EPIS® Právní systém | Plné znění

Právní předpis byl sestaven k datu 31.07.2004.

Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Vyhláška

§1 §2 §3

Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod

B.1. Akutní toxicita orální (per os)

B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky

B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity

B.2. Akutní toxicita (inhalační)

B.3. Akutní toxicita (dermální)

B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)

B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)

B.6. Senzibilizace kůže

B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)

B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)

B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)

B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro

B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo

B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech

B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií

B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae

B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae

B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro

B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro

B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro

B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster

B.21. Test transformace savčích buněk in vitro

B.22. Dominantní letální test u hlodavců

B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích

B.24. Spot test u myší

B.25. Přenosné translokace u myší

B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)

B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)

B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)

B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)

B.30. Testování chronické toxicity

B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci

B.32. Test karcinogenity

B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity

B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test

B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test

B.36. Toxikokinetika

B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice

B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice

B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo

B.40. Leptavé účinky na kůži

B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro

INFORMACE

XXXXXXXX

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx

ze dne 16. října 1998,

xxxxxx xx stanoví xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx podle §4 xxxx. 1 xxxx. c) zákona x. 157/1998 Sb., x xxxxxxxxxx látkách x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x o změně xxxxxxxxx dalších xxxxxx:

§1

Tato xxxxxxxx stanoví xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxx přípravků xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx škodlivých, žíravých, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx reprodukci (dále xxx "toxicita xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků").¹⁾

§2

(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx uvedenými v příloze xxxx xxxxxxxx.

(2) Ke zjišťování xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků xxx xxxxxx i jiné xxxxxx, pokud xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx metody uvedené x xxxxxxxx 1, xxxxxxxxxx xxxx metody xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx²⁾ a xxxxxx xxxxxxxxxx Organizací pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx (OECD).³⁾

§3

Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx 1. xxxxx 1999.

Xxxxxxx:

XXXx. Xxxxx, CSc. x. x.

Příloha x xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.

Metody pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx

X. XXXXXXXXX XXXX

1. XXXXXXXX POJMY

1.1 AKUTNÍ TOXICITA

xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx 14 xxx) xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2 XXXXXX TOXICITA

xx xxxxxxxxx xxxxxx popisující xxxxx příznaky xxxxxxxx xx aplikaci testované xxxxx. Jsou to xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xx xxx xxxxxx, xx xx xxxxxxx podávané dávky xxxx být očekáván xxxxx těžkých xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx x xxxxx.

1.3 XXXXX

xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xxxxx nebo xxxxxxxxx) xxxx jako xxxxxxxx testované látky xx jednotku hmotnosti xxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx xx kilogram xxxxxxx xxxxxxxxx), xxxx xxxx konstantní dietní xxxxxxxxxxx (xxxx na xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx).

1.4 XXXXXXXXXXXXXX XXXXX

xx xxxxxxxx xx xxxx pevných xxxxxxxxx xxxxxx, kterou xx xxxxx xxxxx, xxxx xx to xxxxxxxxx xxxxxxx (včetně xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx.

1.5 DÁVKOVÁNÍ

xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx dávku, xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

1.6 XX₅₀ (STŘEDNÍ XXXXXX DÁVKA)

je xxxxxxxxxxx vypočtená xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx dobu smrt 50 % zvířat, xxxxxx byla xxxxxx. Xxxxxxx XX₅₀ xx xxxxx jako hmotnost xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx pokusného xxxxxxx (xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx).

1.7 XX₅₀ (XXXXXXX XXXXXX KONCENTRACE)

xx xxxxxxxxxxx vypočtená koncentrace xxxxx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxx x 50 % pokusných xxxxxx, xxxxxxxxxxxx po xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx XX₅₀ xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx standardním objemu xxxxxxx (xx.x^-1).

1.8 XXXXX

xx xxxxxxx pro "xx observed adverse xxxxxx xxxxx" (xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) x xx xx nejvyšší v xxxxxx xxxxxxx dávka xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx které xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.9 XXXXXXXX PO XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx x pokusných xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx podávání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látce, xx dobu xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.10 XXXXXXXX TOLEROVANÁ XXXXX (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX XXXX)

xx xxxxxxxx xxxxx, která x xxxxxx vyvolává xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx na xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx.

1.11 XXXXXXXXXX XXXX

xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx po aplikaci xxxxxxxxx xxxxx.

1.12 XXXXXXXXXX XXX

xx xxxxxxxx změn na xxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxxx xxx.

1.13 XXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX)

je xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx xxxxx.

1.14 XXXXXXXXX XXXX

xx vyvolání xxxxxxxxxx tkáňového xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky po xxxx xx 3 xxxxx xx 4 xxxxx.

1.15 XXXXXXXXXXXXXX

xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, metabolismu x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.16 XXXXXXXX

označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx do xxxx.

1.17 EXKRECE

xxxxxxxx proces(y), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx případně xxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx x xxxx.

1.18 DISTRIBUCE

xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) je xxxxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx.

1.19 XXXXXXXXXXXX

xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx chemická xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx v těle xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2. AKUTNÍ - XXXXXXXXX APLIKACE/SUBCHRONICKÁ X XXXXXXXXX XXXXXXXX

Akutní xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxx xxxxx různých xxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1 - X.5), xx kterých může xxx po jediné xxxxxxxx získán xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.

X xxxxxxxxxx na toxicitě xxxxx xxx zvolit xxxxx postupy od xxxxxxxxx testu xx xx kompletní xxxxxxxxx XX₅₀. Xxx inhalační xxxxxx xxxx limitní xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jednorázové xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx pevné xxxxx (xxxxxx X.1 xxx) x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (metoda X.1 xxxx). Při testování xx xxxxxx druhu xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx doplnit xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. V xxxxx xxxxxxx může xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx metoda xxxx xxxx xxx použito xxxxxxx počtu zvířat.

Xxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx aplikací (xxxxxx X.7, X.8 x X.9) xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx opakované xxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat xxx, xxx xx xxxxxxx co xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx testy xx xxxx pomoci xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx studií xx vyžaduje zkoumání xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.26 - X.30 x X.33).

3. XXXXXXXXXX - GENOTOXICITA

Xxxxxxxxxx xx vztahuje k xxxxxxx trvalých přenosných xxxx v xxxxxxxx xxxx struktuře genetického xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxx změny ("xxxxxx") xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx genů, xxxx xxxx nebo xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx aktivita xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx (bodové) xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v savčích xxxxxxx (metoda X.10).

Xxxxxxxxxx jsou xxxx xxxxxxx in vivo, xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx X.12) xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx dřeně (xxxxxx X.11). Xx však xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx vitro xxxxxxx, pokud nejsou xxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxx látky xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx nebo xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx ještě xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo k xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx. Xxxx studie xxx xxxxxx k xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx základním xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx.

Pro xxxx účely xxxxxxxx xxxxxx X.15 až X.25 xxx eukaryontní xxxxxxx xx xxxx x xx vitro, xxx xxxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Tyto xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x jiných účincích x xxxxxxxxxxx složitějších xxx xxxxxxxx používané x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx, xx další xxxxxxxxx xxxxxx mutagenity xx xxxxx naplánovat tak, xxx xxxxxxxx relevantní xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, případně karcinogenním xxxxxxxxxx testované xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx na xxxxxxx faktorech, včetně xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, výsledků xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx způsobů xxxxxxx xxxxx.

Xxx xxxxxxxxxx rizika dědičných xxxxxx u savců xxxx x dispozici xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx savčím xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx, xxxx. specifický locus xxxx x xxxx xxxxxxxxxx mutace xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxx (nezahrnuto x xxxx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi, xxxx. xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxxx B.25). Těchto xxxxx lze použít xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx látky xxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx, zvláště pro xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xx třeba xx xxxxxxxxxx xxx takovou xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxx stanovení genotoxicity xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx danou xxxxxxxx po projednání x Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

4. XXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx karcinogeny, x xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Předběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx při opakované xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx X.7, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx. hyperplazie x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx mohly xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxxxxx identifikovat xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, podrobnější xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.32) xxxx xxxxx x kombinované xxxxxx xxxxxxxxx toxicity/karcinogenity (xxxxxx X.33).

K xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx buněk xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x kterých xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx - xx xxxx (xxxxxx X.21). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx.

5. XXXXXXXXXXX TOXICITA

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxx zhoršení xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a samic (xxxx xx plodnost) xxxx xxxxx nedědičných xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx (xxxxxxxx toxicita) xxxxxxxxxx xxxx teratogenitu x xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx X.31) xxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vývojové xxxxxxxx xxxxxx hlavně s xxxxxxx xxxxxxxxx. Alternativně xxxxx xxx xxxxxxx xxxx způsoby xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx vlastnostech testované xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx způsobu expozice xxxxxxx. X takových xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxxxxx vhodně xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx test (xxxxxx X.35) xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.

6. XXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx způsoby, xxxx. xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx změn x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx z xxxxx akutní xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7) xxxxxxxx také xxxxxxxxx neurotoxického účinku. Xxxxxx xx měla xxxxxx odhalit xxxxxxxx xxxxx s neurotoxickým xxxxxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Navíc xx důležité vzít x xxxxx specifické xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx x jiných xxxxxxxx xxxxxxxx. Bylo xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pozdní xxxxxxxx, xxxxx xx posuzována xxxxxxxx X.37 a X.38 po xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.

7. XXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx různými xxxxxxx, xxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx anebo podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xx následek xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx by xxxx xxxxxx odhalit xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

8. TOXIKOKINETIKA

Toxikokinetické xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx x vyhodnocení xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x výsledky xxxxx pomoci xxx xxxxxx dalších xxxxxx xxxxxxxx. Nepředpokládá xx, xx xxxx x xxxxxx případě zapotřebí xxxxxxxx všechny parametry. Xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bude xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxikokinetických xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx). U některých xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx změny x xxxx sekvenci nebo xx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx studie x xxxxxxxxxxxx podáním (xxxxxx X.36).

Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx odhad xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx také xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických x toxikokinetických xxxxxx.

9. XXXXXXXXXXXXXXX TESTOVANÉ XXXXX

Xxxxxxx testované xxxxx, xxxxxx významnějších nečistot, x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx informace xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx podávání, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x pro xxxxxxxxxx x látkou x xxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x také xxxxx xxxxx xxxxxxx nečistot) x dávkovacím médiu x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

Všechny xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, fyzikálně-chemických vlastností, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx zahrnuty x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx.

10. XXXX X ZVÍŘATA

Xxx xxxxxxxxxxxxx testy xx xxxxxx kontrola xxxxxxxx xxxxxxxxx, ve xxxxxx xxxx xxxxxxx chována, x správná péče x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

10.1 XXXXXXXX XXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxx x prostorech xxx xxxxxxx zvířata xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhům. Xxx xxxxxxx, xxxx a xxxxxxx je vhodná xxxxxxx xxxxxxxxx 22 ^xX ± 3 ^xX při xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx králíky xx xxx xxxxxxx 20 ^xX ± 3 ^xX xxx relativní xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %.

Xxxxxxx experimentální xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx teplotu. Xxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx podmínkách xxxxxxx x popisu testované xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxxx toxických xxxxxx xx xxxxx sledovat xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx x xxxxx xx x závěrečné zprávě x xxxxxxx pokusu.

Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x tmy xx dvanácti hodinách. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx a xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, mohou xxx xxxxxxx xxxxxxx jednotlivě xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jednoho xxxxxxx, xx více xxx 5 xxxxxx x xxxxx kleci.

Xxxxxxxxxx součástí xxxxxx x pokusech xx xxxxxxxxx jsou údaje x xxxxxxx chovu x xxxxxxx x xxxxx xxxxxx chovaných x jedné kleci xxx xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx, tak xxxxx následující xxxx xxxxxxxxxx.

10.2 XXXXXXXX XXXXXX

Krmení xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Podávají-li se xxxxxxxx studované xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx vzájemným xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx reakce xx nutno vzít x úvahu xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx konvenční laboratorní xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxx. Pokud xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x potravě, xx xxxxx xxxx přizpůsobit xxxxx diety.

Xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx přítomny x xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx se xxxxx xxxx xxxxxxxx.

11. XXXXXXX XXXXXX

Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Snížení xxxxx x omezení xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxx dosáhnout např. xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1.bis) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (X.1.xxxx). Xxxxxx x pevnou xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx menší xxxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx vyžaduje x xxxxxxx o 70 % xxxxxx xxxx xxx xxxxxx X.1.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podávat v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx vlastností.

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x testech xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1, X.2 x X.3), ale také x xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx X.11 a X.12), xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx zbytečně xxxxxxx xxxxxxx.

Xxx testování xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxx xxxxxxxxx nebo xxx xxxxxx xx xxxxxx u jednoho xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx vědecké xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx fyzikálně-chemických vlastnostech xxxxx, na výsledcích xxxxxx xxx provedených xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx validizovaných xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxx, xxxx-xx s xxxxxx provedena xxxxxx xxxxxx kožní toxicity x xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx (xxxxxx X.3) x xxxxxx-xx pozorováno xxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx kožní xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4) xxxx xxx xxxxxxxx; látky, xxxxx prokazatelně xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4), xxxxxxx xxx dále testovány xx xxxxxxxx xxx.

Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupy, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx testy na xxxxxxxxx x budou xxxxxx xxxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx, budou xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxx.

Pokud xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, musí být xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, následnou xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx podle nebezpečnosti xxxxx v xxxxx xxxxx tam, kde xx xx xxxxx.

12. HODNOCENÍ A XXXXXXXXXXXX

Při hodnocení x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx in xxxxx xx xxxxx mít xx zřeteli, že xxxxx extrapolace xx xxxxxxx xx možná xxx x xxxxxxx xxxx; xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx, mohou xxxxxxx x ověření xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx mohou být xxxxxxx pro klasifikaci x xxxxxxxxxx nových x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx vlastností xxxxxxxxxx x kvantifikovaných xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxx xxxxx být xxxx xxxxxxx pro xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx vložen xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001

X.1. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (PER XX)

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx xxxxxx sondou, x xx xxxxx skupině xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx orientačního xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x uhynutí. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx pokusech na xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu a xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podávat x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, o xxxxxxx xx známo, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx dráždivých xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých experimentálních xxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx, připraví se xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx látky ve xxxxxxx vehikulu. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx použití xxxxxxx xxxxxxx, další xxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx, teprve xxxxx xxxx další xxxxxxx xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx před testem xxxx xxxxx něho xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xx objem xxxxx xxxxxxxx překročit 10 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx vodné xxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxx xx 20 xx.xx^-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx látky podávané x xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx úpravou xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx dávek. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx lokální xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. Xx xxxxxxx xxxxx xx x xxxx xxxxxxx xxxxxx variační rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx hodnoty.

1.2.2.2 Počet xxxxxxx

Xxx každou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx samic, xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxx xx k xxxxxxxxx informace, že xxxxx z xxxx xxxxxxx xx výrazně xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Poznámka: Xxxxxxxxx-xx xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, než xxxx hlodavci, xxxx xx xx zvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Dávky xx xxxxx xxxxxxx zvolit x xx xxxxx xxxxxxxx, aby xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx středně xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx xxxxx

Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx tři, x xxxx být xxxxxx odstupňovány xxx, xxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx x mortality. Xxxxxxx xxxxx xxxx stačit xx xxxxxxxxxx vztahu xxxx xxxxxx x xxxxxxx, x xxxxx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX₅₀ x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

S xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx limitní test xxxxxx dávkou nejméně 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 samců x 5 xxxxx x xxxxxxxx xxxx popsaných xxxxxxx. Pokud podaná xxxxx xxxxxxx uhynutí, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx úplné studie.

1.2.2.5 Xxxx pozorování

Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx stanovit xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx prodloužit. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx, a xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx tendence k xxxxxxxx mortalitě.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxx podáním xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. X zvířat x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx; přístup x xxxxx xxxx xxxx omezen. V xxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx x jedné xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx najednou, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Po xxxxxx xxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ještě 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, může xxx xxxxxxx - podle xxxxx xxxxxx období - potravu x xxxx zvířatům xxxxxxxxxx.

Xx podání xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Během xxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx pozorování. Xx nezbytné xxxxxxxx x zaznamenat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx aplikaci.

Xxxxxxx xxxxxx během xxxxxxx xxxxxxxxxx dne xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vyšetření. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx usmrcení xxxxxxx xxxx umírajících xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, sliznic, dýchání x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, slinění, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx, xxxxx xxxxx pokusu xxxxxx, i xx, xxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx. Je-li xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx jednom xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví x xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx zvířat. Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxxxx informace, že xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx zvířatech xxxxxxx pohlaví je xxxxx vynechat.

2. XXXXX

Xxxxx xx sestavují xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, počet xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx otravy, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx nálezů. Stanovení xxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx intervalech x x xxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx vyvolané xxxxxxx xxxxxx, xx zaznamenávají xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx látkou. XX₅₀ xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Vyhodnocení údajů xx melo zahrnovat xxxx vztah, xxxxx xxxxxxxx, xxxx expozicí xxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, změn tělesné xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxx, potrava xxx.

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx použije) x koncentrace,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx uhynulých xxxxxx, počet zvířat x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),

- doba uhynutí xx podání xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířat - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxxxx XX₅₀ xxx to xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx úplný pokus, x to xxx 14xxxxx pozorování (x xxxxxxxx xxxxxx výpočtu),

- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX₅₀, xxxxx xx xxx xxxxxxxxx,

- křivky xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx x xxxx xxxxxxxx (pokud je xxxxxxxxx xxxxx metodou xxxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx všech xxxxx xx xxxxxx pohlaví,

- rozbor xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mohlo xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx testu xx vypočtenou xxxxxxx XX₅₀),

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.1. xxx XXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ (XXX XX) - XXXXXX XXXXX XXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx

Xxxx xxxxxx toxicity xxxxxxxxx informace o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx během xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx testované xxxxx.

Xxxxxx x fixní xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx sekvenčním xxxxxxxx sledují xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xx dávku. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxx xxxxx a toxicity, xxxxxx odhadu xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Normálně xx v xxxx xxxxx xxxxx nepoužije xxx xxx xxxx xxxxxx.

X xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx orálně sondou xxxxxxxx pěti samců x xxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxx dávek: 5, 50, 500 xxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx hmotnosti. Použitá xxxxx se odvodí z xxxxxxxxx xxxxxxxxxx studie, x xx jako dávka, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx "xxxxxxx toxicitu" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx úvod xxx 1.2), xxx ne xxxxxxx.

Po podání xx pozorují xxxxxx. Xxxxxxxx vybraná xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx toxicitu, xxx xxxxxx xxxxxxxxx, není xxxxx žádné další xxxxxxxxx. Když xx xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx otestuje na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxx nebo když xxxxxxx toxická xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx utracení, xxxxx se xxxxx xxxxxxxx na nejbližší xxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxx xxxxxx umožňuje xxxxxxx "diskriminující dávku" (xxx xxxx X - Všeobecný xxxx xxx 1.2), xx. xxxxxxxx x předem xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx možno xxxxx, xxxx by xxxxx k xxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx).

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, x xxxxxxx je xxxxx, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

1.2.1.1 Xxxxxxx zvířata

Xxxx xx přednost potkanům, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx tomu.

Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat. Na xxxxxxx xxxxx xx x obou xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx stačí xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx každého x xxxx xxxxxxx.

1.2.1.2 Příprava x xxxxxxxx xxxxx

Xxxxx je xxxxx, xxxxxxxx xx roztok xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx roztoku, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, teprve xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx vehikulích xxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxx nebo xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti. X hlodavců by xxxxx neměl normálně xxxxxxxxx 10 ml.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; výjimkou xxxx vodné roztoky, xxxxx xx možno xxxxxxx xx 20 xx.xx^-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx podávané x xxxxxxx xx se xxxx minimalizovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Potkanům xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx testem; přístup x xxxxx vodě xxxx xxxxxx. X xxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx látka xx xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx dávce. Xxxx-xx xxxxx podat xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx aplikovanou xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ještě 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx xx látka xxxxxxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx - potravu x xxxx xxxxxxxx poskytnout.

1.2.2 Xxxxx postupu

1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx používají xxxxxx, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx údaje, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Dávky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx dalšímu xxxxxxx. Všechna xxxxxxx xx xxxxxxx pozorují x cílem xxxxxxx xxxxxxx otravy xxxxxxx xx sedm xxx; xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx, zvíře xx xxxx xxxxxxxxx ještě xx xxxxxxx xxxx xxx. Posuzují se xxxxxxxxxxx výchozí xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx^-1. Xxxxxxxx zvolená xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx nejbližší xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx nutné podat xxxxx xxxxxxx jednu xxxx více xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Tento xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxx(xxx) dávek, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx otravy, x x nejmenší xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx dávku xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx k dispozici, xxxxxxxxxx se použít xxxx xxxxx xxxxx 500 xx.xx^-1. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxxx, vyšetřuje xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx 2000 xx.xx^-1, xx xxxxxxxxxx studie xxxxxxxx x xxxxxx studii xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx jsou xxx použití xxxxxxx xxxxx (např. 500 xx.xx^-1) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx dalšímu zvířeti xxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. 50 mg.kg^-1). Xxxxxxxx toto xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx určenými xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx, že je xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx více než 5 zvířat.

1.2.2.2 Hlavní xxxxxx

Pro xxxxxx xxxxxxxxxxxx dávkovou hladinu xx xx xxxx xxxxxx nejméně 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx letálních dávek xxxxxxxxx látky.

Dávka, xxxxx xxxx xxxxx x testu, má xxx zvolena x xxxxx xx 4 xxxxxxx úrovní dávek, xxxxxxxxx 5, 50, 500 nebo 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx by měla xxx xx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nikoliv xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů); xxxxxxx uhynutí xxxxxx xxxxxxxx, ale xxxx xxx zaznamenána. Xxxxxxxx xxxx dávka xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx dalšího xxxxxxxxx.

Xxxx podání zvolené xxxxx nevyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx znovu xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx dávek. Xxxxxxx xx xxxx měla xxx dále xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx bylo xxxxxxxxx. Xxxxxxxx těžká xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířat xxxx xxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx vlivem xxxxx, xxxx xx být xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx další nižší xxxxxx dávek. Opět xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, by xxxx xxx pozorována po xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx provádějí x zaznamenávají systematicky. Xxx xxxxx zvíře xx vedou xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxx a zaznamenat xxxxxx účinek aplikované xxxxx x xxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxx xx xxxxxxxx.

Doba xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx stanovit rigorózně. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxx zotavení. Dobu xxxxxxxxxx xx možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx a xxxx xx uhynutí, xxxxxxx xxx, kde xx xxxxxx tendence x pozdnímu vzniku xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx vyšetření xx xxxxx xxxxxxxx nejméně xxxxxxx xxxxx den xx xxxxxx xxxxx x nejméně xxxxxxxxx xx xxx další xxx. Zvířata xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx. Častější xxxxxxxxxx xxxx prováděna xxxxx několika xxxxxxx xxx xx podání xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx vykazují xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, když je xxxxxx, xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx se xxxxxxxx na xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání a xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx věnovat xxxxxxx, křečovým xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, letargii, xxxxxx a xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx provede xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xx xxxxx 3 xxx x potom xxxxxx týdně. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx během xxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxxxx do xxxxx xxxxx, xx xxxxx a pitvají. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx to xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se tkáně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.

X xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky.

X xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx 5 xx.xx^-1 (xxxx jestliže xxxxxxxxxx xxxxxx naznačuje mortalitu xxx této xxxxx), xx xxxxx dále xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx x orientační x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Z xx xxxx být patrný xxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxxx; počet xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx během xxxxx xxxx utracených x xxxxxxxxx xxxxxx; popis xxxxxxxxx xxxxxx; pro xxxxxx studii, xxx xxx pozorován xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx testované xxxxx; xxxxxx průběh xxxxx xxxxxxxxx účinků; xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx než xxx, je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou látkou, xxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx pokusu má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx informace xxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,

- experimentální xxxxxxxx,

- úrovně xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x koncentrace,

- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx úrovní xxxxx,

- xx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x podle xxxxxx xxxxx (počet xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx; případně xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx, stupeň a xxxxxx xxxxxx),

- xxxxxx průběh xxxxxxx xxxxxxxxx příznaků a xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,

- pokud xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, doba úhynu xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx a kritéria xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- diskuse xxxxxxxx,

- interpretace xxxxxxxx, včetně xxxxxxxx xxxxxx toxicity x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx hladiny xxxxxxxx x xxxxx.

3.2 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx

Xxxxx	Výsledky	Xxxxxxxxxxxx
5 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx	Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % přežití; xxxx xxxxxx xxxxxxxx	Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx jedovaté Xxxxx, xxxxx xxxx jedovaté Xxx xxxxxxxx xxx 50 xx.xx^-1
50 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Xxxx xxx 100 % xxxxxxx	Xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx velmi xxxxxxxx. Xxx výsledky xxx 5 mg.kg^-1
	100 % xxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx	Látky, xxxxx xxxx xxxxxx škodlivé Xxx xxxxxxxx x 500 xx.xx^-1
500 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Xxxx než 100 % xxxxxxx	Látky, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx výsledky x 50 xx.xx^-1
	100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx	Xxxxx, které xxx považovat xx xxxxx bez xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx Viz xxxxxxxx u 2000 xx.xx^-1
2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x nebo xxx xxxxxx xxxxxxxx	Xxx xxxxxxxx x 500 xx.xx^-1 Látky, xxxxx nemají xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx

B.1. xxxx XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX STANOVENÍ TŘÍDY XXXXXX TOXICITY

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx xxxxxxxxxxx dávek x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx výsledků xxxxxxx. Kromě xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx stanovených xxxxx, xxxxx lze xxxxxx buď xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxx rozhodovacího xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx z těchto xxxxxxxxxxx dávek xx xxxxx uvážit, xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxx pevně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxx určena pro xxxxxxx přesné XX₅₀. Xxxxxxxx stanovení rozsahu xxxxxxx, xx kterém xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx smrt xxxxx xxxxxx xx i x xxxx metody xxxxxxx kritériem účinku. Xxxxxxxx testu mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx x sekvenčnímu xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx mohlo xxx xxxxx xxx postup xxxxxxx v xxxxxx B.1. Hlavní xxxxxxx xxxx metody xx xxxxx spotřeba xxxxxx xxx u xxxxxx xxxxxx toxicity (orální)(B.1) x než x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1 bis).

1.2 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx ze xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx postupně, v xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxx předběžnou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx úhynu xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx kroku, x.x.

- není zapotřebí xxxxx xxxxx testování;

- xxxxx krok bude xxxxxxxx se stejnou xxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx pohlaví;

- xxxxx xxxx bude xxxxxxxx x vyšší xxxx nižší xxxxxx xxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxx náhodně xxxxxxx, označena tak, xxx xxxx možná xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx mohla xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx podmínky. Xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx ve xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx, ale xxxxx xxxxxx x xxxxx kleci xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx zvířatům x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx kanylou.

Pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx suspenduje xx xxxxxxx nosiči. Doporučuje xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx rostlinném xxxxx (xxxx. kukuřičném) x pak roztoku x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx nevodná xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxx xxxx aplikováním xxxxx xx určitou xxxx bez xxxxxxx (xxxx. potkani přes xxx a myši 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx xx xxxxxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx březí.

Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.

1.3.2.2 Xxxxx x pohlaví

Pro xxxxx krok xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxxx xxx použito xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.3.2.3 Xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx ze xxx xxxxxxx úrovní, xxx. 25, 200 x 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx. Výchozí xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx, aby x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx alespoň xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxxxxx. X závislosti xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 1.

Xxx xxxxx xxxxxxx x výchozí xxxxx xx třeba xxxxxx veškeré xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx struktury x xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxx naznačují, xx úmrtnost xx xxxxxxxxxxxxxxx i při xxxxxxxx úrovni xxxxx (2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), pak se xxxxxxx xxxxxxx test. Xxx nejsou xxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xx - s ohledem xx pokusná xxxxxxx - použít xxxxxxx xxxxx 200 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.

X některých xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx zpřesnit získanou xxxxxxxxx, xxx xxx xx dovoluje xxxx x třemi xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxx případech xx xxxx uvažovat x xxxxxx testování xxx xxxxxxxxxxx pevných dávkách xx výši 5, 50 xxxx 500 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx xx aplikovat xxxxx, x kterých je xxxxx, xx způsobují xxxxx leptavými xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx.

Xxxxxx interval xxxx xxxxxxxxxxx skupinami xx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx, xx trvání x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Testování xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx, xx zvířata xxxxxxxxx xxxxx přežila.

1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx test x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx se provádí xx xxxxx zvířatech xxxxxxx pohlaví. Xxxxx xxxxx x uhynutí xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxxx 200 mg.kg^-1 (xxxx 500 xx.xx^-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.3.2.5 Doba xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx obvykle xx xxxx 14 xxx, xxxxx případů xxx xxxx xxx xxxxxxx vyloučena x xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxx x délky xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx objeví a xxxx xxxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxx-xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxx zvíře.

1.3.3 Xxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx zvážena. Po xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxx určité xxxx, xxxx xxx - x závislosti xx xxxxx xxxx xxxx - nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x vodu.

Maximální objem xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx podán najednou, xxxxxx xx velikosti xxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx neměl xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx objemu xx třeba xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxx, xxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, je možné xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx testování jsou xxxxxxx x Xxxxxxx 1.

1.3.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxx pozorování xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx (xxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx, a xxxx xxxxxxx jednou xxxxx. Xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx vykazující xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx třeba humánně xxxxxxx: xxxx zvířata xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Xx xx byla zvířata xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx nebo byla xxxxxxxx xxxxx, dobu xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxx pozorování xx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx příznaky toxicity. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx kůži a xxxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxxx, x xxxx xx dýchacím, xxxxxxxx, vegetativním x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx aktivitě a xxxxxxx. Xxxxxxxxx je xxxxx věnovat výskytu xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, letargie, xxxxxx x xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx systematicky zaznamenávána: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx jednotlivé xxxxx.

1.3.3.2 Xxxxxxx hmotnost

Všechna xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx a xxx xxxxxxx jednou xxxxx. Xxxxxxxx xx x zaznamenávají změny xxxxxxxxx. Na xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx zvážena před xxx, xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.3.3.3 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x utracených xxxxx testu, se xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xxxx zaznamenány xxx xxxxx zvíře xxxxxx. Xxx získání xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx 24 a xxxx xxxxx.

2. SBĚR X XXXXXX XXXXX

X xxxxxxxxx xxxx být údaje x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxx xxxxx shrnuty xx tabulkové formy, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx nebo utracených x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků, x xxxxxxx nálezy.

Všeobecné xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx výsledků xxx xxxxxxxxxxx je xxxxxxx x Dodatku 2.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Zpráva x pokusu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx získány:

Pokusná xxxxxxx:

- živočišný xxxx/xxxx;

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx-xx xxxx;

- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;

- xxxxx, podmínky xxxxx, xxxxxxx atd.;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx testování:

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxx xxx voda;

- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx (xxxxxx druhu x zdroje);

- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (xxx. xxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x trvání xxxxxx);

- xxxxxx a xxxxxx xxxxxx příznaků xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx:

Xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx:

4. XXXXXXXXXX

Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx x metodou XXXX XX 423.

XXXXXXX 1

XXXXXX XXXXXXXXX

1. Xxx xxxx xxxxxxx x xxxx 1.4.2.3, xxxxxxx xxxxx xx měla xxx xx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx uhynutí xxxxx u xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx informace:

- xxxxx o xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx x jiných xxxxx xxxxxxxx x

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx.

2. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx dávku. X xxxxxxxxxx na počtu xxxxxxx utracených nebo xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx šipky.

3. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 25 xxxx 200 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx xxxxx pouze xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx 5 zvířat xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx pitvou xxxxxx xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxx x podanou xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx třeba pokračovat x xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx dávky.

4. Xxxxx xx xxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jedno xxxxx xxxxxxx pohlaví, xx xx xxxxxxxxxxxx, xx hodnota XX₅₀ xxxxxxxx dávku 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx jen hraniční xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx příznaky x xxxxxx zvířat xxxxx xxx xxxxxxx xxx klasifikaci odpovídající xxxxxxx XX₅₀ ve xxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx testování xx xxxxxx xxxxxx dávky.

5. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx stanovenými dávkami (xxxxxxxx 2). Této xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx k xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx testování xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1.

Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 25 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx

X rámečcích xx udána dávka, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx).

Xxx rámečky xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx pokračuje xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx provede na xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x příslušném xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 2.

Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx testu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkou.

Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx^-1 tělesné hmotnosti

V xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx, 2 - pohlaví zvolené xxxx druhé).

Pod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx pokračuje xx směru šipek xx do xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 2.

Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx doplňkovou xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx provede xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxx testování x výchozí xxxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx druhé).

Pod xxxxxxx je počet xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx uhynulých xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx do xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx 1 - Ukončení xxxxx: Klasifikace se xxxxxxx na základě xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Dodatku 2.

Xxxxxxxx 2 - Pokračování xxxxx x příslušnou xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx rámečku.

DODATEK 2

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx založených xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1

X rámečcích xx xxxxx dávka, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).

Xxx xxxxxxx je počet xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3).

Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx "XXXXX XXXXX TESTOVÁNÍ" v xxxxxxxxxx tohoto xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx klasifikaci. Xx xxxxxxxxx xxxxx varianty 1 xx příslušná xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx nedosáhne příslušného xxxxxxx. (Xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx klasifikace. Ležatá xxxxxxx znamená, xx XX50 xx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.)

(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx tělesné hmotnosti

(b) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 200 xx/xx tělesné hmotnosti

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx variantě 1

x) Xxxxxxx dávka 25 xx/xx tělesné xxxxxxxxx

&xxxx;

x) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

x) Xxxxxxx dávka 2000 xx/xx hmotnosti

X.2. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX)

1. METODA

1.1 Xxxx

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, tenzi par, xxxxxxx xxxx, teplotě xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x výbušnosti (jsou-li xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx látky

1.2 Xxxxxxx metody

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx exponováno xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, a xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx pokusu xxxxxx, x xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

Xxxxxxx se závažnými x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x takovým xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx následkem xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx vlastností.

1.3 Xxxxx xxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se zdravá xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx potřebného xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx nevyžaduje xxx xxxxxxxxxxx expozičního xxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Pevné xxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx velikosti. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx k testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby x ovzduší xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; x xxx xxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx jiná xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx xxxx, xx možno xx xxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud nejsou xxxxx xxxxxx proti xxxx. Xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty (xxx každé pohlaví xxxxxx).

1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x akutních xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vyšších xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx použití xxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxx x xx třeba xxxxxxx, xxx nebyly xxxxxxxxxx xxxxx toxické xxxxx. X těchto testech xx xxxxx xxxxxxx xx podávání xxxxxxxxx xxxxx testované látky.

1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

Má xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx dávek, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, aby xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x, xxxxx xx xx xxxxx, xxxx umožnit xxxxxxxxx XX₅₀ s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx-xx po 4 xxxxxxxx expozici 5 samců x 5 samic plynu x xxxxxxxxxxx 20 xx.x^-1 nebo xxxxx xx aerosolu xxxxxx xxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx 5 xx.x^-1 (xxxx - x xxxxxxxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx rizika xxxxxxx - při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) během 14 xxx k žádné xxxxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxx, považují se xxxxx xxxxxx za xxxxxxxx.

1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxx 4 xxxxxx.

1.3.2.6 Xxxxxxxx

Xxx xxxxxx xx xxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx zařízení, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx konstruovat tak, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx shlukování xxxxxx x aby xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx maximální. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx x xxxxxx celkový xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx boxu. Je xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx dva xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx cestami.

1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx ji xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx záviset na xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxx vzniku x na trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx možno xxxxx potřeby xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx je xxxx, xxx xx objeví x opět xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, stejně xxxx xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx zpožděné xxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xx xxxx 4 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxx. Teplota xxxxx pokusu má xxx 22 ^xX ± 3 ^x X. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx být xxxxxxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx to xxxx xxxxx (xxxx. experimenty x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx tlaku xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky do xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx nepodává xxxxxxx xxx voda.

Používají xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dosaženo xx nejrychleji. Xxxxxxxxxx x xxxxxx boxu xx zajišťovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:

(x) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx),

(x) skutečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxx v xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx expozice (xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxxxx xx vysoké koncentraci, xxxxx xxxxxxxxx častější xxxxxxxxxxxx). Během xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx hodnoty x xxxx xxx ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx xxxxxx kolísání. Xx xxxxx xxxx trvání xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx částic x aerosolů, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxx, xxx to pokus xxxxxxxx (ale xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx),

(x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx kontinuálně.

Xxxxx xxxxxxxx x xx jejím skončení xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx protokol. Xxxxx xxxxxxx dne xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Minimálně xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx sloužit xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx, např. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo umírajících xxxxxx.

Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx, srsti, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx vnějšímu xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx uhynutí je xxxxx xxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx xx expozici xxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx všem změnám xxxxx i xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xx zaznamenávají x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný počet xxxxxx na počátku xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx vykazujících další xxxxxxxx toxicity, popis xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x zaznamenat, xxxxx xxxxxxx přežijí xxxx než xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx humánně xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xxxx zaznamenána xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. LC₅₀ xx xxxxxxx uznávanou xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxx xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx a výskytem x stupněm xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, změn xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu

Zpráva x průběhu xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx informace:

- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx, atd.,

- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx o xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx hodnotami a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx:

a) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x inhalačním xxxxxxxx;

x) xxxxxxx x xxxxxxx vzduchu;

x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx inhalačního xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx);

Pozn.: xxx xxxxxxxx aerosolům látek x roztoku (xxxx. xx xxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx, pokud xx xx xxxxx, koncentraci xxxxxx látky xx xxxxxxxx.

x) povaha xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxx;

x) skutečná xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx;

x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx průměru (XXXX) a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX);

x) xxxx xx xxxxxxxx rovnováhy;

x) xxxx expozice;

- xxxxxxx xxxxxxxxx reakcí xxxxx pohlaví x xxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx, xxxxx x pokuse xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx);

- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxxx;

- hodnota XX₅₀ xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx metody xxxxxxx);

- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pro XX₅₀ (pokud xx xxxxx xxx stanovit);

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxx metoda xxxxxxxxx);

- pitevní xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x humánních xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX₅₀);

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.3. XXXXXX XXXXXXXX (DERMÁLNÍ)

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx látka xx nanáší xx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx účinky x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x zvířata, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.

Xxxxxxx xx závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x takových xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxxxxx xxxxxxx bolest x xxxxx následkem xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx 24 xxxxx xxxx zahájením xxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx ostříhá xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx holení xxxxx je xxxxx xxxx xx to, xxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx) xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx se připraví xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, případně připravenými x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou xxxx vhodným vehikulem, xxx byl dobrý xxxxxxx x xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nutné brát x úvahu xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxx, v jaké xxxxx xx xxxx xxxx látka dostat xx styku x xxxxxxx xxxx, x xx xxxxx relevantních xxxxxxx xxxxxx ten, xxxxx xxxxxxx usnadňuje xxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx neředěné.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Pokusná zvířata

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx. Xxx xxxxxx i xxxx živočišné xxxxx, xxxxx xxxx xxx xx důvody. Xx xxxxx xxxxx známé xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Počet x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx samic, xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x akutních xxxxxxx toxicity xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx se zvážit xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Dávky xx xxxxx xxxxxxx zvolit x xx xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx toxické xxxxx. X xxxxxx testech xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx letálních xxxxx testované xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Má být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxx, x mají xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tak, xxx vznikly xxxxxxxxx xxxxxxx se zřetelným xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků x xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx nebo leptavé xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx, x xxxxx xxxxx umožnit xxxxxxxxx LD₅₀ s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Limitní xxxx

Xxx provést xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx skupinách 5 xxxxx x 5 xxxxx x použitím xxxx xxxxxxxxx postupů. Xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx studii.

1.2.2.5 Xxxx pozorování

Xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 14 dní. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Měla xx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje otravy x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx možno xxxxx xxxxxxx prodloužit. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x vymizí x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx tam, xxx xx patrná xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxx jednotlivě x xxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx 10 % celkového xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx; mělo xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxx této xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx po xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x kůží xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx obvazu x nedráždivé náplasti. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxx xx zabránilo orálnímu xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx omezení xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx, xxxxx možno xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx zaznamenávat. Xxx xxxxx xxxxx xx třeba xxxx xxxxxxxxxx záznamy. První xxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx pracovní xxx je xxxxx xxxxxxx pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mají sloužit xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx slabých či xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx aplikace, xxx a xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx funkce xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, letargii, xxxxxx x komatu. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, i xxxxx xxxxxxx až xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají x xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx pohlaví

Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx jednom xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví, xxx xx zjistilo, xxx xxxxxxx xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxx citlivější xx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Pokud xx x xxxxxxxxx spolehlivá xxxxxxxxx, že zvířata xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx pro xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx bezprostředně před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx x týdenních xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx hmotnosti xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx x bolesti vyvolané xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx látkou. XX₅₀ xx xxxxxxx xxxxxxxxx metodou. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxx x stupněm xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx hmotnosti, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx pokud možno xxxxxxxxx xxxx informace:

- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxx, krmení atd.,

- xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxxx) x koncentrace,

- xxxxxxx pokusných xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví x podle dávek (xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx utracených xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; počet xxxxxxxxxxxx xxxxxx),

- xxxx xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, důvody x kritéria xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,

- všechna xxxxxxxxxx,

- hodnota XX₅₀ xxx xx xxxxxxx, x kterého xxx xxxxxxxx xxxxx pokus, x xx pro 14xxxxx pozorování (x xxxxxxxx xxxxxx výpočtu),

- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx LD₅₀ (xxxxx xxx lze xxxxxxxx),

- křivka xxxxxxxxxx mortality na xxxxx a její xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx danou xxxxxxx xxxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx všech testů xx xxxxxx xxxxxxx,

- rozbor xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx věnovat xxxxxxx xxxxxxxxx vypočtené xxxxxxx XX₅₀ v xxxxxxxxxxx s utracením xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx testu),

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.4. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXX XXXXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxx

Xx xxxxx xxxxxxx zvážit xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx xxxxx s xxxxx snížit xx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx, které xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Následující xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxx, studie xx jediném xxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

x) Fyzikálně-chemické vlastnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx kyselé xxxx xxxxxxxx látky (např. xX xxxxx či xxxxx 2 xxxx xX rovné xx xxxxx 11,5) xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxx leptavé xxxxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.

x) Jestliže xxxx xxxxxxxx přesvědčivé xxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, není xxxxxxxxx xxxxx xxxx.

x) Xxxxxxxx xx studií xxxxxx toxicity. Xxxxxxxx xxxx látka v xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx aplikaci xxxxxxxxx xxx limitní xxxxxx dávky (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx) x nebylo pozorováno xxxxxxxxxx kůže, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx třeba xxxxxxxx xxxxx vysoce xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx dávce xx xxxx několika xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx slouží xxxx xxxxx vlastní xxxxxxxx. Xx stanovené xxxx xx odečte, xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx podráždění, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxx xxxxxxxxxx musí xxx dostatečně xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx také xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxx 24 xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx holení xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx zdravou, xxxxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxx xxxxx králíka xxxx xxxxxxxx husté xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx nanášet xx xxxx xxxx xxxxx xxxxx srsti.

Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x práškové xxxxx, je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx dostatečně xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx použití xxxxxxxx xx nutné brát x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx podráždění xxxx xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx savců, je xxxx xxxxx dát xxxxxxxx albínu králíka.

1.2.2.2 Xxxxx zvířat

Xxxxxxxx xx x in xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xx xxxxxxx), xx třeba uvážit xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx zvířeti. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxx xx dvou xxxxxxx zvířatech.

Xxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx nejméně tři xxxxxx xxxxxxx zvířata. Xxxx xxxxx zvláštních xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx být xxxxxxx další xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx důvody xxx jiný xxxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxx xxxx 0,5 g xxxx nebo polotuhé xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx zvířete xxxxxx v testu xxxx xxxxxxx kontrola.

1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx xxxx xxxxx xxxxx vyhodnotit vratnost xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx dobu 14 xxx xx xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Xxxxxxx xx chovají xxxxxxxxxx x klecích. Testovaná xxxxx xx nanese xx xxxxx plochu (xxx 6 cm²) xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx mulu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx náplastí. X kapalin x xxxxxxxxx xxxx může xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx testovanou xxxxx xx xxx, a xxx xxx xxxxxxxxx xx xxxx. Xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxx x mulu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx nebo xx vdechnout.

Na xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx odstranit xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xx možné, nebo xxxxxxx rozpouštědlem, xxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx celistvost xxxxxxx.

Xxxx expozice xx xxxxxxx 4 xxxxxx.

Xxxxx existuje xxxxxxxxx, xx látka xxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxx, že xxxxxx poleptání, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (např. xx 1 xxxxxx xxxx 3 minuty). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx nejprve xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx 3 xxxxxx xxxx současně, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx odstraní xx 3 xxxxxxxx. Xxxxx xxxx pozorována xxxxxxx xxxxx reakce, xxxxxxxx xx druhý xxxxxx xx 1 xxxxxx. Xxxxx pozorování x xxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx nezbytná 4xxxxxxxx xxxxxxxx a xx xxxxxxxxxx principu xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx třetí xxxxxx xx 4 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx zvířat; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x humánních xxxxxx (xxxx. xxxxxxxx xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx xx pozorována xxxxxxx xxxx).

Jestliže xx xxxxxxx xxxxx reakce (xxxx. xxxxxxx) xxxxxxxxxx xx 3 minutách xxxx xx 1 xxxxxx, xx test xxxxxxxx ukončen.

Za xxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, například xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx použití x xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x stupeň xxxxxx xxxx po 60 xxxxxxxx x xxxx 24, 48 x 72 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x testovanou látkou. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx klasifikuje x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v tabulce 1. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 72 hodin xxxxxxxx xxxxxxx odeznění xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx podrobně xxxxxx xxxxxxx závažné xxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx stupeň xxxxxxxxxx posouzením erytému x xxxxx po xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx rovněž xxxxx xxxxxxx závažné xxxx, popis xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, reverzibilitu xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu obsahuje xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx kůže, xxx xxxxxx: okluzivní, xxxxxxxxxxxxx,

- xx xxxxx tabulky xxxxx x xxxxx xxxxxx xxx xxxxx jednotlivé xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xx 1, 24, 48 x 72 xxxxx xxx. xx xxxxxxxxxx mulu),

- popis xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx včetně xxxxxxxxx,

- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- popis xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxx výsledků.

4. XXXXXXX

4.1 Stupnice xxxxxx xxxx

	Xxxxxxx
1. Hodnocení xxxxxxx x xxxxxxxxx
1.1 Žádný xxxxxx	0
1.2 Velmi xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxxx)	1
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx erytém	2
1.4 Mírný xx xxxxxxx xxxxxx	3
1.5 Xxxxx xxxxxx (xxxxx zrudnutí) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx	4
2. Xxxxxxxxx xxxxx
2.1 Žádný xxxx	0
2.2 Xxxxx xxxxx xxxx (xxxxx viditelný)	1
2.3 Lehký edém (xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vyvýšením)	2
2.4 Xxxxx xxxx (xxxxxx vyvýšeny asi x 1 mm)	3
2.5 Výrazný xxxx (xxxxxxx xxxx xxx 1 xx x otok xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx)	4

4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (XXX)

XXX xx vypočte xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx ze xxxxxx stupně xxxxxx xxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxx jedince x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxx	I_KI
xxxxxxxx	X_XX ≤ 0,5
xxxxx xxxxxx	0,5 &xx; X_XX ≤ 3
xxxxxxx xxxxxx	3 &xx; X_XX ≤ 5
xxxxx xxxxxx	X_XX &xx; 5

X.5. XXXXXX XXXXXXXX (OČNÍ XXXXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

1.1.1 Xxxxxxx xxxxx

Je třeba xxxxxxx zvážit xxxxxxx xxxxxxxx informace x xxxx látce x xxxxx snížit xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx podmínek, xxxxx xxxxx vyvolat xxxxx xxxxxx. X xxxx xxxxx xxx užitečné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx. xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, které - jak xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx x xxx xX rovné xx xxxxx 2 nebo xX rovné xx xxxxx 11,5, není xxxxx testovat, pokud xxx očekávat xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.

b) Xxxxxxxx spolehlivě validizovaných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx x prokázanými xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx vlastnostmi nemají xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx pro xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, že tyto xxxxx xxxxx mít xxxxxxx účinky xx xxx xxx testování xxxxx metodou.

c) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx zřejmé xxxxxxx xxxx výrazně xxxxxxxx účinky xx xxxx ve studii xxxxx dráždivosti, xxxx xxxxx xxxx testovat xx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxx xx xxx xxxxxxx účinky.

Testovaná xxxxx xx v xxxxxxxxxxx xxxxx aplikuje xx jednoho xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x reakce se xxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx posouzení xxxxxx. Xxxx pozorování musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxxxxx zhodnotit také xxxxxxxx nebo nevratnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

24 hodin xxxx testem xx x každého x xxxxxxxxx vybraných xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx očí. Xxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx očí, xxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Ačkoliv xx xxxxxxxxx různé xxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx zvířat

Xxxxxxxx se očekávají xxxxxxx účinky, xx xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx zvířeti. Xxxxxxxx výsledky tohoto xxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx naznačují, že xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxxxx xxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zvířat. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být případně xxxxxxxxx další xxxxxxx.

X xxxxxxxxx případech xx třeba použít xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx vyžadovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Úroveň xxxxx

Při xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,1 ml. X xxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxx objem 0,1 xx xxxx hmotnost xxx 0,1 g (xxxxxxxx je xxxx xxxxx xxxxx). Jedná-li xx o xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, je třeba xx rozemlít xx xxxxx xxxxxx. Objem xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxx.

X xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x pumpou xxxx xxxxxxxxx aerosolových xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx 0,1 xx xxxxx x xxxxxxxxxx xx do xxx podle xxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx 21 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Zvířata xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx spojivkového xxxx xxxxxxx oka xxx, xx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx oční bulvy. Xxxxx xx pak xxx na 1 xxxxxxx lehce x xxxx xxxxxxx, aby xx žádná látka xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx kontrolní.

Jestliže xx xxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx bolest, lze xxxx instilací testované xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx bylo xxxxxxxxx, že následkem xxxxxxxxxx nedojde k xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx zvolit typ, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx lokálního xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx anestezovat x xxxxxxxxx xxx.

Oči xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx vymývat xxxxxxxx 24 xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx oči xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx za xxxxxx.

X některých xxxxx, xxxxx xxx xxxx testovací metodě xxxxxxxx podráždění, je xxxxx xxxxxxx další xxxxxxx x použitím xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xx instilaci xxxxx vymyjí oči. X těchto xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx použít 3 xxxxxxx. Xxx xxxxxx po xxxxxxxxx xx xxx vymývají xxxxxx xx půl xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx kapaliny x rychlosti xxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx

Xxx xx xxxxxxxxx po 1, 24, 48 a 72 xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx-xx xx po 72 xxxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxx lézí, je xxxxx zkoušku xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx postižení rohovky xxxx jiné xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx vývoj xxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx, xxxxxxx x spojivce xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx ve xxxxxx i jiné xxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxx při každém xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxx. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx připouští xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx pomůcku xxx xxxxxxxxx laboratoře x xx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx podráždění oka.)

Xxxxxxxxxxx reakcí xx xxxxx usnadnit xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxxx lampy, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx pozorování xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx všech xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx ještě xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx xxx xxxxx xxxxxxx zvíře xxxxxx stupeň xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx podráždění, xxxxxxxxxx závažných xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxx x zvířatech (xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.),

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností xxxxxxxxx xxxxx),

- x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo leptavých xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx při každém xxxxxxxxxx (xxxx. po 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx)

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx závažných xxxx,

- podrobný popis xxxxxxxxx, charakteru x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x poleptání, včetně xxxxxxxxx oblasti rohovky,

- xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1, 24, 48 a 72 hod.), např. xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx.,

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mimoočních xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- interpretace xxxxxxxx.

4. DODATEK

4.1 Xxxxxxxx xxxx xx oku

	Xxxxxxx
X. Xxxxxxxx - otok
Xxxx xxxx xxxxxxxx	0
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx	1
Xxxxxxx xxxx x xxxxxx víčka	2
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx	3
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx více xxx na polovinu xxxx zcela	4
X. Spojivka - xxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx	0
Xxxxx xxxxxx (xxxxx odlišit xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx)	1
Xxxxxx xx xxxxxxxxx víček x xxxxx x blízkosti xxx	2
Xxxxxx xx zvlhčením xxxxx x srsti x xxxxxxx xxxxx oka	3
X. Xxxxxxxx - enantém
Xxxxx xxxxxx normální	0
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx oproti xxxxx	1
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx nesnadné, xxxxxxxxxx xxxxx červená xxxxx	2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx	3
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx
Anomálie xxxxxx xxxxxxxx	0
Nepravidelná xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxx cév xxxxx rohovky (xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx), reakce xx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx	1
Xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, rozsáhlé xxxxxxxxx a xxxxxxxxx	2
x duhovce (xxxxx nebo více xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx)
X. Xxxxxxx - xxxxxx neprůhlednosti
Neprůhlednost xxxx xxxxxxxx	0
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx diseminovaného xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx zůstávají xxxxx xxxxxxxxx	1
Xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxx, snadno xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx duhovky xxxxx xxxxxxxx	2
Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx duhovky nejsou xxxxx viditelné; xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx	3
Xxxxx neprůhlednost xxxxxxx, duhovka xx xxxxx neviditelná	4
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx plocha xx ≤ 1/4 xxxxxx xxxxxxx	1
1/4 &xx; plocha xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 xxxxxx xxxxxxx	2
1/2 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 plochy xxxxxxx	3
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx &xx; 3/4 xxxxxx xxxxxxx	4

4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx dráždivosti (X_XX)

Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (X_XX) pro xxxxx xxxxx x xxxxx interval hodnocení xx vypočte podle xxxxxx

I_OI = 2.(X + X + X) + 5.X + 5.X.X

Xxxxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx (I_OP) xxx xxxxx xxxxxxxx hodnocení xx xxxxxxx pro xxxxx interval hodnocení xxxx xxxxxx z X_XX.

Akutní xxxxx xxxx dráždivosti IOA xx roven xxxxxxxxxx X_XX xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx

4.3 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx	I_OA
nedráždí	0 - 4,9
xxxxx xxxxxx	5 - 14,9
dráždí	15 - 29,9
xxxxx xxxxxx	30 - 59,9
velmi xxxxx xxxxxx	60 - 79,9
extrémně xxxxxx	80 – 110

X.6. SENZIBILIZACE XXXX

1. XXXXXX

1.1. Úvod

Xxxxxxxx:

Citlivost x xxxxxxxx schopnost xxxxx xxx zjišťování látek x potenciálním xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx lidskou xxxx jsou považovány xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx veřejného xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, která xx xxxxxxxxxx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx látky x potenciálním xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx lidskou xxxx a která xx xx xxxxxx xxx xxxxxxx látky.

Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx testy x xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx rozpuštěním xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx Freundově xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX), x xx testy bez xxxxxxxx.

Testy x xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx pravděpodobného xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx lidskou xxxx xxx metody xxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx (Guinea-pig Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) xx velmi xxxxxxxxx test x xxxxxxxx. Xxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxxxx xxxxxxx dalších xxxxx, xx XXXX xxxxxxxxx xx preferovanou xxxxxxxx x xxxxxxxx.

X xxxxx skupin xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx bez adjuvans (xxxxxxxx xx dává Xxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxxxx xx méně xxxxxxx.

X určitých xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx intradermální injekci xxxxxxxxxx v maximizačním xxxxx xx morčatech. Xxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.

X xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou popsány xxxxxxxxxxx test na xxxxxxx (XXXX) x Xxxxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx x jiných xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx screeningový xxxx xxxxxxxxx uznávanou xxxxxxx dá xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx možno xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx senzibilizátor xxx dalšího xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx nutné xxxxxxx xxxx na xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxx: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx dermatitida) xx xxxxxxxxxxxx zprostředkovaná kožní xxxxxx xx xxxxx. X člověka xxxxx xxx xxxxxx charakterizované xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx, xxxxxxx, puchýřky, xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx reakce xxxxx x xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx zarudnutí xxxx xxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx expozice xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.

Indukční xxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx expozice (xxxxxxxxx): experimentální expozice xxxxxxxx dříve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx, zda xxxxxxx xxxxxx reakcí přecitlivělosti.

1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx

Citlivost x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx šest xxxxxx s xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, že xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pro kůži.

X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx na mírné/střední xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % u xxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx 15% x xxxxxx xxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx látkám:

Číslo XXX	Xxxxx XXXXXX	xxxxxxxx název	generický/obchodní xxxxx
101-86-0	202-983-3	2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx	alfa-hexylcinnamaldehyd
149-30-4	205-736-8	2-merkaptobenzothiazol	xxxxxx
94-07-7	202-303-5	Ethyl xxxxx kyseliny x-xxxxxxxxxxxxx	xxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, kdy xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx použity xxxx kontrolní xxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx.

1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx testované látce xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aplikací (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxxx 10 až 14 xxx (xxxxxxxx xxxxxx), x xxxxxxx xxxxxxx xx může rozvinout xxxxxxxx reakce, jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Rozsah a xxxxxx kožní xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat xx porovnán x xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx u kontrolních xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx expozici x xxxx xxxxxxx a xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.5 Xxxxx testovacích xxxxx

Xxxxxxxx je xxxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku, xxxxxxx xx xx x použitím vody xxxx vhodného xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx kožní xxxxxx xxxx integrita xxxxxxx.

1.5.1 Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx (XXXX)

1.5.1.1 Xxxxxxxx

Zdravá xxxxx xxxxxxx albinotická xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx aspoň 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx testem xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx chemickou xxxxxxxx, x závislosti xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx k poškození xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx zahájením xxxxx x xx xxxxx xxxxx.

1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.5.1.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx se běžné xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Lze xxxxxx samce x xxxxxx. Xxxxxx musí xxx nullipary x xxxxx být xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx x nejméně 5 xxxxxx xx třeba x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxx xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx možné xxxxx x závěru, že xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, kterou zvířata xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x která xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx střední podráždění xxxx.Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx použije xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx u xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx kůže. X xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x předběžném xxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxx tento xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx FCA.

1.5.1.3 Popis xxxxxxx

1.5.1.3.1 Xxxxxxx

Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Následující 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx injekcí, xxxxx xx 0,1 xx, xx podají xx xxxxxxxxx oblasti xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx střední xxxxx:

Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx adjuvans (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx roztokem x objemovém xxxxxx 1 : 1;

Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;

Xxxxxxx 3: xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx FCA x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx roztokem v xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;

Xxx xxxxxxx 3 xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx rozpustí před xxxxxxxx x FCA xx vodné xxxx. Xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxx látky xxxxxxxxxxx xx rozptýlí x xxxxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro injekci 3 xx být xxxxxx jako xxx xxxxxxx 2.

Xxxxxxx 1 x 2 xx aplikují xxxxxx xxxx x xx xxxxxxxx xxxxx, zatímco xxxxxxx 3 xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxx 0 - Kontrolní xxxxxxx

Následující 3 xxxxxxx subkutánních xxxxxxx, xxxxx po 0,1 xx, xx podají xx xxxxxxxx xxxx xxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) smíšené s xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x objemovém xxxxxx 1:1;

Injekce 2: neředěné xxxxxxxxx;

Xxxxxxx 3: Směs xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) xx směsí XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v poměru 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).

5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxx xxx kůži, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx oholení xxxxx 0,5 xx 10% laurylsulfátu sodného xx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.

6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx látkou xx xxxxxxx xxxxxxxx xx napuštěn xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 xx), který xx pak xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 48 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx důvody; xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx do vhodného xxxxxxxx; xxxxxxxx lze xxxxxxxxx xxxxx.

6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx zbaví srsti. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x zafixuje xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx skupiny na xxxx 48 xxxxx.

1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx

20. - 22. den - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx

Xxxx exponovaných x xxxxxxxxxxx zvířat xxxx zbaveny xxxxx. Xx jeden xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxx x xxxxxxx a na xxxxx xxx xx xxxxxxx způsobem aplikuje xxxxx vehikulum (xxxxx xx to třeba). Xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx obvazu xxxxxxx x kontaktu x xxxx xx 24 xxxxxx.

1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx

- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx odstranění náplasti xx xxxxxxxxxx plocha xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;

- přibližně xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx provokační dávky) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx xx podle stupnice xxxxxxx x dodatku;

- přibližně 24 xxxxx po tomto xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorování a xxxxxx xxxxxx xxxx (72 xxxxx).

Doporučuje xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" x testovaných x kontrolních zvířat, xxx pozorující osoba xxxx, xxxxx xxxxx xxxx senzibilizováno x xxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx později, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx také xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx skupině.

Xxxxxxx xxxxx reakce x xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx indukčních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx dalších xxxxxxx, jako xxxx. histopatologického vyšetření xxxx měření xxxxxxxx xxxxxxx řas.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxx

1.5.2.1 Příprava

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx albinotická xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx laboratorní xxxxxxxx xx xxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx srsti xx provede xxxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx použité testovací xxxxxx. Je xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx testu x xx xxxxx xxxxx.

1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Používají xx xxxxx laboratorní kmeny xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxx. Samice xxxx xxx nullipary a xxxxx xxx březí. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx 20 zvířat x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxxxx skupině.

1.5.2.2.3 Xxxxxxx úrovně

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx úroveň, xxxxx je nejvyšší xxxxxxxx mírné, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolává podráždění xxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx možno xxxxxx koncentrace xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx dvou xxxx xxxxx zvířatech.

Pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxx použít vodu xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx detergentu xxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx je preferován 80% xxxxxx xxxxxx/xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx pro provokaci.

1.5.2.3 Xxxxxx

1.5.2.3.1 Indukce

Xxx 0 - Testovaná xxxxxxx

Xxxxx xxx xx xxxxxx srsti (xxxxxxxx xxxxxxxx). Systém xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (výběr xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxx aplikovat přímo).

Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx xx testovací xxxxxx x přidržován x xxxxxxxx s xxxx překrývacím xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx obvazem po xxxx 6 hodin.

Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxx, ať xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxxx 4 - 6 xx². Xx preferováno xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx další xxxxxxxx.

Xxx 0 - Xxxxxxxxx skupina

Xxxxx xxx xx zbaven xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx testovací plochu xx naneseno xxxxx xxxxxxxxx, a xx xxxxxxxx xxxxxxxx jako x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx x kontaktu x xxxx překrývacím xxxxxxx xxxx komůrkou a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx. Xxxxx je možno xxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupina xxxx xxxxx, xxx použít xxxxx xxxxxxxxx skupiny xxx aplikace.

6. - 8. x 13. - 15. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx aplikace xxxx x xxx 0 xx provede xx xxxxxxx xxxxxxxxx plochu xx xxxxxx boku (xxxxxxxx případně srsti) 6. - 8. xxx x xxxxx 13. - 15. xxx.

1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx

27. - 29. xxx - Testovaná a xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx srsti (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx plátek xxxxxxxxxx příslušné množství xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx zvířat. Xx xxxxxx xxxx neošetřeného xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx komůrky xxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.

1.5.2.3.3 Pozorování x hodnocení

- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx;

- xxxxxxxxx o xxx xxxxxx xxxxxxx (přibližně 30 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx uvedené x xxxxxxx;

- xxxxxxxxx po xxxxxxx 24 xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 54 hodin xx aplikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx kožní xxxxxx znovu xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Doporučuje xx xxxxxx "slepého xxxxxx" u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, které xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxxxx xx x xxxxxxxxx výsledků nutná xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx přibližně x xxxxx xxxxxxx, v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx také xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx nálezy, včetně xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx důsledkem indukčních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (xxx xxxxxxx). X objasnění xxxxxxxx nálezů je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx tloušťky xxxxxxx xxx.

2. XXXX X XXXXXX ÚDAJŮ (GPMT X XXXXXXXXX TEST)

Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky, xx xxxxx musí xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx patrná xxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX (XXXX X XXXXXXXXX XXXX)

Pokud xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx xxxx screeningový, xx xxxxx uvést xxxxx tohoto testu xxxx jeho citaci (xxxx. LLNA - xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, XXXX - xxxx xxxxxxxxx ucha x myší) xxxxxx xxxxx podrobností postupu x výsledků xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx.

3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx (XXXX a Buehlerův xxxx)

Zpráva x xxxxxx obsahuje xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx získány:

Pokusná xxxxxxx:

- použitý xxxx xxxxxx;

- xxxxx, xxxxx a xxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxx.

Experimentální xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxx xxxx;

- podrobné xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x technice plátkového xxxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x indukčních x xxxxxxxxxxxx koncentracích xxx xxxxxxx xxxx;

- podrobné informace x xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx testované xxxxx;

- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x vehikula, xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx poslední xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, její xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;

- slovní xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Diskuse xxxxxxxx

Xxxxxx

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 406.

Xxxxxxx

5.1 Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx

0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

1 = xxxxx xxxx skvrnité xxxxxxxxx xxxx;

2 = xxxxxxx xxxxxxx x splývající zarudnutí xxxx;

3 = xxxxxxxxxx zarudnutí x xxxxxxx kůže.

5.2 Klasifikace xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx expozici, tj. xxxxx toho, kolik xxxxxx x rámci xxxxxx xxxx danou xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx klasifikuje xxxx

xxxxx alergen (X. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx

xxxxx alergen (XX. st.) - 9 - 28 % xxxxxx

středně xxxxx xxxxxxx (III. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx

xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 65 - 80 % xxxxxx

extrémní xxxxxxx (X. xx.) - 81 - 100 % xxxxxx

X.7. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx po 28 xxx x odstupňovaných xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx orálně, x to každé xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx během pokusu; xxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx konec pokusu, xx utratí x xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx a jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx xx xxxxxxx vyloučil xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxx lze xxxxxxx sondou xxxx x xxxxxxx xxxx x pitné xxxx, xxxxx xxxxx studie x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností xxxxx.

Xxxxx je xx třeba, xxxxxxxx xxxx suspenduje xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx (vehikulu). Xxxxxxxxxx xx nejprve xxxxxx použití xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x xxx xxxxxxx x jiných xxxxxxxx. Xxx nevodná xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; pokud xxxx xxxxx, musí být xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx, ale xx xxxxx xxxxxx x jiného xxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xx nejdříve xx odstavu x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, než zvířata xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.

Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx jako předběžný xxxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx třeba x xxxx xxxxxxxx xxxxxx zvířata stejného xxxxx x xx xxxxxxxx zdroje.

1.2.2.2 Počet x xxxxxxx

Xxx xxxxxx hladinu dávek xx použije nejméně 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx nutno zvýšit xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx další xxxxxxx (xxxxxxxxx skupině) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx následujících 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx zpožděný xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx také satelitní xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).

1.2.2.3 Volba dávek

Xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx skupinu. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx množství, xxxxx xxxxxx skupina, které xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx informací xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx, je možno xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx-xx taková data x xxxxxxxxx, lze xxxxxxx xxxxxxxxxx vyhledávací xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx vzít v xxxxx xxxxxxx existující xxxxx x toxikologických x toxikokinetických xxxxxx x testované látce xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx dávky x xxxxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx závislost xxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (XXXXX). Xxxxxxx xx xxxxxx xxxx- až xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx; pokud xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx dávek, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinu, xxx xxxxxx xxxxxx velký xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxx větší xxx 10).

Pokud xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxx pitné xxxx, xx xxxxxxxx zajistit, xxx podávané xxxxxxxx xxxxx neovlivňovalo výživu x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xx testovaná xxxxx v potravě, xxxx xx xxxxxx xxx konstantní xxxxxxxxxxx (x xxx) nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxx, mělo xx xx xxx xxx každý xxx xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx přizpůsobovat xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

Pokud má xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx dlouhodobou xxxxxx, xx xxxxx x xxxx studiích použít xxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxxx-xx xxxx xxxxxxxxx xxx popisovaným xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx při xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx za den xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x potravě xxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx, x xxxxx toxicita xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx provedení xxxxxxxxxxx testování xxx xxxxx dávkových xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testu platí, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx nenaznačují, xx xx xxxxx xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxx.

1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx

Xxxx pozorování xx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx s cílem xxxxxxxx případné xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Xxxxxxxx xx xxxxxx testovaná xxxxx 7 xxx x xxxxx po xxxx 28 xxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 dní v xxxxx. Xxxxx xxxxx xx podává jednorázově xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxx kanylou. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx může xxx xxxxx najednou, závisí xx velikosti xxxxxxx. Xxxxx by neměl xxxxxxxx přesáhnout 1 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxx vodných xxxxxxx lze podat x 2 xx xx 100 g xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxx, xxx byl podáván xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx to x xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, u xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx stupňovanými xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx klinické xxxxxxxxxx xx provádí xxxxxxx xxxxxx denně, xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx x s xxxxxxxx doby xxxxxxxxxxx xxxxxx účinku xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx stav xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx všech xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a mortality. Xxxxxxx moribundní x xxxxxxx xxxxxxxxxxx silnou xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, utracena xxxxxxxx způsobem a xxxxxxx.

Důkladné xxxxxxxx xxxxxxxxx všech xxxxxx xx provede xxxx xxxxx aplikací (xx xxxxxx intraindividuálního xxxxxxxxx) x dále xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxx klec x standardním pozorovacím xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx dobu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx skórovacího xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx nejméně; xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxx xxxxxx.

Pozorování xxxxxxxx změny kůže, xxxxx, očí a xxxxxxx, xxxxxxxxxx sekretů x xxxxxxx, změny xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx, zježení xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx) x případně xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx klonických x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x chování (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx) nebo bizarních xxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx pozadu).

Xx čtvrtém týdnu xxxxxxxx xx otestují xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxx, zrakové, proprioceptivní), xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Další xxxxxxxx informace x xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx k testování xxxxxx, jsou xxxxxxx x literatuře (viz Xxxxxxxxx úvod, xxxx X).

Xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx ve xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx vynechat, xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx předběžná xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (90denní); x xxx xxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx poruch xxxxxxxx xx této xxxxxxxxxx xxxxxx. Ovšem x x tomto xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Výjimečně xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx by xxx xxxxxxxxxx funkčního xxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx a xxxx

Zvířata xx xxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx v xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx.

1.2.3.3 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx krve.

Xxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx nebo v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xx xxxx odebrala, se xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xx vhodných xxxxxxxx.

1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxx analýza xxxx xx xxxxxx posouzení xxxxxxxxx toxických účinků xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx před nebo x xxxxxxx utracení (xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx během xxxxxx). Xxxxxxxxxx se xxxxxx zvířata bez xxxxxxx xxxx noc xxxxxxx krve¹⁾. Vyšetření xxxxxx x xxxx xxxxxxxx stanovení sodíku, xxxxxxxx, xxxxxxx, celkového xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, kreatininu, xxxxxxxxx proteinů, albuminu, xxxxxxxx alespoň dvou xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (jaterního xxxx xxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx x některých xxxxxxxxx xxxxxxxxxx užitečné xxxxxxxxx.

Další možnost xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxx během xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx xx možno xxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xX, xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxx xxxx. xxxxxxx.

Xxxx je třeba xxxxxx stanovení nespecifických xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx u xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, specifických xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx vyšetření xx posuzuje podle xxxxxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxx xxxxx nebo xxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x úvahu xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx.

Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx biochemických xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxx xxxxxx.

1) Vyšetření xx xxxxx xx xxxxxxx xxx řadu xxxxxx v séru x xxxxxx, xxxxxxx xxx glukózu. Xxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xx xx, xx u xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxxxx xx mohla maskovat xxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx, hladovění xxxx noc by xxxxx xxx vliv xx celkový xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxx, xx třeba biochemické xxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx xx 4. xxxxx testu.

1.2.3.5 Xxxxx

U xxxxx xxxxxx použitých ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx pečlivé xxxxxxxxx xxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxx lební, xxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, brzlík, xxxxxxx, xxxxx a xxxxx xxxxx xxxxxx se xxxxx očistí xx xxxxxxxx xxxxx x xx nejdříve xx xxxxx se zváží xx xxxxxx xxxxx, xxx xx předešlo xxxxxxxxx.

Následující tkáně xx třeba přechovávat xx xxxxxxx médiu x ohledem na xxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny tkáně x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx oblasti xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxx i xxxxxx xxxxxx (xxxxxx Xxxxxxxxxx plátů), játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, štítnou xxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxx (konzervované xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx), xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxx, xxxxxxxx), xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx x jedna xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xxxx (x. xxxxxxxxxxx xxxx x. tibialis), xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, řez xxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxx xxxxx x nasáté xxxxxx xxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xx možno xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxx xx mohl xxx cílovým xxxxxxx xxx působení testované xxxxx, je xxxxx xxxxxxx.

1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

X xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx dávka, x u xxxxxx xxxxxxxxx skupiny xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů x xxxxx. Pokud xx v xxxxxxxx x tkáních ve xxxxxxx s nejvyšší xxxxxx objeví xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx nutno xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxx i u xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx léze xx xxxxx xxxxxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx do xxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xx zvláštním xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, ve xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.

2. XXXX X XXXXXX XXXXX

X xxxxxxxxx xxxx být údaje x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx údaje xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx formy, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxxxx zvířat, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx v průběhu xxxxx nebo utracených x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxx, typ xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx typy xxxx.

Výsledky x xxxxxxx formě xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx metodu xx xxxxx xxxxxx xxx při xxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Zpráva o xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být získány:

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxxxx druh/kmen;

- xxxxx, stáří x xxxxxxx zvířat;

- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;

- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxx x týdenních xxxxxxxxxxx x na xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx aplikaci, xxxxxxxx x xxxxxxxx diety, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a homogenitě xxxxxxxxx;

- podrobné xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xx xx xx xxxxxxx hmotnosti (xxxxx xxx x xxxxxxxx x xxxxx nebo xxxx);

- podrobné xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx (xxxxxx druhu a xxxxxx);

Výsledky:

- xxxxxxx xxxxxxxx a xxxx změny;

- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxx;

- xxxxx x xxxxxxxxx reakcích xxxxx pohlaví x xxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. zda xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxx;

- podrobný xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxx x xxxxxxxx, pokud xxxx získány;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxx:

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx XXXX XX 407.

X.8. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx látce: xxxxxxxxx velikosti xxxxxx, xxxxx par, xxx xxxx, xxx xxxx, xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx).

1.2 Xxxxxxx metody

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx koncentracích, každá xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xx 28 xxx. Xxxxxxx-xx xx xxx dosažení xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v atmosféře xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx kontrolní skupinu xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují x zjišťují xx xxxxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.3 Popis xxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxx

Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Pokud xx třeba, xxxxx xx x testované xxxxx xxxxxx vehikulum xxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx příslušná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo jiná xxxxxxx, xxxx být x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Existují-li xxxxxx xxxxxxxxxx data, je xxxxx xx xxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx proti xxxx. Xxxxxxx se xx mladých zdravých xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx překročit ± 20 % xxxxxxx hodnoty (xxx xxxxx pohlaví zvlášť).

1.3.2.2 Xxxxx a pohlaví

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x nesmí xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx budou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxxxx každého xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx také xxxxxxxxx xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).

1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx skupiny x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxx - x xxxxxxxxxxx stejné xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. X xxxxxxxx aplikace testované xxxxx xx se xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx toxické účinky, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx koncentrace by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx koncentrace tuto xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx střední koncentrace xxxx xxxxxxx toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx než 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxxxx x xxxxxx x střední koncentrací x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.

1.3.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx

Trvání xxxxxxxx xx xxx 6 xxxxx xxxxx; x xxxxxxx specifických xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxx xxx expozice.

1.3.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxx xxxxxx xx zvířaty se xxxxxxx dynamické xxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu x xxxxxxx nejméně 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x expoziční xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx zamezilo xx xxxxxxx shlukování xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx co xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx neměl xx v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx použít xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx způsoby xxxxxxxx minimalizují příjem xxxxx jinými xxxxxxx.

1.3.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx

Pokusná xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx období xxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx toxické účinky. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx a xxx, xx kterém xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.3.3 Popis xxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 14 xxx bez xxxxxxxx, x xxxxxxxxx zotavení x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx být 22 ^xX ± 3 ^xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx být xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx možné (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx unikání testované xxxxx xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx ani xxxx.

Používá xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x vhodnou analytickou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxx předběžný xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx boxu xxxx xxxxxx. Systém xxxx zaručovat, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx expozice xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:

x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).

b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxx jedné expozice xx xxxx koncentrace xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x více xxx ± 15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx možné xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx koncentrace tak xxxxxxxx, jak je xx xxxxxxxxx možné. Xxxxx se xxxx xxxxxx x aerosolů, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x každé testované xxxxxxx.

c) Xxxxxxx x xxxxxxx vzduchu xxxxx xxxxx kontinuálně.

Xxxxx expozice x xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají systematicky; xxxxx zvíře xx xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx výskyt, xxxxxx x trvání. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny kůže, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a centrální xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx zaznamenávat týdně x spotřebu potravy. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxx prohlížení xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, jako xxxx. x xxxxxxxx kanibalismu, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Po xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x těžkém xxxxxx či xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

Xx konci pokusu xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:

1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx.

2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: x posouzení xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x těchto xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v séru (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), aspartátaminotransferáza (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x celkové xxxxxxxxx x xxxx.

Xxxx xxxxx charakteristiky, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxxx, xxxxxxx, chloridů, xxxxxx, draslíku, xxxxxxx xx xxxxx, lipidů, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxx biochemické xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx studium xxxxxxx xxxxxxx účinků.

1.3.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, plíce x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx vlhkém xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x tkáně (xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny x srdce, i xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxx) je xxxxx přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření. Xxxxx xx xxxxx vyjmout xxx poškození, xxxxxx x fixovat xxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxxx struktura.

1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx koncentrace, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx a xxxxxxx ve skupině x nejvyšší koncentrací xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxxxxx skupin je xxxxx provést histologické xxxxxxxxx se zvláštním xxxxxxx xx xxxxxx x tkáně, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.

2. XXXXX

Údaje xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxxx a xxxxx zvířat s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx poškození.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x tomu xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx xxx.,

- podmínky xxxxxx: xxxxx expozičního xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx odpadního vzduchu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx teploty, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxx stability xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,

- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx: x) xxxxxxxx průtoku vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx; x) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx objemem vzduchu); x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx; x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx; x) hmotnostní xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx průměru (XXXX) x xxxxxxxxxxx směrodatná xxxxxxxx (XXX),

- xxxxx o toxických xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx koncentrací,

- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, případně xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxx xxxxxx,

- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- detailní xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx možné,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx testovací metody

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xx xxxx xxxxx po 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx každé skupině xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx příznaky toxicity. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.2 Popis metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx pokusu xx xxxxxxx srst xx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx cca 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Při xxxxxxxx nebo holení xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx se xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % povrchu xxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx hmotnost xxxxxx xxx rozhodování x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx a x xxxxxxxxx krycího xxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, je xxxxx danou xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx zaručen xxxxx xxxxxxx s xxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 dnů x týdnu.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xx možno xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx morčata. Je xxxxx použít x xxxx zvířecí druhy, xxxxxx použití xxxx xxxx xxx odůvodněné. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxx dávek xxxxxx xxxxxxx 10 zvířat (5 xxxxx x 5 samců) se xxxxxxx xxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být xxxxx. Pokud xx xxxxxxx budou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx nutno zvýšit xxxxxxx počet xxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx zabita xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 dnů xxxxxxxx xxxxx x xxxxx následujících 14 xxx po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vratnost, xxxxxx xxxx zpožděný xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx také xxxxxxxxx skupiny 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx tři xxxxxx xxxxx a xxxxx kontrolní xxxxxxx xxxx - xxxxx xx použilo xxxxxxxx - kontrolní xxxxxxx x aplikací xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx být xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx testované látky xx se xxxx xxxxxxxx každý xxx xx stejnou xxxx. X intervalech xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx v kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx se kontrolní xxxxxxx stejným způsobem xxxx pokusným xxxxxxxx, x to xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx aplikuje xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx dávka by xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx účinek xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx voleny tak, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx s nízkou x xxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.

Xxxx-xx xxxxxxxx testované xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x vysoké xxxxxxx úrovně může xxxx x omezení xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxx-xx x xxxxxxx poškození xxxx, xx dokonce xx xxxxxxxx okolností xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx jej xxxxx s nižšími xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Limitní test

Xxxxxxxx-xx xxx předběžné xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 nebo xxxxx dávky, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx toxické xxxxxx, xxxx další xxxxxxx xxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Všechna zvířata xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxxx, kdy xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx studované látce xxxxxxx 7 dnů x xxxxx xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx určena xxx následné xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx, xxx se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo jejich xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.

Testovanou xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx asi 10 % xxxxxxx xxxx; x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx plocha menší. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx co největší xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v xx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx je po xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x kůží xxxxxx porézního mulového xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx se mulový xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx fixovaly x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxx požití xxxxx xx možno použít x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx volnosti xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx "ochranného xxxxx".

Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxx, stupně x xxxxxx. Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx a sliznic x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Hmotnosti xxxxxx se zaznamenávají xxxxx. Doporučuje se xxxxxxxxxxxx týdně x xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x výjimkou xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Umírající xxxxxxx a xxxxxxx x těžkém xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, humánně xxxxxxx x xxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx xx x všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

1. Xxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxx alespoň xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x srážlivosti xxxx.

2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: k xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx z xxxxxx xxxxxxxxx: alaninaminotransferáza x séru (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx známá xxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx bílkoviny v xxxx.

Xxxx další xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

Další xxxxxxxxxxx analýzy mohou xxx x xxxxxxx xxxxxxx použity pro xxxxxxx xxxxxxx spektra xxxxxx.

1.2.3.1 Pitva

U xxxxx zvířat použitých xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx. Aspoň xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxx x varlata xx xx nejdříve xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx stavu, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx. Orgány x xxxxx, xxxx. xxxxxxxx x xxxxxxxxxx kůže, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxx x xxxxxxx orgány x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x ohledem na xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx dávka, a x xxxxxx kontrolní xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx x orgánech x xxxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx dávkou xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx tkání x u xxxxx xxxxxx x nižšími xxxxxxx. X zvířat xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x tkáně, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx otravy x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx výsledky xx třeba vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x průběhu xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, xxxxx, podmínkách xxxxx, krmení xxx.),

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx druhu obvazu; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx pohlaví x xxxxx,

- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx zvířat xx xxxxx sledovaní,

- xxxxxxx nebo xxxx xxxxxx,

- doba, xxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx další xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx výsledky,

- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx to xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.10. MUTAGENITA - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X SAVCŮ XX XXXXX

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 473, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Test (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx analýzy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx v xxxxxxxxx savčích xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (1) (2) (3). Strukturální xxxxxxx xxxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou většinou xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx může naznačovat, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx numerické xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx se x tomuto xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy xxxx příčinou xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx toho, xx chromozómové mutace x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx, hrají xxxxx xxx vzniku xxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat.

Xxxxx xxxx se xxxxxxx x odhalení xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx. Xxxx chemických xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, je sice xxx xxxxx karcinogenní, xxxx však dostatečná xxxxxxxx xxxx tímto xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx látky x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx nezjistí, xxxxxxx zřejmě xxxxxx xxxxx mechanismem xxx xxxxxx xxxxxxxxxx DNA.

X analýze chromozómových xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx, buněčných xxxxx xxxx xxxxxxxx buněčné xxxxxxx. Použité xxxxx xxxx vybrány xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x kultuře, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx in xxxxx xxxxxxxx obecně xxxxxxxx xxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxxxx systém xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx in xxxx. Xx xxxxx xx xxxxxxxxx podmínek, xxxxx xx xxxxx xxxx x pozitivním xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (4) (5).

1.2 DEFINICE

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx projevuje jako xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx chromatid, xxxx xxxx a opětovné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx (zahrnuty xxxx xxxxxxx typu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx).

Xxxx chromatidy: xxxx zlom xxx xxxxxxxx porušení kontinuity xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx chromatidy xx xxxxx, xxx xx šířka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, koncový (xxxxxxxx) fragment v xxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx (nebo xxxx xxx chromatidy), případně xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx delece.

Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx S-fázi xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx mitózy, xxxxx xxxxxx xxxxx S-fáze. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.

Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx vybočením xxxxxxxxx.

Mitotický xxxxx: xxxxx buněk x xxxxxxxx dělený xxxxxxxx xxxxxx buněk x xxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx populace.

Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx buňky.

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx xxxxxxxxx počet (xxxx 3x, 4x xxx.).

Strukturální xxxxxxx: xxxxx chromozómové struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx delece x xxxxxxxxx x výměny.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Buněčné xxxxxxx xx vystaví xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xx. Ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxx kultury xxxxxxxxx látce, xx xxxxxxxx xxxxxxx například Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx, obarví xx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.

1.4 POPIS METODY

1.4.1 Příprava

1.4.1.1 Xxxxx

Xx možno xxxxxx xxxxx řadu xxxxxxxxx linií, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx fibroblasty xxxxxxxx křečka nebo xxxxxxxxx periferní krve xxxxxxx či jiného xxxxx).

1.4.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx

K xxxxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxx kultivační xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (kultivační xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂, xxxxxxx x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx x nepřítomnost xxxxxxxxxxx v buňkách. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx buňky xxxxxxxxxxx. Xx třeba xxxx xxxxxxxx xxxx buněčného xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Stabilizované xxxxxxx xxxxx x xxxxx: xxxxx xx xxxxx xx zásobních xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx média x xxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxx nedosáhly xxxxxxxxxxx xxxxxx před xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxx teplotě 37 ^xX.

Xxxxxxxxx: xx xxxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxx xxx xxxx krev x xxxxxxx antikoagulantem (xxxx. heparinem), nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 ^xX.

1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Na xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx i v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nejobvyklejší xx kofaktory suplementovaná xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx činidly xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Aroclor 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (10) (11) (12).

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxx obvykle 1 - 10 % x/x. Aktivita metabolického xxxxxxxxxxx systému bude xxxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxx je xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx mitochondriální xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Pro xxxxx xxxxxxxxx aktivace mohou xxx použity i xxxxxxxxx modifikované xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx by xxx být xxxxxxx xxxxxx (např. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx P450 x xxxxxxxxxxx testované xxxxx).

1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx stavu, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx její suspenze xx vhodném xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx mohou do xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxxxx stabilitě xxxxxxxxx, xx delší skladování xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx.

1.5 XXXXXXXX XXXXX

1.6 ROZPOUŠTĚDLO

X zvoleného xxxxxxxxxxxx xxxxx existovat xxxxxxxxx, xx xx mohlo x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx reagovat, a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxx rozpouštědlo, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx prokazujícími xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx všem xxx, xxx xx xx xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Je-li xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlo xxxxx bezvodé. Xxxx xx xx odstranit xxxxxxxxxxxx xxxxx.

1.6.1 Koncentrace

Xxxx kritéria, jež xx uvažují xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx xX resp. xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx x xxx xx x hlavním xxxxxxxxxxx, přičemž se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, počet živých xxxxx, xxxx mitotický xxxxx. Je xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Dochází-li x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx pokrývat xxxxxx od xxxxxxxxx xx nízké nebo xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx znamená, že xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx více xxx násobkem, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. X xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx být xxx nejvyšší koncentraci xxxxxxxxx signifikantní pokles xxxxxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx x xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx index je xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx / cytostatických xxxxxx x xx xxxxxxx xx době xxxxxxxx po expozici xxxxxxxxxx látkou. Xx xxxx akceptovatelný xxx xxxxxxxxx kultury, xxx xx xxxx detekce xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx informace xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx dělení, xxxx xx xxxxxxxx generační xxx; ten ovšem xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. A xxx x malé prodloužení xxxxxxxxxx generačního xxxx xxxx znamenat xxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxx xxxxxxxx z xxxxxxxx optimálního xxxxxxx xxxxxxx.

X relativně xxxxxxxxxxxxxxx látek činí xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx nejnižší x xxxxxx 5 µl/ml, 5 xx/xx nebo 0,01 M.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx netoxické x xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx je xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx se xxx xxxxx nerozpouští, xx být xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx, xxx je xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx médiu xx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx látkou. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx-xx k xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx vyšších, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - se xxxxxxxxxx testovat při xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxx na počátku x xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx může xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx vlivem xxxxxxxxxxx xxxxx, séra, X9 apod. Xxxxxxxxxxxxx xx xx zjistit x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx být xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx buněk.

1.6.2 Xxxxxxxxx x pozitivní kontroly

Xx každého xxxxxxxxxxx, xx již x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xx, xx xxxxx zařadit souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx). Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx účinku.

Xxx pozitivní kontrolu xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x to xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx očekává, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx tak, xxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx neodhaloval xxxxxxxxxxx přímo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxx aktivace	Xxxxx	CAS	XXXXXX
Xx	xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx ethyl xxxxxxxxxxxxxxx mitomycin X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx	66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5	200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1
Xxx	xxxx[x]xxxxx cyklofosfamid monohydrát xxxxxxxxxxxxxx	50-32-8 50-18-0 6055-19-2	200-028-5 200-015-4

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se mohou xxxxxx i jiné xxxxxx xxxxx. Xxx, xxx xx to xxxxx, je xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látku xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxx každý xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kultur xx xxxxx použít x xxxxxxxxx kontrolu, xx které se xxxxxxx rozpouštědlo nebo xxxxxxxxx x kultivačním xxxxx, zpracované xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.6.3 Xxxxxx

1.6.3.1 Xxxxxxxx testovanou xxxxxx

Xx proliferující xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx látkou za xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx působit xxx 48 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx; a xxxxx se doporučuje xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx. Pokud xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx mezi duplicitními xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx (13) (14), je xxxxxxxxxx, xxx xx xxx každou xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx jedna xxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx v testu xxxxxx postupy, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (15).

1.6.3.2 Xxxx sklízení xxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx xx xxxx 3 - 6 hodin a xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx normální xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx začátku expozice (12). Xxxxx jsou xxx použití xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx normálního xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx při xxxx xxxxxxxx xxxxx, než xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu. Negativní xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx, je třeba xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.6.3.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxxxx xx působí Xxxxxxxxxx® xxxx kolchicinem obvykle xx dobu 1 - 2 xxxxx xxxx xxxxxxxxx kultivace. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx sestává x ovlivnění xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, fixace x odbarvení.

1.6.3.4 Xxxxxxx

Všechny xxxxxxxxx, xxxxxx pozitivních a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx, musí xxx x xxxxx xxxx xxxxx počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx ± 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx rozprostřených metafází, xxxxxxxxxxx x obou xxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xx počet xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxx analyzovaných xxxxxxxx xxxxxx.

X xxxx xxxxxx testu xx xxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Jelikož xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je buňka, xx třeba vyhodnotit xxxxxxxx buněk xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi. Xx třeba registrovat xxxxxxxxxx xxxx strukturálních xxxxxxx včetně xxxxxx xxxxx x četnosti x experimentálních x xxxxxxxxxxx kultur. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx obvykle do xxxxxxx xxxxxxxx aberací xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx je xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx také zjištěnou xxxxxxxxxxxx v experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx se data xxx xxxxxxxxxx kultury. Xxxxxxx xx všechna xxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx nepožaduje. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx bylo xxxxxxxxx x xxxx. 1.4.3.3. V xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx použitých xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx podmínek. X xxxxxxxxxx, které xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a podmínky xxxxxxxxxxx aktivace.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Xx xxxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx frekvence xxxxx x chromozómovými xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx uvážit biologickou xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxx (3) (13). Statistická významnost xx xxxx neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku.

Xxxxxx počtu polyploidních xxxxx xxxx indikovat, xx testovaná látka xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx numerické chromozómové xxxxxxx. Nárůst počtu xxxxx s endoreduplikovanými xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buněčného xxxxx (17) (18).

Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, xx x tomto xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Ačkoliv xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx jasně xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx výjimečných xxxxxxxxx xxxxxxx data xxxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx xxxxxx testované látky. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx aberace xx xxxxx xxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek testovaná xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

XXXXXX X XXXXXXX POKUSU

Xx zprávě o xxxxxxx xxxxxx je xxxxx uvést tyto xxxxxxxxx:

Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx rozpouštědla/vehikula

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.

Xxxxx:

- xxx a zdroj xxxxx,

- xxxxxxxx x vhodnost xxxxxx xxxx buněk,

- xxxxxxx mykoplasmat, je-li xx xxxxx,

- xxxxxxxxx o délce xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxx xxxx, xxx xxxx použita xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxx buněk, xx-xx xx xxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx buněčné xxxxxxx, je-li xx xxxxx

- modální xxxxx chromozomů.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xx xxxxx

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx např. xxxxx x xxxxxxxxxxxx a xxxxxx rozpustnosti, xxxx-xx x dispozici,

- xxxxxxx média, xxxxxxxxxxx XX₂, je-li xx xxxxx

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx teplota,

- xxxx kultivace,

- xxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx

- xxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx, xxxxxx kritérií akceptovatelnosti,

- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx přípravy xxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxx,

- počet analyzovaných xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx toxicity,

- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx hodnotí jako xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxxx konfluence, xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x počtu buněk, xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxx srážení,

- xxxxx x xX x osmolalitě xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx stanoveny,

- xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx gapů,

- xxxxx buněk x xxxxxxxxxxxxxx aberacemi a xxx xxxxxxxxxxxxxx aberací xxx každou experimentální x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,

xxxxx xxxxx-xxxxxxx, je-li xx xxxxx,

- statistické xxxxxxx, xxxxx byly xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

B.11. XXXXXXXXXX - XXXX CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX X XXXXXX XXXXX SAVCŮ XX XXXX

1. XXXXXX

Metoda je xxxxxxxxx OECD TG 475, Mammalian Bone Xxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx analýzy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx vivo xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx aberace xxxxx xxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx daná xxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx mutageny xxxx xxxxxxxx chromatidové, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx mutace a xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx řady genetických xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, že xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx změny x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxx systémech.

X xxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxxx hlodavci. Xxxxxxx xxxxx x xxx xx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, obsahující xxxxxxxx rychle se xxxxxxxx xxxxx, xxx xx dají xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx tkáně xx v xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx reparace XXX, i když xxx mohou být xxxx xxxxxxxxxxx druhy x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Test xx xxxx xx také xxxxxx xxx další xxxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx xxx předtím xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, že xx testovaná látka xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx chromatid, xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx xxxx zlom x opětovné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (zahrnuty xxxx xxxxxxx typu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)

Xxxx chromatidy: xxxx xxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx obou xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx mezera xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx šířka poškozené xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment x xxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx (xxxx mimo xxx xxxxxxxxxx), případně xxxxx xxxxxxxxxx hodnoceného xxxxxxxxxx je kratší x důsledku xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, kde xx S-fázi xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx jádro xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx S-fáze. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.

Xxx: achromatická xxxx xxxxx než šířka xxxxx xxxxxxxxxx a x xxxxxxxxxx vybočením xxxxxxxxx.

Mitotický index: xxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

Numerická xxxxxxx: změna počtu xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému pro xxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx hapoidního počtu xxxxxxxxxx (n) xxxx xxxxxxxxx počet (tedy 3x, 4n xxx.).

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zjistitelná xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx a fragmenty x xxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx se xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx na ně xxxxxx látkou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). X xxxxx xxxxxx dřeně xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx zjišťují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.4 POPIS XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Výběr xxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, myši x xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx použít x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx druh. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Hmotnostní xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxxxx x x každého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X, vlhkost xx měla xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Příprava xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x experimentální xxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx umístěny. Xxxxxxx xx třeba jednoznačně xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxx dní xx xxxxxxx aklimatizují x laboratorních xxxxxxxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxx dávek

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx, xxxx podáním xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx nebo vehikulu x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx před xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx čerstvé preparáty, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx prokazují, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx / vehikulum v xxxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x nesmí x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx xx xxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x testovanou látkou. Xxxxxxxxxx se, aby xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx rozpouštědlo / xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx by měly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo při xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrole xx xxxx tak, aby xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx kontrolu:

Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx	62-50-0	200-536-7
xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx	759-73-9	212-072-2
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
cyklofosfamid xxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx kontroly ovlivněné xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x zpracované stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxx pouze xxxxx odběr vzorků, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx interval odběru xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx použít x xxxxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx vehikulum xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx účinky.

1.5 POSTUP

1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx

X xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx pět xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pohlaví. Xxxxx x době, xxx se xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx pohlavími nejsou x toxicitě podstatné xxxxxxx, je testování xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látkám xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, jak xx xxxx například u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx jednorázově. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, například xx xxx xxxxx za xxx podané x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxx režimy xxxxxxxxx musejí xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Vzorky xx xxxxxxxxx ve xxxx různých xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx podání xxxxx xxx. U xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (která xxxx xxxxxxx 12 - 18 xxxxx) xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx absorpci a xxxxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxx vliv xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx chromozómových xxxxxxx, xxxxxxxxxx se další xxxxx xxxxxx po 24 hodinách xx xxxxxxx odběru. Xxxxx xx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx než xxxxxx xx den, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx vzorků 1,5xxxxxxxx délky xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxxx xxxxxx látky.

Xxxx usmrcením se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx kolchicinu x xxxxxxxx xx x xxxx ve vhodném xxxxxxxxx odeberou xxxxxx. X myší je xxxxx interval xxxxxx 3 - 5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx zhruba 4 - 5 xxxxx. X xxxxxx dřeně xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx se x nich chromozómové xxxxxxx.

1.5.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx-xx xx studie xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx žádné xxxxxx xxxxx, xx xxxxx ji xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, kmene, xxxxxxx x pokusného xxxxxx, jaké se xxxxxxx x hlavní xxxxxx (5). Při xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx dávky xxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx pak xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx při xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx režimu xxxxxxxx xx xxxxxx byly xxxxxxx. Xxxxx, xxx x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivitu, jako xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, mohou představovat x těchto kritérií xxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx případ xx případu. Xxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x určitým známkám xxxxxxxx x kostní xxxxx (např. xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx 50 %).

1.5.4 Limitní xxxx

Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2 000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx dvou xxxxxxx xxxxxxxx x jeden xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x látkách x xxxxxxxx xxxxxxxxx strukturou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx za xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx xxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xx xxx při xxxx xxxxxx do 14 xxx, x 1&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx zapotřebí xxxxxxx x limitním xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx

Testovaná xxxxx xx obvykle xxxxxxxx buď xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. V odůvodněných xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x jiné xxxxxxx xxxxxxxx. Maximální xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xx sondou xxxx xxxxxxx najednou vpravit, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, jež normálně xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xxx, xxx xxxxx byl xx všech dávkových xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx variabilita.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxx zvířete xx xxxxxxx kostní xxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx se xxxxxx. Xxxxxxxx buněk xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xx.

1.5.7 Analýza

Jakožto xxxx xxxxxxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx při vysokém xxxxx aberací. Všechny xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx často x porušení xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx 2x ± 2.

2. XXXXX

2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx od xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx v tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxxx, počet xxxxxxx xx xxxxx buňku x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. U experimentálních x xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxxxxxxxx jednotlivé xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx počet x xxxxxxx. Gapy xx zaznamenávají zvlášť x xxxxxxxxxx se, xxx xxxxxxx se xx celkové xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx o xxx, xx xxx xxxxxxx reagují rozdílně, xx xxxxx xxxxx xx obě pohlaví xxx statistickou xxxxxxx xxxxxxx.

2.2 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xx xxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx buněk s xxxxxxxxx xx xxxxxxx x jednorázovou dávkou xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx třeba xxxxxx biologickou významnost xxxxxxxx. Při vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx má schopnost xxxxxxxxx mitotické xxxxxxx x vyvolávat numerické xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx chromozómy může xxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (7) (8).

Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx použití výsledky xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, se v xxxxx systému xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx případech však xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx mohou být xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x když xx experiment několikrát xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx daných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testovaná látka x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xxxxxxxxxx.

Xx xxxxx vzít x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx informace:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.

Pokusná xxxxxxx:

- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- xxxxx, xxx x pohlaví xxxxxxx,

- původ, xxxxxx podmínky, xxxxxx xxxx.,

- hmotnost xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx,

- xxxxx xx studie xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- podrobnosti x přípravě xxxxxxxxx xxxxx,

- podrobnosti x xxxxxxxx testované xxxxx,

- zdůvodnění xxxxxxx podávání,

- xxxxxxxx metody x xxxxxxx, xx xx xxxxx dostala xx xxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx převod xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx dávku (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),

- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx vzorků,

- metody xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx x doba xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx xx studie hodnotí xxxx pozitivní, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- známky xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx index,

- xxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxx-xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- statistické xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- historické údaje x negativních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek.

- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

B.12. MUTAGENITA - XX VIVO XXXXXXXXXXXX XXXX V XXXXXXX XXXXXXXXXXXX

1. METODA

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 474, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Mikronukleus xxxx xx xxxx x xxxxx slouží xx xxxxxxxx poškození, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx erytroblastů; xxxx xxxxxxx x xxx, xx xx analyzují xxxxxxxxxx z xxxxxx xxxxx resp. z xxxxxxxxx krve zvířat, xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx látky, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx představujících xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

Když x xxxxxxxxxxxx kostní xxxxx vznikne xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx je x xxxxx vyloučeno; xxxxxxxx zbude v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx, že xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx. Nárůst xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx je x xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat důkazem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

X xxxxx testu xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx běžně xxxxx, xx xx polychromní xxxxxxxxxx v xxxx xxxxx xxxxx. Analýza xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx krvi je xxxxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, u xxxxxxx bylo xxxxxxxxx, xx xxxx slezina xxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx odstraňovat nebo xx je xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx detekci xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx podle xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxx DNA x mikrojádru. Konečným xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx krvi obsahujících xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx hodnotu použít x případě, xx xx xxxxxxx xxxxxxx xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x hodnocení rizika xxxxxxxxxx, protože xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx metabolismu xx xxxx, farmakokinetiky x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, i xxxx xxx xxxxx být xxxx živočišnými druhy, xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx in xxxx xx také xxxxxxxx xxx další xxxxxx mutagenního efektu, xxxxx byl xxxxxxx xxxxxxx x systému xx vitro.

Existují-li xxxxxxx x tom, xx xx testovaná xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx tkáně xxxxxxxxx, xxxx použití xxxxxx xxxxx xxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): oblasti xxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxx dělení xxxx xxxxxx dělícího xxxxxxxx xxxxxxxxxx organizovaný xxxxx xxxxxxxxx chromozómů x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Mikrojádro (mikronukleus): xxxx xxxxx oddělená xx xxxxx xxxxx (xxxxxxx) vytvářená xxxxx xxxxxxxx mitózy, nebo xxxxxx reprezentovaná xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx chromozómy.

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: zralý xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx erytrocytů xxxxxxx xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx erytrocyt: xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx lze odlišit xx zralých, normochromních xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX METODY

Zvířata xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx xx používá xxxxxx dřeň, zvířata xx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxx usmrtí, xxxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx (1-7). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, odebere xx xx vhodné xxxx xx xxxxxxxx látky x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx se xxxxxx (4) (8) (9) (10). V xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx periferní xxxx, xxxx xxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx do zpracování xxxxx co xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx mikrojader.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx

Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx, doporučují xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx; xxxx však xxx xxxxxx jiný xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx-xx xx periferní xxxx, doporučují xx xxxx. Xxx ovšem xxxxxx jakýkoliv xxxxxx xxxxx druh za xxxxxxxxxxx, xx se x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx že x xxx xxxx xxxxxxxxx dostatečná citlivost xxxx látkám, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx chromozómové aberace. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % průměrné xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.

Xxxxxxx xx měla xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Zdraví xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx pěti xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x laboratorních xxxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx minimalizovaly xxxxxxxx xxxxx toho, xxx x kde jsou xxxxx xxxxxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx

Je-li testovaná xxxxx v pevném xxxxx a xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx její xxxxxxxx ve vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) prokazují, xx xxxxxxxxxx ji xxxxxxxxx.

1.4.2 Podmínky testu

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x nesmí x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx nepříliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x testovanou látkou. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

X xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx in vivo xxx xxxxxxx, kdy xxx očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad xxxxxxxxx xxxxxx. Dávky xxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx účinky xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx hodnotiteli xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx látku x xxxxxx odebírat x xxxxxx časovém xxxxxxxxx. Kde je xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx ze stejné xxxxxxxx skupiny, xxxx xx xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu:

Xxxxx	CAS	XXXXXX
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx	62-50-0	200-536-7
N-ethyl xxxxxxxxxxxxxxx	759-73-9	212-072-2
mitomycin X	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Negativní xxxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx měly xx xxx zařazeny xx všech xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx variabilitě xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx pouze jeden xxxxx xxxxxx, je xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx existují xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx krev, xxxx xxx xxxx souběžná xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx odebraný xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx pouze x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x periferní xxxx (xxxx. 1 - 3 dávky), xxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx a xxxxxxx xxxxxx

V každé xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx pět xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (11). Xxxxx v xxxx, xxx xx xxxxxx provádí, xxxxxxxx xxxxx o stejném xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxx oběma xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx pouze xx xxxxxx xxxxxxx postačující. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx na xxxxxxx, jak je xxxx například x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxx, dvě xxxx xxxx xxxxx x 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx neprokáže xxxxxxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx, až se xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx použita xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx vzorků. Xxxxx xx jedná x xxxxxxxx dávku xxxxxxxxx látky, může xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, například xx dvě dávky xx xxx podané x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Test xx může xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx:

(a) Xx zvířata xx xxxxxxxxxx xxxxxx působí xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxx xx odeberou xxxxxxxxx xxxxxxx, poprvé xx xxxxx xxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx než xx 48 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx vzorků. Xxxxx xx vzorky odeberou xxxxx xxx xx 24 hodinách, xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxx xx 36 xxxxxxxx od xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxx 72 hodiny. Xxxxx xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxx zapotřebí.

(x) Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx za xxx (xxxx. xxx xxxx xxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), odeberou xx xxxxxx v xxxxxxx kostní xxxxx xxxxxx xxxx 18 x 24 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxxxx periferní xxxx xxxxxx xxxx 36 x 48 hodinami xx posledním podání xxxxx (12).

Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx použít x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.5.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x pokusného režimu, xxxx xx použijí x xxxxxx xxxxxx (13). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx pokrývaly xxxxxxx xx xxxxxxxxx toxicity x xxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx definována xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx podávání by xxxxxx xxxx letální. Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx xxxx mitogeny, xxxxx xxxxxxxxxxxx výjimky x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx dávek x xxxxxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx může xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx dřeni (např. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx erytrocytů x xxxxxx xxxxx resp. xxxxxxxxx xxxx).

1.5.4 Limitní xxxx

Jestliže xxxx xxx dávce xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx dávce xxxx ve xxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx studie xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx limitní xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx xx xxx xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx delší než 14 dnů. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx dávkové úrovně xxxxx.

1.5.5 Aplikace xxxxx

Xxxxxxxxx látka se xxxxxxx vpravuje buď xxxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx přijatelné x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xx dá xxxxxx xxxx injekcí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; vyšší xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx xxxxx upravit xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx objem byl xx xxxxx dávkových xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx variabilita.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx / xxxx

Xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zvířete. Xxxxxx způsobem xx xxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx, buňky se xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx se xxxxxxx x ocasní žíly xxxx xxxx xxxxxx xxxx. Krevní buňky xx okamžitě xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (8) (9) (10), xxxx xx zhotoví xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx specifického pro XXX (např. akridinové xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 x xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x artefaktů xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx barviva, xxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx. Tato výhoda xxxxxxxxx, že by xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxx. Xxxxxx). Lze xxxxxx x xxxxx xxxxxxx - xxxxxxxxx kolony xx xxxxxxxx celulózy x xxxxxxxxxx xxxxx x jádrem (16) - pokud xxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx analýzu mikrojader.

1.5.7 Xxxxxxx

X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x celkového počtu xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). K xxxxxx xxxxx xx počítá x xxxxxxx xxxxxx xxxxx minimálně 200 xxxxxxxxxx x x xxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxx minimálně 1000 xxxxxxxxxx (17). Xxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 2000 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx. Doplňující informace xxx získat tak, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve zralých xxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x celkového xxxxx xxxxxxxxxx menší xxx 20 % hodnoty x kontrole. Pokud xxxx xxxxxxx exponována xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx týdnů xxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x minimálně 2000 xxxxxxx erytrocytů xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx - xxxx cytometry), xxxxx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx x xxxxxxxxxxxx zvířat se xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxx. U xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nezralých xxxxxxxxxx, xxxxx nezralých erytrocytů x xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxx, je xxxxx uvést xxxx xxxxx o zralých xxxxxxxxxxxx (xxxxx byly xxxxxxxxxx). Xxxxx nezralých xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Nejsou-li xxxxx xxxxxxx x tom, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx analýzu xxxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX A INTERPRETACE XXXXXXXX

Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku se xxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx na koncentraci xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx x xxxxxxxxxx xx skupině x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx intervalu xxxxxx xxxxxx. Nejprve xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jejímž xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx sice xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxx dát xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se experiment xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testu xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx tvorbu xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo poškození xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx erytrocytech.

Xx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx cílovou xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x xxxxxxx pokusu xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:

- xxxxxxxxxx xxxxx vehikula

- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx známa.

Pokusná xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxx druh/kmen,

- xxxxx, xxx a xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,

- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx hmotnostního xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Podmínky pokusu:

- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,

- údaje xx xxxxxx xxx určení xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- zdůvodnění volby xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,

- xxxxxxxxxxx o podávání xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx cesty xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx x ověření, xx xx xxxxx xxxxxxx xx celkového xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx faktickou xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx),

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx potravy x xxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a odběru xxxxxx,

- metody xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx preparátů,

- xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx,

- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx nejednoznačná.

Xxxxxxxx:

- známky xxxxxxxx,

- podíl xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx,

- počet xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxx každého xxxxxxx zvlášť,

- xxxxxxxx počet ± xxxxxxxxxx odchylka nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx,

- vztah xxxxx - xxxxxx, je-li xx xxxxx,

- xxxxxxx statistické xxxxxxx x xxxxxx,

- xxxxx xx souběžných x xxxxxxxxxxxx negativních xxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Diskuse výsledků.

Xxxxxx.

B.13/14. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXX XXXXXX X BAKTERIÍ

1. XXXXXX

Xxxxxx xx replikací XXXX TG 471, Xxxxxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mutací xx xxxxxxxxx x detekci xxxxxxxx mutací xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxx Escherichia xxxx (xxxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx vzniklé mechanismem xxxxxxxxxx nebo delece xxxxxxx nebo několika xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx bakteriálních kmenů (1) (2) (3). Xxxxxxx bakteriálního xxxxx xxxxxxxxxx mutací spočívá x xxx, xx xx zjišťují mutace, xxxxx zpětně xxxxxxx xxxxxx přítomné x xxxxxxxxxx kmenu xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx funkční xxxxxxxxx xxxxxxxx syntetizovat xxxxxxx xxxxxxxx aminokyselinu. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xx základě xxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, kterou xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.

Xxxxxx mutace xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx genech xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx zvířat xxxx xxx vzniku nádorů. Xxxxxxxxxxx test na xxxxxxxx mutace xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx detekci mutací, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx velké xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx DNA xx xxxxxxxx takových xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xxx xxxx náchylné x xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx umožňuje xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x typech xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx genotoxickými xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx testy xxxxxxxxxx xxxxxx je x dispozici xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx osvědčené xxxxxx xxx xxxxxxxxx chemikálií x xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxx xxxxxxxxxx mutací x xxxxxxxx kmenů Salmonella xxxxxxxxxxx xxxx Escherichia xxxx slouží ke xxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (histidinu xxxx. tryptofanu), jež xxxxx xx xxxxxx xxxxx, který xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nezávislý.

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx změnu bází x DNA. Při xxxxxxxxx xxxxx může x takové změně xxxxx xx xxxxx xxxxxxx mutace xxxx xx jiném místě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (mutageny vyvolávající xxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo odebrání xxxxxxx nebo xxxx xxxx xxxx v XXX, čímž se xxxx xxxxx rámec x XXX.

1.3 XXXXXXX XXXXX

V bakteriálním xxxxx xx využívají xxxxxxxxxxxxx buňky, xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx DNA. Xxxxx in xxxxx xxxxxx xxxxxxxx exogenní xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx metabolické aktivace xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx imitovat xxxxx podmínky xx xxxx, xxxxx test xxxxxxxxxxx přímé xxxxxxxxx x mutagenní x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx test xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx používá xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx vyvolávající genové xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx, xx mnohé chemikálie, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx také v xxxxxx xxxxxxx mutagenní xxxxxxxx. Xxxxxxxx ovšem x xxxxxxxx mutagenních xxxxx, xxx xx xxxxx testem xxxxxxxx; xxxxxxx tohoto xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo rozdíly x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xx druhé xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx test xxxxxxxxxx mutací může xxx xxxxxxxx pro xxxxxx třídy chemických xxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx sloučeniny (kupříkladu xxxxxx antibiotika) a xxxxx, x xxxxx xx předpokládá xxxx xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx analoga xxxxxxxxxx); x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x savců.

Xxxxx sloučeniny, xxx xxxx při xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx karcinogenní xxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx; závisí xx xxxxxxxx xxxxx, x existují karcinogeny, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx mechanismem, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4 XXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx přítomnosti x xx nepřítomnosti xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx klasické miskové xxxxxx "plate incorporation" xx suspenze xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx na xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx půdou. Při xxxxxxxxxxxx metodě xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x smísí s xxxxxxx xxxxxx a xx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxx xxxx metodách xx xxx xx xxx xxx xx inkubaci xxxxxxxxxxx kolonie spočítají x výsledek xx xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx revertujících xxxxxxx xx kontrolních xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Xx xxxxxxx xxxxxxx postupů xxx provedení testu. X nich xxxxxxxxxxx xxxx klasická misková xxxxxx ["plate incorporation"] (1) (2) (3) (4), xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) x suspenzní xxxxxx (11). Jsou xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx nebo par (12).

Xxxxxxx xxxxxxx x rámci xxxxxx xx xxxxxx hlavně xxxxxx xxxxx incorporation x metody xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx metody xxxx přijatelné pro xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxxxxx aktivací, xxx xxx ní. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx se x xxxxxxxx xxxxx, kam xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx kovy, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx alkaloidy, alylové xxxxxxxxxx a nitrosloučeniny (3). Také bylo xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx neodhalí. Xx xx xx xxxxx xxxxxxxx jako xx "xxxxxxxxx případy", k xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx použít xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx případy" (xxxxx x příklady xxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx jejich xxxxxxx použít): xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx x těkavé xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) a xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx od xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.5. XXXXX METODY

1.5.1 Xxxxxxxx

1.5.1.1 Bakterie

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx stacionárního xxxxxx xxxxx (zhruba 10⁹ xxxxx/xx). Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx nepoužívají. Xxxxxxxx xx, aby xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Titr xx dá prokázat xxx z historických xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx miskách.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 37^xX.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx (XX 1535; XX 1537 xxxx TA97a xxxx 1X97; XX98; a XX100); x xxxxx xxxx prokázána xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx reverzním xxxxx xxxx xxxx GC x xx známo, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx se xxxx detekovat xxxxxx xxxxx E. xxxx XX2 xxxx X. xxxxxxxxxxx XX102 (19), xxxxx mají na xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx XX. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů tato:

- X. typhimurium XX1535 x

- X. typhimurium TA1537 xxxx XX97 xxxx XX97x x

- X. xxxxxxxxxxx XX98 x

- X. xxxxxxxxxxx TA100 x

- X. xxxx XX2 xxxX xxxx X. coli XX2 xxxX (xXX101) nebo X. xxxxxxxxxxx XX102.

X detekci mutagenů xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx XX102 xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx E. xxxx (xxxx. E. xxxx XX2 nebo X. xxxx XX2 (xXX101)).

Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx postupů xxxxxxxx zásobní xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxx každý xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxxxxx závislost na xxxxxxxxxxxxx nutné pro xxxx (xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx S. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx E. xxxx). Xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x xx: xxxxxxxxxx xx nepřítomnost X-xxxxxx xxxxxxxx tam, xxx xx xxxxxxxx x xxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxx ampicilinu x xxxxx TA98, XX100 x TA97a xxxx XX97, XX2 uvrA (xXX101) a xxxxxxxxxx xxxx ampicilinu + xxxxxxxxxxxx x xxxxx XX 102); xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (tj. xxx mutace x X. typhimurium xxxxxx xxxxxxxxxx vůči krystalové xxxxxxx a uvrA xxxxxx x X. xxxx xxxx xxxX xxxxxx x S. xxxxxxxxxxx xxxxxx citlivosti xx ultrafialové xxxxxx) (2) (3). Xxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxx spontánně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx možno x x rozmezí uvedeném x xxxxxxxxxx.

1.5.1.2 Médium

Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx (xxxx. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx minimálním xxxxxx X a xxxxxxxx) x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx histidin x biotin xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx několik xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).

1.5.1.3 Metabolická xxxxxxxx

Bakterie xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxx za xxxxxxxxxxx, tak xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx post-mitochondriální frakce (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx látkami, xxxx xx Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-naftoflavonu (18) (20) (21). Post-mitochondriální xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v koncentracích xxxx 5 x 30 % x/x xx xxxxx X9. Xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xxxxx xxxxxxx xx xxxxx testované xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx vhodné xxxxxx post-mitochondriální frakci x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx redukční xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6) (13).

1.5.1.4 Testovaná xxxxx / xxxxxxxx

Xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx rozpustí nebo xx xxxxxxxx jejich xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu x případně se xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx mohou xx xxxxxxxxx systému xxxxxxxx xxxxx nebo se xxxxxxx ředí. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx prokazují, xx jejich xxxxx xxxxxxxxxx xx přijatelné.

1.5.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.5.2.1 Xxxxxxx xxxxx (xxx 1.5.1.1.)

1.5.2.2 Koncentrace

Xx xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxxxxxxxxxx x rozpustnost x konečné xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx.

Může xxx účelné xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx dá xxxxxxx snížením xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx může xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xx skutečných xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x pouhým xxxx.

Xxxxxxxxxx maximální pokusná xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx látek, xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, by xxxxx xxxx několik xxxxxxxxxxx mělo být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxxxxxxx již xx xxxxxxxxxxx nižších xxx 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx, se xxxxxxx až xx xxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx pěti xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx koncentrací xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. √10) xxxx xxxxxxxxxxxx body v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xx koncentrační xxxxxxxxx, xxxx xxx vhodný xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx koncentrací xxxxxxx xxx 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx xxxxxxxx v úvahu, xxxxxxx-xx se látka xxxxxxxxxx podstatné množství xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.5.2.3 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxx specifickou xxxxxxxxx a negativní (xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací, xxx xxx xx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.

X xxxxx x metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx látka pro xxxxxxxxx xxxxxxxx volí xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Příklady xxxxx, jež xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:

Xxxxx	CAS	EINECS
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx	781-43-1	212-308-4
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx	57-97-6	200-359-5
xxxx[x]xxxxx	50-32-8	200-028-5
2-xxxxxxxxxxxxx	613-13-8	210-330-9
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2

Xxxxxxxxxxx xxxxx je vhodnou xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:

Látka	XXX	XXXXXX
Xxxxx červeň	573-58-0	209-358-4

2-aminoantracen xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinnosti xxxxx X9. Xxxxx xx 2-aminoantracen xxxxxxx, xx xxxxx každou xxxxx S9 xxxxxxxxxxxxxxx xxxx mutagenem, xxxxx xxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Příklady xxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní kontrolu x testech xxx xxxxxxxxxx systému metabolické xxxxxxxx, uvádí xxxx xxxxxxx:

Látka	XXX	XXXXXX
Xxxx xxxxx	26628-22-8	247-852-1	XX 1535 x XX 100
2-xxxxxxxxxxxx	607-57-8	210-138-5	TA 98
9-xxxxxxxxxxxx	90-45-9	201-995-6	TA 1537, XX 97 x XX 97a
XXX 191	17070-45-0	241-129-4	XX 1537, TA 97 x XX 97x
xxxxx-xxxxxxxxxxxx	80-15-9	201-254-7	XX 102
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6	WP uvrA x XX 102
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx	70-25-7	200-730-1	XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (pKM101)
4-nitrochinolin-1-oxid	56-57-5	200-281-1	XX2, XX2xxxX a XX2xxxX (xXX101)
Xxxxxxxxxxxx (XX2)	3688-53-7		xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx referenční xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, xx xxxxx uvážit použití xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx x negativní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx testované xxxxx, xx kterými xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx jako při xxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, že zvolené xxxxxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxx či xxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.3 XXXXXX

Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4) xxx metabolické xxxxxxxx xx obvykle xxxxx 0,05 nebo 0,1 ml testovaného xxxxxxx, 0,1 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx zhruba 10⁸ xxxxxxxxxxxxxxx buněk) x 0,5 ml xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. X testech s xxxxxxxxxxxx aktivací xx xxxxxxx mísí 0,5 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x v metabolické xxxxxxxxx xxxxx) x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x testovanou xxxxxx /xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xx povrch xxxxx x minimálním xxxxxx. Vrchní xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx testovaná xxxxx / testovaný roztok xxxxx preinkubovat s xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxx 10⁸ xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) a xxxxxxxxx xxxxxx xxxx metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,5 xx) obvykle xx xxxx 20 xxx xxxx déle xxx 30 - 37 ^xX; xxxxx xx xxxxx s vrchním xxxxxx a xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 ml xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx roztoku 0,1 xx xxxxxxxx a 0,5 xx xxxxx X9 xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx xxxxxxx ke xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx test xxxxx xxxxxxxxxxx.

Plynné xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, například x xxxxxxxxxx nádobách (12) (14) (15) (16).

1.5.4 XXXXXXXX

Všechny xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 ^xX pod xxxx 48 - 72 hodin, xxxxx xx spočítají revertantní xxxxxxx xx každé xxxxx.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xx uvede xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxx), xxx z xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx látku i xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolu (xxxx. xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx) xx uvedou xxxxx xxx xxxxxxxxxx misky x xxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx misku xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx pozitivní xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx testováním, nejlépe xx modifikovaných experimentálních xxxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx případu. Xxxxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nepovažuje xx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx. X následných experimentech xx třeba zvážit xxxxxxxxxx studijních xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx posuzovaných xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx ("xxxxx xxxxxxxxxxxxx" nebo preinkubace x xxxxxxx xxxxxxxxx) x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx závislý xxxxxx xx sledovaném xxxxxxx a/nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxx jedné xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx jednoho xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem xxxx xxx něj (23). Xxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx relevance xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (24), statistická xxxxxxxxxx xx však neměla xxx xxxxxxx určujícím xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx.

Testovaná xxxxx, xxxxx výsledky xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vyvodit x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx závěr. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx několikrát opakuje.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx reverzní xxxxxx ukazují, že xxxxx vyvolává genové xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx posuzovaných xxxxxx x genomu Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx. Negativní xxxxxxxx ukazují, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.

Xxxxx:

- xxxxxxx xxxxx,

- xxxxx xxxxx x kultuře,

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Podmínky xxxxxx:

- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxx (x xx nebo μl) xx xxxxxxxxxxx volby xxxxx a xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx,

- použitá xxxxx,

-xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx),

- postupy xxxxxxxx (xxxxxxxxxx).

Xxxxxxxx:

- xxxxxx toxicity,

- známky xxxxxxx,

- xxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xxxxx x směrodatná xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, je-li to xxxxx,

- statistické xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx,

- údaje z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

B.15. XXXXXX XXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

Xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae xxxxx xxx xxxxx pro xxxxxx produkce xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx a x metabolickou aktivací.

Xxxx využívány xxxxxxx xxxxxxx systémy x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx mutant (xxx-1, xxx-2) na xxxxxxx, adenin xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx, jako xx indukce xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Nejlépe ověřený xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx využití xxxxxxxxxxx xxxxx XV 185-14 X x xxxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 2-1, xxx 4-17, xxx 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx jsou vratné xxxxxxxxx xxxxxxxx typu xxxxxx xxxx, které xxxxxxxx mutace ve xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mutace. XX185-14X xxxx xxxxxx xxx 1-7 marker, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx x xxxxxx hom 3-10, xxxxx xx revertován xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

U xxxxxxxxxxx xxxxx S. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X₇, který je xxxxxxxxxxx xxx ilv 1-92.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx být připraveny xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx použití vhodného xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx vyšší xxx 2 objemová % x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (DMSO). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vehikula nemá xxxxxxxx xxxxxxxx životnost x charakteristiky růstu.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx užívaným xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakce xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx indukujících xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx druhů, xxxxx, postmitochondriálních frakcí xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxx XX 158-14X a xxxxxxxxx xxxx D7 xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx kmeny xxxxx xxx xxxxxx vhodné.

1.2.2.2 Xxxxx

Odpovídající xxxxxxxxxx xxxxx xxxx užívána xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Pozitivní, xxxxxxxxxxx x rozpouštědlem xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx současně. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx mutační xxxxx xxxx xxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx

Xx být xxxxxxx nejméně 5 xxxxxx xxxxxxxxx koncentrací. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx použitá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Látky xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx až po xxx rozpustnosti látky xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xxx xxxxx netoxické, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx jsou xxxxxxxxxx po sedm xxx xxx 28 xx 30 ^xX xx xxx.

1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.7 Počet xxxxxxxxx

Xx nutno xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx xx jednu xxxxxxxxxxx u xxxxx x prototrofními xxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx 3-10 s xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx statisticky xxxxxxxxxx údaje.

1.2.3 Popis xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx x tekutém xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Základní xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx: 1-5 x 10⁷ xxxxx/xx je xxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxx až 18 x. xxx 28 xx 30 ^xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx množství metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx centrifugovány, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx inkubaci xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx je první xxxxx xxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx první xxxxx pozitivní, xx xxxxxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx v tabulkové xxxxx a xxxxxxxx xxxxx kolonií, počet xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxxx. Xxxxxxx výsledky mají xxx potvrzeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx vyhodnoceny xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx informace x:

- xxxxxxxxx kmenech,

- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx ve xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxx, xxxxxxx médií, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, teplota xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontroly,

- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, přežívajících xxxxx x frekvenci mutací, xxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx detekována xxxx xxxx (obecněji mezi xxxxx x jeho xxxxxxxxxxx) a xxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx xx nazýván xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx případ xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xx nazýván xxxxxx xxxxxxxx. Překřížení xx xxxxxx testováno xx xxxxxxx tvorby recesivních xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx vzniklých x xxxxxxxxxxxxxxx kmenů, genová xxxxxxxx je xxxxxxxxx xx základě xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzniklých x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx genu. Xxxxxxxxxx xxxxxxx kmeny xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx X₄ (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 2 x xxx 5), X₇ (xxxxxxxxxxxxxx x trp 5), XX₃₄ (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4) x XX1 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4 x xxx 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x růžové xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x D₅ xxxx D₇ (který xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx konversi x xxxxxxxx xxxxxx v xxx 1-92). Xxx xxxxx jsou heteroalelické xxx xxxxxxxxxxxxxx alely xxx 2.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Roztoky xxxxxxxxxxx látek a xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx těsně xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx vehikula. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx užít xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx rozpouštědlech, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx aktivace

Xxxxx mají být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx exogenního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakce xxxxxxxxxx z jater xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx jiných druhů, xxxxx, postmitochondriálních frakcí xx postupů xxxx xxx xxxxxx vhodné xxx metabolickou aktivaci.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx X₄, X₅, X₇ x XX1. Užití xxxxxx xxxxx může xxx xxxxxx vhodné.

1.2.2.2 Xxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx média xxxx užívána pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx

1.2.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x rozpouštědlem xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx současně. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxx odpovídající pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx

Xx být xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxx na cytotoxicitu x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxxxx pod 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xx mez xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx látky xxxxxxxxx, xx vodě xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxx mohou xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx stacionární xxxx, nebo během xxxxx xx xxxx xx 18 x. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx přítomnost xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.2.5 Podmínky xxxxxxxx

Misky jsou xxxxxxxxxx xx tmě xx xxxxx xx xxxx xxx xxx 28 - 30 ^xX. Misky xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx sektorů xxxxxxxxx mitotickým xxxxxxxxxxx xxxx být umístěny x xxxxxxxxxx (xxx 4 ^xX) po xxxxx 1 - 2 xxx xxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxx utvořit odpovídající xxxxxxxxxxxx kolonie.

1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

Xxxx xxx užity xxxxxxxxxx x frekvencí xxxxxxxxxxx mutací x xxxxxxx akceptovaných xxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx xx xxxxx koncentraci x testu prototrofních xxxxx xxxxxxxxx mitotickou xxxxxxx xxxxxxxx a xxx určení xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx homozygozity xxxxxxx mitotickým xxxxxxxxxxx xx xxx počet xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx dostatečného xxxxx xxxxxxx.

1.2.2.8 Xxxxxx

Xxxxxxxxx S. xxxxxxxxxx xxxxxxx obvykle jako xxxxxxxxxx test v xxxxxxx prostředí x xxxxxxxx xxx stacionární, xxxx xxxxxxxx buňky. Xxxxxxxx pokusy mají xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. 1-5 x 10⁷ xxxxx/xx xx xxxxxxxxx testované xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 ^xX xx xxxxxxx. Odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, pokud xx xx xxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x vyočkovány xx vhodné kultivační xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x buňky x indukcí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Jestliže je xxxxx pokus xxxxxxxxx, xx být xxxxxxxx xxxxx pokus x xxxxxxx xx stacionární xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx dalším xxxxxxx nezávislým experimentem.

2. XXXXX

Xxxxx mají xxx prezentovány x xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx experimentu.

Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x průběhu pokusu

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxx, složení xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, metabolický aktivační xxxxxx,

- podmínky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, postup x xxxxxx ovlivnění, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly,

- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, vztah dávky x xxxxxx, xxxxx xx to xxxxx, xxxxxxxxxxx hodnocení dat,

- diskusi xxxxxxxx,

- vyhodnocení výsledků.

X.17. MUTAGENITA - XXXX XXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX XXXXXXX XX XXXXX

1. XXXXXX

Xxxxxx xx replikací XXXX XX 476, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxx Xxxx Xxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxx genových xxxxxx xx vitro xx xx používat xx zjišťování xxxxxxxx xxxxxx vyvolaných xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx vhodné xxxxxxx xxxxx patří xxxx lymfomové buňky X5178X, xxxxx XXX, XXX-XX52 x V79 xxxxx čínského xxxxxx x lidské xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx XX6 (1). X těchto xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x thymidinkináze (XX) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x v xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx fosforibosyltransferáze (XXXX). Xxxxx mutací x XX, XXXX x XXXX xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Autosomální xxxxxxxxxx XX x XXXX xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx změny (xxxx. xxxxx delece), xxxxx xx xx xxxxxx XXXX xxxxxxxxxx X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).

X xxxxx na genové xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx in vitro xx dají xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx nebo buněčných xxxxx. Xxx xxxxx xxxxx se xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx mutací.

Testy in xxxxx obecně vyžadují xxxxxxxx zdroj metabolické xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx vivo xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx výsledky xxxxxxxxxx xxxxxxx mutagenitu. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx pH, xxxxxxxxxx xx vysoké xxxxxxxxxxxx (7).

Xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx screeningu xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x karcinogenů. Xxxx xxxxxxxxx, xxxxx jsou x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx druhu xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx více xxxxxxx toho, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx tímto testem xxxxxxxx, protože xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx mechanismem xx xxxxxxxxxxx, který v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (6).

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx mutace: genová xxxxxx xxxxxxxxx typu xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xx xxxxx xxxx ztrátě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páru xxxx: xxxxx způsobující xxxxxxxxxx jednoho xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx x XXX.

Xxxxxxxxxx mutageny (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxx jednoho nebo xxxx xxxx bází x XXX.

Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx z xxxx zmutovaných xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx mutací: počet xxxxxxxxxxxx mutovaných xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxx x xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxxx buněk; xxxxxxxxxx xx jako xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx růstu (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxx klonovací účinnosti xxxxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxx).

Xxxxxxxxx suspenzní xxxx: xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolou.

Životnost (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx efficiency) ovlivněných xxxxx x době xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxxxx podmínkách xx xxxxxx exprese.

Přežití: xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx konci působení xxxxx; xxxxxxxxx xx xxxxxxx v porovnánís xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX METODY

Buňky, deficientní xx xxxxxxxxxxxxxx (TK) x xxxxxxxx mutace XX^+/- → XX^-/-, xxxx rezistentní vůči xxxxxxxxxxxxx působení pyrimidinového xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (TFT). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx vůči XXX xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dělení. Za xxxxxxxxxxx TFT xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nemohou. Xxxxxxx xxxx buňky s xxxxxxxxxxx HPRT xxxx XXXX selekčně rezistentní xxxx 6-xxxxxxxxxxx (XX) xxxx 8-azaguaninu (XX). Xxxxx xx xxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx toxicitu xxxxxxxxx xxxxx vůči xxxxxx s xxxxxxxx x bez nich. Xxxxxxx-xx se tedy xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx činidlem, xx xxxxx xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).

Xxxxx x suspenzi nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx vhodnou xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x kultivují xx xx stanovení xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Cytotoxicita xx stanoví xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (přežití) (cloning xxxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nárůstu kultur xx působení xxxxx. Xxxxxxx xx ponechají x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx dobu, xxxxxxxxxxxxxxxxx pro daný xxxxx a typ xxxxx, aby xxxxx xxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx fenotypické xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Frekvence xxxxxxx se stanoví xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, ke xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Po xxxxxx xxxxxxxxx době xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx mutovaných buněk x xxxxxxxxx xxxxx x x počtu xxxxxxx x neselekčním xxxxx.

1.4 XXXXX METODY

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx

Xx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx typů, xxxxxx xxxxxxxx buněk X5171X, XXX, XXX-XX52, V79 x TK6. X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx testu xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx klonovací xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) x xxxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx. U xxxxx xx kontroluje, xxx xxxxxx kontaminovány xxxxxxxxxxxx; infikované buňky xx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxx). Xxxxx xxxxx, xxxxx kultur x koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx parametrům vyhovovat (14). Xxxxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx expozici x xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxx stadiích xxxxx, xx dán frekvencí xxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xx xxxxx buněk xx xxx minimálně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx použít xxxxxxx 10⁶ xxxxx. Xxxx by xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvládnutí xxxxx.

1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx podmínky

Je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO₂, xxxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx xx pro xxxx xxxx podle xxxxxxxxxx systému x xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx růst xxxxx xxxxx xxxxxxxx periody x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx se namnoží xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx x inkubují xxx teplotě 37 ^xX. Před xxxxxxxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx buněk.

1.4.1.4 Metabolická xxxxxxxx

Xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx působí x xxxxxxxxxxx i x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx je kofaktory xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx hlodavců, xxxxxxxxx xxxxxxx indukujícími xxxxxx xxxx je Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx a β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).

Konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x médiu činí xxxxxxx 1 - 10% v/v. Aktivita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xxxx záviset xx xxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxx účely xxxxxxxxx aktivace mohou xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Výběr xxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxx vědecky xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx cytochromu X450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).

1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx stavu, xxxxx xx před xxxxxxxxx xx xxxxx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx naředí. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx systému xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx ředí. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o jejich xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vlastnosti.

1.4.2 Xxxxxxxx testu

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

X zvoleného rozpouštědla xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x testovanou látkou xxxxxxxx reagovat, x xxxxx xxxxxxxxx přežívání xxxxx x xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxx rozpouštědlo xxxx xxx podpořeno xxxxxxxxxxx prokazujícími jeho xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxx tam, xxx je xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx zvažováno xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx testovaná xxxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx bezvodé. Xxxx xx dá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sítem.

1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxx stanovování xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx xX xxxx. osmolality.

Cytotoxicita xx xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx x bez xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž xx xxxxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx, xxxx xx relativní xxxxxxxxx xxxxxxxx (přežití) nebo xxxxxxxxx xxxxxxx růst. Xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxxx x rozpustnost x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx minimálně xxxxx xxxxxxxxxxxxxx koncentrace. Dochází-li x cytotoxicitě, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx toxicity. To xxxxxxx znamená, že xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx lišit xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx hodnotami 2 a √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, měla xx xxxx x xxxxxxxxxxx přežití (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x 10-20 %, xx však xxxx xxx 10 %. X xxxxxxxxx netoxických xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx nejnižší x xxxxxx 5 mg/ml, 5 μx/xx x 1,01 X.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx xx koncentrace, xxx xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, než xx mez rozpustnosti xx finálním xxxxxxxxxxx xxxxx na konci xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxx rozpustnost xx xxxxxxx x xx konci působení, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx expozice x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, X9, xxxx xxx. měnit. Nerozpustnost xx dá zjistit x prostým okem. Xxxxxxxxx nesmí xxx xx překážku při xxxxxxxxx buněk.

1.4.2.3 Kontroly

V xxxxx xxxxxxx experimentu xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, vehikulum) xxxxxxxx, x to xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Xxxxx xx xxxxxxxx metabolická xxxxxxxx, xxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxx	Xxxxx	Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxxxxx
Xx	XXXX	xxxxx methansulfonát ethyl xxxxxxxxxxxxxxx	62-50-0 759-73-9	200-536-7 212-072-2
	XX (xxxx x velké xxxxxxx)	xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	66-27-3	200-625-0
	XXXX	xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx	62-50-0 759-73-9	200-536-7 212-072-2
Xxx	XXXX	3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx	56-49-5 62-75-9 57-97-6	200-276-4 200-549-8 200-359-5
	XX (malé a xxxxx xxxxxxx)	xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx	50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5	200-015-4

				200-028-5 200-276-5
	XXXX	X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx X-9)	62-75-9	200-549-8
		xxxxx[x]xxxxx	50-32-8	200-028-5

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxx i xxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x 5-brom-2'-deoxyuridinu (XXX 59-14-3, xxxxx XXXXXX 200-415-9), lze xxxxxx x tuto referenční xxxxx. Tam, xxx xx xx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx i negativní xxxxxxxx, xx xxxxx xx používá xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulum x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem jako xxxxxxxxxxxxxx kultury. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxx xxxxx nepříznivé xx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.4.3 Xxxxxx

1.4.3.1 Xxxxxxxx testovanou xxxxxx

Xx proliferující buňky xx působí xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Xxxxxxxx xxxxxxx po vhodnou xxxx (xxxxxxx xx xxxxxx doba 3-6 xxxxx). Doba expozice xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx buněčných xxxxx.

Xxx xxxxxx koncentraci xx používají xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx. Používá-li se xxxxx jedna xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx zajistil xxxxxxxxx xxxxx kultur x xxxxxxx (xx. xxxxxxxxx osm xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolou (xxxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xx používají xxxxxxxxxx.

X xxxxxxx plynných xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx uplatnit v xxxxx xxxxxx postupy, xxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (21, 22).

1.4.3.2 Xxxxxxxxx přežívání, viability x xxxxxxx frekvence

Po xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x fenotypické xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx obvykle xxxxxx x analýzou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti - cloning xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx celkového xxxxx.

Xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx expresi xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX x XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, TK xxxxxxxxx 2 xxx). Xxxxx se pěstují x xxxxx x x bez selekčního xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx účinnosti. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (používané x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx x xxxxx L5178Y XX⁺/^- xxxxxxxxx, je třeba xxxxxxxxx na jedné x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace) x xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x tomto xxxxx xxxxxxxxx, změří xx xxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx. Měření xx xxxx xxxxxxx x xx studiích x XX6XX⁺/^-.

2. ÚDAJE

2.1 Zpracování xxxxxxxx

Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, počty xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X případě xxxxxxxxx xxxxxx x testu X5178XX⁺/^- xx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx přinejmenším x xxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrole. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx velkých x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx xxxxx XX⁺/^- xx kolonie xxxxxxx xxxxx kritéria xxxxxxx xxxxxxxxxx růstu (velké) x xxxxxxxx xxxxx (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx nejrozsáhlejší xxxxxxxxx xxxxxxxxx, mají xxxxx dobu xxxxxxxx, x proto xxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx ztráty xxxxxx genu po xxxxxxxxxxxx viditelné xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tvorba malých xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx látkám xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové xxxxxxx (26). Méně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx rodičovské x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (relativní xxxxxxxxx účinnost - xxxxxxxx cloning xxxxxxxxxx) xxxx relativní xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx mutovaných buněk xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxxxx se xxxxxxx data xxxxxx x tabelární xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xx musí potvrdit xxxxxx od xxxxxxx. X případech, xxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxx zdůvodnění. V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx x následných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx rozšířilo xxxxxxx podmínek. K xxxxxxxxxx, které xx xxxx x experimentu xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx koncentracemi x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2.2 VYHODNOCENÍ A XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, například xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx frekvence. Nejprve xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody. Xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx neměla xxx xxxxxxx určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx případech xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, i xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.

Pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x savčích xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx testovaná xxxxx vyvolává x xxxxxxx savčích buněk xxxxxx mutace. Nejprůkaznější xx reprodukovatelný xxxxxxxxx xxxxx xxxxx - xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že za xxxxxx experimentálních podmínek xxxxxxxxx látka x xxxxxxx xxxxxxx buněk xxxxxxxxxx genové mutace.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba uvést xxxx informace:

Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,

- rozpustnost x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx známa.

Buňky:

- xxx x xxxxx xxxxx,

- xxxxx buněčných xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx metody xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx pokusu:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx. xxxxx x xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx k xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- inkubační xxxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx,

-xxxx působení xxxxx,

- hustota buněk xxxxx působení xxxxx,

- xxx x složení xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- délka xxxxxxxx xxxxxxx (případně včetně xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx)

- selekční činidla,

- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx, u xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxx (xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx "malými" x "xxxxxxx" koloniemi).

Výsledky:

- xxxxxx toxicity,

- xxxxxx xxxxxxx,

- údaje o xX x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx a pozitivní xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx malé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx X5178X XX⁺/^-,

- xxxxx xxxxx - xxxxxx, je-li xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

X.18. XXXXXXXXX XXX REPARACE - XXXXXXXXXXX XXXXXXX XXX - XXXXX XXXXX XX VITRO

1. METODA

1.1 Princip xxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (XXX) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX obsahující xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx je xxxxxxx na inkorporaci xxxxxxxxx tymidínu (³X-XxX) xx DNA xxxxxxx xxxxx, xxxxx nejsou x S xxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx ³X-XxX xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx nebo kapalnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x exponovaných buňkách. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx i x xxxxxxxxxxxxx exogenního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. XXX xxxx xxx také xxxxxxxxx v systému xx xxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Příprava

Testované xxxxx x sloučeniny xxxxxxx jako kontrolní xxxx referenční xx xxxxxxxx nebo suspendují x kultivačním xxxxx xxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Další xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx médiem. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk.

Xxxxxxxxx se pouze xxxxxxxxxxxx potkaních xxxxxxxxxx, xxxxxxxx lymfocytů xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx linií (xxxxxx diploidní fibroblasty).

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx

Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kultur xxx autoradiografii x xxxxx xxxxxx (nebo xxxx, xx-xx xx xxxxxxx zdůvodnitelné) xxx XXX UDS.

1.2.2.2 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx

X každém xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx i x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.

Xxxx pozitivní xxxxxxxx lze xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx použít 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-DMBA) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-AAF). Xxxx xxxxxxxxx kontrolu pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx pro xxxxxxxxxxxxxxx, xxx i xxx XXX bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx testované xxxxx

Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx. Nejvyšší koncentrace xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xx xxxx špatně xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx rozpustnosti xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx koncentrace testované xxxxx určuje případ xx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxx

Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂, xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxxx xxx xxxxxxxxxx kontrolovány xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx aktivace

Xxx xxxxxxxxxxxx hepatocytů se xxxxxxxxxxx aktivační systém xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx v xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxx experiment

1.2.3.1 Příprava xxxxxx

Stabilizovaná xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx xx zásobní xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x povrchu xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx vhodné xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 ^xX.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přichytit se xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur testované xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Čerstvě xxxxxxxxx xxxxxxxxxx potkana xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxx xxxxxxxxxxx ³X-XxX po xxxxxxx xxxx. Po ukončené xxxxxxxx xx médium xxxxxxxxxx, buňky xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx emulze (xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx stripping xxxx), xxxxxxxxxx, vyvolána, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.

Stabilizované xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx

Autoradiografické xxxxxxxx: Xxxxxxx kultury xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxx xxxx x pak jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx ³H-TdR. Xxxx xxxxxxxx je xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, aktivitě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxx buněk. X xxxxxxxxx nejvyššího xxxxxxx XXX xx xxxxx ³X-XxX přidat xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx. Xxxxx mezi těmito xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxxxxxxx xxxxxx a ³X-XxX. K xxxxxxxx xxxx XXX a xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx DNA xx xxxxx arginin xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxx nebo xxxxxxxx hydroxyurey do xxxxxxxxxxxx média, xxx xxxxxxx xxxxxxxx semikonzervativní xxxxxxxxx XXX.

Xxxxxxxxx XXX xxxxxx XXX: Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxx vstup xxxxx xx S-fáze, jak xxxx xxxxx uvedeno. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx popsáno xxx autoradiografii. Xx xxxxx xxxxxxxxx je XXX xxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx XXX x xxxxx rozsah xxxxxxxxxxx ³X-XxX.

Xxxxxxxx xxxx použity ve xxxxx uvedených xxxxxxxx xxxxxx lymfocyty, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx replikace XXX xxxxxxxx.

1.2.4 Analýza

1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx

Xxx xxxxxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx kultuře xx xxxxx v S-fázi xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx 50 xxxxx x xxxxxx experimentálním xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx. X každém xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx ³X-XxX v xxxxxxxxxx xx xxxx x xxxx x velikosti xxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx LSC

Xxx xxxxxxxxx XXX XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxx kontroly.

Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.

2.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxxxxx ³X-XxX xx cytoplazmy a xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx buněčné xxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxxx ³X-XxX xx cytoplazmy x xxxxx xxx x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, mediánu x xxxx.

2.2 Xxxxxxxxxxx XXX

Xxxxxxxxxxx ³H-TdR xx xxxxxxxxxxx jako xxx/μx DNA. Průměrná xxxxxxx xxx/μx DNA xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx x vyjádření xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Údaje xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx možné, xxxxxxxxx o:

- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx x číslu xxxxxx x době xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, koncentraci XX₂,

- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systému,

- xxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx X-xxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxx XXX a k xxxxxxxxxxx celkového xxxxxx XXX při metodě XXX,

- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.19. XXX - XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX IN VITRO

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

SCE xx krátkodobý xxxx xxx detekci xxxxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. SCE reprezentují xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX mezi replikačními xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx spojení, xxx xx zatím xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Detekce XXX xxxxxxxx xxxxxxxxxx značení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XxxX) do xxxxxxxxxxxxx DNA na xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx buňky xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x přítomnosti x xxx xxxxxxxxxxx exogenního xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx po xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxx x médiu xxxxxxxxxxx XxxX. Ke xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxx x c-metafázi xxxxxx. Xx ukončení xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Používají xx xxxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx křečka). Xxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xx xxxxxx kultivační xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx (teplota, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO₂ x vlhkost).

Xxxxxxxxx xxxxx xx rozpouští xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiu xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx xxxxx významně ovlivnit xxxxxxxxx xxxxx, rychlost xxxxx xxxx xxxxxxxxx XXX.

Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x přítomnosti x xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx savčího xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Připouští xx xxxxxxx buněčných xxxx x xxxxxxx (xxxxxxx) metabolickou xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx vhodné pro xxxxxxxxxx xxxxxxx chemických xxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxx kultur

Xxx xxxxx experimentální bod xx xxxxxxx nejméně xxx kultury.

1.2.2.2 Negativní x pozitivní kontroly

X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být zařazeny xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx negativní xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít:

- xxxxx působící xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx

- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx

Je-li xxxxx, xx xxxxx zařadit xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx látka.

1.2.2.3 Koncentrace

Xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx umožnit xxxxxxxxx replikaci xxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace ve xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.3 Popis xxxxxxx

1.2.3.1 Xxxxxxxx kultur

Stabilizovaná xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx ze xxxxxxx xxxxxxx (trypsinací xxxx xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx kultivační xxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx nádob xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 ^xX. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx nevytvářely xxxx xxx z 50 % konfluentní xxxxxx. Lze xxxx xxxxxx suspenzních xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx připraví z xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x inkubují xxx 37 ^xX.

1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx růstu xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx až dvě xxxxxx, xxx expozice xxxx být xxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxx xxxxx, je-li xx xxxxx. Xxxxx, xxxxx nemají xxxxxxxxxxx xxxxxxx metabolickou aktivitu, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na xxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx x média xxxxxxxxxx, buňky xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x XxxX xxx xxxxxxxxxx cykly. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x XxxX xx xxxx xxxx buněčných cyklů.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxx kultury xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, dokud xxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx analyzovány x xxxxxx mitotickém xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx kultury x XxxX xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx XxxX.

1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xx xxxxx hodiny xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx do kultur xxxxx xxxxxxxxx dělicího xxxxxxxx (xxxx. kolchicín). Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx x barvení

Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou. Xxxxxxx preparátů ke xxxxxxxxxx XXX xxxx xxx provedeno xxxxxxxx xxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxx xxxx Giemsa).

1.2.3.5 Xxxxxxx

Xxxxx analyzovaných xxxxx xx závislý xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx SCE x kontrole. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 25 dobře xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Preparáty musí xxx xxxxxxxxxx před xxxxxxxx. X lidských xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x 46 xxxxxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxx linií pouze xxxxxxxx, xxxxx se xxxx x ± 2 xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx počtu centromer. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx centromery. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx formou. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x xxxxx xxxxxxxx x xxxxx XXX/xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxxxxxx buňkách, metodách xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, koncentraci XX₂, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, inhibitoru xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx x jeho xxxxx působení, metabolickém xxxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách,

- počtu xxxxxx xxx každý experimentální xxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx mikroskopických preparátů,

- počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx),

- xxxxxxxxx xxxxx SCE/buňku x XXX/xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxx každou kulturu),

- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX,

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.20. XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX XXXXXX XX POHLAVÍ U XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx mutace xxxxxx xx pohlaví (XXXX) xx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx detekci xxxxxx, xxx genových, xxx x malých xxxxxx, v zárodečných xxxxxxx hmyzu. Xx xx xxxx na xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx xxxxxxxxxx X. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxx 80 % xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1/5 xxxxxx haploidního xxxxxx.

Xxxxxx v X-xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx projeví x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx. Když xx mutace xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx její xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx jednoho xx xxxx typů xxxxxxx xxxxxxx, kteří xx xxxxxxxx rodí xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. XXXX xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x zvláštnímu xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxx dobře definované xxxxxx linie a xxxxxx xxxxx Muller-5. Xxxxx být xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx s vícenásobnou xxxxxxx X-xxxxxxxxxx.

1.2.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle (xxxx. xxxx xxxxxxx x Xxxxxx-60 xxxx 80), xxxx xxxxxxxx xx dále xxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxxx.

1.2.1.3 Počet xxxxxx

Test xx xxxxxx xxxxxxx citlivost. Xxxxxxxxx frekvence xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx ovlivňuje xxxxx xxxxx ovlivněných xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Způsob xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx uskutečňuje xxx xx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx plynům xxxx xxxxx. Zkrmování xxxxxxxxx xxxxx xx provádí x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx XxXx a xxxxxxxx xx do xxxxxx xxxx břišní xxxxxx.

1.2.1.5 Negativní a xxxxxxxxx kontroly

V xxxxxx pokusu se xxxxxxxx xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) a pozitivní xxxxxxxx. Jestliže xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx třeba xxxxxxxxx xx experimentu xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.1.6 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx se xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx předběžný xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx maximální xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávající xxxxxx toxicity. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxx divokého xxxx (xx xxxxx 3-5 xxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou x xxxxxxxxxxxx kříženi x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx Muller-5 xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx samice xxxxx xxx xx xxx xxx, xxx xxx xxxxxx celý xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. U xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx letální xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x účinkem xxxxxxxxx xxxxx x xxxx expozice xx xxxxx spermie, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx pozdním stadiu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx X₁ xxxxxx narozené x tohoto xxxxxxx xxxx xxxx kříženy xxxxxxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx/xxxxxxxx) xx svými xxxxxx. X F₂ xxxxxxxx je x xxxxx xxxxxxx zaznamenávána xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx X₁ xxxxxx nesoucí xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (nejsou nalezeni xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx chromozómem), dcery xxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx testovány, xxx xx xxxxxxxx, zda xxxxxxxx se opakuje x xxxxxxx xxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Získané xxxxx xx zpracují do xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx počet xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx, počet afertilních xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx každé xxxxxx xxxxxxx x xxx xxxxxxx testovaného xxxxx. Zaznamenává se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Údaje xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx letálních mutací xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx způsobem.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, informace x:

- xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxx ovlivněných xxxxx, xxxxx sterilních xxxxx, počtu xxxxxxxxx F₂ xxxxxx, xxxxx X₂ kultur xxx potomků, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx letální xxxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,

- kritériích xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin,

- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxx xxxxx ovlivňování x schéma odběru xxxxxx, xxxx dávek, xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x pozitivní xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx počítání xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, xx-xx xx možné,

- xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.21. XXXX XXXXXXXXXXXX SAVČÍCH BUNĚK - XX VITRO

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Savčí xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx in xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x maligní xxxxxxxxxxxx xx vivo. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx X3X10X1/2, 3X3, XXX, Fischerových xxxxxxx x xxxx xx xxxxx o xxxxx xxxxxxx morfologie, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx systémy xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx morfologické xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx karcinogenním xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx není xxxxxxx karcinogenity. Některé xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx účinku xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx vychází ze xxxxxxxxxxx, že expozice xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx relevantní, ale xxxxxx ji nelze xxxxxx x určení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, protože x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx k xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Buňky

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx použitelných x xxxxx transformace. Xxxxxxxxxxxxxx musí xxxxxxxx, xx buňky xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx fenotypické xxxxx po expozici xxxxxx xxxxxxxxxxxx a xx test xxxxxxxxx xxxxxxxxxx je ověřen x že xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx.

1.2.1.2 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx podmínky musí xxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx

Testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx suspendují x xxxxxxxxxxx médiu xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx x kultuře nesmí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx transformace.

1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx přítomnosti vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx její xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx musí xxx zařazeny pozitivní xxxxxxxx x použitím xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x vyžadujících xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx být xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (x rozpouštědlem).

Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxx působící xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,

- xxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx, 4-dimetylaminoazobenzen, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Je-li xxxxx, xx xxxxx zařadit xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx látka.

1.2.2.2 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx nejméně xxx dávky. Tyto xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx závislý xx koncentraci, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nízkou xxxxxx xxxxxxxxx buněk, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx přežívání xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x negativní kontrole. Xx vodě relativně xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxxx až xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xx xxxx rozpustné netoxické xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx testovacím xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx x opakovanou xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx (xx. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivační xxxxx), xxxxxxxx xx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxx vlastní xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx expozice xx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x kultivace xxxxxxx xxxx xx vhodných xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Všechny xxxxxxxx musí být xxxxxxx x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xxxx být prezentovány x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx vyjadřovat xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx inkubace, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, metabolickém xxxxxxxxxx xxxxxxx, pozitivních a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx sledovaného fenotypu, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx xx xxxxxx), xxxxxxxxxx xxxxxx koncentrací,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- diskusi xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX XXXX U XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxx

Xxxxxxxxxx letalita xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Indukce dominantních xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx chemické látce xxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Obecně se xxxxxxx, že dominantní xxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chromozómů (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Smrt embrya xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxx výsledkem xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxx exponováni testované xxxxx a xxxxxx x neovlivněnými, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Vzestup mrtvých xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx počet xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Preimplantační xxxxxx xx hodnotí xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx dominantní xxxxxxxx xx xxxxxx pre- x xxxxxxxxxxxxxxxxx ztrát. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx srovnání xxxxxx xxxxxxxxxx na samici x xxxxxxxxxx skupině x xxxxx xxxxxxxxxxx xx samici x xxxxxxxxx xxxxxxx. Snížení xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx způsobeno xxxxxxx xxxxx (t.j. xxxxxxxxxxxx x/xxxx spermatogonií).

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx nerozpustné xx xxxx se xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx ani xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Způsob xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podává pouze xxxxxx. Xx základě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx podávat xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx způsob xxxxxxxx je orální xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx aplikace.

1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo myši. Xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xx spontánní variabilitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky. Xxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxx detekční xxxxxxxxxx x silou xxxxxxxxxxxxx testu. V xxxxxxxx případě se xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, xxx xx dosáhlo 30 - 50 březích xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2.4 Negativní a xxxxxxxxx xxxxxxxx

Pozitivní x xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxx xxx zařazeny xx xxxxxxx experimentu. Jestliže xxxx xx xxxxxxxxx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivních kontrol x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx být xxxxxxx. Xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx dávkách, aby xxxx xxxxxxxxx citlivost xxxxx (xxxx. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 xx.xx^-1).

1.2.2.5 Xxxxxxxxx

Nejčastěji xx xxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. V některých xxxxxxxxx xx postačující xxxxx xxxxxx dávka.

1.2.2.6 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx podávají x xxxxx dávce 5 g.kg^-1 xxxx x xxxxx 1 x.xx^-1.xxx^-1 xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxx postupů. Nejčastěji xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx.

Jeden xxxxx xx opakovaně xxxxxx x jednou nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxx, intaktními xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxx u samců xxxxxxx xx xxxx xxxxxx jednoho cyklu xxxx, xxxx pokud xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx vagině xx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xxxxxx po xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx všechna xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx expozici.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx implantací. Vaječníky xxxx být vyšetřeny x xxxxxx xxxxx xxxxxxx tělísek.

2. XXXXX

Xxxxx x počtu xxxxx, počtu březích xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx x tabulkách. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx uváděny samostatně. Xxxxx samice xxxx xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, x xxxxx podané xxxxx, x počtu xxxxxx x xxxxxxx implantací.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx srovnání xxxxx xxxxxx implantací xx samici x xxxxxxxxxx skupině x xxxxxx živých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X xxxxxxx xxxx xxx xxxxx odlišeny časná x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxxxx x preimplantační ztráty. Xx xxxxx být xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx počtem xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx nebo jako xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx na dělohu xx xxxxxxxx s xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Zpráva o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxx, xxxxx, xxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xx každého xxxxxxx x exponovaných x kontrolních skupinách,

- testované látce, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x důvodech xxxxxx xxxxxx, negativních x xxxxxxxxxxx kontrolách, xxxxxxx x xxxxxxxx,

- xxxxxxx podání a xxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx x průkazu xxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx,

- kritéria xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx xxxxx/xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXXX SPERMATOGONIÍCH

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 483, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 ÚVOD

Xxxxxx xxxxx je xx xxxx identifikovat xxxxx xxxxxxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx druhu: xxxxxxxxxxxx a chromatidové. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou většinou xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x analýze xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Chromozómové xxxxxx a xxxxxxxx xxxx jsou x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx, a proto xx předpokládá, že xxxxxx predikovat indukci xxxxxxxxx mutací v xxxxxxxxxxx buňkách.

K xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Tímto xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx nepoužívá jiné xxxxxx xxxxx.

Aby xx ve spermatogoniích xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx první mitózu xx xxxxxxxx testované xxxxx, xxxxx než xx xxxxxxxxx ztratí x následujícím xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómů, kde xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu v xxxxxxxxx, x xxxx xx ovlivněné xxxxx xxxx ve spermatocyty.

Xxxxx xxxx xx xxxx je určen xx xxxxxxxxxx, zda xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x somatických buňkách xxxx xxxxxxx x xxxxxxx zárodečných. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx tím, xx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxx metabolismu xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx procesů XXX.

X xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx látkám. Zjištěné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx reakcí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx varleti xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx nemusejí xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx kvůli xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx bariéře Xxxxxxxxx buněk x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx pro xxxx vhodná.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx chromatidového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx projevuje xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx chromatid, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vyjádřená xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx obou chromatid xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx jako xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx chromozóm-ring)

Zlom xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx porušení xxxxxxxxxx jedné nebo xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx větší, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx chromatidy. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (distální) fragment x místě xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx jedna chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.

Xxx: achromatická xxxx xxxxx než xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Numerická xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.

Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (n) xxxx xxx diploidní xxxxx xxxx (3x, 4n xxx.).

Strukturální xxxxxxx: xxxxx chromozómové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx metafáze, pozorovaná xxxx delece x xxxxxxxxx, a výměny.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Zvířata xx vhodným způsobem xxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xx vhodnou xxxx xx xxxxxxxx xx usmrtí. Xxxx xxxxxxxxx xx na xx xxxxxx látkou xxxxxxxxxxx metafázi (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). Xx zárodečných xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xx xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.4 POPIS XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Výběr živočišného xxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxx jakéhokoliv jiného xxxxxxxx xxxxxxx druhu. Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx kmeny mladých xxxxxxxx dospělých xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x každého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.

1.4.1.2 Podmínky xxxxx

Všeobecné podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx B.

Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Zdraví xxxxx xxxxxxx jedinci xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x experimentální xxxxxxx. Jedinci xx xxxxxxxxxxx označí a xx xxxx minimálně xxxx xxx se xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Klece xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vlivy xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxx dávek

Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxx xxxxx x je-li to xxxxx, látka xx xxxx xxxxxxx zvířatům xxxxxxxx nebo se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx přímo xxxx xx xxxx xxxxxxxxx ředí. xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (stabilitě) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x používaných dávkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx použití xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě použito xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Xx každého xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx třeba xxxxxxxx xx zvířaty ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo při xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx tak, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx než xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx intervalu. Xxx xx xx xxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx vhodných pro xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx	XXX	EINECS
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxx	108-91-8	203-629-0
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxx xxxxxxx	79-06-1	201-173-7
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Negativní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zpracování, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx x o xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx mutagenní xxxxxx.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx

X každé xxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx dávkách. Xxxxx xx xxxxx x objemnou xxxxx, xxxx se x xxxxxxxxx aplikace rozdělit, xx. xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx hodin. Xxxxxx režimy xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

V případě xxxxxxx s nejvyšší xxxxxx se vzorky xx expozici xxxxx xxxxxxxxx dvakrát. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxx, xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxx. X ostatních xxxxx (xx. xxxx xxxxx xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx xxxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx buněčného xxxxx xx expozici, xxxxxx xx xxxx vhodnější xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (6).

Xxxxx xxxx mohou xxx xxxxxxx jiné xxxxxx intervaly xxxxxx xxxxxx. Xxxx. xxxxx-xx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, nebo xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxxx na S-fázi xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (1).

Zda xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx opakovaně, xx posuzuje případ xx případu. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx opakovaně, xxxxxxxx xx xxxxxxx xx 24 hodinách (1,5xxxxxxx xxxxxxxxx cyklu) xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx xx xx xx xxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Colcemidu® nebo xxxxxxxxxx x následně xx x xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx je xxxxx xxxxxxxx zhruba 3-5 xxxxx, x čínských xxxxxx xxxxxx 4-5 xxxxx.

1.5.3 Dávkování

Xxxxxxx-xx xx xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx žádné xxxxxx xxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx stejného živočišného xxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx užívají pro xxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx nízké xxxx xxxxxx. Xxx pozdější xxx xxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx nejvyšší xxxxx. Ta je xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx podávání xx účinky xxxx xxxxxxx.

Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx x vyhodnocují xx xxxxxx od xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xxxx být také xxxxxxxxxx xxxx dávka, xxxxx vede x xxxxxxx známkám xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x první x xxxxx meiotické xxxxxxxx( tento xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 50 %).

1.5.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx xxx dávce xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx nebo xx xxxx dávkách xxxxxxxx x jeden den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxx s podobnou xxxxxxxxx strukturou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx studie xx použití tří xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx humánní expozice xx může xxxxxx x xxxxxxxx testu xxxxx dávky.

1.5.5 Aplikace xxxxx

Testovaná látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx žaludeční xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, která se xx sondou xxxx xxxxxxx najednou xxxxxxx, xxxxxx na velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx dráždivých xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx xxx, xxx objem xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx xxxx z xxxx xxxxxx připraví buněčná xxxxxxxx, xx xxxxxx xx působí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx na xxxxxxxx xxxx a xxxxxx.

1.5.7 Xxxxxxx

U xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx metafází (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx x jedné xxxxxxx). Xxxxx xxxxx xx xx xxxxxx, xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vysoký. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx xxxxxxx postupy xxxxx vedou x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk a xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxx xxxx xxxxx počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx číslu 2x ± 2.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx x jednotlivých xxxxxx xx prezentují x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. X každého xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xx jednu buňku. X experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx jednotlivé xxxx xxxxxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxxxxxxxx zvlášť, uvádějí xx, xxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx-xx analyzována xxxxxx x xxxxxx, xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxx zvířat x xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx míra xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx, x to xxx, xx xx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 100 dělících xx xxxxx. Je-li xxxxxxxxxxx pouze xxxxxx, xxxxxxx xx mitotický xxxxx x minimálně 1000 xxxxx z xxxxxxx jedince.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx používá xxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx frekvence xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx jednorázovou xxxxxx a x xxxxxx časovým xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (8); statistická xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivního výsledku. Xxxxxxxxxxxxx výsledky je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx za xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx, xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vykazuje xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinku xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxx xxx ohledu xx počet xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Pozitivní xxxxxxxx xxxxx ukazují, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx daných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xxxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxxxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx dosáhne xxxxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx testované xxxxx rozpouštědla/vehikulu, pokud xx známa.

Xxxxxxx xxxxxxx:

- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- xxxxx x věk xxxxxx,

-xxxxx, chovné xxxxxxxx, xxxxxx apod.,

- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, včetně hmotnostního xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny.

Podmínky xxxxxx:

- xxxxx xx studie xxx xxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx látky,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,

- podrobnosti o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x potravě/pitné xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx / xxx),

- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx podávání xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- metody xxxxxxxxxx toxicity,

- xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx koncentrace a xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- kritéria xxx hodnocení xxxxxxx,

- počet analyzovaných xxxxx na xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx xx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo nejednoznačná.

Xxxxxxxx:

- známky xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxx a xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx aberací x dané xxxxxxx,

- počet xxxxx x aberacemi na xxxxx skupinu,

- xxxxx dávka - xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, byly-li xxxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,

- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx,

- případně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Závěry.

X.24. XXXX XXXX X XXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xx xx in xxxx xxxx xx xxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx chemickým látkám. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x cílovými geny xx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx srsti. Embrya xxxx heterozygoti pro xxxx genů xxxxxxxxxxxxx xxxxx srsti. Mutace xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vyjádřeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxx narozených xxxx. Xxxxx potomků x xxxxxx skvrnami, xxxxxxxx, je xxxxxxxxxx x xxxxxx frekvence xx srovnávána x xxxxxxxxx x potomků x xxxxxxx. Xxxx xxxx test xxxxxxxx xxxxxxxxx somatické xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x izotonickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx nerozpustné xx vodě jsou xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxx s testovanou xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Myši xxxxx X (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxxxxxx, xxxx xxx, x^xx x/x^xx x; xxxxx, b/b; xxxxxx, xxxxx xxx, x se/d xx; xxxxxxx spotting, s/s) xxxx xxxxxxx xxx x xxxxxx HT (xxxxxx, xxxxxxxxx, brachypody, xx x bp/pa x bp; xxxxxx xxxxx, xx fz/ /xx xx; xxxxx xx/xx) xxxx x xxxxxx C57 XX (xxxxxxxxx, x/x).

Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx nonagouti xxxxxxx. Xxxx. křížení xxxx xxxxxx NMRI (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxx, c/c) x XXX (nonagouti, x/x; xxxxx, b/b; xxxxxx x/x).

1.2.1.2 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx samic, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx živých xxxxxxx pro každou xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxxx myší x x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávkou.

1.2.1.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly

Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx ovlivněné xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xx zvýšení xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx předpokladu, že xxxx homogenní. Xxxxxxx xxxxx x pozitivních xxxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x testované xxxxx nebyla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx. Xx-xx xx vhodné, xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxx jiný způsob xxxxxxxx.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx

Používají xx xxxxxxx xxx xxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.

1.2.2 Popis xxxxxxx

Zvířata jsou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx 8., 9. nebo 10. xxx březosti, xxxxxxx xx 1. xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Tyto xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 a 9.25 xxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx ovlivnění xxxxxx xxx provést xxxxx xxxxxx dnů.

Xxxxxxx

X xxxxxx je xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx skvrn mezi xxxxxx a čtvrtým xxxxxx po xxxxxx. Xxxxxxxxx se xxx xxxxx skvrn:

(x) xxxx xxxxxx v xxxxxxx 5 mm xx střední ventrální xxxxx, o kterých xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (XXXX);

(b) xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx žláz, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxx, xxxxxxx slabin x xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xx, xx xxxxxxxx x důsledku xxxxxx xxxxxxxxxxxx (XXX);

(x) zbarvené x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (XX).

Všechny xxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx, XX, xx xxxxxxxxx relevantní. Obtíže x xxxxxxxxx xxxx XXX a XX xx xxxxx vyřešit xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, velké xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxxxx data xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx jednu xxxx více xxxxx xxxxxxxxxx somatickými xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx uváděny xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Zpráva x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxx použitém xxx křížení,

- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x kontrolní xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxxxxx x v kontrolní xxxxxxx při xxxxxx x při xxxxxxxxx,

- dávkových xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx aplikována,

- x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, a xxxxxx xxxxx s XXXX, XXX x XX x xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx skupině,

- xxxxxxx morfologických xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx/xxxxxxx x XX, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx hodnocení,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

B.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX X XXXX

1. METODA

1.1 Xxxxxxx metody

Xxxx xx přenosné xxxxxxxxxxx x myší xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x numerické xxxxxxxxxxxx změny x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx reciproké xxxxxxxxxxx a u xxxxxxxx potomků ještě xxxxxx X-chromozómu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx a XX-xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx F₁ xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx sterilita xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (X-xxxxxxx x x-x xxx). Xxxxxxxxxxx xxxx analyzovány xxxxxxxxxxxxx v meiotických xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx I, xxxx X₁ xxxxx či xxxxxxx xxxxxxx F₁ xxxxx. Xxxxxx XX xxxx xxxxxxxxxxxxx identifikovány xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx x izotonickém xxxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxx suspendovány xx vhodném rozpouštědle. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx toxické účinky.

1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx verifikaci xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx být xxxxx než osm x xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx

Počet xxxxxx nutně xxxxxx xx frekvenci spontánních xxxxxxxxxxx x na xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Test xx xxxxxxx provádí xxxxxxxx samců X₁ xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx x X₁ xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx exponované xxxxxxx. Jestliže xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx samice X₁ xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx 300 xxxxx x 300 xxxxx.

1.2.1.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledky xxxxxxxxxxx kontrol z xxxxxxxxx pokusu x xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxx použity.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxx vlivu xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxx. Pro stanovení xxxxxx xxxxx/xxxxxxx je xxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Xxxxx xxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx se dva xxxxxxx expozice. Xxxxxxxxxx xx používá xxxxx xxxxxxxx testované látky. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx dní x xxxxx xx 35 xxx.

Xxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxxx xx xxxxx schématem xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx budou analyzována. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx rozděleny xx xxxxx. Xx porodu xx xxxxx zaznamenat xxxxx, velikost xxxx x pohlaví xxxxxx. Xx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx až xx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

1.2.2.2 Zjišťování xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx jedna ze xxxx možných xxxxx. Xxxx fertility F₁ xxxxxxx a následná xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx cytogenetickou xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx samců F₁ xxxxxxxx xxx předchozího xxxxxx pomocí xxxxx xxxxxxxxx.

(x) Xxxx xxxxxxxxx

Snížená xxxxxxxxx xxxxxx x X₁ xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx fertility xxxx xxx stanovena xxx xxxxx kmen xxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxx xxxx: X₁ samci xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx odděleni xxxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx xx stejného xxxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx. Klece jsou xxxxxxxxxxxx denně xxxxxxxx 18. xxxx xx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx vrhu x xxxxxxx F₂ xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxx odděleni. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx X₁ samice, X₂ xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx testy. Samice-nositelky xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx translokací x jakéhokoliv xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. XO-samice xxxx určeny změnou xxx ratio xxxx xxxxxx xxxxxxx z 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx vs. xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx normální X₁ xxxxxxx vyřazena x dalšího testování, xxxxxxxx xxxxx X₂ xxx dosahuje xxxx xxxxxxxxx předem určenou xxxxxxxx xxxxxxx, jinak xxxx zaznamenány xxxxx x xxxxx vrhy. X₁ xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxxx xxx X₂ xxxx, xxxx dále xxxxxxxxx buď xxxxxxxx xxxxxx dělohy, xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx počet xxxxxxx implantací xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx. Testovaní X₁ samci jsou xxxxxxxxxxx xxxxx xx 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx vaginální zátky. Xxxxxx jsou xxxxxxxx 14. - 16. xxx a xxxx xxxxxxxxxxxxx živé x xxxxx zárodky.

(x) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Metodou xxx-xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x testes. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx multivalentních xxxxx xx xxxxxx diakinézy - metafáze I x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx nejméně xxxx xxxxx x multivalentními xxxxxxxxxx xxxxxxx požadovaný xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx X₁ xxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 25 buněk x xxxxxxxxx - metafáze X. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx x X₁ samic suspektních XX. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx krátkého xxxxxxxxxx x xxxxx x 10 xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx samčí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (x-x typ). Xxxxxxx X-autosomální xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx samčí xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx pruhováním xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Přítomnost 39 xxxxxxxxxx xx xxxxx 10 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx XX xxxxxx.

2. XXXXX

Získané xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxx xxxxx interval xxxxxxxxxxx xx zaznamenána xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu a xxxxx pohlaví (xxx xxxxx).

Pro xxxxx xxxxxxxxx X₁ xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx velikosti xxxx X₁ xxxxxx xxxxxxxxxxx. Pro analýzu xxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x individuální počty xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx X₁ nosičů xxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx diakinéze-metafáze I xx xxxxx počet xxxx multivalentních figur x xxxxxxx počet xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx translokací.

Xxx X₁ xxxxxxxx xxxxxxx xx zaznamenává xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

X XX xxxxx xx uvádí xxxxxxxx xxxxxxxx trhu, xxx xxxxx F₂ xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx analýzy.

V xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx byly xxxxxxxxx vybráni možní xxxxxxxx X₁ xxxxxxxxxxx, xx třeba v xxxxxxxxx xxxxx informaci x skutečném xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx heterozygotů.

Xxxx xxx uvedeny xxxxx x xxxxxxxxxxx x pozitivních xxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx obsahuje, je-li xx možné, informace x:

- xxxxx xxxx, stáří a xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- počtu rodičovských xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx ovlivňování xxxxxx, xxxxxxx hladiny, xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x pohlaví mláďat xx samici, počet x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx analýzu xxxxxxxxxxx,

- xxxx x xxxxxxxxxx analýzy xxxxxxxxxxx,

- počet x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx včetně xxxxx x xxxxxxxx x obsahu dělohy,

- popis xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a mikroskopické xxxxxxx, xxxxx xxxxx x obrázky,

- xxxxxxxxxxx hodnocení,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.26. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX

(90xxxxx xxxxxxxxx podávání xxx xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx denně xxxxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx období podávání xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, která přežijí xx konce pokusu, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin.

Xxxxxxxxxx látku lze xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Všem zvířatům xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xx celou xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pro usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx aditiva, musí xxx x nich xxxxx, že xxxxxx xxxxxxx účinek. Existují-li xxxxxx dřívější xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xx třeba používat xxxxxxx zdravých xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. X xxxxxxxx případě xx xx počátku xxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx xxx 6 xxxxx, x xxxxxx případě xxxxxx xxx 8 xxxxx. Xx začátku xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé pohlaví xxxxxx) překročit ± 20 % střední xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx test xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx živočišný xxxx x kmen.

1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxx každou hladinu xxxxx xxxxxx nejméně 20 xxxxxx (10 xxxxx a 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx být xxxxx. Xxxxx se zvířata xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx zvýšit celkový xxxxx zvířat x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx možno podávat xxxxx xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) po dobu 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Je xxxxx xxxxxx nejméně xxx úrovně xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. S výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, podává xx xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx obdrží xxxxxxx, které xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx vyvolat toxické xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx neměla xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx více xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx tak, aby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Ve skupině x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx dávky x v xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxx-xx xx testovaná xxxxx x xxxxxxx, xxxx se použít xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx^-1 potravy) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete; použitou xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxx xx xx tak xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx, x dávkování x xxxxxxxxxxxx intervalech (xxxxxxxxx xxxx čtrnáctidenních) přizpůsobovat xxxxxx tělesné hmotnosti xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx test

Xxxxxxx-xx xx 90denní xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x nevyvolá-li xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, je-li xxxx xxxxx) žádné xxxxxxx xxxxxx, xx možno xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx množství xxx další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zvířat.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx zaznamenat xxxx uhynutí x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

X xxxxxxxx xxxxxxx xx zvířatům podává xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx určena x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x otravy xxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx.

Xxxxxxxxxx x kleci xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxx xxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx vodě) x hmotnost zvířat xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolu xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx xxxx např. x důsledku kanibalismu, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx utratit x xxxxxx.

X všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx provádějí xxxxxxxxxxx vyšetření:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx oftalmoskopem xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxx xxxxxx nejlépe x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, vyšetří se xxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx xxxxxxxxxx.

(x) Xx konci pokusu xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx všechny xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů je xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx vápník, xxxxxx, chloridy, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx volí xxxxx xxxxxxxxxxx druhu x xxxxx), alaninaminotransferáza (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx séra (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx močoviny, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx další xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: lipidů, hormonů, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

(d) Xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxx jen xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Pokud xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx prohlídku povrchu xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, lební, hrudní x břišní xxxxxx xxxxxx jejich obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx se xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx ve vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x tkáně xx třeba xxxxxxxxxxx xx vhodném médiu x ohledem xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx místě brzlíku, xxxxxxxxxx a xxxxx, xxxxx, xxxxx, (slinné xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, slinivka xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx orgány), (xxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, lymfatické xxxxxx, (xxxxxx mléčná xxxxx), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx nerv, (xxx), xxxxxx kost x xxxxxx dření, (xxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxx mícha xx třech úrovních - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx, x (slzné xxxxx). Xxxxx v závorkách xx xxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx

(x) Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx orgánů x xxxxx je xxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x u xxxxxx kontrolní xxxxxxx.

(x) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx makroskopická xxxxxxxxx.

(x) Xx xxxxx xxxxxxxx cílové xxxxxx v jiných xxxxxxxxx skupinách.

(x) Xxxxx zvířat xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, protože xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx stavu zvířat. Xx xxxxx xxxx xxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx x xxxxxx xxxxxx skupin xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, musí xx však xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx s vysokou xxxxxx.

(e) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx provést xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření na xxxxxxx x xxxxxxxx, x kterých xxxx xxxxxxxx účinky u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.

2. XXXXX

Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx typy xxxxxxxxx. Xxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxx vhodnou statistickou xxxxxxx. Je k xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx uznávanou statistickou xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx pokusu xx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx informace:

- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,

- experimentální xxxxxxxx - xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x koncentrace,

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x podle xxxxx,

- úroveň bez xxxxxx, pokud xx xxx stanovit,

- xxxx uhynutí během xxxxxxxxxxx, případně xxxx x přežití zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx toxických xxxx xxxxxx účinků,

- xxxx, xxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- spotřeba xxxxxxx x vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,

- hematologická xxxxxxxxx a jejich xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xxxxxx moči),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických nálezů,

- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xx xx xxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.27. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX

(90denní xxxxxxxxx podávání xxx xx, xxxxxx na xxxxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx podává xxxxx xxxxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (nehlodavcům), x xx xxxxx xxxxxxx jedna xxxxxx xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx pokusu, x xxxxxxx, která xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx pitvají.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxx nebo xxxx xxx vhodnější xxxxxxxx x kapslích. Mohou xxx xxxxxxx xxxx xxxx způsoby xxxxxx xxxxxxxx. Všem xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx pokusu stejnou xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pro usnadnění xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xx využít.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata

Xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx používá xxx: xxxx xx přednost xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xx mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxx xx xx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 3 xx 6 xxxxxx a xx starším xxx 9 xxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx orální xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx dlouhodobým xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx se xx xxxxxx xxxxxx živočišný xxxx a xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 8 zvířat (4 xxxxxx a 4 xxxxx). Xxxxx xxxxxx xx xxxxx pokusu xxxx xxx takový, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tři xxxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Nejnižší úroveň xx neměla xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx existují xxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx, xx xxxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx než 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Xx xxxxxxx x nízkou x xxxxxxx úrovní xxxxx x v xxxxxxxxx skupině by x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

Podává-li xx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx zajistit, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx buď xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx^-1 potravy) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx alternativu xx xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx přímo, xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx xx xxx xxx každý xxx ve stejnou xxxx, x dávkování x týdenních xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx změnám tělesné hmotnosti xxxxxxx.

Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx test xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx-xx 90xxxxx xxxx níže xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx den (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx možné expozici xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) xxxxx toxické xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx látka x xxxxxxx, xx xxxxx zajistit, aby xxx aplikované xxxxxxxx xxx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx nebránily xxxxxxxx výživě xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx pozorovat a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x trvání. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.

1.2.3 Popis xxxxxxx

X xxxxxxxx případě xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v xxxxx xx dobu 90 xxx. Podává-li xx xxxxx jiným xxxxxxxx xxx v potravě, xxxxxxxx xx za xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 5 xxx x xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx není xx xx omezeno) xxxxx xxxx, srsti, očí, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx testované xxxxx v xxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxx jednou xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx klinická xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx x minimalizaci xxxxx zvířat xxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx zvířata, která xxxxxxx. Umírající xxxxxxx xx třeba okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx utratit x pitvat.

U xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx následující vyšetření:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx podáváním xxxxxxxxx látky a xx konci xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, ale xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x u xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx změny, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.

(x) Na xxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx uprostřed x xxxx xx xxxxx xxxxxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, protrombinový xxx (Xxxxxxx), trombinový xxx či počet xxxxxxxxxx.

(c) Na xxxxxxx xxxxx, x xxxxx buď v xxxxxxxxx intervalech xxxx xxxxxxxxx x dále xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (přičemž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx transferáza (xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx séra) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx glutamát-oxalacetát xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxx. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: lipidů, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx studium xxxxxxx xxxxxxx účinků. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx měli xxxxxxxx (xx více xxx 24 hodin).

(x) Analýza xxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xx provede xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx těla, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (s příštítnými xxxxxxx) x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx orgány x tkáně xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - x řezech xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, štítná xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx žlázy, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x vaječníky, xxxxxx, (xxxxxxxx pohlavní xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx, jícen, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx x slepé xxxxxx, xxxxxxxx, močový xxxxxx, reprezentativní xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx mléčná xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx nerv, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx včetně kloubních xxxxx) a (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx posuzují, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx podle příznaků xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Histopatologická vyšetření

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x tkání xx třeba provést x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které byla xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx skupiny. Histopatologické xxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxxxxx skupin xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxx když xx to xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx se xxxxxxx xx tabulky. X ní musí xxx pro každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat s xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx x procentuálně xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx poškození. Výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x průběhu xxxxxx má pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx podmínky,

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) a koncentrace,

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x podle xxxxx,

- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx lze stanovit,

- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, případně xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx konce xxxxxxxxx,

- popis xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (zejména xxxxxxxx xxxxxx),

- doba, xxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx další xxxxx,

- spotřeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,

- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,

- diskuse výsledků,

- interpretace výsledků.

B.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX

(90denní xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx se xxxxxxxx xxxxx na xxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx, x to xxxxx skupině xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx podávání se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x zvířata, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx pokusu, se xxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx před xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxx možné, mělo xx xx však xxxxxxx cca 24 xxxxx xxxx experimentem. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx opakovat xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx nanášení xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Xx xxxxx xxxx x úvahu hmotnost xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx připravované xxxxxx xxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Xxx pokusech x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxx formy, xx xxxxx xxxxxxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx zaručen xxxxx kontakt x xxxx. Testované xxxxxxxx xx zpravidla aplikují xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx denně 5 xx 7 xxx x xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x jiné zvířecí xxxxx, jejich xxxxxxx xxxx xxxx být xxxxxxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx rozpětí hmotnosti xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx jako předběžný xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, v obou xxxxxxxx xx xx xxxxxx stejný živočišný xxxx x xxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví

Xxx každou úroveň xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx a 10 xxxxx) xx zdravou xxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx se zvířata xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, xx xxxxx xxxxxx celkový xxxxx zvířat x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx nejvyšší xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx sledovat xxxxxxxx, přetrvávání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx hladiny dávek x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx být nejméně 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx stejnou xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx čtrnáctidenních xx xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete. S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází stejně xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokusným skupinám, x xx xx xxxxxxx množství, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx aplikuje xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx hladina xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné uhynutí xxxx jen x xxxxx xxxxx. Nejnižší xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx střední xxxxxxx xxxxx měla xxxxxxx xxx xxxxxxx účinek xx xxxxxxxxx zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 hladiny xxxxx, mají xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx s xxxxxx a střední xxxxxxxx dávky a x xxxxxxxxx skupině xx počet uhynutí xxx xxx nízký, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Vede-li xxxxxxxx testované látky x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx, což x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x omezení xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx xxxxxxxxx kůže, xx xxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ukončit x xxxxxxx jej xxxxx x nižšími koncentracemi.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx-xx xxx předběžné xxxxxx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx^-1 nebo xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx expozici člověka, xxxxx toxické xxxxxx, xxxx další xxxxxxx xxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Je xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx se xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Xxxxxxx xx chovají v xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx nejlépe 7 xxx v týdnu xx dobu 90 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxx pro následné xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 28 dnů bez xxxxxxxx, xxx se xxxxx xxxxxxxxx reparace xxxxxxxxx účinků nebo xxxxxx přetrvávání. Xxxx xxxxxxxx činí xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx látku xx xxxxx nanášet xxxxxxxxxx xx xxxxx plochu, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % povrchu xxxx, u vysoce xxxxxxxxx látek může xxx tato plocha xxxxx. Látkou je xxxxx xxxxxx co xxxxxxxx část xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx vrstvě.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x kontaktu x xxxx pomocí xxxxxxxxx mulového xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx a aby xx zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pro omezení xxxxxxxx xxxxxx, úplnou xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx vhodným x xxxxxxxx pokožky.

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx otravy xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x trvání.

Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx změny xxxxx, xxxx, xxx x xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, změny funkce xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx týdně x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolu xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx zvířat jako xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx chybného xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx satelitních xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x zvířata x xxxxxx stresu xx xxxxxx xxxxxxx je xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx utratit x xxxxxx.

U xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(a) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx x na xxxxx studie nejlépe x xxxxx zvířat, xxx alespoň x xxxxxxxx xxxxx x x kontrolních skupin. Xxxxxx-xx se oční xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xx konci xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx čas xx xxxxx xxxxxxxxxx.

(c) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx vhodné stanovit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, glukózu na xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx hladovění se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx transamináza xxxx) x aspartátamino xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Mezi xxxxx charakteristiky, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

(x) Analýza xxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxx, ale xxx xx podkladě xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxx, má xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3.1 Pitva

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii xx xxxxxxx pitva zahrnující xxxxx prohlídku xxxxxxx xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x břišní dutiny xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Následující xxxxxx a tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx, příštítná xxxxxxx, xxxx na xxxxx xxxxxxx, (xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, slinivka xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, xxxxxx, přídatné xxxxxxxx orgány, žlučník (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, močový xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx sval), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), (xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx), (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ploch), (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x bederní) a (xxxxx žlázy). Xxxxx x závorkách xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx souvisejí x xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx

(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx x tkání xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které byla xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny.

(x) Xx třeba vyšetřit xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(x) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(x) Xxxxxxx-xx xx potkanů, xxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx zdravotního xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x zvířat xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, musí se xxxx xxxxxxx vždy xx orgánech, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx skupině x xxxxxxx xxxxxx.

(x) Používá-li xx xxxxxxxxx xxxxxxx, musí xx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx na tkáních x orgánech, u xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx u ostatních xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx x procentuálně xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Výsledky xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx použít kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx,

- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,

- doba xxxxxxx během experimentu, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx toxických nebo xxxxxx účinků,

- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,

- oftalmologické xxxxxx,

- hematologická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx vyšetření x jejich xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx případných xxxxxx xxxx),

- xxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je to xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- interpretace xxxxxxxx.

B.29. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX - XXXXXXXXX

(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - studie xx xxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody

Xxxxxxx xxxxxx pokusných xxxxxx xx xxxxxxxxxx studované xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx jedné koncentraci, x xx po 90 xxx. Xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx x atmosféře xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx skupinu xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx denně pozorují x xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxx 5 dní před xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x krmení, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Pokud xx xxxxx, přidá xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx x nich xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Existují-li vhodná xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx tomu. Xxxxxxx xx na mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Na začátku xxxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx test před xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se xx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx nejméně 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx musí být xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, je nutno xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx o xxxxx xxxxxx, která budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx další xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx každého xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, trvání nebo xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Expoziční koncentrace

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (případně kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx stejné xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx). X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v xxxxx počtu. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x člověka, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx než 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x x kontrolní xxxxxxx by počet xxxxxxx měl xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx výsledků obtížné.

1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xx exponují xx xxxx 6 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx studované xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx možné xxxxxx i jiných xxx xxxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení, xxxxx zaručuje proudění xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx za xxxxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxxxxxx obsah xxxxxxx a rovnoměrné xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx třeba ho xxxxxxxxxxx xxx, aby xx nejvíce bránil xxxxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx stability xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, samotné xxxxx xxxx individuální xxxxxxxxxx xxxxxxxx; první xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx látky xxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.6 Xxxx pozorování

Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxx, ve xxxxxx xx xxxxxx x opět xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3. Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx exponují xxxxxxxxx látce xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx být 22 ^xX ± 3 ^xX. Xxxxxxxxx vlhkost xx xxx xxxx 30 % a 70 %, s xxxxxxxx případů, xxx xx xxxx možné (xxxx. experimenty s xxxxxxxx). Během xxxxxxxx xx nepodává xxxxxxx xxx voda.

Používá xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolou xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se provést xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xx třeba nastavit xxx, xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx byly xxxxxx. Xxxxxx xxxx zaručovat, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx nejrychleji.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:

x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).

x) Skutečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxx x dýchací xxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx se nemá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx o xxxx xxx ±15 %. X některých xxxxxx a xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx možné xxxxxxxxx, se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísání. Xx xxxxx xxxx xxxxxx experimentu xxxx xxx koncentrace xxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx, jak xx xx potřeba xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic.

c) Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx

d) Xxxxx xxxxxxxx x xx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx; xxxxx zvíře xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, stupeň x xxxxxx. Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, srsti, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x krevního oběhu, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Je třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx chybného xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

X všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx provést xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxx studie nejlépe x xxxxx zvířat, xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx.

(x) Xx konci pokusu xx má provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx zahrnovat stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx trombocytů.

(c) Xx xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx pozorováním způsobu xxxxxx látky. Doporučuje xx stanovovat vápník, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, glukózu na xxxxx (trvání xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx živočišného druhu x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx séra (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx transamináza), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx xx podkladě xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx nejsou xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx stanovení hematologických x xxxxxxxxxxxxx parametrů xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx použitých xx studii xx xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx prohlídku povrchu xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x ohledem xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny tkáně x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx (xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx x fixovat xxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx - perfusní xxxxxx se považuje xx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxx, mozek - x řezech xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, hypofýza, štítná xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx brzlíku, xxxxxxxxxx, srdce, aorta, xxxxxx žlázy, xxxxx, xxxxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxxxx břišní, xxxxxxx x vaječníky, xxxxxx, (přídatné xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, žaludek, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (samičí xxxxxx xxxxx), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), hrudní kost x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (páteřní xxxxx ve xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx se posuzují, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx systému x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx provést x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

(b) Xx xxxxx xxxxxxxx všechny xxxxxxxxxxxxx xxxx.

(x) Xxxxx zvířat xx skupinách s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx poskytuje obraz xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, musí xx xxxx provést xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx postižení xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

(x) Xxxxxxx-xx xx satelitní xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx tkáních x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx zjištěny xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx sestaví xx tabulky. X xx musí xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na počátku xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx, xxx léze a xxxxxxxxxxxx počet zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Je x tomu xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx: Popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, systému xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, klimatizačního systému, xxxxx xxxxxxxxx odpadního xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx o expozici xx xxxxxxx do xxxxxxx a xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxxxxxx xxxx xxxxx:

x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,

x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx vzduchu),

x) povaha xxxxxxxx, xxxxx bylo užito,

x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně,

x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (x aerosolu),

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxx účinku, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx jednotlivé abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- detailní popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xx xx xxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.30. XXXXXXXXX XXXXXXXXX TOXICITY

1. XXXXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dní x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xx skupinu, xx větší xxxx xxxxxx zvířat. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx účelem sledování xxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx chována xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx jsou xxxxxx, mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2 Testovací podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx nebo xxxx). Xx xxxxx xxxxxx zdravé a xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx laboratorních xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx započata xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx studie xx xxxxx xxxxxx xx xxxx zvířat xxxxx xxxx než ± 20 % od xxxxxxx. V případě, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx test subchronické xxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx použít xxxxxx xxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví

Xxx xxxxxx úroveň xxxxx je třeba xxxxxx xxxxxxx 40 xxxxxx (20 xxxxx x 20 xxxxx), xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Samice xx měly xxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx některá xxxxxxx xxxx dokončením testu, xx třeba použít xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.

V případě xxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx) je možné xxxxxx menší xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxx xxx 4 xx každého xxxxxxx xx xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx x frekvence xxxxxxx

Xx třeba xxxxxx xxxxx tři xxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xx xxxx vyvolat xxxxx xxxxxxx toxicity xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx voleny xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx dávek xx měl xxxx x xxxxx výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxx. V případě, xx testovaná xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx x xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxx

Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx identická x každém xxxxxx x xxxxxxxxxx skupině, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Ve zvláštních xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx orální xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí xx xxxxx negativní kontrolní xxxxxxx, xxxxx není xxxxxxxxxx xxx vehikulu.

1.2.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx způsobu xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx člověka.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vyvolává xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx systémová xxxxxxxx x důsledku xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx odvozena x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x znalosti rozsahu xxxxxxx xxxxxxxxxxx, odvozené x předchozích testů xxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxx

Tam, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx z xxxx, xxxxx xxxx xxx exponován xxxxxx, xxxx se přednost xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx proti tomu xxxxxx důvody. Zvířata xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx v pitné xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.

Ideálně xx se xxxx xxxxx podávat xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" xxxxxxxx v xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx hodnocení. Xxxxxxx, především x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx xx xxxxxxxxxx xx přijatelné.

Inhalační xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx technicky xxxxxxxxxxxxxxx než xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx uvedeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx situacích.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxx xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), nebo x xxxxxxxxxx xx xxxxxx expozici v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx x týdnu (kontinuální xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx hodinou xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, použitou x xxx čištění xxxxxxxxxxx xxxx. V xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxxxxxx x stálou xxxxxxxx xx x xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx ústup xxxxxx denní xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx víkendu.

Xxxxx přerušované nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxxx studia x na xxxxxx xxxxxxxx, která má xxx simulována. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x xxxxx určité xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx kontinuální expozice xxx simulaci xxxxxxxx xxxxxxx prostředí xxxxx xxx narušeny xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx expozice a xxxxxxxx komplikovanější (a xxxxxxxxxx) generace aerosolu xxxx určité xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Expoziční xxxxxx

Xxxxxxx xx exponují x inhalačních komorách, xxxxxxx xxxxxxxxxx zaručuje xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx přísun xxxxxxx x rovnoměrná xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx komory xx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, tak xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx udržuje xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx úniku xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx by v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx zvířat xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.

Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

(a) xxxxxx xxxxxxx: rychlost xxxxxxx xxxxxxx komorou by xxxx xxx nejlépe xxxxxxxxxxxx kontinuálně;

(x) xxxxxxxxxxx: během xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx než 15 % xxxxxxx hodnoty;

(x) xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 22 ± 2 ^xX a xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx případů, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx by měly xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;

(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx u xxxxxxxx xxxx pevných xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx atmosféry xxxxx se odebírají x dýchací xxxx xxxxxx. Xxxxxx vzduchu xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx exponováno, a xxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, i xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx respirabilní. Xxxxxxx xxxxxxxxx částic xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx během vývoje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxxxx aerosolu, x xxxx během xxxxxxx tak xxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.2.6 Trvání xxxxxx

Expozice látky xx xxxx xxxxx xxxxxxx 12 xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx

Xxxxxxx klinické xxxxxxxxx xx mělo být xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Dodatečná xxxxxxxxxx xx měla být xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx zákroky x xxxxxxxxxxxx ztráty xxxxxx xx xxxxxx, např. xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx mrtvá x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinků, x xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx nebo kanibalismu.

Xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx neurologických x xxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Zaznamenává xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx toxických příznaků xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx během prvních 13 xxxxx xxxxxx xxxxx a aspoň xxxxxx za čtyři xxxxx po xxxxx xxxxxx. Je třeba xxxxxxxx xxxxxx spotřeby xxxxxxx (x xxxx xxx, kde xx xxxxxxxxx látka podávána x pitné xxxx) xxxxx během prvních 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx intervalech, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx ukázaly nutnost xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx vyšetření

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. xxxxx xxxxxxxxxxx, hematokrit, xxxxxxx xxxxx erythrocytů, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx srážlivosti) xx měla xxx xxxxxxxxx za xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx xx vzorcích xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx nehlodavců resp. xx 10 potkanů xx xxxxxxx z xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx xx to xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Navíc xx xxx xxx xxxxxxx vzorek xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx zhoršený xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, měl xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.

Diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxxxxx xx xxxxxx ve xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Pokud tato xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost, xxxxxxx se x x skupiny s xxxxxx nejblíže xxxxx.

1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx

Vzorky xxxx 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx zvířat x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hematologické zkoušky. Xxxxxxxxxxx stanovení jsou xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, xxxx xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx:

- xxxxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxx x jednotlivých xxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxxxx, ketolátky, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx- kvantitativně).

1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

V xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech x xx xxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 potkanů xxxxxxx pohlaví v xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx tytéž xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxx toho xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxxx. Z xxxxxx xxxxxx je připravena xxxxxx x jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkoušky:

- celková xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- testy xx xxxxxx jater (xxxx. xxxxxxxx bázické xxxxxxxxx, xxxxxxxx glutamát xxxxxxx xxxxxxxxxxxx¹⁾, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx²⁾, xxxxx xxxxxxxx transpeptidázy, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. krevní xxxxxxx na xxxxx,

- xxxxx na xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.

1) xxxx xxxxx xxxx sérová xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

2) xxxx xxxxx jako xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

1.2.3.5 Xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x všech zvířat xxxxxx xxxx, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx utracením xx xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx. Všechny viditelné xxxxxx xxxx léze, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx být xxxxxx, xx třeba xxxxxxx. Mělo by xxx provedeno porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx změn x xxxxxxxxxxxxxxx nálezy.

Xxxxxxx xxxxxx x tkáně xx xxxx být xxxxxxxx xxx histopatologické xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx týká xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx:xxxxx³⁾ (xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx mozkového, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx³⁾, sleziny, xxxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx³⁾, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, jejuna, ilea, xxxxxxx střeva, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, močového měchýře, xxxxxxxxxxxx xxxxx, slinivky, xxxxx³⁾, akcesorních xxxxxxxxxx xxxxxx, samičí mléčné xxxxx, kůže, svaloviny, xxxxxxxxxxx nervu, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), sterna s xxxxxx dření x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx zásadní pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx, xx být xxxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx x hrtanu.

Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, informace xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxx x dispozici xxxx xxxxxxxxxxxxxx vyšetřením, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

3) xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx xxxxxxx x xx xxxxxxx x xxxxxxxx a xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx tělísky) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx

1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx viditelné změny, xxxxxxx xxxxxx x xxxx léze xxxxxxxxxxx xx v xxxxxxxxxx xxxxxx, mají být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

(x) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všech uchovaných xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx nalezených:

1. u xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,

2. x xxxxx zvířat xx skupiny s xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx skupiny,

(x) xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx,

(x) xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx zkrácení xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx nebo vyvolání xxxxxx, které by xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx,

(x) xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx zvířat, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx podmínkách, xx. xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx nezbytné xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změn xxxxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, ukazujících xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx počet zvířat xx xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx jednotlivé xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxx odpovídající statistickou xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x testu

Xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- živočišný druh, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx: popis xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx pro vytváření xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vycházejícího x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, kde je xx žádoucí, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (xxxx. standardní xxxxxxxx) a xxxx xx zahrnovat:

(x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx zařízením

(b) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx

(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx látky vstupující xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vzduchu)

(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx použito

(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx

(x) xxxxxxx velikosti částic (xx-xx to xxxxxxxxxx)

- dávkové xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x koncentrace

- údaje x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx

- xxxxxxxx (dávková) xxxxxx

- xxxx xxxxx během studie xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx do xxxxx

- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx

- doba, xxx byl pozorován xxxxx xxxxxxxxxx příznak x xxxx xxxxx xxxxx

- xxxx x xxxxxxxx potravy x tělesné xxxxxxxxx

- oftalmologické xxxxxx

- použité xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx

- xxxxx klinické xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx moči)

- xxxxxxx xxxxxx

- xxxxxxxx popis všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

- xxxxxxx xxxxxxxx

- interpretace xxxxxxxx.

X.31. STUDIE XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X NEHLODAVCI

1. METODIKA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxx skupinu, xxxxxxx v xxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx porodu xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx je xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx embryo- x xxxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxx, dospělé xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, stejného věku x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx laboratorních xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx započetím xxxxx. Potom xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx plodností. Xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxx xxx zajištěno přirozenou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx samicím xxxxx. Xxxxxxxx začíná xxxxx xx implantaci x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx organogeneze. Xxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx vyjmuty xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx sledování xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx orgánů xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x krvácení xx xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Běžně xxxxxxxxxxx druhy xxxx xxxxxx, xxx, xxxxxx x králík. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx všeobecně xxxxxxxx kmeny. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx nízkou xxxxxxxx x xxxx xx xxx x xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx dávku xx xxxxx použít xxxxx 20 xxxxxxx potkanů, xxxx nebo křečků xxxx 12 březích xxxxxxx. Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx studované xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxx x xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx i xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx také xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vehikula: xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx mít xxxx xx xxxxxxxxxxx schopnosti. Xx xxxxxxx x xxxxxxxxx(xx) skupině(ách) xx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx x testovací xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx fyzikálně xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xx v ideálním xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx takové xxxxxxx toxicity, jako xx xxxxx xxxxxxx xxxx, xxx už xx xxxx jak 10 % xxxxx. Xxxxx úroveň xxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxxxxxx xxxxxx. Střední xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx tak, xxx byly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx test

V xxxxxxx, xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxx dávce xxxxxxx 1000 xx.xx-1 prokazatelně xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.5 Xxxx expozice

Xxxxxx xxxx xxxxx xx xxx, xxx xx xxxxxxxxxx vaginální xxxxx x/xxxx spermie (pokud xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx organogeneze. Xx toto xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 6. až 15. xxx u xxxxxxx x myši, 6. xx 14. xxx x křečka x 6. xx 18. xxx u xxxxxxx. X případě, že xx xx nultý xxx xxxxxxxxx den, xxx xxxx pozorováno xxxxxx xxxx byla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx. Xxxxx xxxx alternativy končí xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx očekávaným porodem.

1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx

Každý xxx je xxxxx xxxxxxx pečlivé klinické xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx ve stejnou xxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx denně xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx testu. Xxxxx může xxx xxxxxxxx na xxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, zvířata xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x dávka xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vážení. Xxxxxxx známky toxicity xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Samice xxxxxxxxxx xxxxxx potratu xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx většinu období xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Pozorování xxxxxx x xxxxx xx mělo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x sliznic, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx nervového xxxxxxx, somatomotorické aktivity x xxxxxxx. Xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

Xxxxx dojde x xxxxxxx během xxxx na xxxxx xxxxxx, xx xxxxx x xxxxx makroskopicky xxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx mohly xxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx je xxxxx odstranit dělohu x její xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx počet xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx určit xxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxx. U potkanů x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx počet xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx pohlaví xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zárodků x vypočítat xxxxxx. Xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx každý xxxxxxx. X potkanů, xxxx x xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxx xxxxx třetiny xx xxxxxxxx vrhu x x zbytku xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx abnormity xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx důkladně xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx abnormit xxxxxxxxxx x xxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx ve formě xxxxxxx, udávající xxx xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxx a procento xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx x abnormalitami xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1. Xxxxxx x xxxxx

Zpráva x testu xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx pro každou xxxxx,

- xxxxx xxx účinku (xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx),

- xxxx xxxxx během studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx,

- xxxxx x tělesné xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx březosti x xxxxx o xxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx),

- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx/xxxxx, xxxxxxx, defekty xxxxxxx x xxxxxxx tkání),

- xxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxx (živé/mrtvé xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.32. XXXX XXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx cestou, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx na xxxxxxx, po větší xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx zvířata xxxxx xxxxxxxxxx za účelem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx vývinu xxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

Zvířata xx xxxxxxx v xxxxxxxxx podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx nejméně xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Preferovaným xxxxxx xx potkan. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je možno xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx i xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx zvířata x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx laboratorních xxxxxx. Xxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. V xxxxxxx, xx vlastní studii xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx a kmen x obou xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxx a pohlaví

Xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 samic x 50 samců) xxx každou úroveň xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina. Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x negravidní. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx zvýšit x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Dávkové xxxxxx x frekvence xxxxxxx

Xxxxx se xxx xxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx vyvolat příznaky xxxxxxxxx toxicity, xxxx xx mírný xxxxxx xxxxxxxx přírůstků (méně xxx 10 %), xxx podstatnějších xxxx xxxxxxxx xxxx dožití xxxxxx jinými xxxxxx xxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxx nižší než 10 % vysoké xxxxx. Xxxxxxx dávku/dávky xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx vysokou a xxxxxx dávkou.

Xxxxx xxxxxxxxx úrovní xx xxxx vzít v xxxxx xxxxxxxxx testy x xxxxxx toxicity.

Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx denně. Je-li xxxxx xxxxxxxx v xxxxx vodě nebo xxxxxxxxx xx potravy, xxxx xx být xxxxx k xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxx

Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx.

Xx zvláštních xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx

Tři xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, dermální x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx fyzikálních x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a pravděpodobném xxxxxxx expozice x xxxxxxx.

1.2.5.1 Orální xxxxxx

Xxx, xxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx x gastrointestinálního xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x cest, xxxxx může být xxxxxxxxx člověk, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxxxxxxxx x xxxxx vodě xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.

Ideálně xx xx xxxx látka xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx může xxxx x vymizení xxxxxxxx xxxx naopak xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x xxxxxx bez xxxxxxxx, a tudíž xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx. Nicméně, xxxxxxxxx x ohledem xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx.

1.2.5.2 Xxxxxxxx studie

Xxxxxxxx xxxxx na xxxx xxxx xxx xxxxxxx jako simulace xxxxxx cesty xxxxxx x xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx způsob xxxxxxxx xxxxxxx poškození.

1.2.5.3 Xxxxxxxxx studie

Protože xxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx uvedeny xxxxxxxxxx informace x xxxx cestě podání. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, takže zvíře xx obvykle xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxx xxx x xxxxx (přerušovaná xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx jednou xxxxxxx xxx krmení xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx x pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx boxu. X obou xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Hlavní xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx expozicí xx x xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 hodin xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx delším xxxxxxx xxxxx víkendu.

Volba xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx studia a xx lidské xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, je xxxxx vzít x xxxxx určité xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxx zevního xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx nutnosti pití x xxxxxx během xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x spolehlivé) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx komory

Zvířata xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx komorách, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx identickou xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve všech xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Uvnitř xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx mírný xxxxxxx x xxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx do okolního xxxxxxxxx. Xxxxxx by xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x komoře xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

(a) Xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu komorou xx měla být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx kontinuálně.

(x) Koncentrace: xxxxx xxxxx xxxxxxxx by xxxxxxxxxxx testované látky xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx hodnoty.

(x) Xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx by měla xxx udržována x xxxxxxx 22 ± 2 °X a xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x rozptýlení xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

(x) Xxxxxx velikosti xxxxxx: měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx částice xx měly xxx x respirabilní xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Vzorky atmosféry xxxxx xx xxxxxxxxx x dýchací xxxx xxxxxx. Xxxxxx vzduchu xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx je xxxxx exponováno, x xxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx suspendovanému xxxxxxxx, x když xxxxxx xxxx aerosolu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx částic by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx vývoje xxxxxxxxxxxx systému, aby xxxxxxxxx xxxxxxxxx aerosolu, x xxxx během xxxxxxx tak často, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.6 Xxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx test. Test xx xxx xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx a 24 měsících x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x delší xxxxx xxxxxx resp. s xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx ukončení xx xxxx xxx 24 xxxxxx xxx xxxx a křečky x 30 měsíců xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx prodloužené xxxxxx xx přijatelné, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x nejnižší xxxxx xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx na 25 %. Xxx xxxxxxxx testu, xx xxxxxx xx zřetelný xxxxxxxx rozdíl odpovědi, xxxxx pohlaví xx xxxxxxxx xxxxxx. Tam, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou ze xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx to xxxxx xxxx x ukončení xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx nevykazují xxxxxxx xxxxxxx, které xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xxxxx negativní výsledek xxxxx, nesmí být xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, kanibalismem nebo x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x žádné xxxxxxx xxxxx než 10 % a xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx u xxxx x křečků x x 24 měsících x potkanů.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx zvířat v xxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity a xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx kontrola xxxxxx xx nutná, xxx xx zabránilo xxxxxxx zvířat xx xxxxxx v důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxx x xxxxxxx. Moribundní zvířata xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

Klinické příznaky x mortalita xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx věnovat xxxxxx xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, rozměry, xxxxxx x progrese xxxxxxx xxxxxxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenává.

Xx xxxxx provádět xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx tam, xxx je xxxxxxxxx xxxxx podávána x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, ledaže xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx tělesné váhy xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx týdně xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx období testu x aspoň xxxxxx xx čtyři xxxxx xx xxxxx období.

1.3.2 Xxxxxxxx vyšetření

1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx x zhoršeném xxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxxxx studia, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek.

Xx 12 xxxxxx, xx 18 xxxxxx x před xxxxxxxxx xxxxxx se provede xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Diferenciál xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx zvířat xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx, zvláště xxxxx xxxxxxx před xxxxxxxxx, xxxx údaje x xxxxxxxxx patologických xxxx xxxxxxx nutnost, diferenciál xx vyšetří x x xxxxxxx x xxxxxx nejblíže xxxxx, xxx xx vysoká xxxxx.

1.3.2.2 Xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxxx xxxx, která xxxxxxx xxxxx pokusu xxxx xxxx utracena, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx, nebo léze, xxxxx by xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx uchovat.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx vhodných xxxxxxx pro možné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx (včetně xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx mozkové), xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx a příštítná xxxxxxx, tkáň xxxxx, xxxxxxx x xxxxx, xxxxx, xxxxx, slinné xxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, pankreas, xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx orgány, xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, slepé xxxxxx, xxxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, representativní xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx x kostní xxxxx, stehenní xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx (xxxxx, střední xxxxxx x xxxxxxx) a xxx.

Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx měchýře xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Naplnění xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx být xxxxxxx xxxx respirační xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.

1.3.2.3 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxxx nebo byla xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx kontrolní x s xxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx xxxxxx viditelné okem x léze, xxxxx xxxx podezřelé jako xxxxxx, se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.

(x) Je-li xxxxxxxx rozdíl x xxxxxxxxx neoplastických lézí xxxx skupinou x xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx skupinou, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se provede x xxxxx xxxxxx xx xxxxx x x dalších skupinách.

(x) Je-li xxxxxxx xx skupině x xxxxxxx dávkou xxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxxxxx zkoumána x xxxxxxx x xxxxxxxxx nižší dávkou.

(x) Je-li xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx o xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, xx xxxxx xxxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xx sumarizují xx xxxxx xxxxxxx, ukazujících xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx zvířat vykazujících xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx jejich xxxxxxxxx x počet xxxxxx x xxxxxx xxx utracení. Výsledky xx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxx

Xxxxxx x xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx, obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vycházejícího x xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx je xx žádoucí, stability xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Údaje x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (např. směrodatná xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:

(a) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

(x) xxxxxxx x xxxxxxx vzduchu,

(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx objemem xxxxxxx),

(d) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,

(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně,

(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (tam xxx xx xxxxxxxxxx),

- xxxxxxx xxxxxx (včetně xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxx tumoru,

- xxxx úmrtí xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xx konce,

- xxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xxxxxxx x xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,

- data x spotřebě xxxxxxx x tělesné xxxxxxxxx,

- použité xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx,

- xxxxxx patologicko-anatomické,

- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- statistické xxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.33. XXXXXXXXXXX XXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx je určit xxxxxxxxx x karcinogenní xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx druhu xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx satelitní skupinou x xxxxxxxxx satelitní xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxx satelitní xxxxxxx xxxx xxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Zvířata x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx zkoumána xxx xx obecnou xxxxxxxx, xxx xx karcinogenní xxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxx satelitní skupině xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx.

Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx sedm xxx x týdnu, vhodnou xxxxxx, několika skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, jedna xxxxx xx skupinu, xx větší xxxx xxxxxx xxxxxx. Během x xx expozici xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx denně pozorována xx xxxxxx sledování xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx tumorů.

1.2 Popis xxxxxx

Zvířata se xxxxxxx x pokusných xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx testem xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolních x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.1 Experimentální xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx předchozích xxxxxx xx možno použít x další xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx zvířata x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx co xxxxxxxx xx xxxxxxxxx mláďat. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx váze zvířat xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx průměru. V xxxxxxx, xx vlastní xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx orální xxxxxxxx, xx xxxxx použít xxxxxx xxxx a xxxx v xxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Počet x xxxxxxx

Xxx hlodavce xx xxxxxxx xxxxxxx 100 zvířat (50 xxxxx x 50 xxxxx) xx xxxxxx xxxxxx dávky a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx by měly xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx koncem xxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx) xxx xxxxxxxxx patologie xxxx, xxx jsou xxxxxx, xx každá xxxx xxxxxxxxx 20 xxxxxx xxx xxxxx pohlaví, xxxxxxx satelitní xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx pohlaví.

1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x frekvence xxxxxxx

Xxx test xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxx xxxxx souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (méně xxx 10 %), xxx podstatnějších xxxx xxxxxxxx doby dožití xxxxxx xxxxxx účinky xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx interferovat x xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x délkou života xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx. Xxxxxx by neměla xxx xxxxx než 10 % vysoké xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx středním xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxxx testy x xxxxxx xxxxxxxx.

Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx satelitní xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx exponovaná xxxxxxxxx xxxxxxx xx měla xxxxxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxx obvykle xxxxx. Xx-xx xxxxx podávána x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx.

1.2.4 Kontroly

Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x každém xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx expozice xxxxxxxxx látce.

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx inhalační xxxxxx x aerosoly nebo xxxxxxx-xx xx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita xxxx charakterizována, zařadí xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx orální, xxxxxxxx x inhalační. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx charakteristikách xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.2.5.1 Orální xxxxxx

Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x je-li xxxxxx xxxxx z xxxx, jimiž xxxx xxx exponován člověk, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx důvody. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx v pitné xxxx xxxx podanou x xxxxxxx.

Ideálně xx se xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx dávkování xxx xxx x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx v xxxxxx xxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x následné xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx je považováno xx xxxxxxxxxx.

1.2.5.2 Dermální xxxxxx

Xxxxxxxx přímo xx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx cesty xxxxxx x xxxxxxx x xxxx modelový xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx komplikovanější xxx xxxx způsoby xxxxxxxx, jsou zde xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx napodobují předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx je obvykle xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx šest xxxxx xxxxx po pět xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), nebo x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx sedm xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), s xxxxxxxxx xxxxxx hodinou xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx i xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. V xxxx xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx v xxx, xx x xxxxx xx zvíře 17 - 18 xxxxx na ústup xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x ještě delším xxxxxxx během xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx expozice xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x na lidské xxxxxxxx, xxxxx xx xxx simulována. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx prostředí xxxxx xxx xxxxxxxx nutností xxxx x krmení xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx zaručuje xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx hodinu, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx aspektech xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx mírný xxxxxxx x xxx xx brání xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Komory xx měly xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zahrnuje:

(x) xxxxxx vzduchu: xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxx xx xxxx xxx nejlépe kontrolována xxxxxxxxxxx,

(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísat xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,

(x) xxxxxxx x xxxxxxx: pro xxxxxxxx, teplota xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °X x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx testované látky x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx parametry xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

(x) měření xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx měly xxx x respirabilní xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Vzorky xxxxxxxxx komor xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měl xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx exponováno, x měl by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, i xxxx značná část xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, aby bylo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxxxxx.

1.2.6 Xxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx část xxxxxxxx xxxx života xxxxxxx xxxxxxxxx xxx test. Xxxx xx xxx xxx ukončen v 18 xxxxxxxx u xxxx x křečků x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx. Nicméně xxx některé kmeny xxxxxx x xxxxx xxxxx života xxxx. x xxxxxx spontánním xxxxxxxx xxxxxx, doba xxxxxxxx xx měla xxx 24 xxxxxx xxx xxxx a xxxxxx a 30 xxxxxx pro xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx, xxxx počet xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx rozdíl xxxxxxxx, každé xxxxxxx xx xxxxxxxx zvlášť. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx zjevných xxxxxxxxx xxxxxx, nemusí xx xxxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx ostatní skupiny xxxxxxxxxx toxické xxxxxxx, xxxxx xx činily xxxxxxxx. Aby xxxx xxxxx uznat xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, nesmí xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx větší xxx 10 % x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx 50 % v 18 xxxxxxxx u xxxx x křečků x v 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx pohlaví x 10 xxxxxxxxxxx kontrolních xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro testování xxxxxxxxx toxicity xx xxxx xxx v xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. U těchto xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx patologie, xxxxx xx vztah x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxxx projevů xxxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Pozorování

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x klecích zahrnuje xxxxx kůže a xxxxx, xxx a xxxxxxx, jakož x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x centrálního xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx) xx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx ztrátám xxxxxx xx xxxxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx chyb x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx a xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxxxxx a očních xxxxxx x xxxxxxxxx xx zaznamenávají u xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxx tumorů: xxxx xxxxxxxx, lokalizace, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx každého xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenává.

Xx xxxxx xxxxxxxx měření xxxxxxxx potravy (x xxxx xxx, kde xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) týdně během xxxxxxx 13 týdnů x xxx přibližně xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx změny xxxxxxx váhy xxxxxxx xxxxxxx jiné xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Tělesné xxxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 týdnů xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx týdny xx xxxxx období.

1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx

1.3.2.1 Hematologie

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. obsah xxxxxxxxxxx, hematokrit, xxxxxxx xxxxx erythrocytů, celkový xxxxx bílých xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx měření srážlivosti) xx měla být xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx x poté x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech, x xx konci xx xxxxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx studia, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Diferenciál má xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx ve xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx xxxx xxxxx z vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx i x xxxxxxx x dávkou xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxx dávka.

1.3.2.2 Xxxxxxx moči

Xxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx možno xx stejných xxxxxx x xx stejných xxxxxxxxxxx xxxx hematologické xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx buď xx vzorcích jednotlivých xxxxxx nebo xx xxxxxxx vzorku pro xxxxxxx podle xxxxx x xxxxxxx:

- xxxxxx moči, xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).

1.3.2.3 Biochemické xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx měření xx xxxxx nehlodavců x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx vzorky před xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx x jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

- celková koncentrace xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- testy xx funkci xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx transaminázy¹⁾, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx²⁾, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, ornithin xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx na xxxxx,

- xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.

1) xxxx xxxxx jako sérová xxxxxx aminotransferáza

2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx včetně xxxx, která zemřela xxxxx pokusu nebo xxxx utracena v xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxx diferenciální xxxxx bílých xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx nebo xxxx, xxxx léze, které xx mohly xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Všechny xxxxxx x tkáně xx xxxx xxx xxxxxxxx pro histopatologické xxxxxxxxx. Xx se xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx: xxxxx³⁾ (xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, kory xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx tělísek, thymu, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, aorty, slinných xxxx, jater³⁾, sleziny, xxxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx³⁾, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, konečníku, močového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx uzlin, xxxxxxxx, xxxxx³⁾, akcesorních xxxxxxxxxx orgánů, samičí xxxxxx žlázy, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (krční, hrudní x bederní), xxxxxx x xxxxxx dření x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je zásadní xxx odpovídající xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako jsou xxxxxxxxx xxxxxx, má xxx studován xxxx xxxxxxxxxx xxxxx včetně xxxx, xxxxxx x xxxxxx.

Byla-li provedena xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx procedur xx xxxx být x xxxxxxxxx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx patologovi významné xxxxxxx.

3) Tyto xxxxxx x 10 xxxxxx xx xxxxxxx x xx skupinu xxxxxxxx mají xxx xxxxxxx.

1.3.2.5 Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx satelitní xxxxxxx x vysokou dávkou x satelitní kontrolní xxxxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, vyšetří xx xxxxxxxxxxxx cílové xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx skupin části xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx.

Xxx testování xxxxxxxxxxxxx:

(x) xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, která xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx xxxxx xxxxx x u xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x s xxxxxxx xxxxxx;

(x) xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x léze, xxxxx xxxx xxxxxxxxx jako xxxxxx, se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx;

(x) xx-xx xxxxxxxx rozdíl x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx lézí xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx dávkou a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x daném orgánu xx tkáni x x xxxxxxx xxxxxxxxx;

(x) xx-xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx než x xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx zkoumána x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx;

(x) je-li ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx doklad o xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx účinků, xxxxx xx mohly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx dávkovou xxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx sumarizují xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx každou testovanou xxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxxx zjištěné xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx a počet xxxxxx x tumory xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx hodnotí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxx

Zpráva o xxxxx xxxx xxxxx xxxxx obsahovat následující xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, dieta,

- podmínky xxxxx: xxxxx expozičního xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, zdroje vzduchu, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, zneškodňování xxxxxxx vycházejícího z xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxx. Dále xx třeba popsat xxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, xxxxxxxx, a xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Údaje x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) by xxxx xxxxxxxxx:

(x) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,

(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx inhalační xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),

(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,

(x) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxx,

(x) xxxxxx xxxxxxxxx částic (xxx xxx xxxxxxxxxx),

- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxx) x koncentrace,

- xxxx incidence xxxxxx podle xxxxxxx, xxxxx x xxxx xxxxxx,

- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx satelitních xxxxxx,

- výskyt xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx ,

- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- doba, xxx xxx pozorován xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx další xxxxx,

- xxxx x spotřebě xxxxxxx x tělesné xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- použité xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx,

- xxxxx klinické xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx),

- xxxxxx patologicko-anatomické,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx xxxxx,

- diskuse xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.34. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - JEDNOGENERAČNÍ XXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná látka xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Samci dostávají xxxxxxxxxx látku x xxxx růstu a xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx úplného xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (přibližně 56 xxx x myší x 70 xxx x xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx účinek testované xxxxx na xxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx cyklů, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinek xxxxxxxxx látky xx xxxxxx. Xxxxxxx jsou xxxx připuštěna. X xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxxxxx obou pohlaví, x xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx pouze xxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxx modifikovat.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx pokusu x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx látku xxxxxxx v xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx aditivum, xxxx xxx o xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxx 7 xxx v xxxxx.

1.2.2 Pokusná zvířata

1.2.2.1 Xxxxx xxxxx

Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xx xx doby xxxxxxxxx pro jiné xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx charakterizována co xx druhu, xxxxx, xxxxxxx x váhy x/xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx ověřena xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx pohlaví. Xxxxxx x xxxx skupinách, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx xxx odstavena xxxx xxxxxxxxx aplikace.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx, aby bylo xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx termínem xxxxxx. Xxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, x tím xxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnocení xxxxx xxxxx na xxxxxxxx, xxxxxx gravidity x xxxxxxxx chování x X xxxxxxxx, kojení, xxxx x xxxxx xxxxxxxxx generace F₁ xx xxxxxx xx xxxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx samice xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xx xxx poskytnut xxxxxxxx xxx vytvoření xxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Pokud se xxxxxxx xxx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dostávají vehikulum x xxxxxxxxx použitém xxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxx snižuje příjem x xxxxxxx potravy, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx další xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx xxxxxx.

Testovaná xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx v xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinku - xxxxxxxxx toxicitu, ale xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx populaci. Xxxxxxx xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx minimální xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxx připsat xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nepříznivé účinky, xxx u xxxxxx xxx x potomstva.

Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx v tobolkách xx dávka xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx podle změny xxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx na základě xxxxxxx xxxxxxxxx v 0. nebo 6. xxx xx začátku xxxxxxxxxxx.

1.2.5 Limitní xxxx

X případě látek x nízkou xxxxxxxxx, xxxxx se ani xxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na reprodukci, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx vysoká dávka, xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx nepříznivé xxxxxx xx xxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx studie xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Xxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx rodičovské xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx, xx nejméně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X potkanů xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx obdobím xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx xxxx). Samci xx xxx xxxxxx x xxxxxxx na konci xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxx xxx použiti xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x jsou xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx před obdobím xxxxxxxxxxx. Denní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxx týdny xxxxxx připouštění, v xxxx gravidity xx xx xxxxxxxxx X₁ xxxxxxxx. Je přípustná xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx znalostí x xxxxxxxxxxxx studované xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (jedna xxxxxx x jeden samec) xxxxx 1 : 2 (jeden samec xx dvěma samicím).

X xxxxxxx 1 : 1 párování, xxxxxx se xxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx kleci xx xxxxxxxxxx anebo xx xxxx 3 xxxxx. Každé xxxx xxxx samice xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx vaginální xxxxx. Xxx 0 těhotenství xx xxxxxxxxx jako xxx xxxxxx vaginální xxxxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx, u kterých xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xx je xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx k oplodnění x osvědčenými xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx cyklu a xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx plodnosti xx xxxxxxxxx možnost xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xx okamžiku odstavení xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Pokud xx xxxxxxxx xxxx standardizuje, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx postup: mezi 1. a 4. xxxx xx porodu xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 samic xx vrh; pokud xx xxxx proveditelné, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx počty, xxxx. 5 xxxxx x 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx než 8 nelze xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.4 Xxxxxxxxxx

Xxxxx zvíře xx být pozorováno xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, příznaky ztíženého xxxx prodlouženého xxxxxx x všechny xxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxx jak před, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx potravy denně. Xx porodu a x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx (x xxxx, xxxxx se xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx) xx stejný xxx, xxx je xxxxxxxxx xxxxxx. Rodičovská X xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx a xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxx 0 těhotenství. Xxxxx xxx xx xx nejdříve xx xxxxxx vyšetří a xxxxxxx se počty x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx anomálií.

Xxxxx mláďata x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx mláďata xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx xx xxxxx xxxx xx xxxxxx, xx 4. a 7. xxx x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx studie, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.

1.3.5 Patologie

1.3.5.1 Xxxxx

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx generace X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx abnormality anebo xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx reprodukčního xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx.

1.3.5.2 Histopatologická xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx, xxxxxx, děložní xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx váčky, xxxxxxxxxx xxxxx, prostata, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxx X xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx doposud xxxxxxxxx x jiných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx nejvyšší xxxxx x xxxx x xxxxxx, která xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx x x X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupin. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všechny xxxxx makroskopicky xxxxxxxxx. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxx xx sumarizují x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx těhotných xxxxx, xxx xxxx x procento zvířat xxxxxxxxx xxxx změny.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx statisticky xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Zpráva o xxxxxxxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxxxx by měla xxxxx možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje:

- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxx odezvě x xxxxxxxxxx xx dávce x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, gestace x xxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx přežila xx ukončení xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx každého xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx potomků,

- xxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx růst,

- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,

- xxxxxxx xxxxxxxx zvířat X generace,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx, xxxxx je xx možné,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.35. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx několika xxxxxxxx xxxxx a xxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxx (X) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x xxxx a 70 xxx x xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx spermatogenezu.

Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx alespoň dvou xxxxxxxxxx xxxxx, aby xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx podává xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx, v době xxxxxxxxx x xxxxxx, xxxxx samicím. Xx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx zvířatům filiální xxxxxxxx F₁ v xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, v xxxx xxxxxx x xx xx doby xxxxxxxxx X₂ generace.

Xxx xxxxxxxxx aplikaci je xxxxx metodu modifikovat.

1.2 Xxxxx testovací xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx xxxx skupin - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxxxx xxxxxxx (X) xxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxx v xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx. Všechna xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx používá x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jiné xxxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Látka xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx

Dává se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx P xxxxxxx, xx xx doby xxxxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx. Nepoužívá xx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a xxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx x obou xxxxxxx. Xxxxxx x obou xxxxxxxxx, exponované a xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxxx xxxx zahájením xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx x xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupina xxxx xxx dostatečný xxxxx xxxxxx, xxx xxxx zaručeno cca 20 březích samic x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx těhotenství x xxxxxxxxx, x tím xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, průběh gravidity x xxxxxxxx chování, xxxxxx, růst x xxxxx potomstva xxxxxxxx X₁ xx početí xx dospělosti, a xxxxx jejich potomstva xxxxxxxx X₂ až xx xxxxxxxxx.

1.2.4 Podmínky xxxxx

Vodu a xxxxxxx dostávají xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx těhotné xxxxxx přemístí xx xxxxxxxxxx porodních nebo xxxxxxxxxx klecí a xx jim xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.5 Xxxxxxxxx

Použijí xx alespoň xxx xxxxxxxxxx skupiny x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx používá xxx xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxx, xxx zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx dostávají xxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxx objemu. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx další xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx do xxxxxx.

Xxxxxxxxx látka x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má x ideálním případě, xxxxx xx dovolí xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x její xxxxxxxxxx xxxxxx, vyvolávat xxxxxxxx x nikoli xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) xx xxxx(x) vyvolat minimální xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx se daly xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxx u xxxxxx xxx x xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxxx nebo v xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx na základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx podle xxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx hmotnosti x 0. nebo 6. xxx xx xxxxxxx těhotenství.

1.2.6 Xxxxxxx xxxx

V případě xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, pokud xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx žádným xxxxxxxx účinkem xx xxxxxxxxxx, nemusí se xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx předběžná studie xxxxx, xx vysoká xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, není nutné xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 Xxxxx postupu

1.3.1 Xxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx generace X xxxxx xx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx, aspoň xx xxxxxxxxx aklimatizaci xx odstavení. X xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx myši). Xxxxx se xxx xxxxxx x xxxxxxx xx konci období xxxxxxxxxxx nebo se xxxxxxxxx v aplikaci x xxxx použiti xxx xxxxxxxxx produkci xxxxxxx xxxx x xxxx utraceni x xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx samicím rodičovské xxxxxxxx X xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x pokračuje xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Denní xxxxxxxx xxxxxxxxx pak xx xxxx tři xxxxx období připouštění, x xxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx X₁ xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx dávkovacího xxxxx xxxxx znalostí x xxxxxxxxxxxx studované xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. x xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X₁ xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.

1.3.2 Postup xxx xxxxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x jeden xxxxx) anebo 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx dvěma xxxxxxx).

X případě 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxx xx dobu 3 týdnů. Každé xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx vaginální xxxxx. Den 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx den nálezu xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx k xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx X₁ xx xxxxxxxxxxx pro připouštění xx xxxx 11 xxxxx x myší x 13 xxxxx x xxxxxxx. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxx generace X₁ xx xxxxxxx xxxxxxx páry x xxxxxxx vrhů téže xxxxxxx skupiny. Zvířata xxxxxxxxx xx utratí xx xxxxxxx.

Xxxxxxx, x kterých nedojde x oplodnění, je xxxxx xxxxxxxx s xxxxx zjistit xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx další příležitosti x oplodnění s xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx orgánů xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x spermatogenezy.

1.3.3 Xxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx vyšetření xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx porodit xxxxxxxx x xxxxxxx o xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx bez xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vrhů. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx standardizuje, xx xxxxx dodržet následující xxxxxx: mezi 1. x 4. dnem xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx vrhů xxxxxx xxxxxxxxx nadbytečných xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 xxxxx x 4 samic xx xxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx počty, např. 5 samců x 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx než 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx F₂ xx provede xxxxxxx.

1.3.4 Xxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx za xxx. Xxxxxxxx změny xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx porodu x všechny xxxxxxxx xxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx jak xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Během xxxxxxxxx xx xxxxxx kontrolovat xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx stejný xxx, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X x F₁ xxxxxxx xx váží xxxxx xxx xxxxxxxx x pak xxxxx. Xxxxxxx pozorování xx xxxxxxxxxxxxx individuálně pro xxxxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxx 0 těhotenství. Každý xxx xx co xxxxxxxx xx porodu xxxxxxx x xxxxxxx xx počty a xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx anomálií.

Mrtvá xxxxxxx x mláďata xxxxxxxx xx čtvrtém xxx xx xxxxxxxx xxx vyšetření xx xxxxx xxxxxxx. Živá xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx xx xxxxx xxxx xx xxxxxx, ve 4. x 7. xxx x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Pozorují xx x zaznamenávají xxxxxxx xxxxxxxxxxx x chování x fyzickém xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.

1.3.5 Xxxxxxxxx.

1.3.5.1 Pitva

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X a X₁ xx utrácejí, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx účinků látky xx reprodukci. Xxxxxxx xxxxxxxx X₁ xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X₂ xx xxxxxx xx xxxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx xxxx úmrtí xx všechna xxxxxxxxxx xxxxxxx X x X₁ xxxxxxxxxxxxx vyšetří xx xxxxxxxxxx abnormality xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx reprodukčního xxxxxxx. Mláďata xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx.

1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, prostata, hypofýza x další xxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx X a X₁ xx uchovají xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx, že xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx mnohadávkových xxxxxxxx, xxxxxxx xx mikroskopické xxxxxxxxx x xxxxx X x F₁ xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x skupiny dostávající xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx, x xxxx x zvířat, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx skupin xxxxxx, xx xxxxxxx i x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupin. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všechny xxxxx xxxxxxxxxxxxx postižené. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx mikroskopické xxxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx těhotných xxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxxxx by xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:

- druh/kmen xxxxxxxxx xxxxxx,

- údaje x xxxxxxx odezvě x xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx ukazatelů xxxxxxxxx, xxxxxxx a životaschopnosti,

- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx,

- tabulka xxxxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx vrhu, průměrnou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx x xxxxx účinky na xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx růst,

- xxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxx xxxxx,

- xxxxxxx hmotnost zvířat X x X₁ xxxxxxxx, vybraných xxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.36. XXXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxxx cestou. X xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, jedné nebo xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx tekutinách, xxxxxxx xxxxx x exkretech.

Xxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx x "neznačenou" xx "xxxxxxxx" formou xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx informací o xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Zdravá xxxxx zvířata xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nejméně po xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx testování xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx otázek xx xxxx xxxxxx xxxxx mladých, pregnantních xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Toxikokinetické xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxx xx druzích xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Jestliže xxxx xxx xxxxxxxxx používáni xxxxxxxx, xxxxxx xx xxx variabilita hmotnosti xxxxx xxx ± 20 % průměrné xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Pro xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx nejprve 4 xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx dávku. Xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx za xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx provádět xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x různých pohlaví, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx než xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxx distribuce, xxx xxx určení počáteční xxxxxxxxx skupiny xxxxxx xx třeba xxxx x xxxxx jak xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx utracena x xxxxxx xxxxxxx bodu, xxx xxxxx xxxxxxxx xxxx, v xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xx-xx studován xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx skupiny xxxxxx je úměrná xxxxxxxx studie.

Xxxxxxxx-xx xxxxxx větší počet xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx intervalů, xxx xxxxxxxx skupiny zvířat xx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, ale xx skupině nesmí xxx méně xxx 2 xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xx, xxx xxx xxxxx xxxx. xxxx metabolity xxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky ve xxxx retence, xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx

X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx podání by xxxx být xxxxxxx xxxxxxx 2 různé xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx dávka, xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx parametrech nebo xxxxx vyvolává xxxxxxx xxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx dávek xxxxx. Xx xxxxxxxx podmínek xxxx být xxxxxxxx x podávání vysoké xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx prováděny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xx-xx to xxxxxx x xx xxxxxxx vehikulem xxx, xxx jsou používány x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Testovaná xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx sondou xxxx x potravě, aplikována xx xxxx, nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx skupině xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat. Intravenózní xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.

Xxxxxx by se xxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx látkou. Pozornost xx xxxx být xxxxxx věnována xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx, xx-xx testovaná xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx měla xxx sledována xxxxx x příznaky toxicity x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxx x xxxxxx počátku, xxxxxxxxx x trvání.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxx pokusných zvířat xx testovaná látka xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xx zdůvodněných xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx testované látky xxxxxxxxxx.

1.3.1 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxxxx rychlosti a xxxxxxx xxxxxxxx podávané xxxxx mohou být xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx bez xxxxxxxxxx xxxxxxx¹⁾, x xx např.:

- xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx a xx. xxxxxx metabolitů x xxxxxxxxx xxxx. x xxxx, xxxxx, stolici, xxxxxxxxxxxx vzduchu a xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx,

- xxxxxxxxx biologické xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx akutní xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx x kontrolní x xxxxxxxx xxxxxxxxxx skupinou,

- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ledvinami xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x případně xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.

1) X xxxx xxxxxx xx referenční xxxxxxxx xxxxxx xx, xx které je xxxxxxxxx xxxxx podávána xxxxxxx způsobem, xxxxx xxxxxxxxx úplnou biologickou xxxxxxxxxx xxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxx

X xxxxxxxx xxxx jsou xxxxxxxx 2 xxxxxxxx, z xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxx:

- xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx kvalitativní xxxxxxxxx;

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx stanovení koncentrací x množství xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx a orgánech xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxxxx

Při xxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxx moč, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx xx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, x xx xxx xx vyloučení 95 % x xxxxxxxx množství xxxx xxxxxxx 7 xxx xx počátku xxxxxxxxxx.

Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxx x xxxx xxxxxxx testovaných zvířat.

1.3.4 Xxxxxxxxxxxx

K určení xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx metabolitů x xxxxxxxx odpovídající metabolické xxxxxx xxx, xxx xx třeba odpovědět xx otázky x xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických studií. Xxx získání xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vitro studií.

Xxxxx informace x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx látky xxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx - XX xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxx prováděné studie xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, xxxxx možno xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Pro xxxxxx testovanou xxxxxxx xx uvedou xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxx, dávce, tkáni x orgánům (pokud xx xx relevantní). Xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxxxxxxx struktura xxxxxxxxxx x xxxxxxxx metabolické xxxxx studované látky.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx

Xxxxx typu xxxxxxxxx xxxxxx by xxxxxx x testu xxxx xxxxxxxxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,

- charakteristika xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxx,

- xxxxxxxx dávky x xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx(x) podání x xxxxxxx xxxxxxx vehikula,

- xxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,

- metody xxxxxxxxx testované látky x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx vydechovaného xxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx rozdělené xxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxx x xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xx xxxx,

- xxxxxx užité xxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x biologickém xxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx xxx biochemická xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxx metabolismus,

- diskusi xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.37. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH SLOUČENIN XXXXXXX - AKUTNÍ XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Úvod

Při xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látek xx xxxxxxxx vzít x úvahu schopnost xxxxxx xxxxxxx látek xxxxxxx specifický typ xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxxxxx zpožděné projevy xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Vyšetřovací xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek, které xxxxx vyvolat pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x in xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, že látka xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxxxxx

Xx skupiny xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx metody xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, fosfonové xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, thiofosfonových xxxx amidothiofosforečných, nebo xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, pozorovanou x xxxxxxxxx xxxxx této xxxxxxx.

Pozdní xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, distální xxxxxxxxxx, změnami v xxxx a xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx příznaků, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx esterase) x xxxxxxx xxxxx.

1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx testovaných xxxxx xxxxxxxxx nezměnila.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx neurotoxickým xxxxxxx xx xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, EINECS 201-103-5, xxxxxxxx název: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx.: tri-o-kresylfosfát (XXXX).

1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx slepicím, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinky. Xxxxxxx se xx xxxx 21 xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x paréza. Biochemické xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x každé xxxxxxx, obvykle 24 x 48 hodin xx podání xxxxx. 21 dnů xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx utraceny x je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.5 Xxxxx xxxxxx testování

1.5.1 Xxxxxxxx

Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx bez xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx léčby x x xxxxxxxx chůzí xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx skupiny. Nejméně 5 xxx před xxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx chovu x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xx dostatečně xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx orálně sondou, xxxxxxxxxxxx tobolkami xxxx xxxxx srovnatelnou xxxxxxx. Xxxxxxxx xx podávají xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxx, xxxx je např. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx doporučuje rozpustit, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx látek x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx by xx nemusely dostatečně xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx nebo xxxxxx xxxx testem xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.6.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx mladá xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x chovají xx xx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx pohyb.

1.6.1.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxx skupiny xx xxxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx stejně jako x pokusnými.

X xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx aspoň xxxx z nich xxxxx xxx xxxxxxxx xxx biochemické vyšetření (xx xxxxx xxxx x xxxxx den xx podání) a xxxx xxxxxxx 21xxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx může xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxx. Má xxx aspoň xxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx neurotoxicitu, xxx xxxxxxx xxxx určeny xxx xxxxxxxxx x xxx slepice xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx prvků xxxxx (xxxx. plemeno, potrava, xxxxxxxx chovu).

1.6.1.3 Xxxxx xxxxx

Xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx stanovit xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Určitá xxxxxxxx xx v této xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx přiměřené xxxxx x hlavní xxxxxx. Aby se xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx ochranný xxxxxxxxx, x kterém xx známo, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. K xxxxxx maximální neletální xxxxx xxxxxxxxxxx látek xxxx xxx použito xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxx xxxxxx B.1 bis). Xxxxxxxxxx údaje xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx studii xx xxxx xxx co xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x hornímu limitu xxxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx dostatečného xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx (xxxx) a xx 21 dnech xxx histologii (šest). Xxxxxxx xxxx jiný xxxxxxxx xxxxxxxxx, o xxxxxx je známo, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xx použít xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx

Jestliže xxxx x xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti, za xxxxxxx postupů xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx pozorované xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx strukturou není xxxxx toxicitu xxxxxxxx, xxx není xxxxx xxxxxxxx o xxxxxx x xxxxxxx vyšší xxxxx. Limitní xxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx vyskytující se x xxxx naznačuje xxxxxxx použití xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.6.1.5 Xxxx pozorování

Xxxx xxxxxxxxxx je 21 xxx.

1.6.2 Xxxxx postupu

Xx aplikaci prostředku, xxxxxxxxxxxxx před úmrtím xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinku, xx xxxxxxxxx látka xxxxxx x xxxxxx dávce.

1.6.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx začít okamžitě xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x průběhu xxxxxxx xxxx xxx a xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xx dobu 21 dní xxxx xxxxx nebudou xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx nástupu, xxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx se hodnotí xxxxx nejméně čtyřstupňové xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx slepice xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změny xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx např. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.

1.6.2.2 Xxxxxxx hmotnost

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx látky x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.6.2.3 Xxxxxxxxx

Xxxx xxxxxx xxxxxxx vybraných x každé xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem a xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx skupina xxxxxxx) xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx látky. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx NTE xx vyjmou xxxxx x lumbální xxxxx. Xx vhodné xxxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx XXX. Xxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxx testované xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxx xxx xx 48 hodinách, xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx xxxxxxxx pouze xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx pozorování xxxxxxxxxx xxxxxxxx naznačuje, xx xxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx (hodnotí xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), pak je xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorky xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxx, x xx mezi 24 xx 72 hodinami xx xxxxxx xxxxx.

X xxxxxx vzorků xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx také analýza xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). In xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx xxxx k xxxxxxxxx xxxxx xxxx inhibitoru XXxX.

1.6.2.4 Xxxxx

Pitva x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i utracených xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx mozku x xxxxx.

1.6.2.5 Histopatologické xxxxxxxxx

Nervová tkáň x přeživších xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx in xxxx xx použití xxxxxxxxxx xxxxxxx. Odebírá xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx mícha, xxxxx - xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x horní krční xxxxx, xxxxxxx hrudní x lumbosakrální, x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx distální část x n. tibialis (x jeho xxxxx x m. xxxxxxxxxxxxx) x x x. xxxxxxxxxxx. Řezy se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.

2. XXXX X XXXXXX ÚDAJŮ

Xxxxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxx) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx pozdní xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx zvířata. Xxxxx xx xxxx sestaví xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx počátku xxxxxx a xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx chování xxxx xxxxxxxxxxx účinky, xxxx x stupeň xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.

Výsledky xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx výskytu, xxxxxxxxxx x korelace xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx jevy u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx již x xxxx plánované xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x průběhu pokusu

Xxxxxx o xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx mohly být xxxxxxx:

Testovaná xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxx a xxxxx zvířat;

- xxxxx, podmínky ustájení xxx.;

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx studie.

Podmínky xxxxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxxx x přípravě, xxxxxxxxx x homogenitě xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula;

- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a kvalitě xxxx;

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dávek;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx podrobných xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;

- podrobné xxxxx x xxxxxx ochranného xxxxxxxxx.

Výsledky:

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx;

- údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx skupin xxxxxx xxxxxxxxx;

- xxxxxxxxx, stupeň a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx);

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxx;

- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx to xxxxx.

Xxxxxxx výsledků

Xxxxxxxxx x Interpretace

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x metodou XXXX TG 418.

X.38. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX 28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Úvod

Xxx xxxxxxxxx a vyhodnocení xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxx vzít x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx zjištěn x xxxxxx studiích toxicity. X xxxxxxxx organických xxxxxxxxx fosforu xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx testovány xxxxx xxxxxxx.

Vyšetřovací xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxx 28xxxxx test xxxxxx xxxxxxxxxxxxx poskytuje informace x xxxxxx zdravotním xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x závislosti odpovědi xx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx kterém xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx úroveň xx používá pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 Xxxxxxxx

Do xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" patří xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx amidofosforečné xxxx xxxxxxxxxxx kyselin xxxxxxxxxxxxxxxx, thiofosfonových xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx jiné xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx u některých xxxxx této xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx je xxxxxxx projevující se xxxxxx, xxxxxxxx axonopatií, xxxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx příznaků, x xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx specifické xxxxxxxx - NTE (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxx.

1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx denně orálně xxxxxxxx xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x paréza xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, zvláště xxxxxxxx XXX, se xxxxxxx x slepic xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xx xxxxxxxx dávce xxxx zbývající xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx nervových xxxxx.

1.4 Xxxxx xxxxxx testování

1.4.1 Xxxxxxxx

Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x farmakologické xxxxx x x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx.

Používají xx xxxxxxxxxx velké xxxxx xxxx xxxxxx umožňující xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxxx 7 dní x týdnu, buď xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jinou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx,

jako xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx před xxxxxx xxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Doporučuje xx xxxxx xxxxxxx xxxx domácího (Gallus xxxxxx xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 xx 12 měsíců. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxx dovolují xxxxx xxxxx.

1.4.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky se xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx.

X xxxxx xxxxxxx má xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx, xxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxx xxx utraceno pro xxxxxxxxxxx vyšetření (po xxxxx x každém xx xxxx xxxxxxxx xxxx) a xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx ukončení xxxxxxxx.

1.4.2.3 Xxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx výsledkům z xxxxxxxx testu na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx úroveň dávky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, nejlépe xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxx xxxxxx xxxxxxx. Dále xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx umožní sledovat xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.4.2.4 Xxxxxxx xxxx

Jestliže xxxx s xxxxxx xxxxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx a xxx, za xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx studii, xxxxxxxx xxxxx pozorované xxxxxxx xxxxxx x jestliže xxxxx údajů u xxxxx x příbuznou xxxxxxxxxx xxxx důvod xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x studii x xxxxxxx xxxxx dávky. Xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ještě vyšší xxxxxx xxxxx.

1.4.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Všechna zvířata xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx denně xx xxxx expozice x 14 xxx xx xx, nebo xx xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx plánu.

1.4.3 Xxxxx postupu

Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxx dní v xxxxx xx 28 xxx.

1.4.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxx xxxxxxx se pečlivě xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxx 14 dnů po xxxxxxxx xxxxxxxx, do xxxxxxxx xxxxx plánu. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx včetně xxxxxxx, xxxx, stupně x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx abnormality xxxxxxx, ale nemá xx xx xx xxxxxxxx. Ataxie se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pořadové stupnice, xxxxxxxxxxx se xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx xxxxxxx vyjmou x xxxxx x xxxxxxx nucené xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx minimálních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky stresu x bolesti xx xxxxx vyloučit, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

1.4.3.2 Tělesná xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx těsně xxxx xxxxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx a pak xxxxxxx jednou týdně.

1.4.3.3 Xxxxxxxxx

Šest xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx aplikaci xxxxxxxx xxxxx. Xxx analýzu xxxxxxxx XXX se xxxxxx mozek x xxxxxxxx mícha. Xx xxxxxx vypreparovat xxxx x. ischiadicus x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx NTE. Xxxxxxx se usmrcují xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 hodinách x xxxxx xxx xx 48 hodinách po xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx z xxxxxx studie nebo xxxxxx xxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxxxx) naznačují, xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxx usmrcení xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx použít xxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx.

U xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx provede xxxx xxxxxxx acetylcholinesterázy (XXxX). Xx vivo xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx AChE, xxx xxxx vést x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx AChE.

1.4.3.4 Xxxxx

Xxxxx všech xxxxxx (xxxxxxxxx usmrcených x xxxxxxxxxx xxx špatný xxxxxxx stav) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx posouzení xxxxx xxxxx x xxxxx.

1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (nepoužitých pro xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx fixují xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: mozeček (střední xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, mícha (xxxx xxxxx xx xxxxxxx x horní krční xxxxx, střední xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx), z xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx distální část x n. xxxxxxxx (x jeho xxxxx x x. xxxxxxxxxxxxx) x x x. xxxxxxxxxxx. Řezy se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx myelin x xxxxx.

Nejprve xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx. Xxxxx se xxxxxx x xxxxxx skupiny x nejvyšší xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xx slepicích xx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx střední x xxxxxx.

2. XXXX X ZÁZNAM XXXXX

Xxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx testování na xxxxxx neurotoxicitu. Neprůkazné xxxx neurčité výsledky xxxxx vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Údaje xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x počet zvířat xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxx těchto poškození xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezy x dalšími xxxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit vhodnou x xxxxxx uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxx obsahuje xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx xxxxxxx:

Xxxxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx x xxxxx xxxxxx,

- zdroj, xxxxxxxx ustájení xxx.,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na začátku xxxxxx.

Podmínky testování:

- podrobné xxxxx x xxxxxxxx, stabilitě x homogenitě xxxxxxxxx xxxxx,

- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- podrobné xxxxx x xxxxxxx x kvalitě xxxx,

- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x vehikulu, xxxxxx x fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx jiná xxx 24 a 48 xxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxx o xxxxxxx hmotnosti,

- xxxxx o toxických xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx včetně xxxxxxxxx,

- úroveň bez xxxxxx (XXXXX),

- xxxxxxxxx, stupeň a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx),

- xxxxxxxx xxxxx biochemických xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- pitevní xxxxxx,

- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, u kterých xx to xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx

4. XXXXXXXXXX

Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 419.

X.39. Test xxxxxxxxxxx syntézy XXX x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx XXX Xxxxxxxxx (XXX) Test With Xxxxxxxxx Xxxxx Xxxxx Xx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Účelem testu xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx DNA synthesis, XXX) x savčích xxxxxxxxx buňkách xx xxxx je xxxxx xxxxx, vyvolávající reparaci XXX v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4).

Xxxxx xxxx xx xxxx představuje xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx buňkách x xxxx xxxxxxxxx reparaci. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx metabolismu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; jsou xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx vivo.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, xx se xxxxxxxxx látka do xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx tento test xxxxxx.

Výsledek xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (XXX) xx xxxxxxx tak, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (X-xxxx) xxxxxxxx XXX. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (³H-TdR). Xxx xxxxx XXX xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx játra. Xxxx xxxxx xxx xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx předmětem xxxx metody.

Xxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxx bází XXX, xxx jsou x xxxxx poškození odstraněny x nahrazeny. Xxxxx xx xxxxxx UDS xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxxx" (1 - 3 xxxx) je méně xxxxxxx. Dále může xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx neopravení, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx replikace xxxx XXX. Xxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxx x XXX xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx DNA xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx reparačním xxxxxxxx. Xx, že XXX test xxxxxxxxxxx x mutagenní aktivitě xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože poskytuje xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxx x xxxxxxxx: net xxxxxxx xxxxx (NNG) xxxxx xxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx hodnota, xxxxxx zdůvodní xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.

Xxx xxxxxxx xxxxxx (XXX): xxxxxxxxxxxxx xxxx XXX xxxxxxxx buněk při xxxxxxxxxxxxxxxxxxx testech XXX, xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxx x xxxxx (XX) x xxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxx (XX): NNG = XX - XX. Xxxxx XXX xx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX): xxxxxxx syntéza XXX xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX obsahujícího xxxxxx xxxxxxxxx vyvolaného xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX METODY

Xxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx xxxxxx a xxxxxxxxxx segmentu XXX xxxxxxxxxxxx oblast xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemickou látkou xxxx xxxxxxxxxx působením. Xxxx vychází xxxxxxx x xxxxxxxxxxx ³H-TdR xx XXX jaterních xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx v X-xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx ³H-TdR xx xxxxxxx xxxxxxx autoradiograficky, xxxxxxx xxxx technika xxxx tak náchylná x xxxxxxxxxxxx s xxxxxxx x X-xxxx, xxxx xx např. xxxxxxxxxxx metoda.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Výběr xxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxx potkani, xxx xxxxx použít xxxxxxxxx vhodný savčí xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx zahájení xxxxxx měly být xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx nemají xxxxxxxxxx ± 20 % průměrné xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxx chovu xxxx xxxxxxx ve Všeobecném xxxxx x xxxxx X.

Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx jedinci xx xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Jedinci xx jednoznačně xxxxxx x po dobu xxxxxxxxx xxxx dní xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x laboratorních xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x kde jsou xxxxx xxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx

Je-li xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx a xx-xx xx možné, xxxxx xx xxxx podáním xxxxxxxx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx třeba používat xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx ji xxxxxxxxx.

1.4.3 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.3.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx účinky a xxxxx s testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx ne xxxxxx xxxxx rozpouštědlo, xxxx xxx xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx x kompatibilitě x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby kde xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx použito xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.

1.4.3.2 Xxxxxxxx

Do xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (rozpouštědlo/vehikulum) xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xx zvířaty xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxx, xxx xxx očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvýšení xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx odezvě (4). Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx byly xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx patří xxxxxxxxx:

Xxxx odběru xxxxxx	Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxx x xxxxxxxxx (2-4 hodiny)	X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx	62-75-9	200-249-8
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 hodin)	X-2-xxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX)	53-96-3	200-188-6

Xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Je možná xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx cestou, xxx xx podávána xxxxxxxxx xxxxx.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx

X xxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx analyzovatelní xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx historická xxxxxxxx, pak xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, nebo xxx jedinci.

Xxxxx x době, xxx xx xxxxxx provádí, xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx expoziční xxxx, xxxxxxxxxxx, xx mezi xxxxx pohlavími nejsou x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx na samcích. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jak xx xxxx například x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxx xx xxxxxxxxx odpovídajícího xxxxxxx.

1.5.2 Dávkovací xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx podává jednorázově.

1.5.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxx dávky. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky toxicity, xx xxx vyšší xxxxx xx stejném xxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx dávka xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.

Xxxxx, xxx x nízkých netoxických xxxxxxx vykazují specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx od xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, protože xxxxxxxx údaje xxxxxx x xxxxxxxxx, je xxxxx ji xxxxxxxxxx x téže xxxxxxxxxx x xx použití xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx režimu, xxxx xx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.

Xxxx nejvyšší dávku xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx vyvolávající určité xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx (xxxx. pyknotická xxxxx).

1.5.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx minimálně 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx nebo ve xxxx xxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x strukturně xxxxxxxxxx látkách neočekává xxxxxxxxxxxx, nemusí xx xxxxxxx úplná xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx humánní xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxx dávka.

1.5.5 Aplikace xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx i xxxx xxxxxxxxx cesty. Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, protože xx xx tím xxxxx xxxxx vystavit xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx přímo, xxxxxx krevním xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx kapaliny, xxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x hmotnosti organismu; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx koncentracích xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x minimalizovala se xxx xxxxxxxx variabilita.

1.5.6 Příprava xxxxxxxxx xxxxx

Jaterní xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxx zpracovávají obvykle 12 - 16 xxxxx xx podání xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx další xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 xxxxxx xx xxxxxx xxxxx), xxxxxx xx xx 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xx ovšem xxxxx xxxxxx i xxxx xxxx odběru xxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx toxokinetických xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx buněk xx obvykle xxxxxxxxx xxxxxxx jater xx xxxx xxxxxxxxxxx. Je xxxxx zajistit, aby xx xxxxxxx disociované xxxxxxx buňky xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx buňky xx xxxxxx x xxxxxxxxx kontroly mají xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).

1.5.7 Xxxxxxxxx UDS

Čerstvě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx xxxx (např. 3 - 8 xxxxx) obvykle xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx ³X-XxX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx thymidinu, xxx xx snížila xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxx. "xxxx xxxxx"). Xxxxx se xxx promyjí, xxxxxx x xxxxxx. Při xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx "xxxx xxxxx" xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, exponují ve xxx (např. xx xxxx jednoho xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxx), xxxxxxxx, xxxxxx x počítají xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxxx.

1.5.8 Xxxxxxx

Mikroskopické xxxxxxxxx xxxx obsahovat dostatečný xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx UDS xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx radioaktivního xxxxxxx).

Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxx preparátech x xxxxxxx xxxxxxx xx obvykle xxxxxxx 100 xxxxx; pokud xx xxxxx méně xxx 100 xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx být xxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x S-fázi, xxx xxxxx xxxxx v X-xxxx xx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx metodou se xxxxxxx stupeň xxxxxxxxxxx ³X-XxX do jader x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx normálních buňkách, xxxxxxxxxx podle depozice xxxxxxxxxx zrnek.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Výsledky xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx preparátů x xxxxxx. Mimoto xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x tabelární xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx a xxx se xxxxxxx xxxxx xxxxx "nuclear xxxxx" (XXX) xxxxxxxxx xxxxx XX od xxxxx NG. Xxxxxxxx-xx xx "xxxxx v xxxxxx", xxxx být xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx a podložena xxxx x historických xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx výsledky xx mohou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, je třeba xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:

pozitivní		(X) xxxxxxx XXX xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, zdůvodněným xx základě xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx
	nebo	(XX) xxxxxxx XXX významně xxxxx než x xxxxxxxx xxxxxxxx
negativní		(X) xxxxxxx XXX xx xxxxxx/xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx prahu x kontrol
	xxxx	(XX) xxxxxxx XXX xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx variabilita xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx - xxxxxxx x cytotoxicita. Při xxxxxxxxxxxxx výsledků xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla být xxx pozitivní xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Většina xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx získaného souboru xxx vyvodit x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx ukazuje, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx xxxxxxxxx XXX, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx DNA xx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx nevyvolává xxxxxx poškození XXX, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxx x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx dosáhne širokého xxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Ve xxxxxx x průběhu xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx.

Xxxxxxx zvířata:

- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- xxxxx, xxx a xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek xxx jednotlivé skupiny.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,

- xxxxx ze studie xxx určení rozpětí, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x podávání xxxxxxxxx xxxxx,

- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx se xxxxx dostala xx xxxxxxxx oběhu nebo xx xxxxxx xxxxx,

- případný xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) xx faktickou dávku (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),

- xxxxxxxxxxx x kvalitě xxxxxxx x xxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx testované látky x xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx buněk,

- xxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxx hodnoty počtů xxxxxxxxxx zrn v xxxxxxx, cytoplazmě x "xxx nuclear xxxxxx" xxx jednotlivé preparáty, xxxxxxx a xxxxxxx,

- vztah xxxxx-xxxxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx,

- statistické xxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- známky xxxxxxxx,

- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek,

- xxxxx "xxxxx x xxxxxx", xxx-xx xxxxxxxx,

- počet xxxxx x S-fázi, xxx-xx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxx buněk.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Závěry.

Xxxxxx X.39. xxxx xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx od 22.6.2001

X.40. XXXXXXX XXXXXX XX KŮŽI

1. XXXXXX

1.1 XXXX

Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxxxxx Xxxxxx xxx xxx Xxxxxxxxxx of Xxxxxxxxxxx Methods, ECVAM, Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx, Xxxxxxxx Commission) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx na xxxxxxx xxxxxx xx xxxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx transkutánního elektrického xxxxxx xxxx potkana (xxxxxxxxxxxxxx electrical resistance, XXX) x xxxx xxxxxxxxxxx modelu xxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx studie XXXXX xxxxxxxxx, xx xxx xxxxx dokáží xxxxxxxxxx rozlišovat mezi xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x neleptajícími xxxx. Xxxxxx test xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx správně xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxx xxxxxxxxx účinků (známé xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx X35, x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, X34). Xx xxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxx testů; xxxxx xxxx xxxxx testy xxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2 DEFINICE

Poleptání xxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx testované xxxxx.

1.3 REFERENČNÍ XXXXX

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, viz xxxx xxxx. 1.5.3.4 a 1.7.2.3.

1.4 PRINCIP XXXXXX - XXXX XXX XX XXXX XXXXXXX

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nanese xx dobu až 24 xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx terčíků xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx identifikovány xxxxx xxx schopnosti xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x bariérové funkce xxxxxx xxxxxxx.Xxxx schopnost xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporu (XXX) xxx xxxxxxx prahovou xxxxxxx (5xΩ) (4) (5). Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. V případě xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxx v xxx. (6)) je xxxxx xx zkušebního xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx pozitivních xxxxxxxx, xxx xx x xxxxxx xxxx chemických xxxxx vyskytují (2) (7).

1.5 XXXXX METODY - XXXX TER XX XXXX XXXXXXX

1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxx přípravu xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23xxxxx) xxxxxxx, Xxxxxx nebo srovnatelný xxxx. Malými xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx odstraní xxxx x dorzální x xxxxx plochy. Xxxxxxx xx xxx omyjí xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxx xx roztoku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx streptomycinu, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx bakterií. Xxxxx xxxx čtvrtý xxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx omyjí xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx 3 xxx xx použijí. Xxx xxxxxxxx kožních vzorků xxxxxxx xxx zvířata xxxxxx xxx 31 xxx.

1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx xx humánním xxxxxxxx usmrtí, sejme xx kůže x xxxxxxxx xxxxxx x x xx xx xxxxxxx sloupne xxxxxxxxxx xxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PTFE) xxxxxxx, x to xxxxxxxxxxx xxxxxxx x trubici. Xxxx xxxxx trubice xx xxxxxxxx xxxxxx X-xxxxxxx, kterým xx xxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx tkáň xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x X-xxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx X-xxxxxxx se xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxx vazelínou. Xxxxxxx xx ponoří xx xxxxxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX), xxx je xxxxxxxxxxx pružinovou xxxxxx (xxx. 2).

1.5.3 Xxxxx xxxxxxx

1.5.3.1 Nanesení xxxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx stavu, xxxxxx xx na xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx xx stavu xxxxxx, xxxxxx se xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx 150 μl xxxxxxxxxxxx vody a xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx s xxxx xxxxxxxxx možný xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxx látek toho xxx xxxxxxxxx zahřátím xxxxx xx 30 ^xX, xxx se xxxxxxxxx, xxxx rozetřením xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx pro každou xxxxx. Xxxxx se xxxxxx na dobu 24 hodin (xxx xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx xx promýváním xxxxxxx xxxxxxxxx vody xxxxx maximálně 30 ^xX tak xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx testované xxxxx, která v xxxxxxx xxxxxx, se xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx zhruba 30 ^xX.

1.5.3.2 Xxxxxx XXX

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (XXX) xx xxxx pomocí xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx střídavý xxxxx (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Před měřením xxxxxxxxxxxx odporu xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% ethanolu, xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx několika xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxx, že xx xxxxxxx otočí, x xxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx tří xxxxxxxxx 154 xX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxx x xxxxx se xxxxx x xΩ/xxxxxx (xxx. 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx holé xxxxxxxxx xxx krokosvorkou xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx uloží xxxxxx XXXX xxxxxxx xxx, xxx xxxx xx xxxxxxx síranu xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx stejná xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) elektroda se xxxxx do receptorové xxxxxxx tak, xxx xxxxxx xx xxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx hranou xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx XXXX xxxxxxx (xxx. 1), tato xxxxxxxxxx xx xxxx na xxxxxxxx hodnotu xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx, xx je-li xxxxxxxx xxxxx vyšší než 20 xΩ, může xx být xxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx kůže. Xx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, například tak, xx xx PTFE xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx 10 sekund xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx roztokem.

Průměrná xxxxxxxx xxxxxxx TER xx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro popisovanou xxxxxx x aparaturu xxxx xxxx:

&xxxx; Xxxxxxxx	&xxxx; Xxxxx	&xxxx; Xxxxxxx xxxxxx (xX)
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; 10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36%)	&xxxx; 0,5 - 1,0
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; xxxxxxxxxxx xxxx	&xxxx; 10 – 25

1.5.3.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx povrchově xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky

Pokud xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx organických xxxxx hodnota TER xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ, lze xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).

1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x odstranění xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx xx xx epidermální xxxxxx všech xxxxxxx xxxxxx xx 2 xxxxxx po 150 μx 10% (w/v) xxxxxxx sulforhodaminu X x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxx po xxxx 10 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vody, xxxxx xx nejvýše xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xx xx xxxxxxxxx přebytečné (xxxxxxxxxx) xxxxxxx. Každý xxxxxx xxxx se xxx xxxxxxx xxxxx x XXXX xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx (např. xx 20 xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx scintilaci) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx po xxxx 5 xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx zbytky xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx nádobek x 5 xx 30 % (w/v) xxxxxxx dodecylsulfátu xxxxxxx (XXX) x destilované xxxx, xxx se xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 60 ^xX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x zlikvidují x xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xx dobu 8 xxxxx xxx xxxxxxx 21 ^oC (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ∼ 175). Xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx 30 % (x/x) xxxxxxxx SDS x xxxxxxxxxxx vodě v xxxxxxxxx poměru 1 x 5 (x/x) (xx. 1 ml xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx XXX). Xxxxxxx denzita (XX) xxxxxxx xx xxxx xxx cca 565 xx.

1.5.3.3.2 Výpočet obsahu xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x terčíku xx xxxxxxxx x xxxxxxx XX (xxxxxxx extinkční xxxxxxxxxx sulforhodaminu X xxx 565 xx xxxx 8,7 . 10⁴; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Obsah xxxxxxxxxxxxxx X se xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx kůže xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx hodnota. Průměrná xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx akceptovatelného xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx látek xxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx považují:

Kontrola	Látka	Rozmezí xxxxxx xxxxxxx (xx/xxxxxx)
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; 10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	&xxxx; 40 - 100
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; xxxxxxxxxxx xxxx	&xxxx; 15 – 35

1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx možné zvolit xxxxxx xxxx působení xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx (xxxx. 2 xxxxxx) xx xxxxxx xxxxxxxxx silně xxxxxxxxxxx xxxxx. Ve xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kůže xx 2 hodiny (2), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 24hodinovém xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x rozměry zkušební xxxxxxxxx a experimentálním xxxxxxxx. Xxxxxxx hodnota xxx leptavé účinky 5 kΩ xxxx xxxxxxxxx na základě xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx. Xxxxx xx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx by xxx xxxxx použít xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x prahovou hodnotu xxxxxxxxxxx xxxx referenčních xxxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx, jež byly xxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxx (3).

1.6 PRINCIP XXXXXXXX XXXXXX - XXXX X MODELEM XXXXXX XXXX

Xxxxxxxxx materiál xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx 4 hodin xx xxxxxxxxxxxx model xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx corneum. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pokles xxxxxxxxxx xxxxx stanovené například xxxxxx "XXX reduction xxxxx" (MTT = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 difenyl xxxxxxxxxxx xxxxxx) xxx prahovou xxxxxxx definovanou xxx xxxxx expoziční xxxx. Xxxxxxx testu vychází x xxxxxxxxxxx, xx xxxxx způsobující xxxxxxxxx xxxx xxxx xx, xxxxx dokáží proniknout xxxxx xxxxxxx corneum (xxxxxx xxxx erozí) x xxxx dostatečně xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx buněčných xxxxxxxx.

1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX XXXX

1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx

Xxxxxx lidské xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxx však xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx mít funkční xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx lze prokázat xxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xx xxxxx, že xxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx však xxxxxxxx skrze xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Model xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx dostačující x tomu, aby xx dalo dobře xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx například xxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xx. XX xxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx ležet v xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxx. Podobně x případě látky xxx pozitivní kontrolu (xx xxxxxxxx s xxxxxxx xxx negativní xxxxxxxx) musí xxxxxxx xxxxxxxxxx spadat do xxxxxxxx mezí. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx predikční model xxxxxxxx mezinárodnímu validačnímu xxxxxxxxx (2).

1.7.2 Xxxxx xxxxxxx

1.7.2.1 Nanesení testovaného xxxxxxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, nanese xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx 25 (μ/xx²). Xx-xx xxxxx, nanese xx xxx, aby xxxxxxxxx kůži, x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx s xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. Pokud xx xx xxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx roztírají xx xxxxxx. X metody xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xx je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx doby xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx kůže xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.7.2.2 Měření xxxxxxxxxx xxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxx jakákoliv validizovaná xxxxxxxxxxxxx metoda. Nejčastěji xx xxxxxxx xxxxxxx XXX, x xxxxx xxxx prokázáno že x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx přesné a xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky (2). Xxxxxx xxxx se xx dobu 3 xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 mg/ml xxx teplotě 20 - 28 ^xX. Xxxxxxxxx modrý xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) x koncentrace xxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxx XX při xxxxxx xxxxx 545 x 595 xx.

1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx model xxxx x přesné dodržení xxxx xxxxxxxx, promývacího xxxxxxx xxx. mají xx životnost xxxxx xxxxxxxx xxxx. Doporučuje xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x látek xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx studii XXXXX (3). Xx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx prokázáno, že xx xxxxxxx xxxxxx xx použití xxxxxx xxxxx xxxxx reprodukovatelná xxxxx mezinárodních xxxxxxxxx xxx x rámci xxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx dříve (2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, ve kterém xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odbornou xxxxxx.

2. XXXXX

1.8 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

1.8.1 Xxxx TER na xxxx potkana

Hodnoty odporu (x xΩ) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolu x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx uvádějí x xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx a x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.8.2 Xxxx s modelem xxxxxx kůže

Hodnoty OD x vypočtené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční látky xxxxxxx x tabelární xxxxx, a to xxxx pro všechny xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, průměrné xxxxxxx x x xxxx xxxxxxxx klasifikace.

1.9 VYHODNOCENÍ X INTERPRETACE XXXXXXXX

1.9.1 Xxxx XXX na xxxx xxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx TER xxx testovaný materiál xxxxx xxx 5 xΩ, je xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx-xx hodnota XXX xxxxx nebo xxxxx 5 kΩ x xxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx) xx neutrální xxxxxxxxxx xxxxx, pak xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx organických látek, xxx poskytují xxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxxx 5 xΩ, lze xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx obsah xxxxxxx x xxxxxxx vyšší xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx při souběžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x 36 % XXx, xx testovaná xxxxx skutečně xxxxxxxxx x tedy xx xxxxxxx účinky, xxxxxx xx-xx obsah xxxxxxx x xxxxxxx menší, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx.

1.9.2 Xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx

Xxxxxxx XX pro negativní xxxxxxxx představuje 100% xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxx XX xxx xxxxxxxxxx zkušební xxxxxx xx xxxxxxx procentuální xxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx xxxxxxxx. Hraniční xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxx odděluje xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, xx těch, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx odlišuje jednotlivé xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx být x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx předtím, než xx metoda validována, x xxxxxxxxx validační xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxx xxxxx:

- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti; pokud xx xxxxxxxxx referenční xxxxx, uvedou se xxxx xxxxx x xxx xx.

Xxxxxxxx pokusu

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxxx všech případných xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- tabulka hodnot xxxxxx (xxxx XXX) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk (xxxx x modelem xxxxxx xxxx) pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx, x xx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. opakované xxxxxxxxxxx x průměrné xxxxxxx;

- xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Xxxxxxx 1

Obrázek 2

Xxxxxx X.40. byla vložena xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx xx 22.6.2001

X.41. FOTOTOXICITA - XXXX XXXXXXXXXXXX 3T3 XXX XX VITRO

1. XXXXXX

1.1 ÚVOD

Fotoxicita xx xxxxxxxxxx xxxx toxická xxxxxx (xxxxxx), x xxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xx-xx xxxxxxx xxxx ozářena xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx x rámci xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dané xxxxxxxxx xxxxx, tedy ke xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx možné xxxxxxxxx xxxx nikoli.

Toxikologickým výsledkem xxxxx xx xxxxx xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx kombinovaným xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx vivo xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx v xxxx, x sloučeniny, xxx xxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx nanesení xx pokožku.

Test xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x validován v xxxxx xxxxxxxxxx projektu XX/XXXXXX x xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx validní alternativa xx xxxxx vůči xxxxxx xxxxxxxxxx testům xx xxxx. X xxxx 1996 doporučila xxxxxxxx xxxxxx OECD xxxxxxx následných in xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).

Výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro xxxx porovnávány x xxxxxxxx xxxxxx fototxicity/fotoiritace xx xxxx x xxxxxx x lidí x xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx test xx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Test není xxxxxxx x xxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx látky x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, x xxxx xxxx látek xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, reaguje při xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxxx. Test není xxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx umožňoval xxxxxxxxx xxxxxx fotoxicity.

Sekvenční xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxx xxxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxxxx: xxxxxxxxx ultrafialového (XX) či xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxx; měřená ve X/x² xxxx x XX/xx².

Xxxxx světla: xxxxxxxx (= xxxxxxxxx x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx xxxxxxxxxxx (VIS) xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, vyjádřené x xxxxxxx (= X x x) xx xxxxxxxx xxxxxxx, např. X/x² xxxx X/xx².

Xxxxx xxxxxxxx délek xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxx XXX (Commission International xx L'Eclairage) xx xxxxxxx označení XXX (315 - 400 xx), UVB (280 - 315 nm) x UVC (100 - 280 nm). Xxxxxxxxx se i xxxx vymezení: xx xxxxxxx xxxx xxxxx XXX a UVB xx často považuje 320 xx a XXX se xxxxx xxxx na XX-X1 x XX-X2 x xxxxxxx xxxxxx x 340 xx.

Xxxxxxxxxxxxxxx (viabilita) xxxxx: parametr, kterým xx měří celková xxxxxxxx xxxxxxx populace (xxxx. xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx lysozomů), xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx koreluje x xxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (viabilita) xxxxx: životaschopnost xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolami (xxxxxxxxxxxx), které prošly xxxxx procedurou testu (xxx + XX xxxx - XX), xxxxx xxx působení xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx, kterým se xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxx metodickém návodu xxx xxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx k xxxxxxxx fotoxického potenciálu xxxxxx xxxxxxx XXX x MPE.

PIF (photo xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): koeficient představující xxxxx dvou xxxxxx xxxxxxxx cytotoxických koncentrací (XX₅₀) testované xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.

XXX (xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx): nová xxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx křivek xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX ozáření.

Fototoxicita: xxxxxx xxxxxxx xxxxxx (odezva), xxxxx vzniká xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx kůže xxxxxx, xxxx reakce, xxxxx xx obdobně xxxxxxxx ozářením xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx: nižší xxxxxx xxxxx "xxxxxxxxxxxx", xxxxxxxx xx pouze xxxx fototoxických xxxxxx, x nimž dochází x xxxx poté, xx na xx xxxxxx (topicky xxxx xxxxxx přijatá) xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx vždy x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx nadměrném xxxxxxx).

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, která xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx a světla xxxxxxxxxxx, a kdy xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx dvoutýdenní xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxx projevila.

Fotogenotoxicita: genotoxická xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx dochází xxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XX/XXX xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxx. Xxxxx xx tumorogeneze xxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

1.3 XXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx studii, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xxxxxxxxxx použít xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx z xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx mezilaboratorním porovnávání xxxxxx testu (1) (3) (13).

1.4 PRVOTNÍ XXXXX

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), jejichž xxxxxxx společným xxxxx xx xx, že xxxxxx absorbovat xxxxxxxxx xxxxxxx x oblasti xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx zákona fotochemie (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxx xxxxx fotoreakce xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx kvant. Xxxxx by xx xxxxxxx, xxx xx xxxxx uvažovat x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx by se xxxx xxxxxxxx absorpční xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x UV/VIS oblasti (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXXX x. 101). Xxxxx xx xxxxxxx extinkční/absorpční xxxxxxxxxx xxxxx než 10 xxxxx x xxx^-1 x xx^-1, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x není třeba xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx testovat xxx testem xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx biologickým xxxxxx (xxx xxxxxxx).

1.5 XXXXXXX METODY

Byly xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx světla (xxxxxxxxx) chromoforem xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7), xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX in xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x přítomnosti a xxxxxxxxxxxxx necytotoxické dávky XXX/XXX xxxxxx. Cytotoxicita xx xxx xxxxx xxxxx vyjadřuje xxxx xxxxxxxxxxxx závislý xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx (neutral xxx, NR) (9), 24 hodin xx xxxxxxxx testované xxxxx x ozařování.

Buňky Xxxx/x 3X3 se xxxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx tak, xxx xx vytvořila kultura xxxxx v xxxxx xxxxxx (monolayer). Pro xxxxxx testovanou látku xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx po 96 xxxxxxx x látkou x osmi xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx dobu 1 xxxxxx. Jedna x xxxx xxxxxxxx xx pak xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x dávce 5 X/xx² XXX (+XX xxxxxxxxxx), xxxxx destička xx uchovává x xxxxx (-UV xxxxxxxxxx). X xxxx xxxxxxxxxx xx xxx médium xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xx dalších 24 xxxxxxxx xxxxxxxxx xx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (neutral xxx uptake, XXX) xx dobu 3 xxxxx xxxxxxx životaschopnost xxxxx. Pro každou x osmi xxxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, vyjádřená xxxx xxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v přítomnosti (+XX) x v xxxxxxxxxxxxx (-UV) xxxxxx, xxxxxxx na xxxxxx XX₅₀, xx. ři xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx o 50 % v porovnání x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.

1.6 XXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxxxxx xxxxx vůči záření XXX, xxxxxxxxxx xxxxx: x buněk xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx citlivosti xxxx xxxxxx UVA. Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx testu xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx vitro, příští xxx se xxxxxxx xxxxxx XXX v xxxxx 1 - 9 J/cm² x xxxxx xxx se xxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Buňky xxxxxxx kritéria xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx² xxxx xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxx nejvyšší xxxxx XXX záření 9 X/xx² xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx. Xxxx kontrola xx xxxxxxx xxxxxx xx každé xxxxxx xxxxxx buněk.

Citlivost xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX, xxxxx xxxx: xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx x Xxxxxxx vyváženém xxxxxx xxxxxxx [Xxxx´x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, XXXX] s 1 % roztokem xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx ethanolu (XxXX) xxxx xxx xxxx vykazují x xxxxxxxxxxx (+XXX) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% v xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx experimentu x xxxxx (-UVA).

Životaschopnost xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (XX_{540 NRU}) xxxxxx v XX xxxxxxxx negativních xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx 1 x 10⁴ xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx dvou xxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx zdvojnásobení. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx průměrná xxxxxxx XX_{540 NRU} x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx rovna 0,2.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx xxxxx provést xxxxxxxx xxxx se známou xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx studii XX/XXXXXX xxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (XXX); xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxx XXX testovaný dle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: XXX xxxxxxx (+XXX): EC₅₀ = 0,1 - 2,0 μx/xx, CPZ xxxxxxxxx (-XXX): XX₅₀ = 7,0 - 90,0 μg/ml. Fotoiritační xxxxxx (XXX), xxx. xxxxx xxxxxxx XX₅₀, xx xxx minimálně 6.

Xxxxx XXX xx xxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xxxx xxxxxx x jiné xxxxx xxxxxxxxxxx látky, pokud xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx testované (xxxxxxxxx) xxxxx. X xxxxxxx případě xx xxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx dat adekvátně xxxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX₅₀ a XXX xxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxxxx).

1.7 XXXXX METODY

1.7.1 Xxxxxxxx

1.7.1.1 Xxxxx

Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx fibroblastů Balb/c 3X3 klon 31, x xx xxx x XXXX xxxx x ECACC; ta xx proto xxxxxxxxxx. Xxxxx stejného xxxxxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx jejich xxxxxxxxxxxx xxxxxx; xx xxxx třeba xxxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx.

X xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx kontaminovány xxxxxxxxxxxx, x xxx xx použít xxx x xxxxxxx, xx xx xxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxx buněk xxxx UVA xxxxxx xxxx s počtem xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx buňky Xxxx/x 3T3 x xxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx, pokud xxxxx xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx xxxxx Balb/c 3X3 xxxx XXX xxxxxx je třeba xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, a xx xxxxxxxx kontroly xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx návodu.

1.7.1.2 Xxxxx a kultivační xxxxxxxx

Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. V případě xxxxx Balb/c 3T3 xx xxxxx x XXXX xxxxxxxxx 10 % xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 mM xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 ^xX / 7,5 % CO₂. Xx nezbytné, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx cyklus v xxxxxxxxx historickém xxxxxxx xxx xxxx buňky xxxx. buněčnou xxxxx.

1.7.1.3 Xxxxxxxx kultur

Buňky xx xxxxxxxxxx zásobních kultur xx nasadí x xxxxxxxxx hustotě x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxx.

Xxx xxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx v kultivačním xxxxx v takové xxxxxxx, aby xx xxxxx testu (tj. xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxxx) xxxxxxx xx xxxxxxxxxx (xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx). X xxxxxxx xxxxx Balb/c 3X3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x 96 xxxxxxx xx doporučuje xxxxxxx 1 x 10⁴ xxxxx x xxxxx xxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxx destičky x 96 xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxx celým xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx z xxxxxxxx ozařována (+UVA/VIS) x xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX/XXX).

1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx vitro pro xxxxxxxxx genotoxického xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx systému, xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, xxx xx x xxxx, aby působila xxxx fotoxin in xxxx xxxx in xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zapotřebí. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxx xx xxxxx, ani xx vědecky xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.7.1.5 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xxxx být před xxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxx stabilitě prokazují, xx xx xx xxxxxxxxx. Xxxxx je xxxxxxxxxxxxx, že xx xxxxx k xxxxxxxxxxxxx, xxxx se příprava xxxxxxxx pod xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx solném xxxxxxx, xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (XXXX) xxxx xx fyziologickém roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxx (phosphate xxxxxxxx xxxxxx, PBS), xxxxx - aby xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx ozařování - xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx indikátory xX, xxxxxxxxxx světlo.

Pokud xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, rozpustí xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x koncentraci stonásobně xxxxx, xxx je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxx se xxxxx x xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx používá xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, tj. ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx testované xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxxxxx xx doporučuje xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxx (XxXX). Vhodná mohou xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx x nízkou xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx zvážit xxxxxx specifické xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx fototoxického xxxxxx xxxx vychytávání xxxxxxxx.

Xxx se napomohlo xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx, popřípadě xxxxx xx 37 ^xX.

1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX světlem / příprava

Světelný zdroj: xxxxx správného xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx je xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x XXX a xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx xxxxxx XXX xx v xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx vysoce xxxxxxxxxxx, přičemž xxxx xxxxxxxxxxxx xx při xxxxxxxx xx 313 xx x 280 xx xxxxxxx tisícinásobně. Xxxx kritéria xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx vlnové xxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxx absorbuje, x xxx xxxx světelná xxxxx (dosažitelná za xxxxxxxxxx xxxx) xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx látek. Xxxx xxxxxxx xxx použité xxxxxx xxxxx x xxxxx nepatřičně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx sem x xxxxxxxxxx tepla (infračervená xxxxxx).

Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx simulátory, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Jako xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx výbojky - xx xxxx xx xxxxxx, že vyzařují xxxx tepla x xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx však xxxxxxx xxxx. Jelikož xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXX, je třeba xxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx zeslabilo.

Pro test xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XXX:XXX ∼ 2 : 1). Příklad xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxx xxxxxxxxxx použitého xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU in xxxxx je x xxxxx (3).

Xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxx (iradiance) xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx druhý, referenční XX-xxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Ideální xx, xxxx xx x xxxxxxx intervalech xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zdroje x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx xxxxxx spektroradiometru; taková xxxxxxxxxxxxx xxxxx vyžaduje xxxxxxxxxxxxxx obsluhu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx zjištěno, xx xxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx² xx xxx xxxxx Balb/c 3X3 xxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx excitovala i xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xx této xxxxx xxxxxxx xxxxx 50 xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 1,666 mW/cm². Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxx se xxxxx xxxxxx XXX xxxxxxx xxx, xxx buňky xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Doba xxxxxxxx expozice xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx:

&xxxx;	&xxxx; xxxxx xxxxxx (X/xx²) x 100	&xxxx;
&xxxx; x (xxx) =	________________________	(1 X = 1 X s)
	záření (xX/xx²) x 60	&xxxx;

1.7.2 Podmínky xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx byly xxxxxxxxxx xxx koncentracích xxxxxxx, xxx xxxxxxx koncentracích xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (13). Xxxxxxx pH xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).

Xxxxxx koncentrací testované xxxxx xxx použití xxxxxx (+XXX) x xxx xxx (-UVA) xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxx koncentrační řady xx zvolí xxx, xxx xxxxxx závislosti xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx podloženy xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (s konstantním xxxxxxxx ředění).

1.7.3 Xxxxx xxxxxxx

1.7.3.1 Xxxxx xxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxx 1 x 10⁵ buněk/ml x xxxxxxxxxxx médiu. Xx periferních xxxxx 96xxxxxxx mikrotitrační destičky xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx 100 μx xxxxxxxxx xxxxx (= xxxxx xxxxx), xx xxxxxxxxx xxxxx xx dávkuje xx 100 μx xxxxxxx suspenze x xxxxxxx 1 x 10⁵ xxxxx/xx (= 1 x 10⁴ xxxxx xx xxxxx). Xxx každou testovanou xxxxx xx připraví xxx xxxxxxxx - xxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxx (-XXX), xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).

Xxxxx xx inkubují xx dobu 24 xxxxx (7,5 % XX₂, 37 ^oC), xxx xx vytvořil xxxxxxxxxxxxxxx monolayer. Tato xxxxxxxxx doba xxxxxxxx xxxxxxxxxx x adherenci xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.

1.7.3.2 Druhý xxx

Xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx médium x xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx objemem 150 μx EBSS/PBS xx každou jamku. Xxxxx xx 100 μx EBSS/PBS xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xx přidává v xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx x testovanou látkou xx xxxxxxxx x xxxxx po dobu 60 minut (7,5 % CO₂, 37 ^xX).

Xxxx testu s XXX (+XXX) xx xxxxxxx xxx, xx xx buňky xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx dobu 50 xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx xxxxxxx XXX x intenzitě 1,7 xX/xx² (= dávka 5 / xx²). Xxx nedocházelo xx xxxxxxxxxx xxxx pod xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-UVA) xx xx xxxx 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx UVA) xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxx a xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Xxxx xx xxxxxx kultivačním xxxxxx x přes xxx (18 - 22 xxxxx) xx inkubují (7,5 % XX₂, 37 ^oC).

1.7.3.3 Xxxxx xxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxxx pod xxxxxxxxxxx x xxxxxxx kontrastem. xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, ale xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx nepoužijí.

Test příjmu xxxxxxxxx xxxxxxx (XX)

Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Promývací xxxxxx xx odstraní xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μx xxxxx x NR a xxxxxxxx xx xxx 37 ^xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 7,5 % XX₂ xx xxxx 3 xxxxx.

Xx xxxxxxxx xx xxxxxx s XX xxxxxxxx x buňky xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX, xxxx xx pak xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx (xx také xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x obrácené poloze).

Přidá xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx na xxxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxxx směs xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).

Xxxxxxxxxxxxx destičky xx xx xxxx 10 xxxxx rychle třepou xx xxxxxxxx, xxxxx xx NR x xxxxx nevyextrahuje x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xx spektrofometru se xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX xxx 540 xx za xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx formátu (xxxx. XXXXX) pro xxxxx xxxxxxx.

2. XXXXX

1.8 XXXXXXX X XXXXXXXX XXXXX

Xxxxx xxxx umožňovat xxxxxxxxxxx analýzu vztahu xxxxxxxxxxx-xxxxxx při aplikaci XXX/XXX xxxxxx x xxx xx. Xx-xx xxxxxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxxx xxxxxx a postup xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx údaje xxxx xxxxxxxx křivkou. Xxxxxxx testovaná xxxxx xxxx xxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx x xxxxxxxxxxx xx xxx (-XXX) xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx (+XXX) vysoce cytotoxická, xxxx xxxxx x xxxx, xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx experimentu xxxxx xxxxx řádově xxxxx, aby byl xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx. Xxxxx xxxx cytotoxicita zjištěna x žádné x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxx xxx -XXX, xxx xxx +XXX), xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxxxxx koncentrace.

Jsou-li xxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx čáry xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx xxxxx test xxx xxxxxxx opakovat.

Považuje-li xx xxxxxxxxx testu xx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx pozměnit xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Klíčovou proměnnou x tomto xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxx xxxx opakování xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx). Xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx, xxx xxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx vliv xxxxxxxx doby.

1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx k 50 % xxxxxxxx buněčného xxxxxx XX (XX₅₀). Xx xxx učinit xxx, xx xx xx data koncentrace - xxxxxx použije xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx Xxxxxxx funkce nebo xxxxxxxxxx xxxxxxx) xxxx xx xxxxxxx jiná xxxxxx metoda xxxxxxxxx (14). Xxx xx xxxxxxx XX₅₀ použije xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx EC₅₀ xx také xxxxx xxxxxx xxxxxxxx metody. X xxxxx případě xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx papír (xxx x: xxx, xxx x: xxxxxx), protože xx xxxx transformaci xxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx xxxxxx xxxxx lineární.

1.10 VYHODNOCENÍ XXXXXXXX (XXXXXXXXX XXXXXX)

1.10.1 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 1: xxxxxxxxxxxx faktor (XXX)

Xxxxx xx získají xxxxx křivky xxxxxxxxxxx - xxxxxx jak xx xxxxxxxxxxx (+XXX), xxx xx nepřítomnosti (-XXX) xxxxxx, se xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxx podle vzorce

	EC₅₀ (-XX)
&xxxx; (x) XXX =	____________
	EC₅₀ (+XX)

XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx PIF ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX, kdežto při -XXX je xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx XXX xxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx má xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx případě xx xx vypočítat xxx. "&xx; PIF", xxxx xx xxxx cytotoxicity (-XX) provede xx xx maximální xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (C_max) a xxxx hodnota se xxxxxx do xxxxxx:

&xxxx;	&xxxx; X_xxx (-XX)
&xxxx; (x) &xx; XXX =	&xxxx; ___________
&xxxx;	&xxxx; XX₅₀ (+XX)

Xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx "&xx; XXX", pak xxxxx xxxxxxx &xx; 1 xxxxxxxxxx fototoxický xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx nedá xxxxxxxxx ani EC₅₀ (-XX), xxx XX₅₀ (+XX), protože xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx nejvyšší xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx toho, xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx potenciál. X xxxxxxx případě se xxxxxxx formální "PIF = *1", xxxx xx charakterizuje xxxxxxxx

&xxxx;	&xxxx; X_xxx (-XX)
&xxxx; (x) PIF = *1 =	&xxxx; ___________
&xxxx;	&xxxx; X_xxx (+XX)

Xxxxx xx xx xxxxxx xxxxx hodnota "XXX = *1", xxxxxxxxxx xx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

X xxxxxxxxx (b) x (x) je xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x úvahu xxxxxxxxxxx, jichž xx xxx xxxxx xxxxxxx.

1.10.2 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 2: střední xxxxxxxxx (XXX)

Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, vypracovaného xx použití xxx x xxxxxxxxx studie XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx x látek UV xxxxxx (13). V xxxxx modelu xxxx xxxxxxxxx omezení modelu XXX x těch xxxxxxxxx, xxx nelze xxxxxx xxxxxxx XX₅₀. X xxxxx modelu xx xxxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxxx" (XXX) xxxxxxxx xx porovnání xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx. Xxx xxxxxxxx modelu XXX xxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, který xxx xxxxxxx xxxxxx.

1.11 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx výsledek xxxxx (XXX ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxx xxxxx xx fototoxický xxxxxxxxx. Xxxxx xx k xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx nižších xxx 10 μg/ml, xx xxxxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx in xxxx. Xxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci (100 (x/xx), xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx fototoxické xxxxxxxxxx xxxx látky nejspíše xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx látky x xxxx, xxxx údaje x testování xxxx xxxxx x jiném xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu, xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx (XXX &xx; 5 xxxx XXX < 0,1) xxxxxxx, že xxxxxxxxx látka není xxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx buňky x xxxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxxxx, xxx by xx látka dala xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx žádný fototoxický xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxx xx xx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxxxxxx. V xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislosti xxxxxxx xxxxxx (EC₅₀ + UV x XX₅₀ - XX), xx xxxxxxxxxxxx dat xxxxxx. Xxxxxxx tomu xxxxx nebyla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (+XX xxx -XX) x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se nedalo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xx xx xxxxx xxxxxx x xxxx xx xx xxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx kůže xx vitro nebo xxxxxx kůže xx xxxx nebo in xxxx).

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxx xxxxx:

- xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx XXX, xx-xx xxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxx x čistota,

- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jež xxxx k provedení xxxxx důležité,

- stabilita x fotostabilita, jsou-li xxxxx.

Xxxxxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx volby xxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- rozpustnost xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx rozpouštědle,

- xxxxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla x xxxxxxxxx médiu (EBSS xxxx XXX).

Xxxxx:

- xxx x xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxx pasáže, je-li xxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx xxxx záření XXX xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jež xx x xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X NRU xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (a) - xxxxxxxx xxxx ovlivněním x xx něm:

- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx média,

- podmínky xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX₂, xxxxxxx, xxxxxxx),

- xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx před xx a xx xx).

Xxxxxxxx xxxxxx (x) - ovlivnění xxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, které xx použijí v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx x bez xxx,

- v xxxxxxx xxxxxxx rozpustnosti xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zdůvodnění xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace,

- typ x xxxxxxx působícího xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx),

- xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx pokusu (x) - xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx daného xxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx),

- charakteristika xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zdroje xx xxxxxxxxxxx systému,

- xxxxxxxxx UVA (v x X/xx²) xxx xxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx XX/XXX xxxxxx,

- xxxxx xxxxxx XXX (xxxxxxxxx x xxx) x J/cm²,

- teplota xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx uchovávaných v xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (d) - xxxx XXX:

- xxxxxxx xxxxx x XX,

- xxxx inkubace x XX,

- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX², xxxxxxx, xxxxxxx),

- podmínky xxxxxxxx NR (xxxxxxxxx xxxxxxx, doba extrakce),

- xxxxxx délka, xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx optická xxxxxxx XX,

- druhová xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx-xx xxxxxxx,

- složení srovnávacího xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), xxxxx xxx xxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxxxxx x procentech xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxx koncentrace - xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx νs xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) získané xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +UVA x -UVA,

- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx: podle xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX₅₀ (+XXX) x XX₅₀ (-XXX),

- xxxxxxxxx obou xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx získaných xx xxxxxxx ozařování XX/XXX xxxxxxx - xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (XXX),

- klasifikace xxxxxxxxxxxxx potenciálu,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx testu (a) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxxxxxx životaschopnost (xxxxxxx xxxxxxx extraktu XX) ozářených a xxxxxxxxxxx xxxxx,

- historické xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (b) - xxxxxxxx pozitivní kontrola:

- xxxxxxx XX₅₀ (+XXX), XX₅₀ (-XXX) x XXX xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxx EC₅₀ (+XXX), XX₅₀ (-UVA) x PIF, průměry x směrodatné odchylky.

Diskuse xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxx B.41. byla xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001

Xxxxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Xx. nabyl xxxxxxxxx xxxx 1.1.1999.

Xx xxxxx tohoto xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x doplnění xxxxxxxxxxx xxxxxxx předpisem x.:

208/2001 Sb., kterým xx mění xxxxxxxx XX č. 251/98 Xx., xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx - novela bude xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx

x xxxxxxxxx od 22.6.2001

Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Sb. xxx xxxxxx právním předpisem č. 443/2004 Sb. s xxxxxxxxx xx 1.8.2004.

Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxx aktualizováno, xxxxx se jich xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx právního xxxxxxxx.

1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) xx n) xxxxxx č. 157/1998 Xx., o xxxxxxxxxx xxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxx a o xxxxx některých xxxxxxx xxxxxx.

2) Zákon č. 246/1992 Sb., na xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx znění zákonů x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Xx. x č. 30/1998 Xx.

3) Směrnice Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxx zkoušení chemikálií. Xxxxx 4 - xxxx xx zdraví (XXXX Guidelines xxx Xxxxxxx xx Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).

Plné znění - 251/1998 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Plné znění - 251/1998 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu. Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.