Právní předpis byl sestaven k datu 31.07.2004.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
VYHLÁŠKA
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
ze xxx 16. xxxxx 1998,
xxxxxx xx stanoví xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických látek x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §4 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx x. 157/1998 Sb., x chemických látkách x chemických přípravcích x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx:
§1
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování nebezpečných xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx přípravků xxxxxx xxxxxxxxx, toxických, xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, senzibilizujících, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a toxických xxx xxxxxxxxxx (xxxx xxx "xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx").1)
§2
(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků xx xxxxxxxx xxxxxxxxx prováděnými xxxxxxxx xxxxxxxxx x příloze této vyhlášky.
(2) Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx x jiné xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxx citlivé, xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx metody uvedené x odstavci 1, xxxxxxxxxx xxxx metody xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx2) x metody xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx spolupráci x xxxxxx (XXXX).3)
§3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx 1. ledna 1999.
Xxxxxxx:
XXXx. David, CSc. x. r.
Xxxxxxx k xxxxxxxx č. 251/1998 Xx.
Metody xxx xxxxxxxxxx toxicity xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx
B. VŠEOBECNÝ XXXX
1. XXXXXXXX XXXXX
1.1 XXXXXX TOXICITA
xxxxxxxx nepříznivé účinky, xxxxx se xxxxxx xxxxx určité xxxx (xxxxxxxx 14 xxx) xx xxxxxx jedné xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 XXXXXX TOXICITA
xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx xx aplikaci testované xxxxx. Xxxx to xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xx xxx xxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx být očekáván xxxxx těžkých xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxx.
1.3 XXXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx vyjádřena jako xxxxxxxx (gramy xxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx na kilogram xxxxxxx hmotnosti), xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx xx xxxxxx dílů xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx).
1.4 DISKRIMINUJÍCÍ XXXXX
xx xxxxxxxx xx xxxx pevných dávkových xxxxxx, kterou je xxxxx xxxxx, aniž xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx.
1.5 DÁVKOVÁNÍ
xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx dávku, frekvenci x xxxxxxxx dobu xxxxxxxx.
1.6 XX50 (XXXXXXX XXXXXX XXXXX)
xx xxxxxxxxxxx vypočtená xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, která xxxxxxxxxxxxx způsobí xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx 50 % zvířat, xxxxxx xxxx podána. Xxxxxxx LD50 xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxx xxxxxxx (xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx).
1.7 XX50 (XXXXXXX XXXXXX KONCENTRACE)
je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx pravděpodobně xxxxxxx smrt xx xxxxxx xxxx po xxxxxxxx x 50 % xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Hodnota LC50 xx xxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xx.x-1).
1.8 NOAEL
xx xxxxxxx xxx "xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx" (xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) x je xx xxxxxxxx x xxxxxx použitá dávka xxxx expoziční xxxxxxxxxxx, xxx které xxxxxxxxx x zjistitelným toxickým xxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXX XX XXXXXXXXX DÁVCE/SUBCHRONICKÁ TOXICITA
xxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxx zvířat x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx podávání xxxx xxxxxxxx chemické xxxxx, xx dobu xxxxxxxxxxxxx xxxxxx úsek xxxxxxxxx xxxxx života příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.10 XXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX DOSE)
xx xxxxxxxx dávka, xxxxx x xxxxxx vyvolává xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x ohledem xx xxxxxx, který xx xxxxxxxx.
1.11 XXXXXXXXXX XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.12 XXXXXXXXXX OČÍ
xx xxxxxxxx xxxx na xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxx.
1.13 XXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXXXX XXXXXXXXX DERMATITIDA)
xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx xxxxx.
1.14 XXXXXXXXX XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx poškození xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 3 xxxxx xx 4 xxxxx.
1.15 XXXXXXXXXXXXXX
xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxx testovaných xxxxx.
1.16 XXXXXXXX
označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx do xxxx.
1.17 XXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), kterým(i) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx metabolity jsou xxxxxxxxxxxx x těla.
1.18 DISTRIBUCE
označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxx metabolity xxxxxxxxxxx x těle.
1.19 XXXXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx chemická xxxxxxxxx aplikované xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2. AKUTNÍ - XXXXXXXXX APLIKACE/SUBCHRONICKÁ X XXXXXXXXX TOXICITA
Xxxxxx xxxxxxx účinky a xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx toxicity (xxxxxx X.1 - X.5), xx kterých xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxxxx získán xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx xxx zvolit xxxxx postupy xx xxxxxxxxx xxxxx xx xx kompletní stanovení XX50. Pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx navržen, protože xxxxxx xxxxx definovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pozornost xx měla xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx nejmenší xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx utrpení xxxxxxx, xxxxxxxxx metoda xxxxx xxxxx (xxxxxx X.1 xxx) a metoda xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (metoda X.1 xxxx). Xxx xxxxxxxxx xx jednom xxxxx xxxx studie xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx studie. X xxxxx případě může xxx použita xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat.
Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx aplikací (xxxxxx X.7, B.8 x X.9) se posuzují xxxxxxx účinky xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx se xxxxxxx xx nejvíce xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx cílové xxxxxx xxxxxxxx x toxické x netoxické xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx studií xx vyžaduje zkoumání xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx hloubky (xxxxxx X.26 - X.30 x B.33).
3. XXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxx xx vztahuje k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx struktuře xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx ("xxxxxx") mohou postihnout xxxxxx gen xxxx xxxxxxxx xxxx, xxxx xxxx nebo xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx změnou xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Mutagenní xxxxxxxx xxxxx se stanoví xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx (xxxxxx) xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) xxxxx xx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.10).
Xxxxxxxxxx xxxx také xxxxxxx in xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx X.12) xxxx xxxxxxx metafáze xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx X.11). Je však xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx in xxxxx xxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxx využít k xxxxxxxx xxxxxx: potvrzení xxxxxxxx získaných základním xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; zahájení xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx.
Pro xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx X.15 xx X.25 xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x in xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx složitějších xxx xxxxxxxx používané x xxxxxxxxx souboru xxxxx.
Xxxxxx xxxxx, xx xxxxx uvažované xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx naplánovat xxx, xxx xxxxxxxx relevantní xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx studie, xxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, výsledků xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx látky.
Pro xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx u savců xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx detekci xxxxxxxxx účinků x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx už xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx v xxxx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. xxxx na přenosné xxxxxxxxxxx u myší (xxxxxx X.25). Xxxxxx xxxxx lze použít xxx xxxxxxxxxx možného xxxxxxxxxxx rizika xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx test, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxxxx závažných xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx referenční xxxxxxxxxx genetické xxxxxxxxxxx.
4. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx charakterizovány xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, v xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx poskytují testy xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx chronické xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikaci, xxxxxx X.7, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zahrnují xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx, např. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx tkáních, xxxxx xx xxxxx xxx také významné. Xxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx vyžadují xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx aspektu pomocí xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.32) xxxx často x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (metoda X.33).
K dispozici xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx určují xxxxxxxxx xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx buněčných xxxxxx, u xxxxxxx xx předpokládá xxxxxxxxxx x maligní transformací - xx vivo (xxxxxx X.21). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx xxx transformaci.
5. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx reprodukčních xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx (xxxx na xxxxxxxx) xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx (vývojová toxicita) xxxxxxxxxx také xxxxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Testovací xxxxxx (xxxxxx X.31) xxx xxxxxx zaměřené xx teratogenitu jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx s xxxxxxx podáváním. Alternativně xxxxx být použity xxxx způsoby xxxxxxxx x závislosti na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx způsobu expozice xxxxxxx. X takových xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xx možno xxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx B.35) xxxxxxxx xxx, aby xxxxxx xxxxx generaci.
6. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx způsoby, např. xxxxx xxxxxxxxx změn xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx změn x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx neurotoxicitu xxxx vzejít x xxxxx akutní toxicity. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikaci (xxxxxx X.7) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx měla xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx vyžadují xxxxx, hloubkové xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx posuzována xxxxxxxx X.37 x X.38 xx jednorázovém xxxx xxxxxxxxxx podání xxxxx.
7. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, například podle xxxxxxxxxxxx anebo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, které xx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Test toxicity xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx B.7), zahrnuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinků. Xxxxxx xx měla xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx další, xxxxxxxxx zkoumání xxxxxx xxxxxxx.
8. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx x xxxxxxxx xxxxx pomoci xxx xxxxxx dalších studií xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx se, xx xxxx x xxxxxx případě xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxikokinetických xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, metabolismu x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxx změny x xxxx xxxxxxxx nebo xx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx studie x jednorázovým xxxxxxx (xxxxxx X.36).
Informace x chemické xxxxxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx absorpce xxx xxxxxxxxxx způsobu aplikace, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx tkání. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX
Xxxxxxx testované xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x její xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx informace xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x pro manipulaci x xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxxxx x kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxx xxxxx xxxxx větších xxxxxxxx) x dávkovacím médiu x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx měl předcházet xxxxxxxx studie.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx a chování xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx zprávě x xxxxx.
10. XXXX X XXXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx kterém xxxx zvířata xxxxxxx, x xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX CHOVU
Xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhům. Pro xxxxxxx, myši x xxxxxxx xx vhodná xxxxxxx xxxxxxxxx 22 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu 30 - 70 %, xxx xxxxxxx xx xxx teplota 20 xX ± 3 xX xxx relativní xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jsou zvláště xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx tyto xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxxx toxických účinků xx xxxxx sledovat xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx je x xxxxx xx x závěrečné xxxxxx x průběhu xxxxxx.
Xxxxxxxxx má být xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x tmy xx dvanácti xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx týkající se xxxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx pokusu.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, mohou xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx více xxx 5 zvířat x jedné kleci.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x pokusech xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxx chovu x xxxxxxx a xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxx xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX KRMENÍ
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx všem xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x potravě, xxxx xx výživová hodnota xxxxxx xxxxxxxxx působením xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Používají xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx podávána x xxxxxxx, xx xxxxx tomu xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx.
Příměsi x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, ve kterých xx xx tento xxxx projevil.
11. XXXXXXX XXXXXX
Při xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Snížení xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx zvířat xxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (X.1.xxx) nebo xxxxxx stanovení xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (X.1.xxxx). Xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx specifického xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Metoda xxxxxxxxx třídy akutní xxxxxxxx vyžaduje x xxxxxxx x 70 % zvířat xxxx xxx xxxxxx X.1.
Xxxxxxx se závažnými x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utratit; xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx podávat v xxxxxxxx dávkách x xxxxxxx způsobem, o xxxxxxx je známo, xx vyvolávají značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx v xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1, X.2 a X.3), ale také x xx xxxx xxxxxxx mutagenity (xxxxxx X.11 x X.12), xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx velkými xxxxxxx.
Při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx na xxxxxx u jednoho xxxxxxx, xx-xx to xxxxxxxxxx xxxxxxx zdůvodnitelné. Xxxxxx vědecké zdůvodnění xxxx xxx založeno xx fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx xxxxx, na xxxxxxxxxx xxxxxx již xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx dobře validizovaných xxxxx xx vitro. Xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx používanou x xxxxxxxx testu (xxxxxx X.3) a xxxxxx-xx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4) xxxx xxx xxxxxxxx; xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže při xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4), xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx dráždění xxx.
Xx nutno xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx stejnou xxxxxx informací xxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx využívat xxxxxxx xxxxx xxxxxx, budou xxxxxxx méně xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxx.
Pokud budou xxxxxx metody x xxxxxxxxx, musí být xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx rizika, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx podle nebezpečnosti xxxxx x úvahu xxxxx xxx, xxx xx xx možné.
12. XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX
Xxx hodnocení x xxxxxxxxxxxx pokusů xx xxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxx xx xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx je xxxxx xxx x xxxxxxx xxxx; doklady x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx, xxxxx xxxx x dispozici, xxxxx xxxxxxx k ověření xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x označování xxxxxx x stávajících xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx vlastností xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Tyto xxxxxxxx xxxxx xxx také xxxxxxx pro xxxxxx, xxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxx.
Část X - Xxxxxxxxx xxxx byl xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 208/2001 Sb. s xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.1. XXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ (XXX XX)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň dávky. Xxxxxxx dávky xx xxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxxx orientačního xxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxx, která uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Tato xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, o xxxxxxx je známo, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx dráždivých xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx nebo suspenze xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxx xxxxx xxxxxx použití xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx další xxxxxxx roztok x xxxxxx vhodných xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx známy xxxx xxxxxx před xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X hlodavců xx objem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx 20 ml.kg-1. Variabilita xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x testech xx xx měla xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx koncentrací, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx koncentraci xxxxx xx xxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx proti tomu. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx testu xx x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx z xxxx xxxxxxx je výrazně xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxx xxxxxxx.
Poznámka: Používají-li xx v xxxxxxxx xxxxxxx toxicity xxxxxxx xxxxxxx druhů, xxx xxxx xxxxxxxx, mělo xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxxx zvolit x je xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx testech xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Má být xxxxxxxxxx počet hladin xxxxx, nejméně xxx, x mají xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx byl u xxxxxxxxxxx xxxxxx viditelný xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx stačit xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkou x xxxxxxx, a xxxxx xx možné, musí xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx spolehlivostí.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
X xxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxxx xxxxxxx test xxxxxx xxxxxx nejméně 2000 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx xx skupinách 5 xxxxx a 5 samic x xxxxxxxx xxxx popsaných xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx úplné xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx měla xxxxx nejméně 14 xxx. Xxxxx ji xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx obrazu xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx je možno xxxxx xxxxxxx prodloužit. Xxxxxxxx je doba, xxx se xxxxxxx xxxxxx objeví a xxxxxx, x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx mortalitě.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx mají xxx zvířata hladová. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx před xxxxxx. X zvířat x vyšší xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx postačí xxxxxx hladovění; xxxxxxx x pitné xxxx xxxx omezen. X xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx sondou xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxx-xx možno podat xxxxx najednou, lze xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xx menších množstvích xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, může xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx každé xxxxx xx vedou samostatné xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx pozorování. Xx nezbytné sledovat x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x bezprostřední reakci xxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx pracovního xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx pozorování se xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxx, např. xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Okamžik uhynutí xx xxxxx zaznamenat xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx až xx xxxxx pokusu, xx pitvají. Všechny xxxxxxxxxxx nálezy xx xxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x druhého xxxxxxx
Po dokončení xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxx se xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx druhého pohlaví x cílem zjistit, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx nejsou xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx zvířat. Xxxxx xx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx citlivější, xxxxxxxxx na zvířatech xxxxxxx pohlaví xx xxxxx vynechat.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx musí být xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx s xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivých zvířat xx provede bezprostředně xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pak x xxxxxxxxx intervalech a x xxxx xxxxxxx. Xxxxx hmotnosti xx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx xxxxxx xxxx xxx jeden xxx. Xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx a xxxxxx vyvolané xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Vyhodnocení údajů xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, pokud xxxxxxxx, mezi xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxx x xxxxxxx všech abnormalit xxxxxx změn xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, makroskopických xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx chovu, xxxxxxx xxx.
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx podle pohlaví x xxxxx hladiny xxxxx (xxxxx uhynulých xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx podání xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxx LD50 xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx úplný xxxxx, x xx xxx 14xxxxx pozorování (x xxxxxxxx metody xxxxxxx),
- 95% meze xxxxxxxxxxxxx xxx XX50, xxxxx xx xxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx (xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx pohlaví,
- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx účinku, xxxxx xx mohlo xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX50),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.1. bis XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX) - XXXXXX XXXXX DÁVKY
1. METODA
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxx akutní toxicity xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx účincích, xxxxx xxxxx následovat xxxxx xxxxxx xxxx po xxxxxxx xxxxxx jedné xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx x xxxxx xxxxxx xx provádí xx xxxx etapách.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx sekvenčním xxxxxxxx sledují účinky xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx sondou x zvířat téhož xxxxxxx, vždy xxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x vztahu xxxxx a toxicity, xxxxxx xxxxxx minimální xxxxxxx dávky. Normálně xx x této xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxx pěti xxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxx dávka, xxxxx pravděpodobně xxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxx" (viz xxxx X - Xxxxxxxxx úvod xxx 1.2), ale xx xxxxxxx.
Po xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx vybraná výchozí xxxxxx xxxxx vyvolá xxxxxxx toxicitu, ale xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx další xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx pozorována zřejmá xxxxxxxx, látka se xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx úrovni xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx utracení, xxxxx xx znova xxxxxxxx na nejbližší xxxxx xxxxxx dávky.
Xxxxx xxxxxx umožňuje xxxxxxx "diskriminující xxxxx" (xxx xxxx B - Všeobecný xxxx xxx 1.2), tj. xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx dávky, xxxxxx je xxxxx xxxxx, aniž by xxxxx k xxxxx (xxxxxx případů xxxxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx způsobem xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx proti xxxx.
Xx třeba používat xxxxx xxxxxxx kmeny xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx testu xx x xxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx náhodně přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx studie x hlavní xxxxxx. Xxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx každého x xxxx xxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx třeba, xxxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxxx testované xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx první xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx volbou je xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx možnost xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. U nevodných xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx nebo xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx neměl xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 ml.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; výjimkou xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx možno xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx objemů xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx by xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx dávek.
Před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx odebere xxxxx xxxx xxxxxx; přístup x xxxxx xxxx xxxx omezen. X xxx pokusu se xxxxxxx zváží x xxxxxxxxx látka xx xxxx xxxxxx orálně x xxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xx xxxxxxx množstvích xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Po xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx se látka xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, může xxx xxxxxxx - podle xxxxx tohoto xxxxxx - xxxxxxx x xxxx zvířatům xxxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx zvířata. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx údaje, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Dávky xx xxxxxxxx sekvenčně, xxxx se alespoň 24 hodin xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxx x cílem xxxxxxx xxxxxxx otravy xxxxxxx xx sedm dní; xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx otravy xxxxx xxx, xxxxx se xxxx xxxxxxxxx ještě xx xxxxxxx xxxx xxx. Posuzují xx xxxxxxxxxxx výchozí xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 a 2000 xx.xx-1. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dávka nevyvolá xxxxxx xxxxxx x xxxxxx nejbližší xxxxx xxxxxx xxxxxxx, potom xx nutné xxxxx xxxxx potřeby xxxxx xxxx více vmezeřených xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xx měl xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx(xxx) xxxxx, která(é) xxxxxxxx(xxxx) příznaky xxxxxx, x x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxx xx vybrat xxxxxxx dávku podle xxxxx o příbuzných xxxxxxxxxx látkách. Xxxxx xxxxxx x dispozici, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx dávky 500 mg.kg-1. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx nepozorují příznaky xxxxxx, vyšetřuje se xxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxxxxx nedojde x xxxxxxx xxx 2000 mg.kg-1, je xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx studii xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx použití xxxxxxx xxxxx (xxxx. 500 xx.xx-1) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, vyžadující humánní xxxxxxxx, xx xxxxxx dalšímu zvířeti xxxxxxxxx nižší xxxxx (xxxx. 50 xx.xx-1). Xxxxxxxx toto xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx určenými fixními xxxxxxx. Za xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx, že je xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx 5 xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx
Xxx každou xxxxxxxxxxxx dávkovou xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx xx xxxx xxx nullipary a xxxxxx by být xxxxx.
Xxxxxxxxx metody xxxxx dávky xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx dávek xxx xxxxxx studii. Xx xxxxx se vyhnout xxxxxxxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxxxx látky.
Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx x testu, má xxx zvolena x xxxxx xx 4 xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 nebo 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx úroveň xxxxx by měla xxx xx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, avšak xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx); xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxxxx mortalitu, není xxxxxxxxx xxxxxxx testování.
Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx nevyvolá zřejmou xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx znovu xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx kompletní. Xxxxxxxx xxxxx toxická xxxxxxx vyžaduje humánní xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látky, xxxx by xxx xxxxx znovu testována xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Opět xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxx pozorována xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxx látky xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx účinek xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxx by měla xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx by xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx je doba, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx a doba xx uhynutí, xxxxxxx xxx, kde xx patrná tendence x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx provádět nejméně xxxxxxx xxxxx xxx xx podání xxxxx x nejméně xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx vykazující xxxxxx xxxxxx bolesti xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx prováděna xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx po xxxxxx xxxxx, jestliže zvířata xxxx vykazují xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xx byla xxxxxxx xxxxxx vysoká xxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx na změny xxxx, srsti, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx nervové soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, denně xx další 3 xxx a xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx během xxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx x pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají. Xx-xx xx indikováno, xxxxxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx úrovně xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx výjimečně xxxxx xxxxxxx xxxxx.
V xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxx 5 xx.xx-1 (xxxx jestliže xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx), xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx z orientační x xxxxxx xxxxxx xx sestavují do xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. X ní xxxx xxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx testu xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů; xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxx xxxxxx studii, xxx xxx pozorován zřejmý xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx připsat testované xxxxx; časový xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxx, xx třeba xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx x hlavní xxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,
- experimentální xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (včetně vehikula, xxxxx xx xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx,
- xx xxxxx xxxxxxx údaje o xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx použitých xxxxxx; xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx utracených během xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx toxicity; xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx),
- xxxxxx průběh nástupu xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx zvířata xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, doba úhynu xx podání xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx pro indikaci xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx dávkové xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx.
3.2 Xxxxxxxxx x interpretace
Xxxxx | Výsledky | Xxxxxxxxxxxx |
5 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % přežití, xxx zřejmá toxicita 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx jedovaté Xxxxx, xxxxx xxxx jedovaté Xxx výsledky při 50 xx.xx-1 |
50 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti | Xxxx než 100 % xxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx 5 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx škodlivé Xxx výsledky u 500 xx.xx-1 | |
500 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx | Xxxx než 100 % xxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx zdraví xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x 50 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxx za xxxxx xxx významné xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx x 2000 xx.xx-1 | |
2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x xxxx xxx xxxxxx toxicity | Xxx xxxxxxxx x 500 xx.xx-1 Xxxxx, xxxxx xxxxxx významnou xxxxxx toxicitu |
B.1. xxxx XXXXXX XXXXXXXX (ORÁLNÍ) - XXXXXX STANOVENÍ XXXXX XXXXXX TOXICITY
1. METODA
1.1 Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx toxicity poskytuje xxxxxxxxx jak xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx používá tří xxxxx stanovených xxxxx x xxxxxxxxxxx odstupech, xxx xxx bylo xxxxx xxxxxxxxxx látku xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Kromě xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx metodu xxxxxxxx xxxxx tří xxxxxxxxxxx xxxxx stanovených xxxxx, které xxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx, xxxxx xx žádoucí xxxx xxxxxxxx další xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx pevně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx přesné XX50. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, ve xxxxxx xx očekává úmrtnost, xxxxxxx smrt xxxxx xxxxxx je x x xxxx metody xxxxxxx kritériem účinku. Xxxxxxxx xxxxx mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx k sekvenčnímu xxxxxxx xx trvání xxxxx xxxxx být xxxxx xxx postup xxxxxxx x metodě B.1. Xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxx spotřeba zvířat xxx u xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx)(B.1) x než x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1 bis).
1.2 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx orálně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx stanovených xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxx kroku se xxxxxxxxx xxx zvířata xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx provádět předběžnou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx úhynu zvířat xx vztahu x xxxxxxxx látce rozhodne x dalším kroku, x.x.
- není xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx pohlaví;
- xxxxx xxxx bude xxxxxxxx s vyšší xxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx mladá dospělá xxxxxxx jsou náhodně xxxxxxx, označena xxx, xxx xxxx možná xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x chována xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx zvyknout xx xxxxxxxxxxx podmínky. Xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx, ale xxxxx xxxxxx x xxxxx kleci musí xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx aplikována xxxxxxxx x xxxxxx dávce xxxxxxxxx sondou nebo xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xx třeba, xxxxxxxxx xxxxx xx rozpustí xxxx suspenduje ve xxxxxxx nosiči. Doporučuje xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vodného roztoku/suspenze, xxx xxxxxxx roztoku/emulze x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x xxx xxxxxxx x jiných xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx toxická xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx xxxx aplikováním xxxxx po xxxxxxx xxxx bez potravy (xxxx. xxxxxxx přes xxx x xxxx 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx xx neomezuje.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx se přednost xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx proti xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí.
Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx variační rozpětí xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx a pohlaví
Pro xxxxx krok xx xxxxxxxxx tři zvířata xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.3 Úrovně dávek
Výchozí xxxxxxx úroveň xx xxxxxxx ze xxx xxxxxxx xxxxxx, tzn. 25, 200 x 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Výchozí xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx, aby x největší xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx podána. X závislosti xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx příslušného xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 1.
Xxx výběr xxxxxxx x výchozí xxxxx je třeba xxxxxx veškeré xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx informací x vztahu xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxx naznačují, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx i při xxxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), pak xx xxxxxxx xxxxxxx test. Xxx nejsou xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xx - x ohledem xx pokusná xxxxxxx - použít xxxxxxx xxxxx 200 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, než jak xx dovoluje xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx o xxxxxx testování xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 5, 50 xxxx 500 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti.
Nemají xx aplikovat xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx leptavými nebo xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx bolest a xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx x xxxxxxxxxx toxických xxxxxxxx. Testování xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx test
Limitní test x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx výši 2000 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx zvířatech xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx, lze xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx 200 xx.xx-1 (xxxx 500 xx.xx-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx pozorovat xxxxxxx xx dobu 14 xxx, xxxxx případů xxx xxxx být xxxxxxx vyloučena x xxxxxxx pozorování a xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx nemělo xxx xxxxxxxxx předem xxxxx; xxxx být prodlouženo xxxxx toxických xxxxxx, xxxx xxxxxx nástupu x xxxxx zotavovacího xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxx x xxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxxxx xxx-xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx pozorování xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx jednotlivé xxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx zvážena. Po xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx bez potravy xx xxxx xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Xxx xx xxxxx podávána xx xxxxxxx během xxxxxx xxxx, xxxx být - x závislosti xx xxxxx xxxx xxxx - nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x vodu.
Maximální xxxxx xxxxxxxx, xxxxx může xxx podán xxxxxxxx, xxxxxx xx velikosti xxxxxxx. X hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x tělesné xxxxxxxxx, x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 xx xx 100 x xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx x podávaném xxxxxx xx xxxxx minimalizovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx není xxxxx xxxxx xxxxx celou xxxxxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxxx po xxxxxxx po dobu xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx testování xxxx xxxxxxx x Xxxxxxx 1.
1.3.3.1 Všeobecné pozorování
Pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx dvakrát xx xxxxx xxx (xxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx, xxxxx xx vyžaduje xxxxxx zvířat na xxxxxx látky, x xxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx nalezena x xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx silného xxxxxx, xx xxxxx humánně xxxxxxx: xxxx xxxxxxx xxxx hodnocena xxxxxx xxxx xxxxxxx uhynulá.
Ať xx byla zvířata xxxxxxxx z humánních xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx mrtvá, xxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxx pozorování xx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xx xxxx x xxxxx, xx xxxxx x sliznicích, a xxxx na dýchacím, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx nervovém xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, křečí, xxxxxxx, xxxxxx, letargie, spánku x xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx vedeny xxx xxxxx jednotlivé xxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxx hmotnost
Všechna xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx před podáním xxxxxxxxx xxxxx a xxx xxxxxxx jednou xxxxx. Počítají xx x xxxxxxxxxxxxx změny xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx zvážena xxxx xxx, xxx budou xxxxxxx utracena.
1.3.3.3 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx a utracených xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx mikroskopické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zvířat přežívajících 24 a více xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x xxxxxx jednotlivém xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů, xxxx úmrtí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx a vratnost xxxxxxxxx účinků, a xxxxxxx nálezy.
Všeobecné xxxxxxx x interpretaci výsledků xxx klasifikaci xx xxxxxxx x Xxxxxxx 2.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x pokusu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxx zvířat, xx-xx znám;
- počet, xxxxx a xxxxxxx xxxxxx;
- zdroj, podmínky xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxx, xxxxx je xxxx xxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx testované látky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx aplikace;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxxx dávky.
Výsledky:
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dávkové xxxxxx (tzn. zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxx toxicity xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx);
- xxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx x histopatologické xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx k xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x interpretace:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX TG 423.
DODATEK 1
XXXXXX TESTOVÁNÍ
1. Xxx xxxx uvedeno x xxxx 1.4.2.3, výchozí xxxxx xx xxxx xxx xx ze xxx xxxxx stanovených xxxxxxxxx úrovní, xxxxx xxxxxxxxxxxxx způsobí xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxx dávky lze xxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxx x fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx,
- vztah struktury x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. Příslušné xxxxxxxx xxxxxxxx uvedené x xxxxx dodatku xxxxxxxxx xxxxxx pro každou xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx utracených nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, jak xxxxxxxxx šipky.
3. Xxxxx xx xxxxxxxx výchozí xxxxx 25 xxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx uhyne xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxx dále netestuje. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx x ostatních 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx příznaky, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx x podanou xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx potvrdí, xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4. Xxxxx po xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx uhyne xxxxx xxxxx každého xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx XX50 xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx to xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, je třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx zvířat xxxxxxx xxxxxxx: zřetelné, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x těchto xxxxxx xxxxx být důvodem xxx klasifikaci odpovídající xxxxxxx XX50 xx xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxx podnětem pro xxxxx testování xx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
5. Xxxxxx umožňuje testování x třemi doplňkovými xxxxx stanovenými dávkami (xxxxxxxx 2). Xxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx buď k xxxxxx alternativní xxxxx x daném xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx varianty 1.
Postup xxxxxxxxx x výchozí xxxxxx 25 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx udána xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx uhynulých nebo xxxxxxxxxx zvířat (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkou.
Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x příslušném xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, počet zvířat x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx uhynulých xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3). Podle počtu xxxxxxxxx xxxxxx se x testování pokračuje xx xxxxx šipek xx do xxxxxxxx xxxxxx rámečku.
Varianta 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx xxxx podle způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x příslušnou xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Klasifikace xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx x výchozí xxxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx xxxxx dávka, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx první, 2 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x testování xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx šedého rámečku.
Varianta 1 - Ukončení xxxxx: Klasifikace xx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx s příslušnou xxxxxxxxxx dávkou.
Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx se provede xx základě xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX 2
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
X xxxxxxxxx xx xxxxx dávka, xxxxx xxxxxx x pohlaví (1 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx druhé).
Pod xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx nebo utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Šedé rámečky xxx xxxxxxxx "XXXXX XXXXX TESTOVÁNÍ" v xxxxxxxxxx xxxxxx dodatku xxxxxxxx konečné xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Po xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1 se příslušná xxxxx sleduje, dokud xx xxxxxxxxx příslušného xxxxxxx. (Hodnoty v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx příslušný xxxxxx klasifikace. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, že XX50 xx xxxxx xxx hodnota v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.)
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkou 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx dávkou 200 xx/xx xxxxxxx hmotnosti
(c) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkou 2000 xx/xx tělesné hmotnosti
Interpretace xxxxxxxx založených xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
a) Xxxxxxx xxxxx 25 xx/xx tělesné hmotnosti
b) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
x) Xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx
X.2. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Úvod
Xx xxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxx údaje x rozdělení xxxxxxxxx xxxxxx, tenzi par, xxxxxxx xxxx, teplotě xxxx, xxxxxxx vzplanutí x výbušnosti (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx látky
1.2 Xxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx x odstupňovaných xxxxxxxxxxxxx, x to xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Potom xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxx a případy xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx v takových xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxxxxx značnou bolest x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Příprava
Nejméně 5 xxx před xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx v podmínkách xxxxxxxx a krmení, x xxxxxx budou xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do potřebného xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx testované xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx na částice xxxxxxxxx velikosti. Xxxxx xx třeba, xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx; x tom xxxxxxx se zařadí xxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx užije xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický účinek. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx možno xx využít.
1.3.2 Experimentální xxxxxxxx
1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxx hladinu xx xxxxx použít xxxxxxx 10 xxxxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x akutních xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxxxx, xxxx by xx xxxxxx použití xxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx je třeba xxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxxx, xxx nebyly xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X těchto xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xx xxx dostatečný počet xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, aby xxx x xxxxxxxxxxx skupin xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a mortality. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx znázornění xxxxxx mezi dávkou x xxxxxxxxxx x, xxxxx je to xxxxx, musí xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Nedojde-li xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx 5 xxxxx x 5 samic plynu x xxxxxxxxxxx 20 xx.x-1 nebo parám xx xxxxxxxx tekuté xxxx pevné xxxxx x xxxxxxxxxxx 5 xx.x-1 (xxxx - x xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sledované xxxxx včetně rizika xxxxxxx - xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) během 14 xxx x žádné xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx doba xxxxxxxx xx xxx 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx dynamické xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx hodinu, aby xxx xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx rozdělení xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx shlukování xxxxxx x aby xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx maximální. Xxx xxxxxxxxx stability xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx x zásadě xxxxxxx xxxxx pokusných zvířat xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Je xxxx možné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx jinými xxxxxxx.
1.3.2.7 Xxxx pozorování
Doba xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze ji xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx reakcích, na xxxxxxxxx xxxxxx vzniku x xx xxxxxx xxxx zotavení. Dobu xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx potřeby xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx je doba, xxx xx objeví x xxxx xxxxxx xxxxxxx otravy, xxxxxx xxxx doba xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx patrna xxxxxxxx xx zpožděné xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx zváží. Xxxxxxxx xx xx xxxx 4 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx rychlé. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx má xxx 22 oC ± 3 x X. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx ideálně xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx případů, xxx to není xxxxx (xxxx. experimenty x aerosoly). Xxxxxxxxx xxxxx negativního tlaku xxxxxx komory (≤ 5 mm xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx unikání xxxxxxxxx látky do xxxxx. Během xxxxxxxx xx nepodává potrava xxx xxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx stabilních xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx x provoz xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx.
Je xxxxx xxxxxxxx měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx),
(x) xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx expozice (xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. aerosoly xx vysoké xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxx jedné xxxxxxxx xx nemá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x xxxx než ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx regulace xxxx xxxxx dosáhnout, xx xxxxxxxxx větší xxxxxx kolísání. Po xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx stabilní, xxx je to xxxxxxxxx možné. Xxxxx xx xxxx částic x xxxxxxxx, xxxx xx distribuce velikosti xxxxxx xxx xxxxx, xxx to xxxxx xxxxxxxx (xxx nejméně xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu),
(x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx se měří xxxxx možno xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx i xx jejím xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx systematicky. Xxxxx zvíře xx xxxx individuální protokol. Xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a odpovídající xxxxxxxx mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx studii, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat nebo xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Pozorování zahrnuje xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x chování. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, letargii, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx uhynutí xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxx.
Zvířata, která xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx xx xxxxxxxxx zřetelem xx xxxx xxxxxx xxxxx x dolní xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxx xxxxxxxx toxicity, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx. Změny xxxxxxxxx je třeba xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx. XX50 se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx hodnotí xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - mezi xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, včetně xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, změn xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x všech xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, atd.,
- xxxxxxxx pokusu: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx umístění zvířat x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti vzduchu, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx tabulky x xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx hodnotami a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx údaje:
x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu x xxxxxxxxxx zařízení;
x) teplota x xxxxxxx xxxxxxx;
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx);
Pozn.: xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x roztoku (xxxx. xx xxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx koncentraci xxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx, xxxxx xx xx možné, koncentraci xxxxxx látky xx xxxxxxxx.
x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx;
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx;
f) xxxxxxxxxx xxxxxx aerodynamického xxxxxxx (XXXX) a geometrická xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX);
x) xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx;
h) xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (tj. xxxxx zvířat, která x pokuse xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx zvířat x xxxxxxxx toxicity; xxxxx exponovaných zvířat);
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx skončení, xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx;
- xxxxxxx XX50 pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx pozorování (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (pokud xx xxxxx xxx xxxxxxxx);
- křivka xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxxx) x její xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx);
- pitevní nálezy;
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx (se xxxxxxxxx xxxxxxxx x vlivu xxxxxxxxxx utracení zvířat x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX50);
- interpretace výsledků.
B.3. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx na xxxx x odstupňovaných xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx a zaznamenávají xx xxxxxx x xxxxxxx uhynutí. Zvířata, xxxxx uhynou během xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx konec xxxxxx, xx pitvají.
Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx bolest x xxxxx následkem xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x pokusných xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx se xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx testu xx xxxx xxxxxx xx zádech xxxxxxx xxxx oholí. Při xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx na to, xxx se xxxxxxxxxxx (xxxx. abrazí) xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx její xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx formě, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou xxxx vhodným vehikulem, xxx xxx xxxxx xxxxxxx s xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx brát x úvahu xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx by xx xxx xxxxx xxx, x xxxx xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx dostat xx styku x xxxxxxx kůží, x xx všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vybrat xxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx. Xxx použít i xxxx xxxxxxxxx druhy, xxxxx xxxx xxx xx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxx známé xxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xx začátku xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxx dávek xxxxxx xxxxxxx 5 zvířat xxxxxxxx xxxxxxx. Používá-li xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx být březí. Xxxxx xx x xxxxxxxxx informace, xx xxxxx z obou xxxxxxx je výrazně xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxxxx.
Poznámka: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx toxicity zvířata xxxxxxx xxxxx, než xxxx xxxxxxxx, mělo xx xx xxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxxx zvolit x xx třeba zajistit, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X těchto xxxxxxx xx xxxxx vyhnout xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, nejméně xxx, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx zřetelným xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx o úrovních xxxxx je xxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx znázornění xxxxxx mezi dávkou x xxxxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx LD50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxx provést xxxxxxx test xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx skupinách 5 xxxxx x 5 xxxxx x použitím xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx látka způsobí xxxxxxx, je třeba xxxxxxx úplnou xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx má xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx otravy, xxxxxxxxx xxxxxx otravy x trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Rozhodující xx xxxx, kdy xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x vymizí x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx tam, xxx xx patrná xxxxxxxx x výskytu xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxx asi 10 % xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxx látky xxxx xxx xxxx plocha xxxxx; xxxx xx xx však xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx co xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
Testovaná látka xx xx expoziční xxxx 24 hodin xxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxx pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxxx plochu xx xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx mulový xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxx použít i xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx, xxxxx xxxxx xxxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx pokožky.
Xxxxxxxxxx je třeba xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx vést xxxxxxxxxx xxxxxxx. První xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx uhynulým xxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx slabých xx xxxxxxxxxxx zvířat.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx aplikace, xxx x sliznic, x také xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x centrální nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, letargii, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xx nejpřesněji. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, i xxxxx xxxxxxx xx xx konce pokusu, xx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx patologické změny xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x druhého pohlaví
Xx xxxxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx látka xxxxxxx jedné xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, aby xx zjistilo, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx případech xxxx xxx odůvodněno xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxx pohlaví xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, testování xx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx xx možno xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet zvířat xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxxx xxxxxx x jinými xxxxxxx xxxxxx, xxxxx toxických xxxxxx x pitevních xxxxxx. Stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx. Změny hmotnosti xx třeba stanovit x xxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xxxxxxx déle xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx. XX50 se vypočte xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx hodnotí xxxxx, xxxxx existuje, xxxx xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx x výskytem x stupněm všech xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lézí, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxx, krmení xxx.,
- podmínky xxxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx a xxxx xxxxxx: xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx),
- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat,
- tabulky xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx utracených xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x příznaky xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx podání xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxx LD50 xxx xx pohlaví, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x xx pro 14xxxxx xxxxxxxxxx (s xxxxxxxx metody xxxxxxx),
- 95% interval xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (xxxxx xxx lze xxxxxxxx),
- křivka xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx danou metodou xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx druhém xxxxxxx,
- rozbor xxxxxxxx (xxxxxxxx pozornost xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx testu),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.4. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXX DRÁŽDIVOST)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx zvážit všechny xxxxxxxx informace x xxxx látce s xxxxx xxxxxx na xxxxxxx testování xxxxx xx podmínek, které xxxxx xxxxxxx výrazné xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxx xx jediném zvířeti xxxx zda xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx (xxxx. xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX xxxxx xx xxxxx 11,5) xxxx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx dráždivost, xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.
x) Jestliže xxxx dostupné xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx test.
c) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxx v xxxxx xxxxxx toxicity xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx při limitní xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xxxx testovat xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx vysoce xxxxxxx xxx xxxxxxxx cestě xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, přičemž xxxxx xxxxx slouží xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx provést xxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx dostatečně xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxx zhodnotit také xxxxxxxxxxxxx pozorovaných účinků.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx zvířat xx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxx. Xxx střihání xxxx xxxxxx srsti xx xxxxx dbát xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx se zdravou, xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxx xxxxx králíka mají xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxx x některých xxxxxxxx xxxx. Testované látky xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx husté srsti.
Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x kůží. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nutné brát x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx podráždění xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx xxxxxxxx nezředěné.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, je xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xx x in xxxxx screeningových xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx nekrózu (xxxx. je xxxxxxx), xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx testu xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx leptavé xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Pro xxxxx test xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx případů nejednoznačných xxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx důvody xxx jiný xxxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxx xxxx 0,5 g xxxx nebo polotuhé xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx kontrola.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx dostatečně xxxxxx, xxx xxxx možno xxxxx vyhodnotit xxxxxxxx xxxx nevratnost xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx po xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx chovají xxxxxxxxxx x klecích. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xx xxxxx xxxxxx (xxx 6 xx2) xxxx x xxxxxxx xx plátkem mulu xxxxxxxxxxxx nedráždivou náplastí. X kapalin a xxxxxxxxx past xxxx xxx vhodné nanést xxxxxxx testovanou xxxxx xx xxx, x xxx xxx xxxxxxxxx xx kůži. Xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx přidržovat xxxxxx xxxxx na xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxx, aby xx xxxxx xxxxxxx x xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xx vdechnout.
Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx odstranit xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xx možné, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx reakce xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx expozice xx obvykle 4 xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx xxxx vyvolat xxxxxxx (xxxx. tím, xx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (např. xx 1 hodinu xxxx 3 xxxxxx). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 3 xxxxxx xxxx současně, pokud xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxxx. První plátek xx odstraní xx 3 minutách. Pokud xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx 1 xxxxxx. Xxxxx pozorování x xxxx xxxx naznačují, xx xx nezbytná 4xxxxxxxx xxxxxxxx x xx neodporuje xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx třetí plátek xx 4 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxxxx odpovědi xxxx. X případě, xx xxxx možná 4hodinová xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxx s xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx; pokud xx není xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxx xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx).
Jestliže je xxxxxxx kožní reakce (xxxx. xxxxxxx) xxxxxxxxxx xx 3 minutách xxxx xx 1 xxxxxx, je xxxx xxxxxxxx ukončen.
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x člověka.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x vyhodnocení
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx kůže po 60 minutách a xxxx 24, 48 x 72 hodin xx odstranění plátku x testovanou xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx kůže xx klasifikuje x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v tabulce 1. Jestliže nebylo xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx úplného xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxx. Vedle xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx podrobně xxxxxx xxxxxxx závažné léze xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx tkáně) x xxxx toxické xxxxxx. X objasnění xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx testovanou xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx každé pokusné xxxxx xxxxxx stupeň xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxx dobu xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxx všechny xxxxxxx xxxx, xxxxx stupně x xxxxxx podráždění xxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx pozorované xxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx možno xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxx obvazu: okluzivní, xxxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxx xxxxxxx údaje x xxxxx xxxxxx xxx xxxxx jednotlivé xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (za 1, 24, 48 a 72 xxxxx xxx. xx xxxxxxxxxx xxxx),
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx včetně xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x povahy xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- vyhodnocení výsledků.
4. XXXXXXX
4.1 Stupnice xxxxxx xxxx
Xxxxxxx | |
1. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx | |
1.1 Žádný xxxxxx | 0 |
1.2 Xxxxx xxxxx erytém (stěží xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx erytém | 2 |
1.4 Xxxxx xx výrazný erytém | 3 |
1.5 Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx poškození - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx erytému | 4 |
2. Hodnocení edému | |
2.1 Žádný xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx xxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
2.3 Lehký xxxx (xxxxxx jsou zřetelné, xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) | 2 |
2.4 Xxxxx xxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxx x 1 xx) | 3 |
2.5 Xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xxxx xxx 1 xx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx) | 4 |
4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (IKI)
XXX xx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx erytém x xxxx x jednotlivých xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx průměr.
Xxxxxxxxxxx | XXX |
xxxxxxxx | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx xxxxxx | 0,5 &xx; XXX ≤ 3 |
xxxxxxx xxxxxx | 3 < XXX ≤ 5 |
silně xxxxxx | XXX > 5 |
X.5. XXXXXX XXXXXXXX (XXXX XXXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
1.1.1 Výchozí xxxxx
Xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx informace x xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat xxxxx xxxxxx. X tomu xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx reaktivita. Xxxx. xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx - xxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx x oku xX xxxxx či xxxxx 2 xxxx xX rovné či xxxxx 11,5, xxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxx závažná xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx alkalickou nebo xxxxxxx rezervu.
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx validizovaných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx dále xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxx, protože xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx budou xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx metodou.
c) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Látky, xxxxx xxxxxxxxxx zřejmé xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx účinky xx xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx dále xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx pro xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxxxx dávce xxxxxxxx xx jednoho xxx xxxxxxxx pokusným zvířatům, xxxxxx xxxxxxxxxxxx oko xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx intervalech xx odečte a xxxxxxxxx stupeň xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx možné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx také xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
24 xxxxx xxxx xxxxxx xx x každého x xxxxxxxxx vybraných xxxxxxxxx xxxxxx provede xxxxxxxxx xxxx xxx. Zvířata, x kterých xx xxxxxx podráždění očí, xxxx defekt nebo xxxxxxxxx xxxxxxx, xx x experimentu vyloučí.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Ačkoliv se xxxxxxxxx xxxxx druhy xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx dospělému albinotickému xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx se očekávají xxxxxxx účinky, xx xxxxx xxxxxx test xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx výsledky xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxx leptavé (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) účinky xxx xxx při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx další xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aspektů xxxxx být případně xxxxxxxxx další xxxxxxx.
X ostatních případech xx xxxxx použít xxxxxxx xxx zvířat. Xxxxxxxxx nejednoznačných xxxxxx xxxx xxxxxxxxx použití xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Úroveň xxxxx
Při xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,1 xx. X xxxxxx látek, xxxx x zrnitých xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxx 0,1 xx xxxx xxxxxxxx xxx 0,1 x (xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx). Jedná-li xx x xxxxx xxxx hrubě zrnitou xxxxx, xx třeba xx xxxxxxxx na xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, např. xxxxxxxxxxxx xx měrnou xxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxxxxx ve sprejích x xxxxxx nebo xxxxxxxxx aerosolových nádobkách xx třeba xxxxxxxxxxx x sebrat 0,1 xx xxxxx a xxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxx popisu xxx kapaliny.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Délku xxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx vratnost nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx stačí 21 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x klecích. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx spojivkového vaku xxxxxxx oka tak, xx se spodní xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx oční xxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xx 1 xxxxxxx xxxxx k xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxx látka xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx může xxxxxxx xxxxxxxxx bolest, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx lokální xxxxxxxxxxx. Aby xxxx xxxxxxxxx, xx následkem xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx typ, xxxxxxxxxxx x dobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 24 xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxxxx za xxxxxx.
U xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx metodě xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x použitím xxxxxxx, kterým xx xxxx po xxxxxxxxx xxxxx vymyjí xxx. X těchto xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx použít 3 xxxxxxx. Xxx xxxxxx po xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx kapaliny x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
Oči se xxxxxxxxx xx 1, 24, 48 x 72 hodinách. Xxxxxxxxxxx-xx xx xx 72 xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxxx ukončit. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx prodloužit, xxxxx xxxxxxxxx postižení xxxxxxx xxxx jiné příznaky xxxxxxxxxx xxx xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx vývoj xxxx x xxxxxx vratnost xx nevratnost. Vedle xxxxxxxxxx na xxxxxxx, xxxxxxx x spojivce xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx i jiné xxxxxxxx xxxx.
Intenzitu xxxxxx xxx xx xxxxx xxx každém xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxx. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx možnosti interpretace. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx laboratoře x xx, kdo xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx možno xxxxxx xxxxxxxxxxxx referenční xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.)
Xxxxxxxxxxx reakcí xx xxxxx xxxxxxxx použitím xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxxxx zařízení. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx oči xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X ní xxxx být xxx xxxxx pokusné xxxxx xxxxxx stupeň xxxxxxxxxx x xxxxx intervalu xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx podráždění, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lézí x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx chovu, krmení xxx.),
- experimentální xxxxxxxx (včetně relevantních xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností testované xxxxx),
- v xxxxxxxxx formě výčet xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx pro jednotlivá xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. xx 1, 24, 48 x 72 hodinách)
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx zjištěného xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx xxxxxxx rohovky,
- popis xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1, 24, 48 x 72 xxx.), např. xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx.,
- popis xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx místních xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx xxxx xx xxx
Xxxxxxx | |
X. Xxxxxxxx - xxxx | |
Xxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxx zahrnující mžurku | 1 |
Výrazný xxxx x everzí víčka | 2 |
Edém xxxxxxxxxxx xxxxxxxx víček na xxxxxxxx | 3 |
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx na polovinu xxxx zcela | 4 |
X. Spojivka - xxxxxx | |
Slzení xxxx xxxxxxxx | 0 |
Slabé xxxxxx (xxxxx xxxxxxx xx běžné xxxxxxx xx vnitřním xxxxxx) | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx víček x xxxxx x xxxxxxxxx xxx | 2 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx víček x srsti v xxxxxxx xxxxx xxx | 3 |
C. Xxxxxxxx - xxxxxxx | |
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, rozlišení jednotlivých xxx xxxxxxxx, difusnější xxxxx červená barva | 2 |
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx barva | 3 |
X. Duhovka - xxxxxxxx | |
Xxxxxxxx nejsou xxxxxxxx | 0 |
Nepravidelná xxxxxxxxx duhovky, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxx více xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx), xxxxxx xx xxxxxx je zachovaná, xxxxxxxx opožděná | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx | 2 |
v xxxxxxx (xxxxx xxxx více xxxxxx charakteristik) | |
X. Xxxxxxx - xxxxxx neprůhlednosti | |
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx duhovky xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx | 2 |
Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx duhovky xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx | 3 |
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx | 4 |
X. Rohovka - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Neprůhlednost xx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx je ≤ 1/4 plochy xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 xxxxxx xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; plocha neprůhlednosti ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 3 |
plocha xxxxxxxxxxxxxx &xx; 3/4 xxxxxx rohovky | 4 |
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (IOA)
Xxxxxxxxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) pro xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vypočte xxxxx xxxxxx
XXX = 2.(X + X + C) + 5.X + 5.X.X
Xxxxxxxx index oční xxxxxxxxxxx (XXX) pro xxxxx xxxxxxxx hodnocení xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx průměr x XXX.
Akutní index xxxx xxxxxxxxxxx XXX xx xxxxx nejvyššímu XXX xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx
4.3 Klasifikace
Xxxxxxxxxxx | IOA |
nedráždí | 0 - 4,9 |
xxxxx dráždí | 5 - 14,9 |
xxxxxx | 15 - 29,9 |
xxxxx dráždí | 30 - 59,9 |
velmi xxxxx xxxxxx | 60 - 79,9 |
extrémně xxxxxx | 80 – 110 |
X.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1. Xxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx a xxxxxxxx schopnost testů xxx xxxxxxxxxx xxxxx x potenciálním senzibilizačním xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx významné xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx veřejného xxxxxxxxxxxxx.
Neexistuje jediná xxxxxxxxx metoda, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x potenciálním xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro lidskou xxxx a xxxxx xx xx hodila xxx xxxxxxx látky.
Xxx xxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxx charakteristiky xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx alergický stav xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx Xxxxxxxxx kompletním xxxxxxxx (XXX), a xx xxxxx bez xxxxxxxx.
Testy x xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x proto xx xxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx (Guinea-pig Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxx. Ačkoliv x xxxxxxxx schopnosti xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xx XXXX xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx.
X xxxxx skupin xxxxxxxxxx látek xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xx xxxx Xxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx injekci xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx na morčatech. Xxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
X této xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx popsány xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx (XXXX) x Xxxxxxxxx xxxx. Lze xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx.
Pokud screeningový xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx látku označit xxxx xxxxxxxxxxx senzibilizátor xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx morčatech. Xxx xxxxxxxxxx výsledku je xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx na morčeti, xxx jak xx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Definice
Xxxxxxxxxxxxx xxxx: (alergická xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) je xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx na látku. X xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx, pupenci, puchýřky, xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. X jiných xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx.
Indukční xxxxxxxx: experimentální expozice xxxxxxxx testované látce xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx: období nejméně xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx expozici, x xxxxxxx kterého se xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Provokační xxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx přecitlivělosti.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx s použitím xxxxx, x xxxxxxx xx známo, že xxxx xxxxx až xxxxxxx silný xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx kůži.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx mírné/střední xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % x metody x adjuvans a xxxxxxx 15% u xxxxxx bez adjuvans.
Xxxxxxxx xx dává xxxxxxxxxxxx látkám:
Xxxxx XXX | Číslo XXXXXX | xxxxxxxx název | xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxx |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | kaptax |
94-07-7 | 202-303-5 | Ethyl xxxxx xxxxxxxx p-aminobenzoové | xxxxxxxxx |
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx být použity xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx.
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx testované látce xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxxx 10 xx 14 xxx (xxxxxxxx období), x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx rozvinout xxxxxxxx reakce, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx a xxxxxx kožní xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxx x stupněm xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx x xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx za nezbytné xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx nebyla xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx integrita xxxxxxx.
1.5.1 Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxxx (GPMT)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx aspoň 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx chemickou xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x poškození xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx zahájením xxxxx a xx xxxxx testu.
1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Samice musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx tvoří xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxx 5 xxxxxx je xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx menšího xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx morčat x xxxx xxxxx dojít x xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 20 testovaných x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.3 Dávkové xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx na takovou xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx je xxxxxxxx působící mírné xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolá xxxxxxxxxx xxxx. V xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxx účel xxx xxxxxx použití xxxxxx, xxxxxx bylo xxxxxxxxxx XXX.
1.5.1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.1.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx subkutánních xxxxxxx, xxxxx po 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx symetricky xxxxx xxxxxxx xxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx xx vhodném xxxxxxxx xx zvolené xxxxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx FCA x vodou nebo xxxxxxxxxxxxx roztokem x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxx xxxxxxx 3 xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx rozpustí xxxx xxxxxxxx x XXX xx xxxxx fázi. Xxxxx rozpustné x xxxxxxxx nebo látky xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x nezředěném XXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 3 xx být xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 2.
Injekce 1 a 2 xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx 3 xxxxxx xx kaudální xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Následující 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx injekcí, xxxxx xx 0,1 xx, xx podají xx xxxxxxxx míst xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx kompletní xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx fyziologickým xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;
Injekce 2: xxxxxxxx vehikulum;
Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) xx xxxxx XXX/xxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx hodin xxxx xxxxxxx xxxxxxxx aplikací, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx pro kůži, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 0,5 xx 10% xxxxxxxxxxxxx sodného xx vazelíně, xx xxxxxx navození xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6. - 8. den - Xxxxxxxxx skupina
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx vhodném xxxxxxxx xx napuštěn xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 cm), xxxxx xx pak xxxxxxx xx testovací xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 48 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxx odbornými důvody; xxxxx xxxxx jsou xxxxx rozetřeny a xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx; kapaliny xxx xxxxxxxxx xxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx plocha xx xxxxx xxxxx srsti. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxx 48 hodin.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. den - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xx jeden xxx xxxxxxx je aplikována xxxxxxxxx látka v xxxxxx xxxx x xxxxxxx x xx xxxxx xxx xx xxxxxxx způsobem xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xx xx xxxxx). Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx obvazu xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xx 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Pozorování a xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx náplasti xx provokační xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx ostříhá xxxxxxxx xxxxx x x případě xxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx kožní xxxxxx a zaznamenává xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx;
- přibližně 24 xxxxx xx tomto xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorování x xxxxxx xxxxxx xxxx (72 xxxxx).
Doporučuje xx systém "slepého xxxxxx" x testovaných x kontrolních zvířat, xxx xxxxxxxxxx osoba xxxx, xxxxx zvíře xxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx přibližně x xxxxx později, x xxxxxxx xxxxxxx znovu x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Opakovanou xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx skupině.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx důsledkem xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx postupů, xx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx tloušťky xxxxxxx xxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxx
1.5.2.1 Xxxxxxxx
Zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx dobu aspoň 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx a kontrolních xxxxxx. Odstranění srsti xx provede xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx chemickou xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Je xxxxx xxxx na xx, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx a xx konci testu.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx samce x/xxxx xxxxxx. Samice xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx březí. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx 20 xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xxxxxx x kontrolní xxxxxxx.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx úrovně
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx úroveň, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže. Xxxx xxxxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolává xxxxxxxxxx xxxx. X případě xxxxxxx je xxxxx xxxxxx koncentrace stanovit x předběžném xxxxxx xx dvou nebo xxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxx xxxxxx vodu xxxx xxxxxxx nedráždící xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Pro jiné xxxxx je preferován 80% xxxxxx xxxxxx/xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx pro xxxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Testovaná xxxxxxx
Xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Systém xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx nasytí xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xx řídí odbornými xxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx překrývacím xxxxxxx xxxx komůrkou a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx testu xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, ať xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x plochou xxxxxxxxx 4 - 6 xx2. Je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x použitím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx okluze. Xxxxxxxx xx použito xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx skupina
Xxxxx xxx je xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x to xxxxxxxx způsobem xxxx x testované xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx testovací xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupina xxxx xxxxx, lze použít xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx aplikace.
6. - 8. a 13. - 15. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupina
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxx 0 xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx plochu xx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) 6. - 8. xxx x znovu 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx
27. - 29. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxx testovaných a xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx příslušné množství xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx aplikuje na xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxx část xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx aplikovat xxxxxxx plátek x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx komůrky xxxx xxxxxxxxxxx x kontaktu x xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx dobu 6 hodin.
1.5.2.3.3 Xxxxxxxxxx x hodnocení
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx odstranění xxxxxx xx provokační xxxxxx xxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx 30 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx stupnice xxxxxxx x dodatku;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx 24 xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 54 hodin xx aplikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxx xxxxxx znovu xxxxxxxx x zaznamenávají.
Xxxxxxxxxx xx systém "xxxxxxx xxxxxx" x testovaných x xxxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxxxxxxx osoba xxxx, xxxxx zvíře xxxx senzibilizováno x xxxxx je xxxxxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx provokace (tj. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), provede xx xxxxxxxxx x xxxxx později, v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx skupině.
Všechny xxxxx reakce a xxxxxxxxx nálezy, včetně xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx zaznamenávají xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (viz xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx.
2. XXXX X XXXXXX ÚDAJŮ (XXXX X XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx musí xxx xxx každé xxxxxxx xxxxx patrná reakce xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX (XXXX A XXXXXXXXX XXXX)
Pokud xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx uvést xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx citaci (xxxx. XXXX - xxxx regionálních xxxxxxxxxxxx xxxxx, MEST - xxxx ztluštění xxxx x xxxx) xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x výsledků získaných xxx testované x xxxxxxxxxx xxxxx.
3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx (XXXX x Xxxxxxxxx xxxx)
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx tyto xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx podmínky:
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx pro plátkový xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxx studie se xxxxxxx x xxxxxxxxxx x provokačních xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx test;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, aplikaci x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- zdůvodnění xxxxxx vehikula;
- xxxxxxxxxxx x celková xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxx xxx indukci x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx výsledků xxxxxxxx xxxxxxxx citlivosti a xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx xxxxxxx referenční xxxxx, xxxx koncentracea xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx každé xxxxx včetně xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
- xxxxxx xxxxx charakteru x xxxxxx pozorovaných xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Xxxxxx
4. LITERATURA
Tato xxxxxx xx analogická x metodou XXXX XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
0 = žádná viditelná xxxxx;
1 = xxxxx xxxx skvrnité xxxxxxxxx kůže;
2 = xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx;
3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxx.
5.2 Klasifikace xxxxxxxxxx senzibilizace
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxxxxx xxxxxxxx, tj. xxxxx toho, xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx bylo xxxxx xxxxxx senzibilizováno, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx
xxxxx xxxxxxx (X. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
xxxxx alergen (XX. st.) - 9 - 28 % xxxxxx
středně xxxxx xxxxxxx (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 65 - 80 % xxxxxx
xxxxxxxx xxxxxxx (X. xx.) - 81 - 100 % xxxxxx
X.7. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx se xxxxxx xxxxx xx 28 xxx v odstupňovaných xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat orálně, x xx každé xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx se zvířata xxxxx xxxxxxx pozorují, xxx xx zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx, která xxxxxx xxxx jsou xxxxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu, xx utratí a xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx se náhodně xxxxxxx xx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx klece. Každé xxxxxxxxxx zvíře je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx látku lze xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxx vodě, xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxx, rozpustí xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, pak xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxx oleji (např. xxxxxxxxxx) x pak xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx není xxxxx, musí xxx xxxxxxxxx ještě xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx použít x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x nesmí xxx xxxxx. Podávání xxxxx xx xxxx xxxxx xx nejdříve xx odstavu x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx jako předběžný xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx x xxxx studiích xxxxxx zvířata xxxxxxxx xxxxx x ze xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx dávek xx xxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxx se xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, xx nutno xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx skupině) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 28 dnů xxxxxxxx dávku a xxxxx následujících 14 xxx xx podávání xxxxxxxx xxxxxxxx, trvání xxxx zpožděný xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Volba xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tři xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx v kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx pokusným xxxxxxxx, x xx ve xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxx dostupných xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx účinek xxx xxxxx dávce 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx-xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx za účelem xxxxxxxxx xxxxx.
Při xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx existující xxxxx z toxikologických x toxikokinetických xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx úroveň dávky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx. Dále xx vyberou xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Nejnižší xxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (NOAEL). Xxxxxxx xx xxxxxx xxxx- xx xxxxxxxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxx xxxxxxx; pokud xx xxxxx pokrýt větší xxxxxx dávek, xx xxxxx xxxxxx čtvrtou xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. faktor větší xxx 10).
Xxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx x potravě xxxx xxxxx vodě, xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x vodní xxxxxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx konstantní xxxxxxxxxxx (x xxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx; použitou xxxxxxxxxxx je třeba xxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxx sondou, xxxx xx xx xxx xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
Xxxxx má xxxx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx x xxxx studiích xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Neprokáže-li test xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx při dávce 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx za den xxxx při xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxx, která xxxx xxxxx xxxxxxxx, x pokud toxicita xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx s xxxxxxxxxx látkami, je xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testování xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx pravidlo xxxxxxxxx testu xxxxx, xxxxx údaje o xxxxxxxx lidí nenaznačují, xx je třeba xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx xx 28 dní. Zvířata xxxxxxxxx skupiny xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 14 dnů xxx xxxxxxxx x cílem xxxxxxxx xxxxxxxx zpožděné xxxxxx x pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx podává testovaná xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 xxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 dní x xxxxx. Xxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx intubační xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx tekutiny, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx zvířete. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 ml xx 100 x xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx x podávaném objemu xx třeba xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tak, xxx byl xxxxxxx xxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx u xxxxx dráždivých x xxxxxxxxx, x xxxxxxx xx třeba obvykle xxxxxxx xx stupňovanými xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx klinické xxxxxxxxxx xx xxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx, nejlépe x xxxxx xxxxx xxxx x x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx denně xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířat xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx stres xxxx vyřazena, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx všech xxxxxx xx provede xxxx xxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x dále xxxxxxx xxxxxx týdně. Toto xxxxxxxxxx se xxxx xxxx chovnou klec x standardním pozorovacím xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx dobu. Výsledky xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx s xxxxxxxx skórovacího systému, xxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx měnily xx xxxxxxx; xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx neměla xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx a xxxxxxx, xxxxxxxxxx sekretů x exkretů, změny xxxxxxx a vegetativních xxxxxx (slzení, xxxxxxx xxxxx, velikost zornic) x xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx změny xxxxx, xxxxxx, xxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx pohybů, xxxxxxxxxx x chování (vytrvalé xxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, pohyb pozadu).
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx otestují xxxxxx na různé xxxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxx, zrakové, proprioceptivní), xxxxx se xxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, jsou uvedeny x literatuře (viz Xxxxxxxxx xxxx, xxxx X).
Pozorování funkčních xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx aplikace xxx xxxxxxxx vynechat, pokud 28xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx předběžná studie xxx následující xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (90xxxxx); x xxx xxxxxxx je xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Ovšem x v tomto xxxxxxx xxxx xxxxx x funkčních xxxxxxxxx xx čtvrtém týdnu 28xxxxx studie vhodným xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxx subchronickou xxxxxx.
Výjimečně xxx xxxxxxxx pozorování xxxxxxxxx xxxxxx x skupin xxxxxxxxxxxx takové příznaky xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířete xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx x xxxx
Xxxxxxx xx xxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxx nejméně jednou xxxxx, xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx vyšetření na xxxxx xxxxxx zahrnuje xxxxxxxxx hematokritu, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx a změření xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxx xx odebere těsně xxxx xxxx v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxx se xxxx odebrala, se xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx tkáně, zvláště xx xxxxx a xxxxxxx, xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx před xxxx x průběhu xxxxxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx). Doporučuje xx xxxxxx zvířata bez xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx1). Vyšetření xxxxxx x xxxx xxxxxxxx stanovení xxxxxx, xxxxxxxx, glukózy, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx indikujících účinky xx xxxxxxx xxxxx (xxxx alaninaminotransferáza, aspartátaminotransferáza, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, sorbitoldehydrogenáza). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx xx časově definovaný xxxx a vyšetření xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx, osmolalitu xxxx xxxxxxxxxxx hmotnost, pH, xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx příp. xxxxxxx.
Xxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nespecifických xxxxxxxxxx poškození tkání x séru.
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx vápníku, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na xxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx do určitých xxxxxx látek nebo xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx pružně, brát x úvahu použitý xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx před začátkem xxxxxx.
1) Vyšetření xx xxxxx xx xxxxxxx pro xxxx xxxxxx x séru x xxxxxx, zvláště xxx glukózu. Xxxxxx xxxxx pro xxxx xxxxxxxxxx xx xx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx změny a xxxxxx interpretaci. Xx xxxxx straně, hladovění xxxx noc xx xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx x potravě by xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testované látce. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx na xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provést xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve 4. xxxxx xxxxx.
1.2.3.5 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx otvorů, xxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxxx. Játra, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx od xxxxxxxx tkání a xx xxxxxxxx xx xxxxx xx zváží xx xxxxxx stavu, xxx xx předešlo xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx třeba přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x ohledem xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxx), míchu, xxxxxxx, xxxxx i xxxxxx xxxxxx (xxxxxx Xxxxxxxxxx plátů), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, brzlík, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx (konzervované naplněním xxxxxxxx roztokem x xxx ponořením), gonády x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxx. dělohu, xxxxxxxx), xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxx xxxxxx (přednostně xxxxx xxx oblast xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx účinků), xxxxxxxxx xxxx (n. xxxxxxxxxxx xxxx n. tibialis), xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, xxx kostní xxxxx (nebo xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx). Podle xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx. Každý orgán, xxxxx xx mohl xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx působení xxxxxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxx i x xxxxx skupin x xxxxxxx dávkami.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx je xxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx byly xx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xx zvláštním xxxxxxx xx orgány x xxxxx, xx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
X dispozici xxxx být xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc jsou xxxxxxx údaje xxxxxxxxxxxx xx tabulkové xxxxx, xxxxxxxxx u každé xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x průběhu xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxxx toxických xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxx každého xxxxxxxx, xxxxx zvířat vykazujících xxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxxx formě xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistickou xxxxxx xx xxxxx zvolit xxx při plánování xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Zpráva o xxxxxxx pokusu
Zpráva x xxxxxx obsahuje xxxx informace, pokud xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxx, stáří a xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, podmínky chovu, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;
- zdůvodnění xxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx údaje x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx aplikaci, xxxxxxxx x přípravě xxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x způsobu xxxxxxxx testované xxxxx;
- xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xx xx xx xxxxxxx hmotnosti (xxxxx xxx o xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx);
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x xxxxxxx xxxx (xxxxxx xxxxx a xxxxxx);
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxx;
- xxxxxxxx potravy x xxxx;
- xxxxx x xxxxxxxxx reakcích xxxxx pohlaví x xxxxxxx úrovně, xxxxxx xxxxxx příznaků xxxxxxxx;
- povaha, závažnost x trvání xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. zda xxxx vratné xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x motorické xxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x příslušnými xxxxxxx;
- výsledky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx hmotnost při xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx;
- pitevní xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx;
- xxxxx x absorpci, xxxxx xxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx zpracování výsledků.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx OECD XX 407.
X.8. XXXXXX XXXXXXXX INHALAČNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxx xxxxxxx je xxxxx získat xxxxx x xxxxxxxxx látce: xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx par, xxx xxxx, xxx xxxx, xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, každá xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xx 28 xxx. Xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vehikulum. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují x zjišťují xx xxxxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx konce pokusu, xx xxxxxxx.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx třeba, xxxxx xx x testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se užije xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx využít.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Pokusná zvířata
Xxxx se přednost xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx důvody proti xxxx. Pracuje xx xx mladých zdravých xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx každou testovanou xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic x 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v průběhu xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, která budou xxxxxx před koncem xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx vysoké xxxxxxxxxxx satelitní skupinu 10 xxxxxx (5 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx dobu 28 xxx x během xxxxxxxxxxxxx 14 dnů xxxxxxxx vratnost, přetrvávání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Použijí xx xxxxxxx xxx skupiny x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x jedna xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina x xxxxxxxxx - pokud xx užije - x xxxxxxxxxxx stejné xxxx u xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx se xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo jen x xxxxx počtu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, xx xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx než 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx voleny xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x x kontrolní xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx má xxx 6 xxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x jiných xxx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Expoziční xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx expoziční xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu s xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx xxxxxx, xxx xxx zaručen xxxxxxxxx xxxxx kyslíku a xxxxxxxxxx rozdělení látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, je třeba xx xxxxxxxxxxx tak, xxx se zamezilo xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx co xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx boxu xxxxx xx v xxxxxx xxxxxxx xxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx orálně-nasální, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx expozice; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx cestami.
1.3.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x zotavení a xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx xxxxx zaznamenat xxxx uhynutí x xxx, ve xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx exponují xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx x týdnu, xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách, která xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx dalších 14 xxx bez aplikace, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx během experimentu xx xxx 22 xX ± 3 xX. Relativní vlhkost xx být xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx možné (xxxx. xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx). Udržování mírně xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx sloupce) xxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx do xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Používá xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx systém x xxxxxxx analytickou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxx předběžný xxxxx xxx získání xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu je xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx stejné. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xxxxxxxx expozice xxxx dosaženo xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Měření xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx studované xxxxx xx xxxx x dýchací xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx nemá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ± 15 %. U xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx úrovně xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísání. Xx celou dobu xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx koncentrace xxx xxxxxxxx, jak je xx xxxxxxxxx možné. Xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx distribuce xxxxxxxxx částic xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx skončení xx pozorování provádějí x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx; xxxxx zvíře xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx xx xxxxxxxx toxických xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Pozorování xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx a chování. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx týdně. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx týdně x spotřebu potravy. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx prohlížení xxxxxx, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx ke ztrátám xxxxxx, xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
Xx xxxxx pokusu xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Hematologické xxxxxxxxx xx zahrnovat xxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x séru (xxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), aspartátaminotransferáza (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.
Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, xxxxxxx, chloridů, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx účinků.
1.3.3.1 Pitva
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx provede xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx (xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, i xxxxxxx orgány x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxx) je xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx médiu s xxxxxxx xx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx poškození, zvážit x fixovat vhodným xxxxxx, tak aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx koncentrace, a x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x všech xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. X zvířat xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zvláštním xxxxxxx xx orgány x xxxxx, xx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx do xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu patrný xxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx formami xxxxxxxxx.
Xxxxxxx zjištěné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx má pokud xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení xxx.,
- podmínky xxxxxx: popis expozičního xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx přípravy xxxxxx x aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx systému, popis xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x boxu, xxxxx je xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx stability xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx hodnotami x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxx: x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením; x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx; x) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx přiváděné xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx); x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx bylo užito; x) skutečná koncentrace x xxxxxxx zóně; x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (MMAD) x xxxxxxxxxxx směrodatná xxxxxxxx (XXX),
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí xxxxx experimentu, případně xxxx x přežití xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxx účinku,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx xx možné,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX OPAKOVANÁ XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx testovací metody
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xx kůži xxxxx xx 28 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, a xx každé skupině xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx pokusu, x xxxxxxx, která přežijí xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx před xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx oholení xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx holení xxxxx xx xxxxx xxxx na xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nejméně 10 % xxxxxxx těla. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x x velikosti xxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx x tuhými xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx formy, xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit vodou, xxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 dnů x týdnu.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xx xxxxx používat xxxxxxx potkany, xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx použití xxxx xxxx xxx odůvodněné. Xx začátku xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Samice xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx. Pokud se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, xx nutno xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx budou zabita xxxx koncem xxxxxx. Xxxxxx je možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx skupině) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx ukončení xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx také xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx nejméně tři xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupinu xxxx - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx skupinu x aplikací xxxxxxxx. Doba expozice xx xxx xxxxxxx 6 xxxxx denně. Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxx xxxxxxxx každý den xx xxxxxxx xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx čtrnáctidenních xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx stálá xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx k tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx zachází stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx stejným způsobem xxxx xxxxxxxx skupinám, x xx xx xxxxxxx množství, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x člověka, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední xxxxx xxxx vyvolat xxx xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx dávek, xxxx být vmezeřené xxxxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx x xxxxxx x střední dávkou x v xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx být xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
Xxxx-xx aplikace testované xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxx koncentraci, xxx u xxxxxx xxxxxxx úrovně xxxx xxxx x omezení xxxx xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ukončit x provést xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Limitní test
Xxxxxxxx-xx při xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 nebo xxxxx xxxxx, která xxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx odezní xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx studované látce xxxxxxx 7 xxx x xxxxx po xxxx 28 dnů. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx určena xxx následné xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx dalších 14 xxx bez xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx nejméně 6 xxxxx denně.
Testovanou xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx plochu, která xxxxxxxxxxx xxx 10 % xxxxxxx těla; x xxxxxx toxických xxxxx xxxx xxx xxxx plocha menší. Xxxxxx xx třeba xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx dobu 24 xxxxx udržována x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxx, xxx xx mulový xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx se zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx požití látky xx možno xxxxxx x prostředků xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx immobilizaci však xxxxx doporučit. Jako xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxx".
Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx očištění xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx x sliznic x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx týdně i xxxxxxxx potravy. Je xxxxx zajistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat, aby xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx. v xxxxxxxx kanibalismu, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x výjimkou xxxxxxxxxxx xxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx x těžkém stresu xx xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
Na xxxxx pokusu se x všech xxxxxx xxxxxx kontrolních xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx alespoň xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x srážlivosti xxxx.
2. Biochemická xxxxxxx xxxx: x xxxxxxxxx funkce xxxxx x ledvin stanovit xxxxxxx xxxxx x xxxxxx parametrů: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (dříve xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.
Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: vápníku, xxxxxxx, xxxxxxxx, sodíku, xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx širšího spektra xxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii se xxxxxxx pitva. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x varlata xx co xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Orgány a xxxxx, xxxx. normální x xxxxxxxxxx kůže, xxxxx, xxxxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x všechny xxxxxx x makroskopickými xxxxxx xxxx změnami xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx dávka, x x zvířat kontrolní xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxx x xxxxxxx xx skupině x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. X xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx formami xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx (druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx bez xxxxxx, xxxxx ji lze xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- spotřeba xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.10. XXXXXXXXXX - XXXX CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX U XXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
Metoda xx xxxxxxxxx XXXX XX 473, In Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx strukturální chromozómové xxxxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxx x aberacím xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx naznačovat, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx numerické xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx příčinou xxxx xxxxxxxxxxx chorob x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx změny x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx, hrají úlohu xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat.
Xxxxx xxxx xx používá x odhalení xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx. Xxxx chemických xxxxx, xxxxx xxxx x tomto xxxxx xxxxxxxxx, je sice xxx xxxxx karcinogenní, xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx tímto xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx stále xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx zřejmě působí xxxxx mechanismem xxx xxxxxx xxxxxxxxxx XXX.
X xxxxxxx chromozómových xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx stabilizovaných xxxxxxxxx xxxxx, buněčných xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, počtu chromozómů, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx spontánních xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx metabolické xxxxxxxx. Tento xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x savců in xxxx. Xx xxxxx xx vyvarovat xxxxxxxx, xxxxx by mohly xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx způsobeny změnami xX, osmolality xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (4) (5).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: strukturální xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako zlom xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx spojení xxxx chromatid na xxxxxxx místě (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx).
Zlom xxxxxxxxxx: xxxx xxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx mezera xx struktuře xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx šířka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx pak x případech, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx zlomu xx xxxxxxxxxxx (xxxx mimo xxx chromatidy), případně xxxxx xxxxxxxxxx hodnoceného xxxxxxxxxx je xxxxxx x důsledku delece.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx jádro xx mitózy, nýbrž xxxxxx další S-fáze. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.
Xxx: achromatická xxxx xxxxx než šířka xxxxx xxxxxxxxxx a x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Mitotický index: xxxxx buněk v xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx buněk x xxxx populaci xxxxx; xxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Numerická xxxxxxx: změna počtu xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (n) xxxx xxx diploidní počet (xxxx 3n, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx chromozómové struktury xxxxxxxxxxx mikroskopickou analýzou xxxxxxxxx dělení ve xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x výměny.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xx x xxxxxxxxxxxx aktivací x xxx xx. Xx xxxxxxxxxxx intervalech xx xxxxxxxx xxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx, obarví se x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 POPIS METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx celou řadu xxxxxxxxx linií, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx buněk xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx či jiného xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx
K udržování xxxxxx je třeba xxxxxxxx vhodná kultivační xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x vlhkost). U xxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxx způsobem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx modálního xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x buňkách. X případě xxxxxxxxxxx xx buňky xxxxxxxxxxx. Xx třeba znát xxxxxxxx dobu xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx: xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx vysetím do xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx hustotě, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx při xxxxxxx 37 oC.
Xxxxxxxxx: xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxxx) xx přidá xxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx), nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx zdravých jedinců x kultivují se xxx xxxxxxx 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xx testovanou xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x jater xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Aroclor 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx a ß-xxxxxxxxxxxx (10) (11) (12).
Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxx obvykle 1 - 10 % x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx látka. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx i xxxxxxxxx modifikované xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Výběr xxxxxxxxx linií by xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (např. xxxxxxx xxxxxxxxx cytochromu X450 x xxxxxxxxxxx testované xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx x pevném xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx přidávat přímo xxxx xx xxxxxxx xxxx. Je třeba xxxxxxxx čerstvé xxxxxxxxx, xxxxxx údaje o xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vlastnosti.
1.5 XXXXXXXX TESTU
1.6 XXXXXXXXXXXX
X xxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx existovat podezření, xx xx mohlo x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx narušovat přežívání xxxxx x xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx se xxxx známé rozpouštědlo, xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx prokazujícími jeho xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxxx xxx, xxx xx to xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx zvažováno xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxx xxxxxxx, musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx bezvodé. Xxxx xx dá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sítem.
1.6.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxx kritéria, xxx xx xxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, rozpustnost x xxxxxxx a xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Cytotoxicita se xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx x xxx xx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, například xxxxxx xxxxxxxxxx, počet živých xxxxx, nebo mitotický xxxxx. Je vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, musí xxxx xxxxxxxxxxx pokrývat xxxxxx xx maximální xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx jednotlivé xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 a √10. X xxxx sklízení xxxxx xxxx xxx xxx nejvyšší koncentraci xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx růstu, počtu xxxxx, nebo mitotického xxxxxx (vždy o xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx index xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a je xxxxxxx na době xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou. Xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kultury, kde xx jiná xxxxxxx xxxxxxxx byla obtížná x nepraktická. Xxxx xxxxxxxxxx informace je xxxxx xxxxxx také xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx dělení, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx; xxx xxxxx xxxxxxxxxxx celkový xxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx subpopulací xxxxx. X tak x malé xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx generačního xxxx xxxx znamenat xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx optimálního výtěžku xxxxxxx.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látek xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx z xxxxxx 5 µx/xx, 5 xx/xx xxxx 0,01 X.
X xxxxxxxxx nerozpustných látek, xxx xxxx netoxické x koncentracích nižších, xxx xx koncentrace, xxx které xx xxx xxxxx nerozpouští, xx být xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace vyšší, xxx je mez xxxxxxxxxxxx ve finálním xxxxxxxxxxx médiu na xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx-xx x xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx testovat xxx xxxxxxxx koncentracích s xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, protože se xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx změnit v xxxxxxxxxx xxxxxxx vlivem xxxxxxxxxxx buněk, xxxx, X9 xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx nesmí xxx xx překážku xxx xxxxxxxxx buněk.
1.6.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx každého experimentu, xx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx ní, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx). Xxxxx se xxxxxxxx metabolická xxxxxxxx, xxxx být pozitivní xxxxxxxxx xxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx účinku.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx známý xxxxxxxxx, x xx xxx expozičních úrovních, xxx se xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x detekovatelný nárůst xxxxxxx nad xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Koncentrace xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx, xxx účinek byl xxxxxx, ale xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx preparátů. Mezi xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx aktivace | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
Xx | methyl methansulfonát xxxxx methansulfonát xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx mitomycin C 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Xxx | xxxx[x]xxxxx xxxxxxxxxxxxx monohydrát xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx i jiné xxxxxx látky. Xxx, xxx xx xx xxxxx, je xxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxxx skupiny.
Xxx xxxxx časový xxxxxxxx xxxxxxxx kultur xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako experimentální xxxxxxx. Mimoto je xxxxxx xxxxx zařadit xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3 Xxxxxx
1.6.3.1 Xxxxxxxx testovanou xxxxxx
Xx proliferující xxxxx xx působí xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xx xxxxx začít xxxxxxx xxx 48 hodin xx stimulaci mitogenem.
Xxxxxxx xx xxx xxxxxx koncentraci používají xxx xxxxxxx; a xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx negativní xxxxxxxx x rozpouštědlem, nebo xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx prokázat, že xxxxxxx xxxx duplicitními xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (13) (14), xx xxxxxxxxxx, xxx xx xxx každou koncentraci xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx.
V xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxx v xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx použití xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kultivačních xxxxx (15).
1.6.3.2 Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx aktivací x xxx ní xx xxxx 3 - 6 hodin x xxxxxx se xxxxxxxxx x čase xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx začátku expozice (12). Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx expozicí xx xx doby xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx xxxxx xx hodnotí xxxxx xxx době xxxxxxxx xxxxx, xxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Negativní xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xx případu. X xxxxxxxxx, kdy xx potvrzení negativních xxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx zdůvodnit.
1.6.3.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx buněčné xxxxxxx xx xxxxxx Colcemidem® xxxx kolchicinem xxxxxxx xx xxxx 1 - 2 xxxxx xxxx ukončením xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvlášť. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx pozitivních a xxxxxxxxxxx kontrol, se xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metafázických xxxxx a ztrátě xxxxxxxxxx, musí xxx x xxxxx typů xxxxx počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx číslu ± 2. Pro xxxxxx koncentraci a xxxxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx metafází, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx počet analyzovaných xxxxxxxx xxxxxx.
I xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx důležité xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je buňka, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx typy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jejich xxxxx a četnosti x experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx obvykle xx xxxxxxx četnosti xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx x testu xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx v xxxxxxx tabulce.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v xxxx. 1.4.3.3. V následných xxxxxxxxxxxxx je třeba xxxxxx modifikaci xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx podmínek. X xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx koncentrační xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE XXXXXXXX
Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx frekvence xxxxx x chromozómovými xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxx (3) (13). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx počtu polyploidních xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx procesy x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx počtu xxxxx x endoreduplikovanými xxxxxxxxxx xxxx naznačovat, xx testovaná látka xx xxxxxxxxx inhibovat xxxx buněčného cyklu (17) (18).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x tomto xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx většina xxxxxxxxxxx xxxxxxxx jasně xxxxxxxxx, nebo negativní xxxxxxxx, xx výjimečných xxxxxxxxx získaná data xxxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, nebo diskutabilní xxx xxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxx experimentů. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx aberace xx xxxxx xxxxxxx, xx testovaná látka xxxxxxxx x kultuře xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testovaná xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
XXXXXX X XXXXXXX POKUSU
Xx xxxxxx o xxxxxxx pokusu xx xxxxx uvést xxxx xxxxxxxxx:
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla/vehikula
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx a xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx buněk,
- xxxxxxx mykoplasmat, je-li xx nutné,
- xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx cyklu,
- xxxxxxx xxxxx krve, xxx xxxx použita xxxx xxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, použitý xxxxxxx,
- počet xxxxxx xxxxx, je-li xx xxxxx - xxxxxx udržování xxxxxxx xxxxxxx, je-li xx xxxxx
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx na xxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx koncentrací x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx. xxxxx x xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x dispozici,
- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, je-li xx xxxxx
- koncentrace xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx vehikula a xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, je-li xx xxxxx
- xxx x složení xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- pozitivní a xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- kritéria xxx hodnocení aberací,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxxx konfluence, xxxxx x buněčném cyklu, x xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx index,
- xxxxxx srážení,
- xxxxx x pH x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx stanoveny,
- xxxxxxxx aberací, xxxxxx xxxx,
- xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxx chromozómových xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní kulturu xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- souběžné xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx, včetně xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.11. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXX XXXXX XXXXX XX XXXX
1. XXXXXX
Metoda je xxxxxxxxx XXXX XX 475, Xxxxxxxxx Xxxx Xxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxx je xxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx aberace mohou xxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxx xxxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, xx daná xxxxxxxx látka je xxxxxxx vyvolávat numerické xxxxxxx. Aberace xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx chromozómového xxxx xxxxxxx rovněž. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy xxxx xxxxxxxx řady genetických xxxxxx u xxxxxxx x existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy, jež xxxxxxxxx změny x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx úlohu xxx xxxxxxxx x xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx tkání x xxx xx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xxxxx o xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx rychle xx xxxxxxxx buněk, jež xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx a zpracovat. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Tento xxxx xx chromozómové xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx při hodnocení xxxxxxxxxxx rizika, protože xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx reparace XXX, x když xxx xxxxx xxx xxxx živočišnými xxxxx x mezi xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx xxxx xxxxxx xxx další xxxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx testem xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx doklady x xxx, že xx testovaná xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxxxx použití tohoto xxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: strukturální xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx projevuje jako xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, nebo xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu xxxxxxxxx jako zlom xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx místě (zahrnuty xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx chromozóm, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx struktuře xxxxxxxxxx xx větší, xxx xx xxxxx poškozené xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x důsledku delece.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX nepřechází xxxxx xx xxxxxx, nýbrž xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... chromatidami.
Xxx: achromatická léze xxxxx xxx šířka xxxxx xxxxxxxxxx x x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx celkovým xxxxxx xxxxx v xxxx buněčné xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx populace.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx oproti normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx.
Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) mimo xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx xxxxxx xx stadiu xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx na xx xxxxxx xxxxxx zastavující xxxxxxxx (například xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). X xxxxx kostní xxxxx xx pak xxxxxxxx xxxxxxxxx a v xxxxxxxxxxxxx buňkách xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Běžně se xxxxxxxxx potkani, myši x xxxxxx křečci, xxx xxxxx xxxxxx x jakýkoliv jiný xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx se běžné xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx jedinců. Hmotnostní xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx měly xxx xxxxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx úvodu x xxxxx X, xxxxxxx xx měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělí xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Po xxxx xxxxxxxxx xxxx dní xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x laboratorních xxxxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx zvířatům xx rozpustí nebo xx připraví xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xx xxxx podáváním xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx prokazují, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx chemicky xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx příliš známé xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx x kompatibilitě x testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx je to xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx je xxxxx pro xxxxx xxxxxxx zařadit souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx zacházet xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx strukturální xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné xxxxxxx nad xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxx, aby xxxx xxxxxx patrné, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx možné podávat xxxxxxxx způsobem xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx to xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx stejné chemické xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | EINECS |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx nitrosomočovina | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
cyklofosfamid | 50-18-0 | 200-015-4 |
cyklofosfamid xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx měly by xxx zařazeny xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mezi zvířaty. Xxxxxxxx-xx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx dobou xxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx. Mimoto je xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx vehikulum xxxxxxxxxx xxxxx nepříznivé nebo xxxxxxxxx účinky.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx a xxxxxxx xxxxxx
X každé xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx x xxxx, xxx se xxxxxx xxxxxxx, existují údaje x stejném xxxxxxxxxx xxxxx a použití xxxxxxxx způsobů expozice xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx nejsou x xxxxxxxx podstatné xxxxxxx, xx testování xxxxx na xxxxxx xxxxxxx postačující. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxx látkám může xxx xxxxxxx na xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx xx xxxx xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxx x objemnou xxxxx, xxxx se k xxxxxxxxx aplikace dávka xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx dávky za xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Jiné režimy xxxxxxxxx musejí xxx xxxxxxx odůvodněné.
Xxxxxx xx xxxxxxxxx ve xxxx různých časových xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx. U xxxxxxxx xx první xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxx obvykle 12 - 18 hodin) xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxx vliv xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ovlivnit xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx po 24 xxxxxxxx xx xxxxxxx odběru. Xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx látka xxxxxx vícekrát xxx xxxxxx xx xxx, xx třeba xxxxxxx xxxxx xxxxx vzorků 1,5xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx cyklu po xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorky. X xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3 - 5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4 - 5 xxxxx. X xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx x nich chromozómové xxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx ji xxxxxxxx x téže laboratoři xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, xxxxx, xxxxxxx x pokusného xxxxxx, xxxx se xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx (5). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx první xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, aby pokrývaly xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxx xxxx nulové. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx xx pak xxxxx xxxxxx jenom xxxxxxxx xxxxx. Xx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx dávkách ve xxxxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, xxx x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, která xxxx x určitým xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx než 50 %).
1.5.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2 000 xx/xx hmotnosti x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx dávkách xxxxxxxx v xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické účinky x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx genotoxicita, nemusí xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx použití xxx dávkových xxxxxx. Xxx dlouhodobé studie xxxx xxxxxxx dávka 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xx xxx při xxxx xxxxxx xx 14 dnů, x 1&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxx době xxxxxx xxxxx než 14 xxx. Xxxxx očekávané xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx zapotřebí xxxxxxx x xxxxxxxx testu xxxxx dávkové úrovně.
1.5.5 Xxxxxxxx látky
Testovaná xxxxx se obvykle xxxxxxxx xxx žaludeční xxxxxx, xxxx intraperitoneální xxxxxxx. X odůvodněných xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x jiné způsoby xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xx sondou nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx překročit 2 xx/100x xxxxxxxxx; vyšší xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, jež normálně xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší účinky, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx dávkových xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx xx ni xxxxxxxxxxxx roztokem x xxxx xx fixuje. Xxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx a xxxxxx xx.
1.5.7 Analýza
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se x všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx index xxx xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx jedince.
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 buněk. Tento xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nezávisle zakódují. Xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxx dochází často x xxxxxxxx určitého xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx chromozómů, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 Zpracování xxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Experimentální jednotkou xx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, počet aberací xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenají jednotlivé xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, jejich počet x četnost. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xx xx celkové xxxxxxxxx xxxxxxx nezahrnují. Nejsou-li xxxxx xxxxxxx x xxx, že xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx možné xxxxx xx xxx pohlaví xxx statistickou xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Vyhodnocení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxx pozitivního výsledku xx používá několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x chromozómovými aberacemi, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxx ve xxxxxxx x jednorázovou xxxxxx xxx jednom časovém xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx xxxxx použít statistické xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných experimentálních xxxxxxxx.
Nárůst xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx fáze xxxxxxxxx xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x aktivitě testované xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou být xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx experiment xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Pozitivní výsledky xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xxxxxxxxxx.
Xx xxxxx vzít x úvahu, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx bude xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx xxxxxxxxxxx cílovou xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxxxx zvířata:
- použitý živočišný xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx xx studie xxx určení xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x přípravě testované xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx podávání,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx se xxxxx dostala do xxxxxxxxx oběhu xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických preparátů,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx analyzovaných buněk xx xxxxx zvíře,
- kritéria, xxxxx xx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx toxicity,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxx a xxxxx aberací xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, jejich průměr x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
- vztah xxxxx-xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
- xxxxx xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx,
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.12. XXXXXXXXXX - XX XXXX XXXXXXXXXXXX XXXX V XXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací OECD XX 474, Mammalian Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxx in xxxx x xxxxx slouží xx zjištění xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx x chromozómech xxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx erytroblastů; test xxxxxxx x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z kostní xxxxx xxxx. x xxxxxxxxx xxxx zvířat, xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx poškození, xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx fragmenty nebo xxxxxx xxxxxxxxxx.
Když x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx vznikne xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx je x buňky vyloučeno; xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx mikrojádra xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx buňkám xxxxx xxxxx. Xxxxxx četnosti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxx testu xx xxxxxx xxxx hlodavců xxxxxxx xxxxx proto, xx xx polychromní xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, u xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx jeho xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx dostatečně xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx kritérií, xxxx xx přítomnost či xxxxxxxxxxxx kinetochoru (centromery), xxxx xxxxxxxxxxxxx XXX x mikrojádru. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx zralých (xxxxxxxxxxxxxx) erytrocytů x xxxxxxxxx krvi xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx počtu zralých xxxxxxxxxx xxx jako xxxxxxxx xxxxxxx použít x xxxxxxx, že xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Tento xx xxxx mikronukleus xxxx x xxxxx xx xxxxxxx vhodný x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxx metabolismu xx vivo, xxxxxxxxxxxxxxx x procesů xxxxxxxx XXX, i když xxx xxxxx být xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx tkáněmi x xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx efektu, xxxxx xxx předtím xxxxxxx v xxxxxxx xx vitro.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, xx se xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx tkáně nedostane, xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): oblasti xxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxx dělení xxxx vlákna xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx dceřiných xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx (mikronukleus): xxxx xxxxx oddělená xx xxxxx xxxxx (xxxxxxx) vytvářená xxxxx xxxxxxxx mitózy, nebo xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx opožďujícími xx xxxxxxxxx chromozómů xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: zralý xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x jenž xx dá od xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx erytrocytů xxxxxxx xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx pro ribozómy.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: nezralý xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxx jsou xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxx xxxxxxx xx zralých, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Zvířata xxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se používá xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xx vhodnou xxxx xx působení xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xx izoluje x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, jež se xxxxxx (1-7). Pokud xx xxxxxxx periferní xxxx, xxxxxxx xx xx xxxxxx době xx xxxxxxxx látky x připraví xx xxxxxx, xxx se xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, ve kterých xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, musí být xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx co xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx se xxxxxxxx přítomnost xxxxxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Příprava
1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, doporučují xx jako pokusná xxxxxxx myši nebo xxxxxxx; xxxx však xxx použit xxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx-xx xx periferní xxxx, doporučují xx xxxx. Xxx xxxxx xxxxxx jakýkoliv xxxxxx xxxxx druh xx xxxxxxxxxxx, xx xx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xx x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx strukturální xxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx měly xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.
Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat
Xxxxxx xxxxx dospělí jedinci xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci xx xxxxxxxxxxx označí x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx minimalizovaly xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Příprava xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx v pevném xxxxx x xx-xx xx xxxxx, látka xx před podáním xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx připraví xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxxxx testované látky xx xxxxx xxxxxxx xxxxx nebo se xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Podmínky xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x používaných xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x nesmí x testovanou látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, musí být xxxx použití podpořeno xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, aby xxx xx xx xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Xx xxxxxxx testu je xxxxx pro xxxxx xxxxxxx zařadit souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx stejně.
X xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx in vivo xxx dávkách, xxx xxx očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx úroveň. Xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrole xx volí xxx, xxx byly xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx hodnotiteli xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx možné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx možné, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx testovaná látka. Xxxxxxxx látek vhodných xxx xxxxxxxxx kontrolu:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
X-xxxxx nitrosomočovina | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem nebo xxxxxxxxx x zpracované xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx měly xx být zařazeny xx všech časových xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxx x xxxxxxxxxx a x interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx zvířaty. Aplikuje-li xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, ledaže existují xxxxxxxxxx nebo publikované xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx rozpouštědlo, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxx, může xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx přijatelný x vzorek xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx studií x xxxxxxxxx krvi (xxxx. 1 - 3 dávky), xxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx rozmezí xxxxxxxxxx kontroly.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx a pohlaví xxxxxx
V xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pohlaví (11). Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx provádí, existují xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx způsobů xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx pouze na xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx závislá na xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx test xx xxxxxxxxx odpovídajícího xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx schéma
Xxxx se doporučit xxxxx standardní xxxxxx (xxxx. xxxxx, dvě xxxx xxxx xxxxx x 24hodinových xxxxxxxxxxx). Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx schémata, pokud xx v xxxxx xxxxxxxxxxx neprokáže xxxxxxxxx xxxxx; x případě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx, xx xx xxxxxxx toxicita, nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx až xx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxx x objemnou dávku xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxx xx může provádět xxxxx způsoby:
(x) Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx působí xxxxxxxxxxx. Vzorky kostní xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx než xx 24 hodinách x celkově xx xxxxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx od xxxxxx látky, x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Pokud xx vzorky xxxxxxxx xxxxx než xx 24 xxxxxxxx, musí xxx odůvodněné. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx dvakrát, xxxxxx xx dříve xxx po 36 xxxxxxxx od podání xxxxx, se xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, celkově xxxx xxxxxx déle xxx 72 hodiny. Xxxxx xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx pozitivní xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx den (xxxx. dvě xxxx xxxx xxxxx ve 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xx vzorky v xxxxxxx xxxxxx dřeně xxxxxx mezi 18 x 24 xxxxxxxx xx posledním xxxxxx xxxxx x v xxxxxxx xxxxxxxxx krve xxxxxx xxxx 36 x 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx (12).
Je-li xx xxxxxxxxxx, mohou xx mimoto xxxxxx x xxxxx odběrové xxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx studie ke xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx žádné xxxxxx xxxxx, je třeba xx xxxxxxxx x xxxx laboratoři xx xxxxxxx xxxxxxxx živočišného xxxxx, kmene, xxxxxxx x xxxxxxxxx režimu, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx studii (13). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx časový xxxxxxxx odběru xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx rozmezí xx maximální toxicity x xxxxxxxx nízké, xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx časový interval xxxxxx xxxxxx xx xxx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxxx dávku. Xx xx definována xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx ve stejném xxxxxx podávání xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, jež x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako jsou xxxxxxx nebo mitogeny, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, která xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxxx krvi).
1.5.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx dávce xxxx xx xxxx xxxxxxx podaných x xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné toxické xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx neočekává genotoxicita, xxxxxx xxx provedena xxxx studie xx xxxxxxx tří xxxxxxxxx xxxxxx. Pro xxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx za den xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx xxx době xxxxxx xxxxx než 14 dnů. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx vpravuje xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx i xxxx xxxxxxx expozice. Xxxxxxxxx xxxxx kapaliny, xxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, závisí xx velikosti pokusného xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 ml/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo žíravých xxxxx, xxx normálně xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx xxxxx účinky, xx třeba upravit xxxxxxxxxxx látky xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Příprava xxxxxx xxxxx / xxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx usmrcení zvířete. Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx dřeň xxxxx x xxxxxx nebo xxxxx, buňky xx xxxxxxx a obarví xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx x ocasní žíly xxxx xxxx vhodné xxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx obarví (8) (9) (10), xxxx se xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx obarví. Použitím xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx XXX (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxx (14) nebo Xxxxxxx 33258 x xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx vznikajících xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx DNA xxxxxxxxxx. Tato xxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xx xxxxxx použít xxxxx barviva (xxxx. Xxxxxx). Xxx použít x xxxxx xxxxxxx - xxxxxxxxx kolony xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x jádrem (16) - pokud xxxx xxxxxx jsou x xxxxxxxxxx rutinně používány xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
U xxxxxxx xxxxxxx se stanoví xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). K xxxxxx xxxxx se počítá x xxxxxxx kostní xxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxxxxxxx x x xxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxx minimálně 1000 xxxxxxxxxx (17). Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx jedince xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 2000 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx. Doplňující xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxx, xx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Při analýze xxxxxxxxx xxxx být xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 20 % hodnoty x xxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx exponována xxxxxxxxxxx po dobu xxxx xxxxx nebo xxxxx, xxx také xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jedince. Možnou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx systémy xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx - xxxx cytometry), pokud xxxx zdůvodněny x xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxxxx zvířat se xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx. Experimentální xxxxxxxxx xx xxxxx. U xxxxxxx jedince se xxxxxx zaznamená xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx erytrocytů, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry x xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx kontinuálně xx xxxx xxxx týdnů xxxx xxxx, xx xxxxx uvést xxxx xxxxx o zralých xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxx každého xxxxxxx. Nejsou-li xxxxx xxxxxxx x xxx, xx obě xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx za xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx závislý xxxxxx počtu xxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx nárůst počtu xxxxx x xxxxxxxxxx xx skupině x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (18) (19). Statistická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx být jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx testováním, xxxxxxx xx modifikovaných experimentálních xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx látka, xxx jejímž xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, x ojedinělých případech xxxx nelze xx xxxxxxxxx souboru xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky definitivní xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, x xxxx xx experiment xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx mikrojader, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx poškození xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx testovaného zvířecího xxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látka v xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxx xxxxx mikrojader x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx uvažovat, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx cílovou xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx známa.
Pokusná xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx druh/kmen,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, chovné podmínky, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- pozitivní x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxx xxx určení xxxxxxx, byla-li xxxxxxxxx,
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxx dávky,
- xxxxxxxxxxx x přípravě xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx cesty xxxxxxxx,
- případné xxxxxx x ověření, xx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx do cílové xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx látky x potravině/pitné vodě (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx potravy a xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,
- metody měření xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx,
- xxxxx analyzovaných xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- kritéria, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- podíl xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- počet xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx každou skupinu,
- xxxxx xxxxx - účinek, xx-xx xx možné,
- xxxxxxx statistické analýzy x xxxxxx,
- xxxxx ze souběžných x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- údaje xx souběžných pozitivních xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.13/14. XXXXXXXXXX - XXXX REVERZNÍCH XXXXXX X BAKTERIÍ
1. XXXXXX
Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX TG 471, Xxxxxxxxx Xxxxxxx Mutatiton Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxx xxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx typhimurium (xxxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x aminokyselině xxxxxxxxx). Xxxxxx uvedených xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx mechanismem xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx nebo několika xxxxxxxxxx x chromozómu xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxx, xx xx xxxxxxxx mutace, xxxxx zpětně vracejí xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx funkční xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx své xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx aminokyseliny, kterou xxxxxxxx xxxxxxxx zkušební xxxx.
Genové xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx genové mutace x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx genech xxxxxxxxxxx xxxxx hrají x člověka x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx na xxxxxxxx mutace xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, díky xxxx jsou xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxx, zvýšené propustnosti xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx x eliminace xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx posílení xxxxxxxx xxxxxxx reparace XXX, xxx jsou xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx umožňuje xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, jež jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx bakteriální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx širokou xxxxx xxxxxxxx x byly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx chemikálií x xxxxxxx fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Test xxxxxxxxxx mutací x xxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx), xxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, který je xx xxxxxxx aminokyseliny xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páru xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x DNA. Při xxxxxxxxx testu může x xxxxxx změně xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (mutageny vyvolávající xxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo odebrání xxxxxxx xxxx více xxxx bází x XXX, xxxx xx xxxx xxxxx rámec x XXX.
1.3 XXXXXXX XXXXX
X bakteriálním xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, které xx xx xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx látek xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx XXX. Xxxxx in vitro xxxxxx vyžadují exogenní xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx dokonale imitovat xxxxx xxxxxxxx in xxxx, takže xxxx xxxxxxxxxxx přímé xxxxxxxxx x mutagenní a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx dané xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx.
Bakteriální test xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx prokázalo, xx mnohé xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx také x xxxxxx xxxxxxx mutagenní xxxxxxxx. Existují ovšem x příklady xxxxxxxxxxx xxxxx, jež xx xxxxx xxxxxx neodhalí; xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x metabolické xxxxxxxx xxxx rozdíly x biologické dostupnosti. Xx xxxxx straně xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx zvyšují, mohou xxxx k xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Bakteriální test xxxxxxxxxx xxxxxx může xxx nevhodný xxx xxxxxx třídy xxxxxxxxxx xxxxx, jakými jsou xxxxxxxxx xxxxxxx silně xxxxxxxxxxxx sloučeniny (kupříkladu xxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxx, o nichž xx xxxxxxxxxxx xxxx xx, xx specificky xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx buněk (například xxxxxxx xxxxxxxxxx topoizomerázy xxxx xxxxxxx analoga xxxxxxxxxx); x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx testy xx xxxxxx x savců.
Xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx, ovšem xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx; xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, protože xxxxxx xxxxx, negenotoxickým xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4 XXXXXXX XXXXXX
Suspenze xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx testované látky xx přítomnosti x xx nepřítomnosti xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické aktivace. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx "xxxxx incorporation" xx xxxxxxxx smísí x vrchním agarem x xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx inkubuje x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx a xx potom xx xxxxxx xx minimální xxxxxx půdu. Xxx xxxx xxxxxxxx se xxx až xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kolonie spočítají x výsledek xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x rozpouštědlem.
Je xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx testu. X xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ["xxxxx xxxxxxxxxxxxx"] (1) (2) (3) (4), preinkubační xxxxxx (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) x xxxxxxxxx xxxxxx (11). Xxxx xxxx popsány xxxxxx xxxxxxxxxx xxx testování xxxxx xxxx par (12).
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x metody xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxx přijatelné pro xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx preinkubační xxxxxxx; xxxxx se x xxxxxxxx třídy, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x krátkým xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx x diazosloučeniny, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx a nitrosloučeniny (3). Xxxx xxxx xxxxxxxx, xx existují xxxxxx třídy mutagenů, xxxxx se pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Na xx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", k xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx jiných xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "speciální xxxxxxx" (xxxxx x příklady xxxxxxx, které se xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx): azobarviva x diazosloučeniny (3) (5) (6) (13), xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) a xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5. XXXXX METODY
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx kultury xx vypěstují xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx 109 xxxxx/xx). Kultury x xxxxxxx stacionárním xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx, aby xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxx xxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx stanovením počtu xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx.
Doporučená xxxxxxxxx xxxxxxx činí 37xX.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxx bakteriálních xxxxx, které xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx X. typhimurium (TA 1535; TA 1537 xxxx XX97x xxxx 1X97; TA98; x XX100); x xxxxx xxxx prokázána xxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnost xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx reverzním xxxxx xxxx bází XX x je xxxxx, xx nemusejí xxxxxxxxx xxxxxx oxidační xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx látky xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx X. coli XX2 xxxx S. xxxxxxxxxxx XX102 (19), xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx reverzním xxxxx xxx bází XX. Xxxxx xx doporučená xxxxxxxxx xxxxx tato:
- S. typhimurium XX1535 x
- X. xxxxxxxxxxx XX1537 xxxx XX97 xxxx XX97x a
- X. xxxxxxxxxxx XX98 x
- X. xxxxxxxxxxx XX100 a
- E. coli XX2 xxxX xxxx X. coli XX2 xxxX (xXX101) nebo X. xxxxxxxxxxx XX102.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx nejvhodnější xxxxxx TA102 xxxx xxxxxx DNA xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kmen X. xxxx (např. E. xxxx XX2 nebo X. coli WP2 (xXX101)).
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zásobní kultury, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx závislost na xxxxxxxxxxxxx nutné xxx xxxx (xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx X. xxxx). Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx charakteristiky, x xx: přítomnost xx nepřítomnost R-faktor xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx v xxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxx ampicilinu u xxxxx XX98, XX100 x XX97x xxxx XX97, XX2 xxxX (xXX101) a rezistence xxxx xxxxxxxxxx + xxxxxxxxxxxx x kmene XX 102); přítomnost xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (tj. xxx xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxX xxxxxx u E. xxxx xxxx xxxX xxxxxx u S. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) (2) (3). Xxxxxxx xxxxx xxxx mít xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx frekvenčním xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx možno x x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
1.5.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xx vhodný xxxxxxxxx xxxx (xxxx. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X a xxxxxxxx) a xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x biotin xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).
1.5.1.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Bakterie xx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxx za xxxxxxxxxxx, tak xx xxxxxxxxxxxxx vhodného systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) připravená x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx enzymů xxxxxxx, xxxx je Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (18) (20) (21). Post-mitochondriální xxxxxx xx obvykle xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 30 % x/x xx xxxxx X9. Xxxxx a podmínky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx testované xxxxxxxxxx. X některých xxxxxxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x několika xxxxxxxxxxxxx. X azobarviv x xxxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx redukční xxxxxx metabolické aktivace (6) (13).
1.5.1.4 Testovaná xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxx xxxxx se xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx jejich xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu x xxxxxxxx xx xxxxx. Kapalné xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx systému xxxxxxxx xxxxx xxxx se xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x stabilitě xxxxxxxxx, xx xxxxxx delší xxxxxxxxxx je přijatelné.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.5.2.1 Xxxxxxx xxxxx (viz 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Koncentrace
Xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxx použitého množství xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx směsi, xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxx xxxxxx stanovit xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx experimentu. Xxxxxxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx pozadí xxxx xxxxxx xxxxxx přežití xxxxxxxxx kultur. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx posuzuje xxxxx xxxxxxx v konečné xxxxx za xxxxxxxxxx xxxxxxxxx podmínek, viditelného x xxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx maximální pokusná xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxx látek, xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx několik xxxxxxxxxxx xxxx xxx x konečné xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxxxxxxx xxx za xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx resp. 5 µl/misku, xx xxxxxxx xx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Sraženina xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx.
Používá xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx koncentrací xx xxxxxx půllogaritmickým intervalem (xx. √10) mezi xxxxxxxxxxxx body x xxxxxxxx experimentu. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx menší. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx vyšších xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx xxxxxxxx x úvahu, xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutagenních nečistot.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Každý xxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulum) xxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Xxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx efektivnost xxxxxx testu.
X xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx kmene.
Xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx v testech x metabolickou aktivací, xxxxx xxxxxxx:
Xxxxx | CAS | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 |
Xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
Xxxxx | CAS | XXXXXX |
Kongo červeň | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-aminoantracen xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx X9. Xxxxx xx 2-aminoantracen xxxxxxx, xx xxxxx každou xxxxx S9 xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, např. xxxx[x]xxxxxxx, dimethylbenzantracenenm.
Xxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxx xxx kmenově xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolu x testech xxx xxxxxxxxxx systému metabolické xxxxxxxx, xxxxx tato xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX | |
Azid xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 x XX 100 |
2-xxxxxxxxxxxx | 607-57-8 | 210-138-5 | XX 98 |
9-xxxxxxxxxxxx | 90-45-9 | 201-995-6 | XX 1537, XX 97 a XX 97x |
XXX 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, XX 97 a XX 97x |
xxxxx-xxxxxxxxxxxx | 80-15-9 | 201-254-7 | TA 102 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 | WP xxxX x XX 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, XX2xxxX a XX2xxxX (xXX101) |
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx | 56-57-5 | 200-281-1 | XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (xXX101) |
Xxxxxxxxxxxx (AF2) | 3688-53-7 | kmeny xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
K xxxxxxxxx kontrole lze xxxxxx i xxxx xxxxxx referenční xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx x chemické xxxxx.
Xx xxxxx použít x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x rozpouštědla xx xxxx vehikula xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xx jinak zachází xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx se použijí x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že zvolené xxxxxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxx xx mutagenní xxxxxx.
1.5.3 XXXXXX
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4) xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,05 nebo 0,1 ml xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx kultury (xxxxxxxxxx zhruba 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) a 0,5 xx xxxxxxxxxx xxxxx a 2,0 xx xxxxxxxx agaru. X testech x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx 0,5 xx metabolické xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakce (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) s 2,0 ml vrchního xxxxx společně x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx /testovaným xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx zkumavky xx xxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Vrchní agar xx xxxxx xxxx xxxxxxxx ztuhnout.
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx testovaná xxxxx / testovaný xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x sterilním xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,5 xx) xxxxxxx xx xxxx 20 xxx xxxx déle xxx 30 - 37 xX; xxxxx xx xxxxx s xxxxxxx xxxxxx x nalije xx misku x xxxxxxxxxx xxxxxx. Obvykle xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 ml xxxxxxxxx látky / xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,1 xx xxxxxxxx x 0,5 ml směsi X9 xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx během xxxxxxxxxxx provzdušňují třepáním.
Xxx xxxxxxxxx odhad xxxxxxx xx pro xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxx. Duplicitní xxxxxxxx je xxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx xxxxxxx ke xxxxxx misky, nemusí xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Plynné nebo xxxxxx látky xx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x zatavených xxxxxxxx (12) (14) (15) (16).
1.5.4 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxx teplotě 37 xX xxx xxxx 48 - 72 xxxxx, načež xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x negativní xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, popřípadě kontrola xxx působení, xxxx-xx xxxxxxx), xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pro xxxxxxxxxx látku i xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx) xx uvedou počty xxx xxxxxxxxxx misky x průměrný počet xxxxxxxxxxxxx kolonií xx xxxxx misku včetně xxxxxxxxxx odchylky.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xx musejí xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx experimentech xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx parametrů xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxx posuzovaných xxxxxxxx. Ke studijním xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx působení ("xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx) x podmínky metabolické xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xxxxxxx závislý xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx a/nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na jednu xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxx koncentracích x minimálně jednoho xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem xxxx xxx xxx (23). Xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx relevance xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx je xxxxx xxxxxx statistické xxxxxx (24), statistická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Testovaná látka, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria xxxxxxxxx, xx x tomto xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však xxxxx xx xxxxxxxxx souboru xxx vyvodit o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo problematické, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx na reverzní xxxxxx ukazují, xx xxxxx xxxxxxxx genové xxxxxx xxxx substitucí xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx v genomu Xxxxxxxxxx typhimurium xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxx xxxxx xx zkušebním xxxxx xxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- xxxxx buněk x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx kmene.
Podmínky xxxxxx:
- množství xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxx (v xx nebo μl) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxx xxxxx xxx jednu xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx,
-xxx x xxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- postupy xxxxxxxx (xxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- známky xxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx revertantních xxxxxxx na xxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- vztah xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, byly-li provedeny,
- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Závěry.
B.15. XXXXXX XXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kmeny xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx indukovaných xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx využívány xxxxxxx xxxxxxx systémy u xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx vyžadující mutant (xxx-1, ade-2) xx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx systémy, jako xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx canavaninu x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx využití xxxxxxxxxxx xxxxx XX 185-14 X x xxxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 2-1, arg 4-17, lys 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx jsou vratné xxxxxxxxx mutagenů typu xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. XX185-14X xxxx xxxxxx xxx 1-7 marker, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx a xxxxxx xxx 3-10, xxxxx je revertován xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx je jediným xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X7, který xx xxxxxxxxxxx xxx xxx 1-92.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxx xx vodě xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx roztok vyšší xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, aceton xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (DMSO). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkám xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakce xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx kofaktory. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakcí xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxx XX 158-14X a xxxxxxxxx kmen D7 xxxx nejužívanější xxx xxxxxx genových xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx xxx rovněž xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx kultivační xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx a mutovaných xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontroly
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx mutační xxxxx mají xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Má xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mají být xxxxxxxxx xx po xxx rozpustnosti xxxxx xx použití vhodných xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx rozpustné, xx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Misky xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxx 28 xx 30 xX xx xxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx má být x xxxxxxx akceptovaných xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx xx jednu xxxxxxxxxxx x testu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x u životnosti xxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx jako xxx 3-10 s xxxxxx mutační rychlostí xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxx získány statisticky xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Ovlivnění kmenů X. xxxxxxxxxx je xxxxxxx prováděno xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx buňky. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxx: 1-5 x 107 xxxxx/xx xx xxxxxxxxx testované látce xx dobu xx 18 x. při 28 až 30 xX za třepání. Xxxxxxxxxxxx množství metabolického xxxxxxxxxxx systému xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx inkubaci xxxx xxxxxxxx přežívající buňky x xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx negativní, xx xxx xxxxxxxx druhý xxxxx s buňkami xx stacionární xxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx experimentem.
2. ÚDAJE
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx kolonií, xxxxx xxxxxx, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx mutací. Xxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx nezávislým xxxxxxxxxxxx. Údaje xxxx xxx xxxxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o:
- xxxxxxxxx xxxxxxx,
- podmínkách testu: xxxxx xx stacionární xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx inkubace, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém,
- xxxxxxxxx vlastního xxxxxxxxxxx: xxxxxxx expozice, xxxxxx x trvání xxxxxxxxx, xxxxxxx při xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx kolonií, xxxxx xxxxxx, přežívajících buněk x frekvenci xxxxxx, xxxxxx xxxxx a xxxxxx, xxxxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.16. MITOTICKÁ XXXXXXXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae xxxx xxx xxxxxxxxxx mezi xxxx (obecněji mezi xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxx xxxx. První xxxxxx xx nazýván mitotické xxxxxxxxxx x vytváří xxxxxxxxxx produkty, xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxxxxx genová xxxxxxxx. Překřížení xx xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxx recesivních xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, genová xxxxxxxx je xxxxxxxxx xx xxxxxxx tvorby xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x auxotrofního xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx genu. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx X4 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 2 x xxx 5), X7 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 5), BZ34 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4) x JD1 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4 x trp 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx produkující xxxxxxx a růžové xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x X5 xxxx D7 (který xxxxxx měří xxxxxxxxxx xxxxxxx konversi x xxxxxxxx xxxxxx v xxx 1-92). Xxx xxxxx jsou heteroalelické xxx xxxxxxxxxxxxxx alely xxx 2.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx těsně xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx užít xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % v xxxxxxxxxxx rozpouštědlech, jako xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx aktivace
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx působení testovaných xxxxx xxx v xxxxxxxxxxx, tak x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx systémem xx postmitochondriální frakce xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx aplikaci xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx jiných druhů, xxxxx, postmitochondriálních xxxxxx xx xxxxxxx může xxx rovněž vhodné xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Testovací xxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx D4, X5, X7 x XX1. Užití xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx média xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk x frekvenci xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a rozpouštědlem xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxxxxx současně. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mutační xxxxx xxxx xxx xxxxxxx odpovídající pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxxx látky.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx být xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx zvolených xxxxxxxxxxx. Xxxx být xxxx xxxxx xx cytotoxicitu x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx redukovat xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx až xx xxx rozpustnosti xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx látky xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, je určena xxxxxx xx případu.
Xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx buď xxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro tvorbu xxxx, jejichž xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
Misky xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xx xxxxx xx xxxx xxx xxx 28 - 30 xX. Misky použité xxx průkaz xxxxxxxxx x růžových sektorů xxxxxxxxx mitotickým xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx 4 xX) po xxxxx 1 - 2 xxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxx utvořit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx replikací
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx konverzí x xxx xxxxxx životnosti xxxxx. V případě xxxxxxxxx recesivní xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.8 Xxxxxx
Xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx test x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx provedeny xx xxxxxxxxxx buňkách. 1-5 x 107 xxxxx/xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 až 30 xX za xxxxxxx. Odpovídající množství xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx to potřebné.
Xx xxxxxxxx ovlivnění xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx a vyočkovány xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx inkubaci xxxx počítány přežívající xxxxx x xxxxx x xxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx je xxxxx xxxxx negativní, xx být xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx dalším xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx kolonií, xxxxx rekombinací, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx potvrzeny v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Údaje xxxx xxx vyhodnoceny xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx fázi nebo xxxxxxxx, xxxxxxx médií, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, metabolický xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx ovlivnění, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx kolonií, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx dat,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.17. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXX MUTACÍ X XXXXXXX BUŇKÁCH XX VITRO
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 476, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxx Xxxx Mutation Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Test xxxxxxxx xxxxxx xx vitro xx xx používat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx vhodné xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx X5178X, xxxxx XXX, XXX-XX52 x V79 xxxxx xxxxxxxx křečka x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx TK6 (1). X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zjišťují xxxxxx x thymidinkináze (XX) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x x xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx fosforibosyltransferáze (XXXX). Xxxxx xxxxxx x XX, HPRT x XPRT xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx změn. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XX a XXXX může xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx změny (xxxx. xxxxx xxxxxx), které xx na lokusu XXXX chromozomů X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
K xxxxx xx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx in xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx stabilizovaných xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxx růstové xxxxxxxxxx xxxx kultury x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx in xxxxx xxxxxx vyžadují xxxxxxxx xxxxx metabolické xxxxxxxx. Takový xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx podmínky xx vivo dokonale. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx by xxxxxxxx xxxxxxxxxx vlastní mutagenitu. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx x důsledku xxxxx pH, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (7).
Xxxxx test se xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx savčích xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx, neexistuje xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx testem a xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx korelace xxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx toho, že xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx mechanismem xx xxxxxxxxxxx, který v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx typu xxxxxxxx xxxxx, jež xxxx ke xxxxx xxxx ztrátě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kódovaného xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx: xxxxx způsobující xxxxxxxxxx jednoho xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx x XXX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): xxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx párů xxxx x XXX.
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx nezměněné genové xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx počtem xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx růst: xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxx v xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxxx buněk; xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti xxxxxxx efficiency (x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx růst: xxxxxxx nárůst xxxxx xxxxx xxxxx období xxxxxxx v xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolou.
Životnost (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx efficiency) xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x selekčních xxxxxxxxxx xx xxxxxx exprese.
Přežití: xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xx xxxxx působení xxxxx; xxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx XX+/- → XX-/-, xxxx xxxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX). Xxxxx produkující xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx XXX xxxxxxx, což způsobuje xxxxxxxx xxxxxxxxx metabolismu x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx TFT proto xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx normální xxxxx, obsahující xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nemohou. Podobně xxxx buňky x xxxxxxxxxxx XXXX xxxx XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 6-xxxxxxxxxxx (XX) xxxx 8-xxxxxxxxxx (XX). Xxxxx xx xxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testu xx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx vlastnosti testované xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vůči xxxxxx x xxxxxxxx x bez xxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příbuzné xx xxxxxxxxx činidlem, xx xxxxx xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).
Xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx xx x xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a k xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx klonovací xxxxxxxxx (xxxxxxx) (xxxxxxx xxxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nárůstu xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx se ponechají x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx daný xxxxx a xxx xxxxx, xxx mohlo xxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx expresi xxxxxxxxxxxx mutací. Frekvence xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx mutovaných xxxxx a x xxxxx bez xxxxxx xxxxxxx, xx stanovení xxxxxxxxx účinnosti (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx spočítají. Xxxxxxx frekvence se xxxxxx x xxxxx xxxxxxx mutovaných buněk x xxxxxxxxx médiu x z počtu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xx xxxxxx celá xxxx xxxxxxxxx typů, xxxxxx xxxxxxxx xxxxx X5171X, XXX, XXX-XX52, X79 x XX6. X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xxx prokázaná xxxxxxxxx xxxx chemickým xxxxxxxxx, vysoká xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) x xxxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx mutací. U xxxxx se kontroluje, xxx nejsou kontaminovány xxxxxxxxxxxx; infikované xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxx). Xxxxx xxxxx, xxxxx kultur x xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx buněk, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxx stadiích xxxxx, xx xxx frekvencí xxxxxxxxxxx xxxxxx. Obecným xxxxxxxx je, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 106 buněk. Xxxx xx být x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xx prokázala xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.2 Média x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx média a xxxxxxxxx xxxxxxxx (kultivační xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx a xxxxxxx). Xxxxx xx xxx xxxx volí podle xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx namnoží xx zásobních xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx a inkubují xxx xxxxxxx 37 xX. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxxx zbavit xxxxx xxxxxxxxx mutovaných buněk.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx buňky se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxxx xx kofaktory xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce x xxxxx činí xxxxxxx 1 - 10% x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému xxxx xxxxxxx na xxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx chemikálie. X některých případech xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx účely xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx specifické xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x xxxxxxxxxxx testované xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx testované látky
Je-li xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx působením xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx předtím ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx prokazují, že xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
X zvoleného xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx by xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx reagovat, x xxxxx narušovat xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx se xxxx známé xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxxxx xxx, xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx testovaná xxxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx bezvodé. Voda xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sítem.
1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxxxx, xxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxx v systému x změny xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (přežití) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx vhodné stanovit xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. To xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx lišit xxxx xxx xxxxxxxx, který xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxx přežití (xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x 10-20 %, xx xxxx xxxx xxx 10 %. X xxxxxxxxx netoxických xxxxx by xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 xx/xx, 5 μx/xx a 1,01 X.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek, xxx xxxx netoxické x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, než xx koncentrace, xxx xxxxx xx xxx xxxxx nerozpouští, xx xxx nejvyšší použitá xxxxxxxxxxx xxxxx, než xx xxx rozpustnosti xx xxxxxxxx kultivačním xxxxx xx konci xxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxx rozpustnost xx začátku a xx xxxxx působení, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx expozice x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, X9, séra xxx. xxxxx. Nerozpustnost xx dá zjistit x prostým xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.3 Xxxxxxxx
X xxxxx xxxxxxx experimentu xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx (rozpouštědlo, xxxxxxxxx) xxxxxxxx, x xx xxx x metabolickou xxxxxxxx, tak xxx xx. Pokud xx xxxxxxxx metabolická aktivace, xxxx xxx pozitivní xxxxxxxx látka vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx látkami xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
XX (xxxx x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XXXX | xxxxx metansulfonát ethyl xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (xxxx a xxxxx xxxxxxx) | xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XXXX | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx koncentrace S-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
benzo[a]pyren | 50-32-8 | 200-028-5 |
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx použít i xxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx má například xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (CAS 59-14-3, číslo XXXXXX 200-415-9), xxx použít x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxx, xxx xx to možné, xx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx sklízení xxxxxx xx třeba xxxxxx i negativní xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx kontrolu xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx nevykazuje xxxxx xxx buňky nepříznivé xx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Expozice xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Xxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xx xxxxxx doba 3-6 xxxxx). Xxxx expozice xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx používají xxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx. Používá-li xx xxxxx jedna kultura, xx xxxxx zvýšit xxxxx koncentrací xxx, xxx xx zajistil xxxxxxxxx počet kultur x xxxxxxx (xx. xxxxxxxxx osm xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx látek xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, viability x xxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx promyjí x xxxxxxxxx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxx a fenotypické xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx začíná x analýzou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti - cloning xxxxxxxxxx xxxx relativního xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx lokus xx xxxxxxx minimální časový xxxxxxxx xxx téměř xxxxxxxxx expresi xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX x XPRT xxxxxxxx xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, XX xxxxxxxxx 2 xxx). Xxxxx xx xxxxxxx x médiu x x bez xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx exprese xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (používané x výpočtu četnosti xxxxxxx) inokulací xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx x xxxxx L5178Y XX+/- xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxxxx) x xx negativních x xxxxxxxxxxx kontrolách xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, změří xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx a pozitivní xxxxxxxx. Měření xx xxxx xxxxxxx i xx studiích x XX6XX+/-.
2. ÚDAJE
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx xxxx slouží xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x životnosti, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X případě xxxxxxxxx xxxxxx x testu X5178XX+/- se xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxx xxxxxx a velkých xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx x cytogenetické xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx testu TK+/- xx kolonie xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxx xxxxx (velké) x xxxxxxxx xxxxx (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx nejrozsáhlejší xxxxxxxxx xxxxxxxxx, mají xxxxx xxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxx xxxx kolonie. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxx genu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx je asociována x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové xxxxxxx (26). Méně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buňky xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx velké xxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx celkový xxxx. Xxxxxxx frekvence xx vyjadřuje jako xxxxx mutovaných xxxxx xxxxxx xxxxxx přežívajících xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x kultivačních xxxxxxxxxx; xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx shrnou x xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx pozitivní reakce xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx testováním, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xx musí xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. X případech, xxx xx xxxxxxxxx negativních xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, je třeba xxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx tak, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxx podmínek. K xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxx x experimentu xxxxxxxxxxx, xxxxx rozdíly xxxx jednotlivými xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx reprodukovatelný xxxxxx xxxxxxx frekvence. Xxxxxxx xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx neměla být xxxxxxx určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku.
Testovaná xxxxx, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx nesplňují xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, se x xxxxx systému xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní xxxx xxxxxxxxx výsledky, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx dat xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx in vitro xxxxxxx, xx testovaná xxxxx vyvolává x xxxxxxx savčích buněk xxxxxx mutace. Nejprůkaznější xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx dávka - xxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, že xx xxxxxx experimentálních podmínek xxxxxxxxx látka v xxxxxxx savčích xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx zprávě x xxxxxxx pokusu xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- rozpustnost x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx známa.
Buňky:
- typ x zdroj buněk,
- xxxxx xxxxxxxxx kultur,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx kultury,
- absence xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx koncentrací x počtu xxxxxx, xxxxxx např. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx v rozpustnosti, xxxx-xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx média, xxxxxxxxxxx XX2,
- xxxxxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx teplota,
- xxxx inkubace,
-doba xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (případně včetně xxxxx inokulovaných xxxxx, xxxxxxxxx)
- selekční xxxxxxx,
- xxxxxxxx, jimiž se xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx,
- metody xxxxxxxxxx xxxxx živých a xxxxxxxxxx xxxxx,
- definice xxxxxxx, x nichž xx xxxxxxx xxxxxxxx x typ (xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx "malými" x "xxxxxxx" xxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- údaje x xX x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx stanoveny,
- xxxxxxxx kolonií, xx-xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- případné možnosti xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx X5178X XX+/-,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.18. XXXXXXXXX XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX XXXXXXX XXX - SAVČÍ BUŇKY XX VITRO
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (UDS) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX po xxxxxx x odstranění xxxxx DNA obsahující xxxxxx poškození indukovaného xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Test xx xxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (3H-TdR) xx XXX savčích xxxxx, xxxxx xxxxxx x X fázi xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx 3X-XxX xx stanoven xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx primární xxxxxxx xxxxxxx potkaních xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testovanou xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. XXX xxxx xxx také xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Testované xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kontrolní xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x kultivačním médiu xxxx ve vhodném xxxxxxxxxxxx. Další xxxxxx xx provádí xxxxx xxxxxxxxxxx médiem. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx nepříznivě xxxxxxxxxx životnost xxxxx.
Xxxxxxxxx xx pouze xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx linií (xxxxxx diploidní fibroblasty).
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2 Experimentální podmínky
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Pro xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx (nebo xxxx, xx-xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxx XXX XXX.
1.2.2.2 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být současně xxxxxxxx negativní x xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx použít 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-XXXX) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx buněčné linie xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxx i xxx XXX bez metabolické xxxxxxxx xxx xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-NQO). Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx testované látky
Xxxx xxx použito xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Nejvyšší koncentrace xxxx xxxxxxxxx toxický xxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxxxxx rozpustné xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx xx hranici xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxx xx vodě xxxxx rozpustné xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx případ xx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx použito xxxxxx růstové xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, teplota x vlhkost. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx pravidelně xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Pro xxxxxxxxxxxx hepatocytů xx xxxxxxxxxxx aktivační xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x přítomnosti x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx experiment
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), inokuluje xx do xxxxxxxxxxxx xxxxx xx vhodné xxxxxxx a xxxxxxxx xxx 37 xX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx potkaních xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx, xx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x povrchu xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx vhodné xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Primární xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x médiu xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxx xxxx. Xx ukončené xxxxxxxx xx médium xxxxxxxxxx, buňky xxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx xxxx ponořena xx autoradiografické xxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Stabilizované xxxxxxx linie x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxxxx techniky: Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxxxxx xxxx x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 3X-XxX. Xxxx xxxxxxxx je xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, aktivitě xxxxxxxxxxxxx systému x xx typu xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx UDS xx xxxxx 3X-XxX xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx interakcí mezi xxxxxxxxxx látkou x 3X-XxX. K xxxxxxxx xxxx XXX a xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx médium, nízký xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx inhibici semikonzervativní xxxxxxxxx DNA.
Stanovení XXX xxxxxx XXX: Xxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx S-fáze, xxx xxxx shora xxxxxxx. Xxxxx jsou xxx xxxxxxxxxx testované látce, xxx bylo popsáno xxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xx XXX extrahována x xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx obsah XXX x určen xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX.
Xxxxxxxx xxxx použity xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, je x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx replikace XXX xxxxxxxx.
1.2.4 Analýza
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Při xxxxxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx kultuře se xxxxx v X-xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxx 50 xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx zakódovat xxxx xxxxxxxxxxxxxx. X každém xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx inkorporovaného 3X-XxX x xxxxxxxxxx xx určí v xxxx x velikosti xxx xxxxx v xxxxxxxxxx každé hodnocené xxxxx.
1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Xxx stanovení XXX XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx počet kultur xxx xxxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx x xxx kontroly.
Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxxx.
2.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxxxxx x xxxxx zrn xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx jádro xx zaznamenávají xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3H-TdR xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx v xxxxx xx hodnocen xxxxxx průměru, xxxxxxx x modu.
2.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Xxxxxxxxxxx 3H-TdR xx xxxxxxxxxxx jako xxx/μx XXX. Xxxxxxxx xxxxxxx xxx/μx DNA xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx x vyjádření distribuce xxxxxxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx kultury, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, koncentraci XX2,
- xxxxxxxxx látce, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x experimentu,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx autoradiografických xxxxxxxx,
- způsobech xxxxxxxxx xxxxxx buněk do X-xxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx x extrakci XXX x k xxxxxxxxxxx celkového xxxxxx XXX xxx xxxxxx XXX,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.19. SCE - XXXXXX SESTERSKÝCH XXXXXXXXX IN VITRO
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
XXX xx xxxxxxxxxx test xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxx xxxxx sesterskými xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. XXX reprezentují xxxxxx xxxxxxxxxxx sekvencí XXX mezi replikačními xxxxxxxx x identických (xxxxxxxxxxx) lokusech. SCE xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx zlom x xxxxxxxx spojení, xxx xx zatím xxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx SCE xxxxxxxx diferenční xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Toho xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XxxX) xx xxxxxxxxxxxxx DNA na xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x přítomnosti x xxx přítomnosti exogenního xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx, xx-xx to xxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxx x médiu xxxxxxxxxxx BrdU. Ke xxxxx kultivace xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vřeténka (např. xxxxxxxxx) x akumulaci xxxxx v c-metafázi xxxxxx. Xx ukončení xxxxxxxxx xxxx buňky xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx analýzu xxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Používají xx xxxxxxxxxxxx (lidské xxxxxxxxx) xxxx stabilizované xxxxxxx xxxxx (ovariální xxxxx xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx (teplota, xxxxxxxxxx xxxxxx, koncentrace CO2 x xxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx xxxxx, rychlost xxxxx xxxx xxxxxxxxx XXX.
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx použití xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx aktivitou, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx této xxxxxxxx xxxx vhodné xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx chemických xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Pro xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X každém experimentu xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx negativní xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Jako pozitivní xxxxxxxx xxx xxxxxx:
- přímo xxxxxxxx xxxxxxxx: etylmetansulfonát
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx
Xx-xx xxxxx, xx xxxxx zařadit xxxxx pozitivní xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, jako je xxxxxxxxx látka.
1.2.2.3 Koncentrace
Xxxxxxx se nejméně xxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx mít xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxx musí umožnit xxxxxxxxx replikaci buněk. Xx vodě relativně xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxxx až xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx rozpustné xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx kultur
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx ze xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx se do xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx při 37 oC. Pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx počet xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx na xxxxx xxxxxxxxx nevytvářely xxxx xxx x 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx také xxxxxx suspenzních kultur. Xxxxxx lymfocytární xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x inkubují xxx 37 xX.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Buňky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x exponenciální xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx stačí xxxxx xx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxx prodloužena xx xx xxx xxxxxxx xxxxx, je-li xx xxxxx. Buňky, xxxxx nemají dostatečnou xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou x xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx testovaná xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x XxxX xxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx současně x xxxxxxxxxx xxxxxx a XxxX xx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx lymfocytární kultury xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, dokud jsou x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx podmínkách.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx mitotickém xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx x nejcitlivějším xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx s XxxX xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žárovky, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx XxxX.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx buněk
Jednu xx čtyři hodiny xxxx xxxxxxxxx kultivace xx xx kultur xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. kolchicín). Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx samostatně.
1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx SCE xxxx xxx provedeno několika xxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxx).
1.2.3.5 Xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxxxx frekvenci XXX x kontrole. Xxxxxxx xx hodnotí xxxxxxx 25 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx každou xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s 46 xxxxxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx pouze xxxxxxxx, které xx xxxx o ± 2 centromery xx xxxxxxxxx xxxxx centromer. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx se budou xxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxxxxx. Výsledky xxxx xxx ověřeny x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x xxxxx xxxxxxxx a xxxxx XXX/xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx xx možné, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx,
- kultivačních xxxxxxxxxx: složení xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx x jeho xxxxxxxxxxx i jeho xxxxx působení, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx analyzovaných xxxxxxxx (odděleně pro xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxx počtu XXX/xxxxx x XXX/xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxx každou xxxxxxx),
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX,
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx dávka/účinek, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.20. XXXXXXXXX XXXXXXX MUTACE XXXXXX XX XXXXXXX X XXXXXXXXXX MELANOGASTER
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx (XXXX) na Drosophila xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx detekci xxxxxx, xxx xxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxx, x zárodečných xxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxx na xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x přibližbě 800 xxxxxxxx chromozómu X. Xxxx xxxxxxxxxxxx ani 80 % všech xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx x X-xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx projeví x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx. Xxxx xx xxxxxx letální x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx na xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx typů xxxxxxx xxxxxxx, kteří se xxxxxxxx xxxx heterozygotní xxxxxx. XXXX test xx výhodný xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx Xxxxxx-5. Xxxxx být xxxxxxx x jiné vhodné xxxxx popsané xxxxx xxxxx x vícenásobnou xxxxxxx X-chromozómu.
1.2.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx ve xxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx nebo suspendují xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxx xxxxxxx x Tweenu-60 xxxx 80), xxxx aplikací xx xxxx ředí xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxxx.
1.2.1.3 Počet xxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx citlivost. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx ovlivňuje xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxxxxxxxxx per xx, xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx. Zkrmování testované xxxxx xx xxxxxxx x cukerném xxxxxxx. Xx-xx to nutné, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx NaCl x xxxxxxxx xx do xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
V xxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx negativní (s xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jestliže má xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.6 Dávkování
Xxxxxxxxx xx tři xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx dávka rovnající xx maximální tolerované xxxxxxxxxxx nebo vyvolávající xxxxxx toxicity. Xxxxxxxxx xxxxx se testují x xxxxxxxx dosažitelné xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx typu (xx stáří 3-5 xxx) jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx kříženi s xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx Xxxxxx-5 xxxx x jiné vhodné xxxxxxxxx xxxxx (vícenásobná xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Samice xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx virginní samice xxxxx xxx až xxx xxx, xxx xxx xxxxxx celý xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx spermie, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx stadiu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx X1 xxxxxx narozené x xxxxxx xxxxxxx xxxx dále xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (tj. jedna xxxxxx/xxxxxxxx) xx svými xxxxxx. X F2 xxxxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx divokého xxxx. Jestliže x xxxxxxx vznikají X1 xxxxxx nesoucí xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx samic se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xx zjistilo, xxx xxxxxxxx xx opakuje x xxxxxxx generacích.
2. XXXXX
Získané xxxxx xx xxxxxxxx do xxxxx xxxxxxx. Uvádí xx počet xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx x letální xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx každé xxxxxx xxxxxxx a xxx xxxxxxx testovaného xxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxx clusterů xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx. Výsledky se xxxx potvrdit v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx má být xxxxx v úvahu x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx způsobem.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je-li to xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx Drosophily, xxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, počtu sterilních xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx X2 kultur, xxxxx X2 xxxxxx xxx potomků, počtu xxxxxxxxxx nesoucích xxxxxxx xxxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx testu: xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxx x toxicitě, xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxxxxxxx počítání xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, xx-xx xx možné,
- xxxxxxxxx údajů,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.21. TEST XXXXXXXXXXXX XXXXXXX XXXXX - XX VITRO
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxx xxxxx lze xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx vitro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x maligní xxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx C3H10T1/2, 3X3, XXX, Fischerových potkanů x test se xxxxx x změny xxxxxxx morfologie, tvorbu xxxxxxx xxxx změny x uchycení x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx ostatní fyziologické xx xxxxxxxxxxxx změny x xxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx výsledek in xxxxx xxxxx není xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Cytotoxicita xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx růstu xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx relevantní, xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx k xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x některých xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo k xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxx
Existuje xxxx xxxxxxxxx linií x primokultur xxxxxxxxxxxx x testu transformace. Xxxxxxxxxxxxxx musí xxxxxxxx, xx xxxxx použité x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx příslušné fenotypické xxxxx xx expozici xxxxxx xxxxxxxxxxxx a xx test xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx ověřen x xx je xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x spolehlivost.
1.2.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx vhodné xxx xxxxxxx test transformace.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx
Testované xxxxx xx rozpouštějí xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx médiu xxxx xx vhodném rozpouštědle xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla x xxxxxxx nesmí xxxxxxxx xxxxxxxxx buněk, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx testované xxxxx x přítomnosti a xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx buňky s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx zařazeny pozitivní xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx být xxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx kontroly:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx: 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx, 4-dimetylaminoazobenzen, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Je-li xxxxx, xx xxxxx zařadit xxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávat xxxxxxx efekt xxxxxxx xx koncentraci, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x negativní xxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xx hranici xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx koncentrace ve xxxx rozpustné xxxxxxxxx xxxxx xx určuje xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Buňky xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx závislou xx xxxxxxxx testovacím xxxxxxx. Ta může xxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxxxxxxx testované látce xxxxxxxx s výměnou xxxxx (xx. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Buňky bez xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx musí být xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na xxxxx expozice je x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaná xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xx zaznamenáván xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Všechny xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx úrovně x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx transformací xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Data xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx a frekvenci xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, hustotě xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx sledovaného fenotypu, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx to vhodné), xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x transformovaných xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX TEST X XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx letalita xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx fetální xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx zárodečné xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx mutace xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx a numerické xxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx samice může xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinku.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx x neovlivněnými, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx mrtvých xxxxxxxxxx na xxxxxxx x exponované xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx žlutých xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x exponované x kontrolní skupině. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx- x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x živým xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx způsobeno zánikem xxxxx (x.x. xxxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Testovanou xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx vodě xx xxxx nebo xxxxxxxxxx xx vhodném rozpouštědle. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxx x testovanou xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx naředěnou xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx pouze xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx látku xxxxxxxxx. Obvyklý způsob xxxxxxxx je xxxxxx xxxxxx nebo intraperitoneální xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx aplikace.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx počet exponovaných xxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxx variabilitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx řídí xxxxxx zjištěnou detekční xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx testu. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxx 30 - 50 xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
Xxxxxxxxx x negativní (s xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxx xxx zařazeny xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Jestliže xxxx xx laboratoř x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivních xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx vhodných, xxxxxxx dávkách, aby xxxx xxxxxxxxx citlivost xxxxx (např. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 xx.xx-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Nejčastěji xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx snížené xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x jedné xxxxx 5 x.xx-1 xxxx x xxxxx 1 x.xx-1.xxx-1 xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Nejčastěji xx používá jednorázová xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx křížen x xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Samičky xxxx xxx u xxxxx xxxxxxx xx dobu xxxxxx jednoho xxxxx xxxx, nebo xxxxx xx xxxxxxxxx spermie xx vagině či xxxxxxxxx zátka.
Počet xxxxxx xx xxxxxxxx xx dán xxxxxxxxx xxxxxxxx a musí xxxxxxxxx všechna stadia xxxxxxxxxxx buněk sledovaných xx expozici.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx druhé xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx k určení xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx. Vaječníky xxxx xxx vyšetřeny x xxxxxx počtu xxxxxxx tělísek.
2. XXXXX
Xxxxx x počtu xxxxx, počtu březích xxxxx x počtu xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx páření xxxxxx xxxxxxxxxxxx každého xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx samice xxxx xxx xxxxxx x xxxxx páření, x xxxxx podané xxxxx, x xxxxx živých x xxxxxxx implantací.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx efektu je xxxxxxxx xx srovnání xxxxx xxxxxx implantací xx xxxxxx x xxxxxxxxxx skupině x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx ku xxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx poměru x xxxxxxxxx skupině po xxxxxxx vypovídá x xxxxxxxxxxxxxxxxx ztrátách.
V xxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxx rozdíl xxxx počtem corpora xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx průměrného xxxxx xxxxxxxxxx xx dělohu xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Zpráva o xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxx, xxxxx, xxxx a xxxx xxxxxx, počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách,
- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx jejich xxxxxx, negativních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxxxx podání a xxxxxxxx expozice,
- xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx počítání dominantních xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxx/xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Metoda xx xxxxxxxxx XXXX XX 483, Mammalian Xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxx xx xx vivo xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx spermatogoniích (1) (2) (3) (4) (5). Strukturální xxxxxxx xxxx dvojího druhu: xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x analýze numerických xxxxxxx x xxxxx xx k xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x příbuzné xxxx jsou x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx se analyzují xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxxxxxxxxxx, a xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx indukci xxxxxxxxx mutací x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Tato xxxxxx nepoužívá xxxx xxxxxx xxxxx.
Xxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx, je třeba xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx působení xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx získat analýzou xxxxxxxxxxx chromozómů, kde xx zjišťují xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, x když xx ovlivněné xxxxx xxxx xx spermatocyty.
Xxxxx xxxx xx xxxx xx xxxxx xx zjišťování, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx test význam xxxx pro hodnocení xxxxxx mutagenity xxx, xx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxx metabolismu xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx procesů DNA.
X xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx generací xxxxxxxxxxxxx se širokým xxxxxxxx citlivosti vůči xxxxxxxxx xxxxxx. Zjištěné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx generace xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x fyziologické bariéře Xxxxxxxxx buněk a xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Existují-li xxxxxxx toho, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx reaktivní xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, není xxxx xxxxx xxx xxxx vhodná.
1.2 DEFINICE
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx poškození chromozómu, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx obou chromatid, xxxx xxxx a xxxxxxxx spojení xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vyjádřená xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx a opětovné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx chromozóm-ring)
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx chromatid xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx je větší, xxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (distální) xxxxxxxx x xxxxx zlomu xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx osu chromatidy), xxxxxxxx xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx menší než xxxxx jedné xxxxxxxxxx x s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: změna počtu xxxxxxxxxx oproti normálnímu xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx buňky.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (n) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx (3n, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury xxxxxxxxxxx mikroskopickou analýzou xxxxxxxxx dělení ve xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx delece x xxxxxxxxx, a xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx se xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metafázi (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). Xx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xx xxxxxxxx xx v xxxxxxxxxx analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx
Běžně se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx a myší, xxx ovšem použít xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx savčího druhu. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx dospělých xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx uvedeny xx Všeobecném xxxxx x části X.
Xxxxxxx xx měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx mladí xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxxxx označí x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx uspořádat xxx, aby xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vlivy xxxx, jak x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Příprava dávek
Xx-xx testovaná xxxxx x xxxxxx stavu x xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx její xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx před xxxxxxxxx ředí. xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže údaje x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx testu
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x nesmí x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, aby xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx každého testu xx třeba xxx xxxxx pohlaví xxxxxxx xxxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx stejně.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx při xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrole se xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zakódovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx možné podávat xxxxxxxx způsobem xxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx odebírat x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, jako je xxxxxxxxx xxxxx. Příklady xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx | XXX | EINECS |
cyklofosfamid | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxx xxxxxxx | 79-06-1 | 201-173-7 |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Negativní xxxxxxxx ovlivněné xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx experimentální xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx nejsou k xxxxxxxxx xxxxxxxxxx historické xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx zvířaty. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx i neovlivněných xxxxxxx, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx publikované xxxxx prokazující, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Počet x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxx xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxxx jednorázově xxxx xx xxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xx xxx xxxxx xx den xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx hodin. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx být vědecky xxxxxxxxxx.
X případě xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx látce xxxxxxxxx xxxxxxx. Jelikož xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 24 a 48 hodin xx xxxxxxxx. X ostatních xxxxx (xx. xxxx xxxxx xxxxxxxx) xx xxxxx vzorků xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx xxxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xx znám xxxxxxxxx xxxxxx interval xxx xxxxxxx xxxxxx (6).
Xxxxx toho xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx intervaly xxxxxx xxxxxx. Xxxx. xxxxx-xx xx x látku xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mitózy, xxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx na S-fázi xxxxx, xxxx vhodnější xxxxxxxx xxxx odběru xxxxxx (1).
Xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx působit opakovaně, xx xxxxxxxx xxxxxx xx případu. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, usmrcují xx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx (1,5xxxxxxx xxxxxxxxx cyklu) xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Odběry xxx xxxxxxxx x x dalších xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx se to xx xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx se zvířatům xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx x xxxx xx xxxxxxx intervalu xxxxxxxx vzorky. X xxxx xx tento xxxxxxxx xxxxxx 3-5 xxxxx, x čínských xxxxxx xxxxxx 4-5 xxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, kmene x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx tak, aby xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx nízké xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx vzorků xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx nejvyšší xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx jako dávka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx režimu xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxx, xxx x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx a vyhodnocují xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xxxx být také xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx toxicity xx spermatogoniích (např. xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx xxxx při xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx nebo ve xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x jeden den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx humánní expozice xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx testu xxxxx dávky.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx žaludeční xxxxxx, xxxx intraperitoneální xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx případech xxxxx xxx xxxxxxxxxx x jiné způsoby xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, která se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx dávky xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx vykazují při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xxx, aby objem xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x minimalizovala xx xxx objemová xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Okamžitě xx usmrcení xxxxxxx xx z jednoho xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx kterou xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x fixuje xx. Buněčná xxxxxxxx xx nakape xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx. minimálně 500 xxxxxxxx x jedné xxxxxxx). Xxxxx xxxxx xx xx xxxxxx, xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx vedou x xxxxxxx určitého xxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxxx chromozómů, musí xxx x xxxxx xxxx buněk počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx formě. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. X každého xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi x počet xxxxxxx xx jednu buňku. X experimentálních i xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx jednotlivé typy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx počet x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, uvádějí xx, ale obvykle xx do celkové xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx analyzována xxxxxx x meióza, stanoví xx u xxxxx xxxxxxxxx zvířat i xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx míra xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx, a xx xxx, xx xx x xxxxxxx jedince xxxxxxx 100 dělících xx buněk. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx mitotický xxxxx u xxxxxxxxx 1000 buněk x xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE VÝSLEDKŮ
Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se používá xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci testované xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx zřetelný xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxx ve xxxxxxx ovlivněné jednorázovou xxxxxx a x xxxxxx časovým xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování výsledků xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (8); xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx xxxxxxx určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx výsledky je xxxxx xxxxxxxx dalším xxxxxxxxxx, xxxxxxx za xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx výsledky xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, se x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx experimentů vykazuje xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx výsledky, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx účinku xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx počet opakovaných xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x zárodečných xxxxxxx xxxxxxxxxxx živočišného druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testovaná xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx širokého xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx tkáň (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx známa.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx x xxx xxxxxx,
-xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- zdůvodnění doby xxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxx xxxxxx koncentrace xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx / xxx),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx potravy x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- metody xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx působení,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx analyzovaných xxxxx xx jedno xxxxx,
- kritéria, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx nebo nejednoznačná.
Xxxxxxxx:
- známky xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxx spermatogonií x xxxxx a druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxx a počet xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx x aberacemi xx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, je-li xx xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx,
- případně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.24. XXXX XXXX X MYŠÍ
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Je xx xx vivo xxxx xx xxxxxx, x kterých xxxx xxxxxxxxxx xx embrya xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx jsou melanoblasty x xxxxxxxx xxxx xx, které xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Embrya xxxx heterozygoti xxx xxxx genů ovlivňujících xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx ztráty dominantních xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vyjádřeny xxxxxxxxxx fenotypem v xxxxxxxxx xxxxxxx vytvářejících xxxxxx (spots) xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx potomků x xxxxxx skvrnami, xxxxxxxx, je xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx. Myší xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx somatické xxxxxx x embryonálních xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x izotonickém fyziologickém xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x testovanou xxxxxx xxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Myši xxxxx T (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxxxxxx, xxxx xxx, xxx p/cch x; brown, x/x; xxxxxx, xxxxx ear, x xx/x xx; xxxxxxx spotting, s/s) xxxx xxxxxxx xxx x xxxxxx XX (xxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xx x xx/xx x bp; leaden xxxxx, xx fz/ /xx xx; pearl xx/xx) xxxx s xxxxxx C57 XX (xxxxxxxxx, a/a).
Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx nonagouti xxxxxxx. Xxxx. xxxxxxx xxxx xxxxxx NMRI (xxxxxxxxx, x/x; albino, x/x) x XXX (nonagouti, x/x; xxxxx, x/x; xxxxxx x/x).
1.2.1.2 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx samic, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx xxxxx živých xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx myší x x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx výsledky jsou xxxxxxxxxxx pouze v xxxxxxx, xx bylo xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávkou.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxxxx citlivosti xxxxx mohou xxx xxxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx předpokladu, že xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx sondou xxxx intraperitoneální xxxxxxx xxxxx xxxx. Xx-xx xx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx inhalační xxxx xxxx způsob xxxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx, x nichž xxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx xxxx zmenšení xxxxxxxxx vrhu.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx 8., 9. nebo 10. den xxxxxxxx, xxxxxxx xx 1. xxx březosti xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxx odpovídají 7.25, 8.25 x 9.25 xxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx látkou xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx dnů.
Xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx skvrn xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx po xxxxxx. Xxxxxxxxx se xxx xxxxx xxxxx:
(x) xxxx xxxxxx v xxxxxxx 5 xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx předpokládá, xx xxxxxxx zánikem xxxxx (XXXX);
(x) xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xx vyskytují x xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx čela x xxxxxxxxxxx xx, xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (MDS);
(x) xxxxxxxx x xxxx skvrny náhodně xxxxxxxxxx x srsti xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (XX).
Všechny xxx skupiny xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx, XX, xx xxxxxxxxx relevantní. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx XXX a RS xx možné vyřešit xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx sledovaných xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx více xxxxx xxxxxxxxxx somatickými mutacemi. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx se porovnávají xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx také uváděny xxxx xxxxxxx hodnoty xx xxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:
- kmeni xxxxxxxx xxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x experimentální x x xxxxxxxxx skupině,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx při porodu x xxx xxxxxxxxx,
- dávkových úrovních xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xx kterém xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- x způsobu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx s XXXX, XXX x XX x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx malformacích,
- xxxxxx dávka/odpověď x XX, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX U MYŠÍ
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Test xx xxxxxxxx translokace x myší xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx zárodečných buňkách xxxxxxxxx x první xxxxxxxx potomků. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx X-chromozómu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x XX-xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx fertilitu, xxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx F1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Úplná xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (X-xxxxxxx x x-x xxx). Xxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx ze xxxxxxxxxxxx xx stadiu xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, xxxx X1 samců xx xxxxxxx xxxxxxx F1 xxxxx. Xxxxxx XX xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx v mitózách x kostní xxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx x izotonickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx nerozpustné, xxxx xxxxxxxxxx xxxx suspendovány xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxxxx xx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx rozpouštědlo xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxx aplikace
Aplikuje xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx křížení x xxxxxxxxxxxx verifikaci xx xxxxxx provádí xx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu xx měla xxx xxxxx xxx osm x měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx zvířat
Počet xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Test xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx X1 xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx x F1 xxxxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxx exponované xxxxxxx. Xxxxxxxx budou xxxxxxxxxxx xxxx samice X1 xxxxxxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxx 300 xxxxx a 300 samic.
1.2.1.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx kontrol xxxxxxx x předchozích xxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx pokusu x xxxx laboratoře, mohou xxx xxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx efekt, xxx xxx vlivu xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx stanovení xxxxxx xxxxx/xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx dávek. X xxxxxxxxxxx látek xx xxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxx a xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx se dva xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx používá jedna xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxx podávání testované xxxxx xxxx xxx x týdnu xx 35 xxx.
Xxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxxx xx xxxxx schématem xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx samice xxxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxx. Xx porodu xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, velikost vrhu x xxxxxxx mláďat. Xx xxxx xxxx xxxxx i samičí xxxxxxx odděleni xx xx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Zjišťování xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx jedna ze xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx F1 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxx cytogenetická xxxxxxx xxxxx xxxxx X1 xxxxxxxx bez předchozího xxxxxx pomocí xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Test xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x X1 xxxxxxxx xx může xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxx x/xxxx analýzou xxxxxx xxxxxx samic. Xxxxxxxx xxxxxx normální x xxxxxxx fertility xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx myší.
Velikost xxxx: X1 samci xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx stejné xxxxxxx. Klece xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 18. xxxx xx xxxxxxxxx. Velikost xxxx x xxxxxxx F2 xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx X1 xxxxxx, X2 xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx uchováváni xxx xxxxx xxxxx. Samice-nositelky xxxxxxxxxxx jsou verifikovány xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxx xxxxxxx. XX-xxxxxx xxxx xxxxxx změnou xxx ratio xxxx xxxxxx xxxxxxx x 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx vs. xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxx X1 zvířata xxxxxxxx x dalšího xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx X2 xxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx předem xxxxxxx xxxxxxxx hodnotu, jinak xxxx zaznamenány druhé x xxxxx xxxx. X1 zvířata, xxxxx xxxxxxx být xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxxx xxx X2 xxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxx analýzou xxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxxxx vrhu x xxxxxx translokací xx xxxxxxxxx xxxxx embryí, xxxxx vysoký počet xxxxxxx implantací indikuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx X1 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx ranní xxxxxxxxx vaginální zátky. Xxxxxx xxxx usmrceny 14. - 16. xxx x jsou xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Metodou xxx-xxxxxx xxxx připraveny xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx diakinézy - metafáze X x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx splňuje požadovaný xxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx no xxxxxxxx, všichni X1 xxxxx xxxx vyšetřeni xxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx musí být xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 25 xxxxx x xxxxxxxxx - metafáze X. Analýza xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ve spermatogoniích xxxx x xxxxxx xxxxx xx vyžaduje x samců s xxxxxx testes x xxxxxxxxxx meiozy xxxx xxxxxxxxxx xxxx u X1 xxxxx suspektních XX. Přítomnost xxxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx x 10 xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (x-x typ). Xxxxxxx X-xxxxxxxxxxx translokace xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx pruhováním xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx xx xxxxx 10 xxxxxxxx je xxxxxxx xxx XX xxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx formou.
Xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx zaznamenána xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu x xxxxx pohlaví (sex xxxxx).
Xxx odhad xxxxxxxxx X1 zvířat xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu xxxxxxxx x individuální xxxxxxxxx xxxx X1 nosičů xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxxxx počet xxxxxx a mrtvých xxxxxxx v xxxxxxxx x individuální počty xxxxxx x mrtvých xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx X1 xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx diakinéze-metafáze X xx xxxxx xxxxx xxxx multivalentních xxxxx x celkový xxxxx xxxxx xxx každého xxxxxx translokací.
Pro X1 sterilní xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X XX xxxxx se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx trhu, xxx ratio X2 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx, xx pomocí xxxxx fertility xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx F1 translokací, xx xxxxx v xxxxxxxxx uvést informaci x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx heterozygotů.
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxx x negativních x xxxxxxxxxxx kontrolách.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, informace x:
- kmenu xxxx, stáří x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- počtu xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro každé xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x kontrolních skupinách,
- xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx ovlivňování xxxxxx, xxxxxxx hladiny, xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxx potomků xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx x kritériích xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- počet x detailní popis xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x březosti x obsahu dělohy,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.26. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX
(90denní xxxxxxxxx xxxxxxxx per xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxx xxxxxx po 90 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx každé skupině xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxx období podávání xx zvířata xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx příznaky toxicity. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx pokusu, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin.
Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx zvířatům xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Pokud se xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx aditiva, musí xxx x xxxx xxxxx, že xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Existují-li xxxxxx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx proti xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx případě xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx měli být xxxxxxx xxxxxx než 6 xxxxx, x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 8 xxxxx. Xx začátku xxxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx předběžný test xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx se xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx a kmen.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 20 zvířat (10 xxxxx a 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx zabíjet v xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvýšit xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx zvířat, která xxxxx zabita před xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině (satelitní xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx sledovat xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Dávkování
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx úrovně dávek x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx kontrolní skupině xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx stejném xxxxxxxx, které obdrží xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx vyvolat toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí nebo xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx neměla xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx u člověka, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx měla xxxxxxx xxx xxxxxxx účinek xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, mají být xxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx skupině x nízkou x xxxxxxx úrovní dávky x x kontrolní xxxxxxx xx počet xxxxxxx xxx být xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
Xxxxxx-xx se testovaná xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) nebo xxxxxxxxxx dávkování xx xxxxxx k tělesné xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Aplikuje-li xx xxxxx xxxxxx, xxxx xx se xxx xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx intervalech (xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx xx 90xxxxx xxxx xxxx popsanou xxxxxxx x nevyvolá-li xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, je-li tato xxxxx) xxxxx toxické xxxxxx, je xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx látka x potravě, je xxxxx zajistit, aby xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx objeví x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis postupu
X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v xxxxx xx dobu 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách, která xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx dalších 28 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx zotavení x otravy xxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx.
Xxxxxxxxxx v kleci xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, změny funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a chování. Xxxxxx potravy (a xxxxxx vody xxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxx xxxx) x xxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx ke ztrátám xxxxxx xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx zařazení.
Po xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x výjimkou xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx utratit a xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má provést xxxx podáváním testované xxxxx a xx xxxxx studie xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxx, vyšetří xx xxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx a testy xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza krve. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (trvání doby xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), alaninaminotransferáza (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx séra (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx hodnocení, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy mohou xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx.
(d) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx očekávané xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx data, má xx uvážit xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, lební, xxxxxx x xxxxxx dutiny xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx se xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x tkáně xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx brzlíku, xxxxxxxxxx a plíce, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, slinivka xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (kůže), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, tlusté x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, lymfatické xxxxxx, (samičí xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx nerv, (xxx), xxxxxx kost s xxxxxx dření, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx kloubních xxxxx), xxxxxxx xxxxx xx třech úrovních - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx, x (xxxxx žlázy). Xxxxx v xxxxxxxxx xx posuzují x xxxxxxx, pokud xxx xx jejich postižení xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx je xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx xxxxx, a x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx vyšetřit xxxxxx xxxxxx x jiných xxxxxxxxx skupinách.
(x) Xxxxx zvířat xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx mají xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx stavu xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxx x xxxxxx x xxxxxx skupin. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx u xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, musí xx xxxx provést xxxx xx xxxxxxxx, xx kterých xxxx xxxxxxxx postižení xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx skupiny, xxxx xx provést xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx účinky x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou statistickou xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx uznávanou statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx - úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx dávek,
- úroveň xxx xxxxxx, pokud xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků,
- xxxx, kdy xxxx pozorovány jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx další xxxxx,
- spotřeba potravy x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- biochemická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx analýz xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx možné,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.27. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX
(90denní xxxxxxxxx podávání xxx xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx 90 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx), x xx každé xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x zvířata, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx látku xxx podávat x xxxxxxx nebo xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx xx celou xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx x xxxx xxxxx, že xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx historická xxxx, je xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx xxxxxxx pes: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx plemeni. Xx xxxxx používat x xxxxxx druhů xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx; x případě xxx xx má x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 3 do 6 xxxxxx a xx xxxxxxx xxx 9 xxxxxx. Xxxxxxx-xx xx subchronický xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx živočišný xxxx a xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 8 zvířat (4 xxxxxx x 4 xxxxx). Xxxxx xxxxxx xx xxxxx pokusu xxxx být xxxxxx, xxx umožnil xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx se zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Nejnižší xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx existují xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx dávka xxxx hodnotu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx by xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx xxxxxxx jen toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li se xxxx než 3 xxxxxx xxxxx, mají xxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxx s nízkou x xxxxxxx úrovní xxxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx ani aplikované xxxxxxxx ani xxxxx xxxxxxxxxx testované látky xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě xxxxxx.
Podává-li se xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (v xxx xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) xxxx konstantní dávkování xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx alternativu je xxxxx uvést. Podává-li xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx xx xx xxx xxx xxxxx xxx ve xxxxxxx xxxx, a xxxxxxxxx x týdenních xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx.
Provádí-li se xxxxxxxxxxxx orální xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou studiích xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx 90denní xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx xxx (nebo xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, je-li xxxx xxxxx) xxxxx toxické xxxxxx, xx možno xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx nebránily xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx dobu objevení, xxxxxx a xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxx, ve kterém xx xxxxxx x xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
X ideálním xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v xxxxx xx dobu 90 xxx. Podává-li se xxxxx xxxxx způsobem xxx x xxxxxxx, xxxxxxxx se xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 5 xxx v xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx není xx xx xxxxxxx) xxxxx xxxx, srsti, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Příjem xxxxxxx (x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxx) a xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx pečlivá xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxx. Po skončení xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Umírající zvířata xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávky x u xxxxxxxxxxx xxxxxx. Najdou-li xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx všechna xxxxxxx.
(x) Xx xxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx uprostřed x dále xx xxxxx pokusu xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů x testy srážlivosti xxxx jako xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx počet xxxxxxxxxx.
(x) Na xxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a dále xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny studie xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (xxxxxxx trvání xxxx hladovění xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a kmene), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx transamináza xxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, dusík xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Xxxx další xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx studium širšího xxxxxxx účinků. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xx xxxx xxx 24 xxxxx).
(x) Xxxxxxx moče xx nevyžaduje xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx použitých ve xxxxxx se provede xxxxx zahrnující xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, štítná xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x varlata xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx vlhkém stavu, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x tkáně je xxxxx přechovávat xx xxxxxxx médiu s xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, mozek - x řezech xxxxxx/xxxx, xxxx mozku x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx žláza, xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx místě brzlíku,(průdušnice), xxxxx, srdce, aorta, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx břišní, xxxxxxx x vaječníky, xxxxxx, (xxxxxxxx pohlavní xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, močový xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lymfatické xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (oči), xxxxxx kost s xxxxxx dření, (kost xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) x (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx hrudní x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx posuzují, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx nebo pokud xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx nejvyšší dávka, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkových xxxxxx xx provedena xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx, xxxx když xx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx klinických xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X ní musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx počet xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx poškození. Xxxxxxxx xx třeba vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x průběhu pokusu
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx má pokud xxxxx obsahovat tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx nebo xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx podmínky,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, pokud xx xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxx o xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx a podle xxxxx,
- xxxxxx xxx účinku, pokud xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, případně xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx další xxxxx,
- spotřeba xxxxxxx x vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření a xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx možné,
- diskuse xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
X.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX DERMÁLNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx hlodavcích)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx kůži xx 90 dní x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x to xxxxx xxxxxxx jedna xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx.
Xxxxxx před xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx však xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx holení xxxxx je třeba xxxx na to, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. abrazí). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx hmotnost xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx a x xxxxxxxxx krycího xxxxxx.
Xxx xxxxxxxx x xxxxxx látkami, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx formy, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Testované xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx denně 5 xx 7 dnů x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx morčata, xxxxxxxx x jiné xxxxxxx xxxxx, jejich xxxxxxx xxxx musí xxx xxxxxxxxxx. Xx začátku xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx) xx zdravou xxxx. Samice xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx zvýšit celkový xxxxx zvířat o xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx podávat xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x během xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx být xxxxxxx 6 hodin xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx se xxxx xxxxxxxx každý den xx stejnou xxxx. X intervalech xxxxxxxxx xxxx čtrnáctidenních je xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx udržovala stálá xxxxxxx dávky ve xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx zvířete. S xxxxxxxx aplikace testované xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx aplikuje xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx má vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxx xxx v xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx odhady expozice x člověka, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx střední xxxxxxx xxxxx xxxx vyvolat xxx toxický účinek xx xxxxxxxxx zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx skupině x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet uhynutí xxx být xxxxx, xxxxx xx vyhodnocení xxxxxxxx obtížné.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx podráždění xxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x vysoké xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x omezení nebo xxxxxxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx k xxxxxxx poškození kůže, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx okolností xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx koncentracemi.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 nebo xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx zvířata xx třeba xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a čas, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx účinky.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xx jednom. Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx dobu 90 xxx. Xxxxxxx satelitní xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 28 dnů xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxx pozorovat xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx přetrvávání. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx nanášet rovnoměrně xx celou xxxxxx, xxxxx představuje xxx 10 % povrchu xxxx, x vysoce xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx plocha xxxxx. Látkou xx xxxxx xxxxxx co xxxxxxxx část pokusné xxxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx obvazu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx je xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx překrýt, aby xx mulový xxxxx x testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxx xx zabránilo orálnímu xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xx uplynutí xxxx expozice se xxxxxxxx zbytky testované xxxxx, xxxxx možno xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx otravy xxxxxx xxxxxx počátku, xxxxxx a xxxxxx.
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx změny xxxxx, xxxx, xxx x xxxxxxx, x také xxxxxxx x krevního xxxxx, změny funkce xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chybného zařazení. Xx xxxxxxxx studie xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x zvířata x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
U xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx x xx xxxxx studie nejlépe x všech zvířat, xxx alespoň x xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx se oční xxxxx, vyšetří se xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx konci xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxx xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx xxxxxxxxxx.
(c) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx analýza krve. Xxx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci jater x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx glutamát-pyruvát transamináza xxxx) a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx séra (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx močoviny, albumin, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx biochemické xxxxxxx mohou být x případě potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx účinků.
(x) Xxxxxxx moči xx nevyžaduje jako xxxxx xxxxxx, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pokud nejsou xxxxxxxxx historická xxxxxxxxx xxxx, má xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických parametrů xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx dutiny xxxxxx jejich xxxxxx. Xxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) a xxxxxxx se xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, štítná xxxxx, příštítná xxxxxxx, xxxx na místě xxxxxxx, (průdušnice), plíce, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, varlata a xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, žlučník (xx-xx xxxxxxxx), jícen, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lymfatické xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (oči), (hrudní xxxx x xxxxxx xxxxx), (xxxx stehenní xxxxxx kloubních xxxxx), (xxxxxxx mícha ve xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, střed xxxxxx x xxxxxxx) x (xxxxx xxxxx). Tkáně x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx souvisejí x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx normální x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx a tkání xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx makroskopická xxxxxxxxx.
(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x ostatních dávkových xxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx, plíce xxxxxx ve xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx dávkou se xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetřovat x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx to xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx zvířat. Další xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx těchto xxxxxx xxxxxx provádět xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, musí xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na tkáních x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx zjištěny xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x počet xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx lézí. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx k tomu xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx ustájení, krmení,
- xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx dávek (xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxx účinku, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx během experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx případných xxxxxx moči),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx to xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.29. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX - INHALAČNÍ
(90xxxxx opakovaná inhalační xxxxxxxx - xxxxxx xx hlodavcích)
1. METODA
1.1 Princip xxxxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xx 90 xxx. Použije-li xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx kontrolní skupinu xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, která během xxxxxx xxxxxx, x xx, která xxxxxxx xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Nejméně 5 dní před xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx experimentu. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx třeba, přidá xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby x xxxxxxx xxxxxxx příslušná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx užije xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Existují-li xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx je xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx xxxxx xxxx. Pracuje xx na xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xx začátku xxxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti zvířata xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví
Xxx xxxxxx úroveň xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx musí být xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx nutno xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx exponovat xxxxx xxxxxxx (satelitní skupinu) 20 xxxxxx (10 xxxxxx každého pohlaví) xx xxxx 90 xxx nejvyšší koncentraci x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Expoziční xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se nejméně xxx skupiny x xxxxxx xxxxxx koncentrace x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem - xxxxx xx xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx). S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx jen v xxxxx počtu. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx koncentrace xxxx vyvolat toxický xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxx x nízkou x xxxxxxx koncentrací x x kontrolní xxxxxxx xx počet xxxxxxx xxx být xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx expozice
Xxxxxxx xx exponují xx xxxx 6 xxxxx xx ustavení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx specifických xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pro xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx inhalační xxxxxxxx, xxxxx zaručuje xxxxxxxx xxxxxxx x výměnou xxxxxxx 12krát za xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x rovnoměrné xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx tak, aby xx nejvíce bránil xxxxxxxxxx zvířat a xxx xxxxxxxxx expozice xxxxxxxxx látce xxxx xx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx by v xxxxxx celkový xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx přesáhnout 5 % objemu xxxx. Xx možné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx denně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx období xxxxxxxx i xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Je třeba xxxxxxxxxx dobu xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x opět xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3. Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx v xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pozorování, jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx být xxxx 30 % a 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx není možné (xxxx. xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx voda.
Xxxxxxx xx dynamický xxxxxxxxx xxxxxx x vhodnou xxxxxxxxxxx kontrolou koncentrace. Xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx pokus xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xx xxxxx nastavit xxx, xxx xxxxxxxx x celém xxxxxxxxxx xxxx xxxx stejné. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx stabilních xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx nejrychleji.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
a) Měření xxxxxxx vzduchu (xxxxxxxxxxx).
x) Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x dýchací xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx se nemá xxxxxxxxxxx odchylovat xx xxxxxxx xxxxxxx o xxxx xxx ±15 %. U některých xxxxxx x aerosolů, xxx této xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx rozsah xxxxxxxx. Xx celou xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, jak je xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx generátoru xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxxx představa x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx, jak je xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx stálosti xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx
d) Během xxxxxxxx x po xx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pozorují a xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně pozorovat xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx výskyt, stupeň x trvání. Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Hmotnosti xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, aby pokud xxxxx nedocházelo xx xxxxxxx zvířat xxxx xxxx. v důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X všech xxxxxx xxxxxx kontrolních xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx přístrojem xx má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxx přinejmenším x xxxxxxxx dávky a x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, vyšetří xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření, které xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx konci xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, metabolismus xxxxxxx, funkci xxxxx x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů je xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx živočišného xxxxx x xxxxx), alaninamino xxxxxxxxxxx (dříve glutamát-pyruvát xxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl transpeptidáza, xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Mezi xxxxx charakteristiky, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, hormonů, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx rozšíření xxxxxxx pozorovaných xxxxxx.
(x) Analýza xxxx xx nevyžaduje xxxx xxxxx postup, xxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kontrolní xxxx, xx xx xxxxxx stanovení hematologických x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, lební, hrudní x xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx tělísky) a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx a xxxxx xx třeba přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým postižením, xxxxx (xxxx xx xxxxxxx neporušeny, xxxxxx x fixovat vhodným xxxxxx, tak aby xx zachovala xxxxxxxxx xxxx - perfusní xxxxxx se považuje xx xxxxxxx), tkáň xxxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx medula/pons, xxxx xxxxx x xxxxxxx, hypofýza, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, srdce, aorta, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx orgány), (kůže), xxxxxxx (je-li xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, tlusté x xxxxx střevo, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx žláza), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), hrudní xxxx x xxxxxx dření, (xxxx stehenní včetně xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx ve třech xxxxxxxx - krční, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx se xxxxxxxx, xxxxx xx to xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx systému x ostatních orgánů x tkání je xxxxx xxxxxxx u xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx xxxxxxxx všechny xxxxxxxxxxxxx xxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinách.
(x) Xxxxx zvířat xx skupinách x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx stavu zvířat. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, musí xx xxxx provést xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(e) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx se histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, u xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx u ostatních xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx sestaví xx tabulky. X xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx s xxxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx je xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx částic a xxxxxxxx, klimatizačního xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrací x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x expozici xx xxxxxxx xx xxxxxxx x uvedou xxxxx s průměrnými xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají obsahovat xxxx údaje:
x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením,
x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxx objemem xxxxxxx),
x) povaha vehikula, xxxxx xxxx xxxxx,
x) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx zóně,
x) medián velikostí xxxxxx (u xxxxxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx účinku, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- hematologická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- biochemická xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.30. TESTOVÁNÍ XXXXXXXXX TOXICITY
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dní x xxxxx, vhodnou xxxxxx, xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, jedna xxxxx na skupinu, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Během x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxx denně xxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx podmínkách xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx testem xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx.
1.2.2 Testovací podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx x další xxxxx (hlodavce nebo xxxx). Xx xxxxx xxxxxx zdravé x xxxxx jedince xxxxx xxxxxxxxx kmenů xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx být započata xx xxxxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx studie by xxxxx rozdíl xx xxxx zvířat xxxxx xxxx než ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx použít xxxxxx xxxx x xxxx x obou xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx nejméně 40 xxxxxx (20 samic x 20 samců), xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Samice xx xxxx být xxxxxxxxx x neměly xx xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx dokončením xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
X případě xxxxxx xxxxx zvířat (xxxxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxx xxx 4 xx každého pohlaví xx xxxxxxx.
1.2.2.3 Dávky x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xx třeba použít xxxxx xxx dávky x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx toxicity xxx nadměrné xxxxxxxxx. Xxxxxxxx dávka by xxxxxx xxxxxxx prokazatelné xxxxxxx xxxxxxxx. Střední xxxxx xx měly xxx xxxxxx xx xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Výběr xxxxx xx měl xxxx x xxxxx výsledky xxxxxxxxxxx studií.
Obvykle xxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxx. V případě, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx vodě xxxx x xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx, aby x xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxxxx x každém xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx.
Xx zvláštních xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo použije-li xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jehož xxxxxxxxxx aktivita není xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí xx xxxxx negativní kontrolní xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx člověka.
Použití xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx systémová xxxxxxxx x důsledku xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx orálního xxxxx x znalosti rozsahu xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx toxicity.
Xxxxxx xxxxxx
Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx z gastrointestinálního xxxxxx a xx-xx xxxxxx xxxxx z xxxx, jimiž může xxx exponován člověk, xxxx xx přednost xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx dostat xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx se xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx pět xxx x týdnu xxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x období xxx xxxxxxxx, x xxxxx ovlivnit xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, dávkování xxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Inhalační xxxxxx
Xxxxxxx inhalační xxxxxx xxxx technicky xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx podání. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx platnou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx lidské xxxxxxxx, takže xxxxx xx obvykle xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx denně xx xxx xxx x xxxxx (přerušovaná xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx denně xx xxxx xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), s xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx stejnou xxxx xxx, použitou i xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx je x xxx, xx x xxxxx xx zvíře 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx denní xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx během xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxxx studia x xx xxxxxx xxxxxxxx, která xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x úvahu určité xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx prostředí xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx expozice x xxxxxxxx komplikovanější (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx určité koncentrace xxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx komorách, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx byl zajištěn xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx konstrukci, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx srovnatelné xx xxxxx xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx udržuje xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx úniku xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx neměl xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxxxx.
Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(a) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx denní xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx neměla xxxxxxx více než 15 % xxxxxxx xxxxxxx;
(x) teplota x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 xX a xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx případů, xxx xx xxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx průběžně;
(x) xxxxxx velikosti xxxxxx: xxxx xx xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nebo pevných xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx zóny xxxxxx. Xxxxxx vzduchu xx měl xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro distribuci xxxxxx, kterým xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, i když xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx během vývoje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx stabilitu aerosolu, x poté xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx látky xx xxxx trvat xxxxxxx 12 xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx sledování xx mělo xxx xxxxxxxxx nejméně jednou xxxxx. Dodatečná xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx denně x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx ztráty zvířat xx xxxxxx, např. xxxxx xxxx xxxxxxx xx lednice x xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx jsou xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx sledovat, xxx xx xxxxxxxxxx zachytil xxxxxxx x progrese xxxxx toxických účinků, x xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx ztrát x xxxxxxxx nemocí, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx x všech xxxxxx, x dále xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx objevení x xxxxxx xxxxxxxxx příznaků xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx individuálně x xxxxx zvířat xxxxxx xxxxx xxxxx prvních 13 týdnů období xxxxx x xxxxx xxxxxx xx čtyři xxxxx po xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx měření xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x pitné xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx a xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx zdravotní stav xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Hematologická xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, hematokrit, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx za xxx xxxxxx, šest xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx na xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. xx 10 xxxxxxx xx pohlaví z xxxxx skupiny. Xxx xxx xx to xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx xx xxxxxxxx potkanů. Xxxxx xx xxx být xxxxxxx vzorek xxxx xxxxxx od xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx naznačí xxxxxxxx xxxxxxxxx stav zvířat xxxxx studie, xxx xx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Diferenciální xxxxx xxxxxx krvinek se xxxxxxx ve vzorcích xx zvířat xx xxxxxxx s nejvyšší xxxxxx a x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx patologických xxxx xxxxxxx nutnost, xxxxxxx xx x x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxx moči
Xxxxxx xxxx 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx na xxxxxxx xxxxxx pro skupiny xxxxx dávek x xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, ketolátky, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx- xxxxxxxxxxxxx).
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
V přibližně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx závěr xxxx xxxxxxxx krevní vzorky xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx všech nehlodavců x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, pokud xxxxx xxx tytéž xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx. Od xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx před xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx připravena xxxxxx x jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), glutamát xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, ornithin xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxxx xxxxxxx na xxxxx,
- testy xx xxxxxx xxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.
1) nyní xxxxx jako xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx xxxxx jako xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
1.2.3.5 Xxxxx
Kompletní xxxxx xx xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx během xxxxxx xxxx byla utracena x moribundním xxxxx. Xxxx utracením se xxxxxxxx xxxxxx krve xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, které xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx provedeno xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx a tkáně xx měly být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx se xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx:xxxxx3) (xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x příštítných xxxxxxx, xxxxx, trachey x xxxx, srdce, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), jícnu, žaludku, xxxxxxxxxxxxx, jejuna, ilea, xxxxxxx střeva, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx pohlavních xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), sterna x xxxxxx dření a xxxxxxxx kosti xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx měchýře xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x inhalačních studiích, xx zásadní pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx speciálních xxxxxxxx, xxxx xxxx inhalační xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx nosu, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, informace xxxxxxx z těchto xxxxxxxx by měly xxx x dispozici xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodítko.
3) xxxx xxxxxx x 10 zvířat xx xxxxxxx a xx xxxxxxx x xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx
1.2.3.6 Histopatologie
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxx vyskytující xx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
(x) mikroskopické xxxxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx popisem xxxxx lézí xxxxxxxxxx:
1. x xxxxx xxxxxx, xxxxx uhynula xxxx byla utracena xxxxx xxxxxx,
2. x všech xxxxxx xx skupiny s xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx způsobené xxxxxxxxxx látkou jsou xxxxxxxx také xx xxxxxxxxx x nižšími xxxxxxx,
(x) tam, xxx výsledky xxxxxx xxx xxxxxxxx zkrácení xxxxxxxx délky xxxxxx xxxxxx xxxx vyvolání xxxxxx, xxxxx by xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, skupina x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx popsaným xxxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx normálně xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx zvířat, ve xxxxxxxx laboratorních xxxxxxxxxx, xx. xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx posouzení xxxxxxxxxxx změn xxxxxxxxxxxx x xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx tabulek, xxxxxxxxxxx xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx následující informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vycházejícího x xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, kde xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x expozici: ve xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x měly xx zahrnovat:
(x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx zařízením
(b) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx
(c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx inhalační aparatury xxxxxx objemem vzduchu)
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx
(e) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx zóně
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xx-xx xx relevantní)
- dávkové úrovně (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx
- neúčinná (xxxxxxx) xxxxxx
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx až do xxxxx
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx
- xxxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznak x jeho další xxxxx
- data x xxxxxxxx xxxxxxx x tělesné xxxxxxxxx
- oftalmologické xxxxxx
- použité xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxx xxxx)
- xxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů
- xxxxxxxxxxx zpracování výsledků x popisem použitých xxxxx
- diskuse xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X NEHLODAVCI
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx pokusných xxxxxx, xxxxx dávka xx každou skupinu, xxxxxxx v xxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx dochází x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx březí xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx xx xxxxxxx x dalšímu xxxxxx. Xxxx testovací metoda xxxxxxxx xxxxxxx embryo- x fetotoxicity.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, stejného xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx samicím xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx implantaci x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx hysterektomií x podrobeny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx osifikace x xxxxxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx druhy xxxx xxxxxx, myš, křeček x xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx používat všeobecně xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxx by xxx u něj xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx aspoň 20 xxxxxxx xxxxxxx, xxxx nebo xxxxxx xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Xx sledování xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
Xx třeba xxxxxx aspoň xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxx zahrnout do xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx podáno xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx také xxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxx: xxxxx xxx teratogenní xxx mít xxxx xx xxxxxxxxxxx schopnosti. Xx xxxxxxx x xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx fyzikálně xxxxxxxx xxxx biologické xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxx vyvolat takové xxxxxxx xxxxxxxx, jako xx mírné xxxxxxx xxxx, xxx xx xx xxxx jak 10 % xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx by měly xxx voleny tak, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nízkou x xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
V xxxxxxx, že látka x xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx nejméně 1000 mg.kg-1 prokazatelně xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxxx xxx teratogenicity, xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx expozice
Xxxxxx xxxx xxxxx xx xxx, xxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zátka x/xxxx xxxxxxx (pokud xxxxx). Doba xxxxxxxx xx xxxx zahrnovat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 6. xx 15. xxx x xxxxxxx x myši, 6. xx 14. xxx x xxxxxx x 6. až 18. xxx u xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx bylo xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx umělá inseminace, xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx údajům xxxxx den. Podle xxxx alternativy xxxxx xxxxxxxx jeden den xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx sledování x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx sondou, xxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx samicím xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx může xxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, zvířata mohou xxx xxxxxxxxxx vážena x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx třeba ihned xxxxxxxxxx xxxxxx doby xxxxxxx, stupně x xxxxxx. Samice xxxxxxxxxx xxxxxx potratu nebo xxxxxxxxxxx porodu je xxxxx utratit x xxxxx makroskopicky xxxxxxxx. X pozorování je xxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx podávání xxxxx až xx xxxx přibližně jeden xxx xxxx porodem. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xx komplikacím xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx porodu. Xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xx mělo zahrnovat xxxxxxxxxxxx xxxxx kůže x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx nervového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Každý xxxxx xx třeba xxxxx spotřebu xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
Pokud xxxxx x uhynutí xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, xx třeba x xxxxx makroskopicky xxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Ihned xx smrti je xxxxx xxxxxxxxx dělohu x její xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx živých xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx. U xxxxxxx x králíků je xxxxx stanovit počet xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx pohlaví xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx průměr. Xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx každý xxxxxxx. X xxxxxxx, xxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx kosterní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx třetiny xx xxxxxxxx xxxx x x zbytku vhodnými xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx důkladně xxxxxxxx pitvou z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, počet xxxxxx, xxxxx zabřezla, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx zárodků x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx abnormit x xxxxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. XXXXXX
3.1. Xxxxxx x xxxxx
Zpráva x xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- druh, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxx xxxxxx (xxxxx xx bylo xxxxx xxxxxxxx),
- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx konce xxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxx o xxxx (xxxxxx historických xxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx/xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),
- údaje x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx/xxxxx xxxxx, xxxxxxx, defekty xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),
- statistické xxxxxxxxxxx výsledků,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.32. TEST XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx sedm xxx v xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx na xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx a xx xxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx projevů xxxxxxxx, xxxxxxx vývinu xxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx podmínkách xxxxxxxx x krmení nejméně xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx mladá xxxxxx zvířata náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Preferovaným xxxxxx je potkan. Xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx zvířata x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx laboratorních xxxxxx. Xxxxxxxx by měla xxx započata co xxxxxxxx xx odstavení xxxxxx. Na začátku xxxxxx xx xxxxx xxx rozdíl xx xxxx xxxxxx činit xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. V případě, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x kmen x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx hlodavce xx xxxxx nejméně 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) xxx každou xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina. Samice xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, počty xx xxxxx zvýšit x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx před xxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx úrovně x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxx vyvolat příznaky xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx mírný xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx doby dožití xxxxxx jinými xxxxxx xxx tumory.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Střední xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx úrovní by xxxx vzít x xxxxx xxxxxxxxx testy x xxxxxx toxicity.
Xxxxxxxx se provádí xxxxxxx xxxxx. Je-li xxxxx podávána x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx potravy, xxxx by xxx xxxxx k xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxxx ohledu x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx není xxxxxxxxxx xxx vehikulu.
1.2.5 Xxxxxx aplikace
Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx orální, dermální x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx fyzikálních x xxxxxxxxxx charakteristikách xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx studie
Xxx, kde se xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx traktu x xx-xx požití xxxxx z cest, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx orální xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx mohou xxxxxx xxxxxxxxxx látku x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xx měla látka xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, protože xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx může xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" příznaky x xxxxxx xxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx výsledky x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Nicméně, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx týdně xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Dermální studie
Xxxxxxxx xxxxx na xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx simulace xxxxxx xxxxx xxxxxx x člověka x xxxx xxxxxxxx způsob xxxxxxxx xxxxxxx poškození.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx studie jsou xxxxxxxxx komplikovanější xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx zde xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx situacích.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx exponováno xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx hodin denně xx xxx dnů x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx denně po xxxx xxx x xxxxx (kontinuální xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx krmení xxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx i pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X obou xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním koncentracím xxxxxxxxx xxxxx. Hlavní xxxxxx mezi přerušovanou x stálou xxxxxxxx xx v xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx ústup xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Volba xxxxxxxxxxx nebo kontinuální xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx studia x xx lidské expozici, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, je xxxxx xxxx v xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Například, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxx nutnosti xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x spolehlivé) xxxxxxxx aerosolu xxxx xxxxxx koncentrace par x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx exponují x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx zaručuje dynamický xxxxx xxx nejméně 12 výměn vzduchu xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx identickou xxxxxxxxxx, tak xxx xxxx expoziční podmínky xxxxxxxxxxx ve všech xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx se xxxxx úniku testované xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx x zájmu xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) Xxxxxx vzduchu: rychlost xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx kontinuálně.
(x) Xxxxxxxxxxx: během xxxxx xxxxxxxx by xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx hodnoty.
(x) Xxxxxxx x xxxxxxx: xxx hlodavce, xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °C x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx xx voda xxxxxxxxx k rozptýlení xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx by měly xxx kontrolovány xxxxxxxx.
(x) Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx komor u xxxxxxxx xxxx pevných xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx částice xx měly xxx x xxxxxxxxxxxx velikosti xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx vzduchu xx xxx být xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx exponováno, a xxx xx gravimetricky xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, i když xxxxxx část xxxxxxxx xxxx respirabilní. Analýza xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx být prováděna xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxxxx stabilitu xxxxxxxx, x poté během xxxxxxx tak xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx normální xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx test. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx x myší x xxxxxx x 24 xxxxxxxx u xxxxxxx. Nicméně, pro xxxxxxx kmeny zvířat x delší xxxxx xxxxxx xxxx. s xxxxxx spontánním xxxxxxxx xxxxxx doba xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 xxxxxx pro xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx xxx potkany. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx na 25 %. Xxx xxxxxxxx testu, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx ze xxxxxxxx toxických xxxxxx, xxxxxx to nutné xxxx k ukončení xxxxxx testu, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx nevykazují xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, nesmí xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx údajů (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo x důsledku xxxx xxxxxxx) v xxxxx xxxxxxx xxxxx než 10 % a xxxxxxx ve všech xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % v 18 xxxxxxxx u myší x xxxxxx x x 24 měsících x xxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x sliznic, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, autonomního a xxxxxxxxxxx nervového systému, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx nutná, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx zvířat ze xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxx x xxxxxxx. Moribundní xxxxxxx xxxx utracena x xxxxxxx.
Klinické příznaky x mortalita xx xxxx být xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, rozměry, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenává.
Xx třeba provádět xxxxxx xxxxxxxx potravy (x xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx podávána v xxxxx vodě) xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx a xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx tělesné váhy xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx sledování.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxx týdně xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx testu x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx tomto xxxxxx.
1.3.2 Klinická vyšetření
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxxxx studia, je xxxxx xxxxxxxx diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xx 12 měsíců, xx 18 xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx provede xxxxxx xxxxx xx xxxxx zvířat. Xxxxxxxxxxx xxxxxx krvinek xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx zvířat ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x u xxxxxxx. Pokud tato xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x x skupiny x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx vysoká xxxxx.
1.3.2.2 Pitva
Xxxxxxxxx xxxxx by xxxx xxx provedena x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx pokusu xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx tumory xxxx xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx mohly xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx měly být xxxxxxxx xx vhodných xxxxxxx pro možné xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx: xxxxx (včetně xxxx xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, xxxx mozkové), xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, pankreas, xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, ileum, slepé xxxxxx, xxxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, representativní xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, svalovina xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx kloubu, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx (xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx) x xxx.
Naplnění plic x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx uchování xxxxxx xxxxx. Naplnění plic x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx studiích xx xxx xxx xxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, hltanu x xxxxxx.
1.3.2.3 Histopatologické xxxxxxxxx
(x) Xxxxx histopatologie xx xxxxxxx x xxxxxxxx x tkáních xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo byla xxxxxxxx xxxxx testu, x x xxxxx xxxxxx skupiny kontrolní x x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx, které xxxx podezřelé jako xxxxxx, xx vyšetří xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
(x) Xx-xx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx neoplastických xxxx xxxx skupinou s xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se provede x daném orgánu xx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xx-xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx než x xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
(x) Xx-xx xx xxxxxxx x vysokou xxxxxx xxxxxx o xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx účinků, xxxxx xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx kompletně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku testu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx zjištěné xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x počet xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx. Výsledky xx hodnotí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx použity xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxx
Zpráva o xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx, obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx ustájení, xxxxx,
- xxxxxxxx testu: Xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx a aerosolů, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, kde xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Údaje x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) teplotu x xxxxxxx xxxxxxx,
(c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx použito,
(x) skutečné koncentrace x xxxxxxx xxxx,
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx kde xx relevantní),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, dávky a xxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx přežila až xx xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xxxxxxx a xxxxx,
- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- doba, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx abnormální xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,
- xxxx x xxxxxxxx potravy x tělesné xxxxxxxxx,
- použité hematologické xxxxx x výsledky,
- nálezy xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- detailní popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx metod,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.33. XXXXXXXXXXX XXXX CHRONICKÉ XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testu
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx testu chronické xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx je určit xxxxxxxxx a karcinogenní xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx expozici.
Xxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Dávka xxxxxxx xxx tuto satelitní xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx karcinogenity. Xxxxxxx x xxxxx karcinogenity xxxx xxxxxxxx jak xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx toxicitu.
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, vhodnou xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx skupinu, xx xxxxx xxxx xxxxxx zvířat. Xxxxx x po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx denně xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity x xxxxxx tumorů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx x pokusných xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxx započetím xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Experimentální xxxxxxx
Preferovaným xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx předchozích studií xx xxxxx xxxxxx x xxxxx druhy (xxxxxxxx x nehlodavce). Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx zvířata x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx začátku xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxx zvířat xxxxx xxxx než ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, že vlastní xxxxxx předchází xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) na xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx plánováno xxxxxxxx utrácení zvířat, xxxxx se xxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Exponovaná satelitní xxxxxxx (xxxxxxx) xxx xxxxxxxxx patologie xxxx, xxx xxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx 20 xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx satelitní xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Dávkové xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx test xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx kromě xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň by xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity, xxxx xx mírný xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (méně xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx tumory. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx. Xxxxxx by xxxxxx xxx nižší než 10 % xxxxxx xxxxx. Střední xxxxx/xxxxx xx xxxxx stanovit xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx úrovní xx xx xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx testy x xxxxxx toxicity.
Xxx xxxxx testování chronické xxxxxxxx xxxx x xxxxx zahrnuty xxxxxxxxx xxxxxxxxxx skupiny a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx měla xxxxxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx.
Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx vodě xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, měla xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.4 Kontroly
Souběžná xxxxxxxxx skupina xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxxxxxxx případech, xxxx xxxx xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx negativní xxxxxxxxx skupina, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx jsou orální, xxxxxxxx x inhalační. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx fyzikálních x chemických xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Tam, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x je-li xxxxxx jedna x xxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx člověk, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx aplikaci, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx důvody. Zvířata xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx v xxxxxxx, xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x tobolce.
Ideálně xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxxx vyvolat "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx v období xxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx považováno xx přijatelné.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxx xxx zvolena xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x člověka x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx kožního xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx komplikovanější xxx xxxx způsoby xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být platnou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx napodobují xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, takže xxxxx je obvykle xxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx pět xxx v týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), nebo x návaznosti na xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), s přibližně xxxxxx hodinou pro xxxxxx xxxxxx denně xx stejnou xxxx xxx, xxxxxxxx x xxx xxxxxxx expozičního xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx exponována fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx je x xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx denní xxxxxxxx x xxxxx delším xxxxxxx během xxxxxxx.
Xxxxx přerušované nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx má xxx simulována. Xxxxxxx xx xxxxx vzít x xxxxx určité xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx prostředí mohou xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx a xxxxxx xxxxx expozice a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx určité xxxxxxxxxxx xxx x technik xxxxxxxxxxxx.
Expoziční xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx konstrukce xxxxxxxx xxxxxxxxx proud pro xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx za xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry. Xxxxxxxxx x expoziční xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx srovnatelné xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx komory se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx úniku xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx x xxxxx udržení xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
(b) koncentrace: xxxxx denní expozice xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísat xxxx xxx ± 15 % střední xxxxxxx,
(c) xxxxxxx x vlhkost: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx být udržována x rozmezí 22 ± 2 °C x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x atmosféře xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx kontrolovány xxxxxxxx,
(d) měření xxxxxxxxx xxxxxx: měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx x respirabilní xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx zvíře. Vzorky xxxxxxxxx komor xx xxxxxxxxx x dýchací xxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx není respirabilní. Xxxxxxx velikosti xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx často xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x poté xxxxx xxxxxxx tak xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx studie
Xxxxxx xxxxx karcinogenity zahrnuje xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx života xxxxxxx xxxxxxxxx xxx test. Xxxx by xxx xxx ukončen x 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx. Nicméně xxx některé kmeny xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx. x nízkým spontánním xxxxxxxx xxxxxx, doba xxxxxxxx by xxxx xxx 24 měsíců xxx xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x nejnižší xxxxx nebo x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx sexuální xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx zvlášť. Xxx, kde xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x vysokou xxxxxx xx zjevných toxických xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxx celého xxxxx, xxxxx xxxxxxx skupiny xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx uznat negativní xxxxxxxx testu, nesmí xxx xxxxxx použitelných xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 10 % x přežití xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx než 50 % x 18 xxxxxxxx u xxxx a xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x potkanů.
Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx pohlaví x 10 xxxxxxxxxxx kontrolních xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx být x xxxxxx aspoň 12 xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx by mělo xxx xxxxxxxxx utracení xxx, xxx umožnilo xxxxxxxx patologie, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Pozorování
Xxxxx xxxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx i xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, autonomního x xxxxxxxxxxx nervového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx (skupin) xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx kontrola zvířat xx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy tkání xxxx xxxx x xxxxxxx. Moribundní xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx a pitvána.
Xxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxxxxx x očních xxxxxx x mortalita xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx tumoru xx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potravy (x xxxx tam, xxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx přibližně xx tříměsíčních xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx změny xxxxxxx váhy ukázaly xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Tělesné hmotnosti xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx během xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Hematologická xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, celkový xxxxx bílých xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx srážlivosti) xx xxxx být xxxxxxxxx za xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx konci xx vzorcích xxxx xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx skupiny. Xxx xxx xx to xxxxx, xxxxxx ve xxxxx intervalech xx xxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx stavu xxxxxx během xxxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.
Diferenciál xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx ze xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx dávkou x x kontrol. Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx z vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x x xxxxxxx s dávkou xxxxxxxx nižší, než xx vysoká xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx od 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx pokud možno xx stejných zvířat x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx buď xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, glukóza, xxxxxxxxx, xxxxxxx krvácení (semi-kvantitativně),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).
1.3.2.3 Biochemické xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx xxxxxxxxxxx měření xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 potkanů xxxxxxx pohlaví, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx nehlodavců xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. X těchto xxxxxx xx připravena xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx následující zkoušky:
- celková koncentrace xxxxxxxx,
- koncentrace xxxxxxxx,
- testy xx xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx glutamát xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), xxxxxxxx xxxxxx transaminázy2), xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- metabolismus xxxxx, např. krevní xxxxxxx na lačno,
- testy xx xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx aminotransferáza
2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx aminotransferáza
1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxxxxx xx odeberou xxxxxx krve xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx viditelné xxxx, xxxxxx xxxx xxxx, xxxx léze, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, je třeba xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx x tkáně xx měly xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. To xx xxxxxxx týká následujících xxxxxx x tkání: xxxxx3) (prodloužené xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), podvěsku mozkového, xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxx tělísek, xxxxx, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, aorty, xxxxxxxx xxxx, jater3), sleziny, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), jícnu, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, slepého střeva, xxxxxxxx, konečníku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx uzlin, xxxxxxxx, gonád3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, periferního xxxxx, xxxxx (krční, hrudní x xxxxxxx), sterna x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx kosti xxxxxx kloubů, a xxx. Naplnění xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx odpovídající xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx speciálních xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx vyšetření, xxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx k xxxxxxxxx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx patologovi xxxxxxxx xxxxxxx.
3) Xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx pohlaví x xx xxxxxxx xxxxxxxx mají být xxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxx orgánech xxxxx xxxxxx satelitní xxxxxxx x vysokou xxxxxx x xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx. Pokud xx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxxxxx nevyšší xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, vyšetří xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx všech xxxxxxxxx xxxxxx z ostatních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx části xxxxxx věnované xxxxxxxxxxxxx xxx jejím ukončení.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
(x) xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxx, která xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x u xxxxx xxxxxx xxxxxxx kontrolní x s nevyšší xxxxxx;
(x) xxxxxxx xxxxxx viditelné xxxx x xxxx, které xxxx podezřelé xxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx;
(x) xx-xx xxxxxxxx rozdíl x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx skupinou x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx skupinou, histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x daném orgánu xx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx;
(x) je-li xxxxxxx xx skupině x xxxxxxx dávkou podstatně xxxxx xxx u xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx nižší xxxxxx;
(x) je-li xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx doklad x xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx, které xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx dávkovou xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx sumarizují xx xxxxx xxxxxxx, ukazujících xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx testu, xxxxx zvířat vykazujících xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, dobu xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx. Výsledky xx hodnotí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx statistické metody.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Zpráva x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx ustájení, dieta,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, zdroje vzduchu, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vycházejícího z xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Dále xx xxxxx popsat xxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, kde xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: ve xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot a xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(b) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx,
(x) nominální xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx inhalační xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
(x) xxxxxx vehikula, xx-xx použito,
(x) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxx,
(x) xxxxxx velikosti xxxxxx (xxx kde xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx úrovně (xxxxxx vehikula, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxx incidence xxxxxx podle xxxxxxx, xxxxx x xxxx xxxxxx,
- doba xxxxx xxxxx studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx satelitních xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx ,
- xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx,
- doba, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,
- data x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx,
- testy xxxxxxxx xxxxxxxxx x všechny xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx zpracování výsledků x popisem xxxxxxxxx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
X.34. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx samic x xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx dostávají xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx růstu x xxxxxxx v průběhu xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x myší x 70 xxx x potkanů), xxx xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx rodičovské xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx xx dobu xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxx připuštěna. X xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx pohlaví, x xxxx gravidity x xxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx zahájením xxxxx xx zdravá mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx chována xxxxxxx 5 dnů xxxx zahájením xxxxxx x xxxx podmínkách xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx v pitné xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xxxxx xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, že xxxxxx toxické účinky. Xxxxx se aplikuje 7 dní v xxxxx.
1.2.2 Pokusná xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxx
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Používají xx xxxxxx zvířata, xx té xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx x nízkou xxxxxxxxx. Xxxx být xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a váhy x/xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx ověřena xxxxxxx způsobem u xxxx xxxxxxx. Zvířat x obou xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxxxxx cca 20 xxxxxxx samic s xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x potomstva, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx plodnost, xxxxxx gravidity x xxxxxxxx xxxxxxx v X xxxxxxxx, kojení, xxxx x vývoj xxxxxxxxx generace F1 xx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx zvláštních xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx a xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx vytvoření xxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx tři exponované xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xx třeba uvážit xxxxxxx další kontrolní xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx x nejvyšší xxxxxxxxxxx má v xxxxxxxx případě - xxxxx to xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx populaci. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, které by xx daly připsat xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx x rodičů xxx u xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xx dávka xxxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx se každý xxxxx podle xxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx hmotnosti x 0. xxxx 6. xxx od začátku xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxx test
X xxxxxxx látek x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx toxickým xxxxxxx na reprodukci, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ukáže, xx xxxxxx dávka, xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx rodičovské xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxx pěti xx xxxxxx týdnů, xx nejméně pětidenní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx pro xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx a xxxxxxx na konci xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxx xxx použiti xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx koncem xxxxxx.
Xxxxx aplikace xxxxxxx xxxxxxxxxx generace (X) xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx aspoň dva xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Denní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxx týdny xxxxxx připouštění, x xxxx xxxxxxxxx xx xx odstavení X1 xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx dávkovacího xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx studované xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx xxx připouštění
Xx možno xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (jedna xxxxxx x jeden xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).
X případě 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx anebo xx dobu 3 xxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxx vyšetřeny xx xxxxxxxxxx spermatu xxxx vaginální zátky. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx definován jako xxx nálezu vaginální xxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx, u xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx vyšetřit x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx porodit xxxxxxxx a pečovat x své xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx vrhů xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx postup: xxxx 1. x 4. xxxx po porodu xx xxxxxxxx xxxxx xxxx upraví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 samců x 4 xxxxx xx xxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 xxxxx x 3 xxxxxx. Xxxx menší xxx 8 nelze xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx xxx pozorováno xxxxxxx xxxxxx za xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx ztíženého xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx potravy xxxxx. Xx xxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxxx xxxxxxx (x xxxx, xxxxx xx látka xxxxxx x xxxxx xxxx) xx xxxxxx xxx, kdy je xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X zvířata xx xxxx xxxxx den xxxxxxxx x xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxx xx počítá od xxx 0 těhotenství. Xxxxx xxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx vyšetří a xxxxxxx se xxxxx x pohlaví xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx porodů x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx dnu xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx a celé xxxx xx zváží xxxx xx porodu, xx 4. x 7. dnu a xxxxx každý xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx individuálně. Xxxxxxxx xx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx a fyzickém xxxxx matek x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx
1.3.5.1 Xxxxx
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx generace P xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx anebo xxxxxxxxxxx změny se xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx reprodukčního systému. Xxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxx xx vyšetří xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx váčky, xxxxxxxxxx žláza, prostata, xxxxxxxx x cílové xxxxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx P xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V případě, xx tyto orgány xxxxxx doposud xxxxxxxxx x jiných mnohadávkových xxxxxxxx, provede xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx a skupiny xxxxxxxxxxx nejvyšší xxxxx x xxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx.
Xxxxxx, xxxxx jevily xxxxxxxxxxx u těchto xxxxxx zvířat, se xxxxxxx i x X zvířat xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupin. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx postižené. Xxx již xxxx xxxxxxx, reprodukční xxxxxx xxxxxx podezřelých z xxxxxxxxxxx xx mají xxx podrobit mikroskopické xxxxxxx.
2. XXXXX
Data xx sumarizují x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx na začátku xxxxxx, xxxxx plodných xxxxx, počet xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx změny.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx metoda.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxxxxxx
Zpráva x xxxxxxxxxxx xx měla xxxxx možno obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- údaje x xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxxxxxx, gestace x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx nebo xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vrhu, xxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx hmotnost potomků,
- xxxxxxx x xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx růst,
- xxx, kdy byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx zpracování všech xxxxx, xxxxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.35. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx x odstupňovaných xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx (X) xxxxxxxx dostávají xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxx a xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x xxxx a 70 dnů x xxxxxxx), xxx byl xxxxxxxx jakýkoliv nepříznivý xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx spermatogenezu.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (P) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx alespoň dvou xxxxxxxxxx xxxxx, aby xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx testovací xxxxx na xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx poté xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx podává xxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxx, x době xxxxxxxxx x kojení, xxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X1 x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx x až xx xxxx xxxxxxxxx X2 xxxxxxxx.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx zdravá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx dvou skupin - kontrolní x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Rodičovská xxxxxxx (X) xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx nebo v xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx jsou xxxx xxxxx. Všechna xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx celého testu. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo jiné xxxxxxxx, musí xxx x xxxx známo, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 dní x xxxxx.
1.2.2 Pokusná xxxxxxx
Xxxx se xxxxxxxx potkanům xxxx xxxxx. Používají xx xxxxxx X xxxxxxx, xx té xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Nepoužívá se xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx xxxx charakterizována co xx xxxxx, kmene, xxxxxxx x váhy xxxx xxxx. Plodnost xxxx být ověřena x obou pohlaví. Xxxxxx v obou xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Počet x xxxxxxx
Xxxxx exponovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxx 20 březích samic x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx porodu. Cílem xx získat xxxxxxxxxx xxxxx těhotenství x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, průběh xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx, xxxx x xxxxx potomstva generace X1 od xxxxxx xx xxxxxxxxxx, x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx F2 xx xx odstavení.
1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x xxxxxxx dostávají xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx se těhotné xxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx klecí x xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxxxx
Použijí xx xxxxxxx tři xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx kontrolní. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx, xxx zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx dostávají xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx snižuje xxxxxx a utilizaci xxxxxxx, je xxxxx xxxxxx použití xxxxx xxxxxxxxx skupiny, xxxxxxxxx xx xx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, vyvolávat toxicitu x nikoli xxxxxxxxx x rodičovské xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, které xx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látce, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolávat xxxxx xxxxxxxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxx x xxxxxx xxx x xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx hmotnosti. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx tělesné xxxxxxxxx x 0. nebo 6. xxx od xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.6 Limitní xxxx
V případě xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 neprojevuje xxxxxx xxxxxxxx účinkem xx xxxxxxxxxx, nemusí xx xxxxxxxx studie xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx studie xxxxx, že xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxx, není nutné xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx dávkových xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Plán xxxxxx
Xxxxx aplikace xxxxxx rodičovské xxxxxxxx X xxxxx ve xxxx pěti až xxxxxx xxxxx, aspoň xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx v xxxxxxxx x jsou xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx pokusu.
Xxxxx xxxxxxxx samicím rodičovské xxxxxxxx P xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx týdny xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx celé tři xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, x době xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx X1 xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx znalostí x vlastnostech xxxxxxxxx xxxxx, např. o xxxxxxx metabolismu xxxx. x xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx při xxxxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (jedna xxxxxx x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx dvěma xxxxxxx).
X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x týmž xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Každé xxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx zátky xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx F1 se xxxxxxxxxxx pro připouštění xx věku 11 xxxxx x myší x 13 xxxxx x xxxxxxx. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X1 xx xxxxxxx xxxxxxx páry x xxxxxxx vrhů xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx xx odstavu.
Dvojice, x kterých xxxxxxx x oplodnění, xx xxxxx vyšetřit x xxxxx zjistit xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xx xx možné xxx xxxxxxxxxxx další xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx vyšetřením xxxxxxxxxx xxxxx a spermatogenezy.
1.3.3 Xxxxxxxx vrhů
Zvířatům xxxxxxxx xxx vyšetření xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x pečovat x xxx potomstvo xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vrhů. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: mezi 1. x 4. xxxx xx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxx vrhů xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxx počtu 4 xxxxx x 4 samic na xxx; xxxxx to xxxx proveditelné, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx počty, např. 5 xxxxx a 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx standardizovat. Standardizace xxxx xxxxxxxx X2 xx xxxxxxx xxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx být xxxxxxxxxx xxxxxxx jednou xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx porodu x všechny xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx mortality, xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx příjem xxxxxxx xx stejný xxx, xxx xx xxxxxxxxx váženo. Rodičovská X a X1 xxxxxxx xx xxxx xxxxx den xxxxxxxx x pak týdně. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxx gestace xx xxxxxx od xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx anomálií.
Xxxxx xxxxxxx a mláďata xxxxxxxx ve xxxxxxx xxx se xxxxxxxx xxx vyšetření xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx vrhy xx zváží xxxx xx porodu, xx 4. x 7. xxx x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx studie, kdy xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Pozorují xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x fyzickém xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Pitva
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx generací X x F1 xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xx reprodukci. Xxxxxxx xxxxxxxx F1 nevybraná xxx připouštění x xxxxxxx zvířata generace X2 se xxxxxx xx xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx nebo xxxxx xx všechna rodičovská xxxxxxx P x X1 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx strukturní abnormality xxxxx patologické změny, xx zvláštní xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mláďata xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxx, děložní xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx kanálky, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x další xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx X x X1 se xxxxxxxx xxx mikroskopické xxxxxxxxx. X xxxxxxx, že xxxx orgány xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx studiích, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx X a X1 xxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxx dostávající xxxxxxxx xxxxx, která xxxx vybrána xxx xxxxxxxxxxx, x xxxx x zvířat, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Orgány, xxxxx xxxxxx abnormality x xxxxxx skupin xxxxxx, xx vyšetří i x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx případech xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx makroskopicky xxxxxxxxx. Xxx xxx bylo xxxxxxx, reprodukční xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, počet těhotných xxxxx, typ xxxx x procento zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx zpracovány příslušnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x experimentu
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx by xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxx:
- druh/kmen xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx odezvě x závislosti xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx plodnosti, xxxxxxx a životaschopnosti,
- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx do ukončení xxxxxx,
- tabulka xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, průměrnou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx mláďat x individuální xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx hmotnost xxxxxx X x X1 xxxxxxxx, vybraných pro xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.36. TOXIKOKINETIKA
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. X závislosti xx xxxxxxxx studie xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx. xxxx metabolity jsou xxx xxxxx xxxxx xxxxxx stanovovány v xxxxxxx xxxxxxxxxx, tkáních xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx s "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxx" xxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx xx xxxxxxx značení, xxxxxx xx tak, xxx xxxxxxxx co xxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Zdravá xxxxx zvířata xxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nejméně xx xxxx pěti dnů xxxx testováním. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx skupin. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx mladých, pregnantních xx premedikovaných xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Toxikokinetické studie xx xxxxxxxxx na xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druzích. Xxxx xx se xxxxxxxx xx druzích xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx. Jestliže xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, neměla xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx ± 20 % průměrné xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx studium xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx užije xxxxxxx 4 zvířat xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx potřeba provádět xxxxxx xx obou xxxxxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxx odpovědi x různých pohlaví, xxxxx je třeba xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (jiných xxx xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
Je-li xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, pak xxx xxxxxx počáteční xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx x úvahu xxx xxxxx zvířat, která xxxxx utracena v xxxxxx xxxxxxx bodu, xxx xxxxx xxxxxxxx xxxx, x xxxxx xxxx testování prováděno.
Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx skupiny xxxxxx xx úměrná xxxxxxxx xxxxxx.
Zahrnuje-li xxxxxx větší počet xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx měla počítat x xxxxxx časových xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx skupině nesmí xxx xxxx xxx 2 xxxxxxx. Velikost xxxxxxx xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxx xx xx, xxx xxx xxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxxxx poskytla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx ve xxxx retence, xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 2 různé xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xx xxx nízká xxxxx xxxxx, po které xxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, po xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx parametrech xxxx xxxxx vyvolává toxické xxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxx podmínek xxxx xxx xxxxxxxx x podávání xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx studie by xxxx xxx prováděny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x je-li to xxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxx x ostatních xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Testovaná látka xx obvykle xxxxxxxx xxxxxx sondou nebo x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx. Navíc xxxxxx po intravenózní xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx získány důležité xxxxxxxxx o distribuci xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx věnována xxxxxxxx xx vstřebávání x xxxxxxx, xx-xx testovaná xxxxx xxxxxx sondou xxxx x xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dávky, xxxxxxx xx-xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x potravě.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x další xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x údaji x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x trvání.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx.
1.3.1 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx rychlosti a xxxxxxx xxxxxxxx podávané xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx různé xxxxxx x nebo xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx1), x xx např.:
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx metabolitů v xxxxxxxxx xxxx. x xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx jejích xxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. studie akutní xxxxxxxx) mezi xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx skupinou,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx plochy pod xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x plazmě xx xxxx x porovnání x daty xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupině.
1) V xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx rozumí xx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx úplnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
X současné xxxx xxxx xxxxxxxx 2 xxxxxxxx, z xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx schématu mohou xxx použity xxxxx xx xxx:
- xxx xxxxxxx celkotělové xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx kvalitativní xxxxxxxxx;
- kvantitativní informace xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx x orgánech xxxxxxxxx ze xxxxxx x různých xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxx xxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx vzduch, x xxxxxxxx xxxxxxxxx žluč. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx se x xxxxxx exkretech stanovuje xxxxxxxxxx po podání xxxxx, x xx xxx do vyloučení 95 % x xxxxxxxx množství nebo xxxxxxx 7 xxx xx počátku xxxxxxxxxx.
Xx speciálních xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx v xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxx a schématu xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx technikami. Xxxx xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metabolické xxxxxx tam, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických xxxxxx. Xxx xxxxxxx informací x metabolismu xxxx xxx prospěšné xxxxxxxxx xx xxxxx studií.
Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx získat z xxxxxxxxxxxxx studií xxxx. xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx metabolického xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx - XX xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxxx xx podle xxxx prováděné studie xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx možno doplněných xxxxxxxxx znázorněním.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx uvedou xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx variability xx xxxxxx k xxxx, xxxxx, xxxxx x xxxxxxx (xxxxx xx to xxxxxxxxxx). Xxxxxx vstřebávání a xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx měla být xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxx typu xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxx měla xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, životní xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, jestliže xxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx podání,
- xxxxxx(x) xxxxxx x xxxxxxx použitá xxxxxxxx,
- xxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx testované látky x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx vydechovaného xxxxxxx,
- tabulky xxxxxxxx rozdělené xxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxx x xxxxxx,
- uvedení xxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx x závislosti xx čase,
- xxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx x identifikaci xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- metody xxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx,
- navrhované xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- interpretaci xxxxxxxx.
B.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX - XXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látek xx důležité xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx látek xxxxxxx xxxxxxxxxx typ xxxxxxxxxxxxx, který xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X určitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx zpožděné projevy xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx testy xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek, které xxxxx vyvolat pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Negativní xxxxx x xx vitro xxxxxx však xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx látka xxxx neurotoxická.
1.2 Definice
Xx skupiny látek xxxxxxxxxx v názvu xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx sloučeniny fosforu" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx anhydridy xxxxxxxx xxxxxxxxxx, fosfonové xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
Pozdní xxxxxxxxxxxxx xx syndrom xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx a periferním xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx x stárnutím specifické xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx esterase) x xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxx podmínkách xx xxxxxx testovaných druhů xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pozdním neurotoxickým xxxxxxx xx xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, EINECS 201-103-5, chemický xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx xxxxxxxx fosforečné, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (XXXX).
1.4 Xxxxxxx testovací metody
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxx v xxxxxx dávce xxxxxxxx, xxxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinky. Xxxxxxx xx xx xxxx 21 xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx chování, ataxie x xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx XXX, se provádí x slepic xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx podání xxxxx. 21 dnů po xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx slepice utraceny x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tkání.
1.5 Popis xxxxxx xxxxxxxxx
1.5.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx dospělé xxxxxxx xxx interferujících xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx klece xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx volný xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx orálně xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se podávají xxxxxxxx xxxx rozpuštěné xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx velké xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti.
1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx kura xxxxxxxx (Xxxxxx gallus domesticus) xx xxxx 8 xx 12 měsíců. Xxxxxxxxx xx plemena x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx se xx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.6.1.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxx xx xxx dostatečný xxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx xxxx x xxxxx den xx xxxxxx) a xxxx přežilo 21denní xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx se může xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxx historie. Xx xxx xxxxx šest xxxxxx, kterým se xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx prvků xxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx).
1.6.1.3 Volba xxxxx
Má být xxxxxxxxx předběžná xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx x různých xxxxxxxx dávek, aby xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Určitá xxxxxxxx xx x této xxxxxxxxx studii nezbytná xxx stanovení přiměřené xxxxx x xxxxxx xxxxxx. Aby se xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx cholinergní xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx ochranný xxxxxxxxx, x xxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxxxxxxxx x pozdními xxxxxxxxxxxxxx účinky. K xxxxxx maximální neletální xxxxx xxxxxxxxxxx látek xxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxx xxxxxx B.1 bis). Xxxxxxxxxx údaje xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxx xxxxxxxxx při xxxxxx xxxxx.
Úroveň xxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxx studii xx xxxx xxx xx xxxxxxxx x přihlédnutím x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx výběru xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Případné xxxxx by neměly xxxxxxxx xxxxxxx dostatečného xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx (šest) a xx 21 dnech xxx xxxxxxxxxx (xxxx). Xxxxxxx nebo jiný xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx má xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx s dávkou xxxxxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx postupů popsaných xxx tuto xxxxxx, xxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxx údajů x látek s xxxxxxxxx strukturou xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx o studii x xxxxxxx vyšší xxxxx. Limitní test xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx vyskytující xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx použití xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx je 21 xxx.
1.6.2 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinku, je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx pozorování
Xxxxxxxxxx xx začít xxxxxxxx xx xxxxxx látky. Xxxxxxx slepice se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxx dnů a xxx aspoň xxxxxx xxxxx po dobu 21 xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Veškeré xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxx, stupně a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx čtyřstupňové xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx paréza. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx xxxxxxx vykazující xxxxxxxxxxx změny vyjmou x klecí x xxxxxxx xxxxxx motorické xxxxxxxx jako xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx usnadnilo xxxxxxxxx minimálních xxxxxxxxx xxxxxx. Umírající xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx a přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.6.2.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Všechny xxxxxxx xx xxxxx xxxxx před podáním xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.6.2.3 Xxxxxxxxx
Šest xxxxxx náhodně vybraných x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx a xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny (xx-xx xxxxxxx xxxxxxx) xx usmrtí x xxxxxxx dnech xx xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx NTE xx vyjmou xxxxx x xxxxxxxx mícha. Xx xxxxxx vypreparovat xxxx x. ischiadicus x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx inhibici XXX. Běžně se xxxxxxxx tři xxxxxxx x kontrolní a xxxxx testované xxxxxxx xx 24 hodinách x další xxx xx 48 xxxxxxxx, xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx usmrcují pouze xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx pozorování xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxx se x organismu xxxxxxxx xxxxx xxxxxx (hodnotí xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), pak xx xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorky xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxx, a xx xxxx 24 xx 72 hodinami xx podání látky.
X xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx také analýza xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx reaktivace XXxX, xxx xxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Pitva x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x utracených xxx špatný xxxxxxx xxxx) zahrnuje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x míchy.
1.6.2.5 Histopatologické xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx x přeživších xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx biochemické xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tkáně xx xxxxxx in situ xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se: xxxxxxx (střední xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx - xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x horní xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx část x n. xxxxxxxx (x xxxx xxxxx x x. gastrocnemius) x x n. xxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx myelin x xxxxx.
2. SBĚR X XXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx x účincích xxxxxxxxxxx touto xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxx) xxxxx xxxxxxxxxx další xxxxxxxxx xx pozdní neurotoxicitu. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Údaje xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx musí být xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx x xxxxx xxxxxx jevících poškození, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, typy x stupeň xxxxxx xxxxxxxxx nebo účinků x procento zvířat xxxxxxxxxxxx každý xxx x xxxxxx poškození xxxx xxxxxx.
Výsledky xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx výskytu, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a dalšími xxxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx.
Číselné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x obecně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x pokusu xxxxxxxx xxxx informace, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxx zvířata:
- použité plemeno;
- xxxxx x xxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx ustájení xxx.;
- hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx a homogenitě xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula;
- podrobné xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a kvalitě xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx;
- specifikace podávaných xxxxx, včetně xxxxxxxxxx xxxxx x vehikulu, xxxxxx x fyzikální xxxxx aplikované xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx dávkových xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx);
- xxxxxxxx xxxxx biochemických xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx;
- podrobný xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx;
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, x kterých xx xx možné.
Xxxxxxx výsledků
Xxxxxxxxx x Interpretace
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxx XXXX TG 418.
X.38. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH SLOUČENIN XXXXXXX 28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx schopnost xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx typ xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx toxicity. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx fosforu xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx vitro mohou xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Negativní nález x xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx považovat xx xxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Tento 28xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx informace x xxxxxx zdravotním xxxxxx vznikajícím z xxxxxxx xxxxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x závislosti xxxxxxxx xx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx žádné nepříznivé xxxxxx. Xxxx úroveň xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx kritérií xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx neutrální xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx jiné xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx skupiny.
Xxxxxx neurotoxicita xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx, xxxxxxxx axonopatií, xxxxxxx x xxxx x periferním nervu x pozdním xxxxxxxx xxxxxx příznaků, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx denně orálně xxxxxxxx xx xxxx 28 dnů. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, zaznamenává xx abnormální xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxx 14 dnů xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx NTE, xx xxxxxxx x slepic xxxxxxx vybraných z xxxxx xxxxxxx 24 x 48 hodin xx xxxxxxxxx podání xxxxx. Dva xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tkání.
1.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.4.1 Xxxxxxxx
Mladé xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx bez xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x farmakologické léčby x x normální xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx do experimentální x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx studie xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx velké xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx slepic x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxxx 7 dní x týdnu, buď xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jinou srovnatelnou xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxx je xxxx. kukuřičný olej. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x želatinových xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxx nebo xxxxxx před xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.4.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 až 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx plemena x xxxxxxxxxx velikosti x xxxxxxx xx za xxxxxxxx, xxxxx dovolují xxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Počet x xxxxxxx
Xx xxxxx použít nejméně xxx xxxxxx dávek x xxxxx kontrolní xxxxxxx x vehikulem. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx.
X každé xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx aspoň xxxx x nich mohlo xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx vyšetření (xx xxxxx x každém xx dvou xxxxxxxx xxxx) x šest xxxxxxx čtrnáctidenní xxxxxxxxxx xx ukončení xxxxxxxx.
1.4.2.3 Xxxxx dávek
Xxxxxxx xxxxxx se zvolí x přihlédnutím ke xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx testu xx xxxxxx neurotoxicitu x x xxxxxx xxxxxx x toxicitě nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx neurotoxicity, xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinku na xxxxx. Nejnižší xxxxx xx neměla vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx x dávkou xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti a xxx, xx použití xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx důvod xxxxxxxx xxxxxxxx, pak xxxx třeba xxxxxxxx x xxxxxx s xxxxxxx vyšší xxxxx. Xxxxxxx test se xxxxxxxxx, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxxxx se u xxxx xxxxxxxxx potřebu xxxxxxx xxxxx vyšší xxxxxx xxxxx.
1.4.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna zvířata xx pozorují nejméně xxxxxx xxxxx xx xxxx expozice x 14 dnů xx xx, xxxx xx xxxxxxxx a do xxxxx xxxxx xxxxx.
1.4.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxx xxx v xxxxx xx 28 xxx.
1.4.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx má xxxxx xxxxxxxx xx začátku xxxxxx látky. Xxxxxxx xxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx aplikace, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x trvání. Xxxxxxxxxx xx zahrnovat xxxxxxxxxxx xxxxxxx, ale xxxx xx xx xx xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pořadové stupnice, xxxxxxxxxxx se paréza. Xxxxxxx xxxxxxx týdně xx xxxxxxx xxxxxx x klecí x xxxxxxx nucené xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako např. xxxxxxxxxxx po xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx minimálních xxxxxxxxx xxxxxx. Umírající xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx xxxxx vyloučit, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.4.3.2 Tělesná xxxxxxxx
Xxxxxxx slepice se xxxxx xxxxx před xxxxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Xxxx slepic xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx se usmrtí x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxx analýzu xxxxxxxx NTE xx xxxxxx mozek x xxxxxxxx mícha. Xx xxxxxx vypreparovat xxxx x. ischiadicus x xxxxxxxxxx jeho xxxx xx inhibici XXX. Xxxxxxx se usmrcují xxx slepice z xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupiny xx 24 hodinách a xxxxx xxx po 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx studií (např. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xx výhodnější xxxx xxxx usmrcení xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pak xx doporučuje xxxxxx xxxx dobu x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx také xxxxxxx acetylcholinesterázy (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx vést x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.
1.4.3.4 Pitva
Xxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx usmrcených i xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx stav) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Nervová xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tkáně xx xxxxxx xx xxxx za použití xxxxxxxxxx technik. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (řezy xxxxx xx xxxxxxx x horní xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx), z xxxxxxxxxxx nervů xx xxxxxxx xxxxxxxx část x x. xxxxxxxx (x xxxx větve x x. gastrocnemius) x x x. xxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx a xxxxx.
Nejprve xx xxxxxxx fixované tkáně xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxx dávkou. Xxxxx se xxxxxx x zvířat xxxxxxx x xxxxxxxx dávkou xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx vyšetření x xx xxxxxxxxx xx skupin, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x nízkou.
2. XXXX X ZÁZNAM ÚDAJŮ
Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx chování) xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx. Údaje se xxxx sestaví xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x počet xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, typy x xxxxxx těchto poškození xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx poškození xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx vyhodnotí x xxxxxxxx xxxxxxx, závažnosti x korelaci xxxx xxxxxxx xxxxxxx, biochemickými x xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezy x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupin.
Xxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Statistické xxxxxx se xxxxx xxx x době xxxxxxxxx studie.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x pokusu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx plemeno,
- xxxxx x xxxxx xxxxxx,
- xxxxx, xxxxxxxx ustájení atd.,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxx vehikula,
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávek, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x vehikulu, objemu x xxxxxxxxx formě xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xxxx xxx 24 x 48 xxxxx.
Xxxxxxxx:
- údaje o xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxx,
- úroveň bez xxxxxx (XXXXX),
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx),
- podrobný xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich výsledky,
- xxxxxxx nálezy,
- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické vyhodnocení xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx xxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Hodnocení x Xxxxxxxxxxxx
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx s metodou XXXX TG 419.
X.39. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx
1. METODA
Xxxxxx je replikací XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx XXX Xxxxxxxxx (XXX) Test Xxxx Xxxxxxxxx Xxxxx Xxxxx Xx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx syntézy XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX) v savčích xxxxxxxxx buňkách xx xxxx je xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x jaterních xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (1) (2) (3) (4).
Xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx v játrech. Xxxxxxxx xxxxx indikuje xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx následnou xxxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sloučenin; jsou xxxxx xxxxxxx objektem xxx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX in vivo.
Xxxxxxxx-xx doklady o xxx, že xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx tkáně xxxxxxxxx, xxxx tento xxxx xxxxxx.
Výsledek xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (XXX) xx xxxxxxx xxx, xx xx stanoví xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x buňkách, xxxxx xxxxxxxxxxxx plánovanou (X-xxxx) xxxxxxxx XXX. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx thymidin xxxxxxx xxxxxxx (3X-XxX). Xxx xxxxx XXX in xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx játra. Xxxx tkáně xxx xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx předmětem xxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx bází XXX, xxx jsou x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Proto xx xxxxxx UDS xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx repair" (20 - 30 bází), xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx repair" (1 - 3 xxxx) xx xxxx xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxx xxxx XXX. Rozsah xxxxxxxx XXX xxxxxx nic x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxx s XXX xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx XXX není xxxxxxxx xxxxxxxx reparačním xxxxxxxx. Xx, xx XXX test xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx aktivitě xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx potenciální xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
1.2 DEFINICE
Buňky x reparaci: xxx xxxxxxx xxxxx (NNG) xxxxx než xxxxxx, xxxxxx stanovená hodnota, xxxxxx zdůvodní laboratoř xxxxxxxxxxx xxxx.
Net xxxxxxx grains (XXX): xxxxxxxxxxxxx xxxx XXX xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxx x xxxxx (NG) x průměrným xxxxxx xxx x xxxxxxxxxx (XX): NNG = XX - XX. Xxxxx XXX xx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx x kultuře, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx apod.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx XXX synthesis, XXX): xxxxxxx xxxxxxx XXX xx excizi x xxxxxxxxxx xxxxx XXX obsahujícího oblast xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo fyzikálním xxxxxxxx.
1.3 PRINCIP XXXXXX
Xxxx XXX x xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx DNA xxxxxxxxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxxx chemickou xxxxxx xxxx fyzikálním působením. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx XXX jaterních xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx v X-xxxx buněčného xxxxx. Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxx xxxxxxx autoradiograficky, xxxxxxx tato technika xxxx xxx náchylná x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx v S-fázi, xxxx je např. xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx potkani, xxx ovšem použít xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při zahájení xxxxxx měly být xxxxxxxxx a x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.2 Xxxxxxxx chovu
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx X.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx náhodně rozdělí xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx označí x xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx minimalizovaly xxxxxxxx xxxxx toho, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.2 Testovaná xxxxx/xxxxxxxx
Je-li xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x je-li xx xxxxx, xxxxx xx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx připraví xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo vehikulu. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxxx xxxxx nebo se xxxx xxxxxxxxx ředí. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx ji xxxxxxxxx.
1.4.3 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx v používaných xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx s testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx ne xxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx údaji x kompatibilitě x xxxxxxxxxx xxxxxx. Doporučuje xx, xxx xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / vehikulum.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx pohlaví xxxxxxx xxxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx. Je třeba xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xx měly xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxx, xxx lze očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvýšení xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x dávkách xxxxxxxxx ke středně xxxxxx xxxxxx (4). Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx byly xxxxxx patrné, xxx xxxxxx nenapovídaly hodnotiteli xxxxxxxxx zakódovaného preparátu. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx patří xxxxxxxxx:
Doba xxxxxx xxxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx x xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 xxxxx) | X-2-xxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx xxxxx xxxxxx x jiné vhodné xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx cestou, xxx xx podávána xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx minimálně xxx xxxxxxxxxxxxxx jedinci. Xxxxx xxxxxxxx historická xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx negativní x pozitivní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, nebo xxx jedinci.
Pokud x době, xxx xx studie xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx expoziční xxxx, xxxxxxxxxxx, xx mezi xxxxx xxxxxxxxx nejsou x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx pohlaví, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx, kde humánní xxxxxxxx testovaných xxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se test xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka se xxxxxxx xxxxxx jednorázově.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Obvykle xx xxxxxxxxx dvě xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxx, xx při xxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx účinek. Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.
Látky, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxx xx xxxxxx od xxxxxxx. Provádí-li xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx, xx xxxxx ji xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxx x hlavní xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx dávku xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx toxicity v xxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxx x xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné toxické xxxxxx x jestliže xx xx xxxxxxx xxxxx x strukturně xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx očekávané xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.5.5 Aplikace xxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou být xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Intraperitoneální xxxxxxxx se však xxxxxxxxxxxx, protože xx xx xxx xxxxx xxxxx vystavit xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxx xxxx injekcí xxxxxxxx vpravit, závisí xx xxxxxxxxx pokusného xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 ml/100 x xxxxxxxxx organismu; xxxxx dávky xxxx xxx xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx ve všech xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Příprava xxxxxxxxx xxxxx
Jaterní xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx 12 - 16 xxxxx po xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx zapotřebí xxxxx další odběr (xxxxxxx 2 - 4 xxxxxx xx xxxxxx xxxxx), ledaže xx xx 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx reakce zjevná. Xx xxxxx xxxxx xxxxxx x jiné xxxx xxxxxx vzorků, xx-xx xx odůvodněné xx základě toxokinetických xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jaterních buněk xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jater xx xxxx xxxxxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, xxx xx čerstvě xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx vhodnému xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxx kontroly mají xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx UDS
Čerstvě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx po xxxxxxx dobu (xxxx. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx inkubují x xxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxx odstraní( xxxxx se xxxxx xxxxx inkubovat x xxxxx xxxxxxxxxxx nadbytek xxxxxxxxxxx thymidinu, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxx. "cold xxxxx"). Xxxxx se xxx promyjí, xxxxxx x xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se "cold xxxxx" xxxxxxxx. Sklíčka x xxxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx ve xxx (xxxx. xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx týdnů x xxxxxxxxxx), vyvolají, xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. X každého jedince xx xxxxxxxx dva xxxx tři xxxxxxxxx.
1.5.8 Xxxxxxx
Mikroskopické xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx obvykle xxxxxxx 100 buněk; xxxxx xx buněk méně xxx 100 xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx být zdůvodněné. Xxx počítání xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x S-fázi, xxx xxxxx xxxxx v X-xxxx xx registruje.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx jader x cytoplazmy x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Mimoto xx xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx x xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx "xxxxxxx xxxxx" (NNG) xxxxxxxxx xxxxx CG xx xxxxx XX. Xxxxxxxx-xx xx "buňky x xxxxxx", xxxx xxx xxxxxxxx, kterými se xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xx statistické xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE VÝSLEDKŮ
Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxxxx | (X) xxxxxxx XXX xxx předem xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxx dané xxxxxxxxxx | |
xxxx | (II) xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxx než x xxxxxxxx kontroly | |
xxxxxxxxx | (X) hodnoty XXX na úrovni/pod xxxxxx historického xxxxx x xxxxxxx | |
xxxx | (XX) xxxxxxx XXX xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx. |
Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxxx dat, což xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, vztah xxxxx - odpověď x cytotoxicita. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx být xxx pozitivní reakci xxxxxxxxxxxx faktorem.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx poskytuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx získaného souboru xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx několikrát opakuje.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx ukazuje, že xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx XXX, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx DNA in xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx DNA, xxx je xxxxx xxxxxx zjistitelné.
Je xxxxx xxxx x xxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx tkáň (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva o xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx vehikula
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- počet, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx rozpětí, průměrů x směrodatných odchylek xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedena,
- xxxxxxxxxx volby x xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx cílové xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx látky v xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx faktickou dávku (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x kvalitě xxxxxxx x vody,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx x kultivace xxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a počet xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxx hodnoty počtů xxxxxxxxxx zrn v xxxxxxx, xxxxxxxxxx x "xxx xxxxxxx xxxxxx" xxx xxxxxxxxxx preparáty, xxxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- známky toxicity,
- údaje ze xxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx "buněk x xxxxxx", xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx v X-xxxx, xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Závěry.
Metoda X.39. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.40. XXXXXXX XXXXXX XX KŮŽI
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxx centrum pro xxxxxxxxxx alternativních metod (Xxxxxxxx Xxxxxx xxx xxx Xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx Methods, XXXXX, Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx, Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxx vědecky xxxxxxx xxx testy xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx potkana (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, XXX) x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx. Validizační studie XXXXX prokázala, že xxx testy xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx látkami xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx kůži. Xxxxxx test xxxxxxxxxxx x modelu lidské xxxx xxxxxxxx správně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx způsobující xxxxx xxxxxxxxx xxxx R35, x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, X34). Xx xxxxxx xxxxx x postupy xxxx testů; výběr xxxx oběma xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxx nevratného xxxxxxxxx tkáně xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxx. 1.5.3.4 x 1.7.2.3.
1.4 PRINCIP METODY - XXXX XXX XX KŮŽI XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xx dobu až 24 xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx odebrané z xxxxxxx xxxxxxx utracených xxxxxxxx způsobem. Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx identifikovány xxxxx xxx schopnosti xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x bariérové xxxxxx xxxxxx corneum.Tato xxxxxxxxx xx xxxx jakožto xxxxxx xxxxxxxxxxxx transkutánního xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxx určitou xxxxxxxx xxxxxxx (5kΩ) (4) (5). Dráždivé a xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxx prahovou xxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx viz x xxx. (6)) xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xx snížil xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (2) (7).
1.5 XXXXX XXXXXX - XXXX XXX XX XXXX XXXXXXX
1.5.1 Xxxxxxx zvířata
Pro xxxxxxxx xxxxxxx terčíků jsou xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23xxxxx) xxxxxxx, Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Malými xxxxxxx xx xxxxxxx se xxxxxxx odstraní xxxx x dorzální x xxxxx xxxxxx. Zvířata xx xxx omyjí xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xx roztoku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx streptomycinu, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx nebo amfotericinu, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Třetí xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx omytí xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx 3 xxx xx použijí. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx zvířata xxxxxx xxx 31 xxx.
1.5.2 Příprava terčíků xxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, sejme xx xxxx z xxxxxxxx plochy a x té se xxxxxxx xxxxxxx přebytečný xxx. Xxxx se xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PTFE) xxxxxxx, x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x trubici. Xxxx konec xxxxxxx xx přetáhne xxxxxx X-xxxxxxx, kterým se xxxx xxxxxx, a xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx trubice x O-kroužku xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx X-xxxxxxx xx xxx xxxxxxx pečlivě xx xxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxx vazelínou. Trubice xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX), xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx. 2).
1.5.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxxxxx se na xxxxxxxxxxx povrch xxxxxx xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx xx xxxxx xxxxxx, nanese xx xx terčík v xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx pokryl celý xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx 150 μl xxxxxxxxxxxx vody a xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx x xxxx maximální xxxxx xxxxxxx. U některých xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx zahřátím xxxxx xx 30 xX, aby se xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx. Použijí xx vždy tři xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx na dobu 24 hodin (xxx xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vody xxxxx xxxxxxxxx 30 xX xxx xxxxxx, xxxxx se xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx v xxxxxxx xxxxxx, se xx napomoci vymýváním xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx zhruba 30 xX.
1.5.3.2 Měření XXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odpor (TER) xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx impedančního můstku xxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx povrchové xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% xxxxxxxx, xxxxxx se pokryje xxxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx xx ethanol xxxxxxxx tak, že xx xxxxxxx xxxxx, x tkáň se xxxxxxxxx přídavkem tří xxxxxxxxx 154 mM xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xx obě xxxxxx xxxx x xxxxx se odpor x xΩ/xxxxxx (obr. 2). Rozměry xxxxxxxx x délku xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx se během xxxxxx xxxxx xxxxxx XXXX trubice tak, xxx byla xx xxxxxxx xxxxxx hořečnatého xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) elektroda xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx xxxxxx xx xxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx XXXX xxxxxxx (obr. 1), xxxx vzdálenost xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx než 20 xΩ, může xx být xxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx kůže. Xx možno xx xxxxxxx xxxxx povlak xxxxxxxxx, například xxx, xx xx PTFE xxxxxxx utěsní xxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxx 10 sekund xx protřepává, xxxxxx xxxxxx hořečnatého xx xxxxxx x měření xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx XXX xx akceptována, xxxxx xxxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx přijatelných pro xxxx xxxxxx. Navrhované xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx rozmezí xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx tyto:
|
Kontrola
|
Látka
|
Rozmezí xxxxxx (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
10 – 25
|
1.5.3.3 Modifikovaný xxxxxx xxx xxxxxxxxx aktivní xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxx testování povrchově xxxxxxxxx xxxxx (detergentů) xxxx neutrálních organických xxxxx hodnota TER xxxxx nebo rovná 5 kΩ, xxx xx této xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx zjistí, xxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x odstranění barviva xxxxxxxxxxxxxx X
Xx prvotním xxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx terčíků xxxxxx xx 2 xxxxxx po 150 μx 10% (w/v) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x destilované vodě. Xxxxxxx xxxx se xxx xxxxxx xx xxxx 10 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vody, která xx nejvýše xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx) xxxxxxx. Každý xxxxxx xxxx xx xxx opatrně xxxxx x XXXX trubice x uloží do xxxxxxx (xxxx. xx 20 ml skleněných xxxxx xxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 ml xxxxxxxxxxxx vody. Xxxxxxx xx po xxxx 5 xxxxx jemně xxxxxx, aby se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (nenavázaného) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx vyjmou a xxxxx xx xxxxxxx x 5 ml 30 % (w/v) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 60 xX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx vyjmou x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxx xx xxxx 8 xxxxx při xxxxxxx 21 xX (xxxxxxxxx odstředivá síla ∼ 175). Xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxx xx xxx zředí 30 % (w/v) xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (x/x) (xx. 1 xx xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx SDS). Xxxxxxx xxxxxxx (XX) xxxxxxx xx xxxx xxx cca 565 xx.
1.5.3.3.2 Výpočet xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx sulforhodaminu X x terčíku se xxxxxxxx x hodnoty XX (molární extinkční xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xxx 565 xx xxxx 8,7 . 104; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx X se xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx se xxxxxxxx hodnota. Průměrná xxxxxxx navázaného barviva xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx spadají xx akceptovatelného xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxxxxx rozmezí xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxx při xxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx uspořádání považují:
|
Kontrola
|
Látka
|
Rozmezí xxxxxx xxxxxxx (mg/terčík)
|
|
Pozitivní
|
10 X kyselina chlorovodíková
|
40 - 100
|
|
Negativní
|
destilovaná xxxx
|
&xxxx;
15 – 35
|
1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx zvolit xxxxxx dobu xxxxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxxx xxxx (xxxx. 2 hodiny) za xxxxxx xxxxxxxxx silně xxxxxxxxxxx xxxxx. Ve xxxxxxxxxxx studii však xxxx xxxxxxxx, xx xxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxx schopnosti xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek aplikovaných xx terčíky kůže xx 2 xxxxxx (2), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx identifikaci xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx látek xx 24xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx XXX mohou xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x experimentálním xxxxxxxx. Xxxxxxx hodnota xxx leptavé xxxxxx 5 xΩ xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx získaných xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zde. Pokud xx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx změnily, xxxxx xx být xxxxx použít xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Proto xx xxxxxxxxxx okalibrovat xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx validační xxxxxx (3).
1.6 XXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX XXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx až 4 xxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx materiál xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx "XXX reduction xxxxx" (XXX = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxx definovanou pro xxxxx expoziční xxxx. Xxxxxxx xxxxx vychází x předpokladu, že xxxxx způsobující xxxxxxxxx xxxx xxxx ty, xxxxx dokáží xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx nebo xxxxx) x xxxx dostatečně xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxx buněk x xxxxxxxx buněčných xxxxxxxx.
1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX XXXX
1.7.1 Xxxxxx xxxxxx kůže
Modely xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxx však xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx corneum xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxx xxxxxxxx xxx, že xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x nichž xx známo, xx xxxx xxx buňky xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx skrze xxxxxxx xxxxxxx neprocházejí. Xxxxx xxxx za xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vykazovat xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx v modelu xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxx, aby xx dalo xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx buněk (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX, tj. XX xxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx použité xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx model. Xxxxxxx x xxxxxxx látky xxx pozitivní xxxxxxxx (xx srovnání x xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx mezinárodnímu validačnímu xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Popis xxxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, nanese xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx 25 (μ/xx2). Xx-xx xxxxx, xxxxxx xx tak, aby xxxxxxxxx xxxx, a xxxxxxxx se zvlhčí, xxx se x xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. Pokud xx xx xxxxx, pevné xxxxx se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. X metody xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx látek (2). Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx x povrchu xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Měření životnosti xxxxx
X xxxxxx životnosti xxxxx xx xx xxxxxx jakákoliv validizovaná xxxxxxxxxxxxx metoda. Xxxxxxxxxx xx používá redukce XXX, x xxxxx xxxx prokázáno xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky (2). Xxxxxx xxxx xx xx dobu 3 xxxxx ponoří xx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx xxx xxxxxxx 20 - 28 xX. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx pak xxxxxxxxx (xxxxxxxx rozpouštědlem) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XX xxx xxxxxx xxxxx 545 x 595 xx.
1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx kůže x přesné xxxxxxxx xxxx působení, promývacího xxxxxxx xxx. xxxx xx xxxxxxxxx buněk xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx model okalibrovat xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných x xxxxx použitých xx validizační xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxx xx použití široké xxxxx xxxxx reprodukovatelná xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx x xxxxx xxxx laboratoře, tak xxxx různými laboratořemi. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx definované xxxxx (2) a výsledky xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx zveřejněny x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx kterém xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odbornou xxxxxx.
2. XXXXX
1.8 ZPRACOVÁNÍ VÝSLEDKŮ
1.8.1 Xxxx TER na xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx odporu (x xΩ) xxx xxxxxxxxx materiál, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx x pro případné xxxxxxxxxx referenční látky xx xxxxxxx x xxxxxxxxx formě, x xx xxxx xxx xxxxxxx replikace x xxxxxxxxx experimenty, xxxxxxxx xxxxxxx x z xxxx vyvozená klasifikace.
1.8.2 Xxxx s modelem xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX x vypočtené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk se xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, a to xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, průměrné hodnoty x z nich xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.9.1 Xxxx TER xx xxxx potkana
Pokud je xxxxxxxx xxxxxxx TER xxx testovaný xxxxxxxx xxxxx než 5 xΩ, je xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx-xx hodnota XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 kΩ x xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xx.
X povrchově aktivních xxxxx (xxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx hodnoty XXX nepřesahující 5 xΩ, xxx xxxxxxx xxxxxxx penetrace barviva. Xx-xx xxxxx barviva x xxxxxxx xxxxx xxxx rovný průměrnému xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x 36 % XXx, je testovaná xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x tedy xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx-xx xxxxx barviva x terčíku menší, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx pozitivní a xxxx xxxxxxx účinky xxxx.
1.9.2 Test s xxxxxxx xxxxxx kůže
Hodnota XX pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100% xxxxxxxxxxxxxxx buněk. X xxxxxx XX pro xxxxxxxxxx zkušební vzorky xx xxxxxxx procentuální xxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx xxxxxxxx. Hraniční xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxx odděluje xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx být x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, než xx xxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx, že xx xxxx xxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Testovaná xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, popřípadě xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti; pokud xx xxxxxxxxx referenční xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx x xxx xx.
Xxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx hodnot xxxxxx (xxxx XXX) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx x modelem lidské xxxx) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx;
- popis xxxxx xxxxxx pozorovaných xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxx 2
Metoda X.40. byla xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Sb. s xxxxxxxxx od 22.6.2001
X.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX FOTOTOXICITY 3T3 XXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx toxická xxxxxx (reakce), k xxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx chemickým xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xx-xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx testu xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx slouží xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx výsledkem xxxxx in xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx kombinovaným xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx sloučeniny, xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xx xxxx po xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx v kůži, x xxxxxxxxxx, jež xxxxxx xxxx fotoiritanty xx topickém nanesení xx pokožku.
Test xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU in xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX/XXXXXX x xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx validní alternativa xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. X xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx schůze XXXX xxxxxxx xxxxxxxxxx in xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxxx porovnávány x xxxxxxxx xxxxxx fototxicity/fotoiritace xx xxxx x xxxxxx x lidí x bylo xxxxxxxx, xx tento test xx xxx xxxxxxx xxxxxx vynikající xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Test xxxx xxxxxxx x tomu, xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, jež xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx látky x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx fotokarcinogenita, x xxxx řada xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxxxxxxxx. Test není xxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx umožňoval xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx fototoxicity x xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx dodatek.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: intenzita ultrafialového (XX) xx xxxxxxxxxxx xxxxxx dopadajícího xx xxxxxx; xxxxxx xx X/x2 xxxx x XX/xx2.
Xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx (= xxxxxxxxx x xxx) ultrafialového (XX) xxxx xxxxxxxxxxx (VIS) xxxxxx dopadajícího xx xxxxxx, vyjádřené x xxxxxxx (= X x s) na xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. X/x2 xxxx J/cm2.
Pásma xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxx XXX (Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xx X'Xxxxxxxxx) xx xxxxxxx xxxxxxxx XXX (315 - 400 xx), XXX (280 - 315 nm) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx se i xxxx xxxxxxxx: za xxxxxxx mezi xxxxx XXX a XXX xx xxxxx považuje 320 nm x XXX xx xxxxx xxxx xx XX-X1 x XX-X2 x xxxxxxx xxxxxx x 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx (viabilita) xxxxx: xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. příjem xxxxxxx xxxxxxxxxxxx živou xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx testem a xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x celkovým počtem xxxx. xxxxxxxxxx (vitalitou) xxxxx.
Xxxxxxxxx životaschopnost (xxxxxxxxx) xxxxx: životaschopnost buněk xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx prošly xxxxx procedurou xxxxx (xxx + XX xxxx - XX), xxxxx bez xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
Predikční xxxxx: xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx testu toxicity xxxxxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx potenciálu. V xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx test xx xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx XXX x MPE.
PIF (photo xxxxxxxxxx factor, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): koeficient představující xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX50) xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.
XXX (mean xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx): xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace-odezva xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+UV) necytotoxického XXX/XXX ozáření.
Fototoxicita: xxxxxx xxxxxxx reakce (xxxxxx), xxxxx xxxxxx po xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, nebo reakce, xxxxx xx obdobně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx pojmu "fototoxicita", xxxxxxxx se xxxxx xxxx fototoxických reakcí, x nimž xxxxxxx x xxxx poté, xx na xx xxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx) nějaká xxxxx. Tyto fototoxické xxxxxx xxxxx vždy x nespecifickému xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx prvním působení xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxx, a kdy xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x tomu, xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: genotoxická xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxxxxxxx projevy, ke xxxxx xxxxxxx poté, xx xxxx buňky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx dávce XX/XXX xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a látky. Xxxxx xx tumorogeneze xxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx látkou, xxxxxxx x fotokokarcinogenitě.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx jako xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX doporučuje použít xxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx byly xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (3) (13).
1.4 PRVOTNÍ XXXXX
Xxxxxxxxxxx účinky xxxx xxxxxxxxxx u xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx to, že xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x oblasti xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx světelných kvant. Xxxxx xx xx xxxxxxx, xxx se xxxxx uvažovat x xxxxxxxxxxx testování podle xxxxxx xxxxxxxxxxx návodu, xxxx by xx xxxx stanovit absorpční xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x XX/XXX oblasti (xxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxx OECD x. 101). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx-1 x cm-1, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx testovat xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx dodatek).
1.5 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, kterými xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx vyústit xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7), xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Proto je xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx testované x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX záření. Xxxxxxxxxxxx xx při tomto xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx pokles xxxxxx vitálního xxxxxxx, xxxxxxxxx červeně (neutral xxx, XX) (9), 24 xxxxx xx xxxxxxxx testované xxxxx x ozařování.
Buňky Balb/c 3X3 se kultivují xx dobu 24 xxxxx xxx, aby xx vytvořila xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx). Pro xxxxxx testovanou látku xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx x látkou x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx po xxxx 1 xxxxxx. Jedna x obou xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UVA/VIS xxxxxx x xxxxx 5 X/xx2 UVA (+UV xxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx (-XX xxxxxxxxxx). X xxxx xxxxxxxxxx xx xxx médium xxxxxxx xxxxxx kultivačním x xx dalších 24 hodinách kultivace xx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (neutral xxx xxxxxx, NRU) xx xxxx 3 xxxxx stanoví životaschopnost xxxxx. Pro xxxxxx x xxxx koncentrací xx stanoví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, vyjádřená xxxx xxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. X posouzení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XX) x x xxxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxx, xxxxxxx na xxxxxx XX50, xx. xx xxxxxxxxxxx inhibující xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x 50 % x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
1.6 XXXXXXXX JAKOSTI
Citlivost xxxxx vůči xxxxxx XXX, xxxxxxxxxx xxxxx: x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx citlivosti xxxx xxxxxx XXX. Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx při testu xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx, příští xxx se vystaví xxxxxx UVA x xxxxx 1 - 9 X/xx2 a xxxxx xxx se xxxxxx NRU stanoví xxxxxxxxxxxxxxx buněk. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx XXX záření 5 X/xx2 není nižší xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxx nejvyšší xxxxx XXX xxxxxx 9 X/xx2 xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx než 50 % životaschopnosti xxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx provádí xxxxxx xx xxxxx desáté xxxxxx buněk.
Citlivost xxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxx XXX, xxxxx xxxx: test splňuje xxxxxxxx jakosti, xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly (buňky x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx [Earl´s xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, XXXX] x 1 % xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxxx (XxXX) xxxx xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XXX) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% v xxxxxxxxx s neozářenými xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx experimentu v xxxxx (-XXX).
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: absolutní optická xxxxxxx (XX540 XXX) xxxxxx x NR xxxxxxxx negativních xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx 1 x 104 xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx x normální xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx průměrná xxxxxxx XX540 NRU x xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxx xxxx rovna 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: při xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx je xxxxx xxxxxxx souběžný xxxx xx známou xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Při xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx jako xxxxx xxx pozitivní kontrolu xxxxxx chlorpromazin (XXX); xxxxx xx tato xxxxx xxxxxxxxxx. Pro XXX testovaný dle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx tato xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: XXX xxxxxxx (+XXX): XX50 = 0,1 - 2,0 μx/xx, CPZ xxxxxxxxx (-UVA): EC50 = 7,0 - 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX), tzn. xxxxx hodnoty XX50, xx být minimálně 6.
Xxxxx XXX xx xxx souběžnou pozitivní xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx látky, xxxxx xxxx vhodné pro xxxxxxxxxxxxxxx chemické skupiny xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx. X xxxxxxx případě xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 a PIF xxxx MPE (xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 POPIS XXXXXX
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx použita xxxxxxxxxxxxx buněčná xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxx/x 3X3 xxxx 31, x xx xxx x XXXX nebo x XXXXX; ta xx proto doporučuje. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx s xxxxxxxx použít x xxxx xxxxx nebo xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx kultivační xxxxxxxx xxxxxx xxxxx jejich xxxxxxxxxxxx xxxxxx; xx xxxx třeba xxxxxxxx, xx jsou xxxxxx xxxxxx.
X xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx kontrolovat, xx xxxxxx kontaminovány xxxxxxxxxxxx, a smí xx použít xxx x xxxxxxx, že xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx UVA záření xxxx x xxxxxx xxxxxx narůstat, je xxxxx xxxxxxxx buňky Xxxx/x 3X3 x xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx xxxxx Balb/c 3X3 vůči XXX xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx popsaným v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx pasážování xxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. V případě xxxxx Balb/c 3X3 xx jedná o XXXX obohacený 10 % séra xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 xX xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 oC / 7,5 % XX2. Xx xxxxxxxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx dané buňky xxxx. buněčnou xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx kultur
Buňky xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx jednou xx xxxx použitím x xxxxx na fototoxicitu 3X3 NRU in xxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx x kultivačním xxxxx x takové xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxx (tj. xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk 48 xxxxx po xxxxxxxx) xxxxxxx ke xxxxxxxxxx (xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx). V xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx x 96 xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 x 104 xxxxx x jedné xxxxx.
Xxx každou testovanou xxxxx xx buňky xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx, které xxx xxxxxxxxxx celým xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxx (+XXX/XXX) x xxxxx je xxxxxxxxxx v temnu (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxx všech testech xx xxxxx xxx xxxxxxxxx genotoxického xxxx xxxxxxxxxxxxxx potenciálu je xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx fototoxikologie xxxxx xxxxx xxxxx, xxx xx k xxxx, aby xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx in xxxxx, bylo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx ani xx xxxxx, xxx xx xxxxxxx odůvodněné, xxx xx xxxxx xxxx prováděl s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.1.5 Testovaná xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx připravena, xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx se xx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xx xx xxxxx k xxxxxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx solném xxxxxxx (XXXX) nebo xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (phosphate xxxxxxxx xxxxxx, PBS), xxxxx - aby xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx během ozařování - nesmí obsahovat xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx barevné indikátory xX, xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx vodě xxxxxxx xxxxxxxxx, rozpustí se xx xxxxxxx rozpouštědle x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx koncentrace, x xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx solným xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, musí být xxxxxxxx v konstantním xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, xx. xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx rozpouštědlo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo ethanol (XxXX). Vhodná xxxxx xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx x nízkou xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xx však xxxxx xxxx pečlivě zvážit xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx případná xxxxxx x testovanou xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xx napomohlo xxxxxxxxxxx, xx se xxxxxx míchání xxxx. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 oC.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX světlem / xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x správná xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx v XXX x ve xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx záření XXX xx v xxxxx xxxxx méně xxxxxxxxxx, xx xxxxx vysoce xxxxxxxxxxx, přičemž xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx od 313 xx x 280 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx světelného xxxxxx xxxxx zásadní xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx vlnové xxxxx, xxx testovaná xxxxx absorbuje, x xxx byla světelná xxxxx (dosažitelná xx xxxxxxxxxx xxxx) xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Dále xxxxxxx být použité xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx sem x xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).
Xx optimální světelný xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx výbojky x xxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx - xx mají xx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxx imitují xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXX, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxx xxxxxx, kde xx xxxxxx XXX xxxxxxxxx nevyskytuje (UVA:UVB ∼ 2 : 1). Příklad xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx filtrovaného záření xxxxxxxxx simulátoru xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx na fototoxicitu 3X3 XXX xx xxxxx je x xxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxx před xxxxxx testem fototoxicity xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx daný xxxxx. Xxxxxxxxx UV-metru xx xxxxx kontrolovat, x xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, referenční XX-xxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Ideální xx, xxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx spektrální xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x kontroluje xx xxxxxxxxx širokopásmového XX-xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxx ovšem xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx validační xxxxxx xxxx zjištěno, že xxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx2 xx xxx xxxxx Balb/c 3X3 necytotoxická a xxxxxx dostatečně silná, xxx xxxxxxxxxx i xxxxx fototoxické látky. Xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx 50 xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 1,666 mW/cm2. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxx xx dávka xxxxxx XXX upravit xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx a byla xxxxxxxxxx x průkazu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxx xxxxxx (X/xx2) x 100
|
&xxxx; |
| &xxxx;
x (xxx) =
|
&xxxx;
________________________
|
&xxxx;
(1 X = 1 X s)
|
|
záření (mW/mc2) x 60
|
&xxxx; |
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxx převýšit xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx fototoxické xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx koncentracích xxxxxxx, xxx vyšších koncentracích xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (13). Xxxxxxx pH xxx xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (+XXX) x xxx něj (-XXX) xx třeba stanovit x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx, xxx xxxxxx závislosti xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx koncentrační geometrická xxxx (s konstantním xxxxxxxx xxxxxx).
1.7.3 Popis xxxxxxx
1.7.3.1 První xxx
Xxxxxxxx xx suspenze 1 x 105 buněk/ml x xxxxxxxxxxx médiu. Xx periferních jamek 96xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx 100 μl samotného xxxxx (= xxxxx xxxxx), xx ostatních xxxxx se dávkuje xx 100 μl xxxxxxx suspenze x xxxxxxx 1 x 105 xxxxx/xx (= 1 x 104 xxxxx na xxxxx). Xxx každou testovanou xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx - xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-UVA), xxxxx xxx stanovení fotocytotoxicity (+XXX).
Xxxxx se xxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 oC), xxx se vytvořil xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Tato xxxxxxxxx doba umožňuje xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx růst.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx inkubaci xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX xx každou xxxxx. Xxxxx xx 100 μx XXXX/XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxx rozpouštědlo (negativní xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxx koncentracích. Buňky x testovanou xxxxxx xx inkubují x xxxxx xx xxxx 60 minut (7,5 % XX2, 37 xX).
Xxxx testu x XXX (+XXX) se xxxxxxx xxx, xx xx xxxxx xx xxxxxxxx teploty xxxxxxx xx dobu 50 xxxxx xxxx víčko xxxxxxxx x 96 xxxxxxx xxxxxxx UVA x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx2 (= xxxxx 5 / xx2). Xxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx ventilátoru. Duplicitní xxxxxxxx (-XXX) se xx xxxx 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx XXX) xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x temném xxxx.
Xxxxxx xx odstraní x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx noc (18 - 22 xxxxx) xx inkubují (7,5 % XX2, 37 xX).
1.7.3.3 Třetí xxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx mikroskopem x xxxxxxx xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx xx změny xxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx. Tato kontrola xx doporučuje, aby xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, ale xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se tyto xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (XX)
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx předehřátého XXXX/XXX. Promývací xxxxxx xx odstraní xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μx xxxxx x NR x xxxxxxxx se xxx 37 xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 7,5 % XX2 xx dobu 3 xxxxx.
Xx inkubaci xx xxxxxx x XX xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX, xxxx xx xxx xxxxx x důkladně xxxxxxxx (xx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxx xx přesně 150 μx xxxxxxx na xxxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx dobu 10 xxxxx rychle třepou xx třepačce, xxxxx xx XX x xxxxx nevyextrahuje a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX xxx 540 xx za xxxxxxx slepého pokusu xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxx (xxxx. ASCII) xxx xxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXX A XXXXXXXX XXXXX
Xxxxx musí umožňovat xxxxxxxxxxx xxxxxxx vztahu xxxxxxxxxxx-xxxxxx při xxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxx ní. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, koncentrační xxxxxx a postup xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx údaje xxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx testovaná xxxxx xxxx xxx xx xx xxxxxxxxxx limitní xxxxxxxxxxx 100 μx/xx x xxxxxxxxxxx xx xxx (-XXX) xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx (+XXX) xxxxxx cytotoxická, xxxx xxxxx x xxxx, xx se xxxxxxxxxxxx rozsahy v xxxx xxxxxxx experimentu xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx. Pokud xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxx částí xxxxxxxxxxx (xxx xxx -UVA, xxx xxx +UVA), xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx opakovat.
Považuje-li xx opakování testu xx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx dosáhlo jasného xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x tomto testu xx příprava roztoků xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxx jeho opakování xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxxx, triturace, xxxxxxxxxx). Lze xxxx xxxxxxxx x změnách xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx, xxx xxxx ve xxxx xxxxxxx, může xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx.
1.9 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx je xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx k 50 % xxxxxxxx buněčného xxxxxx XX (XX50). Xx xxx učinit xxx, xx xx xx data koncentrace - xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vhodná xxxxxx xxxxxxxxxx regrese (xxxxxxx Xxxxxxx funkce xxxx xxxxxxxxxx regrese) xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx metoda xxxxxxxxx (14). Než xx xxxxxxx XX50 xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxxxxx xxxxxxx proložení. X xxxxxxx xxxxxxx XX50 xx také xxxxx xxxxxx grafické metody. X xxxxx xxxxxxx xx doporučuje použít xxxxxxxxxxxxxxxxx papír (osa x: xxx, xxx x: xxxxxx), protože xx této xxxxxxxxxxxx xxxx křivka xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.10 VYHODNOCENÍ XXXXXXXX (XXXXXXXXX MODELY)
1.10.1 Xxxxxxxxx model, xxxxx 1: xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX)
Xxxxx xx získají xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxx xx přítomnosti (+XXX), xxx za xxxxxxxxxxxxx (-XXX) xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxx podle vzorce
|
EC50 (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) PIF =
|
&xxxx;
____________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, kdežto XXX ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX, xxxxxx při -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx se XXX xxxxxxxxx, i xxxx xx jedná x xxxxxxxx, xxxxx indikuje, xx látka xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx tzv. "&xx; XXX", xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxxx xx xx maximální zkušební xxxxxxxxxxx (Xxxx) a xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx vzorce:
|
Cmax (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) > XXX =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
Xxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxx "&xx; XXX", pak xxxxx xxxxxxx &xx; 1 předpovídá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx XX50 (-XX), ani XX50 (+XX), xxxxxxx látka xxxxxxxxxx cytotoxicitu až xx xxxxxxxx zkušební xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx formální "PIF = *1", xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) PIF = *1 =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (+XX)
|
Xxxxx xx xx získat xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", xxxxxxxxxx xx, xx není xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx (b) x (x) je xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx, jichž xx xxx xxxxx dosáhlo.
1.10.2 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 2: xxxxxxx xxxxxxxxx (XXX)
Xx možno také xxxxxx novější verze xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu, xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx UV xxxxxx (13). V xxxxx modelu xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx modelu XXX x těch xxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx hodnotu XX50. X tomto xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxxx" (MPE) xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva. Xxx aplikaci xxxxxx XXX xxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v Xxxxxxx vyvinut speciální xxxxxxxxxx software, který xxx xxxxxxx xxxxxx.
1.11 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx (XXX ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) ukazuje, xx daná xxxxx xx fototoxický xxxxxxxxx. Xxxxx se x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx koncentracích xxxxxxx xxx 10 μx/xx, xx pravděpodobné, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx fototoxin xxxx xx xxxxxxx expozičních xxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (100 (x/xx), xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dalších informací. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxx, xxxx xxxxx x testování xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu, xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx fototoxicity 3X3 XXX in vitro (XXX &xx; 5 xxxx XXX &xx; 0,1) xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx podmínkách. V xxxxxxxxx, xxx by xx látka dala xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx koncentraci 100 μx/xx, xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx vivo se xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx reakce (XX50 + UV x XX50 - UV), xx xxxxxxxxxxxx dat xxxxxx. Xxxxxxx tomu xxxxx nebyla prokázána xxxxx xxxxxxxx (+XX xxx -UV) x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se nedalo xxxxxxxxx koncentrace 100 μx/xx, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xx xx xxxxx xxxxxx x xxxx xx se uvažovat x jiném, potvrzujícím xxxxx (xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx kůže xx xxxx nebo in xxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxx xxxx informace:
Testovaná xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx údaje x xxxxx XXX, xx-xx xxxxx,
- fyzikální xxxxxx a čistota,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti, xxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- zdůvodnění volby xxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx (XXXX xxxx XXX).
Xxxxx:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- číslo xxxxxxx xxxxxx, je-li xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxx záření XXX xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx x testu xx xxxxxxxxxxxx 3X XXX xx xxxxx používá.
Podmínky xxxxxx (x) - xxxxxxxx před ovlivněním x xx xxx:
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx média,
- podmínky xxxxxxxx (koncentrace CO2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxx xxxxxxxx (zpracování před xx a xx xx).
Xxxxxxxx xxxxxx (b) - xxxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx použijí v xxxxxxxxxxx ozařování XX/XXX xxxxxxx a xxx xxx,
- x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zdůvodnění nejvyšší xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxx x xxxxxxx působícího xxxxx (pufrovaný xxxxx xxxxxx),
- xxxx ovlivňování xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx),
- charakteristika xxxxxxxxxx x podrobnosti x xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx testovaného xxxxxxx,
- xxxxxxxxx XXX (x x W/cm2) xxx xxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx UV/VIS záření,
- xxxxx záření XXX (xxxxxxxxx x čas) x X/xx2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx kultur xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxx XXX:
- xxxxxxx xxxxx s XX,
- xxxx xxxxxxxx x XX,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- podmínky xxxxxxxx XX (extrakční xxxxxxx, doba xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx, xxx xxxxx se spektrofotometricky xxxxxxxxx optická hustota XX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxx (referenční), byla-li xxxxxxx,
- složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx spektrofotometrii (xxxxxx), xxxxx xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx jednotlivých koncentracích xxxxxxxxx látky, xxxxxxxxx x procentech xxxx xxxxxxxx životaschopnosti xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx νx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) získané xxxxxxxxxx experimenty +XXX x -UVA,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx: xxxxx možnosti xxxxxxx xxxxxx EC50 (+XXX) x EC50 (-XXX),
- porovnání xxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx získaných xx xxxxxxx ozařování XX/XXX xxxxxxx - xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (XXX),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (a) - xxxxxxxx negativní xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx,
- historické xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx:
- xxxxxxx EC50 (+XXX), XX50 (-UVA) a XXX látky xxxxxxx xxx pozitivní kontrolu,
- xxxxxxxxxx xxxxx látky xxxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx: xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-XXX) x PIF, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx X.41. byla xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Informace
Právní xxxxxxx x. 251/98 Xx. xxxxx xxxxxxxxx xxxx 1.1.1999.
Ve xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx právním xxxxxxxxx x.:
208/2001 Xx., xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx XX x. 251/98 Xx., kterou xx xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx
x účinností xx 22.6.2001
Xxxxxx předpis č. 251/98 Sb. xxx xxxxxx právním xxxxxxxxx č. 443/2004 Sb. x xxxxxxxxx xx 1.8.2004.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx není aktualizováno, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx změna xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 písm. x) xx n) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x chemických xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x o xxxxx xxxxxxxxx dalších xxxxxx.
2) Xxxxx č. 246/1992 Sb., na ochranu xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx znění xxxxxx x. 162/1993 Sb., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Sb. x x. 30/1998 Xx.
3) Směrnice Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx chemikálií. Xxxxx 4 - xxxx xx zdraví (XXXX Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxx xx Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Effects).