Právní předpis byl sestaven k datu 31.07.2004.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
VYHLÁŠKA
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
xx xxx 16. xxxxx 1998,
xxxxxx xx stanoví xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §4 odst. 1 xxxx. x) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x chemických látkách x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x o xxxxx xxxxxxxxx dalších xxxxxx:
§1
Tato xxxxxxxx stanoví xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, senzibilizujících, karcinogenních, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxx xxx "xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx").1)
§2
(1) Xxxxxxxx chemických xxxxx x přípravků xx xxxxxxxx xxxxxxxxx prováděnými xxxxxxxx uvedenými x příloze xxxx xxxxxxxx.
(2) Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx x jiné xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx stejně citlivé, xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx uvedené x xxxxxxxx 1, xxxxxxxxxx však xxxxxx xxx použití xxxxxxxxx xxxxxx2) a metody xxxxxxxxxx Organizací xxx xxxxxxxxxxxx spolupráci x xxxxxx (OECD).3)
§3
Tato xxxxxxxx xxxxxx účinnosti xxxx 1. xxxxx 1999.
Ministr:
XXXx. David, CSc. x. r.
Xxxxxxx x xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx toxicity chemických xxxxx a xxxxxxxxx
B. VŠEOBECNÝ XXXX
1. XXXXXXXX POJMY
1.1 AKUTNÍ XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxx doby (xxxxxxxx 14 xxx) xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 XXXXXX TOXICITA
xx xxxxxxxxx termín xxxxxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx to xxxxxxxx dostačující pro xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xx xxx xxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx x úmrtí.
1.3 DÁVKA
xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx vyjádřena jako xxxxxxxx (xxxxx nebo xxxxxxxxx) xxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx jednotku hmotnosti xxxxxxxxx zvířete (např. xxxxxxxxx xx kilogram xxxxxxx xxxxxxxxx), nebo xxxx xxxxxxxxxx dietní xxxxxxxxxxx (díly xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx).
1.4 XXXXXXXXXXXXXX DÁVKA
xx xxxxxxxx ze xxxx pevných dávkových xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx xx xx způsobilo xxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxxx x xxxxxxx látkou.
1.5 XXXXXXXXX
xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx dobu xxxxxxxx.
1.6 XX50 (XXXXXXX XXXXXX XXXXX)
je xxxxxxxxxxx vypočtená xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxxxxxx dobu xxxx 50 % zvířat, xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx XX50 xx xxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XX50 (XXXXXXX XXXXXX KONCENTRACE)
je xxxxxxxxxxx vypočtená xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx do xxxxxx xxxx po xxxxxxxx x 50 % xxxxxxxxx zvířat, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx XX50 xx udává xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx standardním xxxxxx xxxxxxx (mg.l-1).
1.8 XXXXX
xx zkratka xxx "xx xxxxxxxx adverse xxxxxx xxxxx" (xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) x xx xx xxxxxxxx x xxxxxx použitá xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx nedochází x xxxxxxxxxxxx toxickým xxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXX PO XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxxxxxx účinky, xxxxx se xxxxxx x pokusných xxxxxx x xxxxxxxx opakovaného xxxxxxx podávání xxxx xxxxxxxx chemické látce, xx dobu představující xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx života xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.10 XXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX (XXX - MAXIMUM XXXXXXXXX DOSE)
xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxx vyvolává xxxxxxxx projevy xxxxxxxx, xxxxx xxx podstatného xxxxx na přežití x xxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx.
1.11 XXXXXXXXXX XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.12 XXXXXXXXXX XXX
xx xxxxxxxx změn na xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx oka.
1.13 XXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXXXX XXXXXXXXX DERMATITIDA)
je xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.14 XXXXXXXXX XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx poškození xxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxx xx 3 xxxxx xx 4 xxxxx.
1.15 TOXIKOKINETIKA
xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx testovaných xxxxx.
1.16 XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), kterým(i) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx.
1.17 XXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx metabolity xxxx xxxxxxxxxxxx x těla.
1.18 DISTRIBUCE
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx.
1.19 XXXXXXXXXXXX
označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx chemická xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x těle xxxxxxxxxxxxx xxxx neenzymatickými xxxxxxxx.
2. AKUTNÍ - XXXXXXXXX APLIKACE/SUBCHRONICKÁ X XXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo systémová xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxx počtu xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (metody X.1 - B.5), xx kterých může xxx xx xxxxxx xxxxxxxx získán xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx postupy od xxxxxxxxx xxxxx až xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XX50. Pro xxxxxxxxx xxxxxx není xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx možné xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jednorázové xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pozornost xx měla xxx xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx metoda pevné xxxxx (metoda X.1 xxx) a xxxxxx xxxxxxxxx třídy akutní xxxxxxxx (xxxxxx X.1 xxxx). Při xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxx druhu xxxxxxx xxxxxx vyvozené z xxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx použita xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx aplikací (xxxxxx X.7, B.8 x X.9) xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx, aby xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx dlouhodobých xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.26 - B.30 x X.33).
3. MUTAGENITA - XXXXXXXXXXXX
Mutagenita xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx struktuře xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxx. Tyto xxxxx ("xxxxxx") mohou postihnout xxxxxx gen nebo xxxxxxxx genů, xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Účinky xx xxxx chromozómy xx xxxxx projevovat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx.
Mutagenní xxxxxxxx xxxxx se stanoví xxxxx in xxxxx xx genové (xxxxxx) xxxxxx v xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) xxxxx xx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx (metoda X.10).
Xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx X.12) xxxx xxxxxxx xxxxxxxx chromozomů xxxxxx dřeně (xxxxxx X.11). Je xxxx xxxxx xxxxx jednoznačně xxxxxxxx xx vitro xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxx látky xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx ještě xxxxx xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxx xxxxxx k xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxxxx nezachycených základním xxxxxxxx metod; xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx.
Pro xxxx účely xxxxxxxx xxxxxx B.15 xx X.25 jak eukaryontní xxxxxxx xx xxxx x xx xxxxx, xxx xxxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Tyto xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx baktérie xxxxxxxxx x základním xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxx, xx xxxxx uvažované xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx informace o xxxxxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx studie, xxxxxx xxx xxxx případ, xxxx záviset xx xxxxxxx xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxx a fyzikální xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx toxicity x xxxxxxx způsobů xxxxxxx xxxxx.
Pro xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x savců xxxx k dispozici xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx) mutacemi, xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx xxxx u xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx v xxxx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, např. xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx u myší (xxxxxx X.25). Xxxxxx xxxxx xxx použít xxx xxxxxxxxxx možného xxxxxxxxxxx rizika xxxxx xxx člověka. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx těchto xxxxx a xxxxx xxxxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx, zvláště xxx xxxxxxxxxx xxxxx test, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxx jen xx xxxxxxx závažných xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx postupuje xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x Národní xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx toxikologie.
4. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxx látky xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx karcinogeny, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx x genotoxickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx ze xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxx xxxxxxxxx testy xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Test toxicity xxx opakované xxxxxxxx, xxxxxx X.7, a xxxxxxxxxxxxx studie x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx takových xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx, např. hyperplazie x určitých xxxxxxx, xxxxx xx mohly xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx studie a xxxxxxxxxxxxxxx informace mohou xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.32) nebo xxxxx x kombinované xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.33).
X dispozici xxxx rovněž xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx změny a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx předpokládá xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx - xx vivo (xxxxxx B.21). Používá xx několika xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx.
5. XXXXXXXXXXX TOXICITA
Reprodukční xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxx zhoršení xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x samic (xxxx na xxxxxxxx) xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxx také xxxxxxxxxxxx x xxxxxx v xxxxxxx laktace.
Xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx X.31) xxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx s xxxxxxx podáváním. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x závislosti xx xxxxxxxxxxx vlastnostech xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx expozice xxxxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx vhodně xxxxxxx.
Xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx test (xxxxxx B.35) rozšířit xxx, aby xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
6. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxxx změn xxxx strukturních a xxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Předběžné xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx akutní toxicity. Xxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx aplikaci (xxxxxx X.7) xxxxxxxx také xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinku. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx chemické xxxxx s neurotoxickým xxxxxxxxxxx, které vyžadují xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky, xxxxx xxxxxxx xxx odhaleny x jiných xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx jisté xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je posuzována xxxxxxxx X.37 x X.38 xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx podání xxxxx.
7. IMUNOTOXICITA
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxxxx odpovědi imunitního xxxxxxx, xxxxx xx xx následek buď xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx by xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pomáhají při xxxxxxxxxxxx a vyhodnocení xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx aspekty xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x výsledky xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx se, xx bude v xxxxxx případě zapotřebí xxxxxxxx xxxxxxx parametry. Xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx absorpce, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxx změny v xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxx xxxx dostatečná xxxxxx x xxxxxxxxxxxx podáním (xxxxxx X.36).
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx také poskytnout xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx absorpce xxx xxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxx. Přispět xxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x předcházejících xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx studií.
9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx významnějších nečistot, x její xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx poskytují xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x pro xxxxxxxxxx x látkou x xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx x kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx nečistot) x xxxxxxxxxx médiu x xxxxxxxxxxx materiálu xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx, fyzikálně-chemických xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
10. XXXX X XXXXXXX
Pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, x správná péče x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX CHOVU
Xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx, myši a xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 22 xX ± 3 xX při relativní xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx xxxxxxx má xxx xxxxxxx 20 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx techniky xxxxxxx xxxx zvláště xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx tyto xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx podmínkách uvedeny x xxxxxx testované xxxxxx. Xxx všech xxxxxxxxx toxických xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx x xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxx x průběhu pokusu.
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x tmy xx dvanácti xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx x uvést xx zprávě x xxxxxxx xxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, mohou xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxx 5 zvířat x xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx zprávy x pokusech xx xxxxxxxxx jsou xxxxx x způsobu xxxxx x xxxxxxx a xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x jedné kleci xxx během xxxxxxxx xxxxxxxxx látce, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX KRMENÍ
Xxxxxx xxxx vyhovovat xxxx xxxxxxxxxx výživy xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Podávají-li xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, může xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx působením xxxxxxxxx látky a xxxxxxx složky xxxxxxx. Xxxxxxx takové xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx při xxxxxxxxxxxx výsledků. Používají xx xxxxxxxxx laboratorní xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x potravě, je xxxxx xxxx přizpůsobit xxxxx xxxxx.
Xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx přítomny v xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
11. XXXXXXX XXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxx testovacích xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx pozornost xxxxxxx xxxxxx.
Snížení počtu x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (X.1.xxx) nebo xxxxxx stanovení xxxxx xxxxxx toxicity (X.1.xxxx). Xxxxxx x xxxxxx xxxxxx nevyužívá xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Metoda xxxxxxxxx xxxxx akutní xxxxxxxx vyžaduje x xxxxxxx o 70 % xxxxxx xxxx xxx xxxxxx B.1.
Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx limitních xxxxx, xxxxx v testech xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1, B.2 a X.3), xxx xxxx x in vivo xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx X.11 a X.12), xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx neprovést nebo xxx omezit xx xxxxxx u jednoho xxxxxxx, je-li to xxxxxxxxxx vědecky xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx provedených xxxxx nebo na xxxxxxxxxx dobře validizovaných xxxxx in xxxxx. Xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxx provedena xxxxxx xxxxxx kožní toxicity x xxxxxx používanou x limitním xxxxx (xxxxxx X.3) x xxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4) xxxx xxx zbytečné; xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx kůže xxx xxxxxx kožní xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4), xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx oka.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupy, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x budou xxxxxx využívat xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx utrpení xxxx xx xxxxx xxxxxxx bez používání xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx, musí být xxxxxx použití xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx xxx, kde xx xx xxxxx.
12. HODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxx xx xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx je xxxxx xxx x omezené xxxx; xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx účincích u xxxx, pokud jsou x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Výsledky xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x stávajících xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx vlastností xxxxxxxxxx x kvantifikovaných xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx také xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx nových i xxxxxxxxxxx xxxxx.
Část X - Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.1. AKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXX (PER XX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx skupině xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx. Xxxx metoda xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Zvířata se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 dní xxxx testem jsou xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx je xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky ve xxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxx první xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, teprve xxxxx xxxx další xxxxxxx roztok x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx suspenze. X xxxxxxxxx vehikulí musí xxx xxxxx xxxx xxxxxx před testem xxxx xxxxx něho xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. U hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx podávat xx 20 ml.kg-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x testech xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx koncentrací, xxx xx zajistil xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx lokální xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx tomu. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx užívaných xxxxxxxxx kmenů. Xx xxxxxxx xxxxx by x obou pohlaví xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx hodnoty.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 5 hlodavců xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx samic, xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x obou xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx toxicity xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx se zvážit xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, aby xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx testech xx xxxxx xx vyvarovat xxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx látky.
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx xxxxx, nejméně tři, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tak, xxx xxx x xxxxxxxxxxx skupin xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx stačit xx znázornění xxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxx, x pokud xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
X xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx nejméně 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx skupinách 5 xxxxx a 5 samic s xxxxxxxx výše popsaných xxxxxxx. Pokud podaná xxxxx xxxxxxx uhynutí, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze ji xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx obrazu xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x trvání xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx je možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxx, x doba xx uhynutí, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx mortalitě.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx. Xxxxxxxx xx potrava xxxxxxx xxxxx před xxxxxx. U xxxxxx x vyšší xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxx x pitné xxxx xxxx xxxxxx. X xxx pokusu se xxxxxxx zváží x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx orálně x jedné dávce. Xxxx-xx možno podat xxxxx najednou, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx menších xxxxxxxxxx xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx přístup x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx xx látka xxxxxxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx, může být xxxxxxx - podle xxxxx tohoto období - potravu x xxxx zvířatům poskytnout.
Xx xxxxxx xxxxx xx pozorování provádění x xxxxxxxxxxxxx systematicky, xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx samostatné xxxxxxx. Během xxxxxxx xxx je třeba xxxxxxxx častá xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx aplikované xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx aplikaci.
Xxxxxxx xxxxxx během xxxxxxx pracovního xxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx klinická xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx denně s xxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxx, xxxx. xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Zvířata, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x ta, xxxxx přežijí xx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxx nálezy xx xxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Hodnocení xxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx
Xx dokončení xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxx se xxxxx nejméně xxxxx xxxxxxx o pěti xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví x xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X jednotlivých xxxxxxxxx může být xxxxxxxxxx použití xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Pokud xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx informace, že xxxxxxx xxxxxxxxxxx pohlaví xxxx xxxxxxx citlivější, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví xx xxxxx vynechat.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx patrný počet xxxxxx na počátku xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx s xxxxxx xxxxxxx otravy, popis xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxx testované xxxxx, xxx x xxxxxxxxx intervalech x x xxxx xxxxxxx. Xxxxx hmotnosti xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx xxxxxx xxxx než xxxxx xxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx podanou xxxxxx, xx zaznamenávají xxxx xxxxxxx vyvolané xxxxx xxxxxx. LD50 xx xxxxxxx uznávanou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx údajů xx xxxx zahrnovat xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x výskytem x xxxxxxx xxxxx abnormalit xxxxxx změn chování, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, změn tělesné xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx xxxxxxx xxxxx (počet xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx zvířat x projevy xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx podání xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxx XX50 xxx xx pohlaví, x xxxxxxx byl xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx metody výpočtu),
- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50, xxxxx xx xxx xxxxxxxxx,
- křivky xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x její xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx druhém xxxxxxx,
- rozbor xxxxxxxx (xxxxxxxx pozornost je xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mohlo xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx testu xx vypočtenou xxxxxxx XX50),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.1. xxx XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX) - XXXXXX FIXNÍ XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxx toxicity xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx během xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx s fixní xxxxxx se xxxxxxx xx dvou xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx účinky xxxxxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxx sondou x zvířat xxxxx xxxxxxx, vždy xxxxx xxxxx na dávku. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxx xxxxx a toxicity, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xx látka xxxxxx orálně xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x pěti xxxxx x xxxxx z xxxxxx fixních xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xxxxx xx odvodí z xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxx" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), xxx ne xxxxxxx.
Xx xxxxxx xx xxxxxxxx účinky. Xxxxxxxx xxxxxxx výchozí xxxxxx dávky vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx na xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx pozorována xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx otestuje na xxxxxxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxx nebo když xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx humánní xxxxxxxx, xxxxx se znova xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx "diskriminující xxxxx" (xxx xxxx B - Všeobecný xxxx xxx 1.2), xx. xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxx je xxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxx k xxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx podávat v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx svých leptavých xxxx dráždivých xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx kmeny xxxxxxxxx zvířat. Na xxxxxxx testu xx x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, v xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx studie x xxxxxx studie. Xxxxx xxxxx xxx xxxxxx studii xxxxx xxxxxxx každého x xxxx xxxxxxx.
1.2.1.2 Příprava x xxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ve vhodném xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxx první xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx roztoku, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x jiných xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx nebo xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti. X hlodavců xx xxxxx neměl xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Variabilita xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx se xxxx xxxxxxxxxxxxx takovou xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx zajistil konstantní xxxxx na všech xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxx testované xxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx. Potkanům se xxxxxxx odebere večer xxxx testem; přístup x pitné xxxx xxxx xxxxxx. X xxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx x jediné dávce. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx najednou, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxx xxxxx 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx používají xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx podávají sekvenčně, xxxx xx xxxxxxx 24 hodin xxxx xxxxxxx xxxxx dalšímu xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx zjistit xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx sedm xxx; xxxxx xxxxxxxxxxx projevy xxxxx xxxxxx sedmý xxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx ještě xx dalších xxxx xxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx výchozí xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 a 2000 xx.xx-1. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx nutné podat xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx vmezeřených xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx by xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx(xxx) dávek, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx xxxxxx, x x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx vyvolává xxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxx xx vybrat xxxxxxx dávku xxxxx xxxxx o příbuzných xxxxxxxxxx látkách. Xxxxx xxxxxx x dispozici, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx první dávky 500 mg.kg-1. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxxx, vyšetřuje se xxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x uhynutí xxx 2000 xx.xx-1, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxx xx této xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx použití výchozí xxxxx (např. 500 xx.xx-1) xxxxxxxx těžké xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. 50 xx.xx-1). Xxxxxxxx toto xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx vhodné xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, že xx xxx tomto xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx než 5 xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx hladinu xx xx mělo xxxxxx nejméně 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxx xxxxx.
Xxxxxxxxx metody xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx studii. Xx xxxxx xx vyhnout xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Dávka, xxxxx xxxx xxxxx x xxxxx, xx xxx zvolena z xxxxx xx 4 xxxxxxx úrovní dávek, xxxxxxxxx 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx ta, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zřejmou xxxxxxxx, xxxxx nikoliv xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxx x humánních xxxxxx); xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, ale mají xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx dávka vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx nevyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Zvířata xx xxxx xxxx xxx dále pozorována xxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx bylo xxxxxxxxx. Xxxxxxxx těžká xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xxx xxxxx xxxxx testována xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Opět xx xxxxxxx, která xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx měla xxx xxxxxxxxxx xx xxxx pozorovací období.
Xx podání látky xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx systematicky. Xxx xxxxx zvíře xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx aplikované xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx aplikaci.
Xxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx obrazu xxxxxx, rychlosti vývoje xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx doba, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxx a doba xx xxxxxxx, zvláště xxx, kde xx xxxxxx tendence x pozdnímu xxxxxx xxxxxxxxx příznaků.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx provádět nejméně xxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx x nejméně xxxxxxxxx xx xxx další xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx bolesti xxxx xxxxxxx příznaky xxxxxx je xxxxx xxxxxxx utratit. Častější xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxx několika prvních xxx po xxxxxx xxxxx, jestliže xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx se xxxxxxxx na změny xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, průjmu, letargii, xxxxxx a xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před podáním xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx další 3 xxx x xxxxx xxxxxx týdně. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, i ta, xxxxx xxxxxxxxx do xxxxx xxxxx, xx xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxxxx vyšetření xxxxx xxxx výjimečně xxxxx xxxxxxx xxxxx.
X xxxxxxx, že látka xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx 5 xx.xx-1 (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx naznačuje mortalitu xxx xxxx xxxxx), xx třeba xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxx x hlavní studie xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx jednotlivě xxx xxxxxx xxxxxxxxxx úroveň xxxxx. X xx xxxx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu; xxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx během testu xxxx utracených x xxxxxxxxx důvodů; xxxxx xxxxxxxxx účinků; xxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxx pozorován xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, který xxx připsat xxxxxxxxx xxxxx; xxxxxx xxxxxx xxxxx toxických účinků; xxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxx, xx xxxxx xxxxxxxxx x zaznamenat xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vzhledem xx xxxxxx nebo bolestem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xxxx zaznamenána xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx xxxxx možno obsahovat xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx i xxxxxx xxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx,
- ve formě xxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx úrovní xxxxx (xxxxx použitých xxxxxx; xxxxx tělesné xxxxxxxxx; případně xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx zvířat x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx účinků),
- xxxxxx průběh nástupu xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx zvířata xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, doba úhynu xx xxxxxx látky, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx indikaci xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- všechny histopatologické xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx, včetně xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx dávkové xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx.
3.2 Xxxxxxxxx a interpretace
Xxxxx | Xxxxxxxx | Interpretace |
5 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Méně než 100 % přežití 100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % přežití; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx jsou xxxxx xxxxxxxx Látky, xxxxx xxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx xxx 50 xx.xx-1 |
50 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % přežití | Xxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx nebo velmi xxxxxxxx. Viz xxxxxxxx xxx 5 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx | Xxxxx, které xxxx xxxxxx škodlivé Xxx xxxxxxxx x 500 mg.kg-1 | |
500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % přežití | Xxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx výsledky x 50 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxx považovat xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx x 2000 xx.xx-1 | |
2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x xxxx xxx xxxxxx toxicity | Xxx xxxxxxxx x 500 xx.xx-1 Látky, xxxxx nemají xxxxxxxxx xxxxxx toxicitu |
B.1. tris AKUTNÍ XXXXXXXX (ORÁLNÍ) - XXXXXX STANOVENÍ XXXXX XXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jak pro xxxxxxxxxx rizika, xxx xxx účely xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx xxxxxxxxxxx dávek x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx aby xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Kromě xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx tří xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx body rozhodovacího xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx testování. Použití xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx, pokud xx žádoucí xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx dávky a xxxx určena pro xxxxxxx xxxxxx LD50. Xxxxxxxx stanovení rozsahu xxxxxxx, xx kterém xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xx x x této metody xxxxxxx kritériem xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxx by trvání xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx postup xxxxxxx x xxxxxx B.1. Xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx je xxxxx spotřeba xxxxxx xxx x metody xxxxxx xxxxxxxx (orální)(B.1) x než x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1 bis).
1.2 Princip xxxxxxxxx metody
Látka xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx postupně, v xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx tři zvířata xxxxxxxx pohlaví. Xxxx xxxxx xxxxxxxx předběžnou xxxxxx. Přítomnost nebo xxxxxxxxxxxx úhynu xxxxxx xx vztahu x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, x.x.
- není xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx xxxx bude xxxxxxxx xx stejnou xxxxxx, ale xx xxxxxxx druhého xxxxxxx;
- xxxxx krok xxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx náhodně xxxxxxx, xxxxxxxx xxx, xxx byla xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 dnů xxxx xxxxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx být x klecích xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx, xxx xxxxx zvířat v xxxxx kleci xxxx xxxxxxx jasné xxxxxxxxxx xxxxxxx zvířete.
Testovaná xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx sondou xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx suspenduje xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx nejprve xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx roztoku/suspenze, xxx použití xxxxxxx/xxxxxx x jedlém xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x pak xxxxxxx x xxxxxx nosičích. Xxx xxxxxxx vehikula xxxx xxx známa xxxxxx toxická xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx známa, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx před testem.
Zvířata xxxx xxxx aplikováním xxxxx po xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx (xxxx. potkani xxxx xxx a myši 3 - 4 xxxxxx); přístup k xxxx se neomezuje.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx se přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx.
Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxx krok xx xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.3 Úrovně dávek
Výchozí xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx ze xxx xxxxxxx xxxxxx, xxx. 25, 200 x 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx taková, xxx x xxxxxxxx pravděpodobností xxxxxxxxx xxxxxxx alespoň xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx příslušného xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 1.
Pro xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx informací x vztahu struktury x xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxx naznačují, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx), pak se xxxxxxx limitní xxxx. Xxx nejsou xxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xx - s xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxx xxxxx 200 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx zpřesnit xxxxxxxx xxxxxxxxx, než jak xx xxxxxxxx test x xxxxx pevnými xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxx případech xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx testování xxx xxxxxxxxxxx pevných xxxxxxx xx xxxx 5, 50 xxxx 500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx leptavými xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx skupinami xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxxxxxxx druhého xxxxxxx xxxx při další xxxxx je třeba xxxxxxx, dokud xxxx xxxxx, xx zvířata xxxxxxxxx dávku přežila.
1.3.2.4 Xxxxxxx test
Limitní test x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví. Xxxxx xxxxx x uhynutí xxxxxxxxxxxxx x podáním xxxxx, xxx další xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxxx 200 xx.xx-1 (xxxx 500 mg.kg-1) xxxxxxx hmotnosti.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 14 xxx, kromě xxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxx vyloučena x xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxx ochrany xxxxxx. Xxxxxx pozorování xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx pevně; xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxx x délky xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx důležité xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxx x xxxx příznaky toxicity, xxxxxxx xxx-xx x xxxxxxxx xxxxxxx příznaky. Xxxxxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx jednotlivé xxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxx zvážena. Xx xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Xxx je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxx xxx - x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířatům potravu x vodu.
Maximální xxxxx xxxxxxxx, xxxxx může xxx xxxxx najednou, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. X hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 ml xx 100 x xxxxxxx hmotnosti. Rozdíly x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx minimalizovat xxxxxxxxx koncentrace tak, xxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx na xxxxx úrovních dávky. Xxxxxxxx není možné xxxxx xxxxx celou xxxxxxxx, xx možné xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx dobu xxxxxxxxxxxxxx 24 hodin.
Podrobnosti xxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx x Xxxxxxx 1.
1.3.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx (den xxxxxxxx) nebo častěji, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx, a xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx nalezena v xxxxxxxxx stavu, xxxx xxxxxxx vykazující xxxxxxxx xxxxx bolesti a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxx: tato zvířata xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx zvířata uhynulá.
Ať xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx kůži x xxxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx aktivitě x xxxxxxx. Pozornost xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx, slinění, xxxxxx, letargie, xxxxxx x kómatu.
Veškerá xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3.2 Tělesná xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx nejméně jednou xxxxx. Xxxxxxxx se x zaznamenávají xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx zvážena před xxx, xxx budou xxxxxxx utracena.
1.3.3.3 Pitva
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, se xxxxxxx xxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx zaznamenány xxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx mikroskopické xxxxxxxxx orgánů xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx přežívajících 24 x více xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x xxxxxx jednotlivém xxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxx xxxxx shrnuty xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x humánních xxxxxx, xxxx úmrtí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, popis, xxxxxx xxxxxx x vratnost xxxxxxxxx účinků, x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx výsledků xxx klasifikaci xx xxxxxxx x Xxxxxxx 2.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Zpráva x xxxxxx obsahuje xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být získány:
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx-xx xxxx;
- počet, xxxxx a xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, podmínky xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx testu.
Podmínky xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx aplikace;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx a xxxxxxx xxxx (xxxxxx xxxxx x zdroje);
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a dávkové xxxxxx (xxx. xxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx xxxxxx úmrtí, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx);
- xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x každého zvířete, xxxx-xx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx x metodou XXXX XX 423.
XXXXXXX 1
XXXXXX TESTOVÁNÍ
1. Xxx xxxx uvedeno x xxxx 1.4.2.3, xxxxxxx xxxxx xx měla xxx xx ze xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx úrovní, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx u xxxxxxxxx xxxxxx. Pro výběr xxxxxxx xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx o fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x účinku,
- xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx dávku. X xxxxxxxxxx na počtu xxxxxxx utracených nebo xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxx xx aplikaci xxxxxxx xxxxx 25 nebo 200 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx druhého xxxxxxx, obvykle se xxx xxxx netestuje. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Jestliže xx xxxx možnost potvrdí, xx třeba xxxxxxxxxx x testování xx xxxxx úrovni dávky.
4. Xxxxx xx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jedno xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx předpokládat, xx xxxxxxx XX50 xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx jen hraniční xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx reakce xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx, xxxxxxx toxické xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx klasifikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx LD50 xx xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti nebo xxxxx, xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxx xxxxx.
5. Xxxxxx umožňuje testování x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx 2). Této xxxxxxxx xx možno xxxxxx buď k xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nebo xxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1.
Xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 25 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx zvířat x xxxxxxx (1 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx je xxxxx uhynulých nebo xxxxxxxxxx zvířat (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu xxxxxxxxx xxxxxx xx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx šipek xx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Klasifikace xx provede na xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx rámečku xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx testu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkou.
Ukončení xxxxx: Klasifikace xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx udána xxxxx, počet zvířat x pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx první, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx druhé).
Pod xxxxxxx xx počet xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx pokračuje xx směru šipek xx xx dosažení xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx testu x xxxxxxxxxx doplňkovou xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Klasifikace xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx testování x výchozí dávkou 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx a pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx je počet xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3). Podle xxxxx uhynulých xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx šedého xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot uvedených x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx nebo podle xxxxxxx xxxxxxxxxxx uvedeného x Dodatku 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx se provede xx xxxxxxx konečných xxxxxx uvedených v xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx.
XXXXXXX 2
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx založených xx testovací xxxxxxxx 1
X rámečcích xx xxxxx dávka, počet xxxxxx a pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx první, 2 - xxxxxxx xxxxxxx jako druhé).
Pod xxxxxxx xx počet xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Xxxx rámečky xxx rámečkem "XXXXX XXXXX XXXXXXXXX" x xxxxxxxxxx xxxxxx dodatku xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx klasifikaci. Xx xxxxxxxxx podle xxxxxxxx 1 se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, dokud xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Xxxxxxx x xxxxxxxxx vyznačují xxxxx xxxxxxx xxx příslušný xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, že XX50 xx xxxxx xxx hodnota x xxxxxxxxxx rámečku xxxxx.)
(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkou 200 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkou 2000 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
x) Xxxxxxx dávka 25 xx/xx xxxxxxx hmotnosti
b) Xxxxxxx dávka 200 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
x) Xxxxxxx dávka 2000 xx/xx xxxxxxxxx
X.2. XXXXXX XXXXXXXX (INHALAČNÍ)
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xx xxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx par, xxxxxxx xxxx, teplotě xxxx, xxxxxxx vzplanutí x xxxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx
1.2 Xxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx studované xxxxx xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, a xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxxxxx x zjišťují xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx pokusu uhynou, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x takových xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, o kterých xx známo, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx následkem xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx potřebného xxxxx experimentálních skupin. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx expozičního xxxxxxxx, xxxx třeba xxxxxxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, přidá xx x testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; v xxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx aditiva, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx historická xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx důvody xxxxx xxxx. Xxxxxxx se xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx použít xxxxxxx 10 xxxxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí.
Xxxxxxxx: Používají-li xx x akutních xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vyšších xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx by xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxxx volit x xx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky. X těchto xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xx xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx koncentrace
Xx xxx dostatečný počet xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, a xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx x mortality. Xxxxxxx údaje xxxx xxxxxx xx znázornění xxxxxx xxxx dávkou x xxxxxxxxxx a, xxxxx xx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.3.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxx-xx xx 4 xxxxxxxx expozici 5 samců x 5 xxxxx plynu x xxxxxxxxxxx 20 xx.x-1 nebo xxxxx xx aerosolu tekuté xxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx 5 xx.x-1 (nebo - x xxxxxxxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sledované xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx - xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dosažitelné xxxxxxxxxxx) xxxxx 14 xxx x xxxxx xxxxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxx, považují xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx expozice
Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx být 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Xxxxxxxx
Pro xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx proudění xxxxxxx s výměnou xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx zaručen xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx konstruovat xxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx stability xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx by xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx orálně-nasální, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx expozice; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxx vzniku x xx xxxxxx xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx je možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxx x xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx, stejně xxxx xxxx do xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx je xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx postupu
Zvířata xx bezprostředně před xxxxxxxx zváží. Xxxxxxxx xx xx xxxx 4 hodin xx xxxxxxxx rovnováhy xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx. Teplota xxxxx xxxxxx xx xxx 22 oC ± 3 x X. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx ideálně xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x aerosoly). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 mm xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Používají xx vhodné systémy xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dosaženo xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx x provoz boxu xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx.
Xx xxxxx zajistit xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:
(a) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně),
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxx v dýchací xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx odchylovat xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ±15 %. U některých aerosolů, xxx xxxx xxxxxx regulace xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Po xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxxxxxx možné. Pokud xx xxxx částic x xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx xxx xxxxx, xxx xx pokus xxxxxxxx (ale xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx),
(x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx skončení xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxx prvního xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx často. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pracovní xxx xx třeba xxxxxxx pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx studii, např. xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat nebo xxxxxxx či xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx umírajících xxxxxx.
Pozorování zahrnuje xxxxx kůže, srsti, xxx, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dýchání, xxxxxxx, křečovým xxxxx, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx zachytit xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx stanovuje xx expozici xxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, která xxxxxxx do konce xxxxxx, se pitvají xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx změnám xxxxx i dolní xxxxx xxxxxxxxx traktu. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x odeberou xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx sestaví xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících další xxxxxxxx xxxxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx nálezy. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x zaznamenat, xxxxx xxxxxxx přežijí xxxx xxx xxxxx xxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. XX50 se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx x stupněm všech xxxxxxxxxx, xxxxxx změn xxxxxxx, klinických xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx poškození, xxxx xxxxxxx hmotnosti, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu pokusu xxxxxxxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, atd.,
- xxxxxxxx pokusu: xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení včetně xxxxxxxxxx, typu, rozměrů, xxxxxx vzduchu, systému xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx systému a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx a distribuce xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx tabulky x xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx odchylkou). Mají xxxxx možno obsahovat xxxx údaje:
x) xxxxxxxx průtoku vzduchu x inhalačním zařízení;
x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx;
c) xxxxxxxxx koncentrace (celkové xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx do inhalačního xxxxxxxx, dělené xxxxxxx xxxxxxx);
Xxxx.: xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx (xxxx. xx vodě) xx xxxxx uvádět nejen xxxxxxxxx koncentraci látky xx xxxxxxx, xxxxx xxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx látky ve xxxxxxxx.
d) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxx;
x) skutečná xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
x) xxxxxxxxxx xxxxxx aerodynamického průměru (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odchylka (XXX);
x) xxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx;
x) xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví a xxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxx zvířat, xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx humánně xxxxxxxx; počet zvířat x příznaky xxxxxxxx; xxxxx exponovaných xxxxxx);
- doba xxxxxxx xxxxx expozice xxxx xx jejím skončení, xxxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx;
- hodnota XX50 pro každé xxxxxxx stanovená xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (xxxxx je xxxxx xxx stanovit);
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxxx) a xxxx xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxx metoda xxxxxxxxx);
- pitevní xxxxxx;
- všechny histopatologické xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat x humánních xxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxxxxx hodnotu LC50);
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.3. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xx xxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx zvířat, x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx během xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx nemají xxxxxxx x takových xxxxxxx x takovým xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x pokusných xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx a xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá zvířata xxxxxxx přiřadí do xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Xxx 24 hodin xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx zvířat xx zádech ostříhá xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx je třeba xxxx na to, xxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx) xxxx, xxx by mohlo xxxxxx její xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit xxxxx xxxx xxxxxxx vehikulem, xxx byl xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nutné xxxx x úvahu xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx látky kůží. Xxxxx xxxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxx, v xxxx xxxxx xx může xxxx xxxxx xxxxxx xx styku x xxxxxxx xxxx, x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxx nejvíce usnadňuje xxxxxx xxxx. Testované xxxxxxxx xx zpravidla xxxxxxxx neředěné.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xx důvody. Je xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xx začátku testu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 zvířat xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx samic, musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx být březí. Xxxxx xx x xxxxxxxxx informace, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx zvířata tohoto xxxxxxx.
Poznámka: Xxxxxxxxx-xx xx v akutních xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, než xxxx hlodavci, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxxx zvolit x je třeba xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx toxické xxxxx. X xxxxxx testech xx xxxxx vyhnout xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx, nejméně xxx, x xxxx xxx xxxxxx odstupňovány xxx, xxx xxxxxxx testovací xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků x xxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxx leptavé xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx údaje musí xxxxxx xx znázornění xxxxxx mezi xxxxxx x účinkem, x xxxxx možno xxxxxxx xxxxxxxxx LD50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxx provést xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx nejméně 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx skupinách 5 xxxxx x 5 xxxxx s xxxxxxxx xxxx popsaných xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx xx být xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx ji xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x trvání fáze xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx prodloužit. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx příznak otravy xxxxxxx x vymizí x xxxx xx xxxxxxx, zvláště xxx, xxx je patrná xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxxxxxx xx plochu, xxxxx xxxx xxx 10 % xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx může xxx xxxx xxxxxx xxxxx; xxxx by xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plochu xx xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx mulový xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x aby xx xxxxxxxxx orálnímu xxxxxx. X zamezení xxxxxx látky xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx nelze xxxxxxxxx.
Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxx nebo xxxxx xxxxxxx způsobem se xxxxxxx očištění xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx zvíře xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Další každodenní xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx sloužit xxxxxxxxxxx snížení ztrát xxxxxx pro xxxxxx, xxxx. xxxxxx nebo xxxxxxxxx uhynulým xxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Pozorování xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, xx xxxxxx xxxx provedena xxxxxxxx, xxx x xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx nejpřesněji. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, i xxxxx přežijí xx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx patologické změny xx zaznamenávají x xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxx histopatologické xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
Xx dokončení studie xx jednom xxxxxxx xx xxxx látka xxxxxxx xxxxx skupině x pěti xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví, xxx xx xxxxxxxx, zda xxxxxxx druhého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx látku. X xxxxxxxxxxx případech xxxx xxx odůvodněno xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx citlivější, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Údaje xx sestaví do xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx počet zvířat xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx uhynutí jednotlivých xxxxxx, počet zvířat x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxx testované xxxxx, xxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx stanovit x xxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xxxxxxx déle než xxxxx xxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx stres x bolesti xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx uhynutí xxxxxxxx touto xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx metodou. Xxxx xx hodnotí xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx zvířat testované xxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx hmotnosti, xxxxxxxxx x všech xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx informace:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxx, xxxxxx atd.,
- xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx: xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (včetně vehikula, xxxxx xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxx toxických xxxxxx xxxxx pohlaví x podle xxxxx (xxxxx xxxxxx uhynulých xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx exponovaných xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxx látky, důvody x xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxx XX50 xxx to pohlaví, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx úplný xxxxx, x to xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (s xxxxxxxx metody výpočtu),
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (xxxxx xxx xxx xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxx mortality xx xxxxx a xxxx xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx výsledků (xxxxxxxx xxxxxxxxx věnovat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx LD50 x xxxxxxxxxxx x utracením xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx během xxxxx),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.4. XXXXXX XXXXXXXX (KOŽNÍ XXXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx
Xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx xxxxx s xxxxx snížit xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, které xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Následující xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx pro posouzení, xxx je xxxxxx xxxxx test, studie xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zda xxxx xxxxxxxxx xxxxx testování.
x) Fyzikálně-chemické vlastnosti x chemická xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX xxxxx či xxxxx 11,5) xxxx xxxxx testovat na xxxxxxxx kožní xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx také xxxxxxxxxx xxxx kyselou xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xxxx dostupné xxxxxxxxxxx xxxxxxx závažných účinků xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx in xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx.
x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx toxicity. Jestliže xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx toxicity xxx xxxxxxxx aplikaci xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx dávky (2000 xx.xx-1 tělesné hmotnosti) x xxxxxx pozorováno xxxxxxxxxx kůže, xxxx xxxxx dále xxxxxxxx xxxxx dráždivost. Xxxxxx xxxx třeba testovat xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx cestě xxxxxx.
Studovaná xxxxx xx nanese x xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx, xxxxxxx každé xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xx stanovené xxxx xx xxxxxx, vyhodnotí x následně xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxx xxxxxxxxxx musí xxx dostatečně xxxxxx, xxx xxxx možné xxxx zhodnotit xxxx xxxxxxxxxxxxx pozorovaných xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Asi 24 xxxxx před xxxxxxxxx testu xx xxxx xxxxxx na xxxxxx ostříhá nebo xxxxx. Xxx střihání xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. abrazí). Xx xxxxx použít xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx husté xxxxx, xxxxx xxxx výraznější x některých xxxxxxxx xxxx. Testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx husté xxxxx.
Xxx pokusech x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x práškové xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx látku dostatečně xxxxxxxx vodou, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx byl xxxxx xxxxxxx x kůží. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx testovanou látkou. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Je xxxxx použít xxxxx xxxxx savců, xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx králíka.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xx z in xxxxx screeningových xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx vyvolávat xxxxxxx (xxxx. xx xxxxxxx), xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx tohoto xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx dvou xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxx nejsou xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx jiný postup, xxxxxx xx na xxxxxxxxx xxxxx xxxx 0,5 ml kapaliny xxxx 0,5 x xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx kůže xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx kontrola.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Dobu xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxx dostatečně dlouhá, xxx xxxx xxxxx xxxxx vyhodnotit vratnost xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx po aplikaci.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Testovaná xxxxx se xxxxxx xx xxxxx plochu (xxx 6 cm2) xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxx past xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx testovanou látku xx xxx, a xxx xxx xxxxxxxxx xx xxxx. Xx xxxx trvání expozice xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx dostalo x mulu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xx vdechnout.
Xx xxxxx xxxx expozice xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx testovanou látku xxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, ale xxx, xxx nebyla xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Doba xxxxxxxx xx obvykle 4 xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx látka xxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxx, xx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx zkrátit délku xxxxxxxx (např. xx 1 xxxxxx xxxx 3 minuty). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 3 xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx odstraní xx 3 minutách. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx druhý plátek xx 1 xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx v xxxx xxxx naznačují, xx xx nezbytná 4xxxxxxxx xxxxxxxx a xx neodporuje xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx plátek xx 4 xxxxxxxx x klasifikují xx xxxxxx xxxxxxxx kůže. X případě, že xxxx xxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx, je třeba xxxxxxx xxxx x xxxxxxxx nejméně xxxx xxxxxxx xxxxxx; pokud xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů (xxxx. xxxxxxxx xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx).
Jestliže je xxxxxxx xxxxx reakce (xxxx. xxxxxxx) xxxxxxxxxx xx 3 minutách xxxx po 1 xxxxxx, je xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xx xxxxxxxx podmínek je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx pokud xx xxxxxxxx očekávanému xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx u xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx a vyhodnocení
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxx xx 60 minutách x xxxx 24, 48 x 72 hodin xx odstranění plátku x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx podráždění kůže xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx systému xxxxxxxxx v tabulce 1. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 72 hodin xxxxxxxx xxxxxxx odeznění xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxx. Vedle xxxxxxxxxx kůže je xxxxx podrobně popsat xxxxxxx xxxxxxx léze xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx) x jiné xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx, maskovaných xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxx měření xxxxxxxx xxxxx xxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx každé pokusné xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxx pozorování. Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx podráždění xxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu obsahuje xxxxx možno tyto xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx chovu, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx, technik přípravy x xxxxxxx xxxx, xxx xxxxxx: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxx tabulky xxxxx x xxxxx xxxxxx xxx každé jednotlivé xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xx 1, 24, 48 x 72 xxxxx xxx. xx odstranění xxxx),
- xxxxx zjištěných xxxxxxx poškození xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx všech xxxxxxx toxických xxxxxx xxxxx podráždění xxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx výsledků.
4. XXXXXXX
4.1 Stupnice reakce xxxx
Hodnota | |
1. Xxxxxxxxx erytému x xxxxxxxxx | |
1.1 Xxxxx xxxxxx | 0 |
1.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx (stěží xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx viditelný xxxxxx | 2 |
1.4 Mírný xx xxxxxxx erytém | 3 |
1.5 Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxx) xxxx tvorba příškvaru (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx | 4 |
2. Hodnocení xxxxx | |
2.1 Xxxxx xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx lehký edém (xxxxx viditelný) | 1 |
2.3 Lehký xxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx ohraničena xxxxxxxxx vyvýšením) | 2 |
2.4 Mírný edém (xxxxxx xxxxxxxx xxx x 1 xx) | 3 |
2.5 Výrazný xxxx (xxxxxxx xxxx xxx 1 xx x otok xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx plochy) | 4 |
4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (XXX)
XXX xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx průměr xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx x x takto získaných xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx průměr.
Xxxxxxxxxxx | XXX |
xxxxxxxx | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx xxxxxx | 0,5 &xx; XXX ≤ 3 |
středně xxxxxx | 3 < XXX ≤ 5 |
xxxxx xxxxxx | XXX &xx; 5 |
X.5. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXX XXXXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
1.1.1 Xxxxxxx xxxxx
Je xxxxx xxxxxxx zvážit xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx s xxxxx snížit xx xxxxxxx testování látky xx xxxxxxxx, které xxxxx xxxxxxx těžké xxxxxx. X xxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx. xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx látky, které - xxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx v xxx xX rovné či xxxxx 2 nebo xX xxxxx xx xxxxx 11,5, xxxx xxxxx xxxxxxxx, pokud xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; látky x prokázanými potenciálně xxxxxxxxx xxxx silně xxxxxxxxxx vlastnostmi xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx pro xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, že tyto xxxxx budou xxx xxxxxxx účinky xx xxx při testování xxxxx metodou.
x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx dráždivosti. Xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx výrazně xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xx studii xxxxx xxxxxxxxxxx, není xxxxx xxxx testovat xx xxxxxxxxxx pro xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, že xxxxx xxx xx xxx xxxxxxx účinky.
Xxxxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx oka xxxxxxxx xxxxxxxx zvířatům, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx kontrola. Xx xxxxxxxxxxx intervalech xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx podráždění x xxxxxx xx xxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxx provést xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxxxxx zhodnotit také xxxxxxxx xxxx nevratnost xxxxxxxxxxxx účinků.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
24 hodin xxxx xxxxxx se x xxxxxxx x xxxxxxxxx vybraných pokusných xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx. Xxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxxx defekt xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxxx různé xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, doporučuje xx xxxxx přednost xxxxxxxx dospělému xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx zvířat
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxx xx jediném xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (reverzibilní xxxxxx) xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) účinky xxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx postupu, xxxx xxxxx další xxxxxxxxx xxxx dráždivosti x xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx specifických xxxxxxx xxxxx xxx případně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx použití xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Úroveň xxxxx
Při xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 0,1 ml. X xxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxx 0,1 xx xxxx xxxxxxxx xxx 0,1 x (xxxxxxxx xx vždy xxxxx xxxxx). Jedná-li xx x xxxxx xxxx hrubě xxxxxxx xxxxx, xx třeba xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx. Objem xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxxxx, např. xxxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxxxxx xx sprejích x pumpou xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nádobkách xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx 0,1 xx xxxxx x xxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxx popisu xxx kapaliny.
1.2.2.4 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxx doby xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxx dostatečně xxxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx však xxxxx 21 xxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Zvířata xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx zvířeti xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx tak, xx xx xxxxxx xxxxx xxxxx odchlípne xx xxxx xxxxx. Xxxxx xx xxx xxx na 1 xxxxxxx lehce k xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, slouží xxxx kontrolní.
Xxxxxxxx xx předpokládá, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx změnám x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx oko.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 24 xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, pokud xx xx považuje xx xxxxxx.
X některých xxxxx, které xxx xxxx xxxxxxxxx metodě xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, kterým xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 3 xxxxxxx. Xxx xxxxxx po instilaci xx xxx xxxxxxxx xxxxxx po xxx xxxxxx x použitím xxxxxxxx objemu kapaliny x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxx se xxxxxxxxx xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx. Neprojevují-li xx xx 72 xxxxxxxx žádné příznaky xxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxxx ukončit. Xxxx pozorování xx xxxxx prodloužit, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx rohovky xxxx jiné xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx tak, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx změn x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx x xxxxx ve xxxxxx x xxxx xxxxxxxx léze.
Intenzitu xxxxxx oka xx xxxxx xxx každém xxxxxxxxx stanovit xxxxx xxxxxxxx v příloze x xxxxxxxxxx. (Klasifikace xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx laboratoře x xx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx podráždění xxx.)
Xxxxxxxxxxx reakcí xx xxxxx usnadnit xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxxx lampy, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxxxx zařízení. Xx xxxxxxxxxxx pozorování po 24 hodinách xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx podráždění, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lézí x xxxxxxx mimooční xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx),
- x xxxxxxxxx formě výčet xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. xx 1, 24, 48 x 72 hodinách)
- xxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx zjištěného xxxxxxxxxx x poleptání, včetně xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx metody xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx body (1, 24, 48 x 72 hod.), např. xxxxxxxxxx lampa, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx.,
- popis xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
4. DODATEK
4.1 Stupnice xxxx xx xxx
Xxxxxxx | |
A. Xxxxxxxx - xxxx | |
Xxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Slabý xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx | 1 |
Výrazný xxxx x xxxxxx xxxxx | 2 |
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx víček xx xxxxxxxx | 3 |
Edém xxxxxxxxxx víčka xxxx xxx xx polovinu xxxx xxxxx | 4 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxx | |
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxx xx xxxxx sekrece xx xxxxxxxx xxxxxx) | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx víček a xxxxx x xxxxxxxxx xxx | 2 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx víček x xxxxx v xxxxxxx xxxxx oka | 3 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxxx | |
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxx zřetelně xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, rozlišení xxxxxxxxxxxx xxx nesnadné, difusnější xxxxx xxxxxxx xxxxx | 2 |
Difuzní xxxxx xxxxxxx xxxxx | 3 |
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx | |
Xxxxxxxx nejsou xxxxxxxx | 0 |
Nepravidelná xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxx cév xxxxx rohovky (jedna xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx), reakce xx xxxxxx je xxxxxxxxx, xxxxxxxx opožděná | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x hemoragie | 2 |
x xxxxxxx (xxxxx nebo xxxx xxxxxx charakteristik) | |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx oblast je xxxxxxxxx diseminovaného charakteru, xxxxxxx duhovky xxxxxxxxx xxxxx viditelné | 1 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx | 2 |
Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxxxx xxxxx viditelný | 3 |
Úplná neprůhlednost xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx neviditelná | 4 |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xx pozorovatelná, xxx xxxx xxxxxx xx ≤ 1/4 plochy xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 plochy xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 3 |
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx &xx; 3/4 xxxxxx rohovky | 4 |
4.2 Xxxxxxx akutního xxxxxx xxxx dráždivosti (XXX)
Xxxxxxxxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx
XXX = 2.(X + X + X) + 5.X + 5.X.X
Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (IOP) xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxx interval xxxxxxxxx xxxx xxxxxx z XXX.
Xxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx XXX xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx v xxxxxxx testu
4.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx | IOA |
nedráždí | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
xxxxxx | 15 - 29,9 |
xxxxx xxxxxx | 30 - 59,9 |
velmi xxxxx dráždí | 60 - 79,9 |
xxxxxxxx xxxxxx | 80 – 110 |
X.6. SENZIBILIZACE XXXX
1. XXXXXX
1.1. Xxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx jsou považovány xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx systém xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx jediná xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro lidskou xxxx x která xx xx hodila xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látky, xxxxxx schopnosti xxxxxxx xxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx testy x xxxxxxxx, xx kterých xx alergický xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx testované xxxxx xx Xxxxxxxxx kompletním xxxxxxxx (FCA), x xx xxxxx xxx xxxxxxxx.
Testy x xxxxxxxx xx zdají xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx pravděpodobného senizibilizačního xxxxxx pro lidskou xxxx xxx xxxxxx xxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xx xxx dává xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xx morčatech (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Test - XXXX) xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxx schopnosti xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx dalších xxxxx, je XXXX xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx (xxxxxxxx se xxxx Xxxxxxxxxx testu) xxxxxxxxxx xx méně citlivé.
X určitých xxxxxxxxx xxx zdůvodnit xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxx spíše xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx použití Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx důvody.
X xxxx metodické xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx na xxxxxxx (XXXX) x Xxxxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx validizované x xxxxx jsou odborné xxxxxx xxx jejich xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx uznávanou xxxxxxx dá xxxxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxxx látku označit xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx dalšího xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxx výsledku xx xxxx xxxxx provést xxxx xx xxxxxxx, xxx xxx je xxxxxx x této xxxxxxxxx kapitole.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx: (alergická xxxxxxxxx dermatitida) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxx reakce xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zarudnutím kůže, xxxxxx, xxxxxxx, puchýřky, xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx reakce lišit x xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx zarudnutí xxxx otok.
Xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx záměrem xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Indukční xxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx expozici, v xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx rozvinout xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Provokační xxxxxxxx (xxxxxxxxx): experimentální xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx subjekt xxxxxx reakcí xxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx šest xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, o xxxxxxx xx známo, že xxxx mírný xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx kůži.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % x metody x xxxxxxxx a xxxxxxx 15% x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx dává xxxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxx XXX | Xxxxx EINECS | xxxxxxxx název | xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | alfa-hexylcinnamaldehyd |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | kaptax |
94-07-7 | 202-303-5 | Ethyl xxxxx kyseliny x-xxxxxxxxxxxxx | xxxxxxxxx |
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx.
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx injekcemi xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aplikací (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxxx 10 až 14 xxx (xxxxxxxx xxxxxx), x xxxxxxx kterého xx může xxxxxxxxx xxxxxxxx reakce, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Rozsah x xxxxxx xxxxx reakce xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxx x stupněm xxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx indukce a xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávka.
1.5 Xxxxx testovacích xxxxx
Xxxxxxxx je xxxxxxxxxx xx nezbytné xxxxxxxxx testovanou látku, xxxxxxx se xx x použitím vody xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx kožní xxxxxx xxxx integrita xxxxxxx.
1.5.1 Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxxx (XXXX)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx albinotická xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx 5 xxx xxxx zahájením xxxxx. Xxxx testem xx zvířata náhodně xxxxxxx xx expozičních x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx, holením xxxx xxxxxxxxx depilací, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxx xx to, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx testu.
1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny albinotických xxxxxx.
1.5.1.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být xxxxx. Xxxxxxxxxxx skupinu tvoří xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxx 5 xxxxxx je třeba x xxxxxxxxx skupině. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx xxxxx než 20 xxxxxxxxxxx a 10 xxxxxxxxxxx morčat a xxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xx dalších xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx celkového xxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.3 Xxxxxxx úrovně
Xxxxxxxxxxx testované látky xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xx takovou xxxxxx, kterou zvířata xxxxxxx xxxxx snášejí x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx střední podráždění xxxx.Xxxx xxxxxxxxxx koncentrace xx použije maximální xxxxxxxxxxx, která x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolá xxxxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx v předběžném xxxxxx xx xxxx xxxx třech xxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx bylo xxxxxxxxxx XXX.
1.5.1.3 Popis xxxxxxx
1.5.1.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Následující 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx injekcí, xxxxx po 0,1 xx, xx podají xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx symetricky xxxxx xxxxxxx xxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx adjuvans (XXX) xxxxxxx x vodou xxxx fyziologickým roztokem x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx ve vhodném xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
Injekce 3: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx FCA x xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxx xxxxxxx 3 xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx rozpustí před xxxxxxxx x XXX xx vodné fázi. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx látky xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x nezředěném FCA. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 3 má xxx xxxxxx xxxx pro xxxxxxx 2.
Xxxxxxx 1 x 2 xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx a co xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx 3 xxxxxx xx kaudální xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Den 0 - Kontrolní xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx injekcí, xxxxx xx 0,1 xx, se xxxxxx xx xxxxxxxx míst xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx kompletní xxxxxxxx (XXX) smíšené x xxxxx nebo fyziologickým xxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxx vehikulum;
Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) se xxxxx XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx a kontrolní xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx hodin před xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxx pro kůži, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx důkladném xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 0,5 xx 10% laurylsulfátu sodného xx vazelíně, za xxxxxx navození xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6. - 8. den - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx látkou xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 xx), který xx xxx přiloží xx testovací xxxxxx x xxxxxx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 48 hodin. Xxxxx vehikula xx xxxx xxxxxxxxx důvody; xxxxx xxxxx jsou xxxxx rozetřeny x xxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx; kapaliny xxx xxxxxxxxx xxxxx.
6. - 8. xxx - Kontrolní xxxxxxx
Xxxxxxxxx plocha xx xxxxx zbaví xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxx skupiny na xxxx 48 xxxxx.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. xxx - Xxxxxxxxx a kontrolní xxxxxxx
Boky xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xx jeden bok xxxxxxx je aplikována xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx nebo v xxxxxxx a xx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xx xx xxxxx). Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xx 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx a xxxxxxxxx skupiny
- xxxxxxxxx 21 hodin xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx oholí x x případě xxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx dalších xxxxx xxxxxxxx (přibližně 48 xxxxx xx začátku xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx) xx pozoruje xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx xx xxxxx stupnice xxxxxxx x xxxxxxx;
- přibližně 24 xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxx (72 xxxxx).
Doporučuje xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx, xxx pozorující osoba xxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx provokace (xx. xxxxxxxxx provokace), provede xx přibližně x xxxxx xxxxxxx, v xxxxxxx xxxxxxx znovu x kontrolní xxxxxxxx x vehikulem. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx reakce x xxxxxxxxx nálezy, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x provokačních postupů, xx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (xxx xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx.
1.5.2 Buehlerův xxxx
1.5.2.1 Xxxxxxxx
Zdravá xxxxx dospělá albinotická xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx podmínky xx xxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx testu. Před xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xx provede xxxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xxxx na xx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx kůže. Zvířata xx zváží před xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxx.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx laboratorní xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxx. Samice xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx březí. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx 20 zvířat v xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx silné xxxxxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolává xxxxxxxxxx xxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx možno xxxxxx koncentrace stanovit x xxxxxxxxxx xxxxxx xx dvou xxxx xxxxx zvířatech.
Pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx nedráždící xxxxxx detergentu xxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx je preferován 80% xxxxxx xxxxxx/xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Testovaná xxxxxxx
Xxxxx xxx xx zbaven srsti (xxxxxxxx ostříhán). Systém xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (výběr vehikula xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx lze xxxxxxxx aplikovat přímo).
Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x kontaktu x xxxx překrývacím xxxxxxx xxxx komůrkou a xxxxxxx xxxxxxx po xxxx 6 xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx okluzivní. Xxxxxx je bavlněný xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxxx 4 - 6 xx2. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s použitím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx zajistila xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx být xxxxx xxxxx expozice.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxx je zbaven xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Xx xxxxxxxxx plochu xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, a xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x testované skupiny. Xxxxxxxx xxxx je xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx x kontaktu s xxxx překrývacím plátkem xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx obvazem po xxxx 6 xxxxx. Xxxxx xx možno xxxxxxxx, xx negativní xxxxxxxxx xxxxxxx není xxxxx, lze použít xxxxx kontrolní skupiny xxx xxxxxxxx.
6. - 8. x 13. - 15. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx jako x xxx 0 xx provede xx xxxxxxx testovací xxxxxx xx tomtéž xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) 6. - 8. xxx x xxxxx 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx
27. - 29. xxx - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx
Neošetřený xxx testovaných a xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx srsti (xxxxxxxx xxxxxxxx). Okluzivní xxxxxx xxxxxxxxxx příslušné xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx aplikuje na xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx aplikovat xxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx komůrky xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.
1.5.2.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 hodin xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx plocha xxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx později (xxxxxxxxx 30 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx uvedené x xxxxxxx;
- xxxxxxxxx po dalších 24 xxxxxxxx (tj. xxxxxxxxx 54 xxxxx xx aplikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxx) se xxxxx xxxxxx znovu pozorují x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx systém "xxxxxxx xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx pozorující osoba xxxx, které xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx kontrolní.
Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, v xxxxxxx potřeby xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxx reakce x xxxxxxxxx nálezy, xxxxxx xxxxxxxxx reakcí, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (viz xxxxxxx). X objasnění xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx dalších xxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx tloušťky xxxxxxx xxx.
2. SBĚR X XXXXXX XXXXX (GPMT X XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx se sestaví xx xxxxxxx, ze xxxxx musí xxx xxx každé xxxxxxx xxxxx patrná reakce xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX (XXXX X XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx xxxx screeningový, xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx testu xxxx xxxx xxxxxx (xxxx. XXXX - xxxx regionálních xxxxxxxxxxxx xxxxx, XXXX - xxxx ztluštění ucha x xxxx) xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx postupu x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx látky.
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (XXXX x Buehlerův xxxx)
Xxxxxx o xxxxxx xxxxxxxx tyto xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- použitý xxxx morčat;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx zvířat;
- xxxxxxxx chovu, xxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx a konci xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx podmínky:
- způsob xxxxxxxx xxxxx pro plátkový xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx o materiálech x technice plátkového xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx x provokačních koncentracích xxx xxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxx x odstranění xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula;
- xxxxxxxxxxx x celková xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, použitá xxx xxxxxxx a xxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx použité xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
- slovní xxxxx charakteru x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx histopatologické xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx hodnocení vyvolaných xxxxxxxxxxxxx reakcí
0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
1 = xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kůže;
2 = středně xxxxxxx x xxxxxxxxxx zarudnutí xxxx;
3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx pozitivity xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, tj. xxxxx xxxx, kolik xxxxxx v xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx klasifikuje xxxx
xxxxx xxxxxxx (X. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
xxxxx alergen (XX. st.) - 9 - 28 % xxxxxx
xxxxxxx xxxxx alergen (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 65 - 80 % xxxxxx
xxxxxxxx xxxxxxx (V. xx.) - 81 - 100 % xxxxxx
B.7. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (28DENNÍ XXXXXXXXX APLIKACE)
1. METODA
1.1 Princip xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx zvířata xxxxx pečlivě pozorují, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Pitva xx xxxxxxx u xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx nebo jsou xxxxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx konec xxxxxx, xx xxxxxx x xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx mladá xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx x jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Klece xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx co xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx klece. Každé xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx lze xxxxxxx xxxxxx xxxx x potravě xxxx x xxxxx vodě, xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností xxxxx.
Xxxxx je xx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx nosiči (xxxxxxxx). Xxxxxxxxxx se nejprve xxxxxx xxxxxxx vodného xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x jedlém xxxxxxxxxx oleji (xxxx. xxxxxxxxxx) x pak xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx toxická xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxx. Xx nezbytné xxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, ale xx xxxxx použít x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxx z běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Podávání xxxxx xx mělo xxxxx co xxxxxxxx xx odstavu x x každém případě xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxx xx nemělo xxxxxxxx rozpětí hmotnosti xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx hodnoty.
Xxxxx xx xxxx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx x xxxx studiích xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx hladinu dávek xx použije xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Pokud se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx koncem xxxxxx.
Xxxxxx je možno xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 28 dnů xxxxxxxx dávku x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, trvání xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx. Používá xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx skupinu. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx v kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x to xx xxxxxxx množství, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx informací xxxx očekávat xxxxxx xxx denní dávce 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx test. Xxxxxx-xx xxxxxx data x dispozici, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx za účelem xxxxxxxxx xxxxx.
Při xxxxxx dávek je xxxxx vzít x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx x toxikokinetických xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx utrpení. Dále xx xxxxxxx xxxxx x klesající xxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx dávce. Nejnižší xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (NOAEL). Xxxxxxx je vhodný xxxx- xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx xxxxx xxxxxx větší xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx čtvrtou xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. faktor xxxxx xxx 10).
Pokud xx xxxxxxxxx látka xxxxxx x xxxxxxx xxxx pitné vodě, xx xxxxxxxx zajistit, xxx podávané xxxxxxxx xxxxx neovlivňovalo xxxxxx x xxxxx rovnováhu. Xxxxxx-xx se testovaná xxxxx v potravě, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x ppm) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx. Aplikuje-li xx xxxxx xxxxxx, mělo xx xx tak xxx každý den xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Pokud má xxxx studie xxxxxxx xxxx předběžný pokus xxxx xxxxxxxxxxx studií, xx třeba v xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxxx-xx xxxx xxxxxxxxx zde popisovaným xxxxxxxx žádné toxické xxxxxx při xxxxx 1000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx den xxxx při takové xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx vodě, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x analogie s xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx provedení xxxxxxxxxxx testování xxx xxxxx xxxxxxxxx úrovních xxxxxxx. Toto pravidlo xxxxxxxxx testu xxxxx, xxxxx xxxxx o xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xx je xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx xx 28 xxx. Zvířata xxxxxxxxx skupiny jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx dalších 14 dnů xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zpožděné xxxxxx x pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx testovaná xxxxx 7 dní x týdnu po xxxx 28 dnů, xx zdůvodněných xxxxxxxxx 5 xxx v xxxxx. Denní dávka xx podává xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kanylou. Xxxxxxxxx objem tekutiny, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, závisí xx xxxxxxxxx zvířete. Xxxxx xx neměl xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x případě vodných xxxxxxx xxx podat x 2 ml xx 100 g xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x podávaném xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx byl podáván xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx dávky. Xxxxxxx xx x xxxxx dráždivých a xxxxxxxxx, x xxxxxxx xx třeba obvykle xxxxxxx xx stupňovanými xxxxxx při vyšších xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx klinické pozorování xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx denně, nejlépe x tutéž xxxxx xxxx x x xxxxxxxx doby očekávaného xxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát denně xx xxxxxxx zběžná xxxxxxxxx všech xxxxxx xx xxxxxx zjištění xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx moribundní x xxxxxxx xxxxxxxxxxx silnou xxxxxx nebo xxxxx xxxx vyřazena, utracena xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Důkladné xxxxxxxx xxxxxxxxx všech xxxxxx xx provede před xxxxx aplikací (xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx týdně. Xxxx xxxxxxxxxx se děje xxxx chovnou xxxx x standardním pozorovacím xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx se pečlivě xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxxxxxxxx x testující xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx nejméně; xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxxxxx neměla znát xxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny kůže, xxxxx, očí x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, změny xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxx, dále xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx klonických x xxxxxxxxx xxxxxx, stereotypů x xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx) nebo xxxxxxxxx xxxxxx chování (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, pohyb xxxxxx).
Xx čtvrtém xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx podněty (xxxx. xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx xx síla xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx aktivita. Xxxxx xxxxxxxx informace x xxxxxxxxx, které xx xxxxx k testování xxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx Xxxxxxxxx xxxx, xxxx X).
Xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx aplikace lze xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (90denní); v xxx xxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx do této xxxxxxxxxx studie. Ovšem x x tomto xxxxxxx jsou xxxxx x funkčních xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx výběr xxxxx pro subchronickou xxxxxx.
Výjimečně xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, které xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx a xxxx
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Spotřeba xxxxxxx x xxxx se xxxx nejméně xxxxxx xxxxx, také x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx.
1.2.3.3 Hematologie
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx nebo x xxxxxxx utracení zvířete, xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx, se xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xx vhodných xxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx analýza krve xx xxxxxx posouzení xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx tkáně, zvláště xx játra x xxxxxxx, se xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxx xxxx xxxx x průběhu utracení (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx během xxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx přes noc xxxxxxx xxxx1). Vyšetření xxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx sodíku, xxxxxxxx, glukózy, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx proteinů, xxxxxxxx, xxxxxxxx alespoň dvou xxxxxx indikujících xxxxxx xx jaterní buňky (xxxx alaninaminotransferáza, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx). Zaměření xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxx jiného xxxxxx) x xxxxxxxxx kyselin xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx xx xxxxx vzhled, xxxxx, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx hmotnost, pH, xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxx příp. krvinky.
Xxxx je třeba xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x séru.
Další xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxx podezřelých x xxxxxxxx na xxxxxx metabolické xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx, fosforu, xxxxxxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx do určitých xxxxxx xxxxx nebo xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx druh x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx některých xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxx stanovení xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1) Xxxxxxxxx xx xxxxx je xxxxxxx xxx xxxx xxxxxx x xxxx x xxxxxx, zvláště xxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx pro xxxx xxxxxxxxxx je xx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx vyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx mohla xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx interpretaci. Na xxxxx straně, hladovění xxxx xxx xx xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx x potravě by xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testované látce. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provést až xx pozorování xxxxxxxxx xxxxxx xx 4. xxxxx testu.
1.2.3.5 Xxxxx
X všech xxxxxx použitých xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx, zahrnující xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxx lební, hrudní x xxxxxx, x xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx, slezina, xxxxx x xxxxx xxxxx zvířat xx xxxxx očistí xx xxxxxxxx xxxxx a xx xxxxxxxx xx xxxxx se xxxxx xx vlhkém stavu, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickými xxxxxxx, xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx hemisfér, mozečku x xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, tenké i xxxxxx xxxxxx (včetně Xxxxxxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, štítnou xxxxx, průdušnici x xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx), xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxx, xxxxxxxx), xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx (přednostně xxxxx xxx oblast xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx pro pokrytí xxxxxxxxxxx účinků), xxxxxxxxx xxxx (x. xxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxx), xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, řez kostní xxxxx (nebo čerstvý xxxxx z xxxxxx xxxxxx dřeně). Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxxx orgán, xxxxx by mohl xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx nejvyšší xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx provést xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx v xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx nutno provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx i x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxxxxxxxxxx léze xx xxxxx vyšetřit.
X xxxxxx satelitních xxxxxx, xxxxx xxxx do xxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x tkáně, xx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXX A ZÁZNAM XXXXX
K xxxxxxxxx xxxx xxx údaje x každém jednotlivém xxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxx údaje xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů, xxxx úmrtí jednotlivých xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx doby xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xxxx x procento zvířat x jednotlivými xxxx xxxx.
Výsledky x xxxxxxx xxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistickou metodu xx xxxxx zvolit xxx xxx plánování xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx obsahuje xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh/kmen;
- xxxxx, xxxxx a xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx atd.;
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx jiné než xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx aplikaci, xxxxxxxx x přípravě diety, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxx látky;
- xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxx xxxx (xxx) na skutečnou xxxxx dávku v xx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx (pokud xxx o aplikaci x xxxxx xxxx xxxx);
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx vody (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxx;
- xxxxxxxx potravy a xxxx;
- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx úrovně, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx toxicity;
- povaha, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, příp. xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx, úchopové síly x motorické aktivity;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x příslušnými xxxxxxx;
- výsledky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx x hmotnosti xxxxxx;
- pitevní xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx XXXX TG 407.
X.8. XXXXXX XXXXXXXX INHALAČNÍ (28DENNÍ XXXXXXXXX APLIKACE)
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx, xxx xxxx, xxx xxxx, xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx pokusných zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx koncentracích, každá xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xx 28 xxx. Použije-li xx xxx dosažení xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v atmosféře xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vehikulum. Během xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx přežijí xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Příprava
Xxxxxxx 5 dní před xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx a krmení, x xxxxxx budou xxxxx experimentu. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, přidá xx x testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx vznikla příslušná xxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Existují-li vhodná xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud nejsou xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Pracuje xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx z běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic x 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx budou xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx exponovat xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 zvířat (5 xxxxxxx každého xxxxxxx) xx dobu 28 xxx a během xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx úrovní xxxxxxxxxxx x jedna xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx - pokud xx užije - x koncentraci stejné xxxx u xxxxxxx x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo jen x xxxxx počtu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxx koncentrací, mají xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Ve xxxxxxxxx x xxxxxx x střední koncentrací x x kontrolní xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxx 6 xxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx expozice.
1.3.2.5 Expoziční xxxxxxxx
Pro xxxxxx xx zvířaty xx xxxxxxx dynamické xxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu x xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x expoziční atmosféře. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xx nejvíce shlukování xxxxxx x xxx xxxxxxxxx expozice testované xxxxx xxxx xx xxxxxxxx. Xxx zajištění xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx neměl xx x zásadě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx použít xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové expozice; xxxxx dva způsoby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx cestami.
1.3.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Pokusná xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxx, xx kterém xx objeví x xxxx odezní toxické xxxxxx.
1.3.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx dalších 14 xxx bez aplikace, x posouzení zotavení x otravy xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx být 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx vlhkost xx xxx mezi 30 % x 70 %, x xxxxxxxx případů, xxx xx xxxx možné (xxxx. experimenty x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx vodního sloupce) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx okolí. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx analytickou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx získání xxxxxxxxxx koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx nastavit xxx, xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx stejné. Xxxxxx xxxx zaručovat, že xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx nemá koncentrace xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x více xxx ± 15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxx xxxx úrovně xxxxxxxx xxxx možné xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísání. Xx celou xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx koncentrace tak xxxxxxxx, jak xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx distribuce xxxxxxxxx částic xxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx expozice a xx jejím xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají systematicky; xxxxx zvíře xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat xx příznaky xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx výskyt, xxxxxx x trvání. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxxxx týdně x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx ke ztrátám xxxxxx, xxxx např. x xxxxxxxx kanibalismu, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx zvířata, která xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata x xxxxxxx x těžkém xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x pitvat.
Xx konci xxxxxx xx u xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů x xxxxxxxxxxx krve.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx a ledvin xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x těchto xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x séru (xxxxx známá xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), aspartátaminotransferáza (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x séru.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, fosforu, chloridů, xxxxxx, xxxxxxxx, glukózy xx xxxxx, lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx použity xxx studium širšího xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3.1 Xxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx (xxxxxxx xxxxxx, játra, ledviny, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, x xxxxxxx orgány x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx velikosti) xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx na pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Plíce xx třeba xxxxxxx xxx poškození, zvážit x xxxxxxx vhodným xxxxxx, tak aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
U xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxx kontrolní xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx x orgánech x xxxxxxx xx skupině x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx těchto xxxxx x x všech xxxxxx x nižšími xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxx x xxxxx, ve xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx xxx.,
- podmínky xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx konstrukce, xxxx, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx systému, xxxxx xxxxxxxxx odpadního xxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx v xxxx, xxxxx je xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,
- xxxxx o xxxxxxxx xx sestaví xx tabulky a xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx údaje: a) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením; x) xxxxxxx a vlhkost xxxxxxx; c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx přiváděné xx inhalačního xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx); x) xxxxxx vehikula, xxxxx xxxx užito; x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx; x) xxxxxxxxxx medián xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (GSD),
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle pohlaví x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x přežití xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo jiných xxxxxx,
- úroveň xxx xxxxxx,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- hematologická vyšetření x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xx xx možné,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.9. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xx xxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxx období podávání xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu, se xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Krátce xxxx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx srsti xx xxxxxx možné, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx cca 24 xxxxx před experimentem. Xxxxxxxxx xxxx oholení xx potřeba xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx xx to, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx nanášení xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % povrchu xxxx. Xx třeba vzít x xxxxx hmotnost xxxxxx xxx rozhodování x xxxxxxxxx připravované xxxxxx kůže x x velikosti xxxxxxx xxxxxx. Xxx pokusech x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx upraveny xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit xxxxx, xxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná zvířata
Xx možno xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx však xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx začátku xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx) xx xxxxxxx kůží. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x nesmí být xxxxx. Pokud xx xxxxxxx budou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvýšit xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx koncem pokusu. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx následujících 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx zpožděný xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - xxxxx xx použilo vehikula - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx expozice xx xxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se mělo xxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx. X intervalech xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx stálá xxxxxxx dávky xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx s pokusnými. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám, x to xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx aplikuje xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx nebo xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx vyvolat žádné xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, xx xxxxxxxx dávka tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx jen xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx než 3 xxxxxx xxxxx, xxxx být vmezeřené xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x x kontrolní xxxxxxx xx počet xxxxxxx měl být xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx snížit koncentraci, xxx x xxxxxx xxxxxxx úrovně xxxx xxxx x omezení xxxx xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. Došlo-li x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx dokonce xx určitých xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx jej xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 mg.kg-1 nebo xxxxx xxxxx, která xxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, žádné xxxxxxx xxxxxx, není xxxxx xxxxxxx nutná.
1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Všechna zvířata xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x dobu, xxx xx objeví x xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx látce xxxxxxx 7 xxx x xxxxx po xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx skupiny, xxxxx xxxx určena xxx xxxxxxxx pozorování, xx třeba chovat xx xxxxxxx 14 xxx bez xxxxxxxx, xxx se xxxxx xxxxxxxxx reparace xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.
Testovanou xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % xxxxxxx těla; x vysoce xxxxxxxxx xxxxx může být xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx největší xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx udržována v xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx mulového xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx dále xxxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxx, xxx se xxxxxx xxxxx a testovaná xxxxx fixovaly x xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxx použít x xxxxxxxxxx pro xxxxxxx volnosti pohybu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx doporučit. Xxxx xxxxxxxxxxxx metody xx xxxxx xxxxxx "ochranného xxxxx".
Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno xxxxx nebo x xxxxxxxx jiného vhodného xxxxxxx xxxxxxxx pokožky.
Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx a xxxxxxx x také xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Doporučuje se xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx pravidelné xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx ztrátám xxxxxx, xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chybného xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x výjimkou satelitních xxxxxx, xxxxxxx. Umírající xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx provedou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx a srážlivosti xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: k xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jeden x xxxxxx xxxxxxxxx: alaninaminotransferáza x séru (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx, lipidů, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy.
Další xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx xxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx spektra xxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva. Aspoň xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx předešlo xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx, xxxx. xxxxxxxx x exponovaná xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx třeba přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x ohledem xx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
U xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x zvířat kontrolní xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Pokud se x orgánech a xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx poškození způsobená xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx provést histologické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x u všech xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx otravy x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx poškození.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx k xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx atd.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxx obvazu; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (včetně vehikula, xxxxx se xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj o xxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxx jiné xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx další xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx a vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx to xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.10. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXX XX VITRO
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx OECD XX 473, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Test (1997).
1.1 XXXX
Účelem xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx in xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (1) (2) (3). Strukturální xxxxxxx xxxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou většinou xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxx x aberacím xxxxxxxxxxxxxx typu. Vznik xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx daná xxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxx aberací x xxxxx se x tomuto xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx příčinou xxxx xxxxxxxxxxx chorob x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx doklady toho, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x příbuzné jevy, xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx genech xxxxxxxxxxx xxxxx, hrají xxxxx xxx xxxxxx rakoviny x xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxx xx používá x odhalení xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxxx xxxxx, které jsou x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxx savce karcinogenní, xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx tímto xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx x existuje xxxxx xxxx dokladů x xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxx testem nezjistí, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx než xxxxxx xxxxxxxxxx XXX.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx kmenů xxxx primární xxxxxxx xxxxxxx. Použité buňky xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx chromozómů, xxxxxx diverzity x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Testy xx xxxxx xxxxxxxx obecně xxxxxxxx zdroj xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx podmínky x xxxxx xx xxxx. Je xxxxx xx vyvarovat xxxxxxxx, xxxxx xx mohly xxxx x pozitivním xxxxxxxx, xxx neodrážejí xxxxxxx xxxxxxxxxx, nýbrž xxxx xxxxxxxxx změnami xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (4) (5).
1.2 DEFINICE
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, případně xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx chromozómového typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx xxxx xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx místě (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx chromozóm, prsténčitý xxxxxxxxx-xxxx).
Zlom xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx předpokladu, xx xxxxxxx mezera xx struktuře xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxx poškozené xxxxxxxxxx. Xxxx pak x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (nebo xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx chromatida hodnoceného xxxxxxxxxx je kratší x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx, nýbrž xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx vybočením xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4n xxx.).
Strukturální xxxxxxx: xxxxx chromozómové struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx dělení xx xxxxxx metafáze, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Buněčné xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx, x xx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx. Ve xxxxxxxxxxx intervalech xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx linií, kmenů xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxx xxxxxxxx (například xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx a kultivační xxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, teplota x xxxxxxx). U xxxxxxxxx linií x xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x nepřítomnost xxxxxxxxxxx v xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx třeba znát xxxxxxxx xxxx buněčného xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx kultur
Stabilizované xxxxxxx xxxxx x xxxxx: xxxxx xx xxxxx xx zásobních xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx konfluentní xxxxxx před dobou xxxxxxxx a xxxxxxxx xx při xxxxxxx 37 xX.
Xxxxxxxxx: xx kultivačnímu xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxx xxx xxxx xxxx x vhodným antikoagulantem (xxxx. xxxxxxxxx), nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx získané xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace
Na xxxxx xx testovanou xxxxxx působí x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Nejobvyklejší xx xxxxxxxxx suplementovaná xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (S9) xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx činidly xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (10) (11) (12).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mitochondriální xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10 % x/x. Aktivita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx bude xxxxxxx xx tom, xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx použity x xxxxxxxxx modifikované xxxxxxx xxxxx exprimující xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxx vědecky xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx P450 x metabolismu xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx testovaná látka x xxxxxx stavu, xxxxx se xxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx údaje o xxxxxx stabilitě prokazují, xx delší skladování xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5 XXXXXXXX TESTU
1.6 XXXXXXXXXXXX
X xxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx existovat podezření, xx by xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx narušovat xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx být podpořeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxx tam, xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě zvažováno xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Je-li xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlo xxxxx bezvodé. Xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.6.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxx x systému x xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx v hlavním xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx, například xxxxxx xxxxxxxxxx, počet xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx minimálně xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Dochází-li x cytotoxicitě, xxxx xxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx znamená, xx xx jednotlivé xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx více xxx násobkem, xxxxx xxxx mezi hodnotami 2 x √10. X xxxx xxxxxxxx xxxxx musí být xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx signifikantní pokles xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx o xxxx než 50%). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx nepřímou xxxxx xxxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xx expozici xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxx akceptovatelný xxx xxxxxxxxx kultury, kde xx jiná detekce xxxxxxxx xxxx obtížná x xxxxxxxxxxx. Jako xxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx použít také xxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx; xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx vždy xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx subpopulací xxxxx. X xxx x xxxx prodloužení xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx času xxxx znamenat xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx sklízení x xxxxxxxx optimálního výtěžku xxxxxxx.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx činí xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx nejnižší x xxxxxx 5 µx/xx, 5 xx/xx xxxx 0,01 M.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek, xxx jsou netoxické x koncentracích nižších, xxx je xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx se xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx být xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace vyšší, xxx xx mez xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx-xx k xxxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, než xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx srážením. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx počátku x xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx může xxxxxxxxxxx změnit x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, séra, X9 xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx dá zjistit x prostým xxxx. Xxxxxxxxx nesmí být xx překážku xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.6.2 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Xx xxxxxxx experimentu, xx xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací xxxx xxx xx, xx xxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx). Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx mutagenního xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx kontrolu xx používá xxxxx xxxxxxxxx, x to xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x detekovatelný xxxxxx xxxxxxx nad pozadí, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testovacího xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx tak, xxx účinek xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Mezi xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Metabolická xxxxxxxx | Xxxxx | CAS | XXXXXX |
Xx | xxxxxx methansulfonát xxxxx xxxxxxxxxxxxxx ethyl xxxxxxxxxxxxxxx mitomycin X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Xxx | xxxx[x]xxxxx cyklofosfamid xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Xxx pozitivní xxxxxxxx se mohou xxxxxx x jiné xxxxxx xxxxx. Xxx, xxx xx xx xxxxx, xx vhodné xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxxx skupiny.
Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx rozpouštědlo xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx experimentální xxxxxxx. Mimoto xx xxxxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxx jakéhokoliv xxxxxxxxx.
1.6.3 Xxxxxx
1.6.3.1 Expozice testovanou xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx i nepřítomnosti xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xx lymfocyty xx xxxxx začít působit xxx 48 xxxxx xx stimulaci xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx používají xxx kultury; x xxxxx xx doporučuje xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x rozpouštědlem, xxxx xxxxxxxxx. Pokud xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx prokázat, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (13) (14), xx xxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxx jedna xxxxxxx.
V xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, jako xx použití xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (15).
1.6.3.2 Xxxx xxxxxxxx kultury
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxxx aktivací x xxx ní xx xxxx 3 - 6 xxxxx x xxxxxx xx odebírají x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5násobku xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (12). Xxxxx xxxx xxx použití xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxx výsledky xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x kontinuální expozicí xx xx doby xxxxxxxx kultivace xxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx normálního xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx delší, xxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Negativní xxxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. X případech, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nepokládá xx xxxxx, xx třeba xxxx xxxxxxxxxx zdůvodnit.
1.6.3.3 Příprava xxxxxxxxxx
Xx buněčné kultury xx působí Xxxxxxxxxx® xxxx kolchicinem xxxxxxx xx xxxx 1 - 2 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx přípravu xxxxxxxxxx zpracovává xxxxxx. Xxxxxxxx chromozómů xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, fixace x odbarvení.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Všechny xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, se xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx postupy často xxxxx k rozbití xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx, musí xxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx centromer x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx ± 2. Xxx xxxxxx koncentraci x xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx rozprostřených metafází, xxxxxxxxxxx z xxxx xxxxxx, xxxxx byly xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx vysoký, xxxx xx xxxxx analyzovaných xxxxxxxx xxxxxx.
I xxxx účelem xxxxx xx zjistit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx polyploidii x xxxxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi. Xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx strukturálních xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx aberací xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx x testu xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx kultury. Xxxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Verifikace xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx nepožaduje. Nejednoznačné xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx. X nutnosti xxxxxxxx xxxxxxxxx výsledky bylo xxxxxxxxx x odst. 1.4.3.3. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxx modifikaci xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, které lze xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislá frekvence xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx mohou xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3) (13). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však neměla xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxx inhibovat xxxx xxxxxxxxx xxxxx (17) (18).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx v tomto xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx výjimečných xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx xxxxxx testované látky. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx ohledu xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky testu xx xxxxxxxxxxxx aberace xx xxxxx xxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx xx daných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testovaná xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
XXXXXX X PRŮBĚHU POKUSU
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx uvést tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla/vehikula
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- karyotyp x vhodnost daného xxxx buněk,
- xxxxxxx mykoplasmat, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx o délce xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxx, xxx xxxx použita xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, použitý xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxxxx, xx-xx xx xxxxx - xxxxxx udržování xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx to xxxxx
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx působení na xxxxx
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxx koncentrací x xxxxx kultur, xxxxxx např. xxxxx x cytotoxicitě x xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx média, xxxxxxxxxxx XX2, xx-xx xx xxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx kultivace,
- xxxx působení,
- xxxxxxx buněk na xxxxxxx kultivace, je-li xx xxxxx
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx přípravy podložních xxxxxxx,
- kritéria xxx hodnocení xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx toxicity,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, negativní nebo xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxxx konfluence, údaje x xxxxxxxx cyklu, x xxxxx buněk, xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xX x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx stanoveny,
- xxxxxxxx aberací, xxxxxx xxxx,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx aberacemi x xxx xxxxxxxxxxxxxx aberací xxx každou experimentální x xxxxxxxxx kulturu xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
vztah xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- statistické xxxxxxx, pokud byly xxxxxxxxx,
- souběžné xxxxx z negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.11. XXXXXXXXXX - TEST XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXX XXXXX XXXXX XX XXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 475, Xxxxxxxxx Xxxx Xxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x savců xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx aberace mohou xxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx numerické xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, ovšem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx jsou xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x člověka x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx jevy, xxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx x tumorsupresorových xxxxxx, xxxxx xxxxx xxx rakovině x xxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx hlodavci. Xxxxxxx tkání v xxx je kostní xxxx, protože se xxxxx x xxxx xxxxxx vaskularizovanou, xxxxxxxxxx xxxxxxxx rychle xx xxxxxxxx buněk, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx druhy x xxxxxx xxxxx xx v xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xx chromozómové xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rizika, xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx faktory xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x procesů xxxxxxxx XXX, i xxxx xxx xxxxx být xxxx xxxxxxxxxxx druhy x mezi xxxxxxx xxxxxxx. Test xx xxxx xx xxxx xxxxxx pro další xxxxxxx xxxxxxxxxxx efektu, xxxxx byl xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx doklady x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxx použití xxxxxx xxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx jedné, případně xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx xxxx zlom x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx chromatidy: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx porušení kontinuity xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx struktuře xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Dále pak x případech, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx zlomu xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx chromatida hodnoceného xxxxxxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx jádro xx mitózy, xxxxx xxxxxx další S-fáze. Xxxxxxxxx jsou chromozómy x 4, 8, 16, ... chromatidami.
Xxx: achromatická xxxx xxxxx než xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxx populace.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx oproti normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx buňky.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (n) mimo xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4x atd.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: změna xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zjistitelná xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x fragmenty x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Zvířata xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxx xxxx xx působení xx xxxxxx. Xxxx usmrcením xx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Colcemidem®). Z xxxxx kostní dřeně xx xxx připraví xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Výběr živočišného xxxxx
Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx použít x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny mladých xxxxxxxx jedinců. Hmotnostní xxxxxxx by xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X, vlhkost xx měla být 50 - 60 %.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx minimalizovaly xxxxxxxx xxxxx toho, jak x kde xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx jednoznačně xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxx podáním zvířatům xx xxxxxxxx xxxx xx připraví xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x případně se xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx čerstvé xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx ji xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xx xxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx o kompatibilitě x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx xxxxx, bylo xx xxxxxx místě použito xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx stejně.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx měly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo při xxxxxxx, kdy xxx xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx účinky xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx xx xxxxx podávat xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx je xx xxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, jako je xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx nitrosomočovina | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 |
cyklofosfamid | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx vehikulem x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx experimentální xxxxxxx xxxx xx xxx zařazeny xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, pokud nejsou x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje o xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x o interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx u xxxxxxxxxxx kontrol xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx vehikulum xxxxxxxxxx xxxxx nepříznivé xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx v době, xxx xx studie xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x stejném živočišném xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx mezi xxxxx pohlavími xxxxxx x toxicitě xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Tam, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxx například u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxx xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací schéma
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx aplikace xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxx xxxxx za xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Jiné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx odebírají xx xxxx xxxxxxx časových xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx. U xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu (která xxxx obvykle 12 - 18 xxxxx) xx podání xxxxx. Xxxxxxx xxxx potřebná xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxx xx kinetiku buněčného xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx chromozómových xxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxx xx 24 hodinách od xxxxxxx xxxxxx. Pokud xx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxxx xxxxx normálního xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxxx xxxxxx látky.
Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Colcemidu® xxxx kolchicinu x xxxxxxxx se x xxxx xx vhodném xxxxxxxxx odeberou xxxxxx. X xxxx je xxxxx interval zhruba 3 - 5 xxxxx, u xxxxxxxx xxxxxx zhruba 4 - 5 hodin. X xxxxxx xxxxx xx odeberou xxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x dispozici xxxxx xxxxxx xxxxx, je xxxxx ji xxxxxxxx x xxxx laboratoři xx použití xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (5). Při xxxxxxxx toxicity se xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx tři xxxxx xxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Ta xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx byly xxxxxxx. Látky, jež x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, mohou představovat x xxxxxx kritérií xxx stanovení xxxxx xxxxxxx, jež xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx případ xx případu. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx jako xxxxx, která vede x určitým xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti x xxxxx xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx x látkách x xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nemusí xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx za xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx limitní dávka 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xx xxx při xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xxx době xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx zapotřebí xxxxxxx x limitním xxxxx xxxxx xxxxxxx úrovně.
1.5.5 Xxxxxxxx látky
Testovaná xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx buď xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X odůvodněných xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxx způsoby xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x xxxxxxxxx; vyšší xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx xxxxx upravit xxxxxxxxxxx látky tak, xxx xxxxx byl xx xxxxx dávkových xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Okamžitě po xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx se ni xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx fixuje. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx na podložní xxxx x obarví xx.
1.5.7 Analýza
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx 1000 buněk x xxxxxxx xxxxxxx.
X každého xxxxxxx xx xxxxxxxxx minimálně 100 buněk. Tento xxxxx xx možné xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx aberací. Všechny xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol) xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx při jejich xxxxxxxx xxxxxxx často x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metafází spojeného xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx 2n ± 2.
2. ÚDAJE
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Údaje od xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx v tabelární xxxxx. Experimentální jednotkou xx xxxxxxx. X xxxxxxx zvířete se xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx buňku x xxxxxxxx xxxxx xx strukturálními chromozómovými xxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenají jednotlivé xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, jejich počet x četnost. Gapy xx zaznamenávají xxxxxx x xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxxxx se xx celkové xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx o xxx, xx obě xxxxxxx reagují xxxxxxxx, xx možné údaje xx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x chromozómovými xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxx xx skupině x xxxxxxxxxxxx dávkou xxx jednom xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx biologickou významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyjasnit xxxxxx testováním, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx má schopnost xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, že testovaná xxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx fáze buněčného xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx xxxxx, při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx systému xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Většina xxxxxxxxxxx xxxx poskytuje xxxxxxxxxxx pozitivní xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx případech však xxxxx ze získaného xxxxxxx xxx xxxxxxx x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxx nejednoznačné xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že xx daných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxx x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx látka bude xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx xxxxxxxxxxx cílovou xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx živočišný xxxx/xxxx,
- počet, xxx x pohlaví xxxxxxx,
- původ, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxx xxx určení xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx metody x xxxxxxx, že xx xxxxx dostala do xxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx hmotnosti/den),
- xxxxxxxxxxx o kvalitě xxxxxxx a vody,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované látky x odběru vzorků,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- látka xxxxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx x doba xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx jedno zvíře,
- kritéria, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- známky toxicity,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- typ x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx jedince zvlášť,
- xxxxxxx počet xxxxxxx x dané xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx odchylka,
- xxxxxxxx změny xxxxxxx,
- vztah xxxxx-xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx.
- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
X.12. XXXXXXXXXX - XX XXXX XXXXXXXXXXXX XXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 474, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxxxxxxxxxxx xxxx xx vivo x savců xxxxxx xx zjištění xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x chromozómech xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; test xxxxxxx x tom, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x kostní xxxxx xxxx. x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx.
Účelem xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx představujících xxxxxxxxxxxx fragmenty nebo xxxxxx chromozómů.
Xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx zbude x xxxxxxxxxx vzniklé xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx, že xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx. Nárůst xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
V xxxxx xxxxx se xxxxxx dřeň xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx proto, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx. Analýza xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) erytrocytů x mikrojádry x xxxxxxxxx krvi je xxxxxxxxxx u každého xxxxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx bylo prokázáno, xx xxxx slezina xxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx podle xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx kinetochoru (centromery), xxxx xxxxxxxxxxxxx DNA x mikrojádru. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) erytrocytů v xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx zvířata testují xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Tento xx xxxx mikronukleus xxxx u xxxxx xx xxxxxxx vhodný x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx reparace XXX, x xxxx xxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx a xxxx konečným xxxxxxx xxxxxxx. Test xx xxxx xx také xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x systému xx xxxxx.
Existují-li xxxxxxx o xxx, xx se xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx metabolit xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): xxxxxxx xxxxxxxxxx, se xxxxxxx xx během xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx (mikronukleus): xxxx xxxxx oddělená xx xxxxx buňky (xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx mitózy, nebo xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx opožďujícími xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: zralý xxxxxxxxx, jemuž chybějí xxxxxxxx a jenž xx xx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx xxx ribozómy.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: nezralý xxxxxxxxx, vývojové xxxxxxx, xxx xxxx dosud xxxxxxxx ribozómy, xxxxx xxx lze xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, xxxxxxx xx ve xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xx izoluje x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx (1-7). Pokud xx používá periferní xxxx, xxxxxxx xx xx vhodné xxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx se xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx používá xxxxxxxxx xxxx, musí xxx xxxx od xxxxxxxx xxxxxxxx xx zpracování xxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx se xxxxxxxx přítomnost mikrojader.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx druhu
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx nebo xxxxxxx; může xxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxx savčí xxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx. Xxx ovšem xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx, xx se x něj xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xx x něj byla xxxxxxxxx xxxxxxxxxx citlivost xxxx látkám, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx měly xxx minimální x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % průměrné xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Všeobecné xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělí xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx dobu xxxxxxxxx pěti xxx xx xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx minimalizovaly xxxxxxxx xxxxx xxxx, jak x kde xxxx xxxxx umístěny.
1.4.1.4 Příprava xxxxx
Je-li xxxxxxxxx xxxxx v pevném xxxxx x je-li xx možné, látka xx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx připraví její xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx o xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx ji neovlivní.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyvolávat toxické xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx reagovat. Používá-li xx xxxxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x kompatibilitě x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Xx xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
X xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx nalezena xxxxxxxxxx in xxxx xxx dávkách, kdy xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx volí tak, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx preparátu. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx způsobem xxx xxxxxxxxxx xxxxx x vzorek xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx možné, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxx | CAS | XXXXXX |
xxxxx methansulfonát | 62-50-0 | 200-536-7 |
N-ethyl xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
mitomycin X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Negativní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx být zařazeny xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zpracování, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx historické údaje x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx x negativních xxxxxxx pouze jeden xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx dobou první xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx publikované xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx nevyvolává žádné xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrola xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx pouze x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 1 - 3 xxxxx), xxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx kontroly.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx x pohlaví xxxxxx
V každé xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (11). Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, existují xxxxx o stejném xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx stejných způsobů xxxxxxxx prokazující, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx pohlaví xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx chemikáliím xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, jak je xxxx například u xxxxxxxxx farmaceutických xxxxxxxxx, xxxxxxx xx test xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx doporučit xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. jedna, dvě xxxx více xxxxx x 24hodinových xxxxxxxxxxx). Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xx x daném xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku tak xxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx limitní xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx do xxxx odběru xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx dávku xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxx xx může xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
(x) Xx zvířata xx xxxxxxxxxx látkou xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx kostní xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx dvakrát, xxxxxx xx xxxxx xxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxxxx ne xxxxxxx xxx po 48 hodinách od xxxxxx xxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Pokud xx vzorky xxxxxxxx xxxxx xxx po 24 hodinách, xxxx xxx xxxxxxxxxx. Vzorky xxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx minimálně xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxx xx 36 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx xxxxxx, celkově xxxx nikoli déle xxx 72 xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx časovém xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx odpověď, xxxx xxx xxxxx xxxxx zapotřebí.
(x) Xxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx den (xxxx. dvě nebo xxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxxx intervalech), odeberou xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx mezi 18 x 24 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx 36 x 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (12).
Je-li xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx použít x xxxxx odběrové xxxxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx třeba xx xxxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, kmene, xxxxxxx x xxxxxxxxx režimu, xxxx se použijí x hlavní xxxxxx (13). Xxx zjištění xxxxxxxx xx užívají xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx dávky xxx, xxx pokrývaly xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx nulové. Xxx xxxxxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxx třeba použít xxxxx nejvyšší xxxxx. Xx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx toxicity, xx při xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx byly xxxxxxx. Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako jsou xxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxx představovat výjimky x těchto kritérií xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxxxx xx případu. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx také xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx k xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx (např. xxxxxx podílu nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx minimálně 2000 xx/xx xxxxxxxxx x jedné dávce xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x podobnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx neočekává xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx studie za xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Pro xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx za den xxx době trvání xx 14 dnů, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx xxx době xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx expozice xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x limitním xxxxx dávkové xxxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx buď xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxx způsoby expozice. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, závisí xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x hmotnosti; xxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx horší účinky, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx tak, xxx objem xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx / xxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x femuru xxxx tibie xxxxxxxx xx usmrcení xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx se xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx získává x ocasní xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxx. Krevní xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (8) (9) (10), xxxx se xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx specifického xxx XXX (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 s xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx eliminovat xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx. Xxxx výhoda xxxxxxxxx, xx xx xx xxxxxx použít xxxxx xxxxxxx (xxxx. Xxxxxx). Xxx xxxxxx x xxxxx systémy - xxxxxxxxx kolony xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx (16) - pokud tyto xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx rutinně xxxxxxxxx xxx xxxxxxx mikrojader.
1.5.7 Xxxxxxx
X každého xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). X xxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxxxxxxx a v xxxxxxx xxxxxxx periferní xxxx xxxxxxxxx 1000 xxxxxxxxxx (17). Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních kontrol) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx jedince xx vyhodnocuje xxxxxxxxx 2000 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx. Doplňující xxxxxxxxx xxx získat xxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxx xxxxxxxxx nemá xxx xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx menší xxx 20 % xxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx dobu xxxx xxxxx xxxx xxxxx, lze xxxx xxxxx mikrojader xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx jedince. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx systémy xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx - xxxx xxxxxxxxx), pokud xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxx. U xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxx zaznamená xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx test xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxx xxxx xxxxx xxxx déle, je xxxxx uvést také xxxxx x zralých xxxxxxxxxxxx (pokud xxxx xxxxxxxxxx). Podíl xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx žádné xxxxxxx x tom, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx údaje za xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxxxxx xxxxx buněk x mikrojádry xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx časovém xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní.
Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx jednoznačně pozitivní xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx nelze ze xxxxxxxxx souboru xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testu xxxxxxx, xx látka xxxxxxxx tvorbu mikrojader, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx poškození xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířecího xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Je xxxxx uvažovat, jaká xx pravděpodobnost, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx specifickou xxxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx testované látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx druh/kmen,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx podmínky, xxxxxx apod.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx počátku xxxxx, xxxxxx hmotnostního xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro jednotlivé xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) kontroly,
- xxxxx xx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, byla-li provedena,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx podávání,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xx celkového xxxxx xxxx do xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx látky x potravině/pitné xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx potravy x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x odběru xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx preparátů,
- metody xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s mikrojádry,
- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxx x každého xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- počet xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx počet ± xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxx xxxxxx skupinu,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, je-li xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy x xxxxxx,
- xxxxx xx souběžných x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.13/14. MUTAGENITA - XXXX XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX
1. METODA
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX TG 471, Xxxxxxxxx Reverse Mutatiton Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mutací se xxxxxxxxx x detekci xxxxxxxx xxxxxx kmeny Xxxxxxxxxx typhimurium (xxxxxxxxxx xx vztahu k xxxxxxxxxxxxx histidin) a xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx vzniklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx delece xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxx, že xx xxxxxxxx mutace, xxxxx zpětně vracejí xxxxxx přítomné v xxxxxxxxxx kmenu xx xxxxxxxxx stavu x xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx bakteriální xxxxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx růst xx xxxxxxxxxxxxx aminokyseliny, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx mutace xxxx u xxxxxxx xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx x existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx genové mutace x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx supresorových genech xxxxxxxxxxx xxxxx hrají x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx nádorů. Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxx mutace xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, díky xxxx xxxx citlivější xxx xxxxxxx mutací, xxxxxx citlivých xxxxxxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx velké xxxxxxxx x eliminace xxxxxxx reparace XXX xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx některé xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx genotoxickými xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mutací xx x xxxxxxxxx velmi xxxxxxxx xxxxxxxx výsledků xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx kmenů Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx aminokyselině (histidinu xxxx. tryptofanu), jež xxxxx ke vzniku xxxxx, který xx xx dodávce aminokyseliny xxxxxx nezávislý.
Mutageny xxxxxxxxxxxx substituci páru xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx bází x XXX. Při xxxxxxxxx xxxxx xxxx x takové xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx mutace xxxx xx jiném xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Frameshift xxxxxxxx (mutageny vyvolávající xxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx, xxx způsobují xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx více xxxx bází x XXX, xxxx se xxxx xxxxx rámec x RNA.
1.3 VÝCHOZÍ XXXXX
V bakteriálním xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx buňky, xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx liší x xxxxxx látek xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx struktuře x xxxxxxxxx xxxxxx XXX. Xxxxx xx xxxxx xxxxxx vyžadují xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx aktivace. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx dokonale imitovat xxxxx podmínky in xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx přímé xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Bakteriální xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx. Pomocí xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx také v xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx specifická xxxxxx vyhodnocovaných xxxxxxx, xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx dostupnosti. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, mohou xxxx k xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx chemických xxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (kupříkladu xxxxxx xxxxxxxxxxx) a xxxxx, x xxxxx xx předpokládá xxxx xx, xx specificky xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx buněk (xxxxxxxxx xxxxxxx inhibitory xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx); x takovém xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxx testy xx xxxxxx x savců.
Xxxxx sloučeniny, xxx xxxx při xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx; xxxxxx xx chemické xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxx jiným, negenotoxickým xxxxxxxxxxx xxxx mechanismem, xxxxx x bakteriálních xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4 PRINCIP XXXXXX
Suspenze bakteriálních xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx "xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xx suspenze xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x vylije xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Při xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx inkubuje x smísí x xxxxxxx xxxxxx x xx potom xx xxxxxx xx minimální xxxxxx půdu. Xxx xxxx xxxxxxxx xx xxx xx tři xxx xx inkubaci xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Je xxxxxxx xxxxxxx postupů xxx xxxxxxxxx testu. X xxxx xxxxxxxxxxx xxxx klasická xxxxxxx xxxxxx ["xxxxx incorporation"] (1) (2) (3) (4), preinkubační metoda (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx metoda (9) (10) x xxxxxxxxx xxxxxx (11). Xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx (12).
Xxxxxxx popsané x xxxxx xxxxxx xx týkají xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx preinkubační. Xxx xxxx xxxxxx xxxx přijatelné xxx xxxxxxxxxxx jak x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx preinkubační metodou; xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx alifatické xxxxxxxxxxx x krátkým řetězcem, xxxxxxxxx xxxx, aldehydy, xxxxxxxxxx x diazosloučeniny, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, alylové xxxxxxxxxx x nitrosloučeniny (3). Xxxx xxxx xxxxxxxx, xx existují xxxxxx třídy mutagenů, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx procedur xxxx xxxxxxxx. Na xx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", k xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "speciální xxxxxxx" (xxxxx x příklady xxxxxxx, xxxxx se xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx použít): xxxxxxxxxx x diazosloučeniny (3) (5) (6) (13), xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5. XXXXX METODY
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx do xxxxxxxx exponenciálního nebo xxxxxxxxxxx stacionárního xxxxxx xxxxx (xxxxxx 109 xxxxx/xx). Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Důležité xx, xxx kultury xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx dá xxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx růstových xxxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx očkováním xx miskách.
Doporučená xxxxxxxxx xxxxxxx činí 37xX.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx bakteriálních xxxxx, xxxxx budou xxxxxxxxx xxxxx kmeny X. xxxxxxxxxxx (TA 1535; XX 1537 xxxx XX97x xxxx 1X97; XX98; x XX100); u nichž xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx laboratořemi. Xxxx xxxxx kmeny X. xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx reverzním místě xxxx xxxx GC x je xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx vyvolávající xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx xxxx detekovat pomocí xxxxx X. coli XX2 xxxx S. xxxxxxxxxxx XX102 (19), xxxxx xxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx AT. Xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx:
- S. xxxxxxxxxxx XX1535 a
- X. xxxxxxxxxxx XX1537 xxxx XX97 xxxx XX97x x
- X. xxxxxxxxxxx TA98 x
- X. xxxxxxxxxxx XX100 x
- X. coli XX2 xxxX xxxx X. coli XX2 xxxX (pKM101) nebo X. xxxxxxxxxxx XX102.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vazby xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx XX102 nebo xxxxxx DNA reparačně xxxxxxxxxxxx kmen X. xxxx (xxxx. X. xxxx XX2 xxxx X. xxxx XX2 (xXX101)).
Xx xxxxx xxxxxx zavedených postupů xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx. Pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxx (histidin x xxxxxxx xxxxx S. xxxxxxxxxxx, tryptofan x xxxxxxx kmenů E. xxxx). Xxxxxxx xx xxxxx zkontrolovat i xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x xx: xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx R-faktor xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx v xxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxx ampicilinu u xxxxx TA98, XX100 x TA97a xxxx XX97, XX2 uvrA (xXX101) x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx + xxxxxxxxxxxx x xxxxx XX 102); přítomnost xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx. xxx xxxxxx u X. xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx vůči krystalové xxxxxxx x uvrA xxxxxx u E. xxxx xxxx xxxX xxxxxx u X. xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xx ultrafialové xxxxxx) (2) (3). Použité xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx očekávaném podle xxxxxxxxxxxx kontrolních dat xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx x x rozmezí uvedeném x xxxxxxxxxx.
1.5.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx agar (xxxx. x Vogelovým-Bonnerovým minimálním xxxxxx X a xxxxxxxx) x vrchní xxxx obsahující xxxxxxxx x biotin xxxx xxxxxxxxx umožňující několik xxxxxx buněk (1) (2) (9).
1.5.1.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx testované látky xxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx systému xxxxxxxxxxx aktivace. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx post-mitochondriální xxxxxx (X9) připravená z xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (18) (20) (21). Xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 a 30 % x/x xx xxxxx X9. Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xxxxx záviset na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X některých xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx použít redukční xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6) (13).
1.5.1.4 Testovaná xxxxx / příprava
Xxxxx xxxxx se xxxx působením na xxxxxxxx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x případně xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx mohou xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx ředí. Je xxxxx používat čerstvé xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x xxxxxxxxx prokazují, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.5.2.1 Xxxxxxx xxxxx (xxx 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx, která xx xxxxx xxxx v xxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxx použitého xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxx xxxxxxx.
Může xxx xxxxxx stanovit xxxxxxxx a nerozpustnost x předběžném xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx se dá xxxxxxx snížením xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií, vymizením xxxx zmenšením růstu xx xxxxxx xxxx xxxxxx stupně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Za xxxxxxxxxxx metabolického aktivačního xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xx skutečných xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x pouhým xxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 5 mg/misku resp. 5 µx/xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx látek, xxx x xxxxxx koncentracích xxxxxx rozpustné, xx xxxxx xxxx několik xxxxxxxxxxx xxxx být x xxxxxxx pokusné xxxxx nerozpustných. Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx již za xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx, xx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx při xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx různých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx intervalem (xx. √10) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Zkoumá-li xx koncentrační závislost, xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx xxxxxxxx v xxxxx, xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx test xxxx zahrnovat x xxxxxxxxx xxxxxxx specifickou xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx) xxxxxxxx, xxx s xxxxxxxxxxxx aktivací, xxx xxx xx. Xxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxx takové koncentrace, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx testu.
U xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx volí xxxxx xxxxxxxxx typu xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx v testech x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 |
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
Látka | CAS | XXXXXX |
Xxxxx červeň | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx S9. Xxxxx xx 2-aminoantracen použije, xx xxxxx xxxxxx xxxxx S9 charakterizovat xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, např. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Příklady xxxxx, xxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx bez xxxxxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx:
Xxxxx | CAS | XXXXXX | |
Azid xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 x XX 100 |
2-xxxxxxxxxxxx | 607-57-8 | 210-138-5 | XX 98 |
9-xxxxxxxxxxxx | 90-45-9 | 201-995-6 | TA 1537, XX 97 a XX 97x |
XXX 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, XX 97 a XX 97x |
kumen-hydroperoxid | 80-15-9 | 201-254-7 | TA 102 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 | XX xxxX x XX 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, WP2uvrA a XX2xxxX (xXX101) |
4-nitrochinolin-1-oxid | 56-57-5 | 200-281-1 | XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (xXX101) |
Furylfuramid (XX2) | 3688-53-7 | xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx x jiné xxxxxx xxxxxxxxxx látky. Xxxx-xx xxxxxxxx, je xxxxx uvážit xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x chemické xxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx x negativní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx jako xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxx xx mutagenní xxxxxx.
1.5.3 XXXXXX
Při xxxxxxxx miskové xxxxxx (1) (2) (3) (4) xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,05 nebo 0,1 ml xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx kultury (xxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx buněk) a 0,5 ml xxxxxxxxxx xxxxx a 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx aktivací se xxxxxxx xxxx 0,5 xx metabolické aktivační xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakce (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) s 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx /testovaným xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxx xxxxx x minimálním xxxxxx. Xxxxxx agar xx nechá před xxxxxxxx ztuhnout.
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxx roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx kmenem (xxxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem (0,5 xx) xxxxxxx xx xxxx 20 xxx xxxx déle xxx 30 - 37 xX; xxxxx xx xxxxx s xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx mísí 0,05 xxxx 0,1 ml xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx roztoku 0,1 xx xxxxxxxx x 0,5 ml směsi X9 nebo xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx provzdušňují xxxxxxxx.
Xxx adekvátní odhad xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx misky. Duplicitní xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xx-xx vědecky xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx xxxxxxx xx xxxxxx misky, xxxxxx xx test xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx nebo xxxxxx látky se xxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (12) (14) (15) (16).
1.5.4 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxx testu se xxxxxxxx při xxxxxxx 37 xX pod xxxx 48 - 72 hodin, xxxxx xx xxxxxxxxx revertantní xxxxxxx xx xxxxx xxxxx.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Údaje xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Rovněž xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x negativní xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, popřípadě kontrola xxx působení, byla-li xxxxxxx), tak x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pro xxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolu (xxxx. xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx) xx xxxxxx počty xxx xxxxxxxxxx misky x xxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se objasňují xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Negativní výsledky xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xx zdůvodnit. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx studijních xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx posuzovaných xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx ("xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Ke xxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xxxxxxxx několik kritérií, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xxxxx při xxxxx xxxx více xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem xxxx xxx něj (23). Xxxx první xx xxxxxxx biologická relevance xxxxxxxx. Jako xxxxxxx xxx vyhodnocování výsledků xxxxx je možno xxxxxx statistické xxxxxx (24), statistická významnost xx xxxx xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka, xxxxx xxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.
Většina experimentů xxxx poskytuje jednoznačně xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vyvodit x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx závěr. Výsledky xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx bakteriálního xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx typu xxxxxxxxxx xxxx xxxx posuzovaných xxxxxx x xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx resp. Xxxxxxxxxxx coli. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx zkušebních xxxxxxxx xxxx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx mutagenní.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx a stabilita xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx rozpouštědle, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxx (x xx xxxx μx) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx xxx jednu xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx,
-xxx x xxxxxxx systému metabolické xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx toxicity,
- xxxxxx srážení,
- počty xx xxxxxxxxxxxx miskách,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx negativních (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.15. GENOVÉ XXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxx produkce xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx a x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx využívány forward xxxxxxx systémy u xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx míra vzniku xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx-1, xxx-2) xx xxxxxxx, adenin vyžadující xxxx mutanty a xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx rezistence xx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx ověřený xxxxxxxx mutační systém xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx XX 185-14 X x okrovými (xxxxx) nonsense mutacemi xxx 2-1, arg 4-17, xxx 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. XX185-14X xxxx xxxxxx xxx 1-7 xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx místě a xxxxxx hom 3-10, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny.
X xxxxxxxxxxx kmenů X. xxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx kmenem X7, který xx xxxxxxxxxxx xxx ilv 1-92.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx testovaných xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx testováním xx použití xxxxxxxx xxxxxxxx. X organických xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxx xxxx xxxxxx vyšší xxx 2 xxxxxxxx % x organických xxxxxxxxxxxxxx, jako xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Finální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx aktivace
Xxxxx xxxx být exponovány xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, tak x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy x xxxxxxxx kofaktory. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, postmitochondriálních xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx aktivaci.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Haploidní xxxx XX 158-14C x xxxxxxxxx xxxx D7 xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx xxx rovněž xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx užívána xxx určení počtu xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
Pozitivní, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxx chemické látky.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Má xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx redukovat xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx až xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx rozpustné, xx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.5 Kultivační xxxxxxxx
Misky xxxx xxxxxxxxxx po sedm xxx při 28 xx 30 xX xx xxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací
Frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxx x rozmezí akceptovaných xxxxxxxxxx hodnot.
1.2.2.7 Počet xxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx 3-10 x xxxxxx mutační xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx získány xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxxxx kmenů X. xxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx stacionární xxxx xxxxxxxx xxxxx. Základní xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxx: 1-5 x 107 xxxxx/xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx dobu xx 18 x. při 28 až 30 xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx. Po xxxxxxxx ovlivnění xxxx xxxxx centrifugovány, promyty x vyočkovány xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx mutací.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx negativní, má xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxx xx stacionární fázi. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxx pozitivní, xx xxxxxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx mají xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Údaje mají xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx informace x:
- xxxxxxxxx kmenech,
- xxxxxxxxxx testu: xxxxx ve xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx médií, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx expozice, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx při xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx dávky x xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx výsledků.
X.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxx xxxx. První xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx produkty, kdežto xxxxx případ xx xxxxxxxx nereciproční a xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx vzniklých x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx je testována xx základě tvorby xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx nese xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx téhož xxxx. Xxxxxxxxxx užívané xxxxx xxx detekci xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx X4 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 2 x xxx 5), X7 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 5), BZ34 (heteroalelický x xxx 4) x XX1 (xxxxxxxxxxxxxx x his 4 x trp 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx produkující xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x D5 xxxx X7 (xxxxx xxxxxx xxxx mitotickou xxxxxxx konversi a xxxxxxxx xxxxxx x xxx 1-92). Oba xxxxx xxxx heteroalelické xxx komplementární xxxxx xxx 2.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx vehikula. X xxxxxxxxxxx látek xx xxxx nerozpustných xx xxxx užít xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx rozpouštědlech, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Metabolická xxxxxxxx
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, tak x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx postmitochondriální xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx aplikaci xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x doplněná xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx druhů, xxxxx, postmitochondriálních xxxxxx xx xxxxxxx může xxx rovněž xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx aktivaci.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx D4, X5, D7 x XX1. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx mutační xxxxx mají xxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látky.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nesmí xxx xxxx xx životnost xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx nerozpustné xxxx xxx xxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx určena xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxx mohou xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx buď xxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xxxxx xx dobu xx 18 x. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx přítomnost xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx tmě xx čtyři xx xxxx xxx xxx 28 - 30 xX. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx sektorů xxxxxxxxx mitotickým xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx 4 xX) xx xxxxx 1 - 2 xxx před xxxxxxxxx, xxx se xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx x frekvencí xxxxxxxxxxx mutací x xxxxxxx akceptovaných normálních xxxxxx.
1.2.2.7 Počet xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tří misek xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx mitotickou xxxxxxx konverzí a xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx recesivní xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx být xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.8 Postup
Xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx test x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx buňky. Xxxxxxxx pokusy xxxx xxx provedeny na xxxxxxxxxx xxxxxxx. 1-5 x 107 xxxxx/xx xx vystaveno xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 xX za xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx ovlivnění, xxxxx xx xx potřebné.
Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx centrifugovány, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xx vhodné kultivační xxxxxx. Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x indukcí mitotické xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx negativní, xx xxx proveden xxxxx xxxxx x xxxxxxx ve stacionární xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx experimentem.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx formě a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx experimentu.
Údaje xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx statistickými metodami.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- podmínky xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx fázi xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx médií, xxxxxxx x trvání xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, postup x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- počet xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, vztah xxxxx x účinku, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx dat,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.17. MUTAGENITA - XXXX XXXXXXXX MUTACÍ X SAVČÍCH XXXXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 476, Xx Vitro Xxxxxxxxx Xxxx Gene Xxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Test xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xx xx xxxxxxxx xx zjišťování genových xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx vhodné xxxxxxx linie xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx X5178X, xxxxx XXX, XXX-XX52 x V79 xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx lymfoblastoidní xxxxx XX6 (1). X xxxxxx buněčných xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x thymidinkináze (TK) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x x xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx fosforibosyltransferáze (XXXX). Xxxxx mutací x XX, XXXX x XXXX xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XX x XXXX může umožnit xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxx), xxxxx xx xx xxxxxx XXXX xxxxxxxxxx X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
X xxxxx na xxxxxx xxxxxx x savčích xxxxxxx xx vitro xx xxxx xxxxxx xxxxxxx stabilizovaných xxxxxxxxx xxxxx nebo buněčných xxxxx. Při xxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxx vyžadují xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Takový systém xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedokáže xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx vivo xxxxxxxx. Xx xxxxx vzniku xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxx důsledkem xxxxxxx mutagenity xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx pH, osmolality xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (7).
Xxxxx test se xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx mutagenů x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx, které xxxx x xxxxx testu xxxxxxxxx, xxxx savčími xxxxxxxxxxx, neexistuje xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx. Tato xxxxxxxx xxxxxx na druhu xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx stále xxxx xxxxxxx toho, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx testem xxxxxxxx, protože xxxxxx xxxxxx xxxxxxx jiným, xxxxxxxxxxxxxx mechanismem xx xxxxxxxxxxx, který v xxxxxxxxxxxxx buňkách xxxxxxxx (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx typu xxxxxxxx formy, jež xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx enzymatické xxxxxxxx xxxxxxxxxx proteinu.
Mutageny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxx xxxx x XXX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxx bází x DNA.
Doba xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxx, během xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx mutací: počet xxxxxxxxxxxx mutovaných xxxxx xxxxxx počtem xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; vypočítává xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxx) a xxxxxxx klonovací účinnosti xxxxxxx xxxxxxxxxx (v xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxx nárůst počtu xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx v porovnání x xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx na miskách x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) ovlivněných buněk xxxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xx konci xxxxxxxx xxxxx; vyjadřuje se xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxx, deficientní xx xxxxxxxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx mutace XX+/- → TK-/-, xxxx rezistentní xxxx xxxxxxxxxxxxx působení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx trifluorthymidinu (XXX). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx vůči XXX xxxxxxx, xxx způsobuje xxxxxxxx buněčného xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Za xxxxxxxxxxx TFT xxxxx xxxxx proliferovat xxxxxxx xxxxx, zatímco xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx thymidinkinázu, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx buňky s xxxxxxxxxxx HPRT xxxx XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 6-xxxxxxxxxxx (XX) xxxx 8-xxxxxxxxxx (XX). Xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx selekčním xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx mutace x xxxxxxx buňkách, je xxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx bedlivě xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx podezření xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vůči xxxxxx s mutacemi x xxx xxxx. Xxxxxxx-xx xx tedy xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx činidlem, xx třeba potvrdit, xx xx selekční xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).
Xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx kultuře xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x metabolickou xxxxxxxx x xxx xx x kultivují xx ke stanovení xxxxxxxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxxxxxx exprese xxxx xxxxxxx mutantů (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx ponechají x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx pro daný xxxxx x xxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxx k xx xxxxxxxxxxxxxxx fenotypické xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x médiu xxxxxxxxxxx selekční činidlo xxx xxxxxxx mutovaných xxxxx a x xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (životnosti). Xx xxxxxx inkubační xxxx xx xxxxxxx spočítají. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx z počtu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x selekčním xxxxx x x xxxxx xxxxxxx v neselekčním xxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Buňky
Dá se xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx, včetně xxxxxxxx buněk X5171X, XXX, XXX-XX52, X79 x XX6. X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xxx prokázaná xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx efficiency) x xxxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx. U xxxxx se xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; infikované xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx naplánovat xxx, xxx měl xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxx). Xxxxx xxxxx, xxxxx kultur x koncentrace testované xxxxx musí těmto xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (14). Minimální xxxxx xxxxxxxxx buněk, xxxxx xxxxxxx expozici x xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxx frekvencí xxxxxxxxxxx xxxxxx. Obecným xxxxxxxx xx, xx xxxxx buněk xx xxx minimálně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnoty frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxxxxxx 106 buněk. Xxxx xx xxx x dispozici adekvátní xxxxxxxxxx údaje, xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx podmínky (xxxxxxxxxx xxxxxx, koncentraci CO2, xxxxxxx x vlhkost). Xxxxx xx xxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx. Zvláště xxxxxxxx je, xxx xxxxxxxx kultivace xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x schopnost jak xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx tvořit kolonie.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx namnoží xx xxxxxxxxx kultur, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x inkubují xxx teplotě 37 xX. Před provedením xxxxx, je xxxxx xxxxxxx zbavit dříve xxxxxxxxx mutovaných buněk.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx působí x xxxxxxxxxxx i x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) připravená x xxxxx hlodavců, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10% v/v. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xxxx záviset na xxx, xxxxxx typu xx testovaná xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx případech xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx použity i xxxxxxxxx modifikované xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Výběr xxxxxxxxx xxxxx by xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx P450 x metabolismu xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, látka xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx připraví xxxx suspenze xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx. Kapalné xxxxxxxxx látky xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx přímo xxxx xx xxxxxxx ředí. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x jejich xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx neovlivňuje xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx známé rozpouštědlo xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxx tam, xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xx vodě xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx odstranit xxxxxxxxxxxx sítem.
1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxx stanovování xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxx x systému x změny xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx růst. Xx vhodné stanovit xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x předběžných xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx minimálně xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, musí xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx maximální xx xxxxx xxxx xxxxxx toxicity. To xxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx lišit více xxx násobkem, který xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x 10-20 %, xx xxxx xxxx xxx 10 %. X xxxxxxxxx netoxických xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx nejnižší x xxxxxx 5 mg/ml, 5 μx/xx a 1,01 X.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek, xxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, než xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx se xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, než xx mez rozpustnosti xx finálním xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx xxxxx působení, xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x důsledku xxxxxxxxxxx xxxxx, X9, xxxx xxx. měnit. Nerozpustnost xx dá zjistit x xxxxxxx okem. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.3 Xxxxxxxx
X xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx) xxxxxxxx, x to xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx xx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx mutagenního účinku. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx patří xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
XX (xxxx x velké xxxxxxx) | xxxxxx methansulfonát | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XPRT | ethyl xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (xxxx x xxxxx kolonie) | cyklofosfamid monohydrát xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XXXX | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx X-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
xxxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (XXX 59-14-3, xxxxx EINECS 200-415-9), xxx xxxxxx x tuto xxxxxxxxxx xxxxx. Tam, kde xx to xxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx každý xxxxxx xxxxxxxx sklízení xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxx xx xxxxxxx rozpouštědlo xxxx vehikulum x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mimoto xx rovněž třeba xxxxxxx kontrolu xxx xxxxxxxxxxx ovlivnění, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx buňky xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx účinky.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx proliferující buňky xx působí testovanou xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx (obvykle xx xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Doba xxxxxxxx xxxx přesáhnout jeden xxxx více buněčných xxxxx.
Xxx každou xxxxxxxxxxx xx používají kultury xxxxxxxxxx xxxx jenom xxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxx jedna xxxxxxx, xx xxxxx zvýšit xxxxx koncentrací tak, xxx xx zajistil xxxxxxxxx xxxxx kultur x analýze (tj. xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Kultury x xxxxxxxxx kontrolou (rozpouštědlem/vehikulem) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx látek je xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx uzavřených xxxxxxxxxxxx xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx přežívání, viability x xxxxxxx frekvence
Po xxxxxxxx expozice xx xxxxx promyjí a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x fenotypické xxxxxxx. Po xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti - cloning efficiency xxxx xxxxxxxxxxx celkového xxxxx.
Xxxxx lokus má xxxxxxx minimální xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX x XPRT xxxxxxxx xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, XX xxxxxxxxx 2 xxx). Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx x x bez selekčního xxxxxxx pro stanovení xxxxx mutantů a xxxxxxxxx účinnosti. Xx xxxxxxxx doby exprese xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx x výpočtu četnosti xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xx selekční médium.
Pokud xx látka x xxxxx X5178X XX+/- xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx kultur (xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxxxx) x xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx velikost xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x tomto xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx a pozitivní xxxxxxxx. Měření xx xxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxx s XX6XX+/-.
2. ÚDAJE
2.1 Zpracování xxxxxxxx
Xxxx data slouží xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x životnosti, počty xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx X5178XX+/- xx kolonie xxxxxxx xxxxxx kritérií xxxxxx a velkých xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (nejvyšší pozitivní xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx x cytogenetické xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx testu XX+/- xx kolonie hodnotí xxxxx xxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxx růstu (xxxxx) x xxxxxxxx xxxxx (xxxx) (25). mutanty, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, mají xxxxx dobu xxxxxxxx, x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx obvykle xxxx xx xxxxxx xxxxxx genu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx malých xxxxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mutanty xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx rodičovské x vytvářejí velké xxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx xxxxxxx efficiency) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Mutační xxxxxxxxx xx vyjadřuje xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx přežívajících xxxxx.
Xxxxxxx xx individuální xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx; nakonec xx xxxxxxx xxxx shrnou x tabelární xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx testováním, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Negativní výsledky xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx případu. X případech, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, je třeba xxxxx zdůvodnění. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx výsledků je xxxxx x následných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx modifikaci xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx podmínek. K xxxxxxxxxx, které xx xxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx metabolické xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Ke stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx existuje xxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx reprodukovatelný xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Nejprve xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxx statistické metody. Xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jejímž xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx výsledky, x xxxxxxxxxxx případech xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o aktivitě xxxxxxxxx xxxxx definitivní xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx nejednoznačné xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky xxxxx xx genové xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx in xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx buněk xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xx reprodukovatelný pozitivní xxxxx xxxxx - xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx za xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx mutace.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx zprávě x xxxxxxx xxxxxx xx třeba uvést xxxx informace:
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- rozpustnost a xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx známa.
Buňky:
- xxx x zdroj xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx počet pasáží,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx kultury,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx kultur, xxxxxx xxxx. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- objem xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- inkubační teplota,
- xxxx xxxxxxxx,
-xxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxx x složení xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx a negativní xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (případně včetně xxxxx inokulovaných xxxxx, xxxxxxxxx)
- xxxxxxxx činidla,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxx (xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxx "xxxxxx" x "velkými" xxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- známky xxxxxxx,
- xxxxx x xX a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx stanoveny,
- xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zjistit malé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx X5178X TK+/-,
- xxxxx dávka - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx, xxxxxx rozpětí, průměrů x směrodatných odchylek.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.18. POŠKOZENÍ XXX REPARACE - XXXXXXXXXXX XXXXXXX DNA - XXXXX XXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Test xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (XXX) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx indukovaného xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx je xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx tymidínu (3H-TdR) xx XXX savčích xxxxx, xxxxx xxxxxx x S fázi xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou xxx v přítomnosti, xxx i x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. UDS xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx v systému xx vivo.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Testované xxxxx a sloučeniny xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x kultivačním xxxxx xxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Další xxxxxx xx provádí jenom xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx nepříznivě xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xx pouze xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx linií (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx).
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického aktivačního xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx (nebo xxxx, xx-xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) pro XXX XXX.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx současně xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxxxxx i x xxxxxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx pro xxxxxxx hepatocyty xxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-XXXX) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-AAF). Xxxx xxxxxxxxx kontrolu xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxx pro xxxxxxxxxxxxxxx, xxx x xxx XXX bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-NQO). Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx metabolického aktivačního xxxxxxx xxx xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx testované látky
Xxxx xxx použito xxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx. Nejvyšší koncentrace xxxx xxxxxxxxx toxický xxxxx.
Xxxxx xx xxxx špatně rozpustné xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx až xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Pro netoxické xxxxx xx xxxx xxxxx rozpustné xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx určuje xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx kultur xxxx být xxxxxxx xxxxxx růstové xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx přítomnosti Xxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx aktivace
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx exponovány testované xxxxx v xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Stabilizovaná xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx xx zásobní xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx setřepáním xxxxx x povrchu xxxxxxxxxx xxxxxx), inokuluje xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxx 37 oC.
Xxxxxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxx čerstvě izolovaným xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Kultury xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx izolované xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxx xxxx. Po ukončené xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx, buňky xxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx xxxx ponořena xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxx může být xxxxxx xxxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Stabilizované xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: Xxxxxxx kultury xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx x pak jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx 3H-TdR. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx systému a xx typu xxxxx. X xxxxxxxxx nejvyššího xxxxxxx XXX xx xxxxx 3X-XxX přidat xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx nebo několik xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx ovlivněn xxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxxxxxxx xxxxxx x 3X-XxX. X odlišení xxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxxxx replikací XXX xx užívá arginin xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx séra nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx média, což xxxxxxx inhibici xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx DNA.
Xxxxxxxxx XXX pomocí XXX: Xxxx expozicí xxxxxxxxx xxxxx je třeba xxxxxxxx vstup buněk xx X-xxxx, xxx xxxx xxxxx uvedeno. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx autoradiografii. Xx xxxxx kultivace xx XXX xxxxxxxxxxx z xxxxx x stanoven xxxxxxx xxxxx XXX x určen rozsah xxxxxxxxxxx 3X-XxX.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx kulturách xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx replikace XXX xxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxx
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx autoradiografie
Při xxxxxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx kultuře xx xxxxx v S-fázi xxxxxxxxx. Hodnotí xx xxxxxxx 50 buněk x každém experimentálním xxxx. Preparáty je xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx. X každém xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 3X-XxX v xxxxxxxxxx xx xxxx x xxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxxx každé hodnocené xxxxx.
1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Xxx xxxxxxxxx XXX XXX se použije xxxxxxxxx xxxxx kultur xxx každou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx kontroly.
Xxxxxxxx xxxx xxx potvrzeny x xxxxxxxxxxx experimentech.
2. XXXXX
Údaje xxxx xxx uvedeny x xxxxxxxxx.
2.1 Vyhodnocení autoradiografie
Xxxxxx inkorporace 3H-TdR xx cytoplazmy x xxxxx zrn xxxxxxxxxx xxxx buněčné jádro xx zaznamenávají odděleně.
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3H-TdR xx xxxxxxxxxx x xxxxx zrn v xxxxx je xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, mediánu x xxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Inkorporace 3X-XxX xx xxxxxxxxxxx xxxx xxx/μx XXX. Xxxxxxxx xxxxxxx xxx/μx XXX xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx používají x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu obsahuje, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxx xxxxxxx x číslu xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, médiu, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- testované látce, xxxxxxxxxxxx, koncentracích x xxxxxxxxxx xxxxxx výběru x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx autoradiografických metodách,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx buněk xx X-xxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxx XXX x k xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XXX při metodě XXX,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.19. XXX - VÝMĚNA XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XX VITRO
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
XXX xx xxxxxxxxxx test xxx xxxxxxx recipročních xxxxx XXX xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx chromatidami xxxxxxxxxx. SCE xxxxxxxxxxxx xxxxxx identických xxxxxxxx XXX mezi replikačními xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. SCE xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx zatím xxxx znalostí x xxxxxxxxxxxx základě xxxxxx xxxxxxx. Detekce SCE xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatid. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XxxX) xx xxxxxxxxxxxxx XXX xx xxxx xxxx buněčných xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx vitro xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému, xx-xx to xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx po xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx XxxX. Xx xxxxx xxxxxxxxx se xxxxx ovlivní xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx) x akumulaci xxxxx x c-metafázi xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buňky xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Používají xx xxxxxxxxxxxx (xxxxxx lymfocyty) xxxx xxxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xxxxx musí být xxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Mycoplasmaty.
Používají xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2 x xxxxxxx).
Testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxxx koncentrace rozpouštědla xxxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx XXX.
Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx savčího xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxx xx použití xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx (xxxxxxx) metabolickou xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx této aktivity xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupinu xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx bod xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Negativní x pozitivní xxxxxxxx
X xxxxxx experimentu xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx negativní xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: etylmetansulfonát
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx
Xx-xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx pozitivní kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované látky xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx vodě relativně xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx postupů. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx rozpustné xxxxxxxxx xxxxx xx určuje xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx kultur
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (trypsinací xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx kultivační xxxxxx), xxxxxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx nádob ve xxxxxx hustotě x xxxxxxxx xxx 37 xX. Xxx xxxxxxxxxxxx kultury xx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx na xxxxx kultivace nevytvářely xxxx xxx x 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx kultury xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx běžnými xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 oC.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx po xxxxxxx dobu. Xx xxxxxxx případů xxxxx xxxxx xx dvě xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx na xxx xxxxxxx xxxxx, xx-xx xx třeba. Xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx metabolickou aktivitu, xxxx xxx exponovány xxxxxxxxxx látkou x xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxx metabolického aktivačního xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx testovaná xxxxx z xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx vymyty x xxxx xxxxxxxxxxx x růstovém xxxxx x BrdU xxx xxxxxxxxxx cykly. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou x XxxX xx dobu xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, dokud xxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx podmínkách.
Xxxxx jsou analyzovány x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x nejcitlivějším xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x XxxX xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xx světle xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxx xx inkorporovaný XxxX.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxx hodiny xxxx xxxxxxxxx kultivace xx xx xxxxxx xxxxx inhibitor xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. kolchicín). Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx a barvení
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx XXX xxxx xxx provedeno několika xxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxx).
1.2.3.5 Xxxxxxx
Xxxxx analyzovaných xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx frekvenci XXX x kontrole. Obvykle xx xxxxxxx nejméně 25 dobře xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx zakódovány xxxx xxxxxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s 46 xxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, které xx xxxx x ± 2 xxxxxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx stanovit, xxx xx budou xxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx centromery. Xxxxxxxx xxxx být ověřeny x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x xxxxx xxxxxxxx x xxxxx XXX/xxxxxxxxx zvlášť xxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx.
Údaje se xxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx možné, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- kultivačních xxxxxxxxxx: složení xxxxx, xxxxxxx, koncentraci XX2, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, kultivačních xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, inhibitoru xxxxxx x jeho xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxx působení, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systému, pozitivních x xxxxxxxxxxx kontrolách,
- xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx,
- způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx preparátů,
- xxxxx analyzovaných xxxxxxxx (xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxx počtu SCE/buňku x XXX/xxxxxxxxx (odděleně xxx xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX,
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li xx možné,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.20. XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX VÁZANÉ XX POHLAVÍ X XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxxx letální xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx (XXXX) na Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxx, jak xxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Je xx test xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx xxxxxxxxxx X. Xxxx reprezentují xxx 80 % xxxxx xxxxxx X-chromozómu. X-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx x X-xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x samců xxxxxxxxx xxxxxxxx gen. Když xx mutace letální x xxxxxxxxxxxx stavu, xxx na xxxx xxxxxxxxxx usuzovat x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx rodí xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. SRLS xxxx xx výhodný vzhledem x xxxxxxxxxx vzhledu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxx
Používají xx xxxxx xxxxx definované xxxxxx xxxxx x xxxxxx linie Xxxxxx-5. Xxxxx být xxxxxxx x xxxx vhodné xxxxx xxxxxxx linie xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx X-chromozómu.
1.2.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxx. Látky ve xxxx nerozpustné xx xxxxxxxxxxx nebo suspendují xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxx etanolu x Tweenu-60 nebo 80), xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxx fyziologickým xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx dimetylsulfoxid (DMSO) xxxx xxxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxx určenou xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx frekvence xxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxxx ovlivňuje xxxxx xxxxx ovlivněných xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx testované xxxxx xx provádí x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx to nutné, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx NaCl x xxxxxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
V xxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx negativní (x xxxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jestliže xx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx historické xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxx do experimentu xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.6 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxx xxxxxxxxx orientační xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx maximální xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity. Xxxxxxxxx xxxxx se testují x xxxxxxxx dosažitelné xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxx (xx xxxxx 3-5 xxx) jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx Xxxxxx-5 xxxx x jiné vhodné xxxxxxxxx linie (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx virginní xxxxxx xxxxx dva xx xxx xxx, xxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx zárodečných xxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx letální efekt xxxxxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx ve středním xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Heterozygotní X1 xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx křížení xxxx dále xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (tj. jedna xxxxxx/xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx. X F2 xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx zaznamenávána xxxxxxx samců xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx v xxxxxxx vznikají X1 xxxxxx nesoucí letální xxxxxx x xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (nejsou xxxxxxxx xxxxx samci s xxxxxxxxxx chromozómem), dcery xxxxxx samic xx xxxxxxx genotypem xxxx xxxx testovány, xxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x dalších xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx tabulky. Uvádí xx xxxxx hodnocených X-xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxx každou xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx křížení a xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx se xxxx potvrdit x xxxxxxxxxx experimentu.
Údaje xx zhodnotí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx letálních xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx X2 kultur, xxxxx F2 kultur xxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx zárodečných xxxxx,
- kritériích pro xxxxxxxx ovlivněných xxxxxx,
- podmínkách testu: xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x schéma odběru xxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx (x rozpouštědlem) x pozitivní xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, je-li xx možné,
- xxxxxxxxx údajů,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.21. XXXX XXXXXXXXXXXX SAVČÍCH BUNĚK - XX XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxx xxxxx xxx použít xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx in vitro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx in xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx X3X10X1/2, 3T3, XXX, Fischerových potkanů x xxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, tvorbu xxxxxxx nebo xxxxx x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx ostatní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx karcinogenním xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx in xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Některé xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx být zjištěna xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonie (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx růstu xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že expozice xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxxxxxxxx relevantní, xxx xxxxxx xx nelze xxxxxx k xxxxxx xxxxxxxxx transformace xx xxxxx experimentech, xxxxxxx x xxxxxxxxx mohlo xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx transformace. Xxxxxxxxxxxxxx musí zajistit, xx buňky xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx příslušné xxxxxxxxxxx xxxxx xx expozici xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx test používaný xxxxxxxxxx je xxxxxx x xx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx oprávněnost x xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Médium
Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx vhodné xxx xxxxxxx test xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx suspendují x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx vhodném rozpouštědle xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx nesmí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx rychlost nebo xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Metabolická xxxxxxxx
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivitou, xxxxxxxx její xxxxxxxxxx xxxx vhodné pro xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Musí xxx xxxxxxxx také xxxxxxxxx xxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx vyžadující metabolickou xxxxxxxx: 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Je-li xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx. Tyto xxxxxxxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx závislý xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx přežívání buněk xxxxxxxxx stejné xxxx x negativní xxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxxx až xx hranici xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx postupů. Nejvyšší xxxxxxx koncentrace xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx určuje xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx závislou xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx x opakovanou xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx (xx. xxxxxxx xxxxxxx metabolické aktivační xxxxx), jestliže se xxxxx x prolongovanou xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxx vlastní xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x přítomnosti x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx systému. Xx xxxxx expozice je x xxxxx propláchnutím xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx. Xxx je zaznamenáván xxxxxx transformace. Xxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxx x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xxxx xxx prezentovány x xxxxxxxxx xxxxx. Xx vhodné vyjadřovat xxxxxxxxx buněk jako xxxxxxxx kontrolní úrovně x frekvenci xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Data xx xxxxx zpracovat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, informace x:
- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxx,
- kultivačních xxxxxxxxxx: koncentraci testované xxxxx, době xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, kultivačních nádobách, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, metabolickém aktivačním xxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, hustotě xxxxx během xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx sledovaného fenotypu, xxxxxxx selektivního xxxxxxx (xx-xx xx xxxxxx), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- metodách vyčíslení xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretaci xxxxxxxx.
B.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX TEST X XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo fetální xxxx. Xxxxxxx dominantních xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx tato xxxxx poškozuje zárodečné xxxxx exponovaného xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx, že dominantní xxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x numerické xxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx a xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx samičku x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx mrtvých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx vyjadřuje xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx porovnáním xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx v exponované x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx letalita xx součet pre- x postimplantačních xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx dominantní xxxxxxxx je xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x exponované skupině x živým implantacím xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (x.x. xxxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxxx xxxxx rozpustit nebo xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx vodě se xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx vhodném rozpouštědle. Xxxxxxx rozpouštědlo xxxxx xxxxxxxx s testovanou xxxxxx ani xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx základě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx podávat xxxxx xxxxxxxxx. Obvyklý xxxxxx xxxxxxxx xx orální xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx aplikace.
1.2.2.2 Experimentální xxxxxxx
Xxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx počet exponovaných xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx variabilitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky. Xxxxx xx xxxx xxxxxx zjištěnou detekční xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx testu. V xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx takový xxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxx 30 - 50 březích xxxxx xx připouštěcí xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pozitivní x xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx do xxxxxxx experimentu. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x dispozici přijatelné xxxxxxxx pozitivních xxxxxxx x xxxxxxxxx experimentů, xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx prokázána citlivost xxxxx (xxxx. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 mg.kg-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xx vyvolávat xxxxxx xxxxxxxx nebo snížené xxxxxxxxx x exponovaných xxxxxx. X některých xxxxxxxxx xx postačující xxxxx xxxxxx dávka.
1.2.2.6 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podávají x jedné dávce 5 x.xx-1 xxxx x dávce 1 x.xx-1.xxx-1 xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Existuje xxxxxxx xxxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx jednorázová xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx.
Xxxxx samec xx opakovaně xxxxxx x jednou xxxx xxxxx neovlivněnými, intaktními xxxxxxxxx xx vhodných xxxxxxxxxxx xx aplikaci xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxx u samců xxxxxxx po xxxx xxxxxx xxxxxxx cyklu xxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx či xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx po expozici xx xxx schématem xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx všechna xxxxxx xxxxxxxxxxx buněk sledovaných xx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx utraceny cervikální xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx březosti a xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx mrtvých a xxxxxx implantací. Xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx x xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x tabulkách. Xxxxxxxx každého xxxxxx xxxxxx identifikace každého xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx samostatně. Xxxxx samice musí xxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, x xxxxx xxxxxx xxxxx, x počtu živých x xxxxxxx implantací.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx dominantního xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx xxxxxx implantací xx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx ztrátách.
V xxxxxxx xxxx xxx xxxxx odlišeny časná x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxxxx x preimplantační xxxxxx. Xx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxx rozdíl xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx xx dělohu xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Údaje xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx možno, xxxxxxxxx x:
- xxxxx, xxxxx, xxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xx každého xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx látce, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x důvodech xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx dávka/odpověď,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXXX SPERMATOGONIÍCH
1. XXXXXX
Metoda xx replikací XXXX XX 483, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxxxxx xxxxx xx xx xxxx identifikovat xxxxx xxxxxxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx chromozómového xxxx xxxxxxx rovněž. Tato xxxxxx není xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx k xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Chromozómové xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxx u xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Tímto xxxxxx xx analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, a proto xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mutací x xxxxxxxxxxx buňkách.
X xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Tímto xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx jiné xxxxxx xxxxx.
Xxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx první xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, dříve než xx poškození xxxxxx x xxxxxxxxxxxx buněčném xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x ovlivněných xxxxxxxxxxxxx xxx získat analýzou xxxxxxxxxxx chromozómů, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx spermatocyty.
Xxxxx xxxx xx xxxx xx xxxxx xx zjišťování, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx tím, xx xxxxxxxx posuzovat xxxxxxx metabolismu xx xxxx, farmakokinetiky x xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX.
X xxxxxx je xxxxxxxx řada generací xxxxxxxxxxxxx se širokým xxxxxxxx citlivosti vůči xxxxxxxxx xxxxxx. Zjištěné xxxxxxx xxxx představují xxxxxx reakcí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, kde xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spermatogonie. Xxxxx jejich xxxxxx xx xxxxxxx pak xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx, že xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxx xxxxx pro xxxx vhodná.
1.2 DEFINICE
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx projevuje xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx vyjádřená xxxx xxxx respektive xxxx xxxx x opětovné xxxxxxx obou xxxxxxxxx xx xxxxxxx místě (xxxxxxxx jako xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: jako zlom xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx jedné xxxx xxxx chromatid za xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx větší, xxx xx šířka xxxxxxxxx chromatidy. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (distální) xxxxxxxx x xxxxx zlomu xx dislokovaný (nebo xxxx osu xxxxxxxxxx), xxxxxxxx jedna xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómu xx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx.
Gap: achromatická xxxx menší xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx buňky.
Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx diploidní xxxxx xxxx (3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx dělení xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, a výměny.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xx xxxxxxx xxxx xx působení xx usmrtí. Xxxx xxxxxxxxx xx xx xx působí xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo Xxxxxxxxxx®). Xx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xx xxxxxxxx xx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx čínských xxxxxx x myší, xxx xxxxx xxxxxx xxxxx jakéhokoliv xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dospělých jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxx zahájení xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx nemají přesahovat ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx B.
Xxxxxxx by měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx označí x xx xxxx minimálně xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx dávek
Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxx stavu x je-li xx xxxxx, látka xx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx podávat xxxxx xxxx xx před xxxxxxxxx xxxx. je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx skladování xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx testu
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum
Rozpouštědlo/vehikulum x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x nesmí x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx použito xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Xx každého xxxxx xx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xx zvířaty xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx kontroly by xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad spontánní xxxxxx.
Xxxxx při xxxxxxxxx kontrole xx xxxx xxx, xxx xxxx účinky patrné, xxx přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx látku x xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx časovém xxxxxxxxx. Xxx xx to xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxx monomer | 79-06-1 | 201-173-7 |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx skupiny xxxx by xxx xxxxxxxx xx všech xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx historické xxxxx o frekvenci xxxxx s aberacemi x o interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo publikované xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx zvířat
X každé zkušební x xxxxxxxxx skupině xxxx xxx minimálně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx samců.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx dvou xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx se x xxxxxxxxx aplikace rozdělit, xx. xx xxx xxxxx za den xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx se xxxxxx xx expozici xxxxx xxxxxxxxx dvakrát. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx kinetiku xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxx. X ostatních xxxxx (xx. xxxx xxxxx nejvyšší) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx xxxx xx 1,5násobku xxxxx buněčného xxxxx xx xxxxxxxx, ledaže xx znám xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx účinku (6).
Xxxxx xxxx xxxxx xxx použity jiné xxxxxx intervaly xxxxxx xxxxxx. Xxxx. jedná-li xx o xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mitózy, xxxx xxxxx s účinky xxxxxxxxxxx xx X-xxxx xxxxx, xxxx vhodnější xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (1).
Zda xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx opakovaně, xx xxxxxxxx případ xx xxxxxxx. Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx (1,5xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx aplikace. Xxxxxx xxx provádět x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx xx to xx účelné.
Xxxx xxxxxxxxx se zvířatům xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x následně xx z nich xx xxxxxxx intervalu xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx xx xxxxx xxxxxxxx zhruba 3-5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4-5 xxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx studie xx xxxxxxxx rozpětí toxicity, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx žádné xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx provádět v xxxx laboratoři xx xxxxxxx stejného živočišného xxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx použijí x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Pro xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xx pak xxxxx xxxxxx jenom xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, že xxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxx, jež x xxxxxxx netoxických xxxxxxx vykazují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, mohou představovat xxxxxxx x těchto xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xxxx být xxxx xxxxxxxxxx jako xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx toxicity xx spermatogoniích (xxxx. xxxxxx xxxxxx mitóz xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x xxxxx meiotické xxxxxxxx( tento xxxxxx xxxx být xxxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx test
Jestliže xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx se xx xxxxxxx údajů x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx strukturou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nemusí být xxxxxxxxx celá xxxxxx xx použití xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx humánní xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx x limitním xxxxx xxxxx dávky.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekcí. X odůvodněných xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Maximální xxxxx xxxxxxxx, která se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx najednou xxxxxxx, xxxxxx na velikosti xxxxxxxxx zvířete a xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx xxx, xxx objem xxx ve všech xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Okamžitě xx usmrcení xxxxxxx xx x xxxxxxx xxxx z xxxx xxxxxx připraví xxxxxxx xxxxxxxx, xx kterou xx působí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x fixuje xx. Buněčná suspenze xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx minimálně 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx. minimálně 500 xxxxxxxx v jedné xxxxxxx). Xxxxx xxxxx xx dá xxxxxx, xx-xx počet pozorovaných xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx) se xxxx xxxxxxxx nezávisle zakódují. Xxxxxxx fixační xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx určitého podílu xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx x všech xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx roven xxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx prezentují x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou je xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se vyhodnocuje xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx x počet xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. X experimentálních i xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx jednotlivé xxxx xxxxxxxxxxxxxx chromozómových aberací, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxxxxxxxx zvlášť, xxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx aberací xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx, xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxx zvířat x xxxxxx x negativní xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx poměr mitóz xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx, a xx xxx, že xx x každého xxxxxxx xxxxxxx 100 dělících xx xxxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx pouze mitóza, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx u xxxxxxxxx 1000 buněk x xxxxxxx jedince.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx xxxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx závislá xxxxxxxxx xxxxx s chromozómovými xxxxxxxxx, xxxx zřetelný xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxx časovým xxxxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxxx xx třeba uvážit xxxxxxxxxxx významnost výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx možno xxxxxx statistické xxxxxx (8); xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních podmínek.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, se v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx nejisté, xxxx xxxxxxxxxxxx bez ohledu xx počet xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx ukazují, že xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x zárodečných xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx oberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek testovaná xxxxx x zárodečných xxxxxxx příslušného živočišného xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Je xxxxx xxxxxxxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, že testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx tkáň (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla/vehikulu, pokud xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx druh/kmen,
- xxxxx a xxx xxxxxx,
-xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,
- hmotnost jednotlivých xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx odchylek xxx xxxxxxxxxx skupiny.
Podmínky xxxxxx:
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxx-xx provedena,
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx testované látky,
- xxxxxxxxxx doby xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx převod koncentrace xxxxx x potravě/pitné xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx / xxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx a odběru xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx toxicity,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,
- kritéria xxx hodnocení xxxxxxx,
- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxx,
- kritéria, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- mitotický xxxxx,
- xxxxx xxxxx spermatogonií x xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxx a xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx počet aberací x xxxx xxxxxxx,
- počet xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx skupinu,
- xxxxx dávka - xxxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, byly-li xxxxxxxxx,
- údaje ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické xxxxx x negativních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx odchylek,
- údaje xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx,
- případně pozorované xxxxx ploidie.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.24. SPOT XXXX U MYŠÍ
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
Xx xx xx xxxx xxxx xx xxxxxx, x kterých xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látkám. Xxxxxxxx buňkami x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxx ovlivňujících xxxxx srsti. Xxxxxx xxxx xxxxxx dominantních xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx jsou vyjádřeny xxxxxxxxxx fenotypem v xxxxxxxxx xxxxxxx vytvářejících xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxx narozených xxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx x potomků x kontrol. Xxxx xxxx xxxx detekuje xxxxxxxxx somatické xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Látky xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx vhodném rozpouštědle. Xxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxx x testovanou xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Používají xx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxx T (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxxxxxx, xxxx xxx, xxx x/xxx x; xxxxx, x/x; xxxxxx, xxxxx ear, x xx/x xx; xxxxxxx spotting, s/s) xxxx xxxxxxx buď x xxxxxx HT (xxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xx x xx/xx x xx; xxxxxx xxxxx, ln fz/ /xx xx; xxxxx xx/xx) nebo x xxxxxx X57 XX (xxxxxxxxx, a/a).
Mohou xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xx budou xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx. xxxxxxx xxxx xxxxxx XXXX (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxx, x/x) x XXX (xxxxxxxxx, x/x; xxxxx, x/x; xxxxxx x/x).
1.2.1.2 Počet x xxxxxxx zvířat
Xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx dávku. Vhodná xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na počtu xxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxx x x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, že bylo xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx ovlivněné xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xx zvýšení xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnoty x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x pozitivních xxxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx účinkem xxxxx xxx x xxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx u testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx aplikace sondou xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx. Je-li xx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx inhalační xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Používají xx xxxxxxx xxx xxxxx, x xxxxx xxxxx vyvolává známky xxxxxxxx xxxx zmenšení xxxxxxxxx xxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivněna xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx jednou 8., 9. xxxx 10. xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 1. xxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxx zjištění xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxx odpovídají 7.25, 8.25 x 9.25 xxx po xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx během xxxxxx xxx.
Xxxxxxx
X mláďat xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx se xxx xxxxx xxxxx:
(x) xxxx skvrny v xxxxxxx 5 xx xx xxxxxxx ventrální xxxxx, o kterých xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (XXXX);
(x) xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx, hrdla, xxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx čela x xxxxxxxxxxx xx, xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (MDS);
(x) zbarvené a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x srsti xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (RS).
Xxxxxxx xxx skupiny xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx, XX, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx mezi XXX x RS xx xxxxx vyřešit xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxx xxxx uváděna xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx skvrn xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx a exponovaných xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Údaje xxxx xxxx uváděny xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, informace x:
- xxxxx použitém xxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx skupině,
- průměrné xxxxxxxxx xxxx x experimentální x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x při xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxxx dni xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx aplikována,
- x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx x WMVS, XXX x XX x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx dávka/odpověď x RS, xx-xx xx možné,
- xxxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX X MYŠÍ
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Test xx přenosné xxxxxxxxxxx x myší xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxx v první xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx X-chromozómu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx a XO-samice xxxxxxxx sníženou xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx výběr X1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx sterilita xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx translokací (X-xxxxxxx x c-t xxx). Xxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx samců ze xxxxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, xxxx X1 xxxxx či xxxxxxx potomků X1 xxxxx. Samice XO xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxxx v izotonickém xxxxxxxxxxxxx roztoku. Jestliže xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx nebo suspendovány xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx bylo xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx reagovat x xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx toxické xxxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx verifikaci xx xxxxxx provádí xx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu xx xxxx xxx xxxxx xxx osm x xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx dospělá xxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a na xxxxxxxxxx xxxxx indukovaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu.
Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx X1 xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx x X1 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx exponované xxxxxxx. Xxxxxxxx budou xxxxxxxxxxx xxxx samice X1 generace xxxxxxx, xxx se xxxxxxxx 300 samců x 300 xxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxx x pozitivní kontroly
Xxxxx se použít xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxx použity.
1.2.1.5 Dávkování
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, ale xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx stanovení xxxxxx xxxxx/xxxxxxx xx xxxxx dvou dalších, xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx postupu
1.2.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx se dva xxxxxxx expozice. Nejčastěji xx xxxxxxx jedna xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx možná xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx dní x xxxxx po 35 xxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx, že všechna xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx konci období xxxxxxxxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxxx rozděleny xx xxxxx. Po porodu xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, velikost xxxx x pohlaví xxxxxx. Xx vrhu jsou xxxxx i xxxxxx xxxxxxx odděleni až xx xxxx zařazení xx experimentu.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxx možných xxxxx. Xxxx fertility X1 xxxxxxx x následná xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx analýza xxxxx xxxxx X1 xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx testu xxxxxxxxx.
(x) Xxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x F1 xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx samic. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx fertility xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx myší.
Xxxxxxxx xxxx: F1 xxxxx xxxxxx x testování xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx klecí xx xxxxxxxx xx stejného xxxxxxxxxxx nebo stejné xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx denně xxxxxxxx 18. dnem po xxxxxxxxx. Xxxxxxxx vrhu x xxxxxxx X2 xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx testovány X1 xxxxxx, F2 xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx uchováváni xxx xxxxx xxxxx. Samice-nositelky xxxxxxxxxxx xxxx verifikovány xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x jakéhokoliv xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. XO-samice xxxx xxxxxx xxxxxx xxx ratio xxxx xxxxxx xxxxxxx z 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx xx. xxxxxx. V následném xxxxx jsou xxxxxxxx X1 xxxxxxx xxxxxxxx x dalšího xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx F2 xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x třetí vrhy. X1 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx normální xx xxxxxxxxxxx tří X2 xxxx, jsou xxxx xxxxxxxxx xxx analýzou xxxxxx dělohy, nebo xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxxxx vrhu x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx smrtí embryí, xxxxx vysoký počet xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx X1 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx 2 - 3 xxxxxxx. Oplodnění se xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx usmrceny 14. - 16. xxx a jsou xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx.
(b) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxx-xxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx stadiu xxxxxxxxx - xxxxxxxx X x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx dvou xxxxx x multivalentními xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx je nositelem xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, všichni X1 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxx vyšetřeno nejméně 25 xxxxx x xxxxxxxxx - metafáze X. Xxxxxxx mitotických xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x samců s xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx meiozy před xxxxxxxxxx xxxx u X1 xxxxx xxxxxxxxxxx XX. Xxxxxxxxxx neobvykle xxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x každé x 10 xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx samčí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (x-x xxx). Xxxxxxx X-xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx být identifikovány xxxxx pruhováním mitotických xxxxxxxxxx. Přítomnost 39 xxxxxxxxxx xx všech 10 mitózách xx xxxxxxx pro XX xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx interval xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx).
Xxx xxxxx xxxxxxxxx F1 zvířat xx uvádí xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx F1 xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx analýzu xxxxxx xxxxxx xx xxxxx průměrný počet xxxxxx x mrtvých xxxxxxx x kontrole x xxxxxxxxxxxx počty xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxx každé xxxxxxxxxxx X1 nosičů xxxxxxxxxxx.
Xxx cytogenetické xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx translokací.
Xxx X1 xxxxxxxx jedince xx zaznamenává počet x xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx xxxx testes a xxxxxxxxxxx x cytogenetické xxxxxxx.
X XX xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx velikost xxxx, xxx xxxxx F2 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
V xxxxxxx, že xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx byly xxxxxxxxx xxxxxxx možní xxxxxxxx F1 xxxxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxx uvést xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx heterozygotů.
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxx xxxx, stáří x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro každé xxxxxxx v exponovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxxx podmínkách, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx hladiny, xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- počtu x pohlaví mláďat xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx analýzu xxxxxxxxxxx,
- xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- počet x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx včetně xxxxx o březosti x obsahu xxxxxx,
- popis xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a mikroskopické xxxxxxx, pokud xxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.26. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx per xx, xxxxxx na xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx 90 xxx x odstupňovaných xxxxxxx několika skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, aby se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, která uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Všem zvířatům xx testovaná látka xxxxxx po celou xxxx pokusu stejnou xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx aditiva, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx xxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx 6 xxxxx, x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 8 týdnů. Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Provádí-li se xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx dlouhodobým xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx a kmen.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 20 zvířat (10 xxxxx a 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx zabíjet v xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx možno podávat xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx každého xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dávek x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx testované látky xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx stejně jako x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, podává xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, které obdrží xxxxxxx, které xx xxxxxxxx nejvyšší xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx vyvolat toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx u člověka, xx nejnižší xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx měla vyvolat xxx toxický účinek xx xxxxxxxxx zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx xx více xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx být xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx x v kontrolní xxxxxxx xx počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx-1 potravy) xxxx xxxxxxxxxx dávkování xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx. Aplikuje-li xx xxxxx xxxxxx, xxxx xx xx xxx xxx xxxxx den xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx intervalech (xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx xx 90denní xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx xxx (xxxx xxxxx vyšší - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx tato xxxxx) žádné toxické xxxxxx, xx možno xx dalšího xxxxxxxxx xxxxxxx. Podává-li xx xxxx toxická látka x xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx, aby xxx xxxxxxxxxx množství xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě zvířat.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Všechna xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx, xxxxxx xxxx objevení, xxxxxx x trvání. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx odezní toxické xxxxxx.
1.2.3 Popis postupu
X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v týdnu xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx bez xxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, změny funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxx potravy (x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx testované látky x xxxxx xxxx) x hmotnost zvířat xx zaznamenávají xxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx jako např. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx oftalmoskopem xxxx rovnocenným přístrojem xx xx xxxxxxx xxxx podáváním testované xxxxx x xx xxxxx xxxxxx nejlépe x xxxxx zvířat, xxx alespoň x xxxxxxxx dávky x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx dobu srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx trombocytů.
(c) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx živočišného xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx močoviny, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx další charakteristiky, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx xxxxxxxxx: lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxx xxxxxxx použity pro xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx.
(d) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx běžný xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx očekávané nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
X xxxxx zvířat použitých xx studii xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx se co xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba přechovávat xx vhodném xxxxx x ohledem na xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x plíce, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, slinivka xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxx mícha xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, střed xxxxxx a bederní, x (xxxxx xxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx posuzují x xxxxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxx postižení xxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx orgánů a xxxxx xx xxxxx xxxxxxx u všech xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx kontrolní xxxxxxx.
(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx makroskopická xxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx zvířat xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx infekce, protože xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxx a xxxxxx x xxxxxx skupin. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx skupin nemusí xxxxxxxx rutinně, xxxx xx xxxx provést xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x vysokou xxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx provést xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx účinky u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx pokusu a xxxxx zvířat x xxxxxxxxxx a procentuálně xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx typy poškození. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx - úrovně xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x podle xxxxx,
- xxxxxx bez xxxxxx, pokud xx xxx stanovit,
- xxxx uhynutí během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj x xxxxxxx zvířat xx konce sledování,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- doba, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky x xxxxxx další xxxxx,
- spotřeba potravy x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.27. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx 90 xxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxxxxxxxxxx), x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx pozorují, aby xx zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx během pokusu, x zvířata, xxxxx xxxxxxx do konce xxxxxx, se xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 dní xxxx testem jsou xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx jednotlivých experimentálních xxxxxx. Testovanou xxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxx podávání x xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Všem xxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xx celou xxxx pokusu stejnou xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum nebo xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, že xxxxxx toxický účinek. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx jako xxxxxxxxx druh - xxxxxxxxxx xxxxxxx pes: xxxx xx přednost xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xx xxxxxxx zdravých xxxxxxxxx; x případě xxx se xx x podáváním xxxxx xx xxxx xx 3 xx 6 xxxxxx x xx starším xxx 9 xxxxxx. Xxxxxxx-xx xx subchronický xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x plemeno.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 8 zvířat (4 xxxxxx x 4 xxxxx). Xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxx takový, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx úrovně x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx testované látky xx se zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx. Xxxxxxxx úroveň xx neměla vyvolat xxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx nejnižší xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx vyvolaly odstupňované xxxxxxx xxxxxx.
Ve xxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx xx x uhynutí xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Podává-li xx xxxx xxxxxxx xxxxx x potravě, xx xxxxx zajistit, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx normální xxxxxx xxxxxx.
Podává-li xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (v xxx xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) xxxx konstantní dávkování xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx alternativu je xxxxx xxxxx. Podává-li xx xxxxx přímo, xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx se xxx xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx změnám xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx test xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx použít xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Provede-li 90xxxxx xxxx xxxx popsanou xxxxxxx a xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx den (xxxx xxxxx vyšší - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx testování xxxxxxx. Podává-li se xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebránily xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx uhynutí a xxx, xx kterém xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
X xxxxxxxx případě xx zvířatům xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx dobu 90 xxx. Xxxxxx-xx se xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx látku 5 xxx x xxxxx.
Xxxxxxxxxx zahrnuje (xxx xxxx xx xx xxxxxxx) změny xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Příjem xxxxxxx (x příjem xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx) x hmotnost xxxxxx xx zaznamenávají xxxxx.
Nejméně jednou xxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, humánně xxxxxxx x xxxxxx.
U xxxxx zvířat xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxx studie xxxxxxx u xxxxx xxxxxx, ale alespoň x xxxxxxxx dávky x u xxxxxxxxxxx xxxxxx. Najdou-li xx xxxx změny, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.
(x) Xx xxxxxxx xxxxx, a xxxxx xxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x dále na xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx hematologické xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů x xxxxx srážlivosti xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či počet xxxxxxxxxx.
(c) Na xxxxxxx xxxxx, a xxxxx xxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxx xx konci pokusu xx xx provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx všechny studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (přičemž xxxxxx xxxx hladovění se xxxx podle xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (dříve xxxxxxx transamináza xxxx) x xxxxxxxx aminotransferáza xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx dekarboxyláza, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx xxxxx toxikologické hodnocení, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být v xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xx xxxx xxx 24 xxxxx).
(x) Xxxxxxx moče xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx zevní xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx obsahu. Játra, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx co nejdříve xx sekci zváží xx vlhkém xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující orgány x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx mozku x xxxxxxx, podvěsek xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx místě xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxxxx břišní, xxxxxxx x vaječníky, xxxxxx, (xxxxxxxx pohlavní xxxxxx), (xxxx), žlučník, xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx x slepé xxxxxx, konečník, močový xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx kost x xxxxxx dření, (kost xxxxxxxx včetně kloubních xxxxx) x (páteřní xxxxx xx třech xxxxxxxx - krční, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx a tkání xx třeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x u zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx skupin xx provedena xxxxxxxx, x xxxxxxx byla xxxxxxxx poškození u xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx, nebo xxxx xx xx indikováno xx xxxxxxx klinických xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx zvířat x xxxxxxxxxx, xxxx poškození x procentuálně xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, potrava,
- xxxxxxxxxxxxxx podmínky,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x koncentrace,
- údaje o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx do konce xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo jiných xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx, xxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx další xxxxx,
- spotřeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 90 dní x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Během xxxxxx podávání xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, xxx se zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou během xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx do xxxxx pokusu, se xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx zdravá mladá xxxxxxx náhodně přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx před xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx možné, mělo xx xx xxxx xxxxxxx cca 24 xxxxx před xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx týden. Xxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx xx xx, xxx se xxxxxxxxxxx xxxx (např. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx vzít x úvahu xxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxx x velikosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx a x xxxxxxxxx krycího xxxxxx.
Při xxxxxxxx x xxxxxx látkami, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx upraveny xx xxxxxxxx formy, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit xxxxx, xxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxx xxxxx 5 xx 7 dnů x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx morčata, případně x xxxx xxxxxxx xxxxx, jejich xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx začátku xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (pro každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx) se xxxxxxx xxxx. Xxxxxx musí xxx nullipary x xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvýšit celkový xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx podávat xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx každého xxxxxxx) po xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx xxxxxxxx sledovat xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx xxxx - xxxxx xx použilo xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx s aplikací xxxxxxxx. Xxxx expozice xx xxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx stejnou xxxx. X xxxxxxxxxxx týdenních xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx udržovala stálá xxxxxxx xxxxx ve xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx zvířete. X xxxxxxxx aplikace testované xxxxx se se xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx skupina, které xx aplikuje xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx hladina xxxxx má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx žádné uhynutí xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Nejnižší xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x člověka, má xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx střední hladina xxxxx xxxx xxxxxxx xxx toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx vyhodnocení xxxxxxxx obtížné.
Vede-li xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx podráždění xxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x vysoké xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Došlo-li x xxxxxxx poškození xxxx, xx dokonce xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Nevyvolá-li xxx xxxxxxxxx studii xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 nebo xxxxx xxxxx, která xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx člověka, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx další xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Je xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx a xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx účinky.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx po jednom. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx nejlépe 7 xxx v týdnu xx dobu 90 xxx. Zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx po dalších 28 xxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx. Doba xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx látku je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx celou xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx asi 10 % xxxxxxx xxxx, u xxxxxx xxxxxxxxx látek xxxx xxx xxxx plocha xxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx co xxxxxxxx xxxx pokusné xxxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxx x kontaktu x kůží pomocí xxxxxxxxx mulového obvazu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx plochu je xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxx obvaz x testovaná xxxxx xxxxxxxx a xxx xx zabránilo orálnímu xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx pohybu, úplnou xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx.
Xxxxxxxxxx v kleci xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, očí a xxxxxxx, a xxxx xxxxxxx x krevního xxxxx, změny funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx studie xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx přežila, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx stresu či xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě vyřadit, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
U všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx provádějí xxxxxxxxxxx vyšetření:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx provést xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx x na xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávky a x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx konci pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx zahrnovat stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, metabolismus xxxxxxx, funkci xxxxx x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (přičemž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxxxxx transferáza (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) x aspartátamino xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, hormonů, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x případě potřeby xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx na podkladě xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx nejsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, má xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx studii xx xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx dutiny xxxxxx xxxxxx obsahu. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx se xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx vysychání.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x ohledem xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra xxxxx x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx místě xxxxxxx, (průdušnice), plíce, xxxxx, xxxxx, (slinné xxxxx), játra, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, xxxxxx, přídatné xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, tenké, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx mléčná xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), (xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx), (kost xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx mícha ve xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx hrudní x xxxxxxx) x (xxxxx xxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx souvisejí x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
(a) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x exponované xxxx, xxxxxx x tkání xx třeba provést x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které byla xxxxxx nejvyšší xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx vyšetřit xxxxxxx makroskopická xxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx cílové xxxxxx x ostatních xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(d) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx zdravotního xxxxx zvířat. Další xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx těchto xxxxxx nemusí provádět xxxxxxx, musí xx xxxx provést xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx skupině x vysokou xxxxxx.
(x) Používá-li xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx provést histopatologické xxxxxxxxx na tkáních x xxxxxxxx, u xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx u ostatních xxxxxxxxxxxx skupin.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx počet xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx lézí. Xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- podmínky xxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx bez účinku, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, kdy byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- oftalmologické nálezy,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- biochemická vyšetření x xxxxxx výsledky (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx moči),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
B.29. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX - INHALAČNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx inhalační xxxxxxxx - studie xx hlodavcích)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx metody
Několik xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx exponováno xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu, x xxxxxxxxxxxxxx koncentracích, xxxxx xxxxxxx xxxxx koncentraci, x xx xx 90 dnů. Xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v atmosféře xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx skupinu xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zjišťují xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxxxx, i xx, která xxxxxxx xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx a krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Pokud xx xxxxx, přidá xx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné vehikulum xxx, xxx v xxxxxxx xxxxxxx příslušná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx užije xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx, musí xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Existují-li xxxxxx xxxxxxxxxx data, je xxxxx xx využít.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx známy důvody xxxxx xxxx. Pracuje xx xx xxxxxxx xxxxxxxx zvířatech x xxxxx užívaných pokusných xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx subchronický xxxxxxxxx test xxxx xxxxxxxxx test před xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx xx xx použít xxxxxx xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou úroveň xxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxx nejméně 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxx budou xxxxxxx x průběhu xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx celkový počet xxxxxx x počet xxxxxx, která xxxxx xxxxxx před xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx exponovat xxxxx xxxxxxx (satelitní skupinu) 20 zvířat (10 xxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 90 xxx nejvyšší koncentraci x během následujících 28 xxx po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx skupiny s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (případně kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x skupiny s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx). X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se zvířaty x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx žádné uhynutí xxxx xxx v xxxxx počtu. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, xx xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx překračovat. Ideálně xx střední xxxxxxxxxxx xxxx vyvolat toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx než 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx x nízkou x střední koncentrací x x kontrolní xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xx exponují po xxxx 6 xxxxx xx ustavení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx specifických xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx za xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx x rovnoměrné xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx zvířat x xxx inhalační expozice xxxxxxxxx xxxxx byla xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx boxu xxxxx by v xxxxxx xxxxxxx objem xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Je možné xxxxxx inhalační expozice xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx individuální celotělové xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxx pozorování
Xxxxxxx zvířata xx xxxxx denně xxxxxxxxx xxxxx celého xxxxxx xxxxxxxx i zotavení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, xx xxxxxx xx objeví x opět xxxxxx xxxxxxx účinky.
1.2.3. Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx v xxxxx, xx dobu 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx dalších 28 xxx bez xxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx mezi 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, kde xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxx expozice xx xxxxxxxx potrava xxx voda.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx inhalační xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx nastavit xxx, xxx podmínky x xxxxx expozičním xxxx xxxx stejné. Xxxxxx musí zaručovat, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx bude xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx v xxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx odchylovat xx xxxxxxx hodnoty o xxxx xxx ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx rozsah xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx tak xxxxxxxx, xxx je xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx vývoji xxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxx, xxx byla xxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx. Během xxxxxxx xx xxxx tak xxxxx, jak je xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx
x) Xxxxx xxxxxxxx x po xx xx zvířata xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx se zaznamenávají; xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx protokol. Xxxxxxx zvířata je xxxxx denně xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx výskyt, stupeň x xxxxxx. Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, aby pokud xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx jako xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chybného xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx vyřadit x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx nejlépe x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx dávky x x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, vyšetří xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxx xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx čas (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, metabolismus xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx volí xxxxx živočišného xxxxx x kmene), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) a aspartátamino xxxxxxxxxxx séra (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků.
(x) Analýza moče xx nevyžaduje jako xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx podkladě xxxxxxxxx xxxx pozorované xxxxxxxx.
Pokud nejsou xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx parametrů xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx použitých xx studii xx xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x břišní xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx se xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx ve vlhkém xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx vhodném médiu x xxxxxxx na xxxxx pozdější histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým postižením, xxxxx (xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, tak aby xx zachovala xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxx xx považuje xx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx medula/pons, xxxx xxxxx x xxxxxxx, hypofýza, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, srdce, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx střevo, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx nerv, (xxx), xxxxxx xxxx x kostní xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - krční, xxxxx hrudní x xxxxxxx). Tkáně v xxxxxxxxx se xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx podle příznaků xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx s cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx respiračního xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx je xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla exponována xxxxxxxx koncentraci, x x xxxxxx kontrolní xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx léze.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx orgány x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Plíce xxxxxx xx skupinách x xxxxxx x střední xxxxxxxxxxx xx mají xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx histopatologická vyšetření xx u zvířat xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, musí xx xxxx provést xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(x) Používá-li xx xxxxxxxxx skupiny, xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx tkáních x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x ostatních xxxxxxxxxxxx skupin.
2. XXXXX
Xxxxx se sestaví xx tabulky. Z xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx x počet xxxxxx x xxxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx: Popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, klimatizačního systému, xxxxx likvidace odpadního xxxxxxx a způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx boxu, pokud xx xxxxxxxx. Popsat xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxx stability koncentrací x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,
- xxxxx o xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x charakteristikou xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxxxxxx xxxx xxxxx:
x) xxxxxxxx průtoku vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx inhalačního xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
x) povaha vehikula, xxxxx xxxx xxxxx,
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (x aerosolu),
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x podle xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx možné xx xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat xx xxxxx sledování,
- xxxxx toxických nebo xxxxxx účinků,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x jejich výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- pitevní nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.30. XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. METODIKA
1.1 Princip xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx skupinu, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx standardních podmínkách xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, mladá zvířata xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Preferovaným xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx možno xxxxxx i xxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxx). Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kmenů laboratorních xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx činit xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx studii xxxxxxxxx xxxx subchronické xxxxxx toxicity, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx nejméně 40 xxxxxx (20 xxxxx x 20 samců), xxxxxx i xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Samice xx xxxx xxx xxxxxxxxx x neměly xx být xxxxx. Xxxxx xx záměrem xxxxxxx některá xxxxxxx xxxx dokončením xxxxx, xx třeba použít xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
V xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat (xxxxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx ne xxxx xxx 4 xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x frekvence xxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxx xxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx vyvolat xxxxx projevy xxxxxxxx xxx nadměrné xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxxxxxxxxx xxxxxxx toxicity. Xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxx ve xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxxx x nízkými xxxxxxx. Xxxxx dávek xx xxx vzít x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Obvykle xxxx xxxxxxx exponována xxxxx. X případě, xx testovaná látka xx xxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxx x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx x ní měla xxxxxxx stálý xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná kontrolní xxxxxxx xx identická x xxxxxx xxxxxx x exponované xxxxxxx, xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx.
Xx zvláštních xxxxxxxxx, jako jsou xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxx negativní kontrolní xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx vehikulu.
1.2.2.5 Xxxxxx aplikace
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vyvolává xxxxxx technické xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxicita x důsledku xxxxxxx xxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x znalosti rozsahu xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx testů xxxxx toxicity.
Xxxxxx xxxxxx
Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, jimiž xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx aplikaci, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x pitné xxxx nebo xxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xx měla xxxxx podávat xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x týdnu xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx v xxxxxx xxx xxxxxxxx, a xxxxx ovlivnit xxxxxxxx x následné xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx praktické xxxxxxx, dávkování xxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Inhalační xxxxxx
Protože xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx než xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx platnou xxxxxxxxxxxx x specifických situacích.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx lidské xxxxxxxx, xxxxx zvíře xx obvykle exponováno xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx xx pět xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x návaznosti xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx sedm xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x přibližně xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx zvířat xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx x xxx xxxxxxx expozičního xxxx. V xxxx xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, že x xxxxx má xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x ještě xxxxxx xxxxxxx xxxxx víkendu.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx studia x xx xxxxxx xxxxxxxx, která xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x xxxxx určité xxxxxxxxx xxxxxx. Například, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxx prostředí xxxxx xxx narušeny xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx expozice x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx aerosolu xxxx určité xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx komory
Xxxxxxx se exponují x inhalačních xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx proud pro xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x expoziční xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, tak xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxx aspektech xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx xx brání xxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxx prostřední. Komory xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx monitorování xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx: rychlost xxxxxxx xxxxxxx komorou xx xxxx xxx nejlépe xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx denní xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxx xxxxxxx více xxx 15 % xxxxxxx xxxxxxx;
(x) xxxxxxx a xxxxxxx: xxx hlodavce, xxxxxxx by měla xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 xX x xxxxxxx v xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx by měly xxx kontrolovány xxxxxxxx;
(x) měření velikosti xxxxxx: xxxx by xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx komor u xxxxxxxx xxxx pevných xxxxxxxx. Aerosolové částice xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Vzorky xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx vzduchu xx xxx být xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx je xxxxx exponováno, a xxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, i když xxxxxx xxxx aerosolu xxxx respirabilní. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx vývoje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx aerosolu, x poté během xxxxxxx tak často, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx stabilitu distribuce xxxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Expozice látky xx xxxx xxxxx xxxxxxx 12 xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Pozorování
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Dodatečná xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx zákroky k xxxxxxxxxxxx ztráty xxxxxx xx studie, xxxx. xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx u xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx jsou xxxxx nebo moribundní. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xx xxxxxx minimalizace ztrát x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxx objevení x xxxxxx toxických xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxx zvířat xxxxxx xxxxx během xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx a aspoň xxxxxx xx xxxxx xxxxx po xxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (a xxxx xxx, xxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x pitné xxxx) xxxxx během xxxxxxx 13 xxxxx x xxx přibližně ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx ukázaly xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx sledování.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx vyšetření
Hematologická xxxxxxxxx (např. obsah xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx destiček xxxx xxxx ukazatele xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx měsíce, šest xxxxxx a poté x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, a na xxxxx na xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. xx 10 potkanů xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx xx to xxxxx, vzorky ve xxxxx intervalech xx xxxx být od xxxxxxxx xxxxxxx. Navíc xx měl xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx stav xxxxxx xxxxx xxxxxx, měl xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx krvinek xx xxxxxxx ve vzorcích xx zvířat xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx a x xxxxxxx. Xxxxx tato xxxx xxxx xxxxx x vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx naznačí nutnost, xxxxxxx se i x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxx moči
Xxxxxx xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx možno xx xxxxxxxx zvířat x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hematologické xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx buď na xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx skupiny xxxxx xxxxx x xxxxxxx:
- vzhled xxxx, xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, ketolátky, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx sedimentu (xxxx- kvantitativně).
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx závěr jsou xxxxxxxx krevní xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx měření xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 potkanů xxxxxxx pohlaví x xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx tytéž xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- koncentrace xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx jater (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx glutamát xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), gamma xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, ornithin xxxxxxxxxxxxx,
- metabolismus xxxxxxx, xxxx. krevní xxxxxxx xx lačno,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.
1) xxxx xxxxx jako xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx xxxxx jako xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
1.2.3.5 Xxxxx
Kompletní xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxx xxxx, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx byla utracena x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx být xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx. Mělo by xxx provedeno xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Všechny xxxxxx x tkáně xx xxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx se xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx:xxxxx3) (xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x příštítných xxxxxxx, thymu, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, xxxxx, slinných xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, ledvin3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, žaludku, xxxxxxxxxxxxx, jejuna, xxxx, xxxxxxx střeva, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, slinivky, xxxxx3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx mléčné xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), xxxxxx s xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx plic x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; naplnění xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx, xx být xxxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxxx jiná xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou dát xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
3) xxxx orgány x 10 xxxxxx xx xxxxxxx a xx skupinu x xxxxxxxx a xx xxxxx xxxxxxxxxx x dále xxxxxx žláza (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxx xxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxx
1.2.3.6 Histopatologie
Xxxxxxx xxxxxxxxx změny, xxxxxxx tumory x xxxx léze vyskytující xx v kterémkoli xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx mikroskopicky. Navíc xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
(x) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všech uchovaných xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx lézí xxxxxxxxxx:
1. x všech xxxxxx, xxxxx uhynula xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx studie,
2. x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx abnormity xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(x) tam, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx s xxxxxxxx nižší xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx,
(d) xxxxxxxxx x xxxxxxxxx lézí, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx laboratorních xxxxxxxxxx, xx. historické xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxx xxx správné xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxx látkou.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku testu, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxx
Xxxxxx o xxxxx xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, zneškodňování xxxxxxx vycházejícího x xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, stability xxxxxxxxxxx xxxx velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Údaje x xxxxxxxx: ve xxxxx tabulky včetně xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx)
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx použito
(e) xxxxxxxx koncentrace v xxxxxxx xxxx
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xx-xx to xxxxxxxxxx)
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) a xxxxxxxxxxx
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx
- xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxx
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx
- xxxxx xxxxxxxxx a jiných xxxxxx
- doba, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznak x xxxx xxxxx xxxxx
- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- použité hematologické xxxxx x výsledky
- xxxxx klinické xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxx xxxx)
- xxxxxxx nálezy
- xxxxxxxx popis všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx
- interpretace xxxxxxxx.
B.31. STUDIE XXXXXXXXXXXX - HLODAVCI X XXXXXXXXXX
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx koncentracích několika xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x tom xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxxx. Krátce xxxx xxxxxxxxxx datem porodu xxxx březí samice xxxxxxxx a jejich xxxxxx i x xxxxxxx je xxxxxxx x dalšímu studiu. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx- x xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx nebyly xxxxx, xxxxxxxx věku x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Potom xxxx xxxxxxxxxx samci x xxxxxxxx plodností. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Testovaná xxxxx xx xxxxxxxx samicím xxxxx. Aplikace začíná xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxxx jsou xxxxx vyjmuty xxxxxxxxxxxxx x podrobeny sledování xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
Běžně xxxxxxxxxxx druhy jsou xxxxxx, myš, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxx. Je xxxxx používat xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Používaný xxxx by xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxx by xxx u něj xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx. Zvířat xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx použít xxxxx 20 xxxxxxx potkanů, xxxx xxxx křečků xxxx 12 březích xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx studované xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
Xx třeba xxxxxx aspoň xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, že je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx vehikulu, xx xxxxx xxxxxxxx do xxxxxx i skupinu, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Je xxxxx xxxx znát xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxx být xxxxxxxxxxx xxx mít xxxx xx reprodukční xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx v xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx fyzikálně xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, pak nejvyšší xxxxx testované látky xx v ideálním xxxxxxx xxxx x xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, jako xx xxxxx xxxxxxx xxxx, xxx už xx xxxx xxx 10 % úmrtí. Xxxxx xxxxxx xxxxx xx neměla xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxx geometricky xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x vysokou xxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
V xxxxxxx, že látka x xxxxxx toxicitou xxx xxxxx xxxxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxxx xxx teratogenicity, xxxx xxxxx testovat xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxx je xxx, xxx xx xxxxxxxxxx vaginální xxxxx x/xxxx spermie (xxxxx xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xx xxxx zahrnovat xxxxxx xxxxxx organogeneze. Xx xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 6. xx 15. xxx x xxxxxxx x myši, 6. xx 14. xxx x křečka x 6. xx 18. xxx u králíka. X případě, xx xx xx nultý xxx xxxxxxxxx den, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx byla xxxxxxxxx xxxxx inseminace, xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx
Každý xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxx x opatření jsou xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx ztrát během xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx orálně xxxxxx, xxxxx xx stejnou xxxx.
Testovaným xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx období xxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx látky nebo, xxxxxxxx k rychlému xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx periodicky xxxxxx x dávka xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx ihned xxxxxxxxxx xxxxxx doby xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx x xx ukončení xxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx jeden xxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx účelem xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xx komplikacím při xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx porodu. Xxxxxxxxxx xxxxxx v kleci xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx kůže x srsti, xxx x sliznic, dále xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Každý xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x vážit zvířata.
1.2.3.1 Xxxxx
Pokud dojde x xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, je xxxxx x xxxxx makroskopicky xxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx xxx xxxx na xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx smrti xx xxxxx odstranit xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx embryí x xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx živých xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx dobu xxxxx xxxxxxx v xxxxxx. X potkanů x králíků xx xxxxx stanovit xxxxx xxxxxxx tělísek. Xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zárodků x xxxxxxxxx průměr. Xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx zevně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx kosterní xxxxxxxxx x zhruba xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx vrhu a x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxxx xxxxxxx tkání. U xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx důkladně xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx abnormit xxxxxxxxxx x skeletu.
2. XXXXX
Xxxxx je xxxxx xxxxxxx ve formě xxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxx testovanou xxxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, počet xxxxxx, která zabřezla, xxxxx x procento xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x abnormalitami xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx abnormit x xxxxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. XXXXXX
3.1. Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx by xxxx pokud možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky ustájení, xxxxxxx,
- podmínky xxxxx,
- dávky (xxxxxx vehikula, xxxxx xxxx xxxxxxx) a xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxx účinku (xxxxx xx xxxx možno xxxxxxxx),
- xxxx xxxxx xxxxx studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx konce xxxxx,
- xxxxx x tělesné xxxxxxxxx x xxxxxxxx potravy,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxx (xxxxxx historických xxxxx),
- údaje x xxxxxxxxx (xxxx/xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx skeletu x xxxxxxx tkání),
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx/xxxxx xxxxx, pohlaví, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.32. XXXX XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip metody
Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx v xxxxx, xxxxxxx cestou, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxx dávka na xxxxxxx, po větší xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx denně xxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx projevů toxicity, xxxxxxx xxxxxx tumorů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nejméně xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do kontrolních x xxxxxxxxxxxx skupin.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Preferovaným xxxxxx je xxxxxx. Xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x další xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx se xxxxxx mladá xxxxxxx x xxxxx chovaných xxxxx xxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx by měla xxx započata xx xxxxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx neměl xxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % od xxxxxxx. V xxxxxxx, xx vlastní xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity, je xxxxx použít xxxxxx xxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx hlodavce xx xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) xxx každou xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx před xxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx expozic
Xxxxx se xxx xxxxxxxxx tři dávkové xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xx mírný pokles xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx jinými xxxxxx xxx tumory.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx xxxxx stanovit xx xxxxxxxx xxxxx xxxx vysokou x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx vzít x xxxxx předchozí xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx do xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx identická x každém ohledu x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo použije-li xx xxx xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, jehož xxxxxxxxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx cesty xxxxxxxx xxxx orální, dermální x xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx podání xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx charakteristikách xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx expozice x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx studie
Xxx, kde xx xxxxxxxxx látka vstřebává x gastrointestinálního traktu x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx může být xxxxxxxxx xxxxxx, dává xx xxxxxxxx orální xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx látku x potravě, rozpuštěnu x pitné xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.
Ideálně xx xx měla xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx pět dnů x týdnu xxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" xxxxxxxx x xxxxxx bez xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx hodnocení. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x ohledem xx praktické aspekty, xxxxxxxxx xxxxxxx týdně xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Dermální xxxxxx
Xxxxxxxx přímo xx xxxx xxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx vstupu x xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx způsoby xxxxxxxx, xxxx zde xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx platnou alternativou xx xxxxxxxxxxxx situacích.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvíře xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hodin denně xx xxx xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), nebo x xxxxxxxxxx na možnou xxxxxxxx x prostředí, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx dní v xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx jednou xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx denně ve xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx i xxx xxxxxxx expozičního boxu. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx v xxx, xx v xxxxx xx zvíře 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx s xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxx a xx lidské xxxxxxxx, xxxxx má xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx v xxxxx určité xxxxxxxxx xxxxxx. Například, výhody xxxxxxxxxxx expozice xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx pití x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx par x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx exponují v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx zaručuje xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx xx hodinu, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní a xxxxxxxxx komory xx xxxx xxx identickou xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx mírný podtlak x xxx xx xxxxx úniku xxxxxxxxx xxxxx xx okolního xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx shlukování xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx atmosféry x xxxxxx xxxxx xxxxxx neměl xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zahrnuje:
(x) Xxxxxx vzduchu: rychlost xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx měla být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx by xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísat xxxx xxx ± 15 % střední hodnoty.
(x) Teplota a xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx udržována v xxxxxxx 22 ± 2 °X x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
(x) Měření xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx částice xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se odebírají x dýchací xxxx xxxxxx. Vzorek vzduchu xx xxx být xxxxxxxxxxxxxxx xxx distribuci xxxxxx, kterým xx xxxxx exponováno, a xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx část xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Analýza xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, aby xxxxxxxxx stabilitu aerosolu, x xxxx xxxxx xxxxxxx tak xxxxx, xxx bylo možno xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx normální xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx a 24 měsících x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxx xxxxxxx kmeny xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx. x xxxxxx spontánním výskytem xxxxxx doba xxxxxxxx xx xxxx být 24 xxxxxx pro xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx xxx potkany. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx takové xxxxxxxxxxx xxxxxx xx přijatelné, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Při xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx pohlaví xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx xxxxx předčasně xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx příčin, xxxxxx to xxxxx xxxx x ukončení xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx činily xxxxxxxx. Xxx xxxx možno xxxxx xxxxxxxxx výsledek xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx chyb xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx větší xxx 10 % x xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x x 24 měsících x xxxxxxx.
1.3 Popis xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx x xxxxx, xxx a xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx kontrola xxxxxx je xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx v důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxx zvířat. Xxxxxxxx pozornost je xxxxx věnovat vývoji xxxxxx: doba objevení, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx x progrese xxxxxxx xxxxxxxxxxx či hmatného xxxxxx xx zaznamenává.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx podávána x xxxxx vodě) týdně xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x pak xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx váhy xxxxxxx nutnost jiné xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx jednou týdně xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx testu x xxxxx jednou xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Pokud xxxxxxxxxx xxxxxx x klecích xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx diferenciální xxxxx bílých xxxxxxx.
Xx 12 xxxxxx, xx 18 xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx nátěr xx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx zvířat xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a u xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx, xxxxxxx údaje xxxxxxx xxxx utracením, xxxx xxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx i x xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx
Kompletní xxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx, xxxxx zemřela xxxxx pokusu xxxx xxxx utracena, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx léze, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.
Následující xxxxxx x tkáně xx měly xxx xxxxxxxx xx vhodných xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx histopatologické vyšetření: xxxxx (včetně xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, kory mozkové), xxxxxxxx xxxxxxx, štítná xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx thymu, xxxxxxx x xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx, xxxxxx, děloha, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, representativní xxxxxxxxxx uzlina, xxxxxx xxxxxx xxxxx, svalovina xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx s xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx (xxxxx, střední xxxxxx x xxxxxxx) a xxx.
Naplnění xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx těchto xxxxx. Xxxxxxxx plic x inhalačních xxxxxxxx xx zásadní pro xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx včetně nosní xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
1.3.2.3 Histopatologické xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx provede v xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x x xxxxx xxxxxx skupiny xxxxxxxxx x x nevyšší xxxxxx.
(b) Všechny xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, se vyšetří xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx.
(x) Xx-xx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx lézí xxxx skupinou x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx skupinou, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx provede x xxxxx xxxxxx xx tkáni i x xxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xx-xx přežití xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx nižší dávkou.
(x) Je-li ve xxxxxxx s vysokou xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx tabulek, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx zvířat vykazujících xxxxxx zjištěné xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx hodnotí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx použity jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxx
Xxxxxx x xxxxx bude, pokud xxxxx, obsahovat následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx testu: Xxxxx expozičního xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxx xxxxxxxxxxx, zneškodňování xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx xx xx žádoucí, stability xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Xxxxx x xxxxxxxx: ve xxxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxxx hodnot a xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx průtoku vzduchu x xxxxxxxxxx zařízení,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx vzduchu,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
(d) povahu xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
(x) mediány xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx xx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx (včetně xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxxxx xxxxxx podle xxxxxxx, dávky x xxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx až xx konce,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- doba, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx další xxxxx,
- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx,
- nálezy xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.33. XXXXXXXXXXX XXXX XXXXXXXXX TOXICITY/KARCINOGENITY
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxx
Cílem xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx druhu savců xx dlouhodobé xxxxxxxx.
Xxx xxxxx účel xx test xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx alespoň jednou xxxxxxxxxxx satelitní xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Dávka použitá xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx může xxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Zvířata x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xx obecnou xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx toxicitu.
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Během x xx expozici xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx pozorována xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx tumorů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Zvířata xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx nejméně pět xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Před testem xx mladá xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx skupin.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx i xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx zvířata z xxxxx xxxxxxxxx kmenů xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx co xxxxxxxx xx odstavení mláďat. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, že vlastní xxxxxx předchází xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx v xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx hlodavce xx použije nejnémě 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) xx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx by xxxx xxx nullipary x xxxxxxxxxx. Xx-xx plánováno xxxxxxxx utrácení xxxxxx, xxxxx se xxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou takto xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Exponovaná satelitní xxxxxxx (xxxxxxx) xxx xxxxxxxxx patologie xxxx, xxx xxxx tumory, xx každá xxxx xxxxxxxxx 20 xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx satelitní xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxx vyvolat příznaky xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx účinky xxx tumory. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx. Xxxxxx by xxxxxx xxx xxxxx xxx 10 % vysoké xxxxx. Střední xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx pásmu xxxx vysokou a xxxxxx dávkou.
Při xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.
Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx satelitní xxxxxxx. Vysoká dávka xxx exponovaná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx zřetelné xxxxxxxx xxxxxxxx.
Expozice xx xxxxxxx obvykle denně. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx přimíšena xx xxxxxxx, měla xx xxx stále x xxxxxxxxx.
1.2.4 Kontroly
Xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina xx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxx s exponovanou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx případech, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x aerosoly xxxx xxxxxxx-xx xx pro xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, xxxxx biologická xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx ani xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx cesty xxxxxxxx jsou xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx způsobu xxxxxx xxxxxx na fyzikálních x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx způsobu expozice x člověka.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Tam, xxx xx testovaná xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, jimiž může xxx exponován xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x pitné xxxx nebo podanou x tobolce.
Ideálně xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx v období xxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Dermální xxxxxx
Aplikace přímo xx xxxx xxxx xxx zvolena jako xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx inhalační xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx informace x této xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, takže xxxxx xx obvykle xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx šest hodin xxxxx po pět xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx expozice), nebo x návaznosti xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin xxxxx xx xxxx xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx denně xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx x xxx xxxxxxx expozičního xxxx. X obou xxxxxxxxx jsou zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx rozdíl mezi xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx je x xxx, že v xxxxx xx zvíře 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx denní xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx víkendu.
Xxxxx přerušované xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx studie x xx lidské xxxxxxxx, která má xxx simulována. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx určité xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx kontinuální expozice xxx simulaci xxxxxxxx xxxxxxx prostředí xxxxx xxx narušeny nutností xxxx x krmení xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx komplikovanější (x xxxxxxxxxx) generace xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x technik xxxxxxxxxxxx.
Expoziční xxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx komorách, xxxxxxx xxxxxxxxxx zaručuje xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx xx hodinu, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx přísun xxxxxxx x rovnoměrná xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x expoziční komory xx měly xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, tak xxx byly expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a tím xx brání xxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx prostředí. Xxxxxx xx měly xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx monitorování xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
(b) koncentrace: xxxxx denní xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx neměla xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxx x vlhkost: pro xxxxxxxx, teplota xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °C x vlhkost v xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x atmosféře xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx být kontrolovány xxxxxxxx,
(d) měření xxxxxxxxx xxxxxx: měla xx xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx xxxxx x tekutých xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx by xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x dýchací xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx by xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, i xxxx značná xxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx často xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx tak xxxxx, aby xxxx xxxxx posoudit xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx zvířata xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx studie
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx života xxxxxxx xxxxxxxxx xxx test. Xxxx xx xxx xxx ukončen x 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x 24 xxxxxxxx x potkanů. Nicméně xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x delší xxxxx xxxxxx xxxx. x xxxxxx spontánním xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxx by xxxx xxx 24 měsíců xxx xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx ukončení xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx uhyne xxxxxxxxx jen skupina x xxxxxxx xxxxxx xx zjevných toxických xxxxxx, nemusí xx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx by činily xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx uznat negativní xxxxxxxx testu, xxxxx xxx xxxxxx použitelných xxxxx (xxxxxxxxx, kanibalismem xxxx x důsledku xxxx xxxxxxx) x xxxxx skupině větší xxx 10 % x xxxxxxx ve xxxxx skupinách nesmí xxx nižší než 50 % v 18 xxxxxxxx x xxxx a xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx zvířat xxx xxxxx xxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. X těchto xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx utracení xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, která xx vztah x xxxxxxxxx xxxxx, od xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Pozorování
Xxxxx pozorování zvířat x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx i xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx nervového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
U xxxxxx xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx (xxxxxx) se xxxxxxx x přiměřených xxxxxxxxxxx klinické xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat xx nutná, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx studie xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx x pitvána.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx objevení, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx tumoru xx xxxxxxxxxxx.
Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx přibližně xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx by zdravotní xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx váhy xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx individuálně x všech zvířat xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxx za xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Klinická xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. obsah xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx destiček xxxx xxxxx xxxxxx srážlivosti) xx měla xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, šest xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx konci xx xxxxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx skupiny. Tam xxx xx to xxxxx, xxxxxx ve xxxxx intervalech by xxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx.
Pokud xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx svědčí x xxxxxxxxx zdravotním xxxxx xxxxxx xxxxx studia, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.
Diferenciál xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxxxxx xx xxxxxx xx skupině x xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Pokud xxxx data xxxx xxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx se xxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx vysoká xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx sbírají pro xxxxxxx pokud xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xx vzorcích xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx na xxxxxxx vzorku pro xxxxxxx podle dávek x xxxxxxx:
- xxxxxx moči, xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (semi-kvantitativně),
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx (semi-kvantitativně).
1.3.2.3 Biochemické xxxxxxxxx
X přibližně xxxxxxxxxxxxxx intervalech a xx xxxxx xxxx xxxxxxxx krevní xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx měření xx všech nehlodavců x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx tytéž xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx vedle xxxx xxxxxxxx vzorky před xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx připravena xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
- celková xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- testy xx xxxxxx xxxxx (xxxx. aktivita xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx glutamát xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, ornithin xxxxxxxxxxxxx,
- metabolismus xxxxx, xxxx. krevní xxxxxxx xx xxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.
1) nyní xxxxx jako sérová xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx známá xxxx xxxxxx aspartát xxxxxxxxxxxxxxxx
1.3.2.4 Makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, které xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx provedeno xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx měly xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx: xxxxx3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, kory xxxxxxx), podvěsku xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx tělísek, xxxxx, xxxxxxx a xxxx, xxxxx, xxxxx, slinných xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), jícnu, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, močového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx uzlin, xxxxxxxx, xxxxx3), akcesorních xxxxxxxxxx orgánů, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, periferního nervu, xxxxx (xxxxx, hrudní x bederní), sterna x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx kosti xxxxxx xxxxxx, x xxx. Naplnění plic x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx xx konzervaci xxxxxx tkání; naplnění xxxx x inhalačních xxxxxxxx je zásadní xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxx. Xx speciálních xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx, má xxx studován xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx procedur xx xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx významné xxxxxxx.
3) Xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx xxxxxxx x xx skupinu xxxxxxxx mají xxx xxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx skupiny x xxxxxxx xxxxxx x satelitní xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx patologické xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx všech xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx satelitních skupin x xx všech xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx věnované karcinogenitě xxx xxxxx ukončení.
Xxx xxxxxxxxx karcinogenity:
(x) úplná xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo byla xxxxxxxx xxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx skupiny xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx;
(b) všechny xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx, které xxxx podezřelé jako xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u všech xxxxxx;
(c) xx-xx xxxxxxxx rozdíl x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx lézí xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx skupinou, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx provede x xxxxx xxxxxx xx xxxxx x x xxxxxxx skupinách;
(x) xx-xx přežití xx skupině x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx u xxxxxxx, měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxxx nižší dávkou;
(x) xx-xx ve xxxxxxx s vysokou xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxxxxxxx odpověď, xx xxxxx xxxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxx xxxxx dávkovou xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx, ukazujících xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx s xxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx hodnotí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx použity jakékoliv xxxxxxxx statistické xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxx
Xxxxxx x xxxxx bude xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx ustájení, xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx x aerosolů, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vycházejícího x xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx pro měření xxxxxxx, vlhkosti, a xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Údaje x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) by xxxx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx zařízení,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
(x) povahu vehikula, xx-xx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx částic (xxx xxx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví, xxxxx a xxxx xxxxxx,
- doba xxxxx xxxxx studie xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx satelitních xxxxxx,
- výskyt xxxxxxxxx účinků xxxxx xxxxxxx a xxxxx ,
- popis xxxxxxxxx x jiných xxxxxx,
- xxxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx abnormální xxxxxxx x jeho další xxxxx,
- xxxx x spotřebě xxxxxxx x tělesné xxxxxxxxx,
- oftalmologické xxxxxx,
- použité hematologické xxxxx a xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx moči),
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx popis všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.34. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Samci xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku x xxxx xxxxx a xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx úplného xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (přibližně 56 xxx x myší x 70 dnů x xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinek xxxxxxxxx xxxxx xx spermatogenezu.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxx. Xxxxxxx jsou xxxx připuštěna. X xxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx látka podává xxxxxxxx obou xxxxxxx, x době xxxxxxxxx x kojení xxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx dvou xxxxxx - xxxxxxxxx x exponované skupiny. Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu.
Doporučuje xx xxxxxxxxxx látku xxxxxxx v potravě xxxx v xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx v průběhu xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx používá k xxxxxxxxx aplikace vehikulum xxxx jiné aditivum, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx aplikuje 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Pokusná xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Používají xx zdravá xxxxxxx, xx xx doby xxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx s nízkou xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a váhy x/xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx způsobem x xxxx xxxxxxx. Xxxxxx x obou xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx být odstavena xxxx xxxxxxxxx aplikace.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx cca 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx termínem xxxxxx. Cílem xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnocení xxxxx xxxxx na xxxxxxxx, xxxxxx gravidity x xxxxxxxx xxxxxxx x X generaci, xxxxxx, xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 xx početí xx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx ad xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx těhotné samice xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a je xxx poskytnut xxxxxxxx xxx vytvoření xxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vehikulum x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxx x využití potravy, xx třeba uvážit xxxxxxx další kontrolní xxxxxxx, spárované co xx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx x nejvyšší xxxxxxxxxxx xx v xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx fyzikálně-chemickými xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx toxicitu, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx populaci. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx by xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxx x rodičů xxx u potomstva.
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx podle změny xxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx dávky xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. xxx od xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Limitní xxxx
X xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxx xxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxxxxxx žádným xxxxxxxx xxxxxxx xx reprodukci, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx na jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ukáže, xx vysoká xxxxx, xxxxxxxxxxxx u matek xxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx plodnost, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Denní xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (P) xxxxx xx xxxx xxxx xx devíti xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx týdnů xxxx xxxxxxx připouštění (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xx konci xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx dalších vrhů x xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx koncem xxxxxx.
Denní xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx generace (X) xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx aspoň xxx xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pak po xxxx tři xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, v xxxx xxxxxxxxx až xx odstavení X1 xxxxxxxx. Je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx při xxxxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (jedna samice x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).
X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xx společné kleci xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx spermatu xxxx xxxxxxxxx zátky. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx, u xxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx neplodnosti xxxx. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx k xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx pohlaví xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx vrhů
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx možnost xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx x xxx potomstvo xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti xxxx. Pokud xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx dodržet xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx porodu xx xxxxxxxx všech xxxx upraví vyřazením xxxxxxxxxxxx jedinců xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 samců x 4 xxxxx xx xxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx standardizovat xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 xxxxx x 3 xxxxxx. Xxxx menší než 8 xxxxx standardizovat.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé zvíře xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx ztíženého xxxx xxxxxxxxxxxxx porodu x xxxxxxx příznaky xxxxxxxx xxxxxx mortality xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxx xxx před, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Během gravidity xx vhodné kontrolovat xxxxxx potravy xxxxx. Xx porodu x x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx (a xxxx, xxxxx se xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx) xx stejný xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X zvířata xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x xxx xxxxx. Všechna pozorování xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx vrh xx xx nejdříve xx xxxxxx vyšetří x xxxxxxx xx počty x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx porodů x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx utracená xx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx vyšetření xx xxxxx defekty. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx a xxxx xxxx xx xxxxx xxxx po xxxxxx, xx 4. x 7. dnu x xxxxx xxxxx xxxxx xx ukončení xxxxxx, xxx jsou xxxxxxx xxxxxxx individuálně. Pozorují xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Patologie
1.3.5.1 Xxxxx
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx všechna xxxxxxx generace X xxxxxxxxxxxxx vyšetří xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx anebo xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx P xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx tyto xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxx u xxxxxx, která xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx i x X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx případech xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všechny xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se mají xxx xxxxxxxx mikroskopické xxxxxxx.
2. XXXXX
Data xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, počet xxxxxxxxx xxxxx, typ xxxx x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky xxxx xxx xxxxxxxxxxx zpracovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx přijímaná xxxxxxxxxxx metoda.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxxxxxxxx
Zpráva x xxxxxxxxxxx xx měla xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí x xxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxx přežila xx xxxxxxxx pokusu,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx,
- toxické a xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx, potomstvo x xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxx hmotnost xxxxxx X xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx je xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.35. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx samic a xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx (X) generace xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx spermatogenního xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x myší x 70 xxx x xxxxxxx), aby xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx estrus.
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X době xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx zvířatům xxxx xxxxxxx a xxxxx, x xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxxx xx látka xxxxxxxx zvířatům xxxxxxxx xxxxxxxx X1 x xxxxxxx růstu do xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx x xx xx xxxx xxxxxxxxx X2 generace.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx metodu xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx (X) xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx nebo v xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx podání jsou xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx testu. Xxxxx se používá x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Látka xx xxxxxxxx 7 dní x xxxxx.
1.2.2 Pokusná xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx X xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx x nízkou xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx charakterizována xx xx druhu, xxxxx, xxxxxxx a xxxx xxxx věku. Plodnost xxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. Xxxxxx x obou xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupina xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx cca 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx, xxxx a xxxxx xxxxxxxxx generace X1 xx xxxxxx xx dospělosti, x xxxxx xxxxxx potomstva xxxxxxxx X2 až xx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xx libitum. Xxxx xxxxxxx se těhotné xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx klecí a xx jim xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx používá xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, pak zvířata xxxxxxxxx skupiny dostávají xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx snižuje xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxx použití xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx výživy.
Xxxxxxxxx látka x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxx případě, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti látky x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, vyvolávat xxxxxxxx x xxxxxx mortalitu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx minimální xxxxxxx účinky, které xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolávat xxxxx pozorovatelné nepříznivé xxxxxx, xxx u xxxxxx ani x xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx těhotných xxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx těhotenství.
1.2.6 Xxxxxxx xxxx
X případě xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx účinkem xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx úrovních. Xxxxx xxxxxxxxx studie xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, nemá xxxxxxxxxx účinky na xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X xxxxx ve xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx myši). Xxxxx xx xxx xxxxxx a xxxxxxx xx konci xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x jsou xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx utraceni x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx pokusu.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx rodičovské xxxxxxxx X xxxxx xx pětidenní xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx aspoň xxx týdny xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxx gravidity xx do xxxxxxxxx X1 xxxxxxxxx. Je xxxxxxxxx změna dávkovacího xxxxx xxxxx znalostí x vlastnostech studované xxxxx, např. o xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. x xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx po odstavu x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx při xxxxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).
V xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx x xxxx xxxxxx xx společné xxxxx xx otěhotnění xxxxx xx dobu 3 xxxxx. Každé xxxx xxxx samice xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, zvířata xxxxxxxx X1 xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 11 xxxxx u xxxx x 13 xxxxx x xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X1 se náhodně xxxxxxx páry x xxxxxxx vrhů xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx důvod xxxxxxxxxxx xxxx. To xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x oplodnění x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukčních xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx estrálního xxxxx x spermatogenezy.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ponechána xxxxxxx xxxxxxx normálně x xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx odstavení xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti vrhů. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx dodržet xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx xx xxx; pokud xx xxxx proveditelné, je xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxx xxxxx, xxxx. 5 xxxxx x 3 samice. Vrhy xxxxx xxx 8 xxxxx standardizovat. Xxxxxxxxxxxxx xxxx generace X2 xx provede xxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx za xxx. Významné xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxxx mortality, xx xxxxxxxxxxxxx. Příjem xxxxxxx se xxxx xxxxx jak xxxx, xxx během xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx xxxxxx kontrolovat xxxxxx potravy xxxxx. Xx xxxxxx x x průběhu xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Rodičovská X a F1 xxxxxxx se xxxx xxxxx xxx aplikace x pak týdně. Xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx zvíře.
Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx od xxx 0 těhotenství. Xxxxx xxx xx xx xxxxxxxx xx porodu xxxxxxx a xxxxxxx xx počty x xxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x přítomnost xxxxxxx anomálií.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx čtvrtém xxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx spočítají x celé vrhy xx zváží xxxx xx porodu, ve 4. x 7. xxx a potom xxxxx xxxxx do xxxxxxxx xxxxxx, kdy xxxx xxxxxxx zvážena xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx se x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x fyzickém xxxxx xxxxx x potomstva.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Pitva
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx generací X a X1 xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx nutné je xxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx reprodukci. Xxxxxxx xxxxxxxx F1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx generace X2 se xxxxxx xx xxxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X x X1 makroskopicky vyšetří xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx patologické xxxxx, xx xxxxxxxx pozorností x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx umírající xx xxxxxxx xx defekty.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxx, děložní xxxxx, xxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx kanálky, xxxxxxxxxx xxxxxx, prostata, hypofýza x další cílové xxxxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx X x X1 se xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření. X případě, že xxxx orgány nebyly xxxxxxx vyšetřeny x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx u všech X x X1 xxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávku, která xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, x xxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx, které xxxxxx abnormality x xxxxxx skupin zvířat, xx xxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všechny xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx již xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx orgány xxxxxx podezřelých x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx mikroskopické xxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx na začátku xxxxxx, počet těhotných xxxxx, xxx změn x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx přijímaná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx by xxxx pokud možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx na xxxxx x pohlaví xxxxxx xxxxxxxxx plodnosti, xxxxxxx a životaschopnosti,
- xxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx vrhu, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx mláďat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- toxické x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X x X1 xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx,
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx údajů, xxxxx je možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.36. XXXXXXXXXXXXXX
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo opakovaně x xxxxxxx stanovené xxxx, xxxxx nebo xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Látka xxxx. xxxx xxxxxxxxxx jsou xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx tekutinách, xxxxxxx xxxxx v exkretech.
Xxxxxx mohou být xxxxxxxxx x "neznačenou" xx "xxxxxxxx" formou xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx se tak, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx na laboratorní xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx pěti xxx xxxx testováním. Před xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. Pro xxxxxx speciálních otázek xx xxxx použít xxxxx mladých, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxx či xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druzích. Xxxx xx se xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxx toxikologických studiích xxxxxxxxxxxx xx testovanou xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, neměla by xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 4 zvířat xxx xxxxxx jednotlivou dávku. Xxx testování není xxxxxx xxxxxxxx určitému xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx podmínek xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx provádět xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxx rozdílné odpovědi x různých xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx ostatních druhů xxxxxx (xxxxxx než xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx menší počet xxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxx distribuce, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny zvířat xx xxxxx xxxx x xxxxx jak xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx bodu, xxx xxxxx časových xxxx, v xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx-xx studován xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx úměrná xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxx větší xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxx než 2 xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx zvířat by xxxx být xxxxxxxxxx xx xx, xxx xxx látku xxxx. xxxx xxxxxxxxxx poskytla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, rovnovážného xxxxx a xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
X případě xxxxxxxxxxxxx podání by xxxx být použity xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx testované látky. Xxxx xx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx které xxxxxx pozorovány xxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxx, xx xxxxx mohou xxx xxxxxxxx změny x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx toxické xxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx nezbytné x xxxxxxxx vysoké xxxxx.
1.2.2.4 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xx-xx to xxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx jsou používány x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx sondou xxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx kůži, nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxx dobu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Intravenózní xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx relativního xxxxxxxxxxx xxx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx. Navíc xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxx xxx xxxxxxx důležité xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x organismu.
Xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx vstřebávání x xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x potravě, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dávky, xxxxxxx xx-xx testovaná látka xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx toxicity x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x údaji x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx.
1.3.1 Absorpce
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx bez xxxxxxxxxx xxxxxxx1), a xx xxxx.:
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. x xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx akutní xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx x kontrolní a xxxxxxxx referenční xxxxxxxx,
- porovnání xxxxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx x případně xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx plochy pod xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x plazmě xx xxxx x xxxxxxxxx x xxxx získanými x referenční skupině.
1) X této xxxxxx xx referenční xxxxxxxx xxxxxx ta, xx xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, který xxxxxxxxx úplnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
V xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx 2 přístupy, x xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx schématu mohou xxx xxxxxxx xxxxx xx xxx:
- xxx použití xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxxxx
Xxx xxxxxx vylučování se xxxxx moč, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx se v xxxxxx exkretech xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx podání xxxxx, x to xxx xx vyloučení 95 % x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxx 7 dnů xx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx speciálních xxxxxxxxx xxxx být potřebné xxxxxxxx xxxx vylučování xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
X určení xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Měla xx xxx objasněna xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx, kde xx třeba odpovědět xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxx prospěšné xxxxxxxxx xx xxxxx studií.
Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x toxicitou xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx studií např. xxxxxxx xxxxxx látky xx enzymy metabolického xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx sloučenin xxxxxxxxxxxx - SH xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxxxx xxxxx xx podle xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx znázorněním.
Pro xxxxxx testovanou xxxxxxx xx uvedou xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxx, dávce, xxxxx x orgánům (xxxxx xx xx relevantní). Xxxxxx vstřebávání x xxxxxxxx a rychlost xxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx měla být xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxx měla xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx podmínky, xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx materiálu, xxxxxxxx xxx použit,
- xxxxxxxx dávky x xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx(x) podání x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx x x ostatní xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xx. jejích xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- tabulky xxxxxxxx rozdělené podle xxxxxxx, dávky, xxxxxx, xxxx, tkání a xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x závislosti xx xxxx,
- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx x identifikaci xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX - AKUTNÍ XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Při xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látek xx xxxxxxxx xxxx x úvahu schopnost xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx typ xxxxxxxxxxxxx, xxxxx nemůže xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx toxicity. X určitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx látek, které xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x in xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxxxx jako "xxxxxxxxx sloučeniny fosforu" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx estery, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, thiofosfonových xxxx amidothiofosforečných, xxxx xxxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx inhibicí x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx target esterase) x xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Referenční xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxx podmínkách xx xxxxxx testovaných druhů xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx používané xxxxx x pozdním xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, XXXXXX 201-103-5, xxxxxxxx xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx xxxxxxxx fosforečné, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (XXXX).
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx dávce xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx možnými xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx po xxxx 21 xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx chování, xxxxxx x paréza. Biochemické xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx XXX, se xxxxxxx x slepic xxxxxxx xxxxxxxxx x každé xxxxxxx, obvykle 24 x 48 hodin xx xxxxxx xxxxx. 21 dnů xx xxxxxx látky xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xx provedeno xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tkání.
1.5 Xxxxx xxxxxx testování
1.5.1 Příprava
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx volný xxxxx slepic x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx srovnatelnou metodou. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx rozpuštěné xx xxxxxxx vehikulu, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx dávky xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx nemusely xxxxxxxxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.6 Experimentální xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx kura xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx domesticus) xx xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x standardní xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.6.1.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx skupiny xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxx xx xxx dostatečný xxxxx xxxxxx, aby xxxxx xxxx x nich xxxxx být utraceno xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx prvý x xxxxx xxx xx xxxxxx) x xxxx xxxxxxx 21xxxxx xxxxxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx může xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx historie. Xx xxx xxxxx šest xxxxxx, xxxxxx se xxxxxx látka vyvolávající xxxxxx neurotoxicitu, xxx xxxxxxx jsou určeny xxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx historické xxxxx, xxxx se x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. plemeno, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx).
1.6.1.3 Xxxxx xxxxx
Má xxx xxxxxxxxx předběžná xxxxxx x využitím xxxxxxxxxxx xxxxx slepic x xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx dávek, aby xx xxxx stanovit xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx x hlavní xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx nezbytná xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx maximální neletální xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (viz xxxxxx B.1 bis). Historické xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx toxikologické xxxxxxxxx xxxxx být xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x výsledkům xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx neměly xxxxxxxx přežití xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxxxxx (xxxx) x xx 21 dnech xxx histologii (šest). Xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxx xx xxxxx, xx neinterferuje x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xx xxxxxx xxxx ochrana xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx x dávkou xxxxxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti, xx xxxxxxx xxxxxxx popsaných xxx tuto studii, xxxxxxxx xxxxx pozorované xxxxxxx účinky x xxxxxxxx podle údajů x látek s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx vyšší xxxxx. Xxxxxxx test xx neprovádí, xxxxx xxxxxxxx vyskytující se x lidí naznačuje xxxxxxx použití ještě xxxxx úrovně xxxxx.
1.6.1.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx xx 21 xxx.
1.6.2 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx podána x xxxxxx dávce.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx pozorování
Pozorování xx začít xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx pozorují několikrát x xxxxxxx xxxxxxx xxxx dnů a xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx 21 dní nebo xxxxx xxxxxxx utraceny xxxxx plánu. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx čtyřstupňové xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se paréza. Xxxxxxx xxxxxxx týdně xx slepice xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx vyjmou x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx minimálních toxických xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxx a přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a pitvat.
1.6.2.2 Xxxxxxx hmotnost
Xxxxxxx xxxxxxx xx zváží xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxx xxxxx jednou xxxxx.
1.6.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny x vehikulem a xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny (xx-xx xxxxxxx použita) xx usmrtí v xxxxxxx dnech xx xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx inhibice NTE xx xxxxxx mozek x xxxxxxxx xxxxx. Xx vhodné xxxxxxxxxxxx xxxx n. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxx na xxxxxxxx XXX. Běžně xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx x další tři xx 48 hodinách, xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx xxxxxxxx pouze xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx klinických xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pomalu (xxxxxxx xx nástup cholinergních xxxxxxxx), pak je xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorky xxxxx xxxxxxx xx xxx zvířat, x xx xxxx 24 xx 72 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx.
X těchto vzorků xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx také xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (AChE). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx spontánní xxxxxxxxxx XXxX, xxx může xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Pitva u xxxxx xxxxxx (plánovaně xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx špatný xxxxxxx xxxx) zahrnuje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx stavu xxxxx x míchy.
1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Nervová xxxx x přeživších xxxxxx (xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tkáně se xxxxxx xx situ xx xxxxxxx perfúzních xxxxxxx. Odebírá xx: xxxxxxx (xxxxxxx podélný xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx - řezy xxxxx xx provádějí x xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxx hrudní x xxxxxxxxxxxxx, z xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x n. xxxxxxxx (x jeho xxxxx x x. gastrocnemius) x x x. xxxxxxxxxxx. Řezy xx xxxxx specifickými barvivy xx xxxxxx x xxxxx.
2. XXXX A XXXXXX ÚDAJŮ
Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx touto xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx testování xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx nebo neurčité xxxxxxxx mohou xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx poškození, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx poškození xxxx účinku.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x průběhu pokusu
Xxxxxx o pokusu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxx zvířata:
- použité xxxxxxx;
- xxxxx a xxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx ustájení xxx.;
- hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx studie.
Podmínky xxxxxxxxx:
- podrobné xxxxx x přípravě, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxx;
- podrobné xxxxx x xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
- zdůvodnění xxxxxxx úrovně xxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x vehikulu, xxxxxx x fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx látky;
- podrobné xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx x tělesné xxxxxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxx, stupeň x xxxxxx xxxxxxxxxx příznaků (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx);
- xxxxxxxx xxxxx biochemických vyšetření x xxxxxx výsledky;
- pitevní xxxxxx;
- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx možné.
Xxxxxxx výsledků
Hodnocení x Xxxxxxxxxxxx
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x metodou XXXX XX 418.
B.38. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH XXXXXXXXX XXXXXXX 28DENNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Xxx xxxxxxxxx x vyhodnocení xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxx specifický typ xxxxxxxxxxxxx, xxxxx nemůže xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X určitých organických xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxx a mají xxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx.
Vyšetřovací testy xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx látek, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Negativní xxxxx x xx vitro xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx 28xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vznikajícím x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx krátkého časového xxxxxx. Xxxxxxxx informace x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx dávce x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx úrovní, xx kterém xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Tato xxxxxx xx používá xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx této xxxxxx jako "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, thioestery xxxx xxxxxxxxx kyseliny fosforečné, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, thiofosfonových xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx pozdní neurotoxicitu, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx skupiny.
Xxxxxx neurotoxicita xx xxxxxxx projevující xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx v xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx esterázy - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx esterase) v xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx orálně xxxxxxxx po xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxx sledována nejméně xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx dávce. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx XXX, se xxxxxxx u slepic xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx. Xxx xxxxx xx poslední xxxxx xxxx zbývající xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4 Xxxxx xxxxxx testování
1.4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx léčby x x xxxxxxxx xxxxx xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx klece xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Testovaná látka xx podává xxxxxx, xxxxx 7 dní x xxxxx, xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx tobolkami xxxx jinou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxx,
xxxx je xxxx. xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx pevných látek x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx nosičů musí xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx testem xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx nosnice xxxx domácího (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) ve xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx o xxxxxxxxxx velikosti x xxxxxxx se za xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Počet x pohlaví
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx látky se xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx jako s xxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxx má xxx xxxxxxxxxx xxxxx slepic, xxx xxxxx šest x nich mohlo xxx utraceno pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx x xxxxxx xx dvou xxxxxxxx xxxx) x šest xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.3 Xxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x přihlédnutím ke xxxx výsledkům x xxxxxxxx testu xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x x xxxxxx údajům x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, nejlépe xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx utrpení. Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx dávek xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.4 Xxxxxxx test
Jestliže xxxx s xxxxxx xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx x xxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx studii, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx očekávat, xxx xxxx třeba uvažovat x xxxxxx x xxxxxxx vyšší xxxxx. Xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx u xxxx naznačuje xxxxxxx xxxxxxx ještě vyšší xxxxxx dávky.
1.4.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx pozorují xxxxxxx xxxxxx denně xx xxxx xxxxxxxx x 14 xxx xx xx, xxxx do xxxxxxxx x do xxxxx podle xxxxx.
1.4.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx dní v xxxxx xx 28 xxx.
1.4.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxx xxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxx 14 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx příznaky xxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xx xx ně xxxxxxxx. Ataxie xx xxxxxxx xxxxx nejméně xxxxxxxxxxxx pořadové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx slepice xxxxxx x klecí x xxxxxxx nucené motorické xxxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxx xx žebříku, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky stresu x bolesti je xxxxx vyloučit, humánním xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxx hmotnost
Xxxxxxx slepice xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxx týdně.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Xxxx slepic xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx se xxxxxx x prvních xxxxx xx xxxxxxxx poslední xxxxx. Pro analýzu xxxxxxxx NTE xx xxxxxx mozek x xxxxxxxx xxxxx. Je xxxxxx vypreparovat xxxx x. ischiadicus x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx inhibici XXX. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx slepice x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx studie xxxx xxxxxx xxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxxxx) naznačují, že xx výhodnější xxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx aplikaci, pak xx xxxxxxxxxx použít xxxx xxxx x xxxxxxxxxx uvést x xxxxxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx acetylcholinesterázy (AChE). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, což xxxx xxxx x xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx XXxX.
1.4.3.4 Pitva
Xxxxx všech xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxxx pro špatný xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx stavu xxxxx x xxxxx.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Nervová xxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx studie) se xxxxxxxxxxxx vyšetří. Tkáně xx xxxxxx xx xxxx xx použití xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (řezy xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxx, střední xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx), z xxxxxxxxxxx nervů xx xxxxxxx distální xxxx x x. tibialis (x jeho větve x x. gastrocnemius) x x x. xxxxxxxxxxx. Řezy xx xxxxx specifickými xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx tkáně xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x skupiny x nejvyšší dávkou. Xxxxx se najdou x zvířat xxxxxxx x xxxxxxxx dávkou xxxxxx účinku, xxxxxxx xx histologické xxxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x nízkou.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Xxxxx jsou výsledky xxxxxxx touto metodou (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxx) negativní, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx neurotoxicitu. Neprůkazné xxxx neurčité xxxxxxxx xxxxx vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.
Uvádějí xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Údaje se xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x počet xxxxxx xxxxxxxx poškození, xxxxx xxxxxxx xxxx biochemické xxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx poškození xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxx xxx x xxxxxx poškození nebo xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx vyhodnotí x xxxxxxxx výskytu, závažnosti x korelaci xxxx xxxxxxx chování, biochemickými x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x testovaných x xxxxxxxxxxx skupin.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit vhodnou x obecně uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x pokusu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx plemeno,
- xxxxx a xxxxx xxxxxx,
- xxxxx, xxxxxxxx ustájení xxx.,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx údaje x přípravě, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx testované xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx podávaných dávek, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, objemu x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, je-li jiná xxx 24 a 48 hodin.
Xxxxxxxx:
- xxxxx o xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx úmrtnosti,
- xxxxxx bez xxxxxx (XXXXX),
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx příznaků (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx),
- podrobný xxxxx biochemických vyšetření x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x Interpretace
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx s metodou XXXX TG 419.
X.39. Test xxxxxxxxxxx syntézy DNA x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx DNA Synthesis (XXX) Xxxx Xxxx Xxxxxxxxx Xxxxx Cells Xx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Účelem xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX) v xxxxxxx xxxxxxxxx buňkách in xxxx je určit xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX v jaterních xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (1) (2) (3) (4).
Tento test xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinků xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx DNA x xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx následnou xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx místem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; jsou xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX in xxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx o xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx test xxxxxx.
Xxxxxxxx neplánované xxxxxxx XXX (UDS) xx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nukleosidů x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx plánovanou (S-fáze) xxxxxxxx XXX. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxxxx se autoradiograficky xxxxxxx thymidin značený xxxxxxx (3X-XxX). Xxx xxxxx XXX in xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx játra. Xxxx xxxxx xxx xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx XXX, xxx jsou x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Proto xx xxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxxx" (1 - 3 xxxx) xx méně xxxxxxx. Dále xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx neopravení, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx lézí XXX. Xxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxx nic x přesnosti procesu xxxxxxxx. Mimoto xx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx sice x XXX xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. To, že XXX xxxx xxxxxxxxxxx x mutagenní xxxxxxxx xxxxxxxxxx informace, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxxx x reparaci: xxx xxxxxxx xxxxx (XXX) xxxxx xxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
Net xxxxxxx xxxxxx (XXX): xxxxxxxxxxxxx xxxx XXX xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx testech XXX, xxxxxxxxx xxxx rozdíl xxxx xxxxxx xxx x xxxxx (NG) x xxxxxxxxx počtem xxx x xxxxxxxxxx (XX): XXX = XX - XX. Xxxxx XXX xx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx na buňky x kultuře, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX): xxxxxxx syntéza XXX xx xxxxxx x odstranění úseku XXX obsahujícího oblast xxxxxxxxx vyvolaného xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx UDS x xxxxxxx jaterních buňkách xx vivo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxx oblast xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemickou xxxxxx xxxx fyzikálním xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx XXX xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx buněk x X-xxxx buněčného xxxxx. Xxxxxxxxxxx 3H-TdR xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx technika xxxx xxx náchylná x interferenci x xxxxxxx x S-fázi, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx použít xxxxxxxxx vhodný savčí xxxx. Používají xx xxxxx laboratorní xxxxx xxxxxxx zdravých dospělých xxxxxxx. Hmotnostní xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x u xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx chovu xxxx xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělí jedinci xx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x laboratorních podmínkách. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx minimalizovaly xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx
Je-li xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx x xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xx xxxx podáváním ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) prokazují, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.3 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x používaných xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx xx xxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx údaji x kompatibilitě x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx možné, xxxx xx xxxxxx xxxxx použito xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx souběžné pozitivní x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx kontroly xx měly xxxxxxxxx XXX při xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné zvýšení xxx xxxxxxxxx úroveň. Xxxxxxxxx xxxxxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xx středně xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx se xxxx xxx, aby xxxx xxxxxx xxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zakódovaného preparátu. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxx odběru xxxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx v xxxxxxxxx (2-4 hodiny) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 hodin) | N-2-fluorenylacetamid (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx xxxxx použít x xxxx xxxxxx xxxxx. Xx možná xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxxx xxxxxx, xxx xx podávána testovaná xxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx x pohlaví xxxxxx
X xxxxx skupině xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelní jedinci. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx skupiny xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxx.
Xxxxx x xxxx, xxx xx studie xxxxxxx, xxxxxxxx údaje ze xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx expoziční test, xxxxxxxxxxx, xx mezi xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx testování pouze xx jednom pohlaví, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx látkám xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx farmaceutických xxxxxxxxx, xxxxxxx se test xx zvířatech odpovídajícího xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx jednorázově.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx dvě xxxxx xxxxx. Nejvyšší xxxxx je xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxx, xx xxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx by xx xxxxxxxx letální účinek. Xxxxx xxxxx představuje xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.
Xxxxx, xxx x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx vykazují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxxx hormony nebo xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x vyhodnocují xx případ xx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, pohlaví x xxxxxxxxx režimu, xxxx xx xxx použijí x hlavní xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx definovat xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx xxx dávce xxxxxxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx nebo ve xxxx xxxxxxx x xxxxx den nevyvolává xxxxx pozorovatelné xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkách neočekává xxxxxxxxxxxx, nemusí xx xxxxxxx xxxxx studie. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vpravuje žaludeční xxxxxx. X odůvodněných xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x jiné xxxxxxxxx cesty. Intraperitoneální xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx, protože by xx xxx xxxxx xxxxx vystavit xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxx, xxxxxx xxxxxxx oběhem. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx zdůvodněné. X xxxxxxxx dráždivých xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xxx, xxx xxxxx xxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx jaterních xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx x pokusných xxxxxx xxxxxxxxxxxx obvykle 12 - 16 xxxxx po podání xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx je zapotřebí xxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 xxxxxx xx xxxxxx látky), xxxxxx xx po 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx reakce xxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xx-xx xx odůvodněné xx základě toxokinetických xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jaterních xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx in xxxx kolagenázou. Je xxxxx zajistit, xxx xx čerstvě xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx minimálně 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx XXX
Xxxxxxx xxxxxxxxx savčí xxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx xxxx (xxxx. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxx odstraní( xxxxx xx potom xxxxx inkubovat x xxxxx xxxxxxxxxxx nadbytek xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx neinkorporovaná xxxxxxxxxxxxx (xxx. "xxxx xxxxx"). Xxxxx xx xxx promyjí, xxxxxx x vysuší. Xxx xxxxxxx inkubačních xxxxxxxxxxx xxxxxx xx "cold xxxxx" xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxx (např. xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxx), xxxxxxxx, xxxxxx x počítají xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx dva xxxx xxx xxxxxxxxx.
1.5.8 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx preparáty xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx morfologií, xxx xxxx možno XXX xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. pyknóza, xxxxxxx xxxxxx radioaktivního xxxxxxx).
Preparáty xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx. Vždy xx xxxxxxxxx xxxx preparátech x xxxxxxx jedince xx obvykle xxxxxxx 100 xxxxx; xxxxx xx xxxxx xxxx xxx 100 na xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx být xxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx zrn xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x X-xxxx, ale xxxxx buněk x X-xxxx se xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx stupeň inkorporace 3X-XxX xx xxxxx x cytoplazmy v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx depozice xxxxxxxxxx xxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Výsledky xxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxx preparátů x xxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx buňku, xxxxxxx jedince a xxxxxx dávku a xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx "nuclear xxxxx" (XXX) odečtením xxxxx XX od xxxxx XX. Počítají-li xx "xxxxx v xxxxxx", xxxx být xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxx buňky xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x historických xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; pokud xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx třeba xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xxxxxxxx pro pozitivní/negativní xxxxxx zahrnují:
xxxxxxxxx | (X) xxxxxxx XXX nad xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx | |
xxxx | (II) xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxxx kontroly | |
negativní | (X) hodnoty XXX na úrovni/pod xxxxxx historického xxxxx x xxxxxxx | |
xxxx | (XX) xxxxxxx XXX xxxxxx signifikantně xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxxx. |
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, což xxxxxxx, xx xx xxxxx vzít x xxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx - odpověď x xxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx statistické xxxxxx; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx reakci xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx nelze xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo problematické, x když se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx XXX se xxxxxxx xxxxxxxxx buňkami xx xxxx ukazuje, xx xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxxxxxxxx XXX, xxxxx xxx opravit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx poškození XXX, xxx xx tímto xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx vzít v xxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx dosáhne xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx tkáň (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx je xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx živočišný xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x pohlaví xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx jednotlivé xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx ze studie xxx xxxxxx rozpětí, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx volby x xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x podávání testované xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx metody x xxxxxxx, že se xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxx xxxxx,
- případný xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx dávku (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x kvalitě xxxxxxx a xxxx,
- xxxxxxxx schéma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x odběru vzorků,
- metody xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- metoda xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx autoradiografická xxxxxx,
- počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxx hodnoty xxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx a "xxx nuclear grains" xxx jednotlivé preparáty, xxxxxxx a skupiny,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx,
- statistické xxxxxxxxx, xxxx-xx provedeno,
- xxxxxx toxicity,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx,
- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- počet "xxxxx x xxxxxx", byl-li xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx x S-fázi, xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx buněk.
Diskuse xxxxxxxx.
Závěry.
Xxxxxx X.39. byla xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx od 22.6.2001
X.40. XXXXXXX XXXXXX XX KŮŽI
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx alternativních xxxxx (Xxxxxxxx Xxxxxx xxx xxx Xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxx, XXXXX, Xxxxx Research Centre, Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx) schválilo xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx transkutánního elektrického xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, XXX) x xxxx xxxxxxxxxxx modelu xxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx studie XXXXX prokázala, že xxx testy xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx vycházející x modelu xxxxxx xxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kůže X35, x ostatní xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kůže, X34). Xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx testů; xxxxx xxxx xxxxx testy xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2 DEFINICE
Poleptání xxxx: xxxxxxxxx nevratného xxxxxxxxx tkáně xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX LÁTKY
Žádná xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, viz xxxx xxxx. 1.5.3.4 a 1.7.2.3.
1.4 XXXXXXX METODY - TEST XXX XX KŮŽI POTKANA
Testovaný xxxxxxxx xx nanese xx xxxx až 24 xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx odebrané z xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Látky, xxxxx mají leptavé xxxxxx, jsou identifikovány xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx normální integritu x xxxxxxxxx funkce xxxxxx xxxxxxx.Xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (TER) xxx určitou xxxxxxxx xxxxxxx (5kΩ) (4) (5). Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx látky XXX xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (jejichž xxxxxxxx viz x xxx. (6)) je xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx pozitivních xxxxxxxx, xxx se x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (2) (7).
1.5 POPIS METODY - TEST XXX XX XXXX POTKANA
1.5.1 Xxxxxxx zvířata
Pro xxxxxxxx xxxxxxx terčíků xxxx xxxxxxxxx mladí (20 xx 23xxxxx) xxxxxxx, Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx nůžkami xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x dorzální a xxxxx plochy. Xxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxx otíráním x xxxxxx xx xxxxxx xx roztoku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx, x koncentracích inhibujících xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx omytí xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx znovu a xxxxx 3 xxx xx použijí. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx zvířata xxxxxx xxx 31 xxx.
1.5.2 Příprava terčíků xxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx usmrtí, xxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx a x té se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PTFE) xxxxxxx, x to xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx X-xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx tkáň xx xxxxxxx. Xxxxxxx trubice x O-kroužku xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx X-xxxxxxx se xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx TPFE xxxxxxx xxxxxx vazelínou. Xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx hořečnatého (154 xX), xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx. 2).
1.5.3 Popis xxxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx x tekutém xxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx uvnitř xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xx terčík v xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxx celý xxxxxx xxxxxxxxx, na xxxxxx xxxxx se xxxxx 150 μl xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Testovaná xxxxx xxxx mít x xxxx xxxxxxxxx možný xxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx 30 xX, xxx xx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx materiálu na xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Látka xx xxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (viz xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx 30 xX tak dlouho, xxxxx xx látka xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx testované xxxxx, která v xxxxxxx xxxxxx, xx xx xxxxxxxx vymýváním xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx 30 xX.
1.5.3.2 Měření TER
Transkutánní xxxxxxxxxx odpor (XXX) xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx proud (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx měřením xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx napětí xxxx přídavkem dostatečného xxxxxx 70% xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Po několika xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx trubice xxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tří xxxxxxxxx 154 mM xxxxxxx xxxxxx hořečnatého. Xxxxxxxxx můstku xx xxxxxxx na obě xxxxxx kůže x xxxxx xx xxxxx x xΩ/xxxxxx (xxx. 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx pod krokosvorkou xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx během xxxxxx xxxxx xxxxxx XXXX trubice xxx, xxx byla xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vždy stejná xxxxx elektrody. Vnější (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx xxxxxx xx dně. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mezi xxxxxx hranou pružinové xxxxxx x xxxxxxx XXXX xxxxxxx (xxx. 1), xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx, xx je-li naměřený xxxxx vyšší než 20 xΩ, xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxx, že xxxxxxxxx xxxxx překrývá xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx kůže. Xx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, například xxx, xx xx XXXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx 10 xxxxxx xx protřepává, roztok xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x čerstvým xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx hodnota TER xx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx leží x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx metodu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro popisovanou xxxxxx x aparaturu xxxx xxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx odporu (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
10 – 25
|
1.5.3.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx aktivní xxxxx a neutrální xxxxxxxxx látky
Pokud xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látek (detergentů) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx hodnota XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ, xxx xx této xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx) barviva. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx x výsledky xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B
Po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou xx xx epidermální xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx na 2 xxxxxx xx 150 μx 10% (w/v) xxxxxxx sulforhodaminu X x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxx se xxx zhruba po xxxx 10 sekund xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Tím xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx) barvivo. Xxxxx xxxxxx xxxx se xxx xxxxxxx xxxxx x XXXX trubice x xxxxx do xxxxxxx (např. do 20 ml xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 ml xxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx po dobu 5 xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx veškeré zbytky xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) barviva. Xxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Pak xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx x 5 xx 30 % (x/x) xxxxxxx dodecylsulfátu xxxxxxx (XXX) x destilované xxxx, kde se xxxx noc inkubují xxx teplotě 60 xX. Po xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxx xx xxxx 8 minut při xxxxxxx 21 xX (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ∼ 175). Xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxx xx pak xxxxx 30 % (x/x) xxxxxxxx XXX v xxxxxxxxxxx vodě x xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (x/x) (xx. 1 xx xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx XXX). Xxxxxxx xxxxxxx (OD) xxxxxxx xx xxxx xxx xxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx obsahu xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x xxxxxxx xx xxxxxxxx z hodnoty XX (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xxx 565 xx xxxx 8,7 . 104; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Obsah xxxxxxxxxxxxxx B xx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx kůže xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Průměrná xxxxxxx navázaného xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx spadají xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx se u xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx metodě x xxxxxxxxxxxxxxx uspořádání považují:
|
Kontrola
|
Látka
|
Rozmezí xxxxxx barviva (xx/xxxxxx)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
40 - 100
|
|
Negativní
|
destilovaná voda
|
15 – 35
|
1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx zvolit xxxxxx xxxx působení xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxx (xxxx. 2 xxxxxx) xx xxxxxx rozlišení silně xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx studii xxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxx schopnosti některých xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx terčíky xxxx xx 2 xxxxxx (2), xxxxxxxx umožňuje xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx leptajících x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xxx ovlivněny xxxxxxxxxxx x rozměry xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxx leptavé xxxxxx 5 kΩ byla xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx aparatuře a xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx. Xxxxx xx se zkušební xxxxxxxx výrazně změnily, xxxxx by xxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx metodiku x prahovou xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných x xxxxx, xxx xxxx xxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxx (3).
1.6 PRINCIP XXXXXXXX XXXXXX - XXXX S XXXXXXX XXXXXX XXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nanáší topicky xx dobu xx 4 hodin na xxxxxxxxxxxx model lidské xxxx, sestávající x xxxxxxxxxxxxxx epidermis s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx podle xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx životnosti xxxxx xxxxxxxxx například xxxxxx "MTT reduction xxxxx" (MTT = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 difenyl xxxxxxxxxxx xxxxxx) pod xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx testu vychází x xxxxxxxxxxx, xx xxxxx způsobující xxxxxxxxx xxxx jsou ty, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx xxxxx) x xxxx dostatečně xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7 XXXXX METODY - XXXX S MODELEM XXXXXX XXXX
1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxx lidské xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx zdrojů, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx vrstvou xxxxxx xxxxx. Bariérová funkce xxxxxxx corneum xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxx prokázat xxx, xx model xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx po nanesení xxxxx, x nichž xx xxxxx, že xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx skrze xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vykazovat xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx x xxxx, xxx xx xxxx dobře xxxxxxxx xxxx látkami xxxxxxxxx a negativní xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx velikostí xxxxxxx MTT, tj. XX xxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx ležet x xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxx xxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx (xx xxxxxxxx s xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) musí hodnoty xxxxxxxxxx spadat do xxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx prokázáno, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxx xxxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx testovaného xxxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka xxxxxx, nanese xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx kůže (xxxxxxxxx xxxxxxxx 25 (μ/xx2). Xx-xx xxxxx, nanese xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxx, x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx se x xxxx zajistil dobrý xxxx. Xxxxx je xx třeba, xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. X metody xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xx je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx doby xxxxxxxx xx xxxxxxxx x povrchu xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Měření životnosti xxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx dá xxxxxx xxxxxxxxx validizovaná xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx xxxxxxx XXX, o xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx přesné a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx xxxx xx xx dobu 3 xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx MTT o xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx xxx xxxxxxx 20 - 28 oC. Xxxxxxxxx modrý xxxxxxxxxxx xxxxxxx se pak xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx formazanu xx xxxxxxx měřením XX při xxxxxx xxxxx 545 a 595 nm.
1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. xxxx xx xxxxxxxxx buněk xxxxxxxx vliv. Doporučuje xx metodu i xxxxxxxxx xxxxx okalibrovat xx použití xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných x látek xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx studii XXXXX (3). Xx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx prokázáno, že xx použitá xxxxxx xx použití xxxxxx xxxxx xxxxx reprodukovatelná xxxxx mezinárodních standardů xxx x rámci xxxx xxxxxxxxxx, tak xxxx různými xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx musí xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx vědeckém xxxxxxxx, ve xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
1.8 ZPRACOVÁNÍ VÝSLEDKŮ
1.8.1 Xxxx XXX xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx (x xΩ) pro xxxxxxxxx materiál, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x pro xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx xx uvádějí x xxxxxxxxx formě, x xx data xxx xxxxxxx replikace a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x x xxxx xxxxxxxx klasifikace.
1.8.2 Xxxx x xxxxxxx xxxxxx kůže
Hodnoty OD x vypočtené procento xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x tabelární xxxxx, x xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, průměrné xxxxxxx x x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.9.1 Xxxx XXX xx xxxx xxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxx hodnota XXX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx než 5 xΩ, xx látka xxxxxxxxxxx. Xx-xx hodnota XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ x xxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (detergent) xx xxxxxxxxx organickou xxxxx, pak xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx účinky xx.
X povrchově xxxxxxxxx xxxxx (detergentů) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek, xxx poskytují xxxxxxx XXX nepřesahující 5 xΩ, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx obsah barviva x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx průměrnému xxxxxx barviva x xxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivní kontrole x 36 % XXx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxxxx účinky, kdežto xx-xx obsah xxxxxxx x xxxxxxx menší, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx.
1.9.2 Xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX pro negativní xxxxxxxx představuje 100% xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Z xxxxxx XX pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorky xx xxxxxxx procentuální xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx procentický xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx odděluje xxxxx, xxxxx nezpůsobují xxxxxxxxx xxxx, xx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx odlišuje jednotlivé xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx předtím, než xx xxxxxx validována, x následnou xxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxx, že xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x průběhu xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Testovaná xxxxx:
- identifikační xxxxx, xxxxxxxxx stav, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxx xx používají referenční xxxxx, xxxxxx se xxxx údaje i xxx ně.
Podmínky pokusu
- xxxxxxxx popis xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx a xxxxxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (test XXX) xxxx procentuální xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx) xxx testovaný xxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, a xx xxxxx xxx všechny xxxxxxxxx xxxx. opakované xxxxxxxxxxx a průměrné xxxxxxx;
- popis všech xxxxxx xxxxxxxxxxxx efektů.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Obrázek 2
Xxxxxx X.40. xxxx xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx od 22.6.2001
B.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 XXX IN XXXXX
1. XXXXXX
1.1 ÚVOD
Fotoxicita je xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), x xxx dochází, xx-xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xx-xx xxxxxxx kůže ozářena xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx látky.
Informace xxxxxxx x rámci testu xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx slouží xx stanovení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx ke xxxxxxxx, zda daná xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx vitro xx stanovení fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx zjistit xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx fototoxické xx xxxx po xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxx, x xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx fotoiritanty xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx xxx vypracován x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx projektu XX/XXXXXX x let 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. X xxxx 1996 doporučila xxxxxxxx schůze XXXX xxxxxxx následných xx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Xxxxxxxx xxxxx fototoxicity 3T3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xx pro xxxxxxx xxxxxx vynikající predikční xxxxxxxxxx. Xxxx není xxxxxxx k xxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx účinky, xxx xxxxx x kombinovaného xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, i xxxx xxxx xxxxx xxxx specifické xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro xxxxxxxxx. Test xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx hodnocení xxxxxx fotoxicity.
Sekvenční přístup xxxxxxxxx fototoxicity x xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx viz xxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX) xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx; xxxxxx xx X/x2 xxxx x XX/xx2.
Xxxxx xxxxxx: množství (= intenzita x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (UV) xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (= X x s) xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. X/x2 xxxx X/xx2.
Xxxxx xxxxxxxx délek ultrafialového xxxxxx: xxxxx doporučení XXX (Commission Xxxxxxxxxxxxx xx X'Xxxxxxxxx) se xxxxxxx xxxxxxxx XXX (315 - 400 xx), UVB (280 - 315 nm) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx xx x xxxx vymezení: xx xxxxxxx xxxx xxxxx XXX x UVB xx xxxxx xxxxxxxx 320 nm x XXX se xxxxx xxxx na XX-X1 x UV-A2 s xxxxxxx xxxxxx x 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: parametr, xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx buněčné populace (xxxx. xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx živou buňku, xxxxxxxxx xxxxxxx, do xxxxxxxxx lysozomů), xxx xxxxx parametrů xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx koreluje x celkovým xxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx (vitalitou) xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (viabilita) xxxxx: životaschopnost xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx testu (xxx + XX xxxx - XX), xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx testu xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx metodickém návodu xxx xxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx x xxxxxxxx fotoxického potenciálu xxxxxx xxxxxxx PIF x MPE.
PIF (xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, fotoiritační xxxxxx): xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx stejně xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX50) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) a x xxxxxxxxxxx (+XX) necytotoxického XXX/XXX xxxxxxx.
XXX (xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx): nová míra xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX ozáření.
Fototoxicita: xxxxxx xxxxxxx xxxxxx (odezva), xxxxx xxxxxx xx xxxx expozici kůže xxxxxx látce x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxx reakce, xxxxx xx obdobně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx xxxxx "fototoxicita", xxxxxxxx se pouze xxxx xxxxxxxxxxxxx reakcí, x xxxx xxxxxxx x xxxx xxxx, xx xx xx xxxxxx (topicky xxxx xxxxxx xxxxxxx) xxxxxx xxxxx. Xxxx fototoxické xxxxxx xxxxx xxxx x nespecifickému poškození xxxxx (xxxxxx podobné xxxx při xxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, která xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx dvoutýdenní indukční xxxxxxx k xxxx, xxx se reaktivita xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: genotoxická xxxxxx (xxxxxx) s xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx poté, xx xxxx buňky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx dávce XX/XXX záření a xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxx: karcinogenita xxxxxxxx opakovanou aplikací xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx látkou, xxxxxxx x fotokokarcinogenitě.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx chlorpromazinu jako xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, se xxx xxxxxxxx xxxxx xx fototoxicitu 3X3 XXX xxxxxxxxxx použít xxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxxxxx z xxxxx, xxxxx byly xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx testu (1) (3) (13).
1.4 PRVOTNÍ XXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x řady xxxxx (5) (6) (7) (8), xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx to, xx xxxxxx absorbovat světelnou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx zákon) xxxxxxxx xxxxx fotoreakce xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx kvant. Xxxxx by xx xxxxxxx, než se xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx návodu, xxxx by xx xxxx xxxxxxxx absorpční xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x XX/XXX xxxxxxx (xxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxx OECD č. 101). Pokud je xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx-1 x cm-1, nemá xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx třeba xx xx škodlivé xxxxxxxxxxxx xxxxxx testovat xxx testem xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxxxx).
1.5 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) chromoforem vyústit xx xxxxxxxxxxxx reakci (7), xxxxxxx všechny xxxxx k xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx dávky XXX/XXX záření. Xxxxxxxxxxxx xx při xxxxx xxxxx vyjadřuje xxxx xxxxxxxxxxxx závislý pokles xxxxxx xxxxxxxxx barviva, xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx, XX) (9), 24 hodin xx xxxxxxxx testované látky x xxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxx/x 3X3 se kultivují xx dobu 24 xxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x jedné xxxxxx (xxxxxxxxx). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx preinkubují xxx xxxxxxxx po 96 xxxxxxx s xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx. Xxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UVA/VIS záření x xxxxx 5 X/xx2 UVA (+UV xxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx (-UV xxxxxxxxxx). X xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xx dalších 24 xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx červeně (xxxxxxx xxx xxxxxx, XXX) xx dobu 3 xxxxx stanoví xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Pro xxxxxx x xxxx koncentrací xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx hodnot x negativních xxxxxxx. X posouzení fototoxického xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislé reakce xxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XX) x x xxxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxx, xxxxxxx na xxxxxx XX50, xx. xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx o 50 % x porovnání x xxxxxxxxxx bez xxxxxxxxx.
1.6 KRITÉRIA JAKOSTI
Citlivost xxxxx xxxx xxxxxx XXX, historické xxxxx: x xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx provádět xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX. Xxxxx xx xxxxxx v xxxxxxx, která xx xxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx, příští xxx se vystaví xxxxxx UVA x xxxxx 1 - 9 X/xx2 x xxxxx xxx se xxxxxx NRU xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jejich životaschopnost xx ozáření xxxxxx XXX záření 5 X/xx2 xxxx xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx kontrolních vzorků xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxx nejvyšší dávce XXX xxxxxx 9 X/xx2 xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx nižší xxx 50 % životaschopnosti xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx každé xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx UVA, xxxxx xxxx: test splňuje xxxxxxxx jakosti, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (buňky x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx roztoku [Xxxx´x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, XXXX] s 1 % xxxxxxxx dimethylsulfoxidu (XXXX) xxxx xxxxxxxx (XxXX) nebo bez xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (+UVA) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx x neozářenými xxxxxxx x témž xxxxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX).
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (XX540 XXX) xxxxxx x XX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, zda xxxxx 1 x 104 xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx jamce xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx s xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Test xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxxx xxxxxxx XX540 XXX x xxxxxxx xxx ovlivnění xxxxx xxxx xxxxx 0,2.
Xxxxxxxxx kontrola: xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx vitro je xxxxx xxxxxxx souběžný xxxx xx známou xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx xxxx xxxxx xxx pozitivní kontrolu xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (XXX); xxxxx se xxxx xxxxx doporučuje. Xxx XXX xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx protokolu v xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in vitro xxxx xxxxxxxxxx tato xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: XXX xxxxxxx (+XXX): XX50 = 0,1 - 2,0 μx/xx, XXX xxxxxxxxx (-XXX): XX50 = 7,0 - 90,0 μx/xx. Fotoiritační xxxxxx (XXX), xxx. xxxxx hodnoty XX50, xx být minimálně 6.
Xxxxx XXX xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxx známé xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx. V xxxxxxx případě xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 x XXX xxxx MPE (xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XXXXX METODY
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Buňky
Při validační xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxx/x 3X3 klon 31, x xx xxx x XXXX xxxx x XXXXX; ta xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx stejného protokolu xx dají s xxxxxxxx použít x xxxx buňky nebo xxxxxxx xxxxx, pokud xx xxxxxxxxxx podmínky xxxxxx xxxxx jejich xxxxxxxxxxxx xxxxxx; xx xxxx xxxxx prokázat, xx jsou xxxxxx xxxxxx.
X buněk xx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolovat, xx nejsou kontaminovány xxxxxxxxxxxx, x smí xx xxxxxx xxx x xxxxxxx, že xx výsledek xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX záření xxxx x počtem xxxxxx narůstat, xx xxxxx xxxxxxxx buňky Xxxx/x 3X3 x xxxxxx s nejnižším xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx než 100. Xxxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxx UVA xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolovat, x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx popsaným x xxxxx xxxxxxxxxx návodu.
1.7.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a inkubační xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3T3 xx jedná x XXXX xxxxxxxxx 10 % xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 xX xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx teplotě 37 xX / 7,5 % XX2. Xx nezbytné, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxx linii.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx zásobních xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx hustotě x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx jednou se xxxx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx pasážují.
Pro test xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx x kultivačním xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxx na xxxxx testu (xx. xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk 48 xxxxx xx xxxxxxxx) xxxxxxx ke xxxxxxxxxx (xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, jednolitou xxxxxx xxxxx). X případě xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx x destičkách x 96 xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 x 104 xxxxx x jedné xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se buňky xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx s 96 xxxxxxx, xxxxx xxx procházejí xxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxx xxxx, kdy xx xxxxx x xxxxxxxx ozařována (+XXX/XXX) x druhá xx xxxxxxxxxx x temnu (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx vitro xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx potenciálu xx xxxxxxx požadavkem xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, není x případě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx žádná xxxxx, xxx xx x xxxx, aby působila xxxx fotoxin xx xxxx xxxx xx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Nepokládá xx proto ani xx xxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx se xxxxx xxxx prováděl s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.1.5 Testovaná xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx před xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx dá xxxxxxxxx. Xxxxx je xxxxxxxxxxxxx, xx xx xxxxx k fotodegradaci, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx pod xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxx x pufrovaném xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxxx solném xxxxxxx (XXXX) xxxx xx fyziologickém xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (phosphate xxxxxxxx saline, PBS), xxxxx - aby xxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxx ozařování - xxxxx obsahovat xxxxx proteinové složky xxx barevné indikátory xX, pohlcující xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx látka xx vodě xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xx xxxxxxx rozpouštědle x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx konečná koncentrace, x následně se xxxxx x xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 % (x/x) ve xxxxx xxxxxxxxx, tj. xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx i v xxxxxxxxxxx kontrolách.
Jako rozpouštědlo xx doporučuje xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo ethanol (XxXX). Vhodná xxxxx xxx i další xxxxxxxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, například xxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx zvážit xxxxxx xxxxxxxxxx vlastnosti, xxxx xx případná xxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx, potlačení xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxx míchání resp. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 xX.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX xxxxxxx / xxxxxxxx
Xxxxxxxx zdroj: xxxxx správného xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx je xxx xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxx. Záření x XXX x xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx spojováno x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx xxxxxx XXX xx x tomto xxxxx méně relevantní, xx přímo xxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xx 313 xx k 280 xx zvyšuje xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx zásadní xxxxxxxxx, xxx emitoval vlnové xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xxx xxxx světelná xxxxx (dosažitelná xx xxxxxxxxxx dobu) xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx látek. Dále xxxxxxx být xxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx poškozující xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx sem x xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).
Xx xxxxxxxxx světelný xxxxx xx pokládají xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx simuluje xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx tyto xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx výbojky x xxxx (xxxxxxxxxxx) rtuťové xxxxxxxxxx výbojky - xx xxxx tu xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx, sluneční xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx simulátory emitují xxxxxxxx xxxxxxxx záření XXX, xx třeba xxxxxx filtrovat tak, xxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxx xx fototoxicitu 3X3 XXX xx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx složka XXX xxxxxxxxx nevyskytuje (XXX:XXX ∼ 2 : 1). Příklad spektrálního xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx je x xxxxx (3).
Dozimetrie: intenzita xxxxxx (iradiance) xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx testem fototoxicity xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru, xxxxx xxxx xxx kalibrován xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, referenční XX-xxxx téhož xxxx x xxxxxxxxx. Ideální xx, xxxx xx x delších xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx širokopásmového XX-xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx vyžaduje xxxxxxxxxxxxxx obsluhu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx studii xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx UVA xxxxxx 5 X/xx2 xx xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx silná, xxx xxxxxxxxxx x xxxxx fototoxické xxxxx. Xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx během 50 minut, xxxx xxx iradiance xxxxxxxxx xx 1,666 xX/xx2. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxxxx linie xxxx xxxx zdroj xxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx XXX xxxxxxx xxx, xxx buňky xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x průkazu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Doba xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxx xxxxxx (X/xx2) x 100
|
&xxxx; |
| &xxxx;
x (xxx) =
|
&xxxx;
________________________
|
&xxxx;
(1 X = 1 X x)
|
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxxx (xX/xx2) x 60
|
&xxxx; |
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx byly xxxxxxxxxx xxx koncentracích xxxxxxx, xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků (13). Xxxxxxx xX xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx použití xxxxxx (+XXX) a xxx xxx (-UVA) xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rozsah x xxxxxx koncentrační řady xx zvolí tak, xxx xxxxxx závislosti xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx dostatečně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Používá xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ředění).
1.7.3 Popis xxxxxxx
1.7.3.1 První xxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx 1 x 105 buněk/ml x kultivačním xxxxx. Xx periferních xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx 100 μx xxxxxxxxx xxxxx (= xxxxx xxxxx), xx xxxxxxxxx xxxxx se dávkuje xx 100 μl xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx 1 x 105 xxxxx/xx (= 1 x 104 xxxxx na xxxxx). Xxx každou xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx - xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-XXX), druhá xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX), xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx doba umožňuje xxxxxxxxxx x adherenci xxxxx x jejich xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx odstraní x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX xx xxxxxx jamku. Xxxxx se 100 μx EBSS/PBS xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Testovaná látka xx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx x testovanou xxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxx xx dobu 60 minut (7,5 % XX2, 37 xX).
Xxxx xxxxx x XXX (+XXX) se xxxxxxx tak, xx xx xxxxx xx xxxxxxxx teploty xxxxxxx xx xxxx 50 xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx xxxxxxx XXX x intenzitě 1,7 xX/xx2 (= dávka 5 / cm2). Xxx nedocházelo ke xxxxxxxxxx vody xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-XXX) xx xx dobu 50 xxxxx (= expoziční xxxx XXX) xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x temném boxu.
Roztok xx odstraní x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx médiem x xxxx xxx (18 - 22 xxxxx) xx inkubují (7,5 % XX2, 37 xX).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx hodnocení
Buňky xx xxxxxxxxxx pod mikroskopem x xxxxxxx xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx buněk způsobené xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx při xxxxxxxxxxxxx cytotoxicity xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx příjmu xxxxxxxxx xxxxxxx (XX)
Xxxxx xx xxxxxxx objemem 150 μx xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx jemným xxxxxxxx. Přidá xx 100 μx xxxxx x NR x xxxxxxxx se xxx 37 xX ve xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 7,5 % XX2 xx dobu 3 xxxxx.
Xx inkubaci se xxxxxx s XX xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX, xxxx xx pak xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxx xxxxx destičky xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx poloze).
Přidá xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx xx xxxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx destičky xx xx xxxx 10 xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, dokud xx XX x xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX xxx 540 nm za xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx srovnávacího xxxxxxx. Xxxxx xx uchovají xx vhodném formátu (xxxx. XXXXX) xxx xxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXX A KVANTITA XXXXX
Xxxxx xxxx umožňovat xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx při xxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxx ní. Xx-xx xxxxxxxx cytotoxicita, koncentrační xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xx xxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx křivkou. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx až xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx x experimentu xx xxx (-UVA) necytotoxická, xxx při xxxxxxxxx (+XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx dojít k xxxx, xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx experimentu xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, aby xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxx částí xxxxxxxxxxx (xxx xxx -UVA, xxx při +UVA), xxxxxxxxx testování x xxxxxx rozestupem xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx až xx nejvyšší xxxxxxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx čáry xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx xxxxx test xxx ověření xxxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx testu xx xxxxxxxx, může xxx důležité pozměnit xxxxxxxxxxxxxx podmínky, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx proměnnou x xxxxx testu xx příprava roztoků xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (spolurozpouštědlo, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx). Xxx xxxx xxxxxxxx x změnách xxxxxxxxx doby xxxx xxxxxxxxxx. U xxxxx, xxx xxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxx xxx významný xxxx xxxxxxxx xxxx.
1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx je to xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované látky xxxxxxx k 50 % xxxxxxxx buněčného xxxxxx XX (XX50). Xx xxx xxxxxx xxx, xx xx xx xxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxx se xxxxxxx XX50 xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx hodnoty XX50 xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xx doporučuje použít xxxxxxxxxxxxxxxxx papír (osa x: log, xxx x: xxxxxx), xxxxxxx xx této xxxxxxxxxxxx xxxx křivka koncentrace - odezva mnohdy xxxxx xxxxxxxx.
1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX XXXXXX)
1.10.1 Xxxxxxxxx model, xxxxx 1: xxxxxxxxxxxx faktor (XXX)
Xxxxx xx získají xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx jak xx přítomnosti (+UVA), xxx za xxxxxxxxxxxxx (-XXX) světla, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxx xxxxx vzorce
|
EC50 (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) PIF =
|
____________
|
|
EC50 (+XX)
|
XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, kdežto XXX ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx předpovídá.
Je-li xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX, xxxxxx xxx -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx se PIF xxxxxxxxx, i když xx jedná o xxxxxxxx, xxxxx indikuje, xx látka xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx případě se xx vypočítat xxx. "&xx; XXX", xxxx xx xxxx cytotoxicity (-XX) xxxxxxx xx xx maximální xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxx) x xxxx hodnota xx xxxxxx xx xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) &xx; XXX =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
Xxxxx xx xx xxxxxxxxx pouze "&xx; XXX", xxx xxxxx hodnota &xx; 1 xxxxxxxxxx fototoxický xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx ani XX50 (-XX), xxx EC50 (+XX), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx zkušební xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx toho, že xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx potenciál. V xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx "XXX = *1", xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) PIF = *1 =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (+UV)
|
Pokud xx dá xxxxxx xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", předpovídá xx, že xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X případech (x) x (x) xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx v úvahu xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx testu dosáhlo.
1.10.2 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 2: xxxxxxx xxxxxxxxx (XXX)
Xx xxxxx také xxxxxx novější verze xxxxxx pro predikci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, vypracovaného xx použití xxx x xxxxxxxxx studie XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx xx podmínek xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx in xxxxx x xxxxx XX xxxxxx (13). X xxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XXX x xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx XX50. X xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx veličina "xxxxxxx xxxxxxxxx" (XXX) xxxxxxxx xx porovnání xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx XXX xxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxx speciální xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx obdržet xxxxxx.
1.11 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx (XXX ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se x xxxxxx xxxxxxxx dojde xxx xxxxxxxxxxxxx nižších xxx 10 μx/xx, xx xxxxxxxxxxxxx, že xxxxx bude xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx expozičních xxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx pouze xxx xxxxxxxx zkušební koncentraci (100 (g/ml), xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx fototoxické xxxxxxxxxx xxxx látky xxxxxxxx xxxxxxxxx dalších xxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx, xxxx údaje x testování dané xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu, xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxx lidské xxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx (XXX < 5 xxxx MPE &xx; 0,1) ukazuje, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx koncentraci 100 μx/xx, negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx látka xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxx xx xx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxxxxxx. V xxxxxxxxx, xxx xxxx při xxxxxxx koncentracích získány xxxxxxxxx koncentrační xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (XX50 + XX a XX50 - XX), xx xxxxxxxxxxxx dat xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (+XX xxx -XX) a xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx koncentrace 100 μx/xx, je xxxxx xxxxxxxxx tento test xxx xxxxx látku xx xx xxxxx xxxxxx x mělo xx xx xxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xx xxxx nebo xx xxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x průběhu pokusu
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- identifikační xxxxx x číslo XXX, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx x provedení xxxxx xxxxxxxx,
- stabilita x fotostabilita, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- rozpustnost xxxxxxxxx látky x xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx médiu (EBSS xxxx XXX).
Xxxxx:
- xxx x zdroj xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx mykoplazmat,
- číslo xxxxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx UVA xxxxxxxxx xxxxxx ozařovacího xxxxxxxx, xxx xx x xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X NRU xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (a) - xxxxxxxx xxxx ovlivněním x xx xxx:
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- doba xxxxxxxx (zpracování xxxx xx x xx xx).
Xxxxxxxx pokusu (x) - xxxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx UV/VIS xxxxxxx x xxx xxx,
- x případě xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxx x xxxxxxx působícího xxxxx (pufrovaný solný xxxxxx),
- doba xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu (x) - ozařování:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx světelného zdroje,
- xxxxxxxxxxxxxxx propustnosti/absorpce použitého xxxxxx (xxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx světelného zdroje xx xxxxxxxxxxx systému,
- xxxxxxxxx XXX (x x X/xx2) xxx xxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx XX/XXX xxxxxx,
- xxxxx xxxxxx UVA (xxxxxxxxx x xxx) x J/cm2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx kultur xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxx XXX:
- xxxxxxx xxxxx x XX,
- doba xxxxxxxx x NR,
- inkubační xxxxxxxx (koncentrace XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- podmínky xxxxxxxx XX (extrakční xxxxxxx, xxxx extrakce),
- xxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx hustota XX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx-xx xxxxxxx,
- xxxxxxx srovnávacího xxxxxxx xxx spektrofotometrii (xxxxxx), pokud byl xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- životaschopnost xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, vyjádřená x procentech xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx νx relativní xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) získané xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +UVA x -XXX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 (+XXX) x EC50 (-XXX),
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx získaných xx xxxxxxx ozařování UV/VIS xxxxxxx - xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx faktoru (XXX) xxxx středního xxxxxxxxxx (XXX),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu,
- kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx testu (x) - xxxxxxxx negativní xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx extraktu XX) ozářených x xxxxxxxxxxx xxxxx,
- historické xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx:
- xxxxxxx EC50 (+UVA), XX50 (-XXX) x XXX xxxxx použité xxx xxxxxxxxx kontrolu,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx: xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-XXX) x XXX, xxxxxxx x xxxxxxxxxx odchylky.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx X.41. byla xxxxxxx právním předpisem x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx od 22.6.2001
Informace
Právní xxxxxxx x. 251/98 Xx. xxxxx xxxxxxxxx dnem 1.1.1999.
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx předpisem x.:
208/2001 Xx., kterým xx xxxx xxxxxxxx XX č. 251/98 Xx., kterou xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx - novela xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx
x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Sb. xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 443/2004 Sb. x účinností xx 1.8.2004.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxx derogační xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) až x) xxxxxx č. 157/1998 Xx., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x o xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
2) Xxxxx č. 246/1992 Sb., xx ochranu xxxxxx proti týrání, xx xxxxx xxxxxx x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Sb. x č. 30/1998 Xx.
3) Směrnice Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxx xxxxxxxx chemikálií. Xxxxx 4 - xxxx xx xxxxxx (XXXX Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxx xx Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).