Právní předpis byl sestaven k datu 31.07.2004.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
XXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
ze dne 16. xxxxx 1998,
xxxxxx xx stanoví xxxxxx xxx zjišťování xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §4 xxxx. 1 xxxx. x) zákona x. 157/1998 Xx., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx přípravcích x o xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx:
§1
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x chemických přípravků xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx, žíravých, xxxxxxxxxx, senzibilizujících, karcinogenních, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx reprodukci (dále xxx "toxicita xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx").1)
§2
(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx prováděnými xxxxxxxx uvedenými v příloze xxxx vyhlášky.
(2) Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxx lze xxxxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx stejně citlivé, xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx2) x metody xxxxxxxxxx Organizací pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx (XXXX).3)
§3
Tato xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx 1. xxxxx 1999.
Xxxxxxx:
XXXx. Xxxxx, XXx. x. r.
Xxxxxxx k xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.
Metody pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx
B. VŠEOBECNÝ XXXX
1. XXXXXXXX XXXXX
1.1 XXXXXX TOXICITA
xxxxxxxx nepříznivé účinky, xxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx 14 xxx) xx podání xxxxx xxxxx xxxxxx látky.
1.2 XXXXXX TOXICITA
xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx to xxxxxxxx dostačující pro xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xx xxx xxxxxx, xx po xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx být očekáván xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x pravděpodobně x xxxxx.
1.3 XXXXX
xx množství xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Dávka xx vyjádřena jako xxxxxxxx (gramy nebo xxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx jednotku xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx), xxxx xxxx xxxxxxxxxx dietní xxxxxxxxxxx (xxxx na xxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx).
1.4 XXXXXXXXXXXXXX XXXXX
xx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx je xxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) související x xxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXXXXX
xx všeobecný xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
1.6 XX50 (XXXXXXX XXXXXX XXXXX)
xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx látky, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxxxxxx dobu smrt 50 % xxxxxx, xxxxxx xxxx podána. Xxxxxxx XX50 se xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 LC50 (XXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX)
xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxx po xxxxxxxx x 50 % xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx po definovanou xxxx. Xxxxxxx XX50 xx xxxxx jako xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx objemu xxxxxxx (xx.x-1).
1.8 XXXXX
xx zkratka pro "xx observed xxxxxxx xxxxxx level" (xxxxxxx xxx pozorovaného xxxxxxxxxxxx xxxxxx) x xx xx nejvyšší x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx které nedochází x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXX XX XXXXXXXXX DÁVCE/SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx zvířat x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.10 XXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX XXXX)
xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxx na přežití x xxxxxxx na xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx.
1.11 PODRÁŽDĚNÍ XXXX
je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.12 XXXXXXXXXX XXX
je xxxxxxxx xxxx xx xxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxxx xxx.
1.13 XXXXXXXXXXXXX KŮŽE (XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX)
xx xxxxxxxxxxxx vyvolaná xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.14 XXXXXXXXX XXXX
je xxxxxxxx xxxxxxxxxx tkáňového xxxxxxxxx xxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxx xx 3 xxxxx xx 4 xxxxx.
1.15 XXXXXXXXXXXXXX
xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, metabolismu a xxxxxxx testovaných xxxxx.
1.16 ABSORPCE
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx vstupuje xx xxxx.
1.17 EXKRECE
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx případně xxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx x xxxx.
1.18 XXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) je xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x těle.
1.19 XXXXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx chemická xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx neenzymatickými xxxxxxxx.
2. XXXXXX - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX A XXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxx xxxxx různých xxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1 - X.5), xx xxxxxxx xxxx xxx xx jediné xxxxxxxx xxxxxx předběžný xxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XX50. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx expozice.
Xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx metodám, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx zvířete, xxxxxxxxx metoda xxxxx xxxxx (xxxxxx X.1 xxx) x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1 xxxx). Xxx testování xx xxxxxx druhu xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx doplnit xxxxxx vyvozené x xxxxx xxxxxx. X xxxxx případě xxxx xxx použita xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx toxicity s xxxxxxxxxx aplikací (xxxxxx X.7, X.8 a X.9) xx posuzují xxxxxxx účinky xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Důležité je xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx xxxx pomoci xxxxxxx cílové xxxxxx xxxxxxxx x toxické x netoxické dávky. Xx dlouhodobých xxxxxx xx vyžaduje xxxxxxxx xxxxxx aspektů do xxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.26 - X.30 x B.33).
3. XXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x množství xxxx struktuře xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxxx. Xxxx změny ("xxxxxx") xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxx, blok xxxx xxxx celé xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx projevovat změnou xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx vitro xx xxxxxx (xxxxxx) xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) anebo xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.10).
Xxxxxxxxxx jsou xxxx xxxxxxx xx vivo, xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx B.12) nebo xxxxxxx metafáze chromozomů xxxxxx xxxxx (metoda X.11). Xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx in xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.
Pro látky xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx nebo xxx xxxxxxxxx a kontrolu xxxxxx mohou být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx ke zjištění xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx studie xxx xxxxxx k xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx základním xxxxxxxx xxxxx; zkoumání xxxxxx xxxxxxxxxxxxx základním xxxxxxxx xxxxx; zahájení xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx.
Pro xxxx xxxxx zahrnují xxxxxx B.15 až X.25 xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x xx xxxxx, xxx rozšiřují xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Tyto xxxxx poskytují xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x jiných účincích x organismech xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxx, xx xxxxx uvažované xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx relevantní xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
Xxxxxxxxx xxxxxx, vhodná xxx xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx na xxxxxxx faktorech, xxxxxx xxxxxxxx x fyzikální xxxxxxxxxxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, metabolického xxxxxxx látky, výsledků xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx látky.
Pro xxxxxxxxxx xxxxxx dědičných xxxxxx x savců xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx savčím xxxxxxxxx, xx už vyvolaných xxxxxxxx (bodovými) xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxx locus xxxx x xxxx xxxxxxxxxx mutace xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi, xxxx. xxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx u myší (xxxxxx X.25). Těchto xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx možného xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx složitosti xxxxxx xxxxx x velmi xxxxxxx počtu potřebných xxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xx xxxxx se xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx jen xx xxxxxxx xxxxxxxxx důvodů.
Xxx stanovení genotoxicity xx postupuje xxxxx xxxxxxxxxxxx metodického xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pro danou xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx referenční xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
4. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx charakterizovány xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx mutagenity/genotoxicity. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Test toxicity xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx B.7, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx x určitých xxxxxxx, xxxxx xx mohly xxx také xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x karcinogenním xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx zkoumání xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx karcinogenity (metoda X.32) xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.33).
X xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx schopnost xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx změny x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx předpokládá souvislost x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx - xx xxxx (xxxxxx X.21). Používá xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx xxx transformaci.
5. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx (xxxx xx plodnost) xxxx xxxxx nedědičných xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxx xxxx teratogenitu x xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx.
Testovací xxxxxx (metoda B.31) xxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx toxicity xxxxxx xxxxxx s xxxxxxx podáváním. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx třígenerační reprodukční xxxx, je xxxxx xxxxxxxxxxx metodu xxx xxxxxxxxxxxxx reprodukční test (xxxxxx X.35) rozšířit xxx, aby xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
6. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxx funkčních změn xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx xxxx periferním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikaci (xxxxxx X.7) zahrnuje xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx odhalit xxxxxxxx xxxxx x neurotoxickým xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, hloubkové xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Navíc xx xxxxxxxx vzít x xxxxx specifické xxxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxx být xxxxxxxx x xxxxxx studiích xxxxxxxx. Xxxx například xxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxx sloučeniny fosforu xxxxxxxxx pozdní xxxxxxxx, xxxxx xx posuzována xxxxxxxx X.37 x X.38 xx xxxxxxxxxxxx xxxx opakovaném podání xxxxx.
7. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx anebo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx imunitního xxxxxxx, které xx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx navozenou xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx B.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8. TOXIKOKINETIKA
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pomáhají při xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx aspekty xxxxxxxx testované chemické xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Nepředpokládá xx, xx bude x xxxxxx případě xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx). U některých xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x jednorázovým podáním (xxxxxx X.36).
Informace x xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, umožňující xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x toxikokinetických xxxxxx.
9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX LÁTKY
Xxxxxxx testované látky, xxxxxx významnějších nečistot, x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx toxikologické xxxxxx.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx poskytují xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx výběr xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x pro xxxxxxxxxx x látkou x xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testované xxxxx (x xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx nečistot) x dávkovacím médiu x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx měl xxxxxxxxxx xxxxxxxx studie.
Všechny xxxxxxxxx týkající xx xxxxxxxxxxxx, fyzikálně-chemických vlastností, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
10. XXXX X ZVÍŘATA
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxx kontrola podmínek xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována, x xxxxxxx xxxx x zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX CHOVU
Životní xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx pokusná xxxxxxx xx xxxxx přizpůsobit xxxxxxxxxxx druhům. Pro xxxxxxx, myši x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 22 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx králíky xx xxx xxxxxxx 20 xX ± 3 xX při relativní xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx xxxx případy xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uvedeny x xxxxxx testované xxxxxx. Xxx všech xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx x xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxx x průběhu xxxxxx.
Xxxxxxxxx xx být xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx x tmy xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxx xx zprávě o xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jednoho xxxxxxx, xx xxxx xxx 5 zvířat x xxxxx kleci.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx jsou xxxxx x xxxxxxx chovu x xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x jedné xxxxx xxx xxxxx expozice xxxxxxxxx látce, xxx xxxxx následující xxxx xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX XXXXXX
Krmení xxxx xxxxxxxxx všem xxxxxxxxxx výživy pro xxxxxxxxx použitý xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxxxxx studované xxxxx x potravě, xxxx xx výživová hodnota xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx nutno xxxx x úvahu xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Používají xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x pitné xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx diety.
Xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx prokazatelně xxxx xx xxxxxxxx, nesmějí xxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx, xx kterých xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
11. XXXXXXX ZVÍŘAT
Při xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Snížení počtu x xxxxxxx bolesti x stresu zvířat xxx dosáhnout xxxx. xxxxxxxx xxxxxx fixní xxxxx (X.1.xxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx (X.1.xxxx). Xxxxxx x xxxxxx xxxxxx nevyužívá smrti xxxx specifického xxxxxxxx x vyžaduje menší xxxxx xxxxxx. Metoda xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x 70 % zvířat xxxx xxx xxxxxx X.1.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx; xxxxxxxxx látky se xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x testech xxxxxx toxicity (xxxxxx X.1, B.2 a X.3), xxx xxxx x xx vivo xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx X.11 x X.12), xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx zbytečně velkými xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx neprovést xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx x jednoho xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxxxx vědecky xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx zdůvodnění xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, na výsledcích xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx na xxxxxxxxxx dobře validizovaných xxxxx in xxxxx. Xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxx xxxxxxxxx studie xxxxxx kožní xxxxxxxx x dávkou xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx (xxxxxx X.3) x xxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4) xxxx xxx xxxxxxxx; xxxxx, xxxxx prokazatelně vyvolaly xxxxxxxxx xxxx silné xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx kožní dráždivosti (xxxxxx X.4), xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx poskytovat stejnou xxxxxx informací xxxx xxxxxxxx testy xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx menšího xxxxx zvířat, budou xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx budou xxxxxx metody k xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx použití xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, následnou xxxxxxxxxxx a označování xxxxx xxxxx nebezpečnosti xxxxx x xxxxx xxxxx xxx, xxx xx to možné.
12. XXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX
Xxx hodnocení x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxx xx xxxxx xx nutno mít xx zřeteli, že xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx xx možná xxx x xxxxxxx xxxx; doklady x xxxxxxxxxxxx účincích u xxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x ověření xxxxxxxx testování.
Výsledky xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxx člověka na xxxxxxx xxxxxxxxxx zjištěných x xxxxxxxxxxxxxxxx těmito xxxxxxxx.
Tyto xxxxxxxx xxxxx být také xxxxxxx pro studie, xxxxxxxx xx posuzování xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Část X - Xxxxxxxxx xxxx byl vložen xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx od 22.6.2001
X.1. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx pokusných zvířat xxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň dávky. Xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx pokusu, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxx metoda xx používá xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx podávat x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx svých leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 dní xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.
Pokud je xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, další xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx oleji, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx známy xxxx xxxxxx před testem xxxx během xxxx xxxxxx relevantní toxikologické xxxxxxxxxx. U xxxxxxxx xx xxxxx neměl xxxxxxxx překročit 10 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx vodné xxxxxxx, xxxxx je xxxxx podávat až 20 ml.kg-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x testech xx xx xxxx minimalizovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx zajistil xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ve vehikulu xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx lokální dráždivé xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx proti xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx by x obou xxxxxxx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být březí. Xxxxx je k xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx z xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Poznámka: Xxxxxxxxx-xx xx x akutních xxxxxxx toxicity zvířata xxxxxxx druhů, xxx xxxx hlodavci, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xx třeba xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dávky. V xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xx vyvarovat xxxxxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxxxx látky.
1.2.2.3 Volba xxxxx
Má být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx xxxxxx odstupňovány xxx, xxx byl x xxxxxxxxxxx xxxxxx viditelný xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkou a xxxxxxx, a pokud xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x přijatelnou xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
S xxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx nejméně 2000 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx a 5 samic s xxxxxxxx výše popsaných xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx uhynutí, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx studie.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx doba, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxx, x xxxx xx uhynutí, xxxxxxx xxx, xxx je xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx potrava xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. U xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxx x pitné vodě xxxx xxxxxx. X xxx pokusu xx xxxxxxx zváží x xxxxxxxxx látka se xxxx sondou xxxxxx x xxxxx dávce. Xxxx-xx možno xxxxx xxxxx xxxxxxxx, lze xxxxx aplikovanou xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx přístup k xxxxxxx xxxxx 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx být xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx a xxxx zvířatům poskytnout.
Xx xxxxxx xxxxx xx pozorování xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xx vedou xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx sledovat x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx jednou xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx dne xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vyšetření. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx umírajících xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, spánku a xxxxxx. Okamžik xxxxxxx xx xxxxx zaznamenat xx nejpřesněji.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx pokusu xxxxxx, i xx, xxxxx přežijí až xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Je-li xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, podá se xxxxx nejméně jedné xxxxxxx x pěti xxxxxxxxx druhého pohlaví x cílem xxxxxxx, xxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx testovanou xxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx použití menšího xxxxx xxxxxx. Pokud xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví xx xxxxx vynechat.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx sestavují xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, doba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx x jinými xxxxxxx otravy, xxxxx xxxxxxxxx účinků a xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx testované xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx zvířat xxxx xxx jeden xxx. Xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx. LD50 xx xxxxxxx uznávanou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxx xx melo zahrnovat xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxx změn xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, změn tělesné xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx toxických xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx chovu, xxxxxxx xxx.
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx zvířat x xxxxxxx otravy, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx uhynutí xx xxxxxx testované xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx pro humánní xxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxx LD50 xxx xx pohlaví, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx úplný xxxxx, x to pro 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx výpočtu),
- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx LD50, xxxxx xx xxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx mortality na xxxxx x xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx danou metodou xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx pohlaví,
- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx by xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx hodnotu XX50),
- interpretace xxxxxxxx.
X.1. xxx XXXXXX TOXICITA XXXXXX (XXX OS) - XXXXXX FIXNÍ DÁVKY
1. METODA
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx následovat xxxxx xxxxxx doby xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.
Xxxxxx s xxxxx xxxxxx se provádí xx xxxx etapách.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dávek xxx xxxxxx xxxxxxxx sondou x zvířat xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxxx studie poskytuje xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx odhadu xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxx xxxxx xxxxx nepoužije xxx xxx pěti xxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx z xxxxxx fixních dávek: 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x předběžné xxxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyvolá "xxxxxxx xxxxxxxx" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx úvod bod 1.2), ale ne xxxxxxx.
Po xxxxxx xx pozorují účinky. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dávky xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx na xxxxxxx úrovni dávky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, látka xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx vyšší úrovni xxxxx. Pokud zvířata xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx toxická reakce xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky.
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxxxx xxxxx" (xxx část B - Xxxxxxxxx úvod xxx 1.2), tj. xxxxxxxx z předem xxxxxxxxxxx xxxxxx dávky, xxxxxx je možno xxxxx, xxxx by xxxxx k xxxxx (xxxxxx případů xxxxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx je xxxxx, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Příprava
1.2.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx nejsou známy xxxxxx xxxxx xxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx kmeny xxxxxxxxx zvířat. Na xxxxxxx xxxxx xx x obou xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem se xxxxxx mladá dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx orientační studie x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx každého x xxxx pohlaví.
1.2.1.2 Příprava x xxxxxxxx xxxxx
Xxxxx je xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxx xx vhodném xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx uvážit xxxxxxx vodného roztoku, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x rostlinném xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx další xxxxxxx xxxxxx x jiných xxxxxxxx vehikulích xxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx testem xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti. X xxxxxxxx by xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 ml.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; výjimkou xxxx vodné xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx až 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xx xx xxxx minimalizovat xxxxxxx xxxxxxx koncentrací, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx dávek.
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Potkanům xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx; přístup x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx. X xxx xxxxxx xx xxxxxxx zváží a xxxxxxxxx látka se xxxx xxxxxx xxxxxx x jediné xxxxx. Xxxx-xx xxxxx podat xxxxx najednou, xxx xxxxx aplikovanou xxxxx xx xxxxxxx množstvích xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx se látka xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx období - xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx poskytnout.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Orientační xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx dávek xx jednotlivá xxxxxxx. Xxxxxxxx xx používají xxxxxx, xxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx sekvenčně, xxxx se xxxxxxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxx dávky xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x cílem xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx dní; xxxxx xxxxxxxxxxx projevy xxxxx xxxxxx xxxxx xxx, zvíře xx xxxx pozorovat ještě xx xxxxxxx xxxx xxx. Posuzují se xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 a 2000 xx.xx-1. Jestliže xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx vyšší xxxxxx xxxxxxx, potom xx nutné xxxxx xxxxx xxxxxxx jednu xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx by xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxx(xxx) xxxxx, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) příznaky otravy, x o xxxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxx se vybrat xxxxxxx xxxxx podle xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx x dispozici, xxxxxxxxxx xx použít xxxx první xxxxx 500 xx.xx-1. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Jestliže xxxxxxx x uhynutí při 2000 xx.xx-1, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x hlavní xxxxxx xx třeba xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx. Jestliže xxxx xxx použití výchozí xxxxx (např. 500 xx.xx-1) zjištěny xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. 50 xx.xx-1). Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx podmínek xx xxxxxxxxx, xx xx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx více xxx 5 zvířat.
1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx hladinu xx se mělo xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xx xxxx xxx nullipary x xxxxxx by být xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx studii. Xx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Dávka, xxxxx xxxx xxxxx x testu, xx xxx zvolena z xxxxx ze 4 xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 nebo 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx); xxxxxxx uhynutí xxxxxx xxxxxxxx, ale xxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxxxx mortalitu, xxxx xxxxxxxxx dalšího xxxxxxxxx.
Xxxx podání xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je nutné xxxxx znovu xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Zvířata xx xxxx měla xxx dále pozorována xxx, aby xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx humánní xxxxxxxx zvířat nebo xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx by být xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Opět xx xxxxxxx, xxxxx xxxx nutné xxxxxxx xxxxxxx, by xxxx xxx xxxxxxxxxx po xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xx podání xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx zvíře xx xxxxx samostatné xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx aplikované xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxx xx měla xxx nejméně 14 xxx. Xxxxx ji xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx by xxx xxxxxx xxxxx obrazu xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx prodloužit. Xxxxxxxx je xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxx x doba xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x pozdnímu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx provádět xxxxxxx xxxxxxx první xxx xx podání xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xx den xxxxx xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx bolesti xxxx xxxxxxx příznaky xxxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xx podání xxxxx, xxxxxxxx zvířata xxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Test xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xx xxxx xxxxxxx příliš vysoká xxxxx.
Pozorování xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, křečovým xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se provede xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx 3 xxx x potom xxxxxx xxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, i xx, xxxxx přežívají xx xxxxx testu, se xxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxx makroskopické patologické xxxxx se xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx úrovně xxxxx xxxx být xxxxxxxxx vyšetření xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
X xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx 5 mg.kg-1 (xxxx jestliže xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx mortalitu xxx xxxx xxxxx), xx třeba xxxx xxxxxxxxxx akutní toxicitu xxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx z xxxxxxxxxx x hlavní xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx úroveň xxxxx. X ní xxxx xxx xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx testu xxxx utracených x xxxxxxxxx důvodů; popis xxxxxxxxx účinků; xxx xxxxxx studii, xxx xxx xxxxxxxxx zřejmý xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx připsat testované xxxxx; xxxxxx xxxxxx xxxxx toxických účinků; xxxxxxxx pitvy. X xxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx než xxx, xx třeba xxxxxxxxx x zaznamenat xxxxx xxxxxxxxx.
Zvířata, xxxxx xxxx humánně xxxxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xxxx zaznamenána jako xxxxxxx vyvolaná xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx informace xxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,
- experimentální xxxxxxxx,
- úrovně xxxxx (včetně vehikula, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx dávek,
- xx formě xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x podle úrovní xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx utracených xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx, xxxxxx a xxxxxx účinků),
- xxxxxx průběh xxxxxxx xxxxxxxxx příznaků a xxx xxxx reversibilní,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx indikaci xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx, včetně příznaků xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x testu.
3.2 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx
Xxxxx | Xxxxxxxx | Xxxxxxxxxxxx |
5 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % přežití; xxxx zřejmá toxicita | Xxxxx, které jsou xxxxx xxxxxxxx Látky, xxxxx xxxx jedovaté Xxx xxxxxxxx xxx 50 mg.kg-1 |
50 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx 5 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx | Xxxxx, které xxxx zdraví xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx x 500 xx.xx-1 | |
500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx než 100 % xxxxxxx | Látky, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx nebo zdraví xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x 50 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx | Látky, které xxx považovat xx xxxxx xxx významné xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx u 2000 xx.xx-1 | |
2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxx výsledky x 500 xx.xx-1 Xxxxx, xxxxx xxxxxx významnou xxxxxx xxxxxxxx |
X.1. tris XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX STANOVENÍ TŘÍDY XXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jak xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx xxxxxxxxxxx dávek x přiměřených odstupech, xxx xxx xxxx xxxxx testovanou látku xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxx testovací metodu xxxxxxxx xxxxx tří xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx body xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx pro xxxxx testování. Xxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx uvážit, pokud xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx zpřesnění.
Metoda xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx přesné XX50. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx xx očekává xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx je x x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx mohlo být xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx x metodě B.1. Hlavní výhodou xxxx metody xx xxxxx spotřeba zvířat xxx u xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (orální)(B.1) x než x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1 bis).
1.2 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat x xxxxx ze xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx postupně, x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxx zvířata xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxx k xxxxxxxx xxxxx rozhodne x dalším kroku, x.x.
- xxxx zapotřebí xxxxx xxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx krok bude xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x vyšší xxxx xxxxx úrovní xxxxx.
1.3 Xxxxx metody
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx, xxx xxxx možná xxxxxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx klecích xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxx zvyknout xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxx x klecích ve xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx, ale xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx aplikována zvířatům x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx nosiči. Doporučuje xx xxxxxxx zvážit xxxxxxx vodného xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. kukuřičném) x pak xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx vehikula xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx není xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx xxxx aplikováním xxxxx xx určitou xxxx xxx potravy (xxxx. xxxxxxx xxxx xxx x xxxx 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx xx neomezuje.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx se přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx důvody xxxxx xxxx. Samice musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx být březí.
Na xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxx krok xx xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx kroku může xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxx xx xxx xxxxxxx úrovní, xxx. 25, 200 a 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx, xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx uhynutí xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxx xxxx xxxxx xxxxxx. X závislosti xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx příslušného diagramu xxxxxxx popsaného x Xxxxxxx 1.
Xxx výběr xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx struktury x xxxxxx. Xxxxx xxxx informace xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxx úrovni xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), pak se xxxxxxx limitní test. Xxx xxxxxx žádné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, doporučuje xx - x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx - xxxxxx výchozí xxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
X některých xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, než jak xx dovoluje xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxx 25, 200 x 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 5, 50 xxxx 500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx aplikovat xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx leptavými xxxx xxxxx dráždícími xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxx interval mezi xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx trvání x xxxxxxxxxx toxických xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví xxxx xxx další xxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxx není xxxxx, xx zvířata xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx test
Limitní test x xxxxxxx úrovní xxxxx xx xxxx 2000 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx zvířatech xxxxxxx pohlaví. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, lze xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxxx 200 xx.xx-1 (xxxx 500 xx.xx-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx dobu 14 xxx, kromě xxxxxxx xxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx utracena z xxxxxx xxxxxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx předem pevně; xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx jejich xxxxxxx x délky xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx objeví x xxxx příznaky toxicity, xxxxxxx xxx-xx o xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: záznamy xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3 Xxxxx postupu
Po xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx zkušební xxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxx látky xxxx xxxxxxx xxx potravy xx dobu xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Xxx je xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxx během určité xxxx, xxxx xxx - x závislosti xx xxxxx xxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx potravu x xxxx.
Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx. X hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx na 100 x tělesné xxxxxxxxx, x xxxxxxx vodných xxxxxxx xxx xxxxx x 2 ml xx 100 x xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx x podávaném xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxx, xxx xxx podáván xxx objem xx xxxxx xxxxxxxx dávky. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx dávku celou xxxxxxxx, je možné xx xxxxxxxxx po xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x Dodatku 1.
1.3.3.1 Xxxxxxxxx pozorování
Pečlivé xxxxxxxx pozorování xx xxxxxxx dvakrát xx xxxxx xxx (xxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxx, a xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, nebo xxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx stresu, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx: xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxx byla xxxxxxxx mrtvá, xxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xx xxxx a xxxxx, na očích x xxxxxxxxxx, a xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx, vegetativním x xxxxxxxxxx nervovém xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, křečí, slinění, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxx pozorování xxxx xxxxxxxxxxxx zaznamenávána: xxxxxxx jsou xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxx jednou xxxxx. Počítají xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3.3 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx použitých xx studii, xxxxxx xxxxxxxxx a utracených xxxxx testu, xx xxxxxxx pitva. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx zaznamenány pro xxxxx zvíře zvlášť. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx orgánů xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx přežívajících 24 x xxxx xxxxx.
2. XXXX A XXXXXX XXXXX
X dispozici xxxx xxx xxxxx x každém xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc jsou xxxxxxx xxxxx shrnuty xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx u každé xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx nebo utracených x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx úmrtí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, popis, časový xxxxxx x vratnost xxxxxxxxx xxxxxx, a xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx poučení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x Xxxxxxx 2.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx pokusu
Zpráva x xxxxxx xxxxxxxx xxxx informace, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx-xx xxxx;
- xxxxx, xxxxx a xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxx x týdenních xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx podávaných objemů x xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx (xxxxxx xxxxx x zdroje);
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx každého zvířete xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx (tzn. xxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx a trvání xxxxxx);
- xxxxxx x xxxxxx xxxxxx příznaků xxxxxxxx a jejich xxxxxxxxxxxxx x každého xxxxxxx;
- pitevní xxxxxx x histopatologické xxxxxx x xxxxxxx zvířete, xxxx-xx x dispozici.
Diskuse xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx metoda je xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 423.
DODATEK 1
XXXXXX TESTOVÁNÍ
1. Xxx xxxx xxxxxxx v xxxx 1.4.2.3, výchozí xxxxx xx xxxx xxx ta xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx výběr xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxx x fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx,
- vztah xxxxxxxxx x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx z jiných xxxxx xxxxxxxx x
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. Příslušné vývojové xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx stanovují xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx dávku. X xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tak, jak xxxxxxxxx šipky.
3. Xxxxx xx xxxxxxxx výchozí xxxxx 25 nebo 200 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx uhyne xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, obvykle se xxx xxxx netestuje. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx 5 xxxxxx žádné xxxxxxx příznaky, xx xxxxx pitvou xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx x podanou xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx potvrdí, xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx úrovni dávky.
4. Xxxxx po xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxxxx, xx hodnota LD50 xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx to xxxx xxx hraniční xxxxxxxx, xx třeba xxxxxxx posoudit xxxxxx xxxxxxxxxxx dvou xxxxxx xxxxxxx pohlaví: zřetelné, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx XX50 ve xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx, xxxx mohou xxx podnětem xxx xxxxx testování xx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
5. Xxxxxx umožňuje xxxxxxxxx x xxxxx doplňkovými xxxxx xxxxxxxxxxx dávkami (xxxxxxxx 2). Této xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx další xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx varianty 1.
Postup xxxxxxxxx x výchozí xxxxxx 25 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx udána dávka, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx zvolené jako xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx uhynulých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxx xxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx provede xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x příslušném xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Klasifikace se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot uvedených x příslušném xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, počet zvířat x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx druhé).
Pod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených zvířat (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x testování xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx se provede xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvedených v xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx podle způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x příslušnou doplňkovou xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx dávkou 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx druhé).
Pod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx nebo utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3). Podle xxxxx xxxxxxxxx zvířat xx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx šedého xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx xxxx podle xxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxxx x Dodatku 2.
Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx základě konečných xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX 2
Xxxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xx testovací xxxxxxxx 1
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx první, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Xxxx rámečky xxx xxxxxxxx "XXXXX XXXXX XXXXXXXXX" x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx konečné xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx varianty 1 xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Ležatá xxxxxxx xxxxxxx, že XX50 je xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx vlevo.)
(a) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 2000 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
x) Xxxxxxx xxxxx 25 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
&xxxx;
x) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
x) Xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx
X.2. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxx
Xx xxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx par, xxxxxxx tání, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (jsou-li xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx látky
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, a to xxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx pozorují x zjišťují xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx humánním xxxxxxxx utratit. Testované xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x takových xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxxxxx xxxxxxx bolest x xxxxx následkem xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx budou xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx do potřebného xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx nevyžaduje xxx xxxxxxxxxxx expozičního xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx testované xxxxx je třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, přidá xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; v xxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem. Pokud xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, že xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná historická xxxx, je možno xx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Pokusná zvířata
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx důvody xxxxx xxxx. Xxxxxxx se xxxxx užívaných pokusných xxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Počet a xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxxx hladinu xx xxxxx xxxxxx nejméně 10 xxxxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx). Samice musí xxx nullipary a xxxxx být březí.
Xxxxxxxx: Používají-li xx x akutních xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxxxx, xxxx by xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu zvířat. Xxxxx je třeba xxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xx xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx dávek, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx byl x testovacích xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkou x mortalitou x, xxxxx je to xxxxx, musí xxxxxxx xxxxxxxxx LC50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.3.2.4 Limitní xxxx
Nedojde-li xx 4 xxxxxxxx expozici 5 xxxxx x 5 samic xxxxx x xxxxxxxxxxx 20 xx.x-1 xxxx parám xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxx x koncentraci 5 xx.x-1 (xxxx - x případech, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx fyzikálních xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sledované xxxxx včetně xxxxxx xxxxxxx - xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dosažitelné xxxxxxxxxxx) xxxxx 14 xxx x xxxxx xxxxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxx 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xx zvířaty xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxxx dynamické xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se expoziční xxx, je xxxxx xx konstruovat tak, xxx se co xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a aby xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx maximální. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x inhalačním xxxx xx xxxxx x zásadě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Je xxxx možné použít xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové expozice; xxxxx dva xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.7 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze ji xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx reakcích, xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xx trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx je xxxx, xxx se xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx je xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx postupu
Zvířata xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx zváží. Xxxxxxxx xx po dobu 4 hodin od xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx mělo xxx xxxxxx. Teplota xxxxx pokusu má xxx 22 oC ± 3 x X. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx to není xxxxx (např. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx tlaku xxxxxx komory (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx nepodává potrava xxx voda.
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry. Xxxxxx musí xxxxxxxxx, xx stabilních podmínek xxxxxxxx xxxx dosaženo xx xxxxxxxxxxx. Konstrukce x provoz xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxxxxxx x komoře.
Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx),
(x) skutečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx v xxxxxxx xxxx alespoň třikrát xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx vyžadovat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Během xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x xxxx než ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xxxx úrovně regulace xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Po xxxxx xxxx trvání xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx to xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx x aerosolů, xxxx xx xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx tak často, xxx xx xxxxx xxxxxxxx (xxx nejméně xxxxxx xxx každou xxxxxxxxxx skupinu),
(x) xxxxxxx a vlhkost xxxxxxx xx xxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají systematicky. Xxxxx xxxxx má xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pracovní xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a odpovídající xxxxxxxx mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx ztrát xxx xxxxxx, např. xxxxxx xxxx zmrazením xxxxxxxxx zvířat nebo xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo umírajících xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, srsti, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Zvláštní xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx uhynutí xx xxxxx xxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x v xxxxxxxx xxxxxxx.
Zvířata, xxxxx xxxxx pokusu xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, doba uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx jeden xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx x bolestem xxxxxxxxx testovanou látkou, xxxx zaznamenána jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. XX50 se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se hodnotí xxxxx - pokud xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx a výskytem x xxxxxxx všech xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx poškození, xxxx xxxxxxx hmotnosti, mortality x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx, atd.,
- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx systému x xxxxxxx umístění xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,
- údaje x xxxxxxxx xx sestaví xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx:
x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx;
x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx;
c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx);
Xxxx.: při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx (xxxx. xx vodě) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx koncentraci xxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx.
d) povaha xxxxxxxx, pokud xxxx xxxxx;
e) skutečná xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx;
x) xxxxxxxxxx xxxxxx aerodynamického průměru (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX);
x) xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx;
x) xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx toxických reakcí xxxxx xxxxxxx x xxxxxx expozice (xx. xxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx toxicity; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx);
- xxxx xxxxxxx xxxxx expozice nebo xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx;
- xxxxxxx XX50 xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx spolehlivosti pro XX50 (pokud xx xxxxx jej xxxxxxxx);
- xxxxxx závislosti xxxxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxxx) a xxxx xxxxxxxx (pokud to xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx);
- pitevní xxxxxx;
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx (xx zvláštním xxxxxxxx x vlivu xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx hodnotu XX50);
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.3. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xx xxxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx uhynutí. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx během xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx konec xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx v takových xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx leptavých nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x pokusných xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých budou xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx testu xx srst xxxxxx xx zádech xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx xx xx, xxx se xxxxxxxxxxx (xxxx. abrazí) xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx její xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Při xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou xxxx xxxxxxx vehikulem, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x kůží. Xxx xxxxxxx vehikula xx nutné brát x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx průnik xxxxxxxxx látky xxxx. Xxxxx vehikula by xx xxx xxxxx xxx, x xxxx xxxxx xx může xxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx kůží, x xx xxxxx relevantních xxxxxxx vybrat xxx, xxxxx xxxxxxx usnadňuje xxxxxx kůží. Testované xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxx xx dospělých xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxx použít i xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xx xxxxxx. Je xxxxx xxxxx známé xxxxx pokusných xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro každou xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Používá-li xx xxxxx, musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx se zvážit xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pečlivě xxxxxx x xx třeba zajistit, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx toxické xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xx xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx látky.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx, xxxxxxx tři, x xxxx být xxxxxx odstupňovány xxx, xxx vznikly testovací xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x mortality. Xxx xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx nebo leptavé xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x účinkem, x xxxxx možno xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxx test jednou xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx a 5 xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx úplnou studii.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx být xxxxxxx 14 dní. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Měla xx xxx určena xxxxx xxxxxx otravy, xxxxxxxxx xxxxxx otravy x trvání xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Rozhodující xx doba, kdy xx příznak xxxxxx xxxxxxx x vymizí x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx patrná xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx uhynutí.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata se xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Testovaná xxxxx xx xxxxxx rovnoměrně xx xxxxxx, xxxxx xxxx asi 10 % xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxx látky xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx; xxxx by xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xx xxxxxxxx xxxx této xxxxxx.
Testovaná xxxxx xx po expoziční xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx obvazu x nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx je xxxx třeba vhodným xxxxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx orálnímu xxxxxx. K zamezení xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxx xxx omezení xxxxxxxx pohybu, úplnou xxxxxxxxxxxx však xxxxx xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx očištění pokožky.
Xxxxxxxxxx je třeba xxxxx systematicky zaznamenávat. Xxx xxxxx xxxxx xx třeba vést xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx se zvířata xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx sloužit xxxxxxxxxxx snížení ztrát xxxxxx pro studii, xxxx. pitvou nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx slabých xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxxx, xxxx, na kterou xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx x sliznic, x xxxx xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Okamžik xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, i xxxxx xxxxxxx xx xx konce pokusu, xx pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xx zaznamenávají x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx histopatologické xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
Xx dokončení xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrazně citlivější xx xxxxxxxxxx látku. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx spolehlivá xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pohlaví xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. X xx xxxx být pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx pokusu, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet zvířat x jinými xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxx x týdenních xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx hmotnosti xx třeba stanovit x zaznamenat, přežijí-li xxxxxxx déle než xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxx x bolesti xxxxxxxx xxxxxxx látkou, xx xxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx touto xxxxxx. XX50 se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx vztah, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx x stupněm všech xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx hmotnosti, mortality x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx atd.,
- xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x typu xxxxxx: xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je užito) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- tabulky xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; počet xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; počet xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx podání xxxxxxxxx látky, xxxxxx x kritéria xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- všechna xxxxxxxxxx,
- hodnota LD50 xxx xx pohlaví, x kterého xxx xxxxxxxx úplný xxxxx, x xx pro 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx výpočtu),
- 95% interval xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (xxxxx xxx xxx xxxxxxxx),
- křivka xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x její xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx danou metodou xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx věnovat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XX50 v xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx během xxxxx),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.4. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXX DRÁŽDIVOST)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx zvážit xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx snížit xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Následující xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxx xx xxxxxxx zvířeti xxxx xxx není xxxxxxxxx xxxxx testování.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti x chemická reaktivita. Xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx (xxxx. xX xxxxx či xxxxx 2 nebo xX rovné či xxxxx 11,5) xxxx xxxxx testovat xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx vzít x xxxxx také xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xxxx dostupné přesvědčivé xxxxxxx závažných účinků xxxxx ze spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx in xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx.
x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx limitní xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti) x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xxxx testovat xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx testovat xxxxx xxxxxx toxické xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx několika xxxxxxxxx xxxxxx, přičemž každé xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx kontrola. Xx stanovené xxxx xx xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx popíše xxxxxx podráždění, xxx xxxx xxxxx provést xxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxx xxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx bylo xxxxx xxxx zhodnotit xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utratit.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxx 24 xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx na xxxxxx ostříhá xxxx xxxxx. Xxx střihání xxxx xxxxxx srsti xx třeba dbát xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx kůže (xxxx. xxxxxx). Je xxxxx xxxxxx pouze xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx kůží.
Xxxxxxx xxxxx králíka xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx jsou výraznější x xxxxxxxxx obdobích xxxx. Xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxx srsti.
Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxx x práškové xxxxx, xx třeba xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, případně xxxxx xxxxxxx vehikulem, xxx xxx xxxxx xxxxxxx s kůží. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nutné brát x xxxxx vliv xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xx xxxxx xxxxxx různé xxxxx savců, je xxxx třeba xxx xxxxxxxx albínu xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Jestliže xx x in xxxxx screeningových xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, že látka xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. je xxxxxxx), xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx třeba xxxxxxxxxx xxxxxx pro neošetřenou xxxxxxxxx skupinu, pro xxxxxxxxx případů xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx mohou být xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx zvláštní důvody xxx jiný xxxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxx xxxx 0,5 g xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx zvířete xxxxxx v xxxxx xxxx xxxxxxx kontrola.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx dostatečně xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vratnost xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx po xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x klecích. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx (xxx 6 xx2) xxxx x pokryje xx plátkem mulu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx náplastí. X xxxxxxx x xxxxxxxxx past xxxx xxx vhodné xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxx, a xxx xxx xxxxxxxxx xx kůži. Po xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx volně xx xxxx vhodným okluzivním xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxx, aby xx xxxxx xxxxxxx x xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx nebo xx xxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxxxxx testovanou xxxxx xxxxx, xxxxx je xx xxxxx, nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx, xxx nebyla xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx expozice xx obvykle 4 xxxxxx.
Xxxxx existuje xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx vyvolat nekrózu (xxxx. tím, xx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx délku xxxxxxxx (xxxx. xx 1 hodinu xxxx 3 xxxxxx). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx použít nejprve xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 3 plátky xxxx xxxxxxxx, pokud xx akutní xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx. První xxxxxx xx odstraní xx 3 minutách. Pokud xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx druhý plátek xx 1 xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx nezbytná 4xxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx třetí xxxxxx xx 4 hodinách x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx kůže. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx dvou xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. jestliže xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx xx pozorována xxxxxxx xxxx).
Xxxxxxxx je xxxxxxx kožní xxxxxx (xxxx. xxxxxxx) pozorována xx 3 xxxxxxxx xxxx xx 1 xxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx ukončen.
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx navrhnout xxxxx xxxxxxxx, například pokud xx odpovídá očekávanému xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx x člověka.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x vyhodnocení
Xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx x stupeň xxxxxx kůže xx 60 xxxxxxxx a xxxx 24, 48 x 72 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxxxx podráždění xxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 1. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 72 hodin xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx kůže xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx závažné xxxx xxxx xxxxxxxxx (nevratná xxxxxxxxx xxxxx xxxxx) x jiné toxické xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxx měření tloušťky xxxxx xxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx sestaví xx tabulky. X xx musí xxx xxx každé xxxxxxx xxxxx patrný xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x edému xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxx závažné xxxx, xxxxx xxxxxx x povahy xxxxxxxxxx xxxx, reverzibilitu xxxx xxxxxxxxx a všechny xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxx možno xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx přípravy x xxxxxxx kůže, xxx obvazu: okluzivní, xxxxxxxxxxxxx,
- ve xxxxx tabulky xxxxx x xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xx 1, 24, 48 a 72 hodin xxx. xx xxxxxxxxxx xxxx),
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx včetně xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x povahy xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx histopatologických nálezů,
- xxxxx xxxxx xxxxxxx toxických účinků xxxxx xxxxxxxxxx kůže,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx | |
1. Xxxxxxxxx erytému x xxxxxxxxx | |
1.1 Xxxxx xxxxxx | 0 |
1.2 Velmi xxxxx xxxxxx (stěží xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx viditelný erytém | 2 |
1.4 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx | 3 |
1.5 Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) znemožňující xxxxxxxxx xxxxxxx | 4 |
2. Xxxxxxxxx edému | |
2.1 Xxxxx xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx xxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
2.3 Lehký xxxx (xxxxxx jsou xxxxxxxx, xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) | 2 |
2.4 Xxxxx xxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxx x 1 xx) | 3 |
2.5 Výrazný xxxx (xxxxxxx xxxx xxx 1 mm x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx) | 4 |
4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx indexu kožní xxxxxxxxxxx (IKI)
XXX xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx ze xxxxxx xxxxxx reakce xxx erytém x xxxx x jednotlivých xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxx jedince x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx u xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx aritmetický xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx | XXX |
nedráždí | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx xxxxxx | 0,5 &xx; XXX ≤ 3 |
xxxxxxx xxxxxx | 3 < IKI ≤ 5 |
silně xxxxxx | XXX > 5 |
X.5. XXXXXX XXXXXXXX (OČNÍ DRÁŽDIVOST)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
1.1.1 Výchozí xxxxx
Je xxxxx xxxxxxx xxxxxx všechny xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx s xxxxx snížit xx xxxxxxx testování xxxxx xx xxxxxxxx, které xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. X xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Např. xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx látky, xxxxx - xxx xx xxxxx očekávat - xxxxxxxx v oku xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX xxxxx či xxxxx 11,5, není xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx očekávat xxxxxxx xxxxxxxxx. Je xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx studií; látky x prokázanými xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nemají xxx xxxx xxxxxxxxx xx dráždivost xxx xxx, protože lze xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxx mít xxxxxxx účinky xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
c) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Látky, xxxxx vykazovaly xxxxxx xxxxxxx nebo výrazně xxxxxxxx xxxxxx na xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx dále testovat xx dráždivost xxx xxx, protože xxx xxxxxxxxxxxx, že xxxxx xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx xx v xxxxxxxxxxx dávce xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx stanovených xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx podráždění x reakce se xxxx xxxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxx xxxxx posouzení xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx nebo nevratnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx závažnými a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
24 xxxxx xxxx testem xx x každého x xxxxxxxxx vybraných pokusných xxxxxx provede xxxxxxxxx xxxx xxx. Zvířata, x xxxxxxx se xxxxxx podráždění xxx, xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxx vyloučí.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Ačkoliv xx xxxxxxxxx xxxxx druhy xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx přednost xxxxxxxx dospělému albinotickému xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet zvířat
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxx xx jediném xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx jednom xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxx leptavé (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) účinky xxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx další xxxxxxxxx xxxx dráždivosti u xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx specifických xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxx zvířat. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx použití xxxxxxx zvířat.
1.2.2.3 Úroveň xxxxx
Při xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 0,1 ml. X xxxxxx xxxxx, xxxx x zrnitých xxxxx je xxxxx xxxxxx objem 0,1 xx xxxx xxxxxxxx xxx 0,1 g (xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx). Jedná-li xx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, xx třeba xx rozemlít xx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx až po xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xx měrnou xxxxxxx.
U xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx vystříknout x xxxxxx 0,1 xx látky x xxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx pozorovaných xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx 21 xxx po xxxxxxxx studované xxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x klecích. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxx, xx xx spodní xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx bulvy. Xxxxx xx xxx xxx xx 1 xxxxxxx lehce x xxxx xxxxxxx, aby xx žádná látka xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxx může xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx použít lokální xxxxxxxxxxx. Xxx bylo xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nedojde x xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx zvolit xxx, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx anestetika. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 24 hodiny xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx oči xxxxxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
U xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx při xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx s použitím xxxxxxx, kterým xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx. X xxxxxx případech xx xxxxxxxxxx xxxxxx 3 králíky. Xxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxx vymývají xxxxxx po xxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx objemu xxxxxxxx x rychlosti xxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxx se xxxxxxxxx po 1, 24, 48 a 72 xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx-xx xx xx 72 xxxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx prodloužit, xxxxx xxxxxxxxx postižení xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx vratnost xx nevratnost. Xxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx, xxxxxxx x spojivce xx xxxxx zaznamenat x xxxxx xx xxxxxx x jiné xxxxxxxx léze.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxx je xxxxx xxx každém xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v příloze x xxxxxxxxxx. (Klasifikace xxxxxx oka xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx interpretace. Xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xx, kdo xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx ilustrovanou referenční xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.)
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx usnadnit xxxxxxxx xxxxxxxxxxx lupy, ruční xxxxxxxxxx lampy, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx zařízení. Xx xxxxxxxxxxx pozorování xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx mimoto xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx stupeň podráždění x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx popis stupně x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx),
- x xxxxxxxxx xxxxx výčet xxxxxxxxxx xxxx leptavých xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx)
- popis všech xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, charakteru x xxxxxxxxx zjištěného xxxxxxxxxx x poleptání, včetně xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1, 24, 48 x 72 hod.), xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx, oční xxxxxxxxx, fluorescein xxx.,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mimoočních xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. DODATEK
4.1 Stupnice xxxx na xxx
Xxxxxxx | |
X. Xxxxxxxx - xxxx | |
Xxxx není xxxxxxxx | 0 |
Slabý xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx | 1 |
Xxxxxxx xxxx x xxxxxx víčka | 2 |
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx víček na xxxxxxxx | 3 |
Edém xxxxxxxxxx xxxxx více xxx xx xxxxxxxx xxxx zcela | 4 |
X. Spojivka - xxxxxx | |
Xxxxxx není xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxx xx xxxxx sekrece xx xxxxxxxx xxxxxx) | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxx x xxxxxxxxx xxx | 2 |
Slzení xx zvlhčením víček x xxxxx x xxxxxxx xxxxx xxx | 3 |
X. Spojivka - xxxxxxx | |
Xxxxx xxxxxx normální | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxx zřetelně xxxxxxxxxx oproti normě | 1 |
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, rozlišení jednotlivých xxx xxxxxxxx, difusnější xxxxx xxxxxxx barva | 2 |
Difuzní xxxxx xxxxxxx xxxxx | 3 |
X. Duhovka - xxxxxxxx | |
Anomálie nejsou xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx duhovky, xxxxxxxxx, xxxxx, nastříknutí cév xxxxx rohovky (jedna xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx), xxxxxx xx xxxxxx je xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxx xxxx přítomná, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx | 2 |
x duhovce (xxxxx nebo xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx) | |
X. Xxxxxxx - xxxxxx neprůhlednosti | |
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx, snadno se xxxxxxxxxxxx, detaily xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx | 2 |
Xxxxxxxxxx zóny xxxxxxxxxxx, xxxxxxx duhovky nejsou xxxxx viditelné; xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx | 3 |
Xxxxx neprůhlednost xxxxxxx, duhovka xx xxxxx neviditelná | 4 |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xx pozorovatelná, xxx xxxx plocha je ≤ 1/4 plochy xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 xxxxxx xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; xxxxxx neprůhlednosti ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 3 |
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx &xx; 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 4 |
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx dráždivosti (XXX)
Xxxxxxxxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) pro xxxxx xxxxx x xxxxx interval xxxxxxxxx xx xxxxxxx podle xxxxxx
XXX = 2.(X + X + C) + 5.X + 5.X.X
Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx hodnocení xxxx xxxxxx x XXX.
Xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx XXX xx roven xxxxxxxxxx XXX zjištěnému x xxxxxxx xxxxx
4.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx | IOA |
nedráždí | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
dráždí | 15 - 29,9 |
xxxxx xxxxxx | 30 - 59,9 |
velmi xxxxx xxxxxx | 60 - 79,9 |
xxxxxxxx xxxxxx | 80 – 110 |
B.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. METODA
1.1. Xxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx zjišťování xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx jsou xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx jediná xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx x která xx se xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxx testu xx xxxxx uvažovat xxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx schopnosti průniku xxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx lze xxxxxxxx xx testy s xxxxxxxx, xx kterých xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx Xxxxxxxxx kompletním xxxxxxxx (XXX), x xx xxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx x xxxxxxxx se xxxxx xxx přesnější x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx lidskou xxxx xxx xxxxxx xxx Freundova xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x proto xx jim xxxx xxxxxxxx.
Maximizační xxxx xx morčatech (Guinea-pig Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) je xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Ačkoliv x xxxxxxxx schopnosti xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxxxx xxxxxxx dalších xxxxx, xx GPMT xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx.
X mnoha skupin xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx adjuvans (xxxxxxxx se dává Xxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxxxx xx méně xxxxxxx.
X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx zdůvodnit volbu Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx důvody.
X xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxx (XXXX) a Xxxxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx x jiných xxxxx, pokud jsou xxxxxxxxxx validizované x xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxx xxx jejich xxxxxxx.
Pokud xxxxxxxxxxxx xxxx provedený uznávanou xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx možno xxxxxxxxxx xxxxx označit xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx dalšího xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxx nutné xxxxxxx xxxx na xxxxxxx, xxx xxx je xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx kůže: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx dermatitida) xx xxxxxxxxxxxx zprostředkovaná xxxxx xxxxxx xx xxxxx. X člověka xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zarudnutím xxxx, xxxxxx, pupenci, puchýřky, xxxxxx (velkými puchýři) xxxx xxxxxxxxx těchto xxxxxxxx. U jiných xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx být xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx.
Indukční xxxxxxxx: experimentální expozice xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxxxxx navodit xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx týdne xx xxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx stav xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx expozice (xxxxxxxxx): experimentální expozice xxxxxxxx dříve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxxxxxxx období pro xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx každých xxxx xxxxxx s použitím xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, že xxxx xxxxx až xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx očekává xxxxxx na xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nejméně 30 % u xxxxxx x adjuvans x xxxxxxx 15% u xxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx se dává xxxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxx XXX | Xxxxx XXXXXX | xxxxxxxx xxxxx | xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxx |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | xxxxxx |
94-07-7 | 202-303-5 | Ethyl xxxxx kyseliny x-xxxxxxxxxxxxx | xxxxxxxxx |
Mohou xxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxx odborném xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx.
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx testované látce xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx případně xxxxxxxxxxx aplikací (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx období 10 xx 14 xxx (xxxxxxxx období), x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx rozvinout xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx x xxxxxx xxxxx reakce xx provokační xxxxxxxx x testovaných zvířat xx porovnán s xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx podstoupí xxxxxxx expozici v xxxx indukce x xx jim xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávka.
1.5 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xx x použitím xxxx xxxx xxxxxxxx rozpouštědla xxx, xxx nebyla xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx integrita xxxxxxx.
1.5.1 Maximizační test xx xxxxxxxxx (XXXX)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx albinotická xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx podmínky po xxxx xxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx náhodně xxxxxxx do xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx stříháním, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxx xx xx, xxx xxxxxxx k poškození xxxx. Zvířata xx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx a na xxxxx testu.
1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxx se běžné xxxxxxxxxxx xxxxx albinotických xxxxxx.
1.5.1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Samice xxxx xxx nullipary x xxxxx být březí. Xxxxxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxx 5 xxxxxx je xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxx xxxxx než 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx možné dojít x xxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 kontrolních xxxxxx.
1.5.1.2.3 Xxxxxxx úrovně
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx expozici xx xxxxxx xx takovou xxxxxx, kterou zvířata xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x která xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx střední xxxxxxxxxx xxxx.Xxxx provokační koncentrace xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, která x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx kůže. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx koncentrace xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx xx dvou xxxx xxxxx zvířatech. Xxx tento xxxx xxx uvážit xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXX.
1.5.1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.1.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, xx xxxxxx xx lopatkové xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (FCA) xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx poměru 1 : 1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
Injekce 3: xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxx xx xxxxx FCA x xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx roztokem x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Pro xxxxxxx 3 xx xxxxx xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxx před xxxxxxxx s FCA xx xxxxx fázi. Xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x nezředěném XXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 3 má být xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 2.
Injekce 1 x 2 xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx a xx xxxxxxxx xxxxx, zatímco xxxxxxx 3 xxxxxx xx kaudální xxxxx xxxxxxxxx plochy.
Den 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Následující 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx po 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx míst xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Injekce 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx adjuvans (XXX) smíšené x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;
Injekce 2: neředěné vehikulum;
Xxxxxxx 3: Směs xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) xx xxxxx XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x poměru 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx před xxxxxxx indukční xxxxxxxx, xxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxx xxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx důkladném xxxxxxxxx xxxxxxxx oholení xxxxx 0,5 ml 10% laurylsulfátu sodného xx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Testovací xxxxxx xx xxxxx xxxxx. Testovanou xxxxxx xx vhodném vehikulu xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 xx), který xx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxx 48 hodin. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx látky jsou xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
6. - 8. den - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx zbaví xxxxx. Xxxxxxx vehikulum xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 48 hodin.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx xxxx zbaveny xxxxx. Xx jeden bok xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx x xxxxxxx x xx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx aplikuje xxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xx xx třeba). Xxxxxx se pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx s xxxx xx 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx a xxxxxxxxx skupiny
- xxxxxxxxx 21 hodin xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x x případě potřeby xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx dalších třech xxxxxxxx (přibližně 48 xxxxx od začátku xxxxxxxx provokační dávky) xx pozoruje kožní xxxxxx a xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx;
- přibližně 24 xxxxx xx tomto xxxxxxxxxx xx provede xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx (72 xxxxx).
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" u testovaných x kontrolních xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx osoba xxxx, které xxxxx xxxx senzibilizováno x xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx je k xxxxxxxxx xxxxxxxx nutná xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx provokace), xxxxxxx xx přibližně x xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx skupinou x xxxxxxxxx. Opakovanou xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx reakcí, xxxxx xxxx důsledkem indukčních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx nálezů je xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxx, jako xxxx. histopatologického xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx řas.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxx
1.5.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx aspoň 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xx provede stříháním, xxxxxxx nebo chemickou xxxxxxxx, v xxxxxxxxxx xx použité xxxxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxx na xx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx xxxx. Zvířata xx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxx testu.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Používají xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxx. Samice xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx 20 xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xxxxxx x kontrolní xxxxxxx.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Koncentrace xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx takovou xxxxxx, xxxxx xx nejvyšší xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx silné xxxxxxxxxx kůže. Jako xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx u nesenzibilizovaných xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. V případě xxxxxxx je možno xxxxxx koncentrace xxxxxxxx x předběžném xxxxxx xx dvou nebo xxxxx xxxxxxxxx.
Pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx vodě xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx zředěný nedráždící xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Pro xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 80% xxxxxx xxxxxx/xxxx xxx indukci x xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Indukce
Den 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxx xx xxxxxx srsti (xxxxxxxx ostříhán). Systém xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx nasytí xxxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; kapaliny lze xxxxxxxx aplikovat xxxxx).
Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx komůrkou x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 hodin.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxx čtverhranný, x xxxxxxx xxxxxxxxx 4 - 6 xx2. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x použitím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx zajistila xxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx další expozice.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx (důkladně ostříhán). Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x kontaktu s xxxx překrývacím xxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx, xx negativní xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, lze použít xxxxx kontrolní skupiny xxx xxxxxxxx.
6. - 8. a 13. - 15. xxx - Testovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx aplikace jako x xxx 0 xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx plochu xx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) 6. - 8. xxx x xxxxx 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Provokace
27. - 29. xxx - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx skupina
Xxxxxxxxxx xxx testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Okluzivní xxxxxx xxxxxxxxxx příslušné xxxxxxxx xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx koncentraci xx aplikuje na xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx zvířat. Na xxxxxx xxxx neošetřeného xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Překrývací plátky xxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx v kontaktu x xxxx xxxxxxx xxxxxxx po xxxx 6 xxxxx.
1.5.2.3.3 Pozorování x xxxxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx plocha xxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx později (přibližně 30 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx plátku) xx xxxxxxxx kožní xxxxxx x zaznamenávají xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x dodatku;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx 24 xxxxxxxx (tj. xxxxxxxxx 54 hodin xx aplikaci provokačního xxxxxx) xx xxxxx xxxxxx znovu xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Doporučuje xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx osoba xxxx, xxxxx zvíře xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx je x xxxxxxxxx výsledků nutná xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx přibližně x xxxxx později, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x kontrolní skupinou x vehikulem. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze také xxxxxxx na původní xxxxxxxxx skupině.
Xxxxxxx xxxxx reakce a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx zaznamenávají podle xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (viz xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxx, xxxx např. xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX (XXXX X XXXXXXXXX TEST)
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx každém xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX (XXXX X XXXXXXXXX XXXX)
Pokud xxx proveden xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx uvést xxxxx tohoto xxxxx xxxx xxxx xxxxxx (xxxx. LLNA - xxxx regionálních lymfatických xxxxx, MEST - xxxx ztluštění xxxx x myší) včetně xxxxx xxxxxxxxxxx postupu x xxxxxxxx získaných xxx testované x xxxxxxxxxx látky.
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx (XXXX x Xxxxxxxxx xxxx)
Xxxxxx o xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx mohly xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx chovu, strava xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx x konci xxxxx.
Experimentální xxxxxxxx:
- způsob xxxxxxxx xxxxx xxx plátkový xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x technice plátkového xxxxx;
- výsledek xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx o xxxxxxxxxx x provokačních xxxxxxxxxxxxx xxx vlastní test;
- xxxxxxxx informace x přípravě, xxxxxxxx x odstranění testované xxxxx;
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx a celková xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxx xxx indukci x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx výsledků xxxxxxxx xxxxxxxx citlivosti x xxxxxxxxxxxxx (viz 1.3.) xxxxxx použité xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx systému xxxxxxxxxxx;
- slovní xxxxx charakteru a xxxxxx pozorovaných účinků;
- xxxxxxx histopatologické xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx xx analogická x xxxxxxx OECD XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx vyvolaných xxxxxxxxxxxxx reakcí
0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
1 = xxxxx xxxx skvrnité xxxxxxxxx xxxx;
2 = středně xxxxxxx x xxxxxxxxxx zarudnutí xxxx;
3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx senzibilizace
Podle xxxxxxxxx pozitivity xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxx danou xxxxxx senzibilizováno, xx xxxxx klasifikuje xxxx
xxxxx xxxxxxx (X. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 9 - 28 % xxxxxx
středně xxxxx xxxxxxx (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 65 - 80 % xxxxxx
xxxxxxxx xxxxxxx (X. xx.) - 81 - 100 % zvířat
X.7. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x odstupňovaných xxxxxxx několika skupinám xxxxxxxxx zvířat xxxxxx, x to xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx se zvířata xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx se zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxx x xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx do kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx tak, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx vliv xxxxxxxx klece. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx látku lze xxxxxxx xxxxxx xxxx x potravě nebo x pitné xxxx, xxxxx xxxxx studie x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností xxxxx.
Xxxxx xx xx třeba, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx). Xxxxxxxxxx se nejprve xxxxxx použití xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, pak xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x jedlém xxxxxxxxxx xxxxx (např. xxxxxxxxxx) a xxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx musí být xxxxx jejich toxická xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx není xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx ještě xxxx xxxxxx. Je nezbytné xxxxxx stabilitu xxxxx xx zvoleném xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, ale xx xxxxx použít x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x běžně xxxxxxxxx pokusných kmenů. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxxxxx xxxxx by xxxx xxxxx xx nejdříve xx xxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx věku 9 xxxxx.
Xx začátku xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx rozpětí hmotnosti xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx tato xxxxxx xxxxxxx jako předběžný xxxxx xxxx dlouhodobou xxxxxx, xx xxxxx x xxxx studiích xxxxxx xxxxxxx stejného xxxxx a xx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro xxxxxx hladinu dávek xx xxxxxxx nejméně 10 zvířat (5 xxxxx x 5 xxxxx). Pokud se xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, xx nutno zvýšit xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx zabita xxxx koncem pokusu.
Xxxxxx xx možno xxxxxxx další skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx následujících 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx vratnost, xxxxxx xxxx zpožděný výskyt xxxxxxxxx účinků. Používá xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Volba dávek
Xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx v kontrolní xxxxxxx zachází stejně xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx usnadnění aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx skupina, které xx xxxxxxxx nejvyšší xxxxx.
Pokud xx xxxxx dostupných xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxx 1000 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx-xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, lze xxxxxxx předběžnou xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Při xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx x toxikokinetických xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx úroveň dávky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx řadě xxx, aby umožnily xxxxxxxx závislost xxxxxx xx dávce. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (XXXXX). Xxxxxxx xx vhodný xxxx- xx čtyřnásobný xxxxxx mezi xxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinu, než xxxxxx xxxxxx velký xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxx xxx 10).
Xxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxx pitné vodě, xx xxxxxxxx zajistit, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xx testovaná xxxxx v potravě, xxxx se použít xxx xxxxxxxxxx koncentrace (x xxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx sondou, xxxx xx xx xxx xxx každý xxx xx stejnou xxxx x dávkování přizpůsobovat xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx studie xxxxxxx xxxx předběžný xxxxx xxxx dlouhodobou xxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Neprokáže-li xxxx xxxxxxxxx zde xxxxxxxxxxx xxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxxxx při xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxx xxx takové xxxxxxxxxxx x potravě xxxx vodě, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x analogie x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx provedení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx pravidlo xxxxxxxxx testu xxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx lidí xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx skupiny xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx dalších 14 xxx xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zpožděné xxxxxx x xxx xxxxxxxxx přetrvávání xxxx xxxxxxxxx účinku.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířatům xx xxxxxx testovaná xxxxx 7 xxx x xxxxx po xxxx 28 dnů, xx zdůvodněných xxxxxxxxx 5 xxx x xxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx sondou nebo xxxxxxx intubační kanylou. Xxxxxxxxx xxxxx tekutiny, xxxxx může xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx na 100 x tělesné xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx podat x 2 ml xx 100 g xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba minimalizovat xxxxxxxxx koncentrace xxx, xxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx úrovních xxxxx. Xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, u kterých xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx provádí nejméně xxxxxx denně, xxxxxxx x tutéž xxxxx xxxx a x xxxxxxxx doby očekávaného xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx provede xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířat xx účelem zjištění xxxxxxxxx a mortality. Xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, utracena xxxxxxxx způsobem x xxxxxxx.
Xxxxxxxx klinické xxxxxxxxx xxxxx zvířat xx provede xxxx xxxxx aplikací (za xxxxxx intraindividuálního porovnání) x dále nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx pozorovacím xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx stejnou xxxxx xxxx. Výsledky xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx skórovacího xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx v testující xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx pozorování xxxxxx xx xxxxxxx; xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, očí x xxxxxxx, přítomnost xxxxxxx x exkretů, xxxxx xxxxxxx a vegetativních xxxxxx (slzení, zježení xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx změny xxxxx, xxxxxx, dále xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x chování (vytrvalé xxxxxxx pohyby xxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx chování (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, pohyb xxxxxx).
Xx xxxxxxx týdnu xxxxxxxx xx otestují xxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxx, xxxxxxx, proprioceptivní), xxxxx se xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Další xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx Xxxxxxxxx xxxx, xxxx X).
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve čtvrtém xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx vynechat, pokud 28xxxxx studie xxxxxx xxxx xxxxxxxxx studie xxx následující xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (90xxxxx); x xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx xxxxxxxx do této xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx x x xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx poruchách xx xxxxxxx xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Výjimečně xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, které by xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířete vadily.
1.2.3.2 Xxxxxxx hmotnost x xxxxxx potravy a xxxx
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxx xxxxxxx jednou xxxxx, xxxx v xxxxxxx aplikace v xxxxx xxxx.
1.2.3.3 Hematologie
Xxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx x změření xxxxxxxxxxx xxxx.
Krev xx xxxxxxx xxxxx xxxx nebo x xxxxxxx xxxxxxxx zvířete, xxxxx, odkud xx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx za vhodných xxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx analýza
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxických účinků xx xxxxx, xxxxxxx xx játra x xxxxxxx, se xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx před xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxx xxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx přes xxx xxxxxxx xxxx1). Vyšetření xxxxxx x séra xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, glukózy, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, močoviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx buňky (xxxx alaninaminotransferáza, aspartátaminotransferáza, xxxxxxxxx fosfatáza, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, sorbitoldehydrogenáza). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx v některých xxxxxxxxx poskytnout xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx definovaný xxxx x xxxxxxxxx xxxx během xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx: hodnotit xx xxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xX, xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxx xxxx. xxxxxxx.
Xxxx je xxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx poškození xxxxx x xxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx, fosforu, xxxxxxxxxxxx xx lačno, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx vyšetření xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxx látek nebo xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx pružně, brát x úvahu použitý xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx látky.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx hodnotách xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx stanovení xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1) Vyšetření xx xxxxx xx xxxxxxx xxx řadu xxxxxx x xxxx x xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxx. Hlavní xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xx to, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxx interpretaci. Xx xxxxx straně, xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxx mít vliv xx celkový metabolismus x u aplikace x potravě by xxxxxxx xx pravidelnosti xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx na xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provést až xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 4. xxxxx testu.
1.2.3.5 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, zahrnující xxxxxxx xxxxxxxxx vnějšího xxxxxxx xxxx, všech otvorů, xxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxx, a xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx, slezina, xxxxx a xxxxx xxxxx zvířat se xxxxx xxxxxx od xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx předešlo xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx (reprezentativní xxxxxxx xxxxxx hemisfér, xxxxxxx x xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxx i xxxxxx xxxxxx (včetně Xxxxxxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, slezinu, xxxxx, brzlík, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxx (xxxxxxxxxxxx naplněním xxxxxxxx roztokem a xxx xxxxxxxxx), xxxxxx x xxxxxxxx pohlavní xxxxxx (xxxx. xxxxxx, xxxxxxxx), močový xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx xxx oblast xxxxxxxx a jedna xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx), periferní xxxx (x. ischiadicus xxxx x. xxxxxxxx), xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxx kostní xxxxx (nebo xxxxxxx xxxxx z xxxxxx xxxxxx xxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxx nebo jiných xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxx xx mohl xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx testované xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.6 Histopatologické xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x tkání. Pokud xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx nutno xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx i u xxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkami.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx léze xx xxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx byly do xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
K dispozici xxxx xxx údaje x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxxxxx skupiny počet xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx nebo utracených x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, popis toxických xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, trvání x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxxx formě xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x uznávanou statistickou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx metodu xx xxxxx xxxxxx xxx xxx plánování xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx obsahuje xxxx informace, xxxxx xxxxx být získány:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx zvířat;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx začátku xxxxx, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxx testu.
Podmínky xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx jiné než xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxx testované látky xxx aplikaci, xxxxxxxx x přípravě xxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a homogenitě xxxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- přepočet z xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxx vodě (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xx na kg xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xxx o xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx);
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x kvalitě xxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxx a xxxx změny;
- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxx;
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx příznaků xxxxxxxx;
- povaha, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, příp. xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx, úchopové síly x xxxxxxxxx aktivity;
- výsledky xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s příslušnými xxxxxxx;
- výsledky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxx, pokud xxxx získány;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Závěry:
4. XXXXXXXXXX
Tato xxxxxx xx analogická xxxxxx XXXX XX 407.
B.8. XXXXXX XXXXXXXX INHALAČNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx látce: xxxxxxxxx velikosti částic, xxxxx xxx, xxx xxxx, bod varu, xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx jedné koncentraci, x xx xx 28 dní. Použije-li xx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Během xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx denně pozorují x xxxxxxxx xx xxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, která přežijí xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx v xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Existují-li vhodná xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx využít.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx důvody proti xxxx. Xxxxxxx se xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť).
1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a nesmí xxx březí. Pokud xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, je nutno xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx před koncem xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx exponovat xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 zvířat (5 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx x během xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví).
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx x různou úrovní xxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx skupina, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx - xxxxx xx užije - x koncentraci xxxxxx xxxx u xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx se se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxx xxx x malém počtu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x člověka, má xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx toxický xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx než 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxxxx x xxxxxx x střední xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxx expozice
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxx 6 xxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx x jiných xxx expozice.
1.3.2.5 Expoziční xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xx zvířaty se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu x xxxxxxx nejméně 12krát xx hodinu, xxx xxx xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx rozdělení látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx, xx třeba xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xx nejvíce shlukování xxxxxx x aby xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxx přesáhnout 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx dva xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx příjem xxxxx jinými xxxxxxx.
1.3.2.6 Xxxx pozorování
Pokusná xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx období expozice x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx objeví x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce denně, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx dobu 28 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx skupinách, která xxxx určena x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx během xxxxxxxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx vlhkost xx xxx xxxx 30 % a 70 %, x xxxxxxxx případů, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. experimenty x xxxxxxxx). Udržování xxxxx xxxxxxxxxxx tlaku xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx do okolí. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx ani xxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx inhalační systém x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx předběžný xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rychlost xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx boxu xxxx stejné. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx co xxxxxxxxxxx.
Měření nebo xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:
x) Xxxxxx průtoku xxxxxxx (kontinuálně).
b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x dýchací xxxx. Xxxxx jedné expozice xx xxxx koncentrace xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x více xxx ± 15 %. X některých xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx úrovně xxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxxx, se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx celou dobu xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx tak xxxxxxxx, xxx je xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx x aerosolů, xxxx xx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx xx pozorování provádějí x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx protokol. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Pozorování xxxxxxxx změny kůže, xxxxx, očí, sliznic, xxxxxxx a krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx prohlížení xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx studie se xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx či xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx vyřadit, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
Xx konci xxxxxx xx u xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
1. Hematologické xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: x posouzení xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx alespoň xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x séru (xxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx glutamátoxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.
Xxxx xxxxx charakteristiky, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx lačno, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xxxxxxx použity xxx studium xxxxxxx xxxxxxx účinků.
1.3.3.1 Xxxxx
X všech xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xx provede xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, plíce x xxxxxxx xx co xxxxxxxx po xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Orgány x xxxxx (dýchací xxxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, i xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx velikosti) xx xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx s xxxxxxx na pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx koncentrace, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické vyšetření xxxxxxxxxx orgánů x xxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxx x xxxxxxx ve skupině x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x všech xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. X zvířat xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zvláštním xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx otravy u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.
2. XXXXX
Údaje se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx poškození.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, krmení xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx v boxu, xxxxx je xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxx teploty, xxxxxxxx xxxxxxx, popřípadě stability xxxxxxxxxxx a distribuce xxxxxxxxx částic xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx variability (např. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx: x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxxxxx a vlhkost xxxxxxx; c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky přiváděné xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx objemem xxxxxxx); x) povaha xxxxxxxx, xxxxx xxxx užito; x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx; x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) x xxxxxxxxxxx směrodatná xxxxxxxx (XXX),
- xxxxx o toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x přežití xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxx,
- xxxxxx xxx účinku,
- xxxx, kdy byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- biochemická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - DERMÁLNÍ (28XXXXX OPAKOVANÁ XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxx xxxxx xx 28 xxx v odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, a xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx období podávání xx zvířata xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx pokusu se xxxxxxx xxxx xx xxxxxx pokusných zvířat. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx možné, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx cca 24 xxxxx xxxx experimentem. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx nanášení xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxx x xxxxx hmotnost xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x velikosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx kůže x x xxxxxxxxx krycího xxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxx formy, xx xxxxx danou látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx vehikulem, xxx byl xxxxxxx xxxxx kontakt x xxxx. Testované kapaliny xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx denně 5 xx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xx xxxxx používat xxxxxxx potkany, králíky xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx použít x xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx být xxxxxxxxxx. Xx začátku xxxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % střední xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx dávek xxxxxx xxxxxxx 10 zvířat (5 xxxxx a 5 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx další xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 28 xxx xxxxxxxx dávku x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vratnost, xxxxxx nebo zpožděný xxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tři xxxxxx xxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx xxxx - xxxxx xx použilo vehikula - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx expozice xx xxx nejméně 6 xxxxx denně. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx každý xxx xx xxxxxxx dobu. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky xx xxxxxx k tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx aplikace testované xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokusným xxxxxxxx, x to ve xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx skupině x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx jen x malém počtu. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 úrovně xxxxx, xxxx být vmezeřené xxxxx xxxxxx tak, xxx vyvolaly odstupňované xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x v kontrolní xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
Xxxx-xx aplikace xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx u xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Došlo-li x těžkému xxxxxxxxx xxxx, je xxxxxxx xx xxxxxxxx okolností xxxxx pokus xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx aplikace xxxxx 1000 xx.xx-1 nebo xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx možné expozici xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx zvířata xx třeba xxxxx xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx dobu uhynutí x dobu, kdy xx xxxxxx x xxxxxxxx opět xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx látce xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 dnů. Xxxxxxx satelitní xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxx xxx xxxxxxxx pozorování, xx třeba xxxxxx xx dalších 14 xxx xxx expozice, xxx se xxxxx xxxxxxxxx reparace xxxxxxxxx xxxxxx xxxx jejich xxxxxxxxxxx. Xxxx expozice xxxx xxxxxxx 6 xxxxx denně.
Xxxxxxxxxx xxxxx je třeba xxxxxxx rovnoměrně na xxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxxxx xxx 10 % xxxxxxx xxxx; x xxxxxx toxických xxxxx xxxx xxx xxxx plocha xxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx co xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx vrstvě.
Testovaná xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx s xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx překrýt, xxx xx mulový xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxx požití xxxxx xx možno xxxxxx x xxxxxxxxxx pro xxxxxxx volnosti xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Jako xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx "ochranného xxxxx".
Xx uplynutí xxxx expozice xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx jiného xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx denně pozorovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx včetně xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, kůže, xxx x xxxxxxx x také xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenávají xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx potravy. Je xxxxx zajistit pravidelné xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxx možno nedocházelo xx ztrátám xxxxxx, xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx stresu xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, humánně xxxxxxx x xxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx se x xxxxx zvířat xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
1. Xxxxxxxxxxxxx vyšetření má xxxxxxxxx alespoň stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Biochemická xxxxxxx xxxx: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jeden x xxxxxx xxxxxxxxx: alaninaminotransferáza x xxxx (xxxxx xxxxx xxxx glutamátpyruvát-transamináza), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, albumin, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné pro xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: vápníku, xxxxxxx, xxxxxxxx, sodíku, xxxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx, lipidů, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy.
Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxx x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx xxxxx zváží xx xxxxxx stavu, xxx se předešlo xxxxxxxxx. Xxxxxx a xxxxx, např. xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx lézemi xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů x xxxxx. Pokud xx x xxxxxxxx x xxxxxxx ve xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx těchto xxxxx x x xxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx. X zvířat xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, ve xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- údaje x zvířatech (xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),
- experimentální xxxxxxxx (xxxxxx druhu xxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx použije) x koncentrace,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx sledovaní,
- xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- spotřeba xxxxxxx x vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je to xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.10. XXXXXXXXXX - TEST XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXX XX VITRO
1. XXXXXX
Metoda xx xxxxxxxxx OECD XX 473, Xx Xxxxx Mammalian Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx analýzy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx v xxxxxxxxx savčích xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, dochází xxxx xxx k aberacím xxxxxxxxxxxxxx typu. Vznik xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx aberací x xxxxx se x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Chromozómové xxxxxx x xxxxxxxx jevy xxxx xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx toho, xx xxxxxxxxxxxx mutace x příbuzné jevy, xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx genech xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx vzniku xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Tento xxxx se používá x xxxxxxxx možných xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx testu xxxxxxxxx, je xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx dostatečná xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x karcinogenitou. Xxxx korelace xxxxxx xx xxxxx látky x xxxxxxxx xxxxx xxxx dokladů x xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx látky, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx testem xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx působí xxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx poškozením DNA.
X analýze xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx buněčné xxxxxxx. Použité buňky xxxx xxxxxxx na xxxxxxx schopnosti růstu x kultuře, stability xxxxxxxxx, xxxxx chromozómů, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx spontánních xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx in xxxxx vyžadují xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Tento xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedokáže xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxx. Je třeba xx vyvarovat podmínek, xxxxx xx mohly xxxx x pozitivním xxxxxxxx, jež neodrážejí xxxxxxx xxxxxxxxxx, nýbrž xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (4) (5).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx chromatid, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx mezi chromatidami.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx jako xxxx x opětovné spojení xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (zahrnuty xxxx aberace typu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx).
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx lze xxxxxxxx porušení xxxxxxxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx vzniklá xxxxxx xx struktuře xxxxxxxxxx xx xxxxx, než xx šířka poškozené xxxxxxxxxx. Xxxx pak x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment v xxxxx zlomu je xxxxxxxxxxx (xxxx mimo xxx xxxxxxxxxx), případně xxxxx xxxxxxxxxx hodnoceného xxxxxxxxxx je xxxxxx x důsledku delece.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, xxx xx X-xxxx replikace XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, .. chromatidami.
Xxx: xxxxxxxxxxxx léze xxxxx než xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Mitotický xxxxx: xxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxx celkovým xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx populace.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx buňky.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx xxxxxxxxx počet (xxxx 3x, 4x xxx.).
Strukturální aberace: xxxxx chromozómové struktury xxxxxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx, x to x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx ní. Ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx buněčné kultury xxxxxxxxx xxxxx, se xxxxxxxx zastaví xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx mikroskopicky xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx celou řadu xxxxxxxxx xxxxx, kmenů xxxx primárních buněčných xxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx fibroblasty xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx periferní krve xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, teplota x xxxxxxx). X xxxxxxxxx linií a xxxxx je xxxxx xxxxxx způsobem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx buněčného xxxxx a kultivační xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx: xxxxx se xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx vysetím xx xxxxxxxxxxxx média x xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx konfluentní xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 oC.
Xxxxxxxxx: xx xxxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxx xxx xxxx krev x vhodným xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx), nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx získané xx xxxxxxxx jedinců x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx i x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nejobvyklejší xx kofaktory xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce (S9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy xxxx xx Aroclor 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx směs xxxxxxxxxxxxx a ß-xxxxxxxxxxxx (10) (11) (12).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10 % x/x. Xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxx, xxxxxx typu je xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx použít mitochondriální xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx aktivace mohou xxx xxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx linií by xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (např. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x metabolismu xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx na buňky xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx mohou xx xxxxxxx přidávat přímo xxxx se xxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx čerstvé preparáty, xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx prokazují, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx.
1.5 XXXXXXXX XXXXX
1.6 XXXXXXXXXXXX
X zvoleného rozpouštědla xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a aktivitu X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx podpořeno xxxxxxxxxxx prokazujícími jeho xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx všem xxx, xxx je xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Je-li testovaná xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Voda xx xx odstranit xxxxxxxxxxxx sítem.
1.6.1 Koncentrace
Xxxx xxxxxxxx, jež xx xxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx koncentrace, xxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxx x systému x xxxxx xX resp. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxx stupně xxxxxxxxxx, xxxxx živých xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx maximální xx xxxxx xxxx xxxxxx toxicity. Xx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx jednotlivé xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx násobkem, xxxxx xxxx mezi xxxxxxxxx 2 x √10. X xxxx sklízení xxxxx xxxx být xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx signifikantní xxxxxx xxxxxxxxxxxxx růstu, počtu xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (vždy o xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx / cytostatických xxxxxx x je xxxxxxx na xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou. Xx xxxx akceptovatelný xxx xxxxxxxxx kultury, kde xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx byla xxxxxxx x nepraktická. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx také xxxxx o kinetice xxxxxxxxx xxxxxx, jako xx průměrný generační xxx; ten ovšem xxxxxxxxxxx xxxxxxx průměr, xxxxx ne vždy xxxxxx existenci v xxxxxx zpožděných subpopulací xxxxx. A xxx x malé xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx značný xxxxxx od xxxxxx xxxx sklízení x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výtěžku xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 µx/xx, 5 mg/ml xxxx 0,01 X.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx x koncentracích xxxxxxx, xxx xx koncentrace, xxx xxxxx xx xxx látka nerozpouští, xx být xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace vyšší, xxx xx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx médiu na xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx případech - xxxxxxxxx xxxxxxx-xx x xxxxxxxxx účinku xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - se xxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx srážením. Může xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx konci xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx může xxxxxxxxxxx změnit x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx, X9 apod. Xxxxxxxxxxxxx xx xx zjistit x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx překážku xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.6.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx ní, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx). Pokud se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx pozitivní xxxxxxxx xx používá známý xxxxxxxxx, x xx xxx xxxxxxxxxxx úrovních, xxx xx očekává, xx xxxxxxxx reprodukovatelný x xxxxxxxxxxxxx nárůst xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testovacího xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx tak, xxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx patří například:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx | XXX | EINECS |
Xx | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx ethyl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx C 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Xxx | xxxx[x]xxxxx cyklofosfamid monohydrát xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Xxx pozitivní xxxxxxxx se mohou xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Xxx, xxx xx to xxxxx, xx xxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx.
Xxx každý časový xxxxxxxx sklízení kultur xx xxxxx použít x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx které se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx, zpracované xxxxxxx xxxxxxxx xxxx experimentální xxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3 Xxxxxx
1.6.3.1 Expozice xxxxxxxxxx xxxxxx
Na proliferující xxxxx se působí xxxxxxxxxx látkou xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx působit xxx 48 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx; a xxxxx xx doporučuje xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx. Pokud xxx xx základě historických xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (13) (14), xx xxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx.
X případě xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x testu xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx použití neprodyšně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (15).
1.6.3.2 Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxx aktivací x xxx ní xx xxxx 3 - 6 xxxxx a xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5násobku xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu xx xxxxxxx xxxxxxxx (12). Xxxxx xxxx xxx použití xxxxxxxxxxx xxxxxxx x bez xxxx xxxxxxxx negativní, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx kultivace xxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx delší, xxx xx 1,5násobek xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Negativní xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, je třeba xxxx rozhodnutí xxxxxxxxx.
1.6.3.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx Colcemidem® xxxx xxxxxxxxxxx obvykle xx xxxx 1 - 2 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx kultura xx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Všechny preparáty, xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, se xxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jelikož xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x rozbití xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx, musí být x všech typů xxxxx xxxxx centromer x xxxxxxxxxxx buňkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxx ± 2. Pro xxxxxx koncentraci a xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx rozprostřených metafází, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx. X případě, xx je xxxxx xxxxxxx vysoký, může xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X xxxx xxxxxx xxxxx xx zjistit strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx buňka, xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx strukturálních xxxxxxx včetně xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx zvlášť, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx aberací xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx je xxxxx v testu xxxxxxxxxxxx také xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx tabulce.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx testováním, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výsledky bylo xxxxxxxxx x odst. 1.4.3.3. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx použitých xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx podmínek. X xxxxxxxxxx, které xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx závislá xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (3) (13). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx počtu polyploidních xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx počtu xxxxx s xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx cyklu (17) (18).
Xxxxxxxxx xxxxx, při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vykazuje jasně xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx získaná xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx posouzení xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx experimentů. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx chromozómové aberace xx vitro ukazují, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx somatických buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testovaná xxxxx x kultuře xxxxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
ZPRÁVA X PRŮBĚHU XXXXXX
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Buňky:
- xxx x zdroj xxxxx,
- xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx buněk,
- xxxxxxx mykoplasmat, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx x délce xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx krve, xxx byla xxxxxxx xxxx krev nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx buněk, xx-xx xx xxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx to xxxxx
- modální xxxxx xxxxxxxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- název xxxxx blokující xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx působení xx xxxxx
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, je-li to xxxxx
- koncentrace xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx
- xxx x složení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx podložních xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aberací,
- xxxxx analyzovaných xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx toxicity,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxxx konfluence, údaje x xxxxxxxx xxxxx, x počtu xxxxx, xxxxxxxxx index,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xX x osmolalitě kultivačního xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx experimentální x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- případné xxxxx ploidie,
xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud byly xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a pozitivních xxxxxxx, včetně rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.11. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXX XXXXX XXXXX IN XXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX TG 475, Xxxxxxxxx Bone Xxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx chromozómových xxxxxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx x buňkách xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxxx xxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxx polyploidie xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx látka je xxxxxxx vyvolávat xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx chromatidové, ovšem x xxxxxxxx chromozómového xxxx dochází xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx xxxx jsou xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x člověka x xxxxxxxx přesvědčivé xxxxxxx xxxx, že xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx x tumorsupresorových xxxxxx, hrají úlohu xxx xxxxxxxx x xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxx systémech.
X xxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxxx hlodavci. Xxxxxxx xxxxx x xxx xx xxxxxx xxxx, xxxxxxx se xxxxx o tkáň xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, obsahující xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx buněk, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx druhy x cílové xxxxx xx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx je zvláště xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx faktory xxxxxxxxxxx xx xxxx, farmakokinetiky x xxxxxxx reparace XXX, x xxxx xxx mohou být xxxx živočišnými xxxxx x xxxx tkáněmi xxxxxxx. Test in xxxx je xxxx xxxxxx pro další xxxxxxx mutagenního efektu, xxxxx xxx předtím xxxxxxx testem xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, že xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxx reaktivní xxxxxxxxx xx cílové xxxxx nedostane, xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: strukturální xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, nebo xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx mezi chromatidami.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx jako xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (zahrnuty xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx chromozóm, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx chromatidy: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx za předpokladu, xx vzniklá mezera xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx šířka poškozené xxxxxxxxxx. Dále pak x xxxxxxxxx, koncový (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx chromatidy), případně xxxxx chromatida hodnoceného xxxxxxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, xxx xx X-xxxx replikace XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx mitózy, xxxxx xxxxxx další S-fáze. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... chromatidami.
Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx šířka xxxxx xxxxxxxxxx x x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx buněk x xxxxxxxx dělený xxxxxxxx xxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Numerická xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxxxxxxxx xxxxx (tedy 3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: změna xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zjistitelná xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx stadiu xxxxxxxx, xxxxxxxxxx jako xxxxxx a fragmenty x výměny.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx vhodnou xxxx xx působení se xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xx xx xxxxxx xxxxxx zastavující xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). X xxxxx kostní xxxxx xx pak xxxxxxxx xxxxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxx buňkách xx xxxxxxxxxxxxx zjišťují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx
Běžně xx xxxxxxxxx potkani, xxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx savčí xxxx. Xxxxxxxxx se běžné xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx minimální x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx podmínky chovu xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx úvodu x xxxxx B, xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Xxxxx je třeba xxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx toho, xxx x kde jsou xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx pěti xxx xx zvířata xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx dávek
Xx-xx testovaná látka x pevném xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu x případně xx xxxxx. Kapalné testované xxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx podáváním xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx čerstvé xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / vehikulum
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum v xxxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx chemicky xxxxxxxx. Používá-li xx xx příliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x testovanou látkou. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Do xxxxxxx testu xx xxxxx pro každé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx zacházet xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx stejně.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx měly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx vivo při xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Dávky xxx xxxxxxxxx kontrole xx xxxx xxx, aby xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zakódovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx kontrolu xx možné xxxxxxx xxxxxxxx způsobem než xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx nitrosomočovina | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberací x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx vzorků, xx nejvhodnější xxxxx xxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx historické nebo xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx vehikulum nevyvolává xxxxx nepříznivé xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x pohlaví xxxxxx
V xxxxx xxxxxxxxxxxxxx a kontrolní xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx každého pohlaví. Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx údaje x stejném xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx způsobů expozice xxxxxxxxxxx, že mezi xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x toxicitě xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Tam, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxx látkám může xxx závislá xx xxxxxxx, jak xx xxxx například u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx xx test xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx jednorázově. Xxxxx se xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx nanejvýše xxxxxxxx xxxxx. Xxxx režimy xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx odůvodněné.
Vzorky xx xxxxxxxxx xx xxxx různých xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx. U xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu (která xxxx xxxxxxx 12 - 18 xxxxx) xx podání xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx absorpci x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x její xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ovlivnit xxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxx chromozómových xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx vzorků xx 24 xxxxxxxx xx xxxxxxx odběru. Xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx než xxxxxx za xxx, xx xxxxx provést xxxxx xxxxx vzorků 1,5xxxxxxxx délky xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx intraperitoneálně xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx x xxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorky. X myší je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3 - 5 xxxxx, u xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4 - 5 xxxxx. X kostní xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx se x nich xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, protože xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx údaje, xx xxxxx ji xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, xxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx se xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx (5). Při xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx interval xxxxxx xxxxxx xxx dávky xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxx. Xxx pozdější xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx nejvyšší xxxxx. Ta xx xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx takové xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, jež x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx vykazují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx hormony nebo xxxxxxxx, xxxxx představovat x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, jež se xxxxxxxxxxx individuálně případ xx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xxxx xxx xxxx definována xxxx xxxxx, která vede x xxxxxxx známkám xxxxxxxx x kostní xxxxx (xxxx. pokles xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx než 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx při xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx údajů x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nemusí xxx provedena xxxx xxxxxx za xxxxxxx xxx dávkových xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx limitní xxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xx xxx xxx xxxx trvání xx 14 dnů, x 1&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxx době trvání xxxxx než 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x limitním xxxxx xxxxx dávkové xxxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx žaludeční xxxxxx, xxxx intraperitoneální xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxx způsoby xxxxxxxx. Maximální objem xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x hmotnosti; xxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx normálně xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx účinky, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx objem xxx xx xxxxx dávkových xxxxxxxx stejný a xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx roztokem x xxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx buněk xx xxxxxx xx podložní xxxx a xxxxxx xx.
1.5.7 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx cytotoxicity xx x xxxxx zvířat xxxxxx pozitivních x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxxx xxxxxxxxx index xxx xxxxxxxxx 1000 xxxxx x každého xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx xx analyzuje xxxxxxxxx 100 buněk. Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx při vysokém xxxxx aberací. Všechny xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx dochází xxxxx x porušení xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx spojeného xx ztrátou xxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x hodnocených xxxxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Údaje xx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx v tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx jedinec. X xxxxxxx zvířete xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, počet xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x procento buněk xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx. U experimentálních x kontrolních xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx strukturálních xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx počet x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x registrují se, xxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Nejsou-li xxxxx doklady o xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx možné xxxxx xx xxx pohlaví xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xx xxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx skupině x jednorázovou dávkou xxx jednom xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Při vyhodnocování xxxxxxxx testu xx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Statistická xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Nárůst počtu xxxxxxxxxxxxx buněk může xxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nárůst xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx fáze xxxxxxxxx xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, se x xxxxx systému xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx poskytuje xxxxxxxxxxx pozitivní xxxx xxxxxxxxx výsledky, x xxxxxxxxxxx případech xxxx xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx nejednoznačné nebo xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx experiment xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx chromozómové xxxxxxx xx vivo xxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx dřeni příslušného xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx daných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testovaná xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx nevyvolává.
Xx třeba xxxx x úvahu, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx používána, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx živočišný xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxx a negativní (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x přípravě testované xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx metody x xxxxxxx, xx se xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx oběhu xxxx xx xxxxxx tkáně,
- případně převod xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx hmotnosti/den),
- xxxxxxxxxxx x kvalitě xxxxxxx a xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx vzorků,
- xxxxxx hodnocení xxxxxxxx,
- látka xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických preparátů,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk xx jedno xxxxx,
- kritéria, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx toxicity,
- xxxxxxxxx index,
- xxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- statistické xxxxxxx, byly-li xxxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx.
- údaje ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.12. MUTAGENITA - XX VIVO XXXXXXXXXXXX XXXX X XXXXXXX ERYTROCYTECH
1. METODA
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 474, Mammalian Xxxxxxxxxxx Micronucleus Test (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx x mitotickém xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; test xxxxxxx x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx resp. z xxxxxxxxx xxxx zvířat, xxxxxxx hlodavců.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx látky, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx mikrojader xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx polychromatický xxxxxxxxx, xxxxx je x xxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxx testu xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xx se polychromní xxxxxxxxxx v xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (polychromních) xxxxxxxxxx x mikrojádry x xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx bylo prokázáno, xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx je tento xxxxxxxxx druh dostatečně xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx kritérií, xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx zralých (xxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx obsahujících xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxx mikronukleus xxxx u xxxxx xx xxxxxxx vhodný x hodnocení rizika xxxxxxxxxx, xxxxxxx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, farmakokinetiky x procesů xxxxxxxx XXX, x xxxx xxx xxxxx xxx xxxx živočišnými xxxxx, xxxx tkáněmi x xxxx konečným efektem xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx také xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx efektu, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx v systému xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx o xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx její xxxxxxxxx metabolit do xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx tohoto xxxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxx dělení xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx umožňující organizovaný xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx): xxxx jádra xxxxxxxx xx jádra buňky (xxxxxxx) vytvářená xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxx reprezentovaná opožďujícími xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx chromozómy.
Xxxxxxxxxxxx erytrocyt: xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx chybějí xxxxxxxx a jenž xx xx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx erytrocyt: xxxxxxx xxxxxxxxx, vývojové xxxxxxx, xxx xxxx dosud xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxx odlišit xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Zvířata xxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx ve xxxxxxx xxxx xx působení xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx (1-7). Xxxxx xx používá xxxxxxxxx xxxx, odebere xx xx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxx, jež xx xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx používá xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxx co xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx živočišného druhu
Xxxxx se používá xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx pokusná xxxxxxx myši nebo xxxxxxx; xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxx savčí druh. Xxxxxxx-xx xx periferní xxxx, xxxxxxxxxx se xxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx druh xx xxxxxxxxxxx, xx se x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx xxxx xx x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, jež xxxxxxxxx strukturální nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jedinců. Hmotnostní xxxxxxx by při xxxxxxxx studie měly xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx úvodu x xxxxx B.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat
Zdraví xxxxx dospělí xxxxxxx xx náhodně rozdělí xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx toho, xxx x xxx xxxx xxxxx umístěny.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx x xx-xx xx xxxxx, látka xx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx testované látky xx xxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xx xxxx podáváním xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx o xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx ji xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx x nesmí x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx nepříliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí být xxxx použití xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx je to xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx rozpouštědlo / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Do xxxxxxx testu xx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx zacházet xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx stejně.
U xxxxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx in xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvýšení xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx účinky xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx preparátu. Pozitivní xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx způsobem xxx testovanou látku x xxxxxx odebírat x jednom xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx testovaná xxxxx. Xxxxxxxx látek xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu:
Xxxxx | CAS | XXXXXX |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
X-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
mitomycin X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Negativní xxxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx skupiny xxxx xx být xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Aplikuje-li xx x negativních xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx první xxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i neovlivněných xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx odebraný xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx pouze x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 1 - 3 xxxxx), xxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx a xxxxxxx xxxxxx
X každé xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pohlaví (11). Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x stejném xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx stejných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxx oběma xxxxxxxxx xxxxxx x toxicitě xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx pohlaví postačující. Xxx, kde xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxx například x xxxxxxxxx farmaceutických xxxxxxxxx, xxxxxxx xx test xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx rozvrh (xxxx. jedna, dvě xxxx xxxx xxxxx x 24xxxxxxxxxx intervalech). Xxx xxxxxx delší xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; v xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku tak xxxxxx, xx se xxxxxxx toxicita, xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx až xx xxxx odběru xxxxxx. Xxxxx xx jedná x xxxxxxxx dávku xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx den podané x rozmezí nanejvýše xxxxxxxx xxxxx.
Test xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
(a) Xx zvířata xx xxxxxxxxxx látkou xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, poprvé xx xxxxx než xx 24 xxxxxxxx x xxxxxxx ne xxxxxxx xxx po 48 xxxxxxxx od xxxxxx látky, s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Pokud xx xxxxxx odeberou xxxxx xxx po 24 hodinách, xxxx xxx odůvodněné. Vzorky xxxxxxxxx krve se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxx xx 36 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, xx vhodnými xxxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxx déle xxx 72 xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx odpověď, xxxx již xxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(b) Xxxxx xx látka xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx za den (xxxx. xxx xxxx xxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx dřeně xxxxxx xxxx 18 x 24 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx mezi 36 x 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (12).
Je-li xx xxxxxxxxxx, mohou xx xxxxxx použít x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx studie ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxx, je třeba xx xxxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx stejného xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x pokusného režimu, xxxx se xxxxxxx x xxxxxx studii (13). Xxx zjištění xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx první xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx tak, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx nulové. Pro xxxxxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx dávku. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx dávka vyvolávající xxxxxx xxxxxx toxicity, xx při vyšších xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx letální. Xxxxx, jež x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx x vyhodnocují xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx může xxx také definována xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (např. xxxxxx xxxxxx nezralých xxxxxxxxxx x celkového xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx test xxx dávce xxxxxxxxx 2000 xx/xx hmotnosti x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx nevyvolává xxxxx pozorovatelné toxické xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx genotoxicita, xxxxxx xxx provedena xxxx xxxxxx xx xxxxxxx tří xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx dlouhodobé xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx xx xxx xxx době xxxxxx xx 14 dnů, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx než 14 dnů. Podle xxxxxxxxx humánní expozice xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxx dávkové úrovně xxxxx.
1.5.5 Aplikace xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx přijatelné x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx dá xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, závisí xx xxxxxxxxx pokusného xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; vyšší xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx žíravých xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx dávkových xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx / xxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx tibie xxxxxxxx xx xxxxxxxx zvířete. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx dřeň xxxxx x femuru xxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx žíly xxxx xxxx vhodné xxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (8) (9) (10), xxxx xx zhotoví xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx XXX (xxxx. akridinové xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 s xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx vznikajících xxx použití xxxxxxx, xxxxx není DNA xxxxxxxxxx. Tato výhoda xxxxxxxxx, xx xx xx nedala xxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxx. Xxxxxx). Xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx x odstranění xxxxx x xxxxxx (16) - xxxxx xxxx xxxxxx jsou x xxxxxxxxxx xxxxxxx používány xxx analýzu xxxxxxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
U každého xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). X xxxxxx xxxxx xx počítá x případě xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx 1000 xxxxxxxxxx (17). Všechny xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol) xx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx jedince xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 2000 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx získat tak, xx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx analýze xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx nezralých erytrocytů x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 20 % hodnoty x kontrole. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx po dobu xxxx xxxxx nebo xxxxx, xxx také xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy (xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx - xxxx xxxxxxxxx), xxxxx xxxx zdůvodněny a xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Údaje z xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx nezralých erytrocytů x mikrojádry x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx erytrocytů. Xxxxx xxx test xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx čtyř týdnů xxxx xxxx, je xxxxx xxxxx také xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxxx). Podíl xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového xxxxx erytrocytů x xxxxxxxx xxxxxxxx erytrocytů x mikrojádry xx xxxxx pro každého xxxxxxx. Nejsou-li žádné xxxxxxx o xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx rozdílně, je xxxxx xxxxx za xxx pohlaví xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx na koncentraci xxxxxxxxx xxxxx závislý xxxxxx počtu buněk x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx x mikrojádry xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxxx xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické metody (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxx testováním, nejlépe xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx kritéria, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za nemutagenní.
Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx případech xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx dát xxxxxxx x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky mohou xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx experiment xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx mikronukleus xxxxx xxxxxxx, xx látka xxxxxxxx tvorbu xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx chromozómového xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx dřeni příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Je xxxxx xxxxxxxx, xxxx xx pravděpodobnost, xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx specifickou xxxxxxx xxxx zasáhne (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx známa.
Pokusná xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxx určení xxxxxxx, byla-li provedena,
- zdůvodnění volby xxxxxxxxx dávky,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx cesty xxxxxxxx,
- případné xxxxxx x xxxxxxx, xx xx látka xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x potravině/pitné vodě (xxx) xx faktickou xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,
- podrobný xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a odběru xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx,
- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- kritéria, xxxxx xx studie xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx pro každého xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx odchylka nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx každou skupinu,
- vztah xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy x metody,
- xxxxx xx souběžných x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xx souběžných xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.13/14. MUTAGENITA - XXXX REVERZNÍCH XXXXXX X BAKTERIÍ
1. METODA
Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX TG 471, Xxxxxxxxx Reverse Xxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxx xxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx mutací kmeny Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx histidin) x xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx detekovat genové xxxxxx vzniklé mechanismem xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx bakteriálních xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x tom, xx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx přítomné v xxxxxxxxxx kmenu xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx aminokyselinu. Xxxxx změněná xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx růst za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, kterou xxxxxxxx mateřský xxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx doklady xxxx, xx xxxxxx mutace x onkogenech x xxxxxxxx supresorových genech xxxxxxxxxxx buněk hrají x člověka a xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxxxx kmenů se xxxxxxxxx charakteristikami, xxxx xxxx jsou xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX v místech xxxxxxx, zvýšené propustnosti xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx reparace XXX, xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kmenů umožňuje xxxxxx některé xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx jsou xxxxxxxx genotoxickými xxxxxxx. Xxx bakteriální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx x dispozici xxxxx xxxxxxxx databáze xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x byly xxxxxxxxxxx osvědčené metody xxx xxxxxxxxx chemikálií x xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx mutací x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx. tryptofanu), jež xxxxx ke xxxxxx xxxxx, xxxxx je xx dodávce xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Mutageny xxxxxxxxxxxx substituci páru xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx změnu xxxx x DNA. Xxx xxxxxxxxx xxxxx může x xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx nebo xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Frameshift xxxxxxxx (xxxxxxxx vyvolávající xxxxxxxx mutace) xxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxx v XXX, xxxx se xxxx xxxxx rámec x RNA.
1.3 VÝCHOZÍ XXXXX
V bakteriálním xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx liší x xxxxxx xxxxx metabolismu, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx XXX. Xxxxx in xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx ovšem xxxxxxxx dokonale xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx in xxxx, takže xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx informace x mutagenní x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Pomocí xxxxxxxx xxxxxxxx xx prokázalo, xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxx tohoto xxxxxxxxxx xxxx xxx specifická xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xx druhé straně xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, mohou xxxx k xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx test xxxxxxxxxx xxxxxx může xxx nevhodný xxx xxxxxx třídy chemických xxxxx, jakými jsou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxx, o xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xx, xx specificky xxxxxxxx replikační xxxxxx xxxxxxx xxxxx (například xxxxxxx xxxxxxxxxx topoizomerázy xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx); x xxxxxxx xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxx testy na xxxxxx x xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx, jež xxxx při xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx absolutní; závisí xx chemické xxxxx, x xxxxxxxx karcinogeny, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx nejsou, protože xxxxxx xxxxx, negenotoxickým xxxxxxxxxxx xxxx mechanismem, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx vystaví xxxxxxxx testované xxxxx xx přítomnosti x xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx klasické xxxxxxx xxxxxx "xxxxx incorporation" xx suspenze xxxxx x vrchním xxxxxx x xxxxxx xx xxxxx x minimální xxxxxx xxxxx. Při xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xx potom xx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Při xxxx metodách xx xxx xx xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx spočítají x xxxxxxxx xx xxxxxxx x počtem xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xx kontrolních xxxxxxx x rozpouštědlem.
Xx xxxxxxx xxxxxxx postupů xxx provedení xxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ["plate xxxxxxxxxxxxx"] (1) (2) (3) (4), xxxxxxxxxxxx metoda (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx metoda (9) (10) x xxxxxxxxx xxxxxx (11). Xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx (12).
Xxxxxxx popsané x xxxxx metody xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Některé xxxxx xx detekují xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx se o xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x krátkým xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3). Také xxxx xxxxxxxx, že existují xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Na xx je xxxxx xxxxxxxx jako xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", x xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx případy" (xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx x diazosloučeniny (3) (5) (6) (13), xxxxx x těkavé xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx xx standardního xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5. POPIS METODY
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx exponenciálního xxxx xxxxxxxxxxx stacionárního xxxxxx xxxxx (zhruba 109 xxxxx/xx). Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx nepoužívají. Důležité xx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xx prokázat xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx růstových xxxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx stanovením xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 37xX.
Použije se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxxxx xxxxx kmeny X. xxxxxxxxxxx (TA 1535; XX 1537 xxxx XX97x xxxx 1X97; XX98; x XX100); x nichž xxxx prokázána xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx kmeny X. typhimurium xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx místě xxxx bází XX x xx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx oxidační mutageny, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x hydraziny. Xxxx látky xx xxxx detekovat xxxxxx xxxxx X. xxxx XX2 xxxx X. xxxxxxxxxxx XX102 (19), xxxxx xxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx XX. Xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx tato:
- S. typhimurium XX1535 x
- X. xxxxxxxxxxx TA1537 xxxx TA97 xxxx XX97x a
- X. typhimurium TA98 x
- X. xxxxxxxxxxx XX100 x
- X. xxxx XX2 xxxX xxxx X. xxxx XX2 xxxX (pKM101) xxxx X. xxxxxxxxxxx XX102.
X detekci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx XX102 xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx X. xxxx (např. E. xxxx XX2 xxxx X. xxxx XX2 (xXX101)).
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zásobní xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxx preparát zásobní xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx (xxxxxxxx x xxxxxxx kmenů X. xxxxxxxxxxx, tryptofan v xxxxxxx kmenů X. xxxx). Podobně je xxxxx zkontrolovat x xxxxx fenotypické xxxxxxxxxxxxxxx, x xx: xxxxxxxxxx xx nepřítomnost X-xxxxxx xxxxxxxx tam, kde xx xxxxxxxx x xxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxx ampicilinu x xxxxx XX98, TA100 x TA97a nebo XX97, XX2 uvrA (xXX101) a xxxxxxxxxx xxxx ampicilinu + xxxxxxxxxxxx x kmene XX 102); xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx mutací (tj. xxx xxxxxx u X. xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x uvrA xxxxxx u X. xxxx xxxx uvrB xxxxxx u S. xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx záření) (2) (3). Použité xxxxx mají xxx xxxxx spontánně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx dat xxxx laboratoře x xxxxx xxxxx x x xxxxxxx uvedeném x literatuře.
1.5.1.2 Médium
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx agar (xxxx. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx minimálním xxxxxx X a xxxxxxxx) x vrchní xxxx obsahující histidin x xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx několik xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).
1.5.1.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace. Nejčastěji xx používá kofaktorem xxxxxxxxxxxxxx post-mitochondriální xxxxxx (X9) připravená z xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx látkami, xxxx xx Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx fenobarbitalu x ß-naftoflavonu (18) (20) (21). Xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 30 % x/x xx xxxxx X9. Xxxxx x podmínky xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X některých xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx post-mitochondriální xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metabolické xxxxxxxx (6) (13).
1.5.1.4 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx látky xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx přidávat xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx používat čerstvé xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxxxxxxx prokazují, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx je přijatelné.
1.5.2 Xxxxxxxx testu
1.5.2.1 Xxxxxxx xxxxx (xxx 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxx
Ke xxxxxxxxx, která xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x nerozpustnost x xxxxxxxxxx experimentu. Xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx snížením počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, vymizením xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx pozadí xxxx xxxxxx stupně přežití xxxxxxxxx kultur. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx může xxxxxxxxxxxx změnit. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx za xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, viditelného x pouhým okem.
Xxxxxxxxxx maximální xxxxxxx xxxxxxxxxxx je x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látek 5 xx/xxxxx resp. 5 µl/misku. U xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx x konečné xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx za xxxxxxxxxxx xxxxxxx než 5 mg/misku resp. 5 µl/misku, xx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx rušit při xxxxxxxxxxxxx.
Používá se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx koncentrací xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx intervalem (xx. √10) xxxx xxxxxxxxxxxx body v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Zkoumá-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx vhodný xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx koncentrací xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx xxxxxxxx x úvahu, xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx a pozitivní xxxxxxxx
Xxxxx test xxxx zahrnovat i xxxxxxxxx xxxxxxx specifickou xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulum) xxxxxxxx, jak s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
X xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx látka xxx xxxxxxxxx kontrolu volí xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Příklady xxxxx, jež jsou xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 |
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx vhodnou xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
Xxxxx xxxxxx | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-xxxxxxxxxxxxx xx nepoužívá xxxx xxxxxx indikátor xxxxxxxxx xxxxx X9. Xxxxx xx 2-aminoantracen použije, xx xxxxx xxxxxx xxxxx X9 xxxxxxxxxxxxxxx xxxx mutagenem, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx enzymy, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, dimethylbenzantracenenm.
Xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxx kmenově xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x testech xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx:
Látka | XXX | XXXXXX | |
Azid xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 x XX 100 |
2-nitrofluoren | 607-57-8 | 210-138-5 | XX 98 |
9-aminoakridin | 90-45-9 | 201-995-6 | TA 1537, XX 97 x XX 97a |
XXX 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, TA 97 a XX 97x |
xxxxx-xxxxxxxxxxxx | 80-15-9 | 201-254-7 | TA 102 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 | XX uvrA x XX 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (xXX101) |
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx | 56-57-5 | 200-281-1 | WP2, XX2xxxX x WP2uvrA (xXX101) |
Furylfuramid (AF2) | 3688-53-7 | xxxxx xxxxxxxxxx plazmidy |
X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx referenční xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx vztahem x chemické xxxxx.
Xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, bez xxxxxxxxx xxxxx, se xxxxxxx xx xxxxx zachází xxxxxx jako při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx použijí x negativní xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx existují xxxxxxxxxx xxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx mutagenní xxxxxx.
1.5.3 POSTUP
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx metodě (1) (2) (3) (4) xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx bakteriální xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x 0,5 ml xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx vrchního xxxxx. X xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx post-mitochondriální frakce (x rozmezí 5 - 30 % x/x v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) s 2,0 xx vrchního xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x testovanou xxxxxx /xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx zkumavky xx promísí x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Vrchní xxxx xx xxxxx před xxxxxxxx ztuhnout.
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxx roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxx 108 životaschopných xxxxx) a sterilním xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem (0,5 xx) obvykle xx xxxx 20 xxx xxxx xxxx xxx 30 - 37 xX; xxxxx se xxxxx x vrchním xxxxxx x xxxxxx xx misku x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxx látky / xxxxxxxxxxx roztoku 0,1 xx xxxxxxxx a 0,5 xx xxxxx X9 nebo sterilního xxxxx s 2,0 xx vrchního xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx provzdušňují xxxxxxxx.
Xxx adekvátní xxxxx xxxxxxx se xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxx. Duplicitní xxxxxxxx xx přijatelné, xx-xx xxxxxxx zdůvodněno. Xxxxx-xx náhodně xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx nutně xxxxxxxxxxx.
Plynné xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx nádobách (12) (14) (15) (16).
1.5.4 INKUBACE
Xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx teplotě 37 xX xxx xxxx 48 - 72 hodin, načež xx spočítají xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx každé xxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx jak x negativní xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, popřípadě xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxx), xxx z xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxx i xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolu (xxxx. xxx působení xxxxxxxxxxxx) xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx včetně xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx reakce xx nepožaduje. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných experimentálních xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx potvrdit xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx nutné, je xxxxx to zdůvodnit. X následných xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx působení ("xxxxx xxxxxxxxxxxxx" nebo xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx) x podmínky metabolické xxxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx při jedné xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x minimálně xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxx (23). Xxxx první se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx vyhodnocování výsledků xxxxx xx možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (24), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria xxxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však xxxxx xx xxxxxxxxx souboru xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, x xxxx xx xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx typu substitucí xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx resp. Xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, že xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxx:
- použité xxxxx,
- počet xxxxx x kultuře,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx misku (x xx xxxx μx) xx zdůvodněním xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx,
-xxx x xxxxxxx systému metabolické xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- postupy xxxxxxxx (zpracování).
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx srážení,
- xxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx rozpětí, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx odchylek.
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
X.15. XXXXXX XXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae mohou xxx xxxxx pro xxxxxx produkce genových xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx využívány xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx kmenů, xxxx xx míra vzniku xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx-1, xxx-2) na xxxxxxx, adenin xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx indukce xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Nejlépe ověřený xxxxxxxx xxxxxxx systém xxxxxxxx xxxxxxx haploidního xxxxx XV 185-14 X x xxxxxxxx (xxxxx) nonsense xxxxxxxx xxx 2-1, arg 4-17, lys 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx xxxx vratné xxxxxxxxx xxxxxxxx typu xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. XX185-14X xxxx xxxxxx xxx 1-7 marker, xxxxxxxx mutaci, revertovanou xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx místě x xxxxxx xxx 3-10, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxxx xxxxx S. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx využívaným xxxxxx X7, který je xxxxxxxxxxx pro ilv 1-92.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx být připraveny xxxxx xxxx testováním xx xxxxxxx vhodného xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx ve vodě xxxxxxxxxxxxx xx nemá xxxx xxxxxx vyšší xxx 2 xxxxxxxx % v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vehikula xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx životnost x xxxxxxxxxxxxxxx růstu.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx jak x přítomnosti, xxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx systémem xx postmitochondriální xxxxxx xxxxxxxxxx x jater xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x doplněná xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx druhů, xxxxx, postmitochondriálních frakcí xx postupů xxxx xxx rovněž xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Haploidní kmen XX 158-14X x xxxxxxxxx xxxx D7 xxxx xxxxxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx kmeny mohou xxx xxxxxx vhodné.
1.2.2.2 Xxxxx
Odpovídající kultivační xxxxx jsou užívána xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x rozpouštědlem xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx současně. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx odpovídající pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Má xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx použitá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx přežití xxx 5 - 10 %. Látky xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx po xxx rozpustnosti xxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx látky netoxické, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Misky xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxx 28 xx 30 xX xx xxx.
1.2.2.6 Frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Počet xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxx buňkami x x xxxxxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx jako xxx 3-10 x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx počet xxxxx zvýšen, xxx xxxx získány xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx kmenů X. cerevisiae xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx a zahrnuje xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx mají být xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx: 1-5 x 107 buněk/ml je xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 h. při 28 xx 30 xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x vyočkovány xx xxxxxx xxxxxxxxxx médium. Xx inkubaci xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx buňky x xxxxx x xxxxxxx genových xxxxxx.
Xxxxxxxx xx první xxxxx xxxxxxxxx, xx xxx proveden xxxxx xxxxx x xxxxxxx xx stacionární fázi. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozitivní, xx xxxxxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxx experimentem.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx kolonií, počet xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx výsledky xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx vyhodnoceny xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx kmenech,
- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx expozice, xxxxxx x trvání xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx kolonií, počtu xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx a xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx rekombinace x Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx (xxxxxxxx mezi xxxxx x jeho xxxxxxxxxxx) x xxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx xx nazýván xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a vytváří xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx případ xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxxxxx genová xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx testováno xx xxxxxxx xxxxxx recesivních xxxxxxxxxxxxx kolonií xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxxxxxxxx kmenů, genová xxxxxxxx je xxxxxxxxx xx xxxxxxx tvorby xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx mitotické xxxxxx xxxxxxxx jsou X4 (heteroalelický x xxx 2 a xxx 5), X7 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 5), XX34 (xxxxxxxxxxxxxx x arg 4) x XX1 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4 x xxx 5). Xxxxxxxxx překřížení xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx může být xxxxxxxxx u D5 xxxx D7 (xxxxx xxxxxx xxxx mitotickou xxxxxxx konversi a xxxxxxxx xxxxxx x xxx 1-92). Xxx xxxxx xxxx heteroalelické xxx komplementární alely xxx 2.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx těsně xxxx xxxxxxxxxx za použití xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx látek xx xxxx nerozpustných xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx dimetylsulfoxid (DMSO). Xxxxxxx koncentrace vehikula xxxx významně ovlivnit xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx mají být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx jak x xxxxxxxxxxx, xxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx z jater xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx druhů, xxxxx, postmitochondriálních xxxxxx xx xxxxxxx může xxx xxxxxx xxxxxx xxx metabolickou xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxx X4, X5, X7 x XX1. Xxxxx jiných xxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx kultivační xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxxxxx současně. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx být xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx zvolených xxxxxxxxxxx. Xxxx xxx brán xxxxx xx xxxxxxxxxxxx x rozpustnost. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx nejvyšší xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxxxx pod 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx testovány xx xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx látky xxxxxxxxx, xx vodě xxxxxxxxx, xx určena xxxxxx od případu.
Xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxx během xxxxx po xxxx xx 18 h. Xxxxxxx dlouhodobě ovlivňované xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx tvorbu xxxx, xxxxxxx přítomnost xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Podmínky xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xx čtyři až xxxx xxx při 28 - 30 xX. Misky xxxxxxx xxx průkaz xxxxxxxxx x růžových xxxxxxx xxxxxxxxx mitotickým xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x chladničce (xxx 4 xX) po xxxxx 1 - 2 xxx xxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Spontánní xxxxxxxxx xxxxxxxxx rekombinace
Xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx s frekvencí xxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tří misek xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxx určení xxxxxxxxxx xxxxx. X případě xxxxxxxxx recesivní homozygozity xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx být xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx dostatečného xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.8 Xxxxxx
Xxxxxxxxx X. cerevisiae xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx buď xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx provedeny xx xxxxxxxxxx buňkách. 1-5 x 107 xxxxx/xx xx vystaveno xxxxxxxxx xxxxx po xxxx xx 18 h. xxx 28 xx 30 oC za xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buňky xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx kultivační xxxxxx. Po inkubaci xxxx počítány přežívající xxxxx x buňky x xxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx negativní, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Jestliže xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, přežívajících xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx potvrzeny x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx o průběhu xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: buňky xx xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxx, xxxxxxx médií, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: hladina xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, teplota xxx xxxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxx kolonií, xxxxx rekombinant, přežívajících xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, vztah dávky x účinku, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx,
- xxxxxxx výsledků,
- vyhodnocení xxxxxxxx.
X.17. XXXXXXXXXX - XXXX GENOVÝCH XXXXXX X SAVČÍCH XXXXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX TG 476, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxx Xxxx Mutation Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Test genových xxxxxx xx xxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx chemickými xxxxxxx. Mezi vhodné xxxxxxx linie xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx X5178X, xxxxx CHO, XXX-XX52 x X79 xxxxx xxxxxxxx křečka x xxxxxx lymfoblastoidní xxxxx XX6 (1). X xxxxxx buněčných xxxxx se nejčastěji xxxx xxxxxxx genetický xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x thymidinkináze (XX) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x v xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx fosforibosyltransferáze (XXXX). Xxxxx xxxxxx x XX, HPRT x XXXX xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx TK x XXXX xxxx umožnit xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxx), xxxxx xx xx lokusu XXXX xxxxxxxxxx X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
X xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx vitro xx xxxx xxxxxx xxxxxxx stabilizovaných buněčných xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx in xxxxx obecně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Takový xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx savčí xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx vzniku xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx výsledky xxxxxxxxxx xxxxxxx mutagenitu. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx nejsou důsledkem xxxxxxx mutagenity může xxxxx x důsledku xxxxx xX, xxxxxxxxxx xx vysoké cytotoxicity (7).
Xxxxx test se xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx savčích xxxxxxxx x karcinogenů. Xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxx testem x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx druhu xxxxxxxx látky a xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx toho, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které xx tímto xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx mechanismem xx xxxxxxxxxxx, xxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nepůsobí (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxx: genová xxxxxx výchozího xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx ke xxxxx xxxx ztrátě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx substituci xxxx xxxx: látky způsobující xxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx páru xxxx x DNA.
Frameshift xxxxxxxx (xxxxxxxx vyvolávající xxxxxxxx xxxxxx): látky, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx párů bází x DNA.
Doba fenotypické xxxxxxx: xxxxxx, během xxxxxxx jsou x xxxx zmutovaných xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx genové xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: počet xxxxxxxxxxxx mutovaných xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx celkový xxxx: xxxxxx počtu xxxxx x čase x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx buněk; xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx kontrolou) x xxxxxxx klonovací účinnosti xxxxxxx efficiency (x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxx nárůst xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx v porovnání x xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxxxx podmínkách xx období xxxxxxx.
Xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx) ovlivněných buněk xxxxxxxxxxxxx xx miskách xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx; vyjadřuje xx xxxxxxx v porovnánís xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx XX+/- → XX-/-, xxxx rezistentní vůči xxxxxxxxxxxxx působení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX). Xxxxx xxxxxxxxxxx thymidinkinázu xxxx xxxx TFT xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx metabolismu x zastavuje xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx TFT xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Podobně xxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx HPRT xxxx XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 6-thioguaninu (XX) xxxx 8-azaguaninu (XX). Xxxxx je xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx selekčním xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx testu xx xxxxxx mutace x xxxxxxx buňkách, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx podezření xx selekční xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx s xxxxxxxx x bez nich. Xxxxxxx-xx xx tedy xxxxxxxxxx strukturně xxxxxxxx xx selekčním činidlem, xx třeba potvrdit, xx xx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).
Buňky x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx kultuře se xx xxxxxxx dobu xxxxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx s metabolickou xxxxxxxx i bez xx x xxxxxxxxx xx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x k xxxxxxx xxxxxxxxxxx exprese xxxx výběrem xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx relativní klonovací xxxxxxxxx (xxxxxxx) (cloning xxxxxxxxxx) xxxx relativního xxxxxxxxx nárůstu xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxx x typ xxxxx, aby xxxxx xxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx fenotypické xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx se stanoví xxxxxxxxx známého xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxx xxxxx a x xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xx stanovení xxxxxxxxx účinnosti (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx spočítají. Xxxxxxx frekvence xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx mutovaných xxxxx x selekčním xxxxx x x počtu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Buňky
Dá xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxx X5171X, XXX, XXX-XX52, X79 x TK6. X xxxxxxxxx xxxx používaných x tomto testu xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx klonovací xxxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx) x stabilní xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx se xxxxxxxxxx, xxx nejsou xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx naplánovat xxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx (xxxxx). Xxxxx xxxxx, počet xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx parametrům xxxxxxxxx (14). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxx stadiích xxxxx, xx xxx frekvencí xxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xx xxxxx xxxxx má xxx xxxxxxxxx desetinásobkem xxxxxxxxxx hodnoty xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 106 xxxxx. Xxxx by xxx x xxxxxxxxx adekvátní xxxxxxxxxx údaje, xxxxxxx xx xx prokázala xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx média a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, koncentraci XX2, xxxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx se pro xxxx volí xxxxx xxxxxxxxxx systému x xxxx xxxxx. Zvláště xxxxxxxx je, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zajišťovaly xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx periody x xxxxxxxxx jak xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx tvořit kolonie.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx namnoží xx xxxxxxxxx kultur, xxxxxxxxx xx kultivačního xxxxx a xxxxxxxx xxx teplotě 37 xX. Před provedením xxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx buněk.
1.4.1.4 Metabolická xxxxxxxx
Xx buňky xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x přítomnosti x x nepřítomnosti vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxxx xx kofaktory xxxxxxxxxxxxxx mitochondriální frakce (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, ovlivněná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx je Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), nebo xxxx fenobarbitalu a β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mitochondriální xxxxxx x xxxxx činí xxxxxxx 1 - 10% x/x. Aktivita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxx xx testovaná xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx koncentracích.
Pro xxxxx xxxxxxxxx aktivace xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx specifické xxxxxxxxx enzymy. Xxxxx xxxxxxxxx linií xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (např. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx stavu, xxxxx xx xxxx působením xx xxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx naředí. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx systému xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx třeba používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o jejich xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx skladování xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
X zvoleného xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx by mohlo x testovanou xxxxxx xxxxxxxx reagovat, x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x aktivitu X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje se, xxx xxxxx xxx, xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx zvažováno xxxxxxx xxxx rozpouštědla xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx bezvodé. Xxxx xx dá odstranit xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxx kritéria, xxx xx xxxxxxx xxx stanovování xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x změny pH xxxx. osmolality.
Cytotoxicita xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx v hlavním xxxxxxxxxxx, přičemž xx xxxxxxx xxxxxx indikace xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx růst. Xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx čtyři xxxxxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxx-xx x cytotoxicitě, musí xxxx xxxxxxxxxxx pokrývat xxxxxx xx xxxxxxxxx xx nízké xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx lišit xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. Xxxxxxx-xx maximální koncentrace x xxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (relativní xxxxxxxxx účinnosti) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x 10-20 %, xx xxxx xxxx xxx 10 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx z xxxxxx 5 mg/ml, 5 μl/ml a 1,01 M.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek, xxx xxxx netoxické x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx xxxxx nerozpouští, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx mez xxxxxxxxxxxx xx finálním xxxxxxxxxxx xxxxx xx konci xxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxx vyhodnotit rozpustnost xx xxxxxxx x xx konci xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x důsledku přítomnosti xxxxx, X9, séra xxx. xxxxx. Nerozpustnost xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.3 Xxxxxxxx
X xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx provést x xxxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx) xxxxxxxx, x xx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx xx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx být pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx účinku. Xxxx látkami pro xxxxxxxxx kontrolu xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
XX (xxxx x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (xxxx x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx cyklofosfamidu benzo[a]pyren 3-methylcholantren | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XPRT | N-nitrosodimethylamin (pro xxxxxx xxxxxxxxxxx S-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
benzo[a]pyren | 50-32-8 | 200-028-5 |
Pro xxxxxxxxx kontrolu se xxxxx použít x xxxx vhodné látky; xxxxxxxx má například xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (XXX 59-14-3, xxxxx XXXXXX 200-415-9), xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxx, xxx xx xx xxxxx, xx xxxxxx použít xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx interval xxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx rozpouštědlo xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx rovněž xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx zvolené xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx proliferující xxxxx xx xxxxxx testovanou xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx ní. Expozice xxxxxxx po xxxxxxx xxxx (xxxxxxx je xxxxxx doba 3-6 xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx jeden xxxx více buněčných xxxxx.
Xxx každou xxxxxxxxxxx xx používají xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx třeba zvýšit xxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx se zajistil xxxxxxxxx počet xxxxxx x xxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Kultury s xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx postupy, xxxx je použití xxxxxxxxxx uzavřených kultivačních xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx frekvence
Po xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx obvykle xxxxxx x analýzou cytotoxicity xxxxxxxxxx klonovací xxxxxxxxx - xxxxxxx efficiency xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx časový xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (HPRT x XXXX vyžaduje xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, XX xxxxxxxxx 2 dny). Xxxxx xx pěstují x médiu x x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx stanovení xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxx četnosti xxxxxxx) inokulací xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx látka x xxxxx X5178X TK+/- xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx kultur (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xx xxxxxxxxxxx x pozitivních xxxxxxxxxx xxxxxxxx velikost xxxxxxx. Xxxxx je xxxxx x tomto xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx kolonií u xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxx i xx xxxxxxxx x XX6XX+/-.
2. ÚDAJE
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx data xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx cytotoxicity x životnosti, počty xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx. X xxxxxxx pozitivní xxxxxx x xxxxx X5178XX+/- se xxxxxxx xxxxxxx pomocí kritérií xxxxxx x velkých xxxxxxx přinejmenším v xxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx xxxxx TK+/- xx kolonie xxxxxxx xxxxx kritéria xxxxxxx xxxxxxxxxx růstu (xxxxx) x xxxxxxxx xxxxx (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx poškození, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, x xxxxx tvoří xxxx kolonie. Xxxxxxx xxxxxx poškození obvykle xxxx xx xxxxxx xxxxxx genu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx je xxxxxxxxxx x expozicí xxxxxx xxxxxxxxxxx hrubé xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mutanty xxxxxx podobnou rychlostí xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx velké xxxxxxx.
Xx třeba xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnost - xxxxxxxx cloning xxxxxxxxxx) xxxx relativní xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx frekvence xx vyjadřuje xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx počtem přežívajících xxxxx.
Xxxxxxx se individuální xxxxx x kultivačních xxxxxxxxxx; xxxxxxx xx xxxxxxx data shrnou x xxxxxxxxx formě.
Verifikace xxxxxx pozitivní reakce xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx musí potvrdit xxxxxx xx případu. X xxxxxxxxx, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, je xxxxx xxxxx zdůvodnění. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx studie xxx, xxx xx rozšířilo xxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, které se xxxx v experimentu xxxxxxxxxxx, patří rozdíly xxxx xxxxxxxxxxxx koncentracemi x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx stanovení xxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, například xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx reprodukovatelný xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Nejprve xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx. Xxxxxxxxxxx významnost by xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx výsledku.
Testovaná xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx kritéria, se x xxxxx systému xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx experimentů sice xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní xxxx negativní výsledky, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx souboru xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx genové xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxxx xxxxxxx buněk xxxxxx mutace. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxx dávka - xxxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx genové xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- rozpustnost a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx x xxxxx buněk,
- xxxxx buněčných xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x xxxxx kultur, xxxxxx např. xxxxx x cytotoxicitě x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x dispozici,
- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- koncentrace testované xxxxx,
- objem vehikula x přidané xxxxxxxxx xxxxx,
- inkubační xxxxxxx,
- xxxx inkubace,
-doba xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx látky,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxx metabolické aktivace, xxxxxx xxxxxxxx akceptovatelnosti,
- xxxxxxxxx a negativní xxxxxxxx,
- xxxxx expresní xxxxxxx (případně xxxxxx xxxxx inokulovaných xxxxx, xxxxxxxxx)
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx,
- metody xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, x nichž xx hodnotí xxxxxxxx x xxx (xxxxxx xxxxxxxxxx kritérií pro xxxxxxxxxxx xxxx "xxxxxx" x "xxxxxxx" xxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx toxicity,
- známky xxxxxxx,
- xxxxx x xX a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jsou-li stanoveny,
- xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zjistit xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx X5178X TK+/-,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx analýzy, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a pozitivních xxxxxxx,
- historické xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx, xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.18. XXXXXXXXX XXX REPARACE - XXXXXXXXXXX XXXXXXX DNA - XXXXX XXXXX XX XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Test xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (UDS) xxxxxxxx měřit xxxxxxxxx xxxxxxx XXX po xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (3H-TdR) xx XXX xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x X xxxx xxxxxxxxx cyklu. Vzestup 3X-XxX xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx primární xxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testovanou látkou xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. UDS xxxx být také xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Testované xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxx referenční xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx médiem. Konečná xxxxxxxxxxx rozpouštědla v xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx životnost xxxxx.
Xxxxxxxxx se pouze xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx hepatocytů, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx linií (xxxxxx xxxxxxxxx fibroblasty).
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce v xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2 Experimentální podmínky
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx bod xx potřeba nejméně xxxx xxxxxxxxx kultur xxx autoradiografii x xxxxx xxxxxx (xxxx xxxx, xx-xx xx xxxxxxx zdůvodnitelné) xxx XXX XXX.
1.2.2.2 Negativní x pozitivní xxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx i v xxxxxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Jako pozitivní xxxxxxxx xxx pro xxxxxxx hepatocyty xxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-XXXX) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx buněčné linie xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxx x xxx XXX xxx metabolické xxxxxxxx lze použít 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxxxxx rozpustné xxxx být xxxxxxxxx x koncentracích až xx xxxxxxx rozpustnosti xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx rozpustné xx xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx případ xx xxxxxxx.
1.2.2.4 Buňky
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx médium, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Pro xxxxxxxxxxxx hepatocytů xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x lymfocyty xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Stabilizovaná buněčná xxxxx xx připravuje xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx setřepáním xxxxx x povrchu xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xx xx kultivačních xxxxx xx vhodné xxxxxxx a inkubuje xxx 37 xX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx potkaních xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxx, xx se xxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx kultivační xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx vhodné xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur xxxxxxxxx xxxxx
Primární xxxxxxxxxx xxxxxxx. Čerstvě xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX po xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx médium xxxxxxxxxx, buňky xxxxxxx, xxxxxxxx x sušeny. Xxxxxxx xxxx ponořena xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx stripping film), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Stabilizované xxxxxxx linie a xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx vhodnou xxxx x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 3X-XxX. Xxxx působení xx xxxxxxx xx druhu xxxxxxxxx látky, aktivitě xxxxxxxxxxxxx systému a xx typu xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxx 3X-XxX xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx několik xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx mezi těmito xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x 3X-XxX. X odlišení xxxx UDS x xxxxxxxxxxxxxxxxx replikací XXX xx užívá arginin xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx séra nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx inhibici xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX.
Xxxxxxxxx XXX pomocí LSC: Xxxx expozicí testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx X-xxxx, xxx xxxx xxxxx uvedeno. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx testované látce, xxx xxxx popsáno xxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx je XXX extrahována z xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx XXX x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX.
Jestliže xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxx
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Při xxxxxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx kultuře xx xxxxx x X-xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxx 50 xxxxx x každém xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx. X každém xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx vybraných xxxx. Množství inkorporovaného 3X-XxX v xxxxxxxxxx xx určí v xxxx o xxxxxxxxx xxx jader x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx LSC
Xxx stanovení LSC XXX se použije xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxx xxxxxxxx.
Výsledky xxxx být xxxxxxxxx x nezávislých experimentech.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
2.1 Vyhodnocení xxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3H-TdR xx cytoplazmy a xxxxx zrn xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxx.
Xxxxxx inkorporace 3X-XxX xx xxxxxxxxxx x xxxxx zrn x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx průměru, xxxxxxx x xxxx.
2.2 Vyhodnocení XXX
Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxxxxxx jako xxx/μx XXX. Xxxxxxxx xxxxxxx xxx/μx XXX xxxxx se směrodatnou xxxxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx možné, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, jejich xxxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx kultury, počtu xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultury, médiu, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx jejich xxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- pokusném schématu,
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx metodách,
- způsobech xxxxxxxxx xxxxxx buněk do X-xxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx XXX x k xxxxxxxxxxx celkového obsahu XXX xxx metodě XXX,
- vztahu xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- diskusi xxxxxxxx,
- interpretaci xxxxxxxx.
B.19. XXX - VÝMĚNA SESTERSKÝCH XXXXXXXXX IN XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
XXX xx xxxxxxxxxx xxxx xxx detekci xxxxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx chromatidami xxxxxxxxxx. XXX reprezentují xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v identických (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxxx vyžaduje zlom x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx zatím xxxx znalostí o xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatid. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (BrdU) xx xxxxxxxxxxxxx XXX na xxxx dvou xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx buňky xx xxxxx jsou xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxxxxx exogenního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xx-xx xx potřebné. Xxxxxxxxx se xx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx BrdU. Xx xxxxx kultivace se xxxxx ovlivní xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vřeténka (např. xxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxx v c-metafázi xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pro analýzu xxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (lidské lymfocyty) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (ovariální xxxxx xxxxxxxx křečka). Xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx z hlediska xxxxxxxxxxx Mycoplasmaty.
Xxxxxxxxx xx vhodná kultivační xxxxx x kultivační xxxxxxxx (xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2 x vlhkost).
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx buněk, xxxxxxxx xxxxx nebo frekvenci XXX.
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx použití xxxxxxxxx xxxx x vnitřní (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx aktivity xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx chemických xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Pro xxxxx experimentální xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X každém xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxx x přímým xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx použita xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxx pozitivní xxxxxxxx xxx použít:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx
Xx-xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka.
1.2.2.3 Koncentrace
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx až xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Stabilizovaná xxxxxxx linie xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx kultivační nádoby), xxxxxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxx 37 xX. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxx kultivace xxxxxxxxxxx xxxx než x 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx suspenzních xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx kultury xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx krve xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 xX.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Buňky xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx v exponenciální xxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu. Ve xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx až xxx xxxxxx, ale xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx xx xx dva xxxxxxx xxxxx, je-li xx třeba. Xxxxx, xxxxx nemají dostatečnou xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx z xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx x růstovém xxxxx x XxxX xxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx současně s xxxxxxxxxx xxxxxx x XxxX xx xxxx xxxx xxxxxxxxx cyklů.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx kultury xxxx exponovány xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx mitotickém xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx xxxxxxx s XxxX xx třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxx ve světle xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx fotolýze XXX, ve xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx XxxX.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx buněk
Xxxxx xx čtyři xxxxxx xxxx xxxxxxxxx kultivace xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx dělicího xxxxxxxx (např. xxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx připraví xxxxxxxxxx cytogenetickou xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx XXX xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxx).
1.2.3.5 Xxxxxxx
Xxxxx analyzovaných buněk xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx SCE x kontrole. Xxxxxxx xx hodnotí nejméně 25 xxxxx rozprostřených xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. V lidských xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx metafáze s 46 xxxxxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx pouze xxxxxxxx, xxxxx se xxxx x ± 2 xxxxxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxx centromer. Xx xxxxx stanovit, xxx se budou xxxxxxxxxx SCE v xxxxxxx xxxxxxxxxx. Výsledky xxxx být ověřeny x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxxxxxxx tabulkovou xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x xxxxx xxxxxxxx x xxxxx XXX/xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx metafázi x xxxxxxxxxxxx i kontrolních xxxxxxxxx.
Údaje se xxxxxxx vhodnými statistickými xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx to možné, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx,
- kultivačních xxxxxxxxxx: složení xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx expozice, inhibitoru xxxxxx a jeho xxxxxxxxxxx i xxxx xxxxx působení, metabolickém xxxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách,
- xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx,
- způsobu xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,
- xxxxx analyzovaných xxxxxxxx (xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxx XXX/xxxxx x XXX/xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxx každou kulturu),
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx vyhodnocení,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.20. XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX XXXXXX XX XXXXXXX X XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxxx letální mutace xxxxxx xx xxxxxxx (XXXX) na Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx detekci xxxxxx, xxx xxxxxxxx, xxx i xxxxxx xxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxx hmyzu. Xx xx test xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx screening xxxxxx x přibližbě 800 xxxxxxxx chromozómu X. Xxxx reprezentují xxx 80 % xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1/5 xxxxxx haploidního xxxxxx.
Xxxxxx x X-xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x samců xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx. Když xx xxxxxx letální x hemizygotním xxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxx jednoho xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. XXXX xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Příprava
1.2.1.1 Xxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxx definované xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx Muller-5. Xxxxx xxx xxxxxxx x jiné xxxxxx xxxxx popsané xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Testované xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx ve xxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxx xxxxxxx x Tweenu-60 nebo 80), xxxx xxxxxxxx xx xxxx ředí xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx vehikulu.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx citlivost. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx per xx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx. Zkrmování xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x cukerném xxxxxxx. Xx-xx to nutné, xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx XxXx a xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.1.5 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
V xxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x pozitivní xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, není třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.6 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx testované xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx testují x xxxxxxxx dosažitelné xxxxx.
1.2.2 Popis postupu
Xxxxx xxxxxxxx xxxx (xx stáří 3-5 xxx) xxxx ovlivněni xxxxxxxxxx látkou x xxxxxxxxxxxx kříženi x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx Xxxxxx-5 nebo x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (vícenásobná xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Samice xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx až xxx xxx, xxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X potomků xxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx látky v xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, na xxxxxxxxxx ve středním xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx spermatidy, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx X1 xxxxxx narozené x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kříženy xxxxxxxxxxxx (tj. xxxxx xxxxxx/xxxxxxxx) xx svými xxxxxx. X F2 xxxxxxxx je x xxxxx kultuře xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxx vznikají X1 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x rodičovském X-xxxxxxxxxx (nejsou xxxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxx genotypem jsou xxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xx opakuje x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx xx zpracují xx xxxxx tabulky. Xxxxx xx xxxxx hodnocených X-xxxxxxxxxx, počet xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx x letální xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx křížení a xxx každého testovaného xxxxx. Zaznamenává xx xxxxx clusterů xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx. Výsledky xx xxxx potvrdit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Údaje xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mutací xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxx v xxxxx x xxxxxxxxxx vhodným xxxxxxxxxxxx způsobem.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- použitých liniích xxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxxxxxx X2 xxxxxx, xxxxx X2 xxxxxx xxx potomků, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro každé xxxxxxx zárodečných buněk,
- xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxx popis xxxxxxxxxxx x schéma xxxxxx xxxxxx, xxxx dávek, xxxxx x toxicitě, xxxxxxxxx (x rozpouštědlem) x pozitivní kontroly,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx mutací,
- xxxxxxx expozice/účinek, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.21. XXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXX XXXXX - XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxx lze použít xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx vivo. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx C3H10T1/2, 3X3, XXX, Fischerových potkanů x test se xxxxx x změny xxxxxxx xxxxxxxxxx, tvorbu xxxxxxx nebo xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx používají systémy xxxxxxxxxx ostatní xxxxxxxxxxxx xx morfologické změny x xxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látkám. Xxxxx výsledek in xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx promotorů. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxx zjištěna xxxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) nebo ovlivněním xxxxxxxxx xxxxx kultury. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx ze xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x určení xxxxxxxxx transformace xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, protože x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx linií x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx použité x xxxxx transformace xxxxxxxx příslušné xxxxxxxxxxx xxxxx po expozici xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx test xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx ověřen x xx je xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx x spolehlivost.
1.2.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx média x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx vhodné pro xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx rozpouštějí xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx rozpouštědle xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x kultuře nesmí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx rychlost xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Metabolická xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx buňky s xxxxxxx metabolickou xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx vhodné pro xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx musí xxx zařazeny pozitivní xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx působících x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Musí být xxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxx xxxxxxxx látky: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Je-li xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako je xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.2 Koncentrace
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx dávky. Tyto xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx efekt závislý xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx způsobují xxxxxx xxxxxx přežívání xxxxx, x xxxxxxxx koncentraci xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx stejné xxxx x negativní xxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xx hranici jejich xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx dobu závislou xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Ta xxxx xxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x výměnou xxxxx (ev. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivační xxxxx), jestliže xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx expozice je x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x kultivace xxxxxxx xxxx za vhodných xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx transformace. Všechny xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xxxx být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx vhodné xxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx počet transformací xx počet přežívajících xxxxx. Xxxx xx xxxxx zpracovat vhodnými xxxxxxxxxxxxx metodami.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx,
- kultivačních xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádobách, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx aktivačním xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx během xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx selektivního xxxxxxx (xx-xx xx vhodné), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a transformovaných xxxxx,
- statistickém xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX XXXX U XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Indukce dominantních xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx látce xxxxxxxx, xx xxxx xxxxx poškozuje zárodečné xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Obecně xx xxxxxxx, xx dominantní xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxx embrya xxxxxxxxxx samice xxxx xxx také xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x pářeni x xxxxxxxxxxxxx, intaktními xxxxxxxx. Vzestup xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x exponované skupině xxx xxxxx mrtvých xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Preimplantační xxxxxx xx hodnotí na xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx porovnáním xxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx- x xxxxxxxxxxxxxxxxx ztrát. Xxxxxxx xxxxxxx dominantní xxxxxxxx xx xxxxxxx xx srovnání živých xxxxxxxxxx xx xxxxxx x exponované xxxxxxx x živým implantacím xx xxxxxx v xxxxxxxxx skupině. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (x.x. xxxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxx).
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Testovanou xxxxx rozpustit xxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx vodě se xxxx nebo xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx rozpouštědlo xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxx vyvolávat xxxxxxx účinky. Před xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx informací xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx aplikace.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Pro test xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo myši. Xxxxxx, pohlavně xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx a xxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxxxxx xxxxx exponovaných xxxxx s ohledem xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky. Xxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxx detekční xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx volí xxxxxx xxxxx xxxxx, aby xx dosáhlo 30 - 50 xxxxxxx xxxxx xx připouštěcí xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx musí xxx zařazeny xx xxxxxxx experimentu. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxx použity. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx citlivost xxxxx (např. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 xx.xx-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x exponovaných xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx je postačující xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxx test
Xxxxxxxxx xxxxx xx podávají x xxxxx xxxxx 5 g.kg-1 xxxx x dávce 1 x.xx-1.xxx-1 při xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx postupů. Nejčastěji xx používá xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, intaktními xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx jednoho xxxxx xxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx spermie xx xxxxxx či xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xx expozici xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx cervikální xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx dělohy xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx mrtvých x xxxxxx xxxxxxxxxx. Vaječníky xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxx počtu xxxxxxx tělísek.
2. ÚDAJE
Xxxxx x xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx páření xxxxxx xxxxxxxxxxxx každého xxxxx x xxxxxx xxxx uváděny xxxxxxxxxx. Xxxxx samice xxxx xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, x xxxxx podané samci, x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxx na srovnání xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx samici x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx implantací x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx mrtvých xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx vypovídá x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxx xxxxx x pozdní letalita. Xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx ztráty. Xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx jako xxxxxx xxxx počtem corpora xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx dělohu xx xxxxxxxx s xxxxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx, informace x:
- xxxxx, xxxxx, xxxx a xxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xx každého xxxxxxx x exponovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxxxx podání a xxxxxxxx expozice,
- xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx k průkazu xxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx počítání xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx dávka/odpověď,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX ABERACÍ X XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 483, Mammalian Xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Aberration Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxx xx xx vivo xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, ovšem x xxxxxxxx chromozómového xxxx xxxxxxx xxxxxx. Tato xxxxxx xxxx xxxxxx x analýze xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, a xxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách.
X xxxxx se obvykle xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx jiné xxxxxx buňky.
Xxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx chromatidového xxxx, je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mitózu xx působení testované xxxxx, dříve xxx xx xxxxxxxxx ztratí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx informace x ovlivněných xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx analýzou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx zjišťují xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx ve spermatocyty.
Xxxxx test xx xxxx je určen xx zjišťování, xxx xxxx mutageny xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx zárodečných. Mimoto xx xxxx xxxxxx xxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mutagenity xxx, xx xxxxxxxx posuzovat xxxxxxx metabolismu in xxxx, farmakokinetiky a xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA.
X testes je xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx širokým xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx látkám. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx představují xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx spermatogonií, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spermatogonie. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx spermatogonií xxxxx, xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x fyziologické xxxxxxx Xxxxxxxxx buněk x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx bariéře.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx pro xxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx chromatidového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx projevuje xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx respektive xxxx xxxx a opětovné xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx aberace xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx chromozóm-ring)
Zlom xxxxxxxxxx: xxxx zlom xxx hodnotit xxxxxxxx xxxxxxxxxx jedné nebo xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx větší, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx v xxxxxxxxx, xxxxxxx (distální) xxxxxxxx x xxxxx zlomu xx dislokovaný (xxxx xxxx xxx chromatidy), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómu je xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxx: achromatická xxxx xxxxx než xxxxx xxxxx chromatidy x s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Numerická xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (n) xxxx xxx diploidní xxxxx xxxx (3x, 4x xxx.).
Strukturální xxxxxxx: xxxxx chromozómové struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dělení xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, x výměny.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx na xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo Xxxxxxxxxx®). Xx zárodečných buněk xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x po xxxxxxxx se x xxxxxxxxxx analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx
Xxxxx se xxxxxxxxx samci xxxxxxxx xxxxxx x xxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx jiného xxxxxxxx savčího xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.1.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx B.
Xxxxxxx by měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Zdraví mladí xxxxxxx jedinci se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x experimentální xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx označí x xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, jak x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx dávek
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x xx-xx xx xxxxx, látka xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx podávat xxxxx xxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxx. xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (stabilitě) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyvolávat toxické xxxxxx x xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx xxxxx, bylo na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné xxxxxxx nad xxxxxxxxx xxxxxx.
Dávky xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx xx možné podávat xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx odebírat v xxxxxx časovém xxxxxxxxx. Xxx xx to xxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Příklady xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx kontrolu.
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
monohydrát xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxx xxxxxxx | 79-06-1 | 201-173-7 |
triethylenmelamin | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem xxxx vehikulem a xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx by xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zpracování, xxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx x o interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx je třeba xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo publikované xxxxx prokazující, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx xxxx mutagenní xxxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Počet x xxxxxxx zvířat
X xxxxx xxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx xxx minimálně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx se k xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxx, xx. na dvě xxxxx xx xxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx několika xxxxx. Xxxxxx xxxxxx dávkování xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
X případě xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx se vzorky xx expozici látce xxxxxxxxx dvakrát. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka může xxxxxxxxxx kinetiku buněčného xxxxxx, provádí xx xxxxx dřívější a xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 24 a 48 xxxxx xx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx (xx. xxxx xxxxx xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 24 hodinách xxxx po 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx expozici, xxxxxx xx znám vhodnější xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (6).
Xxxxx toho xxxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Např. xxxxx-xx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx pohyb xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx s účinky xxxxxxxxxxx xx X-xxxx xxxxx, jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (1).
Xxx xx xxxxxx nechat xxxxx xxxxxxx opakovaně, xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxx po 24 xxxxxxxx (1,5násobku xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxxxx x x dalších intervalech, xxxxxxxx-xx se to xx účelné.
Xxxx xxxxxxxxx xx zvířatům xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x následně xx x xxxx xx xxxxxxx intervalu xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3-5 xxxxx, x čínských xxxxxx zhruba 4-5 xxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx studie ke xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx v xxxx laboratoři za xxxxxxx stejného živočišného xxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx zjištění toxicity xx xxxxxxx pro xxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx vzorků xxx xxxxx tak, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Pro xxxxxxxx xxx xxxxxx vzorků xx xxx třeba xxxxxx jenom nejvyšší xxxxx. Ta je xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, že xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.
Látky, jež x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxxx hormony xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x vyhodnocují xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx dávka, xxxxx vede k xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx (např. xxxxxx xxxxxx mitóz xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x druhé meiotické xxxxxxxx( tento xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx dávkách xxxxxxxx x jeden xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx údajů x xxxxxxx x podobnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx neočekává xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx celá studie xx použití tří xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx humánní xxxxxxxx xx xxxx použít x xxxxxxxx testu xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx látka xx obvykle xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekcí. X odůvodněných xxxxxxxxx xxxxx být přijatelné x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, která xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx najednou xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx překročit 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx dávky xxxx xxx zdůvodněné. S xxxxxxxx dráždivých xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx úrovních stejný x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx připraví buněčná xxxxxxxx, na xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx. Xxxxxxx suspenze xx xxxxxx xx xxxxxxxx sklo x xxxxxx.
1.5.7 Analýza
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx x jedné xxxxxxx). Xxxxx xxxxx xx xx xxxxxx, xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vysoký. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx vedou x xxxxxxx určitého podílu xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx chromozómů, musí xxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx roven xxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx x jednotlivých xxxxxx xx prezentují x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. U xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx buněk xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx buňku. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx zvlášť, xxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xx do xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx analyzována xxxxxx x xxxxxx, stanoví xx u xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx míra xxxxxxxxxxxx poměr xxxxx xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx, a to xxx, že xx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxxxx xx buněk. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx jedince.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x aberacemi ve xxxxxxx ovlivněné xxxxxxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxx časovým xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (8); statistická xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx xxxxxxx určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx za xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, se x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vykazuje xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxxxxxxx případech získaná xxxx nedovolují jednoznačné xxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Výsledky xxxxx xxx nejisté, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx počet xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zárodečných xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx chromozómové xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo je xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx (např. xxxxxxxxx toxicita).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx a věk xxxxxx,
-xxxxx, chovné xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- xxxxx xx studie xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx aplikace xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx koncentrace xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (ppm) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx / xxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx přípravy xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx jedno xxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- známky xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- poměr xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxx a xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx aberací x xxxx xxxxxxx,
- počet xxxxx x xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x negativních xxxxxxx xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx ploidie.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.24. XXXX XXXX X MYŠÍ
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Je xx xx xxxx xxxx xx xxxxxx, x kterých xxxx xxxxxxxxxx xx embrya xxxxxxxxxx chemickým xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x cílovými xxxx xx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Embrya xxxx heterozygoti xxx xxxx genů ovlivňujících xxxxx srsti. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x genech xxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx) pozměněné xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Počet xxxxxxx x xxxxxx skvrnami, xxxxxxxx, xx zaznamenán x jejich frekvence xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x potomků x xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx somatické xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx buňkách.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo suspendovány x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx nerozpustné xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx suspendovány xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxx s testovanou xxxxxx xxxx vyvolávat xxxxxxx efekt. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxx T (xxxxxxxxx, x/x; chinchilla, pink xxx, cch x/xxx x; xxxxx, x/x; xxxxxx, xxxxx ear, x xx/x xx; xxxxxxx spotting, x/x) xxxx xxxxxxx xxx x xxxxxx XX (xxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xx x xx/xx x xx; xxxxxx xxxxx, ln fz/ /xx xx; xxxxx xx/xx) nebo s xxxxxx X57 XX (xxxxxxxxx, x/x).
Xxxxx xxx použita x xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx potomci. Xxxx. xxxxxxx xxxx xxxxxx XXXX (xxxxxxxxx, x/x; albino, x/x) x XXX (xxxxxxxxx, x/x; xxxxx, x/x; xxxxxx d/d).
1.2.1.2 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx samic, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx vzorku xx xxxxxxx na xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx x x kontrolních myší. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx nejméně 300 xxxxxxx samic ovlivněných xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.3 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
Xxxx být použity xxxxxxxx ovlivněné xxxxx xxxxxxxxxxxxx (negativní kontroly). Xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnoty x téže xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx homogenní. Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx laboratoři xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být v xxxxx testu xxxxxxx, xxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mutagenita xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxx xx používá xxxxxx xxxxxxxx sondou xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx. Xx-xx xx xxxxxx, xx xxxxx použít inhalační xxxx jiný xxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxx dvě xxxxx, x nichž xxxxx vyvolává xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.
1.2.2 Popis xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx 8., 9. xxxx 10. xxx březosti, xxxxxxx xx 1. xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx zjištění xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 x 9.25 xxx xx koncepci. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx látkou xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx.
Xxxxxxx
X xxxxxx je xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx mezi xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx:
(x) xxxx xxxxxx v xxxxxxx 5 xx xx střední xxxxxxxxx xxxxx, x kterých xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (XXXX);
(x) xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, axil, xxxxxxx slabin a xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xx, xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (XXX);
(x) xxxxxxxx x xxxx xxxxxx náhodně xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx somatických xxxxxx (XX).
Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx, RS, je xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx XXX a XX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx mikroskopu.
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx potomků.
2. XXXXX
Xxxxxxx data xxxx xxxxxxx jako xxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx somatickými xxxxxxxx. Xxxxx získané x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx se porovnávají xxxxxxxx xxxxxxxx. Údaje xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxx xxxxxxxx xxx křížení,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- průměrné xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxx rozpouštědle,
- xx xxxxxx dni xxxxxxxx xxxx testovaná xxxxx aplikována,
- x způsobu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x jejich xxxxx x WMVS, XXX x RS x experimentální a xxxxxxxxx skupině,
- xxxxxxx morfologických malformacích,
- xxxxxx dávka/odpověď x RS, xx-xx xx možné,
- xxxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX X XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Test xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x numerické xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx zárodečných xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx potomků. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx reciproké xxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx X-chromozómu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x XX-xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx fertilitu, xxxxx xx využívá xxx xxxxx X1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Úplná xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (X-xxxxxxx x x-x xxx). Xxxxxxxxxxx xxxx analyzovány xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx ze xxxxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, xxxx X1 samců či xxxxxxx potomků X1 xxxxx. Samice XX xxxx cytogeneticky xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx roztoku. Jestliže xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx rozpouštědlo xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx reagovat s xxxxxxxxxx látkou nebo xxxxxxxxx xxxxxxx účinky.
1.2.1.1 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxx xx xxxxxxx orálně xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx i xxxx xxxxxx způsoby xxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxx. Nepožaduje xx xxxxx specifický xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxx xxxxx xxx xxx x xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se zdravá, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx zvířat
Počet xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyžadovaném pro xxxxxxxxx kontrolu.
Xxxx xx xxxxxxx provádí xxxxxxxx samců F1 xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx x X1 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx X1 xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx vyžaduje 300 xxxxx x 300 samic.
1.2.1.4 Negativní x pozitivní xxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx výsledky kontrol xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx z xxxx laboratoře, xxxxx xxx použity.
1.2.1.5 Dávkování
Xxxxxxx se jedna xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyvolávající xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, ale xxx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Pro stanovení xxxxxx xxxxx/xxxxxxx xx xxxxx dvou xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx nejvyšší dosažitelná xxxxx.
1.2.2 Xxxxx postupu
1.2.2.1 Xxxxxxxx x oplodnění
Xxxxxxxxx xx dva xxxxxxx expozice. Nejčastěji xx xxxxxxx jedna xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx je xxxxx xxxxxxxx podávání xxxxxxxxx xxxxx sedm xxx x xxxxx xx 35 xxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx analyzována. Xx konci období xxxxxxxxxxx xxxx samice xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx. Po porodu xx třeba zaznamenat xxxxx, velikost xxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxx xxxx xxxxx x samičí xxxxxxx odděleni xx xx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx heterozygotů
Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx F1 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxx cytogenetická xxxxxxx xxxxx xxxxx X1 xxxxxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxx xxxxxxxxx
Snížená xxxxxxxxx xxxxxx x X1 xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x velikosti xxxx a/nebo analýzou xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx normální x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx stanovena xxx každý xxxx xxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx: F1 samci xxxxxx k testování xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx klecí xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 18. xxxx po xxxxxxxxx. Velikost xxxx x xxxxxxx X2 xxxxxxx jsou zaznamenány xxx porodu, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx X1 samice, X2 xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx uchováváni xxx xxxxx testy. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx verifikovány xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxxxx x jakéhokoliv xxxxxx xxxxxxxx potomka. XO-samice xxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx mezi xxxxxx xxxxxxx x 1 : 1 xx 1 : 2 samci xx. xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxx X1 zvířata xxxxxxxx x dalšího xxxxxxxxx, xxxxxxxx první X2 xxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx hodnotu, jinak xxxx zaznamenány xxxxx x xxxxx vrhy. X1 xxxxxxx, která xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx tří F2 xxxx, xxxx dále xxxxxxxxx buď xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Analýzy xxxxxx dělohy: Redukce xxxxxxxxx xxxx x xxxxxx translokací je xxxxxxxxx smrtí xxxxxx, xxxxx xxxxxx počet xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxxx X1 xxxxx jsou xxxxxxxxxxx každý ke 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx vaginální xxxxx. Xxxxxx xxxx usmrceny 14. - 16. xxx x jsou xxxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxx xxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Metodou xxx-xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx jsou xxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx figur xx xxxxxx xxxxxxxxx - metafáze X x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, že testované xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx byl xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx F1 xxxxx xxxx vyšetřeni xxxxxxxxxxxxx. Na každého xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx vyšetřeno nejméně 25 xxxxx x xxxxxxxxx - xxxxxxxx X. Analýza xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx spermatogoniích xxxx x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x samců x xxxxxx testes x xxxxxxxxxx xxxxxx před xxxxxxxxxx xxxx x X1 xxxxx suspektních XX. Přítomnost xxxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx x 10 xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx translokační xxxxxxxxx (x-x typ). Xxxxxxx X-autosomální xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx identifikovány xxxxx pruhováním xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx xx xxxxx 10 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx XX xxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx).
Pro xxxxx xxxxxxxxx X1 zvířat xx xxxxx průměrná xxxxxxxx vrhu kontroly x xxxxxxxxxxxx velikosti xxxx F1 xxxxxx xxxxxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxx xxxxxx se xxxxx průměrný xxxxx xxxxxx x mrtvých xxxxxxx v xxxxxxxx x individuální počty xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxx každé xxxxxxxxxxx F1 xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx cytogenetické xxxxxxx diakinéze-metafáze X xx uvádí počet xxxx xxxxxxxxxxxxxxx figur x xxxxxxx počet xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx X1 xxxxxxxx xxxxxxx xx zaznamenává xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X XX xxxxx se uvádí xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx ratio F2 xxxxxxx x výsledky xxxxxxxxxxxxx analýzy.
V xxxxxxx, že pomocí xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx X1 translokací, xx xxxxx x xxxxxxxxx uvést xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx obsahuje, xx-xx xx xxxxx, informace x:
- xxxxx xxxx, xxxxx x xxxx exponovaných xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx každé xxxxxxx x exponovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxxx podmínkách, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x pohlaví xxxxxx xx samici, počet x pohlaví xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx x xxxxxxxxxx analýzy xxxxxxxxxxx,
- počet x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx včetně xxxxx x březosti x xxxxxx dělohy,
- popis cytogenetické xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx možno x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.26. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xx, studie xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx podává xxxxx xxxxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx zvířat, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, která přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin.
Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx x pitné xxxx. Všem zvířatům xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx je xxxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou známy xxxxxx xxxxx tomu. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx podávání xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx 6 xxxxx, x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 8 xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx orální xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx dlouhodobým xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx se xx xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx každou xxxxxxx xxxxx použít nejméně 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Samice xxxx xxx nullipary x xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx zabíjet v xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat, která xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx dobu 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Dávkování
Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx úrovně dávek x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám, a xx ve xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx vyvolat toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx malý počet. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx neměla vyvolat xxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxx existují xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx hranicích zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, mají být xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxx x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx dávky x v xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
Xxxxxx-xx xx testovaná xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx koncentrace (x xxx xxxx xx.xx-1 potravy) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx třeba xxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxx xxxxxx, xxxx xx xx tak xxx každý xxx xx stejnou xxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx xx 90xxxxx xxxx níže xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx xxx (nebo xxxxx vyšší - xxxxxxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx možno xx xxxxxxx testování xxxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, aby xxx aplikované množství xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky nebránily xxxxxxxx výživě xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxx pozorovat a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xx třeba zaznamenat xxxx xxxxxxx a xxx, xx kterém xx xxxxxx x xxxx odezní toxické xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
X ideálním xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx x kleci xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, očí, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxx potravy (x xxxxxx xxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxxx kontrolu zvířat, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zvířata, která xxxxxxx, x výjimkou xxxxxxxxxxx xxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx zvířata je xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
X všech xxxxxx včetně kontrolních xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným přístrojem xx xx provést xxxx podáváním testované xxxxx a xx xxxxx studie xxxxxxx x všech zvířat, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx konci xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx krve jako xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Quickův), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (trvání xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx živočišného xxxxx x kmene), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, dusík xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: lipidů, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx xxx v případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx.
(d) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, xxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, lební, hrudní x xxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx na xxxxx pozdější histopatologická xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - v xxxxxx medula/pons, xxxx xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx brzlíku, xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx, aorta, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxx, (přídatné xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, tlusté a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx sval), xxxxxxxxx xxxx, (oči), xxxxxx kost s xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx kloubních xxxxx), xxxxxxx xxxxx xx třech xxxxxxxx - xxxxx, střed xxxxxx x xxxxxxx, x (xxxxx xxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx, pokud xxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx z příznaků xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx třeba xxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, a x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx všechna xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(c) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x jiných xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx s nízkou x střední xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx stavu xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxx x xxxxxx x těchto skupin. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx u xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx však xxxxxxx xxxx na xxxxxxxx, xx kterých xxxx xxxxxxxx postižení xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Používá-li xx satelitní xxxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x orgánech, x kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx možno xxxxxx xxxxxxxxxxx uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky ustájení, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- úroveň bez xxxxxx, pokud xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj x xxxxxxx xxxxxx xx konce xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxx,
- doba, xxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- biochemická xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.27. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXX
(90denní xxxxxxxxx podávání xxx xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx 90 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx), x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx pitvají.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Testovanou látku xxx podávat x xxxxxxx xxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx způsoby orální xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx xx celou xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pro usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx o xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx využít.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx xxxxxxx pes: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx plemeni. Je xxxxx používat x xxxxxx xxxxx nehlodavců. Xx xxxxx pracovat xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxx se xx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx od 3 do 6 xxxxxx a xx xxxxxxx xxx 9 xxxxxx. Provádí-li xx subchronický xxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx má xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 8 xxxxxx (4 xxxxxx x 4 xxxxx). Xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx třeba použít xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. S výjimkou xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx. Nejnižší xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx dávek, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx skupině by x uhynutí xxxxxx xxxxxx docházet.
Podává-li xx xxxx toxická xxxxx x xxxxxxx, xx třeba zajistit, xxx xxx aplikované xxxxxxxx ani xxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě xxxxxx.
Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx konstantní xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) xxxx konstantní xxxxxxxxx xx vztahu k xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx alternativu je xxxxx uvést. Podává-li xx látka xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx by se xxx xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx test xxxx xxxxxxxxx test xxxx dlouhodobým testem, x xxxx xxxxxxxx xx má použít xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Provede-li 90denní xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x nevyvolá-li xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx (nebo xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) xxxxx xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zvířat.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxx, xx xxxxxx xx objeví a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis postupu
X ideálním xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látka 7 xxx v xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx jiným způsobem xxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 5 xxx x xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxx xx xx omezeno) xxxxx xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, změny xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx klinická xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx k minimalizaci xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, humánně xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx podáváním xxxxxxxxx látky a xx konci studie xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, ale xxxxxxx x nejvyšší dávky x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx změny, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.
(x) Na začátku xxxxx, x potom xxx x měsíčních xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x dále na xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx srážlivosti xxxx xxxx například xxxx srážlivosti, protrombinový xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Na xxxxxxx testu, a xxxxx xxx v xxxxxxxxx intervalech xxxx xxxxxxxxx x dále xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx analýza krve. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx látky. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (přičemž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), ornithin dekarboxyláza, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Mezi další xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx účinků. Před xxxxxxx xxxxxx xxxx xx nehlodavci xxxx xxxxxxxx (xx xxxx xxx 24 hodin).
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx tělních otvorů, xxxxx, hrudní x xxxxxx xxxxxx včetně xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, štítná xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a varlata xx co nejdříve xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se předešlo xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx orgány x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně s xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - x řezech xxxxxx/xxxx, xxxx mozku x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, štítná žláza, xxxxxxxxx tělíska, tkáň xx místě brzlíku,(průdušnice), xxxxx, srdce, aorta, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx břišní, xxxxxxx x xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), žlučník, jícen, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, reprezentativní xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx nerv, (xxx), xxxxxx kost s xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx kloubních xxxxx) x (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - krční, xxxxx hrudní x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx se posuzují, xxxxx je to xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx a tkání xx třeba xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx nejvyšší xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxx dávkových skupin xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xxxx xxxxxxxx poškození x xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx, xxxx když xx xx xxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, typy xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx poškození. Výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx k tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, případně xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx, xxx byly pozorovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky (xxxxxx xxxxxxxx případných xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.28. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx aplikuje xxxxx na xxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Během xxxxxx podávání xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xx xxxxx pokusu, se xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Krátce xxxx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx možné, mělo xx xx xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nebo oholení xx xxxxxxx opakovat xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx se xxxxxxxx nejméně 10 % xxxxxxx těla. Xx třeba vzít x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx rozhodování x velikosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx kůže x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Při pokusech x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou, xxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxx kontakt s xxxx. Testované kapaliny xx zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xx xxxxx použít xxxxxxx potkany, králíky xxxx morčata, xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx použití xxxx musí xxx xxxxxxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx dermální xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx před dlouhodobým xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 zvířat (10 xxxxx x 10 xxxxx) se zdravou xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx před xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině (satelitní xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx dobu 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx sledovat xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Dávkování
Je xxxxx xxxxxx nejméně xxx hladiny xxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx nebo - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - kontrolní xxxxxxx x aplikací xxxxxxxx. Xxxx expozice xx být xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx testované látky xx xx mělo xxxxxxxx každý xxx xx xxxxxxx dobu. X intervalech xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx aplikovanou dávku xxxxxxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxx stálá xxxxxxx xxxxx ve xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx pokusným xxxxxxxx, x xx ve xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx hladina xxxxx má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx by xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx hladina xxxxx měla xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 hladiny xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx dávky voleny xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx s xxxxxx x střední xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
Xxxx-xx xxxxxxxx testované látky x těžkému podráždění xxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, což x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Došlo-li x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ukončit a xxxxxxx xxx znova x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx-xx xxx předběžné xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxx vyšší xxxxx, která xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx člověka, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx dobu xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx a opět xxxxxx toxické xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx xx jednom. Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx x týdnu xx dobu 90 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxx xxx následné xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xx dalších 28 xxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx denně.
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx celou xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx asi 10 % xxxxxxx xxxx, x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx může xxx xxxx plocha xxxxx. Látkou xx xxxxx xxxxxx co xxxxxxxx část pokusné xxxxxx rovnoměrně x xx nejtenčí vrstvě.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxx x xxxxxxxx x kůží xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxx plochu xx xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx překrýt, xxx xx mulový obvaz x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X zamezení xxxxxx látky je xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxx xxx omezení xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxx expozice xx xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxxx xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx vhodným x xxxxxxxx xxxxxxx.
Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx otravy xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, xxx a xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx zaznamenávat xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx zvířat xxxx xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx skončení studie xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx v xxxxxx stresu či xxxxxx bolestí je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
U xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx běžně provádějí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx provést xxxx podáváním testované xxxxx x xx xxxxx xxxxxx nejlépe x xxxxx zvířat, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx konci xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx čas či xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx hladovění se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx), alaninamino transferáza (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx transamináza xxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx charakteristiky, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x případě potřeby xxxxxxx xxx studium xxxxxxx spektra účinků.
(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo pozorované xxxxxxxx.
Pokud nejsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx začátkem xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx se xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx prohlídku xxxxxxx xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx se xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx vysychání.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x ohledem na xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - x xxxxxx medula/pons, kůra xxxxx a mozečku, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx, příštítná xxxxxxx, xxxx na místě xxxxxxx, (průdušnice), xxxxx, xxxxx, aorta, (slinné xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, slinivka xxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lymfatické xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), (hrudní xxxx x xxxxxx xxxxx), (kost xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx mícha ve xxxxx úrovních - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx) x (xxxxx xxxxx). Tkáně x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, pokud xx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx orgánem.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
(a) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x exponované xxxx, xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx orgány x xxxxxxxxx dávkových xxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx potkanů, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx dávkou xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetřovat x zjištění xxxxxxxx xxxxxxx, protože xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx vždy xx orgánech, na xxxxxxx bylo zjištěno xxxxxxxxx xx skupině x vysokou xxxxxx.
(x) Používá-li xx xxxxxxxxx skupiny, xxxx xx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx být xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x lézemi x xxxxxxxxxxxx počet xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx třeba vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx obsahovat tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx dávek (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx lze xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx sledování,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx účinků,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- oftalmologické nálezy,
- hematologická xxxxxxxxx x jejich výsledky,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky (xxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xxxxxx moči),
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx je to xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.29. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX - INHALAČNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xx hlodavcích)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Několik xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x to po 90 xxx. Xxxxxxx-xx xx xxx dosažení xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx x atmosféře xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Během xxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx pozorují x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx uhynou, i xx, xxxxx xxxxxxx xx konce pokusu, xx pitvají.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Před xxxxxx se zdravá xxxxx zvířata náhodně xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x testované xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx vznikla příslušná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jiná xxxxxxx, xxxx xxx x nich známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx je xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx xxxxx důvody xxxxx tomu. Xxxxxxx xx xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx studiích xx xx xxxxxx stejný xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou úroveň xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 samic x 10 samců). Xxxxxx musí být xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v průběhu xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x během následujících 28 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx skupiny x xxxxxx úrovní koncentrace x xxxxx kontrolní xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx). X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxx jen x xxxxx xxxxx. Pokud xxxxxxxx xxxxxx expozice x člověka, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx vyvolaly odstupňované xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx s xxxxxx x střední xxxxxxxxxxx x x kontrolní xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx měl xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
1.2.2.4 Xxxxxx expozice
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx 6 hodin xx ustavení rovnováhy xxxxxxxxxxx studované látky. X případě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxx xx používá xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx třeba ho xxxxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxx bránil xxxxxxxxxx zvířat a xxx inhalační expozice xxxxxxxxx xxxxx byla xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx přesáhnout 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxx pozorování
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx celého období xxxxxxxx x xxxxxxxx x zaznamenávat toxické xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, xx xxxxxx se objeví x opět xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3. Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxxx skupinách, která xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx aplikace, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx být 22 xX ± 3 xX. Relativní xxxxxxx xx být xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx případů, xxx xx xxxx možné (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx voda.
Používá xx xxxxxxxxx inhalační xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx potřebných xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xx třeba xxxxxxxx xxx, xxx podmínky x celém xxxxxxxxxx xxxx xxxx stejné. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Měření xxxxxxx vzduchu (xxxxxxxxxxx).
x) Skutečná koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx o xxxx xxx ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxx této xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx dobu xxxxxx experimentu xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, jak xx xx prakticky xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxx představa x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx měří tak xxxxx, jak xx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
x) Během xxxxxxxx x xx xx se zvířata xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx zaznamenávají; xxxxx xxxxx má xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx denně pozorovat xx příznaky toxických xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, stupeň x xxxxxx. Xxxxxxxxxx x kleci zahrnuje xxxxx xxxx, srsti, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x krevního oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xx zaznamenávají xxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx nedocházelo ke xxxxxxx zvířat xxxx xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
U xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má provést xxxx podáváním testované xxxxx a xx xxxxx xxxxxx nejlépe x všech xxxxxx, xxx přinejmenším x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, vyšetří xx xxxxxxx zvířata.
(x) Xx konci xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx a testy xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx trombocytů.
(x) Xx xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), alaninamino xxxxxxxxxxx (xxxxx glutamát-pyruvát xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx transamináza), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x celkové xxxxxxxxx x séru. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx rozšíření xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
(x) Analýza xxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxx, xxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxx dřívější kontrolní xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx parametrů xxxxx xxxx začátkem xxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx dutiny x jejich xxxxxx. Xxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x ohledem na xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x makroskopickým postižením, xxxxx (xxxx xx xxxxxxx neporušeny, zvážit x xxxxxxx vhodným xxxxxx, xxx aby xx xxxxxxxxx struktura xxxx - xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx), tkáň xxxxxxxxxxx, xxxxx - x řezech xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx a xxxxxxx, hypofýza, štítná xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx místě brzlíku, xxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx orgány), (xxxx), xxxxxxx (je-li xxxxxxxx), xxxxx, žaludek, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, tlusté x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx žláza), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x kostní xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (páteřní xxxxx ve třech xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx xx posuzují, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxx příznaků xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx skupiny, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Je xxxxx vyšetřit xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx léze.
(x) Xx xxxxx vyšetřit xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinách.
(x) Plíce xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx a střední xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože xx xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx histopatologická vyšetření xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(e) Xxxxxxx-xx xx satelitní xxxxxxx, xxxxxxx se histopatologické xxxxxxxxx na tkáních x xxxxxxxx, x xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx typy xxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Je x tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x průběhu pokusu xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxx pokusu: Popis xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, systému xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Popsat xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrací x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x charakteristikou xxxxxxxxxxx (např. směrodatnou xxxxxxxxx). Mají xxxxxxxxx xxxx xxxxx:
a) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx zařízením,
b) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
x) povaha xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxx,
x) skutečná koncentrace x xxxxxxx zóně,
x) medián xxxxxxxxx xxxxxx (u xxxxxxxx),
- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxx a podle xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx toxických xxxx xxxxxx účinků,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx xx možné,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.30. XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dní x xxxxx, vhodnou xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jedna xxxxx xx skupinu, xx větší část xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx denně xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx chována xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx započetím xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2 Testovací xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx nebo xxxx). Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxx běžně xxxxxxxxx xxxxx laboratorních xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx započata xx nejdříve po xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx studie xx xxxxx xxxxxx ve xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. V xxxxxxx, xx vlastní xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx a kmen x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx úroveň xxxxx je třeba xxxxxx xxxxxxx 40 xxxxxx (20 samic x 20 xxxxx), xxxxxx x xxx xxxxxxxxx skupinu. Samice xx xxxx být xxxxxxxxx a xxxxxx xx xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxx počet xxxxxx.
V případě xxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx) xx možné xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx ne xxxx xxx 4 xx každého xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.3 Dávky x frekvence expozic
Xx třeba xxxxxx xxxxx xxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx dávka by xxxxxx xxxxxxx prokazatelné xxxxxxx xxxxxxxx. Střední xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx ve xxxxxxxx xxxxx mezi xxxxxxxx x nízkými xxxxxxx. Xxxxx dávek xx xxx xxxx x úvahu xxxxxxxx xxxxxxxxxxx studií.
Obvykle xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxx x potravě, je xxxxx xxxxxxxx, xxx x xx měla xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx ohledu x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx expozice testované xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jehož xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ani vehikulu.
1.2.2.5 Xxxxxx aplikace
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx způsobu xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx aplikace xxxxxxxx xxxxxx technické problémy. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx může být xxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx testu x xxxxxxxx rozsahu xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx x předchozích testů xxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx
Tam, xxx xx testovaná xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xx-xx xxxxxx jedna x xxxx, xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx přednost xxxxxx aplikaci, pokud xxxxxx proti tomu xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx dostat xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x tobolce.
Xxxxxxx xx xx měla xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v týdnu, xxxxxxx dávkování pět xxx x týdnu xxxx xxxx x xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x následné xxxxxxxxx. Xxxxxxx, především x xxxxxxx xx praktické xxxxxxx, dávkování xxxxxxx xxxxx je považováno xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Protože inhalační xxxxxx xxxx technicky xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx aplikace, xxxx xxx xxxxxxx podrobněji xxxxxxxxx x xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace může xxx xxxxxxx alternativou x specifických situacích.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxx xxxxx xx xxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), nebo x xxxxxxxxxx na xxxxxx expozici x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), s xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx denně xx stejnou xxxx xxx, použitou i xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. V obou xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx rozdíl mezi xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, že x xxxxx xx zvíře 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx denní xxxxxxxx x ještě xxxxxx xxxxxxx xxxxx víkendu.
Xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Nicméně, xx xxxxx xxxx x xxxxx určité xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx simulaci xxxxxxxx xxxxxxx prostředí mohou xxx xxxxxxxx nutnosti xxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx a technik xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx konstrukce xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x rovnoměrná xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní x xxxxxxxxx komory xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, tak xxx byly xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx komory xx xxxxxxx udržuje xxxxx xxxxxxx x tím xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx prostřední. Komory xx xxxx minimalizovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx by x xxxxx udržení xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx monitorování xxxxxxxx:
(x) průtok xxxxxxx: rychlost průtoku xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx kontinuálně;
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx denní xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx než 15 % střední xxxxxxx;
(x) teplota a xxxxxxx: xxx hlodavce, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 xX x xxxxxxx x komorách 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx kontrolovány xxxxxxxx;
(x) xxxxxx velikosti xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx komor x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx měly xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Vzorek xxxxxxx xx xxx být xxxxxxxxxxxxxxx xxx distribuci xxxxxx, kterým je xxxxx xxxxxxxxxx, a xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx prováděna xxxxx během xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxxxx stabilitu aerosolu, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxxx stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx exponována.
1.2.2.6 Trvání xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx měla xxxxx xxxxxxx 12 xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxx. xxxxx nebo uložení xx xxxxxxx x xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, která jsou xxxxx xxxx moribundní. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx sledovat, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx toxických účinků, x xxxx za xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nemocí, xxxxxxxx nebo kanibalismu.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx neurologických x očních změn x xxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx objevení a xxxxxx xxxxxxxxx příznaků xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx individuálně x xxxxx xxxxxx jednou xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx za xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx spotřeby xxxxxxx (x vody xxx, kde je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x pitné vodě) xxxxx během xxxxxxx 13 xxxxx x xxx přibližně xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx zdravotní stav xxxx změny tělesné xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx frekvence xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. obsah xxxxxxxxxxx, hematokrit, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx srážlivosti) xx xxxx být xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, šest xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx skupiny. Xxx xxx je xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx od xxxxxxxx potkanů. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx před xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxx klinické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx studie, měl xx xxx stanoven xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek se xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx patologických xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx se i x skupiny x xxxxxx xxxxxxxx nižší.
1.2.3.3 Xxxxxxx moči
Xxxxxx xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pro analýzu xxxxx xxxxx od xxxxxxxx zvířat a xx xxxxxxxx intervalech xxxx hematologické xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx skupiny xxxxx xxxxx a xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, objem a xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (semi-kvantitativně),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx- xxxxxxxxxxxxx).
1.2.3.4 Biochemické xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx měření xx všech nehlodavců x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, pokud xxxxx pro xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Od xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx vzorky před xxxxxx. X těchto xxxxxx je připravena xxxxxx x jsou xxxxxxxxx následující xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxx. aktivita xxxxxxx xxxxxxxxx, aktivita xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), glutamát xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), xxxxx xxxxxxxx transpeptidázy, ornithin xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxxx xxxxxxx na xxxxx,
- xxxxx na xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx aspartát aminotransferáza
1.2.3.5 Pitva
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx byla xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx viditelné xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx být xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Mělo by xxx provedeno xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx změn x xxxxxxxxxxxxxxx nálezy.
Xxxxxxx xxxxxx x tkáně xx měly být xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx se xxxxxxx týká následujících xxxxxx x xxxxx:xxxxx3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, mozečkové xxxx, kory mozkové), xxxxxxxx mozkového, štítné xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, thymu, trachey x xxxx, srdce, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, ledvin3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, ilea, xxxxxxx střeva, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, močového měchýře, xxxxxxxxxxxx uzlin, slinivky, xxxxx3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, samičí xxxxxx xxxxx, kůže, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), xxxxxx x xxxxxx dření x xxxxxxxx xxxxx včetně xxxxxx, a xxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x inhalačních xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx studiích, xxxx jsou inhalační xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx a xxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodítko.
3) tyto orgány x 10 zvířat xx xxxxxxx x xx skupinu u xxxxxxxx x ze xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx
1.2.3.6 Histopatologie
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxx léze vyskytující xx x kterémkoli xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
(x) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x tkání x kompletním xxxxxxx xxxxx lézí nalezených:
1. x všech xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
2. x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxx či xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx způsobené xxxx pravděpodobně xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx s nižšími xxxxxxx,
(x) xxx, xxx výsledky svědčí xxx xxxxxxxx zkrácení xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx vyvolání xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx vyšetří xxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) informace x xxxxxxxxx lézí, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx zvířat, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx. xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxx xxx správné posouzení xxxxxxxxxxx změn xxxxxxxxxxxx x zvířat s xxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx počet zvířat xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx a procento xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx uznávané xxxxxxxxxxx metody.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx o testu
Xxxxxx x xxxxx xxxx pokud možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- živočišný druh, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx pro vytváření xxxxxx x aerosolů, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx používá. Dále xx třeba popsat xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x expozici: ve xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx (xxxx. standardní xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
(c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky vstupující xx inhalační xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vzduchu)
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně
(f) xxxxxxx velikosti xxxxxx (xx-xx xx xxxxxxxxxx)
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx
- xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxx
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xx xxxxx
- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx
- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznak x jeho další xxxxx
- xxxx x spotřebě xxxxxxx x tělesné hmotnosti
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- použité hematologické xxxxx a výsledky
- xxxxx klinické xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx moči)
- xxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X NEHLODAVCI
1. XXXXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx koncentracích xxxxxxxx xxxxxxxx březích xxxxxxxxx xxxxxx, jedna xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x tom xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx před xxxxxxxxxx datem porodu xxxx březí xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx i x xxxxxxx xx použita x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx- x xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx laboratorních xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Potom jsou xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx náhodně xxxxxxxxx xx experimentálních xxxxxx.
Oplodnění xxxx xxx xxxxxxxxx přirozenou xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Aplikace xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx během xxxxxx organogeneze. Xxx xxxx termínem xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x podrobeny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx orgánů xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx zpomaleného xxxxx, opožděné osifikace x krvácení do xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Běžně xxxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxx, myš, křeček x xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxxxx xxxxxxxx kmeny. Používaný xxxx xx neměl xxx nízkou plodnost x xxxx xx xxx u xxx xxxxx reakce xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxx jednotlivě.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx aspoň 20 březích xxxxxxx, xxxx xxxx křečků xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx studované xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx podáno xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx znát xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx mít vliv xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx zvířaty v xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx x výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx fyzikálně chemické xxxx biologické xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx x ideálním xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxx xx mírné snížení xxxx, xxx už xx xxxx xxx 10 % xxxxx. Xxxxx úroveň dávek xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Střední xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx byly geometricky xxxxxxxxx mezi nízkou x xxxxxxx dávkou.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx, že xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxx dávce xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, není xxxxx testovat na xxxxxx xxxxxxxx dávek.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxx xx xxx, kdy xx xxxxxxxxxx vaginální xxxxx x/xxxx xxxxxxx (pokud xxxxx). Xxxx aplikace xx měla zahrnovat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxx období xx xxxxx xxxxxxxxx 6. xx 15. xxx x xxxxxxx x xxxx, 6. xx 14. xxx x xxxxxx x 6. xx 18. xxx x xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx za xxxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx inseminace, xx xxxxx xxxxxxxxxx x předchozím xxxxxx xxxxx xxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Další sledování x opatření xxxx xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxxx orálně xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx samicím xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx období testu. Xxxxx může xxx xxxxxxxx xx váhu xxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx látky xxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx periodicky vážena x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx posledního xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Samice xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx utratit x xxxxx makroskopicky vyšetřit. X xxxxxxxxxx xx xxxxx pokračovat x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx až do xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx před xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx vyhnout xx xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx porodu. Xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx změny xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, dále xxxxxxxxx, oběhového, xxxxxxxxxxx x centrálního xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x vážit zvířata.
1.2.3.1 Xxxxx
Pokud dojde x xxxxxxx během xxxx xx xxxxx xxxxxx, je xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na morfologické xxxxxxxxx xxxx patologické xxxxx, které mohly xxx xxxx xx xxxxxx březosti. Xxxxx xx xxxxx xx xxxxx odstranit dělohu x xxxx obsah xxxxxxxx s ohledem xx úmrtí embryí x zárodků x xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Obvykle je xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx. U xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx stanovit xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x vypočítat průměr. Xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X potkanů, myší x xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx kosterní xxxxxxxxx x zhruba xxxxx xxxxxxx až xxxxxxxx xxxx x x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx abnormit xxxxxxxxxx x skeletu.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, počet xxxxxx, která xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x abnormalitami xxxxxxx nebo měkkých xxxxx x vztah xxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxx. Výsledky xx xxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx možno xxxxxx xxxxxxxxx uznávané xxxxxxxxxxx metody.
3. ZPRÁVA
3.1. Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx x testu xx xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx,
- dávky (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx použito) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxx xxxxxx (xxxxx xx bylo xxxxx xxxxxxxx),
- dobu xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx potravy,
- délka xxxxxxxx x údaje x xxxx (včetně xxxxxxxxxxxx xxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxx (živé/mrtvé, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (živé/mrtvé xxxxx, pohlaví, xxxxxxx xxxxxxx a měkkých xxxxx),
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.32. XXXX XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx v týdnu, xxxxxxx cestou, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx a xx xxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx za účelem xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxx tumorů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx chovají v xxxxxxxxx podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxx dní xxxx xxxxxxxxx testu. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx možno xxxxxx i xxxxx xxxxx (xxxxxxxx i xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxx laboratorních zvířat. Xxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx odstavení xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx činit xxxx než ± 20 % xx xxxxxxx. V případě, xx xxxxxxx studii xxxxxxxxx xxxx subchronické xxxxxx toxicity, xx xxxxx xxxxxx stejný xxxx x xxxx x xxxx studiích.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 samců) xxx každou úroveň xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Samice xx měly xxx xxxxxxxxx a negravidní. Xx-xx plánováno xxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxxxx xx xxxxx zvýšit x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Dávkové xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xx při xxxxxxxxx tři dávkové xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxx by xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx přírůstků (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxxx xxxx dožití xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx. Xxxxxx xx neměla xxx xxxxx xxx 10 % vysoké xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx xxxxx stanovit xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Je-li xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xx být xxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx xxxxxxxxx x každém xxxxxx x exponovanou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx.
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx nebo použije-li xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, která není xxxxxxxxxx xxx vehikulu.
1.2.5 Xxxxxx aplikace
Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx orální, xxxxxxxx x inhalační. Volba xxxxxxx podání xxxxxx xx fyzikálních x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a pravděpodobném xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx studie
Xxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x gastrointestinálního xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx přednost orální xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x pitné xxxx xxxx xxxxxxx v xxxxxxx.
Xxxxxxx by xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, protože xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx může xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" xxxxxxxx x období xxx xxxxxxxx, x tudíž xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x ohledem xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Dermální xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx vstupu x člověka x xxxx xxxxxxxx způsob xxxxxxxx xxxxxxx poškození.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx studie
Protože xxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx způsoby xxxxxxxx, xxxx xxx uvedeny xxxxxxxxxx informace x xxxx xxxxx podání. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané lidské xxxxxxxx, takže xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx xx pět xxx x xxxxx (přerušovaná xxxxxxxx), xxxx v xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx po xxxx xxx v xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx jednou xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx i pro xxxxxxx expozičního boxu. X xxxx případech xxxx zvířata obvykle xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx expozicí xx v xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx účinků xxxxx expozice x xxxxx delším xxxxxxx xxxxx víkendu.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx kontinuální xxxxxxxx závisí na xxxxxx xxxxxx a xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx být xxxxxxxxxx. Nicméně, je xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx technické xxxxxx. Xxxxxxxxx, výhody xxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx podmínek zevního xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x technik monitorování.
Xxxxxxxxx komory
Xxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx komorách, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx dynamický xxxxx xxx nejméně 12 xxxxx vzduchu xx xxxxxx, aby xxx zajištěn dostatečný xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx identickou xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve všech xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx se obvykle xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x tím xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx by xxxx xxxxxxxxxxxxx shlukování xxxxxxxxxxx xxxxxx. Obecně xx x xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx x komoře objem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(a) Xxxxxx vzduchu: rychlost xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx kontrolována xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxx: během xxxxx xxxxxxxx by xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxx kolísat xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Teplota x xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx xx měla xxx udržována x xxxxxxx 22 ± 2 °X x xxxxxxx v xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx případů, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx kontrolovány xxxxxxxx.
(x) Měření velikosti xxxxxx: xxxx by xxx stanovena distribuce xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové částice xx měly xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x dýchací xxxx xxxxxx. Vzorek xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx distribuci xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx exponováno, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému suspendovanému xxxxxxxx, i xxxx xxxxxx xxxx aerosolu xxxx respirabilní. Analýza xxxxxxxxx částic xx xxxx být prováděna xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Trvání xxxxx xxxxxxxxxxxxx zahrnuje větší xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx zvířete xxxxxxxxx xxx test. Xxxx xx měl xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x 24 měsících x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x delší xxxxx xxxxxx resp. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx měla být 24 xxxxxx xxx xxxx x křečky x 30 měsíců xxx potkany. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx takové xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx, xxxx počet xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, ve xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx odpovědi, xxxxx pohlaví se xxxxxxxx xxxxxx. Tam, xxx xxxxx předčasně xxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx příčin, xxxxxx to xxxxx xxxx k ukončení xxxxxx testu, pokud xxxxxxx skupiny xxxxxxxxxx xxxxxxx projevy, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xxxxx negativní xxxxxxxx xxxxx, nesmí xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, kanibalismem xxxx x důsledku xxxx xxxxxxx) v xxxxx xxxxxxx xxxxx než 10 % a xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % v 18 xxxxxxxx u xxxx x křečků x x 24 měsících x xxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Denní xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x srsti, xxx x sliznic, xxxxx i xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx nervového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Pravidelná xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxx zvířat ze xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx utracena x xxxxxxx.
Xxxxxxxx příznaky x mortalita by xxxx být zaznamenány x všech xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx vývoji xxxxxx: doba xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, rozměry, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx spotřeby potravy (x xxxx tam, xxx je testovaná xxxxx podávána x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx a xxx xxxxxxxxx xx tříměsíčních xxxxxxxxxxx, xxxxxx by xxxxxxxxx stav xxxx xxxxx xxxxxxx váhy xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx jednou xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx období testu x xxxxx xxxxxx xx čtyři xxxxx xx tomto xxxxxx.
1.3.2 Klinická vyšetření
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Pokud xxxxxxxxxx xxxxxx x klecích xxxxxx x zhoršeném xxxxxxxxxx stavu zvířat xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých krvinek.
Xx 12 měsíců, xx 18 měsíců x xxxx utracením xxxxxx se provede xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx zvířat xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx, zvláště údaje xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx údaje z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, diferenciál xx xxxxxxx x x skupiny x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Pitva
Xxxxxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx nemocná. Všechny xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx, nebo léze, xxxxx xx mohly xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.
Následující xxxxxx x tkáně xx měly xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx histopatologické vyšetření: xxxxx (včetně xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, kory xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxx, štítná xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, děloha, akcesorní xxxxxxxx xxxxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzlina, xxxxxx xxxxxx žláza, svalovina xxxxxx, xxxxxxxxx nerv, xxxxxxx x kostní xxxxx, stehenní xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx (xxxxx, xxxxxxx hrudní x bederní) x xxx.
Naplnění xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx uchování xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx plic x xxxxxxxxxxx studiích xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx. X inhalačních studiích xx měl xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx včetně xxxxx xxxxxx, hltanu a xxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx provede x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx zvířat, která xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx během xxxxx, x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x s xxxxxxx xxxxxx.
(x) Všechny xxxxxx xxxxxxxxx okem x xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx vyšetří xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx.
(x) Xx-xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx lézí xxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se provede x daném xxxxxx xx tkáni x x xxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xx-xx přežití xx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou xxxxxxxxx xxxxx než x xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x skupina x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
(x) Je-li ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx doklad x xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx xxxxxx, které xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxx nižší dávkovou xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx tabulek, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx zjištěné během xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x počet xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx, obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, dieta,
- xxxxxxxx xxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxx klimatizace, zneškodňování xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Dále xx třeba xxxxxx xxxxxxxx pro měření xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx je xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: ve xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x měly xx xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx x xxxxxxxxxx zařízení,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx vzduchu,
(c) xxxxxxxxx koncentrace (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx objemem xxxxxxx),
(d) povahu xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně,
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx xx relevantní),
- xxxxxxx xxxxxx (včetně xxxxxxxx, xx-xx užito) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx tumorů xxxxx xxxxxxx, dávky x xxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx nebo zda xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx,
- doba, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,
- xxxx x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- použité hematologické xxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.33. KOMBINOVANÝ XXXX CHRONICKÉ TOXICITY/KARCINOGENITY
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxx
Cílem xxxxxxxxxxxxx xxxxx chronické xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx a karcinogenní xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx tento xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx satelitní xxxxxxxx. Dávka xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx může být xxxxx xxx nejvyšší xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx x testu xxxxxxxxxxxxx xxxx zkoumána xxx xx obecnou toxicitu, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Zvířata x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupině xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx dní x xxxxx, vhodnou xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx expozici xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx denně xxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx tumorů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x pokusných xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nejméně xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx testem xx xxxxx zdravá xxxxxxx náhodně rozdělí xx kontrolních x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Preferovaným xxxxxx xx potkan. Xx xxxxxxx předchozích xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x další xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx kmenů xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Expozice xx xxxx xxx xxxxxxxx co xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx studie xx neměl xxxxxx xx váze xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, že vlastní xxxxxx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx druh a xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 zvířat (50 xxxxx x 50 xxxxx) xx xxxxxx xxxxxx dávky a xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx. Xx-xx plánováno xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se xxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Exponovaná xxxxxxxxx xxxxxxx (skupiny) pro xxxxxxxxx patologie xxxx, xxx xxxx xxxxxx, xx každá měla xxxxxxxxx 20 xxxxxx xxx každé xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx pohlaví.
1.2.3 Dávkové xxxxxx x frekvence xxxxxxx
Pro test xxxxxxxxxxxxx xx zvolí xxxxxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxx xxxxx souběžné xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň by xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (méně xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxx jinými xxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxx známky toxicity. Xxxxxx xx xxxxxx xxx nižší než 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx dávku/dávky xx xxxxx stanovit xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxx dávkou.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx toxicity.
Xxx xxxxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx zahrnuty xxxxxxxxx xxxxxxxxxx skupiny a xxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx dávka xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx denně. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x pitné xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, měla by xxx xxxxx k xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná xxxxxxxxx skupina xx xxxxxxxxx x každém xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx expozice xxxxxxxxx látce.
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx se pro xxxxxx aplikaci xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx další xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ani xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx způsobu podání xxxxxx na xxxxxxxxxxx x chemických charakteristikách xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Tam, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x je-li xxxxxx jedna x xxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx x potravě, xxxxxxxxxx x pitné xxxx xxxx podanou x xxxxxxx.
Ideálně xx xx měla xxxxx podávat xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx vést k xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx v období xxx aplikace, x xxxxx ovlivnit výsledky x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx s xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Aplikace xxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x člověka x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx studie
Xxxxxxx xxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxxxx komplikovanější xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Intratracheální xxxxxxxxx xxxx xxx platnou xxxxxxxxxxxx v specifických xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx napodobují xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx šest xxxxx xxxxx xx pět xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx sedm xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx stejnou xxxx xxx, použitou x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. V xxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, že v xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx na ústup xxxxxx denní expozice x xxxxx xxxxxx xxxxxxx během víkendu.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xx lidské xxxxxxxx, která má xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx třeba xxxx x úvahu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx simulaci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx nutností xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx komplikovanější (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx zaručuje xxxxxxxxx proud xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx za xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, tak xxx xxxx expoziční xxxxxxxx srovnatelné xx xxxxx aspektech xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxxx komory se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaných xxxxxx. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx expozice xx koncentrace testované xxxxx neměla xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,
(x) teplota x xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °C x xxxxxxx v xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx používána x xxxxxxxxxx testované látky x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx být stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x tekutých nebo xxxxxxx aerosolů. Aerosolové xxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx by xxxxxxxxxxxxx odpovídat celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx značná xxxx xxxxxxxx xxxx respirabilní. Xxxxxxx velikosti xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx generujícího xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx normální xxxx života xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx. Xxxx xx měl xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x 24 xxxxxxxx x potkanů. Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx s delší xxxxx života resp. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx tumorů, xxxx xxxxxxxx xx měla xxx 24 xxxxxx xxx xxxx a xxxxxx x 30 xxxxxx pro xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx takové xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx, když počet xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nebo v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx kterém xx xxxxxxxx xxxxxxxx rozdíl xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx zvlášť. Xxx, xxx uhyne xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx to xxxxx xxxx x xxxxxxxx celého xxxxx, xxxxx ostatní xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx projevy, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Aby bylo xxxxx xxxxx negativní xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx ztráty xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) v xxxxx xxxxxxx větší xxx 10 % x přežití xx xxxxx skupinách xxxxx xxx nižší než 50 % x 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx pohlaví a 10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx každého xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity xx xxxx být x xxxxxx aspoň 12 xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx mělo xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx umožnilo xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx látce, xx xxxxxxxxxxxxxx projevů xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx postupu
1.3.1 Pozorování
Xxxxx pozorování xxxxxx x klecích xxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxx, xxx x xxxxxxx, jakož i xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, autonomního x xxxxxxxxxxx nervového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování.
X xxxxxx exponované xxxxxxxxx xxxxxxx (skupin) xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx klinické xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat xx xxxxx, aby xx zabránilo ztrátám xxxxxx ze xxxxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chyb x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, lokalizace, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenává.
Xx xxxxx xxxxxxxx měření xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v pitné xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx přibližně xx xxxxxxxxxxxx intervalech, xxxxxx xx zdravotní xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx váhy ukázaly xxxxxxx jiné frekvence xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 týdnů xxxxxx testu x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx po xxxxx období.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Hematologie
Hematologická xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxxxxxxx, celkový xxxxx bílých krvinek, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx tři xxxxxx, xxxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx šestiměsíčních intervalech, x xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx to xxxxx, xxxxxx xx xxxxx intervalech by xxxx být xx xxxxx potkanů.
Xxxxx xxxxxxxxxx zvířat v xxxxxxx xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx krvinek xx xxxxxxx xx xxxxxxxx ze xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx dávkou a x xxxxxxx. Xxxxx xxxx data xxxx xxxxx x vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx se xxxxxxx x x xxxxxxx x dávkou xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx od 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx sbírají xxx xxxxxxx xxxxx možno xx xxxxxxxx zvířat x ve stejných xxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx stanovení xxxx xxxxxxxxx buď xx vzorcích xxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx podle xxxxx x xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, objem x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).
1.3.2.3 Biochemické xxxxxxxxx
X přibližně xxxxxxxxxxxxxx intervalech x xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx biochemická xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx vedle xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Z těchto xxxxxx je připravena xxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- koncentrace xxxxxxxx,
- xxxxx xx funkci jater (xxxx. xxxxxxxx bázické xxxxxxxxx, aktivita xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), gamma xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx na xxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx v xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
1.3.2.4 Makroskopické patologické xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx zemřela xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx odeberou xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxx diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, které xx mohly xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx. Xxxx by xxx provedeno porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxxxxx nálezy.
Xxxxxxx xxxxxx x tkáně xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx histopatologické xxxxxxxxx. Xx se xxxxxxx týká xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx: xxxxx3) (xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx žlázy x xxxxxxxxxxx tělísek, xxxxx, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterníku, xxxxxx, xxxx, slepého střeva, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, lymfatických xxxxx, xxxxxxxx, gonád3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, samičí xxxxxx žlázy, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx nervu, xxxxx (krční, xxxxxx x xxxxxxx), xxxxxx x kostní xxxxx x xxxxxxxx kosti xxxxxx xxxxxx, x xxx. Naplnění xxxx x močového měchýře xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx studie, xx xxx xxxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, hltanu x xxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx klinická xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx patologovi xxxxxxxx xxxxxxx.
3) Xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx pohlaví x na xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx satelitní skupiny x xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx. Pokud xx x satelitní skupině xxxxxxxxxx xxxxxxx dávce xxxxxx patologické xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, vyšetří xx histologicky xxxxxx xxxxxx všech ostatních xxxxxx x ostatních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx skupin xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx ukončení.
Xxx testování karcinogenity:
(x) xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx x tkáních xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx testu x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx kontrolní x s xxxxxxx xxxxxx;
(b) xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx;
(x) xx-xx xxxxxxxx rozdíl x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx provede x daném xxxxxx xx xxxxx i x dalších skupinách;
(x) je-li přežití xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx podstatně xxxxx xxx x xxxxxxx, xxxx xx xxx kompletně xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx dávkou;
(x) xx-xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx o xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx účinků, xxxxx xx mohly ovlivnit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, ukazujících xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx počet zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxx xxxxxxxx během xxxxx, dobu jejich xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx statistické xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxx,
- podmínky xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vycházejícího z xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx xx xx žádoucí, stability xxxxxxxxxxx xxxx velikosti xxxxxx aerosolu. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (xxxx. směrodatná xxxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxx vzduchu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(c) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx xx inhalační xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vzduchu),
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,
(e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx zóně,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx kde relevantní),
- dávkové xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxx) a xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx x typu xxxxxx,
- doba xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx ,
- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- doba, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznak x xxxx další xxxxx,
- xxxx x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- oftalmologické xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x výsledky,
- xxxxx klinické xxxxxxxxx x všechny xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem použitých xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.34. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - JEDNOGENERAČNÍ XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxx v odstupňovaných xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxx a xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx spermatogenního xxxxx (přibližně 56 xxx u xxxx x 70 xxx x potkanů), aby xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx spermatogenezu.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx xx dobu alespoň xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. V xxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx podává xxxxxxxx xxxx xxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxx x kojení xxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx je třeba xxxxxx modifikovat.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zdravá mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx zahájením pokusu x xxxx podmínkách xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Doporučuje xx xxxxxxxxxx látku xxxxxxx x xxxxxxx xxxx x pitné xxxx. Jiné xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx testu. Pokud xx xxxxxxx x xxxxxxxxx aplikace vehikulum xxxx xxxx aditivum, xxxx být x xxxx xxxxx, že xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx aplikuje 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xx té doby xxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxx. Nepoužívá xx xxxxx x nízkou xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a xxxx x/xxxx věku. Plodnost xxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx. Zvířat x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x kontrolní, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx aplikace.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxxxx exponovaná i xxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx dostatečný xxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxx x potomstva, x tím zajistit xxxxxxxxxx hodnocení vlivu xxxxx xx plodnost, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx chování x X xxxxxxxx, xxxxxx, xxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 xx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xx xxxxxxx. Xxxx porodem xx xxxxxxx samice xxxxxxxx do zvláštních xxxxxxxxx nebo mateřských xxxxx x je xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx hnízda.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Použijí xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dostávají vehikulum x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx potravy, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx xxxxxx.
Testovaná xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx to xxxx xxxxxxx xxxxxx fyzikálně-chemickými xxxxxxxxxxx nebo povahou xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) xx měla(y) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx by xx daly xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx dávka by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxx u xxxxxx xxx x xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx dávka stanoví xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx změny xxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx samic xxxxx xxxxx být případně xxxxxx xx základě xxxxxxx hmotnosti x 0. nebo 6. xxx xx začátku xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Limitní test
X případě látek x nízkou xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxx dávka, xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity, xxxx nepříznivé xxxxxx xx plodnost, xxxx xxxxx provádět xxxxxx xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx postupu
1.3.1 Xxxx pokusu
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx rodičovské xxxxxxxx (P) xxxxx xx xxxx xxxx xx devíti xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X potkanů aplikace xxxxxxxxx xxxxx týdnů xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx xx xxx utratí x xxxxxxx xx konci xxxxxx připouštění, xxxx xx pokračuje x xxxxxxxx a mohou xxx použiti pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx pak xxxxxxxx x vyšetřeni xxxxx před xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx aplikace xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxx po xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pak po xxxx tři xxxxx xxxxxx připouštění, v xxxx xxxxxxxxx xx xx odstavení F1 xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx dávkovacího xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx samec xx dvěma xxxxxxx).
X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx se ponechá x týmž xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx anebo xx dobu 3 xxxxx. Každé xxxx xxxx xxxxxx vyšetřeny xx xxxxxxxxxx spermatu xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx nálezu xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x cílem xxxxxxx xxxxx neplodnosti xxxx. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukčních xxxxxx nebo vyšetřením xxxxxxxxxx cyklu x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Velikost xxxx
Xxxxxxxx použitým xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx možnost xxxxxxx xxxxxxxx a pečovat x své potomstvo xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx standardizace xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx dodržet xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. a 4. xxxx po xxxxxx xx velikost xxxxx xxxx upraví vyřazením xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx xx xxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 samců x 3 xxxxxx. Xxxx menší než 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé zvíře xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx jednou xx xxx. Xxxxxxxx změny xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx příznaky xxxxxxxx xxxxxx mortality xx zaznamenávají. Xxxxxx xxxxxxx se měří xxxxx xxx xxxx, xxx xxxxx doby xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx x x průběhu laktace xx xxxx příjem xxxxxxx (a vody, xxxxx xx látka xxxxxx x xxxxx xxxx) ve xxxxxx xxx, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X zvířata se xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x xxx xxxxx. Všechna xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx se xx nejdříve xx xxxxxx vyšetří a xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx mláďat, xxxxx xxxxxxx a xxxxxx porodů x xxxxxxxxxx hrubých xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx x celé xxxx xx xxxxx xxxx xx xxxxxx, xx 4. x 7. xxx x xxxxx xxxxx týden xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx matek x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx
1.3.5.1 Pitva
Xx utracení nebo xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx P xxxxxxxxxxxxx vyšetří na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xx defekty.
1.3.5.2 Histopatologická xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, děloha, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, semenné xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x cílové xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx X xx xxxxxxxx xxx mikroskopické xxxxxxxxx. V xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxx u xxxxxx, která xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx zvířat, xx xxxxxxx x x X xxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx případech se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx makroskopicky xxxxxxxxx. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx podezřelých z xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx mikroskopické xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxx xx sumarizují v xxxxxxxxx, kde xx xxxxxx pro každou xxxxxxxx skupinu počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx plodných xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, typ xxxx x procento zvířat xxxxxxxxx tyto xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx statisticky xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx použít xxxxxxxxxx obecně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx metoda.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx měla xxxxx xxxxx obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx zvířat,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx dávce x xxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxxxxxx, gestace x životaschopnosti,
- xxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vrhu, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx a konečnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx,
- toxické x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx růst,
- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X generace,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis všech xxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxx xxxxx, xxxxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.35. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx (X) generace xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx v xxxx xxxxx a xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x xxxx x 70 dnů x xxxxxxx), xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx nepříznivý xxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (P) xxxxxxxxx xxxxx po xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx estrus.
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X době xxxxxxxxxxx xx testovaná xxxxx podává xxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxx, x době xxxxxxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxxx xx látka xxxxxxxx xxxxxxxx filiální xxxxxxxx X1 x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, v xxxx xxxxxx x xx xx doby odstavení X2 xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx testovací xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx zdravá xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx dvou skupin - kontrolní x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx (X) jsou xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx zahájením xxxxxx v těch xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx nebo v xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx podání xxxx xxxx možné. Všechna xxxxxxx látku xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx x usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jiné xxxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx nemají toxické xxxxxx. Látka xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Pokusná xxxxxxx
Dává se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Používají se xxxxxx X xxxxxxx, xx té doby xxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx x nízkou xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x váhy xxxx věku. Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx x xxxx pohlaví. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Počet a xxxxxxx
Xxxxx exponovaná x xxxxxxxxx skupina xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx zaručeno cca 20 březích xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Cílem xx získat xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnocení xxxxx xxxxx na xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x mateřské chování, xxxxxx, xxxx a xxxxx xxxxxxxxx generace X1 od xxxxxx xx xxxxxxxxxx, x xxxxx jejich xxxxxxxxx xxxxxxxx F2 xx xx odstavení.
1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx se těhotné xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xx xxx poskytnut xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, pak xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dostávají xxxxxxxxx v největším xxxxxxxx objemu. Pokud xxxxxxxxx látka xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx výživy.
Xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx látky x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx populaci. Xxxxxxx xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx minimální xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxx xxxxxxx testované xxxxx, x nejnižší xxxxx xx neměla vyvolávat xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx x xxxxxx xxx x xxxxxxxxx.
Xxx podání xxxxxx nebo x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx hmotnosti. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx tělesné xxxxxxxxx x 0. nebo 6. xxx od xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxxx xxxx
V xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, pokud xx xxx dávka 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx žádným xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, nemusí xx xxxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx studie xxxxx, že xxxxxx xxxxx, vyvolávající jasnou xxxxxxxxx xxxxxxxx, nemá xxxxxxxxxx účinky xx xxxxxxxx, xxxx nutné xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx úrovních.
1.3 Xxxxx postupu
1.3.1 Plán xxxxxx
Xxxxx aplikace xxxxxx xxxxxxxxxx generace X začne ve xxxx pěti až xxxxxx xxxxx, xxxxx xx pětidenní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. U xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx připouštění (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx xx buď xxxxxx x vyšetří xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx v aplikaci x jsou xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx utraceni x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx pokusu.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx rodičovské xxxxxxxx X xxxxx xx xxxxxxxxx aklimatizaci x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Denní xxxxxxxx pokračuje pak xx xxxx tři xxxxx období xxxxxxxxxxx, x době xxxxxxxxx xx do xxxxxxxxx X1 xxxxxxxxx. Je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx podle znalostí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. o xxxxxxx metabolismu xxxx. x xxxxxxxxxxxx.
Aplikace xxxxxxxx generace X1 xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx jejich xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx při xxxxxxxxxxx
Xx možno xxxxxx párování 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x jeden xxxxx) anebo 1 : 2 (xxxxx xxxxx ke xxxxx xxxxxxx).
X případě 1 : 1 xxxxxxxx, samice se xxxxxxx x xxxx xxxxxx ve společné xxxxx xx otěhotnění xxxxx po xxxx 3 týdnů. Každé xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Den 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx nálezu xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxx spermatogeneze, xxxxxxx xxxxxxxx F1 se xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 11 xxxxx u xxxx x 13 xxxxx x xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx generace X1 xx xxxxxxx xxxxxxx páry z xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx se utratí xx xxxxxxx.
Dvojice, x xxxxxxx nedojde x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx s xxxxx zjistit xxxxx xxxxxxxxxxx páru. To xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx příležitosti x oplodnění x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukčních orgánů xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx vrhů
Zvířatům xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx porodit xxxxxxxx x xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx velikost xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx xx xxx; pokud xx xxxx xxxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 samců a 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx než 8 xxxxx standardizovat. Standardizace xxxx xxxxxxxx X2 xx xxxxxxx xxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx xxx pozorováno xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Významné změny xxxxxxx, příznaky xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx před, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx xxxxxx kontrolovat xxxxxx xxxxxxx denně. Xx porodu a x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx stejný xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Rodičovská X x X1 xxxxxxx se xxxx xxxxx xxx aplikace x xxx xxxxx. Xxxxxxx pozorování xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx od dne 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx se xx xxxxxxxx xx porodu xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxx mláďat, xxxxx xxxxxxx a živých xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx čtvrtém xxx xx uchovají xxx vyšetření xx xxxxx defekty. Xxxx xxxxxxx se spočítají x xxxx xxxx xx xxxxx xxxx xx xxxxxx, xx 4. x 7. xxx x xxxxx xxxxx týden xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x fyzickém xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Pitva
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X x F1 xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx F1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X2 xx xxxxxx xx odstavení.
Xx xxxxxxxx nebo úmrtí xx xxxxxxx rodičovská xxxxxxx X x X1 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx reprodukčního xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xx defekty.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxx, děložní xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, epididymis, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx cílové xxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxx P x X1 se xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx, že xxxx orgány nebyly xxxxxxx vyšetřeny v xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx X a X1 xxxxxx kontrolní xxxxxxx x skupiny dostávající xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx, x xxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx v průběhu xxxxxx. Xxxxxx, které xxxxxx abnormality u xxxxxx skupin zvířat, xx xxxxxxx i x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx vyšetřují xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx postižené. Xxx xxx bylo xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xx mají xxx podrobit mikroskopické xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx těhotných xxxxx, typ xxxx x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Může xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx přijímaná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- údaje x xxxxxxx xxxxxx x závislosti xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x životaschopnosti,
- xxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx do ukončení xxxxxx,
- tabulka xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx mláďat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx utracením,
- xxxxxxx x xxxxx účinky xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx růst,
- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxx vývoj,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X x F1 xxxxxxxx, vybraných xxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx je xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.36. XXXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x průběhu xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Látka xxxx. xxxx metabolity xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx stanovovány x xxxxxxx xxxxxxxxxx, tkáních xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxx" formou xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx xx použito značení, xxxxxx se xxx, xxx poskytlo co xxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Zdravá xxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xx laboratorní xxxxxxxx xxxxxxx po xxxx pěti dnů xxxx testováním. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx může xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Toxikokinetické studie xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx více xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx se xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvažovaných xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx studiích xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx používáni xxxxxxxx, xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx ± 20 % průměrné xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxx x vylučování xx xxxxx xxxxxxx 4 xxxxxx xxx xxxxxx jednotlivou xxxxx. Xxx xxxxxxxxx není xxxxxx xxxxxxxx určitému xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx provádět xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x různých xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxx xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx zvířat xx třeba brát x xxxxx xxx xxxxx zvířat, která xxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx xxxx, v nichž xxxx testování prováděno.
Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx velikost skupiny xxxxxx xx úměrná xxxxxxxx xxxxxx.
Zahrnuje-li xxxxxx xxxxx počet xxxxx x sledovaných xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx skupiny zvířat xx xxxx počítat x xxxxxx časových xxxxxxxxx a plánovaným xxxxxxxxx zvířat, xxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxx než 2 zvířata. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxx xx to, xxx xxx xxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky xx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx x deplece.
1.2.2.3 Xxxxx
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx podání xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx testované xxxxx. Xxxx xx xx xxx xxxxx dávka xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx dávka, po xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx parametrech xxxx xxxxx xxxxxxxx toxické xxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxx podávání xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x podávání xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx prováděny xxxxxxx způsobem xxxxxxxx x xx-xx xx xxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx toxikologických xxxxxxxx. Testovaná látka xx obvykle podávána xxxxxx sondou xxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx kůži, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx skupině xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxx užitečné xxx xxxxxxxxx relativního xxxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxx x organismu.
Xxxxxx xx se xxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx vstřebávání x xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx xxxxx podána xxxxxx xxxx v potravě, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, zvláště xx-xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx denně x xxxxxxxx toxicity x další relevantní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x údaji x jejich xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxx pokusných xxxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xx zdůvodněných xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx před xxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx.
1.3.1 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx podávané xxxxx mohou být xxxxxxx xxxxx metody x xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx1), x xx např.:
- xxxxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx metabolitů x xxxxxxxxx xxxx. x xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx vzduchu x xxxx xxxxxx zbytků x karkasu,
- xxxxxxxxx biologické odpovědi (xxxx. studie akutní xxxxxxxx) mezi xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- porovnání množství xxxxx xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxx vylučovaných ledvinami xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx skupinou,
- xxxxxxxxx plochy pod xxxxxxx závislosti koncentrací xxxxxxxxx látky a xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x plazmě na xxxx x xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.
1) X xxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx, xx xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx podávána xxxxxxx způsobem, xxxxx xxxxxxxxx úplnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
V xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx 2 xxxxxxxx, x xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx jeden xx xxx:
- xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx kvalitativní informace;
- kvantitativní informace xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx a ev. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xx zvířat x různých xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3 Vylučování
Při xxxxxx vylučování xx xxxxx xxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx případech žluč. Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx xx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx podání xxxxx, x to xxx do vyloučení 95 % z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 7 xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx speciálních xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx vylučování xxxxxxxxx látky x xxxxx x době xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxx objasněna xxxxxxxxx metabolitů x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx, kde xx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx studií.
Xxxxx informace o xxxxxx xxxx metabolismem x xxxxxxxxx látky xxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxxx studií např. xxxxxxx účinků látky xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx - XX xxxxxxx a xxxx xxxxx látky xx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxxxx xxxxx se podle xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x tabulkách, xxxxx možno xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Pro xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu xx xxxxxx xxxxxxx x charakteristiky variability xx xxxxxx x xxxx, dávce, xxxxx x xxxxxxx (pokud xx xx xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x navrženy metabolické xxxxx xxxxxxxxx látky.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxx typu xxxxxxxxx xxxxxx xx zpráva x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxx,
- xxxxxxxx dávky x xxxxxxxxx podání,
- xxxxxx(x) podání x xxxxxxx použitá vehikula,
- xxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx rozdělené xxxxx xxxxxxx, dávky, režimu, xxxx, xxxxx x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx vstřebávání a xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx,
- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x biologickém xxxxxxxxx,
- metody xxxxx xxx biochemická xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx,
- diskusi xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX SLOUČENIN XXXXXXX - AKUTNÍ XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Při xxxxxxxxx a vyhodnocení xxxxxxxxx účinků látek xx důležité xxxx x úvahu schopnost xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx specifický xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X určitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx fosforu xxxx xxxxxxxxxx zpožděné projevy xxxxxxxxxxxxx x mají xxx testovány xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx testy xx vitro xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx látek, xxxxx xxxxx xxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nález x in xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx látka xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2 Definice
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx anhydridy xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, thiofosfonových xxxx amidothiofosforečných, xxxx xxxx xxxxx, které xxxxx způsobit xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx látek této xxxxxxx.
Xxxxxx neurotoxicita xx syndrom projevující xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx s pozdním xxxxxxxx těchto xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx target esterase) x xxxxxxx tkáni.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx může být xxxxxxxxx xx pozitivní xxxxxxxxx skupině x xxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nezměnila.
Příkladem xxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx neurotoxickým xxxxxxx xx xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, XXXXXX 201-103-5, chemický xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (TOCP).
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx orálně v xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx 21 dnů xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x paréza. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx inhibice XXX, se provádí x xxxxxx náhodně xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx podání xxxxx. 21 xxx po xxxxxx látky xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.5.1 Příprava
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx interferujících xxxxxxxx onemocnění x xxxxxxxxxxxxxx léčby a x normální xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována v xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx nebo xxxxxx umožňující volný xxxxx xxxxxx x xxxxxx pozorování xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx orálně xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx rozpuštěné xx xxxxxxx vehikulu, xxxx xx např. xxxxxxxxx xxxx, pevné xx xxxxxxxxxx rozpustit, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.6 Experimentální xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx kura domácího (Xxxxxx gallus xxxxxxxxxx) xx věku 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx plemena x xxxxxxxxxx velikosti x chovají se xx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.6.1.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx kontrolní xxxxxxx s xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně jako x xxxxxxxxx.
X xxxxx skupině má xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx, aby aspoň xxxx x xxxx xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx xxxx x druhý xxx xx podání) a xxxx xxxxxxx 21xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx může xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxx xxxxx xxxx xxxxxx, kterým xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx určeny xxx biochemii x xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx se x provádějící xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx chovu).
1.6.1.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxx předběžná xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx bude xxxxxxx v hlavní xxxxxx. Xxxxxx úmrtnost xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx nezbytná xxx stanovení xxxxxxxxx xxxxx x hlavní xxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxx úmrtí xxx xxxxxx cholinergní účinky, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx maximální xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (viz xxxxxx B.1 bis). Xxxxxxxxxx údaje xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx při výběru xxxxx.
Xxxxxx dávky xxxxxxxxx látky v xxxxxx xxxxxx xx xxxx být xx xxxxxxxx x přihlédnutím x výsledkům xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx dávky x hornímu xxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxxxxx (šest) x xx 21 xxxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxx). Xxxxxxx nebo jiný xxxxxxxx přípravek, o xxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, za xxxxxxx postupů popsaných xxx tuto xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx pozorované xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x látek x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx očekávat, xxx není xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxx naznačuje xxxxxxx použití xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.6.1.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx xx 21 xxx.
1.6.2 Xxxxx xxxxxxx
Xx aplikaci xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx následky xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx dávce.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx začít xxxxxxxx xx podání xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x průběhu xxxxxxx xxxx dnů x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx 21 xxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, včetně nástupu, xxxx, xxxxxx a xxxxxx abnormálního chování. Xxxxxx se hodnotí xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stupnice x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx vyjmou x klecí a xxxxxxx xxxxxx motorické xxxxxxxx xxxx např. xxxxxxxxxxx po žebříku, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Umírající xxxxxxx x zvířata xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx způsobem xxxxxxx x xxxxxx.
1.6.2.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx zváží xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxx jednou xxxxx.
1.6.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxx vybraných x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny x vehikulem x xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolní skupiny (xx-xx skupina použita) xx xxxxxx v xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx vypreparovat xxxx x. ischiadicus x xxxxxxxxxx jeho xxxx xx inhibici XXX. Xxxxx xx xxxxxxxx tři xxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxx testované xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxx tři xx 48 xxxxxxxx, xxx slepice x xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny xx xxxxxxxx xxxxx xx 24 hodinách. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx klinických xxxxxxxx naznačuje, že xxxxxxx látka se x organismu xxxxxxxx xxxxx xxxxxx (hodnotí xx nástup cholinergních xxxxxxxx), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx dvakrát ze xxx zvířat, x xx xxxx 24 xx 72 xxxxxxxx xx podání xxxxx.
X těchto xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxx analýza xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx však xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, což xxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx jako inhibitoru XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Pitva x xxxxx zvířat (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx makroskopické xxxxxxxxx stavu mozku x xxxxx.
1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx histologicky xxxxxxx. Tkáně se xxxxxx in situ xx xxxxxxx perfúzních xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (střední xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx - xxxx xxxxx xx provádějí x horní xxxxx xxxxx, xxxxxxx hrudní x lumbosakrální, z xxxxxxxxxxx nervů xx xxxxxxx distální xxxx x x. xxxxxxxx (x jeho xxxxx x x. gastrocnemius) x z x. xxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx specifickými xxxxxxx xx xxxxxx a xxxxx.
2. SBĚR A XXXXXX XXXXX
Negativní xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx) běžně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx neurotoxicitu. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx sledování.
Xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx zvířata. Údaje xx xxxx xxxxxxx xx tabulky. X xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx na počátku xxxxxx a xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x procento zvířat xxxxxxxxxxxx každý xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx vyhodnotí x xxxxxxxx výskytu, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx jevy x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx třeba vyhodnotit xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx informace, xxxxx xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx x xxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- podrobné xxxxx x přípravě, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;
- podrobné údaje x způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx a xxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxxx úrovně xxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx látky;
- xxxxxxxx xxxxx x podání xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx úmrtnosti;
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx příznaků (xx vratných xxxx xxxxxxxxxx);
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky;
- xxxxxxx nálezy;
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických nálezů;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, u kterých xx xx možné.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Hodnocení x Xxxxxxxxxxxx
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx x metodou XXXX XX 418.
X.38. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX SLOUČENIN XXXXXXX 28DENNÍ OPAKOVANÁ XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Xxx xxxxxxxxx a vyhodnocení xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx schopnost xxxxxx xxxxxxx látek xxxxxxx specifický typ xxxxxxxxxxxxx, který xxxxxx xxx zjištěn x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X určitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx fosforu xxxx xxxxxxxxxx zpožděné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxx testovány xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx vitro xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nález x in xxxxx xxxxxx však xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx 28xxxxx test xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx informace x xxxxxx zdravotním xxxxxx vznikajícím x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx časového xxxxxx. Poskytne informace x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx dávce a xxxx poskytnout xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx kterém xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Definice
Xx xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x xxxxx této xxxxxx jako "organické xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx organické xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx fosforečné, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx kyselin xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx, xxxxx mohou xxxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx této xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx v xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx počátkem xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx esterázy - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxx testovací metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx denně xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 28 xxx. Zvířata xxxx sledována nejméně xxxxxx denně, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x paréza xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx NTE, xx xxxxxxx x slepic xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx skupiny 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx. Xxx týdny xx poslední xxxxx xxxx zbývající slepice xxxxxxxx a xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nervových xxxxx.
1.4 Xxxxx metody xxxxxxxxx
1.4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx zdravé xxxxxxx slepice xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x podmínkách chovu x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Používají xx xxxxxxxxxx velké klece xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx pozorování xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx orálně, xxxxx 7 xxx x xxxxx, buď xxxxxx, xxxxxxxxxxxx tobolkami xxxx jinou srovnatelnou xxxxxxx. Tekutiny se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxx,
jako xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, neboť xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx známy nebo xxxxxx xxxx testem xxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx nosnice xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx domesticus) xx xxxx 8 až 12 xxxxxx. Používají xx xxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx se xx xxxxxxxx, které dovolují xxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Počet x pohlaví
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx počet slepic, xxx xxxxx šest x xxxx xxxxx xxx utraceno pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (po xxxxx x xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx) a šest xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx expozice.
1.4.2.3 Xxxxx xxxxx
Dávkové xxxxxx xx zvolí x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx neurotoxicitu x x xxxxxx údajům x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx neurotoxicity, nezpůsobit xxxxx xxxxxxx ani xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx zvolí xxxx xxxxxxxxxxx dávek xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx sledovat xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx. Xxxxxxxx dávka xx neměla vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx x dávkou xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx a xxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxx xxxxxx, nevyvolá xxxxx pozorované toxické xxxxxx a jestliže xxxxx xxxxx u xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx uvažovat x studii x xxxxxxx vyšší xxxxx. Xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx potřebu xxxxxxx ještě vyšší xxxxxx xxxxx.
1.4.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx pozorují xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx a 14 dnů xx xx, nebo xx xxxxxxxx a xx xxxxx podle plánu.
1.4.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxx xxx v xxxxx xx 28 xxx.
1.4.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx má začít xxxxxxxx xx začátku xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, do xxxxxxxx podle xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x trvání. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx abnormality xxxxxxx, xxx nemá xx na xx xxxxxxxx. Ataxie se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx paréza. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x klecí a xxxxxxx xxxxxx motorické xxxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Umírající zvířata xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx xx xxxxx vyloučit, xxxxxxxx xxxxxxxx utratit x xxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx slepice se xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a pak xxxxxxx xxxxxx týdně.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxx vybraných x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx xx xxxxxx x prvních dnech xx aplikaci poslední xxxxx. Xxx analýzu xxxxxxxx XXX xx xxxxxx mozek x xxxxxxxx xxxxx. Je xxxxxx vypreparovat xxxx x. xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx jeho tkáň xx xxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx slepice x xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx a xxxxx tři xx 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx studie xxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx aplikaci, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dobu a xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx.
X těchto xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx provede xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (AChE). Xx xxxx může xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx vést k xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.
1.4.3.4 Pitva
Xxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx usmrcených i xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Nervová xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tkáně xx fixují in xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Odebírá xx: mozeček (střední xxxxxxx xxx), prodloužená xxxxx, xxxxx (xxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx krční xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx), x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx část x n. xxxxxxxx (x xxxx xxxxx x m. xxxxxxxxxxxxx) x x x. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
Nejprve se xxxxxxx xxxxxxxx tkáně xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxx x xxxxxx skupiny x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx histologické vyšetření x xx xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
2. SBĚR X XXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx touto xxxxxxx (xxxxxxxxx, histopatologie a xxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxxxx testování na xxxxxx neurotoxicitu. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx výsledky xxxxx vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx pro jednotlivá xxxxxxx. Údaje se xxxx sestaví xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx poškození, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxx xxx x xxxxxx poškození nebo xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx z xxxxxxxx výskytu, závažnosti x korelaci xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou x xxxxxx uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxx obsahuje xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být získány:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx plemeno,
- xxxxx a xxxxx xxxxxx,
- zdroj, xxxxxxxx ustájení atd.,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx začátku xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- podrobné xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x homogenitě testované xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxx vehikula,
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx dávek,
- xxxxxxxxxxx podávaných xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxx pro xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx jiná xxx 24 x 48 xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx o toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx úmrtnosti,
- xxxxxx xxx xxxxxx (XXXXX),
- xxxxxxxxx, stupeň x xxxxxx xxxxxxxxxx příznaků (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, u xxxxxxx xx xx možné.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x Interpretace
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx s xxxxxxx XXXX TG 419.
X.39. Test xxxxxxxxxxx syntézy XXX x xxxxxxx jaterních xxxxxxx in xxxx
1. XXXXXX
Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX TG 486, Xxxxxxxxxxx DNA Xxxxxxxxx (XXX) Xxxx Xxxx Xxxxxxxxx Liver Xxxxx Xx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx testu xxxxxxxxxxx syntézy DNA (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx určit xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4).
Tento xxxx xx vivo xxxxxxxxxxx xxxxxx pro zjišťování xxxxxxxxxxxxx účinků chemických xxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx následnou reparaci. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx metabolismu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx xxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, že xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (UDS) xx hodnotí tak, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx značených xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (X-xxxx) xxxxxxxx DNA. Xxxxxxxxxxx xx metoda, při xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx značený xxxxxxx (3H-TdR). Xxx xxxxx XXX xx xxxx se nejčastěji xxxxxxxxx potkaní xxxxx. Xxxx tkáně než xxxxx xx sice xxxx xxxxx použít, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Detekce xxxxxxxx xxxxxx na xxxxx xxxx XXX, xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx UDS xxxxxxx vhodná k xxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx repair" (20 - 30 bází), xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx "shortpatch xxxxxx" (1 - 3 xxxx) je méně xxxxxxx. Dále xxxx xxxxxxxx x mutacím x xxxxxxxx neopravení, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx XXX. Xxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxx xxx x xxxxxxxxx procesu xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxx xxxx sice s XXX xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx DNA xxxx xxxxxxxx excizním xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx, xx XXX test xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxx: net xxxxxxx xxxxx (XXX) xxxxx xxx určitá, xxxxxx stanovená xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx laboratoř xxxxxxxxxxx test.
Xxx xxxxxxx grains (XXX): xxxxxxxxxxxxx míra XXX xxxxxxxx buněk xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxx x jádře (XX) x průměrným počtem xxx x xxxxxxxxxx (XX): NNG = XX - CG. Xxxxx NNG se xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxx x xxxxxxx, v xxxxxxxxxxx kulturách xxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx XXX synthesis, XXX): opravná xxxxxxx XXX xx xxxxxx x odstranění úseku XXX obsahujícího xxxxxx xxxxxxxxx vyvolaného xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Xxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxxxx buňkách xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx excizi a xxxxxxxxxx segmentu DNA xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx fyzikálním xxxxxxxxx. Xxxx vychází obvykle x xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx XXX xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx buněk x X-xxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxxxxxx 3X-XxX se xxxxxxx xxxxxxx autoradiograficky, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxx náchylná x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx v S-fázi, xxxx je xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Příprava
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Běžně xx xxxxxxxxx potkani, xxx ovšem xxxxxx xxxxxxxxx vhodný xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % průměrné xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx chovu
Xxxxxxxxx xxxxxxxx chovu xxxx xxxxxxx ve Všeobecném xxxxx x xxxxx X.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx zvířat
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx jedinci xx náhodně xxxxxxx xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx pěti dní xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x laboratorních xxxxxxxxxx. Xxxxx je třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx toho, jak x xxx xxxx xxxxx umístěny.
1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x xx-xx xx xxxxx, látka xx před xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx mohou podávat xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx třeba používat xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx o stálosti (xxxxxxxxx) prokazují, xx xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.3 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.3.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyvolávat xxxxxxx účinky x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xx xxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx x kompatibilitě x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx vodné xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Xx každého xxxxx xx třeba xxx každé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx. Je třeba xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx spontánní xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx aktivaci xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx patrné, ale xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx preparátu. Xxxx látky pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Doba xxxxxx xxxxxx | Látka | XXX | XXXXXX |
odběr v xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx v xxxxxxxxx (12-16 xxxxx) | N-2-fluorenylacetamid (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx xxxxx použít x xxxx xxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxxx cestou, xxx xx xxxxxxxx testovaná xxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x pohlaví xxxxxx
X xxxxx skupině xxxx xxx minimálně xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx jeden, xxxx xxx xxxxxxx.
Xxxxx x době, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x týmž xxxxxxxxxx druhem xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx možné xxxxxxx testování pouze xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx samcích. Xxx, kde xxxxxxx xxxxxxxx testovaných látkám xxxx xxx pohlavně xxxxxxxxxx, xxx xx xxxx například x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx test xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podává xxxxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Obvykle xx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx. Nejvyšší xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx by xx xxxxxxxx letální xxxxxx. Xxxxx xxxxx představuje xxxxxx 50 - 25 % dávky xxxxx.
Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx pro stanovení xxxxx x xxxxxxxxxxx xx případ xx xxxxxxx. Provádí-li xx xxxxxx ke zjištění xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xx použití xxxxxxxx živočišného xxxxx, xxxxx, pohlaví x xxxxxxxxx xxxxxx, jaké xx xxx použijí x hlavní xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx definovat xxxxx xxxxxxxxxxxx určité xxxxxx toxicity x xxxxxxx (xxxx. pyknotická xxxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx dávce xxxxxxxxx 2&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxx nebo ve xxxx xxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx na základě xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx očekávané xxxxxxx xxxxxxxx může být xxxxxxx x limitním xxxxx vyšší dávka.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx žaludeční xxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx i jiné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xx xxx mohla xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxx, xxxxxx xxxxxxx oběhem. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x nemá xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx organismu; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx koncentracích xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx xxx, xxx objem xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Příprava xxxxxxxxx xxxxx
Jaterní xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxx zpracovávají obvykle 12 - 16 xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxx je zapotřebí xxxxx další xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 xxxxxx xx xxxxxx látky), xxxxxx xx xx 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx reakce xxxxxx. Xx ovšem možno xxxxxx x xxxx xxxx odběru xxxxxx, xx-xx to odůvodněné xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jaterních xxxxx xx xxxxxxx zakládají xxxxxxx jater in xxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx zajistit, xxx xx čerstvě xxxxxxxxxxx xxxxxxx buňky xxxxx xxxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx kontroly mají xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx XXX
Čerstvě xxxxxxxxx xxxxx jaterní xxxxx xx xx xxxxxxx xxxx (xxxx. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx inkubují x xxxxx obsahujícím 3X-XxX. Po inkubaci xx xxxxxx odstraní( xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx obsahujícím nadbytek xxxxxxxxxxx thymidinu, xxx xx xxxxxxx neinkorporovaná xxxxxxxxxxxxx (xxx. "xxxx xxxxx"). Xxxxx xx xxx promyjí, xxxxxx x xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se "xxxx xxxxx" xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xx xxxx jednoho nebo xxxx xxxxx x xxxxxxxxxx), xxxxxxxx, xxxxxx x počítají xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx připraví xxx xxxx xxx preparáty.
1.5.8 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx preparáty xxxx obsahovat dostatečný xxxxx xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zjevné xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx úroveň xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxx preparátech x xxxxxxx xxxxxxx xx obvykle hodnotí 100 buněk; pokud xx buněk méně xxx 100 na xxxxxxx xxxxxxx, musí xx být xxxxxxxxxx. Xxx počítání xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x X-xxxx, ale xxxxx xxxxx x X-xxxx xx registruje.
Xxxxxxx metodou xx xxxxxxx stupeň xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zrnek.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxx údaje z xxxxxxxxxxxx preparátů x xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx buňku, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx x xxx xx stanoví xxxxx xxxxx "xxxxxxx xxxxx" (XXX) xxxxxxxxx xxxxx CG xx xxxxx XX. Xxxxxxxx-xx xx "xxxxx x xxxxxx", musí xxx xxxxxxxx, kterými se xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x podložena xxxx x historických xxxx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami; pokud xx statistické xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx vybrat a xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxx studie.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxxxx | (X) xxxxxxx XXX xxx xxxxxx xxxxxxxxxx prahem, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx historických xxx xxxx xxxxxxxxxx | |
nebo | (XX) xxxxxxx NNG xxxxxxxx xxxxx xxx u xxxxxxxx kontroly | |
xxxxxxxxx | (X) xxxxxxx XXX na úrovni/pod xxxxxx historického xxxxx x kontrol | |
xxxx | (XX) xxxxxxx XXX xxxxxx signifikantně xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxxx. |
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxxx dat, xxx xxxxxxx, že je xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, vztah xxxxx - xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla být xxx pozitivní reakci xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx získaného xxxxxxx xxx vyvodit x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx testu XXX se xxxxxxx xxxxxxxxx buňkami xx xxxx xxxxxxx, že xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx XXX, xxxxx xxx opravit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx DNA in xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx XXX, xxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx vzít x xxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx širokého xxxxxxx nebo je xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx (např. xxxxxxxxx toxicita).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx živočišný xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx podmínky, xxxxxx xxxx.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx volby x xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- případný převod xxxxxxxxxxx látky x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx dávku (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx a vody,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx vzorků,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxx autoradiografická metoda,
- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx zrn x xxxxxxx, xxxxxxxxxx a "xxx xxxxxxx xxxxxx" xxx jednotlivé xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx,
- počet "buněk x xxxxxx", xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx x X-xxxx, xxx-xx stanoven,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Závěry.
Metoda X.39. byla xxxxxxx xxxxxxx předpisem č. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.40. LEPTAVÉ XXXXXX XX KŮŽI
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxxxxx Xxxxxx xxx xxx Xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxx, ECVAM, Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx, Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx validní xxx xxxxx xx xxxxx na xxxxxxx xxxxxx na xxxx: xxxx xx principu xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx potkana (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, XXX) x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx lidské xxxx. Xxxxxxxxxxx studie XXXXX xxxxxxxxx, xx xxx xxxxx dokáží xxxxxxxxxx rozlišovat mezi xxxxxxx xxxxxxx leptajícími x xxxxxxxxxxxxx kůži. Xxxxxx test xxxxxxxxxxx x modelu xxxxxx xxxx xxxxxxxx správně xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (známé xxxxx xxxxxxxxxxx těžké xxxxxxxxx xxxx X35, x xxxxxxx látky xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, X34). Xx uveden xxxxx a xxxxxxx xxxx testů; xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxx uživatele.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx.
1.3 REFERENČNÍ XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxxxxx, viz xxxx xxxx. 1.5.3.4 a 1.7.2.3.
1.4 PRINCIP XXXXXX - XXXX XXX XX XXXX POTKANA
Testovaný xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxx až 24 xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx potkanů utracených xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx mají leptavé xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx schopnosti xxxxxxx normální xxxxxxxxx x xxxxxxxxx funkce xxxxxx xxxxxxx.Xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx transkutánního xxxxxxxxxxxx odporu (XXX) xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5kΩ) (4) (5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx TER xxx xxxxxxxx hodnotu xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxx a neutrálních xxxxxxxxxxx xxxxx (jejichž xxxxxxxx xxx x xxx. (6)) je xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx zařadit xxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xx snížil xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx vyskytují (2) (7).
1.5 XXXXX METODY - XXXX TER XX XXXX XXXXXXX
1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxx přípravu xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23denní) xxxxxxx, Xxxxxx xxxx srovnatelný xxxx. Malými xxxxxxx xx zvířata xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxx omyjí xxxxxxxx otíráním x xxxxxx xx ponoří xx roztoku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, x koncentracích inhibujících xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx 3 xxx xx použijí. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx než 31 xxx.
1.5.2 Příprava terčíků xxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx kůže z xxxxxxxx xxxxxx x x xx xx xxxxxxx xxxxxxx přebytečný xxx. Xxxx se xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) trubice, x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx xx přetáhne xxxxxx X-xxxxxxx, xxxxxx se xxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx trubice x X-xxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Gumový X-xxxxxxx xx pak xxxxxxx pečlivě xx xxxxx XXXX trubice xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx do xxxxxx obsahující xxxxxx xxxxxx hořečnatého (154 xX), xxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx. 2).
1.5.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx na xxxxxxxxxxx povrch xxxxxx xxxxxxx (obr. 2). Xx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xx terčík v xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxx celý xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx x xxxx maximální xxxxx xxxxxxx. X některých xxxxxxx látek toho xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx 30 xX, xxx xx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx tři xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx. Látka se xxxxxx xx dobu 24 hodin (xxx xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx xx promýváním xxxxxxx vodovodní xxxx xxxxx maximálně 30 xX xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xx napomoci xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx zhruba 30 xX.
1.5.3.2 Xxxxxx XXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odpor (XXX) xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx můstku xxx střídavý xxxxx (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx měřením xxxxxxxxxxxx odporu xx xxxxx povrchové xxxxxx xxxx přídavkem xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx xx ethanol xxxxxxxx tak, xx xx xxxxxxx xxxxx, x xxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 154 xX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx na obě xxxxxx xxxx x xxxxx se xxxxx x xΩ/xxxxxx (xxx. 2). Rozměry xxxxxxxx x xxxxx holé xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx xxxxxxx (silné) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx XXXX xxxxxxx xxx, xxx byla xx xxxxxxx xxxxxx hořečnatého xxxxxxxx xxxx stejná xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xx receptorové xxxxxxx xxx, aby xxxxxx xx xxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzdálenost xxxx xxxxxx hranou xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx XXXX xxxxxxx (obr. 1), tato xxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx hodnotu xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx než 20 xΩ, může xx být důsledek xxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx epidermální xxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx se xxxxxxx tento povlak xxxxxxxxx, například tak, xx xx PTFE xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx 10 sekund xx xxxxxxxxxx, roztok xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx se opakuje x čerstvým xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxx metodu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro popisovanou xxxxxx a xxxxxxxxx xxxx xxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X kyselina xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
&xxxx;
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx voda
|
10 – 25
|
1.5.3.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (detergentů) xxxx xxxxxxxxxxx organických xxxxx hodnota XXX xxxxx nebo xxxxx 5 xΩ, xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx) barviva. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx falešně xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Nanesení x odstranění xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx testovanou látkou xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 2 xxxxxx po 150 μx 10% (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x destilované vodě. Xxxxxxx xxxx se xxx xxxxxx xx xxxx 10 sekund xxxxxxxxx prudkým proudem xxxxxxxxx vody, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx) barvivo. Xxxxx xxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx x PTFE xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx (xxxx. xx 20 ml xxxxxxxxxx xxxxx pro scintilaci) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx vody. Xxxxxxx xx po xxxx 5 minut xxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxxxxx veškeré zbytky xxxxxxxxxxxx (nenavázaného) barviva. Xxxxx oplach xx xxxxxxx. Xxx se xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxxxxx x 5 xx 30 % (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxx xxxx, kde xx xxxx noc xxxxxxxx xxx teplotě 60 xX. Xx inkubaci xx terčíky xxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxx xx xxxx 8 minut xxx xxxxxxx 21 oC (xxxxxxxxx odstředivá síla ∼ 175). Xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxx xx pak xxxxx 30 % (w/v) xxxxxxxx SDS x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (x/x) (xx. 1 xx xxxxxxxxxxxx + 4 xx roztoku XXX). Xxxxxxx xxxxxxx (OD) xxxxxxx xx xxxx xxx xxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Výpočet xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx sulforhodaminu B x xxxxxxx xx xxxxxxxx z hodnoty XX (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B xxx 565 xx xxxx 8,7 . 104; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B xx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx hodnota. Průměrná xxxxxxx xxxxxxxxxx barviva xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahu xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx látek xxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx barviva (xx/xxxxxx)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X kyselina xxxxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
40 - 100
|
|
Negativní
|
destilovaná xxxx
|
&xxxx;
15 – 35
|
1.5.3.4 Doplňující xxxxxxxxx
Xx xxxxx zvolit xxxxxx dobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxx (xxxx. 2 hodiny) za xxxxxx xxxxxxxxx silně xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx studii xxxx xxxx zjištěno, xx xxxx TER xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx některých xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx xx terčíky xxxx xx 2 hodiny (2), jakkoliv xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx leptajících x xxxxxxxxxxxxx látek xx 24xxxxxxxxx působení.
Získané xxxxxxx TER mohou xxx xxxxxxxxx vlastnostmi x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx hodnota xxx xxxxxxx účinky 5 xΩ byla xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx získaných na xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx aplikaci postupu xxxxxxxxx xxx. Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx jiných xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx okalibrovat xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných x xxxxx, xxx byly xxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxx (3).
1.6 PRINCIP XXXXXXXX XXXXXX - XXXX X MODELEM XXXXXX XXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nanáší xxxxxxx xx xxxx xx 4 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx podle xxxxxxxxxx xxxxxxx pokles životnosti xxxxx stanovené xxxxxxxxx xxxxxx "XXX reduction xxxxx" (XXX = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 difenyl tetrazolium xxxxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx expoziční xxxx. Xxxxxxx xxxxx vychází x předpokladu, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jsou xx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx xxxxx) x jsou dostatečně xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7 XXXXX METODY - XXXX S XXXXXXX XXXXXX XXXX
1.7.1 Modely xxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx kritéria. Model xxxx mít funkční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx vrstvou xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx funkce xxxxxxx corneum xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxx xxxxxxxx xxx, že model xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx, x nichž xx xxxxx, xx xxxx xxx buňky xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx neprocházejí. Model xxxx za xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxx, xxx xx dalo xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx MTT, xx. XX hodnotou) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kontrola xxxx ležet x xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxx xxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx s xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx důležité, aby xxxx prokázáno, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxx xxxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx pokrývala xxxxxx xxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx 25 (μ/cm2). Xx-xx pevná, nanese xx tak, xxx xxxxxxxxx xxxx, a xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx x xxxx zajistil dobrý xxxx. Xxxxx je xx třeba, pevné xxxxx se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx látek (2). Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx xx materiál x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Měření životnosti xxxxx
X měření xxxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XXX, x xxxxx xxxx xxxxxxxxx že x různých xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx kůže xx xx xxxx 3 xxxxx xxxxxx do xxxxxxx MTT x xxxxxxxxxxx 0,3 mg/ml xxx teplotě 20 - 28 oC. Xxxxxxxxx modrý xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XX při xxxxxx xxxxx 545 x 595 xx.
1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx model xxxx x xxxxxx dodržení xxxx působení, promývacího xxxxxxx atd. xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xx metodu x xxxxxxxxx model xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných x látek xxxxxxxxx xx validizační xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxx xxxxx, aby xxxx prokázáno, xx xx použitá xxxxxx xx použití xxxxxx xxxxx látek xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx x xxxxx xxxx laboratoře, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vědecké xxxxxxxx definované dříve (2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx revizí.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.8.1 Xxxx TER na xxxx potkana
Hodnoty xxxxxx (x xΩ) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční látky xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx pro xxxxxxx replikace a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x z xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.8.2 Xxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční látky xxxxxxx v tabelární xxxxx, x xx xxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx a opakované xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x x xxxx xxxxxxxx klasifikace.
1.9 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
1.9.1 Xxxx XXX xx xxxx potkana
Pokud je xxxxxxxx hodnota XXX xxx testovaný xxxxxxxx xxxxx než 5 xΩ, xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Je-li xxxxxxx XXX nižší xxxx xxxxx 5 xΩ x xxxxxxx xx xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx účinky xx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx poskytují xxxxxxx XXX nepřesahující 5 xΩ, xxx provést xxxxxxx penetrace xxxxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x 36 % XXx, xx testovaná xxxxx skutečně xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxxxx účinky, xxxxxx xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxx pozitivní a xxxx xxxxxxx účinky xxxx.
1.9.2 Xxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX pro xxxxxxxxx xxxxxxxx představuje 100% xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Z xxxxxx XX xxx xxxxxxxxxx zkušební xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxx odděluje xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, od těch, xxxxx poleptání způsobují, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxxx jasně xxxxxxxxx předtím, xxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx, x následnou xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx, xx xx xxxx hraniční xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx údaje, xxxxxxxxx stav, popřípadě xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx údaje x xxx xx.
Xxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx použitého xxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx XXX) xxxx procentuální podíl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (test x modelem xxxxxx xxxx) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx kontroly a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx xxxxx xxxxxx pozorovaných xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxx 2
Metoda X.40. byla vložena xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx xx 22.6.2001
B.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX FOTOTOXICITY 3T3 XXX XX VITRO
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx (reakce), k xxx dochází, je-li xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx pak xxxxxx, nebo je-li xxxxxxx kůže xxxxxxx xx celkovém xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx xxxx testované xxxxx, tedy xx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xx spojení x xxxxxxxx ultrafialovému x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx možné xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x světla, xxxxx testem xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx aplikaci x xxxxxxxxxx x kůži, x xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx fotoiritanty xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx byl xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxx společného projektu XX/XXXXXX x xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx používaným xxxxxx xx xxxx. V xxxx 1996 doporučila xxxxxxxx schůze XXXX xxxxxxx xxxxxxxxxx in xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxx porovnávány x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx a xxxx x xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx vynikající predikční xxxxxxxxxx. Test xxxx xxxxxxx x tomu, xxx xxxxxxxxxxx jiné xxxxxxxxxx xxxxxx, jež xxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx, fotoalergie xxxx fotokarcinogenita, x xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, reaguje xxx xxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx vitro xxxxxxxxx. Xxxx není xxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx umožňoval xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látek je xxxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX) xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxx; xxxxxx xx X/x2 nebo x XX/xx2.
Xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx (= xxxxxxxxx x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx viditelného (VIS) xxxxxx dopadajícího na xxxxxx, vyjádřené x xxxxxxx (= X x x) na xxxxxxxx xxxxxxx, např. X/x2 xxxx J/cm2.
Pásma xxxxxxxx délek xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx doporučení XXX (Xxxxxxxxxx International xx L'Eclairage) se xxxxxxx xxxxxxxx XXX (315 - 400 xx), XXX (280 - 315 xx) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxx: za xxxxxxx xxxx xxxxx XXX x XXX xx často xxxxxxxx 320 xx a XXX se xxxxx xxxx na XX-X1 x XX-X2 s xxxxxxx zhruba u 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: parametr, xxxxxx xx xxxx celková xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx buňku, xxxxxxxxx červeně, do xxxxxxxxx xxxxxxxx), jež xxxxx parametrů xxxxxxxx xxxxx testem x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx x porovnání x negativními xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx prošly xxxxx xxxxxxxxxx testu (xxx + UV xxxx - XX), xxxxx xxx působení xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx, kterým se xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxxxxxxx návodu xxx xxxx je xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu na xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx PIF x XXX.
XXX (xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx představující xxxxx dvou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX50) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v nepřítomnosti (-XX) a x xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX ozáření.
MPE (mean xxxxx effect, xxxxxxx xxxxxxxxx): xxxx míra xxxxxxxx z matematické xxxxxxx xxxxxxxxxxx průběhu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) a x xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxx (odezva), xxxxx xxxxxx po xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, nebo xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kůže xx systémovém xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx xxxxx "fototoxicita", xxxxxxxx xx xxxxx xxxx fototoxických reakcí, x nimž xxxxxxx x kůži xxxx, xx xx xx xxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx) xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx podobné xxxx xxx nadměrném xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx působení xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxx xx zapotřebí xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx indukční xxxxxxx x xxxx, xxx se xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxxxxxxx projevy, xx xxxxx dochází xxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx negenotoxické dávce XX/XXX xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx látky.
Fotokarcinogenita: karcinogenita xxxxxxxx opakovanou aplikací xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx UV xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx studii, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xxxxxxxxxx použít xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx byly použity xxx xxxxxxxxxxxxxxxx porovnávání xxxxxx xxxxx (1) (3) (13).
1.4 XXXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx u řady xxxxx (5) (6) (7) (8), xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx rysem xx xx, že xxxxxx absorbovat xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx záření. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxx xxxxx fotoreakce xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx kvant. Xxxxx xx se xxxxxxx, než se xxxxx uvažovat x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx metodického návodu, xxxx by xx xxxx xxxxxxxx absorpční xxxxxxxx testované látky x XX/XXX oblasti (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx OECD č. 101). Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx-1 x xx-1, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciál x není xxxxx xx xx škodlivé xxxxxxxxxxxx účinky xxxxxxxx xxx testem na xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx, xxx xxxxxx jiným xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx dodatek).
1.5 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxx mechanismy, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx reakci (7), xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx je xxxx fototoxicity 3X3 XXX xx vitro xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x přítomnosti a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX záření. Xxxxxxxxxxxx xx při tomto xxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx červeně (xxxxxxx xxx, NR) (9), 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxx/x 3X3 xx xxxxxxxxx xx dobu 24 xxxxx xxx, xxx xx vytvořila kultura xxxxx x jedné xxxxxx (monolayer). Pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx preinkubují xxx xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx x xxxxxx x osmi xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx. Xxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxx vystaví xxxxxxxxxxxxxxx UVA/VIS záření x xxxxx 5 X/xx2 XXX (+UV xxxxxxxxxx), druhá xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx (-XX xxxxxxxxxx). X obou xxxxxxxxxx xx xxx médium xxxxxxx médiem xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxx 24 xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx červeně (neutral xxx xxxxxx, XXX) xx dobu 3 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx x osmi koncentrací xx xxxxxxx relativní xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, vyjádřená xxxx xxxxxxxx xxxxxx x negativních xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislé reakce xxxxxxx v xxxxxxxxxxx (+XX) a v xxxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx XX50, xx. xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx životaschopnost xxxxx x 50 % x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
1.6 XXXXXXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx záření XXX, xxxxxxxxxx údaje: x xxxxx xx xxxxx pravidelně provádět xxxxxxxx citlivosti vůči xxxxxx UVA. Buňky xx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx xxx testu xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx, příští xxx xx xxxxxxx xxxxxx UVA v xxxxx 1 - 9 X/xx2 a xxxxx xxx xx xxxxxx XXX stanoví xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Buňky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx životaschopnost xx xxxxxxx dávkou XXX xxxxxx 5 X/xx2 xxxx xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxx nejvyšší xxxxx XXX xxxxxx 9 X/xx2 xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx než 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx zhruba xx každé desáté xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX, xxxxx xxxx: xxxx splňuje xxxxxxxx jakosti, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx [Xxxx´x xxxxxxxx xxxx solution, XXXX] x 1 % xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxxx (XxXX) nebo xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+UVA) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-UVA).
Životaschopnost negativních xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (XX540 XXX) xxxxxx x NR xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxxx, xxx xxxxx 1 x 104 xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx jamce xxxxxx xxxxx xxxx dnů xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxxx hodnota XX540 XXX x xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxx xxxx rovna 0,2.
Xxxxxxxxx kontrola: při xxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx látkou. Xxx xxxxxxxxx studii EU/COLIPA xxx jako xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx chlorpromazin (CPZ); xxxxx xx xxxx xxxxx doporučuje. Xxx XXX xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx protokolu x xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: XXX xxxxxxx (+UVA): XX50 = 0,1 - 2,0 μg/ml, XXX xxxxxxxxx (-UVA): XX50 = 7,0 - 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (PIF), tzn. xxxxx xxxxxxx EC50, xx xxx minimálně 6.
Xxxxx CPZ xx xxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx chemické skupiny xxxx xxxxxxxxxxxx testované (xxxxxxxxx) xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx dat xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 x XXX xxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 POPIS XXXXXX
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx použita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxxxxx xxxxxxxxxxx Balb/c 3X3 xxxx 31, x xx buď x XXXX xxxx x XXXXX; xx xx proto xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx s xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx kultivační podmínky xxxxxx podle jejich xxxxxxxxxxxx xxxxxx; xx xxxx třeba prokázat, xx jsou xxxxxx xxxxxx.
X xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx nejsou xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, x smí xx použít xxx x případě, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxx narůstat, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3T3 x xxxxxx s nejnižším xxxxxx, pokud xxxxx xxxxxx než 100. Xxxxxxxxx xxxxx Balb/c 3X3 vůči XXX xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolovat, x xx postupem xxxxxxxx xxxxxxx popsaným x xxxxx metodickém xxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x během xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx kultivační xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx Balb/c 3X3 xx xxxxx x XXXX obohacený 10 % séra xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 mM xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 xX / 7,5 % CO2. Xx xxxxxxxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxx zajišťovaly xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx dané xxxxx xxxx. buněčnou xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kultur xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiu x xxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxx x xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx test xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x kultivačním xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxx (xx. xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 48 xxxxx xx nasazení) xxxxxxx xx xxxxxxxxxx (xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx vrstvu xxxxx). V xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx x 96 xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 x 104 xxxxx v jedné xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se buňky xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx x 96 jamkami, xxxxx xxx procházejí xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxx doby, kdy xx xxxxx x xxxxxxxx ozařována (+UVA/VIS) x druhá xx xxxxxxxxxx x temnu (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace
Zatímco xxx všech testech xx vitro pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx systému, xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, xxx xx x xxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xx xxxxx, bylo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zapotřebí. Xxxxxxxxx xx proto ani xx nutné, ani xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx s xxxxxxx metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.1.5 Xxxxxxxxx látka / xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxx stabilitě prokazují, xx se dá xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxxxxxxxxxx, že xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxx červeným xxxxxxx.
Xxxxx xx rozpustí x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x Xxxxxxx vyváženém xxxxxx xxxxxxx (XXXX) xxxx xx xxxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxx (phosphate xxxxxxxx saline, XXX), xxxxx - xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx během xxxxxxxxx - xxxxx obsahovat xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx testovaná xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, rozpustí xx xx xxxxxxx rozpouštědle x koncentraci stonásobně xxxxx, než xx xxxxxxxxxx konečná xxxxxxxxxxx, x následně xx xxxxx x poměru 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 % (x/x) ve xxxxx xxxxxxxxx, xx. xx xxxxx koncentracích testované xxxxx x x xxxxxxxxxxx kontrolách.
Jako rozpouštědlo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxx (XxXX). Xxxxxx xxxxx xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, například xxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vlastnosti, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo vychytávání xxxxxxxx.
Xxx xx napomohlo xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 oC.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX xxxxxxx / xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx: xxxxx správného xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Záření v XXX a xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx spojováno x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx xxxxxx XXX xx v xxxxx xxxxx méně xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xx 313 xx x 280 xx xxxxxxx tisícinásobně. Xxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx dobu) xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx známých xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Dále xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx poškozující xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx xxx x xxxxxxxxxx tepla (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, jimiž xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx - xx xxxx tu xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx tepla x xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx simulátory xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx záření XXX, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxx UVB xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (UVA:UVB ∼ 2 : 1). Příklad xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx validační studii xxxxx xx fototoxicitu 3X3 XXX xx xxxxx je v xxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxx před xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx xxxx zdroj. Xxxxxxxxx UV-metru je xxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx XX-xxxx xxxxx typu x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx, když xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx iradiance xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zdroje x kontroluje se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxx ovšem vyžaduje xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx validační studii xxxx xxxxxxxx, že xxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx2 je xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 necytotoxická a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx se xxxx xxxxx xxxxxxx během 50 xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 1,666 mW/cm2. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx zdroj xxxxxx, xxxx xx dávka xxxxxx XXX xxxxxxx xxx, aby xxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx x průkazu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx expozice xx xxxxxxxxxx xxxxx vzorce:
|
dávka xxxxxx (X/xx2) x 100
|
&xxxx; | |
| &xxxx;
x (min) =
|
&xxxx;
________________________
|
&xxxx;
(1 X = 1 X x)
|
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxxx (mW/mc2) x 60
|
&xxxx; |
1.7.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx všechny xxxxxxxxxxx xxxxx byly detekovány xxx koncentracích xxxxxxx, xxx xxxxxxx koncentracích xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pozitivních xxxxxxxx (13). Hodnota pH xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx přijatelná (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (+UVA) a xxx xxx (-XXX) xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx zvolí xxx, xxx xxxxxx závislosti xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Používá xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx).
1.7.3 Popis xxxxxxx
1.7.3.1 Xxxxx xxx
Xxxxxxxx xx suspenze 1 x 105 xxxxx/xx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx kultury xx xxxxxxxxxx xx 100 μx samotného xxxxx (= xxxxx xxxxx), xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx 100 μx xxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxx 1 x 105 xxxxx/xx (= 1 x 104 xxxxx na xxxxx). Xxx xxxxxx testovanou xxxxx se připraví xxx xxxxxxxx - xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-UVA), druhá xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx xx inkubují xx xxxx 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 oC), xxx se vytvořil xxxxxxxxxxxxxxx monolayer. Tato xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx x jejich xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Druhý xxx
Xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx odstraní a xxxxxxx xxxxxxx objemem 150 μx XXXX/XXX xx každou xxxxx. Xxxxx xx 100 μx XXXX/XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx rozpouštědlo (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Testovaná látka xx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx. Buňky x xxxxxxxxxx látkou xx xxxxxxxx x xxxxx xx dobu 60 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX).
Xxxx xxxxx s XXX (+XXX) xx xxxxxxx tak, xx xx xxxxx xx xxxxxxxx teploty ozařují xx xxxx 50 xxxxx skrz víčko xxxxxxxx s 96 xxxxxxx zářením UVA x intenzitě 1,7 xX/xx2 (= dávka 5 / xx2). Xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx vody xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Duplicitní xxxxxxxx (-XXX) se xx xxxx 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx XXX) xxxxxxxxxx xx pokojové xxxxxxx x xxxxxx xxxx.
Xxxxxx xx odstraní a xxxxx xx promyjí xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Xxxx xx xxxxxx kultivačním xxxxxx x přes xxx (18 - 22 xxxxx) se xxxxxxxx (7,5 % CO2, 37 oC).
1.7.3.3 Třetí xxx
Xxxxxxxxxxxxx hodnocení
Buňky se xxxxxxxxxx pod mikroskopem x xxxxxxx kontrastem. xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx tyto xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (XX)
Xxxxx xx promyjí objemem 150 μl xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μx xxxxx x NR x xxxxxxxx xx xxx 37 oC ve xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 7,5 % XX2 xx dobu 3 xxxxx.
Xx xxxxxxxx xx xxxxxx x XX xxxxxxxx x buňky xx xxxxxxx objemem 150 μx XXXX/XXX, xxxx xx pak xxxxx x důkladně xxxxxxxx (xx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x obrácené xxxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx 150 μx roztoku xx xxxxxxxx NR (xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx destičky xx xx dobu 10 xxxxx xxxxxx xxxxxx xx třepačce, xxxxx xx NR x xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx homogenní xxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX xxx 540 xx xx xxxxxxx slepého xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxx xx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxx (xxxx. ASCII) pro xxxxx analýzu.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXX X XXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx umožňovat xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxx xxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxx xx. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, koncentrační xxxxxx a postup xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx vyjádřit xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxx xxx až xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx x xxxxxxxxxxx xx xxx (-UVA) xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx (+XXX) xxxxxx cytotoxická, xxxx dojít x xxxx, že se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx experimentu xxxxx muset řádově xxxxx, xxx byl xxxxxx požadavek xxxxxxxxx xxxxxxx xxx. Xxxxx xxxx cytotoxicita zjištěna x xxxxx z xxxx částí xxxxxxxxxxx (xxx xxx -XXX, xxx xxx +XXX), xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx rozestupem mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxxxxx koncentrace.
Jsou-li xxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xx opakování testu xx potřebné, může xxx důležité pozměnit xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx xxxxx, nejvhodnější xxx xxxx opakování xx variace těchto xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxxx, triturace, xxxxxxxxxx). Xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx doby xxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx, xxx xxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx.
1.9 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx je xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x 50 % xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx NR (XX50). Xx xxx učinit xxx, xx xx xx xxxx koncentrace - xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vhodná xxxxxx xxxxxxxxxx regrese (xxxxxxx Xxxxxxx funkce nebo xxxxxxxxxx xxxxxxx) xxxx xx použije jiná xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxx se xxxxxxx XX50 xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx zkontrolovat xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx hodnoty XX50 xx xxxx xxxxx xxxxxx grafické xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxx x: xxx, xxx x: xxxxxx), xxxxxxx xx této xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx mnohdy xxxxx xxxxxxxx.
1.10 VYHODNOCENÍ XXXXXXXX (PREDIKČNÍ XXXXXX)
1.10.1 Xxxxxxxxx model, verze 1: xxxxxxxxxxxx faktor (XXX)
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx (+XXX), xxx za xxxxxxxxxxxxx (-XXX) světla, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (-XX)
|
| &xxxx;
(x) PIF =
|
&xxxx;
____________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx žádný fototoxický xxxxxxxxx, xxxxxx PIF ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx látka xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX, kdežto xxx -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx se PIF xxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxx indikuje, xx látka má xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxx. "&xx; XXX", xxxx xx test cytotoxicity (-XX) provede xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxx) x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx do vzorce:
|
Cmax (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) > PIF =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
Xxxxx xx xx vypočítat xxxxx "&xx; PIF", xxx xxxxx hodnota &xx; 1 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx EC50 (-XX), xxx XX50 (+XX), protože látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxx, že xxxxx nemá žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx "PIF = *1", xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx výsledek
|
Cmax (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) XXX = *1 =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (+UV)
|
Pokud xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", xxxxxxxxxx xx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx (x) x (x) xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxx xxxxxxx x úvahu xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxx.
1.10.2 Xxxxxxxxx model, xxxxx 2: xxxxxxx xxxxxxxxx (XXX)
Xx možno xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx predikci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, vypracovaného xx použití xxx x xxxxxxxxx studie XX/XXXXXX (15) a xxxxxxxxxxxx xx podmínek xxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxx xx vitro x xxxxx XX xxxxxx (13). X xxxxx modelu xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XXX v xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx XX50. X xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx veličina "xxxxxxx xxxxxxxxx" (XXX) xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx. Xxx aplikaci xxxxxx XXX xxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx vyvinut xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, který xxx obdržet zdarma.
1.11 Xxxxxxxxxxxx výsledků
Pozitivní výsledek xxxxx (PIF ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) ukazuje, xx xxxx xxxxx xx fototoxický xxxxxxxxx. Xxxxx se x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 10 μx/xx, xx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx bude působit xxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx vivo. Xxxxx-xx xx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci (100 (x/xx), xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx mohou spadat xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx v jiném xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx vitro.
Negativní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX in xxxxx (XXX &xx; 5 xxxx XXX &xx; 0,1) xxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx i xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že látka xxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x fotoxicita xx vivo xx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx. X případech, xxx byly xxx xxxxxxx koncentracích xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (XX50 + UV a XX50 - UV), xx interpretace dat xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (+XX xxx -UV) x xxx omezenou rozpustnost xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx koncentrace 100 μx/xx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx test xxx xxxxx xxxxx xx xx xxxxx xxxxxx a mělo xx xx uvažovat x xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx nebo xxxxxx xxxx xx xxxx nebo xx xxxx).
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx x průběhu xxxxxx je třeba xxxxx xxxx informace:
Testovaná xxxxx:
- identifikační xxxxx x xxxxx XXX, xx-xx známo,
- fyzikální xxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx x provedení xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x fotostabilita, jsou-li xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx rozpouštědla,
- rozpustnost xxxxxxxxx látky x xxxxx rozpouštědle,
- xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx (XXXX xxxx PBS).
Buňky:
- typ x zdroj xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx mykoplazmat,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxx UVA xxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X NRU xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (a) - xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x po něm:
- xxx x složení xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx (koncentrace XX2, xxxxxxx, vlhkost),
- xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx před xx a xx xx).
Xxxxxxxx xxxxxx (b) - ovlivnění xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx, které xx použijí x xxxxxxxxxxx ozařování XX/XXX xxxxxxx a xxx xxx,
- x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x absence xxxxxxxxxxxx zdůvodnění xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace,
- typ x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx solný xxxxxx),
- doba xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx světelného xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx použitého xxxxxx (xxxxxx),
- charakteristika xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x jeho xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx testovaného xxxxxxx,
- xxxxxxxxx XXX (v x X/xx2) při xxxx vzdálenosti,
- xxxx xxxxxxxx UV/VIS xxxxxx,
- xxxxx záření UVA (xxxxxxxxx x čas) x X/xx2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx kultur xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxx XXX:
- xxxxxxx xxxxx s XX,
- doba xxxxxxxx x XX,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, vlhkost),
- xxxxxxxx xxxxxxxx XX (xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xx spektrofotometricky xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx-xx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), pokud xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- životaschopnost xxxxx xxx jednotlivých koncentracích xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxx životaschopnosti xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx (xxxxxxxxxxx testované xxxxx νx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) získané xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +XXX x -XXX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx: podle xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 (+XXX) x XX50 (-XXX),
- xxxxxxxxx obou xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx získaných xx xxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx - xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (XXX),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (a) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx denzita extraktu XX) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxxxxx xxxxx negativních kontrol, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx akceptovatelnosti xxxxx (x) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-XXX) a XXX xxxxx xxxxxxx xxx pozitivní kontrolu,
- xxxxxxxxxx údaje xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxx EC50 (+XXX), XX50 (-XXX) x PIF, průměry x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx X.41. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x účinností xx 22.6.2001
Xxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxx č. 251/98 Xx. xxxxx xxxxxxxxx dnem 1.1.1999.
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx předpisem x.:
208/2001 Sb., kterým xx xxxx xxxxxxxx XX x. 251/98 Xx., kterou se xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx toxicity chemických xxxxx a xxxxxxxxx - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx
x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxx xxxxxxx č. 251/98 Xx. xxx xxxxxx xxxxxxx předpisem č. 443/2004 Sb. x účinností xx 1.8.2004.
Znění xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx změna xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) xx x) xxxxxx č. 157/1998 Xx., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
2) Zákon č. 246/1992 Sb., xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx znění zákonů x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Xx. x x. 30/1998 Xx.
3) Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx chemikálií. Xxxxx 4 - xxxx xx xxxxxx (XXXX Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxx xx Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).