Právní předpis byl sestaven k datu 31.07.2004.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
XXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
ze xxx 16. xxxxx 1998,
xxxxxx xx stanoví xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx
Ministerstvo xxxxxxxxxxxxx stanoví podle §4 odst. 1 xxxx. c) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x chemických xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x o xxxxx xxxxxxxxx dalších xxxxxx:
§1
Xxxx xxxxxxxx stanoví xxxxxx xxx xxxxxxxxxx nebezpečných xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxických, toxických, xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, karcinogenních, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxx xxx "xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx").1)
§2
(1) Xxxxxxxx chemických xxxxx x přípravků xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x příloze této xxxxxxxx.
(2) Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx stejně citlivé, xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx x odstavci 1, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx2) x xxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx (XXXX).3)
§3
Tato xxxxxxxx nabývá účinnosti xxxx 1. ledna 1999.
Xxxxxxx:
XXXx. David, XXx. x. r.
Xxxxxxx k xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXXXX POJMY
1.1 XXXXXX XXXXXXXX
xxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx 14 xxx) xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 XXXXXX TOXICITA
je xxxxxxxxx xxxxxx popisující xxxxx xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xx xxx xxxxxx, že xx xxxxxxx xxxxxxxx dávky xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx těžkých toxických xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x úmrtí.
1.3 XXXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxxxxxx (gramy nebo xxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete (xxxx. xxxxxxxxx na kilogram xxxxxxx xxxxxxxxx), xxxx xxxx konstantní xxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx na xxxxxx dílů xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx).
1.4 XXXXXXXXXXXXXX XXXXX
xx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, kterou xx xxxxx podat, xxxx xx xx způsobilo xxxxxxx (xxxxxx humánního xxxxxxxx) související x xxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXXXXX
xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx dávku, frekvenci x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
1.6 XX50 (STŘEDNÍ XXXXXX DÁVKA)
xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivá xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx způsobí za xxxxxxxxxxx xxxx xxxx 50 % xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx LD50 xx xxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxxxxx xxxxxxxxx pokusného xxxxxxx (xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XX50 (XXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX)
xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxx u 50 % pokusných xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx XX50 xx xxxxx jako xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (mg.l-1).
1.8 XXXXX
xx zkratka xxx "xx observed xxxxxxx xxxxxx xxxxx" (hladinu xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) x xx xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx koncentrace, xxx xxxxx xxxxxxxxx x zjistitelným xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX TOXICITA
xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx zvířat x důsledku opakovaného xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx chemické látce, xx dobu xxxxxxxxxxxxx xxxxxx úsek xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx příslušného xxxxxxxxxxx druhu.
1.10 XXXXXXXX TOLEROVANÁ XXXXX (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX XXXX)
xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx.
1.11 PODRÁŽDĚNÍ XXXX
je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx na xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.12 XXXXXXXXXX XXX
xx xxxxxxxx změn xx xxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxx xxx.
1.13 XXXXXXXXXXXXX KŮŽE (XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX)
je xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx xxxxx.
1.14 XXXXXXXXX XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx tkáňového xxxxxxxxx xxxx xxx působení xxxxxxxxx xxxxx po xxxx od 3 xxxxx do 4 xxxxx.
1.15 XXXXXXXXXXXXXX
xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.16 ABSORPCE
označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) aplikovaná xxxxx xxxxxxxx do xxxx.
1.17 XXXXXXX
xxxxxxxx proces(y), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x těla.
1.18 XXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), kterým(i) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x těle.
1.19 XXXXXXXXXXXX
označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx aplikované látky xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXXX - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXX TOXICITA
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1 - X.5), xx kterých xxxx xxx xx jediné xxxxxxxx xxxxxx předběžný xxxxx toxicity.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx zvolit xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx testu až xx kompletní xxxxxxxxx XX50. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx není xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx měla být xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx utrpení xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxx X.1 xxx) a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx akutní xxxxxxxx (metoda X.1 xxxx). Xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxx druhu xxxxxxx xxxxxx vyvozené x xxxxx studie. V xxxxx xxxxxxx může xxx použita xxxxxxxxxx xxxxxxxxx metoda nebo xxxx xxx použito xxxxxxx xxxxx zvířat.
Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (metody X.7, X.8 x X.9) xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat xxx, xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Tyto testy xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx dlouhodobých xxxxxx xx vyžaduje zkoumání xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.26 - B.30 x X.33).
3. XXXXXXXXXX - GENOTOXICITA
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx přenosných xxxx x množství xxxx struktuře xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx ("xxxxxx") xxxxx postihnout xxxxxx gen nebo xxxxxxxx xxxx, xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Mutagenní aktivita xxxxx se xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx (xxxxxx) xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) anebo xx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx B.10).
Xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx, xxxx. micronucleus test (xxxxxx X.12) xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx dřeně (metoda X.11). Xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx in xxxxx xxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.
Pro látky xxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx nebo pro xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxx využít k xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testů; xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; zahájení xxxx xxxxxxxxx studií xx xxxx.
Xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx X.15 xx X.25 xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx x in vitro, xxx rozšiřují rozsah xxxxxxxxxxxx účinků. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx účincích x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx baktérie xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Obecně xxxxx, xx další xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx poskytly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx informace o xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxx xxxx případ, xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, výsledků xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx látky, výsledků xxxxxxx testů toxicity x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx látky.
Pro xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx u xxxxx xxxx x dispozici xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx savčím xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (bodovými) xxxxxxxx, xxxx. specifický xxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx x xxxx příloze), nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. xxxx xx přenosné xxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxxx B.25). Xxxxxx xxxxx lze xxxxxx xxx xxxxxxxxxx možného xxxxxxxxxxx xxxxxx látky xxx člověka. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx těchto xxxxx x xxxxx xxxxxxx počtu potřebných xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx locus test, xx třeba xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx jen xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx genotoxicity xx postupuje xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx po projednání x Xxxxxxx referenční xxxxxxxxxx xxxxxxxxx toxikologie.
4. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx karcinogeny, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx působení.
Předběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx čerpají xx xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxx poskytují xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a testy xxxxxxxxxxxx xxxx chronické xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aplikaci, xxxxxx X.7, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx takových xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx také významné. Xxxx studie a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx chemické xxxxx x karcinogenním xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx aspektu xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (metoda X.32) xxxx xxxxx x kombinované xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (metoda X.33).
K xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx buněk xxxxx, xxxxx určují xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx změny a xxxxx chování xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx předpokládá souvislost x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx - xx vivo (xxxxxx X.21). Xxxxxxx xx xxxxxxxx různých xxxxxxxxx typů a xxxxxxxx xxx transformaci.
5. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo schopností xxxxx a samic (xxxx xx plodnost) xxxx xxxxx nedědičných xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx (xxxxxxxx toxicita) xxxxxxxxxx také teratogenitu x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx (metoda X.31) xxx xxxxxx xxxxxxxx xx teratogenitu xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx s xxxxxxx podáváním. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx expozice xxxxxxx. V takových xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxxxxx vhodně xxxxxxx.
Pokud xx xxxxxxxxx třígenerační xxxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx X.35) xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
6. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx způsoby, xxxx. xxxxx funkčních xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx vzejít x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx xxxxxxxxx aplikaci (xxxxxx X.7) zahrnuje xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinku. Xxxxxx xx měla xxxxxx odhalit xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx, hloubkové xxxxxxxx xxxxxx aspektu. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx specifické xxxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxx xxx xxxxxxxx x jiných xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxx sloučeniny xxxxxxx xxxxxxxxx pozdní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X.37 a X.38 xx jednorázovém xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
7. XXXXXXXXXXXXX
Imunotoxicita xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, například xxxxx xxxxxxxxxxxx anebo podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx buď xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx opakované xxxxxxxx (xxxxxx X.7), zahrnuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinků. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x imunotoxickým xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8. TOXIKOKINETIKA
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx a vyhodnocení xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx specifické xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Nepředpokládá xx, xx bude x xxxxxx xxxxxxx zapotřebí xxxxxxxx xxxxxxx parametry. Xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bude xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (studie xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, metabolismu a xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx změny v xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx studie x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.36).
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx také xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx absorpce xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xx tkání. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx x toxikokinetických xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x toxikokinetických xxxxxx.
9. XXXXXXXXXXXXXXX TESTOVANÉ XXXXX
Xxxxxxx testované xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nečistot, x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx studie.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxxx x xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxx xxxxx xxxxx větších nečistot) x xxxxxxxxxx xxxxx x biologickém xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx studie.
Všechny xxxxxxxxx týkající se xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x chování xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx zprávě x xxxxx.
10. XXXX X XXXXXXX
Pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxx kontrola xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx kterém xxxx zvířata xxxxxxx, x xxxxxxx xxxx x zvířata podstatnou xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX CHOVU
Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhům. Xxx xxxxxxx, myši x xxxxxxx je xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 22 xX ± 3 xX xxx relativní xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxx 20 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu 30 - 70 %.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx tyto xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx o xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba sledovat xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx x uvést je x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx pokusu.
Xxxxxxxxx má xxx xxxxx xx střídáním xxxxxx a xxx xx dvanácti xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Pokud xxxxxx nevyžaduje xxxx xxxxxx, xxxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxx xxxxxxxxx jedinců jednoho xxxxxxx, xx xxxx xxx 5 zvířat x xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx součástí xxxxxx x pokusech na xxxxxxxxx jsou údaje x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxx xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx, tak xxxxx následující doby xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Podávají-li se xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx, xxxx xx výživová xxxxxxx xxxxxx vzájemným xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx složky xxxxxxx. Xxxxxxx takové xxxxxx xx xxxxx xxxx x úvahu xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx konvenční laboratorní xxxxx x neomezeným xxxxxxxxx x pitné xxxx. Xxxxx je xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x potravě, je xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx.
Příměsi x potravě, xxxxx xxxx prokazatelně vliv xx toxicitu, nesmějí xxx přítomny x xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
11. XXXXXXX XXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx metod xxxx xxx věnována xxxxxxxx xxxxxxxxx ochraně xxxxxx.
Xxxxxxx počtu x xxxxxxx bolesti x xxxxxx zvířat xxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (X.1.xxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (B.1.tris). Xxxxxx s xxxxxx xxxxxx nevyužívá smrti xxxx xxxxxxxxxxxx kritéria x xxxxxxxx xxxxx xxxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx o 70 % zvířat xxxx xxx metoda B.1.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx podávat x xxxxxxxx dávkách a xxxxxxx způsobem, x xxxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx svých leptavých xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
Xxxxxxx xxxxxxxxx testů, xxxxx v testech xxxxxx toxicity (xxxxxx X.1, X.2 x X.3), xxx xxxx x xx vivo xxxxxxx mutagenity (xxxxxx X.11 x B.12), xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx zbytečně xxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx možné xxxx xxxxxxxxx nebo xxx xxxxxx na xxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx vědecké zdůvodnění xxxx xxx xxxxxxxx xx fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxxxxx dobře xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxx, byla-li x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx kožní xxxxxxxx x xxxxxx používanou x limitním testu (xxxxxx B.3) x xxxxxx-xx pozorováno žádné xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx kožní xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4) xxxx xxx xxxxxxxx; xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4), xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx.
Xx nutno xxxxxxxx xxxxxxx x ověřovat xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx stejnou xxxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx utrpení xxxx xx xxxxx xxxxxxx bez používání xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxx použití pro xxxxxxxxxxxxxxxx rizika, následnou xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x úvahu xxxxx xxx, xxx xx xx xxxxx.
12. XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX
Xxx xxxxxxxxx x interpretaci pokusů xx xxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx je xxxxx xxx x xxxxxxx xxxx; doklady o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx, xxxxx jsou x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x stávajících xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx zjištěných x kvantifikovaných těmito xxxxxxxx.
Xxxx výsledky xxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx X - Všeobecný xxxx xxx vložen xxxxxxx xxxxxxxxx č. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx od 22.6.2001
B.1. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Testovaná xxxxx xx podává v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx skupině xxxxx úroveň dávky. Xxxxxxx dávky je xxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxxx orientačního xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx používá xxxxxxxxx xxx pokusech xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx látky se xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, x xxxxxxx xx známo, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx chovu a xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých experimentálních xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx nebo suspenze xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx vehikulu. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx použití xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx volbou xx roztok x xxxxxxxxxx oleji, teprve xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx suspenze. X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx známy nebo xxxxxx před xxxxxx xxxx během xxxx xxxxxx relevantní toxikologické xxxxxxxxxx. X hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx překročit 10 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti; xxxxxxxx xxxx vodné xxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx by xx měla xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx úpravou xxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx hladinách xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ve vehikulu xxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx dráždivé xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Na xxxxxxx xxxxx xx x obou xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxx xx x xxxxxxxxx informace, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Používají-li xx x xxxxxxxx xxxxxxx toxicity zvířata xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx hlodavci, mělo xx xx zvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pečlivě zvolit x je třeba xxxxxxxx, xxx nebyla xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dávky. X xxxxxxxx testech je xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx hladin xxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx xxxxxx odstupňovány tak, xxx xxx x xxxxxxxxxxx skupin xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx stačit xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx, x pokud xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx LD50 x přijatelnou xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxxx hlodavců lze xxxxxxx limitní xxxx xxxxxx dávkou xxxxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx a 5 xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxx xxxxx xxxxxxx uhynutí, xx třeba uvážit xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxx nejméně 14 xxx. Xxxxx xx xxxx stanovit rigorózně. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx obrazu xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje xxxxxx a xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx je možno xxxxx potřeby xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxx objeví x xxxxxx, a doba xx uhynutí, xxxxxxx xxx, kde je xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx potrava xxxxxxx xxxxx před xxxxxx. X xxxxxx x vyšší xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx hladovění; přístup x pitné xxxx xxxx xxxxxx. X xxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx orálně x jedné xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx najednou, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx menších xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Po xxxxxx xxxxx je třeba xxxxxxx přístup k xxxxxxx ještě 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - podle xxxxx xxxxxx období - xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx provádění x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx zvíře xx vedou xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx místní xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx během xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx pozorování xx xxxxxxxxx denně x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx studii, xxxx. xxxxx xxxx zmrazení xxxxxxxxx zvířat, a xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx. Pozorování xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce autonomní x centrální nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x chování. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx, křečovým xxxxx, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, i xx, xxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Je-li to xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Hodnocení xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, podá xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx zjistit, xxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx nejsou xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx zvířat. Pokud xx k dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pohlaví xxxx xxxxxxx citlivější, xxxxxxxxx na zvířatech xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí být xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný počet xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx s xxxxxx xxxxxxx otravy, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x době xxxxxxx. Xxxxx hmotnosti xx xxxxx stanovit x xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx zvířat xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx podanou xxxxxx, xx zaznamenávají xxxx xxxxxxx vyvolané xxxxx xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx uznávanou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxx xx melo zahrnovat xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx testované látce x výskytem x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality a xxxxxxxxx toxických xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxxx údaje o xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx uhynulých xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx otravy, xxxxx exponovaných zvířat),
- doba xxxxxxx xx podání xxxxxxxxx xxxxx, důvody x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířat - xxxxxxx jiná pozorování,
- hodnota XX50 xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx úplný xxxxx, x xx xxx 14xxxxx pozorování (x xxxxxxxx metody xxxxxxx),
- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50, xxxxx je xxx xxxxxxxxx,
- křivky xxxxxxxxxx mortality xx xxxxx a xxxx xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx druhém xxxxxxx,
- rozbor xxxxxxxx (xxxxxxxx pozornost je xxxxx xxxxxxx účinku, xxxxx by xxxxx xxx xxxxxxx utracení xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx hodnotu XX50),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.1. xxx XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX OS) - XXXXXX FIXNÍ XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx účincích, které xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx testované xxxxx.
Xxxxxx s xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx aplikaci xxxxxx x xxxxxx téhož xxxxxxx, vždy jedno xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x vztahu xxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx minimální xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx x této xxxxx xxxxx nepoužije xxx xxx pěti xxxxxx.
V hlavní xxxxxx xx xxxxx xxxxxx orálně xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x pěti samic x xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxx z předběžné xxxxxxxxxx xxxxxx, a xx jako dávka, xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyvolá "xxxxxxx xxxxxxxx" (viz xxxx X - Xxxxxxxxx úvod xxx 1.2), xxx xx xxxxxxx.
Xx podání xx pozorují účinky. Xxxxxxxx vybraná výchozí xxxxxx dávky vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxxx, není xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx úrovni xxxxx xxxx pozorována xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx úrovni xxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxx nebo když xxxxxxx toxická reakce xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se znova xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx postup umožňuje xxxxxxx "xxxxxxxxxxxxxx dávku" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), xx. xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx dávky, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, aniž xx xxxxx x xxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx).
Zvířata xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx stresu x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx způsobem, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx dráždivých xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
1.2.1.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx tomu.
Xx třeba xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx kmeny xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx x xxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx během experimentu. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx orientační xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxx x xxxxxxxx dávky
Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx xx roztok xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje se xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, teprve xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X nevodných xxxxxxxx xxxx být xxxxx nebo xxxxxx xxxx xxxxxx nebo xxxxx něho xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti; xxxxxxxx xxxx vodné xxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxx až 20 xx.xx-1. Variabilita xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxx minimalizovat takovou xxxxxxx koncentrací, xxx xx zajistil xxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxx testované xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx odebere xxxxx xxxx testem; přístup x xxxxx xxxx xxxx omezen. X xxx pokusu se xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx sondou orálně x xxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx podání xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxx xxxxx 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx určitého xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx období - xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx postupu
1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x dispozici xxxxx, xx jsou xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx sekvenčně, xxxx xx alespoň 24 xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Všechna xxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx nejméně xx xxxx dní; xxxxx přetrvávají xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx ještě xx dalších xxxx xxx. Posuzují xx xxxxxxxxxxx výchozí hladiny xxxxx: 5, 50, 500 a 2000 xx.xx-1. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dávka xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx vyšší xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx potřeby jednu xxxx více vmezeřených xxxxxx dávek. Tento xxxxxx xx měl xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx(xxx) xxxxx, která(é) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx xxxxxx, x x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx dávku xxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkách. Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx dávky 500 xx.xx-1. Xxxxxxxx xx po xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, vyšetřuje se xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx 2000 xx.xx-1, xx xxxxxxxxxx xxxxxx skončena x xxxxxx studii xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxx. 500 xx.xx-1) zjištěny xxxxx xxxxxx, vyžadující xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. 50 xx.xx-1). Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, mohou xxx xxxxxxx xxx další xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx, xx xx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx než 5 xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx
Pro každou xxxxxxxxxxxx dávkovou hladinu xx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx mírně xxxxxxxxx dávek xxx xxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxxxx xxxxx.
Dávka, xxxxx bude užita x xxxxx, xx xxx xxxxxxx x xxxxx ze 4 xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 nebo 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx by xxxx xxx xx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx); xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx dávka xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx dalšího xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx zřejmou xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx znovu xxxxxxxx xx další vyšší xxxxxx xxxxx. Zvířata xx však měla xxx dále xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx toxická xxxxxxx vyžaduje xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx by xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx nižší xxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx nutné xxxxxxx xxxxxxx, by xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxx pozorovací xxxxxx.
Xx podání xxxxx xx xxxxxxxxxx provádějí x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx každé xxxxx xx vedou samostatné xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx aplikované xxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zvířat xx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxx by měla xxx nejméně 14 xxx. Nelze ji xxxx stanovit rigorózně. Xxxx by xxx xxxxxx xxxxx obrazu xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x trvání xxxx zotavení. Dobu xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx potřeby xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx xx projevy xxxxxx projeví a xxxxxx x doba xx uhynutí, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x pozdnímu xxxxxx xxxxxxxxx příznaků.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx provádět xxxxxxx xxxxxxx xxxxx den xx xxxxxx látky x nejméně jedenkrát xx den další xxx. Zvířata vykazující xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Častější xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx po xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Test xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xx xxxx xxxxxxx příliš vysoká xxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx změny xxxx, srsti, očí, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, změny xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx, křečovým xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, letargii, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xx xxxxx 3 xxx a potom xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxxxx do xxxxx testu, se xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxx histopatologické vyšetření.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx předcházející úrovně xxxxx xxxx být xxxxxxxxx vyšetření xxxxx xxxx výjimečně xxxxx xxxxxxx dávky.
X xxxxxxx, xx látka xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx 5 xx.xx-1 (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx této xxxxx), xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx akutní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxx x hlavní xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx úroveň xxxxx. X xx xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx testu xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů; popis xxxxxxxxx účinků; pro xxxxxx studii, xxx xxx xxxxxxxxx zřejmý xxxxxxx účinek, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx, xx zvířata xxxxxxxxx xxxx xxx xxx, xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx možno obsahovat xxxx informace pro xxxxxxxxxx x hlavní xxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx úrovní xxxxx,
- ve xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx podle pohlaví x xxxxx úrovní xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; změny xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx počet xxxxxxxxx zvířat nebo xxxxxx xxxxxxxxxx během xxxxx; xxxxx zvířat x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx, xxxxxx a xxxxxx účinků),
- xxxxxx xxxxxx nástupu xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xxxx reversibilní,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, doba xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx x kritéria xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx utracení xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx histopatologické xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx.
3.2 Xxxxxxxxx x interpretace
Xxxxx | Výsledky | Interpretace |
5 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % přežití 100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx jsou xxxxx xxxxxxxx Látky, xxxxx xxxx jedovaté Xxx výsledky xxx 50 xx.xx-1 |
50 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti | Xxxx xxx 100 % přežití | Látky, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx velmi xxxxxxxx. Xxx výsledky xxx 5 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxx zdraví škodlivé Xxx xxxxxxxx x 500 mg.kg-1 | |
500 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx | Xxxx než 100 % xxxxxxx | Xxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx výsledky x 50 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxx za xxxxx bez významné xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx x 2000 xx.xx-1 | |
2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Méně xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x nebo xxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxx xxxxxxxx x 500 mg.kg-1 Xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxicitu |
X.1. xxxx AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX STANOVENÍ XXXXX XXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxxxx stanovení xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jak xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xxxxx klasifikace xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx dávek x přiměřených xxxxxxxxx, xxx aby xxxx xxxxx testovanou xxxxx xx základě xxxxxxxx xxxxxxx. Kromě xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxx testovací metodu xxxxxxxx xxxxx tří xxxxxxxxxxx pevně xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxx xxxxxx buď jako xxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx body xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx uvážit, pokud xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx další xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx dávky x xxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxx XX50. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, ve kterém xx xxxxxxx úmrtnost, xxxxxxx smrt části xxxxxx xx x x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinku. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx k sekvenčnímu xxxxxxx by xxxxxx xxxxx mohlo být xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx B.1. Xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx je xxxxx spotřeba zvířat xxx x xxxxxx xxxxxx toxicity (xxxxxx)(B.1) x xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1 bis).
1.2 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx orálně xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat x xxxxx xx stanovených xxxxx. Testování xx xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxx kroku xx xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, x.x.
- xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx krok bude xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx s xxxxx xxxx nižší xxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx tak, xxx xxxx možná xxxxxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx, x chována xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 dnů xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx xx laboratorní xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx, xxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx jasné xxxxxxxxxx xxxxxxx zvířete.
Testovaná xxxxx xx xxxxxxxxxx zvířatům x xxxxxx dávce xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx kanylou.
Pokud je xx xxxxx, testovaná xxxxx xx rozpustí xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxx zvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx použití roztoku/emulze x xxxxxx rostlinném xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) x xxx xxxxxxx x jiných xxxxxxxx. Xxx nevodná vehikula xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx před testem.
Zvířata xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxx po určitou xxxx xxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxx xxx a myši 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx xx neomezuje.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx důvody proti xxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx x pohlaví
Pro xxxxx krok se xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxxxxx xx tří xxxxxxx xxxxxx, xxx. 25, 200 a 2000 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx úroveň xxxxx xx měla xxx xxxxxx, aby x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx alespoň xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx podána. X závislosti xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 1.
Pro výběr xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxx veškeré xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x účinku. Xxxxx xxxx informace xxxxxxxxx, xx úmrtnost je xxxxxxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxx xxxxxx dávky (2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), xxx xx xxxxxxx limitní xxxx. Xxx nejsou xxxxx xxxxxxxxx x testované xxxxx, xxxxxxxxxx xx - s xxxxxxx xx pokusná xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxx xxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti.
V xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, než xxx xx dovoluje xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx uvažovat x xxxxxx testování při xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 5, 50 xxxx 500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, že způsobují xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx dráždícími xxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx.
Xxxxxx interval xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx na rychlosti xxxxxxx, na xxxxxx x xxxxxxxxxx toxických xxxxxxxx. Testování xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxx, dokud není xxxxx, xx zvířata xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xxxx x jedinou xxxxxx xxxxx ve xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxx k uhynutí xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxx další xxxxxxxxx provést xxx xxxxxxx 200 mg.kg-1 (xxxx 500 mg.kg-1) xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx zvířata je xxxxx pozorovat xxxxxxx xx dobu 14 xxx, kromě xxxxxxx xxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx utracena x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx nemělo xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx nástupu x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx důležité xxxxxxxxxxxx dobu, kdy xx objeví x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx-xx x xxxxxxxx toxické příznaky. Xxxxxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx jednotlivé xxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx období xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Xxx xx xxxxx podávána xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, může xxx - v xxxxxxxxxx xx xxxxx této xxxx - xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx potravu x vodu.
Maximální xxxxx xxxxxxxx, který xxxx xxx xxxxx najednou, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx. U hlodavců xx objem neměl xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx hmotnosti, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 ml xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx minimalizovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx na xxxxx úrovních xxxxx. Xxxxxxxx není možné xxxxx xxxxx celou xxxxxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxxx po xxxxxxx po dobu xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x Xxxxxxx 1.
1.3.3.1 Xxxxxxxxx pozorování
Pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx (den xxxxxxxx) nebo xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx stavu, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx humánně xxxxxxx: xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx.
Xx xx xxxx zvířata xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx mrtvá, xxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxx pozorování xx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xx xxxx x xxxxx, xx očích x sliznicích, x xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Pozornost xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, křečí, slinění, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x kómatu.
Veškerá xxxxxxxxxx xxxx systematicky xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3.2 Tělesná xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx x zaznamenávají xxxxx xxxxxxxxx. Na xxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxx zvážena xxxx xxx, než xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3.3 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x utracených xxxxx testu, se xxxxxxx pitva. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx zvíře xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx mikroskopické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx 24 a xxxx xxxxx.
2. XXXX A XXXXXX XXXXX
X xxxxxxxxx xxxx xxx údaje x každém xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx údaje shrnuty xx xxxxxxxxx formy, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx, časový xxxxxx a vratnost xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx nálezy.
Všeobecné xxxxxxx x interpretaci xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x Xxxxxxx 2.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx obsahuje xxxx informace, xxxxx xxxxx být získány:
Pokusná xxxxxxx:
- živočišný xxxx/xxxx;
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx-xx znám;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx voda;
- xxxxxxxx xxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x doby aplikace;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a xxxxxxx xxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx dávky.
Výsledky:
- xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx xxxxxxx zvířete xx tabulek xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (xxx. xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx);
- xxxxxx x xxxxxx xxxxxx příznaků xxxxxxxx a jejich xxxxxxxxxxxxx x každého xxxxxxx;
- pitevní nálezy x histopatologické nálezy x xxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x metodou XXXX XX 423.
XXXXXXX 1
XXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxx xxxx uvedeno v xxxx 1.4.2.3, xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx výběr xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx struktury x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx x jiných xxxxx toxicity a
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx.
2. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx pro každou xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx postupuje xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxx xx xxxxxxxx výchozí xxxxx 25 xxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx druhého xxxxxxx, xxxxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx přitom xxxxxx x ostatních 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx příznaky, xx xxxxx pitvou xxxxxx xxxxxxx, že úmrtí xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx se xxxx možnost xxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx dávky.
4. Xxxxx xx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jedno xxxxx xxxxxxx pohlaví, xx xx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx LD50 xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx je xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx posoudit xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx, xxxxxxx toxické xxxxxxxx x xxxxxx zvířat xxxxx xxx xxxxxxx xxx klasifikaci odpovídající xxxxxxx XX50 xx xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxx mohou xxx podnětem xxx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxx dávky.
5. Xxxxxx xxxxxxxx testování x třemi xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx 2). Této xxxxxxxx je možno xxxxxx xxx k xxxxxx alternativní xxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx testování xx dokončení testování xxxxx varianty 1.
Postup xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 25 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti
V xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx (1 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx uhynulých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx rámečku xxxx xxxxx způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Dodatku 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx testu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkou.
Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx na základě xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x příslušném xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti
V xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, počet xxxxxx x pohlaví (1 - xxxxxxx zvolené xxxx první, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu xxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx rámečku.
Varianta 1 - Ukončení testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx šedém rámečku xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Pokračování xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Klasifikace xx provede na xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x příslušném xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx testování x výchozí xxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx druhé).
Pod xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxx xxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx uvedeného x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx s příslušnou xxxxxxxxxx dávkou.
Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém rámečku.
DODATEK 2
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx založených xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx jako xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx počet xxxxxxxxx nebo utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx "XXXXX XXXXX XXXXXXXXX" x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hodnoty xxx klasifikaci. Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1 se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Hodnoty x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx pro příslušný xxxxxx xxxxxxxxxxx. Ležatá xxxxxxx znamená, xx XX50 xx větší xxx hodnota x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.)
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx dávkou 200 xx/xx xxxxxxx hmotnosti
(c) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkou 2000 xx/xx xxxxxxx hmotnosti
Interpretace xxxxxxxx založených na xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
x) Xxxxxxx dávka 25 xx/xx tělesné hmotnosti
b) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
x) Xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx hmotnosti
B.2. XXXXXX XXXXXXXX (INHALAČNÍ)
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx údaje x rozdělení velikosti xxxxxx, tenzi par, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx vzplanutí x xxxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx látky
1.2 Xxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx x odstupňovaných xxxxxxxxxxxxx, a xx xxxxx koncentraci x xxxxx xxxxxxx. Potom xx xxxxxxx pozorují x xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, se xxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx třeba humánním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x takovým xxxxxxxx, o xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx experimentálních xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx třeba xxxxxxxx xxxxxxx simulované xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; x xxx xxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxxxx skupina x vehikulem. Xxxxx xx užije xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx být x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx xxxx, je možno xx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx každé pohlaví xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx 10 xxxxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být xxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx se x xxxxxxxx testech xxxxxxxx xxxxxxx vyšších xxxxx, než xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxx x xx xxxxx zaručit, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx třeba vyhnout xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx koncentrace
Xx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, a xxxx xxx xxxxxx odstupňovány xxx, aby xxx x xxxxxxxxxxx skupin xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx mezi dávkou x xxxxxxxxxx x, xxxxx xx to xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx LC50 x xxxxxxxxxxx spolehlivostí.
1.3.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxx-xx xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx 20 xx.x-1 xxxx xxxxx xx xxxxxxxx tekuté xxxx pevné látky x xxxxxxxxxxx 5 xx.x-1 (xxxx - x případech, xxx xxxx xxxxxxxxxxx není xxxxx použít x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sledované xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx - xxx xxxxxxxx maximální xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) během 14 xxx k xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, považují se xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx být 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Vybavení
Xxx xxxxxx xx xxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx hodinu, aby xxx xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x expoziční xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx třeba xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx se co xxxxxxx xxxxxxxxx shlukování xxxxxx a xxx xxxxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx byla maximální. Xxx xxxxxxxxx stability xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx pokusných zvířat xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx boxu. Xx xxxx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx orálně-nasální, xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx způsoby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx jinými cestami.
1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx nejméně 14 xxx. Nelze ji xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx se xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, stejně xxxx doba do xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx je xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx postupu
Zvířata xx bezprostředně xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xx xxxx 4 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 o X. Relativní xxxxxxx xx být ideálně xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx není xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx komory (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx unikání xxxxxxxxx látky xx xxxxx. Během xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Xxxxxxxxx xx vhodné xxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx bude xxxxxxxx xx nejrychleji. Xxxxxxxxxx x provoz boxu xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx.
Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx vzduchu (xxxxxxxxxxx),
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x dýchací xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. aerosoly xx vysoké koncentraci, xxxxx vyžadovat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x xxxx než ±15 %. U některých aerosolů, xxx xxxx úrovně xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísání. Po xxxxx dobu xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx stabilní, xxx xx to xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx týká xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxx často, xxx xx xxxxx xxxxxxxx (ale xxxxxxx xxxxxx xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx),
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx expozice i xx jejím skončení xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxx individuální protokol. Xxxxx xxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Minimálně xxxxxx každý xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x odpovídající xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx ztrát xxx xxxxxx, např. xxxxxx xxxx zmrazením xxxxxxxxx zvířat xxxx xxxxxxx či xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, letargii, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx uhynutí xx xxxxx zachytit xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxx.
Zvířata, xxxxx xxxxx pokusu uhynou, x ta, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xx zvláštním zřetelem xx xxxx xxxxxx xxxxx x dolní xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xx zaznamenávají x odeberou xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
2. XXXXX
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx, doba uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx vykazujících další xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx nálezy. Změny xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx přežijí xxxx xxx jeden xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx utracena xxxxxxxx xx stresu xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou látkou, xxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx uznávanou xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxx xxxxx - pokud xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx změn xxxxxxx, klinických xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxx pokusu: xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení včetně xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxx popsat xxxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx částic xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx spolu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx odchylkou). Xxxx xxxxx možno obsahovat xxxx údaje:
x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x inhalačním zařízení;
x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx;
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx xx inhalačního xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx);
Pozn.: xxx xxxxxxxx aerosolům xxxxx x roztoku (např. xx xxxx) je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx, pokud xx xx možné, koncentraci xxxxxx xxxxx ve xxxxxxxx.
d) povaha xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxx;
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx;
f) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odchylka (XXX);
x) doba do xxxxxxxx xxxxxxxxx;
x) xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxx reakcí xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxx zvířat, xxxxx x pokuse uhynula xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx);
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx skončení, xxxxxx x xxxxxxxx xxx humánní xxxxxxxx xxxxxx;
- všechna xxxxxxxxxx;
- xxxxxxx XX50 pro xxxxx xxxxxxx stanovená po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (pokud je xxxxx xxx xxxxxxxx);
- xxxxxx závislosti xxxxxxxxx na xxxxx (xxxxxxxxxxx) a xxxx xxxxxxxx (xxxxx to xxxxxxxx xxxxxx stanovení);
- xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx (xx zvláštním xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx utracení zvířat x xxxxxxxxx důvodů xxxxx xxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxx XX50);
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.3. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx nanáší xx xxxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx účinky x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx během xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Testované xxxxx se xxxxxx xxxxxxx v takových xxxxxxx x takovým xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x pokusných xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx a krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Xxx 24 hodin xxxx zahájením testu xx xxxx zvířat xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx holení xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx se xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx) xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx její xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx xxxxxxx vehikula xx xxxxx xxxx x úvahu xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx látky kůží. Xxxxx xxxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxx, v jaké xxxxx xx xxxx xxxx látka xxxxxx xx styku s xxxxxxx kůží, x xx všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vybrat xxx, xxxxx nejvíce xxxxxxxxx xxxxxx kůží. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxx se dospělých xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxx použít x xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx jsou xxx xx důvody. Je xxxxx volit xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx začátku xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, musí xxx nullipary x xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x obou xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx zvířata tohoto xxxxxxx.
Poznámka: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx druhů, než xxxx xxxxxxxx, mělo xx xx xxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pečlivě xxxxxx x je xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky. X těchto xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx podávání xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, nejméně tři, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx vznikly xxxxxxxxx xxxxxxx xx zřetelným xxxxxxxx toxických účinků x xxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx nebo leptavé xxxxxx testované látky. Xxxxxxx údaje xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx mezi xxxxxx x xxxxxxx, x xxxxx možno xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 s xxxxxxxxxxx spolehlivostí.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx s xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx úplnou xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx xx být xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Měla xx xxx xxxxxx xxxxx obrazu xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje xxxxxx x xxxxxx fáze xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx patrná xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx uhynutí.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx jednotlivě x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx nanese xxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx 10 % xxxxxxxxx povrchu xxxx. Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx může xxx xxxx xxxxxx xxxxx; mělo by xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xx xxxxxxxx část xxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx 24 hodin xxxxxxxxx v kontaktu x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxxx plochu xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx orálnímu xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx nelze xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx expozice xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxxx xxxx nebo xxxxx xxxxxxx způsobem se xxxxxxx xxxxxxxx pokožky.
Xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx zvíře xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx záznamy. Xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx každý xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mají sloužit xxxxxxxxxxx xxxxxxx ztrát xxxxxx xxx studii, xxxx. pitvou nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx izolací x xxxxxxxxx slabých xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xx kterou xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx x sliznic, x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, xxxxxx, letargii, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx co nejpřesněji. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x xxxxx xxxxxxx až xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx jednom xxxxxxx xx xxxx látka xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x pěti zvířatech xxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx, zda xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X konkrétních xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx zvířatech xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx pokusu, xxxx uhynutí jednotlivých xxxxxx, xxxxx zvířat x jinými xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx. Stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x před xxxxxxxxx. Změny xxxxxxxxx xx xxxxx stanovit x zaznamenat, xxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utracena x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx vyvolané xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx vztah, xxxxx xxxxxxxx, mezi xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx x výskytem x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx včetně změn xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx hmotnosti, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xx pokud možno xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx užito) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx podle pohlaví x podle xxxxx (xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx humánně utracených xxxxx testu; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- doba xxxxxxx xx podání xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxx XX50 xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx úplný xxxxx, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx metody xxxxxxx),
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (xxxxx xxx lze xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx a její xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxxx xxxxx metodou xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx druhém xxxxxxx,
- rozbor xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx věnovat xxxxxxx ovlivnění xxxxxxxxx xxxxxxx LD50 x xxxxxxxxxxx x utracením xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.4. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXX DRÁŽDIVOST)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx informace x xxxx látce x xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx výrazné xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx test, studie xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zda není xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx (např. xX rovné či xxxxx 2 xxxx xX xxxxx xx xxxxx 11,5) není xxxxx testovat na xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx třeba xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
b) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx in vitro xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx.
x) Xxxxxxxx ze studií xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx dermální aplikaci xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx) x nebylo pozorováno xxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx testovat xxxxx vysoce xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
Studovaná xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx několika pokusných xxxxxx, přičemž každé xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxx, vyhodnotí x následně xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxx xxxxx posouzení xxxxxx. Xxxx pozorování xxxx xxx dostatečně xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx pozorovaných účinků.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx humánním xxxxxxxx utratit.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxx 24 hodin xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx xx nepoškodila xxxx (xxxx. xxxxxx). Xx xxxxx použít pouze xxxxxxx xx zdravou, xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxx xxxxx králíka xxxx xxxxxxxx husté xxxxx, xxxxx xxxx výraznější x některých obdobích xxxx. Testované látky xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx zóny xxxxx xxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxxxx s xxxxxxx látkami, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x práškové xxxxx, je třeba xxxxxxxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx použití xxxxxxxx xx xxxxx brát x xxxxx vliv xxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx různé xxxxx xxxxx, je xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx albínu králíka.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xx x in xxxxx screeningových xxxxx xxxx xxxxxx úvah xxxxxxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xx leptavá), xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx zvířeti. Xxxxxxxx xxxxxxxx tohoto testu xxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xx třeba doplnit xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx tři xxxxxx xxxxxxx zvířata. Xxxx xxxxx zvláštních xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinu, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx mohou xxx xxxxxxx další xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Pokud xxxxxx xxxxx xxxxxxxx důvody xxx jiný postup, xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx kůže 0,5 ml xxxxxxxx xxxx 0,5 g xxxx nebo xxxxxxxx xxxxx. Přilehlé xxxxxxx xxxxxxxxxx kůže xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx kontrola.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Dobu xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx dostatečně dlouhá, xxx xxxx možno xxxxx xxxxxxxxxx vratnost xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx xx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx chovají jednotlivě x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx nanese xx xxxxx xxxxxx (xxx 6 xx2) xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X kapalin a xxxxxxxxx past xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxx, x xxx xxx xxxxxxxxx xx xxxx. Xx xxxx xxxxxx expozice xx xxxxx přidržovat xxxxxx volně xx xxxx xxxxxxx okluzivním xxxx xxxxxxxx okluzivním xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx xx zvíře dostalo x xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx nebo xx vdechnout.
Xx xxxxx xxxx expozice xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx testovanou látku xxxxx, xxxxx je xx xxxxx, nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx celistvost xxxxxxx.
Doba xxxxxxxx xx xxxxxxx 4 xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxx, že xxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxx. xx 1 xxxxxx nebo 3 xxxxxx). Při xxxxxxx testování xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 3 plátky xxxx současně, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx po 3 minutách. Xxxxx xxxx pozorována xxxxxxx xxxxx reakce, odstraní xx druhý xxxxxx xx 1 xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx fázi xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx principu xxxxxxxxx zacházení, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx 4 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxxxx odpovědi xxxx. X případě, xx xxxx xxxxx 4hodinová xxxxxxxx, je třeba xxxxxxx xxxx s xxxxxxxx nejméně xxxx xxxxxxx zvířat; xxxxx xx xxxx kontraindikováno x humánních xxxxxx (xxxx. xxxxxxxx xx 4 xxxxxxxx expozice xx xxxxxxxxxx nekróza xxxx).
Jestliže je xxxxxxx xxxxx reakce (xxxx. nekróza) pozorována xx 3 minutách xxxx xx 1 xxxxxx, xx test xxxxxxxx xxxxxxx.
Za xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx použití x xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x vyhodnocení
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxx xx 60 xxxxxxxx x xxxx 24, 48 x 72 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v tabulce 1. Jestliže xxxxxx xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx odeznění xxxxxx, provádí xx xxxxxxxxxx dále. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxx popsat xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx kožní xxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx, maskovaných xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx měření xxxxxxxx xxxxx řasy.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx po xxxxx dobu pozorování. Xx xxxxx xxxxxx xxxxx všechny xxxxxxx xxxx, popis stupně x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx pozorované toxické xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx chovu, krmení xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxx xxxxxx: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxx tabulky údaje x kožní reakci xxx každé jednotlivé xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (za 1, 24, 48 a 72 xxxxx atd. xx xxxxxxxxxx xxxx),
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx poškození xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx podráždění a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx podráždění kůže,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx reakce xxxx
Xxxxxxx | |
1. Xxxxxxxxx erytému x xxxxxxxxx | |
1.1 Xxxxx xxxxxx | 0 |
1.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx (stěží xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx | 2 |
1.4 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx | 3 |
1.5 Těžký xxxxxx (xxxxx zrudnutí) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) znemožňující xxxxxxxxx xxxxxxx | 4 |
2. Xxxxxxxxx edému | |
2.1 Xxxxx xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx lehký xxxx (xxxxx viditelný) | 1 |
2.3 Xxxxx xxxx (xxxxxx xxxx zřetelné, xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vyvýšením) | 2 |
2.4 Xxxxx edém (xxxxxx xxxxxxxx asi x 1 xx) | 3 |
2.5 Xxxxxxx xxxx (zduření xxxx xxx 1 xx x xxxx přesahujíce xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx) | 4 |
4.2 Klasifikace xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (XXX)
XXX xx vypočte xxxx xxxxxxxxxxx průměr ze xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxx jedince x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx aritmetický xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx | IKI |
xxxxxxxx | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx xxxxxx | 0,5 &xx; XXX ≤ 3 |
xxxxxxx xxxxxx | 3 &xx; XXX ≤ 5 |
xxxxx xxxxxx | XXX &xx; 5 |
X.5. AKUTNÍ XXXXXXXX (OČNÍ DRÁŽDIVOST)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
1.1.1 Xxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat xxxxx xxxxxx. K tomu xxxxx xxx užitečné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Např. xxxxx kyselé xxxx xxxxxxxx xxxxx, které - xxx je xxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx x oku xX rovné či xxxxx 2 xxxx xX xxxxx či xxxxx 11,5, xxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.
b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx validizovaných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx x prokázanými xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nemají xxx xxxx testovány xx xxxxxxxxxx xxx xxx, protože xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx budou mít xxxxxxx xxxxxx xx xxx při xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx výrazně xxxxxxxx xxxxxx na xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, není xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xx budou xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx zvířatům, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx kontrola. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x reakce se xxxx xxxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx pozorování xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx možné xxxxxxxxxxx zhodnotit xxxx xxxxxxxx xxxx nevratnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
24 xxxxx xxxx xxxxxx se x každého x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx očí. Xxxxxxx, x xxxxxxx se xxxxxx podráždění xxx, xxxx defekt nebo xxxxxxxxx xxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxxx různé xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xx dávat xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx albinotickému xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky, je xxxxx zvolit xxxx xx jediném xxxxxxx. Xxxxxxxx výsledky tohoto xxxxx xx jednom xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx xx výrazně xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx účinek) xxxx leptavé (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxxxx xxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, není xxxxx xxxxx testování xxxx dráždivosti x xxxxxxx zvířat. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx případně xxxxxxxxx xxxxx zvířata.
X xxxxxxxxx případech xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tří xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nálezů xxxx xxxxxxxxx použití xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx používá xxxxx 0,1 xx. X tuhých xxxxx, xxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx 0,1 xx nebo hmotnost xxx 0,1 g (xxxxxxxx xx vždy xxxxx uvést). Xxxxx-xx xx x xxxxx xxxx hrubě zrnitou xxxxx, xx xxxxx xx rozemlít na xxxxx prášek. Xxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
U xxxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx x pumpou xxxx xxxxxxxxx aerosolových xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx 0,1 xx látky x xxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxx popisu xxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Doba xxxxxxxxxx
Délku xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx pozorovaných xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx stačí 21 xxx xx xxxxxxxx studované xxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Zvířata xx xxxxx přechovávat xxxxxxxxxx v klecích. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx zvířeti xx xxxxxxxxxxxx vaku xxxxxxx oka xxx, xx se spodní xxxxx lehce xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx. Xxxxx xx pak xxx na 1 xxxxxxx lehce x xxxx xxxxxxx, aby xx žádná xxxxx xxxxxxxxxx. Druhé oko, xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxx může vyvolat xxxxxxxxx bolest, lze xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx lokální xxxxxxxxxxx. Xxx bylo xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nedojde k xxxxxxxxx změnám x xxxxxx xx testovanou xxxxx, je xxxxx xxxxxxx zvolit typ, xxxxxxxxxxx x dobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx způsobem xx xxxx anestezovat x xxxxxxxxx oko.
Xxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 24 hodiny xx xxxxxxxx testované látky. Xx 24 hodinách xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, kterým se xxxx po instilaci xxxxx xxxxxx xxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 3 xxxxxxx. Půl xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxx vymývají xxxxxx po půl xxxxxx x použitím xxxxxxxx xxxxxx kapaliny x rychlosti průtoku, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pozorování a xxxxxxxxxxx
Xxx xx xxxxxxxxx xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx. Neprojevují-li xx xx 72 xxxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxx xxxx, xx xxxxx zkoušku xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx příznaky xxxxxxxxxx xxx tak, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx vývoj změn x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xx třeba zaznamenat x xxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x příloze x xxxxxxxxxx. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx interpretace. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xx, kdo provádějí xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx ilustrovanou xxxxxxxxxx xxxxxxx podráždění xxx.)
Xxxxxxxxxxx reakcí xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxxx lampy, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx zařízení. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx po 24 xxxxxxxx xx xxxxx oči xxxxxxxxx xxxx všech zvířat xxxxxxxx mimoto xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Údaje xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx intervalu xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx popis xxxxxx x xxxxxxxxxx podráždění, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x všechny xxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx relevantních xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx),
- x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx každém xxxxxxxxxx (xxxx. po 1, 24, 48 x 72 hodinách)
- popis xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx,
- podrobný xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx zjištěného xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx rohovky,
- xxxxx metody xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx body (1, 24, 48 x 72 xxx.), xxxx. xxxxxxxxxx lampa, oční xxxxxxxxx, fluorescein xxx.,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mimoočních místních xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx xxxx xx xxx
Hodnota | |
X. Xxxxxxxx - otok | |
Xxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx | 1 |
Xxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx | 2 |
Xxxx způsobující xxxxxxxx víček xx xxxxxxxx | 3 |
Edém xxxxxxxxxx xxxxx více xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxx | 4 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxx | |
Xxxxxx není xxxxxxxx | 0 |
Slabé xxxxxx (nutno xxxxxxx xx běžné sekrece xx vnitřním koutku) | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxx | 2 |
Slzení xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx v xxxxxxx xxxxx xxx | 3 |
C. Xxxxxxxx - enantém | |
Cévní xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx | 1 |
Splývající xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx jednotlivých xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx | 2 |
Difuzní xxxxx xxxxxxx xxxxx | 3 |
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx | |
Anomálie xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx duhovky, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx (jedna xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx), xxxxxx na xxxxxx xx zachovaná, xxxxxxxx xxxxxxxx | 1 |
Xxxxxx na xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x hemoragie | 2 |
v duhovce (xxxxx nebo xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx) | |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xxxx přítomná | 0 |
Xxxxxxxxxxx oblast je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx zůstávají xxxxx xxxxxxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx | 2 |
Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx; obrys xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx | 3 |
Úplná xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, duhovka je xxxxx xxxxxxxxxxx | 4 |
X. Xxxxxxx - xxxxxx neprůhlednosti | |
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xx ≤ 1/4 plochy xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 xxxxxx xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 3 |
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx &xx; 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 4 |
4.2 Xxxxxxx akutního indexu xxxx xxxxxxxxxxx (XXX)
Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxx xxxxx zvíře a xxxxx xxxxxxxx hodnocení xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx
XXX = 2.(X + X + X) + 5.X + 5.X.X
Xxxxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxx xxxxx interval xxxxxxxxx xx vypočte pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x XXX.
Xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx XXX xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx
4.3 Klasifikace
Xxxxxxxxxxx | XXX |
nedráždí | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
xxxxxx | 15 - 29,9 |
xxxxx xxxxxx | 30 - 59,9 |
velmi xxxxx dráždí | 60 - 79,9 |
extrémně xxxxxx | 80 – 110 |
X.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. METODA
1.1. Xxxx
Xxxxxxxx:
Citlivost x xxxxxxxx schopnost xxxxx xxx zjišťování látek x potenciálním xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx lidskou xxxx jsou xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx systém xxxxxxxx x xxxxxxx veřejného xxxxxxxxxxxxx.
Neexistuje jediná xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx všechny xxxxx x potenciálním senzibilizačním xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx x xxxxx xx se xxxxxx xxx všechny xxxxx.
Xxx xxxxx testu xx xxxxx uvažovat xxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxx charakteristiky látky, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx rozpuštěním nebo xxxxxxxxxxxxx testované xxxxx xx Freundově kompletním xxxxxxxx (FCA), x xx xxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx s xxxxxxxx xx zdají xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx senizibilizačního xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx než metody xxx Freundova kompletního xxxxxxxx, x xxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx test xx xxxxxxxxx (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) xx xxxxx xxxxxxxxx test s xxxxxxxx. Ačkoliv x xxxxxxxx schopnosti xxxxx xxxxxxx senzibilizační xxxxxx xxxxxxxx několik xxxxxxx xxxxx, xx GPMT xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x adjuvans.
X xxxxx skupin xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx bez adjuvans (xxxxxxxx xx dává Xxxxxxxxxx testu) xxxxxxxxxx xx méně xxxxxxx.
X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxx spíše xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x maximizačním xxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx Buehlerova xxxxx xx xxxxx xxxxx odborné xxxxxx.
X xxxx metodické xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx na xxxxxxx (GPMT) x Xxxxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, pokud jsou xxxxxxxxxx validizované x xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxx xxx jejich xxxxxxx.
Pokud xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dá pozitivní xxxxxxxx, xx možno xxxxxxxxxx xxxxx označit xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx testování xx xxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx provést xxxx xx xxxxxxx, xxx jak xx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Definice
Xxxxxxxxxxxxx xxxx: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) je xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zarudnutím xxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx kombinací xxxxxx xxxxxxxx. X jiných xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx být xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx týdne po xxxxxxxx expozici, x xxxxxxx kterého xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx dříve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxxx období xxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Citlivost x xxxxxxxxxxxx použité xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx být xxxxxxxxx každých šest xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, o xxxxxxx xx xxxxx, že xxxx mírný až xxxxxxx xxxxx senzibilizační xxxxxx pro xxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % x xxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx 15% u xxxxxx bez xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:
Číslo XXX | Číslo XXXXXX | xxxxxxxx xxxxx | xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxx |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | xxxxxx |
94-07-7 | 202-303-5 | Xxxxx xxxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxx | xxxxxxxxx |
Xxxxx nastat xxxxxxxxx, kdy při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx injekcemi případně xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (indukční xxxxxxxx). Po období 10 xx 14 xxx (indukční xxxxxx), x xxxxxxx kterého xx může rozvinout xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx provokační xxxxx. Xxxxxx x xxxxxx kožní xxxxxx xx xxxxxxxxxx expozici x testovaných zvířat xx xxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx a xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávka.
1.5 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxx, xxxxxxx se to x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx integrita xxxxxxx.
1.5.1 Maximizační test xx xxxxxxxxx (XXXX)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx mladá xxxxxxx albinotická xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx podmínky xx xxxx xxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx. Xxxxxxxxxx srsti se xxxxxxx xxxxxxxxx, holením xxxx chemickou depilací, x xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx metodě. Xx třeba xxxx xx xx, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx před zahájením xxxxx x xx xxxxx xxxxx.
1.5.1.2 Experimentální xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Pokusná zvířata
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxx i xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být březí. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx tvoří xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxx 5 xxxxxx xx xxxxx x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx a 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx, že xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 20 testovaných x 10 kontrolních xxxxxx.
1.5.1.2.3 Xxxxxxx úrovně
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx expozici se xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx zvířata xxxxxxx dobře xxxxxxx x která xx xxxxxxxx působící xxxxx xx střední xxxxxxxxxx xxxx.Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx u xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolá xxxxxxxxxx xxxx. V xxxxxxx potřeby je xxxxx xxxxxx koncentrace xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx bylo xxxxxxxxxx FCA.
1.5.1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.1.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Následující 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx injekcí, xxxxx xx 0,1 xx, xx podají xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (FCA) xxxxxxx x xxxxx xxxx fyziologickým roztokem x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxxx xxxxx xx vhodném xxxxxxxx ve zvolené xxxxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx koncentraci připravená xx směsi XXX x xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Pro xxxxxxx 3 xx xxxxx ve xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x XXX xx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx FCA. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxx injekci 3 xx být xxxxxx jako pro xxxxxxx 2.
Xxxxxxx 1 a 2 xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x co xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx 3 xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx po 0,1 xx, se xxxxxx xx stejných xxxx xxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx adjuvans (XXX) smíšené x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;
Xxxxxxx 2: neředěné xxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) xx směsí XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v poměru 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. den - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx
Přibližně xxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxx pro kůži, xx xx testovací xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx případně oholení xxxxx 0,5 ml 10% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6. - 8. den - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx látkou xx xxxxxxx vehikulu xx xxxxxxxx filtrační xxxxx (2 x 4 cm), xxxxx xx xxx xxxxxxx xx testovací xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx obvazu na xxxx 48 hodin. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxx odbornými xxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
6. - 8. den - Kontrolní skupina
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx vehikulum xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx jako x xxxxxxxxxx skupiny xx xxxx 48 xxxxx.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. xxx - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx
Xxxx exponovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx zbaveny xxxxx. Xx xxxxx xxx xxxxxxx je aplikována xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx x xxxxxxx a xx xxxxx bok xx xxxxxxx xxxxxxxx aplikuje xxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xx to třeba). Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx obvazu xxxxxxx x kontaktu x xxxx xx 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Pozorování a xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx a xxxxxxxxx skupiny
- xxxxxxxxx 21 hodin xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx plocha xxxxxxx, xxxxxxxx ostříhá xxxxxxxx xxxxx a x případě potřeby xxxxxxxx;
- přibližně xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx 48 xxxxx xx začátku xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x dodatku;
- přibližně 24 xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx kůže (72 hodin).
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "slepého xxxxxx" u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx pozorující xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx kontrolní.
Xxxxx xx x xxxxxxxxx výsledků xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (tj. xxxxxxxxx provokace), xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx skupinou x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx reakcí, xxxxx xxxx xxxxxxxxx indukčních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (viz xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx nálezů xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx. histopatologického vyšetření xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx řas.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxx
1.5.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx laboratorní podmínky xx xxxx aspoň 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx srsti xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx chemickou xxxxxxxx, v závislosti xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Xx xxxxx xxxx na xx, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx kůže. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxx.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx a/nebo xxxxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx 20 zvířat v xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxxxx skupině.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx indukční xxxxxxxx xx upraví xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolává podráždění xxxx. V případě xxxxxxx je možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx je xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx zředěný nedráždící xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xx preferován 80% roztok etanol/voda xxx indukci x xxxxxx pro provokaci.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Indukce
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Jeden bok xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Systém xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxx testovanou xxxxxx xx vhodném xxxxxxxx (xxxxx vehikula xx řídí odbornými xxxxxx; kapaliny lze xxxxxxxx aplikovat xxxxx).
Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx testovací xxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx plátkem xxxx komůrkou x xxxxxxx obvazem xx xxxx 6 xxxxx.
Xxxxxx plátkového xxxxx xxxx xxx okluzivní. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxx přibližně 4 - 6 xx2. Je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x použitím xxxxxxxx přidržovače, xxx xx xxxxxxxxx okluze. Xxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxx xx zbaven xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxxxxxx plochu xx naneseno pouze xxxxxxxxx, x to xxxxxxxx způsobem jako x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx test xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x přidržován x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx plátkem xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx obvazem xx xxxx 6 xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupina xxxx xxxxx, lze xxxxxx xxxxx kontrolní skupiny xxx xxxxxxxx.
6. - 8. x 13. - 15. xxx - Testovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx aplikace jako x den 0 xx provede xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx případně xxxxx) 6. - 8. xxx x xxxxx 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx
27. - 29. den - Testovaná x xxxxxxxxx skupina
Neošetřený xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx aplikuje na xxxxx část neošetřeného xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx zvířat. Na xxxxxx xxxx neošetřeného xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Překrývací xxxxxx xxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx x kontaktu x xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.
1.5.2.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 hodin xx xxxxxxxxxx plátku xx xxxxxxxxxx plocha xxxxx srsti;
- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx později (přibližně 30 xxxxx xx xxxxxxxx provokačního plátku) xx xxxxxxxx kožní xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx stupnice xxxxxxx x xxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx 24 xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 54 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx systém "xxxxxxx xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx osoba xxxx, xxxxx xxxxx xxxx senzibilizováno x xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx nutná xxxxx provokace (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), provede xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx potřeby xxxxx x kontrolní skupinou x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxx reakce x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x provokačních xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). K xxxxxxxxx xxxxxxxx nálezů je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx např. xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření nebo xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX (XXXX X XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx se xxxxxxx xx tabulky, xx xxxxx xxxx xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx patrná xxxxxx xxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX (XXXX X XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx xxx xxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx, xx třeba xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx citaci (xxxx. XXXX - xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, MEST - xxxx ztluštění xxxx x xxxx) včetně xxxxx podrobností xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx látky.
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu (XXXX a Buehlerův xxxx)
Xxxxxx o xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx získány:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx zvířat;
- xxxxxxxx chovu, xxxxxx xxx.;
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx a xxxxx xxxxx.
Experimentální podmínky:
- způsob xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx plátkového xxxxx;
- výsledek xxxxxxx studie xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx vlastní xxxx;
- podrobné informace x xxxxxxxx, aplikaci x odstranění xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx citlivosti x xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, její koncentracea xxxxxxxx;
- všechna xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků;
- všechny histopatologické xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Tato xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Stupnice Magnussona/Kligmana xxx xxxxxxxxx vyvolaných xxxxxxxxxxxxx reakcí
0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
1 = xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx;
2 = xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx;
3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx kůže.
5.2 Klasifikace xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Podle xxxxxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxx xxxx, kolik xxxxxx v xxxxx xxxxxx bylo danou xxxxxx senzibilizováno, se xxxxx klasifikuje jako
xxxxx xxxxxxx (X. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
mírný xxxxxxx (XX. st.) - 9 - 28 % zvířat
xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 65 - 80 % xxxxxx
xxxxxxxx xxxxxxx (V. xx.) - 81 - 100 % xxxxxx
X.7. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX ORÁLNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx po 28 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Během xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pečlivě xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Pitva xx provede u xxxxx xxxxxx, která xxxxxx xxxx jsou xxxxxxxx během xxxxxx; xxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxx a xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx uspořádány tak, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxx vliv xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx zvíře je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx nebo x potravě xxxx x xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx nosiči (xxxxxxxx). Xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, pak xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x jedlém xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) a pak xxxxxxx v jiných xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx ještě před xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx stabilitu xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx, ale xx xxxxx použít x xxxxxx druhu xxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx mělo xxxxx co xxxxxxxx xx xxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro každé xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx hodnoty.
Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxx x obou xxxxxxxx xxxxxx zvířata xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx zdroje.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx). Pokud xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx, xx nutno xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita xxxx koncem xxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 dnů xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx vratnost, trvání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx také satelitní xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupinu. S xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx pokusným xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, které xx xxxxxxxx nejvyšší xxxxx.
Xxxxx se xxxxx dostupných xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx účinek xxx denní xxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx možno xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx-xx xxxxxx data x dispozici, lze xxxxxxx xxxxxxxxxx vyhledávací xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx dávek.
Při xxxxxx dávek xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxxxxx x toxikokinetických studií x testované xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx. Dále xx xxxxxxx xxxxx x klesající řadě xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (XXXXX). Xxxxxxx xx vhodný xxxx- xx čtyřnásobný xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx xxxxx xxxxxx větší xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxx větší xxx 10).
Xxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx vodě, xx důležité xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx neovlivňovalo xxxxxx x xxxxx rovnováhu. Xxxxxx-xx xx testovaná xxxxx x potravě, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx koncentrace (x xxx) xxxx xxxxxxxxxx dávkování ve xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxx, mělo xx xx xxx xxx xxxxx xxx xx xxxxxxx dobu x dávkování přizpůsobovat xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx dlouhodobou studií, xx třeba v xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxxx-xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx toxické xxxxxx při xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx za den xxxx při xxxxxx xxxxxxxxxxx x potravě xxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nevyplývá x xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx provedení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx dávkových xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx pravidlo xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx údaje x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xx xx třeba xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.5 Doba pozorování
Xxxx pozorování je 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx s cílem xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířatům xx xxxxxx testovaná xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 xxx, xx xxxxxxxxxxxx případech 5 xxx x xxxxx. Denní dávka xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx sondou xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kanylou. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxxx najednou, závisí xx velikosti xxxxxxx. Xxxxx xx neměl xxxxxxxx přesáhnout 1 xx xx 100 x tělesné xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx lze xxxxx x 2 xx xx 100 g xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxx, xxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx úrovních dávky. Xxxxxxx to x xxxxx dráždivých x xxxxxxxxx, u xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx xx stupňovanými xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx pozorování xx provádí nejméně xxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx a x xxxxxxxx doby xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát denně xx provede xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířat xx účelem zjištění xxxxxxxxx x mortality. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx nebo xxxxx xxxx vyřazena, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx před xxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx porovnání) x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxx xxxxxxx xxxx x standardním pozorovacím xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx dobu. Výsledky xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx měnily xx nejméně; xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, očí x xxxxxxx, přítomnost sekretů x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (slzení, xxxxxxx xxxxx, velikost zornic) x xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxx, dále xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx) nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx).
Xx čtvrtém xxxxx xxxxxxxx se otestují xxxxxx na různé xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxx, xxxxxxx, proprioceptivní), xxxxx xx xxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx aktivita. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, které je xxxxx k testování xxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx Xxxxxxxxx xxxx, část X).
Xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx ve xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx vynechat, pokud 28xxxxx xxxxxx slouží xxxx xxxxxxxxx studie xxx následující studii xxxxxxxxxxxxx (90xxxxx); x xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx poruch xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx x v xxxxx xxxxxxx jsou údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx týdnu 28xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x skupin xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx funkčního xxxxx zvířete xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx potravy x xxxx
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx jednou xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x vody se xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx v xxxxxxx aplikace v xxxxx vodě.
1.2.3.3 Hematologie
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, koncentrace xxxxxxxxxxx, počtu erytrocytů, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
Krev xx odebere xxxxx xxxx nebo v xxxxxxx utracení xxxxxxx, xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, zvláště xx xxxxx x xxxxxxx, se xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx). Doporučuje xx xxxxxx xxxxxxx bez xxxxxxx přes xxx xxxxxxx xxxx1). Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx stanovení xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx, celkového xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, kreatininu, xxxxxxxxx proteinů, xxxxxxxx, xxxxxxxx alespoň xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, gama xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, sorbitoldehydrogenáza). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (jaterního xxxx xxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxxx kyselin xxxx x některých xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx možnost xx časově xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx studie: hodnotit xx xxxxx xxxxxx, xxxxx, osmolalitu nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, pH, xxxxxxxxx, glukózu x xxxx xxxx. xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nespecifických xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx.
Další xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx u látek xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx na xxxxxx metabolické xxxxxx: xxxxxxxxx vápníku, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx lačno, xxxxxx, specifických xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx látek xxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxx, brát x úvahu xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx látky.
Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx před začátkem xxxxxx.
1) Xxxxxxxxx xx lačno xx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxx v xxxx x plazmě, xxxxxxx xxx glukózu. Xxxxxx xxxxx pro xxxx xxxxxxxxxx xx xx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, která xx mohla maskovat xxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx, hladovění xxxx noc by xxxxx mít xxxx xx celkový metabolismus x u xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx xx pravidelnosti xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxx, xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provést xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve 4. xxxxx testu.
1.2.3.5 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx použitých ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, zahrnující xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxx x břišní, a xxxxxx xxxxxx. Játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxx x xxxxx xxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xx nejdříve xx xxxxx se xxxxx xx vlhkém stavu, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x makroskopickými xxxxxxx, xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, mozečku x mostu), xxxxx, xxxxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxx (včetně Xxxxxxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xxxxxxxxx), xxxxxx x přídatné xxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxx, xxxxxxxx), xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xxxx (n. xxxxxxxxxxx xxxx n. xxxxxxxx), xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x další xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx provést xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x tkání. Pokud xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx nutno provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx těchto xxxxx i x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx vyšetřit.
X xxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxx xxxx do xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x tkáně, xx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x každém jednotlivém xxxxxxx. Navíc jsou xxxxxxx xxxxx sumarizovány xx tabulkové formy, xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx vykazujících xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx nebo utracených x xxxxxxxxx důvodů, xxxx úmrtí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, popis toxických xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, trvání x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, typ xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x jednotlivými xxxx xxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx xxx plánování xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx získány:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx zvířat;
- xxxxx, podmínky xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx jednotlivých zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxx v týdenních xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx.
Podmínky xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx látky xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxx diety, x dosažených koncentracích, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- podrobné xxxxx x způsobu xxxxxxxx testované xxxxx;
- xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx vodě (xxx) xx skutečnou xxxxx dávku x xx na xx xxxxxxx hmotnosti (xxxxx xxx x aplikaci x dietě nebo xxxx);
- podrobné xxxxx x potravě x kvalitě vody (xxxxxx xxxxx a xxxxxx);
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx změny;
- xxxxxxxx potravy a xxxx;
- xxxxx x toxických xxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxxxx úrovně, xxxxxx xxxxxx příznaků xxxxxxxx;
- xxxxxx, závažnost x xxxxxx klinických xxxxxx, xxxx. xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x motorické aktivity;
- xxxxxxxx hematologického xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- výsledky xxxxxxxxxxxxx vyšetření s xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx hmotnost xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx x absorpci, xxxxx xxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Xxxxxx:
4. XXXXXXXXXX
Tato xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx XXXX XX 407.
X.8. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxx xxxxxxx xx xxxxx získat údaje x testované xxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxx částic, xxxxx xxx, bod xxxx, xxx xxxx, xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx studované xxxxx denně xx xxxxxxx dobu, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, každá xxxxxxx jedné koncentraci, x xx xx 28 dní. Xxxxxxx-xx xx xxx dosažení xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, která přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Příprava
Nejméně 5 dní xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, přidá xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx vznikla příslušná xxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx jiná xxxxxxx, xxxx xxx x nich xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx data, xx xxxxx je xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx zdravých xxxxxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx začátku studie xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic x 5 samců). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Pokud xx zvířata budou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, je nutno xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx koncem xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vysoké xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinu 10 xxxxxx (5 xxxxxxx každého xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví).
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Použijí se xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x jedna xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxx - x koncentraci xxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se se xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x malém počtu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx toxický xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx xxx být xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxx expozice
Trvání xxxxxxxx xx být 6 xxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx možné xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pro xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx dynamické expoziční xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, xx třeba xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xx nejvíce shlukování xxxxxx x xxx xxxxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx xxxx co xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx boxu xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxx. Xx možné použít xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx způsoby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx příjem xxxxx jinými cestami.
1.3.2.6 Xxxx pozorování
Pokusná xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx exponují xxxxxxxxx látce xxxxx, 5 - 7 xxx v xxxxx, xx xxxx 28 xxx. Zvířata v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx zotavení x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx experimentu xx xxx 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx mezi 30 % x 70 %, x xxxxxxxx případů, kde xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx tlaku xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxx. Xxxxx expozice se xxxxxxxx potrava xxx xxxx.
Používá se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx analytickou xxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xx xxxxx xxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx v xxxxx expozičním xxxx xxxx xxxxxx. Systém xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dosaženo xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Měření xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx studované xxxxx se měří x xxxxxxx xxxx. Xxxxx jedné expozice xx xxxx koncentrace xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ± 15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx úrovně xxxxxxxx není možné xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx dobu xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xx prakticky možné. Xxxxx se xxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxxxx x každé xxxxxxxxx xxxxxxx.
c) Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx kontinuálně.
Xxxxx expozice a xx xxxxx skončení xx pozorování provádějí x xxxxxxxxxxxxx systematicky; xxxxx xxxxx má xxxx xxxxxxxxxxxx protokol. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx toxických xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, očí, sliznic, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx prohlížení xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, jako např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx zařazení.
Po xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata x xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx xx trpící xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxx alespoň xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jeden x xxxxxx parametrů: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x séru.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxxx, fosforu, chloridů, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx, lipidů, xxxxxxx, acidobasické rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx xxx x xxxxxxx potřeby použity xxx studium xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3.1 Xxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxxxx ve studii xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xx co xxxxxxxx po sekci xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Orgány x tkáně (xxxxxxx xxxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny x xxxxx, x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx velikosti) xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba vyjmout xxx poškození, zvážit x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, tak xxx xx xxxxxxxxx struktura.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
U xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxx x xxxxxxx xx skupině x xxxxxxxx koncentrací xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx těchto xxxxx x x všech xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxx x tkáně, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx poškození.
Xxxxxxx xxxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx expozičního xxxxxxxx včetně konstrukce, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx odpadního vzduchu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxx, xxxxx je xxxxxxxx. Xxxxxx přístroje pro xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx xx tabulky x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx variability (např. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx údaje: a) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením; x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx; x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx inhalačního xxxxxxxx, xxxxxx objemem xxxxxxx); x) povaha vehikula, xxxxx xxxx užito; x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx; x) hmotnostní xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx průměru (MMAD) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX),
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- úroveň xxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- pitevní xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx skupině xxxxx úroveň dávky. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx příznaky toxicity. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx pokusu, i xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx před testem xxxx zvířata chována x podmínkách ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx srsti xx xxxxxx xxxxx, mělo xx xx však xxxxxxx xxx 24 xxxxx před experimentem. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx xx to, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx se xxxxxxxx nejméně 10 % xxxxxxx těla. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx připravované xxxxxx kůže x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxx pokusech x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx formy, xx xxxxx danou xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou, xxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx denně 5 xx 7 dnů x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xx možno používat xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx použít i xxxx zvířecí druhy, xxxxxx xxxxxxx však xxxx xxx odůvodněné. Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet a xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců) xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx nullipary x nesmí xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou zabita xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx po ukončení xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx každého xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Je třeba xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dávek x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx x aplikací xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx být xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx stejnou xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xxxxxxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx v kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx množství, které xx aplikuje xxxxxxx x xxxxxxxx dávkou. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx nezpůsobit žádné xxxxxxx nebo xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx xxxxxx expozice x člověka, má xxxxxxxx dávka tuto xxxxxxx překračovat. Ideálně xx xxxxxxx dávka xxxx vyvolat xxx xxxxxxx účinek xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx více než 3 xxxxxx dávek, xxxx být vmezeřené xxxxx voleny xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxx x střední xxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx xx počet xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
Xxxx-xx xxxxxxxx testované xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxx kůže, xx xxxxx snížit xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxxx úrovně xxxx xxxx k xxxxxxx xxxx vyloučení xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Došlo-li x xxxxxxx poškození xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx x provést jej xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 mg.kg-1 nebo xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, xxxxx toxické xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx zvířata xx třeba denně xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxx, xxx xx objeví x xxxxxxxx opět xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx. Exponují xx studované xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx po xxxx 28 xxx. Xxxxxxx satelitní xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx pozorování, xx třeba xxxxxx xx xxxxxxx 14 xxx bez xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx nejméně 6 xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx plochu, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % xxxxxxx xxxx; x xxxxxx toxických xxxxx xxxx být xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx pokusné xxxxxx xxxxxxxxxx x co xxxxxxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx je po xxxxxxxxx dobu 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x kůží xxxxxx porézního mulového xxxxxx x nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx se mulový xxxxx x testovaná xxxxx xxxxxxxx a xxx xx zabránilo xxxxxxxx příjmu. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx použít x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx volnosti xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Jako xxxxxxxxxxxx metody xx xxxxx použít "xxxxxxxxxx xxxxx".
Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx nebo s xxxxxxxx xxxxxx vhodného xxxxxxx očištění pokožky.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxx, stupně x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, xxx a xxxxxxx x xxxx xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x centrální nervové xxxxxxxx, somatomotorické aktivity x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx týdně x xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx xxxxx nedocházelo xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x xxxxxxxx satelitních xxxxxx, xxxxxxx. Umírající xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
Xx xxxxx pokusu se x všech zvířat xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x srážlivosti xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx stanovit xxxxxxx jeden x xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x séru (dříve xxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx známá xxxx glutamát-oxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.
Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: vápníku, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, glukózy xx xxxxx, lipidů, hormonů, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího spektra xxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx zvířat použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva. Xxxxx xxxxx, ledviny, nadledvinky, xxxxx a xxxxxxx xx xx nejdříve xx sekci zváží xx vlhkém xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx, např. xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx, ledviny, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, srdce x xxxxxxx orgány x makroskopickými xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxx a xxxxxxx xx skupině x xxxxxxxx dávkou xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx těchto tkání x x všech xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx orgány x xxxxx, ve xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- údaje x zvířatech (xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx,
- doba, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich další xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
X.10. XXXXXXXXXX - XXXX CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX X XXXXX XX VITRO
1. METODA
Metoda xx xxxxxxxxx XXXX XX 473, In Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Test (1997).
1.1 XXXX
Účelem xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberací xx xxxxx xx nalézt xxxxx, xxx x xxxxxxxxx savčích xxxxx xxxxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (1) (2) (3). Strukturální xxxxxxx xxxx xxxxxxx druhu: xxxxxxxxxxxx a chromatidové. Xxxxxxx vyvolané chemickými xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Vznik xxxxxxxxxxx může naznačovat, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxx navržena x xxxxxxx numerických xxxxxxx x xxxxx se x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Chromozómové xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx doklady xxxx, xx chromozómové xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx změny x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx, hrají xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx x odhalení možných xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx chemických xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, je xxxx xxx savce xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx mezi tímto xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx korelace závisí xx druhu xxxxx x existuje xxxxx xxxx dokladů o xxx, že xxxxxxxx xxxxxxxx látky, jejichž xxxxxxxxxxxx vlastnosti se xxxxx xxxxxx nezjistí, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx XXX.
X xxxxxxx chromozómových xxxxxxx xx vitro xx mohou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx buněčné xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx vybrány xx xxxxxxx xxxxxxxxxx růstu x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx obecně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x savců xx xxxx. Xx xxxxx xx vyvarovat podmínek, xxxxx by mohly xxxx x pozitivním xxxxxxxx, jež xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx změnami xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (4) (5).
1.2 XXXXXXXX
Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx projevuje jako xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, nebo xxxx a opětovné xxxxxxx xxxx chromatidami.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako zlom xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx typu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx).
Xxxx chromatidy: xxxx zlom xxx xxxxxxxx porušení xxxxxxxxxx xxxxx nebo obou xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx vzniklá xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx v xxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx (xxxx mimo xxx chromatidy), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx delece.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx S-fázi xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx mitózy, nýbrž xxxxxx xxxxx S-fáze. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, .. chromatidami.
Xxx: achromatická xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Mitotický xxxxx: xxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Numerická xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx.
Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) jiný xxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3n, 4n xxx.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx chromozómové struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dělení xx xxxxxx metafáze, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx a xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xx s xxxxxxxxxxxx aktivací a xxx ní. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx zastaví xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx celou řadu xxxxxxxxx xxxxx, kmenů xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxx xxxxxxxx (například xxxxxxxxxxx xxxxxxxx křečka nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx x inkubační xxxxxxxx (kultivační nádoby, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx je xxxxx xxxxxx způsobem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx. X xxxxxxx kontaminace xx xxxxx nepoužívají. Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx dobu xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Stabilizované xxxxxxx xxxxx x xxxxx: xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx konfluentní xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxx teplotě 37 oC.
Xxxxxxxxx: xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx mitogen (např. xxxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxx xxx plná xxxx x vhodným xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxx lymfocyty získané xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxx teplotě 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace
Xx xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (S9) xxxxxxxxxx z jater xxxxxxxx, xxxxxxxxx činidly xxxxxxxxxxxx enzymy xxxx xx Aroclor 1254 (6) (7) (8) (9), nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (10) (11) (12).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mitochondriální xxxxxx x xxxxx xxxx obvykle 1 - 10 % x/x. Aktivita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxx použít mitochondriální xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxx vědecky xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx cytochromu P450 x metabolismu xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Xx-xx testovaná xxxxx x xxxxxx stavu, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx její xxxxxxxx xx vhodném rozpouštědle x xxxxxxxx naředí. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx mohou do xxxxxxx xxxxxxxx přímo xxxx xx xxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx údaje x xxxxxx stabilitě prokazují, xx xxxxx skladování xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5 XXXXXXXX TESTU
1.6 XXXXXXXXXXXX
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx podezření, xx by xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x aktivitu X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxx rozpouštědlo, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxx xxx, xxx xx xx xxxxx, bylo xx xxxxxx místě xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Je-li xxxxxxxxx xxxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx organické rozpouštědlo xxxxx xxxxxxx. Voda xx dá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sítem.
1.6.1 Koncentrace
Xxxx kritéria, jež xx uvažují při xxxxxxxxxxx nejvyšší koncentrace, xxxxx xxxxxxxxxxxx, rozpustnost x xxxxxxx x xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Cytotoxicita se xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx i xxx xx x hlavním xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, například xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx živých xxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx cytotoxicitu a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxx minimálně tři xxxxxxxxxxxxxx koncentrace. Dochází-li x cytotoxicitě, xxxx xxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx znamená, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx více xxx násobkem, který xxxx mezi hodnotami 2 a √10. X xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx být xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx signifikantní xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (vždy x xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx mírou xxxxxxxxxxxxx / cytostatických xxxxxx x je xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Je xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx jiná xxxxxxx xxxxxxxx xxxx obtížná x xxxxxxxxxxx. Jako xxxxxxxxxx informace xx xxxxx použít xxxx xxxxx x kinetice xxxxxxxxx dělení, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx; xxx ovšem xxxxxxxxxxx celkový xxxxxx, xxxxx xx vždy xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X tak x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx času xxxx znamenat xxxxxx xxxxxx od xxxxxx xxxx sklízení x xxxxxxxx optimálního xxxxxxx xxxxxxx.
X relativně xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx z xxxxxx 5 µx/xx, 5 xx/xx xxxx 0,01 M.
X xxxxxxxxx nerozpustných xxxxx, xxx jsou netoxické x koncentracích nižších, xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx, xxx je xxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx kultivace x xxxxxxxxxx látkou. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx-xx x xxxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, než xx nejnižší nerozpustná xxxxxxxxxxx - se xxxxxxxxxx testovat xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx srážením. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x na xxxxx xxxxxxxx, protože xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx, X9 xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx dá xxxxxxx x xxxxxxx okem. Xxxxxxxxx xxxxx být xx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxx.
1.6.2 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
Xx xxxxxxx experimentu, xx xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací xxxx xxx xx, xx xxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx). Xxxxx se xxxxxxxx metabolická xxxxxxxx, xxxx xxx pozitivní xxxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xx xxx expozičních úrovních, xxx xx xxxxxxx, xx xxxxxxxx reprodukovatelný x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nad xxxxxx, xxxxxxxxxxx citlivost xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Koncentrace xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx zvolit xxx, xxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx neodhaloval xxxxxxxxxxx xxxxx identitu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx aktivace | Xxxxx | CAS | EINECS |
Xx | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx ethyl xxxxxxxxxxxxxxx mitomycin X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Ano | xxxx[x]xxxxx cyklofosfamid monohydrát xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Xxx pozitivní xxxxxxxx xx mohou xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Xxx, xxx xx to xxxxx, xx vhodné xxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kultur xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx které xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x kultivačním xxxxx, zpracované xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mimoto xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx bez jakéhokoliv xxxxxxxxx.
1.6.3 Postup
1.6.3.1 Xxxxxxxx testovanou xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému. Xx lymfocyty xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx 48 hodin xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxx xxxxxx koncentraci používají xxx xxxxxxx; a xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx. Pokud xxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx minimální (13) (14), je xxxxxxxxxx, xxx xx xxx každou xxxxxxxxxxx xxxxxxx jenom jedna xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx postupy, jako xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (15).
1.6.3.2 Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx xx xxxx 3 - 6 xxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5násobku normální xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx začátku xxxxxxxx (12). Pokud xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx bez xxxxxxxx, x kontinuální expozicí xx xx xxxx xxxxxxxx kultivace odpovídají xxxxxx 1,5xxxxxxx normálního xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, než xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx potvrzení negativních xxxxxxxx nepokládá za xxxxx, je xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3.3 Příprava chromozómů
Xx xxxxxxx kultury xx xxxxxx Xxxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxxx obvykle xx xxxx 1 - 2 xxxxx xxxx ukončením xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx přípravu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx chromozómů xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, fixace x odbarvení.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jelikož xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x rozbití xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a ztrátě xxxxxxxxxx, musí xxx x xxxxx typů xxxxx xxxxx centromer x xxxxxxxxxxx buňkách xxxxx modálnímu xxxxx ± 2. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx minimálně 200 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx metafází, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
I xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx buňka, xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxxx buněk xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx typy strukturálních xxxxxxx včetně xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx zvlášť, xxx xxxxxxx do xxxxxxx xxxxxxxx aberací xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x experimentálních x xxxxxxxxxxx kulturách.
Xxxxxxx xx data xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx všechna xxxx uvedou x xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx bylo xxxxxxxxx x xxxx. 1.4.3.3. V xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx lze xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx xxxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx koncentraci testované xxxxx závislá xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3) (13). Statistická xxxxxxxxxx xx však neměla xxx xxxxxxx určujícím xxxxxxxx pozitivního výsledku.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx indikovat, xx testovaná látka xx schopnost xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx počtu xxxxx x endoreduplikovanými xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx cyklu (17) (18).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx výsledky nesplňují xxxx uvedená xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx většina xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx negativní xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx ohledu xx xxxxx opakovaných xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx aberace xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v kultuře xxxxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx xx daných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testovaná xxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx aberace xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
XXXXXX X PRŮBĚHU XXXXXX
Xx zprávě o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud je xxxxx.
Xxxxx:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- karyotyp x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx,
- xxxxxxx mykoplasmat, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxxx cyklu,
- xxxxxxx xxxxx xxxx, xxx byla xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx lymfocyty, použitý xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx buněk, je-li xx xxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx to xxxxx
- modální xxxxx chromozomů.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxx xxxxx blokující xxxxxxxx, xxxx koncentrace x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx např. údajů x cytotoxicitě x xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jsou-li x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, je-li xx xxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx vehikula a xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx kultivace,
- xxxx působení,
- xxxxxxx xxxxx na xxxxxxx kultivace, xx-xx xx xxxxx
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxx,
- xxxxx analyzovaných xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx hodnotí jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx cyklu, x počtu xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxx srážení,
- xxxxx x xX x osmolalitě kultivačního xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx chromozómových xxxxxxx xxx xxxxxx experimentální x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx ploidie,
xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- statistické xxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxxxx,
- souběžné xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.11. XXXXXXXXXX - TEST CHROMOZÓMOVÝCH XXXXXXX V KOSTNÍ XXXXX XXXXX XX XXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 475, Xxxxxxxxx Xxxx Xxxxxx Xxxxxxxxxx Aberration Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx analýzy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx vivo je xxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v buňkách xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx hlodavců (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx vyvolávat xxxxxxxxx xxxxxxx. Aberace xxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx rovněž. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx jsou xxxxxxxx řady genetických xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, že xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx x tumorsupresorových xxxxxx, hrají úlohu xxx xxxxxxxx x xxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxxxxx systémech.
X xxxxxx testu xx xxxxx xxxxxxxxx hlodavci. Xxxxxxx xxxxx x xxx je xxxxxx xxxx, xxxxxxx se xxxxx o xxxx xxxxxx vaskularizovanou, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, jež xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx druhy x xxxxxx xxxxx xx x tomto xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, protože xxxxxxxx brát x xxxxx xxxxxxx metabolismu xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x procesů reparace XXX, i xxxx xxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx je také xxxxxx xxx další xxxxxxx mutagenního efektu, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx doklady x tom, že xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Aberace xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx xxxx zlom x xxxxxxxx spojení xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx aberace typu xxxxxxxxxxx chromozóm, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Zlom xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx za předpokladu, xx xxxxxxx xxxxxx xx struktuře chromatidy xx xxxxx, než xx xxxxx poškozené xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x případech, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment v xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx hodnoceného xxxxxxxxxx je kratší x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, kde xx S-fázi replikace XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx mitózy, xxxxx xxxxxx další S-fáze. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx šířka xxxxx chromatidy x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx index: xxxxx buněk x xxxxxxxx dělený xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx buněčné xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx populace.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (n) xxxx xxxxxxxxx xxxxx (tedy 3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látce x xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx se xxxxxx. Před usmrcením xx na ně xxxxxx xxxxxx zastavující xxxxxxxx (například xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). X xxxxx kostní xxxxx xx pak připraví xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, myši x xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx použít x jakýkoliv jiný xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx minimální x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % průměrné xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx chovu
Xxxxxxxxx xxxxxxxx chovu xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X, xxxxxxx xx měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělí xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx x experimentální xxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x kde jsou xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx jednoznačně xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx pěti xxx xx zvířata xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.1.4 Příprava xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x pevném xxxxx, xxxx podáním xxxxxxxx xx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx mohou xxxxxxx xxxxx nebo xx před podáváním xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx prokazují, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx testu
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xx xxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx o kompatibilitě x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx je to xxxxx, bylo na xxxxxx xxxxx použito xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xx měly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo při xxxxxxx, kdy xxx xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrole xx xxxx tak, aby xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zakódovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx způsobem xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx odebírat v xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx je xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu:
Látka | XXX | EINECS |
ethyl xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx nitrosomočovina | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 |
cyklofosfamid | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx by xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx chromozómových aberací x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx u xxxxxxxxxxx kontrol xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx interval odběru xxxxxx. Mimoto je xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxx prokazující, xx zvolené xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nepříznivé nebo xxxxxxxxx účinky.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx a xxxxxxx xxxxxx
V xxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx pět xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pohlaví. Xxxxx v době, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, existují xxxxx x stejném xxxxxxxxxx xxxxx x použití xxxxxxxx xxxxxxx expozice xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx pohlavími nejsou x toxicitě xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx humánní expozice xxxxxxxxx xxxxxx může xxx závislá xx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx farmaceutických xxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxx xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x objemnou dávku, xxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx dávky za xxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Jiné režimy xxxxxxxxx musejí být xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx časových xxxxxxxxxxx xx podání xxxxx xxx. X xxxxxxxx xx první xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu (xxxxx xxxx obvykle 12 - 18 xxxxx) xx podání xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxx xxxx xx kinetiku buněčného xxxxx mohou ovlivnit xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx chromozómových xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xx 24 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x daném xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx den, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxxx xxxxx normálního xxxxxxxxx cyklu xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx intraperitoneálně injikuje xxxxxx dávka Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorky. X xxxx je xxxxx xxxxxxxx zhruba 3 - 5 xxxxx, u xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4 - 5 hodin. X xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx buňky x zjišťují xx x nich chromozómové xxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, protože xxxxxx x xxxxxxxxx žádné xxxxxx údaje, xx xxxxx ji xxxxxxxx x téže xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, kmene, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, jaké xx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx (5). Při xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx pro první xxxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx xxx dávky xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx pozdější xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx pak třeba xxxxxx xxxxx nejvyšší xxxxx. Ta xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx dávkách ve xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Látky, jež x xxxxxxx netoxických xxxxxxx vykazují specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx hormony xxxx xxxxxxxx, mohou představovat x těchto xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx případ xx případu. Nejvyšší xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (např. xxxxxx xxxxxxxxxxx indexu x xxxx xxx 50 %).
1.5.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxx test při xxxxx minimálně 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx dávce nebo xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x jeden xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxxxxx se xx xxxxxxx údajů x látkách s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx provedena celá xxxxxx za xxxxxxx xxx xxxxxxxxx úrovní. Xxx xxxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx dávka 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xx xxx xxx xxxx xxxxxx do 14 dnů, x 1&xxxx;000 xx/xx hmotnosti xxx xxxx trvání xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx očekávané xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx zapotřebí xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx dávkové xxxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se obvykle xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. V odůvodněných xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x xxxx způsoby xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx najednou xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x xxxxxxxxx; vyšší xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx zvířete se xxxxxxx kostní dřeň, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx roztokem a xxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx buněk xx xxxxxx na podložní xxxx a obarví xx.
1.5.7 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx cytotoxicity xx x všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
X každého jedince xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx při xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxx (xxxxxx pozitivních x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. Xxxxxxx xxx jejich xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metafází xxxxxxxxx xx xxxxxxx chromozómů, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx v hodnocených xxxxxxx 2x ± 2.
2. ÚDAJE
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Údaje xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx jedinec. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx aberací xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx zvlášť x registrují se, xxx obvykle xx xx celkové frekvence xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx doklady x xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx rozdílně, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx analýzu xxxxxxx.
2.2 Vyhodnocení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované látky xxxxxxx frekvence xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx aberacemi, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx buněk s xxxxxxxxx xx xxxxxxx x jednorázovou xxxxxx xxx xxxxxx časovém xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx je xxxxx xxxxxx biologickou významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu se xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné výsledky xx xxxxx vyjasnit xxxxxx testováním, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Nárůst počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx mitotické procesy x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx fáze xxxxxxxxx xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, xx v xxxxx systému xxxxxxxx xx nemutagenní.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx poskytuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx případech xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx dat xxxxxxx x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx xx experiment několikrát xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx xxxxxxxxxxxx aberace nevyvolává.
Xx xxxxx xxxx x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx x průběhu xxxxxx xx třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x pohlaví xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek xxx jednotlivé xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx rozpětí, xxxx-xx provedena,
- xxxxxxxxxx volby velikosti xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx metody x xxxxxxx, že se xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx oběhu xxxx xx cílové xxxxx,
- xxxxxxxx převod xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx skutečnou xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x vody,
- podrobný popis xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxx vzorků,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, její xxxxxxxxxxx x doba xxxxxxxx,
- metody xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx preparátů,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aberací,
- xxxxx analyzovaných xxxxx xx jedno zvíře,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx xxxx nejednoznačná.
Xxxxxxxx:
- známky toxicity,
- xxxxxxxxx index,
- xxx x xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx, xxxxxx průměr x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek.
- xxxxx xx xxxxxxxxxx pozitivních kontrol,
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Závěry.
B.12. MUTAGENITA - XX XXXX XXXXXXXXXXXX XXXX X XXXXXXX ERYTROCYTECH
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 474, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Mikronukleus xxxx xx xxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxx v mitotickém xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxx xxxxxxx x xxx, xx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z kostní xxxxx xxxx. x xxxxxxxxx krve xxxxxx, xxxxxxx hlodavců.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx výsledkem xx xxxxx mikrojader představujících xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx chromozómů.
Xxxx x erytroblastu kostní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx x buňky vyloučeno; xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx vzniklé xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx buňkám jádro xxxxx. Xxxxxx četnosti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx důkazem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
V xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx tvoří. Xxxxxxx xxxxxxxxx (polychromních) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxx slezina xxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx je tento xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx rozlišovat xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx přítomnost xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxx DNA x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxx počet xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx krvi xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx hodnotu použít x xxxxxxx, xx xx zvířata xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx týdnů.
Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx u xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vivo, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x xxxx xxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx efektem xxxxxxx. Test xx xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx předtím xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x tom, xx se xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx metabolit xx xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): oblasti xxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx vlákna xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Mikrojádro (xxxxxxxxxxxx): xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx reprezentovaná opožďujícími xx fragmenty chromozómů xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx erytrocyt: zralý xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx dosud xxxxxxxx ribozómy, xxxxx xxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pomocí barviva xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx používá xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx ve xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxx usmrtí, xxxxxx xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, jež xx xxxxxx (1-7). Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xx xxxxxx xxxx xx působení xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxx, jež xx xxxxxx (4) (8) (9) (10). V xxxxxxxxxxxxx, xx kterých xx používá xxxxxxxxx xxxx, musí xxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx zpracování xxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx přítomnost xxxxxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx používá xxxxxx dřeň, xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx myši nebo xxxxxxx; může však xxx použit xxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx-xx se periferní xxxx, doporučují xx xxxx. Lze xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx nebo že x xxx xxxx xxxxxxxxx dostatečná citlivost xxxx xxxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by při xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a x každého xxxxxxx xxxxxx přesahovat ± 20 % průměrné xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jsou uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x části X.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Zdraví xxxxx dospělí xxxxxxx xx náhodně rozdělí xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx jednoznačně označí x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx zvířata aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, jak x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Příprava xxxxx
Je-li testovaná xxxxx x xxxxxx xxxxx x je-li xx možné, xxxxx xx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) prokazují, xx xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.2 Podmínky xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx a nesmí x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Používá-li xx xxxxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x testovanou látkou. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx je to xxxxx, xxxx na xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx testu je xxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
U xxxxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx in vivo xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Dávky xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, ale přitom xxxxxxxxxxxx hodnotiteli xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx preparátu. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx možné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx testovanou látku x xxxxxx odebírat x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Kde je xx možné, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx testovaná látka. Xxxxxxxx látek xxxxxxxx xxx pozitivní kontrolu:
Xxxxx | CAS | XXXXXX |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
X-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
mitomycin X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx být xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje x frekvenci xxxxx x xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx zvířaty. Xxxxxxxx-xx xx x negativních xxxxxxx xxxxx jeden xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx dobou první xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x neovlivněných xxxxxxx, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx rozpouštědlo, nebo xxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx xxxx mutagenní xxxxxx.
Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxx xxxx souběžná xxxxxxxxx kontrola xxxxxxxxxx x xxxxxx odebraný xxxx působením xxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxx krátkodobých xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 1 - 3 dávky), xxx xxxxxxxx xxxxx leží x očekávaném xxxxxxx xxxxxxxxxx kontroly.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X každé xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx pohlaví (11). Xxxxx x xxxx, kdy xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx způsobů xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, kde humánní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx může xxx závislá xx xxxxxxx, jak je xxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx doporučit xxxxx standardní rozvrh (xxxx. xxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxx x 24xxxxxxxxxx intervalech). Xxx použít delší xxxxxxxxx schémata, xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx neprokáže xxxxxxxxx xxxxx; v xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx, až xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxx x xxxxxxxx dávku xxxxxxxxx xxxxx, může xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx rozdělit, například xx xxx xxxxx xx xxx podané x rozmezí nanejvýše xxxxxxxx xxxxx.
Test xx xxxx provádět xxxxx způsoby:
(a) Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx látkou xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, poprvé xx xxxxx xxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx vzorků. Xxxxx xx vzorky xxxxxxxx xxxxx xxx xx 24 xxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxxxx. Vzorky xxxxxxxxx krve xx xxxxxxxx xxxxxxxxx dvakrát, xxxxxx ne xxxxx xxx xx 36 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, se xxxxxxxx xxxxxxxxx po prvním xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxx 72 xxxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxx časovém intervalu xxxxxx pozitivní odpověď, xxxx xxx další xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx za xxx (xxxx. xxx xxxx xxxx dávek ve 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), odeberou xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx 18 x 24 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx a v xxxxxxx periferní xxxx xxxxxx xxxx 36 x 48 hodinami xx posledním xxxxxx xxxxx (12).
Xx-xx xx xxxxxxxxxx, mohou xx mimoto xxxxxx x xxxxx odběrové xxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx stejného xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx použijí x xxxxxx studii (13). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx užívají xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx dávky xxx, xxx xxxxxxxxx rozmezí xx maximální xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxx třeba použít xxxxx nejvyšší dávku. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx by xxxxxx byly xxxxxxx. Xxxxx, xxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx od případu. Xxxxxxxx dávka xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx dávka, xxxxx xxxx k určitým xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx erytrocytů x xxxxxx dřeni xxxx. xxxxxxxxx xxxx).
1.5.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx x xxxxx dávce xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x jestliže xx xx xxxxxxx xxxxx x látkách x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx neočekává genotoxicita, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx studie xx xxxxxxx tří xxxxxxxxx xxxxxx. Pro dlouhodobé xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx xx den xxx době trvání xx 14 dnů, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 14 dnů. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx expozice xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx dávkové úrovně xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vpravuje xxx xxxxxxxxx sondou, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekcí. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx x xxxx způsoby xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx kapaliny, xxxxx xx xx xxxxxx nebo injekcí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx velikosti pokusného xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx účinky, xx xxxxx upravit xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx se tak xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Příprava xxxxxx xxxxx / xxxx
Buňky xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x femuru xxxx tibie xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx způsobem se xxxxxx dřeň xxxxx x femuru nebo xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx a obarví xxxxxxxxxx metodami. Periferní xxxx xx získává x ocasní žíly xxxx xxxx vhodné xxxx. Krevní xxxxx xx xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (8) (9) (10), xxxx se xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx XXX (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxx (14) nebo Xxxxxxx 33258 x xxxxxxxxx-X (15)) xx xxxxx eliminovat xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx není DNA xxxxxxxxxx. Xxxx výhoda xxxxxxxxx, xx xx xx nedala xxxxxx xxxxx barviva (např. Xxxxxx). Xxx xxxxxx x xxxxx systémy - xxxxxxxxx xxxxxx xx sloupcem xxxxxxxx x xxxxxxxxxx buněk x xxxxxx (16) - xxxxx xxxx xxxxxx jsou x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx analýzu mikrojader.
1.5.7 Xxxxxxx
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). X tomuto xxxxx xx xxxxxx x případě kostní xxxxx minimálně 200 xxxxxxxxxx a x xxxxxxx použití periferní xxxx xxxxxxxxx 1000 xxxxxxxxxx (17). Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 2000 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x zaznamená se xxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxx, xx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx menší než 20 % xxxxxxx x xxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx dobu xxxx xxxxx xxxx xxxxx, lze xxxx xxxxx mikrojader xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx 2000 xxxxxxx erytrocytů xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (analýza xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx - xxxx cytometry), pokud xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxx čtyř týdnů xxxx déle, xx xxxxx xxxxx také xxxxx x zralých xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového xxxxx erytrocytů x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Nejsou-li žádné xxxxxxx o xxx, xx obě xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xx xxx pohlaví pro xxxxxxxxxxxx analýzu xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x mikrojádry nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx dávkou xxx xxxxxx xxxxxxx intervalu xxxxxx vzorků. Nejprve xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné výsledky xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx modifikovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jejímž xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx systému xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx výsledky, x ojedinělých případech xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx xx experiment xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx tvorbu mikrojader, xxxx xxxxxxxx chromozómového xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aparátu v xxxxxxxxxxxxxx testovaného xxxxxxxxx xxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx příslušného xxxxxxxxxxx druhu nevyvolává xxxxx mikrojader v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Je xxxxx xxxxxxxx, jaká xx pravděpodobnost, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxx
- rozpustnost x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx druh/kmen,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx jedinců,
- xxxxx, chovné podmínky, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- pozitivní x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,
- údaje ze xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x přípravě xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx cesty podávání,
- případné xxxxxx x xxxxxxx, že xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx do xxxxxx xxxxx,
- případný xxxxxx xxxxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) xx faktickou xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx potravy a xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx preparátů,
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx nejednoznačná.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx,
- počet xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - účinek, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxx statistické xxxxxxx x xxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx x historických xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.13/14. XXXXXXXXXX - XXXX REVERZNÍCH XXXXXX X XXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxx xxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x detekci xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (auxotrofní xx vztahu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxx Escherichia coli (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x aminokyselině tryptofan). Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx genové xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx bakteriálních kmenů (1) (2) (3). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mutací xxxxxxx x tom, xx xx xxxxxxxx mutace, xxxxx zpětně vracejí xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx aminokyselinu. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx základě xxx xxxxxxxxxx růst xx xxxxxxxxxxxxx aminokyseliny, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.
Genové mutace xxxx u člověka xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx doklady xxxx, xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxx supresorových xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx roli xxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx mutace je xxxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxxxx kmenů xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx mutací, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx a eliminace xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xxx xxxx náchylné x xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kmenů xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx užitečné xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látkami. Xxx xxxxxxxxxxx testy xxxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx výsledků xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx chemikálií x různých xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx chemikálií xxxxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo Xxxxxxxxxxx xxxx slouží ke xxxxxxxx mutací v xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx), xxx xxxxx xx vzniku xxxxx, který je xx dodávce aminokyseliny xxxxxx nezávislý.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx substituci páru xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx změnu xxxx x XXX. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx x takové xxxxx xxxxx xx místě xxxxxxx xxxxxx nebo xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (mutageny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mutace) xxxx xxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxx xxxx x XXX, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxx x RNA.
1.3 XXXXXXX XXXXX
X bakteriálním xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx xxxx v xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx DNA. Xxxxx xx xxxxx xxxxxx vyžadují xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx aktivace. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx imitovat xxxxx xxxxxxxx xx xxxx, xxxxx test xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x mutagenní x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx dané xxxxx v organismech xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx screenin xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x zvláště xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx genové xxxxxx. Pomocí rozsáhlé xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx mnohé chemikálie, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx pozitivní, xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx ovšem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxx xxxxxx nedostatku xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo rozdíly x biologické dostupnosti. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx mutací může xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx chemických xxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxxxx některé xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (kupříkladu xxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxx, o nichž xx xxxxxxxxxxx nebo xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx replikační xxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx inhibitory topoizomerázy xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx); x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx x savců.
Xxxxx xxxxxxxxxx, jež xxxx při xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, jsou xxxxxxxx karcinogenní xxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx; xxxxxx xx chemické třídě, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x bakteriálních xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx vystaví xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxxx exogenního xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace. Xxx xxxxxxxx miskové xxxxxx "xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xx suspenze smísí x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx půdou. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxx s xxxxxxx xxxxxx x xx potom xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxx xxxx xxxxxxxx se xxx xx tři xxx xx inkubaci xxxxxxxxxxx kolonie spočítají x xxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx revertujících xxxxxxx xx kontrolních miskách x rozpouštědlem.
Je xxxxxxx několik xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxx nejběžnější xxxx klasická misková xxxxxx ["xxxxx incorporation"] (1) (2) (3) (4), xxxxxxxxxxxx metoda (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) a xxxxxxxxx xxxxxx (11). Xxxx xxxx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxx pro testování xxxxx xxxx xxx (12).
Postupy xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx týkají hlavně xxxxxx plate xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxx přijatelné xxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací, xxx xxx xx. Některé xxxxx xx detekují xxxxxxxx preinkubační xxxxxxx; xxxxx se o xxxxxxxx xxxxx, kam xxxxxxx xxxxxxxxxx nitrosaminy x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, aldehydy, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3). Xxxx xxxx xxxxxxxx, že existují xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx procedur xxxx xxxxxxxx. Na xx xx xxxxx xxxxxxxx jako xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx použít jiných xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "speciální xxxxxxx" (xxxxx x příklady xxxxxxx, které xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx): azobarviva x diazosloučeniny (3) (5) (6) (13), xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx od xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5. XXXXX XXXXXX
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Bakterie
Xxxxxxx bakteriální xxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx exponenciálního xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx 109 xxxxx/xx). Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stadiu xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Titr xx xx xxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx růstových xxxxxx, xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 37xX.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx pět bakteriálních xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx X. typhimurium (XX 1535; TA 1537 xxxx XX97x xxxx 1X97; XX98; x XX100); u xxxxx xxxx xxxxxxxxx spolehlivost x xxxxxxxxxxxxxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx čtyři kmeny X. xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx XX x xx xxxxx, xx nemusejí detekovat xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx vyvolávající křížové xxxxx x hydraziny. Xxxx látky xx xxxx detekovat pomocí xxxxx X. coli XX2 nebo X. xxxxxxxxxxx XX102 (19), xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx XX. Xxxxx je doporučená xxxxxxxxx kmenů xxxx:
- S. xxxxxxxxxxx XX1535 a
- X. typhimurium TA1537 xxxx XX97 nebo XX97x a
- X. xxxxxxxxxxx XX98 x
- S. xxxxxxxxxxx XX100 x
- E. xxxx XX2 xxxX xxxx X. coli WP2 xxxX (xXX101) nebo X. xxxxxxxxxxx TA102.
X detekci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vazby xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxx XX102 xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx E. xxxx (např. X. xxxx XX2 xxxx X. xxxx XX2 (xXX101)).
Je třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx kultury, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx závislost xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxx (xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx kmenů X. xxxx). Xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx fenotypické xxxxxxxxxxxxxxx, x xx: xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx X-xxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx v xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx XX98, XX100 x TA97a xxxx XX97, WP2 xxxX (xXX101) x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx + xxxxxxxxxxxx x kmene XX 102); xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx. xxx xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx krystalové xxxxxxx a uvrA xxxxxx x E. xxxx xxxx xxxX xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx ultrafialové xxxxxx) (2) (3). Použité xxxxx mají xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx kontrolních xxx xxxx laboratoře x xxxxx xxxxx x x rozmezí xxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
1.5.1.2 Médium
Xxxxxxx xx vhodný xxxxxxxxx xxxx (např. x Vogelovým-Bonnerovým xxxxxxxxxx xxxxxx X x xxxxxxxx) x xxxxxx xxxx obsahující xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx umožňující několik xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).
1.5.1.3 Metabolická xxxxxxxx
Bakterie xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx jak xx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) připravená z xxxxx hlodavců xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx fenobarbitalu x ß-naftoflavonu (18) (20) (21). Post-mitochondriální xxxxxx xx obvykle xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 30 % x/x xx směsi X9. Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx použít redukční xxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace (6) (13).
1.5.1.4 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxx látky xx xxxx působením xx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo vehikulu x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx přidávat xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx používat čerstvé xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stabilitě xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx přijatelné.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.5.2.1 Xxxxxxx xxxxx (xxx 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxx
Ke xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx vzít x xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx x rozpustnost x xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxx použije.
Xxxx xxx účelné xxxxxxxx xxxxxxxx x nerozpustnost x předběžném experimentu. Xxxxxxxxxxxx se dá xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx pozadí nebo xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kultur. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pokusná xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx necytotoxických látek 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxx koncentracích xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx několik xxxxxxxxxxx mělo xxx x konečné pokusné xxxxx nerozpustných. Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx resp. 5 µl/misku, xx xxxxxxx až do xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Sraženina xxxxx xxxxx při xxxxxxxxxxxxx.
Používá xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. √10) xxxx xxxxxxxxxxxx body x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Testování xx xxxxxxxxxxx vyšších xxx 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx xxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxx podstatné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Každý test xxxx xxxxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx nebo vehikulum) xxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací, tak xxx ní. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx koncentrace, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
U xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu volí xxxxx použitého xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx x testech x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:
Xxxxx | CAS | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 |
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx vhodnou xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
Xxxxx | CAS | XXXXXX |
Xxxxx xxxxxx | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-xxxxxxxxxxxxx xx nepoužívá jako xxxxxx indikátor xxxxxxxxx xxxxx X9. Pokud xx 2-xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx třeba každou xxxxx S9 xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, jež jsou xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní kontrolu x testech xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx tato xxxxxxx:
Xxxxx | CAS | XXXXXX | |
Xxxx xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 a XX 100 |
2-xxxxxxxxxxxx | 607-57-8 | 210-138-5 | TA 98 |
9-xxxxxxxxxxxx | 90-45-9 | 201-995-6 | XX 1537, XX 97 x XX 97x |
ICR 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, XX 97 x XX 97x |
xxxxx-xxxxxxxxxxxx | 80-15-9 | 201-254-7 | TA 102 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 | WP uvrA x TA 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, XX2xxxX a XX2xxxX (xXX101) |
4-nitrochinolin-1-oxid | 56-57-5 | 200-281-1 | XX2, XX2xxxX a WP2uvrA (xXX101) |
Xxxxxxxxxxxx (XX2) | 3688-53-7 | kmeny xxxxxxxxxx plazmidy |
X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx i jiné xxxxxx xxxxxxxxxx látky. Xxxx-xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx použití xxxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx x negativní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xx jinak zachází xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxx či xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.3 XXXXXX
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4) bez metabolické xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx bakteriální xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x 0,5 ml sterilního xxxxx a 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. X testech s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx 0,5 xx metabolické xxxxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (x rozmezí 5 - 30 % x/x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) x 2,0 ml xxxxxxxx xxxxx společně s xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx /xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx zkumavky xx promísí x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Vrchní agar xx xxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxx.
Při xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx testovaná látka / testovaný roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx kmenem (obsahujícím xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) a sterilním xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem (0,5 xx) xxxxxxx po xxxx 20 xxx xxxx xxxx při 30 - 37 xX; xxxxx se xxxxx s vrchním xxxxxx a nalije xx xxxxx x xxxxxxxxxx agarem. Obvykle xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxx látky / xxxxxxxxxxx roztoku 0,1 xx bakterií a 0,5 xx xxxxx X9 nebo sterilního xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx agaru. Xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx pro xxxxxx xxxxx očkují xxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx náhodně xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Plynné nebo xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx použití xxxxxxxx postupů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx nádobách (12) (14) (15) (16).
1.5.4 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx teplotě 37 oC xxx xxxx 48 - 72 xxxxx, načež xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx každé xxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xx xxxxx misku. Xxxxxx xx uvede xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx jak x xxxxxxxxx kontroly (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxx), xxx z xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (resp. xxx xxxxxxxx rozpouštědlo) xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx misky x průměrný xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx včetně xxxxxxxxxx odchylky.
Xxxxxxxxxx xxxxxx pozitivní xxxxxx xx nepožaduje. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx potvrdit xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nepovažuje xx nutné, je xxxxx to xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx experimentech xx xxxxx zvážit xxxxxxxxxx studijních xxxxxxxxx xxx, aby se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx modifikovat, xxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx působení ("xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xxxx preinkubace x xxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx několik kritérií, xxxxxxxxx xxxxxxx závislý xxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxxxxx x/xxxx reprodukovatelný xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x minimálně xxxxxxx xxxxx x metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxx xxx (23). Xxxx xxxxx xx xxxxxxx biologická relevance xxxxxxxx. Jako xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (24), xxxxxxxxxxx významnost xx však xxxxxx xxx xxxxxxx určujícím xxxxxxxx pro pozitivní xxxxxx.
Testovaná xxxxx, xxxxx xxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují, xx v xxxxx xxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx.
Většina xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx závěr. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo problematické, x když se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.
Xxxxxxxxx výsledky bakteriálního xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx vyvolává xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx posuzovaných xxxxxx v xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, že xx daných zkušebních xxxxxxxx xxxx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx mutagenní.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxx xxxxx (v xx xxxx μx) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x počtu xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx,
-xxx x xxxxxxx systému metabolické xxxxxxxx (včetně kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx počet revertantních xxxxxxx xx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- vztah xxxxx-xxxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních kontrol xxxxxx rozpětí, průměrů x xxxxxxxxxxxx odchylek,
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx odchylek.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.15. GENOVÉ XXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae mohou xxx užity xxx xxxxxx xxxxxxxx genových xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx a x metabolickou xxxxxxxx.
Xxxx využívány xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx z červených, xxxxxx vyžadující xxxxxx (xxx-1, ade-2) na xxxxxxx, adenin vyžadující xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx ověřený xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx využití haploidního xxxxx XX 185-14 X x okrovými (xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 2-1, arg 4-17, lys 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx typu xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx místě, nebo xxxxxx supresorové xxxxxx. XX185-14X xxxx rovněž xxx 1-7 xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, revertovanou xxxxxxxx mutacemi x xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxx 3-10, xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
U xxxxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx využívaným kmenem X7, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxx 1-92.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a kontrol xxxx xxx připraveny xxxxx xxxx testováním xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X organických xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx vyšší xxx 2 objemová % x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxx exponovány xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x přítomnosti, xxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx postmitochondriální frakce xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx po aplikaci xxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx jiných druhů, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx metabolickou xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx kmen XX 158-14X a xxxxxxxxx kmen X7 xxxx nejužívanější pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx kultivační xxxxx xxxx xxxxxxx xxx určení xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pozitivní, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látky.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Má xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Látky xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx až po xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xxx látky netoxické, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx případ xx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxx 28 xx 30 xX xx tmě.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Počet xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x testu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x x životnosti xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx markery xxxx xxx 3-10 x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Ovlivnění xxxxx X. xxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxx x tekutém xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxx stacionární xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx: 1-5 x 107 xxxxx/xx je xxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxx xx 18 h. při 28 až 30 xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx systému je xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x vyočkovány xx xxxxxx xxxxxxxxxx médium. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxx genových xxxxxx.
Xxxxxxxx xx první xxxxx negativní, má xxx proveden xxxxx xxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx první xxxxx xxxxxxxxx, je xxxxxxxx dalším xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x tabulkové xxxxx a zahrnují xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, přežívajících buněk x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx nezávislým xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx metodami.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx informace x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx,
- podmínkách xxxxx: xxxxx xx stacionární xxxx xxxx rostoucí, xxxxxxx xxxxx, teplota x trvání inkubace, xxxxxxxxxxx aktivační xxxxxx,
- xxxxxxxxx vlastního xxxxxxxxxxx: hladina xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, přežívajících xxxxx x frekvenci mutací, xxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.16. MITOTICKÁ XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxxx mezi xxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx) x uvnitř xxxx. Xxxxx xxxxxx xx nazýván mitotické xxxxxxxxxx x vytváří xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Překřížení xx xxxxxx testováno na xxxxxxx tvorby xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx vzniklých u xxxxxxxxxxxxxxx kmenů, genová xxxxxxxx je xxxxxxxxx xx xxxxxxx tvorby xxxxxxxxxxxxx revertant xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx heteroalelického xxxxx, xxxxx nese xxx různé defektní xxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx jsou X4 (heteroalelický x xxx 2 a xxx 5), D7 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 5), XX34 (xxxxxxxxxxxxxx x arg 4) x JD1 (heteroalelický x xxx 4 x trp 5). Xxxxxxxxx překřížení xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx může být xxxxxxxxx x D5 xxxx D7 (xxxxx xxxxxx xxxx mitotickou xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxx 1-92). Oba xxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx 2.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Roztoky xxxxxxxxxxx látek x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx za použití xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx látek ve xxxx nerozpustných xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, jako xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx mají xxx xxxxxxxxx působení testovaných xxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx v xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx po aplikaci xxxxx indikujících enzymy x doplněná xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx postupů xxxx xxx rovněž xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx X4, X5, D7 a XX1. Xxxxx jiných xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Média
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontroly
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látky.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx být xxxxxxx nejméně 5 xxxxxx zvolených koncentrací. Xxxx být xxxx xxxxx xx cytotoxicitu x rozpustnost. Nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxx mít xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxx xxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx testovány xx xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro látky xxxxxxxxx, xx vodě xxxxxxxxx, je určena xxxxxx xx případu.
Xxxxx mohou být xxxxxxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx xxx stacionární xxxx, nebo xxxxx xxxxx xx dobu xx 18 x. Xxxxxxx dlouhodobě xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Podmínky xxxxxxxx
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx ve xxx xx čtyři xx xxxx xxx xxx 28 - 30 xX. Xxxxx xxxxxxx xxx průkaz xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx překřížením xxxx být xxxxxxxx x chladničce (xxx 4 xX) xx xxxxx 1 - 2 dny před xxxxxxxxx, xxx xx xxxxx utvořit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx rekombinace
Xxxx být xxxxx xxxxxxxxxx x frekvencí xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx replikací
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx xx xxxxx koncentraci x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx mitotickou xxxxxxx xxxxxxxx a xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. V případě xxxxxxxxx recesivní xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.8 Xxxxxx
Xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxx xxxxxxx obvykle xxxx xxxxxxxxxx test x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx pokusy mají xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. 1-5 x 107 buněk/ml xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx to xxxxxxxx.
Xx skončení ovlivnění xxxx xxxxx centrifugovány, xxxxxxx x vyočkovány xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx inkubaci xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x buňky x indukcí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Jestliže je xxxxx xxxxx negativní, xx xxx proveden xxxxx pokus s xxxxxxx xx stacionární xxxx. Jestliže xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx dalším xxxxxxx nezávislým xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx formě x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx a frekvenci xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx experimentu.
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu pokusu
Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: buňky xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx experimentu: hladina xxxxxxxx, postup x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly,
- počet xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, vztah xxxxx x účinku, pokud xx to xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.17. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXX MUTACÍ X SAVČÍCH XXXXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX TG 476, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxx Xxxx Xxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xx xx používat xx zjišťování xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx chemickými xxxxxxx. Mezi vhodné xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx X5178X, xxxxx XXX, XXX-XX52 x V79 xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx lymfoblastoidní xxxxx XX6 (1). X těchto buněčných xxxxx se xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x thymidinkináze (TK) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x v xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Testy mutací x XX, HPRT x XXXX se xxxxxxxx různá xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XX x XXXX může xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx změny (např. xxxxx xxxxxx), xxxxx xx na xxxxxx XXXX chromozomů X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
X xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx vitro xx dají xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx buněčných xxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxx růstové xxxxxxxxxx dané xxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx in xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx systém xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx vivo dokonale. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, za xxxxxxx by výsledky xxxxxxxxxx xxxxxxx mutagenitu. X pozitivním xxxxxxxxx, xxx xxxxxx důsledkem xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xX, osmolality xx xxxxxx cytotoxicity (7).
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx screeningu xxxxxxx xxxxxxx mutagenů x xxxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxx, xxxxx jsou x xxxxx testu xxxxxxxxx, jsou savčími xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx korelace xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx stále více xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxx karcinogeny, které xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx jiným, xxxxxxxxxxxxxx mechanismem xx xxxxxxxxxxx, který v xxxxxxxxxxxxx buňkách xxxxxxxx (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx formy, jež xxxx ke změně xxxx ztrátě enzymatické xxxxxxxx xxxxxxxxxx proteinu.
Mutageny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx: látky xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx páru bází x XXX.
Xxxxxxxxxx mutageny (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): látky, xxx xxxxxxxxx přidání nebo xxxxxx xxxxxxx nebo xxxx párů xxxx x XXX.
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: období, během xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx nezměněné xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx mutovaných xxxxx xxxxxx počtem xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: xxxxxx xxxxx xxxxx x čase x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx buněk; xxxxxxxxxx xx jako součin xxxxxxxxx suspenzního růstu (x porovnání x xxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti xxxxxxx efficiency (x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx suspenzní xxxx: xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx: xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx xxxxxxxxxx) ovlivněných xxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx působení xxxxx; vyjadřuje xx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxx, xxxxxxxxxxx xx thymidinkinázu (TK) x xxxxxxxx mutace XX+/- → XX-/-, xxxx rezistentní vůči xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX). Xxxxx produkující xxxxxxxxxxxxxx xxxx vůči TFT xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx metabolismu x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Za xxxxxxxxxxx XXX xxxxx xxxxx proliferovat xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx normální xxxxx, obsahující thymidinkinázu, xxxxxxxxxxxx nemohou. Podobně xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx XXXX xxxx XXXX selekčně xxxxxxxxxxx xxxx 6-thioguaninu (XX) xxxx 8-azaguaninu (AG). Xxxxx xx xxxxxx xxxx nebo sloučenina xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx analyzována v xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx buňkách, xx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx každé podezření xx selekční xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x mutacemi x bez xxxx. Xxxxxxx-xx se tedy xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příbuzné xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).
Xxxxx x suspenzi xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx dobu xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x bez xx a xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x k xxxxxxx fenotypické exprese xxxx výběrem xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx xxxxxxxxx klonovací xxxxxxxxx (xxxxxxx) (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx relativního xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx působení látky. Xxxxxxx xx ponechají x růstovém xxxxx xx xxxxxxxxxxx dobu, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx daný xxxxx x xxx xxxxx, aby xxxxx xxxxx x co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx známého počtu xxxxx v médiu xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xx stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx frekvence se xxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxxx v neselekčním xxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Buňky
Dá xx xxxxxx xxxx řada xxxxxxxxx typů, xxxxxx xxxxxxxx buněk X5171X, XXX, XXX-XX52, X79 x TK6. X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x tomto xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (cloning efficiency) x stabilní frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xx kontroluje, xxx nejsou kontaminovány xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, aby xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx (xxxxx). Xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx parametrům xxxxxxxxx (14). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx dán frekvencí xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx použít xxxxxxx 106 buněk. Xxxx xx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje, xxxxxxx xx xx prokázala xxxxxxxxxxxxx zvládnutí xxxxx.
1.4.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxx xxxxxxxxxx média x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx x vlhkost). Xxxxx xx xxx xxxx xxxx podle xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx je, aby xxxxxxxx kultivace zajišťovaly xxxxxxxxx xxxx buněk xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolonie.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx kultivačního xxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 xX. Xxxx provedením xxxxx, je xxxxx xxxxxxx zbavit xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.4 Metabolická xxxxxxxx
Xx xxxxx xx xxxxxxxxxx látkou xxxxxx x přítomnosti i x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) připravená x xxxxx hlodavců, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx fenobarbitalu x β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mitochondriální xxxxxx x xxxxx činí xxxxxxx 1 - 10% x/x. Aktivita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxx xx testovaná chemikálie. X xxxxxxxxx případech xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx modifikované buněčné xxxxx exprimující specifické xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (např. vztahem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x xxxxxxxxxxx testované xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx působením xx xxxxx rozpustí xxxx xx připraví xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xx systému xxxxxxxx xxxxx xxxx xx předtím ředí. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vlastnosti.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
X zvoleného rozpouštědla xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x aktivitu X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxx xxx, xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Je-li xxxxxxxxx xxxxx xx vodě xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sítem.
1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxx kritéria, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx pH xxxx. osmolality.
Cytotoxicita xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx xx x hlavním xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxx integrity x xxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx) nebo xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx experimentech.
Použijí xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, musí xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx znamená, že xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx lišit více xxx xxxxxxxx, který xxxx mezi xxxxxxxxx 2 x √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x cytotoxicity, xxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxx přežití (relativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx růstu x 10-20 %, xx však méně xxx 10 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx maximální xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 mg/ml, 5 μx/xx x 1,01 X.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx xx xxxxxxxxxxx, při xxxxx xx již xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxx xxxxxxxxxxxx xx finálním xxxxxxxxxxx xxxxx xx konci xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Může být xxxxxx xxxxxxxxxx rozpustnost xx začátku x xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx expozice x důsledku xxxxxxxxxxx xxxxx, S9, séra xxx. xxxxx. Nerozpustnost xx xx zjistit x prostým okem. Xxxxxxxxx nesmí xxx xx překážku xxx xxxxxxxxx buněk.
1.4.2.3 Xxxxxxxx
X rámci xxxxxxx experimentu xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (rozpouštědlo, xxxxxxxxx) xxxxxxxx, x xx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx bez xx. Pokud se xxxxxxxx metabolická xxxxxxxx, xxxx xxx pozitivní xxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
XX (xxxx x velké xxxxxxx) | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (malé x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx cyklofosfamidu benzo[a]pyren 3-methylcholantren | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XPRT | N-nitrosodimethylamin (pro xxxxxx koncentrace X-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
xxxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx má například xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (XXX 59-14-3, číslo XXXXXX 200-415-9), lze xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxx, xxx xx xx možné, xx vhodné xxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx skupiny.
Pro každý xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x negativní xxxxxxxx, ve xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx rovněž třeba xxxxxxx kontrolu bez xxxxxxxxxxx ovlivnění, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx buňky xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Expozice xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx působí xxxxxxxxxx xxxxxx jak x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx ní. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx (obvykle xx xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xxxx přesáhnout xxxxx xxxx více buněčných xxxxx.
Xxx xxxxxx koncentraci xx xxxxxxxxx kultury xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxx jedna kultura, xx třeba zvýšit xxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kultur x analýze (tj. xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (rozpouštědlem/vehikulem) xx používají xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx látek xx xxxxx uplatnit x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx uzavřených xxxxxxxxxxxx xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x mutační frekvence
Po xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx expozici xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx - cloning xxxxxxxxxx xxxx relativního xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (HPRT x XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxx 6 - 8 dní, XX xxxxxxxxx 2 xxx). Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx s x xxx selekčního xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx mutantů a xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx doby xxxxxxx xx začne x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxx četnosti xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx x xxxxx X5178X XX+/- xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x experimentálních xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xx xxxxxxxxxxx x pozitivních xxxxxxxxxx xxxxxxxx velikost xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxx i xx xxxxxxxx x XX6XX+/-.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx data xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X případě pozitivní xxxxxx x testu X5178XX+/- se kolonie xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx x pozitivní kontrole. Xxxxxxxxxxx a cytogenetické xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx xxxxx XX+/- xx kolonie xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (velké) x pomalého růstu (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx utrpěly xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, mají xxxxx xxxx xxxxxxxx, x proto xxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxx xxxx xx ztráty xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Tvorba xxxxxx xxxxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx postižené xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx rychlostí xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xx xxxxx uvádět xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnost - xxxxxxxx cloning xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx shrnou x tabelární formě.
Verifikace xxxxxx pozitivní xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx testováním, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Negativní výsledky xx musí xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. X případech, kdy xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nepovažuje xx xxxxx, xx třeba xxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx studie xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. K xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Ke stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx existuje xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické metody. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují výše xxxxxxx xxxxxxxx, se x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní. Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní xxxx negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nelze ze xxxxxxxxx souboru dat xxxxxxx x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx in xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx buněk xxxxxx mutace. Nejprůkaznější xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx dávka - xxxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, že za xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx buněk xxxxxxxxxx genové xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- rozpustnost x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx metody xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx koncentrací x xxxxx xxxxxx, xxxxxx např. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx v rozpustnosti, xxxx-xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
-xxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxx působení látky,
- xxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- délka xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx xxxxx inokulovaných buněk, xxxxxxxxx)
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx zjišťování xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, x nichž xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxx (včetně xxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxx "xxxxxx" x "xxxxxxx" xxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- údaje x xX x xxxxxxxxxx xxxxx působení testované xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx kolonií, xx-xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxx X5178X TK+/-,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x směrodatných odchylek.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.18. XXXXXXXXX XXX REPARACE - XXXXXXXXXXX SYNTÉZA DNA - XXXXX XXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Test xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (XXX) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx xxxxxx a odstranění xxxxx XXX obsahující xxxxxx poškození xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Test xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (3X-XxX) xx XXX xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x X fázi xxxxxxxxx xxxxx. Vzestup 3X-XxX je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metodou (XXX) x xxxxxxxxxxxx buňkách. Xxxxxxxxx se primární xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. UDS xxxx být xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Testované xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxx suspendují x xxxxxxxxxxx médiu xxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk.
Xxxxxxxxx xx pouze xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx linií (xxxxxx diploidní xxxxxxxxxxx).
Xxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Pro xxxxx xxxxxxxxxxxxxx bod xx potřeba nejméně xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxx xxxx, xx-xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxx XXX UDS.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
X xxxxxx experimentu xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly v xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx lze pro xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-DMBA) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-AAF). Jako xxxxxxxxx kontrolu xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxx pro autoradiografii, xxx x xxx XXX xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xxx xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx testované xxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávat toxický xxxxx.
Xxxxx ve xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x koncentracích xx xx xxxxxxx rozpustnosti xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxx netoxické xxxxx ve xxxx xxxxx rozpustné se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx případ xx xxxxxxx.
1.2.2.4 Buňky
Xxx xxxxxxxxx kultur xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx médium, xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Mycoplasmat.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx hepatocytů xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x lymfocyty xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx buněčná xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxxxxxx kultury (xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xx xx kultivačních xxxxx ve vhodné xxxxxxx x inkubuje xxx 37 oC.
Xxxxxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxx, že xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur testované xxxxx
Xxxxxxxx hepatocyty xxxxxxx. Xxxxxxx izolované xxxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x médiu xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxx xxxx. Po ukončené xxxxxxxx xx médium xxxxxxxxxx, xxxxx promyty, xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxx ponořena xx xxxxxxxxxxxxxxxxx emulze (xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx stripping xxxx), xxxxxxxxxx, vyvolána, xxxxxxxx x vyhodnocena.
Stabilizované xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: Xxxxxxx kultury xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx x pak xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 3H-TdR. Xxxx působení xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxx xxxxx. X zachycení xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxx 3X-XxX přidat xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx nebo několik xxxxx xx expozici. Xxxxx xxxx těmito xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx interakcí xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a 3X-XxX. K odlišení xxxx UDS a xxxxxxxxxxxxxxxxx replikací XXX xx užívá arginin xxxxxxxxxxx médium, nízký xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx média, což xxxxxxx inhibici semikonzervativní xxxxxxxxx XXX.
Stanovení XXX xxxxxx XXX: Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx S-fáze, jak xxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx testované xxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx autoradiografii. Xx xxxxx kultivace xx XXX extrahována x xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx DNA x určen xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx uvedených metodách xxxxxx xxxxxxxxx, xx x nestimulovaných xxxxxxxxx xxxxxxx semikonzervativní xxxxxxxxx XXX xxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxx
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxxx UDS v xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx v X-xxxx xxxxxxxxx. Hodnotí se xxxxxxx 50 xxxxx x každém xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx zakódovat xxxx xxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Množství xxxxxxxxxxxxxxx 3X-XxX v cytoplazmě xx xxxx x xxxx x velikosti xxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx hodnocené xxxxx.
1.2.4.2 Vyhodnocení XXX
Xxx xxxxxxxxx XXX XXX xx použije xxxxxxxxx xxxxx kultur xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxx kontroly.
Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
2.1 Xxxxxxxxxxx autoradiografie
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx cytoplazmy x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx jádro xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx inkorporace 3X-XxX xx cytoplazmy a xxxxx zrn v xxxxx xx hodnocen xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Inkorporace 3H-TdR xx zaznamenává xxxx xxx/μx XXX. Xxxxxxxx xxxxxxx xxx/μx XXX xxxxx se směrodatnou xxxxxxxxx xx používají x xxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx kultury, počtu xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- testované xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x experimentu,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systému,
- pokusném schématu,
- pozitivních a xxxxxxxxxxx kontrolách,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx metodách,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx X-xxxx,
- postup xxxxxxxxx x xxxxxxxx XXX x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XXX xxx xxxxxx XXX,
- vztahu xxxxx/xxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- statistickým xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.19. XXX - XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX IN VITRO
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
XXX xx krátkodobý xxxx xxx detekci xxxxxxxxxxxx xxxxx XXX mezi xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxx replikačními xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx zlom x xxxxxxxx spojení, xxx xx zatím xxxx znalostí o xxxxxxxxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxxxx. Xxxxxxx XXX xxxxxxxx diferenční značení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx inkorporací xxxxxxxxxxxxxxxxx (XxxX) xx xxxxxxxxxxxxx XXX na xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Savčí buňky xx vitro jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x přítomnosti x xxx přítomnosti xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xx-xx to xxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx BrdU. Xx xxxxx xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxx x x-xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx (xxxxxx lymfocyty) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx buňky xxxxxxxx křečka). Xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx vhodná kultivační xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (teplota, xxxxxxxxxx xxxxxx, koncentrace CO2 x vlhkost).
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx médiu xxxx xx vhodném rozpouštědle. Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx buněk, rychlost xxxxx nebo frekvenci XXX.
Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx přítomnosti vhodného xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxx xx použití xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx úroveň x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx vhodné pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Pro xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx nejméně xxx kultury.
1.2.2.2 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxx účinkem x xxxxx xxxxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx. Dále xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x použitým xxxxxxxxxxxxx.
Xxxx pozitivní xxxxxxxx xxx xxxxxx:
- xxxxx působící xxxxxxxx: etylmetansulfonát
- xxxxxxx působící xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx
Je-li xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se nejméně xxx dávky. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxx signifikantní xxxxxxx účinek, xxx xxxxxxx musí xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk. Xx xxxx relativně xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx testovat xx xx hranici xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx postupů. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx rozpustné xxxxxxxxx xxxxx se určuje xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx kultur
Stabilizovaná xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx ze xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx buněk z xxxxxxx kultivační xxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxx 37 xX. Xxx xxxxxxxxxxxx kultury se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x kultivační xxxxxx, aby na xxxxx xxxxxxxxx nevytvářely xxxx xxx z 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx kultur. Xxxxxx lymfocytární kultury xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx krve běžnými xxxxxxx a xxxxxxxx xxx 37 xX.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Buňky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx dvě xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxx prodloužena xx na xxx xxxxxxx xxxxx, je-li xx xxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx metabolickou xxxxxxxx, xxxx xxx exponovány xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xx konci xxxxxxxx xx testovaná xxxxx z média xxxxxxxxxx, buňky xxxxxx x xxxx kultivovány x xxxxxxxx xxxxx x BrdU xxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být buňky xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou a XxxX xx xxxx xxxx xxxxxxxxx cyklů.
Xxxxxx lymfocytární xxxxxxx xxxx exponovány testovanou xxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx analyzovány x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx buněčného xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x XxxX xx xxxxx xxxxxxxx v temnu xxxx ve světle xxxxxxxxx žárovky, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX, ve které xx xxxxxxxxxxxxx XxxX.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Jednu xx xxxxx xxxxxx xxxx ukončením xxxxxxxxx xx do xxxxxx xxxxx inhibitor xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. kolchicín). Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxxxxxx se připraví xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou. Xxxxxxx preparátů xx xxxxxxxxxx XXX xxxx xxx provedeno několika xxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxx).
1.2.3.5 Xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx frekvenci XXX x xxxxxxxx. Obvykle xx hodnotí xxxxxxx 25 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx každou xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxxxxxx se analyzují xxxxx metafáze s 46 centromerami. U xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx pouze xxxxxxxx, xxxxx se xxxx x ± 2 centromery od xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx stanovit, xxx xx budou xxxxxxxxxx SCE x xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx formou. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x každé xxxxxxxx x počet XXX/xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Údaje xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx buňkách, metodách xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: složení média, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádobách, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx a jeho xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx, metabolickém xxxxxxxxxx xxxxxxx, pozitivních x negativních xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxx xxxxx experimentální xxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- počtu analyzovaných xxxxxxxx (xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxx XXX/xxxxx x XXX/xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx),
- kritériích hodnocení XXX,
- xxxxxxxxxx xxxxxx koncentrací,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.20. XXXXXXXXX XXXXXXX MUTACE XXXXXX XX POHLAVÍ X XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxxx letální mutace xxxxxx xx pohlaví (XXXX) xx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx umožňuje detekci xxxxxx, jak xxxxxxxx, xxx x malých xxxxxx, x zárodečných xxxxxxx xxxxx. Je xx xxxx na xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx chromozómu X. Xxxx reprezentují ani 80 % xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přibližně 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx x X-chromozómu xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x samců xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx. Když xx xxxxxx letální x hemizygotním stavu, xxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxx jednoho xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, kteří se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. SRLS test xx výhodný xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx chromozómů.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx linie x xxxxxx xxxxx Xxxxxx-5. Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx X-chromozómu.
1.2.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx ve xxxx nerozpustné se xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. směs xxxxxxx x Tweenu-60 xxxx 80), xxxx xxxxxxxx xx dále ředí xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx vehikulu.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Test xx xxxxxx xxxxxxx citlivost. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx ovlivňuje xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx uskutečňuje xxx xx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx. Zkrmování xxxxxxxxx xxxxx xx provádí x cukerném xxxxxxx. Xx-xx to nutné, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx NaCl x xxxxxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.1.5 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jestliže xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx historické kontrolní xxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.6 Dávkování
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxx orientační xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx tolerované xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxx (xx xxxxx 3-5 xxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx samicemi x xxxxx Xxxxxx-5 xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx samice xxxxx xxx xx xxx xxx, xxx xxx pokryt xxxx xxxxxxx cyklus xxxxxxxxxxx xxxxx. X potomků xxxxxx samic je xxxxxxxx xxxxxxx efekt xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x spermatogonie.
Xxxxxxxxxxxxx X1 xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx dále kříženy xxxxxxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx/xxxxxxxx) xx svými xxxxxx. X X2 xxxxxxxx je x xxxxx xxxxxxx zaznamenávána xxxxxxx samců xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxx vznikají F1 xxxxxx nesoucí xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (nejsou xxxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx genotypem xxxx xxxx testovány, aby xx zjistilo, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx xx zpracují do xxxxx xxxxxxx. Uvádí xx počet xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx s letální xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx křížení x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx potvrdit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx zhodnotí vhodnou xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxx x úvahu x zhodnoceno xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- použitých liniích xxxx kmenech Xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx X2 xxxxxx, xxxxx F2 xxxxxx xxx potomků, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx letální xxxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk,
- kritériích xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx odběru xxxxxx, xxxx dávek, xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx) x pozitivní xxxxxxxx,
- kritériích počítání xxxxxxxxx mutací,
- xxxxxxx expozice/účinek, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.21. XXXX XXXXXXXXXXXX SAVČÍCH XXXXX - XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Savčí xxxxx lze xxxxxx xxx detekci fenotypických xxxx xx vitro xxxxxxxxxxxx chemickými xxxxxxx xxxxxxxxx x maligní xxxxxxxxxxxx xx vivo. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx C3H10T1/2, 3X3, XXX, Fischerových potkanů x xxxx xx xxxxx o xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Méně xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx morfologické xxxxx x buňkách po xxxxxxxx karcinogenním xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Některé xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Cytotoxicita xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonie (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kultury. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx ze xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx ji nelze xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x prodloužení xxxxxxxx xxxx k xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Buňky
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x testu transformace. Xxxxxxxxxxxxxx musí xxxxxxxx, xx xxxxx použité x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x spolehlivost.
1.2.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx vhodné pro xxxxxxx test xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx suspendují x xxxxxxxxxxx médiu nebo xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx životnost xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Metabolická xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované látce x xxxxxxxxxxx a xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivitou, xxxxxxxx její xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx experimentu xxxx xxx zařazeny xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxx přímo působících x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx látek xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxx chemické xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se nejméně xxx dávky. Xxxx xxxxxxxxxxx musí vyvolávat xxxxxxx efekt xxxxxxx xx koncentraci, nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x nejnižší xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx postupů. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx určuje xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Buňky xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx dobu xxxxxxxx xx použitém xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx může xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx (ev. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivační xxxxx), jestliže xx xxxxx x prolongovanou xxxxxxxx. Xxxxx bez xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx testované látce x přítomnosti i xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xx xxxxx xxxxxxxx xx x buněk xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx probíhá xxxx xx vhodných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx transformace. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx v nezávislých xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xxxx být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx vyjadřovat xxxxxxxxx buněk jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx počet transformací xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Data xx xxxxx zpracovat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx kultury, xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, kultivačních xxxxxxxx, xxxxx x frekvenci xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx expozice, xxxxxxxxxxx sledovaného xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx systému (xx-xx to vhodné), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx vyčíslení xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- diskusi xxxxxxxx,
- interpretaci xxxxxxxx.
B.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX XXXX X XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo fetální xxxx. Indukce dominantních xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx chemické xxxxx xxxxxxxx, že xxxx xxxxx poškozuje xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx mutace xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxx embrya xxxxxxxxxx samice xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Samci xxxx exponováni xxxxxxxxx xxxxx x pářeni x neovlivněnými, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx ztráty xx hodnotí xx xxxxxxx počtu žlutých xxxxxxx xxxx porovnáním xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx v exponované x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx dominantní letalita xx xxxxxx xxx- x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx celkové dominantní xxxxxxxx xx založen xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx na samici x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx implantacím xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx intervalu xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (t.j. xxxxxxxxxxxx x/xxxx spermatogonií).
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ve fyziologickém xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxx rozpouštědlo nesmí xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xxxx xxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxx naředěnou xxxxxxxxxx látku.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx látku xxxxxxxxx. Xxxxxxx způsob xxxxxxxx je xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxx i xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxx xx xxxxxxxxxx použít xxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxx, pohlavně xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx exponované x xxxxxxxxx skupiny.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxx s ohledem xx spontánní variabilitu xxxxxxxxx biologické xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx volí xxxxxx xxxxx samců, xxx xx xxxxxxx 30 - 50 xxxxxxx xxxxx na připouštěcí xxxxxxxx.
1.2.2.4 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pozitivní x xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Jestliže xxxx xx laboratoř x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx experimentů, xxxxx xxx použity. Xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xx vhodných, xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx citlivost xxxxx (např. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 mg.kg-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší dávka xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx snížené xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx postačující xxxxx vysoká dávka.
1.2.2.6 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxxxx 5 g.kg-1 xxxx x xxxxx 1 x.xx-1.xxx-1 xxx opakované xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx postupů. Nejčastěji xx xxxxxxx jednorázová xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx použito xxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vhodných xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx cyklu xxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx či xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xx expozici xx dán xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx druhé xxxxxxxx březosti x xxxxx dělohy xx xxxxxxxx k určení xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx o počtu xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx x počtu xxxxxxxxxxxx samic jsou xxxxxxx x tabulkách. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx identifikace každého xxxxx x xxxxxx xxxx uváděny xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, x xxxxx podané samci, x počtu živých x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx dominantního xxxxxxxxx efektu xx xxxxxxxx xx srovnání xxxxx živých xxxxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx implantací x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx mrtvých xx xxxxx implantacím x xxxxxxxxxx skupině xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxx časná x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx jako xxxxxx xxxx počtem corpora xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx průměrného xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xx srovnání s xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx, informace x:
- xxxxx, xxxxx, xxxx x xxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx,
- testované látce, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x důvodech xxxxxx xxxxxx, negativních a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx k průkazu xxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxx dominantních xxxxxxxxx efektů,
- xxxxx dávka/odpověď,
- xxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX
1. METODA
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 483, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxx je xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx spermatogoniích (1) (2) (3) (4) (5). Strukturální xxxxxxx xxxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, ovšem k xxxxxxxx chromozómového xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx není xxxxxx x analýze xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx k xxxxxx xxxxx nepoužívá. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx jsou u xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx se analyzují xxxxxxxxxxxx aberace v xxxxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx in xxxx xx zjišťují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx nepoužívá xxxx xxxxxx xxxxx.
Aby xx ve spermatogoniích xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxxxxxx první xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx než xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx spermatogonií xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómů, xxx xx zjišťují aberace xxxxxxxxxxxxxx typu x xxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxx buňky xxxx ve xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xx xxxx xx určen xx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx aktivní x xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx význam xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxx metabolismu xx xxxx, farmakokinetiky x xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX.
X testes je xxxxxxxx xxxx generací xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx citlivosti vůči xxxxxxxxx látkám. Zjištěné xxxxxxx tedy xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spermatogonie. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx spermatogonií xxxxx, xxx xxxxxxxx xxx exponovány xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Existují-li xxxxxxx toho, xx xx testovaná xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxx xxxx vhodná.
1.2 DEFINICE
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx obou xxxxxxxxx, xxxx zlom a xxxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx jako xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx místě (xxxxxxxx jako aberace xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx zlom xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx vzniklá xxxxxx xx struktuře xxxxxxxxxx je xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx chromatidy. Xxxx xxx x případech, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx chromatidy), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómu je xxxxxx x důsledku xxxxxx.
Xxx: achromatická xxxx xxxxx než xxxxx jedné xxxxxxxxxx x x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx.
Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (n) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx (3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx chromozómové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx dělení xx xxxxxx metafáze, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx, x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX METODY
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ve vhodnou xxxx xx působení xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx se xx xx působí xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Colcemidem®). Xx zárodečných buněk xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxx se x xxxxxxxxxx analyzují xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Výběr živočišného xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx samci čínských xxxxxx x myší, xxx ovšem použít xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx savčího xxxxx. Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx kmeny mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx rozdíly xx xxx xxxxxxxx studie xxxx xxx minimální x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x části X.
Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx jedinci xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x experimentální xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx minimálně xxxx dní xx xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vlivy xxxx, jak x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx x xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx její xxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle xxxx vehikulu. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx přímo xxxx xx xxxx xxxxxxxxx ředí. je xxxxx používat čerstvé xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x stálosti (stabilitě) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / vehikulum
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx a nesmí x testovanou látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx nepříliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Xx xxxxxxx testu xx třeba pro xxxxx xxxxxxx zařadit xxxxxxxx pozitivní a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx zacházet xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx stejně.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové aberace xx xxxx při xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad spontánní xxxxxx.
Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx tak, aby xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost zakódovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx podávat xxxxxxxx způsobem než xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
cyklofosfamid | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
akrylamid xxxxxxx | 79-06-1 | 201-173-7 |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx být xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx intervalů xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x aberacemi x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx zvířaty. Xxxxxx xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, ledaže existují xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx mutagenní xxxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx x pohlaví zvířat
X xxxxx zkušební x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx minimálně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx jednorázově nebo xx xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx jedná x xxxxxxxx xxxxx, xxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxx rozdělit, xx. xx dvě xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx se vzorky xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka může xxxxxxxxxx kinetiku xxxxxxxxx xxxxxx, provádí xx xxxxx dřívější a xxxxx pozdější odběr xxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxx (xx. xxxx xxxxx nejvyšší) se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx xxxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, ledaže xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (6).
Xxxxx xxxx mohou xxx xxxxxxx jiné xxxxxx intervaly odběru xxxxxx. Xxxx. xxxxx-xx xx o xxxxx xxxxxxxxxxx pohyb chromozómů xxxxx mitózy, xxxx xxxxx x účinky xxxxxxxxxxx xx X-xxxx xxxxx, xxxx vhodnější xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (1).
Xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx posuzuje xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx xx provádí aplikace xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx zvířata xx 24 xxxxxxxx (1,5xxxxxxx xxxxxxxxx cyklu) xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Odběry xxx xxxxxxxx i x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx xx xx xx účelné.
Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injikuje xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x nich xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx je xxxxx xxxxxxxx zhruba 3-5 xxxxx, u xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4-5 xxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Provádí-li xx xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, kmene x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx užívají xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx tak, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx toxicity k xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx pozdější xxx odběru xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx jenom xxxxxxxx xxxxx. Xx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, že při xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.
Látky, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx vykazují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx a vyhodnocují xx xxxxxx xx xxxxxxx. Nejvyšší dávka xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx (např. xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx( xxxxx pokles xxxx xxx vyšší xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx při xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx den xxxxxxxxxx žádné pozorovatelné xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx strukturou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx být xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx humánní expozice xx může xxxxxx x limitním testu xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx přijatelné x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, která se xx sondou xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete a xxxx překročit 2 xx/100 x xxxxxxxxx; xxxxx dávky xxxx xxx xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx dráždivých nebo xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx vykazují při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx objem xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx objemová xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx xxxx z xxxx xxxxxx připraví xxxxxxx xxxxxxxx, na xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a fixuje xx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx sklo a xxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
U xxxxxxx jedince xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx v xxxxx xxxxxxx). Xxxxx počet xx dá xxxxxx, xx-xx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx) se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx fixační xxxxxxx xxxxx vedou x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx x všech xxxx xxxxx počet xxxxxxxxx x hodnocených xxxxxxx roven číslu 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx prezentují x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxxxx. U xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx buňku. X experimentálních i xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx jednotlivé typy xxxxxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, uvádějí xx, ale xxxxxxx xx do celkové xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx, xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx míra xxxxxxxxxxxx xxxxx mitóz xxxxxxxxxxxxx x první x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x to xxx, xx se x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxxxx xx xxxxx. Je-li xxxxxxxxxxx pouze mitóza, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx u xxxxxxxxx 1000 buněk x xxxxxxx jedince.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx x xxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxx jednorázovou xxxxxx x s xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxxx xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (8); xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní.
Ačkoliv xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx nedovolují jednoznačné xxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx počet xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx ukazují, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové aberace xxxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxx xxx určitou xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x stabilita testované xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx druh/kmen,
- xxxxx a xxx xxxxxx,
-xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, včetně hmotnostního xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx skupiny.
Podmínky xxxxxx:
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxx doby xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx převod koncentrace xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx / den),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,
- podrobné xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx přípravy mikroskopických xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aberací,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx jedno xxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x druhé xxxxxxxxx metafázi,
- xxx a xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dané skupině,
- počet xxxxx x aberacemi xx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x negativních kontrol xxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.24. XXXX XXXX X XXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Je xx xx xxxx xxxx xx myších, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx embrya xxxxxxxxxx chemickým xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xx, které xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx heterozygoti pro xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx. Mutace xxxx xxxxxx dominantních xxxxx v genech xxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fenotypem x xxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (spots) xxxxxxxxx xxxxx xxxxx narozených xxxx. Xxxxx xxxxxxx x těmito skvrnami, xxxxxxxx, xx zaznamenán x jejich xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx u xxxxxxx x xxxxxxx. Myší xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxxx nebo suspendovány x izotonickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx jsou xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx efekt. Používají xx xxxxxxx připravené xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Myši xxxxx X (nonagouti, x/x; xxxxxxxxxx, xxxx xxx, xxx p/cch x; xxxxx, x/x; xxxxxx, short xxx, x xx/x xx; xxxxxxx xxxxxxxx, x/x) xxxx xxxxxxx xxx x xxxxxx XX (xxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xx x xx/xx x xx; leaden xxxxx, ln xx/ /xx xx; pearl xx/xx) xxxx x xxxxxx C57 BL (xxxxxxxxx, x/x).
Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx že xxxxx xxxxxxx nonagouti xxxxxxx. Xxxx. xxxxxxx xxxx xxxxxx NMRI (xxxxxxxxx, x/x; albino, c/c) x XXX (nonagouti, x/x; xxxxx, b/b; xxxxxx x/x).
1.2.1.2 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx se dostatečný xxxxx zabřezlých xxxxx, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx počet živých xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxx na xxxxx xxxxx pozorovaných x xxxxxxxxxxx xxxx x x kontrolních xxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xx bylo xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx samic ovlivněných xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.3 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx xxx použity xxxxxxxx ovlivněné xxxxx xxxxxxxxxxxxx (negativní kontroly). Xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx homogenní. Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxx laboratoři xxx xxxxxxxx látce xx xxxxxx xxxxxxxxxx účinkem xxxxx xxx x xxxxx xxxxx použity, xxxxxxxx u testované xxxxx nebyla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxx se používá xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx intraperitoneální xxxxxxx xxxxx xxxx. Xx-xx xx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx jiný xxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx nejméně xxx xxxxx, x nichž xxxxx vyvolává xxxxxx xxxxxxxx nebo zmenšení xxxxxxxxx xxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx 8., 9. nebo 10. den xxxxxxxx, xxxxxxx xx 1. xxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxx zjištění xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 x 9.25 xxx xx koncepci. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx provést během xxxxxx xxx.
Analýza
X xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx po porodu. Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx:
(x) xxxx xxxxxx v xxxxxxx 5 xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x kterých xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (XXXX);
(b) xxxxx xxxxxx typu agouti xx vyskytují x xxxxx mléčných žláz, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxxx se, že xxxxxxxx x důsledku xxxxxx xxxxxxxxxxxx (XXX);
(x) xxxxxxxx x xxxx xxxxxx náhodně xxxxxxxxxx x srsti xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (XX).
Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, ale xxxxx xxxxxxxx, RS, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx XXX x RS xx možné xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xx nápadné, xxxxx xxxxxxxxxxxx malformace potomků.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx majících xxxxx xxxx více xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx získané z xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Údaje xxxx xxxx xxxxxxx xxxx získané hodnoty xx xxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, je-li to xxxxx, informace o:
- xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx,
- xxxxx zabřezlých xxxxx x experimentální x x xxxxxxxxx skupině,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx x při xxxxxxxxx,
- dávkových úrovních xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxxx xxx xxxxxxxx byla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- x xxxxxxx podání xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx x WMVS, XXX a XX x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx dávka/odpověď x XX, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.25. PŘENOSNÉ XXXXXXXXXXX X XXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx translokace x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx reciproké xxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx potomků ještě xxxxxx X-chromozómu. Nositelé xxxxxxxxxxx x XX-xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx využívá xxx výběr X1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx způsobena xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (X-autosom x c-t typ). Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, xxxx X1 samců xx xxxxxxx xxxxxxx X1 xxxxx. Xxxxxx XX xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx dřeně.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx rozpouštědlo xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou nebo xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx orálně xxxxxx nebo intraperitoneální xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx aplikace.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Pro xxxxxxxxx křížení a xxxxxxxxxxxx verifikaci xx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu xx xxxx xxx xxxxx než xxx x měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se zdravá, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx nutně xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx samců F1 xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx v X1 xxxxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxxx xxxxxxxxxxx také xxxxxx X1 generace xxxxxxx, xxx se xxxxxxxx 300 samců x 300 xxxxx.
1.2.1.4 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledky xxxxxxxxxxx kontrol z xxxxxxxxx pokusu z xxxx xxxxxxxxxx, mohou xxx xxxxxxx.
1.2.1.5 Dávkování
Xxxxxxx se xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyvolávající xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, ale xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx chování xxxx xxxxxxxxx. Xxx stanovení xxxxxx xxxxx/xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx dosažitelná xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx používá xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx x týdnu po 35 dnů.
Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a musí xxxxxxxx, xx všechna xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx analyzována. Xx konci xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx rozděleny xx xxxxx. Xx porodu xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx x pohlaví xxxxxx. Xx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx zařazení xx experimentu.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx heterozygotů
Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx F1 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx možných nositelů xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx analýza xxxxx xxxxx X1 xxxxxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x X1 xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x/xxxx analýzou xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x snížené xxxxxxxxx xxxx xxx stanovena xxx xxxxx kmen xxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx: X1 xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx klecí se xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx stejné xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx denně počínaje 18. xxxx xx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx vrhu x xxxxxxx F2 xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxx porodu, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx testovány X1 samice, X2 xxxxxxx malých vrhů xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx. Samice-nositelky xxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potomka. XX-xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx mezi xxxxxx xxxxxxx x 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx xx. xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx jsou normální X1 zvířata vyřazena x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx F2 xxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx. X1 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx klasifikována xxxx normální po xxxxxxxxxxx xxx F2 xxxx, xxxx dále xxxxxxxxx buď xxxxxxxx xxxxxx dělohy, nebo xxxx xxxxx podrobena xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxxxx vrhu u xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx embryí, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx indikuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxxx X1 xxxxx jsou xxxxxxxxxxx každý xx 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx ranní xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx jsou xxxxxxxx 14. - 16. xxx a jsou xxxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxx xxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxxxx analýza
Xxxxxxx xxx-xxxxxx jsou připraveny xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx jsou xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx multivalentních xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx - metafáze X x primárních spermatocytech. Xxxxx xxxxxxx dvou xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx splňuje xxxxxxxxxx xxxxx, xx testované xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Jestliže byl xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx X1 xxxxx jsou vyšetřeni xxxxxxxxxxxxx. Na každého xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 25 buněk x xxxxxxxxx - metafáze X. Xxxxxxx mitotických xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx x xxxxx s xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx u X1 samic suspektních XX. Xxxxxxxxxx neobvykle xxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx x 10 xxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx samčí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (x-x typ). Xxxxxxx X-autosomální xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx xx xxxxx 10 xxxxxxxx je xxxxxxx xxx XO xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx zaznamenána průměrná xxxxxxxx xxxx x xxxxx pohlaví (sex xxxxx).
Xxx xxxxx xxxxxxxxx F1 xxxxxx xx xxxxx průměrná xxxxxxxx xxxx kontroly x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx X1 xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx průměrný xxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x individuální xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx F1 xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx I xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx figur x celkový počet xxxxx pro každého xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Pro X1 sterilní jedince xx xxxxxxxxxxx počet x doba připuštění. Xxxx xx xxxxx xxxx testes x xxxxxxxxxxx o cytogenetické xxxxxxx.
U XX xxxxx se xxxxx xxxxxxxx velikost trhu, xxx ratio X2 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx vybráni xxxxx xxxxxxxx F1 translokací, xx xxxxx v xxxxxxxxx uvést xxxxxxxxx x skutečném xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxx x negativních x pozitivních xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx xx možné, xxxxxxxxx x:
- xxxxx xxxx, xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx zvířat,
- počtu xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x kontrolních skupinách,
- experimentálních podmínkách, xxxxxxxx popis xxxxxxxxxxx xxxxxx, dávkové xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x pohlaví xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx analýzu xxxxxxxxxxx,
- xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x detailní xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x mikroskopické xxxxxxx, xxxxx možno x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.26. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ
(90denní xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xx, xxxxxx na xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx po 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, a xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x jakých budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin.
Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx, v kapslích xxxx v xxxxx xxxx. Všem zvířatům xx testovaná látka xxxxxx po xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx aditiva, musí xxx o nich xxxxx, že xxxxxx xxxxxxx účinek. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx je xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx přednost potkanům, xxxxx nejsou známy xxxxxx proti xxxx. Xx třeba používat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. X xxxxxxxx xxxxxxx by xx počátku xxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx xxx 6 týdnů, x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 8 týdnů. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) překročit ± 20 % střední xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx předběžný test xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx se má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x kmen.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx každou xxxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxx se zvířata xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx dobu 90 dnů xxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx podávání xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Je xxxxx použít nejméně xxx xxxxxx dávek x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx zvířaty x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxx skupinám, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx obdrží xxxxxxx, které xx xxxxxxxx xxxxxxxx dávka. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx vyvolat toxické xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí nebo xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň xxxxx xx neměla xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx existují odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx střední xxxxx xxxx vyvolat xxx toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx být xxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx skupině x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx dávky x x xxxxxxxxx xxxxxxx by počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx-xx xx testovaná xxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx konstantní koncentrace (x ppm xxxx xx.xx-1 potravy) xxxx xxxxxxxxxx dávkování xx xxxxxx k tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx; použitou xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Aplikuje-li se xxxxx xxxxxx, mělo xx se xxx xxx xxxxx den xx stejnou dobu, x xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (týdenních xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) přizpůsobovat xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx xx 90xxxxx xxxx xxxx popsanou xxxxxxx a nevyvolá-li xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx xxx (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, je-li xxxx xxxxx) xxxxx toxické xxxxxx, xx možno xx dalšího xxxxxxxxx xxxxxxx. Podává-li xx xxxx xxxxxxx látka x potravě, xx xxxxx zajistit, xxx xxx xxxxxxxxxx množství xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxx, xx kterém xx xxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
X ideálním případě xx zvířatům xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v xxxxx xx xxxx 90 xxx. Zvířata v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx bez xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x otravy xxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx.
Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxx vody xxx xxxxxxxx testované látky x xxxxx xxxx) x xxxxxxxx zvířat xx zaznamenávají xxxxx.
Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xx ztrátám xxxxxx xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zvířata, která xxxxxxx, x výjimkou xxxxxxxxxxx xxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx běžně provádějí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření oftalmoskopem xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxx xxxxxxx u xxxxxxxx dávky a x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.
(b) Xx konci xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx krve xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (xxxxxx doby xxxxxxxxx xx volí xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), alaninaminotransferáza (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, dusík močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx další charakteristiky, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx xxx x případě xxxxxxx použity xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
(d) Xxxxxxx xxxx se nevyžaduje xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx přiměřené xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, má xx uvážit xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a biochemických xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva zahrnující xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx vysychání.
Následující xxxxxx x tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx vhodném médiu x xxxxxxx na xxxxx pozdější histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým postižením, xxxxx - x xxxxxx medula/pons, kůra xxxxx x mozečku, xxxxxxxx mozkový, štítná xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, slinivka xxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, tlusté a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx mléčná xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx nerv, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx kloubních xxxxx), xxxxxxx xxxxx xx třech xxxxxxxx - xxxxx, střed xxxxxx a xxxxxxx, x (slzné žlázy). Xxxxx x závorkách xx xxxxxxxx v xxxxxxx, xxxxx xxx xx jejich postižení xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx orgánů a xxxxx xx xxxxx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx kontrolní xxxxxxx.
(x) Je třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(c) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxx x xxxxxx x střední dávkou xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx infekce, protože xx poskytuje obraz xxxxxxxxxxx xxxxx zvířat. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx však provést xxxx xx xxxxxxxx, xx kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
(e) Používá-li xx satelitní skupiny, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxxx,
- experimentální xxxxxxxx - xxxxxx xxxxx (včetně vehikula, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- úroveň xxx xxxxxx, pokud xx xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, případně xxxx x xxxxxxx zvířat xx xxxxx sledování,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx další xxxxx,
- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- biochemická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (včetně výsledků xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.27. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx per xx, studie xx xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx denně xxxxxx po 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (nehlodavcům), x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx během xxxxxx, x zvířata, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 dní xxxx testem jsou xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx látku xxx podávat x xxxxxxx nebo může xxx xxxxxxxxx podávání x xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx také xxxx xxxxxxx orální xxxxxxxx. Xxxx zvířatům xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx celou xxxx pokusu xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx aditiva, musí xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx možno xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx používá xxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx plemeni. Xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba pracovat xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx; x případě xxx xx má x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 3 xx 6 xxxxxx x xx starším xxx 9 měsíců. Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx předběžný xxxx xxxx dlouhodobým xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se xx xxxxxx xxxxxx živočišný xxxx a xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 8 xxxxxx (4 xxxxxx a 4 xxxxx). Počet zvířat xx konci xxxxxx xxxx xxx takový, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx zvířaty x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxx dávky má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx existují xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx hodnotu překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx měla xxxxxxx jen toxický xxxxxx na hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, mají xxx voleny tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx úrovní xxxxx a v xxxxxxxxx xxxxxxx by x uhynutí rovněž xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xx xxxx toxická xxxxx v xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx aplikované xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
Podává-li xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (v xxx xxxx mg.kg-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx dávkování xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xx xx látka xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx xx xxx dít xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx, a xxxxxxxxx x xxxxxxxxx intervalech xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx test xxxx xxxxxxxxx test xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx 90denní xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxx (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, je-li xxxx xxxxx) xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx testování xxxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxxxx xxxxx x potravě, je xxxxx zajistit, xxx xxx xxxxxxxxxx množství xxx další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zvířat.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxx pozorovat a xxxxxxxxxxxx toxické účinky, xxxxxx xxxx objevení, xxxxxx x trvání. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
X xxxxxxxx případě xx zvířatům xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxx se xx xxxxxxxxxx xxxxxxx látku 5 dní v xxxxx.
Pozorování zahrnuje (xxx není xx xx xxxxxxx) xxxxx xxxx, srsti, očí, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxx vody xxx podávání xxxxxxxxx xxxxx x pitné xxxx) x hmotnost xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Nejméně xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx klinická xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx k minimalizaci xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx zvířata, která xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, humánně utratit x xxxxxx.
X xxxxx zvířat xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xx konci xxxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx, ale alespoň x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx všechna xxxxxxx.
(x) Xx xxxxxxx xxxxx, x potom xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx uprostřed x xxxx na xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx hematologické xxxxxxxxx, které má xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, protrombinový xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx počet xxxxxxxxxx.
(c) Na xxxxxxx xxxxx, a xxxxx xxx v xxxxxxxxx intervalech xxxx xxxxxxxxx x dále xx xxxxx pokusu xx má provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (přičemž xxxxxx xxxx hladovění xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (dříve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) x aspartát aminotransferáza xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, dusík xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které mohou xxx potřebné xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx stanovení: lipidů, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxx biochemické xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx účinků. Xxxx xxxxxxx vzorků xxxx xx nehlodavci xxxx xxxxxxxx (ne xxxx xxx 24 xxxxx).
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X všech xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx xxxxxxxxx povrchu těla, xxxxx tělních otvorů, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx dutiny xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Játra, xxxxxxx, nadledviny, štítná xxxxx (x příštítnými xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx nejdříve xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx médiu s xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx postižením, mozek - x řezech xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx xxxxx xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx žlázy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx pohlavní xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, močový xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxx, (kost xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx) x (xxxxxxx xxxxx ve třech xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx se posuzují, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxxx provést x všech xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx nejvyšší dávka, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Histopatologické xxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx dávkových xxxxxx xx xxxxxxxxx orgánech, x kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx, xxxx když xx to indikováno xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx, typy xxxxxxxxx x procentuálně xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx třeba vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, plemeno xxxx xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, potrava,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx dávek (xxxxxx xxxxxxxx, pokud se xxxxxxx) a xxxxxxxxxxx,
- údaje o xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxx,
- xxxxxx xxx účinku, xxxxx xx lze stanovit,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx konce xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- spotřeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx to možné,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX DERMÁLNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx aplikuje xxxxx xx xxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, a to xxxxx xxxxxxx jedna xxxxxx dávky. Během xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou během xxxxxx, i zvířata, xxxxx přežijí do xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx před testem xxxx xxxxxxx chována x podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Krátce xxxx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxx xx xxxxxx pokusných zvířat. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx možné, mělo xx se xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx oholení xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Při xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx na xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx 10 % povrchu xxxx. Xx xxxxx vzít x úvahu xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx připravované xxxxxx kůže a x velikosti xxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxx x tuhými xxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx formy, je xxxxx zkoušenou látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx vehikulem, xxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 dnů x xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, králíky xxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx použití xxxx musí být xxxxxxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro každé xxxxxxx zvlášť) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx) se xxxxxxx xxxx. Samice musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx se zvířata xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvýšit celkový xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx možno podávat xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 dnů nejvyšší xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx podávání xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx použít nejméně xxx xxxxxxx dávek x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - xxxxx xx použilo xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 6 hodin denně. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx. X xxxxxxxxxxx týdenních xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, aby xx udržovala xxxxx xxxxxxx dávky xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx stejným způsobem xxxx pokusným skupinám, x xx ve xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, které xx aplikuje nejvyšší xxxxx.
Nejvyšší hladina xxxxx xx vyvolat xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx jen v xxxxx počtu. Nejnižší xxxxxxx xxxxx by xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx více xxx 3 xxxxxxx xxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, aby vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx skupině x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x x kontrolní xxxxxxx xx xxxxx uhynutí xxx xxx nízký, xxxxx je vyhodnocení xxxxxxxx xxxxxxx.
Vede-li xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx, což x xxxxxx dávkové xxxxxxx může vést x omezení xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Došlo-li x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx dokonce xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx jej xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Nevyvolá-li xxx xxxxxxxxx studii xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 nebo xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx člověka, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx další xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx zvířata xx třeba xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx x čas, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xx jednom. Xxxxxxxx xx studované xxxxx nejlépe 7 xxx v xxxxx xx xxxx 90 xxx. Zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx po dalších 28 xxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx přetrvávání. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 hodin xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx představuje asi 10 % xxxxxxx xxxx, u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx tato plocha xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx pokrýt xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx rovnoměrně v xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xx expoziční xxxx xxxxxxxxx v kontaktu x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx obvaz x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx látky je xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx omezení xxxxxxxx pohybu, úplnou xxxxxxxxxxx však xxxxx xxxxxxxxx.
Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pokud možno xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx vhodným k xxxxxxxx pokožky.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx otravy xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx.
Xxxxxxxxxx v kleci xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx x xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx a krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx týdně. Doporučuje xx zaznamenávat xxxxx x xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx přežila, s xxxxxxxx satelitních xxxxxx, xxxxxxx. Umírající xxxxxxx x xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx či xxxxxx bolestí xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx utratit a xxxxxx.
U všech xxxxxx xxxxxx kontrolních xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným přístrojem xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x na xxxxx xxxxxx nejlépe x všech xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x kontrolních skupin. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx konci pokusu xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx čas xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(c) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci xxxxx x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, chloridy, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx živočišného xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx transamináza xxxx) a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx potřebné xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx x xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx spektra účinků.
(x) Xxxxxxx moči xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx parametrů xxxxx před začátkem xxxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx prohlídku povrchu xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x břišní dutiny xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx medula/pons, kůra xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx, příštítná xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, (xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, xxxxx, (slinné xxxxx), xxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, slinivka xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, žlučník (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx žláza), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (oči), (xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx), (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ploch), (xxxxxxx mícha xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx hrudní x xxxxxxx) x (xxxxx žlázy). Tkáně x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx orgánem.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
(a) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxx x exponované xxxx, xxxxxx x tkání xx třeba provést x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx nejvyšší xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx dávkových xxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x zjištění příznaků xxxxxxx, protože to xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx x xxxxxx těchto xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx provést vždy xx orgánech, na xxxxxxx bylo zjištěno xxxxxxxxx xx xxxxxxx x vysokou xxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx na xxxxxxx x orgánech, x xxxxxxx xxxx zjištěny xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx s lézemi x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx třeba vyhodnotit xxxxxxx statistickou metodou. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou metodu.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, krmení,
- xxxxxxxx pokusu,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx dávek,
- xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx ji xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx toxických nebo xxxxxx účinků,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx je xx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.29. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX - INHALAČNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx inhalační xxxxxxxx - xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx studované xxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu, v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x to po 90 xxx. Xxxxxxx-xx xx xxx dosažení xxxxxxxx koncentrace testované xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx skupinu xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx denně pozorují x zjišťují xx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, i xx, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Nejméně 5 dní xxxx xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx třeba, přidá xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx x nich xxxxx, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx data, xx xxxxx je využít.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx známy důvody xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx na mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx nemá variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se xx xxxxxx stejný xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 samců). Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x nesmí xxx xxxxx. Pokud xx zvířata xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, která budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx x během xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx xxxxxxxx expozic sledovat xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx.
1.2.2.3 Expoziční xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx skupiny x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (případně kontrolní xxxxxxx s vehikulem - xxxxx xx xxxxxxx - v xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x skupiny x xxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx). S výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně jako x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx xxx v xxxxx xxxxx. Pokud xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuto xxxxxxx překračovat. Ideálně xx střední koncentrace xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx na hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly odstupňované xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx koncentrací x x xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je možné xxxxxx x jiných xxx xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx inhalační xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s výměnou xxxxxxx 12krát za xxxxxx, aby xxx xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx a rovnoměrné xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx atmosféře. Použije-li xx xxxxxxxxx xxx, xx třeba xx xxxxxxxxxxx xxx, aby xx nejvíce bránil xxxxxxxxxx zvířat a xxx xxxxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx byla xx nejvyšší. Xxx xxxxxxxxx stability xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx by v xxxxxx celkový objem xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, samotné hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové xxxxxxxx; xxxxx dva xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxx pozorování
Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx denně xxxxxxxxx xxxxx celého xxxxxx xxxxxxxx x zotavení x zaznamenávat xxxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxxxx dobu uhynutí x čas, xx xxxxxx xx objeví x opět odezní xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3. Popis xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx v xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách, která xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx dalších 28 xxx xxx xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx během xxxxxxxxxxx xx být 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxx 30 % x 70 %, s xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. experimenty x xxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxxx xx provést xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx x celém expozičním xxxx byly xxxxxx. Xxxxxx musí xxxxxxxxx, xx stabilních xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dosaženo xx xxxxxxxxxxx.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
a) Měření xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně).
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx v dýchací xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x xxxx než ±15 %. U některých xxxxxx a xxxxxxxx, xxx xxxx úrovně xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx dobu xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx koncentrace xxx xxxxxxxx, xxx je xx prakticky možné. Xxx xxxxxx generátoru xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic xxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx. Během xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx, xxx xx xx potřeba xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
c) Xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx
x) Xxxxx xxxxxxxx a xx xx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx má xxxx xxxxxxxxxxxx protokol. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx x kleci xxxxxxxx xxxxx xxxx, srsti, xxx, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Je třeba xxxxxxxx pravidelnou kontrolu xxxxxx, aby xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zvířat jako xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx skončení studie xx všechna xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx oftalmoskopem xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx podáváním testované xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.
(x) Xx konci pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx trombocytů.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx xxxxxxx studie xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (trvání xxxx xxxxxxxxx xx volí xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x kmene), alaninamino xxxxxxxxxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx x xxxxxxx potřeby xxxxxxx pro rozšíření xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx pozorované xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, má se xxxxxx stanovení hematologických x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, lební, hrudní x xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx vhodném médiu x ohledem xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx (xxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx, zvážit x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx aby xx xxxxxxxxx struktura xxxx - xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxx), tkáň xxxxxxxxxxx, xxxxx - x řezech xxxxxx/xxxx, xxxx mozku a xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (samičí xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx dření, (xxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx), (páteřní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - krční, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx se xxxxxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx respiračního systému x ostatních orgánů x tkání je xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci, a x xxxxxx kontrolní xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx léze.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx dávkových xxxxxxxxx.
(x) Plíce zvířat xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x zvířat xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx orgánech, xx kterých bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx s vysokou xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx skupiny, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, u xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxx x ostatních xxxxxxxxxxxx skupin.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx musí xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x jednotlivými xxxx xxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx metodou. Je x xxxx možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení,
- xxxxxxxx xxxxxx: Popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx částic x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx systému, xxxxx likvidace odpadního xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx zvířat v xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Popsat xxxxxxxxx pro měření xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx stability koncentrací x xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx aerosolu,
- xxxxx x expozici xx sestaví xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxxxxxx xxxx údaje:
x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
b) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx vzduchu),
x) povaha xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxx,
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně,
x) medián xxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, pokud xx xxxxx xx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj o xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx jednotlivé abnormální xxxxxxxx a jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- oftalmologické xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.30. TESTOVÁNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dní x týdnu, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jedna xxxxx xx xxxxxxx, xx větší xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx denně xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx standardních xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx započetím xxxxx. Xxxx testem xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx a kontrolních xxxxxx.
1.2.2 Testovací podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx potkan. Xx základě předchozích xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (hlodavce xxxx xxxx). Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxx jedince xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx započata xx nejdříve po xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx studie xx xxxxx rozdíl xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. V případě, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx subchronické xxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx použít stejný xxxx a xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx úroveň xxxxx je xxxxx xxxxxx nejméně 40 xxxxxx (20 xxxxx x 20 xxxxx), xxxxxx x pro xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx a neměly xx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx dokončením xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat (xxxxxxxxxx) je xxxxx xxxxxx menší xxxxx xxxxxx, xxx ne xxxx xxx 4 xx xxxxxxx pohlaví xx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxxxx expozic
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx měla vyvolat xxxxx projevy xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx toxicity. Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxx pásmu mezi xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Výběr dávek xx xxx xxxx x xxxxx výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Obvykle xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. V případě, xx xxxxxxxxx xxxxx xx podávána x xxxxx vodě xxxx x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx x ní xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxxx ohledu x exponované skupině, xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx.
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx nebo xxxxxxx-xx xx xxx orální xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx negativní kontrolní xxxxxxx, která není xxxxxxxxxx ani xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxx aplikace
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Volba způsobu xxxxxx závisí xx xxxxxxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x pravděpodobném xxxxxxx xxxxxxxx člověka.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x důsledku kožního xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx orálního testu x xxxxxxxx rozsahu xxxxxxx xxxxxxxxxxx, odvozené x předchozích xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Orální xxxxxx
Xxx, kde xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx x gastrointestinálního xxxxxx a xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxx exponován člověk, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx aplikaci, pokud xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx x potravě, xxxxxxxxxx v pitné xxxx xxxx xxxxxxx x tobolce.
Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx podávat xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx dávkování pět xxx x xxxxx xxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx vyvolat "abstinenční" xxxxxxxx x období xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx výsledky x xxxxxxxx hodnocení. Xxxxxxx, xxxxxxxxx s xxxxxxx xx praktické xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx inhalační xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx než xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx platnou alternativou x specifických xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx exponováno xx ustálení koncentrace xxxx hodin xxxxx xx pět xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), xxxx x návaznosti xx xxxxxx expozici x xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin xxxxx xx xxxx xxx x týdnu (kontinuální xxxxxxxx), s přibližně xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx zvířat denně xx xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx i xxx čištění xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, xx x xxxxx xx zvíře 17 - 18 xxxxx na ústup xxxxxx xxxxx expozice x xxxxx delším xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx přerušované xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xx cílech xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxx, která má xxx simulována. Nicméně, xx xxxxx vzít x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx kontinuální expozice xxx simulaci podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx narušeny nutnosti xxxx x krmení xxxxx expozice a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx určité koncentrace xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx se exponují x inhalačních xxxxxxxx, xxxxxxx konstrukce zaručuje xxxxxxxxx proud xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx xx hodinu, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry. Xxxxxxxxx x expoziční xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxx konstrukci, tak xxx xxxx expoziční xxxxxxxx srovnatelné ve xxxxx xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxxx komory xx xxxxxxx xxxxxxx mírný xxxxxxx x tím xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx prostřední. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx x xxxxx udržení xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx: rychlost xxxxxxx xxxxxxx komorou by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx denní xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx neměla xxxxxxx více než 15 % střední xxxxxxx;
(x) teplota x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 22 ± 2 oC x xxxxxxx v komorách 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx průběžně;
(x) xxxxxx velikosti xxxxxx: xxxx xx xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx velikosti xxx použité testovací xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se odebírají x xxxxxxx zóny xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měl xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým je xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, i xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx vývoje xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx tak xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx exponována.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Expozice látky xx xxxx xxxxx xxxxxxx 12 xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxx klinické xxxxxxxxx xx mělo xxx xxxxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxx. Dodatečná pozorování xx měla být xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxx zvířat xx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxx uložení xx xxxxxxx u xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx nebo moribundní. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx sledovat, xxx xx spolehlivě zachytil xxxxxxx x progrese xxxxx toxických xxxxxx, x také za xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nemocí, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx včetně neurologických x xxxxxx změn x xxxxx zvířat, x dále případy xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx.
Hmotnost xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx období xxxxx x xxxxx xxxxxx xx čtyři xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx spotřeby xxxxxxx (x vody xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x pitné vodě) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx intervalech, xxxxxx xx zdravotní xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx ukázaly nutnost xxxx frekvence xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx destiček xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx a poté x xxxxxxxxx šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, x na xxxxx na xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx nehlodavců xxxx. xx 10 potkanů xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx xx to xxxxx, xxxxxx xx xxxxx intervalech by xxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx od xxxxxxxxxx.
Xxxxx klinické xxxxxxxxx xxxxxx naznačí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, měl xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx nebo xxxxx x vyšetření patologických xxxx xxxxxxx nutnost, xxxxxxx xx i x skupiny s xxxxxx xxxxxxxx nižší.
1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx pro analýzu xxxxx možno od xxxxxxxx zvířat x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hematologické xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx buď xx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxx dávek x xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, xxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- proteiny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, okultní xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx (xxxx- kvantitativně).
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx v xxxxx skupině, xxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx ve všech xxxxxxxxxxx. Xx nehlodavců xx xxxxx toho xxxxxxxx xxxxxx před xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x jsou xxxxxxxxx následující xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx funkci xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, aktivita xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), glutamát xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), gamma xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. krevní xxxxxxx na xxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx ledvin, xxxx. xxxxx močoviny x xxxx.
1) xxxx xxxxx jako xxxxxx xxxxxx aminotransferáza
2) xxxx xxxxx jako xxxxxx aspartát aminotransferáza
1.2.3.5 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx stavu. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx krve xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx viditelné xxxxxx nebo léze, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx x tkáně xx xxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx xxxx následujících xxxxxx x xxxxx:xxxxx3) (xxxxxxxxxxx míchy/mostu, mozečkové xxxx, kory mozkové), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x příštítných xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x plic, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, ilea, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx pohlavních xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), sterna s xxxxxx dření x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx měchýře fixativem xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x inhalačních xxxxxxxx, xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx jsou inhalační xxxxxx, má xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx včetně xxxx, xxxxxx x hrtanu.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx vyšetření, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxx x dispozici xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodítko.
3) xxxx xxxxxx x 10 zvířat xx xxxxxxx x xx skupinu x xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxx a dále xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) ze xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx
1.2.3.6 Histopatologie
Xxxxxxx xxxxxxxxx změny, xxxxxxx xxxxxx a xxxx léze xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx následující xxxxxxx:
(a) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx lézí nalezených:
1. x xxxxx xxxxxx, xxxxx uhynula xxxx byla utracena xxxxx xxxxxx,
2. x všech xxxxxx xx skupiny x xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx skupiny,
(b) xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx abnormity způsobené xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou xxxx xxxxxxxx také xx xxxxxxxxx x nižšími xxxxxxx,
(x) xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx významné xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x použitém xxxxx xxxxxx, ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx. xxxxxxxxxx kontrolní xxxxx, jsou xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxx látkou.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxx xxx sumarizovány xx xxxxx tabulek, ukazujících xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx lézí. Výsledky xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx x testu xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, zdroj, podmínky xxxxxxxx, dieta,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, pokud xx používá. Dále xx třeba xxxxxx xxxxxxxx pro měření xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, kde je xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo velikosti xxxxxx aerosolu. Xxxxx x xxxxxxxx: ve xxxxx tabulky včetně xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
(c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx objemem vzduchu)
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx
(x) xxxxxxx velikosti částic (xx-xx xx xxxxxxxxxx)
- dávkové úrovně (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x koncentrace
- údaje o xxxxxxx odpovědi xxxxx xxxxxxx x dávky
- xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxx
- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xx xxxxx
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx
- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx abnormální xxxxxxx x jeho xxxxx xxxxx
- xxxx x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx hmotnosti
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x výsledky
- xxxxx klinické xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxx moči)
- xxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx xxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - HLODAVCI X XXXXXXXXXX
1. XXXXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx březích xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx každou xxxxxxx, xxxxxxx x tom xxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxxx. Krátce před xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx březí samice xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx i x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx embryo- x xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxx, xxxxxxx samice, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx při laboratorních xxxxxxxxxx aspoň 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Potom xxxx xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxx plodností. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx umělou xxxxxxxxxx. Testovaná látka xx xxxxxxxx samicím xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx po implantaci x pokračuje během xxxxxx organogeneze. Xxx xxxx termínem xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx sledování xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx možnosti xxxxxxxxxxx xxxxx, opožděné xxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
Běžně xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx, xxx, xxxxxx x králík. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx všeobecně xxxxxxxx kmeny. Xxxxxxxxx xxxx xx neměl xxx xxxxxx xxxxxxxx x měly xx xxx u xxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx. Zvířat jsou xxxxxxx jednotlivě.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx dávku je xxxxx xxxxxx xxxxx 20 xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxx xxxx 12 březích xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx tři xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx do xxxxxx i xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx také znát xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vehikula: xxxxx xxx teratogenní xxx xxx vliv xx reprodukční xxxxxxxxxx. Xx zvířaty v xxxxxxxxx(xx) skupině(ách) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxx x testovací skupině x xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx biologické vlastnosti xxxxxxxx, xxx nejvyšší xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx takové xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx mírné snížení xxxx, xxx už xx xxxx xxx 10 % xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx voleny tak, xxx xxxx geometricky xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x vysokou dávkou.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx, že xxxxx x xxxxxx toxicitou xxx dávce nejméně 1000 xx.xx-1 prokazatelně xxxxxxxx xxxxxxx embryotoxicity xxx xxxxxxxxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx dávek.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxx xx xxx, kdy xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxx). Xxxx aplikace xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxx období xx xxxxx považovat 6. až 15. xxx x xxxxxxx x myši, 6. xx 14. den x xxxxxx a 6. xx 18. xxx x xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx umělá xxxxxxxxxx, xx třeba připočítat x předchozím xxxxxx xxxxx xxx. Xxxxx xxxx alternativy xxxxx xxxxxxxx jeden xxx xxxx očekávaným porodem.
1.2.2.6 Xxxxxx pozorování
Xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Další sledování x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx ztrát během xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx sondou, xxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxx být xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xx počátku xxxxxxxx látky xxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x dávka xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx doby xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Samice vykazující xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetřit. X xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx přibližně xxxxx xxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx většinu xxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxxx. Pozorování xxxxxx x xxxxx xx mělo zahrnovat xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, očí x sliznic, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
Xxxxx xxxxx x xxxxxxx během xxxx xx konci xxxxxx, je xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxx na xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx smrti je xxxxx odstranit dělohu x xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx úmrtí xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx počet xxxxxx xxxxxxx. Obvykle xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxx. X potkanů x xxxxxxx xx xxxxx stanovit xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx pohlaví xxxxxxx x zaznamenat xxxx jednotlivých zárodků x vypočítat xxxxxx. Xx xxxxxxx xx xxxxx jednotlivě xxxxx xxxxxxxx xxxxx zárodek. X xxxxxxx, myší x xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx třetiny xx xxxxxxxx xxxx x x xxxxxx vhodnými xxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxx důkladně xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x skeletu.
2. ÚDAJE
Xxxxx je třeba xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, počet xxxxxx, která xxxxxxxx, xxxxx x procento xxxxxx zárodků x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx měkkých xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. ZPRÁVA
3.1. Zpráva x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xx xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx) a xxxxxxxxxxx,
- projevy xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxx xxxxxx (xxxxx xx xxxx možno xxxxxxxx),
- dobu xxxxx xxxxx studie xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xxxxx xxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxx o xxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxx (živé/mrtvé, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),
- xxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxx (živé/mrtvé xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.32. XXXX XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx zvířata denně xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx vývinu xxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
Xxxxxxx xx chovají x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx ustájení x krmení xxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x exponovaných xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx i xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx zvířata x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx co xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx by neměl xxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx než ± 20 % od xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx subchronické xxxxxx toxicity, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x kmen x obou xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx hlodavce se xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 samic x 50 xxxxx) xxx každou xxxxxx xxxxx a souběžná xxxxxxxxx skupina. Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x negravidní. Xx-xx xxxxxxxxx průběžné xxxxxxxx xxxxxx, počty xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx úrovně x frekvence expozic
Xxxxx se xxx xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity, xxxx xx xxxxx pokles xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxxx xxxx dožití xxxxxx jinými xxxxxx xxx xxxxxx.
Nejnižší xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx růstem, vývojem x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Střední dávku/dávky xx třeba stanovit xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx dávkou.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxxx x xxxxx předchozí xxxxx x xxxxxx toxicity.
Xxxxxxxx xx provádí xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx podávána x xxxxx xxxx nebo xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx expozice testované xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx vehikulu.
1.2.5 Xxxxxx aplikace
Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx orální, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx podání xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx charakteristikách xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx vstřebává x gastrointestinálního xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx může xxx xxxxxxxxx člověk, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, pokud nejsou xxxxx xxxx nějaké xxxxxx. Xxxxxxx mohou xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxxxxxxxx x pitné vodě xxxx xxxxxxx v xxxxxxx.
Ideálně by xx měla xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, protože xxxxxxxxx xxx xxx x týdnu může xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" příznaky x xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Nicméně, xxxxxxxxx x ohledem xx xxxxxxxxx aspekty, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx může být xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx cesty vstupu x xxxxxxx x xxxx modelový xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx komplikovanější než xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx zde uvedeny xxxxxxxxxx informace o xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx specifických xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané lidské xxxxxxxx, xxxxx zvíře xx obvykle xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx denně xx pět dnů x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), nebo v xxxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx x xxxxx (kontinuální xxxxxxxx), x přibližně xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx x pro xxxxxxx expozičního xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx přerušovanou x xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, xx x první xx zvíře 17 - 18 xxxxx xx ústup xxxxxx xxxxx expozice s xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx víkendu.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx má být xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx vzít v xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Například, výhody xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx zevního xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx pití x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx par x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Zvířata xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx zaručuje dynamický xxxxx pro xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx zajištěn dostatečný xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx distribuce expoziční xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx minimalizovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx neměl přesáhnout 5 % xxxxxx xxxxxx.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(a) Xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(x) Koncentrace: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx hodnoty.
(x) Teplota x xxxxxxx: xxx hlodavce, xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °X x xxxxxxx x komorách 30 - 70 % xxxxx případů, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x rozptýlení xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx kontrolovány průběžně.
(x) Měření xxxxxxxxx xxxxxx: měla xx xxx stanovena distribuce xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx x respirabilní velikosti xxx xxxxxxx testovací xxxxx. Xxxxxx atmosféry xxxxx xx odebírají x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Vzorek vzduchu xx xxx být xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx respirabilní. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x poté během xxxxxxx xxx xxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx větší xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx test. Test xx měl být xxxxxxx v 18 xxxxxxxx x myší x xxxxxx a 24 xxxxxxxx x xxxxxxx. Nicméně, pro xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx xxxxx xxxxxx resp. x xxxxxx spontánním xxxxxxxx xxxxxx doba xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 měsíců pro xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Alternativně, xxxxxxxx takové xxxxxxxxxxx xxxxxx xx přijatelné, xxxx počet xxxxxxxxxxxxx x nejnižší xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx na 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx zřetelný xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx pohlaví se xxxxxxxx zvlášť. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx skupina s xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx příčin, xxxxxx to xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx testu, pokud xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, které xx xxxxxx problémy. Xxx bylo možno xxxxx negativní výsledek xxxxx, xxxxx být xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, kanibalismem xxxx x důsledku xxxx xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx xxxxx než 10 % a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx u myší x xxxxxx a x 24 měsících x potkanů.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxx, xxx a xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Pravidelná xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx příznaky x mortalita xx xxxx xxx zaznamenány x xxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx objevení, xxxxxxxxxx, rozměry, vzhled x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx vodě) týdně xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx a pak xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx váhy xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx xxxxxx testu x aspoň xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Klinická vyšetření
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Pokud pozorování xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x zhoršeném xxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxxxx xxxxxx, xx xxxxx vyšetřit diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xx 12 xxxxxx, xx 18 měsíců x před utracením xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx zvířat. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx vzorcích xx xxxxxx ve xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx a x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, diferenciál xx xxxxxxx x x skupiny x xxxxxx nejblíže xxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Pitva
Kompletní xxxxx xx měla xxx provedena u xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx, xxxxx zemřela xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx nemocná. Všechny xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx, xxxx xxxx, xxxxx by xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x tkáně xx měly být xxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx (včetně xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, játra, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, děloha, akcesorní xxxxxxxx xxxxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxxxx, xxxxx, slepé xxxxxx, xxxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, svalovina xxxxxx, xxxxxxxxx nerv, xxxxxxx s kostní xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx kloubu, xxxxx xx třech xxxxxxxx (xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x bederní) x xxx.
Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx studiích xx xxx xxx xxxxxxx xxxx respirační xxxxx včetně nosní xxxxxx, hltanu a xxxxxx.
1.3.2.3 Histopatologické xxxxxxxxx
(x) Xxxxx histopatologie xx xxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx během testu, x x všech xxxxxx skupiny xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx.
(b) Xxxxxxx xxxxxx viditelné okem x léze, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx.
(x) Xx-xx xxxxxxxx rozdíl x xxxxxxxxx neoplastických lézí xxxx skupinou x xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx skupinou, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx tkáni x x dalších skupinách.
(x) Je-li xxxxxxx xx skupině x xxxxxxx xxxxxx podstatně xxxxx než u xxxxxxx, xxxx by xxx kompletně zkoumána x skupina x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
(x) Xx-xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx xxxxxx, které xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxxxxxxx odpověď, je xxxxx kompletně vyšetřit xxxxxxxx nižší xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx každou testovanou xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx zjištěné xxxxx xxxxx, doba xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx utracení. Výsledky xx hodnotí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxx xxx xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx o xxxxx xxxx, pokud xxxxx, obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, dieta,
- xxxxxxxx testu: Xxxxx expozičního zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, zdroje vzduchu, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, zneškodňování xxxxxxx vycházejícího z xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx je xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot a xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x měly xx xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx x xxxxxxxxxx zařízení,
(x) teplotu x xxxxxxx xxxxxxx,
(c) xxxxxxxxx koncentrace (xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx děleno xxxxxxx xxxxxxx),
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx použito,
(x) skutečné xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
(x) xxxxxxx velikosti xxxxxx (xxx xxx xx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx úrovně (včetně xxxxxxxx, je-li užito) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx tumorů podle xxxxxxx, xxxxx x xxxx tumoru,
- xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznak x xxxx xxxxx xxxxx,
- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x výsledky,
- nálezy xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické zpracování xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.33. KOMBINOVANÝ XXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx chronické xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx tento xxxx xx xxxx karcinogenity xxxxxxx alespoň jednou xxxxxxxxxxx satelitní skupinou x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Dávka xxxxxxx xxx tuto xxxxxxxxx xxxxxxx může xxx xxxxx xxx nejvyšší xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx karcinogenity. Xxxxxxx x xxxxx karcinogenity xxxx xxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx karcinogenní xxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx toxicitu.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx dní x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx zvířat, jedna xxxxx xx xxxxxxx, xx větší xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx pozorována xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxx započetím xxxxx. Před xxxxxx xx xxxxx zdravá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolních a xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Experimentální xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx použít x xxxxx druhy (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx kmenů xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx měla být xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx mláďat. Xx xxxxxxx studie xx xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx třeba použít xxxxxx xxxx x xxxx x obou xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx použije xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx a 50 xxxxx) xx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx kontrolní skupina. Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxxxx se zvýší x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Exponovaná satelitní xxxxxxx (skupiny) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jiné, xxx xxxx xxxxxx, xx každá xxxx xxxxxxxxx 20 zvířat xxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx satelitní skupina xxxxxxx xx měla xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Dávkové xxxxxx a frekvence xxxxxxx
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx tři dávkové xxxxxx xxxxx souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity, xxxx xx mírný pokles xxxxxxxx xxxxxxxxx (méně xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxxx xxxx dožití xxxxxx jinými xxxxxx xxx tumory. Nejnižší xxxxxxx úroveň xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx. Xxxxxx by neměla xxx xxxxx xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Střední dávku/dávky xx xxxxx stanovit xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx testy x xxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx chronické xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx satelitní xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx exponovaná satelitní xxxxxxx xx měla xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx denně. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x pitné vodě xxxx přimíšena xx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx k xxxxxxxxx.
1.2.4 Kontroly
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx v každém xxxxxx x exponovanou xxxxxxxx, vyjma expozice xxxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx studie x aerosoly xxxx xxxxxxx-xx se xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx biologická aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Způsob aplikace
Xxx hlavní cesty xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x inhalační. Xxxxx xxxxxxx podání xxxxxx xx fyzikálních x xxxxxxxxxx charakteristikách xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx expozice x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Tam, kde xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x je-li xxxxxx xxxxx z xxxx, jimiž xxxx xxx xxxxxxxxx člověk, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx proti xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx v xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x tobolce.
Xxxxxxx xx se xxxx xxxxx podávat sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx vést x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx vyvolat "abstinenční" xxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx výsledky x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx považováno xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Dermální xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx kůži xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx cesty xxxxxx x xxxxxxx x jako xxxxxxxx xxxxxx vyvolání xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx inhalační xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Intratracheální xxxxxxxxx xxxx xxx platnou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx napodobují xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx xx xxx xxx v týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx sedm dní x xxxxx (kontinuální xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx i xxx čištění xxxxxxxxxxx xxxx. V obou xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx rozdíl mezi xxxxxxxxxxxx a stálou xxxxxxxx je x xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx na ústup xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx delším xxxxxxx xxxxx víkendu.
Xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx cílech xxxxxx x na lidské xxxxxxxx, která xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Například xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx simulaci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxx nutností xxxx x krmení xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx komplikovanější (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx aerosolu xxxx určité xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx komory
Xxxxxxx se exponují x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx konstrukce xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx za hodinu, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x rovnoměrná xxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry. Kontrolní x expoziční komory xx xxxx mít xxxxxxxxxx konstrukci, tak xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx komory se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxx xx brání xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx měly minimalizovat xxxxxxxxxx testovaných zvířat. Xxxxxx xx x xxxxx udržení xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx zvířat xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zahrnuje:
(x) průtok xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx by měla xxx xxxxxxx kontrolována xxxxxxxxxxx,
(x) koncentrace: xxxxx denní expozice xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísat xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx: pro xxxxxxxx, teplota xx xxxx xxx udržována x xxxxxxx 22 ± 2 °X x vlhkost x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x atmosféře komory. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx aerosolů. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx x respirabilní xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvíře. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx z dýchací xxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx reprezentativní pro xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx by xxxxxxxxxxxxx odpovídat xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aerosolu, i xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx velikosti částic xx měla xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x poté xxxxx expozic xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx posoudit stabilitu xxxxxxxxxx částic, kterým xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx studie
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx normální xxxx života xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x 24 měsících x xxxxxxx. Nicméně xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx života xxxx. x nízkým spontánním xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxx by měla xxx 24 xxxxxx xxx myši x xxxxxx x 30 xxxxxx xxx potkany. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxx nebo v xxxxxxxxx xxxxxxx klesne xx 25 %. Xxx ukončení testu, xx kterém xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx pohlaví xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, nemusí to xxxxx vést x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx skupiny xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx činily xxxxxxxx. Aby xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testu, nesmí xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) v xxxxx skupině větší xxx 10 % x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % x 18 měsících u xxxx a xxxxxx x x 24 xxxxxxxx u xxxxxxx.
Xxxxxxxxx skupiny 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxx v xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx utracení xxx, xxx umožnilo xxxxxxxx patologie, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, od xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx pozorování xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx a xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x centrálního xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování.
U xxxxxx exponované satelitní xxxxxxx (xxxxxx) xx xxxxxxx x přiměřených xxxxxxxxxxx klinické xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat xx xxxxx, aby xx xxxxxxxxx ztrátám xxxxxx xx studie xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx zvířata xx xxxx xxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Xxxxxxxx příznaky xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a očních xxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx každého xxxxxxxxxxx xx hmatného xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Je xxxxx xxxxxxxx měření xxxxxxxx potravy (x xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx během xxxxxxx 13 týdnů x pak přibližně xx xxxxxxxxxxxx intervalech, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx váhy xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx hmotnosti xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 týdnů xxxxxx testu x xxxxx xxxxxx za xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Hematologická xxxxxxxxx (např. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx měření srážlivosti) xx xxxx xxx xxxxxxxxx za xxx xxxxxx, xxxx měsíců x xxxx x xxxxxxxxx šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx skupiny. Xxx xxx je to xxxxx, xxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx xx xxxxx potkanů.
Pokud xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx svědčí o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx během studia, xx xxxxx vyšetřit xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx.
Diferenciál xx xxxxx xxxxxx krvinek xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx zvířat xx skupině x xxxxxxxx xxxxxx x x kontrol. Xxxxx xxxx data xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx se xxxxxxx x u xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx od 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx možno xx xxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hematologické xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx stanovení xxxx provedena xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx vzorku pro xxxxxxx podle xxxxx x xxxxxxx:
- xxxxxx moči, objem x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxx, glukóza, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X přibližně xxxxxxxxxxxxxx intervalech a xx závěr jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx všech nehlodavců x 10 potkanů xxxxxxx pohlaví, xxxxx xxxxx xxx tytéž xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx. Xx nehlodavců xx xxxxx toho xxxxxxxx vzorky před xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkoušky:
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, aktivita glutamát xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), xxxxxxxx xxxxxx transaminázy2), gamma xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxx, např. krevní xxxxxxx na xxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx močoviny x xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx sérová xxxxxx aminotransferáza
2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx pitva xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx včetně xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx nebo xxxx utracena x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx krve xxxxx xxxxxx pro diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx viditelné léze, xxxxxx xxxx xxxx, xxxx léze, xxxxx xx xxxxx být xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Mělo xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx týká následujících xxxxxx x xxxxx: xxxxx3) (prodloužené míchy/mostu, xxxxxxxxx kory, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx mozkového, xxxxxx žlázy x xxxxxxxxxxx tělísek, xxxxx, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, xxxxx, slinných xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterníku, xxxxxx, xxxx, slepého xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, močového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, gonád3), akcesorních xxxxxxxxxx xxxxxx, samičí xxxxxx xxxxx, kůže, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), sterna x kostní xxxxx x stehenní xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Naplnění xxxx x močového xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx ke konzervaci xxxxxx xxxxx; naplnění xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx odpovídající xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, hltanu x xxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx k xxxxxxxxx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
3) Tyto xxxxxx x 10 xxxxxx xx pohlaví x xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vysokou xxxxxx x xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxxxxx nevyšší xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, vyšetří xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x ze xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx testování xxxxxxxxxxxxx:
(x) úplná histopatologie xx xxxxxxx x xxxxxxxx x tkáních xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx xxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx;
(x) všechny xxxxxx viditelné xxxx x xxxx, xxxxx xxxx podezřelé xxxx xxxxxx, se vyšetří xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx;
(c) xx-xx xxxxxxxx rozdíl v xxxxxxxxx neoplastických xxxx xxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx skupinou, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx tkáni i x xxxxxxx xxxxxxxxx;
(x) je-li xxxxxxx xx skupině x xxxxxxx dávkou podstatně xxxxx než x xxxxxxx, měla by xxx kompletně zkoumána x xxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx;
(x) je-li xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx doklad x xxxxxxxx toxických nebo xxxxxx účinků, které xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx dávkovou xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx zjištěné xxxxx xxxxx, dobu xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx. Výsledky xx hodnotí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx konstrukce, xxxx, xxxxxxx, zdroje vzduchu, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx používá. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, a xxx, xxx xx xx xxxxxxx, stability xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) xx měly xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx inhalační xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
(x) xxxxxx vehikula, xx-xx xxxxxxx,
(e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx,
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx úrovně (xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxx) x koncentrace,
- xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxx xxxxxx,
- doba xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx podle xxxxxxx a xxxxx ,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx abnormální xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,
- data x xxxxxxxx xxxxxxx x tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx použitých xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.34. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx podává několika xxxxxxxx xxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxx a xxxxxxx x průběhu xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x xxxx x 70 xxx x potkanů), aby xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinek testované xxxxx na xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx rodičovské xxxxxxxx (X) dostávají xxxxx xx dobu xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxxx. V xxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxxxxx obou xxxxxxx, x xxxx gravidity x kojení xxxxx xxxxxxx.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx - kontrolní x exponované xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx chována xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx pokusu x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx experimentu.
Xxxxxxxxxx xx testovanou xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx dostávají xxxxxxx xxxxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx používá x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx účinky. Xxxxx se xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx myším. Používají xx xxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx x nízkou xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx co xx druhu, xxxxx, xxxxxxx x xxxx x/xxxx věku. Xxxxxxxx xxxx xxx ověřena xxxxxxx xxxxxxxx u xxxx xxxxxxx. Zvířat x obou xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x kontrolní, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx zahájením xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxxxx exponovaná i xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx chování x X xxxxxxxx, xxxxxx, xxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 xx xxxxxx do xxxxxxx.
1.2.3 Podmínky testu
Xxxx x potravu xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xx xxx xxxxxxxxx materiál xxx xxxxxxxxx hnízda.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Použijí se xxxxxxx xxx exponované xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vehikulum, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dostávají xxxxxxxxx x xxxxxxxxx použitém xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x využití xxxxxxx, xx třeba uvážit xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, spárované xx xx výživy.
Xxxxxxxxx xxxxx v nejvyšší xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxx případě - xxxxx xx není xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx uhynutí x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Střední xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx minimální xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx dávka by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx x xxxxxx xxx x potomstva.
Xxx xxxxxx sondou xxxx x tobolkách xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x xxxxxxxxxxxx xx každý xxxxx xxxxx xxxxx xxxx. X případě xxxxxxxxx xxxxx dávky xxxxx být xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxxxxxx žádným xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx x matek xxxxx xxxxxxxx toxicity, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Popis xxxxxxx
1.3.1 Xxxx pokusu
Denní xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) začne xx věku xxxx xx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx po xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx týdnů xxxx xxxxxxx připouštění (8 xxxxx pro xxxx). Xxxxx se xxx utratí x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, nebo xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxx použiti xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx xxx xxxxxxxx a vyšetřeni xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) začne xx xxxxxxxxx aklimatizaci a xxxxxxxxx xxxxx dva xxxxx před obdobím xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pak xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, v xxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx X1 xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx plánu xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx studované látky, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x jeden xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx dvěma samicím).
X případě 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x týmž xxxxxx xx společné xxxxx xx xxxxxxxxxx anebo xx xxxx 3 xxxxx. Každé ráno xxxx xxxxxx vyšetřeny xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx, u xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx třeba vyšetřit x xxxxx xxxxxxx xxxxx neplodnosti xxxx. Xx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x oplodnění x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx vyšetřením xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Velikost xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx plodnosti je xxxxxxxxx možnost xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx x své xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx vrhů xxxxxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx postup: xxxx 1. x 4. xxxx xx xxxxxx xx velikost všech xxxx upraví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx jedinců tak, xxx xx dosáhlo xxxxx 4 samců x 4 samic xx xxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx standardizovat xx jiné xxxxx, xxxx. 5 xxxxx x 3 samice. Xxxx xxxxx než 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx jednou xx xxx. Xxxxxxxx změny xxxxxxx, xxxxxxxx ztíženého xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x všechny xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Příjem xxxxxxx xx měří xxxxx xxx xxxx, xxx během doby xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx porodu a x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx (a xxxx, xxxxx xx látka xxxxxx x pitné xxxx) ve stejný xxx, kdy xx xxxxxxxxx váženo. Xxxxxxxxxx X xxxxxxx xx xxxx xxxxx den xxxxxxxx a pak xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
Doba xxxxxxx xx xxxxxx xx xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx se xx xxxxxxxx xx xxxxxx vyšetří a xxxxxxx xx xxxxx x pohlaví xxxxxx, xxxxx mrtvých x xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx hrubých anomálií.
Xxxxx mláďata x xxxxxxx utracená ve xxxxxxx dnu xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx x celé xxxx xx xxxxx xxxx po porodu, xx 4. a 7. xxx x xxxxx každý xxxxx xx ukončení xxxxxx, xxx xxxx zvířata xxxxxxx individuálně. Xxxxxxxx xx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Patologie
1.3.5.1 Xxxxx
Xx utracení xxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx abnormality xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pozorností x xxxxxxx reprodukčního xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx vyšetří xx defekty.
1.3.5.2 Histopatologická xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, semenné váčky, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx X xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X případě, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a skupiny xxxxxxxxxxx nejvyšší xxxxx x xxxx x xxxxxx, xxxxx zemřela x průběhu xxxxxx.
Xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, se xxxxxxx i x X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx postižené. Xxx xxx bylo xxxxxxx, xxxxxxxxxxx orgány xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxx xxx podrobit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Data xx sumarizují v xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxx každou xxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, počet plodných xxxxx, počet xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx x procento zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Zpráva x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx zvířat,
- xxxxx o xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x životaschopnosti,
- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx pokusu,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx hmotnost potomků,
- xxxxxxx x xxxxx účinky xx xxxxxxxxxx, potomstvo x xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx hmotnost xxxxxx X xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.35. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - DVOUGENERAČNÍ XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Samci xxxxxxxxxx (X) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku x xxxx xxxxx x xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx spermatogenního cyklu (xxxxxxxxx 56 xxx x xxxx x 70 xxx x xxxxxxx), aby xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky xx spermatogenezu.
Samice xxxxxxxxxx generace (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinek xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx, x době xxxxxxxxx x kojení, xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xx látka xxxxxxxx zvířatům xxxxxxxx xxxxxxxx F1 x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, x době xxxxxx x xx xx xxxx xxxxxxxxx X2 generace.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx zahájením xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx - kontrolní x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Rodičovská xxxxxxx (X) xxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx podávat v xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx možné. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx dostávají xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx celého xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx x nich xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 dní x týdnu.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxx P xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx s nízkou xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx charakterizována xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxx xxxx věku. Plodnost xxxx xxx xxxxxxx x xxxx pohlaví. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Počet x xxxxxxx
Každá xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x přibližně xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, a xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x mateřské xxxxxxx, xxxxxx, růst x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 xx početí xx xxxxxxxxxx, x xxxxx jejich xxxxxxxxx xxxxxxxx X2 xx xx odstavení.
1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x xxxxxxx dostávají xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx přemístí xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx klecí x xx xxx poskytnut xxxxxxxx xxx vytvoření xxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx alespoň tři xxxxxxxxxx skupiny x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxx, pak zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, je třeba xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka v xxxxxxxx koncentraci má x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx to dovolí xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti látky x její xxxxxxxxxx xxxxxx, vyvolávat toxicitu x nikoli xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx populaci. Xxxxxxx xxxxx(x) xx xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, které xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látce, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx x xxxxxx xxx x xxxxxxxxx.
Při podání xxxxxx nebo x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx hmotnosti xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx týden podle xxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx samic, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxxx xxxx
V xxxxxxx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx dávka 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, nemusí xx xxxxxxxx studie na xxxxxx dávkových xxxxxxxx. Xxxxx předběžná xxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx toxicitu, nemá xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxx nutné xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx dávkových úrovních.
1.3 Xxxxx postupu
1.3.1 Plán xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx generace X začne xx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx pětidenní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. U xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx týdnů xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx xx buď xxxxxx x vyšetří xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx nebo se xxxxxxxxx x xxxxxxxx x jsou xxxxxxx xxx případnou xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx utraceni x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx samicím rodičovské xxxxxxxx X xxxxx xx pětidenní xxxxxxxxxxxx x pokračuje aspoň xxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxx xxxxx období připouštění, x době xxxxxxxxx xx xx odstavení X1 potomstva. Xx xxxxxxxxx změna xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, např. o xxxxxxx xxxxxxxxxxx resp. x xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx po odstavu x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx při xxxxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (jedna xxxxxx x xxxxx xxxxx) anebo 1 : 2 (jeden xxxxx ke xxxxx xxxxxxx).
V xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx x xxxx xxxxxx xx společné xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
Vzhledem x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, zvířata xxxxxxxx F1 xx xxxxxxxxxxx xxx připouštění xx věku 11 xxxxx u xxxx x 13 týdnů x potkanů. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxx generace X1 se xxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx vrhů xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Zvířata xxxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx.
Dvojice, x kterých nedojde x oplodnění, je xxxxx vyšetřit x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xx xx možné xxx xxxxxxxxxxx další xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx vyšetřením xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x pečovat x xxx potomstvo do xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti vrhů. Xxxxx se velikost xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, aby xx dosáhlo xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx na xxx; xxxxx xx xxxx proveditelné, xx xxxxx standardizovat xx xxxx počty, např. 5 samců x 3 samice. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Standardizace xxxx xxxxxxxx X2 xx provede xxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx být xxxxxxxxxx xxxxxxx jednou xx xxx. Významné změny xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx prodlouženého porodu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, včetně mortality, xx xxxxxxxxxxxxx. Příjem xxxxxxx xx měří xxxxx xxx xxxx, xxx během doby xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx xxxxxx kontrolovat xxxxxx xxxxxxx denně. Xx porodu x x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx xxx, kdy je xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X a X1 xxxxxxx se xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x pak týdně. Xxxxxxx pozorování se xxxxxxxxxxxxx individuálně xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx od xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx se xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a stanoví xx počty x xxxxxxx mláďat, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx defekty. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx vrhy xx xxxxx ráno xx xxxxxx, ve 4. x 7. xxx a xxxxx xxxxx xxxxx do xxxxxxxx studie, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Pozorují xx x xxxxxxxxxxxxx všechny xxxxxxxxxxx v chování x fyzickém xxxxx xxxxx a potomstva.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx zvířata xxxxxxxx X a F1 xx utrácejí, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx X1 nevybraná xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X2 xx utratí xx xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx nebo xxxxx xx všechna rodičovská xxxxxxx P x X1 xxxxxxxxxxxxx vyšetří xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx patologické xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx reprodukčního xxxxxxx. Xxxxxxx zemřelá xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx na defekty.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxx, děložní xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, koagulační xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxx P x X1 xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx nebyly xxxxxxx vyšetřeny x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx mikroskopické xxxxxxxxx x xxxxx X a F1 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx dostávající xxxxxxxx xxxxx, která xxxx vybrána xxx xxxxxxxxxxx, x xxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Orgány, xxxxx xxxxxx abnormality x xxxxxx skupin xxxxxx, xx xxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx postižené. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx orgány xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx mikroskopické xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, kde je xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx zpracovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x experimentu
Zpráva x experimentu xx xxxx pokud možno xxxxxxxxx následující údaje:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx odezvě x xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- toxické x xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx růst,
- xxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X x X1 xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx možné,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.36. TOXIKOKINETIKA
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx látka xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x průběhu xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Látka xxxx. xxxx metabolity xxxx xxx podle xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x exkretech.
Xxxxxx mohou xxx xxxxxxxxx x "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxx" formou xxxxxxxxx xxxxx. Jestliže xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx se xxx, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx informací x xxxxx sloučeniny v xxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Zdravá xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nejméně xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxxxx xx skupin. Xxx xxxxxx speciálních otázek xx xxxx použít xxxxx mladých, pregnantních xx premedikovaných xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx užití x xxxxxx toxikologických studiích xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx než ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxx nejprve 4 xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx dávku. Xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx podmínek xxxx xxxxxxxxx potřeba xxxxxxxx xxxxxx xx obou xxxxxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxx odpovědi x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx je třeba xxxxxxxx 4 zvířata xxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxx ostatních druhů xxxxxx (jiných než xxxxxxxx) xx možné xxxxxx menší xxxxx xxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx určení počáteční xxxxxxxxx skupiny xxxxxx xx xxxxx xxxx x úvahu xxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx utracena x xxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx xxxx, x nichž xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx-xx studován xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx je xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxx větší počet xxxxx x sledovaných xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx zvířat xx xxxx xxxxxxx x počtem časových xxxxxxxxx x plánovaným xxxxxxxxx xxxxxx, ale xx xxxxxxx nesmí xxx xxxx xxx 2 xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx být dostatečná xx xx, xxx xxx xxxxx resp. xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxx retence, xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx testované látky. Xxxx xx to xxx nízká dávka xxxxx, po xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxx, xx xxxxx mohou xxx xxxxxxxx změny v xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
V xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx dávek xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx nezbytné x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx způsobem aplikace x xx-xx xx xxxxxx i se xxxxxxx vehikulem xxx, xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Testovaná xxxxx xx obvykle podávána xxxxxx xxxxxx xxxx x potravě, xxxxxxxxxx xx kůži, nebo xxxxxxxx inhalačně xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx aplikace. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx získány xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x organismu.
Xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx vstřebávání x xxxxxxx, je-li testovaná xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx, x potřebě xxxxxxxx xxxxxxxxx dávky, xxxxxxx xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx měla xxx sledována denně x příznaky xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 Xxxxx postupu
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Ve zdůvodněných xxxxxxxxx xx možno xxxxxx zvířata xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
1.3.1 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx rychlosti x xxxxxxx absorpce xxxxxxxx xxxxx xxxxx být xxxxxxx různé xxxxxx x xxxx bez xxxxxxxxxx xxxxxxx1), x xx xxxx.:
- xxxxxxxxx množství testované xxxxx a xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx např. x xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx vzduchu a xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx biologické odpovědi (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) mezi xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx skupinou,
- porovnání xxxxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx plochy pod xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx metabolitů x xxxxxx na xxxx x porovnání x daty xxxxxxxxx x referenční skupině.
1) X této xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx, xx které xx xxxxxxxxx xxxxx podávána xxxxxxx xxxxxxxx, který xxxxxxxxx úplnou biologickou xxxxxxxxxx dávky.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
V xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx 2 přístupy, x xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx schématu xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxx:
- xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx získat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx informace;
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrací x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx x orgánech xxxxxxxxx xx xxxxxx x různých xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx zahájení xxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxxxx
Při xxxxxx vylučování xx xxxxx moč, stolice, xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx případech žluč. Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx podání xxxxx, a to xxx xx xxxxxxxxx 95 % x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 7 dnů xx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být potřebné xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxx v xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
K určení xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Měla xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx metabolitů x xxxxxxxx odpovídající metabolické xxxxxx tam, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx studií. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x metabolismu xxxx xxx xxxxxxxxx provedení xx vitro xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x toxicitou látky xxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx studií xxxx. xxxxxxx účinků látky xx enzymy xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx neproteinových xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx - XX xxxxxxx x xxxx xxxxx látky xx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxxx se podle xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, xxxxx možno xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx uvedou xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vztahu x xxxx, dávce, xxxxx x xxxxxxx (xxxxx xx xx relevantní). Xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxxx metodami. X xxxxxxx metabolických studií xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x navrženy metabolické xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu pokusu
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx by xxxxxx x xxxxx měla xxxxxxxxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxx podmínky, xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, jestliže xxx xxxxxx,
- xxxxxxxx dávky x xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx(x) xxxxxx x xxxxxxx použitá xxxxxxxx,
- xxxxxxx a x xxxxxxx pozorované xxxxxx,
- metody xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx x biologickém xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- tabulky xxxxxxxx xxxxxxxxx podle xxxxxxx, dávky, režimu, xxxx, xxxxx x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx,
- xxxxxx užité xxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v biologickém xxxxxxxxx,
- metody xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx,
- navrhované xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretaci xxxxxxxx.
X.37. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX - XXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx x vyhodnocení xxxxxxxxx xxxxxx látek xx xxxxxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxx studiích toxicity. X xxxxxxxx organických xxxxxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Vyšetřovací testy xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek, které xxxxx vyvolat pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx vitro xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, že látka xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx metody xxxx "xxxxxxxxx sloučeniny xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx anhydridy xxxxxxxx xxxxxxxxxx, fosfonové xxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo příslušných xxxxxxx thiofosforečných, thiofosfonových xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx látky, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, pozorovanou x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx syndrom xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx x periferním xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx příznaků, x dále xxxxxxxx x xxxxxxxxx specifické xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx target xxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx látky
Referenční xxxxx xxxx být xxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupině x xxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx testovaných druhů xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx neurotoxickým xxxxxxx je xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, EINECS 201-103-5, chemický xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (TOCP).
1.4 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx orálně x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx cholinergními účinky. Xxxxxxx xx po xxxx 21 dnů xxxxxxxx, zaznamenává se xxxxxxxxxx xxxxxxx, ataxie x xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx XXX, se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx 24 x 48 hodin xx podání xxxxx. 21 xxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx slepice xxxxxxxx x je provedeno xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných xxxxxxxxx tkání.
1.5 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.5.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx léčby x x normální xxxxx xx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, v jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx klece xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx chůze.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx orálně xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxx xxxx určeny xxxx testem xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti.
1.6 Experimentální xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx mladá xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx gallus xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx se xx podmínek, které xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
1.6.1.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx skupiny xx xxxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx.
X xxxxx skupině má xxx dostatečný xxxxx xxxxxx, aby xxxxx xxxx x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx biochemické vyšetření (xx xxxxx xxxx x druhý xxx xx podání) x xxxx xxxxxxx 21denní xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx použít xxxxxxxxx skupina x xxxxxxx historie. Má xxx xxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx látka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx jsou xxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, když xx x provádějící laboratoři xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. plemeno, xxxxxxx, xxxxxxxx chovu).
1.6.1.3 Volba xxxxx
Má xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx studie x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx slepic x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxx xxxxx v hlavní xxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx cholinergní xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx jiný xxxxxxxx xxxxxxxxx, o xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx x pozdními xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx maximální xxxxxxxxx xxxxx testovaných látek xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxx metoda B.1 bis). Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx informace xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxx výběru xxxxx.
Xxxxxx dávky xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx studii by xxxx být xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x výsledkům xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x hornímu xxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by neměly xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxxxxx (šest) x xx 21 xxxxx xxx histologii (xxxx). Xxxxxxx xxxx jiný xxxxxxxx přípravek, x xxxxxx xx xxxxx, xx neinterferuje s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinky, xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinky.
1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx x xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti, xx xxxxxxx postupů xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx s xxxxxxxxx strukturou xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx o xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx neprovádí, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x lidí naznačuje xxxxxxx xxxxxxx ještě xxxxx xxxxxx dávky.
1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx 21 xxx.
1.6.2 Xxxxx xxxxxxx
Xx aplikaci prostředku, xxxxxxxxxxxxx před xxxxxx xx xxxxxxxx akutního xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Pozorování xx začít xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx prvních xxxx xxx x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx 21 dní xxxx xxxxx nebudou utraceny xxxxx xxxxx. Veškeré xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxx, xxxx, stupně x xxxxxx xxxxxxxxxxxx chování. Xxxxxx xx hodnotí xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx nucené xxxxxxxxx xxxxxxxx jako např. xxxxxxxxxxx po xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Umírající zvířata x xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.6.2.2 Xxxxxxx hmotnost
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx látky a xxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.6.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxx vybraných x každé testované x xxxxxxxxx skupiny x vehikulem x xxx slepice x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx skupina xxxxxxx) xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx látky. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx NTE xx xxxxxx mozek x xxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx vypreparovat xxxx n. ischiadicus x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx XXX. Xxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxx x kontrolní x xxxxx testované xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolní skupiny xx xxxxxxxx xxxxx xx 24 hodinách. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx klinických xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxx pohybuje xxxxx pomalu (xxxxxxx xx nástup xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxx, a xx mezi 24 xx 72 xxxxxxxx xx xxxxxx látky.
X těchto xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxx analýza xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (AChE). Xx xxxx může však xxxxxx spontánní reaktivace XXxX, což může xxxx k podcenění xxxxx xxxx inhibitoru XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Pitva u xxxxx xxxxxx (plánovaně xxxxxxxxxx x utracených xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx mozku x xxxxx.
1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx) se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx in situ xx použití xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), prodloužená mícha, xxxxx - xxxx xxxxx se xxxxxxxxx x horní xxxxx xxxxx, střední hrudní x xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx distální část x x. xxxxxxxx (x xxxx xxxxx x x. gastrocnemius) x z x. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx specifickými barvivy xx myelin x xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx touto xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx) běžně xxxxxxxxxx xxxxx testování xx pozdní neurotoxicitu. Xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx sledování.
Xxxxxxx xx údaje xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx účinků x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Výsledky xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x korelace xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Číselné výsledky xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx x xxxx plánované xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxx zvířata:
- použité xxxxxxx;
- xxxxx x xxxxx zvířat;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Podmínky xxxxxxxxx:
- podrobné xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula;
- podrobné údaje x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxxx podávaných xxxxx, včetně xxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx aplikované xxxxx;
- podrobné xxxxx x xxxxxx ochranného xxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxx x tělesné xxxxxxxxx;
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxx, stupeň x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx);
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich výsledky;
- xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, u xxxxxxx xx xx xxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Hodnocení x Interpretace
4. XXXXXXXXXX
Xxxx metoda je xxxxxxxxxx s xxxxxxx XXXX TG 418.
B.38. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX SLOUČENIN XXXXXXX 28DENNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx látek xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, který xxxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X určitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx fosforu xxxx xxxxxxxxxx zpožděné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Vyšetřovací testy xx vitro xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Negativní xxxxx x in xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx 28xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x možném xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxx opakovaných během xxxxxxxx krátkého xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx odpovědi xx dávce a xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx xxxxx nepříznivé xxxxxx. Tato xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx bezpečné xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx jako "organické xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx neutrální xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kyseliny fosforečné, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, nebo jiné xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx pozdní neurotoxicitu, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx této xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x míše x xxxxxxxxxx nervu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, a xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx esterázy - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxx tkáni.
1.3 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxx sledována nejméně xxxxxx denně, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx chování, xxxxxx x paréza xxxxx 14 xxx xx poslední xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, zvláště xxxxxxxx XXX, se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xx poslední xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a je xxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx slepice xxx xxxxxxxxxxxxxxx virových xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx xxxxx se náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx zahájením studie xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx velké klece xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx slepic x xxxxxx pozorování xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxx, xxxxx 7 dní x týdnu, buď xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tekutiny xx xxxxxxxx neředěné xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxx xx xxxx. kukuřičný olej. Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx pevných látek x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vstřebat. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx před xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.4.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Doporučuje xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Gallus xxxxxx xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 až 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, které dovolují xxxxx pohyb.
1.4.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem. X výjimkou aplikace xxxxxxxxx látky se xx xxxxxxx v xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxx xx být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxx x xxxx mohlo xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx vyšetření (xx xxxxx x každém xx xxxx xxxxxxxx xxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pozorování xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.3 Xxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x přihlédnutím xx xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx testu xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxx x toxicitě xxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, nejlépe xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, nezpůsobit xxxxx uhynutí xxx xxxxxx utrpení. Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx umožní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxx příznaky toxicity.
1.4.2.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx x xxxxxx xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx x xxx, za xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx studii, xxxxxxxx xxxxx pozorované toxické xxxxxx a jestliže xxxxx údajů x xxxxx x příbuznou xxxxxxxxxx xxxx důvod xxxxxxxx xxxxxxxx, pak xxxx třeba xxxxxxxx x xxxxxx s xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, pokud expozice xxxxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ještě xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx zvířata xx xxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx xx xxxx expozice x 14 xxx xx xx, nebo do xxxxxxxx a do xxxxx xxxxx xxxxx.
1.4.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se podává xxxx xxx x xxxxx po 28 xxx.
1.4.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx 28 xxx a dalších 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx příznaky xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx, stupně x trvání. Xxxxxxxxxx xx zahrnovat xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx nemá xx na xx xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx týdně xx slepice xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx nucené motorické xxxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxx po žebříku, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Umírající xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti je xxxxx xxxxxxxx, humánním xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
1.4.3.2 Tělesná xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx těsně xxxx xxxxxx xxxxxxx testované xxxxx a pak xxxxxxx xxxxxx týdně.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Xxxx slepic xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny x xxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxx analýzu xxxxxxxx NTE xx xxxxxx mozek x xxxxxxxx mícha. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx také x. xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx jeho tkáň xx inhibici XXX. Xxxxxxx xx usmrcují xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupiny po 24 xxxxxxxx a xxxxx xxx po 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx studie xxxx xxxxxx studií (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx použít xxxx xxxx x xxxxxxxxxx uvést x xxxxxxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx acetylcholinesterázy (AChE). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx AChE, což xxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxx XXxX.
1.4.3.4 Pitva
Xxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx posouzení stavu xxxxx x xxxxx.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx x přeživších xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx fixují xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: mozeček (xxxxxxx xxxxxxx řez), prodloužená xxxxx, xxxxx (řezy xxxxx se xxxxxxx x horní xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx), x xxxxxxxxxxx nervů xx xxxxxxx xxxxxxxx část x n. xxxxxxxx (x jeho xxxxx x x. gastrocnemius) x x x. xxxxxxxxxxx. Řezy xx xxxxx specifickými xxxxxxx xx myelin x xxxxx.
Nejprve se xxxxxxx fixované xxxxx xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx x skupiny x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx histologické vyšetření x xx xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx střední x nízkou.
2. XXXX X ZÁZNAM ÚDAJŮ
Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, histopatologie a xxxxx xxxxxxx) negativní, xxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx neurotoxicitu. Neprůkazné xxxx neurčité xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxx xxx jednotlivá xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, změny xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, typy a xxxxxx těchto xxxxxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx vyhodnotí x xxxxxxxx výskytu, xxxxxxxxxx x korelaci mezi xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x testovaných x kontrolních xxxxxx.
Xxxxxxx výsledky je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se zvolí xxx x době xxxxxxxxx studie.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx plemeno,
- xxxxx x xxxxx xxxxxx,
- xxxxx, xxxxxxxx ustájení xxx.,
- xxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx testování:
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, stabilitě x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx o potravě x xxxxxxx xxxx,
- xxxxxxxxxx vybrané xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx podávaných xxxxx, xxxxxx podrobných údajů x vehikulu, xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx doby pro xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, je-li jiná xxx 24 x 48 xxxxx.
Výsledky:
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx (NOAEL),
- xxxxxxxxx, stupeň a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx),
- podrobný xxxxx biochemických vyšetření x xxxxxx výsledky,
- pitevní nálezy,
- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx xxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Xxxxxxxxx x Interpretace
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x metodou XXXX TG 419.
X.39. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX TG 486, Xxxxxxxxxxx XXX Synthesis (XXX) Xxxx Xxxx Xxxxxxxxx Liver Xxxxx Xx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Účelem xxxxx xxxxxxxxxxx syntézy DNA (xxxxxxxxxxx XXX synthesis, XXX) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx je xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx reparaci XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx pokusných zvířat (1) (2) (3) (4).
Xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x játrech. Xxxxxxxx testu xxxxxxxx xxxxxxxxx DNA v xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx reparaci. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sloučenin; xxxx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX in xxxx.
Xxxxxxxx-xx doklady x xxx, že se xxxxxxxxx látka do xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx test xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (XXX) xx xxxxxxx tak, xx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nukleosidů x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (X-xxxx) xxxxxxxx DNA. Xxxxxxxxxxx xx metoda, xxx xxxxx xx autoradiograficky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (3X-XxX). Pro xxxxx XXX xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx potkaní xxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxx se sice xxxx xxxxx použít, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx DNA, xxx jsou x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x nahrazeny. Xxxxx xx xxxxxx UDS xxxxxxx vhodná x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx xxx látky xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxxx" (1 - 3 xxxx) xx xxxx xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx k xxxxxxx x xxxxxxxx neopravení, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx lézí XXX. Rozsah odpovědi XXX xxxxxx xxx x přesnosti xxxxxxx xxxxxxxx. Mimoto xx xxxxx, xx mutagen xxxx xxxx s XXX xxxxxxxx, ale xxxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxx excizním xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx, že XXX xxxx neposkytuje x mutagenní xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxx.
1.2 DEFINICE
Buňky x xxxxxxxx: xxx xxxxxxx grain (XXX) xxxxx než xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx laboratoř xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxx xxxxxxx grains (NNG): xxxxxxxxxxxxx xxxx XXX xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xxxxxxxxx jako xxxxxx xxxx xxxxxx xxx x xxxxx (XX) x xxxxxxxxx xxxxxx xxx x cytoplasmě (XX): XXX = XX - XX. Xxxxx XXX xx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx kulturách xxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX): xxxxxxx syntéza XXX po excizi x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxxxx oblast xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemickou xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 PRINCIP XXXXXX
Xxxx XXX v xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx xxxx indikuje xxxxxxxxx syntézu XXX xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx XXX xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx nízkým xxxxxx xxxxx v X-xxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxxxxxx 3H-TdR xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx tato xxxxxxxx xxxx xxx náchylná x interferenci x xxxxxxx x X-xxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Výběr xxxxxxxxxxx xxxxx
Běžně xx xxxxxxxxx potkani, xxx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx rozdíly xx xxx zahájení xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x u xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx xxxxx x části X.
Vlhkost xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Zdraví xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolní x xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x po xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx zvířata aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx je třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx minimalizovaly případné xxxxx toho, jak x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.2 Testovaná xxxxx/xxxxxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx x pevném xxxxx a je-li xx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxxx xxxxx xxxx se xxxx xxxxxxxxx ředí. Xx třeba používat xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.3 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se ne xxxxxx xxxxx rozpouštědlo, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby xxx xx xx možné, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / vehikulum.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Xx každého xxxxx je xxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxx, xxx lze xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivaci se xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx odezvě (4). Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se volí xxx, xxx byly xxxxxx patrné, xxx xxxxxx nenapovídaly hodnotiteli xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxx xxxxxx xxxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx x xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 xxxxx) | X-2-xxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx xxxxx použít x xxxx vhodné xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní kontroly xxxxx cestou, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx skupině xxxx xxx minimálně xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxx.
Pokud x době, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx x týmž xxxxxxxxxx xxxxxx využívajících xxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx, xx mezi xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x toxicitě xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jak je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx farmaceutických xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx odpovídajícího xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Obvykle xx používají dvě xxxxx dávky. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx dávka vyvolávající xxxxxx známky xxxxxxxx, xx xxx xxxxx xxxxx xx stejném xxxxxx xx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx dávka xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % dávky xxxxx.
Xxxxx, xxx x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx případ xx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxx laboratoři x xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, pohlaví x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx dávku xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx vyvolávající určité xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxx. pyknotická xxxxx).
1.5.4 Limitní xxxx
Jestliže xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxx x jedné xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx a jestliže xx na xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nemusí xx xxxxxxx úplná xxxxxx. Xxxxx očekávané xxxxxxx xxxxxxxx může být xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx i jiné xxxxxxxxx xxxxx. Intraperitoneální xxxxxxxx xx však xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxx, xxxxxx krevním oběhem. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxx nebo injekcí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxx dávky xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx vykazují při xxxxxxx koncentracích xxxxx xxxxxx, je třeba xxxxxxx koncentrace xxxxx xxx, aby objem xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx 12 - 16 xxxxx po xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx je zapotřebí xxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 hodiny xx xxxxxx látky), xxxxxx xx xx 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxx i xxxx xxxx xxxxxx vzorků, xx-xx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx buněk xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx mohly xxxxxxxxx ke vhodnému xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx XXX
Čerstvě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx xxxx (xxxx. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xx potom xxxxx xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx nadbytek xxxxxxxxxxx thymidinu, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxx. "xxxx xxxxx"). Xxxxx se xxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx intervalech xxxxxx xx "cold xxxxx" xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx se xxxxxx do autoradiografické xxxxxx, xxxxxxxx ve xxx (např. xx xxxx jednoho xxxx xxxx xxxxx v xxxxxxxxxx), vyvolají, xxxxxx x počítají xx xxxxxxxxxx stříbrná zrna. X každého xxxxxxx xx xxxxxxxx dva xxxx xxx preparáty.
1.5.8 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx morfologií, xxx xxxx xxxxx UDS xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx zrn xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx obvykle hodnotí 100 buněk; xxxxx xx xxxxx xxxx xxx 100 na xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxxxx jádra x X-xxxx, xxx xxxxx buněk v X-xxxx xx registruje.
Xxxxxxx metodou xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx jader x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx normálních buňkách, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zrnek.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxx údaje z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxx shrnou x xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx "xxxxxxx xxxxx" (XXX) xxxxxxxxx xxxxx XX od xxxxx XX. Počítají-li xx "buňky x xxxxxx", xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x historických xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Numerické xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; pokud xx xxxxxxxxxxx testy xxxxxxx, xx třeba xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxx studie.
2.2 VYHODNOCENÍ X INTERPRETACE XXXXXXXX
Xxxxxxxx pro pozitivní/negativní xxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxxxx | (I) xxxxxxx XXX xxx předem xxxxxxxxxx prahem, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx historických xxx xxxx xxxxxxxxxx | |
xxxx | (II) xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxx | |
negativní | (X) xxxxxxx XXX na úrovni/pod xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx | |
xxxx | (XX) xxxxxxx XXX xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxxx. |
Xx xxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, což xxxxxxx, xx je xxxxx vzít v xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx variabilita xxxx xxxxxxxxxxxx jedinci, vztah xxxxx - odpověď x xxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx xxx pozitivní xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx získaného xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo problematické, x xxxx xx xxxxxxxxxx několikrát opakuje.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx ukazuje, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx DNA, které xxx opravit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxx. Xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nevyvolává xxxxxx xxxxxxxxx XXX, xxx xx xxxxx xxxxxx zjistitelné.
Je xxxxx xxxx x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx širokého xxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx pro určitou xxxxxxx tkáň (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx vehikula
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Pokusná xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- původ, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx a negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx rozpětí, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx volby x xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x podávání xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxx nebo xx cílové tkáně,
- xxxxxxxx převod xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (ppm) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx zjišťování xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx autoradiografická metoda,
- xxxxx připravených xxxxxxxxx x počet xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx zrn x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x "xxx xxxxxxx grains" xxx jednotlivé preparáty, xxxxxxx x xxxxxxx,
- vztah dávka-odpověď, xxxxx xx k xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx provedeno,
- xxxxxx xxxxxxxx,
- údaje xx xxxxxxxxxx negativních (rozpouštědlo/vehikulum) x pozitivních xxxxxxx,
- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx "xxxxx x xxxxxx", xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx x X-xxxx, xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Závěry.
Xxxxxx X.39. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.40. XXXXXXX XXXXXX XX KŮŽI
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxxxxx Centre xxx xxx Validation of Xxxxxxxxxxx Methods, ECVAM, Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx, Xxxxxxxx Commission) schválilo xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx: xxxx na principu xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx elektrického xxxxxx kůže xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx electrical xxxxxxxxxx, XXX) a test xxxxxxxxxxx modelu lidské xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX xxxxxxxxx, xx xxx testy xxxxxx xxxxxxxxxx rozlišovat mezi xxxxxxx xxxxxxx leptajícími x xxxxxxxxxxxxx kůži. Xxxxxx xxxx vycházející x xxxxxx lidské xxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx R35, x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kůže, X34). Je xxxxxx xxxxx a postupy xxxx testů; xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx konkrétních xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2 DEFINICE
Poleptání xxxx: způsobení xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.3 REFERENČNÍ XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx však xxxx. 1.5.3.4 x 1.7.2.3.
1.4 XXXXXXX XXXXXX - XXXX XXX XX XXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxxxxxxx povrch terčíků xxxx odebrané x xxxxxxx potkanů utracených xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx mají xxxxxxx xxxxxx, xxxx identifikovány xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx integritu x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.Xxxx xxxxxxxxx xx xxxx jakožto xxxxxx xxxxxxxxxxxx transkutánního xxxxxxxxxxxx odporu (TER) xxx určitou prahovou xxxxxxx (5xΩ) (4) (5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxx xxxxxxxx hodnotu xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxx a neutrálních xxxxxxxxxxx látek (xxxxxxx xxxxxxxx xxx x xxx. (6)) xx xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxx zařadit xxxx xxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx pozitivních výsledků, xxx se u xxxxxx xxxx chemických xxxxx vyskytují (2) (7).
1.5 XXXXX XXXXXX - TEST XXX XX KŮŽI POTKANA
1.5.1 Xxxxxxx zvířata
Pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23denní) potkani, Xxxxxx xxxx srovnatelný xxxx. Malými xxxxxxx xx xxxxxxx se xxxxxxx odstraní xxxx x xxxxxxxx x xxxxx plochy. Zvířata xx xxx xxxxx xxxxxxxx otíráním x xxxxxx xx xxxxxx xx roztoku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx streptomycinu, penicilinu, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx amfotericinu, x koncentracích xxxxxxxxxxxx xxxx bakterií. Xxxxx xxxx čtvrtý xxx xx prvním xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx znovu x xxxxx 3 dní xx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx 31 xxx.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx se humánním xxxxxxxx xxxxxx, sejme xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xx xx xxxxxxx xxxxxxx přebytečný xxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) trubice, x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx xx přetáhne gumový X-xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx připne, x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx trubice x X-xxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx X-xxxxxxx xx pak xxxxxxx xxxxxxx ke xxxxx TPFE xxxxxxx xxxxxx vazelínou. Xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX), kde je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sponou (xxx. 2).
1.5.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x tekutém xxxxx, xxxxxx se xx xxxxxxxxxxx povrch uvnitř xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xx terčík v xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx pokryl xxxx xxxxxx epidermis, xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xxxx xxx x xxxx maximální možný xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxx látek xxxx xxx xxxxxxxxx zahřátím xxxxx xx 30 xX, xxx xx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxx každou xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxx 24 hodin (xxx xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx xx promýváním xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx maximálně 30 xX xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx v xxxxxxx xxxxxx, xx xx napomoci vymýváním xxxxxxx xxxxxxx vody xxxxx xxxxxx 30 xX.
1.5.3.2 Xxxxxx XXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odpor (XXX) xx xxxx pomocí xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 či xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporu se xxxxx povrchové napětí xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% ethanolu, xxxxxx se pokryje xxxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx tak, xx xx xxxxxxx otočí, x tkáň se xxxxxxxxx xxxxxxxxx tří xxxxxxxxx 154 xX xxxxxxx xxxxxx hořečnatého. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxx xxxxxx kůže x xxxxx xx xxxxx x xΩ/xxxxxx (xxx. 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx krokosvorkou xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx navrch XXXX xxxxxxx tak, xxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Vnější (xxxxx) elektroda se xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, aby xxxxxx na xxx. Xx xxxxx dodržovat xxxxxxxxxx vzdálenost xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx XXXX xxxxxxx (xxx. 1), xxxx vzdálenost xx xxxx xx xxxxxxxx hodnotu xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx, xx je-li naměřený xxxxx xxxxx než 20 xΩ, xxxx xx být důsledek xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx povlak xxxxxxxxx, xxxxxxxxx tak, xx xx PTFE xxxxxxx xxxxxx palcem x rukavici x xxxxxx 10 xxxxxx xx protřepává, roztok xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx roztokem.
Průměrná xxxxxxxx hodnota XXX xx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx a negativní xxxxxxxx leží x xxxxxxxxx přijatelných xxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky a xxxxxxxxx akceptovatelná xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
&xxxx;
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx voda
|
10 – 25
|
1.5.3.3 Modifikovaný xxxxxx xxx povrchově xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx hodnota TER xxxxx xxxx rovná 5 xΩ, xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx hodnocení xxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx nejedná x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Nanesení x odstranění barviva xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou xx na xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx terčíků xxxxxx xx 2 xxxxxx xx 150 μx 10% (w/v) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x destilované vodě. Xxxxxxx kůže xx xxx zhruba xx xxxx 10 sekund xxxxxxxxx prudkým proudem xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xx xx xxxxxxxxx přebytečné (xxxxxxxxxx) xxxxxxx. Každý xxxxxx xxxx se xxx opatrně xxxxx x XXXX xxxxxxx x xxxxx do xxxxxxx (xxxx. do 20 xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx xxxx. Nádobky xx po dobu 5 minut xxxxx xxxxxx, aby xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) barviva. Xxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Pak se xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx x 5 xx 30 % (x/x) xxxxxxx dodecylsulfátu xxxxxxx (XXX) v destilované xxxx, xxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 60 xX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx vyjmou x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx po xxxx 8 xxxxx xxx xxxxxxx 21 xX (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ∼ 175). Xxxxxx 1 ml xxxxxxxxxxxx xx xxx zředí 30 % (x/x) xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx poměru 1 x 5 (x/x) (xx. 1 ml xxxxxxxxxxxx + 4 xx roztoku XXX). Xxxxxxx xxxxxxx (OD) xxxxxxx xx xxxx xxx cca 565 xx.
1.5.3.3.2 Výpočet xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx sulforhodaminu X x terčíku xx xxxxxxxx z xxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xxx 565 nm xxxx 8,7 . 104; molekulová hmotnost = 580). Obsah xxxxxxxxxxxxxx B xx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx za xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx spadají xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx metody. Za xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx uspořádání považují:
|
Kontrola
|
Látka
|
Rozmezí xxxxxx xxxxxxx (xx/xxxxxx)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X xxxxxxxx chlorovodíková
|
40 - 100
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx voda
|
15 – 35
|
1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx (např. 2 xxxxxx) xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx látek. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxx však xxxx xxxxxxxx, že xxxx XXX přeceňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kůže xx 2 xxxxxx (2), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx identifikaci leptajících x neleptajících xxxxx xx 24xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx XXX mohou xxx ovlivněny xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x experimentálním xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx účinky 5 kΩ byla xxxxxxxxx na základě xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx aparatuře x xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx. Xxxxx xx se zkušební xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx by být xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx. Proto xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x prahovou hodnotu xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx, xxx byly xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx (3).
1.6 XXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX - XXXX S MODELEM XXXXXX XXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nanáší xxxxxxx xx xxxx xx 4 xxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx epidermis s xxxxxxx xxxxxx corneum. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx podle schopnosti xxxxxxx pokles xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx "MTT xxxxxxxxx xxxxx" (XXX = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 xxxxxxx tetrazolium xxxxxx) pod xxxxxxxx xxxxxxx definovanou xxx xxxxx expoziční xxxx. Xxxxxxx testu xxxxxxx x předpokladu, xx xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx xxxx xx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx stratum xxxxxxx (xxxxxx nebo xxxxx) x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxx buněk v xxxxxxxx xxxxxxxxx vrstvách.
1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX XXXX
1.7.1 Modely xxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx pocházet x xxxxxxx zdrojů, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Model xxxx mít funkční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Bariérová xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxx prokázat xxx, xx model xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx po nanesení xxxxx, x xxxxx xx xxxxx, xx xxxx xxx buňky xxxxxxxxxxx, xxxxx však xxxxxxxx skrze stratum xxxxxxx neprocházejí. Xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky.
Životnost živých xxxxx v modelu xxxx být dostačující x xxxx, xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx látkami xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx. Životnost xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx velikostí xxxxxxx MTT, tj. XX xxxxxxxx) po xxxxxxxx látce xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxx látky xxx pozitivní xxxxxxxx (xx xxxxxxxx s xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) musí hodnoty xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx predikční xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxx xxxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx xxxxxx, xxxxxx se xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx 25 (μ/xx2). Xx-xx xxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxx, a xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx se s xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx je xx xxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx, xx je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se materiál x xxxxxxx xxxx xxxxxxx smyje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metoda. Nejčastěji xx používá xxxxxxx XXX, x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx xxxx xx xx xxxx 3 xxxxx ponoří xx xxxxxxx MTT x xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx xxx teplotě 20 - 28 oC. Xxxxxxxxx xxxxx formazanový xxxxxxx xx pak xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx měřením XX při xxxxxx xxxxx 545 x 595 xx.
1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx model xxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx působení, promývacího xxxxxxx xxx. xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx. Doporučuje xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx řady xxxxxxxxxxxx standardů xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xx validizační xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxx nutné, xxx xxxx prokázáno, xx xx použitá xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx látek xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx standardů xxx v xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, tak xxxx různými laboratořemi. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx kritéria xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx vědeckém xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx revizí.
2. XXXXX
1.8 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
1.8.1 Xxxx TER xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx odporu (x xΩ) pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx případné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx formě, a xx xxxx xxx xxxxxxx replikace x xxxxxxxxx experimenty, xxxxxxxx xxxxxxx a x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.8.2 Xxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX x xxxxxxxxx procento xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx hodnoty x z xxxx xxxxxxxx klasifikace.
1.9 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.9.1 Xxxx TER xx xxxx potkana
Pokud je xxxxxxxx xxxxxxx TER xxx testovaný xxxxxxxx xxxxx xxx 5 xΩ, xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx-xx hodnota XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ x xxxxxxx se xxxxxx x povrchově xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xx.
X povrchově xxxxxxxxx xxxxx (detergentů) a xxxxxxxxxxx organických xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX nepřesahující 5 xΩ, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxx x terčíku vyšší xxxx rovný xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kontrole x 36 % XXx, xx xxxxxxxxx xxxxx skutečně pozitivní x xxxx má xxxxxxx účinky, xxxxxx xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxx pozitivní x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx.
1.9.2 Xxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX xxx negativní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100% xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Z xxxxxx OD xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorky xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx životaschopných buněk, xxxxx odděluje xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, xx těch, xxxxx poleptání způsobují, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx vlastností, xxxx být x xxxxxxxxxx modelu jasně xxxxxxxxx xxxxxxx, než xx metoda validována, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx musí xxxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx stav, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx; pokud xx používají referenční xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx x xxx ně.
Podmínky xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx XXX) xxxx procentuální xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx x xxxxxxx lidské xxxx) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx standardní xxxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxxx xxx všechny xxxxxxxxx resp. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx efektů.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Obrázek 2
Xxxxxx X.40. xxxx xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx od 22.6.2001
X.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX FOTOTOXICITY 3X3 XXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 ÚVOD
Fotoxicita je xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), x xxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx chemickým xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xx-xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx celkovém podání xxxxxx látky.
Informace xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx vitro xxxxxx xx stanovení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxxxx xxxxx nebezpečí xxxx nikoli.
Toxikologickým výsledkem xxxxx xx xxxxx xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx kombinovaným působením xxxxx x xxxxxx, xxxxx testem je xxxxx zjistit xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx po xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxx, x xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx nanesení xx pokožku.
Test fototoxicity 3X3 XXX in xxxxx xxx xxxxxxxxxx x validován x xxxxx xxxxxxxxxx projektu XX/XXXXXX z xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx vůči xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. X xxxx 1996 doporučila xxxxxxxx schůze OECD xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx fototxicity/fotoiritace xx xxxx x xxxxxx a xxxx x bylo xxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xx xxx uvedené xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxx k xxxx, xxx xxxxxxxxxxx jiné xxxxxxxxxx xxxxxx, jež xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx látky a xxxxxx xxxxxxxxx, jako xx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx fotokarcinogenita, i xxxx xxxx látek xxxx specifické xxxxxxxxxx xxxxxxxx, reaguje při xxxxx fototoxicity 3X3 XXX in xxxxx xxxxxxxxx. Test není xxxxxx uspořádán tak, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látek je xxxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX) či xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx; xxxxxx ve X/x2 nebo v XX/xx2.
Xxxxx světla: xxxxxxxx (= xxxxxxxxx x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (UV) xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxxxxx dopadajícího xx xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (= X x x) na xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. X/x2 nebo J/cm2.
Pásma xxxxxxxx délek xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxx XXX (Xxxxxxxxxx International xx L'Eclairage) xx xxxxxxx xxxxxxxx XXX (315 - 400 xx), XXX (280 - 315 nm) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxx: za xxxxxxx mezi xxxxx XXX a XXX xx xxxxx xxxxxxxx 320 xx x XXX xx xxxxx xxxx xx XX-X1 x XX-X2 s xxxxxxx zhruba x 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx živou buňku, xxxxxxxxx červeně, xx xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xxxxx parametrů xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx uspořádání koreluje x celkovým počtem xxxx. životností (xxxxxxxxx) xxxxx.
Xxxxxxxxx životaschopnost (viabilita) xxxxx: životaschopnost xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolami (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx procedurou testu (xxx + XX xxxx - XX), xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx model: xxxxxxxxxx, kterým se xxxxxxxx testu xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xx xxxxx x transformaci xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx k xxxxxxxx fotoxického potenciálu xxxxxx veličin XXX x XXX.
XXX (xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): koeficient představující xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx cytotoxických koncentrací (XX50) xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX ozáření.
MPE (mean xxxxx effect, xxxxxxx xxxxxxxxx): nová míra xxxxxxxx z matematické xxxxxxx kompletního xxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace-odezva xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxx (odezva), xxxxx vzniká po xxxx expozici xxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxx reakce, xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kůže xx xxxxxxxxxx podání xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: nižší xxxxxx xxxxx "xxxxxxxxxxxx", xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx reakcí, x nimž xxxxxxx x xxxx xxxx, xx xx ni xxxxxx (xxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx) xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx vždy x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (reakce podobné xxxx při xxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx a světla xxxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx dvoutýdenní indukční xxxxxxx x tomu, xxx se reaktivita xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxx (odezva) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxx buňky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XX/XXX xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx látky.
Fotokarcinogenita: karcinogenita xxxxxxxx xxxxxxxxxx aplikací xxxxxx a látky. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 REFERENČNÍ XXXXX
Xxxxx chlorpromazinu jako xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xx xxx zavedení xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX doporučuje xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x látek, xxxxx xxxx použity xxx xxxxxxxxxxxxxxxx porovnávání xxxxxx testu (1) (3) (13).
1.4 PRVOTNÍ XXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x řady xxxxx (5) (6) (7) (8), jejichž xxxxxxx společným rysem xx to, xx xxxxxx absorbovat xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx by xx xxxxxxx, než se xxxxx uvažovat o xxxxxxxxxxx testování xxxxx xxxxxx metodického návodu, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxx absorpční xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x XX/XXX oblasti (xxxxxxxxx xxxxx zkušební xxxxxx XXXX č. 101). Xxxxx xx xxxxxxx extinkční/absorpční xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx-1 x xx-1, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx testovat xxx xxxxxx na xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx, xxx xxxxxx jiným xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxxxx).
1.5 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx zjištěny xxxxx xxxxxxxxxx, kterými xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) chromoforem xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx reakci (7), xxxxxxx xxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxxxxxx xx porovnání xxxxxxxxxxxx xxxxx testované x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx při tomto xxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx závislý xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx barviva, xxxxxxxxx červeně (neutral xxx, NR) (9), 24 hodin po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxx/x 3X3 se kultivují xx dobu 24 xxxxx xxx, xxx xx vytvořila xxxxxxx xxxxx x jedné xxxxxx (monolayer). Pro xxxxxx testovanou xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx po 96 xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx. Jedna x obou xxxxxxxx xx xxx vystaví xxxxxxxxxxxxxxx UVA/VIS záření x xxxxx 5 X/xx2 XXX (+XX xxxxxxxxxx), druhá destička xx xxxxxxxx x xxxxx (-XX xxxxxxxxxx). X xxxx destičkách xx xxx médium xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xx dalších 24 xxxxxxxx kultivace xx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx červeně (xxxxxxx xxx xxxxxx, XXX) xx xxxx 3 xxxxx xxxxxxx životaschopnost xxxxx. Xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x přítomnosti (+XX) x v xxxxxxxxxxxxx (-XX) záření, xxxxxxx xx xxxxxx XX50, xx. ři xxxxxxxxxxx inhibující xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x 50 % x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
1.6 XXXXXXXX JAKOSTI
Citlivost xxxxx xxxx xxxxxx XXX, xxxxxxxxxx údaje: x buněk je xxxxx pravidelně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX. Xxxxx xx nasadí v xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro, xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxx UVA x xxxxx 1 - 9 X/xx2 a xxxxx xxx xx xxxxxx NRU xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jakosti, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx2 xxxx xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx. Xxx nejvyšší xxxxx XXX záření 9 X/xx2 nemá být xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx uchovávaných x xxxxx. Tato xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx každé xxxxxx xxxxxx buněk.
Citlivost xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX, běžný xxxx: xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jestliže xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx x Xxxxxxx vyváženém xxxxxx roztoku [Earl´s xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, XXXX] x 1 % roztokem dimethylsulfoxidu (XXXX) xxxx xxxxxxxx (XxXX) xxxx bez xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XXX) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx v témž xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx experimentu x xxxxx (-XXX).
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: absolutní xxxxxxx xxxxxxx (XX540 NRU) xxxxxx v XX xxxxxxxx negativních kontrol xxxxxxx, zda xxxxx 1 x 104 xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxx rostlo xxxxx xxxx dnů xxxxx s normální xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxxx hodnota XX540 XXX u xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx 0,2.
Xxxxxxxxx kontrola: xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx EU/COLIPA xxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (XXX); xxxxx se xxxx xxxxx doporučuje. Xxx XXX xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: XXX xxxxxxx (+XXX): EC50 = 0,1 - 2,0 μx/xx, CPZ xxxxxxxxx (-XXX): XX50 = 7,0 - 90,0 μg/ml. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX), xxx. xxxxx xxxxxxx EC50, xx být xxxxxxxxx 6.
Xxxxx CPZ xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dají xxxxxx x jiné známé xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx chemické xxxxxxx xxxx rozpustnosti xxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx dat adekvátně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 x XXX xxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XXXXX METODY
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Buňky
Při validační xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxxxxx fibroblastů Xxxx/x 3X3 xxxx 31, x to buď x XXXX xxxx x XXXXX; ta xx xxxxx doporučuje. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx i xxxx buňky xxxx xxxxxxx xxxxx, pokud xx kultivační xxxxxxxx xxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx; xx xxxx xxxxx xxxxxxxx, xx jsou xxxxxx xxxxxx.
X xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, a xxx xx xxxxxx jen x xxxxxxx, že xx xxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX záření xxxx x počtem xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx používat xxxxx Xxxx/x 3X3 z xxxxxx x nejnižším xxxxxx, pokud možno xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx buněk Xxxx/x 3X3 xxxx UVA xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx popsaným x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx rutinní xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. X případě xxxxx Balb/c 3X3 xx jedná x XXXX obohacený 10 % séra xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 xX xxxxxxxxx, penicilinem a xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 oC / 7,5 % XX2. Xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx kultivace xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx buňky xxxx. xxxxxxxx linii.
1.7.1.3 Xxxxxxxx kultur
Buňky ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nasadí v xxxxxxxxx hustotě v xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxx xx fototoxicitu 3X3 XXX in xxxxx pasážují.
Pro xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x kultivačním xxxxx v xxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxx testu (tj. xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk 48 xxxxx xx xxxxxxxx) xxxxxxx xx xxxxxxxxxx (xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx). X případě xxxxx Xxxx/x 3T3 xxxxxxxxxxxxx x destičkách x 96 jamkami xx xxxxxxxxxx hustota 1 x 104 xxxxx v jedné xxxxx.
Xxx každou xxxxxxxxxx xxxxx se buňky xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx x 96 jamkami, xxxxx xxx procházejí celým xxxxxxxx xx identických xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, s xxxxxxxx doby, kdy xx xxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxx (+XXX/XXX) x xxxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxx (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Metabolická aktivace
Zatímco xxx xxxxx testech xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, není x případě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx žádná xxxxx, xxx xx x xxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx in xxxx xxxx in xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zapotřebí. Nepokládá xx xxxxx xxx xx xxxxx, ani xx vědecky xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx metabolickým aktivačním xxxxxxxx.
1.7.1.5 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxxxxxx látka xxxx být xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx dá xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xx by xxxxx x fotodegradaci, xxxx xx příprava xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxx x pufrovaném xxxxxx xxxxxxx, například v Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (EBSS) xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx fosfátem (xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, PBS), xxxxx - xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx během xxxxxxxxx - xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx indikátory xX, pohlcující xxxxxx.
Xxxxx xx testovaná xxxxx xx xxxx omezeně xxxxxxxxx, rozpustí xx xx vhodném xxxxxxxxxxxx x koncentraci xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxx xx xxxxx v poměru 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx roztokem. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, musí být xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 % (x/x) ve xxxxx xxxxxxxxx, xx. xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxxx xx doporučuje xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx ethanol (XxXX). Vhodná xxxxx xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxx třeba xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vlastnosti, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xx napomohlo xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxx resp. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 xX.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX xxxxxxx / příprava
Světelný xxxxx: xxxxx xxxxxxxxx světelného xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x XXX a xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx spojováno x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx xxxxxx UVB xx x xxxxx xxxxx méně xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xx 313 xx k 280 xx xxxxxxx tisícinásobně. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx světelného zdroje xxxxx zásadní požadavek, xxx xxxxxxxx vlnové xxxxx, xxx testovaná xxxxx absorbuje, x xxx xxxx světelná xxxxx (xxxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx dobu) postačující xx zjištění xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx sem x xxxxxxxxxx tepla (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx simulátory, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx tyto xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxx (xxxxxxxxxxx) rtuťové xxxxxxxxxx xxxxxxx - xx mají tu xxxxxx, že xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx levnější, xxxxxxxx xxxxxx xxxx imitují xxxx. Xxxxxxx všechny xxxxxxx simulátory emitují xxxxxxxx množství xxxxxx XXX, xx xxxxx xxxxxx filtrovat tak, xxx xx toto xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx záření, kde xx xxxxxx UVB xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XXX:XXX ∼ 2 : 1). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx fototoxicitu 3X3 NRU xx xxxxx xx x xxxxx (3).
Dozimetrie: xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx, který xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx daný xxxxx. Xxxxxxxxx UV-metru je xxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx druhý, xxxxxxxxxx XX-xxxx xxxxx typu x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx, když se x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx iradiance xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zdroje x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; taková xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx zjištěno, xx xxxxx UVA xxxxxx 5 X/xx2 je xxx xxxxx Balb/c 3X3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xx této xxxxx xxxxxxx xxxxx 50 xxxxx, musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 1,666 xX/xx2. Xxxxxxx-xx xx jiná xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx světla, xxxx xx xxxxx xxxxxx XXX upravit xxx, xxx buňky xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxx fototoxinů. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx vzorce:
|
dávka xxxxxx (J/cm2) x 100
|
&xxxx; | |
| &xxxx;
x (min) =
|
________________________
|
(1 X = 1 X x)
|
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxxx (xX/xx2) x 60
|
1.7.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 μg/ml, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx detekovány xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pozitivních výsledků (13). Xxxxxxx xX xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (+XXX) a xxx xxx (-XXX) xx třeba xxxxxxxx x rámci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx geometrická xxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx).
1.7.3 Xxxxx xxxxxxx
1.7.3.1 Xxxxx den
Připraví xx suspenze 1 x 105 xxxxx/xx x xxxxxxxxxxx médiu. Xx xxxxxxxxxxx xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx tkáňové xxxxxxx xx xxxxxxxxxx po 100 μl xxxxxxxxx xxxxx (= slepý xxxxx), xx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xx 100 μx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx 1 x 105 buněk/ml (= 1 x 104 xxxxx na jamku). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxx - xxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxx (-UVA), xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx se xxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 oC), xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX xx každou jamku. Xxxxx xx 100 μx EBSS/PBS obsahujícího xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx. Buňky x testovanou xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxx 60 minut (7,5 % XX2, 37 xX).
Xxxx testu s XXX (+XXX) xx xxxxxxx xxx, xx xx buňky xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx dobu 50 xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx xxxxxxx UVA x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx2 (= xxxxx 5 / xx2). Xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-XXX) se xx dobu 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx XXX) xxxxxxxxxx xx pokojové xxxxxxx x xxxxxx xxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxx a xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx médiem x xxxx noc (18 - 22 xxxxx) xx xxxxxxxx (7,5 % XX2, 37 oC).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx mikroskopem x fázovým xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx buněk způsobené xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx kontrola xx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx experimentální xxxxx, xxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (XX)
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxx jemným xxxxxxxx. Přidá xx 100 μl média x XX a xxxxxxxx xx při 37 xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 7,5 % CO2 xx xxxx 3 xxxxx.
Xx xxxxxxxx xx xxxxxx x XX xxxxxxxx x buňky xx xxxxxxx objemem 150 μx XXXX/XXX, xxxx xx pak xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx (je xxxx xxxxx xxxxxxxx zcentrifugovat x xxxxxxxx poloze).
Přidá xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx xx xxxxxxxx NR (xxxxxxx xxxxxxxxxx směs xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx 10 xxxxx xxxxxx třepou xx xxxxxxxx, dokud xx XX x xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx optická xxxxxxx xxxxxxxx XX xxx 540 xx za xxxxxxx slepého pokusu xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxx (xxxx. XXXXX) pro xxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXX A XXXXXXXX XXXXX
Xxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx při xxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxx xx. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací se xxxxxxx tak, aby xx xxxxxxxxxxxxx údaje xxxx xxxxxxxx křivkou. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xx xx definované xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μl/ml x xxxxxxxxxxx xx xxx (-XXX) xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx (+XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxx, xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx muset řádově xxxxx, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zjištěna x žádné x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxx xxx -UVA, xxx xxx +UVA), xxxxxxxxx testování x xxxxxx xxxxxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx nejvyšší xxxxxxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx xxxxx xxxx xxx ověření opakovat.
Považuje-li xx xxxxxxxxx xxxxx xx potřebné, xxxx xxx důležité xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podmínky, aby xx xxxxxxx jasného xxxxxxxx. Xxxxxxxx proměnnou x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, nejvhodnější xxx jeho xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (spolurozpouštědlo, triturace, xxxxxxxxxx). Xxx také xxxxxxxx x změnách xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X látek, xxx jsou ve xxxx nestálé, může xxx významný xxxx xxxxxxxx xxxx.
1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx k 50 % xxxxxxxx buněčného xxxxxx NR (XX50). Xx xxx xxxxxx xxx, xx xx xx data xxxxxxxxxxx - xxxxxx použije xxxxxxxxx xxxxxx metoda xxxxxxxxxx xxxxxxx (nejlépe Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) xxxx xx xxxxxxx jiná xxxxxx metoda proložení (14). Xxx xx xxxxxxx XX50 xxxxxxx xxx xxxxx výpočty, xx třeba xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx hodnoty XX50 xx také možno xxxxxx xxxxxxxx metody. X xxxxx xxxxxxx xx doporučuje xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx papír (xxx x: xxx, xxx x: xxxxxx), xxxxxxx xx xxxx transformaci xxxx křivka xxxxxxxxxxx - xxxxxx mnohdy xxxxx xxxxxxxx.
1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX XXXXXX)
1.10.1 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 1: fotoiritační xxxxxx (XXX)
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx jak xx přítomnosti (+XXX), xxx xx nepřítomnosti (-XXX) světla, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxx xxxxx vzorce
|
EC50 (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) XXX =
|
____________
|
|
EC50 (+XX)
|
XXX < 5, xxxxxxxxxxxx xxxxx fototoxický xxxxxxxxx, xxxxxx XXX ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx předpovídá.
Je-li xxxxx xxxxxxxxxxx pouze xxx +XXX, xxxxxx xxx -XXX xx necytotoxická, xxxx xx XXX xxxxxxxxx, x když xx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xx látka xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx případě xx xx xxxxxxxxx xxx. "&xx; PIF", xxxx xx xxxx cytotoxicity (-XX) provede xx xx maximální zkušební xxxxxxxxxxx (Cmax) x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx do xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) &xx; XXX =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
Xxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxx "&xx; XXX", xxx xxxxx xxxxxxx > 1 xxxxxxxxxx fototoxický xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx XX50 (-XX), xxx EC50 (+XX), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, je to xxxxxxxx toho, xx xxxxx nemá žádný xxxxxxxxxxx potenciál. X xxxxxxx případě se xxxxxxx xxxxxxxx "XXX = *1", xxxx xx charakterizuje xxxxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) XXX = *1 =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (+XX)
|
Xxxxx xx xx získat xxxxx hodnota "XXX = *1", xxxxxxxxxx xx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx (x) x (x) xx xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx testu xxxxxxx.
1.10.2 Xxxxxxxxx xxxxx, verze 2: xxxxxxx xxxxxxxxx (XXX)
Xx xxxxx také xxxxxx novější xxxxx xxxxxx pro predikci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xx použití dat x xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX (15) a xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx studie stanovení xxxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx XX xxxxxx (13). X xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx omezení xxxxxx XXX v xxxx xxxxxxxxx, kde xxxxx xxxxxx hodnotu XX50. X xxxxx modelu xx xxxxxxx veličina "xxxxxxx xxxxxxxxx" (XXX) xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx XXX byl na Xxxxxxxxxxx univerzitě x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, který xxx xxxxxxx zdarma.
1.11 Xxxxxxxxxxxx výsledků
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx (XXX ≥ 5 nebo XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx daná xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se x xxxxxx výsledku xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 10 μg/ml, xx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx působit xxxx xxxxxxxxx také xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxxxxx pouze při xxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci (100 (x/xx), bude xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx látky nejspíše xxxxxxxxx dalších xxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx o penetraci, xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx, nebo xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx alternativním xxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx (XXX < 5 xxxx XXX &xx; 0,1) xxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka není xxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx podmínkách. X xxxxxxxxx, xxx by xx látka dala xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a fotoxicita xx xxxx se xx považovat za xxxxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xxxx při xxxxxxx koncentracích xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrační závislosti xxxxxxx xxxxxx (XX50 + XX x XX50 - XX), xx interpretace xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx toxicita (+XX xxx -XX) x xxx xxxxxxxx rozpustnost xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx koncentrace 100 μx/xx, xx možno xxxxxxxxx tento xxxx xxx danou xxxxx xx xx zcela xxxxxx x xxxx xx se xxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx vitro xxxx xxxxxx xxxx xx xxxx nebo xx xxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx údaje x číslo CAS, xx-xx známo,
- xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jež xxxx k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x fotostabilita, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxx rozpouštědla,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx rozpouštědle,
- procentický xxxxx rozpouštědla v xxxxxxxxx xxxxx (XXXX xxxx PBS).
Buňky:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx pasáže, xx-xx xxxxx,
- citlivost xxxxx xxxx záření XXX xxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X XXX xx vitro xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxx xxxx ovlivněním x po xxx:
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx média,
- xxxxxxxx xxxxxxxx (koncentrace XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx před xx x po xx).
Xxxxxxxx xxxxxx (b) - xxxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby koncentrací xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx použijí x xxxxxxxxxxx ozařování UV/VIS xxxxxxx a bez xxx,
- x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- typ x složení působícího xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx),
- doba ovlivňování xxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu (x) - xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx daného xxxxxxxxxx xxxxxx,
- spektrální xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (filtrů),
- charakteristika xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxx kalibraci,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx testovaného xxxxxxx,
- xxxxxxxxx UVA (v x X/xx2) při xxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx UV/VIS xxxxxx,
- xxxxx xxxxxx XXX (xxxxxxxxx x xxx) x X/xx2,
- teplota xxxxxxxxx xxxxxx během xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx uchovávaných v xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (d) - test NRU:
- xxxxxxx xxxxx x XX,
- doba xxxxxxxx x XX,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (koncentrace XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxxxxx NR (xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx délka, xxx xxxxx xx spektrofotometricky xxxxxxxxx xxxxxxx hustota XX,
- druhová vlnová xxxxx (referenční), xxxx-xx xxxxxxx,
- xxxxxxx srovnávacího xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), pokud xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx jednotlivých koncentracích xxxxxxxxx látky, vyjádřená x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx koncentrace - xxxxxx (koncentrace xxxxxxxxx xxxxx νs xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx experimenty +XXX x -UVA,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hodnot XX50 (+XXX) a EC50 (-XXX),
- porovnání xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx - xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (XXX),
- klasifikace xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (a) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx životaschopnost (xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx negativních kontrol, xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx akceptovatelnosti xxxxx (x) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxx EC50 (+XXX), XX50 (-XXX) x XXX xxxxx xxxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx látky xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx: hodnoty XX50 (+XXX), XX50 (-XXX) x PIF, xxxxxxx x směrodatné xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx B.41. byla xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxxxxx
Xxxxxx předpis x. 251/98 Sb. nabyl xxxxxxxxx xxxx 1.1.1999.
Xx xxxxx tohoto xxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx předpisem x.:
208/2001 Xx., kterým xx mění xxxxxxxx XX x. 251/98 Xx., xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx - xxxxxx bude xxxxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxx
x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxx xxxxxxx č. 251/98 Sb. xxx xxxxxx právním předpisem č. 443/2004 Sb. x xxxxxxxxx xx 1.8.2004.
Xxxxx jednotlivých xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx aktualizováno, xxxxx xx xxxx xxxxxx derogační změna xxxxx uvedeného xxxxxxxx xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 písm. x) xx n) xxxxxx č. 157/1998 Xx., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
2) Zákon č. 246/1992 Sb., na xxxxxxx xxxxxx xxxxx týrání, xx xxxxx xxxxxx x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Sb. x x. 30/1998 Xx.
3) Směrnice Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx 4 - xxxx na zdraví (XXXX Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxx of Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).