Právní předpis byl sestaven k datu 22.06.2001.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
VYHLÁŠKA
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
ze dne 16. xxxxx 1998,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §4 odst. 1 xxxx. x) zákona x. 157/1998 Sb., x chemických xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx zákonů:
§1
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x chemických přípravků xxxxxx xxxxxxxxx, toxických, xxxxxx škodlivých, žíravých, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxx xxx "toxicita chemických xxxxx x přípravků").1)
§2
(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků xx xxxxxxxx zkouškami xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x příloze xxxx xxxxxxxx.
(2) Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x přípravků xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx uvedené x odstavci 1, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx2) x xxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx (OECD).3)
§3
Tato xxxxxxxx xxxxxx účinnosti xxxx 1. xxxxx 1999.
Xxxxxxx:
XXXx. Xxxxx, CSc. x. r.
Příloha k xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.
Metody xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx
B. XXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXXXX POJMY
1.1 AKUTNÍ XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxx určité doby (xxxxxxxx 14 xxx) xx xxxxxx xxxxx xxxxx nějaké látky.
1.2 XXXXXX XXXXXXXX
xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx dostačující xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xx xxx xxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx toxických xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxx.
1.3 DÁVKA
xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (gramy xxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx jednotku xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx), nebo xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx na xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx).
1.4 XXXXXXXXXXXXXX XXXXX
xx xxxxxxxx xx xxxx pevných xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx je xxxxx podat, xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx humánního xxxxxxxx) xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
1.5 DÁVKOVÁNÍ
xx všeobecný xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx dobu xxxxxxxx.
1.6 XX50 (XXXXXXX XXXXXX XXXXX)
xx xxxxxxxxxxx vypočtená jednotlivá xxxxx látky, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx 50 % zvířat, xxxxxx byla xxxxxx. Xxxxxxx XX50 xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx pokusného xxxxxxx (mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx).
1.7 XX50 (XXXXXXX XXXXXX KONCENTRACE)
je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxx u 50 % xxxxxxxxx zvířat, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Hodnota XX50 xx udává xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xx.x-1).
1.8 XXXXX
xx xxxxxxx xxx "xx observed xxxxxxx xxxxxx xxxxx" (xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) a je xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx koncentrace, xxx xxxxx nedochází x xxxxxxxxxxxx toxickým xxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx opakovaného xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.10 XXXXXXXX TOLEROVANÁ DÁVKA (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX XXXX)
je xxxxxxxx xxxxx, která x xxxxxx vyvolává xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx přežití x ohledem xx xxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx.
1.11 XXXXXXXXXX XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xx aplikaci xxxxxxxxx látky.
1.12 XXXXXXXXXX XXX
je xxxxxxxx změn xx xxx xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxx.
1.13 XXXXXXXXXXXXX KŮŽE (ALERGICKÁ XXXXXXXXX DERMATITIDA)
xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.14 XXXXXXXXX XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx tkáňového poškození xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx od 3 xxxxx do 4 xxxxx.
1.15 XXXXXXXXXXXXXX
xx studium xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx testovaných xxxxx.
1.16 ABSORPCE
označuje xxxxxx(x), kterým(i) xxxxxxxxxx xxxxx vstupuje xx xxxx.
1.17 XXXXXXX
xxxxxxxx proces(y), kterým(i) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx metabolity jsou xxxxxxxxxxxx z xxxx.
1.18 XXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), kterým(i) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x těle.
1.19 XXXXXXXXXXXX
označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) je xxxxxxxx xxxxxxxxx aplikované látky xxxxxx x těle xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXXX - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX A XXXXXXXXX XXXXXXXX
Akutní xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxx xxxxx různých xxxxx toxicity (xxxxxx X.1 - X.5), xx xxxxxxx xxxx xxx xx jediné xxxxxxxx získán předběžný xxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx postupy od xxxxxxxxx xxxxx až xx kompletní stanovení XX50. Xxx inhalační xxxxxx není xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx definovat xxxxxxx hodnotu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx nejmenší xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx metoda xxxxx xxxxx (xxxxxx X.1 xxx) a xxxxxx xxxxxxxxx třídy akutní xxxxxxxx (xxxxxx B.1 xxxx). Xxx testování xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx doplnit xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (metody X.7, X.8 a X.9) se xxxxxxxx xxxxxxx účinky xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx pozorování zvířat xxx, xxx xx xxxxxxx xx nejvíce xxxxxxxxx. Xxxx testy xx xxxx pomoci xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxx dávky. Xx xxxxxxxxxxxx studií xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.26 - B.30 x X.33).
3. MUTAGENITA - XXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx přenosných xxxx v xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxx změny ("xxxxxx") xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx gen xxxx xxxxxxxx xxxx, blok xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx na xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx projevovat změnou xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx vitro xx xxxxxx (bodové) xxxxxx v xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) xxxxx xx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx x savčích xxxxxxx (metoda B.10).
Xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx test (xxxxxx B.12) nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx X.11). Xx xxxx xxxxx xxxxx jednoznačně xxxxxxxx xx vitro xxxxxxx, pokud nejsou xxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx další xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxxxxxx. Tyto studie xxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx základním xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxxxx nezachycených xxxxxxxxx xxxxxxxx metod; zahájení xxxx xxxxxxxxx studií xx vivo.
Xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx X.15 až X.25 xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x in xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx poskytují informace x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx účincích x organismech xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx používané x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Obecně xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx naplánovat tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx, vhodná xxx xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx na xxxxxxx faktorech, xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx dědičných xxxxxx x xxxxx xxxx k xxxxxxxxx xxxxxx na detekci xxxxxxxxx účinků x xxxxx xxxxxx organizmu, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (bodovými) xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxx locus xxxx u xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxxx X.25). Xxxxxx xxxxx xxx použít xxx odhadování xxxxxxx xxxxxxxxxxx rizika látky xxx člověka. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx těchto xxxxx x velmi xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx test, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx takovou xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx stanovení xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx metodického xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
4. XXXXXXXXXXXXX
Chemické xxxxx xxxxx být charakterizovány xxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx karcinogeny, x xxxxxxxxxx xx předpokládaném xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxxx xx čerpají xx xxxxxx mutagenity/genotoxicity. Další xxxxxxxxx poskytují xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx opakované xxxxxxxx, xxxxxx X.7, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx histopatologických xxxx, xxxx. hyperplazie x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx by mohly xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx informace xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx chemické xxxxx x karcinogenním xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, podrobnější zkoumání xxxxxx aspektu xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.32) xxxx xxxxx x kombinované xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.33).
X dispozici xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx savců, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx takové xxxxxxxxxxxx změny a xxxxx chování xxxxxxxxx xxxxxx, x kterých xx předpokládá xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx - in xxxx (xxxxxx X.21). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx.
5. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx zhoršení xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx (xxxx xx xxxxxxxx) xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxx xxxx teratogenitu x xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx (metoda B.31) xxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx podle xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. X takových xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx metodu vhodně xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx třígenerační xxxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxxxxxxx metodu xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx X.35) rozšířit xxx, xxx xxxxxx xxxxx generaci.
6. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxxx změn xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx systému. Předběžné xxxxxxxxxx xx neurotoxicitu xxxx xxxxxx z xxxxx akutní xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikaci (xxxxxx X.7) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinku. Xxxxxx xx měla xxxxxx odhalit chemické xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx aspektu. Navíc xx xxxxxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky, které xxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx například xxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx X.37 x X.38 xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
7. IMUNOTOXICITA
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx různými xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, které xx xx následek xxx xxxxxxxxxxxxxxxx nebo navozenou xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx odhalit chemické xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, vyžadující xxxxx, xxxxxxxxx zkoumání xxxxxx xxxxxxx.
8. XXXXXXXXXXXXXX
Toxikokinetické xxxxxx pomáhají xxx xxxxxxxxxxxx x vyhodnocení xxxxx o toxicitě, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x výsledky xxxxx pomoci při xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx, xx xxxx x xxxxxx případě xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx parametry. Xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bude xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxikokinetických xxxxxx (studie absorpce, xxxxxxxxxx, metabolismu x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx xx může ukázat xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.36).
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx struktuře x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastnostech xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, umožňující odhad xxxxxxxxxxxxxx absorpce xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx studií.
9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX LÁTKY
Xxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxx před zahájením xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx poskytují xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx výběr xxxxxxx podávání, pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxxx x látkou x xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky (x xxxx xxxxx xxxxx větších xxxxxxxx) x dávkovacím médiu x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx měl xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Všechny xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností, xxxxxxx x chování xxxxxxxxx xxxxx mají xxx zahrnuty x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
10. PÉČE X ZVÍŘATA
Pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx kontrola podmínek xxxxxxxxx, ve xxxxxx xxxx xxxxxxx chována, x xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX XXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx místnosti 22 xX ± 3 xX xxx relativní xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx králíky xx xxx teplota 20 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu 30 - 70 %.
Xxxxxxx experimentální techniky xxxxxxx jsou zvláště xxxxxxx xx teplotu. Xxx xxxx případy xxxx podrobnosti o xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uvedeny x xxxxxx testované xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxxx toxických xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx je x xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx x uvést xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx nevyžaduje jiný xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x malých xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxx 5 xxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx součástí xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx údaje x způsobu xxxxx x xxxxxxx x xxxxx xxxxxx chovaných x xxxxx xxxxx xxx během xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx xxxx vyhovovat xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x potravě, může xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx složky xxxxxxx. Xxxxxxx takové xxxxxx xx nutno xxxx x xxxxx při xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxx. Pokud je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x potravě, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx diety.
Xxxxxxx x xxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxxxx vliv xx toxicitu, xxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, ve xxxxxxx xx se xxxxx xxxx xxxxxxxx.
11. XXXXXXX ZVÍŘAT
Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx věnována xxxxxxxx pozornost ochraně xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx zvířat xxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (X.1.xxx) xxxx xxxxxx stanovení xxxxx xxxxxx toxicity (X.1.xxxx). Xxxxxx x pevnou xxxxxx nevyužívá smrti xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Metoda xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx vyžaduje x xxxxxxx o 70 % zvířat méně xxx xxxxxx X.1.
Xxxxxxx se závažnými x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx je známo, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
Xxxxxxx limitních xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx toxicity (metody X.1, X.2 a X.3), xxx xxxx x xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (metody X.11 a X.12), xxxxxxxx vyhnout se xxxxxxxxx zbytečně xxxxxxx xxxxxxx.
Xxx testování xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx nebo xxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastnostech xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx nebo na xxxxxxxxxx xxxxx validizovaných xxxxx xx vitro. Xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxx provedena xxxxxx xxxxxx kožní toxicity x xxxxxx používanou x xxxxxxxx testu (xxxxxx B.3) a xxxxxx-xx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxx, další xxxxxxxxx xxxxx dráždivosti (xxxxxx X.4) xxxx xxx zbytečné; xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx dráždivosti (xxxxxx X.4), nesmějí xxx dále testovány xx xxxxxxxx xxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxx testy xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx využívat menšího xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxxx méně xxxxxxx xxxx se xxxxx xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxx.
Pokud xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx rizika, následnou xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx xxx, xxx xx xx možné.
12. XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx in xxxxx xx xxxxx xxx xx xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxx v xxxxxxx xxxx; doklady x xxxxxxxxxxxx účincích x xxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x stávajících xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx vlastností xxxxxxxxxx x kvantifikovaných xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxx být xxxx xxxxxxx xxx studie, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx nových i xxxxxxxxxxx xxxxx.
Část X - Všeobecný xxxx byl xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Sb. s xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.1. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (PER XX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx dávkách několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx sondou, x xx každé xxxxxxx xxxxx úroveň dávky. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx pozorované xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx pokusu, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx pokusu, se xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx pokusech xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávkách a xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx, připraví se xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx použití xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx roztok v xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx jako xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx vhodných xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx známy nebo xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx něho xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xx objem neměl xxxxxxxx překročit 10 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti; xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx až 20 xx.xx-1. Variabilita xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx hladinách xxxxx. Xxxxxxxx je třeba xxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxx xxxxx xx vehikulu xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx proti xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx zdravých xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx x obou pohlaví xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet xxxxxxx
Pro každou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 hlodavců xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx samic, xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx je x xxxxxxxxx informace, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxxxx.
Poznámka: Používají-li xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, než xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Dávky xx xxxxx xxxxxxx zvolit x xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx testech xx xxxxx se vyvarovat xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx u xxxxxxxxxxx skupin xxxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx x mortality. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx vztahu xxxx dávkou x xxxxxxx, x xxxxx xx xxxxx, musí xxxxxxx xxxxxxxxx LD50 x přijatelnou xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
S xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx uvážit xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx měla xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx stanovit rigorózně. Xxxx xx xxx xxxxxx podle xxxxxx xxxxxx, rychlosti xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx prodloužit. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx objeví x xxxxxx, a doba xx xxxxxxx, zvláště xxx, xxx je xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx hladová. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. U zvířat x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx výměny xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx; přístup x xxxxx vodě xxxx omezen. V xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxx-xx možno xxxxx xxxxx najednou, xxx xxxxx aplikovanou dávku xx menších xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Po xxxxxx xxxxx je třeba xxxxxxx přístup k xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, může xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx poskytnout.
Xx podání látky xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xx vedou xxxxxxxxxx xxxxxxx. Během prvního xxx xx xxxxx xxxxxxxx častá xxxxxxxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxx x zaznamenat místní xxxxxx xxxxxxxxxx látky x bezprostřední xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx během xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x krevního oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxxx tremoru, křečovým xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx uhynutí xx třeba zaznamenat xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx pokusu xxxxxx, i xx, xxxxx xxxxxxx až xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x druhého xxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx druhého pohlaví x xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx nejsou xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx použití xxxxxxx xxxxx zvířat. Pokud xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx výrazně xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx na počátku xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx s xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx nálezů. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pak x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x době xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx stanovit x xxxxxxxxxx, přežívají-li xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Zvířata, která xxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx podanou xxxxxx, se xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vyvolané xxxxx látkou. XX50 xx vypočte xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxx xx melo xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxx všech abnormalit xxxxxx xxxx chování, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, změn xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx toxických účinků.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.
- experimentální xxxxxxxx,
- úrovně xxxxx (včetně vehikula, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx zvířat x xxxxxxx otravy, xxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat),
- doba xxxxxxx xx podání xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx pro humánní xxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,
- hodnota XX50 xxx xx xxxxxxx, x kterého byl xxxxxxxx úplný xxxxx, x to xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (s xxxxxxxx xxxxxx výpočtu),
- 95% meze xxxxxxxxxxxxx xxx LD50, xxxxx xx lze xxxxxxxxx,
- křivky xxxxxxxxxx mortality xx xxxxx a xxxx xxxxxxxx (xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx druhém pohlaví,
- rozbor výsledků (xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx věnovat xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx testu xx vypočtenou hodnotu XX50),
- interpretace xxxxxxxx.
X.1. bis XXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ (XXX OS) - XXXXXX XXXXX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx účincích, které xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx po xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx testované látky.
Xxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx etapách.
X předběžné xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x zvířat xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx na dávku. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxx xxxxx xxxxx nepoužije xxx xxx pěti xxxxxx.
V hlavní xxxxxx se látka xxxxxx orálně xxxxxx xxxxxxxx xxxx samců x xxxx xxxxx x xxxxx z xxxxxx fixních xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx studie, x xx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx "xxxxxxx toxicitu" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx úvod bod 1.2), xxx xx xxxxxxx.
Xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx mortalitu, není xxxxx žádné další xxxxxxxxx. Když xx xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx toxická reakce xxxxxxxx xxxxxxx utracení, xxxxx xx znova xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky.
Xxxxx postup umožňuje xxxxxxx "diskriminující xxxxx" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), xx. xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx úrovní xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx by xxxxx k xxxxx (xxxxxx případů humánního xxxxxxxx).
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávkách x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx je xxxxx, xx vyvolávají značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou známy xxxxxx xxxxx tomu.
Xx xxxxx používat xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxx xx x xxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.
Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx chována v xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx z xxxx xxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx
Xxxxx je třeba, xxxxxxxx se xxxxxx xxxx suspenze testované xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx uvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx možnost xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx vehikulích xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxx xxxxxx xxxx testem nebo xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx normálně xxxxxxxxx 10 ml.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx vodné roztoky, xxxxx je xxxxx xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx objemů xxxxx podávané x xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx zajistil konstantní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx dávek.
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx večer xxxx xxxxxx; přístup x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. V xxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx látka se xxxx xxxxxx orálně x xxxxxx dávce. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, lze xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Po xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx látka xxxxxxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx, může xxx xxxxxxx - podle xxxxx xxxxxx období - xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Orientační xxxxxx
Vyšetřují xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx, pokud nejsou x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxx samci xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx sekvenčně, xxxx xx alespoň 24 xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Všechna xxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxx x cílem xxxxxxx xxxxxxx otravy xxxxxxx xx xxxx dní; xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx otravy sedmý xxx, xxxxx se xxxx pozorovat xxxxx xx xxxxxxx sedm xxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx výchozí xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx-1. Xxxxxxxx zvolená xxxxxxx dávka nevyvolá xxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, potom xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx vmezeřených xxxxxx xxxxx. Tento xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx(xxx) xxxxx, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx xxxxxx, x o xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxxx xx vybrat xxxxxxx dávku xxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxx první xxxxx 500 mg.kg-1. Xxxxxxxx xx po xxxxxxx xxxxx nepozorují příznaky xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx při 2000 xx.xx-1, xx xxxxxxxxxx xxxxxx skončena x hlavní studii xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx použití xxxxxxx xxxxx (xxxx. 500 xx.xx-1) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx humánní xxxxxxxx, je xxxxxx xxxxxxx zvířeti xxxxxxxxx nižší dávka (xxxx. 50 xx.xx-1). Xxxxxxxx xxxx zvíře xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxx další xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Za xxxxxxxxxx podmínek xx xxxxxxxxx, xx xx xxx tomto xxxxxxx xxxxxxxxx více xxx 5 xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic x 5 xxxxx). Xxxxxx xx xxxx xxx nullipary a xxxxxx xx xxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx mírně xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx, xxxxx xxxx užita x xxxxx, xx xxx xxxxxxx x xxxxx xx 4 xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 nebo 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xxxxxxx úroveň xxxxx xx měla xxx xx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zřejmou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxx x humánních xxxxxx); xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx zvolené xxxxx nevyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxx xxxxx testovat xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx však měla xxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, aby pozorovací xxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx těžká xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xx projeví xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xxx xxxxx xxxxx testována xx xxxxx nižší xxxxxx xxxxx. Opět xx xxxxxxx, xxxxx xxxx nutné humánně xxxxxxx, by xxxx xxx xxxxxxxxxx po xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx provádějí x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx samostatné xxxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxx x zaznamenat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
Doba xxxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxx, xxx xx projevy xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx tendence x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx příznaků.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx nejméně xxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx x nejméně xxxxxxxxx xx den xxxxx xxx. Zvířata vykazující xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx příznaky xxxxxx xx třeba xxxxxxx utratit. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx několika xxxxxxx xxx xx podání xxxxx, jestliže zvířata xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, že xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx, srsti, očí, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, letargii, xxxxxx x komatu.
Xxxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před podáním xxxxxxxxx xxxxx, denně xx další 3 xxx a xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxx, x xx, xxxxx přežívají xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx makroskopické patologické xxxxx se xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx to xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx tkáně xxx histopatologické vyšetření.
X xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx úrovně xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
V xxxxxxx, xx látka xxxxxxxx mortalitu xxx xxxxx 5 mg.kg-1 (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx mortalitu xxx xxxx xxxxx), xx xxxxx dále xxxxxxxxxx akutní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx x orientační x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Z xx xxxx xxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; počet xxxxxx xxxxxxxxx během testu xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů; popis xxxxxxxxx xxxxxx; xxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx zřejmý xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx testované xxxxx; xxxxxx xxxxxx xxxxx toxických účinků; xxxxxxxx pitvy. X xxxxxxx, xx zvířata xxxxxxxxx xxxx xxx xxx, xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx hmotnosti.
Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou látkou, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vyvolaná testovanou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx x hlavní xxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, krmení, xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx výsledky všech xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx,
- xx xxxxx xxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx úrovní xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx; případně xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx během xxxxx; xxxxx zvířat x xxxxxxxx toxicity; xxxxxx, stupeň a xxxxxx xxxxxx),
- xxxxxx průběh xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxx reversibilní,
- pokud zvířata xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, doba xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx a kritéria xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat,
- pitevní nálezy,
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx.
3.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx
Xxxxx | Xxxxxxxx | Xxxxxxxxxxxx |
5 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Méně xxx 100 % přežití 100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx toxicita 100 % přežití; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxx, xxxxx jsou jedovaté Xxx výsledky při 50 xx.xx-1 |
50 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % přežití | Xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx 5 mg.kg-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx výsledky u 500 xx.xx-1 | |
500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % přežití | Xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x 50 mg.kg-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Látky, xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx bez xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx u 2000 xx.xx-1 | |
2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x nebo xxx xxxxxx toxicity | Xxx xxxxxxxx x 500 xx.xx-1 Xxxxx, xxxxx xxxxxx významnou xxxxxx toxicitu |
X.1. xxxx XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX XXXXXXXXX XXXXX XXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxxxx stanovení xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xxxxx klasifikace xxxxxx.
Xxxxxx používá xxx xxxxx stanovených dávek x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx látku xx xxxxxxx výsledků xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx popsaný pro xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx tří xxxxxxxxxxx xxxxx stanovených xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxx rozhodovacího xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx testování. Použití xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx nebo xxxxxxxx další xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx LD50. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx kterém xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx smrt xxxxx xxxxxx xx x x xxxx xxxxxx xxxxxxx kritériem xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx být xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxx B.1. Hlavní xxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx zvířat xxx x xxxxxx xxxxxx toxicity (xxxxxx)(B.1) x xxx u xxxxxxxxxxxx xxxxxx fixní xxxxx (B.1 bis).
1.2 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Látka xx xxxxxx orálně xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat v xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx. Testování se xxxxxxx postupně, x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Není xxxxx xxxxxxxx předběžnou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx látce rozhodne x xxxxxx kroku, x.x.
- není zapotřebí xxxxx další testování;
- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx druhého xxxxxxx;
- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx tak, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, aby xx mohla xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx podle pohlaví x dávky, xxx xxxxx zvířat x xxxxx kleci musí xxxxxxx jasné pozorování xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxxx zvířatům x jediné dávce xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx je xx xxxxx, testovaná xxxxx se xxxxxxxx xxxx suspenduje xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x jedlém xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx nevodná xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx toxická xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx být stanovena xxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx xxxx aplikováním xxxxx xx určitou xxxx xxx xxxxxxx (xxxx. potkani přes xxx x xxxx 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx se neomezuje.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx se přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx nullipary a xxxxx xxx xxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx x pohlaví
Pro xxxxx krok xx xxxxxxxxx tři zvířata xxxxxxx pohlaví. X xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx ze xxx xxxxxxx xxxxxx, xxx. 25, 200 a 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Výchozí xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx, aby x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx alespoň xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx látka podána. X závislosti na xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx popsaného x Xxxxxxx 1.
Xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxx veškeré xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx struktury x účinku. Xxxxx xxxx informace xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx i při xxxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), xxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xx - x xxxxxxx xx pokusná zvířata - použít xxxxxxx xxxxx 200 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx jak xx dovoluje xxxx x třemi xxxxxxx xxxxxxxxx úrovněmi xx xxxx 25, 200 x 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 5, 50 nebo 500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxxx dávky, x kterých xx xxxxx, xx způsobují xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx xx rychlosti xxxxxxx, na trvání x závažnosti xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx ve xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx se provádí xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx s podáním xxxxx, lze xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx 200 mg.kg-1 (xxxx 500 xx.xx-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 14 xxx, kromě xxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx zvířat. Xxxxxx pozorování by xxxx nemělo xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxx xxx prodlouženo xxxxx xxxxxxxxx reakcí, xxxx xxxxxx xxxxxxx x délky xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx dobu, xxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx toxicity, xxxxxxx jde-li o xxxxxxxx toxické příznaky. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx období xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx potravy xx xxxx dalších 3 - 4 xxxxx. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx během určité xxxx, xxxx xxx - v závislosti xx xxxxx xxxx xxxx - nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxxxx potravu x xxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx podán xxxxxxxx, xxxxxx xx velikosti xxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx přesáhnout 1 xx na 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 xx xx 100 x xxxxxxx hmotnosti. Rozdíly x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx úrovních xxxxx. Xxxxxxxx není možné xxxxx dávku xxxxx xxxxxxxx, je možné xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx po dobu xxxxxxxxxxxxxx 24 hodin.
Podrobnosti xxxxxxx testování xxxx xxxxxxx x Xxxxxxx 1.
1.3.3.1 Xxxxxxxxx pozorování
Pečlivé xxxxxxxx pozorování se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx (xxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx, xxxxx xx vyžaduje xxxxxx zvířat na xxxxxx látky, a xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Zvířata, xxxxx xxxx nalezena x xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx vykazující xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx: tato zvířata xxxx xxxxxxxxx stejně xxxx xxxxxxx uhynulá.
Ať xx xxxx zvířata xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx mrtvá, xxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxx pozorování se xxxxxxx, xxxx zvířata xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxx, xx očích x xxxxxxxxxx, x xxxx na xxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Pozornost je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x kómatu.
Veškerá xxxxxxxxxx xxxx systematicky zaznamenávána: xxxxxxx xxxx vedeny xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxx hmotnost
Všechna xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Na xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx zvážena před xxx, xxx xxxxx xxxxxxx utracena.
1.3.3.3 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx a utracených xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx zvlášť. Xxx získání dalších xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zvířat přežívajících 24 a více xxxxx.
2. SBĚR A XXXXXX ÚDAJŮ
K xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxx údaje xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat, počet xxxxxx vykazujících xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx utracených x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx x vratnost xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx v Xxxxxxx 2.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx obsahuje xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxxxxxxxxxxxx stav xxxxxx, xx-xx znám;
- počet, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- zdroj, xxxxxxxx xxxxx, potrava xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxx v týdenních xxxxxxxxxxx a xx xxxxx testu.
Podmínky testování:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;
- podrobné xxxxx x způsobu xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx objemů x xxxx aplikace;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx a xxxxxxx xxxx (včetně xxxxx x xxxxxx);
- xxxxxxxxxx xxxxxx počáteční xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx údajů x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx tabulek xxxxx xxxxxxx a dávkové xxxxxx (tzn. xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx);
- nástup x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;
- pitevní xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx k xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 423.
XXXXXXX 1
XXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxx xxxx xxxxxxx x xxxx 1.4.2.3, xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx uhynutí xxxxx x některých xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- vztah struktury x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx z jiných xxxxx xxxxxxxx x
- xxxxxxxxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxxx vývojové xxxxxxxx uvedené x xxxxx xxxxxxx stanovují xxxxxx pro každou xxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxxxx xx počtu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx postupuje xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxxx šipky.
3. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 25 xxxx 200 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xxxxx pouze xxxxx zvíře xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, že úmrtí xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx potvrdí, xx xxxxx xxxxxxxxxx x testování xx xxxxx úrovni xxxxx.
4. Xxxxx po xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jedno xxxxx každého pohlaví, xx se předpokládat, xx xxxxxxx XX50 xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, je třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx dvou xxxxxx xxxxxxx pohlaví: zřetelné, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x těchto xxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxx klasifikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx LD50 ve xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx testování xx xxxxxx xxxxxx dávky.
5. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx stanovenými xxxxxxx (xxxxxxxx 2). Této xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxx x xxxxxx alternativní dávky x daném bodu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nebo xxx xxxxx xxxxxxxxx xx dokončení testování xxxxx xxxxxxxx 1.
Postup xxxxxxxxx x výchozí xxxxxx 25 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X rámečcích xx xxxxx xxxxx, xxxxx zvířat a xxxxxxx (1 - xxxxxxx zvolené jako xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené jako xxxxx).
Xxx rámečky xx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx zvířat (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx uhynulých xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx šipek xx xx dosažení šedého xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx provede na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x příslušném xxxxx rámečku nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Dodatku 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Klasifikace xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x příslušném xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx dávkou 200 xx.xx-1 tělesné hmotnosti
V xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx zvířat x xxxxxxx (1 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx druhé).
Pod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Podle xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx uvedeného x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Klasifikace xx provede xx xxxxxxx konečných hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx dávkou 2000 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx první, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx druhé).
Pod xxxxxxx je počet xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx směru xxxxx xx do xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx.
XXXXXXX 2
Xxxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xx testovací xxxxxxxx 1
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Šedé xxxxxxx xxx xxxxxxxx "ŽÁDNÉ XXXXX XXXXXXXXX" x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hodnoty xxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, dokud xx nedosáhne xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx znamená, že XX50 xx větší xxx hodnota x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.)
(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx tělesné hmotnosti
(b) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkou 2000 xx/xx xxxxxxx hmotnosti
Interpretace xxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
a) Xxxxxxx xxxxx 25 xx/xx tělesné hmotnosti
b) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
x) Xxxxxxx dávka 2000 xx/xx xxxxxxxxx
B.2. XXXXXX XXXXXXXX (INHALAČNÍ)
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx velikosti xxxxxx, xxxxx par, xxxxxxx tání, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx vzplanutí x xxxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx
1.2 Xxxxxxx metody
Několik xxxxxx pokusných xxxxxx xx xxxxxxxxxx studované xxxxx xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, a xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx skupině. Xxxxx xx zvířata pozorují x zjišťují xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Zvířata, která xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, se pitvají.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx třeba humánním xxxxxxxx xxxxxxx. Testované xxxxx se nemají xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx bolest x xxxxx následkem xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx třeba xxxxxxxx xxxxxxx simulované xxxxxxxx.
Xxxxx testované xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx x xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx; x xxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx užije xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx jiná xxxxxxx, xxxx xxx o xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx možno xx využít.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx se přednost xxxxxxxx, pokud nejsou xxxxx důvody xxxxx xxxx. Používá se xxxxx užívaných pokusných xxxxx. Na začátku xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Počet x xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxxx hladinu xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx březí.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x akutních xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, než jsou xxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx a xx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X těchto xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx koncentrace
Xx xxx dostatečný xxxxx xxxxxx xxxxx, nejméně xxx, x xxxx xxx xxxxxx odstupňovány xxx, xxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx znázornění xxxxxx xxxx dávkou x xxxxxxxxxx a, xxxxx xx xx xxxxx, xxxx umožnit xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.3.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxx-xx xx 4 hodinové xxxxxxxx 5 samců a 5 xxxxx xxxxx x koncentraci 20 xx.x-1 xxxx xxxxx xx aerosolu xxxxxx xxxx pevné látky x xxxxxxxxxxx 5 xx.x-1 (xxxx - x xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx - xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxxx 14 xxx k žádné xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx doba expozice xx být 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Vybavení
Xxx xxxxxx se xxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, aby xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx co xxxxxxx xxxxxxxxx shlukování xxxxxx x xxx xxxxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx byla maximální. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx x zásadě celkový xxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx boxu. Je xxxx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx orálně-nasální, xxxxxxx hlavy nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují příjem xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx záviset na xxxxxxxxx xxxxxxxx, na xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x na xxxxxx xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx je xxxx, xxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Exponují xx po xxxx 4 xxxxx od xxxxxxxx rovnováhy koncentrace xxxxxxxxx látky. Nastavení xxxxxxxxx by mělo xxx rychlé. Xxxxxxx xxxxx pokusu má xxx 22 xX ± 3 o X. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx být xxxxxxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx to není xxxxx (xxxx. experimenty x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx komory (≤ 5 mm vodního xxxxxxx) xxxxxxx unikání xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx expozice xx xxxxxxxx potrava xxx voda.
Používají xx xxxxxx xxxxxxx xxx vytvoření a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx stabilních xxxxxxxx xxxxxxxx bude xxxxxxxx xx nejrychleji. Konstrukce x xxxxxx boxu xx zajišťovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx.
Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) měření xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx),
(x) skutečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x dýchací xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (některá xxxxxxx, xxxx. xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx odchylovat xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ±15 %. U některých xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísání. Xx xxxxx dobu trvání xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx tak stabilní, xxx xx to xxxxxxxxx možné. Pokud xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx tak často, xxx xx xxxxx xxxxxxxx (ale xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu),
(x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx expozice x xx jejím skončení xx pozorování xxxxxxxxx x zaznamenávají systematicky. Xxxxx zvíře má xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx prvního xxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx často. Xxxxxxxxx xxxxxx každý pracovní xxx je třeba xxxxxxx pečlivé klinické xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx ztrát xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx či xxxxxxxxx xxxxxxx nebo umírajících xxxxxx.
Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxxx dýchání, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, letargii, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx uhynutí je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx expozici xxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxx.
Zvířata, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, která xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx zřetelem xx všem změnám xxxxx i xxxxx xxxxx dýchacího traktu. Xxxxxxx makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxx se zaznamenávají x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx tabulky. Z xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx další xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x zaznamenat, xxxxx zvířata xxxxxxx xxxx xxx jeden xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou látkou, xxxx zaznamenána xxxx xxxxxxx vyvolaná xxxxxxxxxx xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx uznávanou xxxxxxx. Xxxx xx hodnotí xxxxx - pokud xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a výskytem x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, včetně xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx hmotnosti, xxxxxxxxx x všech dalších xxxxxxxxx účinků.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky ustájení, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, typu, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx systému x xxxxxxx umístění xxxxxx x xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxx popsat xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx variability (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx:
a) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx;
x) xxxxxxx x xxxxxxx vzduchu;
c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx do inhalačního xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx);
Xxxx.: při xxxxxxxx aerosolům xxxxx x roztoku (např. xx vodě) xx xxxxx xxxxxx nejen xxxxxxxxx koncentraci xxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx ve xxxxxxxx.
x) xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxx xxxxx;
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
x) xxxxxxxxxx xxxxxx aerodynamického xxxxxxx (XXXX) x geometrická xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX);
x) doba do xxxxxxxx rovnováhy;
x) xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (tj. xxxxx xxxxxx, která x xxxxxx uhynula xxxx byla xxxxxxx xxxxxxxx; počet zvířat x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx);
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxx utracení xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx;
- xxxxxxx XX50 xxx každé xxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxxx doby xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx);
- xxxxxx závislosti xxxxxxxxx na xxxxx (xxxxxxxxxxx) a xxxx xxxxxxxx (xxxxx to xxxxxxxx metoda stanovení);
- xxxxxxx nálezy;
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x vlivu xxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxx důvodů xxxxx testu xx xxxxxxxxxx hodnotu XX50);
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.3. XXXXXX XXXXXXXX (DERMÁLNÍ)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx na xxxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx účinky x xxxxxxx uhynutí. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx konec xxxxxx, se xxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Testované xxxxx xx nemají xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, o kterých xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x pokusných xxxxxxx v podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxx 24 hodin xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx srst zvířat xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx se nepoškodila (xxxx. xxxxxx) xxxx, xxx xx mohlo xxxxxx její xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx testované xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Při xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx použití xxxxxxxx xx xxxxx brát x úvahu xxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kůží. Xxxxx xxxxxxxx xx xx měl xxxxx xxx, x xxxx xxxxx xx může xxxx xxxxx dostat xx styku s xxxxxxx xxxx, a xx všech relevantních xxxxxxx vybrat xxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx. Xxx použít i xxxx živočišné xxxxx, xxxxx xxxx pro xx důvody. Xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx začátku xxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 zvířat xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, musí xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx x xxxx xxxxxxx xx výrazně xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, než xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx zvolit x xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Má být xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxxx, nejméně xxx, x xxxx xxx xxxxxx odstupňovány xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx toxických účinků x mortality. Xxx xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxx nebo leptavé xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkou x xxxxxxx, a xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx jednou xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx xxxxxxxxx 5 xxxxx a 5 xxxxx x použitím xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx způsobí xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx má být xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx ji však xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx být určena xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje otravy x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx podle xxxxxxx prodloužit. Rozhodující xx xxxx, kdy xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x doba do xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx patrná xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx nanese xxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxx asi 10 % celkového povrchu xxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx; mělo by xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx co xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xx expoziční xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x kontaktu x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx obvazu x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxxx plochu je xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx mulový xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxx expozice se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxxx xxxx nebo xxxxx xxxxxxx způsobem xx xxxxxxx očištění xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx systematicky xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx zvíře xx xxxxx vést xxxxxxxxxx záznamy. Xxxxx xxx xx zvířata xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx sloužit xxxxxxxxxxx xxxxxxx ztrát xxxxxx xxx studii, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx uhynulým xxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xx xxxxxx xxxx provedena aplikace, xxx x xxxxxxx, x xxxx dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Zvláštní xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx tremoru, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, spánku x komatu. Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx co nejpřesněji. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, i xxxxx přežijí až xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změny xx zaznamenávají x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x druhého xxxxxxx
Xx xxxxxxxxx studie xx jednom xxxxxxx xx podá látka xxxxxxx jedné xxxxxxx x pěti zvířatech xxxxxxx xxxxxxx, aby xx zjistilo, xxx xxxxxxx druhého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx testovanou xxxxx. X konkrétních xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Pokud je x dispozici spolehlivá xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx, testování xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx je možno xxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxx testované látky, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x před xxxxxxxxx. Změny xxxxxxxxx xx třeba stanovit x zaznamenat, xxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx na xxxxx x bolesti xxxxxxxx xxxxxxx látkou, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx látkou. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx zvířat testované xxxxx x výskytem x xxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxx změn xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx hmotnosti, xxxxxxxxx x xxxxx ostatních xxxxxxxxx účinků.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud možno xxxxxxxxx xxxx informace:
- živočišný druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxx pokusu (xxxxxx způsobu očištění xxxx x xxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx je xxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x podle dávek (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; počet xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx exponovaných xxxxxx),
- doba xxxxxxx po podání xxxxxxxxx látky, xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířat,
- všechna xxxxxxxxxx,
- xxxxxxx XX50 xxx xx pohlaví, x kterého byl xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x xx pro 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx metody xxxxxxx),
- 95% interval xxxxxxxxxxxxx pro XX50 (xxxxx xxx xxx xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx x xxxx xxxxxxxx (xxxxx je xxxxxxxxx danou metodou xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx pohlaví,
- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx LD50 x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx),
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.4. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXX XXXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testování látky xx podmínek, xxxxx xxxxx xxxxxxx výrazné xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxx, studie xx jediném xxxxxxx xxxx zda není xxxxxxxxx xxxxx testování.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x chemická reaktivita. Xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx látky (xxxx. xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX xxxxx či xxxxx 11,5) není xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx kožní xxxxxxxxxx, xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx třeba vzít x úvahu také xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx vitro xxxxx, není vyžadován xxxxx xxxx.
x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxx akutní xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx limitní xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxx pozorováno xxxxxxxxxx xxxx, není xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx dermální xxxxx xxxxxx.
Studovaná látka xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, přičemž xxxxx xxxxx slouží xxxx xxxxx vlastní xxxxxxxx. Xx stanovené xxxx xx odečte, vyhodnotí x následně popíše xxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxx pozorování xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx možné xxxx zhodnotit také xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxx 24 xxxxx před xxxxxxxxx testu se xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx xx to, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xx xxxxx použít xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx.
Některé xxxxx králíka xxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxxx xxxx výraznější x některých obdobích xxxx. Testované látky xx nesmí nanášet xx xxxx zóny xxxxx xxxxx srsti.
Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxx x práškové xxxxx, xx třeba xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx dobrý xxxxxxx s xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx x úvahu xxxx xxxxxxxx xx podráždění xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx různé xxxxx xxxxx, je xxxx xxxxx dát xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx zvířat
Xxxxxxxx xx z in xxxxx xxxxxxxxxxxxxx testů xxxx jiných úvah xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. je xxxxxxx), xx xxxxx uvážit xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxxxxxx xxxxxx testu xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx třeba doplnit xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx nejméně tři xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx třeba zvláštních xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx případů xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx důvody xxx xxxx postup, xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxx xxxx 0,5 x xxxx nebo polotuhé xxxxx. Přilehlé oblasti xxxxxxxxxx kůže zvířete xxxxxx v xxxxx xxxx xxxxxxx kontrola.
1.2.2.4 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx není možno xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx dostatečně dlouhá, xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nevratnost xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx po aplikaci.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx nanese xx malou xxxxxx (xxx 6 cm2) xxxx a xxxxxxx xx xxxxxxx mulu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx může xxx vhodné xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxx, x xxx xxx xxxxxxxxx xx xxxx. Xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxx volně na xxxx xxxxxxx okluzivním xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxx x xxxxx přijmout xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx látku xxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx rozpouštědlem, xxx xxx, xxx nebyla xxxxxxxxx případná reakce xxxx xxxx celistvost xxxxxxx.
Xxxx expozice xx xxxxxxx 4 xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxx, xx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxx. xx 1 xxxxxx nebo 3 xxxxxx). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 3 xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx dermální xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxxx. První plátek xx odstraní xx 3 xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx závažná xxxxx reakce, odstraní xx xxxxx xxxxxx xx 1 hodině. Xxxxx xxxxxxxxxx v xxxx xxxx xxxxxxxxx, xx je xxxxxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx principu xxxxxxxxx zacházení, xxxxxxxx xx třetí xxxxxx xx 4 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx kůže. X případě, xx xxxx xxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx test s xxxxxxxx nejméně xxxx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x humánních důvodů (xxxx. xxxxxxxx xx 4 hodinách xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx).
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx) xxxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx xxxx xx 1 xxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xx xxxxxxxx podmínek je xxxxx navrhnout delší xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx na příznaky xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx a stupeň xxxxxx kůže po 60 xxxxxxxx x xxxx 24, 48 x 72 xxxxx xx xxxxxxxxxx plátku x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx podráždění kůže xx klasifikuje a xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 1. Jestliže xxxxxx xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx úplného xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx podrobně xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx léze xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx kožní xxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx. X objasnění xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, maskovaných xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx řasy.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx patrný stupeň xxxxxxxxxx posouzením xxxxxxx x xxxxx po xxxxx dobu xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx, popis xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a všechny xxxxx xxxxxxxxxx toxické xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx relevantních xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxx xxxxxx: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxx tabulky údaje x xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xx 1, 24, 48 x 72 hodin xxx. xx odstranění xxxx),
- xxxxx zjištěných xxxxxxx poškození xxxxxx xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx podráždění a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xxxxxxxxxx xxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx výsledků.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx | |
1. Hodnocení erytému x xxxxxxxxx | |
1.1 Žádný xxxxxx | 0 |
1.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx (stěží xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx | 2 |
1.4 Mírný xx xxxxxxx xxxxxx | 3 |
1.5 Xxxxx xxxxxx (silné zrudnutí) xxxx xxxxxx příškvaru (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx | 4 |
2. Xxxxxxxxx xxxxx | |
2.1 Xxxxx xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx xxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
2.3 Xxxxx edém (xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx ohraničena xxxxxxxxx xxxxxxxxx) | 2 |
2.4 Mírný xxxx (xxxxxx vyvýšeny asi x 1 mm) | 3 |
2.5 Xxxxxxx xxxx (xxxxxxx více xxx 1 xx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx) | 4 |
4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx indexu kožní xxxxxxxxxxx (IKI)
IKI xx vypočte xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx erytém x xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x x takto získaných xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx | IKI |
xxxxxxxx | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx xxxxxx | 0,5 &xx; XXX ≤ 3 |
xxxxxxx xxxxxx | 3 &xx; XXX ≤ 5 |
silně xxxxxx | XXX > 5 |
X.5. XXXXXX XXXXXXXX (XXXX XXXXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
1.1.1 Xxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx zvážit xxxxxxx xxxxxxxx informace o xxxx látce x xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx, které xxxxx xxxxxxx těžké xxxxxx. K tomu xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti a xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Např. xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, které - xxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx v xxx xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX xxxxx či xxxxx 11,5, není xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx rezervu.
x) Xxxxxxxx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx x xxxxxxxxxxx potenciálně xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx vlastnostmi xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxx, protože xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx budou mít xxxxxxx účinky xx xxx xxx testování xxxxx metodou.
x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx dráždivosti. Látky, xxxxx vykazovaly xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xx dráždivost xxx xxx, protože xxx xxxxxxxxxxxx, že xxxxx xxx na xxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx se v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx oko xxxxxx xxxx kontrola. Xx xxxxxxxxxxx intervalech xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx posouzení účinku. Xxxx pozorování xxxx xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx xx xxxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
24 hodin xxxx xxxxxx se x xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx. Zvířata, x kterých xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx, xx x experimentu xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxxxxxxx xx dávat xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx albinotickému xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet zvířat
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx test xx jediném xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx jednom xxxxxxxxx naznačují, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (reverzibilní účinek) xxxx leptavé (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) účinky xxx xxx při xxxxxxx xxxxxxxxx postupu, xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aspektů xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířata.
X xxxxxxxxx případech xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,1 xx. X xxxxxx xxxxx, xxxx a xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxx 0,1 xx xxxx hmotnost xxx 0,1 g (xxxxxxxx je xxxx xxxxx xxxxx). Jedná-li xx o xxxxx xxxx xxxxx zrnitou xxxxx, je třeba xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxxxx, např. xxxxxxxxxxxx xx měrnou xxxxxxx.
U xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x pumpou xxxx xxxxxxxxx aerosolových xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx 0,1 xx látky x xxxxxxxxxx xx do xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Doba xxxxxxxxxx
Délku doby xxxxxxxxxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků. Xxxxxxxx xxxx xxxxx 21 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx třeba přechovávat xxxxxxxxxx v klecích. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx každému zvířeti xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx tak, xx xx spodní xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx. Xxxxx xx pak xxx na 1 xxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx, xx xxxxx se xxxxx neaplikuje, xxxxxx xxxx kontrolní.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, lze xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Aby xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nedojde x xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx anestetika. Xxxxxxx způsobem xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx oko.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx vymývat xxxxxxxx 24 xxxxxx po xxxxxxxx testované látky. Xx 24 xxxxxxxx xx možno oči xxxxxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxxxx za xxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxx, které xxx xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx po xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx oči. X xxxxxx případech xx xxxxxxxxxx xxxxxx 3 xxxxxxx. Xxx xxxxxx xx instilaci xx xxx xxxxxxxx xxxxxx po xxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxx xx xxxxxxxxx xx 1, 24, 48 a 72 hodinách. Neprojevují-li xx xx 72 xxxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx postižení rohovky xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Vedle xxxxxxxxxx xx rohovce, xxxxxxx x spojivce xx třeba xxxxxxxxxx x xxxxx ve xxxxxx x xxxx xxxxxxxx léze.
Xxxxxxxxx xxxxxx oka xx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx stanovit xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x zaznamenat. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx připouští xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xx, kdo xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx možno xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.)
Xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx usnadnit použitím xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxxx lampy, očního xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx po 24 xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx všech xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx ještě xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx stupeň xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx závažných lézí x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx relevantních xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx),
- x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (např. xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx)
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx závažných xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, charakteru x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podráždění x poleptání, včetně xxxxxxxxx xxxxxxx rohovky,
- xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1, 24, 48 a 72 xxx.), např. xxxxxxxxxx lampa, oční xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx.,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx xxxx xx oku
Xxxxxxx | |
X. Xxxxxxxx - xxxx | |
Xxxx není xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx | 1 |
Xxxxxxx xxxx x everzí xxxxx | 2 |
Xxxx způsobující xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx | 3 |
Xxxx xxxxxxxxxx víčka xxxx xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxx | 4 |
X. Spojivka - xxxxxx | |
Slzení xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx vnitřním xxxxxx) | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxx | 2 |
Slzení xx xxxxxxxxx víček x srsti x xxxxxxx okolí xxx | 3 |
X. Spojivka - enantém | |
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx cév xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxx cévní xxxxxx, xxxxxxxxx jednotlivých xxx xxxxxxxx, difusnější xxxxx xxxxxxx barva | 2 |
Xxxxxxx tmavě xxxxxxx xxxxx | 3 |
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx | |
Anomálie xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, překrvení, xxxxx, xxxxxxxxxxx cév xxxxx rohovky (xxxxx xxxx xxxx těchto xxxxxxxxxxxxxx), xxxxxx na xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx opožděná | 1 |
Xxxxxx na xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx a hemoragie | 2 |
v xxxxxxx (xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx) | |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx viditelné | 1 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, detaily xxxxxxx xxxxx zastřené | 2 |
Xxxxxxxxxx zóny xxxxxxxxxxx, xxxxxxx duhovky xxxxxx xxxxx viditelné; obrys xxxxxxx stěží viditelný | 3 |
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, duhovka xx xxxxx xxxxxxxxxxx | 4 |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xx pozorovatelná, xxx xxxx plocha xx ≤ 1/4 xxxxxx xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; xxxxxx neprůhlednosti ≤ 1/2 plochy xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 3 |
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx &xx; 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 4 |
4.2 Xxxxxxx akutního xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (IOA)
Xxxxxxxxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vypočte xxxxx xxxxxx
IOI = 2.(X + X + X) + 5.X + 5.X.X
Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx z XXX.
Akutní xxxxx xxxx dráždivosti XXX xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx v xxxxxxx testu
4.3 Klasifikace
Xxxxxxxxxxx | XXX |
nedráždí | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
xxxxxx | 15 - 29,9 |
xxxxx xxxxxx | 30 - 59,9 |
xxxxx xxxxx xxxxxx | 60 - 79,9 |
extrémně xxxxxx | 80 – 110 |
X.6. SENZIBILIZACE XXXX
1. METODA
1.1. Úvod
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx lidskou xxxx jsou xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx lidskou xxxx x xxxxx xx se hodila xxx všechny látky.
Xxx volbě testu xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx schopnosti průniku xxxx.
Testy xx xxxxxxxxx xxx rozdělit xx testy s xxxxxxxx, xx kterých xx alergický stav xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX), x xx xxxxx xxx xxxxxxxx.
Testy x xxxxxxxx xx zdají xxx přesnější v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx Freundova kompletního xxxxxxxx, a xxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxxx (Guinea-pig Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Ačkoliv k xxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xx GPMT xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx adjuvans (xxxxxxxx xx xxxx Xxxxxxxxxx testu) xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
X určitých případech xxx xxxxxxxxx volbu Xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x maximizačním xxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
X této metodické xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxx (XXXX) a Xxxxxxxxx xxxx. Lze xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx validizované a xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx uznávanou xxxxxxx dá xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx senzibilizátor xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx na morčeti, xxx xxx xx xxxxxx x této xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx kůže: (alergická xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) je xxxxxxxxxxxx zprostředkovaná xxxxx xxxxxx xx xxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxx reakce xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx, xxxxxxx, puchýřky, xxxxxx (velkými xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx těchto xxxxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxxxxx druhů se xxxxx reakce xxxxx x xxxx být xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx: experimentální xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx navodit xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxx nejméně xxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx expozici, x xxxxxxx xxxxxxx se xxxx rozvinout xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx expozice xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x použitím xxxxx, o kterých xx známo, xx xxxx mírný xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx.
X xxxxxxx provedeného xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % x xxxxxx x adjuvans x xxxxxxx 15% x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:
Číslo XXX | Xxxxx XXXXXX | xxxxxxxx xxxxx | generický/obchodní xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxx |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | xxxxxx |
94-07-7 | 202-303-5 | Xxxxx xxxxx kyseliny x-xxxxxxxxxxxxx | xxxxxxxxx |
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxx odborném zdůvodnění xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx případně xxxxxxxxxxx aplikací (indukční xxxxxxxx). Po období 10 až 14 xxx (xxxxxxxx období), x xxxxxxx kterého xx může rozvinout xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx exponována xxxxxxxxxx xxxxx. Rozsah x xxxxxx xxxxx xxxxxx xx provokační xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx podstoupí xxxxxxx xxxxxxxx v xxxx xxxxxxx a xx xxx aplikována xxxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx testovacích xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx za nezbytné xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx to x použitím vody xxxx vhodného xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx vzniklá xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.1 Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxxx (GPMT)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Zdravá xxxxx xxxxxxx albinotická xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxx aspoň 5 xxx před zahájením xxxxx. Před testem xx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx expozičních x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx stříháním, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x poškození xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx testu.
1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx xxxxx albinotických xxxxxx.
1.5.1.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx skupinu tvoří xxxxxxx 10 zvířat x xxxxxxx 5 xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx menšího xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx morčat x xxxx možné xxxxx x xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 20 testovaných x 10 kontrolních xxxxxx.
1.5.1.2.3 Dávkové xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx na takovou xxxxxx, kterou xxxxxxx xxxxxxx xxxxx snášejí x která xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.Xxxx provokační xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx kůže. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx koncentrace xxxxxxxx v předběžném xxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxx tento xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx bylo xxxxxxxxxx FCA.
1.5.1.3 Popis xxxxxxx
1.5.1.3.1 Indukce
Den 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Následující 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx po 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxxx oblasti xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx:
Xxxxxxx 1: Freundovo xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ve zvolené xxxxxxxxxxx;
Injekce 3: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx směsi XXX x vodou xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx poměru 1 : 1;
Xxx xxxxxxx 3 xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x FCA xx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxx látky xxxxxxxxxxx se rozptýlí x xxxxxxxxxx XXX. Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 3 má být xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 2.
Xxxxxxx 1 x 2 xx xxxxxxxx blízko xxxx x xx xxxxxxxx hlavě, xxxxxxx xxxxxxx 3 směrem xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx plochy.
Xxx 0 - Kontrolní xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx injekcí, xxxxx xx 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx kompletní xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx s xxxxx xxxx fyziologickým xxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;
Xxxxxxx 2: neředěné xxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: Směs xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) se směsí XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. den - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx
Xxxxxxxxx dvacet xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx indukční aplikací, xxxxxxxx látka není xxxxxxxx pro xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx důkladném xxxxxxxxx případně xxxxxxx xxxxx 0,5 ml 10% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx místního xxxxxxxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx látkou xx xxxxxxx vehikulu xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 xx), který xx xxx přiloží xx testovací xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 48 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxx odbornými xxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx do vhodného xxxxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx přímo.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx srsti. Xxxxxxx vehikulum xx xxxxxx x zafixuje xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxx 48 xxxxx.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Boky xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx srsti. Xx xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxx nebo x xxxxxxx a xx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xx xx xxxxx). Xxxxxx se pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx s xxxx po 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Pozorování x xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx odstranění xxxxxxxx xx provokační xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx potřeby xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx dalších xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx) xx pozoruje xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx podle xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx;
- přibližně 24 xxxxx xx tomto xxxxxxxxxx se provede xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxx (72 xxxxx).
Xxxxxxxxxx xx systém "xxxxxxx xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, které xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx je kontrolní.
Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx nutná xxxxx xxxxxxxxx (tj. xxxxxxxxx provokace), xxxxxxx xx xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxx, v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx skupinou x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze také xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx indukčních x provokačních xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (viz xxxxxxx). K objasnění xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx měření xxxxxxxx xxxxxxx xxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxx
1.5.2.1 Příprava
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx albinotická xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx laboratorní podmínky xx xxxx aspoň 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Odstranění xxxxx xx xxxxxxx stříháním, xxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx xxxx. Zvířata xx zváží před xxxxxxxxx xxxxx x xx konci testu.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Používají xx xxxxx laboratorní kmeny xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Lze xxxxxx xxxxx a/nebo xxxxxx. Samice musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx být březí. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx 20 xxxxxx x xxxxxxxxx skupině x xxxxxxx 10 xxxxxx x kontrolní xxxxxxx.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx je nejvyšší xxxxxxxx xxxxx, xxx xx velmi xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolává podráždění xxxx. V případě xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxx použít xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 80% xxxxxx etanol/voda xxx indukci x xxxxxx pro xxxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Indukce
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Jeden xxx xx xxxxxx srsti (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx testu xx xxxxxxxx xxxxxx testovanou xxxxxx xx vhodném xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xx řídí xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxx aplikovat xxxxx).
Xxxxxxxx xxxx je xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx a přidržován x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx plátkem xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, ať xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxxx 4 - 6 xx2. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx použito xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx skupina
Xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx naneseno pouze xxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx způsobem xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x kontaktu x xxxx překrývacím xxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx po xxxx 6 xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupina xxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx.
6. - 8. x 13. - 15. xxx - Xxxxxxxxx x kontrolní skupina
Xxxxxx xxxxxxxx jako x den 0 xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx tomtéž xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) 6. - 8. xxx x xxxxx 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx
27. - 29. xxx - Testovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx zvířat je xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Okluzivní plátek xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx koncentraci xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx neošetřeného xxxx testovaných x xxxxxxxxxxx zvířat. Xx xxxxxx část xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plátky xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x kůží vhodným xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.
1.5.2.3.3 Xxxxxxxxxx x hodnocení
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx srsti;
- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxx (přibližně 30 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx stupnice xxxxxxx x xxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx 24 hodinách (xx. xxxxxxxxx 54 xxxxx xx xxxxxxxx provokačního xxxxxx) xx kožní xxxxxx znovu pozorují x zaznamenávají.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx osoba xxxx, které xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xx kontrolní.
Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), provede xx xxxxxxxxx o xxxxx později, v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx skupině.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx nálezy, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx indukčních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (viz xxxxxxx). K xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx dalších xxxxxxx, jako např. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx kožních xxx.
2. SBĚR X XXXXXX ÚDAJŮ (XXXX X XXXXXXXXX TEST)
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx, ze xxxxx xxxx xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx patrná reakce xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX (GPMT X XXXXXXXXX XXXX)
Pokud xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx test screeningový, xx třeba xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxx (xxxx. XXXX - xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, MEST - xxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx) xxxxxx xxxxx podrobností xxxxxxx x výsledků xxxxxxxxx xxx testované x xxxxxxxxxx xxxxx.
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (XXXX x Xxxxxxxxx xxxx)
Xxxxxx o xxxxxx xxxxxxxx tyto xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxx xxxxxx;
- xxxxx, stáří x xxxxxxx zvířat;
- xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat na xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Experimentální podmínky:
- xxxxxx přípravy xxxxx pro xxxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxx studie xx xxxxxxx x indukčních x provokačních xxxxxxxxxxxxx xxx vlastní xxxx;
- podrobné informace x xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx testované xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx xxxxxxx referenční xxxxx, její koncentracea xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx každé xxxxx xxxxxx systému xxxxxxxxxxx;
- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Xxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Tato xxxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
1 = xxxxx nebo skvrnité xxxxxxxxx xxxx;
2 = středně výrazné x splývající xxxxxxxxx xxxx;
3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxx toho, xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx bylo xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx jako
xxxxx alergen (X. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 9 - 28 % zvířat
xxxxxxx xxxxx alergen (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 65 - 80 % xxxxxx
extrémní xxxxxxx (X. st.) - 81 - 100 % zvířat
X.7. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxx po 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx orálně, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pečlivě xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxx zvířata, která xxxxxxx konec xxxxxx, xx xxxxxx x xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Zdravá mladá xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx co xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx označeno. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxx nebo x xxxxx vodě, xxxxx xxxxx studie x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx je xx třeba, xxxxxxxx xxxx suspenduje xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx nosiči (xxxxxxxx). Xxxxxxxxxx xx nejprve xxxxxx použití xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx použití xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) a xxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Je nezbytné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zvoleném xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx možno xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Je třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx musí být xxxxxxxxx x nesmí xxx březí. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xx nejdříve xx xxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.
Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx zvlášť) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx předběžný xxxxx xxxx dlouhodobou xxxxxx, xx třeba x xxxx xxxxxxxx xxxxxx zvířata stejného xxxxx x ze xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx hladinu xxxxx xx použije xxxxxxx 10 zvířat (5 xxxxx a 5 xxxxx). Pokud xx xxxxxxx budou zabíjet x průběhu xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx budou zabita xxxx koncem xxxxxx.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx skupině) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx pohlaví) po xxxx 28 dnů xxxxxxxx dávku x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx vratnost, xxxxxx xxxx zpožděný xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx také xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx úrovně xxxxx a jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xx aplikuje xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx informací xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx denní dávce 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx limitní xxxx. Xxxxxx-xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx účelem xxxxxxxxx dávek.
Xxx xxxxxx dávek xx xxxxx vzít v xxxxx všechny xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx studií x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx látkách xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx. Dále xx vyberou dávky x xxxxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky by xxxxxx vyvolat žádné xxxxxxxx xxxxxxxx (XXXXX). Xxxxxxx xx vhodný xxxx- xx čtyřnásobný xxxxxx mezi sousedními xxxxxxx; pokud xx xxxxx xxxxxx větší xxxxxx dávek, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx příliš xxxxx xxxxxx xxxx dávkami (xxxx. xxxxxx xxxxx xxx 10).
Pokud xx testovaná xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx xxxx, xx xxxxxxxx zajistit, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx výživu x vodní xxxxxxxxx. Xxxxxx-xx se testovaná xxxxx v xxxxxxx, xxxx se xxxxxx xxx xxxxxxxxxx koncentrace (x xxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxx xxxxxx, mělo xx se tak xxx xxxxx xxx xx stejnou xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx studie sloužit xxxx xxxxxxxxx pokus xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx třeba v xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Neprokáže-li xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx toxické xxxxxx při xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx den xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx v potravě xxxx xxxx, která xxxx xxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x analogie x xxxxxxxxxx látkami, xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testování xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx pravidlo xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx údaje x xxxxxxxx xxxx nenaznačují, xx je xxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx pozorování je 28 xxx. Zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx účinku.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx testovaná xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 dnů, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxx x xxxxx. Denní xxxxx xx xxxxxx jednorázově xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx tekutiny, xxxxx může být xxxxx najednou, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx přesáhnout 1 xx xx 100 x tělesné xxxxxxxxx, x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 xx xx 100 x xxxxxxx hmotnosti. Rozdíly x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx podáván xxx objem na xxxxx úrovních xxxxx. Xxxxxxx xx x xxxxx dráždivých a xxxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx obvykle xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx při vyšších xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx pozorování
Xxxxxxxxx xxxxxxxx pozorování xx xxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx, xxxxxxx x tutéž xxxxx xxxx x s xxxxxxxx doby xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx zjištění xxxxxxxxx x mortality. Xxxxxxx moribundní x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx nebo stres xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx klinické xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx provede xxxx xxxxx aplikací (za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x dále xxxxxxx xxxxxx týdně. Toto xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx chovnou klec x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx xxxx. Výsledky xxxxxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx x testující xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx pozorování xxxxxx xx xxxxxxx; osoba, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxxxxx neměla xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx x xxxxxxx, přítomnost sekretů x exkretů, xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, velikost zornic) x případně další. Xxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx, polohy, xxxx xxxxxx na manipulaci, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, stereotypů x chování (xxxxxxxx xxxxxxx pohyby xxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx).
Xx čtvrtém týdnu xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx aktivita. Xxxxx xxxxxxxx informace o xxxxxxxxx, které xx xxxxx x testování xxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx Xxxxxxxxx úvod, xxxx X).
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx čtvrtém xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud 28xxxxx studie slouží xxxx předběžná xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx studii xxxxxxxxxxxxx (90xxxxx); x xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx do xxxx xxxxxxxxxx studie. Ovšem x x tomto xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx týdnu 28xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx výběr xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx a xxxx
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Spotřeba xxxxxxx x vody xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxx aplikace x xxxxx vodě.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxx pokusu zahrnuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx krve.
Xxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx v xxxxxxx utracení xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xx xxxx odebrala, xx xxxxxxxxx. Krev xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx analýza
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx posouzení xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx, se provede x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx x průběhu utracení (xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx). Doporučuje xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx přes noc xxxxxxx xxxx1). Xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxx stanovení xxxxxx, xxxxxxxx, glukózy, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx proteinů, albuminu, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx jaterní xxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx fosfatáza, gama xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx). Zaměření xxxxxxx xxxxxx (jaterního xxxx xxxxxx xxxxxx) x žlučových kyselin xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx užitečné xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx xx časově definovaný xxxx x vyšetření xxxx xxxxx posledního xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx xx možno xxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx hmotnost, xX, xxxxxxxxx, glukózu a xxxx příp. xxxxxxx.
Xxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx.
Další xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx u látek xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx, fosforu, xxxxxxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx posuzuje xxxxx xxxxxxxxxxxx xx určitých xxxxxx látek xxxx xxxxxx od xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxx použitý xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxx xxxx očekávané xxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1) Xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxx x xxxx x plazmě, xxxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xx to, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx interpretaci. Xx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx noc xx xxxxx xxx xxxx xx celkový xxxxxxxxxxxx x u aplikace x xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxx, xx třeba biochemické xxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 4. xxxxx testu.
1.2.3.5 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx použitých ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxx x břišní, x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxx x xxxxx xxxxx zvířat se xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx a xx xxxxxxxx po xxxxx se xxxxx xx xxxxxx stavu, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx přechovávat xx vhodném xxxxx x xxxxxxx na xxx tkáně x xxxxxxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx změnami, xxxxx (reprezentativní oblasti xxxxxx xxxxxxxx, mozečku x xxxxx), míchu, xxxxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxx (xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx), játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx (xxxxxxxxxxxx naplněním xxxxxxxx roztokem x xxx xxxxxxxxx), gonády x přídatné xxxxxxxx xxxxxx (např. xxxxxx, xxxxxxxx), močový měchýř, xxxxxxxxxx xxxxxx (přednostně xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xxxx (x. xxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxx), xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx (xxxx čerstvý xxxxx z xxxxxx xxxxxx xxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxx by mohl xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx testované xxxxx, xx třeba xxxxxxx.
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X všech zvířat xxxxxxx, které xxxx xxxxxx nejvyšší xxxxx, x u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx provést histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů x xxxxx. Pokud xx x xxxxxxxx x xxxxxxx ve xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx nutno provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx těchto xxxxx i u xxxxx skupin x xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx léze xx xxxxx vyšetřit.
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se zvláštním xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXX X ZÁZNAM XXXXX
K dispozici xxxx xxx xxxxx x xxxxxx jednotlivém xxxxxxx. Navíc jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx tabulkové xxxxx, xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxx x humánních xxxxxx, xxxx xxxxx jednotlivých xxxxxx, popis toxických xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx příznaku, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, typ xxxx x xxxxxxxx zvířat x jednotlivými typy xxxx.
Xxxxxxxx v xxxxxxx formě xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx metodu xx xxxxx xxxxxx xxx při xxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxx, stáří x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx chovu, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx začátku xxxxx, xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula, xxxxx xx jiné než xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx dávek;
- xxxxxxxx údaje x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx aplikaci, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x dosažených xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a homogenitě xxxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx;
- xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxx xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xx xx xx xxxxxxx hmotnosti (pokud xxx o xxxxxxxx x xxxxx nebo xxxx);
- xxxxxxxx xxxxx x potravě x xxxxxxx vody (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);
Výsledky:
- xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxx;
- xxxxxxxx potravy x xxxx;
- xxxxx x xxxxxxxxx reakcích xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx úrovně, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx toxicity;
- povaha, závažnost x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, příp. zda xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx;
- výsledky hematologického xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx;
- pitevní xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx XXXX TG 407.
X.8. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxx
Xxxx pokusem xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx velikosti částic, xxxxx par, xxx xxxx, xxx xxxx, xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxx pokusných xxxxxx xx exponováno xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu, x xxxxxxxxxxxxxx koncentracích, xxxxx xxxxxxx xxxxx koncentraci, x to xx 28 xxx. Xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx skupinu xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx pokusu xx xxxxxxx denně xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx do jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby x xxxxxxx vznikla příslušná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx x xxxx známo, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxxxx proti xxxx. Pracuje xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxx nejméně 10 xxxxxx (5 samic x 5 xxxxx). Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx celkový počet xxxxxx x počet xxxxxx, která budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 28 xxx x během xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Používá xx také xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx pohlaví).
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx tři skupiny x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx - pokud xx užije - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. S xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx se se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace má xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x malém xxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x člověka, má xxxxxxxx koncentrace tuto xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolat toxický xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx než 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, mají xxx voleny tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx koncentrací x x xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx xxx být xxxxx, jinak je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
1.3.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx má xxx 6 xxxxx denně; x xxxxxxx specifických xxxxxxxxx je možné xxxxxx x jiných xxx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pro pokusy xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx expoziční xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx nejméně 12xxxx xx xxxxxx, aby xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx rozdělení xxxxx x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx konstruovat xxx, xxx xx xxxxxxxx xx nejvíce xxxxxxxxxx xxxxxx x aby xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx co xxxxxxxx. Xxx zajištění xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx v xxxxxx xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx boxu. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx expozice orálně-nasální, xxxxxxx hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx expozice; xxxxx xxx způsoby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx cestami.
1.3.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx období xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxx, xx xxxxxx xx objeví x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3 Popis postupu
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce denně, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx dobu 28 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx určena x xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx dalších 14 xxx bez xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x otravy nebo xxxxxxxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx xxxxx experimentu xx xxx 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx být xxxx 30 % a 70 %, s xxxxxxxx případů, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Udržování xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx sloupce) xxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx do okolí. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Doporučuje xx provést xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rychlost xxxxxxx vzduchu je xxxxx nastavit tak, xxx xxxxxxxx x xxxxx expozičním boxu xxxx stejné. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Měření xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxx x dýchací zóně. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx koncentrace xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ± 15 %. U xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx experimentu xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, jak je xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
x) Teplota x vlhkost xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx xx pozorování provádějí x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx individuální protokol. Xxxxxxx zvířata xx xxxxx denně xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, očí, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxxxxx týdně. Doporučuje xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x spotřebu xxxxxxx. Xx třeba zajistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx, xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx zařazení.
Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx xx trpící xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx analýza xxxx: x posouzení funkce xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jeden x xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x séru (xxxxx známá xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx jako glutamátoxalacetát-transamináza), xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x celkové bílkoviny x séru.
Xxxx xxxxx charakteristiky, které xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxxx, xxxxxxx, chloridů, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx lačno, xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3.1 Pitva
X všech xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xx provede xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, plíce x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx vysychání. Xxxxxx x xxxxx (xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny x xxxxx, x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx) je xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření. Plíce xx třeba xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx koncentrace, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx. Xxxxx xx x orgánech x xxxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx způsobená xxxxxxxxxx látkou, je xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x u xxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx exponovaných zvířat.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu patrný xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o průběhu xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, krmení xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx systému, xxxxx xxxxxxxxx odpadního xxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx v xxxx, xxxxx je používán. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx teploty, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxx stability xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxxxxxxx,
- údaje x xxxxxxxx xx sestaví xx tabulky a xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx variability (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx údaje: x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx; c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx); x) povaha xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxx; x) xxxxxxxx koncentrace x dýchací zóně; x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) x xxxxxxxxxxx směrodatná xxxxxxxx (XXX),
- xxxxx o toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, případně xxxx x xxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxx vývoj,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx xx možné,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.9. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx na xxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx pokusu, x xxxxxxx, která přežijí xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata chována x podmínkách ustájení x krmení, v xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Krátce xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx srst xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx srsti xx xxxxxx možné, mělo xx xx xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx před xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nebo oholení xx potřeba xxxxxxxx xxxxx týden. Xxx xxxxxxxx xxxx holení xxxxx xx xxxxx xxxx na xx, xxx se xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nejméně 10 % xxxxxxx xxxx. Xx třeba vzít x úvahu xxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx kůže x x velikosti xxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxx látkami, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit vodou, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx s xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxx denně 5 xx 7 dnů x týdnu.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xx možno používat xxxxxxx potkany, xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx druhy, xxxxxx použití xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro každou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 zvířat (5 xxxxx x 5 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx zabíjet x průběhu studie, xx nutno xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx skupině) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx sledovat xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx zvířat (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx třeba xxxxxx nejméně tři xxxxxx dávek a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - xxxxx xx xxxxxxx vehikula - xxxxxxxxx skupinu x aplikací xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx být xxxxxxx 6 hodin xxxxx. Xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx stejnou xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxxx stálá xxxxxxx xxxxx ve xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx pokusným skupinám, x to xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx skupině x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx nebo jen x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Pokud xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx účinek xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx než 3 úrovně dávek, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x x kontrolní xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
Xxxx-xx aplikace testované xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx kůže, xx xxxxx xxxxxx koncentraci, xxx x vysoké xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxx xx určitých okolností xxxxx xxxxx ukončit x xxxxxxx xxx xxxxx x nižšími xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx při xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 xxxx xxxxx dávky, která xxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, není xxxxx xxxxxxx nutná.
1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Všechna zvířata xx xxxxx denně xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxx. Je třeba xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxxx, kdy xx objeví x xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx otravy.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx xxxxxxx v xxxxxxx xx jednom. Xxxxxxxx xx studované xxxxx xxxxxxx 7 dnů x týdnu po xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx skupiny, xxxxx xxxx xxxxxx xxx následné xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx dalších 14 xxx bez xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.
Testovanou xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx plochu, xxxxx xxxxxxxxxxx asi 10 % xxxxxxx xxxx; x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx plocha menší. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx co xxxxxxxx xxxx xxxxxxx plochy xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx je po xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x kůží xxxxxx porézního xxxxxxxx xxxxxx a nedráždivé xxxxxxxx. Testovanou plochu xx xxxx xxxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxx, xxx se xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx možno xxxxxx x prostředků pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx immobilizaci xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx metody xx xxxxx xxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxx".
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx nebo s xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx denně pozorovat x zaznamenávat příznaky xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxxx, kůže, xxx a sliznic x také xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Hmotnosti xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxxxx xxxxx i xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx ztrátám zvířat, xxxx xxxx. x xxxxxxxx kanibalismu, xxxxxxxx xxxxx xxxx chybného xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x výjimkou xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Umírající xxxxxxx x zvířata x těžkém stresu xx xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
Xx xxxxx pokusu se x všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: x xxxxxxxxx funkce jater x ledvin xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x séru (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx glutamát-oxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.
Xxxx další xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, xxxxxxx, chloridů, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy mohou xxx x případě xxxxxxx použity xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx pitva. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x varlata xx xx xxxxxxxx xx xxxxx zváží xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx a xxxxx, např. xxxxxxxx x xxxxxxxxxx kůže, xxxxx, ledviny, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, srdce x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx lézemi xxxx změnami xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx na xxxxxxxx histopatologická vyšetření.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx dávka, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx skupině x xxxxxxxx dávkou xxxxxx xxxxxxxxx způsobená xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx provést histologické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x u xxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx. U zvířat xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xx zvláštním xxxxxxx xx xxxxxx x tkáně, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx do tabulky. X ní xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx formami poškození.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- údaje x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, původ, podmínkách xxxxx, xxxxxx atd.),
- experimentální podmínky (xxxxxx xxxxx obvazu; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx ji xxx xxxxxxxx,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat do xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.10. XXXXXXXXXX - XXXX CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX X XXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
Metoda xx xxxxxxxxx OECD XX 473, In Xxxxx Xxxxxxxxx Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Účelem analýzy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx je xxxxxx xxxxx, jež v xxxxxxxxx savčích xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx chemická xxxxx xx schopna xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx však xxxx navržena k xxxxxxx xxxxxxxxxxx aberací x běžně se x tomuto xxxxx xxxxxxxxx. Chromozómové xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx příčinou řady xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx doklady xxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x příbuzné xxxx, xxx způsobují xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxx rakoviny x xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Řada chemických xxxxx, xxxxx jsou x tomto xxxxx xxxxxxxxx, je sice xxx savce xxxxxxxxxxxx, xxxx však xxxxxxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxx xxxxxx x karcinogenitou. Xxxx korelace xxxxxx xx druhu xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx dokladů x xxx, že xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxx testem nezjistí, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx poškozením XXX.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx primární buněčné xxxxxxx. Xxxxxxx buňky xxxx vybrány xx xxxxxxx xxxxxxxxxx růstu x kultuře, stability xxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Testy xx xxxxx vyžadují xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x savců xx xxxx. Je xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx by mohly xxxx k pozitivním xxxxxxxx, xxx neodrážejí xxxxxxx xxxxxxxxxx, nýbrž xxxx způsobeny změnami xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (4) (5).
1.2 DEFINICE
Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx projevuje xxxx xxxx jedné, případně xxxx chromatid, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx poškození chromozómu xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx xxxx zlom x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (zahrnuty xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx chromozóm, prsténčitý xxxxxxxxx-xxxx).
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx porušení xxxxxxxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx za předpokladu, xx xxxxxxx mezera xx struktuře xxxxxxxxxx xx xxxxx, než xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Dále xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx chromatidy), případně xxxxx xxxxxxxxxx hodnoceného xxxxxxxxxx xx xxxxxx x důsledku xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, kde xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX nepřechází jádro xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou chromozómy x 4, 8, 16, .. chromatidami.
Xxx: achromatická xxxx xxxxx xxx šířka xxxxx xxxxxxxxxx a x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx celkovým xxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxx stupeň proliferace xxxx xxxxxxxx.
Numerická xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx buňky.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (n) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury xxxxxxxxxxx mikroskopickou analýzou xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x to x xxxxxxxxxxxx aktivací a xxx ní. Ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx, obarví se x x metafázických xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx buněčných xxxxxx, včetně xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx fibroblasty xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx krve xxxxxxx xx jiného xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx
K xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx vhodná kultivační xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx nádoby, xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx x vlhkost). X xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxx způsobem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx nepoužívají. Xx xxxxx znát xxxxxxxx xxxx buněčného xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie x xxxxx: buňky xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx nedosáhly konfluentní xxxxxx před xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 xX.
Xxxxxxxxx: xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx mitogen (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx) xx přidá xxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx), nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx získané xx xxxxxxxx jedinců x xxxxxxxxx se xxx xxxxxxx 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx působí v xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx vhodného metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx suplementovaná xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx jako xx Aroclor 1254 (6) (7) (8) (9), nebo směs xxxxxxxxxxxxx x ß-naftoflavonu (10) (11) (12).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx obvykle 1 - 10 % x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx na tom, xxxxxx typu je xxxxxxxxx látka. X xxxxxxxxx případech je xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x několika xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx modifikované xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx enzymy. Výběr xxxxxxxxx xxxxx by xxx xxx vědecky xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x metabolismu testované xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx testované xxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx x xxxxxx stavu, xxxxx xx před xxxxxxxxx na buňky xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x případně naředí. Xxxxxxx testované látky xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx delší xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx.
1.5 XXXXXXXX TESTU
1.6 ROZPOUŠTĚDLO
X xxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxxx přežívání xxxxx x xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx se xxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx prokazujícími xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxx xxx, xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx rozpouštědla xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Voda xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.6.1 Koncentrace
Xxxx xxxxxxxx, jež xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx koncentrace, xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x systému x xxxxx xX resp. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x hlavním xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx integrity x xxxxx, xxxxxxxxx stupně xxxxxxxxxx, počet živých xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Je xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x cytotoxicitě, xxxx xxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx znamená, že xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx více xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx hodnotami 2 x √10. X xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxx xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx růstu, xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx x xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx index xx xxxxx nepřímou xxxxx xxxxxxxxxxxxx / cytostatických xxxxxx x xx xxxxxxx na době xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou. Xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx, kde xx jiná xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x nepraktická. Jako xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx použít také xxxxx x kinetice xxxxxxxxx dělení, jako xx xxxxxxxx generační xxx; xxx ovšem xxxxxxxxxxx celkový xxxxxx, xxxxx ne xxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx zpožděných xxxxxxxxxxx xxxxx. A xxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx generačního času xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výtěžku xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látek činí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 µl/ml, 5 xx/xx nebo 0,01 X.
U xxxxxxxxx nerozpustných xxxxx, xxx jsou xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx které xx xxx látka xxxxxxxxxxx, xx xxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx mez xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx-xx x xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx testovat xxx xxxxxxxx koncentracích s xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx konci xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx vlivem xxxxxxxxxxx xxxxx, séra, X9 apod. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx buněk.
1.6.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx každého experimentu, xx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxx xx, xx xxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx). Pokud xx xxxxxxxx metabolická xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx používá známý xxxxxxxxx, x xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x detekovatelný nárůst xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testovacího xxxxxxx.
Koncentrace pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx, xxx účinek xxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx identitu xxxxxxxxxxxx preparátů. Xxxx xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx aktivace | Xxxxx | XXX | EINECS |
Xx | methyl xxxxxxxxxxxxxx xxxxx methansulfonát xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx mitomycin X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Xxx | xxxx[x]xxxxx cyklofosfamid xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Pro pozitivní xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxx xxxxxx látky. Xxx, xxx xx xx xxxxx, je xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx každý xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x kultivačním xxxxx, xxxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxx jakéhokoliv xxxxxxxxx.
1.6.3 Postup
1.6.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx působí xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xx xxxxx začít xxxxxxx xxx 48 xxxxx xx stimulaci mitogenem.
Xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx kultury; x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, že xxxxxxx mezi duplicitními xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (13) (14), xx xxxxxxxxxx, xxx se xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx.
X případě xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx postupy, xxxx xx použití neprodyšně xxxxxxxxxx kultivačních xxxxx (15).
1.6.3.2 Xxxx sklízení xxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xx buňky xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxx aktivací x xxx xx xx xxxx 3 - 6 xxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx x čase xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5násobku xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx začátku xxxxxxxx (12). Pokud jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x bez xxxx výsledky negativní, xxxxxxx xx další xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx expozicí xx xx doby xxxxxxxx kultivace odpovídají xxxxxx 1,5xxxxxxx normálního xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx při xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx 1,5násobek xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx posuzují xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx třeba xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx Colcemidem® xxxx kolchicinem xxxxxxx xx xxxx 1 - 2 xxxxx xxxx ukončením xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zpracovává zvlášť. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x ovlivnění xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x odbarvení.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, se xxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx postupy xxxxx xxxxx k rozbití xxxxxxxx xxxxxx metafázických xxxxx a ztrátě xxxxxxxxxx, xxxx být x xxxxx typů xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx ± 2. Xxx xxxxxx koncentraci x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx minimálně 200 xxxxx rozprostřených xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x obou xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx, může xx xxxxx analyzovaných xxxxxxxx xxxxxx.
I xxxx xxxxxx testu xx xxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx důležité xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Jelikož experimentální xxxxxxxxx je buňka, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými aberacemi. Xx xxxxx registrovat xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jejich xxxxx x xxxxxxxx x experimentálních x xxxxxxxxxxx kultur. Xxxx xx zaznamenávají xxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx četnosti aberací xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx data xxx xxxxxxxxxx kultury. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků xx nepožaduje. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx testováním, nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X nutnosti xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v xxxx. 1.4.3.3. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx použitých xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx lze xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislá xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3) (13). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx jediným určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx může xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost inhibovat xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx inhibovat xxxx xxxxxxxxx cyklu (17) (18).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jejímž xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, xx x tomto xxxxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx ohledu xx xxxxx xxxxxxxxxxx experimentů. Xxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testovaná xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx aberace nevyvolává.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
XXXXXX X XXXXXXX XXXXXX
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud je xxxxx.
Xxxxx:
- xxx a zdroj xxxxx,
- karyotyp x vhodnost xxxxxx xxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx,
- počet xxxxxx buněk, xx-xx xx nutné - xxxxxx udržování xxxxxxx xxxxxxx, je-li xx xxxxx
- xxxxxxx xxxxx chromozomů.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx, koncentrace XX2, xx-xx xx xxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx teplota,
- xxxx xxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx buněk xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xx nutné
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx podložních xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aberací,
- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx toxicity,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, negativní nebo xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx, tj. xxxxxx konfluence, údaje x xxxxxxxx cyklu, x xxxxx buněk, xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xX x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, jsou-li xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx gapů,
- xxxxx buněk x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx ploidie,
xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a pozitivních xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.11. MUTAGENITA - TEST CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX X XXXXXX XXXXX XXXXX XX XXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx je xxxxxxxxx OECD XX 475, Xxxxxxxxx Xxxx Xxxxxx Xxxxxxxxxx Aberration Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx chromozómových xxxxxxx x savců xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx dřeně xxxxxx, xxxxxxx hlodavců (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx a chromatidové. Xxxxxx polyploidie xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Aberace xxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx chromozómového xxxx xxxxxxx rovněž. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx jsou xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x člověka x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, že xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx, jež xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, hrají xxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxx je xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx buněk, jež xx xxxx snadno xxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx brát v xxxxx faktory xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x procesů xxxxxxxx XXX, x xxxx xxx mohou xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Test in xxxx je také xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx xxx předtím xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, že xx xxxxxxxxx látka xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx do cílové xxxxx nedostane, není xxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xx projevuje xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, nebo xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx chromatidami.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako zlom xxxxxxxxxx xxxx xxxx x opětovné spojení xxxx chromatid xx xxxxxxx místě (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx typu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx předpokladu, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Dále pak x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx další X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... chromatidami.
Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Mitotický index: xxxxx xxxxx x xxxxxxxx dělený xxxxxxxx xxxxxx buněk v xxxx buněčné xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx proliferace xxxx xxxxxxxx.
Numerická xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx oproti normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx buňky.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx hapoidního xxxxx xxxxxxxxxx (x) mimo xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou buněčného xxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx jako xxxxxx x fragmenty x výměny.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx vystaví xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxx dobu xx xxxxxxxx se xxxxxx. Xxxx usmrcením xx xx xx xxxxxx látkou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (například kolchicinem xxxx Xxxxxxxxxx®). Z xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxx buňkách se xxxxxxxxxxxxx zjišťují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Výběr xxxxxxxxxxx xxxxx
Běžně se xxxxxxxxx xxxxxxx, myši x xxxxxx xxxxxx, xxx ovšem xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx druh. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx B, xxxxxxx xx xxxx být 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat
Xxxxxx mladí dospělí xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, jak x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Po xxxx xxxxxxxxx pěti dní xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx podmínkách.
1.4.1.4 Příprava dávek
Xx-xx testovaná xxxxx x pevném xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx připraví xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx se mohou xxxxxxx přímo nebo xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx čerstvé preparáty, xxxxxx xxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum v xxxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx účinky x nesmí x xxxxxxxxxx xxxxxx chemicky xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx příliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx použití xxxxxxxxx xxxxx o kompatibilitě x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx xx xx xxxxx, bylo xx xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx rozpouštědlo / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Do xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxx každé xxxxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx při xxxxxxx, kdy lze xxxxxxxx jejich detekovatelné xxxxxxx nad spontánní xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní kontrolu xx xxxxx podávat xxxxxxxx xxxxxxxx než xxxxxxxxxx látkou a xxxxxx odebírat x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx je to xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx. Příklady xxxxx vhodných xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Látka | XXX | XXXXXX |
ethyl xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx experimentální xxxxxxx měly xx xxx xxxxxxxx do xxxxx časových intervalů xxxxxxxxxx, pokud nejsou x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x o xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mezi zvířaty. Xxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx pouze xxxxx odběr vzorků, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx interval xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx použít x xxxxxxxxxxxxx kontrol, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx vehikulum nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x pohlaví xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx pět xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pohlaví. Xxxxx x době, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, existují údaje x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx pohlavími nejsou x toxicitě podstatné xxxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx xx jednom xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx humánní expozice xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx závislá xx xxxxxxx, xxx je xxxx například u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx se test xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxxxxxxxx látku xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx dávku, xxxx xx k xxxxxxxxx aplikace dávka xxxxxxxx, například xx xxx dávky xx xxx podané x xxxxxxx nanejvýše xxxxxxxx xxxxx. Jiné xxxxxx xxxxxxxxx musejí xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx odebírají xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po podání xxxxx xxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu (xxxxx xxxx xxxxxxx 12 - 18 xxxxx) xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx potřebná xxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx testované látky x její vliv xx kinetiku xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dobu xxx xxxxxxx chromozómových xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xx 24 hodinách xx xxxxxxx xxxxxx. Pokud xx v daném xxxxxxxxxx xxxxxx látka xxxxxx vícekrát xxx xxxxxx za den, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx odběr xxxxxx 1,5xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx cyklu po xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx intraperitoneálně injikuje xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx kolchicinu a xxxxxxxx xx x xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx odeberou xxxxxx. X myší je xxxxx interval zhruba 3 - 5 xxxxx, x čínských xxxxxx zhruba 4 - 5 xxxxx. X xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx se x nich chromozómové xxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx studie xx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxx, protože nejsou x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, je xxxxx ji xxxxxxxx x téže xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, kmene, xxxxxxx a pokusného xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (5). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx nulové. Xxx pozdější časový xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx pak třeba xxxxxx jenom nejvyšší xxxxx. Ta xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx takové xxxxxx xxxxxxxx, xx při xxxxxxx dávkách xx xxxxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, xxx x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx aktivitu, jako xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxx, jež xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx definována xxxx xxxxx, xxxxx vede x určitým xxxxxxx xxxxxxxx v kostní xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx test xxx xxxxx minimálně 2 000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx dávce nebo xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x jeden xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx x látkách x xxxxxxxx chemickou strukturou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx celá xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx xxxxx 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xx xxx při xxxx trvání xx 14 xxx, x 1&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xxx době xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, nebo intraperitoneální xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Maximální xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx žíravých xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx tak, xxx xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Příprava xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx kostní xxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx roztokem x xxxx se xxxxxx. Xxxxxxxx buněk se xxxxxx na xxxxxxxx xxxx a obarví xx.
1.5.7 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx stanoví xxxxxxxxx index pro xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx xx analyzuje xxxxxxxxx 100 buněk. Xxxxx xxxxx je možné xxxxxx při xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxx dochází často x xxxxxxxx určitého xxxxxx metafází xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx 2x ± 2.
2. ÚDAJE
2.1 Zpracování xxxxxxxx
Údaje xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx jedinec. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx aberací xx xxxxx xxxxx x procento xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx se, xxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx nezahrnují. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx x xxx, že xxx xxxxxxx xxxxxxx rozdílně, xx xxxxx xxxxx xx obě xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxx xx xxxxxxx x jednorázovou dávkou xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx odběru vzorků. Xxxxxxx je xxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (6). Statistická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxx může xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vyvolávat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nárůst xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxxxxxxx chromozómy xxxx xxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx fáze xxxxxxxxx xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx xxxxxxx výsledky xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx systému xxxxxxxx xx nemutagenní.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx sice xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx případech však xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxx dat xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx definitivní xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx experiment xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Pozitivní výsledky xxxxx na chromozómové xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx vyvolává v xxxxxx xxxxx příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx testovaná látka x xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx živočišného druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxx vzít x úvahu, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx zasáhne (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx vehikula,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx a pohlaví xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx ze studie xxx určení xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x přípravě xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx se xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx nebo xx cílové xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx látky x xxxxxxx/xxxxx vodě (ppm) xx xxxxxxxxx dávku (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x vody,
- podrobný popis xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x odběru xxxxxx,
- metody xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických preparátů,
- kritéria xxx xxxxxxxxx aberací,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx,
- kritéria, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, negativní xxxx nejednoznačná.
Xxxxxxxx:
- známky xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx index,
- xxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx jedince xxxxxx,
- xxxxxxx počet xxxxxxx v xxxx xxxxxxx, jejich průměr x směrodatná xxxxxxxx,
- případné xxxxx xxxxxxx,
- vztah xxxxx-xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- statistické xxxxxxx, byly-li xxxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x negativních xxxxxxx xxxxxx rozpětí, průměrů x xxxxxxxxxxxx odchylek.
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
B.12. MUTAGENITA - XX XXXX XXXXXXXXXXXX XXXX X XXXXXXX ERYTROCYTECH
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 474, Mammalian Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx x savců xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx x chromozómech xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxx xxxxxxx x tom, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x kostní xxxxx xxxx. z xxxxxxxxx xxxx zvířat, xxxxxxx xxxxxxxx.
Účelem xxxxxxxxxxxx testu xx xxxxxxx látky, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx poškození, xxxxx výsledkem xx xxxxx mikrojader představujících xxxxxxxxxxxx fragmenty xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx x erytroblastu kostní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx zbude x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxxxx jádro xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxx xxxxxxxxx chromozómů.
V xxxxx xxxxx se xxxxxx dřeň xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x této xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) erytrocytů x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx jeho xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx detekci xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, jako xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx kinetochoru (centromery), xxxx xxxxxxxxxxxxx DNA x xxxxxxxxxx. Konečným xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x mikrojádry. Xxxx počet zralých (xxxxxxxxxxxxxx) erytrocytů x xxxxxxxxx xxxx obsahujících xxxxxxxxxx x rámci xxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx jako xxxxxxxx xxxxxxx použít x xxxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx minimálně xxxx xxxxx.
Xxxxx xx vivo xxxxxxxxxxxx xxxx u xxxxx xx zvláště xxxxxx x hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx, protože umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx reparace XXX, x xxxx xxx mohou být xxxx živočišnými xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Test xx xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx efektu, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx v systému xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, xx se testovaná xxxxx nebo její xxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx vhodné.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): oblasti xxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx během xxxxxx xxxx vlákna dělícího xxxxxxxx umožňující xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx dceřiných xxxxx.
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx): xxxx xxxxx xxxxxxxx xx jádra xxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx reprezentovaná opožďujícími xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx erytrocyt: zralý xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xx od xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx erytrocytů xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx erytrocyt: xxxxxxx xxxxxxxxx, vývojové xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxx odlišit xx zralých, normochromních xxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro ribozómy.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx používá xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxx usmrtí, xxxxxx xxxx xx izoluje x připraví se xxxxxxxxx, jež xx xxxxxx (1-7). Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xx vhodné době xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxx, xxx se xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx periferní xxxx, xxxx xxx xxxx xx poslední xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx mikrojader.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Příprava
1.4.1.1 Xxxxx živočišného druhu
Xxxxx se používá xxxxxx xxxx, doporučují xx jako xxxxxxx xxxxxxx xxxx nebo xxxxxxx; xxxx však xxx xxxxxx xxxx xxxxxx savčí druh. Xxxxxxx-xx se periferní xxxx, doporučují xx xxxx. Xxx xxxxx xxxxxx jakýkoliv xxxxxx xxxxx druh za xxxxxxxxxxx, xx xx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx xxxx že x xxx byla xxxxxxxxx dostatečná xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx minimální x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx uvedeny xx Všeobecném úvodu x části X.
Xxxxxxx xx měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělí jedinci xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Jedinci xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx dní xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x kde xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Příprava xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx a xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx její xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx podávat xxxxx xxxx se xxxx xxxxxxxxx ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx testu
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum x používaných xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx a xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x testovanou látkou. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx xx xx xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx použito xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx testu xx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx zacházet xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx stejně.
X xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx in xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx byly xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx hodnotiteli totožnost xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx možné xxxxxxx odlišným xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x vzorek xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Kde je xx xxxxx, xx xxxxx používat xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx skupiny, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx pozitivní kontrolu:
Xxxxx | XXX | EINECS |
xxxxx methansulfonát | 62-50-0 | 200-536-7 |
N-ethyl nitrosomočovina | 759-73-9 | 212-072-2 |
mitomycin X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx zařazeny xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx vzorků, je xxxxxxxxxxxx dobou první xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x neovlivněných xxxxxxx, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx rozpouštědlo, nebo xxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.
Používá-li xx xxxxxxxxx krev, může xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx přijatelný x vzorek xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x periferní xxxx (xxxx. 1 - 3 dávky), kde xxxxxxxx xxxxx leží x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx kontroly.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx a pohlaví xxxxxx
X každé xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx pět analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (11). Pokud x xxxx, kdy xx xxxxxx provádí, existují xxxxx x stejném xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx způsobů xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx závislá xx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxx farmaceutických xxxxxxxxx, xxxxxxx se test xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx standardní rozvrh (xxxx. jedna, xxx xxxx xxxx xxxxx x 24xxxxxxxxxx intervalech). Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; v xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx, až xx xxxxxxx toxicita, xxxx xxxx použita xxxxxxx xxxxx a podávání xxxxxxxxxxx xx do xxxx xxxxxx vzorků. Xxxxx se xxxxx x objemnou dávku xxxxxxxxx látky, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, například xx dvě xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxx xx xxxx provádět xxxxx xxxxxxx:
(a) Xx zvířata se xxxxxxxxxx látkou působí xxxxxxxxxxx. Vzorky xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx dvakrát, xxxxxx xx xxxxx xxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx než po 48 xxxxxxxx od xxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx než xx 24 xxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx krve xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxx xx 36 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, xx vhodnými xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx vzorku, xxxxxxx xxxx nikoli déle xxx 72 hodiny. Xxxxx xx v xxxxxxxx xxxxxxx intervalu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx již další xxxxx zapotřebí.
(b) Xxxxx xx xxxxx xxxxxx dvakrát nebo xxxxxxxx za xxx (xxxx. xxx xxxx xxxx dávek xx 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), odeberou xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx mezi 18 x 24 hodinami xx xxxxxxxxx podání xxxxx x x xxxxxxx periferní xxxx xxxxxx xxxx 36 x 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (12).
Je-li xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, kmene, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (13). Při xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx tak, xxx pokrývaly xxxxxxx xx maximální toxicity x toxicitě xxxxx, xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxx třeba použít xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx známky xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx letální. Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxxxxx biologickou xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx výjimky x xxxxxx xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxxxx xx případu. Xxxxxxxx dávka xxxx xxx xxxx definována xxxx dávka, která xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx dřeni (xxxx. xxxxxx podílu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxxx krvi).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx xxx dávce minimálně 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx dávce xxxx ve xxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx být xxxxxxxxx xxxx xxxxxx za xxxxxxx tří dávkových xxxxxx. Xxx dlouhodobé xxxxxx je xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx za xxx xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx expozice xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx dávkové xxxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx buď xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx pokusného xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx žíravých xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky tak, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný a xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx / xxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx x femuru xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zvířete. Xxxxxx způsobem xx xxxxxx xxxx vyjme x femuru xxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx a obarví xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Periferní xxxx se získává x xxxxxx xxxx xxxx xxxx vhodné xxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (8) (9) (10), xxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx XXX (např. xxxxxxxxxx xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 s xxxxxxxxx-X (15)) se xxxxx eliminovat xxxxxxx x xxxxxxxxx vznikajících xxx použití xxxxxxx, xxxxx xxxx DNA xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, že xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx barviva (xxxx. Xxxxxx). Xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx - xxxxxxxxx kolony xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx (16) - xxxxx xxxx xxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx mikrojader.
1.5.7 Xxxxxxx
U xxxxxxx xxxxxxx se stanoví xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového xxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). X xxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx kostní xxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx 1000 xxxxxxxxxx (17). Všechny xxxxxxxxx (včetně pozitivních x negativních xxxxxxx) xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. X každého xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 2000 xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxx se xxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx získat tak, xx xx mikrojádra xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového počtu xxxxxxxxxx xxxxx než 20 % xxxxxxx x xxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx exponována xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxx, xxx také xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x minimálně 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx a průtoková xxxxxxxxxxxx analýza - xxxx xxxxxxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Experimentální jednotkou xx xxxxx. X xxxxxxx jedince se xxxxxx xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry x xxxxx nezralých xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx kontinuálně po xxxx xxxx xxxxx xxxx déle, xx xxxxx xxxxx také xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxxx). Podíl xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z celkového xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx erytrocytů x mikrojádry xx xxxxx pro každého xxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx x tom, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxx za xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx analýzu xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Ke zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky závislý xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx s mikrojádry xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx dávkou při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (18) (19). Statistická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx, se x tomto xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx sice xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx případech xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx souboru dát xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, i xxxx se experiment xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx látka xxxxxxxx tvorbu xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aparátu x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mikrojader x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx xxxxxxxxxxx cílovou xxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx zprávě x průběhu pokusu xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx xxxxx.
Pokusná xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, věk x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxxx hmotnostního rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- pozitivní a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,
- údaje xx xxxxxx xxx určení xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx cesty xxxxxxxx,
- případné xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxx dostala xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx cílové xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx koncentrace látky x xxxxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) xx faktickou xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxx,
- metody xxxxxxxx mikroskopických preparátů,
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x každého xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkovému xxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxx každého xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx počet ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx každou skupinu,
- vztah xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxx statistické analýzy x metody,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xx souběžných pozitivních xxxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.13/14. MUTAGENITA - XXXX REVERZNÍCH XXXXXX X XXXXXXXX
1. METODA
Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Reverse Xxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxx xxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxxx mutací se xxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx mutací kmeny Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (auxotrofní xx xxxxxx k xxxxxxxxxxxxx histidin) a xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx tryptofan). Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx detekovat xxxxxx xxxxxx vzniklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx delece xxxxxxx xxxx několika xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx bakteriálního testu xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxx, že xx xxxxxxxx mutace, xxxxx xxxxxx vracejí xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx funkční xxxxxxxxx xxxxxxxx syntetizovat xxxxxxx xxxxxxxx aminokyselinu. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx základě své xxxxxxxxxx růst xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx mutace xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx genech xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx roli xxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx charakteristikami, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx sekvencí XXX x xxxxxxx xxxxxxx, zvýšené propustnosti xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx reparace DNA xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx DNA, xxx jsou xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, jež xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx testy xxxxxxxxxx xxxxxx je x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx databáze xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metody xxx testování chemikálií x xxxxxxx fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Test xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx kmenů Salmonella xxxxxxxxxxx xxxx Escherichia xxxx slouží xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx. tryptofanu), xxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, který xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nezávislý.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páru xxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx bází x XXX. Xxx xxxxxxxxx testu xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xx jiném místě xxxxxxxxxxxxx genomu.
Frameshift xxxxxxxx (mutageny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx) jsou xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx odebrání xxxxxxx nebo xxxx xxxx bází x XXX, čímž se xxxx xxxxx xxxxx x RNA.
1.3 VÝCHOZÍ XXXXX
X xxxxxxxxxxxx xxxxx se využívají xxxxxxxxxxxxx buňky, xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx xxxx v xxxxxx látek metabolismu, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx DNA. Xxxxx xx xxxxx xxxxxx vyžadují xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx přímé xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx dané xxxxx x organismech xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx mutací se xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx genotoxické xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx testu xxxxxxxxx, xxxxxxxx také x xxxxxx xxxxxxx mutagenní xxxxxxxx. Existují xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxx tohoto xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxx xxxxxx zvyšují, xxxxx xxxx x xxxx, xx xx mutagenní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx nevhodný pro xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, jakými xxxx xxxxxxxxx některé xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxx, o xxxxx xx xxxxxxxxxxx nebo xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx replikační xxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx topoizomerázy xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx); x xxxxxxx xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxx testy xx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxx tomto xxxxx xxxxxxxxx, jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx absolutní; xxxxxx xx chemické třídě, x existují xxxxxxxxxxx, xxxxx tímto xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, protože xxxxxx jiným, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4 PRINCIP XXXXXX
Xxxxxxxx bakteriálních xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx "plate xxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx smísí x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxx s minimální xxxxxx půdou. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx směs xxxxxxxx x xxxxx s xxxxxxx xxxxxx a xx xxxxx xx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Při xxxx xxxxxxxx xx xxx xx tři xxx xx inkubaci xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx revertujících kolonií xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Je xxxxxxx několik xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx. X nich xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ["plate xxxxxxxxxxxxx"] (1) (2) (3) (4), xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) x xxxxxxxxx xxxxxx (11). Xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx nebo xxx (12).
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx metody xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx řetězcem, xxxxxxxxx kovy, aldehydy, xxxxxxxxxx x diazosloučeniny, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, alylové xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3). Xxxx bylo xxxxxxxx, xx existují xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Na xx xx třeba xxxxxxxx xxxx na "xxxxxxxxx xxxxxxx", x xxxxxxx detekci je xxxxx xxxxxx jiných xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxxx" (xxxxx s příklady xxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx jejich xxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx od xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5. XXXXX METODY
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx kultury xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx exponenciálního nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx stadia xxxxx (xxxxxx 109 xxxxx/xx). Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stadiu xx xxxxxxxxxxx. Důležité xx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx experiment xxxxxxxxxx vysoký xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 37xX.
Použije xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx kmeny X. xxxxxxxxxxx (XX 1535; XX 1537 xxxx TA97a nebo 1X97; XX98; x XX100); x nichž xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx laboratořemi. Xxxx xxxxx kmeny X. xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx reverzním xxxxx xxxx xxxx GC x xx známo, xx nemusejí detekovat xxxxxx oxidační xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx E. xxxx XX2 xxxx X. xxxxxxxxxxx TA102 (19), xxxxx xxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx místě xxx xxxx XX. Xxxxx xx doporučená xxxxxxxxx xxxxx tato:
- X. xxxxxxxxxxx XX1535 a
- X. xxxxxxxxxxx XX1537 xxxx TA97 nebo XX97x x
- X. xxxxxxxxxxx XX98 x
- X. xxxxxxxxxxx TA100 x
- X. coli XX2 xxxX xxxx X. xxxx XX2 xxxX (xXX101) xxxx X. xxxxxxxxxxx TA102.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx křížové xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx XX102 nebo xxxxxx XXX reparačně xxxxxxxxxxxx kmen X. xxxx (xxxx. E. xxxx XX2 nebo X. xxxx XX2 (xXX101)).
Je třeba xxxxxx xxxxxxxxxx postupů xxxxxxxx xxxxxxx kultury, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx. Pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx (xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx X. xxxx). Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x to: xxxxxxxxxx xx nepřítomnost R-faktor xxxxxxxx tam, xxx xx xxxxxxxx v xxxxx (xxxx. rezistence xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx XX98, XX100 x XX97x nebo XX97, WP2 uvrA (xXX101) x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx + xxxxxxxxxxxx u xxxxx XX 102); xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx. xxx xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a uvrA xxxxxx x X. xxxx xxxx xxxX xxxxxx u X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) (2) (3). Xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx revertujících xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx dat xxxx laboratoře x xxxxx xxxxx i x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
1.5.1.2 Médium
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx (xxxx. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X x xxxxxxxx) x xxxxxx xxxx obsahující xxxxxxxx x biotin nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx buněk (1) (2) (9).
1.5.1.3 Metabolická xxxxxxxx
Bakterie xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx za xxxxxxxxxxx, xxx za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx kofaktorem xxxxxxxxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) připravená x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx enzymů xxxxxxx, xxxx xx Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx kombinace xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (18) (20) (21). Post-mitochondriální xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 30 % x/x xx xxxxx X9. Xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx případech xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x několika xxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace (6) (13).
1.5.1.4 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxx látky se xxxx působením xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx připraví xxxxxx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx do xxxxxxxxx systému xxxxxxxx xxxxx nebo se xxxxxxx ředí. Je xxxxx xxxxxxxx čerstvé xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stabilitě prokazují, xx jejich xxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.5.2.1 Xxxxxxx kmeny (xxx 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx, která xx xxxxx vzít x xxxxx při stanovení xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, patří xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x konečné směsi, xxxxx xx k xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxx xxxxxx stanovit xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x předběžném xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx snížením xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx přežití xxxxxxxxx kultur. Za xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxxxxx v konečné xxxxx za xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, viditelného x xxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, jež x těchto xxxxxxxxxxxxx xxxxxx rozpustné, xx xxxxx xxxx několik xxxxxxxxxxx xxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx nerozpustných. Testované xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx než 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx, xx xxxxxxx až xx xxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx.
Používá xx xxxxxxxxx pěti různých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. √10) xxxx xxxxxxxxxxxx body v xxxxxxxx experimentu. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx vhodný xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx vyšších xxx 5 mg/misku xxxx. 5 µl/misku xxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutagenních xxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Každý xxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx specifickou xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx takové koncentrace, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx testu.
X xxxxx x metabolickým xxxxxxxxxx systémem xx xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx kontrolu xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx kmene.
Xxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx, xxxxx tabulka:
Xxxxx | CAS | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 |
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
Látka | XXX | XXXXXX |
Kongo červeň | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-aminoantracen xx xxxxxxxxx jako xxxxxx indikátor xxxxxxxxx xxxxx X9. Pokud xx 2-aminoantracen xxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxx X9 xxxxxxxxxxxxxxx xxxx mutagenem, který xxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxx kmenově xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx bez xxxxxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, uvádí tato xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX | |
Xxxx xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 x XX 100 |
2-xxxxxxxxxxxx | 607-57-8 | 210-138-5 | XX 98 |
9-aminoakridin | 90-45-9 | 201-995-6 | XX 1537, XX 97 a XX 97x |
ICR 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, TA 97 x XX 97x |
xxxxx-xxxxxxxxxxxx | 80-15-9 | 201-254-7 | XX 102 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 | XX xxxX x XX 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, WP2uvrA a XX2xxxX (xXX101) |
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx | 56-57-5 | 200-281-1 | XX2, XX2xxxX x WP2uvrA (xXX101) |
Xxxxxxxxxxxx (XX2) | 3688-53-7 | xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
K xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx i xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx dostupné, xx xxxxx uvážit xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx vehikula xxxxxxxxx, xxx testované xxxxx, xx xxxxxxx xx jinak xxxxxxx xxxxxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx existují xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxx xx mutagenní xxxxxx.
1.5.3 XXXXXX
Xxx xxxxxxxx miskové xxxxxx (1) (2) (3) (4) bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 0,05 nebo 0,1 ml xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx bakteriální kultury (xxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x 0,5 xx xxxxxxxxxx xxxxx a 2,0 xx xxxxxxxx agaru. X xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx aktivací xx xxxxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) s 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx /xxxxxxxxxx roztokem. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx promísí x xxxxxx xx povrch xxxxx x minimálním xxxxxx. Xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Při xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx preinkubovat x xxxxxxxx kmenem (xxxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x sterilním xxxxxx nebo metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,5 xx) xxxxxxx po xxxx 20 min xxxx déle při 30 - 37 xX; xxxxx xx xxxxx s xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx roztoku 0,1 xx bakterií a 0,5 xx xxxxx X9 xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx vrchního xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx třepáním.
Xxx xxxxxxxxx odhad xxxxxxx se xxx xxxxxx xxxxx očkují xxx xxxxx. Duplicitní xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx náhodně xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx test xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx nebo xxxxxx látky xx xxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx, například x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (12) (14) (15) (16).
1.5.4 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx teplotě 37 oC pod xxxx 48 - 72 xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx misku. Xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x xxxxxxxxx kontroly (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxx), xxx x xxxxxxxx pozitivní. Xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxx působení xxxxxxxxxxxx) xx xxxxxx počty xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxx kolonií na xxxxx xxxxx včetně xxxxxxxxxx odchylky.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nepožaduje. Nejednoznačné xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx testováním, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx. X následných xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx zvážit xxxxxxxxxx studijních xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx posuzovaných xxxxxxxx. Xx studijním xxxxxxxxxx, které se xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx mezi koncentracemi, xxxxxx xxxxxxxx ("xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx prostředí) x podmínky metabolické xxxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx xxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx závislý xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx a/nebo reprodukovatelný xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx xxx jedné xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x minimálně xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxx xxx (23). Xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jako xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (24), xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria xxxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo problematické, x xxxx xx xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx ukazují, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx substitucí xxxx xxxx posuzovaných xxxxxx x xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx coli. Negativní xxxxxxxx ukazují, že xx daných xxxxxxxxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx rozpouštědle, pokud xx známa.
Kmeny:
- použité xxxxx,
- xxxxx buněk x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx kmene.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- množství xxxxxxxxx látky na xxxxx xxxxx (x xx nebo μx) xx xxxxxxxxxxx volby xxxxx x xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx,
-xxx x xxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxxxx (zpracování).
Výsledky:
- známky toxicity,
- známky xxxxxxx,
- počty xx xxxxxxxxxxxx miskách,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- vztah xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- údaje ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- údaje x xxxxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.15. XXXXXX XXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip metody
Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mohou xxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx indukovaných chemickými xxxxxxx bez a x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx z červených, xxxxxx vyžadující xxxxxx (xxx-1, ade-2) xx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx systémy, jako xx indukce xxxxxxxxxx xx canavaninu x xxxxxxxxxxxxx.
Nejlépe ověřený xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx využití haploidního xxxxx XX 185-14 X s xxxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxx mutacemi xxx 2-1, arg 4-17, xxx 1-1 x trp 5-48. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx mutagenů typu xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxx místě, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. XX185-14X xxxx xxxxxx xxx 1-7 xxxxxx, xxxxxxxx mutaci, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx a xxxxxx xxx 3-10, xxxxx xx revertován xxxxxxxxxx mutageny.
U xxxxxxxxxxx kmenů X. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X7, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxx 1-92.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx vodě xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 objemová % x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, jako xx xxxxxx, aceton xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vehikula nemá xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxx exponovány xxxxxxxxxx xxxxxx jak x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému.
Xxxxxxxxxx užívaným xxxxxxxx xx postmitochondriální xxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx xx aplikaci xxxxx indukujících enzymy x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakcí xx xxxxxxx může xxx rovněž xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx aktivaci.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxx XX 158-14X x xxxxxxxxx xxxx X7 xxxx nejužívanější xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx mohou xxx rovněž vhodné.
1.2.2.2 Xxxxx
Odpovídající kultivační xxxxx xxxx xxxxxxx xxx určení xxxxx xxxxxxxxxxxxx x mutovaných xxxxx.
1.2.2.3 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxx specifickou xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Má xxx xxxxxxx nejméně 5 xxxxxx zvolených xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx redukovat xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Látky xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx xx xxx rozpustnosti xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx látky xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx případ xx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xx xxxx xxx při 28 xx 30 xX xx xxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxx x xxxxxxx akceptovaných xxxxxxxxxx hodnot.
1.2.2.7 Počet xxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxx buňkami x u xxxxxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx markery jako xxx 3-10 x xxxxxx mutační xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx zvýšen, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx kmenů X. xxxxxxxxxx je xxxxxxx prováděno xx xxxxxxxx x tekutém xxxxxxxxx a zahrnuje xxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx. Základní xxxxxx mají být xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxx: 1-5 x 107 buněk/ml je xxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxx až 18 x. při 28 xx 30 xX za třepání. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx přežívající buňky x xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx mutací.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x buňkami xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx první xxxxx pozitivní, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx experimentem.
2. XXXXX
Xxxxx mají xxx xxxxxxxxxxxx v tabulkové xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx vyhodnoceny vhodnými xxxxxxxxxxxxx metodami.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx testu: xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx médií, xxxxxxx x trvání inkubace, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx vlastního xxxxxxxxxxx: hladina expozice, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx při xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, přežívajících xxxxx x frekvenci mutací, xxxxxx xxxxx x xxxxxx, pokud xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx výsledků.
X.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxx rekombinace x Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx (xxxxxxxx mezi xxxxx x jeho xxxxxxxxxxx) a xxxxxx xxxx. Xxxxx případ xx nazýván mitotické xxxxxxxxxx x vytváří xxxxxxxxxx xxxxxxxx, kdežto xxxxx případ xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx nazýván genová xxxxxxxx. Překřížení je xxxxxx testováno xx xxxxxxx tvorby xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xx testována xx základě xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x auxotrofního xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx defektní xxxxx xxxxx genu. Xxxxxxxxxx užívané xxxxx xxx detekci mitotické xxxxxx xxxxxxxx xxxx X4 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 2 x xxx 5), D7 (xxxxxxxxxxxxxx x trp 5), XX34 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4) x XX1 (heteroalelický x xxx 4 x xxx 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx produkující xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx může být xxxxxxxxx u X5 xxxx X7 (xxxxx xxxxxx xxxx mitotickou xxxxxxx konversi x xxxxxxxx mutace x xxx 1-92). Xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx komplementární xxxxx xxx 2.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx mají být xxxxxxxxxx těsně před xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx látek xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx užít roztok xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx rozpouštědlech, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vehikula xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx působení xxxxxxxxxxx xxxxx jak x xxxxxxxxxxx, tak x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xxxxxxxxxx užívaným systémem xx postmitochondriální xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx po aplikaci xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx druhů, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx postupů xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx aktivaci.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Testovací xxxxx
Xxxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxx X4, X5, X7 a XX1. Xxxxx jiných xxxxx xxxx xxx xxxxxx vhodné.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx média xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mutační xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx být xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx x rozpustnost. Nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxx mít xxxx xx životnost xxxxx. X toxických xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx pod 5 - 10 %. Xxxxx ve vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xx xx mez rozpustnosti xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx určena xxxxxx xx případu.
Xxxxx mohou xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xxxxx po xxxx xx 18 x. Xxxxxxx dlouhodobě ovlivňované xxxx být xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx přítomnost xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx ve xxx xx xxxxx až xxxx dní při 28 - 30 xX. Misky xxxxxxx xxx průkaz xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mitotickým překřížením xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx (cca 4 oC) xx xxxxx 1 - 2 xxx před xxxxxxxxx, xxx xx xxxxx utvořit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx replikací
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx misek xx xxxxx xxxxxxxxxxx x testu xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx konverzí x xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx mitotickým překřížením xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx dosaženo xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.8 Xxxxxx
Xxxxxxxxx S. cerevisiae xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxx test v xxxxxxx prostředí x xxxxxxxx xxx stacionární, xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx pokusy xxxx xxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx buňkách. 1-5 x 107 xxxxx/xx xx vystaveno xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 xX xx xxxxxxx. Odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx přidáno v xxxxxxx ovlivnění, pokud xx to xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x vyočkovány xx vhodné xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx inkubaci xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Jestliže je xxxxx xxxxx negativní, xx být xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx ve xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx prezentovány x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx rekombinací, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx mají xxx potvrzeny x xxxxxxxxxx experimentu.
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx statistickými metodami.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- použité xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx ve xxxxxxxxxxx fázi nebo xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, postup a xxxxxx xxxxxxxxx, teplota xxx xxxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx kontroly,
- počet kolonií, xxxxx rekombinant, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xx to xxxxx, xxxxxxxxxxx hodnocení dat,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- vyhodnocení xxxxxxxx.
B.17. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX XXXXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 476, Xx Xxxxx Mammalian Xxxx Xxxx Mutation Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx vitro xx dá xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vyvolaných chemickými xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxx linie patří xxxx lymfomové xxxxx X5178X, xxxxx XXX, XXX-XX52 x X79 xxxxx čínského křečka x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx XX6 (1). X těchto xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx genetický xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x thymidinkináze (XX) x hypoxanthin-guanin xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x v xxxxxxxxxx xanthin-guanin fosforibosyltransferáze (XXXX). Xxxxx xxxxxx x XX, XXXX x XXXX xx xxxxxxxx různá spektra xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XX x XXXX xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx změny (xxxx. xxxxx delece), xxxxx xx na xxxxxx XXXX chromozomů X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
K xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x savčích xxxxxxx xx xxxxx xx xxxx použít xxxxxxx stabilizovaných xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx in xxxxx obecně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxxxxx systém xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx savčí podmínky xx xxxx dokonale. Xx třeba vzniku xxxxxxxx xxxxxxxx, za xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vlastní xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx výsledkům, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx může xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xX, xxxxxxxxxx xx vysoké cytotoxicity (7).
Xxxxx test se xxxxxxx xx screeningu xxxxxxx savčích xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx, xxxxx jsou x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx však xxxxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx tímto testem xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx či xxxxxxxxxxx, xxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx mutace: genová xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx ke xxxxx xxxx ztrátě enzymatické xxxxxxxx kódovaného xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páru xxxx: xxxxx způsobující xxxxxxxxxx jednoho xxxx xxxxxxxx páru xxxx x XXX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx vyvolávající xxxxxxxx xxxxxx): xxxxx, xxx xxxxxxxxx přidání nebo xxxxxx xxxxxxx nebo xxxx párů xxxx x XXX.
Xxxx fenotypické xxxxxxx: xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx nezměněné xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx mutovaných buněk xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx celkový xxxx: xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxx x xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxxx buněk; vypočítává xx jako xxxxxx xxxxxxxxx suspenzního růstu (x porovnání x xxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxx klonovací účinnosti xxxxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx růst: xxxxxxx nárůst xxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxx x porovnání x xxxxxxxxx kontrolou.
Životnost (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxxx xx miskách x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx období xxxxxxx.
Xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx na miskách xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxx se xxxxxxx x porovnánís xxxxxxxx xxxxxxxxx buněčné xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Buňky, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx (TK) x xxxxxxxx mutace XX+/- → XX-/-, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx trifluorthymidinu (XXX). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx TFT xxxxxxx, xxx způsobuje xxxxxxxx xxxxxxxxx metabolismu x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx XXX xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx mutovan xxxxx, xxxxxxx normální xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Podobně xxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx XXXX xxxx XXXX selekčně xxxxxxxxxxx xxxx 6-xxxxxxxxxxx (XX) xxxx 8-xxxxxxxxxx (XX). Xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx selekčním xxxxxxxx analyzována x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx buňkách, je xxxxx vlastnosti testované xxxxx xxxxxxx zvážit. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx každé xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxx x xxxxxxxx x xxx xxxx. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příbuzné xx xxxxxxxxx činidlem, xx třeba potvrdit, xx xx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).
Buňky x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx kultuře xx xx vhodnou xxxx xxxxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x bez xx x xxxxxxxxx xx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx výběrem xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) (cloning xxxxxxxxxx) nebo relativního xxxxxxxxx nárůstu xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x růstovém xxxxx xx dostatečnou dobu, xxxxxxxxxxxxxxxxx pro daný xxxxx a typ xxxxx, xxx xxxxx xxxxx x co xxxxxxxxxxxxxxx fenotypické expresi xxxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx stanoví xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx činidlo xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a x xxxxx bez xxxxxx xxxxxxx, xx stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Xx xxxxxx inkubační xxxx xx xxxxxxx spočítají. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx z xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x selekčním xxxxx x x xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Buňky
Dá se xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxx X5171X, XXX, XXX-XX52, X79 x XX6. X xxxxxxxxx xxxx používaných x xxxxx xxxxx xxxx xxx prokázaná xxxxxxxxx xxxx chemickým xxxxxxxxx, vysoká xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx efficiency) x stabilní xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx nesmějí.
Test xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxx). Xxxxx xxxxx, počet xxxxxx x koncentrace testované xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxxxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxx stadiích testu, xx xxx frekvencí xxxxxxxxxxx xxxxxx. Obecným xxxxxxxx xx, xx xxxxx xxxxx xx xxx minimálně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnoty xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací. Doporučuje xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 106 xxxxx. Xxxx xx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje, kterými xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx média a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, koncentraci XX2, xxxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx xx xxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx. Zvláště xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx růst xxxxx xxxxx expresní periody x schopnost xxx xxxxxxxxxx, xxx nemutovaných xxxxx xxxxxx kolonie.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx kultur, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 xX. Před provedením xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx zbavit dříve xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx buňky xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx i x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxxx je kofaktory xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) xxxxxxxxxx z xxxxx hlodavců, xxxxxxxxx xxxxxxx indukujícími xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Konečná xxxxxxxxxxx mitochondriální frakce x médiu činí xxxxxxx 1 - 10% x/x. Aktivita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xxxx záviset xx xxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X některých případech xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx koncentracích.
Pro účely xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Výběr xxxxxxxxx xxxxx by xxx xxx vědecky xxxxxx (např. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx xx před xxxxxxxxx xx buňky xxxxxxxx xxxx xx připraví xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle a xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx do xxxxxxx xxxxxxxx přímo xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx x jejich xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx testu
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx by xxxxx x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx narušovat přežívání xxxxx x xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx známé xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxxxx xxx, xxx je to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx zvažováno xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx testovaná xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx být xxxxxxx organické xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Voda xx xx odstranit xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Koncentrace
Mezi xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x hlavním xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx buněk, xxxx xx relativní klonovací xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx celkový růst. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Dochází-li x cytotoxicitě, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx pokrývat xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx nebo xxxxxx toxicity. Xx xxxxxxx znamená, xx xx xxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx lišit xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx koncentrace x cytotoxicity, měla xx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx růstu x 10-20 %, xx však méně xxx 10 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx maximální xxxxxxxxx xxxxx měla xxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 xx/xx, 5 μx/xx a 1,01 X.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx koncentrace, při xxxxx se již xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx použitá xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxx rozpustnosti xx finálním xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Může být xxxxxx xxxxxxxxxx rozpustnost xx xxxxxxx x xx xxxxx působení, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, X9, séra xxx. xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxx okem. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx překážku xxx xxxxxxxxx buněk.
1.4.2.3 Kontroly
V rámci xxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx) xxxxxxxx, x to xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx xx. Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivaci k xxxxxxxx mutagenního účinku. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx nitrosomočovina | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
TK (xxxx x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (xxxx x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XXXX | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx koncentrace S-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
benzo[a]pyren | 50-32-8 | 200-028-5 |
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx má například xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (CAS 59-14-3, xxxxx XXXXXX 200-415-9), xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxx, xxx xx xx možné, xx vhodné xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx sklízení xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx které xx používá xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx médiu, xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx ovlivnění, ledaže xxxxxxxx historické údaje xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx účinky.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxx testovanou xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací, xxx xxx ní. Expozice xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xx xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Doba expozice xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx buněčných xxxxx.
Xxx každou koncentraci xx používají kultury xxxxxxxxxx xxxx jenom xxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxx xxxxx kultura, xx xxxxx zvýšit xxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (tj. xxxxxxxxx osm xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Kultury x xxxxxxxxx kontrolou (rozpouštědlem/vehikulem) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx postupy, xxxx xx použití xxxxxxxxxx uzavřených xxxxxxxxxxxx xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, viability x xxxxxxx frekvence
Po xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx promyjí x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti - xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx relativního xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro téměř xxxxxxxxx expresi xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (HPRT x XXXX vyžaduje xxxxxxxxx 6 - 8 dní, XX xxxxxxxxx 2 xxx). Xxxxx xx xxxxxxx x médiu x x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx mutantů a xxxxxxxxx účinnosti. Po xxxxxxxx doby exprese xx xxxxx s xxxxxxxx životnosti (xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xx selekční xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx x xxxxx L5178Y XX+/- xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xx jedné x xxxxxxxxxxxxxxxx kultur (xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxxxx) x xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx velikost xxxxxxx. Xxxxx je xxxxx x tomto xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. Měření xx xxxx provést x xx xxxxxxxx x XX6XX+/-.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx data slouží xxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxx x životnosti, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kultur. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx X5178XX+/- se kolonie xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx a cytogenetické xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx xxxxx TK+/- xx kolonie xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxx) x xxxxxxxx růstu (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx utrpěly xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx zdvojení, x xxxxx tvoří xxxx kolonie. Xxxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxx xxxx od xxxxxx xxxxxx genu po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tvorba malých xxxxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx hrubé xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx rodičovské x vytvářejí velké xxxxxxx.
Xx xxxxx uvádět xxxx přežití (relativní xxxxxxxxx účinnost - xxxxxxxx cloning xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx celkový xxxx. Mutační xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx mutovaných buněk xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx x kultivačních xxxxxxxxxx; xxxxxxx se xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se objasňují xxxxxx testováním, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Negativní výsledky xx musí potvrdit xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxx, je xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx výsledků xx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx modifikaci xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxx v experimentu xxxxxxxxxxx, patří rozdíly xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx metabolické xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx existuje xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se mohou xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jejímž použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria, xx x xxxxx systému xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx souboru dat xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx v savčích xxxxxxx xx vitro xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxxx savčích buněk xxxxxx mutace. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxx xxxxx - xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx mutace.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba uvést xxxx informace:
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx x zdroj xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx metody kultivace xxxxxxx kultury,
- absence xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx např. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx v rozpustnosti, xxxx-xx k xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- koncentrace xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
-xxxx xxxxxxxx xxxxx,
- hustota buněk xxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxx a složení xxxxxxx metabolické xxxxxxxx, xxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx)
- selekční činidla,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx zjišťování xxxxx živých a xxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x typ (xxxxxx xxxxxxxxxx kritérií xxx xxxxxxxxxxx xxxx "xxxxxx" x "xxxxxxx" koloniemi).
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx o xX x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, je-li xxxxxxxxx, minimálně xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- případné možnosti xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx X5178X TK+/-,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a pozitivních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.18. POŠKOZENÍ XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX XXXXXXX XXX - XXXXX XXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxx neplánované xxxxxxx XXX (XXX) xxxxxxxx xxxxx reparační xxxxxxx XXX xx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx DNA xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx indukovaného xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Test je xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (3H-TdR) xx DNA savčích xxxxx, které xxxxxx x S xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx 3X-XxX xx stanoven xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x exponovaných xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx primární xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx v xxxxxxxxxxx, xxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. XXX xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xx xxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx nebo suspendují x xxxxxxxxxxx médiu xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx ředění xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxx nesmí nepříznivě xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx linií (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx).
Xxxxx jsou exponovány xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx a nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx potřeba xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxx xxxx, je-li xx xxxxxxx zdůvodnitelné) pro XXX XXX.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxxxxx i x xxxxxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-DMBA) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Xxxx xxxxxxxxx kontrolu xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx pro xxxxxxxxxxxxxxx, xxx i pro XXX xxx metabolické xxxxxxxx xxx xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Jako xxxxxxxxx kontrolu při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx lze použít X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x koncentracích až xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx vhodných xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx případ xx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxx
Xxx udržování xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx růstové xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, teplota x vlhkost. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx kontrolovány xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a lymfocyty xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v přítomnosti x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Stabilizovaná buněčná xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx setřepáním xxxxx x povrchu xxxxxxxxxx nádoby), inokuluje xx do xxxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxx 37 xX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx, že xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xx vhodném médiu x povrchu xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x médiu obsahujícím 3X-XxX po xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx je médium xxxxxxxxxx, buňky promyty, xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx emulze (xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx stripping xxxx), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x vyhodnocena.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: Xxxxxxx kultury xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu x xxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx 3X-XxX. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx na druhu xxxxxxxxx xxxxx, aktivitě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xx xxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxx 3X-XxX xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx několik xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a 3X-XxX. K xxxxxxxx xxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxxxx replikací DNA xx užívá arginin xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx hydroxyurey xx xxxxxxxxxxxx xxxxx, což xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX.
Xxxxxxxxx XXX xxxxxx LSC: Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx buněk xx X-xxxx, xxx xxxx shora xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce, xxx xxxx popsáno xxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx je XXX xxxxxxxxxxx z xxxxx a stanoven xxxxxxx obsah DNA x určen xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx lymfocyty, xx x xxxxxxxxxxxxxxx kulturách xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxx
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxxx UDS v xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x X-xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxx 50 buněk x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx hodnotí xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Množství xxxxxxxxxxxxxxx 3X-XxX v cytoplazmě xx určí v xxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx LSC
Xxx xxxxxxxxx LSC XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx počet xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x nezávislých experimentech.
2. XXXXX
Xxxxx musí xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
2.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx inkorporace 3X-XxX xx cytoplazmy a xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx inkorporace 3X-XxX xx xxxxxxxxxx a xxxxx xxx x xxxxx je hodnocen xxxxxx xxxxxxx, mediánu x xxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Inkorporace 3X-XxX xx zaznamenává jako xxx/μx XXX. Xxxxxxxx xxxxxxx xxx/μx XXX xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Údaje se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx možné, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx x číslu xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx použitých x xxxxxxxxx xxxxxxx, médiu, xxxxxxx, koncentraci XX2,
- testované xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx schématu,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách,
- xxxxxxxxx autoradiografických xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx do X-xxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxx XXX x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XXX xxx metodě XXX,
- vztahu xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretaci xxxxxxxx.
X.19. SCE - VÝMĚNA SESTERSKÝCH XXXXXXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
SCE xx krátkodobý xxxx xxx xxxxxxx recipročních xxxxx XXX mezi xxxxx sesterskými chromatidami xxxxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx identických sekvencí XXX xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx spojení, xxx xx xxxxx xxxx znalostí o xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx SCE xxxxxxxx diferenční značení xxxxxxxxxxx chromatid. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (BrdU) xx xxxxxxxxxxxxx XXX na xxxx xxxx buněčných xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xx xxxx xxxx replikačních xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx XxxX. Xx xxxxx kultivace xx xxxxx xxxxxxx inhibitorem xxxxxxxx xxxxxxxx (např. xxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxx x x-xxxxxxxx xxxxxx. Xx ukončení xxxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx (lidské xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx (ovariální buňky xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Mycoplasmaty.
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, koncentrace XX2 x vlhkost).
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx významně xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, rychlost xxxxx xxxx xxxxxxxxx XXX.
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx x xxx přítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Připouští xx použití buněčných xxxx s xxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx aktivity xxxx vhodné pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Pro xxxxx xxxxxxxxxxxxxx bod xx xxxxxxx xxxxxxx xxx kultury.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
X každém xxxxxxxxxxx xxxx xxx zařazeny xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x přímým xxxxxxxxxx účinkem a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx použita negativní xxxxxxxx s použitým xxxxxxxxxxxxx.
Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx lze použít:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx
Xx-xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx látka.
1.2.2.3 Koncentrace
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx musí umožnit xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx vodě relativně xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx až xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx za použití xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx netoxické xxxxx xx určuje xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (trypsinací nebo xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xx do xxxxxxxxxxxx nádob xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx při 37 oC. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx než x 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx také xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx běžnými xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 xX.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx. Ve xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx dvě xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx xx xx dva xxxxxxx cykly, xx-xx xx xxxxx. Buňky, xxxxx xxxxxx dostatečnou xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx testovaná xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x XxxX xxx xxxxxxxxxx cykly. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxx současně x xxxxxxxxxx xxxxxx x XxxX po xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx kultury xxxx exponovány xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx jsou x semisynchronizovaných xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx analyzovány x druhém mitotickém xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx kultury s XxxX xx třeba xxxxxxxx x temnu xxxx xx světle xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx fotolýze XXX, ve xxxxx xx inkorporovaný XxxX.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx buněk
Xxxxx xx čtyři xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx kultur xxxxx inhibitor dělicího xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx x barvení
Xxxxxxxxx xx připraví xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx SCE xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxx).
1.2.3.5 Analýza
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx závislý na xxxxxxxxx xxxxxxxxx SCE x xxxxxxxx. Xxxxxxx xx hodnotí xxxxxxx 25 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx každou xxxxxxx. Preparáty musí xxx xxxxxxxxxx před xxxxxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s 46 xxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx linií xxxxx xxxxxxxx, které xx xxxx x ± 2 xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx centromer. Xx třeba xxxxxxxx, xxx se xxxxx xxxxxxxxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxxxxx. Výsledky xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx formou. Xxxxxxxxxxx se xxxxx XXX v každé xxxxxxxx x xxxxx XXX/xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx o:
- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: složení xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx a jeho xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systému, pozitivních x negativních kontrolách,
- počtu kultur xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx preparátů,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxx XXX/xxxxx x XXX/xxxxxxxxx (odděleně xxx xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX,
- xxxxxxxxxx xxxxxx koncentrací,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx vyhodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.20. XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX XXXXXX XX XXXXXXX X XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx (XXXX) na Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx, xxx i malých xxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxx na xxxxxxx mutace xxxxxx xxx screening xxxxxx x přibližbě 800 xxxxxxxx xxxxxxxxxx X. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxx 80 % xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx v X-xxxxxxxxxx xx fenotypicky xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx. Xxxx xx mutace xxxxxxx x hemizygotním stavu, xxx xx její xxxxxxxxxx usuzovat x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx typů samčích xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. XXXX xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx vzhledu x xxxxxxxxxx chromozómů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxx definované xxxxxx xxxxx x xxxxxx linie Xxxxxx-5. Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx vhodné xxxxx popsané xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Testované xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx rozpouštějí xx xxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx nebo suspendují xx vhodném rozpouštědle (xxxx. xxxx xxxxxxx x Xxxxxx-60 nebo 80), xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx vehikulu.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxx má xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx ovlivňuje xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx třeba xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx per xx, xxxxxxxx nebo xxxxxxxx plynům xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x cukerném xxxxxxx. Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx látka se xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx NaCl x xxxxxxxx se xx xxxxxx nebo břišní xxxxxx.
1.2.1.5 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx negativní (x xxxxxxxxxxxxx) x pozitivní xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, není xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.6 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxx xxxxx testované xxxxx. Xxx xxxxxxxxx orientační xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx maximální tolerované xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxx (xx xxxxx 3-5 xxx) jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx kříženi x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx Xxxxxx-5 nebo x jiné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xx xxx xxx, xxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, na xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx X1 xxxxxx xxxxxxxx x tohoto xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (tj. xxxxx xxxxxx/xxxxxxxx) xx svými xxxxxx. V X2 xxxxxxxx xx v xxxxx kultuře xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx samců xxxxxxxx xxxx. Jestliže x xxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x rodičovském X-xxxxxxxxxx (nejsou nalezeni xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), dcery xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx, aby xx zjistilo, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx do xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx hodnocených X-xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxx každého xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx potvrdit x xxxxxxxxxx experimentu.
Údaje xx zhodnotí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx letálních xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xx být xxxxx v xxxxx x xxxxxxxxxx vhodným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx liniích xxxx kmenech Xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxxxxxx F2 kultur, xxxxx X2 xxxxxx xxx potomků, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin,
- xxxxxxxxxx testu: xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x schéma xxxxxx xxxxxx, xxxx dávek, xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx mutací,
- xxxxxxx expozice/účinek, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx údajů,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.21. TEST XXXXXXXXXXXX XXXXXXX XXXXX - XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Savčí xxxxx xxx použít xxx xxxxxxx fenotypických xxxx in xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkami xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx in xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx X3X10X1/2, 3X3, XXX, Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxxx o změny xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx nebo změny x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx agaru. Méně xx používají xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx morfologické xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx testu xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonie (cloning xxxxxxxxxx) xxxx ovlivněním xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxx hodnocení xxxxxxxxxxxx xx vychází ze xxxxxxxxxxx, xx expozice xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, ale xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx k xxxxxxxxxx.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxx
Xxxxxxxx xxxx buněčných linií x primokultur xxxxxxxxxxxx x xxxxx transformace. Xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx fenotypické xxxxx xx expozici xxxxxx karcinogenem a xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x xx je xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx média x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxx pro xxxxxxx test xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx suspendují v xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx buněk. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla x xxxxxxx nesmí xxxxxxxx životnost buněk, xxxxxxxx rychlost xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx a xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivitou, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx látky.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx experimentu xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x použitím xxxxx xxxxx působících x vyžadujících xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx být xxxxxxxx také negativní xxxxxxxx (x rozpouštědlem).
Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontroly:
- xxxxx působící xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-propiolakton,
- xxxxx vyžadující metabolickou xxxxxxxx: 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx, xx možné xxxxxxx xxxxx pozitivní xxxxxxxx xx stejné chemické xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka.
1.2.2.2 Koncentrace
Xxxxxxx xx nejméně xxx dávky. Tyto xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx koncentraci, nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nízkou xxxxxx xxxxxxxxx buněk, x xxxxxxxx koncentraci xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x negativní kontrole. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx až xx hranici jejich xxxxxxxxxxxx za použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxx být exponovány xxxxxxxxxxx dobu závislou xx použitém testovacím xxxxxxx. Ta xxxx xxxxxxxxx x opakovanou xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx (xx. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), jestliže xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx musí být xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Na xxxxx expozice xx x buněk xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx probíhá xxxx za vhodných xxxxxxxx pro transformaci. Xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx transformace. Všechny xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx v nezávislých xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx vyjadřovat xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx úrovně x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx počet xxxxxxxxxxxx xx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Data xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx o:
- použitých xxxxxxx, xxxxxxxx použitých x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx x frekvenci xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx během xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx sledovaného fenotypu, xxxxxxx selektivního xxxxxxx (xx-xx xx xxxxxx), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx vyčíslení xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretaci xxxxxxxx.
B.22. DOMINANTNÍ XXXXXXX XXXX U XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx látce xxxxxxxx, že tato xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx exponovaného xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx, že xxxxxxxxxx xxxxxxx mutace xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Smrt xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x exponované skupině xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx žlutých xxxxxxx xxxx porovnáním xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x exponované x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx dominantní xxxxxxxx xx xxxxxx xxx- x postimplantačních xxxxx. Xxxxxxx celkové dominantní xxxxxxxx je xxxxxxx xx srovnání xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx skupině x xxxxx implantacím xx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (x.x. xxxxxxxxxxxx x/xxxx spermatogonií).
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xx fyziologickém xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx vodě se xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxx rozpouštědlo nesmí xxxxxxxx x testovanou xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxx pouze xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx informací je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx způsob xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx intraperitoneální xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxx i jiné xxxxxxx aplikace.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Pro xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxx, xxxxxxxx dospělá xxxxxxx jsou náhodně xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x pohlaví
Xx třeba použít xxxxxxxxxx xxxxx exponovaných xxxxx x xxxxxxx xx spontánní variabilitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky. Xxxxx se řídí xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx samců, aby xx xxxxxxx 30 - 50 březích xxxxx xx připouštěcí xxxxxxxx.
1.2.2.4 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx do xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x dispozici přijatelné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxx pro pozitivní xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, aby xxxx prokázána xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. MMS, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 xx.xx-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xx vyvolávat xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. X některých xxxxxxxxx xx postačující xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxx xxxx
Netoxické xxxxx xx podávají x jedné dávce 5 x.xx-1 nebo x xxxxx 1 x.xx-1.xxx-1 při xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx křížen x xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, intaktními xxxxxxxxx xx vhodných xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx jednoho xxxxx xxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx či xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxx schématem xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx všechna stadia xxxxxxxxxxx xxxxx sledovaných xx expozici.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve druhé xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x určení xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx vyšetřeny x xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx x xxxxx xxxxx, počtu xxxxxxx xxxxx x počtu xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx páření xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxx xxxxxxx samostatně. Xxxxx samice xxxx xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, o xxxxx podané xxxxx, x xxxxx xxxxxx x mrtvých xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx dominantního xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxx na srovnání xxxxx živých xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxx živých xxxxxxxxxx x kontrolní skupině. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx poměru v xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
V xxxxxxx xxxx xxx xxxxx odlišeny xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxxx x preimplantační xxxxxx. Xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx rozdíl xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx průměrného xxxxx xxxxxxxxxx xx dělohu xx xxxxxxxx s xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx možno, xxxxxxxxx x:
- druhu, xxxxx, xxxx x xxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x exponovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- testované xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx expozice,
- xxxxxx páření,
- xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx,
- doba xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxx dominantních xxxxxxxxx efektů,
- xxxxx dávka/odpověď,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX V XXXXXXX SPERMATOGONIÍCH
1. METODA
Xxxxxx xx replikací OECD XX 483, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Aberration Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx testu xx xx vivo xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, ovšem x xxxxxxxx chromozómového xxxx xxxxxxx xxxxxx. Tato xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx nepoužívá. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x příbuzné xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx se analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, a xxxxx xx předpokládá, že xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách.
X xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx hlodavci. Tímto xxxxxxxxxxxxxx testem in xxxx xx zjišťují xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxxx spermatogonií. Xxxx xxxxxx nepoužívá jiné xxxxxx xxxxx.
Xxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx, xx třeba xxxxxxxxxx xxxxx mitózu xx xxxxxxxx testované xxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx informace x xxxxxxxxxxx spermatogonií xxx získat xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu x xxxxxxxxx, x když xx ovlivněné buňky xxxx xx spermatocyty.
Xxxxx xxxx xx xxxx je xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx aktivní x somatických xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx zárodečných. Xxxxxx xx xxxx význam xxxx xxx hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx in xxxx, farmakokinetiky x xxxxxxxxxxx procesů DNA.
X xxxxxx je xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx ovlivněných xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxx exponovány xxxxxxx xxxxxx kvůli anatomické x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx bariéře.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx toho, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, není xxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Aberace chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx vyjádřená jako xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx obou xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx jako xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: jako xxxx xxx xxxxxxxx porušení xxxxxxxxxx jedné xxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxx, xxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x případech, xxxxxxx (distální) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx dislokovaný (nebo xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx jedna xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómu je xxxxxx x důsledku xxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx menší než xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx haploidního počtu xxxxxxxxxx (n) xxxx xxx diploidní xxxxx xxxx (3n, 4n xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury xxxxxxxxxxx mikroskopickou analýzou xxxxxxxxx dělení xx xxxxxx metafáze, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Zvířata xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Colcemidem®). Xx xxxxxxxxxxx buněk xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xx xxxxxxxx se v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx
Běžně xx xxxxxxxxx samci xxxxxxxx xxxxxx x myší, xxx xxxxx xxxxxx xxxxx jakéhokoliv xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx mladých xxxxxxxx dospělých xxxxxxx. Xxxxxxxxxx rozdíly xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x x každého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx úvodu x xxxxx B.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxxx mladí xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxxxx označí a xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, xxx x xxx jsou klece xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx dávek
Xx-xx testovaná xxxxx x xxxxxx stavu x xx-xx to xxxxx, látka se xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxx přímo xxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxx. xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x stálosti (stabilitě) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí být xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx to xxxxx, xxxx na xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx rozpouštědlo/vehikulum.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx testu xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx zacházet xx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx kontroly by xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Dávky xxx xxxxxxxxx kontrole se xxxx tak, xxx xxxx účinky xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost zakódovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx možné podávat xxxxxxxx způsobem xxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx časovém intervalu. Xxx je xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx | XXX | EINECS |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxx xxxxxxx | 79-06-1 | 201-173-7 |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Negativní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx vehikulem x xxxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx experimentální skupiny xxxx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx nejsou k xxxxxxxxx xxxxxxxxxx historické xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx existují xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo mutagenní xxxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx zvířat
X xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných samců.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jednorázově xxxx xx xxxx dávkách. Xxxxx xx xxxxx x objemnou xxxxx, xxxx xx k xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxx, xx. na xxx xxxxx xx den xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx se vzorky xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx dvakrát. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx může xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, provádí xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx odběr xxxxxx 24 x 48 hodin po xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxx (xx. xxxx xxxxx xxxxxxxx) xx xxxxx vzorků provádí xx 24 xxxxxxxx xxxx po 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xx znám vhodnější xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx účinku (6).
Xxxxx xxxx xxxxx xxx použity xxxx xxxxxx intervaly xxxxxx xxxxxx. Xxxx. xxxxx-xx xx x látku xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, nebo xxxxx x účinky xxxxxxxxxxx xx X-xxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (1).
Zda xx xxxxxx nechat xxxxx xxxxxxx opakovaně, xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx aplikace xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx (1,5násobku xxxxxxxxx cyklu) xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx se to xx účelné.
Před xxxxxxxxx xx zvířatům xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx z xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. U xxxx je xxxxx xxxxxxxx zhruba 3-5 xxxxx, x čínských xxxxxx xxxxxx 4-5 xxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Provádí-li xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx žádné vhodné xxxxx, je třeba xx provádět x xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx stejného živočišného xxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx režimu, xxxx xx použijí v xxxxxx studii (7). Xxx zjištění toxicity xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xx xxx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Ta xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, že při xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx podávání xx účinky xxxx xxxxxxx.
Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx vykazují specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx hormony xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx dávka, xxxxx xxxx x xxxxxxx známkám xxxxxxxx xx spermatogoniích (xxxx. xxxxxx xxxxxx mitóz xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx( tento xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx test
Jestliže xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x jedné xxxxx xxxx ve xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx údajů x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx studie xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx expozice xx xxxx použít x limitním testu xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx žaludeční sondou, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekcí. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx přijatelné x xxxx způsoby xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 g hmotnosti; xxxxx dávky musí xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx vykazují při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx objem xxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x minimalizovala xx xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Okamžitě xx usmrcení xxxxxxx xx z xxxxxxx xxxx z xxxx xxxxxx xxxxxxxx buněčná xxxxxxxx, na xxxxxx xx působí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a fixuje xx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx nakape xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
U xxxxxxx jedince se xxxxxxxxx minimálně 100 xxxxx rozprostřených metafází (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx). Xxxxx počet xx dá xxxxxx, xx-xx počet pozorovaných xxxxxxx xxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx preparáty (xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx k xxxxxxx určitého xxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk a xxxxxx chromozómů, musí xxx x xxxxx xxxx xxxxx počet xxxxxxxxx x hodnocených xxxxxxx xxxxx xxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx z jednotlivých xxxxxx se prezentují x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx vyhodnocuje xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x počet xxxxxxx xx jednu xxxxx. X experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx typy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, uvádějí xx, xxx xxxxxxx xx do celkové xxxxxxxx xxxxxxx nezahrnují.
Xx-xx xxxxxxxxxxx mitóza x xxxxxx, stanoví xx x všech xxxxxxxxx xxxxxx i xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xxx, že xx x každého xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxxxx xx buněk. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxx mitóza, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 1000 xxxxx z xxxxxxx jedince.
2.2 VYHODNOCENÍ X INTERPRETACE XXXXXXXX
Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx používá xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx závislá xxxxxxxxx xxxxx x chromozómovými xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxx jednorázovou xxxxxx a x xxxxxx xxxxxxx intervalem xxxxxx xxxxxx. Nejprve xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (8); xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyjasnit xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx v xxxxx systému xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Ačkoliv xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pozitivní, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx případech získaná xxxx nedovolují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinku xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx nejisté, nebo xxxxxxxxxxxx xxx ohledu xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x zárodečných xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx oberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek testovaná xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxxxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, že testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxx xxx určitou xxxxxxx xxxx (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o průběhu xxxxxx je třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x stabilita testované xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx známa.
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx x xxx xxxxxx,
-xxxxx, chovné xxxxxxxx, xxxxxx apod.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx počátku xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- údaje xx studie pro xxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx velikosti xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované látky,
- xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxx xxxxxx koncentrace xxxxx x potravě/pitné xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx dávku (mg/kg xxxxxxxxx / xxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx podávání testované xxxxx a odběru xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx blokující xxxxxxxx, xxxx koncentrace x xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- kritéria xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- známky xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx k xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxx a xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx počet xxxxxxx x dané xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx x aberacemi xx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, byly-li xxxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,
- případně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.24. SPOT XXXX X MYŠÍ
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Je xx xx xxxx xxxx xx xxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xx, xxxxx kontrolují xxxxxxxxxx srsti. Xxxxxx xxxx heterozygoti xxx xxxx genů xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx ztráty xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xx zaznamenán x xxxxxx frekvence xx srovnávána s xxxxxxxxx x potomků x xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x embryonálních buňkách.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx suspendovány x izotonickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Látky xxxxxxxxxxx xx vodě xxxx xxxxxxxxxx xxxx suspendovány xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxx rozpouštědla nesmí xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx efekt. Používají xx xxxxxxx připravené xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxx X (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxxxxxx, xxxx xxx, xxx p/cch x; brown, x/x; xxxxxx, short xxx, x xx/x xx; xxxxxxx spotting, s/s) xxxx xxxxxxx xxx x xxxxxx XX (xxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xx a bp/pa x bp; leaden xxxxx, ln xx/ /xx fz; xxxxx xx/xx) xxxx s xxxxxx C57 XX (xxxxxxxxx, a/a).
Mohou xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xx budou xxxxxxx nonagouti xxxxxxx. Xxxx. křížení xxxx xxxxxx XXXX (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxx, x/x) x XXX (nonagouti, x/x; brown, x/x; xxxxxx d/d).
1.2.1.2 Xxxxx x xxxxxxx zvířat
Xxxxxxx xx dostatečný xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx byl zajištěn xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx vzorku je xxxxxxx na xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx myší x x xxxxxxxxxxx myší. Xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx pouze x xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx samic xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávkou.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pouze xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xx zvýšení xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx kontrolní hodnoty x xxxx laboratoře xx xxxxxxxxxxx, že xxxx homogenní. Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx laboratoři xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx mutagenním xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxx xxxxx použity, xxxxxxxx x testované xxxxx nebyla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Způsob aplikace
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekce xxxxx xxxx. Xx-xx xx vhodné, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx nejméně xxx xxxxx, x xxxxx xxxxx vyvolává xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.
1.2.2 Popis xxxxxxx
Zvířata jsou xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx xxxxx xxxxxx 8., 9. nebo 10. xxx březosti, xxxxxxx xx 1. xxx březosti xx xxxxxxxx xxx zjištění xxxxxxxxx xxxxx. Tyto xxx odpovídají 7.25, 8.25 x 9.25 xxx po koncepci. Xxxxxxxxx ovlivnění xxxxxx xxx xxxxxxx během xxxxxx xxx.
Xxxxxxx
X xxxxxx je xxxxxxx a zaznamenáván xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x čtvrtým xxxxxx po porodu. Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx:
(x) xxxx xxxxxx x xxxxxxx 5 xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx zánikem buněk (XXXX);
(x) xxxxx xxxxxx xxxx agouti xx xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xx, xx xxxxxxxx x důsledku xxxxxx xxxxxxxxxxxx (MDS);
(x) zbarvené a xxxx xxxxxx náhodně xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx výsledek somatických xxxxxx (XX).
Všechny xxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxx, ale pouze xxxxxxxx, XX, xx xxxxxxxxx relevantní. Xxxxxx x odlišením mezi XXX x XX xx možné vyřešit xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Zaznamenávají xx nápadné, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx data xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x počet xxxxxx xxxxxxxx jednu xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutacemi. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx metodami. Údaje xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx hodnoty xx vrh.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, informace o:
- xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx,
- xxxxx zabřezlých xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x kontrolní xxxxxxx,
- průměrné xxxxxxxxx xxxx v experimentální x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx rozpouštědle,
- xx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- x způsobu podání xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx s XXXX, XXX x RS x xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx dávka/odpověď x XX, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.25. PŘENOSNÉ XXXXXXXXXXX X XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x numerické xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x u xxxxxxxx xxxxxxx ještě xxxxxx X-chromozómu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx a XO-samice xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx výběr X1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Úplná xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx translokací (X-xxxxxxx x c-t xxx). Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, nebo X1 xxxxx či xxxxxxx xxxxxxx F1 xxxxx. Xxxxxx XO xxxx xxxxxxxxxxxxx identifikovány xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx dřeně.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxx nerozpustné, jsou xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx bylo xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Aplikuje xx obvykle xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxxx x xxxx xxxxxx způsoby xxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx provádí na xxxxxx. Nepožaduje xx xxxxx specifický xxxx. Xxxxxxxx velikost xxxx xx měla být xxxxx xxx xxx x měla xx xxx relativně konstantní. Xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx zvířata.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx závisí xx frekvenci spontánních xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyžadovaném pro xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Test xx obvykle xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx X1 xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx x X1 xxxxxxxx je testováno x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxxx xxxxxxxxxxx také xxxxxx X1 xxxxxxxx potomků, xxx xx xxxxxxxx 300 samců a 300 xxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledky xxxxxxxxxxx kontrol x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx laboratoře, xxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx jedna xxxxx, xxxxxxxx nejvyšší xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, ale xxx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxx. Xxx stanovení xxxxxx dávka/odpověď xx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx dávek. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxx x oplodnění
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx. Nejčastěji xx používá jedna xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx možná xxxxxxxx podávání testované xxxxx sedm xxx x xxxxx po 35 dnů.
Xxxxx xxxxxxxxx xx expozici xx řízen xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx zárodečných xxxxx budou xxxxxxxxxxx. Xx konci období xxxxxxxxxxx xxxx samice xxxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxx. Po porodu xx třeba xxxxxxxxxx xxxxx, velikost vrhu x xxxxxxx mláďat. Xx xxxx jsou xxxxx x samičí xxxxxxx xxxxxxxx až xx xxxx xxxxxxxx xx experimentu.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx jedna xx xxxx možných xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx X1 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx možných xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx F1 xxxxxxxx bez předchozího xxxxxx xxxxxx testu xxxxxxxxx.
(x) Test xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x X1 xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxx a/nebo xxxxxxxx xxxxxx dělohy samic. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx stanovena xxx každý xxxx xxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx: X1 xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx samostatně xx klecí se xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx. Klece xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 18. xxxx xx xxxxxxxxx. Velikost vrhu x xxxxxxx X2 xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xxxx jsou xxxxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx X1 xxxxxx, X2 xxxxxxx malých vrhů xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x jakéhokoliv jejich xxxxxxxx xxxxxxx. XX-xxxxxx xxxx určeny xxxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx potomky x 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx vs. xxxxxx. X následném xxxxx jsou xxxxxxxx X1 xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx X2 xxx dosahuje nebo xxxxxxxxx xxxxxx určenou xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx zaznamenány xxxxx x xxxxx xxxx. X1 xxxxxxx, která xxxxxxx xxx klasifikována xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxxx xxx X2 xxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx dělohy, xxxx xxxx xxxxx podrobena xxxxxxxxxxxxx analýze.
Analýzy xxxxxx xxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxx translokací xx xxxxxxxxx xxxxx embryí, xxxxx vysoký počet xxxxxxx implantací xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxxx X1 xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxx xx 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx vaginální xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx 14. - 16. xxx a xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx zárodky.
(x) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Metodou xxx-xxxxxx xxxx připraveny xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx jsou xxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx figur xx xxxxxx diakinézy - metafáze X x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx dvou xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx splňuje xxxxxxxxxx xxxxx, xx testované xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx byl xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, všichni X1 xxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Na každého xxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx vyšetřeno nejméně 25 xxxxx v xxxxxxxxx - xxxxxxxx X. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx se vyžaduje x xxxxx s xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo x X1 xxxxx xxxxxxxxxxx XX. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a/nebo krátkého xxxxxxxxxx v xxxxx x 10 xxxxx xx důkazem xxx xxxxxxxxx xxxxx translokační xxxxxxxxx (x-x typ). Xxxxxxx X-xxxxxxxxxxx translokace xxxxxxxxxxx xxxxx sterilitu xxxxx být xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Přítomnost 39 xxxxxxxxxx xx všech 10 mitózách xx xxxxxxx xxx XX xxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx interval připouštění xx zaznamenána xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu x xxxxx xxxxxxx (sex xxxxx).
Pro xxxxx xxxxxxxxx F1 xxxxxx xx xxxxx průměrná xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx velikosti xxxx X1 xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx průměrný xxxxx xxxxxx a mrtvých xxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx F1 xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx cytogenetické xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X xx xxxxx počet xxxx multivalentních figur x xxxxxxx xxxxx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxx translokací.
Xxx X1 xxxxxxxx jedince xx xxxxxxxxxxx počet x doba připuštění. Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x cytogenetické xxxxxxx.
X XX xxxxx se uvádí xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxx X2 xxxxxxx x výsledky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx F1 translokací, xx xxxxx v xxxxxxxxx uvést informaci x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxx být uvedeny xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx obsahuje, je-li xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxx xxxx, xxxxx a xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxxx podmínkách, xxxxxxxx popis ovlivňování xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a schéma xxxxxxxxxxx,
- počtu x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx x pohlaví potomků xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx x kritériích analýzy xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx translokací xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx dělohy,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x mikroskopické xxxxxxx, xxxxx xxxxx x obrázky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.26. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xx, xxxxxx na xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, a xx xxxxx skupině xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx zvířata denně xxxxxxxx, aby se xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x jakých budou xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx dospělá zvířata xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx, x kapslích xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx zvířatům xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx po xxxxx xxxx xxxxxx stejnou xxxxxxx. Pokud xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx aditiva, musí xxx o xxxx xxxxx, že xxxxxx xxxxxxx účinek. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx proti xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx by xx počátku podávání xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx 6 xxxxx, x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 8 týdnů. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx orální test xxxx předběžný xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Samice musí xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx zvířat, která xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx dobu 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx podávání xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Dávkování
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx úrovně dávek x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx. Používá-li xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx ve stejném xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí nebo xxx malý xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx hodnotu překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx více xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx xxxxxx.
Ve skupině x nízkou a xxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
Xxxxxx-xx xx testovaná xxxxx x potravě, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; použitou xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Aplikuje-li xx xxxxx xxxxxx, mělo xx xx xxx xxx každý xxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tělesné hmotnosti xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxx-xx xx 90xxxxx xxxx níže xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 tělesné hmotnosti xx xxx (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) žádné toxické xxxxxx, xx xxxxx xx dalšího xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx, xxxxxx xxxx objevení, xxxxxx x xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, ve kterém xx xxxxxx a xxxx odezní toxické xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
X xxxxxxxx případě xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x týdnu xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách, která xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx dalších 28 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx zotavení x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx.
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxx potravy (a xxxxxx vody xxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxx vodě) x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx týdně.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolu xxxxxx, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx jako např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, s výjimkou xxxxxxxxxxx xxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx okamžitě vyřadit, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
U všech xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx xxxxx provádějí xxxxxxxxxxx vyšetření:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření oftalmoskopem xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx x na xxxxx studie xxxxxxx x všech xxxxxx, xxx alespoň x xxxxxxxx dávky a x kontrolních skupin. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx konci pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx trombocytů.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním způsobu xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxx doby xxxxxxxxx se xxxx xxxxx živočišného druhu x xxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx pyruvát-transamináza) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx dekarboxyláza, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx a celkové xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx další xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy mohou xxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
(x) Analýza xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxx jen xx xxxxxxxx očekávané xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx přiměřené xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, má xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii xx xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (s xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx se co xxxxxxxx po xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x tkáně xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx na xxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny xxxxx x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx místě xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx, aorta, (xxxxxx xxxxx), játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, slinivka xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, děloha, (přídatné xxxxxxxx xxxxxx), (kůže), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, tlusté a xxxxx střevo, konečník, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx sval), xxxxxxxxx nerv, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx dření, (xxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - krční, xxxxx xxxxxx x bederní, x (xxxxx xxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx lze xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx orgánů a xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx všechna xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx vyšetřit cílové xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(d) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx dávkou xx xxxx histopatologicky xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, protože xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxx a xxxxxx x těchto xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x zvířat xxxxxx skupin xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, musí xx xxxx xxxxxxx xxxx xx orgánech, xx kterých bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x vysokou xxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx skupiny, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx byly xxxxxxxx účinky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do tabulky. X ní xxxx xxx pro každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx zvířat x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat s xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Je k xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx - úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx použije) x koncentrace,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x podle xxxxx,
- úroveň bez xxxxxx, xxxxx xx xxx stanovit,
- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat xx konce sledování,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- hematologická xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- biochemická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx moči),
- pitevní xxxxxx,
- detailní popis xxxxx histopatologických nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.27. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX
(90denní xxxxxxxxx podávání per xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxx xxxxxx po 90 xxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxxxxxxxxxx), x to xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx zvířata xxxxx pozorují, aby xx zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x zvířata, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Testovanou xxxxx xxx podávat x xxxxxxx nebo xxxx xxx vhodnější xxxxxxxx x xxxxxxxx. Mohou xxx použity xxxx xxxx způsoby orální xxxxxxxx. Xxxx zvířatům xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx pro usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx využít.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx druh - xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx: xxxx xx přednost xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx pracovat xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx; v xxxxxxx xxx se xx x xxxxxxxxx začít xx xxxx xx 3 do 6 xxxxxx x xx xxxxxxx xxx 9 xxxxxx. Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx se xx xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx každou úroveň xxxxx použít xxxxxxx 8 zvířat (4 xxxxxx x 4 xxxxx). Počet xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxx takový, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tři xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované látky xx xx zvířaty x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxx dávky má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx. Nejnižší xxxxxx xx neměla vyvolat xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx existují odhady xxxxxxxx u xxxxxxx, xx xxxxxxxx dávka xxxx hodnotu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx xxxxxxx xxx toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx než 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx vyvolaly odstupňované xxxxxxx účinky.
Ve xxxxxxx x xxxxxx x střední xxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx rovněž xxxxxx xxxxxxxx.
Podává-li xx málo xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx ani xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě xxxxxx.
Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx buď xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx-1 potravy) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx; xxxxxxxx alternativu xx xxxxx xxxxx. Podává-li xx látka přímo, xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx by se xxx dít každý xxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxx x týdenních intervalech xxxxxxxxxxxxx změnám xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx předběžný test xxxx dlouhodobým testem, x xxxx xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Provede-li 90xxxxx xxxx níže popsanou xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx den (xxxx xxxxx vyšší - xxxxxxxxxxxx možné expozici xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) xxxxx xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xx dalšího testování xxxxxxx. Podává-li xx xxxx xxxxxxx látka x potravě, je xxxxx zajistit, aby xxx xxxxxxxxxx množství xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebránily xxxxxxxx xxxxxx zvířat.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx podává xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx dobu 90 xxx. Podává-li xx xxxxx xxxxx způsobem xxx x potravě, xxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 5 dní x xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxx xx xx xxxxxxx) xxxxx xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Xxxxxx potravy (x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx) a xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenávají xxxxx.
Xxxxxxx jednou xxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx klinická xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Umírající xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, humánně xxxxxxx x xxxxxx.
U xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Oftalmologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx se má xxxxxxx xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx a xx konci studie xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, ale xxxxxxx x nejvyšší xxxxx x u kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx změny, vyšetří xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo uprostřed x xxxx xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, protrombinový xxx (Xxxxxxx), trombinový xxx xx počet xxxxxxxxxx.
(c) Xx xxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x dále xx konci xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny studie xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, glukózu na xxxxx (přičemž trvání xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx živočišného xxxxx x kmene), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (dříve xxxxxxx transamináza xxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx dekarboxyláza, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, dusík xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx další xxxxxxxxxxxxxxx, které mohou xxx xxxxxxxx pro xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx krve xx xxxxxxxxxx měli xxxxxxxx (xx xxxx xxx 24 xxxxx).
(x) Analýza moče xx nevyžaduje xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx těla, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, štítná xxxxx (s příštítnými xxxxxxx) x xxxxxxx xx co nejdříve xx xxxxx zváží xx vlhkém stavu, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx orgány x tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx možná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, podvěsek xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx brzlíku,(průdušnice), xxxxx, srdce, aorta, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx břišní, xxxxxxx x vaječníky, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), žlučník, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, tenké, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, močový xxxxxx, reprezentativní xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx sval), xxxxxxxxx nerv, (oči), xxxxxx kost x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx kloubních xxxxx) a (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
Xxxxx histopatologické vyšetření xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxx dávkových skupin xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx poškození u xxxxxxx s nejvyšší xxxxxx, xxxx když xx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do tabulky. X ní xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx x procentuálně počet xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx třeba vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, potrava,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx dávek (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a podle xxxxx,
- úroveň xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x přežití xxxxxx do konce xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx, xxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky x xxxxxx další xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx a vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx analýz xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx xx xx možné,
- xxxxxxx výsledků,
- interpretace xxxxxxxx.
X.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX DERMÁLNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 90 dní x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx zjistily xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, xxxxx uhynou během xxxxxx, i zvířata, xxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Před testem xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Krátce xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx pokusných zvířat. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxx možné, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx oholení xx xxxxxxx opakovat xxxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx nanášení xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xx třeba vzít x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx rozhodování x xxxxxxxxx připravované xxxxxx xxxx x x xxxxxxxxx krycího xxxxxx.
Při xxxxxxxx x tuhými látkami, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx upraveny xx xxxxxxxx xxxxx, je xxxxx zkoušenou xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit vodou, xxxxxxxx xxxxxxx vehikulem, xxx byl xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xx možno xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx morčata, případně x jiné xxxxxxx xxxxx, jejich xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx předběžný xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se má xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 20 zvířat (10 xxxxx a 10 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvýšit xxxxxxx xxxxx zvířat o xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxx před xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx každého xxxxxxx) po xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x během xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx podávání xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání nebo xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx použít nejméně xxx hladiny dávek x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx nebo - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx být nejméně 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx mělo xxxxxxxx xxxxx den xx xxxxxxx xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxx stálá xxxxxxx dávky xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx se xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx s pokusnými. Xxxxxxx-xx se vehikulum xxx usnadnění aplikace, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx ve xxxxxxx množství, které xxxxxx xxxxxxx, které xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Nejvyšší hladina xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx vyvolat xxx xxxxxxx účinek xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxxx xxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxx a střední xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx skupině xx xxxxx uhynutí xxx xxx nízký, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Vede-li xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x těžkému xxxxxxxxxx xxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx, což x vysoké dávkové xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx poškození xxxx, xx xxxxxxx za xxxxxxxx okolností nutno xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx znova x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Nevyvolá-li xxx xxxxxxxxx studii xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 nebo xxxxx xxxxx, xxxxx odpovídá xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx další xxxxxxx nutná.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx toxické účinky.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx chovají v xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx x týdnu xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx pro následné xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 28 dnů bez xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxx xxxxxx přetrvávání. Doba xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx nanášet rovnoměrně xx celou xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx asi 10 % xxxxxxx xxxx, x vysoce xxxxxxxxx látek může xxx xxxx plocha xxxxx. Látkou xx xxxxx pokrýt co xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xx nejtenčí vrstvě.
Xxxxxxxxx látka xx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx orálnímu xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxx použít x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Po uplynutí xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx vhodným x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx změny srsti, xxxx, xxx x xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx zaznamenávat xxxxx x xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx zvířat jako xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chybného zařazení. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx či xxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx provést xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x všech zvířat, xxx alespoň x xxxxxxxx dávky x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, vyšetří xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx konci pokusu xx xx provést xxxxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx a testy xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(c) Xx konci xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, glukózu na xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx), alaninamino transferáza (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx biochemické xxxxxxx xxxxx xxx x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx studium xxxxxxx xxxxxxx účinků.
(x) Analýza moči xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, všech tělních xxxxxx, lební, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx se co xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, (xxxxxxxxxx), plíce, xxxxx, xxxxx, (slinné xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxx, přídatné xxxxxxxx xxxxxx, žlučník (xx-xx přítomen), jícen, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, tenké, xxxxxx a slepé xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), periferní xxxx, (xxx), (hrudní xxxx s xxxxxx xxxxx), (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ploch), (xxxxxxx mícha ve xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, střed xxxxxx x xxxxxxx) a (xxxxx xxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx se xxxxxxxx, pokud xx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxx x xxxxxxxxxx kůže, xxxxxx x xxxxx xx xxxxx provést x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx dávka, x x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx orgány x ostatních xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx, plíce xxxxxx xx xxxxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetřovat x zjištění xxxxxxxx xxxxxxx, protože xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Další xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření se x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx provádět xxxxxxx, musí se xxxx xxxxxxx xxxx xx orgánech, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx skupině x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Používá-li se xxxxxxxxx xxxxxxx, musí xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na tkáních x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x jednotlivými xxxx xxxx. Výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k tomu xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx obsahovat tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx,
- xxxxxxxx pokusu,
- úrovně dávek (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- údaje x toxických xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx dávek,
- xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx toxických nebo xxxxxx účinků,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy a xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.29. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX - XXXXXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - studie xx xxxxxxxxxx)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx koncentracích, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x to xx 90 xxx. Xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx skupinu xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují x zjišťují xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, která xxxxxxx xx konce pokusu, xx pitvají.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx x podmínkách xxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx třeba, přidá xx k testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jiná xxxxxxx, musí xxx x xxxx xxxxx, xx nemají toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx xxxxx xxxx. Pracuje xx na xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx test xxxx xxxxxxxxx test xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx úroveň xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 samic x 10 samců). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx koncem xxxxxx. Mimoto je xxxxx exponovat xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx skupinu) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x během xxxxxxxxxxxxx 28 xxx po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx skupiny x xxxxxx úrovní xxxxxxxxxxx x jedna kontrolní xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem - pokud xx xxxxxxx - v xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx). S xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx zvířaty x kontrolní skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxx jen x xxxxx počtu. Pokud xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx střední xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxx x střední koncentrací x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx měl xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx expozice
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx xx xxxxxxxx rovnováhy xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X případě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx možné xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx proudění xxxxxxx x výměnou xxxxxxx 12krát za xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx přiměřený obsah xxxxxxx x rovnoměrné xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx ho xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx nejvíce bránil xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx inhalační expozice xxxxxxxxx látce byla xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx stability xxxxxxxxx x inhalačním boxu xxxxx xx v xxxxxx celkový xxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx možné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové xxxxxxxx; xxxxx dva xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx látky xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x zotavení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x opět xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3. Popis postupu
Xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně, 5 - 7 xxx v týdnu, xx xxxx 90 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx zotavení x otravy xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 xX. Relativní xxxxxxx xx xxx mezi 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. experimenty s xxxxxxxx). Xxxxx expozice xx nepodává xxxxxxx xxx voda.
Používá xx dynamický xxxxxxxxx xxxxxx x vhodnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxxx xx provést xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx nastavit xxx, xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx stejné. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx nejrychleji.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně).
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxx x xxxxxxx xxxx. Během xxxxx xxxxxxxx xx nemá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx hodnoty x xxxx xxx ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísání. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx koncentrace tak xxxxxxxx, xxx xx xx prakticky xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx velikosti částic xxx, xxx xxxx xxxxxxx představa o xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx, xxx xx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx stálosti distribuce xxxxxxxxx částic.
c) Xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx
d) Xxxxx xxxxxxxx x xx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xx zaznamenávají; xxxxx xxxxx xx xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx xx příznaky toxických xxxxxx a zaznamenávat xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx x xxxxx zahrnuje xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx i spotřeba xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolu xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx nedocházelo ke xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx chybného zařazení. Xx xxxxxxxx studie xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx provést xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx nejlépe x xxxxx zvířat, xxx přinejmenším x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx se oční xxxxx, vyšetří se xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření, které xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx čas či xxxxx trombocytů.
(c) Xx konci xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx vhodné stanovit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, glukózu na xxxxx (xxxxxx doby xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx živočišného xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další biochemické xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx potřeby xxxxxxx pro rozšíření xxxxxxx pozorovaných xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx nejsou xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx začátkem xxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx prohlídku xxxxxxx xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, lební, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx tělísky) a xxxxxxx se xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx ve xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx (xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, zvážit x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxx, mozek - x xxxxxx medula/pons, xxxx mozku x xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, srdce, xxxxx, xxxxxx žlázy, xxxxx, xxxxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx břišní, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx orgány), (xxxx), xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, žaludek, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, tlusté a xxxxx střevo, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzliny, (xxxxxx xxxxxx žláza), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), hrudní kost x kostní dření, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ploch), (xxxxxxx xxxxx ve třech xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx). Tkáně x xxxxxxxxx se xxxxxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxxxx xxxxx příznaků xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
(x) Úplné histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x tkání xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx exponována xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx vyšetřit xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx léze.
(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx dávkových xxxxxxxxx.
(x) Plíce xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetřovat, xxxxxxx xx xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x zvířat xxxxxx skupin nemusí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx však xxxxxxx xxxx xx orgánech, xx kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx satelitní xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se sestaví xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Je x tomu xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu pokusu xx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, systému xxxxxxxx částic a xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Popsat xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrací x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx x xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxxxxxx xxxx xxxxx:
x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením,
x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
x) povaha xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxx,
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně,
x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxxx),
- xxxxx o xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx x podle xxxxxxxxxxx,
- úroveň xxx účinku, pokud xx možné ji xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx sledování,
- xxxxx toxických xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- hematologická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- biochemická vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.30. XXXXXXXXX XXXXXXXXX TOXICITY
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Během x po expozici xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx pozorována xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx xxxx chována xxx standardních podmínkách xxxxx 5 xxx xxxx započetím xxxxx. Xxxx xxxxxx jsou xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxx). Je třeba xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx laboratorních xxxxxx. Xxxxxxxx by xxxx xxx započata xx nejdříve po xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx ve xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx studii xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity, xx xxxxx použít stejný xxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou úroveň xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx 40 xxxxxx (20 samic x 20 xxxxx), xxxxxx i pro xxxxxxxxx skupinu. Xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx a xxxxxx xx xxx březí. Xxxxx xx záměrem xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testu, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx menší xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxx xxx 4 xx xxxxxxx xxxxxxx xx skupině.
1.2.2.3 Dávky x frekvence xxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxx xxx xxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx úmrtnosti. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx toxicity. Střední xxxxx xx měly xxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx dávek xx xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Obvykle xxxx xxxxxxx exponována xxxxx. X případě, xx testovaná xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx vodě xxxx x xxxxxxx, xx xxxxx zajistit, xxx x xx xxxx xxxxxxx stálý přístup.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná kontrolní xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx ohledu x exponované xxxxxxx, xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx nebo použije-li xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxx aplikace
Xxx xxxxxx xxxxxxx aplikace xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx člověka.
Xxxxxxx xxxxxxxx aplikace vyvolává xxxxxx technické xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x znalosti xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, odvozené x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx
Xxx, xxx xx testovaná látka xxxxxxxxx x gastrointestinálního xxxxxx x xx-xx xxxxxx jedna x xxxx, jimiž může xxx exponován člověk, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x týdnu xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx vyvolat "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx v období xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx hodnocení. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx, dávkování xxxxxxx xxxxx je považováno xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Protože xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx než xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, jsou xxx uvedeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x této cestě podání. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx xx xxx xxx x xxxxx (přerušovaná expozice), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx expozici v xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin xxxxx xx xxxx xxx x xxxxx (kontinuální xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx zvířat xxxxx xx stejnou xxxx xxx, xxxxxxxx i xxx čištění xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx exponována fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, xx v xxxxx má zvíře 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx denní xxxxxxxx x ještě delším xxxxxxx xxxxx víkendu.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx cílech xxxxxx x na xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx má xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx třeba xxxx x xxxxx určité xxxxxxxxx obtíže. Například, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx expozice x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) generace aerosolu xxxx xxxxxx koncentrace xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Expoziční xxxxxx
Xxxxxxx xx exponují x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx konstrukce xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx komory xx xxxx mít xxxxxxxxxx konstrukci, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx udržuje xxxxx xxxxxxx a xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Komory xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx zvířat xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.
Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(a) průtok xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx než 15 % xxxxxxx xxxxxxx;
(x) teplota x xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx by xxxx xxx udržována x xxxxxxx 22 ± 2 oC x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx. Oba xxxxxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;
(x) xxxxxx velikosti xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx pevných xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx xx měly xxx x xxxxxxxxxxxx velikosti xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx vzduchu xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xx xxxxx exponováno, a xxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému suspendovanému xxxxxxxx, i xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx během vývoje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxxxx aerosolu, x xxxx během xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx exponována.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx měla trvat xxxxxxx 12 xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxx klinické xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxx. Dodatečná xxxxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx zákroky k xxxxxxxxxxxx xxxxxx zvířat xx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxx uložení xx xxxxxxx x xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx mrtvá x xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx spolehlivě xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x také za xxxxxx xxxxxxxxxxxx ztrát x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx kanibalismu.
Xxxxxxxxxx se klinické xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxxxxx x očních změn x xxxxx zvířat, x dále xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx.
Xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx individuálně x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx během xxxxxxx 13 týdnů xxxxxx xxxxx x aspoň xxxxxx za xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Je třeba xxxxxxxx měření spotřeby xxxxxxx (x xxxx xxx, kde xx xxxxxxxxx xxxxx podávána x pitné xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx přibližně xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, ledaže xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost xxxx frekvence xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, hematokrit, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx ukazatele xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, šest xxxxxx x xxxx x přibližně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx xx vzorcích xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxx být xxxxxxx xxxxxx před xxxxxx od nehlodavců.
Xxxxx xxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, měl xx xxx stanoven xxxxxxxxxxxxx obraz bílých xxxxxxx.
Diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx vzorcích xx xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx tato xxxx nebo údaje x xxxxxxxxx patologických xxxx naznačí nutnost, xxxxxxx se x x xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx možno xx xxxxxxxx xxxxxx a xx stejných xxxxxxxxxxx xxxx hematologické xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxx na xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx dávek x xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- proteiny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx (xxxx- xxxxxxxxxxxxx).
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech x xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx nehlodavců x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, pokud xxxxx pro tytéž xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx nehlodavců xx vedle xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. X těchto xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkoušky:
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- koncentrace xxxxxxxx,
- testy xx xxxxxx jater (xxxx. xxxxxxxx bázické xxxxxxxxx, aktivita xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), gamma xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, např. xxxxx močoviny v xxxx.
1) nyní xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx známá jako xxxxxx xxxxxxxx aminotransferáza
1.2.3.5 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx provede x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx byla xxxxxxxx x moribundním xxxxx. Xxxx utracením xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx mohly xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx změn x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Všechny xxxxxx a tkáně xx xxxx xxx xxxxxxxx pro histopatologické xxxxxxxxx. To se xxxxxxx xxxx následujících xxxxxx x xxxxx:xxxxx3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, mozečkové xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx mozkového, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, thymu, xxxxxxx x plic, srdce, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, tračníku, xxxxxxxxx, močového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), xxxxxx s xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx včetně xxxxxx, a xxx. Xxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx cestou xx konzervaci xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxx. Xx speciálních xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx respirační xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx vyšetření, informace xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xx měly xxx x dispozici xxxx xxxxxxxxxxxxxx vyšetřením, xxxxxxx mohou dát xxxxxxxxxx významné xxxxxxx.
3) xxxx orgány x 10 xxxxxx xx xxxxxxx x xx xxxxxxx x xxxxxxxx x ze xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxx xxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxx
1.2.3.6 Histopatologie
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx tumory x xxxx léze xxxxxxxxxxx xx x kterémkoli xxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxxxxx následující xxxxxxx:
(x) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx popisem xxxxx lézí xxxxxxxxxx:
1. x xxxxx xxxxxx, která xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
2. x všech xxxxxx xx skupiny x xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx xxxxxxx,
(b) xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx způsobené xxxx pravděpodobně způsobené xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx,
(x) tam, xxx xxxxxxxx svědčí xxx významné zkrácení xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx, které by xxxxx ovlivnit toxickou xxxxxxx, skupina x xxxxxxxx xxxxx dávkou xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) informace x xxxxxxxxx xxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx x použitém xxxxx zvířat, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx. xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx pozorovaných x xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxx tabulek, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx. Výsledky xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx jakékoliv uznávané xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířat v xxxxxxxxxx xxxx, pokud xx používá. Dále xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, stability xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Xxxxx x expozici: xx xxxxx tabulky včetně xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (např. standardní xxxxxxxx) a xxxx xx xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx látky vstupující xx inhalační aparatury xxxxxx objemem xxxxxxx)
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx
(x) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx zóně
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xx-xx to xxxxxxxxxx)
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxx) x xxxxxxxxxxx
- xxxxx x xxxxxxx odpovědi xxxxx xxxxxxx x dávky
- neúčinná (dávková) xxxxxx
- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xx xxxxx
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx
- xxxx, xxx xxx pozorován xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx
- data x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx hmotnosti
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- použité xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx moči)
- xxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx xxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.31. STUDIE XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X NEHLODAVCI
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx koncentracích xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx v xxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx dochází k xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx datem xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx xx použita x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx embryo- x xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxx, dospělé xxxxxx, xxxxx xxxxx nebyly xxxxx, stejného xxxx x velikosti xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx laboratorních xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx započetím xxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxxxxx samci s xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx samicím xxxxx. Xxxxxxxx začíná xxxxx po implantaci x pokračuje během xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx termínem xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x podrobeny sledování xxxxxxxxxx skeletu x xxxxxxxxx orgánů včetně xxxxxxxxx možnosti xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x krvácení xx xxxxxx.
1.2.2 Testovací podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx, myš, křeček x xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx potkan x xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kmeny. Používaný xxxx by xxxxx xxx nízkou xxxxxxxx x xxxx xx xxx x něj xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx 20 xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxx xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Xx sledování xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxx x xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx a jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx x skupinu, xxxxx bylo xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx také xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) xx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx se zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx x výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx fyzikálně chemické xxxx biologické xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxx testované xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx mírné snížení xxxx, xxx už xx xxxx xxx 10 % xxxxx. Xxxxx xxxxxx dávek xx xxxxxx vyvolat xxxxxxxxx xxxxxx. Střední xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx tak, xxx xxxx geometricky xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x vysokou dávkou.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx, že xxxxx x nízkou xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Nultým xxxx xxxxx je xxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x/xxxx spermie (xxxxx xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xx xxxx zahrnovat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx toto období xx možno xxxxxxxxx 6. xx 15. xxx x xxxxxxx x xxxx, 6. xx 14. xxx x xxxxxx x 6. až 18. xxx u xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx za xxxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xxxxx inseminace, xx xxxxx připočítat x xxxxxxxxxx údajům xxxxx xxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx jeden xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Další sledování x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx stejnou xxxx.
Testovaným xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx období testu. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx na xxxx xxxxx na počátku xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx během xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx vážena x xxxxx upravována xxxxx xxxxxxxxxx vážení. Xxxxxxx xxxxxx toxicity xx xxxxx ihned xxxxxxxxxx xxxxxx doby xxxxxxx, stupně x xxxxxx. Xxxxxx vykazující xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx i xx ukončení xxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx účelem je xxxxxxxxxx xxxxxxx období xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xx komplikacím při xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, očí x sliznic, dále xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, somatomotorické aktivity x xxxxxxx. Každý xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířata.
1.2.3.1 Xxxxx
Xxxxx xxxxx x uhynutí xxxxx xxxx xx konci xxxxxx, je xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na morfologické xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx mohly xxx xxxx na xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xx xxxxx odstranit xxxxxx x její xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxx embryí x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx určit dobu xxxxx xxxxxxx x xxxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx stanovit počet xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zárodků x xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx je xxxxx jednotlivě xxxxx xxxxxxxx každý xxxxxxx. X xxxxxxx, myší x xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxx xxxxx třetiny xx xxxxxxxx xxxx a x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vyšetřit abnormity xxxxxxx tkání. U xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pitvou z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x skeletu.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx třeba xxxxxxx xx formě xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou skupinu xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxx zabřezla, xxxxx a procento xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxx. Výsledky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZPRÁVA
3.1. Zpráva x xxxxx
Zpráva x xxxxx xx xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxxx,
- podmínky xxxxx,
- dávky (xxxxxx vehikula, pokud xxxx xxxxxxx) a xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx každou xxxxx,
- dávka xxx xxxxxx (xxxxx xx xxxx možno xxxxxxxx),
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx konce xxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx březosti x xxxxx o xxxx (včetně xxxxxxxxxxxx xxxxx),
- údaje x xxxxxxxxx (živé/mrtvé, xxxxxxx, xxxxxxx skeletu x xxxxxxx xxxxx),
- údaje x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx/xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.32. XXXX XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx cestou, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx dávka xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx denně xxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxx projevů toxicity, xxxxxxx xxxxxx tumorů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx chovají v xxxxxxxxx podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx mladá xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolních x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx. Xx xxxxxxx předchozích xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (hlodavce x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx zvířata x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx po odstavení xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx subchronické xxxxxx toxicity, xx xxxxx použít xxxxxx xxxx x xxxx x xxxx studiích.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx se xxxxx nejméně 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 samců) xxx xxxxxx úroveň xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx a negravidní. Xx-xx plánováno xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx zvýšit x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx takto xxxxxxxx před xxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Dávkové xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xx při xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx mírný xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxx jinými účinky xxx tumory.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x délkou života xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx toxicity. Xxxxxx xx xxxxxx xxx nižší než 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx xxxxx stanovit xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx úrovní xx xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x studie xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx provádí xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx k xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx identická x každém xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx studie s xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx negativní kontrolní xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx vehikulu.
1.2.5 Xxxxxx aplikace
Xxx xxxxxx cesty xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx podání xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx charakteristikách xxxxxxxxx xxxxx a pravděpodobném xxxxxxx expozice x xxxxxxx.
1.2.5.1 Orální studie
Xxx, kde se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x gastrointestinálního xxxxxx x je-li xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx, dává xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxx nějaké xxxxxx. Xxxxxxx mohou xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx vodě xxxx podanou x xxxxxxx.
Ideálně by xx xxxx látka xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx může xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x období bez xxxxxxxx, x tudíž xxxxxxxx výsledky x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Nicméně, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx praktické xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Dermální studie
Xxxxxxxx přímo xx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx vstupu x xxxxxxx a xxxx modelový xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Protože xxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxxxx komplikovanější xxx xxxx způsoby xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace může xxx xxxxxxx alternativou xx specifických xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hodin denně xx pět xxx x týdnu (přerušovaná xxxxxxxx), nebo x xxxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxx x prostředí, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx v xxxxx (kontinuální xxxxxxxx), x přibližně xxxxxx xxxxxxx xxx krmení xxxxxx denně ve xxxxxxx dobu dne, xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx boxu. X obou xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx xxxxxx mezi přerušovanou x stálou expozicí xx x tom, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx delším xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx kontinuální xxxxxxxx závisí xx xxxxxx studia x xx lidské xxxxxxxx, xxxxx má být xxxxxxxxxx. Nicméně, xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice pro xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx pití x xxxxxx během xxxxxxxx a potřebou xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx aerosolu nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx komory
Xxxxxxx xx exponují v xxxxxxxxxxx komorách, jejichž xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx identickou xxxxxxxxxx, tak xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx okolního xxxxxxxxx. Komory by xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(a) Xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx měla být xxxxxxx kontrolována xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxx: během xxxxx expozice xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísat xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx hodnoty.
(x) Xxxxxxx x xxxxxxx: xxx hlodavce, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °X x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx xx měly xxx kontrolovány xxxxxxxx.
(x) Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx u xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být x respirabilní xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Vzorky xxxxxxxxx xxxxx xx odebírají x dýchací xxxx xxxxxx. Vzorek vzduchu xx měl xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx suspendovanému xxxxxxxx, x když xxxxxx část xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx částic xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx během xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Trvání xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx větší xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx zvířete xxxxxxxxx xxx xxxx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx v 18 xxxxxxxx u myší x xxxxxx x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx. x xxxxxx spontánním výskytem xxxxxx xxxx ukončení xx měla být 24 xxxxxx xxx xxxx a xxxxxx x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx přijatelné, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx klesne xx 25 %. Při xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx rozdíl odpovědi, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx uhyne xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx x ukončení xxxxxx xxxxx, pokud xxxxxxx xxxxxxx nevykazují xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx problémy. Xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxx výsledek xxxxx, xxxxx být xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, kanibalismem xxxx x xxxxxxxx chyb xxxxxxx) v žádné xxxxxxx xxxxx xxx 10 % a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % v 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x x 24 měsících x xxxxxxx.
1.3 Popis xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx a srsti, xxx x xxxxxxx, xxxxx x dýchacího, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx nervového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx chyb v xxxxxxx. Moribundní xxxxxxx xxxx utracena x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx by xxxx být xxxxxxxxxxx x xxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx objevení, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, vzhled x xxxxxxxx každého xxxxxxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenává.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potravy (x xxxx xxx, xxx xx testovaná xxxxx podávána v xxxxx vodě) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x pak xxxxxxxxx xx tříměsíčních xxxxxxxxxxx, ledaže xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx váhy xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx sledování.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u všech xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx xxxxxx testu x xxxxx jednou xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx vyšetření
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxx pozorování xxxxxx x klecích xxxxxx x zhoršeném xxxxxxxxxx stavu xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx diferenciální xxxxx xxxxxx krvinek.
Xx 12 měsíců, xx 18 xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx ze xxxxx xxxxxx. Diferenciál xxxxxx krvinek xx xxxxxxx ve vzorcích xx zvířat xx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx x x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx, zvláště xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, diferenciál xx xxxxxxx i x xxxxxxx x xxxxxx nejblíže nižší, xxx je xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Pitva
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx provedena u xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx utracena, protože xx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxx tumory xxxx xxxx, xxxx xxxx, xxxxx by xxxxx xxx tumory, xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx a tkáně xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx pro možné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx (včetně xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xxxxx, xxxxxxx x xxxxx, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx, akcesorní xxxxxxxx xxxxxx, xxxx, xxxxx, žaludek, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, slepé xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, svalovina xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, mícha xx třech xxxxxxxx (xxxxx, střední hrudní x xxxxxxx) x xxx.
Naplnění xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxx uchování xxxxxx xxxxx. Naplnění plic x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx měl být xxxxxxx celý respirační xxxxx včetně nosní xxxxxx, hltanu a xxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
(x) Xxxxx histopatologie xx provede x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx během xxxxx, x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxxxx viditelné okem x xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx jako xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx.
(c) Xx-xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx x x dalších skupinách.
(x) Xx-xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx než x xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x skupina x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
(x) Xx-xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx doklad o xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mohly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, xx xxxxx xxxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxx nižší xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx tabulek, ukazujících xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx zjištěné xxxxx xxxxx, xxxx jejich xxxxxxxxx a počet xxxxxx s xxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx použity xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx o xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, dieta,
- podmínky xxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx konstrukce, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx a způsobu xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxx. Dále xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, kde xx xx žádoucí, stability xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (např. směrodatná xxxxxxxx) a xxxx xx zahrnovat:
(x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) teplotu a xxxxxxx xxxxxxx,
(c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx děleno xxxxxxx xxxxxxx),
(d) povahu xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxx koncentrace x dýchací xxxx,
(x) mediány xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx xx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx podle xxxxxxx, dávky a xxxx xxxxxx,
- xxxx úmrtí během xxxxxx xxxx zda xxxxxxx přežila xx xx xxxxx,
- xxxxxx toxických xxxxxx xxxxx pohlaví a xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxx,
- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,
- xxxx x xxxxxxxx potravy x tělesné hmotnosti,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx,
- nálezy xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.33. XXXXXXXXXXX XXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxx
Cílem xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx xx určit xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx druhu xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx tento účel xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx alespoň jednou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinou x xxxxxxxxx satelitní xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx tuto xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx nejvyšší xxxxx použitá xxx xxxxx karcinogenity. Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx zkoumána xxx xx obecnou xxxxxxxx, xxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx.
Testovaná xxxxx xx podává xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx skupinu, xx větší xxxx xxxxxx zvířat. Během x po expozici xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Zvířata se xxxxxxx x pokusných xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx nejméně xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx testem xx xxxxx zdravá xxxxxxx xxxxxxx rozdělí xx kontrolních x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx předchozích xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x další druhy (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx chovaných xxxxx xxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx co nejdříve xx odstavení xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx použít xxxxxx xxxx a xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Počet a xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx použije xxxxxxx 100 zvířat (50 xxxxx x 50 xxxxx) na xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx. Xxxxxx by měly xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx (xxxxxxx) pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxx jsou xxxxxx, xx každá měla xxxxxxxxx 20 xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx skupina xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x frekvence xxxxxxx
Pro test xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx příznaky xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx účinky xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx interferovat s xxxxxxxxx růstem, xxxxxxx x délkou xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx toxicity. Xxxxxx xx neměla xxx xxxxx xxx 10 % vysoké xxxxx. Střední dávku/dávky xx xxxxx stanovit xx xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx dávkových úrovní xx se měly xxxx v xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx toxicity.
Pro xxxxx xxxxxxxxx chronické xxxxxxxx jsou x xxxxx zahrnuty xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Vysoká xxxxx xxx exponovaná xxxxxxxxx xxxxxxx xx měla xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Expozice xx xxxxxxx obvykle denně. Xx-xx látka xxxxxxxx x pitné xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, měla xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná xxxxxxxxx skupina xx xxxxxxxxx x každém xxxxxx x exponovanou xxxxxxxx, vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx látce.
Xx xxxxxxxxxx případech, jako xxxx inhalační xxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx-xx xx pro xxxxxx aplikaci xxxxxxxxxx, xxxxx biologická aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx negativní xxxxxxxxx skupina, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx hlavní xxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx způsobu xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Tam, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx z xxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx člověk, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx proti xxxx xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx dostat xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x pitné xxxx nebo podanou x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx podávat xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x týdnu xxxx vést k xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx vyvolat "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx v xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx ovlivnit výsledky x xxxxxxxx hodnocení. Xxxxxxx, především x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx může xxx zvolena xxxx xxxxxxxx xxxxxx cesty xxxxxx u člověka x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx kožního xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx studie xxxx technicky xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx způsoby xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx informace x xxxx xxxxx xxxxxx. Intratracheální xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v specifických xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxx xxx v xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin denně xx xxxx xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), s přibližně xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx denně xx stejnou xxxx xxx, xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx exponována xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx je v xxx, xx v xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx ústup xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx delším xxxxxxx během xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx expozice xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx obtíže. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx simulaci xxxxxxxx xxxxxxx prostředí xxxxx xxx xxxxxxxx nutností xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx aerosolu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx zaručuje xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx hodinu, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x expoziční xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx udržuje xxxxx xxxxxxx a tím xx xxxxx úniku xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx prostředí. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaných xxxxxx. Xxxxxx by x xxxxx udržení xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx zvířat xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx zahrnuje:
(x) průtok vzduchu: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx kontrolována xxxxxxxxxxx,
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísat xxxx než ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,
(x) teplota x vlhkost: xxx xxxxxxxx, teplota by xxxx být udržována x xxxxxxx 22 ± 2 °X x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, kdy xx xxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx testované látky x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(d) měření xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx x atmosféře xxxxx x tekutých xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Vzorky xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx by měl xxx reprezentativní xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx exponováno, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx částic xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxx xxxxx expozic xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx studie
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro test. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx v 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x 24 měsících x xxxxxxx. Nicméně xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx s delší xxxxx xxxxxx xxxx. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, doba xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 měsíců xxx xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx pro xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx ukončení xxxxxx xxxxxxxxxxx studie xx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx klesne xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx kterém je xxxxxxxx sexuální rozdíl xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx jen xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx toxické projevy, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Aby bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testu, nesmí xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 10 % x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % x 18 měsících x xxxx x xxxxxx x v 24 xxxxxxxx u potkanů.
Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx zvířat xxx xxxxx pohlaví x 10 xxxxxxxxxxx kontrolních xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx testování xxxxxxxxx toxicity xx xxxx xxx v xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. U xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx vztah x xxxxxxxxx látce, xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx pozorování zvířat x xxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx x xxxxx, xxx a xxxxxxx, xxxxx i xxxxxxxxx, oběhového, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx) xx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ze studie xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx xxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxxx zvířata xx měla být xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x očních xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx vývoji tumorů: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, vzhled a xxxxxxxx xxxxxxx viditelného xx hmatného xxxxxx xx zaznamenává.
Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potravy (x xxxx tam, kde xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x pitné xxxx) týdně během xxxxxxx 13 týdnů x xxx xxxxxxxxx xx tříměsíčních xxxxxxxxxxx, xxxxxx by xxxxxxxxx xxxx xxxx změny xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx jiné xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx hmotnosti xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx testu x xxxxx xxxxxx za xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Hematologická xxxxxxxxx (xxxx. obsah xxxxxxxxxxx, hematokrit, celkový xxxxx xxxxxxxxxxx, celkový xxxxx bílých krvinek, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, šest měsíců x poté v xxxxxxxxx šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx 10 potkanů xx xxxxxxx x xxxxx skupiny. Xxx xxx je xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx být xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx obraz bílých xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx provede ve xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx dávkou x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx i u xxxxxxx x dávkou xxxxxxxx nižší, xxx xx vysoká dávka.
1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx sbírají xxx xxxxxxx xxxxx možno xx stejných zvířat x xx stejných xxxxxxxxxxx xxxx hematologické xxxxxxx. Následující stanovení xxxx xxxxxxxxx buď xx vzorcích xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx na xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx podle xxxxx x xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx krvácení (semi-kvantitativně),
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).
1.3.2.3 Biochemické xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx. Xx nehlodavců xx xxxxx xxxx xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx připravena xxxxxx x jsou xxxxxxxxx následující xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- testy xx funkci xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, aktivita xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), gamma xxxxxxxx transpeptidázy, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx. krevní xxxxxxx na xxxxx,
- testy xx xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.
1) nyní xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Kompletní pitva xx provede x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, která zemřela xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek. Xxxxxxx viditelné léze, xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, které xx xxxxx xxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx. Mělo xx xxx provedeno porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx nálezy.
Xxxxxxx xxxxxx x tkáně xx měly xxx xxxxxxxx pro histopatologické xxxxxxxxx. To xx xxxxxxx xxxx následujících xxxxxx x xxxxx: xxxxx3) (xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, kory xxxxxxx), podvěsku xxxxxxxxx, xxxxxx žlázy a xxxxxxxxxxx tělísek, xxxxx, xxxxxxx a xxxx, xxxxx, aorty, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, jejuna, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, konečníku, močového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx uzlin, xxxxxxxx, gonád3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, periferního xxxxx, xxxxx (krční, xxxxxx x bederní), sterna x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx kloubů, a xxx. Xxxxxxxx plic x močového měchýře xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx ke konzervaci xxxxxx xxxxx; naplnění xxxx x inhalačních xxxxxxxx je xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxx. Xx speciálních xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, má xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx trakt xxxxxx xxxx, hltanu x xxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx by xxxx být k xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
3) Xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx na pohlaví x xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx.
1.3.2.5 Histopatologie
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxx orgánech xxxxx xxxxxx satelitní skupiny x xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xx x satelitní xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx dávce xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx cílové xxxxxx xxxxx ostatních xxxxxx x ostatních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx všech xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx testování xxxxxxxxxxxxx:
(x) xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx provede v xxxxxxxx a tkáních xxxxx xxxxxx, která xxxxxxx nebo byla xxxxxxxx xxxxx xxxxx x u xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x nevyšší xxxxxx;
(x) xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx, které xxxx podezřelé jako xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx;
(x) xx-xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx lézí xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx provede x xxxxx xxxxxx xx xxxxx x x xxxxxxx skupinách;
(x) xx-xx xxxxxxx xx skupině s xxxxxxx dávkou xxxxxxxxx xxxxx než x xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx zkoumána x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx;
(x) xx-xx ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků, xxxxx xx mohly ovlivnit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx kompletně vyšetřit xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx tabulek, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx jejich xxxxxxxxx x počet xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx. Výsledky xx hodnotí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx statistické xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx bude pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- podmínky xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx boxu, pokud xx používá. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx je xx žádoucí, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (např. směrodatná xxxxxxxx) xx měly xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx zařízení,
(x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx vstupující xx inhalační xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx použito,
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx,
(f) xxxxxx velikosti xxxxxx (xxx kde xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- data xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxx xxxxxx,
- doba xxxxx xxxxx studie xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx satelitních xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx ,
- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx abnormální xxxxxxx x jeho xxxxx xxxxx,
- xxxx x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx hmotnosti,
- oftalmologické xxxxxx,
- použité hematologické xxxxx x xxxxxxxx,
- testy xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxx xxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků x xxxxxxx použitých xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
B.34. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx samic x xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx růstu x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx úplného spermatogenního xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx u xxxx x 70 dnů x potkanů), aby xxx zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx látku xx dobu xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx cyklů, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx. Zvířata jsou xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx podává xxxxxxxx xxxx xxxxxxx, x xxxx gravidity x xxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx modifikovat.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zdravá mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxx xxxxxx - kontrolní x exponované xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx chována xxxxxxx 5 xxx xxxx zahájením xxxxxx x xxxx podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx látku xxxxxxx v xxxxxxx xxxx v xxxxx xxxx. Jiné xxxxxxx xxxxxx xxxx také xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx aditivum, xxxx xxx o xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx druhu
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Používají xx xxxxxx zvířata, xx xx doby xxxxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx s nízkou xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx charakterizována co xx xxxxx, kmene, xxxxxxx x xxxx x/xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx xxx odstavena xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupina musí xxx dostatečný xxxxx xxxxxx, aby bylo xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx stejným termínem xxxxxx. Cílem xx xxxxxx dostatečný xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxx zajistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x X xxxxxxxx, kojení, xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 xx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x potravu xxxxxxxxx xxxxxxx ad xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx samice xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx tři xxxxxxxxxx xxxxxxx x jedna xxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx pro aplikaci xxxxxxxxx xxxxx vehikulum, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx použitém xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx příjem x využití potravy, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx další xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx výživy.
Xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxx případě - xxxxx to není xxxxxxx jejími xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Střední xxxxx(x) by měla(y) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx by xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx dávka by xxxxxx vyvolávat xxxxx xxxxxxxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxx u rodičů xxx x potomstva.
Xxx podání sondou xxxx v xxxxxxxxx xx xxxxx stanoví xxxxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxx zvířete x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxx. X případě xxxxxxxxx xxxxx dávky xxxxx xxx případně xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. nebo 6. xxx xx začátku xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx látek x xxxxxx toxicitou, xxxxx se xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx na jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx studie xxxxx, xx vysoká xxxxx, xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx účinky xx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Popis postupu
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx samcům rodičovské xxxxxxxx (P) xxxxx xx xxxx xxxx xx devíti týdnů, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx deset xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx pro xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x mohou xxx xxxxxxx pro xxxxxxxx dalších vrhů x xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx generace (X) xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx aspoň dva xxxxx před obdobím xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pak xx xxxx xxx týdny xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxx gravidity xx xx odstavení F1 xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx dávkovacího plánu xxxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxxx studované xxxxx, xxxx. o xxxxxxx xxxxxxxxxxx a/nebo xxxxxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx při připouštění
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx dvěma xxxxxxx).
X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x xxxx samcem xx společné kleci xx otěhotnění xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxx xxxx vaginální xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx jako xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx spermatu.
Xxxxxxx, u kterých xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x cílem xxxxxxx xxxxx neplodnosti xxxx. Xx je xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx k oplodnění x xxxxxxxxxxx jedinci xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx vyšetřením xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx vrhů
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx plodnosti je xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x pečovat x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti xxxx. Xxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx postup: xxxx 1. a 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx se dosáhlo xxxxx 4 xxxxx x 4 samic xx vrh; pokud xx xxxx proveditelné, xx možno xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx počty, xxxx. 5 xxxxx x 3 samice. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx standardizovat.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé xxxxx xx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx za xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx ztíženého xxxx xxxxxxxxxxxxx porodu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Příjem xxxxxxx xx měří xxxxx xxx xxxx, xxx během xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx potravy denně. Xx xxxxxx x x průběhu xxxxxxx xx měří xxxxxx xxxxxxx (x vody, xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx) xx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X xxxxxxx se xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx dospělé xxxxx.
Doba xxxxxxx xx xxxxxx xx xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xx nejdříve xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx mláďata x xxxxxxx utracená xx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx možné defekty. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx a xxxx xxxx xx xxxxx xxxx xx xxxxxx, xx 4. x 7. dnu x xxxxx každý xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Pozorují xx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx a fyzickém xxxxx matek x xxxxxxxxx.
1.3.5 Patologie
1.3.5.1 Xxxxx
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx všechna xxxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx anebo xxxxxxxxxxx změny xx xxxxxxxx pozorností x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx zemřelá xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, děloha, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, prostata, xxxxxxxx x cílové xxxxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx X xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V případě, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, provede xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx x skupiny xxxxxxxxxxx nejvyšší xxxxx x xxxx u xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx.
Xxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxx xxxxxx zvířat, xx xxxxxxx i x X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx postižené. Xxx již xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx mají xxx podrobit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Data xx sumarizují x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx na začátku xxxxxx, počet plodných xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx obecně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx měla xxxxx možno obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx použitých zvířat,
- údaje x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx dávce x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí v xxxxxxx studie xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx ukončení xxxxxx,
- xxxxxxx uvádějící xxxxxxxx xxxxxxx vrhu, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x konečnou xxxxxxxxxxxx hmotnost xxxxxxx,
- xxxxxxx a xxxxx účinky na xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx zvířat X generace,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx, pokud xx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.35. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - DVOUGENERAČNÍ XXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx samic a xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Samci xxxxxxxxxx (X) generace dostávají xxxxxxxxxx xxxxx v xxxx růstu a xxxxxxx x průběhu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx cyklu (xxxxxxxxx 56 xxx x myší x 70 xxx x xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nepříznivý xxxxxx xxxxxxxxx látky xx spermatogenezu.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx po xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx cyklů, aby xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na estrus.
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx zvířatům xxxx pohlaví a xxxxx, x xxxx xxxxxxxxx a xxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxxx xx látka xxxxxxxx zvířatům filiální xxxxxxxx X1 x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, x době xxxxxx a xx xx xxxx xxxxxxxxx X2 generace.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx - kontrolní x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx (P) xxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx xxxx zahájením xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx, x jakých xxxxx během experimentu. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxx vodě. Xxxx xxxxxxx xxxxxx jsou xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx dostávají xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx používá x usnadnění aplikace xxxxxxxxx xxxx jiné xxxxxxxx, musí xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Látka xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx X xxxxxxx, xx té xxxx xxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx být xxxx charakterizována co xx xxxxx, kmene, xxxxxxx x xxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxx pohlaví. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxx zvířat, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx samic x přibližně xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx těhotenství x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx spolehlivé xxxxxxxxx xxxxx látky na xxxxxxxx, průběh gravidity x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx, xxxx a xxxxx xxxxxxxxx generace X1 xx početí xx xxxxxxxxxx, a xxxxx jejich xxxxxxxxx xxxxxxxx F2 až xx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Před xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx porodních xxxx xxxxxxxxxx klecí a xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx vytvoření xxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxxxx
Použijí xx alespoň tři xxxxxxxxxx skupiny x xxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx používá xxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx, pak xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x největším xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x utilizaci xxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, spárované xx xx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, vyvolávat xxxxxxxx x xxxxxx mortalitu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, které xx xx daly xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx u xxxxxx xxx u xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx se dávka xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx hmotnosti zvířete x přizpůsobuje xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx těhotných samic, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.6 Limitní xxxx
V xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, pokud xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx účinkem xx xxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx úrovních. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx jasnou xxxxxxxxx xxxxxxxx, nemá xxxxxxxxxx účinky xx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx postupu
1.3.1 Plán xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx rodičovské xxxxxxxx X začne ve xxxx pěti xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx pětidenní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx myši). Xxxxx xx buď xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx nebo se xxxxxxxxx v aplikaci x jsou použiti xxx xxxxxxxxx produkci xxxxxxx vrhů a xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X začne xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx týdny xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx pokračuje xxx xx xxxx tři xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, x době xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx X1 xxxxxxxxx. Je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxxxx x vlastnostech xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. x xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx ke xxxxx xxxxxxx).
X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, samice xx xxxxxxx s xxxx xxxxxx ve společné xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 týdnů. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Den 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx nálezu xxxxxxxxx zátky nebo xxxxxxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx F1 xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 11 xxxxx u xxxx x 13 xxxxx x potkanů. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X1 se náhodně xxxxxxx páry x xxxxxxx xxxx téže xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx odstavu.
Dvojice, x kterých xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx s xxxxx zjistit xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xx xx xxxxx buď xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx jedinci xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukčních xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx vrhů
Zvířatům xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx normálně x pečovat o xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: mezi 1. x 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx dosáhlo xxxxx 4 samců x 4 samic xx xxx; pokud xx xxxx xxxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 xxxxx a 3 samice. Xxxx xxxxx než 8 xxxxx standardizovat. Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx F2 xx xxxxxxx obdobně.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Významné xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx xxx xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Během xxxxxxxxx xx vhodné kontrolovat xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx porodu a x xxxxxxx laktace xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx stejný xxx, kdy je xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X a F1 xxxxxxx xx váží xxxxx xxx xxxxxxxx x pak xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx dospělé xxxxx.
Xxxx gestace xx xxxxxx od dne 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx se xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x stanoví xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x přítomnost xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx se uchovají xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Živá xxxxxxx xx xxxxxxxxx x celé xxxx xx zváží xxxx xx xxxxxx, xx 4. x 7. xxx x xxxxx xxxxx týden do xxxxxxxx xxxxxx, kdy xxxx xxxxxxx zvážena xxxxxxxxxxxx. Pozorují xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Xxxxx
Všechna xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X x F1 xx utrácejí, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxxxx xxx připouštění x xxxxxxx zvířata xxxxxxxx X2 se xxxxxx xx xxxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxx úmrtí xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X x X1 xxxxxxxxxxxxx vyšetří xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xx zvláštní xxxxxxxxxx x orgánům reprodukčního xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, epididymis, xxxxxxx xxxxxxx, koagulační xxxxxx, prostata, xxxxxxxx x xxxxx cílové xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx X a X1 xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx, že xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxx X a F1 xxxxxx xxxxxxxxx skupiny x skupiny xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávku, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, a dále x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Orgány, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupin. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx postižené. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, reprodukční orgány xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx podrobit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx je xxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, typ změn x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Může xx xxxxxx kterákoliv xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Zpráva x xxxxxxxxxxx xx xxxx pokud možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- druh/kmen xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx x toxické odezvě x xxxxxxxxxx xx xxxxx a pohlaví xxxxxx ukazatelů plodnosti, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx,
- tabulka xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx vrhu, průměrnou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx mláďat x xxxxxxxxxxxx hmotnost xxxxxxx před xxxxxxxxx,
- xxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X x X1 xxxxxxxx, vybraných xxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxx xxxxx údajů, xxxxx je xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.36. XXXXXXXXXXXXXX
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx testovací metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. X závislosti xx xxxxxxxx studie látka xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x průběhu xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Xxxxx resp. xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx účelu xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx.
Xxxxxx mohou xxx xxxxxxxxx s "xxxxxxxxxx" xx "značenou" xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx značení, xxxxxx se xxx, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxx sloučeniny x xxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx zvířata jsou xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx dnů xxxx testováním. Před xxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx použít xxxxx mladých, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx zvířat.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Toxikokinetické studie xx xxxxxxxxx xx xxxxxx či více xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxx toxikologických xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx testovanou xxxxxx. Jestliže xxxx xxx testování používáni xxxxxxxx, neměla xx xxx xxxxxxxxxxx hmotnosti xxxxx než ± 20 % průměrné xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx užije xxxxxxx 4 xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx určitému xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx potřeba xxxxxxxx xxxxxx xx obou xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx rozdílné odpovědi x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx třeba xxxxxxxx 4 zvířata xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx než xxxxxxxx) je možné xxxxxx xxxxx počet xxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, pak xxx určení počáteční xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxx zvířat, která xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx xxxxx časových xxxx, x xxxxx xxxx xxxxxxxxx prováděno.
Xx-xx studován metabolismus, xxx velikost skupiny xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx studie.
Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, pak xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x plánovaným xxxxxxxxx xxxxxx, ale xx xxxxxxx nesmí xxx xxxx než 2 xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx zvířat by xxxx xxx xxxxxxxxxx xx to, xxx xxx xxxxx xxxx. xxxx metabolity xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
X případě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx použity xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx xx xxx xxxxx dávka xxxxx, xx xxxxx xxxxxx pozorovány xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xx xxxxx mohou být xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
V xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx dostatečné xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxx podmínek xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxxxxxxxxx studie by xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx aplikace x xx-xx xx xxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx toxikologických xxxxxxxx. Testovaná xxxxx xx obvykle xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxx, aplikována xx xxxx, xxxx xxxxxxxx inhalačně xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat. Intravenózní xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx užitečné xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx aplikace. Navíc xxxxxx xx intravenózní xxxxxxxx xxxxx mohou xxx získány xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx se xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx vehikula x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx věnována xxxxxxxx xx vstřebávání v xxxxxxx, xx-xx testovaná xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx-xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx v potravě.
1.2.2.5 Xxxx sledování
Xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx toxicity x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx zaznamenávány xxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 Xxxxx postupu
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxx látka xxxxxx způsobem přiměřeným xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx zvířata před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
1.3.1 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx absorpce xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x nebo xxx xxxxxxxxxx skupiny1), a xx xxxx.:
- xxxxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx metabolitů v xxxxxxxxx xxxx. x xxxx, žluči, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxx zbytků x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) mezi xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx skupinou,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxx vylučovaných xxxxxxxxx xxxx testovanou x xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx plochy xxx xxxxxxx závislosti koncentrací xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx metabolitů x xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxxx x xxxx získanými x referenční skupině.
1) V xxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx ta, xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx způsobem, xxxxx xxxxxxxxx úplnou biologickou xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
X xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx 2 xxxxxxxx, x xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx oba:
- xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx lze získat xxxxxxxx kvalitativní xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3 Vylučování
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx se x xxxxxx exkretech stanovuje xxxxxxxxxx xx podání xxxxx, x to xxx do vyloučení 95 % x xxxxxxxx množství nebo xxxxxxx 7 xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxx x době xxxxxxx testovaných xxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
X určení xxxxxxx a schématu xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx analyzují xxxxxxxx technikami. Xxxx xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx tam, kde xx xxxxx odpovědět xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx informací x xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx provedení xx vitro xxxxxx.
Xxxxx informace x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, sledováním poklesu xxxxxxxxxxx neproteinových sloučenin xxxxxxxxxxxx - SH xxxxxxx a xxxx xxxxx látky na xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx možno xxxxxxxxxx xxxxxxxxx znázorněním.
Xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxx, xxxxx, xxxxx x xxxxxxx (xxxxx xx xx relevantní). Xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x rychlost xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metabolitů x xxxxxxxx metabolické xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxx typu prováděné xxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx údaje:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, životní podmínky, xxxxxx,
- charakteristika xxxxxxxxx materiálu, jestliže xxx xxxxxx,
- xxxxxxxx dávky x xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx(x) podání x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- toxické x x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. jejích xxxxxxxxxx v biologickém xxxxxxxxx xxxxxx vydechovaného xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx, režimu, xxxx, xxxxx x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx vstřebávání x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xx čase,
- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v biologickém xxxxxxxxx,
- metody xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxx metabolismus,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH XXXXXXXXX XXXXXXX - XXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Při xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látek xx xxxxxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx zjištěn x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X určitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a mají xxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx.
Vyšetřovací xxxxx xx xxxxx mohou xxx použity xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx vitro xxxxxx xxxx xxxx xxxxx považovat xx xxxxx, xx látka xxxx neurotoxická.
1.2 Definice
Xx xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, thioestery xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, fosfonové nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx amidothiofosforečných, xxxx xxxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxx, pozorovanou u xxxxxxxxx xxxxx této xxxxxxx.
Pozdní xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx v xxxx a periferním xxxxx x pozdním xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x dále xxxxxxxx x stárnutím xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx target xxxxxxxx) x nervové xxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx na pozitivní xxxxxxxxx skupině k xxxxxxx, že v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, EINECS 201-103-5, chemický název: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx xxxxxxxx fosforečné, xxx.: tri-o-kresylfosfát (XXXX).
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx slepicím, xxxxxxxxx před možnými xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinky. Xxxxxxx xx xx xxxx 21 dnů xxxxxxxx, zaznamenává xx xxxxxxxxxx chování, ataxie x paréza. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx XXX, se xxxxxxx x xxxxxx náhodně xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, obvykle 24 x 48 hodin xx podání xxxxx. 21 xxx xx xxxxxx látky xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření vybraných xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.5.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx bez xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx xxxxx xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 dní před xxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx chovu x xxxxxx, v jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx klece xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx rozpuštěné xx xxxxxxx vehikulu, xxxx je např. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx dávky xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx tobolkách by xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx vlastnosti.
1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 xx 12 měsíců. Xxxxxxxxx xx plemena x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x chovají xx xx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.6.1.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx použije xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované látky xx xx xxxxxxx x kontrolní skupině xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx.
V xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxx x nich xxxxx xxx xxxxxxxx xxx biochemické xxxxxxxxx (xx xxxxx xxxx x druhý xxx xx podání) x xxxx přežilo 21xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se může xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxx aspoň šest xxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx neurotoxicitu, xxx xxxxxxx xxxx určeny xxx biochemii a xxx slepice xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx historické xxxxx, když se x xxxxxxxxxxx laboratoři xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx testu (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx chovu).
1.6.1.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx příslušného xxxxx xxxxxx x xxxxxx x různých xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx v hlavní xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx studii nezbytná xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxx úmrtí pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, x kterém xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx s pozdními xxxxxxxxxxxxxx účinky. K xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxx xxxxxx B.1 bis). Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxx výběru xxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx studii xx xxxx xxx xx xxxxxxxx x přihlédnutím x výsledkům xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx dávky x xxxxxxx limitu xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Případné xxxxx xx neměly xxxxxxxx přežití xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxxxxx (xxxx) x xx 21 dnech xxx xxxxxxxxxx (šest). Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, o xxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx neurotoxickými xxxxxx, xx xx xxxxxx xxxx ochrana xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinky.
1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx x dávkou xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti, za xxxxxxx postupů xxxxxxxxx xxx xxxx studii, xxxxxxxx žádné pozorované xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx údajů x xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx vyšší xxxxx. Limitní xxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx úrovně xxxxx.
1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx je 21 xxx.
1.6.2 Xxxxx xxxxxxx
Xx aplikaci xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx následky akutního xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxxxxxx látka xxxxxx x jediné dávce.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx pozorování
Pozorování xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx látky. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pozorují xxxxxxxxxx x průběhu xxxxxxx xxxx xxx x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx po xxxx 21 dní xxxx xxxxx nebudou xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxx, stupně x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx hodnotí xxxxx xxxxxxx čtyřstupňové xxxxxxxx stupnice a xxxxxxxxxxx se xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vykazující xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx po xxxxxxx, xxx xx usnadnilo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x zvířata xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx způsobem xxxxxxx a xxxxxx.
1.6.2.2 Xxxxxxx hmotnost
Všechny xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxx aspoň xxxxxx xxxxx.
1.6.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem x xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx kontrolní skupiny (xx-xx xxxxxxx použita) xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx látky. Xxx xxxxxxx inhibice XXX xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. ischiadicus x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx XXX. Xxxxx xx xxxxxxxx tři slepice x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 hodinách x xxxxx tři xx 48 xxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx 24 hodinách. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx klinických xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxx pohybuje xxxxx xxxxxx (hodnotí xx xxxxxx cholinergních xxxxxxxx), pak xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx ze xxx xxxxxx, a xx xxxx 24 xx 72 hodinami xx xxxxxx xxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xxxxx se případně xxxxxxx také analýza xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). In xxxx může však xxxxxx xxxxxxxxx reaktivace XXxX, xxx xxxx xxxx x podcenění xxxxx xxxx inhibitoru XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Xxxxx x xxxxx zvířat (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxx špatný xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx stavu xxxxx x xxxxx.
1.6.2.5 Histopatologické xxxxxxxxx
Xxxxxxx tkáň x xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx histologicky xxxxxxx. Tkáně se xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx perfúzních xxxxxxx. Xxxxxxx se: xxxxxxx (xxxxxxx podélný xxx), prodloužená xxxxx, xxxxx - xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x lumbosakrální, x xxxxxxxxxxx nervů se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x x. xxxxxxxx (x jeho xxxxx x m. xxxxxxxxxxxxx) x z n. xxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx myelin x xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxxxx touto metodou (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx chování) xxxxx xxxxxxxxxx další xxxxxxxxx xx pozdní xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx sledování.
Xxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný počet xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx účinky, typy x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx každý typ x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx vyhodnotí x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx x histopatologickými xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx třeba vyhodnotit xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxxxxx metody xx xxxxx již v xxxx plánované studie.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx informace, xxxxx mohly xxx xxxxxxx:
Testovaná xxxxxxx:
- použité xxxxxxx;
- xxxxx a xxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx ustájení xxx.;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxx o přípravě, xxxxxxxxx x homogenitě xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx výběru vehikula;
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx látky;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a xxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxxx úrovně xxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxx x fyzikální xxxxx aplikované xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx o tělesné xxxxxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx dávkových xxxxxx xxxxxx úmrtnosti;
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx);
- podrobný xxxxx biochemických xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky;
- pitevní xxxxxx;
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů;
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, u kterých xx xx možné.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 418.
X.38. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH XXXXXXXXX XXXXXXX 28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx x vyhodnocení xxxxxxxxx účinků xxxxx xx důležité vzít x xxxxx schopnost xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx specifický typ xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx zjištěn x xxxxxx studiích xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx zpožděné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a mají xxx testovány xxxxx xxxxxxx.
Vyšetřovací xxxxx xx vitro xxxxx xxx použity xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Negativní nález x in xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Tento 28xxxxx xxxx pozdní xxxxxxxxxxxxx poskytuje xxxxxxxxx x xxxxxx zdravotním xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx opakovaných xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx časového xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx dávce x xxxx poskytnout xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx kterém nejsou xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxxxx. Tato úroveň xx používá xxx xxxxxxxxx kritérií bezpečné xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx látek označených x xxxxx xxxx xxxxxx xxxx "organické xxxxxxxxxx xxxxxxx" patří xxxxxxxxxx neutrální xxxxxxxxx xxxxxx, thioestery xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, nebo xxxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxxx xxxxxx neurotoxicitu, xxxxxxxxxxx x některých xxxxx xxxx skupiny.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx je xxxxxxx projevující se xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx x periferním xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx specifické xxxxxxxx - XXX (neuropathy xxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxx tkáni.
1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx denně xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xx abnormální xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx dávce. Xxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxxxx xxxxxxxx XXX, se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx posledním xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx slepice xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx histopatologické vyšetření xxxxxxxxx xxxxxxxxx tkání.
1.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.4.1 Xxxxxxxx
Mladé zdravé xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx virových xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, v xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx klece xxxx xxxxxx umožňující xxxxx pohyb xxxxxx x xxxxxx pozorování xxxxx.
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxxx 7 xxx x xxxxx, buď xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx srovnatelnou xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx olej. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx velké xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx nemusely xxxxxxxxxx vstřebat. U xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.4.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx mladá xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Gallus xxxxxx xxxxxxxxxx) ve xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xx za xxxxxxxx, které dovolují xxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Počet x xxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx látky xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx aspoň xxxx x nich mohlo xxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx vyšetření (po xxxxx x xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx) x šest xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pozorování xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.3 Xxxxx dávek
Xxxxxxx xxxxxx xx zvolí x přihlédnutím ke xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx a x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, nejlépe xxxxxxxx xxxxxx neurotoxicity, xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxx xxxxxx utrpení. Xxxx xx zvolí xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx způsobem, xxxxx umožní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx neměla xxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx.
1.4.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx xxxx x dávkou xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx x xxx, za xxxxxxx xxxxxxx popsaných xxx xxxx studii, nevyvolá xxxxx pozorované xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx údajů x xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx expozice xxxxxxxxxxx xx x xxxx naznačuje xxxxxxx xxxxxxx ještě vyšší xxxxxx xxxxx.
1.4.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx x 14 xxx po xx, xxxx do xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.4.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxx v xxxxx po 28 xxx.
1.4.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx po 28 xxx x xxxxxxx 14 xxx po xxxxxxxx aplikace, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x trvání. Pozorování xx zahrnovat xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xx xx xx xxxxxxxx. Ataxie se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pořadové stupnice, xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x klecí x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako např. xxxxxxxxxxx xx žebříku, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx minimálních toxických xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx testované xxxxx a xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxx vybraných x xxxxx testované a xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx aplikaci poslední xxxxx. Xxx analýzu xxxxxxxx NTE xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx inhibici XXX. Xxxxxxx se usmrcují xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx a každé xxxxxxxxx xxxxxxx po 24 xxxxxxxx x xxxxx tři xx 48 xxxxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) naznačují, xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pak xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxxxx uvést v xxxxxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx provede xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx vést x xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx AChE.
1.4.3.4 Xxxxx
Xxxxx všech xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx pro špatný xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Nervová xxxx z přeživších xxxxxx (nepoužitých xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tkáně xx xxxxxx xx xxxx xx použití xxxxxxxxxx technik. Xxxxxxx xx: mozeček (xxxxxxx xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, mícha (xxxx xxxxx se xxxxxxx x horní xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx), x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x x. xxxxxxxx (x xxxx větve x m. gastrocnemius) x z n. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx barvivy xx xxxxxx x xxxxx.
Nejprve xx xxxxxxx xxxxxxxx tkáně xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx x skupiny x xxxxxxxx dávkou. Xxxxx se najdou x zvířat xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx účinku, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x na xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx dávku xxxxxxx x xxxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx metodou (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx a xxxxx chování) xxxxxxxxx, xxxxx xx neprovádí xxxxx testování xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Neprůkazné xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx další xxxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Údaje xx xxxx sestaví xx xxxxxxx. Z ní xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx počet xxxxxx xx počátku xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx poškození xxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxx xxx x xxxxxx poškození xxxx xxxxxx.
Výsledky studie xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x korelaci xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx.
Xxxxxxx výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x obecně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Statistické xxxxxx se xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx informace, pokud xxxxx být získány:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xxxxx xxxxxx,
- xxxxx, xxxxxxxx ustájení atd.,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na začátku xxxxxx.
Podmínky xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x homogenitě testované xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x kvalitě xxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dávek,
- xxxxxxxxxxx podávaných xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx údajů x vehikulu, xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxx pro xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, je-li xxxx xxx 24 x 48 xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx (NOAEL),
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, u xxxxxxx xx to možné.
Xxxxxxx výsledků
Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x metodou XXXX TG 419.
X.39. Test xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx
1. XXXXXX
Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx XXX Xxxxxxxxx (XXX) Xxxx With Xxxxxxxxx Xxxxx Xxxxx Xx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx testu xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX) x xxxxxxx xxxxxxxxx buňkách in xxxx xx xxxxx xxxxx, vyvolávající xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (1) (2) (3) (4).
Xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx v játrech. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx DNA x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx reparaci. Xxxxx jsou obvykle xxxxxxx místem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx detekci xxxxxxxxx XXX xx vivo.
Xxxxxxxx-xx doklady x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxxx xxxx xxxxxx.
Výsledek xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (XXX) xx hodnotí xxx, xx xx stanoví xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x buňkách, které xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (X-xxxx) xxxxxxxx DNA. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, při xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (3X-XxX). Xxx xxxxx XXX xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx tkáně xxx xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx předmětem xxxx metody.
Detekce xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx bází XXX, xxx jsou v xxxxx xxxxxxxxx odstraněny x xxxxxxxxx. Proto xx xxxxxx UDS xxxxxxx vhodná k xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxxx" (1 - 3 xxxx) je xxxx xxxxxxx. Dále xxxx xxxxxxxx x mutacím x důsledku neopravení, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx lézí XXX. Xxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxx nic x přesnosti procesu xxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx, že xxxxxxx xxxx xxxx x XXX xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx XXX není xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx, že XXX test xxxxxxxxxxx x mutagenní xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Buňky x reparaci: xxx xxxxxxx xxxxx (NNG) xxxxx než xxxxxx, xxxxxx stanovená hodnota, xxxxxx zdůvodní xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxx (XXX): xxxxxxxxxxxxx míra XXX xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx testech UDS, xxxxxxxxx jako rozdíl xxxx xxxxxx xxx x xxxxx (NG) x xxxxxxxxx počtem xxx v xxxxxxxxxx (XX): XXX = XX - XX. Xxxxx XXX xx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxx x xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx apod.
Xxxxxxxxxxx syntéza XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX): opravná syntéza XXX po excizi x odstranění xxxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemickou xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx UDS x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx DNA xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látkou xxxx fyzikálním působením. Xxxx vychází obvykle x inkorporace 3X-XxX xx DNA jaterních xxxxx, charakteristických nízkým xxxxxx xxxxx x X-xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx 3X-XxX se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx tato technika xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx v X-xxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Běžně xx používají potkani, xxx ovšem použít xxxxxxxxx vhodný xxxxx xxxx. Používají se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx rozdíly xx xxx xxxxxxxx xxxxxx měly být xxxxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx nemají xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
Všeobecné xxxxxxxx chovu jsou xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.
Xxxxxxx xx xxxx být 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělí xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xx jednoznačně xxxxxx x po xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x kde xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.2 Testovaná xxxxx/xxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx x je-li xx xxxxx, xxxxx xx před xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx mohou xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.3 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.3.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx chemicky reagovat. Xxxxxxx-xx xx xx xxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx být jeho xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x kompatibilitě x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx možné, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx vodné xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Xx každého xxxxx je třeba xxx každé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx kontroly xx měly xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx patrné, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx hodnotiteli xxxxxxxxx zakódovaného xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx patří xxxxxxxxx:
Doba xxxxxx xxxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx v xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 xxxxx) | N-2-fluorenylacetamid (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx možno xxxxxx x jiné xxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx cestou, xxx xx xxxxxxxx testovaná xxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelní xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx historická xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx negativní x pozitivní xxxxxxxx xxxxxxxxx jeden, xxxx xxx jedinci.
Xxxxx x xxxx, kdy xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx s xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx, xx mezi xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x toxicitě xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx pohlavně xxxxxxxxxx, jak xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx farmaceutických xxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxx xx xxxxxxxxx odpovídajícího xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx xx používají xxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx dávka vyvolávající xxxxxx xxxxxx toxicity, xx xxx xxxxx xxxxx xx stejném xxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx účinek. Xxxxx dávka představuje xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.
Látky, jež x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxx představovat xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx případ xx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxx xx zjištění xxxxxxx xxxxxxxx, protože xxxxxxxx údaje xxxxxx x dispozici, xx xxxxx ji realizovat x xxxx laboratoři x xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx režimu, jaké xx xxx xxxxxxx x hlavní xxxxxx.
Xxxx nejvyšší xxxxx xxx také xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxx. pyknotická xxxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx minimálně 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxx xxxx ve xxxx dávkách x xxxxx den nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a jestliže xx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nemusí xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx humánní xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.5.5 Aplikace xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou být xxxxxxxxxx i jiné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se však xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xx xxx mohla xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky přímo, xxxxxx xxxxxxx oběhem. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx x nemá xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx objem xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Příprava jaterních xxxxx
Jaterní xxxxx xx x pokusných xxxxxx zpracovávají xxxxxxx 12 - 16 xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx odběr (xxxxxxx 2 - 4 xxxxxx xx xxxxxx xxxxx), xxxxxx xx xx 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx zjevná. Xx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxx odběru vzorků, xx-xx to xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Krátkodobé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx buněk xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, xxx xx čerstvě disociované xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Jaterní xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx XXX
Čerstvě xxxxxxxxx savčí xxxxxxx xxxxx xx po xxxxxxx dobu (xxxx. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxx x médiu xxxxxxxxxxx 3X-XxX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xx potom xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, aby xx snížila neinkorporovaná xxxxxxxxxxxxx (tzv. "xxxx xxxxx"). Xxxxx xx xxx xxxxxxx, fixují x xxxxxx. Xxx xxxxxxx inkubačních xxxxxxxxxxx xxxxxx xx "cold xxxxx" xxxxxxxx. Sklíčka x preparáty xx xxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx v xxxxxxxxxx), vyvolají, obarví x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. X každého xxxxxxx xx připraví xxx xxxx tři xxxxxxxxx.
1.5.8 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zjevné xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).
Preparáty xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 buněk; xxxxx xx buněk xxxx xxx 100 xx xxxxxxx jedince, xxxx xx xxx zdůvodněné. Xxx xxxxxxxx xxx xx nevyhodnocují xxxxx x X-xxxx, ale xxxxx xxxxx v X-xxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX do jader x cytoplazmy x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx depozice xxxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Výsledky xxxxxxxx údaje z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Mimoto se xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx a xxx se xxxxxxx xxxxx xxxxx "xxxxxxx xxxxx" (XXX) xxxxxxxxx xxxxx XX xx xxxxx XX. Xxxxxxxx-xx xx "xxxxx x xxxxxx", xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx mohou vyhodnotit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; pokud xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx třeba xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE XXXXXXXX
Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
pozitivní | (X) xxxxxxx XXX nad xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, zdůvodněným xx základě xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx | |
nebo | (XX) xxxxxxx NNG významně xxxxx xxx x xxxxxxxx kontroly | |
negativní | (X) xxxxxxx XXX xx xxxxxx/xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx | |
xxxx | (XX) hodnoty XXX xxxxxx signifikantně xxxxx než souběžná xxxxxxxx. |
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxxx xxx, což xxxxxxx, xx je xxxxx vzít v xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, vztah xxxxx - xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx výsledků xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxxxxx významnost by xxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx reakci xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx souboru xxx vyvodit o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx xxxxx být stále xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.
Xxxxxxxxx výsledek testu XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx xxxxxxxxx XXX, které xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx experimentálních podmínek xxxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxx poškození XXX, xxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxx v xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxx (např. xxxxxxxxx toxicita).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx vehikula
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- počet, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- původ, xxxxxx podmínky, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat na xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných xxxxxxxx xxx jednotlivé xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx a negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx studie xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x přípravě xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x podávání xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx, že xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxx tkáně,
- případný převod xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx/xxxxx xxxx (ppm) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxx vzorků,
- metody zjišťování xxxxxxxx,
- metoda xxxxxxxx x kultivace xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx autoradiografická xxxxxx,
- počet připravených xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x "xxx xxxxxxx grains" xxx jednotlivé xxxxxxxxx, xxxxxxx a skupiny,
- vztah xxxxx-xxxxxxx, xxxxx je k xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- známky xxxxxxxx,
- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek,
- xxxxx "xxxxx x opravě", xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx x X-xxxx, xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx buněk.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxx X.39. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx od 22.6.2001
X.40. XXXXXXX XXXXXX XX XXXX
1. METODA
1.1 XXXX
Xxxxxxxx centrum xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx metod (Xxxxxxxx Centre for xxx Xxxxxxxxxx of Xxxxxxxxxxx Xxxxxxx, XXXXX, Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx, Xxxxxxxx Commission) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx testy xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx na xxxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx transkutánního elektrického xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx electrical xxxxxxxxxx, XXX) x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx lidské xxxx. Validizační xxxxxx XXXXX xxxxxxxxx, xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx látkami leptajícími x neleptajícími kůži. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx lidské xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kůže X35, x xxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, X34). Xx xxxxxx xxxxx x postupy xxxx testů; výběr xxxx oběma testy xxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kůže xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx.
1.3 REFERENČNÍ XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxx látka není xxxxxxxxxxxxx, viz xxxx xxxx. 1.5.3.4 x 1.7.2.3.
1.4 XXXXXXX XXXXXX - XXXX XXX XX XXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nanese xx xxxx xx 24 hodin xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxx utracených xxxxxxxx způsobem. Látky, xxxxx mají xxxxxxx xxxxxx, jsou xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx normální integritu x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.Xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx inherentního xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporu (XXX) xxx určitou prahovou xxxxxxx (5xΩ) (4) (5). Dráždivé x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxx prahovou xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxx x neutrálních xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxx x xxx. (6)) xx xxxxx xx zkušebního xxxxxxx zařadit test xxxxxx barviva, aby xx xxxxxx počet xxxxxxxxx pozitivních xxxxxxxx, xxx xx u xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (2) (7).
1.5 XXXXX XXXXXX - XXXX TER XX XXXX XXXXXXX
1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23xxxxx) xxxxxxx, Xxxxxx xxxx srovnatelný xxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx odstraní srst x dorzální x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx pak xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx ponoří xx roztoku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx amfotericinu, x koncentracích inhibujících xxxx bakterií. Třetí xxxx xxxxxx den xx xxxxxx omytí xx zvířata xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx 3 xxx xx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků xxxxxxx být xxxxxxx xxxxxx než 31 xxx.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx z xxxxxxxx plochy x x té xx xxxxxxx sloupne xxxxxxxxxx xxx. Kůže xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxx, x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx xx přetáhne xxxxxx X-xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxx se xxxxxxx. Rozměry trubice x X-xxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx X-xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx ke xxxxx XXXX trubice xxxxxx vazelínou. Trubice xx xxxxxx xx xxxxxx obsahující xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX), xxx je xxxxxxxxxxx pružinovou xxxxxx (xxx. 2).
1.5.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx stavu, xxxxxx xx na xxxxxxxxxxx xxxxxx uvnitř xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx xx stavu xxxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx pokryl celý xxxxxx epidermis, na xxxxxx látky xx xxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx s xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxxx látek xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx 30 xX, xxx se xxxxxxxxx, xxxx rozetřením xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx prášek. Xxxxxxx xx vždy xxx xxxxxxx xxx každou xxxxx. Látka se xxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (viz xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx xx promýváním xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx 30 xX tak xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx. Odstranění xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx v xxxxxxx ztuhla, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx zhruba 30 xX.
1.5.3.2 Měření XXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odpor (TER) xx xxxx pomocí xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx proud (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Před xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx povrchové xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% ethanolu, xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx tak, že xx xxxxxxx otočí, x xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tří xxxxxxxxx 154 xX xxxxxxx síranu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxx x xxxxx se xxxxx x kΩ/terčík (xxx. 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx holé xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx xxxxxxx (silné) xxxxxxxxx xx během xxxxxx uloží xxxxxx XXXX xxxxxxx tak, xxx xxxx do xxxxxxx síranu xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx stejná xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xx receptorové xxxxxxx xxx, xxx xxxxxx na dně. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mezi xxxxxx xxxxxx pružinové xxxxxx x spodkem XXXX trubice (obr. 1), xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx naměřený xxxxx xxxxx xxx 20 kΩ, může xx být xxxxxxxx xxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx kůže. Xx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, například xxx, xx xx XXXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx 10 sekund xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx hořečnatého xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx opakuje x čerstvým xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx hodnota XXX xx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx leží x xxxxxxxxx přijatelných xxx xxxx metodu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky a xxxxxxxxx akceptovatelná xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx a aparaturu xxxx xxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx odporu (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx voda
|
10 – 25
|
1.5.3.3 Modifikovaný xxxxxx xxx xxxxxxxxx aktivní xxxxx a neutrální xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ, xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx se xxxxxx, xxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Nanesení x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx na xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 2 xxxxxx xx 150 μx 10% (w/v) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxx se xxx xxxxxx xx xxxx 10 sekund xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vody, která xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx se xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx se xxx opatrně xxxxx x XXXX xxxxxxx x uloží xx xxxxxxx (xxxx. xx 20 ml skleněných xxxxx pro xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx vody. Nádobky xx xx dobu 5 xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (nenavázaného) xxxxxxx. Xxxxx oplach xx xxxxxxx. Pak xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx x 5 xx 30 % (w/v) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) v xxxxxxxxxxx xxxx, xxx se xxxx xxx inkubují xxx teplotě 60 xX. Po xxxxxxxx xx xxxxxxx vyjmou x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxx 8 xxxxx xxx xxxxxxx 21 xX (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ∼ 175). Xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxx xx xxx zředí 30 % (x/x) xxxxxxxx SDS v xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (x/x) (xx. 1 ml xxxxxxxxxxxx + 4 xx roztoku SDS). Xxxxxxx denzita (OD) xxxxxxx se xxxx xxx xxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx obsahu xxxxxxx
Xxxxx sulforhodaminu X x xxxxxxx se xxxxxxxx z xxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx sulforhodaminu B xxx 565 xx xxxx 8,7 . 104; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B se xxxxxxxx xxx každý xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx se xxxxxxxx hodnota. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx za xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx hodnoty spadají xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx. Za xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx se u xxxxxxxxxxx látek xxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xx/xxxxxx)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X kyselina xxxxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
40 - 100
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
15 – 35
|
1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx působení xxxxxxxxx látky xx xxxxxx xxxx (xxxx. 2 xxxxxx) xx xxxxxx xxxxxxxxx silně xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx studii xxxx xxxx xxxxxxxx, že xxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx 2 xxxxxx (2), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx leptajících x xxxxxxxxxxxxx látek xx 24xxxxxxxxx působení.
Získané xxxxxxx XXX xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x rozměry xxxxxxxx xxxxxxxxx x experimentálním xxxxxxxx. Prahová xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx 5 xΩ xxxx xxxxxxxxx xx základě xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx aparatuře x xxx xxxxxxxx postupu xxxxxxxxx xxx. Xxxxx xx se zkušební xxxxxxxx výrazně xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx použít jiných xxxxxxxxx a kontrolních xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx okalibrovat xxxxxxxx x xxxxxxxx hodnotu xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, jež xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx (3).
1.6 PRINCIP XXXXXXXX XXXXXX - XXXX S XXXXXXX XXXXXX KŮŽE
Testovaný xxxxxxxx xx xxxxxx topicky xx dobu až 4 xxxxx na xxxxxxxxxxxx model xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx například xxxxxx "XXX reduction xxxxx" (XXX = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 difenyl tetrazolium xxxxxx) pod prahovou xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx dobu. Xxxxxxx testu xxxxxxx x předpokladu, že xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx xxxx xx, xxxxx dokáží xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx xxxxx) x jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx vrstvách.
1.7 XXXXX METODY - XXXX X MODELEM XXXXXX KŮŽE
1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxx mohou pocházet x xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Model xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx vrstvou xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx přiměřeně xxxxxxxxx. Xx xxx prokázat xxx, xx xxxxx xxxx rezistentní xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x nichž xx známo, xx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx stratum xxxxxxx neprocházejí. Xxxxx xxxx za definovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx být dostačující x xxxx, aby xx dalo xxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx. Životnost buněk (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx MTT, tj. XX xxxxxxxx) po xxxxxxxx xxxxx použité xxxx negativní kontrola xxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx mezích xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx (xx srovnání x xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx) musí xxxxxxx xxxxxxxxxx spadat do xxxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxx xxxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx xxxxxx, xxxxxx se xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx (minimální xxxxxxxx 25 (μ/xx2). Xx-xx xxxxx, nanese xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxx, x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx x xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx roztírají na xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, že xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx (2). Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Měření xxxxxxxxxx xxxxx
X xxxxxx životnosti xxxxx xx dá xxxxxx jakákoliv validizovaná xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx redukce XXX, o které xxxx prokázáno xx x různých xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx přesné a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx kůže xx xx dobu 3 xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx xxx teplotě 20 - 28 oC. Xxxxxxxxx xxxxx formazanový xxxxxxx xx pak xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) x koncentrace xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XX xxx xxxxxx xxxxx 545 x 595 xx.
1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx xxxx x přesné xxxxxxxx xxxx působení, promývacího xxxxxxx xxx. xxxx xx xxxxxxxxx buněk xxxxxxxx xxxx. Doporučuje xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx použití xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX (3). Je xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx prokázáno, že xx xxxxxxx xxxxxx xx použití široké xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx mezinárodních xxxxxxxxx xxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx různými laboratořemi. Xxxxxxxxx musí metoda xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2) x xxxxxxxx xxxxxx validizační xxxxxx xxxx být zveřejněny x takovém xxxxxxxx xxxxxxxx, xx kterém xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.8.1 Xxxx XXX xx xxxx potkana
Hodnoty odporu (x kΩ) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolu x xxx případné xxxxxxxxxx referenční látky xx xxxxxxx x xxxxxxxxx formě, a xx xxxx xxx xxxxxxx replikace a xxxxxxxxx experimenty, xxxxxxxx xxxxxxx a x xxxx xxxxxxxx klasifikace.
1.8.2 Xxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX x vypočtené procento xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční látky xxxxxxx v tabelární xxxxx, x xx xxxx xxx všechny xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx hodnoty x z xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.9 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.9.1 Xxxx XXX xx xxxx potkana
Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxx XXX xxx testovaný xxxxxxxx xxxxx xxx 5 xΩ, je látka xxxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxx XXX xxxxx nebo xxxxx 5 xΩ x xxxxxxx se xxxxxx o povrchově xxxxxxx xxxxx (detergent) xx xxxxxxxxx organickou xxxxx, xxx testovaná xxxxx leptavé xxxxxx xx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (detergentů) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX nepřesahující 5 xΩ, lze provést xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx obsah xxxxxxx x xxxxxxx vyšší xxxx rovný průměrnému xxxxxx barviva x xxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x 36 % XXx, xx testovaná xxxxx skutečně pozitivní x xxxx má xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx menší, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx.
1.9.2 Xxxx x xxxxxxx xxxxxx kůže
Hodnota XX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx představuje 100% xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxx XX xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorky xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx. Hraniční xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivé xxxxx xxxxxxxxx vlastností, xxxx být x xxxxxxxxxx xxxxxx jasně xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx validována, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx, xx je xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx o průběhu xxxxxx xx třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- identifikační údaje, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti; xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, uvedou xx xxxx xxxxx x xxx ně.
Podmínky pokusu
- xxxxxxxx popis použitého xxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (test TER) xxxx procentuální xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk (test x xxxxxxx lidské xxxx) xxx testovaný xxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx standardní referenční xxxxx, x xx xxxxx xxx všechny xxxxxxxxx xxxx. opakované xxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx xxxxx xxxxxx pozorovaných xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxx 2
Metoda X.40. byla xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
B.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 XXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 ÚVOD
Fotoxicita je xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), x xxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx chemickým xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx je-li xxxxxxx kůže xxxxxxx xx xxxxxxxx podání xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x rámci xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx vitro xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dané testované xxxxx, tedy xx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx ve spojení x expozicí xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx možné xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx kombinovaným xxxxxxxxx xxxxx x světla, xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx sloučeniny, xxxxx xxxx fototoxické xx vivo xx xxxxxxx aplikaci a xxxxxxxxxx x xxxx, x sloučeniny, jež xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx topickém xxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxx fototoxicity 3X3 XXX in xxxxx xxx xxxxxxxxxx x validován x xxxxx společného xxxxxxxx XX/XXXXXX x xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx alternativa xx xxxxx vůči xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. X xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx schůze XXXX xxxxxxx následných xx xxxxx trestů pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX in vitro xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx vivo u xxxxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx, xx tento xxxx xx pro xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx není xxxxxxx x tomu, xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, jež xxxxx x kombinovaného xxxxxxxx látky x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, i xxxx řada xxxxx xxxx specifické vlastnosti xxxxxxxx, reaguje xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx umožňoval hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx přístup xxxxxxxxx fototoxicity u xxxxxxxxxx látek je xxxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX) xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxx; xxxxxx ve X/x2 xxxx x XX/xx2.
Xxxxx světla: xxxxxxxx (= xxxxxxxxx x xxx) ultrafialového (XX) xxxx viditelného (VIS) xxxxxx dopadajícího na xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (= W x s) na xxxxxxxx povrchu, xxxx. X/x2 xxxx X/xx2.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx doporučení XXX (Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xx X'Xxxxxxxxx) xx xxxxxxx xxxxxxxx XXX (315 - 400 xx), UVB (280 - 315 xx) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxx: za xxxxxxx xxxx pásmy XXX x XXX xx často považuje 320 xx a XXX se xxxxx xxxx xx UV-A1 x XX-X2 x xxxxxxx xxxxxx x 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: parametr, xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx populace (xxxx. xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx živou xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, do xxxxxxxxx lysozomů), xxx xxxxx xxxxxxxxx měřených xxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx.
Xxxxxxxxx životaschopnost (viabilita) xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx x porovnání x negativními xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), které xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxx + XX xxxx - XX), xxxxx xxx působení xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx testu xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx test je xxxxx x transformaci xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx XXX x XXX.
XXX (xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, fotoiritační xxxxxx): xxxxxxxxxx představující xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx koncentrací (XX50) testované xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX ozáření.
MPE (mean xxxxx effect, xxxxxxx xxxxxxxxx): xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx křivek xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) x v xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX ozáření.
Fototoxicita: xxxxxx xxxxxxx xxxxxx (odezva), xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx kůže xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx expozici xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx, xxxxx xx obdobně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx podání xxxxxx látky.
Fotoiritace: xxxxx xxxxxx pojmu "fototoxicita", xxxxxxxx se xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x nimž dochází x xxxx xxxx, xx xx xx xxxxxx (topicky xxxx xxxxxx xxxxxxx) nějaká xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx x nespecifickému xxxxxxxxx xxxxx (reakce xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx imunologická xxxxxxxxxx, která xx xxx prvním xxxxxxxx xxxxx x světla xxxxxxxxxxx, x kdy xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx, xxx se xxxxxxxxxx xxxx projevila.
Fotogenotoxicita: genotoxická xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, ke xxxxx xxxxxxx poté, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XX/XXX xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx opakovanou xxxxxxxx xxxxxx x látky. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX zářením xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 REFERENČNÍ XXXXX
Xxxxx chlorpromazinu xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx studii, xx xxx zavedení xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx referenční látky xxxxxxxxx z xxxxx, xxxxx byly xxxxxxx xxx mezilaboratorním xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (3) (13).
1.4 XXXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxx byly xxxxxxxxxx x řady xxxxx (5) (6) (7) (8), xxxxxxx xxxxxxx společným rysem xx xx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx záření. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx zákon) vyžaduje xxxxx fotoreakce dostatečnou xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx by xx xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx testování podle xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xx xxxx stanovit xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x UV/VIS xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx OECD x. 101). Pokud xx xxxxxxx extinkční/absorpční koeficient xxxxx než 10 xxxxx x mol-1 x xx-1, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxxxx).
1.5 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, kterými xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) chromoforem vyústit xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7), přičemž xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Proto xx xxxx fototoxicity 3X3 XXX xx vitro xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx necytotoxické xxxxx XXX/XXX záření. Xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx červeně (xxxxxxx xxx, NR) (9), 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x ozařování.
Buňky Balb/c 3X3 xx xxxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx tak, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x jedné xxxxxx (xxxxxxxxx). Pro xxxxxx testovanou látku xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx po 96 xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx dobu 1 hodiny. Xxxxx x obou xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX záření x dávce 5 X/xx2 UVA (+XX xxxxxxxxxx), xxxxx destička xx xxxxxxxx x xxxxx (-XX xxxxxxxxxx). X xxxx xxxxxxxxxx xx xxx médium xxxxxxx médiem xxxxxxxxxxx x xx dalších 24 xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx červeně (xxxxxxx xxx xxxxxx, XXX) xx dobu 3 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx x osmi koncentrací xx xxxxxxx relativní xxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XX) x x xxxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxx, xxxxxxx xx úrovni XX50, xx. xx xxxxxxxxxxx inhibující životaschopnost xxxxx x 50 % x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
1.6 KRITÉRIA XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx záření XXX, xxxxxxxxxx xxxxx: x xxxxx xx xxxxx pravidelně xxxxxxxx xxxxxxxx citlivosti xxxx xxxxxx XXX. Buňky xx xxxxxx v xxxxxxx, která xx xxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, xxxxxx xxx se xxxxxxx xxxxxx UVA x xxxxx 1 - 9 X/xx2 x xxxxx xxx xx xxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk. Xxxxx xxxxxxx kritéria xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx životaschopnost xx xxxxxxx dávkou XXX záření 5 X/xx2 xxxx xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx kontrolních xxxxxx xxxxxxxxxxxx v temnu. Xxx nejvyšší dávce XXX záření 9 X/xx2 xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx nižší než 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx uchovávaných v xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx desáté xxxxxx buněk.
Citlivost buněk xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx UVA, xxxxx xxxx: xxxx xxxxxxx xxxxxxxx jakosti, jestliže xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx [Xxxx´x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, XXXX] s 1 % roztokem dimethylsulfoxidu (XXXX) nebo ethanolu (XxXX) xxxx xxx xxxx vykazují x xxxxxxxxxxx (+XXX) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x témž xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX).
Xxxxxxxxxxxxxxx negativních xxxxxxx: xxxxxxxxx optická xxxxxxx (OD540 XXX) xxxxxx x XX xxxxxxxx negativních xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx 1 x 104 xxxxx nasazených x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx zdvojnásobení. Test xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx průměrná xxxxxxx XX540 XXX u xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: při xxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx je xxxxx xxxxxxx souběžný xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx látkou. Xxx xxxxxxxxx studii XX/XXXXXX xxx jako látka xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx chlorpromazin (CPZ); xxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxx XXX xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxx definována xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: XXX xxxxxxx (+UVA): EC50 = 0,1 - 2,0 μx/xx, XXX xxxxxxxxx (-XXX): XX50 = 7,0 - 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (PIF), xxx. xxxxx xxxxxxx XX50, xx xxx xxxxxxxxx 6.
Xxxxx XXX xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dají použít x jiné xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx vhodné xxx xxxxxxxxxxxxxxx chemické skupiny xxxx xxxxxxxxxxxx testované (xxxxxxxxx) látky. X xxxxxxx případě xx xxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx hodnot XX50 x XXX xxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 POPIS METODY
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Buňky
Při xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněčná linie xxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxx/x 3X3 xxxx 31, x xx xxx x XXXX nebo x XXXXX; ta xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx stejného xxxxxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx použít x xxxx buňky xxxx xxxxxxx linie, pokud xx kultivační podmínky xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx; xx xxxx xxxxx prokázat, xx xxxx xxxxxx xxxxxx.
X buněk xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, a xxx xx xxxxxx xxx x xxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx citlivost xxxxx xxxx UVA xxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx buňky Xxxx/x 3T3 x xxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx xxxxx Balb/c 3X3 xxxx XXX xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx postupem xxxxxxxx xxxxxxx popsaným v xxxxx xxxxxxxxxx návodu.
1.7.1.2 Xxxxx a kultivační xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx pasážování xxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. X případě xxxxx Xxxx/x 3X3 xx xxxxx x XXXX obohacený 10 % séra novorozených xxxxx, 4 mM xxxxxxxxx, penicilinem x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 oC / 7,5 % XX2. Xx nezbytné, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx historickém rozmezí xxx dané buňky xxxx. xxxxxxxx xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nasadí x xxxxxxxxx hustotě v xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx jednou xx xxxx použitím x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, aby na xxxxx xxxxx (tj. xxx se stanovuje xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxxx) xxxxxxx ke konfluenci (xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx). X xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3T3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x 96 xxxxxxx xx doporučuje xxxxxxx 1 x 104 xxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx testovanou xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx identicky xx xxx destičky s 96 jamkami, xxxxx xxx xxxxxxxxxx celým xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx x xxxxxxxx ozařována (+XXX/XXX) x xxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx vitro xxx xxxxxxxxx genotoxického nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx žádná xxxxx, xxx by k xxxx, xxx působila xxxx xxxxxxx in xxxx nebo xx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zapotřebí. Nepokládá xx xxxxx xxx xx xxxxx, xxx xx vědecky xxxxxxxxxx, xxx se xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx metabolickým aktivačním xxxxxxxx.
1.7.1.5 Xxxxxxxxx látka / xxxxxxxx
Xxxxxxxxx látka xxxx být xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxx stabilitě xxxxxxxxx, xx xx xx xxxxxxxxx. Pokud je xxxxxxxxxxxxx, že xx xxxxx k xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx příprava xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx rozpustí x xxxxxxxxxx solném xxxxxxx, xxxxxxxxx x Xxxxxxx vyváženém xxxxxx xxxxxxx (XXXX) xxxx xx fyziologickém xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, PBS), xxxxx - xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx během xxxxxxxxx - xxxxx obsahovat xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx barevné xxxxxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx vodě xxxxxxx xxxxxxxxx, rozpustí se xx vhodném rozpouštědle x koncentraci stonásobně xxxxx, než je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxx xx xxxxx v xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx se používá xxxxxxxxxxxx, musí být xxxxxxxx v konstantním xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, xx. ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx i x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxx (XxXX). Xxxxxx xxxxx xxx i další xxxxxxxxxxxx x nízkou xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx aceton, xx však xxxxx xxxx pečlivě xxxxxx xxxxxx specifické xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, potlačení xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo vychytávání xxxxxxxx.
Xxx se napomohlo xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxx míchání xxxx. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 xX.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx UV xxxxxxx / příprava
Světelný xxxxx: xxxxx správného xxxxxxxxxx xxxxxx x správná xxxxxxxx je při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Záření v XXX x xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx záření XXX xx x xxxxx xxxxx méně xxxxxxxxxx, xx přímo xxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xx 313 xx k 280 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxx zdroje xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx emitoval vlnové xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xxx byla světelná xxxxx (xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx) xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Dále xxxxxxx být použité xxxxxx délky x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).
Xx optimální xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx simuluje xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx výbojky - xx mají xx xxxxxx, že xxxxxxxx xxxx tepla a xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx však imitují xxxx. Xxxxxxx všechny xxxxxxx xxxxxxxxxx emitují xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXX, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx toto xxxxxx cytotoxické xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxx xx fototoxicitu 3X3 XXX xx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (UVA:UVB ∼ 2 : 1). Příklad xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx filtrovaného xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx validační studii xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx xx x xxxxx (3).
Dozimetrie: intenzita xxxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx, xxxxx xxxx xxx kalibrován xxx daný xxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxx xx doporučuje xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx XX-xxxx téhož xxxx x xxxxxxxxx. Ideální xx, když se x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x kontroluje se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru xxxxxx spektroradiometru; xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx studii xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx XXX záření 5 X/xx2 xx xxx xxxxx Balb/c 3X3 necytotoxická a xxxxxx xxxxxxxxxx silná, xxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx látky. Xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx během 50 xxxxx, xxxx xxx iradiance xxxxxxxxx xx 1,666 mW/cm2. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx linie nebo xxxx xxxxx xxxxxx, xxxx se dávka xxxxxx UVA xxxxxxx xxx, xxx buňky xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx expozice se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxx xxxxxx (X/xx2) x 100
|
&xxxx; |
| &xxxx;
x (xxx) =
|
&xxxx;
________________________
|
&xxxx;
(1 X = 1 X s)
|
|
záření (xX/xx2) x 60
|
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx četnost xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (13). Xxxxxxx xX xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx přijatelná (oblast xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (+XXX) x xxx něj (-XXX) xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx předběžných xxxxxxxxxxx. Rozsah a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx koncentrační xxxxxxxxxxx xxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx).
1.7.3 Xxxxx xxxxxxx
1.7.3.1 Xxxxx xxx
Xxxxxxxx xx suspenze 1 x 105 xxxxx/xx x kultivačním xxxxx. Xx periferních xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx destičky xxx tkáňové xxxxxxx xx odpipetuje xx 100 μl xxxxxxxxx xxxxx (= xxxxx xxxxx), do xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xx 100 μx xxxxxxx suspenze x xxxxxxx 1 x 105 buněk/ml (= 1 x 104 xxxxx xx jamku). Xxx xxxxxx testovanou xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx - xxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxx (-XXX), xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX), xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Tato xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx růst.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx inkubaci se xxxxxxxxxx médium x xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx dvakrát xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX xx každou xxxxx. Xxxxx xx 100 μx XXXX/XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx koncentraci xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xx přidává v xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxx xx xxxx 60 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX).
Xxxx xxxxx s XXX (+UVA) xx xxxxxxx xxx, že xx buňky za xxxxxxxx teploty xxxxxxx xx xxxx 50 xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx s 96 xxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx2 (= xxxxx 5 / xx2). Xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx ventilátoru. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-XXX) xx xx dobu 50 xxxxx (= expoziční xxxx UVA) xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx teploty x xxxxxx boxu.
Roztok xx xxxxxxxx x xxxxx xx promyjí xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx (18 - 22 xxxxx) xx xxxxxxxx (7,5 % XX2, 37 xX).
1.7.3.3 Třetí xxx
Xxxxxxxxxxxxx hodnocení
Buňky se xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x fázovým xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx se změny xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Tato xxxxxxxx xx doporučuje, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se tyto xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx červeně (XX)
Xxxxx xx xxxxxxx objemem 150 μl předehřátého XXXX/XXX. Xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μl xxxxx x XX x xxxxxxxx xx xxx 37 xX ve xxxxxxxx atmosféře xx 7,5 % XX2 xx xxxx 3 xxxxx.
Xx xxxxxxxx se xxxxxx x XX xxxxxxxx a xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX, xxxx xx xxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x obrácené xxxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx xx xxxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xx xxxx 10 xxxxx xxxxxx třepou xx xxxxxxxx, xxxxx xx XX x xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xx spektrofometru xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX xxx 540 xx za xxxxxxx slepého pokusu xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxx (xxxx. XXXXX) xxx xxxxx analýzu.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXX X KVANTITA XXXXX
Xxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzu vztahu xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxx aplikaci XXX/XXX xxxxxx x xxx ní. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací se xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx údaje xxxx vyjádřit křivkou. Xxxxxxx testovaná xxxxx xxxx xxx až xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μl/ml x xxxxxxxxxxx ve xxx (-XXX) xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx (+XXX) xxxxxx cytotoxická, xxxx dojít k xxxx, xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx experimentu xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, aby xxx xxxxxx požadavek adekvátní xxxxxxx dat. Pokud xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxx xxx -XXX, xxx při +XXX), xxxxxxxxx testování x xxxxxx rozestupem mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx hraniční - xxxxxx dělicí čáry xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx xxxxx xxxx xxx ověření opakovat.
Považuje-li xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podmínky, aby xx dosáhlo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx proměnnou x xxxxx testu xx příprava roztoků xxxxxxxxx xxxxx, nejvhodnější xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx těchto xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx). Xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx, xxx jsou xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx.
1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx xx to xxxxx, stanoví se xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx k 50 % inhibici xxxxxxxxx xxxxxx NR (XX50). Xx lze xxxxxx xxx, xx xx xx data koncentrace - xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx metoda xxxxxxxxxx regrese (xxxxxxx Xxxxxxx funkce xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx metoda xxxxxxxxx (14). Xxx se xxxxxxx EC50 xxxxxxx xxx další xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. K xxxxxxx xxxxxxx XX50 xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X tomto xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx papír (xxx x: xxx, xxx x: xxxxxx), xxxxxxx xx této xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva mnohdy xxxxx xxxxxxxx.
1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX XXXXXX)
1.10.1 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 1: fotoiritační xxxxxx (XXX)
Xxxxx se získají xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx (+UVA), xxx xx xxxxxxxxxxxxx (-XXX) xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxx xxxxx vzorce
|
EC50 (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) XXX =
|
&xxxx;
____________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
XXX < 5, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, kdežto XXX ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX, kdežto xxx -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx XXX xxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxx x xxxxxxxx, který xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxx. "&xx; XXX", xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx (-XX) provede až xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Cmax) a xxxx hodnota se xxxxxx do xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) > PIF =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+UV)
|
Pokud xx xx xxxxxxxxx xxxxx "&xx; PIF", xxx xxxxx xxxxxxx > 1 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx nedá xxxxxxxxx ani EC50 (-XX), ani XX50 (+XX), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx cytotoxicitu xx xx nejvyšší zkušební xxxxxxxxxxx, je xx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxx žádný xxxxxxxxxxx potenciál. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx formální "XXX = *1", xxxx xx charakterizuje xxxxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) PIF = *1 =
|
___________
|
|
Cmax (+XX)
|
Xxxxx xx dá xxxxxx xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", xxxxxxxxxx xx, že není xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx (x) x (x) je xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx, jichž xx xxx xxxxx xxxxxxx.
1.10.2 Xxxxxxxxx model, verze 2: xxxxxxx fotoefekt (XXX)
Xx xxxxx také xxxxxx novější xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx x validační xxxxxx XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx XX xxxxxx (13). X xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx modelu XXX x těch xxxxxxxxx, xxx nelze xxxxxx xxxxxxx XX50. X xxxxx xxxxxx xx používá xxxxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxxx" (MPE) xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva. Xxx xxxxxxxx modelu XXX byl xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx vyvinut xxxxxxxxx xxxxxxxxxx software, xxxxx xxx obdržet zdarma.
1.11 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx (XXX ≥ 5 nebo XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxx látka xx fototoxický xxxxxxxxx. Xxxxx xx k xxxxxx xxxxxxxx dojde xxx koncentracích xxxxxxx xxx 10 μx/xx, xx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx také xx xxxxxxx expozičních xxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci (100 (x/xx), xxxx xxx xxxxxxxxx nebezpečnosti xxxx xxxxxxxxxxx schopnosti xxxx látky xxxxxxxx xxxxxxxxx dalších xxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx a možné xxxxxxxxx látky x xxxx, xxxx údaje x xxxxxxxxx xxxx xxxxx x jiném xxxxxxxxxxxx alternativním xxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx (XXX &xx; 5 xxxx XXX &xx; 0,1) xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxxxxx xxx použité xxxxx buňky x xxxxxx podmínkách. X xxxxxxxxx, xxx by xx xxxxx dala xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxx fototoxický xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx xx xx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx byly při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislosti xxxxxxx reakce (XX50 + XX x XX50 - UV), xx interpretace xxx xxxxxx. Naproti tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx toxicita (+UV xxx -XX) x xxx xxxxxxxx rozpustnost xxxxx xx nedalo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xx xxxxx xxxxxxxxx tento xxxx xxx xxxxx xxxxx xx ne zcela xxxxxx a xxxx xx se xxxxxxxx x jiném, xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx kůže xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx ex xxxx nebo xx xxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x průběhu pokusu
Ve xxxxxx x průběhu xxxxxx je xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx údaje x xxxxx XXX, xx-xx xxxxx,
- fyzikální xxxxxx a xxxxxxx,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jež xxxx k provedení xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx rozpouštědla,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- procentický xxxxx rozpouštědla x xxxxxxxxx xxxxx (XXXX xxxx XXX).
Xxxxx:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxx, je-li xxxxx,
- citlivost xxxxx xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxx ozařovacího xxxxxxxx, xxx se x testu xx xxxxxxxxxxxx 3T XXX xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxx před ovlivněním x xx xxx:
- xxx a složení xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xx a xx xx).
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx UV/VIS xxxxxxx x xxx xxx,
- x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a absence xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxx koncentrace,
- xxx x xxxxxxx působícího xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx),
- doba xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu (c) - xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx světelného xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx zdroje,
- xxxxxxxxxxxxxxx propustnosti/absorpce xxxxxxxxx xxxxxx (filtrů),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxx kalibraci,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx UVA (v x W/cm2) xxx xxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx XX/XXX xxxxxx,
- xxxxx záření XXX (xxxxxxxxx x čas) x X/xx2,
- teplota xxxxxxxxx kultur xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxx XXX:
- xxxxxxx média x XX,
- xxxx inkubace x NR,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (koncentrace CO2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- podmínky xxxxxxxx XX (extrakční xxxxxxx, xxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XX,
- xxxxxxx vlnová xxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx-xx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), xxxxx xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx (xxxxxxxxxxx testované xxxxx νs xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +UVA x -XXX,
- xxxxxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx: podle xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx EC50 (+XXX) x XX50 (-XXX),
- xxxxxxxxx obou xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx získaných xx xxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx - xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) xxxx středního xxxxxxxxxx (XXX),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu,
- kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx testu (x) - souběžná xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx životaschopnost (xxxxxxx denzita extraktu XX) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx akceptovatelnosti xxxxx (x) - xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx:
- xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-UVA) x XXX xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx pro pozitivní xxxxxxxx: xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-UVA) x PIF, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx X.41. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx od 22.6.2001
Xxxxxxxxx
Xxxxxx předpis č. 251/98 Sb. xxxxx xxxxxxxxx xxxx 1.1.1999.
Ve xxxxx xxxxxx právního xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx předpisem x.:
208/2001 Xx., xxxxxx xx mění vyhláška XX x. 251/98 Xx., xxxxxx se xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a přípravků - xxxxxx bude xxxxxxxxxxx x příští xxxxxxxxxxx
x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxx předpis č. 251/98 Sb. byl xxxxxx xxxxxxx předpisem č. 443/2004 Sb. s xxxxxxxxx xx 1.8.2004.
Znění xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jiných xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx není aktualizováno, xxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxx změna xxxxx xxxxxxxxx právního xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) až x) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x chemických xxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
2) Xxxxx č. 246/1992 Sb., xx xxxxxxx xxxxxx proti xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Sb. x x. 30/1998 Xx.
3) Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x rozvoj xxx xxxxxxxx chemikálií. Xxxxx 4 - xxxx xx zdraví (XXXX Xxxxxxxxxx for Xxxxxxx of Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).