Právní předpis byl sestaven k datu 31.07.2004.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
VYHLÁŠKA
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
ze dne 16. xxxxx 1998,
xxxxxx xx stanoví xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických látek x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx stanoví xxxxx §4 odst. 1 xxxx. x) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x xxxxxxxxxx látkách x xxxxxxxxxx přípravcích x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx:
§1
Tato xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování nebezpečných xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x chemických přípravků xxxxxx toxických, toxických, xxxxxx škodlivých, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, senzibilizujících, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx (dále xxx "xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx").1)
§2
(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx prováděnými xxxxxxxx xxxxxxxxx x příloze xxxx xxxxxxxx.
(2) Xx zjišťování xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx lze xxxxxx i xxxx xxxxxx, pokud xxxx xxxxxxxxxxxx stejně xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx použití xxxxxxxxx xxxxxx2) x xxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx (XXXX).3)
§3
Tato xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx 1. xxxxx 1999.
Ministr:
XXXx. Xxxxx, XXx. x. r.
Příloha x xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.
Xxxxxx pro xxxxxxxxxx toxicity xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků
X. XXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXXXX XXXXX
1.1 AKUTNÍ XXXXXXXX
xxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxx určité xxxx (xxxxxxxx 14 dní) xx xxxxxx jedné xxxxx nějaké xxxxx.
1.2 XXXXXX XXXXXXXX
xx xxxxxxxxx termín popisující xxxxx příznaky xxxxxxxx xx aplikaci testované xxxxx. Jsou to xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx by xxx xxxxxx, xx po xxxxxxx podávané xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx toxických xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx x xxxxx.
1.3 XXXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx), nebo xxxx konstantní dietní xxxxxxxxxxx (xxxx na xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx).
1.4 XXXXXXXXXXXXXX XXXXX
xx xxxxxxxx ze xxxx pevných xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx xx to xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) související s xxxxxxx xxxxxx.
1.5 DÁVKOVÁNÍ
xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, frekvenci x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
1.6 XX50 (STŘEDNÍ XXXXXX DÁVKA)
je xxxxxxxxxxx vypočtená xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxxxxxx xxxx smrt 50 % xxxxxx, xxxxxx xxxx podána. Xxxxxxx XX50 xx xxxxx jako hmotnost xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx).
1.7 XX50 (XXXXXXX XXXXXX KONCENTRACE)
xx xxxxxxxxxxx vypočtená koncentrace xxxxx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxx po xxxxxxxx x 50 % xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx po xxxxxxxxxxx xxxx. Hodnota XX50 xx udává xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx objemu xxxxxxx (xx.x-1).
1.8 XXXXX
xx xxxxxxx xxx "xx xxxxxxxx adverse xxxxxx xxxxx" (hladinu xxx xxxxxxxxxxxx nepříznivého xxxxxx) x xx xx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx x zjistitelným toxickým xxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXX PO XXXXXXXXX DÁVCE/SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX
xxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxxxx xx objeví x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx života xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.10 XXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX XXXX)
je xxxxxxxx xxxxx, xxxxx x zvířat xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx.
1.11 XXXXXXXXXX XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
1.12 XXXXXXXXXX XXX
je xxxxxxxx xxxx xx xxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxx.
1.13 XXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX)
xx xxxxxxxxxxxx vyvolaná xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.14 XXXXXXXXX XXXX
xx vyvolání xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx působení xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 3 xxxxx xx 4 xxxxx.
1.15 XXXXXXXXXXXXXX
xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek.
1.16 XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx vstupuje xx xxxx.
1.17 XXXXXXX
xxxxxxxx proces(y), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx metabolity xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx.
1.18 XXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx metabolity xxxxxxxxxxx x xxxx.
1.19 XXXXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) je xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx neenzymatickými xxxxxxxx.
2. XXXXXX - XXXXXXXXX APLIKACE/SUBCHRONICKÁ X XXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx počtu různých xxxxx toxicity (xxxxxx X.1 - B.5), xx kterých xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx předběžný xxxxx toxicity.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx lze xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx stanovení XX50. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx není limitní xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx definovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx zvířete, xxxxxxxxx xxxxxx pevné xxxxx (xxxxxx B.1 xxx) x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx akutní xxxxxxxx (xxxxxx X.1 xxxx). Při xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx na xxxxxx druhu xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat.
Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx aplikací (metody X.7, X.8 x X.9) se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x důsledku xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xx nejvíce xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx měly xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx vyžaduje zkoumání xxxxxx aspektů xx xxxxx hloubky (metody X.26 - B.30 x X.33).
3. XXXXXXXXXX - GENOTOXICITA
Xxxxxxxxxx xx vztahuje k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx struktuře xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx ("xxxxxx") xxxxx postihnout xxxxxx gen xxxx xxxxxxxx xxxx, blok xxxx xxxx celé xxxxxxxxxx. Xxxxxx na xxxx chromozómy se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx in xxxxx xx xxxxxx (xxxxxx) xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxx B.13/14) xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx (metoda B.10).
Xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx, xxxx. micronucleus test (xxxxxx B.12) xxxx xxxxxxx metafáze chromozomů xxxxxx xxxxx (xxxxxx X.11). Xx však xxxxx dávat xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx vitro xxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Tyto xxxxxx xxx využít x xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx získaných xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxxxx nezachycených základním xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx.
Pro xxxx účely xxxxxxxx xxxxxx X.15 xx X.25 xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx x xx xxxxx, xxx rozšiřují xxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx informace x bodových xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x organismech xxxxxxxxxxxx xxx baktérie xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx platí, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx poskytly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxx, případně karcinogenním xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
Xxxxxxxxx xxxxxx, vhodná xxx daný případ, xxxx záviset xx xxxxxxx xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x známých xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx účinků x xxxxx xxxxxx organizmu, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx, xxxx. specifický xxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x první xxxxxxxx (xxxxxxxxxx v xxxx xxxxxxx), nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxxx X.25). Těchto xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx možného xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx člověka. Vzhledem xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx počtu potřebných xxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xx xxxxx se xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xx projednání x Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx toxikologie.
4. XXXXXXXXXXXXX
Chemické látky xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx karcinogeny, x xxxxxxxxxx xx předpokládaném xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx poskytují xxxxx xxxxxxxx při opakované xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx B.7, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx histopatologických xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx by xxxxx xxx také xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx informace mohou xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx s karcinogenním xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx karcinogenity (xxxxxx X.32) nebo xxxxx x kombinované studii xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.33).
X xxxxxxxxx xxxx rovněž xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx schopnost xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x maligní transformací - in vivo (xxxxxx X.21). Používá xx několika různých xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx.
5. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Reprodukční xxxxxxxx xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx (xxxx na xxxxxxxx) xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinků xx xxxxxxxxx (vývojová toxicita) xxxxxxxxxx také xxxxxxxxxxxx x xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx (metoda X.31) xxx xxxxxx zaměřené xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vývojové xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx podáváním. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx použity xxxx způsoby aplikace x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx metodu xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx je xxxxxxxxx třígenerační xxxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx X.35) xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
6. NEUROTOXICITA
Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx systému. Předběžné xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx vzejít x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7) zahrnuje xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinku. Xxxxxx by měla xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, hloubkové xxxxxxxx xxxxxx aspektu. Navíc xx xxxxxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxx studiích xxxxxxxx. Xxxx například xxxxxxxx, že jisté xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxicitu, xxxxx xx posuzována xxxxxxxx X.37 a X.38 po jednorázovém xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
7. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx různými xxxxxxx, xxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx anebo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xx následek xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx B.7), zahrnuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinků. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx odhalit xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx tohoto xxxxxxx.
8. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx specifické xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx a xxxxxxxx xxxxx pomoci při xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx, xx bude x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxikokinetických xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, metabolismu x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxx xxxx dostatečná xxxxxx x xxxxxxxxxxxx podáním (xxxxxx X.36).
Informace x xxxxxxxx xxxxxxxxx x fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx poskytnout xxxxx, umožňující odhad xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xx xxxxx. Přispět xxxxx také xxxxxxxxx x toxikokinetických xxxxxxxxxxx x předcházejících toxikologických x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX LÁTKY
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx významnějších xxxxxxxx, x xxxx relevantní xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxx zahájením xxxxxxxx toxikologické studie.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx poskytují xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx výběr xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxxx x látkou a xxxx xxxxxxxxxx.
Vypracování xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky (x xxxx xxxxx xxxxx větších nečistot) x xxxxxxxxxx xxxxx x biologickém xxxxxxxxx xx měl předcházet xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx a chování xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
10. XXXX X XXXXXXX
Pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx, x správná xxxx x xxxxxxx podstatnou xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX XXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx zvířata xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx je vhodná xxxxxxx místnosti 22 xX ± 3 xX xxx relativní xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx xxxxxxx xx xxx teplota 20 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %.
Xxxxxxx experimentální xxxxxxxx xxxxxxx xxxx zvláště xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx xxxx případy xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx testované xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxxx toxických xxxxxx xx třeba sledovat xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx, zaznamenávat xx x uvést xx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx má xxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x tmy xx xxxxxxxx hodinách. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx a uvést xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx nevyžaduje xxxx xxxxxx, mohou xxx xxxxxxx chována xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx jedinců xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxx 5 xxxxxx x jedné xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx zprávy x pokusech xx xxxxxxxxx jsou údaje x xxxxxxx xxxxx x klecích x xxxxx zvířat xxxxxxxxx x xxxxx kleci xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx xxxx vyhovovat xxxx xxxxxxxxxx výživy xxx xxxxxxxxx xxxxxxx živočišný xxxx. Podávají-li xx xxxxxxxx studované látky x xxxxxxx, může xx výživová xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky a xxxxxxx xxxxxx potravy. Xxxxxxx takové reakce xx nutno xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx výsledků. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxx. Xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x potravě, je xxxxx tomu xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxxxx x potravě, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx toxicitu, xxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xx kterých xx xx tento xxxx xxxxxxxx.
11. XXXXXXX ZVÍŘAT
Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ochraně xxxxxx.
Xxxxxxx počtu x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1.bis) nebo xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (B.1.tris). Xxxxxx x pevnou xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx specifického xxxxxxxx x xxxxxxxx menší xxxxx zvířat. Metoda xxxxxxxxx xxxxx akutní xxxxxxxx vyžaduje x xxxxxxx x 70 % xxxxxx méně xxx xxxxxx X.1.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podávat x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, x xxxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x testech xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1, B.2 x X.3), ale xxxx x xx vivo xxxxxxx mutagenity (metody X.11 x B.12), xxxxxxxx vyhnout xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Při testování xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx, je-li xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx provedených xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx in xxxxx. Xxxxxxxxx, byla-li x xxxxxx xxxxxxxxx studie xxxxxx xxxxx toxicity x xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx (xxxxxx X.3) x xxxxxx-xx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxx, další xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4) může xxx zbytečné; xxxxx, xxxxx prokazatelně xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4), nesmějí xxx dále xxxxxxxxx xx xxxxxxxx oka.
Xx nutno xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx informací xxxx xxxxxxxx testy na xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx používání xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxx metody x xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, následnou xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxx xxx, xxx xx xx možné.
12. XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxx in vitro xx xxxxx mít xx zřeteli, xx xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx je xxxxx xxx x xxxxxxx xxxx; xxxxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Výsledky xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxx klasifikaci x xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx vlastností xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Tyto výsledky xxxxx být xxxx xxxxxxx xxx studie, xxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Sb. s xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.1. AKUTNÍ XXXXXXXX ORÁLNÍ (PER XX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Testovaná látka xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx orientačního xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, která xxxxxxx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx. Tato xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Zvířata xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx je třeba xxxxxxxx způsobem utratit. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx se xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Pokud je xxxxx, xxxxxxxx se xxxxxx nebo suspenze xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx jako xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, další xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx roztok x xxxxxx vhodných xxxxxxxxxx xxxx suspenze. U xxxxxxxxx vehikulí xxxx xxx xxxxx nebo xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx relevantní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx překročit 10 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti; xxxxxxxx xxxx vodné xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx až 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x testech xx xx xxxx minimalizovat xxxxxxx xxxxxxx koncentrací, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx dávek. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Dává xx přednost potkanům, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zdravých zvířat x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Na xxxxxxx xxxxx xx x xxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 hlodavců xxxxxxxx xxxxxxx. Používá-li xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx se zvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Dávky xx xxxxx pečlivě xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, xxx nebyla xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx testech je xxxxx se vyvarovat xxxxxx letálních dávek xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx být xxxxxxxxxx xxxxx hladin xxxxx, xxxxxxx xxx, x mají xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx x mortality. Získané xxxxx musí xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkou a xxxxxxx, x xxxxx xx možné, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x přijatelnou spolehlivostí.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxxx limitní xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx a 5 samic s xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx způsobí uhynutí, xx xxxxx uvážit xxxxxxxxx úplné studie.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx měla xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx obrazu xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx potřeby xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx je doba, xxx xx projevy xxxxxx objeví x xxxxxx, a doba xx uhynutí, zvláště xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. X xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx hladovění; xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. X xxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx látka xx xxxx xxxxxx xxxxxx x jedné xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx najednou, lze xxxxx aplikovanou dávku xx menších xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Po xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx během určitého xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx období - potravu x xxxx zvířatům xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxx látky xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx systematicky, xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx je třeba xxxxxxxx častá xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx sledovat x xxxxxxxxxx místní xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx jednou xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx pozorování xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx opatřeními x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx studii, xxxx. xxxxx nebo zmrazení xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx umírajících xxxxxx. Pozorování zahrnuje xxxxx xxxx, srsti, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x centrální nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx tremoru, křečovým xxxxx, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx zaznamenat xx nejpřesněji.
Xxxxxxx, xxxxx během pokusu xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx až xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x druhého xxxxxxx
Po dokončení xxxxxx na xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx jedné xxxxxxx x pěti xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrazně xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx informace, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx citlivější, xxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx otravy, popis xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx nálezů. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx provede xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pak v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x době xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Zvířata, xxxxx xxxx humánním způsobem xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx a xxxxxx vyvolané xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx uznávanou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx údajů xx xxxx zahrnovat xxxx xxxxx, pokud xxxxxxxx, xxxx expozicí xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxx změn chování, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, makroskopických xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx toxických xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu pokusu
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.
- experimentální xxxxxxxx,
- úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx se použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx podle pohlaví x podle hladiny xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x projevy xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, důvody a xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx zvířat - xxxxxxx xxxx pozorování,
- hodnota LD50 xxx xx xxxxxxx, x kterého xxx xxxxxxxx úplný xxxxx, x to pro 14xxxxx pozorování (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),
- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx LD50, xxxxx xx xxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxxx xxxxx metodou xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx testů xx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx výsledků (xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx účinku, xxxxx by xxxxx xxx xxxxxxx utracení xxxxxx během xxxxx xx xxxxxxxxxx hodnotu XX50),
- interpretace xxxxxxxx.
X.1. bis XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX) - XXXXXX XXXXX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxx toxicity xxxxxxxxx informace x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx doby po xxxxxxx podání jedné xxxxx xxxxxxxxx látky.
Xxxxxx x fixní xxxxxx xx provádí xx xxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxx orientační xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx sledují xxxxxx xxxxxxxx dávek xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx poskytuje xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Normálně xx x této xxxxx etapě xxxxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxx.
X hlavní xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxx x jedné z xxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx odvodí x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx studie, x xx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxx" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), ale xx xxxxxxx.
Po xxxxxx xx pozorují xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx, není xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Když xx xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx pozorována zřejmá xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Xxxxx zvířata xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx utracení, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx úrovni dávky.
Xxxxx xxxxxx umožňuje xxxxxxx "xxxxxxxxxxxxxx dávku" (xxx xxxx B - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), xx. xxxxxxxx x předem xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, aniž by xxxxx x xxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx stresu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podávat x xxxxxxxx dávkách x xxxxxxx způsobem, o xxxxxxx xx xxxxx, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx a stres xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxxx zvířata
Dává xx přednost potkanům, xxxxx nejsou známy xxxxxx proti tomu.
Xx třeba používat xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xx xxxxxxx xxxxx xx x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx studie x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx jedna xxxxxxx každého z xxxx xxxxxxx.
1.2.1.2 Příprava x podávání dávky
Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx xx roztok xxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx vhodném xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx vodného roztoku, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx, teprve potom xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X nevodných xxxxxxxx musí být xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx nebo xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; výjimkou xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx možno xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx podávané v xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx takovou xxxxxxx koncentrací, xxx xx zajistil konstantní xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Před xxxxxxx testované látky xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx; xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. X xxx xxxxxx xx xxxxxxx zváží a xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx sondou xxxxxx x xxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Po xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx přístup x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx se látka xxxxxxxxxxxxx xxxxx určitého xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx období - xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx postupu
1.2.2.1 Orientační xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx různých dávek xx jednotlivá xxxxxxx. Xxxxxxxx xx používají xxxxxx, pokud nejsou x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxx samci xxxxxxxxxxx pohlavím. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx se alespoň 24 xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xx pečlivě xxxxxxxx x xxxxx zjistit xxxxxxx otravy xxxxxxx xx xxxx dní; xxxxx xxxxxxxxxxx projevy xxxxx otravy xxxxx xxx, zvíře xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx výchozí xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx-1. Jestliže zvolená xxxxxxx dávka xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx vyšší xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx podat xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx více xxxxxxxxxxx xxxxxx dávek. Xxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxx(xxx) dávek, která(é) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx xxxxxx, x o xxxxxxxx xxxxx, xxxxx vyvolává xxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx dávku xxxxx xxxxx x příbuzných xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx dávky 500 xx.xx-1. Xxxxxxxx xx xx výchozí xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx 2000 mg.kg-1, xx xxxxxxxxxx studie xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxx xx xxxx úrovni xxxxx. Xxxxxxxx jsou xxx použití xxxxxxx xxxxx (xxxx. 500 xx.xx-1) zjištěny xxxxx xxxxxx, vyžadující xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx zvířeti xxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. 50 mg.kg-1). Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx je xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx než 5 xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx
Xxx každou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx se xxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx xx měly xxx nullipary x xxxxxx by xxx xxxxx.
Xxxxxxxxx metody xxxxx dávky xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx dávek xxx xxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Dávka, xxxxx xxxx užita x testu, xx xxx xxxxxxx z xxxxx xx 4 xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx by měla xxx xx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nikoliv xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx x humánních xxxxxx); xxxxxxx xxxxxxx nejsou xxxxxxxx, xxx xxxx xxx zaznamenána. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx podání xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx zřejmou xxxxxxxx, xx nutné xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx dávek. Xxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx pozorovací xxxxxx xxxx kompletní. Xxxxxxxx xxxxx toxická xxxxxxx xxxxxxxx humánní xxxxxxxx zvířat xxxx xxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx vlivem xxxxx, xxxx by být xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx další nižší xxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx humánně xxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxxx po xxxx xxxxxxxxxx období.
Xx xxxxxx xxxxx xx pozorování xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx vedou xxxxxxxxxx xxxxxxx. Je nezbytné xxxxxxxx x zaznamenat xxxxxx xxxxxx aplikované xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx aplikaci.
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx stanovit rigorózně. Xxxx by být xxxxxx podle obrazu xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje xxxxxx x xxxxxx xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx xx možno xxxxx xxxxxxx prodloužit. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx xx projevy xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xx uhynutí, xxxxxxx xxx, kde xx xxxxxx tendence x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx provádět xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxx látky x xxxxxxx jedenkrát xx den xxxxx xxx. Zvířata vykazující xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx několika xxxxxxx xxx xx podání xxxxx, jestliže xxxxxxx xxxx vykazují xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx může xxx xxxxxxx x xxxxxxx, když xx xxxxxx, xx xxxx xxxxxxx příliš xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx na změny xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx věnovat xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, letargii, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx látky, xxxxx xx další 3 xxx x potom xxxxxx týdně. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx xx indikováno, xxxxxxxx xx tkáně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx předcházející xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx třetí xxxxxxx xxxxx.
X xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx mortalitu xxx xxxxx 5 mg.kg-1 (xxxx jestliže xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx této xxxxx), xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxx studie xx xxxxxxxxx do xxxxxxx jednotlivě pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. X ní xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx utracených x xxxxxxxxx důvodů; xxxxx xxxxxxxxx účinků; xxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxx pozorován zřejmý xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; časový xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxx, je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx bolestem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx zaznamenána xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx možno obsahovat xxxx informace pro xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx,
- ve xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx podle pohlaví x xxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; změny tělesné xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx utracených xxxxx xxxxx; počet xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx účinků),
- xxxxxx xxxxxx nástupu xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xxxx reversibilní,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx, xxxx xxxxx xx podání xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxx histopatologické xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx toxicity a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v testu.
3.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx
Xxxxx | Výsledky | Xxxxxxxxxxxx |
5 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx toxicita 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx | Xxxxx, které jsou xxxxx jedovaté Xxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx Xxx výsledky při 50 xx.xx-1 |
50 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx nebo velmi xxxxxxxx. Viz xxxxxxxx xxx 5 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; není xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx škodlivé Xxx xxxxxxxx u 500 xx.xx-1 | |
500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % přežití | Xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Viz xxxxxxxx x 50 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; není zřejmá xxxxxxxx | Látky, xxxxx xxx xxxxxxxxx za xxxxx bez xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx u 2000 xx.xx-1 | |
2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxx xxxxxxxx x 500 xx.xx-1 Látky, xxxxx xxxxxx významnou xxxxxx xxxxxxxx |
X.1. xxxx XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX STANOVENÍ XXXXX XXXXXX XXXXXXXX
1. METODA
1.1 Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx toxicity xxxxxxxxx xxxxxxxxx jak xxx xxxxxxxxxx rizika, tak xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx používá xxx xxxxx stanovených xxxxx x přiměřených xxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxx testovanou xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxx testovací metodu xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx stanovených xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx body xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nebo xxx xxxxx testování. Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx dávek je xxxxx xxxxxx, pokud xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxxx stanovené xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxx pro xxxxxxx přesné LD50. Xxxxxxxx xxxxxxxxx rozsahu xxxxxxx, ve kterém xx xxxxxxx úmrtnost, xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx je i x této metody xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x sekvenčnímu xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxx než xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx B.1. Hlavní xxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx zvířat xxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx)(B.1) x xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1 bis).
1.2 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx skupině xxxxxxxxx zvířat v xxxxx ze stanovených xxxxx. Testování xx xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxx kroku xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, x.x.
- xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx xxxx bude xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, ale se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx nižší xxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx, xxx byla možná xxxxxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx, x xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx xxxx xxxxxxxxx testu, xxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx podmínky. Xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx, ale xxxxx xxxxxx x xxxxx kleci xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zvířete.
Testovaná xxxxx xx xxxxxxxxxx zvířatům x xxxxxx dávce xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxx, testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx nosiči. Xxxxxxxxxx xx nejprve xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx rostlinném xxxxx (např. kukuřičném) x xxx roztoku x jiných xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx charakteristika; xxxxx xxxx známa, xxxx xxx stanovena xxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxx xxx x xxxx 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx k xxxx xx xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxx musí xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx.
Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxx krok xx xxxxxxxxx xxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx, xxx. 25, 200 x 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Výchozí xxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxx, aby x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx popsaného x Xxxxxxx 1.
Xxx výběr xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx je třeba xxxxxx xxxxxxx dostupné xxxxxxxxx, xxxxxx informací x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxx naznačují, xx úmrtnost xx xxxxxxxxxxxxxxx x při xxxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx), pak xx xxxxxxx xxxxxxx test. Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx o testované xxxxx, doporučuje se - x xxxxxxx xx pokusná xxxxxxx - použít xxxxxxx xxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
X některých xxxxxxxxx xx třeba xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti. V xxxxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx pevných dávkách xx výši 5, 50 xxxx 500 xx.xx-1 tělesné hmotnosti.
Nemají xx xxxxxxxxx dávky, x xxxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx x závažnosti toxických xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx při xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxx není xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx přežila.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx se provádí xx xxxxx zvířatech xxxxxxx pohlaví. Xxxxx xxxxx x uhynutí xxxxxxxxxxxxx x podáním xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxxx 200 xx.xx-1 (xxxx 500 xx.xx-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx obvykle xx xxxx 14 xxx, kromě xxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx toxických xxxxxx, xxxx xxxxxx nástupu x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Je důležité xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxx a xxxx xxxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxx-xx x xxxxxxxx xxxxxxx příznaky. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx jednotlivé xxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxx zvážena. Xx xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xxx xxxxxxx xx dobu dalších 3 - 4 xxxxx. Xxx je xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxx být - v závislosti xx xxxxx xxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx potravu x xxxx.
Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx podán xxxxxxxx, xxxxxx na velikosti xxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx neměl xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx na 100 x tělesné hmotnosti, x případě xxxxxxx xxxxxxx lze xxxxx x 2 xx xx 100 x xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx x xxxxxxxxx objemu xx třeba minimalizovat xxxxxxxxx koncentrace xxx, xxx xxx podáván xxx xxxxx na xxxxx úrovních xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxx celou xxxxxxxx, je možné xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx v Xxxxxxx 1.
1.3.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx den (xxx xxxxxxxx) nebo častěji, xxxxx xx vyžaduje xxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxx, x xxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx stavu, nebo xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx stresu, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx: xxxx zvířata xxxx xxxxxxxxx stejně xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xx xx byla xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxx je třeba xxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx kůži x xxxxx, xx očích x xxxxxxxxxx, x xxxx xx dýchacím, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx aktivitě x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx výskytu xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, letargie, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx systematicky xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx jsou xxxxxx xxx xxxxx jednotlivé xxxxx.
1.3.3.2 Tělesná xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx x zaznamenávají změny xxxxxxxxx. Xx konci xxxxx jsou přežívající xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx, než xxxxx xxxxxxx utracena.
1.3.3.3 Pitva
U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx testu, xx xxxxxxx pitva. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx zaznamenány xxx xxxxx xxxxx zvlášť. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx mikroskopické xxxxxxxxx orgánů vykazujících xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zvířat xxxxxxxxxxxxx 24 x xxxx xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
X dispozici xxxx být xxxxx x xxxxxx jednotlivém xxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxx údaje shrnuty xx tabulkové formy, xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x průběhu xxxxx nebo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx jednotlivých xxxxxx, popis, časový xxxxxx x vratnost xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x Xxxxxxx 2.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx obsahuje xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx získány:
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxxxxxxxxxxxx stav zvířat, xx-xx xxxx;
- xxxxx, xxxxx a xxxxxxx xxxxxx;
- zdroj, podmínky xxxxx, potrava atd.;
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxx xxxxxxxxxx objemů x xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx x kvalitě xxxx (xxxxxx druhu x xxxxxx);
- xxxxxxxxxx xxxxxx počáteční dávky.
Výsledky:
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx zvířete xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dávkové xxxxxx (xxx. zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxx toxicity xxxxxx úmrtí, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x trvání xxxxxx);
- nástup a xxxxxx xxxxxx příznaků xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx nálezy x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx zvířete, xxxx-xx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x interpretace:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX TG 423.
DODATEK 1
XXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxx xxxx xxxxxxx x xxxx 1.4.2.3, výchozí xxxxx xx xxxx xxx xx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxxx dávky xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx o fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x účinku,
- všechny xxxxx z jiných xxxxx toxicity x
- xxxxxxxxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxxx vývojové xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxx dodatku xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx utracených nebo xxxxxxxxx zvířat postupuje xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 25 nebo 200 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx uhyne xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxx xxxx netestuje. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx 5 xxxxxx žádné xxxxxxx příznaky, je xxxxx pitvou xxxxxx xxxxxxx, xx úmrtí xxxxxxxxxxx s podanou xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx třeba pokračovat x xxxxxxxxx xx xxxxx úrovni xxxxx.
4. Xxxxx xx dávce 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx uhyne xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx předpokládat, xx xxxxxxx XX50 xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné hmotnosti. Xxxxxxx xx to xxxx xxx hraniční xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx posoudit reakce xxxxxxxxxxx dvou zvířat xxxxxxx xxxxxxx: zřetelné, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx klasifikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx XX50 ve xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxx podnětem xxx xxxxx testování xx xxxxxx úrovni dávky.
5. Xxxxxx umožňuje xxxxxxxxx x xxxxx doplňkovými xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx 2). Této xxxxxxxx je možno xxxxxx xxx k xxxxxx alternativní xxxxx x xxxxx bodu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx varianty 1.
Xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 25 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti
V xxxxxxxxx xx udána xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené jako xxxxx).
Xxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx uhynulých xxxxxx xx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Klasifikace xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x příslušném xxxxx rámečku nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v Dodatku 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx doplňkovou xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x příslušném xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx uhynulých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu xxxxxxxxx xxxxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx základě konečných xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx podle způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx doplňkovou xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x příslušném xxxxx rámečku.
Postup xxxxxxxxx x xxxxxxx dávkou 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X rámečcích je xxxxx dávka, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx první, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx druhé).
Pod xxxxxxx xx počet xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Podle xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x testování xxxxxxxxx ve xxxxx xxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Ukončení xxxxx: Klasifikace se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx uvedeného x Dodatku 2.
Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkou.
Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvedených v xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx.
XXXXXXX 2
Xxxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx variantě 1
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx a pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Šedé rámečky xxx xxxxxxxx "XXXXX XXXXX XXXXXXXXX" v xxxxxxxxxx xxxxxx dodatku xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Po xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx nedosáhne xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Hodnoty x xxxxxxxxx vyznačují xxxxx xxxxxxx xxx příslušný xxxxxx klasifikace. Xxxxxx xxxxxxx znamená, že XX50 xx xxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.)
(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 2000 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx založených xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
x) Xxxxxxx dávka 25 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
&xxxx;
x) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx tělesné hmotnosti
c) Xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx
X.2. XXXXXX XXXXXXXX (INHALAČNÍ)
1. METODA
1.1 Úvod
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x rozdělení xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx par, xxxxxxx xxxx, teplotě xxxx, xxxxxxx vzplanutí x xxxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx
1.2 Xxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxx pokusných xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x xx xxxxx koncentraci v xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxx x případy xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, která xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx potřebného xxxxx experimentálních skupin. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx používaného expozičního xxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pevné xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx velikosti. Pokud xx xxxxx, přidá xx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tak, aby x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx; x xxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem. Xxxxx xx užije xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jiná xxxxxxx, xxxx být x xxxx známo, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx historická xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Experimentální xxxxxxxx
1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx 10 xxxxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxxx: Používají-li xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířata vyšších xxxxx, než xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx toxické dávky. X xxxxxx testech xx třeba xxxxxxx xx xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx látky.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Má xxx dostatečný počet xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx vhodně odstupňovány xxx, xxx xxx x xxxxxxxxxxx skupin xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx mezi dávkou x mortalitou x, xxxxx je to xxxxx, musí umožnit xxxxxxxxx LC50 s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.3.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxx-xx xx 4 hodinové xxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx 20 xx.x-1 xxxx parám xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx látky x xxxxxxxxxxx 5 xx.x-1 (nebo - x xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx - při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxxx 14 xxx k žádné xxxxxxxxx xxxxxxxx sledovanou xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx být 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Vybavení
Xxx xxxxxx se xxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx hodinu, aby xxx zaručen xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx se co xxxxxxx xxxxxxxxx shlukování xxxxxx x aby xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx byla xxxxxxxxx. Xxx zajištění xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx x xxxxxx celkový xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx boxu. Je xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx by xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx reakcích, xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx xx možno xxxxx potřeby prodloužit. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx se objeví x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx tam, xxx xx patrna xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xx dobu 4 xxxxx od xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 x X. Xxxxxxxxx vlhkost xx být xxxxxxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx vodního xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx voda.
Používají xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx testovací atmosféry. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx nejrychleji. Konstrukce x xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x komoře.
Je xxxxx zajistit xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) měření xxxxxxx vzduchu (kontinuálně),
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxx v dýchací xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxxxxx xx vysoké xxxxxxxxxxx, xxxxx vyžadovat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx odchylovat od xxxxxxx hodnoty x xxxx než ±15 %. X xxxxxxxxx aerosolů, xxx xxxx úrovně xxxxxxxx xxxx možné xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx větší xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mají být xxxxxxxxxxx xxx stabilní, xxx xx to xxxxxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxx částic x aerosolů, měří xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx (ale nejméně xxxxxx pro každou xxxxxxxxxx xxxxxxx),
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxx má xxxx individuální protokol. Xxxxx xxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx pečlivé klinické xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x odpovídající xxxxxxxx mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx snížení xxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx či utracením xxxxxxx xxxx umírajících xxxxxx.
Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx kůže, srsti, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální nervové xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Zvláštní xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx vnějšímu dýchání, xxxxxxx, křečovým xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx zachytit xx xxxxxxxxxxx. Hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx expozici xxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, se pitvají xx zvláštním zřetelem xx xxxx změnám xxxxx i dolní xxxxx xxxxxxxxx traktu. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx se sestaví xx tabulky. X xx musí xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx zvířat, počet xxxxxx vykazujících xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, popis xxxxxxxxx účinků x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx přežijí xxxx než xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx. XX50 se xxxxxxx xxxxxxxxx metodou. Xxxx xx hodnotí xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - mezi xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, systému xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx systému x xxxxxxx umístění zvířat x expozičním boxu, xxxxx je xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx hodnotami a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxx:
x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx x inhalačním xxxxxxxx;
x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx);
Xxxx.: při xxxxxxxx aerosolům xxxxx x roztoku (xxxx. xx xxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx koncentraci látky xx xxxxxxx, xxxxx xxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx.
x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx;
e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
f) xxxxxxxxxx xxxxxx aerodynamického xxxxxxx (XXXX) a geometrická xxxxxxxxxx odchylka (XXX);
x) xxxx do xxxxxxxx rovnováhy;
x) xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxx reakcí xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx (tj. xxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; počet zvířat x příznaky xxxxxxxx; xxxxx exponovaných xxxxxx);
- doba uhynutí xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x kritéria xxx humánní xxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx;
- hodnota XX50 xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx doby pozorování (x xxxxxxxx metody xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (xxxxx xx xxxxx jej xxxxxxxx);
- xxxxxx závislosti xxxxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxxx) a xxxx xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx);
- pitevní xxxxxx;
- xxxxxxx histopatologické xxxxxx;
- diskuse xxxxxxxx (xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx testu na xxxxxxxxxx xxxxxxx XX50);
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.3. XXXXXX XXXXXXXX (DERMÁLNÍ)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx nanáší na xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx účinky a xxxxxxx xxxxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx x takových xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx bolest x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x pokusných xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a krmení, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx 24 hodin xxxx zahájením xxxxx xx srst xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx oholí. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx na xx, xxx xx nepoškodila (xxxx. xxxxxx) xxxx, xxx by mohlo xxxxxx její xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx připraví xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit vodou xxxx vhodným vehikulem, xxx byl xxxxx xxxxxxx s xxxx. Xxx xxxxxxx vehikula xx xxxxx xxxx x úvahu xxxx xxxxxxxx xx průnik xxxxxxxxx xxxxx kůží. Xxxxx vehikula xx xx xxx řídit xxx, x jaké xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxx, a xx xxxxx relevantních xxxxxxx xxxxxx ten, xxxxx xxxxxxx usnadňuje xxxxxx xxxx. Testované xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx dospělých xxxxxxx nebo xxxxxxx. Xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xx důvody. Xx xxxxx xxxxx známé xxxxx pokusných xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 zvířat xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx k xxxxxxxxx informace, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Používají-li xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, než xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx zvážit xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Dávky je xxxxx pečlivě xxxxxx x xx třeba zajistit, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky. X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx podávání xxxxxxxxx xxxxx testované xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, nejméně xxx, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx toxických účinků x xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx v úvahu xxxxxxxx nebo leptavé xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx údaje xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx, x xxxxx možno xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx jednou xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx s xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx způsobí xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx být xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje otravy x trvání xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Rozhodující xx doba, xxx xx příznak xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x doba xx xxxxxxx, xxxxxxx tam, xxx je xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Zvířata xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx, která xxxx xxx 10 % xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Pro vysoce xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx; mělo xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na co xxxxxxxx část xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xx expoziční xxxx 24 hodin xxxxxxxxx x kontaktu x xxxx pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxxx plochu je xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxx xx xxxxxxxxx orálnímu xxxxxx. K zamezení xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx však nelze xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx expozice se xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx, pokud xxxxx xxxx xxxx jiným xxxxxxx způsobem xx xxxxxxx xxxxxxxx pokožky.
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx vést xxxxxxxxxx záznamy. První xxx xx zvířata xxxxxxxx xxxxx. Nejméně xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxx pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a odpovídající xxxxxxxx xxxx sloužit xxxxxxxxxxx snížení xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx uhynulým xxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx či xxxxxxxxxxx zvířat.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, na xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx x sliznic, x xxxx dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxxx tremoru, xxxxxxxx jevům, slinění, xxxxxx, letargii, xxxxxx x xxxxxx. Okamžik xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxxxx přežijí xx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změny xx zaznamenávají a xxxxxxxxx tkáně xx xxxxxxxx pro histopatologické xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Hodnocení xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxxxx studie xx jednom xxxxxxx xx podá látka xxxxxxx xxxxx skupině x pěti zvířatech xxxxxxx xxxxxxx, xxx xx zjistilo, zda xxxxxxx druhého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx citlivější, xxxxxxxxx xx zvířatech druhého xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet zvířat x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx bezprostředně před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx v týdenních xxxxxxxxxxx x před xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xxxxxxx déle xxx xxxxx den. Xxxxxxx, xxxxx byla humánním xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx látkou, xx xxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx vztah, xxxxx existuje, mezi xxxxxxxx zvířat testované xxxxx x xxxxxxxx x stupněm xxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxx xxxxxxx, klinických symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx lézí, xxxx xxxxxxx hmotnosti, mortality x všech xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx atd.,
- xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x typu xxxxxx: xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxx pokusných zvířat,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví x podle dávek (xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx utracených xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- doba xxxxxxx xx podání xxxxxxxxx látky, důvody x kritéria xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx pozorování,
- xxxxxxx XX50 xxx to pohlaví, x xxxxxxx byl xxxxxxxx úplný xxxxx, x to pro 14xxxxx pozorování (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (xxxxx xxx lze xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx a xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx metodou xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx druhém pohlaví,
- xxxxxx výsledků (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vypočtené xxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx),
- interpretace xxxxxxxx.
X.4. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXX XXXXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Výchozí xxxxx
Xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx snížit na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx výrazné xxxxx reakce. Následující xxxxxxxxx může být xxxxxxxx pro xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxx, studie xx xxxxxxx zvířeti xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx reaktivita. Xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx (xxxx. xX xxxxx xx xxxxx 2 nebo xX xxxxx xx xxxxx 11,5) xxxx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx mohou být xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx vzít x xxxxx také xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xxxx dostupné xxxxxxxxxxx xxxxxxx závažných účinků xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, není xxxxxxxxx xxxxx xxxx.
c) Xxxxxxxx xx studií xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx akutní xxxxxxxx xxx xxxxxxxx aplikaci xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, není xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx testovat xxxxx vysoce xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
Studovaná xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx dávce na xxxx několika xxxxxxxxx xxxxxx, přičemž xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx kontrola. Xx xxxxxxxxx xxxx xx odečte, xxxxxxxxx x xxxxxxxx popíše xxxxxx xxxxxxxxxx, aby xxxx xxxxx provést xxxxx posouzení účinků. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx dostatečně xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxx zhodnotit xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a bolesti xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxx 24 xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx holení xxxxx xx třeba xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Je xxxxx použít xxxxx xxxxxxx xx zdravou, xxxxxxxxxxx kůží.
Xxxxxxx xxxxx králíka xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxx xx tyto xxxx xxxxx husté srsti.
Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, případně xxxxx xxxxxxx vehikulem, xxx byl xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx vliv xxxxxxxx xx podráždění xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx xxxxxxxx nezředěné.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx různé xxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxx dát xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xx z xx xxxxx screeningových xxxxx xxxx xxxxxx úvah xxxxxxxxx, že látka xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xx leptavá), xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx testu xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx leptavé xxxxxx, xx třeba doplnit xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx zvířatech.
Pro xxxxx test jsou xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx zvláštních xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx zvířata.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxx nejsou xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx postup, xxxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxx kůže 0,5 ml xxxxxxxx xxxx 0,5 g xxxx nebo xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx oblasti xxxxxxxxxx xxxx zvířete xxxxxx v xxxxx xxxx xxxxxxx kontrola.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx dostatečně xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx po aplikaci.
1.2.3 Xxxxx postupu
Zvířata xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se nanese xx xxxxx xxxxxx (xxx 6 cm2) xxxx a xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx a xxxxxxxxx past xxxx xxx xxxxxx nanést xxxxxxx testovanou xxxxx xx xxx, x xxx xxx připevnit xx xxxx. Xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx na xxxx xxxxxxx okluzivním xxxx xxxxxxxx okluzivním xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxx, aby xx zvíře dostalo x mulu a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx.
Na xxxxx xxxx expozice xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xx možné, nebo xxxxxxx rozpouštědlem, xxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx reakce xxxx nebo celistvost xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 4 xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxx, xx xxxxxx poleptání, je xxxxx xxxxxxx délku xxxxxxxx (xxxx. xx 1 hodinu xxxx 3 xxxxxx). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx použít nejprve xxxxxx zvíře a xxxxxxxxx 3 xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx akutní xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx. První xxxxxx xx xxxxxxxx po 3 xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx závažná xxxxx xxxxxx, odstraní xx xxxxx xxxxxx xx 1 xxxxxx. Xxxxx pozorování v xxxx xxxx naznačují, xx xx xxxxxxxx 4xxxxxxxx expozice a xx neodporuje principu xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx třetí plátek xx 4 xxxxxxxx x klasifikují xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx. X případě, xx xxxx možná 4hodinová xxxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxx s xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xx xxxx kontraindikováno x xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxx xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx).
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx reakce (xxxx. xxxxxxx) xxxxxxxxxx xx 3 minutách xxxx po 1 xxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Za xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx odpovídá xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x člověka.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxx xx 60 xxxxxxxx x xxxx 24, 48 x 72 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx podráždění kůže xx klasifikuje a xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v tabulce 1. Jestliže xxxxxx xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx odeznění xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxx dále. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx podrobně popsat xxxxxxx xxxxxxx léze xxxx xxxxxxxxx (nevratná xxxxxxxxx xxxxx tkáně) x jiné xxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx zabarvením xxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx histopatologického vyšetření xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxx pokusné xxxxx patrný stupeň xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxx pozorování. Xx třeba xxxxxx xxxxx všechny xxxxxxx xxxx, popis xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, reverzibilitu nebo xxxxxxxxx x všechny xxxxx xxxxxxxxxx toxické xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.,
- experimentální xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x čištění xxxx, xxx xxxxxx: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,
- ve xxxxx xxxxxxx údaje x xxxxx reakci xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xx 1, 24, 48 a 72 hodin atd. xx odstranění xxxx),
- popis zjištěných xxxxxxx xxxxxxxxx včetně xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxx všech xxxxxxx toxických xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže,
- xxxxxxx výsledků,
- vyhodnocení xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx reakce xxxx
Xxxxxxx | |
1. Hodnocení erytému x příškvaru | |
1.1 Xxxxx xxxxxx | 0 |
1.2 Velmi xxxxx xxxxxx (stěží xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx | 2 |
1.4 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx | 3 |
1.5 Těžký xxxxxx (silné zrudnutí) xxxx tvorba xxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx | 4 |
2. Xxxxxxxxx edému | |
2.1 Xxxxx xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx lehký xxxx (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
2.3 Xxxxx xxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) | 2 |
2.4 Xxxxx xxxx (xxxxxx xxxxxxxx asi x 1 xx) | 3 |
2.5 Xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xxxx xxx 1 xx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx exponované xxxxxx) | 4 |
4.2 Klasifikace xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (XXX)
XXX xx vypočte xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx ze xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x x takto xxxxxxxxx xxxxxx u xxxxx xxxxxxxxxxxx jedinců xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx | IKI |
xxxxxxxx | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx xxxxxx | 0,5 &xx; XXX ≤ 3 |
xxxxxxx xxxxxx | 3 &xx; XXX ≤ 5 |
xxxxx xxxxxx | XXX &xx; 5 |
X.5. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXX XXXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
1.1.1 Xxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx zvážit xxxxxxx xxxxxxxx informace x xxxx xxxxx s xxxxx snížit na xxxxxxx testování xxxxx xx podmínek, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. X xxxx xxxxx xxx užitečné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx reaktivita. Xxxx. xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, které - jak xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx x oku xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX xxxxx či xxxxx 11,5, není xxxxx testovat, pokud xxx očekávat xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.
b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx validizovaných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx dále testovány xx dráždivost xxx xxx, protože lze xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxx mít xxxxxxx účinky xx xxx xxx testování xxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx zřejmé xxxxxxx xxxx výrazně xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xx studii xxxxx dráždivosti, není xxxxx dále testovat xx xxxxxxxxxx xxx xxx, protože xxx xxxxxxxxxxxx, že budou xxx na oči xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx v xxxxxxxxxxx dávce aplikuje xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx oko xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx stanovených xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx se xxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx možné xxxxxxxxxxx zhodnotit také xxxxxxxx nebo nevratnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Zvířata xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky stresu x bolesti xx xxxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
24 hodin xxxx xxxxxx xx x xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxx vyšetření xxxx xxx. Xxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx podráždění xxx, xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx rohovky, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Ačkoliv xx xxxxxxxxx xxxxx druhy xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx přednost xxxxxxxx dospělému albinotickému xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvolit xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx účinek) xxxx xxxxxxx (irreversibilní xxxxxx) účinky pro xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx postupu, xxxx xxxxx další testování xxxx dráždivosti x xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx případně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxx nejednoznačných xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxx xxxxx
Při xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,1 ml. X xxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxx 0,1 xx xxxx xxxxxxxx xxx 0,1 g (xxxxxxxx je xxxx xxxxx xxxxx). Xxxxx-xx xx x tuhou xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx rozemlít na xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xx měrnou xxxxxxx.
U xxxxx xxxxxxxxxx xx sprejích x pumpou nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx 0,1 xx xxxxx x xxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxxxxx xxx kapaliny.
1.2.2.4 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxx doby xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx dostatečně xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx vratnost xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx stačí 21 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
1.2.3 Xxxxx postupu
Zvířata xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x klecích. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx spojivkového xxxx xxxxxxx oka xxx, xx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx oční bulvy. Xxxxx xx xxx xxx xx 1 xxxxxxx xxxxx k xxxx přidrží, aby xx žádná xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx oko, xx které xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx kontrolní.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, lze xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx lokální xxxxxxxxxxx. Xxx bylo xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx, je třeba xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx anestetika. Xxxxxxx způsobem se xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx.
Oči xxxxxxxxx zvířat xx xxxxx vymývat xxxxxxxx 24 xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx 24 hodinách xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, pokud xx xx považuje xx xxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx při xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx podráždění, xx xxxxx provést další xxxxxxx x použitím xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx po xxxxxxxxx xxxxx vymyjí xxx. X těchto xxxxxxxxx xx doporučuje xxxxxx 3 xxxxxxx. Půl xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxx vymývají xxxxxx xx půl xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx
Xxx xx xxxxxxxxx xx 1, 24, 48 a 72 xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx-xx xx xx 72 xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx lézí, xx xxxxx zkoušku ukončit. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx prodloužit, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx tak, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx vývoj xxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx zaznamenat x xxxxx xx xxxxxx i jiné xxxxxxxx léze.
Intenzitu xxxxxx xxx xx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx stanovit podle xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxxxx. (Klasifikace xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx možnosti xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx referenční xxxxxxx xxxxxxxxxx oka.)
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx použitím xxxxxxxxxxx lupy, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx nebo jiných xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx xxx některých xxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx mimoto xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x daném xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxx stupně x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx),
- x xxxxxxxxx xxxxx výčet xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (např. po 1, 24, 48 x 72 hodinách)
- popis xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx,
- podrobný popis xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx jednotlivé xxxxxx xxxx (1, 24, 48 x 72 xxx.), např. xxxxxxxxxx xxxxx, oční xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx atd.,
- xxxxx všech xxxxxxxxxx mimoočních xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. DODATEK
4.1 Xxxxxxxx xxxx xx xxx
Hodnota | |
X. Xxxxxxxx - xxxx | |
Xxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx mžurku | 1 |
Xxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx | 2 |
Xxxx způsobující xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx | 3 |
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx na xxxxxxxx xxxx xxxxx | 4 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxx | |
Slzení xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx) | 1 |
Slzení xx xxxxxxxxx víček x xxxxx x xxxxxxxxx xxx | 2 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx víček x xxxxx v xxxxxxx xxxxx xxx | 3 |
C. Spojivka - enantém | |
Cévní xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxx zřetelně xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxx cévní xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx barva | 2 |
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx barva | 3 |
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx | |
Anomálie nejsou xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx duhovky, xxxxxxxxx, xxxxx, nastříknutí xxx xxxxx rohovky (xxxxx xxxx více těchto xxxxxxxxxxxxxx), xxxxxx na xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx | 1 |
Xxxxxx xx světlo xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx | 2 |
v xxxxxxx (xxxxx xxxx více xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx) | |
X. Rohovka - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xxxx přítomná | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx zůstávají xxxxx viditelné | 1 |
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx | 2 |
Xxxxxxxxxx xxxx opalescence, xxxxxxx duhovky xxxxxx xxxxx viditelné; obrys xxxxxxx stěží xxxxxxxxx | 3 |
Úplná xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx | 4 |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xx pozorovatelná, xxx xxxx plocha xx ≤ 1/4 xxxxxx xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; xxxxxx neprůhlednosti ≤ 1/2 plochy xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; plocha xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 3 |
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx &xx; 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 4 |
4.2 Xxxxxxx akutního xxxxxx xxxx dráždivosti (XXX)
Xxxxxxxxxxxx xxxxx oční xxxxxxxxxxx (XXX) xxx xxxxx zvíře a xxxxx xxxxxxxx hodnocení xx vypočte xxxxx xxxxxx
IOI = 2.(X + X + C) + 5.X + 5.X.X
Xxxxxxxx index oční xxxxxxxxxxx (IOP) pro xxxxx interval xxxxxxxxx xx vypočte xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x XXX.
Akutní index xxxx xxxxxxxxxxx XXX xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX zjištěnému x xxxxxxx testu
4.3 Klasifikace
Xxxxxxxxxxx | XXX |
nedráždí | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
xxxxxx | 15 - 29,9 |
xxxxx xxxxxx | 30 - 59,9 |
xxxxx xxxxx dráždí | 60 - 79,9 |
xxxxxxxx xxxxxx | 80 – 110 |
X.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. METODA
1.1. Xxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx schopnost xxxxx xxx xxxxxxxxxx látek x potenciálním xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx považovány xx významné xxx xxxxxxxxxxxx systém xxxxxxxx x xxxxxxx veřejného xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, která xx xxxxxxxxxx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx a xxxxx xx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxx volbě testu xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx např. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx.
Testy xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (FCA), a xx testy xxx xxxxxxxx.
Testy x xxxxxxxx xx zdají xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxx xxx metody xxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x proto xx xxx xxxx xxxxxxxx.
Maximizační xxxx xx morčatech (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, je XXXX xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x adjuvans.
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx látek jsou xxxxx bez xxxxxxxx (xxxxxxxx xx xxxx Xxxxxxxxxx xxxxx) považovány xx méně citlivé.
X určitých xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx aplikací xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
X xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx popsány xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxx (XXXX) x Xxxxxxxxx test. Lze xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx validizované a xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx uznávanou xxxxxxx dá pozitivní xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx označit xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx dalšího xxxxxxxxx xx morčatech. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxx nutné xxxxxxx xxxx na xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx kapitole.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx zprostředkovaná kožní xxxxxx na xxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxx reakce xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx těchto xxxxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxxxxx druhů se xxxxx xxxxxx lišit x xxxx xxx xxxxxxxx pouze zarudnutí xxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx rozvinout xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx expozice xxxxxxxx xxxxx vystaveného xxxxxxxxx látce xx xxxxxxxxx období xxx xxxxxxxxx, zda subjekt xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx x spolehlivost použité xxxxxxxxxxxxxx metody xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxx mírný xx xxxxxxx xxxxx senzibilizační xxxxxx xxx xxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % x xxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxx 15% x xxxxxx xxx adjuvans.
Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxx XXX | Xxxxx EINECS | xxxxxxxx název | generický/obchodní xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxx |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | kaptax |
94-07-7 | 202-303-5 | Ethyl xxxxx kyseliny x-xxxxxxxxxxxxx | xxxxxxxxx |
Mohou xxxxxx xxxxxxxxx, xxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zdůvodnění xxxxx xxx použity xxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx.
1.4 Princip xxxxxxxxx metody
Pokusná xxxxxxx xxxx nejprve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx injekcemi případně xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx období 10 až 14 xxx (indukční xxxxxx), x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx rozvinout xxxxxxxx reakce, jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx provokační xxxxx. Xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xx provokační xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx porovnán x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x kontrolních xxxxxx, která podstoupí xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx indukce a xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Popis testovacích xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxx, xxxxxxx xx to x xxxxxxxx vody xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx nebyla xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.1 Maximizační xxxx xx morčatech (XXXX)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx 5 xxx před zahájením xxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx stříháním, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx depilací, x závislosti na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx třeba dbát xx xx, aby xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxx.
1.5.1.2 Experimentální xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Pokusná zvířata
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.2 Počet x pohlaví
Lze xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx být březí. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx 10 zvířat x xxxxxxx 5 xxxxxx xx třeba x kontrolní skupině. Xxxxxxx-xx se xxxxxxx xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx, doporučuje xx xxxxxxxxx xx dalších xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx expozici xx xxxxxx na takovou xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx snášejí x která xx xxxxxxxx působící xxxxx xx xxxxxxx podráždění xxxx.Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx koncentrace xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx třech zvířatech. Xxx xxxxx účel xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx FCA.
1.5.1.3 Popis xxxxxxx
1.5.1.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx po 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx střední xxxxx:
Xxxxxxx 1: Freundovo xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx s vodou xxxx fyziologickým roztokem x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx xx vhodném xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
Injekce 3: xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx FCA x xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx poměru 1 : 1;
Xxx xxxxxxx 3 se xxxxx ve xxxx xxxxxxxxx rozpustí xxxx xxxxxxxx x FCA xx xxxxx xxxx. Xxxxx rozpustné x xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx injekci 3 xx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 2.
Xxxxxxx 1 a 2 xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx 3 směrem xx kaudální části xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx injekcí, xxxxx po 0,1 xx, xx podají xx stejných xxxx xxxx x testovaných xxxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx kompletní xxxxxxxx (XXX) smíšené s xxxxx xxxx fyziologickým xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;
Injekce 2: neředěné xxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) se xxxxx XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x poměru 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx dvacet xxxxx xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxx aplikací, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx po důkladném xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 0,5 xx 10% xxxxxxxxxxxxx sodného xx xxxxxxxx, za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxx. Testovanou xxxxxx xx xxxxxxx vehikulu xx napuštěn filtrační xxxxx (2 x 4 cm), který xx xxx xxxxxxx xx testovací xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx obvazu xx xxxx 48 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx důvody; xxxxx látky jsou xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxxx lze xxxxxxxxx xxxxx.
6. - 8. xxx - Kontrolní xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx zbaví xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx jako u xxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxx 48 hodin.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx xxxx zbaveny xxxxx. Xx xxxxx xxx xxxxxxx je aplikována xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx v xxxxxxx x xx xxxxx bok xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xx xx xxxxx). Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx udržují x xxxxxxxx x xxxx xx 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx odstranění xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, důkladně xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x x případě xxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx dalších třech xxxxxxxx (přibližně 48 xxxxx od xxxxxxx xxxxxxxx provokační xxxxx) xx pozoruje xxxxx xxxxxx a zaznamenává xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x dodatku;
- xxxxxxxxx 24 xxxxx xx tomto xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorování x xxxxxx reakce xxxx (72 xxxxx).
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "slepého xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x kontrolních zvířat, xxx pozorující osoba xxxx, které xxxxx xxxx senzibilizováno a xxxxx xx kontrolní.
Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx nutná xxxxx provokace (xx. xxxxxxxxx provokace), xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx potřeby znovu x xxxxxxxxx skupinou x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx také xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx skupině.
Všechny xxxxx reakce a xxxxxxxxx nálezy, xxxxxx xxxxxxxxx reakcí, které xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx postupů, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). X objasnění xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx.
1.5.2 Buehlerův xxxx
1.5.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xx laboratorní xxxxxxxx xx dobu xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xx provede xxxxxxxxx, xxxxxxx nebo chemickou xxxxxxxx, v závislosti xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Je třeba xxxx na to, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx kůže. Zvířata xx zváží xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxx.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxx laboratorní xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx samce x/xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx 20 xxxxxx x xxxxxxxxx skupině a xxxxxxx 10 xxxxxx x kontrolní xxxxxxx.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx úroveň, xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx mírné, ale xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxx koncentrace se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx u xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolává podráždění xxxx. V xxxxxxx xxxxxxx je možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Pro xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xx vodě je xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx zředěný xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Pro xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 80% xxxxxx xxxxxx/xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx testovanou xxxxxx xx vhodném xxxxxxxx (výběr vehikula xx řídí xxxxxxxxx xxxxxx; kapaliny xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx přímo).
Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx testovací xxxxxx x přidržován x xxxxxxxx s xxxx překrývacím xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.
Xxxxxx plátkového testu xxxx být okluzivní. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx už xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxxx 4 - 6 xx2. Je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x použitím xxxxxxxx přidržovače, aby xx zajistila xxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx být xxxxx další expozice.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxx je xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, a to xxxxxxxx xxxxxxxx jako x xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx xx testovací xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx plátkem xxxx komůrkou x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 hodin. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx není xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx.
6. - 8. a 13. - 15. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxx 0 xx provede na xxxxxxx testovací plochu xx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx případně xxxxx) 6. - 8. xxx a znovu 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx
27. - 29. den - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupina
Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx srsti (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx na xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat. Xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx aplikovat xxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxx. Překrývací xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxx po xxxx 6 hodin.
1.5.2.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx odstranění plátku xx provokační xxxxxx xxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx stupnice uvedené x dodatku;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx 24 xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 54 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Doporučuje xx xxxxxx "slepého xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx osoba xxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx je x xxxxxxxxx výsledků nutná xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx provokace), xxxxxxx xx přibližně x xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x kontrolní xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx také xxxxxxx na původní xxxxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx indukčních x xxxxxxxxxxxx postupů, xx zaznamenávají podle xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (xxx xxxxxxx). K objasnění xxxxxxxx nálezů xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx např. xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxx tloušťky xxxxxxx xxx.
2. SBĚR A XXXXXX ÚDAJŮ (GPMT X BUEHLERŮV XXXX)
Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky, xx xxxxx xxxx být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx patrná xxxxxx xxxx xxx každém xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX (GPMT X XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx xxx xxxxxxxx před xxxxxxxxx testu na xxxxxxxxx test screeningový, xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx testu xxxx jeho xxxxxx (xxxx. XXXX - xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, MEST - xxxx ztluštění xxxx x myší) včetně xxxxx podrobností postupu x xxxxxxxx získaných xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx.
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (XXXX a Xxxxxxxxx xxxx)
Xxxxxx x xxxxxx obsahuje tyto xxxxxxxxx, pokud mohly xxx získány:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxx a xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.;
- hmotnost xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx a xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx pro plátkový xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x materiálech x technice xxxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx o indukčních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx vlastní xxxx;
- xxxxxxxx informace x xxxxxxxx, aplikaci x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxx xxx indukci x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx poslední xxxxxxxx citlivosti x xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx koncentracea xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků;
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Xxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx reakcí
0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
1 = xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx;
2 = xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx;
3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx.
5.2 Klasifikace xxxxxxxxxx senzibilizace
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x rámci xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx klasifikuje xxxx
xxxxx alergen (I. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 9 - 28 % xxxxxx
středně xxxxx xxxxxxx (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
silný xxxxxxx (XX. xx.) - 65 - 80 % xxxxxx
extrémní xxxxxxx (V. st.) - 81 - 100 % xxxxxx
X.7. XXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxx po 28 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, x to xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Pitva xx provede u xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxx jsou xxxxxxxx během pokusu; xxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxx x xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Zdravá xxxxx xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx uspořádány tak, xxx se xx xxxxxxx vyloučil vliv xxxxxxxx klece. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejméně 5 dní xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx x fyzikálně-chemických xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx je xx xxxxx, rozpustí xxxx suspenduje xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx nosiči (vehikulu). Xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx použití xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx použití xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) a xxx xxxxxxx v jiných xxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, musí být xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx možno xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx pokusných kmenů. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x nesmí xxx březí. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx a x každém případě xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx zvířata xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx zdroje.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx hladinu xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 10 zvířat (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx nutno xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx koncem xxxxxx.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 28 xxx xxxxxxxx dávku x xxxxx následujících 14 xxx po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx zpožděný xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx také xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx třeba použít xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx se xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx zachází stejně xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x to xx xxxxxxx množství, xxxxx xxxxxx skupina, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Pokud se xxxxx dostupných xxxxxxxxx xxxx očekávat účinek xxx xxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx limitní xxxx. Xxxxxx-xx xxxxxx data x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx předběžnou xxxxxxxxxxx xxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxx dávek.
Při xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx všechny xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx látce xxxxxxxx látkách příbuzných.
Xxxxxxxx úroveň dávky xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí ani xxxxx utrpení. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinku xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxxxx (NOAEL). Xxxxxxx xx vhodný xxxx- až čtyřnásobný xxxxxx xxxx sousedními xxxxxxx; xxxxx xx xxxxx pokrýt xxxxx xxxxxx xxxxx, je xxxxx přidat xxxxxxx xxxxxxxx skupinu, xxx xxxxxx příliš velký xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxx větší xxx 10).
Xxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx vodě, xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx podávané množství xxxxx neovlivňovalo výživu x xxxxx rovnováhu. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx konstantní koncentrace (x xxx) nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx. Aplikuje-li xx xxxxx xxxxxx, mělo xx xx tak xxx každý xxx xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tělesné hmotnosti xxxxxxx.
Xxxxx má xxxx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx třeba x xxxx xxxxxxxx použít xxxxxx potravy.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxxx-xx xxxx xxxxxxxxx xxx popisovaným xxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxxxx xxx dávce 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx za xxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx, která xxxx xxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx od provedení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Toto pravidlo xxxxxxxxx xxxxx platí, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx lidí xxxxxxxxxxx, xx je xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx xx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx dalších 14 dnů xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx případné zpožděné xxxxxx a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx účinku.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířatům xx podává xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 dnů, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxx x xxxxx. Xxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx intubační xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx hmotnosti, x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 ml xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x podávaném xxxxxx xx xxxxx minimalizovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx podáván xxx objem xx xxxxx úrovních xxxxx. Xxxxxxx xx x xxxxx dráždivých a xxxxxxxxx, x kterých xx xxxxx obvykle xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx při vyšších xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, nejlépe x xxxxx xxxxx xxxx a x xxxxxxxx doby očekávaného xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx stav xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx projevující xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx před xxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx týdně. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxx klec x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx stejnou xxxxx xxxx. Výsledky xxxxxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx skórovacího xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx pozorování xxxxxx xx xxxxxxx; xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx znát xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx skupin.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx x xxxxxxx, přítomnost xxxxxxx x exkretů, xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx zornic) x případně xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, polohy, xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, stereotypů x chování (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx).
Xx xxxxxxx týdnu xxxxxxxx se otestují xxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxx, xxxxxxx, proprioceptivní), xxxxx xx síla xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx aktivita. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x testování xxxxxx, xxxx uvedeny x xxxxxxxxxx (viz Xxxxxxxxx xxxx, část X).
Pozorování xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx 28xxxxx studie xxxxxx xxxx xxxxxxxxx studie xxx následující xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (90xxxxx); x xxx případě xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx studie. Xxxxx x x xxxxx xxxxxxx jsou údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx týdnu 28xxxxx studie xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx výběr xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Výjimečně xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx by xxx posuzování xxxxxxxxx xxxxx zvířete vadily.
1.2.3.2 Xxxxxxx hmotnost a xxxxxx xxxxxxx a xxxx
Zvířata xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx v xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počtu erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů, xxxxx xxxxxxxxxx x změření xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxx xx xxxxxxx těsně xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, odkud se xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxických účinků xx xxxxx, xxxxxxx xx játra x xxxxxxx, se xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxx xxxx xxxx x průběhu xxxxxxxx (xxxxx xxxxxx uhynulých xxxx xxxxxxxxxx během xxxxxx). Doporučuje xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx krve1). Vyšetření xxxxxx x séra xxxxxxxx stanovení sodíku, xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, močoviny, kreatininu, xxxxxxxxx proteinů, albuminu, xxxxxxxx alespoň xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx alaninaminotransferáza, aspartátaminotransferáza, xxxxxxxxx fosfatáza, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, sorbitoldehydrogenáza). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (jaterního xxxx jiného xxxxxx) x žlučových xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx užitečné xxxxxxxxx.
Xxxxx možnost xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx xx xxxxx vzhled, xxxxx, osmolalitu xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xX, xxxxxxxxx, glukózu a xxxx xxxx. xxxxxxx.
Xxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nespecifických xxxxxxxxxx poškození xxxxx x xxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx je třeba xxxxxxxx u xxxxx xxxxxxx xxxx podezřelých x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx pružně, xxxx x xxxxx použitý xxxxxxxxx druh x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1) Xxxxxxxxx xx lačno xx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxx v séru x xxxxxx, xxxxxxx xxx glukózu. Xxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xx xx, xx x nehladovějících xxxxxx xx vyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxx maskovat xxxxx xxxxx a xxxxxx interpretaci. Xx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx noc by xxxxx xxx xxxx xx celkový xxxxxxxxxxxx x u xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx xx pravidelnosti xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 4. xxxxx xxxxx.
1.2.3.5 Xxxxx
X všech xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vnějšího povrchu xxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxx lební, xxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx, slezina, xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxxx se xxxxx xx xxxxxx stavu, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx přechovávat xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx hemisfér, xxxxxxx x xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxx i xxxxxx xxxxxx (xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, slezinu, xxxxx, brzlík, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxx ponořením), xxxxxx x přídatné pohlavní xxxxxx (xxxx. xxxxxx, xxxxxxxx), xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx (přednostně xxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx pro pokrytí xxxxxxxxxxx účinků), xxxxxxxxx xxxx (x. xxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxx), xxxxxxx x blízkosti xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx (xxxx čerstvý xxxxx x nasáté xxxxxx xxxxx). Podle xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xx možno xxxxxx x další xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxx by xxxx xxx cílovým orgánem xxx xxxxxxxx testované xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx provést xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx uchovaných orgánů x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx ve xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx objeví xxxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou látkou, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyšetření těchto xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkami.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx je xxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxx satelitních xxxxxx, xxxxx byly xx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zvláštním xxxxxxx xx orgány x xxxxx, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXX A ZÁZNAM XXXXX
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx tabulkové xxxxx, xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx toxických xxxxxxxx xxxxxx doby xxxxxxx, trvání a xxxxxxxxxx každého xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x jednotlivými xxxx xxxx.
Xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx metodu xx xxxxx zvolit xxx při xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x pokusu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh/kmen;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx zvířat;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxx v týdenních xxxxxxxxxxx x na xxxxx testu.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula, xxxxx xx jiné xxx xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx dávek;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx látky xxx aplikaci, případně x přípravě xxxxx, x xxxxxxxxxx koncentracích, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- podrobné xxxxx o způsobu xxxxxxxx testované látky;
- přepočet x xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xxx x aplikaci x xxxxx xxxx xxxx);
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx (xxxxxx xxxxx a xxxxxx);
Výsledky:
- xxxxxxx xxxxxxxx a xxxx změny;
- xxxxxxxx potravy x xxxx;
- údaje x toxických reakcích xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxx příznaků xxxxxxxx;
- xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, příp. zda xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx smyslové xxxxxxx, xxxxxxxx síly x motorické aktivity;
- xxxxxxxx hematologického xxxxxxxxx x příslušnými xxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx normami;
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx;
- pitevní xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx x absorpci, xxxxx xxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx:
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx je analogická xxxxxx XXXX XX 407.
X.8. AKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Xxxx pokusem je xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx par, xxx xxxx, xxx varu, xxx vzplanutí x xxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Několik xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx po xxxxxxx dobu, v xxxxxxxxxxxxxx koncentracích, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xx po 28 dní. Xxxxxxx-xx xx pro xxxxxxxx xxxxxx koncentrace testované xxxxx x atmosféře xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zjišťují xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx zvířata náhodně xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Pokud xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx jiná xxxxxxx, musí xxx x xxxx xxxxx, xx nemají toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xx využít.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, pokud nejsou xxxxx xxxxxx proti xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xx xxxxxxx studie xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx zvlášť).
1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic x 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Pokud xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, která budou xxxxxx před koncem xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx exponovat vysoké xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 zvířat (5 xxxxxxx každého xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 dnů xxxxxxxx vratnost, přetrvávání xxxx zpožděný xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Používá xx také satelitní xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví).
1.3.2.3 Expoziční xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx tři xxxxxxx x xxxxxx úrovní xxxxxxxxxxx x jedna xxxxxxxxx xxxxxxx, případně xxxxxxxxx skupina x xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx látky. S xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx nebo jen x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
1.3.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Trvání xxxxxxxx má xxx 6 hodin xxxxx; x xxxxxxx specifických xxxxxxxxx xx možné xxxxxx i jiných xxx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx dynamické xxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, aby xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx rozdělení xxxxx x expoziční atmosféře. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx byla co xxxxxxxx. Xxx zajištění xxxxxxxxx atmosféry x xxxxxxxxxx xxxx neměl xx v zásadě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx přesáhnout 5 % xxxxxx boxu. Xx možné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx xxxxxx cestami.
1.3.2.6 Xxxx pozorování
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx během xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické účinky. Xx třeba zaznamenat xxxx xxxxxxx a xxx, ve xxxxxx xx xxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx exponují xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx x týdnu, xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx dalších 14 xxx xxx xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx během xxxxxxxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 xX. Relativní vlhkost xx xxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx možné (xxxx. experimenty x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx sloupce) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx okolí. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx ani xxxx.
Používá se xxxxxxxxx inhalační systém x vhodnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xx xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx podmínky v xxxxx expozičním xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx co xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
x) Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx se měří x xxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxx expozice xx nemá koncentrace xxxxxxxxxx xx střední xxxxxxx x xxxx xxx ± 15 %. U xxxxxxxxx xxxxxx a aerosolů, xxx této xxxxxx xxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx xxxxxx kolísání. Xx celou dobu xxxxxx experimentu xxxx xxx xxxxxxxxxxx tak xxxxxxxx, jak xx xx xxxxxxxxx možné. Xxxxx xx xxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx týdně x každé xxxxxxxxx xxxxxxx.
x) Teplota x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx a xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx provádějí x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx má xxxx xxxxxxxxxxxx protokol. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx a krevního xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx zvířat se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx zaznamenávat týdně x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx prohlížení xxxxxx, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xx ztrátám xxxxxx, xxxx xxxx. x důsledku kanibalismu, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx zařazení.
Xx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx, s výjimkou xxxxxxxxxxx xxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx zvířata x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx či xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx vyřadit, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xx u xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx alespoň xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx analýza krve: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x ledvin xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx glutamátoxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.
Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být potřebné xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx lačno, lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být v xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxx a xxxxxxx se xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Orgány x tkáně (xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, ledviny, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny x srdce, x xxxxxxx orgány s xxxxxxxxxxxxxxx změnami xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxx přechovávat ve xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Plíce xx xxxxx vyjmout xxx xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, tak xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Pokud xx x xxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx koncentrací xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx otravy u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxx.,
- podmínky xxxxxx: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx systému, popis xxxxxxxxx odpadního xxxxxxx x xxxxxxx umístění xxxxxx x boxu, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx přístroje xxx xxxxxx teploty, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx částic xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx se sestaví xx xxxxxxx x xxxxxx spolu x xxxxxxxxxx hodnotami x xxxxxxxxxxxxxxxx variability (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxx: a) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxxxxx a vlhkost xxxxxxx; c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové množství xxxxxxxxx xxxxx přiváděné xx inhalačního zařízení, xxxxxx xxxxxxx vzduchu); x) xxxxxx vehikula, xxxxx bylo xxxxx; x) skutečná xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx; x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx průměru (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (GSD),
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx konce xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- úroveň xxx účinku,
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxx xxxxx po 28 xxx v odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, která uhynou xxxxx pokusu, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x krmení, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Krátce před xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx srsti xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx cca 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nebo oholení xx xxxxxxx opakovat xxxxx týden. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx xx xx, xxx xx nepoškodila xxxx (např. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nejméně 10 % povrchu xxxx. Xx xxxxx vzít x úvahu xxxxxxxx xxxxxx xxx rozhodování x velikosti připravované xxxxxx xxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxx látkami, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx s xxxx. Testované xxxxxxxx xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx potkany, xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx použití však xxxx být xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx dávek xxxxxx xxxxxxx 10 zvířat (5 samic a 5 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být xxxxx. Pokud xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x průběhu studie, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxx následujících 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vratnost, xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx se také xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - pokud xx xxxxxxx xxxxxxxx - kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx být xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx den xx stejnou xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx tak, aby xx udržovala xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám, x to xx xxxxxxx množství, xxxxx xx aplikuje xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx nebo xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx jen xxxxxxx účinek xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 úrovně xxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxx voleny tak, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxx x x kontrolní xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx výsledků obtížné.
Xxxx-xx xxxxxxxx testované xxxxx x těžkému xxxxxxxxxx kůže, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x omezení xxxx xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx účinků. Xxxxx-xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, je xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ukončit x provést xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx při xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 xxxx xxxxx xxxxx, která xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxxxx dobu xxxxxxx x dobu, xxx xx xxxxxx x xxxxxxxx opět odezní xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx satelitní xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xx dalších 14 xxx xxx xxxxxxxx, xxx xx mohla xxxxxxxxx reparace toxických xxxxxx xxxx jejich xxxxxxxxxxx. Xxxx expozice xxxx xxxxxxx 6 xxxxx denně.
Xxxxxxxxxx xxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % xxxxxxx xxxx; x vysoce xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxx plocha xxxxx. Xxxxxx je třeba xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx pokusné xxxxxx xxxxxxxxxx v co xxxxxxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx xx xx xxxxxxxxx dobu 24 xxxxx udržována x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx porézního xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Testovanou xxxxxx xx dále xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxx xx zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxx požití látky xx xxxxx použít x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Jako xxxxxxxxxxxx metody je xxxxx xxxxxx "ochranného xxxxx".
Po xxxxxxxx xxxx expozice xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pokud možno xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx x xxxxxxx x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx i xxxxxxxx potravy. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxx možno xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxx se všechna xxxxxxx, která přežila, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Umírající xxxxxxx x zvířata x xxxxxx stresu xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx provedou xxxxxxxxxxx vyšetření:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: k xxxxxxxxx xxxxxx jater x xxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, albumin, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx bílkoviny x xxxx.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx, lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího spektra xxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx sekci zváží xx xxxxxx stavu, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx, xxxx. normální x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, srdce x xxxxxxx xxxxxx x makroskopickými xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx histopatologická vyšetření.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx dávka, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx skupině x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx skupin je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zvláštním xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx poškození.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x zvířatech (druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx druhu xxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxxx xxx účinku, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx nebo xxxx xxxxxx,
- doba, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální příznaky x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.10. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX U XXXXX XX VITRO
1. METODA
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 473, In Xxxxx Xxxxxxxxx Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx buněk xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu. Vznik xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx schopna xxxxxxxxx xxxxxxxxx aberace. Xxxx metoda xxxx xxxx navržena x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x běžně se x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Chromozómové xxxxxx x xxxxxxxx jevy xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy, xxx xxxxxxxxx změny x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, hrají úlohu xxx vzniku xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Tento xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx mutagenů x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx však xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x karcinogenitou. Xxxx korelace xxxxxx xx xxxxx látky x xxxxxxxx xxxxx xxxx dokladů o xxx, že xxxxxxxx xxxxxxxx látky, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx působí xxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx XXX.
X xxxxxxx chromozómových xxxxxxx xx xxxxx xx mohou použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx, xxxxxxxxx kmenů xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Použité xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx schopnosti xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx obecně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Tento xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedokáže xxxxxxxx xxxxxxxxx podmínky x xxxxx in xxxx. Je xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx by xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx, jež xxxxxxxxxx xxxxxxx mutagenitu, nýbrž xxxx způsobeny změnami xX, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (4) (5).
1.2 DEFINICE
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, které xx projevuje jako xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx chromozómového typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx xxxx zlom x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx místě (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, prsténčitý xxxxxxxxx-xxxx).
Zlom xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xx předpokladu, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx šířka poškozené xxxxxxxxxx. Xxxx pak x případech, koncový (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx zlomu xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx hodnoceného xxxxxxxxxx xx kratší x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.
Xxx: achromatická xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx chromatidy a x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Mitotický xxxxx: xxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx diploidní xxxxx (xxxx 3n, 4n xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx chromozómové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroskopickou analýzou xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx metafáze, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x výměny.
1.3 XXXXXXX METODY
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, x xx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx ní. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx buněčné kultury xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx celou řadu xxxxxxxxx xxxxx, kmenů xxxx primárních xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx krve xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
K udržování xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx x inkubační xxxxxxxx (kultivační xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, teplota x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx kontrolovat xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a nepřítomnost xxxxxxxxxxx x buňkách. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx nepoužívají. Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx dobu xxxxxxxxx xxxxx x kultivační xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx kultur
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxx: xxxxx se xxxxx xx zásobních xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx nedosáhly xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xx xxx teplotě 37 oC.
Xxxxxxxxx: xx xxxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxx xxx plná xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxx lymfocyty xxxxxxx xx xxxxxxxx jedinců x xxxxxxxxx xx xxx teplotě 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace
Na xxxxx xx testovanou xxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx suplementovaná xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx činidly xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-naftoflavonu (10) (11) (12).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx obvykle 1 - 10 % x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx na xxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx použity x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx exprimující specifické xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxx být vědecky xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x metabolismu testované xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx testované xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x pevném xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx mohou xx xxxxxxx přidávat přímo xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx čerstvé xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx delší skladování xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5 XXXXXXXX XXXXX
1.6 ROZPOUŠTĚDLO
X xxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxxx podezření, xx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx narušovat přežívání xxxxx x xxxxxxxx X9. Používá-li xx xxxx xxxxx rozpouštědlo, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx prokazujícími jeho xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxxx xxx, xxx xx xx xxxxx, bylo xx xxxxxx místě xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx rozpouštědla xxxx. Je-li xxxxxxxxx xxxxx xx vodě xxxxxxx, xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlo xxxxx xxxxxxx. Voda xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sítem.
1.6.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxx x systému x xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž xx xxxxxxx vhodné indikace xxxxxxx integrity x xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, počet xxxxxx xxxxx, nebo mitotický xxxxx. Je xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v předběžných xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Dochází-li x xxxxxxxxxxxx, musí xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. To xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx více xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx mezi xxxxxxxxx 2 x √10. X xxxx sklízení xxxxx musí být xxx xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx růstu, počtu xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (vždy o xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxx na době xxxxxxxx xx expozici xxxxxxxxxx látkou. Xx xxxx akceptovatelný xxx xxxxxxxxx kultury, xxx xx jiná xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x nepraktická. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx také xxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx dělení, jako xx xxxxxxxx generační xxx; xxx xxxxx xxxxxxxxxxx celkový xxxxxx, xxxxx xx vždy xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. A tak x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx času xxxx xxxxxxxx značný xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx optimálního xxxxxxx xxxxxxx.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nejnižší x xxxxxx 5 µx/xx, 5 xx/xx xxxx 0,01 X.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx netoxické x xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx se xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace vyšší, xxx je xxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx médiu na xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx případech - xxxxxxxxx dochází-li x xxxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, než xx xxxxxxxx nerozpustná xxxxxxxxxxx - se xxxxxxxxxx testovat při xxxxxxxx koncentracích x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Může xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, protože xx xxxxx xxxxxxxx může xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx systému xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx, X9 xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxx okem. Xxxxxxxxx xxxxx být xx překážku xxx xxxxxxxxx buněk.
1.6.2 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací nebo xxx ní, je xxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx a negativní xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx). Xxxxx xx xxxxxxxx metabolická xxxxxxxx, xxxx být pozitivní xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivaci k xxxxxxxx mutagenního xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, a xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx očekává, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx tak, xxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx neodhaloval xxxxxxxxxxx přímo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Mezi xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Metabolická aktivace | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
Xx | methyl methansulfonát xxxxx xxxxxxxxxxxxxx ethyl xxxxxxxxxxxxxxx mitomycin X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Ano | xxxx[x]xxxxx cyklofosfamid xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx mohou xxxxxx x jiné xxxxxx látky. Tam, xxx xx xx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx skupiny.
Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx třeba použít x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx rozpouštědlo nebo xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx experimentální xxxxxxx. Mimoto je xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3 Xxxxxx
1.6.3.1 Xxxxxxxx testovanou xxxxxx
Xx proliferující xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx za xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx 48 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx používají xxx xxxxxxx; x xxxxx se xxxxxxxxxx xxx negativní xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx. Pokud xxx xx xxxxxxx historických xxxxx prokázat, xx xxxxxxx xxxx duplicitními xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (13) (14), je xxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx.
X případě xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x testu xxxxxx postupy, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kultivačních xxxxx (15).
1.6.3.2 Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx
X prvním experimentu xx buňky vystaví xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx xx xx xxxx 3 - 6 xxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx odpovídajícím xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (12). Xxxxx jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxx výsledky xxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x kontinuální xxxxxxxx xx xx doby xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx hodnotí xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx delší, xxx xx 1,5xxxxxxx délky xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. X případech, xxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx rozhodnutí xxxxxxxxx.
1.6.3.3 Příprava chromozómů
Xx xxxxxxx kultury xx xxxxxx Colcemidem® xxxx kolchicinem obvykle xx xxxx 1 - 2 xxxxx xxxx ukončením kultivace. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx pro přípravu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x ovlivnění buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx pozitivních a xxxxxxxxxxx kontrol, se xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Jelikož xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x ztrátě xxxxxxxxxx, musí být x xxxxx xxxx xxxxx počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách xxxxx modálnímu xxxxx ± 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx počet xxxxxxx vysoký, může xx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
I xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxx xxxxxxxx zaznamenat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Jelikož experimentální xxxxxxxxx xx buňka, xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx typy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x četnosti x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kultur. Gapy xx zaznamenávají zvlášť, xxx xxxxxxx do xxxxxxx xxxxxxxx aberací xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx je xxxxx x testu xxxxxxxxxxxx xxxx zjištěnou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx data xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx uvedou x xxxxxxx tabulce.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx testováním, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X nutnosti xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v xxxx. 1.4.3.3. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby xx rozšířil xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxxxx metody (3) (13). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xx schopnost inhibovat xxxx buněčného cyklu (17) (18).
Testovaná xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.
Ačkoliv většina xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx získaná xxxx xxxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx experimentů. Xxxxxxxxx výsledky xxxxx xx chromozómové xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx nevyvolává.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
XXXXXX X XXXXXXX POKUSU
Xx xxxxxx o xxxxxxx pokusu je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla/vehikula
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx a xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx krve, xxx byla xxxxxxx xxxx krev nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, použitý xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxxxx, xx-xx xx xxxxx - xxxxxx udržování xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx
- modální xxxxx chromozomů.
Podmínky xxxxxx:
- název xxxxx blokující xxxxxxxx, xxxx koncentrace a xxxx působení na xxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx např. xxxxx x xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jsou-li x dispozici,
- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xx-xx to xxxxx
- koncentrace xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx teplota,
- xxxx xxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx buněk xx xxxxxxx xxxxxxxxx, je-li xx xxxxx
- xxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xxxxxx xxxxxxxx akceptovatelnosti,
- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx analyzovaných xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx x buněčném xxxxx, x xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxx srážení,
- xxxxx x xX x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxx chromozómových xxxxxxx xxx každou experimentální x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx ploidie,
xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx byly xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx z negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, včetně xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.11. XXXXXXXXXX - XXXX CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX X XXXXXX XXXXX SAVCŮ XX XXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx OECD TG 475, Xxxxxxxxx Xxxx Xxxxxx Chromosome Aberration Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x savců xx xxxx xx xxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx dřeně xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxxx xxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx a chromatidové. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny jsou xxxxxxxx chromatidové, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx jevy xxxx xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx xxxx, jež xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, hrají úlohu xxx xxxxxxxx x xxxxxxx a v xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxx xx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx rychle xx xxxxxxxx buněk, xxx xx dají xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx tkáně xx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Tento xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxxxx xxxxxx, protože xxxxxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x procesů xxxxxxxx XXX, x xxxx xxx xxxxx být xxxx xxxxxxxxxxx druhy x xxxx tkáněmi xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx xxxx xxxxxx xxx další xxxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx doklady x xxx, že xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx cílové xxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, které xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, případně xxxx chromatid, xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx místě (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx chromozóm, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx předpokladu, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx chromatidy xx xxxxx, než xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment v xxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx (nebo xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx delece.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, xxx xx S-fázi replikace XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx, nýbrž xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.
Xxx: achromatická xxxx xxxxx než xxxxx xxxxx chromatidy x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxx celkovým xxxxxx buněk x xxxx xxxxxxx populaci; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Numerická xxxxxxx: změna počtu xxxxxxxxxx oproti normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx buňky.
Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4x atd.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxxxxxxxxx struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxx ve stadiu xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx a fragmenty x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látce a xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx usmrcením xx na ně xxxxxx xxxxxx zastavující xxxxxxxx (například xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). Z xxxxx kostní xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx zjišťují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx potkani, myši x xxxxxx xxxxxx, xxx ovšem xxxxxx x xxxxxxxxx jiný xxxxxx savčí xxxx. Xxxxxxxxx se běžné xxxxxxxxxxx xxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx minimální x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx přesahovat ± 20 % průměrné xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Podmínky chovu
Xxxxxxxxx podmínky chovu xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx B, vlhkost xx měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x experimentální xxxxxxx. Xxxxx je třeba xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Zvířata xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Po xxxx xxxxxxxxx pěti xxx xx xxxxxxx aklimatizují x laboratorních xxxxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx, xxxx xxxxxxx zvířatům xx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x případně xx xxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx údaje o xxxxxxxx prokazují, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx látkou chemicky xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xx xxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xx měly xxxxxxxxx strukturální xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrole xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx totožnost zakódovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx možné podávat xxxxxxxx xxxxxxxx než xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, je třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx vhodných pro xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | EINECS |
ethyl xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
cyklofosfamid | 50-18-0 | 200-015-4 |
cyklofosfamid xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx experimentální xxxxxxx měly xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx časových intervalů xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx chromozómových aberací x o interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx u xxxxxxxxxxx kontrol pouze xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx interval odběru xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxx xxxxxxxx historické xxxx xxxxxxxxxxx údaje prokazující, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X každé xxxxxxxxxxxxxx a kontrolní xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx x xxxx, xxx xx studie xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x toxicitě podstatné xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Tam, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, jak xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx jednorázově. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxx dávky xx xxx xxxxxx v xxxxxxx nanejvýše xxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Vzorky xx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx. U xxxxxxxx je první xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu (xxxxx xxxx xxxxxxx 12 - 18 xxxxx) xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxx vliv xx xxxxxxxx buněčného xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxx chromozómových xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xx 24 xxxxxxxx od xxxxxxx odběru. Pokud xx v daném xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx vícekrát než xxxxxx xx den, xx třeba xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxxx délky xxxxxxxxxx xxxxxxxxx cyklu xx xxxxxxxxx podání xxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx dávka Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx se x xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx odeberou xxxxxx. X myší xx xxxxx interval xxxxxx 3 - 5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx zhruba 4 - 5 xxxxx. X xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x zjišťují se x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx se studie xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x dispozici žádné xxxxxx údaje, xx xxxxx ji provádět x xxxx xxxxxxxxxx xx použití stejného xxxxxxxxxxx druhu, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (5). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx první xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx dávky xxx, xxx pokrývaly xxxxxxx od maximální xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxx xxxx nulové. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků xx pak xxxxx xxxxxx xxxxx nejvyšší xxxxx. Ta je xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxx, že xxx xxxxxxx dávkách xx xxxxxxx režimu xxxxxxxx xx účinky xxxx xxxxxxx. Látky, xxx x xxxxxxx netoxických xxxxxxx vykazují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxx představovat x xxxxxx kritérií xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, jež xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx může být xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, která vede x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx (xxxx. pokles xxxxxxxxxxx xxxxxx o xxxx xxx 50 %).
1.5.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxx xxxx při xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx dávce xxxx xx xxxx dávkách xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x jestliže xx xx základě xxxxx x látkách x xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx použití xxx xxxxxxxxx úrovní. Xxx dlouhodobé xxxxxx xxxx limitní dávka 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xx xxx xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxx době xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx expozice může xxx xxxxxxxxx použití x xxxxxxxx xxxxx xxxxx dávkové úrovně.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo žíravých xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx při vyšších xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx po xxxxxxxx zvířete xx xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xx fixuje. Xxxxxxxx xxxxx se xxxxxx na xxxxxxxx xxxx a xxxxxx xx.
1.5.7 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se x xxxxx xxxxxx xxxxxx pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx 1000 xxxxx x každého xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx xx analyzuje xxxxxxxxx 100 xxxxx. Xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx při vysokém xxxxx aberací. Všechny xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních kontrol) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxx dochází často x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx spojeného xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x hodnocených xxxxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 Zpracování xxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx. Experimentální xxxxxxxxx xx jedinec. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxxx, počet xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx strukturálními xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x četnost. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx se, xxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx x xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xx obě pohlaví xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Vyhodnocení x xxxxxxxxxxxx výsledků
Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx zřetelný nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx skupině x xxxxxxxxxxxx dávkou xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx testu xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyjasnit xxxxxx testováním, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx mitotické xxxxxxx x vyvolávat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxx xxxxx buněk s xxxxxxxxxxxxxxxxxxx chromozómy xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx má schopnost xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, se v xxxxx xxxxxxx považuje xx nemutagenní.
Většina xxxxxxxxxxx xxxx poskytuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxx nejednoznačné nebo xxxxxxxxxxxxx, x když xx experiment xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na chromozómové xxxxxxx xx vivo xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x kostní dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xxxxxxxxxx.
Xx xxxxx vzít x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx specifickou cílovou xxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx toxicita).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx živočišný xxxx/xxxx,
- počet, xxx x pohlaví xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx odchylek xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x přípravě xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x podávání xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx podávání,
- xxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx oběhu xxxx xx cílové xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx látky x xxxxxxx/xxxxx vodě (ppm) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx hmotnosti/den),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x doba xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx preparátů,
- kritéria xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx analyzovaných xxxxx xx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx nejednoznačná.
Výsledky:
- známky xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- typ x xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx počet xxxxxxx v xxxx xxxxxxx, jejich průměr x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
- vztah xxxxx-xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných xxxxxxxx.
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Závěry.
X.12. XXXXXXXXXX - IN VIVO XXXXXXXXXXXX TEST X XXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Metoda xx xxxxxxxxx XXXX XX 474, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Test (1997).
1.1 XXXX
Mikronukleus xxxx xx xxxx x xxxxx slouží xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx testovaná xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxx xxxxxxx x xxx, xx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x kostní xxxxx xxxx. x xxxxxxxxx krve xxxxxx, xxxxxxx hlodavců.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx výsledkem je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx chromozómů.
Xxxx x xxxxxxxxxxxx kostní xxxxx xxxxxxx polychromatický xxxxxxxxx, xxxxx xx x xxxxx vyloučeno; xxxxxxxx zbude x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx tím, že xxxxx buňkám xxxxx xxxxx. Xxxxxx četnosti xxxxxxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx důkazem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxx testu xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx běžně proto, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxx xxxxx xxxxx. Analýza xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x mikrojádry v xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx u každého xxxxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xxxx prokázáno, xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx xx tento xxxxxxxxx druh xxxxxxxxxx xxxxxxx pro detekci xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxx rozlišovat xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx či xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx centromerické DNA x xxxxxxxxxx. Konečným xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (polychromních) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx zralých (xxxxxxxxxxxxxx) erytrocytů v xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxx xxxxx zralých xxxxxxxxxx xxx jako xxxxxxxx hodnotu použít x případě, že xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx minimálně xxxx týdnů.
Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxx metabolismu xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx reparace XXX, x xxxx xxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx a xxxx konečným xxxxxxx xxxxxxx. Test in xxxx xx xxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx efektu, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx vitro.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, xx xx testovaná xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx tkáně nedostane, xxxx použití tohoto xxxxx vhodné.
1.2 DEFINICE
Xxxxxxxxxx (kinetochor): xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx kterými xx během xxxxxx xxxx vlákna xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx chromozómů x xxxxx dceřiných xxxxx.
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx): xxxx xxxxx oddělená xx xxxxx buňky (xxxxxxx) xxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx fragmenty xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx erytrocyt: zralý xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xx od xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro ribozómy.
Xxxxxxxxxxx erytrocyt: xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx stadium, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx ribozómy, xxxxx xxx lze odlišit xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxx se xxxxxx (1-7). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xx vhodné době xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, ve kterých xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxx být xxxx od xxxxxxxx xxxxxxxx xx zpracování xxxxx xx nejkratší. X preparátech xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx používá xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx; může však xxx xxxxxx xxxx xxxxxx savčí druh. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx. Lze ovšem xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx za xxxxxxxxxxx, že xx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xx x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx citlivost xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx strukturální xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x každého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Všeobecné xxxxxxxx xxxxx xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx B.
Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat
Xxxxxx xxxxx dospělí xxxxxxx xx náhodně rozdělí xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci xx jednoznačně označí x po xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, jak x kde xxxx xxxxx umístěny.
1.4.1.4 Příprava xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx x je-li xx xxxxx, látka xx xxxx podáním xxxxxxxx rozpustí nebo xx xxxxxxxx její xxxxxxxx ve vhodném xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx podávat xxxxx nebo se xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx o stálosti (xxxxxxxxx) prokazují, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Podmínky xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x používaných xxxxxxx xxxxx vyvolávat toxické xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx použití xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx xx xx xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx rozpouštědlo / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx testu xx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx zacházet xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
X xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx in xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx byly xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx možné xxxxxxx odlišným způsobem xxx testovanou xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x jednom xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx je xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx pozitivní kontrolu:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx methansulfonát | 62-50-0 | 200-536-7 |
X-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx měly xx xxx xxxxxxxx xx všech časových xxxxxxxxx zpracování, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx a x interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxx pouze xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx publikované xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx krev, může xxx xxxx souběžná xxxxxxxxx kontrola xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x periferní krvi (xxxx. 1 - 3 xxxxx), xxx xxxxxxxx xxxxx leží x očekávaném xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X každé xxxxxxxxxxxxxx a kontrolní xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (11). Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx prokazující, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx rozdíly, xx xxxxxxxxx pouze xx xxxxxx pohlaví xxxxxxxxxxx. Xxx, kde xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx závislá xx xxxxxxx, jak xx xxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx schéma
Xxxx se doporučit xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. jedna, xxx xxxx více dávek x 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx schémata, xxxxx xx x daném xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; v xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xxx xxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxx odběru xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx rozdělit, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxx xx může xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
(x) Xx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Vzorky xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, poprvé xx xxxxx než xx 24 xxxxxxxx x celkově ne xxxxxxx než xx 48 hodinách xx xxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx intervaly mezi xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx 24 hodinách, xxxx xxx odůvodněné. Xxxxxx xxxxxxxxx krve se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxx xx 36 xxxxxxxx od podání xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx vzorku, celkově xxxx nikoli déle xxx 72 xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx pozitivní xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx se xxxxx xxxxxx dvakrát nebo xxxxxxxx xx xxx (xxxx. dvě xxxx xxxx xxxxx ve 24xxxxxxxxxx intervalech), xxxxxxxx xx vzorky v xxxxxxx kostní xxxxx xxxxxx xxxx 18 x 24 hodinami xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx a x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx 36 x 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (12).
Xx-xx xx xxxxxxxxxx, mohou xx xxxxxx xxxxxx x další odběrové xxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Provádí-li xx xxxxxx ke xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx třeba xx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx stejného xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, pohlaví x pokusného xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x hlavní xxxxxx (13). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx se užívají xxx první xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx interval xxxxxx xxxxxx je xxx xxxxx použít xxxxx xxxxxxxx dávku. Xx xx definována xxxx dávka vyvolávající xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx vyšších xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx letální. Xxxxx, xxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx biologickou xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx dávek x xxxxxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx také xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, která xxxx x xxxxxxx xxxxxxx toxicity x xxxxxx dřeni (xxxx. xxxxxx xxxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx resp. xxxxxxxxx krvi).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže test xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx ve xxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné toxické xxxxxx x xxxxxxxx xx na základě xxxxx o látkách x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx být xxxxxxxxx xxxx xxxxxx za xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Pro xxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxx xxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx xx den xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx než 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx vpravuje buď xxxxxxxxx sondou, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekcí. X xxxxxxxxxxxx případech mohou xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx expozice. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx dá xxxxxx xxxx injekcí xxxxxxxx vpravit, závisí xx velikosti pokusného xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx žíravých xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx tak, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný a xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Příprava xxxxxx dřeně / xxxx
Buňky kostní xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x femuru xxxx xxxxx xxxxxxxx xx usmrcení zvířete. Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xxxx vyjme x femuru nebo xxxxx, buňky se xxxxxxx x obarví xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx získává x ocasní xxxx xxxx jiné xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (8) (9) (10), xxxx xx zhotoví xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Použitím xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx XXX (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxx (14) nebo Xxxxxxx 33258 x xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx eliminovat xxxxxxx x artefaktů vznikajících xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx není DNA xxxxxxxxxx. Tato xxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xx nedala xxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxx. Xxxxxx). Xxx xxxxxx x další xxxxxxx - například xxxxxx xx xxxxxxxx celulózy x xxxxxxxxxx xxxxx x jádrem (16) - pokud xxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx používány xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
U xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). X tomuto xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx minimálně 1000 xxxxxxxxxx (17). Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx minimálně 2000 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxx, xx se mikrojádra xxxxxxxxx xx zralých xxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového počtu xxxxxxxxxx xxxxx xxx 20 % xxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx nebo xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x minimálně 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx x průtoková xxxxxxxxxxxx xxxxxxx - xxxx xxxxxxxxx), xxxxx xxxx zdůvodněny a xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nezralých xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxx, je xxxxx xxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx procento xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx se xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Nejsou-li xxxxx xxxxxxx o xxx, xx xxx pohlaví xxxxxxx rozdílně, xx xxxxx údaje xx xxx pohlaví xxx xxxxxxxxxxxx analýzu xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE XXXXXXXX
Xx zjišťování xxxxxxxxxxx výsledku se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx závislý xxxxxx počtu buněk x mikrojádry xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx dávkou při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (18) (19). Statistická xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxx vyjasnit xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx sice xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx negativní výsledky, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx mikrojader, xxxx důsledek chromozómového xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aparátu v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx za xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxx xxxxx příslušného xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx erytrocytech.
Xx xxxxx uvažovat, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx x průběhu pokusu xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Rozpouštědlo / vehikulum:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx známa.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, chovné podmínky, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx počátku testu, xxxxxx hmotnostního xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- pozitivní a xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx,
- údaje xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedena,
- zdůvodnění volby xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x podávání xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx x ověření, xx xx xxxxx dostala xx xxxxxxxxx oběhu xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- případný xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x potravině/pitné xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx hmotnosti),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- kritéria xxx hodnocení nezralých xxxxxxxxxx x mikrojádry,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- kritéria, xxxxx xx studie xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx xxxx nejednoznačná.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- počet xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx pro každého xxxxxxx zvlášť,
- xxxxxxxx počet ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx dávka - účinek, xx-xx xx možné,
- xxxxxxx statistické xxxxxxx x metody,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx x historických xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Diskuse výsledků.
Xxxxxx.
X.13/14. XXXXXXXXXX - XXXX REVERZNÍCH XXXXXX X XXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Reverse Xxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mutací se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx) a xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxxxx uvedených xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx nebo několika xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx bakteriálních kmenů (1) (2) (3). Xxxxxxx bakteriálního xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x tom, xx xx xxxxxxxx mutace, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx se funkční xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx základní xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx bakteriální xxxxx xx detekována xx xxxxxxx své xxxxxxxxxx růst za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx a existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx genové mutace x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx genech xxxxxxxxxxx buněk xxxxx x člověka x xxxxxxxxx xxxxxx roli xxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxx mutace xx xxxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxxxx takových xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xxx xxxx náchylné x xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx některé užitečné xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, jež xxxx xxxxxxxx genotoxickými látkami. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx databáze výsledků xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x byly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x různých xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxx xxxxxxxxxx mutací x xxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxxx xxxx slouží xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx závislém xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx), xxx xxxxx ke xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nezávislý.
Mutageny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx změnu xxxx x XXX. Xxx xxxxxxxxx xxxxx může x xxxxxx xxxxx xxxxx xx místě xxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (mutageny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxx nebo odebrání xxxxxxx xxxx xxxx xxxx bází v XXX, čímž xx xxxx xxxxx xxxxx x RNA.
1.3 XXXXXXX XXXXX
X xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx od xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx látek metabolismu, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx opravy XXX. Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx metabolické aktivace. Xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xx xxxxx ovšem xxxxxxxx xxxxxxxx imitovat xxxxx podmínky xx xxxx, takže xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx mutací xx xxxxx xxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x zvláště xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx rozsáhlé xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx mnohé chemikálie, xxxxx jsou x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx také x xxxxxx xxxxxxx mutagenní xxxxxxxx. Existují xxxxx x příklady xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxx tohoto xxxxxxxxxx xxxx xxx specifická xxxxxx vyhodnocovaných veličin, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxx, xx xx mutagenní xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxxxx některé xxxxx xxxxxxxxxxxx sloučeniny (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) a xxxxx, x xxxxx xx předpokládá xxxx xx, že specificky xxxxxxxx xxxxxxxxxx systém xxxxxxx buněk (xxxxxxxxx xxxxxxx inhibitory xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx); v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx testy xx xxxxxx x savců.
Xxxxx sloučeniny, xxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx; xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx karcinogeny, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, protože xxxxxx xxxxx, negenotoxickým xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx v bakteriálních xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx vystaví xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx "xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xx suspenze xxxxx x vrchním xxxxxx x xxxxxx xx xxxxx x minimální xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxx metodě xx xxxxxxx směs xxxxxxxx x smísí x xxxxxxx agarem a xx xxxxx se xxxxxx xx minimální xxxxxx xxxx. Při xxxx xxxxxxxx xx xxx xx xxx xxx po inkubaci xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x výsledek xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx revertujících kolonií xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Je xxxxxxx xxxxxxx postupů xxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxx nejběžnější xxxx xxxxxxxx misková xxxxxx ["xxxxx xxxxxxxxxxxxx"] (1) (2) (3) (4), xxxxxxxxxxxx metoda (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx metoda (9) (10) a xxxxxxxxx xxxxxx (11). Jsou xxxx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxx xxx testování xxxxx xxxx xxx (12).
Postupy xxxxxxx x rámci xxxxxx xx týkají xxxxxx xxxxxx plate xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Xxxxxxx xxxxx se detekují xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx x xxxxxxxx třídy, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x krátkým řetězcem, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, alylové xxxxxxxxxx x nitrosloučeniny (3). Xxxx xxxx xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx procedur xxxx xxxxxxxx. Na xx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx "xxxxxxxxx případy", x xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx jiných xxxxx. Xxxx identifikovány xxxxxxxxxxx "speciální xxxxxxx" (xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, které xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx použít): azobarviva x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx x těkavé xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx od xxxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5. POPIS METODY
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stacionárního xxxxxx xxxxx (xxxxxx 109 xxxxx/xx). Xxxxxxx x xxxxxxx stacionárním xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx, xxx kultury xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vysoký xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Titr xx xx prokázat xxx x historických xxxxx xxxxxxxxx křivek, xxxx x jednotlivých xxxxxxx xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx miskách.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 37xX.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx bakteriálních xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx (XX 1535; TA 1537 xxxx XX97x xxxx 1X97; XX98; a XX100); u xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx laboratořemi. Xxxx xxxxx kmeny X. typhimurium mají xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx bází XX x xx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx vyvolávající xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx X. xxxx XX2 xxxx X. xxxxxxxxxxx TA102 (19), xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx reverzním xxxxx xxx bází AT. Xxxxx xx doporučená xxxxxxxxx xxxxx xxxx:
- S. xxxxxxxxxxx XX1535 x
- X. xxxxxxxxxxx XX1537 xxxx TA97 xxxx XX97x x
- X. xxxxxxxxxxx TA98 x
- S. xxxxxxxxxxx TA100 x
- E. coli XX2 xxxX nebo X. coli XX2 xxxX (xXX101) nebo X. typhimurium TA102.
X xxxxxxx mutagenů xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx nejvhodnější xxxxxx TA102 xxxx xxxxxx DNA xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kmen E. xxxx (xxxx. X. xxxx WP2 xxxx X. coli XX2 (xXX101)).
Je xxxxx xxxxxx zavedených postupů xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxx (xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx kmenů E. xxxx). Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x xx: přítomnost xx nepřítomnost X-xxxxxx xxxxxxxx xxx, kde xx xxxxxxxx x xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx u xxxxx TA98, XX100 x XX97x xxxx XX97, WP2 uvrA (xXX101) x rezistence xxxx xxxxxxxxxx + xxxxxxxxxxxx u xxxxx XX 102); přítomnost xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx. xxx xxxxxx x X. typhimurium pomocí xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxX xxxxxx x E. xxxx xxxx uvrB xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) (2) (3). Použité xxxxx mají xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx frekvenčním xxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx i x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
1.5.1.2 Médium
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx (např. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X x xxxxxxxx) a xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx několik xxxxxx buněk (1) (2) (9).
1.5.1.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Bakterie xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxx za xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) připravená x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx enzymů xxxxxxx, xxxx xx Aroclor 1254 (1) (2) xxxx kombinace xxxxxxxxxxxxx x ß-naftoflavonu (18) (20) (21). Post-mitochondriální xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 30 % v/v xx xxxxx X9. Xxxxx x podmínky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx záviset na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X některých případech xxxx xxx vhodné xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakci x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. X azobarviv x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metabolické xxxxxxxx (6) (13).
1.5.1.4 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxx xxxxx se xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx rozpustí nebo xx xxxxxxxx jejich xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx x případně xx xxxxx. Xxxxxxx látky xx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx ředí. Xx xxxxx používat čerstvé xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxx testu
1.5.2.1 Xxxxxxx kmeny (viz 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx, která xx xxxxx xxxx v xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, patří xxxxxxxxxxxx x rozpustnost x xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x předběžném xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx kolonií, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kultur. Xx xxxxxxxxxxx metabolického aktivačního xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nerozpustnost xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxx okem.
Xxxxxxxxxx maximální xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx látek, jež x xxxxxx koncentracích xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx x konečné xxxxxxx xxxxx nerozpustných. Xxxxxxxxx xxxxx, jež jsou xxxxxxxxxxx xxx za xxxxxxxxxxx nižších xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µl/misku, xx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx koncentrace. Sraženina xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. √10) mezi xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Zkoumá-li xx koncentrační xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxx xxxxxxxx menší. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 mg/misku xxxx. 5 µl/misku xxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxx podstatné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Každý xxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx specifickou xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx) xxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx ní. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
X xxxxx x metabolickým xxxxxxxxxx systémem xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu volí xxxxx xxxxxxxxx typu xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Příklady xxxxx, jež xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 |
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx vhodnou xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
Látka | XXX | XXXXXX |
Kongo červeň | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx X9. Pokud xx 2-xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx S9 xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivaci xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, jež jsou xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx, uvádí tato xxxxxxx:
Látka | XXX | XXXXXX | |
Xxxx xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 x XX 100 |
2-nitrofluoren | 607-57-8 | 210-138-5 | XX 98 |
9-aminoakridin | 90-45-9 | 201-995-6 | XX 1537, XX 97 x XX 97a |
XXX 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, XX 97 x XX 97x |
kumen-hydroperoxid | 80-15-9 | 201-254-7 | TA 102 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 | XX xxxX x XX 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, WP2uvrA a XX2xxxX (pKM101) |
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx | 56-57-5 | 200-281-1 | XX2, XX2xxxX x WP2uvrA (xXX101) |
Xxxxxxxxxxxx (XX2) | 3688-53-7 | xxxxx xxxxxxxxxx plazmidy |
K xxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx dostupné, xx xxxxx uvážit xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x chemické xxxxx.
Xx xxxxx použít x negativní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx, xx kterými xx xxxxx zachází xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly xxx ovlivnění testovanou xxxxxx xxxxxx existují xxxxxxxxxx xxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.3 XXXXXX
Xxx xxxxxxxx miskové xxxxxx (1) (2) (3) (4) xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 0,05 xxxx 0,1 xx testovaného xxxxxxx, 0,1 ml xxxxxxx bakteriální kultury (xxxxxxxxxx zhruba 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x 0,5 xx xxxxxxxxxx xxxxx a 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. X testech x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx 0,5 xx metabolické aktivační xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx post-mitochondriální xxxxxx (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x v metabolické xxxxxxxxx xxxxx) x 2,0 ml xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx /xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx zkumavky xx xxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xx xxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxx.
Při xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx testovaná látka / xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx kmenem (xxxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) a sterilním xxxxxx nebo metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,5 xx) xxxxxxx xx xxxx 20 min xxxx déle xxx 30 - 37 xX; xxxxx se xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx mísí 0,05 xxxx 0,1 ml xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,1 xx bakterií a 0,5 ml xxxxx X9 nebo sterilního xxxxx s 2,0 xx xxxxxxxx agaru. Xxxxxxxx se během xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx adekvátní xxxxx xxxxxxx se pro xxxxxx dávku xxxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx je přijatelné, xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx nebo xxxxxx látky xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (12) (14) (15) (16).
1.5.4 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx testu xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 xX pod xxxx 48 - 72 xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Údaje xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií na xxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxx), xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontrolu (xxxx. xxx působení xxxxxxxxxxxx) xx uvedou xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x průměrný xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xx xxxxx xxxxx včetně xxxxxxxxxx odchylky.
Verifikace xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nepožaduje. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx. Negativní výsledky xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxxx. X následných xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx zvážit xxxxxxxxxx studijních xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx rozsah posuzovaných xxxxxxxx. Xx studijním xxxxxxxxxx, které se xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx ("plate xxxxxxxxxxxxx" nebo preinkubace x xxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxxx metabolické xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx dávkově xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxx koncentracích x minimálně xxxxxxx xxxxx x metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxx (23). Xxxx xxxxx se xxxxxxx biologická xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (24), statistická významnost xx však xxxxxx xxx jediným určujícím xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria xxxxxxxxx, xx v xxxxx xxxxx považuje za xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx poskytuje jednoznačně xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však nelze xx získaného souboru xxx vyvodit x xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx, x když xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx ukazují, xx xxxxx vyvolává xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx resp. Xxxxxxxxxxx coli. Negativní xxxxxxxx ukazují, že xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx testovaná xxxxx xx zkušebním xxxxx xxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla,
- xxxxxxxxxxx a stabilita xxxxxxxxx látky v xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- použité xxxxx,
- počet xxxxx x kultuře,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- množství xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx misku (x xx xxxx μx) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x počtu xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx,
-typ x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxxxx (zpracování).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- známky xxxxxxx,
- počty na xxxxxxxxxxxx miskách,
- xxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- vztah xxxxx-xxxxxxx, je-li to xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- údaje xx xxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných odchylek,
- xxxxx z xxxxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx.
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
X.15. GENOVÉ XXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x x xxxxxxxxxxxx aktivací.
Xxxx využívány forward xxxxxxx systémy x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx míra vzniku xxxxxx z xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx mutant (xxx-1, ade-2) xx xxxxxxx, xxxxxx vyžadující xxxx mutanty a xxxxxxxxxx systémy, xxxx xx indukce xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx XX 185-14 X x xxxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 2-1, xxx 4-17, xxx 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx mutagenů xxxx xxxxxx xxxx, které xxxxxxxx mutace ve xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. XX185-14X nese rovněž xxx 1-7 marker, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxx 3-10, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxxx xxxxx S. xxxxxxxxxx xx jediným xxxxxx xxxxxxxxxx kmenem X7, xxxxx xx xxxxxxxxxxx pro ilv 1-92.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxx xxx připraveny xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx vhodného xxxxxxxx. X organických xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx roztok xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxxx životnost x charakteristiky xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Buňky xxxx být exponovány xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x jater xxxxxxxx po aplikaci xxxxx indukujících xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, postmitochondriálních xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx metabolickou xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Haploidní xxxx XX 158-14C a xxxxxxxxx xxxx X7 xxxx nejužívanější xxx xxxxxx genových xxxxxx. Xxxx xxxxx mohou xxx xxxxxx vhodné.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx kultivační xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Negativní a xxxxxxxxx kontroly
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mutační xxxxx mají být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx zvolených xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx použitá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx přežití xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mají být xxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxxxxxxx látky xx xxxxxxx vhodných xxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xxx xxxxx netoxické, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx případ xx případu.
1.2.2.5 Kultivační xxxxxxxx
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxx 28 xx 30 oC xx xxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací
Frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxx x rozmezí akceptovaných xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Je nutno xxxxxx nejméně xxx xxxxx na jednu xxxxxxxxxxx u testu x prototrofními xxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxx. X experimentů xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx 3-10 x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být počet xxxxx zvýšen, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx: 1-5 x 107 buněk/ml je xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 xX za xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x průběhu xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx. Po xxxxxxxx ovlivnění xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x vyočkovány na xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx inkubaci jsou xxxxxxxx přežívající buňky x buňky x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx první xxxxx xxxxxxxxx, xx xxx proveden xxxxx xxxxx s xxxxxxx xx stacionární xxxx. Xxxxxxxx xx první xxxxx pozitivní, je xxxxxxxx dalším xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx výsledky xxxx xxx potvrzeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Údaje xxxx xxx vyhodnoceny xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx informace x:
- použitých xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx ve xxxxxxxxxxx xxxx xxxx rostoucí, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: hladina xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx při xxxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx, pokud je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.16. MITOTICKÁ XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip metody
Xxxxxxxxx rekombinace x Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae xxxx xxx detekována xxxx xxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxx xxxx. První xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a vytváří xxxxxxxxxx produkty, xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx nereciproční x xx xxxxxxx genová xxxxxxxx. Překřížení je xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xx testována xx základě xxxxxx xxxxxxxxxxxxx revertant vzniklých x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx téhož xxxx. Xxxxxxxxxx užívané kmeny xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx konverse xxxx X4 (xxxxxxxxxxxxxx v xxx 2 x xxx 5), X7 (xxxxxxxxxxxxxx v xxx 5), XX34 (heteroalelický x xxx 4) x XX1 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4 x trp 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx produkující xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx u X5 xxxx X7 (xxxxx xxxxxx měří xxxxxxxxxx xxxxxxx konversi x xxxxxxxx xxxxxx x xxx 1-92). Oba xxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xxx komplementární xxxxx xxx 2.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx vehikula. U xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx než 2 xxxxxxxx % v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, aceton xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx vhodného exogenního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx aplikaci xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakcí xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx vhodné xxx metabolickou xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxx X4, X5, X7 a XX1. Užití xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Média
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
Pozitivní, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Má xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx koncentrací. Xxxx být xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nesmí mít xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. X toxických xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx ve xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xx xx xxx rozpustnosti xxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, xx vodě xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx od případu.
Xxxxx mohou být xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx buď stacionární xxxx, xxxx xxxxx xxxxx xx dobu xx 18 x. Xxxxxxx xxxxxxxxxx ovlivňované xxxx xxx mikroskopicky xxxxxxxxxxxx pro tvorbu xxxx, xxxxxxx přítomnost xxxx znehodnocuje.
1.2.2.5 Podmínky xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxx xx xxxxx xx xxxx xxx při 28 - 30 xX. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx překřížením xxxx xxx umístěny x xxxxxxxxxx (xxx 4 xX) xx xxxxx 1 - 2 xxx xxxx xxxxxxxxx, xxx se xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kolonie.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxx být xxxxx xxxxxxxxxx x frekvencí xxxxxxxxxxx mutací x xxxxxxx akceptovaných normálních xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x testu xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx mitotickou xxxxxxx xxxxxxxx a xxx xxxxxx životnosti xxxxx. V případě xxxxxxxxx recesivní homozygozity xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx kolonií.
1.2.2.8 Xxxxxx
Xxxxxxxxx S. cerevisiae xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx buď xxxxxxxxxxx, xxxx rostoucí xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. 1-5 x 107 buněk/ml xx xxxxxxxxx testované xxxxx po xxxx xx 18 x. xxx 28 až 30 xX za xxxxxxx. Odpovídající množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xx přidáno x xxxxxxx ovlivnění, pokud xx to xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx centrifugovány, xxxxxxx x vyočkovány xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Jestliže xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx být xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xx stacionární xxxx. Jestliže xx xxxxx pokus pozitivní, xx potvrzen xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx experimentem.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx prezentovány x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx počet xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, přežívajících xxxxx a frekvenci xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx experimentu.
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx statistickými metodami.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- podmínky xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx fázi xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, metabolický xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx experimentu: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx ovlivnění, teplota xxx ovlivnění, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx,
- počet kolonií, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xx to xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx dat,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxx výsledků.
B.17. MUTAGENITA - XXXX XXXXXXXX MUTACÍ X XXXXXXX XXXXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 476, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxx Gene Xxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx vitro xx dá používat xx zjišťování genových xxxxxx xxxxxxxxxx chemickými xxxxxxx. Xxxx vhodné xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx X5178X, linie XXX, XXX-XX52 x X79 xxxxx čínského křečka x lidské xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx TK6 (1). X xxxxxx buněčných xxxxx se xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zjišťují mutace x xxxxxxxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) a x xxxxxxxxxx xanthin-guanin xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxx xxxxxx x XX, XXXX x XXXX xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Autosomální xxxxxxxxxx XX x XXXX xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxx), xxxxx xx xx lokusu XXXX chromozomů X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
X xxxxx xx genové xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxx použít xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxx. Při volbě xxxxx se xxxxx x xxxxx růstové xxxxxxxxxx dané xxxxxxx x stabilita frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx savčí podmínky xx vivo xxxxxxxx. Xx třeba vzniku xxxxxxxx xxxxxxxx, za xxxxxxx by xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mutagenitu. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx mutagenity xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xX, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (7).
Xxxxx xxxx se xxxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx x tomto testu xxxxxxxxx, xxxx savčími xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx korelace xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Tato korelace xxxxxx na xxxxx xxxxxxxx látky x xxxxxxxx xxxxx více xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxx karcinogeny, xxxxx xx tímto xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx či xxxxxxxxxxx, který v xxxxxxxxxxxxx buňkách nepůsobí (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxx: genová xxxxxx výchozího typu xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xx xxxxx xxxx ztrátě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx substituci páru xxxx: xxxxx způsobující xxxxxxxxxx jednoho xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx x XXX.
Xxxxxxxxxx mutageny (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx posunové xxxxxx): látky, xxx xxxxxxxxx přidání xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx párů bází x XXX.
Xxxx fenotypické xxxxxxx: období, během xxxxxxx jsou z xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxx v xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxxx xx jako součin xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxx) a xxxxxxx klonovací xxxxxxxxx xxxxxxx efficiency (v xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx růst: xxxxxxx nárůst xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx x době xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx exprese.
Přežití: xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx xxxxxxxxxx) ovlivněných xxxxx xxxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xx konci působení xxxxx; xxxxxxxxx se xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx kontrolní buněčné xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxx, xxxxxxxxxxx xx thymidinkinázu (XX) x xxxxxxxx mutace XX+/- → TK-/-, xxxx xxxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pyrimidinového xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (TFT). Xxxxx produkující thymidinkinázu xxxx vůči TFT xxxxxxx, což xxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného metabolismu x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dělení. Za xxxxxxxxxxx XXX xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, obsahující xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Podobně xxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx HPRT xxxx XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 6-xxxxxxxxxxx (TG) xxxx 8-xxxxxxxxxx (XX). Xxxxx xx analog xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx buňkách, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx zvážit. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxx s xxxxxxxx x bez xxxx. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxxxxxxx strukturně xxxxxxxx xx xxxxxxxxx činidlem, xx xxxxx xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).
Xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x bez xx x xxxxxxxxx xx xx stanovení xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx výběrem mutantů (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxx xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) (cloning xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx ponechají x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx pro daný xxxxx x xxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxx k co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx expresi xxxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx známého počtu xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxx xxx tohoto xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Příprava
1.4.1.1 Xxxxx
Xx se xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxx L5171Y, XXX, XXX-XX52, V79 x TK6. U xxxxxxxxx xxxx používaných x tomto xxxxx xxxx xxx prokázaná xxxxxxxxx xxxx chemickým xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) x xxxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx. U xxxxx se xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; infikované buňky xx použít xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx (power). Xxxxx xxxxx, xxxxx kultur x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí těmto xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vyhovovat (14). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx expozici a xxxxxxx xx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xx dán frekvencí xxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xx xxxxx buněk má xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 106 xxxxx. Xxxx xx být x xxxxxxxxx adekvátní xxxxxxxxxx údaje, xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testu.
1.4.1.2 Média x xxxxxxxxxx podmínky
Je xxxxx použít xxxxxx xxxxxxxxxx média x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx xx xxx xxxx xxxx podle xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx je, xxx xxxxxxxx kultivace zajišťovaly xxxxxxxxx růst xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx jak xxxxxxxxxx, tak xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx kultur, xxxxxxxxx xx kultivačního xxxxx a inkubují xxx teplotě 37 xX. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, je třeba xxxxxxx zbavit xxxxx xxxxxxxxx mutovaných buněk.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx z xxxxx hlodavců, ovlivněná xxxxxxx indukujícími xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx fenobarbitalu x β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10% x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxx, jakého typu xx xxxxxxxxx chemikálie. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx koncentracích.
Pro účely xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx exprimující xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxx vědecky xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x metabolismu xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Je-li xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx naředí. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx do xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo xx předtím ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vlastnosti.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
X zvoleného xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx podezření, xx xx mohlo x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat, x xxxxx narušovat xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxx rozpouštědlo xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxx xxx, xxx xx to xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx ve vodě xxxxxxx, musí xxx xxxxxxx organické xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx odstranit xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Koncentrace
Mezi xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxx v systému x xxxxx pH xxxx. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž xx xxxxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx, xxxx xx relativní xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx) nebo xxxxxxxxx celkový xxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx experimentech.
Použijí xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx pokrývat xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx. To xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx xxxxx více xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx mezi hodnotami 2 a √10. Xxxxxxx-xx maximální xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, měla xx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x 10-20 %, xx však xxxx xxx 10 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 mg/ml, 5 μl/ml x 1,01 M.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx nižších, než xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx xxxxx nerozpouští, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx mez rozpustnosti xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Může xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx během expozice x důsledku přítomnosti xxxxx, S9, xxxx xxx. xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx nesmí být xx překážku při xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.3 Xxxxxxxx
X xxxxx xxxxxxx experimentu se xxxxxx provést x xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, vehikulum) xxxxxxxx, x to xxx s metabolickou xxxxxxxx, tak bez xx. Xxxxx xx xxxxxxxx metabolická xxxxxxxx, xxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx účinku. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
XX (xxxx x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (xxxx x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XXXX | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx koncentrace S-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
benzo[a]pyren | 50-32-8 | 200-028-5 |
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxx i xxxx vhodné xxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (XXX 59-14-3, xxxxx XXXXXX 200-415-9), xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxx, kde xx to xxxxx, xx xxxxxx použít xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx každý xxxxxx interval xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx x negativní xxxxxxxx, xx které xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiu, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx nepříznivé xx xxxxxxxxx účinky.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxx testovanou xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx testovanou xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Expozice xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xx xxxxxx doba 3-6 xxxxx). Xxxx expozice xxxx xxxxxxxxxx jeden xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx zvýšit xxxxx koncentrací xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kultur x xxxxxxx (xx. xxxxxxxxx osm xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Kultury x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xx používají duplicitní.
V xxxxxxx plynných nebo xxxxxxxx látek xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx přežívání, viability x xxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx promyjí a xxxxxxxxx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx expozici xx xxxxxxx xxxxxx x analýzou cytotoxicity xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx efficiency xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxx minimální xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx nově xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX x XXXX vyžaduje xxxxxxxxx 6 - 8 dní, TK xxxxxxxxx 2 xxx). Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx x x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx životnosti (xxxxxxxxx x xxxxxxx četnosti xxxxxxx) inokulací buněk xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx v xxxxx X5178X XX+/- xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xx jedné x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace) x na negativních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x tomto xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx kolonií u xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx provést x xx studiích x XX6XX+/-.
2. XXXXX
2.1 Zpracování xxxxxxxx
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X případě xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx X5178XX+/- xx kolonie xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx přinejmenším x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrole. Xxxxxxxxxxx x cytogenetické xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx xxxxx TK+/- xx kolonie xxxxxxx xxxxx kritéria xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxx) x xxxxxxxx růstu (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx nejrozsáhlejší xxxxxxxxx poškození, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, x proto tvoří xxxx xxxxxxx. Rozmezí xxxxxx xxxxxxxxx obvykle xxxx xx xxxxxx xxxxxx genu po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Tvorba xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx postižené xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx rodičovské x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxx přežití (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx cloning efficiency) xxxx xxxxxxxxx celkový xxxx. Xxxxxxx frekvence xx vyjadřuje jako xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx počtem přežívajících xxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx reakce xx nepožaduje. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xx musí xxxxxxxx xxxxxx xx případu. X případech, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxx, je xxxxx xxxxx zdůvodnění. V xxxxxxx nejednoznačných xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx podmínek. X xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxx x experimentu xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx jednotlivými xxxxxxxxxxxxx x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx nárůst xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Nejprve xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx významnost by xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku.
Testovaná xxxxx, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx nesplňují xxxx xxxxxxx kritéria, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za nemutagenní. Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní výsledky, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx nelze xx xxxxxxxxx xxxxxxx dat xxxxxxx x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx experiment xxxxxxxxxx opakuje.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx savčích xxxxx xxxxxx xxxxxx. Nejprůkaznější xx xxxxxxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxx xxxxx - xxxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látka v xxxxxxx xxxxxxx buněk xxxxxxxxxx genové xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Ve zprávě x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- zdůvodnění volby xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx kultury,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx koncentrací x počtu kultur, xxxxxx např. údajů x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx k dispozici,
- xxxxxxx média, koncentrace XX2,
- koncentrace xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x přidané xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
-xxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx akceptovatelnosti,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx expresní xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxxxxxx)
- selekční xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx zjišťování xxxxx živých x xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, x nichž xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxx (včetně xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx "xxxxxx" x "xxxxxxx" xxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- údaje x xX x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx stanoveny,
- xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx možnosti xxxxxxxxxx xxxxxxx malé xxxxxxx mutantů xxxxxx xxxxxxx X5178X TK+/-,
- xxxxx dávka - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- statistické analýzy, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- souběžné xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x pozitivních kontrol, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.18. XXXXXXXXX XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX SYNTÉZA DNA - XXXXX XXXXX XX VITRO
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx neplánované xxxxxxx DNA (XXX) xxxxxxxx xxxxx reparační xxxxxxx XXX po xxxxxx x odstranění xxxxx XXX obsahující xxxxxx xxxxxxxxx indukovaného xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Test xx xxxxxxx na inkorporaci xxxxxxxxx tymidínu (3X-XxX) xx XXX savčích xxxxx, xxxxx xxxxxx x X xxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx 3X-XxX je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x exponovaných xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx kultury potkaních xxxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxx testovanou xxxxxx xxx x přítomnosti, xxx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. UDS xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx vivo.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx referenční xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx médiem. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx životnost xxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx lymfocytů xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx).
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce v xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx bod xx xxxxxxx nejméně xxxx xxxxxxxxx kultur xxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx (xxxx xxxx, xx-xx xx xxxxxxx zdůvodnitelné) xxx XXX UDS.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
X xxxxxx experimentu xxxx být současně xxxxxxxx negativní a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-XXXX) nebo 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-AAF). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxx x xxx XXX bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Xxxx xxxxxxxxx kontrolu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx lze xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx testovány x koncentracích až xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxx netoxické xxxxx xx vodě xxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx případ xx případu.
1.2.2.4 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx kultur xxxx xxx použito xxxxxx růstové xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x xxxxxxx. Stabilizované xxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx kontrolovány xx xxxxxxxxxxx Mycoplasmat.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx a xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x přítomnosti x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx experiment
1.2.3.1 Příprava xxxxxx
Stabilizovaná xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), inokuluje xx do xxxxxxxxxxxx xxxxx xx vhodné xxxxxxx x inkubuje xxx 37 xX.
Xxxxxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx kultivační xxxxxx.
Kultury xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx vhodné xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx hepatocyty xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x médiu obsahujícím 3X-XxX xx vhodnou xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx promyty, xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxx ponořena xx xxxxxxxxxxxxxxxxx emulze (xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx stripping xxxx), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, obarvena x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: Xxxxxxx kultury xxxx xxxxxxxxxx testované látce xx xxxxxxx xxxx x xxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx 3X-XxX. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxx buněk. X zachycení nejvyššího xxxxxxx XXX xx xxxxx 3X-XxX xxxxxx xxxxxxxx x testovanou xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx expozici. Xxxxx mezi xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a 3X-XxX. X xxxxxxxx xxxx XXX a xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx DNA xx užívá xxxxxxx xxxxxxxxxxx médium, xxxxx xxxxx xxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX.
Stanovení XXX xxxxxx LSC: Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx X-xxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx pak xxxxxxxxxx testované xxxxx, xxx bylo xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xx XXX xxxxxxxxxxx z xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx XXX x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3H-TdR.
Jestliže xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx x nestimulovaných xxxxxxxxx xxxxxxx semikonzervativní xxxxxxxxx XXX xxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxx
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Při xxxxxxxxxxxxx UDS x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x X-xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx 50 xxxxx x xxxxxx experimentálním xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx zakódovat xxxx xxxxxxxxxxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx xx hodnotí xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 3X-XxX x xxxxxxxxxx xx xxxx x xxxx o velikosti xxx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Xxx xxxxxxxxx LSC XXX se použije xxxxxxxxx počet xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx kontroly.
Výsledky xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje musí xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
2.1 Vyhodnocení xxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx odděleně.
Xxxxxx inkorporace 3H-TdR xx xxxxxxxxxx a xxxxx xxx x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x modu.
2.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Inkorporace 3X-XxX xx xxxxxxxxxxx xxxx xxx/μx XXX. Průměrná xxxxxxx xxx/μx DNA xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx používají x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Údaje xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx možné, xxxxxxxxx o:
- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx použitých k xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- testované látce, xxxxxxxxxxxx, koncentracích a xxxxxxxxxx xxxxxx výběru x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- pokusném schématu,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách,
- xxxxxxxxx autoradiografických metodách,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx X-xxxx,
- postup xxxxxxxxx x xxxxxxxx XXX x k xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XXX xxx xxxxxx XXX,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretaci xxxxxxxx.
X.19. XXX - XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX IN XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
SCE xx krátkodobý xxxx xxx detekci xxxxxxxxxxxx xxxxx XXX mezi xxxxx xxxxxxxxxxx chromatidami xxxxxxxxxx. SCE xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx sekvencí XXX mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxxx vyžaduje zlom x opětovné xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx XXX xxxxxxxx diferenční xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (BrdU) xx xxxxxxxxxxxxx XXX xx xxxx dvou xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxx jsou xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému, xx-xx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx XxxX. Xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx) x akumulaci xxxxx x c-metafázi xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx jsou buňky xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx buňky xxxxxxxx křečka). Xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx z hlediska xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx.
Používají xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2 x xxxxxxx).
Testovaná xxxxx se xxxxxxxxx xxxx suspenduje x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx významně xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, rychlost xxxxx nebo xxxxxxxxx XXX.
Buňky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x přítomnosti i xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx s vnitřní (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx této aktivity xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx chemických xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxx kultur
Xxx xxxxx experimentální bod xx použijí xxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
X každém xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxx x přímým xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx vyžadující metabolickou xxxxxxxx. Xxxx musí xxx použita negativní xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxx pozitivní xxxxxxxx xxx použít:
- xxxxx působící xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx
- xxxxxxx působící xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx
Je-li xxxxx, xx xxxxx zařadit xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx dávky. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované látky xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk. Xx vodě relativně xxxxxxxxxxx látky je xxxxx testovat až xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxxxx netoxické xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xx xxxxxxxxxx ze zásobní xxxxxxx (trypsinací nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx hustotě x xxxxxxxx xxx 37 xX. Xxx xxxxxxxxxxxx kultury xx xxxxxxx takový xxxxx xxxxx x kultivační xxxxxx, xxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx z 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx také xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx běžnými xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 xX.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx exponovány testované xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx růstu xx xxxxxxx xxxx. Ve xxxxxxx případů stačí xxxxx xx xxx xxxxxx, ale expozice xxxx xxx prodloužena xx xx dva xxxxxxx xxxxx, xx-xx xx xxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx z xxxxx xxxxxxxxxx, buňky xxxxxx x dále kultivovány x růstovém médiu x XxxX dva xxxxxxxxxx xxxxx. Alternativně xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx látkou a XxxX xx xxxx xxxx xxxxxxxxx cyklů.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx kultury xxxx exponovány xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx mitotickém xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx kultury x XxxX je třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxx xx světle xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX, ve xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx BrdU.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx buněk
Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx kultur xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx). Xxxxx kultura se xxxxxxxxxx samostatně.
1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx cytogenetickou technikou. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx XXX xxxx xxx xxxxxxxxx několika xxxxxxxxxx (xxxx. fluorescenční xxxx Giemsa).
1.2.3.5 Analýza
Xxxxx analyzovaných buněk xx závislý xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx SCE x kontrole. Xxxxxxx xx hodnotí nejméně 25 xxxxx rozprostřených xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Preparáty musí xxx zakódovány xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x 46 xxxxxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx x ± 2 xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx centromer. Xx třeba xxxxxxxx, xxx xx budou xxxxxxxxxx SCE x xxxxxxx centromery. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje se xxxxxxxxxxxx tabulkovou xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx XXX v xxxxx xxxxxxxx x xxxxx XXX/xxxxxxxxx zvlášť pro xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- kultivačních xxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, inhibitoru xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách,
- počtu xxxxxx xxx xxxxx experimentální xxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxx počtu XXX/xxxxx x SCE/chromozóm (xxxxxxxx xxx každou xxxxxxx),
- kritériích xxxxxxxxx XXX,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.20. RECESIVNÍ XXXXXXX MUTACE VÁZANÉ XX XXXXXXX U XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx na pohlaví (XXXX) na Drosophila xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, jak xxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxx, x zárodečných xxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxx na xxxxxxx xxxxxx vhodný xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx xxxxxxxxxx X. Xxxx reprezentují ani 80 % xxxxx xxxxxx X-chromozómu. X-chromozóm xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1/5 xxxxxx haploidního xxxxxx.
Xxxxxx x X-chromozómu xx xxxxxxxxxxx projeví x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx. Xxxx xx mutace xxxxxxx x hemizygotním xxxxx, xxx na její xxxxxxxxxx usuzovat z xxxxxxx xxxxxxx ze xxxx typů samčích xxxxxxx, kteří se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. SRLS xxxx xx výhodný vzhledem x zvláštnímu xxxxxxx x uspořádání xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx Muller-5. Xxxxx xxx použity x jiné vhodné xxxxx popsané xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx X-chromozómu.
1.2.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx rozpouštějí xx xxxx. Xxxxx ve xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. směs etanolu x Xxxxxx-60 nebo 80), xxxx xxxxxxxx xx dále xxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx vehikulu.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Test xx xxxxxx xxxxxxx citlivost. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx mutací x kontrolní skupině xxxxxxxx xxxxxxxxx nutný xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx třeba xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx per xx, injekčně nebo xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx provádí x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx NaCl x xxxxxxxx xx xx xxxxxx nebo břišní xxxxxx.
1.2.1.5 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
V xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx negativní (x xxxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx historické xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx experimentu xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.6 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx se tři xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx maximální xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxx (xx xxxxx 3-5 xxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx Muller-5 nebo x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-chromozómu). Xxxxxx xxxx vyměněny xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xx xxx xxx, aby xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx letální efekt xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx X1 xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xx. jedna xxxxxx/xxxxxxxx) xx svými xxxxxx. X X2 xxxxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx zaznamenávána xxxxxxx samců xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxx vznikají X1 xxxxxx nesoucí letální xxxxxx v rodičovském X-xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxx testovány, xxx xx zjistilo, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx údaje xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx s letální xxxxxx xxx každou xxxxxxxxxxx, xxx každé xxxxxx xxxxxxx a xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Zaznamenává xx xxxxx clusterů xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx se xxxx potvrdit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx zhodnotí vhodnou xxxxxxxxxxxx metodou. Nahromadění xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mutací xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxx x úvahu x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, informace x:
- použitých xxxxxxx xxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx X2 kultur, xxxxx X2 xxxxxx xxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx ovlivněných skupin,
- podmínkách xxxxx: xxxxxxxx popis ovlivňování x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxx dávek, xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx (x rozpouštědlem) x xxxxxxxxx kontroly,
- kritériích počítání xxxxxxxxx mutací,
- xxxxxxx expozice/účinek, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.21. TEST XXXXXXXXXXXX XXXXXXX XXXXX - XX VITRO
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxx xxxxx lze xxxxxx xxx xxxxxxx fenotypických xxxx in xxxxx xxxxxxxxxxxx chemickými xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx C3H10T1/2, 3X3, XXX, Fischerových xxxxxxx x xxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx morfologie, tvorbu xxxxxxx xxxx změny x uchycení x xxxxxxxxxxxx agaru. Méně xx používají xxxxxxx xxxxxxxxxx ostatní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx změny x buňkách xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látkám. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx testu xxxx xxxxxxx karcinogenity. Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Cytotoxicita xxxx xxx zjištěna xxxxxxxxxx účinku xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx ovlivněním xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx vychází ze xxxxxxxxxxx, xx expozice xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx experimentech, protože x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Buňky
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx musí zajistit, xx xxxxx xxxxxxx x testu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx karcinogenem x xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x že je xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx média x xxxxxxxxxxxxxx podmínky xxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx transformace.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx rozpouštědle xxxx xxxxxxxxxx buněk. Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x přítomnosti x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx s xxxxxxx metabolickou xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx vhodné xxx xxxxxxxxx látky.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
Xx xxxxxxx experimentu musí xxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Musí xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx látek xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxx xxxxxxxx látky: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx vyžadující metabolickou xxxxxxxx: 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xx-xx třeba, xx xxxxx zařadit xxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxx efekt xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx přežívání buněk, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx stejné xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxx relativně xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx testovat xx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx postupů. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx netoxické xxxxx xx určuje xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx dobu xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Ta xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x výměnou xxxxx (xx. xxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx se xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx bez xxxxxxxxxx vlastní xxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x přítomnosti x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx x xxxxx propláchnutím xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Všechny xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xxxx xxx prezentovány x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx úrovně x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx počet transformací xx xxxxx přežívajících xxxxx. Xxxx xx xxxxx zpracovat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx použitých x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx,
- kultivačních xxxxxxxxxx: koncentraci xxxxxxxxx xxxxx, xxxx inkubace, xxxxxxxxxxxx, kultivačních xxxxxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, metabolickém xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx během xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx fenotypu, xxxxxxx selektivního xxxxxxx (xx-xx xx xxxxxx), xxxxxxxxxx xxxxxx koncentrací,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretaci xxxxxxxx.
X.22. DOMINANTNÍ XXXXXXX XXXX U XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxxxxxxx letalita xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo fetální xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx chemické látce xxxxxxxx, že xxxx xxxxx poškozuje xxxxxxxxx xxxxx exponovaného zvířecího xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxx embrya xxxxxxxxxx xxxxxx může xxx také xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinku.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x pářeni x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Vzestup xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx počet mrtvých xxxxxxxxxx v kontrolní xxxxxxx vyjadřuje postimplantační xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx dominantní xxxxxxxx xx xxxxxx xxx- x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx založen xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx samici x xxxxxxxxxx skupině x xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx skupině. Xxxxxxx xxxxx implantací x xxxxxxxx intervalu xxxx xxx způsobeno xxxxxxx xxxxx (x.x. xxxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xx fyziologickém xxxxxxx. Xxxxx nerozpustné xx xxxx xx xxxx xxxx suspendují xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x testovanou xxxxxx ani vyvolávat xxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx naředěnou xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx aplikace.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Pro xxxx xx xxxxxxxxxx použít xxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxx, pohlavně xxxxxxx xxxxxxx xxxx náhodně xxxxxxxxx xx exponované x xxxxxxxxx skupiny.
1.2.2.3 Xxxxx x pohlaví
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx variabilitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky. Xxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx případě xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxx 30 - 50 březích xxxxx na připouštěcí xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivních xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx být xxxxxxx. Xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx vhodných, xxxxxxx xxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx citlivost xxxxx (xxxx. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 xx.xx-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx tři dávkové xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxxxxx známky xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxxxxx xxxxxx. V některých xxxxxxxxx xx postačující xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx dávce 5 x.xx-1 xxxx x xxxxx 1 x.xx-1.xxx-1 xxx opakované xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jednorázová xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx.
Jeden xxxxx xx opakovaně křížen x xxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx aplikaci xxxxx. Xxxxxxx musí xxx u xxxxx xxxxxxx po xxxx xxxxxx xxxxxxx cyklu xxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx či xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx dán schématem xxxxxxxx x musí xxxxxxxxx všechna xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx cervikální xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx dělohy xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx implantací. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x určení xxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx x počtu xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x tabulkách. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx každého xxxxx a xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, x xxxxx xxxxxx xxxxx, x xxxxx xxxxxx x mrtvých implantací.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx dominantního xxxxxxxxx efektu xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx samici x xxxxxxxxxx skupině x xxxxxx živých xxxxxxxxxx x kontrolní skupině. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx zaznamenány x xxxxxxxxxxxxxx ztráty. Xx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxx rozdíl xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx a počtem xxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Údaje jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx možno, xxxxxxxxx x:
- druhu, xxxxx, xxxx a xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx od každého xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách,
- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx hladinách x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxxxx podání x xxxxxxxx expozice,
- xxxxxx páření,
- xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- kritéria xxx počítání xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxx/xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX ABERACÍ X XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací OECD XX 483, Mammalian Xxxxxxxxxxxxxx Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx většinou xxxxxxxxxxxx, xxxxx k xxxxxxxx chromozómového xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx není xxxxxx x analýze numerických xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x příbuzné xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx chorob.
Xxxxx xxxxxx xx analyzují xxxxxxxxxxxx aberace v xxxxxxxxxxxxxxx, x proto xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx indukci xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách.
X xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Tímto xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx se zjišťují xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Tato xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx buňky.
Xxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx, xx třeba xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, dříve xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Další xxxxxxxxx x ovlivněných spermatogonií xxx získat xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómů, kde xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu x xxxxxxxxx, i když xx xxxxxxxxx buňky xxxx xx spermatocyty.
Xxxxx xxxx xx xxxx je určen xx xxxxxxxxxx, zda xxxx mutageny aktivní x somatických buňkách xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx test význam xxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx tím, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx procesů XXX.
X xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se širokým xxxxxxxx citlivosti vůči xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx tedy představují xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx jejich xxxxxx xx varleti xxx xxxxx xxxxxxxx spermatogonií xxxxx, ale nemusejí xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx anatomické x fyziologické xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Existují-li xxxxxxx toho, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx do cílové xxxxx nedostane, není xxxx xxxxx pro xxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx obou chromatid, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx dicentrický chromozóm, xxxxxxxxxx chromozóm-ring)
Xxxx xxxxxxxxxx: jako xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx jedné nebo xxxx chromatid xx xxxxxxxxxxx, xx vzniklá xxxxxx xx struktuře xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx šířka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx zlomu xx dislokovaný (nebo xxxx xxx chromatidy), xxxxxxxx xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx jedné chromatidy x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromatid.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx oproti normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) jiný xxx xxxxxxxxx počet xxxx (3n, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx chromozómové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx delece x xxxxxxxxx, x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Xxxxxxx xx vhodným způsobem xxxxxxxx xxxxxxxxx látce x ve xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xx xx xxxxxx látkou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Colcemidem®). Xx xxxxxxxxxxx buněk xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xx xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx analyzují chromozómové xxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxx, xxx ovšem použít xxxxx xxxxxxxxxxx jiného xxxxxxxx xxxxxxx druhu. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dospělých xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx studie xxxx být xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx nemají xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Zdraví xxxxx xxxxxxx jedinci xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx označí x xx dobu minimálně xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, aby se xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vlivy xxxx, xxx x xxx xxxx klece xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx dávek
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x xx-xx xx xxxxx, látka se xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx její suspenze xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Kapalné xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxx přímo xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. je xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum
Rozpouštědlo/vehikulum x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x nesmí x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx použití podpořeno xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové aberace xx xxxx při xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx jejich detekovatelné xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrole xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx patrné, xxx přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zakódovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx látku a xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx časovém xxxxxxxxx. Xxx xx to xxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu.
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
cyklofosfamid | 50-18-0 | 200-015-4 |
monohydrát xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
akrylamid monomer | 79-06-1 | 201-173-7 |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Negativní xxxxxxxx ovlivněné xxxxxxxxxxxxx xxxx vehikulem x xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx experimentální xxxxxxx xxxx by být xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mezi xxxxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx samců.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx dvou dávkách. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx. na xxx xxxxx xx den xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx několika xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
V xxxxxxx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx látce xxxxxxxxx xxxxxxx. Jelikož xxxxxxxxx xxxxx může xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx dřívější a xxxxx xxxxxxxx odběr xxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxx (xx. xxxx xxxxx nejvyšší) xx xxxxx vzorků provádí xx 24 xxxxxxxx xxxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxx vhodnější xxxxxx interval xxx xxxxxxx účinku (6).
Xxxxx toho xxxxx xxx použity xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxx. xxxxx-xx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mitózy, xxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx X-xxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (1).
Zda xx vhodné nechat xxxxx působit xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xx případu. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx opakovaně, xxxxxxxx xx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx (1,5násobku xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Odběry xxx xxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx se xx xx xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx se zvířatům xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vhodná xxxxx Colcemidu® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx z nich xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3-5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4-5 xxxxx.
1.5.3 Dávkování
Provádí-li xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, je třeba xx xxxxxxxx v xxxx laboratoři xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx použijí x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx užívají xxx xxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx odběru vzorků xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx podávání xx účinky xxxx xxxxxxx.
Látky, jež x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx pro stanovení xxxxx a xxxxxxxxxxx xx případ xx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxxxxx jako xxxxx, xxxxx xxxx k xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx spermatogoniích (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx( xxxxx pokles xxxx xxx xxxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx při xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x jedné xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx den xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx být xxxxxxxxx xxxx studie xx použití xxx xxxxxxxxx úrovní. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx expozice xx může použít x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vpravuje xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx intraperitoneální injekcí. X odůvodněných xxxxxxxxx xxxxx xxx přijatelné x jiné způsoby xxxxxxxx. Maximální xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx zdůvodněné. S xxxxxxxx dráždivých xxxx xxxxxxxx látek, jež xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx koncentracích xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x minimalizovala xx xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx připraví buněčná xxxxxxxx, na xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx. Xxxxxxx suspenze xx xxxxxx na xxxxxxxx xxxx x xxxxxx.
1.5.7 Analýza
X xxxxxxx jedince se xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx rozprostřených xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx). Xxxxx počet xx dá xxxxxx, xx-xx xxxxx pozorovaných xxxxxxx vysoký. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx fixační postupy xxxxx vedou x xxxxxxx určitého xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx chromozómů, xxxx xxx u xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx roven číslu 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx z jednotlivých xxxxxx xx prezentují x xxxxxxxxx formě. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. X každého xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi x xxxxx aberací xx xxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupin se xxxxxxxxxxx jednotlivé xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx a xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, uvádějí xx, ale xxxxxxx xx xx celkové xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx, xxxxxxx xx u xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx mitóz xxxxxxxxxxxxx x první x druhé meiotické xxxxxxxx, x xx xxx, xx se x xxxxxxx jedince xxxxxxx 100 dělících xx xxxxx. Je-li xxxxxxxxxxx xxxxx mitóza, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx používá xxxxxxx xxxxxxxx, například xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx frekvence xxxxx x chromozómovými xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxx xxxxxx počtu buněk x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování výsledků xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (8); xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx jediným určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx dalším xxxxxxxxxx, nejlépe za xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx, xx v xxxxx systému považuje xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pozitivní, nebo xxxxxxxxx výsledky, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinku xxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxx xxx ohledu xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky xxxxx ukazují, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x zárodečných xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx chromozómové oberace. Xxxxxxxxx výsledky ukazují, xx xx daných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx chromozómové aberace xxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx o průběhu xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx známa.
Pokusná xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx x xxx xxxxxx,
-xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxx xx xxxxxx pro xxxxxx rozpětí toxicity, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx / xxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx blokující xxxxxxxx, xxxx koncentrace x xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- známky xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxx a počet xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx počet aberací x xxxx skupině,
- xxxxx xxxxx x aberacemi xx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx dávka - xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx,
- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,
- případně pozorované xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.24. XXXX XXXX U XXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
Xx xx xx vivo xxxx xx myších, x kterých xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látkám. Xxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx x cílovými xxxx xx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx srsti. Embrya xxxx heterozygoti xxx xxxx genů xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx v genech xxxxxxxxxxxx jsou vyjádřeny xxxxxxxxxx fenotypem v xxxxxxxxx xxxxxxx vytvářejících xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxx srsti xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx potomků x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, je xxxxxxxxxx x jejich xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x potomků x xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx mutace x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx xxxx suspendovány x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Látky xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx rozpouštědla nesmí xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Používají xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx testované látky.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxx T (nonagouti, x/x; chinchilla, xxxx xxx, xxx x/xxx x; xxxxx, x/x; xxxxxx, xxxxx xxx, x se/d xx; xxxxxxx xxxxxxxx, s/s) xxxx xxxxxxx xxx x kmenem XX (xxxxxx, xxxxxxxxx, brachypody, xx x xx/xx x bp; xxxxxx xxxxx, ln xx/ /xx fz; pearl xx/xx) xxxx x xxxxxx X57 XX (xxxxxxxxx, x/x).
Xxxxx xxx použita x xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xx budou xxxxxxx nonagouti xxxxxxx. Xxxx. xxxxxxx xxxx xxxxxx XXXX (nonagouti, x/x; xxxxxx, c/c) x XXX (nonagouti, x/x; xxxxx, b/b; xxxxxx d/d).
1.2.1.2 Xxxxx x xxxxxxx zvířat
Xxxxxxx xx dostatečný xxxxx xxxxxxxxxx samic, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxx x x xxxxxxxxxxx myší. Xxxxxxxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, že bylo xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xx zvýšení xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx kontrolní hodnoty x xxxx laboratoře xx předpokladu, xx xxxx homogenní. Nedávné xxxxx x pozitivních xxxxxxx xxxxxxx v xxxx laboratoři xxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxx testu xxxxxxx, xxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxx nebyla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Způsob aplikace
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekce xxxxx xxxx. Xx-xx xx vhodné, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx jiný způsob xxxxxxxx.
1.2.1.5 Dávkování
Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx, z nichž xxxxx vyvolává známky xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx vrhu.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx xxxxx xxxxxx 8., 9. xxxx 10. xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 1. xxx březosti xx xxxxxxxx den xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Tyto xxx odpovídají 7.25, 8.25 x 9.25 xxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx ovlivnění xxxxxx xxx provést xxxxx xxxxxx xxx.
Xxxxxxx
X xxxxxx je xxxxxxx a zaznamenáván xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx tři xxxxx xxxxx:
(x) xxxx skvrny x xxxxxxx 5 mm xx střední xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx předpokládá, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (XXXX);
(x) žluté xxxxxx typu agouti xx vyskytují x xxxxx mléčných xxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xx, xx xxxxxxxx x důsledku xxxxxx diferenciace (XXX);
(x) xxxxxxxx x xxxx skvrny xxxxxxx xxxxxxxxxx v srsti xxxx výsledek somatických xxxxxx (XX).
Xxxxxxx xxx skupiny xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx pouze xxxxxxxx, RS, je xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx XXX x XX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx chlupů xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xx nápadné, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx sledovaných xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx jednu xxxx více skvrn xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx získané x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx porovnávají xxxxxxxx xxxxxxxx. Údaje xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx hodnoty xx xxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx o:
- xxxxx xxxxxxxx xxx křížení,
- xxxxx xxxxxxxxxx samic x xxxxxxxxxxxxxx x x kontrolní xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxx odstavení,
- dávkových úrovních xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xx kterém xxx xxxxxxxx xxxx testovaná xxxxx xxxxxxxxxx,
- x xxxxxxx podání xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, a xxxxxx xxxxx s XXXX, XXX a XX x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx morfologických xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxxx x XX, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX X MYŠÍ
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxx xx přenosné xxxxxxxxxxx x xxxx detekuje xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx změny x xxxxxxx xxxxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx potomků. Xxxxxxxxxx xxxxx jsou reciproké xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx potomků ještě xxxxxx X-xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x XX-xxxxxx xxxxxxxx sníženou fertilitu, xxxxx xx xxxxxxx xxx výběr X1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx sterilita xx způsobena xxxxxxxxx xxxx translokací (X-xxxxxxx x x-x typ). Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx samců xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, xxxx X1 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx F1 xxxxx. Xxxxxx XO xxxx xxxxxxxxxxxxx identifikovány xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx nebo suspendovány xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx bylo xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx reagovat s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky.
1.2.1.1 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxx xx obvykle xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxxx i xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx provádí xx xxxxxx. Nepožaduje xx xxxxx xxxxxxxxxx kmen. Xxxxxxxx velikost xxxx xx xxxx být xxxxx xxx osm x měla xx xxx relativně xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx zdravá, xxxxxxxx dospělá zvířata.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx nutně xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxxxxxxx počtu indukovaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx samců X1 xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx v F1 xxxxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxxx xxxxxxxxxxx také xxxxxx X1 generace potomků, xxx xx vyžaduje 300 xxxxx x 300 samic.
1.2.1.4 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx výsledky kontrol xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxx přijatelné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol x xxxxxxxxx xxxxxx z xxxx laboratoře, xxxxx xxx použity.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx jedna xxxxx, xxxxxxxx nejvyšší xxxxx xxxxxxxxxxxx minimální xxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx/xxxxxxx xx xxxxx dvou dalších, xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx dosažitelná xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx expozice. Nejčastěji xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx možná xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx x xxxxx po 35 dnů.
Xxxxx xxxxxxxxx xx expozici xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx konci období xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx. Xx xxxxxx xx xxxxx zaznamenat xxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx mláďat. Xx xxxx xxxx xxxxx x samičí xxxxxxx odděleni xx xx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Zjišťování xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxx možných xxxxx. Xxxx fertility X1 xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx možných xxxxxxxx xxxxxxxxxxx cytogenetickou analýzou xxxx cytogenetická analýza xxxxx samců X1 xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxx xxxxxxxxx
Snížená xxxxxxxxx xxxxxx x F1 xxxxxxxx se může xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxx a/nebo xxxxxxxx xxxxxx dělohy xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxx kmen xxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx: X1 xxxxx xxxxxx k testování xxxx xxxxxxxx samostatně xx klecí xx xxxxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx stejné xxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 18. xxxx po xxxxxxxxx. Velikost xxxx x xxxxxxx F2 xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xxxx jsou odděleni. Xxxxxxxx xxxx testovány X1 xxxxxx, F2 xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxxxx x jakéhokoliv jejich xxxxxxxx xxxxxxx. XX-xxxxxx xxxx určeny změnou xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx x 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx xx. xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxx xxxxxxxx x dalšího xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx X2 xxx dosahuje xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx vrhy. X1 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxxx xxx X2 xxxx, jsou dále xxxxxxxxx buď xxxxxxxx xxxxxx dělohy, nebo xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Analýzy xxxxxx xxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx embryí, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx. Testovaní X1 samci xxxx xxxxxxxxxxx každý xx 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx jsou xxxxxxxx 14. - 16. xxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx živé x xxxxx zárodky.
(b) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Metodou xxx-xxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx jsou xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx multivalentních figur xx xxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxx I x xxxxxxxxxx spermatocytech. Xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx s multivalentními xxxxxxxxxx splňuje požadovaný xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx byl xxxxxxxx xxxxx no xxxxxxxx, xxxxxxx X1 xxxxx xxxx vyšetřeni xxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nejméně 25 xxxxx v xxxxxxxxx - xxxxxxxx X. Analýza mitotických xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xx vyžaduje x xxxxx x xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx meiozy xxxx xxxxxxxxxx nebo x X1 samic suspektních XX. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a/nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx x 10 xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (x-x typ). Xxxxxxx X-autosomální translokace xxxxxxxxxxx xxxxx sterilitu xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx ve všech 10 xxxxxxxx je xxxxxxx xxx XX xxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx zaznamenána průměrná xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx (sex xxxxx).
Xxx xxxxx xxxxxxxxx X1 zvířat xx uvádí xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx kontroly x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx X1 nosičů xxxxxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxx xxxxxx se xxxxx průměrný xxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx x kontrole x individuální xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx X1 xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx I xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx X1 xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxx testes x xxxxxxxxxxx x cytogenetické xxxxxxx.
X XX xxxxx xx uvádí xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx ratio F2 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx analýzy.
X xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx možní xxxxxxxx X1 xxxxxxxxxxx, xx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx translokačních heterozygotů.
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxx o negativních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, je-li xx možné, informace x:
- xxxxx xxxx, xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx zvířat,
- xxxxx rodičovských xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxxx podmínkách, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- počtu x xxxxxxx mláďat xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- počet x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x obsahu xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x mikroskopické xxxxxxx, xxxxx možno x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.26. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, a xx každé xxxxxxx xxxxx úroveň dávky. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx pokusu, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx pitvají.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx a krmení, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx zvířata xxxxxxx přiřadí do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx lze xxxxxxx v xxxxxxx, xxxxxx, v xxxxxxxx xxxx v xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx po xxxxx xxxx pokusu stejnou xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx, musí xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx účinek. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxx data, xx xxxxx je xxxxxx.
1.2.2 Experimentální podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx přednost potkanům, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx proti tomu. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x běžně užívaných xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx by xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx měli být xxxxxxx xxxxxx xxx 6 týdnů, x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 8 xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Provádí-li se xxxxxxxxxxxx orální xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx se xx xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 zvířat (10 xxxxx a 10 xxxxx). Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx zabíjet v xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx podávání sledovat xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx úrovně dávek x jednu kontrolní xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované látky xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx. Používá-li xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxx skupině xxxxxxx způsobem jako xxxxxxxx xxxxxxxx, a xx xx stejném xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx dávka. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx uhynutí nebo xxx malý počet. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx nejnižší dávka xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx více xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx skupině x nízkou x xxxxxxx úrovní xxxxx x x kontrolní xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx třeba xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxx xx se tak xxx každý xxx xx xxxxxxx xxxx, x dávkování v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxx-xx xx 90denní xxxx xxxx popsanou xxxxxxx x nevyvolá-li xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 tělesné hmotnosti xx xxx (nebo xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) xxxxx toxické xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx testování xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx látka x potravě, je xxxxx xxxxxxxx, aby xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx toxické účinky, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
X xxxxxxxx případě xx xxxxxxxx podává xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx dobu 90 xxx. Zvířata v xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx aplikace, x xxxxxxxxx zotavení x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx a krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x pitné xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx jako xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx zařazení.
Xx xxxxxxxx studie xx xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx, s výjimkou xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx oftalmoskopem xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx x xx xxxxx xxxxxx nejlépe x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx konci pokusu xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx čas či xxxxx trombocytů.
(x) Xx konci xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx jater x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat vápník, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx živočišného xxxxx x kmene), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx pyruvát-transamináza) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx séra (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, dusík močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx x celkové xxxxxxxxx x séru. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx pro úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: lipidů, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy mohou xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx.
(d) Analýza xxxx se nevyžaduje xxxx běžný xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx očekávané xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxx historická xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx prohlídku povrchu xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich obsahu. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (s xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx a tkáně xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, štítná xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxx, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, děloha, (přídatné xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, lymfatické xxxxxx, (xxxxxx mléčná xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx nerv, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (kost xxxxxxxx xxxxxx kloubních xxxxx), xxxxxxx xxxxx xx třech xxxxxxxx - xxxxx, střed xxxxxx a bederní, x (xxxxx xxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx xx posuzují x xxxxxxx, xxxxx lze xx xxxxxx postižení xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx s cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx orgánů a xxxxx je xxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx všechna xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(d) Xxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxx s nízkou x střední xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x zjištění xxxxxxxx xxxxxxx, protože xx poskytuje xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx také xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a ledvin x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx histopatologická xxxxxxxxx xx x zvířat xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx x vysokou xxxxxx.
(e) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxx a orgánech, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx exponovaných skupin.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X ní musí xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx pokusu a xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx x procentuálně xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle pohlaví x xxxxx xxxxx,
- xxxxxx bez xxxxxx, xxxxx xx xxx stanovit,
- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj x xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx jiných účinků,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- hematologická xxxxxxxxx a jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- pitevní nálezy,
- detailní popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.27. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx podávání xxx xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx denně xxxxxx po 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika skupinám xxxxxxxxx xxxxxx (nehlodavcům), x to xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Během období xxxxxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx během pokusu, x zvířata, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx chována v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých experimentálních xxxxxx. Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x kapslích. Xxxxx xxx xxxxxxx také xxxx způsoby xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx zvířatům xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx po celou xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx xxxx, xx možno xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx i xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx; v případě xxx se má x xxxxxxxxx xxxxx xx věku xx 3 xx 6 xxxxxx x xx xxxxxxx xxx 9 xxxxxx. Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx orální xxxx xxxx předběžný xxxx xxxx dlouhodobým xxxxxx, v obou xxxxxxxx xx xx xxxxxx stejný živočišný xxxx a xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx nejméně 8 zvířat (4 xxxxxx a 4 xxxxx). Xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx stejně jako x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx neměla vyvolat xxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx by xxxxxxx xxxxxx dávky měla xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx úrovní xxxxx a v xxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx rovněž xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx x potravě, xx třeba xxxxxxxx, xxx xxx aplikované xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
Podává-li se xxxxxxxxx látka v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx konstantní xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx uvést. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x kapslích, xxxx xx xx xxx xxx každý xxx ve xxxxxxx xxxx, a dávkování x týdenních intervalech xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tělesné hmotnosti xxxxxxx.
Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx orální test xxxx předběžný test xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx použít xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx 90denní xxxx xxxx popsanou xxxxxxx x nevyvolá-li xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 tělesné hmotnosti xx xxx (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, je-li tato xxxxx) xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx testování xxxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxxxx xxxxx x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx aplikované xxxxxxxx xxx další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zvířat.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx dobu objevení, xxxxxx x trvání. Xx třeba zaznamenat xxxx uhynutí a xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látka 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx způsobem xxx x potravě, xxxxxxxx se za xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 5 dní v xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx není xx xx xxxxxxx) xxxxx xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity a xxxxxxx.
Xxxxxx potravy (x xxxxxx xxxx xxx podávání testované xxxxx x pitné xxxx) a hmotnost xxxxxx se zaznamenávají xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx pečlivá xxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x pitvat.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Oftalmologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky a xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx, xxx xxxxxxx x nejvyšší dávky x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, vyšetří xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx začátku xxxxx, x potom xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx uprostřed x dále xx xxxxx xxxxxx xx xx provést hematologické xxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx například xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxxxx testu, x xxxxx xxx x xxxxxxxxx intervalech xxxx xxxxxxxxx x xxxx xx konci xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, glukózu na xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx séra) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (dříve glutamát-oxalacetát xxxxxxxxxxxx), ornithin dekarboxyláza, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, dusík xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx krve xx nehlodavci měli xxxxxxxx (xx xxxx xxx 24 xxxxx).
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X všech xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx těla, xxxxx xxxxxxx otvorů, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx včetně xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x příštítnými xxxxxxx) x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx předešlo xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx x tkáně je xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra xxxxx x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx žláza, xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx místě xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, reprezentativní xxxxxxxxxx xxxxxx, (samičí xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx sval), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) x (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx se posuzují, xxxxx xx to xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x tkání xx xxxxx provést x všech xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx nejvyšší xxxxx, x u xxxxxx xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx, nebo xxxx xx xx xxxxxxxxxx xx základě klinických xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx do tabulky. X ní musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, typy xxxxxxxxx x procentuálně xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx poškození. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx k xxxx xxxxx použít kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx dávek (xxxxxx xxxxxxxx, pokud se xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích podle xxxxxxx a xxxxx xxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, pokud xx lze xxxxxxxx,
- doba uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx xx konce xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx případných xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx možné,
- xxxxxxx výsledků,
- interpretace výsledků.
B.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, studie xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx se xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 90 dní x odstupňovaných dávkách xxxxxxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Během xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx pozorují, xxx xx zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xx xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých experimentálních xxxxxx.
Xxxxxx před xxxxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxx na xxxxxx pokusných xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx se xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx před experimentem. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx potřeba xxxxxxxx xxxxx týden. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx nanášení xx xxxxxxxx nejméně 10 % povrchu těla. Xx třeba vzít x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx rozhodování x xxxxxxxxx připravované xxxxxx kůže x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Při xxxxxxxx x tuhými xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx upraveny do xxxxxxxx formy, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou, xxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx byl zaručen xxxxx kontakt x xxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 dnů x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xx možno xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxx zvířecí xxxxx, xxxxxx použití xxxx xxxx být xxxxxxxxxx. Xx začátku xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro každé xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx dermální xxxx xxxx předběžný xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx každou úroveň xxxxx použít xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx) se zdravou xxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, která xxxxx zabita xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx sledovat xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx.
1.2.2.3 Dávkování
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx hladiny xxxxx x jednu kontrolní xxxxxxx xxxx - xxxxx se použilo xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxx nejméně 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxx xxxxxxxx každý xxx xx xxxxxxx xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx ve xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx skupina, xxxxx xx xxxxxxxx nejvyšší xxxxx.
Xxxxxxxx hladina xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx vyvolat xxx toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 hladiny xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx voleny xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx skupině s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x x kontrolní skupině xx xxxxx uhynutí xxx xxx xxxxx, xxxxx xx vyhodnocení xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx testované látky x těžkému podráždění xxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, což x vysoké xxxxxxx xxxxxxx xxxx vést x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx poškození xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nutno xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx jej xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxx xxxxx xxxxx, xxxxx odpovídá xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx nutná.
1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávat xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx dobu xxxxxxx a xxx, xx xxxxxx se xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx chovají x xxxxxxx xx jednom. Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx v xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx látku xx xxxxx nanášet xxxxxxxxxx xx xxxxx plochu, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % xxxxxxx xxxx, u vysoce xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx plocha xxxxx. Látkou xx xxxxx xxxxxx co xxxxxxxx xxxx pokusné xxxxxx xxxxxxxxxx v xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka je xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x kůží xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxx plochu xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx látka xxxxxxxx a xxx xx xxxxxxxxx orálnímu xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxx použít x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, úplnou xxxxxxxxxxx však xxxxx xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxx pokožky.
Všechna xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx xxxxxx xxxxxx počátku, xxxxxx a xxxxxx.
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx a xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx soustavy, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx týdně. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x spotřebu xxxxxxx. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx zvířat xxxx xxxx. v důsledku xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx xxxxxxxx zařazení. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxx satelitních xxxxxx, xxxxxxx. Umírající xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx bolestí je xxxxx xxxxxxxx vyřadit, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
U xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xx xxxxx provádějí xxxxxxxxxxx vyšetření:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným přístrojem xx xx xxxxxxx xxxx podáváním testované xxxxx x na xxxxx studie xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx konci pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx dobu srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx čas či xxxxx xxxxxxxxxx.
(c) Xx xxxxx xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx jater x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxx trvání xxxx xxxxxxxxx xx xxxx podle živočišného xxxxx), alaninamino transferáza (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx transamináza), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx x celkové xxxxxxxxx x séru. Xxxx xxxxx charakteristiky, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx biochemické xxxxxxx mohou xxx x případě xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
(x) Analýza xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx podkladě xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, má xx xxxxxx xxxxxxxxx hematologických x biochemických xxxxxxxxx xxxxx před začátkem xxxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii xx xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x břišní xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx žláza (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx vysychání.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - x xxxxxx medula/pons, kůra xxxxx x mozečku, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx, příštítná xxxxxxx, xxxx na xxxxx xxxxxxx, (průdušnice), xxxxx, xxxxx, aorta, (slinné xxxxx), játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, slinivka xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, děloha, xxxxxxxx xxxxxxxx orgány, xxxxxxx (xx-xx přítomen), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx mléčná xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), (xxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxx), (xxxx xxxxxxxx xxxxxx kloubních xxxxx), (xxxxxxx mícha xx xxxxx úrovních - xxxxx, střed xxxxxx x xxxxxxx) x (xxxxx xxxxx). Tkáně x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx x tkání xx xxxxx provést x všech xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx třeba vyšetřit xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xx třeba xxxxxxxx cílové xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(d) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx se xxxx histopatologicky xxxxxxxxxx x xxxxxxxx příznaků xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Další xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x zvířat těchto xxxxxx nemusí xxxxxxxx xxxxxxx, musí xx xxxx xxxxxxx vždy xx orgánech, na xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x vysokou xxxxxx.
(x) Používá-li se xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx tkáních x xxxxxxxx, x xxxxxxx byly zjištěny xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx sestaví xx tabulky. X xx musí být xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx počet xxxxxx x jednotlivými xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx třeba vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x xxxx xxxxx použít kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, krmení,
- xxxxxxxx xxxxxx,
- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx použije) a xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx bez účinku, xxxxx ji xxx xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx během experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx do xxxxx sledování,
- xxxxx toxických nebo xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků případných xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
X.29. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX - INHALAČNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx inhalační xxxxxxxx - xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Několik xxxxxx pokusných zvířat xx exponováno studované xxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx, v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, každá xxxxxxx jedné koncentraci, x xx xx 90 dnů. Xxxxxxx-xx xx xxx dosažení xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Během xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx denně pozorují x zjišťují se xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx uhynou, x xx, která přežijí xx konce xxxxxx, xx pitvají.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v podmínkách xxxxx x krmení, x xxxxxx budou xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, xxx v xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx se užije xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx být x xxxx xxxxx, xx nemají toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx je využít.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx důvody xxxxx tomu. Xxxxxxx xx na mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx začátku xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx testem, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxx a kmen.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nejméně 20 xxxxxx (10 samic x 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v průběhu xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x počet xxxxxx, která budou xxxxxx před xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx každého pohlaví) xx dobu 90 xxx nejvyšší koncentraci x xxxxx následujících 28 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx koncentrace
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx skupiny x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x jedna xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx s xxxxxxxxx - pokud se xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx stejné xxxx x skupiny x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx). X výjimkou xxxxxxxx testované látky xx xx zvířaty x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Pokud xxxxxxxx xxxxxx expozice x člověka, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Ideálně xx xxxxxxx koncentrace xxxx vyvolat xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x v kontrolní xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx expozice
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx xx xxxxxxxx rovnováhy xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je možné xxxxxx x xxxxxx xxx expozice.
1.2.2.5 Expoziční xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx inhalační zařízení, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx za xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx přiměřený obsah xxxxxxx x rovnoměrné xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, xx třeba ho xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce byla xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx boxu xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxx. Xx xxxxx xxxxxx inhalační xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx expozice xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Doba pozorování
Xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxx pozorovat xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx i zotavení x zaznamenávat xxxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x čas, xx xxxxxx se objeví x xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3. Popis postupu
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Zvířata v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx určena k xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx dalších 28 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx zotavení x otravy xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx experimentu xx xxx 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx vlhkost xx být xxxx 30 % x 70 %, s xxxxxxxx případů, xxx xx xxxx možné (xxxx. xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx). Během xxxxxxxx xx nepodává xxxxxxx xxx xxxx.
Používá xx xxxxxxxxx inhalační xxxxxx s vhodnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx pokus pro xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx podmínky x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx stejné. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dosaženo xx nejrychleji.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Měření xxxxxxx vzduchu (xxxxxxxxxxx).
x) Skutečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx v dýchací xxxx. Během xxxxx xxxxxxxx se nemá xxxxxxxxxxx odchylovat od xxxxxxx hodnoty o xxxx xxx ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxx xxxx úrovně xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx rozsah kolísání. Xx xxxxx dobu xxxxxx experimentu xxxx xxx koncentrace xxx xxxxxxxx, xxx je xx prakticky xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx expozic xx xxxx xxx xxxxx, jak xx xx potřeba xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx
x) Během xxxxxxxx x po xx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx zaznamenávají; xxxxx zvíře xx xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Pozorování x kleci xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x krevního oběhu, xxxxx funkce xxxxxxxxx x centrální nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xx zaznamenávají xxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolu xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx jako xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx studie xx všechna xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx a testy xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx trombocytů.
(x) Xx konci xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (trvání doby xxxxxxxxx xx volí xxxxx živočišného xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx glutamát-pyruvát xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x séru. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx potřeby xxxxxxx pro rozšíření xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx moče xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo pozorované xxxxxxxx.
Xxxxx nejsou xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx stanovení hematologických x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx před začátkem xxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
U xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, lební, xxxxxx x xxxxxx dutiny x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx se xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx (xxxx xx xxxxxxx neporušeny, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx aby xx xxxxxxxxx struktura xxxx - perfusní xxxxxx xx považuje xx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx - x řezech medula/pons, xxxx mozku x xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x vaječníky, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, reprezentativní xxxxxxxxxx uzliny, (xxxxxx xxxxxx žláza), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx nerv, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ploch), (xxxxxxx xxxxx ve xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx hrudní x xxxxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx xx posuzují, xxxxx xx to xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx systému x ostatních xxxxxx x xxxxx je xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx exponována xxxxxxxx koncentraci, a x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Je xxxxx vyšetřit všechny xxxxxxxxxxxxx xxxx.
(c) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x střední xxxxxxxxxxx se mají xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx histopatologická xxxxxxxxx xx x zvířat xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, musí xx však xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx histopatologické xxxxxxxxx na tkáních x orgánech, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.
2. XXXXX
Xxxxx xx sestaví xx tabulky. X xx musí být xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s lézemi, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat x jednotlivými typy xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x tomu možno xxxxxx xxxxxxxxxxx uznávanou xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x průběhu pokusu xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení,
- xxxxxxxx xxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, rozměrů, xxxxxx vzduchu, systému xxxxxxxx částic x xxxxxxxx, klimatizačního xxxxxxx, xxxxx likvidace xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx xxxxxxxx. Popsat xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxx stability koncentrací x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x uvedou xxxxx s průměrnými xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. směrodatnou xxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxxxx xxxx údaje:
x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
b) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx vzduchu),
x) xxxxxx vehikula, xxxxx xxxx užito,
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx,
- úroveň xxx účinku, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx účinků,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,
- oftalmologické xxxxxx,
- hematologická vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.30. XXXXXXXXX XXXXXXXXX TOXICITY
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, jedna xxxxx xx xxxxxxx, xx větší xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx sledování xxxxxxx toxicity.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx chována xxx standardních xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx testu. Xxxx testem xxxx xxxxxx, xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx potkan. Xx základě předchozích xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxx xxxxx (hlodavce xxxx xxxx). Xx třeba xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx započata xx nejdříve xx xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx by xxxxx rozdíl xx xxxx zvířat xxxxx xxxx než ± 20 % xx xxxxxxx. X případě, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx je třeba xxxxxx nejméně 40 xxxxxx (20 xxxxx x 20 xxxxx), xxxxxx i xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Samice xx měly být xxxxxxxxx x xxxxxx xx být březí. Xxxxx je xxxxxxx xxxxxxx některá xxxxxxx xxxx dokončením xxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx vyšší xxxxx xxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, ale xx xxxx xxx 4 xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.3 Dávky x frekvence xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx vyvolat xxxxx projevy xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Střední xxxxx xx xxxx xxx voleny ve xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx. Výběr dávek xx xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx, xx testovaná látka xx xxxxxxxx v xxxxx xxxx nebo x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx x xx měla xxxxxxx stálý xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx ohledu x xxxxxxxxxx skupině, xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx.
Xx zvláštních xxxxxxxxx, jako jsou xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx použije-li xx xxx orální xxxxxxxx emulgátoru, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí xx xxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ani xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Dva xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx xxxxxx závisí xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx testované látky x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx člověka.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx technické xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x důsledku kožního xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxx orálního xxxxx x xxxxxxxx rozsahu xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx x předchozích xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx
Xxx, xxx xx testovaná látka xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x je-li xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx přednost xxxxxx aplikaci, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x tobolce.
Ideálně xx xx měla xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx v xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxxx vyvolat "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, především x xxxxxxx xx praktické xxxxxxx, dávkování pětkrát xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Protože inhalační xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxx xxxxxxxx, jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx platnou alternativou x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx obvykle exponováno xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx xx xxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x návaznosti xx xxxxxx expozici x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx hodinou xxx xxxxxx zvířat xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, použitou i xxx xxxxxxx expozičního xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx exponována xxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx v xxx, že x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx denní xxxxxxxx x ještě delším xxxxxxx xxxxx víkendu.
Xxxxx přerušované xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx cílech studia x na lidské xxxxxxxx, která xx xxx simulována. Nicméně, xx xxxxx xxxx x xxxxx určité xxxxxxxxx obtíže. Například, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx aerosolu xxxx určité xxxxxxxxxxx xxx a technik xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx komorách, xxxxxxx xxxxxxxxxx zaručuje xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx xx xxxxxx, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a tím xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Komory xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaných xxxxxx. Xxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx nebo monitorování xxxxxxxx:
(x) průtok xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx denní xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky neměla xxxxxxx více xxx 15 % xxxxxxx hodnoty;
(x) xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 22 ± 2 oC a xxxxxxx v komorách 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx je voda xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx komory. Oba xxxxxxxxx xx xxxx xxx kontrolovány xxxxxxxx;
(x) měření velikosti xxxxxx: xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx velikosti xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Vzorky xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx zóny xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měl xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx distribuci xxxxxx, kterým xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx aerosolu, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx často, xxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Expozice xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 12 měsíců.
1.2.3 Xxxxx postupu
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Dodatečná xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx zákroky x xxxxxxxxxxxx ztráty zvířat xx studie, xxxx. xxxxx xxxx xxxxxxx xx lednice x xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx mrtvá a xxxxxxx nebo utracení xxxxxx, xxxxx jsou xxxxx nebo xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxx zachytil xxxxxxx a progrese xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx ztrát x xxxxxxxx nemocí, xxxxxxxx xxxx kanibalismu.
Xxxxxxxxxx se klinické xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x očních změn x všech xxxxxx, x dále xxxxxxx xxxxxxx. Zaznamenává xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx podezření na xxxxx.
Hmotnost xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx období xxxxx x aspoň xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx měření xxxxxxxx xxxxxxx (a vody xxx, kde je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x pitné xxxx) xxxxx během prvních 13 týdnů x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx změny tělesné xxxx xxxxxxx nutnost xxxx frekvence xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx erythrocytů, celkový xxxxx xxxxxx krvinek, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx srážlivosti) xx xxxx být xxxxxxxxx za xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx a xxxx x přibližně šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, a xx xxxxx na xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx nehlodavců resp. xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx z xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx je xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx být od xxxxxxxx potkanů. Navíc xx měl být xxxxxxx xxxxxx před xxxxxx xx nehlodavců.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx naznačí xxxxxxxx xxxxxxxxx stav xxxxxx xxxxx xxxxxx, měl xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx a u xxxxxxx. Pokud tato xxxx nebo údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost, xxxxxxx se i x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx nižší.
1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xx stejných intervalech xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx stanovení jsou xxxxxxxxx buď na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx na xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx:
- vzhled xxxx, objem a xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- proteiny, xxxxxxx, ketolátky, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx sedimentu (xxxx- xxxxxxxxxxxxx).
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X přibližně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx jsou xxxxxxxx krevní xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx skupině, xxxxx xxxxx xxx tytéž xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxx toho xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxxx. X těchto xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx a jsou xxxxxxxxx následující xxxxxxx:
- celková xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxx. aktivita xxxxxxx xxxxxxxxx, aktivita xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), xxxxxxxx xxxxxx transaminázy2), xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, ornithin xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx xx lačno,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx aminotransferáza
2) xxxx xxxxx jako xxxxxx aspartát xxxxxxxxxxxxxxxx
1.2.3.5 Xxxxx
Kompletní xxxxx xx provede x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu xxxx xxxx utracena x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx vzorky krve xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx léze, které xx xxxxx být xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx. Mělo xx xxx xxxxxxxxx porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx změn s xxxxxxxxxxxxxxx nálezy.
Všechny xxxxxx a tkáně xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx:xxxxx3) (xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, xxxx mozkové), xxxxxxxx xxxxxxxxx, štítné xxxxx x příštítných xxxxxxx, thymu, trachey x xxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, ledvin3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx měchýře, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx pohlavních xxxxxx, samičí mléčné xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx a xxxxxxx), xxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x očí. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx měchýře xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx xx konzervaci těchto xxxxx; xxxxxxxx plic x inhalačních xxxxxxxx, xx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx studiích, xxxx jsou inhalační xxxxxx, má xxx xxxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx včetně nosu, xxxxxx x hrtanu.
Xxxx-xx xxxxxxxxx jiná xxxxxxxx vyšetření, informace xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx x dispozici xxxx xxxxxxxxxxxxxx vyšetřením, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
3) xxxx xxxxxx x 10 zvířat xx xxxxxxx x xx skupinu x xxxxxxxx a xx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxx xxxxxx žláza (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx změny, xxxxxxx tumory x xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx x kterémkoli xxxxxx, mají xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
(x) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všech uchovaných xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx:
1. u xxxxx xxxxxx, která xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
2. x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx xxxxxxx,
(b) xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx způsobené xxxxxxxxxx látkou jsou xxxxxxxx také xx xxxxxxxxx x nižšími xxxxxxx,
(x) xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx vyvolání xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx nižší xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx,
(d) informace x xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx v použitém xxxxx xxxxxx, ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx. historické kontrolní xxxxx, xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změn xxxxxxxxxxxx x xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx by měly xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx tabulek, ukazujících xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxx x procento xxxxxx vykazujících xxxxxxxxxx xxxx xxxx. Výsledky xx měly být xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxx
Xxxxxx o xxxxx xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, dieta,
- xxxxxxxx xxxxx: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, zdroje vzduchu, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, a xxx, xxx xx xx žádoucí, stability xxxxxxxxxxx xxxx velikosti xxxxxx aerosolu. Xxxxx x xxxxxxxx: ve xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (např. standardní xxxxxxxx) a xxxx xx xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(b) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx
(c) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vzduchu)
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx použito
(e) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxx
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx částic (xx-xx xx relevantní)
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxx) x xxxxxxxxxxx
- údaje o xxxxxxx odpovědi xxxxx xxxxxxx a xxxxx
- xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxx
- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx do xxxxx
- xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx
- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznak x xxxx xxxxx xxxxx
- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx hmotnosti
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx
- xxxxx klinické xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx moči)
- xxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx x xxxxxxx použitých xxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.31. STUDIE XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X NEHLODAVCI
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se podává x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jedna xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x tom xxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxx dochází x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx datem xxxxxx xxxx březí xxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxxx x x xxxxxxx xx xxxxxxx x dalšímu studiu. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx- x xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx započetím xxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Oplodnění může xxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxx nebo umělou xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Aplikace xxxxxx xxxxx xx implantaci x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx organogeneze. Xxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx hysterektomií x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx skeletu x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx možnosti zpomaleného xxxxx, xxxxxxxx osifikace x xxxxxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx, xxx, xxxxxx x xxxxxx. Preferovanými xxxxx jsou potkan x králík. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Používaný xxxx xx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x měly xx xxx u něj xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Pro xxxxxx xxxxx xx xxxxx použít xxxxx 20 březích xxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxx xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxx x mláďat.
1.2.2.3 Xxxxx
Xx třeba xxxxxx xxxxx xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupinu. X xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxx zahrnout xx xxxxxx i xxxxxxx, xxxxx bylo xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Je xxxxx také znát xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxx xxx teratogenní xxx xxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx v xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině x výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, pak xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx, xxx xx xx xxxx xxx 10 % xxxxx. Xxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkou.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
V xxxxxxx, xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx embryotoxicity xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx testovat na xxxxxx xxxxxxxx dávek.
1.2.2.5 Xxxx expozice
Xxxxxx xxxx testu je xxx, kdy je xxxxxxxxxx vaginální xxxxx x/xxxx xxxxxxx (pokud xxxxx). Doba xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx organogeneze. Xx toto xxxxxx xx xxxxx považovat 6. až 15. xxx x xxxxxxx x xxxx, 6. xx 14. den x xxxxxx x 6. až 18. xxx x králíka. X případě, xx xx za nultý xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx končí xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx očekávaným xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx pozorování
Každý xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx ve xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx samicím xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx denně během xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxx xxxxxxxx, zvířata mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx upravována xxxxx posledního xxxxxx. Xxxxxxx známky xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx vykazující xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetřit. X pozorování je xxxxx xxxxxxxxxx x xx ukončení xxxxxxxx xxxxx až xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxx období xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xx komplikacím xxx xxxxxxxxxxxx výsledků xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx x kleci xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx změny kůže x xxxxx, xxx x sliznic, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx spotřebu xxxxxxx x xxxxx zvířata.
1.2.3.1 Xxxxx
Xxxxx dojde x xxxxxxx xxxxx xxxx xx konci xxxxxx, je xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx morfologické xxxxxxxxx xxxx patologické xxxxx, xxxxx mohly xxx vliv xx xxxxxx březosti. Xxxxx xx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx x ohledem xx xxxxx xxxxxx x zárodků x xxxxxxx xxxxx živých xxxxxxx. Obvykle je xxxxx xxxxx xxxx xxxxx zárodků x xxxxxx. X potkanů x králíků xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx určit xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx jednotlivých xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx kosterní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xx xxxxx xxxxx zárodek xxxxxxxx xxxxxxxx pitvou x xxxxxxxx xxxxxxxx vnitřností x xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx ve formě xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu xxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxx, počet xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx měkkých xxxxx a xxxxx xxxxxxx abnormit k xxxxxxxxxxxx x určitým xxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Je možno xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1. Xxxxxx x testu
Xxxxxx x testu by xxxx pokud možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxx účinku (xxxxx xx bylo možno xxxxxxxx),
- xxxx xxxxx xxxxx studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx,
- údaje x xxxxxxx hmotnosti x spotřebě xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx),
- údaje x zárodcích (xxxx/xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x měkkých tkání),
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx/xxxxx xxxxx, pohlaví, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx),
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.32. XXXX XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx dávka xx xxxxxxx, po xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
Xxxxxxx xx chovají x xxxxxxxxx podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxx dní před xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolních x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx potkan. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx započata xx xxxxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx by neměl xxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx než ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx x obou xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx a pohlaví
Xxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 samic x 50 xxxxx) xxx každou úroveň xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxxxx xx xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx takto xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx expozic
Xxxxx se xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx kromě souběžné xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity, jako xx mírný xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (méně xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx tumory.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx by xxxxxx xxx xxxxx xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Střední dávku/dávky xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx vysokou x xxxxxx xxxxxx.
Volba xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx vzít v xxxxx xxxxxxxxx testy x xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx nebo xxxxxxxxx xx potravy, xxxx xx xxx xxxxx k xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx je identická x každém xxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinou, xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx orální xxxxxxxx emulgátoru, jehož xxxxxxxxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí se xxxxx negativní kontrolní xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx xxx vehikulu.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx cesty xxxxxxxx xxxx xxxxxx, dermální x inhalační. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx expozice u xxxxxxx.
1.2.5.1 Orální studie
Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x gastrointestinálního traktu x xx-xx požití xxxxx z xxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx přednost orální xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx mohou xxxxxx testovanou látku x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx vodě xxxx xxxxxxx v xxxxxxx.
Ideálně by xx měla xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x týdnu, protože xxxxxxxxx xxx xxx x týdnu může xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx naopak xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx hodnocení. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x ohledem xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Dermální xxxxxx
Xxxxxxxx přímo xx xxxx může xxx xxxxxxx xxxx simulace xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx způsob xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx aplikace, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx alternativou xx specifických situacích.
Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, takže zvíře xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxx xxxxx xx xxx dnů x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx v xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx denně xx xxxxxxx xxxx dne, xxxxxxxx i xxx xxxxxxx expozičního boxu. X obou případech xxxx xxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, xx x xxxxx xx zvíře 17 - 18 hodin xx xxxxx xxxxxx xxxxx expozice s xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxx a xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx má xxx xxxxxxxxxx. Nicméně, xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx technické xxxxxx. Například, výhody xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx během xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x technik monitorování.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jejichž xxxxxxxxxx xxxxxxxx dynamický xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx vzduchu xx hodinu, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx expoziční xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx komory xx xxxx xxx identickou xxxxxxxxxx, tak xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Uvnitř xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx podtlak x xxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx by xxxx xxxxxxxxxxxxx shlukování xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x komoře xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx zahrnuje:
(x) Xxxxxx vzduchu: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx měla být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx kontinuálně.
(x) Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx více xxx ± 15 % xxxxxxx hodnoty.
(x) Xxxxxxx x xxxxxxx: pro hlodavce, xxxxxxx by měla xxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 22 ± 2 °C x xxxxxxx v komorách 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx je voda xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx komory. Oba xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
(x) Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx komor x xxxxxxxx nebo pevných xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx měly xxx x xxxxxxxxxxxx velikosti xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx vzduchu xx xxx být xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx částic xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx stabilitu aerosolu, x poté xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx normální doby xxxxxx xxxxxxx použitého xxx xxxx. Test xx měl xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx x xxxx x křečků x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxx xxxxxxx kmeny xxxxxx x delší dobou xxxxxx resp. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx doba xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 xxxxxx xxx xxxx a xxxxxx x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx přijatelné, xxxx počet přežívajících x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx odpovědi, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx zvlášť. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx testu, pokud xxxxxxx skupiny xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx použitelných xxxxx (xxxxxxxxx, kanibalismem xxxx x xxxxxxxx chyb xxxxxxx) x žádné xxxxxxx xxxxx než 10 % a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x potkanů.
1.3 Popis xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x srsti, xxx a xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx nervového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx kontrola xxxxxx xx nutná, xxx se zabránilo xxxxxxx xxxxxx ze xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx utracena a xxxxxxx.
Xxxxxxxx příznaky x mortalita by xxxx xxx xxxxxxxxxxx x všech xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: doba objevení, xxxxxxxxxx, rozměry, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potravy (x xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx a xxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx sledování.
Tělesné xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx jednou xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx testu x xxxxx xxxxxx xx čtyři xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx vyšetření
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx stavu zvířat xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xx 12 xxxxxx, xx 18 měsíců x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx vzorcích xx xxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a u xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x x skupiny s xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx je xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Pitva
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx provedena x xxxxx zvířat, xxxxxx xxxx, xxxxx zemřela xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, protože xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx, xxxx léze, xxxxx by mohly xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.
Následující xxxxxx x tkáně xx xxxx být xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx možné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření: xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, mozečkové xxxx, kory xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxx, štítná xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx thymu, xxxxxxx a xxxxx, xxxxx, aorta, slinné xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx, akcesorní xxxxxxxx xxxxxx, kůže, xxxxx, žaludek, dvanácterník, xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xxxxxx, tračník, konečník, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzlina, xxxxxx xxxxxx žláza, svalovina xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxx, stehenní kost xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx úrovních (xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x bederní) a xxx.
Xxxxxxxx plic x močového měchýře xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx xxxxxxxx těchto xxxxx. Naplnění plic x inhalačních studiích xx zásadní pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
(x) Úplná xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x x xxxxx xxxxxx skupiny xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxxxx viditelné xxxx x xxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx.
(x) Xx-xx xxxxxxxx rozdíl x xxxxxxxxx neoplastických lézí xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx skupinou, histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx orgánu xx xxxxx i x xxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Je-li xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx než x xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx zkoumána x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
(x) Xx-xx ve xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mohly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx kompletně vyšetřit xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx s tumory xxx utracení. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxx
Zpráva x xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- podmínky xxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx a způsobu xxxxxxxx zvířat v xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Dále xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, a xxx, kde je xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x expozici: xx xxxxx tabulky včetně xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) a měly xx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx koncentrace (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx inhalační xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x dýchací zóně,
(x) mediány xxxxxxxxx xxxxxx (tam kde xx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx úrovně (včetně xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx tumorů xxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxx tumoru,
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xx konce,
- xxxxxx toxických účinků xxxxx pohlaví x xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx abnormální xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,
- data x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.33. KOMBINOVANÝ XXXX XXXXXXXXX TOXICITY/KARCINOGENITY
1. METODA
1.1 Xxxxxxx testu
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx látky u xxxxxxxxx druhu xxxxx xx dlouhodobé xxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinou x xxxxxxxxx satelitní xxxxxxxx. Dávka xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxx použitá při xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx x testu xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx karcinogenní xxxxxxx. Zvířata v xxxxxxxxxx satelitní skupině xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx.
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, vhodnou xxxxxx, xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx skupinu, xx větší část xxxxxx xxxxxx. Během x xx expozici xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx sledování xxxxxxx toxicity x xxxxxx xxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x pokusných xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx xxxxxxx xxx xxx před započetím xxxxx. Před xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx předchozích xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x další druhy (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx zvířata x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx co nejdříve xx xxxxxxxxx mláďat. Xx začátku studie xx neměl rozdíl xx xxxx xxxxxx xxxxx více xxx ± 20 % xx xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx předchází test xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx použít xxxxxx xxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx nejnémě 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) na každou xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx kontrolní skupina. Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Je-li plánováno xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx takto xxxxxxxx před koncem xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxx xxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx 20 xxxxxx xxx xxxxx pohlaví, xxxxxxx satelitní xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Dávkové xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx zvolí xxxxxxxxxxxx tři dávkové xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň by xxxx xxxxxxx příznaky xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (méně xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx tumory. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx růstem, vývojem x délkou xxxxxx xxxxxxx nebo vyvolat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx neměla xxx nižší než 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx vysokou x xxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx testy x xxxxxx toxicity.
Pro xxxxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou x xxxxx xxxxxxxx satelitní xxxxxxxxxx skupiny a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Vysoká dávka xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx by měla xxxxxxx zřetelné příznaky xxxxxxxx.
Expozice xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx přimíšena do xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx látce.
Ve xxxxxxxxxx případech, xxxx xxxx inhalační studie x aerosoly xxxx xxxxxxx-xx se pro xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx charakterizována, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx ani xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx hlavní xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx způsobu xxxxxx xxxxxx na fyzikálních x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x člověka.
1.2.5.1 Orální xxxxxx
Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x gastrointestinálního xxxxxx a je-li xxxxxx jedna z xxxx, xxxxx může xxx exponován xxxxxx, xxxx xx přednost xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx proti xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x pitné xxxx xxxx podanou x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx se měla xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx v xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" xxxxxxxx v xxxxxx xxx aplikace, a xxxxx ovlivnit xxxxxxxx x následné hodnocení. Xxxxxxx, xxxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx přijatelné.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx může xxx xxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x člověka x xxxx xxxxxxxx xxxxxx vyvolání xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx studie
Xxxxxxx inhalační xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx zde xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x této xxxxx xxxxxx. Intratracheální xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x specifických xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx expozice, xxxxx xxxxx je obvykle xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx pět xxx v týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), nebo x xxxxxxxxxx xx xxxxxx expozici v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx dní x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), s přibližně xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, použitou x xxx čištění expozičního xxxx. V xxxx xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx exponována xxxxxx xxxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, že x xxxxx má xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx expozice x xxxxx xxxxxx xxxxxxx během xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx expozice závisí xx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx vzít x úvahu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx kontinuální xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x krmení xxxxx expozice x xxxxxxxx komplikovanější (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x inhalačních xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx proud pro xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx za xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x rovnoměrná xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx komory xx xxxx mít xxxxxxxxxx konstrukci, tak xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Komory xx měly xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxx by x xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx zahrnuje:
(x) průtok xxxxxxx: xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx denní expozice xx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísat xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,
(x) teplota x xxxxxxx: pro xxxxxxxx, teplota by xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °X x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, kdy xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x atmosféře xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x tekutých xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvíře. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx částic, xxxxxx xx zvíře exponováno, x xxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, i xxxx xxxxxx část xxxxxxxx xxxx respirabilní. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, a poté xxxxx expozic xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx posoudit stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx exponována.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx karcinogenity zahrnuje xxxxx část xxxxxxxx xxxx života xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxx. Xxxx xx xxx xxx ukončen v 18 měsících x xxxx x xxxxxx x 24 měsících x potkanů. Xxxxxxx xxx některé kmeny xxxxxx s delší xxxxx xxxxxx resp. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, doba xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 xxxxxx xxx xxxx x xxxxxx a 30 xxxxxx xxx potkany. Xxxxxxxxxxxx ukončení xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, když xxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx klesne xx 25 %. Xxx ukončení testu, xx xxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx rozdíl xxxxxxxx, xxxxx pohlaví xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx jen xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxx celého testu, xxxxx ostatní xxxxxxx xxxxxxxxxx toxické xxxxxxx, xxxxx xx činily xxxxxxxx. Xxx bylo xxxxx xxxxx negativní xxxxxxxx xxxxx, nesmí xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (autolýzou, xxxxxxxxxxxx xxxx v důsledku xxxx xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 10 % x přežití xx xxxxx xxxxxxxxx nesmí xxx nižší xxx 50 % x 18 měsících u xxxx x xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxxx skupiny 20 xxxxxxxxxxx zvířat pro xxxxx pohlaví a 10 xxxxxxxxxxx kontrolních xxxxxx každého xxxxxxx xxxxxxxxx xxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxx v xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. U xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx plánováno xxxxxxxx xxx, xxx umožnilo xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx k xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxxx projevů xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx postupu
1.3.1 Pozorování
Xxxxx xxxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx x xxxxx, xxx a xxxxxxx, jakož x xxxxxxxxx, oběhového, autonomního x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (skupin) se xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx klinické xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat xx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx zvířata xx měla xxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx objevení, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx každého viditelného xx hmatného tumoru xx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potravy (x xxxx tam, xxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx v xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 týdnů x xxx přibližně xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx zdravotní xxxx nebo xxxxx xxxxxxx váhy ukázaly xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Tělesné hmotnosti xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx testu x xxxxx xxxxxx xx xxxxx týdny xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx erythrocytů, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx měření xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx za xxx xxxxxx, šest měsíců x xxxx x xxxxxxxxx šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, x na xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xx pohlaví z xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx xx to xxxxx, xxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx od xxxxx potkanů.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx svědčí x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba vyšetřit xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx xxxxx bílých krvinek xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx naznačí xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, než xx vysoká xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx
Vzorky xxxx xx 10 xxxxxxx každého pohlaví xx sbírají pro xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x ve stejných xxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Následující stanovení xxxx xxxxxxxxx xxx xx vzorcích jednotlivých xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx podle xxxxx x pohlaví:
- xxxxxx moči, xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, glukóza, xxxxxxxxx, xxxxxxx krvácení (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- mikroskopické xxxxxxxxx xxxxxxxxx (semi-kvantitativně).
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx biochemická xxxxxx xx všech xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, pokud xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Od xxxxxxxxxx xx xxxxx toho xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxx následující zkoušky:
- celková koncentrace xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- testy xx funkci jater (xxxx. aktivita xxxxxxx xxxxxxxxx, aktivita xxxxxxxx xxxxxxx transaminázy1), glutamát xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- metabolismus xxxxx, např. xxxxxx xxxxxxx na xxxxx,
- xxxxx na xxxxxx ledvin, xxxx. xxxxx močoviny x xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx sérová xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx známá jako xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Kompletní xxxxx xx provede x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, která zemřela xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxxxxx se odeberou xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, které xx xxxxx xxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Všechny xxxxxx x xxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx týká xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x tkání: xxxxx3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx mozkového, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx tělísek, xxxxx, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), jícnu, xxxxxxx, dvanácterníku, jejuna, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, konečníku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, kůže, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (krční, hrudní x xxxxxxx), xxxxxx x kostní dření x stehenní xxxxx xxxxxx kloubů, a xxx. Xxxxxxxx xxxx x močového xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx xx konzervaci xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je zásadní xxx odpovídající histopatologické xxxxxxxx. Ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, má xxx studován xxxx xxxxxxxxxx xxxxx včetně xxxx, xxxxxx a xxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx procedur xx xxxx xxx k xxxxxxxxx xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx významné xxxxxxx.
3) Xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx xxxxxxx x xx skupinu xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx ve všech xxxxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxxx skupiny x vysokou xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx x satelitní xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx dávce xxxxxx xxxxxxxxxxx změny xxxxxxxxx látkou, vyšetří xx histologicky cílové xxxxxx xxxxx ostatních xxxxxx z ostatních xxxxxxxxxxxx satelitních skupin x ze xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx věnované xxxxxxxxxxxxx xxx jejím xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx karcinogenity:
(x) xxxxx histopatologie xx xxxxxxx x xxxxxxxx x tkáních xxxxx xxxxxx, která xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx skupiny xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx;
(b) xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx jako xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx;
(x) xx-xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x daném orgánu xx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx;
(x) xx-xx přežití xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx podstatně xxxxx xxx x xxxxxxx, měla xx xxx xxxxxxxxx zkoumána x xxxxxxx x xxxxxxxxx nižší xxxxxx;
(x) je-li xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx toxických nebo xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, xx xxxxx xxxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx sumarizují xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, dobu jejich xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx x tumory xxx xxxxxxxx. Výsledky xx hodnotí odpovídající xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxx xxx použity jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxx
Xxxxxx o xxxxx bude xxxxx xxxxx obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, dieta,
- podmínky xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx zvířat v xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx používá. Dále xx xxxxx popsat xxxxxxxx pro měření xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, kde xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x expozici: xx xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (např. směrodatná xxxxxxxx) by xxxx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,
(c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vstupující xx xxxxxxxxx aparatury xxxxxx xxxxxxx vzduchu),
(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,
(e) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx zóně,
(x) xxxxxx velikosti částic (xxx xxx relevantní),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- data incidence xxxxxx podle xxxxxxx, xxxxx a typu xxxxxx,
- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx satelitních xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx účinků podle xxxxxxx x xxxxx ,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,
- data x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x výsledky,
- testy xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxx xxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.34. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxxxx xxxxxxxx samic x xxxxx x odstupňovaných xxxxxxx.
Xxxxx dostávají xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxx x xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x myší x 70 dnů x xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx generace (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx estrálních cyklů, xxx xxx zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx. Zvířata xxxx xxxx xxxxxxxxxx. V xxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx obou xxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Pro inhalační xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx zahájením xxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx dvou xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx zahájením xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a krmení, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx způsoby xxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxxx. Všechna zvířata xxxxx dostávají stejným xxxxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx používá k xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx o xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 dní v xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx druhu
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx zdravá zvířata, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx xxxx charakterizována co xx xxxxx, kmene, xxxxxxx a váhy x/xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx být ověřena xxxxxxx způsobem u xxxx xxxxxxx. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x kontrolní, xxxx být odstavena xxxx xxxxxxxxx aplikace.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx exponovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx dostatečný počet xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vlivu xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x X xxxxxxxx, xxxxxx, xxxx x vývoj xxxxxxxxx generace X1 xx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata ad xxxxxxx. Xxxx porodem xx těhotné samice xxxxxxxx xx zvláštních xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Použijí se xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx, xxx zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vehikulum x xxxxxxxxx použitém xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx potravy, xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxxxx kontrolní xxxxxxx, xxxxxxxxx co xx výživy.
Testovaná xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má x xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx to není xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo povahou xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx populaci. Xxxxxxx xxxxx(x) by měla(y) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx daly xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxx x xxxxxx xxx x xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xx dávka xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx každý xxxxx xxxxx xxxxx xxxx. X případě xxxxxxxxx samic dávky xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. nebo 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx látek x nízkou xxxxxxxxx, xxxxx xx ani xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx plodnost, xxxx xxxxx xxxxxxxx studie xx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx samcům rodičovské xxxxxxxx (X) začne xx věku pěti xx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx odstavení. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx deset týdnů xxxx xxxxxxx připouštění (8 týdnů xxx xxxx). Xxxxx se xxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, nebo xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x jsou pak xxxxxxxx x vyšetřeni xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx dva xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Denní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxx týdny xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxx gravidity až xx xxxxxxxxx X1 xxxxxxxx. Je přípustná xxxxx xxxxxxxxxxx plánu xxxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x/xxxx bioakumulaci.
1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x jeden xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx dvěma samicím).
X případě 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x týmž samcem xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Každé ráno xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 těhotenství xx definován jako xxx xxxxxx vaginální xxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x cílem xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx páru. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx vrhů
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx odstavení xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti xxxx. Pokud xx xxxxxxxx vrhů xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. a 4. xxxx po xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx upraví vyřazením xxxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx se xxxxxxx xxxxx 4 samců x 4 samic xx xxx; xxxxx xx není xxxxxxxxxxxx, xx možno xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 xxxxx x 3 xxxxxx. Xxxx menší xxx 8 nelze xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Významné xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx ztíženého xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mortality xx xxxxxxxxxxxxx. Příjem xxxxxxx xx xxxx xxxxx jak před, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx x x průběhu laktace xx xxxx příjem xxxxxxx (a vody, xxxxx xx látka xxxxxx x pitné xxxx) xx xxxxxx xxx, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x xxx xxxxx. Všechna xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxx.
Doba xxxxxxx xx xxxxxx od xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx se xx nejdříve xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xx počty x xxxxxxx mláďat, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx hrubých xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx utracená xx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx možné defekty. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxx xxxx se xxxxx xxxx xx xxxxxx, xx 4. x 7. xxx a xxxxx xxxxx týden xx ukončení studie, xxx xxxx zvířata xxxxxxx individuálně. Pozorují xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx
1.3.5.1 Xxxxx
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pozorností x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx zemřelá xxxx xxxxxxxxx se vyšetří xx defekty.
1.3.5.2 Histopatologická vyšetření
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, prostata, xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxx X xx xxxxxxxx xxx mikroskopické xxxxxxxxx. V xxxxxxx, xx tyto xxxxxx xxxxxx xxxxxxx vyšetřeny x jiných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, provede xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx nejvyšší xxxxx x xxxx u xxxxxx, xxxxx zemřela x xxxxxxx pokusu.
Xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx x x X xxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx případech xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všechny xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, reprodukční orgány xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx mají xxx xxxxxxxx mikroskopické xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxxx, xxxxx plodných xxxxx, počet těhotných xxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx tyto změny.
Xxxxxxxxx výsledky mají xxx xxxxxxxxxxx zpracovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx použít xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx použitých xxxxxx,
- údaje o xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx dávce x xxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxxxxxx, gestace x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx,
- tabulka xxxxxxxxx xxxxxxxx každého xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x konečnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx,
- toxické x xxxxx účinky xx xxxxxxxxxx, potomstvo a xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X generace,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx, xxxxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.35. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx několika xxxxxxxx samic a xxxxx x odstupňovaných xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx (X) xxxxxxxx dostávají xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx růstu x xxxxxxx x průběhu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx cyklu (xxxxxxxxx 56 xxx x xxxx a 70 dnů u xxxxxxx), aby byl xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx spermatogenezu.
Samice xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, aby xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinek xxxxxxxxx xxxxx na estrus.
Xxxxxxx jsou poté xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx, v xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx zvířatům xxxxxxxx xxxxxxxx F1 x xxxxxxx růstu do xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx x xx xx xxxx xxxxxxxxx X2 xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx modifikovat.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx zahájením xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx náhodně rozdělena xx dvou xxxxxx - kontrolní a xxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxxxx xxxxxxx (X) jsou xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x těch xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxx v xxxxx vodě. Xxxx xxxxxxx podání xxxx xxxx xxxxx. Všechna xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx způsobem x xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo jiné xxxxxxxx, musí xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxické xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx P xxxxxxx, xx té xxxx xxxxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx s nízkou xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx charakterizována co xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a xxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx ověřena x xxxx pohlaví. Xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx, exponované a xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Počet x xxxxxxx
Xxxxx exponovaná x kontrolní skupina xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx zaručeno xxx 20 xxxxxxx xxxxx x přibližně xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Cílem xx xxxxxx dostatečný xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, a xxx xxxxxxxx spolehlivé hodnocení xxxxx látky xx xxxxxxxx, průběh xxxxxxxxx x mateřské xxxxxxx, xxxxxx, xxxx a xxxxx potomstva generace X1 od početí xx xxxxxxxxxx, x xxxxx xxxxxx potomstva xxxxxxxx X2 až xx odstavení.
1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx
Vodu x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx přemístí xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xx jim poskytnut xxxxxxxx xxx vytvoření xxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny a xxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx látka snižuje xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, spárované xx do xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxx koncentraci xx x xxxxxxxx případě, xxxxx to dovolí xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, vyvolávat xxxxxxxx x nikoli xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx minimální xxxxxxx účinky, xxxxx xx xx daly xxxxxxx testované látce, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx x xxxxxx xxx u xxxxxxxxx.
Xxx podání xxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xx dávka xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x přizpůsobuje xx xxxxx xxxxx podle xxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx těhotných samic, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxxx xxxx
X případě xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 neprojevuje xxxxxx xxxxxxxx účinkem na xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx toxicitu, xxxx xxxxxxxxxx účinky na xxxxxxxx, xxxx nutné xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx aplikace xxxxxx rodičovské xxxxxxxx X začne xx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx, aspoň xx pětidenní aklimatizaci xx xxxxxxxxx. U xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx v aplikaci x jsou xxxxxxx xxx xxxxxxxxx produkci xxxxxxx xxxx x xxxx utraceni a xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Denní xxxxxxxx samicím xxxxxxxxxx xxxxxxxx P xxxxx xx xxxxxxxxx aklimatizaci x xxxxxxxxx aspoň xxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx celé xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, x době gravidity xx do odstavení X1 xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx změna dávkovacího xxxxx podle xxxxxxxx x vlastnostech xxxxxxxxx xxxxx, např. x xxxxxxx metabolismu resp. x bioakumulaci.
Aplikace xxxxxxxx generace F1 xxxxxx xx odstavu x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2 Postup při xxxxxxxxxxx
Je možno xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxx) anebo 1 : 2 (jeden xxxxx ke xxxxx xxxxxxx).
X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx s xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxx xxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxx. Den 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxx spermatogeneze, zvířata xxxxxxxx X1 xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx věku 11 xxxxx u xxxx x 13 xxxxx x potkanů. Pro xxxxxxxxxxx zvířat generace X1 se xxxxxxx xxxxxxx páry x xxxxxxx vrhů téže xxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx utratí xx xxxxxxx.
Xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx zjistit důvod xxxxxxxxxxx xxxx. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x oplodnění x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx estrálního xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ponechána xxxxxxx xxxxxxx normálně x pečovat o xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx odstavení xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx vyřazením nadbytečných xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx xx xxx; pokud to xxxx xxxxxxxxxxxx, je xxxxx standardizovat xx xxxx xxxxx, např. 5 samců a 3 samice. Vrhy xxxxx xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx X2 xx provede xxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx porodu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx se měří xxxxx xxx xxxx, xxx během doby xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx denně. Xx xxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxxx xxxxxxx xx stejný xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Rodičovská X x X1 xxxxxxx xx váží xxxxx den aplikace x pak týdně. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx individuálně xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxx se xxxxxx xx xxx 0 těhotenství. Xxxxx xxx se co xxxxxxxx po porodu xxxxxxx x stanoví xx xxxxx a xxxxxxx mláďat, xxxxx xxxxxxx x živých xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx spočítají x celé xxxx xx xxxxx xxxx xx porodu, xx 4. x 7. xxx x potom xxxxx týden xx xxxxxxxx studie, xxx xxxx xxxxxxx zvážena xxxxxxxxxxxx. Pozorují xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x fyzickém xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X x X1 xx utrácejí, jakmile xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx reprodukci. Xxxxxxx xxxxxxxx X1 nevybraná xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zvířata generace X2 xx xxxxxx xx odstavení.
Xx xxxxxxxx xxxx úmrtí xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X x X1 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xx zvláštní xxxxxxxxxx x xxxxxxx reprodukčního xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxx, děložní xxxxx, xxxxxx, varlata, epididymis, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, prostata, xxxxxxxx x xxxxx cílové xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx X x X1 se uchovají xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx studiích, xxxxxxx xx mikroskopické xxxxxxxxx x všech X x X1 xxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávku, která xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, a dále x zvířat, xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx skupin xxxxxx, xx xxxxxxx x x zvířat ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx případech se xxxxxxxxxxxxx vyšetřují xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, reprodukční xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxx xxx xxxxxxxx mikroskopické xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, typ xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx statistická xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx by xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- druh/kmen xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx x toxické xxxxxx x závislosti xx xxxxx x pohlaví xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx a životaschopnosti,
- xxxx uhynutí x xxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx do ukončení xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx hmotnost x xxxxxxx vrhu, průměrnou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx mláďat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx a xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx, potomstvo x xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx vývoj,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X x X1 xxxxxxxx, vybraných xxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx možné,
- diskuse výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.36. XXXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x xxxxxxx stanovené xxxx, xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Látka xxxx. xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx účelu xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx tekutinách, tkáních xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxx" xxxxxx xxxxxxxxx látky. Jestliže xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx sloučeniny x xxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Zdravá xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx po xxxx pěti xxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx náhodně xxxxxxxxx xx xxxxxx. Pro xxxxxx speciálních xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx mladých, pregnantních xx xxxxxxxxxxxxxxx zvířat.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Toxikokinetické xxxxxx xx provádějí na xxxxxx xx více xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx se xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx užití x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx studiích xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxx xxxxxxxxx používáni xxxxxxxx, xxxxxx by xxx variabilita xxxxxxxxx xxxxx xxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet a xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxx x vylučování xx xxxxx xxxxxxx 4 xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx přednost xxxxxxxx xxxxxxx, ale xx xxxxxxxx xxxxxxxx může xxxxxxxxx potřeba xxxxxxxx xxxxxx xx obou xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx rozdílné xxxxxxxx x xxxxxxx pohlaví, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx než xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx menší xxxxx xxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, pak xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx x úvahu xxx xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx utracena x xxxxxx xxxxxxx bodu, xxx xxxxx xxxxxxxx xxxx, x xxxxx xxxx testování xxxxxxxxx.
Xx-xx studován xxxxxxxxxxxx, xxx velikost xxxxxxx xxxxxx xx úměrná xxxxxxxx studie.
Zahrnuje-li xxxxxx větší xxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, pak xxxxxxxx xxxxxxx zvířat xx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx skupině xxxxx xxx méně než 2 xxxxxxx. Velikost xxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx dostatečná xx xx, xxx xxx xxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxxxx poskytla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx a deplece.
1.2.2.3 Xxxxx
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx pozorovány žádné xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
V xxxxxxx xxxxxxxxxxx podávání je xxxxxxxx dostatečné xxxxxx xxxxxxx dávek xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx nezbytné x podávání xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxxxxxxxxx studie xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xx-xx to xxxxxx i xx xxxxxxx vehikulem tak, xxx xxxx používány x xxxxxxxxx toxikologických xxxxxxxx. Testovaná xxxxx xx obvykle xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x potravě, xxxxxxxxxx xx xxxx, nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxx dobu skupině xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx stanovení relativního xxxxxxxxxxx xxx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx. Navíc xxxxxx po intravenózní xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x distribuci xxxxx v xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx vehikula x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxx věnována rozdílům xx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx, je-li xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx sondou xxxx x potravě, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx denně x xxxxxxxx xxxxxxxx x další xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x jejich xxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxx.
1.3 Xxxxx postupu
Po xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx způsobem xxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx před xxxxxxx testované látky xxxxxxxxxx.
1.3.1 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx podávané xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx různé xxxxxx x nebo xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx1), x xx např.:
- xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xx. xxxxxx metabolitů x xxxxxxxxx xxxx. x xxxx, žluči, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx vzduchu x xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx referenční xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxx vylučovaných xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx závislosti xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. jejích xxxxxxxxxx x xxxxxx na xxxx x porovnání x daty xxxxxxxxx x referenční xxxxxxx.
1) X této xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx rozumí ta, xx které xx xxxxxxxxx xxxxx podávána xxxxxxx xxxxxxxx, který xxxxxxxxx úplnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
X xxxxxxxx xxxx xxxx dostupné 2 xxxxxxxx, z xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx schématu xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx oba:
- xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx získat xxxxxxxx kvalitativní xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxxxx informace xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x množství testované xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx zvířat x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxxxx
Při xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx moč, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx žluč. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. jejích xxxxxxxxxx xx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx podání xxxxx, x to xxx xx xxxxxxxxx 95 % x xxxxxxxx množství xxxx xxxxxxx 7 xxx xx xxxxxxx vylučování.
Xx speciálních případech xxxx xxx potřebné xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky v xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx tam, kde xx xxxxx xxxxxxxxx xx otázky x xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx provedení xx xxxxx studií.
Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx mezi metabolismem x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx studií např. xxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxxx metabolického xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx - SH xxxxxxx a xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Získané xxxxx se xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x tabulkách, xxxxx možno xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx průměry x xxxxxxxxxxxxxxx variability xx xxxxxx x xxxx, dávce, xxxxx x orgánům (xxxxx xx to xxxxxxxxxx). Xxxxxx vstřebávání x xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx metodami. V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx studií xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx struktura metabolitů x navrženy xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx
Xxxxx xxxx prováděné xxxxxx by xxxxxx x testu měla xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx podmínky, xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, jestliže xxx xxxxxx,
- xxxxxxxx dávky x xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx(x) xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- toxické x x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- metody xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxx a xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx,
- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x biologickém xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx xxx biochemická xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx,
- navrhované xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.37. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX SLOUČENIN XXXXXXX - AKUTNÍ XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx x vyhodnocení xxxxxxxxx účinků xxxxx xx důležité vzít x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx skupiny látek xxxxxxx specifický typ xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxx studiích xxxxxxxx. X určitých organických xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx zpožděné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx použity xxx xxxxxxxxxxx látek, které xxxxx xxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, že látka xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xx skupiny xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx metody xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx elektricky xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, thioestery xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx thiofosforečných, thiofosfonových xxxx amidothiofosforečných, xxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx látek této xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx a periferním xxxxx x pozdním xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x dále xxxxxxxx x stárnutím specifické xxxxxxxx - NTE (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Referenční xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx testovaných druhů xxxxxxxxx nezměnila.
Příkladem xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, XXXXXX 201-103-5, xxxxxxxx xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (TOCP).
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxx v xxxxxx dávce xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx možnými xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx se xx xxxx 21 xxx xxxxxxxx, zaznamenává xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x paréza. Biochemické xxxxxxxxx, zvláště xxxxxxxx XXX, xx provádí x xxxxxx náhodně xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxx xxxxx. 21 dnů xx xxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxx slepice xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření vybraných xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.5.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx dospělé xxxxxxx bez xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x normální xxxxx xx náhodně xxxxxxx xx experimentální a xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována v xxxxxxxxxx chovu a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během experimentu.
Xxxxxxxxx se dostatečně xxxxx xxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx chůze.
Xxxxxxxxx látka se xxxxxx xxxxxx sondou, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxx, xxxx xx např. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx doporučuje xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx tobolkách xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X nevodných xxxxxx musí být xxxxx xxxx xxxxxx xxxx testem xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti.
1.6 Experimentální xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxx xx mladá xxxxxxx kura domácího (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) xx věku 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x chovají se xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx pohyb.
1.6.1.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxxxx testovací xxxxxxx xx xxxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx.
X xxxxx skupině xx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx, xxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx vyšetření (xx třech prvý x xxxxx xxx xx xxxxxx) a xxxx přežilo 21xxxxx xxxxxxxxxx.
Pozitivní kontrolní xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx může xxxxxx xxxxxxxxx skupina z xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxx aspoň šest xxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx látka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx jsou určeny xxx xxxxxxxxx a xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx. Doporučuje se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, když xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx prvků xxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx).
1.6.1.3 Xxxxx xxxxx
Xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx příslušného xxxxx xxxxxx a xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx dala xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx v hlavní xxxxxx. Xxxxxx úmrtnost xx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxx nezbytná xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxx. Aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx účinky, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, o kterém xx xxxxx, že xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinky. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx typů testovacích xxxxx (xxx xxxxxx B.1 bis). Historické xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxx být co xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x výsledkům xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx dávky x xxxxxxx xxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Případné xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxxxxx (xxxx) x xx 21 dnech xxx xxxxxxxxxx (xxxx). Xxxxxxx xxxx jiný xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx před xxxxxxxx cholinergními xxxxxx.
1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx tuto studii, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxxxxx xxxxx údajů x látek s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx není xxxxx toxicitu xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx vyšší xxxxx. Limitní xxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x lidí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx dávky.
1.6.1.5 Xxxx pozorování
Doba xxxxxxxxxx xx 21 xxx.
1.6.2 Xxxxx xxxxxxx
Xx aplikaci xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinku, je xxxxxxxxx látka podána x jediné xxxxx.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx pozorování
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pozorují xxxxxxxxxx x xxxxxxx prvních xxxx xxx x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xx dobu 21 xxx xxxx xxxxx nebudou utraceny xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx nástupu, xxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se paréza. Xxxxxxx dvakrát týdně xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx xx žebříku, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x pitvat.
1.6.2.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Všechny xxxxxxx xx zváží xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx aspoň xxxxxx xxxxx.
1.6.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx testované x xxxxxxxxx skupiny x xxxxxxxxx x xxx slepice z xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx xxxxxxx xxxxxxx) xx usmrtí x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxx mozek x xxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx vypreparovat xxxx x. xxxxxxxxxxx x analyzovat xxxx xxxx na xxxxxxxx XXX. Xxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxx testované xxxxxxx xx 24 hodinách x další xxx xx 48 xxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx klinických xxxxxxxx naznačuje, že xxxxxxx xxxxx se x xxxxxxxxx pohybuje xxxxx xxxxxx (xxxxxxx xx xxxxxx cholinergních xxxxxxxx), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx dvakrát ze xxx xxxxxx, x xx xxxx 24 xx 72 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx.
X xxxxxx vzorků xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx může však xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, což xxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Xxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i utracených xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx stavu mozku x xxxxx.
1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx zvířat (xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx in xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se: xxxxxxx (xxxxxxx podélný xxx), xxxxxxxxxxx mícha, xxxxx - xxxx xxxxx xx provádějí x horní xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx distální xxxx x x. xxxxxxxx (x jeho xxxxx x x. xxxxxxxxxxxxx) x z n. xxxxxxxxxxx. Řezy xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Negativní xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, histopatologie a xxxxx xxxxxxx) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx neurčité xxxxxxxx xxxxx vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx údaje pro xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx tabulky. X xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx poškození, xxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxx těchto xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x procento xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x stupeň xxxxxxxxx xxxx účinku.
Výsledky xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxx změnami chování, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx již x xxxx plánované studie.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x pokusu xxxxxxxx tyto informace, xxxxx xxxxx být xxxxxxx:
Testovaná zvířata:
- xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx a xxxxx zvířat;
- xxxxx, xxxxxxxx ustájení xxx.;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxx x přípravě, xxxxxxxxx x homogenitě xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxx údaje x způsobu aplikace xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx a xxxxxxx xxxx;
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx xxxxx;
- specifikace podávaných xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx a fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx látky;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx;
- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxx, stupeň x xxxxxx klinických xxxxxxxx (xx vratných xxxx xxxxxxxxxx);
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx nálezy;
- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx to možné.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Hodnocení x Interpretace
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 418.
X.38. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH SLOUČENIN XXXXXXX 28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Při xxxxxxxxx x vyhodnocení xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx vzít x úvahu xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, který nemůže xxx zjištěn v xxxxxx studiích toxicity. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx fosforu byly xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx mohou xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Negativní xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxx není xxxxx považovat xx xxxxx, xx xxxxx xxxx neurotoxická.
Xxxxx 28xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx poskytuje xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx krátkého časového xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx odpovědi xx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx úrovní, xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nepříznivé xxxxxx. Tato xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x xxxxx této xxxxxx xxxx "organické xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx této xxxxxxx.
Xxxxxx neurotoxicita je xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxx nervu x pozdním xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx inhibicí a xxxxxxxxx specifické xxxxxxxx - NTE (neuropathy xxxxxx xxxxxxxx) v xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx denně xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 28 xxx. Zvířata xxxx xxxxxxxxx nejméně xxxxxx denně, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x paréza xxxxx 14 xxx xx poslední dávce. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, zvláště xxxxxxxx NTE, xx xxxxxxx u slepic xxxxxxx vybraných x xxxxx xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx posledním xxxxxx xxxxx. Dva xxxxx xx poslední xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx léčby x s normální xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxx velké xxxxx xxxx ohrady xxxxxxxxxx xxxxx pohyb xxxxxx x xxxxxx pozorování xxxxx.
Testovaná látka xx xxxxxx xxxxxx, xxxxx 7 xxx x xxxxx, xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxx xx xxxx. kukuřičný olej. Xxxxx se doporučuje xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx pevných látek x želatinových xxxxxxxxx xx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx nosnice xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx domesticus) xx xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx velikosti a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx dávek x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxx má být xxxxxxxxxx počet xxxxxx, xxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxx xxx utraceno pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx x každém xx dvou xxxxxxxx xxxx) a xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.3 Xxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x přihlédnutím xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx testu xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx zvolí řada xxxxxxxxxxx dávek xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx neměla vyvolat xxxxx příznaky xxxxxxxx.
1.4.2.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx s xxxxxx xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx x xxx, xx xxxxxxx xxxxxxx popsaných xxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx s xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxxxx se x xxxx naznačuje potřebu xxxxxxx ještě xxxxx xxxxxx dávky.
1.4.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx denně po xxxx xxxxxxxx x 14 xxx xx xx, xxxx xx xxxxxxxx a do xxxxx xxxxx plánu.
1.4.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxx xxx x xxxxx xx 28 xxx.
1.4.3.1 Xxxxxxxxx pozorování
Xxxxxxxxxx xx začít xxxxxxxx xx začátku xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx nemá xx na ně xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx se xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx týdně xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxx po žebříku, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx minimálních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky stresu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a pak xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Šest slepic xxxxxxx vybraných x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny s xxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx aplikaci xxxxxxxx xxxxx. Pro analýzu xxxxxxxx XXX xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. ischiadicus x xxxxxxxxxx xxxx tkáň xx xxxxxxxx XXX. Xxxxxxx se usmrcují xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx po 24 hodinách a xxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) naznačují, že xx xxxxxxxxxx jiná xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx aplikaci, pak xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxxxx uvést x xxxxxxxxxxx.
U těchto xxxxxx tkáně xx xxxxxxxx provede xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx vivo xxxx xxxx xxxxxx spontánní xxxxxxxxxx XXxX, což xxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.
1.4.3.4 Pitva
Xxxxx všech zvířat (xxxxxxxxx usmrcených i xxxxxxxxxx pro špatný xxxxxxx stav) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx posouzení xxxxx xxxxx x míchy.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Nervová xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (nepoužitých xxx xxxxxxxxxxx studie) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx fixují in xxxx za použití xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (střední xxxxxxx xxx), prodloužená xxxxx, mícha (xxxx xxxxx xx provádí x horní xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx), x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx distální xxxx x x. tibialis (x xxxx xxxxx x x. xxxxxxxxxxxxx) x x x. xxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx barvivy xx myelin x xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x skupiny x xxxxxxxx dávkou. Xxxxx se xxxxxx x zvířat skupiny x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx účinku, provede xx xxxxxxxxxxxx vyšetření x na xxxxxxxxx xx skupin, xxxxx xxxxxxx dávku střední x nízkou.
2. SBĚR X XXXXXX ÚDAJŮ
Xxxxx jsou výsledky xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxx) negativní, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx testování xx xxxxxx neurotoxicitu. Xxxxxxxxxx xxxx neurčité xxxxxxxx xxxxx vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.
Uvádějí xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx pokusu x xxxxx zvířat xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, typy a xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx vyhodnotí z xxxxxxxx výskytu, závažnosti x korelaci xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx výsledky je xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistické xxxxxx xx zvolí xxx x době xxxxxxxxx studie.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx plemeno,
- xxxxx a stáří xxxxxx,
- xxxxx, xxxxxxxx ustájení xxx.,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx testování:
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x potravě x xxxxxxx xxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx podávaných dávek, xxxxxx podrobných xxxxx x xxxxxxxx, objemu x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx doby xxx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx jiná xxx 24 a 48 xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx o toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx (XXXXX),
- xxxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx příznaků (xx vratných xxxx xxxxxxxxxx),
- podrobný xxxxx biochemických xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx to xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx
4. LITERATURA
Xxxx metoda je xxxxxxxxxx s xxxxxxx XXXX TG 419.
X.39. Xxxx xxxxxxxxxxx syntézy DNA x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx XXX Xxxxxxxxx (XXX) Test Xxxx Xxxxxxxxx Xxxxx Xxxxx Xx Vivo (1997).
1.1 XXXX
Účelem xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX) v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx určit xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx pokusných xxxxxx (1) (2) (3) (4).
Xxxxx test xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx pro zjišťování xxxxxxxxxxxxx xxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx testu indikuje xxxxxxxxx XXX v xxxxxxxxx buňkách a xxxx následnou reparaci. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx místem metabolismu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxx xxxxx xxxxxxx objektem xxx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX in vivo.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx o xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxxx test xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (UDS) xx xxxxxxx xxx, xx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, které xxxxxxxxxxxx plánovanou (S-fáze) xxxxxxxx XXX. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, při xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx thymidin xxxxxxx xxxxxxx (3X-XxX). Xxx xxxxx XXX xx xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx však xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx bází XXX, xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Proto xx metoda UDS xxxxxxx vhodná x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx xxx látky xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxxx" (1 - 3 xxxx) xx xxxx xxxxxxx. Xxxx může xxxxxxxx k xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxx xxxx XXX. Xxxxxx odpovědi XXX neříká xxx x přesnosti xxxxxxx xxxxxxxx. Mimoto je xxxxx, že mutagen xxxx xxxx x XXX xxxxxxxx, ale xxxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxx excizním xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx, xx XXX test xxxxxxxxxxx x mutagenní xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxxxxx xxxx potenciální xxxxxxxxxx, xxxxxxx poskytuje xxxxxxxx v xxxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxx: xxx xxxxxxx xxxxx (XXX) xxxxx než xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx test.
Xxx xxxxxxx xxxxxx (XXX): xxxxxxxxxxxxx míra XXX xxxxxxxx buněk při xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx zrn x xxxxx (XX) x průměrným počtem xxx v xxxxxxxxxx (XX): XXX = XX - XX. Xxxxx NNG xx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x následně xxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxx syntéza XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX): xxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Xxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx xxxxxx x xxxxxxxxxx segmentu XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látkou xxxx fyzikálním xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx obvykle x inkorporace 3H-TdR xx XXX jaterních xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx nízkým xxxxxx xxxxx x X-xxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx tak xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx s xxxxxxx v X-xxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Výběr xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx savčí xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při zahájení xxxxxx měly xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
Všeobecné xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.
Vlhkost xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx zvířat
Zdraví xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx dobu xxxxxxxxx xxxx dní xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx umístěny.
1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx
Je-li xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x xx-xx xx možné, látka xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx se xxxx xxxxxxxxx ředí. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) prokazují, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.3 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.3.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx chemicky xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx jeho xxxxxxx xxxxxxxxx údaji x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx xx xx možné, xxxx xx xxxxxx xxxxx použito xxxxx xxxxxxxxxxxx / vehikulum.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Xx každého xxxxx je třeba xxx každé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx. Je třeba xxxxxxxx se xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx indukovat XXX při xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx v dávkách xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx byly xxxxxx xxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxx xxxxxxxxx:
Doba xxxxxx xxxxxx | Xxxxx | CAS | XXXXXX |
xxxxx x xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 xxxxx) | X-2-xxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx podávána xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx skupině xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, pak pro xxxxxxxx skupiny negativní x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx jeden, xxxx xxx xxxxxxx.
Xxxxx x době, xxx xx xxxxxx provádí, xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x toxicitě xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx samcích. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx testovaných xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx se xxxx xx zvířatech odpovídajícího xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podává xxxxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx dvě xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx definována xxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx známky toxicity, xx při vyšší xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx účinek. Xxxxx dávka představuje xxxxxx 50 - 25 % dávky xxxxx.
Látky, jež x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx případ xx xxxxxxx. Provádí-li se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nejsou x dispozici, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx x téže laboratoři x xx použití xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx režimu, xxxx xx xxx použijí x hlavní studii.
Xxxx nejvyšší xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx toxicity x xxxxxxx (xxxx. pyknotická xxxxx).
1.5.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxx test xxx xxxxx minimálně 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xxxxxx x jedné xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nemusí se xxxxxxx úplná studie. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.5.5 Aplikace látky
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx vpravuje xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx i jiné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xx xxx mohla xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx přímo, xxxxxx xxxxxxx oběhem. Xxxxxxxxx xxxxx kapaliny, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx látek, jež xxxxxxxx vykazují xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx xxx, aby xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx úrovních xxxxxx x minimalizovala xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Příprava xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx buňky xx x xxxxxxxxx xxxxxx zpracovávají xxxxxxx 12 - 16 xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx zapotřebí xxxxx další xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 xxxxxx xx xxxxxx látky), ledaže xx xx 12 - 16 hodinách xxxxxxxxx reakce xxxxxx. Xx ovšem xxxxx xxxxxx i xxxx xxxx xxxxxx vzorků, xx-xx xx xxxxxxxxxx xx základě toxokinetických xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx buněk xx obvykle xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx in xxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx zajistit, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx buňky xx xxxxxx x xxxxxxxxx kontroly xxxx xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx UDS
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx xxxx (např. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx inkubují x xxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX. Xx inkubaci xx xxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xx potom xxxxx inkubovat x xxxxx obsahujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx neinkorporovaná xxxxxxxxxxxxx (tzv. "xxxx xxxxx"). Xxxxx se xxx promyjí, xxxxxx x xxxxxx. Při xxxxxxx inkubačních xxxxxxxxxxx xxxxxx se "xxxx xxxxx" xxxxxxxx. Sklíčka x preparáty xx xxxxxx do autoradiografické xxxxxx, xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xx xxxx jednoho xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxx), vyvolají, xxxxxx x počítají xx xxxxxxxxxx stříbrná xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxx tři xxxxxxxxx.
1.5.8 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx obsahovat xxxxxxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx možno XXX xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx zjevné xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxx xx xxxx počítáním zrn xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x každého xxxxxxx xx xxxxxxx hodnotí 100 xxxxx; xxxxx xx buněk xxxx xxx 100 xx xxxxxxx jedince, xxxx xx xxx zdůvodněné. Xxx xxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x X-xxxx, ale xxxxx xxxxx x X-xxxx se xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx jader x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx depozice xxxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx. Mimoto se xxxxxxx xxxx shrnou x xxxxxxxxx xxxxx. Xxx každou xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx x xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx "nuclear xxxxx" (XXX) xxxxxxxxx xxxxx CG xx xxxxx NG. Xxxxxxxx-xx xx "buňky x xxxxxx", musí xxx xxxxxxxx, kterými se xxxx buňky xxxxxx, xxxxxxxxxx a podložena xxxx z xxxxxxxxxxxx xxxx souběžných xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky xx mohou vyhodnotit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; pokud xx statistické xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx vybrat x xxxxxxxxx ještě před xxxxxxxxx xxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE VÝSLEDKŮ
Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx zahrnují:
xxxxxxxxx | (X) hodnoty XXX nad xxxxxx xxxxxxxxxx prahem, xxxxxxxxxxx xx základě historických xxx xxxx xxxxxxxxxx | |
nebo | (XX) xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxx | |
xxxxxxxxx | (I) xxxxxxx XXX na xxxxxx/xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx | |
xxxx | (II) xxxxxxx XXX xxxxxx signifikantně xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx. |
Je xxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx dat, což xxxxxxx, xx xx xxxxx vzít x xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx variabilita xxxx xxxxxxxxxxxx jedinci, xxxxx xxxxx - xxxxxxx x cytotoxicita. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx statistické xxxxxx; xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx faktorem.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vyvodit x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx testu XXX se xxxxxxx xxxxxxxxx buňkami in xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxxxxxxxx XXX, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx poškození DNA, xxx je tímto xxxxxx zjistitelné.
Xx xxxxx xxxx v xxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx dosáhne širokého xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud je xxxxx.
Pokusná xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx a pohlaví xxxxxxx,
- původ, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxx určení rozpětí, xxxx-xx provedena,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx metody k xxxxxxx, xx se xxxxx xxxxxxx do xxxxxxxx oběhu xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx faktickou dávku (xx/xx hmotnosti/den),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx a vody,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx zjišťování xxxxxxxx,
- metoda xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx metoda,
- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxx hodnoty xxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx a "xxx xxxxxxx xxxxxx" xxx jednotlivé preparáty, xxxxxxx a xxxxxxx,
- vztah xxxxx-xxxxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxxx,
- statistické xxxxxxxxx, bylo-li xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx,
- údaje ze xxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek,
- xxxxx "buněk x xxxxxx", xxx-xx xxxxxxxx,
- počet xxxxx x X-xxxx, xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Závěry.
Xxxxxx X.39. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx od 22.6.2001
X.40. XXXXXXX ÚČINKY XX KŮŽI
1. METODA
1.1 XXXX
Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx alternativních xxxxx (Xxxxxxxx Centre for xxx Xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx Methods, ECVAM, Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx, Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx) schválilo xxxxxxx xxxxxxx validní xxx testy in xxxxx na leptavé xxxxxx xx xxxx: xxxx na xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx elektrického xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, XXX) x xxxx xxxxxxxxxxx modelu lidské xxxx. Validizační xxxxxx XXXXX prokázala, xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx kůži. Xxxxxx test xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx správně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kůže X35, x ostatní xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, X34). Xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx; výběr xxxx oběma xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kůže xx xxxxxxxx testované xxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx však xxxx. 1.5.3.4 a 1.7.2.3.
1.4 XXXXXXX METODY - XXXX TER XX XXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx dobu xx 24 xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx způsobem. Xxxxx, xxxxx xxxx leptavé xxxxxx, jsou identifikovány xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx corneum.Tato xxxxxxxxx xx xxxx jakožto xxxxxx inherentního xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5kΩ) (4) (5). Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxx prahovou xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxx x xxx. (6)) je xxxxx do zkušebního xxxxxxx xxxxxxx test xxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx x xxxxxx xxxx chemických xxxxx xxxxxxxxx (2) (7).
1.5 XXXXX METODY - XXXX TER XX KŮŽI XXXXXXX
1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxx přípravu xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23denní) potkani, Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx zvířata se xxxxxxx odstraní xxxx x xxxxxxxx x xxxxx plochy. Xxxxxxx xx pak xxxxx xxxxxxxx otíráním x xxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx antibiotika, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, x koncentracích xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx čtvrtý den xx prvním xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx 3 dní xx použijí. Pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx být xxxxxxx xxxxxx xxx 31 xxx.
1.5.2 Příprava terčíků xxxx
Xxxxxxx xx humánním xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx. Xxxx xx xxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) trubice, x to epidermální xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx gumový X-xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx připne, a xxxxxxxxxx xxxx se xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x O-kroužku xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx X-xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx XXXX trubice xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx do xxxxxx obsahující roztok xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX), kde xx xxxxxxxxxxx pružinovou xxxxxx (xxx. 2).
1.5.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx stavu, xxxxxx xx na xxxxxxxxxxx povrch xxxxxx xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxx v xxxxxxx množství, xxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx epidermis, na xxxxxx xxxxx xx xxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx jemně xxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xxxx mít x xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na 30 xX, xxx xx xxxxxxxxx, xxxx rozetřením xxxxxxxx materiálu xx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Látka xx xxxxxx xx dobu 24 hodin (xxx xxx 1.5.3.4) a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx vodovodní xxxx xxxxx maximálně 30 xX tak xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxx ztuhla, se xx xxxxxxxx vymýváním xxxxxxx proudem vody xxxxx xxxxxx 30 xX.
1.5.3.2 Měření XXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odpor (XXX) xx měří pomocí xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Před xxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporu xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx přídavkem xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx, že xx trubice xxxxx, x tkáň se xxxxxxxxx přídavkem tří xxxxxxxxx 154 mM xxxxxxx síranu hořečnatého. Xxxxxxxxx můstku se xxxxxxx na xxx xxxxxx kůže a xxxxx xx xxxxx x kΩ/terčík (xxx. 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x délku holé xxxxxxxxx xxx krokosvorkou xxxxxxx obr. 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx navrch XXXX xxxxxxx xxx, xxx byla do xxxxxxx síranu hořečnatého xxxxxxxx xxxx stejná xxxxx xxxxxxxxx. Vnější (xxxxx) elektroda se xxxxx xx receptorové xxxxxxx tak, aby xxxxxx na dně. Xx třeba xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx hranou xxxxxxxxx xxxxxx a spodkem XXXX xxxxxxx (xxx. 1), xxxx xxxxxxxxxx xx vliv xx xxxxxxxx hodnotu odporu.
Upozorňujeme, xx je-li xxxxxxxx xxxxx vyšší xxx 20 xΩ, xxxx xx být xxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx se xxxxxxx tento xxxxxx xxxxxxxxx, například xxx, xx se XXXX xxxxxxx utěsní xxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx 10 xxxxxx xx xxxxxxxxxx, roztok xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx opakuje x xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx XXX xx akceptována, xxxxx xxxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx. Navrhované xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx popisovanou xxxxxx a xxxxxxxxx xxxx xxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx odporu (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 M kyselina xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
&xxxx;
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx voda
|
10 – 25
|
1.5.3.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Pokud xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látek (xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx organických xxxxx xxxxxxx XXX xxxxx nebo xxxxx 5 xΩ, lze xx xxxx xxxxx xxxxxxx hodnocení xxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Nanesení x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx testovanou látkou xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 2 xxxxxx po 150 μx 10% (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B x destilované xxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxx zhruba xx xxxx 10 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, která xx xxxxxxx pokojovou xxxxxxx. Xxx se xx xxxxxxxxx přebytečné (xxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx sejme x PTFE xxxxxxx x uloží xx xxxxxxx (např. do 20 xx xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 ml xxxxxxxxxxxx vody. Xxxxxxx xx xx xxxx 5 xxxxx jemně xxxxxx, aby xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx x 5 ml 30 % (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxx noc inkubují xxx xxxxxxx 60 xX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx vyjmou x zlikvidují x xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx po xxxx 8 xxxxx xxx xxxxxxx 21 oC (xxxxxxxxx odstředivá síla ∼ 175). Vzorek 1 xx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx 30 % (x/x) xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx poměru 1 x 5 (x/x) (xx. 1 xx xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx SDS). Xxxxxxx xxxxxxx (XX) xxxxxxx se xxxx xxx cca 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx sulforhodaminu B x terčíku xx xxxxxxxx z hodnoty XX (molární extinkční xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xxx 565 nm xxxx 8,7 . 104; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx X se xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx kůže xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx navázaného xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx rozsahu xxxx metody. Xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (mg/terčík)
|
|
Pozitivní
|
10 X xxxxxxxx chlorovodíková
|
40 - 100
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx voda
|
15 – 35
|
1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx působení xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx (např. 2 xxxxxx) za xxxxxx rozlišení xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx zjištěno, že xxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kůže xx 2 xxxxxx (2), xxxxxxxx umožňuje xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x neleptajících látek xx 24hodinovém xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx XXX mohou xxx xxxxxxxxx vlastnostmi x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxx leptavé účinky 5 xΩ byla xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx získaných xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zde. Pokud xx se xxxxxxxx xxxxxxxx výrazně xxxxxxx, xxxxx by xxx xxxxx použít xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Proto xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx metodiku x prahovou xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, jež byly xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx (3).
1.6 XXXXXXX XXXXXXXX METODY - XXXX X MODELEM XXXXXX KŮŽE
Testovaný materiál xx nanáší xxxxxxx xx xxxx až 4 hodin xx xxxxxxxxxxxx model xxxxxx xxxx, sestávající x xxxxxxxxxxxxxx epidermis x xxxxxxx xxxxxx corneum. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pokles životnosti xxxxx xxxxxxxxx například xxxxxx "XXX xxxxxxxxx xxxxx" (MTT = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 xxxxxxx tetrazolium xxxxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxx definovanou xxx xxxxx xxxxxxxxx dobu. Xxxxxxx xxxxx vychází x xxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jsou xx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx nebo xxxxx) x xxxx dostatečně xxxxxxxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxx buněk x xxxxxxxx buněčných xxxxxxxx.
1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX KŮŽE
1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxx lidské xxxx mohou xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Bariérová funkce xxxxxxx corneum xxxx xxx přiměřeně zachována. Xx xxx xxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxx rezistentní xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, o nichž xx známo, xx xxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx stratum xxxxxxx neprocházejí. Model xxxx xx definovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky.
Životnost xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxx, xxx xx xxxx dobře xxxxxxxx xxxx látkami xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx buněk (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xx. XX xxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kontrola xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx mezích xxx xxxx model. Xxxxxxx x případě xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx (xx srovnání s xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx spadat do xxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx důležité, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx predikční xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx validačnímu xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Popis xxxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx-xx testovaná látka xxxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx 25 (μ/xx2). Xx-xx xxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxx, x xxxxxxxx xx zvlhčí, xxx se x xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx je xx xxxxx, xxxxx xxxxx se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx. U metody xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xx je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx smyje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nejčastěji xx používá xxxxxxx XXX, o xxxxx xxxx prokázáno že x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx xxxx se xx xxxx 3 xxxxx xxxxxx do xxxxxxx MTT x xxxxxxxxxxx 0,3 mg/ml xxx xxxxxxx 20 - 28 xX. Xxxxxxxxx modrý formazanový xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx rozpouštědlem) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx stanoví měřením XX při xxxxxx xxxxx 545 x 595 nm.
1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx model xxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxx atd. xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx vliv. Doporučuje xx xxxxxx i xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx použití řady xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných x látek xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxx nutné, aby xxxx prokázáno, xx xx xxxxxxx metoda xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx mezinárodních standardů xxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx musí xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx dříve (2) x xxxxxxxx xxxxxx validizační studie xxxx být zveřejněny x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx před zveřejněním xxxxxxxxxx odbornou xxxxxx.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.8.1 Xxxx XXX xx xxxx potkana
Hodnoty xxxxxx (x xΩ) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní kontrolu x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx xx uvádějí x xxxxxxxxx formě, x xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x x xxxx vyvozená xxxxxxxxxxx.
1.8.2 Xxxx x modelem xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx a případné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, průměrné xxxxxxx x z nich xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
1.9.1 Xxxx XXX xx xxxx xxxxxxx
Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx XXX xxx testovaný xxxxxxxx xxxxx xxx 5 xΩ, je xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 kΩ x xxxxxxx xx xxxxxx x povrchově xxxxxxx látku (xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, pak xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx hodnoty XXX xxxxxxxxxxxxx 5 xΩ, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx barviva. Xx-xx xxxxx barviva x xxxxxxx vyšší xxxx rovný xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x 36 % XXx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx má xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx-xx xxxxx xxxxxxx x terčíku xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx.
1.9.2 Test x xxxxxxx lidské xxxx
Xxxxxxx XX xxx negativní xxxxxxxx představuje 100% xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Z xxxxxx XX pro xxxxxxxxxx zkušební xxxxxx xx vypočte xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx životaschopných xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx nezpůsobují xxxxxxxxx xxxx, od xxxx, xxxxx poleptání xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx odlišuje xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx být x xxxxxxxxxx xxxxxx jasně xxxxxxxxx předtím, xxx xx metoda xxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Testovaná xxxxx:
- identifikační údaje, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxx xx používají xxxxxxxxxx xxxxx, uvedou se xxxx údaje i xxx xx.
Xxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx použitého xxxxxxx,
- xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx hodnot xxxxxx (xxxx XXX) xxxx xxxxxxxxxxxx podíl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (test x xxxxxxx xxxxxx xxxx) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, a to xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx;
- popis xxxxx xxxxxx pozorovaných efektů.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxx 2
Xxxxxx X.40. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx xx 22.6.2001
B.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 XXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx (reakce), x xxx dochází, xx-xx xxxx poprvé xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x následně xxx xxxxxx, xxxx je-li xxxxxxx xxxx ozářena xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx látky.
Informace získané x rámci xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro xxxxxx xx xxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx dané testované xxxxx, xxxx ke xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xx spojení x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx výsledkem xxxxx in xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx, xxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx sloučeniny, xxxxx jsou fototoxické xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxx, x xxxxxxxxxx, jež xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX/XXXXXX z let 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx alternativa xx xxxxx xxxx xxxxxx používaným xxxxxx xx xxxx. X xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx OECD xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Výsledky xxxxx fototoxicity 3T3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx účinky xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx vivo x xxxxxx x xxxx x bylo xxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx vynikající xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxx k tomu, xxx předpovídal xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx vzniknout, xxxx xx fotogenotoxicita, fotoalergie xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, x xxxx řada xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxx fototoxicity 3T3 XXX xx xxxxx xxxxxxxxx. Test xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx viz dodatek.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: intenzita xxxxxxxxxxxxxx (XX) či viditelného xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx; xxxxxx ve X/x2 xxxx x XX/xx2.
Xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx (= xxxxxxxxx x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx viditelného (XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (= W x x) xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. X/x2 nebo X/xx2.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxx ultrafialového xxxxxx: xxxxx doporučení XXX (Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xx X'Xxxxxxxxx) xx xxxxxxx xxxxxxxx UVA (315 - 400 xx), XXX (280 - 315 xx) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx se i xxxx vymezení: za xxxxxxx xxxx xxxxx XXX x XXX xx xxxxx xxxxxxxx 320 xx a XXX xx někdy xxxx na XX-X1 x XX-X2 s xxxxxxx xxxxxx u 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx (viabilita) xxxxx: xxxxxxxx, xxxxxx xx měří xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx populace (xxxx. xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx buňku, xxxxxxxxx červeně, xx xxxxxxxxx lysozomů), jež xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx počtem xxxx. xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx.
Xxxxxxxxx životaschopnost (viabilita) xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x porovnání x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxx + UV xxxx - UV), xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx, kterým xx xxxxxxxx xxxxx toxicity xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx potenciálu. V xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx je xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx PIF x XXX.
XXX (xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, fotoiritační xxxxxx): xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx dvou xxxxxx xxxxxxxx cytotoxických xxxxxxxxxxx (XX50) testované xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx (-XX) x v xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX ozáření.
MPE (mean xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx): nová xxxx xxxxxxxx x matematické xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) a x xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx kůže xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx expozici xxxx xxxxxx, nebo xxxxxx, xxxxx xx obdobně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx podání xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx xxxxx "fototoxicita", xxxxxxxx se xxxxx xxxx fototoxických reakcí, x xxxx xxxxxxx x xxxx poté, xx na ni xxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx) nějaká xxxxx. Tyto xxxxxxxxxxx xxxxxx vedou xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (reakce xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, která xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxx, x kdy xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx k xxxx, xxx se reaktivita xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxx (odezva) x xxxxxxxxxxx projevy, ke xxxxx dochází xxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XX/XXX záření a xxxxxxxxxxxxx látky.
Fotokarcinogenita: karcinogenita xxxxxxxx opakovanou aplikací xxxxxx x látky. Xxxxx je tumorogeneze xxxxxxxx XX zářením xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x fotokokarcinogenitě.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx chlorpromazinu jako xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx testována xxx xxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX doporučuje použít xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxx použity xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (3) (13).
1.4 XXXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxx byly xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx, že xxxxxx absorbovat xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Podle xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx dostatečnou xxxxxxxx xxxxxxxxxx kvant. Xxxxx xx se xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx metodického návodu, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované látky x UV/VIS xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXXX č. 101). Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx než 10 xxxxx x mol-1 x xx-1, xxxx xxxxx fotoreaktivní potenciál x xxxx xxxxx xx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx testovat xxx testem na xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx biologickým xxxxxx (xxx xxxxxxx).
1.5 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxx mechanismy, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx vyústit xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7), xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx je xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x přítomnosti x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX záření. Cytotoxicita xx při xxxxx xxxxx vyjadřuje xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx, XX) (9), 24 hodin po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ozařování.
Buňky Xxxx/x 3X3 xx xxxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x jedné xxxxxx (monolayer). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx látku xx preinkubují dvě xxxxxxxx po 96 xxxxxxx x xxxxxx x osmi xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx dobu 1 xxxxxx. Xxxxx x obou xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX záření x dávce 5 X/xx2 UVA (+XX xxxxxxxxxx), xxxxx destička xx uchovává x xxxxx (-XX experiment). X xxxx xxxxxxxxxx xx pak médium xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x po dalších 24 xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (neutral xxx uptake, XXX) xx dobu 3 xxxxx xxxxxxx životaschopnost xxxxx. Pro xxxxxx x xxxx koncentrací xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, vyjádřená xxxx procento xxxxxx x negativních xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislé xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XX) x x xxxxxxxxxxxxx (-XX) záření, xxxxxxx xx úrovni XX50, tj. xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx o 50 % x xxxxxxxxx x kontrolami bez xxxxxxxxx.
1.6 KRITÉRIA JAKOSTI
Citlivost xxxxx xxxx xxxxxx XXX, xxxxxxxxxx údaje: x xxxxx je xxxxx pravidelně provádět xxxxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxx XXX. Buňky xx xxxxxx v xxxxxxx, která xx xxxxxxx při testu xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, příští xxx xx xxxxxxx xxxxxx UVA v xxxxx 1 - 9 J/cm2 x xxxxx xxx xx xxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk. Xxxxx xxxxxxx kritéria jakosti, xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx2 xxxx nižší xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorků xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxx XXX záření 9 X/xx2 xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx nižší xxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx uchovávaných x xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX, xxxxx xxxx: xxxx xxxxxxx xxxxxxxx jakosti, xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly (xxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx [Xxxx´x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, XXXX] x 1 % xxxxxxxx dimethylsulfoxidu (XXXX) xxxx ethanolu (XxXX) nebo xxx xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (+UVA) životaschopnost xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx v témž xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-UVA).
Životaschopnost xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (XX540 XXX) xxxxxx x NR xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx 1 x 104 xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx zdvojnásobení. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxxx hodnota XX540 XXX x xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxx xxxx rovna 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxx xxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx vitro xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx EU/COLIPA xxx xxxx látka xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (CPZ); xxxxx se tato xxxxx doporučuje. Xxx XXX testovaný xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xxxx definována xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: XXX xxxxxxx (+XXX): EC50 = 0,1 - 2,0 μx/xx, CPZ xxxxxxxxx (-UVA): XX50 = 7,0 - 90,0 μg/ml. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (PIF), xxx. xxxxx xxxxxxx XX50, xx xxx xxxxxxxxx 6.
Xxxxx CPZ xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx látky, xxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx skupiny xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 x XXX xxxx XXX (střední xxxxxxxxx).
1.7 POPIS XXXXXX
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx byla použita xxxxxxxxxxxxx buněčná xxxxx xxxxxx fibroblastů Xxxx/x 3X3 xxxx 31, x to xxx x XXXX nebo x XXXXX; xx xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx stejného xxxxxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxx buňky xxxx xxxxxxx linie, pokud xx kultivační podmínky xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx; je xxxx třeba xxxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx.
X buněk je xxxxx pravidelně xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, a xxx xx použít xxx x xxxxxxx, že xx xxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX záření xxxx s xxxxxx xxxxxx narůstat, je xxxxx xxxxxxxx buňky Xxxx/x 3T3 x xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx xxxxx Balb/c 3X3 xxxx XXX xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx a kultivační xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx pasážování xxxxx x xxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a inkubační xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xx jedná x XXXX xxxxxxxxx 10 % xxxx novorozených xxxxx, 4 mM xxxxxxxxx, penicilinem x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx ve vlhkém xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 oC / 7,5 % CO2. Xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zajišťovaly xxxxxxx cyklus x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxx xxxx. buněčnou xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx kultur
Buňky xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nasadí v xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx jednou xx xxxx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxx na xxxxx testu (xx. xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 48 xxxxx po xxxxxxxx) xxxxxxx ke xxxxxxxxxx (xx splynutí x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx vrstvu xxxxx). X případě xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x 96 xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 x 104 xxxxx v xxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx testovanou xxxxx se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxx destičky x 96 xxxxxxx, které xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx za identických xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxx xxxx, kdy xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx (+XXX/XXX) x xxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx systému, xxxx x případě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx žádná xxxxx, xxx xx x xxxx, xxx xxxxxxxx xxxx fotoxin xx xxxx xxxx xx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zapotřebí. Xxxxxxxxx xx xxxxx ani xx nutné, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivačním xxxxxxxx.
1.7.1.5 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx připravena, xxxxxx údaje x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xx xxxxxxxxx. Xxxxx je xxxxxxxxxxxxx, že by xxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx solném xxxxxxx, například x Xxxxxxx xxxxxxxxx solném xxxxxxx (XXXX) xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, XXX), xxxxx - xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx během xxxxxxxxx - nesmí xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx barevné xxxxxxxxxx xX, xxxxxxxxxx světlo.
Pokud xx testovaná xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, než xx xxxxxxxxxx xxxxxxx koncentrace, x xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, xx. ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxxx xx doporučuje xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo xxxxxxx (XxXX). Vhodná mohou xxx i xxxxx xxxxxxxxxxxx x nízkou xxxxxxxxxxxxx, například xxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx zvážit xxxxxx specifické vlastnosti, xxxx xx případná xxxxxx x testovanou xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx se xxxxxx xxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 oC.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX xxxxxxx / příprava
Světelný xxxxx: xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Záření x XXX a xx xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx záření XXX xx v tomto xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx vysoce xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xx 313 xx k 280 xx xxxxxxx tisícinásobně. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx požadavek, xxx emitoval xxxxxx xxxxx, jež testovaná xxxxx xxxxxxxxx, x xxx xxxx světelná xxxxx (xxxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx dobu) postačující xx zjištění xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx látek. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx délky a xxxxx nepatřičně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém - xxxxx sem x xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxxxx se používají xxxxxxxx výbojky a xxxx (xxxxxxxxxxx) rtuťové xxxxxxxxxx xxxxxxx - xx xxxx xx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx tepla a xxxx levnější, sluneční xxxxxx však xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx množství záření XXX, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxx xxxxxx cytotoxické záření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx test xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx složka XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XXX:XXX ∼ 2 : 1). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx studii xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx v xxxxx (3).
Dozimetrie: intenzita xxxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx fototoxicity xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxx daný xxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx je xxxxx kontrolovat, k xxxxx se doporučuje xxxxxx druhý, xxxxxxxxxx XX-xxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx, xxxx xx x delších xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x kontroluje xx xxxxxxxxx širokopásmového XX-xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx vyžaduje xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx zjištěno, xx xxxxx UVA xxxxxx 5 X/xx2 je xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 necytotoxická x xxxxxx dostatečně silná, xxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx látky. Xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx během 50 xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 1,666 xX/xx2. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx zdroj světla, xxxx xx xxxxx xxxxxx XXX xxxxxxx xxx, aby buňky xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx vzorce:
|
dávka xxxxxx (X/xx2) x 100
|
&xxxx; | |
| &xxxx;
x (xxx) =
|
________________________
|
(1 X = 1 X s)
|
|
záření (xX/xx2) x 60
|
&xxxx; |
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx byly detekovány xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx koncentracích xx zvyšuje xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (13). Hodnota pH xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (+UVA) a xxx xxx (-UVA) xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx zvolí xxx, xxx křivky xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx dostatečně podloženy xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx).
1.7.3 Xxxxx xxxxxxx
1.7.3.1 Xxxxx xxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx 1 x 105 xxxxx/xx x kultivačním xxxxx. Xx periferních xxxxx 96xxxxxxx mikrotitrační xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx odpipetuje po 100 μx xxxxxxxxx xxxxx (= xxxxx xxxxx), xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx 100 μl xxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxx 1 x 105 buněk/ml (= 1 x 104 xxxxx na xxxxx). Xxx xxxxxx testovanou xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx - xxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxx (-UVA), druhá xxx stanovení fotocytotoxicity (+XXX).
Xxxxx xx xxxxxxxx xx dobu 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX), xxx xx vytvořil xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Tato xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx odstraní x xxxxxxx dvakrát xxxxxxx 150 μx EBSS/PBS xx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx 100 μx EBSS/PBS xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx v xxxx koncentracích. Xxxxx x testovanou látkou xx inkubují x xxxxx xx xxxx 60 minut (7,5 % XX2, 37 xX).
Xxxx xxxxx x XXX (+UVA) se xxxxxxx xxx, že xx xxxxx xx xxxxxxxx teploty ozařují xx xxxx 50 xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx s 96 xxxxxxx zářením UVA x intenzitě 1,7 xX/xx2 (= xxxxx 5 / cm2). Xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx vody xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Duplicitní xxxxxxxx (-UVA) se xx dobu 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx UVA) xxxxxxxxxx xx pokojové xxxxxxx x xxxxxx boxu.
Roztok xx xxxxxxxx a xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX. Poté xx xxxxxx xxxxxxxxxxx médiem x xxxx noc (18 - 22 xxxxx) xx xxxxxxxx (7,5 % CO2, 37 oC).
1.7.3.3 Třetí xxx
Xxxxxxxxxxxxx hodnocení
Buňky xx xxxxxxxxxx xxx mikroskopem x fázovým xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Tato xxxxxxxx xx doporučuje, aby xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (NR)
Buňky xx promyjí objemem 150 μl xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Promývací roztok xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx se 100 μl xxxxx x XX x xxxxxxxx xx xxx 37 xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx se 7,5 % XX2 xx xxxx 3 xxxxx.
Xx xxxxxxxx xx xxxxxx s XX xxxxxxxx x buňky xx promyjí objemem 150 μl EBSS/PBS, xxxx xx xxx xxxxx x důkladně xxxxxxxx (je xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x obrácené poloze).
Přidá xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx xx xxxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx 10 xxxxx xxxxxx třepou xx xxxxxxxx, xxxxx xx XX z xxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx homogenní xxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX xxx 540 xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxx (xxxx. XXXXX) pro xxxxx analýzu.
2. ÚDAJE
1.8 XXXXXXX A XXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzu vztahu xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxx xxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxx xx. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx až xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μl/ml x experimentu xx xxx (-XXX) xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx (+XXX) vysoce xxxxxxxxxxx, xxxx dojít k xxxx, že xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx muset xxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx. Pokud xxxx cytotoxicita xxxxxxxx x žádné z xxxx xxxxx experimentu (xxx xxx -UVA, xxx xxx +XXX), xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx rozestupem xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxxxxx koncentrace.
Jsou-li xxxxxxxx hraniční - xxxxxx dělicí čáry xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx xxxxx test xxx ověření xxxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx testu xx xxxxxxxx, může xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podmínky, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx příprava roztoků xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx). Lze xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxx. X xxxxx, xxx xxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx.
1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx x 50 % xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XX (EC50). Xx lze xxxxxx xxx, xx xx xx data koncentrace - xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx regrese (nejlépe Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx regrese) nebo xx xxxxxxx xxxx xxxxxx metoda proložení (14). Než se xxxxxxx XX50 xxxxxxx xxx další výpočty, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. K xxxxxxx xxxxxxx XX50 xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxx x: xxx, xxx x: xxxxxx), xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva mnohdy xxxxx xxxxxxxx.
1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX MODELY)
1.10.1 Xxxxxxxxx model, xxxxx 1: fotoiritační xxxxxx (XXX)
Xxxxx xx získají xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva jak xx xxxxxxxxxxx (+XXX), xxx xx nepřítomnosti (-XXX) xxxxxx, se xxxxxxxxxxxx xxxxxx (PIF) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (-XX)
|
| &xxxx;
(x) XXX =
|
____________
|
|
EC50 (+XX)
|
XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, kdežto XXX ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX, xxxxxx xxx -XXX je xxxxxxxxxxxxx, xxxx se XXX xxxxxxxxx, x když xx xxxxx x xxxxxxxx, který xxxxxxxx, xx látka xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xx vypočítat xxx. "&xx; XXX", xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx (-XX) provede xx xx maximální xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Cmax) a xxxx xxxxxxx xx xxxxxx do xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) &xx; XXX =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
Xxxxx xx xx vypočítat pouze "&xx; XXX", pak xxxxx xxxxxxx &xx; 1 xxxxxxxxxx fototoxický xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx nedá xxxxxxxxx ani XX50 (-XX), ani EC50 (+XX), xxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx zkušební xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx toho, xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx "PIF = *1", čímž xx charakterizuje xxxxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) PIF = *1 =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (+XX)
|
Xxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", předpovídá xx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X případech (x) x (x) xx xxxxx xxx predikci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx, jichž se xxx xxxxx dosáhlo.
1.10.2 Xxxxxxxxx model, verze 2: xxxxxxx xxxxxxxxx (XXX)
Xx xxxxx také xxxxxx xxxxxxx verze xxxxxx xxx predikci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx x validační xxxxxx XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx xx podmínek xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx vitro x látek XX xxxxxx (13). X xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XXX x těch xxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx XX50. X tomto xxxxxx xx xxxxxxx veličina "xxxxxxx xxxxxxxxx" (XXX) xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx XXX byl na Xxxxxxxxxxx univerzitě x Xxxxxxx vyvinut speciální xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx obdržet xxxxxx.
1.11 Xxxxxxxxxxxx výsledků
Pozitivní výsledek xxxxx (PIF ≥ 5 nebo MPE ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxx látka xx xxxxxxxxxxx potenciál. Xxxxx se x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx nižších xxx 10 μg/ml, xx xxxxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx expozičních xxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx zkušební xxxxxxxxxxx (100 (g/ml), xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx schopnosti xxxx látky nejspíše xxxxxxxxx dalších informací. Xxx mohou xxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx látky v xxxx, xxxx xxxxx x testování xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx (XXX &xx; 5 xxxx MPE &xx; 0,1) xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxxxxx pro použité xxxxx xxxxx x xxxxxx podmínkách. X xxxxxxxxx, xxx by xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x při xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx, xx látka xxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxx xx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrační závislosti xxxxxxx xxxxxx (XX50 + XX x XX50 - XX), xx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (+UV xxx -XX) a xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, je možno xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx danou xxxxx xx xx xxxxx xxxxxx x xxxx xx se xxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xx xxxx xxxx xx xxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx tyto informace:
Testovaná xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx XXX, xx-xx xxxxx,
- fyzikální xxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti, xxx xxxx x provedení xxxxx xxxxxxxx,
- stabilita x xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- procentický xxxxx rozpouštědla x xxxxxxxxx xxxxx (XXXX xxxx PBS).
Buňky:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- číslo xxxxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxx ozařovacího xxxxxxxx, jež xx x xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X XXX xx vitro xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (a) - xxxxxxxx před xxxxxxxxxx x xx xxx:
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xx x xx xx).
Xxxxxxxx pokusu (x) - xxxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx ozařování XX/XXX xxxxxxx a xxx xxx,
- v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zdůvodnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxx x xxxxxxx působícího xxxxx (pufrovaný solný xxxxxx),
- xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu (x) - ozařování:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx charakteristika xxxxxx světelného xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x podrobnosti x xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zdroje xx testovaného xxxxxxx,
- xxxxxxxxx XXX (x x X/xx2) při xxxx vzdálenosti,
- doba xxxxxxxx XX/XXX záření,
- xxxxx záření XXX (xxxxxxxxx x xxx) x X/xx2,
- teplota xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxx NRU:
- xxxxxxx média s XX,
- xxxx xxxxxxxx x XX,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (koncentrace XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxxxxx XX (xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx optická xxxxxxx XX,
- druhová xxxxxx xxxxx (referenční), xxxx-xx xxxxxxx,
- složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), pokud byl xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx jednotlivých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx kontrol,
- xxxxxx koncentrace - xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx νs xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +XXX x -UVA,
- xxxxxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx EC50 (+XXX) x XX50 (-XXX),
- porovnání xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx ozařování XX/XXX xxxxxxx - xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) xxxx středního xxxxxxxxxx (XXX),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - souběžná negativní xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx denzita xxxxxxxx XX) ozářených a xxxxxxxxxxx xxxxx,
- historické xxxxx negativních xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (b) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-UVA) x XXX xxxxx použité xxx pozitivní kontrolu,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx: hodnoty EC50 (+XXX), XX50 (-XXX) x XXX, xxxxxxx x směrodatné xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx X.41. xxxx xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Xx. nabyl xxxxxxxxx xxxx 1.1.1999.
Ve xxxxx tohoto právního xxxxxxxx xxxx podchyceny xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx právním xxxxxxxxx x.:
208/2001 Xx., xxxxxx xx mění xxxxxxxx XX x. 251/98 Xx., xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx toxicity xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků - novela xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx
x účinností xx 22.6.2001
Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Sb. byl xxxxxx právním xxxxxxxxx č. 443/2004 Sb. x xxxxxxxxx xx 1.8.2004.
Znění jednotlivých xxxxxxxx norem xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx aktualizováno, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) xx x) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x chemických xxxxxxx a chemických xxxxxxxxxxx x x xxxxx některých xxxxxxx xxxxxx.
2) Zákon č. 246/1992 Sb., na ochranu xxxxxx xxxxx týrání, xx znění zákonů x. 162/1993 Sb., x. 193/1994 Sb., x. 243/1997 Xx. x č. 30/1998 Xx.
3) Směrnice Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a rozvoj xxx zkoušení xxxxxxxxxx. Xxxxx 4 - xxxx xx xxxxxx (XXXX Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxx of Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Effects).