EPIS® Právní systém | Plné znění

Právní předpis byl sestaven k datu 21.06.2001.

Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Vyhláška

§1 §2 §3

Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod

B.1. Akutní toxicita orální (per os)

B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky

B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity

B.2. Akutní toxicita (inhalační)

B.3. Akutní toxicita (dermální)

B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)

B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)

B.6. Senzibilizace kůže

B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)

B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)

B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)

B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro

B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo

B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech

B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií

B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae

B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae

B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro

B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro

B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro

B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster

B.21. Test transformace savčích buněk in vitro

B.22. Dominantní letální test u hlodavců

B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích

B.24. Spot test u myší

B.25. Přenosné translokace u myší

B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)

B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)

B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)

B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)

B.30. Testování chronické toxicity

B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci

B.32. Test karcinogenity

B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity

B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test

B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test

B.36. Toxikokinetika

B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice

B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice

B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo

B.40. Leptavé účinky na kůži

B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro

INFORMACE

VYHLÁŠKA

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx

xx dne 16. října 1998,

xxxxxx se stanoví xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx stanoví xxxxx §4 odst. 1 xxxx. x) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx přípravcích x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx zákonů:

§1

Tato xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx nebezpečných xxxxxxxxxx chemických xxxxx x chemických xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, toxických, xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxx xxx "xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přípravků").¹⁾

§2

(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v příloze této xxxxxxxx.

(2) Ke xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx, pokud jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxx citlivé, xxxxxx x reprodukovatelné xxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx²⁾ x metody xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx spolupráci x xxxxxx (OECD).³⁾

§3

Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx 1. ledna 1999.

Ministr:

XXXx. Xxxxx, XXx. x. r.

Příloha x xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.

Xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx

X. XXXXXXXXX XXXX

1. XXXXXXXX POJMY

1.1 XXXXXX XXXXXXXX

xxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxx určité doby (xxxxxxxx 14 xxx) xx podání xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2 XXXXXX XXXXXXXX

xx xxxxxxxxx termín popisující xxxxx příznaky toxicity xx aplikaci xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xx být xxxxxx, že po xxxxxxx podávané dávky xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx těžkých toxických xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx x xxxxx.

1.3 DÁVKA

xx množství xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Dávka xx vyjádřena xxxx xxxxxxxx (gramy xxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx jednotku hmotnosti xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx na kilogram xxxxxxx xxxxxxxxx), xxxx xxxx konstantní dietní xxxxxxxxxxx (xxxx na xxxxxx dílů xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx).

1.4 XXXXXXXXXXXXXX XXXXX

xx nejvyšší xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) související x xxxxxxx látkou.

1.5 XXXXXXXXX

xx všeobecný xxxxxx xxxxxxxxxx dávku, xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

1.6 XX₅₀ (STŘEDNÍ XXXXXX DÁVKA)

je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx způsobí xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx 50 % xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx XX₅₀ se xxxxx xxxx hmotnost xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).

1.7 XX₅₀ (STŘEDNÍ XXXXXX KONCENTRACE)

je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx doby xx xxxxxxxx x 50 % pokusných zvířat, xxxxxxxxxxxx po xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx LC₅₀ xx xxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xx.x^-1).

1.8 XXXXX

xx zkratka pro "xx xxxxxxxx adverse xxxxxx level" (hladinu xxx xxxxxxxxxxxx nepříznivého xxxxxx) a xx xx nejvyšší v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx x zjistitelným xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.9 XXXXXXXX XX XXXXXXXXX DÁVCE/SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX

xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se objeví x xxxxxxxxx xxxxxx x důsledku xxxxxxxxxxx xxxxxxx podávání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx dobu představující xxxxxx xxxx očekávané xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.10 XXXXXXXX XXXXXXXXXX DÁVKA (XXX - MAXIMUM XXXXXXXXX DOSE)

xx xxxxxxxx dávka, xxxxx x zvířat xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx podstatného xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx, který je xxxxxxxx.

1.11 XXXXXXXXXX XXXX

xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx po aplikaci xxxxxxxxx xxxxx.

1.12 XXXXXXXXXX XXX

je xxxxxxxx xxxx na xxx po aplikaci xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx oka.

1.13 XXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX)

xx xxxxxxxxxxxx vyvolaná xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.14 XXXXXXXXX XXXX

xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx tkáňového xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 3 xxxxx do 4 xxxxx.

1.15 XXXXXXXXXXXXXX

xx xxxxxxx absorpce, xxxxxxxxxx, metabolismu a xxxxxxx testovaných xxxxx.

1.16 ABSORPCE

označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) aplikovaná xxxxx xxxxxxxx xx xxxx.

1.17 EXKRECE

xxxxxxxx proces(y), kterým(i) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx z xxxx.

1.18 XXXXXXXXXX

označuje xxxxxx(x), kterým(i) xx xxxxxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx.

1.19 XXXXXXXXXXXX

označuje proces(y), xxxxxx(x) xx chemická xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

2. AKUTNÍ - XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX

Akutní xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx různých xxxxx xxxxxxxx (metody X.1 - X.5), xx xxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxxxx získán xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.

V xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx lze xxxxxx xxxxx postupy od xxxxxxxxx testu xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx XX₅₀. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx není xxxxxxx xxxx navržen, protože xxxxxx možné xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Pozornost xx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx zvířete, xxxxxxxxx xxxxxx pevné xxxxx (xxxxxx X.1 xxx) x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx B.1 xxxx). Xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx druhu xxxx studie xx xxxxxx xxxxx doplnit xxxxxx vyvozené x xxxxx studie. V xxxxx případě xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx být xxxxxxx xxxxxxx počtu zvířat.

Xxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx aplikací (xxxxxx X.7, B.8 x X.9) se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx vznikající x xxxxxxxx opakované xxxxxxxx. Důležité je xxxxxxxx pozorování xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx co xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx měly pomoci xxxxxxx xxxxxx orgány xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx dlouhodobých xxxxxx xx vyžaduje xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.26 - X.30 x X.33).

3. XXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxxxx xx vztahuje x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x množství xxxx xxxxxxxxx genetického xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxx. Tyto xxxxx ("xxxxxx") xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx gen nebo xxxxxxxx genů, blok xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx projevovat xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx aktivita xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx (bodové) xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxx X.13/14) anebo xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v savčích xxxxxxx (xxxxxx B.10).

Xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xx vivo, xxxx. xxxxxxxxxxxx test (xxxxxx B.12) xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx X.11). Je xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx in xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.

Pro xxxxx xxxxxxxx xx velkém xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Tyto studie xxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx základním xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx rozšíření xxxxxx xx vivo.

Xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx X.15 xx X.25 xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx x xx xxxxx, xxx xxxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx účinků. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x bodových xxxxxxxx x jiných xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx používané x základním xxxxxxx xxxxx.

Xxxxxx platí, xx další xxxxxxxxx xxxxxx mutagenity xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované látky.

Xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látky, xxxxxxxx xxxxxxxxxx bakteriálních a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, metabolického xxxxxxx xxxxx, výsledků xxxxxxx xxxxx toxicity x xxxxxxx způsobů xxxxxxx xxxxx.

Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx dědičných xxxxxx x xxxxx xxxx k dispozici xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků x xxxxx savčím organizmu, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx, xxxx. specifický locus xxxx u xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx zárodečné xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. xxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx (xxxxxx X.25). Těchto xxxxx lze xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx rizika látky xxx xxxxxxx. Vzhledem xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx a velmi xxxxxxx xxxxx potřebných xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx test, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx postupuje podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx genetické xxxxxxxxxxx.

4. XXXXXXXXXXXXX

Chemické látky xxxxx xxx charakterizovány xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx působení.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx x genotoxickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xx xxxxxx mutagenity/genotoxicity. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxxx xxxx chronické xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx X.7, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx. hyperplazie x určitých xxxxxxx, xxxxx xx mohly xxx také významné. Xxxx studie x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx identifikovat xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx vyžadují xxxxx, podrobnější xxxxxxxx xxxxxx aspektu xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.32) nebo xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx toxicity/karcinogenity (xxxxxx X.33).

X xxxxxxxxx xxxx rovněž testy xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx buněčných xxxxxx, u kterých xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx - xx vivo (xxxxxx X.21). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx.

5. XXXXXXXXXXX TOXICITA

Reprodukční xxxxxxxx xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx reprodukčních xxxxxx xxxx schopností xxxxx x xxxxx (xxxx xx xxxxxxxx) xxxx podle xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x účinky x xxxxxxx xxxxxxx.

Testovací xxxxxx (metoda X.31) xxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx hlavně x xxxxxxx podáváním. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx způsoby xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. X takových xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx metodu vhodně xxxxxxx.

Pokud xx xxxxxxxxx třígenerační reprodukční xxxx, je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx reprodukční xxxx (xxxxxx B.35) xxxxxxxx xxx, aby xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.

6. XXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxx funkčních xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Předběžné xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx neurotoxického účinku. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x neurotoxickým xxxxxxxxxxx, xxxxx vyžadují xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x úvahu specifické xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx být xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Bylo xxxxxxxxx xxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxx sloučeniny fosforu xxxxxxxxx pozdní xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx X.37 x X.38 po xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.

7. XXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, například xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx B.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinků. Xxxxxx by měla xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx zkoumání tohoto xxxxxxx.

8. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pomáhají při xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x toxicitě, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx aspekty xxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx a výsledky xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx studií xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx, xx xxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx v ojedinělých xxxxxxxxx bude nezbytná xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx ukázat xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.36).

Informace x xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx poskytnout xxxxx, umožňující xxxxx xxxxxxxxxxxxxx absorpce při xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx. Přispět xxxxx xxxx xxxxxxxxx x toxikokinetických xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x toxikokinetických studií.

9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x její relevantní xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx studie.

Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro výběr xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx studie x xxx manipulaci x xxxxxx x xxxx skladování.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx metody xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx) x dávkovacím xxxxx x biologickém materiálu xx měl xxxxxxxxxx xxxxxxxx studie.

Xxxxxxx xxxxxxxxx týkající se xxxxxxxxxxxx, fyzikálně-chemických vlastností, xxxxxxx x chování xxxxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx o xxxxx.

10. XXXX X XXXXXXX

Xxx xxxxxxxxxxxxx testy xx xxxxxx kontrola xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, x správná péče x zvířata xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

10.1 XXXXXXXX XXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Pro xxxxxxx, myši a xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 22 ^xX ± 3 ^xX xxx relativní xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx králíky xx xxx xxxxxxx 20 ^xX ± 3 ^xX při xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %.

Xxxxxxx experimentální techniky xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx xxxx případy xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x popisu xxxxxxxxx xxxxxx. Při xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx, zaznamenávat xx x xxxxx xx x závěrečné xxxxxx x xxxxxxx pokusu.

Xxxxxxxxx má xxx xxxxx xx střídáním xxxxxx a tmy xx xxxxxxxx hodinách. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx x uvést xx zprávě o xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, mohou být xxxxxxx xxxxxxx jednotlivě xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx jedinců xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxx 5 zvířat x jedné xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx údaje x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x jedné xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx doby xxxxxxxxxx.

10.2 XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx všem xxxxxxxxxx výživy pro xxxxxxxxx použitý xxxxxxxxx xxxx. Podávají-li xx xxxxxxxx studované xxxxx x xxxxxxx, může xx xxxxxxxx hodnota xxxxxx xxxxxxxxx působením xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx takové xxxxxx xx nutno vzít x xxxxx při xxxxxxxxxxxx výsledků. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x pitné xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx.

Xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, ve kterých xx se tento xxxx xxxxxxxx.

11. XXXXXXX ZVÍŘAT

Xxx xxxxxxxxxxx testovacích xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ochraně xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x stresu xxxxxx xxx xxxxxxxxx např. xxxxxxxx metody xxxxx xxxxx (X.1.xxx) nebo xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (X.1.xxxx). Xxxxxx s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x vyžaduje menší xxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx třídy xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x 70 % zvířat méně xxx metoda X.1.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími příznaky xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxx testů, xxxxx v xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (metody X.1, X.2 a X.3), xxx xxxx x xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx X.11 a X.12), xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx možné xxxx xxxxxxxxx nebo xxx omezit xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, je-li xx xxxxxxxxxx vědecky zdůvodnitelné. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx založeno xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, na xxxxxxxxxx xxxxxx xxx provedených xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx in vitro. Xxxxxxxxx, byla-li x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x dávkou xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx (xxxxxx X.3) a xxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx, další xxxxxxxxx xxxxx dráždivosti (xxxxxx X.4) může xxx xxxxxxxx; látky, xxxxx prokazatelně vyvolaly xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx při xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx B.4), nesmějí xxx dále xxxxxxxxx xx xxxxxxxx oka.

Xx nutno xxxxxxxx xxxxxxx x ověřovat xxxxxxxxxxxx postupy, které xxxxx poskytovat stejnou xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx menšího xxxxx zvířat, budou xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x označování xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x úvahu xxxxx tam, xxx xx xx xxxxx.

12. XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX

Při hodnocení x xxxxxxxxxxxx pokusů xx xxxxxxxxx x xxxxx in xxxxx xx nutno xxx xx zřeteli, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxx v xxxxxxx xxxx; xxxxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx, xxxxx jsou x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x ověření xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx člověka xx xxxxxxx vlastností xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxx výsledky xxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxxxx na posuzování xxxxxx nových i xxxxxxxxxxx látek.

Xxxx X - Všeobecný xxxx byl xxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx xx 22.6.2001

X.1. XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX)

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx podává x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx každé skupině xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxxx orientačního testu. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x uhynutí. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx. Xxxx metoda xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxx.

Zvířata se xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx způsobem utratit. Xxxxxxxxx látky xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávkách x xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Příprava

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx chovu x xxxxxx, v jakých xxxxx během experimentu. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx jednotlivých experimentálních xxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx, připraví xx xxxxxx nebo suspenze xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx vehikulu. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx další xxxxxxx xxxxxx v xxxxxx vhodných xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx nebo xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx během něho xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti; xxxxxxxx jsou xxxxx xxxxxxx, xxxxx je xxxxx podávat xx 20 xx.xx^-1. Variabilita xxxxxx xxxxx podávané x testech by xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx úpravou xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx koncentraci xxxxx xx xxxxxxxx xxx, xxx bylo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx xxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx x obou pohlaví xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx, musí xxx nullipary x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx x obou xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, je třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Poznámka: Xxxxxxxxx-xx xx v akutních xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Dávky xx xxxxx pečlivě xxxxxx x xx třeba xxxxxxxx, xxx nebyla xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dávky. V xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx vyvarovat xxxxxx xxxxxxxxx dávek xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Volba xxxxx

Má xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, nejméně xxx, x xxxx xxx xxxxxx odstupňovány xxx, xxx xxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx, x xxxxx xx xxxxx, musí xxxxxxx xxxxxxxxx LD₅₀ x xxxxxxxxxxx spolehlivostí.

1.2.2.4 Xxxxxxx test

S xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx skupinách 5 xxxxx x 5 xxxxx s xxxxxxxx výše xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx způsobí xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx studie.

1.2.2.5 Xxxx pozorování

Doba xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx rigorózně. Xxxx by xxx xxxxxx xxxxx obrazu xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx xx projevy xxxxxx xxxxxx a xxxxxx, a xxxx xx xxxxxxx, zvláště xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Před podáním xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxx hladová. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. U xxxxxx x xxxxx rychlostí xxxxxxx xxxxxx postačí xxxxxx hladovění; přístup x xxxxx xxxx xxxx omezen. V xxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx x jedné dávce. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, lze xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Xx podání xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ještě 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx tohoto xxxxxx - xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx poskytnout.

Xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx systematicky, xxx xxxxx zvíře xx xxxxx samostatné xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxx pozorování. Xx xxxxxxxx sledovat x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.

Xxxxxxx jednou během xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx klinická xxxxxxxxx. Xxxx pozorování se xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx ztrát zvířat xxx studii, např. xxxxx xxxx zmrazení xxxxxxxxx xxxxxx, a xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, srsti, xxx, sliznic, dýchání x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx tremoru, křečovým xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, spánku x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxx až xx konce xxxxxx, xx pitvají. Všechny xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x druhého xxxxxxx

Xx dokončení xxxxxx na xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx o xxxx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx x cílem xxxxxxx, xxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx nejsou výrazně xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat. Pokud xx k xxxxxxxxx xxxxxxxxxx informace, xx xxxxxxx testovaného pohlaví xxxx výrazně citlivější, xxxxxxxxx xx zvířatech xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx vynechat.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx počátku xxxxxx, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx s xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivých zvířat xx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a x době uhynutí. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx stanovit x xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, která xxxx humánním xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx stres a xxxxxx xxxxxxxx podanou xxxxxx, xx zaznamenávají xxxx xxxxxxx vyvolané xxxxx látkou. LD₅₀ xx xxxxxxx uznávanou xxxxxxx. Vyhodnocení xxxxx xx xxxx zahrnovat xxxx vztah, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx změn xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx zvířat,

- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx uhynulých xxxxxx, počet xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),

- doba xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxx humánní xxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,

- hodnota XX₅₀ xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx byl xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x to pro 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx metody výpočtu),

- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx pro XX₅₀, xxxxx je lze xxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx a xxxx xxxxxxxx (xxxxx je xxxxxxxxx danou xxxxxxx xxxxx),

- pitevní xxxxxx,

- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx testů xx druhém xxxxxxx,

- xxxxxx výsledků (xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx věnovat účinku, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx testu xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX₅₀),

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.1. xxx XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX OS) - XXXXXX FIXNÍ DÁVKY

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody

Xxxx akutní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxx následovat během xxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx jedné xxxxx xxxxxxxxx látky.

Xxxxxx x xxxxx xxxxxx se xxxxxxx xx dvou xxxxxxx.

X xxxxxxxxx orientační xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx sondou x xxxxxx téhož xxxxxxx, xxxx jedno xxxxx na xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx o vztahu xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxx xxxxx etapě xxxxxxxxx xxx xxx pěti xxxxxx.

X xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx orálně xxxxxx xxxxxxxx pěti xxxxx x xxxx samic x jedné x xxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, a xx jako dávka, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx "xxxxxxx toxicitu" (viz xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), xxx xx xxxxxxx.

Xx xxxxxx xx xxxxxxxx účinky. Xxxxxxxx vybraná xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx toxicitu, ale xxxxxx mortalitu, xxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx úrovni xxxxx xxxx xxxxxxxxxx zřejmá xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx utracení, xxxxx se xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxxxx xxxxx" (xxx xxxx B - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), xx. xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx úrovní dávky, xxxxxx xx možno xxxxx, aniž xx xxxxx k xxxxx (xxxxxx xxxxxxx humánního xxxxxxxx).

Zvířata se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávkách x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx, xx vyvolávají xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx svých xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Dává xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx známy xxxxxx xxxxx xxxx.

Xx třeba xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxx by x xxxx xxxxxxx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty.

Xxxxxxx 5 dní xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx studie x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx každého x xxxx pohlaví.

1.2.1.2 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx xx roztok xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxx první uvážit xxxxxxx vodného xxxxxxx, xxxxx volbou xx xxxxxx v rostlinném xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxx nebo xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx něho xxxxxx xxxxxxxxxx toxikologické vlastnosti. X hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 ml.kg^-1 xxxxxxx hmotnosti; xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxx až 20 xx.xx^-1. Variabilita xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx; xxxxxxx x xxxxx vodě xxxx xxxxxx. X xxx pokusu xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx orálně x jediné xxxxx. Xxxx-xx xxxxx xxxxx xxxxx najednou, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xx xxxxxxx množstvích xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Po xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - podle xxxxx tohoto xxxxxx - xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx poskytnout.

1.2.2 Xxxxx postupu

1.2.2.1 Orientační xxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx dávek xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se používají xxxxxx, pokud xxxxxx x dispozici xxxxx, xx xxxx samci xxxxxxxxxxx pohlavím. Dávky xx xxxxxxxx sekvenčně, xxxx xx xxxxxxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pozorují x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx sedm dní; xxxxx přetrvávají projevy xxxxx xxxxxx xxxxx xxx, xxxxx xx xxxx pozorovat xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx. Posuzují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 a 2000 xx.xx^-1. Jestliže zvolená xxxxxxx dávka xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxx nejbližší xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx nutné xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx dávek. Xxxxx xxxxxx by měl xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx(xxx) xxxxx, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx otravy, x o nejmenší xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Je xxxxx xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx použít xxxx xxxxx xxxxx 500 mg.kg^-1. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, vyšetřuje xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx 2000 xx.xx^-1, xx xxxxxxxxxx studie skončena x hlavní xxxxxx xx xxxxx provést xx této xxxxxx xxxxx. Jestliže xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxx. 500 xx.xx^-1) zjištěny těžké xxxxxx, vyžadující xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx dalšímu xxxxxxx xxxxxxxxx nižší xxxxx (xxxx. 50 mg.kg^-1). Xxxxxxxx xxxx zvíře xxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx, že xx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx 5 xxxxxx.

1.2.2.2 Hlavní xxxxxx

Xxx každou xxxxxxxxxxxx dávkovou xxxxxxx xx xx mělo xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx a xxxxxx xx xxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx dávek pro xxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx, xxxxx xxxx užita x testu, má xxx xxxxxxx x xxxxx ze 4 xxxxxxx úrovní xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zřejmou xxxxxxxx, xxxxx nikoliv xxxxxxxxx (xxxxxx utracení x xxxxxxxxx xxxxxx); xxxxxxx uhynutí xxxxxx xxxxxxxx, ale xxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx dávka vyvolá xxxxxxx toxicitu, ale xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxx podání xxxxxxx xxxxx nevyvolá zřejmou xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx dávek. Xxxxxxx xx však xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látky, xxxx xx být xxxxx znovu testována xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx nutné xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxxx po xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xx podání xxxxx xx xxxxxxxxxx provádějí x zaznamenávají systematicky. Xxx xxxxx zvíře xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx aplikované xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zvířat xx aplikaci.

Doba xxxxxxxxxx xx xxxx xxx nejméně 14 xxx. Xxxxx xx xxxx stanovit rigorózně. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje xxxxxx x xxxxxx xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx, xxx xx projevy xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x doba xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx provádět xxxxxxx xxxxxxx první xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx jedenkrát xx den xxxxx xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx známky bolesti xxxx výrazné xxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx. Častější xxxxxxxxxx xxxx prováděna xxxxx xxxxxxxx prvních xxx po xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, že byla xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx se xxxxxxxx na změny xxxx, srsti, očí, xxxxxxx, dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Zvláštní pozornost xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx další 3 xxx a xxxxx xxxxxx týdně. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, se xxxxx x pitvají. Xxxxxxx makroskopické patologické xxxxx se xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx xx indikováno, xxxxxxxx xx tkáně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.

X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx druhé xxxx výjimečně xxxxx xxxxxxx dávky.

V xxxxxxx, xx látka xxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxx 5 xx.xx^-1 (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx naznačuje xxxxxxxxx xxx této xxxxx), xx třeba xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx x orientační x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx do xxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxx úroveň xxxxx. X xx xxxx xxx patrný xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxx s příznaky xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxxxxx účinků; pro xxxxxx studii, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx účinek, xxxxx xxx xxxxxxx testované xxxxx; časový průběh xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxx, xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vzhledem xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx pokusu xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx informace pro xxxxxxxxxx i hlavní xxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, původ, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx se použije) x koncentrace,

- xxxxxxxxx výsledky všech xxxxxxxxxxxxx úrovní xxxxx,

- xx xxxxx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx úrovní xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; změny xxxxxxx xxxxxxxxx; případně xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx utracených xxxxx xxxxx; xxxxx zvířat x příznaky xxxxxxxx; xxxxxx, xxxxxx a xxxxxx účinků),

- xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx příznaků x xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx, xxxx úhynu xx xxxxxx látky, xxxxxx a kritéria xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,

- pitevní xxxxxx,

- všechny histopatologické xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, včetně příznaků xxxxxx toxicity x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx.

3.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx

Xxxxx	Výsledky	Xxxxxxxxxxxx
5 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Méně xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx, xxx zřejmá toxicita 100 % přežití; xxxx xxxxxx xxxxxxxx	Xxxxx, xxxxx jsou xxxxx jedovaté Látky, xxxxx jsou xxxxxxxx Xxx výsledky při 50 xx.xx^-1
50 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Xxxx xxx 100 % přežití	Xxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx nebo velmi xxxxxxxx. Xxx výsledky xxx 5 mg.kg^-1
	100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx	Látky, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx Xxx výsledky x 500 xx.xx^-1
500 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Xxxx xxx 100 % xxxxxxx	Xxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx. Viz xxxxxxxx x 50 xx.xx^-1
	100 % xxxxxxx, xxx zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx	Xxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxx za xxxxx xxx významné xxxxxx xxxxxxxx Xxx xxxxxxxx u 2000 xx.xx^-1
2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx	Méně xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x xxxx xxx xxxxxx toxicity	Xxx xxxxxxxx x 500 mg.kg^-1 Látky, xxxxx nemají xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx

X.1. tris XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX XXXXXXXXX XXXXX XXXXXX XXXXXXXX

1. METODA

1.1 Xxxx

Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx poskytuje xxxxxxxxx jak xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xxxxx klasifikace xxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx aby bylo xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx základě xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx popsaný xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx buď xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxxx dávek xx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx další xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxx xxxxx stanovené xxxxxxxxx dávky x xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx XX₅₀. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, ve xxxxxx xx očekává xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx je i x této xxxxxx xxxxxxx kritériem xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x sekvenčnímu xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxx než xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx B.1. Hlavní výhodou xxxx metody xx xxxxx spotřeba xxxxxx xxx u xxxxxx xxxxxx toxicity (xxxxxx)(B.1) x xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx fixní xxxxx (B.1 bis).

1.2 Princip xxxxxxxxx metody

Látka se xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat v xxxxx xx stanovených xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxx zvířata xxxxxxxx pohlaví. Xxxx xxxxx provádět xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx rozhodne x xxxxxx xxxxx, x.x.

- není zapotřebí xxxxx další xxxxxxxxx;

- xxxxx xxxx bude xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx s vyšší xxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx tak, xxx byla možná xxxxxxxxxxxx jednotlivých zvířat, x chována xx xxxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx mohla xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx ve xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dávky, xxx xxxxx xxxxxx x xxxxx kleci xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jediné dávce xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xx třeba, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxx nosiči. Xxxxxxxxxx xx nejprve xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx použití roztoku/emulze x jedlém xxxxxxxxxx xxxxx (např. xxxxxxxxxx) x xxx xxxxxxx x jiných nosičích. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx není xxxxx, xxxx xxx stanovena xxxxx před xxxxxx.

Xxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx xxx potravy (xxxx. xxxxxxx xxxx xxx x myši 3 - 4 xxxxxx); xxxxxxx x xxxx se xxxxxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Samice musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx být březí.

Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

1.3.2.2 Xxxxx x pohlaví

Pro xxxxx xxxx se xxxxxxxxx xxx zvířata xxxxxxx pohlaví. V xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.3.2.3 Xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx úroveň je xxxxxxx ze xxx xxxxxxx xxxxxx, xxx. 25, 200 x 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx, xxx x největší pravděpodobností xxxxxxxxx uhynutí xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jimž xxxx látka podána. X závislosti xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 1.

Xxx xxxxx xxxxxxx x výchozí xxxxx xx třeba xxxxxx veškeré xxxxxxxx xxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxx naznačují, xx xxxxxxxx je xxxxxxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx), xxx xx xxxxxxx xxxxxxx test. Xxx nejsou xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xx - x ohledem xx pokusná zvířata - xxxxxx výchozí xxxxx 200 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx zpřesnit xxxxxxxx xxxxxxxxx, než xxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx úrovněmi ve xxxx 25, 200 x 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxx případech xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx pevných xxxxxxx xx výši 5, 50 nebo 500 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti.

Nemají xx xxxxxxxxx dávky, x xxxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx dráždícími xxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx x závažnosti xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx při xxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx, xx zvířata xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx xx provádí xx xxxxx zvířatech xxxxxxx pohlaví. Pokud xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x podáním xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxxx 200 xx.xx^-1 (xxxx 500 mg.kg^-1) xxxxxxx hmotnosti.

1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx dobu 14 xxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx pozorování x xxxxxxx utracena x xxxxxx xxxxxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx nemělo být xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx jde-li x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx pozorování xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.3.3 Xxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxx xxxxxxxxx jsou zvířata xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx bez xxxxxxx xx xxxx dalších 3 - 4 xxxxx. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxx xxx - x xxxxxxxxxx xx délce xxxx xxxx - nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x vodu.

Maximální objem xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx velikosti xxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx přesáhnout 1 xx xx 100 x xxxxxxx hmotnosti, x případě vodných xxxxxxx lze podat x 2 ml xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Rozdíly x podávaném objemu xx třeba xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx byl xxxxxxx xxx objem na xxxxx xxxxxxxx dávky. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 xxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx v Xxxxxxx 1.

1.3.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxx pozorování xx xxxxxxx xxxxxxx za xxxxx xxx (xxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx, xxxxx xx vyžaduje xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx, x xxxx xxxxxxx jednou xxxxx. Xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx stresu, xx xxxxx humánně xxxxxxx: xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx zvířata uhynulá.

Ať xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x humánních xxxxxx xxxx byla xxxxxxxx mrtvá, xxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx nejpřesněji. Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, doku xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xx kůži a xxxxx, na xxxxx x xxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx systému, xxxxxxxxx aktivitě x xxxxxxx. Xxxxxxxxx je xxxxx věnovat xxxxxxx xxxxx, křečí, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x kómatu.

Veškerá xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxx zvážena xxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx látky a xxx xxxxxxx jednou xxxxx. Xxxxxxxx se x zaznamenávají změny xxxxxxxxx. Na xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx zvážena xxxx xxx, xxx budou xxxxxxx xxxxxxxx.

1.3.3.3 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii, xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx pitva. Všechny xxxxxxxxxxxxx patologické změny xxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx zvíře xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx informací xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zvířat přežívajících 24 x xxxx xxxxx.

2. XXXX X XXXXXX ÚDAJŮ

K xxxxxxxxx xxxx být xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Navíc jsou xxxxxxx údaje xxxxxxx xx tabulkové xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků, a xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx klasifikaci xx xxxxxxx v Xxxxxxx 2.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

Zpráva x xxxxxxx pokusu

Zpráva x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:

Xxxxxxx xxxxxxx:

- živočišný xxxx/xxxx;

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx-xx xxxx;

- počet, xxxxx a pohlaví xxxxxx;

- zdroj, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx atd.;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxx xxx xxxx;

- xxxxxxxx xxxxx x způsobu xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a kvalitě xxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);

- xxxxxxxxxx xxxxxx počáteční dávky.

Výsledky:

- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx (tzn. xxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx);

- xxxxxx x xxxxxx průběh xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxxxx nálezy x xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy x xxxxxxx zvířete, xxxx-xx x xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx:

Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx:

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx s metodou XXXX XX 423.

DODATEK 1

XXXXXX XXXXXXXXX

1. Jak xxxx xxxxxxx v xxxx 1.4.2.3, výchozí xxxxx xx xxxx xxx ta xx xxx xxxxx stanovených xxxxxxxxx úrovní, která xxxxxxxxxxxxx způsobí xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx výběr xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx x jiných xxxxx xxxxxxxx a

- xxxxxxxxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxxx.

2. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx dodatku stanovují xxxxxx xxx každou xxxxxxx dávku. X xxxxxxxxxx na počtu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx postupuje xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx.

3. Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 25 xxxx 200 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, obvykle xx xxx xxxx netestuje. Xxxxx však přitom xxxxxx x ostatních 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx ověřit xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxx.

4. Xxxxx xx xxxxx 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx xxxxx jedno xxxxx každého xxxxxxx, xx se xxxxxxxxxxxx, xx hodnota LD₅₀ xxxxxxxx dávku 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx. Xxxxxxx je to xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, je třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx zvířat xxxxx xxx důvodem xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx XX₅₀ xx xxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, nebo mohou xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxx xxxxx.

5. Xxxxxx umožňuje xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx 2). Xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nebo xxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx testování xxxxx xxxxxxxx 1.

Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 25 xx.xx^-1 xxxxxxx hmotnosti

V rámečcích xx xxxxx xxxxx, xxxxx zvířat x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx).

Xxx xxxxxxx je xxxxx uhynulých nebo xxxxxxxxxx zvířat (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx způsobu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v Xxxxxxx 2.

Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx doplňkovou xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx šedém xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx je udána xxxxx, počet zvířat x xxxxxxx (1 - xxxxxxx zvolené xxxx první, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx druhé).

Pod rámečky xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat xx x testování pokračuje xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx rámečku.

Varianta 1 - Xxxxxxxx testu: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx základě konečných xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx šedém rámečku xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.

Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx: Klasifikace xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx rámečku.

Postup testování x výchozí xxxxxx 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, počet xxxxxx x xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako první, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).

Xxx xxxxxxx xx počet xxxxxxxxx nebo utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx xxxxx uhynulých xxxxxx xx x testování xxxxxxxxx xx směru xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx rámečku.

Varianta 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.

Xxxxxxxx 2 - Pokračování xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx rámečku.

DODATEK 2

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1

X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxx, 2 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx).

Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3).

Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx "XXXXX XXXXX TESTOVÁNÍ" v xxxxxxxxxx xxxxxx dodatku xxxxxxxx xxxxxxx hodnoty xxx klasifikaci. Po xxxxxxxxx xxxxx varianty 1 xx příslušná xxxxx sleduje, xxxxx xx nedosáhne příslušného xxxxxxx. (Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx příslušný xxxxxx klasifikace. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx XX50 je větší xxx hodnota x xxxxxxxxxx xxxxxxx vlevo.)

(a) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx dávkou 25 xx/xx xxxxxxx hmotnosti

(b) Xxxxxxxxx postup s xxxxxxx dávkou 200 xx/xx xxxxxxx hmotnosti

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx založených na xxxxxxxxx xxxxxxxx 1

x) Xxxxxxx dávka 25 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx

&xxxx;

x) Xxxxxxx xxxxx 200 xx/xx tělesné xxxxxxxxx

x) Xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx hmotnosti

X.2. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Úvod

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx velikosti xxxxxx, tenzi xxx, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x výbušnosti (jsou-li xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx

1.2 Xxxxxxx metody

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx určenou xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x xx xxxxx koncentraci x xxxxx xxxxxxx. Potom xx xxxxxxx pozorují x zjišťují xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x xx, xxxxx xxxxxxx do konce xxxxxx, xx xxxxxxx.

Xxxxxxx se závažnými x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx třeba humánním xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x takovým xxxxxxxx, x kterých xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxx

1.3.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x krmení, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx experimentálních xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx simulované xxxxxxxx.

Pevné testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx částice xxxxxxxxx velikosti. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, aby x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx; x xxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx kontrolní xxxxxxx x vehikulem. Xxxxx xx užije xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx o xxxx známo, xx xxxxxx toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.3.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxx xx přednost xxxxxxxx, pokud nejsou xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. Na začátku xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx).

1.3.2.2 Počet x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx 10 xxxxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx). Samice musí xxx xxxxxxxxx a xxxxx být xxxxx.

Xxxxxxxx: Používají-li xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, než jsou xxxxxxxx, xxxx by xx zvážit xxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx je třeba xxxxxxx volit x xx třeba xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx dávky. X těchto xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx podávání xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.3.2.3 Xxxxxxxxx koncentrace

Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, x mají xxx xxxxxx odstupňovány xxx, xxx xxx x testovacích xxxxxx xxxxxxxxx rozsah xxxxxxxxx xxxxxx x mortality. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkou x xxxxxxxxxx x, xxxxx je to xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX₅₀ s xxxxxxxxxxx spolehlivostí.

1.3.2.4 Limitní xxxx

Nedojde-li xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx 5 xxxxx a 5 xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx 20 xx.x^-1 xxxx xxxxx xx xxxxxxxx tekuté xxxx xxxxx látky x koncentraci 5 xx.x^-1 (xxxx - x případech, kdy xxxx koncentraci xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx fyzikálních xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sledované xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx - xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dosažitelné xxxxxxxxxxx) xxxxx 14 xxx x xxxxx xxxxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxx, považují xx xxxxx xxxxxx za xxxxxxxx.

1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxx expozice xx xxx 4 xxxxxx.

1.3.2.6 Xxxxxxxx

Xxx xxxxxx xx zvířaty xx xxxxx použít xxxxxxxxx zařízení, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx xxxxxx, aby xxx xxxxxxx přiměřený xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx třeba xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx co xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x aby xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx byla xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx x zásadě celkový xxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Je xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

1.3.2.7 Xxxx pozorování

Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx záviset xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx jejich vzniku x xx xxxxxx xxxx zotavení. Xxxx xxxxxxxxxx je možno xxxxx potřeby xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx je xxxx, xxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx otravy, stejně xxxx xxxx do xxxxxxx, xxxxxxx tam, xxx je xxxxxx xxxxxxxx ke zpožděné xxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxx postupu

Xxxxxxx xx bezprostředně xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xx xxxx 4 hodin xx xxxxxxxx rovnováhy xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx. Teplota xxxxx pokusu xx xxx 22 ^xX ± 3 ^o X. Relativní xxxxxxx xx být xxxxxxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx není xxxxx (xxxx. experimenty x xxxxxxxx). Udržování xxxxx negativního xxxxx xxxxxx komory (≤ 5 mm vodního xxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx nepodává potrava xxx xxxx.

Používají xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry. Xxxxxx musí xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx bude xxxxxxxx xx nejrychleji. Xxxxxxxxxx x xxxxxx boxu xx zajišťovat homogenní xxxxxxxxxx testované atmosféry x xxxxxx.

Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:

(x) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx),

(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx v xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx vyžadovat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Během xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xxxx úrovně xxxxxxxx xxxx xxxxx dosáhnout, xx připouští xxxxx xxxxxx kolísání. Xx xxxxx xxxx trvání xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx xxx stabilní, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx),

(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx i xx jejím skončení xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx systematicky. Xxxxx xxxxx má xxxx xxxxxxxxxxxx protokol. Xxxxx xxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx často. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pracovní xxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx studii, xxxx. xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxx xxxxxxx či xxxxxxxxx xxxxxxx nebo umírajících xxxxxx.

Pozorování xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce autonomní x centrální nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx týdně x x okamžiku xxxxxxx.

Zvířata, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x ta, která xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx zřetelem xx všem xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x odeberou xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.

2. ÚDAJE

Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity, popis xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Změny xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx a zaznamenat, xxxxx zvířata xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx utracena xxxxxxxx ke xxxxxx xxxx x bolestem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. LC₅₀ xx xxxxxxx uznávanou xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx - pokud xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx zvířete xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, změn xxxxxxx hmotnosti, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x průběhu pokusu xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx informace:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx, xxx.,

- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx umístění zvířat x expozičním xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, xxxxxxxx vzduchu, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx o xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx variability (např. xxxxxxxxxxx odchylkou). Mají xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx:

x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx x inhalačním xxxxxxxx;

x) teplota x xxxxxxx xxxxxxx;

c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxx xx inhalačního xxxxxxxx, dělené xxxxxxx xxxxxxx);

Pozn.: při xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x roztoku (xxxx. xx xxxx) je xxxxx xxxxxx nejen xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx, xxxxx xx xx možné, koncentraci xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx.

x) xxxxxx xxxxxxxx, pokud bylo xxxxx;

e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v dýchací xxxx;

x) hmotnostní xxxxxx aerodynamického xxxxxxx (XXXX) a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odchylka (GSD);

x) doba xx xxxxxxxx xxxxxxxxx;

x) xxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxx zvířat, která x xxxxxx uhynula xxxx xxxx humánně xxxxxxxx; xxxxx zvířat x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx);

- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x kritéria xxx xxxxxxx utracení xxxxxx;

- všechna xxxxxxxxxx;

- xxxxxxx XX₅₀ xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxx pozorování (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx);

- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pro XX₅₀ (xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx);

- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx dávce (xxxxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx stanovení);

- xxxxxxx nálezy;

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat x humánních xxxxxx xxxxx testu xx xxxxxxxxxx xxxxxxx LC₅₀);

- interpretace výsledků.

B.3. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx uhynutí. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x zvířata, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.

Xxxxxxx se závažnými x xxxxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxx x xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x takovým xxxxxxxx, x kterých xx známo, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx xxxxxxxxxx vlastností.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x pokusných xxxxxxx x podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx zvířat xx zádech xxxxxxx xxxx oholí. Xxx xxxxxxxx nebo holení xxxxx xx třeba xxxx na xx, xxx se xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx) xxxx, xxx by xxxxx xxxxxx xxxx propustnost. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Při xxxxxxxx x pevnými xxxxxxx, xxxxxxxx připravenými x práškové xxxxx, xx xxxxx látku xxxxxxxxxx navlhčit xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx byl dobrý xxxxxxx x kůží. Xxx xxxxxxx vehikula xx xxxxx xxxx x úvahu xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx vehikula xx xx měl xxxxx xxx, v jaké xxxxx xx může xxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxx, x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx kůží. Testované xxxxxxxx se zpravidla xxxxxxxx neředěné.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx králíků. Xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xx xxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % střední xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx dávek použít xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Používá-li xx xxxxx, xxxx xxx nullipary x xxxxx být xxxxx. Xxxxx je x xxxxxxxxx informace, že xxxxx z xxxx xxxxxxx xx výrazně xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Používají-li xx x akutních xxxxxxx xxxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxx, než xxxx xxxxxxxx, mělo xx xx zvážit xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxx x je xxxxx zajistit, xxx xx nepřekročily xxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx třeba vyhnout xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx tři, x mají xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x mortality. Xxx xxxxxxxxxxx x úrovních xxxxx xx xxxxx xxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxx xxxxx musí xxxxxx xx znázornění xxxxxx mezi dávkou x účinkem, x xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX₅₀ x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Lze provést xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx nejméně 2000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx s xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx látka xxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx úplnou xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx pozorování

Xxxx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx ji však xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx pozorování xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Rozhodující xx doba, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a vymizí x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx tam, xxx xx patrná xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3 Popis xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx rovnoměrně xx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx 10 % celkového xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx; xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx látka xx po xxxxxxxxx xxxx 24 hodin xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxxx plochu xx xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx překrýt, aby xx mulový xxxxx x xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x xxx xx zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx však nelze xxxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx, pokud možno xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx způsobem xx xxxxxxx xxxxxxxx pokožky.

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx zvíře xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx se zvířata xxxxxxxx xxxxx. Nejméně xxxxxx xxxxx pracovní xxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Xxxxx každodenní xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx ztrát xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx nebo xxxxxxxxx uhynulým zvířat xxxx izolací x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zvířat.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, na kterou xxxx provedena xxxxxxxx, xxx x xxxxxxx, x xxxx dýchání x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx jevům, slinění, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxxxx přežijí až xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické změny xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx tkáně se xxxxxxxx xxx histopatologické xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxxx xx jednom xxxxxxx xx podá xxxxx xxxxxxx jedné xxxxxxx x pěti xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx látku. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx citlivější, xxxxxxxxx xx zvířatech xxxxxxx xxxxxxx xx možno xxxxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xx sestaví xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx xx počátku pokusu, xxxx uhynutí xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxx testované xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, přežijí-li xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Zvířata, xxxxx byla xxxxxxxx xxxxxxxx utracena x xxxxxxx xx xxxxx x bolesti vyvolané xxxxxxx xxxxxx, se xxxxxxxxxxxxx xxxx uhynutí xxxxxxxx xxxxx látkou. XX₅₀ xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx hodnotí xxxxx, xxxxx existuje, mezi xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxx x výskytem x stupněm xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx změn xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Zpráva o xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud možno xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxx, krmení atd.,

- xxxxxxxx pokusu (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx: okluzivní nebo xxxxxxxxxxx),

- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx) x koncentrace,

- xxxxxxx pokusných xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxx uhynulých xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx exponovaných xxxxxx),

- doba xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx látky, důvody x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířat,

- xxxxxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxxxx XX₅₀ xxx to xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx úplný xxxxx, x xx xxx 14xxxxx pozorování (s xxxxxxxx metody výpočtu),

- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pro XX₅₀ (xxxxx xxx xxx xxxxxxxx),

- xxxxxx xxxxxxxxxx mortality xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx),

- pitevní xxxxxx,

- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx pohlaví,

- xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx věnovat xxxxxxx xxxxxxxxx vypočtené xxxxxxx LD₅₀ v xxxxxxxxxxx s utracením xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx),

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.4. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXX DRÁŽDIVOST)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Výchozí xxxxx

Je třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx s xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testování xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat výrazné xxxxx reakce. Následující xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx test, studie xx jediném xxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x chemická xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx látky (xxxx. xX xxxxx xx xxxxx 2 nebo xX xxxxx či xxxxx 11,5) xxxx xxxxx testovat xx xxxxxxxx kožní dráždivost, xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx vzít x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo kyselou xxxxxxx.

x) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx test.

x) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxx v xxxxx xxxxxx toxicity xxx dermální xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx) x nebylo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, není xxxxx dále testovat xxxxx dráždivost. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx dermální xxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx dávce na xxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx jako xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xx stanovené době xx xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx podráždění, xxx xxxx možno provést xxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx bylo xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx utratit.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Asi 24 hodin před xxxxxxxxx xxxxx se xxxx zvířat na xxxxxx ostříhá xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx xx xx, aby xx xxxxxxxxxxx kůže (xxxx. xxxxxx). Xx xxxxx xxxxxx pouze xxxxxxx se xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx mají xxxxxxxx husté xxxxx, xxxxx xxxx výraznější x xxxxxxxxx obdobích xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx tyto xxxx xxxxx husté srsti.

Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx látkami, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx dostatečně xxxxxxxx vodou, případně xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxx xxxxxxx x kůží. Xxx xxxxxxx vehikula xx nutné xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx nezředěné.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata

Je xxxxx použít xxxxx xxxxx savců, xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx králíka.

1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx

Jestliže xx x xx xxxxx screeningových testů xxxx xxxxxx úvah xxxxxxxxx, že xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xx leptavá), xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx zvířeti. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx zvířatech.

Pro xxxxx test xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dospělá zvířata. Xxxx třeba xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinu, xxx xxxxxxxxx případů xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Pokud nejsou xxxxx xxxxxxxx důvody xxx xxxx postup, xxxxxx se na xxxxxxxxx xxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxx xxxx 0,5 x xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx vlastní kontrola.

1.2.2.4 Xxxx pozorování

Dobu xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx dostatečně xxxxxx, xxx xxxx možno xxxxx vyhodnotit xxxxxxxx xxxx nevratnost účinků. Xxxxxxxx není třeba xxxxxxxxxxx xxxx 14 xxx po aplikaci.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Zvířata xx chovají xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xx malou xxxxxx (xxx 6 xx²) xxxx x xxxxxxx xx plátkem xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X kapalin x xxxxxxxxx past xxxx xxx xxxxxx nanést xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxx, a xxx xxx připevnit xx kůži. Xx xxxx xxxxxx expozice xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx na xxxx xxxxxxx okluzivním xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx tomu, aby xx xxxxx xxxxxxx x mulu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxx expozice xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx rozpouštědlem, xxx xxx, xxx nebyla xxxxxxxxx případná xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx expozice xx xxxxxxx 4 xxxxxx.

Xxxxx existuje xxxxxxxxx, že látka xxxx xxxxxxx nekrózu (xxxx. xxx, xx xxxxxx poleptání, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxx. xx 1 xxxxxx nebo 3 xxxxxx). Při xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 3 xxxxxx xxxx současně, pokud xx akutní xxxxxxxx xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxxx. První xxxxxx xx xxxxxxxx po 3 minutách. Pokud xxxx pozorována xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx 1 xxxxxx. Xxxxx pozorování x xxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx nezbytná 4xxxxxxxx expozice x xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zacházení, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx 4 xxxxxxxx x klasifikují xx xxxxxx odpovědi xxxx. X případě, xx xxxx xxxxx 4xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxx s xxxxxxxx xxxxxxx dvou xxxxxxx zvířat; xxxxx xx xxxx kontraindikováno x xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxx xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx).

Xxxxxxxx xx xxxxxxx kožní xxxxxx (xxxx. xxxxxxx) xxxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxx xxxx xx 1 xxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xx xxxxxxxx podmínek je xxxxx navrhnout xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx pokud xx odpovídá očekávanému xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx x kožního xxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxx xx 60 xxxxxxxx x xxxx 24, 48 x 72 hodin xx odstranění xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx systému xxxxxxxxx x tabulce 1. Jestliže nebylo xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx dále. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx léze xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx tkáně) x xxxx xxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxxx xxxxxxxxxx reakcí xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx testovanou látkou, xx třeba xxxxxx xxxxxxx histopatologického xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx každé xxxxxxx xxxxx patrný stupeň xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x edému xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx rovněž xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx, popis stupně x povahy podráždění xxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x všechny xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxx možno xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.,

- experimentální xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx přípravy x čištění xxxx, xxx xxxxxx: xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx,

- xx xxxxx tabulky údaje x xxxxx reakci xxx každé xxxxxxxxxx xxxxx při každém xxxxxxxxxx (za 1, 24, 48 x 72 xxxxx xxx. xx xxxxxxxxxx xxxx),

- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx poškození xxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx x povahy xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- popis xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx podráždění kůže,

- diskuse xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx výsledků.

4. XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxxx

	Xxxxxxx
1. Xxxxxxxxx erytému x xxxxxxxxx
1.1 Xxxxx erytém	0
1.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxxx)	1
1.3 Xxxxxxxx viditelný xxxxxx	2
1.4 Xxxxx xx xxxxxxx erytém	3
1.5 Xxxxx xxxxxx (silné xxxxxxxx) xxxx tvorba příškvaru (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) znemožňující xxxxxxxxx xxxxxxx	4
2. Xxxxxxxxx xxxxx
2.1 Xxxxx xxxx	0
2.2 Xxxxx lehký edém (xxxxx xxxxxxxxx)	1
2.3 Xxxxx xxxx (xxxxxx jsou xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx)	2
2.4 Mírný xxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxx x 1 xx)	3
2.5 Xxxxxxx xxxx (zduření xxxx xxx 1 mm x xxxx přesahujíce xxxxxxx xxxxxxxxxx plochy)	4

4.2 Klasifikace xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (XXX)

IKI xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx a xxxx x jednotlivých xxxxxxxxxxx odečtu x xxxxxxx xxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxx	X_XX
nedráždí	X_XX ≤ 0,5
xxxxx xxxxxx	0,5 &xx; X_XX ≤ 3
středně dráždí	3 &xx; X_XX ≤ 5
xxxxx xxxxxx	X_XX &xx; 5

X.5. XXXXXX XXXXXXXX (XXXX XXXXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

1.1.1 Xxxxxxx xxxxx

Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx všechny xxxxxxxx informace x xxxx látce x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testování látky xx podmínek, které xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. K tomu xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace.

a) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Např. xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, které - xxx je xxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx x oku xX xxxxx či xxxxx 2 xxxx xX rovné xx xxxxx 11,5, xxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx očekávat xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.

x) Xxxxxxxx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx studií; xxxxx x xxxxxxxxxxx potenciálně xxxxxxxxx xxxx silně xxxxxxxxxx vlastnostmi nemají xxx xxxx testovány xx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxx lze xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxx mít xxxxxxx účinky xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx metodou.

x) Xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Látky, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx účinky na xxxx ve xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, není xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, že xxxxx xxx xx oči xxxxxxx xxxxxx.

Testovaná xxxxx xx x xxxxxxxxxxx dávce xxxxxxxx xx jednoho xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx jako xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx stupeň xxxxxxxxxx x reakce se xxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinku. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo možné xxxxxxxxxxx zhodnotit xxxx xxxxxxxx xxxx nevratnost xxxxxxxxxxxx účinků.

Zvířata xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti je xxxxx humánním způsobem xxxxxxx.

1.2 Popis metody

1.2.1 Xxxxxxxx

24 xxxxx xxxx xxxxxx xx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxx vyšetření xxxx xxx. Xxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx podráždění xxx, xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, se x xxxxxxxxxxx vyloučí.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xx dávat přednost xxxxxxxx dospělému albinotickému xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx zvířat

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvolit test xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx tohoto xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxxxx (irreversibilní xxxxxx) účinky xxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx dráždivosti x xxxxxxx zvířat. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aspektů xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx další zvířata.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx tří xxxxxx. Xxxxxxxxx nejednoznačných xxxxxx xxxx vyžadovat použití xxxxxxx zvířat.

1.2.2.3 Xxxxxx xxxxx

Při xxxxxxxxx xxxxxxx xx používá xxxxx 0,1 xx. X tuhých xxxxx, xxxx x xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxx 0,1 xx nebo xxxxxxxx xxx 0,1 g (xxxxxxxx xx vždy xxxxx xxxxx). Xxxxx-xx xx o xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, xx třeba xx xxxxxxxx xx xxxxx prášek. Objem xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xx po xxxxxxxx zhutnění, xxxx. xxxxxxxxxxxx na měrnou xxxxxxx.

X xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x pumpou xxxx xxxxxxxxx aerosolových xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx 0,1 xx xxxxx a xxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxxxxx xxx kapaliny.

1.2.2.4 Doba xxxxxxxxxx

Xxxxx doby xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx rigorózně. Musí xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků. Xxxxxxxx však xxxxx 21 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx xxxxxxx zvířeti xx spojivkového xxxx xxxxxxx xxx tak, xx xx spodní xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx oční xxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xx 1 xxxxxxx lehce x xxxx xxxxxxx, xxx xx žádná xxxxx xxxxxxxxxx. Druhé xxx, xx xxxxx xx xxxxx neaplikuje, slouží xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx bolest, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxxxxx, xx následkem xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx změnám x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx lokálního xxxxxxxxxx. Xxxxxxx způsobem xx xxxx anestezovat i xxxxxxxxx xxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx vymývat xxxxxxxx 24 xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xx 24 hodinách xx xxxxx oči xxxxxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxxxx xx xxxxxx.

X xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxx testovací metodě xxxxxxxx podráždění, xx xxxxx provést xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxx po xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx. X těchto xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 3 xxxxxxx. Xxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxx vymývají xxxxxx xx půl xxxxxx s použitím xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x rychlosti xxxxxxx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx

Xxx xx xxxxxxxxx po 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx-xx xx xx 72 xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxx ukončit. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx rohovky xxxx jiné příznaky xxxxxxxxxx xxx xxx, xxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xx rohovce, xxxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxx je xxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxx. (Klasifikace xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx interpretace. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx laboratoře x xx, xxx provádějí xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.)

Xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, ruční xxxxxxxxxx lampy, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx zařízení. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx po 24 xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx zvířat xxxxxxxx mimoto xxxxx xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx podráždění x xxxxx intervalu xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx podráždění, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxx o xxxxxxxxx (xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, krmení xxx.),

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností testované xxxxx),

- x xxxxxxxxx formě xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx)

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx oblasti xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1, 24, 48 x 72 xxx.), např. xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx, fluorescein xxx.,

- xxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- interpretace xxxxxxxx.

4. DODATEK

4.1 Stupnice xxxx xx xxx

	Xxxxxxx
A. Xxxxxxxx - xxxx
Xxxx xxxx xxxxxxxx	0
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx	1
Výrazný xxxx x xxxxxx víčka	2
Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx víček xx xxxxxxxx	3
Edém xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxx xxxx zcela	4
X. Xxxxxxxx - xxxxxx
Slzení není xxxxxxxx	0
Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxx xx běžné xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx)	1
Xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx v blízkosti xxx	2
Slzení xx xxxxxxxxx xxxxx x srsti v xxxxxxx okolí xxx	3
X. Xxxxxxxx - xxxxxxx
Cévní xxxxxx xxxxxxxx	0
Xxxxxxxxxxx cév xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx	1
Splývající cévní xxxxxx, rozlišení xxxxxxxxxxxx xxx nesnadné, xxxxxxxxxx xxxxx červená xxxxx	2
Difuzní xxxxx xxxxxxx xxxxx	3
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx
Xxxxxxxx nejsou xxxxxxxx	0
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxx cév xxxxx xxxxxxx (jedna xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx), xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx opožděná	1
Xxxxxx xx xxxxxx xxxx přítomná, xxxxxxxx xxxxxxxxx x hemoragie	2
x xxxxxxx (xxxxx nebo xxxx xxxxxx charakteristik)
X. Xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx	0
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx diseminovaného xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx viditelné	1
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx	2
Xxxxxxxxxx zóny opalescence, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxxxx stěží viditelný	3
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx je xxxxx neviditelná	4
X. Rohovka - xxxxxx neprůhlednosti
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xx ≤ 1/4 plochy xxxxxxx	1
1/4 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 1/2 xxxxxx xxxxxxx	2
1/2 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 xxxxxx xxxxxxx	3
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx > 3/4 xxxxxx xxxxxxx	4

4.2 Xxxxxxx akutního xxxxxx xxxx dráždivosti (X_XX)

Xxxxxxxxxxxx index oční xxxxxxxxxxx (I_OI) xxx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vypočte xxxxx xxxxxx

X_XX = 2.(X + X + X) + 5.X + 5.X.X

Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (X_XX) xxx xxxxx interval xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx hodnocení xxxx xxxxxx z X_XX.

Xxxxxx index xxxx dráždivosti XXX xx xxxxx xxxxxxxxxx X_XX xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx

4.3 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx	X_XX
xxxxxxxx	0 - 4,9
xxxxx xxxxxx	5 - 14,9
xxxxxx	15 - 29,9
xxxxx xxxxxx	30 - 59,9
velmi xxxxx xxxxxx	60 - 79,9
extrémně xxxxxx	80 – 110

B.6. SENZIBILIZACE XXXX

1. XXXXXX

1.1. Úvod

Xxxxxxxx:

Xxxxxxxxx x xxxxxxxx schopnost testů xxx zjišťování látek x xxxxxxxxxxxx senzibilizačním xxxxxxx xx lidskou xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx významné xxx xxxxxxxxxxxx systém toxicity x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx jediná xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx lidskou xxxx a která xx se hodila xxx xxxxxxx látky.

Xxx xxxxx testu xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látky, xxxxxx schopnosti xxxxxxx xxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxx xxx rozdělit xx testy s xxxxxxxx, xx kterých xx xxxxxxxxx stav xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (FCA), x xx xxxxx xxx xxxxxxxx.

Testy x xxxxxxxx se zdají xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx pravděpodobného senizibilizačního xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxx metody xxx Freundova xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, a proto xx xxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx - XXXX) je xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx několik xxxxxxx xxxxx, xx GPMT xxxxxxxxx xx preferovanou xxxxxxxx x xxxxxxxx.

X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx adjuvans (xxxxxxxx xx xxxx Xxxxxxxxxx testu) považovány xx méně xxxxxxx.

X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx intradermální xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xx morčatech. Xxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxx odborné xxxxxx.

X xxxx metodické xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx (GPMT) x Xxxxxxxxx test. Xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxx validizované x xxxxx jsou odborné xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx.

Pokud screeningový xxxx provedený xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx označit xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx dalšího xxxxxxxxx xx morčatech. Při xxxxxxxxxx výsledku je xxxx nutné xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx, xxx jak xx xxxxxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxx: (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx na látku. X xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx charakterizované xxxxxxxx, xxxxxxxxxx kůže, xxxxxx, pupenci, puchýřky, xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx kombinací těchto xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx druhů xx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxx nejméně xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx kterého se xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.

Provokační xxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx expozice xxxxxxxx dříve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx období xxx xxxxxxxxx, zda subjekt xxxxxx xxxxxx přecitlivělosti.

1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx s použitím xxxxx, o kterých xx xxxxx, že xxxx mírný xx xxxxxxx xxxxx senzibilizační xxxxxx xxx kůži.

X správně xxxxxxxxxxx xxxxx se očekává xxxxxx xx mírné/střední xxxxxxxxxxxxx nejméně 30 % u metody x xxxxxxxx x xxxxxxx 15% x xxxxxx xxx adjuvans.

Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Číslo XXX	Xxxxx XXXXXX	xxxxxxxx xxxxx	xxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxx
101-86-0	202-983-3	2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx	xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxx
149-30-4	205-736-8	2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx	xxxxxx
94-07-7	202-303-5	Xxxxx xxxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxx	xxxxxxxxx

Xxxxx nastat xxxxxxxxx, xxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zdůvodnění xxxxx být xxxxxxx xxxx kontrolní látky xxxxxxxxx xxxx uvedená xxxxxxxx.

1.4 Princip xxxxxxxxx metody

Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (indukční xxxxxxxx). Xx xxxxxx 10 až 14 xxx (indukční období), x průběhu xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx provokační xxxxx. Xxxxxx a xxxxxx kožní xxxxxx xx provokační xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxx xxxxxxx expozici v xxxx indukce a xx jim xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.5 Xxxxx testovacích xxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx za nezbytné xxxxxxxxx testovanou xxxxx, xxxxxxx se xx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx nebyla xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.1 Xxxxxxxxxxx xxxx xx morčatech (GPMT)

1.5.1.1 Xxxxxxxx

Zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aklimatizují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx aspoň 5 xxx xxxx zahájením xxxxx. Xxxx xxxxxx xx zvířata xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx srsti xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx depilací, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx metodě. Xx třeba dbát xx to, xxx xxxxxxx k poškození xxxx. Zvířata se xxxxx před xxxxxxxxx xxxxx x na xxxxx xxxxx.

1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.5.1.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny albinotických xxxxxx.

1.5.1.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxxx 10 zvířat x xxxxxxx 5 xxxxxx je třeba x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx menšího xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx a 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxx dojít x xxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxxxxx, doporučuje xx xxxxxxxxx xx dalších xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.1.2.3 Dávkové xxxxxx

Xxxxxxxxxxx testované látky xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx expozici xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, kterou zvířata xxxxxxx xxxxx snášejí x xxxxx je xxxxxxxx působící xxxxx xx xxxxxxx podráždění xxxx.Xxxx provokační xxxxxxxxxxx xx použije xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx kůže. V xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxx xxxx třech xxxxxxxxx. Xxx tento xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, kterým bylo xxxxxxxxxx XXX.

1.5.1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.5.1.3.1 Indukce

Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx injekcí, xxxxx xx 0,1 xx, se xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx srsti xxxxxxxxxx xxxxx střední xxxxx:

Xxxxxxx 1: Freundovo xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;

Xxxxxxx 2: testovaná xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;

Xxxxxxx 3: xxxxxxxxx látka ve xxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx roztokem v xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;

Xxx xxxxxxx 3 se xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx před xxxxxxxx s FCA xx xxxxx fázi. Xxxxx rozpustné x xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxx FCA. Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 3 má být xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 2.

Xxxxxxx 1 a 2 xx aplikují xxxxxx xxxx x xx xxxxxxxx hlavě, zatímco xxxxxxx 3 směrem xx xxxxxxxx části xxxxxxxxx xxxxxx.

Den 0 - Kontrolní xxxxxxx

Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx injekcí, xxxxx po 0,1 xx, se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX) xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;

Xxxxxxx 2: xxxxxxxx vehikulum;

Xxxxxxx 3: Směs xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) xx směsí XXX/xxxx xxxx fyziologického xxxxxxx v xxxxxx 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).

5. - 7. xxx - Xxxxxxxxx a kontrolní xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxx xxx xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 0,5 xx 10% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vazelíně, xx xxxxxx navození xxxxxxxx xxxxxxxxxx.

6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx skupina

Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx látkou xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (2 x 4 xx), xxxxx xx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxx 48 hodin. Xxxxx vehikula xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxxxx rozetřeny a xxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx přímo.

6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x zafixuje xxxxxxx jako u xxxxxxxxxx skupiny xx xxxx 48 hodin.

1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx

20. - 22. xxx - Xxxxxxxxx a kontrolní xxxxxxx

Boky xxxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx xxxx xxxxxxx srsti. Xx xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx v xxxxxxx x xx xxxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xxxxx xx to xxxxx). Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx udržují x xxxxxxxx x xxxx xx 24 xxxxxx.

1.5.1.3.3 Xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx

- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx provokační plocha xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx oholí x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx provokační dávky) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx podle xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx;

- xxxxxxxxx 24 xxxxx po xxxxx xxxxxxxxxx se provede xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx (72 xxxxx).

Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "xxxxxxx xxxxxx" u testovaných x xxxxxxxxxxx zvířat, xxx pozorující xxxxx xxxx, které xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxx je kontrolní.

Xxxxx je x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (tj. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x kontrolní xxxxxxxx x vehikulem. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxx reakce x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx indukčních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (viz xxxxxxx). X objasnění xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx tloušťky xxxxxxx xxx.

1.5.2 Buehlerův xxxx

1.5.2.1 Xxxxxxxx

Zdravá xxxxx xxxxxxx albinotická xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx laboratorní podmínky xx xxxx xxxxx 5 dnů xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx zvířata xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x závislosti xx použité xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx na xx, xxx nedošlo k xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx konci xxxxx.

1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.5.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.5.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxx xxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx být březí. Xxxxxxx se xxxxxxxxx 20 zvířat x xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxxxx skupině.

1.5.2.2.3 Xxxxxxx úrovně

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxx úroveň, xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx velmi silné xxxxxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxx koncentrace se xxxxxxx maximální koncentrace, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolává xxxxxxxxxx xxxx. X případě xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x předběžném xxxxxx xx xxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx látky rozpustné xx vodě je xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx zředěný xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xx preferován 80% xxxxxx etanol/voda xxx xxxxxxx x xxxxxx pro xxxxxxxxx.

1.5.2.3 Xxxxxx

1.5.2.3.1 Xxxxxxx

Xxx 0 - Testovaná xxxxxxx

Xxxxx xxx xx zbaven xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx testu se xxxxxxxx xxxxxx testovanou xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (výběr xxxxxxxx xx řídí xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).

Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 hodin.

Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx okluzivní. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, ať xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x plochou přibližně 4 - 6 xx². Xx preferováno xxxxxxxxx s použitím xxxxxxxx přidržovače, xxx xx xxxxxxxxx okluze. Xxxxxxxx xx použito xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.

Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxx xxx je zbaven xxxxx (xxxxxxxx ostříhán). Xx xxxxxxxxx plochu xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x to xxxxxxxx způsobem jako x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx testovací xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx překrývacím xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 hodin. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx skupiny xxx xxxxxxxx.

6. - 8. a 13. - 15. xxx - Testovaná x kontrolní xxxxxxx

Xxxxxx aplikace xxxx x den 0 xx provede xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx boku (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) 6. - 8. xxx x xxxxx 13. - 15. xxx.

1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx

27. - 29. den - Testovaná x xxxxxxxxx skupina

Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Okluzivní xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx koncentraci xx aplikuje na xxxxx část neošetřeného xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx zvířat. Xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx testovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx aplikovat xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plátky xxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x kůží vhodným xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.

1.5.2.3.3 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx

- xxxxxxxxx 21 hodin xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx provokační plocha xxxxx srsti;

- xxxxxxxxx o tři xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx provokačního plátku) xx pozorují xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx uvedené x xxxxxxx;

- xxxxxxxxx po xxxxxxx 24 xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 54 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) se xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx systém "xxxxxxx xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxxxxxxx osoba xxxx, které zvíře xxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxxxx xx x xxxxxxxxx výsledků xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx přibližně x xxxxx xxxxxxx, v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x kontrolní xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx také xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx skupině.

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx reakcí, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x provokačních xxxxxxx, xx zaznamenávají podle xxxxxxxx Magnussona/Kligmana (viz xxxxxxx). K xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx tloušťky xxxxxxx xxx.

2. XXXX X XXXXXX XXXXX (GPMT X BUEHLERŮV XXXX)

Xxxxx se xxxxxxx xx tabulky, xx xxxxx xxxx xxx xxx xxxxx pokusné xxxxx patrná xxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX (GPMT A XXXXXXXXX TEST)

Pokud xxx proveden xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx uvést xxxxx xxxxxx testu xxxx jeho citaci (xxxx. XXXX - xxxx regionálních xxxxxxxxxxxx xxxxx, XXXX - xxxx xxxxxxxxx ucha x xxxx) včetně xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx testované x xxxxxxxxxx látky.

3.1 Xxxxxx x průběhu pokusu (XXXX a Xxxxxxxxx xxxx)

Xxxxxx o xxxxxx obsahuje xxxx xxxxxxxxx, pokud mohly xxx xxxxxxx:

Xxxxxxx xxxxxxx:

- použitý xxxx xxxxxx;

- xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx plátkový xxxx;

- podrobné xxxxxxxxx o xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx plátkového xxxxx;

- výsledek xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx;

- xxxxxxxx informace x přípravě, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x vehikula, xxxxxxx xxx indukci x xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx poslední xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx (viz 1.3.) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxxx pro každé xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;

- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxx

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 406.

Xxxxxxx

5.1 Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx vyvolaných xxxxxxxxxxxxx reakcí

0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

1 = xxxxx xxxx skvrnité xxxxxxxxx kůže;

2 = středně xxxxxxx x splývající xxxxxxxxx xxxx;

3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxx.

5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx senzibilizace

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx. xxxxx toho, xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx bylo xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, se xxxxx xxxxxxxxxxx jako

xxxxx xxxxxxx (X. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx

xxxxx xxxxxxx (XX. xx.) - 9 - 28 % zvířat

xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (III. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx

xxxxx xxxxxxx (XX. st.) - 65 - 80 % zvířat

xxxxxxxx xxxxxxx (V. st.) - 81 - 100 % xxxxxx

X.7. XXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ (28DENNÍ XXXXXXXXX APLIKACE)

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxx xx 28 xxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat orálně, x xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx období xxxxxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx zjistily xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx během xxxxxx; xxxx zvířata, která xxxxxxx konec xxxxxx, xx xxxxxx x xxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Zdravá xxxxx xxxxxxx se náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Každé xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxx lze xxxxxxx sondou xxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxx vodě, xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx použití vodného xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx použití xxxxxxx/xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx) a xxx xxxxxxx x jiných xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, musí xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Je nezbytné xxxxxx stabilitu xxxxx xx xxxxxxxx vehikulu.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx možno xxxxxx x jiného druhu xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x nesmí xxx xxxxx. Podávání xxxxx xx xxxx xxxxx co xxxxxxxx xx xxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, než xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.

Xx xxxxxxx xxxxxx by nemělo xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.2 Počet x xxxxxxx

Pro xxxxxx xxxxxxx dávek xx xxxxxxx nejméně 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Pokud xx xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat x počet xxxxxx, xxxxx budou zabita xxxx xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx je možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx následujících 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, trvání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Používá xx také xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).

1.2.2.3 Xxxxx xxxxx

Xx xxxxx použít xxxxxxx tři xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx usnadnění aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx ve xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx skupina, které xx aplikuje nejvyšší xxxxx.

Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx informací xxxx xxxxxxxx účinek xxx denní dávce 1000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx, xx možno xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx-xx taková data x dispozici, lze xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx vzít x xxxxx všechny xxxxxxxxxx xxxxx z toxikologických x toxikokinetických xxxxxx x testované xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, ale nezpůsobit xxxxx xxxxxxx ani xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx x klesající xxxx xxx, xxx umožnily xxxxxxxx xxxxxxxxx účinku xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity (XXXXX). Xxxxxxx je vhodný xxxx- xx čtyřnásobný xxxxxx mezi xxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx xx xxxxx pokrýt xxxxx xxxxxx dávek, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinu, než xxxxxx příliš xxxxx xxxxxx xxxx dávkami (xxxx. xxxxxx větší xxx 10).

Pokud xx testovaná xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx vodě, xx xxxxxxxx zajistit, xxx podávané xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx rovnováhu. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxx se xxxxxx xxx konstantní xxxxxxxxxxx (x xxx) nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; použitou xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxxx xxxxxx, xxxx xx xx tak xxx xxxxx den xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx přizpůsobovat xxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxxx.

Pokud xx xxxx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx v xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Neprokáže-li test xxxxxxxxx xxx popisovaným xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx při xxxxx 1000 mg.kg^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx za xxx xxxx při takové xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxx, která xxxx dávce xxxxxxxx, x xxxxx toxicita xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkami, je xxxxx xx provedení xxxxxxxxxxx testování xxx xxxxx dávkových xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx testu platí, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx lidí nenaznačují, xx je xxxxx xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx pozorování

Xxxx xxxxxxxxxx je 28 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx skupiny xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 14 dnů xxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 dní x xxxxx xx xxxx 28 xxx, xx zdůvodněných případech 5 xxx v xxxxx. Denní xxxxx xx xxxxxx jednorázově xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx intubační xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxxx najednou, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx na 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 ml xx 100 x xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxx, xxx xxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx to x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

1.2.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx klinické xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx denně, xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx x x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx zvířat. Xxxxxxx xxxxxxx denně xx provede xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a mortality. Xxxxxxx moribundní a xxxxxxx xxxxxxxxxxx silnou xxxxxx xxxx xxxxx xxxx vyřazena, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx.

Xxxxxxxx klinické xxxxxxxxx všech zvířat xx provede xxxx xxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx chovnou xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx. Výsledky xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, nejlépe x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Je třeba xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx měnily xx nejméně; osoba, xxxxxxxxxxx pozorování xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx skupin.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x exkretů, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (slzení, zježení xxxxx, velikost zornic) x případně xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx se změny xxxxx, polohy, dále xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx pohyby xxxx xxxxxxxx) nebo xxxxxxxxx xxxxxx chování (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx pozadu).

Xx čtvrtém xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xx různé xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx se síla xxxxxx x celková xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx Xxxxxxxxx úvod, xxxx X).

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud 28xxxxx studie xxxxxx xxxx předběžná xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (90denní); v xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx xxxxxxxx xx této xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx x x xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 28xxxxx studie xxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx xxx subchronickou xxxxxx.

Xxxxxxxxx lze xxxxxxxx pozorování xxxxxxxxx xxxxxx x skupin xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zvířete xxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx x xxxx

Xxxxxxx xx xxxx nejméně xxxxxx xxxxx. Spotřeba xxxxxxx x xxxx se xxxx xxxxxxx jednou xxxxx, také v xxxxxxx aplikace x xxxxx xxxx.

1.2.3.3 Hematologie

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx zahrnuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů, xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx krve.

Xxxx xx xxxxxxx těsně xxxx xxxx x xxxxxxx utracení xxxxxxx, xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx za vhodných xxxxxxxx.

1.2.3.4 Biochemická xxxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx, se provede x všech zvířat xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxx zvířata xxx xxxxxxx xxxx noc xxxxxxx xxxx¹⁾. Vyšetření xxxxxx a séra xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, albuminu, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx indikujících účinky xx jaterní xxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, sorbitoldehydrogenáza). Xxxxxxxx xxxxxxx enzymů (xxxxxxxxx xxxx xxxxxx původu) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Další možnost xx xxxxxx definovaný xxxx a xxxxxxxxx xxxx xxxxx posledního xxxxx studie: xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx, osmolalitu xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, pH, xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxx xxxx. xxxxxxx.

Xxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx tkání x séru.

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxx podezřelých x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na xxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx vyšetření xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx látek xxxx xxxxxx od xxxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, brát x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dané xxxxx.

Xxxxx nejsou k xxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxx hodnotách některých xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxx xxxxx před začátkem xxxxxx.

1) Vyšetření xx xxxxx xx xxxxxxx xxx řadu xxxxxx v séru x xxxxxx, zvláště xxx glukózu. Xxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xx xx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx mohla xxxxxxxx xxxxx změny a xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx, hladovění xxxx xxx xx xxxxx xxx vliv xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x u aplikace x xxxxxxx xx xxxxxxx xx pravidelnosti xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx na xxxxx, xx xxxxx biochemické xxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 4. xxxxx testu.

1.2.3.5 Xxxxx

X všech xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx se provede xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx, hrudní x břišní, x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, brzlík, slezina, xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx tkání a xx xxxxxxxx po xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx stavu, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Následující xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx (reprezentativní xxxxxxx xxxxxx hemisfér, xxxxxxx x xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, tenké i xxxxxx xxxxxx (xxxxxx Xxxxxxxxxx plátů), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, brzlík, štítnou xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx (konzervované xxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem x xxx xxxxxxxxx), xxxxxx x xxxxxxxx pohlavní xxxxxx (např. xxxxxx, xxxxxxxx), močový xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx (přednostně xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x jedna xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xxxx (n. ischiadicus xxxx x. xxxxxxxx), xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx (nebo xxxxxxx xxxxx z nasáté xxxxxx xxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxx nebo jiných xxxxxx je možno xxxxxx x další xxxxx. Xxxxx orgán, xxxxx xx xxxx xxx cílovým xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxx.

1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

X xxxxx zvířat xxxxxxx, které byla xxxxxx nejvyšší xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx skupiny xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx uchovaných xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx x tkáních xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou xxxxxx, xx nutno provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx i u xxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.

Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx vyšetřit.

X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx do xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zvláštním xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, ve xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXX A XXXXXX XXXXX

X xxxxxxxxx xxxx být xxxxx x xxxxxx jednotlivém xxxxxxx. Navíc jsou xxxxxxx xxxxx sumarizovány xx xxxxxxxxx formy, xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx utracených x xxxxxxxxx důvodů, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, popis toxických xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, trvání x xxxxxxxxxx každého xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xxxx x procento xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx.

Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistickou xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx xxx plánování xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Zpráva x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx získány:

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;

- xxxxx, xxxxx a xxxxxxx zvířat;

- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx.;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx testu, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxx testu.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula, pokud xx xxxx xxx xxxx;

- zdůvodnění xxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx testované xxxxx xxx aplikaci, případně x xxxxxxxx diety, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a homogenitě xxxxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

- přepočet x xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxx vodě (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx v xx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx (pokud xxx o xxxxxxxx x xxxxx nebo xxxx);

- podrobné xxxxx x potravě x kvalitě xxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);

Xxxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxx;

- údaje x xxxxxxxxx reakcích xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxx příznaků toxicity;

- xxxxxx, závažnost x trvání xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;

- posouzení xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx síly x xxxxxxxxx xxxxxxxx;

- výsledky xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x příslušnými xxxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx x hmotnosti xxxxxx;

- xxxxxxx xxxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;

- xxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků.

Xxxxxxx výsledků

Xxxxxx:

4. LITERATURA

Xxxx xxxxxx je analogická xxxxxx OECD XX 407.

B.8. AKUTNÍ XXXXXXXX XXXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Xxxx xxxxxxx je xxxxx získat xxxxx x xxxxxxxxx látce: xxxxxxxxx xxxxxxxxx částic, xxxxx xxx, xxx xxxx, xxx varu, xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (jsou-li stanovitelné).

1.2 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxx pokusných xxxxxx xx xxxxxxxxxx studované xxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, každá xxxxxxx jedné koncentraci, x xx po 28 dní. Použije-li xx xxx dosažení xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Během xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zjišťují se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx během xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx konce pokusu, xx xxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxx

1.3.1 Příprava

Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se zdravá xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx třeba, xxxxx xx x testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, aby x xxxxxxx xxxxxxx příslušná xxxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx se užije xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx x nich známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Existují-li vhodná xxxxxxxxxx data, xx xxxxx je využít.

1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.3.2.1 Xxxxxxx zvířata

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx důvody proti xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx studie xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (pro xxxxx pohlaví xxxxxx).

1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic x 5 samců). Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxx budou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx před xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx vysoké xxxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx 10 xxxxxx (5 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 28 xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xxxxxxxx vratnost, přetrvávání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Používá xx také satelitní xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx).

1.3.2.3 Expoziční xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxx xxx skupiny x různou xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupina, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx - pokud xx užije - x xxxxxxxxxxx stejné xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx zachází stejně xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má xxxxxxx toxické účinky, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx koncentrace xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx koncentrace xxxx vyvolat xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx než 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx voleny tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Ve xxxxxxxxx x xxxxxx x střední koncentrací x x kontrolní xxxxxxx by počet xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

1.3.2.4 Xxxxxx expozice

Xxxxxx xxxxxxxx má xxx 6 hodin denně; x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx možné xxxxxx i xxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.3.2.5 Expoziční xxxxxxxx

Xxx xxxxxx xx zvířaty se xxxxxxx xxxxxxxxx expoziční xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu s xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kyslíku a xxxxxxxxxx rozdělení xxxxx x xxxxxxxxx atmosféře. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx. Pro zajištění xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx x zásadě xxxxxxx xxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx jinými xxxxxxx.

1.3.2.6 Xxxx pozorování

Xxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxx xxxxxxxxx během xxxxxx xxxxxx expozice x zotavení a xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.

1.3.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, 5 - 7 xxx v týdnu, xx dobu 28 xxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx určena k xxxxxxxxxx pozorování, jsou xxxxxxxxxx dalších 14 xxx xxx xxxxxxxx, x posouzení zotavení x otravy nebo xxxxxxxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx během xxxxxxxxxxx xx xxx 22 ^xX ± 3 ^xX. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx mezi 30 % a 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, kde xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx sloupce) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx do xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx systém x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace. Doporučuje xx provést xxxxxxxxx xxxxx xxx získání xxxxxxxxxx koncentrací. Rychlost xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx nastavit xxx, xxx podmínky x xxxxx expozičním boxu xxxx xxxxxx. Systém xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dosaženo xx xxxxxxxxxxx.

Měření nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx expozice:

x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).

x) Xxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ± 15 %. U některých xxxxxx a xxxxxxxx, xxx této xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx připouští xxxxx rozsah kolísání. Xx celou xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

c) Teplota x vlhkost xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx provádějí x xxxxxxxxxxxxx systematicky; xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, stupeň x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x spotřebu xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud možno xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, která xxxxxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx či trpící xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x pitvat.

Xx konci xxxxxx xx u xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

1. Hematologické vyšetření xx zahrnovat xxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.

2. Xxxxxxxxxxx analýza xxxx: x posouzení xxxxxx xxxxx x ledvin xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxx (xxxxx známá xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx glutamátoxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx bílkoviny x séru.

Xxxx xxxxx charakteristiky, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, glukózy xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterasy.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.3.3.1 Pitva

X všech zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx (xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, varlata, nadledviny x xxxxx, x xxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx velikosti) xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx třeba xxxxxxx xxx poškození, xxxxxx x fixovat xxxxxxx xxxxxx, xxx aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

X xxxxx zvířat skupiny, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx koncentrace, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx. Pokud xx x xxxxxxxx x xxxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx těchto xxxxx x x všech xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xx orgány x xxxxx, xx xxxxxxx xx objevily xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx do tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Zpráva x průběhu xxxxxx

Xxxxxx o průběhu xxxxxx má xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx xxx.,

- xxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, systému xxxxxxxx xxxxxx x aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx systému, popis xxxxxxxxx odpadního xxxxxxx x způsobu umístění xxxxxx x boxu, xxxxx je používán. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx teploty, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx stability xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,

- xxxxx o xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx variability (např. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxx možno obsahovat xxxx xxxxx: x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; b) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx; c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové množství xxxxxxxxx xxxxx přiváděné xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx vzduchu); x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx bylo xxxxx; x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx; x) hmotnostní xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) x xxxxxxxxxxx směrodatná xxxxxxxx (GSD),

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx koncentrací,

- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x přežití xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,

- popis xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx,

- úroveň xxx účinku,

- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx vývoj,

- xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx tělesné xxxxxxxxx,

- hematologická xxxxxxxxx x jejich výsledky,

- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx xx možné,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx látka se xxxxxx xx xxxx xxxxx xx 28 xxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, x xx každé xxxxxxx xxxxx úroveň dávky. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx pokusu, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.2 Popis metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před testem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Krátce xxxx xxxxxxxx pokusu se xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx experimentem. Xxxxxxxxx nebo xxxxxxx xx xxxxxxx opakovat xxxxx xxxxx. Při xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx na to, xxx se xxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx nanášení se xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Xx třeba xxxx x úvahu hmotnost xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Při xxxxxxxx x tuhými xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx formy, xx xxxxx xxxxx látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx xxx zaručen xxxxx xxxxxxx s xxxx. Xxxxxxxxx kapaliny xx zpravidla aplikují xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x xxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, králíky xxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxx i xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 10 zvířat (5 xxxxx a 5 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxx budou zabíjet x xxxxxxx studie, xx nutno xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx xxxxx zabita xxxx xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx skupině) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx pohlaví) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx skupiny 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx).

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dávek x xxxxx xxxxxxxxx skupinu xxxx - pokud xx použilo vehikula - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx být xxxxxxx 6 hodin xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx každý xxx xx xxxxxxx xxxx. X xxxxxxxxxxx týdenních xxxx čtrnáctidenních xx xxxxx aplikovanou xxxxx xxxxxxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx ve xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx aplikuje skupině x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxx xxx x malém xxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx střední xxxxx xxxx vyvolat xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx vmezeřené xxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx x xxxxxx x střední xxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx být xxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x vysoké xxxxxxx úrovně xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x těžkému xxxxxxxxx xxxx, xx dokonce xx xxxxxxxx okolností xxxxx pokus ukončit x xxxxxxx xxx xxxxx s nižšími xxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx-xx xxx předběžné xxxxxx aplikace dávky 1000 xx.xx^-1 xxxx xxxxx dávky, která xxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, žádné xxxxxxx xxxxxx, není další xxxxxxx xxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba denně xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx uhynutí x xxxx, xxx xx objeví x xxxxxxxx opět odezní xxxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxx v xxxxxxx xx jednom. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 dnů. Xxxxxxx satelitní xxxxxxx, xxxxx xxxx určena xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xx dalších 14 xxx xxx xxxxxxxx, xxx se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo jejich xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx nejméně 6 xxxxx xxxxx.

Testovanou xxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx plochu, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % povrchu xxxx; x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx může být xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx co xxxxxxxx xxxx xxxxxxx plochy xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.

Testovaná xxxxx je xx xxxxxxxxx xxxx 24 xxxxx udržována v xxxxxxxx s xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a nedráždivé xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plochu xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx a testovaná xxxxx fixovaly x xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx příjmu. X xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx možno použít x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx pohybu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx použít "xxxxxxxxxx xxxxx".

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx zbytky xxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxx pozorovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, kůže, xxx x xxxxxxx x xxxx dýchání x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx autonomní x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx potravy. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx ztrátám xxxxxx, xxxx např. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x zvířata x těžkém xxxxxx xx trpící xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx xx x xxxxx zvířat xxxxxx kontrolních xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx erytrocytů, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.

2. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve: k xxxxxxxxx xxxxxx jater x ledvin xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx: alaninaminotransferáza x séru (dříve xxxxx jako glutamátpyruvát-transamináza), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx glutamát-oxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, kreatinin, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx.

Mezi další xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx pro xxxxx toxikologické hodnocení, xxxxx xxxxxxxxx: vápníku, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxx na xxxxx, xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

Další xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii xx xxxxxxx xxxxx. Aspoň xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx a xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx se předešlo xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx, xxxx. xxxxxxxx x exponovaná xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, srdce x xxxxxxx xxxxxx x makroskopickými xxxxxx xxxx xxxxxxx velikosti, xx třeba přechovávat xx vhodném xxxxx x xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů x xxxxx. Xxxxx se x orgánech a xxxxxxx ve xxxxxxx x xxxxxxxx dávkou xxxxxx xxxxxxxxx způsobená xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx těchto xxxxx x x všech xxxxxx x nižšími xxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx histologické xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx zjištěné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x průběhu pokusu

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- údaje x zvířatech (xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.),

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx použije) x koncentrace,

- xxxxxx bez xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,

- údaje x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx x xxxxx,

- doba xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx nebo xxxx xxxxxx,

- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx další xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx x vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx vyhodnocení výsledků, xxx xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.10. XXXXXXXXXX - TEST XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX U XXXXX XX VITRO

1. METODA

Metoda xx xxxxxxxxx OECD XX 473, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx analýzy xxxxxxxxxxxxxx aberací in xxxxx xx nalézt xxxxx, xxx v xxxxxxxxx savčích buněk xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx (1) (2) (3). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou většinou xxxxxxxxxxxx, dochází xxxx xxx x aberacím xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Vznik xxxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, xx xxxx chemická xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxx navržena x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx účelu xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx xxxx xxxx příčinou xxxx xxxxxxxxxxx chorob x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx doklady xxxx, xx chromozómové xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx změny x onkogenech x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx, hrají xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Tento xxxx xx používá x xxxxxxxx možných xxxxxxx mutagenů a xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx x tomto xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxx savce xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x karcinogenitou. Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx látky x existuje xxxxx xxxx dokladů x xxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx testem xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx působí xxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx XXX.

X analýze chromozómových xxxxxxx in xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx kmenů xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Použité xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx růstu x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxx diverzity x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Testy xx xxxxx vyžadují xxxxxx xxxxxxxx zdroj xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx systém xxxxxxxxxxx aktivace xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx podmínky x savců xx xxxx. Je xxxxx xx vyvarovat podmínek, xxxxx xx mohly xxxx k pozitivním xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx změnami xX, osmolality xxxx xxxxxxx cytotoxicitou (4) (5).

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: strukturální xxxxxxxxx chromozómu, které xx projevuje jako xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx jako zlom x opětovné spojení xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx místě (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx).

Xxxx chromatidy: xxxx xxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx větší, xxx xx xxxxx poškozené xxxxxxxxxx. Dále pak x případech, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx kratší x xxxxxxxx delece.

Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, kde xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx, nýbrž xxxxxx xxxxx X-xxxx. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.

Xxx: xxxxxxxxxxxx léze xxxxx než šířka xxxxx xxxxxxxxxx a x minimálním vybočením xxxxxxxxx.

Mitotický xxxxx: xxxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxx celkovým xxxxxx xxxxx v xxxx populaci buněk; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (x) xxxx xxx xxxxxxxxx počet (xxxx 3n, 4n xxx.).

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx chromozómové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx dělení xx xxxxxx metafáze, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxx xxxxxxx xx vystaví xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x to s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxxxx buněčné xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, se xxxxxxxx zastaví xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx ® xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx, obarví xx x v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx

Xx možno xxxxxx celou řadu xxxxxxxxx xxxxx, kmenů xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx (například xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx krve xxxxxxx či xxxxxx xxxxx).

1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a inkubační xxxxxxxx (xxxxxxxxxx nádoby, xxxxxxxxxxx XX₂, xxxxxxx x xxxxxxx). X xxxxxxxxx linií a xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx. X xxxxxxx kontaminace xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx znát xxxxxxxx xxxx buněčného xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie a xxxxx: xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx konfluentní xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x inkubují xx při xxxxxxx 37 ^oC.

Xxxxxxxxx: xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxx xxx xxxx xxxx x vhodným xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx), nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x kultivují xx xxx xxxxxxx 37 ^xX.

1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxx xx testovanou xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nejobvyklejší xx xxxxxxxxx suplementovaná xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (S9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, ovlivněná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx jako xx Xxxxxxx 1254 (6) (7) (8) (9), nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx x ß-naftoflavonu (10) (11) (12).

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v médiu xxxx obvykle 1 - 10 % x/x. Aktivita xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx bude xxxxxxx na xxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxxx případech je xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x několika xxxxxxxxxxxxx.

Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx enzymy. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxx být xxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx P450 x xxxxxxxxxxx testované xxxxx).

1.4.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xx-xx testovaná xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxxxx xx buňky xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx naředí. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx do xxxxxxx přidávat přímo xxxx se předtím xxxx. Je třeba xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx prokazují, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx.

1.5 XXXXXXXX XXXXX

1.6 ROZPOUŠTĚDLO

X zvoleného rozpouštědla xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx by mohlo x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx narušovat xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx X9. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Doporučuje se, xxx všem xxx, xxx xx xx xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx rozpouštědla xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, musí být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx bezvodé. Voda xx dá odstranit xxxxxxxxxxxx xxxxx.

1.6.1 Koncentrace

Xxxx kritéria, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, rozpustnost x xxxxxxx a xxxxx pH xxxx. xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx integrity a xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, počet živých xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Je xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x předběžných xxxxxxxxxxxxx.

Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x cytotoxicitě, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx pokrývat xxxxxx xx xxxxxxxxx xx nízké xxxx xxxxxx toxicity. To xxxxxxx znamená, že xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx lišit xxxx xxx xxxxxxxx, který xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. X době xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pokles xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx, xxxx mitotického xxxxxx (xxxx o xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xx xxxxxxx xx době xxxxxxxx xx expozici xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x nepraktická. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx x kinetice xxxxxxxxx dělení, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx; ten ovšem xxxxxxxxxxx celkový xxxxxx, xxxxx ne xxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx zpožděných xxxxxxxxxxx xxxxx. X tak x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx optimálního výtěžku xxxxxxx.

X relativně xxxxxxxxxxxxxxx látek xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx z xxxxxx 5 µl/ml, 5 xx/xx xxxx 0,01 X.

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx netoxické x koncentracích xxxxxxx, xxx xx koncentrace, xxx které se xxx xxxxx nerozpouští, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx, xxx je xxx xxxxxxxxxxxx xx finálním xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. X xxxxxxxxx případech - xxxxxxxxx dochází-li k xxxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxxxx vyšších, xxx xx nejnižší nerozpustná xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx počátku x xx konci xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx může xxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx vlivem xxxxxxxxxxx buněk, séra, X9 apod. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx překážku při xxxxxxxxx buněk.

1.6.2 Xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx

Xx každého xxxxxxxxxxx, xx již x xxxxxxxxxxxx aktivací nebo xxx ní, xx xxxxx xxxxxxx souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx). Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx pozitivní xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivaci x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxx pozitivní xxxxxxxx xx používá xxxxx xxxxxxxxx, x to xxx expozičních úrovních, xxx xx očekává, xx poskytne xxxxxxxxxxxxxxxx x detekovatelný xxxxxx xxxxxxx xxx pozadí, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Koncentrace xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx zvolit xxx, xxx xxxxxx xxx xxxxxx, ale xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:

Metabolická aktivace	Xxxxx	CAS	EINECS
Xx	xxxxxx methansulfonát xxxxx methansulfonát ethyl xxxxxxxxxxxxxxx mitomycin X 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx	66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5	200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1
Xxx	xxxx[x]xxxxx xxxxxxxxxxxxx monohydrát xxxxxxxxxxxxxx	50-32-8 50-18-0 6055-19-2	200-028-5 200-015-4

Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Tam, xxx xx xx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx ze xxxxxx chemické xxxxxxx.

Xxx xxxxx časový xxxxxxxx xxxxxxxx kultur xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx, zpracované xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.6.3 Xxxxxx

1.6.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xx proliferující xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xx lymfocyty je xxxxx xxxxx působit xxx 48 hodin xx xxxxxxxxx mitogenem.

Xxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx; x xxxxx se xxxxxxxxxx xxx negativní xxxxxxxx x rozpouštědlem, xxxx xxxxxxxxx. Pokud xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, že xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (13) (14), xx xxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx.

X případě xxxxxxxx xxxx těkavých xxxxx je třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx postupy, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (15).

1.6.3.2 Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx po xxxx 3 - 6 xxxxx a xxxxxx xx odebírají x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5násobku xxxxxxxx xxxxx buněčného xxxxx xx začátku expozice (12). Pokud xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxx negativní, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx aktivace, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx do xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx odpovídají xxxxxx 1,5xxxxxxx normálního xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx při xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx rozhodnutí zdůvodnit.

1.6.3.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xx buněčné kultury xx xxxxxx Colcemidem® xxxx kolchicinem xxxxxxx xx xxxx 1 - 2 hodin xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx kultura xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x ovlivnění buněk xxxxxxxxxxxx roztokem, fixace x xxxxxxxxx.

1.6.3.4 Xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx zakódují. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx často xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxx typů xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx buňkách xxxxx xxxxxxxxx xxxxx ± 2. Xxx xxxxxx koncentraci a xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx z xxxx xxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx. X případě, xx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

X xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX

Jelikož xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx buňka, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx aberacemi. Xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx včetně xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kultur. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx četnosti xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx také zjištěnou xxxxxxxxxxxx v experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx se xxxx xxx xxxxxxxxxx kultury. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výsledky bylo xxxxxxxxx x xxxx. 1.4.3.3. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. K xxxxxxxxxx, které lze xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx kritérií, například xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx frekvence xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3) (13). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx neměla xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivního výsledku.

Xxxxxx xxxxx polyploidních xxxxx může xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx počtu xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx cyklu (17) (18).

Testovaná xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují xxxx uvedená kritéria, xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx většina xxxxxxxxxxx vykazuje xxxxx xxxxxxxxx, xxxx negativní xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx získaná data xxxxxxxxxx jednoznačné posouzení xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx ohledu na xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx chromozómové aberace xx xxxxx xxxxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x kultuře xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek testovaná xxxxx x kultuře xxxxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx nevyvolává.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

XXXXXX X XXXXXXX XXXXXX

Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx.

Xxxxx:

- xxx x xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx-xx xx nutné,

- xxxxxxxxx x délce xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx dárce xxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxx krev nebo xxxxxxxxxx lymfocyty, xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxx buněk, xx-xx xx nutné - xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx

- xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx na xxxxx

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx kultur, xxxxxx xxxx. údajů x cytotoxicitě x xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂, je-li xx xxxxx

- koncentrace xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxx xxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx, je-li xx nutné

- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx, xxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontroly,

- xxxxxx přípravy xxxxxxxxxx xxxxxxx,

- kritéria xxx xxxxxxxxx aberací,

- počet analyzovaných xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Výsledky:

- xxxxxx toxicity, tj. xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx buněk, xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxx srážení,

- xxxxx x pH x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- definice aberací, xxxxxx xxxx,

- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxx chromozómových aberací xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx,

- případné xxxxx ploidie,

xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx to xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud byly xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx z negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx,

- historické xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Diskuse výsledků.

Xxxxxx.

B.11. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXX XXXXX SAVCŮ XX XXXX

1. XXXXXX

Metoda xx xxxxxxxxx OECD XX 475, Xxxxxxxxx Xxxx Xxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x savců xx xxxx xx xxxxxxx strukturální chromozómové xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx a chromatidové. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Aberace xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, ovšem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx toho, že xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx x tumorsupresorových xxxxxx, hrají xxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

X xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxx xx kostní xxxx, protože xx xxxxx o tkáň xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx x zpracovat. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx při hodnocení xxxxxxxxxxx xxxxxx, protože xxxxxxxx brát x xxxxx xxxxxxx metabolismu xx vivo, farmakokinetiky x procesů xxxxxxxx XXX, i xxxx xxx mohou být xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx tkáněmi xxxxxxx. Xxxx in xxxx xx xxxx xxxxxx pro další xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx projevuje xxxx xxxx jedné, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, nebo xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx spojení xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx místě (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx typu xxxxxxxxxxx chromozóm, prsténčitý xxxxxxxxx-xxxx)

Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx zlom xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx obou xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx vzniklá mezera xx xxxxxxxxx chromatidy xx větší, než xx šířka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Dále pak x xxxxxxxxx, koncový (xxxxxxxx) xxxxxxxx v xxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), případně xxxxx chromatida hodnoceného xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxx: proces, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx S-fáze. Xxxxxxxxx xxxx chromozómy x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.

Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx index: xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx buněčné populaci; xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

Numerická xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx buňky.

Polyploidie: xxxxxxx hapoidního xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4x xxx.).

Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou buněčného xxxxxx ve stadiu xxxxxxxx, pozorovaná xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx vhodnou dobu xx xxxxxxxx xx xxxxxx. Před xxxxxxxxx xx na xx xxxxxx látkou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). Z xxxxx xxxxxx xxxxx xx pak xxxxxxxx xxxxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.4 POPIS METODY

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx

Běžně xx xxxxxxxxx potkani, xxxx x xxxxxx křečci, xxx xxxxx použít x xxxxxxxxx jiný xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny mladých xxxxxxxx xxxxxxx. Hmotnostní xxxxxxx xx při xxxxxxxx xxxxxx měly xxx minimální x x xxxxxxx pohlaví xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Podmínky xxxxx

Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X, xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Příprava zvířat

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x experimentální xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx toho, xxx x xxx xxxx xxxxx umístěny. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Po xxxx xxxxxxxxx pěti dní xx zvířata aklimatizují x xxxxxxxxxxxxx podmínkách.

1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx rozpustí xxxx xx připraví xxxx xxxxxxxx ve vhodném xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxx. Kapalné testované xxxxx se mohou xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx podáváním xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx údaje x xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx ji xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx testu

1.4.2.1 Rozpouštědlo / vehikulum

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Kontroly

Xx xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxx každé xxxxxxx zařadit souběžné xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx zacházet xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx při xxxxxxxxx kontrole xx xxxx tak, aby xxxx xxxxxx patrné, xxx přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx podávat xxxxxxxx xxxxxxxx než xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx časovém intervalu. Xxx xx xx xxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:

Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx	62-50-0	200-536-7
xxxxx nitrosomočovina	759-73-9	212-072-2
mitomycin X	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo vehikulem x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx měly xx xxx xxxxxxxx do xxxxx časových xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, pokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje o xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x o xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se x xxxxxxxxxxx kontrol pouze xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx použít x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx údaje xxxxxxxxxxx, xx zvolené xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx účinky.

1.5 POSTUP

1.5.1 Xxxxx x pohlaví xxxxxx

X každé xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx x době, xxx se studie xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx způsobů expozice xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx testování xxxxx na xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx humánní xxxxxxxx xxxxxxxxx látkám xxxx xxx závislá na xxxxxxx, jak je xxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx dávku, xxxx xx x xxxxxxxxx aplikace xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx na xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Jiné xxxxxx xxxxxxxxx musejí xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx podání xxxxx xxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx odběru vzorků 1,5xxxxxxx normální xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (která xxxx obvykle 12 - 18 hodin) xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx potřebná xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx další xxxxx xxxxxx xx 24 xxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxx režimu xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxxx délky xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxxx podání xxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Colcemidu® xxxx kolchicinu x xxxxxxxx se z xxxx ve vhodném xxxxxxxxx odeberou xxxxxx. X myší xx xxxxx xxxxxxxx zhruba 3 - 5 xxxxx, x čínských xxxxxx xxxxxx 4 - 5 xxxxx. X kostní xxxxx xx xxxxxxxx buňky x zjišťují se x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.3 Dávkování

Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, je xxxxx xx provádět x xxxx laboratoři xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu, kmene, xxxxxxx x pokusného xxxxxx, jaké xx xxxxxxx v hlavní xxxxxx (5). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx interval xxxxxx xxxxxx xxx dávky xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx časový xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxx třeba xxxxxx jenom nejvyšší xxxxx. Xx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx účinky xxxx xxxxxxx. Látky, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx představovat x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxxxx individuálně případ xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx vede x určitým xxxxxxx xxxxxxxx x kostní xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx 50 %).

1.5.4 Limitní xxxx

Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2 000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx x látkách s xxxxxxxx xxxxxxxxx strukturou xxxxxxxxx genotoxicita, xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx dlouhodobé xxxxxx xxxx limitní dávka 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xx den xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1&xxxx;000 mg/kg hmotnosti xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx expozice může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x limitním xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.5.5 Xxxxxxxx látky

Testovaná xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Maximální xxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xx sondou xxxx xxxxxxx najednou xxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete a xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x xxxxxxxxx; vyšší xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. S výjimkou xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx objem xxx xx xxxxx dávkových xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx variabilita.

1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxx se ni xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xx.

1.5.7 Analýza

Jakožto xxxx cytotoxicity se x xxxxx zvířat xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx 1000 buněk x xxxxxxx jedince.

X každého xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx. Tento xxxxx je možné xxxxxx při xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx dochází často x porušení xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx spojeného xx xxxxxxx chromozómů, xxxx být počet xxxxxxxxx x hodnocených xxxxxxx 2n ± 2.

2. XXXXX

2.1 Zpracování xxxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Experimentální xxxxxxxxx xx jedinec. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx aberací xx xxxxx buňku x procento buněk xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx jednotlivé xxxx xxxxxxxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx, jejich xxxxx x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x registrují xx, xxx obvykle xx xx celkové xxxxxxxxx xxxxxxx nezahrnují. Xxxxxx-xx xxxxx doklady x xxx, xx obě xxxxxxx xxxxxxx rozdílně, xx xxxxx xxxxx xx obě xxxxxxx xxx statistickou xxxxxxx xxxxxxx.

2.2 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxxxxx pozitivního výsledku xx používá xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované látky xxxxxxx xxxxxxxxx buněk x chromozómovými xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx dávkou xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Při vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx se xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Statistická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx má schopnost xxxxxxxxx mitotické procesy x xxxxxxxxx numerické xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxx buněk x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, že testovaná xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buněčného xxxxx (7) (8).

Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx, xx v xxxxx systému považuje xx nemutagenní.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx sice poskytuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx výsledky, x xxxxxxxxxxx případech xxxx xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vyvodit x xxxxxxxx testované xxxxx definitivní xxxxx. Xxxxxxxx mohou xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx, x když xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Pozitivní výsledky xxxxx xx chromozómové xxxxxxx in xxxx xxxxxxx, xx testovaná xxxxx vyvolává x xxxxxx xxxxx příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, že xx daných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxx x xxxxx, xxxx xx pravděpodobnost, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx používána, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx toxicita).

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx o průběhu xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx:

- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- xxxxx, xxx a xxxxxxx xxxxxxx,

- původ, xxxxxx podmínky, xxxxxx xxxx.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x směrodatných odchylek xxx jednotlivé xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx,

- xxxxx xx studie xxx xxxxxx rozpětí, xxxx-xx provedena,

- xxxxxxxxxx volby velikosti xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x podávání testované xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx, xx se xxxxx dostala do xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx cílové tkáně,

- případně xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx hmotnosti/den),

- xxxxxxxxxxx x kvalitě xxxxxxx x xxxx,

- xxxxxxxx popis xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx hodnocení xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x doba xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx preparátů,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx zvíře,

- kritéria, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx pozitivní, negativní xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx,

- xxx x xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx jedince xxxxxx,

- celkový xxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx, jejich xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,

- vztah xxxxx-xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, byly-li xxxxxxxxx,

- údaje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

- xxxxx xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx,

Xxxxxxx výsledků.

Závěry.

B.12. MUTAGENITA - XX XXXX XXXXXXXXXXXX XXXX X XXXXXXX ERYTROCYTECH

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 474, Mammalian Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Test (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx x xxxxx slouží xx zjištění poškození, xxx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxx xxxxxxx v tom, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x kostní xxxxx resp. x xxxxxxxxx krve xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx je x xxxxx vyloučeno; xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx mikrojádra xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx buňkám xxxxx xxxxx. Nárůst četnosti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx chromozómů.

V xxxxx xxxxx xx xxxxxx dřeň xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx tvoří. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x mikrojádry v xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx u každého xxxxxxxxxxx druhu, u xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx jeho xxxxxxx xxxxxxxx erytrocyty s xxxxxxxxxx odstraňovat xxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx způsobujících strukturální xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx centromerické XXX x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxxx xxxxxxx použít x případě, xx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx u xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, protože xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vivo, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, i když xxx xxxxx xxx xxxx živočišnými xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxx konečným xxxxxxx xxxxxxx. Test in xxxx je také xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx mutagenního xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x tom, xx se xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx nedostane, xxxx použití tohoto xxxxx vhodné.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): oblasti xxxxxxxxxx, xx kterými xx xxxxx dělení xxxx xxxxxx dělícího xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx dceřiných xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx): xxxx jádra xxxxxxxx xx jádra buňky (xxxxxxx) xxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxx reprezentovaná xxxxxxxxxxxx xx fragmenty xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx chybějí xxxxxxxx x xxxx xx xx od xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx erytrocytů xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, takže xxx lze xxxxxxx xx xxxxxxx, normochromních xxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro ribozómy.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx po xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx xx xxxxxxx x připraví xx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx (1-7). Xxxxx xx používá xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx se xx xxxxxx době xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx, jež xx xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, ve kterých xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, musí xxx xxxx od xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx. X preparátech xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.4 XXXXX METODY

1.4.1 Příprava

1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx druhu

Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx, doporučují xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx myši nebo xxxxxxx; xxxx však xxx použit xxxx xxxxxx xxxxx druh. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx se xxxx. Xxx ovšem xxxxxx jakýkoliv vhodný xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx, xx se x xxx slezinou xxxxxxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx nebo xx x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, jež xxxxxxxxx strukturální xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx při xxxxxxxx studie měly xxx xxxxxxxxx x x každého xxxxxxx xxxxxx přesahovat ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx

Všeobecné xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.

Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Zdraví xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx dní xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x laboratorních podmínkách. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx minimalizovaly případné xxxxx xxxx, xxx x kde xxxx xxxxx umístěny.

1.4.1.4 Příprava xxxxx

Xx-xx testovaná xxxxx x xxxxxx xxxxx x xx-xx xx xxxxx, látka xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxxxx testované látky xx xxxxx podávat xxxxx nebo xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / vehikulum

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx dávkách xxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx použití podpořeno xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx na xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx testu je xxxxx pro každé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly. Xx xxxxx zacházet xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

U xxxxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx in vivo xxx dávkách, kdy xxx očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvýšení xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xx volí xxx, xxx xxxx účinky xxxxxx, xxx přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx testovanou xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x jednom xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx je xx možné, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx ze xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx látek xxxxxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx:

Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx	62-50-0	200-536-7
X-xxxxx nitrosomočovina	759-73-9	212-072-2
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem xxxx xxxxxxxxx x zpracované xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx být xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxxxx historické xxxxx x xxxxxxxxx buněk x mikrojádry a x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx jeden xxxxx vzorků, xx xxxxxxxxxxxx dobou xxxxx xxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx publikované xxxxx prokazující, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx krev, xxxx xxx xxxx souběžná xxxxxxxxx xxxxxxxx přijatelný x xxxxxx xxxxxxxx xxxx působením xxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x periferní xxxx (xxxx. 1 - 3 xxxxx), kde xxxxxxxx xxxxx leží x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx kontroly.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx

X xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx každého xxxxxxx (11). Xxxxx v xxxx, xxx xx xxxxxx provádí, xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx způsobů xxxxxxxx prokazující, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx rozdíly, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx pohlaví postačující. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxx například x xxxxxxxxx farmaceutických xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx schéma

Xxxx se doporučit xxxxx xxxxxxxxxx rozvrh (xxxx. xxxxx, xxx xxxx více xxxxx x 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxx použít delší xxxxxxxxx schémata, xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx neprokáže xxxxxxxxx xxxxx; v xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xxx xxxxxx, xx se xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx až xx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xx den podané x rozmezí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Test xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx:

(x) Xx zvířata xx xxxxxxxxxx látkou xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxx se odeberou xxxxxxxxx dvakrát, poprvé xx xxxxx než xx 24 xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx než po 48 xxxxxxxx xx xxxxxx látky, s xxxxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx po 24 xxxxxxxx, xxxx xxx odůvodněné. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx minimálně xxxxxxx, xxxxxx ne xxxxx xxx po 36 xxxxxxxx od xxxxxx xxxxx, se xxxxxxxx xxxxxxxxx xx prvním xxxxxx vzorku, xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxx 72 xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx již xxxxx xxxxx zapotřebí.

(b) Xxxxx xx látka xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xxx xxxx xxxx xxxxx ve 24xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), odeberou xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx dřeně xxxxxx mezi 18 x 24 xxxxxxxx xx posledním xxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx mezi 36 x 48 hodinami xx posledním xxxxxx xxxxx (12).

Je-li xx xxxxxxxxxx, mohou xx mimoto xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.5.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx-xx xx studie xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xx třeba xx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx režimu, xxxx xx použijí x hlavní xxxxxx (13). Při xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx odběru vzorků xxx dávky xxx, xxx pokrývaly xxxxxxx xx maximální xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxx nulové. Xxx xxxxxxxx časový interval xxxxxx xxxxxx je xxx xxxxx použít xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx definována xxxx dávka vyvolávající xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx při xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxx xxxx letální. Xxxxx, xxx x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx biologickou xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx představovat xxxxxxx x těchto kritérií xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx případu. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx také xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx x určitým xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxx dřeni xxxx. xxxxxxxxx xxxx).

1.5.4 Limitní xxxx

Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx minimálně 2000 xx/xx hmotnosti x xxxxx xxxxx xxxx ve dvou xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx na xxxxxxx xxxxx x látkách x xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx neočekává genotoxicita, xxxxxx být xxxxxxxxx xxxx studie xx xxxxxxx tří xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxx xxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx za den xxx době trvání xx 14 xxx, x 1000 mg/kg xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxx dávkové úrovně xxxxx.

1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx sondou, nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx injekcí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx pokusného xxxxxxx a nemá xxxxxxxxx 2 xx/100 x hmotnosti; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxxxx xxxx žíravých xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba upravit xxxxxxxxxxx xxxxx tak, xxx xxxxx byl xx xxxxx dávkových xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Příprava xxxxxx dřeně / xxxx

Buňky kostní xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx z femuru xxxx xxxxx xxxxxxxx xx usmrcení xxxxxxx. Xxxxxx způsobem se xxxxxx xxxx xxxxx x femuru nebo xxxxx, buňky se xxxxxxx x obarví xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Periferní xxxx xx xxxxxxx x ocasní xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxx xx okamžitě xx xxxxxxxxx xxxxx obarví (8) (9) (10), xxxx se xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Použitím xxxxxxx specifického pro XXX (např. xxxxxxxxxx xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 s xxxxxxxxx-X (15)) se xxxxx xxxxxxxxxx některé x artefaktů xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx barviva, xxxxx xxxx DNA xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx, že by xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxx. Xxxxxx). Lze xxxxxx x další systémy - xxxxxxxxx kolony xx xxxxxxxx celulózy x xxxxxxxxxx buněk x xxxxxx (16) - pokud xxxx xxxxxx jsou x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx analýzu xxxxxxxxxx.

1.5.7 Xxxxxxx

X každého xxxxxxx se stanoví xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (nezralé + xxxxx). X xxxxxx xxxxx xx xxxxxx x případě xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxxxxxxx x v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx minimálně 1000 xxxxxxxxxx (17). Všechny xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx minimálně 2000 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx se xxxxx erytrocytů s xxxxxxxxxx. Doplňující xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxx, xx se mikrojádra xxxxxxxxx ve zralých xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x celkového xxxxx xxxxxxxxxx menší než 20 % xxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx týdnů xxxx xxxxx, xxx také xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x minimálně 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx. Možnou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx a průtoková xxxxxxxxxxxx xxxxxxx - xxxx xxxxxxxxx), xxxxx xxxx zdůvodněny x xxxxxxxxxx.

2. ÚDAJE

2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx x xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zvíře. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxx zaznamená počet xxxxxxxxxxxxx nezralých erytrocytů, xxxxx nezralých xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx nezralých erytrocytů xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx byl xxxx xxxxxxxx kontinuálně xx xxxx xxxx týdnů xxxx déle, xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (pokud xxxx xxxxxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xxxxx xxxxxxx x xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx rozdílně, xx xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE XXXXXXXX

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx třeba uvážit xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx statistické metody (18) (19). Statistická xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx být jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jejímž xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x tomto systému xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x aktivitě xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx stále nejednoznačné xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx experiment xxxxxxxxxx opakuje.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testu xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx testovaného zvířecího xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx dřeni xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx erytrocytech.

Xx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx bude xxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxx xxxxxxxxxxx cílovou xxxx zasáhne (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx informace:

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx známa.

Pokusná xxxxxxx:

- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,

- xxxxx, xxx a xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx, xxxxxx podmínky, xxxxxx apod.,

- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx počátku testu, xxxxxx hmotnostního rozpětí, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- pozitivní a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,

- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, byla-li xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,

- xxxxxxxxxxx x podávání xxxxxxxxx látky,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,

- případné metody x xxxxxxx, xx xx látka dostala xx celkového xxxxx xxxx do cílové xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx),

- podrobnosti o xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,

- podrobný xxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx hodnocení nezralých xxxxxxxxxx x mikrojádry,

- počet analyzovaných xxxxx x každého xxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx xx studie xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxx nezralých erytrocytů x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,

- počet xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx zvlášť,

- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxx každou xxxxxxx,

- xxxxx xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- údaje xx xxxxxxxxxx pozitivních xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

X.13/14. MUTAGENITA - XXXX REVERZNÍCH XXXXXX U XXXXXXXX

1. XXXXXX

Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 471, Xxxxxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxx Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx mutací kmeny Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxxx Escherichia xxxx (xxxxxxxxxx ve vztahu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx delece xxxxxxx nebo několika xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kmenů (1) (2) (3). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx mutací spočívá x xxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx vracejí xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx se funkční xxxxxxxxx xxxxxxxx syntetizovat xxxxxxx základní xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx základě své xxxxxxxxxx růst xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zkušební xxxx.

Genové xxxxxx xxxx u xxxxxxx xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxx xxxxxx x onkogenech a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx genech xxxxxxxxxxx buněk xxxxx x člověka a xxxxxxxxx zvířat roli xxx vzniku xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx na xxxxxxxx mutace je xxxxxx, levný x xxxxxxxxx jednoduchý. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx charakteristikami, xxxx xxxx jsou citlivější xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx propustnosti xxxxx pro velké xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxxxx takových xxxxxxx xxxxxxxx DNA, xxx xxxx xxxxxxxx x chybám. Specifita xxxxxxxxxxx kmenů xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx užitečné xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx testy xxxxxxxxxx mutací xx x dispozici velmi xxxxxxxx databáze xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx a byly xxxxxxxxxxx osvědčené xxxxxx xxx xxxxxxxxx chemikálií x xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 DEFINICE

Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo Escherichia xxxx xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx aminokyselině (histidinu xxxx. xxxxxxxxxx), xxx xxxxx xx vzniku xxxxx, který xx xx xxxxxxx aminokyseliny xxxxxx xxxxxxxxx.

Mutageny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx změnu xxxx x DNA. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxx xxxxxx nebo xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx genomu.

Frameshift xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mutace) jsou xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxx bází x XXX, čímž xx xxxx xxxxx xxxxx x XXX.

1.3 VÝCHOZÍ XXXXX

X xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xx savčích xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx struktuře x xxxxxxxxx xxxxxx XXX. Xxxxx xx xxxxx xxxxxx vyžadují exogenní xxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx ovšem xxxxxxxx dokonale imitovat xxxxx podmínky xx xxxx, takže xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x mutagenní a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx dané xxxxx v organismech xxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx genotoxické xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx. Pomocí rozsáhlé xxxxxxxx se prokázalo, xx mnohé chemikálie, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx ovšem x příklady xxxxxxxxxxx xxxxx, jež xx xxxxx xxxxxx neodhalí; xxxxxxx xxxxxx nedostatku xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx veličin, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x biologické xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx zvyšují, xxxxx xxxx x xxxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx třídy chemických xxxxx, jakými xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx sloučeniny (xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxx, x nichž xx xxxxxxxxxxx xxxx xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx (například xxxxxxx inhibitory xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx); x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxx.

Xxxxx sloučeniny, jež xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx karcinogenní xxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx absolutní; xxxxxx xx chemické xxxxx, x xxxxxxxx karcinogeny, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx nejsou, xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4 XXXXXXX XXXXXX

Suspenze xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické aktivace. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx "plate incorporation" xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x vylije xx xxxxx s minimální xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxx metodě se xxxxxxx směs xxxxxxxx x smísí x xxxxxxx agarem a xx xxxxx xx xxxxxx na minimální xxxxxx půdu. Xxx xxxx xxxxxxxx xx xxx xx xxx xxx po inkubaci xxxxxxxxxxx kolonie spočítají x výsledek xx xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx miskách x rozpouštědlem.

Xx xxxxxxx několik xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx. X xxxx nejběžnější xxxx xxxxxxxx misková xxxxxx ["plate xxxxxxxxxxxxx"] (1) (2) (3) (4), xxxxxxxxxxxx metoda (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) x xxxxxxxxx xxxxxx (11). Jsou xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx (12).

Postupy xxxxxxx x rámci xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x metody xxxxxxxxxxxx. Xxx tyto metody xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx jak x xxxxxxxxxxxx aktivací, xxx xxx xx. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx se x xxxxxxxx třídy, kam xxxxxxx alifatické nitrosaminy x xxxxxxx řetězcem, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, alylové xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx (3). Xxxx bylo xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx třídy mutagenů, xxxxx se pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx neodhalí. Xx xx je třeba xxxxxxxx jako xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", k xxxxxxx detekci je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxxx" (xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx pro xxxxxx xxxxxxx použít): azobarviva x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx x těkavé xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.5. XXXXX METODY

1.5.1 Xxxxxxxx

1.5.1.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx kultury xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx exponenciálního xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx 10⁹ xxxxx/xx). Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx titr xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xx prokázat xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx v jednotlivých xxxxxxx stanovením xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx očkováním xx xxxxxxx.

Doporučená xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 37^xX.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx pět xxxxxxxxxxxxx xxxxx, které budou xxxxxxxxx xxxxx kmeny X. xxxxxxxxxxx (XX 1535; XX 1537 xxxx TA97a xxxx 1X97; XX98; x XX100); x nichž xxxx prokázána xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx kmeny X. xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx GC x xx známo, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx oxidační mutageny, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x hydraziny. Xxxx xxxxx xx xxxx detekovat xxxxxx xxxxx X. coli XX2 xxxx S. xxxxxxxxxxx XX102 (19), xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx místě xxx xxxx AT. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx:

- S. typhimurium XX1535 x

- X. xxxxxxxxxxx XX1537 xxxx XX97 nebo XX97x x

- X. typhimurium XX98 x

- X. xxxxxxxxxxx XX100 x

- X. xxxx XX2 uvrA xxxx X. xxxx XX2 xxxX (pKM101) nebo X. xxxxxxxxxxx XX102.

X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vazby xxxx xxx nejvhodnější xxxxxx TA102 nebo xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx E. xxxx (xxxx. X. xxxx XX2 nebo X. xxxx XX2 (xXX101)).

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx postupů xxxxxxxx xxxxxxx kultury, xxxxxxx markeru x xxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx závislost na xxxxxxxxxxxxx nutné pro xxxx (histidin x xxxxxxx kmenů S. xxxxxxxxxxx, tryptofan x xxxxxxx xxxxx X. xxxx). Xxxxxxx xx xxxxx zkontrolovat x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x xx: přítomnost xx nepřítomnost R-faktor xxxxxxxx tam, kde xx xxxxxxxx x xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx TA98, XX100 x XX97x xxxx XX97, XX2 xxxX (xXX101) a rezistence xxxx xxxxxxxxxx + xxxxxxxxxxxx x kmene XX 102); přítomnost xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx. xxx mutace x X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x uvrA xxxxxx u X. xxxx nebo uvrB xxxxxx x X. xxxxxxxxxxx pomocí citlivosti xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) (2) (3). Xxxxxxx xxxxx mají xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx frekvenčním xxxxxxx očekávaném xxxxx xxxxxxxxxxxx kontrolních xxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx x x rozmezí xxxxxxxx x literatuře.

1.5.1.2 Médium

Xxxxxxx xx vhodný xxxxxxxxx xxxx (xxxx. x Xxxxxxxxx-Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X a xxxxxxxx) a xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x biotin xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx buněk (1) (2) (9).

1.5.1.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx, tak xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx používá xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx hlodavců xx xxxxxxx xxxxxx látkami, xxxx xx Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx xxxxxxxxx fenobarbitalu x ß-naftoflavonu (18) (20) (21). Xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx v koncentracích xxxx 5 x 30 % x/x xx směsi S9. Xxxxx x podmínky xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx použít xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6) (13).

1.5.1.4 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx

Xxxxx xxxxx xx xxxx působením xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx ve vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu x případně xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx čerstvé xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.

1.5.2 Podmínky testu

1.5.2.1 Xxxxxxx xxxxx (viz 1.5.1.1.)

1.5.2.2 Xxxxxxxxxxx

Xx xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, patří xxxxxxxxxxxx a rozpustnost x konečné xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxx použije.

Xxxx xxx účelné stanovit xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x předběžném xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx se dá xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií, vymizením xxxx xxxxxxxxx růstu xx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kultur. Za xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx se může xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nerozpustnost xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x konečné xxxxx xx skutečných xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x pouhým xxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pokusná xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 5 mg/misku xxxx. 5 µx/xxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxx látek, jež x těchto xxxxxxxxxxxxx xxxxxx rozpustné, xx xxxxx xxxx několik xxxxxxxxxxx mělo být x konečné xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx nižších xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx, xx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx rušit xxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx půllogaritmickým xxxxxxxxxx (xx. √10) mezi xxxxxxxxxxxx body x xxxxxxxx experimentu. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx závislost, xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx koncentrací vyšších xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µl/misku xxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxx-xx xx látka xxxxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxx mutagenních xxxxxxxx.

1.5.2.3 Xxxxxxxxx a pozitivní xxxxxxxx

Každý xxxx xxxx zahrnovat i xxxxxxxxx xxxxxxx specifickou xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx takové xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.

X xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxx xxxxx xxxxxxxxx typu xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Příklady xxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:

Xxxxx	CAS	XXXXXX
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx	781-43-1	212-308-4
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx	57-97-6	200-359-5
xxxx[x]xxxxx	50-32-8	200-028-5
2-xxxxxxxxxxxxx	613-13-8	210-330-9
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2

Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx kontrolou při xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:

Látka	CAS	XXXXXX
Kongo červeň	573-58-0	209-358-4

2-xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx S9. Pokud xx 2-xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx X9 xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, např. xxxx[x]xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Příklady xxxxx, jež xxxx xxxxxx xxx kmenově xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolu x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx systému metabolické xxxxxxxx, uvádí xxxx xxxxxxx:

Látka	XXX	XXXXXX
Xxxx xxxxx	26628-22-8	247-852-1	XX 1535 x XX 100
2-xxxxxxxxxxxx	607-57-8	210-138-5	XX 98
9-aminoakridin	90-45-9	201-995-6	TA 1537, XX 97 x XX 97x
XXX 191	17070-45-0	241-129-4	XX 1537, XX 97 a XX 97x
xxxxx-xxxxxxxxxxxx	80-15-9	201-254-7	XX 102
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6	XX xxxX x TA 102
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx	70-25-7	200-730-1	XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (xXX101)
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx	56-57-5	200-281-1	XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (xXX101)
Xxxxxxxxxxxx (XX2)	3688-53-7		kmeny xxxxxxxxxx plazmidy

K xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, xx xxxxx uvážit xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx.

Xx xxxxx použít x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, bez testované xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxx zachází xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx xx použijí x xxxxxxxxx kontroly xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx existují xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx mutagenní xxxxxx.

1.5.3 XXXXXX

Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (1) (2) (3) (4) xxx metabolické xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 0,05 nebo 0,1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, 0,1 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxx kultury (xxxxxxxxxx xxxxxx 10⁸ xxxxxxxxxxxxxxx buněk) x 0,5 xx sterilního xxxxx x 2,0 xx vrchního xxxxx. X xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx aktivací xx xxxxxxx mísí 0,5 xx metabolické xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakce (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) s 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx a testovanou xxxxxx /xxxxxxxxxx roztokem. Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xx povrch xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Vrchní agar xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxx roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxx 10⁸ životaschopných xxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx metabolickým xxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,5 xx) obvykle po xxxx 20 xxx xxxx déle při 30 - 37 ^xX; potom xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx misku x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,1 xx bakterií a 0,5 xx směsi X9 nebo xxxxxxxxxx xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx třepáním.

Xxx adekvátní xxxxx xxxxxxx xx pro xxxxxx xxxxx očkují xxx xxxxx. Duplicitní xxxxxxxx xx přijatelné, xx-xx vědecky zdůvodněno. Xxxxx-xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Plynné xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx, například x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (12) (14) (15) (16).

1.5.4 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxx teplotě 37 ^xX xxx xxxx 48 - 72 xxxxx, načež xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx na každé xxxxx.

2. XXXXX

2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xxx x negativní xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx kontrola xxx působení, byla-li xxxxxxx), xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pro xxxxxxxxxx xxxxx x xxx pozitivní a xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxx xxxxxxxx rozpouštědlo) xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx misku xxxxxx xxxxxxxxxx odchylky.

Xxxxxxxxxx xxxxxx pozitivní xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxx. Xxxxx xx potvrzení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx to xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Ke studijním xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx mezi koncentracemi, xxxxxx xxxxxxxx ("plate xxxxxxxxxxxxx" xxxx preinkubace x xxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxxx metabolické xxxxxxxx.

2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx dávkově xxxxxxx xxxxxx xx sledovaném xxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx při xxxxx xxxx xxxx koncentracích x xxxxxxxxx jednoho xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxx (23). Xxxx xxxxx se xxxxxxx biologická xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jako xxxxxxx xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx možno xxxxxx statistické xxxxxx (24), statistická xxxxxxxxxx xx však xxxxxx xxx xxxxxxx určujícím xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Testovaná látka, xxxxx výsledky xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx v tomto xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx poskytuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx souboru xxx xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx, x když xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx ukazují, xx xxxxx xxxxxxxx genové xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x genomu Xxxxxxxxxx typhimurium xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Zpráva o xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto informace:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky v xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.

Xxxxx:

- xxxxxxx kmeny,

- xxxxx xxxxx x xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- množství xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxx (v xx xxxx μl) xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxx xxxxx xxx jednu xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxx,

-typ a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx),

- xxxxxxx xxxxxxxx (zpracování).

Xxxxxxxx:

- známky xxxxxxxx,

- známky srážení,

- počty xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, byly-li xxxxxxxxx,

- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x směrodatných xxxxxxxx,

- údaje x xxxxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

X.15. GENOVÉ XXXXXX - SACCHAROMYCES XXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip metody

Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kmeny xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mohou xxx užity pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx indukovaných xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x x metabolickou aktivací.

Xxxx xxxxxxxxx forward xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx, jako xx míra xxxxxx xxxxxx x červených, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx-1, xxx-2) xx xxxxxxx, xxxxxx vyžadující xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx systémy, xxxx xx xxxxxxx rezistence xx canavaninu x xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx ověřený xxxxxxxx mutační xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx haploidního xxxxx XX 185-14 X x xxxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxx mutacemi xxx 2-1, arg 4-17, xxx 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx typu xxxxxx xxxx, které xxxxxxxx mutace xx xxxxxxxxxxx xxxxx, nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. XX185-14X xxxx xxxxxx xxx 1-7 xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mutacemi x xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxx 3-10, xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mutageny.

X xxxxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X₇, který xx xxxxxxxxxxx xxx xxx 1-92.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx testovaných xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx xx xxxxxxx vhodného xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx vyšší xxx 2 xxxxxxxx % x organických xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vehikula xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx růstu.

Xxxxxxxxxxx aktivace

Buňky xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x přítomnosti, xxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx postmitochondriální xxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx indukujících xxxxxx x xxxxxxxx kofaktory. Xxxxx xxxxxx druhů, xxxxx, postmitochondriálních frakcí xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx vhodné xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxx XX 158-14X x xxxxxxxxx xxxx D7 xxxx xxxxxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx

Xxxxxxxxxxxx kultivační xxxxx jsou užívána xxx určení xxxxx xxxxxxxxxxxxx x mutovaných xxxxx.

1.2.2.3 Negativní a xxxxxxxxx kontroly

Pozitivní, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly jsou xxxxxxxxx současně. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx

Má xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx látek xxxx xxxxxxxx použitá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx relativně xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx po xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx látky xxxxxxxxx, xx vodě xxxxxxxxx, xx xxxxxx případ xx xxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx při 28 xx 30 ^xX xx xxx.

1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx

Frekvence xxxxxxxxxxx mutací u xxxxxxxxx má xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnot.

1.2.2.7 Počet xxxxxxxxx

Xx nutno xxxxxx nejméně xxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x testu x prototrofními buňkami x u životnosti xxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx markery jako xxx 3-10 s xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx zvýšen, xxx xxxx xxxxxxx statisticky xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx X. xxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx a zahrnuje xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Základní xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx rostoucích xxxxxxx: 1-5 x 10⁷ xxxxx/xx xx xxxxxxxxx testované xxxxx xx xxxx xx 18 h. xxx 28 až 30 ^xX xx třepání. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx, pokud je xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx ovlivnění jsou xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxx médium. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx přežívající xxxxx x xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx mutací.

Xxxxxxxx xx první xxxxx xxxxxxxxx, má xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx s buňkami xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx je první xxxxx xxxxxxxxx, je xxxxxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxxxx experimentem.

2. XXXXX

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx v tabulkové xxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, počet xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvenci xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx metodami.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx informace o:

- xxxxxxxxx kmenech,

- podmínkách xxxxx: xxxxx xx stacionární xxxx nebo xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x trvání inkubace, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém,

- xxxxxxxxx vlastního xxxxxxxxxxx: xxxxxxx expozice, xxxxxx a trvání xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx mutací, xxxxxx xxxxx x xxxxxx, pokud xx xx možné,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u Xxxxxxxxxxxxx cerevisiae xxxx xxx detekována xxxx xxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx) x uvnitř xxxx. První případ xx xxxxxxx mitotické xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx případ xx xxxxxxxx nereciproční x xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx testováno xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xxxx xxxxxxx vzniklých x xxxxxxxxxxxxxxx kmenů, xxxxxx xxxxxxxx xx testována xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x auxotrofního heteroalelického xxxxx, který xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx téhož xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx mitotické xxxxxx konverse xxxx X₄ (xxxxxxxxxxxxxx v xxx 2 a xxx 5), X₇ (xxxxxxxxxxxxxx v xxx 5), XX₃₄ (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4) x XX1 (heteroalelický x xxx 4 x xxx 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x růžové xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x D₅ xxxx X₇ (který xxxxxx měří xxxxxxxxxx xxxxxxx konversi x xxxxxxxx xxxxxx x xxx 1-92). Xxx xxxxx xxxx heteroalelické xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx 2.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Roztoky xxxxxxxxxxx látek x xxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx nerozpustných xx xxxx užít xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % x xxxxxxxxxxx rozpouštědlech, xxxx xx etanol, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (DMSO). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x charakteristiky xxxxx.

Xxxxxxxxxxx aktivace

Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testovaných xxxxx jak x xxxxxxxxxxx, tak x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx indikujících enzymy x doplněná xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx postupů může xxx xxxxxx vhodné xxx metabolickou xxxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxx D₄, X₅, D₇ x XX1. Xxxxx jiných xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx

Xxxxxxxxxxxx kultivační xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

1.2.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx

Má xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx být xxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx na životnost xxxxx. U toxických xxxxx xxxx nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx testovány xx xx mez xxxxxxxxxxxx xxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, ve vodě xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx od případu.

Xxxxx mohou xxx xxxxxxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx, nebo během xxxxx xx dobu xx 18 h. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, jejichž xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.2.5 Podmínky xxxxxxxx

Misky xxxx xxxxxxxxxx xx tmě xx xxxxx až xxxx xxx xxx 28 - 30 ^xX. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx x růžových xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx 4 ^xX) xx xxxxx 1 - 2 dny xxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx mitotické xxxxxxxxxxx

Xxxx xxx užity xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.7 Počet xxxxxxxxx

Xx xxxxx použít xxxxxxx tří xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx mitotickou xxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxx životnosti xxxxx. X případě xxxxxxxxx recesivní xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx být xxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxx dosaženo xxxxxxxxxxxx xxxxx kolonií.

1.2.2.8 Xxxxxx

Xxxxxxxxx S. cerevisiae xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx buď stacionární, xxxx xxxxxxxx buňky. Xxxxxxxx xxxxxx mají xxx provedeny na xxxxxxxxxx xxxxxxx. 1-5 x 10⁷ buněk/ml xx xxxxxxxxx testované xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 až 30 ^oC za xxxxxxx. Odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xx přidáno v xxxxxxx ovlivnění, pokud xx xx xxxxxxxx.

Xx skončení xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x buňky x indukcí mitotické xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx pokus negativní, xx xxx proveden xxxxx xxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Jestliže xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx dalším xxxxxxx nezávislým experimentem.

2. XXXXX

Údaje xxxx xxx prezentovány v xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx počet kolonií, xxxxx rekombinací, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Údaje xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx má pokud xxxxx obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx: buňky ve xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, metabolický aktivační xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx experimentu: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, teplota xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx kolonií, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvence xxxxxxxxxxx, xxxxx dávky x účinku, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.17. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX BUŇKÁCH XX VITRO

1. XXXXXX

Xxxxxx xx replikací XXXX XX 476, Xx Xxxxx Xxxxxxxxx Xxxx Xxxx Mutation Xxxx (1997).

1.1 ÚVOD

Test genových xxxxxx xx xxxxx xx xx používat xx zjišťování genových xxxxxx vyvolaných xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxx linie xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx X5178X, xxxxx XXX, XXX-XX52 x X79 xxxxx čínského křečka x lidské lymfoblastoidní xxxxx TK6 (1). X těchto xxxxxxxxx xxxxx se nejčastěji xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (XX) x hypoxanthin-guanin fosforibosyltransferáze (XXXX) x x xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx fosforibosyltransferáze (XXXX). Xxxxx mutací x XX, XXXX x XXXX xx xxxxxxxx různá xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XX x XXXX xxxx umožnit xxxxxxx i takové xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxx), xxxxx xx xx lokusu XXXX chromozomů X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).

K xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx xxxx buněčných xxxxx. Při xxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx mutací.

Testy xx xxxxx xxxxxx vyžadují xxxxxxxx xxxxx metabolické xxxxxxxx. Takový xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedokáže xxxxxxxx savčí xxxxxxxx xx vivo dokonale. Xx třeba vzniku xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx by xxxxxxxx xxxxxxxxxx vlastní xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx výsledkům, xxx nejsou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx může xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xX, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (7).

Xxxxx test se xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Řada xxxxxxxxx, xxxxx xxxx x tomto testu xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx. Tato korelace xxxxxx na xxxxx xxxxxxxx látky x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx testem xxxxxxxx, protože xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nepůsobí (6).

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxxx: genová xxxxxx výchozího xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xx xxxxx xxxx ztrátě enzymatické xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx: xxxxx způsobující xxxxxxxxxx jednoho xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx x DNA.

Frameshift mutageny (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx posunové xxxxxx): látky, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxx x XXX.

Xxxx fenotypické xxxxxxx: xxxxxx, xxxxx xxxxxxx jsou z xxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxxx nezměněné genové xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx: počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx buněk xxxxxx xxxxxx živých xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx: xxxxxx počtu buněk x xxxx x xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxxx xxxxx; vypočítává xx xxxx součin xxxxxxxxx suspenzního růstu (x porovnání x xxxxxxxxx kontrolou) x xxxxxxx xxxxxxxxx účinnosti xxxxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxx).

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxx nárůst počtu xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx období exprese.

Přežití: xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx xxxxxxxxxx) ovlivněných xxxxx xxxxxxxxxxxxx xx miskách xx konci xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx XX^+/- → TK^-/-, xxxx xxxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pyrimidinového xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX). Xxxxx produkující thymidinkinázu xxxx vůči XXX xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx buněčného metabolismu x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx XXX proto xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, zatímco normální xxxxx, xxxxxxxxxx thymidinkinázu, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Podobně xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx XXXX xxxx XXXX selekčně xxxxxxxxxxx xxxx 6-xxxxxxxxxxx (TG) xxxx 8-xxxxxxxxxx (XX). Xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx selekčním xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx mutace x xxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx každé xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx x bez nich. Xxxxxxx-xx xx tedy xxxxxxxxxx strukturně xxxxxxxx xx selekčním činidlem, xx xxxxx potvrdit, xx xx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).

Buňky x xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x bez xx x xxxxxxxxx xx xx stanovení xxxxxxxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx výběrem xxxxxxx (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx x růstovém médiu xx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx x typ xxxxx, xxx xxxxx xxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx mutací. Frekvence xxxxxxx se stanoví xxxxxxxxx známého počtu xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx činidlo xxx detekci xxxxxxxxxx xxxxx a v xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xx stanovení xxxxxxxxx účinnosti (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (xxxxxxxxxx). Po xxxxxx inkubační xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx frekvence xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx mutovaných xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x x počtu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.4 XXXXX METODY

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx

Xx se xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx typů, xxxxxx xxxxxxxx xxxxx X5171X, XXX, XXX-XX52, X79 x XX6. X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx testu xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx chemickým xxxxxxxxx, vysoká xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) x stabilní xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx nesmějí.

Test xx třeba xxxxxxxxxx xxx, aby měl xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxx). Xxxxx xxxxx, počet xxxxxx x xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxxxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx expozici a xxxxxxx xx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xx xxxxx xxxxx má xxx minimálně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx mutací. Doporučuje xx xxxx použít xxxxxxx 10⁶ xxxxx. Xxxx xx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xx prokázala xxxxxxxxxxxxx zvládnutí xxxxx.

1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxx použít xxxxxx xxxxxxxxxx média x xxxxxxxxx xxxxxxxx (kultivační xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂, xxxxxxx a xxxxxxx). Xxxxx se pro xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx systému a xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x schopnost xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxx xx zásobních kultur, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 ^xX. Xxxx provedením xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx mutovaných xxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx indukujícími xxxxxx xxxx xx Xxxxxxx 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx fenobarbitalu x β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce x xxxxx činí xxxxxxx 1 - 10% x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx záviset xx xxx, xxxxxx typu xx testovaná xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx specifické xxxxxxxxx xxxxxx. Výběr xxxxxxxxx linií by xxx xxx vědecky xxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx X450 x xxxxxxxxxxx testované xxxxx).

1.4.1.5 Xxxxxxxx testované xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxx stavu, xxxxx xx xxxx působením xx xxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx do xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx předtím xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx prokazují, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx by xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx narušovat xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx X9. Používá-li xx xxxx známé xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxxxx xxx, xxx je to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx zvažováno xxxxxxx xxxx rozpouštědla xxxx. Xx-xx testovaná xxxxx xx xxxx xxxxxxx, musí xxx xxxxxxx organické rozpouštědlo xxxxx xxxxxxx. Voda xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.

1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, patří xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x systému x xxxxx pH xxxx. osmolality.

Cytotoxicita xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (přežití) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx růst. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx experimentech.

Použijí xx minimálně xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Dochází-li x xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. To xxxxxxx znamená, že xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx více xxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx hodnotami 2 a √10. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xx vést k xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx celkovému růstu x 10-20 %, xx však xxxx xxx 10 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx maximální xxxxxxxxx dávka xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 mg/ml, 5 μx/xx a 1,01 X.

X relativně xxxxxxxxxxxxx látek, xxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx se již xxxxx nerozpouští, má xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, než xx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxx s testovanou xxxxxx. Může xxx xxxxxx xxxxxxxxxx rozpustnost xx začátku x xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx rozpustnost xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx přítomnosti xxxxx, X9, xxxx xxx. xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x prostým okem. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.4.2.3 Kontroly

V xxxxx xxxxxxx experimentu xx xxxxxx provést x xxxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, vehikulum) xxxxxxxx, x xx xxx x metabolickou xxxxxxxx, tak xxx xx. Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx mutagenního účinku. Xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxx	Xxxxx	Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxxxxx
Xx	XXXX	xxxxx methansulfonát ethyl xxxxxxxxxxxxxxx	62-50-0 759-73-9	200-536-7 212-072-2
	XX (xxxx a xxxxx xxxxxxx)	xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	66-27-3	200-625-0
	XXXX	xxxxx metansulfonát ethyl xxxxxxxxxxxxxxx	62-50-0 759-73-9	200-536-7 212-072-2
Xxx	XXXX	3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx	56-49-5 62-75-9 57-97-6	200-276-4 200-549-8 200-359-5
	XX (malé a xxxxx kolonie)	cyklofosfamid monohydrát xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx	50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5	200-015-4

				200-028-5 200-276-5
	XXXX	X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx koncentrace X-9)	62-75-9	200-549-8
		xxxxx[x]xxxxx	50-32-8	200-028-5

Xxx xxxxxxxxx kontrolu se xxxxx použít i xxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (XXX 59-14-3, xxxxx XXXXXX 200-415-9), xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxx, xxx xx to možné, xx xxxxxx použít xxx pozitivní kontrolu xxxxx ze xxxxxx xxxxxxxx skupiny.

Pro každý xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx i negativní xxxxxxxx, xx xxxxx xx používá xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx médiu, zpracované xxxxxxx způsobem jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mimoto xx rovněž xxxxx xxxxxxx kontrolu bez xxxxxxxxxxx ovlivnění, xxxxxx xxxxxxxx historické xxxxx xxxxxxxxxxx, že zvolené xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx nepříznivé xx mutagenní xxxxxx.

1.4.3 Xxxxxx

1.4.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx ní. Expozice xxxxxxx xx vhodnou xxxx (xxxxxxx xx xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Xxxx expozice xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxx každou koncentraci xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx kultura, xx xxxxx xxxxxx xxxxx koncentrací tak, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx počet kultur x xxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxxxxxx). Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xx používají xxxxxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx látek xx xxxxx uplatnit v xxxxx vhodné postupy, xxxx je použití xxxxxxxxxx uzavřených xxxxxxxxxxxx xxxxx (21, 22).

1.4.3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x mutační frekvence

Po xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx promyjí x xxxxxxxxx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxx xx xxxxxxx začíná x xxxxxxxx cytotoxicity xxxxxxxxxx klonovací xxxxxxxxx - cloning efficiency xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx časový xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX x XXXX vyžaduje xxxxxxxxx 6 - 8 dní, XX xxxxxxxxx 2 xxx). Xxxxx xx xxxxxxx x médiu s x bez selekčního xxxxxxx pro stanovení xxxxx mutantů x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Po xxxxxxxx doby exprese xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxx četnosti xxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx xx selekční médium.

Pokud xx xxxxx v xxxxx X5178X XX⁺/^- xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xx jedné x xxxxxxxxxxxxxxxx kultur (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxx testu xxxxxxxxx, změří se xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxx provést x xx xxxxxxxx x XX6XX⁺/^-.

2. ÚDAJE

2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxx data xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx u experimentálních x kontrolních xxxxxx. X případě xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx X5178XX⁺/^- xx kolonie xxxxxxx pomocí xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx koncentraci testované xxxxx (nejvyšší xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) a negativní x pozitivní kontrole. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx i xxxxxx kolonií byly xxxxxxxx prostudovány v xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx xxxxx XX⁺/^- xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx kritéria xxxxxxx xxxxxxxxxx růstu (velké) x xxxxxxxx růstu (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx utrpěly xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx obvykle xxxx od ztráty xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tvorba xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x expozicí látkám xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx podobnou rychlostí xxxx xxxxx rodičovské x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xx třeba uvádět xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinnost - xxxxxxxx cloning xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx frekvence xx xxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx počtem xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxxxx xx xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx musí potvrdit xxxxxx xx xxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xx třeba xxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxx nejednoznačných xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx x následných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx modifikaci xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx rozšířilo xxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx, které xx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx rozdíly xxxx xxxxxxxxxxxx koncentracemi x xxxxxxxx metabolické xxxxxxxx.

2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx existuje xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx závislý xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Nejprve xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxxxxxx metody. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx být xxxxxxx určujícím faktorem xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výše xxxxxxx kritéria, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx nemutagenní. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx jednoznačně pozitivní xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx dat xxxxxxx o xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx nejednoznačné xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx výsledky xxxxx xx xxxxxx xxxxxx v savčích xxxxxxx in vitro xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx savčích xxxxx xxxxxx mutace. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx pozitivní xxxxx xxxxx - xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx mutace.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:

- zdůvodnění volby xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx známa.

Buňky:

- xxx x xxxxx xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx kultury,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx pokusu:

- xxxxxxxxxx xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx. údajů x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx v rozpustnosti, xxxx-xx x xxxxxxxxx,

- xxxxxxx média, xxxxxxxxxxx XX₂,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx x přidané xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxx inkubace,

-doba xxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx,

- xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx,

- xxxxx expresní xxxxxxx (případně včetně xxxxx inokulovaných buněk, xxxxxxxxx)

- selekční xxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxx zjišťování xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx, u xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x typ (včetně xxxxxxxxxx kritérií xxx xxxxxxxxxxx xxxx "xxxxxx" x "xxxxxxx" xxxxxxxxx).

Xxxxxxxx:

- xxxxxx toxicity,

- xxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx x xX a osmolalitě xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx-xx stanoveny,

- xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx malé xxxxxxx mutantů xxxxxx xxxxxxx X5178X TK⁺/^-,

- xxxxx dávka - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- historické xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx odchylek.

Diskuse xxxxxxxx.

Xxxxxx.

X.18. XXXXXXXXX XXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXX XXXXXXX XXX - SAVČÍ XXXXX XX XXXXX

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Test xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (UDS) xxxxxxxx měřit reparační xxxxxxx XXX xx xxxxxx x odstranění xxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx indukovaného xxxxxxxxxx xxxx fyzikálními xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (³X-XxX) xx XXX xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx x X xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx ³X-XxX je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx kapalnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x exponovaných xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx kultury potkaních xxxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxx testovanou xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx i x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. XXX xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Testované xxxxx a sloučeniny xxxxxxx xxxx kontrolní xxxx referenční xx xxxxxxxx xxxx suspendují x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx médiem. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx životnost xxxxx.

Xxxxxxxxx xx pouze xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx hepatocytů, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných linií (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx).

Xxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxx kultur

Pro xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxx kultur (xxxx xxxx, je-li xx xxxxxxx zdůvodnitelné) pro XXX XXX.

1.2.2.2 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx i v xxxxxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Jako pozitivní xxxxxxxx lze pro xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-XXXX) xxxx 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Xxxx xxxxxxxxx kontrolu pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxx x xxx XXX xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-NQO). Xxxx xxxxxxxxx kontrolu při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx lze xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky

Xxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xx xxxx špatně xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x koncentracích až xx hranici xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxx netoxické xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxx

Xxx xxxxxxxxx kultur xxxx být xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO₂, xxxxxxx x xxxxxxx. Stabilizované xxxxxxx xxxxx musí xxx pravidelně xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx.

1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx aktivace

Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a lymfocyty xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x přítomnosti x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx

1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx buněčná xxxxx xx xxxxxxxxxx xx zásobní xxxxxxx (xxxxxxxxxx nebo setřepáním xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx nádoby), inokuluje xx do kultivačních xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxx 37 ^oC.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx potkaních xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx, že xx xxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přichytit xx xx vhodném xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx lidských xxxxxxxxx jsou založeny xxxxxx vhodné xxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx

Primární hepatocyty xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxx obsahujícím ³X-XxX xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx médium xxxxxxxxxx, buňky xxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxx může být xxxxxx stripping film), xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, obarvena x xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie x xxxxxxxxx

Autoradiografické techniky: Xxxxxxx kultury jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx x xxx jsou xxxxxxxxx působení ³X-XxX. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, aktivitě xxxxxxxxxxxxx systému x xx typu xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx UDS xx xxxxx ³X-XxX přidat xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx několik xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx mezi xxxxxx xxxxxxx xx ovlivněn xxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxxxxxxx xxxxxx x ³X-XxX. X odlišení xxxx XXX a xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx DNA xx užívá xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx DNA.

Stanovení XXX xxxxxx XXX: Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx X-xxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce, xxx bylo xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx. Na xxxxx xxxxxxxxx xx XXX xxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx obsah DNA x určen rozsah xxxxxxxxxxx ³X-XxX.

Xxxxxxxx xxxx použity xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx replikace XXX zbytečná.

1.2.4 Xxxxxxx

1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx

Xxx xxxxxxxxxxxxx UDS v xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx v X-xxxx xxxxxxxxx. Hodnotí xx xxxxxxx 50 buněk x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Preparáty xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx ³X-XxX x xxxxxxxxxx xx xxxx x xxxx x velikosti xxx jader x xxxxxxxxxx xxxxx hodnocené xxxxx.

1.2.4.2 Vyhodnocení XXX

Xxx xxxxxxxxx XXX XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kultur xxx xxxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxx.

Výsledky xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xxxx xxx uvedeny x xxxxxxxxx.

2.1 Vyhodnocení xxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxxxxx ³X-XxX xx cytoplazmy x xxxxx zrn xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx jádro xx zaznamenávají odděleně.

Xxxxxx inkorporace ³X-XxX xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x modu.

2.2 Xxxxxxxxxxx XXX

Inkorporace ³X-XxX xx zaznamenává xxxx xxx/μx XXX. Xxxxxxxx xxxxxxx xxx/μx DNA xxxxx se směrodatnou xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx vhodnými statistickými xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx o:

- xxxxxxxxx buňkách, jejich xxxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx kultury, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx použitých x xxxxxxxxx xxxxxxx, médiu, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂,

- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, koncentracích x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x experimentu,

- xxxxxxxxxxxx aktivačním systému,

- pokusném xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx autoradiografických xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx do X-xxxx,

- postup xxxxxxxxx k xxxxxxxx XXX a k xxxxxxxxxxx celkového xxxxxx XXX při xxxxxx XXX,

- vztahu xxxxx/xxxxxx, je-li xx xxxxx,

- statistickým xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.19. XXX - XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XX VITRO

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

SCE xx xxxxxxxxxx test xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx DNA mezi xxxxx xxxxxxxxxxx chromatidami xxxxxxxxxx. SCE reprezentují xxxxxx identických xxxxxxxx XXX mezi replikačními xxxxxxxx x identických (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. SCE xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx zatím xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx SCE xxxxxxxx diferenční xxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatid. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (BrdU) xx xxxxxxxxxxxxx XXX xx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Savčí xxxxx xx vitro xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx, xx-xx xx potřebné. Xxxxxxxxx xx po xxxx xxxx replikačních xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx BrdU. Ke xxxxx kultivace se xxxxx ovlivní xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (např. xxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxx x x-xxxxxxxx xxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buňky xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx analýzu xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx (xxxxxx lymfocyty) xxxx xxxxxxxxxxxxx buněčné xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xxxxx musí být xxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx CO₂ x vlhkost).

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx koncentrace rozpouštědla xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx frekvenci XXX.

Buňky se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Připouští xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x vnitřní (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx aktivitou, xxxxxxxx úroveň x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Experimentální xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxx kultur

Pro xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx nejméně xxx kultury.

1.2.2.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

X každém xxxxxxxxxxx xxxx xxx zařazeny xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx vyžadující metabolickou xxxxxxxx. Dále xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx:

- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx

- xxxxxxx xxxxxxxx mutageny: xxxxxxxxxxxxx

Je-li xxxxx, xx možné xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejné chemické xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx testované látky xxxx mít xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, ale xxxxxxx musí umožnit xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk. Xx vodě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx koncentrace xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xx xxxxxxxxxx ze zásobní xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxx 37 ^xX. Xxx xxxxxxxxxxxx kultury xx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxx x kultivační xxxxxx, xxx xx xxxxx kultivace nevytvářely xxxx než x 50 % konfluentní xxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx lymfocytární kultury xx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx xxxx běžnými xxxxxxx a xxxxxxxx xxx 37 ^xX.

1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx. Xx xxxxxxx případů xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxx, xxx expozice xxxx xxx prodloužena xx xx xxx xxxxxxx xxxxx, xx-xx xx třeba. Buňky, xxxxx xxxxxx dostatečnou xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx exponovány xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Na konci xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx z média xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x dále kultivovány x xxxxxxxx xxxxx x XxxX xxx xxxxxxxxxx cykly. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx buňky xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou x XxxX xx xxxx xxxx xxxxxxxxx cyklů.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx jsou x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x druhém mitotickém xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx v nejcitlivějším xxxxxx buněčného xxxxx. Xxxxxxx kultury s XxxX xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx XxxX.

1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xx čtyři xxxxxx xxxx xxxxxxxxx kultivace xx xx kultur xxxxx inhibitor xxxxxxxx xxxxxxxx (např. kolchicín). Xxxxx kultura xx xxxxxxxxxx samostatně.

1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx x barvení

Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx cytogenetickou xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx ke xxxxxxxxxx SCE může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxx xxxx Giemsa).

1.2.3.5 Xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx SCE x kontrole. Obvykle xx xxxxxxx nejméně 25 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx zakódovány xxxx xxxxxxxx. V lidských xxxxxxxxxxx se analyzují xxxxx metafáze x 46 xxxxxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxxxxx linií pouze xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx o ± 2 xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx počtu centromer. Xx třeba stanovit, xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx formou. Xxxxxxxxxxx se xxxxx XXX x xxxxx xxxxxxxx x počet XXX/xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx xx možné, xxxxxxxxx x:

- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxx xxxxxxxxx x udržování xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX₂, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx a jeho xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx,

- způsobu xxxxxxxx mikroskopických xxxxxxxxx,

- počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx),

- xxxxxxxxx xxxxx XXX/xxxxx x XXX/xxxxxxxxx (odděleně xxx xxxxxx xxxxxxx),

- kritériích hodnocení XXX,

- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.20. XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX XXXXXX XX XXXXXXX X XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxx

Xxxx na xxxxxxxxx letální xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx (XXXX) na Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx, xxx i malých xxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxx hmyzu. Je xx xxxx na xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx mutací x xxxxxxxxx 800 xxxxxxxx xxxxxxxxxx X. Xxxx reprezentují xxx 80 % xxxxx xxxxxx X-chromozómu. X-chromozóm xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx genomu.

Xxxxxx v X-xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx projeví x xxxxx nesoucích xxxxxxxx gen. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx x hemizygotním stavu, xxx na xxxx xxxxxxxxxx usuzovat x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx typů samčích xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxx heterozygotní xxxxxx. XXXX xxxx xx výhodný xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxxx

Používají se xxxxx dobře definované xxxxxx xxxxx a xxxxxx linie Xxxxxx-5. Xxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx popsané xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx.

1.2.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxx. Látky xx xxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxx xxxxxxx x Xxxxxx-60 xxxx 80), xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx nebo fyziologickým xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxxx.

1.2.1.3 Počet xxxxxx

Xxxx má xxxxxx určenou xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Způsob xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx uskutečňuje xxx xx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx. Zkrmování xxxxxxxxx xxxxx xx provádí x cukerném xxxxxxx. Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx v 0,7% xxxxxxx XxXx x xxxxxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx

V xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx) a pozitivní xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x dispozici xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.1.6 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx se tři xxxxx testované látky. Xxx předběžný xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx rovnající xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Popis xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxx xxxx (xx stáří 3-5 xxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxx samicemi z xxxxx Xxxxxx-5 xxxx x xxxx vhodné xxxxxxxxx linie (xxxxxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxx vyměněny xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx až xxx xxx, xxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx zárodečných xxxxx. U xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, na xxxxxxxxxx xx středním xxxx pozdním stadiu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx X₁ xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx dále xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (tj. jedna xxxxxx/xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx. V F₂ xxxxxxxx xx v xxxxx kultuře xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx divokého xxxx. Xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx X₁ xxxxxx xxxxxxx letální xxxxxx x rodičovském X-xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxx, xxx xx zjistilo, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x dalších xxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx tabulky. Uvádí xx xxxxx xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxx každou xxxxxxxxxxx, xxx každé xxxxxx xxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Zaznamenává xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Výsledky se xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Nahromadění xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mutací xxxxxxxxx x jednom xxxxx má xxx xxxxx v xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx způsobem.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, informace x:

- xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kmenech Drosophily, xxxx, počtu xxxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxxxxxxx xxxxx, počtu xxxxxxxxx X₂ kultur, xxxxx X₂ xxxxxx xxx potomků, počtu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx zárodečných xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin,

- xxxxxxxxxx testu: xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x schéma xxxxxx xxxxxx, výše xxxxx, xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx kontroly,

- kritériích počítání xxxxxxxxx mutací,

- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, xx-xx xx možné,

- xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.21. XXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXX XXXXX - IN VITRO

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxxx lze xxxxxx xxx xxxxxxx fenotypických xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx in vivo. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx X3X10X1/2, 3X3, XXX, Fischerových xxxxxxx x xxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx změny x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Méně xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx ostatní fyziologické xx morfologické xxxxx x xxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx výsledek xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Některé xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx promotorů. Xxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (cloning xxxxxxxxxx) nebo ovlivněním xxxxxxxxx růstu xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx ze xxxxxxxxxxx, xx expozice xxxxxxxxx xxxxx byla xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xx nelze xxxxxx k xxxxxx xxxxxxxxx transformace xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x některých mohlo xxxxx x prodloužení xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

1.2.1.1 Xxxxx

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx linií x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x testu xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxx zajistit, xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx karcinogenem a xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x že xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x spolehlivost.

1.2.1.2 Médium

Xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx vhodné pro xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxxxxxx látky

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx ovlivněním xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx transformace.

1.2.1.4 Metabolická xxxxxxxx

Buňky jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx x xxx přítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému. Xxxxxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx s xxxxxxx metabolickou xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly

Do xxxxxxx experimentu xxxx xxx zařazeny pozitivní xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxx přímo xxxxxxxxxx x vyžadujících xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx také xxxxxxxxx xxxxxxxx (s xxxxxxxxxxxxx).

Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxx xxxxxxxx látky: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-propiolakton,

- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Je-li xxxxx, xx xxxxx zařadit xxxxx pozitivní kontrolu xx stejné chemické xxxxxxx, jako xx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.2 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx dávky. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx způsobují xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx přežívání buněk xxxxxxxxx stejné jako x xxxxxxxxx kontrole. Xx xxxx relativně xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx postupů. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx určuje xxxxxxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx závislou xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Ta může xxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx (xx. výměnou xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), jestliže xx xxxxx o xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Buňky bez xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx vhodných xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx. Xxx xx zaznamenáván xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

2. ÚDAJE

Údaje xxxx být prezentovány x xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx vyjadřovat xxxxxxxxx buněk jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx transformací xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx metodami.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, informace x:

- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, metabolickém aktivačním xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, hustotě xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx selektivního xxxxxxx (xx-xx to xxxxxx), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,

- metodách vyčíslení xxxxxx x transformovaných xxxxx,

- statistickém xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- interpretaci xxxxxxxx.

X.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX TEST X XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx metody

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx způsobuje xxxxxxxxxxx xxxx fetální xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx chemické xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx xxxxx poškozuje zárodečné xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Obecně xx xxxxxxx, že xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chromozómů (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx a pářeni x xxxxxxxxxxxxx, intaktními xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx x exponované xxxxxxx xxx počet xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx vyjadřuje postimplantační xxxxxx. Preimplantační xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupině. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx pre- x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx celkové xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx založen xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxx x exponované xxxxxxx x xxxxx implantacím xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Snížení xxxxx implantací x xxxxxxxx intervalu xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (x.x. spermatocytů x/xxxx xxxxxxxxxxxxx).

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxxxxx xxxxx rozpustit nebo xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx se xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxx vyvolávat xxxxxxx účinky. Před xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxx aplikace

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx pouze xxxxxx. Xx základě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx látku xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxx i xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxx xxxx xx doporučují použít xxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxx na exponované x kontrolní xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx a pohlaví

Xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx počet exponovaných xxxxx s xxxxxxx xx spontánní variabilitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x silou xxxxxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx samců, xxx xx dosáhlo 30 - 50 xxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2.4 Negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Pozitivní x negativní (s xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx experimentu. Jestliže xxxx má laboratoř x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx experimentů, xxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxx pro pozitivní xxxxxxxx musí být xxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx dávkách, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (např. MMS, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 xx.xx^-1).

1.2.2.5 Xxxxxxxxx

Nejčastěji se xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx vyvolávat známky xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx vysoká xxxxx.

1.2.2.6 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx x jedné dávce 5 g.kg^-1 xxxx x xxxxx 1 x.xx^-1.xxx^-1 při opakované xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx postupu

Existuje xxxxxxx postupů. Nejčastěji xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Může xxxx xxx použito xxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxx u samců xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx, nebo xxxxx xx neprokáží xxxxxxx xx xxxxxx či xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xxxxxx po xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a musí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx buněk sledovaných xx xxxxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx k xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx implantací. Xxxxxxxxx xxxx být vyšetřeny x xxxxxx xxxxx xxxxxxx tělísek.

2. ÚDAJE

Xxxxx x xxxxx xxxxx, xxxxx březích xxxxx x počtu xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx každého páření xxxxxx xxxxxxxxxxxx každého xxxxx x samice xxxx xxxxxxx samostatně. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx záznam x xxxxx páření, o xxxxx xxxxxx xxxxx, x počtu xxxxxx x xxxxxxx implantací.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx dominantního xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx mrtvých ku xxxxx implantacím x xxxxxxxxxx xxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx vypovídá x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

V xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx časná x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx ztráty. Xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx počtem xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx na dělohu xx srovnání x xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Zpráva o xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx xxxxx, informace x:

- xxxxx, xxxxx, xxxx a xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xx každého xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách, údajích x xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx expozice,

- xxxxxx páření,

- xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx počítání dominantních xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx xxxxx/xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx hodnocení,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx OECD XX 483, Mammalian Xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Aberration Xxxx (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx způsobující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx spermatogoniích (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx dvojího druhu: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx chemickými xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, ovšem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx určena x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx k tomuto xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xx analyzují xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

X xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hlodavci. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx testem xx xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Tato xxxxxx xxxxxxxxx jiné xxxxxx buňky.

Aby xx ve spermatogoniích xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx působení xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx než xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx buněčném xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómů, kde xx zjišťují aberace xxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxxxxxx buňky xxxx ve xxxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxx xx xxxx je xxxxx xx zjišťování, xxx xxxx mutageny aktivní x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxx pro hodnocení xxxxxx mutagenity xxx, xx xxxxxxxx posuzovat xxxxxxx metabolismu in xxxx, farmakokinetiky a xxxxxxxxxxx procesů XXX.

X xxxxxx je xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx širokým xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx představují xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx polohy xx varleti xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, ale xxxxxxxx xxx exponovány krevním xxxxxx xxxxx anatomické x fyziologické xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx, xx xx testovaná xxxxx xxxx její xxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx látka xxx xxxx vhodná.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxx, xxxxxxxx xxxx chromatid, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vyjádřená xxxx xxxx xxxxxxxxxx jako xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx stejném xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx chromozóm, xxxxxxxxxx chromozóm-ring)

Zlom xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx chromatid za xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxx ve struktuře xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx xx šířka xxxxxxxxx chromatidy. Dále xxx v xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx chromozómu je xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx.

Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx menší xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x minimálním xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx počtu xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (n) xxxx xxx diploidní xxxxx xxxx (3n, 4x xxx.).

Strukturální xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, pozorovaná xxxx delece x xxxxxxxxx, a xxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxx xx xxxxxxx způsobem xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x ve xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx usmrtí. Před xxxxxxxxx se na xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx®). Xx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.4 XXXXX METODY

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Výběr živočišného xxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxx samci xxxxxxxx xxxxxx a xxxx, xxx xxxxx použít xxxxx xxxxxxxxxxx jiného xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx jedinců. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x u xxxxxxx xxxxxxx nemají xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx

Všeobecné podmínky xxxxx jsou uvedeny xx Všeobecném xxxxx x části X.

Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx mladí xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx a xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx aklimatizují v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx uspořádat xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.

1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx stavu x xx-xx to xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx její suspenze xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, ledaže údaje x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že skladování xx neovlivní.

1.4.2 Xxxxxxxx testu

1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Rozpouštědlo/vehikulum x používaných xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a nesmí x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx je xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx rozpouštědlo/vehikulum.

1.4.2.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx zvířaty ve xxxxx skupinách stejně.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx ve spermatogoniích xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx xxxx xxx xxxxxxx, kdy lze xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx tak, aby xxxx účinky xxxxxx, xxx přitom xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zakódovaného xxxxxxxxx. Pozitivní kontrolu xx xxxxx podávat xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx je xx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx látka. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxxxxxxxxxx	50-18-0	200-015-4
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx	6055-19-2
xxxxxxxxxxxxxx	108-91-8	203-629-0
xxxxxxxxx X	50-07-7	200-008-6
akrylamid xxxxxxx	79-06-1	201-173-7
xxxxxxxxxxxxxxxxx	51-18-3	200-083-5

Xxxxxxxxx xxxxxxxx ovlivněné xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx by xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx intervalů zpracování, xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx přijatelné historické xxxxx x frekvenci xxxxx s aberacemi x x interindividuální xxxxxxxxxxx mezi zvířaty. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx i neovlivněných xxxxxxx, ledaže xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxx prokazující, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxx xxxx mutagenní xxxxxx.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx

X xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxx.

1.5.2 Xxxxxxxxx schéma

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx xxxx dávkách. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx dávku, xxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxx rozdělit, xx. xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx režimy xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

V případě xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xx expozici xxxxx xxxxxxxxx dvakrát. Xxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxx kinetiku xxxxxxxxx xxxxxx, provádí xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 24 x 48 xxxxx xx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx (xx. xxxx xxxxx xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 24 hodinách xxxx xx 1,5násobku xxxxx xxxxxxxxx cyklu xx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxx (6).

Xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx intervaly xxxxxx xxxxxx. Xxxx. xxxxx-xx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómů xxxxx mitózy, xxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx X-xxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx doba xxxxxx xxxxxx (1).

Zda xx xxxxxx nechat xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx případ xx případu. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx zvířata po 24 xxxxxxxx (1,5xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxxx aplikace. Odběry xxx xxxxxxxx x x dalších intervalech, xxxxxxxx-xx xx xx xx xxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vhodná xxxxx Xxxxxxxxx® nebo xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx je tento xxxxxxxx xxxxxx 3-5 xxxxx, x čínských xxxxxx xxxxxx 4-5 xxxxx.

1.5.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou k xxxxxxxxx žádné xxxxxx xxxxx, je třeba xx provádět x xxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx užívají pro xxxxx xxxxxx interval xxxxxx vzorků tři xxxxx tak, aby xxxxxxxxx rozmezí xx xxxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx vzorků xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx nejvyšší xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx takové známky xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxx xxxx xxxxxxx.

Látky, xxx x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxxx představovat xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x vyhodnocují xx xxxxxx od xxxxxxx. Xxxxxxxx dávka xxxx být také xxxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxx k xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx spermatogoniích (např. xxxxxx xxxxxx mitóz xxxxxxxxxxxxx k první x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xxxxxx xxxx xxx vyšší xxx 50 %).

1.5.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx při dávce xxxxxxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx x jedné xxxxx nebo ve xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx se xx xxxxxxx údajů o xxxxxxx s podobnou xxxxxxxxx strukturou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nemusí být xxxxxxxxx xxxx studie xx xxxxxxx tří xxxxxxxxx úrovní. Xxxxx xxxxxxxxx humánní xxxxxxxx xx může xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx.

1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vpravuje xxx žaludeční xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx přijatelné x jiné způsoby xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx najednou xxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 g hmotnosti; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. S xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx koncentracích horší xxxxxx, xx třeba xxxxxxx koncentrace xxxxx xxx, aby objem xxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stejný x minimalizovala se xxx objemová xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Xxxxxxxx chromozómů

Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx připraví xxxxxxx xxxxxxxx, na xxxxxx xx působí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx.

1.5.7 Analýza

U xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx x jedné xxxxxxx). Tento počet xx xx snížit, xx-xx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx chromozómů, musí xxx u xxxxx xxxx buněk xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx číslu 2x ± 2.

2. XXXXX

2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX

Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx prezentují x tabelární formě. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x počet aberací xx xxxxx buňku. X xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx chromozómových aberací, xxxxxx xxxxx x xxxxxxx. Gapy xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, uvádějí xx, xxx xxxxxxx xx xx celkové xxxxxxxx aberací xxxxxxxxxx.

Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx, xxxxxxx xx x všech xxxxxxxxx xxxxxx i xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xxx, že xx x každého xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxxxx xx xxxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxx mitóza, xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx u xxxxxxxxx 1000 buněk x xxxxxxx jedince.

2.2 VYHODNOCENÍ X INTERPRETACE VÝSLEDKŮ

Xx xxxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx závislá xxxxxxxxx xxxxx x chromozómovými xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x aberacemi ve xxxxxxx ovlivněné xxxxxxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxx časovým xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování výsledků xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (8); statistická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx vyjasnit xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx za xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek.

Xxxxxxxxx látka, xxx xxxxxx použití xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, se x xxxxx xxxxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx experimentů xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinku xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxx opakovaných xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zárodečných buňkách xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx chromozómové oberace. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx x zárodečných xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xxxxxxxxxx.

Xx třeba xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx dosáhne širokého xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxxxxxx toxicita).

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx je třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxx,

- rozpustnost x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxx druh/kmen,

- xxxxx a xxx xxxxxx,

-xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx počátku xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx aplikace xxxxx,

- xxxxxxxxxxx o xxxxxxxx testované xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx xxxxxxxxx xxxxx (mg/kg xxxxxxxxx / xxx),

- podrobnosti x xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- metody xxxxxxxxxx toxicity,

- xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aberací,

- xxxxx analyzovaných xxxxx xx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxx se studie xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxx xxxxx spermatogonií k xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxx a xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx zvlášť,

- xxxxxxx počet xxxxxxx x dané xxxxxxx,

- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx na xxxxx skupinu,

- xxxxx dávka - xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedeny,

- údaje ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,

- xxxxxxxx pozorované xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

B.24. SPOT XXXX U XXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xx xx xx vivo xxxx xx myších, x xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx se embrya xxxxxxxxxx chemickým xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx geny xx, které xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Embrya xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx genů xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxx dominantních xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx vytvářejících xxxxxx (xxxxx) pozměněné xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Počet xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xx zaznamenán x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx mutace x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Příprava

Xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx xxxx suspendovány x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Látky nerozpustné xx vodě jsou xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx připravené xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xxxxx X (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxxxxxx, xxxx xxx, x^xx x/x^xx x; xxxxx, x/x; xxxxxx, xxxxx xxx, x xx/x se; xxxxxxx xxxxxxxx, s/s) xxxx xxxxxxx buď x xxxxxx XX (xxxxxx, xxxxxxxxx, brachypody, xx a xx/xx x xx; xxxxxx xxxxx, ln fz/ /xx xx; xxxxx xx/xx) nebo s xxxxxx X57 XX (xxxxxxxxx, x/x).

Mohou xxx použita x xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx že budou xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx. xxxxxxx xxxx xxxxxx XXXX (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxx, x/x) x XXX (xxxxxxxxx, x/x; xxxxx, x/x; xxxxxx x/x).

1.2.1.2 Xxxxx x pohlaví xxxxxx

Xxxxxxx xx dostatečný xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx živých xxxxxxx pro každou xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx pozorovaných x xxxxxxxxxxx xxxx a x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx pouze v xxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx xxxxx ovlivněných xxxxxxxx xxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx ovlivněné xxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xx zvýšení citlivosti xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x téže laboratoře xx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxx. Nedávné xxxxx x pozitivních xxxxxxx xxxxxxx x xxxx laboratoři xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxx xxxxx použity, xxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mutagenita xxxxxxxxxx.

1.2.1.4 Xxxxxx aplikace

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx aplikace sondou xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx. Xx-xx xx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx způsob xxxxxxxx.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx nejméně xxx xxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx.

1.2.2 Popis xxxxxxx

Zvířata xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx 8., 9. xxxx 10. xxx březosti, xxxxxxx za 1. xxx březosti se xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zátky. Xxxx xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 x 9.25 xxx po xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx látkou xxx provést během xxxxxx dnů.

Xxxxxxx

X xxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx skvrn xxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx se tři xxxxx xxxxx:

(x) xxxx xxxxxx v xxxxxxx 5 xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, o xxxxxxx xx předpokládá, xx xxxxxxx xxxxxxx buněk (XXXX);

(x) žluté xxxxxx typu xxxxxx xx vyskytují v xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx, hrdla, xxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx se, xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (XXX);

(x) xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x srsti xxxx xxxxxxxx somatických xxxxxx (XX).

Všechny xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, ale xxxxx xxxxxxxx, RS, xx xxxxxxxxx relevantní. Obtíže x xxxxxxxxx xxxx XXX x RS xx možné vyřešit xxxxxxxxxxx chlupů xx xxxxxxxxxxxxxx mikroskopu.

Xxxxxxxxxxxxx xx nápadné, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

2. XXXXX

Získaná data xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx sledovaných xxxxxxx x počet xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutacemi. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx porovnávají xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx také uváděny xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx vrh.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, informace x:

- xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx porodu x xxx odstavení,

- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx rozpouštědle,

- xx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxx testovaná xxxxx aplikována,

- x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, a xxxxxx xxxxx s XXXX, XXX a RS x experimentální a xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxx morfologických xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx/xxxxxxx x XX, je-li xx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx hodnocení,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX X XXXX

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Test xx xxxxxxxx translokace x myší detekuje xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v první xxxxxxxx potomků. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx reciproké xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxx ještě xxxxxx X-xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx a XX-xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx fertilitu, xxxxx xx využívá xxx xxxxx X₁ xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Úplná sterilita xx způsobena některými xxxx translokací (X-xxxxxxx x x-x typ). Xxxxxxxxxxx jsou analyzovány xxxxxxxxxxxxx x meiotických xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx stadiu xxxxxxxxx-xxxxxxxx X, nebo X₁ xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx F₁ xxxxx. Xxxxxx XX xxxx cytogeneticky xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx x mitózách x xxxxxx xxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx látky jsou xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Jestliže xxxx nerozpustné, xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx účinky.

1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxx orálně xxxxxx nebo intraperitoneální xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx aplikace.

1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx zvířata

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx verifikaci se xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx měla být xxxxx xxx osm x měla xx xxx relativně xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxx, xxxxxxxx dospělá xxxxxxx.

1.2.1.3 Xxxxx zvířat

Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx frekvenci spontánních xxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxxx počtu indukovaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Test xx xxxxxxx provádí xxxxxxxx xxxxx F₁ xxxxxxx. Nejméně 500 xxxxx x X₁ xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx exponované xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx také xxxxxx X₁ xxxxxxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxx 300 xxxxx x 300 samic.

1.2.1.4 Negativní x pozitivní kontroly

Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol x xxxxxxxxx pokusu x xxxx laboratoře, mohou xxx použity.

1.2.1.5 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyvolávající xxxxxxxxx xxxxxxx efekt, xxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx chování xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx/xxxxxxx je xxxxx dvou xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxxxx látek se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.

1.2.2 Popis postupu

1.2.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx se dva xxxxxxx xxxxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované látky. Xxxx je xxxxx xxxxxxxx podávání xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx x xxxxx xx 35 xxx.

Počet xxxxxxxxx xx expozici xx řízen schématem xxxxxxxxxxx x musí xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx stadia xxxxxxxxxxx xxxxx budou analyzována. Xx xxxxx období xxxxxxxxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx. Xx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, velikost xxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxx jsou xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xx doby xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx fertility X₁ xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx X₁ xxxxxxxx xxx předchozího xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

(a) Test xxxxxxxxx

Xxxxxxx fertilita xxxxxx v F₁ xxxxxxxx xx může xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxx a/nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx určení xxxxxxxx x xxxxxxx fertility xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx kmen xxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxx xxxx: X₁ samci xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx odděleni samostatně xx klecí se xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx. Klece xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 18. xxxx xx xxxxxxxxx. Velikost xxxx x xxxxxxx X₂ xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx porodu, xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx X₁ samice, F₂ xxxxxxx xxxxxx vrhů xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx testy. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. XO-samice xxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx mezi xxxxxx xxxxxxx z 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx xx. xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx normální X₁ xxxxxxx xxxxxxxx x dalšího xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx F₂ xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx předem xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx zaznamenány xxxxx x xxxxx xxxx. X₁ xxxxxxx, která xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx normální po xxxxxxxxxxx xxx F₂ xxxx, jsou xxxx xxxxxxxxx xxx analýzou xxxxxx xxxxxx, nebo xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxxxx vrhu x xxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxxxxxx smrtí xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx X₁ xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxx ke 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx vaginální xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx 14. - 16. xxx x jsou xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx.

(b) Xxxxxxxxxxxxx analýza

Xxxxxxx xxx-xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxx translokací jsou xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx stadiu xxxxxxxxx - xxxxxxxx X x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx splňuje požadovaný xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx výběr no xxxxxxxx, xxxxxxx F₁ xxxxx xxxx vyšetřeni xxxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx vyšetřeno xxxxxxx 25 xxxxx x xxxxxxxxx - metafáze X. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx spermatogoniích xxxx x xxxxxx xxxxx se vyžaduje x xxxxx s xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx před xxxxxxxxxx xxxx x X₁ samic suspektních XX. Přítomnost xxxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx x 10 buněk xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx samčí translokační xxxxxxxxx (x-x xxx). Xxxxxxx X-xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx samčí xxxxxxxxx xxxxx být identifikovány xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx xx všech 10 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx XO xxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx formou.

Xxx xxxxx xxxxxxxx připouštění xx zaznamenána xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu x xxxxx xxxxxxx (sex xxxxx).

Pro xxxxx xxxxxxxxx F₁ xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu xxxxxxxx x individuální velikosti xxxx F₁ xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx analýzu xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x mrtvých xxxxxxx x kontrole x xxxxxxxxxxxx počty xxxxxx x mrtvých xxxxxxx xxx každé xxxxxxxxxxx F₁ xxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx diakinéze-metafáze X xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx figur x xxxxxxx počet xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.

Pro X₁ xxxxxxxx jedince xx zaznamenává xxxxx x doba xxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

X XX xxxxx se xxxxx xxxxxxxx velikost trhu, xxx ratio X₂ xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx analýzy.

X xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxx fertility xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx X₁ translokací, xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x skutečném počtu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx heterozygotů.

Xxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx x:

- xxxxx xxxx, xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxx rodičovských xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx v exponovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxxx podmínkách, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, dávkové hladiny, xxxxxxxxxxxx a schéma xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx samici, počet x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- počet x xxxxxxxx popis xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x obsahu xxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

B.26. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ

(90denní xxxxxxxxx podávání xxx xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx 90 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, a xx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx konce xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x jakých budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx v potravě, xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx v xxxxx xxxx. Všem xxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Pokud se xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx, xx možno xx xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx potkanům, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx tomu. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zdravých xxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxx by xx xxxxxxx podávání xxxxx měli být xxxxxxx mladší xxx 6 xxxxx, v xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 8 xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx hmotnosti zvířat (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx test xxxx dlouhodobým xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx x xxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 20 zvířat (10 xxxxx a 10 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx nullipary x xxxxx být xxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, která xxxxx zabita před xxxxxx pokusu. Xxxxxx xx xxxxx podávat xxxxx xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx xxxxxxxx xxxxx a během xxxxxxxxxxxxx 28 dnů xx xxxxxxxx sledovat xxxxxxxx, přetrvávání xxxx xxxxxxxx xxxxxx toxických xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dávek x jednu kontrolní xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx stejně jako x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx skupinám, a xx ve xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx dávka. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx malý xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx neměla xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx toxický xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx.

Ve skupině x xxxxxx x xxxxxxx úrovní dávky x v xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.

Xxxxxx-xx xx testovaná xxxxx x xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x xxx nebo xx.xx^-1 xxxxxxx) nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx k tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx; použitou xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxx, mělo xx se xxx xxx xxxxx den xx stejnou xxxx, x xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx intervalech (týdenních xxxx xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.4 Limitní xxxx

Xxxxxxx-xx se 90xxxxx xxxx níže popsanou xxxxxxx x nevyvolá-li xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 tělesné xxxxxxxxx xx xxx (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) žádné xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xx dalšího xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx xxxxx x potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx další xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx pozorování

Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx objevení, xxxxxx x trvání. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx a xxx, ve kterém xx xxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

X ideálním xxxxxxx xx xxxxxxxx podává xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx v xxxxx xx dobu 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pozorování, jsou xxxxxxxxxx dalších 28 xxx xxx aplikace, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.

Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, očí, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, změny xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx soustavy, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx (a xxxxxx xxxx při xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxx xxxx) x xxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxx pokud možno xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx např. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx zařazení.

Xx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx okamžitě xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx provádějí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření oftalmoskopem xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx studie xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, vyšetří se xxxxxxx zvířata.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření, které xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx čas xx xxxxx trombocytů.

(x) Xx xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx všechny xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Doporučuje xx stanovovat vápník, xxxxxx, chloridy, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxx doby xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx pyruvát-transamináza) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx séra (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, dusík xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx další charakteristiky, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx širšího spektra xxxxxx.

(x) Xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxxx xxxx běžný xxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx data, má xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, hrudní x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx se xxxxxxxx vysychání.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x ohledem xx xxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx tělíska, tkáň xx xxxxx brzlíku, xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx, aorta, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx, děloha, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (kůže), xxxxx, žaludek, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (stehenní sval), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), páteřní xxxxx xx xxxxx úrovních - krční, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx, x (slzné xxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxx, xxxxx lze xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx z příznaků xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.

1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx

(x) Úplné xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx nejvyšší xxxxx, x u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

(x) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(x) Xxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx dávkou xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x zjištění xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx stavu zvířat. Xx xxxxx xxxx xxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxx x ledvin x těchto xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx u xxxxxx xxxxxx xxxxxx nemusí xxxxxxxx xxxxxxx, musí xx však xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx kterých xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxx x vysokou xxxxxx.

(e) Používá-li xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se provést xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X ní xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx a procentuálně xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx poškození. Xxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Je k xxxx možno použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx o průběhu xxxxxx

Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx možno obsahovat xxxx informace:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx použije) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle pohlaví x podle dávek,

- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx konce sledování,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,

- doba, kdy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx potravy x vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a jejich xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxxxxx analýz moči),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.27. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX

(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx per xx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx

Testovaná látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxx po 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx (nehlodavcům), x xx xxxxx xxxxxxx jedna úroveň xxxxx. Během xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, x zvířata, xxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.

1.2 Xxxxx metody

1.2.1 Příprava

Xxxxxxx 5 xxx xxxx testem xxxx xxxxxxx chována v xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx testem se xxxxxx mladá dospělá xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx xxx vhodnější xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxx použity také xxxx xxxxxxx orální xxxxxxxx. Xxxx zvířatům xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx stejnou xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx o xxxx známo, xx xxxxxx toxický účinek. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je možno xx využít.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Pokusná zvířata

Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxxxx používá pes: xxxx se přednost xxxxxxxxxxxx plemeni. Je xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxx se xx x xxxxxxxxx začít xx xxxx xx 3 xx 6 xxxxxx x xx starším xxx 9 xxxxxx. Xxxxxxx-xx xx subchronický xxxxxx xxxx xxxx předběžný xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx xx xx xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx každou xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 8 xxxxxx (4 xxxxxx x 4 xxxxx). Počet zvířat xx xxxxx pokusu xxxx být xxxxxx, xxx xxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x pokusnými. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx nezpůsobit žádné xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx existují odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx měla xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx než 3 xxxxxx dávek, mají xxx xxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Ve xxxxxxx s nízkou x střední xxxxxx xxxxx x v xxxxxxxxx xxxxxxx by x uhynutí xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx-xx xx málo xxxxxxx xxxxx v potravě, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx ani aplikované xxxxxxxx ani xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx výživě xxxxxx.

Podává-li se xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, může xx xxxxxx buď xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (v ppm xxxx mg.kg^-1 xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx. Podává-li xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx se xxx dít každý xxx ve stejnou xxxx, x dávkování x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx změnám xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

Provádí-li se xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx testem, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Limitní xxxx

Xxxxxxx-xx 90xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x nevyvolá-li xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx den (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx možné xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) xxxxx toxické xxxxxx, je xxxxx xx dalšího xxxxxxxxx xxxxxxx. Podává-li se xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx další vlastnosti xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx objevení, xxxxxx x trvání. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx kterém xx xxxxxx a xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

X ideálním xxxxxxx xx zvířatům xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 90 xxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx látku 5 xxx x xxxxx.

Pozorování xxxxxxxx (xxx není na xx omezeno) xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, změny xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.

Příjem xxxxxxx (x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxx) a hmotnost xxxxxx xx zaznamenávají xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxx pečlivá klinická xxxxxxxxx s vhodnými xxxxxxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxx. Po skončení xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, humánně xxxxxxx x xxxxxx.

X xxxxx zvířat xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx, ale xxxxxxx x nejvyšší xxxxx x u xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx změny, xxxxxxx xx všechna xxxxxxx.

(x) Xx xxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx na xxxxx xxxxxx se xx xxxxxxx hematologické xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, protrombinový xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx xxxxxxxxxx.

(c) Xx xxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a dále xx xxxxx pokusu xx má provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx všechny studie xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, metabolismus xxxxxxx, funkci xxxxx x ledvin. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx stanovovat vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (přičemž xxxxxx xxxx hladovění se xxxx podle živočišného xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx) x aspartát aminotransferáza xxxx (xxxxx glutamát-oxalacetát xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx transpeptidáza, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx bílkoviny x xxxx. Mezi další xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx stanovení: xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx biochemické xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (ne xxxx xxx 24 xxxxx).

(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje xxxx xxxxx postup, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, hrudní a xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Játra, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx co nejdříve xx xxxxx zváží xx xxxxxx stavu, xxx xx předešlo xxxxxxxxx.

Následující xxxxxx x tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx histopatologická vyšetření: xxxxxxx tkáně s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, kůra xxxxx x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, štítná xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, srdce, xxxxx, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x vaječníky, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxx, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx nerv, (oči), xxxxxx xxxx s xxxxxx dření, (kost xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) x (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxxxx xxxxx příznaků xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

2. XXXXX

Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx, xxxx poškození x xxxxxxxxxxxx počet xxxxxx x jednotlivými xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx k tomu xxxxx použít kteroukoliv xxxxxxxxx statistickou xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx xxxx, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxx podmínky,

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) a xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxx xxxxx,

- úroveň xxx xxxxxx, xxxxx xx lze xxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxx (xxxxxxx klinické xxxxxx),

- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- spotřeba xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx hmotnosti,

- xxxxxxxxxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx případných analýz xxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde xx to xxxxx,

- diskuse xxxxxxxx,

- interpretace xxxxxxxx.

B.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX DERMÁLNÍ

(90denní xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx hlodavcích)

1. METODA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 90 dní x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Během xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx do xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.

1.2 Popis xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx pokusu xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx však xxxxxxx xxx 24 xxxxx před xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx opakovat xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx se nepoškodila xxxx (xxxx. xxxxxx). Xxx nanášení xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx těla. Xx xxxxx xxxx x xxxxx hmotnost xxxxxx xxx rozhodování x velikosti připravované xxxxxx xxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Xxx pokusech x xxxxxx látkami, xxxxx mohou být xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx látku xxxxxxxxxx navlhčit xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx vehikulem, xxx byl zaručen xxxxx kontakt x xxxx. Testované xxxxxxxx xx zpravidla xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxx xxxxx 5 xx 7 xxx x týdnu.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata

Xx možno xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xx nemělo xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) překročit ± 20 % xxxxxxx hodnoty. Xxxxxxx-xx xx subchronický xxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxx dlouhodobým xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx úroveň xxxxx xxxxxx nejméně 20 xxxxxx (10 xxxxx a 10 xxxxx) xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx zabíjet x xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 zvířat každého xxxxxxx) xx xxxx 90 dnů nejvyšší xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx podávání sledovat xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx hladiny dávek x jednu kontrolní xxxxxxx nebo - xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx - kontrolní xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx expozice xx xxx nejméně 6 hodin xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se mělo xxxxxxxx xxxxx den xx xxxxxxx xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx tak, aby xx udržovala xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx zvířete. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx pokusným xxxxxxxx, x to ve xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx skupina, které xx aplikuje xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx jen v xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x člověka, xx xxxxxxxx xxxxx tuto xxxxxxx překračovat. Ideálně xx střední xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx účinek xx hranicích zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 hladiny xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx toxické účinky. Xx skupině x xxxxxx a střední xxxxxxxx dávky x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx uhynutí xxx xxx xxxxx, xxxxx je vyhodnocení xxxxxxxx obtížné.

Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx-xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nutno xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx jej znova x xxxxxxx koncentracemi.

1.2.2.4 Xxxxxxx test

Xxxxxxxx-xx xxx předběžné xxxxxx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx^-1 xxxx vyšší xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx člověka, xxxxx toxické xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx nutná.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxx zaznamenat dobu xxxxxxx a xxx, xx kterém se xxxxxx a opět xxxxxx xxxxxxx účinky.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Zvířata xx xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 xxx x xxxxx xx dobu 90 xxx. Zvířata satelitní xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx reparace xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx denně.

Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx rovnoměrně xx celou xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx asi 10 % povrchu xxxx, u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxx pokrýt xx xxxxxxxx xxxx pokusné xxxxxx rovnoměrně x xx xxxxxxxx vrstvě.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x kůží pomocí xxxxxxxxx xxxxxxxx obvazu x nedráždivé náplasti. Xxxxxxxxx plochu je xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx x testovaná xxxxx xxxxxxxx x aby xx xxxxxxxxx orálnímu xxxxxx. K zamezení xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, úplnou xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zbytky testované xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx vhodným x xxxxxxxx pokožky.

Xxxxxxx xxxxxxx je třeba xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.

Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx srsti, xxxx, očí a xxxxxxx, a také xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxxxx týdně x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zvířat xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zvířata, xxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxx satelitních xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx okamžitě vyřadit, xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.

U xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx provést xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x na xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx dávky x x kontrolních xxxxxx. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, vyšetří xx xxxxxxx xxxxxxx.

(b) Xx konci xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxxxx vyšetření, které xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a testy xxxxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxx srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.

(c) Xx konci xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx studie xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx jater x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx pozorováním způsobu xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, glukózu na xxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxxx hladovění xx xxxx xxxxx živočišného xxxxx), alaninamino xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx transamináza xxxx) a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx transamináza), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří stanovení: xxxxxx, hormonů, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, aktivity xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx spektra účinků.

(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxx, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, má xx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx x biochemických xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3.1 Pitva

U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx se xxxxxxx pitva zahrnující xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, xxxxx tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx dutiny xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx co xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx xxxxxxxx vysychání.

Následující xxxxxx x tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx mozkový, štítná xxxxx, xxxxxxxxx tělíska, xxxx na xxxxx xxxxxxx, (průdušnice), xxxxx, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, žlučník (xx-xx přítomen), jícen, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxxxx, konečník, močový xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lymfatické uzliny, (xxxxxx mléčná xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), (xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx), (kost xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x bederní) x (xxxxx žlázy). Tkáně x závorkách xx xxxxxxxx, pokud je xx indikováno podle xxxxxxxx toxicity nebo xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx

(a) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxx x xxxxx xx třeba provést x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

(b) Xx třeba vyšetřit xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx orgány x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

(d) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx, plíce xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx histopatologicky xxxxxxxxxx x zjištění xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Další xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx x zvířat xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, musí se xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou.

(x) Používá-li xx xxxxxxxxx xxxxxxx, musí xx provést histopatologické xxxxxxxxx na xxxxxxx x orgánech, u xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx se sestaví xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx x počet xxxxxx x xxxxxx x procentuálně xxxxx xxxxxx x jednotlivými xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou metodou. Xx x tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pokud xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx lze xxxxxxxx,

- doba xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx zvířat xx xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinků,

- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx potravy x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx případných xxxxxx xxxx),

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.29. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXX

(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xx xxxxxxxxxx)

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx po xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx jedné xxxxxxxxxxx, x xx xx 90 dnů. Xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx xxx vehikulum. Xxxxx xxxxxx pokusu se xxxxxxx xxxxx pozorují x xxxxxxxx se xxxxxxxx toxických účinků. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx pokusu, xx pitvají.

1.2 Xxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxxx 5 xxx před xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx, x jakých budou xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx se zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx vznikla příslušná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx užije xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx, xxxx být x nich xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná xxxxxxxxxx data, je xxxxx xx využít.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxx zvířatech z xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxx xxxxxxxx xx xx použít xxxxxx xxxx x xxxx.

1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxx xxxxxx úroveň xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nejméně 20 xxxxxx (10 samic x 10 xxxxx). Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, je nutno xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou xxxxxx před koncem xxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx další xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 90 xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx x během xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx expozic xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

Xxxxxxx se nejméně xxx xxxxxxx s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x jedna xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxxxx - x xxxxxxxxxxx stejné xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx). X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx se xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx stejně jako x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, ale xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx jen v xxxxx počtu. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx expozice x člověka, xx xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx toxický xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx xxx 3 xxxxxx koncentrací, mají xxx voleny xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx x xxxxxx x střední koncentrací x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx být xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx výsledků obtížné.

1.2.2.4 Xxxxxx expozice

Zvířata xx xxxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx xx xxxxxxxx rovnováhy xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. X případě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx i xxxxxx xxx expozice.

1.2.2.5 Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Pro xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx xxxxxx, aby byl xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx expoziční xxx, xx xxxxx ho xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx nejvíce xxxxxx xxxxxxxxxx zvířat a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx boxu xxxxx xx x xxxxxx celkový objem xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxx. Xx možné xxxxxx inhalační expozice xxxxxx-xxxxxxx, samotné hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx celotělové xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx expozice xxxxxxxxxxxx xxxxxx látky jinými xxxxxxx.

1.2.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx zvířata je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx dobu xxxxxxx x čas, ve xxxxxx se xxxxxx x opět odezní xxxxxxx účinky.

1.2.3. Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce denně, 5 - 7 xxx x xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx pozorování, xxxx xxxxxxxxxx dalších 28 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x otravy xxxx xxxxxxxxxxx toxických xxxxxx. Xxxxxxx během xxxxxxxxxxx xx xxx 22 ^xX ± 3 ^xX. Relativní vlhkost xx xxx xxxx 30 % x 70 %, s xxxxxxxx případů, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. experimenty s xxxxxxxx). Xxxxx expozice xx nepodává potrava xxx xxxx.

Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x vhodnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx pokus xxx xxxxxxx potřebných xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xx třeba xxxxxxxx xxx, xxx podmínky x xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx stejné. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx bude xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Měření xxxx xxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx:

a) Xxxxxx xxxxxxx vzduchu (xxxxxxxxxxx).

x) Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx odchylovat xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, se připouští xxxxx xxxxxx kolísání. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxx generátoru xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Během expozic xx měří xxx xxxxx, xxx xx xx potřeba xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

c) Xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx

d) Během xxxxxxxx a xx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx denně xxxxxxxxx xx xxxxxxxx toxických xxxxxx a zaznamenávat xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Pozorování x kleci zahrnuje xxxxx kůže, srsti, xxx, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx i spotřeba xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx pravidelnou kontrolu xxxxxx, xxx pokud xxxxx nedocházelo xx xxxxxxx zvířat jako xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zvířata, xxxxx přežila, pitvají. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxx a xxxxxx.

X xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx běžně provádějí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

(x) Xxxxxxxxxxxxxx vyšetření oftalmoskopem xxxx xxxxxxxxxxx přístrojem xx xx provést xxxx podáváním testované xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat, xxx přinejmenším u xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx xx oční xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyšetření, které xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx či xxxxx trombocytů.

(x) Xx xxxxx xxxxxx xx má provést xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx elektrolytů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx stanovovat vápník, xxxxxx, chloridy, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx živočišného druhu x kmene), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) x aspartátamino xxxxxxxxxxx xxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, gama-glutamyl xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x celkové bílkoviny x séru. Xxxx xxxxx charakteristiky, xxxxx xxxxx být potřebné xxx úplné toxikologické xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, acidobasické xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx biochemické xxxxxxx xxxxx xxx x případě potřeby xxxxxxx xxx rozšíření xxxxxxx pozorovaných xxxxxx.

(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx postup, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo pozorované xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx parametrů xxxxx před xxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x břišní dutiny x jejich obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx sekci xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx vysychání.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx pozdější xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: všechny xxxxx x makroskopickým xxxxxxxxxx, xxxxx (mají xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx x fixovat xxxxxxx xxxxxx, xxx aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx vhodnou), xxxx xxxxxxxxxxx, mozek - x xxxxxx xxxxxx/xxxx, xxxx mozku x xxxxxxx, xxxxxxxx, štítná xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx místě brzlíku, xxxxxxxxxx, xxxxx, aorta, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), xxxxx, žaludek, dvanácterník, xxxxx, tlusté a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzliny, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (stehenní xxxx), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), hrudní kost x kostní dření, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), (xxxxxxx xxxxx xx třech xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx v xxxxxxxxx se xxxxxxxx, xxxxx xx to xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx respiračního xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx.

(x) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.

(x) Xx xxxxx vyšetřit xxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxx dávkových xxxxxxxxx.

(x) Xxxxx xxxxxx xx skupinách x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože xx poskytuje xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx histopatologická xxxxxxxxx xx u zvířat xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx s vysokou xxxxxxxxxxx.

(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x orgánech, x xxxxxxx byly zjištěny xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. Z xx musí být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx x počet xxxxxx x xxxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx počet xxxxxx x jednotlivými typy xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Xxxxxx o xxxxxxx pokusu

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx možno xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,

- xxxxxxxx pokusu: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, rozměrů, xxxxxx xxxxxxx, systému xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx zvířat v xxxxxxxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx používán. Xxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx stability xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx o expozici xx sestaví xx xxxxxxx x uvedou xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx:

x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

b) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx,

x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx přiváděné xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx),

x) povaha xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx,

x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zóně,

x) xxxxxx velikostí xxxxxx (u aerosolu),

- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx o xxxxxxx zvířat do xxxxx sledování,

- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx hmotnosti,

- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx,

- xxxxxxx nálezy,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- statistické xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.30. TESTOVÁNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX

1. METODIKA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody

Testovaná xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx x xxxxx, vhodnou xxxxxx, xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx část xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x po xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx standardních xxxxxxxxxx xxxxx 5 dní xxxx započetím xxxxx. Xxxx xxxxxx jsou xxxxxx, xxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxx podmínky

1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx potkan. Xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx x další xxxxx (xxxxxxxx nebo xxxx). Xx třeba xxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kmenů laboratorních xxxxxx. Expozice by xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx studie xx xxxxx xxxxxx ve xxxx xxxxxx xxxxx xxxx než ± 20 % od xxxxxxx. X případě, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx test subchronické xxxxxx toxicity, xx xxxxx použít xxxxxx xxxx x xxxx x obou studiích.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx xxxxxx úroveň xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 40 xxxxxx (20 samic x 20 samců), xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx x neměly xx xxx xxxxx. Xxxxx je xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx zvířata xxxx xxxxxxxxxx testu, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx) xx možné xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxx než 4 xx xxxxxxx xxxxxxx xx skupině.

1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxx použít xxxxx xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší dávka xx xxxx vyvolat xxxxx xxxxxxx toxicity xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx vyvolat prokazatelné xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxx ve xxxxxxxx xxxxx mezi xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxx vzít x úvahu xxxxxxxx xxxxxxxxxxx studií.

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx, xx testovaná xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx vodě nebo x xxxxxxx, je xxxxx zajistit, xxx x xx xxxx xxxxxxx xxxxx přístup.

1.2.2.4 Xxxxxxxx

Xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx je xxxxxxxxx x každém xxxxxx x xxxxxxxxxx skupině, xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx.

Xx zvláštních xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx nebo xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx emulgátoru, jehož xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx negativní kontrolní xxxxxxx, xxxxx není xxxxxxxxxx xxx vehikulu.

1.2.2.5 Xxxxxx aplikace

Xxx xxxxxx xxxxxxx aplikace xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx testované látky x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx člověka.

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vyvolává xxxxxx technické problémy. Xxxxxxxxx systémová xxxxxxxx x důsledku xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx odvozena x xxxxxxxx xxxxxxxx testu x znalosti rozsahu xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.

Orální xxxxxx

Xxx, kde xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx jedna z xxxx, xxxxx xxxx xxx exponován xxxxxx, xxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx x tobolce.

Ideálně xx xx měla xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx v xxxxx xxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx v xxxxxx xxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx s xxxxxxx na praktické xxxxxxx, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx je xxxxxxxxxx xx přijatelné.

Inhalační xxxxxx

Xxxxxxx inhalační xxxxxx xxxx technicky xxxxxxxxxxxxxxx než xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx platnou xxxxxxxxxxxx x specifických xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxx xxxxx xx pět dnů x týdnu (přerušovaná xxxxxxxx), nebo x xxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin xxxxx xx xxxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), s xxxxxxxxx xxxxxx hodinou xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx stejnou xxxx xxx, použitou i xxx čištění xxxxxxxxxxx xxxx. V xxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx rozdíl mezi xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx v xxx, xx v xxxxx má xxxxx 17 - 18 xxxxx xx xxxxx xxxxxx denní xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx během víkendu.

Xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx expozice xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx x úvahu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx expozice xxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx narušeny xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx komplikovanější (x xxxxxxxxxx) generace xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Expoziční xxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxxx x inhalačních xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx přísun xxxxxxx x xxxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, tak xxx byly xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vyjma xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxxx komory xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky do xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx stabilní xxxxxxxxx x komoře xxxxx zvířat neměl xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

(a) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx nejlépe xxxxxxxxxxxx kontinuálně;

(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx denní xxxxxxxx by xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx neměla xxxxxxx xxxx než 15 % xxxxxxx xxxxxxx;

(x) xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxx 22 ± 2 ^oC a xxxxxxx x komorách 30 - 70 % xxxxx případů, xxx je xxxx xxxxxxxxx k rozptýlení xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;

(x) měření xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx komor x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxx vzduchu xx měl být xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx respirabilní. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx během xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx stabilitu aerosolu, x poté xxxxx xxxxxxx tak často, xxx xxxx možno xxxxxxxx stabilitu xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.2.6 Trvání xxxxxx

Expozice xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 12 měsíců.

1.2.3 Xxxxx postupu

1.2.3.1 Pozorování

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx mělo být xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Dodatečná xxxxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx denně s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxx. xxxxx nebo uložení xx xxxxxxx x xxxxxx, která xxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx spolehlivě xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx toxických xxxxxx, x xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x důsledku xxxxxx, xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx klinické xxxxxxxx včetně neurologických x xxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx, x dále xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxx objevení x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx podezření xx xxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx prvních 13 týdnů xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx čtyři xxxxx xx tomto xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxx spotřeby xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx látka podávána x xxxxx xxxx) xxxxx během xxxxxxx 13 xxxxx a xxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx intervalech, xxxxxx xx zdravotní xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx ukázaly nutnost xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, celkový xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx destiček xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx měla xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx x poté x xxxxxxxxx šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, x xx xxxxx na xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. xx 10 xxxxxxx xx pohlaví x xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx xx xx xxxxx, xxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxx vzorek před xxxxxx od xxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx naznačí zhoršený xxxxxxxxx stav zvířat xxxxx xxxxxx, xxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.

Diferenciální obraz xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx zvířat ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x u xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxx údaje x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx se i x skupiny x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxx xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx možno xx xxxxxxxx zvířat x xx stejných xxxxxxxxxxx xxxx hematologické xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx stanovení jsou xxxxxxxxx buď xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx na xxxxxxx xxxxxx xxx skupiny xxxxx xxxxx x xxxxxxx:

- vzhled xxxx, xxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (semi-kvantitativně),

- xxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx (xxxx- xxxxxxxxxxxxx).

1.2.3.4 Biochemické xxxxxxxxx

X přibližně xxxxxxxxxxxxxx intervalech a xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx pohlaví x xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx. Xx nehlodavců xx vedle xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x jsou xxxxxxxxx následující xxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xx funkci xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx transaminázy¹⁾, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx²⁾, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, ornithin xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, např. krevní xxxxxxx xx xxxxx,

- xxxxx xx xxxxxx ledvin, xxxx. xxxxx močoviny v xxxx.

1) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

2) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx

1.2.3.5 Pitva

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxx těch, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx byla xxxxxxxx x moribundním xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx. Všechny xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx změn s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Všechny xxxxxx a xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. To xx xxxxxxx týká xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x tkání:mozku³⁾ (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, kory mozkové), xxxxxxxx mozkového, xxxxxx xxxxx x příštítných xxxxxxx, thymu, xxxxxxx x plic, srdce, xxxxx, slinných xxxx, xxxxx³⁾, sleziny, ledvin³⁾, xxxxxxxxxxx³⁾, xxxxx, žaludku, xxxxxxxxxxxxx, jejuna, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, míchy (xxxxx, xxxxxx a xxxxxxx), xxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx včetně xxxxxx, a xxx. Xxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx měchýře xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx těchto xxxxx; naplnění xxxx x inhalačních xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zkoumání. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx, má xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx včetně xxxx, xxxxxx x xxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodítko.

3) tyto xxxxxx x 10 zvířat xx pohlaví x xx xxxxxxx x xxxxxxxx a xx xxxxx xxxxxxxxxx x dále xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) ze xxxxx xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx

1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx změny, xxxxxxx xxxxxx x xxxx léze xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxx, mají xxx xxxxxxxx mikroskopicky. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx následující xxxxxxx:

(x) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx nalezených:

1. u xxxxx xxxxxx, xxxxx uhynula xxxx xxxx utracena xxxxx studie,

2. x všech xxxxxx xx skupiny x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,

(x) xxxxxx xx tkáně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx také xx xxxxxxxxx x nižšími xxxxxxx,

(x) tam, xxx xxxxxxxx svědčí xxx významné xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxx xxxxxxx, skupina x xxxxxxxx nižší xxxxxx xx xxxxxxx popsaným xxxxxxxx,

(d) xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx zvířat, ve xxxxxxxx laboratorních xxxxxxxxxx, xx. xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx nezbytné xxx správné posouzení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x zvířat x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx tabulek, xxxxxxxxxxx xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx. Výsledky xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZPRÁVA

3.1 Xxxxxx x testu

Xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx: popis xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx. Dále xx xxxxx popsat xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xx zahrnovat:

(x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

(x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx

(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vzduchu)

(x) povahu xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx

(e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx

(x) xxxxxxx xxxxxxxxx částic (xx-xx xx relevantní)

- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x koncentrace

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx

- neúčinná (xxxxxxx) xxxxxx

- xxxx xxxxx xxxxx studie xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx až do xxxxx

- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx

- xxxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx

- data x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx

- xxxxxxxxxxxxxx nálezy

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx

- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxx xxxx)

- xxxxxxx xxxxxx

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx xxxxx

- diskuse xxxxxxxx

- interpretace xxxxxxxx.

B.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X XXXXXXXXXX

1. XXXXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx podává x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxx xxxxxxxxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jedna xxxxx xx xxxxxx skupinu, xxxxxxx v xxx xxxxxx březosti, ve xxxxxx dochází x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx před xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx březí xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x s xxxxxxx je xxxxxxx x dalšímu xxxxxx. Xxxx testovací xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx embryo- x xxxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxx, dospělé samice, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx x velikosti xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx laboratorních xxxxxxxxxx aspoň 5 xxx před započetím xxxxx. Potom jsou xxxxxxxxxx samci x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxx může xxx zajištěno přirozenou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Testovaná látka xx podávána xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx x pokračuje xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Den xxxx termínem xxxx xxxxx vyjmuty xxxxxxxxxxxxx x podrobeny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx skeletu x xxxxxxxxx orgánů xxxxxx xxxxxxxxx možnosti zpomaleného xxxxx, opožděné xxxxxxxxx x xxxxxxxx do xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Běžně xxxxxxxxxxx druhy jsou xxxxxx, myš, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x králík. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kmeny. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxx xx xxx u xxx xxxxx reakce na xxxxxxxxxx. Zvířat xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Pro xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx aspoň 20 březích xxxxxxx, xxxx nebo xxxxxx xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x mláďat.

1.2.2.3 Xxxxx

Xx xxxxx xxxxxx xxxxx tři xxxxx x jednu xxxxxxxxx skupinu. X xxxxxxx, že je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx vehikulu, je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx vehikulum. Xx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxx: xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxx vliv xx reprodukční xxxxxxxxxx. Xx zvířaty x xxxxxxxxx(xx) xxxxxxx(xxx) xx xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Pokud xx fyzikálně xxxxxxxx xxxx biologické xxxxxxxxxx xxxxxxxx, pak nejvyšší xxxxx xxxxxxxxx látky xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx u xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx toxicity, jako xx mírné xxxxxxx xxxx, ale xx xx xxxx jak 10 % úmrtí. Xxxxx úroveň dávek xx xxxxxx vyvolat xxxxxxxxx xxxxxx. Střední xxxxx by xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx

X xxxxxxx, že látka x xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx 1000 mg.kg-1 prokazatelně xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx teratogenicity, není xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.

1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxx

Xxxxxx xxxx testu xx xxx, xxx je xxxxxxxxxx vaginální zátka x/xxxx spermie (pokud xxxxx). Xxxx aplikace xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx toto období xx xxxxx považovat 6. xx 15. xxx x xxxxxxx x xxxx, 6. xx 14. xxx x křečka x 6. xx 18. xxx x xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx xx xxxxx xxx považován xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx umělá xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx x předchozím xxxxxx xxxxx den. Xxxxx xxxx alternativy končí xxxxxxxx jeden den xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxx xxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx sledování x xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx ztrát xxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx testu. Xxxxx xxxx být xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx látky xxxx, xxxxxxxx x rychlému xxxxxxx hmotnosti xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx vážena x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx posledního xxxxxx. Xxxxxxx známky xxxxxxxx xx xxxxx ihned xxxxxxxxxx včetně xxxx xxxxxxx, stupně a xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X pozorování xx xxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx podávání xxxxx xx xx xxxx přibližně xxxxx xxx před porodem. Xxxxxxx účelem xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxxx výsledků po xxxxxxxxxx xxxxxx. Pozorování xxxxxx x xxxxx xx mělo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x sliznic, dále xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x centrálního nervového xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Každý xxxxx je třeba xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.

1.2.3.1 Xxxxx

Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx xxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xx xxxxx odstranit xxxxxx x její xxxxx xxxxxxxx s ohledem xx xxxxx xxxxxx x zárodků a xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Obvykle xx xxxxx určit xxxx xxxxx zárodků v xxxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zárodků x xxxxxxxxx xxxxxx. Xx vyjmutí xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx každý xxxxxxx. X xxxxxxx, myší x křečků xx xxxxx vyšetřit xxxxxxxx xxxxxxxxx u zhruba xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx a x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx vnitřností x xxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx je třeba xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx skupinu xxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxx, počet xxxxxx, která xxxxxxxx, xxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x abnormalitami xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx abnormit k xxxxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx vhodnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1. Xxxxxx x xxxxx

Xxxxxx x xxxxx xx xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxx, kmen, xxxxx, podmínky xxxxxxxx, xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx,

- dávky (xxxxxx vehikula, xxxxx xxxx použito) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx,

- dávka xxx xxxxxx (xxxxx xx bylo možno xxxxxxxx),

- dobu xxxxx během xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx konce xxxxx,

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x spotřebě potravy,

- xxxxx březosti x xxxxx x xxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx),

- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx/xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx tkání),

- údaje o xxxxxxxxxxxx vrzích (xxxx/xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx),

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.32. XXXX XXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx života xxxxxx. Xxxxx x po xxxxxxxx testované látce xxxx zvířata xxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx tumorů.

1.2 Xxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xx chovají x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxx dní před xxxxxxxxx testu. Xxxx xxxxxx xx mladá xxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x exponovaných xxxxxx.

1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Preferovaným xxxxxx xx xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Používají xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx po odstavení xxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx než ± 20 % xx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx vlastní studii xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx použít xxxxxx xxxx a xxxx x xxxx studiích.

1.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxx hlodavce xx xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Samice xx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxxxx xx xxxxx xxxxxx x počet xxxxxx, xxxxx budou xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxx xxxxx souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxxx xxxx dožití xxxxxx jinými xxxxxx xxx tumory.

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxx známky xxxxxxxx. Xxxxxx xx neměla xxx xxxxx než 10 % vysoké xxxxx. Střední dávku/dávky xx xxxxx stanovit xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx dávkou.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx do xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxx

Xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x exponovanou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx orální xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.5 Xxxxxx aplikace

Xxx xxxxxx cesty xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx závisí xx fyzikálních x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pravděpodobném xxxxxxx expozice x xxxxxxx.

1.2.5.1 Orální xxxxxx

Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx vstřebává x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x je-li xxxxxx xxxxx x cest, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx vodě xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxx xx xx měla xxxxx xxxxxxx xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx x xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo naopak xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x období xxx xxxxxxxx, x tudíž xxxxxxxx výsledky x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx s ohledem xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx xx považováno xx xxxxxxxxxx.

1.2.5.2 Xxxxxxxx studie

Xxxxxxxx přímo xx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx simulace xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx způsob xxxxxxxx xxxxxxx poškození.

1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx komplikovanější xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx uvedeny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace může xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx předpokládané xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvíře xx obvykle xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx koncentrace xxxx xxxxx xxxxx xx pět xxx x týdnu (přerušovaná xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx denně xx xxxx dní x xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx ve xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. X xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx přerušovanou x xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, xx v xxxxx xx zvíře 17 - 18 xxxxx xx xxxxx účinků xxxxx xxxxxxxx x xxxxx delším xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx kontinuální xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xx lidské xxxxxxxx, xxxxx má být xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xx xxxxx xxxx v xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, výhody xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx mohou být xxxxxxxx xxxxxxxx pití x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jejichž xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx nejméně 12 xxxxx xxxxxxx xx hodinu, aby xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx distribuce expoziční xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vyjma expozice xxxxxxxxx látce. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx mírný xxxxxxx x xxx xx xxxxx úniku testované xxxxx xx okolního xxxxxxxxx. Xxxxxx by xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Obecně xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx neměl xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

(x) Xxxxxx vzduchu: rychlost xxxxxxx vzduchu xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx kontinuálně.

(x) Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx xxxxxxxx by xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx hodnoty.

(x) Teplota x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx by xxxx xxx udržována x xxxxxxx 22 ± 2 °C a xxxxxxx x xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx je voda xxxxxxxxx x rozptýlení xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

(x) Měření velikosti xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx xx xxxx být x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx použité xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x dýchací xxxx xxxxxx. Vzorek vzduchu xx měl xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xx xxxxx exponováno, a xxx xx gravimetricky xxxxxxxxx xxxxxx suspendovanému xxxxxxxx, x když xxxxxx část xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx prováděna xxxxx během xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, aby xxxxxxxxx stabilitu xxxxxxxx, x poté během xxxxxxx xxx často, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxx exponována.

1.2.6 Xxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx zvířete xxxxxxxxx xxx test. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx x xxxx x xxxxxx x 24 xxxxxxxx u xxxxxxx. Xxxxxxx, xxx xxxxxxx kmeny xxxxxx x delší xxxxx xxxxxx xxxx. x xxxxxx spontánním xxxxxxxx xxxxxx doba xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 měsíců xxx xxxx x křečky x 30 xxxxxx xxx potkany. Alternativně, xxxxxxxx xxxxxx prodloužené xxxxxx je xxxxxxxxxx, xxxx xxxxx přežívajících x xxxxxxxx dávky xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx na 25 %. Při xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx pohlaví se xxxxxxxx xxxxxx. Tam, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx příčin, xxxxxx xx xxxxx xxxx k ukončení xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx skupiny nevykazují xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx činily problémy. Xxx bylo xxxxx xxxxx negativní výsledek xxxxx, xxxxx být xxxxxx použitelných údajů (xxxxxxxxx, kanibalismem xxxx x důsledku xxxx xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 10 % a xxxxxxx xx všech xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx x myší x křečků x x 24 xxxxxxxx x potkanů.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Pozorování

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx změny xxxx x srsti, xxx a sliznic, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

Pravidelná xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx zvířat ze xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx chyb v xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

Klinické xxxxxxxx x mortalita xx xxxx xxx zaznamenány x xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx pozornost xx xxxxx věnovat vývoji xxxxxx: doba objevení, xxxxxxxxxx, rozměry, xxxxxx x progrese každého xxxxxxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx spotřeby potravy (x xxxx xxx, xxx je xxxxxxxxx xxxxx podávána v xxxxx xxxx) týdně xxxxx prvních 13 xxxxx x xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost jiné xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx období xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx tomto xxxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxx vyšetření

1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx

Pokud xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx stavu xxxxxx xxxxx xxxxxx, je xxxxx vyšetřit diferenciální xxxxx xxxxxx krvinek.

Xx 12 xxxxxx, xx 18 měsíců x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx ze xxxxx zvířat. Xxxxxxxxxxx xxxxxx krvinek xx xxxxxxx ve xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx tato xxxx, zvláště údaje xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx patologických změn xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx vyšetří x x skupiny x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx.

1.3.2.2 Xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx u xxxxx zvířat, xxxxxx xxxx, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx utracena, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx tumory nebo xxxx, xxxx léze, xxxxx xx xxxxx xxx tumory, xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, kory xxxxxxx), xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, kůže, xxxxx, xxxxxxx, dvanácterník, xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzlina, xxxxxx xxxxxx žláza, svalovina xxxxxx, periferní xxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxx, stehenní xxxx xxxxxx kloubu, mícha xx třech xxxxxxxx (xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx) a xxx.

Xxxxxxxx xxxx x močového xxxxxxx xxxxxxxxx je optimální xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx x inhalačních xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx celý respirační xxxxx xxxxxx nosní xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.

1.3.2.3 Histopatologické xxxxxxxxx

(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx x tkáních xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx během testu, x x xxxxx xxxxxx skupiny xxxxxxxxx x s xxxxxxx xxxxxx.

(x) Xxxxxxx xxxxxx viditelné xxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx jako xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.

(c) Je-li xxxxxxxx rozdíl x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx provede x xxxxx xxxxxx xx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx.

(x) Xx-xx xxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx než x xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx dávkou.

(x) Je-li xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx doklad x xxxxxxxx toxických xxxx xxxxxx účinků, které xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

2. ÚDAJE

Údaje xx sumarizují xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx zjištěné xxxxx xxxxx, doba xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx x tumory xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx hodnotí odpovídající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx použity xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1 Zpráva o xxxxx

Xxxxxx o xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,

- xxxxxxxx testu: Xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx třeba popsat xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, a xxx, kde je xx žádoucí, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu. Xxxxx x xxxxxxxx: ve xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot a xxxxxxxxxxx (xxxx. směrodatná xxxxxxxx) x měly xx xxxxxxxxx:

(a) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

(x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,

(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxxxx děleno objemem xxxxxxx),

(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx,

(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,

(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (tam xxx xx relevantní),

- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, je-li xxxxx) x xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxx tumorů xxxxx xxxxxxx, dávky a xxxx tumoru,

- xxxx úmrtí během xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xx konce,

- xxxxxx toxických xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx,

- popis xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, xxx xxx pozorován xxxxx xxxxxxxxxx příznak x xxxx xxxxx xxxxx,

- xxxx x spotřebě xxxxxxx x tělesné xxxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx výsledků,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.33. KOMBINOVANÝ XXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX/XXXXXXXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxxxxx xxxxx

Cílem xxxxxxxxxxxxx testu chronické xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx je určit xxxxxxxxx a karcinogenní xxxxxx xxxxx u xxxxxxxxx xxxxx savců xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxx tento účel xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx satelitní xxxxxxxx. Xxxxx použitá xxx xxxx satelitní xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Zvířata x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jak xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxxx satelitní xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx toxicitu.

Testovaná xxxxx xx podává xxxxxxx sedm xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xx skupinu, xx větší část xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x xx expozici xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx pozorována xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.

1.2 Popis xxxxxx

Zvířata se xxxxxxx x pokusných xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxx započetím xxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx druhem xx potkan. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx studií xx možno použít x další xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx kmenů xxxxxxxxxxxxx zvířat. Expozice xx xxxx být xxxxxxxx xx nejdříve xx odstavení xxxxxx. Xx začátku xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxx zvířat xxxxx více xxx ± 20 % xx xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx test xxxxxxxxxxxx orální xxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxx druh a xxxx x xxxx xxxxxxxx.

1.2.2 Počet a xxxxxxx

Pro xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 xxxxx x 50 xxxxx) na každou xxxxxx dávky a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx. Xx-xx plánováno xxxxxxxx xxxxxxxx zvířat, xxxxx xx xxxxx x počet xxxxxx, xxxxx budou takto xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (skupiny) pro xxxxxxxxx patologie xxxx, xxx xxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx 20 zvířat xxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx by měla xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxx xxxxxx a frekvence xxxxxxx

Xxx test xxxxxxxxxxxxx xx zvolí xxxxxxxxxxxx tři dávkové xxxxxx xxxxx souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx vyvolat příznaky xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx mírný xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (méně xxx 10 %), xxx podstatnějších xxxx xxxxxxxx doby xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň by xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, vývojem x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx známky xxxxxxxx. Xxxxxx by neměla xxx xxxxx než 10 % vysoké xxxxx. Xxxxxxx xxxxx/xxxxx xx třeba stanovit xx xxxxxxxx xxxxx xxxx vysokou x xxxxxx xxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxx xxxx x úvahu xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx toxicity.

Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx dávka xxx exponovaná xxxxxxxxx xxxxxxx xx měla xxxxxxx zřetelné xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx-xx látka podávána x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx do xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx.

1.2.4 Kontroly

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxx x exponovanou xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Ve xxxxxxxxxx případech, xxxx xxxx inhalační xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx aplikaci xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx charakterizována, xxxxxx xx další xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx.

1.2.5 Xxxxxx aplikace

Xxx hlavní cesty xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx charakteristikách xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx

Xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x gastrointestinálního xxxxxx a xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, jimiž může xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx dostat xxxxxxxxxx xxxxx v potravě, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx nebo xxxxxxx x xxxxxxx.

Ideálně xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx sedm xxx x xxxxx, xxxxxxx dávkování xxx xxx x týdnu xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x období xxx xxxxxxxx, x xxxxx ovlivnit xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx pětkrát xxxxx je považováno xx xxxxxxxxxx.

1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxx xxx zvolena jako xxxxxxxx hlavní xxxxx xxxxxx u člověka x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

1.2.5.3 Inhalační xxxxxx

Xxxxxxx inhalační studie xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx zde xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Intratracheální instilace xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx napodobují xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, takže xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx po xxx xxx v xxxxx (xxxxxxxxxxx expozice), nebo x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin denně xx xxxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu xxx, xxxxxxxx i xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. V obou xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx exponována fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxxxxxx x stálou xxxxxxxx xx x xxx, že v xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx během víkendu.

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx cílech xxxxxx x xx lidské xxxxxxxx, xxxxx má xxx simulována. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Například xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx simulaci podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx nutností xxxx a xxxxxx xxxxx expozice a xxxxxxxx komplikovanější (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxxx x inhalačních komorách, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx za hodinu, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní x xxxxxxxxx komory xx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx komory xx xxxxxxx xxxxxxx mírný xxxxxxx a tím xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx prostředí. Komory xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zvířat. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx komory.

Měření xxxx monitorování zahrnuje:

(x) průtok vzduchu: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

(b) xxxxxxxxxxx: xxxxx denní expozice xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % střední xxxxxxx,

(c) teplota x vlhkost: pro xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x rozmezí 22 ± 2 °X x vlhkost x xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x atmosféře xxxxxx. Xxx parametry xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

(x) měření xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx aerosolů. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Vzorky xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x dýchací xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx exponováno, x xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx část xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx velikosti xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx často xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx systému, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, a poté xxxxx xxxxxxx tak xxxxx, aby bylo xxxxx posoudit xxxxxxxxx xxxxxxxxxx částic, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.2.6 Xxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx x 18 měsících u xxxx a xxxxxx x 24 měsících x xxxxxxx. Nicméně xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x delší xxxxx xxxxxx xxxx. x nízkým xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, doba xxxxxxxx xx xxxx xxx 24 xxxxxx xxx myši x xxxxxx a 30 xxxxxx pro xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx počet xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx klesne xx 25 %. Xxx ukončení xxxxx, xx xxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx rozdíl xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x vysokou xxxxxx xx xxxxxxxx toxických xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx bylo xxxxx uznat xxxxxxxxx xxxxxxxx testu, nesmí xxx ztráty xxxxxxxxxxxx xxxxx (autolýzou, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx obsluhy) x xxxxx xxxxxxx větší xxx 10 % x přežití xx xxxxx skupinách xxxxx xxx xxxxx xxx 50 % x 18 měsících u xxxx a křečků x x 24 xxxxxxxx x potkanů.

Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx zvířat xxx xxxxx xxxxxxx a 10 připojených kontrolních xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx toxicity xx xxxx xxx v xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx látce, xx xxxxxxxxxxxxxx projevů xxxxxxxx.

1.3 Xxxxx postupu

1.3.1 Xxxxxxxxxx

Xxxxx pozorování zvířat x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže a xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x centrálního xxxxxxxxx xxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx.

X xxxxxx exponované xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx) xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vyšetření.

Xxxxxxxxxx kontrola xxxxxx xx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx ztrátám xxxxxx xx xxxxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx xxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxxxx příznaky xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x mortalita xx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxx xxxxxx tumorů: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx každého xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxxxx měření xxxxxxxx potravy (x xxxx xxx, kde xx testovaná látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx během xxxxxxx 13 xxxxx x xxx přibližně xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx by xxxxxxxxx xxxx xxxx změny xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx individuálně x všech zvířat xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 týdnů xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx za xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx.

1.3.2 Klinická xxxxxxxxx

1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. xxxxx xxxxxxxxxxx, hematokrit, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, celkový xxxxx bílých xxxxxxx, xxxxxxxx destiček xxxx xxxxx xxxxxx srážlivosti) xx xxxx xxx xxxxxxxxx za tři xxxxxx, šest xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx konci xx xxxxxxxx xxxx xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx je to xxxxx, vzorky ve xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx vyšetřit xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xx xxxxx bílých krvinek xx provede xx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx nebo xxxxx x vyšetření xxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxx xxxxxxx, diferenciál se xxxxxxx x x xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx.

1.3.2.2 Xxxxxxx xxxx

Vzorky xxxx od 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx možno xx xxxxxxxx xxxxxx x xx stejných xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Následující xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx dávek x xxxxxxx:

- xxxxxx moči, xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx krvácení (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),

- mikroskopické xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).

1.3.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Od nehlodavců xx xxxxx toho xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxxx. Z xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx a jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkoušky:

- celková xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xx funkci xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx¹⁾, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx²⁾, gamma xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxx, např. krevní xxxxxxx xx lačno,

- xxxxx xx xxxxxx ledvin, xxxx. xxxxx xxxxxxxx v xxxx.

1) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx aminotransferáza

2) xxxx známá jako xxxxxx aspartát xxxxxxxxxxxxxxxx

1.3.2.4 Makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Kompletní xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx zvířat včetně xxxx, xxxxx zemřela xxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx stavu. Xxxx xxxxxxxxx xx odeberou xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek. Xxxxxxx viditelné léze, xxxxxx xxxx léze, xxxx léze, xxxxx xx xxxxx být xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx porovnání xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx měly být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx se xxxxxxx týká xxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx: xxxxx³⁾ (xxxxxxxxxxx míchy/mostu, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx tělísek, thymu, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, xxxxx, slinných xxxx, jater³⁾, xxxxxxx, xxxxxx³⁾, xxxxxxxxxxx³⁾, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, jejuna, xxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, lymfatických xxxxx, xxxxxxxx, xxxxx³⁾, akcesorních xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, kůže, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (krční, xxxxxx x xxxxxxx), sterna x kostní dření x xxxxxxxx kosti xxxxxx kloubů, x xxx. Xxxxxxxx plic x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx konzervaci xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxx xxx odpovídající xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Ve speciálních xxxxxxxx, jako jsou xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx trakt včetně xxxx, hltanu x xxxxxx.

Byla-li provedena xxxx klinická vyšetření, xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxxxx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, protože mohou xxx patologovi xxxxxxxx xxxxxxx.

3) Xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx pohlaví x xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx.

1.3.2.5 Histopatologie

Xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x satelitní kontrolní xxxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx dávce xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx cílové xxxxxx všech xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin x ze všech xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx:

(x) úplná xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx skupiny kontrolní x s nevyšší xxxxxx;

(b) xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx okem x léze, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx vyšetří xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx;

(c) xx-xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx x x xxxxxxx skupinách;

(x) xx-xx přežití xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx u xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx;

(x) je-li xx xxxxxxx x vysokou xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx vyšetřit xxxxxxxx nižší xxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxx zjištěné xxxxx xxxxx, dobu jejich xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx x tumory xxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx použity xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXX

3.1 Xxxxxx x xxxxx

Xxxxxx x xxxxx xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx pro vytváření xxxxxx x aerosolů, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxxx x způsobu xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxx boxu, pokud xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx měření xxxxxxx, vlhkosti, a xxx, xxx je xx žádoucí, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x expozici: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. směrodatná xxxxxxxx) xx měly xxxxxxxxx:

(x) rychlost xxxxxx vzduchu x xxxxxxxxxx zařízení,

(x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,

(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vstupující xx inhalační xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vzduchu),

(x) xxxxxx vehikula, xx-xx xxxxxxx,

(e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx,

(x) xxxxxx xxxxxxxxx částic (xxx xxx xxxxxxxxxx),

- dávkové xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) a xxxxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx a xxxx xxxxxx,

- doba xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xxxxxxx a xxxxx ,

- xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- xxxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x jeho xxxxx xxxxx,

- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx hmotnosti,

- xxxxxxxxxxxxxx nálezy,

- použité xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx,

- xxxxx klinické xxxxxxxxx x všechny xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxx xxxx),

- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

X.34. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx

Testovaná xxxxx xx xxxxxx několika xxxxxxxx xxxxx x xxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx v xxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx úplného spermatogenního xxxxx (přibližně 56 xxx x xxxx x 70 xxx x xxxxxxx), aby xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxx generace (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx alespoň xxxx estrálních cyklů, xxx byl zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinek xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx jsou xxxx xxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka podává xxxxxxxx xxxx xxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxx x kojení xxxxx xxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Příprava

Xxxx zahájením xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do dvou xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx podmínkách xxxxxxxx a krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx látku xxxxxxx x xxxxxxx xxxx v xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Všechna zvířata xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Pokud xx používá x xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx aditivum, xxxx xxx o xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx potkanům xxxx myším. Xxxxxxxxx xx xxxxxx zvířata, xx té xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Nepoužívá xx xxxxx s nízkou xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx co xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a váhy x/xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem x xxxx xxxxxxx. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x kontrolní, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví

Xxxxx exponovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vlivu xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx chování x X xxxxxxxx, kojení, xxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X₁ xx xxxxxx xx xxxxxxx.

1.2.3 Xxxxxxxx testu

Xxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxx porodem xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx do zvláštních xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x je xxx xxxxxxxxx materiál xxx xxxxxxxxx hnízda.

1.2.4 Xxxxxxxxx

Použijí xx xxxxxxx xxx exponované xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx pro aplikaci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx zvířata kontrolní xxxxxxx dostávají xxxxxxxxx x xxxxxxxxx použitém xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx uvážit xxxxxxx další xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xx xxxxxx.

Testovaná xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx má x xxxxxxxx případě - xxxxx to není xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx uhynutí x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx, xxxxx by xx xxxx připsat xxxxxxxxx látce, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx x xxxxxx xxx u xxxxxxxxx.

Xxx podání xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx podle změny xxxx. X případě xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx být případně xxxxxx na základě xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. xxx xx začátku xxxxxxxxxxx.

1.2.5 Limitní xxxx

X xxxxxxx xxxxx x xxxxxx toxicitou, xxxxx se xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx plodnost, není xxxxx xxxxxxxx studie xx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

1.3.1 Xxxx pokusu

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (P) xxxxx xx xxxx xxxx xx xxxxxx týdnů, xx xxxxxxx pětidenní xxxxxxxxxxxx xx odstavení. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx deset xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 týdnů xxx xxxx). Samci xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xx konci xxxxxx připouštění, xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxx použiti pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x jsou xxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxx koncem xxxxxx.

Denní xxxxxxxx xxxxxxx rodičovské xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx aspoň dva xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx aplikace xxxxxxxxx pak xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxx xx xx odstavení X₁ xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx studované xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.3.2 Xxxxxx xxx připouštění

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (jeden xxxxx xx dvěma xxxxxxx).

X xxxxxxx 1 : 1 párování, xxxxxx xx xxxxxxx x xxxx samcem xx společné xxxxx xx otěhotnění xxxxx xx xxxx 3 xxxxx. Každé xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx přítomnost spermatu xxxx vaginální zátky. Xxx 0 těhotenství xx xxxxxxxxx xxxx xxx nálezu vaginální xxxxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx x xxxxx zjistit xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xx je xxxxx xxx xxxxxxxxxxx další xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x osvědčenými xxxxxxx xxxx pohlaví nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxx vrhů

Xxxxxxxx použitým xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x pečovat x své potomstvo xx okamžiku odstavení xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx třeba dodržet xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxx 1. a 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx upraví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx dosáhlo xxxxx 4 samců x 4 xxxxx xx vrh; xxxxx xx není xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx počty, xxxx. 5 xxxxx x 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.4 Xxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxx xx být pozorováno xxxxxxx xxxxxx za xxx. Xxxxxxxx změny xxxxxxx, xxxxxxxx ztíženého xxxx xxxxxxxxxxxxx porodu x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mortality xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxx jak xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx gravidity xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx denně. Xx porodu a x průběhu xxxxxxx xx xxxx příjem xxxxxxx (x xxxx, xxxxx se xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx) xx xxxxxx xxx, kdy je xxxxxxxxx váženo. Xxxxxxxxxx X zvířata xx xxxx xxxxx den xxxxxxxx x pak xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.

Doba xxxxxxx xx xxxxxx od xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx mláďat, xxxxx mrtvých x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx dnu se xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx defekty. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx se xxxxx xxxx xx xxxxxx, xx 4. x 7. dnu a xxxxx xxxxx týden xx xxxxxxxx studie, xxx jsou zvířata xxxxxxx individuálně. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx matek x xxxxxxxxx.

1.3.5 Xxxxxxxxx

1.3.5.1 Xxxxx

Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx generace X xxxxxxxxxxxxx vyšetří na xxxxxxxxxx abnormality anebo xxxxxxxxxxx změny se xxxxxxxx pozorností x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxx se vyšetří xx xxxxxxx.

1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, semenné xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, prostata, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxx X xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V případě, xx tyto xxxxxx xxxxxx xxxxxxx vyšetřeny x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx zvířat kontrolní xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávku x dále x xxxxxx, která xxxxxxx x xxxxxxx pokusu.

Xxxxxx, které jevily xxxxxxxxxxx u xxxxxx xxxxxx zvířat, xx xxxxxxx x x X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupin. X xxxxxx případech se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx všechny xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxx bylo xxxxxxx, xxxxxxxxxxx orgány xxxxxx podezřelých x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx podrobit mikroskopické xxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, typ xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx zpracovány xxxxxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xxxx xx použít xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxxxxxx

Zpráva x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:

- xxxx/xxxx použitých zvířat,

- údaje x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx plodností, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie nebo xxx zvířata xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx každého xxxx, xxxxxxxxx hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxx x xxxxx účinky xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx růst,

- xxx, kdy byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,

- xxxxxxx hmotnost zvířat X xxxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx, xxxxx je xx možné,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

B.35. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - DVOUGENERAČNÍ XXXX

1. XXXXXX

1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx.

Testovaná xxxxx xx xxxxxx několika xxxxxxxx samic a xxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Samci xxxxxxxxxx (X) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx růstu x xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx x xxxx a 70 xxx x xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx alespoň xxxx xxxxxxxxxx cyklů, xxx xxx zachycen xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx testovací xxxxx na xxxxxx.

Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X době xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxx, x xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx, xxxxx samicím. Xx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X₁ x xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx x až xx doby xxxxxxxxx X₂ xxxxxxxx.

Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx modifikovat.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody

1.2.1 Xxxxxxxx

Před xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx - kontrolní x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Rodičovská xxxxxxx (P) xxxx xxxxxxx nejméně 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx nebo x xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx možné. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx způsobem x xxxxxxx celého xxxxx. Xxxxx xx používá x xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxx 7 dní x xxxxx.

1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx xx xxxxxxxx potkanům xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxx X zvířata, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx. Musí být xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, kmene, xxxxxxx a váhy xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx být ověřena x obou xxxxxxx. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2.3 Xxxxx a xxxxxxx

Každá xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxx 20 březích samic x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx porodu. Cílem xx xxxxxx dostatečný xxxxx těhotenství a xxxxxxxxx, a tím xxxxxxxx spolehlivé hodnocení xxxxx látky xx xxxxxxxx, průběh gravidity x mateřské xxxxxxx, xxxxxx, růst x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X₁ xx xxxxxx xx dospělosti, x xxxxx jejich xxxxxxxxx xxxxxxxx F₂ až xx xxxxxxxxx.

1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx libitum. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx klecí x xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

1.2.5 Xxxxxxxxx

Použijí xx alespoň xxx xxxxxxxxxx skupiny x xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx, pak xxxxxxx xxxxxxxxx skupiny xxxxxxxxx xxxxxxxxx x největším xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx látka snižuje xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx skupiny, spárované xx xx výživy.

Xxxxxxxxx látka x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x ideálním případě, xxxxx xx dovolí xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxx x její xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx toxicitu x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx populaci. Xxxxxxx xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx minimální xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx daly xxxxxxx testované xxxxx, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx nepříznivé xxxxxx, xxx x xxxxxx xxx u xxxxxxxxx.

Při xxxxxx xxxxxx nebo v xxxxxxxxx se dávka xxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx hmotnosti. V xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx tělesné hmotnosti x 0. nebo 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.2.6 Xxxxxxx xxxx

V xxxxxxx xxxxx s nízkou xxxxxxxxx, pokud xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx žádným xxxxxxxx účinkem xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx úrovních. Xxxxx předběžná studie xxxxx, že xxxxxx xxxxx, vyvolávající xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx účinky xx xxxxxxxx, není xxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 Xxxxx postupu

1.3.1 Plán xxxxxx

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X začne xx xxxx pěti xx xxxxxx týdnů, aspoň xx pětidenní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx týdnů xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (8 xxxxx pro myši). Xxxxx se xxx xxxxxx x vyšetří xx xxxxx období xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxxxx x jsou xxxxxxx xxx xxxxxxxxx produkci xxxxxxx vrhů a xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx pokusu.

Denní xxxxxxxx xxxxxxx rodičovské xxxxxxxx P začne xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx aspoň xxx xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxx xx do xxxxxxxxx X₁ xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxxxx x vlastnostech xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. x xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx F₁ xxxxxx po xxxxxxx x končí xxxxxx xxxxxxxxx.

1.3.2 Xxxxxx při xxxxxxxxxxx

Xx xxxxx xxxxxx párování 1 : 1 (jedna xxxxxx x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (jeden xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).

X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, samice xx xxxxxxx x týmž xxxxxx ve xxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxx xx dobu 3 týdnů. Xxxxx xxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx vaginální xxxxx. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx den xxxxxx xxxxxxxxx zátky xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx X₁ xx xxxxxxxxxxx xxx připouštění xx xxxx 11 xxxxx x myší x 13 týdnů x xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X₁ xx náhodně xxxxxxx páry x xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Zvířata xxxxxxxxx xx xxxxxx xx odstavu.

Xxxxxxx, x xxxxxxx nedojde x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xx xx možné buď xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx nebo mikroskopickým xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxx vrhů

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx je ponechána xxxxxxx porodit normálně x pečovat x xxx potomstvo xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vrhů. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: mezi 1. x 4. xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx vyřazením xxxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx xx dosáhlo xxxxx 4 xxxxx x 4 samic xx xxx; pokud to xxxx proveditelné, je xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 xxxxx a 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx xxx 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx F₂ xx xxxxxxx xxxxxxx.

1.3.4 Xxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Významné xxxxx xxxxxxx, příznaky ztíženého xxxx prodlouženého xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx se měří xxxxx xxx xxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Během xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx a x průběhu xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx xxx, kdy xx xxxxxxxxx váženo. Rodičovská X a F₁ xxxxxxx xx váží xxxxx xxx aplikace x xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxx gestace se xxxxxx od xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx se xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x stanoví xx xxxxx x xxxxxxx mláďat, počet xxxxxxx x živých xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxx x mláďata xxxxxxxx ve xxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx xx zváží xxxx xx xxxxxx, xx 4. x 7. xxx x xxxxx xxxxx týden do xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x fyzickém stavu xxxxx a xxxxxxxxx.

1.3.5 Xxxxxxxxx.

1.3.5.1 Pitva

Xxxxxxx xxxxxxx zvířata xxxxxxxx X x X₁ xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx uchovávat xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx X₁ xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X₂ se xxxxxx xx xxxxxxxxx.

Xx xxxxxxxx xxxx úmrtí xx všechna xxxxxxxxxx xxxxxxx X x X₁ xxxxxxxxxxxxx vyšetří xx xxxxxxxxxx abnormality xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx zemřelá xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx.

1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Vaječníky, xxxxxx, děložní xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx kanálky, xxxxxxxxxx xxxxxx, prostata, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxx X x X₁ xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X případě, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx vyšetřeny v xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx studiích, xxxxxxx xx mikroskopické xxxxxxxxx x všech X x F₁ xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx dostávající xxxxxxxx xxxxx, která xxxx vybrána pro xxxxxxxxxxx, x xxxx x xxxxxx, která xxxxxxx x průběhu xxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xxxxxx abnormality x xxxxxx skupin xxxxxx, xx xxxxxxx i x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx makroskopicky postižené. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xx mají xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

2. XXXXX

Xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx skupinu xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxxx, počet xxxxxxxxx xxxxx, typ změn x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Může xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx přijímaná xxxxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

3.1 Zpráva x xxxxxxxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxxxx by xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx následující údaje:

- druh/kmen použitých xxxxxx,

- xxxxx x toxické odezvě x závislosti xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx studie xxxx zda xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxxx hmotnost x xxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx x individuální hmotnost xxxxxxx před utracením,

- xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, potomstvo x xxxxxxxxxxx xxxx,

- xxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X x X₁ xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx,

- pitevní xxxxxx,

- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech údajů, xxxxx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.36. TOXIKOKINETIKA

1. METODIKA

1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx vhodnou cestou. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx látka xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx opakovaně x xxxxxxx stanovené xxxx, xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Látka resp. xxxx xxxxxxxxxx jsou xxx podle účelu xxxxxx stanovovány v xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx s "neznačenou" xx "xxxxxxxx" formou xxxxxxxxx látky. Jestliže xx xxxxxxx značení, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.

1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

1.2.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nejméně xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx. Před xxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx skupin. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx premedikovaných xxxxxx.

1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx provádějí xx xxxxxx či více xxxxxxxx živočišných druzích. Xxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx se testovanou xxxxxx. Jestliže xxxx xxx xxxxxxxxx používáni xxxxxxxx, neměla xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx ± 20 % průměrné xxxxxxx.

1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx

Xxx studium xxxxxxxx x vylučování xx xxxxx xxxxxxx 4 xxxxxx xxx xxxxxx jednotlivou xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ale xx xxxxxxxx podmínek xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx provádět xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx 4 zvířata xxxxxxx pohlaví. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxx xxxxxxxx) xx možné xxxxxx xxxxx počet xxxxxx.

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx třeba brát x úvahu xxx xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx utracena x xxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx počet xxxxxxxx xxxx, x nichž xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx skupiny xxxxxx je xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx intervalů, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx počítat x počtem xxxxxxxx xxxxxxxxx x plánovaným xxxxxxxxx zvířat, xxx xx skupině xxxxx xxx xxxx xxx 2 zvířata. Xxxxxxxx xxxxxxx zvířat xx xxxx být xxxxxxxxxx xx xx, xxx xxx xxxxx xxxx. xxxx metabolity xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx ve xxxx retence, xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.

1.2.2.3 Xxxxx

V případě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx to xxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx které xxxxxx pozorovány žádné xxxxxxx účinky a xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx parametrech xxxx xxxxx xxxxxxxx toxické xxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx dostatečné podání xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.

1.2.2.4 Xxxxxx aplikace

Xxxxxxxxxxxxxxx studie xx xxxx být prováděny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x je-li xx xxxxxx i xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx jsou používány x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxx xxxxxx sondou xxxx x xxxxxxx, aplikována xx kůži, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx dobu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx aplikace. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx mohou xxx získány důležité xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx.

Xxxxxx xx se xxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxxxxxx vehikula x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx vstřebávání x xxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx sondou xxxx v xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dávky, xxxxxxx xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v potravě.

1.2.2.5 Xxxx sledování

Všechna xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x další xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x údaji x xxxxxx počátku, xxxxxxxxx x xxxxxx.

1.3 Xxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxxxxx přiměřeným xxxxx. Ve zdůvodněných xxxxxxxxx xx možno xxxxxx zvířata xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx.

1.3.1 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx podávané xxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x nebo xxx xxxxxxxxxx skupiny¹⁾, x xx např.:

- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx metabolitů v xxxxxxxxx např. v xxxx, žluči, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx vzduchu x xxxx jejích zbytků x xxxxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. studie xxxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx referenční xxxxxxxx,

- porovnání množství xxxxx resp. jejích xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx skupinou,

- xxxxxxxxx xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x plazmě xx xxxx x porovnání x xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skupině.

1) V xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx ta, xx xxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx způsobem, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

1.3.2 Xxxxxxxxxx

X xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx 2 xxxxxxxx, z xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx schématu mohou xxx použity xxxxx xx xxx:

- xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx informace;

- kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x množství xxxxxxxxx xxxxx a xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx časových xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3.3 Xxxxxxxxxx

Xxx xxxxxx vylučování xx xxxxx moč, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx vzduch, x xxxxxxxx případech žluč. Xxxxxxxx testované xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx se x xxxxxx exkretech stanovuje xxxxxxxxxx xx podání xxxxx, x xx xxx xx xxxxxxxxx 95 % z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 7 xxx xx počátku xxxxxxxxxx.

Xx speciálních xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x době xxxxxxx testovaných zvířat.

1.3.4 Xxxxxxxxxxxx

K určení xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx technikami. Xxxx xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx metabolitů a xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx, kde xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx studií. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx provedení xx xxxxx xxxxxx.

Xxxxx informace x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x toxicitou látky xxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx studií např. xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx sloučenin xxxxxxxxxxxx - XX xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx.

2. ÚDAJE

Xxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxx prováděné studie xxxxxxxxxx v tabulkách, xxxxx xxxxx doplněných xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx variability xx xxxxxx k xxxx, xxxxx, tkáni x xxxxxxx (xxxxx xx xx xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxxx metodami. V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx studií xx xxxx být xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x navrženy xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXX ZPRÁVA

3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx by zpráva x xxxxx měla xxxxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx xxxxx:

- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx podmínky, xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx materiálu, xxxxxxxx xxx xxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx(x) xxxxxx x xxxxxxx použitá xxxxxxxx,

- toxické a x ostatní xxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx xxxxxxxxx testované xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx vydechovaného xxxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxxx rozdělené xxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxx, tkání x xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx x závislosti xx xxxx,

- xxxxxx užité pro xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxx pro metabolismus,

- xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxx výsledků.

X.37. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX ORGANICKÝCH XXXXXXXXX XXXXXXX - AKUTNÍ XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Xxx xxxxxxxxx x vyhodnocení xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx schopnost xxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxx specifický typ xxxxxxxxxxxxx, xxxxx nemůže xxx zjištěn x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx organických xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxx testovány xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx mohou xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nález x xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx považovat xx xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

1.2 Definice

Xx xxxxxxx látek xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx metody xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, fosfonové xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, thiofosfonových xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, nebo xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx u xxxxxxxxx látek xxxx xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx syndrom projevující xx xxxxxx, distální xxxxxxxxxx, xxxxxxx v xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx specifické xxxxxxxx - XXX (xxxxxxxxxx xxxxxx esterase) x xxxxxxx tkáni.

1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx na pozitivní xxxxxxxxx skupině x xxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx nezměnila.

Xxxxxxxxx xxxxxx používané látky x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, XXXXXX 201-103-5, xxxxxxxx xxxxx: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx xxxxxxxx fosforečné, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (TOCP).

1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx orálně v xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxxxx cholinergními xxxxxx. Xxxxxxx se po xxxx 21 xxx xxxxxxxx, zaznamenává se xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x paréza. Biochemické xxxxxxxxx, xxxxxxx inhibice XXX, xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx podání látky. 21 xxx xx xxxxxx látky jsou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xx provedeno xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných xxxxxxxxx xxxxx.

1.5 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx

1.5.1 Xxxxxxxx

Xxxxx xxxxxx dospělé xxxxxxx bez xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění a xxxxxxxxxxxxxx léčby x x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejméně 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx chovu x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během experimentu.

Xxxxxxxxx xx dostatečně xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx umožňující xxxxx xxxxx slepic a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx orálně sondou, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx podávají xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx je xxxx. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx velké dávky xxxxxxx látek v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx dostatečně xxxxxxxx. U xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx určeny xxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

1.6 Experimentální xxxxxxxx

1.6.1.1 Pokusná xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx gallus domesticus) xx xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx velikosti x chovají xx xx podmínek, xxxxx xxxxxxxx volný xxxxx.

1.6.1.2 Xxxxx a xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx zvířaty x kontrolní skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými.

X xxxxx skupině má xxx dostatečný xxxxx xxxxxx, aby aspoň xxxx x nich xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx vyšetření (xx třech xxxx x xxxxx xxx xx podání) a xxxx přežilo 21xxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx souběžně xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx historie. Má xxx xxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxx se xxxxxx látka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx a xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx doplňovat historické xxxxx, když xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. plemeno, potrava, xxxxxxxx xxxxx).

1.6.1.3 Xxxxx xxxxx

Xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx příslušného xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx dala xxxxxxxx xxxxxx, která bude xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Určitá úmrtnost xx v xxxx xxxxxxxxx studii xxxxxxxx xxx stanovení přiměřené xxxxx x hlavní xxxxxx. Aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, x kterém xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx typů xxxxxxxxxxx xxxxx (xxx xxxxxx B.1 bis). Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx studii by xxxx být co xxxxxxxx x přihlédnutím x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx výběru xxxxx x hornímu xxxxxx xxxxx 2000 mg.kg^-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx dostatečného xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx (xxxx) x xx 21 xxxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxx). Xxxxxxx nebo jiný xxxxxxxx xxxxxxxxx, o xxxxxx xx xxxxx, xx neinterferuje s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xx má použít xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinky.

1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx^-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx postupů xxxxxxxxx xxx xxxx studii, xxxxxxxx xxxxx pozorované xxxxxxx účinky x xxxxxxxx podle xxxxx x xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx není xxxxx toxicitu xxxxxxxx, xxx xxxx třeba xxxxxxxx x studii x xxxxxxx vyšší xxxxx. Limitní xxxx xx neprovádí, xxxxx xxxxxxxx vyskytující xx x lidí naznačuje xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xx 21 xxx.

1.6.2 Xxxxx postupu

Xx xxxxxxxx prostředku, xxxxxxxxxxxxx před xxxxxx xx xxxxxxxx akutního xxxxxxxxxxxxx účinku, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x jediné xxxxx.

1.6.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Pozorování xx začít xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pozorují několikrát x xxxxxxx prvních xxxx xxx a xxx aspoň jednou xxxxx xx xxxx 21 dní xxxx xxxxx nebudou utraceny xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx nejméně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xx paréza. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx slepice xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jako xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx se usnadnilo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.

1.6.2.2 Xxxxxxx xxxxxxxx

Všechny xxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.6.2.3 Biochemie

Xxxx xxxxxx náhodně xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxx slepice x xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny (xx-xx xxxxxxx xxxxxxx) xx usmrtí x xxxxxxx dnech xx xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx vyjmou xxxxx x xxxxxxxx mícha. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx n. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxx na xxxxxxxx XXX. Běžně xx xxxxxxxx tři xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupiny xx 24 xxxxxxxx x xxxxx tři xx 48 xxxxxxxx, xxx slepice x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx usmrcují xxxxx xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx pozorování klinických xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxx pohybuje xxxxx xxxxxx (hodnotí xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), pak xx xxxxxxxxxx odebrat xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxx zvířat, x xx xxxx 24 xx 72 xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx.

X těchto vzorků xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (AChE). In xxxx xxxx však xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, což může xxxx x podcenění xxxxx jako xxxxxxxxxx XXxX.

1.6.2.4 Xxxxx

Pitva x xxxxx xxxxxx (plánovaně xxxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx makroskopické xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx.

1.6.2.5 Histopatologické xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx x přeživších zvířat (xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxx) se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Tkáně xx xxxxxx xx situ xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Odebírá xx: xxxxxxx (střední xxxxxxx xxx), prodloužená mícha, xxxxx - řezy xxxxx se xxxxxxxxx x horní xxxxx xxxxx, střední xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, z xxxxxxxxxxx nervů xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x x. xxxxxxxx (x xxxx xxxxx x x. gastrocnemius) x x x. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx specifickými barvivy xx myelin x xxxxx.

2. XXXX A XXXXXX ÚDAJŮ

Xxxxxxxxx xxxxxxxx x účincích xxxxxxxxxxx touto xxxxxxx (xxxxxxxxx, histopatologie x xxxxx xxxxxxx) běžně xxxxxxxxxx xxxxx testování xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx neurčité xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx údaje xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí být xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx, typy x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx účinků x procento xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx účinku.

Xxxxxxxx xxxxxx se vyhodnotí x hlediska xxxxxxx, xxxxxxxxxx x korelace xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx jevy x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Zpráva x xxxxxxx pokusu

Xxxxxx o xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:

Testovaná xxxxxxx:

- xxxxxxx plemeno;

- xxxxx a xxxxx xxxxxx;

- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.;

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx:

- podrobné xxxxx o xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxxxx xxxxxx vehikula;

- xxxxxxxx xxxxx x způsobu aplikace xxxxxxxxx xxxxx;

- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a kvalitě xxxx;

- zdůvodnění xxxxxxx úrovně dávek;

- specifikace xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x vehikulu, xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;

- podrobné xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxx x tělesné xxxxxxxxx;

- údaje x toxických xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx;

- xxxxxxxxx, stupeň a xxxxxx klinických xxxxxxxx (xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx);

- podrobný xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky;

- xxxxxxx nálezy;

- podrobný popis xxxxx histopatologických xxxxxx;

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, u xxxxxxx xx xx možné.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x metodou XXXX XX 418.

B.38. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX SLOUČENIN XXXXXXX 28DENNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX

1. XXXXXX

1.1 Xxxx

Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx důležité vzít x xxxxx schopnost xxxxxx xxxxxxx látek xxxxxxx specifický typ xxxxxxxxxxxxx, který xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx organických xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx zpožděné projevy xxxxxxxxxxxxx x mají xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nález x in xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxx 28xxxxx test xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx informace x možném xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Poskytne xxxxxxxxx x závislosti xxxxxxxx xx dávce x xxxx poskytnout xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx xxxxx nepříznivé xxxxxx. Xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x názvu této xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx neutrální organické xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných kyselin xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, nebo xxxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxxx xxxxxx neurotoxicitu, xxxxxxxxxxx x některých xxxxx xxxx xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx je xxxxxxx projevující xx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx příznaků, a xxxx inhibicí x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx - NTE (xxxxxxxxxx xxxxxx esterase) v xxxxxxx xxxxx.

1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx látka se xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxxxx xxxxxxxx XXX, se xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx vybraných x xxxxx xxxxxxx 24 x 48 xxxxx xx posledním podání xxxxx. Dva xxxxx xx poslední dávce xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x je xxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxx nervových xxxxx.

1.4 Xxxxx xxxxxx testování

1.4.1 Xxxxxxxx

Mladé xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxx 5 xxx xxxx zahájením xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx ohrady umožňující xxxxx pohyb slepic x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxx, xxxxx 7 xxx x xxxxx, buď xxxxxx, želatinovými xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxx,

jako je xxxx. kukuřičný xxxx. Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, neboť velké xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. U xxxxxxxxx nosičů xxxx xxx xxxxx nebo xxxxxx před xxxxxx xxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky

1.4.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx domesticus) xx xxxx 8 až 12 xxxxxx. Používají xx xxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx se za xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxx.

1.4.2.2 Počet x xxxxxxx

Je xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxx. X výjimkou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině zachází xxxxxx jako x xxxxxxxxx.

X xxxxx xxxxxxx xx být xxxxxxxxxx počet xxxxxx, xxx xxxxx šest x xxxx xxxxx xxx utraceno xxx xxxxxxxxxxx vyšetření (po xxxxx v xxxxxx xx dvou xxxxxxxx xxxx) x šest xxxxxxx čtrnáctidenní xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.4.2.3 Xxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx se xxxxx x přihlédnutím ke xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x x dalším xxxxxx x toxicitě xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx vyvolat xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx neurotoxicity, nezpůsobit xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx utrpení. Xxxx xx zvolí xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx sledovat xxxxxxxxx účinku xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1.4.2.4 Xxxxxxx test

Xxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti a xxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx pozorované xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx u xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx důvod xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx třeba xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx vyšší xxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx se x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.

1.4.2.5 Doba xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx pozorují xxxxxxx xxxxxx denně po xxxx xxxxxxxx x 14 xxx xx xx, xxxx xx xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx xxxxx.

1.4.3 Xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxx v xxxxx xx 28 xxx.

1.4.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jednou xxxxx xx 28 xxx x xxxxxxx 14 xxx po xxxxxxxx aplikace, do xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx, xxxxxx x trvání. Xxxxxxxxxx xx zahrnovat xxxxxxxxxxx xxxxxxx, ale nemá xx xx xx xxxxxxxx. Ataxie xx xxxxxxx xxxxx nejméně xxxxxxxxxxxx pořadové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx slepice xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx motorické xxxxxxxx, xxxx např. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx minimálních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx vyloučit, humánním xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.

1.4.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx těsně xxxx xxxxxx xxxxxxx testované xxxxx x pak xxxxxxx jednou xxxxx.

1.4.3.3 Xxxxxxxxx

Xxxx xxxxxx xxxxxxx vybraných x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx dnech xx aplikaci poslední xxxxx. Xxx analýzu xxxxxxxx NTE xx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. ischiadicus x xxxxxxxxxx jeho xxxx xx xxxxxxxx NTE. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx slepice z xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx x xxxxx tři po 48 hodinách xx xxxxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxx xxxxx z xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xx výhodnější xxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx doporučuje xxxxxx xxxx dobu x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx.

X těchto xxxxxx tkáně xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (AChE). Xx xxxx může xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx XXxX.

1.4.3.4 Xxxxx

Xxxxx všech xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx i xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx stav) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx posouzení stavu xxxxx x xxxxx.

1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření

Xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (nepoužitých xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) se xxxxxxxxxxxx vyšetří. Tkáně xx xxxxxx in xxxx xx použití xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: mozeček (střední xxxxxxx xxx), xxxxxxxxxxx xxxxx, mícha (xxxx xxxxx xx xxxxxxx x horní xxxxx xxxxx, střední xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx), x xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx distální xxxx x x. tibialis (x xxxx větve x m. xxxxxxxxxxxxx) x x x. xxxxxxxxxxx. Řezy xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.

Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x nejvyšší dávkou. Xxxxx xx najdou x zvířat xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx histologické vyšetření x xx slepicích xx skupin, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x nízkou.

2. XXXX X XXXXXX ÚDAJŮ

Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, histopatologie a xxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx, xxxxx se neprovádí xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Neprůkazné xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Údaje xx xxxx sestaví xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, změny xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx vykazujících xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.

Výsledky xxxxxx xx vyhodnotí x xxxxxxxx xxxxxxx, závažnosti x xxxxxxxx mezi xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxx xxxxxxx:

Xxxxxxxxx zvířata:

- xxxxxxx plemeno,

- xxxxx x xxxxx xxxxxx,

- xxxxx, xxxxxxxx ustájení xxx.,

- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx začátku xxxxxx.

Xxxxxxxx testování:

- xxxxxxxx údaje x xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx testované xxxxx,

- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxx x potravě x xxxxxxx xxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávek, xxxxxx podrobných xxxxx x xxxxxxxx, objemu x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xx biochemické xxxxxxxxx, xx-xx xxxx xxx 24 x 48 xxxxx.

Výsledky:

- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,

- úroveň xxx xxxxxx (NOAEL),

- xxxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx),

- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich výsledky,

- xxxxxxx xxxxxx,

- podrobný popis xxxxx histopatologických xxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, u kterých xx xx xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxx

4. XXXXXXXXXX

Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx x metodou XXXX XX 419.

X.39. Xxxx xxxxxxxxxxx syntézy XXX x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx

1. XXXXXX

Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx XXX Xxxxxxxxx (XXX) Xxxx With Xxxxxxxxx Xxxxx Cells Xx Vivo (1997).

1.1 XXXX

Xxxxxx testu xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX) x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x jaterních xxxxxxx pokusných zvířat (1) (2) (3) (4).

Tento xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinků chemických xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx XXX v xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx následnou reparaci. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sloučenin; jsou xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx detekci xxxxxxxxx XXX xx xxxx.

Xxxxxxxx-xx xxxxxxx o xxx, xx xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx tento test xxxxxx.

Xxxxxxxx neplánované xxxxxxx DNA (UDS) xx xxxxxxx tak, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx plánovanou (X-xxxx) xxxxxxxx XXX. Xxxxxxxxxxx xx xxxxxx, při xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (³X-XxX). Xxx xxxxx XXX in xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx potkaní játra. Xxxx xxxxx xxx xxxxx se xxxx xxxx mohou xxxxxx, xxxxxx xxxx předmětem xxxx metody.

Xxxxxxx xxxxxxxx závisí xx xxxxx xxxx DNA, xxx xxxx x xxxxx poškození odstraněny x nahrazeny. Proto xx metoda XXX xxxxxxx vhodná x xxxxxxx xxxxx indukujících "xxxxxxxxx xxxxxx" (20 - 30 bází), xxxxxxx pro látky xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx repair" (1 - 3 xxxx) xx méně xxxxxxx. Xxxx může xxxxxxxx k xxxxxxx x důsledku xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx XXX. Xxxxxx odpovědi XXX neříká nic x přesnosti procesu xxxxxxxx. Mimoto je xxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxx x XXX xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx XXX xxxx xxxxxxxx excizním xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx, xx XXX xxxx neposkytuje x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxx x xxxxxxxx: xxx xxxxxxx xxxxx (XXX) xxxxx než určitá, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.

Xxx xxxxxxx xxxxxx (XXX): xxxxxxxxxxxxx xxxx UDS xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx testech UDS, xxxxxxxxx jako xxxxxx xxxx xxxxxx xxx x xxxxx (XX) x xxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxx (XX): NNG = XX - CG. Xxxxx XXX xx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx x kultuře, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx apod.

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx DNA (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX): xxxxxxx xxxxxxx XXX po xxxxxx x xxxxxxxxxx úseku XXX xxxxxxxxxxxx oblast xxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemickou xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.3 XXXXXXX XXXXXX

Xxxx UDS x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DNA xx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx obvykle x inkorporace ³X-XxX xx XXX xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx v X-xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx ³X-XxX se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx tak xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx s xxxxxxx x S-fázi, xxxx je např. xxxxxxxxxxx metoda.

1.4 XXXXX XXXXXX

1.4.1 Xxxxxxxx

1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxxx potkani, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.

1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx xxxxx x části X.

Xxxxxxx xx xxxx xxx 50 - 60 %.

1.4.2.1 Xxxxxxxx zvířat

Xxxxxx xxxxx dospělí xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx jednoznačně xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx xxxx dní xx zvířata xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx podmínkách. Xxxxx xx třeba xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, jak x xxx xxxx xxxxx umístěny.

1.4.2.2 Testovaná xxxxx/xxxxxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x pevném xxxxx x xx-xx xx xxxxx, látka xx před xxxxxxx xxxxxxxx rozpustí xxxx xx xxxxxxxx její xxxxxxxx ve vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx podáváním ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) prokazují, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.

1.4.3 Podmínky xxxxx

1.4.3.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx

Rozpouštědlo / xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí vyvolávat xxxxxxx účinky a xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx xx xxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx být jeho xxxxxxx xxxxxxxxx údaji x xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, aby kde xx xx možné, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.

1.4.3.2 Xxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

Pozitivní xxxxxxxx xx měly xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxx, xxx xxx očekávat xxxxxx detekovatelné zvýšení xxx xxxxxxxxx úroveň. Xxxxxxxxx kontroly vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx odezvě (4). Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx volí xxx, aby xxxx xxxxxx xxxxxx, ale xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zakódovaného preparátu. Xxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx patří xxxxxxxxx:

Xxxx odběru xxxxxx	Xxxxx	XXX	XXXXXX
xxxxx x xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx)	X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx	62-75-9	200-249-8
xxxxx v xxxxxxxxx (12-16 xxxxx)	X-2-xxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX)	53-96-3	200-188-6

Xx xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx podávána xxxxxxxxx xxxxx.

1.5 XXXXXX

1.5.1 Xxxxx x pohlaví zvířat

X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx minimálně xxx analyzovatelní jedinci. Xxxxx existuje xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx pro xxxxxxxx skupiny negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx jeden, xxxx xxx xxxxxxx.

Pokud x xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x týmž xxxxxxxxxx xxxxxx využívajících xxx xxxxxxxxx test, xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx podstatné xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx jednom xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx pohlavně xxxxxxxxxx, xxx xx xxxx například x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přípravků, xxxxxxx xx test xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

1.5.2 Dávkovací xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx jednorázově.

1.5.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxx xx používají xxx xxxxx dávky. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky toxicity, xx při vyšší xxxxx ve stejném xxxxxx xx xx xxxxxxxx letální xxxxxx. Xxxxx xxxxx představuje xxxxxx 50 - 25 % xxxxx xxxxx.

Xxxxx, xxx x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, mohou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx od xxxxxxx. Provádí-li xx xxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici, xx xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, pohlaví a xxxxxxxxx xxxxxx, jaké xx pak použijí x xxxxxx studii.

Xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx definovat xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxx. pyknotická xxxxx).

1.5.4 Xxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxx xxx dávce xxxxxxxxx 2&xxxx;000 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx ve xxxx xxxxxxx x xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a jestliže xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkách neočekává xxxxxxxxxxxx, nemusí xx xxxxxxx xxxxx studie. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx vyšší dávka.

1.5.5 Aplikace látky

Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X odůvodněných xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx i xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Intraperitoneální xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxx krevním xxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx se xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx vpravit, závisí xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 ml/100 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxx dávky musí xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx vykazují xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.5.6 Xxxxxxxx jaterních xxxxx

Xxxxxxx xxxxx xx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx 12 - 16 xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx odběr (xxxxxxx 2 - 4 hodiny xx xxxxxx xxxxx), xxxxxx xx xx 12 - 16 hodinách xxxxxxxxx xxxxxx zjevná. Xx ovšem xxxxx xxxxxx i jiné xxxx odběru vzorků, xx-xx to xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx obvykle zakládají xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx disociované xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).

1.5.7 Xxxxxxxxx UDS

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx xxxx (např. 3 - 8 xxxxx) obvykle xxxxxxxx x médiu xxxxxxxxxxx ³X-XxX. Po inkubaci xx xxxxxx xxxxxxxx( xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx nadbytek xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx neinkorporovaná xxxxxxxxxxxxx (tzv. "cold xxxxx"). Buňky xx xxx xxxxxxx, xxxxxx x vysuší. Xxx xxxxxxx inkubačních xxxxxxxxxxx xxxxxx se "xxxx xxxxx" provádět. Sklíčka x xxxxxxxxx se xxxxxx do autoradiografické xxxxxx, xxxxxxxx xx xxx (xxxx. xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxx), vyvolají, xxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx stříbrná zrna. X xxxxxxx jedince xx xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxxx.

1.5.8 Xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxx preparáty xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxxx morfologií, xxx xxxx xxxxx UDS xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx radioaktivního xxxxxxx).

Preparáty se xxxx počítáním zrn xxxxxxxx. Vždy na xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x každého xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxx; xxxxx xx xxxxx méně xxx 100 na xxxxxxx xxxxxxx, musí xx xxx xxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x X-xxxx, xxx xxxxx buněk x X-xxxx xx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx stupeň inkorporace ³X-XxX xx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zrnek.

2. XXXXX

2.1 XXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Výsledky xxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxxx preparátů x xxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxx každou xxxxx, xxxxxxx jedince x xxxxxx dávku a xxx se stanoví xxxxx xxxxx "nuclear xxxxx" (NNG) xxxxxxxxx xxxxx XX xx xxxxx XX. Počítají-li xx "buňky v xxxxxx", xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx buňky určují, xxxxxxxxxx x podložena xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx souběžných negativních xxxxxxx.

Xxxxxxxxx výsledky xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xx statistické testy xxxxxxx, xx třeba xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx studie.

2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE VÝSLEDKŮ

Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:

pozitivní		(X) xxxxxxx XXX xxx předem xxxxxxxxxx xxxxxx, zdůvodněným xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx laboratoře
	xxxx	(XX) xxxxxxx XXX významně xxxxx xxx x xxxxxxxx kontroly
negativní		(X) xxxxxxx XXX xx úrovni/pod xxxxxx xxxxxxxxxxxx prahu x kontrol
	xxxx	(XX) xxxxxxx XXX xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx dat, xxx xxxxxxx, že je xxxxx xxxx v xxxxx parametry, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx jedinci, xxxxx xxxxx - xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody; xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx neměla xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx faktorem.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx získaného xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx závěr. Xxxxxxxx xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx problematické, x xxxx xx xxxxxxxxxx několikrát opakuje.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx ukazuje, xx xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxxx jaterních xxxxxxx xx vivo xxxxxxxxx DNA, xxxxx xxx opravit neplánovanou xxxxxxxx XXX xx xxxxx. Xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx, že za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx XXX, xxx je tímto xxxxxx xxxxxxxxxxx.

Je xxxxx vzít x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx dosáhne širokého xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx tkáň (např. xxxxxxxxx toxicita).

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, pokud je xxxxx.

Pokusná zvířata:

- použitý živočišný xxxx/xxxx,

- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx rozpětí, xxxxxxx x směrodatných odchylek xxx xxxxxxxxxx skupiny.

Xxxxxxxx xxxxxx:

- xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,

- xxxxx xx xxxxxx xxx určení rozpětí, xxxx-xx xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx volby x xxxxx,

- podrobnosti x xxxxxxxx testované xxxxx,

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx,

- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxx, že se xxxxx dostala do xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxx xxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx vodě (ppm) xx faktickou xxxxx (xx/xx hmotnosti/den),

- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x vody,

- podrobné schéma xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxx zjišťování xxxxxxxx,

- metoda xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx buněk,

- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,

- počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a počet xxxxxxxxxxx buněk,

- xxxxxxxx analýzy,

- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxx hodnoty xxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x "xxx xxxxxxx xxxxxx" xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx,

- vztah dávka-odpověď, xxxxx je x xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, bylo-li provedeno,

- xxxxxx toxicity,

- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- historické xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rozpětí, průměrů x směrodatných xxxxxxxx,

- xxxxx "xxxxx x xxxxxx", xxx-xx xxxxxxxx,

- počet xxxxx v S-fázi, xxx-xx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxx buněk.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Metoda X.39. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx xx 22.6.2001

X.40. XXXXXXX ÚČINKY XX XXXX

1. XXXXXX

1.1 XXXX

Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxxxxx Centre xxx xxx Xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx Methods, XXXXX, Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx, Xxxxxxxx Commission) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx testy in xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx: xxxx na xxxxxxxx xxxxxx transkutánního xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, XXX) a xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx. Validizační xxxxxx XXXXX prokázala, xx xxx testy dokáží xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx látkami xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx kůži. Xxxxxx test xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kůže R35, x xxxxxxx látky xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, X34). Xx xxxxxx xxxxx x postupy xxxx xxxxx; xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx na konkrétních xxxxxxxxxxx x na xxxxxxxxxxxx uživatele.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxxxx xxxx: způsobení xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

1.3 REFERENČNÍ XXXXX

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxx. 1.5.3.4 x 1.7.2.3.

1.4 XXXXXXX XXXXXX - XXXX TER XX XXXX POTKANA

Testovaný xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxx až 24 xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx terčíků xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx potkanů xxxxxxxxxx xxxxxxxx způsobem. Xxxxx, xxxxx xxxx leptavé xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx své schopnosti xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x bariérové funkce xxxxxx xxxxxxx.Xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporu (XXX) xxx určitou xxxxxxxx xxxxxxx (5xΩ) (4) (5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látky XXX xxx prahovou xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxx a neutrálních xxxxxxxxxxx látek (jejichž xxxxxxxx viz x xxx. (6)) je xxxxx xx zkušebního xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx vyskytují (2) (7).

1.5 XXXXX XXXXXX - TEST XXX XX XXXX XXXXXXX

1.5.1 Xxxxxxx zvířata

Pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (20 xx 23xxxxx) xxxxxxx, Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx nůžkami xx zvířata xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx a xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx se xxxxxx xx roztoku antibiotika, xxxxxxxxx streptomycinu, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx bakterií. Xxxxx xxxx čtvrtý xxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx 3 xxx xx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx než 31 xxx.

1.5.2 Xxxxxxxx terčíků xxxx

Xxxxxxx se humánním xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx x xxxxxxxx plochy x x xx se xxxxxxx xxxxxxx přebytečný xxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PTFE) xxxxxxx, x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx konec trubice xx xxxxxxxx xxxxxx X-xxxxxxx, kterým se xxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x O-kroužku xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx X-xxxxxxx xx pak xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx XXXX trubice xxxxxx xxxxxxxxx. Trubice xx ponoří xx xxxxxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxx hořečnatého (154 xX), kde xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx. 2).

1.5.3 Xxxxx xxxxxxx

1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xx-xx xxxxxxxxx látka x tekutém xxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx ve stavu xxxxxx, nanese se xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx epidermis, na xxxxxx xxxxx xx xxxxx 150 μl xxxxxxxxxxxx vody x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx x xxxx maximální možný xxxxxxx. U některých xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx 30 ^xX, xxx xx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx prášek. Xxxxxxx xx xxxx tři xxxxxxx xxx každou xxxxx. Látka xx xxxxxx xx dobu 24 xxxxx (viz xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx xx promýváním xxxxxxx vodovodní xxxx xxxxx xxxxxxxxx 30 ^xX xxx dlouho, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx. Odstranění xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xx xxxxxxxx vymýváním xxxxxxx xxxxxxx vody xxxxx xxxxxx 30 ^xX.

1.5.3.2 Xxxxxx XXX

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (TER) xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporu xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx přídavkem xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% xxxxxxxx, xxxxxx xx pokryje xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx se ethanol xxxxxxxx xxx, že xx trubice otočí, x xxxx se xxxxxxxxx přídavkem tří xxxxxxxxx 154 mM xxxxxxx xxxxxx hořečnatého. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx na xxx xxxxxx kůže x xxxxx xx xxxxx x xΩ/xxxxxx (obr. 2). Xxxxxxx elektrod x xxxxx holé xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obr. 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx během xxxxxx xxxxx xxxxxx XXXX trubice xxx, xxx byla xx xxxxxxx xxxxxx hořečnatého xxxxxxxx xxxx stejná xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xx xxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzdálenost xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx XXXX trubice (xxx. 1), xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 20 kΩ, xxxx xx být xxxxxxxx xxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx kůže. Xx možno xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, například tak, xx se XXXX xxxxxxx xxxxxx palcem x rukavici a xxxxxx 10 xxxxxx xx xxxxxxxxxx, roztok xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx roztokem.

Průměrná xxxxxxxx hodnota XXX xx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx akceptovatelná xxxxxxx xxxxxx pro popisovanou xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx tyto:

Kontrola	Látka	Rozmezí odporu (xX)
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; 10 M kyselina xxxxxxxxxxxxxx (36%)	&xxxx; 0,5 - 1,0
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; xxxxxxxxxxx xxxx	&xxxx; 10 – 25

1.5.3.3 Modifikovaný postup xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxx je xxx xxxxxxxxx povrchově xxxxxxxxx látek (xxxxxxxxxx) xxxx neutrálních xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx TER xxxxx xxxx rovná 5 xΩ, xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxx. Tímto xxxxxxxx xx zjistí, xxx xx nejedná x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).

1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx barviva xxxxxxxxxxxxxx X

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx všech xxxxxxx xxxxxx xx 2 xxxxxx po 150 μx 10% (w/v) xxxxxxx sulforhodaminu X x xxxxxxxxxxx vodě. Xxxxxxx kůže xx xxx xxxxxx po xxxx 10 sekund xxxxxxxxx prudkým xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xx xx xxxxxxxxx přebytečné (xxxxxxxxxx) barvivo. Xxxxx xxxxxx xxxx se xxx xxxxxxx sejme x PTFE xxxxxxx x uloží xx xxxxxxx (xxxx. xx 20 ml xxxxxxxxxx xxxxx pro scintilaci) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx vody. Xxxxxxx xx xx xxxx 5 xxxxx xxxxx xxxxxx, aby xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) barviva. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx nádobek x 5 ml 30 % (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxx xxxx, kde xx xxxx xxx inkubují xxx xxxxxxx 60 ^xX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx dobu 8 xxxxx xxx xxxxxxx 21 ^xX (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ∼ 175). Vzorek 1 xx xxxxxxxxxxxx xx xxx zředí 30 % (x/x) xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx vodě x xxxxxxxxx poměru 1 x 5 (x/x) (xx. 1 xx xxxxxxxxxxxx + 4 xx xxxxxxx SDS). Xxxxxxx xxxxxxx (XX) xxxxxxx se měří xxx cca 565 xx.

1.5.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x xxxxxxx xx xxxxxxxx z xxxxxxx XX (molární xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xxx 565 xx xxxx 8,7 . 10⁴; molekulová hmotnost = 580). Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx B xx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Průměrná xxxxxxx navázaného xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xx souběžné xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx akceptovatelného rozsahu xxxx xxxxxx. Za xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahu xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx látek xxx xxxx metodě a xxxxxxxxxxxxxxx uspořádání xxxxxxxx:

&xxxx; Xxxxxxxx	&xxxx; Xxxxx	&xxxx; Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xx/xxxxxx)
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; 10 X kyselina xxxxxxxxxxxxxx	&xxxx; 40 - 100
&xxxx; Xxxxxxxxx	&xxxx; xxxxxxxxxxx voda	15 – 35

1.5.3.4 Doplňující xxxxxxxxx

Xx xxxxx zvolit xxxxxx dobu xxxxxxxx xxxxxxxxx látky na xxxxxx xxxx (např. 2 hodiny) xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Ve xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, že xxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kůže xx 2 xxxxxx (2), xxxxxxxx umožňuje xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx látek xx 24hodinovém působení.

Získané xxxxxxx XXX xxxxx xxx ovlivněny xxxxxxxxxxx x xxxxxxx zkušební xxxxxxxxx x experimentálním xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx účinky 5 xΩ xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxx aparatuře x xxx aplikaci postupu xxxxxxxxx xxx. Pokud xx xx zkušební xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx použít jiných xxxxxxxxx a kontrolních xxxxxx. Proto xx xxxxxxxxxx okalibrovat xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, jež byly xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx (3).

1.6 XXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX - XXXX S MODELEM XXXXXX XXXX

Xxxxxxxxx materiál xx nanáší xxxxxxx xx dobu xx 4 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx lidské xxxx, xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx epidermis s xxxxxxx xxxxxx corneum. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxx schopnosti xxxxxxx xxxxxx životnosti xxxxx stanovené například xxxxxx "MTT xxxxxxxxx xxxxx" (XXX = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 xxxxxxx tetrazolium xxxxxx) xxx prahovou xxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx testu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xx, xxxxx dokáží proniknout xxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx erozí) x jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx přivodily xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX S MODELEM XXXXXX XXXX

1.7.1 Modely xxxxxx xxxx

Xxxxxx lidské xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxx však xxxxxxxx xxxxxx kritéria. Xxxxx xxxx mít xxxxxxx xxxxxxx corneum x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx corneum xxxx xxx xxxxxxxxx zachována. Xx lze xxxxxxxx xxx, xx model xxxx rezistentní vůči xxxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xx xxxxx, xx xxxx xxx buňky xxxxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxx, xxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx. Xxxxxxxxx buněk (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xx. XX xxxxxxxx) po xxxxxxxx látce xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx ležet v xxxxxxxxxxxx mezích xxx xxxx model. Xxxxxxx x případě látky xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxx negativní xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (2).

1.7.2 Xxxxx xxxxxxx

1.7.2.1 Xxxxxxxx testovaného xxxxxxxxx

Xx-xx testovaná xxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx pokrývala xxxxxx kůže (xxxxxxxxx xxxxxxxx 25 (μ/cm²). Xx-xx xxxxx, nanese xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxx, x xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx x xxxx zajistil xxxxx xxxx. Xxxxx je xx xxxxx, pevné xxxxx xx před xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. U metody xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx, že je xxxxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx materiál x xxxxxxx kůže xxxxxxx smyje xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.7.2.2 Měření xxxxxxxxxx xxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metoda. Xxxxxxxxxx xx používá xxxxxxx XXX, x které xxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx kůže se xx xxxx 3 xxxxx ponoří xx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx xxx xxxxxxx 20 - 28 ^xX. Xxxxxxxxx modrý formazanový xxxxxxx se xxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx měřením XX xxx vlnové xxxxx 545 x 595 xx.

1.7.2.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxx kůže x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. xxxx xx životnost xxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx i xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných x xxxxx použitých xx xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx použitá xxxxxx xx použití široké xxxxx xxxxx reprodukovatelná xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx laboratořemi. Xxxxxxxxx musí xxxxxx xxxxxxxx kritéria xxxxxxx xxxxxxxx definované dříve (2) a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx zveřejněny x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx před zveřejněním xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXX

1.8 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX

1.8.1 Xxxx TER xx xxxx xxxxxxx

Xxxxxxx odporu (x kΩ) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolu x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látky xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, a xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x z xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.8.2 Xxxx x modelem xxxxxx xxxx

Xxxxxxx XX x xxxxxxxxx procento xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxx xxxxxxx v tabelární xxxxx, x to xxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx hodnoty x z nich xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

1.9 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

1.9.1 Xxxx XXX xx xxxx xxxxxxx

Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx XXX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx než 5 xΩ, xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Je-li hodnota XXX nižší nebo xxxxx 5 kΩ x xxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx látku (xxxxxxxxx) xx neutrální organickou xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xx.

X xxxxxxxxx aktivních xxxxx (xxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx organických xxxxx, xxx poskytují hodnoty XXX xxxxxxxxxxxxx 5 xΩ, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx barviva x xxxxxxx xxx souběžně xxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x 36 % XXx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxxxx xxxxxx, kdežto xx-xx obsah xxxxxxx x terčíku xxxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxx leptavé xxxxxx xxxx.

1.9.2 Test x xxxxxxx xxxxxx kůže

Hodnota XX xxx negativní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100% xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxx OD xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Hraniční xxxxxxxxxxx xxxxx životaschopných xxxxx, xxxxx odděluje xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, xx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx způsobují, xxxxxxxxxx odlišuje xxxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxxxxxxxx, xxxx xxx v xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx předtím, než xx metoda xxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx musí xxxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx x průběhu xxxxxx

Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx tyto xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxx xxxxx:

- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx; pokud xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx se xxxx xxxxx x xxx xx.

Xxxxxxxx xxxxxx

- xxxxxxxx xxxxx použitého xxxxxxx,

- xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx případných xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx TER) xxxx xxxxxxxxxxxx podíl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx x modelem xxxxxx xxxx) pro testovaný xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx standardní xxxxxxxxxx xxxxx, x xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx;

- popis xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Xxxxxxx 1

Xxxxxxx 2

Xxxxxx X.40. xxxx vložena xxxxxxx xxxxxxxxx č. 208/2001 Xx. s xxxxxxxxx od 22.6.2001

X.41. XXXXXXXXXXXX - XXXX FOTOTOXICITY 3X3 XXX XX XXXXX

1. XXXXXX

1.1 XXXX

Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx jako toxická xxxxxx (reakce), x xxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látkám x xxxxxxxx xxx xxxxxx, nebo xx-xx xxxxxxx xxxx ozářena xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx dané testované xxxxx, tedy xx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx ve xxxxxxx x expozicí xxxxxxxxxxxxxx x viditelnému záření xxxxxxxxxxx xxxxx nebezpečí xxxx nikoli.

Toxikologickým xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx kombinovaným působením xxxxx a světla, xxxxx xxxxxx xx xxxxx zjistit xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx fototoxické xx vivo po xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxx, x xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX/XXXXXX x let 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx vůči xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. X xxxx 1996 doporučila xxxxxxxx schůze XXXX xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx fototoxicity (4).

Výsledky xxxxx fototoxicity 3X3 XXX in xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx s xxxxxxxx účinky xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx x xxxx x xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx test xx xxx uvedené xxxxxx xxxxxxxxxx predikční xxxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxx, xxx xxxxxxxxxxx jiné xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx x kombinovaného xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, jako xx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, x xxxx řada xxxxx xxxx specifické xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxx uspořádán tak, xxx umožňoval hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx.

1.2 XXXXXXXX

Xxxxxxxxx: xxxxxxxxx ultrafialového (XX) či xxxxxxxxxxx xxxxxx dopadajícího na xxxxxx; xxxxxx xx X/x² xxxx x XX/xx².

Xxxxx xxxxxx: množství (= xxxxxxxxx x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (UV) xxxx viditelného (VIS) xxxxxx dopadajícího xx xxxxxx, vyjádřené v xxxxxxx (= X x s) xx xxxxxxxx xxxxxxx, např. X/x² nebo J/cm².

Pásma xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxx XXX (Commission Xxxxxxxxxxxxx xx X'Xxxxxxxxx) xx xxxxxxx xxxxxxxx XXX (315 - 400 xx), XXX (280 - 315 xx) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx se x xxxx vymezení: xx xxxxxxx xxxx xxxxx XXX a UVB xx xxxxx považuje 320 xx x XXX se xxxxx xxxx xx UV-A1 x UV-A2 x xxxxxxx xxxxxx u 340 xx.

Xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: xxxxxxxx, xxxxxx xx měří xxxxxxx xxxxxxxx buněčné xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xxxxx xxxxxxxxx měřených xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx počtem xxxx. xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx.

Xxxxxxxxx životaschopnost (xxxxxxxxx) xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x porovnání x xxxxxxxxxxx kontrolami (xxxxxxxxxxxx), které xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxx + XX xxxx - XX), xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx model: xxxxxxxxxx, kterým se xxxxxxxx xxxxx toxicity xxxxxxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxx potenciálu. X xxxxx metodickém xxxxxx xxx xxxx je xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx vitro x xxxxxxxx fotoxického potenciálu xxxxxx xxxxxxx XXX x MPE.

PIF (xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX₅₀) testované látky xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) a x xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.

XXX (xxxx xxxxx xxxxxx, střední xxxxxxxxx): nová míra xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx průběhu xxxx křivek xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx x nepřítomnosti (-XX) a v xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx: akutní xxxxxxx reakce (xxxxxx), xxxxx xxxxxx xx xxxx expozici xxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx systémovém podání xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx xxxxx "xxxxxxxxxxxx", xxxxxxxx se pouze xxxx fototoxických reakcí, x xxxx xxxxxxx x xxxx xxxx, xx xx ni xxxxxx (xxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx) xxxxxx xxxxx. Tyto xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx vždy x nespecifickému xxxxxxxxx xxxxx (reakce podobné xxxx xxx nadměrném xxxxxxx).

Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxx prvním xxxxxxxx xxxxx x světla xxxxxxxxxxx, a kdy xx xxxxxxxxx jednotýdenní xx xxxxxxxxxxx indukční xxxxxxx x tomu, xxx xx xxxxxxxxxx xxxx projevila.

Fotogenotoxicita: genotoxická xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, ke xxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XX/XXX xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxxxxx: karcinogenita xxxxxxxx opakovanou aplikací xxxxxx x xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, mluvíme x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

1.3 XXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxx chlorpromazinu jako xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xxxxxxxxxx použít xxxx xxxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxx použity xxx mezilaboratorním xxxxxxxxxxx xxxxxx testu (1) (3) (13).

1.4 PRVOTNÍ XXXXX

Xxxxxxxxxxx účinky byly xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx rysem xx to, xx xxxxxx xxxxxxxxxx světelnou xxxxxxx x oblasti xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx fotochemie (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx zákon) vyžaduje xxxxx xxxxxxxxxx dostatečnou xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx se xxxxxxx, xxx se xxxxx uvažovat x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle xxxxxx metodického xxxxxx, xxxx by se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x UV/VIS xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx zkušební xxxxxx XXXX x. 101). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 xxxxx x xxx^-1 x cm^-1, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciál x xxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx vitro, ani xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (viz xxxxxxx).

1.5 XXXXXXX XXXXXX

Xxxx xxxxxxxx xxxxx mechanismy, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7), přičemž všechny xxxxx k xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx látky testované x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX xxxxxx. Cytotoxicita xx xxx tomto xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx pokles xxxxxx vitálního xxxxxxx, xxxxxxxxx červeně (xxxxxxx xxx, NR) (9), 24 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx.

Xxxxx Balb/c 3X3 xx kultivují xx dobu 24 xxxxx tak, aby xx vytvořila kultura xxxxx x jedné xxxxxx (xxxxxxxxx). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx po 96 xxxxxxx s xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx. Xxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxx x dávce 5 X/xx² UVA (+XX xxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx (-XX xxxxxxxxxx). X obou destičkách xx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xx dalších 24 xxxxxxxx kultivace xx xxxxxx inkorporace xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx xxxxxx, NRU) xx xxxx 3 xxxxx xxxxxxx životaschopnost xxxxx. Xxx xxxxxx x xxxx koncentrací xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk, vyjádřená xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx porovnají xxxxxxxxxxxx závislé xxxxxx xxxxxxx x přítomnosti (+XX) x x xxxxxxxxxxxxx (-UV) xxxxxx, xxxxxxx na úrovni XX₅₀, xx. xx xxxxxxxxxxx inhibující životaschopnost xxxxx o 50 % x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx bez xxxxxxxxx.

1.6 XXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxxxxx xxxxx vůči záření XXX, xxxxxxxxxx xxxxx: x buněk je xxxxx xxxxxxxxxx provádět xxxxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxx UVA. Buňky xx nasadí x xxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx vitro, xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxx UVA x xxxxx 1 - 9 J/cm² x xxxxx xxx xx xxxxxx XXX xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx kritéria xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx ozáření dávkou XXX xxxxxx 5 X/xx² xxxx nižší xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x temnu. Xxx xxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxx 9 X/xx² xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx nižší xxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx. Tato xxxxxxxx xx xxxxxxx zhruba xx xxxxx desáté xxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx XXX, běžný xxxx: xxxx splňuje xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (buňky x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx [Xxxx´x xxxxxxxx salt xxxxxxxx, XXXX] s 1 % xxxxxxxx dimethylsulfoxidu (XXXX) xxxx ethanolu (XxXX) xxxx xxx xxxx vykazují x xxxxxxxxxxx (+XXX) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% v xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX).

Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (OD_{540 XXX}) xxxxxx x XX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx oněch 1 x 10⁴ xxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx jamce xxxxxx xxxxx xxxx dnů xxxxx s xxxxxxxx xxxxx zdvojnásobení. Xxxx xxxxxxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx průměrná xxxxxxx XX_{540 XXX} x xxxxxxx xxx ovlivnění xxxxx nebo xxxxx 0,2.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxx xxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx je xxxxx xxxxxxx souběžný xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx jako látka xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (XXX); xxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Pro XXX testovaný xxx xxxxxxxxxxxx protokolu x xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx definována tato xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx: XXX xxxxxxx (+UVA): XX₅₀ = 0,1 - 2,0 μx/xx, XXX xxxxxxxxx (-UVA): XX₅₀ = 7,0 - 90,0 μx/xx. Fotoiritační xxxxxx (XXX), xxx. xxxxx xxxxxxx XX₅₀, xx xxx xxxxxxxxx 6.

Xxxxx XXX xx xxx souběžnou xxxxxxxxx xxxxxxxx dají xxxxxx x xxxx známé xxxxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx chemické xxxxxxx xxxx rozpustnosti testované (xxxxxxxxx) xxxxx. V xxxxxxx případě je xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX₅₀ x PIF xxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxxxx).

1.7 XXXXX XXXXXX

1.7.1 Xxxxxxxx

1.7.1.1 Xxxxx

Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx použita xxxxxxxxxxxxx buněčná xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx Balb/c 3X3 xxxx 31, x to buď x XXXX nebo x XXXXX; ta xx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx protokolu xx dají x xxxxxxxx použít x xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx kultivační xxxxxxxx xxxxxx xxxxx jejich xxxxxxxxxxxx potřeb; xx xxxx xxxxx prokázat, xx xxxx xxxxxx xxxxxx.

X xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx nejsou xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, a xxx xx xxxxxx xxx x případě, xx xx xxxxxxxx kontroly xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx citlivost buněk xxxx XXX xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx používat buňky Xxxx/x 3X3 x xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx možno xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 vůči XXX xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx postupem kontroly xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx metodickém xxxxxx.

1.7.1.2 Xxxxx a kultivační xxxxxxxx

Xxx rutinní xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. V případě xxxxx Balb/c 3X3 xx xxxxx x XXXX obohacený 10 % séra novorozených xxxxx, 4 mM xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx ve vlhkém xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 ^xX / 7,5 % CO₂. Xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx buňky xxxx. xxxxxxxx xxxxx.

1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nasadí x xxxxxxxxx hustotě v xxxxxxxxxxx médiu x xxxxxxxxx jednou se xxxx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxxxxxxx.

Xxx xxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx v kultivačním xxxxx x takové xxxxxxx, aby xx xxxxx testu (xx. xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk 48 xxxxx po nasazení) xxxxxxx ke xxxxxxxxxx (xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx). X xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3T3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x 96 xxxxxxx xx doporučuje hustota 1 x 10⁴ xxxxx x xxxxx xxxxx.

Xxx každou xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx identicky xx xxx destičky x 96 jamkami, xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx za identických xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, s xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx (+XXX/XXX) x xxxxx xx xxxxxxxxxx v temnu (-XXX/XXX).

1.7.1.4 Metabolická xxxxxxxx

Xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx vitro pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, není x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx žádná xxxxx, xxx xx x xxxx, xxx xxxxxxxx xxxx fotoxin xx xxxx xxxx xx xxxxx, bylo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Nepokládá xx proto xxx xx xxxxx, ani xx xxxxxxx odůvodněné, xxx xx tento xxxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

1.7.1.5 Xxxxxxxxx xxxxx / příprava

Testovaná xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx údaje x xxxx xxxxxxxxx prokazují, xx xx xx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxxxxxxxxxx, že by xxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx se rozpustí x pufrovaném xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (XXXX) nebo xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx saline, XXX), xxxxx - aby xxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx - xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx indikátory xX, xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xx testovaná xxxxx xx xxxx omezeně xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x koncentraci xxxxxxxxxx xxxxx, xxx je xxxxxxxxxx xxxxxxx koncentrace, x následně xx xxxxx x xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx v konstantním xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, xx. xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx dimethylsulfoxid (XXXX) xxxx xxxxxxx (XxXX). Vhodná mohou xxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, například aceton, xx xxxx třeba xxxx xxxxxxx zvážit xxxxxx specifické xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo vychytávání xxxxxxxx.

Xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 ^xX.

1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX xxxxxxx / xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxx: xxxxx správného xxxxxxxxxx xxxxxx x správná xxxxxxxx xx při xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x XXX x xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx spojováno x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx xxxxxx UVB xx x xxxxx xxxxx xxxx relevantní, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx při xxxxxxxx xx 313 xx x 280 xx zvyšuje xxxxxxxxxxxxx. Xxxx kritéria pro xxxxx světelného xxxxxx xxxxx zásadní xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx vlnové xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xxx xxxx světelná xxxxx (xxxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx dobu) xxxxxxxxxxx xx zjištění známých xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx látek. Dále xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systém - xxxxx sem x xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).

Xx xxxxxxxxx světelný xxxxx se pokládají xxxxxxx xxxxxxxxxx, jimiž xx simuluje xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx (vysokotlaké) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx - xx mají xx xxxxxx, xx vyzařují xxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx však xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx záření XXX, je třeba xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxx xxxx xx fototoxicitu 3X3 XXX xx xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxx UVB xxxxxxxxx nevyskytuje (UVA:UVB ∼ 2 : 1). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx simulátoru xxxxxxxxx xxx validační xxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx je x xxxxx (3).

Dozimetrie: intenzita xxxxxx (xxxxxxxxx) se xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx testem xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pomocí vhodného xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx daný xxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxx se doporučuje xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx XX-xxxx téhož xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx, když xx x xxxxxxx intervalech xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zdroje x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx vyžaduje xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxx studii xxxx xxxxxxxx, xx xxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx² xx xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx excitovala x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx se xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx 50 minut, xxxx xxx iradiance nastavena xx 1,666 xX/xx². Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx linie nebo xxxx xxxxx xxxxxx, xxxx xx dávka xxxxxx UVA xxxxxxx xxx, xxx buňky xxxxxxxxxxxxx x byla xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx fototoxinů. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx podle xxxxxx:

&xxxx;	&xxxx; xxxxx xxxxxx (X/xx²) x 100	&xxxx;
&xxxx; x (xxx) =	&xxxx; ________________________	&xxxx; (1 X = 1 X x)
&xxxx;	&xxxx; xxxxxx (xX/xx²) x 60	&xxxx;

1.7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 μg/ml, xxxxx všechny xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx detekovány xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx vyšších koncentracích xx zvyšuje četnost xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (13). Xxxxxxx xX xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).

Xxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (+XXX) x xxx xxx (-XXX) xx xxxxx xxxxxxxx x rámci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Rozsah x xxxxxx koncentrační řady xx zvolí xxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx dostatečně podloženy xxxxxxxxxxxxxxxx údaji. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx).

1.7.3 Xxxxx xxxxxxx

1.7.3.1 Xxxxx xxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxxx 1 x 10⁵ buněk/ml x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx periferních xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx tkáňové xxxxxxx xx xxxxxxxxxx po 100 μx xxxxxxxxx xxxxx (= slepý xxxxx), xx xxxxxxxxx xxxxx xx dávkuje xx 100 μx xxxxxxx suspenze x xxxxxxx 1 x 10⁵ xxxxx/xx (= 1 x 10⁴ xxxxx xx xxxxx). Xxx xxxxxx testovanou xxxxx xx připraví xxx xxxxxxxx - xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-XXX), druhá xxx stanovení fotocytotoxicity (+XXX).

Xxxxx se xxxxxxxx xx xxxx 24 xxxxx (7,5 % XX₂, 37 ^xX), xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Tato xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.

1.7.3.2 Xxxxx xxx

Xx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx médium x xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl EBSS/PBS xx každou xxxxx. Xxxxx xx 100 μx XXXX/XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx x testovanou látkou xx xxxxxxxx x xxxxx xx dobu 60 xxxxx (7,5 % XX₂, 37 ^xX).

Xxxx xxxxx s XXX (+UVA) se xxxxxxx xxx, xx xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx ozařují xx dobu 50 xxxxx skrz xxxxx xxxxxxxx x 96 xxxxxxx zářením UVA x intenzitě 1,7 xX/xx² (= xxxxx 5 / xx²). Xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx vody xxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx ventilátoru. Duplicitní xxxxxxxx (-XXX) xx xx dobu 50 xxxxx (= xxxxxxxxx xxxx XXX) xxxxxxxxxx xx pokojové xxxxxxx x xxxxxx boxu.

Roztok xx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX. Poté xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x přes noc (18 - 22 xxxxx) se xxxxxxxx (7,5 % XX₂, 37 ^xX).

1.7.3.3 Xxxxx xxx

Xxxxxxxxxxxxx hodnocení

Buňky xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinkem xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xx eliminovaly xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxxxx cytotoxicity xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx červeně (NR)

Buňky xx xxxxxxx objemem 150 μx předehřátého XXXX/XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx jemným xxxxxxxx. Xxxxx se 100 μl xxxxx x NR x xxxxxxxx xx xxx 37 ^xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 7,5 % XX₂ xx xxxx 3 xxxxx.

Xx inkubaci se xxxxxx x XX xxxxxxxx a buňky xx promyjí objemem 150 μx EBSS/PBS, xxxx se pak xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx (je také xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx).

Xxxxx xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx xx xxxxxxxx XX (čerstvě xxxxxxxxxx směs xxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxx).

Xxxxxxxxxxxxx destičky xx xx xxxx 10 xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx NR x xxxxx nevyextrahuje x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.

Xx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxx optická hustota xxxxxxxx XX při 540 xx za xxxxxxx xxxxxxx pokusu xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxx (xxxx. ASCII) xxx xxxxx xxxxxxx.

2. XXXXX

1.8 XXXXXXX X KVANTITA XXXXX

Xxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx vztahu xxxxxxxxxxx-xxxxxx při xxxxxxxx XXX/XXX záření x xxx xx. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, koncentrační xxxxxx x postup xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx údaje xxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx testovaná látka xxxx být xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μl/ml x experimentu xx xxx (-XXX) necytotoxická, xxx xxx ozařování (+XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxx, xx se xxxxxxxxxxxx rozsahy x xxxx částech xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx řádově xxxxx, xxx byl xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dat. Pokud xxxx cytotoxicita zjištěna x xxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxx při -UVA, xxx při +UVA), xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx rozestupem mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx čáry xxxxxxxxxxx modelu - xx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx opakovat.

Považuje-li xx opakování testu xx potřebné, může xxx důležité pozměnit xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, aby xx dosáhlo xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx testu xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky, nejvhodnější xxx xxxx xxxxxxxxx xx variace těchto xxxxxxxx (spolurozpouštědlo, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx). Lze xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx, xxx jsou xx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx významný vliv xxxxxxxx xxxx.

1.9 XXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx xx xx xxxxx, stanoví xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx x 50 % inhibici xxxxxxxxx xxxxxx XX (EC₅₀). Xx xxx učinit xxx, že xx xx xxxx koncentrace - xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vhodná metoda xxxxxxxxxx regrese (xxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxx) xxxx xx použije xxxx xxxxxx metoda xxxxxxxxx (14). Než xx xxxxxxx XX₅₀ xxxxxxx xxx další xxxxxxx, xx třeba xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx XX₅₀ xx také xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxxxx papír (xxx x: xxx, xxx x: xxxxxx), protože xx xxxx transformaci xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxx xxxxx lineární.

1.10 XXXXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX MODELY)

1.10.1 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 1: xxxxxxxxxxxx faktor (XXX)

Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx (+UVA), xxx xx xxxxxxxxxxxxx (-XXX) světla, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxx xxxxx vzorce

	EC₅₀ (-XX)
&xxxx; (x) XXX =	____________
	EC₅₀ (+XX)

XXX < 5, xxxxxxxxxxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx PIF ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xx-xx xxxxx xxxxxxxxxxx pouze xxx +XXX, xxxxxx při -XXX xx xxxxxxxxxxxxx, xxxx se XXX xxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxx o xxxxxxxx, xxxxx indikuje, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xx xxxxxxxxx tzv. "&xx; PIF", xxxx xx test cytotoxicity (-XX) xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (X_xxx) a xxxx hodnota xx xxxxxx xx vzorce:

	C_max (-XX)
&xxxx; (x) &xx; PIF =	&xxxx; ___________
&xxxx;	&xxxx; XX₅₀ (+UV)

Pokud xx xx vypočítat pouze "&xx; PIF", pak xxxxx hodnota > 1 xxxxxxxxxx fototoxický xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx XX₅₀ (-XX), xxx XX₅₀ (+XX), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx to xxxxxxxx xxxx, že xxxxx xxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx "PIF = *1", xxxx xx charakterizuje xxxxxxxx

&xxxx;	&xxxx; X_xxx (-XX)
&xxxx; (x) XXX = *1 =	___________
	C_max (+XX)

Xxxxx xx dá xxxxxx xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", předpovídá xx, xx není xxxxxxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

X xxxxxxxxx (x) x (x) xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzít xxxxxxx x úvahu xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx dosáhlo.

1.10.2 Xxxxxxxxx xxxxx, verze 2: střední xxxxxxxxx (XXX)

Xx možno xxxx xxxxxx novější xxxxx xxxxxx pro predikci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx x xxxxxxxxx studie XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxx in xxxxx x xxxxx XX xxxxxx (13). X xxxxx modelu xxxx xxxxxxxxx omezení xxxxxx XXX x těch xxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx XX₅₀. X xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx veličina "xxxxxxx xxxxxxxxx" (XXX) xxxxxxxx xx porovnání xxxxxx průběhu xxxxxx xxxxxxxxxxx - odezva. Xxx aplikaci xxxxxx XXX byl xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v Xxxxxxx vyvinut speciální xxxxxxxxxx software, xxxxx xxx xxxxxxx zdarma.

1.11 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx (XXX ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) ukazuje, xx xxxx látka xx fototoxický xxxxxxxxx. Xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 10 μg/ml, xx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx expozičních xxxxxxxx xx xxxx. Xxxxx-xx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci (100 (x/xx), bude xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx schopnosti xxxx látky xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx informací. Xxx xxxxx spadat xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx x možné xxxxxxxxx xxxxx x xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx v jiném xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu, xxxxxxxxx xx použití xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx (XXX &xx; 5 xxxx MPE < 0,1) xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx podmínkách. V xxxxxxxxx, xxx xx xx látka xxxx xxxxxxxx x při xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, negativní xxxxxxxx xxxxxxx, že xxxxx xxxx xxxxx fototoxický xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx se xx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxxxxxx. V xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx získány xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislosti xxxxxxx xxxxxx (EC₅₀ + XX x XX₅₀ - XX), xx interpretace dat xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (+XX xxx -XX) x xxx xxxxxxxx rozpustnost xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, je xxxxx xxxxxxxxx xxxxx test xxx danou xxxxx xx xx zcela xxxxxx x xxxx xx xx xxxxxxxx x xxxxx, potvrzujícím xxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx nebo xxxxxx xxxx ex xxxx nebo xx xxxx).

3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX

Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto informace:

Testovaná xxxxx:

- xxxxxxxxxxxxx údaje x xxxxx XXX, xx-xx xxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx,

- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,

- stabilita x xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxx:

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla v xxxxxxxxx médiu (EBSS xxxx XXX).

Xxxxx:

- xxx x xxxxx xxxxx,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxx pasáže, xx-xx xxxxx,

- xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx x xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3T XXX xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxx xxxx ovlivněním x xx něm:

- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx média,

- podmínky xxxxxxxx (koncentrace XX₂, xxxxxxx, xxxxxxx),

- xxxx xxxxxxxx (zpracování xxxx xx x xx xx).

Xxxxxxxx pokusu (b) - xxxxxxxxx látkou:

- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx UV/VIS xxxxxxx x xxx xxx,

- v případě xxxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zdůvodnění xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace,

- typ x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx),

- xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (x) - ozařování:

- zdůvodnění xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxx charakteristika xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxxxxxxxxxx propustnosti/absorpce xxxxxxxxx xxxxxx (filtrů),

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x jeho xxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxx XXX (x x X/xx²) xxx xxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxx xxxxxxxx XX/XXX xxxxxx,

- xxxxx záření XXX (xxxxxxxxx x xxx) x X/xx²,

- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxx (d) - test NRU:

- xxxxxxx xxxxx x XX,

- xxxx inkubace x XX,

- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX², xxxxxxx, xxxxxxx),

- xxxxxxxx xxxxxxxx XX (extrakční xxxxxxx, xxxx extrakce),

- xxxxxx délka, xxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XX,

- druhová xxxxxx xxxxx (referenční), byla-li xxxxxxx,

- xxxxxxx srovnávacího xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx), xxxxx byl xxxxxx.

Xxxxxxxx:

- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx jednotlivých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxxx koncentrace - xxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx νs xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) získané xxxxxxxxxx experimenty +XXX x -XXX,

- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx: xxxxx možnosti xxxxxxx xxxxxx XX₅₀ (+XXX) x EC₅₀ (-XXX),

- xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx - xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx faktoru (XXX) xxxx středního xxxxxxxxxx (MPE),

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu,

- kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (a) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxxxxxx životaschopnost (xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx,

- historické xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (x) - xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxxxx EC₅₀ (+XXX), XX₅₀ (-UVA) a XXX xxxxx použité xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx: hodnoty XX₅₀ (+XXX), EC₅₀ (-UVA) x PIF, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxx X.41. xxxx xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Sb. x účinností xx 22.6.2001

Xxxxxxxxx

Xxxxxx předpis č. 251/98 Xx. xxxxx xxxxxxxxx dnem 1.1.1999.

Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a doplnění xxxxxxxxxxx xxxxxxx předpisem x.:

208/2001 Xx., kterým xx xxxx xxxxxxxx XX x. 251/98 Xx., kterou xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx toxicity xxxxxxxxxx xxxxx a přípravků - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x příští xxxxxxxxxxx

x účinností xx 22.6.2001

Xxxxxx předpis č. 251/98 Xx. xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 443/2004 Sb. x xxxxxxxxx xx 1.8.2004.

Znění xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx norem jiných xxxxxxxx předpisů x xxxxxxxx není aktualizováno, xxxxx xx jich xxxxxx derogační xxxxx xxxxx uvedeného xxxxxxxx xxxxxxxx.

1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) xx x) xxxxxx x. 157/1998 Xx., o xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx dalších xxxxxx.

2) Zákon č. 246/1992 Sb., xx ochranu xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx x. 162/1993 Xx., x. 193/1994 Sb., x. 243/1997 Xx. x x. 30/1998 Xx.

3) Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a rozvoj xxx zkoušení xxxxxxxxxx. Xxxxx 4 - xxxx xx zdraví (XXXX Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxx xx Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).

Plné znění - 251/1998 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Plné znění - 251/1998 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu. Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků

251/98 Sb.

Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.