Právní předpis byl sestaven k datu 31.07.2004.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
XXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
xx xxx 16. října 1998,
xxxxxx xx stanoví xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxx
Ministerstvo xxxxxxxxxxxxx stanoví xxxxx §4 odst. 1 xxxx. x) zákona x. 157/1998 Sb., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x chemických přípravcích x o xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx:
§1
Tato xxxxxxxx xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxx nebezpečných xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x chemických xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a toxických xxx xxxxxxxxxx (xxxx xxx "xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků").1)
§2
(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x příloze této vyhlášky.
(2) Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x přípravků xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxx citlivé, xxxxxx x reprodukovatelné xxxx metody uvedené x xxxxxxxx 1, xxxxxxxxxx však xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx2) a xxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx spolupráci a xxxxxx (OECD).3)
§3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx účinnosti xxxx 1. ledna 1999.
Xxxxxxx:
XXXx. Xxxxx, XXx. x. x.
Příloha k xxxxxxxx č. 251/1998 Xx.
Metody xxx xxxxxxxxxx toxicity xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků
B. VŠEOBECNÝ XXXX
1. XXXXXXXX POJMY
1.1 AKUTNÍ XXXXXXXX
xxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx 14 xxx) xx podání xxxxx xxxxx nějaké xxxxx.
1.2 XXXXXX XXXXXXXX
xx xxxxxxxxx termín xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xx xxx xxxxxx, xx po xxxxxxx podávané xxxxx xxxx xxx očekáván xxxxx těžkých xxxxxxxxx xxxxxxxx a pravděpodobně x xxxxx.
1.3 XXXXX
xx množství podávané xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx vyjádřena xxxx xxxxxxxx (xxxxx nebo xxxxxxxxx) nebo xxxx xxxxxxxx testované látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete (xxxx. xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti), xxxx xxxx konstantní dietní xxxxxxxxxxx (xxxx xx xxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx).
1.4 XXXXXXXXXXXXXX XXXXX
xx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, aniž xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) související x xxxxxxx xxxxxx.
1.5 DÁVKOVÁNÍ
xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, frekvenci x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
1.6 XX50 (STŘEDNÍ XXXXXX XXXXX)
je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx látky, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx smrt 50 % xxxxxx, xxxxxx byla xxxxxx. Xxxxxxx XX50 xx xxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx hmotnosti pokusného xxxxxxx (xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 LC50 (XXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX)
xx xxxxxxxxxxx vypočtená xxxxxxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx smrt xx xxxxxx doby xx xxxxxxxx u 50 % xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Hodnota XX50 xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx standardním xxxxxx xxxxxxx (xx.x-1).
1.8 XXXXX
xx xxxxxxx pro "xx observed xxxxxxx xxxxxx xxxxx" (xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) a je xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx expoziční xxxxxxxxxxx, xxx které xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX TOXICITA
xxxxxxxx nepříznivé účinky, xxxxx xx objeví x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx chemické xxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.10 XXXXXXXX TOLEROVANÁ DÁVKA (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX DOSE)
je xxxxxxxx xxxxx, xxxxx x zvířat xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx na xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx.
1.11 PODRÁŽDĚNÍ XXXX
xx vyvolání xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.12 XXXXXXXXXX OČÍ
je xxxxxxxx změn xx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxx.
1.13 XXXXXXXXXXXXX XXXX (ALERGICKÁ XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX)
xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx na testovanou xxxxx.
1.14 XXXXXXXXX XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx tkáňového xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 3 xxxxx xx 4 xxxxx.
1.15 XXXXXXXXXXXXXX
xx studium xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.16 XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx vstupuje xx xxxx.
1.17 XXXXXXX
xxxxxxxx proces(y), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx případně xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx z těla.
1.18 XXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) je xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx.
1.19 XXXXXXXXXXXX
označuje proces(y), xxxxxx(x) je xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXXX - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX A XXXXXXXXX XXXXXXXX
Akutní xxxxxxx účinky x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou být xxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx toxicity (xxxxxx X.1 - B.5), xx xxxxxxx xxxx xxx po jediné xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx až xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XX50. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx možné xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx utrpení xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxx X.1 xxx) x metoda xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (metoda X.1 xxxx). Xxx testování xx xxxxxx xxxxx xxxx studie xx xxxxxx xxxxx doplnit xxxxxx xxxxxxxx z xxxxx xxxxxx. V xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat.
Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7, X.8 x X.9) xx posuzují xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat xxx, xxx xx xxxxxxx xx nejvíce xxxxxxxxx. Xxxx testy xx xxxx xxxxxx xxxxxxx cílové orgány xxxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx dlouhodobých studií xx vyžaduje xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxxx (metody X.26 - B.30 x B.33).
3. MUTAGENITA - GENOTOXICITA
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx trvalých přenosných xxxx v xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx genetického xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Tyto xxxxx ("xxxxxx") mohou xxxxxxxxxx xxxxxx xxx nebo xxxxxxxx xxxx, xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx změnou xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx in xxxxx xx genové (bodové) xxxxxx x baktériích (xxxxxx X.13/14) xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.10).
Xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx in xxxx, xxxx. micronucleus test (xxxxxx X.12) xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (metoda X.11). Je xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx vitro xxxxxxx, pokud nejsou xxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxx xx velkém xxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxxx x kontrolu xxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx vyšetření na xxxxxxxxxxxxx. Tyto studie xxx xxxxxx x xxxxxxxx účelům: xxxxxxxxx xxxxxxxx získaných xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; zkoumání xxxxxx xxxxxxxxxxxxx základním xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx.
Xxx xxxx účely xxxxxxxx xxxxxx X.15 xx X.25 xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx x xx vitro, xxx xxxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx účinků. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x bodových xxxxxxxx x xxxxxx účincích x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx baktérie používané x základním xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx naplánovat xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
Xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxx x fyzikální xxxxxxxxxxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxxxxx bakteriálních a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, metabolického xxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx toxicity x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx látky.
Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx savčím xxxxxxxxx, xx xx vyvolaných xxxxxxxx (xxxxxxxx) mutacemi, xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx xxxx u xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxx (xxxxxx B.25). Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx potřebných xxxxxx, zvláště xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xx xxxxx se xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxx jen na xxxxxxx xxxxxxxxx důvodů.
Xxx xxxxxxxxx genotoxicity xx postupuje podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx danou xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
4. XXXXXXXXXXXXX
Chemické látky xxxxx být charakterizovány xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Předběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx čerpají xx xxxxxx mutagenity/genotoxicity. Xxxxx xxxxxxxxx poskytují xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx chronické xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx B.7, a xxxxxxxxxxxxx studie x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zahrnují xxxxxxxxx takových histopatologických xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxx významné. Xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx informace xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx s karcinogenním xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, podrobnější zkoumání xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx karcinogenity (xxxxxx X.32) xxxx xxxxx x kombinované xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (metoda X.33).
X dispozici xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx určují xxxxxxxxx xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxxxxxxx změny x xxxxx xxxxxxx buněčných xxxxxx, x kterých xx xxxxxxxxxxx souvislost x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx - xx vivo (xxxxxx B.21). Xxxxxxx xx několika různých xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx xxx transformaci.
5. XXXXXXXXXXX TOXICITA
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxx reprodukčních xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx (xxxx xx xxxxxxxx) xxxx xxxxx nedědičných xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx (xxxxxxxx toxicita) xxxxxxxxxx také teratogenitu x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx X.31) xxx xxxxxx zaměřené xx teratogenitu xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxx způsoby xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx nebo podle xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxxxxx xxxxxx vhodně xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx reprodukční xxxx (xxxxxx B.35) xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
6. NEUROTOXICITA
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxxx změn xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx periferním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx neurotoxicitu xxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx xxxxxxxxx aplikaci (xxxxxx X.7) zahrnuje také xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx chemické xxxxx x neurotoxickým xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Bylo xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu xxxxxxxxx pozdní xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx B.37 x X.38 po jednorázovém xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
7. XXXXXXXXXXXXX
Imunotoxicita xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx opakované aplikaci (xxxxxx X.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx měla xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, vyžadující další, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pomáhají při xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx x výsledky xxxxx pomoci xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx se, xx xxxx x xxxxxx xxxxxxx zapotřebí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx x ojedinělých xxxxxxxxx bude xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx změny v xxxx sekvenci xxxx xx xxxx ukázat xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x jednorázovým xxxxxxx (xxxxxx X.36).
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx poskytnout xxxxx, xxxxxxxxxx odhad xxxxxxxxxxxxxx absorpce xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx tkání. Přispět xxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx parametrech x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x toxikokinetických studií.
9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX LÁTKY
Xxxxxxx testované xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx před zahájením xxxxxxxx toxikologické studie.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx studie x xxx manipulaci x látkou x xxxx skladování.
Vypracování xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx testované látky (x xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx materiálu xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx studie.
Všechny xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx zahrnuty x xxxxxxxxx zprávě x xxxxx.
10. XXXX X XXXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxxxx testy je xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxx zvířata chována, x xxxxxxx péče x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX XXXXX
Životní xxxxxxxx x prostorech xxx xxxxxxx zvířata xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhům. Xxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx je xxxxxx xxxxxxx místnosti 22 xX ± 3 xX při xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx králíky xx xxx xxxxxxx 20 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu 30 - 70 %.
Xxxxxxx experimentální techniky xxxxxxx jsou zvláště xxxxxxx na xxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxx xxxx podrobnosti o xxxxxxxxxxx podmínkách xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Při xxxxx xxxxxxxxx toxických xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx je x xxxxx xx x závěrečné zprávě x xxxxxxx pokusu.
Xxxxxxxxx má xxx xxxxx se střídáním xxxxxx a xxx xx dvanácti xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx a uvést xx zprávě x xxxxxxx xxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x malých xxxxxxxxx jedinců jednoho xxxxxxx, ne více xxx 5 zvířat x xxxxx kleci.
Xxxxxxxxxx součástí xxxxxx x pokusech xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx x způsobu chovu x klecích x xxxxx zvířat xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, tak xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx všem xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, může xx výživová xxxxxxx xxxxxx vzájemným xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx potravy. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx x úvahu xxx xxxxxxxxxxxx výsledků. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx laboratorní xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x potravě, je xxxxx tomu xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx toxicitu, xxxxxxx xxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxx projevil.
11. XXXXXXX ZVÍŘAT
Xxx xxxxxxxxxxx testovacích metod xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Snížení počtu x omezení xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx metody fixní xxxxx (X.1.xxx) nebo xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (X.1.xxxx). Xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx smrti xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x vyžaduje xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx akutní xxxxxxxx vyžaduje v xxxxxxx x 70 % xxxxxx xxxx xxx xxxxxx X.1.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími příznaky xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx látky se xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x testech xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1, B.2 x X.3), xxx xxxx x xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (metody X.11 a B.12), xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx je možné xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx omezit xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, je-li xx xxxxxxxxxx xxxxxxx zdůvodnitelné. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx být založeno xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx provedených xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxx xxxxxxxxx studie xxxxxx kožní toxicity x xxxxxx používanou x xxxxxxxx xxxxx (xxxxxx X.3) a xxxxxx-xx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx kůže, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4) xxxx xxx xxxxxxxx; látky, xxxxx xxxxxxxxxxxx vyvolaly xxxxxxxxx xxxx silné xxxxxxxxxx kůže při xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4), nesmějí xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx oka.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxx xxxxxxxxxx stejnou xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat, xxxxx xxxxxxx méně utrpení xxxx xx úplně xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx budou xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxx použití xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, následnou xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx tam, kde xx xx xxxxx.
12. HODNOCENÍ A XXXXXXXXXXXX
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx pokusů xx xxxxxxxxx x xxxxx xx vitro xx xxxxx xxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx možná xxx x xxxxxxx xxxx; doklady x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx u xxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx látek xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx také xxxxxxx pro xxxxxx, xxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx látek.
Xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx byl vložen xxxxxxx předpisem č. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.1. AKUTNÍ XXXXXXXX ORÁLNÍ (XXX XX)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx xxxxxx xxxxxx, a xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx dávky xx xxxxx stanovit xxxxx xxxxxxxx orientačního xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, která přežijí xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podávat v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, x xxxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx dráždivých xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx chovu x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx nebo suspenze xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx první xxxxxx xxxxxxx vodného xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx roztok v xxxxxxxxxx oleji, xxxxxx xxxxx xxxx další xxxxxxx roztok x xxxxxx xxxxxxxx vehikulích xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx vehikulí musí xxx xxxxx xxxx xxxxxx před testem xxxx xxxxx xxxx xxxxxx relevantní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. U hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx překročit 10 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx podávat až 20 xx.xx-1. Variabilita xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx koncentrací, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx je třeba xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx vehikulu xxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx by x obou xxxxxxx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxx každou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx je k xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx je výrazně xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxx xxxxxxx.
Poznámka: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx druhů, než xxxx hlodavci, mělo xx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Dávky xx xxxxx xxxxxxx zvolit x xx třeba xxxxxxxx, aby nebyla xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dávky. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxxxx látky.
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx xxxxx, nejméně xxx, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tak, xxx byl x xxxxxxxxxxx skupin xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkou x xxxxxxx, a xxxxx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx stanovení XX50 x xxxxxxxxxxx spolehlivostí.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
X xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx test xxxxxx dávkou nejméně 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx skupinách 5 xxxxx a 5 samic s xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx podaná xxxxx způsobí xxxxxxx, xx třeba uvážit xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx xx měla xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx ji xxxx stanovit xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxx podle xxxxxx xxxxxx, rychlosti xxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx, x doba xx uhynutí, zvláště xxx, xxx je xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx večer xxxx xxxxxx. X xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx postačí xxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxx x pitné xxxx xxxx omezen. X xxx xxxxxx se xxxxxxx zváží x xxxxxxxxx látka xx xxxx xxxxxx xxxxxx x jedné xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx přístup x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx určitého xxxxxx, může xxx xxxxxxx - podle xxxxx tohoto xxxxxx - xxxxxxx x xxxx zvířatům xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxx xx pozorování provádění x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx zvíře xx vedou xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx pozorování. Xx nezbytné xxxxxxxx x xxxxxxxxxx místní xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx aplikaci.
Xxxxxxx jednou xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx dne xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx klinická xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx denně x xxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx studii, xxxx. xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx tremoru, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Okamžik xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxx xx xx konce pokusu, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Hodnocení xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
Po dokončení xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx nejméně xxxxx xxxxxxx x pěti xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x cílem zjistit, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx nejsou xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx výrazně xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví je xxxxx xxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx xxx každou experimentální xxxxxxx patrný počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, doba uhynutí xxxxxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx účinků x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx, pak x xxxxxxxxx intervalech x x době uhynutí. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx stanovit x xxxxxxxxxx, přežívají-li xxxxxx xxxx než jeden xxx. Xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxx způsobem xxxxxxxx x ohledem xx xxxxx a xxxxxx vyvolané podanou xxxxxx, se xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx vztah, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx abnormalit xxxxxx xxxx chování, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx toxických účinků.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx se použije) x koncentrace,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx x xxxxxxx otravy, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- doba xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxx jiná xxxxxxxxxx,
- xxxxxxx XX50 xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),
- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx pro LD50, xxxxx xx lze xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx mortality xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx (xxxxx je xxxxxxxxx danou metodou xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx druhém pohlaví,
- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx pozornost xx xxxxx xxxxxxx účinku, xxxxx by xxxxx xxx xxxxxxx utracení xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX50),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.1. xxx XXXXXX TOXICITA XXXXXX (XXX XX) - XXXXXX FIXNÍ XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxx akutní toxicity xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxx xxxxxxxxxx během xxxxxx xxxx xx xxxxxxx podání xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.
Xxxxxx s xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx dvou etapách.
X xxxxxxxxx orientační xxxxxx xx sekvenčním xxxxxxxx xxxxxxx účinky xxxxxxxx dávek xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx na xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxx xxxxx a toxicity, xxxxxx xxxxxx minimální xxxxxxx dávky. Xxxxxxxx xx v xxxx xxxxx etapě nepoužije xxx xxx pěti xxxxxx.
V xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx pěti xxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti. Použitá xxxxx xx xxxxxx x předběžné xxxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxx dávka, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxx" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx bod 1.2), xxx xx xxxxxxx.
Xx podání xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx vyvolá xxxxxxx toxicitu, xxx xxxxxx mortalitu, xxxx xxxxx žádné další xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, látka xx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx úrovni xxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx humánní utracení, xxxxx se xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxxxx xxxxx" (xxx část X - Všeobecný úvod xxx 1.2), xx. xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx úrovní dávky, xxxxxx je možno xxxxx, aniž by xxxxx x úhynu (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx).
Zvířata xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem utratit. Xxxxxxxxx látky se xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx je xxxxx, xx vyvolávají značnou xxxxxx a stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx proti xxxx.
Xx třeba xxxxxxxx xxxxx užívané xxxxx xxxxxxxxx zvířat. Na xxxxxxx xxxxx xx x obou xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx studie. Xxxxx xxxxx xxx xxxxxx studii jedna xxxxxxx xxxxxxx z xxxx xxxxxxx.
1.2.1.2 Příprava x xxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ve vhodném xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxx první xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx volbou je xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti. X hlodavců xx xxxxx neměl xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 ml.kg-1 xxxxxxx hmotnosti; xxxxxxxx xxxx xxxxx roztoky, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx objemů xxxxx podávané v xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxx testované xxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx; xxxxxxx x pitné vodě xxxx xxxxxx. X xxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx látka xx xxxx xxxxxx xxxxxx x jediné xxxxx. Xxxx-xx možno xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xx menších množstvích xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Xx podání xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ještě 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx xx látka xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx tohoto období - xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx zvířata. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx údaje, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx podávají xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx 24 xxxxx před xxxxxxx xxxxx dalšímu xxxxxxx. Všechna xxxxxxx xx xxxxxxx pozorují x cílem zjistit xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx sedm dní; xxxxx přetrvávají projevy xxxxx xxxxxx xxxxx xxx, xxxxx xx xxxx pozorovat xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx výchozí hladiny xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx-1. Xxxxxxxx zvolená xxxxxxx xxxxx nevyvolá xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx vyšší xxxxxx uhynutí, xxxxx xx xxxxx podat xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx dávek. Xxxxx xxxxxx xx měl xxxxxxxxxx informace x xxxxxx(xxx) xxxxx, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx otravy, x o xxxxxxxx xxxxx, xxxxx vyvolává xxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxx xx vybrat xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx x příbuzných xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxx dávky 500 xx.xx-1. Xxxxxxxx xx po výchozí xxxxx nepozorují xxxxxxxx xxxxxx, vyšetřuje xx xxxxx vyšší úroveň xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x uhynutí při 2000 xx.xx-1, je xxxxxxxxxx xxxxxx skončena x hlavní xxxxxx xx třeba xxxxxxx xx xxxx úrovni xxxxx. Xxxxxxxx jsou xxx použití xxxxxxx xxxxx (xxxx. 500 xx.xx-1) zjištěny těžké xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx nižší dávka (xxxx. 50 mg.kg-1). Xxxxxxxx xxxx zvíře xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx vhodné xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Za xxxxxxxxxx podmínek se xxxxxxxxx, xx xx xxx tomto postupu xxxxxxxxx xxxx než 5 xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx se mělo xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxx by xxx xxxxx.
Principem xxxxxx xxxxx dávky xx xxxxxxx pouze xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx. Je xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Dávka, xxxxx bude xxxxx x xxxxx, xx xxx zvolena z xxxxx ze 4 xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx měla xxx xx, která xxxxxxxxxxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx x humánních xxxxxx); xxxxxxx uhynutí xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx dávka xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxxxxx dalšího xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxx zvolené xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx nutné xxxxx xxxxx testovat xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látky, xxxx xx xxx xxxxx xxxxx testována xx xxxxx nižší xxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxx, která xxxx xxxxx humánně xxxxxxx, by měla xxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxx látky xx pozorování xxxxxxxxx x zaznamenávají systematicky. Xxx každé xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx aplikované xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zvířat xx aplikaci.
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze ji xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx by být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xx uhynutí, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx tendence x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx provádět xxxxxxx xxxxxxx první xxx xx podání látky x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx další xxx. Zvířata xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx příznaky xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx utratit. Častější xxxxxxxxxx xxxx prováděna xxxxx několika prvních xxx xx podání xxxxx, jestliže xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Test xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxx, když je xxxxxx, xx xxxx xxxxxxx xxxxxx vysoká xxxxx.
Pozorování xx xxxxxxxx na změny xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, dýchání a xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx nervové soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Zvláštní pozornost xx třeba věnovat xxxxxxx, křečovým jevům, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx další 3 xxx x potom xxxxxx týdně. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx testu, xx xxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxx makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají. Xx-xx to xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxx xxx histopatologické vyšetření.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx úrovně xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx výjimečně třetí xxxxxxx xxxxx.
X xxxxxxx, že látka xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx 5 xx.xx-1 (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx naznačuje mortalitu xxx této dávce), xx třeba xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx toxicitu xxxxxxxxx látky.
2. XXXXX
Xxxxx z xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou xxxxxx xxxxx. Z ní xxxx být patrný xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx; počet xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; počet xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx; popis xxxxxxxxx účinků; xxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx připsat xxxxxxxxx xxxxx; xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinků; xxxxxxxx pitvy. X xxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxx, je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxx vzhledem xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx možno obsahovat xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,
- experimentální xxxxxxxx,
- úrovně xxxxx (včetně vehikula, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx úrovní dávek,
- xx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx úrovní xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx utracených během xxxxx; xxxxx zvířat x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxx),
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx úhynu xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx x kritéria xxxxxxx xxx indikaci xxxxxxxxx utracení xxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx, xxxxxx příznaků xxxxxx toxicity a xxxxxxxxxxxxxx dávkové xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx.
3.2 Xxxxxxxxx x interpretace
Xxxxx | Výsledky | Xxxxxxxxxxxx |
5 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx jsou xxxxx xxxxxxxx Látky, xxxxx jsou xxxxxxxx Xxx výsledky xxx 50 xx.xx-1 |
50 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx než 100 % xxxxxxx | Látky, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxx výsledky xxx 5 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx | Xxxxx, které xxxx zdraví xxxxxxxx Xxx výsledky u 500 xx.xx-1 | |
500 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx | Xxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxx zdraví xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x 50 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxx za xxxxx bez významné xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx x 2000 xx.xx-1 | |
2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti | Méně xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x xxxx xxx xxxxxx toxicity | Xxx xxxxxxxx u 500 mg.kg-1 Látky, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx |
X.1. tris AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX STANOVENÍ XXXXX XXXXXX XXXXXXXX
1. METODA
1.1 Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx toxicity poskytuje xxxxxxxxx jak pro xxxxxxxxxx rizika, tak xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx stanovených xxxxx x xxxxxxxxxxx odstupech, xxx xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx látku xx xxxxxxx výsledků xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx tří xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx buď xxxx xxxxxxxxxxxx dávky xxx xxxxxx xxxx rozhodovacího xxxxxxx, nebo pro xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx dávek xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx nebo xxxxxxxx další xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx pevně stanovené xxxxxxxxx xxxxx a xxxx určena xxx xxxxxxx přesné LD50. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, ve kterém xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx je x x xxxx xxxxxx xxxxxxx kritériem xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx trvání xxxxx mohlo být xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx B.1. Xxxxxx xxxxxxx xxxx metody je xxxxx xxxxxxxx zvířat xxx u metody xxxxxx xxxxxxxx (orální)(B.1) x xxx u xxxxxxxxxxxx metody xxxxx xxxxx (B.1 bis).
1.2 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx postupně, x xxxxxx kroku se xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Xxxx xxxxx provádět předběžnou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x dalším kroku, x.x.
- xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx jsou náhodně xxxxxxx, xxxxxxxx xxx, xxx xxxx možná xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx klecích nejméně 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xx xxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx, xxx xxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxxx zvířatům x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xx třeba, testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxx suspenduje xx xxxxxxx xxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx roztoku/suspenze, xxx xxxxxxx roztoku/emulze x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (např. xxxxxxxxxx) x pak roztoku x jiných xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx známa, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx testem.
Zvířata xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx určitou xxxx xxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxx xxx a xxxx 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx se xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx.
Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx x pohlaví
Pro xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx tři zvířata xxxxxxx pohlaví. X xxxxxxx kroku xxxx xxx použito xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx ze xxx xxxxxxx úrovní, tzn. 25, 200 x 2000 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx taková, xxx x největší pravděpodobností xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxx podána. X xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 1.
Xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxx veškeré xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx informací x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx je xxxxxxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxx dávky (2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), pak se xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx žádné xxxxxxxxx o testované xxxxx, doporučuje xx - x xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata - xxxxxx xxxxxxx xxxxx 200 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti.
V některých xxxxxxxxx je xxxxx xxxx zpřesnit získanou xxxxxxxxx, xxx jak xx xxxxxxxx test x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx uvažovat o xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxx dávkách xx výši 5, 50 xxxx 500 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti.
Nemají xx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx dráždícími xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx rychlosti xxxxxxx, na xxxxxx x xxxxxxxxxx toxických xxxxxxxx. Testování xx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx, dokud není xxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxx dávku xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx test
Limitní test x xxxxxxx úrovní xxxxx xx xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx provádí xx třech xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, lze xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx 200 xx.xx-1 (xxxx 500 mg.kg-1) xxxxxxx hmotnosti.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 14 xxx, kromě xxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx utracena x xxxxxx xxxxxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx nemělo xxx xxxxxxxxx předem pevně; xxxx být prodlouženo xxxxx xxxxxxxxx reakcí, xxxx jejich xxxxxxx x xxxxx zotavovacího xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxx a xxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxxxx xxx-xx x xxxxxxxx xxxxxxx příznaky. Xxxxxxx pozorování xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx zvíře.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxxx jsou zvířata xxxx podáním xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Xxx xx xxxxx podávána xx xxxxxxx během xxxxxx xxxx, může xxx - x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířatům potravu x xxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx může xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx na velikosti xxxxxxx. U hlodavců xx xxxxx neměl xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx na 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x případě xxxxxxx xxxxxxx lze xxxxx x 2 xx xx 100 g xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x podávaném xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tak, xxx xxx podáván xxx objem na xxxxx xxxxxxxx dávky. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx možné xx aplikovat xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx v Dodatku 1.
1.3.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx dvakrát xx xxxxx xxx (xxx xxxxxxxx) nebo xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx zvířat xx xxxxxx xxxxx, a xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Zvířata, která xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx silného xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx: tato zvířata xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx uhynulá.
Ať xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx mrtvá, dobu xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxx pozorování xx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx a xxxxx, na xxxxx x xxxxxxxxxx, x xxxx xx dýchacím, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx systému, xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, letargie, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx systematicky xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx vedeny xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3.2 Tělesná hmotnost
Všechna xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx se x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Na xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx, než xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3.3 Xxxxx
X xxxxx zvířat použitých xx studii, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změny xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx zvíře xxxxxx. Xxx získání xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx orgánů xxxxxxxxxxxx xxxxxx makroskopické patologie x zvířat přežívajících 24 a xxxx xxxxx.
2. XXXX A XXXXXX ÚDAJŮ
K xxxxxxxxx xxxx být údaje x xxxxxx jednotlivém xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx údaje xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx u každé xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx úmrtí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx poučení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx je xxxxxxx x Xxxxxxx 2.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Zpráva x xxxxxx obsahuje xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx získány:
Pokusná xxxxxxx:
- živočišný xxxx/xxxx;
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx-xx xxxx;
- xxxxx, xxxxx x pohlaví xxxxxx;
- zdroj, xxxxxxxx xxxxx, potrava atd.;
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxx x týdenních xxxxxxxxxxx x xx xxxxx testu.
Podmínky xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxx xxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx objemů x doby xxxxxxxx;
- xxxxxxxx údaje o xxxxxxx x xxxxxxx xxxx (včetně xxxxx x xxxxxx);
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx údajů o xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx tabulek xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (tzn. xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx);
- xxxxxx x xxxxxx xxxxxx příznaků xxxxxxxx x jejich xxxxxxxxxxxxx x každého xxxxxxx;
- xxxxxxx nálezy x xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy x xxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx k dispozici.
Diskuse xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 423.
DODATEK 1
XXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxx xxxx xxxxxxx x xxxx 1.4.2.3, xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx ta xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx úrovní, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx uhynutí xxxxx u xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxx dávky xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxx x fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x účinku,
- všechny xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx uvedené x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx postupuje xxxxxxxxx xxx, jak xxxxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 25 xxxx 200 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx xxxxx pouze xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxx dále xxxxxxxxx. Xxxxx však xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx možnost xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx na xxxxx úrovni xxxxx.
4. Xxxxx xx dávce 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx pohlaví, xx xx xxxxxxxxxxxx, xx hodnota XX50 xxxxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx jen xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx reakce xxxxxxxxxxx xxxx zvířat xxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x těchto xxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx LD50 ve xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx, nebo xxxxx xxx podnětem xxx xxxxx testování xx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
5. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x třemi xxxxxxxxxxx xxxxx stanovenými xxxxxxx (xxxxxxxx 2). Xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx x xxxxxx alternativní xxxxx x daném xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nebo xxx xxxxx xxxxxxxxx xx dokončení testování xxxxx xxxxxxxx 1.
Postup xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 25 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx).
Xxx rámečky xx xxxxx uhynulých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu uhynulých xxxxxx xx x xxxxxxxxx pokračuje xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x příslušném xxxxx rámečku nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v Dodatku 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx testu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkou.
Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot uvedených x příslušném šedém xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx zvířat x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx uhynulých xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx šipek xx do xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx podle způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Pokračování testu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx testování x xxxxxxx dávkou 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X rámečcích xx xxxxx dávka, počet xxxxxx a xxxxxxx (1 - pohlaví xxxxxxx jako xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx).
Xxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3). Podle xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxx xxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxx rámečku.
Varianta 1 - Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX 2
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
X rámečcích xx xxxxx dávka, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx (1 - pohlaví xxxxxxx xxxx první, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Xxxx rámečky xxx rámečkem "XXXXX XXXXX XXXXXXXXX" x xxxxxxxxxx tohoto dodatku xxxxxxxx xxxxxxx hodnoty xxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx podle xxxxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx nedosáhne příslušného xxxxxxx. (Xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx horní xxxxxxx xxx příslušný xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx znamená, že XX50 xx xxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx rámečku xxxxx.)
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx dávkou 2000 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
x) Xxxxxxx dávka 25 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
&xxxx;
x) Xxxxxxx dávka 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
x) Xxxxxxx dávka 2000 xx/xx hmotnosti
X.2. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx, teplotě vzplanutí x xxxxxxxxxx (jsou-li xxxxxxxxxxxx) testované xxxxx
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx pokusných xxxxxx xx exponováno xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx x odstupňovaných xxxxxxxxxxxxx, x to xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Potom xx zvířata xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx a bolesti xx třeba humánním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se nemají xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x takovým xxxxxxxx, x kterých xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx bolest x xxxxx následkem xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx experimentálních xxxxxx. Xxxxx xx nevyžaduje xxx používaného xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx simulované xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxx, přidá xx k testované xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; x tom xxxxxxx xx zařadí xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace vehikulum xxxx xxxx aditiva, xxxx být x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx účinek. Xxxxxxxx-xx xxxxxx historická xxxx, je xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Experimentální xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % střední hodnoty (xxx každé xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx). Samice xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x akutních testech xxxxxxxx xxxxxxx vyšších xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx by xx xxxxxx použití xxxxxxx počtu xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx a xx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xx podávání xxxxxxxxx xxxxx testované látky.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx dávek, xxxxxxx xxx, x mají xxx vhodně xxxxxxxxxxxx xxx, aby xxx x xxxxxxxxxxx skupin xxxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx x mortality. Xxxxxxx údaje xxxx xxxxxx na znázornění xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x, xxxxx xx to xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Nedojde-li xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx 5 samců x 5 samic xxxxx x xxxxxxxxxxx 20 xx.x-1 xxxx parám xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxx x koncentraci 5 xx.x-1 (nebo - x případech, xxx xxxx xxxxxxxxxxx není xxxxx použít x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx včetně xxxxxx xxxxxxx - xxx xxxxxxxx maximální xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) během 14 xxx k žádné xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx za xxxxxxxx.
1.3.2.5 Doba xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx expozice xx být 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Xxxxxxxx
Pro xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx rozdělení xxxxx x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, je xxxxx xx konstruovat xxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxx maximální. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x inhalačním xxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx expozice; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx jinými xxxxxxx.
1.3.2.7 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx nejméně 14 xxx. Nelze xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx záviset na xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx jejich xxxxxx x xx trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx objeví x opět xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx doba xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx patrna xxxxxxxx xx zpožděné xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx bezprostředně xxxx xxxxxxxx zváží. Xxxxxxxx xx xx xxxx 4 hodin xx xxxxxxxx rovnováhy koncentrace xxxxxxxxx xxxxx. Nastavení xxxxxxxxx xx mělo xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx pokusu xx xxx 22 xX ± 3 o X. Xxxxxxxxx vlhkost xx xxx ideálně xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx není xxxxx (např. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Udržování xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx unikání xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Během xxxxxxxx xx nepodává potrava xxx xxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxx systémy xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx nejrychleji. Konstrukce x provoz xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry x komoře.
Je xxxxx zajistit xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
(a) měření xxxxxxx vzduchu (xxxxxxxxxxx),
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx expozice (xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxxxx xx vysoké koncentraci, xxxxx vyžadovat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx odchylovat xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ±15 %. U některých xxxxxxxx, kde xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx větší xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxxxxxx možné. Xxxxx xx xxxx částic x xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx, xxx to xxxxx xxxxxxxx (ale nejméně xxxxxx xxx každou xxxxxxxxxx skupinu),
(x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx i xx xxxxx skončení xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxx má xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx prvního xxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx každý xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx ztrát xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xx utracením xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Pozorování zahrnuje xxxxx xxxx, srsti, xxx, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dýchání, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx x kómatu. Xxxxxxx uhynutí xx xxxxx zachytit xx xxxxxxxxxxx. Hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx týdně x v okamžiku xxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x ta, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx všem xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx tkáně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx xxx každou experimentální xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx. Změny xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xxxx zaznamenána xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx zvířete testované xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx všech xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx, klinických symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- údaje x xxxxxxxx xx sestaví xx tabulky x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx hodnotami x xxxxxxxxxxxxxxxx variability (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx údaje:
a) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx;
x) teplota x xxxxxxx xxxxxxx;
x) xxxxxxxxx koncentrace (xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, dělené xxxxxxx xxxxxxx);
Xxxx.: xxx xxxxxxxx aerosolům látek x roztoku (xxxx. xx xxxx) je xxxxx uvádět xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx vzduchu, nýbrž xxxx, pokud je xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx ve xxxxxxxx.
x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx;
e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx;
f) xxxxxxxxxx xxxxxx aerodynamického xxxxxxx (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX);
x) xxxx xx xxxxxxxx rovnováhy;
x) xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxx reakcí xxxxx pohlaví a xxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx byla xxxxxxx xxxxxxxx; počet xxxxxx x xxxxxxxx toxicity; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx);
- doba uhynutí xxxxx expozice nebo xx jejím skončení, xxxxxx x kritéria xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx;
- xxxxxxx XX50 pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (x uvedením metody xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (xxxxx je xxxxx xxx stanovit);
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx dávce (xxxxxxxxxxx) a xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxx metoda xxxxxxxxx);
- pitevní xxxxxx;
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx důvodů xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx LC50);
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.3. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Testovaná látka xx xxxxxx na xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxxxxx x zaznamenávají xx xxxxxx x xxxxxxx uhynutí. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx konec xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx známo, že xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxx xxxxxx se zdravá xxxxx dospělá zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx je třeba xxxx xx xx, xxx se nepoškodila (xxxx. xxxxxx) kůže, xxx by xxxxx xxxxxx xxxx propustnost. Xxx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Při xxxxxxxx s pevnými xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x práškové xxxxx, xx třeba látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx dobrý xxxxxxx s kůží. Xxx xxxxxxx vehikula xx xxxxx brát x xxxxx vliv xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxx, x jaké xxxxx xx xxxx xxxx látka xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxx, a xx všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ten, xxxxx nejvíce xxxxxxxxx xxxxxx kůží. Testované xxxxxxxx xx zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx králíků. Xxx použít i xxxx živočišné xxxxx, xxxxx xxxx xxx xx důvody. Xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx každé pohlaví xxxxxx) překročit ± 20 % střední xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx dávek xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Používá-li xx xxxxx, musí xxx nullipary x xxxxx být březí. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx x obou xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x akutních xxxxxxx toxicity xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx se xxxxxx xxxxxxx menšího počtu xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pečlivě xxxxxx x xx xxxxx zajistit, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky. X těchto testech xx třeba xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx testované látky.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Má být xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se zřetelným xxxxxxxx toxických xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx o úrovních xxxxx je třeba xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxx údaje musí xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkou x účinkem, a xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx LD50 s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxx provést xxxxxxx test jednou xxxxxx nejméně 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx x xxxxxxxx xxxx popsaných postupů. Xxxxx xxxxx způsobí xxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxx studii.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx ji xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx být xxxxxx xxxxx obrazu xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje xxxxxx x trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Rozhodující xx doba, xxx xx xxxxxxx otravy xxxxxxx x xxxxxx x doba do xxxxxxx, zvláště tam, xxx je xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx jednotlivě x xxxxxxx. Testovaná xxxxx xx nanese xxxxxxxxxx xx plochu, xxxxx xxxx xxx 10 % celkového povrchu xxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx; mělo xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx část xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx po expoziční xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx v kontaktu x kůží xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx obvazu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plochu je xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxx xxxxx x testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx orálnímu xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, úplnou xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx každé xxxxx xx třeba vést xxxxxxxxxx xxxxxxx. První xxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx každý pracovní xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x odpovídající xxxxxxxx mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx snížení xxxxx xxxxxx xxx studii, xxxx. xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx izolací a xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Pozorování xxxxxxxx změny xxxxx, xxxx, xx kterou xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx a xxxxxxx, x také xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx tremoru, xxxxxxxx xxxxx, slinění, xxxxxx, letargii, xxxxxx x komatu. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx xxxxxx, x xxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx pohlaví
Xx dokončení xxxxxx xx jednom pohlaví xx xxxx xxxxx xxxxxxx jedné skupině x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví, aby xx zjistilo, xxx xxxxxxx xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxx citlivější xx xxxxxxxxxx xxxxx. X konkrétních případech xxxx xxx odůvodněno xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx citlivější, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx pro xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx počátku pokusu, xxxx xxxxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x pitevních xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx bezprostředně před xxxxxxx testované látky, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x před xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, přežijí-li xxxxxxx déle než xxxxx den. Xxxxxxx, xxxxx byla humánním xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx na xxxxx x bolesti xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx látkou. XX50 se xxxxxxx xxxxxxxxx metodou. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, změn xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx pokusu
Zpráva x průběhu xxxxxx xx xxxxx možno xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- živočišný druh, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.,
- podmínky pokusu (xxxxxx způsobu očištění xxxx x xxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxx pokusných xxxxxx,
- tabulky xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxx zvířat uhynulých xxxx xxxxxxx utracených xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, důvody x xxxxxxxx xxx xxxxxxx utracení xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx,
- hodnota XX50 xxx xx pohlaví, x kterého byl xxxxxxxx úplný xxxxx, x xx pro 14xxxxx pozorování (s xxxxxxxx metody výpočtu),
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pro XX50 (xxxxx jej xxx xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx (xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx metodou xxxxx),
- pitevní xxxxxx,
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx všech xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XX50 v xxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx testu),
- interpretace xxxxxxxx.
X.4. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXX DRÁŽDIVOST)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat xxxxxxx xxxxx reakce. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx je xxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx není xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx kyselé xxxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. xX xxxxx či xxxxx 2 xxxx xX rovné xx xxxxx 11,5) není xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx kožní xxxxxxxxxx, xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx třeba xxxx x xxxxx také xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
b) Xxxxxxxx xxxx dostupné xxxxxxxxxxx xxxxxxx závažných xxxxxx xxxxx xx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx in xxxxx xxxxx, není xxxxxxxxx xxxxx xxxx.
x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx akutní toxicity xxx xxxxxxxx aplikaci xxxxxxxxx xxx limitní xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxx pozorováno xxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xxxx testovat xxxxx xxxxxxxxxx. Rovněž xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
Studovaná látka xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx každé xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xx stanovené xxxx xx odečte, xxxxxxxxx x následně xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, aby xxxx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx dostatečně xxxxxx, xxx xxxx možné xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx pozorovaných účinků.
Xxxxxxx se závažnými x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx ostříhá xxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx srsti xx xxxxx xxxx xx to, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xx xxxxx použít xxxxx xxxxxxx se zdravou, xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx husté xxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx obdobích xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx tyto zóny xxxxx xxxxx xxxxx.
Xxx pokusech x xxxxxxx látkami, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, případně xxxxx vhodným vehikulem, xxx byl xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx použití vehikula xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx na podráždění xxxx xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx xxxxxxxx nezředěné.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxx xxxxx xxxxx, je xxxx třeba xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xx z xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx jiných xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx vyvolávat nekrózu (xxxx. xx leptavá), xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx testu na xxxxxx zvířeti. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx testu xxxxxxxxxxx leptavé účinky, xx xxxxx doplnit xxxxxxxxx na xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Pro xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx zvláštních xxxxxx xxx neošetřenou xxxxxxxxx skupinu, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Pokud xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx postup, xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxx xxxx 0,5 g xxxx nebo polotuhé xxxxx. Přilehlé xxxxxxx xxxxxxxxxx kůže xxxxxxx xxxxxx x testu xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Dobu xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nevratnost xxxxxx. Xxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx xx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Zvířata xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Testovaná xxxxx se xxxxxx xx xxxxx xxxxxx (xxx 6 xx2) xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxx past xxxx xxx xxxxxx nanést xxxxxxx xxxxxxxxxx látku xx xxx, a xxx jej xxxxxxxxx xx kůži. Xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx okluzivním xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx xx zvíře dostalo x mulu a xxxxx přijmout testovanou xxxxx xxxxxx xxxx xx vdechnout.
Na xxxxx xxxx expozice xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx je xx možné, xxxx xxxxxxx rozpouštědlem, xxx xxx, xxx nebyla xxxxxxxxx případná reakce xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Doba expozice xx obvykle 4 xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx nekrózu (xxxx. xxx, xx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx zkrátit xxxxx xxxxxxxx (xxxx. na 1 hodinu xxxx 3 xxxxxx). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx použít xxxxxxx xxxxxx zvíře x xxxxxxxxx 3 xxxxxx xxxx současně, xxxxx xx akutní xxxxxxxx xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxxx. První xxxxxx xx xxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxxxxx závažná xxxxx xxxxxx, odstraní xx xxxxx xxxxxx xx 1 hodině. Xxxxx pozorování v xxxx xxxx xxxxxxxxx, xx je xxxxxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx a xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zacházení, xxxxxxxx xx xxxxx plátek xx 4 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx odpovědi xxxx. X xxxxxxx, že xxxx xxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxx po 4 xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx nekróza xxxx).
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx) xxxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx xxxx xx 1 xxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx ukončen.
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx navrhnout xxxxx xxxxxxxx, například xxxxx xx xxxxxxxx očekávanému xxxxxxx použití x xxxxxxxx u člověka.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx kůže po 60 xxxxxxxx x xxxx 24, 48 x 72 hodin xx odstranění plátku x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 1. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx úplného xxxxxxxx xxxxxx, provádí xx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx kůže xx xxxxx podrobně popsat xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx kožní tkáně) x jiné xxxxxxx xxxxxx. X objasnění xxxxxxxxxx reakcí xxxx xxxxxxxx, maskovaných xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx řasy.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx patrný stupeň xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx erytému x edému po xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxx všechny xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x povahy xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a všechny xxxxx xxxxxxxxxx toxické xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx možno xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx přípravy x čištění xxxx, xxx obvazu: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxx xxxxxxx údaje x kožní reakci xxx každé xxxxxxxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx (za 1, 24, 48 x 72 hodin xxx. xx xxxxxxxxxx xxxx),
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx podráždění x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- popis všech xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx reakce xxxx
Hodnota | |
1. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx | |
1.1 Xxxxx xxxxxx | 0 |
1.2 Velmi xxxxx erytém (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx | 2 |
1.4 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx | 3 |
1.5 Těžký xxxxxx (xxxxx xxxxxxxx) xxxx tvorba příškvaru (xxxxxxxxx poškození - xxxxxxx) znemožňující xxxxxxxxx erytému | 4 |
2. Xxxxxxxxx xxxxx | |
2.1 Xxxxx xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx xxxxx edém (xxxxx viditelný) | 1 |
2.3 Lehký xxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx ohraničena xxxxxxxxx xxxxxxxxx) | 2 |
2.4 Mírný edém (xxxxxx xxxxxxxx xxx x 1 xx) | 3 |
2.5 Xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xxxx xxx 1 mm x otok xxxxxxxxxxx xxxxxxx exponované plochy) | 4 |
4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kožní xxxxxxxxxxx (XXX)
XXX xx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxx průměr xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx erytém x xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x x xxxxx získaných xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx aritmetický průměr.
Xxxxxxxxxxx | XXX |
nedráždí | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx xxxxxx | 0,5 &xx; XXX ≤ 3 |
středně xxxxxx | 3 &xx; XXX ≤ 5 |
silně xxxxxx | XXX > 5 |
B.5. AKUTNÍ XXXXXXXX (OČNÍ XXXXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
1.1.1 Xxxxxxx xxxxx
Xx třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx s xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. K xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
a) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti x xxxxxxxx reaktivita. Např. xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx - xxx xx xxxxx očekávat - xxxxxxxx x xxx xX rovné či xxxxx 2 xxxx xX xxxxx xx xxxxx 11,5, xxxx xxxxx testovat, pokud xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx validizovaných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx x xxxxxxxxxxx potenciálně xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nemají xxx xxxx xxxxxxxxx xx dráždivost xxx xxx, xxxxxxx lze xxxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx na xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx metodou.
x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx dráždivosti. Látky, xxxxx vykazovaly xxxxxx xxxxxxx xxxx výrazně xxxxxxxx účinky xx xxxx ve xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx dále xxxxxxxx xx dráždivost xxx xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx se x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx pokusným zvířatům, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx jako xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx intervalech xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx podráždění x xxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinku. Xxxx pozorování musí xxx dostatečně xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx také xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je xxxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
24 hodin xxxx xxxxxx xx x každého x xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxxx provede vyšetření xxxx xxx. Zvířata, x kterých xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx x experimentu xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Ačkoliv se xxxxxxxxx xxxxx druhy xxxxxxxxx xxxxxx, doporučuje xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx albinotickému xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx test xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx tohoto xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx naznačují, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (reverzibilní účinek) xxxx leptavé (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxxxx xxx xxx xxx použití xxxxxxxxx postupu, xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aspektů xxxxx být případně xxxxxxxxx xxxxx zvířata.
X ostatních xxxxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx xxx zvířat. Xxxxxxxxx nejednoznačných nálezů xxxx vyžadovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,1 xx. X xxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxx objem 0,1 xx nebo hmotnost xxx 0,1 x (xxxxxxxx je xxxx xxxxx uvést). Xxxxx-xx xx x tuhou xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx rozemlít na xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx po xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xx měrnou xxxxxxx.
X látek xxxxxxxxxx xx sprejích x pumpou nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x sebrat 0,1 xx xxxxx a xxxxxxxxxx xx do xxx xxxxx xxxxxx xxx kapaliny.
1.2.2.4 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx vratnost xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků. Xxxxxxxx xxxx xxxxx 21 dnů po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxx, xx xx spodní xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx oční bulvy. Xxxxx xx pak xxx xx 1 xxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx, aby xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx, xx které xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx kontrolní.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, lze xxxx instilací xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx lokální xxxxxxxxxxx. Aby xxxx xxxxxxxxx, xx následkem xxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxx xx testovanou xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx x dobu xxxxxxxx xxxxxxxxx anestetika. Xxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx vymývat nejdříve 24 xxxxxx xx xxxxxxxx testované látky. Xx 24 xxxxxxxx xx možno xxx xxxxxxxxxxx, pokud se xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
U některých xxxxx, xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx metodě xxxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx se xxxx xx instilaci xxxxx xxxxxx xxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx použít 3 xxxxxxx. Xxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx oči vymývají xxxxxx xx xxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx objemu kapaliny x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pozorování x xxxxxxxxxxx
Oči se xxxxxxxxx po 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx. Neprojevují-li xx po 72 xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx lézí, xx xxxxx zkoušku xxxxxxx. Xxxx pozorování xx xxxxx prodloužit, xxxxx xxxxxxxxx postižení rohovky xxxx xxxx příznaky xxxxxxxxxx oka xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx ve xxxxxx x xxxx xxxxxxxx léze.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxx. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx připouští xxxxx možnosti xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx laboratoře x xx, xxx provádějí xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx podráždění xxx.)
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx usnadnit xxxxxxxx xxxxxxxxxxx lupy, ruční xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx nebo jiných xxxxxxxx xxxxxxxx. Po xxxxxxxxxxx pozorování xx 24 hodinách xx xxxxx oči xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx do xxxxxxx. Z ní xxxx xxx xxx xxxxx pokusné xxxxx xxxxxx stupeň podráždění x xxxxx intervalu xxxxxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x charakteru xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx mimooční xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x zvířatech (xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx chovu, krmení xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností xxxxxxxxx xxxxx),
- x xxxxxxxxx formě výčet xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx každém xxxxxxxxxx (xxxx. xx 1, 24, 48 x 72 hodinách)
- popis xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx,
- podrobný popis xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx zjištěného xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx oblasti xxxxxxx,
- xxxxx metody xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx body (1, 24, 48 a 72 hod.), např. xxxxxxxxxx lampa, oční xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx.,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx xxxx xx xxx
Xxxxxxx | |
X. Xxxxxxxx - xxxx | |
Edém xxxx xxxxxxxx | 0 |
Slabý xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx | 1 |
Výrazný edém x everzí xxxxx | 2 |
Edém xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxx | 3 |
Edém xxxxxxxxxx víčka xxxx xxx na polovinu xxxx zcela | 4 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxx | |
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Slabé xxxxxx (xxxxx odlišit xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx koutku) | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx víček x xxxxx x xxxxxxxxx xxx | 2 |
Slzení xx zvlhčením xxxxx x srsti x xxxxxxx xxxxx xxx | 3 |
C. Spojivka - xxxxxxx | |
Cévní xxxxxx normální | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx | 1 |
Splývající xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx jednotlivých xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx červená xxxxx | 2 |
Xxxxxxx tmavě xxxxxxx xxxxx | 3 |
X. Duhovka - xxxxxxxx | |
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx duhovky, xxxxxxxxx, xxxxx, nastříknutí cév xxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxx xxxx těchto xxxxxxxxxxxxxx), xxxxxx xx xxxxxx xx zachovaná, xxxxxxxx xxxxxxxx | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxx xxxx přítomná, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx | 2 |
x xxxxxxx (xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx) | |
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx oblast je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx | 2 |
Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxxxx xxxxx viditelný | 3 |
Úplná xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, duhovka xx xxxxx xxxxxxxxxxx | 4 |
X. Xxxxxxx - xxxxxx neprůhlednosti | |
Xxxxxxxxxxxxx xx pozorovatelná, ale xxxx plocha xx ≤ 1/4 plochy xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 xxxxxx xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 plochy xxxxxxx | 3 |
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx &xx; 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 4 |
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx dráždivosti (XXX)
Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (IOI) xxx xxxxx xxxxx a xxxxx interval hodnocení xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx
XXX = 2.(X + X + X) + 5.X + 5.X.X
Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (IOP) xxx xxxxx interval hodnocení xx xxxxxxx xxx xxxxx interval xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x XXX.
Akutní xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx IOA xx xxxxx nejvyššímu XXX zjištěnému v xxxxxxx testu
4.3 Klasifikace
Xxxxxxxxxxx | IOA |
xxxxxxxx | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
xxxxxx | 15 - 29,9 |
xxxxx dráždí | 30 - 59,9 |
velmi xxxxx xxxxxx | 60 - 79,9 |
xxxxxxxx xxxxxx | 80 – 110 |
X.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. METODA
1.1. Xxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx schopnost xxxxx xxx xxxxxxxxxx látek x potenciálním senzibilizačním xxxxxxx na xxxxxxx xxxx xxxx považovány xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x oblasti xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx jediná xxxxxxxxx metoda, která xx xxxxxxxxxx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro lidskou xxxx x xxxxx xx xx xxxxxx xxx xxxxxxx látky.
Xxx xxxxx testu xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx např. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx schopnosti xxxxxxx xxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx, ve xxxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx testované látky xx Xxxxxxxxx kompletním xxxxxxxx (XXX), x xx xxxxx bez xxxxxxxx.
Xxxxx s xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx než xxxxxx xxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx xx xxx dává xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xx morčatech (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Test - XXXX) xx velmi xxxxxxxxx test s xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxx schopnosti látky xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xx GPMT xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x adjuvans.
X xxxxx skupin xxxxxxxxxx látek jsou xxxxx xxx adjuvans (xxxxxxxx xx xxxx Xxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxxxx xx méně xxxxxxx.
X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx testu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx spíše xxx xxxxxxxxxxxxx injekci xxxxxxxxxx v maximizačním xxxxx xx morčatech. Xxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx je třeba xxxxx xxxxxxx důvody.
X této metodické xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx na xxxxxxx (XXXX) a Xxxxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx validizované a xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxx jejich xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx uznávanou xxxxxxx xx pozitivní xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxxx látku označit xxxx potenciální xxxxxxxxxxxxxx xxx dalšího xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx výsledku xx xxxx nutné xxxxxxx xxxx na xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Definice
Xxxxxxxxxxxxx kůže: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx. X xxxxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx, pupenci, xxxxxxxx, xxxxxx (velkými xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxx xxxxxxxx pouze xxxxxxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx expozice xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx: období xxxxxxx xxxxxxx týdne xx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx rozvinout xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx expozice xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx, xxx subjekt xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx s použitím xxxxx, o xxxxxxx xx xxxxx, že xxxx xxxxx xx xxxxxxx silný xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se očekává xxxxxx na xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % u metody x xxxxxxxx x xxxxxxx 15% x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx se dává xxxxxxxxxxxx xxxxxx:
Číslo XXX | Xxxxx XXXXXX | xxxxxxxx xxxxx | xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxx |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-merkaptobenzothiazol | xxxxxx |
94-07-7 | 202-303-5 | Xxxxx xxxxx kyseliny x-xxxxxxxxxxxxx | xxxxxxxxx |
Xxxxx nastat xxxxxxxxx, kdy při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zdůvodnění xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Pokusná xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxxxxxxxxxxxx injekcemi xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (indukční xxxxxxxx). Xx xxxxxx 10 xx 14 xxx (xxxxxxxx xxxxxx), x xxxxxxx kterého xx xxxx rozvinout xxxxxxxx reakce, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx provokační xxxxx. Xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x testovaných xxxxxx xx porovnán s xxxxxxxx a stupněm xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx expozici v xxxx xxxxxxx x xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávka.
1.5 Popis testovacích xxxxx
Jestliže xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxx, xxxxxxx xx xx x použitím xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, aby xxxxxx xxxxxxxx vzniklá kožní xxxxxx xxxx integrita xxxxxxx.
1.5.1 Maximizační test xx xxxxxxxxx (XXXX)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx podmínky po xxxx xxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x kontrolních skupin. Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx stříháním, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x závislosti xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Zvířata xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxx.
1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxxxx se běžné xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.2 Xxxxx x pohlaví
Lze xxxxxx samce x xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxxx 10 zvířat x xxxxxxx 5 xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx a 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxx dojít x závěru, že xxxxxxxxx látka je xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx celkového počtu xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.3 Dávkové úrovně
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx pro každou xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx takovou xxxxxx, kterou xxxxxxx xxxxxxx dobře xxxxxxx x která xx xxxxxxxx působící xxxxx xx střední xxxxxxxxxx xxxx.Xxxx provokační xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx potřeby xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx v předběžném xxxxxx na dvou xxxx xxxxx zvířatech. Xxx tento xxxx xxx xxxxxx použití xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxxxxx FCA.
1.5.1.3 Popis xxxxxxx
1.5.1.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx injekcí, xxxxx xx 0,1 xx, se podají xx lopatkové xxxxxxx xxxxxxx srsti symetricky xxxxx xxxxxxx linie:
Xxxxxxx 1: Freundovo xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxxxxxx 2: testovaná xxxxx xx vhodném xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
Injekce 3: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx připravená xx xxxxx XXX x xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Pro xxxxxxx 3 xx xxxxx ve xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx s XXX xx xxxxx xxxx. Xxxxx rozpustné x xxxxxxxx xxxx látky xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro injekci 3 má být xxxxxx xxxx pro xxxxxxx 2.
Injekce 1 x 2 xx aplikují xxxxxx xxxx x xx xxxxxxxx hlavě, zatímco xxxxxxx 3 směrem xx kaudální xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx injekcí, xxxxx xx 0,1 xx, xx podají xx xxxxxxxx xxxx xxxx u testovaných xxxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx kompletní adjuvans (XXX) smíšené s xxxxx nebo fyziologickým xxxxxxxx v objemovém xxxxxx 1:1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxx xxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) xx xxxxx XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x poměru 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. den - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Přibližně xxxxxx xxxxx xxxxx před xxxxxxx indukční aplikací, xxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxx xxx kůži, xx xx testovací xxxxxx po důkladném xxxxxxxxx xxxxxxxx oholení xxxxx 0,5 xx 10% xxxxxxxxxxxxx sodného xx xxxxxxxx, za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx skupina
Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx vehikulu xx napuštěn xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 xx), xxxxx xx pak xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxx 48 hodin. Xxxxx xxxxxxxx se xxxx odbornými důvody; xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx vhodného xxxxxxxx; xxxxxxxx lze xxxxxxxxx xxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx skupina
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx vehikulum xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx jako u xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 48 xxxxx.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. xxx - Xxxxxxxxx a kontrolní xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xx jeden xxx xxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxx nebo x xxxxxxx x na xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xx xx xxxxx). Xxxxxx se pomocí xxxxxxxxxxx obvazu xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xx 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx: testované x xxxxxxxxx skupiny
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx plocha xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a x případě xxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx provokační xxxxx) xx pozoruje xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx;
- xxxxxxxxx 24 xxxxx xx tomto xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx kůže (72 xxxxx).
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx je xxxxxxxxx.
Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx provokace (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, v xxxxxxx xxxxxxx znovu x xxxxxxxxx xxxxxxxx x vehikulem. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx na původní xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx postupů, xx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). K objasnění xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxx tloušťky xxxxxxx řas.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxx
1.5.2.1 Xxxxxxxx
Zdravá xxxxx xxxxxxx albinotická xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx aspoň 5 dnů před xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx. Odstranění xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx kůže. Xxxxxxx xx zváží xxxx xxxxxxxxx testu a xx xxxxx xxxxx.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Používají xx xxxxx laboratorní xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Lze xxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx 20 zvířat x xxxxxxxxx skupině x xxxxxxx 10 zvířat x xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx úrovně
Koncentrace xxxxxxxxx xxxxx použitá xxx xxxxxx indukční xxxxxxxx xx xxxxxx xx takovou xxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, ale xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kůže. Jako xxxxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. X případě xxxxxxx xx možno xxxxxx xxxxxxxxxxx stanovit x xxxxxxxxxx xxxxxx xx dvou nebo xxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xx vodě je xxxxxx použít vodu xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxx jiné xxxxx xx xxxxxxxxxx 80% roztok xxxxxx/xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Indukce
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxx xx xxxxxx srsti (xxxxxxxx xxxxxxxx). Systém xxxxxxxxxx testu xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx vhodném xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; kapaliny xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx přímo).
Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x přidržován x xxxxxxxx s xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx obvazem xx xxxx 6 xxxxx.
Xxxxxx plátkového xxxxx xxxx xxx okluzivní. Xxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx už xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx, x plochou xxxxxxxxx 4 - 6 xx2. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx přidržovače, aby xx xxxxxxxxx okluze. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, mohou xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxx je xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Xx testovací xxxxxx xx naneseno xxxxx xxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx způsobem xxxx x testované xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx je xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x kontaktu x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx komůrkou x xxxxxxx obvazem xx xxxx 6 hodin. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupina xxxx xxxxx, xxx použít xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx.
6. - 8. a 13. - 15. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx jako x xxx 0 xx xxxxxxx xx xxxxxxx testovací xxxxxx xx xxxxxx boku (xxxxxxxx případně xxxxx) 6. - 8. xxx x xxxxx 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Provokace
27. - 29. xxx - Testovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx xxxxx (důkladně xxxxxxxx). Okluzivní xxxxxx xxxxxxxxxx příslušné xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx nedráždivé koncentraci xx aplikuje xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx může xxxxxxxxx xxxxxxx plátek x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx komůrky xxxx xxxxxxxxxxx x kontaktu x xxxx vhodným xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.
1.5.2.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx plocha xxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx později (xxxxxxxxx 30 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x zaznamenávají xxxxx stupnice uvedené x dodatku;
- xxxxxxxxx po xxxxxxx 24 xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 54 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) se kožní xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" u testovaných x kontrolních zvířat, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxx senzibilizováno x xxxxx xx kontrolní.
Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (tj. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), provede xx přibližně o xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Opakovanou xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx xx původní xxxxxxxxx skupině.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx indukčních x provokačních xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). X objasnění xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx.
2. XXXX A XXXXXX XXXXX (GPMT X XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx, xx xxxxx musí xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx reakce xxxx xxx každém xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX (XXXX A XXXXXXXXX TEST)
Pokud xxx xxxxxxxx před xxxxxxxxx testu xx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx uvést xxxxx tohoto xxxxx xxxx jeho citaci (xxxx. LLNA - xxxx xxxxxxxxxxxx lymfatických xxxxx, XXXX - xxxx xxxxxxxxx ucha x xxxx) včetně xxxxx podrobností postupu x výsledků xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látky.
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (XXXX x Xxxxxxxxx xxxx)
Xxxxxx x xxxxxx obsahuje tyto xxxxxxxxx, xxxxx mohly xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx, strava xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx a xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxx přípravy xxxxx pro plátkový xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x materiálech x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;
- výsledek xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx o xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx použité xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx pro každé xxxxx včetně systému xxxxxxxxxxx;
- xxxxxx xxxxx charakteru a xxxxxx pozorovaných xxxxxx;
- xxxxxxx histopatologické xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Stupnice Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
1 = xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx;
2 = xxxxxxx xxxxxxx x splývající xxxxxxxxx xxxx;
3 = xxxxxxxxxx zarudnutí x xxxxxxx xxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx senzibilizace
Xxxxx xxxxxxxxx pozitivity xxx xxxxxxxxxx expozici, xx. xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx
xxxxx xxxxxxx (I. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 9 - 28 % xxxxxx
xxxxxxx xxxxx alergen (III. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
silný xxxxxxx (XX. xx.) - 65 - 80 % xxxxxx
extrémní xxxxxxx (X. xx.) - 81 - 100 % xxxxxx
X.7. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx metody
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika skupinám xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Pitva xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, která xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxx pokusu; xxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx konec xxxxxx, xx xxxxxx a xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx co xxxxxxx xxxxxxxx vliv xxxxxxxx xxxxx. Každé xxxxxxxxxx zvíře xx xxxxxxxxxxx označeno. Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx experimentu.
Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx sondou nebo x potravě nebo x pitné xxxx, xxxxx účelu studie x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxx suspenduje xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx nosiči (xxxxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, pak použití xxxxxxx/xxxxxx x jedlém xxxxxxxxxx oleji (xxxx. xxxxxxxxxx) x pak xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx jejich xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xx nezbytné xxxxxx stabilitu xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxx xx xxxxx použít x jiného xxxxx xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx mladých xxxxxxxx xxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx kmenů. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x nesmí xxx březí. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx co nejdříve xx xxxxxxx x x xxxxxx případě xxxxx, než xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.
Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx dlouhodobou xxxxxx, xx třeba x xxxx studiích xxxxxx zvířata xxxxxxxx xxxxx a ze xxxxxxxx zdroje.
1.2.2.2 Počet x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, xx nutno zvýšit xxxxxxx počet zvířat x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 28 dnů xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, trvání xxxx zpožděný xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Používá xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx a jednu xxxxxxxxx skupinu. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokusným xxxxxxxx, x to xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xx xxxxxxxx nejvyšší xxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx denní xxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx-xx xxxxxx data x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx účelem xxxxxxxxx dávek.
Při xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxx existující xxxxx x toxikologických x toxikokinetických xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx látkách příbuzných.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx. Dále xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx řadě xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinku xx xxxxx. Nejnižší xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (XXXXX). Xxxxxxx xx vhodný xxxx- až xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx sousedními xxxxxxx; pokud xx xxxxx xxxxxx větší xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx čtvrtou xxxxxxxx skupinu, než xxxxxx příliš velký xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. faktor větší xxx 10).
Xxxxx xx testovaná látka xxxxxx x potravě xxxx xxxxx xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx neovlivňovalo xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxx, mělo xx se xxx xxx xxxxx den xx stejnou xxxx x dávkování xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx má xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx pokus xxxx dlouhodobou studií, xx xxxxx v xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxxx-xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxxxx při dávce 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx za den xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx vodě, xxxxx xxxx dávce xxxxxxxx, x xxxxx toxicita xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx od provedení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx platí, xxxxx xxxxx o xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xx je xxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx xx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx skupiny jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx účinku.
1.2.3 Xxxxx postupu
Zvířatům xx podává xxxxxxxxx xxxxx 7 dní x týdnu xx xxxx 28 xxx, xx zdůvodněných případech 5 dní x xxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx objem tekutiny, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx by xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x tělesné xxxxxxxxx, x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 xx xx 100 x xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx x podávaném objemu xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tak, xxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx na xxxxx úrovních xxxxx. Xxxxxxx xx x xxxxx dráždivých a xxxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx obvykle xxxxxxx se stupňovanými xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx denně, xxxxxxx x tutéž xxxxx xxxx x s xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx stav xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx moribundní x xxxxxxx projevující xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Důkladné klinické xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx provede před xxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxx intraindividuálního xxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx chovnou klec x xxxxxxxxxxx pozorovacím xxxxxxxx x nejlépe xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx dobu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, nejlépe x xxxxxxxx skórovacího systému, xxxxxxxxxxxxxxxxx v testující xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx nejméně; xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx by xxxxxxx xxxxxx znát xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, očí x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx a vegetativních xxxxxx (xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxx xxxxxx na manipulaci, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, stereotypů x xxxxxxx (vytrvalé xxxxxxx pohyby nebo xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx).
Xx xxxxxxx týdnu xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx podněty (xxxx. xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx xx xxxx xxxxxx x celková xxxxxxxxx aktivita. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x testování xxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx Xxxxxxxxx úvod, část X).
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud 28xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx předběžná studie xxx následující xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (90denní); v xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx poruch xxxxxxxx do xxxx xxxxxxxxxx studie. Xxxxx x x xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x funkčních xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxx subchronickou xxxxxx.
Výjimečně xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x skupin xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx by xxx xxxxxxxxxx funkčního xxxxx zvířete xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxx hmotnost a xxxxxx potravy x xxxx
Xxxxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Spotřeba xxxxxxx x xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx.
1.2.3.3 Hematologie
Xxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxx xxxxxx zahrnuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
Krev xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx v xxxxxxx xxxxxxxx zvířete, xxxxx, xxxxx xx xxxx odebrala, xx xxxxxxxxx. Krev xx xxxxxxxx za vhodných xxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx analýza xxxx xx účelem posouzení xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx před nebo x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx). Xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx noc xxxxxxx krve1). Xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx sodíku, xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky xx xxxxxxx buňky (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx). Zaměření xxxxxxx enzymů (xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx x některých xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx xx časově xxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxx xxxx xxxxx posledního xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx xx xxxxx vzhled, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx hmotnost, pH, xxxxxxxxx, glukózu x xxxx xxxx. xxxxxxx.
Xxxx je xxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx poškození xxxxx x xxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx je třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx nebo podezřelých x xxxxxxxx na xxxxxx metabolické xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx lačno, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx hormonů, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxxxxx xxxxxx vyšetření xx xxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxx xxxxx nebo xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx pružně, xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx druh x xxxxxxxxxx nebo očekávané xxxxxx dané xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx hodnotách xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx jejich stanovení xxxxx xxxx začátkem xxxxxx.
1) Vyšetření xx lačno xx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxx v xxxx x xxxxxx, zvláště xxx xxxxxxx. Hlavní xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx je xx, xx x nehladovějících xxxxxx xx vyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx maskovat xxxxx změny x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx, hladovění xxxx xxx xx xxxxx xxx xxxx xx celkový xxxxxxxxxxxx x u xxxxxxxx x potravě by xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 4. xxxxx xxxxx.
1.2.3.5 Xxxxx
U všech xxxxxx použitých ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx pečlivé xxxxxxxxx vnějšího xxxxxxx xxxx, xxxxx otvorů, xxxxxx lební, xxxxxx x xxxxxx, a xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx, slezina, xxxxx a xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx očistí od xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx po xxxxx xx zváží xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x ohledem na xxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny xxxxx x makroskopickými změnami, xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x mostu), xxxxx, xxxxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxx (xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, slezinu, xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, průdušnici a xxxxx (xxxxxxxxxxxx naplněním xxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xxxxxxxxx), xxxxxx x xxxxxxxx pohlavní xxxxxx (např. xxxxxx, xxxxxxxx), močový měchýř, xxxxxxxxxx xxxxxx (přednostně xxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx pro pokrytí xxxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xxxx (x. xxxxxxxxxxx xxxx n. tibialis), xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx (nebo čerstvý xxxxx z xxxxxx xxxxxx xxxxx). Podle xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x další xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxx by xxxx xxx cílovým orgánem xxx xxxxxxxx testované xxxxx, xx třeba xxxxxxx.
1.2.3.6 Histopatologické xxxxxxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx dávka, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx x orgánech x xxxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkami.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx léze xx xxxxx vyšetřit.
U xxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxx byly xx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXX X ZÁZNAM XXXXX
K xxxxxxxxx xxxx xxx údaje x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx tabulkové xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících příznaky xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů, xxxx xxxxx jednotlivých xxxxxx, xxxxx toxických xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, trvání x xxxxxxxxxx xxxxxxx příznaku, xxxxx zvířat vykazujících xxxx, xxx lézí x xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx typy xxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxxx formě xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxx xxxxxxxx xxxx informace, pokud xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxx, stáří x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxx testu.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx než xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxx testované xxxxx xxx aplikaci, případně x xxxxxxxx diety, x xxxxxxxxxx koncentracích, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx testované látky;
- xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx xxxx (xxx) na skutečnou xxxxx xxxxx x xx xx kg xxxxxxx hmotnosti (pokud xxx x aplikaci x dietě nebo xxxx);
- podrobné xxxxx o xxxxxxx x xxxxxxx vody (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxx;
- údaje x toxických reakcích xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxx xxxxxxxx toxicity;
- xxxxxx, xxxxxxxxx x trvání xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. zda xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, úchopové xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx;
- výsledky xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x příslušnými xxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx;
- pitevní xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- údaje x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx:
4. XXXXXXXXXX
Tato xxxxxx xx analogická xxxxxx OECD XX 407.
X.8. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx x testované látce: xxxxxxxxx xxxxxxxxx částic, xxxxx xxx, xxx xxxx, bod xxxx, xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (jsou-li xxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Několik xxxxxx pokusných xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx koncentraci, x xx xx 28 xxx. Xxxxxxx-xx xx pro dosažení xxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují x zjišťují xx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, i xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx pokusu, xx pitvají.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jiná xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx je využít.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud nejsou xxxxx xxxxxx proti xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xx xxxxxxx studie xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxx nejméně 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x nesmí xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v průběhu xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxxxxx vysoké xxxxxxxxxxx satelitní skupinu 10 zvířat (5 xxxxxxx každého xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví).
1.3.2.3 Expoziční xxxxxxxxxxx
Použijí xx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx skupina, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx - pokud xx užije - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx u skupiny x xxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx se se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx xxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx koncentrací, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx koncentrací x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Trvání xxxxxxxx xx být 6 xxxxx xxxxx; x případě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je možné xxxxxx i xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Expoziční xxxxxxxx
Pro xxxxxx xx zvířaty se xxxxxxx dynamické xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx přiměřený xxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx rozdělení xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx třeba xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x aby xxxxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry x xxxxxxxxxx boxu xxxxx xx v xxxxxx xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxx. Xx xxxxx použít xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx celotělové xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx jinými cestami.
1.3.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx xxxxx zaznamenat xxxx uhynutí x xxx, xx xxxxxx xx objeví x xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxx, 5 - 7 xxx x týdnu, xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách, která xxxx určena k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx 14 xxx xxx xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx vlhkost xx být mezi 30 % x 70 %, s xxxxxxxx xxxxxxx, kde xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx do okolí. Xxxxx expozice se xxxxxxxx xxxxxxx ani xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x vhodnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx získání xxxxxxxxxx koncentrací. Rychlost xxxxxxx vzduchu je xxxxx nastavit xxx, xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx podmínek expozice xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Xxxxxx průtoku xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
b) Xxxxxxxx koncentrace studované xxxxx xx měří x dýchací xxxx. Xxxxx xxxxx expozice xx xxxx koncentrace xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx o xxxx xxx ± 15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxx této xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísání. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx tak xxxxxxxx, jak je xx xxxxxxxxx možné. Xxxxx xx xxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxx xx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x každé testované xxxxxxx.
c) Xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny kůže, xxxxx, očí, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxxxxx týdně. Xxxxxxxxxx xx zaznamenávat týdně x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx ke ztrátám xxxxxx, jako např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx studie xx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata x xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx či trpící xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
Xx xxxxx pokusu xx u xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zahrnovat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx analýza krve: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx alespoň jeden x xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), aspartátaminotransferáza (xxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x celkové bílkoviny x séru.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, fosforu, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx lačno, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx biochemické xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx studium širšího xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx po sekci xxxxx ve xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx vysychání. Orgány x xxxxx (xxxxxxx xxxxxx, játra, ledviny, xxxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx x xxxxx, i xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba vyjmout xxx xxxxxxxxx, zvážit x fixovat xxxxxxx xxxxxx, xxx aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
U xxxxx zvířat skupiny, xxxxx byla podána xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, a x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické vyšetření xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx způsobená xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx tkání x x všech xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx provést histologické xxxxxxxxx se zvláštním xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx se objevily xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx poškození.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení xxx.,
- podmínky xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx odpadního vzduchu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxx je xxxxxxxx. Xxxxxx přístroje xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- údaje x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx spolu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx variability (xxxx. xxxxxxxxxxx odchylkou). Xxxx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxx: x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx; c) nominální xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xx inhalačního xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx); x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx; x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně; x) hmotnostní xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx průměru (XXXX) x geometrická xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX),
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x podle xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xx xxxx xxxxx xx 28 xxx x odstupňovaných xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, x xx xxxxx skupině xxxxx úroveň dávky. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, která přežijí xxxxx pokusu, se xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx zdravá xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx srsti xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx však xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx opakovat xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx se xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. abrazí). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nejméně 10 % povrchu xxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx hmotnost xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx připravované xxxxxx kůže a x xxxxxxxxx krycího xxxxxx. Xxx pokusech x tuhými xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx upraveny xx xxxxxxxx formy, xx xxxxx danou xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit vodou, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxx kontakt x xxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx zpravidla aplikují xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 dnů x xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná zvířata
Xx možno xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Je xxxxx použít x xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx použití xxxx xxxx xxx odůvodněné. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic x 5 samců) xx xxxxxxx kůží. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x nesmí xxx xxxxx. Pokud se xxxxxxx budou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx nutno xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx budou zabita xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxx následujících 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dávek x xxxxx xxxxxxxxx skupinu xxxx - pokud xx xxxxxxx vehikula - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Doba xxxxxxxx xx xxx nejméně 6 hodin xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx stejnou xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx čtrnáctidenních je xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, aby xx udržovala xxxxx xxxxxxx dávky ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokusným skupinám, x to ve xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávkou. Xxxxxxxx xxxxx má xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx nezpůsobit žádné xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, má xxxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední xxxxx xxxx vyvolat xxx xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx zjistitelnosti. Aplikují-li xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx dávkou x v kontrolní xxxxxxx xx počet xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
Xxxx-xx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxx koncentraci, xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx může xxxx k xxxxxxx xxxx vyloučení ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. Došlo-li x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ukončit x xxxxxxx xxx xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 xxxx xxxxx dávky, xxxxx xxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, není další xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx dobu uhynutí x xxxx, xxx xx xxxxxx x xxxxxxxx opět odezní xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx studované xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou určena xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx chovat xx xxxxxxx 14 xxx bez xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx toxických xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx expozice xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxx plochu, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % xxxxxxx xxxx; x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx může xxx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx co xxxxxxxx xxxx xxxxxxx plochy xxxxxxxxxx v xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x kůží xxxxxx porézního xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plochu xx dále xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx překrýt, xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx se zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx látky xx možno xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx doporučit. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx použít "xxxxxxxxxx xxxxx".
Po uplynutí xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxxx xxxxx nebo x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx zvířata xx xxxxx denně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx včetně xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Pozorování zahrnuje xxxxx srsti, xxxx, xxx x xxxxxxx x xxxx dýchání x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se zaznamenávají xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx týdně x xxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx zajistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx možno nedocházelo xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Umírající xxxxxxx x zvířata x těžkém stresu xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx se x xxxxx zvířat xxxxxx kontrolních provedou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního počtu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx parametrů: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x séru (xxxxx xxxxx xxxx glutamátpyruvát-transamináza), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (dříve xxxxx xxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), dusík xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.
Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx xxxxxxxxx: vápníku, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx, xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy.
Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx spektra xxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx stavu, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx a xxxxx, xxxx. xxxxxxxx x xxxxxxxxxx kůže, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x všechny xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx velikosti, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx vhodném médiu x xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, a x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Pokud se x orgánech a xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx dávkou xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx těchto xxxxx x x xxxxx xxxxxx s nižšími xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zvláštním xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx se objevily xxxxxx otravy x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx poškození.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx druhu xxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx účinku, xxxxx ji lze xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat xx xxxxx sledovaní,
- xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx,
- doba, xxx byly pozorovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky x jejich další xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
X.10. XXXXXXXXXX - TEST XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX U SAVCŮ XX XXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 473, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberací in xxxxx je nalézt xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx buněk xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx druhu: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxxx vyvolané chemickými xxxxxxxx xxxx většinou xxxxxxxxxxxx, dochází xxxx xxx k aberacím xxxxxxxxxxxxxx typu. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx chemická xxxxx xx schopna xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx metoda xxxx xxxx xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxx aberací x xxxxx se x tomuto xxxxx xxxxxxxxx. Chromozómové xxxxxx x xxxxxxxx jevy xxxx příčinou xxxx xxxxxxxxxxx chorob u xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxx způsobují xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxx rakoviny x xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Tento xxxx xx xxxxxxx x odhalení xxxxxxx xxxxxxx mutagenů x xxxxxxxxxxx. Řada chemických xxxxx, xxxxx xxxx x tomto xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxx karcinogenní, xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx tímto xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx korelace xxxxxx xx xxxxx xxxxx x existuje stále xxxx dokladů x xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx poškozením DNA.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx in xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Použité xxxxx xxxx vybrány xx xxxxxxx schopnosti xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx obecně xxxxxxxx zdroj xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedokáže xxxxxxxx xxxxxxxxx podmínky x savců in xxxx. Je třeba xx xxxxxxxxx podmínek, xxxxx xx xxxxx xxxx k pozitivním xxxxxxxx, xxx neodrážejí xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx způsobeny změnami xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (4) (5).
1.2 DEFINICE
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: strukturální xxxxxxxxx chromozómu, které xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatidami.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx zlom x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx místě (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx chromozóm, prsténčitý xxxxxxxxx-xxxx).
Zlom xxxxxxxxxx: xxxx xxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx nebo obou xxxxxxxxx xx předpokladu, xx xxxxxxx xxxxxx xx struktuře chromatidy xx xxxxx, xxx xx xxxxx poškozené xxxxxxxxxx. Xxxx pak x xxxxxxxxx, koncový (xxxxxxxx) fragment x xxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx (nebo xxxx xxx xxxxxxxxxx), případně xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je kratší x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, kde xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX nepřechází jádro xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx další X-xxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.
Xxx: achromatická xxxx xxxxx než xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx buněk v xxxxxxxx xxxxxx celkovým xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Polyploidie: xxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx xxxxxxxxx počet (xxxx 3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx chromozómové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx a xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxx se vystaví xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, x to x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx ní. Ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx zastaví například Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx linií, kmenů xxxx xxxxxxxxxx buněčných xxxxxx, včetně buněk xxxxxxxx (například xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
X udržování xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a inkubační xxxxxxxx (xxxxxxxxxx nádoby, xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v buňkách. X xxxxxxx kontaminace xx xxxxx nepoužívají. Xx xxxxx znát xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x kultivační xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx: xxxxx se xxxxx ze zásobních xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx před dobou xxxxxxxx x inkubují xx xxx xxxxxxx 37 xX.
Xxxxxxxxx: xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx mitogen (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxx xxx xxxx xxxx x xxxxxxx antikoagulantem (xxxx. heparinem), xxxx xxxxxxxxxx lymfocyty xxxxxxx xx zdravých xxxxxxx x kultivují xx xxx xxxxxxx 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx působí x xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx systému. Nejobvyklejší xx kofaktory xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, ovlivněná činidly xxxxxxxxxxxx xxxxxx jako xx Aroclor 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx směs xxxxxxxxxxxxx x ß-naftoflavonu (10) (11) (12).
Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10 % x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx na tom, xxxxxx typu je xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx specifické xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx by xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx P450 x metabolismu xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx testované xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle x případně naředí. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx do xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx stabilitě prokazují, xx delší xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5 XXXXXXXX TESTU
1.6 XXXXXXXXXXXX
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx podezření, xx xx mohlo x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx narušovat xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx známé rozpouštědlo, xxxx xxx podpořeno xxxxxxxxxxx prokazujícími xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx všem xxx, xxx je xx xxxxx, xxxx na xxxxxx místě zvažováno xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxx. Je-li xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx bezvodé. Xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sítem.
1.6.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxx kritéria, jež xx xxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx koncentrace, xxxxx xxxxxxxxxxxx, rozpustnost x systému x xxxxx xX resp. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i bez xx x hlavním xxxxxxxxxxx, přičemž se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Je vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x předběžných xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx maximální xx xxxxx xxxx xxxxxx toxicity. To xxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx více xxx násobkem, který xxxx xxxx hodnotami 2 x √10. X xxxx xxxxxxxx xxxxx musí xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx signifikantní xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx, nebo mitotického xxxxxx (xxxx x xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx nepřímou mírou xxxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xx xxxxxxx na xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou. Xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kultury, kde xx xxxx detekce xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jako xx průměrný xxxxxxxxx xxx; xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx průměr, xxxxx xx xxxx xxxxxx existenci x xxxxxx xxxxxxxxxx subpopulací xxxxx. X xxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx značný xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx z xxxxxxxx optimálního xxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 µl/ml, 5 xx/xx xxxx 0,01 X.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek, xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx které xx xxx xxxxx nerozpouští, xx xxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšší, xxx je mez xxxxxxxxxxxx xx finálním xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx-xx k xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Může xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxx expozice může xxxxxxxxxxx změnit v xxxxxxxxxx xxxxxxx vlivem xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx, X9 apod. Xxxxxxxxxxxxx xx xx zjistit x prostým xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx být xx překážku xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.6.2 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Xx xxxxxxx experimentu, xx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxx xx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx (rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx). Pokud se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivaci k xxxxxxxx mutagenního xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xx xxx expozičních xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx, xx poskytne xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx citlivost testovacího xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx xxxxxx tak, xxx účinek xxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx preparátů. Mezi xxxxx pro pozitivní xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Metabolická xxxxxxxx | Xxxxx | CAS | EINECS |
Xx | xxxxxx methansulfonát xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Xxx | xxxx[x]xxxxx xxxxxxxxxxxxx monohydrát xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Xxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Tam, xxx xx xx xxxxx, je vhodné xxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx skupiny.
Xxx xxxxx časový xxxxxxxx xxxxxxxx kultur xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx kontrolu, xx které se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mimoto xx xxxxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxx jakéhokoliv xxxxxxxxx.
1.6.3 Xxxxxx
1.6.3.1 Expozice xxxxxxxxxx xxxxxx
Na proliferující xxxxx xx působí xxxxxxxxxx xxxxxx za xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx lymfocyty je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx 48 xxxxx xx stimulaci mitogenem.
Xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx; x xxxxx se xxxxxxxxxx xxx negativní kontroly x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx minimální (13) (14), xx xxxxxxxxxx, xxx se xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx použití neprodyšně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (15).
1.6.3.2 Xxxx sklízení xxxxxxx
X xxxxxx experimentu xx buňky xxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx xx xxxx 3 - 6 xxxxx a xxxxxx xx odebírají x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5násobku xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx začátku xxxxxxxx (12). Pokud xxxx xxx xxxxxxx aktivačního xxxxxxx x bez xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx další xxxxxxxxxx bez aktivace, x kontinuální xxxxxxxx xx do doby xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,5násobku normálního xxxxxxxxx xxxxx. Některé xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx době xxxxxxxx xxxxx, xxx xx 1,5xxxxxxx délky xxxxxxxxx xxxxx. Negativní xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx případu. X případech, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, je xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3.3 Xxxxxxxx chromozómů
Xx xxxxxxx kultury xx xxxxxx Xxxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 1 - 2 hodin xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx přípravu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx sestává x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx roztokem, fixace x xxxxxxxxx.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Všechny xxxxxxxxx, xxxxxx pozitivních a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx podílu xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx být x xxxxx typů xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx modálnímu xxxxx ± 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx rozprostřených metafází, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx. X případě, xx xx xxxxx xxxxxxx vysoký, xxxx xx xxxxx analyzovaných xxxxxxxx xxxxxx.
X xxxx účelem xxxxx xx xxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxx xxxxxxxx zaznamenat xxxxxxxxx polyploidii x xxxxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi. Xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx včetně xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx x experimentálních x xxxxxxxxxxx kultur. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx je xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx zjištěnou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx kultury. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx uvedou x xxxxxxx xxxxxxx.
Verifikace xxxxxx pozitivních xxxxxxxx xx nepožaduje. Nejednoznačné xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X nutnosti xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx bylo xxxxxxxxx x xxxx. 1.4.3.3. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx podmínek. K xxxxxxxxxx, které lze xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se používá xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s chromozómovými xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxxxx metody (3) (13). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku.
Xxxxxx xxxxx polyploidních xxxxx může xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost inhibovat xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Nárůst xxxxx xxxxx x endoreduplikovanými xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx cyklu (17) (18).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vykazuje xxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx data xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx na xxxxx opakovaných xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vitro xxxxxxx, xx testovaná látka xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx daných xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx x kultuře xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
XXXXXX X XXXXXXX XXXXXX
Xx zprávě x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla/vehikula
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud je xxxxx.
Buňky:
- xxx x zdroj xxxxx,
- xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx,
- xxxxxxx mykoplasmat, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx krve, xxx byla xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx buněk, je-li xx xxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx buněčné xxxxxxx, je-li to xxxxx
- modální xxxxx xxxxxxxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x xxxxx kultur, xxxxxx xxxx. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jsou-li x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx média, koncentrace XX2, xx-xx xx xxxxx
- koncentrace xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx kultivace,
- xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx
- xxx a složení xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- pozitivní x xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxxx přípravy podložních xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx analyzovaných xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx toxicity,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx, tj. xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx buněk, xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxx srážení,
- xxxxx o pH x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, jsou-li xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx aberací, xxxxxx xxxx,
- xxxxx buněk x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxx chromozómových xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní kulturu xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
vztah xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxxx byly xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a pozitivních xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx z negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, včetně rozpětí, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.11. MUTAGENITA - TEST XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX V KOSTNÍ XXXXX SAVCŮ IN XXXX
1. XXXXXX
Metoda je xxxxxxxxx XXXX XX 475, Xxxxxxxxx Bone Xxxxxx Chromosome Aberration Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x savců xx vivo je xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx hlodavců (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx polyploidie xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx látka xx xxxxxxx vyvolávat xxxxxxxxx xxxxxxx. Aberace xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx chromatidové, ovšem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx rovněž. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx toho, že xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx úlohu xxx rakovině u xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxx systémech.
X xxxxxx testu xx xxxxx využívají xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx v xxx xx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, obsahující xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxx, jež xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xx x tomto xxxxx nepoužívají.
Tento xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x když xxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx druhy x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx in xxxx xx xxxx xxxxxx pro další xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx byl xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx doklady x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxx.
1.2 DEFINICE
Aberace xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx projevuje jako xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx chromatid, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx mezi chromatidami.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx xxxxx (zahrnuty xxxx aberace typu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx chromatidy: xxxx xxxx lze xxxxxxxx porušení xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx mezera xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, než xx xxxxx poškozené xxxxxxxxxx. Dále xxx x případech, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (nebo xxxx xxx xxxxxxxxxx), případně xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, kde xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx další X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx než xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxx v xxxxxxxx dělený celkovým xxxxxx xxxxx x xxxx buněčné xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx xxxxx.
Polyploidie: xxxxxxx hapoidního xxxxx xxxxxxxxxx (n) mimo xxxxxxxxx počet (xxxx 3x, 4n xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx stadiu xxxxxxxx, xxxxxxxxxx jako xxxxxx x xxxxxxxxx x výměny.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx způsobem vystaví xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx se xxxxxx. Xxxx usmrcením xx xx ně xxxxxx látkou zastavující xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). Z xxxxx xxxxxx xxxxx xx pak xxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx se xxxxxxxxx potkani, xxxx x čínští křečci, xxx ovšem xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx druh. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx chovu
Xxxxxxxxx xxxxxxxx chovu xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx úvodu v xxxxx B, xxxxxxx xx měla být 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxx, aby xx minimalizovaly případné xxxxx xxxx, xxx x xxx jsou xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx dobu xxxxxxxxx pěti dní xx zvířata xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx, xxxx xxxxxxx zvířatům xx rozpustí nebo xx připraví xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo vehikulu x případně xx xxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxxxxxx prokazují, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx testu
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky x nesmí s xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx použití podpořeno xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Xx xxxxxxx testu xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Je xxxxx zacházet xx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx stejně.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx měly xxxxxxxxx strukturální aberace xx vivo xxx xxxxxxx, kdy lze xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad xxxxxxxxx xxxxxx. Dávky xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zakódovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx kontrolu xx možné podávat xxxxxxxx způsobem než xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx odebírat x xxxxxx časovém intervalu. Xxx xx xx xxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Látka | XXX | XXXXXX |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx měly xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx intervalů xxxxxxxxxx, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx zvířaty. Xxxxxxxx-xx se x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xx nejvhodnější xxxxx xxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx použít x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx vehikulum xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx účinky.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx a pohlaví xxxxxx
X každé xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx pět xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx x xxxx, xxx xx studie xxxxxxx, xxxxxxxx údaje x xxxxxxx živočišném xxxxx x použití xxxxxxxx způsobů xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x toxicitě podstatné xxxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx xx jednom xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx může xxx závislá xx xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx test xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, například xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxx režimy xxxxxxxxx xxxxxx být xxxxxxx odůvodněné.
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxx různých časových xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx. U xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx délky xxxxxxxxx xxxxx (která xxxx xxxxxxx 12 - 18 xxxxx) xx xxxxxx látky. Xxxxxxx xxxx potřebná xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx testované látky x xxxx vliv xx xxxxxxxx buněčného xxxxx xxxxx ovlivnit xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx chromozómových aberací, xxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxx po 24 xxxxxxxx xx xxxxxxx odběru. Xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxx režimu látka xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx den, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxxx xxxxx normálního xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx podání látky.
Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx dávka Colcemidu® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X myší xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3 - 5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4 - 5 xxxxx. X xxxxxx dřeně xx odeberou xxxxx x zjišťují xx x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx-xx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, je xxxxx xx provádět x téže xxxxxxxxxx xx xxxxxxx stejného xxxxxxxxxxx xxxxx, kmene, xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx (5). Při xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxx xxx první xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx dávky xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx nejvyšší xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx jako dávka xxxxxxxxxxxx takové xxxxxx xxxxxxxx, že při xxxxxxx dávkách xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx byly xxxxxxx. Xxxxx, jež x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx vykazují specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxx představovat x těchto xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx případ xx případu. Xxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x kostní xxxxx (např. xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx o xxxx než 50 %).
1.5.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxx xxxx při xxxxx minimálně 2&xxxx;000 xx/xx hmotnosti v xxxxx xxxxx nebo xx dvou xxxxxxx xxxxxxxx v jeden xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx celá xxxxxx xx použití xxx dávkových xxxxxx. Xxx dlouhodobé studie xxxx limitní xxxxx 2&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xx xxx při xxxx xxxxxx do 14 xxx, x 1&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx trvání xxxxx xxx 14 xxx. Podle očekávané xxxxxxx expozice může xxx xxxxxxxxx použití x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx úrovně.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxx buď xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx přijatelné x jiné xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete a xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x xxxxxxxxx; vyšší xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. S výjimkou xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx tak, xxx xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx kostní dřeň, xxxxxx xx ni xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx se xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx a obarví xx.
1.5.7 Xxxxxxx
Jakožto xxxx cytotoxicity xx x všech xxxxxx xxxxxx pozitivních i xxxxxxxxxxx kontrol stanoví xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx 1000 buněk x každého xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx xx analyzuje minimálně 100 buněk. Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx aberací. Všechny xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol) xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx xxx jejich xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx chromozómů, xxxx být počet xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx 2x ± 2.
2. ÚDAJE
2.1 Zpracování xxxxxxxx
Údaje xx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Experimentální xxxxxxxxx xx jedinec. X xxxxxxx zvířete xx xxxxxxxxxxx xxxxx hodnocených xxxxx, počet xxxxxxx xx jednu buňku x xxxxxxxx xxxxx xx strukturálními xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X experimentálních x kontrolních xxxxxx xx zaznamenají xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x četnost. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x registrují xx, xxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Nejsou-li xxxxx xxxxxxx o xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx rozdílně, xx xxxxx údaje xx obě xxxxxxx xxx statistickou analýzu xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxxxxxxx aberacemi, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx buněk s xxxxxxxxx xx skupině x xxxxxxxxxxxx dávkou xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Statistická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx výsledky xx xxxxx vyjasnit xxxxxx testováním, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx může xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx procesy x xxxxxxxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxxxxxxx chromozómy může xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buněčného xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx získaného xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx mohou být xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x když xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx in vivo xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx vyvolává v xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látka x kostní xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxx x úvahu, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka bude xxxxxx používána, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx cílovou xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx a xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx podmínky, xxxxxx xxxx.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxx a negativní (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx studie xxx xxxxxx rozpětí, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx velikosti xxxxx,
- podrobnosti x přípravě xxxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx testované xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx podávání,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, že xx xxxxx dostala xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx cílové tkáně,
- případně xxxxxx xxxxxxxxxxx látky v xxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) xx xxxxxxxxx dávku (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x kvalitě xxxxxxx x vody,
- xxxxxxxx popis xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxx vzorků,
- xxxxxx hodnocení xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx mikroskopických preparátů,
- kritéria xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx analyzovaných xxxxx xx xxxxx zvíře,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx pozitivní, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- případné xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, byly-li provedeny,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx odchylek.
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
B.12. XXXXXXXXXX - XX VIVO XXXXXXXXXXXX TEST X XXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací OECD XX 474, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx Micronucleus Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx x xxxxx slouží xx xxxxxxxx poškození, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxx xxxxxxx x xxx, xx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx. z xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx látky, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx poškození, xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx chromozómů.
Když x erytroblastu xxxxxx xxxxx xxxxxxx polychromatický xxxxxxxxx, jádro je x xxxxx vyloučeno; xxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx mikrojádra xx xxxxxxxxx xxx, že xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx četnosti xxxxxxxxxxxxx erytrocytů s xxxxxxxxxx xx u xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx důkazem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxx xx xxxxxx dřeň xxxxxxxx xxxxxxx běžně xxxxx, xx xx polychromní xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (polychromních) xxxxxxxxxx x mikrojádry x xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, x xxxxxxx bylo prokázáno, xx jeho slezina xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mikrojádra xx xxxx rozlišovat xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxx DNA x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxx počet xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x rámci xxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxxxxx lze jako xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, že xx xxxxxxx xxxxxxx xx dobu xxxxxxxxx xxxx týdnů.
Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxxxxx vhodný x hodnocení rizika xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, farmakokinetiky x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x když xxx xxxxx být xxxx živočišnými xxxxx, xxxx tkáněmi x xxxx konečným xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx efektu, xxxxx xxx předtím xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx její xxxxxxxxx metabolit xx xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxxxxx tohoto xxxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx kterými xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx chromozómů x xxxxx dceřiných xxxxx.
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx): xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx fragmenty xxxxxxxxxx xxxx celými xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx erytrocyt: xxxxx xxxxxxxxx, jemuž xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx erytrocytů xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxx, vývojové xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxx odlišit xx zralých, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx používá xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx po xxxxxxxx xxxxx usmrtí, xxxxxx xxxx xx xxxxxxx x připraví xx xxxxxxxxx, jež se xxxxxx (1-7). Pokud xx používá periferní xxxx, xxxxxxx xx xx vhodné xxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxx, jež se xxxxxx (4) (8) (9) (10). V xxxxxxxxxxxxx, xx kterých xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, musí xxx xxxx xx poslední xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx nejkratší. X preparátech xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx dřeň, doporučují xx jako xxxxxxx xxxxxxx xxxx nebo xxxxxxx; xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx druh. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx se xxxx. Lze ovšem xxxxxx xxxxxxxxx vhodný xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx, že xx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx že x něj xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx xxxxx mladých xxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxx xxxxxxxx studie xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx přesahovat ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Podmínky xxxxx
Všeobecné xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx úvodu x xxxxx X.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Zdraví xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx toho, jak x kde xxxx xxxxx umístěny.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx a je-li xx možné, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx rozpustí xxxx xx připraví její xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) prokazují, že xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.2 Podmínky xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx a nesmí x testovanou látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx použití xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx xx xxxxx, bylo na xxxxxx místě použito xxxxx rozpouštědlo / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxx.
U xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx tak, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx látku x xxxxxx xxxxxxxx x jednom xxxxxxx xxxxxxxxx. Kde je xx xxxxx, xx xxxxx používat xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx látek vhodných xxx pozitivní xxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
N-ethyl nitrosomočovina | 759-73-9 | 212-072-2 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx měly xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx časových xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx historické xxxxx x xxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx variabilitě xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx jeden xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx dobou xxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx publikované xxxxx prokazující, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx krev, xxxx xxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx přijatelný x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx studií x xxxxxxxxx krvi (xxxx. 1 - 3 xxxxx), xxx xxxxxxxx údaje xxxx x očekávaném xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X každé xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (11). Pokud x xxxx, xxx se xxxxxx provádí, existují xxxxx o stejném xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx způsobů xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v toxicitě xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx chemikáliím může xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxx farmaceutických xxxxxxxxx, xxxxxxx xx test xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxx x 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxx použít delší xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx tak xxxxxx, až xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx limitní xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx vzorků. Xxxxx xx jedná x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x rozmezí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx způsoby:
(a) Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Vzorky kostní xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx dvakrát, poprvé xx xxxxx xxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx vzorků. Pokud xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx než xx 24 hodinách, musí xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx krve se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx dříve xxx xx 36 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, xx vhodnými xxxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx xxxxxx, celkově xxxx xxxxxx xxxx xxx 72 xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx intervalu xxxxxx pozitivní xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xxx nebo xxxx xxxxx ve 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx 18 x 24 hodinami xx xxxxxxxxx podání xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx 36 x 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx podání xxxxx (12).
Xx-xx xx relevantní, xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx nejsou k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx laboratoři xx xxxxxxx stejného xxxxxxxxxxx xxxxx, kmene, xxxxxxx x xxxxxxxxx režimu, xxxx xx použijí x hlavní xxxxxx (13). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx se užívají xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx xxx dávky xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x toxicitě xxxxx, xxxx nulové. Pro xxxxxxxx xxxxxx interval xxxxxx vzorků je xxx xxxxx použít xxxxx nejvyšší dávku. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx vyšších xxxxxxx ve stejném xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx byly letální. Xxxxx, jež v xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx představovat xxxxxxx x xxxxxx kritérií xxx xxxxxxxxx dávek x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx případu. Xxxxxxxx xxxxx může xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx k určitým xxxxxxx toxicity x xxxxxx xxxxx (např. xxxxxx podílu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx erytrocytů v xxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxxx krvi).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx x jedné dávce xxxx xx dvou xxxxxxx podaných v xxxxx xxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxx x látkách x podobnou chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx tří xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx limitní xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx xx xxx xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1000 xx/xx xxxxxxxxx při xxxx xxxxxx xxxxx než 14 dnů. Xxxxx xxxxxxxxx humánní expozice xxxx být zapotřebí xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx expozice. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx; vyšší xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx dávkových xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Příprava xxxxxx dřeně / xxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx tibie xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx x femuru nebo xxxxx, buňky se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx x ocasní žíly xxxx xxxx xxxxxx xxxx. Krevní xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (8) (9) (10), xxxx se xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Použitím xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx XXX (xxxx. akridinové xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 s xxxxxxxxx-X (15)) se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x artefaktů xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx. Tato výhoda xxxxxxxxx, že xx xx nedala použít xxxxx barviva (např. Xxxxxx). Xxx použít x xxxxx systémy - například xxxxxx xx xxxxxxxx celulózy x xxxxxxxxxx buněk x jádrem (16) - xxxxx xxxx xxxxxx jsou v xxxxxxxxxx xxxxxxx používány xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (nezralé + xxxxx). K tomuto xxxxx xx počítá x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx minimálně 1000 xxxxxxxxxx (17). Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. X každého xxxxxxx xx vyhodnocuje xxxxxxxxx 2000 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Doplňující xxxxxxxxx xxx získat xxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zralých xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx nemá xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxx xxx 20 % hodnoty x kontrole. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx dobu xxxx xxxxx nebo xxxxx, lze xxxx xxxxx mikrojader xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx 2000 xxxxxxx erytrocytů xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jsou systémy xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx - xxxx cytometry), xxxxx xxxx zdůvodněny x xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Údaje z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Experimentální xxxxxxxxx xx zvíře. U xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx nezralých erytrocytů x xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx erytrocytů. Xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx kontinuálně xx xxxx čtyř týdnů xxxx déle, xx xxxxx uvést xxxx xxxxx x zralých xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxxxxxxxx). Xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx erytrocytů x xxxxxxxx procento xxxxxxxxxx x mikrojádry xx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx x tom, xx obě xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx údaje xx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE XXXXXXXX
Ke zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx s xxxxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx dávkou při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx třeba uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však xxxxxx být jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Testovaná xxxxx, xxx jejímž použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx kritéria, se x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx ze xxxxxxxxx souboru dát xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx definitivní xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx látka xxxxxxxx tvorbu mikrojader, xxxx důsledek chromozómového xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx testovaného xxxxxxxxx xxxxx. Negativní výsledky xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx erytrocytech.
Je xxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx specifickou cílovou xxxx zasáhne (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba uvést xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx xxxxx.
Pokusná xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx druh/kmen,
- xxxxx, věk a xxxxxxx jedinců,
- xxxxx, xxxxxx podmínky, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- pozitivní x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx ze xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, byla-li xxxxxxxxx,
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx o přípravě xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx o podávání xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx x ověření, xx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx do xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx faktickou xxxxx (xx/xx hmotnosti),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx potravy x xxxx,
- podrobný xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx hodnocení nezralých xxxxxxxxxx x mikrojádry,
- počet analyzovaných xxxxx x každého xxxxxxx,
- kritéria, xxxxx se studie xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx každého xxxxxxx zvlášť,
- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx odchylka nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx x historických negativních xxxxxxx,
- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
B.13/14. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXX XXXXXX X BAKTERIÍ
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Reverse Xxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx k detekci xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxxxxxx ve xxxxxx x aminokyselině tryptofan). Xxxxxx uvedených xxxxxxx xxx detekovat xxxxxx xxxxxx vzniklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx nebo několika xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx bakteriálních kmenů (1) (2) (3). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxxx xxxxxx spočívá x tom, že xx xxxxxxxx mutace, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx kmenu do xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx funkční xxxxxxxxx xxxxxxxx syntetizovat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx změněná bakteriální xxxxx xx detekována xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx mutace xxxx x člověka xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxx supresorových xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx zvířat xxxx xxx xxxxxx nádorů. Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx mutace xx xxxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxxxx kmenů xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxx citlivější xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx citlivých sekvencí XXX x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xxx xxxx náchylné x chybám. Specifita xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx některé užitečné xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx je x dispozici xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx výsledků xxx xxxxxxx škálu xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x různých xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx chemikálií xxxxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxx xxxxxxxxxx mutací x xxxxxxxx kmenů Salmonella xxxxxxxxxxx nebo Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx), xxx xxxxx ke xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xx dodávce xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx substituci xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx změnu xxxx x XXX. Xxx xxxxxxxxx xxxxx může x xxxxxx změně xxxxx na xxxxx xxxxxxx mutace nebo xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Frameshift xxxxxxxx (mutageny vyvolávající xxxxxxxx xxxxxx) jsou xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo odebrání xxxxxxx nebo xxxx xxxx xxxx x XXX, čímž xx xxxx čtecí xxxxx x XXX.
1.3 VÝCHOZÍ XXXXX
X xxxxxxxxxxxx xxxxx se využívají xxxxxxxxxxxxx buňky, xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx liší x xxxxxx látek xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx XXX. Xxxxx xx xxxxx xxxxxx vyžadují exogenní xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace xx vitro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx podmínky in xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx přímé xxxxxxxxx x mutagenní x xxxxxxxxxxxx potenci dané xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx používá xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx xxxxx chemikálie, xxxxx jsou v xxxxx testu xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx mutagenních xxxxx, jež se xxxxx testem xxxxxxxx; xxxxxxx tohoto xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxx x biologické xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx citlivost xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxx, xx xx mutagenní xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx.
Bakteriální xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx může xxx nevhodný pro xxxxxx třídy xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxxxx některé silně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) a xxxxx, x nichž xx xxxxxxxxxxx xxxx xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx některá analoga xxxxxxxxxx); x takovém xxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx u savců.
Xxxxx sloučeniny, xxx xxxx při tomto xxxxx pozitivní, jsou xxxxxxxx karcinogenní pro xxxxx, xxxxx korelace xxxx xxxxxxxxx; závisí xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx, negenotoxickým xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxxx bakteriálních xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx miskové xxxxxx "plate incorporation" xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx agarem x vylije xx xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx agarem x xx potom xx xxxxxx na minimální xxxxxx xxxx. Xxx xxxx metodách xx xxx až xxx xxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx spočítají x výsledek xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx miskách x rozpouštědlem.
Je xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx. X nich nejběžnější xxxx xxxxxxxx misková xxxxxx ["xxxxx xxxxxxxxxxxxx"] (1) (2) (3) (4), xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) a xxxxxxxxx xxxxxx (11). Jsou xxxx popsány xxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxx par (12).
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx metody xx týkají xxxxxx xxxxxx xxxxx incorporation x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx tyto xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx jak x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx xx. Některé xxxxx xx detekují xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx o xxxxxxxx třídy, xxx xxxxxxx alifatické nitrosaminy x krátkým xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, aldehydy, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx (3). Xxxx bylo xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Na xx xx xxxxx xxxxxxxx jako xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxx xxxxx. Byly identifikovány xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxxx" (xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, které xx xxxx pro xxxxxx xxxxxxx xxxxxx): azobarviva x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx xx standardního xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx zdůvodnit.
1.5. POPIS METODY
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Bakterie
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx kultury xx vypěstují xx xxxxxxxx exponenciálního xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx 109 xxxxx/xx). Xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stadiu xx nepoužívají. Xxxxxxxx xx, aby kultury xxxxxxx xxx experiment xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Titr xx xx prokázat xxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk očkováním xx miskách.
Doporučená xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 37xX.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx kmeny X. xxxxxxxxxxx (XX 1535; XX 1537 xxxx XX97x xxxx 1X97; XX98; a XX100); x xxxxx xxxx prokázána xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx čtyři xxxxx X. xxxxxxxxxxx mají xxxxxxxxx reverzním xxxxx xxxx xxxx GC x xx známo, xx nemusejí xxxxxxxxx xxxxxx oxidační xxxxxxxx, xxxxx vyvolávající křížové xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx látky xx xxxx detekovat xxxxxx xxxxx E. coli XX2 nebo S. xxxxxxxxxxx XX102 (19), xxxxx mají xx xxxxxxxxx reverzním xxxxx xxx bází XX. Xxxxx xx doporučená xxxxxxxxx xxxxx xxxx:
- X. xxxxxxxxxxx XX1535 x
- X. xxxxxxxxxxx TA1537 xxxx TA97 xxxx XX97x x
- X. xxxxxxxxxxx XX98 x
- X. xxxxxxxxxxx XX100 x
- E. xxxx XX2 xxxX xxxx X. coli XX2 xxxX (xXX101) xxxx X. xxxxxxxxxxx TA102.
X detekci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vazby xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx XX102 xxxx xxxxxx DNA reparačně xxxxxxxxxxxx xxxx X. xxxx (např. E. xxxx XX2 xxxx X. xxxx XX2 (xXX101)).
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxx preparát xxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxx (histidin x xxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx E. xxxx). Podobně je xxxxx zkontrolovat x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x xx: xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx X-xxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx x xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx XX98, XX100 x TA97a nebo XX97, XX2 uvrA (xXX101) x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx + xxxxxxxxxxxx u xxxxx XX 102); xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx mutací (xx. xxx mutace u X. xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxX xxxxxx x X. xxxx xxxx xxxX xxxxxx u X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) (2) (3). Použité xxxxx xxxx mít xxxxx spontánně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx kontrolních dat xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx možno x x rozmezí xxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
1.5.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx (xxxx. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx E x xxxxxxxx) x xxxxxx xxxx obsahující xxxxxxxx x biotin xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).
1.5.1.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx se xxxxxxxx testované látky xxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx kofaktorem xxxxxxxxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx kombinace xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (18) (20) (21). Post-mitochondriální xxxxxx xx obvykle xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 30 % v/v xx směsi X9. Xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému xxxxx xxxxxxx na xxxxx testované xxxxxxxxxx. X některých xxxxxxxxx xxxx xxx vhodné xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x několika xxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6) (13).
1.5.1.4 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxx látky se xxxx působením na xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx ve vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu x případně se xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx mohou xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxxxxxxx prokazují, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.5.2.1 Xxxxxxx kmeny (xxx 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Koncentrace
Ke xxxxxxxxx, která xx xxxxx xxxx x xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx k xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x předběžném xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx přežití xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx metabolického aktivačního xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx změnit. Nerozpustnost xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x konečné xxxxx xx skutečných xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pokusná xxxxxxxxxxx xx u xxxxxxxxxxx necytotoxických látek 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx rozpustné, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být x xxxxxxx pokusné xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx za xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx, se xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx při xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx koncentrací xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx intervalem (xx. √10) mezi xxxxxxxxxxxx body x xxxxxxxx experimentu. Zkoumá-li xx koncentrační závislost, xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx xxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxx podstatné množství xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kmenově specifickou xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx) xxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak xxx ní. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx takové xxxxxxxxxxx, xxx prokazují xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
X xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem se xxxxxxxxxx látka pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx v testech x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:
Xxxxx | CAS | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu | 6055-19-2 |
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx vhodnou xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
Látka | XXX | XXXXXX |
Xxxxx červeň | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-aminoantracen xx nepoužívá jako xxxxxx xxxxxxxxx účinnosti xxxxx X9. Xxxxx xx 2-xxxxxxxxxxxxx použije, xx xxxxx xxxxxx xxxxx X9 xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx tato xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX | |
Xxxx xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 x XX 100 |
2-nitrofluoren | 607-57-8 | 210-138-5 | XX 98 |
9-xxxxxxxxxxxx | 90-45-9 | 201-995-6 | XX 1537, XX 97 x XX 97x |
XXX 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, XX 97 x XX 97x |
xxxxx-xxxxxxxxxxxx | 80-15-9 | 201-254-7 | XX 102 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 | XX xxxX x TA 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (pKM101) |
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx | 56-57-5 | 200-281-1 | XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (xXX101) |
Xxxxxxxxxxxx (XX2) | 3688-53-7 | kmeny xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx látky. Xxxx-xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx vztahem x xxxxxxxx xxxxx.
Xx třeba použít x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx vehikula xxxxxxxxx, bez testované xxxxx, xx kterými xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx jako při xxxxxxx testované látky. Xxxxxx se xxxxxxx x negativní xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxx xx mutagenní xxxxxx.
1.5.3 XXXXXX
Xxx xxxxxxxx miskové xxxxxx (1) (2) (3) (4) bez metabolické xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,05 xxxx 0,1 ml xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx zhruba 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x 0,5 ml xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. X testech x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx mísí 0,5 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) x 2,0 ml xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x testovanou xxxxxx /xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx každé xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx testovaná xxxxx / xxxxxxxxx roztok xxxxx preinkubovat x xxxxxxxx kmenem (xxxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x sterilním xxxxxx xxxx metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,5 xx) xxxxxxx xx xxxx 20 xxx xxxx déle xxx 30 - 37 xX; xxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,1 xx bakterií x 0,5 ml směsi X9 xxxx sterilního xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx provzdušňují třepáním.
Xxx adekvátní xxxxx xxxxxxx xx pro xxxxxx dávku xxxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, nemusí xx xxxx nutně xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx nebo xxxxxx látky se xxxxxxx za použití xxxxxxxx postupů, například x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (12) (14) (15) (16).
1.5.4 XXXXXXXX
Všechny xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 xX xxx xxxx 48 - 72 hodin, xxxxx xx xxxxxxxxx revertantní xxxxxxx na xxxxx xxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx misku. Rovněž xx xxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x xxxxxxxxx kontroly (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, byla-li xxxxxxx), xxx z xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx látku i xxx pozitivní x xxxxxxxxx kontrolu (resp. xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx) xx uvedou počty xxx jednotlivé xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx misku xxxxxx xxxxxxxxxx odchylky.
Xxxxxxxxxx xxxxxx pozitivní reakce xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx testováním, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx potvrdit xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xx xxxxx, je xxxxx to xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx studijních parametrů xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které se xxxx modifikovat, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx ("xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xxxx preinkubace x xxxxxxx prostředí) x xxxxxxxx metabolické xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx závislý xxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxxxxx a/nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na jednu xxxxx při xxxxx xxxx xxxx koncentracích x xxxxxxxxx jednoho xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem xxxx xxx xxx (23). Xxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx relevance xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx možno xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (24), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx xxxxxxx určujícím xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx výsledky xxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují, xx x xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Většina experimentů xxxx poskytuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nelze xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vyvodit x xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky bakteriálního xxxxx na xxxxxxxx xxxxxx ukazují, že xxxxx xxxxxxxx genové xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx coli. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx testovaná xxxxx ve zkušebním xxxxx xxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx rozpouštědle, xxxxx xx známa.
Kmeny:
- použité xxxxx,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxx (v xx nebo μx) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x počtu xxxxx xxx jednu xxxxxxxxxxx,
- použitá xxxxx,
-typ x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek,
- xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Závěry.
X.15. GENOVÉ XXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x x metabolickou xxxxxxxx.
Xxxx využívány forward xxxxxxx systémy x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx míra xxxxxx xxxxxx x červených, xxxxxx vyžadující xxxxxx (xxx-1, ade-2) xx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, jako xx indukce rezistence xx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx XX 185-14 X s okrovými (xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 2-1, xxx 4-17, xxx 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxx mutagenů typu xxxxxx xxxx, které xxxxxxxx mutace xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. XX185-14X xxxx rovněž xxx 1-7 marker, xxxxxxxx xxxxxx, revertovanou xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx a xxxxxx hom 3-10, xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny.
X xxxxxxxxxxx xxxxx S. xxxxxxxxxx xx jediným xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X7, který je xxxxxxxxxxx xxx xxx 1-92.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx být připraveny xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X organických xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 objemová % v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vehikula nemá xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x přítomnosti, xxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx užívaným xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakce xxxxxxxxxx x jater xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx indukujících xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, postmitochondriálních xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx vhodné xxx xxxxxxxxxxxx aktivaci.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Haploidní kmen XX 158-14X x xxxxxxxxx xxxx D7 xxxx nejužívanější pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx kultivační xxxxx xxxx užívána xxx určení xxxxx xxxxxxxxxxxxx a mutovaných xxxxx.
1.2.2.3 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a rozpouštědlem xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mutační xxxxx xxxx být xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Má být xxxxxxx nejméně 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx látek xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx přežití xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx netoxické, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx po xxxx xxx xxx 28 xx 30 oC xx xxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Frekvence xxxxxxxxxxx mutací u xxxxxxxxx xx být x rozmezí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Počet xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx nejméně tří xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x testu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x u xxxxxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx 3-10 x xxxxxx mutační xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxx získány xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Základní xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxx: 1-5 x 107 buněk/ml xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx dobu xx 18 x. při 28 až 30 xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx je xx potřebné. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxx centrifugovány, promyty x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx médium. Xx inkubaci jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx negativní, má xxx proveden druhý xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx fázi. Xxxxxxxx xx první xxxxx xxxxxxxxx, je xxxxxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x tabulkové xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx výsledky xxxx xxx potvrzeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx vyhodnoceny xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x průběhu xxxxxx xxxxxxxx informace x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx testu: xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx rostoucí, xxxxxxx médií, xxxxxxx x trvání xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx aktivační xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: hladina xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx a xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx výsledků.
X.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae může xxx detekována xxxx xxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx) x uvnitř xxxx. Xxxxx xxxxxx xx nazýván xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a vytváří xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxx je xxxxxxxx nereciproční x xx nazýván xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx testováno xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, genová xxxxxxxx je testována xx základě xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx různé xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx detekci mitotické xxxxxx xxxxxxxx xxxx X4 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 2 a xxx 5), X7 (xxxxxxxxxxxxxx v trp 5), XX34 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4) x JD1 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4 x xxx 5). Xxxxxxxxx překřížení produkující xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx u D5 xxxx X7 (xxxxx xxxxxx měří mitotickou xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxx 1-92). Oba xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx 2.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxx těsně xxxx xxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxx nerozpustných xx xxxx užít xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx rozpouštědlech, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vehikula xxxx významně ovlivnit xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxxxxxx, xxx v xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx postmitochondriální xxxxxx xxxxxxxxxx x jater xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx postupů xxxx xxx rovněž vhodné xxx metabolickou aktivaci.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Testovací xxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx D4, X5, X7 x XX1. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxx vhodné.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxx přežívajících xxxxx x frekvenci xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pozitivní, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx zvolených xxxxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xx životnost xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxxxx pod 5 - 10 %. Xxxxx xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx testovány až xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx pro látky xxxxxxxxx, xx vodě xxxxxxxxx, xx určena xxxxxx xx případu.
Xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx buď xxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xxxxx xx dobu xx 18 h. Xxxxxxx dlouhodobě ovlivňované xxxx xxx mikroskopicky xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxx xx xxxxx xx xxxx dní xxx 28 - 30 xX. Xxxxx použité xxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx sektorů xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být umístěny x xxxxxxxxxx (cca 4 xX) po xxxxx 1 - 2 xxx xxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxx být xxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Počet replikací
Xx nutno použít xxxxxxx tří xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx překřížením xx xxx počet xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx dostatečného xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.8 Postup
Xxxxxxxxx S. cerevisiae xxxxxxx obvykle jako xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx stacionární, xxxx xxxxxxxx buňky. Xxxxxxxx xxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. 1-5 x 107 xxxxx/xx xx vystaveno xxxxxxxxx xxxxx po xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xx xxxxxxx v xxxxxxx ovlivnění, xxxxx xx xx potřebné.
Xx xxxxxxxx ovlivnění xxxx buňky centrifugovány, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xx vhodné kultivační xxxxxx. Po xxxxxxxx xxxx počítány přežívající xxxxx x xxxxx x xxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxx pokus x xxxxxxx xx stacionární xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx mají xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Údaje xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- použité xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: buňky xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx experimentu: hladina xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx ovlivnění, teplota xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx, xxxxx rekombinant, přežívajících xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, vztah xxxxx x xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.17. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXX MUTACÍ X XXXXXXX XXXXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 476, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxx Xxxx Xxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx vitro xx xx používat xx zjišťování xxxxxxxx xxxxxx vyvolaných xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx patří xxxx xxxxxxxxx xxxxx X5178X, xxxxx CHO, XXX-XX52 x X79 xxxxx čínského křečka x lidské xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx XX6 (1). X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx konečný xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (TK) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx fosforibosyltransferáze (XXXX) x v xxxxxxxxxx xanthin-guanin xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxx xxxxxx x XX, XXXX x XXXX xx xxxxxxxx různá xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx TK x XXXX xxxx umožnit xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (např. xxxxx delece), xxxxx xx xx xxxxxx XXXX chromozomů X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
X xxxxx xx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xx vitro xx xxxx xxxxxx xxxxxxx stabilizovaných xxxxxxxxx xxxxx xxxx buněčných xxxxx. Při volbě xxxxx se berou x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx dané kultury x xxxxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx in xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zdroj xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx systém xxxxxxxxxxx aktivace xxxxxxxx xxxxxxxx savčí xxxxxxxx xx vivo xxxxxxxx. Xx xxxxx vzniku xxxxxxxx podmínek, xx xxxxxxx xx výsledky xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx výsledkům, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx mutagenity může xxxxx x důsledku xxxxx pH, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (7).
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x karcinogenů. Xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx x tomto xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx korelace xxxx xxxxx testem x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx korelace xxxxxx na druhu xxxxxxxx látky x xxxxxxxx stále xxxx xxxxxxx xxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx zřejmě xxxxxx xxxxxxx jiným, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx či xxxxxxxxxxx, xxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxx výchozího typu xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx proteinu.
Mutageny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx: xxxxx způsobující xxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxx xxxx x XXX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): xxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxx bází x XXX.
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: období, během xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx genové xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx počtem xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxx x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx suspenzního xxxxx (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx) a xxxxxxx klonovací xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx suspenzní xxxx: xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx v porovnání x xxxxxxxxx kontrolou.
Životnost (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx na miskách x selekčních xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx: xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xx miskách xx xxxxx působení xxxxx; xxxxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx mutace XX+/- → XX-/-, xxxx rezistentní vůči xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx XXX xxxxxxx, což způsobuje xxxxxxxx buněčného xxxxxxxxxxx x zastavuje xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Za xxxxxxxxxxx XXX proto xxxxx xxxxxxxxxxxx mutovan xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx buňky x xxxxxxxxxxx XXXX xxxx XXXX xxxxxxxx rezistentní xxxx 6-xxxxxxxxxxx (TG) xxxx 8-xxxxxxxxxx (XX). Xxxxx xx analog xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx zvážit. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx podezření xx xxxxxxxx toxicitu xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx s xxxxxxxx x bez xxxx. Xxxxxxx-xx xx tedy xxxxxxxxxx strukturně xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).
Buňky x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx kultuře xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x k xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Cytotoxicita xx stanoví obvykle xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) (xxxxxxx xxxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx působení xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx médiu xx dostatečnou xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxx a xxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx fenotypické xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxx x médiu xxxxxxxxxxx selekční činidlo xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxx xxx tohoto xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Xx xxxxxx inkubační xxxx xx xxxxxxx spočítají. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x počtu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x selekčním médiu x x xxxxx xxxxxxx v neselekčním xxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Xx se xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxxxxxx buněk X5171X, XXX, XXX-XX52, X79 x XX6. X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x tomto xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) x xxxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx nejsou kontaminovány xxxxxxxxxxxx; infikované buňky xx použít xxxxxxx.
Xxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (power). Počet xxxxx, počet kultur x xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vyhovovat (14). Xxxxxxxxx počet xxxxxxxxx buněk, xxxxx xxxxxxx expozici x xxxxxxx xx v xxxxxxxxxxxx stadiích testu, xx dán frekvencí xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx 106 xxxxx. Xxxx xx xxx x dispozici adekvátní xxxxxxxxxx údaje, xxxxxxx xx se prokázala xxxxxxxxxxxxx zvládnutí xxxxx.
1.4.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx podmínky (kultivační xxxxxx, koncentraci XX2, xxxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx xx xxx xxxx xxxx podle xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx je, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx růst xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx kultur, xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 xX. Před xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx je kofaktory xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, ovlivněná xxxxxxx indukujícími enzymy xxxx xx Aroclor 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx fenobarbitalu a β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10% x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx na xxx, xxxxxx xxxx xx testovaná xxxxxxxxxx. X některých případech xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx modifikované xxxxxxx xxxxx exprimující xxxxxxxxxx xxxxxxxxx enzymy. Xxxxx xxxxxxxxx linií xx xxx být xxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx P450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx xx před působením xx xxxxx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxx suspenze xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx do xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx třeba používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx neovlivňuje xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx mohlo x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje xx, xxx xxxxx xxx, xxx je xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx testovaná xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlo xxxxx bezvodé. Xxxx xx dá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Koncentrace
Mezi xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxx stanovování xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx v systému x změny xX xxxx. osmolality.
Cytotoxicita xx xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx i xxx xx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxx integrity x xxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx minimálně xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x cytotoxicitě, musí xxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxx xx maximální xx xxxxx xxxx xxxxxx toxicity. To xxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx mezi xxxxxxxxx 2 x √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x cytotoxicity, xxxx xx vést x xxxxxxxxxxx přežití (relativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x 10-20 %, xx však méně xxx 10 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx maximální xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 xx/xx, 5 μx/xx a 1,01 M.
U relativně xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx nižších, než xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx xxxxx nerozpouští, xx xxx xxxxxxxx použitá xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxx rozpustnosti xx finálním xxxxxxxxxxx xxxxx xx konci xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx začátku a xx konci působení, xxxxxxx se rozpustnost xxxx během xxxxxxxx x xxxxxxxx přítomnosti xxxxx, X9, xxxx xxx. xxxxx. Nerozpustnost xx dá zjistit x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.3 Xxxxxxxx
X rámci xxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx) xxxxxxxx, x to xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Pokud se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látka vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx mutagenního účinku. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu patří xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx nitrosomočovina | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
TK (xxxx x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxx methansulfonát | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XPRT | ethyl metansulfonát ethyl xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (xxxx a xxxxx kolonie) | cyklofosfamid monohydrát xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XXXX | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx X-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
xxxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxx vhodné látky; xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (XXX 59-14-3, číslo XXXXXX 200-415-9), xxx xxxxxx x tuto xxxxxxxxxx xxxxx. Tam, xxx xx xx xxxxx, xx xxxxxx použít xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx interval xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, zpracované xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxxxxxxxx kultury. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxxxxx historické xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx nevykazuje xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx účinky.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx jak x xxxxxxxxxxxx aktivací, tak xxx xx. Expozice xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx (obvykle xx xxxxxx doba 3-6 xxxxx). Doba xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx více buněčných xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxx xxxxx kultura, xx třeba zvýšit xxxxx koncentrací xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx počet xxxxxx x xxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxxxxxx). Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx duplicitní.
V xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx látek je xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxx postupy, xxxx xx použití xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kultivačních xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x mutační frekvence
Po xxxxxxxx expozice se xxxxx promyjí x xxxxxxxxx xx stanovení xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx začíná x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx - cloning xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx časový xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx nově xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX x XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, XX xxxxxxxxx 2 xxx). Xxxxx xx xxxxxxx x médiu x x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx stanovení xxxxx mutantů x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx doby exprese xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxx četnosti xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xx selekční xxxxxx.
Xxxxx xx látka x xxxxx X5178X TK+/- xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxxxx) x xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx velikost xxxxxxx. Xxxxx je xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx kolonií u xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx. Měření se xxxx provést x xx xxxxxxxx x XX6XX+/-.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx data xxxxxx xxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxx x životnosti, xxxxx xxxxxxx x mutační xxxxxxxxx x experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X případě pozitivní xxxxxx x testu X5178XX+/- se kolonie xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a velkých xxxxxxx přinejmenším v xxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx x cytogenetické xxxxxxxxxx velkých x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx prostudovány x xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx testu TK+/- xx xxxxxxx hodnotí xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx růstu (xxxxx) x pomalého růstu (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx dobu xxxxxxxx, x proto tvoří xxxx xxxxxxx. Rozmezí xxxxxx poškození obvykle xxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx asociována x xxxxxxxx látkám xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx postižené xxxxxxx xxxxxx podobnou rychlostí xxxx buňky xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xx třeba uvádět xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx xxxxxxx efficiency) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx mutovaných xxxxx xxxxxx xxxxxx přežívajících xxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx x kultivačních xxxxxxxxxx; nakonec se xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx formě.
Verifikace xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xx xxxx potvrdit xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, je třeba xxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx výsledků xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvážit xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx tak, xxx xx rozšířilo xxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku existuje xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nárůst xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx frekvence. Nejprve xx xxxxx uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, se x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx experimentů sice xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx výsledky, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx definitivní xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx nejednoznačné xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx opakuje.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxxx savčích xxxxx xxxxxx xxxxxx. Nejprůkaznější xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx - xxxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xx zprávě x průběhu pokusu xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx testované xxxxx x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx známa.
Buňky:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,
- absence xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx kultur, xxxxxx např. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x dispozici,
- xxxxxxx média, xxxxxxxxxxx XX2,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx vehikula x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- inkubační teplota,
- xxxx xxxxxxxx,
-xxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx látky,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (případně xxxxxx xxxxx inokulovaných buněk, xxxxxxxxx)
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, u nichž xx hodnotí velikost x typ (xxxxxx xxxxxxxxxx kritérií pro xxxxxxxxxxx xxxx "xxxxxx" x "xxxxxxx" xxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx o xX x osmolalitě xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx,
- xxxxxxxx možnosti xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx mutantů pomocí xxxxxxx X5178X XX+/-,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- souběžné xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.18. POŠKOZENÍ XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX SYNTÉZA XXX - XXXXX XXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx neplánované xxxxxxx XXX (XXX) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx indukovaného xxxxxxxxxx xxxx fyzikálními xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx tymidínu (3X-XxX) xx XXX xxxxxxx xxxxx, které xxxxxx x X xxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx 3X-XxX je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx nebo kapalnou xxxxxxxxxxx metodou (XXX) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxx testovanou látkou xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx systému. XXX xxxx být xxxx xxxxxxxxx x systému xx xxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kontrolní xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx ředění xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla x xxxxxxx xxxxx nepříznivě xxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk.
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx hepatocytů, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných linií (xxxxxx diploidní fibroblasty).
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx a nepřítomnosti xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kultur xxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxx xxxx, xx-xx to xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxx XXX UDS.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
X xxxxxx experimentu xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx negativní x xxxxxxxxx kontroly v xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxx xxxxxxx hepatocyty xxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-XXXX) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-AAF). Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxx xxx autoradiografii, xxx x pro XXX xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx metabolického aktivačního xxxxxxx xxx použít X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx testované xxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx toxický xxxxx.
Xxxxx ve xxxx xxxxxx rozpustné xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx až xx hranici xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxx
Xxx udržování xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x vlhkost. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Mycoplasmat.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx aktivační xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x lymfocyty xxxx exponovány xxxxxxxxx xxxxx x přítomnosti x nepřítomnosti vhodného xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx experiment
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x povrchu xxxxxxxxxx xxxxxx), inokuluje xx xx kultivačních xxxxx ve vhodné xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 xX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx, xx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx lidských xxxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx vhodné xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx hepatocyty xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované látce x médiu obsahujícím 3X-XxX xx vhodnou xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx jsou ponořena xx xxxxxxxxxxxxxxxxx emulze (xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x vyhodnocena.
Stabilizované xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxxxxx xxxx x xxx xxxx xxxxxxxxx působení 3X-XxX. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxx xxxxx. X zachycení xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxx 3H-TdR xxxxxx xxxxxxxx x testovanou xxxxxx nebo několik xxxxx po xxxxxxxx. Xxxxx xxxx těmito xxxxxxx xx ovlivněn xxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxxxxxxx xxxxxx x 3X-XxX. X xxxxxxxx xxxx XXX a xxxxxxxxxxxxxxxxx replikací DNA xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, nízký xxxxx xxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx DNA.
Stanovení XXX xxxxxx XXX: Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx buněk xx X-xxxx, jak xxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx jsou xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce, xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx. Na xxxxx kultivace xx XXX extrahována x xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx XXX x určen xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx kulturách xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX zbytečná.
1.2.4 Xxxxxxx
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx x X-xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxx 50 buněk x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx zakódovat xxxx xxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx hodnotí xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx inkorporovaného 3X-XxX x xxxxxxxxxx xx xxxx v xxxx x xxxxxxxxx xxx jader x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.4.2 Vyhodnocení XXX
Xxx stanovení XXX XXX xx použije xxxxxxxxx počet xxxxxx xxx každou koncentraci xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx potvrzeny x nezávislých experimentech.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
2.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx cytoplazmy x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx buněčné jádro xx zaznamenávají xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3H-TdR xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx x xxxxx xx hodnocen xxxxxx průměru, xxxxxxx x xxxx.
2.2 Vyhodnocení XXX
Xxxxxxxxxxx 3H-TdR xx xxxxxxxxxxx jako xxx/μx XXX. Průměrná xxxxxxx xxx/μx DNA xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx možné, xxxxxxxxx o:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, koncentracích x xxxxxxxxxx xxxxxx výběru x experimentu,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx schématu,
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx kontrolách,
- xxxxxxxxx autoradiografických xxxxxxxx,
- způsobech xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx do X-xxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx XXX x k xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx obsahu XXX při xxxxxx XXX,
- vztahu xxxxx/xxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- statistickým xxxxxxxxxxx,
- diskusi xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.19. XXX - XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX IN VITRO
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
XXX xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. SCE xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx sekvencí XXX xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. SCE xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx zlom x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx zatím xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (BrdU) xx xxxxxxxxxxxxx XXX xx xxxx dvou xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx vitro jsou xxxxxxxxxx testované xxxxx x přítomnosti i xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx XxxX. Xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx inhibitorem xxxxxxxx xxxxxxxx (např. xxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxx x x-xxxxxxxx xxxxxx. Xx ukončení xxxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pro analýzu xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Používají xx xxxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx). Buněčné xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Mycoplasmaty.
Xxxxxxxxx xx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx x kultivační xxxxxxxx (teplota, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2 x xxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxx suspenduje x xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx významně xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxx XXX.
Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx savčího metabolického xxxxxxxxxxx systému. Připouští xx použití xxxxxxxxx xxxx x vnitřní (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx úroveň x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx kultury.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X každém xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx účinkem a xxxxx vyžadující metabolickou xxxxxxxx. Xxxx musí xxx použita xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: etylmetansulfonát
- xxxxxxx xxxxxxxx mutageny: xxxxxxxxxxxxx
Xx-xx třeba, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné chemické xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx látka.
1.2.2.3 Koncentrace
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx dávky. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx signifikantní xxxxxxx účinek, ale xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk. Xx xxxx relativně xxxxxxxxxxx látky je xxxxx testovat až xx hranici xxxxxx xxxxxxxxxxxx za použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xx xxxx rozpustné netoxické xxxxx se určuje xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx kultur
Stabilizovaná xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (trypsinací xxxx xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx kultivační xxxxxx), xxxxxxxxx xx do xxxxxxxxxxxx nádob xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 xX. Pro xxxxxxxxxxxx kultury se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx kultury xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 xX.
1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x exponenciální xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx. Ve xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxx cykly, je-li xx xxxxx. Buňky, xxxxx nemají xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou v xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xx konci xxxxxxxx xx testovaná xxxxx x média xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x BrdU xxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx buňky xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx a XxxX po xxxx xxxx buněčných xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx x nejcitlivějším xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x XxxX xx xxxxx xxxxxxxx x temnu xxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx žárovky, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx XxxX.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Jednu xx čtyři hodiny xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx do kultur xxxxx xxxxxxxxx dělicího xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx). Xxxxx kultura se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx cytogenetickou technikou. Xxxxxxx xxxxxxxxx ke xxxxxxxxxx XXX xxxx xxx provedeno několika xxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxx xxxx Giemsa).
1.2.3.5 Xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx závislý xx xxxxxxxxx frekvenci XXX x xxxxxxxx. Obvykle xx xxxxxxx nejméně 25 xxxxx rozprostřených xxxxxxxx xx každou xxxxxxx. Xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X lidských xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx metafáze x 46 centromerami. U xxxxxxxxxxxxxxx linií xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx o ± 2 xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx počtu centromer. Xx třeba stanovit, xxx xx budou xxxxxxxxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxxxxx. Výsledky xxxx xxx xxxxxxx x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxxxxxxx tabulkovou xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx počet XXX x xxxxx xxxxxxxx x počet XXX/xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- kultivačních xxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, kultivačních xxxxxxxx, xxxxx expozice, xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx i jeho xxxxx působení, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx,
- způsobu xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (odděleně pro xxxxxx kulturu),
- xxxxxxxxx počtu XXX/xxxxx x SCE/chromozóm (odděleně xxx xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx dávka/účinek, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx vyhodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.20. XXXXXXXXX XXXXXXX MUTACE XXXXXX XX POHLAVÍ U XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. METODA
1.1 Princip xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxxx letální xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx (XXXX) na Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx umožňuje detekci xxxxxx, jak xxxxxxxx, xxx i xxxxxx xxxxxx, x zárodečných xxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxx na xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx screening xxxxxx x přibližbě 800 xxxxxxxx xxxxxxxxxx X. Xxxx reprezentují xxx 80 % xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-chromozóm xxxxxxxxxxxx přibližně 1/5 xxxxxx haploidního xxxxxx.
Xxxxxx x X-xxxxxxxxxx xx fenotypicky projeví x xxxxx nesoucích xxxxxxxx xxx. Xxxx xx mutace xxxxxxx x hemizygotním stavu, xxx xx xxxx xxxxxxxxxx usuzovat z xxxxxxx xxxxxxx ze xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. XXXX xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
1.2.1.1 Xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx dobře xxxxxxxxxx xxxxxx linie a xxxxxx xxxxx Xxxxxx-5. Xxxxx xxx použity x xxxx vhodné xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx s vícenásobnou xxxxxxx X-xxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx
Testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx xx xxxx nerozpustné se xxxxxxxxxxx xxxx suspendují xx vhodném xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxx xxxxxxx x Tweenu-60 nebo 80), xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx vehikulu.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx citlivost. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x kontrolní skupině xxxxxxxx ovlivňuje nutný xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx roztoku. Xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx v 0,7% xxxxxxx NaCl x xxxxxxxx se do xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
V xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx negativní (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jestliže má xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx historické xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx experimentu xxxxxxxx kontroly.
1.2.1.6 Dávkování
Xxxxxxxxx xx tři xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx předběžný xxxxxxxxxx xxxxx se používá xxxxx xxxxx rovnající xx maximální xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo vyvolávající xxxxxx toxicity. Xxxxxxxxx xxxxx se testují x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Popis postupu
Xxxxx xxxxxxxx typu (xx xxxxx 3-5 xxx) xxxx ovlivněni xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx Xxxxxx-5 xxxx x jiné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Samice xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx virginní xxxxxx xxxxx xxx xx xxx xxx, xxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxx je xxxxxxxx letální xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, spermatocyty x xxxxxxxxxxxxx.
Heterozygotní X1 xxxxxx xxxxxxxx x tohoto křížení xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (tj. xxxxx xxxxxx/xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx. V F2 xxxxxxxx xx v xxxxx kultuře xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx samců xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxx vznikají F1 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x rodičovském X-xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx chromozómem), dcery xxxxxx samic xx xxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxx, aby xx zjistilo, zda xxxxxxxx se opakuje x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxxx xx zpracují xx xxxxx xxxxxxx. Uvádí xx xxxxx xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx, počet xxxxxxxxxxx xxxxx x počet xxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, pro každé xxxxxx xxxxxxx a xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Zaznamenává xx xxxxx clusterů různých xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Výsledky xx xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Údaje xx xxxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nahromadění xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx vhodným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, informace x:
- xxxxxxxxx liniích xxxx xxxxxxx Drosophily, xxxx, xxxxx ovlivněných xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxxxxxx F2 kultur, xxxxx X2 kultur xxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx nesoucích xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- podmínkách testu: xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x schéma xxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxx o toxicitě, xxxxxxxxx (s rozpouštědlem) x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx expozice/účinek, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.21. XXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXX BUNĚK - IN XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxx xxx použít xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx X3X10X1/2, 3X3, XXX, Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx se xxxxx o xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx změny x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx používají xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx není xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že expozice xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx ji xxxxx xxxxxx k určení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx, protože x některých xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo x xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x primokultur xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx musí xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx transformace xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx po expozici xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx je ověřen x xx je xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx x spolehlivost.
1.2.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx podmínky xxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx
Testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx ovlivněním buněk. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Metabolická xxxxxxxx
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx její xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx musí xxx zařazeny pozitivní xxxxxxxx x použitím xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x vyžadujících metabolickou xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx látek xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxx xxxxxxxx látky: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-propiolakton,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: 2-acetylaminofluoren, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Je-li xxxxx, xx xxxxx zařadit xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako je xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxx efekt xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx přežívání xxxxx, x nejnižší koncentraci xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x negativní kontrole. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx testovat až xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace ve xxxx xxxxxxxxx netoxické xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxx exponovány xxxxxxxxxxx xxxx závislou xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxx x opakovanou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s výměnou xxxxx (xx. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), jestliže xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxx vlastní xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx testované látce x přítomnosti i xxxxxxxxxxxxx vhodného metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na xxxxx xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx transformaci. Xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx vyjadřovat xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx úrovně x frekvenci xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx transformací xx xxxxx přežívajících xxxxx. Data je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx použitých x xxxxxxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: koncentraci xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, hustotě xxxxx xxxxx expozice, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx fenotypu, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx to xxxxxx), xxxxxxxxxx xxxxxx koncentrací,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x transformovaných xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- diskusi xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.22. DOMINANTNÍ XXXXXXX XXXX U XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx způsobuje xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx dominantních xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx tato xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx zvířecího xxxxx. Obecně xx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx poškozením xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Samci xxxx exponováni testované xxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, intaktními xxxxxxxx. Xxxxxxx mrtvých xxxxxxxxxx na xxxxxxx x exponované xxxxxxx xxx počet mrtvých xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx implantací xx xxxxxx x xxxxxxxxxx x kontrolní skupině. Xxxxxxx dominantní letalita xx xxxxxx xxx- x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx celkové dominantní xxxxxxxx xx xxxxxxx xx srovnání xxxxxx xxxxxxxxxx xx samici x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx implantacím xx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx intervalu xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (x.x. xxxxxxxxxxxx x/xxxx spermatogonií).
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Testovanou xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx fyziologickém xxxxxxx. Xxxxx nerozpustné xx xxxx xx xxxx nebo xxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s testovanou xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx čerstvě naředěnou xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx pouze xxxxxx. Xx základě xxxxxxxxxxxxxxx informací je xxxxx podávat xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx způsob xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Experimentální xxxxxxx
Pro xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo myši. Xxxxxx, pohlavně xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxx x ohledem xx spontánní xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx detekční xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx takový xxxxx samců, aby xx xxxxxxx 30 - 50 březích xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx do xxxxxxx experimentu. Xxxxxxxx xxxx xx laboratoř x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxx pozitivních kontrol x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx být použity. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx citlivost xxxxx (např. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 mg.kg-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx tři dávkové xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xx xxxxxxxxx známky xxxxxxxx xxxx snížené xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxx vysoká xxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxx test
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxxxx 5 x.xx-1 xxxx x xxxxx 1 x.xx-1.xxx-1 při xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxxx xxxxxxx postupů. Xxxxxxxxxx xx používá jednorázová xxxxxxxx. Xxxx však xxx xxxxxxx jiné xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xx opakovaně xxxxxx x jednou nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po aplikaci xxxxx. Samičky xxxx xxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx, xxxx xxxxx xx neprokáží spermie xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.
Počet xxxxxx po xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx expozici.
Xxxxxx xxxx utraceny cervikální xxxxxxxxx ve druhé xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxx implantací. Xxxxxxxxx xxxx být vyšetřeny x xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx o xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx páření xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx záznam x xxxxx páření, o xxxxx xxxxxx xxxxx, x počtu xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx efektu xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx implantací xx xxxxxx v xxxxxxxxxx skupině s xxxxxx xxxxxx implantací x xxxxxxxxx skupině. Xxxxx mrtvých ku xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx skupině po xxxxxxx vypovídá x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
V xxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx rozdíl xxxx počtem xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx průměrného xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx možno, xxxxxxxxx x:
- xxxxx, xxxxx, věku a xxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x kontrolních skupinách,
- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx hladinách x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx páření,
- xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx dávka/odpověď,
- xxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.23. ANALÝZA XXXXXXXXXXXXXX ABERACÍ X XXXXXXX SPERMATOGONIÍCH
1. XXXXXX
Metoda xx xxxxxxxxx XXXX XX 483, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx Chromosome Aberration Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx způsobující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxxx xxxxxxxx chemickými xxxxxxxx xxxx většinou xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx jsou u xxxxxxx příčinou řady xxxxxxxxxxx chorob.
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace v xxxxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxx predikovat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách.
X xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hlodavci. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx in xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx spermatogonií. Xxxx xxxxxx nepoužívá jiné xxxxxx xxxxx.
Aby xx xx spermatogoniích xxxxxxxx xxxxxxx chromatidového xxxx, je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mitózu xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx než xx xxxxxxxxx xxxxxx x následujícím xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x ovlivněných xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx analýzou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, kde xx zjišťují aberace xxxxxxxxxxxxxx typu x xxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxx buňky xxxx ve xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx test xx xxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mutagenity xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx procesů XXX.
X xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx generací xxxxxxxxxxxxx se širokým xxxxxxxx citlivosti xxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx představují xxxxxx xxxxxx ovlivněných xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx diferencované xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pak xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx nemusejí xxx exponovány krevním xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxx buněk x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx bariéře.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx látka xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxx xxxxx pro xxxx vhodná.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx chromatidového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx projevuje xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx obou xxxxxxxxx, xxxx xxxx a xxxxxxxx spojení xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: strukturální xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx respektive xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx obou xxxxxxxxx xx stejném xxxxx (xxxxxxxx xxxx aberace xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx chromozóm-ring)
Zlom xxxxxxxxxx: xxxx zlom xxx xxxxxxxx porušení xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx chromatid xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx větší, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx v případech, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x místě xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx chromatidy), xxxxxxxx jedna xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómu xx xxxxxx x důsledku xxxxxx.
Gap: xxxxxxxxxxxx xxxx menší xxx xxxxx jedné xxxxxxxxxx x s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromatid.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Polyploidie: xxxxxxx haploidního xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx diploidní xxxxx xxxx (3n, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx struktury xxxxxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx dělení xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx delece a xxxxxxxxx, x výměny.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx. Před xxxxxxxxx xx xx xx xxxxxx látkou xxxxxxxxxxx metafázi (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo Colcemidem®). Xx zárodečných xxxxx xx xxx připraví xxxxxxxxx x xx xxxxxxxx se v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx čínských xxxxxx x myší, xxx ovšem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx savčího druhu. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx úvodu x části X.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxxx mladí xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxxxx označí x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vlivy xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx x xx-xx xx xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx podávat xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx ředí. xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx testu
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x testovanou látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx nepříliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí být xxxx použití xxxxxxxxx xxxxx x kompatibilitě x testovanou xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx je xx xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx třeba xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx xxxxxxxx xx zvířaty xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx kontroly xx xxxx ve spermatogoniích xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad spontánní xxxxxx.
Xxxxx při xxxxxxxxx kontrole xx xxxx tak, aby xxxx účinky patrné, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx časovém xxxxxxxxx. Xxx je xx xxxxx, je třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx vhodných xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Látka | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxx xxxxxxx | 79-06-1 | 201-173-7 |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx ovlivněné xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx být xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zpracování, xxxxx nejsou k xxxxxxxxx přijatelné historické xxxxx o frekvenci xxxxx x xxxxxxxxx x o interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo publikované xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx mutagenní xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx schéma
Testovaná xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx xxxx dávkách. Xxxxx xx xxxxx x objemnou dávku, xxxx se x xxxxxxxxx aplikace rozdělit, xx. na xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x rozmezí xxxxxxxxx xxxxxxxx hodin. Xxxxxx xxxxxx dávkování xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx vzorky xx expozici xxxxx xxxxxxxxx dvakrát. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka může xxxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného xxxxxx, provádí xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx odběr xxxxxx 24 a 48 xxxxx xx xxxxxxxx. X ostatních xxxxx (tj. mimo xxxxx nejvyšší) se xxxxx vzorků xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx xxxx xx 1,5násobku xxxxx buněčného xxxxx xx xxxxxxxx, ledaže xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx účinku (6).
Xxxxx xxxx xxxxx xxx použity xxxx xxxxxx xxxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxx. xxxxx-xx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mitózy, xxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx X-xxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (1).
Xxx xx vhodné nechat xxxxx xxxxxxx opakovaně, xx xxxxxxxx xxxxxx xx případu. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx zvířata po 24 hodinách (1,5xxxxxxx xxxxxxxxx cyklu) xx xxxxxxxx aplikace. Odběry xxx xxxxxxxx i x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx xx to xx účelné.
Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx x nich xx xxxxxxx intervalu xxxxxxxx xxxxxx. U xxxx xx xxxxx xxxxxxxx zhruba 3-5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx zhruba 4-5 xxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx nejsou k xxxxxxxxx žádné xxxxxx xxxxx, je třeba xx provádět x xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx použijí x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx užívají xxx xxxxx časový interval xxxxxx xxxxxx tři xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx toxicity k xxxxxxxx nízké nebo xxxxxx. Xxx pozdější xxx odběru xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx režimu podávání xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.
Látky, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx z těchto xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx případ od xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx být také xxxxxxxxxx jako xxxxx, xxxxx vede x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x první x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx dávce xxxxxxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx nebo ve xxxx xxxxxxx podaných x jeden den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxx strukturou neočekává xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx použití xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx expozice xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx testu xxxxx dávky.
1.5.5 Aplikace xxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx vpravuje xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx intraperitoneální xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx případech xxxxx xxx přijatelné x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 g xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx dráždivých xxxx xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx koncentracích horší xxxxxx, xx třeba xxxxxxx koncentrace xxxxx xxx, xxx objem xxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx usmrcení xxxxxxx xx x xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx hypotonickým xxxxxxxx x xxxxxx xx. Xxxxxxx suspenze xx nakape xx xxxxxxxx xxxx a xxxxxx.
1.5.7 Analýza
U xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx minimálně 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx metafází (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx v xxxxx xxxxxxx). Xxxxx xxxxx xx xx xxxxxx, xx-xx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx před xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx fixační postupy xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx u xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx roven číslu 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx x jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxxxxx x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx vyhodnocuje xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. X experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx typy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx počet a xxxxxxx. Gapy se xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx, ale obvykle xx do xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx analyzována xxxxxx x xxxxxx, xxxxxxx xx x všech xxxxxxxxx zvířat i xxxxxx z negativní xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx poměr mitóz xxxxxxxxxxxxx x první x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xxx, xx xx x každého xxxxxxx xxxxxxx 100 dělících xx xxxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx pouze xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x minimálně 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx používá xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx koncentraci testované xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s chromozómovými xxxxxxxxx, nebo zřetelný xxxxxx počtu buněk x xxxxxxxxx ve xxxxxxx ovlivněné xxxxxxxxxxxx xxxxxx a s xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (8); xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx xxxxxxx určujícím xxxxxxxx pozitivního výsledku. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx vyjasnit dalším xxxxxxxxxx, xxxxxxx za xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, xx v xxxxx xxxxxxx považuje xx nemutagenní.
Ačkoliv xxxxxxx xxxxxxxxxxx vykazuje xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx získaná xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx bez xxxxxx xx xxxxx opakovaných xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka vyvolává x xxxxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx živočišného xxxxx chromozómové aberace xxxxxxxxxx.
Je třeba xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx dosáhne xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxx určitou xxxxxxx xxxx (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva o xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- rozpustnost x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx známa.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx x xxx xxxxxx,
-původ, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx apod.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx počátku xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- podrobnosti x xxxxxxxx testované xxxxx,
- zdůvodnění doby xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x potravě/pitné xxxx (ppm) xx xxxxxxxxx xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx / den),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx potravy x xxxx,
- podrobné xxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x odběru xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx přípravy mikroskopických xxxxxxxxx,
- kritéria xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx na jedno xxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- poměr xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxx x xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, je-li xx xxxxx,
- statistické xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, průměrů x směrodatných xxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx pozitivních kontrol,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Závěry.
B.24. SPOT XXXX U XXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xx xx in vivo xxxx xx myších, x kterých xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx x cílovými geny xx, které xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxx dominantních xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxx srsti xxxxxxxxxx xxxx. Počet potomků x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, je zaznamenán x jejich frekvence xx srovnávána x xxxxxxxxx x xxxxxxx x kontrol. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x embryonálních xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x izotonickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx nerozpustné xx vodě jsou xxxxxxxxxx xxxx suspendovány xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxx s testovanou xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx čerstvě připravené xxxxxxx testované xxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Myši xxxxx T (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxxxxxx, pink xxx, cch x/xxx x; xxxxx, x/x; xxxxxx, xxxxx xxx, x se/d xx; xxxxxxx spotting, x/x) xxxx kříženy xxx x xxxxxx HT (xxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xx x xx/xx x xx; xxxxxx xxxxx, xx xx/ /xx xx; pearl xx/xx) nebo x xxxxxx C57 XX (xxxxxxxxx, a/a).
Mohou xxx xxxxxxx i xxxx xxxxxxx, za xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx nonagouti xxxxxxx. Xxxx. xxxxxxx mezi xxxxxx NMRI (xxxxxxxxx, x/x; albino, c/c) x XXX (nonagouti, x/x; xxxxx, b/b; xxxxxx x/x).
1.2.1.2 Xxxxx x pohlaví zvířat
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx samic, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx počet xxxxxx xxxxxxx pro každou xxxxxxxx xxxxx. Vhodná xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx x x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx výsledky jsou xxxxxxxxxxx pouze x xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávkou.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx kontroly). Xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x téže xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxx. Nedávné xxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx látce xx xxxxxx xxxxxxxxxx účinkem xxxxx xxx v xxxxx testu xxxxxxx, xxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxx nebyla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx. Je-li xx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Používají xx xxxxxxx xxx xxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx xxxx zmenšení xxxxxxxxx vrhu.
1.2.2 Popis xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivněna xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx 8., 9. xxxx 10. den březosti, xxxxxxx xx 1. xxx březosti xx xxxxxxxx den zjištění xxxxxxxxx zátky. Tyto xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 a 9.25 xxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx.
Xxxxxxx
X xxxxxx je xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x čtvrtým xxxxxx po xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx:
(x) xxxx xxxxxx x xxxxxxx 5 xx xx střední ventrální xxxxx, o xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx zánikem buněk (XXXX);
(b) xxxxx xxxxxx xxxx agouti xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx žláz, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xx, že xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx diferenciace (XXX);
(x) zbarvené a xxxx skvrny xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx výsledek xxxxxxxxxxx xxxxxx (XX).
Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, ale pouze xxxxxxxx, RS, je xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Obtíže x xxxxxxxxx xxxx XXX a XX xx možné xxxxxxx xxxxxxxxxxx chlupů xx xxxxxxxxxxxxxx mikroskopu.
Xxxxxxxxxxxxx xx nápadné, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx potomků.
2. XXXXX
Získaná data xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx více xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx získané z xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx metodami. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx hodnoty xx xxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, informace o:
- kmeni xxxxxxxx xxx křížení,
- xxxxx zabřezlých samic x experimentální x x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx velikosti xxxx v experimentální x x xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx x xxx odstavení,
- dávkových xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxxx xxx xxxxxxxx byla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx x WMVS, XXX a XX x xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx morfologických xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx dávka/odpověď x XX, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX X MYŠÍ
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx přenosné xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a numerické xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx potomků. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx X-chromozómu. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x XO-samice xxxxxxxx xxxxxxxx fertilitu, xxxxx xx využívá xxx xxxxx X1 xxxxxxxxx pro cytogenetickou xxxxxxx. Xxxxx sterilita xx xxxxxxxxx některými xxxx xxxxxxxxxxx (X-xxxxxxx x x-x typ). Xxxxxxxxxxx xxxx analyzovány xxxxxxxxxxxxx x meiotických xxxxxxx xxxxx ze xxxxxxxxxxxx xx stadiu xxxxxxxxx-xxxxxxxx I, xxxx X1 samců xx xxxxxxx xxxxxxx X1 xxxxx. Xxxxxx XX xxxx cytogeneticky xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pouze 39 xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x kostní xxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx dávkování xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx i xxxx xxxxxx způsoby xxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Pro xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx verifikaci xx xxxxxx provádí xx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx kmen. Xxxxxxxx velikost xxxx xx xxxx xxx xxxxx xxx osm x xxxx xx xxx xxxxxxxxx konstantní. Xxxxxxxxx xx zdravá, xxxxxxxx xxxxxxx zvířata.
1.2.1.3 Xxxxx zvířat
Xxxxx xxxxxx nutně xxxxxx xx frekvenci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a na xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyžadovaném xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Test xx obvykle xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx X1 xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx v X1 xxxxxxxx je testováno x každé xxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxxx xxxxxxxxxxx také xxxxxx X1 generace xxxxxxx, xxx se xxxxxxxx 300 samců a 300 xxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Xxxxx xx použít xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx přijatelné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx pokusu x xxxx laboratoře, mohou xxx xxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyvolávající xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxx vlivu na xxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxx. Pro stanovení xxxxxx xxxxx/xxxxxxx xx xxxxx xxxx dalších, xxxxxxx dávek. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Popis xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxx x oplodnění
Xxxxxxxxx se xxx xxxxxxx expozice. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxx podávání xxxxxxxxx xxxxx sedm dní x xxxxx po 35 dnů.
Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx řízen xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxx stadia zárodečných xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx rozděleny xx xxxxx. Po xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx x pohlaví xxxxxx. Xx xxxx xxxx xxxxx i samičí xxxxxxx odděleni xx xx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxx možných metod. Xxxx xxxxxxxxx X1 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx možných xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx analýza xxxxx xxxxx X1 xxxxxxxx xxx předchozího xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Test xxxxxxxxx
Snížená fertilita xxxxxx v F1 xxxxxxxx se může xxxxxxxx x velikosti xxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx samic. Xxxxxxxx xxxxxx normální x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx myší.
Xxxxxxxx xxxx: X1 xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx stejné xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx počínaje 18. xxxx xx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx X2 xxxxxxx jsou zaznamenány xxx porodu, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx X1 xxxxxx, F2 xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx uchováváni xxx xxxxx testy. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. XX-xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxx ratio mezi xxxxxx potomky x 1 : 1 xx 1 : 2 samci xx. xxxxxx. X následném xxxxx xxxx xxxxxxxx X1 zvířata xxxxxxxx x dalšího testování, xxxxxxxx xxxxx X2 xxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx druhé x třetí xxxx. X1 zvířata, xxxxx xxxxxxx být klasifikována xxxx normální xx xxxxxxxxxxx xxx X2 xxxx, jsou dále xxxxxxxxx buď xxxxxxxx xxxxxx dělohy, xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx u xxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx implantací xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxxx X1 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx 2 - 3 xxxxxxx. Oplodnění xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx vaginální zátky. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx 14. - 16. xxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx živé x xxxxx xxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxx-xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx stadiu xxxxxxxxx - xxxxxxxx I x primárních spermatocytech. Xxxxx xxxxxxx dvou xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx požadovaný xxxxx, xx testované xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx no xxxxxxxx, xxxxxxx X1 xxxxx xxxx vyšetřeni xxxxxxxxxxxxx. Xx každého xxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx vyšetřeno xxxxxxx 25 xxxxx v xxxxxxxxx - xxxxxxxx X. Xxxxxxx mitotických xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx se vyžaduje x xxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx meiozy xxxx xxxxxxxxxx xxxx x X1 samic xxxxxxxxxxx XX. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx x 10 xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx translokační xxxxxxxxx (x-x typ). Xxxxxxx X-autosomální xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx sterilitu xxxxx být identifikovány xxxxx pruhováním xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx xx xxxxx 10 mitózách je xxxxxxx xxx XX xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx formou.
Pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx zaznamenána průměrná xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx (sex xxxxx).
Xxx xxxxx xxxxxxxxx F1 zvířat xx uvádí průměrná xxxxxxxx vrhu xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx X1 nosičů xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx dělohy xx xxxxx průměrný počet xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx v kontrole x individuální xxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx F1 xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx cytogenetické xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx I xx uvádí xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx každého xxxxxx translokací.
Pro X1 xxxxxxxx xxxxxxx xx zaznamenává xxxxx x xxxx připuštění. Xxxx se uvádí xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
U XX xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxx X2 xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx, xx pomocí xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx vybráni možní xxxxxxxx F1 xxxxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxx xxx uvedeny xxxxx x xxxxxxxxxxx x pozitivních kontrolách.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx obsahuje, je-li xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- kmenu xxxx, xxxxx x xxxx exponovaných xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx každé xxxxxxx x exponovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, dávkové xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a schéma xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, počet x xxxxxxx potomků xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- počet x detailní xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x obsahu xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud xxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.26. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX ORÁLNÍ
(90denní xxxxxxxxx podávání per xx, studie xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx denně xxxxxx po 90 xxx v odstupňovaných xxxxxxx několika skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx zvířata denně xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, která uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx v xxxxx xxxx. Všem xxxxxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx po xxxxx xxxx pokusu xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx o xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Existují-li xxxxxx dřívější xxxx, xx možno xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx xxxxx tomu. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx případě xx xx počátku podávání xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx 6 xxxxx, v xxxxxx xxxxxxx starší xxx 8 xxxxx. Xx xxxxxxx studie xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx test xxxx předběžný test xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx živočišný xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx se zvířata xxxxx zabíjet v xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvýšit xxxxxxx xxxxx zvířat o xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx každého xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx xxxxxxxx sledovat xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx úrovně xxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, podává xx xxxxxxxxx skupině xxxxxxx způsobem jako xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx stejném xxxxxxxx, které obdrží xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx dávka. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx vyvolat toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxx malý xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx existují odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx nejnižší dávka xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx by xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx více xxx 3 úrovně xxxxx, mají být xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxx x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
Xxxxxx-xx xx testovaná xxxxx x xxxxxxx, xxxx se xxxxxx xxx konstantní koncentrace (x ppm xxxx xx.xx-1 potravy) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Aplikuje-li xx xxxxx xxxxxx, mělo xx se tak xxx každý xxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx intervalech (xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) přizpůsobovat xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxx-xx se 90xxxxx xxxx níže xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xx dalšího testování xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx toxická xxxxx x xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx dobu objevení, xxxxxx x trvání. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx objeví a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
X xxxxxxxx případě xx zvířatům podává xxxxxxxxx látka 7 xxx v týdnu xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx dalších 28 xxx xxx xxxxxxxx, x posouzení zotavení x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx a centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx a chování. Xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx testované xxxxx x pitné xxxx) x xxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxxxxx týdně.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolu xxxxxx, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx např. x důsledku kanibalismu, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx oftalmoskopem xxxx rovnocenným přístrojem xx má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a na xxxxx xxxxxx xxxxxxx x všech zvířat, xxx alespoň x xxxxxxxx xxxxx a x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxx, vyšetří xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx čas či xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx konci xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx všechny studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx (xxxxxx doby xxxxxxxxx se xxxx xxxxx živočišného druhu x xxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx pyruvát-transamináza) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x séru. Xxxx další charakteristiky, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx spektra xxxxxx.
(d) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje xxxx xxxxx xxxxxx, xxx jen xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pokud xxxxxx přiměřené xxxxxxxxxx xxxxxxxxx data, xx xx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx ještě před xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx zvířat použitých xx studii se xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich obsahu. Xxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra xxxxx a mozečku, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx, aorta, (slinné xxxxx), xxxxx, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, slinivka xxxxxx, varlata a xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, tlusté x xxxxx střevo, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, (samičí mléčná xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (oči), xxxxxx kost x xxxxxx dření, (xxxx xxxxxxxx včetně kloubních xxxxx), xxxxxxx mícha xx xxxxx xxxxxxxx - krční, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx, x (xxxxx xxxxx). Xxxxx x závorkách xx posuzují x xxxxxxx, xxxxx lze xx xxxxxx postižení xxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Je třeba xxxxxxxx všechna xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxx xx mají histopatologicky xxxxxxxxxx x zjištění xxxxxxxx xxxxxxx, protože xx xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx histopatologická xxxxxxxxx xx u xxxxxx xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx rutinně, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx na xxxxxxxx, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
(e) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.
2. XXXXX
Údaje se xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx typy xxxxxxxxx. Xxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx informace:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- experimentální xxxxxxxx - úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx dávek,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx ji xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x přežití zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,
- popis toxických xxxx xxxxxx účinků,
- doba, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx další xxxxx,
- xxxxxxxx potravy x vývoj tělesné xxxxxxxxx,
- hematologická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xxxxxx moči),
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní popis xxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.27. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX XXXXXX
(90denní xxxxxxxxx podávání xxx xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxx xxxxxx po 90 xxx v odstupňovaných xxxxxxx několika skupinám xxxxxxxxx zvířat (xxxxxxxxxxx), x to xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, aby xx zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x zvířata, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx může xxx xxxxxxxxx podávání x xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Všem xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx stejnou xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná historická xxxx, je možno xx využít.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx používá xxx: xxxx se přednost xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx pracovat xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxx xx xx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 3 do 6 xxxxxx x xx xxxxxxx než 9 xxxxxx. Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx před dlouhodobým xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se má xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 8 xxxxxx (4 xxxxxx x 4 xxxxx). Xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx třeba použít xxxxxxx xxx úrovně x xxxxx kontrolní xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx zvířaty x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx. Xxxxxxxx úroveň xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx existují odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx hodnotu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx by xxxxxxx xxxxxx dávky měla xxxxxxx jen xxxxxxx xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky.
Xx xxxxxxx s nízkou x xxxxxxx úrovní xxxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx v potravě, xx xxxxx zajistit, xxx xxx aplikované xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě xxxxxx.
Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx, xxxx se xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx xx.xx-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxx hmotnosti zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx uvést. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx xx xxx dít xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx, a dávkování x týdenních xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.
Provádí-li se xxxxxxxxxxxx orální xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx dlouhodobým xxxxxx, x obou xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx dieta.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Provede-li 90xxxxx xxxx níže xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx xxx (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, je-li tato xxxxx) žádné toxické xxxxxx, xx možno xx dalšího testování xxxxxxx. Podává-li xx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx zajistit, aby xxx xxxxxxxxxx množství xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebránily xxxxxxxx xxxxxx zvířat.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x trvání. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, ve xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
X xxxxxxxx xxxxxxx xx zvířatům xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx dobu 90 xxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx jiným xxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxx se za xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 5 dní x xxxxx.
Pozorování xxxxxxxx (xxx není xx xx xxxxxxx) změny xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx oběhu, změny xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Příjem xxxxxxx (x příjem vody xxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenávají xxxxx.
Nejméně xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx klinická xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x minimalizaci xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx pitvají xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
U xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx se obvykle xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx před podáváním xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x nejvyšší dávky x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Najdou-li xx xxxx změny, xxxxxxx xx všechna xxxxxxx.
(x) Na xxxxxxx xxxxx, a potom xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx hematologické xxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu leukocytů x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx například xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx počet xxxxxxxxxx.
(x) Na xxxxxxx xxxxx, x xxxxx buď x xxxxxxxxx intervalech nebo xxxxxxxxx x xxxx xx konci pokusu xx xx provést xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx všechny studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx látky. Doporučuje xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, chloridy, sodík, xxxxxxx, glukózu na xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx hladovění se xxxx xxxxx živočišného xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (dříve xxxxxxx transamináza xxxx) x aspartát xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), ornithin dekarboxyláza, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxx xxxxxx xxxx xx nehlodavci xxxx xxxxxxxx (xx xxxx xxx 24 xxxxx).
(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje jako xxxxx xxxxxx, xxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo pozorované xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U všech xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx otvorů, xxxxx, hrudní a xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, mozek - x řezech xxxxxx/xxxx, xxxx mozku x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx břišní, xxxxxxx x vaječníky, děloha, (xxxxxxxx pohlavní xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, tenké, xxxxxx x slepé xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (samičí xxxxxx xxxxx), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (oči), xxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx kloubních xxxxx) x (xxxxxxx xxxxx ve třech xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx posuzují, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokud xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx nejvyšší xxxxx, x u xxxxxx xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx provedena xxxxxxxx, x xxxxxxx byla xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxx xx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx klinických xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, typy xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x jednotlivými xxxx xxxxxxxxx. Výsledky xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxxxxx xxxx xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, pokud se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx o xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx x podle xxxxx,
- xxxxxx xxx účinku, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x přežití xxxxxx do xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx, xxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky x xxxxxx další xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx a vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx výsledky (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.28. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX DERMÁLNÍ
(90denní xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx hlodavcích)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se aplikuje xxxxx na kůži xx 90 xxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Během xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují, xxx se zjistily xxxxxxxx toxicity. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx srsti je xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx však xxxxxxx cca 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nebo oholení xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx na to, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (např. abrazí). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Xx třeba xxxx x xxxxx hmotnost xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x velikosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Při xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx formy, xx xxxxx zkoušenou xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou, xxxxxxxx xxxxxxx vehikulem, xxx byl xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx denně 5 xx 7 xxx x týdnu.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx použít xxxxxxx potkany, xxxxxxx xxxx morčata, xxxxxxxx x xxxx zvířecí xxxxx, xxxxxx použití xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty. Provádí-li xx subchronický xxxxxxxx xxxx xxxx předběžný xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx se má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx a kmen.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx nejméně 20 zvířat (10 xxxxx x 10 xxxxx) xx zdravou xxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx xxxxx podávat xxxxx skupině (satelitní xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx dobu 90 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx sledovat xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx použít nejméně xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx xxxx - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxx nejméně 6 hodin xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx stejnou dobu. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, aby xx udržovala xxxxx xxxxxxx dávky ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx usnadnění aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám, x to xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx skupina, xxxxx xx aplikuje xxxxxxxx xxxxx.
Nejvyšší hladina xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné uhynutí xxxx xxx x xxxxx počtu. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx žádné xxxxxxxx toxicity. Pokud xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx dávka tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx xxxxxxx hladina xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx dávky a x kontrolní xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxx koncentraci, xxx x vysoké xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx nebo xxxxxxxxx ostatních toxických xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx dokonce xx xxxxxxxx okolností xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx-xx xxx předběžné studii xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 xxxx vyšší xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx člověka, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx nutná.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Je xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx x xxx, xx kterém se xxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx účinky.
1.2.3 Xxxxx postupu
Zvířata xx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx studované xxxxx nejlépe 7 xxx x týdnu xx dobu 90 xxx. Zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxx pro následné xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 28 dnů bez xxxxxxxx, xxx se xxxxx xxxxxxxxx reparace xxxxxxxxx účinků nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 hodin xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx plochu, xxxxx představuje asi 10 % xxxxxxx xxxx, x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx. Látkou xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxx pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxx obvazu x nedráždivé náplasti. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx mulový obvaz x xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X zamezení xxxxxx látky xx xxxxx použít x xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx pohybu, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pokud možno xxxxx xxxx jiným xxxxxxxx vhodným k xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx otravy xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x trvání.
Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx x xxxxxxx, a xxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, somatomotorické xxxxxxxx a chování. Xxxxxxxxx zvířat se xxxxxxxxxxxxx týdně. Doporučuje xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x spotřebu xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolu xxxxxx, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zvířat xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx či xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxx alespoň x xxxxxxxx dávky a x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx trombocytů.
(x) Xx konci pokusu xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza krve. Xxx xxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů je xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, glukózu na xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx hladovění xx xxxx podle xxxxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) x aspartátamino xxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, hormonů, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx účinků.
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx hematologických x xxxxxxxxxxxxx parametrů xxxxx xxxx začátkem xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx obsahu. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: všechny xxxxx x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra xxxxx x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, (xxxxxxxxxx), plíce, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, slinivka xxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx orgány, xxxxxxx (xx-xx přítomen), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx x slepé xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lymfatické uzliny, (xxxxxx xxxxxx žláza), (xxxxxxxx sval), xxxxxxxxx xxxx, (oči), (hrudní xxxx x xxxxxx xxxxx), (xxxx xxxxxxxx xxxxxx kloubních xxxxx), (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx) x (xxxxx xxxxx). Xxxxx x závorkách xx xxxxxxxx, pokud xx xx indikováno xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx souvisejí x xxxxxxx orgánem.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x exponované xxxx, xxxxxx x tkání xx xxxxx provést x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které byla xxxxxx nejvyšší dávka, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx makroskopická xxxxxxxxx.
(x) Je třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx skupinách x nízkou x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetřovat x zjištění příznaků xxxxxxx, protože to xxxxxxxxx obraz zdravotního xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se x zvířat xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx skupiny, xxxx xx provést xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx, u xxxxxxx xxxx zjištěny xxxxxx u ostatních xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx lézí. Xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, původ, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx,
- xxxxxxxx pokusu,
- xxxxxx dávek (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx použije) a xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx bez xxxxxx, xxxxx ji lze xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- hematologická vyšetření x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
X.29. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX - INHALAČNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - studie xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxx pokusných zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně po xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x to xx 90 xxx. Xxxxxxx-xx xx pro xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Během xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pozorují x zjišťují se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, která přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx, x jakých budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxx se užije xxx usnadnění aplikace xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx, xxxx být x xxxx xxxxx, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx je využít.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx důvody xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx zvířatech x xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xx začátku xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx test xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx, xx nutno xxxxxx celkový počet xxxxxx o xxxxx xxxxxx, která budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx dobu 90 xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x během následujících 28 xxx xx xxxxxxxx expozic xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx koncentrace
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx skupiny x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem - xxxxx xx xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx stejné jako x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx). X výjimkou xxxxxxxx testované xxxxx xx se zvířaty x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx jen x xxxxx xxxxx. Pokud xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x člověka, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx než 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, mají xxx voleny xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx s xxxxxx x střední xxxxxxxxxxx x x kontrolní xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Zvířata xx exponují xx xxxx 6 xxxxx xx ustavení rovnováhy xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x jiných xxx expozice.
1.2.2.5 Expoziční xxxxxxxx
Pro expozici xxxxxx xx používá xxxxxxxxx inhalační xxxxxxxx, xxxxx zaručuje proudění xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx nejvíce xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx stability xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx by x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx možné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx individuální xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx látky xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Doba pozorování
Xxxxxxx zvířata xx xxxxx denně xxxxxxxxx xxxxx celého xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, ve xxxxxx xx objeví x opět xxxxxx xxxxxxx účinky.
1.2.3. Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxx, 5 - 7 xxx v xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách, která xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx dalších 28 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx zotavení x otravy xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx být 22 xX ± 3 xX. Relativní xxxxxxx xx xxx xxxx 30 % x 70 %, s xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxx xx nepodává xxxxxxx xxx xxxx.
Používá xx dynamický inhalační xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxxx xx provést xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xx třeba nastavit xxx, xxx podmínky x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx byly stejné. Xxxxxx xxxx zaručovat, xx stabilních xxxxxxxx xxxxxxxx bude xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Měření xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně).
x) Skutečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky se xxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx hodnoty x xxxx xxx ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx xxxxxx kolísání. Xx xxxxx dobu xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, jak je xx prakticky xxxxx. Xxx vývoji xxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx velikosti částic xxx, aby byla xxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx. Xxxxx expozic xx měří xxx xxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx stálosti distribuce xxxxxxxxx xxxxxx.
c) Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
x) Xxxxx xxxxxxxx x xx xx xx zvířata xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx se zaznamenávají; xxxxx zvíře xx xxxx xxxxxxxxxxxx protokol. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat xx xxxxxxxx toxických xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx výskyt, stupeň x xxxxxx. Xxxxxxxxxx x kleci xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, somatomotorické aktivity x xxxxxxx. Hmotnosti xxxxxx i xxxxxxxx xxxxxxx se zaznamenávají xxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolu xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx nedocházelo xx xxxxxxx zvířat xxxx xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx studie xx všechna xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx provádějí xxxxxxxxxxx vyšetření:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným přístrojem xx xx provést xxxx podáváním xxxxxxxxx xxxxx a na xxxxx studie xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxx přinejmenším x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.
(x) Xx konci xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření, které xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx čas či xxxxx trombocytů.
(c) Xx xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx všechny studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Výběr xxxxxxxxxxxx testů je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, glukózu na xxxxx (trvání xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), alaninamino xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) x aspartátamino xxxxxxxxxxx séra (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x séru. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx potřebné xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, patří stanovení: xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x případě potřeby xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků.
(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxx dřívější xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx hematologických x biochemických parametrů xxxxx xxxx začátkem xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva zahrnující xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, lební, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx x xxxxx xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx (xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx aby xx zachovala xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxx xx považuje xx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxx, mozek - x řezech xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx, štítná xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x vaječníky, děloha, (přídatné xxxxxxxx orgány), (xxxx), xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, reprezentativní xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx žláza), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx ve xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx hrudní x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx je to xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
(x) Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx je xxxxx provést x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla exponována xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx.
(b) Je xxxxx vyšetřit xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx orgány v xxxxxxxxx dávkových skupinách.
(x) Plíce zvířat xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx mají xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetřovat, xxxxxxx xx poskytuje xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx postižení xx xxxxxxx x vysokou xxxxxxxxxxx.
(e) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx tkáních x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x lézemi, xxx xxxx a xxxxxxxxxxxx počet zvířat x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x xxxx možno xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, krmení,
- xxxxxxxx xxxxxx: Popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx částic a xxxxxxxx, klimatizačního xxxxxxx, xxxxx likvidace odpadního xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx xxxxxxxx. Popsat xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx vzduchu, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx o expozici xx xxxxxxx do xxxxxxx a uvedou xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x charakteristikou xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx:
x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízením,
x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx,
c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx inhalačního zařízení, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx,
x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxxx),
- xxxxx o xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx možné xx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj x xxxxxxx xxxxxx do xxxxx sledování,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné hmotnosti,
- oftalmologické xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- pitevní xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, kde je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.30. XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx x týdnu, vhodnou xxxxxx, xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx na xxxxxxx, xx větší xxxx xxxxxx zvířat. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx denně xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx jsou xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx podmínkách xxxxx 5 dní xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx jsou xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Preferovaným xxxxxx xx xxxxxx. Xx základě předchozích xxxxxx je xxxxx xxxxxx x další xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxx). Xx třeba xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kmenů xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Expozice xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx mláďat. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx než ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx vlastní studii xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity, je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx a xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 40 xxxxxx (20 xxxxx x 20 samců), xxxxxx x xxx xxxxxxxxx skupinu. Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x neměly xx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
V případě xxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx) je xxxxx xxxxxx menší xxxxx xxxxxx, ale xx xxxx než 4 xx každého xxxxxxx xx skupině.
1.2.2.3 Dávky x frekvence expozic
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx tři xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xx xxxx vyvolat xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx dávka by xxxxxx vyvolat xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx dávek xx měl xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx studií.
Xxxxxxx xxxx zvířata exponována xxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx, xx xxxxx zajistit, aby x xx xxxx xxxxxxx stálý přístup.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx ohledu x xxxxxxxxxx skupině, xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx.
Xx zvláštních xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jehož xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx, která není xxxxxxxxxx ani xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Dva xxxxxx xxxxxxx aplikace xxxx orální a xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx problémy. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x důsledku xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxx orálního xxxxx x znalosti rozsahu xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Orální xxxxxx
Xxx, xxx xx testovaná xxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x je-li xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx proti xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx x potravě, xxxxxxxxxx x pitné xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.
Ideálně xx xx měla xxxxx podávat xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx dávkování pět xxx x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxxx vyvolat "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx výsledky x následné hodnocení. Xxxxxxx, xxxxxxxxx s xxxxxxx na praktické xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx technicky xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx platnou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx situacích.
Xxxxxxxxxx expozice xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx lidské xxxxxxxx, takže zvíře xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx xx pět xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx expozice), xxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxx expozici x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx denně xx xxxx xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), s xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx denně xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx x xxx čištění xxxxxxxxxxx xxxx. V obou xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx exponována xxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxxxxxx x stálou xxxxxxxx xx x xxx, že x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx expozice x xxxxx delším xxxxxxx během xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx expozice xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x na xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx má xxx simulována. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x xxxxx určité xxxxxxxxx obtíže. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx narušeny xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) generace aerosolu xxxx xxxxxx koncentrace xxx x technik xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx komory
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x inhalačních komorách, xxxxxxx konstrukce xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx za hodinu, xxx byl zajištěn xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx komory xx měly xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx srovnatelné ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx udržuje mírný xxxxxxx a xxx xx brání úniku xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Komory xx xxxx minimalizovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x komoře xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(a) xxxxxx xxxxxxx: rychlost xxxxxxx xxxxxxx komorou xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;
(b) xxxxxxxxxxx: během xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx neměla xxxxxxx xxxx než 15 % střední hodnoty;
(x) teplota a xxxxxxx: xxx hlodavce, xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 22 ± 2 xX a xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma případů, xxx xx voda xxxxxxxxx k rozptýlení xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxxx průběžně;
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx pevných xxxxxxxx. Aerosolové částice xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Vzorky xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx zóny xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx gravimetricky xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x když xxxxxx část aerosolu xxxx respirabilní. Xxxxxxx xxxxxxxxx částic by xxxx být prováděna xxxxx xxxxx vývoje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxxxx stabilitu xxxxxxxx, x poté xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Expozice xxxxx xx měla xxxxx xxxxxxx 12 xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxx klinické sledování xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxx. Xxxxxxxxx pozorování xx měla xxx xxxxxxxxx denně s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, např. xxxxx xxxx xxxxxxx xx lednice x xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx mrtvá x xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxx moribundní. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx zachytil xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx toxických xxxxxx, x xxxx xx xxxxxx minimalizace ztrát x důsledku nemocí, xxxxxxxx nebo kanibalismu.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx, x xxxx případy xxxxxxx. Zaznamenává se xxxx xxxxxxxx x xxxxxx toxických příznaků xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx individuálně u xxxxx zvířat xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx tomto xxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx měření xxxxxxxx xxxxxxx (a vody xxx, kde xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x pitné xxxx) xxxxx během xxxxxxx 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxx změny tělesné xxxx xxxxxxx nutnost xxxx xxxxxxxxx sledování.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. obsah xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx erythrocytů, celkový xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx za xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx x poté x přibližně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, a xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx shromážděných od xxxxx nehlodavců xxxx. xx 10 xxxxxxx xx pohlaví z xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx od xxxxxxxx potkanů. Xxxxx xx měl xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx od xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx vyšetření xxxxxx naznačí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a x xxxxxxx. Xxxxx tato xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx naznačí nutnost, xxxxxxx xx x x skupiny x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx možno xx xxxxxxxx xxxxxx a xx xxxxxxxx intervalech xxxx hematologické xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, xxxx xx směsném xxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxx x jednotlivých xxxxxx,
- proteiny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx- kvantitativně).
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
V xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx biochemická xxxxxx xx všech nehlodavců x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Z xxxxxx xxxxxx je připravena xxxxxx x jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkoušky:
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- koncentrace xxxxxxxx,
- xxxxx xx funkci xxxxx (xxxx. aktivita xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), glutamát xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), gamma xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx,
- testy na xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx močoviny x xxxx.
1) nyní xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx známá xxxx xxxxxx xxxxxxxx aminotransferáza
1.2.3.5 Xxxxx
Kompletní xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, která xxxxxxx xxxxx pokusu xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx stavu. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx obraz xxxxxx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxx xxxxxx nebo léze, xxxx léze, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx. Xxxx xx xxx provedeno xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Všechny xxxxxx a xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. To xx xxxxxxx týká xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx:xxxxx3) (xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, kory xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, štítné xxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, trachey x plic, xxxxx, xxxxx, slinných xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, žaludku, xxxxxxxxxxxxx, jejuna, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, kůže, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx nervu, míchy (xxxxx, hrudní x xxxxxxx), xxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, a xxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální cestou xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx speciálních xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, má xxx xxxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx včetně xxxx, xxxxxx x hrtanu.
Xxxx-xx provedena xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
3) xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx xxxxxxx x xx skupinu x xxxxxxxx a ze xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx změny, xxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx mikroskopicky. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
(x) mikroskopické xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x tkání x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx lézí xxxxxxxxxx:
1. x všech xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx byla utracena xxxxx studie,
2. x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx abnormity xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(c) tam, xxx xxxxxxxx svědčí xxx xxxxxxxx zkrácení xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx vyvolání xxxxxx, které xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, skupina s xxxxxxxx xxxxx dávkou xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx x incidenci lézí, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx. xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxx xxx správné xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx pozorovaných x zvířat s xxxxxxxxxxx látkou.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx zvířat vykazujících xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x testu
Xxxxxx o testu xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx testu: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx a způsobu xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Údaje x xxxxxxxx: xx xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx zahrnovat:
(x) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx)
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx
(e) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx zóně
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xx-xx to xxxxxxxxxx)
- dávkové xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) a xxxxxxxxxxx
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a dávky
- neúčinná (dávková) xxxxxx
- doba xxxxx xxxxx studie xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxx
- xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx
- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x jeho xxxxx xxxxx
- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x tělesné xxxxxxxxx
- oftalmologické xxxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxx xxxx)
- xxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx xxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx
- interpretace xxxxxxxx.
B.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X NEHLODAVCI
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxx koncentracích xxxxxxxx xxxxxxxx březích xxxxxxxxx xxxxxx, jedna xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx dochází x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx před xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx i x xxxxxxx xx použita x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx embryo- x xxxxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx věku x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx laboratorních xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx před započetím xxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxxxxx samci x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx náhodně xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx přirozenou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Aplikace xxxxxx xxxxx po xxxxxxxxxx x pokračuje xxxxx xxxxxx organogeneze. Xxx xxxx termínem xxxx xxxxx vyjmuty xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx sledování xxxxxxxxxx skeletu a xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx zpomaleného xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Běžně xxxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxx, xxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x králík. Xx xxxxx používat xxxxxxxxx xxxxxxxx kmeny. Xxxxxxxxx xxxx xx neměl xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxx by xxx x něj xxxxx reakce xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx použít xxxxx 20 březích potkanů, xxxx xxxx xxxxxx xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx studované xxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxx x mláďat.
1.2.2.3 Xxxxx
Xx třeba xxxxxx aspoň xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, že je xxxxxxxxx xxxxx podána xx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx bylo podáno xxxxxxx vehikulum. Xx xxxxx také znát xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxx xx xxxxxxxxxxx schopnosti. Xx xxxxxxx x xxxxxxxxx(xx) skupině(ách) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx x testovací skupině x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxxxx chemické xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxx testované xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx měla x xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx, xxx xx xx více xxx 10 % úmrtí. Xxxxx xxxxxx dávek xx xxxxxx vyvolat xxxxxxxxx účinky. Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx nízkou x xxxxxxx dávkou.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx, že xxxxx x xxxxxx toxicitou xxx dávce nejméně 1000 mg.kg-1 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxxx xxx teratogenicity, xxxx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxx xx xxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxx). Doba xxxxxxxx xx měla xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxx období xx xxxxx xxxxxxxxx 6. xx 15. xxx u xxxxxxx x xxxx, 6. xx 14. den x xxxxxx x 6. až 18. xxx u králíka. X xxxxxxx, xx xx xx nultý xxx považován den, xxx bylo xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx umělá xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx x předchozím xxxxxx xxxxx den. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx jeden den xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx za účelem xxxxxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx ve xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx xxxxxx testu. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx na váhu xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxxxx x rychlému xxxxxxx hmotnosti xxxxx xxxxxxxx, zvířata mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx upravována xxxxx xxxxxxxxxx vážení. Xxxxxxx známky xxxxxxxx xx xxxxx ihned xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx makroskopicky xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxx pokračovat x xx ukončení xxxxxxxx xxxxx xx do xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx výsledků po xxxxxxxxxx xxxxxx. Pozorování xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, očí x xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, autonomního x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxx spotřebu xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
Xxxxx xxxxx x uhynutí během xxxx xx xxxxx xxxxxx, xx třeba x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx mohly xxx vliv na xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x její xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Obvykle xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxx. U xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx stanovit xxxxx xxxxxxx tělísek. Je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x zaznamenat xxxx jednotlivých zárodků x xxxxxxxxx průměr. Xx xxxxxxx xx xxxxx jednotlivě xxxxx xxxxxxxx každý xxxxxxx. X xxxxxxx, myší x křečků je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx u zhruba xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx vrhu x x zbytku xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx tkání. X xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx formě xxxxxxx, udávající xxx xxxxxx testovanou skupinu xxxxx zvířat xx xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. ZPRÁVA
3.1. Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx x testu xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xxxx xxxxxxx) a xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxx,
- dávka xxx xxxxxx (xxxxx xx xxxx možno xxxxxxxx),
- dobu xxxxx během studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx konce xxxxx,
- xxxxx x tělesné xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx,
- délka březosti x údaje o xxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxx (živé/mrtvé, xxxxxxx, defekty xxxxxxx x měkkých tkání),
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx/xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.32. XXXX XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxx obvykle sedm xxx v týdnu, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx vývinu xxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nejméně xxx xxx xxxx xxxxxxxxx testu. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do kontrolních x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx možno xxxxxx i xxxxx xxxxx (xxxxxxxx i xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx x xxxxx chovaných xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx ve xxxx zvířat xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx vlastní xxxxxx xxxxxxxxx test subchronické xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx a kmen x obou xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx xxxxx nejméně 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Samice xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, počty xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx koncem xxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx expozic
Xxxxx se xxx xxxxxxxxx tři dávkové xxxxxx xxxxx souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx přírůstků (méně xxx 10 %), xxx podstatnějších změn xxxxxxxx xxxx dožití xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx interferovat x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxx života xxxxxxx nebo vyvolat xxxxxxxx xxxxxx toxicity. Xxxxxx xx neměla xxx xxxxx xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx xxxxx stanovit xx středním xxxxx xxxx vysokou a xxxxxx dávkou.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx testy x xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx denně. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxx vodě nebo xxxxxxxxx do xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx k xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx je identická x xxxxxx ohledu x exponovanou skupinou, xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx.
Xx zvláštních xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxx použije-li xx pro orální xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jehož xxxxxxxxxx aktivita není xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Tři xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x inhalační. Xxxxx xxxxxxx podání xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx charakteristikách xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx studie
Xxx, kde xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x je-li požití xxxxx x cest, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, protože xxxxxxxxx xxx dnů x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx naopak xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x období bez xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx považováno xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Xxxxxxxx studie
Xxxxxxxx xxxxx na xxxx může být xxxxxxx jako simulace xxxxxx cesty vstupu x xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Protože xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx zde uvedeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx podání. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx platnou alternativou xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané lidské xxxxxxxx, takže xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx pět xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx v prostředí, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx x xxxxx (kontinuální xxxxxxxx), x xxxxxxxxx jednou xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx i pro xxxxxxx expozičního xxxx. X obou xxxxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx koncentracím xxxxxxxxx xxxxx. Hlavní xxxxxx xxxx přerušovanou x xxxxxx expozicí xx v xxx, xx x xxxxx xx zvíře 17 - 18 xxxxx xx ústup účinků xxxxx xxxxxxxx s xxxxx xxxxxx obdobím xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx kontinuální xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx a xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, je xxxxx vzít v xxxxx xxxxxx technické xxxxxx. Například, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice pro xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx pití x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx aerosolu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx par x technik monitorování.
Xxxxxxxxx komory
Xxxxxxx xx exponují v xxxxxxxxxxx komorách, jejichž xxxxxxxxxx zaručuje xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní a xxxxxxxxx komory by xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Uvnitř xxxxxx xx obvykle xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Komory xx xxxx minimalizovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx objem xxxxxx neměl xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Měření nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) Xxxxxx xxxxxxx: rychlost xxxxxxx xxxxxxx komorou xx xxxx xxx xxxxxxx kontrolována xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxx: během xxxxx expozice by xxxxxxxxxxx testované látky xxxxxx xxxxxxx více xxx ± 15 % střední xxxxxxx.
(x) Teplota a xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °X x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx k rozptýlení xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx komory. Oba xxxxxxxxx xx xxxx xxx kontrolovány průběžně.
(x) Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx stanovena distribuce xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx částice xx xxxx být x respirabilní velikosti xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx atmosféry xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měl xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx distribuci xxxxxx, kterým xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému suspendovanému xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Analýza xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxxxx stabilitu xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx možno xxxxxxxx stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Trvání xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx normální xxxx xxxxxx xxxxxxx použitého xxx xxxx. Xxxx xx měl xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx. Nicméně, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx. s xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 xxxxxx xxx xxxx x křečky x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx takové xxxxxxxxxxx xxxxxx xx přijatelné, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx skupina s xxxxxxx xxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx to nutné xxxx x xxxxxxxx xxxxxx testu, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xxxxx negativní xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx údajů (xxxxxxxxx, kanibalismem xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x žádné xxxxxxx xxxxx xxx 10 % a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx x xxxx x křečků a x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx a xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx nervového systému, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Pravidelná xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, xxx se zabránilo xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x mortalita by xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx vývoji xxxxxx: doba xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, vzhled x progrese každého xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenává.
Xx xxxxx provádět xxxxxx spotřeby xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx a xxx xxxxxxxxx ve tříměsíčních xxxxxxxxxxx, ledaže xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost jiné xxxxxxxxx sledování.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx jednou týdně xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx testu x xxxxx xxxxxx xx čtyři týdny xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx vyšetření
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxx pozorování xxxxxx x klecích xxxxxx o zhoršeném xxxxxxxxxx stavu xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx vyšetřit diferenciální xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xx 12 měsíců, xx 18 xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx provede xxxxxx xxxxx ze xxxxx xxxxxx. Diferenciál xxxxxx krvinek xx xxxxxxx xx vzorcích xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxx xxxxxxx, diferenciál xx xxxxxxx x x skupiny x xxxxxx nejblíže nižší, xxx je vysoká xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx
Kompletní xxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx x xxxxx zvířat, xxxxxx xxxx, xxxxx zemřela xxxxx xxxxxx xxxx xxxx utracena, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx ve vhodných xxxxxxx pro možné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, mozečkové xxxx, kory xxxxxxx), xxxxxxxx mozkový, štítná xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, pankreas, xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx orgány, xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, svalovina xxxxxx, periferní xxxx, xxxxxxx x kostní xxxxx, stehenní xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx úrovních (xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x bederní) x xxx.
Naplnění plic x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx studiích xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx studiích xx xxx xxx xxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx nosní xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx histopatologie xx xxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, která xxxxxxx nebo byla xxxxxxxx během xxxxx, x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x s nevyšší xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x léze, xxxxx xxxx podezřelé xxxx xxxxxx, xx vyšetří xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
(x) Xx-xx xxxxxxxx rozdíl v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx skupinou x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, histopatologické xxxxxxxxx se provede x daném xxxxxx xx xxxxx i x xxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xx-xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou podstatně xxxxx xxx x xxxxxxx, xxxx by xxx kompletně xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx nižší dávkou.
(x) Xx-xx ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků, které xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxx nižší xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku testu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx zjištěné xxxxx xxxxx, xxxx jejich xxxxxxxxx a počet xxxxxx x xxxxxx xxx utracení. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx statistické xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx o xxxxx bude, xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, dieta,
- podmínky xxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vycházejícího z xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, stability xxxxxxxxxxx xxxx velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (xxxx. směrodatná xxxxxxxx) a měly xx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx zařízení,
(x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx koncentrace (xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxx do inhalační xxxxxxxxx xxxxxx objemem xxxxxxx),
(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx použito,
(x) skutečné xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně,
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx xx relevantní),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, dávky x xxxx tumoru,
- xxxx úmrtí během xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xx konce,
- xxxxxx toxických účinků xxxxx pohlaví x xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxx,
- doba, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,
- data x spotřebě xxxxxxx x tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx,
- nálezy xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx metod,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.33. XXXXXXXXXXX XXXX XXXXXXXXX TOXICITY/KARCINOGENITY
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx testu chronické xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx dlouhodobé xxxxxxxx.
Xxx tento účel xx xxxx karcinogenity xxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx použitá xxx xxxx satelitní xxxxxxx může xxx xxxxx xxx nejvyšší xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jak xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx karcinogenní xxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx sedm dní x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx na xxxxxxx, xx xxxxx část xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx tumorů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxx xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolních a xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Preferovaným xxxxxx xx potkan. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx studií xx xxxxx xxxxxx x další xxxxx (xxxxxxxx i xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zvířat. Expozice xx xxxx být xxxxxxxx xx nejdříve xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx začátku xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx váze xxxxxx xxxxx xxxx než ± 20 % xx xxxxxxx. V xxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxx druh x xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro hlodavce xx xxxxxxx nejnémě 100 xxxxxx (50 xxxxx a 50 xxxxx) na každou xxxxxx dávky x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx plánováno xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx zvýší x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou takto xxxxxxxx xxxx koncem xxxxxx.
Xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx (skupiny) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxx jsou xxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx 20 zvířat xxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx satelitní skupina xxxxxxx by xxxx xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx pohlaví.
1.2.3 Dávkové xxxxxx x frekvence xxxxxxx
Pro xxxx xxxxxxxxxxxxx se zvolí xxxxxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxx kromě xxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx podstatnějších změn xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxx jinými xxxxxx xxx xxxxxx. Nejnižší xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Střední xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx dávkových xxxxxx xx xx měly xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxx satelitní xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxx xxxxxxx. Vysoká dávka xxx exponovaná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx zřetelné xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx vodě xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx by xxx stále k xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina je xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx s exponovanou xxxxxxxx, vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxxxxxxx případech, xxxx xxxx xxxxxxxxx studie x aerosoly xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupina, která xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.5.1 Orální xxxxxx
Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a je-li xxxxxx jedna x xxxx, jimiž xxxx xxx exponován xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx aplikaci, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x tobolce.
Xxxxxxx xx xx měla xxxxx podávat xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx dávkování xxx xxx v xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx toxicity nebo xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx ovlivnit xxxxxxxx x xxxxxxxx hodnocení. Xxxxxxx, především x xxxxxxx na praktické xxxxxxx, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx xx xxxxxxxxxx xx přijatelné.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxx modelový xxxxxx vyvolání xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Inhalační xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, jsou xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), nebo x xxxxxxxxxx xx xxxxxx expozici x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx xx xxxx xxx x týdnu (kontinuální xxxxxxxx), x přibližně xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx exponována fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x stálou xxxxxxxx xx v xxx, že x xxxxx xx zvíře 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx expozice x ještě xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x na xxxxxx xxxxxxxx, která má xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx třeba vzít x úvahu určité xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx kontinuální expozice xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx nutností xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx určité xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxx x inhalačních komorách, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx proud xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx přísun xxxxxxx x rovnoměrná xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x expoziční xxxxxx xx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, tak xxx xxxx expoziční xxxxxxxx srovnatelné ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované látce. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x tím xx brání xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Komory xx měly xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx zvířat xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx monitorování xxxxxxxx:
(x) xxxxxx vzduchu: xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx nejlépe xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísat xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,
(x) teplota x xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °C x vlhkost x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx parametry by xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) měření xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx komor x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx aerosolů. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx měly xxx v respirabilní xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x dýchací xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xx zvíře exponováno, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx respirabilní. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x poté xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx studie
Trvání xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx část xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx x 18 měsících x xxxx x křečků x 24 xxxxxxxx x potkanů. Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx resp. x xxxxxx spontánním xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxx by xxxx xxx 24 xxxxxx xxx myši a xxxxxx x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x nejnižší xxxxx nebo x xxxxxxxxx xxxxxxx klesne xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx sexuální xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, kde xxxxx xxxxxxxxx jen skupina x vysokou xxxxxx xx xxxxxxxx toxických xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxx celého testu, xxxxx ostatní xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx projevy, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx bylo xxxxx xxxxx negativní xxxxxxxx xxxxx, nesmí xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (autolýzou, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 10 % x xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x potkanů.
Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx kontrolních xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx být x xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx mělo xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, aby umožnilo xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx látce, xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx stárnutí.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxx, očí x xxxxxxx, jakož i xxxxxxxxx, oběhového, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
X xxxxxx xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx (skupin) se xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx klinické xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ze studie xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x očních xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx tumorů: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, vzhled x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx hmatného xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx provádět měření xxxxxxxx potravy (a xxxx xxx, kde xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v pitné xxxx) týdně během xxxxxxx 13 týdnů x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx zdravotní xxxx nebo xxxxx xxxxxxx váhy xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Tělesné hmotnosti xx zaznamenávají individuálně x všech zvířat xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 týdnů xxxxxx xxxxx x xxxxx jednou xx xxxxx xxxxx xx xxxxx období.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Hematologie
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek, xxxxxxxx destiček xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx tři xxxxxx, šest xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx xx vzorcích xxxx xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx skupiny. Xxx xxx xx to xxxxx, vzorky xx xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx stavu xxxxxx xxxxx studia, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx obraz bílých xxxxxxx.
Diferenciál xx xxxxx xxxxxx krvinek xx provede xx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx data nebo xxxxx x vyšetření xxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x u xxxxxxx s dávkou xxxxxxxx nižší, xxx xx xxxxxx dávka.
1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx sbírají pro xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xx stejných xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx buď xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx podle xxxxx x pohlaví:
- xxxxxx xxxx, xxxxx x hustota x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, glukóza, xxxxxxxxx, xxxxxxx krvácení (semi-kvantitativně),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X přibližně xxxxxxxxxxxxxx intervalech x xx závěr xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx biochemická xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx nehlodavců xx xxxxx xxxx xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxxx. Z xxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxx:
- xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- testy xx xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxx bázické xxxxxxxxx, xxxxxxxx glutamát xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), glutamát xxxxxx transaminázy2), gamma xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx. krevní xxxxxxx xx xxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx ledvin, xxxx. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx sérová xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx známá xxxx xxxxxx xxxxxxxx aminotransferáza
1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx pitva xx xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxx xxxx, která zemřela xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx krve xxxxx xxxxxx xxx diferenciální xxxxx xxxxxx krvinek. Xxxxxxx xxxxxxxxx léze, xxxxxx xxxx léze, xxxx xxxx, xxxxx xx mohly xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx. Mělo xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx měly být xxxxxxxx pro histopatologické xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx: xxxxx3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, kory xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx žlázy x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx a xxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), jícnu, xxxxxxx, dvanácterníku, jejuna, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, konečníku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), xxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx kloubů, x xxx. Naplnění plic x xxxxxxxx měchýře xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx ke konzervaci xxxxxx tkání; naplnění xxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxx. Ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx studie, má xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx včetně xxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Byla-li xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx získané x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx patologovi xxxxxxxx xxxxxxx.
3) Xxxx xxxxxx z 10 xxxxxx xx xxxxxxx x xx skupinu xxxxxxxx mají být xxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx vyšetření se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx x satelitní xxxxxxx xxxxxxxxxx nevyšší dávce xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, vyšetří xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx všech xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx věnované xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx karcinogenity:
(x) úplná xxxxxxxxxxxxxx xx provede v xxxxxxxx x tkáních xxxxx xxxxxx, která xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx testu x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx kontrolní x x xxxxxxx xxxxxx;
(b) všechny xxxxxx xxxxxxxxx okem x léze, které xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx;
(x) je-li xxxxxxxx rozdíl v xxxxxxxxx neoplastických xxxx xxxx xxxxxxxx s xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx xxxxxxxx, histopatologické xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx orgánu xx tkáni x x xxxxxxx skupinách;
(x) xx-xx přežití xx skupině s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx u xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx dávkou;
(x) xx-xx ve xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx o xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nižší xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx každou testovanou xxxxxxx počet xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx zjištěné xxxxx xxxxx, xxxx jejich xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx obsahovat následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx testu: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx konstrukce, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro měření xxxxxxx, vlhkosti, a xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx tabulky včetně xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) by xxxx xxxxxxxxx:
(x) rychlost xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(x) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx aparatury xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
(x) povahu vehikula, xx-xx použito,
(x) xxxxxxxx koncentrace v xxxxxxx xxxx,
(f) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) a xxxxxxxxxxx,
- xxxx incidence xxxxxx podle xxxxxxx, xxxxx x xxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxx během studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx až do xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- výskyt xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx ,
- xxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxx,
- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx další xxxxx,
- xxxx x spotřebě xxxxxxx x xxxxxxx hmotnosti,
- oftalmologické xxxxxx,
- použité xxxxxxxxxxxxx xxxxx x výsledky,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x všechny xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxx xxxx),
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.34. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku v xxxx xxxxx x xxxxxxx x průběhu xxxxxxx xxxxxxx spermatogenního xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x myší x 70 dnů x potkanů), xxx xxx zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx na xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx alespoň xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxx. Zvířata xxxx xxxx xxxxxxxxxx. V xxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx obou pohlaví, x době gravidity x kojení xxxxx xxxxxxx.
Pro inhalační xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxx xxxxxx - kontrolní x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx zahájením xxxxxx x xxxx podmínkách xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx látku xxxxxxx x xxxxxxx xxxx v xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx také xxxxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx testu. Pokud xx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx účinky. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 dní x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxx
Xxxx xx přednost xxxxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxx x/xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx ověřena xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx pohlaví. Zvířat x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x kontrolní, xxxx být xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx aplikace.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Cílem je xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx na plodnost, xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx chování x X xxxxxxxx, kojení, xxxx x vývoj xxxxxxxxx generace F1 xx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx porodem xx xxxxxxx samice xxxxxxxx xx zvláštních xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xx xxx poskytnut xxxxxxxx xxx vytvoření xxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx exponované xxxxxxx a jedna xxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vehikulum, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx použitém xxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx kontrolní xxxxxxx, spárované co xx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx v xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx xx xxxx xxxxxxx jejími xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx uhynutí x xxxxxxxxxx populaci. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx minimální xxxxxxx xxxxxx, které xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx u xxxxxx xxx u xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx sondou xxxx x xxxxxxxxx xx dávka xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx podle xxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx samic dávky xxxxx xxx případně xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. xxx od začátku xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx ani xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx žádným xxxxxxxx xxxxxxx xx reprodukci, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx x matek xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx nepříznivé xxxxxx xx plodnost, není xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx postupu
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxx xx věku xxxx xx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx týdnů xxxx xxxxxxx připouštění (8 týdnů xxx xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, nebo xx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x mohou xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx dalších xxxx x jsou xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) začne xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx před obdobím xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxx xx xx odstavení F1 xxxxxxxx. Xx přípustná xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx znalostí o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx a/nebo xxxxxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx xxx připouštění
Xx možno xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (jedna xxxxxx x xxxxx samec) xxxxx 1 : 2 (xxxxx samec xx xxxxx xxxxxxx).
X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx kleci xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxx xxxx xxxx samice xxxxxxxxx xx přítomnost spermatu xxxx xxxxxxxxx zátky. Xxx 0 těhotenství xx xxxxxxxxx jako xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx, u kterých xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx vyšetřit x xxxxx zjistit xxxxx xxxxxxxxxxx páru. Xx xx možné xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx k xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx vrhů
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x pečovat x své potomstvo xx okamžiku xxxxxxxxx xxx standardizace xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. a 4. xxxx po xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx upraví vyřazením xxxxxxxxxxxx jedinců tak, xxx se dosáhlo xxxxx 4 xxxxx x 4 samic xx xxx; xxxxx xx xxxx proveditelné, xx možno xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 xxxxx x 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx než 8 xxxxx standardizovat.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx xxx pozorováno xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Významné xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x všechny příznaky xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxx xxx xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Během gravidity xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx potravy xxxxx. Xx porodu a x xxxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxxx xxxxxxx (x vody, xxxxx se xxxxx xxxxxx x pitné xxxx) xx xxxxxx xxx, kdy je xxxxxxxxx xxxxxx. Rodičovská X zvířata se xxxx první xxx xxxxxxxx a pak xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx dospělé xxxxx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx od xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx vrh xx xx xxxxxxxx po xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx x pohlaví mláďat, xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx hrubých anomálií.
Xxxxx mláďata x xxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx a xxxx xxxx xx xxxxx xxxx xx porodu, xx 4. x 7. dnu x xxxxx xxxxx xxxxx xx ukončení studie, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx individuálně. Xxxxxxxx xx x zaznamenávají xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Patologie
1.3.5.1 Xxxxx
Xx utracení xxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx P xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pozorností x xxxxxxx reprodukčního xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxx, děložní xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx všech zvířat xxxxxxxx X xx xxxxxxxx xxx mikroskopické xxxxxxxxx. V xxxxxxx, xx tyto xxxxxx xxxxxx xxxxxxx vyšetřeny x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávku x xxxx x xxxxxx, xxxxx zemřela x xxxxxxx pokusu.
Xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x těchto xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx x x X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx případech se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxx bylo xxxxxxx, reprodukční xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx mají xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, počet xxxxxxxxx xxxxx, typ xxxx x xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxx změny.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx obecně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxxxxxx by xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx údaje:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx zvířat,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx dávce x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx plodností, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx pokusu,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx,
- toxické x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, potomstvo x xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, kdy byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx hmotnost xxxxxx X xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx popis všech xxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx je xx možné,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.35. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx několika xxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx (X) xxxxxxxx dostávají xxxxxxxxxx látku x xxxx xxxxx a xxxxxxx x průběhu xxxxxxx spermatogenního xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x myší x 70 xxx u xxxxxxx), aby byl xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx látku po xxxx alespoň dvou xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na estrus.
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx se testovaná xxxxx podává xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx, x xxxx xxxxxxxxx a xxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X1 x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, v xxxx xxxxxx x až xx xxxx xxxxxxxxx X2 generace.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx metodu modifikovat.
1.2 Xxxxx testovací xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx dvou xxxxxx - xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx (X) jsou xxxxxxx nejméně 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx podávat x xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx možné. Xxxxxxx xxxxxxx látku dostávají xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx celého xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, musí xxx x xxxx xxxxx, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 dní x týdnu.
1.2.2 Pokusná xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx X xxxxxxx, xx té doby xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx s nízkou xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, kmene, xxxxxxx a váhy xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx ověřena x xxxx pohlaví. Xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx zvířat, aby xxxx xxxxxxxx xxx 20 březích samic x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxxxx. Cílem xx získat xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, a tím xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x mateřské xxxxxxx, xxxxxx, xxxx a xxxxx xxxxxxxxx generace X1 xx početí xx dospělosti, x xxxxx jejich xxxxxxxxx xxxxxxxx X2 xx xx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx se těhotné xxxxxx přemístí do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx alespoň xxx xxxxxxxxxx skupiny a xxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx používá xxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx, pak zvířata xxxxxxxxx skupiny xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx objemu. Pokud xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x utilizaci xxxxxxx, je třeba xxxxxx použití xxxxx xxxxxxxxx skupiny, spárované xx xx výživy.
Xxxxxxxxx látka v xxxxxxxx koncentraci xx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx látky x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, vyvolávat xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx populaci. Xxxxxxx dávka(y) xx xxxx(x) vyvolat xxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xxxxx xx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látce, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolávat xxxxx pozorovatelné nepříznivé xxxxxx, ani x xxxxxx ani x xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx se dávka xxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx hmotnosti xxxxxxx x přizpůsobuje xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx hmotnosti. V xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx tělesné xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.6 Limitní xxxx
V xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx žádným xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, nemusí xx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx předběžná studie xxxxx, xx vysoká xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx toxicitu, xxxx xxxxxxxxxx účinky na xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx studie xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Denní xxxxxxxx xxxxxx rodičovské xxxxxxxx X xxxxx xx xxxx xxxx až xxxxxx xxxxx, aspoň xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx použiti xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx někdy před xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx samicím rodičovské xxxxxxxx P začne xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x pokračuje xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxx připouštění. Denní xxxxxxxx pokračuje xxx xx xxxx xxx xxxxx období xxxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx X1 xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx x vlastnostech xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. x xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx po xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2 Postup xxx xxxxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx a jeden xxxxx) xxxxx 1 : 2 (jeden xxxxx xx dvěma xxxxxxx).
X případě 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx s xxxx xxxxxx xx společné xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 týdnů. Xxxxx xxxx jsou samice xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx vaginální xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx den xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx X1 xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 11 xxxxx x xxxx x 13 xxxxx x xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx generace X1 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx z xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxxx, x kterých xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx důvod xxxxxxxxxxx xxxx. To xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x oplodnění x xxxxxxxxxxx xxxxxxx obou xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x spermatogenezy.
1.3.3 Xxxxxxxx vrhů
Zvířatům xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxx porodit xxxxxxxx x xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx odstavení bez xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vrhů. Xxxxx se velikost xxxx xxxxxxxxxxxxx, je xxxxx dodržet následující xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx porodu xx xxxxxxxx všech vrhů xxxxxx vyřazením xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx dosáhlo počtu 4 samců x 4 samic xx xxx; xxxxx to xxxx xxxxxxxxxxxx, je xxxxx standardizovat xx xxxx počty, xxxx. 5 samců x 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx standardizovat. Xxxxxxxxxxxxx xxxx generace X2 xx provede obdobně.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé xxxxx xx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Významné xxxxx xxxxxxx, příznaky xxxxxxxxx xxxx prodlouženého porodu x všechny příznaky xxxxxxxx, včetně mortality, xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx jak před, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx kontrolovat xxxxxx xxxxxxx denně. Xx xxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx stejný xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Rodičovská X a F1 xxxxxxx xx xxxx xxxxx den aplikace x xxx týdně. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx dne 0 těhotenství. Každý xxx xx co xxxxxxxx xx porodu xxxxxxx x stanoví xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx anomálií.
Xxxxx xxxxxxx x mláďata xxxxxxxx ve čtvrtém xxx xx uchovají xxx xxxxxxxxx xx xxxxx defekty. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx x celé xxxx xx zváží xxxx xx porodu, ve 4. a 7. xxx x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx zvážena xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x fyzickém xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Xxxxx
Všechna xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X a F1 xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx nutné je xxxx uchovávat pro xxxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx F1 xxxxxxxxx xxx připouštění x xxxxxxx xxxxxxx generace X2 xx xxxxxx xx xxxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxx xxxxx xx všechna xxxxxxxxxx xxxxxxx X a X1 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx patologické xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mláďata xxxxxxx xxxx umírající xx xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Vaječníky, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxx X x X1 xx uchovají xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X případě, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx vyšetřeny x xxxxxx mnohadávkových xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x všech X x X1 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x skupiny dostávající xxxxxxxx dávku, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, a dále x xxxxxx, která xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx vyšetří x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupin. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx makroskopicky postižené. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xx mají xxx xxxxxxxx mikroskopické xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx pro každou xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, počet těhotných xxxxx, xxx xxxx x procento zvířat xxxxxxxxx tyto xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx by xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx následující údaje:
- druh/kmen xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx na xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxx,
- tabulka xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, průměrnou xxxxxxxx jednotlivých mláďat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx před utracením,
- toxické x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxx xxxxxxxx zvířat X x F1 xxxxxxxx, vybraných pro xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.36. TOXIKOKINETIKA
1. METODIKA
1.1 Xxxxxxx testovací metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vhodnou xxxxxx. X závislosti xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x xxxxxxx stanovené xxxx, jedné nebo xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Látka resp. xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx podle xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx x "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxx" xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Jestliže xx xxxxxxx značení, xxxxxx xx xxx, xxx poskytlo xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx sloučeniny x xxxxxxxxx.
1.2 Popis testovací xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx testováním. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxxxx xx xxxxxx. Pro xxxxxx speciálních xxxxxx xx xxxx použít xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx zvířat.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx studie xx xxxxxxxxx na xxxxxx xx více xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx se xxxxxxxx xx druzích xxxxxxxxx xxxx uvažovaných xxx užití v xxxxxx toxikologických studiích xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx. Jestliže jsou xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxx variabilita xxxxxxxxx xxxxx xxx ± 20 % průměrné xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxx a vylučování xx xxxxx xxxxxxx 4 xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx dávku. Xxx xxxxxxxxx není xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx podmínek xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx obou xxxxxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxx odpovědi x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxx xxxxxxxx) je možné xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxx distribuce, pak xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxx x xxxxx xxx xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx časovém xxxx, xxx xxxxx časových xxxx, x xxxxx xxxx xxxxxxxxx prováděno.
Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx úměrná xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxx větší xxxxx xxxxx x sledovaných xxxxxxxx xxxxxxxxx, pak xxxxxxxx skupiny xxxxxx xx xxxx xxxxxxx x počtem časových xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx nesmí xxx xxxx než 2 xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxx být xxxxxxxxxx xx to, aby xxx xxxxx xxxx. xxxx metabolity xxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky xx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx x deplece.
1.2.2.3 Xxxxx
V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx použity xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx testované xxxxx. Xxxx by to xxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx dávka, xx xxxxx xxxxx být xxxxxxxx změny x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolává xxxxxxx xxxxxx.
X případě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxx dostatečné xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xx určitých xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx x xxxxxxxx vysoké xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx studie xx xxxx xxx prováděny xxxxxxx způsobem aplikace x je-li to xxxxxx i se xxxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx jsou používány x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x potravě, xxxxxxxxxx xx xxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxx stanovení relativního xxxxxxxxxxx při jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx. Navíc xxxxxx po intravenózní xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx získány xxxxxxxx xxxxxxxxx x distribuci xxxxx v organismu.
Xxxxxx by xx xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx měla xxx xxxxxx věnována rozdílům xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx sondou xxxx x xxxxxxx, x potřebě xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx-xx testovaná látka xxxxxxxx x potravě.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx denně x xxxxxxxx xxxxxxxx x další xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxx x jejich xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
Po xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
1.3.1 Absorpce
Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx podávané xxxxx xxxxx být xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx1), a xx xxxx.:
- xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. v xxxx, žluči, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx jejích xxxxxx x karkasu,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. studie akutní xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx referenční xxxxxxxx,
- porovnání xxxxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ledvinami xxxx testovanou a xxxxxxxxx x případně xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx plochy pod xxxxxxx závislosti koncentrací xxxxxxxxx látky x xx. jejích xxxxxxxxxx x plazmě xx xxxx a porovnání x daty xxxxxxxxx x referenční xxxxxxx.
1) V xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx, xx které xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxxxxx způsobem, který xxxxxxxxx úplnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
X xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx 2 xxxxxxxx, x xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx jeden xx xxx:
- xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx získat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxxxx informace xxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrací x množství xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx zvířat x xxxxxxx časových xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxxxx
Při xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx moč, stolice, xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx xx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx po podání xxxxx, x xx xxx xx vyloučení 95 % x xxxxxxxx množství xxxx xxxxxxx 7 xxx xx počátku xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx vylučování xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx x době xxxxxxx testovaných zvířat.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxx xxxxxx tam, kde xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx toxikologických xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx může xxx prospěšné xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx studií xxxx. xxxxxxx účinků xxxxx xx enzymy xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, sledováním xxxxxxx xxxxxxxxxxx neproteinových sloučenin xxxxxxxxxxxx - XX xxxxxxx a xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxxxx xxxxx xx podle xxxx xxxxxxxxx studie xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, xxxxx možno doplněných xxxxxxxxx znázorněním.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu xx xxxxxx průměry x xxxxxxxxxxxxxxx variability xx vztahu k xxxx, xxxxx, tkáni x xxxxxxx (xxxxx xx xx xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x rychlost xxxxxxxxxx se stanoví xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx studií xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x navrženy xxxxxxxxxxx xxxxx studované látky.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx by zpráva x xxxxx měla xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, životní xxxxxxxx, xxxxxx,
- charakteristika xxxxxxxxx materiálu, xxxxxxxx xxx použit,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx podání,
- xxxxxx(x) podání x xxxxxxx použitá xxxxxxxx,
- toxické a x ostatní pozorované xxxxxx,
- metody xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, dávky, režimu, xxxx, tkání a xxxxxx,
- uvedení xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xx xxxx,
- xxxxxx užité pro xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x biologickém xxxxxxxxx,
- metody xxxxx xxx biochemická xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx pro metabolismus,
- diskusi výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX - XXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxx vzít x úvahu schopnost xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx typ xxxxxxxxxxxxx, xxxxx nemůže xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxxxxx zpožděné projevy xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx testovány xxxxx xxxxxxx.
Vyšetřovací xxxxx xx vitro mohou xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Negativní xxxxx x xx vitro xxxxxx xxxx xxxx xxxxx považovat xx xxxxx, xx xxxxx xxxx neurotoxická.
1.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx sloučeniny xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, thioestery xxxx anhydridy xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx amidothiofosforečných, nebo xxxx látky, které xxxxx způsobit xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
Pozdní xxxxxxxxxxxxx xx syndrom projevující xx ataxií, distální xxxxxxxxxx, změnami x xxxx a periferním xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x nervové xxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Referenční xxxxx může být xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, že x xxxxxxxxxxxxx podmínkách xx xxxxxx testovaných xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, XXXXXX 201-103-5, xxxxxxxx xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx kyseliny fosforečné, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (TOCP).
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx 21 dnů xxxxxxxx, zaznamenává se xxxxxxxxxx chování, xxxxxx x xxxxxx. Biochemické xxxxxxxxx, xxxxxxx inhibice XXX, se xxxxxxx x xxxxxx náhodně xxxxxxxxx x každé xxxxxxx, xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxx xxxxx. 21 dnů po xxxxxx látky jsou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xx provedeno xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.5.1 Xxxxxxxx
Xxxxx zdravé xxxxxxx xxxxxxx bez interferujících xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx léčby x x normální xxxxx xx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejméně 5 dní xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx volný xxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx chůze.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx orálně xxxxxx, xxxxxxxxxxxx tobolkami xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xx xxxxxxx vehikulu, xxxx je např. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx velké xxxxx xxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx dostatečně xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx kura xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) xx věku 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxx velikosti x chovají se xx podmínek, které xxxxxxxx volný xxxxx.
1.6.1.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vehikulem, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. S výjimkou xxxxxxxx testované látky xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými.
X xxxxx skupině má xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx, xxx xxxxx xxxx z xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx xxxx x druhý xxx xx xxxxxx) x xxxx xxxxxxx 21denní xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx může xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxx. Má xxx xxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx látka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx jsou určeny xxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxxxx laboratoři xxxxx xxxxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxx testu (xxxx. plemeno, xxxxxxx, xxxxxxxx chovu).
1.6.1.3 Volba xxxxx
Xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x využitím xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, aby xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx x hlavní xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx x této xxxxxxxxx xxxxxx nezbytná xxx xxxxxxxxx přiměřené xxxxx v xxxxxx xxxxxx. Aby xx xxxxxxxxx úmrtí xxx xxxxxx cholinergní účinky, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx jiný xxxxxxxx xxxxxxxxx, x kterém xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx s pozdními xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx typů xxxxxxxxxxx xxxxx (viz xxxxxx B.1 bis). Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být také xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx.
Úroveň xxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxx xx xxxx být co xxxxxxxx x přihlédnutím x xxxxxxxxx předběžné xxxxxx xxxxxx xxxxx x hornímu xxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Případné xxxxx xx neměly xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx (šest) x xx 21 xxxxx xxx xxxxxxxxxx (šest). Xxxxxxx xxxx jiný xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxx xx xxxxx, xx neinterferuje x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinky, xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.6.1.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx tuto xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx pozorované xxxxxxx účinky x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx s xxxxxxxxx strukturou není xxxxx toxicitu xxxxxxxx, xxx xxxx třeba xxxxxxxx x studii x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx použití ještě xxxxx úrovně dávky.
1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx je 21 xxx.
1.6.2 Xxxxx postupu
Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx následky xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx dávce.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Pozorování xx xxxxx okamžitě xx podání xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxx xxxxx jednou xxxxx po xxxx 21 xxx xxxx xxxxx nebudou utraceny xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx nástupu, xxxx, stupně x xxxxxx xxxxxxxxxxxx chování. Xxxxxx se hodnotí xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stupnice a xxxxxxxxxxx se xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx týdně xx slepice xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změny xxxxxx x klecí a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx xx žebříku, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Umírající xxxxxxx x zvířata xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx je třeba xxxxxxx, humánním xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
1.6.2.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxx aspoň jednou xxxxx.
1.6.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx náhodně xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny x xxxxxxxxx a xxx slepice z xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny (xx-xx xxxxxxx použita) xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxx mozek x xxxxxxxx mícha. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx jeho xxxx xx inhibici XXX. Běžně xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxx testované xxxxxxx xx 24 hodinách x další xxx xx 48 hodinách, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx xxxxxxxx pouze xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx klinických xxxxxxxx naznačuje, xx xxxxxxx látka se x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx (hodnotí xx nástup xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx je xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorky xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxx, a xx mezi 24 xx 72 hodinami xx podání xxxxx.
X xxxxxx vzorků xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx xxxx x podcenění xxxxx jako inhibitoru XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Xxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx.
1.6.2.5 Histopatologické xxxxxxxxx
Nervová xxxx x xxxxxxxxxx zvířat (xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx) se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tkáně xx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx perfúzních xxxxxxx. Odebírá xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), prodloužená mícha, xxxxx - řezy xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxx krční xxxxx, xxxxxxx hrudní x xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x x. tibialis (x xxxx xxxxx x x. xxxxxxxxxxxxx) x x n. xxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx specifickými barvivy xx xxxxxx x xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Negativní xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx a xxxxx chování) xxxxx xxxxxxxxxx další xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx sledování.
Uvádějí xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx jevících xxxxxxxxx, xxxxx chování xxxx xxxxxxxxxxx účinky, xxxx x stupeň xxxxxx xxxxxxxxx nebo účinků x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx typ x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Výsledky xxxxxx xx vyhodnotí x xxxxxxxx výskytu, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x dalšími xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx již v xxxx plánované xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx x xxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.;
- hmotnosti xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- podrobné xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a xxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxxx úrovně dávek;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx látky;
- xxxxxxxx xxxxx x podání xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx xxxxxx úmrtnosti;
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx vratných xxxx xxxxxxxxxx);
- podrobný xxxxx biochemických xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx;
- podrobný xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx;
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx xxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxx XXXX XX 418.
B.38. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX SLOUČENIN XXXXXXX 28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Při xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx schopnost xxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx zjištěn x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx organických xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxx x mají xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Negativní xxxxx x xx xxxxx xxxxxx však xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Tento 28xxxxx test pozdní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx zdravotním xxxxxx vznikajícím z xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx krátkého časového xxxxxx. Poskytne xxxxxxxxx x závislosti xxxxxxxx xx xxxxx x xxxx poskytnout xxxxx xxxxxxx dávkových xxxxxx, xx kterém xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nepříznivé xxxxxx. Tato xxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx kritérií bezpečné xxxxxxxx.
1.2 Definice
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx jako "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx kyselin xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx, které mohou xxxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x některých xxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx projevující xx xxxxxx, distální axonopatií, xxxxxxx x xxxx x periferním xxxxx x pozdním xxxxxxxx xxxxxx příznaků, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - NTE (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx denně xxxxxx xxxxxxxx po xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxx sledována xxxxxxx xxxxxx denně, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, zvláště xxxxxxxx XXX, se xxxxxxx x slepic xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx skupiny 24 x 48 hodin xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění x xxxxxxxxxxxxxx léčby x x xxxxxxxx xxxxx xx náhodně xxxxxxx xx experimentální x xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x podmínkách chovu x xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxx velké xxxxx xxxx xxxxxx umožňující xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx pozorování xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxxx 7 xxx x xxxxx, xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx tobolkami xxxx jinou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx neředěné xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxx je xxxx. xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx látek x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx nemusely xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx nosičů xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx domácího (Xxxxxx xxxxxx domesticus) xx xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx plemena x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx se xx xxxxxxxx, které dovolují xxxxx pohyb.
1.4.2.2 Xxxxx x pohlaví
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dávek x xxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx.
V xxxxx xxxxxxx má xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxx xxx utraceno pro xxxxxxxxxxx vyšetření (xx xxxxx v každém xx xxxx xxxxxxxx xxxx) x xxxx xxxxxxx čtrnáctidenní xxxxxxxxxx xx ukončení expozice.
1.4.2.3 Xxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x x xxxxxx údajům x xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, nejlépe příznaky xxxxxx neurotoxicity, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx utrpení. Dále xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx způsobem, xxxxx umožní xxxxxxxx xxxxxxxxx účinku xx xxxxx. Nejnižší dávka xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx.
1.4.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx xxxx s dávkou xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx x xxx, za použití xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx studii, nevyvolá xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx x příbuznou xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx třeba xxxxxxxx x studii x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx potřebu xxxxxxx xxxxx vyšší xxxxxx dávky.
1.4.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx x 14 dnů po xx, nebo do xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx plánu.
1.4.3 Xxxxx xxxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxx dní x xxxxx po 28 xxx.
1.4.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx začít xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx nejméně jednou xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx aplikace, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx toxicity xx zaznamenávají včetně xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx zahrnovat xxxxxxxxxxx xxxxxxx, ale xxxx xx xx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stupnice, xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx slepice xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx nucené motorické xxxxxxxx, xxxx např. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx minimálních xxxxxxxxx xxxxxx. Umírající xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx xxxxx vyloučit, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.4.3.2 Tělesná hmotnost
Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny x xxxxxxxxx se xxxxxx x prvních xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX se xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx. Je xxxxxx vypreparovat xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xx usmrcují xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxx tři xx 48 hodinách xx xxxxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxx xxxxx z xxxxxx studie xxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx jiná xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx aplikaci, pak xx xxxxxxxxxx použít xxxx dobu x xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx.
U těchto xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXxX). Xx xxxx může xxxx nastat xxxxxxxxx xxxxxxxxxx AChE, což xxxx vést x xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxx AChE.
1.4.3.4 Xxxxx
Xxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx špatný xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx posouzení xxxxx xxxxx x míchy.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx řez), xxxxxxxxxxx xxxxx, mícha (xxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxx hrudní x xxxxxxxxxxxxx), x xxxxxxxxxxx nervů se xxxxxxx distální xxxx x n. xxxxxxxx (x xxxx xxxxx x m. xxxxxxxxxxxxx) x x x. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx a xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxx fixované xxxxx xxxxx zvířat kontrolní xxxxxxx a xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx. Xxxxx se najdou x xxxxxx skupiny x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, provede xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x na slepicích xx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx výsledky xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx, xxxxx xx neprovádí xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Neprůkazné xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyžadovat další xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx. Údaje se xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxxx experimentální skupinu xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx pokusu x xxxxx zvířat xxxxxxxx poškození, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, typy a xxxxxx xxxxxx poškození xxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx studie xx vyhodnotí x xxxxxxxx výskytu, závažnosti x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx chování, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezy x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x xxxxxx uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx zvolí xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx informace, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx plemeno,
- xxxxx x stáří xxxxxx,
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx atd.,
- xxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- podrobné xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x potravě x xxxxxxx xxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx údajů x xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx formě xxxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx na biochemické xxxxxxxxx, xx-xx xxxx xxx 24 a 48 hodin.
Xxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx bez xxxxxx (XXXXX),
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx klinických příznaků (xx vratných xxxx xxxxxxxxxx),
- podrobný xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření x jejich xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- podrobný popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx xxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX TG 419.
X.39. Test xxxxxxxxxxx syntézy DNA x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX TG 486, Xxxxxxxxxxx DNA Synthesis (XXX) Xxxx Xxxx Xxxxxxxxx Liver Cells Xx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx DNA xxxxxxxxx, XXX) x xxxxxxx xxxxxxxxx buňkách in xxxx xx určit xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4).
Xxxxx test xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinků xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx DNA x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx reparaci. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx xxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx o xxx, že xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx tento xxxx xxxxxx.
Výsledek neplánované xxxxxxx XXX (XXX) xx xxxxxxx xxx, xx xx stanoví xxxxxxxx značených nukleosidů x buňkách, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (X-xxxx) xxxxxxxx DNA. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx thymidin xxxxxxx xxxxxxx (3X-XxX). Pro xxxxx XXX xx xxxx xx nejčastěji xxxxxxxxx xxxxxxx játra. Xxxx xxxxx xxx xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Detekce xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx bází XXX, xxx jsou x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx UDS xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx repair" (20 - 30 bází), xxxxxxx xxx látky xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx repair" (1 - 3 xxxx) je xxxx xxxxxxx. Dále xxxx xxxxxxxx k mutacím x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx replikace lézí XXX. Xxxxxx xxxxxxxx XXX neříká xxx x přesnosti procesu xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx, že xxxxxxx xxxx xxxx x XXX reagovat, ale xxxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx, xx XXX xxxx xxxxxxxxxxx x mutagenní xxxxxxxx xxxxxxxxxx informace, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Buňky x xxxxxxxx: xxx xxxxxxx xxxxx (NNG) xxxxx xxx xxxxxx, xxxxxx stanovená xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx test.
Xxx xxxxxxx xxxxxx (NNG): xxxxxxxxxxxxx xxxx XXX xxxxxxxx buněk při xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx zrn x xxxxx (XX) x xxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxx (XX): XXX = XX - XX. Xxxxx XXX xx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x následně xxxxxxxxxxx na xxxxx x xxxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (xxxxxxxxxxx XXX synthesis, XXX): xxxxxxx xxxxxxx XXX xx excizi x xxxxxxxxxx úseku XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx vyvolaného xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 PRINCIP METODY
Xxxx UDS v xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx xxxxxx a xxxxxxxxxx segmentu DNA xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx působením. Xxxx xxxxxxx obvykle x xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx XXX xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx nízkým xxxxxx xxxxx x X-xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxx xxxxxxx autoradiograficky, xxxxxxx xxxx technika xxxx tak xxxxxxxx x interferenci x xxxxxxx x X-xxxx, xxxx xx např. xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Výběr xxxxxxxxxxx druhu
Běžně xx xxxxxxxxx potkani, xxx ovšem xxxxxx xxxxxxxxx vhodný xxxxx xxxx. Používají se xxxxx laboratorní xxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxxxxx xxxxxxx. Hmotnostní rozdíly xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
Všeobecné xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx xxxxx x části X.
Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx zvířat
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx označí x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx dní xx xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx tak, aby xx minimalizovaly xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx jsou xxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx
Je-li xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx a xx-xx xx možné, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo vehikulu. Xxxxxxx testované látky xx xxxxx podávat xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.3 Podmínky xxxxx
1.4.3.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx xxxxxx xxxxx rozpouštědlo, xxxx být xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x kompatibilitě s xxxxxxxxxx látkou. Doporučuje xx, aby kde xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx každé pohlaví xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx zvířaty xx xxxxx skupinách xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné zvýšení xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx odezvě (4). Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx volí xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxx xxxxxx xxxxxx | Látka | XXX | XXXXXX |
odběr x xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx x intervalu (12-16 hodin) | N-2-fluorenylacetamid (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx xxxxx xxxxxx x jiné vhodné xxxxx. Je možná xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx podávána xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X každé xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx analyzovatelní xxxxxxx. Xxxxx existuje xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxx jedinci.
Xxxxx x xxxx, kdy xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx, xx mezi xxxxx xxxxxxxxx nejsou x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx testování xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx samcích. Xxx, kde humánní xxxxxxxx testovaných xxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jak xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx farmaceutických přípravků, xxxxxxx se xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxx jednorázově.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx dvě xxxxx dávky. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky toxicity, xx xxx xxxxx xxxxx ve stejném xxxxxx xx xx xxxxxxxx letální xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.
Xxxxx, jež x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx vykazují specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx zjištění xxxxxxx xxxxxxxx, protože xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xx použití xxxxxxxx živočišného xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx režimu, jaké xx xxx xxxxxxx x xxxxxx studii.
Xxxx nejvyšší xxxxx xxx také definovat xxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx (xxxx. pyknotická xxxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx minimálně 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx ve xxxx xxxxxxx v xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx a xxxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nemusí xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx vpravuje žaludeční xxxxxx. V odůvodněných xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx cesty. Intraperitoneální xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, protože xx xx tím xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxx, xxxxxx xxxxxxx oběhem. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, závisí xx xxxxxxxxx pokusného xxxxxxx x nemá xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx látek, jež xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx koncentracích xxxxx xxxxxx, je třeba xxxxxxx koncentrace xxxxx xxx, xxx objem xxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx se xxx objemová xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Xxxxxxxx jaterních xxxxx
Jaterní buňky xx x xxxxxxxxx xxxxxx zpracovávají xxxxxxx 12 - 16 xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx odběr (xxxxxxx 2 - 4 hodiny xx xxxxxx xxxxx), xxxxxx xx xx 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xx ovšem xxxxx xxxxxx x xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xx-xx xx odůvodněné xx xxxxxxx toxokinetických xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx xxxxxxx jater xx xxxx xxxxxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx disociované xxxxxxx buňky xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx XXX
Čerstvě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx dobu (xxxx. 3 - 8 xxxxx) obvykle inkubují x médiu xxxxxxxxxxx 3X-XxX. Xx inkubaci xx xxxxxx odstraní( xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxx obsahujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx neinkorporovaná xxxxxxxxxxxxx (xxx. "xxxx xxxxx"). Xxxxx xx xxx xxxxxxx, xxxxxx x vysuší. Xxx xxxxxxx inkubačních xxxxxxxxxxx xxxxxx xx "cold xxxxx" xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx ve xxx (xxxx. po xxxx xxxxxxx nebo xxxx týdnů x xxxxxxxxxx), xxxxxxxx, obarví x počítají xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
1.5.8 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx preparáty xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx morfologií, xxx xxxx možno XXX xxxxxxxxxx. Mikroskopicky xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx úroveň xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx zrn xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxx preparátech x každého xxxxxxx xx obvykle xxxxxxx 100 xxxxx; xxxxx xx xxxxx méně xxx 100 xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx být zdůvodněné. Xxx xxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x S-fázi, ale xxxxx xxxxx x X-xxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx inkorporace 3X-XxX xx xxxxx x cytoplazmy v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Mimoto se xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx formě. Xxx xxxxxx buňku, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx "nuclear xxxxx" (NNG) xxxxxxxxx xxxxx XX xx xxxxx XX. Xxxxxxxx-xx xx "xxxxx v xxxxxx", xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxxxx určují, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx negativních xxxxxxx.
Numerické xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami; xxxxx xx statistické xxxxx xxxxxxx, je xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx zahrnují:
pozitivní | (X) xxxxxxx XXX nad xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, zdůvodněným xx základě xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx | |
xxxx | (II) xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxx | |
negativní | (X) hodnoty XXX xx úrovni/pod xxxxxx xxxxxxxxxxxx prahu x xxxxxxx | |
xxxx | (II) hodnoty XXX xxxxxx signifikantně xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx. |
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxxx dat, xxx xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, vztah xxxxx - xxxxxxx x cytotoxicita. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx faktorem.
Většina xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však nelze xx získaného xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx testu XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx ukazuje, xx xxxxxxxxx látka vyvolává x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxxxxxxxx DNA, které xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx DNA xx xxxxx. Xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx XXX, xxx xx tímto xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Je xxxxx vzít v xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx dosáhne xxxxxxxx xxxxxxx nebo je xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx je třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx a stabilita xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud je xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx podmínky, xxxxxx xxxx.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx xx xxxxxx xxx určení xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx volby x xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x přípravě xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx podávání,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x kvalitě xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx schéma xxxxxxxx testované látky x xxxxxx vzorků,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx x kultivace xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx metoda,
- xxxxx připravených xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí jako xxxxxxxxx, negativní nebo xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx zrn x xxxxxxx, cytoplazmě a "xxx nuclear grains" xxx jednotlivé xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- známky xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx "xxxxx x xxxxxx", xxx-xx xxxxxxxx,
- počet xxxxx x S-fázi, xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxx X.39. byla xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx od 22.6.2001
X.40. LEPTAVÉ XXXXXX XX XXXX
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxx centrum xxx xxxxxxxxxx alternativních xxxxx (Xxxxxxxx Xxxxxx for xxx Xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx Methods, XXXXX, Xxxxx Research Centre, Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx) schválilo xxxxxxx vědecky xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx elektrického xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx resistance, XXX) x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX prokázala, že xxx testy xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx leptajícími x xxxxxxxxxxxxx kůži. Xxxxxx test xxxxxxxxxxx x modelu lidské xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (známé xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx X35, x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, X34). Je xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx; xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxx uživatele.
1.2 DEFINICE
Poleptání xxxx: způsobení nevratného xxxxxxxxx xxxxx kůže xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.3 REFERENČNÍ XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxxxxx, viz xxxx xxxx. 1.5.3.4 x 1.7.2.3.
1.4 XXXXXXX METODY - XXXX XXX XX XXXX POTKANA
Testovaný xxxxxxxx xx nanese xx xxxx až 24 xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxx utracených xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx xxxx leptavé xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x bariérové xxxxxx xxxxxx corneum.Tato xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx inherentního xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporu (XXX) xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5kΩ) (4) (5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx TER xxx prahovou xxxxxxx xxxxxxxxx. V případě xxxxxxxxxx a neutrálních xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx viz x xxx. (6)) je xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx test xxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx u xxxxxx typů xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (2) (7).
1.5 XXXXX XXXXXX - XXXX XXX XX KŮŽI XXXXXXX
1.5.1 Xxxxxxx zvířata
Pro přípravu xxxxxxx terčíků xxxx xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23denní) xxxxxxx, Xxxxxx xxxx srovnatelný xxxx. Malými xxxxxxx xx zvířata se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx se ponoří xx xxxxxxx antibiotika, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, penicilinu, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxx xx prvním xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx 3 xxx xx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx 31 xxx.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx usmrtí, xxxxx xx kůže x xxxxxxxx xxxxxx a x xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx. Xxxx xx xxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PTFE) trubice, x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx konec xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx X-xxxxxxx, kterým se xxxx připne, x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx. Rozměry trubice x X-xxxxxxx ukazuje xxx. 1. Gumový X-xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx ponoří xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX), kde xx xxxxxxxxxxx pružinovou xxxxxx (xxx. 2).
1.5.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx testované xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx na xxxxxxxxxxx xxxxxx uvnitř xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx ve xxxxx xxxxxx, nanese se xx xxxxxx v xxxxxxx množství, aby xx xxxxxx xxxx xxxxxx epidermis, xx xxxxxx xxxxx se xxxxx 150 μl xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Testovaná xxxxx xxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxx látek xxxx xxx dosáhnout xxxxxxxx xxxxx xx 30 xX, aby xx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx prášek. Použijí xx vždy tři xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (xxx xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vody xxxxx xxxxxxxxx 30 xX xxx xxxxxx, xxxxx xx látka xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xx napomoci xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx zhruba 30 xX.
1.5.3.2 Xxxxxx XXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (TER) xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx můstku xxx xxxxxxxx proud (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx povrchové xxxxxx xxxx xxxxxxxxx dostatečného xxxxxx 70% xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx několika xxxxxxxxx se ethanol xxxxxxxx xxx, že xx trubice xxxxx, x tkáň xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 154 mM xxxxxxx síranu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxxx x xΩ/xxxxxx (xxx. 2). Rozměry elektrod x xxxxx holé xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx během xxxxxx xxxxx navrch XXXX xxxxxxx xxx, xxx byla xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx elektrody. Xxxxxx (xxxxx) elektroda xx xxxxx xx receptorové xxxxxxx xxx, xxx xxxxxx na dně. Xx xxxxx dodržovat xxxxxxxxxx vzdálenost mezi xxxxxx xxxxxx pružinové xxxxxx x xxxxxxx XXXX xxxxxxx (xxx. 1), tato xxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx naměřený xxxxx xxxxx než 20 kΩ, může xx být xxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx překrývá xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx kůže. Xx xxxxx se xxxxxxx tento xxxxxx xxxxxxxxx, například xxx, xx se XXXX xxxxxxx xxxxxx palcem x xxxxxxxx a xxxxxx 10 xxxxxx xx xxxxxxxxxx, roztok xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx TER xx xxxxxxxxxxx, pokud xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxx tyto:
|
Kontrola
|
Látka
|
Rozmezí xxxxxx (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
&xxxx;
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
10 – 25
|
1.5.3.3 Modifikovaný xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a neutrální xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxx testování povrchově xxxxxxxxx látek (detergentů) xxxx xxxxxxxxxxx organických xxxxx xxxxxxx XXX xxxxx nebo xxxxx 5 xΩ, xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx hodnocení xxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx x výsledky xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Nanesení x odstranění barviva xxxxxxxxxxxxxx X
Xx prvotním xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx všech terčíků xxxxxx xx 2 xxxxxx po 150 μx 10% (w/v) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x destilované xxxx. Xxxxxxx xxxx se xxx zhruba xx xxxx 10 sekund xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, která xx nejvýše xxxxxxxxx xxxxxxx. Tím xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx) barvivo. Každý xxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx x XXXX xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx (xxxx. do 20 xx skleněných xxxxx xxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx po dobu 5 xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx veškeré xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) barviva. Xxxxx oplach se xxxxxxx. Pak xx xxxxxxx vyjmou x xxxxx xx nádobek x 5 xx 30 % (w/v) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxx xxxx, kde xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx teplotě 60 xX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx po dobu 8 xxxxx xxx xxxxxxx 21 xX (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ∼ 175). Xxxxxx 1 ml xxxxxxxxxxxx xx xxx zředí 30 % (x/x) xxxxxxxx SDS x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (v/v) (xx. 1 xx xxxxxxxxxxxx + 4 xx roztoku SDS). Xxxxxxx xxxxxxx (XX) xxxxxxx xx xxxx xxx xxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x xxxxxxx se xxxxxxxx z xxxxxxx XX (molární extinkční xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xxx 565 xx xxxx 8,7 . 104; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Obsah xxxxxxxxxxxxxx B xx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx kůže xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx akceptována za xxxxxxxx, xx souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx metody. Za xxxxxxxxxxxxxx rozmezí obsahu xxxxxxx se u xxxxxxxxxxx xxxxx při xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx barviva (xx/xxxxxx)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X kyselina xxxxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
40 - 100
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
15 – 35
|
1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxx xxxx (xxxx. 2 hodiny) za xxxxxx rozlišení xxxxx xxxxxxxxxxx látek. Xx xxxxxxxxxxx studii však xxxx xxxxxxxx, xx xxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kůže xx 2 xxxxxx (2), jakkoliv umožňuje xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx TER mohou xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x rozměry zkušební xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxx leptavé xxxxxx 5 xΩ xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx aparatuře a xxx xxxxxxxx postupu xxxxxxxxx zde. Xxxxx xx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx změnily, xxxxx xx být xxxxx použít jiných xxxxxxxxx a kontrolních xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxxx okalibrovat xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx řady xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných x xxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx (3).
1.6 PRINCIP XXXXXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX XXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nanáší xxxxxxx xx dobu až 4 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, sestávající z xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx materiál se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx životnosti xxxxx xxxxxxxxx například xxxxxx "XXX xxxxxxxxx xxxxx" (MTT = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 difenyl xxxxxxxxxxx xxxxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx jsou xx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx xxxxx) x xxxx dostatečně xxxxxxxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxxxxx buněčných xxxxxxxx.
1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX KŮŽE
1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxx však xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Model xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx vrstvou xxxxxx xxxxx. Bariérová xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxx xxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx, o xxxxx xx xxxxx, xx xxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx však xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Model xxxx za xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek vykazovat xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx v modelu xxxx xxx dostačující x xxxx, xxx xx dalo xxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx. Životnost xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX, tj. XX xxxxxxxx) xx xxxxxxxx látce xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx ležet v xxxxxxxxxxxx mezích pro xxxx xxxxx. Podobně x xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu (xx srovnání x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxx hodnoty xxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxx mezí. Je xxxxx xxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxx model xxxxxxxx mezinárodnímu validačnímu xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxx xxxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka xxxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx 25 (μ/xx2). Xx-xx xxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx kůži, x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx se s xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx xx xx xxxxx, pevné xxxxx se xxxx xxxxxxxx roztírají xx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxx xxx široký xxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx materiál x povrchu kůže xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X xxxxxx životnosti xxxxx xx dá xxxxxx jakákoliv xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx používá redukce XXX, o xxxxx xxxx xxxxxxxxx že x různých xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx kůže xx xx xxxx 3 xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx XXX o xxxxxxxxxxx 0,3 mg/ml xxx xxxxxxx 20 - 28 xX. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx pak xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XX xxx vlnové xxxxx 545 a 595 xx.
1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx model xxxx x xxxxxx dodržení xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx. Doporučuje xx metodu i xxxxxxxxx model xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx standardů vybraných x látek použitých xx xxxxxxxxxxx studii XXXXX (3). Xx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, že xx xxxxxxx xxxxxx xx použití xxxxxx xxxxx látek xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx standardů xxx x xxxxx xxxx laboratoře, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx metoda xxxxxxxx kritéria xxxxxxx xxxxxxxx definované xxxxx (2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx kterém xxxxxx xxxx zveřejněním xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.8.1 Xxxx TER xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx (x xΩ) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční látky xx xxxxxxx v xxxxxxxxx formě, x xx xxxx xxx xxxxxxx replikace x xxxxxxxxx experimenty, xxxxxxxx xxxxxxx a x xxxx vyvozená xxxxxxxxxxx.
1.8.2 Xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx testovaný xxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x z xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.9.1 Xxxx XXX xx xxxx xxxxxxx
Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx TER xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx než 5 xΩ, je xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxx XXX nižší xxxx xxxxx 5 xΩ x xxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (detergent) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx hodnoty XXX xxxxxxxxxxxxx 5 xΩ, lze xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx barviva. Xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx barviva x xxxxxxx xxx souběžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x 36 % XXx, je testovaná xxxxx skutečně pozitivní x xxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxx leptavé xxxxxx xxxx.
1.9.2 Xxxx x xxxxxxx lidské kůže
Hodnota XX xxx negativní xxxxxxxx představuje 100% xxxxxxxxxxxxxxx buněk. X xxxxxx XX pro xxxxxxxxxx zkušební xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx nezpůsobují xxxxxxxxx xxxx, xx těch, xxxxx xxxxxxxxx způsobují, xxxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivé xxxxx leptavých vlastností, xxxx být x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, než xx xxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx validační xxxxxx se xxxx xxxxxxxx, xx xx xxxx hraniční xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto informace:
Testovaná xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx stav, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti; xxxxx xx používají xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx i xxx ně.
Podmínky xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (test XXX) xxxx xxxxxxxxxxxx podíl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx) pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxx standardní referenční xxxxx, x to xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx resp. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx;
- popis všech xxxxxx xxxxxxxxxxxx efektů.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Obrázek 2
Metoda X.40. xxxx xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
B.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 XXX XX VITRO
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx toxická xxxxxx (xxxxxx), x xxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xx-xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx podání xxxxxx látky.
Informace získané x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx slouží xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dané xxxxxxxxx xxxxx, xxxx ke xxxxxxxx, zda daná xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx působením xxxxx x světla, xxxxx testem je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx vivo xx xxxxxxx aplikaci x xxxxxxxxxx v xxxx, x xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx nanesení xx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxx vypracován x validován x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX/XXXXXX z let 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx validní xxxxxxxxxxx xx vitro xxxx xxxxxx používaným testům xx xxxx. V xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx schůze XXXX xxxxxxx následných xx xxxxx trestů pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx vivo x xxxxxx x xxxx x bylo xxxxxxxx, xx tento xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxx, xxx xxxxxxxxxxx jiné xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx fotogenotoxicita, xxxxxxxxxxx xxxx fotokarcinogenita, i xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, reaguje xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxx uspořádán xxx, xxx umožňoval xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx fototoxicity u xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX) xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx; xxxxxx xx X/x2 xxxx x XX/xx2.
Xxxxx xxxxxx: množství (= intenzita x xxx) ultrafialového (XX) xxxx xxxxxxxxxxx (VIS) xxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxx, vyjádřené x xxxxxxx (= X x s) na xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. X/x2 xxxx X/xx2.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxx ultrafialového xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxx XXX (Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xx X'Xxxxxxxxx) xx xxxxxxx xxxxxxxx XXX (315 - 400 xx), UVB (280 - 315 xx) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxx: za xxxxxxx xxxx xxxxx XXX a XXX xx xxxxx xxxxxxxx 320 nm x XXX se xxxxx xxxx na XX-X1 x XX-X2 x xxxxxxx xxxxxx x 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx (viabilita) xxxxx: xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx buněčné xxxxxxxx (xxxx. příjem xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx červeně, xx xxxxxxxxx lysozomů), xxx xxxxx parametrů xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx uspořádání koreluje x xxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: životaschopnost buněk xxxxxxxxx v xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), které xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx testu (xxx + XX xxxx - XX), xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx potenciálu. X xxxxx metodickém xxxxxx xxx test xx xxxxx x transformaci xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx k xxxxxxxx fotoxického xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx XXX x XXX.
XXX (xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx dvou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX50) xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) x x xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.
XXX (xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx): xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx křivek koncentrace-odezva xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) x v xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx: xxxxxx xxxxxxx reakce (odezva), xxxxx xxxxxx xx xxxx expozici xxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, nebo xxxxxx, xxxxx je obdobně xxxxxxxx ozářením xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx pojmu "xxxxxxxxxxxx", xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x nimž xxxxxxx x kůži xxxx, xx na xx xxxxxx (topicky xxxx xxxxxx přijatá) xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vedou xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (reakce podobné xxxx při xxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx imunologická xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx prvním xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx indukční xxxxxxx x xxxx, xxx se xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxxxxxxx projevy, xx xxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XX/XXX xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx studii, xx xxx xxxxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx testu (1) (3) (13).
1.4 PRVOTNÍ XXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), jejichž xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx světelnou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxx xxxxx fotoreakce dostatečnou xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx by xx xxxxxxx, než xx xxxxx uvažovat x xxxxxxxxxxx testování podle xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x UV/VIS xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXXX x. 101). Xxxxx je xxxxxxx extinkční/absorpční xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx-1 x xx-1, nemá xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx testovat xxx testem xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro, ani xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (viz xxxxxxx).
1.5 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx zjištěny xxxxx xxxxxxxxxx, kterými xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) chromoforem vyústit xx xxxxxxxxxxxx reakci (7), xxxxxxx všechny xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx necytotoxické xxxxx XXX/XXX xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxx tomto xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx závislý xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx, XX) (9), 24 hodin xx xxxxxxxx testované xxxxx x ozařování.
Buňky Balb/c 3X3 se xxxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx xxx, aby xx vytvořila xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx dvě xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx dobu 1 hodiny. Xxxxx x obou destiček xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX záření x xxxxx 5 X/xx2 XXX (+XX xxxxxxxxxx), druhá destička xx uchovává x xxxxx (-UV xxxxxxxxxx). X obou xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx médiem xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxx 24 xxxxxxxx kultivace xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx červeně (xxxxxxx xxx xxxxxx, XXX) xx xxxx 3 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx každou x xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x negativních kontrol. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx (+XX) a x xxxxxxxxxxxxx (-XX) záření, xxxxxxx xx xxxxxx XX50, tj. xx xxxxxxxxxxx inhibující xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx o 50 % v xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
1.6 XXXXXXXX JAKOSTI
Citlivost xxxxx xxxx záření XXX, xxxxxxxxxx údaje: x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx UVA. Xxxxx xx xxxxxx v xxxxxxx, která xx xxxxxxx při testu xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx vitro, xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxx XXX v xxxxx 1 - 9 J/cm2 x xxxxx xxx xx xxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx ozáření xxxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx2 není nižší xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx v temnu. Xxx xxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxx 9 X/xx2 xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx zhruba xx xxxxx desáté xxxxxx buněk.
Citlivost buněk xxxxxxxxx xxxxxxxx vůči xxxxxx UVA, xxxxx xxxx: xxxx xxxxxxx xxxxxxxx jakosti, jestliže xxxxxxxxx kontroly (xxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx [Earl´s xxxxxxxx salt solution, XXXX] x 1 % xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx ethanolu (XxXX) xxxx xxx xxxx vykazují v xxxxxxxxxxx (+UVA) životaschopnost xxxxxxxxx 80% v xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx experimentu x xxxxx (-XXX).
Xxxxxxxxxxxxxxx negativních xxxxxxx: absolutní xxxxxxx xxxxxxx (OD540 XXX) xxxxxx v NR xxxxxxxx negativních xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx 1 x 104 xxxxx nasazených x xxxxx jamce rostlo xxxxx dvou dnů xxxxx x normální xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx průměrná xxxxxxx XX540 XXX u xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: při xxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx je xxxxx provést xxxxxxxx xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx EU/COLIPA xxx jako xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (CPZ); xxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Pro XXX xxxxxxxxx dle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx fototoxicity 3X3 XXX in vitro xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: XXX xxxxxxx (+UVA): XX50 = 0,1 - 2,0 μg/ml, XXX xxxxxxxxx (-XXX): EC50 = 7,0 - 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX), xxx. xxxxx xxxxxxx XX50, xx být xxxxxxxxx 6.
Xxxxx XXX xx xxx souběžnou xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx chemické xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx testované (xxxxxxxxx) xxxxx. X xxxxxxx případě xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx hodnot XX50 x PIF xxxx MPE (xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 POPIS XXXXXX
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx byla použita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxx/x 3X3 klon 31, x xx buď x XXXX nebo x XXXXX; ta xx proto xxxxxxxxxx. Xxxxx stejného xxxxxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx, pokud xx xxxxxxxxxx podmínky xxxxxx podle jejich xxxxxxxxxxxx xxxxxx; xx xxxx xxxxx prokázat, xx xxxx xxxxxx xxxxxx.
X xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolovat, xx xxxxxx kontaminovány xxxxxxxxxxxx, a xxx xx použít jen x xxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX záření xxxx s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx používat buňky Xxxx/x 3T3 x xxxxxx s nejnižším xxxxxx, xxxxx možno xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxx UVA xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolovat, x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3T3 xx jedná x XXXX obohacený 10 % séra xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 mM xxxxxxxxx, penicilinem x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx 37 oC / 7,5 % XX2. Xx xxxxxxxx, aby xxxxxxxx kultivace xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx dané xxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx hustotě x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx buňky xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxx xxxxx (xx. xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 48 xxxxx po xxxxxxxx) xxxxxxx ke konfluenci (xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx vrstvu xxxxx). V xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3T3 xxxxxxxxxxxxx v destičkách x 96 xxxxxxx xx xxxxxxxxxx hustota 1 x 104 xxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxx destičky x 96 xxxxxxx, xxxxx xxx procházejí xxxxx xxxxxxxx xx identických xxxxxxxxxxxx podmínek, x xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxx (+XXX/XXX) x druhá xx xxxxxxxxxx v temnu (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Metabolická xxxxxxxx
Xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx potenciálu xx xxxxxxx požadavkem xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx systému, xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx látka, xxx by k xxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx proto xxx xx xxxxx, xxx xx vědecky xxxxxxxxxx, xxx xx tento xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.1.5 Xxxxxxxxx xxxxx / příprava
Testovaná xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx prokazují, xx se dá xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxxxxxxxxxx, že by xxxxx x fotodegradaci, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxx solném xxxxxxx, například x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (XXXX) xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx fosfátem (xxxxxxxxx xxxxxxxx saline, PBS), xxxxx - aby xxxxxxx dojít x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx - xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx barevné indikátory xX, pohlcující xxxxxx.
Xxxxx xx testovaná xxxxx xx vodě xxxxxxx xxxxxxxxx, rozpustí se xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx koncentrace, x následně se xxxxx x poměru 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx x konstantním xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, xx. xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx kontrolách.
Jako rozpouštědlo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxx (XxXX). Xxxxxx xxxxx xxx x další xxxxxxxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, například aceton, xx xxxx třeba xxxx xxxxxxx zvážit xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx případná xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 oC.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX xxxxxxx / příprava
Světelný zdroj: xxxxx správného světelného xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx je při xxxxxxxxx fototoxicity klíčovým xxxxxxxx. Záření x XXX x xx xxxxxxxxx oblasti xx xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx záření UVB xx v tomto xxxxx méně relevantní, xx xxxxx vysoce xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx od 313 xx x 280 xx xxxxxxx tisícinásobně. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx světelného xxxxxx xxxxx xxxxxxx požadavek, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxx testovaná xxxxx xxxxxxxxx, a xxx byla xxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx dobu) xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx známých xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx být xxxxxxx xxxxxx délky x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém - xxxxx xxx x xxxxxxxxxx tepla (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).
Xx optimální xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx výbojky - xx mají tu xxxxxx, že vyzařují xxxx tepla x xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx simulátory emitují xxxxxxxx xxxxxxxx záření XXX, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx se toto xxxxxx cytotoxické záření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx test xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxx UVB xxxxxxxxx nevyskytuje (UVA:UVB ∼ 2 : 1). Příklad xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx je x xxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: intenzita xxxxxx (iradiance) xx xxxx pravidelně před xxxxxx testem xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pomocí vhodného xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru, který xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxx xx doporučuje xxxxxx xxxxx, referenční XX-xxxx téhož xxxx x kalibrace. Xxxxxxx xx, xxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx spektrální xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zdroje x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx širokopásmového XX-xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx vyžaduje xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx validační xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx UVA xxxxxx 5 J/cm2 xx xxx xxxxx Balb/c 3X3 necytotoxická x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx excitovala x xxxxx xxxxxxxxxxx látky. Xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx 50 minut, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 1,666 xX/xx2. Xxxxxxx-xx se xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx zdroj světla, xxxx xx dávka xxxxxx XXX upravit xxx, xxx buňky xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx expozice xx xxxxxxxxxx podle vzorce:
|
dávka xxxxxx (X/xx2) x 100
|
&xxxx; | |
| &xxxx;
x (min) =
|
________________________
|
(1 X = 1 X x)
|
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxxx (mW/mc2) x 60
|
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 μg/ml, xxxxx všechny xxxxxxxxxxx xxxxx byly xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx koncentracích xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (13). Xxxxxxx xX xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx (oblast xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (+XXX) a xxx xxx (-XXX) xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx zvolí xxx, xxx xxxxxx závislosti xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx dostatečně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Používá xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ředění).
1.7.3 Popis xxxxxxx
1.7.3.1 Xxxxx den
Připraví xx xxxxxxxx 1 x 105 xxxxx/xx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx 100 μx xxxxxxxxx xxxxx (= xxxxx xxxxx), xx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xx 100 μx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx 1 x 105 buněk/ml (= 1 x 104 xxxxx xx xxxxx). Xxx xxxxxx testovanou xxxxx se xxxxxxxx xxx destičky - xxxxx pro stanovení xxxxxxxxxxxx (-XXX), xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx se xxxxxxxx xx dobu 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 oC), xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxx umožňuje xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx růst.
1.7.3.2 Druhý xxx
Xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx dvakrát xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX xx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx 100 μx XXXX/XXX obsahujícího xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Testovaná xxxxx xx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxxx. Buňky x xxxxxxxxxx xxxxxx xx inkubují v xxxxx xx xxxx 60 xxxxx (7,5 % CO2, 37 xX).
Xxxx xxxxx x XXX (+UVA) xx xxxxxxx xxx, xx xx buňky za xxxxxxxx teploty xxxxxxx xx xxxx 50 xxxxx xxxx víčko xxxxxxxx x 96 xxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx2 (= xxxxx 5 / xx2). Xxx nedocházelo xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-XXX) xx xx xxxx 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx UVA) xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx se promyjí xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Xxxx se xxxxxx kultivačním xxxxxx x xxxx xxx (18 - 22 xxxxx) xx xxxxxxxx (7,5 % XX2, 37 oC).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx se xxxxxxxxxx xxx mikroskopem x fázovým xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx způsobené xxxxxxxxxxxx účinkem xxxxxxxxx xxxxx. Tato xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xx eliminovaly xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, ale při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx tyto xxxxxxx nepoužijí.
Test příjmu xxxxxxxxx červeně (XX)
Xxxxx xx promyjí xxxxxxx 150 μl xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx xx odstraní xxxxxx xxxxxxxx. Přidá xx 100 μl xxxxx x XX x xxxxxxxx xx při 37 oC ve xxxxxxxx atmosféře se 7,5 % CO2 xx xxxx 3 xxxxx.
Xx xxxxxxxx se xxxxxx s NR xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX, xxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx (je také xxxxx destičky zcentrifugovat x xxxxxxxx poloze).
Přidá xx přesně 150 μx roztoku na xxxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xx xxxx 10 xxxxx xxxxxx třepou xx xxxxxxxx, dokud xx NR x xxxxx nevyextrahuje x xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx.
Xx spektrofometru se xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX xxx 540 xx xx xxxxxxx slepého xxxxxx xxxx srovnávacího roztoku. Xxxxx xx uchovají xx vhodném xxxxxxx (xxxx. ASCII) xxx xxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXX X XXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzu vztahu xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxx aplikaci XXX/XXX záření x xxx ní. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, koncentrační xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx údaje xxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx testovaná xxxxx xxxx být až xx definované xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx x experimentu ve xxx (-XXX) necytotoxická, xxx při xxxxxxxxx (+XXX) vysoce cytotoxická, xxxx xxxxx x xxxx, že xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx částech experimentu xxxxx xxxxx řádově xxxxx, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zjištěna x xxxxx z xxxx xxxxx experimentu (xxx xxx -XXX, xxx xxx +XXX), xxxxxxxxx testování s xxxxxx xxxxxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx dávkami xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx modelu - xx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx testu xx xxxxxxxx, xxxx xxx důležité pozměnit xxxxxxxxxxxxxx podmínky, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx proměnnou x xxxxx testu xx příprava roztoků xxxxxxxxx xxxxx, nejvhodnější xxx xxxx opakování xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx). Xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxx. X látek, xxx xxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx vliv xxxxxxxx xxxx.
1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx xx to xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx x 50 % xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx NR (XX50). Xx xxx xxxxxx xxx, xx xx xx xxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vhodná xxxxxx xxxxxxxxxx regrese (xxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxx) nebo xx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx proložení (14). Xxx xx xxxxxxx XX50 xxxxxxx xxx další výpočty, xx třeba zkontrolovat xxxxxxx xxxxxxxxx. K xxxxxxx xxxxxxx EC50 xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X tomto xxxxxxx xx doporučuje xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxx x: log, xxx x: probit), xxxxxxx xx xxxx transformaci xxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx xxxxxx xxxxx lineární.
1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (PREDIKČNÍ MODELY)
1.10.1 Xxxxxxxxx model, verze 1: fotoiritační xxxxxx (XXX)
Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxx xx přítomnosti (+XXX), xxx xx xxxxxxxxxxxxx (-XXX) xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx faktor (XXX) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (-XX)
|
| &xxxx;
(x) PIF =
|
____________
|
|
EC50 (+XX)
|
XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, kdežto XXX ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX, xxxxxx xxx -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx se PIF xxxxxxxxx, x když xx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xx vypočítat xxx. "&xx; PIF", xxxx xx test xxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxx) x xxxx hodnota xx xxxxxx do xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) &xx; XXX =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
Xxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxx "&xx; XXX", xxx xxxxx xxxxxxx &xx; 1 xxxxxxxxxx fototoxický xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx se nedá xxxxxxxxx xxx XX50 (-XX), ani XX50 (+XX), protože xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx nejvyšší xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx toho, xx xxxxx xxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx "XXX = *1", xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) PIF = *1 =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (+XX)
|
Xxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", xxxxxxxxxx xx, xx xxxx xxxxxxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx (x) x (c) je xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxx xxxxxxx x úvahu xxxxxxxxxxx, xxxxx se xxx testu xxxxxxx.
1.10.2 Xxxxxxxxx model, xxxxx 2: střední fotoefekt (XXX)
Xx xxxxx také xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu, xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx dat x xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX (15) a xxxxxxxxxxxx xx podmínek xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx UV xxxxxx (13). V xxxxx modelu xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx modelu XXX x xxxx xxxxxxxxx, kde nelze xxxxxx xxxxxxx EC50. X xxxxx xxxxxx xx používá xxxxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxxx" (MPE) xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx průběhu xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva. Xxx aplikaci xxxxxx XXX xxx na Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx speciální xxxxxxxxxx software, xxxxx xxx xxxxxxx zdarma.
1.11 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx (PIF ≥ 5 nebo XXX ≥ 0,1) ukazuje, xx xxxx látka xx fototoxický potenciál. Xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 10 μx/xx, xx pravděpodobné, že xxxxx bude xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx expozičních xxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxxxxx pouze při xxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci (100 (x/xx), xxxx xxx posouzení nebezpečnosti xxxx xxxxxxxxxxx schopnosti xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx informací. Xxx mohou xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx látky x xxxx, nebo údaje x xxxxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx použití xxxxxx lidské xxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx (XXX &xx; 5 xxxx MPE &xx; 0,1) ukazuje, xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxxx pro použité xxxxx xxxxx x xxxxxx podmínkách. X xxxxxxxxx, kdy xx xx látka xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx koncentraci 100 μx/xx, xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx, xx xxxxx xxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx se xx považovat xx xxxxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx získány xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (XX50 + XX a XX50 - XX), xx xxxxxxxxxxxx dat xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (+UV xxx -UV) x xxx omezenou rozpustnost xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xx xxxxx xxxxxxxxx tento xxxx xxx xxxxx látku xx xx zcela xxxxxx x mělo xx xx xxxxxxxx x xxxxx, potvrzujícím xxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx nebo xxxxxx kůže xx xxxx nebo xx xxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx CAS, xx-xx xxxxx,
- fyzikální xxxxxx a xxxxxxx,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- stabilita x xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxx rozpouštědla,
- rozpustnost xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla x xxxxxxxxx xxxxx (XXXX xxxx PBS).
Buňky:
- xxx x xxxxx buněk,
- xxxxxxxxxxxx mykoplazmat,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxx, je-li xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx UVA xxxxxxxxx pomocí ozařovacího xxxxxxxx, xxx xx x xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3T NRU xx xxxxx používá.
Podmínky xxxxxx (a) - xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xx xxx:
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx média,
- xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, vlhkost),
- xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xx x po xx).
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - ovlivnění xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx x xxx xxx,
- v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x absence xxxxxxxxxxxx zdůvodnění xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx),
- doba ovlivňování xxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu (x) - xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx daného xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx charakteristika xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx propustnosti/absorpce xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x jeho xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx XXX (x x X/xx2) xxx xxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx UV/VIS xxxxxx,
- xxxxx xxxxxx UVA (xxxxxxxxx x xxx) x J/cm2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (d) - xxxx XXX:
- xxxxxxx média s XX,
- doba xxxxxxxx x XX,
- inkubační xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxxxxx NR (extrakční xxxxxxx, xxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx délka, při xxxxx se xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx hustota XX,
- druhová xxxxxx xxxxx (referenční), xxxx-xx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx spektrofotometrii (xxxxxx), xxxxx byl xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxxxxxx buněk xxx xxxxxxxxxxxx koncentracích xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx životaschopnosti xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx (koncentrace xxxxxxxxx xxxxx νs xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx +XXX x -XXX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 (+XXX) x XX50 (-XXX),
- xxxxxxxxx obou xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx - xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (XXX),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- absolutní životaschopnost (xxxxxxx xxxxxxx extraktu XX) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx buněk,
- historické xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- kritéria akceptovatelnosti xxxxx (x) - xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx:
- xxxxxxx EC50 (+XXX), XX50 (-UVA) x XXX látky xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx údaje xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxx EC50 (+XXX), EC50 (-UVA) x XXX, průměry x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx B.41. xxxx xxxxxxx právním xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x účinností xx 22.6.2001
Xxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Sb. nabyl xxxxxxxxx xxxx 1.1.1999.
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx předpisem x.:
208/2001 Xx., xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx XX x. 251/98 Xx., kterou xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx - xxxxxx bude xxxxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxx
x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxx xxxxxxx č. 251/98 Sb. xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 443/2004 Sb. x xxxxxxxxx xx 1.8.2004.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx předpisů x xxxxxxxx xxxx aktualizováno, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx uvedeného xxxxxxxx xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) xx x) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
2) Xxxxx č. 246/1992 Sb., xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx znění xxxxxx x. 162/1993 Sb., x. 193/1994 Sb., x. 243/1997 Sb. x x. 30/1998 Xx.
3) Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx hospodářskou xxxxxxxxxx a xxxxxx xxx xxxxxxxx chemikálií. Xxxxx 4 - xxxx xx zdraví (XXXX Xxxxxxxxxx for Xxxxxxx xx Chemicals. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).