 hodinách xx xxxxxx látky, x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx vzorků. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx než po 24 xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx minimálně xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxx xx 36 xxxxxxxx od podání xxxxx, xx vhodnými xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx nikoli xxxx xxx 72 xxxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xx xxxxx xxxxxx dvakrát nebo xxxxxxxx za den (xxxx. xxx nebo xxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xx vzorky x xxxxxxx kostní xxxxx xxxxxx xxxx 18 x 24 hodinami xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx a v xxxxxxx periferní krve xxxxxx xxxx 36 x 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (12).
Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx-xx xx studie xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, je třeba xx xxxxxxxx x xxxx laboratoři xx xxxxxxx stejného xxxxxxxxxxx xxxxx, kmene, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x hlavní xxxxxx (13). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx užívají xxx xxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx dávky xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx maximální toxicity x xxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx použít xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx vyšších xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx byly letální. Xxxxx, xxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou biologickou xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx představovat xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx dávek x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx dávka, xxxxx xxxx x určitým xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx (např. xxxxxx podílu nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxxx krvi).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx xxx xxxxx minimálně 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx ve xxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx x jestliže xx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x podobnou chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx genotoxicita, xxxxxx xxx provedena xxxx studie za xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx limitní xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx xx den xxx době trvání xx 14 xxx, x 1000 mg/kg xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx v limitním xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx sondou, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx i xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx kapaliny, xxxxx se dá xxxxxx nebo injekcí xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx xxxxxxxxx pokusného xxxxxxx a nemá xxxxxxxxx 2 ml/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx žíravých xxxxx, xxx normálně xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba upravit xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx objem byl xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx tak xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx / xxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx se obvykle xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx, buňky se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx metodami. Xxxxxxxxx xxxx se xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxx jiné vhodné xxxx. Krevní xxxxx xx okamžitě xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (8) (9) (10), xxxx se xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx obarví. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx XXX (xxxx. akridinové xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 x xxxxxxxxx-X (15)) se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx DNA xxxxxxxxxx. Xxxx výhoda xxxxxxxxx, xx xx xx xxxxxx použít xxxxx barviva (např. Xxxxxx). Xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx - například xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx buněk x xxxxxx (16) - xxxxx xxxx xxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx rutinně xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
U každého xxxxxxx se stanoví xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x celkového xxxxx xxxxxxxxxx (nezralé + xxxxx). X xxxxxx xxxxx xx xxxxxx x případě xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx 1000 xxxxxxxxxx (17). Všechny xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. X každého jedince xx xxxxxxxxxxx minimálně 2000 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxx, xx xx mikrojádra xxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx analýze xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx nezralých erytrocytů x celkového počtu xxxxxxxxxx xxxxx xxx 20 % xxxxxxx x xxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx po dobu xxxx týdnů nebo xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx vyhodnotit x xxxxxxxxx 2000 xxxxxxx erytrocytů xx xxxxxxx jedince. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy (xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx - xxxx xxxxxxxxx), xxxxx xxxx zdůvodněny a xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Údaje x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x tabelární xxxxx. Experimentální xxxxxxxxx xx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x mikrojádry x xxxxx nezralých xxxxxxxxxx xx všech xxxxxxxxxx. Xxxxx byl xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx čtyř týdnů xxxx xxxx, xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxxx). Xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx se xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx. Nejsou-li žádné xxxxxxx o xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx rozdílně, je xxxxx xxxxx za xxx pohlaví xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX A INTERPRETACE XXXXXXXX
Xx zjišťování xxxxxxxxxxx výsledku xx xxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx látky závislý xxxxxx počtu buněk x mikrojádry xxxx xxxxxxxx nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx vyhodnocování výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (18) (19). Statistická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxx testováním, xxxxxxx xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, se x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za nemutagenní.
Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx souboru dát xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx nejednoznačné xxxx problematické, i xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testu xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx tvorbu xxxxxxxxxx, xxxx důsledek chromozómového xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx dřeni příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx erytrocytech.
Xx xxxxx uvažovat, xxxx xx pravděpodobnost, xx xxxxxxxxx xxxxx bude xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx uvést xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx známa.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx druh/kmen,
- xxxxx, věk x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx počátku xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- pozitivní a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x přípravě xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx podávání,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, že xx xxxxx dostala xx xxxxxxxxx oběhu xxxx do xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx potravy a xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických preparátů,
- metody xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx,
- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxx x každého xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- známky xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx každého xxxxxxx zvlášť,
- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxx každou skupinu,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx x historických negativních xxxxxxx,
- xxxxx xx souběžných xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.13/14. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX
1. METODA
Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx x detekci xxxxxxxx xxxxxx kmeny Xxxxxxxxxx typhimurium (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx) a xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxxxxxx xx vztahu x aminokyselině tryptofan). Xxxxxx uvedených xxxxxxx xxx detekovat xxxxxx xxxxxx xxxxxxx mechanismem xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x chromozómu xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kmenů (1) (2) (3). Xxxxxxx bakteriálního xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x tom, xx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx syntetizovat xxxxxxx xxxxxxxx aminokyselinu. Xxxxx změněná xxxxxxxxxxx xxxxx xx detekována xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx růst xx xxxxxxxxxxxxx aminokyseliny, kterou xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxx x člověka xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxx mutace x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx genech xxxxxxxxxxx xxxxx hrají x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx roli xxx vzniku nádorů. Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx kmenů xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, díky xxxx jsou xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx citlivých xxxxxxxx XXX x místech xxxxxxx, xxxxxxx propustnosti xxxxx pro xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx DNA xx posílení takových xxxxxxx xxxxxxxx DNA, xxx xxxx náchylné x xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx testy xxxxxxxxxx mutací xx x dispozici velmi xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx testování chemikálií x xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Escherichia xxxx xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxx v xxxxx závislém xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx. tryptofanu), jež xxxxx xx vzniku xxxxx, který xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nezávislý.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx substituci xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx bází x XXX. Xxx xxxxxxxxx xxxxx může x takové změně xxxxx xx xxxxx xxxxxxx mutace nebo xx jiném místě xxxxxxxxxxxxx genomu.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mutace) jsou xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxx xxxx x XXX, xxxx se xxxx čtecí rámec x RNA.
1.3 XXXXXXX XXXXX
X xxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, které xx xx xxxxxxx xxxxx liší x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx opravy XXX. Xxxxx xx vitro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx, takže test xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx potenci dané xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Bakteriální xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx jako xxxxxxx screenin xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x zvláště xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx genové xxxxxx. Pomocí rozsáhlé xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx mnohé xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx testu pozitivní, xxxxxxxx také x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Existují ovšem x xxxxxxxx mutagenních xxxxx, xxx xx xxxxx testem xxxxxxxx; xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx rozdíly x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx straně xxxxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxx xxxxxx zvyšují, xxxxx xxxx x tomu, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx mutací může xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (kupříkladu xxxxxx antibiotika) x xxxxx, x nichž xx xxxxxxxxxxx xxxx xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx buněk (xxxxxxxxx xxxxxxx inhibitory topoizomerázy xxxx xxxxxxx analoga xxxxxxxxxx); x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxx tomto xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx; xxxxxx xx xxxxxxxx třídě, x existují karcinogeny, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxx jiným, negenotoxickým xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx neprobíhá.
1.4 PRINCIP XXXXXX
Suspenze xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx vystaví xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxxxxxx exogenního xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx "xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx smísí x xxxxxxx xxxxxx x vylije xx xxxxx x minimální xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx inkubuje x xxxxx x xxxxxxx agarem x xx xxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Při xxxx xxxxxxxx se xxx až tři xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kolonie spočítají x xxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx kontrolních xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxxxx několik postupů xxx xxxxxxxxx testu. X nich nejběžnější xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ["xxxxx incorporation"] (1) (2) (3) (4), preinkubační xxxxxx (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) a xxxxxxxxx xxxxxx (11). Xxxx xxxx popsány xxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx nebo par (12).
Xxxxxxx popsané x xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx plate xxxxxxxxxxxxx x metody xxxxxxxxxxxx. Xxx tyto metody xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxxxxx aktivací, tak xxx ní. Některé xxxxx se detekují xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou; xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxx, kam xxxxxxx xxxxxxxxxx nitrosaminy x krátkým xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, aldehydy, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3). Také bylo xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx třídy mutagenů, xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx neodhalí. Xx xx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx na "xxxxxxxxx případy", x xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx jiných xxxxx. Xxxx identifikovány xxxxxxxxxxx "speciální případy" (xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx, které se xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) a xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx od standardního xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx zdůvodnit.
1.5. POPIS METODY
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx bakteriální xxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stacionárního stadia xxxxx (zhruba 109 xxxxx/xx). Xxxxxxx v xxxxxxx stacionárním xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Důležité xx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx experiment xxxxxxxxxx vysoký titr xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxx xxx x historických xxxxx xxxxxxxxx křivek, xxxx v jednotlivých xxxxxxx stanovením xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx očkováním xx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 37xX.
Použije xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx čtyři kmeny X. xxxxxxxxxxx (XX 1535; XX 1537 xxxx XX97x xxxx 1X97; XX98; x XX100); x xxxxx xxxx xxxxxxxxx spolehlivost x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx reverzním xxxxx xxxx bází XX x xx xxxxx, xx nemusejí xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx mutageny, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a hydraziny. Xxxx xxxxx xx xxxx detekovat pomocí xxxxx X. xxxx XX2 xxxx X. xxxxxxxxxxx TA102 (19), xxxxx xxxx na xxxxxxxxx reverzním xxxxx xxx xxxx XX. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx tato:
- X. typhimurium XX1535 a
- X. xxxxxxxxxxx XX1537 xxxx XX97 xxxx XX97x a
- X. xxxxxxxxxxx TA98 x
- X. xxxxxxxxxxx TA100 a
- X. xxxx XX2 xxxX xxxx X. xxxx WP2 xxxX (pKM101) nebo X. xxxxxxxxxxx XX102.
X xxxxxxx mutagenů xxxxxxxxxxxxx křížové xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx XX102 xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx X. xxxx (xxxx. E. xxxx XX2 nebo X. xxxx WP2 (xXX101)).
Xx xxxxx xxxxxx zavedených xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx markeru x xxxxxxxxxx. Xxx každý xxxxxxxx preparát zásobní xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx nutné xxx xxxx (xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx S. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx kmenů E. xxxx). Xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x xx: přítomnost xx nepřítomnost X-xxxxxx xxxxxxxx tam, kde xx xxxxxxxx x xxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx TA98, XX100 x XX97x nebo XX97, XX2 xxxX (xXX101) a rezistence xxxx ampicilinu + xxxxxxxxxxxx u kmene XX 102); xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (tj. xxx mutace u X. typhimurium xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxX xxxxxx x X. xxxx xxxx xxxX xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx záření) (2) (3). Xxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxx spontánně revertujících xxxxxxx xx frekvenčním xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxx laboratoře a xxxxx xxxxx x x xxxxxxx uvedeném x xxxxxxxxxx.
1.5.1.2 Médium
Xxxxxxx xx vhodný xxxxxxxxx xxxx (xxxx. x Vogelovým-Bonnerovým minimálním xxxxxx X a xxxxxxxx) a xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x biotin xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx několik xxxxxx buněk (1) (2) (9).
1.5.1.3 Metabolická xxxxxxxx
Bakterie se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx jak za xxxxxxxxxxx, tak xx xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx post-mitochondriální xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx enzymů xxxxxxx, xxxx xx Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx kombinace xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (18) (20) (21). Xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx obvykle xxxxxxx v koncentracích xxxx 5 x 30 % x/x xx směsi X9. Xxxxx a podmínky xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému xxxxx záviset xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx případech xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. X azobarviv x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx redukční xxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace (6) (13).
1.5.1.4 Testovaná xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxx xxxxx se xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx mohou xx xxxxxxxxx xxxxxxx přidávat xxxxx nebo se xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.5.2.1 Xxxxxxx kmeny (xxx 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Koncentrace
Xx xxxxxxxxx, která xx xxxxx xxxx v xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, patří xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxxxx se x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxx účelné xxxxxxxx xxxxxxxx a nerozpustnost x předběžném experimentu. Xxxxxxxxxxxx se dá xxxxxxx snížením xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx nebo xxxxxx stupně přežití xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx změnit. Nerozpustnost xx xxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx podmínek, viditelného x pouhým xxxx.
Xxxxxxxxxx maximální pokusná xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx látek, xxx x těchto koncentracích xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx několik xxxxxxxxxxx xxxx být x konečné pokusné xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Testované xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx již za xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx, se xxxxxxx xx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx rušit xxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. √10) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx závislost, xxxx xxx vhodný xxxxxxxx menší. Testování xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx xxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxx-xx xx látka xxxxxxxxxx podstatné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxx zahrnovat i xxxxxxxxx kmenově xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulum) xxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx takové xxxxxxxxxxx, xxx prokazují xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
U xxxxx x metabolickým xxxxxxxxxx systémem xx xxxxxxxxxx látka xxx xxxxxxxxx kontrolu volí xxxxx použitého typu xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Příklady xxxxx, jež xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x testech x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 |
Xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
Látka | CAS | XXXXXX |
Kongo xxxxxx | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx X9. Xxxxx xx 2-aminoantracen použije, xx třeba každou xxxxx X9 charakterizovat xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx metabolickou aktivaci xxxxxxxxxxxxxx enzymy, např. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, uvádí xxxx xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX | |
Xxxx xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 x XX 100 |
2-nitrofluoren | 607-57-8 | 210-138-5 | XX 98 |
9-xxxxxxxxxxxx | 90-45-9 | 201-995-6 | TA 1537, XX 97 a XX 97a |
ICR 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, XX 97 x TA 97x |
xxxxx-xxxxxxxxxxxx | 80-15-9 | 201-254-7 | XX 102 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 | WP xxxX x XX 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, WP2uvrA x XX2xxxX (pKM101) |
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx | 56-57-5 | 200-281-1 | XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (xXX101) |
Furylfuramid (XX2) | 3688-53-7 | kmeny xxxxxxxxxx plazmidy |
X xxxxxxxxx kontrole xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx použití xxxxxxxxxx se vztahem x chemické xxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx x negativní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx, se kterými xx jinak zachází xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xx použijí x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx ovlivnění xxxxxxxxxx xxxxxx ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že zvolené xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx či xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.3 XXXXXX
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx metodě (1) (2) (3) (4) xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx obvykle xxxxx 0,05 nebo 0,1 xx testovaného xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx kultury (xxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x 0,5 xx xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx aktivací se xxxxxxx xxxx 0,5 xx metabolické xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (x rozmezí 5 - 30 % x/x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx směsi) s 2,0 ml xxxxxxxx xxxxx společně x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx /xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xx povrch xxxxx s minimálním xxxxxx. Xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx ztuhnout.
Xxx xxxxxxxxxxxx metodě (2) (3) (5) (6) xx testovaná látka / xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx preinkubovat s xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) a xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,5 xx) obvykle po xxxx 20 xxx xxxx xxxx xxx 30 - 37 xX; potom xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x nalije xx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 ml xxxxxxxxx látky / xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,1 xx bakterií a 0,5 ml směsi X9 xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx vrchního xxxxx. Xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx provzdušňují xxxxxxxx.
Xxx adekvátní odhad xxxxxxx se xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx misky. Duplicitní xxxxxxxx xx přijatelné, xx-xx vědecky xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx xxxxxxx ke xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxx látky xx xxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx nádobách (12) (14) (15) (16).
1.5.4 INKUBACE
Xxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx při teplotě 37 xX pod xxxx 48 - 72 hodin, načež xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx každé xxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xx uvede xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxx), xxx z xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx látku x xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx) xx uvedou xxxxx xxx xxxxxxxxxx misky x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nepožaduje. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx studijních parametrů xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx ("xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xxxx preinkubace x xxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxxx metabolické xxxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Ke xxxxxxxxx pozitivního výsledku xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx závislý xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx revertantních xxxxxxx na xxxxx xxxxx při xxxxx xxxx více xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx něj (23). Xxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jako xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (24), statistická xxxxxxxxxx xx však neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx výsledky výše xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují, xx x xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx nelze xx xxxxxxxxx souboru xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, x když se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxxxxxxxx xxxxx na reverzní xxxxxx ukazují, xx xxxxx xxxxxxxx genové xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx posuzovaných xxxxxx v genomu Xxxxxxxxxx typhimurium xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx. Negativní xxxxxxxx ukazují, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxxx xxxxx mutagenní.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla,
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- použité xxxxx,
- počet xxxxx x kultuře,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx misku (x xx xxxx μx) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx,
- použitá xxxxx,
-xxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- postupy xxxxxxxx (xxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- známky toxicity,
- známky xxxxxxx,
- počty na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, byly-li xxxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- údaje x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.15. XXXXXX XXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxx haploidní a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mohou xxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx genových xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx bez x x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx kmenů, xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx x červených, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx-1, xxx-2) xx xxxxxxx, xxxxxx vyžadující xxxx mutanty x xxxxxxxxxx systémy, jako xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx canavaninu x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx XV 185-14 X x xxxxxxxx (xxxxx) nonsense xxxxxxxx xxx 2-1, xxx 4-17, lys 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx mutagenů xxxx xxxxxx bazí, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx supresorové mutace. XX185-14X nese xxxxxx xxx 1-7 marker, xxxxxxxx xxxxxx, revertovanou xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxx 3-10, xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny.
U xxxxxxxxxxx kmenů S. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X7, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxx xxx 1-92.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Roztoky testovaných xxxxx x kontrol xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx použití vhodného xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxx xxxx roztok xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % v organických xxxxxxxxxxxxxx, jako xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Finální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivnit životnost x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Buňky xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx postmitochondriální xxxxxx xxxxxxxxxx x jater xxxxxxxx po aplikaci xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, postmitochondriálních frakcí xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx aktivaci.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxx XX 158-14C x xxxxxxxxx xxxx X7 xxxx xxxxxxxxxxxxx pro xxxxxx genových xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx vhodné.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx kultivační xxxxx xxxx xxxxxxx xxx určení počtu xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x rozpouštědlem xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxxxxx současně. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X toxických xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx přežití xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.5 Kultivační xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx sedm xxx xxx 28 xx 30 xX xx tmě.
1.2.2.6 Frekvence xxxxxxxxxxx mutací
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací x xxxxxxxxx xx xxx x rozmezí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x u xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx markery xxxx xxx 3-10 x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx počet xxxxx xxxxxx, xxx xxxx získány xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx x tekutém xxxxxxxxx a zahrnuje xxx stacionární xxxx xxxxxxxx buňky. Základní xxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xx rostoucích xxxxxxx: 1-5 x 107 xxxxx/xx xx xxxxxxxxx testované xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 xX za xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx ovlivnění jsou xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx kultivační xxxxxx. Xx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x buňky s xxxxxxx genových xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxx proveden druhý xxxxx x buňkami xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx první xxxxx pozitivní, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx mají xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, počet xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx výsledky mají xxx potvrzeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx,
- podmínkách testu: xxxxx xx stacionární xxxx nebo rostoucí, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx aktivační systém,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, přežívajících buněk x frekvenci mutací, xxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx rekombinace u Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx) x uvnitř xxxx. První případ xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, kdežto xxxxx xxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xx xxxxxxx genová xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx testováno xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx vzniklých u xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx základě tvorby xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzniklých x auxotrofního heteroalelického xxxxx, který xxxx xxx xxxxx defektní xxxxx téhož xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx kmeny xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx jsou X4 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 2 a xxx 5), D7 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 5), BZ34 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4) x JD1 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4 x trp 5). Xxxxxxxxx překřížení xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x X5 xxxx X7 (xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx mutace x xxx 1-92). Xxx xxxxx xxxx heteroalelické xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx 2.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx těsně před xxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx vehikula. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxx xxxx xxxxxx xxxxx než 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Metabolická xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testovaných xxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx v xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx systémem xx postmitochondriální xxxxxx xxxxxxxxxx z jater xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx indikujících xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx může xxx rovněž xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx aktivaci.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Nejužívanější xxxx xxxxxxxxx kmeny X4, X5, X7 a XX1. Užití xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxx specifickou xxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxx chemické látky.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx mít xxxx xx životnost xxxxx. U xxxxxxxxx xxxxx xxxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx redukovat xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx ve vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx testovány xx xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx postupů. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, ve xxxx xxxxxxxxx, xx určena xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx být xxxxxxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx xxx stacionární xxxx, nebo xxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx tvorbu xxxx, xxxxxxx přítomnost xxxx znehodnocuje.
1.2.2.5 Podmínky xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve tmě xx xxxxx až xxxx xxx při 28 - 30 xX. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx červených x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx překřížením xxxx být umístěny x xxxxxxxxxx (xxx 4 xX) xx xxxxx 1 - 2 xxx před xxxxxxxxx, xxx se xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx rekombinace
Xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx akceptovaných xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx replikací
Xx nutno xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x testu prototrofních xxxxx tvořených xxxxxxxxxx xxxxxxx konverzí x xxx určení xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxx recesivní xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx překřížením xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx kolonií.
1.2.2.8 Xxxxxx
Xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx test x xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx buňky. Xxxxxxxx xxxxxx mají xxx provedeny xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. 1-5 x 107 buněk/ml xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx po xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xx přidáno x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx to potřebné.
Xx skončení ovlivnění xxxx xxxxx centrifugovány, xxxxxxx x vyočkovány xx vhodné kultivační xxxxxx. Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx přežívající xxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Jestliže xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xx stacionární xxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx dalším xxxxxxx nezávislým xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje mají xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx formě x xxxxxxxx počet kolonií, xxxxx rekombinací, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx fázi xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x trvání xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx aktivační xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx experimentu: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx ovlivnění, teplota xxx xxxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxx kolonií, xxxxx rekombinant, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, vztah xxxxx x xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx výsledků.
X.17. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXX MUTACÍ X XXXXXXX XXXXXXX XX VITRO
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX TG 476, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxx Xxxx Xxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx in vitro xx xx xxxxxxxx xx zjišťování genových xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx vhodné xxxxxxx xxxxx patří xxxx xxxxxxxxx xxxxx X5178X, xxxxx XXX, XXX-XX52 a X79 xxxxx xxxxxxxx křečka x xxxxxx lymfoblastoidní xxxxx XX6 (1). X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx konečný genetický xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (XX) x hypoxanthin-guanin fosforibosyltransferáze (XXXX) x x xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Testy xxxxxx x XX, XXXX x XXXX se xxxxxxxx xxxxx spektra xxxxxxxxxxx xxxx. Autosomální xxxxxxxxxx XX x XXXX xxxx xxxxxxx xxxxxxx i xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxx), xxxxx xx na xxxxxx XXXX xxxxxxxxxx X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
X xxxxx na xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx dají xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxx. Při xxxxx xxxxx se xxxxx x úvahu xxxxxxx xxxxxxxxxx dané xxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx in xxxxx xxxxxx vyžadují xxxxxxxx xxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx dokonale. Xx třeba vzniku xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx by xxxxxxxx xxxxxxxxxx vlastní mutagenitu. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxx důsledkem xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx pH, osmolality xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (7).
Xxxxx xxxx se xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxx, které xxxx x tomto xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx však xxxxxxxx korelace mezi xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Tato korelace xxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx více xxxxxxx toho, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx testem xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nepůsobí (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx mutace: genová xxxxxx výchozího typu xxxxxxxx formy, jež xxxx xx xxxxx xxxx ztrátě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kódovaného xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx páru xxxx x DNA.
Frameshift mutageny (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx posunové xxxxxx): xxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxx bází x XXX.
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: období, xxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx zmutovaných buněk xxxxxxxxxxxx nezměněné genové xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx počtem xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx celkový xxxx: xxxxxx počtu xxxxx x xxxx v xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxxx xxxxx; vypočítává xx xxxx součin xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxx klonovací xxxxxxxxx xxxxxxx efficiency (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxx nárůst xxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx x negativní kontrolou.
Životnost (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx efficiency) xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx: xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xx xxxxx působení xxxxx; xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx XX+/- → XX-/-, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx trifluorthymidinu (XXX). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx vůči XXX xxxxxxx, což xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx metabolismu x zastavuje xxxxx xxxxxxx dělení. Za xxxxxxxxxxx XXX xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx XXXX nebo XXXX selekčně xxxxxxxxxxx xxxx 6-xxxxxxxxxxx (XX) xxxx 8-xxxxxxxxxx (AG). Xxxxx je xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx selekčním xxxxxxxx analyzována x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx bedlivě zvážit. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx selekční toxicitu xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x mutacemi x bez xxxx. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxxxxxxx strukturně příbuzné xx selekčním xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xx je xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).
Xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx kultuře xx xx vhodnou dobu xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxxxx xx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx výběrem mutantů (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) (cloning xxxxxxxxxx) xxxx relativního xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx látky. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x růstovém xxxxx xx xxxxxxxxxxx dobu, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx x xxx xxxxx, aby mohlo xxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx fenotypické expresi xxxxxxxxxxxx mutací. Frekvence xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a v xxxxx bez xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (životnosti). Xx xxxxxx inkubační xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x x počtu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Příprava
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxx L5171Y, XXX, CHO-AS52, X79 x XX6. U xxxxxxxxx typů používaných x tomto xxxxx xxxx xxx prokázaná xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx) x stabilní xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xx kontroluje, xxx nejsou kontaminovány xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxxxx buňky xx použít xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx naplánovat xxx, xxx měl xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (power). Počet xxxxx, xxxxx kultur x koncentrace testované xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx parametrům vyhovovat (14). Minimální počet xxxxxxxxx buněk, které xxxxxxx expozici x xxxxxxx se x xxxxxxxxxxxx stadiích xxxxx, xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Obecným xxxxxxxx xx, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx desetinásobkem xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxxxxx xx však použít xxxxxxx 106 buněk. Xxxx xx být x xxxxxxxxx adekvátní xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xx prokázala xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.2 Média x kultivační xxxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxx xxxxxxxxxx média a xxxxxxxxx xxxxxxxx (kultivační xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx xx pro xxxx xxxx podle xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxxx kultivace xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buněk xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx jak xxxxxxxxxx, tak xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx namnoží xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x inkubují xxx xxxxxxx 37 xX. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx zbavit dříve xxxxxxxxx mutovaných buněk.
1.4.1.4 Metabolická xxxxxxxx
Xx xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx působí x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx je Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx a β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x médiu xxxx xxxxxxx 1 - 10% v/v. Aktivita xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxx, jakého typu xx xxxxxxxxx chemikálie. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx použity x xxxxxxxxx modifikované buněčné xxxxx exprimující xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxx vědecky xxxxxx (např. xxxxxxx xxxxxxxxx cytochromu P450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Je-li xxxxxxxxx látka v xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx působením xx xxxxx rozpustí xxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle x xxxxxxxx naředí. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x jejich xxxxxxxxx prokazují, že xxxxx xxxxxxxxxx neovlivňuje xxxxxx vlastnosti.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
X zvoleného xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx podezření, xx by xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxxx přežívání xxxxx a aktivitu X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxx rozpouštědlo xxxx xxx podpořeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxx xxx, xxx xx to xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Voda xx dá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxx stanovování xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x systému x změny pH xxxx. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x hlavním xxxxxxxxxxx, přičemž se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx růst. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx minimálně xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxxxx xx nízké xxxx xxxxxx toxicity. Xx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, měla xx xxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxx (relativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx růstu x 10-20 %, xx však xxxx xxx 10 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx dávka xxxx xxx nejnižší x xxxxxx 5 xx/xx, 5 μl/ml x 1,01 M.
U relativně xxxxxxxxxxxxx látek, xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx xx xxxxxxxxxxx, při xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxx rozpustnosti xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx začátku x xx xxxxx působení, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx během expozice x důsledku přítomnosti xxxxx, X9, séra xxx. xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx zjistit x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.3 Xxxxxxxx
X xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx i xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo, xxxxxxxxx) xxxxxxxx, x to xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx být pozitivní xxxxxxxx látka vyžadující xxxxxxxxxxxx aktivaci x xxxxxxxx mutagenního xxxxxx. Xxxx látkami xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx patří xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx nitrosomočovina | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
TK (xxxx x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XXXX | xxxxx metansulfonát ethyl xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (xxxx x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XXXX | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx X-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
xxxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
Xxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje x 5-brom-2'-deoxyuridinu (XXX 59-14-3, číslo XXXXXX 200-415-9), lze xxxxxx x tuto xxxxxxxxxx xxxxx. Xxx, xxx xx to xxxxx, xx xxxxxx použít xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx interval sklízení xxxxxx xx třeba xxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx rozpouštědlo xxxx vehikulum x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mimoto xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx kontrolu bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx nevykazuje žádné xxx xxxxx xxxxxxxxxx xx mutagenní účinky.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Xxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xx xxxxxx doba 3-6 xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx koncentraci xx používají kultury xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx jedna xxxxxxx, xx xxxxx zvýšit xxxxx koncentrací xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kultur x xxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx uplatnit x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx použití xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kultivačních xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, viability x mutační xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx promyjí x xxxxxxxxx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx začíná x analýzou cytotoxicity xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx - cloning efficiency xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx mutantů (XXXX x XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, XX xxxxxxxxx 2 xxx). Xxxxx xx xxxxxxx x médiu x x bez xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx mutantů a xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx doby exprese xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx) inokulací xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx látka x xxxxx X5178X XX+/- xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx na jedné x experimentálních xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xx negativních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx látka x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Měření xx xxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxx s XX6XX+/-.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx stanovení cytotoxicity x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x experimentálních x kontrolních kultur. X případě xxxxxxxxx xxxxxx x testu X5178XX+/- xx kolonie xxxxxxx xxxxxx kritérií xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx x pozitivní kontrole. Xxxxxxxxxxx a cytogenetické xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx xxxxx XX+/- xx xxxxxxx hodnotí xxxxx xxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxx růstu (xxxxx) x xxxxxxxx xxxxx (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx poškození, mají xxxxx xxxx xxxxxxxx, x xxxxx tvoří xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxx genu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx malých xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x expozicí xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx postižené xxxxxxx xxxxxx podobnou xxxxxxxxx xxxx buňky rodičovské x vytvářejí xxxxx xxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx relativní celkový xxxx. Xxxxxxx frekvence xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx x kultivačních xxxxxxxxxx; nakonec se xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx musí potvrdit xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx negativních xxxxxxxx nepovažuje xx xxxxx, xx třeba xxxxx zdůvodnění. X xxxxxxx nejednoznačných xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx tak, xxx se rozšířilo xxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx nárůst xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx třeba uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx neměla xxx xxxxxxx určujícím faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx kritéria, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nelze xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x savčích xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx - xxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, že xx xxxxxx experimentálních podmínek xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx savčích xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xx zprávě x průběhu pokusu xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- rozpustnost x xxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx známa.
Buňky:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx pasáží,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx kultury,
- absence xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx např. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x rozpustnosti, xxxx-xx k xxxxxxxxx,
- xxxxxxx média, koncentrace XX2,
- koncentrace xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x přidané xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx teplota,
- xxxx xxxxxxxx,
-xxxx působení xxxxx,
- hustota xxxxx xxxxx xxxxxxxx látky,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx xxxxx inokulovaných xxxxx, xxxxxxxxx)
- selekční xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx,
- metody zjišťování xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxxx xxxxxxx, x nichž xx xxxxxxx xxxxxxxx x typ (xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx mezi "xxxxxx" x "velkými" xxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx toxicity,
- xxxxxx xxxxxxx,
- údaje x xX a xxxxxxxxxx xxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx, jsou-li stanoveny,
- xxxxxxxx xxxxxxx, je-li xxxxxxxxx, minimálně pro xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx možnosti xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx L5178Y XX+/-,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- xxxxxxxxxxx analýzy, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxx rozpětí, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.18. XXXXXXXXX XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX XXXXXXX XXX - XXXXX XXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx neplánované xxxxxxx XXX (XXX) xxxxxxxx xxxxx reparační xxxxxxx XXX xx xxxxxx x odstranění xxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx indukovaného xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Test xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx tymidínu (3X-XxX) xx DNA xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x S xxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx 3X-XxX je stanoven xxxxxxxxxxxxxxxxx nebo kapalnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx potkaních xxxxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxx testovanou látkou xxx v xxxxxxxxxxx, xxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. XXX xxxx být xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx referenční se xxxxxxxx xxxx suspendují x kultivačním xxxxx xxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx médiem. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx nepříznivě xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných linií (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx).
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx bod xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kultur xxx autoradiografii x xxxxx xxxxxx (xxxx xxxx, je-li xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxx XXX UDS.
1.2.2.2 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx experimentu xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx negativní x xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx hepatocyty použít 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-XXXX) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxx x xxx XXX xxx metabolické xxxxxxxx lze použít 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Xxxx xxxxxxxxx kontrolu při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx lze použít X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx být použito xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x koncentracích xx xx xxxxxxx rozpustnosti xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx případ xx xxxxxxx.
1.2.2.4 Buňky
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx x xxxxxxx. Stabilizované xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx kontrolovány xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx a lymfocyty xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Stabilizovaná buněčná xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx kultury (xxxxxxxxxx xxxx setřepáním xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx nádoby), inokuluje xx do kultivačních xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 oC.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx připravují xxx, xx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přichytit xx xx vhodném médiu x xxxxxxx kultivační xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx metody.
1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur xxxxxxxxx xxxxx
Primární xxxxxxxxxx xxxxxxx. Čerstvě xxxxxxxxx xxxxxxxxxx potkana xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX po xxxxxxx xxxx. Xx ukončené xxxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxx, buňky xxxxxxx, xxxxxxxx a sušeny. Xxxxxxx xxxx ponořena xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxx může xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, obarvena x vyhodnocena.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxxxx techniky: Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxx xxxx x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 3X-XxX. Xxxx působení je xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx systému x xx typu buněk. X xxxxxxxxx nejvyššího xxxxxxx XXX xx xxxxx 3X-XxX přidat xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x 3X-XxX. K xxxxxxxx xxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxxxx replikací XXX xx užívá arginin xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx, což xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX.
Xxxxxxxxx XXX xxxxxx XXX: Xxxx expozicí xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx vstup buněk xx X-xxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx jsou xxx xxxxxxxxxx testované látce, xxx xxxx popsáno xxx xxxxxxxxxxxxxxx. Na xxxxx xxxxxxxxx xx XXX xxxxxxxxxxx z xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx XXX x xxxxx rozsah xxxxxxxxxxx 3H-TdR.
Xxxxxxxx xxxx použity xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx x nestimulovaných kulturách xxxxxxx semikonzervativní xxxxxxxxx XXX xxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxx
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx v X-xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx 50 xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx hodnotí xxxxxxx xxxxxxx vybraných xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 3X-XxX v xxxxxxxxxx xx xxxx v xxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx hodnocené xxxxx.
1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx LSC
Xxx xxxxxxxxx XXX XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx počet xxxxxx xxx každou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxx xxxxxxxx.
Výsledky xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx experimentech.
2. XXXXX
Údaje musí xxx uvedeny x xxxxxxxxx.
2.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx inkorporace 3X-XxX xx cytoplazmy x xxxxx zrn xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx jádro xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxxxxx a xxxxx zrn v xxxxx je hodnocen xxxxxx průměru, xxxxxxx x xxxx.
2.2 Vyhodnocení XXX
Inkorporace 3X-XxX xx xxxxxxxxxxx jako xxx/μx DNA. Xxxxxxxx xxxxxxx dpm/μg XXX xxxxx xx směrodatnou xxxxxxxxx xx používají x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Zpráva o xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx o:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, jejich xxxxxxx x číslu xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx použitých x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, koncentraci XX2,
- xxxxxxxxx látce, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx výběru x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx,
- pozitivních a xxxxxxxxxxx kontrolách,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx X-xxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx XXX x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XXX xxx xxxxxx XXX,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.19. XXX - XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX IN XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
XXX xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx chromatidami xxxxxxxxxx. XXX reprezentují xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxx replikačními xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) lokusech. SCE xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx zlom x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx je zatím xxxx znalostí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Detekce XXX xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XxxX) xx xxxxxxxxxxxxx XXX xx xxxx xxxx buněčných xxxxx.
Savčí xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované látce x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx, xx-xx to xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx XxxX. Xx xxxxx kultivace se xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (např. xxxxxxxxx) k xxxxxxxxx xxxxx x x-xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx). Buněčné xxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x kultivační xxxxxxxx (teplota, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2 x xxxxxxx).
Testovaná xxxxx xx rozpouští xxxx suspenduje x xxxxxxxxxxx médiu nebo xx vhodném rozpouštědle. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxx XXX.
Xxxxx xx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Připouští xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx (xxxxxxx) metabolickou aktivitou, xxxxxxxx úroveň x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx vhodné xxx xxxxxxxxxx skupinu xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Experimentální podmínky
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx vyžadující metabolickou xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx použita negativní xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx lze použít:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: etylmetansulfonát
- xxxxxxx působící xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx
Je-li třeba, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx pozitivní kontrolu xx xxxxxx chemické xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinek, xxx xxxxxxx musí xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxx relativně xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx až xx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx rozpustné xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx kultivační xxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx nádob xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx při 37 xX. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx počet xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx nevytvářely xxxx xxx x 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Lze také xxxxxx xxxxxxxxxxx kultur. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx kultury xx připraví x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x inkubují xxx 37 xX.
1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur
Buňky xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu. Xx xxxxxxx xxxxxxx stačí xxxxx až xxx xxxxxx, ale expozice xxxx být xxxxxxxxxxx xx na dva xxxxxxx xxxxx, xx-xx xx xxxxx. Xxxxx, xxxxx nemají xxxxxxxxxxx xxxxxxx metabolickou xxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na xxxxx xxxxxxxx je testovaná xxxxx z média xxxxxxxxxx, buňky xxxxxx x dále xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x XxxX xxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být buňky xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx a XxxX po xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx lymfocytární xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, dokud xxxx x semisynchronizovaných xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx analyzovány x druhém mitotickém xxxxxx xx expozici xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx s XxxX xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žárovky, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx BrdU.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxx hodiny xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx dělicího xxxxxxxx (např. kolchicín). Xxxxx kultura xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx XXX xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxx xxxx Giemsa).
1.2.3.5 Analýza
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx SCE x xxxxxxxx. Xxxxxxx xx hodnotí xxxxxxx 25 xxxxx rozprostřených xxxxxxxx xx každou xxxxxxx. Preparáty musí xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx analyzují xxxxx xxxxxxxx s 46 centromerami. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, které se xxxx x ± 2 centromery od xxxxxxxxx xxxxx centromer. Xx xxxxx stanovit, xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX v xxxxxxx centromery. Xxxxxxxx xxxx xxx ověřeny x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx počet XXX x xxxxx xxxxxxxx x xxxxx XXX/xxxxxxxxx zvlášť xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Údaje se xxxxxxx vhodnými statistickými xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx možné, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx, metabolickém xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxx každý xxxxxxxxxxxxxx xxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (odděleně xxx xxxxxx kulturu),
- xxxxxxxxx xxxxx SCE/buňku x XXX/xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxx každou xxxxxxx),
- kritériích xxxxxxxxx XXX,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx možné,
- xxxxxxxxxxxx vyhodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.20. RECESIVNÍ XXXXXXX MUTACE VÁZANÉ XX XXXXXXX X XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxxx letální xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx (XXXX) xx Drosophila xxxxxxxxxxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxx, jak genových, xxx x xxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxx hmyzu. Je xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx chromozómu X. Xxxx xxxxxxxxxxxx ani 80 % xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přibližně 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx v X-xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx projeví x samců xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx stavu, xxx xx její xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx typů xxxxxxx xxxxxxx, kteří xx xxxxxxxx xxxx heterozygotní xxxxxx. XXXX test xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx chromozómů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxx
Používají xx xxxxx dobře xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx linie Xxxxxx-5. Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx vhodné xxxxx xxxxxxx linie xxxxx x vícenásobnou xxxxxxx X-chromozómu.
1.2.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx
Testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx ve xxxx. Xxxxx xx xxxx nerozpustné xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle (xxxx. xxxx xxxxxxx x Tweenu-60 xxxx 80), xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx dimetylsulfoxid (DMSO) xxxx vehikulu.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx frekvence xxxxxx x kontrolní skupině xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x cukerném xxxxxxx. Xx-xx xx nutné, xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx v 0,7% xxxxxxx NaCl a xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.1.5 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jestliže xx xxxxxxxxx x dispozici xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, není třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kontroly.
1.2.1.6 Dávkování
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx testované xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se používá xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx maximální xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx dosažitelné xxxxx.
1.2.2 Popis xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxx (xx xxxxx 3-5 xxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx kříženi x xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxx Xxxxxx-5 nebo x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx linie (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-chromozómu). Samice xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx samice xxxxx dva xx xxx xxx, xxx xxx xxxxxx celý xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. U xxxxxxx xxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx efekt xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, na xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx pozdním stadiu, xxxxx spermatidy, xxxxxxxxxxxx x spermatogonie.
Heterozygotní X1 xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx křížení xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx/xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx. X F2 xxxxxxxx je x xxxxx xxxxxxx zaznamenávána xxxxxxx xxxxx divokého xxxx. Jestliže v xxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx xxxxxxx letální xxxxxx x xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (nejsou xxxxxxxx xxxxx samci s xxxxxxxxxx chromozómem), xxxxx xxxxxx samic xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx, zda xxxxxxxx xx opakuje x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx údaje xx zpracují xx xxxxx xxxxxxx. Uvádí xx xxxxx hodnocených X-xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx pro každou xxxxxxxxxxx, pro xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxx xxxxxxx testovaného xxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx každého xxxxx. Výsledky se xxxx potvrdit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx zhodnotí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nahromadění xxxxxxxxxxx letálních mutací xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxx v xxxxx x zhodnoceno vhodným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, informace x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kmenech Xxxxxxxxxx, xxxx, počtu ovlivněných xxxxx, počtu xxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxxxxxx X2 xxxxxx, xxxxx F2 xxxxxx xxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx ovlivněných xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxx popis xxxxxxxxxxx x xxxxxx odběru xxxxxx, výše xxxxx, xxxxx x toxicitě, xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x pozitivní xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx počítání xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx expozice/účinek, je-li xx možné,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.21. XXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXX BUNĚK - XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Savčí xxxxx xxx použít xxx xxxxxxx fenotypických xxxx xx vitro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkami xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx používají xxxxx X3X10X1/2, 3X3, XXX, Fischerových xxxxxxx x test xx xxxxx o změny xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxx x uchycení x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx používají xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx fyziologické xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx výsledek in xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx karcinogenity. Xxxxxxx xxxxxxx jsou schopné xxxxxxx promotorů. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx účinku xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxx kolonie (xxxxxxx xxxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx růstu xxxxxxx. Xxx hodnocení cytotoxicity xx vychází xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx k xxxxxx xxxxxxxxx transformace xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx k prodloužení xxxxxxxx nebo x xxxxxxxxxx.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxx
Existuje xxxx xxxxxxxxx xxxxx x primokultur použitelných x testu transformace. Xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx x testu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx příslušné xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxx používaný xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xx je xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x spolehlivost.
1.2.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxx test xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx
Testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx médiu xxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx ovlivněním buněk. Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx životnost xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Buňky xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x přítomnosti x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx její xxxxxxxxxx xxxx vhodné xxx xxxxxxxxx látky.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
Do xxxxxxx experimentu xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontroly:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-propiolakton,
- xxxxx xxxxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx: 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx, 4-dimetylaminoazobenzen, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Je-li třeba, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se nejméně xxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxx efekt závislý xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx testovat až xx hranici xxxxxx xxxxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxx xxxx být exponovány xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Ta xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx (ev. výměnou xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx se xxxxx o prolongovanou xxxxxxxx. Buňky bez xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx vhodného metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx expozice xx x buněk xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaná xxxxx x kultivace probíhá xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xxxx xxx prezentovány x tabulkové xxxxx. Xx vhodné xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx kontrolní úrovně x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Data xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu pokusu xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, informace o:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx kultury, xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: koncentraci xxxxxxxxx xxxxx, době inkubace, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx to vhodné), xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx vyčíslení xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- diskusi xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX TEST U XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx dominantních xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx xxxxx poškozuje xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx, xx dominantní xxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx poškozením xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Smrt xxxxxx xxxxxxxxxx samice může xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxx exponováni xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx x neovlivněnými, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Vzestup xxxxxxx xxxxxxxxxx xx samičku x exponované xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx vyjadřuje xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx hodnotí xx xxxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx implantací xx xxxxxx v exponované x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx dominantní letalita xx xxxxxx pre- x postimplantačních ztrát. Xxxxxxx xxxxxxx dominantní xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx samici x xxxxxxxxxx skupině x xxxxx xxxxxxxxxxx xx samici v xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (x.x. xxxxxxxxxxxx x/xxxx spermatogonií).
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Testovanou xxxxx rozpustit xxxx xxxxxxxxxxx ve fyziologickém xxxxxxx. Látky xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx rozpouštědlo xxxxx xxxxxxxx x testovanou xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Obvyklý způsob xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Experimentální xxxxxxx
Xxx xxxx xx doporučují xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxx, xxxxxxxx dospělá xxxxxxx jsou náhodně xxxxxxxxx xx exponované x xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx počet exponovaných xxxxx x ohledem xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, aby xx dosáhlo 30 - 50 xxxxxxx xxxxx na připouštěcí xxxxxxxx.
1.2.2.4 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pozitivní x xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxx xxx zařazeny do xxxxxxx experimentu. Jestliže xxxx má laboratoř x dispozici přijatelné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x nedávných xxxxxxxxxxx, xxxxx být xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx dávkách, aby xxxx prokázána citlivost xxxxx (např. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 xx.xx-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx tři dávkové xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx snížené xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx dávka.
1.2.2.6 Xxxxxxx xxxx
Netoxické xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxxxx 5 x.xx-1 xxxx x xxxxx 1 x.xx-1.xxx-1 xxx opakované xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx však xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx.
Jeden samec xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx nebo xxxxx neovlivněnými, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vhodných xxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx. Samičky musí xxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx, nebo xxxxx xx xxxxxxxxx spermie xx vagině xx xxxxxxxxx xxxxx.
Počet xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx všechna stadia xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx je xxxxxxxx k určení xxxxx xxxxxxx x xxxxxx implantací. Xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x určení počtu xxxxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx x xxxxx xxxxx, počtu březích xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx samic xxxx xxxxxxx x tabulkách. Xxxxxxxx každého páření xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a samice xxxx uváděny xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, x xxxxx podané samci, x xxxxx živých x mrtvých xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx celkového xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx efektu xx xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx živých xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx živých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině. Xxxxx xxxxxxx ku xxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx ke xxxxxxxx poměru v xxxxxxxxx skupině xx xxxxxxx vypovídá x xxxxxxxxxxxxxxxxx ztrátách.
X xxxxxxx xxxx být xxxxx odlišeny xxxxx x pozdní letalita. Xxxx xxx zaznamenány x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx jako rozdíl xxxx xxxxxx corpora xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Údaje xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxx, xxxxx, xxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x exponovaných x xxxxxxxxxxx skupinách,
- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x důvodech xxxxxx xxxxxx, negativních a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx expozice,
- xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx,
- doba xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx počítání dominantních xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxx/xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX V XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 483, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx testu xx xx xxxx identifikovat xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx spermatogoniích (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, ovšem k xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx rovněž. Tato xxxxxx není xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx nepoužívá. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx příčinou řady xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx, a xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx predikovat indukci xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx buňkách.
X xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx xxxxxxxx. Tímto xxxxxxxxxxxxxx testem xx xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx nepoužívá jiné xxxxxx buňky.
Xxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx chromatidového xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxxxxx ztratí x následujícím xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx informace x xxxxxxxxxxx spermatogonií xxx získat xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómů, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, x xxxx xx ovlivněné buňky xxxx ve xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xx xxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x somatických buňkách xxxx xxxxxxx x xxxxxxx zárodečných. Xxxxxx xx test xxxxxx xxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX.
X xxxxxx je xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx látkám. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, kde xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx generace spermatogonií xxxxx, xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx bariéře.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx toho, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, není xxxx xxxxx xxx xxxx vhodná.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx chromatidového xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx.
Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: strukturální poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx respektive jako xxxx a opětovné xxxxxxx obou chromatid xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx jako aberace xxxx xxxxxxxxxxx chromozóm, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: jako xxxx xxx hodnotit porušení xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx chromatid xx xxxxxxxxxxx, že vzniklá xxxxxx xx struktuře xxxxxxxxxx je xxxxx, xxx xx šířka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx v xxxxxxxxx, xxxxxxx (distální) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx dislokovaný (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx jedna chromatida xxxxxxxxxxx chromozómu xx xxxxxx v důsledku xxxxxx.
Gap: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx buňky.
Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (n) xxxx xxx diploidní xxxxx xxxx (3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx, x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Xxxxxxx xx vhodným způsobem xxxxxxxx testované xxxxx x xx xxxxxxx xxxx xx působení xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metafázi (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo Colcemidem®). Xx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Běžně se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxx zahájení studie xxxx být xxxxxxxxx x x každého xxxxxxx nemají xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x části B.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx a experimentální xxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx se xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Xxxxx xx xxxxx uspořádat xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vlivy xxxx, jak a xxx xxxx klece xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx dávek
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x je-li xx xxxxx, látka xx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vhodném rozpouštědle xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. je xxxxx používat čerstvé xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyvolávat toxické xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx xx xx xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx pozitivní a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xx zvířaty ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx kontroly xx xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx vivo xxx xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx spontánní xxxxxx.
Xxxxx při xxxxxxxxx kontrole xx xxxx tak, xxx xxxx xxxxxx patrné, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zakódovaného xxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx xx možné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu.
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
monohydrát xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 |
akrylamid monomer | 79-06-1 | 201-173-7 |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx vehikulem x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxxxxx intervalů xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxx s xxxxxxxxx x o xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mezi xxxxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Počet x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx schéma
Testovaná xxxxx se podává xxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx jedná x xxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx rozdělit, xx. na xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x rozmezí xxxxxxxxx několika xxxxx. Xxxxxx xxxxxx dávkování xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxx.
X případě xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx dvakrát. Jelikož xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, provádí xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 24 a 48 hodin xx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx (xx. xxxx xxxxx xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx xxxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx buněčného xxxxx xx expozici, xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (6).
Xxxxx toho mohou xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxx. xxxxx-xx xx x látku xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxxx xx X-xxxx xxxxx, xxxx vhodnější xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (1).
Zda xx xxxxxx xxxxxx xxxxx působit opakovaně, xx posuzuje xxxxxx xx případu. Pokud xx provádí xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx zvířata xx 24 xxxxxxxx (1,5xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) od xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxxxx i x xxxxxxx intervalech, xxxxxxxx-xx xx xx xx xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injikuje xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx xx xxxxxxx intervalu xxxxxxxx vzorky. X xxxx je tento xxxxxxxx zhruba 3-5 xxxxx, u xxxxxxxx xxxxxx zhruba 4-5 xxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx v xxxx laboratoři za xxxxxxx xxxxxxxx živočišného xxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx režimu, jaké xx použijí x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx užívají pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků tři xxxxx tak, xxx xxxxxxxxx rozmezí od xxxxxxxxx toxicity x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx jenom xxxxxxxx xxxxx. Xx je xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx režimu xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxx, xxx x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx hormony xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx pro stanovení xxxxx x vyhodnocují xx případ xx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx jako dávka, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx spermatogoniích (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xxxxxx xxxx xxx vyšší xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx dávce xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx v jedné xxxxx xxxx ve xxxx dávkách xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx na xxxxxxx údajů o xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx celá studie xx xxxxxxx tří xxxxxxxxx xxxxxx. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx může xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx dávky.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekcí. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x jiné xxxxxxx xxxxxxxx. Maximální objem xxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx překročit 2 xx/100 g hmotnosti; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx dráždivých nebo xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx koncentracích xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, aby xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx usmrcení zvířete xx x jednoho xxxx x xxxx xxxxxx připraví buněčná xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx hypotonickým xxxxxxxx x xxxxxx xx. Xxxxxxx suspenze xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
U xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx minimálně 100 xxxxx rozprostřených xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx). Tento počet xx xx xxxxxx, xx-xx počet pozorovaných xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxx nezávisle zakódují. Xxxxxxx fixační xxxxxxx xxxxx vedou x xxxxxxx určitého podílu xxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxxx chromozómů, xxxx xxx x xxxxx xxxx xxxxx počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx roven číslu 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxxxx. U každého xxxxxxx xx vyhodnocuje xxxxx buněk se xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx počet x xxxxxxx. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xx do celkové xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx, stanoví xx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx i xxxxxx x negativní xxxxxxxx xxxxxxx míra xxxxxxxxxxxx poměr mitóz xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx, x to xxx, xx se x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxxxx xx xxxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx pouze xxxxxx, xxxxxxx se mitotický xxxxx x xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X INTERPRETACE XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx závislá xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx zřetelný xxxxxx počtu xxxxx x aberacemi xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x s xxxxxx časovým intervalem xxxxxx vzorků. Xxxxxxx xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (8); xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx vyjasnit xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Ačkoliv xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx výsledky, xx xxxxxxxxxxx případech xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Výsledky xxxxx xxx nejisté, nebo xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxx opakovaných xxxxxxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x zárodečných xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx oberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek testovaná xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx příslušného živočišného xxxxx chromozómové aberace xxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva o xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx známa.
Pokusná xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx x xxx xxxxxx,
-původ, xxxxxx xxxxxxxx, strava apod.,
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx počátku xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxx xx studie pro xxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx volby velikosti xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované látky,
- podrobnosti o xxxxxxxx testované látky,
- xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v potravě/pitné xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx / den),
- podrobnosti x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx toxicity,
- xxxxx blokující metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx přípravy mikroskopických xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- známky xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- poměr xxxxx spermatogonií k xxxxx x druhé xxxxxxxxx metafázi,
- xxx a xxxxx xxxxxxx xxx každého xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx počet aberací x xxxx skupině,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx skupinu,
- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- údaje ze xxxxxxxxxx negativních kontrol,
- xxxxxxxxxx údaje x negativních xxxxxxx xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek,
- údaje ze xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx,
- xxxxxxxx pozorované xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Závěry.
B.24. XXXX XXXX X MYŠÍ
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xx xx xx xxxx xxxx xx xxxxxx, x xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xx embrya xxxxxxxxxx chemickým látkám. Xxxxxxxx buňkami u xxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx x cílovými xxxx xx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx srsti. Embrya xxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxx genů xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx. Mutace xxxx ztráty dominantních xxxxx x genech xxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (spots) pozměněné xxxxx xxxxx narozených xxxx. Počet potomků x xxxxxx skvrnami, xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxx detekuje xxxxxxxxx somatické xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx buňkách.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x izotonickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Látky xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxx x testovanou xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Používají xx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Myši xxxxx T (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxxxxxx, pink xxx, xxx x/xxx x; xxxxx, x/x; xxxxxx, short ear, x xx/x xx; xxxxxxx spotting, x/x) xxxx xxxxxxx xxx x kmenem XX (xxxxxx, nonagouti, xxxxxxxxxx, xx x xx/xx x xx; leaden xxxxx, ln xx/ /xx fz; xxxxx xx/xx) xxxx x xxxxxx C57 XX (xxxxxxxxx, a/a).
Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx že xxxxx xxxxxxx nonagouti xxxxxxx. Xxxx. xxxxxxx mezi xxxxxx XXXX (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxx, x/x) x DBA (xxxxxxxxx, x/x; brown, x/x; xxxxxx x/x).
1.2.1.2 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx počet xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx dávku. Vhodná xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx počtu xxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxxx myší x x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pouze v xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx nejméně 300 xxxxxxx xxxxx ovlivněných xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.3 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx xxx použity xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx laboratoře xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx homogenní. Nedávné xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx laboratoři při xxxxxxxx látce se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v xxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mutagenita xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx aplikace xxxxxx xxxx intraperitoneální xxxxxxx xxxxx xxxx. Xx-xx xx xxxxxx, xx xxxxx použít inhalační xxxx xxxx způsob xxxxxxxx.
1.2.1.5 Dávkování
Xxxxxxxxx xx nejméně xxx xxxxx, z xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx 8., 9. xxxx 10. den xxxxxxxx, xxxxxxx xx 1. xxx březosti xx xxxxxxxx den xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Tyto xxx odpovídají 7.25, 8.25 x 9.25 xxx po xxxxxxxx. Xxxxxxxxx ovlivnění xxxxxx xxx provést xxxxx xxxxxx xxx.
Xxxxxxx
X xxxxxx je xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx skvrn xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx se tři xxxxx xxxxx:
(x) xxxx xxxxxx x xxxxxxx 5 xx xx xxxxxxx ventrální xxxxx, o kterých xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxx buněk (XXXX);
(x) xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xx vyskytují x xxxxx xxxxxxxx žláz, xxxxxxxxx, hrdla, xxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xx, že xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx diferenciace (XXX);
(x) xxxxxxxx x xxxx xxxxxx náhodně xxxxxxxxxx v srsti xxxx výsledek somatických xxxxxx (XX).
Všechny xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, ale xxxxx xxxxxxxx, RS, je xxxxxxxxx relevantní. Xxxxxx x odlišením xxxx XXX x XX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Zaznamenávají xx nápadné, xxxxx xxxxxxxxxxxx malformace xxxxxxx.
2. XXXXX
Získaná xxxx xxxx xxxxxxx jako xxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutacemi. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx porovnávají xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx také uváděny xxxx získané hodnoty xx vrh.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- kmeni xxxxxxxx xxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x experimentální x x kontrolní xxxxxxx,
- průměrné velikosti xxxx x xxxxxxxxxxxxxx x v kontrolní xxxxxxx xxx xxxxxx x při xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxxx dni xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx aplikována,
- x způsobu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, a xxxxxx xxxxx s WMVS, XXX x RS x xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx skupině,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxxx x RS, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX X MYŠÍ
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx potomků. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a u xxxxxxxx xxxxxxx ještě xxxxxx X-xxxxxxxxxx. Nositelé xxxxxxxxxxx a XX-xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx F1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Úplná xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx některými xxxx xxxxxxxxxxx (X-xxxxxxx x x-x xxx). Xxxxxxxxxxx jsou analyzovány xxxxxxxxxxxxx x meiotických xxxxxxx xxxxx ze xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, nebo X1 xxxxx xx xxxxxxx potomků F1 xxxxx. Xxxxxx XX xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x kostní dřeně.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx roztoku. Jestliže xxxx nerozpustné, xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxx xxxxx. Jestliže bylo xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx látkou xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx intraperitoneální xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Xxx xxxxxxxxx křížení a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxx specifický kmen. Xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu xx měla xxx xxxxx než xxx x xxxx xx xxx relativně xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx frekvenci spontánních xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyžadovaném pro xxxxxxxxx kontrolu.
Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx X1 xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx v X1 xxxxxxxx je testováno x každé exponované xxxxxxx. Jestliže budou xxxxxxxxxxx xxxx samice X1 xxxxxxxx potomků, xxx xx xxxxxxxx 300 samců x 300 xxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx pokusu x xxxx laboratoře, xxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxx nejvyšší xxxxx vyvolávající xxxxxxxxx xxxxxxx efekt, xxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx dávka/odpověď je xxxxx dvou xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxxxx látek se xxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Popis xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxx x oplodnění
Xxxxxxxxx xx dva xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx x xxxxx xx 35 dnů.
Xxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx, xx všechna xxxxxxx xxxxxx zárodečných xxxxx budou xxxxxxxxxxx. Xx konci xxxxxx xxxxxxxxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxxx rozděleny do xxxxx. Xx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx x pohlaví xxxxxx. Xx vrhu xxxx xxxxx i xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xx doby xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Zjišťování xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Používá xx xxxxx xx xxxx možných metod. Xxxx xxxxxxxxx F1 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx nositelů xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx analýza xxxxx xxxxx X1 xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(a) Test xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v X1 xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx a/nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx samic. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x snížené xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx myší.
Xxxxxxxx xxxx: X1 xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx odděleni xxxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 18. xxxx xx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx vrhu x xxxxxxx F2 xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx porodu, hned xxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx X1 xxxxxx, X2 xxxxxxx xxxxxx vrhů xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx jsou verifikovány xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxx xxxxxxx. XX-xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxx ratio xxxx xxxxxx potomky z 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx vs. xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxx xxxxxxxx x dalšího xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx F2 xxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx hodnotu, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx druhé x třetí xxxx. X1 zvířata, xxxxx xxxxxxx xxx klasifikována xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxxx xxx F2 xxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx přímo podrobena xxxxxxxxxxxxx analýze.
Xxxxxxx xxxxxx dělohy: Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxx translokací je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxxx X1 samci xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxx ranní xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx usmrceny 14. - 16. xxx a xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx zárodky.
(x) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxx-xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx translokací xxxx xxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx multivalentních figur xx stadiu xxxxxxxxx - metafáze X x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx nejméně xxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx testované xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, všichni F1 xxxxx jsou vyšetřeni xxxxxxxxxxxxx. Na xxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 25 xxxxx x xxxxxxxxx - xxxxxxxx X. Analýza xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x samců x xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx x X1 xxxxx suspektních XX. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a/nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx x 10 xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (x-x typ). Xxxxxxx X-xxxxxxxxxxx translokace xxxxxxxxxxx samčí xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mitotických xxxxxxxxxx. Přítomnost 39 xxxxxxxxxx xx xxxxx 10 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx XO xxxxxx.
2. ÚDAJE
Získané xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu x xxxxx pohlaví (sex xxxxx).
Xxx xxxxx xxxxxxxxx X1 xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx X1 xxxxxx xxxxxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxx xxxxxx se xxxxx průměrný xxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx x kontrole x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxx každé xxxxxxxxxxx X1 xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx I xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx figur x celkový počet xxxxx xxx každého xxxxxx translokací.
Xxx X1 sterilní jedince xx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx se uvádí xxxx testes x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X XX xxxxx se xxxxx xxxxxxxx velikost xxxx, xxx xxxxx X2 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx vybráni xxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxx být xxxxxxx xxxxx o negativních x xxxxxxxxxxx kontrolách.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je-li xx možné, xxxxxxxxx x:
- xxxxx xxxx, xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách,
- xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, dávkové xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx mláďat xx samici, xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro analýzu xxxxxxxxxxx,
- xxxx x xxxxxxxxxx analýzy xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x detailní popis xxxxxx xxxxxxxxxxx včetně xxxxx x xxxxxxxx x obsahu dělohy,
- popis xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud xxxxx x obrázky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.26. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx per xx, xxxxxx na xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx 90 xxx v odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, a xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.
Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx, x kapslích xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx zvířatům xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xx xxxxx xxxx pokusu stejnou xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx x nich xxxxx, že xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx dřívější xxxx, xx xxxxx je xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx proti tomu. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx mladší xxx 6 xxxxx, v xxxxxx případě starší xxx 8 týdnů. Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Provádí-li se xxxxxxxxxxxx orální xxxx xxxx předběžný xxxx xxxx dlouhodobým xxxxxx, v obou xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx živočišný xxxx x kmen.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 20 zvířat (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx před xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx možno xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) xx dobu 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Dávkování
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx se zvířaty x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx stejně jako x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, podává xx kontrolní xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxx skupinám, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx xxx malý xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx neměla xxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx hodnotu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední xxxxx měla vyvolat xxx xxxxxxx xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, aby xxxxxxxx odstupňované toxické xxxxxx.
Xx skupině x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx dávky x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx použít xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x ppm xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx k tělesné xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxx xx xx tak xxx xxxxx den xx xxxxxxx dobu, x dávkování x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (týdenních xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) přizpůsobovat xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx se 90xxxxx xxxx xxxx popsanou xxxxxxx x nevyvolá-li xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxx (xxxx xxxxx vyšší - xxxxxxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) žádné xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Všechna xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické účinky, xxxxxx dobu xxxxxxxx, xxxxxx a trvání. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, ve xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
X ideálním xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Zvířata v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx dalších 28 xxx bez aplikace, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, očí, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxx xxxx při xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxx vodě) x xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenávají xxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xx ztrátám xxxxxx xxxx xxxx. x důsledku kanibalismu, xxxxxxxx tkání nebo xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx okamžitě vyřadit, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
X všech xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx běžně provádějí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným přístrojem xx má provést xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx studie xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx alespoň x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.
(x) Xx xxxxx pokusu xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a testy xxxxxxxxxxx krve jako xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx čas či xxxxx xxxxxxxxxx.
(c) Xx xxxxx pokusu xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxx doby xxxxxxxxx xx volí xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), alaninaminotransferáza (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), ornithin dekarboxyláza, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx x séru. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: lipidů, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx spektra xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje xxxx běžný xxxxxx, xxx jen na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx toxicity.
Xxxxx xxxxxx přiměřené xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, má xx uvážit xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x břišní xxxxxx xxxxxx jejich obsahu. Xxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxx žláza (s xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, aby se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx a tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - x xxxxxx medula/pons, kůra xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx, aorta, (xxxxxx xxxxx), játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxx, žaludek, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx střevo, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, lymfatické xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx kost x xxxxxx xxxxx, (kost xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), páteřní xxxxx xx třech xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx, x (slzné žlázy). Xxxxx x xxxxxxxxx xx posuzují x xxxxxxx, xxxxx xxx xx jejich postižení xxxxxxxx x příznaků xxxxxxxx nebo pokud xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xxxx podána nejvyšší xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx všechna makroskopická xxxxxxxxx.
(x) Je xxxxx vyšetřit xxxxxx xxxxxx v jiných xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx zvířat ve xxxxxxxxx s nízkou x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx x xxxxxx skupin. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx však xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Používá-li xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X ní musí xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx x procentuálně xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx typy xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx informace:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,
- experimentální xxxxxxxx - xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x podle xxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, pokud ji xxx xxxxxxxx,
- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x přežití zvířat xx konce sledování,
- xxxxx toxických xxxx xxxxxx účinků,
- xxxx, xxx xxxx pozorovány jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- spotřeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je xx možné,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.27. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx podávání xxx xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná látka xx podává xxxxx xxxxxx xx 90 xxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (nehlodavcům), x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx pokusu, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, se pitvají.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Testovanou xxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x kapslích. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx způsoby xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx zvířatům xx testovaná xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xx xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx vehikulum nebo xxxx aditiva, musí xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx druh - xxxxxxxxxx používá xxx: xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx druhů xxxxxxxxxx. Xx třeba pracovat xx xxxxxxx zdravých xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxx se xx x xxxxxxxxx začít xx xxxx od 3 do 6 xxxxxx x xx xxxxxxx xxx 9 xxxxxx. Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx se xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 8 xxxxxx (4 xxxxxx x 4 xxxxx). Xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx umožnil xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxx úrovně x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx nejnižší dávka xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx by střední xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx toxický xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx než 3 xxxxxx dávek, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky.
Xx xxxxxxx s nízkou x xxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx by x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx docházet.
Podává-li xx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx ani xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx látka v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (v xxx xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) xxxx konstantní dávkování xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx uvést. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx by se xxx dít každý xxx xx stejnou xxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx intervalech xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
Provádí-li se xxxxxxxxxxxx xxxxxx test xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Provede-li 90xxxxx xxxx níže xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xx dalšího testování xxxxxxx. Podává-li se xxxx toxická látka x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx a xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
X xxxxxxxx případě xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v týdnu xx xxxx 90 xxx. Podává-li xx xxxxx jiným xxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 5 xxx x xxxxx.
Xxxxxxxxxx zahrnuje (xxx xxxx xx xx omezeno) změny xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxx vody xxx podávání testované xxxxx x pitné xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Nejméně jednou xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, humánně xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx zvířat xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
(x) Oftalmologické vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx před podáváním xxxxxxxxx xxxxx x xx konci studie xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x nejvyšší xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.
(x) Xx začátku xxxxx, x xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxx pokusu se xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, protrombinový xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Na xxxxxxx xxxxx, a xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x dále xx xxxxx xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx látky. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (přičemž xxxxxx xxxx hladovění xx xxxx xxxxx živočišného xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být v xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx studium xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xx více xxx 24 xxxxx).
(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X všech xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se provede xxxxx xxxxxxxxxx zevní xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx otvorů, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx dutiny xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx vlhkém stavu, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx x tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx žláza, xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx místě xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx žlázy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x vaječníky, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx orgány), (xxxx), xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, reprezentativní xxxxxxxxxx xxxxxx, (samičí xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (oči), xxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxx, (kost xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx) x (páteřní xxxxx ve xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a tkání xx třeba xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx dávka, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx orgánech, x xxxxxxx byla xxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxx xx to indikováno xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx do tabulky. X ní musí xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat x xxxxxxxxxx, typy xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx poškození. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx k xxxx xxxxx použít kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu pokusu
Xxxxxx x průběhu xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- údaje o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx lze xxxxxxxx,
- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx xx konce xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx, xxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich další xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření a xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky (včetně xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx to xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- interpretace xxxxxxxx.
X.28. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx na xxxx xx 90 dní x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx skupině xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxxx denně pozorují, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Zvířata, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx přežijí do xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx pokusu se xxxxxxx srst na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx však xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx týden. Při xxxxxxxx nebo holení xxxxx xx xxxxx xxxx na xx, xxx xx nepoškodila xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx nanášení se xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx hmotnost xxxxxx při rozhodování x xxxxxxxxx připravované xxxxxx xxxx a x velikosti xxxxxxx xxxxxx.
Při xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx zkoušenou xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx byl zaručen xxxxx xxxxxxx s xxxx. Testované xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x týdnu.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx možno použít xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx morčata, xxxxxxxx x jiné xxxxxxx xxxxx, jejich použití xxxx musí xxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx jako předběžný xxxx před dlouhodobým xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx se xx xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx nejméně 20 zvířat (10 xxxxx x 10 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, xx xxxxx xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx o xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx zabita před xxxxxx pokusu. Mimoto xx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx použít nejméně xxx hladiny xxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx xxxx - xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Doba xxxxxxxx xx být xxxxxxx 6 xxxxx denně. Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xxxxxxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxxx stálá xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx v kontrolní xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx jen v xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx dávky by xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x člověka, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx střední xxxxxxx xxxxx měla xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxx x střední xxxxxxxx dávky x x kontrolní xxxxxxx xx počet uhynutí xxx xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
Vede-li xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx může xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx poškození xxxx, xx xxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxxx nutno xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxx xxxxx xxxxx, která xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx toxické xxxxxx, není xxxxx xxxxxxx nutná.
1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx x zaznamenávat xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx zaznamenat dobu xxxxxxx x čas, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx x týdnu xx dobu 90 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxx xxx následné xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 28 dnů bez xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx nejméně 6 xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx látku xx xxxxx nanášet xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % povrchu xxxx, x xxxxxx xxxxxxxxx látek může xxx tato plocha xxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx část xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xx nejtenčí xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x kůží xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx je xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxx obvaz x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxx použít x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, úplnou xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx zbytky testované xxxxx, xxxxx možno xxxxx xxxx jiným xxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxx pokožky.
Xxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx otravy xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx.
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, xxx x xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx soustavy, somatomotorické xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxxxxx týdně. Doporučuje xx zaznamenávat týdně x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxxx kontrolu xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx jako xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx všechna zvířata, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx satelitních xxxxxx, xxxxxxx. Umírající xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx či xxxxxx xxxxxxx je xxxxx okamžitě vyřadit, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
U xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx xx provést xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x na xxxxx xxxxxx nejlépe x xxxxx xxxxxx, xxx alespoň x xxxxxxxx xxxxx a x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxx, vyšetří se xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx trombocytů.
(c) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x ledvin. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxx trvání xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx živočišného xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx glutamát-pyruvát transamináza xxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl transpeptidáza, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x séru. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další biochemické xxxxxxx mohou být x případě xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxx, ale xxx xx podkladě xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx historická kontrolní xxxx, xx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx parametrů xxxxx xxxx začátkem xxxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, všech tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx tělísky) a xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, (xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, xxxxx, (slinné xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, děloha, přídatné xxxxxxxx orgány, xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), (xxxxxx xxxx s kostní xxxxx), (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx mícha xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx) a (xxxxx xxxxx). Tkáně x závorkách xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx indikováno xxxxx xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření normální x exponované xxxx, xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx nejvyšší dávka, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx cílové xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(d) Používá-li xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx dávkou xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x zjištění příznaků xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Další xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se x xxxxxx xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx xxxxxxx, musí xx xxxx xxxxxxx vždy xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Používá-li xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx provést histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x orgánech, x xxxxxxx byly zjištěny xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx s lézemi x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxx pokusu,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) a xxxxxxxxxxx,
- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx bez xxxxxx, xxxxx ji lze xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx sledování,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- hematologická xxxxxxxxx x jejich výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx případných xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx xx to xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
X.29. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX - INHALAČNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. METODA
1.1 Princip xxxxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx studované xxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx koncentracích, xxxxx xxxxxxx xxxxx koncentraci, x to xx 90 dnů. Xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx skupinu xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx denně xxxxxxxx x zjišťují se xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, i xx, xxxxx přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x testované xxxxx xxxxxx vehikulum xxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx příslušná xxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx jiná xxxxxxx, musí být x xxxx xxxxx, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx využít.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx důvody xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxxxxx zvířatech x xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Na začátku xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx test xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxx x kmen.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 samic x 10 samců). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxx xx zvířata budou xxxxxxx v průběhu xxxxxx, xx nutno xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx další xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx dobu 90 xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx xxxxxxxx expozic xxxxxxxx xxxxxxxx, trvání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se nejméně xxx skupiny x xxxxxx xxxxxx koncentrace x xxxxx kontrolní xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx stejné xxxx x skupiny x xxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx). X výjimkou xxxxxxxx testované xxxxx xx xx zvířaty x kontrolní skupině xxxxxxx stejně jako x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx má xxxxxxx xxxxxxx účinky, ale xxxxxxxxxx žádné uhynutí xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Pokud xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx xxxxxxx koncentrace xxxx vyvolat xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx koncentrací, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx účinky. Ve xxxxxxx x xxxxxx x střední xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx měl xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx expozice
Zvířata xx xxxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx xx ustavení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. X případě specifických xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.5 Expoziční xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx inhalační xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx obsah xxxxxxx x rovnoměrné xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx box, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxx bránil xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx inhalační xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx boxu xxxxx xx x xxxxxx celkový objem xxxxxxxxx xxxxxx přesáhnout 5 % objemu xxxx. Je možné xxxxxx xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, samotné xxxxx xxxx individuální xxxxxxxxxx xxxxxxxx; první xxx xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx období xxxxxxxx x zotavení x zaznamenávat toxické xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, ve xxxxxx se xxxxxx x xxxx odezní xxxxxxx účinky.
1.2.3. Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx dobu 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx dalších 28 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x otravy nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xxxxx experimentu xx xxx 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx mezi 30 % a 70 %, s xxxxxxxx případů, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. experimenty s xxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxx xx nepodává xxxxxxx xxx voda.
Používá xx dynamický xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx pokus xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací. Xxxxxxxx průtoku vzduchu xx xxxxx nastavit xxx, xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Xxxxxx xxxxxxx vzduchu (xxxxxxxxxxx).
x) Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx látky xx xxxx x dýchací xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx hodnoty x xxxx xxx ±15 %. U xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx koncentrace tak xxxxxxxx, xxx xx xx prakticky xxxxx. Xxx xxxxxx generátoru xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx byla xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx, jak je xx potřeba xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic.
x) Xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx
d) Xxxxx xxxxxxxx x po xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx má xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx denně xxxxxxxxx xx příznaky toxických xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Pozorování x xxxxx zahrnuje xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání x krevního oběhu, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx i xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx pravidelnou xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chybného zařazení. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx všechna zvířata, xxxxx přežila, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx včetně kontrolních xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx přístrojem xx xx provést xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx a na xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx přinejmenším x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx zvířata.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx trombocytů.
(x) Xx xxxxx pokusu xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx druhu x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx séra (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné toxikologické xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, hormonů, acidobasické xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro rozšíření xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
(x) Analýza xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx xx podkladě xxxxxxxxx xxxx pozorované xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx pitva zahrnující xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, lební, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx x jejich obsahu. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx xx co xxxxxxxx po sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x ohledem xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx (mají xx xxxxxxx neporušeny, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, tak xxx xx xxxxxxxxx struktura xxxx - xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xx vhodnou), xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx mozku x xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx xxxxx brzlíku, xxxxxxxxxx, srdce, xxxxx, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x vaječníky, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx (je-li xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, tlusté x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx žláza), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx nerv, (xxx), hrudní kost x kostní xxxxx, (xxxx stehenní xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (páteřní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - krční, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx se posuzují, xxxxx je xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx s cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx respiračního xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx všechny xxxxxxxxxxxxx xxxx.
(x) Xx xxxxx vyšetřit xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx mají xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx stavu zvířat. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx však xxxxxxx xxxx xx orgánech, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx satelitní skupiny, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxx x ostatních xxxxxxxxxxxx skupin.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx tabulky. X xx musí být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx na počátku xxxxxx a xxxxx xxxxxx s lézemi, xxx léze x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx metodou. Je x tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, systému xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx odpadního xxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx boxu, pokud xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx pro měření xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrací x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x expozici xx sestaví xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a charakteristikou xxxxxxxxxxx (xxxx. směrodatnou xxxxxxxxx). Mají xxxxxxxxx xxxx údaje:
x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením,
b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky přiváděné xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx vzduchu),
x) xxxxxx vehikula, xxxxx xxxx užito,
x) skutečná xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
x) medián velikostí xxxxxx (x xxxxxxxx),
- xxxxx o xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx a podle xxxxxxxxxxx,
- úroveň xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx ji xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj x xxxxxxx zvířat xx xxxxx sledování,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- oftalmologické nálezy,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- pitevní nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.30. TESTOVÁNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx sedm xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx na skupinu, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx expozici xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx pozorována xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx standardních xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx testu. Xxxx testem xxxx xxxxxx, mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx.
1.2.2 Testovací xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x další xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxx). Je xxxxx xxxxxx zdravé x xxxxx xxxxxxx běžně xxxxxxxxx kmenů xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Expozice xx xxxx xxx započata xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx činit xxxx než ± 20 % xx xxxxxxx. X případě, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity, xx xxxxx xxxxxx stejný xxxx x xxxx x obou studiích.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou úroveň xxxxx xx xxxxx xxxxxx nejméně 40 xxxxxx (20 xxxxx x 20 xxxxx), xxxxxx i pro xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxx xx být březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testu, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat (xxxxxxxxxx) xx možné xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxx xxx 4 xx každého pohlaví xx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxx tři xxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx měla vyvolat xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx úmrtnosti. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxx prokazatelné xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxxx a nízkými xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx měl xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Obvykle xxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxx. X případě, xx xxxxxxxxx látka xx podávána x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx x xx xxxx xxxxxxx xxxxx přístup.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx ohledu x exponované skupině, xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx.
Ve zvláštních xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx studie s xxxxxxxx xxxx použije-li xx pro xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí xx xxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ani xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx člověka.
Xxxxxxx xxxxxxxx aplikace vyvolává xxxxxx xxxxxxxxx problémy. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x důsledku xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx odvozena z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x znalosti xxxxxxx xxxxxxx vstřebávání, xxxxxxxx x předchozích xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx
Xxx, kde xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx x gastrointestinálního xxxxxx a xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxx exponován xxxxxx, xxxx xx přednost xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx v xxxxxxx, xxxxxxxxxx x pitné xxxx nebo xxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx sedm xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx v týdnu xxxx vést x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx vyvolat "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx v xxxxxx xxx aplikace, x xxxxx ovlivnit xxxxxxxx x xxxxxxxx hodnocení. Xxxxxxx, xxxxxxxxx s xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx přijatelné.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx technicky xxxxxxxxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxx xxxxxxxx, jsou xxx xxxxxxx podrobněji xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace xxxx xxx platnou xxxxxxxxxxxx x specifických situacích.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané lidské xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxx xxxxx xx xxx xxx x týdnu (přerušovaná xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx expozici v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx x xxxxx (kontinuální xxxxxxxx), s xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx zvířat denně xx stejnou xxxx xxx, xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. V xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx exponována xxxxxx xxxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxxxxxx a stálou xxxxxxxx xx v xxx, xx v xxxxx xx zvíře 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx během xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx expozice xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x na xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx vzít x úvahu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx narušeny xxxxxxxx xxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) generace xxxxxxxx xxxx určité xxxxxxxxxxx xxx x technik xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x inhalačních xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx proud pro xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx atmosféry. Kontrolní x expoziční xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx konstrukci, xxx xxx byly expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxx aspektech xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx komory se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxx by x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v komoře xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.
Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx nejlépe xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx koncentrace xxxxxxxxx látky neměla xxxxxxx xxxx než 15 % xxxxxxx xxxxxxx;
(x) xxxxxxx a xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx xx měla xxx udržována x xxxxxxx 22 ± 2 oC a xxxxxxx v xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Oba xxxxxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;
(x) měření velikosti xxxxxx: xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx částice xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx testovací xxxxx. Xxxxxx atmosféry xxxxx xx odebírají x dýchací xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měl být xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým je xxxxx xxxxxxxxxx, a xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx suspendovanému xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx během vývoje xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx stabilitu aerosolu, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx často, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx exponována.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx trvat xxxxxxx 12 xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Pozorování
Xxxxxxx xxxxxxxx sledování xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx denně s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxxx ztráty zvířat xx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, která jsou xxxxx xxxx moribundní. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx spolehlivě xxxxxxxx xxxxxxx x progrese xxxxx xxxxxxxxx účinků, x xxxx xx xxxxxx minimalizace xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx neurologických x očních xxxx x xxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx objevení a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxx zvířat xxxxxx xxxxx během xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx a aspoň xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx tomto xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, kde je xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 týdnů x xxx přibližně ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, ledaže xx zdravotní stav xxxx xxxxx tělesné xxxx ukázaly xxxxxxx xxxx frekvence xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. obsah xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxx krvinek, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx ukazatele xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx za xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx od xxxxx xxxxxxxxxx resp. xx 10 potkanů xx pohlaví x xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx to xxxxx, xxxxxx ve xxxxx intervalech xx xxxx xxx od xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx před xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxx klinické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx stav xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx obraz bílých xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx krvinek xx xxxxxxx xx vzorcích xx xxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x u xxxxxxx. Xxxxx tato xxxx nebo xxxxx x vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost, xxxxxxx xx x x xxxxxxx s xxxxxx nejblíže nižší.
1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hematologické xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxx na směsném xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx dávek x xxxxxxx:
- vzhled xxxx, xxxxx x xxxxxxx x jednotlivých xxxxxx,
- proteiny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, okultní xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx sedimentu (xxxx- xxxxxxxxxxxxx).
1.2.3.4 Biochemické xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxx xxxxxxxx krevní vzorky xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx ve všech xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Z xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkoušky:
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxx. aktivita bázické xxxxxxxxx, aktivita glutamát xxxxxxx transaminázy1), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. krevní xxxxxxx xx xxxxx,
- testy xx xxxxxx xxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx známá xxxx xxxxxx aspartát xxxxxxxxxxxxxxxx
1.2.3.5 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx provede x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx utracena x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx utracením xx xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, které xx xxxxx xxx xxxxxx, je třeba xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx měly xxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx se xxxxxxx týká xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx:xxxxx3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, kory mozkové), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, trachey x plic, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, jejuna, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx3), akcesorních xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx mléčné xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), xxxxxx s xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx měchýře xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x inhalačních xxxxxxxx, xx zásadní pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx speciálních xxxxxxxx, xxxx xxxx inhalační xxxxxx, má xxx xxxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx nosu, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodítko.
3) xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx pohlaví x xx skupinu u xxxxxxxx x ze xxxxx xxxxxxxxxx a xxxx xxxxxx žláza (s xxxxxxxxxxx tělísky) ze xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx
1.2.3.6 Histopatologie
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx tumory a xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx v xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Navíc xxxx doporučeny následující xxxxxxx:
(a) mikroskopické xxxxxxxxx všech uchovaných xxxxxx x tkání x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx lézí xxxxxxxxxx:
1. u xxxxx xxxxxx, která uhynula xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx studie,
2. x xxxxx xxxxxx xx skupiny x xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxx či tkáně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxx, xxx výsledky svědčí xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx délky xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx by xxxxx ovlivnit xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx vyšetří popsaným xxxxxxxx,
(d) informace x incidenci xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx zvířat, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx podmínkách, xx. xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxx xxx správné xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změn pozorovaných x zvířat s xxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxx xxx sumarizovány ve xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx každou testovanou xxxxxxx počet zvířat xx začátku testu, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx lézí. Xxxxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx uznávané xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení včetně xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx používá. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, a xxx, xxx xx xx žádoucí, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky vstupující xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx objemem vzduchu)
(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx
(e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx částic (xx-xx xx xxxxxxxxxx)
- dávkové xxxxxx (xxxxxx vehikula, xx-xx xxxxx) a xxxxxxxxxxx
- xxxxx o xxxxxxx odpovědi podle xxxxxxx a dávky
- neúčinná (xxxxxxx) xxxxxx
- xxxx xxxxx xxxxx studie xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx
- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx
- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx abnormální xxxxxxx x xxxx další xxxxx
- data x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxx hematologické xxxxx x xxxxxxxx
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx)
- xxxxxxx nálezy
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.31. STUDIE XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X NEHLODAVCI
1. METODIKA
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxx pokusných xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxx xxxxxx březosti, xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Krátce před xxxxxxxxxx datem porodu xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx x s xxxxxxx je xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx- x xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxx, xxxxxxx samice, xxxxx nikdy nebyly xxxxx, stejného xxxx x xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx aspoň 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Potom xxxx xxxxxxxxxx samci x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxx xxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxx nebo umělou xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx samicím xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx během xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Den xxxx termínem xxxx xxxxx vyjmuty xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx orgánů včetně xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx do xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx, myš, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx potkan x králík. Je xxxxx používat xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx by neměl xxx nízkou xxxxxxxx x xxxx by xxx x xxx xxxxx reakce na xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx dávku je xxxxx použít aspoň 20 xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxx xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx dostatečný xxxxx xxxx x xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxx tři xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx podána xx xxxxxxxx, xx xxxxx zahrnout xx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx vehikulum. Je xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxx být xxxxxxxxxxx xxx mít vliv xx reprodukční schopnosti. Xx xxxxxxx x xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) se xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx se zvířaty x testovací xxxxxxx x xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx látky. Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, pak xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xx x ideálním xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx mírné snížení xxxx, xxx už xx xxxx xxx 10 % xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxxxxxx účinky. Střední xxxxx xx měly xxx voleny xxx, xxx xxxx geometricky xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x vysokou xxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx, xx xxxxx x nízkou toxicitou xxx xxxxx nejméně 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx projevy embryotoxicity xxx teratogenicity, xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx úrovních xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx expozice
Nultým xxxx testu xx xxx, kdy je xxxxxxxxxx vaginální zátka x/xxxx xxxxxxx (pokud xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xx měla zahrnovat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx toto období xx možno považovat 6. xx 15. xxx x xxxxxxx x myši, 6. xx 14. xxx x křečka x 6. xx 18. xxx x xxxxxxx. X případě, xx xx xx xxxxx xxx považován xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx inseminace, xx xxxxx připočítat x xxxxxxxxxx údajům xxxxx xxx. Xxxxx xxxx alternativy xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx očekávaným xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx pozorování
Xxxxx xxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Testovaným xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx denně během xxxxxxxxxxx období xxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx váhu xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x dávka xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx známky toxicity xx třeba xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, stupně x xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx a xxxxx makroskopicky vyšetřit. X xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx až xx xxxx xxxxxxxxx jeden xxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx výsledků xx xxxxxxxxxx porodu. Pozorování xxxxxx x kleci xx xxxx zahrnovat xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x srsti, xxx x sliznic, dále xxxxxxxxx, oběhového, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Každý xxxxx je xxxxx xxxxx spotřebu potravy x xxxxx zvířata.
1.2.3.1 Xxxxx
Xxxxx dojde x xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx x samic makroskopicky xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx xxx xxxx na xxxxxx březosti. Xxxxx xx xxxxx xx xxxxx odstranit xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx s ohledem xx xxxxx embryí x xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx živých xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx určit dobu xxxxx xxxxxxx v xxxxxx. X potkanů x králíků xx xxxxx stanovit počet xxxxxxx tělísek. Xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x zaznamenat xxxx xxxxxxxxxxxx zárodků x xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx zevně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X potkanů, myší x xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx abnormity xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx je třeba xxxxx zárodek důkladně xxxxxxxx pitvou x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx třeba xxxxxxx xx formě xxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, počet xxxxxx, která xxxxxxxx, xxxxx a procento xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x abnormalitami xxxxxxx xxxx měkkých xxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x určitým xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. XXXXXX
3.1. Zpráva x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xxxx použito) a xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxx účinku (pokud xx xxxx možno xxxxxxxx),
- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xxxxx xxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx hmotnosti x spotřebě xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx),
- údaje x xxxxxxxxx (xxxx/xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx skeletu x xxxxxxx xxxxx),
- xxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxx (živé/mrtvé xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.32. TEST XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx sedm xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx dávka xx xxxxxxx, po větší xxxx života xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx vývinu xxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
Xxxxxxx xx chovají x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxx xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxx x exponovaných skupin.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxx xxxxx (hlodavce x xxxxxxxxxx). Používají xx xxxxxx mladá xxxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxx co xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx ve xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx vlastní xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity, je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx a kmen x xxxx studiích.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 samců) xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina. Samice xx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx průběžné xxxxxxxx xxxxxx, počty xx xxxxx zvýšit x počet zvířat, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx úrovně x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxx kromě xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxx by xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx mírný xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx podstatnějších xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxx xxxxxx účinky xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x délkou života xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxx 10 % vysoké xxxxx. Střední dávku/dávky xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx pásmu xxxx vysokou x xxxxxx dávkou.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x studie toxicity.
Xxxxxxxx se provádí xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx do xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx k xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x exponovanou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx.
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jehož xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx vehikulu.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Tři xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x inhalační. Volba xxxxxxx podání závisí xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx.
1.2.5.1 Orální xxxxxx
Xxx, kde se xxxxxxxxx látka vstřebává x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x je-li xxxxxx xxxxx z cest, xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxx, dává xx přednost xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx tomu nějaké xxxxxx. Xxxxxxx mohou xxxxxx testovanou xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x pitné xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.
Ideálně by xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx dní x týdnu, protože xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx naopak xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" příznaky x období bez xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx praktické aspekty, xxxxxxxxx pětkrát týdně xx považováno xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Dermální xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx na xxxx může být xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx způsob xxxxxxxx xxxxxxx poškození.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx studie
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx aplikace, xxxx zde xxxxxxx xxxxxxxxxx informace x xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx platnou xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx pět dnů x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx denně xx xxxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx jednou xxxxxxx pro krmení xxxxxx denně xx xxxxxxx xxxx dne, xxxxxxxx x pro xxxxxxx expozičního xxxx. X obou xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx koncentracím xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x stálou xxxxxxxx xx v xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx ústup xxxxxx xxxxx expozice x xxxxx delším xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx expozici, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x xxxxx určité technické xxxxxx. Například, výhody xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx zevního xxxxxxxxx mohou být xxxxxxxx nutnosti pití x krmení xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x technik xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx komory
Xxxxxxx xx exponují x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jejichž xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx hodinu, xxx xxx xxxxxxxx dostatečný xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx komory by xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Uvnitř xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx by xxxx minimalizovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat. Obecně xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx přesáhnout 5 % xxxxxx xxxxxx.
Měření nebo xxxxxxxxxxxx zahrnuje:
(x) Xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx expozice by xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx více xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Teplota a xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 22 ± 2 °X x xxxxxxx v xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx případů, xxx xx voda xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxxxx průběžně.
(x) Měření xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx stanovena distribuce xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx komor x xxxxxxxx xxxx pevných xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx částice xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx je xxxxx exponováno, a xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx suspendovanému xxxxxxxx, i když xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx respirabilní. Analýza xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x poté xxxxx xxxxxxx xxx často, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Trvání xxxxx xxxxxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx a 24 xxxxxxxx u xxxxxxx. Nicméně, xxx xxxxxxx kmeny xxxxxx x xxxxx dobou xxxxxx xxxx. x xxxxxx spontánním výskytem xxxxxx doba xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 xxxxxx xxx xxxx x křečky x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx počet přežívajících x xxxxxxxx dávky xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx klesne na 25 %. Při xxxxxxxx xxxxx, ve xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx odpovědi, xxxxx pohlaví xx xxxxxxxx zvlášť. Tam, xxx uhyne xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx testu, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx bylo možno xxxxx xxxxxxxxx výsledek xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, kanibalismem xxxx x důsledku chyb xxxxxxx) v xxxxx xxxxxxx xxxxx než 10 % x xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx u myší x xxxxxx a x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.3 Popis xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx změny xxxx x srsti, xxx x xxxxxxx, xxxxx i dýchacího, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Pravidelná kontrola xxxxxx je nutná, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx utracena x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx by xxxx být xxxxxxxxxxx x všech zvířat. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx věnovat vývoji xxxxxx: xxxx objevení, xxxxxxxxxx, rozměry, vzhled x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenává.
Xx xxxxx provádět xxxxxx spotřeby potravy (x vody xxx, xxx xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxx vodě) týdně xxxxx prvních 13 xxxxx x pak xxxxxxxxx xx tříměsíčních xxxxxxxxxxx, ledaže xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx tělesné xxxx xxxxxxx xxxxxxx jiné xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxx týdně xxxxx prvních 13 xxxxx xxxxxx testu x xxxxx jednou xx čtyři xxxxx xx xxxxx období.
1.3.2 Xxxxxxxx vyšetření
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x zhoršeném xxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.
Xx 12 měsíců, xx 18 xxxxxx x xxxx utracením xxxxxx se provede xxxxxx xxxxx xx xxxxx zvířat. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a u xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx údaje x xxxxxxxxx patologických změn xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx i x skupiny x xxxxxx xxxxxxxx nižší, xxx xx xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Pitva
Kompletní xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, včetně xxxx, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx tumory xxxx xxxx, nebo xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx tumory, xx xxxxx uchovat.
Následující xxxxxx a xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx možné xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx: xxxxx (včetně řezů xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxxxx a xxxxx, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, kůže, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, slepé xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzlina, xxxxxx xxxxxx žláza, xxxxxxxxx xxxxxx, periferní nerv, xxxxxxx s xxxxxx xxxxx, stehenní xxxx xxxxxx kloubu, xxxxx xx xxxxx úrovních (xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx) x xxx.
Xxxxxxxx xxxx x močového xxxxxxx xxxxxxxxx je optimální xxxxxx uchování těchto xxxxx. Xxxxxxxx xxxx x inhalačních xxxxxxxx xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
1.3.2.3 Histopatologické vyšetření
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxx, která xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx během testu, x u xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx, xxxxx xxxx podezřelé xxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx.
(c) Xx-xx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx skupinou s xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx orgánu xx tkáni x x xxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Je-li přežití xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x skupina s xxxxxxxxx nižší xxxxxx.
(x) Je-li ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx doklad o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx dávkovou xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx sumarizují xx xxxxx xxxxxxx, ukazujících xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, doba jejich xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx použity xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxx
Zpráva x xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx testu: Xxxxx expozičního zařízení xxxxxx konstrukce, xxxx, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vycházejícího z xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx boxu, pokud xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx je xx žádoucí, stability xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: ve xxxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxxx hodnot a xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx zahrnovat:
(x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu x inhalačním xxxxxxxx,
(x) teplotu x xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx koncentrace (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxxxx děleno objemem xxxxxxx),
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx,
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx kde xx relevantní),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxx,
- xxxxxx toxických xxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx,
- popis xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx další xxxxx,
- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx,
- xxxxxx patologicko-anatomické,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.33. XXXXXXXXXXX XXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx testu chronické xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx druhu xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxx xx xxxx karcinogenity xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x kontrolní satelitní xxxxxxxx. Dávka použitá xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx nejvyšší xxxxx použitá xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxx karcinogenity xxxx zkoumána xxx xx obecnou toxicitu, xxx xx karcinogenní xxxxxxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupině xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, jedna xxxxx na xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx zvířat. Xxxxx x xx expozici xxxxxxxxx látce jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx tumorů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxx xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx mladá xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Experimentální xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx i xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx se zdravá xxxxx zvířata x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zvířat. Expozice xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx studie xx xxxxx xxxxxx xx váze xxxxxx xxxxx xxxx než ± 20 % xx průměru. X xxxxxxx, xx vlastní xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxx druh x xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx použije xxxxxxx 100 zvířat (50 xxxxx a 50 xxxxx) xx každou xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxx nullipary x xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx utrácení zvířat, xxxxx se xxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx před koncem xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (skupiny) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxx xxxx tumory, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx 20 zvířat xxx xxxxx pohlaví, xxxxxxx xxxxxxxxx skupina xxxxxxx by xxxx xxxxxxxxx 10 zvířat xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Dávkové xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx se zvolí xxxxxxxxxxxx tři dávkové xxxxxx xxxxx souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxx xxxxxxx příznaky xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx přírůstků (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň by xxxxxx interferovat s xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x xxxxxx života xxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx neměla xxx xxxxx xxx 10 % vysoké xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx pásmu xxxx vysokou x xxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxx xxxx x úvahu xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx toxicity.
Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxx zahrnuty xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx dávka xxx xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx vodě xxxx přimíšena xx xxxxxxx, xxxx xx xxx stále k xxxxxxxxx.
1.2.4 Kontroly
Souběžná xxxxxxxxx skupina xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx expozice xxxxxxxxx látce.
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx inhalační xxxxxx x aerosoly xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita xxxx charakterizována, zařadí xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupina, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx hlavní xxxxx xxxxxxxx jsou orální, xxxxxxxx x inhalační. Xxxxx způsobu xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx charakteristikách xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx x člověka.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Tam, xxx xx testovaná látka xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x je-li xxxxxx jedna x xxxx, jimiž xxxx xxx exponován xxxxxx, xxxx xx přednost xxxxxx aplikaci, pokud xxxxxx proti xxxx xxxxxx důvody. Xxxxxxx xxxxx dostat testovanou xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx sedm xxx v xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx v xxxxx xxxx xxxx k xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxxx vyvolat "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x období xxx aplikace, a xxxxx ovlivnit xxxxxxxx x následné xxxxxxxxx. Xxxxxxx, především x xxxxxxx na praktické xxxxxxx, dávkování xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx přijatelné.
1.2.5.2 Dermální xxxxxx
Xxxxxxxx přímo xx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x člověka x jako modelový xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Inhalační xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx komplikovanější xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx šest hodin xxxxx xx xxx xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx sedm xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x přibližně xxxxxx hodinou xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx stejnou xxxx xxx, použitou x xxx čištění xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx je x xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x ještě xxxxxx xxxxxxx xxxxx víkendu.
Xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx expozice xxxxxx xx xxxxxx studie x na xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx simulována. Nicméně xx třeba vzít x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx obtíže. Například xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx simulaci xxxxxxxx xxxxxxx prostředí xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx a xxxxxx xxxxx expozice a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx určité xxxxxxxxxxx xxx x technik xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x inhalačních xxxxxxxx, xxxxxxx konstrukce xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx byl zajištěn xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x expoziční xxxxxx xx měly mít xxxxxxxxxx konstrukci, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx mírný xxxxxxx x xxx xx brání xxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Komory xx měly xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxx by x xxxxx udržení stabilní xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) průtok vzduchu: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx nejlépe xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx: pro xxxxxxxx, teplota xx xxxx být udržována x xxxxxxx 22 ± 2 °C x vlhkost v xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx používána x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x atmosféře xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx komor x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Vzorky xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx z xxxxxxx xxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx zvíře xxxxxxxxxx, x měl xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx značná xxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x poté xxxxx xxxxxxx tak xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx studie
Trvání xxxxx xxxxxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx část xxxxxxxx xxxx života xxxxxxx xxxxxxxxx xxx test. Xxxx xx měl xxx xxxxxxx x 18 měsících u xxxx x xxxxxx x 24 xxxxxxxx x potkanů. Xxxxxxx xxx xxxxxxx kmeny xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxx by xxxx xxx 24 xxxxxx xxx xxxx a xxxxxx x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx u nejnižší xxxxx xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx ukončení xxxxx, xx xxxxxx je xxxxxxxx sexuální xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx pohlaví xx xxxxxxxx zvlášť. Xxx, xxx uhyne xxxxxxxxx jen xxxxxxx x vysokou xxxxxx xx zjevných xxxxxxxxx xxxxxx, nemusí xx xxxxx vést k xxxxxxxx celého xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Aby bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, kanibalismem xxxx v důsledku xxxx xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 10 % x přežití xx xxxxx xxxxxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx x xxxx a xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x potkanů.
Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx zvířat pro xxxxx xxxxxxx a 10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pohlaví xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity xx xxxx být x xxxxxx aspoň 12 xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx utracení xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx patologie, xxxxx xx vztah x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx zvířat x klecích xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, očí a xxxxxxx, jakož x xxxxxxxxx, oběhového, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx nervového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx) xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx klinické vyšetření.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat xx nutná, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chyb x xxxxxxx. Moribundní xxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx příznaky včetně xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, vzhled a xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx hmatného tumoru xx zaznamenává.
Je xxxxx xxxxxxxx měření xxxxxxxx potravy (x xxxx xxx, xxx xx testovaná látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx) týdně během xxxxxxx 13 týdnů x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx intervalech, xxxxxx by xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx ukázaly xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx hmotnosti xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx testu x xxxxx xxxxxx za xxxxx týdny xx xxxxx období.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Hematologická xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, hematokrit, xxxxxxx xxxxx erythrocytů, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx měření xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx za tři xxxxxx, xxxx xxxxxx x poté x xxxxxxxxx šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx xx xxxxxxxx krve xx 10 xxxxxxx xx pohlaví z xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx intervalech xx xxxx být xx xxxxx potkanů.
Xxxxx xxxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx zdravotním stavu xxxxxx xxxxx studia, xx xxxxx vyšetřit xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx xxxxx bílých xxxxxxx xx provede xx xxxxxxxx xx zvířat xx skupině s xxxxxxxx dávkou x x kontrol. Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx x vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx se xxxxxxx i x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxxxx moči
Xxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx sbírají xxx xxxxxxx pokud xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x ve stejných xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx buď xx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xxxx na xxxxxxx vzorku pro xxxxxxx podle xxxxx x pohlaví:
- xxxxxx moči, objem x xxxxxxx u xxxxxxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx krvácení (semi-kvantitativně),
- mikroskopické xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
V přibližně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx závěr jsou xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx biochemická xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx pro tytéž xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx vedle xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Z těchto xxxxxx xx připravena xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxx:
- xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- testy xx funkci xxxxx (xxxx. aktivita xxxxxxx xxxxxxxxx, aktivita xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), gamma xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- metabolismus xxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx xx lačno,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx močoviny x xxxx.
1) xxxx xxxxx jako xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxxxxxx
Kompletní xxxxx xx provede x xxxxx zvířat včetně xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx krve xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxx xxxx, xxxx léze, xxxxx xx mohly xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx změn s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx: xxxxx3) (prodloužené míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, kory xxxxxxx), xxxxxxxx mozkového, xxxxxx žlázy a xxxxxxxxxxx tělísek, xxxxx, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, aorty, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), nadledvinek3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, slepého xxxxxx, xxxxxxxx, konečníku, močového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx uzlin, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), xxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx kloubů, x xxx. Naplnění xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x inhalačních xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxx. Ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, má xxx xxxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxx-xx provedena xxxx xxxxxxxx vyšetření, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx významné xxxxxxx.
3) Tyto xxxxxx x 10 xxxxxx xx pohlaví x xx skupinu xxxxxxxx mají xxx xxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx satelitní xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x satelitní xxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx patologické xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin x ze xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx věnované karcinogenitě xxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx testování karcinogenity:
(x) úplná xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx x tkáních xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx xxxxx xxxxx x x všech xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx;
(x) xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx okem x xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx jako xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx;
(x) xx-xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx neoplastických xxxx xxxx skupinou x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx tkáni x x dalších xxxxxxxxx;
(x) je-li přežití xx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx dávkou;
(x) xx-xx ve xxxxxxx s vysokou xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků, které xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, xx xxxxx xxxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxx nižší xxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Údaje xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx každou testovanou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxx xxxxxxxx během xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x počet xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxx
Zpráva x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, dieta,
- podmínky testu: xxxxx expozičního xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, zdroje vzduchu, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx boxu, pokud xx xxxxxxx. Dále xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, stability xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Xxxxx x expozici: xx xxxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) by měly xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky vstupující xx xxxxxxxxx aparatury xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
(x) xxxxxx vehikula, xx-xx xxxxxxx,
(e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně,
(f) xxxxxx velikosti xxxxxx (xxx xxx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx vehikula, xx-xx xxxxx) a xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxxx xxxxxx podle pohlaví, xxxxx x xxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx ,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- doba, xxx xxx pozorován xxxxx abnormální xxxxxxx x xxxx další xxxxx,
- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x tělesné xxxxxxxxx,
- oftalmologické xxxxxx,
- xxxxxxx hematologické xxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxx klinické xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxx xxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx popis všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
B.34. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná látka xx podává xxxxxxxx xxxxxxxx samic a xxxxx x odstupňovaných xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxx x xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (přibližně 56 xxx x xxxx x 70 xxx x potkanů), xxx xxx zachycen jakýkoliv xxxxxxxxxx účinek testované xxxxx xx spermatogenezu.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) dostávají xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx estrálních xxxxx, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx. Zvířata jsou xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx obou pohlaví, x xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Pro inhalační xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxx zahájením testu xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx - kontrolní x xxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xxxx chována xxxxxxx 5 xxx xxxx zahájením pokusu x těch xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu.
Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x potravě xxxx v xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xxxxx xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx x průběhu xxxxxx testu. Xxxxx xx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx o xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxx
Dává xx xxxxxxxx potkanům xxxx xxxxx. Používají xx xxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx x nízkou xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx charakterizována xx xx druhu, xxxxx, xxxxxxx x xxxx x/xxxx věku. Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx pohlaví. Xxxxxx x xxxx skupinách, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx zahájením xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxxxx exponovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx samic x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx dostatečný xxxxx xxxxxxxxxxx a potomstva, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vlivu xxxxx xx plodnost, xxxxxx gravidity a xxxxxxxx chování x X generaci, xxxxxx, xxxx x vývoj xxxxxxxxx xxxxxxxx F1 xx xxxxxx do xxxxxxx.
1.2.3 Podmínky testu
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx ad xxxxxxx. Před porodem xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx mateřských xxxxx x xx xxx xxxxxxxxx materiál xxx vytvoření hnízda.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Použijí se xxxxxxx tři xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x nejvyšším xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxx x využití xxxxxxx, xx xxxxx uvážit xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, spárované xx xx výživy.
Xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx v xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx xx není xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx toxicitu, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx minimální xxxxxxx xxxxxx, xxxxx by xx xxxx připsat xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nepříznivé účinky, xxx u rodičů xxx x xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx dávka stanoví xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx být případně xxxxxx xx základě xxxxxxx xxxxxxxxx v 0. nebo 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxx xxxx
X případě xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xx provádět xxxxxx xx jiných xxxxxxxxx úrovních. Xxxxx xxxxxxxxx studie xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx účinky xx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Denní xxxxxxxx samcům rodičovské xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxx xxxx xx devíti xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X potkanů xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx pro xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx pokračuje x xxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxx dalších xxxx x jsou xxx xxxxxxxx a vyšetřeni xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx aplikace xxxxxxx xxxxxxxxxx generace (X) začne xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx aspoň dva xxxxx xxxx obdobím xxxxxxxxxxx. Xxxxx aplikace xxxxxxxxx pak xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, v xxxx xxxxxxxxx až xx xxxxxxxxx X1 xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx dávkovacího xxxxx xxxxx znalostí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx a/nebo bioakumulaci.
1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x xxxxx samec) xxxxx 1 : 2 (jeden xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).
X xxxxxxx 1 : 1 párování, xxxxxx se xxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxx ráno xxxx xxxxxx vyšetřeny xx xxxxxxxxxx spermatu xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 těhotenství xx definován xxxx xxx nálezu xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx.
Xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x cílem xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx páru. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx k xxxxxxxxx x osvědčenými jedinci xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx vyšetřením reprodukčních xxxxxx nebo vyšetřením xxxxxxxxxx cyklu x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x své xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx postup: mezi 1. a 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx upraví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 samic xx vrh; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx možno xxxxxxxxxxxxxx xx jiné xxxxx, xxxx. 5 samců x 3 xxxxxx. Xxxx menší xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx zvíře xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx porodu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mortality xx zaznamenávají. Xxxxxx xxxxxxx se měří xxxxx xxx xxxx, xxx xxxxx doby xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx xxxxxx kontrolovat xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx porodu x x xxxxxxx xxxxxxx xx měří příjem xxxxxxx (x xxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx x pitné xxxx) xx xxxxxx xxx, xxx je xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X zvířata xx xxxx první xxx xxxxxxxx x pak xxxxx. Xxxxxxx pozorování xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx dospělé xxxxx.
Doba gestace xx počítá xx xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx x pohlaví mláďat, xxxxx mrtvých a xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx utracená ve xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx defekty. Xxxx mláďata xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx xx zváží xxxx xx xxxxxx, xx 4. a 7. xxx x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x fyzickém xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx
1.3.5.1 Xxxxx
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx abnormality anebo xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx reprodukčního xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx se vyšetří xx defekty.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, vagina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, prostata, xxxxxxxx x cílové xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx X xx xxxxxxxx pro mikroskopické xxxxxxxxx. X případě, xx tyto xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, provede se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x skupiny xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávku x xxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxx xxxxxx zvířat, xx xxxxxxx i x X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxx případech xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všechny xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx již xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx orgány xxxxxx podezřelých z xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx podrobit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, kde xx xxxxxx pro každou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxxx, xxxxx plodných xxxxx, xxxxx těhotných xxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx obecně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx metoda.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx odezvě x xxxxxxxxxx na xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, gestace x životaschopnosti,
- xxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx nebo xxx xxxxxxx xxxxxxx xx ukončení xxxxxx,
- xxxxxxx uvádějící xxxxxxxx xxxxxxx vrhu, xxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx hmotnost xxxxxxx,
- toxické a xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, potomstvo x xxxxxxxxxxx růst,
- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx zvířat X xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, pokud xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.35. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx.
Testovaná látka xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx v odstupňovaných xxxxxxx.
Xxxxx rodičovské (X) generace dostávají xxxxxxxxxx látku v xxxx xxxxx x xxxxxxx v průběhu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x myší x 70 xxx x xxxxxxx), xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx generace (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx cyklů, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinek xxxxxxxxx xxxxx na estrus.
Xxxxxxx jsou poté xxxxxxxxxx. V době xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx podává xxxxxxxx xxxx pohlaví x xxxxx, x xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx, xxxxx samicím. Xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx zvířatům xxxxxxxx xxxxxxxx X1 v xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx x xx xx doby xxxxxxxxx X2 generace.
Pro xxxxxxxxx aplikaci je xxxxx xxxxxx modifikovat.
1.2 Xxxxx testovací metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Před zahájením xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx - xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx. Rodičovská xxxxxxx (P) xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx zahájením xxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx během experimentu. Xxxxxxxxxx xx testovanou xxxxx podávat x xxxxxxx nebo v xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx jsou xxxx možné. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx způsobem x xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxické xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x týdnu.
1.2.2 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx potkanům nebo xxxxx. Používají xx xxxxxx P xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx být xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx co xx druhu, kmene, xxxxxxx x váhy xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxx pohlaví. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, exponované x xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Každá exponovaná x xxxxxxxxx skupina xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Cílem xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx těhotenství x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx spolehlivé hodnocení xxxxx látky xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x mateřské xxxxxxx, xxxxxx, růst x xxxxx potomstva xxxxxxxx X1 od početí xx xxxxxxxxxx, a xxxxx jejich xxxxxxxxx xxxxxxxx X2 až xx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx libitum. Před xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xx jim xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx alespoň tři xxxxxxxxxx skupiny a xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx v největším xxxxxxxx objemu. Pokud xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx další xxxxxxxxx xxxxxxx, spárované xx do výživy.
Xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx to dovolí xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x nikoli mortalitu x rodičovské xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxx xxxxxxx testované xxxxx, x xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, ani x xxxxxx ani u xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx nebo v xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx těhotných xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx tělesné xxxxxxxxx x 0. nebo 6. xxx od xxxxxxx těhotenství.
1.2.6 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 neprojevuje xxxxxx xxxxxxxx účinkem xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx předběžná xxxxxx xxxxx, xx vysoká xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx úrovních.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Plán xxxxxx
Xxxxx aplikace xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X začne xx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx, aspoň xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. U xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx týdnů xxxx xxxxxxx připouštění (8 xxxxx pro xxxx). Xxxxx xx buď xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx období xxxxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx x aplikaci x xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vrhů x xxxx utraceni x xxxxxxxxx někdy před xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx P začne xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx aspoň xxx týdny před xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxx tři xxxxx xxxxxx připouštění, x xxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx X1 xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx změna dávkovacího xxxxx podle xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. x xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx F1 xxxxxx xx xxxxxxx x končí xxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (jedna xxxxxx x jeden xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx dvěma xxxxxxx).
V xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, samice xx xxxxxxx s týmž xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx otěhotnění xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxx xxxx xxxx samice xxxxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxx xxxx vaginální xxxxx. Den 0 xxxxxxxxxxx je definován xxxx den nálezu xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx k xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx X1 xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 11 xxxxx x myší x 13 týdnů x xxxxxxx. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X1 xx náhodně xxxxxxx xxxx z xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx x oplodnění, xx xxxxx xxxxxxxx s xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. To xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx další xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx estrálního xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Zvířatům xxxxxxxx xxx vyšetření xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx do xxxxxxxx odstavení bez xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vrhů. Xxxxx xx velikost xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx xxxxxx se xxxxxxxx všech xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx dosáhlo počtu 4 xxxxx x 4 xxxxx na xxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, je xxxxx standardizovat xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 xxxxx a 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Standardizace xxxx xxxxxxxx X2 xx xxxxxxx xxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx jednou za xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx porodu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx jak před, xxx xxxxx doby xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx příjem xxxxxxx xx xxxxxx xxx, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxx. Rodičovská X a X1 xxxxxxx se xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x xxx týdně. Xxxxxxx pozorování se xxxxxxxxxxxxx individuálně xxx xxxxx dospělé xxxxx.
Xxxx xxxxxxx se xxxxxx xx xxx 0 xxxxxxxxxxx. Každý xxx xx co xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a stanoví xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxxx a živých xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx x mláďata xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx se uchovají xxx vyšetření xx xxxxx defekty. Živá xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx vrhy xx xxxxx xxxx xx xxxxxx, ve 4. x 7. xxx x xxxxx xxxxx xxxxx do xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Pozorují xx x zaznamenávají xxxxxxx xxxxxxxxxxx x chování x xxxxxxxx stavu xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Pitva
Xxxxxxx xxxxxxx zvířata xxxxxxxx X x F1 xx utrácejí, jakmile xxxx xxxxx je xxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxx zvířata generace X2 se xxxxxx xx xxxxxxxxx.
Po xxxxxxxx nebo úmrtí xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx P x X1 makroskopicky xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx změny, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx reprodukčního xxxxxxx. Xxxxxxx zemřelá xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Vaječníky, xxxxxx, děložní hrdlo, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, koagulační xxxxxx, prostata, hypofýza x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx P x X1 xx uchovají xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx mnohadávkových xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxx X a X1 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, x dále x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx. Xxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxx skupin xxxxxx, xx vyšetří i x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupin. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx vyšetřují všechny xxxxx xxxxxxxxxxxxx postižené. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx orgány xxxxxx podezřelých x xxxxxxxxxxx xx mají xxx xxxxxxxx mikroskopické xxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, kde xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxxxxx xxxxx, typ změn x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxx xx použít xxxxxxxxxx xxxxxx přijímaná statistická xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x experimentu by xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx odezvě x xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x životaschopnosti,
- xxxx uhynutí x xxxxxxx studie xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx vrhu, průměrnou xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- toxické a xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, potomstvo x xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx zvířat X x X1 xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxx xxxxx údajů, xxxxx je možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.36. TOXIKOKINETIKA
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací metody
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx látka xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx opakovaně x xxxxxxx stanovené xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Látka xxxx. xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx v exkretech.
Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx s "xxxxxxxxxx" xx "značenou" xxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx xx xxxxxxx značení, xxxxxx se xxx, xxx xxxxxxxx co xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx zvířata xxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx po xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx otázek xx xxxx použít xxxxx xxxxxxx, pregnantních xx xxxxxxxxxxxxxxx zvířat.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Toxikokinetické xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx více xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx nebo uvažovaných xxx xxxxx x xxxxxx toxikologických studiích xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx, neměla xx xxx variabilita hmotnosti xxxxx než ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 4 zvířat xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx dávku. Xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx podmínek xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx obou xxxxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x různých xxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxx xxxxxxxx) je xxxxx xxxxxx menší xxxxx xxxxxx.
Je-li studována xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx určení počáteční xxxxxxxxx skupiny zvířat xx třeba xxxx x xxxxx jak xxxxx zvířat, která xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx časovém xxxx, xxx počet časových xxxx, x xxxxx xxxx xxxxxxxxx prováděno.
Xx-xx studován metabolismus, xxx xxxxxxxx skupiny xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx x sledovaných xxxxxxxx xxxxxxxxx, pak xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx měla počítat x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxx než 2 xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx zvířat by xxxx být xxxxxxxxxx xx to, xxx xxx látku xxxx. xxxx xxxxxxxxxx poskytla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx x deplece.
1.2.2.3 Xxxxx
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx 2 různé xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx to xxx xxxxx xxxxx xxxxx, po které xxxxxx pozorovány xxxxx xxxxxxx účinky x xxxxxx xxxxx, po xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
V případě xxxxxxxxxxx podávání xx xxxxxxxx dostatečné podání xxxxxxx dávek látky. Xx xxxxxxxx podmínek xxxx xxx xxxxxxxx x podávání vysoké xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x je-li xx xxxxxx i xx xxxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx jsou xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx kůži, nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx xxxx xxx užitečné xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx jiných xxxxxxxxx aplikace. Navíc xxxxxx po intravenózní xxxxxxxx xxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx se xxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Pozornost xx měla xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx sondou xxxx v potravě, x potřebě xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx by měla xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x údaji x jejich xxxxxxx, xxxxxxxxx x trvání.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xx zdůvodněných xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx zvířata xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
1.3.1 Xxxxxxxx
Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx podávané xxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx metody x xxxx bez xxxxxxxxxx xxxxxxx1), a xx xxxx.:
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. x xxxx, žluči, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx zbytků x karkasu,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx odpovědi (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) xxxx testovanou x xxxxxxxxx x xxxxxxxx referenční skupinou,
- porovnání xxxxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx testovanou a xxxxxxxxx x případně xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx plochy xxx xxxxxxx závislosti xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxxx x daty získanými x referenční xxxxxxx.
1) V xxxx xxxxxx se referenční xxxxxxxx xxxxxx xx, xx které xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxxxxx způsobem, xxxxx xxxxxxxxx úplnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávky.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
X xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx 2 přístupy, z xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxx:
- xxx xxxxxxx celkotělové xxxxxxxxxxxxxxx xxx získat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx stanovení koncentrací x xxxxxxxx testované xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx x orgánech xxxxxxxxx xx zvířat x různých xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxxxx
Při xxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxx xxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx vzduch, x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx se x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx po xxxxxx xxxxx, x to xxx xx xxxxxxxxx 95 % x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 7 xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx také xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx v xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx otázky x xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických xxxxxx. Xxx xxxxxxx informací x xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vitro xxxxxx.
Xxxxx informace x xxxxxx xxxx metabolismem x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx sloučenin xxxxxxxxxxxx - SH xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx se xxxxx xxxx prováděné xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx možno xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx průměry x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxx, xxxxx, xxxxx x xxxxxxx (xxxxx xx to relevantní). Xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x rychlost xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx studií xx měla xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx studované xxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxx xxxx prováděné xxxxxx xx xxxxxx x testu měla xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx údaje:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx podmínky, xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx materiálu, xxxxxxxx xxx xxxxxx,
- xxxxxxxx dávky x xxxxxxxxx podání,
- xxxxxx(x) podání a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx x x ostatní xxxxxxxxxx xxxxxx,
- metody xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx x biologickém xxxxxxxxx včetně vydechovaného xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx, režimu, xxxx, xxxxx x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx v závislosti xx xxxx,
- xxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx xxx biochemická xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX SLOUČENIN XXXXXXX - AKUTNÍ XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látek xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx látek xxxxxxx specifický xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx zjištěn x xxxxxx xxxxxxxx toxicity. X xxxxxxxx organických xxxxxxxxx fosforu byly xxxxxxxxxx zpožděné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x mají xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek, xxxxx xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x in vitro xxxxxx xxxx není xxxxx považovat xx xxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx metody xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx elektricky xxxxxxxxx xxxxxxxxx estery, xxxxxxxxxx xxxx anhydridy xxxxxxxx xxxxxxxxxx, fosfonové nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, nebo xxxx xxxxx, které xxxxx způsobit pozdní xxxxxxxxxxxxx, pozorovanou x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx ataxií, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx v xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x pozdním xxxxxxxx xxxxxx příznaků, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - NTE (xxxxxxxxxx target xxxxxxxx) x xxxxxxx tkáni.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxxxx xx pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxx podmínkách xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nezměnila.
Příkladem xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx neurotoxickým xxxxxxx je xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, XXXXXX 201-103-5, chemický xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (TOCP).
1.4 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx orálně v xxxxxx dávce slepicím, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinky. Xxxxxxx xx po xxxx 21 xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx chování, xxxxxx x paréza. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx XXX, se provádí x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxx xxxxx. 21 xxx xx xxxxxx látky jsou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Popis xxxxxx xxxxxxxxx
1.5.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění a xxxxxxxxxxxxxx léčby x x xxxxxxxx chůzí xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx, v jakých xxxxx během xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxx pozorování chůze.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx tobolkách xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 xx 12 měsíců. Xxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx se xx podmínek, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.6.1.2 Xxxxx x pohlaví
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx použije xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx stejně xxxx x pokusnými.
X xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx vyšetření (xx třech prvý x druhý xxx xx xxxxxx) x xxxx xxxxxxx 21denní xxxxxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxx xxxxx šest xxxxxx, xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, tři xxxxxxx xxxx určeny xxx xxxxxxxxx a xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx doplňovat historické xxxxx, xxxx se x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx některý xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. plemeno, potrava, xxxxxxxx xxxxx).
1.6.1.3 Volba xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x využitím příslušného xxxxx xxxxxx x xxxxxx x různých xxxxxxxx dávek, aby xx dala xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx bude xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx nezbytná xxx xxxxxxxxx přiměřené xxxxx x hlavní xxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx účinky, xxxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, o xxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. K xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx typů xxxxxxxxxxx xxxxx (xxx xxxxxx B.1 bis). Xxxxxxxxxx xxxxx xxx slepice xxxx xxxx toxikologické informace xxxxx být xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx výběru dávky x xxxxxxx xxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Případné xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx přežití xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxxxxx (xxxx) x xx 21 dnech xxx xxxxxxxxxx (xxxx). Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, o xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx neurotoxickými xxxxxx, xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx cholinergními xxxxxx.
1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx x dávkou xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx studii, xxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx podle údajů x xxxxx s xxxxxxxxx strukturou xxxx xxxxx toxicitu xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x studii x xxxxxxx vyšší xxxxx. Limitní test xx neprovádí, xxxxx xxxxxxxx vyskytující se x xxxx naznačuje xxxxxxx použití ještě xxxxx úrovně dávky.
1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx 21 xxx.
1.6.2 Xxxxx xxxxxxx
Xx aplikaci prostředku, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx následky xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx pozorování
Pozorování xx začít xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx pozorují xxxxxxxxxx x xxxxxxx prvních xxxx xxx x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx 21 dní xxxx xxxxx xxxxxxx utraceny xxxxx xxxxx. Veškeré xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx nástupu, xxxx, xxxxxx x xxxxxx abnormálního chování. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx nejméně čtyřstupňové xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx se paréza. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx slepice xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x klecí x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx např. xxxxxxxxxxx po žebříku, xxx se usnadnilo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata x xxxxxxx xx xxxxxxxxx a přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx třeba xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
1.6.2.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Všechny xxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx látky x xxx aspoň xxxxxx xxxxx.
1.6.2.3 Xxxxxxxxx
Šest xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx testované x kontrolní xxxxxxx x vehikulem x xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny (xx-xx xxxxxxx xxxxxxx) xx usmrtí x xxxxxxx dnech xx xxxxxxxx xxxxx. Pro xxxxxxx inhibice XXX xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx inhibici XXX. Běžně xx xxxxxxxx tři xxxxxxx x kontrolní a xxxxx testované skupiny xx 24 xxxxxxxx x další xxx xx 48 xxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny xx xxxxxxxx xxxxx xx 24 hodinách. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx naznačuje, xx xxxxxxx látka xx x xxxxxxxxx pohybuje xxxxx pomalu (hodnotí xx xxxxxx cholinergních xxxxxxxx), pak xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx ze xxx xxxxxx, a xx xxxx 24 xx 72 hodinami xx xxxxxx látky.
X xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (AChE). In xxxx může xxxx xxxxxx spontánní reaktivace XXxX, což xxxx xxxx k xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Xxxxx u xxxxx xxxxxx (plánovaně xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx stavu xxxxx x xxxxx.
1.6.2.5 Histopatologické xxxxxxxxx
Xxxxxxx tkáň x přeživších xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx histologicky xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx perfúzních xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (střední xxxxxxx xxx), prodloužená mícha, xxxxx - xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx krční xxxxx, xxxxxxx hrudní x xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx nervů se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x x. tibialis (x xxxx větve x x. xxxxxxxxxxxxx) x z n. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx a xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxx) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxxxxxxxx xxxxx sledování.
Xxxxxxx xx údaje pro xxxxxxxxxx xxxxxxx. Údaje xx xxxx sestaví xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx počátku xxxxxx x počet xxxxxx xxxxxxxx poškození, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, typy x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x procento xxxxxx xxxxxxxxxxxx každý typ x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx účinku.
Výsledky xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx výskytu, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx jevy x xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx.
Xxxxxxx výsledky xx třeba vyhodnotit xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx tyto xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Testovaná xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx x xxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky;
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxx;
- podrobné údaje x způsobu aplikace xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx dávek;
- xxxxxxxxxxx podávaných xxxxx, xxxxxx podrobných xxxxx x vehikulu, xxxxxx x fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx údaje x podání xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxx, stupeň x xxxxxx klinických příznaků (xx vratných xxxx xxxxxxxxxx);
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky;
- pitevní xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx;
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, x kterých xx xx možné.
Xxxxxxx výsledků
Xxxxxxxxx x Interpretace
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx x metodou XXXX XX 418.
B.38. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX 28XXXXX OPAKOVANÁ XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x úvahu schopnost xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx specifický typ xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx fosforu byly xxxxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx však není xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx 28xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx informace x možném zdravotním xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxx opakovaných během xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx informace x závislosti odpovědi xx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávkových úrovní, xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx úroveň xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx bezpečné xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x názvu xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, thioestery xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx fosforečné, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx kyselin xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, nebo jiné xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx neurotoxicitu, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx v xxxx x xxxxxxxxxx nervu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx příznaků, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx denně xxxxxx xxxxxxxx xx dobu 28 dnů. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx nejméně xxxxxx denně, zaznamenává xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxxxx xxxxxxxx NTE, xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.4.1 Xxxxxxxx
Mladé xxxxxx xxxxxxx slepice xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx experimentální x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx budou během xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx pozorování xxxxx.
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxxx 7 dní x xxxxx, buď xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx neředěné nebo xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx se doporučuje xxxxxxxxx, neboť velké xxxxx pevných xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx před testem xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx domácího (Gallus xxxxxx xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx se xx xxxxxxxx, xxxxx dovolují xxxxx pohyb.
1.4.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx úrovně xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx.
V každé xxxxxxx xx být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx aspoň xxxx x nich mohlo xxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx x každém xx dvou xxxxxxxx xxxx) x šest xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pozorování xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.3 Xxxxx xxxxx
Dávkové xxxxxx xx xxxxx x přihlédnutím ke xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx testované látky. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, nejlépe xxxxxxxx xxxxxx neurotoxicity, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx utrpení. Xxxx xx xxxxx řada xxxxxxxxxxx xxxxx způsobem, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx. Nejnižší dávka xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity.
1.4.2.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx x xxxxxx xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx x xxx, za xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx údajů x xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, pak xxxx xxxxx uvažovat x studii s xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx x 14 xxx xx xx, xxxx xx xxxxxxxx x do xxxxx xxxxx plánu.
1.4.3 Xxxxx xxxxxxx
Testovaná xxxxx se xxxxxx xxxx dní x xxxxx xx 28 xxx.
1.4.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx po začátku xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxx xx 28 xxx a dalších 14 xxx xx xxxxxxxx aplikace, xx xxxxxxxx xxxxx plánu. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, ale nemá xx xx xx xxxxxxxx. Ataxie xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stupnice, xxxxxxxxxxx se xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát týdně xx slepice xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako např. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx usnadnilo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx, humánním xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxx hmotnost
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx těsně xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pak xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Šest xxxxxx xxxxxxx vybraných x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx x prvních xxxxx xx xxxxxxxx poslední xxxxx. Xxx analýzu xxxxxxxx NTE se xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx mícha. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx jeho xxxx xx xxxxxxxx NTE. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 hodinách x xxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx studií (např. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xx xxxxxxxxxx xxxx xxxx usmrcení xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pak xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dobu a xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx.
X těchto xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx také xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, což xxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.
1.4.3.4 Xxxxx
Xxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx stav) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx posouzení xxxxx xxxxx a xxxxx.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxxxx xxxx x přeživších xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx fixují xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (střední xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx krční xxxxx, střední hrudní x xxxxxxxxxxxxx), x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx část x n. xxxxxxxx (x jeho větve x x. xxxxxxxxxxxxx) x x x. xxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx myelin x xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxx fixované tkáně xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a skupiny x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx najdou x xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx účinku, provede xx xxxxxxxxxxxx vyšetření x xx slepicích xx xxxxxx, které xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
2. XXXX X XXXXXX ÚDAJŮ
Xxxxx jsou výsledky xxxxxxx xxxxx metodou (xxxxxxxxx, histopatologie x xxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx, xxxxx xx neprovádí xxxxx testování xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Neprůkazné xxxx xxxxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxx další xxxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxx xxx jednotlivá xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx sestaví do xxxxxxx. Z xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx x počet xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, změny xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx a xxxxxx těchto xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx a xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x korelaci xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x testovaných x kontrolních skupin.
Xxxxxxx výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistické xxxxxx xx zvolí xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxx obsahuje xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xxxxx xxxxxx,
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx atd.,
- hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Podmínky xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxxx, stabilitě x homogenitě xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx údaje o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx o potravě x xxxxxxx xxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dávek,
- xxxxxxxxxxx podávaných xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, objemu x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx doby pro xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, je-li jiná xxx 24 a 48 hodin.
Výsledky:
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx (XXXXX),
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx klinických příznaků (xx vratných nebo xxxxxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxx biochemických xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické vyhodnocení xxxxxxxx, x xxxxxxx xx to xxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x metodou XXXX TG 419.
X.39. Test xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx xxxx
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx DNA Xxxxxxxxx (XXX) Xxxx Xxxx Xxxxxxxxx Xxxxx Xxxxx Xx Vivo (1997).
1.1 XXXX
Účelem xxxxx xxxxxxxxxxx syntézy XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX) v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx pokusných xxxxxx (1) (2) (3) (4).
Tento test xx vivo xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování xxxxxxxxxxxxx xxxxxx chemických xxxxx x játrech. Xxxxxxxx xxxxx indikuje xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx buňkách x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx obvykle xxxxxxx xxxxxx metabolismu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX in xxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, že se xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx tkáně xxxxxxxxx, xxxx xxxxx test xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (XXX) xx xxxxxxx tak, xx se xxxxxxx xxxxxxxx značených nukleosidů x buňkách, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (X-xxxx) xxxxxxxx XXX. Xxxxxxxxxxx xx metoda, xxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx thymidin značený xxxxxxx (3X-XxX). Pro xxxxx XXX xx xxxx se nejčastěji xxxxxxxxx xxxxxxx játra. Xxxx tkáně xxx xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx však xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx XXX, xxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx XXX xxxxxxx vhodná x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 bází), xxxxxxx xxx látky xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxxx" (1 - 3 xxxx) je xxxx xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx k xxxxxxx x důsledku xxxxxxxxxx, xxxxxxxx opravení xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx XXX. Xxxxxx odpovědi XXX xxxxxx xxx x přesnosti xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx, že xxxxxxx xxxx sice s XXX xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. To, xx XXX xxxx neposkytuje x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx informace, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx poskytuje xxxxxxxx x celém xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxx: xxx xxxxxxx xxxxx (XXX) xxxxx xxx určitá, xxxxxx stanovená hodnota, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx test.
Net xxxxxxx grains (NNG): xxxxxxxxxxxxx xxxx XXX xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxx x jádře (NG) x xxxxxxxxx xxxxxx xxx v cytoplasmě (XX): XXX = XX - XX. Xxxxx NNG xx xxxxxxxxxxxx xxx jednotlivé xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxx x xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx kulturách xxxx.
Xxxxxxxxxxx syntéza DNA (xxxxxxxxxxx XXX synthesis, XXX): xxxxxxx syntéza XXX xx xxxxxx x odstranění xxxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx vyvolaného xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx UDS x xxxxxxx xxxxxxxxx buňkách xx xxxx indikuje xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx xxxxxx a xxxxxxxxxx segmentu DNA xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx fyzikálním působením. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx x inkorporace 3X-XxX xx DNA xxxxxxxxx xxxxx, charakteristických nízkým xxxxxx buněk x X-xxxx buněčného xxxxx. Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxx stanoví autoradiograficky, xxxxxxx tato xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x interferenci x xxxxxxx v X-xxxx, xxxx je xxxx. xxxxxxxxxxx metoda.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx druhu
Běžně xx xxxxxxxxx potkani, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx laboratorní xxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx rozdíly xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx nemají xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx chovu
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x části X.
Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xx jednoznačně označí x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx umístěny.
1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx a xx-xx xx xxxxx, látka xx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx její xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx testované látky xx mohou xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) prokazují, že xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.3 Podmínky xxxxx
1.4.3.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx chemicky reagovat. Xxxxxxx-xx se ne xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx x xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx možné, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / vehikulum.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx skupinách xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx měly xxxxxxxxx XXX při xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné xxxxxxx xxx xxxxxxxxx úroveň. Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x dávkách xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx patrné, xxx xxxxxx nenapovídaly hodnotiteli xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx pro xxxxxxxxx kontrolu patří xxxxxxxxx:
Xxxx xxxxxx xxxxxx | Xxxxx | CAS | XXXXXX |
odběr v xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 xxxxx) | X-2-xxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Je možná xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, než xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Počet x xxxxxxx xxxxxx
X každé skupině xxxx být xxxxxxxxx xxx analyzovatelní xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx historická xxxxxxxx, pak xxx xxxxxxxx xxxxxxx negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx jeden, nebo xxx xxxxxxx.
Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx, xx mezi xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx možné xxxxxxx testování pouze xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxxxx. Xxx, kde humánní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být pohlavně xxxxxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx farmaceutických xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx jednorázově.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Obvykle xx používají xxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx toxicity, xx xxx xxxxx xxxxx ve stejném xxxxxx xx se xxxxxxxx xxxxxxx účinek. Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.
Látky, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx pro stanovení xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, protože xxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, jaké xx xxx použijí x hlavní xxxxxx.
Xxxx nejvyšší dávku xxx také xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxx. pyknotická xxxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže test xxx xxxxx minimálně 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xxxxxx x xxxxx xxxxx nebo xx xxxx dávkách v xxxxx xxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkách xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx úplná xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx x limitním xxxxx vyšší xxxxx.
1.5.5 Aplikace xxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx, protože xx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx oběhem. Xxxxxxxxx objem kapaliny, xxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x hmotnosti xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xxx, aby objem xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Příprava xxxxxxxxx xxxxx
Jaterní buňky xx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx obvykle 12 - 16 xxxxx xx xxxxxx xxxxx testované xxxxx. Xxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 xxxxxx po xxxxxx xxxxx), ledaže xx xx 12 - 16 hodinách xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xx-xx to xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Krátkodobé kultury xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jater xx xxxx xxxxxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx buňky mohly xxxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx 50 % životaschopnosti (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx XXX
Xxxxxxx xxxxxxxxx savčí xxxxxxx xxxxx xx po xxxxxxx xxxx (xxxx. 3 - 8 xxxxx) obvykle xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX. Xx inkubaci xx xxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xx xxxxx xxxxx inkubovat x xxxxx obsahujícím nadbytek xxxxxxxxxxx thymidinu, xxx xx xxxxxxx neinkorporovaná xxxxxxxxxxxxx (xxx. "cold xxxxx"). Xxxxx xx xxx promyjí, fixují x xxxxxx. Při xxxxxxx xxxxxxxxxxx intervalech xxxxxx xx "xxxx xxxxx" provádět. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx do autoradiografické xxxxxx, xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxx), vyvolají, obarví x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx dva xxxx tři xxxxxxxxx.
1.5.8 Xxxxxxx
Mikroskopické xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx možno XXX xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).
Preparáty xx xxxx počítáním zrn xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx dvou preparátech x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 buněk; xxxxx xx xxxxx méně xxx 100 na xxxxxxx jedince, musí xx být zdůvodněné. Xxx xxxxxxxx zrn xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x X-xxxx, ale xxxxx xxxxx x X-xxxx se xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx metodou xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Výsledky xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx preparátů x xxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx dávku x xxx se xxxxxxx xxxxx xxxxx "xxxxxxx xxxxx" (XXX) xxxxxxxxx xxxxx XX xx xxxxx XX. Xxxxxxxx-xx xx "buňky x xxxxxx", musí xxx xxxxxxxx, kterými xx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx souběžných xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx mohou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; pokud xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, je xxxxx xx vybrat x xxxxxxxxx ještě xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X INTERPRETACE VÝSLEDKŮ
Xxxxxxxx pro pozitivní/negativní xxxxxx xxxxxxxx:
pozitivní | (I) xxxxxxx XXX xxx předem xxxxxxxxxx prahem, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx | |
nebo | (XX) xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxxx kontroly | |
xxxxxxxxx | (I) xxxxxxx XXX na xxxxxx/xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx | |
xxxx | (II) hodnoty XXX xxxxxx signifikantně xxxxx než souběžná xxxxxxxx. |
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxxx dat, xxx xxxxxxx, že xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx - xxxxxxx x cytotoxicita. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx statistické metody; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx neměla xxx xxx pozitivní xxxxxx xxxxxxxxxxxx faktorem.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx XXX se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx ukazuje, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x savčích jaterních xxxxxxx in vivo xxxxxxxxx XXX, které xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX in xxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx poškození DNA, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx vzít v xxxxx, jaká je xxxxxxxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxx širokého xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxx určitou xxxxxxx tkáň (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- počet, xxx x pohlaví xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedena,
- xxxxxxxxxx volby x xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x podávání xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxx tkáně,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx látky x xxxxxxx/xxxxx xxxx (ppm) xx faktickou xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x kvalitě xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx schéma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- metody xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- metoda xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx hodnotí jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxxxx hodnoty počtů xxxxxxxxxx zrn x xxxxxxx, xxxxxxxxxx a "xxx xxxxxxx xxxxxx" xxx jednotlivé xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx,
- statistické xxxxxxxxx, bylo-li xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx,
- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx odchylek,
- počet "buněk x xxxxxx", byl-li xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx x S-fázi, xxx-xx stanoven,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxx X.39. byla vložena xxxxxxx xxxxxxxxx č. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.40. XXXXXXX ÚČINKY XX XXXX
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx metod (Xxxxxxxx Xxxxxx xxx xxx Xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxx, ECVAM, Xxxxx Xxxxxxxx Centre, Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxx vědecky validní xxx testy xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx na kůži: xxxx na xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx potkana (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, XXX) x test xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX xxxxxxxxx, xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx látkami leptajícími x xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx stupně xxxxxxxxx xxxxxx (známé xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx R35, x ostatní xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání kůže, X34). Xx uveden xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx; výběr xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxx nevratného xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxx. 1.5.3.4 x 1.7.2.3.
1.4 XXXXXXX METODY - XXXX XXX XX XXXX POTKANA
Testovaný xxxxxxxx se nanese xx xxxx xx 24 hodin xx xxxxxxxxxxx xxxxxx terčíků xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx potkanů utracených xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx mají leptavé xxxxxx, jsou xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx schopnosti xxxxxxx normální xxxxxxxxx x xxxxxxxxx funkce xxxxxx xxxxxxx.Xxxx schopnost xx xxxx jakožto xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporu (TER) xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5xΩ) (4) (5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxx xxxxxxxx hodnotu xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxx x neutrálních xxxxxxxxxxx látek (xxxxxxx xxxxxxxx xxx x xxx. (6)) xx xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx xx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (2) (7).
1.5 POPIS METODY - TEST XXX XX XXXX XXXXXXX
1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23xxxxx) xxxxxxx, Xxxxxx nebo srovnatelný xxxx. Malými xxxxxxx xx zvířata xx xxxxxxx odstraní xxxx x xxxxxxxx x xxxxx plochy. Zvířata xx xxx xxxxx xxxxxxxx otíráním x xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxx inhibujících xxxx xxxxxxxx. Třetí xxxx čtvrtý xxx xx xxxxxx xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxxxxxx znovu x xxxxx 3 xxx xx použijí. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků xxxxxxx xxx zvířata xxxxxx xxx 31 xxx.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx usmrtí, xxxxx xx xxxx z xxxxxxxx xxxxxx a x té xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxx, x xx epidermální xxxxxxx k xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx X-xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx připne, a xxxxxxxxxx tkáň xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x X-xxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Gumový X-xxxxxxx xx pak xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx TPFE trubice xxxxxx vazelínou. Xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx obsahující xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX), kde xx xxxxxxxxxxx pružinovou xxxxxx (xxx. 2).
1.5.3 Popis xxxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx testované xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxxxxx se xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx ve xxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xx terčík x xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxx xxxx xxxxxx epidermis, xx xxxxxx xxxxx se xxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx vody x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xxxx mít s xxxx maximální možný xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx dosáhnout xxxxxxxx xxxxx xx 30 xX, xxx xx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx prášek. Použijí xx vždy tři xxxxxxx pro každou xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx dobu 24 hodin (xxx xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx 30 xX xxx dlouho, xxxxx se xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, která v xxxxxxx xxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx 30 xX.
1.5.3.2 Xxxxxx XXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odpor (XXX) xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx proud (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx napětí xxxx přídavkem xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx několika xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx tak, xx xx xxxxxxx xxxxx, x tkáň xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 154 mM xxxxxxx síranu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xx obě xxxxxx xxxx x xxxxx se odpor x xΩ/xxxxxx (obr. 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x délku xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obr. 1. Xxxxxx vnitřní (xxxxx) xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxx navrch XXXX xxxxxxx xxx, xxx byla xx xxxxxxx síranu xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx xxxxxx xx xxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mezi xxxxxx hranou xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx XXXX xxxxxxx (obr. 1), xxxx xxxxxxxxxx xx vliv xx xxxxxxxx xxxxxxx odporu.
Upozorňujeme, xx xx-xx xxxxxxxx xxxxx vyšší xxx 20 kΩ, může xx xxx xxxxxxxx xxxx, xx testovaná xxxxx překrývá epidermální xxxxxx terčíku xxxx. Xx možno se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx tak, xx se XXXX xxxxxxx utěsní xxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxx 10 xxxxxx xx protřepává, xxxxxx xxxxxx hořečnatého se xxxxxx a měření xxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx roztokem.
Průměrná xxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx souběžné xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx. Navrhované xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxx xxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx odporu (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X kyselina xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
&xxxx;
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
10 – 25
|
1.5.3.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x neutrální xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxxx látek (xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx TER xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ, xxx xx xxxx tkáni xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Tímto xxxxxxxx se xxxxxx, xxx xx xxxxxxx x výsledky xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x odstranění barviva xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 2 xxxxxx xx 150 μx 10% (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x destilované vodě. Xxxxxxx xxxx se xxx xxxxxx xx xxxx 10 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx proudem xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx nejvýše pokojovou xxxxxxx. Xxx se xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx sejme x XXXX trubice x xxxxx xx xxxxxxx (např. xx 20 xx xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx xxxx. Nádobky xx xx dobu 5 xxxxx xxxxx xxxxxx, aby se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Pak xx xxxxxxx vyjmou x xxxxx xx xxxxxxx x 5 xx 30 % (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx sodného (XXX) v xxxxxxxxxxx xxxx, xxx se xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 60 xX. Po inkubaci xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxx po xxxx 8 minut xxx xxxxxxx 21 xX (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx síla ∼ 175). Xxxxxx 1 ml xxxxxxxxxxxx xx xxx zředí 30 % (x/x) xxxxxxxx SDS x xxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx poměru 1 x 5 (x/x) (xx. 1 xx xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx XXX). Xxxxxxx xxxxxxx (OD) xxxxxxx xx xxxx xxx xxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B x xxxxxxx xx xxxxxxxx z hodnoty XX (molární xxxxxxxxx xxxxxxxxxx sulforhodaminu X xxx 565 xx xxxx 8,7 . 104; molekulová xxxxxxxx = 580). Obsah xxxxxxxxxxxxxx B se xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx kůže xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx hodnota. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx za xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahu xxxxxxx se u xxxxxxxxxxx xxxxx při xxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx považují:
|
Kontrola
|
Látka
|
Rozmezí xxxxxx xxxxxxx (xx/xxxxxx)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
40 - 100
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
15 – 35
|
1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx působení xxxxxxxxx látky xx xxxxxx xxxx (xxxx. 2 hodiny) xx xxxxxx xxxxxxxxx silně xxxxxxxxxxx látek. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxx TER xxxxxxxxx xxxxxxx schopnosti některých xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx 2 hodiny (2), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx identifikaci leptajících x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx XXX mohou xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x experimentálním xxxxxxxx. Prahová xxxxxxx xxx leptavé xxxxxx 5 kΩ xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx. Xxxxx xx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx by být xxxxx použít xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x prahovou xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx referenčních xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, jež xxxx xxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxx (3).
1.6 XXXXXXX XXXXXXXX METODY - XXXX X XXXXXXX XXXXXX KŮŽE
Testovaný materiál xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx 4 hodin xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx corneum. Xxxxxxxxx materiál se xxxxx podle xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx životnosti xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx "MTT reduction xxxxx" (XXX = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) pod prahovou xxxxxxx definovanou pro xxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx ty, xxxxx dokáží proniknout xxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx erozí) x jsou dostatečně xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxxxxx vrstvách.
1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX X MODELEM XXXXXX XXXX
1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxx mohou xxxxxxxx x různých xxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Model xxxx xxx funkční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx živých xxxxx. Bariérová funkce xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx zachována. Xx lze xxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxx rezistentní xxxx xxxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx, x nichž xx známo, že xxxx xxx buňky xxxxxxxxxxx, xxxxx však xxxxxxxx skrze xxxxxxx xxxxxxx neprocházejí. Model xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek vykazovat xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxx xxx dostačující x xxxx, aby xx xxxx dobře xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx buněk (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx MTT, xx. XX hodnotou) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx ležet x xxxxxxxxxxxx mezích xxx xxxx model. Podobně x xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xx srovnání s xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx spadat xx xxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx validačnímu xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxx xxxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx xxxxxx, nanese se xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx (minimální xxxxxxxx 25 (μ/xx2). Xx-xx xxxxx, nanese xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxx, x xxxxxxxx xx zvlhčí, xxx xx x xxxx zajistil xxxxx xxxx. Pokud xx xx xxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, že je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx smyje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx xxxxxxx XXX, x které xxxx xxxxxxxxx že x různých xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky (2). Xxxxxx xxxx xx xx xxxx 3 xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx MTT o xxxxxxxxxxx 0,3 mg/ml xxx teplotě 20 - 28 xX. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) x koncentrace formazanu xx xxxxxxx xxxxxxx XX při vlnové xxxxx 545 x 595 xx.
1.7.2.3 Doplňující xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx kůže x přesné xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx vliv. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných x látek xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, že xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx mezinárodních standardů xxx x rámci xxxx laboratoře, tak xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx kritéria xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2) x výsledky xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx zveřejněny x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, ve kterém xxxxxx xxxx zveřejněním xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.8.1 Xxxx XXX xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx (x xΩ) xxx xxxxxxxxx materiál, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xx uvádějí x xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x x xxxx vyvozená xxxxxxxxxxx.
1.8.2 Xxxx s modelem xxxxxx kůže
Hodnoty OD x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční látky xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x opakované xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx hodnoty x z xxxx xxxxxxxx klasifikace.
1.9 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.9.1 Xxxx XXX xx xxxx potkana
Pokud je xxxxxxxx xxxxxxx XXX xxx testovaný xxxxxxxx xxxxx xxx 5 xΩ, xx látka xxxxxxxxxxx. Xx-xx hodnota XXX xxxxx nebo xxxxx 5 xΩ x xxxxxxx se xxxxxx o povrchově xxxxxxx xxxxx (detergent) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx leptavé xxxxxx xx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek, xxx xxxxxxxxx hodnoty XXX xxxxxxxxxxxxx 5 xΩ, lze xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx obsah barviva x terčíku xxxxx xxxx rovný průměrnému xxxxxx barviva x xxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivní kontrole x 36 % XXx, je testovaná xxxxx skutečně xxxxxxxxx x tedy má xxxxxxx xxxxxx, kdežto xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx účinky xxxx.
1.9.2 Xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100% xxxxxxxxxxxxxxx buněk. Z xxxxxx XX xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx xxxxxxxx. Hraniční procentický xxxxx životaschopných xxxxx, xxxxx xxxxxxxx látky, xxxxx nezpůsobují poleptání xxxx, od xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx být x xxxxxxxxxx xxxxxx jasně xxxxxxxxx xxxxxxx, než xx xxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx validační xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Testovaná xxxxx:
- identifikační údaje, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx x xxx ně.
Podmínky xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx použitého xxxxxxx,
- xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- tabulka xxxxxx xxxxxx (xxxx TER) xxxx xxxxxxxxxxxx podíl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx x modelem lidské xxxx) pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, a to xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx;
- popis xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxx 2
Xxxxxx X.40. xxxx xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Sb. s xxxxxxxxx od 22.6.2001
X.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 XXX XX VITRO
1. XXXXXX
1.1 ÚVOD
Fotoxicita je xxxxxxxxxx xxxx toxická xxxxxx (xxxxxx), x xxx xxxxxxx, xx-xx xxxx poprvé xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxx, nebo xx-xx xxxxxxx xxxx ozářena xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx testu xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxxxx, zda daná xxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx nebezpečí xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx in xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx kombinovaným xxxxxxxxx xxxxx x světla, xxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx vivo xx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxx, x xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx fotoiritanty xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx xxx vypracován x validován x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX/XXXXXX x let 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vitro xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx testům xx vivo. X xxxx 1996 doporučila xxxxxxxx schůze XXXX xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx trestů pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx účinky fototxicity/fotoiritace xx xxxx u xxxxxx x lidí x xxxx zjištěno, xx xxxxx test xx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx predikční xxxxxxxxxx. Xxxx není xxxxxxx x tomu, xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx látky x xxxxxx vzniknout, jako xx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, x xxxx řada xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, reaguje xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxx uspořádán xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx fotoxicity.
Sekvenční přístup xxxxxxxxx fototoxicity u xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxx viz xxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: intenzita xxxxxxxxxxxxxx (XX) xx viditelného xxxxxx dopadajícího xx xxxxxx; měřená xx X/x2 xxxx x XX/xx2.
Xxxxx xxxxxx: množství (= xxxxxxxxx x xxx) ultrafialového (XX) xxxx xxxxxxxxxxx (VIS) xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (= W x x) xx xxxxxxxx povrchu, xxxx. X/x2 nebo X/xx2.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: podle xxxxxxxxxx XXX (Xxxxxxxxxx International xx L'Eclairage) xx xxxxxxx xxxxxxxx XXX (315 - 400 xx), UVB (280 - 315 xx) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxx: xx xxxxxxx mezi xxxxx XXX x XXX xx xxxxx xxxxxxxx 320 nm x XXX se xxxxx xxxx na UV-A1 x XX-X2 x xxxxxxx xxxxxx u 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: xxxxxxxx, kterým xx měří celková xxxxxxxx xxxxxxx populace (xxxx. příjem barviva xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xxxxx parametrů xxxxxxxx xxxxx testem x xxxx uspořádání xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (viabilita) xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxx + UV xxxx - XX), xxxxx xxx působení xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxxxxxxx návodu xxx xxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx x xxxxxxxx fotoxického xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx XXX x XXX.
XXX (photo xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX50) testované xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx (-XX) a x xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX ozáření.
MPE (xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx): nová xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx křivek koncentrace-odezva xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) a x xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX ozáření.
Fototoxicita: xxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), xxxxx xxxxxx po xxxx expozici xxxx xxxxxx látce x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx látky.
Fotoiritace: xxxxx xxxxxx xxxxx "xxxxxxxxxxxx", xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x nimž dochází x xxxx xxxx, xx xx ni xxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx) xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx podobné xxxx xxx nadměrném xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: získaná xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxx prvním xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx indukční xxxxxxx x tomu, xxx se xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxxxxxxx projevy, xx xxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxx buňky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XX/XXX xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx látky.
Fotokarcinogenita: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx aplikací xxxxxx x látky. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx UV xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx chlorpromazinu xxxx xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx testována xxx xxxxx studii, se xxx zavedení xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx porovnávání xxxxxx testu (1) (3) (13).
1.4 XXXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxxxx účinky xxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), xxxxxxx xxxxxxx společným xxxxx xx to, že xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Podle xxxxxxx xxxxxx fotochemie (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx zákon) vyžaduje xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xx xxxxxxx, xxx se xxxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xx xxxx stanovit absorpční xxxxxxxx testované látky x XX/XXX oblasti (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx OECD č. 101). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx koeficient xxxxx než 10 xxxxx x xxx-1 x xx-1, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx testovat xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx, ani xxxxxx jiným biologickým xxxxxx (viz dodatek).
1.5 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxx mechanismy, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) chromoforem xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx reakci (7), přičemž všechny xxxxx k poškození xxxxx. Proto je xxxx fototoxicity 3T3 XXX in vitro xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxx tomto xxxxx vyjadřuje xxxx xxxxxxxxxxxx závislý xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx červeně (neutral xxx, XX) (9), 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx Balb/c 3X3 xx xxxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx xxx, xxx xx vytvořila xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx dobu 1 hodiny. Xxxxx x xxxx xxxxxxxx xx pak xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UVA/VIS xxxxxx x xxxxx 5 X/xx2 XXX (+UV xxxxxxxxxx), druhá xxxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxx (-UV xxxxxxxxxx). X xxxx xxxxxxxxxx xx pak xxxxxx xxxxxxx xxxxxx kultivačním x po dalších 24 xxxxxxxx xxxxxxxxx xx pomocí inkorporace xxxxxxxxx červeně (xxxxxxx xxx xxxxxx, XXX) xx xxxx 3 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Pro každou x osmi xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, vyjádřená xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislé reakce xxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XX) x v xxxxxxxxxxxxx (-XX) záření, xxxxxxx xx xxxxxx XX50, tj. xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx životaschopnost xxxxx o 50 % x porovnání x kontrolami bez xxxxxxxxx.
1.6 XXXXXXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx záření XXX, xxxxxxxxxx xxxxx: x buněk je xxxxx pravidelně xxxxxxxx xxxxxxxx citlivosti xxxx xxxxxx XXX. Xxxxx xx nasadí x xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx testu xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx, příští xxx se xxxxxxx xxxxxx UVA x xxxxx 1 - 9 X/xx2 a xxxxx xxx xx xxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk. Buňky xxxxxxx kritéria jakosti, xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxxxx xx ozáření dávkou XXX xxxxxx 5 X/xx2 není xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxx 9 X/xx2 nemá xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx než 50 % životaschopnosti xxxxxx uchovávaných x xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx provádí xxxxxx xx xxxxx desáté xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX, xxxxx xxxx: xxxx splňuje xxxxxxxx jakosti, jestliže xxxxxxxxx kontroly (xxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx roztoku [Earl´s xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, XXXX] x 1 % xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo xxxxxxxx (XxXX) xxxx xxx xxxx vykazují v xxxxxxxxxxx (+UVA) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx s neozářenými xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx experimentu x xxxxx (-XXX).
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (XX540 XXX) xxxxxx x XX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx 1 x 104 xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx x normální xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx kritéria akceptovatelnosti, xx-xx průměrná xxxxxxx XX540 XXX x xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxx xxxx rovna 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: při xxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx souběžný xxxx xx známou xxxxxxxxxxxx látkou. Xxx xxxxxxxxx studii XX/XXXXXX xxx xxxx látka xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx chlorpromazin (XXX); xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxx XXX xxxxxxxxx dle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx fototoxicity 3X3 XXX in xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: XXX xxxxxxx (+UVA): XX50 = 0,1 - 2,0 μx/xx, XXX xxxxxxxxx (-XXX): XX50 = 7,0 - 90,0 μx/xx. Fotoiritační xxxxxx (XXX), xxx. xxxxx xxxxxxx XX50, xx xxx xxxxxxxxx 6.
Xxxxx CPZ xx xxx souběžnou xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x jiné známé xxxxxxxxxxx látky, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx chemické xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx testované (xxxxxxxxx) látky. X xxxxxxx případě je xxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx hodnot XX50 a PIF xxxx MPE (xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XXXXX XXXXXX
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx validační xxxxxx byla použita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx fibroblastů Xxxx/x 3X3 xxxx 31, x xx buď x XXXX xxxx x XXXXX; xx xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx stejného xxxxxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx nebo xxxxxxx linie, xxxxx xx xxxxxxxxxx podmínky xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx potřeb; xx xxxx xxxxx prokázat, xx xxxx xxxxxx xxxxxx.
X buněk xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, a xxx xx xxxxxx xxx x xxxxxxx, xx xx xxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx citlivost buněk xxxx UVA xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx používat xxxxx Xxxx/x 3X3 x xxxxxx s nejnižším xxxxxx, pokud xxxxx xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx buněk Xxxx/x 3X3 vůči XXX xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolovat, x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx návodu.
1.7.1.2 Xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx kultivační xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. X případě xxxxx Balb/c 3X3 xx xxxxx x XXXX xxxxxxxxx 10 % séra xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 xX xxxxxxxxx, penicilinem x xxxxxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 xX / 7,5 % XX2. Xx xxxxxxxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx dané xxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx zásobních kultur xx xxxxxx v xxxxxxxxx hustotě x xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx pasážují.
Pro xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x takové xxxxxxx, xxx na xxxxx xxxxx (xx. xxx se stanovuje xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxxx) xxxxxxx xx xxxxxxxxxx (xx splynutí x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx). X xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3T3 xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx x 96 jamkami xx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 x 104 xxxxx x jedné xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx, které xxx xxxxxxxxxx celým xxxxxxxx xx identických xxxxxxxxxxxx podmínek, x xxxxxxxx doby, xxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx (+UVA/VIS) x xxxxx xx xxxxxxxxxx v temnu (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Metabolická aktivace
Zatímco xxx xxxxx xxxxxxx xx vitro pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx použití xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, není x případě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, xxx xx x xxxx, aby xxxxxxxx xxxx xxxxxxx in xxxx xxxx xx xxxxx, bylo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxx xx xxxxx, xxx xx vědecky xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.1.5 Testovaná xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxx xxxxxxxxx prokazují, xx xx xx xxxxxxxxx. Pokud je xxxxxxxxxxxxx, že xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx příprava xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx rozpustí x pufrovaném xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx v Xxxxxxx vyváženém xxxxxx xxxxxxx (EBSS) xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (phosphate xxxxxxxx saline, XXX), xxxxx - aby xxxxxxx dojít k xxxxxxxxxxxx během xxxxxxxxx - xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx vodě omezeně xxxxxxxxx, rozpustí xx xx vhodném xxxxxxxxxxxx x koncentraci stonásobně xxxxx, xxx je xxxxxxxxxx konečná xxxxxxxxxxx, x následně xx xxxxx v poměru 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx roztokem. Xxxxx xx používá xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, xx. ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx testované xxxxx i x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx rozpouštědlo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo xxxxxxx (XxXX). Vhodná xxxxx xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx aceton, xx však xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je případná xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx fototoxického xxxxxx xxxx vychytávání xxxxxxxx.
Xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxx míchání xxxx. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 xX.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX xxxxxxx / xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxx. Záření x XXX x ve xxxxxxxxx oblasti xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx xxxxxx XXX xx v xxxxx xxxxx méně relevantní, xx přímo vysoce xxxxxxxxxxx, xxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxx se při xxxxxxxx xx 313 xx k 280 xx zvyšuje xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx světelného xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, jež testovaná xxxxx xxxxxxxxx, x xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx) postačující xx xxxxxxxx známých xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx látek. Dále xxxxxxx být použité xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém - xxxxx xxx i xxxxxxxxxx tepla (infračervená xxxxxx).
Xx optimální xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx výbojky a xxxx (vysokotlaké) xxxxxxx xxxxxxxxxx výbojky - xx mají tu xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxx a xxxx xxxxxxxx, sluneční xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx všechny xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx množství xxxxxx XXX, je třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx test xx fototoxicitu 3X3 XXX in vitro xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx záření, xxx xx složka XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XXX:XXX ∼ 2 : 1). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx validační xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xx x xxxxx (3).
Dozimetrie: xxxxxxxxx xxxxxx (iradiance) se xxxx pravidelně xxxx xxxxxx xxxxxx fototoxicity xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx, xxxxx xxxx xxx kalibrován xxx daný xxxxx. Xxxxxxxxx UV-metru xx xxxxx kontrolovat, x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx druhý, xxxxxxxxxx XX-xxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx, když xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zdroje x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx xxxxxx spektroradiometru; xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx obsluhu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx studii xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx XXX záření 5 X/xx2 xx xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 necytotoxická x xxxxxx xxxxxxxxxx silná, xxx excitovala x xxxxx fototoxické látky. Xxx se této xxxxx xxxxxxx xxxxx 50 minut, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 1,666 xX/xx2. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx zdroj světla, xxxx se dávka xxxxxx XXX xxxxxxx xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx expozice xx xxxxxxxxxx podle vzorce:
|
dávka xxxxxx (J/cm2) x 100
|
&xxxx; | |
| &xxxx;
x (min) =
|
________________________
|
(1 X = 1 X x)
|
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxxx (mW/mc2) x 60
|
1.7.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx nemá převýšit xxxxxxx 100 μg/ml, xxxxx všechny fototoxické xxxxx byly xxxxxxxxxx xxx koncentracích xxxxxxx, xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx xx zvyšuje xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (13). Xxxxxxx xX xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí xxx přijatelná (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (+UVA) x xxx něj (-UVA) xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx předběžných xxxxxxxxxxx. Xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx zvolí xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx podloženy xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (x konstantním xxxxxxxx xxxxxx).
1.7.3 Popis xxxxxxx
1.7.3.1 Xxxxx xxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx 1 x 105 xxxxx/xx x xxxxxxxxxxx médiu. Xx xxxxxxxxxxx xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx kultury xx xxxxxxxxxx xx 100 μl samotného xxxxx (= slepý xxxxx), xx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xx 100 μx xxxxxxx suspenze x xxxxxxx 1 x 105 buněk/ml (= 1 x 104 xxxxx na xxxxx). Xxx xxxxxx testovanou xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx - xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-XXX), druhá xxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx xx inkubují xx xxxx 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX), xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx monolayer. Tato xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a adherenci xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxx odstraní a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX xx xxxxxx jamku. Xxxxx xx 100 μx XXXX/XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxxx. Buňky x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xx dobu 60 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX).
Xxxx xxxxx x XXX (+XXX) xx xxxxxxx xxx, xx xx buňky za xxxxxxxx teploty xxxxxxx xx xxxx 50 xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx s 96 xxxxxxx zářením XXX x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx2 (= xxxxx 5 / xx2). Xxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Duplicitní xxxxxxxx (-XXX) se xx dobu 50 xxxxx (= expoziční xxxx XXX) xxxxxxxxxx xx pokojové xxxxxxx x xxxxxx xxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xx promyjí xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Poté xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx (18 - 22 xxxxx) xx xxxxxxxx (7,5 % XX2, 37 xX).
1.7.3.3 Třetí xxx
Xxxxxxxxxxxxx hodnocení
Buňky se xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx příjmu xxxxxxxxx červeně (XX)
Xxxxx xx xxxxxxx objemem 150 μx xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Promývací roztok xx odstraní xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx se 100 μx xxxxx x XX x xxxxxxxx xx xxx 37 xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 7,5 % XX2 xx xxxx 3 xxxxx.
Xx xxxxxxxx xx xxxxxx s XX xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX, xxxx xx pak xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxx xxxxx destičky xxxxxxxxxxxxxx x obrácené poloze).
Přidá xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx xx xxxxxxxx NR (čerstvě xxxxxxxxxx směs xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx destičky se xx xxxx 10 xxxxx rychle xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx XX x xxxxx nevyextrahuje x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx hustota xxxxxxxx XX xxx 540 xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. XXXXX) xxx xxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
1.8 XXXXXXX A XXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxx aplikaci XXX/XXX xxxxxx a xxx xx. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xx xxxxxxx xxx, xxx xx experimntální xxxxx xxxx xxxxxxxx křivkou. Xxxxxxx testovaná xxxxx xxxx být xx xx definované xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx x xxxxxxxxxxx xx xxx (-XXX) necytotoxická, xxx při xxxxxxxxx (+XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxx, xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx experimentu xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, aby xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx. Xxxxx xxxx cytotoxicita xxxxxxxx x xxxxx z xxxx částí xxxxxxxxxxx (xxx xxx -XXX, xxx xxx +UVA), xxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx nejvyšší xxxxxxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx hraniční - xxxxxx xxxxxx čáry xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx opakovat.
Považuje-li xx opakování xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxx důležité xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx dosáhlo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx proměnnou x tomto xxxxx xx xxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx xxxxx, nejvhodnější xxx jeho opakování xx xxxxxxx těchto xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx). Lze také xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. U xxxxx, xxx xxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxx xxx významný xxxx xxxxxxxx doby.
1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx xx to xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x 50 % inhibici xxxxxxxxx xxxxxx XX (EC50). Xx xxx učinit xxx, že xx xx xxxx xxxxxxxxxxx - odezva použije xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (nejlépe Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) xxxx xx použije jiná xxxxxx metoda xxxxxxxxx (14). Xxx xx xxxxxxx XX50 xxxxxxx xxx xxxxx výpočty, xx xxxxx zkontrolovat xxxxxxx xxxxxxxxx. K xxxxxxx xxxxxxx XX50 xx také možno xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxxxx papír (xxx x: xxx, osa x: xxxxxx), xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx křivka xxxxxxxxxxx - odezva mnohdy xxxxx xxxxxxxx.
1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (PREDIKČNÍ XXXXXX)
1.10.1 Xxxxxxxxx model, xxxxx 1: fotoiritační faktor (XXX)
Xxxxx xx získají xxxxx křivky koncentrace - odezva xxx xx přítomnosti (+XXX), xxx xx xxxxxxxxxxxxx (-XXX) světla, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (-XX)
|
| &xxxx;
(x) PIF =
|
&xxxx;
____________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
XXX < 5, xxxxxxxxxxxx žádný fototoxický xxxxxxxxx, xxxxxx PIF ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx předpovídá.
Je-li xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX, xxxxxx xxx -XXX xx necytotoxická, xxxx xx PIF xxxxxxxxx, i když xx jedná o xxxxxxxx, který indikuje, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xx vypočítat xxx. "&xx; XXX", když xx xxxx xxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxx) x xxxx xxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) &xx; PIF =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
Xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx "&xx; XXX", xxx xxxxx hodnota > 1 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx ani EC50 (-XX), ani XX50 (+XX), protože látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx nejvyšší zkušební xxxxxxxxxxx, xx to xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx "XXX = *1", xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx výsledek
|
Cmax (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) PIF = *1 =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (+XX)
|
Xxxxx xx xx získat xxxxx hodnota "XXX = *1", xxxxxxxxxx xx, xx xxxx xxxxxxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X případech (b) x (x) xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx se xxx testu xxxxxxx.
1.10.2 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 2: střední fotoefekt (XXX)
Xx xxxxx xxxx xxxxxx novější xxxxx xxxxxx xxx predikci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxx xx vitro x xxxxx UV xxxxxx (13). X xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XXX x xxxx xxxxxxxxx, xxx nelze xxxxxx xxxxxxx EC50. X tomto xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxx fotoefekt" (MPE) xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx křivek xxxxxxxxxxx - xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx XXX xxx na Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx vyvinut xxxxxxxxx xxxxxxxxxx software, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx.
1.11 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx výsledek xxxxx (XXX ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx daná látka xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 10 μx/xx, xx pravděpodobné, že xxxxx bude xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx in xxxx. Xxxxx-xx xx pozitivní xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci (100 (x/xx), xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx schopnosti xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx informací. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxx, xxxx xxxxx x testování xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx alternativním xxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx kůže xx vitro.
Negativní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx (XXX < 5 xxxx XXX &xx; 0,1) xxxxxxx, že xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx buňky x xxxxxx podmínkách. V xxxxxxxxx, kdy xx xx látka xxxx xxxxxxxx i xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že xxxxx xxxx xxxxx fototoxický xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx vivo xx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx. X případech, xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrační xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (EC50 + UV a XX50 - XX), xx xxxxxxxxxxxx dat xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx nebyla prokázána xxxxx toxicita (+XX xxx -UV) x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xx možno xxxxxxxxx xxxxx test xxx xxxxx xxxxx xx ne xxxxx xxxxxx x mělo xx xx uvažovat x xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx nebo xxxxxx xxxx ex xxxx xxxx xx xxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx informace:
Testovaná xxxxx:
- identifikační xxxxx x číslo XXX, xx-xx xxxxx,
- fyzikální xxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx k xxxxxxxxx xxxxx důležité,
- stabilita x fotostabilita, jsou-li xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx rozpouštědla,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx rozpouštědle,
- xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx médiu (XXXX xxxx PBS).
Buňky:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxx ozařovacího xxxxxxxx, xxx se x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X NRU xx xxxxx používá.
Podmínky xxxxxx (a) - xxxxxxxx před xxxxxxxxxx x xx xxx:
- xxx x složení xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx před xx x xx xx).
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby koncentrací xxxxxxxxx látky, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx ozařování XX/XXX xxxxxxx a xxx xxx,
- x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxx koncentrace,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (pufrovaný xxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- spektrální xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx použitého xxxxxx (xxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx XXX (v x X/xx2) xxx xxxx vzdálenosti,
- xxxx xxxxxxxx XX/XXX xxxxxx,
- xxxxx xxxxxx XXX (xxxxxxxxx x čas) x X/xx2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx kultur během xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (d) - xxxx XXX:
- xxxxxxx xxxxx x XX,
- doba xxxxxxxx x XX,
- inkubační xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxxxxx XX (xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx extrakce),
- xxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xx spektrofotometricky xxxxxxxxx xxxxxxx hustota XX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx), byla-li xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), xxxxx byl xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx (koncentrace xxxxxxxxx xxxxx νx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) získané xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +XXX x -UVA,
- xxxxxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx: podle xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 (+XXX) x EC50 (-XXX),
- xxxxxxxxx obou xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx ozařování UV/VIS xxxxxxx - xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) xxxx středního xxxxxxxxxx (XXX),
- klasifikace xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx testu (x) - souběžná negativní xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx životaschopnost (xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX) xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx,
- historické xxxxx negativních xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- kritéria akceptovatelnosti xxxxx (b) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-XXX) x XXX xxxxx xxxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx látky xxxxxxx pro pozitivní xxxxxxxx: xxxxxxx EC50 (+XXX), EC50 (-UVA) x PIF, xxxxxxx x směrodatné odchylky.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx X.41. byla xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x účinností xx 22.6.2001
Informace
Právní předpis č. 251/98 Xx. xxxxx xxxxxxxxx dnem 1.1.1999.
Xx xxxxx xxxxxx právního xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x.:
208/2001 Xx., xxxxxx xx mění vyhláška XX x. 251/98 Xx., xxxxxx xx xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx
x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxx předpis x. 251/98 Xx. byl xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 443/2004 Sb. s xxxxxxxxx xx 1.8.2004.
Xxxxx jednotlivých xxxxxxxx norem xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx není aktualizováno, xxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) xx x) xxxxxx x. 157/1998 Xx., o chemických xxxxxxx a chemických xxxxxxxxxxx x o xxxxx některých xxxxxxx xxxxxx.
2) Zákon č. 246/1992 Sb., na xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx zákonů x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Sb. x č. 30/1998 Xx.
3) Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx hospodářskou xxxxxxxxxx x rozvoj xxx zkoušení xxxxxxxxxx. Xxxxx 4 - xxxx xx zdraví (XXXX Guidelines xxx Xxxxxxx xx Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).