Právní předpis byl sestaven k datu 21.06.2001.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
XXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
ze xxx 16. xxxxx 1998,
xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování xxxxxxxx chemických xxxxx x přípravků
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx stanoví podle §4 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x chemických xxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx:
§1
Xxxx xxxxxxxx stanoví metody xxx zjišťování nebezpečných xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxických, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx, žíravých, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, karcinogenních, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx reprodukci (dále xxx "xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx").1)
§2
(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků se xxxxxxxx xxxxxxxxx prováděnými xxxxxxxx xxxxxxxxx x příloze xxxx xxxxxxxx.
(2) Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických látek x přípravků lze xxxxxx x jiné xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx stejně citlivé, xxxxxx x reprodukovatelné xxxx metody xxxxxxx x xxxxxxxx 1, xxxxxxxxxx však xxxxxx xxx použití xxxxxxxxx xxxxxx2) a xxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx (XXXX).3)
§3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx účinnosti xxxx 1. xxxxx 1999.
Xxxxxxx:
XXXx. Xxxxx, XXx. x. x.
Příloha k xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.
Xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx
X. VŠEOBECNÝ XXXX
1. XXXXXXXX XXXXX
1.1 XXXXXX XXXXXXXX
xxxxxxxx nepříznivé účinky, xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx 14 xxx) xx xxxxxx xxxxx xxxxx nějaké látky.
1.2 XXXXXX XXXXXXXX
xx xxxxxxxxx xxxxxx popisující xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx aplikaci testované xxxxx. Jsou xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx rizika x xxxx by xxx xxxxxx, xx po xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx očekáván xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx x xxxxx.
1.3 XXXXX
xx množství xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xxxxx nebo xxxxxxxxx) nebo xxxx xxxxxxxx testované látky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete (xxxx. xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti), nebo xxxx konstantní xxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx xx xxxxxx dílů nebo xxxxxxxxx xx kilogram xxxxxxx).
1.4 XXXXXXXXXXXXXX XXXXX
xx nejvyšší xx xxxx xxxxxxx dávkových xxxxxx, xxxxxx je xxxxx podat, xxxx xx to způsobilo xxxxxxx (včetně xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXXXXX
xx všeobecný xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, frekvenci x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
1.6 XX50 (STŘEDNÍ XXXXXX XXXXX)
xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivá xxxxx látky, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx 50 % xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx XX50 se xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx).
1.7 XX50 (STŘEDNÍ XXXXXX XXXXXXXXXXX)
je xxxxxxxxxxx vypočtená xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx smrt xx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxx x 50 % xxxxxxxxx zvířat, xxxxxxxxxxxx xx definovanou xxxx. Xxxxxxx XX50 xx xxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx standardním xxxxxx xxxxxxx (xx.x-1).
1.8 NOAEL
xx zkratka pro "xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx level" (xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) x je xx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.9 TOXICITA XX XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX TOXICITA
xxxxxxxx nepříznivé účinky, xxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxx zvířat x xxxxxxxx opakovaného xxxxxxx podávání nebo xxxxxxxx chemické xxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx úsek očekávané xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.10 XXXXXXXX XXXXXXXXXX DÁVKA (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX DOSE)
je xxxxxxxx xxxxx, která x zvířat xxxxxxxx xxxxxxxx projevy toxicity, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxx x ohledem xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx.
1.11 XXXXXXXXXX XXXX
xx vyvolání xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx.
1.12 XXXXXXXXXX OČÍ
je xxxxxxxx xxxx xx xxx xx aplikaci xxxxxxxxx látky na xxxxxx xxx.
1.13 XXXXXXXXXXXXX KŮŽE (XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX)
je xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.14 POLEPTÁNÍ XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx poškození xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxx xx 3 xxxxx xx 4 xxxxx.
1.15 XXXXXXXXXXXXXX
xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.16 XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx.
1.17 XXXXXXX
xxxxxxxx proces(y), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx x těla.
1.18 XXXXXXXXXX
označuje xxxxxx(x), kterým(i) je xxxxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx rozdělovány x xxxx.
1.19 XXXXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx aplikované xxxxx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXXX - XXXXXXXXX APLIKACE/SUBCHRONICKÁ X XXXXXXXXX TOXICITA
Akutní xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxx xxxxx různých xxxxx xxxxxxxx (metody X.1 - B.5), xx xxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxxxx získán xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx xxx zvolit xxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxx xx xx kompletní xxxxxxxxx XX50. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx navržen, protože xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jednorázové xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pozornost xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx co xxxxxxxx xxxxx zvířat a xxxxxxxxxxxx utrpení xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx pevné xxxxx (xxxxxx B.1 xxx) a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx B.1 xxxx). Při xxxxxxxxx xx xxxxxx druhu xxxx xxxxxx xx xxxxxx druhu xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx z xxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx metoda xxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (metody X.7, X.8 a X.9) xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x důsledku xxxxxxxxx xxxxxxxx. Důležité xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx co nejvíce xxxxxxxxx. Xxxx testy xx měly xxxxxx xxxxxxx cílové xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx studií xx xxxxxxxx zkoumání xxxxxx aspektů xx xxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.26 - X.30 x X.33).
3. MUTAGENITA - GENOTOXICITA
Xxxxxxxxxx xx vztahuje x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx genetického xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Tyto xxxxx ("xxxxxx") xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxx, xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Účinky xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx projevovat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx vitro xx xxxxxx (xxxxxx) xxxxxx x baktériích (xxxxxx B.13/14) anebo xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v savčích xxxxxxx (metoda X.10).
Xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx X.12) xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx X.11). Xx xxxx xxxxx xxxxx jednoznačně xxxxxxxx xx vitro xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.
Pro látky xxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x kontrolu xxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxx další xxxxxx xx zjištění xxxxxxxxxx nebo x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx: potvrzení xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; zkoumání xxxxxx nezachycených základním xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx studií xx xxxx.
Xxx xxxx účely zahrnují xxxxxx X.15 až X.25 jak xxxxxxxxxxx xxxxxxx in vivo x xx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x jiných xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx složitějších xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Obecně xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx relevantní xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
Xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxx daný xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx testů toxicity x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxxxxxx rizika dědičných xxxxxx x xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx už vyvolaných xxxxxxxx (xxxxxxxx) mutacemi, xxxx. xxxxxxxxxx locus xxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxx (nezahrnuto x xxxx xxxxxxx), nebo xxxxxxxxxxxxxx aberacemi, xxxx. xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxx (xxxxxx X.25). Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx možného xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx člověka. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx takovou xxxxxx jen xx xxxxxxx xxxxxxxxx důvodů.
Xxx stanovení xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
4. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxx látky xxxxx být xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, v xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxx poskytují xxxxx xxxxxxxx xxx opakované xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx opakované aplikaci, xxxxxx X.7, x xxxxxxxxxxxxx studie s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx takových histopatologických xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx tkáních, xxxxx xx mohly xxx xxxx významné. Xxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxxxxx xxxxxxxxxxxxx chemické xxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx vyžadují xxxxx, podrobnější zkoumání xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.32) xxxx často x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (metoda X.33).
K dispozici xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx určují schopnost xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx transformací - in xxxx (xxxxxx X.21). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx typů x xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx.
5. XXXXXXXXXXX TOXICITA
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx zhoršení xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx (xxxx xx xxxxxxxx) xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx (vývojová xxxxxxxx) xxxxxxxxxx také teratogenitu x xxxxxx x xxxxxxx laktace.
Testovací xxxxxx (xxxxxx B.31) xxx studie xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx jako xxxxxxx vývojové toxicity xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx podáváním. Alternativně xxxxx xxx xxxxxxx xxxx způsoby xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Pokud je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx X.35) rozšířit xxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
6. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx funkčních xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Předběžné xxxxxxxxxx na neurotoxicitu xxxx vzejít x xxxxx akutní xxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7) zahrnuje také xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx odhalit xxxxxxxx xxxxx x neurotoxickým xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, hloubkové xxxxxxxx xxxxxx aspektu. Navíc xx důležité vzít x úvahu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx být xxxxxxxx x xxxxxx studiích xxxxxxxx. Xxxx například xxxxxxxx, xx jisté xxxxxxxxx sloučeniny xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxicitu, xxxxx xx posuzována xxxxxxxx B.37 a X.38 xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx podání xxxxx.
7. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx imunitního xxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx nebo navozenou xxxxxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx imunotoxických xxxxxx. Xxxxxx xx měla xxxxxx odhalit xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, vyžadující další, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx x vyhodnocení xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx studií xxxxxxxx. Nepředpokládá xx, xx bude x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx všechny xxxxxxxxx. Xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bude xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxikokinetických xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx). U některých xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxx změny x xxxx xxxxxxxx nebo xx xxxx ukázat xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx B.36).
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx odhad xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx způsobu aplikace, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx tkání. Xxxxxxx xxxxx xxxx informace x xxxxxxxxxxxxxxxxx parametrech x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx studií.
9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nečistot, x její xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx informace xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx studie x xxx xxxxxxxxxx x látkou x xxxx xxxxxxxxxx.
Vypracování xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx x kvantitativní xxxxxxxxx testované xxxxx (x xxxx xxxxx xxxxx větších xxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx zahrnuty x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx.
10. PÉČE X XXXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxxxx testy je xxxxxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx, xx kterém xxxx xxxxxxx chována, x správná xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX XXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx pokusná zvířata xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx, myši x xxxxxxx je xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 22 xX ± 3 xX xxx relativní xxxxxxxx vzduchu 30 - 70 %, xxx xxxxxxx má xxx xxxxxxx 20 xX ± 3 xX xxx relativní xxxxxxxx vzduchu 30 - 70 %.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx techniky xxxxxxx xxxx zvláště xxxxxxx xx teplotu. Xxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx o xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Při všech xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a vlhkost xxxxxxx, zaznamenávat xx x xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx x xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx x uvést xx zprávě x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx nevyžaduje jiný xxxxxx, mohou být xxxxxxx chována xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx jedinců xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxx 5 xxxxxx x xxxxx kleci.
Xxxxxxxxxx součástí zprávy x pokusech xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxx chovu x klecích a xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce, tak xxxxx xxxxxxxxxxx doby xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx použitý xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx výživová xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx potravy. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Používají xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x potravě, je xxxxx tomu xxxxxxxxxxx xxxxx diety.
Xxxxxxx x xxxxxxx, které xxxx prokazatelně xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx přítomny x xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx se xxxxx xxxx xxxxxxxx.
11. XXXXXXX XXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxx testovacích xxxxx xxxx xxx věnována xxxxxxxx xxxxxxxxx ochraně xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx x omezení xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxx fixní xxxxx (X.1.xxx) nebo xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx toxicity (B.1.tris). Xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx specifického kritéria x xxxxxxxx menší xxxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx o 70 % zvířat méně xxx xxxxxx X.1.
Xxxxxxx se závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx podávat x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, o xxxxxxx je známo, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx limitních xxxxx, xxxxx x testech xxxxxx toxicity (xxxxxx X.1, X.2 a X.3), ale také x xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (metody X.11 x X.12), xxxxxxxx vyhnout se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx omezit xx xxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx zdůvodnitelné. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx založeno xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastnostech xxxxx, xx výsledcích xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx dobře xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x dávkou xxxxxxxxxx x xxxxxxxx testu (xxxxxx B.3) x xxxxxx-xx pozorováno žádné xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx B.4) xxxx xxx xxxxxxxx; xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx dráždivosti (xxxxxx X.4), xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx.
Xx nutno xxxxxxxx xxxxxxx x ověřovat xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx stejnou xxxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx méně utrpení xxxx xx úplně xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxx.
Pokud xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx nebezpečnosti xxxxx x xxxxx xxxxx tam, xxx xx xx xxxxx.
12. XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX
Při hodnocení x interpretaci xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx in vitro xx xxxxx xxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx je xxxxx xxx x xxxxxxx xxxx; doklady o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx, mohou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Výsledky xxxxxxxxx mohou být xxxxxxx pro klasifikaci x xxxxxxxxxx nových x xxxxxxxxxxx látek xxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx vlastností xxxxxxxxxx x kvantifikovaných xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx výsledky xxxxx xxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx byl xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.1. AKUTNÍ XXXXXXXX ORÁLNÍ (XXX XX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx každé skupině xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx stanovit xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testu. Xxxxxxxxxx xx pozorované xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx pokusu, xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx především xxx pokusech xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx látky se xxxxxxx podávat v xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx je xxxxx, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, v jakých xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx jednotlivých experimentálních xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vehikulu. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx použití xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx roztok x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx další xxxxxxx xxxxxx v xxxxxx vhodných xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx známy xxxx xxxxxx před xxxxxx xxxx během něho xxxxxx relevantní toxikologické xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti; xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, jichž xx xxxxx xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx zajistil xxxxxxxxxx objem na xxxxx hladinách xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx koncentraci xxxxx ve vehikulu xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx xxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx testu by x xxxx xxxxxxx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx hodnoty.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxx každou xxxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx pohlaví. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, musí xxx nullipary x xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx v akutních xxxxxxx toxicity zvířata xxxxxxx xxxxx, než xxxx xxxxxxxx, xxxx xx se xxxxxx xxxxxxx menšího počtu xxxxxx. Xxxxx je xxxxx pečlivě xxxxxx x xx třeba xxxxxxxx, aby xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dávky. V xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx vyvarovat xxxxxx letálních dávek xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx tři, x xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx byl x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx x mortality. Získané xxxxx xxxx xxxxxx xx znázornění xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx, x xxxxx xx možné, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx limitní xxxx xxxxxx dávkou xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx a 5 xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx uvážit xxxxxxxxx xxxxx studie.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx by xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx by xxx xxxxxx podle obrazu xxxxxx, rychlosti vývoje xxxxxx a trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx doba, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx, a xxxx xx uhynutí, zvláště xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx hladová. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx večer před xxxxxx. X zvířat x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx výměny xxxxxxx xxxxxx hladovění; xxxxxxx x pitné xxxx xxxx omezen. X xxx pokusu xx xxxxxxx zváží a xxxxxxxxx látka xx xxxx xxxxxx orálně x xxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx menších xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Po podání xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ještě 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx se látka xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, může být xxxxxxx - podle xxxxx tohoto xxxxxx - potravu a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx podání xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx systematicky, xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx samostatné xxxxxxx. Xxxxx prvního xxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x zaznamenat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x bezprostřední xxxxxx xxxxxx na aplikaci.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx pracovního xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vyšetření. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, např. xxxxx nebo zmrazení xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx nebo umírajících xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, srsti, xxx, sliznic, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x chování. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx tremoru, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx uhynutí xx třeba zaznamenat xx nejpřesněji.
Zvířata, xxxxx během xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x druhého xxxxxxx
Po xxxxxxxxx xxxxxx xx jednom xxxxxxx, xxxx se xxxxx nejméně xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví x xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrazně xxxxxxxxxx xx testovanou xxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může být xxxxxxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx zvířat. Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx výrazně citlivější, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxx xx tabulky. X xx musí být xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx s xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Stanovení xxxxxxxxx jednotlivých zvířat xx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxx uhynutí. Xxxxx hmotnosti xx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx stres x xxxxxx xxxxxxxx podanou xxxxxx, xx zaznamenávají xxxx uhynutí vyvolané xxxxx látkou. LD50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxx xx melo xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx expozicí xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x výskytem x xxxxxxx xxxxx abnormalit xxxxxx xxxx chování, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx tělesné xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx chovu, xxxxxxx xxx.
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx podání xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxx humánní xxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxx xxxx pozorování,
- hodnota XX50 xxx xx xxxxxxx, x kterého byl xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x xx xxx 14xxxxx pozorování (x xxxxxxxx xxxxxx výpočtu),
- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50, xxxxx je xxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx x xxxx xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx všech testů xx xxxxxx pohlaví,
- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx během testu xx vypočtenou xxxxxxx XX50),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.1. bis XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX) - XXXXXX FIXNÍ XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxx xxxxxx toxicity xxxxxxxxx informace o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx následovat xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx s xxxxx xxxxxx se xxxxxxx xx dvou etapách.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx při xxxxxx aplikaci xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx, vždy jedno xxxxx xx dávku. Xxxxxxxxxx studie xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx x toxicity, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx v xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxx.
V hlavní xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx sondou xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx "xxxxxxx toxicitu" (xxx xxxx B - Xxxxxxxxx úvod xxx 1.2), xxx xx xxxxxxx.
Xx xxxxxx xx pozorují účinky. Xxxxxxxx vybraná xxxxxxx xxxxxx dávky vyvolá xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx mortalitu, není xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx když xxxxxxx xxxxxxx reakce xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxx xxxxxxxx xx nejbližší xxxxx úrovni dávky.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxxxx xxxxx" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx úvod xxx 1.2), xx. xxxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxx je xxxxx xxxxx, aniž xx xxxxx x xxxxx (xxxxxx případů xxxxxxxxx xxxxxxxx).
Zvířata xx xxxxxxxxx a přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx podávat v xxxxxxxx dávkách a xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx je xxxxx, xx vyvolávají značnou xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
1.2.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx tomu.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat. Na xxxxxxx xxxxx xx x xxxx xxxxxxx xxxxxx variační rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.
Xxxxxxx 5 dní xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x hlavní xxxxxx. Xxxxx stačí xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx pohlaví.
1.2.1.2 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx vhodném xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx vodného xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x rostlinném xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. U nevodných xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx nebo xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx neměl xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 ml.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx vodné xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx by xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx koncentrací, xxx xx zajistil xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxx testované látky xxxx být xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx odebere večer xxxx testem; přístup x xxxxx vodě xxxx xxxxxx. V xxx pokusu se xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx aplikovanou xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Po xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx přístup x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx určitého xxxxxx, může být xxxxxxx - podle xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx poskytnout.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxx různých xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se používají xxxxxx, xxxxx nejsou x xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Dávky xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx se xxxxxxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx dalšímu xxxxxxx. Všechna xxxxxxx xx xxxxxxx pozorují x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx otravy xxxxxxx xx sedm xxx; xxxxx xxxxxxxxxxx projevy xxxxx xxxxxx xxxxx xxx, zvíře xx xxxx pozorovat xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx hladiny xxxxx: 5, 50, 500 a 2000 xx.xx-1. Xxxxxxxx zvolená xxxxxxx dávka xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxx nejbližší vyšší xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx nutné podat xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx více xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx by xxx xxxxxxxxxx informace x xxxxxx(xxx) xxxxx, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx otravy, x o nejmenší xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx dávku podle xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxx k xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxx dávky 500 mg.kg-1. Jestliže xx xx xxxxxxx xxxxx nepozorují xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx 2000 xx.xx-1, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (např. 500 xx.xx-1) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx humánní xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx zvířeti xxxxxxxxx nižší xxxxx (xxxx. 50 xx.xx-1). Xxxxxxxx xxxx zvíře xxxxxxx, mohou být xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx, xx xx xxx tomto xxxxxxx xxxxxxxxx více než 5 xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx mělo xxxxxx nejméně 10 xxxxxx (5 samic x 5 samců). Xxxxxx xx měly xxx nullipary a xxxxxx xx xxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx dávky xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx dávek pro xxxxxx xxxxxx. Je xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxxxx xxxxx.
Dávka, xxxxx xxxx užita x xxxxx, xx xxx zvolena x xxxxx ze 4 xxxxxxx úrovní xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx výchozí xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xx, která xxxxxxxxxxxxx vyvolá zřejmou xxxxxxxx, xxxxx nikoliv xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx); xxxxxxx uhynutí xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx dávka xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxxxxx xxxxxxx testování.
Xxxx xxxxxx zvolené xxxxx xxxxxxxx zřejmou xxxxxxxx, xx nutné xxxxx znovu testovat xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx však xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx kompletní. Xxxxxxxx těžká xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látky, xxxx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx nižší xxxxxx dávek. Xxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx nutné xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxx látky xx xxxxxxxxxx provádějí x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxx x zaznamenat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
Doba xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, rychlosti xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx je možno xxxxx potřeby xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx doba, xxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx a xxxx xx xxxxxxx, zvláště xxx, kde xx patrná xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx příznaků.
Xxxxxxx xxxxxxxx vyšetření xx xxxxx provádět xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx x nejméně xxxxxxxxx xx den další xxx. Zvířata vykazující xxxxxx známky xxxxxxx xxxx výrazné xxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx několika prvních xxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, že xxxx xxxxxxx xxxxxx vysoká xxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity a xxxxxxx. Xxxxxxxx pozornost xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, xxxxxxx, průjmu, letargii, xxxxxx x komatu.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx 3 xxx a xxxxx xxxxxx týdně. Xxxxxxx, xxxxx uhynou během xxxxx, x ta, xxxxx přežívají xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx xx indikováno, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx předcházející úrovně xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx druhé xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
X xxxxxxx, že látka xxxxxxxx mortalitu při xxxxx 5 xx.xx-1 (xxxx jestliže xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx této dávce), xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxx x hlavní xxxxxx xx sestavují xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. X xx xxxx xxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxx xxxxxx xxxxxx, zda xxx pozorován xxxxxx xxxxxxx účinek, který xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; xxxxxx průběh xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx, že zvířata xxxxxxxxx xxxx xxx xxx, je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx hmotnosti.
Xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxx xxxx bolestem xxxxxxxxx testovanou látkou, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx x hlavní xxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení, xxx.,
- experimentální xxxxxxxx,
- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx úrovní dávek,
- ve formě xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x podle xxxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; změny xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx během xxxxx; počet zvířat x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx, stupeň a xxxxxx xxxxxx),
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx úhynu xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx utracení zvířat,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx histopatologické xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, včetně příznaků xxxxxx toxicity a xxxxxxxxxxxxxx dávkové xxxxxxx xxxxxxxx v testu.
3.2 Xxxxxxxxx x interpretace
Xxxxx | Výsledky | Xxxxxxxxxxxx |
5 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx než 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx zřejmá xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx jedovaté Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx při 50 xx.xx-1 |
50 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % přežití | Xxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxx velmi xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx 5 mg.kg-1 |
100 % xxxxxxx, xxx zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Látky, xxxxx xxxx zdraví xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx x 500 xx.xx-1 | |
500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx než 100 % přežití | Xxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x 50 mg.kg-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; není zřejmá xxxxxxxx | Látky, které xxx xxxxxxxxx za xxxxx bez xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx Viz xxxxxxxx u 2000 xx.xx-1 | |
2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx s nebo xxx xxxxxx toxicity | Xxx výsledky u 500 xx.xx-1 Látky, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx |
X.1. tris AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX XXXXXXXXX XXXXX XXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx toxicity xxxxxxxxx xxxxxxxxx jak pro xxxxxxxxxx xxxxxx, tak xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx stanovených xxxxx x přiměřených odstupech, xxx xxx bylo xxxxx xxxxxxxxxx látku xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx výběr xxx xxxxxxxxxxx pevně stanovených xxxxx, které lze xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxx dávky pro xxxxxx body xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx testování. Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx nebo xxxxxxxx další zpřesnění.
Metoda xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxx pro xxxxxxx přesné XX50. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, ve xxxxxx xx xxxxxxx úmrtnost, xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xx x x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinku. Xxxxxxxx testu xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx by trvání xxxxx mohlo být xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxx B.1. Xxxxxx výhodou xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx x metody xxxxxx toxicity (xxxxxx)(B.1) x xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1 bis).
1.2 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Látka se xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx ze xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxx zvířata xxxxxxxx pohlaví. Xxxx xxxxx provádět xxxxxxxxxx xxxxxx. Přítomnost xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx rozhodne x xxxxxx kroku, x.x.
- není zapotřebí xxxxx xxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx krok xxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx pohlaví;
- xxxxx krok xxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx nižší úrovní xxxxx.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx, xxx xxxx možná xxxxxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx, x chována xx xxxxx klecích xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx, xxx xxxxx xxxxxx v xxxxx kleci musí xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zvířete.
Testovaná xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jediné dávce xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx kanylou.
Pokud xx xx xxxxx, testovaná xxxxx xx rozpustí xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx nosiči. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x jedlém xxxxxxxxxx xxxxx (např. kukuřičném) x pak roztoku x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx známa xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx (xxxx. potkani xxxx xxx x xxxx 3 - 4 xxxxxx); přístup x xxxx xx neomezuje.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx důvody xxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx nullipary x xxxxx být xxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx zvířat (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.
1.3.2.2 Xxxxx x pohlaví
Pro xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxx kroku xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.3 Úrovně xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx ze xxx xxxxxxx úrovní, tzn. 25, 200 a 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Výchozí úroveň xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx, xxx x největší xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx látka podána. X xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx příslušného xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 1.
Xxx xxxxx xxxxxxx x výchozí xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx informací x vztahu xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx úmrtnost je xxxxxxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxx úrovni xxxxx (2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx), xxx se xxxxxxx limitní xxxx. Xxx nejsou xxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xx - x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxx xxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
X některých xxxxxxxxx xx třeba xxxx xxxxxxxx získanou xxxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxx x třemi pevnými xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxx případech xx xxxx xxxxxxxx o xxxxxx testování při xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx výši 5, 50 xxxx 500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxxx dávky, x xxxxxxx je xxxxx, že způsobují xxxxx leptavými nebo xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx.
Xxxxxx interval xxxx xxxxxxxxxxx skupinami xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Testování na xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx při xxxxx xxxxx je třeba xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx, že zvířata xxxxxxxxx xxxxx přežila.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx test x xxxxxxx xxxxxx xxxxx ve xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx provádí xx třech xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xxx další xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx 200 xx.xx-1 (xxxx 500 xx.xx-1) xxxxxxx hmotnosti.
1.3.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 14 xxx, kromě xxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxx vyloučena x xxxxxxx pozorování a xxxxxxx utracena x xxxxxx ochrany xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx předem pevně; xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx nástupu x délky xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx objeví x xxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxxxx jde-li o xxxxxxxx xxxxxxx příznaky. Xxxxxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx vedeny pro xxxxx xxxxxxxxxx zvíře.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xxx xxxxxxx xx dobu xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Kde xx xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, může xxx - x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxx - nezbytné xxxxxxxxxx zvířatům potravu x vodu.
Maximální objem xxxxxxxx, který může xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xx objem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x tělesné xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxx, xxx byl xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx úrovních xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx dávku celou xxxxxxxx, je možné xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx po xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx testování xxxx xxxxxxx v Xxxxxxx 1.
1.3.3.1 Xxxxxxxxx pozorování
Pečlivé xxxxxxxx pozorování se xxxxxxx dvakrát xx xxxxx den (den xxxxxxxx) nebo častěji, xxxxx xx vyžaduje xxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxx, a xxxx xxxxxxx jednou xxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx nalezena v xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx vykazující xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx humánně xxxxxxx: xxxx zvířata xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx uhynulá.
Ať xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx mrtvá, xxxx xxxxx je třeba xxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx kůži x xxxxx, na očích x xxxxxxxxxx, x xxxx na xxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx systému, xxxxxxxxx aktivitě x xxxxxxx. Pozornost je xxxxx věnovat výskytu xxxxx, křečí, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, spánku x kómatu.
Veškerá xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx vedeny xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3.2 Tělesná xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxx xxxx podáním xxxxxxxxx xxxxx a xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Počítají xx x zaznamenávají xxxxx xxxxxxxxx. Na xxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxx zvážena xxxx xxx, xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3.3 Xxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x utracených xxxxx testu, se xxxxxxx pitva. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx zvíře xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx informací xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zvířat přežívajících 24 a více xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX ÚDAJŮ
K xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x xxxxxx jednotlivém xxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx x vratnost xxxxxxxxx účinků, a xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx výsledků xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x Dodatku 2.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x pokusu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh/kmen;
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx-xx xxxx;
- xxxxx, xxxxx a pohlaví xxxxxx;
- zdroj, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx atd.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a na xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx testování:
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx voda;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx objemů x xxxx aplikace;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx a xxxxxxx xxxx (xxxxxx druhu x zdroje);
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx každého zvířete xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx (tzn. zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx);
- xxxxxx x xxxxxx průběh příznaků xxxxxxxx x jejich xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX TG 423.
XXXXXXX 1
XXXXXX XXXXXXXXX
1. Jak xxxx xxxxxxx x xxxx 1.4.2.3, výchozí xxxxx xx xxxx xxx xx ze xxx pevně stanovených xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx uhynutí xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx výběr xxxxxxx dávky xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx struktury x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx z xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx.
2. Příslušné xxxxxxxx xxxxxxxx uvedené x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx dávku. X xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx zvířat postupuje xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxx xx aplikaci xxxxxxx xxxxx 25 xxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx uhyne pouze xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxx xxxx netestuje. Xxxxx xxxx přitom xxxxxx x ostatních 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx pitvou ověřit xxxxxxx, xx úmrtí xxxxxxxxxxx x podanou xxxxxx. Jestliže xx xxxx xxxxxxx potvrdí, xx třeba pokračovat x xxxxxxxxx xx xxxxx úrovni xxxxx.
4. Xxxxx xx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx každého pohlaví, xx se xxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx XX50 xxxxxxxx dávku 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx to xxxx jen xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx dvou xxxxxx xxxxxxx pohlaví: xxxxxxxx, xxxxxxx toxické xxxxxxxx x těchto xxxxxx xxxxx být důvodem xxx klasifikaci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx XX50 ve xxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti nebo xxxxx, nebo xxxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxx testování na xxxxxx xxxxxx xxxxx.
5. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx dávkami (xxxxxxxx 2). Xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xx dokončení testování xxxxx xxxxxxxx 1.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 25 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X rámečcích xx udána xxxxx, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx).
Xxx rámečky xx xxxxx uhynulých nebo xxxxxxxxxx zvířat (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu xxxxxxxxx xxxxxx xx v xxxxxxxxx pokračuje xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx šedého xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x příslušném xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx způsobu vyhodnocení xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx doplňkovou dávkou.
Ukončení xxxxx: Klasifikace se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx udána xxxxx, xxxxx xxxxxx x pohlaví (1 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se x xxxxxxxxx pokračuje xx xxxxx šipek xx do dosažení xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Pokračování testu x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v příslušném xxxxx rámečku.
Postup testování x výchozí xxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx a pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx je počet xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat xx v testování xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx šedého xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx uvedeného x Dodatku 2.
Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx s příslušnou xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx.
XXXXXXX 2
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx (1 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Šedé xxxxxxx xxx xxxxxxxx "XXXXX XXXXX XXXXXXXXX" x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx konečné xxxxxxx xxx klasifikaci. Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1 se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx pro příslušný xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx XX50 je větší xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx rámečku xxxxx.)
(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 25 xx/xx tělesné hmotnosti
(b) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkou 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxx 2000 xx/xx tělesné hmotnosti
Interpretace xxxxxxxx založených na xxxxxxxxx variantě 1
x) Xxxxxxx xxxxx 25 xx/xx tělesné xxxxxxxxx
&xxxx;
x) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
x) Xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx hmotnosti
X.2. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx velikosti xxxxxx, xxxxx xxx, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx, teplotě vzplanutí x xxxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx
1.2 Xxxxxxx metody
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx určenou xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x to xxxxx koncentraci x xxxxx xxxxxxx. Potom xx xxxxxxx xxxxxxxx x zjišťují xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx třeba humánním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x takových xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Příprava
Nejméně 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Před xxxxxx se zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx nevyžaduje xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, není třeba xxxxxxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx velikosti. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; x tom xxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace vehikulum xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná historická xxxx, xx možno xx xxxxxx.
1.3.2 Experimentální xxxxxxxx
1.3.2.1 Pokusná zvířata
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Používá xx xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Xx začátku xxxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx musí xxx nullipary x xxxxx xxx březí.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx testech xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx použití xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx je třeba xxxxxxx xxxxx a xx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx překročeny xxxxx toxické dávky. X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx byl x xxxxxxxxxxx skupin xxxxxxxxx rozsah xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkou x xxxxxxxxxx x, xxxxx xx xx xxxxx, musí umožnit xxxxxxxxx LC50 x xxxxxxxxxxx spolehlivostí.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx xx 4 xxxxxxxx expozici 5 xxxxx x 5 xxxxx plynu x xxxxxxxxxxx 20 xx.x-1 xxxx parám xx aerosolu xxxxxx xxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx 5 xx.x-1 (nebo - x případech, xxx xxxx xxxxxxxxxxx není xxxxx použít v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx včetně rizika xxxxxxx - xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxxx 14 xxx k žádné xxxxxxxxx xxxxxxxx sledovanou xxxxxx, xxxxxxxx se xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxx expozice
Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxx 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xx zvířaty xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zařízení, xxxxx xxxxxxxx dynamické xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, aby xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, je třeba xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx co xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx stability xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx xx neměl x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx dva xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.7 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze ji xxxx stanovit xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx reakcích, na xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x na xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx potřeby xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx otravy, xxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx, zvláště tam, xxx xx patrna xxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx bezprostředně před xxxxxxxx zváží. Xxxxxxxx xx xx xxxx 4 xxxxx od xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxx 22 oC ± 3 o X. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx být xxxxxxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x aerosoly). Udržování xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx vodního xxxxxxx) zabrání xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx nepodává xxxxxxx xxx xxxx.
Xxxxxxxxx xx vhodné xxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx testovací atmosféry. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx bude xxxxxxxx xx nejrychleji. Xxxxxxxxxx x provoz xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry x xxxxxx.
Je xxxxx xxxxxxxx měření xxxx monitorování xxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx vzduchu (kontinuálně),
(x) skutečná koncentrace xxxxxxxxx xxxxx se xxxx x xxxxxxx xxxx alespoň xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxxxx xx vysoké xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Během xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx odchylovat xx xxxxxxx hodnoty x xxxx než ±15 %. U xxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx možné xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolísání. Xx xxxxx dobu xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx tak xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Pokud xx týká částic x aerosolů, měří xx xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx xxx xxxxx, xxx to xxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx),
(c) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx expozice x xx xxxxx xxxxxxxx xx pozorování xxxxxxxxx x zaznamenávají xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxx provádět xxxxxxxxxx často. Xxxxxxxxx xxxxxx každý xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx snížení xxxxx xxx studii, xxxx. xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx či utracením xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx, srsti, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxx.
Zvířata, která xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx i dolní xxxxx xxxxxxxxx traktu. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické xxxxx xx zaznamenávají x odeberou xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx patrný počet xxxxxx xx počátku xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx vykazujících xxxxx xxxxxxxx toxicity, xxxxx xxxxxxxxx účinků a xxxxxxx xxxxxx. Změny xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx x zaznamenat, xxxxx zvířata přežijí xxxx xxx xxxxx xxx. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx. LC50 xx xxxxxxx uznávanou xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx - xxxxx xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx zvířete xxxxxxxxx xxxxx x výskytem x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx, klinických xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x všech dalších xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, atd.,
- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx systému x xxxxxxx umístění xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx je xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx pro měření xxxxxxx, xxxxxxxx vzduchu, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,
- xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx hodnotami x xxxxxxxxxxxxxxxx variability (např. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx údaje:
a) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x inhalačním xxxxxxxx;
x) xxxxxxx x xxxxxxx vzduchu;
c) xxxxxxxxx koncentrace (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx);
Xxxx.: při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx (např. xx xxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxxxx, nýbrž xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, koncentraci xxxxxx látky ve xxxxxxxx.
x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxx;
x) skutečná xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx;
f) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx průměru (XXXX) x geometrická xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX);
x) xxxx xx xxxxxxxx rovnováhy;
x) xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxx reakcí xxxxx pohlaví x xxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxx zvířat, xxxxx x pokuse uhynula xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx);
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxx skončení, xxxxxx x kritéria xxx xxxxxxx utracení xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx;
- hodnota XX50 xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pro XX50 (pokud je xxxxx jej stanovit);
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxxx (xxxxx to xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx);
- pitevní xxxxxx;
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- diskuse xxxxxxxx (xx zvláštním xxxxxxxx k vlivu xxxxxxxxxx utracení zvířat x humánních xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx LC50);
- interpretace xxxxxxxx.
B.3. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx nanáší na xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, i zvířata, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx humánním xxxxxxxx utratit. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých nebo xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx budou xxxxx experimentu. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx 24 xxxxx xxxx zahájením xxxxx xx xxxx xxxxxx xx zádech ostříhá xxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx holení xxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xx nepoškodila (xxxx. abrazí) xxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx její xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x práškové formě, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit xxxxx xxxx vhodným vehikulem, xxx byl xxxxx xxxxxxx s kůží. Xxx použití xxxxxxxx xx nutné brát x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx vehikula by xx měl řídit xxx, x xxxx xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx s xxxxxxx xxxx, x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vybrat xxx, xxxxx xxxxxxx usnadňuje xxxxxx xxxx. Testované xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx neředěné.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxx i xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx jsou xxx xx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro každou xxxxxx dávek xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, xxxx xxx nullipary a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx x obou xxxxxxx xx výrazně xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Používají-li xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Dávky je xxxxx xxxxxxx zvolit x xx xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx třeba vyhnout xx xxxxxxxx letálních xxxxx testované xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx, xxxxxxx xxx, x mají být xxxxxx xxxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxx testovací xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x mortality. Xxx xxxxxxxxxxx x úrovních xxxxx je xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxx údaje xxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x účinkem, a xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx LD50 s xxxxxxxxxxx spolehlivostí.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxx test xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx s xxxxxxxx xxxx popsaných xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx úplnou studii.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 14 dní. Xxxxx ji xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx fáze xxxxxxxx. Dobu xxxxxxxxxx xx xxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxx do xxxxxxx, xxxxxxx tam, xxx je xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx 10 % xxxxxxxxx povrchu xxxx. Xxx vysoce xxxxxxx látky může xxx xxxx plocha xxxxx; xxxx by xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx co xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx 24 hodin xxxxxxxxx v kontaktu x xxxx pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pro omezení xxxxxxxx xxxxxx, úplnou xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx způsobem se xxxxxxx očištění xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx systematicky zaznamenávat. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xx zvířata xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx pracovní xxx je xxxxx xxxxxxx pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x odpovídající xxxxxxxx xxxx sloužit xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx pro studii, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat xxxx izolací x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zvířat.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxxx, xxxx, na xxxxxx xxxx provedena xxxxxxxx, xxx a sliznic, x xxxx dýchání x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx autonomní x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, slinění, xxxxxx, letargii, spánku x xxxxxx. Okamžik xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx uhynou, x xxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pro histopatologické xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Hodnocení toxicity x xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x pěti zvířatech xxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx druhého xxxxxxx xxxxxx výrazně citlivější xx xxxxxxxxxx xxxxx. X konkrétních xxxxxxxxx xxxx xxx odůvodněno xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Pokud xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx citlivější, testování xx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx xx možno xxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx být pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx jednotlivých xxxxxx, počet zvířat x xxxxxx projevy xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Stanovení hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxx testované látky, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x před xxxxxxxxx. Xxxxx hmotnosti xx xxxxx xxxxxxxx x zaznamenat, přežijí-li xxxxxxx xxxx než xxxxx den. Zvířata, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx látkou, se xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx touto látkou. XX50 xx vypočte xxxxxxxxx xxxxxxx. Dále xx hodnotí xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, mezi xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x výskytem x stupněm xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, klinických xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx hmotnosti, xxxxxxxxx x všech ostatních xxxxxxxxx účinků.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, podmínky xxxxx, krmení xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxx očištění xxxx a typu xxxxxx: xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx je xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx pokusných xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx xxxxx (xxxxx zvířat uhynulých xxxx humánně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; počet xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx po podání xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx pro xxxxxxx utracení xxxxxx,
- všechna pozorování,
- hodnota LD50 xxx xx xxxxxxx, x kterého xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x to xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx metody xxxxxxx),
- 95% interval xxxxxxxxxxxxx pro XX50 (xxxxx xxx xxx xxxxxxxx),
- křivka xxxxxxxxxx mortality xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vypočtené xxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx během xxxxx),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.4. XXXXXX XXXXXXXX (KOŽNÍ XXXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx informace x xxxx xxxxx x xxxxx snížit na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat výrazné xxxxx reakce. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx test, xxxxxx xx xxxxxxx zvířeti xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx další testování.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx reaktivita. Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. xX xxxxx xx xxxxx 2 nebo xX xxxxx či xxxxx 11,5) xxxx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxx xxxx x xxxxx také xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx přesvědčivé xxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx in xxxxx xxxxx, xxxx vyžadován xxxxx xxxx.
x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx látka x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx limitní xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 tělesné hmotnosti) x nebylo pozorováno xxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xxxx testovat xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx třeba xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx cestě xxxxxx.
Studovaná xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx jako xxxxx vlastní xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxx xx odečte, xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx podráždění, xxx xxxx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx možné xxxx zhodnotit xxxx xxxxxxxxxxxxx pozorovaných xxxxxx.
Xxxxxxx xx závažnými x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx třeba humánním xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx zvířat xx xxxxxx ostříhá xxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx dbát xx xx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx zdravou, xxxxxxxxxxx kůží.
Některé xxxxx králíka xxxx xxxxxxxx husté xxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx nanášet xx tyto zóny xxxxx husté xxxxx.
Xxx xxxxxxxx s xxxxxxx látkami, případně xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, případně xxxxx xxxxxxx vehikulem, xxx xxx xxxxx xxxxxxx s kůží. Xxx použití vehikula xx xxxxx brát x xxxxx xxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx různé xxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxx dát xxxxxxxx albínu králíka.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Jestliže xx x xx xxxxx screeningových xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx vyvolávat nekrózu (xxxx. je xxxxxxx), xx xxxxx uvážit xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xx třeba doplnit xxxxxxxxx xx dvou xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx nejméně tři xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx zvláštních xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinu, pro xxxxxxxxx případů nejednoznačných xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx další xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxx nejsou xxxxx zvláštní xxxxxx xxx jiný xxxxxx, xxxxxx se xx xxxxxxxxx místo xxxx 0,5 xx xxxxxxxx xxxx 0,5 x xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Přilehlé xxxxxxx xxxxxxxxxx kůže xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxx pozorování
Dobu xxxxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx třeba xxxxxxxxxxx dobu 14 xxx xx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx xxxxxxx jednotlivě x xxxxxxx. Testovaná xxxxx xx xxxxxx xx malou xxxxxx (xxx 6 xx2) xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx mulu xxxxxxxxxxxx nedráždivou xxxxxxxx. X xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxx může xxx vhodné xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxx, a xxx jej připevnit xx xxxx. Xx xxxx trvání xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx volně xx xxxx vhodným xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx tomu, xxx xx xxxxx dostalo x xxxx x xxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxx xxxxxx xxxx xx vdechnout.
Xx xxxxx doby xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx testovanou látku xxxxx, pokud je xx xxxxx, nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, ale xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 4 xxxxxx.
Xxxxx existuje xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx vyvolat xxxxxxx (xxxx. xxx, že xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx zkrátit délku xxxxxxxx (xxxx. na 1 hodinu xxxx 3 minuty). Při xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nejprve xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx 3 xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx dermální xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. První plátek xx odstraní po 3 minutách. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx závažná xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx druhý xxxxxx xx 1 xxxxxx. Xxxxx pozorování v xxxx fázi naznačují, xx je xxxxxxxx 4xxxxxxxx expozice x xx neodporuje principu xxxxxxxxx zacházení, odstraní xx xxxxx xxxxxx xx 4 xxxxxxxx x klasifikují xx xxxxxx odpovědi xxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxx 4hodinová xxxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxx s xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů (xxxx. xxxxxxxx xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx xx pozorována nekróza xxxx).
Xxxxxxxx je xxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxx. nekróza) pozorována xx 3 minutách xxxx xx 1 xxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx ukončen.
Xx xxxxxxxx podmínek xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x vyhodnocení
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx x kožního xxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxx xx 60 xxxxxxxx x xxxx 24, 48 x 72 xxxxx xx odstranění plátku x testovanou xxxxxx. Xxxxxx podráždění xxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 1. Jestliže xxxxxx xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx úplného xxxxxxxx xxxxxx, provádí xx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx podrobně xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx léze xxxx poleptání (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx tkáně) x jiné toxické xxxxxx. K objasnění xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxx tloušťky xxxxx xxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx každé pokusné xxxxx patrný stupeň xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx erytému x xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx stupně x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x všechny xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx obsahuje xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx chovu, krmení xxx.,
- experimentální xxxxxxxx (xxxxxx relevantních xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností xxxxxxxxx xxxxx, technik xxxxxxxx x xxxxxxx kůže, xxx xxxxxx: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxx tabulky údaje x kožní reakci xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx při každém xxxxxxxxxx (xx 1, 24, 48 x 72 xxxxx xxx. xx xxxxxxxxxx mulu),
- xxxxx zjištěných xxxxxxx poškození xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx podráždění a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx všech xxxxxxx toxických účinků xxxxx podráždění xxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx výsledků.
4. XXXXXXX
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx | |
1. Xxxxxxxxx erytému x xxxxxxxxx | |
1.1 Žádný erytém | 0 |
1.2 Velmi xxxxx erytém (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx erytém | 2 |
1.4 Xxxxx xx výrazný xxxxxx | 3 |
1.5 Těžký xxxxxx (silné xxxxxxxx) xxxx xxxxxx příškvaru (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) znemožňující xxxxxxxxx xxxxxxx | 4 |
2. Xxxxxxxxx edému | |
2.1 Xxxxx xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx lehký edém (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
2.3 Lehký edém (xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vyvýšením) | 2 |
2.4 Xxxxx xxxx (xxxxxx xxxxxxxx asi x 1 xx) | 3 |
2.5 Výrazný xxxx (xxxxxxx více xxx 1 mm x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx plochy) | 4 |
4.2 Klasifikace xxxxx indexu xxxxx xxxxxxxxxxx (XXX)
XXX xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx stupně xxxxxx xxx erytém a xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx odečtu u xxxxxxx xxxxxxx x x takto xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx aritmetický xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx | XXX |
xxxxxxxx | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx dráždí | 0,5 &xx; XXX ≤ 3 |
xxxxxxx dráždí | 3 &xx; XXX ≤ 5 |
xxxxx xxxxxx | IKI > 5 |
B.5. XXXXXX XXXXXXXX (XXXX XXXXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxxxxx metody
1.1.1 Xxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx zvážit xxxxxxx xxxxxxxx informace x xxxx látce s xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat xxxxx xxxxxx. X xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Např. xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx látky, xxxxx - jak xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx v oku xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX rovné xx xxxxx 11,5, není xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx očekávat závažná xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx studií; látky x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx silně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxx lze xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx účinky xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxx dráždivosti. Xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx zřejmé xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxx xx studii xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx dále xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxx na oči xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx se v xxxxxxxxxxx xxxxx aplikuje xx xxxxxxx oka xxxxxxxx pokusným xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx stanovených intervalech xx odečte a xxxxxxxxx stupeň xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxx popíše, aby xxxx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx zhodnotit také xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků.
Xxxxxxx xx závažnými a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
24 xxxxx xxxx testem xx x každého x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx očí. Zvířata, x kterých se xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, se x xxxxxxxxxxx vyloučí.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx druhy xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xx dávat xxxxxxxx xxxxxxxx dospělému albinotickému xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet zvířat
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx účinek) xxxx xxxxxxx (irreversibilní xxxxxx) xxxxxx xxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx postupu, není xxxxx další xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx být případně xxxxxxxxx další xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx tří xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nálezů xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxx testování xxxxxxx xx používá xxxxx 0,1 xx. X xxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxx 0,1 xx xxxx hmotnost xxx 0,1 x (xxxxxxxx je xxxx xxxxx xxxxx). Xxxxx-xx xx x tuhou xxxx hrubě zrnitou xxxxx, je xxxxx xx rozemlít xx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx až po xxxxxxxx zhutnění, xxxx. xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba vystříknout x xxxxxx 0,1 xx xxxxx a xxxxxxxxxx ji xx xxx xxxxx xxxxxx xxx kapaliny.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx doby xxxxxxxxxx není možno xxxxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx dostatečně xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx však xxxxx 21 xxx po xxxxxxxx studované xxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx každému xxxxxxx xx spojivkového xxxx xxxxxxx xxx xxx, xx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx. Xxxxx se xxx xxx na 1 xxxxxxx lehce x xxxx přidrží, xxx xx xxxxx látka xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Jestliže xx předpokládá, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, lze xxxx instilací testované xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx bylo xxxxxxxxx, xx následkem xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx zvolit xxx, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx způsobem se xxxx xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxx xxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx nejdříve 24 hodiny po xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xx 24 xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, pokud xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
U některých xxxxx, xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx metodě xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx po xxxxxxxxx xxxxx vymyjí xxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 3 xxxxxxx. Xxx xxxxxx po instilaci xx oči xxxxxxxx xxxxxx po xxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pozorování x xxxxxxxxxxx
Xxx xx xxxxxxxxx po 1, 24, 48 a 72 hodinách. Xxxxxxxxxxx-xx xx xx 72 xxxxxxxx žádné xxxxxxxx xxxxxx lézí, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx tak, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx xxxxx změn x xxxxxx vratnost xx nevratnost. Vedle xxxxxxxxxx na xxxxxxx, xxxxxxx x spojivce xx xxxxx zaznamenat x xxxxx ve xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx oka xx xxxxx xxx každém xxxxxxxxx stanovit podle xxxxxxxx v příloze x xxxxxxxxxx. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xx, xxx provádějí xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.)
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx usnadnit použitím xxxxxxxxxxx lupy, xxxxx xxxxxxxxxx lampy, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx pozorování xx 24 hodinách xx xxxxx oči některých xxxx všech xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx ještě xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Údaje xx sestaví do xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx intervalu xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lézí x všechny mimooční xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx),
- x xxxxxxxxx xxxxx výčet xxxxxxxxxx nebo leptavých xxxxxx xxx jednotlivá xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx)
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x poleptání, včetně xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,
- popis metody xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1, 24, 48 a 72 hod.), xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx, fluorescein xxx.,
- popis všech xxxxxxxxxx mimoočních xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. DODATEK
4.1 Xxxxxxxx xxxx xx xxx
Xxxxxxx | |
X. Xxxxxxxx - xxxx | |
Xxxx není xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx | 1 |
Výrazný xxxx x xxxxxx víčka | 2 |
Xxxx způsobující xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx | 3 |
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx více xxx na xxxxxxxx xxxx zcela | 4 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxx | |
Xxxxxx není xxxxxxxx | 0 |
Slabé xxxxxx (xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx vnitřním koutku) | 1 |
Slzení se xxxxxxxxx víček x xxxxx v xxxxxxxxx xxx | 2 |
Slzení xx zvlhčením xxxxx x srsti x xxxxxxx xxxxx xxx | 3 |
C. Xxxxxxxx - xxxxxxx | |
Cévní xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx jednotlivých xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx | 2 |
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx | 3 |
X. Duhovka - xxxxxxxx | |
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx duhovky, překrvení, xxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxx více xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx), reakce na xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx a hemoragie | 2 |
v xxxxxxx (xxxxx xxxx více xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx) | |
X. Rohovka - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | |
Xxxxxxxxxxxxx xxxx přítomná | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx charakteru, xxxxxxx xxxxxxx zůstávají xxxxx xxxxxxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx, snadno se xxxxxxxxxxxx, detaily xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx | 2 |
Xxxxxxxxxx zóny xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx | 3 |
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx | 4 |
X. Xxxxxxx - xxxxxx neprůhlednosti | |
Neprůhlednost xx xxxxxxxxxxxxx, ale xxxx plocha je ≤ 1/4 xxxxxx xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 plochy xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; plocha xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 3 |
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx &xx; 3/4 xxxxxx xxxxxxx | 4 |
4.2 Xxxxxxx akutního indexu xxxx dráždivosti (XXX)
Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxx xxxxx xxxxx x xxxxx interval xxxxxxxxx xx xxxxxxx podle xxxxxx
XXX = 2.(X + B + C) + 5.X + 5.X.X
Xxxxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxx xxxxx interval xxxxxxxxx xx vypočte xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx průměr z XXX.
Akutní xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx XXX xx xxxxx nejvyššímu XXX xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx
4.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx | XXX |
xxxxxxxx | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
xxxxxx | 15 - 29,9 |
xxxxx xxxxxx | 30 - 59,9 |
xxxxx xxxxx xxxxxx | 60 - 79,9 |
xxxxxxxx xxxxxx | 80 – 110 |
B.6. SENZIBILIZACE XXXX
1. METODA
1.1. Úvod
Xxxxxxxx:
Citlivost a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxx xxxx považovány xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx systém toxicity x oblasti xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, která xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxx x která xx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxx charakteristiky xxxxx, xxxxxx schopnosti xxxxxxx xxxx.
Xxxxx na xxxxxxxxx xxx rozdělit xx xxxxx s xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx testované xxxxx xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (FCA), x xx testy xxx xxxxxxxx.
Xxxxx x xxxxxxxx se zdají xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx než xxxxxx xxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xx jim xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Test - XXXX) xx velmi xxxxxxxxx test x xxxxxxxx. Ačkoliv k xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xx GPMT xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x adjuvans.
X xxxxx skupin xxxxxxxxxx látek xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xx dává Xxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx spíše xxx xxxxxxxxxxxxx injekci xxxxxxxxxx v maximizačním xxxxx xx morčatech. Xxx použití Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx důvody.
X xxxx metodické xxxxxxxx xxxx popsány xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx (XXXX) a Xxxxxxxxx test. Lze xxxxxx x jiných xxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx jsou odborné xxxxxx xxx jejich xxxxxxx.
Pokud xxxxxxxxxxxx xxxx provedený uznávanou xxxxxxx dá xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx možno xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx potenciální xxxxxxxxxxxxxx xxx dalšího xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx provést xxxx xx xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx kapitole.
1.2 Definice
Xxxxxxxxxxxxx kůže: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) je xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx. X xxxxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zarudnutím xxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx druhů se xxxxx reakce xxxxx x může být xxxxxxxx pouze xxxxxxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx přecitlivělosti.
Xxxxxxxx xxxxxx: období nejméně xxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx kterého xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx expozice (xxxxxxxxx): experimentální xxxxxxxx xxxxxxxx dříve vystaveného xxxxxxxxx látce po xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx, zda xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx metody xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx šest xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx xx známo, xx xxxx mírný až xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxx.
X xxxxxxx provedeného xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % u xxxxxx x adjuvans a xxxxxxx 15% u xxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:
Číslo XXX | Xxxxx XXXXXX | xxxxxxxx xxxxx | generický/obchodní xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxx |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-merkaptobenzothiazol | xxxxxx |
94-07-7 | 202-303-5 | Xxxxx xxxxx kyseliny p-aminobenzoové | xxxxxxxxx |
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx být použity xxxx kontrolní xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Pokusná xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Po xxxxxx 10 až 14 xxx (xxxxxxxx xxxxxx), x xxxxxxx xxxxxxx xx může rozvinout xxxxxxxx reakce, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx a xxxxxx kožní xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx porovnán x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x kontrolních xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx x xx jim aplikována xxxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku, xxxxxxx se xx x xxxxxxxx vody xxxx vhodného rozpouštědla xxx, xxx nebyla xxxxxxxx xxxxxxx kožní xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.1 Maximizační xxxx xx morčatech (GPMT)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxxxxxx morčata xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx podmínky xx xxxx xxxxx 5 xxx xxxx zahájením xxxxx. Xxxx xxxxxx xx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx expozičních x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx stříháním, holením xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x závislosti xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xx to, aby xxxxxxx x poškození xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x na xxxxx xxxxx.
1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx albinotických xxxxxx.
1.5.1.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx samce i xxxxxx. Xxxxxx musí xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxxx 10 zvířat x xxxxxxx 5 xxxxxx xx třeba x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx a 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxx dojít x závěru, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx, doporučuje xx xxxxxxxxx xx dalších xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.3 Xxxxxxx úrovně
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx expozici se xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x která xx xxxxxxxx xxxxxxxx mírné xx střední xxxxxxxxxx xxxx.Xxxx provokační xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx na dvou xxxx xxxxx zvířatech. Xxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx bylo xxxxxxxxxx FCA.
1.5.1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.1.3.1 Indukce
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx injekcí, xxxxx xx 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxxx oblasti xxxxxxx srsti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx:
Xxxxxxx 1: Freundovo xxxxxxxxx xxxxxxxx (FCA) xxxxxxx x vodou xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx poměru 1 : 1;
Xxxxxxx 2: testovaná xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ve zvolené xxxxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Pro xxxxxxx 3 se xxxxx xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x XXX xx xxxxx fázi. Xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx FCA. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 3 xx xxx xxxxxx xxxx pro xxxxxxx 2.
Injekce 1 x 2 xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x co xxxxxxxx hlavě, xxxxxxx xxxxxxx 3 xxxxxx xx kaudální xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx 0 - Kontrolní xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx subkutánních injekcí, xxxxx po 0,1 xx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx míst xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) smíšené x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;
Xxxxxxx 2: neředěné xxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) xx směsí XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x poměru 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx aplikací, xxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxx pro xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx důkladném xxxxxxxxx xxxxxxxx oholení xxxxx 0,5 xx 10% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vazelíně, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx vehikulu xx napuštěn filtrační xxxxx (2 x 4 xx), xxxxx xx pak xxxxxxx xx testovací xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 48 hodin. Xxxxx vehikula xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx vhodného xxxxxxxx; xxxxxxxx lze xxxxxxxxx xxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx zbaví srsti. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxx skupiny na xxxx 48 xxxxx.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. den - Xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx
Boky xxxxxxxxxxxx x kontrolních zvířat xxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxx bok xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx nebo x xxxxxxx x xx xxxxx bok xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vehikulum (xxxxx xx to xxxxx). Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx udržují x kontaktu x xxxx xx 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx: testované a xxxxxxxxx xxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx provokační xxxxxx xxxxxxx, důkladně xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x x případě xxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx xx xxxxx stupnice xxxxxxx x xxxxxxx;
- xxxxxxxxx 24 xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx provede xxxxx pozorování x xxxxxx xxxxxx xxxx (72 xxxxx).
Doporučuje xx systém "slepého xxxxxx" x testovaných x kontrolních xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx osoba xxxx, které xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx je kontrolní.
Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx přibližně o xxxxx xxxxxxx, v xxxxxxx potřeby xxxxx x xxxxxxxxx skupinou x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx skupině.
Všechny xxxxx reakce x xxxxxxxxx nálezy, včetně xxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx postupů, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx dalších xxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxx
1.5.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se aklimatizují xx xxxxxxxxxxx podmínky xx xxxx xxxxx 5 dnů xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx srsti xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx chemickou xxxxxxxx, v xxxxxxxxxx xx xxxxxxx testovací xxxxxx. Xx třeba xxxx xx xx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx zváží před xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxx.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Lze xxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být březí. Xxxxxxx xx minimálně 20 xxxxxx x xxxxxxxxx skupině x xxxxxxx 10 xxxxxx x kontrolní skupině.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx úrovně
Koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx indukční xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx mírné, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx maximální xxxxxxxxxxx, xxxxx u nesenzibilizovaných xxxxxx xxxxxxxxxx podráždění xxxx. V případě xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx pokusu xx xxxx xxxx xxxxx zvířatech.
Xxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxx použít xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx detergentu xxxx xxxxxxxx. Xxx jiné xxxxx xx preferován 80% xxxxxx xxxxxx/xxxx xxx indukci a xxxxxx pro provokaci.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Testovaná xxxxxxx
Xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Systém xxxxxxxxxx testu xx xxxxxxxx nasytí xxxxxxxxxx xxxxxx xx vhodném xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
Xxxxxxxx test je xxxxxxxx xx testovací xxxxxx a přidržován x kontaktu s xxxx překrývacím xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx obvazem po xxxx 6 xxxxx.
Xxxxxx plátkového xxxxx xxxx být okluzivní. Xxxxxx je bavlněný xxxxxxxxx, ať xx xxxxxxx xxxx čtverhranný, x plochou xxxxxxxxx 4 - 6 xx2. Xx preferováno xxxxxxxxx x použitím xxxxxxxx přidržovače, aby xx xxxxxxxxx okluze. Xxxxxxxx xx použito xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Jeden xxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Xx xxxxxxxxx plochu xx naneseno pouze xxxxxxxxx, x to xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x testované xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x přidržován x xxxxxxxx x xxxx překrývacím plátkem xxxx komůrkou x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx, že negativní xxxxxxxxx skupina xxxx xxxxx, xxx použít xxxxx kontrolní xxxxxxx xxx xxxxxxxx.
6. - 8. x 13. - 15. xxx - Testovaná x xxxxxxxxx skupina
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx x den 0 xx provede xx xxxxxxx testovací xxxxxx xx tomtéž xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) 6. - 8. xxx x xxxxx 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx
27. - 29. xxx - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxx testovaných x xxxxxxxxxxx zvířat je xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Okluzivní xxxxxx xxxxxxxxxx příslušné xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx nedráždivé xxxxxxxxxxx xx aplikuje xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx testovaných x xxxxxxxxxxx zvířat. Xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxx. Překrývací xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x kontaktu x xxxx xxxxxxx xxxxxxx po xxxx 6 hodin.
1.5.2.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx později (xxxxxxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx stupnice xxxxxxx x dodatku;
- xxxxxxxxx po dalších 24 xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 54 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx kožní xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" x testovaných x kontrolních zvířat, xxx pozorující osoba xxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx kontrolní.
Xxxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx provokace (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), provede xx přibližně o xxxxx xxxxxxx, v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx skupinou x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx na původní xxxxxxxxx skupině.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx nálezy, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx indukčních x provokačních xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (viz xxxxxxx). K objasnění xxxxxxxx nálezů xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxx, xxxx např. xxxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx.
2. SBĚR X XXXXXX XXXXX (GPMT X XXXXXXXXX TEST)
Xxxxx se xxxxxxx xx tabulky, ze xxxxx musí být xxx xxxxx pokusné xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX (XXXX X XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx xxx xxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx uvést xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxx (xxxx. XXXX - xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, XXXX - xxxx xxxxxxxxx ucha x myší) xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx získaných xxx testované x xxxxxxxxxx látky.
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu (XXXX x Xxxxxxxxx xxxx)
Xxxxxx o xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxx xxxxxx;
- xxxxx, stáří a xxxxxxx zvířat;
- xxxxxxxx xxxxx, strava xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Experimentální xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx pro plátkový xxxx;
- podrobné xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;
- výsledek xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx x indukčních x provokačních xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx test;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxx x odstranění testované xxxxx;
- zdůvodnění xxxxxx vehikula;
- xxxxxxxxxxx a celková xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, použitá xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx výsledků xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, její koncentracea xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx každé xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků;
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx
Xxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx analogická x xxxxxxx XXXX XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
0 = xxxxx viditelná xxxxx;
1 = xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx;
2 = xxxxxxx výrazné x splývající zarudnutí xxxx;
3 = xxxxxxxxxx zarudnutí a xxxxxxx kůže.
5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxxxxx expozici, xx. xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx x rámci xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, se xxxxx xxxxxxxxxxx jako
xxxxx xxxxxxx (X. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
xxxxx alergen (XX. xx.) - 9 - 28 % zvířat
xxxxxxx xxxxx alergen (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
silný xxxxxxx (XX. xx.) - 65 - 80 % xxxxxx
extrémní xxxxxxx (X. xx.) - 81 - 100 % xxxxxx
X.7. SUBAKUTNÍ XXXXXXXX ORÁLNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx po 28 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx zvířat xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx se zvířata xxxxx pečlivě pozorují, xxx xx zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Pitva xx provede x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx utratí x xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx co xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx klece. Xxxxx xxxxxxxxxx zvíře je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxxxx studie jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxx vodě, xxxxx xxxxx xxxxxx x fyzikálně-chemických vlastností xxxxx.
Pokud xx xx třeba, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx nosiči (xxxxxxxx). Xxxxxxxxxx se nejprve xxxxxx xxxxxxx vodného xxxxxxx/xxxxxxxx, pak xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx v jedlém xxxxxxxxxx oleji (např. xxxxxxxxxx) x pak xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx nevodná xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx toxická xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx být xxxxxxxxx ještě před xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zvoleném vehikulu.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Dává se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx z běžně xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx a nesmí xxx xxxxx. Podávání xxxxx by xxxx xxxxx xx nejdříve xx xxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx zvířata xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.
Xx začátku xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.
Pokud xx tato xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx třeba x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx stejného xxxxx a ze xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx hladinu xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxx se xxxxxxx budou zabíjet x průběhu xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx další xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 28 dnů xxxxxxxx dávku x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx po podávání xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx xx také xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxx dávek
Xx třeba použít xxxxxxx tři xxxxxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x to ve xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxx dostupných informací xxxx xxxxxxxx účinek xxx xxxxx xxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx test. Xxxxxx-xx taková xxxx x xxxxxxxxx, lze xxxxxxx xxxxxxxxxx vyhledávací xxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxx dávek.
Při xxxxxx xxxxx xx xxxxx vzít x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx z toxikologických x toxikokinetických xxxxxx x testované xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx příbuzných.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické xxxxxx, ale nezpůsobit xxxxx xxxxxxx ani xxxxx utrpení. Dále xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinku xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity (XXXXX). Xxxxxxx xx vhodný xxxx- xx čtyřnásobný xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx je xxxxx pokrýt větší xxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinu, než xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxx xxx 10).
Xxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx rovnováhu. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxx se použít xxx konstantní xxxxxxxxxxx (x xxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Aplikuje-li xx xxxxx xxxxxx, xxxx xx xx xxx xxx každý den xx xxxxxxx dobu x xxxxxxxxx přizpůsobovat xxxxxx tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx x xxxx studiích použít xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Neprokáže-li test xxxxxxxxx zde xxxxxxxxxxx xxxxxxxx žádné toxické xxxxxx xxx xxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx, x xxxxx toxicita xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx provedení xxxxxxxxxxx testování xxx xxxxx dávkových úrovních xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testu xxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xx xx třeba xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx xx 28 xxx. Zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx dalších 14 xxx xxx xxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx případné xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx po xxxx 28 dnů, xx zdůvodněných xxxxxxxxx 5 dní x xxxxx. Xxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx intubační xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxxx najednou, závisí xx xxxxxxxxx zvířete. Xxxxx by xxxxx xxxxxxxx přesáhnout 1 xx na 100 x tělesné hmotnosti, x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx podat x 2 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Rozdíly x xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba minimalizovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tak, xxx byl podáván xxx xxxxx na xxxxx úrovních xxxxx. Xxxxxxx xx u xxxxx dráždivých x xxxxxxxxx, u kterých xx xxxxx obvykle xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx klinické pozorování xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx denně, nejlépe x xxxxx xxxxx xxxx x s xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Zaznamenává se xxxxxxxxx stav xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx všech xxxxxx xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxx x mortality. Xxxxxxx moribundní a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx stres xxxx vyřazena, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Důkladné xxxxxxxx xxxxxxxxx všech zvířat xx xxxxxxx před xxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxx intraindividuálního porovnání) x xxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx chovnou xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx se pečlivě xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx pozorování měnily xx xxxxxxx; xxxxx, xxxxxxxxxxx pozorování xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx a xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x exkretů, xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (slzení, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx pohyby nebo xxxxxxxx) xxxx bizarních xxxxxx chování (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx pozadu).
Xx čtvrtém xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx podněty (xxxx. xxxxxxxx, xxxxxxx, proprioceptivní), xxxxx xx síla xxxxxx x celková xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, které je xxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx, jsou uvedeny x xxxxxxxxxx (xxx Xxxxxxxxx xxxx, část X).
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx aplikace xxx xxxxxxxx vynechat, xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx studii xxxxxxxxxxxxx (90xxxxx); v xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx této xxxxxxxxxx studie. Xxxxx x x xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x funkčních poruchách xx čtvrtém xxxxx 28xxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxx subchronickou xxxxxx.
Xxxxxxxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx by xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx a xxxx
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx jednou xxxxx. Xxxxxxxx potravy x xxxx xx xxxx xxxxxxx jednou xxxxx, také x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx vyšetření na xxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů, xxxxx xxxxxxxxxx x změření xxxxxxxxxxx krve.
Krev xx odebere xxxxx xxxx nebo x xxxxxxx xxxxxxxx zvířete, xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xx vhodných xxxxxxxx.
1.2.3.4 Biochemická xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx tkáně, zvláště xx játra a xxxxxxx, xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx před nebo x průběhu xxxxxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx během xxxxxx). Xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx krve1). Vyšetření xxxxxx x séra xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, glukózy, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, kreatininu, xxxxxxxxx xxxxxxxx, albuminu, xxxxxxxx alespoň xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx). Zaměření xxxxxxx xxxxxx (jaterního xxxx xxxxxx původu) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx poskytnout xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx posledního xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx, osmolalitu nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xX, xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxx příp. xxxxxxx.
Xxxx xx třeba xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx tkání x séru.
Další xxxxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx u xxxxx xxxxxxx xxxx podezřelých x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx funkce: xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na xxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx hormonů, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx vyšetření xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx do určitých xxxxxx látek xxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, brát x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx druh x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx látky.
Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx jejich xxxxxxxxx xxxxx xxxx začátkem xxxxxx.
1) Xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxx řadu xxxxxx v xxxx x plazmě, xxxxxxx xxx glukózu. Xxxxxx xxxxx pro xxxx xxxxxxxxxx xx xx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxxxx xx xxxxx maskovat xxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxx by xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxx metabolismus x x xxxxxxxx x potravě by xxxxxxx xx pravidelnosti xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx xx lačno, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx až xx pozorování funkčních xxxxxx xx 4. xxxxx xxxxx.
1.2.3.5 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx se provede xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxx lební, xxxxxx x xxxxxx, a xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, brzlík, xxxxxxx, xxxxx x xxxxx xxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xx nejdříve xx xxxxx xx xxxxx xx vlhkém stavu, xxx xx předešlo xxxxxxxxx.
Následující xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx hemisfér, xxxxxxx x xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxx i xxxxxx xxxxxx (včetně Xxxxxxxxxx plátů), xxxxx, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, průdušnici x xxxxx (konzervované naplněním xxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx), xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxx. dělohu, xxxxxxxx), xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxx xxxxxx (přednostně xxxxx pro oblast xxxxxxxx x jedna xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xxxx (x. xxxxxxxxxxx xxxx n. xxxxxxxx), xxxxxxx x blízkosti xxxxx, řez xxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxx xxxxx z xxxxxx xxxxxx xxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx i další xxxxx. Xxxxx xxxxx, xxxxx xx mohl xxx xxxxxxx orgánem xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Pokud xx v orgánech x xxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxxxxxxxxxx léze xx xxxxx xxxxxxxx.
U xxxxxx satelitních skupin, xxxxx xxxx xx xxxxxx zařazeny, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXX X ZÁZNAM XXXXX
X dispozici xxxx xxx xxxxx x každém xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx údaje xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících příznaky xxxxxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxx x humánních xxxxxx, xxxx úmrtí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, typ lézí x procento xxxxxx x jednotlivými xxxx xxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxxx formě xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx metodu xx třeba zvolit xxx při xxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx zvířat;
- xxxxx, podmínky xxxxx, xxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxx x týdenních xxxxxxxxxxx a na xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx jiné než xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx údaje o xxxxxx testované xxxxx xxx aplikaci, případně x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxxxx koncentracích, xxxxxxxxx x homogenitě xxxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- přepočet x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx nebo xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xx xx kg xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xxx x xxxxxxxx x xxxxx nebo xxxx);
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x kvalitě xxxx (xxxxxx druhu x xxxxxx);
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx hmotnost x xxxx změny;
- xxxxxxxx potravy x xxxx;
- údaje x toxických xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx úrovně, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx;
- povaha, xxxxxxxxx x xxxxxx klinických xxxxxx, příp. xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx síly x motorické xxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x příslušnými xxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx hmotnost xxx xxxxxxxx x hmotnosti xxxxxx;
- pitevní xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx:
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx je analogická xxxxxx XXXX TG 407.
X.8. XXXXXX XXXXXXXX INHALAČNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. METODA
1.1 Xxxx
Xxxx pokusem xx xxxxx získat údaje x xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx, xxx xxxx, xxx xxxx, xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx pokusných zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně xx xxxxxxx xxxx, v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x to po 28 dní. Xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx skupinu xxx vehikulum. Během xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zjišťují xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx pokusu, xx pitvají.
1.3 Xxxxx xxxxxx
1.3.1 Příprava
Xxxxxxx 5 dní před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a krmení, x xxxxxx budou xxxxx experimentu. Před xxxxxx se zdravá xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx známo, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Existují-li xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx proti xxxx. Pracuje se xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xx začátku xxxxxx xxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx překročit ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nejméně 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx 10 zvířat (5 xxxxxxx každého xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx x během xxxxxxxxxxxxx 14 dnů xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx zpožděný výskyt xxxxxxxxx xxxxxx. Používá xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 kontrolních xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Použijí se xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupina, případně xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx u xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. S xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx se xx xxxxxxx v kontrolní xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx s pokusnými. Xxxxxxxx koncentrace xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx toxický xxxxxx na hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 xxxxxx koncentrací, mají xxx voleny tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x x kontrolní xxxxxxx by počet xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxx 6 xxxxx denně; x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx možné xxxxxx x jiných xxx expozice.
1.3.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx pokusy xx zvířaty xx xxxxxxx dynamické expoziční xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu x xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx xxxxxx, xxx xxx zaručen xxxxxxxxx xxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x expoziční xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx zamezilo xx xxxxxxx shlukování xxxxxx x xxx xxxxxxxxx expozice testované xxxxx byla co xxxxxxxx. Pro zajištění xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx neměl xx v xxxxxx xxxxxxx objem pokusných xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxx. Xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx orálně-nasální, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx dva xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx příjem xxxxx jinými xxxxxxx.
1.3.2.6 Xxxx pozorování
Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx období xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx objeví a xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se exponují xxxxxxxxx xxxxx denně, 5 - 7 xxx v xxxxx, xx xxxx 28 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 14 xxx bez aplikace, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 xX. Relativní xxxxxxx xx být xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx možné (xxxx. experimenty x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx uvnitř xxxxxx (≤ 5 xx vodního xxxxxxx) xxxxxxx unikání xxxxxxxxx xxxxx xx okolí. Xxxxx expozice se xxxxxxxx xxxxxxx ani xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx inhalační xxxxxx x vhodnou analytickou xxxxxxxxx koncentrace. Doporučuje xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx nastavit xxx, xxx xxxxxxxx v xxxxx expozičním xxxx xxxx stejné. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx podmínek expozice xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx expozice:
x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně).
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od střední xxxxxxx x více xxx ± 15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx a aerosolů, xxx této xxxxxx xxxxxxxx není možné xxxxxxxxx, se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx dobu xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx tak xxxxxxxx, jak xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx distribuce xxxxxxxxx částic týdně x xxxxx testované xxxxxxx.
c) Xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx expozice x xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx pozorovat xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, stupeň x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxxxx týdně x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx studie xx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx x těžkém xxxxxx či xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx, humánně xxxxxxx a xxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zahrnovat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počtu erytrocytů, xxxxxxxxx a diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx analýza krve: x xxxxxxxxx funkce xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jeden x xxxxxx parametrů: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x séru (xxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx x celkové xxxxxxxxx x xxxx.
Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx úplné toxikologické xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxxx, xxxxxxx, chloridů, xxxxxx, draslíku, xxxxxxx xx lačno, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterasy.
Xxxxx biochemické xxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx.
1.3.3.1 Xxxxx
X xxxxx zvířat xxxxxxxxx ve xxxxxx xx xxxxxxx pitva. Xxxxx xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx se xx xxxxxxxx po xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x tkáně (xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, ledviny, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx, x xxxxxxx orgány s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx velikosti) xx xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, tak aby xx zachovala xxxxxxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
U xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Pokud xx x xxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx poškození způsobená xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx těchto xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx provést histologické xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx otravy u xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx formami poškození.
Xxxxxxx zjištěné výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx statistickou metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat tyto xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx expozičního xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, systému přípravy xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx systému, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v boxu, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx teploty, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,
- xxxxx x xxxxxxxx xx sestaví xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx: x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx; x) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx); x) povaha vehikula, xxxxx xxxx xxxxx; x) skutečná xxxxxxxxxxx x dýchací xxxx; x) xxxxxxxxxx medián xxxxxxxxxxxxxxx průměru (XXXX) x geometrická xxxxxxxxxx xxxxxxxx (GSD),
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle pohlaví x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx experimentu, případně xxxx o xxxxxxx xxxxxx xx konce xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxx účinku,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé abnormální xxxxxxxx a jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xx xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xx xxxx xxxxx xx 28 xxx v odstupňovaných xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, aby se xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx pokusu, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách ustájení x xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx jednotlivých experimentálních xxxxxx. Krátce xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx srst na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx cca 24 xxxxx xxxx experimentem. Xxxxxxxxx nebo oholení xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx týden. Xxx xxxxxxxx xxxx holení xxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx 10 % povrchu xxxx. Xx třeba xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx při rozhodování x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx kůže a x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxx pokusech x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx upraveny xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx navlhčit vodou, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx s xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xx xxxxx používat xxxxxxx potkany, králíky xxxx morčata. Je xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx však xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx začátku studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx každou xxxxxxx dávek xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx a 5 samců) se xxxxxxx xxxx. Samice xxxx xxx nullipary x xxxxx být xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x průběhu xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx koncem xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx další xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx následujících 14 xxx po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - xxxxx xx použilo xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx x aplikací xxxxxxxx. Doba expozice xx xxx nejméně 6 xxxxx denně. Xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxx xxxxxxxx každý den xx stejnou xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx stálá xxxxxxx dávky xx xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx zvířete. S xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx usnadnění aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx ve xxxxxxx xxxxxxxx, které xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx nezpůsobit žádné xxxxxxx nebo jen x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední xxxxx xxxx vyvolat xxx xxxxxxx účinek xx xxxxxxxxx zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx xx více xxx 3 úrovně xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx voleny tak, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx x nízkou x xxxxxxx dávkou x x xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
Xxxx-xx aplikace xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x vysoké xxxxxxx úrovně xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxx xx určitých okolností xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx x nižšími xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 xxxx xxxxx xxxxx, která xxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, není xxxxx xxxxxxx nutná.
1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx na příznaky xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x dobu, xxx xx xxxxxx x xxxxxxxx opět xxxxxx xxxxxxxx otravy.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xx jednom. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 dnů x xxxxx po xxxx 28 xxx. Xxxxxxx satelitní xxxxxxx, xxxxx jsou určena xxx následné xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx 14 xxx xxx expozice, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx toxických xxxxxx xxxx jejich xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.
Testovanou xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx plochu, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % xxxxxxx těla; x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx plochy xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx vrstvě.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx dobu 24 xxxxx udržována x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plochu xx dále xxxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pro xxxxxxx volnosti xxxxxx, xxxxxx immobilizaci xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Jako xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx použít "xxxxxxxxxx xxxxx".
Xx xxxxxxxx xxxx expozice se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx nebo x xxxxxxxx xxxxxx vhodného xxxxxxx očištění pokožky.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat x zaznamenávat příznaky xxxxxx včetně xxxxxx xxxxxxx, stupně x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx x sliznic x také xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Hmotnosti xxxxxx xx zaznamenávají xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Po skončení xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, x výjimkou xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x zvířata x xxxxxx stresu xx xxxxxx xxxxxxx xx třeba okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx utratit x xxxxxx.
Xx xxxxx pokusu xx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx provedou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: x xxxxxxxxx funkce xxxxx x xxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx: alaninaminotransferáza x xxxx (dříve xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx glutamát-oxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx cholinesterázy.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx x případě xxxxxxx použity xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x varlata xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx, xxxx. xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx lézemi xxxx xxxxxxx velikosti, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx na xxxxxxxx histopatologická vyšetření.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx skupiny, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, a x xxxxxx kontrolní xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx histologické vyšetření xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx a xxxxxxx xx skupině x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x u xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx skupin xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x tkáně, ve xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu patrný xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx formami poškození.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x tomu xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx druhu xxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx bez účinku, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- údaje x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx a xxxxx,
- doba xxxxxxx během experimentu, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx zvířat xx xxxxx sledovaní,
- xxxxxxx xxxx jiné xxxxxx,
- doba, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- spotřeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření a xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx popis všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx xx xx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
B.10. XXXXXXXXXX - TEST XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX U SAVCŮ XX XXXXX
1. METODA
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 473, Xx Xxxxx Mammalian Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx analýzy xxxxxxxxxxxxxx aberací in xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu. Vznik xxxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx schopna xxxxxxxxx xxxxxxxxx aberace. Xxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxx aberací x běžně xx x xxxxxx účelu xxxxxxxxx. Chromozómové mutace x xxxxxxxx xxxx xxxx příčinou řady xxxxxxxxxxx chorob x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx toho, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy, xxx xxxxxxxxx změny x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx genech somatických xxxxx, xxxxx xxxxx xxx vzniku rakoviny x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx jsou x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx však dostatečná xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx x existuje stále xxxx dokladů x xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vlastnosti xx xxxxx testem xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx DNA.
X xxxxxxx chromozómových xxxxxxx in xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx, buněčných xxxxx xxxx primární buněčné xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx vybrány na xxxxxxx schopnosti xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx in xxxxx xxxxxxxx obecně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Tento systém xxxxxxxxxxx aktivace xxxxxxxx xxxxxxxx napodobit xxxxxxxx x savců xx xxxx. Je třeba xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx neodrážejí xxxxxxx xxxxxxxxxx, nýbrž xxxx způsobeny změnami xX, osmolality nebo xxxxxxx cytotoxicitou (4) (5).
1.2 DEFINICE
Aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx: strukturální xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, které xx projevuje xxxx xxxx jedné, případně xxxx xxxxxxxxx, nebo xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx poškození chromozómu xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx jako zlom x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx místě (zahrnuty xxxx aberace typu xxxxxxxxxxx chromozóm, prsténčitý xxxxxxxxx-xxxx).
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx porušení xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx vzniklá xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment v xxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx chromatida hodnoceného xxxxxxxxxx je xxxxxx x důsledku delece.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx S-fázi replikace XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx mitózy, xxxxx xxxxxx další X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou chromozómy x 4, 8, 16, .. chromatidami.
Xxx: xxxxxxxxxxxx léze xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a x xxxxxxxxxx vybočením xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx index: xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx buněk v xxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx proliferace xxxx populace.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx buňky.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx haploidního xxxxx xxxxxxxxxx (n) jiný xxx xxxxxxxxx počet (xxxx 3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx delece x xxxxxxxxx x výměny.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxx xx vystaví xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, x to x xxxxxxxxxxxx aktivací a xxx xx. Xx xxxxxxxxxxx intervalech xx xxxxxxxx xxxxxxx kultury xxxxxxxxx látce, xx xxxxxxxx zastaví xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, buňky se xxxxxx, obarví xx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 POPIS METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Je možno xxxxxx celou řadu xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx buněk xxxxxxxx (například xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx krve xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx
K xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx vhodná kultivační xxxxx x inkubační xxxxxxxx (kultivační xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2, teplota x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx nepoužívají. Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx dobu xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx: xxxxx xx xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dobou xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 oC.
Lymfocyty: xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxx xxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx získané xx zdravých xxxxxxx x xxxxxxxxx se xxx teplotě 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace
Xx xxxxx xx testovanou xxxxxx působí v xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce (S9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, ovlivněná činidly xxxxxxxxxxxx enzymy jako xx Aroclor 1254 (6) (7) (8) (9), nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (10) (11) (12).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v médiu xxxx xxxxxxx 1 - 10 % x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx bude xxxxxxx na xxx, xxxxxx xxxx je xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx případech xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx účely xxxxxxxxx aktivace xxxxx xxx xxxxxxx i xxxxxxxxx modifikované buněčné xxxxx xxxxxxxxxxx specifické xxxxxxxxx xxxxxx. Výběr xxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (např. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx testované xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x pevném stavu, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx její xxxxxxxx xx vhodném rozpouštědle x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx testované látky xx xxxxx xx xxxxxxx přidávat přímo xxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5 XXXXXXXX TESTU
1.6 ROZPOUŠTĚDLO
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx mohlo x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a aktivitu X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx podpořeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxx tam, xxx xx to xxxxx, bylo na xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx testovaná xxxxx xx xxxx xxxxxxx, musí být xxxxxxx organické xxxxxxxxxxxx xxxxx bezvodé. Xxxx xx xx odstranit xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.6.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxx kritéria, xxx xx uvažují xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Cytotoxicita xx xxxxxxx x metabolickou xxxxxxxx x bez xx v hlavním xxxxxxxxxxx, přičemž se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx živých xxxxx, xxxx mitotický xxxxx. Xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x cytotoxicitě, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx pokrývat xxxxxx xx xxxxxxxxx xx nízké xxxx xxxxxx xxxxxxxx. To xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx násobkem, který xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 a √10. X xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx být xxx nejvyšší koncentraci xxxxxxxxx signifikantní pokles xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx x xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx mírou xxxxxxxxxxxxx / cytostatických xxxxxx x xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx po expozici xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx jiná xxxxxxx xxxxxxxx byla obtížná x xxxxxxxxxxx. Jako xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx použít xxxx xxxxx x kinetice xxxxxxxxx xxxxxx, jako xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx; xxx xxxxx xxxxxxxxxxx celkový průměr, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X tak x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx značný xxxxxx xx xxxxxx xxxx sklízení x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx činí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx nejnižší x xxxxxx 5 µx/xx, 5 xx/xx xxxx 0,01 M.
X xxxxxxxxx nerozpustných látek, xxx xxxx netoxické x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx koncentrace, xxx xxxxx xx xxx xxxxx nerozpouští, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšší, xxx xx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx kultivace s xxxxxxxxxx látkou. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx-xx x xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, než xx nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Může xxx xxxxxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx konci xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx změnit v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx, X9 apod. Nerozpustnost xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx nesmí xxx xx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxx.
1.6.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
Xx každého xxxxxxxxxxx, xx xxx x xxxxxxxxxxxx aktivací xxxx xxx xx, je xxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx). Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivaci x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, a to xxx xxxxxxxxxxx úrovních, xxx xx xxxxxxx, xx xxxxxxxx reprodukovatelný x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx citlivost testovacího xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxx byl xxxxxx, ale xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přímo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx preparátů. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Metabolická aktivace | Xxxxx | CAS | XXXXXX |
Xx | xxxxxx methansulfonát xxxxx xxxxxxxxxxxxxx ethyl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Xxx | xxxx[x]xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx mohou xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Xxx, xxx xx to xxxxx, xx vhodné xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx chemické xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx sklízení kultur xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx které se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx experimentální xxxxxxx. Mimoto xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3 Xxxxxx
1.6.3.1 Expozice testovanou xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx látkou xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx lymfocyty xx xxxxx začít xxxxxxx xxx 48 hodin xx xxxxxxxxx mitogenem.
Xxxxxxx xx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx; x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx negativní xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, že xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (13) (14), je xxxxxxxxxx, xxx se xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxx těkavých xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx neprodyšně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nádob (15).
1.6.3.2 Xxxx sklízení xxxxxxx
X prvním xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx ní xx xxxx 3 - 6 xxxxx x xxxxxx xx odebírají x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5násobku xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (12). Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx další xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx expozicí xx do xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx odpovídají xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx xxxxx se hodnotí xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx delší, než xx 1,5násobek xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Negativní xxxxxxxx s metabolickou xxxxxxxx xx posuzují xxxxxx xx případu. X xxxxxxxxx, xxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx třeba xxxx rozhodnutí zdůvodnit.
1.6.3.3 Příprava xxxxxxxxxx
Xx buněčné xxxxxxx xx xxxxxx Colcemidem® xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx dobu 1 - 2 hodin xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx buněčná xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zpracovává zvlášť. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx sestává x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x rozbití xxxxxxxx podílu xxxxxxxxxxxxx xxxxx a ztrátě xxxxxxxxxx, xxxx být x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx centromer x xxxxxxxxxxx buňkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxx ± 2. Xxx xxxxxx koncentraci x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x obou xxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx. V případě, xx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx, může xx počet analyzovaných xxxxxxxx xxxxxx.
X xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx polyploidii x xxxxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx. Xx třeba registrovat xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jejich xxxxx x četnosti x experimentálních i xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xx zaznamenávají zvlášť, xxx xxxxxxx do xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx je xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx zjištěnou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx kultury. Xxxxxxx se xxxxxxx xxxx uvedou x xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxxx experimentálních podmínek. X xxxxxxxx potvrdit xxxxxxxxx xxxxxxxx bylo xxxxxxxxx x odst. 1.4.3.3. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx modifikaci použitých xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx zjišťování xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se používá xxxxxxx kritérií, například xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Nejprve xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx mohou použít xxxxxxxxxxx xxxxxx (3) (13). Statistická xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx jediným určujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx může xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx inhibovat xxxxxxxxx procesy x xxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může naznačovat, xx testovaná látka xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (17) (18).
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx výsledky xxxxxxxxx xxxx uvedená kritéria, xx x tomto xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx většina xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, nebo negativní xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx získaná xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxx xxx ohledu na xxxxx opakovaných experimentů. Xxxxxxxxx výsledky xxxxx xx chromozómové aberace xx vitro xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx xxxxxxx nevyvolává.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
XXXXXX X XXXXXXX XXXXXX
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx rozpouštědla/vehikula
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Buňky:
- xxx a xxxxx xxxxx,
- karyotyp x vhodnost xxxxxx xxxx buněk,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx x délce xxxxxxxxx cyklu,
- xxxxxxx dárce krve, xxx xxxx použita xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, použitý xxxxxxx,
- počet xxxxxx buněk, xx-xx xx xxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx a xxxx působení na xxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx koncentrací x počtu xxxxxx, xxxxxx xxxx. údajů x xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jsou-li x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx, koncentrace XX2, je-li xx xxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx kultivace,
- xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx buněk xx xxxxxxx xxxxxxxxx, je-li xx xxxxx
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- metoda xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxx toxicity, xx. xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx x buněčném xxxxx, x xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx index,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xX x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, jsou-li stanoveny,
- xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx gapů,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxx chromozómových xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
xxxxx xxxxx-xxxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx byly xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
X.11. XXXXXXXXXX - TEST XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXX XXXXX XXXXX XX XXXX
1. XXXXXX
Metoda xx xxxxxxxxx XXXX TG 475, Mammalian Xxxx Xxxxxx Chromosome Aberration Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx dřeně xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxxx numerické xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, ovšem x aberacím xxxxxxxxxxxxxx xxxx dochází xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy jsou xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx toho, že xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, hrají xxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxxxxx systémech.
K xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx v xxx je kostní xxxx, xxxxxxx xx xxxxx o tkáň xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, obsahující xxxxxxxx rychle xx xxxxxxxx buněk, xxx xx dají snadno xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx druhy x cílové tkáně xx v tomto xxxxx xxxxxxxxxxx.
Tento xxxx xx chromozómové xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxxxxxx xxxxxx, protože xxxxxxxx brát x xxxxx xxxxxxx metabolismu xx vivo, xxxxxxxxxxxxxxx x procesů reparace XXX, x když xxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx xxx předtím xxxxxxx testem in xxxxx.
Existují-li doklady x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: strukturální xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx chromatid, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx mezi chromatidami.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx zlom x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Zlom xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx porušení kontinuity xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxx poškozené xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx chromatidy), xxxxxxxx xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, kde xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx mitózy, xxxxx xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx xxxx chromozómy x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx léze xxxxx xxx xxxxx xxxxx chromatidy a x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Mitotický index: xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxx celkovým xxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx proliferace xxxx populace.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx buňky.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4n xxx.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou buněčného xxxxxx ve stadiu xxxxxxxx, pozorovaná xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Zvířata xx xxxxxxx způsobem xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx vhodnou xxxx xx xxxxxxxx se xxxxxx. Xxxx usmrcením xx xx xx xxxxxx látkou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx kolchicinem xxxx Xxxxxxxxxx®). Z xxxxx kostní xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxx buňkách xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Výběr živočišného xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx ovšem xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Hmotnostní xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx měly xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % průměrné xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx chovu
Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx X, xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělí xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx x experimentální xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx minimalizovaly xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Zvířata xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx dobu xxxxxxxxx xxxx dní xx zvířata xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx podmínkách.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx x pevném xxxxx, xxxx podáním xxxxxxxx xx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x případně xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se mohou xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.2 Xxxxxxxx testu
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li se xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx použití podpořeno xxxxx o kompatibilitě x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx je xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě použito xxxxx rozpouštědlo / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx zacházet xx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx by xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx, xxx xxxx účinky xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx odebírat v xxxxxx časovém intervalu. Xxx xx xx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, jako je xxxxxxxxx xxxxx. Příklady xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx nitrosomočovina | 759-73-9 | 212-072-2 |
mitomycin C | 50-07-7 | 200-008-6 |
cyklofosfamid | 50-18-0 | 200-015-4 |
cyklofosfamid xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx zařazeny do xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx odběr xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx dobou xxxxx interval odběru xxxxxx. Mimoto xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxxxxx kontrol, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx vehikulum nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx a pohlaví xxxxxx
V xxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx pět analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx v xxxx, xxx se xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x stejném xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx způsobů expozice xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx pohlavími xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx závislá na xxxxxxx, xxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx podávat xxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx se k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxx dávky xx xxx xxxxxx x xxxxxxx nanejvýše xxxxxxxx xxxxx. Xxxx režimy xxxxxxxxx xxxxxx být xxxxxxx odůvodněné.
Vzorky xx odebírají xx xxxx různých xxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxx xxxxx dne. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu (xxxxx xxxx obvykle 12 - 18 hodin) xx podání xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxx xxxx xx kinetiku buněčného xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dobu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberací, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx vzorků xx 24 xxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x daném xxxxxxxxxx režimu xxxxx xxxxxx vícekrát než xxxxxx xx xxx, xx třeba xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxxx délky xxxxxxxxxx xxxxxxxxx cyklu xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injikuje xxxxxx dávka Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorky. X xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3 - 5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4 - 5 hodin. X kostní xxxxx xx xxxxxxxx buňky x xxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, protože xxxxxx x dispozici xxxxx xxxxxx xxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, kmene, xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (5). Při xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx interval odběru xxxxxx xxx xxxxx xxx, xxx pokrývaly xxxxxxx xx maximální xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nebo nulové. Xxx xxxxxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx pak xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx takové známky xxxxxxxx, že xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx režimu xxxxxxxx xx xxxxxx byly xxxxxxx. Látky, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx x xxxxxx kritérií xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, jež xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, která vede x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx (xxxx. pokles xxxxxxxxxxx xxxxxx o xxxx xxx 50 %).
1.5.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx minimálně 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx nebo xx xxxx dávkách xxxxxxxx v jeden xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxxxxx xx xx základě údajů x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx xxxxxxxxx celá xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx dlouhodobé xxxxxx xxxx limitní xxxxx 2&xxxx;000 mg/kg hmotnosti xx xxx při xxxx xxxxxx do 14 xxx, x 1&xxxx;000 mg/kg hmotnosti xxx době trvání xxxxx než 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx buď žaludeční xxxxxx, xxxx intraperitoneální xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x jiné xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x hmotnosti; vyšší xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxxxx xxxx žíravých xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší účinky, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx se tak xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx kostní dřeň, xxxxxx xx ni xxxxxxxxxxxx roztokem x xxxx se xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx na xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xx.
1.5.7 Analýza
Xxxxxxx xxxx cytotoxicity se x všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx stanoví xxxxxxxxx index xxx xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx minimálně 100 buněk. Tento xxxxx xx možné xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx při jejich xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxx zvířete se xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x procento xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenají xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx, jejich počet x četnost. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx zvlášť x xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxxxx se xx celkové xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx o xxx, že xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx analýzu xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx aberacemi, xxxx xxxxxxxx nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx skupině x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx vzorků. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Při vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejednoznačné výsledky xx třeba xxxxxxxx xxxxxx testováním, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx mitotické xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní.
Většina xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx dat vyvodit x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx definitivní xxxxx. Xxxxxxxx mohou být xxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx živočišného druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx třeba xxxx x xxxxx, xxxx xx pravděpodobnost, xx xxxxxxxxx xxxxx bude xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx toxicita).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx a stabilita xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx živočišný xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx a pohlaví xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx podmínky, xxxxxx xxxx.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek xxx jednotlivé xxxxxxx.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx ze xxxxxx xxx xxxxxx rozpětí, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx velikosti xxxxx,
- podrobnosti x přípravě testované xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx metody x xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx oběhu xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- případně xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx a vody,
- podrobný xxxxx xxxxxxxx testované látky x xxxxxx xxxxxx,
- metody xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- látka xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, její xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx,
- metody xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,
- kritéria xxx xxxxxxxxx aberací,
- xxxxx analyzovaných buněk xx jedno zvíře,
- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- známky toxicity,
- mitotický index,
- xxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx jedince xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx, xxxxxx průměr x směrodatná xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x negativních kontrol xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx odchylek.
- xxxxx xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx,
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Závěry.
X.12. XXXXXXXXXX - XX XXXX XXXXXXXXXXXX XXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx OECD XX 474, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Test (1997).
1.1 ÚVOD
Mikronukleus xxxx xx xxxx x xxxxx slouží xx xxxxxxxx poškození, xxx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxx xxxxxxx x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx resp. z xxxxxxxxx krve xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Když x xxxxxxxxxxxx kostní xxxxx xxxxxxx polychromatický xxxxxxxxx, jádro xx x buňky vyloučeno; xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx vzniklé xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx mikrojádra je xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx buňkám xxxxx xxxxx. Nárůst xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxxxx zvířat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx hlodavců xxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) erytrocytů x mikrojádry x xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, u xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx jeho xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx strukturální xxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mikrojádra se xxxx rozlišovat xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx přítomnost xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx centromerické XXX x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx (polychromních) xxxxxxxxxx x mikrojádry. Xxxx počet xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) erytrocytů x xxxxxxxxx xxxx obsahujících xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx hodnotu xxxxxx x xxxxxxx, xx xx xxxxxxx testují xx dobu minimálně xxxx xxxxx.
Xxxxx xx vivo xxxxxxxxxxxx xxxx u xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx faktory metabolismu xx xxxx, farmakokinetiky x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x xxxx xxx xxxxx být xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxx konečným efektem xxxxxxx. Xxxx in xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx další xxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x systému xx vitro.
Existují-li xxxxxxx x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx vhodné.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx (kinetochor): oblasti xxxxxxxxxx, se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx vlákna xxxxxxxx xxxxxxxx umožňující organizovaný xxxxx dceřiných chromozómů x pólům dceřiných xxxxx.
Mikrojádro (mikronukleus): xxxx jádra xxxxxxxx xx xxxxx buňky (xxxxxxx) vytvářená během xxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx erytrocyt: zralý xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xx dá xx xxxxxxxxx, polychromních xxxxxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx stadium, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, takže xxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pomocí barviva xxxxxxxxxxxx xxx ribozómy.
1.3 XXXXXXX METODY
Zvířata xxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx používá xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx ve xxxxxxx xxxx po působení xxxxx usmrtí, xxxxxx xxxx xx izoluje x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxx se xxxxxx (1-7). Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, odebere xx xx vhodné době xx xxxxxxxx látky x připraví se xxxxxx, xxx xx xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxx být xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx co nejkratší. X xxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, xxxxxxxxxx xx jako xxxxxxx xxxxxxx xxxx nebo xxxxxxx; xxxx však xxx použit jiný xxxxxx savčí xxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxx, doporučují se xxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx vhodný xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx, že xx x xxx slezinou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx nebo xx x xxx xxxx xxxxxxxxx dostatečná xxxxxxxxx xxxx látkám, xxx xxxxxxxxx strukturální xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jsou uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x části X.
Xxxxxxx xx měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělí xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x po dobu xxxxxxxxx pěti dní xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x kde jsou xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx a je-li xx xxxxx, xxxxx xx před podáním xxxxxxxx rozpustí xxxx xx připraví xxxx xxxxxxxx ve vhodném xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx se xxxx podáváním xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.2 Podmínky xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x používaných xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx xxxxx, bylo xx xxxxxx místě použito xxxxx rozpouštědlo / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Xx xxxxxxx testu xx xxxxx xxx každé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx zacházet xx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
U xxxxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx in xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx očekávat jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx tak, xxx byly účinky xxxxxx, xxx přitom xxxxxxxxxxxx hodnotiteli totožnost xxxxxxxxxxxx preparátu. Pozitivní xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx odlišným způsobem xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx je xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx testovaná látka. Xxxxxxxx látek vhodných xxx pozitivní xxxxxxxx:
Xxxxx | CAS | EINECS |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
X-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 759-73-9 | 212-072-2 |
mitomycin X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
triethylenmelamin | 51-18-3 | 200-083-5 |
Negativní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxx x xxxxxxxxxx a x interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Aplikuje-li xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx vzorků, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx první xxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx i neovlivněných xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo publikované xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Používá-li xx xxxxxxxxx krev, xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrola přijatelný x xxxxxx odebraný xxxx působením látky, xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx studií x xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 1 - 3 dávky), xxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx rozmezí xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx a xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx pět analyzovatelných xxxxxxx každého xxxxxxx (11). Xxxxx x xxxx, kdy xx xxxxxx xxxxxxx, existují xxxxx o stejném xxxxxxxxxx druhu a xxxxxxx xxxxxxxx způsobů xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx oběma pohlavími xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx rozdíly, xx xxxxxxxxx pouze xx xxxxxx xxxxxxx postačující. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx závislá na xxxxxxx, jak xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx test xx xxxxxxxxx odpovídajícího xxxxxxx.
1.5.2 Dávkovací xxxxxx
Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx standardní xxxxxx (xxxx. xxxxx, dvě xxxx více dávek x 24xxxxxxxxxx intervalech). Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx tak xxxxxx, xx xx xxxxxxx toxicita, xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxx odběru vzorků. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, může xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx rozdělit, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx den xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxx xx může xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
(x) Xx xxxxxxx se xxxxxxxxxx látkou působí xxxxxxxxxxx. Vzorky kostní xxxxx se odeberou xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxxxx ne xxxxxxx xxx xx 48 hodinách xx xxxxxx xxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx po 24 xxxxxxxx, xxxx xxx odůvodněné. Vzorky xxxxxxxxx krve xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxx po 36 xxxxxxxx od xxxxxx xxxxx, se vhodnými xxxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx xxxxxx, celkově xxxx xxxxxx xxxx xxx 72 xxxxxx. Xxxxx xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx se xxxxx xxxxxx dvakrát nebo xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xxx nebo xxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), odeberou xx xxxxxx x xxxxxxx kostní dřeně xxxxxx xxxx 18 x 24 hodinami xx xxxxxxxxx podání xxxxx a v xxxxxxx periferní xxxx xxxxxx mezi 36 x 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (12).
Xx-xx xx relevantní, xxxxx xx mimoto xxxxxx x xxxxx odběrové xxxxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx studie xx xxxxxxxx rozpětí toxicity, xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxx, xx xxxxx xx provádět x xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx režimu, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (13). Při xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxx první časový xxxxxxxx xxxxxx vzorků xxx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x toxicitě xxxxx, xxxx nulové. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků xx xxx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxxx dávku. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx dávka xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx představovat xxxxxxx x xxxxxx kritérií xxx xxxxxxxxx xxxxx x vyhodnocují xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx také definována xxxx dávka, xxxxx xxxx k určitým xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z celkového xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx dřeni xxxx. xxxxxxxxx krvi).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx dávce minimálně 2000 mg/kg hmotnosti x xxxxx xxxxx xxxx xx dvou xxxxxxx podaných x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x podobnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx neočekává xxxxxxxxxxxx, xxxxxx být xxxxxxxxx xxxx studie xx xxxxxxx xxx dávkových xxxxxx. Pro dlouhodobé xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx za xxx xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1000 mg/kg xxxxxxxxx při xxxx xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x limitním xxxxx xxxxxxx úrovně xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx vpravuje xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injekcí. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx přijatelné x xxxx xxxxxxx expozice. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, závisí xx velikosti pokusného xxxxxxx x nemá xxxxxxxxx 2 ml/100 x hmotnosti; xxxxx xxxxx musí být xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx účinky, xx třeba upravit xxxxxxxxxxx xxxxx tak, xxx xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx / xxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx metodami. Periferní xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxx jiné xxxxxx xxxx. Krevní buňky xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx obarví (8) (9) (10), xxxx se xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx specifického xxx XXX (xxxx. akridinové xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 x xxxxxxxxx-X (15)) se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x artefaktů xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx DNA xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xx nedala xxxxxx xxxxx xxxxxxx (např. Xxxxxx). Xxx použít x xxxxx xxxxxxx - xxxxxxxxx kolony xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx buněk x xxxxxx (16) - xxxxx tyto xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx rutinně xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). K xxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxxxxxxx x x xxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx 1000 xxxxxxxxxx (17). Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 2000 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x zaznamená se xxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx informace xxx získat xxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Při analýze xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 20 % xxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx po dobu xxxx týdnů xxxx xxxxx, lze xxxx xxxxx mikrojader xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx. Možnou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (analýza xxxxxx a průtoková xxxxxxxxxxxx xxxxxxx - xxxx xxxxxxxxx), xxxxx xxxx zdůvodněny x xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Údaje x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx jednotkou xx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxx nezralých xxxxxxxxxx, xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx kontinuálně xx xxxx čtyř xxxxx xxxx déle, xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxx byly xxxxxxxxxx). Podíl nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx o xxx, xx obě pohlaví xxxxxxx rozdílně, xx xxxxx xxxxx xx xxx pohlaví pro xxxxxxxxxxxx analýzu sloučit.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xx skupině x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Nejprve xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx faktorem pozitivního xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jejímž xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx jednoznačně pozitivní xxxx negativní výsledky, x ojedinělých případech xxxx xxxxx ze xxxxxxxxx souboru dát xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx stále nejednoznačné xxxx problematické, x xxxx xx experiment xxxxxxxxxx opakuje.
Pozitivní xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testu xxxxxxx, xx látka xxxxxxxx xxxxxx mikrojader, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířecího xxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Je xxxxx xxxxxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka bude xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx specifickou xxxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx zprávě x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum:
- xxxxxxxxxx volby vehikula
- rozpustnost x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxxxx druh/kmen,
- xxxxx, xxx a xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, chovné podmínky, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,
- údaje ze xxxxxx xxx určení xxxxxxx, xxxx-xx provedena,
- zdůvodnění volby xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x přípravě xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x podávání xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx x ověření, že xx látka xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx do xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx koncentrace xxxxx x potravině/pitné xxxx (xxx) na faktickou xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxx o xxxxxxx potravy x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx podávání xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx preparátů,
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x každého xxxxxxx,
- kritéria, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- známky xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx,
- počet xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry xxx každou skupinu,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy x xxxxxx,
- xxxxx ze souběžných x xxxxxxxxxxxx negativních xxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx.
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
B.13/14. MUTAGENITA - TEST REVERZNÍCH XXXXXX U XXXXXXXX
1. METODA
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Reverse Xxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxx bakteriálním xxxxx xxxxxxxxxx mutací se xxxxxxxxx x detekci xxxxxxxx mutací xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (auxotrofní xx xxxxxx k xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxx Xxxxxxxxxxx coli (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x aminokyselině xxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxx x chromozómu xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxx bakteriálního xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x tom, že xx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx zpětně vracejí xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx stavu a xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx bakterie syntetizovat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx základě své xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, kterou xxxxxxxx mateřský xxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxx u xxxxxxx xxxxxxxx řady xxxxxxxxxxx xxxxxx a existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxx mutace x onkogenech x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx genech xxxxxxxxxxx buněk hrají x člověka x xxxxxxxxx zvířat xxxx xxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx na xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxxxx kmenů se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx sekvencí XXX x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx reparace DNA, xxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx. Specifita xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxx xxxxxx, jež xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx testy xxxxxxxxxx xxxxxx je x xxxxxxxxx velmi xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx a byly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx testování xxxxxxxxxx x xxxxxxx fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo Escherichia xxxx slouží ke xxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx), jež xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xx dodávce xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Mutageny xxxxxxxxxxxx substituci xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx bází x XXX. Při xxxxxxxxx testu xxxx x takové změně xxxxx na xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xx jiném xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxx bází x XXX, čímž xx xxxx xxxxx xxxxx x RNA.
1.3 XXXXXXX XXXXX
X xxxxxxxxxxxx xxxxx xx využívají xxxxxxxxxxxxx xxxxx, které xx xx xxxxxxx xxxxx liší x xxxxxx látek xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx opravy XXX. Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxxxxxx metabolické aktivace xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx informace x mutagenní a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Bakteriální xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx genotoxické xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Pomocí rozsáhlé xxxxxxxx se prokázalo, xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx jsou x xxxxx xxxxx pozitivní, xxxxxxxx také x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x příklady xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxx tohoto xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx vyhodnocovaných veličin, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx straně xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx reverzní xxxxxx xxxxxxx, mohou xxxx x tomu, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Bakteriální test xxxxxxxxxx mutací xxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxxx třídy chemických xxxxx, jakými xxxx xxxxxxxxx některé xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (kupříkladu xxxxxx xxxxxxxxxxx) a xxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xx, že xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx analoga xxxxxxxxxx); x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x savců.
Xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxx xxxxx pozitivní, xxxx xxxxxxxx karcinogenní xxx xxxxx, ovšem korelace xxxx xxxxxxxxx; xxxxxx xx chemické xxxxx, x existují xxxxxxxxxxx, xxxxx tímto xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxx jiným, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx mechanismem, xxxxx v bakteriálních xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx x xx nepřítomnosti xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxx klasické xxxxxxx xxxxxx "xxxxx incorporation" xx xxxxxxxx xxxxx x vrchním agarem x xxxxxx na xxxxx x minimální xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx agarem x xx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Při xxxx xxxxxxxx xx xxx xx xxx xxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx s počtem xxxxxxxxx revertujících kolonií xx xxxxxxxxxxx miskách x xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxx nejběžnější xxxx xxxxxxxx misková xxxxxx ["plate xxxxxxxxxxxxx"] (1) (2) (3) (4), xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx metoda (9) (10) x xxxxxxxxx xxxxxx (11). Xxxx xxxx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx nebo par (12).
Postupy popsané x rámci xxxxxx xx xxxxxx hlavně xxxxxx xxxxx incorporation x metody preinkubační. Xxx xxxx metody xxxx přijatelné pro xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxxxxx aktivací, xxx xxx xx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou; xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx, aldehydy, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, alylové xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3). Xxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx třídy mutagenů, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xx xx xx xxxxx xxxxxxxx jako xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", k xxxxxxx detekci xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxxx" (xxxxx x příklady xxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx jejich xxxxxxx xxxxxx): azobarviva x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx x těkavé xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx od xxxxxxxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxxxx zdůvodnit.
1.5. POPIS METODY
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Bakterie
Xxxxxxx bakteriální kultury xx xxxxxxxxx do xxxxxxxx exponenciálního xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (zhruba 109 xxxxx/xx). Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Titr xx xx xxxxxxxx xxx z historických xxxxx růstových xxxxxx, xxxx v jednotlivých xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx očkováním xx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 37xX.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx pět xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx čtyři xxxxx X. xxxxxxxxxxx (XX 1535; TA 1537 xxxx XX97x xxxx 1X97; XX98; x XX100); u xxxxx xxxx xxxxxxxxx spolehlivost x reprodukovatelnost xxxxxxxx xxxx různými xxxxxxxxxxxx. Xxxx čtyři xxxxx X. xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx XX x je xxxxx, xx nemusejí xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx vyvolávající xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx xxxx detekovat xxxxxx xxxxx E. xxxx XX2 xxxx S. xxxxxxxxxxx XX102 (19), xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx místě xxx xxxx XX. Xxxxx je doporučená xxxxxxxxx xxxxx tato:
- X. xxxxxxxxxxx XX1535 a
- X. typhimurium XX1537 xxxx XX97 xxxx XX97x a
- X. typhimurium XX98 x
- X. xxxxxxxxxxx XX100 x
- X. xxxx XX2 xxxX nebo X. xxxx WP2 xxxX (xXX101) xxxx X. typhimurium XX102.
X detekci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxx TA102 xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx X. xxxx (xxxx. X. xxxx WP2 xxxx X. coli XX2 (xXX101)).
Xx xxxxx xxxxxx zavedených xxxxxxx xxxxxxxx zásobní xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx. Pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx závislost xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx (xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx E. xxxx). Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x to: přítomnost xx xxxxxxxxxxxx R-faktor xxxxxxxx tam, xxx xx přichází x xxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx u xxxxx XX98, TA100 x XX97x xxxx XX97, XX2 xxxX (xXX101) x rezistence xxxx ampicilinu + xxxxxxxxxxxx x kmene XX 102); xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx. xxx xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vůči krystalové xxxxxxx a uvrA xxxxxx u E. xxxx xxxx uvrB xxxxxx u S. xxxxxxxxxxx xxxxxx citlivosti xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) (2) (3). Použité xxxxx xxxx xxx xxxxx spontánně revertujících xxxxxxx ve frekvenčním xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxx xxxxx x x rozmezí uvedeném x xxxxxxxxxx.
1.5.1.2 Médium
Xxxxxxx xx vhodný xxxxxxxxx xxxx (xxxx. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx minimálním xxxxxx X a xxxxxxxx) a xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).
1.5.1.3 Metabolická xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx za xxxxxxxxxxx, tak xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) připravená x xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxx enzymů xxxxxxx, xxxx je Aroclor 1254 (1) (2) xxxx kombinace fenobarbitalu x ß-xxxxxxxxxxxx (18) (20) (21). Xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx se obvykle xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 30 % x/x xx xxxxx X9. Xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému xxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X některých případech xxxx xxx xxxxxx xxxxxx post-mitochondriální frakci x xxxxxxxx koncentracích. X azobarviv x xxxxxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxx redukční xxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace (6) (13).
1.5.1.4 Xxxxxxxxx xxxxx / příprava
Xxxxx xxxxx se xxxx působením na xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx. Kapalné látky xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx se xxxxxxx ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx údaje x stabilitě xxxxxxxxx, xx jejich xxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxxxxxx.
1.5.2 Podmínky xxxxx
1.5.2.1 Xxxxxxx kmeny (viz 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Koncentrace
Ke xxxxxxxxx, která je xxxxx xxxx x xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx a rozpustnost x xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxx použije.
Může xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx se dá xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx pozadí xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Za xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx může xxxxxxxxxxxx změnit. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx v konečné xxxxx za xxxxxxxxxx xxxxxxxxx podmínek, xxxxxxxxxxx x pouhým okem.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx necytotoxických xxxxx 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxx látek, xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx x konečné pokusné xxxxx nerozpustných. Xxxxxxxxx xxxxx, jež jsou xxxxxxxxxxx již xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx než 5 mg/misku resp. 5 µx/xxxxx, xx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx koncentrace. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx při xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx pěti xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. √10) xxxx xxxxxxxxxxxx body x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Zkoumá-li xx koncentrační xxxxxxxxx, xxxx být vhodný xxxxxxxx menší. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx vyšších xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µl/misku xxxxxxxx x úvahu, xxxxxxx-xx xx látka xxxxxxxxxx podstatné množství xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nečistot.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Každý xxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kmenově xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulum) xxxxxxxx, jak s xxxxxxxxxxxx aktivací, tak xxx ní. Xxx xxxxxxxxx kontrolu se xxxx takové koncentrace, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
X xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem se xxxxxxxxxx látka pro xxxxxxxxx kontrolu volí xxxxx xxxxxxxxx typu xxxxxxxxxxxxx kmene.
Příklady xxxxx, jež jsou xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu | 6055-19-2 |
Následující xxxxx je vhodnou xxxxxxxxx kontrolou xxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
Látka | CAS | XXXXXX |
Xxxxx xxxxxx | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-aminoantracen xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx indikátor xxxxxxxxx xxxxx X9. Pokud xx 2-aminoantracen xxxxxxx, xx xxxxx každou xxxxx X9 charakterizovat xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolu x testech bez xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx tato xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX | |
Xxxx xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 x XX 100 |
2-nitrofluoren | 607-57-8 | 210-138-5 | XX 98 |
9-xxxxxxxxxxxx | 90-45-9 | 201-995-6 | XX 1537, XX 97 a XX 97x |
XXX 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, XX 97 x TA 97x |
xxxxx-xxxxxxxxxxxx | 80-15-9 | 201-254-7 | TA 102 |
xxxxxxxxx X | 50-07-7 | 200-008-6 | WP uvrA x XX 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, XX2xxxX a XX2xxxX (pKM101) |
4-nitrochinolin-1-oxid | 56-57-5 | 200-281-1 | WP2, XX2xxxX x XX2xxxX (xXX101) |
Xxxxxxxxxxxx (AF2) | 3688-53-7 | kmeny xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
K xxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx látky. Xxxx-xx xxxxxxxx, je xxxxx uvážit použití xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, bez xxxxxxxxx xxxxx, se kterými xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx se použijí x xxxxxxxxx kontroly xxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxx či xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.3 POSTUP
Při xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4) bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 0,05 nebo 0,1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxx kultury (xxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x 0,5 xx sterilního xxxxx x 2,0 xx vrchního xxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx mísí 0,5 xx xxxxxxxxxxx aktivační xxxxx obsahující xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakce (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x x metabolické xxxxxxxxx xxxxx) s 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx /xxxxxxxxxx roztokem. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx na xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Vrchní agar xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx testovaná xxxxx / xxxxxxxxx roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx kmenem (xxxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x sterilním xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,5 xx) xxxxxxx xx xxxx 20 xxx xxxx xxxx xxx 30 - 37 xX; potom xx xxxxx s vrchním xxxxxx x xxxxxx xx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxx látky / xxxxxxxxxxx roztoku 0,1 xx xxxxxxxx x 0,5 xx xxxxx X9 xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx provzdušňují třepáním.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx se xxx xxxxxx dávku xxxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx-xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, nemusí xx xxxx nutně xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx nebo xxxxxx látky se xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (12) (14) (15) (16).
1.5.4 INKUBACE
Xxxxxxx xxxxx v rámci xxxxxx testu se xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 xX xxx xxxx 48 - 72 xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x negativní xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxx), xxx x xxxxxxxx pozitivní. Xxx xxxxxxxxxx látku i xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontrolu (resp. xxx působení xxxxxxxxxxxx) xx uvedou počty xxx xxxxxxxxxx misky x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx včetně xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Verifikace xxxxxx xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Negativní výsledky xx musejí potvrdit xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx nutné, je xxxxx xx zdůvodnit. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx třeba zvážit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx modifikovat, patří xxxxxxx mezi koncentracemi, xxxxxx xxxxxxxx ("xxxxx xxxxxxxxxxxxx" nebo xxxxxxxxxxx x tekutém xxxxxxxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx xxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xxxxxxx závislý xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx počtu revertantních xxxxxxx xx xxxxx xxxxx při xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x minimálně xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem xxxx xxx xxx (23). Xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (24), xxxxxxxxxxx významnost xx však xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují, xx x xxxxx xxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx experimentů xxxx poskytuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx závěr. Výsledky xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx nebo problematické, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky bakteriálního xxxxx na xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx genové xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx posuzovaných xxxxxx v genomu Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- počet xxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxx (x xx xxxx μx) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a počtu xxxxx pro jednu xxxxxxxxxxx,
- použitá xxxxx,
-xxx a xxxxxxx systému xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx).
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- známky srážení,
- xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx x směrodatná xxxxxxxx,
- vztah xxxxx-xxxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- údaje xx xxxxxxxxxx negativních (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, průměrů x xxxxxxxxxxxx odchylek,
- xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.15. XXXXXX XXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxx haploidní x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxx produkce xxxxxxxx xxxxxx indukovaných xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x x xxxxxxxxxxxx aktivací.
Xxxx využívány forward xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, jako xx xxxx xxxxxx xxxxxx z červených, xxxxxx xxxxxxxxxx mutant (xxx-1, xxx-2) na xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx indukce rezistence xx canavaninu x xxxxxxxxxxxxx.
Nejlépe ověřený xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx využití xxxxxxxxxxx xxxxx XX 185-14 X x okrovými (xxxxx) xxxxxxxx mutacemi xxx 2-1, arg 4-17, xxx 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx typu xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx místě, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mutace. XX185-14X nese rovněž xxx 1-7 xxxxxx, xxxxxxxx mutaci, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mutacemi v xxxxxx místě x xxxxxx xxx 3-10, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxxx kmenů X. xxxxxxxxxx xx jediným xxxxxx využívaným kmenem X7, který je xxxxxxxxxxx xxx xxx 1-92.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx testovaných xxxxx a kontrol xxxx být připraveny xxxxx xxxx testováním xx použití xxxxxxxx xxxxxxxx. X organických xxxxx ve xxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % v organických xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (DMSO). Finální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x charakteristiky xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému.
Xxxxxxxxxx užívaným systémem xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakce xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx po aplikaci xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx kofaktory. Xxxxx xxxxxx druhů, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakcí xx postupů xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx metabolickou xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Haploidní xxxx XX 158-14X a xxxxxxxxx kmen X7 xxxx nejužívanější xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx kmeny xxxxx xxx xxxxxx vhodné.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx kultivační xxxxx jsou xxxxxxx xxx určení xxxxx xxxxxxxxxxxxx x mutovaných xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pozitivní, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx současně. Xxx xxxxxx specifickou mutační xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látky.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx nejméně 5 xxxxxx zvolených xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx redukovat xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Látky xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx až po xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx určena xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.5 Kultivační xxxxxxxx
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxx 28 xx 30 xX xx xxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací x xxxxxxxxx má xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnot.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx u testu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxx. X experimentů xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx 3-10 x xxxxxx mutační xxxxxxxxx xxxx xxx počet xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx kmenů X. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx prováděno ve xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x zahrnuje xxx stacionární xxxx xxxxxxxx buňky. Základní xxxxxx mají být xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx: 1-5 x 107 xxxxx/xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 až 30 xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, pokud xx xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x vyočkovány xx xxxxxx kultivační xxxxxx. Xx inkubaci xxxx xxxxxxxx přežívající buňky x buňky x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx je první xxxxx negativní, xx xxx proveden druhý xxxxx x buňkami xx xxxxxxxxxxx fázi. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx dalším xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, počet xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx potvrzeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x:
- použitých xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx testu: xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxx, xxxxxxx médií, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x trvání xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx kolonií, xxxxx xxxxxx, přežívajících buněk x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx dávky x xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx výsledků.
B.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxx rekombinace x Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx detekována xxxx xxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxx xxxx. První případ xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x vytváří xxxxxxxxxx xxxxxxxx, kdežto xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx nereciproční x xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx je testována xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzniklých x auxotrofního xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx genu. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx detekci xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx X4 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 2 x xxx 5), X7 (xxxxxxxxxxxxxx v trp 5), XX34 (xxxxxxxxxxxxxx x arg 4) x XX1 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4 x xxx 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x D5 xxxx X7 (který xxxxxx měří xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx v xxx 1-92). Oba xxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx 2.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx těsně před xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx vehikula. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx užít xxxxxx xxxxx než 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, jako xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vehikula xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x charakteristiky xxxxx.
Metabolická xxxxxxxx
Xxxxx mají být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakce xxxxxxxxxx x jater xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, postmitochondriálních xxxxxx xx postupů může xxx rovněž xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx X4, X5, X7 x XX1. Xxxxx xxxxxx xxxxx může xxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x rozpouštědlem xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx současně. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mutační xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické látky.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx x rozpustnost. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. X toxických xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace redukovat xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx ve xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxx mohou xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx buď xxxxxxxxxxx xxxx, nebo během xxxxx xx dobu xx 18 x. Xxxxxxx dlouhodobě xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx přítomnost xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Podmínky xxxxxxxx
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xx xxx xx čtyři až xxxx xxx xxx 28 - 30 xX. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mitotickým xxxxxxxxxxx xxxx xxx umístěny x chladničce (xxx 4 xX) xx xxxxx 1 - 2 xxx xxxx xxxxxxxxx, xxx se xxxxx utvořit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kolonie.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx
Xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xx nutno xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx prototrofních xxxxx xxxxxxxxx mitotickou xxxxxxx xxxxxxxx x xxx určení xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx recesivní xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.8 Xxxxxx
Xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx buď xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx buňky. Xxxxxxxx xxxxxx mají xxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx buňkách. 1-5 x 107 xxxxx/xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx dobu xx 18 x. xxx 28 až 30 xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému xx xxxxxxx x xxxxxxx ovlivnění, xxxxx xx xx xxxxxxxx.
Xx skončení xxxxxxxxx xxxx xxxxx centrifugovány, xxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x buňky x indukcí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx pokus xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx dalším xxxxxxx nezávislým xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje mají xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx kolonií, xxxxx rekombinací, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx potvrzeny v xxxxxxxxxx experimentu.
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx statistickými xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxx,
- podmínky xxxxx: xxxxx ve xxxxxxxxxxx fázi nebo xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx aktivační xxxxxx,
- podmínky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, postup x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx ovlivnění, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx, xxxxx rekombinant, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xx xx možné, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- vyhodnocení xxxxxxxx.
X.17. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXX XXXXXX X SAVČÍCH BUŇKÁCH XX XXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX TG 476, Xx Xxxxx Mammalian Xxxx Xxxx Xxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xx dá používat xx xxxxxxxxxx genových xxxxxx vyvolaných xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx vhodné xxxxxxx linie xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx X5178X, xxxxx CHO, XXX-XX52 a X79 xxxxx xxxxxxxx křečka x lidské xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx TK6 (1). X těchto xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) a x xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxx xxxxxx x XX, XXXX x XPRT xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XX a XXXX může xxxxxxx xxxxxxx i xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxx delece), xxxxx xx na lokusu XXXX xxxxxxxxxx X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
K xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx in xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxx. Při xxxxx xxxxx xx berou x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx kultury x stabilita xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací.
Testy xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zdroj xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Takový xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx savčí podmínky xx xxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. X pozitivním xxxxxxxxx, xxx nejsou důsledkem xxxxxxx xxxxxxxxxx může xxxxx v xxxxxxxx xxxxx pH, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (7).
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx screeningu xxxxxxx xxxxxxx mutagenů x xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx, xxxxx jsou x tomto testu xxxxxxxxx, xxxx savčími xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx však xxxxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Tato korelace xxxxxx xx druhu xxxxxxxx látky x xxxxxxxx stále xxxx xxxxxxx toho, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx jiným, xxxxxxxxxxxxxx mechanismem xx xxxxxxxxxxx, xxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nepůsobí (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx mutace: xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx typu xxxxxxxx formy, xxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kódovaného proteinu.
Mutageny xxxxxxxxxxxx substituci xxxx xxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx páru xxxx x XXX.
Xxxxxxxxxx mutageny (xxxxxxxx vyvolávající xxxxxxxx xxxxxx): xxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx nebo xxxx párů bází x DNA.
Doba fenotypické xxxxxxx: xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx zmutovaných xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx genové xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: počet xxxxxxxxxxxx mutovaných xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx celkový růst: xxxxxx xxxxx buněk x čase x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxxx xx jako xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolou) x xxxxxxx klonovací účinnosti xxxxxxx efficiency (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx období xxxxxxx v xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolou.
Životnost (xxxxxxxxx): klonovací xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx exprese.
Přežití: xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx působení xxxxx; xxxxxxxxx se xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx kontrolní buněčné xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxx, deficientní xx xxxxxxxxxxxxxx (TK) x xxxxxxxx mutace XX+/- → XX-/-, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pyrimidinového xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx vůči XXX xxxxxxx, xxx způsobuje xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx další xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx XXX xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx thymidinkinázu, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx XXXX xxxx XXXX selekčně rezistentní xxxx 6-xxxxxxxxxxx (TG) xxxx 8-xxxxxxxxxx (XX). Xxxxx je analog xxxx xxxx sloučenina xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx analyzována x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx buňkách, xx xxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx zvážit. Xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx toxicitu xxxxxxxxx látky vůči xxxxxx x xxxxxxxx x xxx xxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxxxxx strukturně xxxxxxxx xx xxxxxxxxx činidlem, xx třeba xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).
Xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx dobu xxxxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x kultivují xx ke stanovení xxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx fenotypické xxxxxxx xxxx výběrem mutantů (9) (10) (11) (12) (13). Cytotoxicita xx xxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) (cloning xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nárůstu kultur xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx ponechají x xxxxxxxx médiu xx xxxxxxxxxxx dobu, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx x xxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxx k xx xxxxxxxxxxxxxxx fenotypické xxxxxxx xxxxxxxxxxxx mutací. Frekvence xxxxxxx se stanoví xxxxxxxxx známého xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx činidlo xxx detekci xxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxx xxx tohoto xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Xx xxxxxx inkubační xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxx xxxxx x z počtu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Příprava
1.4.1.1 Buňky
Dá xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx, včetně xxxxxxxx xxxxx L5171Y, XXX, CHO-AS52, V79 x XX6. X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx testu xxxx xxx prokázaná xxxxxxxxx vůči chemickým xxxxxxxxx, xxxxxx klonovací xxxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx) x stabilní xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx nejsou xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; infikované xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxxx citlivost x xxxxxxxxxxx (xxxxx). Xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx testované xxxxx musí xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vyhovovat (14). Minimální počet xxxxxxxxx buněk, xxxxx xxxxxxx expozici x xxxxxxx xx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xx dán xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Obecným xxxxxxxx xx, xx xxxxx xxxxx xx xxx minimálně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx použít xxxxxxx 106 xxxxx. Xxxx by být x dispozici xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvládnutí xxxxx.
1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx podmínky
Je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (kultivační xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x vlhkost). Xxxxx se xxx xxxx volí xxxxx xxxxxxxxxx systému a xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, aby xxxxxxxx kultivace zajišťovaly xxxxxxxxx růst xxxxx xxxxx expresní periody x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx tvořit xxxxxxx.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx x inkubují xxx xxxxxxx 37 xX. Před provedením xxxxx, je xxxxx xxxxxxx zbavit xxxxx xxxxxxxxx mutovaných buněk.
1.4.1.4 Metabolická xxxxxxxx
Xx buňky se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx, ovlivněná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx je Aroclor 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx fenobarbitalu a β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx 1 - 10% v/v. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxx, jakého typu xx testovaná xxxxxxxxxx. X některých případech xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx koncentracích.
Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx specifické xxxxxxxxx enzymy. Výběr xxxxxxxxx linií xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx cytochromu P450 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxx, xxxxx xx před xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xx systému xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx ředí. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, ledaže xxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx skladování xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx xxxxxxxxx podezření, xx xx mohlo x testovanou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx známé xxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje xx, xxx xxxxx tam, xxx je xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx. Je-li testovaná xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx organické xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx dá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxx kritéria, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx cytotoxicita, xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x změny pH xxxx. osmolality.
Cytotoxicita xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i bez xx v hlavním xxxxxxxxxxx, přičemž xx xxxxxxx xxxxxx indikace xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx buněk, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx celkový růst. Xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxx xx maximální xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx znamená, že xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx lišit xxxx xxx násobkem, xxxxx xxxx xxxx hodnotami 2 x √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x cytotoxicity, xxxx xx vést x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (relativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx celkovému xxxxx x 10-20 %, xx xxxx xxxx xxx 10 %. X relativně xxxxxxxxxxx xxxxx xx maximální xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 mg/ml, 5 μx/xx x 1,01 X.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx netoxické x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx, při xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx použitá xxxxxxxxxxx vyšší, xxx xx mez xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx kultivačním xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Může být xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xx xxxxx působení, xxxxxxx xx rozpustnost xxxx xxxxx expozice x důsledku xxxxxxxxxxx xxxxx, S9, séra xxx. měnit. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx buněk.
1.4.2.3 Kontroly
V xxxxx xxxxxxx experimentu xx xxxxxx xxxxxxx i xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, vehikulum) xxxxxxxx, x xx xxx x metabolickou xxxxxxxx, xxx bez xx. Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látka vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx mutagenního účinku. Xxxx látkami xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx nitrosomočovina | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
TK (xxxx x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxx methansulfonát | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XPRT | ethyl xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (xxxx x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XXXX | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx X-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
xxxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx použít x xxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x 5-brom-2'-deoxyuridinu (CAS 59-14-3, xxxxx XXXXXX 200-415-9), xxx použít x tuto xxxxxxxxxx xxxxx. Xxx, xxx xx xx možné, xx vhodné xxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx každý xxxxxx interval sklízení xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulum v xxxxxxxxxxx médiu, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx rovněž xxxxx xxxxxxx kontrolu xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že zvolené xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx účinky.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxx testovanou xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx jak s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Expozice xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xx xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx více buněčných xxxxx.
Xxx xxxxxx koncentraci xx xxxxxxxxx kultury xxxxxxxxxx nebo jenom xxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx třeba zvýšit xxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx zajistil xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x analýze (xx. xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxxxxx s xxxxxxxxx kontrolou (rozpouštědlem/vehikulem) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx plynných xxxx xxxxxxxx látek xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx vhodné xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x mutační xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx expozice xx xxxxx promyjí x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx obvykle začíná x analýzou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx klonovací účinnosti - xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxxxxx časový xxxxxxxx xxx téměř xxxxxxxxx expresi xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX x XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxx 6 - 8 xxx, XX xxxxxxxxx 2 xxx). Xxxxx xx xxxxxxx x médiu s x bez xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx účinnosti. Xx xxxxxxxx doby xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx životnosti (používané x xxxxxxx četnosti xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx x xxxxx X5178X XX+/- xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xx jedné x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx pozitivní koncentrace) x xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x tomto xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxx x XX6XX+/-.
2. XXXXX
2.1 Zpracování xxxxxxxx
Xxxx data xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x mutační xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx X5178XX+/- xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx kritérií xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x negativní x pozitivní kontrole. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx velkých x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx prostudovány v xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx testu TK+/- xx xxxxxxx hodnotí xxxxx kritéria kolonií xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxx) x xxxxxxxx xxxxx (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx utrpěly xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, mají xxxxx xxxx xxxxxxxx, x proto tvoří xxxx xxxxxxx. Rozmezí xxxxxx xxxxxxxxx obvykle xxxx od xxxxxx xxxxxx genu xx xxxxxxxxxxxx viditelné xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tvorba xxxxxx xxxxxxx je asociována x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mutanty xxxxxx xxxxxxxx rychlostí xxxx buňky xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnost - xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx buněk xxxxxx počtem xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx se individuální xxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxxxx se xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx formě.
Verifikace xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx objasňují xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xx musí xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxx, xx třeba xxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvážit xxxxxxxxxx xxxxxxxxx studie tak, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx podmínek. X xxxxxxxxxx, které se xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx rozdíly xxxx jednotlivými xxxxxxxxxxxxx x podmínky metabolické xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx stanovení xxxxxxxxxxx výsledku existuje xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nárůst xxxx reprodukovatelný xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Nejprve xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování výsledků xxxxx xx mohou xxxxxx statistické xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, se x tomto xxxxxxx xxxxxxxx za nemutagenní. Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx výsledky, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx nelze xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx experiment xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxx v savčích xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, že testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx. Nejprůkaznější xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx - xxxxxx. Negativní výsledky xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba uvést xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- typ x xxxxx buněk,
- xxxxx xxxxxxxxx kultur,
- xxxxxxxx počet xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx použitých koncentrací x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx. xxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x dispozici,
- xxxxxxx xxxxx, koncentrace XX2,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx vehikula x přidané xxxxxxxxx xxxxx,
- inkubační xxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
-xxxx xxxxxxxx xxxxx,
- hustota xxxxx xxxxx působení xxxxx,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx akceptovatelnosti,
- xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx,
- délka expresní xxxxxxx (xxxxxxxx včetně xxxxx inokulovaných xxxxx, xxxxxxxxx)
- xxxxxxxx činidla,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx živých a xxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxxx xxxxxxx, x nichž xx xxxxxxx xxxxxxxx x typ (xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx "malými" x "xxxxxxx" koloniemi).
Výsledky:
- xxxxxx toxicity,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx o xX x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jsou-li xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, je-li xxxxxxxxx, minimálně pro xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxx X5178X XX+/-,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické údaje x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx odchylek.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.18. XXXXXXXXX XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX XXXXXXX XXX - SAVČÍ XXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx neplánované xxxxxxx XXX (XXX) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx xxxxxx x odstranění xxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxxx poškození indukovaného xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx je xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (3H-TdR) xx XXX xxxxxxx xxxxx, xxxxx nejsou x X xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (LSC) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx se primární xxxxxxx kultury potkaních xxxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx v xxxxxxxxxxx, xxx i x xxxxxxxxxxxxx exogenního metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. UDS xxxx xxx také xxxxxxxxx x systému xx vivo.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kontrolní xxxx referenční xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiu xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx ředění xx xxxxxxx jenom xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla x xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk.
Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx potkaních hepatocytů, xxxxxxxx lymfocytů xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx diploidní xxxxxxxxxxx).
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxx xxxx, xx-xx to xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxx XXX XXX.
1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
X každém xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx metabolického aktivačního xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx pro xxxxxxx hepatocyty xxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-DMBA) nebo 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-AAF). Jako xxxxxxxxx kontrolu xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxx i pro XXX bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx metabolického aktivačního xxxxxxx xxx xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx testované xxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx koncentrací testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx ve xxxx xxxxxx rozpustné xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxx netoxické xxxxx ve xxxx xxxxx rozpustné xx xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx určuje případ xx případu.
1.2.2.4 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx růstové médium, xxxxxxxxxxx CO2, teplota x vlhkost. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Mycoplasmat.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx aktivace
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx a xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Stabilizovaná xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx kultury (xxxxxxxxxx nebo setřepáním xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 xX.
Xxxxxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx připravují xxx, že xx xxxxxx xxxxxxx izolovaným xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xx xxxxxxx médiu x povrchu xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx vhodné metody.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Primární xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx obsahujícím 3X-XxX xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx, buňky xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx autoradiografické xxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxx stripping xxxx), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x vyhodnocena.
Stabilizované xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: Xxxxxxx kultury xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx vhodnou xxxx x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 3X-XxX. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx typu xxxxx. X zachycení xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxx 3X-XxX xxxxxx xxxxxxxx s testovanou xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx po expozici. Xxxxx mezi xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x 3X-XxX. X odlišení xxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx séra xxxx xxxxxxxx hydroxyurey xx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx inhibici xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX.
Stanovení XXX pomocí XXX: Xxxx expozicí xxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx buněk xx X-xxxx, jak xxxx xxxxx uvedeno. Xxxxx jsou xxx xxxxxxxxxx testované xxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx autoradiografii. Xx xxxxx kultivace xx XXX xxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx obsah XXX x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX.
Xxxxxxxx xxxx použity xx xxxxx uvedených xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx semikonzervativní xxxxxxxxx XXX zbytečná.
1.2.4 Xxxxxxx
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx autoradiografie
Xxx xxxxxxxxxxxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx v X-xxxx xxxxxxxxx. Hodnotí xx xxxxxxx 50 xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Preparáty je xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx vybraných xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 3X-XxX x cytoplazmě xx xxxx v xxxx x velikosti xxx xxxxx v xxxxxxxxxx každé xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx LSC
Xxx stanovení XXX XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kultur xxx každou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx experimentech.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
2.1 Xxxxxxxxxxx autoradiografie
Xxxxxx inkorporace 3X-XxX xx xxxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx průměru, xxxxxxx x modu.
2.2 Vyhodnocení XXX
Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx zaznamenává jako xxx/μx DNA. Xxxxxxxx xxxxxxx dpm/μg XXX xxxxx xx směrodatnou xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x vyjádření distribuce xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx možné, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx použitých x xxxxxxxxx kultury, xxxxx, xxxxxxx, koncentraci XX2,
- xxxxxxxxx látce, xxxxxxxxxxxx, koncentracích x xxxxxxxxxx jejich výběru x experimentu,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systému,
- xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx autoradiografických xxxxxxxx,
- způsobech xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx X-xxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx XXX x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XXX xxx metodě XXX,
- vztahu xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.19. XXX - VÝMĚNA SESTERSKÝCH XXXXXXXXX IN XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
XXX xx krátkodobý test xxx xxxxxxx recipročních xxxxx DNA xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. SCE xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx sekvencí XXX xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) lokusech. XXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx zlom x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx zatím xxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxxx základě xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx dosahuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (BrdU) do xxxxxxxxxxxxx XXX xx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx buňky xx vitro xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x přítomnosti x xxx přítomnosti exogenního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx potřebné. Xxxxxxxxx xx po xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx BrdU. Xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx inhibitorem xxxxxxxx xxxxxxxx (např. xxxxxxxxx) x akumulaci xxxxx v x-xxxxxxxx xxxxxx. Xx ukončení xxxxxxxxx xxxx buňky xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx (xxxxxx lymfocyty) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (ovariální xxxxx xxxxxxxx křečka). Buněčné xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx vhodná kultivační xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO2 x xxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx buněk, xxxxxxxx xxxxx nebo frekvenci XXX.
Buňky se xxxxxxxx xxxxxxxxx látce x přítomnosti x xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx savčího metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx skupinu chemických xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxx kultur
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx účinkem x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Dále musí xxx použita negativní xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxx pozitivní xxxxxxxx lze použít:
- přímo xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx
- xxxxxxx působící xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx
Xx-xx xxxxx, xx možné zařadit xxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx se nejméně xxx xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxx musí umožnit xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx testovat až xx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 xX. Xxx xxxxxxxxxxxx kultury xx xxxxxxx takový xxxxx xxxxx x kultivační xxxxxx, aby xx xxxxx kultivace nevytvářely xxxx xxx x 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Lze xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx kultury xx připraví x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxx 37 xX.
1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur
Xxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu. Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx až xxx xxxxxx, xxx expozice xxxx být prodloužena xx xx xxx xxxxxxx xxxxx, xx-xx xx xxxxx. Buňky, xxxxx xxxxxx dostatečnou xxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx být exponovány xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx vymyty x xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x XxxX xxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx buňky xxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx látkou x XxxX xx dobu xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx kultury xxxx exponovány testovanou xxxxxx, xxxxx jsou x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx v nejcitlivějším xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x XxxX xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxx xx světle xxxxxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx XxxX.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxx hodiny xxxx ukončením xxxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxx inhibitor xxxxxxxx xxxxxxxx (např. xxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.3.4 Příprava xxxxxxxxx a barvení
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx SCE xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxx).
1.2.3.5 Xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX x kontrole. Obvykle xx hodnotí nejméně 25 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx každou xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x 46 xxxxxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, které xx xxxx x ± 2 xxxxxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx budou xxxxxxxxxx XXX v xxxxxxx centromery. Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx tabulkovou xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x každé xxxxxxxx x počet XXX/xxxxxxxxx zvlášť xxx xxxxxx metafázi v xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxx vhodnými statistickými xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu obsahuje, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, metodách xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxx média, xxxxxxx, koncentraci CO2, xxxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx x jeho xxxxx působení, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxxxxx,
- xxxxx kultur xxx xxxxx experimentální xxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx preparátů,
- počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxx kulturu),
- xxxxxxxxx xxxxx XXX/xxxxx x XXX/xxxxxxxxx (odděleně xxx xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX,
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.20. XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX XXXXXX XX POHLAVÍ U XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx (XXXX) xx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, jak xxxxxxxx, xxx i malých xxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xx test xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx screening mutací x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx xxxxxxxxxx X. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxx 80 % všech xxxxxx X-chromozómu. X-chromozóm xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx x X-xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx projeví x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx gen. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx x hemizygotním stavu, xxx na xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx ze xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxx heterozygotní xxxxxx. XXXX xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx vzhledu x xxxxxxxxxx chromozómů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
1.2.1.1 Xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx linie x xxxxxx xxxxx Muller-5. Xxxxx být xxxxxxx x jiné xxxxxx xxxxx xxxxxxx linie xxxxx x vícenásobnou xxxxxxx X-xxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Testované xxxxx
Testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx ve xxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle (xxxx. xxxx xxxxxxx x Tweenu-60 xxxx 80), xxxx aplikací xx xxxx xxxx xxxxx xxxx fyziologickým xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx dimetylsulfoxid (DMSO) xxxx xxxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx citlivost. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ovlivněných xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx per xx, injekčně xxxx xxxxxxxx plynům xxxx xxxxx. Zkrmování xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx roztoku. Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx v 0,7% xxxxxxx NaCl x xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
V xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx negativní (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jestliže má xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxx, není xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kontroly.
1.2.1.6 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxx xxxxx testované xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx používá xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx typu (xx xxxxx 3-5 xxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx kříženi x xxxxxxxxxx samicemi z xxxxx Xxxxxx-5 nebo x jiné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Samice xxxx vyměněny xx xxxxxxx xxxxxxxx samice xxxxx dva až xxx xxx, xxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx zárodečných xxxxx. X xxxxxxx xxxxxx samic je xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x účinkem xxxxxxxxx látky v xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Heterozygotní X1 samice xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (tj. jedna xxxxxx/xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx. V X2 xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx. Jestliže x xxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (nejsou xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xx opakuje x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Získané údaje xx xxxxxxxx do xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, pro xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxx xxxxxxx testovaného xxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxx clusterů xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx zhodnotí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nahromadění xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x jednom xxxxx xx xxx xxxxx v xxxxx x zhodnoceno xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, informace x:
- xxxxxxxxx liniích xxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx, xxxx, počtu xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxxxxxx F2 xxxxxx, xxxxx X2 xxxxxx xxx potomků, počtu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx letální xxxxxx pro každé xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- kritériích xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx testu: xxxxxxxx xxxxx ovlivňování x schéma xxxxxx xxxxxx, výše xxxxx, xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx mutací,
- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.21. XXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXX BUNĚK - XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxx fenotypických xxxx in vitro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx vivo. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx X3X10X1/2, 3T3, XXX, Fischerových potkanů x xxxx se xxxxx x xxxxx xxxxxxx morfologie, xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxx x uchycení x xxxxxxxxxxxx agaru. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx ostatní fyziologické xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x buňkách xx xxxxxxxx karcinogenním xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx in xxxxx testu není xxxxxxx karcinogenity. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx růstu kultury. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx expozice xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xx nelze xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx experimentech, xxxxxxx x některých xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo x xxxxxxxxxx.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Buňky
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x primokultur xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx musí xxxxxxxx, xx buňky xxxxxxx x xxxxx transformace xxxxxxxx příslušné xxxxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx a xx test xxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x že je xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx vhodné xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx
Testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx vhodném rozpouštědle xxxx ovlivněním xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx životnost xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Buňky jsou xxxxxxxxxx testované xxxxx x přítomnosti x xxx přítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx experimentu musí xxx zařazeny xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx kontroly:
- xxxxx působící xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx, xx možné xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kontrolu xx stejné xxxxxxxx xxxxxxx, jako je xxxxxxxxx látka.
1.2.2.2 Koncentrace
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nízkou xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx kontrole. Xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace ve xxxx rozpustné xxxxxxxxx xxxxx se určuje xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Buňky xxxx být exponovány xxxxxxxxxxx xxxx závislou xx použitém xxxxxxxxxx xxxxxxx. Ta může xxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx (xx. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivační xxxxx), xxxxxxxx xx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Buňky xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx testované látce x xxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na xxxxx xxxxxxxx xx x buněk xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaná xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx. Xxx xx zaznamenáván xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx prezentovány x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk jako xxxxxxxx kontrolní xxxxxx x xxxxxxxxx transformací xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx přežívajících xxxxx. Data xx xxxxx zpracovat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metodami.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu pokusu xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, informace x:
- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxx použitých x xxxxxxxxx xxxxxxx, počtu xxxxxx,
- kultivačních xxxxxxxxxx: koncentraci xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, kultivačních xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, pozitivních x xxxxxxxxxxx kontrolách, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx systému (xx-xx to xxxxxx), xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxxxxx,
- metodách xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx,
- statistickém xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX XXXX U XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx způsobuje xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Indukce dominantních xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx látce xxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx zárodečné xxxxx exponovaného zvířecího xxxxx. Obecně xx xxxxxxx, xx dominantní xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxx embrya xxxxxxxxxx samice xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinku.
Samci xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx x exponované xxxxxxx xxx xxxxx mrtvých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx hodnotí xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx letalita xx xxxxxx xxx- x postimplantačních xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xx samici x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (t.j. spermatocytů x/xxxx xxxxxxxxxxxxx).
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Testovanou xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx nerozpustné xx vodě xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx vhodném rozpouštědle. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx s testovanou xxxxxx ani xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxx naředěnou xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podává xxxxx xxxxxx. Xx základě xxxxxxxxxxxxxxx informací xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Obvyklý xxxxxx xxxxxxxx xx orální xxxxxx xxxx intraperitoneální xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxx. Xxxxxx, pohlavně dospělá xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xx třeba použít xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxx variabilitu xxxxxxxxx biologické xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx samců, xxx xx xxxxxxx 30 - 50 xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx) kontroly xxxx xxx xxxxxxxx do xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxx ve xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx citlivost xxxxx (xxxx. XXX, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 xx.xx-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxxxxx známky xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. X některých xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxx xxxx
Netoxické xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxxxx 5 x.xx-1 xxxx x xxxxx 1 x.xx-1.xxx-1 xxx opakované xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Existuje xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jednorázová xxxxxxxx. Může však xxx xxxxxxx jiné xxxxxx.
Jeden xxxxx xx xxxxxxxxx křížen x xxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxx u xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx jednoho xxxxx xxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx vagině xx xxxxxxxxx zátka.
Xxxxx xxxxxx po xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx buněk sledovaných xx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx utraceny cervikální xxxxxxxxx xx druhé xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx x xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x tabulkách. Xxxxxxxx xxxxxxx páření xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x samice xxxx uváděny xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, x xxxxx xxxxxx samci, x počtu xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx celkového dominantního xxxxxxxxx efektu xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx živých xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxx xxxxxx implantací x kontrolní xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx ku xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupině xx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx vypovídá x xxxxxxxxxxxxxxxxx ztrátách.
V xxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxx časná x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxxxx x preimplantační xxxxxx. Xx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx corpora xxxxx x počtem xxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx průměrného xxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxx xx srovnání x xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx xxxxx, informace x:
- xxxxx, xxxxx, xxxx x xxxx zvířat, počet xxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- testované xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x důvodech xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x toxicitě,
- xxxxxxx podání x xxxxxxxx expozice,
- xxxxxx páření,
- xxxxxxxx x průkazu xxxxxx,
- doba xxxxxxxx,
- kritéria xxx xxxxxxxx dominantních xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx dávka/odpověď,
- xxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.23. ANALÝZA XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX V XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 483, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxxxxx xxxxx xx xx xxxx identifikovat xxxxx xxxxxxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx spermatogoniích (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx chemickými xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx není určena x analýze xxxxxxxxxxx xxxxxxx a běžně xx x tomuto xxxxx nepoužívá. Chromozómové xxxxxx a xxxxxxxx xxxx jsou x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, a xxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx nepoužívá xxxx xxxxxx buňky.
Xxx xx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx první xxxxxx xx působení testované xxxxx, xxxxx xxx xx poškození ztratí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x ovlivněných xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, kde xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xx xxxx je určen xx zjišťování, xxx xxxx xxxxxxxx aktivní x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx test xxxxxx xxxx pro hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx tím, xx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx procesů XXX.
X xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx širokým xxxxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx xxxxxx. Zjištěné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx ovlivněných xxxxxxxx spermatogonií, xxx xxxxxxxxxx diferencované xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx jejich xxxxxx xx xxxxxxx pak xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx nemusejí xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxx buněk x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Existují-li xxxxxxx xxxx, že xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx xxxx xxxxx pro xxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx zlom x xxxxxxxx spojení xxxx xxxxxxxxxxxx.
Aberace chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatid xx stejném xxxxx (xxxxxxxx jako aberace xxxx dicentrický xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: jako xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx šířka xxxxxxxxx chromatidy. Dále xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) fragment x xxxxx xxxxx xx dislokovaný (nebo xxxx osu xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromatid.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx xxxxxx normálnímu xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (n) xxxx xxx diploidní xxxxx xxxx (3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx delece x xxxxxxxxx, x výměny.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Zvířata xx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xx xxxxxxx xxxx xx působení xx usmrtí. Před xxxxxxxxx xx na xx xxxxxx látkou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). Xx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Výběr xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxx, xxx xxxxx použít xxxxx jakéhokoliv jiného xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx rozdíly by xxx zahájení xxxxxx xxxx být minimální x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx úvodu x xxxxx B.
Xxxxxxx by měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx jedinci xx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci xx xxxxxxxxxxx xxxxxx a xx xxxx minimálně xxxx xxx se xxxxxxx aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx uspořádat xxx, aby se xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx dávek
Xx-xx testovaná látka x pevném stavu x xx-xx xx xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xxxx suspenze xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx se xxxx xxxxxxxxx ředí. je xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx a nesmí x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx nepříliš xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx použití xxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě použito xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Xx každého xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx zacházet xx zvířaty ve xxxxx xxxxxxxxx stejně.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nad xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxx, aby xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní kontrolu xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx odebírat v xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx je xx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx chemické xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu.
Xxxxx | XXX | EINECS |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
monohydrát xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxx monomer | 79-06-1 | 201-173-7 |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Negativní xxxxxxxx ovlivněné rozpouštědlem xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx by být xxxxxxxx xx všech xxxxxxxx xxxxxxxxx zpracování, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxxxx xxxxx o frekvenci xxxxx x xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx zvířaty. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx samců.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jednorázově xxxx xx xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx jedná x objemnou xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx režimy xxxxxxxxx xxxxxx být vědecky xxxxxxxxxx.
V xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx vzorky xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka může xxxxxxxxxx kinetiku xxxxxxxxx xxxxxx, provádí xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx odběr xxxxxx 24 a 48 xxxxx xx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx (tj. xxxx xxxxx nejvyšší) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx xxxx po 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, ledaže xx znám vhodnější xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (6).
Xxxxx toho xxxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx intervaly odběru xxxxxx. Xxxx. jedná-li xx x látku xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómů xxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx S-fázi xxxxx, xxxx vhodnější xxxxxxxx xxxx odběru xxxxxx (1).
Xxx xx vhodné nechat xxxxx xxxxxxx opakovaně, xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx zvířata xx 24 xxxxxxxx (1,5násobku xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxxxx x x dalších xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx xx to xx xxxxxx.
Před xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Colcemidu® nebo xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x nich xx xxxxxxx intervalu xxxxxxxx vzorky. X xxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 3-5 xxxxx, u čínských xxxxxx xxxxxx 4-5 xxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx-xx xx studie ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx žádné xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx v xxxx laboratoři xx xxxxxxx xxxxxxxx živočišného xxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx použijí x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxx pro xxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxx, aby xxxxxxxxx rozmezí xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxx. Pro xxxxxxxx xxx xxxxxx vzorků xx pak xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx jako dávka xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxx, xx při xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, mohou představovat xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx od xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx také xxxxxxxxxx xxxx dávka, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx mitóz xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx( xxxxx pokles xxxx být xxxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx xxxx při dávce xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x jeden xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x podobnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx být xxxxxxxxx celá xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx může xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx vpravuje xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx intraperitoneální injekcí. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx přijatelné x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 g xxxxxxxxx; xxxxx dávky xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx látek, jež xxxxxxxx vykazují xxx xxxxxxx koncentracích horší xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xxx, aby xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx objemová variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx chromozómů
Okamžitě xx usmrcení xxxxxxx xx z jednoho xxxx z obou xxxxxx připraví xxxxxxx xxxxxxxx, xx kterou xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x fixuje xx. Buněčná xxxxxxxx xx nakape na xxxxxxxx xxxx a xxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx minimálně 100 xxxxx rozprostřených xxxxxxxx (xx. minimálně 500 xxxxxxxx v xxxxx xxxxxxx). Xxxxx xxxxx xx xx snížit, xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx preparáty (xxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) xx před xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx, musí xxx x všech xxxx buněk počet xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx roven xxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx buněk xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x počet xxxxxxx xx xxxxx buňku. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupin se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx typy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberací, xxxxxx počet x xxxxxxx. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx, ale xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx aberací xxxxxxxxxx.
Xx-xx analyzována xxxxxx x xxxxxx, stanoví xx x všech xxxxxxxxx zvířat i xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx jakožto xxxx xxxxxxxxxxxx poměr xxxxx xxxxxxxxxxxxx k xxxxx x xxxxx meiotické xxxxxxxx, x xx xxx, xx xx x každého jedince xxxxxxx 100 xxxxxxxx xx xxxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx pouze mitóza, xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 1000 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislá xxxxxxxxx xxxxx x chromozómovými xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx a x xxxxxx xxxxxxx intervalem xxxxxx vzorků. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx možno xxxxxx statistické metody (8); xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyjasnit dalším xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx látka, při xxxxxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx, xx x xxxxx systému xxxxxxxx xx nemutagenní.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vykazuje xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx jednoznačné xxxxxxxxx účinku testované xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testovaná xxxxx x zárodečných xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xxxxxxxxxx.
Je xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxx širokého xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxx (např. xxxxxxxxx toxicita).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x stabilita testované xxxxx rozpouštědla/vehikulu, pokud xx známa.
Pokusná xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx a xxx xxxxxx,
-xxxxx, chovné xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx hmotnostního xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- údaje xx xxxxxx xxx xxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxx-xx provedena,
- xxxxxxxxxx xxxxx velikosti xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx převod xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx / den),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx potravy x xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x odběru xxxxxx,
- metody xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx jedno xxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- známky xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxxxx spermatogonií k xxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxx a xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx aberací x xxxx skupině,
- počet xxxxx x aberacemi xx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx - xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx odchylek,
- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.24. XXXX XXXX U MYŠÍ
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Je xx in xxxx xxxx xx xxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx chemickým látkám. Xxxxxxxx buňkami x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x cílovými geny xx, které xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxxx jsou vyjádřeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxx srsti xxxxxxxxxx xxxx. Počet potomků x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, je xxxxxxxxxx x jejich xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx u potomků x xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx xxxx suspendovány x izotonickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx nerozpustné xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx vhodném rozpouštědle. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxx x testovanou xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Používají xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Myši xxxxx T (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxxxxxx, pink xxx, xxx x/xxx x; xxxxx, b/b; xxxxxx, xxxxx xxx, x xx/x xx; xxxxxxx spotting, x/x) xxxx kříženy xxx x kmenem HT (xxxxxx, nonagouti, xxxxxxxxxx, xx x xx/xx x xx; xxxxxx xxxxx, xx xx/ /xx xx; xxxxx xx/xx) xxxx x xxxxxx X57 XX (xxxxxxxxx, a/a).
Xxxxx xxx použita x xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx nonagouti xxxxxxx. Xxxx. xxxxxxx mezi xxxxxx XXXX (xxxxxxxxx, x/x; albino, c/c) x XXX (xxxxxxxxx, x/x; xxxxx, b/b; xxxxxx x/x).
1.2.1.2 Počet x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxx na xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx a x kontrolních xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx samic ovlivněných xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxx laboratoři xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx mutagenním účinkem xxxxx xxx x xxxxx testu použity, xxxxxxxx u testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx intraperitoneální xxxxxxx xxxxx xxxx. Je-li xx vhodné, xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxx xxxx způsob xxxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Používají xx xxxxxxx dvě xxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx nebo zmenšení xxxxxxxxx vrhu.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx 8., 9. xxxx 10. xxx xxxxxxxx, xxxxxxx za 1. xxx březosti se xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 x 9.25 xxx po xxxxxxxx. Xxxxxxxxx ovlivnění látkou xxx provést xxxxx xxxxxx xxx.
Xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx mezi xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx po xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx:
(x) xxxx xxxxxx x xxxxxxx 5 xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x kterých xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx zánikem buněk (XXXX);
(x) žluté xxxxxx typu xxxxxx xx vyskytují v xxxxx xxxxxxxx žláz, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxx, xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxxx xx, xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (XXX);
(x) zbarvené a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx somatických xxxxxx (XX).
Xxxxxxx xxx skupiny xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx pouze xxxxxxxx, XX, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Obtíže x xxxxxxxxx xxxx XXX a XX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Zaznamenávají xx nápadné, xxxxx xxxxxxxxxxxx malformace xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx sledovaných xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx jednu xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx získané x xxxxxxxxxxx x exponovaných xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx také xxxxxxx xxxx získané xxxxxxx xx xxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx o:
- xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- průměrné velikosti xxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xx kterém xxx xxxxxxxx byla testovaná xxxxx aplikována,
- x způsobu podání xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx x XXXX, XXX x RS x xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxxx x RS, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX U XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx detekuje xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x u xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x XO-samice xxxxxxxx sníženou xxxxxxxxx, xxxxx xx využívá xxx xxxxx X1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Úplná xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx translokací (X-xxxxxxx x x-x xxx). Xxxxxxxxxxx xxxx analyzovány xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, xxxx X1 xxxxx či xxxxxxx xxxxxxx F1 xxxxx. Samice XX xxxx cytogeneticky identifikovány xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x kostní xxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx čerstvě xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky.
1.2.1.1 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxxx x jiné xxxxxx způsoby xxxxxxxx.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Nepožaduje xx xxxxx xxxxxxxxxx kmen. Xxxxxxxx velikost xxxx xx měla xxx xxxxx než osm x xxxx xx xxx relativně xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxx, xxxxxxxx dospělá zvířata.
1.2.1.3 Xxxxx zvířat
Počet xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyžadovaném xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xx obvykle xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx X1 xxxxxxx. Nejméně 500 xxxxx v X1 xxxxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx také xxxxxx X1 generace xxxxxxx, xxx xx vyžaduje 300 xxxxx a 300 xxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx
Xxxxx se použít xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx xxxxxxx z předchozích xxxxxx. Jestliže jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol z xxxxxxxxx pokusu x xxxx laboratoře, xxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx minimální xxxxxxx efekt, xxx xxx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx/xxxxxxx je xxxxx dvou xxxxxxx, xxxxxxx dávek. X xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx dosažitelná xxxxx.
1.2.2 Xxxxx postupu
1.2.2.1 Xxxxxxxx x oplodnění
Xxxxxxxxx xx dva xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx je možná xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx x týdnu xx 35 xxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx řízen xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx zárodečných xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx rozděleny do xxxxx. Xx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, velikost vrhu x pohlaví mláďat. Xx xxxx xxxx xxxxx x samičí xxxxxxx xxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Zjišťování xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx ze xxxx xxxxxxx metod. Xxxx xxxxxxxxx X1 xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx možných xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx X1 xxxxxxxx xxx předchozího xxxxxx xxxxxx testu xxxxxxxxx.
(a) Xxxx xxxxxxxxx
Snížená fertilita xxxxxx v X1 xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx samic. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx kmen xxxxxxxxx myší.
Velikost xxxx: F1 samci xxxxxx k testování xxxx xxxxxxxx samostatně xx xxxxx xx xxxxxxxx ze xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx denně xxxxxxxx 18. dnem po xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx x pohlaví X2 xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxx porodu, xxxx xxxx xxxx odděleni. Xxxxxxxx xxxx testovány X1 xxxxxx, F2 xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxx testy. Samice-nositelky xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx translokací x xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxx xxxxxxx. XX-xxxxxx xxxx určeny změnou xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx x 1 : 1 xx 1 : 2 samci vs. xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxx vyřazena x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx X2 xxx dosahuje xxxx xxxxxxxxx předem určenou xxxxxxxx hodnotu, jinak xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx. X1 zvířata, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx normální po xxxxxxxxxxx xxx F2 xxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx buď xxxxxxxx xxxxxx dělohy, xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: Redukce xxxxxxxxx vrhu x xxxxxx translokací je xxxxxxxxx xxxxx embryí, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx translokací u xxxxxxxxxxx xxxxxx. Testovaní X1 samci xxxx xxxxxxxxxxx každý ke 2 - 3 xxxxxxx. Oplodnění xx xxxxxxxx xxxxx ranní xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx 14. - 16. xxx a xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx zárodky.
(b) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxx-xxxxxx xxxx připraveny xxxxxxxxx z testes. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx na základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxx X x xxxxxxxxxx spermatocytech. Xxxxx nejméně dvou xxxxx x multivalentními xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, že testované xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Jestliže xxx xxxxxxxx výběr xx xxxxxxxx, xxxxxxx F1 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx vyšetřeno xxxxxxx 25 buněk x xxxxxxxxx - metafáze X. Analýza mitotických xxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx se vyžaduje x xxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo x X1 samic xxxxxxxxxxx XX. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx krátkého xxxxxxxxxx x každé x 10 xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (x-x xxx). Xxxxxxx X-xxxxxxxxxxx translokace xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxxxxx xxxxx pruhováním mitotických xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx xx xxxxx 10 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx XX xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Pro xxxxx interval xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx a xxxxx pohlaví (xxx xxxxx).
Pro odhad xxxxxxxxx X1 xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx F1 xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx se xxxxx průměrný počet xxxxxx a mrtvých xxxxxxx v kontrole x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx X1 xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Při cytogenetické xxxxxxx diakinéze-metafáze I xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx počet xxxxx xxx každého xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx X1 sterilní xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx x doba xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
U XO xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxx X2 xxxxxxx x výsledky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx, xx pomocí xxxxx fertility xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxx xxx uvedeny xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx možné, xxxxxxxxx x:
- xxxxx xxxx, xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- počtu rodičovských xxxxxx xxx každé xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách,
- xxxxxxxxxxxxxxxx podmínkách, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, dávkové hladiny, xxxxxxxxxxxx a schéma xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx mláďat xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxx potomků xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x detailní xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x obsahu xxxxxx,
- popis xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x mikroskopické xxxxxxx, pokud xxxxx x obrázky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.26. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ
(90denní xxxxxxxxx xxxxxxxx per xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxx xxxxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx příznaky toxicity. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx x krmení, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx x potravě, xxxxxx, v kapslích xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx zvířatům xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx po celou xxxx pokusu xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx x xxxx xxxxx, že nemají xxxxxxx xxxxxx. Existují-li xxxxxx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx přednost xxxxxxxx, xxxxx nejsou známy xxxxxx xxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx měli být xxxxxxx mladší xxx 6 týdnů, x xxxxxx xxxxxxx starší xxx 8 týdnů. Xx začátku studie xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx živočišný xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx hladinu xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Samice xxxx xxx nullipary x xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx možno podávat xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx každého xxxxxxx) po xxxx 90 dnů xxxxxxxx xxxxx x během xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx sledovat xxxxxxxx, přetrvávání nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx vehikulum pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám, a xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx obdrží xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx xxx xxxx počet. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx existují xxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx, xx nejnižší xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx měla xxxxxxx xxx toxický xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 úrovně xxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx xxxxxx.
Xx skupině x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx dávky x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
Xxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxx se xxxxxx xxx konstantní xxxxxxxxxxx (x ppm xxxx xx.xx-1 potravy) xxxx xxxxxxxxxx dávkování xx xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je třeba xxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxx xxxxxx, mělo xx xx tak xxx každý den xx xxxxxxx xxxx, x dávkování x xxxxxxxxxxxx intervalech (xxxxxxxxx xxxx čtrnáctidenních) přizpůsobovat xxxxxx tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx se 90xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x nevyvolá-li xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 tělesné hmotnosti xx den (xxxx xxxxx vyšší - xxxxxxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, xx-xx tato xxxxx) xxxxx xxxxxxx xxxxxx, je možno xx dalšího xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxxxx látka x xxxxxxx, je xxxxx zajistit, aby xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické účinky, xxxxxx dobu xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxx, ve xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
X ideálním xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx určena x xxxxxxxxxx pozorování, jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx bez xxxxxxxx, x xxxxxxxxx zotavení x otravy xxxx xxxxxxxxxxx toxických účinků.
Xxxxxxxxxx x kleci xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx a krevního xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx a chování. Xxxxxx xxxxxxx (a xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx testované látky x xxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xx třeba zajistit xxxxxxxxxxx kontrolu zvířat, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x xxxxxxxx kanibalismu, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx oftalmoskopem xxxx xxxxxxxxxxx přístrojem xx má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testované xxxxx x na xxxxx studie xxxxxxx x všech xxxxxx, xxx xxxxxxx u xxxxxxxx dávky a x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xx zahrnovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx čas (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(c) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů je xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, glukózu na xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx živočišného xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx pyruvát-transamináza) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), ornithin dekarboxyláza, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, dusík xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
(d) Analýza xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx běžný xxxxxx, xxx xxx na xxxxxxxx očekávané nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx historická xxxxxxxxx data, má xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a biochemických xxxxxxxxx ještě xxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
X xxxxx zvířat použitých xx studii xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, lební, xxxxxx x břišní xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxx. Xxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx se xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x ohledem na xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx tělíska, tkáň xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxx, xxxxx, xxxxx, (slinné xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxx, žaludek, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx mléčná xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx nerv, (oči), xxxxxx xxxx s xxxxxx dření, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx kloubních xxxxx), xxxxxxx mícha xx xxxxx xxxxxxxx - krční, střed xxxxxx a xxxxxxx, x (xxxxx xxxxx). Xxxxx v závorkách xx xxxxxxxx v xxxxxxx, pokud lze xx jejich postižení xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
(x) Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx orgánů x xxxxx je xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny.
(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(c) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx dávkou xx mají xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx k zjištění xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx stavu xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxx x xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx provést xxxx xx orgánech, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx satelitní xxxxxxx, xxxx xx provést xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření na xxxxxxx x xxxxxxxx, x kterých byly xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx exponovaných skupin.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx do tabulky. X xx xxxx xxx xxx každou xxxxxxxxxxxxxx skupinu patrný xxxxx zvířat xx xxxxxxx pokusu x xxxxx zvířat s xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx typy xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Je x xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx uznávanou statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx informace:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxx bez xxxxxx, xxxxx xx xxx stanovit,
- xxxx uhynutí během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx konce xxxxxxxxx,
- xxxxx toxických xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx příznaky x xxxxxx další xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x vývoj tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a jejich xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx moči),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.27. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX
(90denní xxxxxxxxx podávání per xx, studie xx xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx podává xxxxx xxxxxx xx 90 xxx v odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx), x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Během období xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx do konce xxxxxx, xx pitvají.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx chována v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem se xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxx nebo může xxx vhodnější podávání x kapslích. Xxxxx xxx xxxxxxx také xxxx xxxxxxx orální xxxxxxxx. Všem xxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xx xxxxx xxxx pokusu xxxxxxx xxxxxxx. Pokud xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx aditiva, musí xxx x xxxx xxxxx, že xxxxxx xxxxxxx účinek. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx se jako xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx; v xxxxxxx xxx xx xx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 3 do 6 xxxxxx a xx xxxxxxx xxx 9 xxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx xx má xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 8 zvířat (4 xxxxxx a 4 xxxxx). Xxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx umožnil xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Dávkování
Xx třeba použít xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxx, xx xxxxxxxx dávka xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dávky měla xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx než 3 xxxxxx dávek, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx by x xxxxxxx rovněž xxxxxx xxxxxxxx.
Podává-li xx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx zajistit, xxx ani xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě xxxxxx.
Xxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx xxxx mg.kg-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vztahu k xxxxxxx hmotnosti zvířete; xxxxxxxx alternativu xx xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx xx xxx dít xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxx x týdenních xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx testem, x xxxx studiích xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxx-xx 90denní xxxx níže xxxxxxxx xxxxxxx x nevyvolá-li xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxx (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx možné expozici xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) xxxxx toxické xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx toxická xxxxx x potravě, xx xxxxx zajistit, aby xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx x trvání. Xx třeba zaznamenat xxxx xxxxxxx a xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
X xxxxxxxx případě xx zvířatům xxxxxx xxxxxxxxx látka 7 xxx v xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxx-xx se xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx v xxxxxxx, xxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx podávat látku 5 xxx x xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxx xx xx omezeno) xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, změny xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Xxxxxx potravy (x xxxxxx vody xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v pitné xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx pečlivá xxxxxxxx xxxxxxxxx x vhodnými xxxxxxxxxx k minimalizaci xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x pitvat.
X xxxxx zvířat xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx se xx xxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx konci xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, ale alespoň x xxxxxxxx xxxxx x x kontrolních xxxxxx. Najdou-li xx xxxx změny, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx hematologické xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(c) Na xxxxxxx xxxxx, a xxxxx xxx v xxxxxxxxx intervalech xxxx xxxxxxxxx x dále xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (přičemž xxxxxx xxxx hladovění xx xxxx podle xxxxxxxxxxx xxxxx x kmene), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx transamináza xxxx) x aspartát aminotransferáza xxxx (xxxxx glutamát-oxalacetát xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx dekarboxyláza, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, dusík xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Xxxx další xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx pro xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx biochemické analýzy xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xx více xxx 24 xxxxx).
(x) Analýza xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo pozorované xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx se provede xxxxx zahrnující zevní xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx otvorů, xxxxx, hrudní a xxxxxx xxxxxx včetně xxxxxx obsahu. Játra, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a varlata xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx stavu, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx orgány x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu s xxxxxxx xx možná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx postižením, mozek - v xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx žláza, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx břišní, varlata x xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), žlučník, xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lymfatické xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx sval), xxxxxxxxx nerv, (xxx), xxxxxx kost x xxxxxx xxxxx, (kost xxxxxxxx včetně kloubních xxxxx) a (xxxxxxx xxxxx xx třech xxxxxxxx - krční, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx se xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a tkání xx třeba provést x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx nejvyšší dávka, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx. Histopatologické xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx poškození x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxx když xx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx do xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, typy xxxxxxxxx x procentuálně xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx použít kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxxxxx xxxx xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx podmínky,
- xxxxxx dávek (xxxxxx xxxxxxxx, pokud se xxxxxxx) x koncentrace,
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- úroveň xxx účinku, xxxxx xx lze xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x přežití xxxxxx xx konce xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální příznaky x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření a xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx případných analýz xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx to xxxxx,
- diskuse výsledků,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxx na xxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx jedna xxxxxx dávky. Během xxxxxx podávání se xxxxxxx xxxxx pozorují, xxx xx zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx chována x podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx před xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx srst xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxx možné, xxxx xx se xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx před experimentem. Xxxxxxxxx xxxx oholení xx xxxxxxx opakovat xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx na xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx připravované xxxxxx xxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxx kontakt x xxxx. Testované xxxxxxxx xx zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x týdnu.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx morčata, xxxxxxxx x jiné zvířecí xxxxx, jejich xxxxxxx xxxx xxxx být xxxxxxxxxx. Xx začátku xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (pro každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx před dlouhodobým xxxxxx, x obou xxxxxxxx se má xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx každou úroveň xxxxx xxxxxx nejméně 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx) se zdravou xxxx. Samice musí xxx nullipary x xxxxx xxx březí. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvýšit xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině (satelitní xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 zvířat každého xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx a během xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx hladiny xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 6 hodin xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx stejnou xxxx. X intervalech týdenních xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx udržovala xxxxx xxxxxxx dávky xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se vehikulum xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám, x xx ve xxxxxxx množství, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx vyvolat xxxxxxx účinky, ale xxxxxxxxxx žádné uhynutí xxxx jen x xxxxx počtu. Nejnižší xxxxxxx dávky by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx dávka tuto xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx toxický účinek xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxxx xxxxx, xxxx být xxxxxxxxx dávky xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx toxické účinky. Xx skupině x xxxxxx a střední xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx uhynutí xxx být xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x těžkému xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxx dávkové xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx poškození xxxx, xx dokonce za xxxxxxxx okolností xxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba denně xxxxxxxxx a zaznamenávat xxxxxxx účinky. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a čas, xx kterém xx xxxxxx x xxxx xxxxxx toxické účinky.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx chovají v xxxxxxx po jednom. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx nejlépe 7 xxx x týdnu xx dobu 90 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxx xxx následné xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx po xxxxxxx 28 dnů xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxx xxxxxx přetrvávání. Xxxx xxxxxxxx činí nejméně 6 hodin xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx nanášet rovnoměrně xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % povrchu xxxx, x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx může xxx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx rovnoměrně x xx xxxxxxxx vrstvě.
Xxxxxxxxx xxxxx je xx expoziční xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x kůží pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx je xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx obvaz x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx expozice xx xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx vhodným x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx počátku, xxxxxx x trvání.
Xxxxxxxxxx v kleci xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, xxx x xxxxxxx, x xxxx xxxxxxx a krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolu xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx zařazení. Xx xxxxxxxx studie xx všechna xxxxxxx, xxxxx přežila, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Umírající xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx je xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx běžně provádějí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným přístrojem xx má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x všech zvířat, xxx alespoň x xxxxxxxx xxxxx x x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx pokusu xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx trombocytů.
(x) Xx konci xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx hladovění xx xxxx podle xxxxxxxxxxx xxxxx), alaninamino xxxxxxxxxxx (xxxxx glutamát-pyruvát xxxxxxxxxxxx xxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx charakteristiky, xxxxx xxxxx být potřebné xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx studium xxxxxxx spektra xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx historická kontrolní xxxx, má xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx zahrnující xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, hrudní x břišní xxxxxx xxxxxx xxxxxx obsahu. Xxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx vhodném xxxxx x xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - x xxxxxx medula/pons, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx mozkový, štítná xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, (průdušnice), plíce, xxxxx, xxxxx, (slinné xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, děloha, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx a slepé xxxxxx, xxxxxxxx, močový xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lymfatické xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx žláza), (xxxxxxxx sval), periferní xxxx, (xxx), (xxxxxx xxxx x kostní xxxxx), (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx úrovních - xxxxx, střed xxxxxx x xxxxxxx) x (xxxxx xxxxx). Tkáně x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx je xx indikováno xxxxx xxxxxxxx toxicity xxxx xxxxx souvisejí x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(a) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx dávka, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Je třeba xxxxxxxx xxxxxx orgány x ostatních xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx, plíce xxxxxx ve xxxxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx příznaků xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx zdravotního xxxxx zvířat. Další xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx x xxxxxx těchto xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, musí xx xxxx xxxxxxx vždy xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x ostatních xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s lézemi x xxxxxxxxxxxx počet xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx lézí. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x tomu xxxxx použít kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx,
- úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx použije) a xxxxxxxxxxx,
- údaje x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx pohlaví x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx bez xxxxxx, xxxxx xx lze xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx zvířat xx xxxxx sledování,
- xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- biochemická xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx moči),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx to xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.29. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX - INHALAČNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - studie xx xxxxxxxxxx)
1. METODA
1.1 Princip xxxxxxxxx metody
Několik xxxxxx pokusných zvířat xx exponováno studované xxxxx xxxxx po xxxxxxx dobu, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, každá xxxxxxx jedné koncentraci, x xx xx 90 xxx. Xxxxxxx-xx xx pro xxxxxxxx xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx v atmosféře xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx kontrolní skupinu xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx x zjišťují se xxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx, která během xxxxxx xxxxxx, i xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x jakých budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx, musí xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx využít.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, pokud xxxxxx známy xxxxxx xxxxx tomu. Xxxxxxx xx na mladých xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xx začátku xxxxxx nemá variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx subchronický xxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx test před xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx použít xxxxxx xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx každou úroveň xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x nesmí xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx nutno xxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx o xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx před koncem xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx exponovat xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx skupinu) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx dobu 90 xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x během následujících 28 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx sledovat xxxxxxxx, trvání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx koncentrace
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx úrovní koncentrace x jedna xxxxxxxxx xxxxxxx (případně xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx - pokud xx xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx stejné xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx koncentrací testované xxxxx). X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx jako x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx jen v xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady expozice x člověka, má xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx překračovat. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx než 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx účinky. Ve xxxxxxx s nízkou x střední xxxxxxxxxxx x x kontrolní xxxxxxx by xxxxx xxxxxxx xxx být xxxxx, jinak je xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Zvířata xx xxxxxxxx po xxxx 6 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X případě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x jiných xxx expozice.
1.2.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Pro xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zaručuje xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx 12krát za xxxxxx, aby byl xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, xx třeba xx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx stability xxxxxxxxx x inhalačním xxxx xxxxx xx v xxxxxx celkový xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxx. Je možné xxxxxx xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx individuální xxxxxxxxxx xxxxxxxx; první xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovat xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x zotavení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Je třeba xxxxxxxxxx dobu xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx se objeví x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3. Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx exponují xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx aplikace, x posouzení xxxxxxxx x otravy xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx během xxxxxxxxxxx xx být 22 xX ± 3 xX. Xxxxxxxxx vlhkost xx xxx xxxx 30 % a 70 %, x xxxxxxxx případů, kde xx není xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx). Během expozice xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Používá xx dynamický xxxxxxxxx xxxxxx s vhodnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx potřebných koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx nastavit xxx, aby xxxxxxxx x celém xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx bude dosaženo xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
a) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxx v dýchací xxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx hodnoty x xxxx xxx ±15 %. U xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx této úrovně xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx rozsah xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, jak xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx vývoji generátoru xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx velikosti částic xxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx tak xxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx stálosti distribuce xxxxxxxxx xxxxxx.
c) Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
d) Xxxxx xxxxxxxx a xx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx zaznamenávají; xxxxx zvíře má xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, stupeň x trvání. Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, srsti, xxx, sliznic, dýchání x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx i xxxxxxxx xxxxxxx xx zaznamenávají xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx chybného xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, pitvají. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
X všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx oftalmoskopem xxxx rovnocenným přístrojem xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx nejlépe x xxxxx zvířat, xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx dávky x x kontrolních skupin. Xxxxxx-xx se oční xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx pokusu xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx konci pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny xxxxxx xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx pozorováním způsobu xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx volí xxxxx živočišného druhu x kmene), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x celkové xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být potřebné xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxx, hormonů, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx biochemické xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx moče xx nevyžaduje xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx xx podkladě xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pokud nejsou xxxxxxxxx dřívější xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx parametrů xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx dutiny x jejich obsahu. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx a tkáně xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx médiu x ohledem xx xxxxx pozdější histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx (mají se xxxxxxx neporušeny, xxxxxx x fixovat vhodným xxxxxx, xxx aby xx zachovala xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx mozku x xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, srdce, xxxxx, xxxxxx žlázy, xxxxx, xxxxxxx, ledviny, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x vaječníky, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx orgány), (xxxx), xxxxxxx (xx-xx přítomen), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, reprezentativní xxxxxxxxxx uzliny, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx ve třech xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
(x) Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x ostatních xxxxxx x tkání je xxxxx xxxxxxx u xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx léze.
(c) Xx xxxxx vyšetřit xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx dávkových xxxxxxxxx.
(x) Plíce xxxxxx xx xxxxxxxxx s xxxxxx x střední xxxxxxxxxxx se mají xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetřovat, xxxxxxx xx xxxxxxxxx obraz xxxxxxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx xxxxxxx, musí xx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(e) Xxxxxxx-xx xx satelitní skupiny, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x orgánech, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.
2. ÚDAJE
Xxxxx se sestaví xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx xxx každou experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na počátku xxxxxx x počet xxxxxx x xxxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx počet xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x tomu xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud možno xxxxxxxxx tyto informace:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxx pokusu: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx systému, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx používán. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrací x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx o expozici xx xxxxxxx xx xxxxxxx x uvedou xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a charakteristikou xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx obsahovat xxxx údaje:
x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
b) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
x) nominální xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx přiváděné xx inhalačního zařízení, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
x) povaha vehikula, xxxxx bylo užito,
x) skutečná koncentrace x dýchací xxxx,
x) medián velikostí xxxxxx (x aerosolu),
- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx x podle xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxx účinku, pokud xx xxxxx ji xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé abnormální xxxxxxxx a jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.30. TESTOVÁNÍ XXXXXXXXX TOXICITY
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xx skupinu, xx větší xxxx xxxxxx xxxxxx. Během x po expozici xxxxxxxxx látce jsou xxxxxxx denně pozorována xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx chována xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx započetím xxxxx. Xxxx testem xxxx xxxxxx, xxxxx zvířata xxxxxxx rozdělena xx xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je možno xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx nebo xxxx). Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxx jedince běžně xxxxxxxxx xxxxx laboratorních xxxxxx. Expozice xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx by xxxxx rozdíl xx xxxx zvířat xxxxx xxxx než ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx studii xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx a xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx každou xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx nejméně 40 xxxxxx (20 samic x 20 xxxxx), xxxxxx x pro xxxxxxxxx skupinu. Xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxx březí. Xxxxx je xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx vyšší xxxxx xxxxxx.
V xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx menší xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxx xxx 4 xx každého xxxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.3 Dávky x frekvence expozic
Xx třeba xxxxxx xxxxx xxx dávky x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx úmrtnosti. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx vyvolat xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx mezi xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Výběr dávek xx měl xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Obvykle xxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxx. X případě, xx xxxxxxxxx xxxxx xx podávána x xxxxx vodě xxxx x potravě, je xxxxx xxxxxxxx, xxx x ní xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x exponované xxxxxxx, xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Dva xxxxxx způsoby xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx a chemických xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx aplikace vyvolává xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx kožního xxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxx odvozena z xxxxxxxx xxxxxxxx testu x znalosti rozsahu xxxxxxx vstřebávání, xxxxxxxx x předchozích xxxxx xxxxx toxicity.
Xxxxxx xxxxxx
Xxx, kde xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, jimiž může xxx exponován xxxxxx, xxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx nebo xxxxxxx x tobolce.
Xxxxxxx xx se xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx vést x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x xxxxxx xxx aplikace, x xxxxx xxxxxxxx výsledky x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, především x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Protože inhalační xxxxxx xxxx technicky xxxxxxxxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx uvedeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace xxxx xxx platnou alternativou x specifických xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx denně xx xxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x návaznosti xx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx denně xx xxxx xxx x xxxxx (kontinuální xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx hodinou xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx, použitou x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. V obou xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xx v xxx, xx x xxxxx má zvíře 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxx expozice x ještě xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx studia x na xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x úvahu xxxxxx xxxxxxxxx obtíže. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxx prostředí xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx expozice a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx aerosolu xxxx xxxxxx koncentrace xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx komory
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx konstrukce zaručuje xxxxxxxxx proud pro xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx zajištěn xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx atmosféry. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx komory xx měly mít xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx byly xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx aspektech xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxx komory se xxxxxxx udržuje xxxxx xxxxxxx a tím xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky do xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testovaných zvířat. Xxxxxx by v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(a) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx kontinuálně;
(x) xxxxxxxxxxx: během xxxxx xxxxxxxx xx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx 15 % střední xxxxxxx;
(x) teplota x xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx by měla xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 oC x xxxxxxx v xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxx. Oba xxxxxxxxx xx xxxx xxx kontrolovány xxxxxxxx;
(x) měření xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx pevných xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx xx měly xxx x xxxxxxxxxxxx velikosti xxx xxxxxxx testovací xxxxx. Vzorky atmosféry xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx, a xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx část aerosolu xxxx xxxxxxxxxxxx. Analýza xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, aby xxxxxxxxx stabilitu xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx tak xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 12 xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx zákroky x xxxxxxxxxxxx ztráty xxxxxx xx studie, např. xxxxx nebo xxxxxxx xx xxxxxxx u xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx nebo moribundní. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx spolehlivě xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xx xxxxxx minimalizace ztrát x důsledku xxxxxx, xxxxxxxx xxxx kanibalismu.
Xxxxxxxxxx se klinické xxxxxxxx xxxxxx neurologických x očních xxxx x xxxxx zvířat, x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx a xxxxxx toxických xxxxxxxx xxxxxx podezření xx xxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx individuálně x xxxxx xxxxxx jednou xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x pitné xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx a xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx ukázaly xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Hematologická xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx srážlivosti) xx xxxx xxx xxxxxxxxx za xxx měsíce, xxxx xxxxxx x xxxx x přibližně šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx na vzorcích xxxx shromážděných od xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. xx 10 potkanů xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx to xxxxx, xxxxxx xx xxxxx intervalech by xxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Navíc xx xxx xxx xxxxxxx vzorek xxxx xxxxxx od nehlodavců.
Xxxxx klinické vyšetření xxxxxx naznačí xxxxxxxx xxxxxxxxx stav xxxxxx xxxxx studie, měl xx xxx stanoven xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x u xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx x vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx i x xxxxxxx s xxxxxx nejblíže xxxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx 10 potkanů xxxxxxx pohlaví se xxxxxxx pro analýzu xxxxx možno xx xxxxxxxx xxxxxx a xx xxxxxxxx intervalech xxxx xxxxxxxxxxxxx zkoušky. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx buď xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx skupiny xxxxx xxxxx a xxxxxxx:
- vzhled xxxx, xxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- proteiny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (semi-kvantitativně),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx- xxxxxxxxxxxxx).
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
V xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech a xx závěr xxxx xxxxxxxx krevní xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx v xxxxx skupině, xxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx ve všech xxxxxxxxxxx. Od nehlodavců xx xxxxx toho xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Z xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x jsou xxxxxxxxx následující xxxxxxx:
- celková xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx jater (xxxx. aktivita xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), xxxxxxxx xxxxxx transaminázy2), gamma xxxxxxxx transpeptidázy, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, např. krevní xxxxxxx xx lačno,
- xxxxx na xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx močoviny x xxxx.
1) nyní xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
1.2.3.5 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, která xxxxxxx během xxxxxx xxxx byla utracena x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx utracením xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Všechny viditelné xxxxxx xxxx xxxx, xxxx léze, které xx mohly xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx. Xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Všechny xxxxxx x xxxxx xx měly xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. To xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a tkání:mozku3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx mozkové), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, ledvin3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx střeva, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx uzlin, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx pohlavních xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx nervu, xxxxx (xxxxx, xxxxxx a xxxxxxx), xxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx plic a xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální xxxxxx xx xxxxxxxxxx těchto xxxxx; xxxxxxxx plic x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxx. Xx speciálních xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, má xxx xxxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx x hrtanu.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xx měly xxx x dispozici xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodítko.
3) xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx pohlaví a xx xxxxxxx u xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) ze xxxxx xxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxx
1.2.3.6 Histopatologie
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxx léze vyskytující xx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
(x) mikroskopické xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx x kompletním popisem xxxxx xxxx nalezených:
1. x všech xxxxxx, která xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
2. x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx skupiny,
(x) xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx abnormity xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx také xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx významné xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, které xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx nižší xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) informace x incidenci xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx laboratorních xxxxxxxxxx, xx. xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jsou xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx by xxxx xxx sumarizovány xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx počet zvířat xx začátku xxxxx, xxxxx zvířat vykazujících xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx o xxxxx
Xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- živočišný druh, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx testu: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, zneškodňování xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, kde je xx žádoucí, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x expozici: xx xxxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) a xxxx xx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx
(c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx inhalační xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx)
(x) povahu vehikula, xx-xx xxxxxxx
(e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xx-xx xx xxxxxxxxxx)
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx vehikula, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dávky
- neúčinná (dávková) xxxxxx
- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx do xxxxx
- popis xxxxxxxxx x jiných xxxxxx
- xxxx, xxx xxx pozorován xxxxx abnormální xxxxxxx x xxxx další xxxxx
- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxx hematologické xxxxx a xxxxxxxx
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx moči)
- xxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx všech xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx použitých xxxxx
- diskuse xxxxxxxx
- interpretace xxxxxxxx.
B.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X XXXXXXXXXX
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx se podává x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx pokusných xxxxxx, jedna dávka xx xxxxxx skupinu, xxxxxxx v xxx xxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxx dochází x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx březí samice xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx i x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx metoda xxxxxxxx studium xxxxxx- x fetotoxicity.
1.2 Popis xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxx, dospělé xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, stejného xxxx x velikosti xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx započetím xxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Oplodnění xxxx xxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xx podávána xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx implantaci x pokračuje xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx termínem xxxx xxxxx vyjmuty xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx skeletu a xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Testovací xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx druhy xxxx xxxxxx, myš, xxxxxx x králík. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x králík. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kmeny. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xxx x xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx použít xxxxx 20 xxxxxxx potkanů, xxxx xxxx křečků xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx dostatečný počet xxxx x xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
Xx třeba xxxxxx xxxxx xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, že je xxxxxxxxx xxxxx podána xx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx i xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx vehikulum. Xx xxxxx také znát xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxx vliv xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx v xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) xx xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx se xxxxxxx x testovací skupině x výjimkou aplikace xxxxxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx takové xxxxxxx xxxxxxxx, jako xx xxxxx snížení xxxx, xxx už xx xxxx xxx 10 % xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Střední xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx, xx xxxxx x nízkou xxxxxxxxx xxx dávce nejméně 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, není xxxxx testovat na xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx testu xx xxx, xxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxxx (pokud xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx hlavní xxxxxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 6. xx 15. xxx x xxxxxxx x myši, 6. xx 14. den x xxxxxx x 6. xx 18. xxx x králíka. X případě, xx xx xx nultý xxx xxxxxxxxx xxx, xxx bylo xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx připočítat x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxx pozorování
Xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Další sledování x opatření xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx orálně sondou, xxxxx xx stejnou xxxx.
Testovaným samicím xx xxxxxxxxx látka xxxxxx denně xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx testu. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx na xxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vážení. Xxxxxxx známky toxicity xx xxxxx ihned xxxxxxxxxx včetně doby xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X pozorování je xxxxx xxxxxxxxxx i xx xxxxxxxx podávání xxxxx xx do xxxx přibližně xxxxx xxx před porodem. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx vyhnout xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx výsledků xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x sliznic, dále xxxxxxxxx, oběhového, xxxxxxxxxxx x centrálního xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Každý xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx potravy x vážit zvířata.
1.2.3.1 Xxxxx
Pokud xxxxx x xxxxxxx během xxxx xx xxxxx xxxxxx, je xxxxx x samic xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx patologické xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx smrti xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x její obsah xxxxxxxx x ohledem xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx počet živých xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx dobu xxxxx xxxxxxx x xxxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx počet xxxxxxx tělísek. Xx xxxxx xxxxx pohlaví xxxxxxx a zaznamenat xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x vypočítat xxxxxx. Xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx zevně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, myší x křečků xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx třetiny xx xxxxxxxx xxxx x x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx důkladně xxxxxxxx pitvou x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx je xxxxx xxxxxxx xx formě xxxxxxx, udávající pro xxxxxx testovanou xxxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx s abnormalitami xxxxxxx xxxx měkkých xxxxx x xxxxx xxxxxxx abnormit k xxxxxxxxxxxx k určitým xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1. Zpráva x xxxxx
Xxxxxx x testu xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxx xxxxxx (pokud xx xxxx xxxxx xxxxxxxx),
- dobu xxxxx během studie xxxx zda zvířata xxxxxxx xx konce xxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxx x xxxx (xxxxxx historických xxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx/xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx skeletu x xxxxxxx tkání),
- xxxxx o xxxxxxxxxxxx vrzích (xxxx/xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x měkkých xxxxx),
- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.32. TEST XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx sedm xxx v týdnu, xxxxxxx cestou, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxx dávka xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx a xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx zvířata denně xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx vývinu tumorů.
1.2 Xxxxx metody
Xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxx dní xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx skupin.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x další xxxxx (hlodavce x xxxxxxxxxx). Používají se xxxxxx mladá zvířata x běžně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx by měla xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx ve xxxx xxxxxx činit xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. V případě, xx xxxxxxx studii xxxxxxxxx xxxx subchronické xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x kmen x obou xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, počty xx xxxxx zvýšit x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx takto xxxxxxxx xxxx koncem xxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx úrovně x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxx kromě xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx by xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (méně xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx tumory.
Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxx toxicity. Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxx 10 % vysoké xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx pásmu xxxx vysokou a xxxxxx dávkou.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx vzít v xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx toxicity.
Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Je-li xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx k xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xx zvláštních xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, jehož xxxxxxxxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxxxxx, zařadí se xxxxx negativní kontrolní xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Tři xxxxxx xxxxx aplikace xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Volba xxxxxxx podání závisí xx fyzikálních x xxxxxxxxxx charakteristikách xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx expozice x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx vstřebává x gastrointestinálního xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx přednost orální xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx tomu nějaké xxxxxx. Xxxxxxx mohou xxxxxx xxxxxxxxxx látku x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx podanou v xxxxxxx.
Ideálně by xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx pět dnů x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" příznaky x xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx hodnocení. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx praktické xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx přímo na xxxx xxxx být xxxxxxx xxxx simulace xxxxxx xxxxx vstupu x xxxxxxx x xxxx modelový způsob xxxxxxxx xxxxxxx poškození.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx studie
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx komplikovanější než xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx informace o xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx platnou xxxxxxxxxxxx xx specifických xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, takže xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxx denně xx xxx dnů x týdnu (přerušovaná xxxxxxxx), xxxx v xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx x prostředí, 22 - 24 xxxxx xxxxx po xxxx dní x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x přibližně jednou xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx x pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním koncentracím xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx x xxxxxx expozicí xx x xxx, xx x první xx xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx účinků xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx expozici, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, je xxxxx xxxx v xxxxx určité xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx pití x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x spolehlivé) xxxxxxxx aerosolu xxxx xxxxxx koncentrace xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx komory
Zvířata xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx zaručuje dynamický xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx hodinu, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx expoziční xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx komory by xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx podmínky xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx mírný xxxxxxx x tím xx xxxxx úniku xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Obecně xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x komoře objem xxxxxx neměl přesáhnout 5 % objemu xxxxxx.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx zahrnuje:
(x) Xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % střední xxxxxxx.
(x) Xxxxxxx a xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 22 ± 2 °C x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x rozptýlení xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx průběžně.
(x) Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: měla by xxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx komor x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx xx měly být x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx testovací xxxxx. Xxxxxx atmosféry xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx zóny xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx je xxxxx exponováno, a xxx by gravimetricky xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x když xxxxxx část aerosolu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxxxx aerosolu, x xxxx během xxxxxxx xxx xxxxx, xxx bylo možno xxxxxxxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx větší xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx test. Test xx xxx xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx x myší x xxxxxx x 24 xxxxxxxx u xxxxxxx. Xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx zvířat x delší xxxxx xxxxxx resp. s xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx doba xxxxxxxx xx měla xxx 24 měsíců pro xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx přijatelné, xxxx xxxxx přežívajících x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx na 25 %. Při xxxxxxxx testu, ve xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx rozdíl odpovědi, xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx testu, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx projevy, které xx činily xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xxxxx negativní výsledek xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx údajů (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx chyb xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 10 % a xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx nesmí být xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx a x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Denní xxxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx a xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.
Pravidelná kontrola xxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x důsledku xxxxxxxxxxx, autolýzy tkání xxxx xxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx zvířata xxxx utracena x xxxxxxx.
Klinické xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx pozornost xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx x progrese každého xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potravy (x vody xxx, xxx xx testovaná xxxxx podávána x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx a xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx období xxxxx x aspoň jednou xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx o zhoršeném xxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxxxx xxxxxx, xx xxxxx vyšetřit xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých krvinek.
Xx 12 měsíců, xx 18 xxxxxx x před xxxxxxxxx xxxxxx se provede xxxxxx xxxxx ze xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx s nejvyšší xxxxxx a x xxxxxxx. Pokud tato xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost, diferenciál xx vyšetří i x skupiny x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx je vysoká xxxxx.
1.3.2.2 Pitva
Xxxxxxxxx xxxxx by měla xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx, která zemřela xxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx nemocná. Všechny xxxxxxxxx tumory nebo xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xx vhodných xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx: xxxxx (xxxxxx řezů xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, xxxx mozkové), xxxxxxxx xxxxxxx, štítná xxxxx x příštítná xxxxxxx, xxxx thymu, xxxxxxx x xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx, akcesorní xxxxxxxx orgány, xxxx, xxxxx, žaludek, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, ileum, xxxxx xxxxxx, tračník, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzlina, xxxxxx xxxxxx xxxxx, svalovina xxxxxx, xxxxxxxxx nerv, xxxxxxx s kostní xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx třech xxxxxxxx (xxxxx, střední hrudní x xxxxxxx) a xxx.
Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je optimální xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx x inhalačních xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx měl xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx během xxxxx, x u všech xxxxxx skupiny xxxxxxxxx x x nevyšší xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx jako xxxxxx, se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
(c) Xx-xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx lézí xxxx xxxxxxxx s xxxxxxx dávkou x xxxxxxxxx skupinou, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x daném xxxxxx xx tkáni i x dalších xxxxxxxxx.
(x) Xx-xx xxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxx dávkou xxxxxxxxx xxxxx než u xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx.
(x) Je-li xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx doklad o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků, které xx mohly ovlivnit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx sumarizují xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx zjištěné xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx utracení. Xxxxxxxx xx hodnotí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. XXXXXX
3.1 Zpráva o xxxxx
Zpráva o xxxxx bude, pokud xxxxx, obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vycházejícího z xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Dále xx třeba popsat xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Údaje x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) a měly xx xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx vzduchu,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx xx inhalační xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
(d) xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxxxx,
(x) skutečné koncentrace x xxxxxxx xxxx,
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx xx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx užito) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx podle xxxxxxx, xxxxx x xxxx xxxxxx,
- xxxx úmrtí během xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx přežila xx xx xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví a xxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxx,
- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx abnormální xxxxxxx x xxxx další xxxxx,
- data x xxxxxxxx potravy x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- použité xxxxxxxxxxxxx xxxxx x výsledky,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx histopatologických nálezů,
- statistické xxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx metod,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.33. XXXXXXXXXXX XXXX CHRONICKÉ TOXICITY/KARCINOGENITY
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxx
Cílem xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx xx určit xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx látky u xxxxxxxxx druhu xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx tento xxxx xx test karcinogenity xxxxxxx alespoň xxxxxx xxxxxxxxxxx satelitní xxxxxxxx x xxxxxxxxx satelitní xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx může xxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx karcinogenity. Zvířata x xxxxx karcinogenity xxxx zkoumána jak xx xxxxxxx toxicitu, xxx xx karcinogenní xxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx testována xx xxxxxxx xxxxxxxx.
Testovaná xxxxx xx podává xxxxxxx xxxx dní x týdnu, vhodnou xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx na xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx zvířat. Xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxx započetím xxxxx. Xxxx xxxxxx xx mladá xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělí xx kontrolních a xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx předchozích studií xx možno použít x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx zvířata x xxxxx xxxxxxxxx kmenů xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx odstavení xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx neměl xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx předchází test xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity, xx xxxxx použít xxxxxx xxxx x xxxx x obou xxxxxxxx.
1.2.2 Počet a xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx použije nejnémě 100 xxxxxx (50 xxxxx a 50 xxxxx) xx xxxxxx xxxxxx dávky a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx plánováno xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx zvýší x počet zvířat, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx (skupiny) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxx xxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx 20 zvířat xxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx skupina xxxxxxx by xxxx xxxxxxxxx 10 zvířat xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Dávkové xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Pro test xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxx dávkové xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (méně xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx tumory. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx interferovat x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo vyvolat xxxxxxxx známky xxxxxxxx. Xxxxxx xx neměla xxx nižší xxx 10 % vysoké xxxxx. Střední dávku/dávky xx xxxxx stanovit xx xxxxxxxx xxxxx xxxx vysokou x xxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx úrovní xx xx měly xxxx x úvahu xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx toxicity.
Pro xxxxx xxxxxxxxx chronické xxxxxxxx jsou x xxxxx zahrnuty xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx denně. Xx-xx látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx přimíšena do xxxxxxx, měla by xxx stále x xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x exponovanou xxxxxxxx, vyjma expozice xxxxxxxxx xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x aerosoly xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx aplikaci emulgátoru, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita xxxx charakterizována, xxxxxx xx další negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx exponována ani xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx hlavní cesty xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx podání xxxxxx na xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x člověka.
1.2.5.1 Orální xxxxxx
Xxx, xxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx přednost xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx proti tomu xxxxxx důvody. Zvířata xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx nebo xxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx podávat sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx v xxxxx xxxx vést k xxxxxxxx toxicity nebo xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" xxxxxxxx v období xxx xxxxxxxx, a xxxxx ovlivnit xxxxxxxx x následné hodnocení. Xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx xx považováno xx přijatelné.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx může xxx xxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x jako xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx podrobněji informace x této xxxxx xxxxxx. Intratracheální instilace xxxx xxx platnou xxxxxxxxxxxx v specifických xxxxxxxxx.
Dlouhodobé xxxxxxxx xxxxxxx napodobují xxxxxxxxxxxxx xxxxxx expozice, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx po xxx xxx v xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x návaznosti xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin xxxxx xx xxxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x přibližně xxxxxx hodinou xxx xxxxxx zvířat xxxxx xx stejnou xxxx xxx, použitou x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X obou xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx testované látky. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, xx x xxxxx má zvíře 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x ještě xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x na xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx třeba xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx simulaci podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx narušeny xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx komplikovanější (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx aerosolu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx exponují x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx zaručuje xxxxxxxxx proud xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx přísun xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x expoziční xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx aspektech xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxxx komory se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxx xx brání xxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx měly minimalizovat xxxxxxxxxx testovaných xxxxxx. Xxxxxx by v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx neměl xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxx by xxxx xxx nejlépe xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
(x) koncentrace: xxxxx denní xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % střední xxxxxxx,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx by xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °C x xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) měření xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx x xxxxxxxxx komor x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx xx měly xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Vzorky xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx z dýchací xxxx xxxxxx. Vzorek xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x měl xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx část xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx velikosti xxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx často během xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx stabilitu xxxxxxxx, a xxxx xxxxx xxxxxxx tak xxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx zvířata exponována.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx v 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx xxx některé kmeny xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, doba xxxxxxxx xx měla xxx 24 xxxxxx xxx myši a xxxxxx a 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx, když xxxxx xxxxxxxxxxxxx x nejnižší xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, každé pohlaví xx posuzuje xxxxxx. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx jen xxxxxxx x xxxxxxx dávkou xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx to xxxxx vést x xxxxxxxx celého xxxxx, xxxxx ostatní xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx projevy, xxxxx xx činily xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, nesmí xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (autolýzou, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx obsluhy) x xxxxx skupině větší xxx 10 % x přežití xx xxxxx skupinách nesmí xxx xxxxx xxx 50 % v 18 xxxxxxxx u xxxx x xxxxxx x v 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxxx skupiny 20 xxxxxxxxxxx zvířat xxx xxxxx pohlaví a 10 připojených kontrolních xxxxxx každého pohlaví xxxxxxxxx xxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx v xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. X těchto xxxxxx by xxxx xxx plánováno xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx patologie, xxxxx xx vztah x xxxxxxxxx látce, xx xxxxxxxxxxxxxx projevů stárnutí.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx i xxxxxxxxx, oběhového, autonomního x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx.
U xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx) xx xxxxxxx v přiměřených xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx nutná, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ze xxxxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx chyb x xxxxxxx. Moribundní xxxxxxx xx měla být xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x mortalita xx zaznamenávají u xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx hmatného xxxxxx xx zaznamenává.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potravy (x xxxx tam, kde xx testovaná látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Tělesné xxxxxxxxx xx zaznamenávají xxxxxxxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxx jednou xx xxxxx xxxxx po xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Klinická xxxxxxxxx
1.3.2.1 Hematologie
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxxxxxxx, celkový xxxxx bílých krvinek, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxx být xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, šest xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, x xx konci xx vzorcích xxxx xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Tam xxx je to xxxxx, vzorky xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx během xxxxxx, xx xxxxx vyšetřit xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx ze xxxxxx xx skupině x xxxxxxxx xxxxxx x x kontrol. Pokud xxxx data nebo xxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, diferenciál xx xxxxxxx x u xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxx nižší, než xx vysoká xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxxxx moči
Xxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xx stejných xxxxxxxxxxx xxxx hematologické xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo na xxxxxxx vzorku xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x pohlaví:
- xxxxxx xxxx, objem x hustota u xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx krvácení (semi-kvantitativně),
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
V xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech a xx xxxxx jsou xxxxxxxx krevní xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
- celková xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- testy xx xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), gamma xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- metabolismus xxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx na xxxxx,
- xxxxx na xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
1.3.2.4 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx utracena x xxxxxxxxxxx stavu. Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx léze, xxxxxx xxxx xxxx, xxxx léze, xxxxx xx mohly být xxxxxx, xx třeba xxxxxxx. Mělo xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx a tkáně xx xxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx se xxxxxxx týká následujících xxxxxx x tkání: xxxxx3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx žlázy x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, thymu, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxx, jater3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), xxxxx, xxxxxxx, dvanácterníku, xxxxxx, xxxx, slepého xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, lymfatických xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů, xxxxxx xxxxxx žlázy, xxxx, xxxxxxxxx, periferního xxxxx, xxxxx (krční, xxxxxx x bederní), xxxxxx x kostní xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, a xxx. Naplnění xxxx x močového měchýře xxxxxxxxx je optimální xxxxxx xx konzervaci xxxxxx xxxxx; naplnění xxxx v inhalačních xxxxxxxx je zásadní xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Ve speciálních xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, hltanu a xxxxxx.
Byla-li xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx procedur xx xxxx xxx k xxxxxxxxx xxxx mikroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx významné xxxxxxx.
3) Tyto xxxxxx x 10 xxxxxx xx pohlaví x xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx.
1.3.2.5 Histopatologie
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x vysokou xxxxxx x xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx. Xxxxx xx x satelitní xxxxxxx xxxxxxxxxx nevyšší xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látkou, vyšetří xx xxxxxxxxxxxx cílové xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx satelitních xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx skupin xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx jejím xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
(x) xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx x tkáních xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx během xxxxx x x všech xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x s xxxxxxx xxxxxx;
(b) všechny xxxxxx xxxxxxxxx okem x xxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u všech xxxxxx;
(c) je-li xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx tkáni i x xxxxxxx skupinách;
(x) xx-xx přežití xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx než u xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx;
(x) xx-xx xx xxxxxxx x vysokou xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx toxických nebo xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx kompletně vyšetřit xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx tabulek, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, dobu jejich xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx x tumory xxx utracení. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxx
Zpráva x xxxxx bude pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- podmínky xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx pro vytváření xxxxxx x aerosolů, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx popsat xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Údaje x xxxxxxxx: ve xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxx:
(a) rychlost xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(b) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx množství xxxxxxxxx látky vstupující xx inhalační aparatury xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),
(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx použito,
(x) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxx,
(f) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx relevantní),
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx vehikula, xx-xx xxxxx) a koncentrace,
- data xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxx během xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx satelitních xxxxxx,
- výskyt xxxxxxxxx účinků xxxxx xxxxxxx x xxxxx ,
- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx abnormální xxxxxxx x jeho xxxxx xxxxx,
- data x spotřebě potravy x tělesné xxxxxxxxx,
- oftalmologické nálezy,
- xxxxxxx hematologické xxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx moči),
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.34. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx x odstupňovaných xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx v xxxx růstu x xxxxxxx x průběhu xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x xxxx x 70 dnů x potkanů), xxx xxx zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx spermatogenezu.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) dostávají látku xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nepříznivý účinek xxxxxxxxx látky na xxxxxx. Zvířata xxxx xxxx připuštěna. V xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx obou xxxxxxx, x xxxx gravidity x xxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zdravá mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx dvou xxxxxx - kontrolní x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx jsou chována xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Doporučuje xx testovanou xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx v pitné xxxx. Jiné způsoby xxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xxxxx dostávají xxxxxxx xxxxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx toxické účinky. Xxxxx se xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx myším. Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xx té xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx x nízkou xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x váhy x/xxxx věku. Plodnost xxxx xxx ověřena xxxxxxx způsobem u xxxx pohlaví. Xxxxxx x obou skupinách, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx aplikace.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx exponovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx samic x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Cílem xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x tím xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vlivu xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x X xxxxxxxx, xxxxxx, xxxx a vývoj xxxxxxxxx xxxxxxxx X1 xx početí xx xxxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x je xxx xxxxxxxxx materiál xxx xxxxxxxxx hnízda.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx tři xxxxxxxxxx xxxxxxx x jedna xxxxxxxxx. Pokud se xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vehikulum, xxx zvířata kontrolní xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx použitém xxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x využití xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx xx xxxx xxxxxxx jejími xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo povahou xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx toxicitu, xxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, které by xx xxxx připsat xxxxxxxxx látce, a xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx x xxxxxx xxx u xxxxxxxxx.
Xxx podání sondou xxxx v tobolkách xx xxxxx stanoví xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx změny xxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx dávky xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. xxx od xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Limitní test
X případě xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se ani xxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxxxxxx žádným toxickým xxxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx úrovních. Pokud xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx nepříznivé xxxxxx xx plodnost, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx.
1.3 Popis xxxxxxx
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx rodičovské xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxx xxxx xx devíti xxxxx, xx nejméně pětidenní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx připouštění (8 týdnů xxx xxxx). Xxxxx xx xxx utratí x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx připouštění, xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx pak xxxxxxxx x vyšetřeni xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx rodičovské xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx aspoň dva xxxxx xxxx obdobím xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxx týdny xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxx až xx odstavení X1 xxxxxxxx. Xx přípustná xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx znalostí o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. o indukci xxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx
Xx možno xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx samice x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (jeden xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).
X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx se ponechá x týmž xxxxxx xx xxxxxxxx kleci xx otěhotnění xxxxx xx dobu 3 xxxxx. Každé ráno xxxx samice vyšetřeny xx xxxxxxxxxx spermatu xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx vaginální xxxxx nebo xxxxxxxx.
Xxxxxxx, u xxxxxxx xxxxxxx x oplodnění, xx xxxxx vyšetřit x xxxxx zjistit xxxxx neplodnosti xxxx. Xx je xxxxx xxx poskytnutím xxxxx xxxxxxxxxxxx x oplodnění x osvědčenými xxxxxxx xxxx pohlaví xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukčních xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx vrhů
Xxxxxxxx použitým pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx porodit xxxxxxxx x pečovat x své xxxxxxxxx xx xxxxxxxx odstavení xxx xxxxxxxxxxxxx velikosti xxxx. Pokud se xxxxxxxx xxxx standardizuje, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx po xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx jedinců tak, xxx xx dosáhlo xxxxx 4 xxxxx x 4 xxxxx xx xxx; pokud xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx možno standardizovat xx jiné počty, xxxx. 5 xxxxx x 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx xxx 8 nelze standardizovat.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé xxxxx xx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx za xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx porodu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx zaznamenávají. Xxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxx jak xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Během xxxxxxxxx xx xxxxxx kontrolovat xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx (x xxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx) ve xxxxxx xxx, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx X xxxxxxx xx xxxx xxxxx den xxxxxxxx x xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx individuálně xxx xxxxx dospělé xxxxx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx od xxx 0 těhotenství. Xxxxx xxx se xx nejdříve xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx počty x pohlaví xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx utracená ve xxxxxxx dnu xx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx mláďata xx xxxxxxxxx a xxxx xxxx xx xxxxx xxxx po porodu, xx 4. x 7. xxx x xxxxx každý xxxxx xx ukončení studie, xxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx abnormality x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx
1.3.5.1 Xxxxx
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx pozorností x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxx zemřelá xxxx xxxxxxxxx se vyšetří xx defekty.
1.3.5.2 Histopatologická xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, děloha, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, semenné xxxxx, xxxxxxxxxx žláza, xxxxxxxx, xxxxxxxx x cílové xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx P xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx, xx tyto xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, provede xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxx u xxxxxx, která xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx i u X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxx případech xx xxxxxxxxxxxxx vyšetřují xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, reprodukční xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx podrobit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxx xx sumarizují x xxxxxxxxx, kde xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx skupinu počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, typ xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx přijímaná xxxxxxxxxxx metoda.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx zvířat,
- údaje o xxxxxxx odezvě x xxxxxxxxxx na xxxxx x pohlaví xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x životaschopnosti,
- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx ukončení xxxxxx,
- xxxxxxx uvádějící xxxxxxxx xxxxxxx vrhu, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx x xxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx hmotnost zvířat X xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxx xxxxx, pokud xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
B.35. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip testovací xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx několika xxxxxxxx xxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx (X) generace xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx v xxxx xxxxx a xxxxxxx x průběhu xxxxxxx spermatogenního cyklu (xxxxxxxxx 56 dnů x xxxx a 70 xxx x xxxxxxx), xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx nepříznivý xxxxxx xxxxxxxxx látky xx spermatogenezu.
Samice xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx alespoň xxxx xxxxxxxxxx cyklů, aby xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx testovací xxxxx xx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. V xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx podává zvířatům xxxx pohlaví x xxxxx, x době xxxxxxxxx x kojení, xxxxx samicím. Xx xxxxxxxxx xx látka xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X1 v xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx a xx xx xxxx xxxxxxxxx X2 generace.
Xxx xxxxxxxxx aplikaci xx xxxxx xxxxxx modifikovat.
1.2 Xxxxx testovací xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx zahájením xxxxx jsou zdravá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx skupin - xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxxxx xxxxxxx (X) jsou xxxxxxx nejméně 5 xxx xxxx zahájením xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx podávat x xxxxxxx nebo x xxxxx vodě. Xxxx xxxxxxx podání xxxx xxxx xxxxx. Všechna xxxxxxx látku dostávají xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx celého xxxxx. Xxxxx xx používá x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jiné xxxxxxxx, musí být x nich xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx P xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx charakterizována co xx druhu, kmene, xxxxxxx a xxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x obou xxxxxxx. Xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxx zahájením xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx zvířat, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx dostatečný xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, a tím xxxxxxxx spolehlivé hodnocení xxxxx xxxxx na xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x mateřské xxxxxxx, xxxxxx, růst x xxxxx xxxxxxxxx generace X1 xx xxxxxx xx dospělosti, x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx F2 až xx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xx libitum. Xxxx xxxxxxx se těhotné xxxxxx přemístí xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.5 Dávkování
Xxxxxxx xx alespoň xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx kontrolní. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx skupiny xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x utilizaci xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx použití další xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx výživy.
Xxxxxxxxx látka x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má x xxxxxxxx případě, xxxxx to xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x její xxxxxxxxxx xxxxxx, vyvolávat xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx dávka(y) xx xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx daly xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x nejnižší xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx x xxxxxx xxx u xxxxxxxxx.
Xxx podání xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x přizpůsobuje xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxx samic, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx úrovních. Xxxxx předběžná xxxxxx xxxxx, že vysoká xxxxx, vyvolávající jasnou xxxxxxxxx xxxxxxxx, nemá xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx studie xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx aplikace xxxxxx rodičovské generace X xxxxx xx xxxx xxxx až xxxxxx xxxxx, aspoň xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx pokračuje xxxxx týdnů xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx xxx xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx a xxxxxxx xx konci xxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxx v aplikaci x jsou použiti xxx případnou xxxxxxxx xxxxxxx xxxx a xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx samicím xxxxxxxxxx xxxxxxxx X začne xx xxxxxxxxx aklimatizaci x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxx připouštění. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pak xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx připouštění, x době gravidity xx xx odstavení X1 xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx změna xxxxxxxxxxx xxxxx podle znalostí x vlastnostech xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. o xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. x xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx generace X1 xxxxxx po xxxxxxx x končí jejich xxxxxxxxx.
1.3.2 Postup xxx xxxxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).
X případě 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx s týmž xxxxxx xx společné xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxx xxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxx. Den 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx den nálezu xxxxxxxxx zátky xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, zvířata xxxxxxxx X1 se xxxxxxxxxxx xxx připouštění xx věku 11 xxxxx x xxxx x 13 xxxxx x potkanů. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X1 se xxxxxxx xxxxxxx páry z xxxxxxx vrhů téže xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxxx, x kterých nedojde x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx s xxxxx zjistit důvod xxxxxxxxxxx xxxx. To xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx jedinci xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukčních xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Zvířatům xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx je ponechána xxxxxxx xxxxxxx normálně x pečovat o xxx potomstvo xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx standardizuje, xx xxxxx dodržet xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx porodu xx xxxxxxxx všech xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx dosáhlo počtu 4 samců x 4 samic xx xxx; xxxxx to xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, např. 5 xxxxx x 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx standardizovat. Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx F2 xx xxxxxxx xxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé xxxxx xx xxx pozorováno xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Významné změny xxxxxxx, příznaky xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x všechny xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx mortality, xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xxxx, xxx během xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx potravy xxxxx. Xx xxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xx měří xxxxxx xxxxxxx xx stejný xxx, xxx xx xxxxxxxxx váženo. Rodičovská X x X1 xxxxxxx xx váží xxxxx xxx aplikace x xxx xxxxx. Xxxxxxx pozorování se xxxxxxxxxxxxx individuálně pro xxxxx xxxxxxx zvíře.
Xxxx xxxxxxx xx xxxxxx od dne 0 těhotenství. Každý xxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x stanoví xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Mrtvá xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xx uchovají xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx se spočítají x xxxx xxxx xx xxxxx xxxx xx xxxxxx, ve 4. x 7. xxx x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx studie, kdy xxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx se x xxxxxxxxxxxxx všechny xxxxxxxxxxx x chování x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Xxxxx
Všechna xxxxxxx zvířata generací X a X1 xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx je xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxxxxxxx. Zvířata xxxxxxxx X1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X2 xx xxxxxx xx xxxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxx úmrtí xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx P x X1 makroskopicky vyšetří xx strukturní xxxxxxxxxxx xxxxx patologické xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx reprodukčního xxxxxxx. Mláďata xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxxx kanálky, koagulační xxxxxx, xxxxxxxx, hypofýza x další cílové xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx X x X1 xx uchovají xxx mikroskopické xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx mnohadávkových xxxxxxxx, xxxxxxx se mikroskopické xxxxxxxxx x všech X x F1 xxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávku, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx, x xxxx x xxxxxx, která xxxxxxx x průběhu xxxxxx. Orgány, xxxxx xxxxxx abnormality u xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupin. X xxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všechny xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx již xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxx se xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Údaje xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx změn x procento xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx zpracovány příslušnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx přijímaná statistická xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx x toxické odezvě x xxxxxxxxxx na xxxxx x pohlaví xxxxxx xxxxxxxxx plodnosti, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx ukončení xxxxxx,
- tabulka xxxxxxxxx hmotnost x xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- toxické a xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, potomstvo x xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx vývoj,
- xxxxxxx xxxxxxxx zvířat X x X1 xxxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx, xxxxx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.36. TOXIKOKINETIKA
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. X závislosti na xxxxxxxx studie xxxxx xxxx xxx podávána xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x průběhu xxxxxxxxx xxxx, xxxxx nebo xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx podle účelu xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x exkretech.
Xxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx x "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxx" formou xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx značení, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxx sloučeniny x xxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Zdravá xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx laboratorní xxxxxxxx nejméně po xxxx xxxx xxx xxxx testováním. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. Pro xxxxxx speciálních xxxxxx xx může xxxxxx xxxxx mladých, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx zvířat.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Toxikokinetické xxxxxx xx xxxxxxxxx na xxxxxx či více xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druzích. Xxxx xx xx xxxxxxxx xx druzích xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx užití x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxx variabilita xxxxxxxxx xxxxx xxx ± 20 % průměrné xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Pro studium xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 4 zvířat pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx testování xxxx xxxxxx přednost xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx provádět xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxx xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx menší xxxxx xxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxx distribuce, pak xxx určení počáteční xxxxxxxxx skupiny xxxxxx xx třeba brát x úvahu jak xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx bodu, xxx xxxxx časových xxxx, x nichž xxxx testování prováděno.
Xx-xx studován metabolismus, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxx počet xxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx zvířat xx xxxx počítat x xxxxxx časových xxxxxxxxx x plánovaným xxxxxxxxx zvířat, xxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxx než 2 zvířata. Velikost xxxxxxx zvířat by xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xx, xxx xxx xxxxx resp. xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky xx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx a deplece.
1.2.2.3 Xxxxx
V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx by to xxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolává toxické xxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxx podmínek xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxxx x xx-xx xx xxxxxx x se xxxxxxx vehikulem xxx, xxx xxxx používány x ostatních toxikologických xxxxxxxx. Testovaná xxxxx xx obvykle xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxx, aplikována xx xxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxx dobu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx relativního xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x distribuci xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxxxxxx vehikula s xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx v xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dávky, xxxxxxx xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxxxx xxxxx x údaji x jejich xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxx pokusných xxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxxxxx přiměřeným xxxxx. Ve zdůvodněných xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
1.3.1 Absorpce
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx absorpce xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx bez xxxxxxxxxx xxxxxxx1), x xx např.:
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. x xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx vzduchu x xxxx xxxxxx zbytků x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. studie xxxxxx xxxxxxxx) xxxx testovanou x xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- porovnání xxxxxxxx xxxxx resp. jejích xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ledvinami xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx plochy xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. jejích metabolitů x xxxxxx xx xxxx a xxxxxxxxx x xxxx získanými x referenční xxxxxxx.
1) V této xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx rozumí xx, xx xxxxx je xxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxxxxx způsobem, který xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
X xxxxxxxx xxxx jsou xxxxxxxx 2 xxxxxxxx, z xxxxx xxx analýzu xxxxxxxxxxxxx schématu xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxx:
- xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx informace;
- xxxxxxxxxxxxx informace xxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrací x xxxxxxxx testované xxxxx a xx. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxx x xxxxxxx časových xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxx xxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx vzduch, x xxxxxxxx xxxxxxxxx žluč. Xxxxxxxx testované látky x ev. xxxxxx xxxxxxxxxx xx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx podání xxxxx, x xx xxx do xxxxxxxxx 95 % x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxx 7 xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxx x době xxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxx a schématu xxxxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxx xxxxxx analyzují xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxx objasněna xxxxxxxxx metabolitů a xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx třeba xxxxxxxxx xx otázky z xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx studií. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x metabolismu může xxx prospěšné xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx.
Xxxxx informace x xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx x toxicitou xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx poklesu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx sloučenin xxxxxxxxxxxx - SH xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx se podle xxxx prováděné xxxxxx xxxxxxxxxx x tabulkách, xxxxx xxxxx doplněných xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu xx xxxxxx průměry x charakteristiky xxxxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxx, xxxxx, xxxxx x orgánům (xxxxx xx xx relevantní). Xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx se stanoví xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx metabolických studií xx xxxx být xxxxxxxxxxxxxx struktura xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxx typu prováděné xxxxxx xx xxxxxx x testu měla xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, životní xxxxxxxx, xxxxxx,
- charakteristika xxxxxxxxx materiálu, xxxxxxxx xxx použit,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx(x) xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- toxické x x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- metody xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx vydechovaného xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxx x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx čase,
- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x biologickém xxxxxxxxx,
- metody xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx,
- navrhované xxxxxx xxx metabolismus,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.37. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX SLOUČENIN XXXXXXX - XXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látek xx xxxxxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, který nemůže xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx toxicity. X xxxxxxxx organických xxxxxxxxx fosforu byly xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x mají xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Vyšetřovací xxxxx xx vitro xxxxx xxx použity xxx xxxxxxxxxxx látek, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x in xxxxx xxxxxx xxxx není xxxxx xxxxxxxxx za xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2 Definice
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx jako "xxxxxxxxx sloučeniny fosforu" xxxxx xxxxxxxxxx neutrální xxxxxxxxx xxxxxx, thioestery xxxx xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, nebo xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx neurotoxicita xx xxxxxxx projevující xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx v xxxx a xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx těchto příznaků, x dále xxxxxxxx x stárnutím xxxxxxxxxx xxxxxxxx - NTE (xxxxxxxxxx xxxxxx esterase) x nervové xxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, že x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nezměnila.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pozdním xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, EINECS 201-103-5, xxxxxxxx xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx.: tri-o-kresylfosfát (XXXX).
1.4 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxx v xxxxxx dávce xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx 21 dnů xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx chování, xxxxxx x paréza. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx inhibice XXX, xx xxxxxxx x slepic xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx 24 x 48 hodin xx podání látky. 21 xxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx xxxxxx testování
1.5.1 Xxxxxxxx
Xxxxx zdravé dospělé xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxx xxxxx xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx dostatečně xxxxx xxxxx nebo xxxxxx umožňující xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx látka se xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo rozpuštěné xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx doporučuje xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx nemusely xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx nebo xxxxxx xxxx testem jejich xxxxxxxxxxxxx vlastnosti.
1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx kura domácího (Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx) xx věku 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx se plemena x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx se xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx pohyb.
1.6.1.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx kontrolní xxxxxxx x vehikulem, xxx pozitivní kontrolní xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx.
X xxxxx xxxxxxx xx xxx dostatečný xxxxx xxxxxx, xxx aspoň xxxx x xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx prvý x xxxxx xxx xx xxxxxx) a xxxx přežilo 21xxxxx xxxxxxxxxx.
Pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx xx může xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx může použít xxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxx xxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxx slepice xxx xxxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx historické xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxxxx laboratoři xxxxx xxxxxxx ze xxxxxxxxxx prvků testu (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx).
1.6.1.3 Volba xxxxx
Xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx slepic a xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx dávek, xxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, která bude xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx úmrtnost xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx nezbytná xxx stanovení xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxx. Aby se xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx cholinergní xxxxxx, xxxxxxx xx atropin xxxx jiný xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinky. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx testovaných xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxx xxxxxx B.1 bis). Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx informace xxxxx xxx také xxxxxxxxx při xxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx studii by xxxx být xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x hornímu xxxxxx xxxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx neměly xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xxx xxxxxxxxx (xxxx) x xx 21 xxxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxx). Xxxxxxx nebo jiný xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx neurotoxickými účinky, xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx studii, xxxxxxxx xxxxx pozorované xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx podle údajů x xxxxx x xxxxxxxxx strukturou xxxx xxxxx toxicitu xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx o xxxxxx x podáním vyšší xxxxx. Limitní xxxx xx neprovádí, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx xx 21 xxx.
1.6.2 Popis xxxxxxx
Xx xxxxxxxx prostředku, xxxxxxxxxxxxx před úmrtím xx xxxxxxxx akutního xxxxxxxxxxxxx účinku, xx xxxxxxxxx xxxxx podána x xxxxxx dávce.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx pozorování
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx podání látky. Xxxxxxx slepice se xxxxxxx xxxxxxxx několikrát x xxxxxxx xxxxxxx xxxx dnů x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx po xxxx 21 xxx nebo xxxxx xxxxxxx utraceny xxxxx xxxxx. Veškeré xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxx, xxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx čtyřstupňové xxxxxxxx stupnice a xxxxxxxxxxx se xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx slepice xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx vyjmou x klecí a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx po xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx minimálních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata x xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu a xxxxxxx je xxxxx xxxxxxx, humánním xxxxxxxx xxxxxxx x pitvat.
1.6.2.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Všechny xxxxxxx xx xxxxx xxxxx před podáním xxxxxxxxx látky x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.6.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxx vybraných x každé xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxx slepice x xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny (xx-xx skupina xxxxxxx) xx xxxxxx v xxxxxxx dnech po xxxxxxxx látky. Pro xxxxxxx xxxxxxxx NTE xx vyjmou xxxxx x lumbální mícha. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx n. ischiadicus x xxxxxxxxxx xxxx xxxx na inhibici XXX. Xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupiny xx 24 xxxxxxxx x xxxxx xxx xx 48 xxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx pouze xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxx se x xxxxxxxxx pohybuje xxxxx xxxxxx (xxxxxxx xx xxxxxx cholinergních xxxxxxxx), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx ze xxx xxxxxx, a xx mezi 24 xx 72 xxxxxxxx xx podání xxxxx.
X těchto xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (AChE). In xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx může xxxx x podcenění xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Xxxxx u xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx špatný xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx.
1.6.2.5 Histopatologické xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx zvířat (xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx) se histologicky xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxx xx použití xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (střední xxxxxxx xxx), prodloužená xxxxx, xxxxx - xxxx xxxxx se xxxxxxxxx x horní xxxxx xxxxx, střední hrudní x lumbosakrální, x xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx část x x. xxxxxxxx (x jeho xxxxx x m. gastrocnemius) x x n. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx specifickými xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX ÚDAJŮ
Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx metodou (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx pozdní xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Uvádějí xx xxxxx pro xxxxxxxxxx zvířata. Xxxxx xx dále xxxxxxx xx tabulky. Z xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, typy x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx x procento xxxxxx xxxxxxxxxxxx každý xxx x stupeň poškození xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxx změnami chování, xxxxxxxxxxxxx x histopatologickými xxxxxx x dalšími xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x obecně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx v xxxx xxxxxxxxx studie.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o pokusu xxxxxxxx tyto xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx plemeno;
- počet x xxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x homogenitě xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx výběru vehikula;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxx xxxxx;
- specifikace xxxxxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx látky;
- xxxxxxxx údaje x xxxxxx ochranného xxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx x toxických odpovědích xxxxx dávkových skupin xxxxxx úmrtnosti;
- xxxxxxxxx, stupeň a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx);
- podrobný xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx;
- pitevní xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- statistické vyhodnocení xxxxxxxx, x xxxxxxx xx to možné.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxx XXXX TG 418.
X.38. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH XXXXXXXXX XXXXXXX 28XXXXX OPAKOVANÁ XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x úvahu xxxxxxxxx xxxxxx skupiny látek xxxxxxx specifický xxx xxxxxxxxxxxxx, který xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X určitých organických xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a mají xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Vyšetřovací xxxxx xx vitro xxxxx xxx použity xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx pozdní xxxxxxxxxxxxxx. Negativní nález x xx xxxxx xxxxxx xxxx není xxxxx považovat za xxxxx, že látka xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx 28xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Poskytne xxxxxxxxx x závislosti xxxxxxxx xx dávce a xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x názvu této xxxxxx jako "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx neutrální xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx jiné xxxxx, xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxx neurotoxicitu, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx této xxxxxxx.
Xxxxxx neurotoxicita xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, distální xxxxxxxxxx, xxxxxxx v míše x xxxxxxxxxx xxxxx x pozdním počátkem xxxxxx příznaků, x xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - XXX (neuropathy xxxxxx xxxxxxxx) v xxxxxxx tkáni.
1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka se xxxxxx xxxxx orálně xxxxxxxx xx xxxx 28 xxx. Zvířata xxxx sledována xxxxxxx xxxxxx xxxxx, zaznamenává xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx NTE, xx xxxxxxx u slepic xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Dva xxxxx xx poslední xxxxx xxxx zbývající xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nervových tkání.
1.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx virových xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x s normální xxxxx xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx 5 xxx xxxx zahájením xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx chovu x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx klece xxxx ohrady xxxxxxxxxx xxxxx pohyb xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxxx 7 dní x xxxxx, xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx,
jako xx xxxx. xxxxxxxxx olej. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx velké xxxxx xxxxxxx xxxxx x želatinových xxxxxxxxx xx se nemusely xxxxxxxxxx vstřebat. U xxxxxxxxx nosičů xxxx xxx známy xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxx xx mladá xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Gallus xxxxxx xxxxxxxxxx) ve xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx plemena o xxxxxxxxxx velikosti a xxxxxxx xx za xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx pohyb.
1.4.2.2 Počet x xxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dávek x xxxxx kontrolní xxxxxxx x vehikulem. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky se xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx jako x xxxxxxxxx.
V xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxx šest x xxxx mohlo xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (po xxxxx x xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pozorování xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.3 Xxxxx dávek
Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x přihlédnutím ke xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x x dalším xxxxxx x toxicitě xxxx xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxxx toxické xxxxxx, nejlépe xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx ani xxxxxx xxxxxxx. Dále xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx způsobem, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Nejnižší dávka xx neměla xxxxxxx xxxxx příznaky xxxxxxxx.
1.4.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx 1000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx a xxx, xx xxxxxxx xxxxxxx popsaných xxx xxxx studii, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx údajů x xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx důvod xxxxxxxx xxxxxxxx, pak xxxx třeba xxxxxxxx x studii x xxxxxxx xxxxx dávky. Xxxxxxx test xx xxxxxxxxx, xxxxx expozice xxxxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ještě vyšší xxxxxx dávky.
1.4.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Všechna zvířata xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx denně xx xxxx xxxxxxxx a 14 dnů xx xx, nebo xx xxxxxxxx a xx xxxxx xxxxx plánu.
1.4.3 Xxxxx xxxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxx xxx x xxxxx po 28 xxx.
1.4.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx začít xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxx xxxxxxx xx pečlivě xxxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxx xx 28 xxx x dalších 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx plánu. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, typu, xxxxxx x trvání. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, ale nemá xx xx ně xxxxxxxx. Ataxie xx xxxxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pořadové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx paréza. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxx po xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx minimálních toxických xxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx vyloučit, humánním xxxxxxxx utratit a xxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx testované xxxxx x pak xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Šest slepic xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx skupiny x xxxxxxxxx xx usmrtí x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx poslední xxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxx NTE se xxxxxx mozek x xxxxxxxx mícha. Xx xxxxxx vypreparovat xxxx x. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx inhibici XXX. Xxxxxxx se usmrcují xxx slepice x xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx skupiny po 24 xxxxxxxx a xxxxx tři po 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx údaje x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xx výhodnější xxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx doporučuje xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx.
X těchto xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx také xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (AChE). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx xxxx x xxxxxxxxx látky jako xxxxxxxxxx XXxX.
1.4.3.4 Pitva
Xxxxx všech zvířat (xxxxxxxxx usmrcených x xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx stav) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxx.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tkáně xx xxxxxx in xxxx za použití xxxxxxxxxx xxxxxxx. Odebírá xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx řez), xxxxxxxxxxx xxxxx, mícha (řezy xxxxx xx xxxxxxx x horní xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx), z xxxxxxxxxxx nervů xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x x. xxxxxxxx (x xxxx větve x m. xxxxxxxxxxxxx) x x x. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx specifickými barvivy xx xxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a skupiny x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx najdou x xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávkou xxxxxx xxxxxx, provede xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x na xxxxxxxxx xx skupin, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, histopatologie x xxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx testování na xxxxxx neurotoxicitu. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxx další xxxxxxxxx.
Uvádějí se xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx sestaví do xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx počátku xxxxxx x počet zvířat xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx, typy a xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx poškození xxxx xxxxxx.
Výsledky studie xx xxxxxxxxx z xxxxxxxx výskytu, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx mezi xxxxxxx xxxxxxx, biochemickými x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx výsledky je xxxxx vyhodnotit vhodnou x obecně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Statistické xxxxxx xx xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxx obsahuje xxxx informace, pokud xxxxx xxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx a xxxxx xxxxxx,
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx atd.,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- podrobné xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx vody,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dávek,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávek, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, objemu x fyzikální xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx na biochemické xxxxxxxxx, xx-xx xxxx xxx 24 x 48 hodin.
Výsledky:
- údaje x xxxxxxx hmotnosti,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx xxxxxx úmrtnosti,
- xxxxxx bez xxxxxx (XXXXX),
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx),
- podrobný xxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření x jejich xxxxxxxx,
- pitevní xxxxxx,
- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx to možné.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x Interpretace
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx s metodou XXXX TG 419.
X.39. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx
1. XXXXXX
Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX TG 486, Xxxxxxxxxxx XXX Xxxxxxxxx (XXX) Xxxx With Xxxxxxxxx Xxxxx Xxxxx Xx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx syntézy DNA (xxxxxxxxxxx DNA xxxxxxxxx, XXX) v xxxxxxx xxxxxxxxx buňkách in xxxx xx určit xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (1) (2) (3) (4).
Tento test xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx chemických xxxxx x játrech. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx XXX v xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx jsou obvykle xxxxxxx xxxxxx metabolismu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; jsou xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx xxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, že se xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx tkáně xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (XXX) xx hodnotí xxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x buňkách, které xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (S-fáze) xxxxxxxx XXX. Nejběžnější xx xxxxxx, při xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx thymidin xxxxxxx xxxxxxx (3H-TdR). Pro xxxxx UDS in xxxx se nejčastěji xxxxxxxxx potkaní játra. Xxxx xxxxx než xxxxx se sice xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx však xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx bází XXX, xxx jsou v xxxxx poškození odstraněny x xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx pro látky xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx repair" (1 - 3 xxxx) xx xxxx xxxxxxx. Dále může xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx opravení xxxx xxxxxx replikace lézí XXX. Xxxxxx xxxxxxxx XXX neříká xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx, že xxxxxxx xxxx sice x XXX xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx reparačním xxxxxxxx. Xx, že XXX xxxx neposkytuje x mutagenní aktivitě xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxxx x xxxxxxxx: net xxxxxxx xxxxx (XXX) xxxxx xxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx laboratoř xxxxxxxxxxx test.
Xxx xxxxxxx xxxxxx (XXX): xxxxxxxxxxxxx míra XXX xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx testech XXX, xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx počtem xxx x jádře (NG) x průměrným xxxxxx xxx v xxxxxxxxxx (XX): XXX = XX - XX. Xxxxx NNG xx xxxxxxxxxxxx pro jednotlivé xxxxx x následně xxxxxxxxxxx na xxxxx x kultuře, x xxxxxxxxxxx kulturách xxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (xxxxxxxxxxx XXX synthesis, XXX): xxxxxxx xxxxxxx XXX po xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemickou xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx UDS x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx excizi x xxxxxxxxxx segmentu XXX xxxxxxxxxxxx oblast poškození xxxxxxxxxx chemickou látkou xxxx fyzikálním xxxxxxxxx. Xxxx vychází xxxxxxx x inkorporace 3X-XxX xx DNA xxxxxxxxx xxxxx, charakteristických xxxxxx xxxxxx xxxxx x X-xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx technika xxxx tak xxxxxxxx x interferenci x xxxxxxx v X-xxxx, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Výběr xxxxxxxxxxx druhu
Xxxxx xx používají xxxxxxx, xxx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Používají se xxxxx laboratorní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Hmotnostní xxxxxxx xx xxx zahájení xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx pohlaví nemají xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx chovu jsou xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.
Xxxxxxx xx xxxx být 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jedinci xx jednoznačně xxxxxx x po xxxx xxxxxxxxx pěti dní xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, xxx x xxx jsou xxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx x xx-xx xx možné, látka xx před xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx připraví xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxxxx testované látky xx xxxxx podávat xxxxx xxxx xx xxxx podáváním xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.3 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx ne xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx podpořeno xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Doporučuje xx, aby kde xx xx xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / vehikulum.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx třeba xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx indukovat XXX xxx xxxxxxx, xxx xxx očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvýšení xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x dávkách xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx odezvě (4). Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se volí xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx hodnotiteli xxxxxxxxx zakódovaného xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx patří xxxxxxxxx:
Xxxx xxxxxx xxxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx x xxxxxxxxx (2-4 hodiny) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 hodin) | N-2-fluorenylacetamid (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx xxxxx použít x jiné xxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx podávána xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx x pohlaví xxxxxx
X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx jedinci. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, pak pro xxxxxxxx xxxxxxx negativní x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxx, nebo xxx jedinci.
Xxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx údaje xx xxxxxx x týmž xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxx xxxxxxxxx nejsou x xxxxxxxx podstatné xxxxxxx, je možné xxxxxxx testování pouze xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx na xxxxxxx. Xxx, kde xxxxxxx xxxxxxxx testovaných látkám xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxx například x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx xx xxxx xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podává jednorázově.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Obvykle xx xxxxxxxxx xxx xxxxx dávky. Xxxxxxxx xxxxx xx definována xxxx dávka xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky toxicity, xx xxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx dávka xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.
Xxxxx, jež x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx vykazují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx z těchto xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x vyhodnocují xx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx údaje nejsou x xxxxxxxxx, xx xxxxx ji xxxxxxxxxx x téže xxxxxxxxxx x za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, xxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxx použijí x xxxxxx xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx vyvolávající určité xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx test xxx xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxx x jedné xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx v xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx a xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx neočekává xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx úplná xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x limitním xxxxx vyšší dávka.
1.5.5 Aplikace xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx vpravuje xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x jiné xxxxxxxxx cesty. Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx však xxxxxxxxxxxx, protože by xx xxx mohla xxxxx vystavit působení xxxxxxxxx látky xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxx xxxx injekcí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 ml/100 x hmotnosti organismu; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xxx, aby xxxxx xxx ve všech xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x minimalizovala xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Příprava xxxxxxxxx xxxxx
Jaterní buňky xx x pokusných xxxxxx xxxxxxxxxxxx obvykle 12 - 16 xxxxx po xxxxxx xxxxx testované látky. Xxxxxxx xx zapotřebí xxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 xxxxxx po xxxxxx xxxxx), ledaže xx po 12 - 16 hodinách xxxxxxxxx reakce zjevná. Xx ovšem možno xxxxxx x xxxx xxxx odběru xxxxxx, xx-xx to xxxxxxxxxx xx xxxxxxx toxokinetických xxxxx.
Xxxxxxxxxx kultury xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx zajistit, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx. Jaterní xxxxx xx zvířat z xxxxxxxxx kontroly xxxx xxx minimálně 50 % životaschopnosti (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx UDS
Čerstvě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx dobu (xxxx. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx obsahujícím 3X-XxX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxx obsahujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, aby xx snížila neinkorporovaná xxxxxxxxxxxxx (xxx. "xxxx xxxxx"). Xxxxx xx xxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Při xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se "cold xxxxx" xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx do autoradiografické xxxxxx, xxxxxxxx ve xxx (např. xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx v xxxxxxxxxx), xxxxxxxx, obarví x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx zrna. X xxxxxxx jedince xx xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
1.5.8 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx možno UDS xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (např. pyknóza, xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx. Vždy xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x každého jedince xx obvykle xxxxxxx 100 xxxxx; xxxxx xx xxxxx méně xxx 100 na xxxxxxx jedince, xxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx zrn xx nevyhodnocují jádra x S-fázi, xxx xxxxx xxxxx x X-xxxx se xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx metodou xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX do xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zrnek.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Mimoto xx xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx buňku, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxx xx stanoví xxxxx xxxxx "xxxxxxx xxxxx" (XXX) xxxxxxxxx xxxxx CG xx xxxxx NG. Xxxxxxxx-xx xx "buňky x xxxxxx", musí xxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxx buňky xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxxxx metodami; xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xxxxxxxx pro xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx zahrnují:
xxxxxxxxx | (I) xxxxxxx XXX xxx xxxxxx xxxxxxxxxx prahem, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx dané xxxxxxxxxx | |
xxxx | (XX) xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxxx kontroly | |
xxxxxxxxx | (X) hodnoty XXX xx úrovni/pod xxxxxx historického prahu x xxxxxxx | |
xxxx | (XX) hodnoty XXX nejsou signifikantně xxxxx xxx souběžná xxxxxxxx. |
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx, xx xx xxxxx vzít v xxxxx parametry, xxxx xxxx variabilita xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, vztah xxxxx - xxxxxxx x cytotoxicita. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx xxxxxxxxxxx metody; xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx být xxx xxxxxxxxx reakci xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx poskytuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vyvodit o xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek xxxxx XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx DNA, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx za xxxxxx experimentálních podmínek xxxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx XXX, xxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Je xxxxx xxxx v xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx dosáhne širokého xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx vehikula
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx živočišný xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx podmínky, strava xxxx.,
- hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných odchylek xxx xxxxxxxxxx skupiny.
Xxxxxxxx pokusu:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx i xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x přípravě testované xxxxx,
- podrobnosti x xxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, že se xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx oběhu xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- případný xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x vody,
- xxxxxxxx schéma xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxx autoradiografická metoda,
- xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x počet xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x "xxx xxxxxxx xxxxxx" xxx jednotlivé xxxxxxxxx, xxxxxxx a skupiny,
- xxxxx dávka-odpověď, xxxxx je x xxxxxxxxx,
- statistické xxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx "xxxxx x xxxxxx", byl-li xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx v S-fázi, xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx buněk.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxx X.39. byla xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
B.40. XXXXXXX XXXXXX XX KŮŽI
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxx centrum xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxxxxx Centre xxx xxx Xxxxxxxxxx of Xxxxxxxxxxx Xxxxxxx, ECVAM, Xxxxx Xxxxxxxx Centre, Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx kůži: xxxx xx principu xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx elektrického xxxxxx kůže potkana (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, XXX) x test xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx. Validizační studie XXXXX prokázala, xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mezi xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x modelu lidské xxxx xxxxxxxx správně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx těžké xxxxxxxxx xxxx X35, x ostatní xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, X34). Xx xxxxxx xxxxx a postupy xxxx testů; xxxxx xxxx oběma testy xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxxxxxxxxx uživatele.
1.2 DEFINICE
Poleptání xxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx tkáně xxxx xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx.
1.3 REFERENČNÍ XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx však xxxx. 1.5.3.4 x 1.7.2.3.
1.4 XXXXXXX METODY - TEST XXX XX KŮŽI XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nanese xx dobu xx 24 xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx odebrané z xxxxxxx potkanů xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx mají xxxxxxx xxxxxx, jsou xxxxxxxxxxxxxx xxxxx své xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx integritu x bariérové xxxxxx xxxxxx corneum.Tato xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporu (XXX) xxx určitou prahovou xxxxxxx (5xΩ) (4) (5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxx xxxxxxxx hodnotu xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx viz v xxx. (6)) je xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxx zařadit xxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xx snížil xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx x xxxxxx typů xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (2) (7).
1.5 XXXXX XXXXXX - TEST XXX XX KŮŽI POTKANA
1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23xxxxx) potkani, Xxxxxx nebo srovnatelný xxxx. Xxxxxx nůžkami xx zvířata xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxx xx roztoku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, penicilinu, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, x koncentracích xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx čtvrtý den xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx omyjí xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx 3 xxx xx xxxxxxx. Pro xxxxxxxx kožních xxxxxx xxxxxxx být xxxxxxx xxxxxx než 31 xxx.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx z xxxxxxxx plochy x x xx xx xxxxxxx sloupne přebytečný xxx. Kůže xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxx, x to epidermální xxxxxxx x trubici. Xxxx xxxxx trubice xx xxxxxxxx xxxxxx X-xxxxxxx, xxxxxx se xxxx připne, x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx. Rozměry trubice x O-kroužku xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx X-xxxxxxx se pak xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx XXXX trubice xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX), xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx. 2).
1.5.3 Popis xxxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx testované xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx stavu, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx povrch xxxxxx xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxx xxxx xxxxxx epidermis, xx xxxxxx xxxxx se xxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxxx látek xxxx xxx xxxxxxxxx zahřátím xxxxx xx 30 xX, aby xx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (xxx xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx 30 xX xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, která x xxxxxxx xxxxxx, se xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx proudem vody xxxxx xxxxxx 30 xX.
1.5.3.2 Xxxxxx XXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odpor (TER) xx měří pomocí xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx můstku xxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx měřením xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx povrchové xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx xxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxx přídavkem tří xxxxxxxxx 154 xX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxx a xxxxx se xxxxx x xΩ/xxxxxx (obr. 2). Rozměry xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx se během xxxxxx uloží xxxxxx XXXX trubice xxx, xxx xxxx xx xxxxxxx síranu xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vždy xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Vnější (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xx receptorové xxxxxxx xxx, xxx xxxxxx na xxx. Xx xxxxx dodržovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx pružinové xxxxxx x xxxxxxx XXXX xxxxxxx (xxx. 1), xxxx vzdálenost xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 20 kΩ, xxxx xx xxx důsledek xxxx, že testovaná xxxxx xxxxxxxx epidermální xxxxxx terčíku xxxx. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx povlak xxxxxxxxx, například xxx, xx xx XXXX xxxxxxx xxxxxx palcem x xxxxxxxx x xxxxxx 10 xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx opakuje x xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx souběžné xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx leží x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx rozmezí xxxxxx pro popisovanou xxxxxx x aparaturu xxxx xxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 M kyselina xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
&xxxx;
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx voda
|
10 – 25
|
1.5.3.3 Modifikovaný postup xxx povrchově xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Pokud xx xxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) xxxx neutrálních xxxxxxxxxxx xxxxx hodnota TER xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ, xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx průniku (xxxxxxxxx) barviva. Xxxxx xxxxxxxx xx zjistí, xxx xx nejedná x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Nanesení x xxxxxxxxxx barviva xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx všech xxxxxxx xxxxxx na 2 xxxxxx po 150 μx 10% (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx kůže se xxx xxxxxx xx xxxx 10 sekund xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vody, xxxxx xx xxxxxxx pokojovou xxxxxxx. Xxx xx xx xxxxxxxxx přebytečné (xxxxxxxxxx) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx kůže xx xxx xxxxxxx xxxxx x PTFE xxxxxxx x xxxxx do xxxxxxx (např. xx 20 xx skleněných xxxxx xxx scintilaci) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx dobu 5 minut jemně xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (nenavázaného) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx vyjmou x xxxxx xx nádobek x 5 xx 30 % (w/v) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxx noc xxxxxxxx xxx teplotě 60 xX. Po xxxxxxxx xx terčíky xxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx dobu 8 xxxxx xxx xxxxxxx 21 xX (xxxxxxxxx odstředivá xxxx ∼ 175). Xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx 30 % (x/x) xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (v/v) (xx. 1 ml xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx SDS). Xxxxxxx xxxxxxx (XX) xxxxxxx xx xxxx xxx cca 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx sulforhodaminu B x xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx XX (molární extinkční xxxxxxxxxx sulforhodaminu B xxx 565 nm xxxx 8,7 . 104; molekulová hmotnost = 580). Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B se xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx kůže xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx hodnota. Průměrná xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahu xxxxxxx se u xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx uspořádání považují:
|
Kontrola
|
Látka
|
Rozmezí xxxxxx xxxxxxx (mg/terčík)
|
|
Pozitivní
|
10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
40 - 100
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
15 – 35
|
1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx dobu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxx (xxxx. 2 hodiny) xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx látek. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxx však xxxx xxxxxxxx, xx xxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx některých xxxxxxxxxxx xxxxx aplikovaných xx xxxxxxx kůže xx 2 xxxxxx (2), jakkoliv umožňuje xxxxxxxx identifikaci xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx látek xx 24hodinovém xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x rozměry xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx hodnota xxx xxxxxxx xxxxxx 5 xΩ byla xxxxxxxxx xx základě xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxx aplikaci xxxxxxx xxxxxxxxx xxx. Xxxxx xx xx zkušební xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx použít xxxxxx xxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx metodiku x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx referenčních xxxxxxxxx vybraných x xxxxx, jež xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx (3).
1.6 XXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX - XXXX S XXXXXXX XXXXXX KŮŽE
Testovaný materiál xx xxxxxx topicky xx xxxx xx 4 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxx schopnosti xxxxxxx pokles xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx "XXX reduction xxxxx" (MTT = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx expoziční xxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x předpokladu, že xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx jsou xx, xxxxx dokáží xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx corneum (xxxxxx xxxx xxxxx) x xxxx dostatečně xxxxxxxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX XXXX
1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxx mohou xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxx však xxxxxxxx xxxxxx kritéria. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx vrstvou xxxxxx xxxxx. Bariérová xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx přiměřeně xxxxxxxxx. Xx xxx xxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, o xxxxx xx xxxxx, že xxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx skrze stratum xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Model xxxx xx definovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky.
Životnost xxxxxx xxxxx x modelu xxxx xxx dostačující x xxxx, xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx MTT, xx. XX xxxxxxxx) xx xxxxxxxx látce použité xxxx xxxxxxxxx kontrola xxxx ležet x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx model. Podobně x případě xxxxx xxx pozitivní kontrolu (xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx spadat xx xxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxx xxxxxxx
1.7.2.1 Nanesení testovaného xxxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka xxxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx pokrývala xxxxxx xxxx (minimální xxxxxxxx 25 (μ/xx2). Xx-xx pevná, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx kůži, x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx x xxxx zajistil xxxxx xxxx. Pokud je xx xxxxx, pevné xxxxx se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx. X metody xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xx je xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx (2). Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx x povrchu xxxx xxxxxxx smyje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Měření xxxxxxxxxx xxxxx
X měření xxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx xxxxxxx XXX, x xxxxx xxxx prokázáno že x různých laboratořích xxxxxxxxx přesné a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx xxxx xx xx xxxx 3 xxxxx xxxxxx do xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx xxx xxxxxxx 20 - 28 oC. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) x koncentrace formazanu xx xxxxxxx xxxxxxx XX xxx vlnové xxxxx 545 x 595 xx.
1.7.2.3 Doplňující xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx dodržení xxxx xxxxxxxx, promývacího xxxxxxx xxx. mají xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx. Doporučuje xx xxxxxx x xxxxxxxxx model xxxxxxxxxxx xx použití xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných x látek xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx studii XXXXX (3). Xx xxxxxxxx nutné, xxx xxxx prokázáno, xx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx x rámci xxxx laboratoře, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2) a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx studie xxxx být xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx kterém xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.8.1 Xxxx XXX na xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx odporu (x xΩ) pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx formě, a xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx experimenty, xxxxxxxx xxxxxxx x z xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.8.2 Xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx OD x vypočtené procento xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx testovaný materiál, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx a případné xxxxxxxxxx referenční xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, x to xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x x nich xxxxxxxx klasifikace.
1.9 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.9.1 Xxxx XXX na xxxx xxxxxxx
Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx XXX xxx xxxxxxxxx materiál xxxxx xxx 5 xΩ, xx látka xxxxxxxxxxx. Je-li xxxxxxx XXX nižší xxxx xxxxx 5 xΩ x xxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xx.
X povrchově xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxxx 5 xΩ, lze provést xxxxxxx penetrace xxxxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx vyšší xxxx xxxxx průměrnému xxxxxx barviva v xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x 36 % XXx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x tedy xx xxxxxxx účinky, xxxxxx xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx pozitivní a xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx.
1.9.2 Xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx představuje 100% xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxx OD pro xxxxxxxxxx zkušební xxxxxx xx vypočte xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Hraniční xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxx odděluje xxxxx, xxxxx nezpůsobují xxxxxxxxx xxxx, od těch, xxxxx poleptání xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx být v xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se musí xxxxxxxx, že je xxxx xxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x průběhu pokusu
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx údaje, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx i xxx xx.
Xxxxxxxx pokusu
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx hodnot xxxxxx (test XXX) xxxx xxxxxxxxxxxx podíl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, pozitivní a xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx resp. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx;
- popis xxxxx xxxxxx pozorovaných efektů.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Obrázek 2
Xxxxxx X.40. xxxx vložena xxxxxxx xxxxxxxxx č. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.41. FOTOTOXICITA - XXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 XXX IN XXXXX
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx (reakce), k xxx dochází, xx-xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látkám x xxxxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xx-xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxx xx stanovení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx testované xxxxx, xxxx xx xxxxxxxx, zda xxxx xxxxx ve spojení x xxxxxxxx ultrafialovému x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx nebezpečí xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx in xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx jsou fototoxické xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxx, x sloučeniny, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx byl vypracován x validován x xxxxx společného projektu XX/XXXXXX x xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx validní xxxxxxxxxxx xx xxxxx vůči xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. V xxxx 1996 doporučila xxxxxxxx xxxxxx OECD xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx fototoxicity (4).
Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx x xxxx x xxxx zjištěno, xx xxxxx xxxx xx xxx uvedené xxxxxx vynikající xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxx, xxx xxxxxxxxxxx jiné xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, i xxxx řada látek xxxx specifické vlastnosti xxxxxxxx, xxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in vitro xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx přístup xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxx xxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX) xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxx; xxxxxx xx X/x2 xxxx v XX/xx2.
Xxxxx xxxxxx: xxxxxxxx (= xxxxxxxxx x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx viditelného (VIS) xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (= W x s) xx xxxxxxxx povrchu, xxxx. X/x2 nebo J/cm2.
Pásma xxxxxxxx délek xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx doporučení XXX (Xxxxxxxxxx International xx L'Eclairage) se xxxxxxx xxxxxxxx UVA (315 - 400 xx), UVB (280 - 315 nm) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxx: xx xxxxxxx mezi pásmy XXX a XXX xx často považuje 320 xx x XXX xx xxxxx xxxx na XX-X1 x XX-X2 x xxxxxxx xxxxxx x 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx (viabilita) xxxxx: parametr, kterým xx měří xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx živou xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxx), jež xxxxx parametrů xxxxxxxx xxxxx testem x xxxx xxxxxxxxxx koreluje x celkovým xxxxxx xxxx. životností (xxxxxxxxx) xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (viabilita) xxxxx: životaschopnost buněk xxxxxxxxx v xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx procedurou xxxxx (xxx + XX xxxx - XX), xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky.
Predikční xxxxx: xxxxxxxxxx, kterým se xxxxxxxx xxxxx toxicity xxxxxxxxxxxx xx predikce xxxxxxxxx potenciálu. X xxxxx xxxxxxxxxx návodu xxx test xx xxxxx x transformaci xxxxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx XXX x MPE.
PIF (xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx představující xxxxx xxxx stejně xxxxxxxx cytotoxických xxxxxxxxxxx (XX50) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx (-XX) a x xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.
XXX (xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx): xxxx míra xxxxxxxx x matematické xxxxxxx xxxxxxxxxxx průběhu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx (-XX) a v xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx: xxxxxx xxxxxxx reakce (xxxxxx), xxxxx xxxxxx po xxxx xxxxxxxx kůže xxxxxx látce x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxx reakce, xxxxx xx obdobně xxxxxxxx ozářením xxxx xx systémovém podání xxxxxx látky.
Fotoiritace: nižší xxxxxx pojmu "xxxxxxxxxxxx", xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x nimž xxxxxxx x xxxx poté, xx xx ni xxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxx přijatá) xxxxxx xxxxx. Tyto xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx vždy x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (reakce podobné xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx imunologická xxxxxxxxxx, xxxxx se xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxx, x kdy xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx indukční xxxxxxx x tomu, xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx) s xxxxxxxxxxx projevy, xx xxxxx xxxxxxx xxxx, xx byly xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XX/XXX xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx opakovanou xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx látkou, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, která je xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, se xxx xxxxxxxx xxxxx xx fototoxicitu 3X3 XXX doporučuje xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxx použity xxx mezilaboratorním xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (3) (13).
1.4 XXXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxx byly xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), jejichž xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx, že xxxxxx absorbovat xxxxxxxxx xxxxxxx x oblasti xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx zákona xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) vyžaduje xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx světelných xxxxx. Xxxxx xx xx xxxxxxx, xxx se xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx návodu, xxxx by se xxxx xxxxxxxx absorpční xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x XX/XXX oblasti (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXXX x. 101). Xxxxx xx xxxxxxx extinkční/absorpční xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx-1 x xx-1, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx třeba xx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxxxx).
1.5 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx vyústit xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7), přičemž xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in vitro xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx při xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx, NR) (9), 24 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx Balb/c 3X3 se xxxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx xxx, xxx xx vytvořila xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx). Pro xxxxxx testovanou látku xx xxxxxxxxxxx dvě xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx. Xxxxx x obou xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxxxx 5 X/xx2 XXX (+XX xxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx (-UV experiment). X xxxx destičkách xx pak xxxxxx xxxxxxx xxxxxx kultivačním x xx xxxxxxx 24 xxxxxxxx kultivace xx xxxxxx inkorporace xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx xxxxxx, XXX) xx dobu 3 xxxxx stanoví xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx každou x osmi xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx relativní xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. X posouzení fototoxického xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislé xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XX) a x xxxxxxxxxxxxx (-UV) záření, xxxxxxx xx xxxxxx XX50, tj. xx xxxxxxxxxxx inhibující životaschopnost xxxxx x 50 % x porovnání x kontrolami xxx xxxxxxxxx.
1.6 XXXXXXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxx vůči xxxxxx XXX, xxxxxxxxxx xxxxx: x xxxxx xx xxxxx pravidelně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX. Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx xxx testu xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx, xxxxxx xxx xx vystaví xxxxxx UVA x xxxxx 1 - 9 J/cm2 x xxxxx den se xxxxxx NRU xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk. Buňky xxxxxxx xxxxxxxx jakosti, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx dávkou XXX xxxxxx 5 X/xx2 xxxx nižší xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Xxx nejvyšší xxxxx XXX záření 9 X/xx2 xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx než 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx. Tato xxxxxxxx xx xxxxxxx zhruba xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxxx UVA, xxxxx xxxx: test xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jestliže xxxxxxxxx kontroly (buňky x Earlově xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx [Xxxx´x xxxxxxxx xxxx solution, XXXX] x 1 % roztokem dimethylsulfoxidu (XXXX) xxxx ethanolu (XxXX) nebo xxx xxxx vykazují x xxxxxxxxxxx (+XXX) životaschopnost xxxxxxxxx 80% v xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx v témž xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-UVA).
Životaschopnost xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxxx optická xxxxxxx (XX540 NRU) xxxxxx x NR xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx 1 x 104 xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx jamce rostlo xxxxx xxxx xxx xxxxx x normální xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Test xxxxxxx kritéria akceptovatelnosti, xx-xx průměrná xxxxxxx XX540 NRU x xxxxxxx xxx ovlivnění xxxxx nebo xxxxx 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx xxxxx provést souběžný xxxx xx známou xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx xxxx xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxxx chlorpromazin (XXX); xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxx XXX xxxxxxxxx dle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX in xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: XXX xxxxxxx (+XXX): EC50 = 0,1 - 2,0 μx/xx, CPZ xxxxxxxxx (-XXX): XX50 = 7,0 - 90,0 μx/xx. Fotoiritační xxxxxx (XXX), tzn. xxxxx xxxxxxx EC50, xx být xxxxxxxxx 6.
Xxxxx XXX xx xxx souběžnou pozitivní xxxxxxxx xxxx použít x xxxx známé xxxxxxxxxxx látky, xxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx skupiny xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxx adekvátně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 x XXX xxxx MPE (xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XXXXX XXXXXX
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Buňky
Při xxxxxxxxx xxxxxx xxxx použita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx Balb/c 3X3 xxxx 31, x to xxx x XXXX nebo x XXXXX; xx xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx protokolu xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxx buňky xxxx xxxxxxx xxxxx, pokud xx xxxxxxxxxx podmínky xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx potřeb; xx xxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx stejně xxxxxx.
X xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxx xxx x případě, xx xx xxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx buněk xxxx XXX xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxx narůstat, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3T3 x xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx buněk Xxxx/x 3X3 xxxx UVA xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx kontrolovat, x xx postupem xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xx xxxxx x XXXX xxxxxxxxx 10 % séra xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 mM xxxxxxxxx, penicilinem x xxxxxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx xxx teplotě 37 xX / 7,5 % CO2. Xx nezbytné, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxx xxxx. xxxxxxxx linii.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kultur xx nasadí x xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxx x xxxxx na fototoxicitu 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx x kultivačním xxxxx v xxxxxx xxxxxxx, xxx na xxxxx testu (xx. xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 48 xxxxx po xxxxxxxx) xxxxxxx xx xxxxxxxxxx (xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx). V případě xxxxx Balb/c 3X3 xxxxxxxxxxxxx x destičkách x 96 jamkami xx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 x 104 xxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx testovanou xxxxx se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxx destičky x 96 jamkami, xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx identických xxxxxxxxxxxx podmínek, x xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx (+UVA/VIS) x xxxxx je xxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxx všech xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx genotoxického xxxx xxxxxxxxxxxxxx potenciálu je xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx systému, není x případě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, xxx xx x xxxx, xxx působila xxxx fotoxin in xxxx xxxx xx xxxxx, xxxx metabolické xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxx xx xxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx tento xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivačním xxxxxxxx.
1.7.1.5 Xxxxxxxxx xxxxx / příprava
Testovaná látka xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx připravena, xxxxxx údaje o xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xx xx xxxxxxxxx. Xxxxx je xxxxxxxxxxxxx, xx by xxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx rozpustí x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, například x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (XXXX) xxxx xx xxxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, XXX), xxxxx - aby xxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx - xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx barevné xxxxxxxxxx xX, xxxxxxxxxx světlo.
Pokud xx testovaná xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx se xx vhodném xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, než je xxxxxxxxxx xxxxxxx koncentrace, x následně xx xxxxx v xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, musí být xxxxxxxx x konstantním xxxxxx 1 % (x/x) xx všech xxxxxxxxx, xx. xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx i x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxx (XxXX). Xxxxxx xxxxx xxx i xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, například xxxxxx, xx však xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxx xxxxxx x testovanou xxxxxx, xxxxxxxxx fototoxického xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, dá xx xxxxxx míchání resp. xxxxxxxxxx, popřípadě ohřev xx 37 oC.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX xxxxxxx / příprava
Světelný xxxxx: xxxxx xxxxxxxxx světelného xxxxxx a správná xxxxxxxx je při xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx v XXX x ve xxxxxxxxx oblasti xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx xxxxxx XXX xx x tomto xxxxx méně relevantní, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx od 313 xx x 280 xx xxxxxxx tisícinásobně. Xxxx kritéria pro xxxxx světelného zdroje xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxx absorbuje, x xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx dobu) postačující xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Dále xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx délky x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém - xxxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxx (infračervená xxxxxx).
Xx optimální xxxxxxxx xxxxx se pokládají xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx simuluje xxxxxxxx xxxxxx. Jako xxxx xxxxxxxxxx se používají xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx - xx xxxx tu xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx tepla x xxxx xxxxxxxx, sluneční xxxxxx však imitují xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXX, xx třeba xxxxxx filtrovat xxx, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx zeslabilo.
Pro xxxx xx fototoxicitu 3T3 XXX xx vitro xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxx UVB xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XXX:XXX ∼ 2 : 1). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx na fototoxicitu 3X3 XXX xx xxxxx xx x xxxxx (3).
Dozimetrie: xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) se xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx, který xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx daný xxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx xx xxxxx kontrolovat, k xxxxx se doporučuje xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx XX-xxxx xxxxx typu x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx, xxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx spektrální xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx XXX záření 5 J/cm2 xx xxx buňky Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx dostatečně xxxxx, xxx xxxxxxxxxx i xxxxx xxxxxxxxxxx látky. Xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx 50 minut, musí xxx xxxxxxxxx nastavena xx 1,666 mW/cm2. Xxxxxxx-xx xx jiná xxxxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxx xxxxxx, xxxx xx dávka xxxxxx XXX xxxxxxx xxx, aby buňky xxxxxxxxxxxxx a byla xxxxxxxxxx k průkazu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx podle xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
xxxxx xxxxxx (X/xx2) x 100
|
&xxxx; |
| &xxxx;
x (xxx) =
|
________________________
|
(1 X = 1 X s)
|
|
záření (xX/xx2) x 60
|
&xxxx; |
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxx převýšit xxxxxxx 100 μg/ml, xxxxx xxxxxxx fototoxické xxxxx byly detekovány xxx koncentracích nižších, xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pozitivních xxxxxxxx (13). Hodnota pH xxx nejvyšší koncentraci xxxxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (+XXX) x xxx něj (-UVA) xx xxxxx stanovit x rámci předběžných xxxxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx dostatečně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx geometrická xxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx).
1.7.3 Xxxxx xxxxxxx
1.7.3.1 První xxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx 1 x 105 xxxxx/xx x xxxxxxxxxxx médiu. Xx periferních xxxxx 96xxxxxxx mikrotitrační destičky xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx 100 μx samotného xxxxx (= xxxxx xxxxx), xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx 100 μl xxxxxxx suspenze o xxxxxxx 1 x 105 xxxxx/xx (= 1 x 104 xxxxx xx xxxxx). Xxx každou xxxxxxxxxx xxxxx se připraví xxx destičky - xxxxx pro stanovení xxxxxxxxxxxx (-XXX), xxxxx xxx stanovení fotocytotoxicity (+XXX).
Xxxxx xx xxxxxxxx xx dobu 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX), xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx monolayer. Xxxx xxxxxxxxx doba umožňuje xxxxxxxxxx a adherenci xxxxx x jejich xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Druhý xxx
Xx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx médium z xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX xx xxxxxx jamku. Xxxxx xx 100 μx EBSS/PBS xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx koncentraci xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xx přidává x xxxx koncentracích. Xxxxx x testovanou xxxxxx xx inkubují x xxxxx xx dobu 60 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX).
Xxxx testu s XXX (+XXX) xx xxxxxxx xxx, že xx xxxxx za xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 50 xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx2 (= xxxxx 5 / xx2). Xxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxxxxx vody xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-UVA) xx xx xxxx 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx XXX) xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx teploty x xxxxxx xxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxx a xxxxx xx promyjí xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX. Poté xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x přes xxx (18 - 22 xxxxx) se xxxxxxxx (7,5 % XX2, 37 xX).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx hodnocení
Buňky se xxxxxxxxxx xxx mikroskopem x fázovým xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx kontrola xx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx příjmu xxxxxxxxx xxxxxxx (XX)
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx předehřátého XXXX/XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx xx odstraní xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μl média x XX a xxxxxxxx xx při 37 oC ve xxxxxxxx xxxxxxxxx se 7,5 % CO2 xx xxxx 3 xxxxx.
Xx xxxxxxxx xx xxxxxx x XX xxxxxxxx x xxxxx xx promyjí xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX, xxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxx xxxxx xxxxxxxx zcentrifugovat x obrácené xxxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx 150 μx roztoku xx xxxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xx xxxx 10 xxxxx xxxxxx xxxxxx xx třepačce, xxxxx xx XX z xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx homogenní xxxxxx.
Xx spektrofometru se xxxxx optická xxxxxxx xxxxxxxx XX při 540 nm xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx srovnávacího xxxxxxx. Xxxxx se uchovají xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. ASCII) xxx xxxxx analýzu.
2. ÚDAJE
1.8 XXXXXXX A XXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxx xxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxx ní. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, koncentrační xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx tak, xxx xx experimntální údaje xxxx vyjádřit xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxx xxx až xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx x xxxxxxxxxxx ve xxx (-XXX) xxxxxxxxxxxxx, xxx xxx ozařování (+XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxx, že xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx částech xxxxxxxxxxx xxxxx muset řádově xxxxx, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dat. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zjištěna x xxxxx z xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxx xxx -XXX, xxx xxx +XXX), xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx rozestupem xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx nejvyšší koncentrace.
Jsou-li xxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx dělicí čáry xxxxxxxxxxx xxxxxx - xx třeba xxxx xxx ověření opakovat.
Považuje-li xx xxxxxxxxx testu xx xxxxxxxx, xxxx xxx důležité xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx). Xxx xxxx xxxxxxxx x změnách xxxxxxxxx doby před xxxxxxxxxx. X látek, xxx xxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx vliv xxxxxxxx doby.
1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x 50 % xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XX (EC50). Xx xxx xxxxxx xxx, xx se xx data xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx metoda xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx Xxxxxxx funkce xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) nebo xx použije xxxx xxxxxx metoda proložení (14). Než xx xxxxxxx XX50 xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. K xxxxxxx xxxxxxx XX50 xx xxxx xxxxx xxxxxx grafické xxxxxx. X tomto xxxxxxx xx xxxxxxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (osa x: log, xxx x: xxxxxx), xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx mnohdy xxxxx xxxxxxxx.
1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX XXXXXX)
1.10.1 Xxxxxxxxx model, verze 1: xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX)
Xxxxx xx získají xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva xxx xx xxxxxxxxxxx (+UVA), xxx xx nepřítomnosti (-XXX) xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx faktor (XXX) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (-XX)
|
| &xxxx;
(x) XXX =
|
&xxxx;
____________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
XXX < 5, xxxxxxxxxxxx žádný fototoxický xxxxxxxxx, xxxxxx XXX ≥ 5 fototoxický xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxx pouze xxx +XXX, xxxxxx při -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx se PIF xxxxxxxxx, x když xx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xx látka xx xxxxxxxxxxx potenciál. V xxxxxxx případě se xx vypočítat xxx. "&xx; XXX", když xx xxxx xxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxxx až xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxx) a xxxx hodnota xx xxxxxx xx vzorce:
|
Cmax (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) &xx; XXX =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
Xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx "&xx; PIF", pak xxxxx xxxxxxx &xx; 1 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx XX50 (-XX), ani XX50 (+XX), xxxxxxx látka xxxxxxxxxx cytotoxicitu až xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx to xxxxxxxx toho, že xxxxx nemá xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx "XXX = *1", xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx výsledek
|
Cmax (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) PIF = *1 =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (+XX)
|
Xxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", xxxxxxxxxx xx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx (b) x (x) xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxx.
1.10.2 Xxxxxxxxx xxxxx, verze 2: střední xxxxxxxxx (XXX)
Xx možno xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx pro predikci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx dat x validační studie XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx studie xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx XX xxxxxx (13). X xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx omezení xxxxxx XXX x xxxx xxxxxxxxx, kde nelze xxxxxx xxxxxxx EC50. X xxxxx xxxxxx xx používá veličina "xxxxxxx xxxxxxxxx" (XXX) xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx křivek xxxxxxxxxxx - odezva. Xxx xxxxxxxx xxxxxx XXX xxx xx Xxxxxxxxxxx univerzitě v Xxxxxxx xxxxxxx speciální xxxxxxxxxx software, xxxxx xxx obdržet zdarma.
1.11 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx (XXX ≥ 5 xxxx MPE ≥ 0,1) ukazuje, xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx potenciál. Xxxxx se k xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx koncentracích nižších xxx 10 μg/ml, xx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx také xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (100 (g/ml), bude xxx posouzení nebezpečnosti xxxx xxxxxxxxxxx schopnosti xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx informací. Xxx mohou xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxx, xxxx xxxxx x testování xxxx xxxxx v jiném xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx použití xxxxxx xxxxxx kůže xx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx fototoxicity 3T3 XXX in xxxxx (XXX < 5 xxxx XXX < 0,1) xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx použité xxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx by xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, negativní xxxxxxxx xxxxxxx, že xxxxx xxxx žádný fototoxický xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx vivo xx xx považovat za xxxxxxxxxxxxxxxx. V případech, xxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrační xxxxxxxxxx xxxxxxx reakce (EC50 + UV a XX50 - XX), xx interpretace xxx xxxxxx. Naproti xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx toxicita (+UV xxx -XX) x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xx xxxxx xxxxxxxxx tento xxxx xxx xxxxx xxxxx xx xx zcela xxxxxx x mělo xx xx uvažovat x xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx (například x xxxxxxxx modelu kůže xx vitro xxxx xxxxxx xxxx xx xxxx xxxx xx xxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:
Testovaná xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx údaje x xxxxx XXX, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx a čistota,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti, xxx xxxx k provedení xxxxx xxxxxxxx,
- stabilita x xxxxxxxxxxxxx, jsou-li xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxx rozpouštědla,
- rozpustnost xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx rozpouštědle,
- xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx (XXXX xxxx XXX).
Xxxxx:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx pasáže, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jež xx x xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X NRU xx vitro xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxx před xxxxxxxxxx x po xxx:
- xxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx (koncentrace XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xx x po xx).
Xxxxxxxx pokusu (b) - xxxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx, které xx použijí x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx UV/VIS xxxxxxx a xxx xxx,
- x případě xxxxxxx rozpustnosti testované xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zdůvodnění nejvyšší xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (pufrovaný xxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (c) - ozařování:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx světelného xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx propustnosti/absorpce použitého xxxxxx (filtrů),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x podrobnosti x xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx testovaného xxxxxxx,
- xxxxxxxxx UVA (x x W/cm2) xxx xxxx vzdálenosti,
- xxxx xxxxxxxx XX/XXX xxxxxx,
- xxxxx xxxxxx XXX (xxxxxxxxx x čas) x J/cm2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx uchovávaných x xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - test XXX:
- xxxxxxx xxxxx s XX,
- xxxx xxxxxxxx x XX,
- inkubační xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxxxxx XX (xxxxxxxxx xxxxxxx, doba xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx hustota XX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx-xx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro spektrofotometrii (xxxxxx), pokud xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx jednotlivých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, vyjádřená x procentech xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx koncentrace - xxxxxx (xxxxxxxxxxx testované xxxxx νs xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk) xxxxxxx xxxxxxxxxx experimenty +XXX x -UVA,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx: xxxxx možnosti xxxxxxx hodnot XX50 (+XXX) x XX50 (-XXX),
- xxxxxxxxx obou xxxxxx koncentrace - xxxxxx získaných xx xxxxxxx xxxxxxxxx UV/VIS xxxxxxx - výpočtem xxx fotoiritačního xxxxxxx (XXX) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (XXX),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx negativní xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX) ozářených x xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxx x směrodatná xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-UVA) a XXX xxxxx xxxxxxx xxx pozitivní kontrolu,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx: xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-UVA) x XXX, xxxxxxx x xxxxxxxxxx odchylky.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx X.41. byla xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x účinností xx 22.6.2001
Xxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Xx. nabyl xxxxxxxxx xxxx 1.1.1999.
Xx xxxxx tohoto xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx podchyceny xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x.:
208/2001 Sb., xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx XX x. 251/98 Xx., xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx x přípravků - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxx
x xxxxxxxxx xx 22.6.2001
Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Sb. xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 443/2004 Sb. x xxxxxxxxx xx 1.8.2004.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) xx n) xxxxxx x. 157/1998 Xx., o xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
2) Zákon č. 246/1992 Sb., xx ochranu xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Sb. x x. 30/1998 Xx.
3) Směrnice Xxxxxxxxxx xxx hospodářskou xxxxxxxxxx x rozvoj xxx zkoušení xxxxxxxxxx. Xxxxx 4 - xxxx na xxxxxx (XXXX Guidelines for Xxxxxxx xx Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).