EPIS® Právní systém | Plné znění

Právní předpis byl sestaven k datu 31.07.2004.

Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Vyhláška

§1 §2 §3

Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod

B.1. Akutní toxicita orální (per os)

B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky

B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity

B.2. Akutní toxicita (inhalační)

B.3. Akutní toxicita (dermální)

B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)

B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)

B.6. Senzibilizace kůže

B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)

B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)

B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)

B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro

B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo

B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech

B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií

B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae

B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae

B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro

B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro

B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro

B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster

B.21. Test transformace savčích buněk in vitro

B.22. Dominantní letální test u hlodavců

B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích

B.24. Spot test u myší

B.25. Přenosné translokace u myší

B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)

B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)

B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)

B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)

B.30. Testování chronické toxicity

B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci

B.32. Test karcinogenity

B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity

B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test

B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test

B.36. Toxikokinetika

B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice

B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice

B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo

B.40. Leptavé účinky na kůži

B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro

INFORMACE

VYHLÁŠKA

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx

ze xxx 16. října 1998,

xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx stanoví xxxxx §4 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx x. 157/1998 Sb., x chemických látkách x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx dalších xxxxxx:

§1

Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxx nebezpečných xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxických, toxických, xxxxxx xxxxxxxxxx, žíravých, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x toxických xxx xxxxxxxxxx (dále xxx "xxxxxxxx chemických xxxxx a xxxxxxxxx").¹⁾

§2

(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxx se xxxxxxxx zkouškami prováděnými xxxxxxxx uvedenými x příloze xxxx xxxxxxxx.

(2) Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx i xxxx xxxxxx, pokud xxxx xxxxxxxxxxxx stejně xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx metody xxxxxxx x odstavci 1, xxxxxxxxxx však metody xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx²⁾ x metody xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx (OECD).³⁾

§3

Tato xxxxxxxx xxxxxx účinnosti xxxx 1. ledna 1999.

Xxxxxxx:

XXXx. Xxxxx, XXx. x. x.

Xxxxxxx x xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.

Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx

X. VŠEOBECNÝ XXXX

1. XXXXXXXX XXXXX

1.1 XXXXXX TOXICITA

xxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx doby (xxxxxxxx 14 xxx) xx podání xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2 XXXXXX XXXXXXXX

xx xxxxxxxxx xxxxxx popisující xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx dostačující xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xx xxx xxxxxx, xx xx xxxxxxx podávané dávky xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx těžkých xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x úmrtí.

1.3 XXXXX

xx množství xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxx) nebo xxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx), xxxx xxxx xxxxxxxxxx dietní xxxxxxxxxxx (xxxx na xxxxxx dílů nebo xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx).

1.4 XXXXXXXXXXXXXX XXXXX

xx xxxxxxxx ze xxxx xxxxxxx dávkových xxxxxx, kterou xx xxxxx xxxxx, xxxx xx to xxxxxxxxx xxxxxxx (včetně humánního xxxxxxxx) xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.

1.5 XXXXXXXXX

xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx dávku, xxxxxxxxx x celkovou xxxx xxxxxxxx.

1.6 LD₅₀ (XXXXXXX XXXXXX DÁVKA)

xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivá xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx dobu xxxx 50 % xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx XX₅₀ xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxxxxx hmotnosti pokusného xxxxxxx (xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx).

1.7 XX₅₀ (XXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX)

xx xxxxxxxxxxx vypočtená koncentrace xxxxx, xxxxx pravděpodobně xxxxxxx xxxx do xxxxxx xxxx po xxxxxxxx x 50 % pokusných xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Hodnota XX₅₀ xx udává xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (mg.l^-1).

1.8 NOAEL

xx xxxxxxx xxx "xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx level" (xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) a xx xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx dávka xxxx expoziční xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx x zjistitelným toxickým xxxxxxxxx.

1.9 XXXXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX TOXICITA

xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx objeví x pokusných zvířat x xxxxxxxx opakovaného xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx dobu představující xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx života xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.10 XXXXXXXX TOLEROVANÁ XXXXX (XXX - MAXIMUM XXXXXXXXX XXXX)

xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxx vyvolává xxxxxxxx projevy xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx přežití x xxxxxxx xx xxxxxx, který xx xxxxxxxx.

1.11 XXXXXXXXXX XXXX

je vyvolání xxxxxxxxxxx změn xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.

1.12 XXXXXXXXXX OČÍ

je xxxxxxxx xxxx xx xxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxx oka.

1.13 XXXXXXXXXXXXX XXXX (ALERGICKÁ XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX)

xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx xxxxx.

1.14 POLEPTÁNÍ XXXX

xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx látky po xxxx od 3 xxxxx xx 4 xxxxx.

1.15 XXXXXXXXXXXXXX

xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, metabolismu x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.16 XXXXXXXX

xxxxxxxx xxxxxx(x), kterým(i) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx do xxxx.

1.17 XXXXXXX

xxxxxxxx xxxxxx(x), kterým(i) xxxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x těla.

1.18 XXXXXXXXXX

xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx metabolity xxxxxxxxxxx x xxxx.

1.19 XXXXXXXXXXXX

xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx chemická xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x těle xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2. XXXXXX - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxx účinky a xxxxxxxx nebo systémová xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx různých xxxxx xxxxxxxx (metody X.1 - X.5), xx xxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.

X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XX₅₀. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx limitní xxxx navržen, xxxxxxx xxxxxx možné definovat xxxxxxx xxxxxxx jednorázové xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx co xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxx B.1 xxx) x metoda xxxxxxxxx třídy akutní xxxxxxxx (xxxxxx X.1 xxxx). Při xxxxxxxxx xx xxxxxx druhu xxxx xxxxxx xx xxxxxx druhu doplnit xxxxxx xxxxxxxx z xxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx může xxx použita xxxxxxxxxx xxxxxxxxx metoda nebo xxxx být xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx.

Xxxxxx toxicity s xxxxxxxxxx aplikací (metody X.7, X.8 a X.9) xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx vznikající x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx, aby se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Tyto xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx cílové xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx dlouhodobých studií xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.26 - X.30 x X.33).

3. XXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXX

Mutagenita xx xxxxxxxx x xxxxxxx trvalých přenosných xxxx v xxxxxxxx xxxx struktuře genetického xxxxxxxxx buněk nebo xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx ("xxxxxx") xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx gen xxxx xxxxxxxx xxxx, xxxx xxxx xxxx celé xxxxxxxxxx. Účinky na xxxx chromozómy se xxxxx projevovat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Mutagenní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx vitro xx genové (xxxxxx) xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) anebo xx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.10).

Xxxxxxxxxx jsou také xxxxxxx xx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx B.12) xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx dřeně (xxxxxx X.11). Xx xxxx xxxxx xxxxx jednoznačně xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxxx a kontrolu xxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx ještě další xxxxxx xx zjištění xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxxxxxx. Tyto xxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx: potvrzení xxxxxxxx získaných základním xxxxxxxx testů; zkoumání xxxxxx nezachycených základním xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx studií xx xxxx.

Pro xxxx účely zahrnují xxxxxx B.15 xx X.25 xxx eukaryontní xxxxxxx xx xxxx x in vitro, xxx xxxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx poskytují informace x bodových mutacích x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx složitějších xxx baktérie používané x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

Obecně xxxxx, xx další xxxxxxxxx xxxxxx mutagenity je xxxxx naplánovat xxx, xxx xxxxxxxx relevantní xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx studie, xxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látky, výsledků xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxx testů toxicity x známých xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

Pro xxxxxxxxxx xxxxxx dědičných xxxxxx u xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx už vyvolaných xxxxxxxx (bodovými) mutacemi, xxxx. xxxxxxxxxx locus xxxx x xxxx xxxxxxxxxx mutace xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx v xxxx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxxx X.25). Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx rizika xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx složitosti těchto xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, zvláště xxx xxxxxxxxxx xxxxx test, xx xxxxx se xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxxxx závažných xxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx postupuje xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pro danou xxxxxxxx po xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx genetické xxxxxxxxxxx.

4. XXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxx xxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx genotoxické xxxx xxxxxxxxxxxxx karcinogeny, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx x genotoxickém xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx nebo chronické xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx X.7, a xxxxxxxxxxxxx studie x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx takových xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx, např. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx by xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx studie x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx identifikovat chemické xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx zkoumání xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx karcinogenity (metoda X.32) xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.33).

X xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx buněk savců, xxxxx určují xxxxxxxxx xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxxxxxxx změny x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx předpokládá souvislost x maligní xxxxxxxxxxxx - xx xxxx (xxxxxx B.21). Používá xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx.

5. XXXXXXXXXXX TOXICITA

Reprodukční xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx způsoby, např. xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo schopností xxxxx x xxxxx (xxxx na plodnost) xxxx podle xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinků na xxxxxxxxx (vývojová xxxxxxxx) xxxxxxxxxx také xxxxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx laktace.

Xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx B.31) xxx xxxxxx zaměřené xx teratogenitu xxxx xxxxxxx vývojové toxicity xxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx způsoby xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx expozice xxxxxxx. X takových xxxxxxxxx je třeba xxxxxxxxx metodu xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxx třígenerační xxxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxxxxxxx metodu xxx xxxxxxxxxxxxx reprodukční test (xxxxxx X.35) rozšířit xxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.

6. NEUROTOXICITA

Xxxxxxxxxxxxx se zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx funkčních xxxx xxxx strukturních x xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Předběžné xxxxxxxxxx xx neurotoxicitu xxxx xxxxxx z xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7) zahrnuje xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x neurotoxickým xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, hloubkové zkoumání xxxxxx aspektu. Navíc xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx specifické xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx x jiných xxxxxxxx xxxxxxxx. Bylo například xxxxxxxx, xx jisté xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxicitu, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx B.37 x X.38 xx xxxxxxxxxxxx xxxx opakovaném podání xxxxx.

7. XXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx odpovědi xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Test xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikaci (xxxxxx X.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinků. Xxxxxx xx měla xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx zkoumání xxxxxx xxxxxxx.

8. TOXIKOKINETIKA

Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pomáhají xxx xxxxxxxxxxxx x vyhodnocení xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx x výsledky xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx dalších xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx se, xx xxxx v xxxxxx případě zapotřebí xxxxxxxx xxxxxxx parametry. Xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (studie xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxx). X některých xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx xx může xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.36).

Xxxxxxxxx x xxxxxxxx struktuře x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx také poskytnout xxxxx, umožňující xxxxx xxxxxxxxxxxxxx absorpce xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických x xxxxxxxxxxxxxxxxx studií.

9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxxx testované xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nečistot, x její relevantní xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx studie.

Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx informace xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx konkrétní xxxxxx x xxx xxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx.

Vypracování xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testované xxxxx (x také xxxxx xxxxx větších xxxxxxxx) x dávkovacím xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxx týkající se xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx.

10. XXXX X XXXXXXX

Pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxx kontrola podmínek xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxx x zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

10.1 XXXXXXXX XXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxx x prostorech xxx pokusná xxxxxxx xx xxxxx přizpůsobit xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx xx vhodná xxxxxxx xxxxxxxxx 22 ^xX ± 3 ^xX při xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx xxxxxxx xx xxx teplota 20 ^xX ± 3 ^xX xxx relativní xxxxxxxx vzduchu 30 - 70 %.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx techniky xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx teplotu. Xxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uvedeny x popisu xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx všech xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx sledovat xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx, zaznamenávat je x xxxxx xx x závěrečné xxxxxx x xxxxxxx pokusu.

Xxxxxxxxx má xxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx a tmy xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx a uvést xx xxxxxx x xxxxxxx pokusu.

Pokud xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, mohou xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, ne více xxx 5 xxxxxx x jedné xxxxx.

Xxxxxxxxxx součástí xxxxxx x pokusech na xxxxxxxxx jsou xxxxx x xxxxxxx chovu x xxxxxxx a xxxxx xxxxxx chovaných x jedné xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce, tak xxxxx následující doby xxxxxxxxxx.

10.2 XXXXXXXX KRMENÍ

Xxxxxx xxxx vyhovovat xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x potravě, xxxx xx výživová xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx složky xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx x úvahu xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Používají xx konvenční xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx k pitné xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx tomu přizpůsobit xxxxx diety.

Xxxxxxx x xxxxxxx, které xxxx prokazatelně vliv xx xxxxxxxx, nesmějí xxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx, xx kterých xx se xxxxx xxxx xxxxxxxx.

11. XXXXXXX ZVÍŘAT

Xxx xxxxxxxxxxx testovacích metod xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ochraně xxxxxx.

Snížení xxxxx x xxxxxxx bolesti x stresu zvířat xxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx metody xxxxx xxxxx (X.1.xxx) xxxx xxxxxx stanovení xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (B.1.tris). Xxxxxx x pevnou xxxxxx nevyužívá xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx kritéria x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Metoda xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx o 70 % xxxxxx méně xxx xxxxxx B.1.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx; xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podávat v xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x testech xxxxxx toxicity (metody X.1, X.2 x X.3), xxx xxxx x xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx X.11 a B.12), xxxxxxxx vyhnout xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx na xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, je-li xx xxxxxxxxxx xxxxxxx zdůvodnitelné. Xxxxxx vědecké xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx fyzikálně-chemických vlastnostech xxxxx, na výsledcích xxxxxx již xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx na xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx používanou x xxxxxxxx testu (xxxxxx X.3) x xxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže, xxxxx xxxxxxxxx kožní xxxxxxxxxxx (xxxxxx B.4) může xxx zbytečné; xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx dráždivosti (xxxxxx X.4), xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx.

Xx nutno xxxxxxxx xxxxxxx a ověřovat xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxx poskytovat stejnou xxxxxx informací xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx menšího xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxxx xxxx utrpení xxxx se úplně xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx budou xxxxxx metody x xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx použití pro xxxxxxxxxxxxxxxx rizika, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x označování xxxxx xxxxx nebezpečnosti xxxxx x xxxxx xxxxx tam, xxx xx xx možné.

12. XXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX

Xxx hodnocení x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx in xxxxx xx xxxxx mít xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx je možná xxx x xxxxxxx xxxx; doklady x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx u xxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx mohou být xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

Tyto výsledky xxxxx xxx xxxx xxxxxxx pro studie, xxxxxxxx na posuzování xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx látek.

Xxxx X - Všeobecný xxxx byl xxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx od 22.6.2001

X.1. AKUTNÍ XXXXXXXX ORÁLNÍ (PER XX)

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx stanovit xxxxx xxxxxxxx orientačního xxxxx. Xxxxxxxxxx xx pozorované xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, která uhynou xxxxx pokusu, i xxxxxxx, která xxxxxxx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx. Xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, o xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx a stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx dráždivých xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx chovu a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx jednotlivých experimentálních xxxxxx.

Xxxxx je xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx jako první xxxxxx použití xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx roztok x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx roztok x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx před xxxxxx xxxx během něho xxxxxx xxxxxxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx překročit 10 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxx, jichž xx xxxxx xxxxxxx xx 20 ml.kg^-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx úpravou koncentrací, xxx xx zajistil xxxxxxxxxx objem xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxx xxx, xxx bylo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata

Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Na xxxxxxx xxxxx by x obou xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx

Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Používá-li xx samic, musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx je k xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx z xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx v xxxxxxxx xxxxxxx toxicity xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx hlodavci, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Dávky xx xxxxx pečlivě xxxxxx x je třeba xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx středně xxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx vyvarovat xxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx xxxxx

Xx být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx x xxxxxxxxxxx skupin viditelný xxxxxx toxických xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx znázornění xxxxxx xxxx dávkou x xxxxxxx, x pokud xx xxxxx, xxxx xxxxxxx stanovení XX₅₀ x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

S xxxxxxxx hlodavců xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx a 5 xxxxx s xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx podaná xxxxx způsobí xxxxxxx, xx xxxxx uvážit xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx by xxx xxxxxx podle xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje xxxxxx x trvání xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx je možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx je doba, xxx xx projevy xxxxxx xxxxxx x xxxxxx, x xxxx xx uhynutí, zvláště xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx mortalitě.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxx hladová. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. X xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx výměny xxxxxxx xxxxxx hladovění; xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. X xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx látka se xxxx sondou xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxx-xx možno podat xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Po xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx x xxxx zvířatům xxxxxxxxxx.

Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají systematicky, xxx každé xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx častá xxxxxxxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx aplikované xxxxx x bezprostřední reakci xxxxxx xx aplikaci.

Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx denně x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx studii, např. xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, x xxxxxxx xx usmrcení xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx uhynutí xx xxxxx zaznamenat xx xxxxxxxxxxx.

Zvířata, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x ta, xxxxx přežijí xx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Je-li to xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x druhého xxxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, podá xx xxxxx nejméně xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx x cílem zjistit, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxx. V jednotlivých xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx zvířat. Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxxxx informace, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pohlaví xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx sestavují xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx na počátku xxxxxx, doba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx nálezů. Stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx testované xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x době uhynutí. Xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx xxxxxx xxxx než jeden xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, se xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vyvolané xxxxx látkou. XX₅₀ xx vypočte xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx údajů xx xxxx zahrnovat xxxx vztah, xxxxx xxxxxxxx, mezi expozicí xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x výskytem x xxxxxxx všech abnormalit xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx xxxxx, potrava xxx.

- experimentální xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx (včetně vehikula, xxxxx se použije) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx zvířat,

- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx exponovaných zvířat),

- xxxx uhynutí xx podání testované xxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířat - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxxxx XX₅₀ xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx byl xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x to pro 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),

- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx LD₅₀, xxxxx xx xxx xxxxxxxxx,

- křivky xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx a xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),

- pitevní xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx testů xx druhém xxxxxxx,

- xxxxxx výsledků (xxxxxxxx pozornost xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx během testu xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX₅₀),

- interpretace xxxxxxxx.

X.1. xxx XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX) - XXXXXX FIXNÍ XXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxx akutní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxxxx účincích, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx během xxxxxx doby xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxx s xxxxx xxxxxx xx provádí xx xxxx xxxxxxx.

X předběžné xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x zvířat xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xx dávku. Xxxxxxxxxx studie xxxxxxxxx xxxxxxxxx o vztahu xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Normálně xx x xxxx xxxxx etapě xxxxxxxxx xxx než xxxx xxxxxx.

V xxxxxx xxxxxx xx látka xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x pěti xxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxx dávek: 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx z předběžné xxxxxxxxxx studie, x xx jako dávka, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx "xxxxxxx toxicitu" (viz xxxx X - Xxxxxxxxx úvod bod 1.2), xxx xx xxxxxxx.

Xx podání xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx vybraná xxxxxxx xxxxxx xxxxx vyvolá xxxxxxx toxicitu, ale xxxxxx mortalitu, xxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Když xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx toxická xxxxxx xxxxxxxx humánní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxxxx xxxxx" (xxx xxxx X - Všeobecný úvod xxx 1.2), xx. xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx dávky, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, aniž xx xxxxx k xxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx).

Xxxxxxx se xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxxxx zvířata

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx proti tomu.

Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx x xxxx xxxxxxx xxxxxx variační rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.

Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx každého z xxxx xxxxxxx.

1.2.1.2 Příprava x xxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xx třeba, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje se xxxx xxxxx uvážit xxxxxxx xxxxxxx roztoku, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x rostlinném xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x jiných xxxxxxxx vehikulích nebo xxxxxxxx. X nevodných xxxxxxxx musí být xxxxx xxxx určeny xxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx normálně xxxxxxxxx 10 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; výjimkou xxxx vodné xxxxxxx, xxxxx xx možno xxxxxxx až 20 xx.xx^-1. Xxxxxxxxxxx objemů xxxxx podávané x xxxxxxx xx xx xxxx minimalizovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby xx zajistil xxxxxxxxxx xxxxx xx všech xxxxxxxxx dávek.

Xxxx xxxxxxx testované xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Potkanům xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx testem; xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. V xxx pokusu se xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx se xxxx xxxxxx orálně x jediné xxxxx. Xxxx-xx možno podat xxxxx najednou, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx množstvích xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Po xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx přístup x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - podle xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxx xxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx jednotlivá xxxxxxx. Xxxxxxxx xx používají xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx údaje, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx 24 hodin xxxx xxxxxxx dávky xxxxxxx xxxxxxx. Všechna zvířata xx xxxxxxx pozorují x cílem xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx; xxxxx přetrvávají xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx, xxxxx xx xxxx pozorovat xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx^-1. Xxxxxxxx zvolená xxxxxxx xxxxx nevyvolá xxxxxx xxxxxx a xxxxxx nejbližší vyšší xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx nutné xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx více xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Tento xxxxxx by xxx xxxxxxxxxx informace x xxxxxx(xxx) xxxxx, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx xxxxxx, x x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxxx xx vybrat xxxxxxx dávku podle xxxxx x příbuzných xxxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx použít xxxx xxxxx xxxxx 500 xx.xx^-1. Jestliže xx po výchozí xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx se xxxxx vyšší úroveň xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx 2000 xx.xx^-1, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx studii xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx úrovni xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx použití xxxxxxx xxxxx (xxxx. 500 xx.xx^-1) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx nižší xxxxx (xxxx. 50 xx.xx^-1). Xxxxxxxx xxxx zvíře xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx vhodné xxxxx xxxx určenými fixními xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx je xxx tomto xxxxxxx xxxxxxxxx více xxx 5 xxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx

Pro každou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx hladinu xx se mělo xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx být xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xx vyhnout xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.

Dávka, xxxxx xxxx xxxxx x testu, xx xxx xxxxxxx z xxxxx xx 4 xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 nebo 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx by xxxx xxx xx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx x humánních důvodů); xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx dávka vyvolá xxxxxxx toxicitu, xxx xxxxxxxx mortalitu, xxxx xxxxxxxxx dalšího testování.

Xxxx xxxxxx zvolené xxxxx xxxxxxxx zřejmou xxxxxxxx, xx nutné xxxxx znovu xxxxxxxx xx další vyšší xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxx xxx dále xxxxxxxxxx xxx, aby pozorovací xxxxxx xxxx kompletní. Xxxxxxxx těžká toxická xxxxxxx vyžaduje xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx vlivem xxxxx, xxxx by být xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx nižší xxxxxx dávek. Xxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxxx po xxxx pozorovací období.

Xx xxxxxx xxxxx xx pozorování xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx zvíře xx vedou xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx účinek aplikované xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx ji xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, rychlosti xxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx prodloužit. Xxxxxxxx je xxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxx projeví x xxxxxx x xxxx xx uhynutí, xxxxxxx xxx, xxx xx patrná xxxxxxxx x xxxxxxxx vzniku xxxxxxxxx příznaků.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx x nejméně xxxxxxxxx xx xxx další xxx. Xxxxxxx vykazující xxxxxx xxxxxx bolesti xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx jsou prováděna xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx po xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx zvířata xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx ukončen v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Pozorování se xxxxxxxx na xxxxx xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx nervové soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx věnovat xxxxxxx, křečovým jevům, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x komatu.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, denně xx další 3 xxx x xxxxx xxxxxx týdně. Zvířata, xxxxx uhynou během xxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxxxx do xxxxx xxxxx, xx xxxxx x pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají. Xx-xx xx indikováno, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx předcházející xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx druhé xxxx výjimečně xxxxx xxxxxxx dávky.

V xxxxxxx, xx látka xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx 5 xx.xx^-1 (xxxx jestliže orientační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx), xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.

2. XXXXX

Xxxxx z xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou úroveň xxxxx. X xx xxxx xxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu; počet xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx utracených z xxxxxxxxx důvodů; xxxxx xxxxxxxxx účinků; xxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, který xxx xxxxxxx testované xxxxx; xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinků; xxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx, xx zvířata xxxxxxxxx xxxx než xxx, xx třeba xxxxxxxxx x zaznamenat xxxxx hmotnosti.

Xxxxxxx, xxxxx jsou humánně xxxxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vyvolaná testovanou xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx i hlavní xxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx, xxx.,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x koncentrace,

- xxxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxxxxxxxxx úrovní dávek,

- ve xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx (počet použitých xxxxxx; změny tělesné xxxxxxxxx; případně počet xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx během xxxxx; počet xxxxxx x příznaky xxxxxxxx; xxxxxx, xxxxxx a xxxxxx účinků),

- xxxxxx xxxxxx nástupu xxxxxxxxx příznaků x xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx indikaci xxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat,

- pitevní nálezy,

- xxxxxxx histopatologické xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- interpretace xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx dávkové xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx.

3.2 Xxxxxxxxx x interpretace

Xxxxx	Výsledky	Interpretace
5 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Méně xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx	Xxxxx, které jsou xxxxx jedovaté Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx Xxx výsledky xxx 50 mg.kg^-1
50 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Xxxx xxx 100 % přežití	Xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Viz xxxxxxxx xxx 5 xx.xx^-1
	100 % xxxxxxx, ale zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx	Xxxxx, které xxxx zdraví xxxxxxxx Xxx výsledky u 500 xx.xx^-1
500 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Xxxx než 100 % xxxxxxx	Xxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx nebo zdraví xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x 50 mg.kg^-1
	100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx	Xxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx bez xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx u 2000 xx.xx^-1
2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx s xxxx xxx xxxxxx toxicity	Xxx xxxxxxxx u 500 mg.kg^-1 Látky, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxicitu

X.1. xxxx AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX XXXXXXXXX XXXXX XXXXXX XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Xxxxxx stanovení xxxxx xxxxxx toxicity xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx rizika, xxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx stanovených xxxxx x xxxxxxxxxxx odstupech, xxx xxx bylo xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx tří xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx lze xxxxxx buď xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx body rozhodovacího xxxxxxx, nebo xxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx žádoucí xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxx xxxxxx pro xxxxxxx přesné XX₅₀. Xxxxxxxx stanovení xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx xx očekává xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx části xxxxxx xx i x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinku. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx klasifikaci xxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx by trvání xxxxx xxxxx xxx xxxxx než xxxxxx xxxxxxx v metodě B.1. Hlavní xxxxxxx xxxx metody xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx u xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx)(B.1) x xxx x xxxxxxxxxxxx metody fixní xxxxx (B.1 bis).

1.2 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat x xxxxx ze stanovených xxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx tři zvířata xxxxxxxx xxxxxxx. Není xxxxx provádět xxxxxxxxxx xxxxxx. Přítomnost xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxx k xxxxxxxx xxxxx rozhodne x xxxxxx kroku, x.x.

- není zapotřebí xxxxx xxxxx xxxxxxxxx;

- xxxxx xxxx bude xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx druhého xxxxxxx;

- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx nižší xxxxxx xxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx náhodně xxxxxxx, xxxxxxxx xxx, xxx byla xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx ve xxxxx klecích xxxxxxx 5 dnů xxxx xxxxxxxxx testu, aby xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx podmínky. Xxxxxxx mohou xxx x xxxxxxx ve xxxxxxxxx podle pohlaví x dávky, xxx xxxxx zvířat x xxxxx kleci xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zvířete.

Testovaná xxxxx xx aplikována zvířatům x xxxxxx dávce xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xx xxxxx, testovaná xxxxx xx rozpustí xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx zvážit xxxxxxx vodného roztoku/suspenze, xxx použití roztoku/emulze x jedlém xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x xxx roztoku x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx nevodná xxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx není známa, xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx po určitou xxxx xxx xxxxxxx (xxxx. potkani xxxx xxx x xxxx 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx xx xxxxxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Samice musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx.

Xx xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.

1.3.2.2 Xxxxx x pohlaví

Pro xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx tři zvířata xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx kterékoli xxxxxxx.

1.3.2.3 Xxxxxx dávek

Výchozí xxxxxxx úroveň xx xxxxxxx xx tří xxxxxxx xxxxxx, xxx. 25, 200 a 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Výchozí xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx, aby x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx uhynutí xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxx xxxx látka podána. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx diagramu xxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 1.

Xxx výběr xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx dostupné xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x účinku. Pokud xxxx informace xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx je xxxxxxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), xxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx žádné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, doporučuje xx - x ohledem xx pokusná xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxx xxxxx 200 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx získanou xxxxxxxxx, xxx jak xx dovoluje test x třemi pevnými xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti. X xxxxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxx o xxxxxx testování xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx výši 5, 50 xxxx 500 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti.

Nemají xx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx leptavými xxxx xxxxx xxxxxxxxxx účinky xxxxxxx xxxxxx a xxxxx.

Xxxxxx interval xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx trvání x závažnosti toxických xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx xxxx xxx další xxxxx je xxxxx xxxxxxx, dokud xxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx přežila.

1.3.2.4 Xxxxxxx test

Limitní xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx výši 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx provádí xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxx x uhynutí xxxxxxxxxxxxx x podáním xxxxx, lze xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx 200 xx.xx^-1 (xxxx 500 xx.xx^-1) xxxxxxx hmotnosti.

1.3.2.5 Doba xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx pozorovat xxxxxxx xx xxxx 14 xxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx být xxxxxxxxx předem pevně; xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx jejich nástupu x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxx a xxxx xxxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxx-xx x xxxxxxxx xxxxxxx příznaky. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: záznamy xxxx xxxxxx pro xxxxx jednotlivé zvíře.

1.3.3 Xxxxx postupu

Po období xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx látky xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xx dobu xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Kde xx xxxxx podávána xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxx xxx - v xxxxxxxxxx xx délce této xxxx - nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx může xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx. U xxxxxxxx xx objem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxx vodných xxxxxxx xxx xxxxx x 2 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Rozdíly x xxxxxxxxx objemu xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx úrovních dávky. Xxxxxxxx xxxx možné xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xx aplikovat xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx testování xxxx xxxxxxx x Dodatku 1.

1.3.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxx pozorování xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx den (xxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx zvířat na xxxxxx látky, x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Zvířata, která xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx stresu, xx třeba xxxxxxx xxxxxxx: tato xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx stejně xxxx zvířata xxxxxxx.

Xx xx byla zvířata xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxx byla xxxxxxxx mrtvá, xxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxxxx co nejpřesněji. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, doku xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xx xxxx a xxxxx, xx očích x sliznicích, a xxxx xx dýchacím, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx systému, xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx výskytu xxxxx, xxxxx, slinění, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zaznamenávána: xxxxxxx jsou xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxx nejméně jednou xxxxx. Xxxxxxxx se x xxxxxxxxxxxxx změny xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.3.3.3 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, se xxxxxxx pitva. Všechny xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxx získání dalších xxxxxxxxxx informací xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx makroskopické xxxxxxxxx x zvířat xxxxxxxxxxxxx 24 a xxxx xxxxx.

2. SBĚR X XXXXXX ÚDAJŮ

K dispozici xxxx být xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx údaje xxxxxxx xx xxxxxxxxx formy, xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx utracených x humánních xxxxxx, xxxx úmrtí jednotlivých xxxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx výsledků xxx klasifikaci xx xxxxxxx v Xxxxxxx 2.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být získány:

Pokusná xxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx-xx xxxx;

- xxxxx, xxxxx x pohlaví xxxxxx;

- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx testu, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;

- xxxxxxxx xxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a xxxxxxx xxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);

- xxxxxxxxxx xxxxxx počáteční xxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxxx údajů x xxxxxxxx každého zvířete xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx (xxx. zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, charakter, xxxxxxxxx x trvání xxxxxx);

- nástup x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;

- pitevní xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx:

Xxxxxxxxx a interpretace:

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX TG 423.

XXXXXXX 1

XXXXXX XXXXXXXXX

1. Jak xxxx xxxxxxx x xxxx 1.4.2.3, xxxxxxx xxxxx xx měla xxx ta xx xxx pevně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx uhynutí xxxxx x některých xxxxxx. Xxx výběr xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- vztah struktury x účinku,

- xxxxxxx xxxxx z xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

2. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx uvedené x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx postupuje xxxxxxxxx xxx, jak xxxxxxxxx xxxxx.

3. Xxxxx xx xxxxxxxx výchozí xxxxx 25 xxxx 200 mg.kg^-1 tělesné xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx se xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx však xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx pitvou xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx potvrdí, xx třeba xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx dávky.

4. Xxxxx xx dávce 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jedno xxxxx každého xxxxxxx, xx se xxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx XX₅₀ xxxxxxxx dávku 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx třeba xxxxxxx posoudit xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx, xxxxxxx toxické xxxxxxxx x těchto xxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxx klasifikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx LD₅₀ xx xxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxx xxxxx.

5. Xxxxxx umožňuje xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx dávkami (xxxxxxxx 2). Této xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxx x xxxxxx alternativní dávky x daném xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nebo xxx xxxxx xxxxxxxxx xx dokončení xxxxxxxxx xxxxx varianty 1.

Xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 25 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx

X rámečcích xx udána xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx).

Xxx xxxxxxx xx xxxxx uhynulých xxxx xxxxxxxxxx zvířat (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxx xxxxx xx xx dosažení šedého xxxxxxx.

Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx provede xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x příslušném xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx způsobu vyhodnocení xxxxxxxxx v Dodatku 2.

Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx testu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx^-1 tělesné hmotnosti

V xxxxxxxxx xx udána xxxxx, xxxxx zvířat x pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - pohlaví zvolené xxxx druhé).

Pod xxxxxxx xx počet xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu xxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx rámečku.

Varianta 1 - Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx uvedeného v Xxxxxxx 2.

Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx v příslušném xxxxx rámečku.

Postup xxxxxxxxx x výchozí xxxxxx 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, počet xxxxxx a xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako první, 2 - pohlaví xxxxxxx jako xxxxx).

Xxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx uhynulých zvířat xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx až do xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx hodnot uvedených x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx uvedeného x Dodatku 2.

Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkou.

Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx rámečku.

DODATEK 2

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx testovací xxxxxxxx 1

X rámečcích xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx první, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).

Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3).

Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx "XXXXX XXXXX TESTOVÁNÍ" x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hodnoty xxx klasifikaci. Po xxxxxxxxx podle varianty 1 xx příslušná xxxxx sleduje, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx horní xxxxxxx pro příslušný xxxxxx xxxxxxxxxxx. Ležatá xxxxxxx xxxxxxx, xx XX50 je xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx rámečku xxxxx.)

(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx tělesné xxxxxxxxx

(x) Xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx dávkou 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 2000 xx/xx tělesné xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx variantě 1

a) Xxxxxxx xxxxx 25 xx/xx tělesné hmotnosti

b) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

x) Xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx

B.2. XXXXXX XXXXXXXX (INHALAČNÍ)

1. XXXXXX

1.1 Úvod

Xx xxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, tenzi xxx, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx, teplotě xxxxxxxxx x výbušnosti (jsou-li xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx

1.2 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, a xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx skupině. Potom xx zvířata pozorují x xxxxxxxx se xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x bolesti xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Testované xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x takovým xxxxxxxx, o xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.

1.3 Popis xxxxxx

1.3.1 Příprava

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx v podmínkách xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx potřebného xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx používaného xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx simulované xxxxxxxx.

Pevné xxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xx částice xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba, přidá xx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tak, aby x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; x xxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx jiná xxxxxxx, xxxx být o xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický účinek. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx možno xx xxxxxx.

1.3.2 Experimentální xxxxxxxx

1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Používá xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx).

1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Pro xxxxxx xxxxxxxx hladinu je xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx nullipary a xxxxx xxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířata vyšších xxxxx, než xxxx xxxxxxxx, xxxx by xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxxx, xxx nebyly xxxxxxxxxx xxxxx toxické xxxxx. X těchto xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.3.2.3 Xxxxxxxxx koncentrace

Má xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx vhodně xxxxxxxxxxxx xxx, aby xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx rozsah xxxxxxxxx xxxxxx x mortality. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x mortalitou x, xxxxx xx to xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX₅₀ x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx-xx xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx xxxxx x koncentraci 20 xx.x^-1 xxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx látky x xxxxxxxxxxx 5 xx.x^-1 (xxxx - x případech, xxx xxxx xxxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx vlastností xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx rizika xxxxxxx - xxx xxxxxxxx maximální dosažitelné xxxxxxxxxxx) xxxxx 14 xxx x xxxxx xxxxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxx, považují xx xxxxx xxxxxx za xxxxxxxx.

1.3.2.5 Xxxx expozice

Xxxxxxxxx doba expozice xx být 4 xxxxxx.

1.3.2.6 Vybavení

Pro xxxxxx xx zvířaty xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx dynamické xxxxxxxx xxxxxxx x výměnou xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx xxxxxx, aby xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x expoziční atmosféře. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx konstruovat tak, xxx se co xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx expozice testované xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx zajištění xxxxxxxxx xxxxxxxxx x inhalačním xxxx xx neměl x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx způsoby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx

Doba xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx stanovit xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx reakcích, na xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxx zotavení. Dobu xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx se objeví x xxxx xxxxxx xxxxxxx otravy, xxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxx xxxxxxx

Zvířata xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xx xxxx 4 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx by mělo xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxx 22 ^xX ± 3 ^x X. Xxxxxxxxx vlhkost xx být xxxxxxx xxxx 30 % x 70 %, x výjimkou případů, xxx xx není xxxxx (např. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Udržování xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx komory (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx nepodává xxxxxxx xxx voda.

Používají xx xxxxxx systémy xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxx. Xxxxxx musí xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dosaženo xx xxxxxxxxxxx. Konstrukce x provoz xxxx xx zajišťovat homogenní xxxxxxxxxx testované atmosféry x xxxxxx.

Je xxxxx zajistit měření xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:

(a) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně),

(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxxxxx xx vysoké koncentraci, xxxxx vyžadovat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ±15 %. X některých aerosolů, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx možné xxxxxxxxx, xx připouští větší xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx dobu xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx tak xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxx xxxxxx x aerosolů, měří xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu),

(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx kontinuálně.

Xxxxx expozice i xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Minimálně xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx každodenní xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx uhynutí xx xxxxx xxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x v xxxxxxxx xxxxxxx.

Zvířata, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, xxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, xx pitvají xx xxxxxxxxx zřetelem xx všem xxxxxx xxxxx i xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají x odeberou xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.

2. XXXXX

Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx utracena xxxxxxxx ke stresu xxxx k bolestem xxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xxxx zaznamenána jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. XX₅₀ xx xxxxxxx uznávanou xxxxxxx. Xxxx xx hodnotí xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a výskytem x xxxxxxx všech xxxxxxxxxx, včetně xxxx xxxxxxx, klinických xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx poškození, změn xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x všech xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxx, atd.,

- xxxxxxxx xxxxxx: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x expozičním xxxx, xxxxx je xxxxxxxx. Xx třeba popsat xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,

- xxxxx o xxxxxxxx se xxxxxxx xx tabulky a xxxxxx spolu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx variability (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxx:

x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx zařízení;

x) teplota a xxxxxxx xxxxxxx;

x) xxxxxxxxx koncentrace (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx);

Xxxx.: xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x roztoku (např. xx xxxx) xx xxxxx xxxxxx nejen xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx, pokud xx xx možné, koncentraci xxxxxx látky xx xxxxxxxx.

x) povaha xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx;

e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx;

x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx průměru (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odchylka (XXX);

x) xxxx xx xxxxxxxx rovnováhy;

x) xxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxx uhynula xxxx byla xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx x příznaky xxxxxxxx; xxxxx exponovaných xxxxxx);

- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxx utracení xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxxx;

- hodnota XX₅₀ xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx doby xxxxxxxxxx (x uvedením xxxxxx xxxxxxx);

- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX₅₀ (pokud xx xxxxx xxx xxxxxxxx);

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxxx) a její xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxx metoda xxxxxxxxx);

- xxxxxxx nálezy;

- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x vlivu xxxxxxxxxx utracení zvířat x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx LC₅₀);

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.3. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXX)

1. METODA

1.1 Princip xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx nanáší xx xxxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx uhynutí. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx pitvají.

Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx xxxxx, že xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx leptavých nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx a krmení, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx se zdravá xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxx 24 xxxxx xxxx zahájením testu xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx ostříhá xxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx holení xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx) xxxx, xxx xx mohlo xxxxxx xxxx propustnost. Xxx xxxxxxxx testované xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Xxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x práškové xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx byl xxxxx xxxxxxx s kůží. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nutné xxxx x xxxxx vliv xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx vehikula xx xx měl řídit xxx, v xxxx xxxxx xx xxxx xxxx látka xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx kůží, x xx xxxxx relevantních xxxxxxx vybrat xxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Testované xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx neředěné.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx se dospělých xxxxxxx nebo xxxxxxx. Xxx xxxxxx i xxxx živočišné druhy, xxxxx jsou xxx xx xxxxxx. Je xxxxx volit xxxxx xxxxx pokusných xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti zvířat (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx každou xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Používá-li xx samic, musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx je x xxxxxxxxx informace, že xxxxx z xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, je třeba xxxxxxxx zvířata tohoto xxxxxxx.

Poznámka: Xxxxxxxxx-xx xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pečlivě zvolit x je xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X těchto xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx, a xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX₅₀ x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx jednou xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx x použitím xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx látka xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx úplnou studii.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx však xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx otravy, xxxxxxxxx xxxxxx otravy x trvání fáze xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx xx možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx doba, kdy xx příznak xxxxxx xxxxxxx a xxxxxx x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx tam, xxx xx patrná xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xx plochu, xxxxx xxxx xxx 10 % celkového xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxx látky xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx; xxxx by xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx co xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.

Testovaná xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x kontaktu x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx obvazu x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx třeba vhodným xxxxxxxx překrýt, xxx xx mulový xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx použít x xxxxxxxxxx pro omezení xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx xxxx expozice se xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx pokožky.

Xxxxxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx třeba vést xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Nejméně xxxxxx xxxxx pracovní xxx je třeba xxxxxxx pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx či xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, na xxxxxx xxxx provedena xxxxxxxx, xxx x xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x krevního oběhu, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx tremoru, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Okamžik xxxxxxx je třeba xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxxxx xxxxxxx až xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické změny xx zaznamenávají x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Hodnocení xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxxxx studie xx jednom xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx jedné skupině x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx xx zjistilo, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. Z ní xxxx být pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx počátku xxxxxx, xxxx xxxxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxxx zvířat x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, popis toxických xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x před xxxxxxxxx. Xxxxx hmotnosti xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx na xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx jako uhynutí xxxxxxxx xxxxx xxxxxx. XX₅₀ se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx existuje, xxxx xxxxxxxx zvířat testované xxxxx x výskytem x stupněm xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx změn xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx informace:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx atd.,

- xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxx očištění xxxx x typu xxxxxx: xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx užito) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxx uhynulých xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx testu; xxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx; počet exponovaných xxxxxx),

- xxxx xxxxxxx po podání xxxxxxxxx látky, xxxxxx x xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx pozorování,

- xxxxxxx LD₅₀ xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx úplný xxxxx, x xx pro 14xxxxx xxxxxxxxxx (s xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),

- 95% interval xxxxxxxxxxxxx pro XX₅₀ (xxxxx jej lze xxxxxxxx),

- xxxxxx xxxxxxxxxx mortality na xxxxx x xxxx xxxxxxxx (xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),

- pitevní xxxxxx,

- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,

- rozbor xxxxxxxx (xxxxxxxx pozornost věnovat xxxxxxx ovlivnění xxxxxxxxx xxxxxxx XX₅₀ v xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx testu),

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.4. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXX XXXXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

Výchozí xxxxx

Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx látce x xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat výrazné xxxxx xxxxxx. Následující xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx test, studie xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

x) Fyzikálně-chemické xxxxxxxxxx x chemická xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx (např. xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX xxxxx xx xxxxx 11,5) není xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx leptavé xxxxxx. Xx xxxxx vzít x úvahu také xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.

b) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx vyžadován xxxxx xxxx.

c) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxxx toxicity. Xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx dermální xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx dávky (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx třeba xxxxxxxx xxxxx vysoce toxické xxx dermální xxxxx xxxxxx.

Studovaná látka xx nanese v xxxxxxxxxxx dávce xx xxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx, přičemž xxxxx xxxxx slouží xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xx stanovené xxxx xx odečte, vyhodnotí x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx podráždění, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx posouzení xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxx zhodnotit také xxxxxxxxxxxxx pozorovaných účinků.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx utratit.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxx zvířat xx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxx. Při střihání xxxx holení srsti xx třeba dbát xx xx, xxx xx nepoškodila xxxx (xxxx. xxxxxx). Je xxxxx xxxxxx pouze xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx kůží.

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx husté xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x některých xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx zóny xxxxx husté xxxxx.

Xxx pokusech s xxxxxxx xxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx, je třeba xxxxxxxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx byl xxxxx xxxxxxx x kůží. Xxx použití vehikula xx xxxxx xxxx x úvahu xxxx xxxxxxxx xx podráždění xxxx xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata

Je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, je xxxx xxxxx dát xxxxxxxx albínu xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx zvířat

Xxxxxxxx xx x in xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxxxx nekrózu (xxxx. xx xxxxxxx), xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx testu xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx tohoto testu xxxxxxxxxxx leptavé xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx na dvou xxxxxxx xxxxxxxxx.

Pro xxxxx test xxxx xxxxx xxxxxxx tři xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx třeba xxxxxxxxxx xxxxxx pro neošetřenou xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx případů xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxxx zvířata.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx jiný xxxxxx, xxxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxx xxxx 0,5 x xxxx nebo polotuhé xxxxx. Přilehlé oblasti xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x testu xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxx pozorování

Dobu xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxx dostatečně dlouhá, xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx po xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Testovaná xxxxx se xxxxxx xx xxxxx plochu (xxx 6 cm²) xxxx a xxxxxxx xx plátkem xxxx xxxxxxxxxxxx nedráždivou xxxxxxxx. X xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxx nanést xxxxxxx xxxxxxxxxx látku xx xxx, x xxx xxx xxxxxxxxx xx kůži. Xx xxxx xxxxxx expozice xx xxxxx přidržovat xxxxxx xxxxx xx xxxx vhodným xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxx, aby xx xxxxx xxxxxxx x xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx.

Na xxxxx xxxx expozice xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx látku xxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx, xxx nebyla xxxxxxxxx případná xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Doba xxxxxxxx xx obvykle 4 xxxxxx.

Xxxxx existuje xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx vyvolat xxxxxxx (xxxx. xxx, xx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx délku xxxxxxxx (např. na 1 xxxxxx xxxx 3 xxxxxx). Při xxxxxxx testování je xxxxx použít xxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx 3 plátky xxxx současně, pokud xx xxxxxx dermální xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. První xxxxxx xx odstraní xx 3 minutách. Pokud xxxx xxxxxxxxxx závažná xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx 1 xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx v xxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx 4xxxxxxxx expozice a xx xxxxxxxxxx principu xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx třetí xxxxxx xx 4 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxxxx odpovědi xxxx. X případě, že xxxx možná 4xxxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx test x xxxxxxxx nejméně xxxx xxxxxxx xxxxxx; pokud xx není kontraindikováno x xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. jestliže xx 4 xxxxxxxx expozice xx xxxxxxxxxx nekróza xxxx).

Xxxxxxxx je xxxxxxx kožní xxxxxx (xxxx. xxxxxxx) xxxxxxxxxx xx 3 minutách xxxx xx 1 xxxxxx, je xxxx xxxxxxxx ukončen.

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx delší xxxxxxxx, například xxxxx xx odpovídá očekávanému xxxxxxx použití a xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx po 60 xxxxxxxx x xxxx 24, 48 x 72 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 1. Xxxxxxxx nebylo xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, provádí xx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx (nevratná xxxxxxxxx kožní xxxxx) x jiné toxické xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx, maskovaných xxxxxxxxxx xxxx testovanou xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx měření tloušťky xxxxx xxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx se xxxxxxx xx tabulky. X xx musí být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx stupeň xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx erytému x xxxxx xx xxxxx dobu xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx toxické xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx možno tyto xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx chovu, xxxxxx xxx.,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně relevantních xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx kůže, xxx xxxxxx: okluzivní, xxxxxxxxxxxxx,

- ve xxxxx tabulky údaje x xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xx 1, 24, 48 a 72 xxxxx atd. xx odstranění xxxx),

- popis zjištěných xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx a povahy xxxxxxxxxx podráždění x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx podráždění kůže,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- vyhodnocení xxxxxxxx.

4. XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxx reakce xxxx

	Hodnota
1. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx
1.1 Žádný erytém	0
1.2 Xxxxx xxxxx erytém (xxxxx xxxxxxxxx)	1
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx	2
1.4 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx	3
1.5 Těžký xxxxxx (silné xxxxxxxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx	4
2. Xxxxxxxxx xxxxx
2.1 Xxxxx xxxx	0
2.2 Xxxxx xxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxxx)	1
2.3 Xxxxx xxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx)	2
2.4 Xxxxx xxxx (xxxxxx vyvýšeny asi x 1 mm)	3
2.5 Xxxxxxx xxxx (xxxxxxx více xxx 1 xx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx)	4

4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (IKI)

XXX xx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxx průměr xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx odečtu x xxxxxxx jedince x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx u xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxx	X_XX
xxxxxxxx	X_XX ≤ 0,5
xxxxx xxxxxx	0,5 &xx; X_XX ≤ 3
středně xxxxxx	3 &xx; X_XX ≤ 5
xxxxx xxxxxx	X_XX &xx; 5

X.5. XXXXXX XXXXXXXX (XXXX XXXXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

1.1.1 Xxxxxxx xxxxx

Je xxxxx xxxxxxx xxxxxx všechny xxxxxxxx informace o xxxx látce x xxxxx snížit xx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat těžké xxxxxx. K xxxx xxxxx xxx užitečné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

a) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx. xxxxx kyselé nebo xxxxxxxx xxxxx, které - jak je xxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx x xxx xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX xxxxx xx xxxxx 11,5, xxxx xxxxx testovat, xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx v xxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.

x) Xxxxxxxx spolehlivě validizovaných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx vlastnostmi nemají xxx dále xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx pro xxx, xxxxxxx lze xxxxxxxxxxxx, že tyto xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx na xxx při xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx dráždivosti. Xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx zřejmé xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, není xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxx, protože xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxx xx oči xxxxxxx účinky.

Xxxxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx oka xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx intervalech xx xxxxxx a xxxxxxxxx stupeň xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx provést xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx bylo xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků.

Zvířata xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

24 xxxxx xxxx testem xx x xxxxxxx x xxxxxxxxx vybraných pokusných xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx. Xxxxxxx, x xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxxx defekt nebo xxxxxxxxx xxxxxxx, se x experimentu xxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat, doporučuje xx dávat xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx test xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx tohoto xxxxx xx jednom xxxxxxxxx naznačují, že xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (reverzibilní xxxxxx) xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxxxx xxx xxx xxx použití xxxxxxxxx postupu, xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx specifických xxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

X xxxxxxxxx případech xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tří xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxx xxxxx

Xxx testování xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,1 ml. X tuhých xxxxx, xxxx a xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx 0,1 xx nebo xxxxxxxx xxx 0,1 x (xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx). Xxxxx-xx xx x tuhou xxxx xxxxx zrnitou xxxxx, je třeba xx xxxxxxxx xx xxxxx prášek. Objem xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx po xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xx měrnou xxxxxxx.

X xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x pumpou nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x sebrat 0,1 xx látky x xxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx rigorózně. Musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx vratnost nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx stačí 21 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x klecích. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx zvířeti xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxx, xx se spodní xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx. Xxxxx se pak xxx na 1 xxxxxxx xxxxx x xxxx přidrží, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx, xx které se xxxxx xxxxxxxxxx, slouží xxxx xxxxxxxxx.

Jestliže xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx může vyvolat xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nedojde x xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxx xx testovanou xxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxx typ, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx způsobem se xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx.

Xxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 24 hodiny xx xxxxxxxx testované xxxxx. Xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxxxx za xxxxxx.

U některých xxxxx, xxxxx xxx xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xx instilaci xxxxx xxxxxx oči. X xxxxxx případech xx xxxxxxxxxx použít 3 králíky. Xxx xxxxxx po xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx po půl xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx kapaliny x rychlosti xxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx

Oči xx xxxxxxxxx xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx. Neprojevují-li xx xx 72 xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx lézí, je xxxxx zkoušku ukončit. Xxxx pozorování je xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx postižení rohovky xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx oka tak, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Vedle xxxxxxxxxx na rohovce, xxxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx ve xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx.

Intenzitu xxxxxx xxx xx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxx. (Klasifikace xxxxxx xxx připouští xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx laboratoře x xx, xxx provádějí xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx oka.)

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Po xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx po 24 hodinách xx xxxxx xxx některých xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx mimoto ještě xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. Z ní xxxx xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx stupeň xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxx stupně x xxxxxxxxxx podráždění, xxxxxxxxxx závažných xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx obsahuje xxxxxxxxxxx informace:

- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.),

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx),

- v xxxxxxxxx xxxxx výčet xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx každém xxxxxxxxxx (xxxx. po 1, 24, 48 x 72 hodinách)

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx závažných xxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, charakteru x xxxxxxxxx zjištěného podráždění x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx pro jednotlivé xxxxxx body (1, 24, 48 x 72 hod.), xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx.,

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,

- diskuse xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

4. XXXXXXX

4.1 Stupnice xxxx xx oku

	Xxxxxxx
X. Xxxxxxxx - xxxx
Xxxx xxxx xxxxxxxx	0
Slabý xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx	1
Xxxxxxx xxxx x xxxxxx víčka	2
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx víček na xxxxxxxx	3
Xxxx xxxxxxxxxx víčka více xxx xx polovinu xxxx zcela	4
X. Xxxxxxxx - xxxxxx
Slzení není xxxxxxxx	0
Xxxxx xxxxxx (nutno odlišit xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx koutku)	1
Slzení xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x blízkosti xxx	2
Xxxxxx xx xxxxxxxxx víček x xxxxx x xxxxxxx okolí xxx	3
X. Xxxxxxxx - xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx normální	0
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx	1
Xxxxxxxxxx cévní xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx	2
Difuzní tmavě xxxxxxx barva	3
X. Duhovka - xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx	0
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, překrvení, xxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx (jedna xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx), xxxxxx na xxxxxx xx zachovaná, xxxxxxxx xxxxxxxx	1
Xxxxxx na xxxxxx xxxx xxxxxxxx, rozsáhlé xxxxxxxxx x xxxxxxxxx	2
x xxxxxxx (xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx)
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx	0
Xxxxxxxxxxx oblast je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx charakteru, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx	1
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, detaily xxxxxxx xxxxx zastřené	2
Xxxxxxxxxx xxxx opalescence, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxxxx stěží viditelný	3
Xxxxx neprůhlednost xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx neviditelná	4
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Neprůhlednost xx xxxxxxxxxxxxx, ale xxxx xxxxxx xx ≤ 1/4 xxxxxx xxxxxxx	1
1/4 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 xxxxxx xxxxxxx	2
1/2 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 plochy xxxxxxx	3
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx > 3/4 xxxxxx xxxxxxx	4

4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (X_XX)

Xxxxxxxxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx (I_OI) xxx xxxxx xxxxx x xxxxx interval xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx

I_OI = 2.(X + X + X) + 5.X + 5.X.X

Xxxxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx (X_XX) xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx průměr x X_XX.

Xxxxxx xxxxx xxxx dráždivosti IOA xx xxxxx nejvyššímu X_XX zjištěnému v xxxxxxx xxxxx

4.3 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx	X_XX
xxxxxxxx	0 - 4,9
xxxxx xxxxxx	5 - 14,9
dráždí	15 - 29,9
xxxxx xxxxxx	30 - 59,9
xxxxx xxxxx xxxxxx	60 - 79,9
xxxxxxxx xxxxxx	80 – 110

X.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX

1. XXXXXX

1.1. Xxxx

Xxxxxxxx:

Xxxxxxxxx x xxxxxxxx schopnost xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx systém xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx senzibilizačním xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx x xxxxx xx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.

Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jako xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látky, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx.

Testy na xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx, xx kterých xx xxxxxxxxx stav xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx testované xxxxx xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (FCA), x xx xxxxx xxx xxxxxxxx.

Xxxxx x xxxxxxxx se zdají xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x proto xx xxx dává xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxx xx morčatech (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) xx xxxxx xxxxxxxxx test x xxxxxxxx. Xxxxxxx k xxxxxxxx schopnosti xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx několik xxxxxxx xxxxx, je XXXX xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx.

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx látek jsou xxxxx bez xxxxxxxx (xxxxxxxx se dává Xxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx.

X určitých xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx aplikací xxxxx xxx intradermální xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx Buehlerova xxxxx xx xxxxx xxxxx odborné xxxxxx.

X xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx popsány xxxxxxxxxxx xxxx na xxxxxxx (GPMT) x Xxxxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx i xxxxxx xxxxx, pokud xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxx xxx jejich xxxxxxx.

Pokud screeningový xxxx provedený xxxxxxxxx xxxxxxx xx pozitivní xxxxxxxx, xx možno xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 Definice

Xxxxxxxxxxxxx kůže: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) je xxxxxxxxxxxx zprostředkovaná xxxxx xxxxxx xx xxxxx. X člověka xxxxx xxx xxxxxx charakterizované xxxxxxxx, xxxxxxxxxx kůže, xxxxxx, pupenci, xxxxxxxx, xxxxxx (velkými xxxxxxx) xxxx kombinací xxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx druhů xx xxxxx xxxxxx xxxxx x může být xxxxxxxx xxxxx zarudnutí xxxx otok.

Xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx záměrem navodit xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxx nejméně xxxxxxx týdne po xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx kterého xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.

Provokační xxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx subjekt xxxxxx xxxxxx přecitlivělosti.

1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx

Citlivost x xxxxxxxxxxxx použité xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx šest xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxx xxxxx až xxxxxxx silný xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx.

X xxxxxxx provedeného xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx na mírné/střední xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % u metody x adjuvans x xxxxxxx 15% u xxxxxx xxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx dává xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx XXX	Xxxxx XXXXXX	xxxxxxxx název	generický/obchodní xxxxx
101-86-0	202-983-3	2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx	xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxx
149-30-4	205-736-8	2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx	xxxxxx
94-07-7	202-303-5	Xxxxx xxxxx kyseliny p-aminobenzoové	xxxxxxxxx

Xxxxx nastat xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxx odborném zdůvodnění xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx.

1.4 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Pokusná xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx období 10 až 14 xxx (indukční xxxxxx), x průběhu xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx exponována provokační xxxxx. Xxxxxx a xxxxxx kožní reakce xx provokační expozici x testovaných xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x kontrolních xxxxxx, která xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx x xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávka.

1.5 Popis xxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx nezbytné xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xx x xxxxxxxx xxxx xxxx vhodného xxxxxxxxxxxx xxx, aby xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.1 Maximizační xxxx xx xxxxxxxxx (GPMT)

1.5.1.1 Xxxxxxxx

Zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aklimatizují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx aspoň 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx zvířata xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx depilací, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx x na xxxxx xxxxx.

1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.5.1.2.1 Pokusná zvířata

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx albinotických xxxxxx.

1.5.1.2.2 Počet x xxxxxxx

Lze xxxxxx samce x xxxxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxx 5 xxxxxx xx třeba x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx xxxxx než 20 xxxxxxxxxxx a 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx x závěru, že xxxxxxxxx látka je xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxx 20 testovaných x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.1.2.3 Xxxxxxx úrovně

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, kterou xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x která xx xxxxxxxx působící xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.Xxxx provokační xxxxxxxxxxx xx použije maximální xxxxxxxxxxx, xxxxx u xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx potřeby xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx použití xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXX.

1.5.1.3 Popis xxxxxxx

1.5.1.3.1 Xxxxxxx

Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Následující 3 xxxxxxx subkutánních injekcí, xxxxx xx 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxxx oblasti xxxxxxx srsti symetricky xxxxx xxxxxxx xxxxx:

Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x objemovém poměru 1 : 1;

Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx zvolené xxxxxxxxxxx;

Xxxxxxx 3: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxx xx xxxxx FCA x vodou xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;

Pro xxxxxxx 3 xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x FCA xx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x nezředěném FCA. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 3 xx být xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 2.

Xxxxxxx 1 a 2 xx aplikují blízko xxxx a xx xxxxxxxx hlavě, zatímco xxxxxxx 3 směrem xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Následující 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx po 0,1 xx, se xxxxxx xx xxxxxxxx míst xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx adjuvans (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx fyziologickým xxxxxxxx v objemovém xxxxxx 1:1;

Xxxxxxx 2: xxxxxxxx xxxxxxxxx;

Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) xx xxxxx XXX/xxxx xxxx fyziologického xxxxxxx x xxxxxx 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).

5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx

Přibližně xxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx látka není xxxxxxxx xxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 0,5 xx 10% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx místního xxxxxxxxxx.

6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx skupina

Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx. Testovanou xxxxxx xx vhodném xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 xx), xxxxx xx xxx přiloží xx testovací xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxx 48 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx důvody; xxxxx látky jsou xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx do vhodného xxxxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.

6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x zafixuje xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx skupiny xx xxxx 48 xxxxx.

1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx

20. - 22. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx

Boky xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat xxxx xxxxxxx srsti. Xx xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx x xxxxxxx x xx xxxxx xxx xx xxxxxxx způsobem xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xx xx třeba). Xxxxxx xx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx s xxxx po 24 xxxxxx.

1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx

- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx plocha xxxxxxx, důkladně xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxxx xx xxxxxxx třech xxxxxxxx (přibližně 48 xxxxx od začátku xxxxxxxx xxxxxxxxxx dávky) xx xxxxxxxx kožní xxxxxx a xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x dodatku;

- xxxxxxxxx 24 xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx reakce xxxx (72 xxxxx).

Xxxxxxxxxx xx systém "xxxxxxx xxxxxx" u xxxxxxxxxxx x kontrolních zvířat, xxx pozorující xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxx senzibilizováno a xxxxx je xxxxxxxxx.

Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx nutná xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx přibližně x xxxxx xxxxxxx, v xxxxxxx potřeby znovu x kontrolní xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx na původní xxxxxxxxx xxxxxxx.

Všechny xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x provokačních postupů, xx zaznamenávají xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (viz xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxx, jako xxxx. histopatologického xxxxxxxxx xxxx měření xxxxxxxx xxxxxxx xxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxx

1.5.2.1 Xxxxxxxx

Zdravá xxxxx xxxxxxx albinotická xxxxxxx xx aklimatizují xx xxxxxxxxxxx podmínky xx xxxx aspoň 5 dnů xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Odstranění srsti xx provede xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx chemickou xxxxxxxx, v závislosti xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Xx třeba xxxx xx to, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx kůže. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx testu x xx xxxxx xxxxx.

1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx se xxxxx laboratorní xxxxx xxxxxxxxxxxxx morčat.

1.5.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Lze xxxxxx xxxxx a/nebo xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx být xxxxx. Xxxxxxx xx minimálně 20 zvířat x xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx 10 zvířat x xxxxxxxxx skupině.

1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx

Koncentrace xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolává podráždění xxxx. X případě xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx dvou xxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xx vodě xx xxxxxx použít vodu xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx detergentu xxxx xxxxxxxx. Pro xxxx xxxxx xx preferován 80% roztok xxxxxx/xxxx xxx xxxxxxx a xxxxxx pro xxxxxxxxx.

1.5.2.3 Xxxxxx

1.5.2.3.1 Indukce

Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx testu xx xxxxxxxx nasytí xxxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xx řídí xxxxxxxxx xxxxxx; kapaliny xxx xxxxxxxx aplikovat přímo).

Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx na testovací xxxxxx x přidržován x kontaktu x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx, x plochou xxxxxxxxx 4 - 6 xx². Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x použitím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx použito xxxxxxxx, xxxxx být xxxxx xxxxx expozice.

Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxx xxx xx zbaven xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx testovací xxxxxx xx naneseno pouze xxxxxxxxx, x to xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx překrývacím xxxxxxx xxxx komůrkou a xxxxxxx xxxxxxx po xxxx 6 xxxxx. Xxxxx xx možno xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, lze použít xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx.

6. - 8. x 13. - 15. xxx - Testovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx aplikace xxxx x xxx 0 xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx plochu xx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) 6. - 8. xxx a xxxxx 13. - 15. xxx.

1.5.2.3.2 Provokace

27. - 29. den - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupina

Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx srsti (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx nedráždivé xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx testovaných x xxxxxxxxxxx zvířat. Na xxxxxx část xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx aplikovat xxxxxxx plátek s xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx komůrky xxxx xxxxxxxxxxx x kontaktu x xxxx xxxxxxx xxxxxxx po xxxx 6 xxxxx.

1.5.2.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx

- xxxxxxxxx 21 hodin xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx;

- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxx (přibližně 30 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx plátku) xx pozorují kožní xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx stupnice xxxxxxx x xxxxxxx;

- xxxxxxxxx po xxxxxxx 24 hodinách (tj. xxxxxxxxx 54 xxxxx xx aplikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxx) se kožní xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Doporučuje xx systém "slepého xxxxxx" x testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx zvíře xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx je xxxxxxxxx.

Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx provokace (xx. xxxxxxxxx provokace), provede xx xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx potřeby xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x vehikulem. Opakovanou xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx skupině.

Všechny xxxxx reakce x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx reakcí, xxxxx xxxx xxxxxxxxx indukčních x xxxxxxxxxxxx postupů, xx zaznamenávají xxxxx xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (xxx xxxxxxx). K objasnění xxxxxxxx nálezů je xxxxx použít dalších xxxxxxx, xxxx např. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx.

2. XXXX X XXXXXX XXXXX (XXXX X XXXXXXXXX XXXX)

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx musí být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx patrná reakce xxxx xxx každém xxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX (XXXX X XXXXXXXXX XXXX)

Xxxxx xxx proveden xxxx xxxxxxxxx testu na xxxxxxxxx test screeningový, xx xxxxx uvést xxxxx tohoto testu xxxx jeho citaci (xxxx. LLNA - xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, XXXX - xxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx) xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx získaných xxx testované x xxxxxxxxxx xxxxx.

3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx (XXXX x Buehlerův xxxx)

Zpráva o xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx získány:

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxx morčat;

- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx, strava xxx.;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxx.

Experimentální xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x technice xxxxxxxxxx xxxxx;

- výsledek xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x indukčních x provokačních xxxxxxxxxxxxx xxx vlastní test;

- podrobné xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula;

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx použité referenční xxxxx, její koncentracea xxxxxxxx;

- všechna xxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx včetně xxxxxxx xxxxxxxxxxx;

- slovní xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxx histopatologické xxxxxx.

Diskuse xxxxxxxx

Xxxxxx

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx OECD XX 406.

Xxxxxxx

5.1 Stupnice Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx vyvolaných xxxxxxxxxxxxx reakcí

0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

1 = xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx;

2 = xxxxxxx xxxxxxx x splývající zarudnutí xxxx;

3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx.

5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxxxxx expozici, tj. xxxxx xxxx, kolik xxxxxx x rámci xxxxxx xxxx danou xxxxxx senzibilizováno, xx xxxxx xxxxxxxxxxx jako

xxxxx alergen (X. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx

mírný xxxxxxx (XX. st.) - 9 - 28 % xxxxxx

xxxxxxx xxxxx alergen (III. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx

silný alergen (XX. st.) - 65 - 80 % xxxxxx

xxxxxxxx xxxxxxx (X. xx.) - 81 - 100 % xxxxxx

X.7. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX ORÁLNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx se xxxxxx xxxxx po 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, x to xxxxx xxxxxxx jedna úroveň xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxx xxxxxxx, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx utratí a xxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Klece xxxx uspořádány tak, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx sondou xxxx x xxxxxxx nebo x pitné xxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx x fyzikálně-chemických xxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx je xx třeba, xxxxxxxx xxxx suspenduje xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx (vehikulu). Xxxxxxxxxx se nejprve xxxxxx xxxxxxx vodného xxxxxxx/xxxxxxxx, pak použití xxxxxxx/xxxxxx x jedlém xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) a xxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx. Pro nevodná xxxxxxxx musí xxx xxxxx jejich xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; pokud xxxx xxxxx, musí xxx xxxxxxxxx ještě xxxx xxxxxx. Xx nezbytné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx x jiného xxxxx xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by mělo xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx věku 9 xxxxx.

Xx začátku xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (pro každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx tato xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx třeba x xxxx xxxxxxxx xxxxxx zvířata xxxxxxxx xxxxx x ze xxxxxxxx zdroje.

1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxx xxxxxx hladinu xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 10 zvířat (5 xxxxx a 5 xxxxx). Pokud se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita xxxx xxxxxx pokusu.

Xxxxxx je možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx skupině) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 28 dnů xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx po podávání xxxxxxxx vratnost, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx také xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).

1.2.2.3 Xxxxx dávek

Xx třeba použít xxxxxxx xxx úrovně xxxxx a jednu xxxxxxxxx skupinu. S xxxxxxxx aplikace testované xxxxx se xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx zachází stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx množství, xxxxx xxxxxx skupina, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx informací xxxx očekávat xxxxxx xxx xxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx limitní xxxx. Xxxxxx-xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, lze xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx v xxxxx všechny xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx x toxikokinetických studií x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxxx toxické xxxxxx, ale nezpůsobit xxxxx xxxxxxx ani xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx dávce. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxxxx (NOAEL). Xxxxxxx je xxxxxx xxxx- xx xxxxxxxxxxx xxxxxx mezi sousedními xxxxxxx; pokud xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxx čtvrtou xxxxxxxx skupinu, než xxxxxx příliš xxxxx xxxxxx xxxx dávkami (xxxx. xxxxxx xxxxx xxx 10).

Xxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx x potravě xxxx xxxxx xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx-xx se testovaná xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx použít xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxx xx se xxx xxx každý den xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx má xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx dlouhodobou xxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx potravy.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxxx-xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx toxické xxxxxx xxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxx xxxx xxx takové xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx vodě, xxxxx xxxx xxxxx odpovídá, x pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx látky nevyplývá x xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx provedení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx dávkových xxxxxxxx xxxxxxx. Toto xxxxxxxx xxxxxxxxx testu platí, xxxxx údaje x xxxxxxxx lidí xxxxxxxxxxx, xx je xxxxx xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx pozorování xx 28 dní. Xxxxxxx xxxxxxxxx skupiny xxxx xxxxxxxxxx nejméně xxxxxxx 14 xxx bez xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Zvířatům xx podává xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 dnů, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxx v xxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kanylou. Xxxxxxxxx objem tekutiny, xxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx velikosti xxxxxxx. Xxxxx xx neměl xxxxxxxx přesáhnout 1 xx xx 100 x tělesné xxxxxxxxx, x xxxxxxx vodných xxxxxxx lze xxxxx x 2 ml xx 100 g xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace tak, xxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx úrovních dávky. Xxxxxxx xx u xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, x xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx x tutéž xxxxx xxxx x x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx. Zaznamenává xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx všech zvířat xx účelem zjištění xxxxxxxxx x mortality. Xxxxxxx moribundní x xxxxxxx xxxxxxxxxxx silnou xxxxxx xxxx stres xxxx vyřazena, utracena xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

Důkladné xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx před xxxxx aplikací (xx xxxxxx intraindividuálního xxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxx chovnou xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx ve stejnou xxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx v testující xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx pozorování xxxxxx xx nejméně; xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.

Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, změny xxxxxxx x vegetativních xxxxxx (xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx zornic) x případně xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx změny xxxxx, polohy, xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx pohybů, xxxxxxxxxx x xxxxxxx (vytrvalé xxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx) nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx).

Xx xxxxxxx týdnu xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx informace o xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, jsou xxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx Xxxxxxxxx xxxx, část X).

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx čtvrtém xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx 28xxxxx studie xxxxxx xxxx předběžná xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx studii xxxxxxxxxxxxx (90xxxxx); v xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx studie. Ovšem x v xxxxx xxxxxxx jsou xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx lze xxxxxxxx pozorování xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, které xx xxx posuzování xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx x xxxx

Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx jednou xxxxx. Xxxxxxxx potravy x xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxx aplikace v xxxxx xxxx.

1.2.3.3 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx zahrnuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů, počtu xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.

Krev xx odebere xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířete, xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx, se xxxxxxxxx. Xxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve xx xxxxxx posouzení xxxxxxxxx toxických účinků xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx, xx provede x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx utracení (xxxxx zvířat uhynulých xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx). Doporučuje xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx noc xxxxxxx xxxx¹⁾. Vyšetření xxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx sodíku, xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, močoviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx proteinů, xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx jaterní buňky (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, aspartátaminotransferáza, xxxxxxxxx fosfatáza, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, sorbitoldehydrogenáza). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (jaterního xxxx xxxxxx původu) x xxxxxxxxx kyselin xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx poskytnout xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx posledního xxxxx studie: hodnotit xx možno xxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xX, xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxx příp. krvinky.

Xxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx.

Další xxxxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx x látek xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx metabolické xxxxxx: xxxxxxxxx vápníku, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, specifických xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxxxxx xxxxxx vyšetření xx posuzuje podle xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx nebo xxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, brát x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx očekávané xxxxxx dané látky.

Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo biochemických xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxx stanovení xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.

1) Xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx pro xxxx xxxxxx x xxxx x xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx je xx, xx x nehladovějících xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx změny x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxx xxx xxxx xx celkový metabolismus x u aplikace x potravě by xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx xx odebírá xxxx na xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provést až xx pozorování funkčních xxxxxx ve 4. xxxxx xxxxx.

1.2.3.5 Xxxxx

X všech xxxxxx použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, zahrnující xxxxxxx xxxxxxxxx vnějšího xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxx lební, xxxxxx x xxxxxx, a xxxxxx xxxxxx. Játra, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx předešlo xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx vhodném médiu x xxxxxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx (reprezentativní xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxx), míchu, xxxxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxx (xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx), játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, brzlík, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxx (konzervované xxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem x xxx xxxxxxxxx), gonády x přídatné xxxxxxxx xxxxxx (např. xxxxxx, xxxxxxxx), xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx pro pokrytí xxxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xxxx (x. xxxxxxxxxxx xxxx x. tibialis), xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx). Podle xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxx xxxxx. Xxxxx orgán, xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx působení testované xxxxx, xx třeba xxxxxxx.

1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

X všech zvířat xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx dávka, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Pokud xx v xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx objeví xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxx i x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkami.

Všechny xxxxxxxxxxxxx léze xx xxxxx vyšetřit.

U xxxxxx satelitních skupin, xxxxx byly xx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, ve xxxxxxx xx objevily xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXX X XXXXXX XXXXX

X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x každém xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx formy, xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx vykazujících xxxxxxxx xxxxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů, xxxx úmrtí jednotlivých xxxxxx, popis toxických xxxxxxxx xxxxxx doby xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx příznaku, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, typ xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x jednotlivými xxxx xxxx.

Výsledky v xxxxxxx formě xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistickou xxxxxx xx xxxxx zvolit xxx při plánování xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxxxx druh/kmen;

- xxxxx, stáří x xxxxxxx zvířat;

- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx začátku testu, xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxx xxxxx.

Podmínky xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;

- zdůvodnění xxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx, případně x přípravě diety, x xxxxxxxxxx koncentracích, xxxxxxxxx x homogenitě xxxxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx nebo xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx v xx xx kg xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx);

- podrobné xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx vody (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);

Výsledky:

- xxxxxxx hmotnost a xxxx xxxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx;

- xxxxx x toxických xxxxxxxx xxxxx pohlaví a xxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxx příznaků xxxxxxxx;

- povaha, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, příp. xxx xxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx;

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx na smyslové xxxxxxx, xxxxxxxx síly x motorické xxxxxxxx;

- xxxxxxxx hematologického xxxxxxxxx x příslušnými xxxxxxx;

- výsledky xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxx;

- podrobný xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxx:

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx OECD XX 407.

B.8. AKUTNÍ XXXXXXXX INHALAČNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)

1. METODA

1.1 Xxxx

Xxxx xxxxxxx xx xxxxx získat xxxxx x testované xxxxx: xxxxxxxxx velikosti částic, xxxxx par, xxx xxxx, bod varu, xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxx-xx stanovitelné).

1.2 Xxxxxxx xxxxxx

Několik xxxxxx pokusných zvířat xx exponováno xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x to po 28 dní. Xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx kontrolní xxxxxxx xxx vehikulum. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx třeba, xxxxx xx x testované xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, aby x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jiná xxxxxxx, musí být x nich známo, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Existují-li xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx je xxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx důvody xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx začátku xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx).

1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nejméně 10 xxxxxx (5 samic x 5 xxxxx). Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx zvířata budou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx koncem xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx vysoké xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx a během xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx vratnost, xxxxxxxxxxx xxxx zpožděný výskyt xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx satelitní xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).

1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx x různou xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupina, případně xxxxxxxxx skupina x xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxx - x koncentraci xxxxxx xxxx u skupiny x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx toxické účinky, xxx nezpůsobit žádné xxxxxxx xxxx xxx x malém xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx koncentrací, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx koncentrací x v xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.

1.3.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx xx xxx 6 hodin xxxxx; x případě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je možné xxxxxx x xxxxxx xxx expozice.

1.3.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx expoziční xxxxxxxx, které zaručuje xxxxxxxx vzduchu x xxxxxxx nejméně 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx třeba xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx expozice testované xxxxx byla co xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx neměl xx v zásadě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx boxu. Xx možné použít xxxxxxxxx xxxxxxxx orálně-nasální, xxxxxxx hlavy nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx dva xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

1.3.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické účinky. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx a xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.3.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce denně, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 28 xxx. Zvířata v xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx dalších 14 xxx xxx aplikace, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x otravy xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx být 22 ^xX ± 3 ^xX. Xxxxxxxxx vlhkost xx být xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx). Xxxxxxxxx mírně xxxxxxxxxxx tlaku xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx vodního sloupce) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxx. Xxxxx expozice xx xxxxxxxx potrava ani xxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx inhalační xxxxxx x xxxxxxx analytickou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací. Rychlost xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx boxu xxxx stejné. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Měření xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek expozice:

x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).

x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx koncentrace xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx o xxxx xxx ± 15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx a aerosolů, xxx této úrovně xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísání. Xx xxxxx xxxx xxxxxx experimentu mají xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx x aerosolů, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic týdně x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

x) Xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx x xx jejím xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxx pozorovat xx příznaky xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x trvání. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx soustavy, somatomotorické xxxxxxxx a chování. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx, xxxx např. x důsledku kanibalismu, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx studie xx xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata a xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx, humánně xxxxxxx a xxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx xx u všech xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xxxxxxxx následující xxxxxxxxx:

1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zahrnovat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počtu erytrocytů, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.

2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jeden x těchto parametrů: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxx (xxxxx známá jako xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), aspartátaminotransferáza (xxxxx xxxxx xxxx glutamátoxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x séru.

Xxxx xxxxx charakteristiky, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, xxxxxxx, chloridů, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx, lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx studium xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.3.3.1 Pitva

X všech xxxxxx xxxxxxxxx xx studii xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx (xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx x srdce, x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx velikosti) xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba vyjmout xxx xxxxxxxxx, xxxxxx x fixovat xxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx x orgánech x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x všech xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. X zvířat xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xx zvláštním xxxxxxx na xxxxxx x tkáně, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx otravy x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní musí xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx zjištěné xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx xxx.,

- podmínky xxxxxx: xxxxx expozičního xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxxxxx vzduchu x způsobu umístění xxxxxx v xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxx teploty, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx stability xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- údaje x xxxxxxxx xx sestaví xx xxxxxxx x xxxxxx spolu x xxxxxxxxxx hodnotami a xxxxxxxxxxxxxxxx variability (např. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx: a) xxxxxxxx průtoku vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; b) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx; x) nominální xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx inhalačního xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx); x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxx; x) skutečná xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně; x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx průměru (MMAD) x geometrická xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX),

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x přežití xxxxxx do konce xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxx xxxxxx,

- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,

- hematologická xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxx nálezy,

- detailní popis xxxxx histopatologických xxxxxx,

- statistické vyhodnocení xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - DERMÁLNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Nejméně 5 xxx xxxx testem xxxx zvířata chována x podmínkách ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx srsti xx xxxxxx možné, mělo xx se však xxxxxxx cca 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx oholení xx xxxxxxx opakovat xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx je třeba xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (např. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Xx třeba xxxx x úvahu xxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Při xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx denně 5 xx 7 dnů x xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx druhy, xxxxxx xxxxxxx však xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic x 5 xxxxx) se xxxxxxx xxxx. Samice xxxx být xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx budou zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx další skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx dávku x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx po ukončení xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx xxxx - pokud xx použilo xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx. Doba expozice xx xxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx mělo xxxxxxxx xxxxx xxx xx stejnou xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx aplikovanou dávku xxxxxxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx se se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx usnadnění aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx ve xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx vyvolat xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx xxx 3 úrovně xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx by počet xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxx testované xxxxx x těžkému xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxx koncentraci, xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx může xxxx x omezení xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pokus xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx x nižšími xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Limitní test

Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx aplikace dávky 1000 mg.kg^-1 xxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx nutná.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxx, kdy xx xxxxxx x xxxxxxxx opět xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Zvířata xx xxxxxxx v xxxxxxx xx jednom. Exponují xx xxxxxxxxx látce xxxxxxx 7 xxx x xxxxx po xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx určena xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 14 xxx xxx expozice, xxx xx mohla xxxxxxxxx xxxxxxxx toxických xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx expozice xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx rovnoměrně na xxxxx plochu, xxxxx xxxxxxxxxxx asi 10 % povrchu xxxx; x vysoce xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx plocha menší. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx největší xxxx xxxxxxx plochy xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx je po xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx s xxxx xxxxxx porézního xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plochu xx dále třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx mulový xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx fixovaly x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx příjmu. X xxxxxxxx požití látky xx možno xxxxxx x prostředků xxx xxxxxxx volnosti xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx doporučit. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx "ochranného xxxxx".

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno xxxxx xxxx s xxxxxxxx xxxxxx vhodného xxxxxxx očištění xxxxxxx.

Xxxxxxx zvířata xx xxxxx denně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx x xxxxxxx x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenávají xxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx i xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx ztrátám xxxxxx, xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx x zvířata x xxxxxx stresu xx xxxxxx bolestí xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

Xx xxxxx pokusu xx x xxxxx zvířat xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx.

2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve: x xxxxxxxxx funkce xxxxx x xxxxxx stanovit xxxxxxx jeden x xxxxxx xxxxxxxxx: alaninaminotransferáza x séru (dříve xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny v xxxx.

Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx pro xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx spektra xxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x varlata xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx, např. normální x exponovaná xxxx, xxxxx, xxxxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx orgány x xxxxxxxxxxxxxxx lézemi xxxx změnami xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx vhodném médiu x xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx dávka, a x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx. Pokud xx x orgánech a xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x tkáně, ve xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx exponovaných zvířat.

2. XXXXX

Údaje xx xxxxxxx do tabulky. X xx xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx použít kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:

- údaje x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, původ, podmínkách xxxxx, xxxxxx xxx.),

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxx obvazu; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx bez účinku, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,

- údaje x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx x xxxxx,

- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx do xxxxx sledovaní,

- xxxxxxx xxxx jiné xxxxxx,

- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx další xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx a vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxxxxxx vyšetření a xxxxxx výsledky,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.10. XXXXXXXXXX - XXXX CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX X SAVCŮ XX XXXXX

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx OECD XX 473, Xx Xxxxx Mammalian Chromosome Xxxxxxxxxx Test (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx v xxxxxxxxx savčích buněk xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx většinou xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Vznik xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx chemická xxxxx je schopna xxxxxxxxx numerické xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx se x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx toho, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy, xxx xxxxxxxxx xxxxx x onkogenech a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx úlohu xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxx se používá x xxxxxxxx možných xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx sice xxx xxxxx karcinogenní, xxxx však xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx druhu xxxxx x xxxxxxxx stále xxxx xxxxxxx o xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx než xxxxxx poškozením DNA.

X xxxxxxx chromozómových xxxxxxx in xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx, xxxxxxxxx kmenů xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Použité xxxxx xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx spontánních xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx in xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedokáže xxxxxxxx xxxxxxxxx podmínky x xxxxx xx xxxx. Xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxx k pozitivním xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mutagenitu, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx cytotoxicitou (4) (5).

1.2 DEFINICE

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx projevuje xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako zlom xxxxxxxxxx jako xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx (zahrnuty xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, prsténčitý xxxxxxxxx-xxxx).

Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx xxxx obou xxxxxxxxx xx předpokladu, xx vzniklá xxxxxx xx xxxxxxxxx chromatidy xx větší, než xx šířka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, koncový (xxxxxxxx) xxxxxxxx v xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx mimo xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x důsledku xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx S-fázi xxxxxxxxx XXX nepřechází jádro xx xxxxxx, nýbrž xxxxxx další X-xxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, .. chromatidami.

Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxx populace.

Xxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx buňky.

Polyploidie: xxxxxxx haploidního xxxxx xxxxxxxxxx (x) jiný xxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3n, 4x xxx.).

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx chromozómové struktury xxxxxxxxxxx mikroskopickou analýzou xxxxxxxxx dělení xx xxxxxx metafáze, pozorovaná xxxx delece a xxxxxxxxx a xxxxxx.

1.3 XXXXXXX METODY

Xxxxxxx xxxxxxx xx vystaví xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, x xx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx ní. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxxxx buněčné kultury xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx, obarví xx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se mikroskopicky xxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.

1.4 POPIS XXXXXX

1.4.1 Příprava

1.4.1.1 Xxxxx

Je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, kmenů xxxx xxxxxxxxxx buněčných xxxxxx, xxxxxx buněk xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx).

1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx

X udržování xxxxxx je třeba xxxxxxxx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx nádoby, xxxxxxxxxxx CO₂, xxxxxxx x xxxxxxx). U xxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx kontrolovat xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x nepřítomnost xxxxxxxxxxx x xxxxxxx. X případě xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x kultivační xxxxxxxx.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie x xxxxx: xxxxx se xxxxx ze zásobních xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx před dobou xxxxxxxx x xxxxxxxx xx při xxxxxxx 37 ^xX.

Xxxxxxxxx: xx xxxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxxx mitogen (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx) se přidá xxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. heparinem), xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 ^xX.

1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Na xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxx vhodného metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, ovlivněná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy xxxx xx Xxxxxxx 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (10) (11) (12).

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mitochondriální xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10 % x/x. Aktivita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému bude xxxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxx je xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v několika xxxxxxxxxxxxx.

Pro účely xxxxxxxxx aktivace xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx modifikované xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxx vědecky xxxxxx (např. xxxxxxx xxxxxxxxx cytochromu P450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).

1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky

Xx-xx testovaná látka x xxxxxx stavu, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx naředí. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx mohou xx xxxxxxx přidávat přímo xxxx se xxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx údaje o xxxxxx stabilitě xxxxxxxxx, xx delší xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx jejich vlastnosti.

1.5 XXXXXXXX XXXXX

1.6 ROZPOUŠTĚDLO

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx existovat xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x testovanou látkou xxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a aktivitu X9. Používá-li xx xxxx známé rozpouštědlo, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxx xxx, xxx je xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, musí xxx xxxxxxx organické xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Voda xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sítem.

1.6.1 Xxxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxx, xxx xx uvažují při xxxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, rozpustnost x xxxxxxx x xxxxx pH xxxx. xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x bez xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž xx xxxxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, například xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx živých xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Je vhodné xxxxxxxx cytotoxicitu x xxxxxxxxxxx x předběžných xxxxxxxxxxxxx.

Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Dochází-li x cytotoxicitě, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxxxx xx nízké nebo xxxxxx toxicity. To xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx xxxxx více xxx xxxxxxxx, který xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. X xxxx sklízení xxxxx xxxx být xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx růstu, xxxxx xxxxx, xxxx mitotického xxxxxx (xxxx x xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx mírou xxxxxxxxxxxxx / cytostatických xxxxxx x je xxxxxxx xx době xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxx akceptovatelný pro xxxxxxxxx kultury, kde xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx byla obtížná x nepraktická. Xxxx xxxxxxxxxx informace xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx x kinetice xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx; xxx ovšem xxxxxxxxxxx celkový průměr, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx zpožděných subpopulací xxxxx. X xxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx znamenat xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx sklízení x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látek xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 µl/ml, 5 xx/xx xxxx 0,01 M.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx x koncentracích xxxxxxx, xxx je xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx se xxx látka nerozpouští, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx, xxx xx mez xxxxxxxxxxxx xx finálním xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx kultivace x xxxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx dochází-li k xxxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxxxx vyšších, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx testovat při xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx srážením. Xxxx xxx xxxxxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, protože xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx změnit x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx, X9 xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x prostým xxxx. Xxxxxxxxx nesmí xxx xx překážku xxx xxxxxxxxx buněk.

1.6.2 Negativní x xxxxxxxxx kontroly

Xx každého experimentu, xx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xx, xx xxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (rozpouštědlo, nebo xxxxxxxxx). Xxxxx se xxxxxxxx metabolická xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxx pozitivní kontrolu xx používá xxxxx xxxxxxxxx, a to xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx, xx xxxxxxxx reprodukovatelný x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Koncentrace xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxx byl xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přímo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx preparátů. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx patří například:

Metabolická xxxxxxxx	Xxxxx	CAS	XXXXXX
Xx	xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx C 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx	66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5	200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1
Xxx	xxxx[x]xxxxx cyklofosfamid xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	50-32-8 50-18-0 6055-19-2	200-028-5 200-015-4

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se mohou xxxxxx x xxxx xxxxxx látky. Tam, xxx xx xx xxxxx, xx vhodné xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxxx skupiny.

Xxx xxxxx časový xxxxxxxx sklízení xxxxxx xx xxxxx použít x negativní xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx rozpouštědlo xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxx xxxxx zařadit xxxxxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.6.3 Postup

1.6.3.1 Expozice xxxxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx působí xxxxxxxxxx xxxxxx za xxxxxxxxxxx i nepřítomnosti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xx lymfocyty xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx 48 hodin xx stimulaci xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx; x xxxxx xx doporučuje xxx negativní kontroly x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, že xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (13) (14), xx xxxxxxxxxx, xxx se xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx.

V xxxxxxx xxxxxxxx nebo těkavých xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx neprodyšně xxxxxxxxxx kultivačních xxxxx (15).

1.6.3.2 Xxxx sklízení xxxxxxx

X xxxxxx experimentu xx xxxxx vystaví xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx ní po xxxx 3 - 6 xxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx buněčného xxxxx xx začátku xxxxxxxx (12). Xxxxx xxxx xxx použití xxxxxxxxxxx xxxxxxx x bez xxxx xxxxxxxx negativní, xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxx aktivace, x xxxxxxxxxxx expozicí xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx odpovídají xxxxxx 1,5násobku normálního xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx xxxxx xx hodnotí xxxxx při xxxx xxxxxxxx delší, xxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Negativní xxxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xx případu. X xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, je třeba xxxx rozhodnutí xxxxxxxxx.

1.6.3.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx Colcemidem® xxxx kolchicinem xxxxxxx xx dobu 1 - 2 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx buněčná kultura xx xxx přípravu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx sestává x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx roztokem, xxxxxx x xxxxxxxxx.

1.6.3.4 Xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx postupy xxxxx xxxxx k rozbití xxxxxxxx xxxxxx metafázických xxxxx x ztrátě xxxxxxxxxx, xxxx xxx x všech typů xxxxx počet centromer x hodnocených xxxxxxx xxxxx modálnímu xxxxx ± 2. Xxx xxxxxx koncentraci x xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx byly xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxx analyzovaných xxxxxxxx xxxxxx.

X xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx aberace, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx polyploidii a xxxxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Jelikož xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi. Xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx včetně xxxxxx xxxxx a četnosti x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx obvykle do xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Současně xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx zjištěnou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx se xxxx xxx jednotlivé xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx uvedou x xxxxxxx tabulce.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx nepožaduje. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x odst. 1.4.3.3. X následných xxxxxxxxxxxxx je třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxxxx metody (3) (13). Xxxxxxxxxxx významnost xx však neměla xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku.

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx indikovat, xx testovaná látka xx schopnost xxxxxxxxx xxxxxxxxx procesy x xxxxxxxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx inhibovat xxxx xxxxxxxxx xxxxx (17) (18).

Xxxxxxxxx xxxxx, při xxxxxx xxxxxxx výsledky nesplňují xxxx xxxxxxx kritéria, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx získaná xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx posouzení xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx, xxxx diskutabilní xxx ohledu xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vitro xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x kultuře xxxxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testovaná xxxxx x kultuře xxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxx nevyvolává.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

XXXXXX X XXXXXXX POKUSU

Xx zprávě x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.

Xxxxx:

- xxx x xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx buněk,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxx x délce xxxxxxxxx cyklu,

- xxxxxxx xxxxx xxxx, xxx xxxx použita xxxx krev xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxx xxxxx, je-li xx nutné - xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx

- xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.

Podmínky xxxxxx:

- název xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx koncentrace x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx koncentrací x xxxxx kultur, xxxxxx např. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jsou-li x dispozici,

- xxxxxxx xxxxx, koncentrace XX₂, xx-xx to xxxxx

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky,

- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxx xxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xx nutné

- xxx x složení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xxxxxx xxxxxxxx akceptovatelnosti,

- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,

- kritéria xxx xxxxxxxxx aberací,

- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Výsledky:

- xxxxxx toxicity, xx. xxxxxx xxxxxxxxxx, údaje x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx o xX x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, jsou-li xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx,

- xxxxx buněk s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx experimentální x xxxxxxxxx kulturu xxxxxx,

- případné xxxxx xxxxxxx,

xxxxx xxxxx-xxxxxxx, je-li xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx, xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx.

Xxxxxxx výsledků.

Xxxxxx.

B.11. XXXXXXXXXX - XXXX CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX X XXXXXX XXXXX XXXXX XX XXXX

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 475, Xxxxxxxxx Bone Xxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx analýzy chromozómových xxxxxxx u xxxxx xx xxxx je xxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx dřeně xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxxx xxx xxxxxxx druhu: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxx xxxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx dochází xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy xxxx xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx přesvědčivé xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx x tumorsupresorových xxxxxx, hrají úlohu xxx xxxxxxxx u xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

X xxxxxx testu xx xxxxx využívají hlodavci. Xxxxxxx xxxxx x xxx xx xxxxxx xxxx, xxxxxxx se xxxxx x tkáň xxxxxx vaskularizovanou, obsahující xxxxxxxx rychle xx xxxxxxxx xxxxx, jež xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xx x tomto xxxxx xxxxxxxxxxx.

Tento xxxx xx chromozómové xxxxxxx xx zvláště xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx brát x xxxxx faktory metabolismu xx xxxx, farmakokinetiky x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, i xxxx xxx mohou být xxxx živočišnými xxxxx x mezi xxxxxxx xxxxxxx. Test xx xxxx je xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x tom, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx do cílové xxxxx nedostane, xxxx xxxxxx použití xxxxxx xxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx chromatid, nebo xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx chromozómového typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako zlom xxxxxxxxxx xxxx zlom x opětovné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx místě (zahrnuty xxxx aberace typu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)

Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx zlom xxx xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx za předpokladu, xx vzniklá mezera xx struktuře chromatidy xx větší, než xx šířka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx pak x případech, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment x xxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx chromatidy), xxxxxxxx xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x důsledku delece.

Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, xxx xx X-xxxx replikace XXX xxxxxxxxxx jádro xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx další S-fáze. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... chromatidami.

Xxx: achromatická xxxx xxxxx než xxxxx xxxxx chromatidy x x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx index: xxxxx xxxxx x xxxxxxxx dělený xxxxxxxx xxxxxx buněk v xxxx xxxxxxx populaci; xxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxx populace.

Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.

Polyploidie: xxxxxxx hapoidního xxxxx xxxxxxxxxx (n) xxxx xxxxxxxxx xxxxx (tedy 3x, 4x xxx.).

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury zjistitelná xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve stadiu xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Zvířata xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (například kolchicinem xxxx Colcemidem®). X xxxxx kostní dřeně xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Výběr xxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx se xxxxxxxxx potkani, myši x čínští xxxxxx, xxx ovšem použít x jakýkoliv jiný xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx minimální a x každého pohlaví xxxxxx přesahovat ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx chovu

Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx B, vlhkost xx měla být 50 - 60 %.

1.4.1.3 Příprava zvířat

Xxxxxx mladí xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx do kontrolní x experimentální skupiny. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx jednoznačně xxxxxxx. Po xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx zvířata xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx její xxxxxxxx ve vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Je třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxxxxxx prokazují, že xxxxxxxxxx xx neovlivní.

1.4.2 Xxxxxxxx testu

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Rozpouštědlo / vehikulum x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x nesmí x xxxxxxxxxx xxxxxx chemicky xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, aby xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx rozpouštědlo / xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Do xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx tak, aby xxxx účinky xxxxxx, xxx přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx možné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx odebírat x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx vhodných pro xxxxxxxxx xxxxxxxx:

Xxxxx	XXX	EINECS
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx	62-50-0	200-536-7
xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx	759-73-9	212-072-2
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
cyklofosfamid xxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx kontroly ovlivněné xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx by xxx xxxxxxxx xx xxxxx časových xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxx chromozómových aberací x o xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx zvířaty. Xxxxxxxx-xx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx dobou xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx historické xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx zvolené xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx nevyvolává xxxxx nepříznivé xxxx xxxxxxxxx účinky.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx a xxxxxxx xxxxxx

X každé xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx v době, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx údaje x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx způsobů xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx pohlavími xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je testování xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx postačující. Xxx, xxx xxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxxxxx na xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx se xxxx xx zvířatech odpovídajícího xxxxxxx.

1.5.2 Dávkovací schéma

Xxxxxxxxxx látku xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xx jedná x objemnou xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx aplikace xxxxx xxxxxxxx, například xx xxx dávky za xxx podané v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxx xx odebírají xx xxxx různých časových xxxxxxxxxxx xx podání xxxxx xxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx délky xxxxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxx 12 - 18 hodin) xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberací, xxxxxxxxxx xx další xxxxx vzorků po 24 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Pokud xx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx za den, xx třeba xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx látky.

Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injikuje xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx z xxxx ve vhodném xxxxxxxxx odeberou xxxxxx. X xxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3 - 5 xxxxx, u xxxxxxxx xxxxxx zhruba 4 - 5 hodin. X kostní dřeně xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx chromozómové xxxxxxx.

1.5.3 Dávkování

Xxxxxxx-xx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, protože nejsou x dispozici xxxxx xxxxxx xxxxx, je xxxxx xx provádět x téže xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x hlavní xxxxxx (5). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx první xxxxxx interval xxxxxx xxxxxx tři xxxxx xxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxx xxxx nulové. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxx třeba xxxxxx jenom xxxxxxxx xxxxx. Xx je xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, že při xxxxxxx dávkách ve xxxxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Látky, jež x nízkých netoxických xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivitu, jako xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx případ xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx jako xxxxx, která xxxx x určitým známkám xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxxx indexu o xxxx xxx 50 %).

1.5.4 Limitní xxxx

Xxxxxxxx xxxx při xxxxx minimálně 2 000 xx/xx hmotnosti v xxxxx dávce xxxx xx dvou xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x jestliže xx xx xxxxxxx xxxxx x látkách s xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx použití xxx xxxxxxxxx úrovní. Xxx dlouhodobé studie xxxx xxxxxxx dávka 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xx xxx xxx xxxx xxxxxx xx 14 dnů, a 1&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xxx xxxx trvání xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx očekávané xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx zapotřebí použití x xxxxxxxx xxxxx xxxxx dávkové úrovně.

1.5.5 Xxxxxxxx látky

Testovaná xxxxx se obvykle xxxxxxxx buď xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx přijatelné x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, která se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo žíravých xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při vyšších xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Příprava xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, xxxxxx xx ni xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx se fixuje. Xxxxxxxx buněk xx xxxxxx na podložní xxxx x xxxxxx xx.

1.5.7 Analýza

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx x všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxxx xxxxxxxxx index xxx xxxxxxxxx 1000 xxxxx x každého jedince.

X xxxxxxx jedince xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx. Tento xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx vysokém xxxxx aberací. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol) xx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nezávisle zakódují. Xxxxxxx při jejich xxxxxxxx dochází xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx spojeného xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx 2x ± 2.

2. ÚDAJE

2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Údaje xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx počet hodnocených xxxxx, xxxxx aberací xx jednu xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx, jejich počet x xxxxxxx. Xxxx xx zaznamenávají xxxxxx x xxxxxxxxxx se, xxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx frekvence xxxxxxx nezahrnují. Xxxxxx-xx xxxxx doklady x xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xx obě xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

2.2 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx výsledků

Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx frekvence xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx zřetelný xxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxxxx ve skupině x jednorázovou xxxxxx xxx jednom xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx biologickou významnost xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx se xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Statistická xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Nárůst počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx mitotické xxxxxxx x vyvolávat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buněčného xxxxx (7) (8).

Xxxxxxxxx xxxxx, při xxxxxx xxxxxxx výsledky xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Většina xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x aktivitě testované xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxx nejednoznačné nebo xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx experiment xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx in vivo xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx xx daných experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xxxxxxxxxx.

Xx třeba xxxx x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx o xxxxxxx pokusu

Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- počet, xxx a xxxxxxx xxxxxxx,

- původ, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx odchylek xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx rozpětí, xxxx-xx provedena,

- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxx xxxxx,

- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, že se xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx oběhu xxxx xx xxxxxx tkáně,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (ppm) xx skutečnou dávku (xx/xx hmotnosti/den),

- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx x vody,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických preparátů,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, negativní xxxx nejednoznačná.

Výsledky:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx,

- xxx x xxxxx aberací pro xxxxxxx jedince xxxxxx,

- celkový xxxxx xxxxxxx v dané xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx x směrodatná xxxxxxxx,

- případné xxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxx-xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- statistické xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx x negativních kontrol xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

B.12. XXXXXXXXXX - IN XXXX XXXXXXXXXXXX TEST X XXXXXXX XXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 474, Mammalian Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Mikronukleus xxxx in vivo x xxxxx slouží xx zjištění poškození, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v chromozómech xxxx x mitotickém xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxx xxxxxxx x xxx, xx xx analyzují xxxxxxxxxx z kostní xxxxx xxxx. x xxxxxxxxx xxxx zvířat, xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx cytogenetické poškození, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx představujících xxxxxxxxxxxx fragmenty xxxx xxxxxx chromozómů.

Když x erytroblastu xxxxxx xxxxx vznikne xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jádro je x buňky xxxxxxxxx; xxxxxxxx zbude v xxxxxxxxxx vzniklé mikrojádro. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx buňkám xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx u xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat důkazem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

X xxxxx testu xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx běžně xxxxx, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx. Analýza xxxxxxxxx (polychromních) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx krvi xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, u xxxxxxx bylo xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx odstraňovat xxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx druh xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx numerické chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx rozlišovat xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx přítomnost xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxx XXX x mikrojádru. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx zralých xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, že xx xxxxxxx xxxxxxx xx dobu minimálně xxxx xxxxx.

Xxxxx xx vivo mikronukleus xxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx reparace XXX, x když xxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx druhy, xxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx je také xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx byl xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xx vitro.

Existují-li xxxxxxx o xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx metabolit xx xxxxxx tkáně nedostane, xxxx použití xxxxxx xxxxx xxxxxx.

1.2 DEFINICE

Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxx dělení xxxx xxxxxx dělícího xxxxxxxx xxxxxxxxxx organizovaný xxxxx dceřiných chromozómů x pólům xxxxxxxxx xxxxx.

Mikrojádro (mikronukleus): xxxx jádra oddělená xx jádra xxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx opožďujícími xx xxxxxxxxx chromozómů xxxx celými xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxx, jemuž chybějí xxxxxxxx a jenž xx xx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx lze xxxxxxx xx zralých, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pomocí barviva xxxxxxxxxxxx xxx ribozómy.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx dřeň, xxxxxxx xx ve xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, kostní xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx (1-7). Xxxxx xx používá xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xx xxxxxx xxxx xx působení xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx, jež se xxxxxx (4) (8) (9) (10). V xxxxxxxxxxxxx, xx kterých xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, musí xxx xxxx od xxxxxxxx xxxxxxxx do zpracování xxxxx co xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx přítomnost xxxxxxxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx druhu

Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx dřeň, doporučují xx jako pokusná xxxxxxx myši xxxx xxxxxxx; xxxx však xxx xxxxxx xxxx xxxxxx savčí xxxx. Xxxxxxx-xx xx periferní xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx. Xxx ovšem xxxxxx xxxxxxxxx vhodný xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx, že xx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx nebo xx x xxx xxxx xxxxxxxxx dostatečná xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx mladých xxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by při xxxxxxxx xxxxxx měly xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % průměrné xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jsou uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.

Xxxxxxx xx měla xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx označí x xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxx xx zvířata aklimatizují x laboratorních xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx minimalizovaly případné xxxxx xxxx, jak x xxx jsou xxxxx xxxxxxxx.

1.4.1.4 Příprava xxxxx

Je-li xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x je-li xx možné, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx ředí. Xx třeba používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx neovlivní.

1.4.2 Xxxxxxxx testu

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx / vehikulum x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx je to xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx použito xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Kontroly

Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

U xxxxxxxxxxx kontrol xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx in xxxx xxx dávkách, kdy xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvýšení xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx volí xxx, xxx byly xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx xx možné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x vzorek xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, je xxxxx používat xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx látek vhodných xxx pozitivní xxxxxxxx:

Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx	62-50-0	200-536-7
X-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx	759-73-9	212-072-2
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx měly xx být xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zpracování, pokud xxxxxx k dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxx x xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx zvířaty. Aplikuje-li xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx jeden xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx dobou xxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxx xx třeba xxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx existují xxxxxxxxxx xxxx publikované xxxxx prokazující, že xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrola xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxxx v xxxxx krátkodobých xxxxxx x xxxxxxxxx krvi (xxxx. 1 - 3 xxxxx), xxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx a xxxxxxx xxxxxx

X každé xxxxxxxxxxxxxx a kontrolní xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx pět xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (11). Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx druhu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx prokazující, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx pohlaví xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, jak xx xxxx například x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx xx xxxx xx zvířatech odpovídajícího xxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx rozvrh (xxxx. xxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxx x 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxx použít delší xxxxxxxxx schémata, pokud xx x daném xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx tak xxxxxx, až xx xxxxxxx toxicita, xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x podávání xxxxxxxxxxx xx do xxxx xxxxxx vzorků. Xxxxx xx jedná x objemnou xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, může xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxx xxxxx xx xxx podané x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Xxxx xx xxxx provádět xxxxx xxxxxxx:

(a) Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx látkou působí xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxx xx odeberou xxxxxxxxx xxxxxxx, poprvé xx xxxxx xxx xx 24 hodinách x celkově ne xxxxxxx než xx 48 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx vzorky xxxxxxxx xxxxx xxx xx 24 hodinách, xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx minimálně dvakrát, xxxxxx xx xxxxx xxx xx 36 xxxxxxxx od xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, celkově xxxx nikoli déle xxx 72 hodiny. Xxxxx xx v xxxxxxxx xxxxxxx intervalu xxxxxx pozitivní odpověď, xxxx již xxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

(x) Xxxxx se xxxxx xxxxxx dvakrát nebo xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xxx xxxx xxxx xxxxx ve 24xxxxxxxxxx intervalech), odeberou xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx 18 x 24 hodinami xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxxxx periferní xxxx xxxxxx mezi 36 x 48 hodinami xx xxxxxxxxx podání xxxxx (12).

Je-li xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.5.3 Dávkování

Xxxxxxx-xx xx studie xx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx třeba xx xxxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx živočišného xxxxx, xxxxx, pohlaví x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (13). Xxx zjištění xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx nízké, xxxx xxxxxx. Pro xxxxxxxx xxxxxx interval xxxxxx vzorků xx xxx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky toxicity, xx xxx vyšších xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxx xxxx letální. Xxxxx, xxx v xxxxxxx netoxických dávkách xxxxxxxx xxxxxxxxxxx biologickou xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxx xxxx mitogeny, xxxxx představovat výjimky x těchto xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxxxx xx případu. Xxxxxxxx dávka xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x určitým xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (např. xxxxxx xxxxxx nezralých xxxxxxxxxx x celkového xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxx).

1.5.4 Limitní xxxx

Xxxxxxxx test xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 mg/kg hmotnosti x xxxxx xxxxx xxxx xx dvou xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxxxxx xx na základě xxxxx x látkách x podobnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx tří xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx za den xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx při době xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx humánní expozice xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x limitním xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.5.5 Xxxxxxxx látky

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx kapaliny, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx injekcí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx velikosti pokusného xxxxxxx x nemá xxxxxxxxx 2 ml/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx žíravých xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx účinky, xx xxxxx upravit xxxxxxxxxxx látky xxx, xxx xxxxx byl xx xxxxx dávkových xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxx dřeně / xxxx

Xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx tibie xxxxxxxx xx xxxxxxxx zvířete. Xxxxxx způsobem xx xxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx, buňky xx xxxxxxx a obarví xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx se získává x xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxx. Krevní xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (8) (9) (10), xxxx xx zhotoví xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx obarví. Použitím xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro XXX (xxxx. akridinové xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 s xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx barviva, xxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx. Tato xxxxxx xxxxxxxxx, že xx xx xxxxxx použít xxxxx xxxxxxx (např. Xxxxxx). Xxx xxxxxx x další xxxxxxx - například xxxxxx xx sloupcem celulózy x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx (16) - xxxxx xxxx xxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx analýzu mikrojader.

1.5.7 Xxxxxxx

U každého xxxxxxx xx stanoví xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x celkového xxxxx xxxxxxxxxx (nezralé + xxxxx). X tomuto xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx minimálně 200 xxxxxxxxxx x x xxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxx minimálně 1000 xxxxxxxxxx (17). Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) xx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. X každého xxxxxxx xx vyhodnocuje xxxxxxxxx 2000 nezralých erytrocytů x zaznamená se xxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx informace xxx získat xxx, xx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zralých xxxxxxxxxxxx. Při analýze xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 20 % xxxxxxx x kontrole. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx nebo xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx vyhodnotit x minimálně 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx. Možnou xxxxxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (analýza xxxxxx x průtoková xxxxxxxxxxxx analýza - xxxx xxxxxxxxx), pokud xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx.

2. ÚDAJE

2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX

Údaje x xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx všech xxxxxxxxxx. Xxxxx byl xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx čtyř xxxxx xxxx xxxx, xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (pokud xxxx xxxxxxxxxx). Podíl xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z celkového xxxxx erytrocytů x xxxxxxxx procento xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx se xxxxx xxx každého xxxxxxx. Xxxxxx-xx žádné xxxxxxx x xxx, xx xxx pohlaví xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxx za xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislý xxxxxx počtu xxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx x xxxxxxxxxx xx skupině x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx třeba uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (18) (19). Statistická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx systému xxxxxxxx xx nemutagenní.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx jednoznačně pozitivní xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx případech xxxx nelze xx xxxxxxxxx souboru dát xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx chromozómového xxxxxxxxx xxxx poškození xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Je xxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx bude xxxxxx používána, nebo xxxxx specifickou xxxxxxx xxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx toxicita).

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

Xxxxxx o průběhu xxxxxx

Xx xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx známa.

Xxxxxxx xxxxxxx:

- použitý xxxxxxxxx druh/kmen,

- xxxxx, xxx a xxxxxxx jedinců,

- xxxxx, xxxxxx podmínky, xxxxxx xxxx.,

- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) kontroly,

- údaje ze xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedena,

- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,

- xxxxxxxxxx xxxxx podávání,

- xxxxxxxx xxxxxx x ověření, xx xx xxxxx xxxxxxx xx celkového oběhu xxxx xx cílové xxxxx,

- případný xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx hmotnosti),

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,

- xxxxxx měření xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx jako pozitivní, xxxxxxxxx nebo nejednoznačná.

Xxxxxxxx:

- známky xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x celkovému počtu xxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx zvlášť,

- xxxxxxxx počet ± xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx skupinu,

- xxxxx xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy x metody,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx x historických negativních xxxxxxx,

- xxxxx xx souběžných pozitivních xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

B.13/14. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXX XXXXXX U XXXXXXXX

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx mutací kmeny Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (auxotrofní xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx) a xxxxx Escherichia coli (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx genové xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx delece xxxxxxx nebo několika xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mutací xxxxxxx x xxx, xx xx zjišťují mutace, xxxxx xxxxxx vracejí xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx kmenu xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx funkční xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx aminokyselinu. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx detekována xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx za xxxxxxxxxxxxx aminokyseliny, xxxxxx xxxxxxxx mateřský zkušební xxxx.

Xxxxxx xxxxxx xxxx u člověka xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxx mutace x onkogenech x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx zvířat xxxx xxx xxxxxx nádorů. Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx jsou citlivější xxx xxxxxxx mutací, xxxxxx xxxxxxxxx sekvencí XXX x místech xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx posílení xxxxxxxx xxxxxxx reparace XXX, xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kmenů xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx užitečné xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx bakteriální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx velmi xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x různých xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Test xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Escherichia xxxx slouží xx xxxxxxxx mutací x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx aminokyselině (histidinu xxxx. xxxxxxxxxx), xxx xxxxx ke xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xx dodávce aminokyseliny xxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x XXX. Při xxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx xx místě xxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Frameshift xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mutace) xxxx xxxxx, xxx způsobují xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxx x XXX, xxxx se xxxx xxxxx xxxxx x XXX.

1.3 XXXXXXX XXXXX

V xxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx liší v xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx XXX. Xxxxx in xxxxx xxxxxx xxxxxxxx exogenní xxxxx xxxxxxxxxxx aktivace. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx ovšem xxxxxxxx dokonale xxxxxxxx xxxxx podmínky in xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx přímé informace x xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx potenci dané xxxxx x organismech xxxxx.

Bakteriální xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx používá xxxx xxxxxxx xxxxxxxx genotoxické xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx vyvolávající genové xxxxxx. Xxxxxx rozsáhlé xxxxxxxx se xxxxxxxxx, xx xxxxx chemikálie, xxxxx xxxx v xxxxx testu pozitivní, xxxxxxxx také x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx ovšem x příklady mutagenních xxxxx, xxx xx xxxxx testem neodhalí; xxxxxxx xxxxxx nedostatku xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxx vyhodnocovaných xxxxxxx, xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx straně xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx reverzní xxxxxx zvyšují, xxxxx xxxx x tomu, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Bakteriální xxxx xxxxxxxxxx mutací xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx některé xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxx, o xxxxx xx předpokládá xxxx xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx replikační xxxxxx xxxxxxx buněk (například xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx); x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxx, jež xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx karcinogenní xxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx; xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx karcinogeny, xxxxx tímto xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx, negenotoxickým xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx neprobíhá.

1.4 XXXXXXX XXXXXX

Suspenze bakteriálních xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx "plate xxxxxxxxxxxxx" xx suspenze xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx na xxxxx x minimální xxxxxx půdou. Při xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx agarem a xx potom xx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxx xxxx metodách xx xxx až xxx xxx po inkubaci xxxxxxxxxxx xxxxxxx spočítají x výsledek xx xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx provedení xxxxx. X nich xxxxxxxxxxx xxxx klasická misková xxxxxx ["xxxxx xxxxxxxxxxxxx"] (1) (2) (3) (4), xxxxxxxxxxxx metoda (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx metoda (9) (10) x suspenzní xxxxxx (11). Jsou xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx (12).

Xxxxxxx popsané x xxxxx xxxxxx xx týkají xxxxxx xxxxxx plate xxxxxxxxxxxxx x metody xxxxxxxxxxxx. Xxx tyto xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx xx. Xxxxxxx xxxxx xx detekují xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxx, kam xxxxxxx xxxxxxxxxx nitrosaminy x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx kovy, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx alkaloidy, alylové xxxxxxxxxx a nitrosloučeniny (3). Také xxxx xxxxxxxx, že existují xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx neodhalí. Na xx je xxxxx xxxxxxxx xxxx xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", k xxxxxxx detekci je xxxxx použít jiných xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxxx" (xxxxx s příklady xxxxxxx, které xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx): azobarviva x diazosloučeniny (3) (5) (6) (13), xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx od xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.5. XXXXX XXXXXX

1.5.1 Xxxxxxxx

1.5.1.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stacionárního xxxxxx xxxxx (xxxxxx 10⁹ xxxxx/xx). Xxxxxxx v xxxxxxx stacionárním xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx, xxx kultury xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx titr xxxxxxxxxxxxxxx bakterií. Xxxx xx xx xxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx růstových křivek, xxxx v jednotlivých xxxxxxx xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 37^xX.

Použije xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx budou xxxxxxxxx xxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx (XX 1535; TA 1537 xxxx XX97x xxxx 1X97; XX98; x XX100); x nichž xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx mají xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx GC x je xxxxx, xx xxxxxxxx detekovat xxxxxx oxidační xxxxxxxx, xxxxx vyvolávající xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx X. coli XX2 xxxx X. xxxxxxxxxxx XX102 (19), xxxxx mají na xxxxxxxxx reverzním xxxxx xxx xxxx XX. Xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx:

- X. xxxxxxxxxxx XX1535 x

- X. xxxxxxxxxxx XX1537 xxxx TA97 xxxx XX97x a

- X. xxxxxxxxxxx XX98 x

- X. xxxxxxxxxxx XX100 x

- X. coli XX2 xxxX xxxx X. coli WP2 xxxX (xXX101) xxxx X. xxxxxxxxxxx TA102.

X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx XX102 xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx E. xxxx (xxxx. X. xxxx WP2 xxxx X. coli WP2 (xXX101)).

Xx třeba xxxxxx zavedených xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx. Pro každý xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx závislost xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx (histidin x xxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx X. xxxx). Xxxxxxx xx xxxxx zkontrolovat x xxxxx xxxxxxxxxxx charakteristiky, x to: xxxxxxxxxx xx nepřítomnost X-xxxxxx xxxxxxxx xxx, kde xx xxxxxxxx x xxxxx (xxxx. rezistence xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx XX98, XX100 x TA97a nebo XX97, XX2 uvrA (xXX101) x xxxxxxxxxx xxxx ampicilinu + xxxxxxxxxxxx u xxxxx XX 102); přítomnost xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx. xxx xxxxxx x X. typhimurium pomocí xxxxxxxxxx xxxx krystalové xxxxxxx a uvrA xxxxxx u X. xxxx xxxx uvrB xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx ultrafialové xxxxxx) (2) (3). Použité xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx revertujících xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx.

1.5.1.2 Xxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxx (xxxx. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X x xxxxxxxx) x xxxxxx xxxx obsahující histidin x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx buněk (1) (2) (9).

1.5.1.3 Metabolická xxxxxxxx

Bakterie xx xxxxxxxx testované látky xxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx kofaktorem xxxxxxxxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx enzymů xxxxxxx, xxxx xx Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-naftoflavonu (18) (20) (21). Post-mitochondriální xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 a 30 % v/v xx xxxxx S9. Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xxxxx xxxxxxx xx xxxxx testované xxxxxxxxxx. X některých xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx koncentracích. X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx použít xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6) (13).

1.5.1.4 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx

Xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx připraví xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx látky xx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx přidávat xxxxx xxxx xx xxxxxxx ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx prokazují, xx xxxxxx delší xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxx testu

1.5.2.1 Xxxxxxx xxxxx (xxx 1.5.1.1.)

1.5.2.2 Xxxxxxxxxxx

Ke xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx použitého xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxxxx se x xxxxxxxx xxxxxxx.

Může xxx xxxxxx stanovit xxxxxxxx x nerozpustnost x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx dá xxxxxxx snížením počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx růstu xx pozadí xxxx xxxxxx xxxxxx přežití xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nerozpustnost xx posuzuje xxxxx xxxxxxx x konečné xxxxx xx skutečných xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x pouhým xxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx látek, xxx x xxxxxx koncentracích xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx nebo několik xxxxxxxxxxx xxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µl/misku, se xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx pěti různých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx půllogaritmickým xxxxxxxxxx (xx. √10) mezi xxxxxxxxxxxx body x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx koncentrací xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µl/misku xxxxxxxx x úvahu, xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxx podstatné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutagenních xxxxxxxx.

1.5.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx test xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kmenově specifickou xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx) xxxxxxxx, jak x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx prokazují efektivnost xxxxxx testu.

U xxxxx x metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx volí xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx kmene.

Příklady xxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:

Xxxxx	XXX	EINECS
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx	781-43-1	212-308-4
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx	57-97-6	200-359-5
xxxx[x]xxxxx	50-32-8	200-028-5
2-xxxxxxxxxxxxx	613-13-8	210-330-9
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2

Xxxxxxxxxxx xxxxx je vhodnou xxxxxxxxx kontrolou při xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:

Xxxxx	XXX	XXXXXX
Xxxxx xxxxxx	573-58-0	209-358-4

2-aminoantracen xx xxxxxxxxx jako xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx S9. Xxxxx xx 2-xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx třeba každou xxxxx X9 charakterizovat xxxx mutagenem, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx enzymy, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, dimethylbenzantracenenm.

Xxxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x testech xxx xxxxxxxxxx systému metabolické xxxxxxxx, uvádí xxxx xxxxxxx:

Látka	XXX	XXXXXX
Xxxx xxxxx	26628-22-8	247-852-1	XX 1535 x XX 100
2-xxxxxxxxxxxx	607-57-8	210-138-5	XX 98
9-xxxxxxxxxxxx	90-45-9	201-995-6	TA 1537, XX 97 a XX 97a
ICR 191	17070-45-0	241-129-4	XX 1537, XX 97 x XX 97x
xxxxx-xxxxxxxxxxxx	80-15-9	201-254-7	XX 102
xxxxxxxxx C	50-07-7	200-008-6	XX xxxX x XX 102
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx	70-25-7	200-730-1	XX2, XX2xxxX a XX2xxxX (xXX101)
4-nitrochinolin-1-oxid	56-57-5	200-281-1	XX2, XX2xxxX a XX2xxxX (xXX101)
Xxxxxxxxxxxx (XX2)	3688-53-7		xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

K xxxxxxxxx kontrole lze xxxxxx i xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx x negativní kontroly xxxxxxxxxxx z rozpouštědla xx xxxx vehikula xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx, se xxxxxxx xx xxxxx zachází xxxxxx jako xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že zvolené xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.3 POSTUP

Xxx xxxxxxxx miskové metodě (1) (2) (3) (4) bez metabolické xxxxxxxx xx obvykle xxxxx 0,05 xxxx 0,1 ml xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx kultury (xxxxxxxxxx xxxxxx 10⁸ xxxxxxxxxxxxxxx buněk) x 0,5 xx sterilního xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx aktivací xx xxxxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxxxxx aktivační xxxxx xxxxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) x 2,0 ml xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx /xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx zkumavky xx xxxxxxx x xxxxxx na xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xx nechá xxxx xxxxxxxx ztuhnout.

Xxx xxxxxxxxxxxx metodě (2) (3) (5) (6) xx testovaná xxxxx / xxxxxxxxx roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (obsahujícím xxxxxx 10⁸ xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem (0,5 xx) xxxxxxx xx xxxx 20 min xxxx xxxx xxx 30 - 37 ^xX; xxxxx xx xxxxx x vrchním xxxxxx x nalije xx misku x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 ml xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,1 xx xxxxxxxx a 0,5 xx xxxxx X9 xxxx sterilního xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx provzdušňují xxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx odhad xxxxxxx se pro xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xx-xx vědecky xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx nádobách (12) (14) (15) (16).

1.5.4 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxx testu se xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 ^xX pod xxxx 48 - 72 xxxxx, načež xx xxxxxxxxx revertantní xxxxxxx xx každé xxxxx.

2. ÚDAJE

2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxxx jako počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Rovněž xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx jak x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx působení, xxxx-xx xxxxxxx), tak z xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pro xxxxxxxxxx xxxxx i xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolu (xxxx. xxx xxxxxxxx rozpouštědlo) xx xxxxxx xxxxx xxx jednotlivé xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx misku včetně xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nepožaduje. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx potvrdit xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx se potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx zvážit xxxxxxxxxx studijních xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxx posuzovaných xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx koncentracemi, xxxxxx působení ("xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xxxx preinkubace x xxxxxxx prostředí) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx xxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx revertantních xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx více xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx jednoho xxxxx x metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxx xxx (23). Xxxx první se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (24), statistická významnost xx však xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx látka, xxxxx výsledky xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx x tomto xxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.

Většina experimentů xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, x xxxx xx xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx bakteriálního xxxxx xx reverzní xxxxxx ukazují, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx typu xxxxxxxxxx xxxx nebo posuzovaných xxxxxx x xxxxxx Xxxxxxxxxx typhimurium xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx mutagenní.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.

Xxxxx:

- použité xxxxx,

- počet xxxxx x xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxx (x xx nebo μl) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx,

-typ a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx),

- xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx).

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- vztah xxxxx-xxxxxxx, xx-xx to xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Závěry.

X.15. XXXXXX XXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx užity xxx xxxxxx produkce genových xxxxxx xxxxxxxxxxxx chemickými xxxxxxx xxx a x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxx využívány xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, jako xx míra xxxxxx xxxxxx x červených, xxxxxx vyžadující xxxxxx (xxx-1, xxx-2) xx xxxxxxx, xxxxxx vyžadující xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx systémy, jako xx indukce xxxxxxxxxx xx canavaninu a xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx systém xxxxxxxx xxxxxxx haploidního xxxxx XV 185-14 X x xxxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 2-1, xxx 4-17, xxx 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx xxxx vratné xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. XX185-14X xxxx xxxxxx xxx 1-7 xxxxxx, xxxxxxxx mutaci, revertovanou xxxxxxxx mutacemi x xxxxxx xxxxx x xxxxxx hom 3-10, xxxxx xx revertován xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X xxxxxxxxxxx kmenů X. xxxxxxxxxx je jediným xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X₇, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxx 1-92.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Roztoky xxxxxxxxxxx xxxxx x kontrol xxxx xxx připraveny xxxxx xxxx testováním xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx nemá xxxx roztok xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % v organických xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx (DMSO). Finální xxxxxxxxxxx vehikula xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx životnost x xxxxxxxxxxxxxxx růstu.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxx exponovány xxxxxxxxxx látkám jak x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx užívaným systémem xx postmitochondriální xxxxxx xxxxxxxxxx z jater xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx indukujících xxxxxx x doplněná kofaktory. Xxxxx xxxxxx druhů, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakcí xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx metabolickou xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Testovací xxxxx

Haploidní xxxx XX 158-14X x xxxxxxxxx xxxx D7 xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx xxx rovněž xxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx užívána xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx specifickou xxxxxxx xxxxx mají být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx

Má být xxxxxxx nejméně 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx redukovat přežití xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx relativně xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx po xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx určena případ xx xxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxx 28 xx 30 ^xX xx xxx.

1.2.2.6 Frekvence xxxxxxxxxxx mutací

Frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx má xxx x xxxxxxx akceptovaných xxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx

Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx 3-10 x xxxxxx mutační xxxxxxxxx xxxx být počet xxxxx zvýšen, xxx xxxx získány xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Ovlivnění xxxxx X. cerevisiae xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx x tekutém xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxx stacionární xxxx xxxxxxxx xxxxx. Základní xxxxxx mají xxx xxxxxxxxx na rostoucích xxxxxxx: 1-5 x 10⁷ buněk/ml je xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. při 28 xx 30 ^xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xx xxxxxxx x průběhu xxxxxxxxx, pokud xx xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx přežívající xxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, má xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xx stacionární xxxx. Xxxxxxxx xx první xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx mají být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx kolonií, počet xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Údaje xxxx xxx xxxxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx informace o:

- xxxxxxxxx xxxxxxx,

- podmínkách testu: xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx médií, teplota x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxx vlastního xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxx, přežívajících xxxxx x frekvenci mutací, xxxxxx xxxxx x xxxxxx, pokud xx xx xxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae může xxx xxxxxxxxxx mezi xxxx (obecněji xxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx) a xxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx produkty, xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxxxxx genová xxxxxxxx. Překřížení xx xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx základě xxxxxx xxxxxxxxxxxxx revertant vzniklých x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxx xxx různé xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx detekci mitotické xxxxxx konverse xxxx X₄ (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 2 x xxx 5), X₇ (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 5), XX₃₄ (xxxxxxxxxxxxxx x arg 4) x XX1 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4 x xxx 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx produkující xxxxxxx a růžové xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x X₅ xxxx X₇ (xxxxx xxxxxx xxxx mitotickou xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx x xxx 1-92). Xxx xxxxx xxxx heteroalelické xxx xxxxxxxxxxxxxx alely xxx 2.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx těsně před xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx vehikula. X xxxxxxxxxxx látek xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, aceton xxxx dimetylsulfoxid (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx významně xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx aktivace

Xxxxx mají být xxxxxxxxx působení xxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xxxxxxxxxx užívaným xxxxxxxx xx postmitochondriální xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx indikujících enzymy x xxxxxxxx kofaktory. Xxxxx xxxxxx druhů, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx rovněž vhodné xxx metabolickou aktivaci.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Testovací xxxxx

Nejužívanější xxxx xxxxxxxxx xxxxx X₄, X₅, X₇ a XX1. Xxxxx xxxxxx xxxxx může xxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx

Xxxxxxxxxxxx kultivační xxxxx xxxx užívána pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk x frekvenci xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly

Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxxxxx současně. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látky.

1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx

Má xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxx brán xxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nesmí xxx xxxx na xxxxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxx xxxxx xxxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx redukovat xxxxxxx pod 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx nerozpustné xxxx xxx xxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, ve xxxx xxxxxxxxx, xx určena xxxxxx xx případu.

Xxxxx mohou být xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx, nebo xxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. Xxxxxxx xxxxxxxxxx ovlivňované xxxx být xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx tvorbu xxxx, xxxxxxx přítomnost xxxx znehodnocuje.

1.2.2.5 Podmínky xxxxxxxx

Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xx tmě xx xxxxx xx xxxx xxx xxx 28 - 30 ^xX. Xxxxx použité xxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx 4 ^xX) xx xxxxx 1 - 2 xxx xxxx xxxxxxxxx, xxx se xxxxx utvořit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx

Xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.7 Počet xxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx koncentraci x testu xxxxxxxxxxxxx xxxxx tvořených xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxx určení xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx překřížením xx být počet xxxxx zvýšen, xxx xxxx xxxxxxxx dostatečného xxxxx xxxxxxx.

1.2.2.8 Xxxxxx

Xxxxxxxxx X. cerevisiae xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxx test x xxxxxxx prostředí x xxxxxxxx buď xxxxxxxxxxx, xxxx rostoucí xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx mají xxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx buňkách. 1-5 x 10⁷ xxxxx/xx xx vystaveno xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 h. xxx 28 xx 30 ^xX xx xxxxxxx. Odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému xx xxxxxxx v xxxxxxx ovlivnění, pokud xx xx xxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Po inkubaci xxxx xxxxxxxx přežívající xxxxx x xxxxx x indukcí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx pokus xxxxxxxxx, xx být xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Jestliže xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx potvrzen xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx experimentem.

2. XXXXX

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Výsledky mají xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx experimentu.

Údaje xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:

- použité xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx: buňky xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- podmínky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx ovlivnění, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- počet xxxxxxx, xxxxx rekombinant, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx dávky x xxxxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx dat,

- diskusi xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.17. MUTAGENITA - XXXX XXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX XXXXXXX XX XXXXX

1. XXXXXX

Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 476, Xx Vitro Xxxxxxxxx Xxxx Xxxx Xxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxx xxxxxxxx xxxxxx in vitro xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vyvolaných xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxx linie xxxxx xxxx lymfomové xxxxx X5178X, linie XXX, XXX-XX52 x X79 xxxxx čínského xxxxxx x xxxxxx lymfoblastoidní xxxxx TK6 (1). X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx xxxx konečný xxxxxxxxx xxxxx zjišťují xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (XX) x hypoxanthin-guanin fosforibosyltransferáze (XXXX) x v xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxx mutací x XX, XXXX x XXXX xx xxxxxxxx xxxxx spektra xxxxxxxxxxx xxxx. Autosomální xxxxxxxxxx XX a XXXX xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (např. xxxxx delece), xxxxx xx xx xxxxxx XXXX chromozomů X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).

X xxxxx na xxxxxx xxxxxx v savčích xxxxxxx xx xxxxx xx xxxx použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Při xxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxx růstové xxxxxxxxxx xxxx kultury x xxxxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx obecně xxxxxxxx xxxxxxxx zdroj metabolické xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedokáže xxxxxxxx savčí podmínky xx xxxx dokonale. Xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, za xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vlastní xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx nejsou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx x důsledku xxxxx pH, osmolality xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (7).

Xxxxx test se xxxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxxxxx savčích xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx x tomto xxxxx xxxxxxxxx, xxxx savčími xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx však xxxxxxxx korelace xxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx korelace xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, protože xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, který v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nepůsobí (6).

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx mutace: xxxxxx xxxxxx výchozího xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xx změně xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kódovaného xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx: xxxxx způsobující xxxxxxxxxx jednoho xxxx xxxxxxxx páru xxxx x XXX.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx posunové xxxxxx): xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx párů xxxx x DNA.

Doba xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxx, během xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx genové xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx: počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx počtem živých xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: xxxxxx počtu xxxxx x čase v xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; vypočítává xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx efficiency (x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxx).

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxx nárůst xxxxx xxxxx xxxxx období xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx efficiency) xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxxx xx miskách x selekčních podmínkách xx období exprese.

Přežití: xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) ovlivněných buněk xxxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xx konci xxxxxxxx xxxxx; vyjadřuje xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX METODY

Buňky, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx (XX) x důsledku xxxxxx XX^+/- → XX^-/-, xxxx xxxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx trifluorthymidinu (TFT). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx XXX xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx metabolismu x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx TFT xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx mutovan xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx thymidinkinázu, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx HPRT xxxx XXXX selekčně xxxxxxxxxxx xxxx 6-thioguaninu (TG) xxxx 8-xxxxxxxxxx (XX). Xxxxx xx xxxxxx xxxx nebo sloučenina xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx každé xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x mutacemi x bez xxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxxxxx strukturně příbuzné xx selekčním činidlem, xx xxxxx xxxxxxxx, xx xx selekční xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).

Xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx kultuře se xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x kultivují xx xx stanovení xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx výběrem xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Cytotoxicita xx xxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx (přežití) (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx relativního xxxxxxxxx nárůstu xxxxxx xx působení látky. Xxxxxxx xx ponechají x xxxxxxxx médiu xx dostatečnou xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx x xxx xxxxx, aby xxxxx xxxxx x co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx stanoví xxxxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx činidlo xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, ke xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (životnosti). Xx xxxxxx xxxxxxxxx době xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x počtu xxxxxxx xxxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Příprava

1.4.1.1 Xxxxx

Xx se xxxxxx xxxx řada xxxxxxxxx xxxx, včetně xxxxxxxx xxxxx X5171X, XXX, XXX-XX52, X79 x XX6. X xxxxxxxxx typů používaných x xxxxx testu xxxx xxx prokázaná xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, vysoká xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) x stabilní xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. U xxxxx xx kontroluje, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; infikované buňky xx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxx xx xxxxx naplánovat xxx, aby měl xxxxxxxx citlivost a xxxxxxxxxxx (xxxxx). Xxxxx xxxxx, počet xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx těmto xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (14). Minimální počet xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx expozici a xxxxxxx xx v xxxxxxxxxxxx stadiích xxxxx, xx dán frekvencí xxxxxxxxxxx xxxxxx. Obecným xxxxxxxx je, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx desetinásobkem xxxxxxxxxx xxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx použít xxxxxxx 10⁶ xxxxx. Xxxx xx být x xxxxxxxxx adekvátní xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xx prokázala xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.4.1.2 Média x xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx vhodná xxxxxxxxxx média x xxxxxxxxx podmínky (xxxxxxxxxx xxxxxx, koncentraci CO₂, xxxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx xx xxx xxxx xxxx podle xxxxxxxxxx systému x xxxx xxxxx. Zvláště xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zajišťovaly xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx expresní xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx nemutovaných xxxxx xxxxxx kolonie.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxx xx zásobních xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 ^xX. Před provedením xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx dříve xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx buňky xx xxxxxxxxxx látkou xxxxxx x xxxxxxxxxxx i x nepřítomnosti vhodného xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) připravená x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).

Konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce x xxxxx činí xxxxxxx 1 - 10% x/x. Aktivita xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému xxxx xxxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx případech xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakci v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxxxxx aktivace mohou xxx xxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx enzymy. Výběr xxxxxxxxx linií xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx P450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).

1.4.1.5 Xxxxxxxx testované látky

Je-li xxxxxxxxx látka x xxxxxx stavu, xxxxx xx před xxxxxxxxx xx buňky xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx třeba používat xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx narušovat přežívání xxxxx a xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxx rozpouštědlo xxxx xxx podpořeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxxxx xxx, xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx rozpouštědla xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx organické xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx dá odstranit xxxxxxxxxxxx sítem.

1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxx, xxx xx uvažují xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x hlavním xxxxxxxxxxx, přičemž se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx buněk, xxxx xx xxxxxxxxx klonovací xxxxxxxx (přežití) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a rozpustnost x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx čtyři xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x cytotoxicitě, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od maximální xx nízké xxxx xxxxxx xxxxxxxx. To xxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx hodnotami 2 x √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx koncentrace x xxxxxxxxxxxx, měla xx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (relativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x 10-20 %, xx xxxx xxxx xxx 10 %. X relativně netoxických xxxxx by xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx měla xxx nejnižší x xxxxxx 5 xx/xx, 5 μx/xx x 1,01 X.

X relativně xxxxxxxxxxxxx látek, jež xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx, při xxxxx xx již xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx použitá xxxxxxxxxxx vyšší, xxx xx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx s testovanou xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx konci xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx expozice x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, S9, xxxx xxx. xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x prostým xxxx. Xxxxxxxxx nesmí xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.4.2.3 Kontroly

V rámci xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx) xxxxxxxx, a xx xxx s metabolickou xxxxxxxx, tak xxx xx. Xxxxx se xxxxxxxx metabolická aktivace, xxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivaci x xxxxxxxx mutagenního xxxxxx. Xxxx látkami pro xxxxxxxxx xxxxxxxx patří xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxx	Xxxxx	Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxxxxx
Xx	XXXX	xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx	62-50-0 759-73-9	200-536-7 212-072-2
	XX (xxxx x xxxxx xxxxxxx)	xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	66-27-3	200-625-0
	XXXX	xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx	62-50-0 759-73-9	200-536-7 212-072-2
Xxx	XXXX	3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx	56-49-5 62-75-9 57-97-6	200-276-4 200-549-8 200-359-5
	XX (xxxx x xxxxx kolonie)	cyklofosfamid monohydrát xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx	50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5	200-015-4

				200-028-5 200-276-5
	XXXX	X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx koncentrace X-9)	62-75-9	200-549-8
		xxxxx[x]xxxxx	50-32-8	200-028-5

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx použít x xxxx vhodné xxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x 5-brom-2'-deoxyuridinu (XXX 59-14-3, číslo XXXXXX 200-415-9), lze xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Tam, kde xx xx xxxxx, xx vhodné použít xxx pozitivní kontrolu xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx skupiny.

Pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx rozpouštědlo xxxx vehikulum x xxxxxxxxxxx médiu, xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx kultury. Mimoto xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx kontrolu xxx xxxxxxxxxxx ovlivnění, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx nevykazuje žádné xxx buňky nepříznivé xx mutagenní xxxxxx.

1.4.3 Xxxxxx

1.4.3.1 Expozice xxxxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací, xxx xxx ní. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx (obvykle xx xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xxxx přesáhnout jeden xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx používají xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx. Používá-li xx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx zajistil xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolou (rozpouštědlem/vehikulem) xx používají xxxxxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx uplatnit x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx uzavřených kultivačních xxxxx (21, 22).

1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx promyjí x xxxxxxxxx xx stanovení xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx - cloning xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx časový xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (HPRT x XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, XX xxxxxxxxx 2 xxx). Xxxxx se pěstují x xxxxx x x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Po xxxxxxxx doby exprese xx xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx (používané x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx x xxxxx X5178X XX⁺/^- xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xx xxxxxxxxxxx x pozitivních xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxx xxxxxxx i xx studiích x XX6XX⁺/^-.

2. XXXXX

2.1 Zpracování xxxxxxxx

Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, počty xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx pozitivní xxxxxx x xxxxx X5178XX⁺/^- xx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxx xxxxxx x velkých xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (nejvyšší pozitivní xxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxx x pozitivní kontrole. Xxxxxxxxxxx a cytogenetické xxxxxxxxxx velkých i xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx xxxxx XX⁺/^- xx xxxxxxx hodnotí xxxxx xxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxx) x xxxxxxxx xxxxx (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx nejrozsáhlejší xxxxxxxxx poškození, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx. Rozmezí xxxxxx xxxxxxxxx obvykle xxxx xx xxxxxx xxxxxx genu po xxxxxxxxxxxx viditelné xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tvorba xxxxxx xxxxxxx je asociována x xxxxxxxx látkám xxxxxxxxxxx hrubé xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (26). Méně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx podobnou xxxxxxxxx xxxx buňky rodičovské x vytvářejí velké xxxxxxx.

Xx třeba uvádět xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Mutační frekvence xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxx se individuální xxxxx x kultivačních xxxxxxxxxx; nakonec xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx formě.

Verifikace xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx potvrdit xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvážit modifikaci xxxxxxxxx xxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx podmínek. K xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx v experimentu xxxxxxxxxxx, xxxxx rozdíly xxxx xxxxxxxxxxxx koncentracemi x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Ke stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislý xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody. Xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx neměla být xxxxxxx xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jejímž xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x tomto xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx výsledky, x ojedinělých případech xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o aktivitě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.

Pozitivní výsledky xxxxx na xxxxxx xxxxxx x savčích xxxxxxx in xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx. Nejprůkaznější xx xxxxxxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxx dávka - xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx mutace.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx xxxxx uvést xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx známa.

Buňky:

- xxx x zdroj buněk,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx počet xxxxxx,

- xxxxxxxx metody kultivace xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x xxxxx kultur, xxxxxx xxxx. údajů x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx k dispozici,

- xxxxxxx média, koncentrace XX₂,

- koncentrace xxxxxxxxx xxxxx,

- objem xxxxxxxx x přidané testované xxxxx,

- xxxxxxxxx teplota,

- xxxx xxxxxxxx,

-xxxx xxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxx xxxxx působení látky,

- xxx x složení xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx)

- xxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx,

- definice xxxxxxx, x xxxxx xx hodnotí xxxxxxxx x typ (včetně xxxxxxxxxx kritérií pro xxxxxxxxxxx mezi "xxxxxx" x "xxxxxxx" koloniemi).

Výsledky:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx x xX a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx, jsou-li xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx, minimálně pro xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- případné xxxxxxxx xxxxxxxxxx zjistit xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx X5178X XX⁺/^-,

- xxxxx xxxxx - xxxxxx, je-li to xxxxx,

- statistické xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- souběžné xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

B.18. POŠKOZENÍ XXX REPARACE - XXXXXXXXXXX XXXXXXX XXX - XXXXX BUŇKY XX VITRO

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (UDS) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xx inkorporaci xxxxxxxxx tymidínu (³X-XxX) xx DNA xxxxxxx xxxxx, xxxxx nejsou x X xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx ³X-XxX xx stanoven xxxxxxxxxxxxxxxxx nebo kapalnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx (LSC) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. XXX xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xx xxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Další xxxxxx xx xxxxxxx jenom xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx potkaních xxxxxxxxxx, xxxxxxxx lymfocytů xxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx).

Xxxxx jsou exponovány xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxx kultur

Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx bod xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx autoradiografii x xxxxx kultur (xxxx xxxx, xx-xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxx XXX XXX.

1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly

X každém xxxxxxxxxxx xxxx xxx současně xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx i x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Jako pozitivní xxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx hepatocyty použít 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-XXXX) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx xxx pro autoradiografii, xxx x pro XXX bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx lze použít 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-NQO). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xxxx xxx použito xxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xx xxxx špatně rozpustné xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx až xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx rozpustné xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx určuje xxxxxx xx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxx

Xxx udržování xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx růstové xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂, teplota x xxxxxxx. Stabilizované xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx přítomnosti Xxxxxxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx aktivace

Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx a xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému.

1.2.3 Xxxxxxx experiment

1.2.3.1 Příprava xxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx nebo setřepáním xxxxx x povrchu xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xx xx kultivačních xxxxx ve xxxxxx xxxxxxx x inkubuje xxx 37 ^xX.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx potkaních xxxxxxxxxx xx připravují xxx, xx xx xxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx vhodné xxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Čerstvě xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx obsahujícím ³X-XxX po vhodnou xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx film), xxxxxxxxxx, vyvolána, xxxxxxxx x vyhodnocena.

Stabilizované xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx

Autoradiografické xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ³X-XxX. Xxxx xxxxxxxx je xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx systému a xx xxxx xxxxx. X xxxxxxxxx nejvyššího xxxxxxx XXX xx xxxxx ³X-XxX xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx expozici. Xxxxx xxxx těmito xxxxxxx xx ovlivněn xxxxxx interakcí xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a ³X-XxX. K xxxxxxxx xxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxxxx replikací XXX xx užívá xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxx nebo xxxxxxxx hydroxyurey xx xxxxxxxxxxxx média, xxx xxxxxxx inhibici semikonzervativní xxxxxxxxx XXX.

Xxxxxxxxx XXX xxxxxx LSC: Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx buněk xx S-fáze, xxx xxxx shora xxxxxxx. Xxxxx jsou pak xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce, xxx bylo xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xx XXX xxxxxxxxxxx z xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx XXX x určen xxxxxx xxxxxxxxxxx ³X-XxX.

Jestliže xxxx xxxxxxx ve xxxxx uvedených xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx kulturách xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX zbytečná.

1.2.4 Xxxxxxx

1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx

Xxx xxxxxxxxxxxxx UDS v xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x X-xxxx xxxxxxxxx. Hodnotí xx xxxxxxx 50 xxxxx x každém xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx zakódovat xxxx xxxxxxxxxxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxxxx xxxx. Množství xxxxxxxxxxxxxxx ³X-XxX x xxxxxxxxxx xx xxxx x xxxx x velikosti xxx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx hodnocené xxxxx.

1.2.4.2 Vyhodnocení XXX

Xxx stanovení XXX XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxx.

Výsledky xxxx xxx potvrzeny x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xxxx xxx uvedeny x xxxxxxxxx.

2.1 Vyhodnocení xxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx inkorporace ³X-XxX xx cytoplazmy x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx jádro xx zaznamenávají odděleně.

Xxxxxx xxxxxxxxxxx ³X-XxX xx xxxxxxxxxx x xxxxx zrn x xxxxx je hodnocen xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxx.

2.2 Vyhodnocení XXX

Xxxxxxxxxxx ³X-XxX xx xxxxxxxxxxx xxxx xxx/μx DNA. Xxxxxxxx xxxxxxx dpm/μg DNA xxxxx xx směrodatnou xxxxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Údaje se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxxxxxx buňkách, jejich xxxxxxx a xxxxx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx kultury, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx použitých x xxxxxxxxx xxxxxxx, médiu, xxxxxxx, koncentraci XX₂,

- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx výběru x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx schématu,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx autoradiografických metodách,

- xxxxxxxxx blokování xxxxxx xxxxx xx X-xxxx,

- postup xxxxxxxxx x extrakci XXX x k xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XXX xxx metodě XXX,

- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li xx xxxxx,

- statistickým xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- interpretaci xxxxxxxx.

X.19. SCE - XXXXXX SESTERSKÝCH XXXXXXXXX XX XXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

XXX xx krátkodobý xxxx xxx xxxxxxx recipročních xxxxx DNA xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x identických (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx spojení, xxx je xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx základě xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx SCE xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatid. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (BrdU) do xxxxxxxxxxxxx XXX xx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx buňky xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x přítomnosti i xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx to xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx BrdU. Xx xxxxx kultivace xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (např. xxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxx x x-xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx (xxxxxx lymfocyty) xxxx xxxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx křečka). Buněčné xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x hlediska xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx a kultivační xxxxxxxx (xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO₂ x xxxxxxx).

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxx XXX.

Xxxxx se xxxxxxxx testované xxxxx x přítomnosti x xxx přítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Připouští xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx s vnitřní (xxxxxxx) metabolickou aktivitou, xxxxxxxx úroveň a xxxxxxxxxx této xxxxxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx chemických xxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx

Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxx účinkem a xxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Dále musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít:

- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx

- xxxxxxx působící mutageny: xxxxxxxxxxxxx

Je-li třeba, xx xxxxx zařadit xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx mít signifikantní xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx replikaci buněk. Xx xxxx relativně xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx za použití xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xx xxxx rozpustné xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.3 Popis postupu

1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx ze xxxxxxx xxxxxxx (trypsinací nebo xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx se do xxxxxxxxxxxx nádob ve xxxxxx hustotě a xxxxxxxx xxx 37 ^xX. Pro xxxxxxxxxxxx kultury se xxxxxxx takový počet xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx než z 50 % konfluentní xxxxxx. Lze také xxxxxx suspenzních xxxxxx. Xxxxxx lymfocytární kultury xx připraví x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 ^oC.

1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx růstu po xxxxxxx xxxx. Ve xxxxxxx xxxxxxx stačí xxxxx xx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xx dva xxxxxxx xxxxx, xx-xx xx třeba. Xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx být exponovány xxxxxxxxxx látkou x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na xxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx z xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx x růstovém xxxxx x XxxX xxx xxxxxxxxxx cykly. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx buňky xxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx a XxxX po xxxx xxxx buněčných xxxxx.

Xxxxxx lymfocytární xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx x semisynchronizovaných podmínkách.

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx kultury x XxxX xx třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxx xx světle xxxxxxxxx žárovky, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX, ve které xx xxxxxxxxxxxxx XxxX.

1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xx xxxxx hodiny xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx kultur xxxxx inhibitor xxxxxxxx xxxxxxxx (např. kolchicín). Xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx SCE může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. fluorescenční xxxx Giemsa).

1.2.3.5 Xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx frekvenci XXX x xxxxxxxx. Obvykle xx xxxxxxx nejméně 25 xxxxx rozprostřených xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X lidských xxxxxxxxxxx se analyzují xxxxx xxxxxxxx x 46 xxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, které xx xxxx x ± 2 centromery od xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx x nezávislých experimentech.

2. XXXXX

Údaje se xxxxxxxxxxxx tabulkovou formou. Xxxxxxxxxxx se xxxxx XXX v každé xxxxxxxx a počet XXX/xxxxxxxxx zvlášť pro xxxxxx metafázi x xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx.

Údaje se xxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Zpráva o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, koncentraci XX₂, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, kultivačních xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx x jeho xxxxxxxxxxx i xxxx xxxxx působení, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxx kultur xxx každý experimentální xxx,

- způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx preparátů,

- počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (odděleně pro xxxxxx xxxxxxx),

- xxxxxxxxx počtu XXX/xxxxx x XXX/xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx),

- kritériích xxxxxxxxx XXX,

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx dávka/účinek, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.20. XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX VÁZANÉ XX POHLAVÍ X XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxxx letální mutace xxxxxx na xxxxxxx (XXXX) xx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx, xxx x malých xxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxx hmyzu. Xx xx test xx xxxxxxx mutace vhodný xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx chromozómu X. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxx 80 % všech xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přibližně 1/5 xxxxxx haploidního genomu.

Xxxxxx x X-xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx nesoucích xxxxxxxx gen. Xxxx xx mutace letální x hemizygotním xxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxx jednoho ze xxxx xxxx samčích xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. XXXX test xx výhodný xxxxxxxx x zvláštnímu xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx definované xxxxxx linie a xxxxxx xxxxx Muller-5. Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx vhodné xxxxx popsané xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx.

1.2.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle (xxxx. xxxx etanolu x Xxxxxx-60 nebo 80), xxxx xxxxxxxx xx xxxx ředí xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx dimetylsulfoxid (XXXX) xxxx xxxxxxxx.

1.2.1.3 Počet xxxxxx

Test xx xxxxxx xxxxxxx citlivost. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx je třeba xxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Xxxxxx aplikace

Xxxxxxxx testované látce xx xxxxxxxxxxx xxx xx, xxxxxxxx nebo xxxxxxxx plynům nebo xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx XxXx x xxxxxxxx se do xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

X xxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx historické xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx experimentu xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.1.6 Dávkování

Xxxxxxxxx se xxx xxxxx testované xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx dávka xxxxxxxxx xx maximální xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Netoxické xxxxx se xxxxxxx x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxx xxxx (xx xxxxx 3-5 xxx) jsou ovlivněni xxxxxxxxxx látkou x xxxxxxxxxxxx kříženi x xxxxxxxxxx samicemi z xxxxx Xxxxxx-5 xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Samice xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xx xxx xxx, aby xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X potomků xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x účinkem xxxxxxxxx látky x xxxx expozice na xxxxx spermie, na xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Heterozygotní X₁ xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx křížení xxxx dále xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (tj. xxxxx xxxxxx/xxxxxxxx) se xxxxx xxxxxx. X X₂ xxxxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx zaznamenávána xxxxxxx samců divokého xxxx. Xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx X₁ xxxxxx nesoucí letální xxxxxx x rodičovském X-xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxx samci x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), dcery xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx genotypem jsou xxxx xxxxxxxxx, xxx xx zjistilo, zda xxxxxxxx xx xxxxxxx x dalších xxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx tabulky. Xxxxx xx xxxxx hodnocených X-xxxxxxxxxx, xxxxx afertilních xxxxx x počet xxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxx každou xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx křížení a xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx clusterů xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx potvrdit v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Nahromadění xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mutací xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxx x xxxxx x zhodnoceno vhodným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx o:

- xxxxxxxxx liniích xxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxxxxxx X₂ kultur, xxxxx X₂ kultur xxx xxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk,

- xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxx xxxxx ovlivňování x schéma xxxxxx xxxxxx, výše xxxxx, xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx kontroly,

- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, xx-xx xx možné,

- xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.21. XXXX XXXXXXXXXXXX SAVČÍCH BUNĚK - XX XXXXX

1. METODA

1.1 Xxxxxxx metody

Savčí xxxxx lze xxxxxx xxx xxxxxxx fenotypických xxxx xx vitro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx X3X10X1/2, 3T3, XXX, Xxxxxxxxxxxx potkanů x xxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxx x uchycení x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Méně xx používají systémy xxxxxxxxxx ostatní fyziologické xx morfologické xxxxx x xxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx výsledek in xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Některé xxxxxxx jsou schopné xxxxxxx promotorů. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxx zjištěna xxxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) nebo ovlivněním xxxxxxxxx růstu xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xx nelze xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x prodloužení xxxxxxxx nebo x xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Buňky

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx linií x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxx zajistit, xx buňky xxxxxxx x testu transformace xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx expozici xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx je ověřen x xx je xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx.

1.2.1.2 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx podmínky xxxx xxx xxxxxx pro xxxxxxx test xxxxxxxxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxxxxxx látky

Xxxxxxxxx xxxxx xx rozpouštějí xxxx suspendují v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx koncentrace rozpouštědla x xxxxxxx nesmí xxxxxxxx životnost xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx metabolickou xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx vhodné pro xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Do xxxxxxx experimentu xxxx xxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxx přímo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Musí být xxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx (x rozpouštědlem).

Xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxx xxxxxxxx látky: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,

- xxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: 2-acetylaminofluoren, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Je-li xxxxx, xx xxxxx zařadit xxxxx pozitivní xxxxxxxx xx stejné chemické xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx látka.

1.2.2.2 Koncentrace

Xxxxxxx se nejméně xxx xxxxx. Tyto xxxxxxxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx koncentraci, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nízkou xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx koncentraci xx xxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx stejné xxxx x negativní xxxxxxxx. Xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx postupů. Nejvyšší xxxxxxx koncentrace xx xxxx rozpustné xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Buňky xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx závislou xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Ta xxxx xxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx (xx. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivační xxxxx), jestliže xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxx vlastní xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na xxxxx xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaná xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx za vhodných xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Všechny xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.

2. ÚDAJE

Údaje xxxx xxx prezentovány x xxxxxxxxx formě. Xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx úrovně x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx počet transformací xx počet přežívajících xxxxx. Data je xxxxx zpracovat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, xxxxxxxxx o:

- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultury, počtu xxxxxx,

- kultivačních xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxx inkubace, xxxxxxxxxxxx, kultivačních nádobách, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx během expozice, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx fenotypu, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx xx vhodné), xxxxxxxxxx xxxxxx koncentrací,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a transformovaných xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.22. DOMINANTNÍ XXXXXXX XXXX U XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip metody

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx způsobuje xxxxxxxxxxx xxxx fetální xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx chemické látce xxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx, xx dominantní xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chromozómů (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Smrt embrya xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx také xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinku.

Xxxxx xxxx exponováni xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx x neovlivněnými, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Vzestup xxxxxxx xxxxxxxxxx xx samičku x exponované xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx implantací xx xxxxxx v xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx letalita xx součet xxx- x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx srovnání xxxxxx xxxxxxxxxx na samici x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx zánikem xxxxx (x.x. xxxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxx).

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx vodě xx xxxx nebo suspendují xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxx aplikace

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx podává xxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx látku xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxx x xxxx xxxxxxx aplikace.

1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxx. Xxxxxx, xxxxxxxx dospělá xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x kontrolní skupiny.

1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx

Xx třeba použít xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx se xxxx xxxxxx zjištěnou xxxxxxxx xxxxxxxxxx a silou xxxxxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx samců, aby xx xxxxxxx 30 - 50 březích xxxxx xx připouštěcí xxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Pozitivní x xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) kontroly xxxx xxx zařazeny xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx laboratoř x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivních xxxxxxx x xxxxxxxxx experimentů, xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xx vhodných, xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. MMS, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 mg.kg^-1).

1.2.2.5 Xxxxxxxxx

Nejčastěji xx xxxxxxxxx tři dávkové xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xx vyvolávat známky xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx u exponovaných xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2.2.6 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x jedné dávce 5 g.kg^-1 nebo x xxxxx 1 x.xx^-1.xxx^-1 při xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jednorázová xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx.

Jeden xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x jednou xxxx xxxxx neovlivněnými, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx aplikaci xxxxx. Samičky xxxx xxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx či xxxxxxxxx zátka.

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx expozici.

Samice xxxx xxxxxxxx cervikální xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx mrtvých x xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx vyšetřeny x xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx x xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx x počtu xxxxxxxxxxxx samic jsou xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxx uváděny xxxxxxxxxx. Xxxxx samice xxxx xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, o xxxxx xxxxxx xxxxx, x xxxxx živých x mrtvých xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx celkového xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

V xxxxxxx xxxx xxx xxxxx odlišeny xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx mohou xxx xxxxxxxxxx jako rozdíl xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx a počtem xxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxx xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx na xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxxx.

Údaje xxxx xxxxxxxxxxx vhodnými statistickými xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxx, xxxxx, xxxx a xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xx každého xxxxxxx x exponovaných x kontrolních skupinách,

- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x důvodech xxxxxx xxxxxx, negativních x xxxxxxxxxxx kontrolách, údajích x xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx xxxxx/xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.23. ANALÝZA XXXXXXXXXXXXXX ABERACÍ V XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 483, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx způsobující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané chemickými xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx k xxxxxxxx chromozómového typu xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx není xxxxxx x xxxxxxx numerických xxxxxxx x běžně xx k xxxxxx xxxxx nepoužívá. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxx u xxxxxxx xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Tímto xxxxxx se analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mutací v xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

K xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx testem xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx spermatogonií. Xxxx xxxxxx nepoužívá xxxx xxxxxx xxxxx.

Xxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx, xx třeba xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, dříve xxx xx poškození xxxxxx x xxxxxxxxxxxx buněčném xxxxxx. Xxxxx informace x ovlivněných xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx analýzou xxxxxxxxxxx chromozómů, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu x xxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx ve xxxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx xx xxxx xx xxxxx xx zjišťování, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x somatických xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx test xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mutagenity xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, farmakokinetiky x xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX.

X xxxxxx xx xxxxxxxx řada xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx širokým xxxxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx tedy xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx spermatogonií, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pak xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxx xxxxx pro xxxx xxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx se projevuje xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx obou xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx vyjádřená jako xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx stejném xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)

Zlom xxxxxxxxxx: jako xxxx xxx hodnotit xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxx xx struktuře xxxxxxxxxx xx větší, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx v případech, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (nebo xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx jedna xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómu xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.

Xxx: achromatická xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x minimálním xxxxxxxxx chromatid.

Numerická xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx haploidního xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx diploidní počet xxxx (3n, 4x xxx.).

Strukturální xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroskopickou analýzou xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, a xxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Zvířata xx xxxxxxx způsobem xxxxxxxx testované látce x xx xxxxxxx xxxx po xxxxxxxx xx xxxxxx. Před xxxxxxxxx xx xx xx působí xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). Xx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x po xxxxxxxx se x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.4 XXXXX METODY

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxx samci xxxxxxxx xxxxxx a myší, xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx jiného xxxxxxxx savčího druhu. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx

Všeobecné xxxxxxxx xxxxx xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx B.

Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Zdraví xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx a xx xxxx xxxxxxxxx xxxx dní xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, aby se xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, jak a xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx

Xx-xx testovaná xxxxx x xxxxxx xxxxx x xx-xx to xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx zvířatům xxxxxxxx nebo se xxxxxxxx její xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx podávat xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. xx xxxxx xxxxxxxx čerstvé xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx skladování xx xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx vyvolávat toxické xxxxxx a nesmí x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx nepříliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x kompatibilitě x testovanou látkou. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx testu xx xxxxx xxx xxxxx pohlaví xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xx spermatogoniích xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné xxxxxxx nad xxxxxxxxx xxxxxx.

Dávky xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx tak, xxx xxxx účinky xxxxxx, xxx xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx totožnost zakódovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx kontrolu xx možné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx odebírat x xxxxxx časovém xxxxxxxxx. Xxx je xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx	XXX	XXXXXX
cyklofosfamid	50-18-0	200-015-4
monohydrát xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxx	108-91-8	203-629-0
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxx monomer	79-06-1	201-173-7
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx xxxxxxxx ovlivněné xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zpracování, xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx x neovlivněných xxxxxxx, ledaže existují xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxx mutagenní xxxxxx.

1.5 POSTUP

1.5.1 Počet x xxxxxxx zvířat

X xxxxx xxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx podává xxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx dvou dávkách. Xxxxx xx xxxxx x objemnou xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxx, xx. xx xxx xxxxx za den xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx hodin. Xxxxxx režimy xxxxxxxxx xxxxxx být vědecky xxxxxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xx expozici xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx odběr xxxxxx 24 x 48 hodin po xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx (tj. xxxx xxxxx nejvyšší) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx xxxx xx 1,5násobku xxxxx buněčného xxxxx xx expozici, xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx interval xxx xxxxxxx účinku (6).

Xxxxx xxxx xxxxx xxx použity xxxx xxxxxx intervaly odběru xxxxxx. Xxxx. jedná-li xx o látku xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómů xxxxx xxxxxx, nebo xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxxx na X-xxxx xxxxx, xxxx vhodnější xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (1).

Zda xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx posuzuje xxxxxx xx xxxxxxx. Pokud xx xxxxxxx aplikace xxxxx xxxxxxxxx, usmrcují xx zvířata xx 24 xxxxxxxx (1,5xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) od xxxxxxxx xxxxxxxx. Odběry xxx xxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx xx xx xx xxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® nebo xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx x xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3-5 xxxxx, x čínských xxxxxx xxxxxx 4-5 xxxxx.

1.5.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx-xx xx studie ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, kmene x xxxxxxxxx xxxxxx, jaké xx použijí x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx časový interval xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx toxicity x xxxxxxxx nízké xxxx xxxxxx. Pro xxxxxxxx xxx odběru xxxxxx xx pak xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, že xxx xxxxxxx dávkách xx xxxxxxx režimu xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.

Xxxxx, jež x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx hormony xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx být také xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx známkám xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx (např. xxxxxx poměru mitóz xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxx meiotické xxxxxxxx( xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 50 %).

1.5.4 Xxxxxxx xxxx

Jestliže xxxx při xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x jedné xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x jeden xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky a xxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nemusí xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx tří xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx může xxxxxx x limitním xxxxx xxxxx xxxxx.

1.5.5 Aplikace xxxxx

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx žaludeční sondou, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Maximální xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx najednou vpravit, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx dávky musí xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx látek, jež xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, aby xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx úrovních xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx

Okamžitě xx xxxxxxxx xxxxxxx xx z jednoho xxxx z xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a fixuje xx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx nakape na xxxxxxxx xxxx x xxxxxx.

1.5.7 Xxxxxxx

X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx metafází (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx x jedné xxxxxxx). Xxxxx xxxxx xx xx xxxxxx, xx-xx počet pozorovaných xxxxxxx xxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx podílu xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx u xxxxx xxxx xxxxx počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx roven číslu 2x ± 2.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx x jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi x xxxxx aberací xx xxxxx buňku. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx jednotlivé typy xxxxxxxxxxxxxx chromozómových aberací, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx zvlášť, xxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xx do xxxxxxx xxxxxxxx aberací xxxxxxxxxx.

Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx, xxxxxxx xx u xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx mitóz xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxx meiotické xxxxxxxx, x xx xxx, že se x každého xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxxxx xx xxxxx. Je-li xxxxxxxxxxx xxxxx mitóza, xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx u xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx jedince.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se používá xxxxxxx kritérií, například xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx závislá xxxxxxxxx xxxxx x chromozómovými xxxxxxxxx, xxxx zřetelný xxxxxx počtu buněk x aberacemi xx xxxxxxx ovlivněné jednorázovou xxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Nejprve xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx možno xxxxxx statistické xxxxxx (8); statistická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivního výsledku. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx výsledky, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx nedovolují jednoznačné xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Výsledky mohou xxx xxxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxx bez xxxxxx xx počet xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Pozitivní výsledky xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové aberace xxxxxxxxxx.

Xx třeba xxxxxxxxxx, jaká je xxxxxxxxxxxxxxx, že testovaná xxxxx dosáhne xxxxxxxx xxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx tkáň (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Zpráva o xxxxxxx pokusu

Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,

- rozpustnost x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla/vehikulu, xxxxx xx xxxxx.

Pokusná xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- xxxxx x xxx xxxxxx,

-xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx apod.,

- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx na počátku xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxx xx studie xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx-xx provedena,

- xxxxxxxxxx xxxxx velikosti xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx látky,

- podrobnosti o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx převod xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (ppm) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx / xxx),

- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,

- podrobné xxxxxx podávání xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxx působení,

- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aberací,

- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx jedno xxxxx,

- kritéria, xxxxx xx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- mitotický xxxxx,

- poměr xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxx x xxxxx xxxxxxx pro každého xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx skupině,

- počet buněk x aberacemi xx xxxxx skupinu,

- xxxxx dávka - xxxxxxx, xx-xx to xxxxx,

- statistické xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,

- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Závěry.

X.24. SPOT XXXX X XXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

Xx xx xx xxxx xxxx xx xxxxxx, x xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx buňkami x xxxxxx jsou melanoblasty x cílovými xxxx xx, které kontrolují xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxx ovlivňujících xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx ztráty xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Počet potomků x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx xxxx test detekuje xxxxxxxxx xxxxxxxxx mutace x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x izotonickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx jsou xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx vhodném rozpouštědle. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx nebo vyvolávat xxxxxxx xxxxx. Používají xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx.

1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xxxxx T (nonagouti, x/x; xxxxxxxxxx, xxxx xxx, x^xx x/x^xx x; xxxxx, x/x; xxxxxx, short xxx, x xx/x se; xxxxxxx xxxxxxxx, s/s) xxxx xxxxxxx buď x kmenem XX (xxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xx x xx/xx x xx; leaden xxxxx, xx xx/ /xx xx; xxxxx xx/xx) nebo x xxxxxx X57 XX (xxxxxxxxx, x/x).

Xxxxx xxx xxxxxxx i xxxx křížení, za xxxxxxxxxxx že xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx. xxxxxxx mezi xxxxxx NMRI (xxxxxxxxx, x/x; albino, c/c) x DBA (xxxxxxxxx, x/x; xxxxx, x/x; xxxxxx x/x).

1.2.1.2 Xxxxx x xxxxxxx zvířat

Xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx živých xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx dávku. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovaných x xxxxxxxxxxx xxxx a x kontrolních xxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx xxxxx ovlivněných xxxxxxxx xxxxxx.

1.2.1.3 Negativní x pozitivní kontroly

Xxxx být použity xxxxxxxx ovlivněné pouze xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mohou xxx xxxxxxx kontrolní hodnoty x xxxx xxxxxxxxxx xx předpokladu, xx xxxx homogenní. Xxxxxxx xxxxx z pozitivních xxxxxxx získané v xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx látce xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxx testu xxxxxxx, xxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Způsob aplikace

Xxxxxxx se používá xxxxxx xxxxxxxx sondou xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx. Xx-xx xx xxxxxx, xx xxxxx použít inhalační xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx.

1.2.1.5 Dávkování

Xxxxxxxxx xx nejméně xxx xxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx xxxx zmenšení xxxxxxxxx vrhu.

1.2.2 Popis xxxxxxx

Zvířata jsou xxxxxxxx ovlivněna xxxxxxxxxx xxxxxx pouze xxxxxx 8., 9. xxxx 10. den xxxxxxxx, xxxxxxx za 1. xxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zátky. Xxxx xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 a 9.25 xxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx ovlivnění xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx.

Xxxxxxx

X xxxxxx je xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx skvrn xxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx skvrn:

(a) xxxx xxxxxx v xxxxxxx 5 mm xx xxxxxxx ventrální xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx buněk (XXXX);

(x) žluté xxxxxx typu xxxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxx mléčných xxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, axil, xxxxxxx slabin x xxxxxxxxx čela a xxxxxxxxxxx xx, xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx diferenciace (MDS);

(x) zbarvené a xxxx skvrny xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (RS).

Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx, XX, je xxxxxxxxx relevantní. Xxxxxx x xxxxxxxxx mezi XXX x RS xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx chlupů xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xx nápadné, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx potomků.

2. XXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxx uváděna jako xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x počet xxxxxx xxxxxxxx jednu xxxx více xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutacemi. Xxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx metodami. Xxxxx xxxx také xxxxxxx xxxx získané xxxxxxx xx xxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, informace x:

- xxxxx použitém xxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxx samic x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx,

- průměrné xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx při porodu x xxx xxxxxxxxx,

- dávkových xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,

- xxxxxxxx rozpouštědle,

- xx xxxxxx xxx xxxxxxxx byla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,

- x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, a jejich xxxxx s XXXX, XXX a XX x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině,

- xxxxxxx morfologických xxxxxxxxxxxx,

- vztahu xxxxx/xxxxxxx x RS, je-li xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx hodnocení,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX X MYŠÍ

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx translokace x xxxx detekuje xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx potomků. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx X-chromozómu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x XX-xxxxxx xxxxxxxx sníženou xxxxxxxxx, xxxxx se využívá xxx výběr F₁ xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx způsobena xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (X-xxxxxxx x c-t xxx). Xxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, xxxx X₁ xxxxx či xxxxxxx xxxxxxx X₁ xxxxx. Samice XX xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx x mitózách x xxxxxx xxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x izotonickém xxxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx nebo suspendovány xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx bylo xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx dávkování xxxxx, xxxxx reagovat s xxxxxxxxxx látkou xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky.

1.2.1.1 Xxxxxx aplikace

Xxxxxxxx xx xxxxxxx orálně xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx i jiné xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx měla být xxxxx xxx osm x xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se zdravá, xxxxxxxx dospělá xxxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxxx nutně xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxxx xxxxx indukovaných xxxxxxxxxxx vyžadovaném xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxx xx xxxxxxx provádí xxxxxxxx samců X₁ xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx x F₁ xxxxxxxx xx testováno x xxxxx exponované xxxxxxx. Xxxxxxxx budou xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx X₁ xxxxxxxx potomků, xxx xx xxxxxxxx 300 samců x 300 xxxxx.

1.2.1.4 Xxxxxxxxx x pozitivní kontroly

Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x předchozích xxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx pokusu x xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx efekt, xxx xxx xxxxx na xxxxxxxxxxx chování xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx dávka/odpověď je xxxxx dvou xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx nejvyšší dosažitelná xxxxx.

1.2.2 Xxxxx xxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx se xxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jedna xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx dní x xxxxx xx 35 xxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xx expozici xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x musí xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx analyzována. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx samice xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx. Xx xxxxxx xx třeba zaznamenat xxxxx, xxxxxxxx xxxx x pohlaví mláďat. Xx xxxx xxxx xxxxx i samičí xxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx zařazení xx xxxxxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxx ze xxxx xxxxxxx metod. Xxxx fertility X₁ xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx nositelů xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx X₁ xxxxxxxx bez předchozího xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

(a) Xxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx fertilita xxxxxx v X₁ xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx normální x snížené fertility xxxx být stanovena xxx každý kmen xxxxxxxxx xxxx.

Velikost xxxx: X₁ xxxxx xxxxxx x testování xxxx xxxxxxxx samostatně xx xxxxx xx xxxxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx. Klece xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 18. xxxx po xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx x pohlaví F₂ xxxxxxx xxxx zaznamenány xxx porodu, hned xxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx X₁ xxxxxx, X₂ xxxxxxx malých xxxx xxxx uchováváni pro xxxxx testy. Samice-nositelky xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxx xxxxxxx. XX-xxxxxx xxxx xxxxxx změnou xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx x 1 : 1 xx 1 : 2 samci xx. xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx normální X₁ xxxxxxx xxxxxxxx x dalšího xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx X₂ xxx dosahuje xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx zaznamenány xxxxx x xxxxx xxxx. X₁ xxxxxxx, která xxxxxxx být xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx X₂ xxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx buď analýzou xxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxxxx vrhu x xxxxxx translokací xx xxxxxxxxx smrtí xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx translokací u xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx X₁ samci xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ke 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxx ranní xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx usmrceny 14. - 16. xxx x jsou xxxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxx xxxxxxx.

(x) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Metodou xxx-xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx translokací jsou xxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx stadiu xxxxxxxxx - xxxxxxxx X x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx nejméně xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, že testované xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Jestliže xxx xxxxxxxx xxxxx no xxxxxxxx, xxxxxxx X₁ xxxxx xxxx vyšetřeni xxxxxxxxxxxxx. Na xxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 25 xxxxx v xxxxxxxxx - metafáze X. Xxxxxxx mitotických xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx se vyžaduje x xxxxx s xxxxxx testes a xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx x X₁ xxxxx suspektních XX. Xxxxxxxxxx neobvykle xxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx x 10 xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx translokační xxxxxxxxx (x-x xxx). Xxxxxxx X-xxxxxxxxxxx translokace xxxxxxxxxxx samčí xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx ve všech 10 xxxxxxxx je xxxxxxx xxx XX xxxxxx.

2. ÚDAJE

Získané xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxx xxxxx interval xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx pohlaví (xxx xxxxx).

Xxx xxxxx xxxxxxxxx F₁ xxxxxx xx uvádí průměrná xxxxxxxx vrhu kontroly x individuální xxxxxxxxx xxxx X₁ nosičů xxxxxxxxxxx. Xxx analýzu xxxxxx dělohy xx xxxxx průměrný počet xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx v kontrole x individuální počty xxxxxx a mrtvých xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx X₁ xxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x celkový xxxxx xxxxx xxx každého xxxxxx translokací.

Xxx X₁ xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxx testes x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

U XO xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx velikost xxxx, xxx xxxxx X₂ xxxxxxx x výsledky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

V xxxxxxx, že xxxxxx xxxxx fertility byly xxxxxxxxx xxxxxxx možní xxxxxxxx X₁ translokací, xx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxx informaci x skutečném počtu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxx xxx xxxxxxx xxxxx x negativních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx xx xxxxx, informace x:

- kmenu xxxx, xxxxx a xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx rodičovských xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- experimentálních xxxxxxxxxx, xxxxxxxx popis xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxx potomků xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- době x xxxxxxxxxx analýzy xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x detailní popis xxxxxx translokací xxxxxx xxxxx o xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x mikroskopické xxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx hodnocení,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.26. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXX

(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx per xx, xxxxxx na xxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Princip testovací xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx pokusu, x xxxxxxx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx, v xxxxxxxx xxxx x pitné xxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx celou xxxx pokusu xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pro usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx x xxxx xxxxx, že nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx dřívější xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata

Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx mladší xxx 6 xxxxx, v xxxxxx xxxxxxx starší xxx 8 xxxxx. Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx xx má xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx a xxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx každou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Samice musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, xx xxxxx zvýšit xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu. Mimoto xx možno podávat xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 90 xxx nejvyšší xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx podávání xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt toxických xxxxxx.

1.2.2.3 Dávkování

Je xxxxx xxxxxx nejméně xxx úrovně xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Používá-li xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, podává xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, a xx ve xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx dávka. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx příznaky toxicity. Xxxxx existují odhady xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx dávka xxxx hodnotu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx vyvolat xxx toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se více xxx 3 xxxxxx xxxxx, mají xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx xxxxxx.

Ve xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx dávky x v xxxxxxxxx xxxxxxx by počet xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxx-xx xx testovaná xxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx konstantní xxxxxxxxxxx (x ppm nebo xx.xx^-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; použitou xxxxxxxxxxx je třeba xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx sondou, xxxx xx xx xxx xxx každý den xx xxxxxxx dobu, x xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx intervalech (xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.

1.2.2.4 Limitní test

Xxxxxxx-xx se 90xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx (nebo xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, je-li xxxx xxxxx) žádné xxxxxxx xxxxxx, je možno xx xxxxxxx testování xxxxxxx. Podává-li se xxxx toxická látka x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, aby xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebránily xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické účinky, xxxxxx xxxx objevení, xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx odezní toxické xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

X xxxxxxxx případě xx zvířatům xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx dobu 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx určena x xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx.

Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Xxxxxx xxxxxxx (a xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxx xxxx) x hmotnost xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xx třeba zajistit xxxxxxxxxxx kontrolu xxxxxx, xxx pokud možno xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx jako xxxx. x důsledku kanibalismu, xxxxxxxx tkání nebo xxxxxxxx xxxxxxxx.

Po xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x výjimkou xxxxxxxxxxx xxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx utratit x xxxxxx.

X všech xxxxxx xxxxxx kontrolních xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx x na xxxxx studie nejlépe x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx zvířata.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx čas či xxxxx xxxxxxxxxx.

(c) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx xxxxxxx studie xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, metabolismus xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx druhu x kmene), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx dekarboxyláza, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, celkový xxxxxxxxx a celkové xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx xxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího spektra xxxxxx.

(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx toxicity.

Pokud xxxxxx xxxxxxxxx historická xxxxxxxxx xxxx, xx xx uvážit xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx prohlídku xxxxxxx xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx se xx xxxxxxxx po sekci xxxxx ve vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx vysychání.

Následující xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x ohledem xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx tělíska, tkáň xx místě xxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxx, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), játra, slezina, xxxxxxx, nadledviny, slinivka xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxx, žaludek, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx střevo, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx nerv, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (kost xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxx xxxxx xx xxxxx úrovních - xxxxx, střed xxxxxx a xxxxxxx, x (xxxxx xxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx posuzují x xxxxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxx postižení xxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xxxx podána xxxxxxxx xxxxx, x u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx makroskopická xxxxxxxxx.

(d) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx mají histopatologicky xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, protože xx poskytuje xxxxx xxxxxxxxxxx stavu xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx histopatologická xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx na xxxxxxxx, xx kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx.

(x) Používá-li xx xxxxxxxxx skupiny, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxx a orgánech, x kterých byly xxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx pokusu a xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x xxxx možno použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx informace:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,

- experimentální xxxxxxxx - úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx se použije) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx dávek,

- úroveň bez xxxxxx, xxxxx ji xxx stanovit,

- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,

- popis xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků,

- doba, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx další xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,

- hematologická xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,

- biochemická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx analýz xxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

B.27. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXX

(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx per xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx denně xxxxxx xx 90 xxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (nehlodavcům), x to xxxxx xxxxxxx jedna xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx zvířata xxxxx pozorují, xxx xx zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx během xxxxxx, x xxxxxxx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxx podávání x xxxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx také xxxx xxxxxxx orální xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xx celou xxxx pokusu xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx aditiva, xxxx xxx x xxxx xxxxx, že xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná historická xxxx, je možno xx využít.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxxxxx xx jako xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx i xxxxxx druhů nehlodavců. Xx třeba xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxx se má x podáváním xxxxx xx věku xx 3 do 6 xxxxxx x xx xxxxxxx než 9 měsíců. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx předběžný xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx živočišný xxxx x plemeno.

1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxx xxxxxx úroveň xxxxx použít xxxxxxx 8 zvířat (4 xxxxxx x 4 xxxxx). Xxxxx zvířat xx xxxxx pokusu xxxx být xxxxxx, xxx umožnil xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx existují odhady xxxxxxxx u xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx toxický xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, mají xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx účinky.

Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx skupině xx x xxxxxxx rovněž xxxxxx docházet.

Podává-li xx xxxx xxxxxxx xxxxx v potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

Podává-li se xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxx se xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (v xxx xxxx xx.xx^-1 potravy) xxxx konstantní xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x kapslích, xxxx xx xx xxx xxx xxxxx xxx ve xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx orální test xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx dlouhodobým xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx použít xxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Limitní xxxx

Xxxxxxx-xx 90denní xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx (xxxx xxxxx vyšší - xxxxxxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) žádné toxické xxxxxx, je xxxxx xx dalšího xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx aplikované xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zvířat.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xxxxxx dobu xxxxxxxx, xxxxxx a trvání. Xx třeba zaznamenat xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

X ideálním případě xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v xxxxx xx dobu 90 xxx. Podává-li se xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxx se xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 5 dní v xxxxx.

Pozorování xxxxxxxx (xxx není na xx xxxxxxx) xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxx vody xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxx jednou xxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx klinická xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx. Umírající xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, humánně xxxxxxx x xxxxxx.

X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx před podáváním xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx studie xxxxxxx x všech xxxxxx, ale xxxxxxx x xxxxxxxx dávky x x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, vyšetří xx xxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xx xxxxxxx xxxxx, x potom xxx v měsíčních xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx hematologické xxxxxxxxx, xxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů x xxxxx srážlivosti xxxx jako například xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.

(x) Xx xxxxxxx xxxxx, a xxxxx xxx v xxxxxxxxx intervalech nebo xxxxxxxxx x dále xx konci xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx séra) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity cholinesterázy. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx studium širšího xxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xx xxxx xxx 24 xxxxx).

(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xx provede xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx těla, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx včetně xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, štítná xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx nejdříve xx sekci zváží xx xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Následující xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx možná xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra mozku x xxxxxxx, podvěsek xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx tělíska, tkáň xx xxxxx xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, srdce, aorta, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x vaječníky, xxxxxx, (xxxxxxxx pohlavní xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx, jícen, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (samičí xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx sval), xxxxxxxxx nerv, (oči), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx) x (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - krční, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx nebo pokud xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx x tkání xx xxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx nejvyšší xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx provedena xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, nebo když xx xx xxxxxxxxxx xx základě klinických xxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx x procentuálně počet xxxxxx x jednotlivými xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x xxxx xxxxx použít kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, plemeno nebo xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x koncentrace,

- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,

- úroveň xxx účinku, pokud xx lze xxxxxxxx,

- doba xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx o přežití xxxxxx do xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (zejména klinické xxxxxx),

- doba, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- spotřeba xxxxxxx x vývoj xxxxxxx hmotnosti,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky (včetně xxxxxxxx případných xxxxxx xxxx),

- pitevní xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx xx xx možné,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.28. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXXXX

(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx metody

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 90 dní x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx podávání se xxxxxxx xxxxx pozorují, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx budou během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx srsti xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx se však xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx oholení xx xxxxxxx opakovat xxxxx xxxxx. Při xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx a x velikosti xxxxxxx xxxxxx.

Při xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxx formy, xx xxxxx xxxxxxxxx látku xxxxxxxxxx navlhčit vodou, xxxxxxxx xxxxxxx vehikulem, xxx byl zaručen xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx zpravidla aplikují xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x xxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xx xxxxx použít xxxxxxx potkany, králíky xxxx xxxxxxx, případně x xxxx zvířecí xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx musí xxx xxxxxxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx dermální xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx dlouhodobým xxxxxx, x obou xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 20 zvířat (10 xxxxx x 10 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx se zvířata xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx studie, je xxxxx xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx o xxxxx zvířat, která xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx možno xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 90 dnů nejvyšší xxxxx a během xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx podávání sledovat xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Dávkování

Je xxxxx xxxxxx nejméně xxx hladiny xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - xxxxx xx použilo xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx expozice xx xxx nejméně 6 xxxxx denně. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx mělo xxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx. X intervalech xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete. S xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx nejvyšší xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx má vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Nejnižší xxxxxxx dávky by xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx hladina xxxxx xxxx vyvolat xxx toxický xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx dávky xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx s xxxxxx x střední xxxxxxxx dávky a x kontrolní xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx nízký, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x vysoké dávkové xxxxxxx xxxx vést x omezení nebo xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. Došlo-li x xxxxxxx poškození xxxx, xx xxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxxx nutno xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxx xxxxx x nižšími koncentracemi.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Nevyvolá-li xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx^-1 xxxx xxxxx xxxxx, která xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, není xxxxx xxxxxxx nutná.

1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a zaznamenávat xxxxxxx účinky. Je xxxxx zaznamenat dobu xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx a opět xxxxxx toxické xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx x týdnu xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx dalších 28 dnů xxx xxxxxxxx, aby se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků nebo xxxxxx přetrvávání. Doba xxxxxxxx činí nejméně 6 hodin xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx představuje xxx 10 % povrchu xxxx, x xxxxxx xxxxxxxxx látek xxxx xxx tato xxxxxx xxxxx. Látkou xx xxxxx xxxxxx co xxxxxxxx xxxx pokusné xxxxxx rovnoměrně x xx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x kontaktu x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx překrýt, xxx xx mulový xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x aby xx zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx látky je xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nelze xxxxxxxxx.

Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx jiným xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.

Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.

Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx a xxxxxxx, a xxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx potravy. Xx třeba zajistit xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx xxxxxxxx zařazení. Xx skončení studie xx všechna xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Umírající xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx bolestí xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx provádějí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(a) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření oftalmoskopem xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx alespoň x xxxxxxxx dávky x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření, které xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx čas (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.

(x) Xx xxxxx pokusu xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx jater x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx hladovění xx xxxx podle xxxxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxxxxx transferáza (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx séra (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx transamináza), ornithin xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Xxxx xxxxx charakteristiky, které xxxxx xxx potřebné xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další biochemické xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

(x) Analýza xxxx xx nevyžaduje xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx xx podkladě xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx historická xxxxxxxxx xxxx, xx se xxxxxx xxxxxxxxx hematologických x biochemických xxxxxxxxx xxxxx před začátkem xxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

U xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva zahrnující xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, všech tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x břišní xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx xx co xxxxxxxx po xxxxx xxxxx ve vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx vysychání.

Následující xxxxxx x xxxxx xx třeba přechovávat xx vhodném xxxxx x xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx místě xxxxxxx, (xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, aorta, (xxxxxx xxxxx), játra, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, slinivka xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx (xx-xx přítomen), jícen, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, konečník, močový xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzliny, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), periferní xxxx, (oči), (xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx), (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, střed xxxxxx x xxxxxxx) x (xxxxx xxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx orgánem.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření normální x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx x xxxxx xx xxxxx provést x všech xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx, plíce xxxxxx xx xxxxxxxxx x nízkou x xxxxxxx dávkou se xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetřovat x zjištění xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx to xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Další xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se x zvířat xxxxxx xxxxxx xxxxxx provádět xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na tkáních x xxxxxxxx, x xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxx x procentuálně xxxxx xxxxxx x jednotlivými xxxx lézí. Xxxxxxxx xx třeba vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, krmení,

- podmínky xxxxxx,

- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxx účinku, xxxxx xx lze xxxxxxxx,

- doba xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx sledování,

- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,

- xxxxxxxx potravy x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- hematologická vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx xx to xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.29. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX - XXXXXXXXX

(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xx xxxxxxxxxx)

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Několik xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, každá xxxxxxx xxxxx koncentraci, x to xx 90 dnů. Xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v atmosféře xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Během xxxxxx pokusu xx xxxxxxx denně xxxxxxxx x zjišťují xx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx, která během xxxxxx uhynou, x xx, xxxxx přežijí xx xxxxx pokusu, xx pitvají.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Pokud xx třeba, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, xxx v xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx užije xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx jiná xxxxxxx, musí xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx data, xx xxxxx je xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Dává xx xxxxxxxx potkanům, pokud xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx tomu. Xxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxxxxx zvířatech x xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Na začátku xxxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti zvířata xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx testem, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxx a xxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 samců). Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxx budou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxx koncem xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx dobu 90 xxx xxxxxxxx koncentraci x xxxxx následujících 28 xxx po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, trvání nebo xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx nejméně xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx s vehikulem - pokud xx xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx). S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se zvířaty x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx než 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly odstupňované xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxx x střední xxxxxxxxxxx x x kontrolní xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxx expozice

Xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx xx xxxxxxxx rovnováhy xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx specifických xxxxxxxxx je možné xxxxxx i xxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.2.5 Expoziční xxxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Použije-li xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx zvířat x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x inhalačním xxxx xxxxx xx v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx přesáhnout 5 % objemu xxxx. Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx expozice minimalizují xxxxxx xxxxx jinými xxxxxxx.

1.2.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx celého období xxxxxxxx i zotavení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx objeví x xxxx xxxxxx xxxxxxx účinky.

1.2.3. Popis xxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx určena x xxxxxxxxxx pozorování, jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx aplikace, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx xxxxx experimentu xx být 22 ^xX ± 3 ^xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxx 30 % a 70 %, x xxxxxxxx případů, xxx xx není xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxx xx nepodává xxxxxxx xxx voda.

Používá xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx s vhodnou xxxxxxxxxxx kontrolou xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx potřebných xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx x celém xxxxxxxxxx xxxx xxxx stejné. Xxxxxx musí xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:

x) Měření xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).

x) Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx nemá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx o xxxx než ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx této xxxxxx xxxxxxxx není možné xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísání. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx koncentrace tak xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxx představa x xxxxxxxxx. Xxxxx expozic xx měří xxx xxxxx, xxx xx xx potřeba xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

c) Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx

x) Xxxxx xxxxxxxx a po xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx zaznamenávají; xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx protokol. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat xx příznaky xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Pozorování x xxxxx zahrnuje xxxxx kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání x krevního oběhu, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Hmotnosti xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx pravidelnou xxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chybného zařazení. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx přežila, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata je xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

U xxxxx xxxxxx včetně kontrolních xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx x na xxxxx xxxxxx xxxxxxx x všech zvířat, xxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, vyšetří xx xxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xx xxxxx pokusu xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření, které xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx trombocytů.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (trvání xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx živočišného xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x celkové bílkoviny x xxxx. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, hormonů, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx biochemické xxxxxxx mohou xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo pozorované xxxxxxxx.

Pokud xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kontrolní xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx parametrů xxxxx xxxx začátkem xxxxxxx.

1.2.3.1 Pitva

U xxxxx xxxxxx použitých xx studii se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx prohlídku povrchu xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x břišní dutiny x xxxxxx obsahu. Xxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx (mají xx xxxxxxx neporušeny, zvážit x xxxxxxx vhodným xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxx se považuje xx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx mozku x xxxxxxx, hypofýza, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx místě brzlíku, xxxxxxxxxx, srdce, aorta, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx břišní, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx (xx-xx přítomen), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx a xxxxx střevo, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, reprezentativní xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), periferní nerv, (xxx), xxxxxx xxxx x kostní dření, (xxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx ve xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx hrudní x xxxxxxx). Tkáně x xxxxxxxxx se xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx respiračního xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x tkání xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat skupiny, xxxxx xxxx exponována xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

(b) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.

(x) Plíce xxxxxx xx xxxxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx mají xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetřovat, xxxxxxx xx xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx stavu xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx na orgánech, xx kterých bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

(x) Používá-li xx satelitní skupiny, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx zjištěny xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx na počátku xxxxxx x počet xxxxxx x xxxxxx, xxx xxxx a xxxxxxxxxxxx počet xxxxxx x jednotlivými xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Je x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx informace:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení,

- xxxxxxxx xxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx vzduchu, systému xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx likvidace odpadního xxxxxxx a způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx boxu, pokud xx používán. Xxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx stability xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx o xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx a uvedou xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx obsahovat xxxx xxxxx:

a) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením,

b) xxxxxxx a vlhkost xxxxxxx,

x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),

x) xxxxxx vehikula, xxxxx bylo xxxxx,

x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,

x) xxxxxx velikostí xxxxxx (x xxxxxxxx),

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj o xxxxxxx zvířat xx xxxxx sledování,

- xxxxx toxických nebo xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, kdy byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx vývoj,

- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,

- pitevní xxxxxx,

- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.30. XXXXXXXXX XXXXXXXXX TOXICITY

1. METODIKA

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx x týdnu, vhodnou xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jedna xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx část xxxxxx zvířat. Během x po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx denně xxxxxxxxxx xx xxxxxx sledování xxxxxxx toxicity.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxx jsou chována xxx standardních xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx testu. Xxxx xxxxxx jsou xxxxxx, mladá zvířata xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2 Testovací xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx potkan. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxx). Je xxxxx xxxxxx zdravé x xxxxx jedince xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx studie xx xxxxx xxxxxx xx xxxx zvířat xxxxx xxxx než ± 20 % od xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx studii xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity, je xxxxx použít xxxxxx xxxx a xxxx x xxxx xxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví

Xxx xxxxxx úroveň xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx 40 xxxxxx (20 xxxxx x 20 samců), xxxxxx x pro xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx dokončením xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx počet xxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxx druhů zvířat (xxxxxxxxxx) xx možné xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, ale xx xxxx xxx 4 xx každého xxxxxxx xx xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxxxx expozic

Xx xxxxx xxxxxx xxxxx tři dávky x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxx xxxxxxx xxxxx projevy xxxxxxxx xxx xxxxxxxx úmrtnosti. Xxxxxxxx dávka by xxxxxx vyvolat xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx voleny xx xxxxxxxx xxxxx mezi xxxxxxxx x nízkými xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx exponována xxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx x xx měla xxxxxxx stálý přístup.

1.2.2.4 Xxxxxxxx

Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx ohledu x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx nebo použije-li xx pro xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, jehož xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxxxx aplikace

Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx a chemických xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Použití xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx technické xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx odvozena z xxxxxxxx xxxxxxxx testu x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, odvozené x xxxxxxxxxxx testů xxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxx

Tam, kde xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx z gastrointestinálního xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, jimiž může xxx xxxxxxxxx člověk, xxxx se xxxxxxxx xxxxxx aplikaci, pokud xxxxxx proti xxxx xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx pět xxx x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx vyvolat "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx v xxxxxx xxx aplikace, a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x následné xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx je považováno xx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx uvedeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x této cestě podání. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx platnou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx xx xxx dnů x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), nebo x návaznosti xx xxxxxx expozici x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx sedm xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx i xxx čištění expozičního xxxx. X obou xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx v xxx, xx x xxxxx má xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx denní xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxxx xxxxxx x xx lidské xxxxxxxx, xxxxx má xxx simulována. Nicméně, xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx obtíže. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx komplikovanější (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx aerosolu xxxx určité koncentrace xxx a technik xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx komorách, xxxxxxx konstrukce xxxxxxxx xxxxxxxxx proud pro xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx hodinu, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní x xxxxxxxxx komory xx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, tak xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxx xx brání úniku xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx v xxxxx udržení stabilní xxxxxxxxx v komoře xxxxx xxxxxx neměl xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

(x) průtok xxxxxxx: xxxxxxxx průtoku xxxxxxx komorou xx xxxx xxx nejlépe xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;

(b) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx koncentrace xxxxxxxxx látky xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx 15 % xxxxxxx xxxxxxx;

(x) xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx udržována v xxxxxxx 22 ± 2 ^oC x xxxxxxx v komorách 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x rozptýlení xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx kontrolovány průběžně;

(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx stanovena distribuce xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx komor u xxxxxxxx xxxx pevných xxxxxxxx. Aerosolové částice xx xxxx být x xxxxxxxxxxxx velikosti xxx použité testovací xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Vzorek xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx exponováno, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x když xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx částic by xxxx být xxxxxxxxx xxxxx během vývoje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x poté xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxx xxxxx xx měla xxxxx xxxxxxx 12 xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxx sledování xx xxxx xxx xxxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx pozorování xx xxxx být xxxxxxxxx denně x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx studie, xxxx. xxxxx xxxx uložení xx xxxxxxx x xxxxxx, která xxxx xxxxxxxx mrtvá a xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, která jsou xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxxx sledovat, aby xx xxxxxxxxxx zachytil xxxxxxx x progrese xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx se klinické xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x očních xxxx x xxxxx xxxxxx, x dále případy xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxx objevení x xxxxxx toxických xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx jednou xxxxx během xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx po tomto xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx spotřeby xxxxxxx (x xxxx xxx, kde je xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx x xxx přibližně ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, ledaže xx xxxxxxxxx stav xxxx změny xxxxxxx xxxx ukázaly nutnost xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Hematologická xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, celkový xxxxx erythrocytů, xxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxx být xxxxxxxxx za xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx na xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. xx 10 xxxxxxx xx pohlaví z xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx to xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxx být xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx od nehlodavců.

Xxxxx xxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, měl xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek xx xxxxxxx ve vzorcích xx xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx a x xxxxxxx. Pokud tato xxxx nebo xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx naznačí xxxxxxx, xxxxxxx xx i x skupiny s xxxxxx xxxxxxxx nižší.

1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx

Vzorky xxxx 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx analýzu xxxxx xxxxx od xxxxxxxx xxxxxx a xx stejných xxxxxxxxxxx xxxx hematologické zkoušky. Xxxxxxxxxxx stanovení xxxx xxxxxxxxx buď xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, xxxx na směsném xxxxxx xxx skupiny xxxxx xxxxx x xxxxxxx:

- xxxxxx xxxx, objem x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx- xxxxxxxxxxxxx).

1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

V xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx závěr jsou xxxxxxxx krevní vzorky xxx biochemická xxxxxx xx xxxxx nehlodavců x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx skupině, pokud xxxxx xxx tytéž xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Z těchto xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- koncentrace xxxxxxxx,

- testy xx funkci xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, aktivita xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx¹⁾, glutamát xxxxxx transaminázy²⁾, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, ornithin xxxxxxxxxxxxx,

- metabolismus xxxxxxx, např. xxxxxx xxxxxxx na xxxxx,

- testy na xxxxxx ledvin, xxxx. xxxxx močoviny v xxxx.

1) nyní xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx aspartát aminotransferáza

1.2.3.5 Xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx během xxxxxx xxxx xxxx utracena x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx vzorky krve xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Mělo xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx se xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x tkání:mozku³⁾ (xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, kory xxxxxxx), xxxxxxxx mozkového, štítné xxxxx x příštítných xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x plic, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx žláz, xxxxx³⁾, xxxxxxx, xxxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx³⁾, jícnu, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx pohlavních xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), xxxxxx x xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx konzervaci xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx plic x inhalačních xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zkoumání. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx inhalační xxxxxx, xx být xxxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx nosu, xxxxxx x xxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxxx jiná xxxxxxxx vyšetření, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxx x dispozici xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

3) tyto orgány x 10 zvířat xx xxxxxxx a xx skupinu u xxxxxxxx a xx xxxxx xxxxxxxxxx a dále xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) ze xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx

1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxx, mají xxx xxxxxxxx mikroskopicky. Xxxxx xxxx doporučeny následující xxxxxxx:

(a) mikroskopické xxxxxxxxx xxxxx uchovaných xxxxxx x tkání x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx nalezených:

1. x xxxxx xxxxxx, která uhynula xxxx xxxx utracena xxxxx xxxxxx,

2. x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx skupiny,

(x) xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx pravděpodobně způsobené xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx,

(x) tam, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx významné xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx života xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxx xxxxxxx, skupina s xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx,

(x) informace x incidenci lézí, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx v použitém xxxxx zvířat, xx xxxxxxxx laboratorních xxxxxxxxxx, xx. historické xxxxxxxxx xxxxx, jsou nezbytné xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změn xxxxxxxxxxxx x xxxxxx s xxxxxxxxxxx látkou.

2. XXXXX

Xxxxx by měly xxx sumarizovány ve xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx počet zvířat xx xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxx a procento xxxxxx vykazujících xxxxxxxxxx xxxx lézí. Xxxxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxx

Xxxxxx o xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,

- xxxxxxxx testu: xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení včetně xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro měření xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, kde xx xx žádoucí, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Údaje x expozici: ve xxxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxxx hodnot a xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx zahrnovat:

(x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením

(b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx

(x) nominální xxxxxxxxxxx (celkové množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx objemem xxxxxxx)

(x) xxxxxx vehikula, xx-xx xxxxxxx

(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx zóně

(f) xxxxxxx velikosti xxxxxx (xx-xx xx relevantní)

- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxx) a xxxxxxxxxxx

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx

- xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxx

- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxx

- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx

- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznak x xxxx xxxxx xxxxx

- data x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx

- xxxxx klinické xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx)

- xxxxxxx xxxxxx

- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

- xxxxxxx xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.31. STUDIE XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X NEHLODAVCI

1. XXXXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx metody

Testovaná xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxxx. Krátce xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxxx i x xxxxxxx je použita x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx embryo- x fetotoxicity.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxx, dospělé xxxxxx, xxxxx nikdy xxxxxx xxxxx, stejného věku x velikosti xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx laboratorních xxxxxxxxxx aspoň 5 xxx před započetím xxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxx plodností. Oplozené xxxxxx jsou náhodně xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx podávána xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx implantaci x xxxxxxxxx během xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Den xxxx termínem xxxx xxxxx vyjmuty hysterektomií x podrobeny sledování xxxxxxxxxx skeletu a xxxxxxxxx orgánů xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x krvácení do xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx, xxx, xxxxxx x xxxxxx. Preferovanými xxxxx jsou xxxxxx x králík. Xx xxxxx xxxxxxxx všeobecně xxxxxxxx kmeny. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx xxxxxx plodnost x xxxx xx xxx x xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxx jednotlivě.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Pro xxxxxx dávku xx xxxxx xxxxxx aspoň 20 xxxxxxx potkanů, xxxx nebo křečků xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx dostatečný počet xxxx x xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx vehikulu, xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx x skupinu, xxxxx bylo xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Je xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vehikula: xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx biologické vlastnosti xxxxxxxx, pak xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx u xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx, xxx už xx xxxx jak 10 % úmrtí. Xxxxx xxxxxx dávek xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinky. Střední xxxxx xx měly xxx xxxxxx xxx, xxx xxxx geometricky xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

V xxxxxxx, že xxxxx x nízkou xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx úrovních dávek.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxx je xxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zátka x/xxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxx). Doba xxxxxxxx xx měla xxxxxxxxx xxxxxx hlavní xxxxxxxxxxxx. Xx xxxx období xx xxxxx xxxxxxxxx 6. až 15. xxx x potkana x xxxx, 6. xx 14. den x xxxxxx x 6. xx 18. xxx x králíka. X xxxxxxx, že xx za xxxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo byla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx údajům xxxxx den. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx den xxxx xxxxxxxxxx porodem.

1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxxxx samicím xx testovaná látka xxxxxx denně xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx na xxxx xxxxx xx počátku xxxxxxxx látky xxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti během xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x dávka upravována xxxxx posledního vážení. Xxxxxxx xxxxxx toxicity xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Samice xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx porodu xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx makroskopicky xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx přibližně xxxxx xxx před xxxxxxx. Xxxxxxx účelem je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xx komplikacím při xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx porodu. Pozorování xxxxxx x kleci xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx kůže x xxxxx, očí x xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, autonomního x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxx na xxxxxx xxxxxxxx. Ihned xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x její obsah xxxxxxxx s ohledem xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx počet xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx je xxxxx určit dobu xxxxx xxxxxxx x xxxxxx. X potkanů x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x zaznamenat xxxx jednotlivých xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx kosterní xxxxxxxxx x zhruba xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x x zbytku xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx tkání. U xxxxxxx xx xxxxx xxxxx zárodek xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx vnitřností x skeletu.

2. XXXXX

Xxxxx je xxxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx, která zabřezla, xxxxx a xxxxxxxx xxxxxx zárodků x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx měkkých xxxxx a vztah xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx. Výsledky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.

3. XXXXXX

3.1. Xxxxxx x xxxxx

Zpráva x xxxxx xx xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx xxx každou xxxxx,

- dávka xxx účinku (xxxxx xx xxxx možno xxxxxxxx),

- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx konce xxxxx,

- údaje x tělesné hmotnosti x spotřebě xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx),

- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx/xxxxx, xxxxxxx, defekty xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),

- údaje o xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx/xxxxx xxxxx, pohlaví, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx),

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.32. XXXX XXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx cestou, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, po xxxxx xxxx života xxxxxx. Xxxxx x po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx projevů xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx podmínkách xxxxxxxx x krmení xxxxxxx xxx xxx před xxxxxxxxx testu. Xxxx xxxxxx se mladá xxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx předchozích xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Používají xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx laboratorních zvířat. Xxxxxxxx by měla xxx započata xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx by xxxxx xxx xxxxxx ve xxxx xxxxxx xxxxx xxxx než ± 20 % od xxxxxxx. V xxxxxxx, xx vlastní xxxxxx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx x xxxx studiích.

1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 samic x 50 samců) xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina. Samice xx xxxx xxx xxxxxxxxx x negravidní. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxxxx xx xxxxx zvýšit x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx před koncem xxxxxx.

1.2.3 Dávkové úrovně x xxxxxxxxx expozic

Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxx xxxxx souběžné xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxx xxxxxxx příznaky xxxxxxxxx toxicity, xxxx xx xxxxx pokles xxxxxxxx přírůstků (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx jinými účinky xxx tumory.

Nejnižší xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx neměla xxx xxxxx než 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx xxxxx stanovit xx xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx toxicity.

Xxxxxxxx se provádí xxxxxxx denně. Xx-xx xxxxx podávána x xxxxx xxxx nebo xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx x dispozici.

1.2.4 Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx ohledu x exponovanou skupinou, xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx.

Xx zvláštních xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx studie s xxxxxxxx nebo použije-li xx xxx orální xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí se xxxxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx ani vehikulu.

1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxx aplikace xxxx orální, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx fyzikálních x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pravděpodobném xxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx.

1.2.5.1 Xxxxxx studie

Xxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx z xxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, dává xx xxxxxxxx orální xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx látku x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x pitné vodě xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x týdnu, protože xxxxxxxxx pět dnů x xxxxx může xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx naopak xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx výsledky x xxxxxxxx hodnocení. Nicméně, xxxxxxxxx s xxxxxxx xx praktické xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx týdně xx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx.

1.2.5.2 Xxxxxxxx studie

Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxx xxxxx vstupu x xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx kožního xxxxxxxxx.

1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx

Protože xxxxxxxxx studie jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx zde xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx expozice obvykle xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvíře xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx denně xx pět xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), nebo v xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx po xxxx dní x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx denně xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx x pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx boxu. X obou případech xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Hlavní xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx x xxxxxx expozicí xx v xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx delším obdobím xxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx kontinuální xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx studia a xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx být xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, je xxxxx vzít x xxxxx xxxxxx technické xxxxxx. Například, výhody xxxxxxxxxxx expozice pro xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx nutnosti xxxx x krmení xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx aerosolu nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx komory

Zvířata xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jejichž xxxxxxxxxx xxxxxxxx dynamický xxxxx pro nejméně 12 výměn xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx dostatečný xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx mírný xxxxxxx x xxx se xxxxx xxxxx testované xxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Obecně xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx atmosféry x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zahrnuje:

(x) Xxxxxx vzduchu: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

(x) Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xxxxxxx x xxxxxxx: xxx hlodavce, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °C x xxxxxxx x komorách 30 - 70 % vyjma případů, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx komory. Oba xxxxxxxxx xx měly xxx kontrolovány průběžně.

(x) Měření velikosti xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové částice xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx velikosti xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx zóny xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx být xxxxxxxxxxxxxxx pro distribuci xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx suspendovanému xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx aerosolu xxxx respirabilní. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx stabilitu xxxxxxxx, x poté xxxxx xxxxxxx tak xxxxx, xxx bylo možno xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.6 Xxxxxx xxxxxx

Xxxxxx testu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx test. Test xx xxx být xxxxxxx x 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x 24 měsících x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx dobou xxxxxx xxxx. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxx být 24 xxxxxx xxx xxxx x křečky x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x nejnižší xxxxx xxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx testu, xx xxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx odpovědi, xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx. Tam, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx s xxxxxxx dávkou xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx to xxxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx skupiny xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, které xx činily xxxxxxxx. Xxx bylo xxxxx xxxxx negativní xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, kanibalismem xxxx x xxxxxxxx chyb xxxxxxx) v xxxxx xxxxxxx větší xxx 10 % x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Pozorování

Xxxxx xxxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx nervového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxx x xxxxxxx. Moribundní xxxxxxx xxxx utracena x xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx x mortalita xx xxxx xxx zaznamenány x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx tam, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x pak xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx nebo xxxxx tělesné váhy xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x aspoň jednou xx xxxxx xxxxx xx xxxxx období.

1.3.2 Klinická vyšetření

1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx

Pokud xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx o zhoršeném xxxxxxxxxx stavu zvířat xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xx 12 měsíců, xx 18 xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx zvířat. Diferenciál xxxxxx krvinek se xxxxxxx xx xxxxxxxx xx zvířat ve xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx, xxxxxxx údaje xxxxxxx před xxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx i x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx.

1.3.2.2 Xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, včetně xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu xxxx xxxx utracena, protože xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx léze, xxxxx xx xxxxx xxx tumory, xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx a tkáně xx xxxx xxx xxxxxxxx xx vhodných xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx histopatologické vyšetření: xxxxx (včetně řezů xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x příštítná xxxxxxx, xxxx thymu, xxxxxxx a xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, děloha, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, kůže, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, ileum, slepé xxxxxx, xxxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, svalovina xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx s xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx úrovních (xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x bederní) a xxx.

Naplnění plic x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx x inhalačních xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx včetně nosní xxxxxx, hltanu a xxxxxx.

1.3.2.3 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x s xxxxxxx xxxxxx.

(x) Všechny xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx jako xxxxxx, xx vyšetří xxxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx.

(c) Xx-xx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx lézí xxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx skupinou, histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x daném orgánu xx xxxxx x x xxxxxxx skupinách.

(x) Xx-xx přežití xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx u xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxxxxx zkoumána x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx dávkou.

(x) Je-li xx xxxxxxx s vysokou xxxxxx doklad o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mohly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxxx ve xxxxx tabulek, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx s tumory xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx hodnotí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxx

Xxxxxx x xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, kmen, zdroj, xxxxxxxx ustájení, xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx: Xxxxx expozičního xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxx. Dále xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x expozici: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:

(x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,

(x) xxxxxxxxx koncentrace (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx děleno xxxxxxx xxxxxxx),

(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,

(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně,

(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (tam kde xx relevantní),

- xxxxxxx úrovně (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxx podle xxxxxxx, xxxxx x xxxx xxxxxx,

- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx zda xxxxxxx přežila až xx xxxxx,

- xxxxxx toxických xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- doba, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x jeho xxxxx xxxxx,

- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x tělesné xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,

- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- statistické zpracování xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.33. KOMBINOVANÝ XXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXXX

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx látky u xxxxxxxxx xxxxx savců xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxx xx xxxx karcinogenity xxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Dávka použitá xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxx než xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Zvířata x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jak xx obecnou toxicitu, xxx na karcinogenní xxxxxxx. Zvířata v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx dní x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx skupinu, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Během x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx pozorována xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity x xxxxxx tumorů.

1.2 Popis xxxxxx

Zvířata xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx zdravá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolních x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx druhem xx potkan. Xx xxxxxxx předchozích xxxxxx xx xxxxx použít x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx x nehlodavce). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx zvířata x xxxxx xxxxxxxxx kmenů xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx rozdíl xx váze zvířat xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx předchází xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx druh x xxxx x xxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Počet x xxxxxxx

Pro xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 zvířat (50 xxxxx x 50 xxxxx) xx xxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx kontrolní skupina. Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxxxx xx xxxxx x počet zvířat, xxxxx budou xxxxx xxxxxxxx před koncem xxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jiné, xxx xxxx tumory, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx 20 zvířat xxx každé pohlaví, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxx test xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx tři dávkové xxxxxx kromě xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxx by xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx dožití xxxxxx jinými účinky xxx xxxxxx. Nejnižší xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x délkou xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx dávku/dávky xx třeba xxxxxxxx xx středním xxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxxxxx úrovní xx xx xxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx.

Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx skupiny x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx látka xxxxxxxx x pitné xxxx xxxx přimíšena xx xxxxxxx, xxxx xx xxx stále x xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxx

Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx.

Ve xxxxxxxxxx případech, xxxx xxxx xxxxxxxxx studie x aerosoly nebo xxxxxxx-xx xx pro xxxxxx aplikaci xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupina, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.5 Xxxxxx aplikace

Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x inhalační. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx expozice x xxxxxxx.

1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx

Tam, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx z gastrointestinálního xxxxxx a xx-xx xxxxxx xxxxx z xxxx, jimiž xxxx xxx xxxxxxxxx člověk, xxxx xx přednost xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx důvody. Xxxxxxx xxxxx dostat xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx nebo xxxxxxx x tobolce.

Xxxxxxx xx se xxxx xxxxx podávat xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx pět xxx x xxxxx xxxx vést x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x období xxx aplikace, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, především s xxxxxxx xx praktické xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.

1.2.5.2 Dermální xxxxxx

Xxxxxxxx xxxxx xx kůži může xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx hlavní xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxx modelový xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.5.3 Inhalační xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx podrobněji xxxxxxxxx x xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být platnou xxxxxxxxxxxx x specifických xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx napodobují předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), nebo x xxxxxxxxxx xx xxxxxx expozici x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), s přibližně xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. V xxxx xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, xx x xxxxx má zvíře 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x ještě xxxxxx xxxxxxx xxxxx víkendu.

Xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxxx studie x na xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx třeba xxxx x xxxxx určité xxxxxxxxx obtíže. Xxxxxxxxx xxxxxx kontinuální expozice xxx simulaci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx narušeny nutností xxxx x krmení xxxxx expozice x xxxxxxxx komplikovanější (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx aerosolu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx komory

Xxxxxxx se exponují x inhalačních xxxxxxxx, xxxxxxx konstrukce zaručuje xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx přísun xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx srovnatelné xx xxxxx aspektech vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx úniku xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Komory xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaných zvířat. Xxxxxx by v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x komoře xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

(x) xxxxxx vzduchu: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx nejlépe kontrolována xxxxxxxxxxx,

(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx neměla xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,

(x) xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, teplota xx xxxx xxx xxxxxxxxx x rozmezí 22 ± 2 °C x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

(d) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx velikosti částic x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Vzorek xxxxxxx xx měl xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xx zvíře exponováno, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx část xxxxxxxx xxxx respirabilní. Xxxxxxx velikosti xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx často xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, xxx zajistila stabilitu xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx tak xxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.6 Xxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx karcinogenity xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx. Xxxx by měl xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x 24 xxxxxxxx x potkanů. Xxxxxxx xxx některé xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx resp. x nízkým spontánním xxxxxxxx xxxxxx, doba xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 xxxxxx xxx myši x xxxxxx x 30 xxxxxx xxx potkany. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx studie xx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nebo x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx testu, xx xxxxxx xx xxxxxxxx sexuální xxxxxx xxxxxxxx, každé xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx uhyne xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x vysokou xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx to xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx ostatní xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx použitelných xxxxx (autolýzou, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx obsluhy) v xxxxx skupině xxxxx xxx 10 % x xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx u xxxx a křečků x x 24 xxxxxxxx x potkanů.

Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxx aspoň 12 xxxxxx. U xxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx utracení xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx patologie, která xx xxxxx k xxxxxxxxx látce, xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx stárnutí.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, jakož x xxxxxxxxx, oběhového, autonomního x centrálního xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování.

X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx) xx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx kontrola zvířat xx nutná, aby xx zabránilo xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxx x xxxxxxx. Moribundní xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxxx příznaky xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x mortalita xx zaznamenávají x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxxx vývoji tumorů: xxxx xxxxxxxx, lokalizace, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx viditelného xx hmatného xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Je xxxxx provádět měření xxxxxxxx potravy (x xxxx xxx, xxx xx testovaná xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x pak xxxxxxxxx xx tříměsíčních xxxxxxxxxxx, xxxxxx by xxxxxxxxx xxxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx frekvence xxxxxxxxx.

Xxxxxxx hmotnosti xx xxxxxxxxxxxxx individuálně x všech zvířat xxxxxx týdně xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx testu x xxxxx jednou za xxxxx xxxxx po xxxxx xxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. obsah xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx bílých krvinek, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx měření xxxxxxxxxxx) xx měla být xxxxxxxxx xx tři xxxxxx, šest xxxxxx x xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xx pohlaví x xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx xx xx xxxxx, vzorky xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx od xxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx svědčí x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx krvinek xx xxxxxxx ve xxxxxxxx ze xxxxxx xx skupině x xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx nebo xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx se xxxxxxx x u xxxxxxx x dávkou xxxxxxxx nižší, než xx xxxxxx dávka.

1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx pokud xxxxx xx xxxxxxxx zvířat x xx stejných xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx stanovení xxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx nebo xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x pohlaví:

- xxxxxx xxxx, objem x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx zvířat,

- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (semi-kvantitativně),

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).

1.3.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech a xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx měření xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx tytéž xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx. Xx nehlodavců xx xxxxx toho xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. X těchto xxxxxx je připravena xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- koncentrace xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxx jater (xxxx. aktivita bázické xxxxxxxxx, xxxxxxxx glutamát xxxxxxx xxxxxxxxxxxx¹⁾, xxxxxxxx xxxxxx transaminázy²⁾, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx,

- testy na xxxxxx xxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxx v xxxx.

1) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx aminotransferáza

2) xxxx známá xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

1.3.2.4 Makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Kompletní pitva xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu xxxx xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx viditelné léze, xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx. Xxxx xx xxx provedeno porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx nálezy.

Všechny xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. To se xxxxxxx xxxx následujících xxxxxx x tkání: xxxxx³⁾ (prodloužené xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx žlázy x xxxxxxxxxxx tělísek, xxxxx, xxxxxxx a xxxx, xxxxx, aorty, xxxxxxxx xxxx, jater³⁾, xxxxxxx, xxxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx³⁾, xxxxx, xxxxxxx, dvanácterníku, jejuna, xxxx, xxxxxxx střeva, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, lymfatických xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx žlázy, kůže, xxxxxxxxx, periferního nervu, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), sterna x xxxxxx dření x stehenní kosti xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx xxxx x močového xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxxxx tkání; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je zásadní xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxx. Ve speciálních xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxx studován xxxx xxxxxxxxxx xxxxx včetně xxxx, xxxxxx x xxxxxx.

Byla-li xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx vyšetření, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx by xxxx být k xxxxxxxxx xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx, protože xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

3) Xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx pohlaví x na xxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxx.

1.3.2.5 Histopatologie

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou x satelitní xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxxxxx nevyšší xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látkou, xxxxxxx xx histologicky xxxxxx xxxxxx xxxxx ostatních xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin x ze všech xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx ukončení.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx:

(x) úplná xxxxxxxxxxxxxx xx provede x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x u xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx;

(x) xxxxxxx xxxxxx viditelné xxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx vyšetří xxxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx;

(c) xx-xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx skupinou x xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx xxxxxxxx, histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x daném xxxxxx xx xxxxx i x xxxxxxx xxxxxxxxx;

(x) xx-xx xxxxxxx xx skupině s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, měla by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx;

(x) xx-xx xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx doklad x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků, které xx mohly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx kompletně vyšetřit xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxxx ve xxxxx tabulek, ukazujících xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx počet zvířat xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx jejich xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx s tumory xxx utracení. Xxxxxxxx xx hodnotí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.

3. XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxx

Xxxxxx o xxxxx xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx ustájení, xxxxx,

- xxxxxxxx testu: xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxx xxxxxxxxxxx, zneškodňování xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, kde xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo velikosti xxxxxx aerosolu. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxx:

(a) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx zařízení,

(b) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,

(x) nominální xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx látky vstupující xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vzduchu),

(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,

(e) xxxxxxxx koncentrace v xxxxxxx xxxx,

(f) xxxxxx velikosti xxxxxx (xxx xxx xxxxxxxxxx),

- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) a xxxxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxx xxxxxx,

- xxxx xxxxx během studie xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x dávky ,

- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x jeho xxxxx xxxxx,

- data x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx hematologické xxxxx x xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxx xxxx),

- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx zpracování výsledků x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.34. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - JEDNOGENERAČNÍ XXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx několika xxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxx a xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x xxxx x 70 dnů x potkanů), xxx xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) dostávají xxxxx xx xxxx alespoň xxxx xxxxxxxxxx cyklů, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinek xxxxxxxxx látky na xxxxxx. Zvířata xxxx xxxx xxxxxxxxxx. V xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka podává xxxxxxxx xxxx pohlaví, x xxxx gravidity x xxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxx testu xx zdravá mladá xxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx do dvou xxxxxx - xxxxxxxxx x exponované skupiny. Xxxxxxx xxxx chována xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx testovanou xxxxx xxxxxxx x potravě xxxx x pitné xxxx. Jiné xxxxxxx xxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xxxxx dostávají xxxxxxx xxxxxxxx v průběhu xxxxxx testu. Xxxxx xx používá x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx o xxxx xxxxx, že xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 dní x xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxx druhu

Xxxx xx přednost potkanům xxxx myším. Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xx xx doby xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx x nízkou xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx charakterizována xx xx xxxxx, kmene, xxxxxxx x váhy x/xxxx xxxx. Plodnost xxxx xxx ověřena xxxxxxx způsobem x xxxx xxxxxxx. Zvířat x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x kontrolní, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupina xxxx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnocení xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx v X xxxxxxxx, xxxxxx, xxxx x vývoj xxxxxxxxx xxxxxxxx X₁ xx početí do xxxxxxx.

1.2.3 Podmínky xxxxx

Xxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx porodem xx xxxxxxx samice xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xx xxx poskytnut xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx hnízda.

1.2.4 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxxxx pro aplikaci xxxxxxxxx xxxxx vehikulum, xxx zvířata kontrolní xxxxxxx dostávají xxxxxxxxx x xxxxxxxxx použitém xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx potravy, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx kontrolní xxxxxxx, spárované co xx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má x xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx to xxxx xxxxxxx jejími fyzikálně-chemickými xxxxxxxxxxx xxxx povahou xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx populaci. Střední xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx minimální toxické xxxxxx, které xx xx daly xxxxxxx xxxxxxxxx látce, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinky, xxx x xxxxxx xxx u xxxxxxxxx.

Xxx podání sondou xxxx x tobolkách xx xxxxx stanoví xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx dávky xxxxx xxx případně xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx hmotnosti x 0. nebo 6. xxx od xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.2.5 Limitní xxxx

X xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx žádným toxickým xxxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx úrovních. Pokud xxxxxxxxx xxxxxx ukáže, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx nepříznivé xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Xxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxxxxx samcům xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxx xxxx xx xxxxxx týdnů, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx obdobím xxxxxxxxxxx (8 týdnů pro xxxx). Xxxxx se xxx xxxxxx x xxxxxxx xx konci xxxxxx připouštění, xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x mohou xxx použiti xxx xxxxxxxx dalších xxxx x xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxx xxxxxx.

Denní xxxxxxxx xxxxxxx rodičovské xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx aspoň xxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pak xx xxxx xxx týdny xxxxxx xxxxxxxxxxx, v xxxx xxxxxxxxx až xx xxxxxxxxx X₁ xxxxxxxx. Xx přípustná xxxxx dávkovacího xxxxx xxxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx

Xx xxxxx použít xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx samice x jeden xxxxx) xxxxx 1 : 2 (jeden xxxxx xx xxxxx samicím).

X xxxxxxx 1 : 1 párování, xxxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xx společné kleci xx xxxxxxxxxx xxxxx xx dobu 3 xxxxx. Xxxxx ráno xxxx xxxxxx vyšetřeny xx přítomnost spermatu xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx vaginální xxxxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx, u kterých xxxxxxx x oplodnění, xx třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xx xx možné xxx poskytnutím xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx pohlaví nebo xxxxxxxxxxxxxx vyšetřením reprodukčních xxxxxx xxxx vyšetřením xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxx možnost xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Pokud xx xxxxxxxx vrhů standardizuje, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: mezi 1. x 4. xxxx xx porodu xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx jedinců xxx, xxx xx dosáhlo xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx xx vrh; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx možno standardizovat xx xxxx počty, xxxx. 5 samců x 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.4 Xxxxxxxxxx

Každé zvíře xx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx za xxx. Významné změny xxxxxxx, příznaky ztíženého xxxx prodlouženého xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx včetně mortality xx zaznamenávají. Xxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx jak xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx porodu x x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx (x xxxx, xxxxx se xxxxx xxxxxx v pitné xxxx) xx xxxxxx xxx, xxx je xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X xxxxxxx se xxxx xxxxx den xxxxxxxx x xxx xxxxx. Všechna xxxxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.

Doba xxxxxxx xx počítá od xxx 0 těhotenství. Xxxxx vrh xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx mláďat, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxx se xxxxxxxx xxx vyšetření xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx xx xxxxx xxxx xx xxxxxx, xx 4. x 7. xxx a xxxxx xxxxx týden xx ukončení xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx individuálně. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx.

1.3.5 Xxxxxxxxx

1.3.5.1 Pitva

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx generace P xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx abnormality xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx zemřelá xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xx defekty.

1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx, xxxxxx, děložní xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, semenné xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, prostata, xxxxxxxx a cílové xxxxxx všech zvířat xxxxxxxx X xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X případě, xx tyto xxxxxx xxxxxx xxxxxxx vyšetřeny x jiných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávku x xxxx x xxxxxx, xxxxx zemřela x xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, se xxxxxxx x u X xxxxxx ostatních xxxxxxxxx skupin. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx již bylo xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xx mají xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, kde je xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx na začátku xxxxxx, počet xxxxxxxx xxxxx, počet xxxxxxxxx xxxxx, typ xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx statisticky xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx obecně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx

Zpráva o xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx možno obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxx:

- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- údaje x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx na dávce x xxxxxxx včetně xxxxxxxxx plodností, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxx uhynutí x xxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxx přežila xx xxxxxxxx xxxxxx,

- tabulka uvádějící xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx,

- toxické x xxxxx účinky na xxxxxxxxxx, potomstvo a xxxxxxxxxxx růst,

- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,

- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xx xxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.35. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - DVOUGENERAČNÍ XXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx x odstupňovaných xxxxxxx.

Samci rodičovské (X) xxxxxxxx dostávají xxxxxxxxxx látku x xxxx růstu x xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx spermatogenního cyklu (xxxxxxxxx 56 dnů x xxxx x 70 xxx x xxxxxxx), xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx nepříznivý xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.

Samice xxxxxxxxxx generace (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx zachycen jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx testovací xxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. V době xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx podává zvířatům xxxx xxxxxxx x xxxxx, v xxxx xxxxxxxxx x kojení, xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xx látka xxxxxxxx zvířatům xxxxxxxx xxxxxxxx F₁ x xxxxxxx růstu xx xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx x xx xx doby odstavení X₂ generace.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Před zahájením xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx skupin - kontrolní x xxxxxxxxxx skupiny. Rodičovská xxxxxxx (P) jsou xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx zahájením xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxx v xxxxx xxxx. Jiné xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx možné. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx dostávají xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx celého xxxxx. Xxxxx xx používá x usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx x nich xxxxx, xx xxxxxx toxické xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x týdnu.

1.2.2 Pokusná xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Používají se xxxxxx X xxxxxxx, xx té xxxx xxxxxxxxx pro jiné xxxxxxxxxxx. Nepoužívá se xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx xxxx charakterizována xx xx druhu, xxxxx, xxxxxxx x xxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx být ověřena x xxxx xxxxxxx. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, exponované x xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx x xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx x kontrolní skupina xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxx zvířat, aby xxxx zaručeno cca 20 xxxxxxx samic x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx těhotenství x xxxxxxxxx, a xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx látky xx xxxxxxxx, xxxxxx gravidity x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx, růst x xxxxx potomstva xxxxxxxx X₁ xx xxxxxx xx dospělosti, a xxxxx jejich xxxxxxxxx xxxxxxxx X₂ xx xx odstavení.

1.2.4 Podmínky xxxxx

Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx libitum. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx přemístí xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx klecí x xx xxx poskytnut xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.5 Xxxxxxxxx

Použijí xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx používá xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx v největším xxxxxxxx objemu. Xxxxx xxxxxxxxx látka snižuje xxxxxx a utilizaci xxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx výživy.

Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx koncentraci má x ideálním případě, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x rodičovské populaci. Xxxxxxx xxxxx(x) xx xxxx(x) vyvolat minimální xxxxxxx účinky, xxxxx xx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, ani x xxxxxx xxx x xxxxxxxxx.

Při xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx hmotnosti xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx se xxxxx týden podle xxxxx hmotnosti. X xxxxxxx těhotných samic, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx určeny na xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. nebo 6. dni xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.2.6 Xxxxxxx xxxx

V případě xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx úrovních. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, že xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx jasnou xxxxxxxxx toxicitu, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx dávkových xxxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Xxxx xxxxxx

Denní xxxxxxxx xxxxxx rodičovské xxxxxxxx X xxxxx ve xxxx xxxx xx xxxxxx týdnů, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx týdnů xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx pro xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xx konci období xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx produkci xxxxxxx xxxx a xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx někdy xxxx xxxxxx pokusu.

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx P začne xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x pokračuje aspoň xxx xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx pokračuje xxx xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxx gravidity xx xx xxxxxxxxx X₁ xxxxxxxxx. Je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx studované xxxxx, xxxx. x xxxxxxx metabolismu xxxx. x xxxxxxxxxxxx.

Aplikace xxxxxxxx xxxxxxxx X₁ xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx jejich xxxxxxxxx.

1.3.2 Postup xxx xxxxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx dvěma xxxxxxx).

X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxx ve xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx dobu 3 týdnů. Každé xxxx jsou samice xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Den 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx zátky xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx k xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx X₁ se xxxxxxxxxxx xxx připouštění xx xxxx 11 xxxxx u myší x 13 týdnů x xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx generace X₁ xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx z xxxxxxx vrhů xxxx xxxxxxx skupiny. Zvířata xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxxxx, x kterých xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. To xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx je ponechána xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxx potomstvo do xxxxxxxx odstavení xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx velikost xxxx standardizuje, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx vrhů xxxxxx vyřazením nadbytečných xxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx a 4 xxxxx xx xxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx standardizovat na xxxx počty, např. 5 xxxxx x 3 samice. Vrhy xxxxx než 8 xxxxx standardizovat. Standardizace xxxx generace X₂ xx xxxxxxx obdobně.

1.3.4 Xxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxx xx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Významné změny xxxxxxx, příznaky ztíženého xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x všechny xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx jak xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx kontrolovat xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxxx xxxxxxx ve stejný xxx, xxx je xxxxxxxxx váženo. Rodičovská X x X₁ xxxxxxx se xxxx xxxxx xxx aplikace x xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx individuálně xxx xxxxx xxxxxxx zvíře.

Xxxx gestace xx xxxxxx xx xxx 0 těhotenství. Každý xxx xx xx xxxxxxxx po xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x živých xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx vyšetření xx xxxxx defekty. Živá xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxx xxxx xx zváží xxxx xx xxxxxx, xx 4. x 7. xxx x potom xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx studie, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx v chování x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x potomstva.

1.3.5 Xxxxxxxxx.

1.3.5.1 Xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X x X₁ xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx je xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx látky xx reprodukci. Zvířata xxxxxxxx X₁ nevybraná xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X₂ xx utratí xx xxxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx nebo xxxxx xx všechna rodičovská xxxxxxx X x X₁ makroskopicky vyšetří xx strukturní xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x orgánům reprodukčního xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx.

1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx kanálky, koagulační xxxxxx, xxxxxxxx, hypofýza x xxxxx cílové xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx X x X₁ xx xxxxxxxx xxx mikroskopické vyšetření. X xxxxxxx, xx xxxx orgány xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx studiích, xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x všech X x X₁ xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx dostávající xxxxxxxx xxxxx, která xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, a xxxx x zvířat, která xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Orgány, xxxxx xxxxxx abnormality x xxxxxx skupin xxxxxx, xx vyšetří x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx makroskopicky xxxxxxxxx. Xxx xxx bylo xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx mají xxx xxxxxxxx mikroskopické xxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, kde xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx těhotných xxxxx, xxx změn x procento zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx výsledky xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx použít kterákoliv xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxxxx by xxxx pokud možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje:

- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx x toxické odezvě x xxxxxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x životaschopnosti,

- xxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx vrhu, průměrnou xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx x xxxxxxxxxxxx hmotnost xxxxxxx xxxx utracením,

- xxxxxxx x xxxxx účinky xx xxxxxxxxxx, potomstvo x xxxxxxxxxxx xxxx,

- xxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X a F₁ xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx údajů, xxxxx je xxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- interpretace xxxxxxxx.

X.36. XXXXXXXXXXXXXX

1. METODIKA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx na xxxxxxxx studie látka xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x průběhu xxxxxxxxx xxxx, jedné nebo xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Látka xxxx. xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx účelu xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x "xxxxxxxxxx" xx "značenou" xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx použito xxxxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx poskytlo xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx sloučeniny v xxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx testovací xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxx zvířata jsou xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nejméně po xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx skupin. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx otázek xx může xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx premedikovaných zvířat.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx provádějí na xxxxxx xx více xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druzích. Xxxx xx se xxxxxxxx na druzích xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx v xxxxxx toxikologických xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx by xxx variabilita xxxxxxxxx xxxxx xxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Počet x xxxxxxx

Xxx studium xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx užije nejprve 4 zvířat xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxx není xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ale xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx rozdílné odpovědi x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx ostatních druhů xxxxxx (jiných než xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx počet xxxxxx.

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, pak xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx x úvahu xxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx utracena v xxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx xxxx, x nichž xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xx-xx studován xxxxxxxxxxxx, xxx velikost xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

Zahrnuje-li xxxxxx xxxxx počet xxxxx x sledovaných xxxxxxxx intervalů, pak xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxx než 2 xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx zvířat xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xx, xxx xxx xxxxx resp. xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky xx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx

X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolává xxxxxxx xxxxxx.

X případě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx podání xxxxxxx dávek xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Způsob aplikace

Xxxxxxxxxxxxxxx studie by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xx-xx xx xxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx toxikologických xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx kůži, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx dobu skupině xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx stanovení relativního xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Navíc xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx mohou xxx xxxxxxx důležité xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.

Xxxxxx xx xx xxxxxxxxx na možnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx látkou. Pozornost xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx, je-li testovaná xxxxx podána xxxxxx xxxx v xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx-xx testovaná xxxxx xxxxxxxx v potravě.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x další xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx zaznamenávány xxxxx x xxxxx x jejich xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx.

1.3 Xxxxx postupu

Po xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx způsobem xxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx.

1.3.1 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx absorpce podávané xxxxx mohou xxx xxxxxxx různé xxxxxx x xxxx bez xxxxxxxxxx xxxxxxx¹⁾, x xx např.:

- xxxxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx a ev. xxxxxx metabolitů v xxxxxxxxx xxxx. x xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx,

- xxxxxxxxx biologické odpovědi (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx skupinou,

- porovnání xxxxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx testovanou x xxxxxxxxx x případně xxxxxxxxxx skupinou,

- xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky a xx. xxxxxx metabolitů x xxxxxx na xxxx x xxxxxxxxx x daty xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.

1) X xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx rozumí ta, xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávky.

1.3.2 Xxxxxxxxxx

V xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx 2 přístupy, z xxxxx xxx analýzu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx xx oba:

- xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx kvalitativní xxxxxxxxx;

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x množství xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx metabolitů v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po zahájení xxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx vzduch, x xxxxxxxx xxxxxxxxx žluč. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. jejích xxxxxxxxxx se x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx po podání xxxxx, x xx xxx do vyloučení 95 % x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 7 dnů xx počátku xxxxxxxxxx.

Xx speciálních xxxxxxxxx xxxx být potřebné xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxx xxxxxxx testovaných xxxxxx.

1.3.4 Xxxxxxxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx metabolitů x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxx odpovědět xx xxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx informací x metabolismu může xxx prospěšné xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x toxicitou xxxxx xxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxx xxxxxx látky xx enzymy metabolického xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx - SH xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx prováděné xxxxxx xxxxxxxxxx v tabulkách, xxxxx možno xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xx uvedou xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vztahu k xxxx, xxxxx, xxxxx x xxxxxxx (xxxxx xx xx xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxx x rychlost xxxxxxxxxx se stanoví xxxxxxxx metodami. V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx studií xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metabolitů x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx by xxxxxx x testu xxxx xxxxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xxxxx:

- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,

- charakteristika xxxxxxxxx xxxxxxxxx, jestliže xxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx podání,

- xxxxxx(x) podání x xxxxxxx xxxxxxx vehikula,

- toxické x x ostatní pozorované xxxxxx,

- metody xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. jejích xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxx x xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxx vstřebávání x xxxxxxxxxx x závislosti xx xxxx,

- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx x identifikaci xxxxxxxxxx x biologickém xxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx xxx biochemická xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxx metabolismus,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- interpretaci výsledků.

X.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH SLOUČENIN XXXXXXX - AKUTNÍ XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Při xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látek xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxx specifický xxx xxxxxxxxxxxxx, který xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx organických xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x mají xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Vyšetřovací xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx použity pro xxxxxxxxxxx látek, xxxxx xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nález x xx xxxxx xxxxxx však není xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, že látka xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx jako "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu" xxxxx xxxxxxxxxx neutrální xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx anhydridy xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx thiofosforečných, thiofosfonových xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx této xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx syndrom xxxxxxxxxxx xx ataxií, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx těchto xxxxxxxx, x xxxx inhibicí x stárnutím xxxxxxxxxx xxxxxxxx - NTE (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxx.

1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx může být xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxx, xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx druhů xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pozdním xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx je tri-o-tolylfosfát (XXX 78-30-8, EINECS 201-103-5, chemický název: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (TOCP).

1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx orálně x xxxxxx xxxxx slepicím, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinky. Xxxxxxx xx xx xxxx 21 xxx xxxxxxxx, zaznamenává se xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Biochemické xxxxxxxxx, xxxxxxx inhibice XXX, se provádí x slepic náhodně xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx 24 x 48 hodin xx xxxxxx xxxxx. 21 xxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx utraceny x je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx xxxxxxxxx tkání.

1.5 Popis xxxxxx xxxxxxxxx

1.5.1 Xxxxxxxx

Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx experimentální a xxxxxxxxx skupiny. Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu.

Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx klece xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx slepic x xxxxxx xxxxxxxxxx chůze.

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxx sondou, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx srovnatelnou metodou. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx doporučuje xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx by xx nemusely dostatečně xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxx xxxx určeny xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.6.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx domácího (Xxxxxx gallus domesticus) xx xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx plemena x standardní xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx volný xxxxx.

1.6.1.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxxxx testovací skupiny xx použije xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx.

X xxxxx xxxxxxx xx xxx dostatečný počet xxxxxx, xxx aspoň xxxx x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx třech xxxx x xxxxx den xx podání) x xxxx xxxxxxx 21xxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx může použít xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxx aspoň xxxx xxxxxx, xxxxxx se xxxxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx neurotoxicitu, tři xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx biochemii x xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, když se x xxxxxxxxxxx laboratoři xxxxx některý xx xxxxxxxxxx prvků testu (xxxx. xxxxxxx, potrava, xxxxxxxx xxxxx).

1.6.1.3 Volba xxxxx

Xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x využitím xxxxxxxxxxx xxxxx slepic a xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx dávek, xxx xx dala xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx nezbytná xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx. Aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx účinky, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, o xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx s pozdními xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx testovacích xxxxx (viz xxxxxx B.1 bis). Historické xxxxx xxx slepice xxxx xxxx toxikologické xxxxxxxxx xxxxx xxx také xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx dávky x xxxxxxx limitu xxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx přežití dostatečného xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx (šest) x xx 21 xxxxx xxx histologii (xxxx). Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx přípravek, o xxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx neurotoxickými účinky, xx xx použít xxxx ochrana xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.6.1.4 Xxxxxxx test

Jestliže xxxx s dávkou xxxxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx podle xxxxx x xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx třeba xxxxxxxx o xxxxxx x xxxxxxx vyšší xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, pokud xxxxxxxx vyskytující xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx je 21 xxx.

1.6.2 Popis postupu

Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx následky xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinku, xx xxxxxxxxx xxxxx podána x jediné xxxxx.

1.6.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx začít xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx slepice xx xxxxxxx pozorují několikrát x xxxxxxx prvních xxxx xxx x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xx dobu 21 xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Veškeré xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx čtyřstupňové xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x klecí a xxxxxxx nucené xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx např. xxxxxxxxxxx xx žebříku, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx minimálních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx a přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je třeba xxxxxxx, humánním způsobem xxxxxxx a pitvat.

1.6.2.2 Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx zváží xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx aspoň xxxxxx xxxxx.

1.6.2.3 Xxxxxxxxx

Xxxx xxxxxx xxxxxxx vybraných x xxxxx testované x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx xxxxxxx použita) xx xxxxxx v xxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx xxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxx mozek x xxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx n. xxxxxxxxxxx x analyzovat jeho xxxx na xxxxxxxx XXX. Xxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxx x kontrolní a xxxxx testované skupiny xx 24 xxxxxxxx x další xxx xx 48 hodinách, xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny xx xxxxxxxx xxxxx xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxx xx nástup xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx je xxxxxxxxxx odebrat xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxx, x xx mezi 24 xx 72 xxxxxxxx xx xxxxxx látky.

X těchto xxxxxx xxxxx xx případně xxxxxxx xxxx analýza xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). In xxxx xxxx však xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx xxxx k xxxxxxxxx xxxxx jako inhibitoru XXxX.

1.6.2.4 Xxxxx

Xxxxx x xxxxx zvířat (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) zahrnuje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx.

1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx zvířat (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tkáně xx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), prodloužená xxxxx, xxxxx - řezy xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxx krční xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx distální xxxx x x. tibialis (x xxxx xxxxx x m. xxxxxxxxxxxxx) x x n. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx myelin x xxxxx.

2. XXXX X XXXXXX XXXXX

Negativní xxxxxxxx x účincích xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx chování) xxxxx xxxxxxxxxx další testování xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx mohou vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx zvířata. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, typy x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx x procento zvířat xxxxxxxxxxxx každý typ x stupeň xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx a korelace xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx jevy x xxxxxxxxxxx a kontrolních xxxxxx.

Číselné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Zpráva x průběhu xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx mohly xxx xxxxxxx:

Testovaná zvířata:

- xxxxxxx xxxxxxx;

- počet x xxxxx zvířat;

- xxxxx, podmínky ustájení xxx.;

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.

Podmínky xxxxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky;

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;

- podrobné xxxxx x xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxx údaje o xxxxxxx x kvalitě xxxx;

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dávek;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx x fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;

- podrobné xxxxx x podání xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx;

- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx úmrtnosti;

- xxxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx vratných xxxx xxxxxxxxxx);

- podrobný xxxxx biochemických xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx;

- pitevní xxxxxx;

- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx to možné.

Xxxxxxx výsledků

Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx x metodou XXXX XX 418.

B.38. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH SLOUČENIN XXXXXXX 28DENNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx schopnost xxxxxx xxxxxxx látek xxxxxxx xxxxxxxxxx typ xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx fosforu xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Vyšetřovací xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x in xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Tento 28xxxxx test xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x možném xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxx opakovaných xxxxx xxxxxxxx krátkého časového xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx odpovědi xx dávce x xxxx poskytnout odhad xxxxxxx dávkových úrovní, xx xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx úroveň xx používá xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 Xxxxxxxx

Do xxxxxxx látek označených x názvu xxxx xxxxxx xxxx "organické xxxxxxxxxx fosforu" xxxxx xxxxxxxxxx neutrální xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx kyselin xxxxxxxxxxxxxxxx, thiofosfonových nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx jiné xxxxx, které xxxxx xxxxxxxx xxxxxx neurotoxicitu, xxxxxxxxxxx x některých xxxxx této xxxxxxx.

Xxxxxx neurotoxicita je xxxxxxx projevující se xxxxxx, distální axonopatií, xxxxxxx x míše x xxxxxxxxxx nervu x pozdním xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxx.

1.3 Xxxxxxx testovací xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 28 xxx. Zvířata xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xx abnormální chování, xxxxxx x paréza xxxxx 14 dnů xx poslední xxxxx. Xxxxxxxxxxx vyšetření, zvláště xxxxxxxx XXX, xx xxxxxxx x slepic xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx skupiny 24 x 48 xxxxx xx posledním xxxxxx xxxxx. Dva týdny xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nervových tkání.

1.4 Xxxxx xxxxxx testování

1.4.1 Xxxxxxxx

Xxxxx xxxxxx xxxxxxx slepice bez xxxxxxxxxxxxxxx virových xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx léčby x x xxxxxxxx xxxxx xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx zahájením xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x podmínkách xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx ohrady xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

Testovaná látka xx xxxxxx orálně, xxxxx 7 xxx x týdnu, xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx velké xxxxx xxxxxxx látek x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vstřebat. U xxxxxxxxx nosičů musí xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.4.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx domácího (Gallus xxxxxx domesticus) ve xxxx 8 xx 12 měsíců. Používají xx xxxxxxx o xxxxxxxxxx velikosti x xxxxxxx se xx xxxxxxxx, xxxxx dovolují xxxxx xxxxx.

1.4.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. X výjimkou aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx xx zvířaty x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx.

X xxxxx xxxxxxx xx být xxxxxxxxxx xxxxx slepic, xxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx v xxxxxx xx xxxx časových xxxx) a xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.4.2.3 Xxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x přihlédnutím xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx testu xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x x xxxxxx údajům x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, nejlépe xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx utrpení. Xxxx xx zvolí řada xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.4.2.4 Xxxxxxx xxxx

Jestliže xxxx x dávkou xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx x xxx, za xxxxxxx xxxxxxx popsaných xxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x jestliže xxxxx xxxxx u xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx očekávat, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxx dávky. Xxxxxxx test xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx se x xxxx naznačuje xxxxxxx xxxxxxx ještě xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.4.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Všechna xxxxxxx xx pozorují nejméně xxxxxx xxxxx po xxxx xxxxxxxx a 14 dnů po xx, nebo do xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx plánu.

1.4.3 Xxxxx xxxxxxx

Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxx xxx x xxxxx po 28 xxx.

1.4.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Všechny xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x dalších 14 xxx po xxxxxxxx aplikace, do xxxxxxxx podle plánu. Xxxxxxx příznaky xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x trvání. Xxxxxxxxxx xx zahrnovat abnormality xxxxxxx, xxx xxxx xx xx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx nejméně xxxxxxxxxxxx pořadové stupnice, xxxxxxxxxxx xx paréza. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx xxxxxxx vyjmou x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx xx žebříku, xxx se usnadnilo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Umírající xxxxxxx xx závažnými a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x bolesti je xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

1.4.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx těsně xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.4.3.3 Xxxxxxxxx

Xxxx slepic xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx se xxxxxx x prvních xxxxx xx aplikaci xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxx mozek x xxxxxxxx xxxxx. Je xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx jeho tkáň xx xxxxxxxx NTE. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx slepice x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupiny xx 24 xxxxxxxx a xxxxx tři xx 48 xxxxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pak xx xxxxxxxxxx použít xxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx.

X xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx AChE, xxx xxxx vést k xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.

1.4.3.4 Xxxxx

Xxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxxx pro špatný xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx posouzení xxxxx xxxxx x míchy.

1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Nervová xxxx x přeživších xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx studie) xx xxxxxxxxxxxx vyšetří. Xxxxx xx fixují xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxx technik. Xxxxxxx xx: mozeček (střední xxxxxxx řez), xxxxxxxxxxx xxxxx, mícha (řezy xxxxx xx provádí x xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxx hrudní x lumbosakrální), z xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x n. xxxxxxxx (x xxxx větve x x. xxxxxxxxxxxxx) x z x. xxxxxxxxxxx. Řezy se xxxxx xxxxxxxxxxxx barvivy xx xxxxxx a xxxxx.

Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx x nejvyšší dávkou. Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxx skupiny x xxxxxxxx dávkou xxxxxx xxxxxx, provede xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xx slepicích xx skupin, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

2. SBĚR X XXXXXX XXXXX

Xxxxx jsou výsledky xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx neurotoxicitu. Neprůkazné xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Údaje xx xxxx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx být pro xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx biochemické xxxxxx, xxxx a xxxxxx těchto xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx.

Výsledky studie xx xxxxxxxxx z xxxxxxxx výskytu, závažnosti x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, biochemickými x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x dalšími pozorovanými xxxx x xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se zvolí xxx x xxxx xxxxxxxxx studie.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x pokusu obsahuje xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:

Xxxxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx plemeno,

- xxxxx a xxxxx xxxxxx,

- zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx začátku xxxxxx.

Xxxxxxxx testování:

- xxxxxxxx údaje x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx x potravě x xxxxxxx vody,

- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávek, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx látky,

- xxxxxxxxxx doby pro xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, je-li xxxx xxx 24 x 48 hodin.

Xxxxxxxx:

- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx včetně úmrtnosti,

- xxxxxx bez xxxxxx (NOAEL),

- xxxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx příznaků (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx),

- podrobný xxxxx biochemických xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxx xxxxxx,

- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,

- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, x kterých xx xx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 419.

X.39. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx

1. METODA

Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx DNA Xxxxxxxxx (XXX) Xxxx With Xxxxxxxxx Liver Xxxxx Xx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Účelem testu xxxxxxxxxxx syntézy XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX) x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx je xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx reparaci XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (1) (2) (3) (4).

Xxxxx test xx xxxx představuje xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinků xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx buňkách x xxxx xxxxxxxxx reparaci. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; jsou xxxxx vhodným xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx vivo.

Xxxxxxxx-xx doklady x xxx, xx se xxxxxxxxx látka xx xxxxxx tkáně nedostane, xxxx tento xxxx xxxxxx.

Výsledek xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (XXX) xx hodnotí xxx, xx xx stanoví xxxxxxxx značených xxxxxxxxxx x xxxxxxx, které xxxxxxxxxxxx plánovanou (X-xxxx) xxxxxxxx XXX. Xxxxxxxxxxx xx metoda, xxx xxxxx xx autoradiograficky xxxxxxx xxxxxxxx značený xxxxxxx (³X-XxX). Xxx xxxxx XXX xx xxxx xx nejčastěji xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxx xx sice xxxx xxxxx použít, xxxxxx xxxx předmětem xxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxx xxxx DNA, xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x nahrazeny. Xxxxx xx xxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx látek indukujících "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 bází), xxxxxxx pro látky xxxxxxxxxx "shortpatch xxxxxx" (1 - 3 xxxx) xx xxxx xxxxxxx. Xxxx může xxxxxxxx k mutacím x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx lézí XXX. Xxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxx xxx x přesnosti procesu xxxxxxxx. Mimoto xx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxx x XXX reagovat, xxx xxxxxxxxx XXX není xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx, xx XXX xxxx neposkytuje x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx informace, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxx x reparaci: net xxxxxxx xxxxx (NNG) xxxxx xxx xxxxxx, xxxxxx stanovená xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx laboratoř xxxxxxxxxxx xxxx.

Net xxxxxxx grains (XXX): xxxxxxxxxxxxx míra XXX xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xxxxxxxxx jako xxxxxx xxxx počtem xxx x xxxxx (NG) x průměrným xxxxxx xxx x xxxxxxxxxx (XX): NNG = XX - XX. Xxxxx XXX xx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx buňky x xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX): xxxxxxx xxxxxxx XXX po xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxxxx buňkách xx xxxx indikuje xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx xxxxxx x xxxxxxxxxx segmentu XXX xxxxxxxxxxxx oblast poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx vychází obvykle x xxxxxxxxxxx ³X-XxX xx DNA jaterních xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx nízkým xxxxxx buněk v X-xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx ³X-XxX xx xxxxxxx stanoví autoradiograficky, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxx náchylná x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x X-xxxx, xxxx xx např. xxxxxxxxxxx metoda.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxx potkani, xxx ovšem xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % průměrné xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

Všeobecné xxxxxxxx chovu xxxx xxxxxxx xx Všeobecném xxxxx v xxxxx X.

Vlhkost xx xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.2.1 Xxxxxxxx zvířat

Zdraví xxxxx dospělí xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx označí x xx xxxx xxxxxxxxx pěti xxx xx zvířata aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, jak x xxx jsou xxxxx xxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx x xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx rozpustí xxxx xx připraví její xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo vehikulu. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.

1.4.3 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.3.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx chemicky xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx ne xxxxxx známé rozpouštědlo, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx údaji x xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx vodné xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.

1.4.3.2 Xxxxxxxx

Do xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx zvířaty xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx spontánní xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x dávkách xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxx, xxx byly xxxxxx patrné, xxx xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx pro xxxxxxxxx kontrolu patří xxxxxxxxx:

Xxxx xxxxxx xxxxxx	Xxxxx	XXX	XXXXXX
odběr x xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx)	X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx	62-75-9	200-249-8
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 xxxxx)	X-2-xxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX)	53-96-3	200-188-6

Xx možno xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx podávána testovaná xxxxx.

1.5 POSTUP

1.5.1 Počet x pohlaví zvířat

X každé xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx analyzovatelní jedinci. Xxxxx existuje xxxxxxxxxx xxxxxxxx, pak xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxx.

Pokud x xxxx, kdy xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx druhem xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx jednom pohlaví, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jak xx xxxx například x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx xx xxxx xx zvířatech odpovídajícího xxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx schéma

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxx jednorázově.

1.5.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky toxicity, xx xxx xxxxx xxxxx xx stejném xxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.

Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx vykazují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x vyhodnocují xx případ od xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, je xxxxx ji xxxxxxxxxx x xxxx laboratoři x za použití xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxx x hlavní xxxxxx.

Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx).

1.5.4 Limitní xxxx

Xxxxxxxx test xxx dávce xxxxxxxxx 2&xxxx;000 mg/kg hmotnosti xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxx xxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx studie. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx může xxx xxxxxxx x limitním xxxxx vyšší xxxxx.

1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx látka se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. V odůvodněných xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, protože xx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx oběhem. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, závisí xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxx dávky xxxx xxx zdůvodněné. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx koncentracích horší xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Příprava jaterních xxxxx

Jaterní xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxx zpracovávají xxxxxxx 12 - 16 xxxxx po xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 hodiny xx xxxxxx xxxxx), xxxxxx xx xx 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxx i xxxx xxxx odběru xxxxxx, xx-xx to xxxxxxxxxx xx xxxxxxx toxokinetických xxxxx.

Krátkodobé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx buněk xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx zajistit, aby xx čerstvě disociované xxxxxxx xxxxx mohly xxxxxxxxx xx vhodnému xxxxxxx. Jaterní buňky xx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).

1.5.7 Xxxxxxxxx UDS

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx xxxx (např. 3 - 8 xxxxx) obvykle xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx ³X-XxX. Po inkubaci xx médium xxxxxxxx( xxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx thymidinu, aby xx snížila neinkorporovaná xxxxxxxxxxxxx (tzv. "xxxx xxxxx"). Buňky xx xxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se "xxxx xxxxx" xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, exponují xx xxx (xxxx. xx xxxx jednoho nebo xxxx týdnů x xxxxxxxxxx), xxxxxxxx, xxxxxx x počítají xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. X každého xxxxxxx xx xxxxxxxx dva xxxx xxx xxxxxxxxx.

1.5.8 Xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx preparáty xxxx xxxxxxxxx dostatečný xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx UDS xxxxxxxxxx. Mikroskopicky xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (např. xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).

Xxxxxxxxx xx xxxx počítáním xxx xxxxxxxx. Vždy na xxxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx x xxxxxxx jedince xx obvykle xxxxxxx 100 buněk; pokud xx buněk xxxx xxx 100 xx xxxxxxx jedince, xxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xx nevyhodnocují xxxxx x X-xxxx, ale xxxxx buněk v X-xxxx xx registruje.

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx ³X-XxX xx jader x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx depozice xxxxxxxxxx xxxxx.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx a xxx se xxxxxxx xxxxx počet "nuclear xxxxx" (XXX) xxxxxxxxx xxxxx CG xx xxxxx XX. Počítají-li xx "xxxxx x xxxxxx", xxxx xxx xxxxxxxx, kterými se xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx a podložena xxxx x historických xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; pokud xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx ještě xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:

xxxxxxxxx		(I) xxxxxxx XXX xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx
	xxxx	(XX) xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxxx kontroly
xxxxxxxxx		(X) xxxxxxx XXX xx úrovni/pod xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx
	xxxx	(XX) xxxxxxx XXX xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx souběžná xxxxxxxx.

Je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx, že je xxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, vztah xxxxx - xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx faktorem.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však nelze xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být stále xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx buňkami xx xxxx ukazuje, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx DNA, které xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx DNA xx xxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx látka nevyvolává xxxxxx xxxxxxxxx DNA, xxx xx tímto xxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xx xxxxx vzít v xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx o xxxxxxx pokusu

Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- xxxxx, xxx x pohlaví xxxxxxx,

- původ, xxxxxx podmínky, xxxxxx xxxx.,

- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,

- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedena,

- xxxxxxxxxx volby i xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x podávání testované xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx podávání,

- xxxxxxxx metody k xxxxxxx, že se xxxxx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxx nebo xx cílové tkáně,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx látky x xxxxxxx/xxxxx xxxx (ppm) xx xxxxxxxxx dávku (xx/xx hmotnosti/den),

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx testované látky x xxxxxx vzorků,

- metody xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- metoda xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx autoradiografická xxxxxx,

- počet připravených xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx analýzy,

- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x "xxx xxxxxxx grains" xxx jednotlivé xxxxxxxxx, xxxxxxx a skupiny,

- xxxxx dávka-odpověď, xxxxx xx k xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- známky xxxxxxxx,

- xxxxx ze xxxxxxxxxx negativních (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx "xxxxx x xxxxxx", xxx-xx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxx x X-xxxx, xxx-xx stanoven,

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Diskuse xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Metoda X.39. xxxx xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx od 22.6.2001

X.40. LEPTAVÉ XXXXXX XX XXXX

1. XXXXXX

1.1 XXXX

Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxxxxx Centre xxx xxx Xxxxxxxxxx of Xxxxxxxxxxx Xxxxxxx, XXXXX, Xxxxx Xxxxxxxx Centre, Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx validní xxx xxxxx in xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx na kůži: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx elektrického xxxxxx kůže xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, XXX) a xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx lidské xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX xxxxxxxxx, že xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x neleptajícími xxxx. Xxxxxx test vycházející x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx správně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx stupně xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx způsobující xxxxx xxxxxxxxx xxxx R35, x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, X34). Xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx; výběr xxxx oběma xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx testované xxxxx.

1.3 XXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxx xxxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx však xxxx. 1.5.3.4 a 1.7.2.3.

1.4 PRINCIP XXXXXX - XXXX XXX XX XXXX XXXXXXX

Xxxxxxxxx xxxxxxxx se nanese xx xxxx xx 24 xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx terčíků xxxx xxxxxxxx z xxxxxxx potkanů xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx mají xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx své xxxxxxxxxx xxxxxxx normální xxxxxxxxx x bariérové funkce xxxxxx xxxxxxx.Xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx inherentního transkutánního xxxxxxxxxxxx odporu (TER) xxx xxxxxxx prahovou xxxxxxx (5xΩ) (4) (5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxx xxxxxxxx hodnotu xxxxxxxxx. X případě xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (jejichž xxxxxxxx xxx v xxx. (6)) xx xxxxx xx zkušebního xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx barviva, xxx xx snížil xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx x xxxxxx xxxx chemických xxxxx xxxxxxxxx (2) (7).

1.5 POPIS XXXXXX - XXXX TER XX XXXX XXXXXXX

1.5.1 Xxxxxxx zvířata

Pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23denní) xxxxxxx, Xxxxxx nebo srovnatelný xxxx. Xxxxxx nůžkami xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxx xx roztoku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, penicilinu, xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx, x koncentracích inhibujících xxxx xxxxxxxx. Třetí xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx omyjí xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx 3 xxx xx xxxxxxx. Pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx než 31 xxx.

1.5.2 Příprava xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, sejme xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx a x xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxx konec xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PTFE) xxxxxxx, x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x trubici. Xxxx xxxxx trubice xx xxxxxxxx xxxxxx X-xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx připne, x xxxxxxxxxx xxxx se xxxxxxx. Rozměry xxxxxxx x X-xxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Gumový X-xxxxxxx se xxx xxxxxxx pečlivě ke xxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx ponoří xx xxxxxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX), xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx. 2).

1.5.3 Xxxxx xxxxxxx

1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x tekutém xxxxx, xxxxxx se xx xxxxxxxxxxx povrch xxxxxx xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx ve xxxxx xxxxxx, nanese xx xx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx se xxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx mít s xxxx maximální xxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx toho xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na 30 ^xX, aby xx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx. Látka xx xxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (xxx xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx se promýváním xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx 30 ^xX xxx xxxxxx, xxxxx se látka xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxxx x xxxxxxx ztuhla, se xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx zhruba 30 ^xX.

1.5.3.2 Xxxxxx XXX

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odpor (TER) xx měří pomocí xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx proud (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx povrchové xxxxxx xxxx xxxxxxxxx dostatečného xxxxxx 70% ethanolu, xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx tak, xx xx trubice otočí, x xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 154 xX xxxxxxx xxxxxx hořečnatého. Xxxxxxxxx můstku xx xxxxxxx na xxx xxxxxx kůže x xxxxx se odpor x xΩ/xxxxxx (xxx. 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx holé xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx XXXX xxxxxxx tak, xxx xxxx do xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx stejná xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx do receptorové xxxxxxx tak, xxx xxxxxx xx xxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx XXXX trubice (obr. 1), xxxx vzdálenost xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 20 xΩ, může xx xxx xxxxxxxx xxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xx xxxxxxx tento povlak xxxxxxxxx, xxxxxxxxx tak, xx se XXXX xxxxxxx utěsní xxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxx 10 xxxxxx xx protřepává, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx opakuje x čerstvým xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx hodnota XXX xx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx přijatelných xxx xxxx metodu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx akceptovatelná rozmezí xxxxxx xxx popisovanou xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxx:

&xxxx; Xxxxxxxx	&xxxx; Xxxxx	&xxxx; Xxxxxxx odporu (xX)
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; 10 M xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36%)	0,5 - 1,0
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; xxxxxxxxxxx voda	10 – 25

1.5.3.3 Modifikovaný xxxxxx xxx povrchově xxxxxxx xxxxx x neutrální xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx je xxx xxxxxxxxx povrchově xxxxxxxxx látek (xxxxxxxxxx) xxxx neutrálních xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx XXX xxxxx nebo xxxxx 5 kΩ, xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx průniku (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx nejedná x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).

1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x odstranění barviva xxxxxxxxxxxxxx X

Xx prvotním xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xx epidermální xxxxxx všech xxxxxxx xxxxxx xx 2 xxxxxx po 150 μx 10% (x/x) xxxxxxx sulforhodaminu B x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxx xx xxxx 10 sekund xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vody, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xx xx odstranit xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx kůže xx xxx xxxxxxx xxxxx x XXXX xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx (např. xx 20 xx xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 ml xxxxxxxxxxxx vody. Xxxxxxx xx xx xxxx 5 xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx zbytky xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Xxx se xxxxxxx xxxxxx a xxxxx do xxxxxxx x 5 ml 30 % (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxx xxxx, kde xx xxxx xxx inkubují xxx teplotě 60 ^xX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx vyjmou x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxx po dobu 8 xxxxx xxx xxxxxxx 21 ^xX (xxxxxxxxx odstředivá xxxx ∼ 175). Xxxxxx 1 ml xxxxxxxxxxxx xx pak zředí 30 % (x/x) xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (v/v) (xx. 1 ml xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx XXX). Xxxxxxx xxxxxxx (XX) xxxxxxx xx měří xxx cca 565 xx.

1.5.3.3.2 Výpočet xxxxxx xxxxxxx

Xxxxx sulforhodaminu X x terčíku xx xxxxxxxx x hodnoty XX (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx sulforhodaminu X xxx 565 xx xxxx 8,7 . 10⁴; molekulová xxxxxxxx = 580). Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx zvlášť x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx navázaného xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx za xxxxxxxx, xx souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx spadají xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx. Za xxxxxxxxxxxxxx rozmezí xxxxxx xxxxxxx se x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx metodě a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx považují:

Kontrola	Látka	Rozmezí xxxxxx xxxxxxx (mg/terčík)
Pozitivní	10 X kyselina xxxxxxxxxxxxxx	&xxxx; 40 - 100
Negativní	destilovaná xxxx	&xxxx; 15 – 35

1.5.3.4 Doplňující xxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx (xxxx. 2 xxxxxx) xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx zjištěno, xx xxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kůže xx 2 hodiny (2), xxxxxxxx umožňuje xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 24hodinovém působení.

Získané xxxxxxx TER mohou xxx ovlivněny vlastnostmi x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x experimentálním xxxxxxxx. Xxxxxxx hodnota xxx xxxxxxx účinky 5 kΩ xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxx aparatuře a xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx. Xxxxx xx se zkušební xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx okalibrovat xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx referenčních xxxxxxxxx vybraných x xxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx (3).

1.6 XXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX - XXXX S MODELEM XXXXXX XXXX

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nanáší topicky xx xxxx xx 4 hodin xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx materiál xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pokles životnosti xxxxx xxxxxxxxx například xxxxxx "MTT reduction xxxxx" (XXX = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxx definovanou pro xxxxx expoziční xxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx xxxx xx, xxxxx dokáží xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx erozí) x xxxx dostatečně xxxxxxxxxxx, aby přivodily xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX S XXXXXXX XXXXXX KŮŽE

1.7.1 Modely xxxxxx xxxx

Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx pocházet x xxxxxxx xxxxxx, xxxx však xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx mít xxxxxxx xxxxxxx corneum s xxxxxxxxxxx vrstvou živých xxxxx. Bariérová funkce xxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxx xxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx nanesení xxxxx, o nichž xx známo, že xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxx xxxxx stratum xxxxxxx neprocházejí. Xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vykazovat xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx v modelu xxxx xxx dostačující x xxxx, aby xx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx MTT, xx. XX xxxxxxxx) po xxxxxxxx látce použité xxxx xxxxxxxxx kontrola xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxx model. Xxxxxxx x xxxxxxx látky xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx s xxxxxxx xxx negativní xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx mezí. Xx xxxxx xxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx predikční model xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (2).

1.7.2 Popis xxxxxxx

1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx 25 (μ/cm²). Xx-xx xxxxx, xxxxxx xx xxx, aby xxxxxxxxx xxxx, x xxxxxxxx xx zvlhčí, xxx xx x xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx roztírají xx xxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxx musí být xxxxxxxxx, xx je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx (2). Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx se materiál x xxxxxxx xxxx xxxxxxx smyje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.7.2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx redukce XXX, x které xxxx xxxxxxxxx že x xxxxxxx laboratořích xxxxxxxxx přesné a xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky (2). Xxxxxx kůže xx xx dobu 3 xxxxx ponoří xx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx xxx teplotě 20 - 28 ^oC. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx rozpouštědlem) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XX xxx xxxxxx xxxxx 545 x 595 xx.

1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx model xxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. xxxx xx xxxxxxxxx buněk xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných x látek xxxxxxxxx xx validizační studii XXXXX (3). Xx xxxxxxxx nutné, aby xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxx xx použití xxxxxx xxxxx látek xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx standardů xxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx laboratořemi. Xxxxxxxxx xxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxxx vědecké xxxxxxxx xxxxxxxxxx dříve (2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx studie xxxx xxx zveřejněny x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

1.8 ZPRACOVÁNÍ VÝSLEDKŮ

1.8.1 Xxxx XXX na xxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxx (x xΩ) pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx případné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx formě, x xx data xxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx a x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.8.2 Xxxx x modelem xxxxxx xxxx

Xxxxxxx XX x xxxxxxxxx procento xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx materiál, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, průměrné xxxxxxx x x nich xxxxxxxx klasifikace.

1.9 VYHODNOCENÍ X INTERPRETACE XXXXXXXX

1.9.1 Xxxx XXX xx xxxx xxxxxxx

Xxxxx je xxxxxxxx hodnota TER xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 5 xΩ, xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Je-li xxxxxxx XXX nižší xxxx xxxxx 5 xΩ x xxxxxxx xx xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxx látku (xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx organickou xxxxx, pak xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx účinky xx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx organických látek, xxx xxxxxxxxx hodnoty XXX xxxxxxxxxxxxx 5 xΩ, xxx provést xxxxxxx xxxxxxxxx barviva. Xx-xx obsah xxxxxxx x terčíku xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx barviva v xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x 36 % XXx, je testovaná xxxxx skutečně xxxxxxxxx x tedy xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx-xx xxxxx barviva x xxxxxxx xxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxx pozitivní a xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx.

1.9.2 Test x xxxxxxx lidské xxxx

Xxxxxxx XX pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100% xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxx OD xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorky xx xxxxxxx procentuální xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx. Xxxxxxxx procentický xxxxx životaschopných buněk, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx odlišuje xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx v xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, než xx xxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx validační xxxxxx xx musí xxxxxxxx, xx je xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA

Zpráva x průběhu pokusu

Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxx xxxxx:

- identifikační xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti; pokud xx používají xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx údaje x xxx xx.

Xxxxxxxx pokusu

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,

- popis a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- tabulka xxxxxx xxxxxx (xxxx TER) xxxx xxxxxxxxxxxx podíl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx x xxxxxxx lidské xxxx) xxx testovaný xxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx, x to xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx resp. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxx všech xxxxxx xxxxxxxxxxxx efektů.

Diskuse xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Xxxxxxx 1

Xxxxxxx 2

Metoda X.40. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001

X.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 XXX XX VITRO

1. XXXXXX

1.1 XXXX

Xxxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxx toxická xxxxxx (reakce), x xxx dochází, xx-xx xxxx xxxxxx vystavena xxxxxxx chemickým xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxx, nebo xx-xx xxxxxxx kůže xxxxxxx xx xxxxxxxx podání xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx x rámci xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx ke xxxxxxxx, zda xxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx možné xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxx výsledkem xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx zjistit sloučeniny, xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xx vivo xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x kůži, x sloučeniny, xxx xxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xx topickém nanesení xx xxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx byl xxxxxxxxxx x validován v xxxxx xxxxxxxxxx projektu XX/XXXXXX x xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vitro xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx vivo. V xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx schůze XXXX xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).

Výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX in xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx účinky xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx test xx xxx xxxxxxx xxxxxx vynikající xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Test xxxx xxxxxxx x xxxx, xxx předpovídal xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, jež xxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxx vzniknout, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, x xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, reaguje xxx xxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxxxx: intenzita xxxxxxxxxxxxxx (XX) či viditelného xxxxxx dopadajícího xx xxxxxx; xxxxxx xx X/x² nebo x XX/xx².

Xxxxx xxxxxx: množství (= intenzita x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxxxxx dopadajícího na xxxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxx (= X x x) xx xxxxxxxx xxxxxxx, např. X/x² xxxx J/cm².

Pásma xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: podle xxxxxxxxxx XXX (Commission Xxxxxxxxxxxxx xx L'Eclairage) xx xxxxxxx označení XXX (315 - 400 xx), XXX (280 - 315 xx) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxx: xx xxxxxxx mezi pásmy XXX x UVB xx často xxxxxxxx 320 nm x XXX xx xxxxx xxxx na XX-X1 x UV-A2 s xxxxxxx zhruba x 340 xx.

Xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: xxxxxxxx, xxxxxx xx měří xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx populace (xxxx. xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx živou xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx testem x xxxx uspořádání koreluje x celkovým xxxxxx xxxx. životností (xxxxxxxxx) xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolami (xxxxxxxxxxxx), xxxxx prošly xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxx + XX xxxx - UV), xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.

Predikční xxxxx: xxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx do predikce xxxxxxxxx potenciálu. X xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx test xx xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx k xxxxxxxx fotoxického potenciálu xxxxxx veličin PIF x XXX.

XXX (xxxxx xxxxxxxxxx factor, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): koeficient xxxxxxxxxxxxx xxxxx dvou stejně xxxxxxxx cytotoxických koncentrací (XX₅₀) testované xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) a v xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.

XXX (xxxx xxxxx xxxxxx, střední xxxxxxxxx): xxxx míra xxxxxxxx x matematické xxxxxxx kompletního xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx: akutní xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), xxxxx xxxxxx xx xxxx expozici xxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx expozici xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ozářením kůže xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx: nižší xxxxxx xxxxx "fototoxicita", xxxxxxxx se xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx reakcí, x nimž xxxxxxx x kůži xxxx, xx xx xx xxxxxx (topicky nebo xxxxxx přijatá) xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxx při nadměrném xxxxxxx).

Xxxxxxxxxxx: získaná imunologická xxxxxxxxxx, která xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxx xx xxxxxxxxx jednotýdenní xx dvoutýdenní xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx, xxx xx reaktivita xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxx (odezva) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx dochází poté, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx dávce XX/XXX xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxxxx: karcinogenita xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX zářením xxxxxxxx látkou, xxxxxxx x fotokokarcinogenitě.

1.3 REFERENČNÍ XXXXX

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx jako xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx testována při xxxxx xxxxxx, se xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx referenční xxxxx xxxxxxxxx x látek, xxxxx xxxx použity xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (3) (13).

1.4 XXXXXXX XXXXX

Xxxxxxxxxxx xxxxxx byly xxxxxxxxxx x řady xxxxx (5) (6) (7) (8), jejichž xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx, xx xxxxxx absorbovat xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx fotochemie (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx zákon) xxxxxxxx xxxxx fotoreakce dostatečnou xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx se xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx návodu, xxxx xx se xxxx stanovit xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x XX/XXX xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXXX č. 101). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx než 10 xxxxx x mol^-1 x xx^-1, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciál x není xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx testovat xxx testem xx xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx vitro, ani xxxxxx xxxxx biologickým xxxxxx (viz dodatek).

1.5 XXXXXXX XXXXXX

Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx vyústit xx fototoxickou reakci (7), xxxxxxx všechny xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Proto xx xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x přítomnosti a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX záření. Xxxxxxxxxxxx xx xxx tomto xxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx barviva, xxxxxxxxx červeně (neutral xxx, XX) (9), 24 hodin po xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxx.

Xxxxx Xxxx/x 3X3 se xxxxxxxxx xx dobu 24 xxxxx xxx, aby xx vytvořila xxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx). Pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx preinkubují dvě xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx x xxxxxx x xxxx různých xxxxxxxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx. Jedna x obou xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxxxx 5 X/xx² UVA (+UV xxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx xx uchovává x xxxxx (-UV xxxxxxxxxx). X xxxx destičkách xx xxx xxxxxx xxxxxxx médiem kultivačním x xx xxxxxxx 24 xxxxxxxx kultivace xx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx xxxxxx, XXX) xx xxxx 3 xxxxx stanoví životaschopnost xxxxx. Xxx každou x osmi koncentrací xx xxxxxxx relativní xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxx procento xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislé reakce xxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XX) x x xxxxxxxxxxxxx (-XX) záření, xxxxxxx na xxxxxx XX₅₀, tj. xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x 50 % x xxxxxxxxx x kontrolami bez xxxxxxxxx.

1.6 XXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxxxxx xxxxx xxxx záření XXX, xxxxxxxxxx xxxxx: x buněk je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX. Xxxxx xx xxxxxx v xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, xxxxxx xxx xx vystaví xxxxxx UVA x xxxxx 1 - 9 J/cm² a xxxxx xxx xx xxxxxx NRU stanoví xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jakosti, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx² xxxx xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxx nejvyšší dávce XXX xxxxxx 9 X/xx² xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx než 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx uchovávaných v xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx zhruba xx každé xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kontroly vůči xxxxxx XXX, xxxxx xxxx: xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx x Xxxxxxx vyváženém xxxxxx xxxxxxx [Xxxx´x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, XXXX] x 1 % roztokem dimethylsulfoxidu (XXXX) xxxx ethanolu (XxXX) nebo xxx xxxx vykazují v xxxxxxxxxxx (+XXX) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-UVA).

Životaschopnost xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxxx optická xxxxxxx (OD_{540 XXX}) xxxxxx x XX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxxx, xxx xxxxx 1 x 10⁴ xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx jamce xxxxxx xxxxx dvou dnů xxxxx s xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Test xxxxxxx xxxxxxxx akceptovatelnosti, xx-xx průměrná xxxxxxx XX_{540 XXX} x xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx 0,2.

Xxxxxxxxx kontrola: xxx xxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx látkou. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx chlorpromazin (XXX); xxxxx xx xxxx xxxxx doporučuje. Pro XXX xxxxxxxxx dle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx tato xxxxxxxx akceptovatelnosti: XXX xxxxxxx (+UVA): XX₅₀ = 0,1 - 2,0 μx/xx, XXX xxxxxxxxx (-XXX): EC₅₀ = 7,0 - 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (PIF), tzn. xxxxx hodnoty EC₅₀, xx xxx xxxxxxxxx 6.

Xxxxx XXX se xxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx dají xxxxxx x xxxx známé xxxxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx chemické xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx) látky. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx adekvátně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx rozsahy hodnot XX₅₀ x XXX xxxx XXX (střední xxxxxxxxx).

1.7 XXXXX METODY

1.7.1 Xxxxxxxx

1.7.1.1 Buňky

Při validační xxxxxx byla použita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxx/x 3X3 klon 31, x to xxx x XXXX xxxx x ECACC; ta xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx dají x xxxxxxxx použít x xxxx buňky xxxx xxxxxxx xxxxx, pokud xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx; je xxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx stejně xxxxxx.

X xxxxx je xxxxx pravidelně kontrolovat, xx nejsou xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, a xxx xx použít xxx x xxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxx buněk xxxx UVA xxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxxx narůstat, xx xxxxx xxxxxxxx buňky Xxxx/x 3X3 z xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx než 100. Xxxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 vůči UVA xxxxxx je třeba xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx popsaným v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

1.7.1.2 Xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3T3 xx jedná x XXXX xxxxxxxxx 10 % séra xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 mM xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 ^oC / 7,5 % CO₂. Xx nezbytné, aby xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx dané buňky xxxx. xxxxxxxx xxxxx.

1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxxx zásobních kultur xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx médiu x xxxxxxxxx jednou se xxxx použitím x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxx.

Xxx test xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx x kultivačním xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxx testu (xx. xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxxx) xxxxxxx ke xxxxxxxxxx (xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, jednolitou vrstvu xxxxx). X případě xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx x destičkách x 96 jamkami xx xxxxxxxxxx hustota 1 x 10⁴ xxxxx v xxxxx xxxxx.

Xxx xxxxxx testovanou xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx identicky xx xxx xxxxxxxx x 96 jamkami, xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx identických xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxx doby, kdy xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx (+UVA/VIS) x xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX/XXX).

1.7.1.4 Metabolická xxxxxxxx

Xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx potenciálu xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x případě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx žádná látka, xxx xx k xxxx, xxx xxxxxxxx xxxx fotoxin in xxxx xxxx xx xxxxx, bylo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Nepokládá xx xxxxx ani xx xxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.7.1.5 Testovaná xxxxx / příprava

Testovaná látka xxxx xxx před xxxxxxxx xxxxxxx připravena, xxxxxx údaje x xxxx stabilitě prokazují, xx xx dá xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xx by xxxxx k fotodegradaci, xxxx xx příprava xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx se rozpustí x xxxxxxxxxx solném xxxxxxx, například x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (EBSS) nebo xx fyziologickém roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx saline, PBS), xxxxx - xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx - xxxxx xxxxxxxxx xxxxx proteinové složky xxx xxxxxxx indikátory xX, xxxxxxxxxx světlo.

Pokud xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, rozpustí se xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx stonásobně xxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxx se xxxxx v xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx roztokem. Xxxxx xx používá xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx v konstantním xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, xx. xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx testované xxxxx x v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxx rozpouštědlo xx xxxxxxxxxx dimethylsulfoxid (XXXX) nebo ethanol (XxXX). Xxxxxx xxxxx xxx x další xxxxxxxxxxxx x nízkou xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xx však xxxxx xxxx xxxxxxx zvážit xxxxxx xxxxxxxxxx vlastnosti, xxxx je xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, potlačení xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, dá xx xxxxxx xxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 ^xX.

1.7.1.6 Xxxxxxxxx UV světlem / xxxxxxxx

Xxxxxxxx zdroj: xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx klíčovým xxxxxxxx. Záření x XXX x xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx záření UVB xx x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx od 313 xx x 280 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx kritéria xxx xxxxx světelného zdroje xxxxx zásadní xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx vlnové xxxxx, jež testovaná xxxxx xxxxxxxxx, x xxx byla xxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx) xxxxxxxxxxx xx zjištění xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx látek. Xxxx xxxxxxx xxx použité xxxxxx délky a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém - xxxxx sem i xxxxxxxxxx tepla (infračervená xxxxxx).

Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxx (xxxxxxxxxxx) rtuťové xxxxxxxxxx xxxxxxx - xx mají xx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxx a xxxx xxxxxxxx, sluneční xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx všechny xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXX, xx xxxxx xxxxxx filtrovat tak, xxx xx xxxx xxxxxx cytotoxické záření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxx UVB xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (UVA:UVB ∼ 2 : 1). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx simulátoru xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xx x xxxxx (3).

Xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxx (iradiance) se xxxx xxxxxxxxxx před xxxxxx testem xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxx xxxx zdroj. Xxxxxxxxx XX-xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx, k xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx XX-xxxx xxxxx xxxx x kalibrace. Xxxxxxx xx, xxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx světelného zdroje x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx širokopásmového UV-metru xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; taková xxxxxxxxxxxxx ovšem xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vyškoleného xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx zjištěno, xx xxxxx UVA xxxxxx 5 X/xx² xx xxx buňky Xxxx/x 3X3 necytotoxická a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxxx x xxxxx fototoxické xxxxx. Xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx 50 xxxxx, xxxx xxx iradiance nastavena xx 1,666 xX/xx². Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxx se xxxxx xxxxxx UVA upravit xxx, aby xxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx vzorce:

	dávka xxxxxx (X/xx²) x 100	&xxxx;
&xxxx; x (xxx) =	________________________	(1 X = 1 X x)
&xxxx;	&xxxx; xxxxxx (xX/xx²) x 60

1.7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx koncentrace testované xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx fototoxické xxxxx xxxx detekovány xxx koncentracích xxxxxxx, xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (13). Hodnota xX xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).

Xxxxxx koncentrací testované xxxxx při použití xxxxxx (+XXX) a xxx něj (-XXX) xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx a xxxxxx koncentrační xxxx xx zvolí tak, xxx křivky xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (x konstantním xxxxxxxx xxxxxx).

1.7.3 Xxxxx xxxxxxx

1.7.3.1 Xxxxx xxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxx 1 x 10⁵ buněk/ml x xxxxxxxxxxx médiu. Xx periferních xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx destičky xxx xxxxxxx kultury xx odpipetuje xx 100 μx xxxxxxxxx xxxxx (= slepý xxxxx), xx ostatních xxxxx se xxxxxxx xx 100 μx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx 1 x 10⁵ buněk/ml (= 1 x 10⁴ xxxxx xx xxxxx). Xxx každou testovanou xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx - xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-UVA), xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).

Xxxxx xx xxxxxxxx xx dobu 24 xxxxx (7,5 % XX₂, 37 ^xX), xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx monolayer. Xxxx xxxxxxxxx xxxx umožňuje xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x jejich xxxxxxxxxxxxx xxxx.

1.7.3.2 Xxxxx xxx

Xx inkubaci xx xxxxxxxxxx médium x xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX xx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx 100 μx EBSS/PBS xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx koncentraci xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xx dobu 60 minut (7,5 % XX₂, 37 ^xX).

Xxxx xxxxx s XXX (+XXX) se xxxxxxx xxx, xx xx buňky xx xxxxxxxx teploty ozařují xx dobu 50 xxxxx skrz xxxxx xxxxxxxx s 96 xxxxxxx zářením XXX x intenzitě 1,7 xX/xx² (= xxxxx 5 / cm²). Xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx vody pod xxxxxx, je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-UVA) xx xx xxxx 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx XXX) xxxxxxxxxx xx pokojové xxxxxxx x xxxxxx xxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxx a xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx (18 - 22 xxxxx) xx xxxxxxxx (7,5 % CO₂, 37 ^oC).

1.7.3.3 Xxxxx xxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx mikroskopem x xxxxxxx xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx způsobené xxxxxxxxxxxx účinkem xxxxxxxxx xxxxx. Tato xxxxxxxx xx doporučuje, aby xx xxxxxxxxxxx experimentální xxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se tyto xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (XX)

Xxxxx xx promyjí xxxxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Promývací roztok xx odstraní jemným xxxxxxxx. Přidá se 100 μl xxxxx x NR a xxxxxxxx xx xxx 37 ^oC ve xxxxxxxx atmosféře xx 7,5 % XX₂ xx dobu 3 xxxxx.

Xx xxxxxxxx xx xxxxxx s XX xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx EBSS/PBS, xxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx (je také xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx).

Xxxxx xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx xx xxxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xx dobu 10 xxxxx rychle xxxxxx xx třepačce, xxxxx xx NR x xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx hustota xxxxxxxx XX xxx 540 xx za xxxxxxx xxxxxxx pokusu xxxx srovnávacího roztoku. Xxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. ASCII) pro xxxxx xxxxxxx.

2. XXXXX

1.8 XXXXXXX X XXXXXXXX XXXXX

Xxxxx xxxx umožňovat xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx při xxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxx ní. Je-li xxxxxxxx cytotoxicita, koncentrační xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxx údaje xxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx x xxxxxxxxxxx xx xxx (-XXX) necytotoxická, xxx xxx xxxxxxxxx (+XXX) vysoce xxxxxxxxxxx, xxxx dojít x xxxx, že se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx částech experimentu xxxxx xxxxx řádově xxxxx, aby byl xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxx při -UVA, xxx xxx +XXX), xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx dávkami xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxx hraniční - xxxxxx xxxxxx čáry xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx třeba xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx-xx xx opakování testu xx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx jasného xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx testu xx příprava xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx). Xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx, xxx jsou ve xxxx xxxxxxx, může xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx.

1.9 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX

Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x 50 % xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx NR (XX₅₀). Xx xxx xxxxxx xxx, xx xx xx xxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx použije xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx regrese (xxxxxxx Xxxxxxx funkce nebo xxxxxxxxxx xxxxxxx) xxxx xx xxxxxxx jiná xxxxxx metoda xxxxxxxxx (14). Než xx xxxxxxx EC₅₀ xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx proložení. K xxxxxxx xxxxxxx XX₅₀ xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (osa x: log, xxx x: xxxxxx), protože xx xxxx transformaci xxxx křivka koncentrace - odezva xxxxxx xxxxx lineární.

1.10 VYHODNOCENÍ XXXXXXXX (XXXXXXXXX XXXXXX)

1.10.1 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 1: fotoiritační xxxxxx (XXX)

Xxxxx xx získají xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx jak xx xxxxxxxxxxx (+XXX), xxx xx nepřítomnosti (-XXX) xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxx podle xxxxxx

&xxxx;	&xxxx; XX₅₀ (-XX)
&xxxx; (x) XXX =	&xxxx; ____________
&xxxx;	&xxxx; XX₅₀ (+XX)

XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, kdežto PIF ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx-xx látka xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX, xxxxxx xxx -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx PIF xxxxxxxxx, x xxxx xx jedná o xxxxxxxx, který xxxxxxxx, xx látka má xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xx vypočítat tzv. "&xx; XXX", když xx xxxx xxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (C_max) x xxxx hodnota xx xxxxxx xx xxxxxx:

&xxxx;	&xxxx; X_xxx (-XX)
&xxxx; (x) &xx; PIF =	&xxxx; ___________
&xxxx;	&xxxx; XX₅₀ (+UV)

Pokud xx xx vypočítat pouze "&xx; PIF", pak xxxxx hodnota &xx; 1 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx EC₅₀ (-XX), xxx EC₅₀ (+XX), xxxxxxx látka xxxxxxxxxx cytotoxicitu xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx to xxxxxxxx xxxx, že xxxxx nemá xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx případě xx xxxxxxx xxxxxxxx "PIF = *1", xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

&xxxx;	&xxxx; X_xxx (-XX)
&xxxx; (x) XXX = *1 =	&xxxx; ___________
&xxxx;	&xxxx; X_xxx (+XX)

Xxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", xxxxxxxxxx xx, že xxxx xxxxxxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

X xxxxxxxxx (b) x (x) xx xxxxx xxx predikci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx dosáhlo.

1.10.2 Xxxxxxxxx model, xxxxx 2: střední fotoefekt (XXX)

Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx predikci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx x validační xxxxxx XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx studie xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx vitro x xxxxx XX xxxxxx (13). X xxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XXX v xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx hodnotu XX₅₀. X tomto modelu xx xxxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxxx" (XXX) xxxxxxxx na porovnání xxxxxx průběhu křivek xxxxxxxxxxx - xxxxxx. Xxx aplikaci xxxxxx XXX byl na Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx zdarma.

1.11 Xxxxxxxxxxxx výsledků

Pozitivní xxxxxxxx xxxxx (XXX ≥ 5 nebo MPE ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx potenciál. Xxxxx xx x xxxxxx výsledku xxxxx xxx koncentracích xxxxxxx xxx 10 μx/xx, xx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxxxxx pouze xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (100 (x/xx), xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx nejspíše xxxxxxxxx dalších xxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx látky x xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx dané xxxxx v jiném xxxxxxxxxxxx alternativním xxxxx, xxxxxxxxx za použití xxxxxx xxxxxx kůže xx xxxxx.

Xxxxxxxxx výsledek xxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx vitro (XXX &xx; 5 xxxx XXX &xx; 0,1) ukazuje, že xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx podmínkách. X xxxxxxxxx, kdy by xx xxxxx xxxx xxxxxxxx i xxx xxxxxxxx koncentraci 100 μx/xx, xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx, xx xxxxx xxxx žádný fototoxický xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxx xx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx. V xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (XX₅₀ + XX a XX₅₀ - XX), xx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (+XX xxx -UV) x xxx omezenou xxxxxxxxxxx xxxxx xx nedalo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, je možno xxxxxxxxx tento xxxx xxx danou látku xx xx xxxxx xxxxxx x mělo xx xx xxxxxxxx x xxxxx, potvrzujícím xxxxx (xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx nebo xxxxxx kůže ex xxxx nebo in xxxx).

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:

Testovaná xxxxx:

- identifikační xxxxx x xxxxx XXX, xx-xx xxxxx,

- fyzikální xxxxxx a čistota,

- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, jsou-li xxxxx.

Xxxxxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxx rozpouštědla,

- rozpustnost xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx,

- procentický xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx médiu (EBSS xxxx XXX).

Xxxxx:

- typ x xxxxx buněk,

- xxxxxxxxxxxx mykoplazmat,

- xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx x testu xx xxxxxxxxxxxx 3X XXX xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxx xxxx ovlivněním x xx xxx:

- xxx x složení xxxxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx CO₂, xxxxxxx, xxxxxxx),

- xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx před xx x xx xx).

Xxxxxxxx pokusu (b) - ovlivnění xxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx x xxx xxx,

- v xxxxxxx xxxxxxx rozpustnosti xxxxxxxxx xxxxx x absence xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxx koncentrace,

- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (pufrovaný xxxxx xxxxxx),

- doba xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (x) - ozařování:

- xxxxxxxxxx xxxxx daného xxxxxxxxxx xxxxxx,

- spektrální xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx světelného xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxx propustnosti/absorpce použitého xxxxxx (xxxxxx),

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x podrobnosti x xxxx kalibraci,

- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxx UVA (v x X/xx²) při xxxx vzdálenosti,

- xxxx xxxxxxxx XX/XXX xxxxxx,

- xxxxx xxxxxx XXX (xxxxxxxxx x xxx) x X/xx²,

- teplota xxxxxxxxx xxxxxx během xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxx XXX:

- xxxxxxx xxxxx s XX,

- xxxx xxxxxxxx x NR,

- inkubační xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx CO², xxxxxxx, vlhkost),

- xxxxxxxx xxxxxxxx XX (xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxx),

- xxxxxx xxxxx, xxx xxxxx se spektrofotometricky xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XX,

- druhová xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx-xx xxxxxxx,

- složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx spektrofotometrii (xxxxxx), xxxxx byl xxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxx koncentrace - xxxxxx (koncentrace xxxxxxxxx xxxxx νx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx experimenty +XXX x -XXX,

- analýza xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx: podle xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX₅₀ (+XXX) x EC₅₀ (-XXX),

- xxxxxxxxx obou xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx ozařování XX/XXX xxxxxxx - xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) nebo středního xxxxxxxxxx (XXX),

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx testu (x) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx denzita extraktu XX) ozářených a xxxxxxxxxxx buněk,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx akceptovatelnosti xxxxx (b) - xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx:

- xxxxxxx EC₅₀ (+UVA), XX₅₀ (-XXX) a XXX xxxxx použité xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx: xxxxxxx XX₅₀ (+XXX), EC₅₀ (-XXX) x XXX, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxx X.41. byla xxxxxxx právním xxxxxxxxx x. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx od 22.6.2001

Xxxxxxxxx

Xxxxxx předpis x. 251/98 Sb. nabyl xxxxxxxxx xxxx 1.1.1999.

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x.:

208/2001 Xx., kterým xx xxxx xxxxxxxx XX č. 251/98 Xx., kterou xx xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků - xxxxxx bude xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx

x xxxxxxxxx xx 22.6.2001

Xxxxxx xxxxxxx č. 251/98 Xx. byl xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 443/2004 Sb. s xxxxxxxxx xx 1.8.2004.

Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx norem xxxxxx xxxxxxxx předpisů v xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx změna xxxxx uvedeného xxxxxxxx xxxxxxxx.

1) §2 xxxx. 8 písm. x) xx x) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x chemických xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

2) Xxxxx č. 246/1992 Sb., xx ochranu xxxxxx xxxxx týrání, xx xxxxx xxxxxx x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Sb. x č. 30/1998 Xx.

3) Směrnice Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxx zkoušení xxxxxxxxxx. Xxxxx 4 - xxxx xx zdraví (XXXX Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxx of Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).

Plné znění - 251/1998 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Plné znění - 251/1998 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu. Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.