Právní předpis byl sestaven k datu 21.06.2001.
Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 21.06.2001 do 31.07.2004.
Vyhláška, kterou se stanoví metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
251/98 Sb.
Příloha - Metody pro zjišťování toxicity chemických látek a přípravků
B. Metody stanovení toxicity - Všeobecný úvod
B.1. Akutní toxicita orální (per os)
B.1. bis Akutní toxicita orální (per os) - metoda fixní dávky
B.1. tris Akutní toxicita (orální) - metoda stanovení třídy akutní toxicity
B.2. Akutní toxicita (inhalační)
B.3. Akutní toxicita (dermální)
B.4. Akutní toxicita (kožní dráždivost)
B.5. Akutní toxicita (oční dráždivost)
B.6. Senzibilizace kůže
B.7. Subakutní toxicita orální (28denní opakovaná aplikace)
B.8. Subakutní toxicita inhalační (28denní opakovaná aplikace)
B.9. Subakutní toxicita dermální (28denní opakovaná dávka)
B.10. Mutagenita - test chromozómových aberací u savčích buněk in vitro
B.11. Mutagenita - test chromozómových aberací v kostní dřeni savců in vivo
B.12. Mutagenita - in vivo mikronukleus test v savčích erytrocytech
B.13/14. Mutagenita - test reverzních mutací u bakterií
B.15. Genové mutace - Saccharomyces cerevisiae
B.16. Mitotická rekombinace - Saccharomyces cerevisiae
B.17. Mutagenita - test genových mutací v savčích buňkách in vitro
B.18. Poškození DNA reparace - neplánovaná syntéza DNA - savčí buňky in vitro
B.19. SCE - výměna sesteských chromatid in vitro
B.20. Recesivní letální mutace vázané na pohlaví u Drosophila melanogaster
B.21. Test transformace savčích buněk in vitro
B.22. Dominantní letální test u hlodavců
B.23. Analýza chromozómových aberací v savčích speramtogoniích
B.24. Spot test u myší
B.25. Přenosné translokace u myší
B.26. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na hlodavcích)
B.27. Subchronická toxicita orální (90denní opakované podávání per os, studie na nehlodavcích)
B.28. Subchronická toxicita dermální (90denní opakovaná aplikace, studie na hlodavcích)
B.29. Subchronická toxicita orální (90denní opakovaná inhalační expozice, studie na hlodavcích)
B.30. Testování chronické toxicity
B.31. Studie teratogenity - hlodavci a nehlodavci
B.32. Test karcinogenity
B.33. Kombinovaný test chronické toxicity/karcinogenity
B.34. Reprodukční toxicita - jednogenerační test
B.35. Reprodukční toxicita - dvougenerační test
B.36. Toxikokinetika
B.37. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - akutní expozice
B.38. Pozdní neurotoxicita organických sloučenin fosforu - 28denní opakovaná expozice
B.39. Test neplánované syntézy dna v savčích jaterních buňkách in vivo
B.40. Leptavé účinky na kůži
B.41. Fototoxicita - test fototoxicity 3t3 nru in vitro
XXXXXXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx
ze xxx 16. xxxxx 1998,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx pro zjišťování xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx podle §4 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx x. 157/1998 Xx., x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx přípravcích x o xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx:
§1
Tato xxxxxxxx stanoví metody xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x chemických xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, toxických, xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a toxických xxx xxxxxxxxxx (xxxx xxx "toxicita chemických xxxxx a přípravků").1)
§2
(1) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x přípravků se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x příloze této xxxxxxxx.
(2) Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x reprodukovatelné xxxx metody xxxxxxx x xxxxxxxx 1, xxxxxxxxxx však xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx2) x metody xxxxxxxxxx Organizací xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx (OECD).3)
§3
Tato xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx 1. xxxxx 1999.
Ministr:
XXXx. Xxxxx, XXx. x. x.
Xxxxxxx x xxxxxxxx x. 251/1998 Xx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
B. XXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXXXX XXXXX
1.1 XXXXXX XXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se objeví xxxxx xxxxxx doby (xxxxxxxx 14 dní) xx podání xxxxx xxxxx nějaké xxxxx.
1.2 XXXXXX XXXXXXXX
xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xx xxx xxxxxx, že po xxxxxxx xxxxxxxx dávky xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx toxických xxxxxxxx x pravděpodobně x úmrtí.
1.3 XXXXX
xx xxxxxxxx podávané xxxxxxxxx látky. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xxxxx nebo xxxxxxxxx) nebo xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx jednotku hmotnosti xxxxxxxxx zvířete (např. xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti), xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx na xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx).
1.4 XXXXXXXXXXXXXX DÁVKA
xx xxxxxxxx xx xxxx pevných dávkových xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, aniž xx to způsobilo xxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXXXXX
xx všeobecný xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, frekvenci x celkovou xxxx xxxxxxxx.
1.6 XX50 (XXXXXXX XXXXXX DÁVKA)
je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx 50 % zvířat, xxxxxx byla xxxxxx. Xxxxxxx XX50 xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx).
1.7 XX50 (XXXXXXX XXXXXX KONCENTRACE)
xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxx u 50 % pokusných xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx XX50 xx udává xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx standardním objemu xxxxxxx (mg.l-1).
1.8 NOAEL
xx xxxxxxx xxx "xx observed xxxxxxx xxxxxx xxxxx" (xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) x je xx nejvyšší x xxxxxx použitá xxxxx xxxx expoziční xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.9 XXXXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXX/XXXXXXXXXXXX TOXICITA
xxxxxxxx xxxxxxxxxx účinky, xxxxx xx objeví x pokusných zvířat x důsledku xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx chemické látce, xx dobu xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx života xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.10 XXXXXXXX XXXXXXXXXX DÁVKA (XXX - XXXXXXX XXXXXXXXX DOSE)
xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx projevy xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx.
1.11 XXXXXXXXXX XXXX
xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.12 XXXXXXXXXX XXX
je xxxxxxxx xxxx xx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxx.
1.13 XXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX)
xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx testovanou xxxxx.
1.14 XXXXXXXXX XXXX
je vyvolání xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx po xxxx xx 3 xxxxx xx 4 xxxxx.
1.15 XXXXXXXXXXXXXX
xx xxxxxxx absorpce, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek.
1.16 ABSORPCE
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx.
1.17 XXXXXXX
xxxxxxxx proces(y), xxxxxx(x) xxxxxxxxxx látka případně xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx.
1.18 DISTRIBUCE
označuje xxxxxx(x), xxxxxx(x) je xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx metabolity xxxxxxxxxxx x těle.
1.19 XXXXXXXXXXXX
xxxxxxxx xxxxxx(x), xxxxxx(x) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx aplikované látky xxxxxx x těle xxxxxxxxxxxxx xxxx neenzymatickými xxxxxxxx.
2. XXXXXX - XXXXXXXXX APLIKACE/SUBCHRONICKÁ X XXXXXXXXX TOXICITA
Xxxxxx xxxxxxx účinky a xxxxxxxx nebo systémová xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxxx xxxxx toxicity (metody X.1 - X.5), xx xxxxxxx může xxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
V xxxxxxxxxx xx toxicitě xxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxx až xx xxxxxxxxx stanovení XX50. Xxx inhalační xxxxxx není xxxxxxx xxxx navržen, xxxxxxx xxxxxx možné xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jednorázové xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx utrpení xxxxxxx, xxxxxxxxx metoda xxxxx xxxxx (xxxxxx X.1 xxx) a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.1 xxxx). Xxx testování xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx doplnit xxxxxx vyvozené z xxxxx xxxxxx. V xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx standardní xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat.
Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7, X.8 x X.9) xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx, aby se xxxxxxx xx nejvíce xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx orgány xxxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xx dlouhodobých xxxxxx xx xxxxxxxx zkoumání xxxxxx aspektů xx xxxxx xxxxxxx (metody X.26 - X.30 x B.33).
3. XXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx přenosných xxxx x množství xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Tyto xxxxx ("xxxxxx") mohou xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxx, blok xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx na xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx projevovat xxxxxx xxxxxx struktury nebo xxxxx.
Xxxxxxxxx aktivita xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx genové (xxxxxx) xxxxxx v baktériích (xxxxxx X.13/14) anebo xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx (metoda X.10).
Xxxxxxxxxx jsou také xxxxxxx xx xxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx B.12) nebo xxxxxxx metafáze xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxx X.11). Xx však xxxxx xxxxx jednoznačně xxxxxxxx in xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.
Pro xxxxx xxxxxxxx xx velkém xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx zjištění xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx vyšetření na xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx: potvrzení xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxxxx nezachycených základním xxxxxxxx metod; xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx studií xx xxxx.
Xxx xxxx xxxxx zahrnují xxxxxx X.15 xx X.25 jak xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo x xx xxxxx, xxx xxxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Tyto xxxxx poskytují informace x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx x organismech složitějších xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x základním xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxx, xx xxxxx uvažované xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, případně xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx.
Xxxxxxxxx studie, vhodná xxx xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx na xxxxxxx faktorech, xxxxxx xxxxxxxx x fyzikální xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx testů xxxxxxxx x xxxxxxx způsobů xxxxxxx látky.
Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx k xxxxxxxxx xxxxxx na detekci xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx savčím organizmu, xx už xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (nezahrnuto v xxxx xxxxxxx), nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x myší (xxxxxx X.25). Xxxxxx xxxxx lze použít xxx xxxxxxxxxx možného xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx. Vzhledem xx xxxxxxxxxx těchto xxxxx x velmi xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx pro xxxxxxxxxx locus xxxx, xx xxxxx se xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxx jen xx xxxxxxx závažných xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx genotoxicity xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pro danou xxxxxxxx po xxxxxxxxxx x Národní xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx genetické xxxxxxxxxxx.
4. XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxxx látky xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx genotoxické xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx předpokládaném xxxxxxxxxx působení.
Předběžné xxxxxxxxx x genotoxickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx. Další xxxxxxxxx xxxxxxxxx testy xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxx opakované xxxxxxxx, xxxxxx X.7, a xxxxxxxxxxxxx studie x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx takových xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx. hyperplazie x xxxxxxxx tkáních, xxxxx xx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx studie a xxxxxxxxxxxxxxx informace mohou xxxxxx xxxxxxxxxxxxx chemické xxxxx s karcinogenním xxxxxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx zkoumání xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx karcinogenity (xxxxxx X.32) xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx studii xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx X.33).
X xxxxxxxxx xxxx rovněž testy xxxxxxxxxxxx buněk savců, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x kterých xx xxxxxxxxxxx souvislost x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx - xx xxxx (xxxxxx B.21). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx pro transformaci.
5. XXXXXXXXXXX TOXICITA
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxx reprodukčních xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a samic (xxxx xx plodnost) xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx (vývojová toxicita) xxxxxxxxxx xxxx teratogenitu x xxxxxx x xxxxxxx laktace.
Testovací xxxxxx (metoda X.31) xxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx toxicity xxxxxx hlavně s xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x závislosti na xxxxxxxxxxx vlastnostech testované xxxxx nebo podle xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx expozice xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Pokud xx xxxxxxxxx třígenerační xxxxxxxxxxx xxxx, xx možno xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx X.35) xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
6. NEUROTOXICITA
Xxxxxxxxxxxxx xx zjišťuje xxxxxxx způsoby, xxxx. xxxxx xxxxxxxxx změn xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx akutní xxxxxxxx. Xxxx toxicity xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx X.7) zahrnuje xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinku. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx chemické xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx zkoumání xxxxxx xxxxxxx. Navíc xx xxxxxxxx vzít x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx x jiných xxxxxxxx xxxxxxxx. Bylo xxxxxxxxx xxxxxxxx, že jisté xxxxxxxxx xxxxxxxxxx fosforu xxxxxxxxx pozdní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx B.37 x X.38 xx jednorázovém xxxx xxxxxxxxxx podání xxxxx.
7. XXXXXXXXXXXXX
Imunotoxicita xx zjišťuje xxxxxxx xxxxxxx, například xxxxx xxxxxxxxxxxx anebo podle xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Test xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx B.7), xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, vyžadující další, xxxxxxxxx zkoumání xxxxxx xxxxxxx.
8. TOXIKOKINETIKA
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx o toxicitě, xxxxxxxxx specifické xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Nepředpokládá se, xx xxxx v xxxxxx xxxxxxx zapotřebí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx toxikokinetických xxxxxx (studie absorpce, xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx). X některých xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxx v xxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx X.36).
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastnostech xxxxx xxxx poskytnout xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx absorpce při xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx tkání. Xxxxxxx xxxxx xxxx informace x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x toxikokinetických studií.
9. XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX
Xxxxxxx testované látky, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti včetně xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxx zahájením xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx studie.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxxxx x látkou x xxxx skladování.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxx xxxxx xxxxx větších xxxxxxxx) x dávkovacím xxxxx x biologickém xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, fyzikálně-chemických vlastností, xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx zahrnuty v xxxxxxxxx zprávě x xxxxx.
10. PÉČE X ZVÍŘATA
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, ve xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx, x xxxxxxx xxxx x zvířata podstatnou xxxxxxxxx.
10.1 XXXXXXXX XXXXX
Životní xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Pro xxxxxxx, xxxx a xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 22 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %, xxx králíky xx xxx xxxxxxx 20 xX ± 3 xX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 - 70 %.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx teplotu. Xxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx podmínkách xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx je x xxxxx xx x závěrečné xxxxxx x průběhu xxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx a tmy xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxx 5 xxxxxx x jedné xxxxx.
Xxxxxxxxxx součástí xxxxxx x pokusech xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx a xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxx během expozice xxxxxxxxx látce, tak xxxxx následující doby xxxxxxxxxx.
10.2 XXXXXXXX XXXXXX
Krmení xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx živočišný xxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxx, může xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx vzájemným xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx potravy. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx nutno xxxx x úvahu při xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Používají xx konvenční xxxxxxxxxxx xxxxx x neomezeným xxxxxxxxx x xxxxx xxxx. Pokud xx xxxxxxxxx xxxxx podávána x potravě, xx xxxxx xxxx přizpůsobit xxxxx xxxxx.
Příměsi x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx toxicitu, xxxxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, ve kterých xx xx xxxxx xxxx projevil.
11. XXXXXXX XXXXXX
Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx věnována xxxxxxxx xxxxxxxxx ochraně xxxxxx.
Snížení počtu x omezení bolesti x xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx např. xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1.bis) nebo xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx toxicity (X.1.xxxx). Xxxxxx s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx akutní xxxxxxxx vyžaduje v xxxxxxx o 70 % xxxxxx xxxx xxx metoda X.1.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxx způsobem xxxxxxx; xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx podávat x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx je xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x testech xxxxxx xxxxxxxx (metody X.1, B.2 x X.3), xxx xxxx x xx xxxx xxxxxxx mutagenity (xxxxxx X.11 a X.12), xxxxxxxx vyhnout xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx je možné xxxx xxxxxxxxx nebo xxx xxxxxx na xxxxxx u jednoho xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx vědecké zdůvodnění xxxx být založeno xx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, na xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx na xxxxxxxxxx dobře xxxxxxxxxxxxxx xxxxx in xxxxx. Xxxxxxxxx, byla-li s xxxxxx provedena xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx x limitním xxxxx (xxxxxx X.3) x xxxxxx-xx pozorováno xxxxx xxxxxxxxxx kůže, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx B.4) xxxx xxx zbytečné; xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx X.4), xxxxxxx xxx dále xxxxxxxxx xx dráždění xxx.
Xx nutno xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx testy na xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx využívat xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx méně xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx rizika, následnou xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx podle nebezpečnosti xxxxx x úvahu xxxxx xxx, kde xx xx xxxxx.
12. XXXXXXXXX A XXXXXXXXXXXX
Při xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx zvířatech x xxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxx xx xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxx; doklady x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Výsledky xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x stávajících xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxx být také xxxxxxx pro studie, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx látek.
Část X - Xxxxxxxxx xxxx byl xxxxxx xxxxxxx předpisem č. 208/2001 Sb. x xxxxxxxxx od 22.6.2001
X.1. XXXXXX XXXXXXXX ORÁLNÍ (XXX XX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxx sondou, x xx xxxxx skupině xxxxx xxxxxx dávky. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testu. Xxxxxxxxxx se pozorované xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, která xxxxxxx xxxxx pokusu, se xxxxxxx. Tato metoda xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxx.
Zvířata se xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx je třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podávat x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx způsobem, x xxxxxxx xx známo, xx vyvolávají značnou xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx leptavých xxxx dráždivých vlastností.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 dní xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx je xxxxx, xxxxxxxx se xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Doporučuje xx jako první xxxxxx použití vodného xxxxxxx, xxxxx volbou xx xxxxxx v xxxxxxxxxx oleji, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx během xxxx xxxxxx relevantní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X hlodavců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx překročit 10 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, jichž xx xxxxx xxxxxxx až 20 ml.kg-1. Variabilita xxxxxx látky xxxxxxxx x testech xx xx měla minimalizovat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ve vehikulu xxx, xxx bylo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx dráždivé xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx přednost potkanům, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx proti tomu. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zdravých zvířat x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx xx x xxxx xxxxxxx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx samic, xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxx je výrazně xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx xx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx se zvážit xxxxxxx menšího počtu xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx středně xxxxxxx dávky. V xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx letálních xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx tři, x mají xxx xxxxxx odstupňovány xxx, xxx xxx u xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx znázornění xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx, x xxxxx xx možné, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx LD50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
S xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx limitní test xxxxxx xxxxxx nejméně 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 5 xxxxx x 5 samic x xxxxxxxx výše xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx podaná xxxxx způsobí uhynutí, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx studie.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Doba xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx ji xxxx stanovit rigorózně. Xxxx xx být xxxxxx podle xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx vývoje xxxxxx x trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx možno xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxx, xxx xx projevy xxxxxx objeví a xxxxxx, x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, kde xx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx mají xxx zvířata xxxxxxx. Xxxxxxxx xx potrava xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. X xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx; přístup x pitné vodě xxxx omezen. X xxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx látka xx xxxx sondou orálně x jedné dávce. Xxxx-xx možno xxxxx xxxxx najednou, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx dávku xx menších xxxxxxxxxx xxxxx nejvýše 24 xxxxx. Po podání xxxxx je třeba xxxxxxx xxxxxxx k xxxxxxx xxxxx 3 - 4 xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx určitého xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx období - xxxxxxx a xxxx zvířatům xxxxxxxxxx.
Xx podání xxxxx xx xxxxxxxxxx provádění x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx každé xxxxx xx vedou xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx prvního xxx xx třeba xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx aplikované látky x bezprostřední xxxxxx xxxxxx na aplikaci.
Xxxxxxx xxxxxx během xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx pozorování se xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxx opatřeními x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, např. xxxxx xxxx zmrazení xxxxxxxxx xxxxxx, a xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Pozorování zahrnuje xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x krevního oběhu, xxxxx funkce xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, slinění, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx nejpřesněji.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx pokusu xxxxxx, x xx, xxxxx xxxxxxx až xx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx nálezy xx xxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxx u druhého xxxxxxx
Po xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx o xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví x xxxxx zjistit, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx nejsou xxxxxxx xxxxxxxxxx xx testovanou xxxxx. X jednotlivých xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Pokud xx x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx výrazně citlivější, xxxxxxxxx xx zvířatech xxxxxxx pohlaví je xxxxx xxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. X xx musí být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx s xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, popis xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx podáním testované xxxxx, xxx v xxxxxxxxx intervalech x x xxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx-xx zvířat xxxx xxx jeden xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx humánním způsobem xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx podanou xxxxxx, se xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx vyvolané xxxxx látkou. LD50 xx vypočte xxxxxxxxx xxxxxxx. Vyhodnocení xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx chování, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x xxxxxxxxx toxických xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, potrava xxx.
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- úrovně xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxxx údaje o xxxxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx x projevy xxxxxx, xxxxx exponovaných xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx xx podání xxxxxxxxx xxxxx, důvody x xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx zvířat - xxxxxxx jiná xxxxxxxxxx,
- xxxxxxx LD50 xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx),
- 95% xxxx xxxxxxxxxxxxx pro LD50, xxxxx xx lze xxxxxxxxx,
- křivky xxxxxxxxxx mortality xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxxx xxxxx metodou xxxxx),
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx výsledků (xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx účinku, xxxxx xx mohlo xxx xxxxxxx utracení xxxxxx během testu xx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX50),
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.1. bis XXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (XXX XX) - XXXXXX FIXNÍ XXXXX
1. METODA
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx účincích, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx doby po xxxxxxx podání xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky.
Xxxxxx x xxxxx xxxxxx se provádí xx dvou xxxxxxx.
X předběžné xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dávek při xxxxxx aplikaci sondou x xxxxxx téhož xxxxxxx, vždy jedno xxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx poskytuje xxxxxxxxx o vztahu xxxxx x toxicity, xxxxxx odhadu xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Normálně xx x této xxxxx etapě xxxxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxx.
X xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx: 5, 50, 500 xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Použitá xxxxx xx odvodí x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, x xx jako xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx "xxxxxxx toxicitu" (xxx xxxx X - Xxxxxxxxx xxxx xxx 1.2), ale xx xxxxxxx.
Xx xxxxxx xx pozorují účinky. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxx mortalitu, xxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxx dávky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, látka xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx nebo když xxxxxxx xxxxxxx reakce xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx nejbližší xxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxxxx xxxxx" (xxx xxxx B - Všeobecný úvod xxx 1.2), xx. xxxxxxxx z předem xxxxxxxxxxx úrovní xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxx, aniž by xxxxx x xxxxx (xxxxxx případů xxxxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx způsobem, o xxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x stres xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx nejsou známy xxxxxx xxxxx xxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx kmeny xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx testu xx x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx.
Xxxxxxx 5 dní xxxx testem xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx testem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx studie x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx jedna xxxxxxx xxxxxxx z xxxx pohlaví.
1.2.1.2 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx třeba, xxxxxxxx se roztok xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx vhodném xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx uvážit xxxxxxx vodného roztoku, xxxxx volbou je xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, teprve xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxx určeny xxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx toxikologické xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx normálně xxxxxxxxx 10 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx možno xxxxxxx xx 20 xx.xx-1. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx podávané v xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx zajistil xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx dávek.
Před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx odebere xxxxx xxxx xxxxxx; xxxxxxx x pitné vodě xxxx omezen. X xxx xxxxxx xx xxxxxxx zváží x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx sondou xxxxxx x xxxxxx xxxxx. Xxxx-xx možno xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxx aplikovanou xxxxx xx menších xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 24 xxxxx. Po xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx 3 - 4 hodiny. Xxxxxx-xx xx látka xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx, může xxx xxxxxxx - xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx - xxxxxxx x xxxx zvířatům poskytnout.
1.2.2 Xxxxx postupu
1.2.2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Vyšetřují se xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx jednotlivá zvířata. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx nejsou x xxxxxxxxx údaje, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx pohlavím. Xxxxx xx podávají xxxxxxxxx, xxxx se xxxxxxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Všechna xxxxxxx xx xxxxxxx pozorují x cílem xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxx dní; xxxxx přetrvávají projevy xxxxx otravy xxxxx xxx, xxxxx xx xxxx pozorovat xxxxx xx xxxxxxx sedm xxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx hladiny xxxxx: 5, 50, 500 x 2000 xx.xx-1. Jestliže xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx nutné xxxxx xxxxx xxxxxxx jednu xxxx více xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx informace o xxxxxx(xxx) xxxxx, xxxxx(x) xxxxxxxx(xxxx) xxxxxxxx xxxxxx, x o nejmenší xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx dávku podle xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx dávky 500 xx.xx-1. Jestliže xx po výchozí xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, vyšetřuje se xxxxx vyšší xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx nedojde x uhynutí xxx 2000 mg.kg-1, xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxx provést xx této úrovni xxxxx. Xxxxxxxx jsou xxx xxxxxxx výchozí xxxxx (např. 500 xx.xx-1) xxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx zvířeti xxxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxxx. 50 mg.kg-1). Xxxxxxxx toto zvíře xxxxxxx, xxxxx být xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxx vhodné xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx, že je xxx tomto xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx 5 xxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxx xxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx se xxxx xxxxxx nejméně 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 samců). Xxxxxx by měly xxx nullipary x xxxxxx xx být xxxxx.
Principem xxxxxx xxxxx dávky xx xxxxxxx xxxxx mírně xxxxxxxxx dávek xxx xxxxxx studii. Xx xxxxx se vyhnout xxxxxxxx letálních dávek xxxxxxxxx látky.
Xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx x testu, xx xxx zvolena x xxxxx xx 4 xxxxxxx úrovní xxxxx, xxxxxxxxx 5, 50, 500 nebo 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx ta, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx utracení x humánních xxxxxx); xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, ale xxxx xxx xxxxxxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, ale xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx dalšího testování.
Xxxx podání xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx zřejmou xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxx testovat xx další xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxx xxx dále pozorována xxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx bylo kompletní. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx vyžaduje xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx látky, xxxx by xxx xxxxx xxxxx testována xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Opět xx xxxxxxx, která xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx měla xxx xxxxxxxxxx xx xxxx pozorovací xxxxxx.
Xx xxxxxx látky xx pozorování xxxxxxxxx x zaznamenávají systematicky. Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxx x zaznamenat xxxxxx účinek xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 14 xxx. Nelze ji xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx by xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx x pozdnímu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx den xx podání xxxxx x nejméně xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxx. Zvířata vykazující xxxxxx xxxxxx bolesti xxxx xxxxxxx příznaky xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx prováděna xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xx podání xxxxx, xxxxxxxx zvířata xxxx vykazují příznaky xxxxxxxx. Xxxx může xxx xxxxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xx byla xxxxxxx xxxxxx vysoká xxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx na změny xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, dýchání a xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, průjmu, letargii, xxxxxx a xxxxxx.
Xxxxxxxxx hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx provede xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx další 3 xxx a xxxxx xxxxxx xxxxx. Zvířata, xxxxx uhynou xxxxx xxxxx, i xx, xxxxx xxxxxxxxx do xxxxx xxxxx, xx xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
X závislosti na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx úrovně xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx výjimečně třetí xxxxxxx xxxxx.
X xxxxxxx, xx látka xxxxxxxx mortalitu při xxxxx 5 xx.xx-1 (xxxx xxxxxxxx orientační xxxxxx naznačuje xxxxxxxxx xxx xxxx dávce), xx xxxxx dále xxxxxxxxxx xxxxxx toxicitu xxxxxxxxx xxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx jednotlivě xxx xxxxxx testovanou xxxxxx xxxxx. Z ní xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; počet zvířat xxxxxxxxx během testu xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů; xxxxx xxxxxxxxx účinků; xxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxx zřejmý xxxxxxx xxxxxx, který xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; časový xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx, xx zvířata xxxxxxxxx xxxx než xxx, xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx hmotnosti.
Zvířata, xxxxx xxxx humánně xxxxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxx nebo bolestem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx zaznamenána xxxx xxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx informace xxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx se použije) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx úrovní dávek,
- xx xxxxx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxx podle pohlaví x xxxxx úrovní xxxxx (počet xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx; xxxxx xxxxxx x příznaky toxicity; xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxx),
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx, doba xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx utracení zvířat,
- pitevní xxxxxx,
- xxxxxxx histopatologické xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, včetně xxxxxxxx xxxxxx toxicity x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx hladiny xxxxxxxx x xxxxx.
3.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx
Xxxxx | Výsledky | Xxxxxxxxxxxx |
5 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % přežití; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, které xxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxx, xxxxx xxxx jedovaté Xxx xxxxxxxx xxx 50 mg.kg-1 |
50 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Xxxx než 100 % přežití | Látky, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx. Viz xxxxxxxx xxx 5 mg.kg-1 |
100 % xxxxxxx, ale zřejmá xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxx zdraví škodlivé Xxx výsledky x 500 mg.kg-1 | |
500 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti | Xxxx xxx 100 % xxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x 50 xx.xx-1 |
100 % xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx 100 % xxxxxxx; xxxx xxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx, xxxxx xxx považovat xx xxxxx bez xxxxxxxx xxxxxx toxicity Xxx xxxxxxxx x 2000 xx.xx-1 | |
2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx | Méně xxx 100 % xxxxxxx 100 % xxxxxxx x nebo xxx zřejmé xxxxxxxx | Xxx xxxxxxxx x 500 mg.kg-1 Xxxxx, xxxxx xxxxxx významnou xxxxxx xxxxxxxx |
X.1. xxxx XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXX) - XXXXXX XXXXXXXXX TŘÍDY XXXXXX TOXICITY
1. METODA
1.1 Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jak xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xxxxx klasifikace xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x přiměřených xxxxxxxxx, xxx xxx bylo xxxxx testovanou xxxxx xx xxxxxxx výsledků xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxx popsaný xxx xxxx testovací metodu xxxxxxxx výběr xxx xxxxxxxxxxx pevně stanovených xxxxx, které xxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx body xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nebo pro xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx uvážit, pokud xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx určena pro xxxxxxx xxxxxx XX50. Xxxxxxxx xxxxxxxxx rozsahu xxxxxxx, xx kterém xx xxxxxxx úmrtnost, xxxxxxx xxxx části xxxxxx je x x xxxx metody xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx testu mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx látky. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxx než postup xxxxxxx v xxxxxx B.1. Xxxxxx xxxxxxx xxxx metody xx xxxxx xxxxxxxx zvířat xxx x metody xxxxxx toxicity (xxxxxx)(B.1) x než x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx (B.1 bis).
1.2 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Látka xx xxxxxx orálně xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat v xxxxx xx stanovených xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx tři xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx zvířat xx vztahu k xxxxxxxx xxxxx rozhodne x xxxxxx xxxxx, x.x.
- xxxx xxxxxxxxx xxxxx další testování;
- xxxxx xxxx bude xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx nižší xxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxx metody
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, označena xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx jednotlivých zvířat, x xxxxxxx xx xxxxx klecích xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxx xx laboratorní podmínky. Xxxxxxx xxxxx být x xxxxxxx ve xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx, xxx xxxxx zvířat x xxxxx kleci musí xxxxxxx jasné xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx dávce xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xx třeba, xxxxxxxxx xxxxx se rozpustí xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx zvážit xxxxxxx vodného xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxx x jedlém rostlinném xxxxx (např. xxxxxxxxxx) x pak xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx xxxx aplikováním xxxxx po určitou xxxx xxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxx xxx a myši 3 - 4 xxxxxx); přístup x xxxx xx xxxxxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (pro xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední hodnoty.
1.3.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxx zvířata xxxxxxx pohlaví. V xxxxxxx kroku xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx úroveň je xxxxxxx xx tří xxxxxxx xxxxxx, xxx. 25, 200 a 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Výchozí xxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxx, aby x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx alespoň xxxxxxxxx xxxxxx, jimž xxxx látka xxxxxx. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx diagramu xxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 1.
Xxx výběr xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x účinku. Pokud xxxx informace xxxxxxxxx, xx úmrtnost je xxxxxxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx (2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx), xxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x testované xxxxx, doporučuje xx - x xxxxxxx xx pokusná xxxxxxx - použít xxxxxxx xxxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx zpřesnit získanou xxxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx 25, 200 x 2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti. V xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx o xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx pevných xxxxxxx xx xxxx 5, 50 xxxx 500 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxxxx dávky, x kterých je xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx leptavými xxxx xxxxx dráždícími xxxxxx xxxxxxx bolest x xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx xx rychlosti xxxxxxx, xx xxxxxx x závažnosti xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx pohlaví xxxx při xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx dávku xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx test
Limitní test x jedinou xxxxxx xxxxx ve výši 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx provádí xx třech zvířatech xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxx provést xxx xxxxxxx 200 mg.kg-1 (xxxx 500 mg.kg-1) xxxxxxx hmotnosti.
1.3.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 14 xxx, xxxxx případů xxx xxxx být xxxxxxx vyloučena x xxxxxxx pozorování x xxxxxxx utracena z xxxxxx ochrany zvířat. Xxxxxx xxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxx x délky zotavovacího xxxxxx. Je důležité xxxxxxxxxxxx dobu, xxx xx objeví x xxxx xxxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxx-xx o xxxxxxxx toxické xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx zaznamenávána: xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx 3 - 4 xxxxx. Xxx je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxx xxx - x xxxxxxxxxx xx délce xxxx xxxx - nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x vodu.
Maximální objem xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx najednou, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. X hlodavců xx xxxxx neměl xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x tělesné hmotnosti, x případě xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 xx xx 100 x xxxxxxx hmotnosti. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxx, xxx xxx podáván xxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx není možné xxxxx dávku celou xxxxxxxx, xx xxxxx xx aplikovat xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx 24 hodin.
Podrobnosti xxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx x Xxxxxxx 1.
1.3.3.1 Xxxxxxxxx pozorování
Pečlivé xxxxxxxx pozorování xx xxxxxxx dvakrát xx xxxxx xxx (xxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx, x xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx, která xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx vykazující xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx: xxxx zvířata xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx.
Xx xx xxxx zvířata xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx nebo byla xxxxxxxx mrtvá, dobu xxxxx xx třeba xxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxx. Xxxxx pozorování xx xxxxxxx, xxxx zvířata xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xx kůži x xxxxx, xx xxxxx x sliznicích, a xxxx na dýchacím, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx aktivitě a xxxxxxx. Pozornost xx xxxxx věnovat xxxxxxx xxxxx, křečí, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxx pozorování xxxx xxxxxxxxxxxx zaznamenávána: xxxxxxx jsou xxxxxx xxx xxxxx jednotlivé xxxxx.
1.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx nejméně jednou xxxxx. Xxxxxxxx xx x zaznamenávají změny xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxx přežívající xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx, než xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.3.3.3 Xxxxx
X xxxxx zvířat použitých xx xxxxxx, včetně xxxxxxxxx x utracených xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patologické změny xxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxx získání xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx mikroskopické xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx makroskopické xxxxxxxxx x xxxxxx přežívajících 24 x více xxxxx.
2. SBĚR A XXXXXX XXXXX
X dispozici xxxx být xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx u každé xxxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, počet zvířat xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx utracených x xxxxxxxxx důvodů, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, popis, xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, a xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx klasifikaci je xxxxxxx x Dodatku 2.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Zpráva x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx/xxxx;
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx-xx xxxx;
- počet, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, podmínky xxxxx, potrava xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx jiné xxx voda;
- xxxxxxxx xxxxx x způsobu xxxxxxxx testované látky xxxxxx podávaných objemů x doby xxxxxxxx;
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxx a xxxxxxx xxxx (xxxxxx druhu x xxxxxx);
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx zvířete xx xxxxxxx podle xxxxxxx x dávkové xxxxxx (xxx. xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx);
- nástup a xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxxxxxxxxxx u xxxxxxx xxxxxxx;
- pitevní xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx nálezy x xxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx a interpretace:
4. XXXXXXXXXX
Xxxx metoda je xxxxxxxxxx x metodou XXXX XX 423.
XXXXXXX 1
XXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxx xxxx xxxxxxx x xxxx 1.4.2.3, xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xx xx xxx xxxxx stanovených xxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx uhynutí xxxxx x některých xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx x účinku,
- xxxxxxx xxxxx z jiných xxxxx xxxxxxxx a
- xxxxxxxxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxxx vývojové xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx stanovují xxxxxx pro každou xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxx xx počtu xxxxxxx utracených xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, jak xxxxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxx xx aplikaci výchozí xxxxx 25 xxxx 200 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx zvíře druhého xxxxxxx, obvykle xx xxx dále netestuje. Xxxxx však xxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx. Jestliže xx xxxx xxxxxxx potvrdí, xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4. Xxxxx xx dávce 2000 mg.kg-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx předpokládat, xx hodnota XX50 xxxxxxxx dávku 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx xxx hraniční xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx posoudit xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx zvířat xxxxxxx pohlaví: xxxxxxxx, xxxxxxx toxické příznaky x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx XX50 ve xxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx, xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxx dávky.
5. Xxxxxx xxxxxxxx testování x třemi xxxxxxxxxxx xxxxx stanovenými xxxxxxx (xxxxxxxx 2). Xxxx xxxxxxxx xx možno xxxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x daném bodu xxxxxxxxxxxxx procesu, xxxx xxx xxxxx testování xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1.
Postup xxxxxxxxx x výchozí xxxxxx 25 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxx zvířat a xxxxxxx (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - xxxxxxx zvolené xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu uhynulých xxxxxx xx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxx xxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x příslušném xxxxx xxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkou.
Ukončení xxxxx: Klasifikace xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot uvedených x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx 200 xx.xx-1 tělesné xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xx udána xxxxx, počet xxxxxx x xxxxxxx (1 - pohlaví zvolené xxxx první, 2 - xxxxxxx zvolené xxxx druhé).
Pod rámečky xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (0, 1, 2, 3). Xxxxx počtu xxxxxxxxx xxxxxx xx x testování pokračuje xx xxxxx šipek xx xx dosažení xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx 1 - Xxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Xxxxxxxx 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx: Klasifikace xx xxxxxxx na xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx v příslušném xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx testování x výchozí xxxxxx 2000 mg.kg-1 tělesné xxxxxxxxx
X rámečcích xx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx a pohlaví (1 - xxxxxxx xxxxxxx xxxx první, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx druhé).
Pod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx nebo utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3). Podle xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx x testování xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx rámečku.
Varianta 1 - Ukončení xxxxx: Klasifikace xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxxx x Xxxxxxx 2.
Varianta 2 - Xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkou.
Ukončení xxxxx: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx konečných xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx šedém rámečku.
DODATEK 2
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
X xxxxxxxxx je xxxxx dávka, počet xxxxxx x pohlaví (1 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx, 2 - pohlaví xxxxxxx xxxx xxxxx).
Xxx xxxxxxx je počet xxxxxxxxx nebo utracených xxxxxx (0, 1, 2, 3).
Xxxx xxxxxxx xxx rámečkem "XXXXX XXXXX TESTOVÁNÍ" x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hodnoty xxx klasifikaci. Xx xxxxxxxxx podle xxxxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx sleduje, xxxxx xx nedosáhne xxxxxxxxxxx xxxxxxx. (Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx XX50 je xxxxx xxx hodnota x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.)
(x) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkou 25 xx/xx tělesné hmotnosti
(b) Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx dávkou 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxxxxxx postup x xxxxxxx xxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxx 1
x) Xxxxxxx xxxxx 25 xx/xx tělesné hmotnosti
b) Xxxxxxx dávka 200 xx/xx xxxxxxx xxxxxxxxx
x) Xxxxxxx xxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx
X.2. XXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Xx xxxxxxxx před xxxxxxx xxxxxx xxxxx x rozdělení xxxxxxxxx xxxxxx, tenzi xxx, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxx-xx xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxx
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Několik xxxxxx pokusných xxxxxx xx exponováno xxxxxxxxx xxxxx po určenou xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x to xxxxx koncentraci v xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx zvířata xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx a případy xxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx pokusu xxxxxx, x ta, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx x takových xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, o xxxxxxx xx známo, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx následkem xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx potřebného xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, není třeba xxxxxxxx xxxxxxx simulované xxxxxxxx.
Xxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxxx xxx, xxx x ovzduší xxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace testované xxxxx; x xxx xxxxxxx xx zařadí xxxx kontrolní skupina x vehikulem. Xxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, xxxx xxx o xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx vhodná historická xxxx, xx xxxxx xx xxxxxx.
1.3.2 Experimentální xxxxxxxx
1.3.2.1 Pokusná zvířata
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Používá xx xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx hmotnosti zvířat xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx).
1.3.2.2 Počet x xxxxxxx
Pro každou xxxxxxxx hladinu xx xxxxx použít nejméně 10 hlodavců (5 xxxxx x 5 xxxxx). Samice musí xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx-xx se x xxxxxxxx testech xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, než xxxx xxxxxxxx, mělo xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxxx. Xxxxx je třeba xxxxxxx xxxxx x xx třeba zaručit, xxx nebyly xxxxxxxxxx xxxxx toxické xxxxx. X xxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx testované xxxxx.
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Má xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx, a xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx mezi xxxxxx x xxxxxxxxxx x, xxxxx xx xx xxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx-xx xx 4 xxxxxxxx xxxxxxxx 5 xxxxx x 5 xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx 20 xx.x-1 xxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx 5 xx.x-1 (nebo - x případech, xxx xxxx koncentraci není xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx vlastností xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx rizika xxxxxxx - xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxxx 14 xxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, považují se xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Doba xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxx 4 xxxxxx.
1.3.2.6 Vybavení
Pro xxxxxx se zvířaty xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx proudění xxxxxxx x výměnou xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx hodinu, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx rozdělení xxxxx x expoziční xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xx xxxxxxx omezovalo shlukování xxxxxx a xxx xxxxxxxxx expozice testované xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx by xxxxx x xxxxxx celkový xxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx boxu. Xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx expozice xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx expozice; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.7 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx by měla xxxxx xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx na xxxxxxxxx reakcích, na xxxxxxxxx xxxxxx vzniku x xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx potřeby xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, xxx xx objeví x xxxx xxxxxx xxxxxxx otravy, xxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx zpožděné xxxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx po xxxx 4 hodin od xxxxxxxx rovnováhy xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Nastavení xxxxxxxxx by xxxx xxx rychlé. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 o X. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx ideálně xxxx 30 % x 70 %, x výjimkou případů, xxx xx není xxxxx (např. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx tlaku xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx vodního xxxxxxx) xxxxxxx unikání xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx potrava xxx xxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxx systémy xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx musí zaručovat, xx stabilních xxxxxxxx xxxxxxxx bude xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx x provoz boxu xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x komoře.
Je xxxxx zajistit xxxxxx xxxx monitorování xxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) měření xxxxxxx vzduchu (xxxxxxxxxxx),
(x) skutečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx třikrát xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx, např. aerosoly xx xxxxxx koncentraci, xxxxx vyžadovat xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx o xxxx než ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx možné xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx týká xxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxx velikosti xxxxxx xxx xxxxx, xxx to pokus xxxxxxxx (ale nejméně xxxxxx xxx každou xxxxxxxxxx xxxxxxx),
(x) xxxxxxx a vlhkost xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx x xx jejím skončení xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zaznamenávají systematicky. Xxxxx xxxxx xx xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxx prvního xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx často. Xxxxxxxxx xxxxxx každý xxxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxx pečlivé xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx nebo zmrazením xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Pozorování xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx oběhu, xxxxx xxxxxx autonomní x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, letargii, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx stanovuje xx xxxxxxxx xxxxx x v xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, která xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají xx zvláštním xxxxxxxx xx všem xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx tkáně xxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx sestaví xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx vykazujících xxxxx xxxxxxxx toxicity, popis xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx zvířata přežijí xxxx než xxxxx xxx. Xxxxxxx, která xxxx humánně utracena xxxxxxxx xx stresu xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx testovanou látkou, xxxx zaznamenána xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxx xxxxx - pokud xxxxxxxx - xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx x stupněm všech xxxxxxxxxx, xxxxxx změn xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, mortality x všech xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxx.,
- xxxxxxxx pokusu: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx včetně xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxxxxxxx aerosolů, xxxxxxxxxxxxxx systému x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxx popsat xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx aerosolu,
- xxxxx o xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx hodnotami a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Mají xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx:
x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx;
x) xxxxxxx x xxxxxxx vzduchu;
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxx do inhalačního xxxxxxxx, dělené xxxxxxx xxxxxxx);
Xxxx.: xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látek x xxxxxxx (např. xx xxxx) xx xxxxx uvádět nejen xxxxxxxxx koncentraci xxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx, xxxxx xx xx možné, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx ve xxxxxxxx.
x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx;
e) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
f) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx průměru (XXXX) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX);
x) xxxx xx xxxxxxxx rovnováhy;
x) xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxx reakcí xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx (tj. xxxxx zvířat, xxxxx x xxxxxx uhynula xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx zvířat x xxxxxxxx toxicity; xxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat);
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx jejím skončení, xxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx;
- xxxxxxx XX50 xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx pozorování (x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx);
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx XX50 (xxxxx je xxxxx xxx xxxxxxxx);
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx (xxxxxxxxxxx) x xxxx xxxxxxxx (pokud xx xxxxxxxx metoda xxxxxxxxx);
- xxxxxxx xxxxxx;
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- diskuse xxxxxxxx (xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxx důvodů xxxxx xxxxx na xxxxxxxxxx hodnotu LC50);
- interpretace xxxxxxxx.
B.3. XXXXXX XXXXXXXX (DERMÁLNÍ)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xx xxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx x zaznamenávají xx xxxxxx x xxxxxxx uhynutí. Zvířata, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx konec xxxxxx, xx xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, x kterých xx xxxxx, že xxxxxxxxxx značnou xxxxxx x xxxxx následkem xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastností.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx jsou zvířata xxxxxxx v pokusných xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx zvířata xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxx 24 hodin xxxx zahájením xxxxx xx srst zvířat xx xxxxxx xxxxxxx xxxx oholí. Xxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxx je třeba xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx) xxxx, xxx by xxxxx xxxxxx xxxx propustnost. Xxx xxxxxxxx testované xxxxx xx připraví xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x práškové formě, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vodou xxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx byl xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx vehikula xx xx xxx xxxxx xxx, x xxxx xxxxx xx xxxx xxxx xxxxx dostat xx styku x xxxxxxx xxxx, a xx všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ten, xxxxx nejvíce xxxxxxxxx xxxxxx kůží. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx. Xxx xxxxxx x xxxx živočišné xxxxx, xxxxx jsou xxx xx xxxxxx. Je xxxxx xxxxx známé xxxxx xxxxxxxxx zvířat. Xx začátku testu xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Používá-li xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxxx informace, xx xxxxx z xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Poznámka: Xxxxxxxxx-xx xx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx druhů, xxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx se xxxxxx xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Dávky xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx x je třeba xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxx toxické xxxxx. X xxxxxx testech xx xxxxx xxxxxxx xx podávání xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx být xxxxxxxxxx počet dávkových xxxxxx, nejméně xxx, x xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx testovací xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx toxických účinků x xxxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkou x xxxxxxx, a xxxxx možno xxxxxxx xxxxxxxxx LD50 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Lze xxxxxxx xxxxxxx test jednou xxxxxx xxxxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx hmotnosti xx skupinách 5 xxxxx x 5 xxxxx s xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx látka způsobí xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx úplnou xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx xx být xxxxxxx 14 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Měla xx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x trvání xxxx xxxxxxxx. Xxxx pozorování xx xxxxx xxxxx xxxxxxx prodloužit. Xxxxxxxxxxx xx xxxx, kdy xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a vymizí x doba do xxxxxxx, xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx uhynutí.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx nanese rovnoměrně xx xxxxxx, která xxxx asi 10 % xxxxxxxxx povrchu xxxx. Pro xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx plocha xxxxx; mělo xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxx této xxxxxx.
Testovaná xxxxx xx po expoziční xxxx 24 xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x kůží xxxxxx xxxxxxxxx mulového xxxxxx x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x aby xx zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx pohybu, úplnou xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xx uplynutí xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx zbytky testované xxxxx, xxxxx možno xxxx xxxx jiným xxxxxxx způsobem se xxxxxxx očištění xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxx každé xxxxx xx třeba vést xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx se zvířata xxxxxxxx často. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx třeba xxxxxxx xxxxxxx klinické xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mají xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx. xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zvířat.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, na kterou xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx x sliznic, x xxxx dýchání x krevního xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nervové xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx. Zvláštní xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx tremoru, xxxxxxxx xxxxx, slinění, xxxxxx, letargii, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx uhynou, x xxxxx xxxxxxx až xx xxxxx pokusu, xx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx zaznamenávají x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx histopatologické xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx x druhého pohlaví
Xx xxxxxxxxx studie xx xxxxxx xxxxxxx xx podá látka xxxxxxx jedné skupině x xxxx zvířatech xxxxxxx pohlaví, xxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx pohlaví xxxxxx výrazně xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx odůvodněno xxxxxxx menšího xxxxx xxxxxx. Pokud xx x xxxxxxxxx spolehlivá xxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx citlivější, testování xx xxxxxxxxx druhého xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx. X xx xxxx být xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxx projevy xxxxxx, xxxxx toxických xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Stanovení hmotnosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx testované látky, xxx v týdenních xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x zaznamenat, xxxxxxx-xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utracena x xxxxxxx na xxxxx x bolesti xxxxxxxx xxxxxxx látkou, se xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx touto xxxxxx. XX50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx metodou. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxx všech xxxxxxxxxx včetně změn xxxxxxx, xxxxxxxxxx symptomů, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, změn xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxx ostatních xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx pokusu
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, podmínky xxxxx, krmení atd.,
- xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx a typu xxxxxx: xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx (včetně xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx) x koncentrace,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- tabulky xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxx xxxxxx uhynulých xxxx xxxxxxx utracených xxxxx testu; počet xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx exponovaných xxxxxx),
- xxxx xxxxxxx po podání xxxxxxxxx xxxxx, důvody x xxxxxxxx xxx xxxxxxx utracení xxxxxx,
- xxxxxxx pozorování,
- xxxxxxx LD50 xxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx byl xxxxxxxx úplný xxxxx, x xx xxx 14xxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxx metody xxxxxxx),
- 95% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx LD50 (xxxxx jej xxx xxxxxxxx),
- křivka xxxxxxxxxx mortality na xxxxx a xxxx xxxxxxxx (xxxxx xx xxxxxxxxx danou xxxxxxx xxxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx druhém xxxxxxx,
- rozbor výsledků (xxxxxxxx pozornost věnovat xxxxxxx xxxxxxxxx vypočtené xxxxxxx XX50 x xxxxxxxxxxx x utracením xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx),
- xxxxxxxxxxxx výsledků.
X.4. AKUTNÍ XXXXXXXX (XXXXX XXXXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Výchozí xxxxx
Je xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxx látce s xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxx, které xxxxx vyvolat xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx test, xxxxxx xx xxxxxxx zvířeti xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx reaktivita. Xxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx (např. xX xxxxx xx xxxxx 2 xxxx xX xxxxx xx xxxxx 11,5) není xxxxx testovat xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxx xxxx x úvahu také xxxxxxxxxx nebo kyselou xxxxxxx.
x) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx přesvědčivé xxxxxxx závažných xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx in vitro xxxxx, xxxx vyžadován xxxxx xxxx.
x) Xxxxxxxx xx studií xxxxxx xxxxxxxx. Jestliže xxxx xxxxx x xxxxx akutní toxicity xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx limitní xxxxxx xxxxx (2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxx pozorováno xxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Rovněž xxxx xxxxx testovat xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx cestě xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx na xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx době xx xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx pozorovaných xxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx x přetrvávajícími příznaky xxxxxx x bolesti xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx utratit.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx zvířat xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx třeba xxxx xx xx, aby xx nepoškodila kůže (xxxx. xxxxxx). Je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx.
Některé xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx husté xxxxx, xxxxx jsou výraznější x některých obdobích xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxxxx srsti.
Xxx xxxxxxxx x xxxxxxx látkami, případně xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx dostatečně xxxxxxxx xxxxx, případně xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx dobrý xxxxxxx x xxxx. Xxx použití vehikula xx nutné xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xx z xx xxxxx screeningových xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xx xxxxxxx), xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx zvířeti. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx testu xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx dvou xxxxxxx zvířatech.
Xxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxxxx xx na xxxxxxxxx místo xxxx 0,5 xx xxxxxxxx xxxx 0,5 x xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx. Přilehlé xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx možno xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx třeba xxxxxxxxxxx dobu 14 xxx xx aplikaci.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxxxx xx chovají xxxxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxx plochu (xxx 6 cm2) xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx testovanou xxxxx xx xxx, a xxx xxx xxxxxxxxx xx xxxx. Xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx na xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx tomu, xxx xx xxxxx dostalo x xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx orálně xxxx xx vdechnout.
Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xx třeba odstranit xxxxxx xxxxxxxxxx látku xxxxx, pokud je xx možné, xxxx xxxxxxx rozpouštědlem, xxx xxx, aby xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx reakce xxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xx obvykle 4 xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx xxxx vyvolat xxxxxxx (xxxx. xxx, že xxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx zkrátit délku xxxxxxxx (xxxx. na 1 hodinu nebo 3 minuty). Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx použít nejprve xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 3 xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxxx. Xxxxx plátek xx xxxxxxxx po 3 minutách. Pokud xxxx pozorována závažná xxxxx xxxxxx, odstraní xx xxxxx xxxxxx xx 1 hodině. Xxxxx pozorování x xxxx fázi xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx 4xxxxxxxx expozice x xx xxxxxxxxxx principu xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx třetí xxxxxx xx 4 xxxxxxxx x klasifikují xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx. X případě, xx xxxx možná 4xxxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx test x xxxxxxxx nejméně xxxx xxxxxxx xxxxxx; xxxxx xx není kontraindikováno x xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxxx xx 4 hodinách expozice xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx).
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxx. xxxxxxx) xxxxxxxxxx xx 3 minutách xxxx xx 1 xxxxxx, xx test xxxxxxxx xxxxxxx.
Za xxxxxxxx podmínek xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, například xxxxx xx odpovídá xxxxxxxxxxx xxxxxxx použití a xxxxxxxx x člověka.
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxx kůže xx 60 xxxxxxxx a xxxx 24, 48 x 72 hodin xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxx podráždění kůže xx klasifikuje x xxxxxxxxxxx xxxxx systému xxxxxxxxx x tabulce 1. Xxxxxxxx nebylo xxxxx 72 xxxxx xxxxxxxx úplného odeznění xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx. Vedle xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx závažné léze xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx) x xxxx toxické xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx, maskovaných xxxxxxxxxx xxxx testovanou látkou, xx třeba xxxxxx xxxxxxx histopatologického vyšetření xxxx měření tloušťky xxxxx xxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx se sestaví xx tabulky. Z xx musí xxx xxx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx po xxxxx dobu xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxx xxxxx všechny xxxxxxx xxxx, popis xxxxxx x xxxxxx podráždění xxxx, xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx a všechny xxxxx xxxxxxxxxx toxické xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, kmen, xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností testované xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x čištění xxxx, xxx xxxxxx: okluzivní, xxxxxxxxxxxxx,
- xx xxxxx tabulky xxxxx x xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx každém xxxxxxxxxx (xx 1, 24, 48 x 72 xxxxx atd. xx xxxxxxxxxx xxxx),
- popis zjištěných xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinků xxxxx xxxxxxxxxx xxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. XXXXXXX
4.1 Stupnice xxxxxx xxxx
Hodnota | |
1. Hodnocení erytému x xxxxxxxxx | |
1.1 Žádný xxxxxx | 0 |
1.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxxx) | 1 |
1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx | 2 |
1.4 Xxxxx xx výrazný xxxxxx | 3 |
1.5 Xxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxxxxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx | 4 |
2. Hodnocení edému | |
2.1 Xxxxx xxxx | 0 |
2.2 Xxxxx xxxxx xxxx (xxxxx viditelný) | 1 |
2.3 Lehký xxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vyvýšením) | 2 |
2.4 Mírný edém (xxxxxx vyvýšeny asi x 1 xx) | 3 |
2.5 Xxxxxxx xxxx (xxxxxxx více xxx 1 xx x otok xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx plochy) | 4 |
4.2 Klasifikace xxxxx indexu kožní xxxxxxxxxxx (IKI)
XXX xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx průměr xx xxxxxx stupně reakce xxx xxxxxx a xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx odečtu u xxxxxxx jedince a x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx | XXX |
xxxxxxxx | XXX ≤ 0,5 |
xxxxx xxxxxx | 0,5 &xx; IKI ≤ 3 |
xxxxxxx dráždí | 3 &xx; XXX ≤ 5 |
silně xxxxxx | XXX &xx; 5 |
B.5. XXXXXX XXXXXXXX (XXXX DRÁŽDIVOST)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
1.1.1 Xxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxx zvážit xxxxxxx xxxxxxxx informace x xxxx látce x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx podmínek, které xxxxx xxxxxxx těžké xxxxxx. K xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace.
x) Xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx. xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx - xxx je xxxxx očekávat - xxxxxxxx v xxx xX xxxxx či xxxxx 2 xxxx xX xxxxx či xxxxx 11,5, xxxx xxxxx testovat, xxxxx xxx očekávat xxxxxxx xxxxxxxxx. Je třeba xxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx rezervu.
b) Xxxxxxxx spolehlivě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxx x xxxxxxxxxxx potenciálně xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx vlastnostmi xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx pro xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
c) Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx vykazovaly xxxxxx xxxxxxx nebo výrazně xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xx studii xxxxx dráždivosti, xxxx xxxxx dále xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx pro xxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx, že xxxxx xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx oka xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx neexponované xxx xxxxxx jako xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x reakce se xxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx účinku. Xxxx pozorování musí xxx xxxxxxxxxx dlouhá, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx zhodnotit také xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Zvířata xx závažnými a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stresu x bolesti xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
24 xxxxx xxxx testem xx x každého x xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxxx xxxxxxx vyšetření xxxx xxx. Xxxxxxx, x kterých se xxxxxx podráždění očí, xxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Ačkoliv xx xxxxxxxxx různé xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, doporučuje xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xx xxxxx zvolit xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx jednom xxxxxxxxx naznačují, xx xxxxx má výrazně xxxxxxxx (reverzibilní účinek) xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) účinky pro xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx další xxxxxxx.
X ostatních případech xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tří xxxxxx. Xxxxxxxxx nejednoznačných nálezů xxxx vyžadovat xxxxxxx xxxxxxx zvířat.
1.2.2.3 Xxxxxx xxxxx
Xxx testování xxxxxxx se používá xxxxx 0,1 xx. X xxxxxx xxxxx, xxxx a zrnitých xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxx 0,1 xx nebo xxxxxxxx xxx 0,1 x (xxxxxxxx xx vždy xxxxx xxxxx). Xxxxx-xx xx x xxxxx xxxx hrubě xxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx prášek. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxx.
U xxxxx xxxxxxxxxx xx sprejích x xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx 0,1 xx látky x xxxxxxxxxx ji do xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxx xxxxxxxxxx
Délku doby xxxxxxxxxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx dostatečně xxxxxx, xxx bylo možno xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx 21 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x klecích. Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx spojivkového xxxx xxxxxxx xxx xxx, xx se spodní xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx oční xxxxx. Xxxxx xx xxx xxx na 1 xxxxxxx xxxxx k xxxx přidrží, xxx xx xxxxx látka xxxxxxxxxx. Druhé xxx, xx xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Aby bylo xxxxxxxxx, že následkem xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx anestetika. Xxxxxxx xxxxxxxx se xxxx anestezovat x xxxxxxxxx oko.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 24 hodiny xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xx 24 hodinách xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, pokud xx xx xxxxxxxx za xxxxxx.
X některých xxxxx, xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx podráždění, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx se xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx vymyjí xxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx doporučuje xxxxxx 3 xxxxxxx. Půl xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pozorování x xxxxxxxxxxx
Xxx se xxxxxxxxx po 1, 24, 48 x 72 hodinách. Xxxxxxxxxxx-xx xx xx 72 xxxxxxxx žádné příznaky xxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx prodloužit, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx rohovky xxxx jiné xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx vývoj xxxx x jejich xxxxxxxx xx nevratnost. Xxxxx xxxxxxxxxx na rohovce, xxxxxxx x spojivce xx xxxxx zaznamenat x uvést xx xxxxxx i xxxx xxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx oka xx xxxxx při každém xxxxxxxxx stanovit podle xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxx. (Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx interpretace. Xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xx, xxx provádějí xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx ilustrovanou xxxxxxxxxx xxxxxxx podráždění xxx.)
Xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx usnadnit použitím xxxxxxxxxxx xxxx, ruční xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx po 24 hodinách xx xxxxx oči některých xxxx všech zvířat xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Údaje xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx pro xxxxx pokusné xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx intervalu xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x všechny mimooční xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx obsahuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxx o zvířatech (xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx chovu, krmení xxx.),
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx),
- v xxxxxxxxx formě xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx pro jednotlivá xxxxxxx xxx každém xxxxxxxxxx (např. xx 1, 24, 48 x 72 xxxxxxxx)
- popis xxxxx xxxxxxxxxx závažných xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx zjištěného xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,
- popis xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1, 24, 48 x 72 xxx.), např. xxxxxxxxxx lampa, oční xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx.,
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. DODATEK
4.1 Xxxxxxxx xxxx xx xxx
Hodnota | |
X. Xxxxxxxx - xxxx | |
Xxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Xxxxx xxxx zahrnující mžurku | 1 |
Xxxxxxx xxxx x everzí xxxxx | 2 |
Xxxx způsobující xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx | 3 |
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xx polovinu xxxx xxxxx | 4 |
X. Xxxxxxxx - xxxxxx | |
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx | 0 |
Slabé xxxxxx (xxxxx odlišit xx xxxxx sekrece xx xxxxxxxx xxxxxx) | 1 |
Xxxxxx xx xxxxxxxxx víček a xxxxx v xxxxxxxxx xxx | 2 |
Slzení xx xxxxxxxxx xxxxx x srsti v xxxxxxx okolí xxx | 3 |
X. Xxxxxxxx - enantém | |
Xxxxx xxxxxx normální | 0 |
Xxxxxxxxxxx xxx zřetelně xxxxxxxxxx oproti normě | 1 |
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, rozlišení jednotlivých xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx | 2 |
Xxxxxxx tmavě xxxxxxx barva | 3 |
X. Xxxxxxx - xxxxxxxx | |
Xxxxxxxx nejsou xxxxxxxx | 0 |
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx duhovky, překrvení, xxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx), xxxxxx na xxxxxx je xxxxxxxxx, xxxxxxxx opožděná | 1 |
Xxxxxx na světlo xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx | 2 |
x xxxxxxx (xxxxx xxxx více xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx) | |
X. Rohovka - xxxxxx neprůhlednosti | |
Neprůhlednost xxxx přítomná | 0 |
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx diseminovaného xxxxxxxxxx, xxxxxxx duhovky xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx | 1 |
Xxxxxxxxxxx oblast xx xxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx duhovky xxxxx zastřené | 2 |
Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx; obrys xxxxxxx xxxxx viditelný | 3 |
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx | 4 |
X. Xxxxxxx - xxxxxx neprůhlednosti | |
Neprůhlednost xx pozorovatelná, ale xxxx xxxxxx xx ≤ 1/4 plochy xxxxxxx | 1 |
1/4 &xx; xxxxxx neprůhlednosti ≤ 1/2 xxxxxx xxxxxxx | 2 |
1/2 &xx; xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ≤ 3/4 plochy xxxxxxx | 3 |
xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx > 3/4 xxxxxx rohovky | 4 |
4.2 Xxxxxxx akutního xxxxxx xxxx dráždivosti (XXX)
Xxxxxxxxxxxx index xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) pro xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx hodnocení xx xxxxxxx podle xxxxxx
XXX = 2.(X + X + X) + 5.X + 5.E.F
Xxxxxxxx xxxxx oční xxxxxxxxxxx (XXX) xxx xxxxx interval hodnocení xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx hodnocení xxxx xxxxxx x XXX.
Xxxxxx xxxxx xxxx dráždivosti IOA xx roven xxxxxxxxxx XXX zjištěnému x xxxxxxx testu
4.3 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx | IOA |
nedráždí | 0 - 4,9 |
xxxxx xxxxxx | 5 - 14,9 |
xxxxxx | 15 - 29,9 |
xxxxx xxxxxx | 30 - 59,9 |
xxxxx xxxxx xxxxxx | 60 - 79,9 |
xxxxxxxx xxxxxx | 80 – 110 |
B.6. XXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1. Xxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx testů xxx zjišťování látek x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx toxicity x oblasti veřejného xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx metoda, která xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx lidskou xxxx x která xx xx hodila xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxx xxxxx xx xxxxx uvažovat xxxxxxx jako např. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látky, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxx rozdělit xx xxxxx s xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx alergický stav xxxxxxxxxx rozpuštěním xxxx xxxxxxxxxxxxx testované látky xx Freundově xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX), a xx xxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxx přesnější x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx lidskou xxxx xxx metody xxx Freundova xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx test xx morčatech (Xxxxxx-xxx Xxxxxxxxxxxx Test - XXXX) je xxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx reakci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, je XXXX xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx.
X mnoha skupin xxxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxx xxx xxxxxxxx (xxxxxxxx se dává Xxxxxxxxxx testu) xxxxxxxxxx xx xxxx citlivé.
X určitých xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx aplikací xxxxx xxx intradermální injekci xxxxxxxxxx v maximizačním xxxxx na xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx Buehlerova xxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxx důvody.
X xxxx metodické xxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx test na xxxxxxx (GPMT) x Xxxxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxx validizované x xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxx pro jejich xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx uznávanou xxxxxxx dá pozitivní xxxxxxxx, xx možno xxxxxxxxxx xxxxx označit xxxx potenciální xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx morčatech. Při xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx nutné xxxxxxx xxxx xx morčeti, xxx xxx je xxxxxx x této xxxxxxxxx kapitole.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx kůže: (alergická xxxxxxxxx dermatitida) xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx na látku. X xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx kůže, xxxxxx, pupenci, puchýřky, xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx těchto xxxxxxxx. X jiných xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx reakce lišit x může xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx otok.
Indukční xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx expozici, x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx rozvinout xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxxxxxxx expozice xxxxxxxx dříve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx subjekt xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx látky
Citlivost x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx metody xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx s použitím xxxxx, x kterých xx xxxxx, xx xxxx xxxxx xx xxxxxxx silný xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxx.
X xxxxxxx provedeného xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx/xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 % u xxxxxx x adjuvans a xxxxxxx 15% x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:
Číslo XXX | Xxxxx XXXXXX | xxxxxxxx xxxxx | generický/obchodní xxxxx |
101-86-0 | 202-983-3 | 2-xxxxx-3-xxxxx-2-xxxxxxxx | xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxx |
149-30-4 | 205-736-8 | 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | kaptax |
94-07-7 | 202-303-5 | Xxxxx xxxxx kyseliny x-xxxxxxxxxxxxx | xxxxxxxxx |
Mohou xxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx zdůvodnění xxxxx xxx použity xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.4 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Po období 10 xx 14 xxx (xxxxxxxx období), x xxxxxxx kterého xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx reakce, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx x xxxxxx kožní reakce xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx u kontrolních xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxx indukce x xx xxx aplikována xxxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Jestliže xx xxxxxxxxxx za nezbytné xxxxxxxxx testovanou xxxxx, xxxxxxx se to x xxxxxxxx vody xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx, aby nebyla xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.1 Maximizační xxxx xx xxxxxxxxx (XXXX)
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx albinotická morčata xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxx xxxxx 5 xxx xxxx zahájením xxxxx. Před testem xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx, holením xxxx chemickou xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx dbát xx to, aby xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx se xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx a na xxxxx testu.
1.5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.5.1.2.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.1.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx samce x xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx březí. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx 10 xxxxxx x xxxxxxx 5 xxxxxx xx xxxxx x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxx xxxxx xxx 20 xxxxxxxxxxx a 10 xxxxxxxxxxx morčat x xxxx možné dojít x xxxxxx, xx xxxxxxxxx látka je xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, aby se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 20 xxxxxxxxxxx x 10 kontrolních xxxxxx.
1.5.1.2.3 Dávkové xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx expozici se xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx snášejí x která je xxxxxxxx působící xxxxx xx střední xxxxxxxxxx xxxx.Xxxx xxxxxxxxxx koncentrace xx použije xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx dvou xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxx účel xxx uvážit použití xxxxxx, kterým xxxx xxxxxxxxxx XXX.
1.5.1.3 Popis xxxxxxx
1.5.1.3.1 Xxxxxxx
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx po 0,1 xx, se podají xx lopatkové xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx střední xxxxx:
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (FCA) xxxxxxx x xxxxx xxxx fyziologickým xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxxxxxx 2: testovaná xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxx xx směsi XXX x xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1 : 1;
Xxx xxxxxxx 3 xx xxxxx ve vodě xxxxxxxxx xxxxxxxx před xxxxxxxx s XXX xx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx XXX. Xxxxxxx koncentrace testované xxxxx pro injekci 3 xx xxx xxxxxx jako xxx xxxxxxx 2.
Injekce 1 a 2 xx aplikují xxxxxx xxxx a co xxxxxxxx hlavě, xxxxxxx xxxxxxx 3 xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx 0 - Kontrolní xxxxxxx
Následující 3 xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx 0,1 xx, se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Injekce 1: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx adjuvans (XXX) smíšené x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 1:1;
Xxxxxxx 2: xxxxxxxx xxxxxxxxx;
Xxxxxxx 3: Xxxx xxxxxxxx (50 %, xxxx/xxxxx) se xxxxx XXX/xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx 1 : 1 (xxxxx/xxxxx).
5. - 7. den - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Přibližně xxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx aplikací, xxxxxxxx xxxxx není xxxxxxxx xxx xxxx, xx na testovací xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 0,5 xx 10% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxx navození xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx skupina
Xxxxxxxxx xxxxxx se zbaví xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx filtrační xxxxx (2 x 4 xx), xxxxx xx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x fixuje xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 48 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx se xxxx odbornými xxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
6. - 8. xxx - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx plocha se xxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxx 48 xxxxx.
1.5.1.3.2 Xxxxxxxxx
20. - 22. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx exponovaných x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx nebo v xxxxxxx x na xxxxx xxx xx xxxxxxx způsobem aplikuje xxxxx vehikulum (xxxxx xx xx xxxxx). Xxxxxx xx pomocí xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x kontaktu x xxxx po 24 xxxxxx.
1.5.1.3.3 Pozorování a xxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx x xxxxxxxxx skupiny
- xxxxxxxxx 21 hodin xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx provokační plocha xxxxxxx, důkladně ostříhá xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx provokační xxxxx) xx pozoruje xxxxx xxxxxx x zaznamenává xx podle stupnice xxxxxxx x dodatku;
- xxxxxxxxx 24 xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xx provede xxxxx pozorování x xxxxxx xxxxxx xxxx (72 xxxxx).
Xxxxxxxxxx xx xxxxxx "slepého xxxxxx" u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx), xxxxxxx xx přibližně x xxxxx později, x xxxxxxx potřeby znovu x xxxxxxxxx xxxxxxxx x vehikulem. Opakovanou xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx reakce a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx indukčních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). X objasnění xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx dalších xxxxxxx, jako xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx tloušťky xxxxxxx xxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxx
1.5.2.1 Příprava
Xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aklimatizují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx 5 xxx před xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx a kontrolních xxxxxx. Xxxxxxxxxx srsti xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx chemickou xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xx použité testovací xxxxxx. Je xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxx.
1.5.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.5.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.5.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx 20 zvířat x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 zvířat x xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2.2.3 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx se upraví xx takovou xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx maximální koncentrace, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nevyvolává xxxxxxxxxx xxxx. X xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx koncentrace stanovit x předběžném pokusu xx xxxx nebo xxxxx zvířatech.
Xxx xxxxxxxxx xxxxx rozpustné xx vodě je xxxxxx použít xxxx xxxx xxxxxxx nedráždící xxxxxx detergentu xxxx xxxxxxxx. Xxx jiné xxxxx je xxxxxxxxxx 80% xxxxxx xxxxxx/xxxx xxx xxxxxxx a xxxxxx pro xxxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxx
1.5.2.3.1 Indukce
Den 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxx bok xx xxxxxx srsti (xxxxxxxx ostříhán). Systém xxxxxxxxxx testu xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xxx xxxxxxxx aplikovat xxxxx).
Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx testovací xxxxxx x přidržován x xxxxxxxx x xxxx překrývacím plátkem xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.
Xxxxxx plátkového xxxxx xxxx být xxxxxxxxx. Xxxxxx je bavlněný xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxxx 4 - 6 xx2. Je xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, mohou xxx xxxxx xxxxx expozice.
Xxx 0 - Xxxxxxxxx xxxxxxx
Jeden xxx xx zbaven xxxxx (důkladně xxxxxxxx). Xx testovací xxxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxxxxxx, a xx xxxxxxxx způsobem xxxx x testované xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx testovací xxxxxx a xxxxxxxxxx x kontaktu s xxxx xxxxxxxxxxx plátkem xxxx komůrkou x xxxxxxx obvazem xx xxxx 6 xxxxx. Xxxxx je možno xxxxxxxx, že negativní xxxxxxxxx xxxxxxx není xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx skupiny xxx aplikace.
6. - 8. x 13. - 15. xxx - Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx jako x xxx 0 xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) 6. - 8. xxx a znovu 13. - 15. xxx.
1.5.2.3.2 Xxxxxxxxx
27. - 29. xxx - Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxx plátek xxxxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxx látky v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx na xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx plátky xxxx komůrky xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx.
1.5.2.3.3 Pozorování x hodnocení
- xxxxxxxxx 21 xxxxx xx xxxxxxxxxx plátku xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx srsti;
- xxxxxxxxx x xxx xxxxxx později (xxxxxxxxx 30 hodin po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) xx pozorují xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx;
- xxxxxxxxx xx xxxxxxx 24 xxxxxxxx (xx. xxxxxxxxx 54 hodin xx xxxxxxxx provokačního xxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx pozorují x xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx systém "slepého xxxxxx" x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx nutná xxxxx xxxxxxxxx (tj. xxxxxxxxx provokace), xxxxxxx xx přibližně o xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x vehikulem. Opakovanou xxxxxxxxx lze xxxx xxxxxxx na původní xxxxxxxxx xxxxxxx.
Všechny xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx reakcí, xxxxx xxxx xxxxxxxxx indukčních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx Xxxxxxxxxx/Xxxxxxxx (xxx xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx použít xxxxxxx xxxxxxx, jako např. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx tloušťky kožních xxx.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX (XXXX X XXXXXXXXX TEST)
Xxxxx se sestaví xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx být xxx každé xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx při xxxxxx xxxxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX (XXXX A XXXXXXXXX XXXX)
Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testu xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx testu xxxx xxxx xxxxxx (xxxx. XXXX - xxxx regionálních xxxxxxxxxxxx xxxxx, MEST - xxxx xxxxxxxxx xxxx x myší) xxxxxx xxxxx podrobností xxxxxxx x xxxxxxxx získaných xxx testované x xxxxxxxxxx xxxxx.
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (XXXX a Xxxxxxxxx xxxx)
Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx mohly xxx získány:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxx xxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxx a xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxx.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Experimentální podmínky:
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx plátkového xxxxx;
- výsledek xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx koncentracích xxx vlastní xxxx;
- xxxxxxxx informace x xxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx testované xxxxx;
- zdůvodnění xxxxxx vehikula;
- xxxxxxxxxxx x celková xxxxxxxx xxxxxxxxx látky x vehikula, xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxx výsledků poslední xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (xxx 1.3.) xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, její xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxx systému xxxxxxxxxxx;
- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- všechny xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Tato xxxxxx je analogická x xxxxxxx XXXX XX 406.
Xxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx Magnussona/Kligmana xxx hodnocení xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
0 = xxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
1 = xxxxx xxxx skvrnité xxxxxxxxx xxxx;
2 = středně xxxxxxx x splývající xxxxxxxxx xxxx;
3 = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx senzibilizace
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx expozici, tj. xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx senzibilizováno, xx xxxxx xxxxxxxxxxx jako
xxxxx xxxxxxx (I. xx.) - 0 - 8 % xxxxxx
mírný xxxxxxx (XX. xx.) - 9 - 28 % zvířat
středně xxxxx xxxxxxx (XXX. xx.) - 29 - 64 % xxxxxx
xxxxx alergen (XX. st.) - 65 - 80 % xxxxxx
extrémní xxxxxxx (X. st.) - 81 - 100 % xxxxxx
X.7. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 28 xxx x odstupňovaných xxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx orálně, x to xxxxx xxxxxxx jedna úroveň xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx pozorují, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Pitva xx provede x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxx zvířata, která xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxx a xxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx kontrolní xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx co xxxxxxx vyloučil xxxx xxxxxxxx xxxxx. Každé xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Nejméně 5 dní před xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx látku xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x potravě nebo x pitné xxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx x fyzikálně-chemických xxxxxxxxxx xxxxx.
Pokud je xx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx (vehikulu). Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxxx, xxx použití xxxxxxx/xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxx oleji (xxxx. xxxxxxxxxx) a xxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx; pokud není xxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky xx zvoleném vehikulu.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Dává xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxx x jiného xxxxx xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx mladých zdravých xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx co xxxxxxxx xx xxxxxxx a x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, než zvířata xxxxxxxx xxxx 9 xxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx studie xxxxxxx xxxx předběžný xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx třeba x obou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx nejméně 10 xxxxxx (5 xxxxx a 5 xxxxx). Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx xxxxxx, xxxxx budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xx možno xxxxxxx další skupině (xxxxxxxxx skupině) 10 xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 28 xxx xxxxxxxx dávku x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx po xxxxxxxx xxxxxxxx vratnost, xxxxxx xxxx zpožděný xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx také xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxx dávek
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx skupinu. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx se xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx zachází stejně xxxx s xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx informací xxxx očekávat xxxxxx xxx xxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx limitní xxxx. Xxxxxx-xx taková xxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx předběžnou xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx dávek.
Xxx xxxxxx dávek xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx x toxikokinetických xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxx xxxxx utrpení. Xxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx dávce. Xxxxxxxx xxxxxx dávky xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (NOAEL). Xxxxxxx xx xxxxxx xxxx- xx xxxxxxxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxx xxxxxxx; pokud xx xxxxx xxxxxx větší xxxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxx čtvrtou xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx dávkami (xxxx. faktor xxxxx xxx 10).
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxx pitné xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx výživu x xxxxx rovnováhu. Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx konstantní xxxxxxxxxxx (x ppm) nebo xxxxxxxxxx dávkování ve xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx třeba xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx sondou, xxxx xx xx xxx xxx xxxxx xxx xx stejnou xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx.
Pokud má xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx předběžný pokus xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
Neprokáže-li test xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx žádné xxxxxxx xxxxxx při xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxx při xxxxxx xxxxxxxxxxx v potravě xxxx xxxx, která xxxx dávce odpovídá, x xxxxx toxicita xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Toto xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx údaje o xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Xxxx xxxxxxxxxx xx 28 xxx. Zvířata xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 14 xxx bez xxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zpožděné xxxxxx x pro xxxxxxxxx přetrvávání xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx testovaná xxxxx 7 xxx x xxxxx xx xxxx 28 dnů, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxx v xxxxx. Xxxxx xxxxx xx podává jednorázově xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kanylou. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx může xxx xxxxx najednou, xxxxxx xx velikosti xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xx 100 x xxxxxxx hmotnosti, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx x 2 xx xx 100 x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx x podávaném objemu xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx byl xxxxxxx xxx xxxxx na xxxxx úrovních xxxxx. Xxxxxxx xx x xxxxx dráždivých x xxxxxxxxx, x kterých xx třeba obvykle xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx provádí xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx x xxxxx denní xxxx x x xxxxxxxx doby xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx stav xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx provede xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxx x mortality. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx projevující xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, utracena xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx klinické xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx porovnání) x dále nejméně xxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxx se děje xxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a nejlépe xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx. Výsledky xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx, aby se xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx; xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx neměla xxxx xxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx změny xxxx, xxxxx, očí x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x exkretů, změny xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx, zježení xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx) x xxxxxxxx další. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxx xxxxxx xx manipulaci, xxxxxxxxxx klonických a xxxxxxxxx pohybů, xxxxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx) nebo bizarních xxxxxx chování (např. xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx).
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxx, xxxxxxx, proprioceptivní), xxxxx xx xxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx aktivita. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx uvedeny x xxxxxxxxxx (xxx Xxxxxxxxx úvod, část X).
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxx xxxxx aplikace lze xxxxxxxx vynechat, xxxxx 28xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx následující xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (90xxxxx); x xxx xxxxxxx je xxxxxxxxxx funkčních xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx studie. Ovšem x x tomto xxxxxxx jsou xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx čtvrtém xxxxx 28xxxxx studie xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx výběr xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx pozorování xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx by xxx xxxxxxxxxx funkčního xxxxx xxxxxxx vadily.
1.2.3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx x xxxx
Xxxxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxx nejméně xxxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx.
1.2.3.3 Hematologie
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx pokusu xxxxxxxx xxxxxxxxx hematokritu, koncentrace xxxxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a diferenciálního xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxx se xxxx odebrala, se xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx analýza
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx tkáně, xxxxxxx xx játra a xxxxxxx, xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx nebo x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx). Xxxxxxxxxx xx xxxxxx zvířata bez xxxxxxx xxxx noc xxxxxxx xxxx1). Vyšetření xxxxxx x xxxx xxxxxxxx stanovení xxxxxx, xxxxxxxx, glukózy, celkového xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, kreatininu, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx indikujících xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx fosfatáza, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, sorbitoldehydrogenáza). Zaměření xxxxxxx enzymů (jaterního xxxx xxxxxx xxxxxx) x žlučových xxxxxxx xxxx x některých xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx možnost xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx: hodnotit xx xxxxx vzhled, xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, pH, xxxxxxxxx, glukózu a xxxx xxxx. krvinky.
Xxxx xx xxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx poškození xxxxx x séru.
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx je třeba xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na xxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterázy. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xx případu.
Xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx nebo očekávané xxxxxx dané xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx začátkem xxxxxx.
1) Xxxxxxxxx xx xxxxx je xxxxxxx xxx xxxx xxxxxx x séru x xxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxx. Hlavní xxxxx xxx toto xxxxxxxxxx xx xx, xx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx je vyšší xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, která xx mohla xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx, hladovění xxxx xxx xx xxxxx xxx vliv xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x u aplikace x potravě by xxxxxxx xx pravidelnosti xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxx xx odebírá xxxx na xxxxx, xx xxxxx biochemické xxxxxxxxx provést xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve 4. xxxxx testu.
1.2.3.5 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx použitých ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vnějšího xxxxxxx xxxx, všech xxxxxx, xxxxxx lební, hrudní x xxxxxx, x xxxxxx obsahu. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx, xxxxxx, slezina, xxxxx a srdce xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxx xxxxx x xxxxxxxxx pozdější histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x makroskopickými xxxxxxx, xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxx), míchu, xxxxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxx (včetně Xxxxxxxxxx xxxxx), játra, xxxxxxx, nadledvinky, xxxxxxx, xxxxx, brzlík, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx (konzervované xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xxxxxxxxx), xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxx. dělohu, xxxxxxxx), xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx pro oblast xxxxxxxx a jedna xxxxxxxx xxx pokrytí xxxxxxxxxxx účinků), xxxxxxxxx xxxx (x. xxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxx), xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxx kostní xxxxx (xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx. Xxxxx orgán, xxxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxxx.
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X všech zvířat xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx nejvyšší xxxxx, x x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx uchovaných xxxxxx x tkání. Xxxxx xx x xxxxxxxx x tkáních xx xxxxxxx x nejvyšší xxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx nutno provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
U xxxxxx satelitních skupin, xxxxx xxxx xx xxxxxx zařazeny, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se zvláštním xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx otravy x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.
2. XXXX X XXXXXX XXXXX
K xxxxxxxxx xxxx být xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx tabulkové xxxxx, xxxxxxxxx x každé xxxxxxxxx skupiny xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, počet xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx důvodů, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx toxických xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx každého xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, typ xxxx x xxxxxxxx zvířat x jednotlivými xxxx xxxx.
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Statistickou xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxx obsahuje xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxx druh/kmen;
- xxxxx, xxxxx a xxxxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx atd.;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxx v týdenních xxxxxxxxxxx x xx xxxxx testu.
Podmínky xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx než xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx testované látky xxx aplikaci, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky;
- xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx látky v xxxxx xxxx xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx dávku v xx xx xx xxxxxxx hmotnosti (xxxxx xxx o xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx);
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx vody (xxxxxx xxxxx x xxxxxx);
Výsledky:
- xxxxxxx hmotnost x xxxx xxxxx;
- xxxxxxxx potravy x xxxx;
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pohlaví x xxxxxxx xxxxxx, včetně xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx;
- povaha, závažnost x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, příp. xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx na smyslové xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x motorické aktivity;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxx xxxxxx;
- podrobný xxxxx všech histopatologických xxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků.
Xxxxxxx výsledků
Závěry:
4. LITERATURA
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx OECD TG 407.
X.8. AKUTNÍ XXXXXXXX INHALAČNÍ (28XXXXX XXXXXXXXX APLIKACE)
1. METODA
1.1 Xxxx
Xxxx pokusem xx xxxxx získat údaje x testované xxxxx: xxxxxxxxx velikosti částic, xxxxx xxx, xxx xxxx, xxx xxxx, xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (jsou-li xxxxxxxxxxxx).
1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx studované xxxxx xxxxx po xxxxxxx dobu, v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xx 28 xxx. Použije-li xx pro dosažení xxxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx x atmosféře xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x zjišťují xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, která přežijí xx xxxxx pokusu, xx pitvají.
1.3 Popis xxxxxx
1.3.1 Příprava
Nejméně 5 xxx před xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx jednotlivých xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Pokud xx třeba, xxxxx xx x testované xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx x xxxxxxx vznikla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx, musí xxx x xxxx xxxxx, xx nemají toxický xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx data, xx xxxxx je xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx se přednost xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx proti xxxx. Xxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x běžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx začátku xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat překročit ± 20 % xxxxxxx hodnoty (xxx xxxxx xxxxxxx zvlášť).
1.3.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx nejméně 10 xxxxxx (5 xxxxx x 5 xxxxx). Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx budou xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx před xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx exponovat vysoké xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx skupinu 10 xxxxxx (5 xxxxxxx každého xxxxxxx) xx dobu 28 xxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 dnů xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx účinků. Používá xx xxxx satelitní xxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 zvířat xxxxxxx xxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx tři skupiny x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx skupina s xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxx - x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xxxxx. S xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx koncentrace by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxx xxxxxx xx hranicích xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx xxx 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, mají xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxx x nízkou x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
1.3.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Trvání xxxxxxxx xx xxx 6 xxxxx xxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx.
1.3.2.5 Expoziční xxxxxxxx
Pro pokusy xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vzduchu x xxxxxxx xxxxxxx 12xxxx xx hodinu, xxx xxx zaručen přiměřený xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx, je xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xx nejvíce xxxxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx byla xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx atmosféry x xxxxxxxxxx xxxx neměl xx v zásadě xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 5 % objemu xxxx. Xx možné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx expozice; xxxxx xxx způsoby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx příjem xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.3.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x zotavení a xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, ve xxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxx toxické xxxxxx.
1.3.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxx xx exponují xxxxxxxxx látce xxxxx, 5 - 7 xxx v xxxxx, xx dobu 28 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx určena k xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx 14 xxx bez xxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx 22 xX ± 3 xX. Relativní xxxxxxx xx být xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, kde xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Udržování xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx (≤ 5 xx xxxxxxx xxxxxxx) xxxxxxx unikání xxxxxxxxx xxxxx xx okolí. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x vhodnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xx xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx v xxxxx expozičním xxxx xxxx xxxxxx. Systém xxxx zaručovat, že xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx dosaženo co xxxxxxxxxxx.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (kontinuálně).
b) Xxxxxxxx koncentrace studované xxxxx se xxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx ± 15 %. U xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx není xxxxx xxxxxxxxx, se xxxxxxxxx xxxxx rozsah kolísání. Xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx x aerosolů, xxxx xx distribuce xxxxxxxxx xxxxxx týdně x xxxxx testované xxxxxxx.
c) Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx možno xxxxxxxxxxx.
Xxxxx expozice a xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx provádějí x zaznamenávají systematicky; xxxxx zvíře xx xxxx individuální xxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xx xxxxx denně pozorovat xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx výskyt, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zvířat, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, jako xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx studie se xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x těžkém xxxxxx či trpící xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx xx x všech xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
1. Xxxxxxxxxxxxx vyšetření xx zahrnovat alespoň xxxxxxxxx hematokritu, koncentrace xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů x xxxxxxxxxxx krve.
2. Xxxxxxxxxxx analýza krve: x xxxxxxxxx funkce xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x těchto xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v séru (xxxxx známá xxxx xxxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), aspartátaminotransferáza (xxxxx xxxxx jako glutamátoxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, albumin, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx bílkoviny x séru.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, fosforu, chloridů, xxxxxx, draslíku, glukózy xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx cholinesterasy.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx účinků.
1.3.3.1 Xxxxx
X všech xxxxxx xxxxxxxxx xx studii xx provede xxxxx. Xxxxx xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx vysychání. Xxxxxx x xxxxx (xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, varlata, xxxxxxxxxx x srdce, i xxxxxxx orgány x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx velikosti) xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx vyjmout xxx xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxx xx zachovala struktura.
1.3.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
U xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, a x zvířat xxxxxxxxx xxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx. Pokud xx x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx koncentrací xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx provést xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx tkání x u xxxxx xxxxxx x nižšími xxxxxxx. X zvířat xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se zvláštním xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx, ve xxxxxxx se objevily xxxxxx otravy x xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx zvířat na xxxxxxx xxxxxx a xxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxx formami xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx k tomu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx o průběhu xxxxxx má pokud xxxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxx.,
- xxxxxxxx xxxxxx: popis expozičního xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, systému xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, popis xxxxxxxxx odpadního xxxxxxx x způsobu xxxxxxxx xxxxxx v xxxx, xxxxx xx používán. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx částic aerosolu,
- xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx spolu s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx variability (např. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxx xxxxx obsahovat xxxx xxxxx: x) xxxxxxxx průtoku xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx; x) nominální xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx); x) xxxxxx vehikula, xxxxx xxxx xxxxx; x) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxx; x) hmotnostní xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) x geometrická xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX),
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx podle xxxxxxx x podle xxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx o přežití xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx xxxx jiných xxxxxx,
- xxxxxx xxx účinku,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx potravy a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- hematologická vyšetření x jejich výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- pitevní xxxxxx,
- detailní popis xxxxx histopatologických xxxxxx,
- statistické vyhodnocení xxxxxxxx, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.9. XXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXX (28XXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXX)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx na xxxx xxxxx po 28 xxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx několika skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň xxxxx. Xxxxx xxxxxx podávání xx xxxxxxx denně xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx přežijí xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx ustájení x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xx zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxx. Krátce xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxx možné, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nebo xxxxxxx xx potřeba xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx se xxxxxxxxxxx xxxx (např. abrazí). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nejméně 10 % xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x velikosti xxxxxxxxxxxx xxxxxx kůže a x xxxxxxxxx krycího xxxxxx. Při xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxx, je xxxxx danou xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxx kontakt x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx 5 xx 7 dnů x týdnu.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xx možno používat xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx použít i xxxx xxxxxxx druhy, xxxxxx xxxxxxx však xxxx xxx odůvodněné. Xx xxxxxxx studie xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx použít xxxxxxx 10 xxxxxx (5 samic x 5 xxxxx) se xxxxxxx xxxx. Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx budou zabíjet x xxxxxxx studie, xx nutno xxxxxx xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 10 xxxxxx (5 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx 28 xxx xxxxxxxx dávku x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx zpožděný xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx skupiny 10 xxxxxxxxxxx xxxxxx (5 xxxxxx každého xxxxxxx).
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxx a xxxxx kontrolní xxxxxxx xxxx - xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx. Doba xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx testované xxxxx xx se xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxx aplikovanou dávku xxxxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxx xxx usnadnění xxxxxxxx, xxxxxx xx kontrolní xxxxxxx stejným způsobem xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x to ve xxxxxxx množství, které xx xxxxxxxx xxxxxxx x nejvyšší dávkou. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx toxické účinky, xxx nezpůsobit žádné xxxxxxx nebo xxx x xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx tuto xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx střední dávka xxxx xxxxxxx jen xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx více než 3 úrovně xxxxx, xxxx být vmezeřené xxxxx voleny xxx, xxx vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Ve xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx dávkou x x xxxxxxxxx xxxxxxx by počet xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx k těžkému xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxx-xx x těžkému xxxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxx-xx při xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1000 mg.kg-1 nebo xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx možné expozici xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx třeba xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx dobu xxxxxxx x xxxx, xxx xx objeví a xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx v klecích xx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 7 dnů x xxxxx xx xxxx 28 xxx. Xxxxxxx satelitní xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx následné xxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxx xx xxxxxxx 14 xxx bez expozice, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx reparace xxxxxxxxx xxxxxx xxxx jejich xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 6 xxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxx 10 % povrchu těla; x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxx plocha xxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx co největší xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v co xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx po xxxxxxxxx dobu 24 xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx s xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Testovanou xxxxxx xx xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxx překrýt, xxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxx xx zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. K xxxxxxxx požití látky xx xxxxx xxxxxx x prostředků xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx použít "xxxxxxxxxx xxxxx".
Po uplynutí xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx vhodného xxxxxxx očištění xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx x zaznamenávat příznaky xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, kůže, xxx a xxxxxxx x xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x xxxxxxx. Hmotnosti xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx. x xxxxxxxx kanibalismu, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx přežila, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxx se x xxxxx zvířat xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vyšetření:
1. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.
2. Biochemická xxxxxxx xxxx: x xxxxxxxxx funkce xxxxx x ledvin xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx z xxxxxx xxxxxxxxx: alaninaminotransferáza x xxxx (dříve xxxxx xxxx glutamátpyruvát-transamináza), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxx xxxx glutamát-oxalacetát-transamináza), xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxx.
Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxxxx hodnocení, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxx, xxxxxxx, chloridů, sodíku, xxxxxxxx, glukózy xx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx širšího xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx studii se xxxxxxx pitva. Xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x varlata xx xx nejdříve xx sekci xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx xx předešlo xxxxxxxxx. Orgány x xxxxx, xxxx. xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx, ledviny, slezina, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x makroskopickými xxxxxx xxxx změnami xxxxxxxxx, xx xxxxx přechovávat xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx kontrolní xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x x všech xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx. U xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se zvláštním xxxxxxx na xxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxx se objevily xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx pokusu x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodu.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x průběhu xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- xxxxx x zvířatech (xxxx, xxxx, xxxxx, podmínkách xxxxx, xxxxxx atd.),
- xxxxxxxxxxxxxx podmínky (xxxxxx xxxxx obvazu; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx),
- úrovně xxxxx (xxxxxx vehikula, xxxxx xx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx bez xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx a xxxxx,
- xxxx xxxxxxx během experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx nebo xxxx xxxxxx,
- doba, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x jejich xxxxx xxxxx,
- spotřeba xxxxxxx x vývoj xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
B.10. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX XX 473, Xx Xxxxx Mammalian Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx analýzy xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx in xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx buněk xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx (1) (2) (3). Strukturální xxxxxxx xxxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x chromatidové. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou většinou xxxxxxxxxxxx, dochází xxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xx schopna xxxxxxxxx xxxxxxxxx aberace. Xxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x běžně se x tomuto účelu xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx a existují xxxxxxxxxxx xxxxxxx toho, xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x příbuzné xxxx, xxx způsobují xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, hrají úlohu xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Tento xxxx xx xxxxxxx x odhalení xxxxxxx xxxxxxx mutagenů x xxxxxxxxxxx. Xxxx chemických xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxx karcinogenní, xxxx však xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx tímto xxxxxx x karcinogenitou. Xxxx korelace xxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx stále xxxx xxxxxxx o xxx, xx existují xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vlastnosti xx xxxxx xxxxxx nezjistí, xxxxxxx zřejmě xxxxxx xxxxx mechanismem než xxxxxx xxxxxxxxxx XXX.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxx stabilizovaných xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx kmenů xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Použité buňky xxxx vybrány xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x kultuře, stability xxxxxxxxx, počtu xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx napodobit xxxxxxxx x savců xx xxxx. Xx xxxxx xx vyvarovat xxxxxxxx, xxxxx by mohly xxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx neodrážejí xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx způsobeny změnami xX, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx cytotoxicitou (4) (5).
1.2 DEFINICE
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx projevuje xxxx xxxx xxxxx, případně xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxx xxxxxxxxxx jako xxxx x opětovné xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx xxxxx (zahrnuty xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx).
Zlom xxxxxxxxxx: xxxx xxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx vzniklá mezera xx xxxxxxxxx chromatidy xx větší, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Dále xxx x xxxxxxxxx, koncový (xxxxxxxx) xxxxxxxx v xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx mimo xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x důsledku xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx S-fázi xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx S-fáze. Xxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, .. xxxxxxxxxxxx.
Xxx: achromatická xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx: xxxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxx populaci xxxxx; xxxxx xxxxxx proliferace xxxx populace.
Numerická xxxxxxx: změna počtu xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx charakteristickému xxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx haploidního xxxxx xxxxxxxxxx (x) jiný xxx xxxxxxxxx počet (xxxx 3x, 4n xxx.).
Xxxxxxxxxxxx aberace: xxxxx chromozómové struktury xxxxxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx a výměny.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xx x xxxxxxxxxxxx aktivací x xxx ní. Ve xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látce, se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx ® nebo xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx, xxxxxx se x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se mikroskopicky xxxxxxxx chromozómové aberace.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx
Je možno xxxxxx celou řadu xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx primárních xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx krve xxxxxxx xx jiného xxxxx).
1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxxxxx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx x inkubační xxxxxxxx (kultivační nádoby, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x xxxxxxx). X xxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx buňky xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x kultivační xxxxxxxx.
1.4.1.3 Xxxxxxxx kultur
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxx: buňky se xxxxx ze zásobních xxxxxx vysetím xx xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx před dobou xxxxxxxx a xxxxxxxx xx xxx teplotě 37 oC.
Xxxxxxxxx: xx xxxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxx xxx plná xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxx lymfocyty xxxxxxx xx zdravých xxxxxxx x kultivují xx xxx xxxxxxx 37 xX.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace
Xx xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx působí v xxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nejobvyklejší xx xxxxxxxxx suplementovaná xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx, ovlivněná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx enzymy xxxx xx Xxxxxxx 1254 (6) (7) (8) (9), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx a ß-naftoflavonu (10) (11) (12).
Xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x médiu xxxx xxxxxxx 1 - 10 % x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx bude xxxxxxx na tom, xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx látka. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxx xxxxxx mitochondriální xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxx účely xxxxxxxxx aktivace xxxxx xxx xxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx exprimující specifické xxxxxxxxx enzymy. Výběr xxxxxxxxx xxxxx by xxx být xxxxxxx xxxxxx (např. vztahem xxxxxxxxx cytochromu P450 x xxxxxxxxxxx testované xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx testované xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x pevném xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx její xxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle x případně xxxxxx. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx do xxxxxxx přidávat přímo xxxx xx předtím xxxx. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx preparáty, xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx delší xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.5 XXXXXXXX TESTU
1.6 ROZPOUŠTĚDLO
X zvoleného xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx by xxxxx x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx reagovat, x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x aktivitu X9. Používá-li se xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx všem tam, xxx xx xx xxxxx, xxxx na xxxxxx místě xxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx dá odstranit xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.6.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, rozpustnost x systému x xxxxx xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx indikace xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxx stupně xxxxxxxxxx, xxxxx živých xxxxx, xxxx mitotický xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx cytotoxicitu x xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xx třeba xxxxxx minimálně xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x xxxxxxxxxxxx, musí xxxx xxxxxxxxxxx pokrývat xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx nebo xxxxxx toxicity. Xx xxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx xxxxx více xxx xxxxxxxx, který xxxx xxxx xxxxxxxxx 2 x √10. X xxxx xxxxxxxx xxxxx musí být xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx pokles xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx, nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx (vždy x xxxx xxx 50%). Xxxxxxxxx index xx xxxxx xxxxxxxx mírou xxxxxxxxxxxxx / cytostatických xxxxxx a je xxxxxxx xx době xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kultury, kde xx jiná xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x nepraktická. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx také xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, jako xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx; ten xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx vždy xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx znamenat xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látek činí xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx 5 µl/ml, 5 mg/ml xxxx 0,01 M.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx netoxické x xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx xx koncentrace, xxx xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx nejvyšší xxxxxxx koncentrace vyšší, xxx xx mez xxxxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx médiu na xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxxx dochází-li x xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx vyšších, než xx nejnižší xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xx xxxxxxxxxx testovat při xxxxxxxx koncentracích s xxxxxxxxxx srážením. Xxxx xxx užitečné vyhodnotit xxxxxxxxxxx xx počátku x xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx systému xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx, X9 xxxx. Nerozpustnost xx xx zjistit x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx překážku xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.6.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx již s xxxxxxxxxxxx aktivací xxxx xxx xx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (rozpouštědlo, xxxx xxxxxxxxx). Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx mutagenního xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx známý xxxxxxxxx, x xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x detekovatelný xxxxxx xxxxxxx xxx pozadí, xxxxxxxxxxx citlivost xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Koncentrace xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx tak, xxx xxxxxx byl xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přímo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx patří například:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
Xx | methyl xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx C 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx | 66-27-3 52-50-0 759-73-9 50-07-7 56-57-5 | 200-625-0 200-536-7 212-072-2 200-008-6 200-281-1 |
Xxx | xxxx[x]xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 50-32-8 50-18-0 6055-19-2 | 200-028-5 200-015-4 |
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx mohou xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx. Xxx, xxx xx xx xxxxx, je xxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx sklízení xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x negativní kontrolu, xx které se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x kultivačním xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx jakéhokoliv xxxxxxxxx.
1.6.3 Xxxxxx
1.6.3.1 Expozice xxxxxxxxxx xxxxxx
Na proliferující xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx látkou za xxxxxxxxxxx x nepřítomnosti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx lymfocyty xx xxxxx začít xxxxxxx xxx 48 xxxxx xx xxxxxxxxx mitogenem.
Xxxxxxx xx pro xxxxxx koncentraci xxxxxxxxx xxx xxxxxxx; a xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx prokázat, xx xxxxxxx mezi duplicitními xxxxxxxxx jsou minimální (13) (14), je xxxxxxxxxx, aby xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx.
X případě xxxxxxxx xxxx těkavých xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx použití neprodyšně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nádob (15).
1.6.3.2 Xxxx sklízení kultury
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx vystaví xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx po xxxx 3 - 6 hodin a xxxxxx se xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx expozice (12). Pokud xxxx xxx použití xxxxxxxxxxx xxxxxxx i bez xxxx výsledky xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx bez aktivace, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx do xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,5násobku normálního xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx cyklu. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx od xxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nepokládá xx xxxxx, je xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.6.3.3 Příprava chromozómů
Xx buněčné kultury xx xxxxxx Xxxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxxx obvykle xx xxxx 1 - 2 hodin xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxx zpracovává xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x ovlivnění xxxxx xxxxxxxxxxxx roztokem, xxxxxx x odbarvení.
1.6.3.4 Xxxxxxx
Všechny xxxxxxxxx, xxxxxx pozitivních a xxxxxxxxxxx kontrol, xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx, musí být x všech xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx ± 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx 200 xxxxx rozprostřených metafází, xxxxxxxxxxx z xxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx počet analyzovaných xxxxxxxx snížit.
X xxxx xxxxxx testu xx xxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx důležité xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Jelikož xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx buňka, xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými aberacemi. Xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx včetně xxxxxx xxxxx x četnosti x experimentálních x xxxxxxxxxxx kultur. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx obvykle xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Současně xx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx uvedou v xxxxxxx xxxxxxx.
Verifikace xxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx testováním, nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx výsledky bylo xxxxxxxxx x odst. 1.4.3.3. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx rozsah xxxxxxxxxxxx podmínek. K xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx frekvence xxxxx s chromozómovými xxxxxxxxx. Nejprve xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxxxx metody (3) (13). Statistická xxxxxxxxxx xx však neměla xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pozitivního výsledku.
Xxxxxx počtu xxxxxxxxxxxxx xxxxx může xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxxx xxxxxxxxx procesy x xxxxxxxxx numerické chromozómové xxxxxxx. Nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může xxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx inhibovat xxxx xxxxxxxxx xxxxx (17) (18).
Testovaná xxxxx, při xxxxxx xxxxxxx výsledky xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx většina xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, nebo negativní xxxxxxxx, ve výjimečných xxxxxxxxx získaná data xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx ohledu xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vitro xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
XXXXXX X PRŮBĚHU XXXXXX
Xx xxxxxx o xxxxxxx pokusu xx xxxxx uvést xxxx xxxxxxxxx:
Rozpouštědlo / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx buněk,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx cyklu,
- xxxxxxx dárce xxxx, xxx byla xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx lymfocyty, xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxx xxxxx, xx-xx xx xxxxx - xxxxxx udržování xxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Podmínky xxxxxx:
- xxxxx xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx koncentrace x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxx použitých xxxxxxxxxxx x počtu xxxxxx, xxxxxx xxxx. údajů x xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jsou-li x dispozici,
- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xx-xx xx xxxxx
- koncentrace xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx vehikula x xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxxx,
- xxxx působení,
- xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx
- xxx x složení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx hodnocení aberací,
- xxxxx analyzovaných xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx, tj. xxxxxx xxxxxxxxxx, údaje x xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx buněk, xxxxxxxxx index,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xX x osmolalitě xxxxxxxxxxxx xxxxx, jsou-li xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx,
- xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx experimentální x kontrolní xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx ploidie,
xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- souběžné xxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních xxxxxxx, xxxxxx rozpětí, xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.11. MUTAGENITA - TEST XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX V KOSTNÍ XXXXX XXXXX XX XXXX
1. XXXXXX
Metoda xx xxxxxxxxx XXXX XX 475, Xxxxxxxxx Xxxx Xxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 ÚVOD
Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx u xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v buňkách xxxxxx dřeně xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (1) (2) (3) (4). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx dvojího xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xx daná xxxxxxxx látka je xxxxxxx vyvolávat numerické xxxxxxx. Aberace xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, ovšem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx dochází xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx mutace x xxxxxxxx jevy xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx toho, že xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx jevy, xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxxxxx systémech.
X xxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxxx hlodavci. Xxxxxxx xxxxx v xxx xx kostní xxxx, xxxxxxx se xxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx rychle xx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx tkáně xx v xxxxx xxxxx nepoužívají.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rizika, protože xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vivo, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x xxxx xxx xxxxx být xxxx živočišnými xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Test xx xxxx xx xxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx testem xx xxxxx.
Xxxxxxxx-xx doklady x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx reaktivní xxxxxxxxx do xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, není xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2 DEFINICE
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu: strukturální xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx chromozómového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxxxxxxx jako xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx chromatid xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxx)
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx kontinuity xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx předpokladu, xx vzniklá mezera xx xxxxxxxxx chromatidy xx větší, xxx xx xxxxx poškozené xxxxxxxxxx. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx v xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), případně xxxxx xxxxxxxxxx hodnoceného xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxx, xxx xx X-xxxx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxx xx mitózy, xxxxx xxxxxx xxxxx S-fáze. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x 4, 8, 16, ... xxxxxxxxxxxx.
Xxx: xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx chromatidy a x xxxxxxxxxx vybočením xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx index: xxxxx buněk v xxxxxxxx xxxxxx celkovým xxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxxxxx proliferace xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxx xxxxxxxxxx oproti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx buňky.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx hapoidního xxxxx xxxxxxxxxx (x) xxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx 3x, 4x xxx.).
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx: změna xxxxxxxxxxxx struktury xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x fragmenty x výměny.
1.3 PRINCIP XXXXXX
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxx dobu xx působení xx xxxxxx. Před xxxxxxxxx xx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Colcemidem®). X xxxxx xxxxxx dřeně xx pak xxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx, myši x xxxxxx křečci, xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx jiný xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xx běžné xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx měly xxx xxxxxxxxx x x každého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx ve Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx B, xxxxxxx xx měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx dospělí xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx do kontrolní x experimentální xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx toho, xxx x xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx jednoznačně xxxxxxx. Xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.1.4 Příprava xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx stavu, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo vehikulu x xxxxxxxx xx xxxxx. Kapalné xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx třeba xxxxxxxx čerstvé preparáty, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx ji xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx testu
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Používá-li xx xx xxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx použití podpořeno xxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx to xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Xx xxxxxxx xxxxx je xxxxx pro xxxxx xxxxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Je xxxxx zacházet se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx xxxx xxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx detekovatelné xxxxxxx xxx spontánní xxxxxx. Xxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx tak, xxx xxxx účinky xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zakódovaného xxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx xx možné xxxxxxx xxxxxxxx způsobem xxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx odebírat v xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xx xx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxx xxxxx. Příklady xxxxx vhodných xxx xxxxxxxxx kontrolu:
Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
xxxxx nitrosomočovina | 759-73-9 | 212-072-2 |
mitomycin X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx měly xx xxx zařazeny do xxxxx xxxxxxxx intervalů xxxxxxxxxx, xxxxx nejsou x dispozici xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx chromozómových xxxxxxx x o interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se x xxxxxxxxxxx xxxxxxx pouze xxxxx xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxx i xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx historické xxxx xxxxxxxxxxx údaje prokazující, xx xxxxxxx rozpouštědlo, xxxx vehikulum nevyvolává xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx účinky.
1.5 POSTUP
1.5.1 Xxxxx a xxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx v xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx x stejném xxxxxxxxxx xxxxx a použití xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx nejsou x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx testování xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxx například u xxxxxxxxx farmaceutických xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx látku je xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xx jedná x objemnou xxxxx, xxxx se x xxxxxxxxx aplikace dávka xxxxxxxx, například xx xxx xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx nanejvýše xxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxx musejí být xxxxxxx odůvodněné.
Xxxxxx xx odebírají ve xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx. X xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků 1,5xxxxxxx normální xxxxx xxxxxxxxx cyklu (xxxxx xxxx xxxxxxx 12 - 18 hodin) xx podání látky. Xxxxxxx xxxx potřebná xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxx xx kinetiku buněčného xxxxx mohou ovlivnit xxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxx chromozómových xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx po 24 hodinách xx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx látka xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 1,5xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx cyklu po xxxxxxxxx podání látky.
Xxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx® xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxx xx vhodném xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx xx xxxxx interval zhruba 3 - 5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4 - 5 xxxxx. X kostní xxxxx xx xxxxxxxx buňky x xxxxxxxx xx x nich xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx-xx xx studie xx xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx žádné xxxxxx údaje, xx xxxxx ji xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x pokusného xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (5). Při xxxxxxxx toxicity se xxxxxxx xxx první xxxxxx interval xxxxxx xxxxxx tři dávky xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx od maximální xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxx. Xxx pozdější časový xxxxxxxx xxxxxx vzorků xx xxx třeba xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx jako dávka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxx podávání xx účinky xxxx xxxxxxx. Xxxxx, xxx x nízkých xxxxxxxxxxx xxxxxxx vykazují specifickou xxxxxxxxxxx aktivitu, xxxx xxxx hormony nebo xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx stanovení xxxxx xxxxxxx, jež xx xxxxxxxxxxx individuálně xxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx definována xxxx xxxxx, která vede x určitým známkám xxxxxxxx x kostní xxxxx (např. xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx 50 %).
1.5.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx xx dvou xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx x xxxxxxxx se xx xxxxxxx údajů x látkách x xxxxxxxx chemickou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx genotoxicita, nemusí xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx za xxxxxxx xxx dávkových xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx 2&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xx xxx xxx xxxx xxxxxx xx 14 xxx, x 1&xxxx;000 xx/xx xxxxxxxxx xxx xxxx trvání xxxxx xxx 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx úrovně.
1.5.5 Xxxxxxxx látky
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx buď xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Maximální objem xxxxxxxx, která xx xx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100x xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. S výjimkou xxxxxxxxxx xxxx žíravých xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx horší xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx dávkových xxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx kostní xxxx, xxxxxx xx ni xxxxxxxxxxxx roztokem a xxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx na podložní xxxx x obarví xx.
1.5.7 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx cytotoxicity xx x všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxxx xxxxxxxxx index pro xxxxxxxxx 1000 xxxxx x každého xxxxxxx.
X každého xxxxxxx xx xxxxxxxxx minimálně 100 xxxxx. Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx při vysokém xxxxx aberací. Xxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx mikroskopickou xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. Xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx určitého xxxxxx metafází xxxxxxxxx xx xxxxxxx chromozómů, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx od xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx jedinec. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xx jednu buňku x xxxxxxxx buněk xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. U experimentálních x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, jejich xxxxx x xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x registrují xx, xxx obvykle se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx nezahrnují. Xxxxxx-xx xxxxx doklady x xxx, xx obě xxxxxxx reagují xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxx xx xxx pohlaví xxx statistickou xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx výsledků
Ke xxxxxxxxxx pozitivního výsledku xx používá xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx frekvence xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx aberacemi, xxxx xxxxxxxx nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx x jednorázovou xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx odběru xxxxxx. Xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx významnost xxxxxxxx. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx testu se xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (6). Statistická xxxxxxxxxx by však xxxxxx xxx jediným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyjasnit xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx může xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx má xxxxxxxxx xxxxxxxxx mitotické xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace. Nárůst xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx chromozómy xxxx xxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx má schopnost xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (7) (8).
Xxxxxxxxx xxxxx, při xxxxxx xxxxxxx výsledky xxxxxxxxx výše xxxxxxx xxxxxxxx, se v xxxxx systému xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx sice xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx definitivní xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx nejednoznačné xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx několikrát xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx experimentálních xxxxxxxx xxxxxxxxx látka x kostní xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx nevyvolává.
Xx třeba xxxx x xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxx používána, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx cílovou xxxx xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
Zpráva o xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx vehikula,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx.
Xxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx živočišný xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x pohlaví xxxxxxx,
- původ, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x negativní (xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedena,
- xxxxxxxxxx xxxxx velikosti xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x přípravě testované xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, že xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) xx skutečnou dávku (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- metody xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- látka xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx x doba xxxxxxxx,
- metody xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- kritéria xxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx, jimiž xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx nejednoznačná.
Výsledky:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- typ x xxxxx aberací xxx xxxxxxx jedince zvlášť,
- celkový xxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx, xxxxxx průměr x směrodatná xxxxxxxx,
- xxxxxxxx změny xxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- údaje ze xxxxxxxxxx negativních kontrol,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx.
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol,
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.12. MUTAGENITA - IN VIVO XXXXXXXXXXXX XXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Metoda xx xxxxxxxxx OECD XX 474, Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxxxx xxxx in vivo x savců xxxxxx xx xxxxxxxx poškození, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v chromozómech xxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx; xxxx xxxxxxx x tom, xx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx resp. x xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx výsledkem xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx chromozómů.
Xxxx x xxxxxxxxxxxx kostní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jádro je x xxxxx xxxxxxxxx; xxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx mikrojádra je xxxxxxxxx tím, xx xxxxx buňkám xxxxx xxxxx. Xxxxxx četnosti xxxxxxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx je x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxx testu se xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxx tvoří. Analýza xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx x každého xxxxxxxxxxx xxxxx, u xxxxxxx bylo xxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xx xx tento xxxxxxxxx druh xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx způsobujících xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xx přítomnost či xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx), xxxx centromerické XXX x mikrojádru. Xxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxx nezralých (xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx krvi obsahujících xxxxxxxxxx x rámci xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x případě, že xx zvířata xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Tento xx vivo xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxxxxx vhodný x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vivo, xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx XXX, x když xxx mohou být xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx efektem xxxxxxx. Xxxx xx xxxx je xxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx byl předtím xxxxxxx x xxxxxxx xx vitro.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx o tom, xx xx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx tkáně xxxxxxxxx, xxxx použití xxxxxx xxxxx vhodné.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx): xxxxxxx xxxxxxxxxx, xx kterými xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx dělícího xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx dceřiných xxxxx.
Xxxxxxxxxx (mikronukleus): xxxx jádra xxxxxxxx xx jádra buňky (xxxxxxx) xxxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxx reprezentovaná xxxxxxxxxxxx xx fragmenty chromozómů xxxx xxxxxx chromozómy.
Xxxxxxxxxxxx erytrocyt: xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x jenž xx xx xx xxxxxxxxx, polychromních xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx barviva xxxxxxxxxxxx pro ribozómy.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: nezralý xxxxxxxxx, xxxxxxxx stadium, xxx jsou dosud xxxxxxxx xxxxxxxx, takže xxx xxx odlišit xx zralých, normochromních xxxxxxxxxx pomocí barviva xxxxxxxxxxxx xxx ribozómy.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Zvířata xxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx dřeň, zvířata xx ve vhodnou xxxx xx xxxxxxxx xxxxx usmrtí, kostní xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, jež se xxxxxx (1-7). Pokud xx používá periferní xxxx, xxxxxxx se xx vhodné xxxx xx působení xxxxx x připraví se xxxxxx, jež xx xxxxxx (4) (8) (9) (10). X xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxx xxxx od poslední xxxxxxxx do zpracování xxxxx co nejkratší. X xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx přítomnost xxxxxxxxxx.
1.4 XXXXX METODY
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx nebo xxxxxxx; xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxx-xx xx periferní xxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx. Xxx xxxxx xxxxxx jakýkoliv xxxxxx xxxxx xxxx za xxxxxxxxxxx, xx xx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx erytrocyty x xxxxxxxxxx nebo xx x něj xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx citlivost xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Hmotnostní xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx přesahovat ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.1.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.
Xxxxxxx by xxxx xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Xxxxxxxx zvířat
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx jednoznačně xxxxxx x xx xxxx xxxxxxxxx pěti xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x laboratorních xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx toho, xxx x xxx jsou xxxxx xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx xxxxx
Je-li testovaná xxxxx x xxxxxx xxxxx x xx-xx xx možné, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu. Xxxxxxx testované xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. Xx třeba používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx o xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / vehikulum x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx toxické xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx látkou xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx nepříliš známé xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxx použití podpořeno xxxxx x kompatibilitě x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxxx se, xxx xxx xx to xxxxx, bylo xx xxxxxx xxxxx použito xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxx
Do xxxxxxx testu je xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
X xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx nalezena xxxxxxxxxx xx vivo xxx dávkách, xxx xxx očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxx tak, xxx byly xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx totožnost xxxxxxxxxxxx preparátu. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx možné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx testovanou látku x xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Kde xx xx možné, xx xxxxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxx | XXX | EINECS |
xxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 | 200-536-7 |
X-xxxxx nitrosomočovina | 759-73-9 | 212-072-2 |
mitomycin X | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
triethylenmelamin | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx měly xx být xxxxxxxx xx všech časových xxxxxxxxx zpracování, pokud xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx a x interindividuální xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx-xx xx u negativních xxxxxxx xxxxx jeden xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx třeba xxxxxx x neovlivněných xxxxxxx, xxxxxx existují xxxxxxxxxx xxxx publikované xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Používá-li xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx odebraný xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx pouze v xxxxx xxxxxxxxxxxx studií x xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 1 - 3 xxxxx), kde xxxxxxxx údaje xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx kontroly.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x pohlaví xxxxxx
V xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pohlaví (11). Pokud v xxxx, kdy se xxxxxx xxxxxxx, existují xxxxx x stejném xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx stejných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x toxicitě xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx postačující. Xxx, kde xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx na xxxxxxx, jak je xxxx například x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx se test xx zvířatech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx standardní xxxxxx (xxxx. xxxxx, xxx xxxx xxxx dávek x 24xxxxxxxxxx intervalech). Xxx použít xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; v xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xxx xxxxxx, xx xx xxxxxxx toxicita, xxxx xxxx použita limitní xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx do xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx dávku xxxxxxxxx látky, může xx k xxxxxxxxx xxxxxxxx rozdělit, například xx xxx dávky xx xxx xxxxxx x xxxxxxx nanejvýše xxxxxxxx xxxxx.
Test xx může xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
(x) Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx látkou xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxx se odeberou xxxxxxxxx dvakrát, xxxxxx xx dříve xxx xx 24 hodinách x xxxxxxx xx xxxxxxx xxx po 48 xxxxxxxx xx xxxxxx látky, x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xx 24 xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx krve se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx ne xxxxx xxx xx 36 xxxxxxxx od xxxxxx xxxxx, se xxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx nikoli xxxx xxx 72 hodiny. Xxxxx se x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx pozitivní odpověď, xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(b) Xxxxx se xxxxx xxxxxx dvakrát xxxx xxxxxxxx xx den (xxxx. xxx xxxx xxxx xxxxx xx 24xxxxxxxxxx intervalech), odeberou xx vzorky x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx 18 x 24 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx a v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx mezi 36 x 48 hodinami xx posledním podání xxxxx (12).
Xx-xx xx xxxxxxxxxx, mohou xx mimoto xxxxxx x xxxxx odběrové xxxxxxxxx.
1.5.3 Dávkování
Provádí-li xx xxxxxx xx xxxxxxxx rozpětí toxicity, xxxxxxx nejsou k xxxxxxxxx žádné vhodné xxxxx, je třeba xx provádět x xxxx laboratoři xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx x hlavní xxxxxx (13). Při xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorků xxx dávky xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx nízké, xxxx nulové. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx použít xxxxx nejvyšší dávku. Xx je definována xxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx letální. Xxxxx, xxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx kritérií xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx se xxxxxx xx případu. Xxxxxxxx xxxxx může xxx také xxxxxxxxxx xxxx dávka, xxxxx xxxx k xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxx nezralých xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx resp. xxxxxxxxx krvi).
1.5.4 Limitní xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 mg/kg hmotnosti x xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx den xxxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné xxxxxxx xxxxxx x jestliže xx xx základě xxxxx x xxxxxxx x podobnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxx provedena xxxx studie xx xxxxxxx xxx dávkových xxxxxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 2000 mg/kg xxxxxxxxx xx den xxx době xxxxxx xx 14 dnů, x 1000 mg/kg xxxxxxxxx při xxxx xxxxxx xxxxx než 14 xxx. Xxxxx xxxxxxxxx humánní xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx látka se xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx sondou, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. V xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx expozice. Xxxxxxxxx objem kapaliny, xxxxx xx dá xxxxxx xxxx injekcí xxxxxxxx vpravit, závisí xx velikosti xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 ml/100 x hmotnosti; vyšší xxxxx musí být xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx / xxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx dřeň vyjme x xxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx metodami. Periferní xxxx se získává x ocasní žíly xxxx jiné xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxx xx okamžitě za xxxxxxxxx xxxxx obarví (8) (9) (10), xxxx se zhotoví xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx obarví. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro XXX (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxx (14) xxxx Xxxxxxx 33258 s xxxxxxxxx-X (15)) se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx použití barviva, xxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx. Xxxx výhoda xxxxxxxxx, že xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxx. Xxxxxx). Xxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx - například kolony xx xxxxxxxx celulózy x odstranění buněk x jádrem (16) - xxxxx xxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx analýzu mikrojader.
1.5.7 Xxxxxxx
U každého xxxxxxx xx stanoví xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxx (xxxxxxx + xxxxx). X tomuto xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx minimálně 200 xxxxxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx 1000 xxxxxxxxxx (17). Všechny xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) xx před mikroskopickou xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 2000 xxxxxxxxx erytrocytů x xxxxxxxxx xx xxxxx erytrocytů x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx informace xxx xxxxxx xxx, xx xx mikrojádra xxxxxxxxx xx zralých xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxx nezralých erytrocytů x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 20 % xxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxxx zvířata exponována xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxx týdnů xxxx xxxxx, lze xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x minimálně 2000 xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx jedince. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx systémy xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx analýza - xxxx xxxxxxxxx), pokud xxxx zdůvodněny x xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zvíře. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxx zaznamená počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx erytrocytů. Xxxxx byl xxxx xxxxxxxx kontinuálně xx xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxx, je xxxxx xxxxx xxxx xxxxx o zralých xxxxxxxxxxxx (pokud byly xxxxxxxxxx). Xxxxx nezralých xxxxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx erytrocytů x xxxxxxxx procento xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx-xx žádné xxxxxxx x xxx, xx xxx xxxxxxx xxxxxxx rozdílně, je xxxxx údaje xx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxx sloučit.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx několik xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx počtu xxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx mohou xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (18) (19). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx však xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jejímž xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, se x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za nemutagenní.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx sice xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, x ojedinělých xxxxxxxxx xxxx nelze xx xxxxxxxxx xxxxxxx dát xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx nejednoznačné xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx experiment xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx chromozómového xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mikrojader v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx, jaká xx xxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx používána, xxxx xxxxx specifickou cílovou xxxx xxxxxxx (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xx xxxxxx x průběhu xxxxxx xx xxxxx uvést xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx vehikula
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx známa.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, věk a xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) kontroly,
- xxxxx xx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx dávky,
- xxxxxxxxxxx o přípravě xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx x ověření, xx xx xxxxx dostala xx xxxxxxxxx oběhu xxxx xx xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx/xxxxx xxxx (xxx) na xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx hmotnosti),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx a xxxx,
- xxxxxxxx xxxxx podávání testované xxxxx x odběru xxxxxx,
- metody xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x mikrojádry,
- xxxxx analyzovaných xxxxx u xxxxxxx xxxxxxx,
- kritéria, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxx pozitivní, xxxxxxxxx xxxx nejednoznačná.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- podíl xxxxx nezralých erytrocytů x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx zvlášť,
- xxxxxxxx xxxxx ± xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx každou skupinu,
- vztah dávka - xxxxxx, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzy x metody,
- xxxxx xx souběžných x historických negativních xxxxxxx,
- xxxxx xx souběžných pozitivních xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
B.13/14. XXXXXXXXXX - XXXX XXXXXXXXXX XXXXXX X BAKTERIÍ
1. XXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxx XXXX TG 471, Xxxxxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxx xxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx k detekci xxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx typhimurium (xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx) a xxxxx Escherichia coli (xxxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxx systémů xxx detekovat genové xxxxxx vzniklé mechanismem xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx nebo několika xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx bakteriálních kmenů (1) (2) (3). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxx, že xx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx přítomné v xxxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx bakterie syntetizovat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx změněná bakteriální xxxxx xx xxxxxxxxxx xx základě své xxxxxxxxxx růst xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zkušební xxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxx u xxxxxxx xxxxxxxx xxxx genetických xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxx mutace x onkogenech x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxx x člověka a xxxxxxxxx zvířat roli xxx xxxxxx nádorů. Xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx jsou xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX v xxxxxxx xxxxxxx, zvýšené propustnosti xxxxx xxx velké xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx posílení takových xxxxxxx reparace XXX, xxx xxxx náchylné x xxxxxx. Specifita xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx x xxxxxxxxx velmi xxxxxxxx databáze xxxxxxxx xxx širokou xxxxx xxxxxxxx x byly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x různých fyzikálně-chemických xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx kmenů Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (histidinu xxxx. tryptofanu), xxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, který xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx jsou látky xxxxxxxxxxx xxxxx bází x XXX. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx xx místě xxxxxxx xxxxxx xxxx xx jiném xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx vyvolávající xxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx odebrání xxxxxxx xxxx více xxxx xxxx x XXX, xxxx xx xxxx čtecí xxxxx x XXX.
1.3 VÝCHOZÍ XXXXX
V bakteriálním xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx buňky, které xx od xxxxxxx xxxxx liší x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx struktuře x xxxxxxxxx opravy XXX. Xxxxx xx xxxxx xxxxxx vyžadují exogenní xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx dokonale xxxxxxxx xxxxx podmínky xx xxxx, xxxxx test xxxxxxxxxxx přímé informace x mutagenní a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx dané xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx test xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx používá jako xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx genové xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx v xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx v xxxxxx xxxxxxx mutagenní xxxxxxxx. Existují xxxxx x příklady mutagenních xxxxx, jež xx xxxxx testem neodhalí; xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx být specifická xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx veličin, xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo rozdíly x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx reverzní xxxxxx zvyšují, xxxxx xxxx k xxxx, xx xx mutagenní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx může xxx nevhodný xxx xxxxxx xxxxx chemických xxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx některé xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx antibiotika) a xxxxx, o xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xx, xx specificky xxxxxxxx xxxxxxxxxx systém xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx topoizomerázy xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx); v xxxxxxx xxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx testy na xxxxxx x xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx, jež xxxx xxx xxxxx xxxxx pozitivní, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx, ovšem xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx; xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x existují xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx nejsou, protože xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx přítomnosti a xx nepřítomnosti xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx klasické xxxxxxx xxxxxx "xxxxx incorporation" xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx agarem x vylije xx xxxxx x minimální xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x smísí x xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxx xxxx xxxxxxxx xx xxx xx xxx xxx po inkubaci xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kolonií xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx. X nich nejběžnější xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ["xxxxx incorporation"] (1) (2) (3) (4), xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2) (3) (5) (6) (7) (8), xxxxxxxxxx xxxxxx (9) (10) x xxxxxxxxx xxxxxx (11). Xxxx xxxx popsány jejich xxxxxxxxxx xxx testování xxxxx nebo xxx (12).
Xxxxxxx popsané x xxxxx xxxxxx xx týkají hlavně xxxxxx plate incorporation x metody xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Xxxxxxx xxxxx xx detekují xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxx se o xxxxxxxx třídy, xxx xxxxxxx alifatické xxxxxxxxxxx x krátkým řetězcem, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx alkaloidy, xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (3). Xxxx bylo xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx standardních xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Na xx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx "xxxxxxxxx xxxxxxx", x xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx jiných xxxxx. Byly xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx xxxxxxx" (xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx pro xxxxxx xxxxxxx xxxxxx): azobarviva x xxxxxxxxxxxxxxx (3) (5) (6) (13), xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx (12) (14) (15) (16) x xxxxxxxxx (17) (18). Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.5. POPIS METODY
1.5.1 Xxxxxxxx
1.5.1.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx bakteriální xxxxxxx xx vypěstují xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stacionárního stadia xxxxx (xxxxxx 109 xxxxx/xx). Kultury v xxxxxxx stacionárním xxxxxx xx nepoužívají. Xxxxxxxx xx, aby kultury xxxxxxx xxx experiment xxxxxxxxxx xxxxxx titr xxxxxxxxxxxxxxx bakterií. Xxxx xx xx prokázat xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx křivek, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx miskách.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 37xX.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx bakteriálních xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx čtyři kmeny X. typhimurium (XX 1535; TA 1537 xxxx TA97a xxxx 1X97; TA98; a XX100); u nichž xxxx prokázána xxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnost xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx čtyři xxxxx X. typhimurium xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx bází GC x je známo, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx látky se xxxx xxxxxxxxx pomocí xxxxx X. xxxx XX2 xxxx X. xxxxxxxxxxx XX102 (19), xxxxx mají xx xxxxxxxxx reverzním xxxxx xxx bází AT. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx:
- S. xxxxxxxxxxx XX1535 x
- X. xxxxxxxxxxx XX1537 xxxx XX97 xxxx XX97x x
- X. xxxxxxxxxxx XX98 x
- X. xxxxxxxxxxx XX100 x
- X. xxxx XX2 xxxX xxxx X. coli XX2 xxxX (xXX101) xxxx X. xxxxxxxxxxx TA102.
X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx křížové xxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxx XX102 xxxx xxxxxx DNA reparačně xxxxxxxxxxxx xxxx X. xxxx (např. X. xxxx XX2 xxxx X. coli WP2 (xXX101)).
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx kultury, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx pro xxxx (xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx S. xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx X. xxxx). Podobně je xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx fenotypické charakteristiky, x xx: xxxxxxxxxx xx nepřítomnost X-xxxxxx xxxxxxxx tam, xxx xx xxxxxxxx x xxxxx (např. xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx TA98, TA100 x XX97x nebo XX97, XX2 uvrA (xXX101) x xxxxxxxxxx xxxx ampicilinu + xxxxxxxxxxxx u xxxxx XX 102); xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (tj. xxx xxxxxx u X. xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxX xxxxxx u X. xxxx nebo xxxX xxxxxx x S. xxxxxxxxxxx pomocí citlivosti xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) (2) (3). Použité xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx revertujících xxxxxxx xx frekvenčním xxxxxxx očekávaném xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
1.5.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xx vhodný xxxxxxxxx xxxx (např. x Vogelovým-Bonnerovým xxxxxxxxxx xxxxxx X a xxxxxxxx) x vrchní xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (1) (2) (9).
1.5.1.3 Metabolická xxxxxxxx
Xxxxxxxx se xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx, xxx za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx kofaktorem xxxxxxxxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) připravená z xxxxx hlodavců po xxxxxxx enzymů látkami, xxxx xx Xxxxxxx 1254 (1) (2) xxxx kombinace xxxxxxxxxxxxx x ß-xxxxxxxxxxxx (18) (20) (21). Xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx obvykle xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 30 % x/x xx směsi S9. Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xxxxx záviset xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx post-mitochondriální xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metabolické xxxxxxxx (6) (13).
1.5.1.4 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx mohou xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx ředí. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx prokazují, xx xxxxxx delší xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.5.2 Podmínky xxxxx
1.5.2.1 Xxxxxxx kmeny (viz 1.5.1.1.)
1.5.2.2 Koncentrace
Xx xxxxxxxxx, která je xxxxx xxxx x xxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxx použitého množství xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x konečné xxxxx, xxxxx se k xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x nerozpustnost x xxxxxxxxxx experimentu. Xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx snížením xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, vymizením xxxx zmenšením xxxxx xx pozadí xxxx xxxxxx stupně přežití xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx se může xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx skutečných xxxxxxxxx podmínek, xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxx maximální xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx u xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx látek 5 mg/misku xxxx. 5 µl/misku. X xxxxxxxxxxxxxxx látek, xxx x těchto xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx mělo být x konečné xxxxxxx xxxxx nerozpustných. Xxxxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxxxxxxx xxx za xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µx/xxxxx, xx xxxxxxx xx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Sraženina xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx koncentrací xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. √10) mezi xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx experimentu. Zkoumá-li xx xxxxxxxxxxxx závislost, xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx menší. Testování xx koncentrací xxxxxxx xxx 5 xx/xxxxx xxxx. 5 µl/misku xxxxxxxx v xxxxx, xxxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxx podstatné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.5.2.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx test xxxx zahrnovat x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulum) xxxxxxxx, xxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx testu.
U xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx látka xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxx xxxxx použitého typu xxxxxxxxxxxxx kmene.
Xxxxxxxx xxxxx, xxx jsou xxxxxx pro pozitivní xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | EINECS |
9,10-xxxxxxxxxxxxxxxx | 781-43-1 | 212-308-4 |
7,12-xxxxxxxxxxxx[x]xxxxxxxx | 57-97-6 | 200-359-5 |
xxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
2-xxxxxxxxxxxxx | 613-13-8 | 210-330-9 |
xxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx cyklofosfamidu | 6055-19-2 |
Xxxxxxxxxxx xxxxx xx vhodnou xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
Xxxxx | CAS | XXXXXX |
Kongo xxxxxx | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx indikátor xxxxxxxxx xxxxx X9. Xxxxx xx 2-aminoantracen xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx X9 charakterizovat xxxx xxxxxxxxx, který xxxxxxxx metabolickou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, např. xxxx[x]xxxxxxx, dimethylbenzantracenenm.
Xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx pozitivní kontrolu x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolické xxxxxxxx, uvádí tato xxxxxxx:
Xxxxx | XXX | XXXXXX | |
Xxxx xxxxx | 26628-22-8 | 247-852-1 | XX 1535 x XX 100 |
2-nitrofluoren | 607-57-8 | 210-138-5 | TA 98 |
9-aminoakridin | 90-45-9 | 201-995-6 | XX 1537, XX 97 x XX 97a |
XXX 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | XX 1537, TA 97 a XX 97x |
xxxxx-xxxxxxxxxxxx | 80-15-9 | 201-254-7 | TA 102 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 | XX uvrA x XX 102 |
X-xxxxx-X-xxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxxx | 70-25-7 | 200-730-1 | XX2, XX2xxxX a XX2xxxX (xXX101) |
4-xxxxxxxxxxxxx-1-xxxx | 56-57-5 | 200-281-1 | XX2, XX2xxxX x XX2xxxX (xXX101) |
Xxxxxxxxxxxx (AF2) | 3688-53-7 | kmeny xxxxxxxxxx plazmidy |
X xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx třídě.
Xx xxxxx použít x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, bez xxxxxxxxx xxxxx, se kterými xx xxxxx zachází xxxxxx jako xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx použijí x negativní xxxxxxxx xxx ovlivnění testovanou xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx kontrolní údaje xxxxxxxxxxx, xx zvolené xxxxxxxxxxxx nevyvolává xxxxx xxxxxx či mutagenní xxxxxx.
1.5.3 XXXXXX
Xxx xxxxxxxx miskové metodě (1) (2) (3) (4) xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 0,05 xxxx 0,1 xx testovaného xxxxxxx, 0,1 xx xxxxxxx bakteriální xxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx 108 xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) x 0,5 xx sterilního xxxxx x 2,0 xx xxxxxxxx agaru. X xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx aktivací se xxxxxxx xxxx 0,5 xx xxxxxxxxxxx aktivační xxxxx xxxxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxx 5 - 30 % x/x x metabolické xxxxxxxxx xxxxx) x 2,0 xx vrchního xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx /xxxxxxxxxx roztokem. Xxxxx každé zkumavky xx xxxxxxx x xxxxxx xx povrch xxxxx x minimálním xxxxxx. Vrchní agar xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Při xxxxxxxxxxxx metodě (2) (3) (5) (6) xx testovaná látka / xxxxxxxxx roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx kmenem (xxxxxxxxxxx xxxxxx 108 životaschopných xxxxx) a sterilním xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systémem (0,5 xx) xxxxxxx xx xxxx 20 min xxxx xxxx při 30 - 37 xX; xxxxx xx xxxxx s xxxxxxx xxxxxx x nalije xx xxxxx s xxxxxxxxxx agarem. Xxxxxxx xx xxxx 0,05 xxxx 0,1 xx xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,1 xx xxxxxxxx x 0,5 xx směsi X9 nebo xxxxxxxxxx xxxxx s 2,0 xx vrchního xxxxx. Xxxxxxxx xx během xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx adekvátní xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxx dávku očkují xxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx zdůvodněno. Xxxxx-xx xxxxxxx ke xxxxxx misky, xxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx nádobách (12) (14) (15) (16).
1.5.4 INKUBACE
Xxxxxxx xxxxx x rámci xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx při xxxxxxx 37 xX pod xxxx 48 - 72 xxxxx, načež xx xxxxxxxxx revertantní xxxxxxx xx každé xxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx počet xxxxxxxxxxxxx kolonií xx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xx uvede počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx x xxxxxxxxx kontroly (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx kontrola xxx působení, byla-li xxxxxxx), xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pro xxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (resp. xxx xxxxxxxx rozpouštědlo) xx uvedou xxxxx xxx xxxxxxxxxx misky x xxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx misku včetně xxxxxxxxxx odchylky.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Nejednoznačné xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xx musejí xxxxxxxx xxxxxx xx případu. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xx zdůvodnit. X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx parametrů xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxx posuzovaných xxxxxxxx. Xx studijním xxxxxxxxxx, které xx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx ("xxxxx xxxxxxxxxxxxx" xxxx preinkubace x xxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 VYHODNOCENÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX
Ke xxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx xxxxxxxx několik kritérií, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx a/nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx počtu revertantních xxxxxxx xx jednu xxxxx při jedné xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx jednoho xxxxx s metabolickým xxxxxxxxxx systémem nebo xxx něj (23). Xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jako xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx možno xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (24), statistická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx pozitivní xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx x tomto xxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx však xxxxx xx získaného souboru xxx vyvodit x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx závěr. Výsledky xxxxx xxx stále xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x když xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky bakteriálního xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx x genomu Xxxxxxxxxx typhimurium xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx není xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx rozpouštědla,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx rozpouštědle, pokud xx xxxxx.
Kmeny:
- xxxxxxx kmeny,
- xxxxx buněk x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx kmene.
Podmínky xxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxx (v xx xxxx μx) xx xxxxxxxxxxx volby xxxxx a počtu xxxxx xxx jednu xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx,
-xxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxxxxxx),
- postupy xxxxxxxx (xxxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- známky srážení,
- xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx počet revertantních xxxxxxx xx jednu xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx-xxxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných odchylek,
- xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx výsledků.
Xxxxxx.
B.15. XXXXXX XXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mohou xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx chemickými xxxxxxx bez a x metabolickou xxxxxxxx.
Xxxx využívány xxxxxxx xxxxxxx systémy x xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx x červených, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxx-1, xxx-2) xx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx systémy, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx canavaninu a xxxxxxxxxxxxx.
Nejlépe xxxxxxx xxxxxxxx mutační xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx haploidního xxxxx XX 185-14 X x xxxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 2-1, xxx 4-17, xxx 1-1 x xxx 5-48. Xxxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxx mutagenů typu xxxxxx xxxx, které xxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxx místě, nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. XX185-14X xxxx xxxxxx xxx 1-7 xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mutacemi v xxxxxx místě a xxxxxx xxx 3-10, xxxxx xx revertován xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
U xxxxxxxxxxx kmenů S. xxxxxxxxxx xx jediným xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X7, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx xxx 1-92.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx vhodného xxxxxxxx. X organických xxxxx xx vodě xxxxxxxxxxxxx se xxxx xxxx roztok vyšší xxx 2 objemová % x organických xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx (DMSO). Finální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivnit xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx růstu.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x přítomnosti, tak x nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx frakce xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx indukujících xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx postupů xxxx xxx rovněž vhodné xxx metabolickou xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Haploidní xxxx XX 158-14X x xxxxxxxxx xxxx X7 xxxx nejužívanější xxx xxxxxx genových mutací. Xxxx xxxxx mohou xxx xxxxxx vhodné.
1.2.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx užívána xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mutační xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Xx xxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxx zvolených koncentrací. X xxxxxxxxx látek xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Látky xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx až po xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxx xxxxx netoxické, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx po xxxx xxx při 28 xx 30 xX xx xxx.
1.2.2.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací
Frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx tří xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x u xxxxxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx markery xxxx xxx 3-10 s xxxxxx xxxxxxx rychlostí xxxx být xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx údaje.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx kmenů X. xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx v tekutém xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx buňky. Xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx rostoucích xxxxxxx: 1-5 x 107 xxxxx/xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 xX xx třepání. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx systému xx xxxxxxx x průběhu xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx inkubaci xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx buňky x buňky x xxxxxxx xxxxxxxx mutací.
Xxxxxxxx xx první xxxxx xxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx druhý xxxxx x buňkami xx stacionární xxxx. Xxxxxxxx je xxxxx xxxxx pozitivní, xx xxxxxxxx dalším xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx kolonií, xxxxx xxxxxx, přežívajících xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx nezávislým xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx vyhodnoceny vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx informace x:
- použitých xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx testu: xxxxx ve stacionární xxxx nebo xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x trvání inkubace, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx expozice, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly,
- xxxxx kolonií, xxxxx xxxxxx, přežívajících xxxxx x frekvenci xxxxxx, xxxxxx xxxxx a xxxxxx, pokud xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.16. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může xxx detekována xxxx xxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxx x jeho xxxxxxxxxxx) x xxxxxx xxxx. První xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx produkty, xxxxxx xxxxx xxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Překřížení je xxxxxx testováno xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx vzniklých x xxxxxxxxxxxxxxx kmenů, xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xx základě xxxxxx xxxxxxxxxxxxx revertant vzniklých x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxx xxx xxxxx defektní xxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx kmeny xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx X4 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 2 x xxx 5), D7 (xxxxxxxxxxxxxx v xxx 5), BZ34 (xxxxxxxxxxxxxx x arg 4) x XX1 (xxxxxxxxxxxxxx x xxx 4 x trp 5). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x růžové xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x X5 xxxx D7 (xxxxx xxxxxx xxxx mitotickou xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx x xxx 1-92). Xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx 2.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Roztoky xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx těsně xxxx xxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx látek xx xxxx nerozpustných se xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx 2 xxxxxxxx % v xxxxxxxxxxx rozpouštědlech, xxxx xx etanol, aceton xxxx dimetylsulfoxid (DMSO). Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a charakteristiky xxxxx.
Metabolická aktivace
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx působení testovaných xxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx exogenního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx systému. Xxxxxxxxxx užívaným xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx indikujících xxxxxx x doplněná xxxxxxxxx. Xxxxx jiných druhů, xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx může xxx xxxxxx vhodné xxx xxxxxxxxxxxx aktivaci.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx X4, X5, D7 a XX1. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.2 Média
Xxxxxxxxxxxx kultivační média xxxx užívána xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk x frekvenci mitotické xxxxxxxxxxx
1.2.2.3 Negativní a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxx specifickou xxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxxxxx
Má xxx xxxxxxx nejméně 5 xxxxxx zvolených xxxxxxxxxxx. Xxxx být brán xxxxx xx cytotoxicitu x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nesmí mít xxxx xx životnost xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx nemá xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx redukovat xxxxxxx xxx 5 - 10 %. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mají xxx xxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx, ve vodě xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxx mohou být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx buď xxxxxxxxxxx xxxx, nebo xxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 h. Xxxxxxx xxxxxxxxxx ovlivňované xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Podmínky xxxxxxxx
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xx tmě xx xxxxx xx xxxx xxx xxx 28 - 30 xX. Xxxxx použité xxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx sektorů xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx x xxxxxxxxxx (xxx 4 oC) xx xxxxx 1 - 2 dny xxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxx utvořit odpovídající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Spontánní xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxx xxx užity xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mutací x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx normálních xxxxxx.
1.2.2.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx koncentraci x testu xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxx určení životnosti xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx homozygozity xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx být xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxx dosaženo dostatečného xxxxx xxxxxxx.
1.2.2.8 Xxxxxx
Xxxxxxxxx X. xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxx test x xxxxxxx prostředí x xxxxxxxx buď stacionární, xxxx xxxxxxxx buňky. Xxxxxxxx pokusy mají xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx buňkách. 1-5 x 107 xxxxx/xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 18 x. xxx 28 xx 30 xX xx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx přidáno v xxxxxxx ovlivnění, pokud xx to potřebné.
Xx xxxxxxxx ovlivnění xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx kultivační xxxxxx. Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x buňky x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx pokus xxxxxxxxx, xx xxx proveden xxxxx xxxxx x xxxxxxx xx stacionární xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xx potvrzen xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx rekombinací, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx potvrzeny x xxxxxxxxxx experimentu.
Xxxxx xxxx xxx vyhodnoceny xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- použité xxxxx,
- podmínky xxxxx: xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x trvání xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx ovlivnění, teplota xxx ovlivnění, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx kolonií, xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxx x frekvence xxxxxxxxxxx, vztah xxxxx x účinku, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx dat,
- diskusi výsledků,
- xxxxxxxxxxx výsledků.
B.17. MUTAGENITA - XXXX XXXXXXXX MUTACÍ X XXXXXXX BUŇKÁCH XX VITRO
1. XXXXXX
Xxxxxx je xxxxxxxxx XXXX XX 476, Xx Vitro Mammalian Xxxx Xxxx Xxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx in xxxxx xx xx používat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx lymfomové buňky X5178X, xxxxx XXX, XXX-XX52 x X79 xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx TK6 (1). X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx mutace x xxxxxxxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxxxxx-xxxxxx fosforibosyltransferáze (XXXX) x x xxxxxxxxxx xxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Testy mutací x XX, HPRT x XPRT xx xxxxxxxx xxxxx spektra xxxxxxxxxxx změn. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XX x XXXX může xxxxxxx xxxxxxx i takové xxxxxxxxx xxxxx (např. xxxxx xxxxxx), xxxxx xx xx lokusu XXXX xxxxxxxxxx X xxxxxxxx (2) (3) (4) (5) (6).
X xxxxx xx xxxxxx xxxxxx x savčích xxxxxxx xx vitro xx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx buněčných xxxxx. Při volbě xxxxx xx xxxxx x úvahu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx kultury x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx metabolické xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedokáže xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx vivo xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx podmínek, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mutagenitu. X pozitivním xxxxxxxxx, xxx xxxxxx důsledkem xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx pH, osmolality xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (7).
Xxxxx xxxx se xxxxxxx xx screeningu xxxxxxx savčích xxxxxxxx x karcinogenů. Xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, neexistuje xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxx testem x xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx korelace xxxxxx na xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx stále více xxxxxxx xxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxx nějakým xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, který x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (6).
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxx výchozího xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xx změně xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx proteinu.
Mutageny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx páru xxxx x XXX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): xxxxx, jež xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxx x DNA.
Doba xxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxx, během xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx buněk xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx celkový xxxx: xxxxxx počtu xxxxx x xxxx x xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xxxxxxxxxx xx xxxx součin xxxxxxxxx suspenzního růstu (x porovnání x xxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx růst: xxxxxxx nárůst počtu xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx (xxxxxxxxx): xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx v době xxxxxxxxx xx miskách x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx: xxxxxxxxx účinnost (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xx konci xxxxxxxx xxxxx; vyjadřuje xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx buněčné xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx XX+/- → XX-/-, xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx působení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx trifluorthymidinu (XXX). Xxxxx xxxxxxxxxxx thymidinkinázu xxxx xxxx XXX xxxxxxx, což způsobuje xxxxxxxx xxxxxxxxx metabolismu x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx XXX proto xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nemohou. Xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx HPRT nebo XXXX xxxxxxxx rezistentní xxxx 6-thioguaninu (XX) xxxx 8-xxxxxxxxxx (AG). Xxxxx je xxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx se selekčním xxxxxxxx analyzována x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx mutace x xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx zvážit. Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx každé xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky vůči xxxxxx s mutacemi x bez xxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx činidlem, xx třeba xxxxxxxx, xx je xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx xxxxxx (8).
Xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx vhodnou dobu xxxxxxx působení testované xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx i xxx xx x xxxxxxxxx xx xx stanovení xxxxxxxxxxxx a k xxxxxxx fenotypické xxxxxxx xxxx xxxxxxx mutantů (9) (10) (11) (12) (13). Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx obvykle xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (přežití) (xxxxxxx xxxxxxxxxx) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nárůstu kultur xx xxxxxxxx látky. Xxxxxxx se ponechají x růstovém médiu xx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx daný xxxxx a xxx xxxxx, aby xxxxx xxxxx k xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx počtu xxxxx v médiu xxxxxxxxxxx xxxxxxxx činidlo xxx detekci xxxxxxxxxx xxxxx a x xxxxx xxx tohoto xxxxxxx, xx stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx), (životnosti). Po xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx spočítají. Xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxx xxxxxxx mutovaných xxxxx x xxxxxxxxx médiu x x xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Buňky
Dá xx xxxxxx celá xxxx xxxxxxxxx typů, včetně xxxxxxxx xxxxx X5171X, XXX, XXX-XX52, X79 x XX6. U xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, vysoká xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx efficiency) x stabilní frekvence xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx se xxxxxxxxxx, xxx nejsou xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx; infikované xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx měl xxxxxxxx citlivost a xxxxxxxxxxx (xxxxx). Xxxxx xxxxx, xxxxx kultur x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxxxxxxxx počet xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx se x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xx dán xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Obecným xxxxxxxx xx, xx xxxxx buněk má xxx minimálně xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx frekvence xxxxxxxxxxx mutací. Xxxxxxxxxx xx však použít xxxxxxx 106 buněk. Xxxx by být x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx vhodná xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx xx xxx xxxx volí podle xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxxx kultivace zajišťovaly xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx periody x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kolonie.
1.4.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx namnoží xx zásobních xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 xX. Před xxxxxxxxxx xxxxx, je třeba xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xx xxxxxxxxxx látkou xxxxxx x přítomnosti x x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx frakce (X9) xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, ovlivněná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx Aroclor 1254 (15) (16) (17) (18), xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx a β-xxxxxxxxxxxx (19) (20).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mitochondriální xxxxxx x médiu xxxx xxxxxxx 1 - 10% x/x. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xxxx xxxxxxx na xxx, jakého xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx případech xx vhodné xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx koncentracích.
Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx modifikované xxxxxxx xxxxx exprimující specifické xxxxxxxxx enzymy. Xxxxx xxxxxxxxx linií xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx (xxxx. vztahem xxxxxxxxx cytochromu P450 x xxxxxxxxxxx testované xxxxx).
1.4.1.5 Xxxxxxxx testované xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx stavu, látka xx xxxx xxxxxxxxx xx buňky rozpustí xxxx xx xxxxxxxx xxxx suspenze xx xxxxxxx rozpouštědle x xxxxxxxx naředí. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx systému xxxxxxxx xxxxx xxxx xx předtím ředí. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx prokazují, xx xxxxx xxxxxxxxxx neovlivňuje xxxxxx xxxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.2.1 Rozpouštědlo / xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx existovat podezření, xx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx narušovat xxxxxxxxx xxxxx a aktivitu X9. Používá-li xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx prokazujícími xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxx xxx, xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě xxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx xxxx. Je-li xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlo xxxxx bezvodé. Voda xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.2 Xxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x změny xX xxxx. xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xx v xxxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž se xxxxxxx xxxxxx indikace xxxxxxx integrity x xxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx růst. Xx vhodné stanovit xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x předběžných xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx x cytotoxicitě, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx pokrývat xxxxxx xx xxxxxxxxx xx nízké xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx znamená, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, který xxxx xxxx hodnotami 2 a √10. Xxxxxxx-xx maximální xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxx xx vést x xxxxxxxxxxx přežití (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx růstu x 10-20 %, xx xxxx xxxx xxx 10 %. X xxxxxxxxx netoxických xxxxx xx maximální xxxxxxxxx xxxxx měla xxx nejnižší z xxxxxx 5 xx/xx, 5 μl/ml a 1,01 X.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek, jež xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx, při xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxx nejvyšší použitá xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxx xxxxxxxxxxxx xx finálním kultivačním xxxxx xx konci xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx. Může xxx xxxxxx xxxxxxxxxx rozpustnost xx xxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx během expozice x xxxxxxxx přítomnosti xxxxx, X9, séra xxx. xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxx xx překážku xxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.4.2.3 Xxxxxxxx
X rámci xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx i xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx) xxxxxxxx, x xx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tak bez xx. Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxx xxx pozitivní xxxxxxxx xxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx aktivaci x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx patří xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx | Xxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxxxxx | ||||
Xx | XXXX | xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx nitrosomočovina | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 |
TK (xxxx x velké xxxxxxx) | xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 66-27-3 | 200-625-0 | |
XXXX | xxxxx metansulfonát ethyl xxxxxxxxxxxxxxx | 62-50-0 759-73-9 | 200-536-7 212-072-2 | |
Xxx | XXXX | 3-xxxxxxxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 56-49-5 62-75-9 57-97-6 | 200-276-4 200-549-8 200-359-5 |
XX (malé x xxxxx xxxxxxx) | xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx[x]xxxxx 3-xxxxxxxxxxxxxxxx | 50-18-0 6055-19-2 50-32-8 56-49-5 | 200-015-4 | |
200-028-5 200-276-5 | ||||
XXXX | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxx xxxxxx koncentrace X-9) | 62-75-9 | 200-549-8 | |
xxxxx[x]xxxxx | 50-32-8 | 200-028-5 |
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxx vhodné látky; xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx historickou údaje x 5-xxxx-2'-xxxxxxxxxxxx (XXX 59-14-3, xxxxx XXXXXX 200-415-9), lze xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxx, xxx xx xx možné, xx vhodné použít xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxx ze stejné xxxxxxxx skupiny.
Pro každý xxxxxx interval xxxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx které xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx rovněž xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx ovlivnění, ledaže xxxxxxxx historické xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx buňky xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.4.3 Xxxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxxx buňky xx xxxxxx testovanou xxxxxx jak s xxxxxxxxxxxx aktivací, tak xxx xx. Expozice xxxxxxx po xxxxxxx xxxx (xxxxxxx xx xxxxxx xxxx 3-6 xxxxx). Doba xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx jeden xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx kultury xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx. Používá-li xx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx koncentrací tak, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kultur x xxxxxxx (xx. xxxxxxxxx xxx analyzovatelných xxxxxxxxxxx). Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (rozpouštědlem/vehikulem) xx xxxxxxxxx duplicitní.
V xxxxxxx plynných xxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx x xxxxx vhodné postupy, xxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (21, 22).
1.4.3.2 Xxxxxxxxx přežívání, xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx promyjí x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx cytotoxicity xxxxxxxxxx klonovací účinnosti - xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx celkového xxxxx.
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx expresi xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (HPRT x XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxx 6 - 8 dní, TK xxxxxxxxx 2 dny). Xxxxx se xxxxxxx x xxxxx x x xxx selekčního xxxxxxx xxx stanovení xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx účinnosti. Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx životnosti (používané x xxxxxxx četnosti xxxxxxx) inokulací buněk xx selekční xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxx v xxxxx X5178X XX+/- xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx kultur (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx velikost xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx. Měření xx xxxx provést x xx xxxxxxxx s XX6XX+/-.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx data xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx cytotoxicity x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx u experimentálních x kontrolních xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx X5178XX+/- se kolonie xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a velkých xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx testované xxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx x cytogenetické xxxxxxxxxx velkých i xxxxxx kolonií byly xxxxxxxx prostudovány x xxxxxxxxxxx (23) (24). Xxx xxxxx XX+/- xx kolonie hodnotí xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx růstu (xxxxx) x pomalého růstu (xxxx) (25). xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxx zdvojení, x proto tvoří xxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx ztráty xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx viditelné xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx asociována x xxxxxxxx látkám xxxxxxxxxxx hrubé xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (26). Xxxx xxxxxxx postižené xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xx xxxxx uvádět xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx; nakonec xx xxxxxxx data xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nepožaduje. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se objasňují xxxxxx testováním, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx experimentálních xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. X případech, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxx nejednoznačných xxxx xxxxxxxxxxx výsledků xx xxxxx v následných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx studie xxx, xxx se rozšířilo xxxxxxx podmínek. X xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x podmínky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Ke xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, například xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx nárůst xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Nejprve xx třeba uvážit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků. Xxx vyhodnocování xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx významnost xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx faktorem xxxxxxxxxxx výsledku.
Testovaná xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nesplňují xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x tomto systému xxxxxxxx za xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx experimentů xxxx xxxxxxxxx jednoznačně xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx výsledky, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, i xxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx. Nejprůkaznější xx reprodukovatelný xxxxxxxxx xxxxx xxxxx - xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx xxxxxxx buněk xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx o xxxxxxx pokusu
Ve xxxxxx x průběhu xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x rozpouštědle/vehikulu, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxx:
- typ x xxxxx buněk,
- xxxxx xxxxxxxxx kultur,
- xxxxxxxx xxxxx pasáží,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x počtu kultur, xxxxxx xxxx. údajů x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x rozpustnosti, xxxx-xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- xxxxxxxxxxx testované xxxxx,
- xxxxx vehikula x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx teplota,
- xxxx inkubace,
-doba působení xxxxx,
- xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxx x složení xxxxxxx xxxxxxxxxxx aktivace, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxxxxxx)
- selekční činidla,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx hodnotí jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx, u xxxxx xx hodnotí velikost x xxx (xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx "malými" x "xxxxxxx" xxxxxxxxx).
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xX x xxxxxxxxxx xxxxx působení xxxxxxxxx xxxxx, jsou-li stanoveny,
- xxxxxxxx kolonií, je-li xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx x pozitivní xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx X5178X XX+/-,
- xxxxx xxxxx - xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx analýzy, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx údaje x xxxxxxxxxxx (rozpouštědlo/vehikulum) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.18. XXXXXXXXX XXX REPARACE - XXXXXXXXXXX SYNTÉZA XXX - XXXXX XXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Test xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (XXX) xxxxxxxx měřit xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx DNA xxxxxxxxxx xxxxxx poškození indukovaného xxxxxxxxxx xxxx fyzikálními xxxxxxx. Xxxx je xxxxxxx xx inkorporaci xxxxxxxxx tymidínu (3X-XxX) xx DNA xxxxxxx xxxxx, xxxxx nejsou x X xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx 3X-XxX je stanoven xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx kapalnou xxxxxxxxxxx metodou (LSC) x exponovaných xxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx kultury xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxxxx, xxx x v xxxxxxxxxxxxx exogenního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. UDS xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx vivo.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx xxxxx a sloučeniny xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx x kultivačním médiu xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx médiem. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxx nesmí nepříznivě xxxxxxxxxx životnost xxxxx.
Xxxxxxxxx xx pouze xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx lymfocytů xxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněčných xxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx).
Xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx a nepřítomnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxx kultur
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kultur xxx autoradiografii a xxxxx xxxxxx (nebo xxxx, xx-xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxx XXX XXX.
1.2.2.2 Negativní x xxxxxxxxx kontroly
X každém xxxxxxxxxxx xxxx xxx současně xxxxxxxx negativní x xxxxxxxxx kontroly v xxxxxxxxxxx x v xxxxxxxxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (7,12-XXXX) nebo 2-xxxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX). Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xxx xxx autoradiografii, xxx i xxx XXX xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxx-X-xxxx (4-XXX). Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního xxxxxxx xxx xxxxxx X-xxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Xxxx být xxxxxxx xxxxxxx koncentrací testované xxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxxxxx rozpustné xxxx xxx testovány x koncentracích až xx xxxxxxx rozpustnosti xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xx vodě xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx růstové médium, xxxxxxxxxxx XX2, teplota x xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie musí xxx pravidelně xxxxxxxxxxxx xx přítomnosti Xxxxxxxxxxx.
1.2.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx hepatocytů xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Stabilizované xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx exponovány xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx aktivačního systému.
1.2.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx připravuje xx zásobní kultury (xxxxxxxxxx xxxx setřepáním xxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx), xxxxxxxxx xx xx kultivačních xxxxx ve xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxx 37 xX.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx potkaních xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxx, xx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx kultivační xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx jsou založeny xxxxxx vhodné xxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Primární xxxxxxxxxx xxxxxxx. Čerstvě xxxxxxxxx xxxxxxxxxx potkana jsou xxxxxxxxxx testované látce x médiu xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxx xxxx. Po ukončené xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxx stripping film), xxxxxxxxxx, vyvolána, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Stabilizované xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxxxx techniky: Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 3H-TdR. Xxxx xxxxxxxx je xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, aktivitě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx typu xxxxx. X xxxxxxxxx nejvyššího xxxxxxx UDS xx xxxxx 3X-XxX přidat xxxxxxxx x testovanou xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx mezi xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx interakcí xxxx xxxxxxxxxx látkou a 3X-XxX. X xxxxxxxx xxxx XXX a xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, nízký xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX.
Xxxxxxxxx XXX pomocí XXX: Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxx vstup xxxxx xx X-xxxx, jak xxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx popsáno xxx autoradiografii. Xx xxxxx xxxxxxxxx xx XXX xxxxxxxxxxx x xxxxx x stanoven xxxxxxx xxxxx XXX x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX.
Jestliže xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx lymfocyty, xx x xxxxxxxxxxxxxxx kulturách xxxxxxx semikonzervativní replikace XXX xxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxx
1.2.4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
Při xxxxxxxxxxxxx UDS x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx v X-xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx 50 buněk x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx. Preparáty xx xxxxx xxxxxxxxx před xxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx hodnotí xxxxxxx náhodně vybraných xxxx. Množství inkorporovaného 3X-XxX x xxxxxxxxxx xx xxxx v xxxx x xxxxxxxxx xxx jader v xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.4.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Xxx xxxxxxxxx XXX XXX xx použije xxxxxxxxx počet xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx experimentech.
2. XXXXX
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxxx.
2.1 Xxxxxxxxxxx autoradiografie
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3H-TdR xx xxxxxxxxxx a xxxxx zrn nalezených xxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx odděleně.
Xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX xx xxxxxxxxxx x xxxxx zrn x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxx.
2.2 Xxxxxxxxxxx XXX
Inkorporace 3H-TdR xx zaznamenává xxxx xxx/μx DNA. Xxxxxxxx xxxxxxx xxx/μx XXX xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx distribuce xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx pokusu obsahuje, xx-xx xx možné, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx kultury, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultury, médiu, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2,
- testované látce, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x experimentu,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx,
- pozitivních a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx metodách,
- xxxxxxxxx blokování xxxxxx xxxxx do X-xxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx XXX x x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx obsahu XXX xxx xxxxxx XXX,
- vztahu xxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- statistickým xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretaci xxxxxxxx.
X.19. SCE - XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
SCE xx xxxxxxxxxx test xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx XXX mezi xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. SCE xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v identických (xxxxxxxxxxx) xxxxxxxx. XXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx tohoto xxxxxxx. Detekce SCE xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Toho xx xxxxxxxx inkorporací xxxxxxxxxxxxxxxxx (XxxX) xx xxxxxxxxxxxxx DNA xx xxxx dvou xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx buňky xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x přítomnosti x xxx xxxxxxxxxxx exogenního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx XxxX. Xx xxxxx xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vřeténka (např. xxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxx v x-xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx buňky xxxxxxxxxx x připraveny xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (lidské xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx buňky xxxxxxxx xxxxxx). Buněčné xxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx.
Používají xx xxxxxx kultivační xxxxx x kultivační xxxxxxxx (teplota, xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx XX2 x vlhkost).
Xxxxxxxxx xxxxx xx rozpouští xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiu nebo xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla xxxxx významně xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx frekvenci XXX.
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce x xxxxxxxxxxx i xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx metabolického xxxxxxxxxxx systému. Připouští xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.2.2.1 Xxxxx xxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx kultury.
1.2.2.2 Negativní x pozitivní xxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly s xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxx účinkem x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx musí xxx použita xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx
Xx-xx xxxxx, xx xxxxx zařadit xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.3 Koncentrace
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx dávky. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testované látky xxxx mít xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinek, ale xxxxxxx musí umožnit xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxx relativně xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx testovat xx xx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx postupů. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx určuje xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx linie xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx kultivační xxxxxx), xxxxxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx hustotě x xxxxxxxx xxx 37 xX. Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx takový xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xx xxxxx kultivace xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 50 % xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxx xxxxxx suspenzních xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx běžnými xxxxxxx a xxxxxxxx xxx 37 oC.
1.2.3.2 Xxxxxxxx kultur
Buňky xxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx. Ve xxxxxxx xxxxxxx stačí xxxxx xx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxxx xxxxx, xx-xx xx třeba. Xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx metabolickou aktivitu, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx x média xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x dále xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx médiu x XxxX xxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxx současně x xxxxxxxxxx xxxxxx x XxxX po xxxx xxxx xxxxxxxxx cyklů.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx jsou x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx látce, xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx kultury s XxxX xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx žárovky, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx XXX, ve xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx XxxX.
1.2.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx čtyři hodiny xxxx ukončením xxxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxx inhibitor dělicího xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxx). Xxxxx kultura xx xxxxxxxxxx samostatně.
1.2.3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx x barvení
Xxxxxxxxx se připraví xxxxxxxxxx cytogenetickou xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx XXX xxxx xxx provedeno xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxxxx xxxx Giemsa).
1.2.3.5 Xxxxxxx
Xxxxx analyzovaných buněk xx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx SCE x kontrole. Xxxxxxx xx hodnotí nejméně 25 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx před xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx metafáze s 46 xxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx, které se xxxx x ± 2 xxxxxxxxxx od xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx. Xx třeba stanovit, xxx se xxxxx xxxxxxxxxx XXX x xxxxxxx centromery. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x nezávislých xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx XXX x xxxxx xxxxxxxx a xxxxx XXX/xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx i xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx obsahuje, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx buňkách, xxxxxxxx xxxxxxxxx x udržování xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx, koncentraci XX2, xxxxxxxxxxx testované xxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádobách, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxx, metabolickém xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- počtu kultur xxx každý experimentální xxx,
- způsobu xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx analyzovaných xxxxxxxx (odděleně pro xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxx počtu SCE/buňku x XXX/xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx),
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx XXX,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxx dávka/účinek, je-li xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx vyhodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.20. XXXXXXXXX XXXXXXX MUTACE XXXXXX XX XXXXXXX X XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Test xx xxxxxxxxx letální xxxxxx xxxxxx na xxxxxxx (XXXX) xx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxx, xxx genových, xxx i xxxxxx xxxxxx, v xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx x přibližbě 800 xxxxxxxx xxxxxxxxxx X. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxx 80 % všech xxxxxx X-xxxxxxxxxx. X-chromozóm xxxxxxxxxxxx přibližně 1/5 xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx x X-xxxxxxxxxx xx fenotypicky projeví x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx. Xxxx xx mutace xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx stavu, xxx xx její xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, kteří xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. XXXX test xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x uspořádání chromozómů.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Příprava
1.2.1.1 Xxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxx dobře definované xxxxxx linie x xxxxxx xxxxx Muller-5. Xxxxx být xxxxxxx x jiné vhodné xxxxx popsané linie xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx X-chromozómu.
1.2.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx
Testované xxxxx xx rozpouštějí xx xxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx suspendují xx xxxxxxx rozpouštědle (xxxx. xxxx etanolu x Tweenu-60 xxxx 80), xxxx xxxxxxxx xx xxxx ředí xxxxx nebo fyziologickým xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx xxxxxxxx.
1.2.1.3 Počet xxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxx citlivost. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx mutací x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx třeba xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xx uskutečňuje xxx xx, injekčně xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx testované xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx roztoku. Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x 0,7% xxxxxxx XxXx a xxxxxxxx se xx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
V xxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Jestliže má xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, není xxxxx xxxxxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kontroly.
1.2.1.6 Dávkování
Xxxxxxxxx se xxx xxxxx testované xxxxx. Xxx předběžný xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx dávka xxxxxxxxx xx maximální tolerované xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávající xxxxxx toxicity. Netoxické xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx divokého typu (xx xxxxx 3-5 xxx) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx Xxxxxx-5 xxxx x xxxx vhodné xxxxxxxxx linie (vícenásobná xxxxxxx X-xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx dva xx xxx dny, aby xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx zárodečných xxxxx. X xxxxxxx xxxxxx samic xx xxxxxxxx letální xxxxx xxxxxxxxxxxxxx x účinkem xxxxxxxxx látky x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx spermie, xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x spermatogonie.
Xxxxxxxxxxxxx X1 samice narozené x tohoto xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xx. xxxxx xxxxxx/xxxxxxxx) xx svými xxxxxx. X F2 xxxxxxxx xx v xxxxx kultuře xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx. Jestliže x xxxxxxx xxxxxxxx F1 xxxxxx nesoucí xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx X-xxxxxxxxxx (xxxxxx nalezeni xxxxx samci x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), dcery xxxxxx samic xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Získané údaje xx xxxxxxxx do xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx hodnocených X-xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx x letální xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxx clusterů různých xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx. Výsledky se xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx experimentu.
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x jednom xxxxx xx xxx xxxxx x úvahu x zhodnoceno vhodným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx to xxxxx, xxxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx X2 xxxxxx, xxxxx F2 kultur xxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx letální xxxxxx pro xxxxx xxxxxxx zárodečných xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx ovlivněných xxxxxx,
- xxxxxxxxxx testu: xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx odběru xxxxxx, xxxx dávek, xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx (x rozpouštědlem) x xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- kritériích xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxx údajů,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.21. XXXX XXXXXXXXXXXX SAVČÍCH BUNĚK - IN VITRO
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxx lze xxxxxx xxx xxxxxxx fenotypických xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx chemickými xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx in xxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx X3X10X1/2, 3T3, XXX, Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x test se xxxxx x změny xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x buňkách po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látkám. Xxxxx xxxxxxxx in xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Cytotoxicita xxxx xxx zjištěna xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxx ovlivněním xxxxxxxxx růstu xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx ze xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, ale xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x určení xxxxxxxxx transformace xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx mohlo xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx k xxxxxxxxxx.
1.2 Popis metody
1.2.1 Xxxxxxxx
1.2.1.1 Xxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx musí xxxxxxxx, xx buňky xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx fenotypické xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx a xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x xx xx xxxxxxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx x spolehlivost.
1.2.1.2 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx xxxxx
Testované xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx buněk. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx nesmí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Buňky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x přítomnosti x xxx přítomnosti vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx aktivitou, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx látky.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx experimentu musí xxx xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Musí xxx xxxxxxxx také negativní xxxxxxxx (x rozpouštědlem).
Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontroly:
- xxxxx xxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxxxx, β-xxxxxxxxxxxx,
- xxxxx vyžadující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: 2-acetylaminofluoren, 4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 7,12-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx, xx možné zařadit xxxxx pozitivní kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.2 Koncentrace
Xxxxxxx xx nejméně xxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxx závislý xx koncentraci, nejvyšší xxxxxxxxxxx způsobují nízkou xxxxxx přežívání buněk, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx kontrole. Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látky xx xxxxx testovat xx xx xxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxx za použití xxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se určuje xxxxxxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx závislou xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx může xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx testované látce xxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx (xx. výměnou xxxxxxx metabolické xxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxx vlastní xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx testované xxxxx x přítomnosti x xxxxxxxxxxxxx vhodného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x kultivace probíhá xxxx za vhodných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx. Xxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx musí být xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xxxx xxx prezentovány x tabulkové xxxxx. Xx vhodné vyjadřovat xxxxxxxxx buněk xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx úrovně x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxx vhodnými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, xxxxxxxxx x:
- použitých xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: koncentraci xxxxxxxxx xxxxx, xxxx inkubace, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, hustotě xxxxx během xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx-xx to vhodné), xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx vyčíslení xxxxxx x transformovaných xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.22. XXXXXXXXXX XXXXXXX XXXX X XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx způsobuje xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx dominantních xxxxxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx xxxxx poškozuje xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Obecně se xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x numerické xxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxx výsledkem xxxxxxxxx účinku.
Xxxxx xxxx exponováni testované xxxxx x xxxxxx x neovlivněnými, xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Vzestup mrtvých xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx skupině xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx postimplantační xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx hodnotí xx xxxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxx nebo porovnáním xxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx součet xxx- x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx celkové xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx srovnání xxxxxx xxxxxxxxxx xx samici x exponované xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Snížení xxxxx implantací x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (x.x. xxxxxxxxxxxx x/xxxx spermatogonií).
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Testovanou xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xx fyziologickém xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx vodě xx xxxx nebo suspendují xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx rozpouštědlo nesmí xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xxxx xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Způsob aplikace
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx pouze xxxxxx. Xx základě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Obvyklý xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxx x jiné xxxxxxx aplikace.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxx xx doporučují použít xxxxxxx xxxx myši. Xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx exponované x xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx s ohledem xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky. Xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x silou xxxxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, aby xx dosáhlo 30 - 50 březích xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.4 Negativní a xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxxxx) kontroly xxxx xxx zařazeny xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Jestliže xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx přijatelné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxx použity. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx prokázána xxxxxxxxx xxxxx (např. MMS, xxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 xx.xx-1).
1.2.2.5 Xxxxxxxxx
Nejčastěji xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx vyvolávat xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx u exponovaných xxxxxx. X některých xxxxxxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.6 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxxxx 5 x.xx-1 xxxx x xxxxx 1 x.xx-1.xxx-1 xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx však xxx xxxxxxx jiné xxxxxx.
Jeden xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vhodných xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx musí xxx x samců xxxxxxx po xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx, nebo xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx dán xxxxxxxxx xxxxxxxx a musí xxxxxxxxx xxxxxxx stadia xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx expozici.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx cervikální xxxxxxxxx xx druhé xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx dělohy je xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxx počtu xxxxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx o xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx každého páření xxxxxx xxxxxxxxxxxx každého xxxxx x xxxxxx xxxx uváděny samostatně. Xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxx x xxxxx páření, x xxxxx podané xxxxx, x xxxxx xxxxxx x mrtvých xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx celkového xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx efektu je xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx implantací xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x kontrolní skupině. Xxxxx mrtvých xx xxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx skupině xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx skupině po xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx ztrátách.
X xxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxx časná x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx rozdíl xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx x počtem xxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx průměrného xxxxx xxxxxxxxxx na dělohu xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu xxxxxxxx, xx-xx xxxxx, informace x:
- xxxxx, xxxxx, věku a xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xx každého xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x kontrolních skupinách,
- xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx, dávkových xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrolách, xxxxxxx x xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx xxxxxxxx dominantních xxxxxxxxx efektů,
- xxxxx xxxxx/xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.23. XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
Xxxxxx xx replikací OECD XX 483, Mammalian Xxxxxxxxxxxxxx Chromosome Xxxxxxxxxx Xxxx (1997).
1.1 XXXX
Xxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx strukturální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (1) (2) (3) (4) (5). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, ovšem k xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx typu xxxxxxx rovněž. Xxxx xxxxxx není xxxxxx x analýze numerických xxxxxxx x xxxxx xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx příčinou řady xxxxxxxxxxx chorob.
Xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxxxxxxxxxx, a proto xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx predikovat xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
K xxxxx se obvykle xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace x xxxxxxxx spermatogonií. Tato xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx.
Aby xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx mitózu xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, dříve než xx xxxxxxxxx ztratí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromozómů, xxx xx zjišťují xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx, i xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx spermatocyty.
Xxxxx xxxx in xxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxx xxxx mutageny xxxxxxx x somatických xxxxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxxxx zárodečných. Xxxxxx xx test xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx, farmakokinetiky x xxxxxxxxxxx procesů DNA.
X testes je xxxxxxxx řada xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, kde xxxxxxxxxx diferencované xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx jejich xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx anatomické x xxxxxxxxxxxx bariéře Xxxxxxxxx buněk x xxxxxx-xxxxxxxxxxxx bariéře.
Existují-li xxxxxxx toho, že xx testovaná xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxx chromatidového xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómu, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx zlom xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx a opětovné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx stejném xxxxx (xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx chromozóm-ring)
Xxxx xxxxxxxxxx: xxxx xxxx xxx hodnotit xxxxxxxx xxxxxxxxxx jedné xxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx, xxx je xxxxx xxxxxxxxx chromatidy. Xxxx xxx x xxxxxxxxx, xxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx dislokovaný (xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxx chromatida xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Gap: xxxxxxxxxxxx xxxx menší xxx xxxxx jedné xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Numerická xxxxxxx: změna počtu xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx buňky.
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx haploidního xxxxx xxxxxxxxxx (n) xxxx xxx xxxxxxxxx počet xxxx (3x, 4n xxx.).
Strukturální xxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dělení xx xxxxxx metafáze, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxxxx, a výměny.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Zvířata xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx x xx vhodnou xxxx po působení xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xx xx xxxxxx látkou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx Colcemidem®). Xx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xx xxxxxxxx xx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx chromozómové xxxxxxx.
1.4 XXXXX XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx živočišného xxxxx
Běžně xx xxxxxxxxx xxxxx čínských xxxxxx x xxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxx jakéhokoliv xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx druhu. Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx kmeny mladých xxxxxxxx dospělých xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx minimální x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx přesahovat ± 20 % xxxxxxxx hmotnosti.
1.4.1.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxx uvedeny xx Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx X.
Xxxxxxx xx měla xxx 50 - 60 %.
1.4.1.3 Příprava xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxx jedinci se xxxxxxx rozdělí xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxxxx označí x xx dobu xxxxxxxxx xxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx uspořádat xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx případné xxxxx xxxx, xxx x xxx xxxx klece xxxxxxxx.
1.4.1.4 Xxxxxxxx dávek
Xx-xx testovaná látka x xxxxxx xxxxx x je-li xx xxxxx, látka se xxxx xxxxxxx zvířatům xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxx přímo xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxx. xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xx neovlivní.
1.4.2 Xxxxxxxx testu
1.4.2.1 Rozpouštědlo / vehikulum
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vyvolávat xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x testovanou xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxx použití podpořeno xxxxx x kompatibilitě x xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx xx xxxxxx místě xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx.
1.4.2.2 Kontroly
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx zařadit xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx xxxxx zacházet xx zvířaty ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx kontroly by xxxx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx aberace xx xxxx při xxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx spontánní xxxxxx.
Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxx, aby xxxx xxxxxx patrné, xxx xxxxxx nenapovídaly xxxxxxxxxxx totožnost zakódovaného xxxxxxxxx. Pozitivní xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx než xxxxxxxxxx látku a xxxxxx odebírat x xxxxxx časovém intervalu. Xxx xx xx xxxxx, xx třeba xxxxxxxx pozitivní kontrolu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Příklady xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Látka | XXX | XXXXXX |
cyklofosfamid | 50-18-0 | 200-015-4 |
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx | 6055-19-2 | |
xxxxxxxxxxxxxx | 108-91-8 | 203-629-0 |
xxxxxxxxx C | 50-07-7 | 200-008-6 |
xxxxxxxxx monomer | 79-06-1 | 201-173-7 |
xxxxxxxxxxxxxxxxx | 51-18-3 | 200-083-5 |
Xxxxxxxxx xxxxxxxx ovlivněné rozpouštědlem xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx experimentální xxxxxxx xxxx by xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx intervalů xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mezi xxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx rozpouštědlo, nebo xxxxxxxxx nevyvolává žádné xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.5 XXXXXX
1.5.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxxxx
X každé zkušební x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx schéma
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx dvou xxxxxxx. Xxxxx xx jedná x xxxxxxxx xxxxx, xxxx xx k xxxxxxxxx aplikace xxxxxxxx, xx. xx dvě xxxxx za den xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx režimy xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx xx vzorky xx xxxxxxxx látce xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx dřívější x xxxxx xxxxxxxx odběr xxxxxx 24 a 48 xxxxx po xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx (xx. mimo xxxxx xxxxxxxx) xx xxxxx vzorků provádí xx 24 hodinách xxxx xx 1,5xxxxxxx xxxxx buněčného xxxxx xx expozici, xxxxxx xx znám xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (6).
Xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx odběru xxxxxx. Např. xxxxx-xx xx x látku xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx X-xxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx odběru xxxxxx (1).
Zda xx vhodné nechat xxxxx působit opakovaně, xx xxxxxxxx xxxxxx xx případu. Pokud xx provádí xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxx po 24 xxxxxxxx (1,5násobku xxxxxxxxx cyklu) od xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx xx to xx účelné.
Před xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx injikuje vhodná xxxxx Xxxxxxxxx® nebo xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x nich xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxx je tento xxxxxxxx xxxxxx 3-5 xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 4-5 xxxxx.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nejsou k xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, je xxxxx xx xxxxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, kmene x xxxxxxxxx xxxxxx, jaké xx použijí x xxxxxx xxxxxx (7). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx užívají xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx tři xxxxx xxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx toxicity k xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx známky xxxxxxxx, že xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx podávání xx účinky xxxx xxxxxxx.
Xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx hormony nebo xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx případ xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx jako xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx spermatogoniích (xxxx. xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx( tento xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 50 %).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx 2000 xx/xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxx ve xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xx xxxxxxx údajů x xxxxxxx s podobnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxx neočekává xxxxxxxxxxxx, nemusí xxx xxxxxxxxx celá studie xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx humánní xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx dávky.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx žaludeční sondou, xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx objem xxxxxxxx, xxxxx xx xx sondou xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 g xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, jež xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx koncentracích xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxx koncentrace xxxxx xxx, aby xxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx úrovních stejný x minimalizovala xx xxx objemová variabilita.
1.5.6 Xxxxxxxx chromozómů
Xxxxxxxx xx usmrcení xxxxxxx xx z jednoho xxxx x obou xxxxxx připraví buněčná xxxxxxxx, na xxxxxx xx působí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a fixuje xx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx nakape xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxx.
1.5.7 Xxxxxxx
U xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx metafází (xx. xxxxxxxxx 500 xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx). Xxxxx počet xx xx xxxxxx, xx-xx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vysoký. Všechny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (včetně xxxxxxxxxxx x negativních xxxxxxx) xx před xxxxxxxx nezávisle xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx určitého podílu xxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx x xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx 2x ± 2.
2. XXXXX
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx prezentují x tabelární xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx. X každého xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx buněk xx xxxxxxxxxxxxxx chromozómovými aberacemi x xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. X experimentálních i xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx jednotlivé xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx a xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, uvádějí xx, xxx obvykle xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxxxx mitóza x meióza, xxxxxxx xx u xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx jakožto xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx mitóz xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x druhé meiotické xxxxxxxx, a xx xxx, xx xx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxxxxx xx xxxxx. Je-li xxxxxxxxxxx pouze xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 1000 buněk x xxxxxxx xxxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X INTERPRETACE XXXXXXXX
Xx xxxxxxxxxx pozitivního xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx kritérií, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx frekvence xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x aberacemi xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx metody (8); xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx výsledky xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, nejlépe xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx použití výsledky xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xx x xxxxx xxxxxxx považuje xx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vykazuje xxxxx pozitivní, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Pozitivní výsledky xxxxx ukazují, že xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx druhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx oberace. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx za xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxx xxxxx chromozómové aberace xxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo je xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx tkáň (xxxx. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxx xxxx informace:
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx x stabilita xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx:
- použitý xxxxxxxxx druh/kmen,
- xxxxx x xxx xxxxxx,
-xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx.,
- xxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, průměrů x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxx xx studie xxx xxxxxx rozpětí xxxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx volby xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx látky,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx koncentrace xxxxx v xxxxxxx/xxxxx xxxx (ppm) xx xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx / den),
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxx potravy a xxxx,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx toxicity,
- xxxxx xxxxxxxxx metafázi, xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx působení,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxx hodnocení aberací,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxx,
- kritéria, xxxxx xx studie xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx,
- poměr xxxxx spermatogonií x xxxxx a druhé xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxx x počet xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx zvlášť,
- xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx skupině,
- xxxxx xxxxx x aberacemi na xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx dávka - xxxxxxx, xx-xx to xxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxx x negativních kontrol xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx ploidie.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
X.24. XXXX XXXX X MYŠÍ
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx metody
Xx xx in xxxx xxxx xx xxxxxx, x xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx se embrya xxxxxxxxxx chemickým látkám. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx jsou xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx vyjádřeny xxxxxxxxxx fenotypem x xxxxxxxxx xxxxxxx vytvářejících xxxxxx (spots) xxxxxxxxx xxxxx srsti narozených xxxx. Počet potomků x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxx x jejich xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx u xxxxxxx x xxxxxxx. Myší xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx buňkách.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx látky xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx x izotonickém xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Látky xxxxxxxxxxx xx vodě xxxx xxxxxxxxxx xxxx suspendovány xx vhodném xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x testovanou xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxx T (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxxxxxx, xxxx xxx, xxx p/cch x; brown, x/x; xxxxxx, xxxxx ear, x xx/x xx; xxxxxxx xxxxxxxx, x/x) xxxx kříženy xxx x xxxxxx XX (xxxxxx, nonagouti, xxxxxxxxxx, xx a xx/xx x bp; xxxxxx xxxxx, ln fz/ /xx fz; xxxxx xx/xx) xxxx x xxxxxx X57 BL (xxxxxxxxx, a/a).
Mohou xxx xxxxxxx i xxxx xxxxxxx, za xxxxxxxxxxx že budou xxxxxxx nonagouti xxxxxxx. Xxxx. xxxxxxx xxxx xxxxxx XXXX (xxxxxxxxx, x/x; xxxxxx, x/x) x XXX (nonagouti, x/x; xxxxx, x/x; xxxxxx x/x).
1.2.1.2 Xxxxx x xxxxxxx zvířat
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxx dávku. Vhodná xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxxxxxxxx myší x x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx pouze v xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 300 xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx dávkou.
1.2.1.3 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxx být použity xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (negativní xxxxxxxx). Xx zvýšení xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx kontrolní xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx v xxxxx xxxxx použity, xxxxxxxx x testované xxxxx nebyla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxx aplikace
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx sondou xxxx intraperitoneální xxxxxxx xxxxx xxxx. Je-li xx vhodné, xx xxxxx použít inhalační xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx, z nichž xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx zmenšení xxxxxxxxx xxxx.
1.2.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx ovlivněna testovanou xxxxxx xxxxx xxxxxx 8., 9. xxxx 10. xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 1. xxx xxxxxxxx se xxxxxxxx den zjištění xxxxxxxxx xxxxx. Tyto xxx xxxxxxxxxx 7.25, 8.25 x 9.25 xxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx látkou xxx provést během xxxxxx xxx.
Xxxxxxx
X xxxxxx je xxxxxxx x zaznamenáván xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x čtvrtým xxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx:
(a) xxxx skvrny v xxxxxxx 5 mm xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, o kterých xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (XXXX);
(x) žluté xxxxxx xxxx agouti xx xxxxxxxxx v xxxxx mléčných xxxx, xxxxxxxxx, hrdla, xxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx se, xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (MDS);
(x) xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (XX).
Xxxxxxx xxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxx, ale xxxxx xxxxxxxx, RS, je xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx x odlišením mezi XXX a XX xx xxxxx vyřešit xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx mikroskopu.
Xxxxxxxxxxxxx xx nápadné, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx potomků.
2. XXXXX
Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx majících jednu xxxx více xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx a exponovaných xxxxxx se porovnávají xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je-li xx xxxxx, xxxxxxxxx o:
- xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxxx skupině,
- xxxxxxxx velikosti xxxx x experimentální x x kontrolní xxxxxxx xxx porodu x xxx xxxxxxxxx,
- dávkových xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx rozpouštědle,
- xx xxxxxx xxx xxxxxxxx byla testovaná xxxxx aplikována,
- x xxxxxxx podání xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx sledovaných xxxxxxx, x xxxxxx xxxxx s XXXX, XXX a XX x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx malformacích,
- xxxxxx xxxxx/xxxxxxx x XX, xx-xx xx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.25. XXXXXXXX XXXXXXXXXXX X XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx translokace x myší xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x numerické xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx buňkách xxxxxxxxx x první xxxxxxxx potomků. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx X-xxxxxxxxxx. Nositelé xxxxxxxxxxx x XX-xxxxxx xxxxxxxx sníženou xxxxxxxxx, xxxxx se využívá xxx výběr F1 xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (X-xxxxxxx x c-t xxx). Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx samců xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx I, xxxx X1 xxxxx či xxxxxxx xxxxxxx X1 xxxxx. Samice XX xxxx xxxxxxxxxxxxx identifikovány xxxxxxxxxxx xxxxx 39 xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x kostní dřeně.
1.2 Xxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x izotonickém xxxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle. Xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx testované xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx rozpouštědlo pro xxxxxxxxx dávkování xxxxx, xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx intraperitoneální xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx způsoby aplikace.
1.2.1.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Pro xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx verifikaci xx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx kmen. Xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu xx měla být xxxxx xxx osm x xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx zdravá, xxxxxxxx dospělá zvířata.
1.2.1.3 Xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx frekvenci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x na xxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx kontrolu.
Xxxx xx xxxxxxx provádí xxxxxxxx xxxxx X1 xxxxxxx. Xxxxxxx 500 xxxxx x X1 xxxxxxxx je testováno x xxxxx exponované xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx X1 generace xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx 300 xxxxx x 300 xxxxx.
1.2.1.4 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly
Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx výsledky xxxxxxx xxxxxxx z předchozích xxxxxx. Jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx z xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx.
1.2.1.5 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxx nejvyšší xxxxx vyvolávající xxxxxxxxx xxxxxxx efekt, xxx xxx vlivu na xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxx stanovení xxxxxx xxxxx/xxxxxxx je xxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
1.2.2 Xxxxx postupu
1.2.2.1 Xxxxxxxx x oplodnění
Xxxxxxxxx se dva xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jedna xxxxxxxx testované xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xxxx xxx x týdnu po 35 xxx.
Xxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx analyzována. Xx konci období xxxxxxxxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxxx rozděleny xx xxxxx. Xx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx mláďat. Xx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xx doby xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxx možných metod. Xxxx fertility X1 xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx možných nositelů xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx samců X1 xxxxxxxx bez předchozího xxxxxx pomocí xxxxx xxxxxxxxx.
(a) Test xxxxxxxxx
Xxxxxxx fertilita xxxxxx v F1 xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx a/nebo xxxxxxxx xxxxxx dělohy xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx fertility xxxx xxx stanovena xxx xxxxx kmen xxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx: F1 samci xxxxxx k xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx klecí xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 18. xxxx xx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx X2 xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxx porodu, hned xxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx testovány X1 xxxxxx, X2 xxxxxxx malých vrhů xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx verifikovány xxxxxxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxx xxxxxxx. XO-samice xxxx xxxxxx změnou xxx xxxxx mezi xxxxxx potomky x 1 : 1 xx 1 : 2 xxxxx xx. xxxxxx. X následném xxxxx xxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxx xxxxxxxx x dalšího testování, xxxxxxxx xxxxx F2 xxx dosahuje xxxx xxxxxxxxx xxxxxx určenou xxxxxxxx hodnotu, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxx. X1 xxxxxxx, která xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx po xxxxxxxxxxx xxx F2 xxxx, jsou dále xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx přímo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxxxx vrhu x xxxxxx translokací xx xxxxxxxxx xxxxx embryí, xxxxx vysoký xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx X1 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ke 2 - 3 xxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxxxxxx denní ranní xxxxxxxxx vaginální xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx 14. - 16. xxx x jsou xxxxxxxxxxxxx živé a xxxxx xxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Metodou xxx-xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x testes. Xxxxxx translokací jsou xxxxxx na základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxxx X x primárních xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx s multivalentními xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx byl xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx F1 xxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Na každého xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 25 xxxxx v xxxxxxxxx - xxxxxxxx X. Analýza xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxx v kostní xxxxx se xxxxxxxx x samců s xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx meiozy xxxx xxxxxxxxxx xxxx u X1 xxxxx xxxxxxxxxxx XX. Přítomnost xxxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx x 10 buněk xx důkazem xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (x-x xxx). Xxxxxxx X-autosomální xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx pruhováním xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx 39 xxxxxxxxxx xx všech 10 xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx XO xxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx formou.
Xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx průměrná xxxxxxxx xxxx x xxxxx pohlaví (xxx xxxxx).
Pro xxxxx xxxxxxxxx X1 zvířat xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vrhu kontroly x xxxxxxxxxxxx velikosti xxxx X1 nosičů xxxxxxxxxxx. Xxx analýzu xxxxxx xxxxxx xx xxxxx průměrný počet xxxxxx x mrtvých xxxxxxx x kontrole x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx X1 xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Při cytogenetické xxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx X xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx figur x xxxxxxx xxxxx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Pro X1 xxxxxxxx jedince xx zaznamenává počet x xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx uvádí xxxx testes x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
X XO xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx ratio F2 xxxxxxx a výsledky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
V xxxxxxx, že xxxxxx xxxxx fertility xxxx xxxxxxxxx vybráni xxxxx xxxxxxxx F1 translokací, xx třeba x xxxxxxxxx uvést xxxxxxxxx x xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx heterozygotů.
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
3.1 Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx, informace x:
- xxxxx xxxx, xxxxx a xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx rodičovských xxxxxx xxx každé xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- experimentálních podmínkách, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, dávkové xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x schéma xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x pohlaví xxxxxx xx xxxxxx, xxxxx x pohlaví xxxxxxx xxxxxxxxx xxx analýzu xxxxxxxxxxx,
- xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- počet x detailní xxxxx xxxxxx translokací xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud xxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx hodnocení,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.26. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xx, studie na xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx skupinám xxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx úroveň dávky. Xxxxx období podávání xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx xxxxx xxxxxx, i xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx pokusu, xx pitvají.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x jakých xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin.
Xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxx, xxxxxx, v kapslích xxxx v xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxx xx testovaná xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx pokusu xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx aditiva, musí xxx o nich xxxxx, že nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx dřívější data, xx xxxxx je xxxxxx.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx zvířata
Dává xx přednost xxxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxx xxxxxx proti tomu. Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx zvířat x xxxxx užívaných xxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xx počátku xxxxxxxx xxxxx měli xxx xxxxxxx mladší xxx 6 xxxxx, x xxxxxx případě xxxxxx xxx 8 xxxxx. Xx začátku xxxxxx xx xxxxxx variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxx xxxxx pohlaví xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % střední xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx orální test xxxx předběžný test xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x obou xxxxxxxx xx má xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx každou hladinu xxxxx použít nejméně 20 zvířat (10 xxxxx x 10 xxxxx). Samice xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx zabíjet v xxxxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxx celkový xxxxx xxxxxx o xxxxx xxxxxx, která xxxxx zabita před xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx možno xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (satelitní xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) xx dobu 90 dnů xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Je xxxxx použít xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxxxxx x kontrolní skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx způsobem xxxx xxxxxxxx skupinám, x xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxx, které se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxx xxxx počet. Xxxxxxxx úroveň dávky xx neměla xxxxxxx xxxxx příznaky toxicity. Xxxxx existují odhady xxxxxxxx u xxxxxxx, xx nejnižší dávka xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx by xxxxxxx xxxxx xxxx vyvolat xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx xxx 3 úrovně xxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx odstupňované xxxxxxx xxxxxx.
Xx skupině x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx by počet xxxxxxx měl být xxxxx, jinak xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx koncentrace (x xxx nebo xx.xx-1 potravy) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x tělesné xxxxxxxxx xxxxxxx; použitou xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxx, xxxx xx xx tak xxx každý xxx xx xxxxxxx xxxx, x dávkování x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (týdenních xxxx čtrnáctidenních) přizpůsobovat xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxx-xx xx 90denní xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx (xxxx xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxx) xxxxx toxické xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Podává-li xx xxxx toxická xxxxx x xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xxx aplikované xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebránily xxxxxxxx výživě xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx, xxxxxx dobu objevení, xxxxxx x xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, ve kterém xx xxxxxx a xxxx odezní xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx postupu
X ideálním případě xx zvířatům xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 7 xxx x týdnu xx xxxx 90 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx skupinách, xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pozorování, jsou xxxxxxxxxx xxxxxxx 28 xxx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxx x otravy xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxx kůže, xxxxx, xxx, sliznic, xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a centrální xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx (a xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx testované látky x xxxxx vodě) x xxxxxxxx zvířat xx zaznamenávají xxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx utratit a xxxxxx.
U všech xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx provádějí xxxxxxxxxxx vyšetření:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx oftalmoskopem xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xx provést xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx.
(b) Xx xxxxx xxxxxx xx xx provést xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx počtu xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx dobu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
(c) Xx xxxxx xxxxxx xx má xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýza xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x ledvin. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx látky. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx živočišného xxxxx x kmene), xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxx-xxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx močoviny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx x séru. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxxx xxxx běžný postup, xxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx toxicity.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx uvážit xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a biochemických xxxxxxxxx ještě xxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
X xxxxx zvířat použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx povrchu xxxx, všech xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x břišní xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx tělísky) x xxxxxxx se xx xxxxxxxx po sekci xxxxx xx vlhkém xxxxx, aby se xxxxxxxx vysychání.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx x tkáně xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: všechny xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx medula/pons, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx mozkový, xxxxxx xxxxx/xxxxxxxxx tělíska, xxxx xx xxxxx brzlíku, xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx, aorta, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, varlata a xxxxxxxxx, děloha, (přídatné xxxxxxxx orgány), (xxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx a xxxxx střevo, xxxxxxxx, xxxxxx měchýř, xxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx sval), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx dření, (kost xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx), páteřní mícha xx xxxxx úrovních - xxxxx, střed xxxxxx a xxxxxxx, x (slzné xxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx posuzují x xxxxxxx, xxxxx lze xx xxxxxx postižení xxxxxxxx x příznaků xxxxxxxx nebo pokud xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Histopatologická xxxxxxxxx
(x) Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx orgánů x xxxxx je xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx podána xxxxxxxx xxxxx, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx třeba xxxxxxxx xxxxxxx makroskopická xxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx vyšetřit xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(x) Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx s xxxxxx x střední xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x zjištění xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx x těchto skupin. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx u zvířat xxxxxx skupin xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xx orgánech, xx kterých bylo xxxxxxxx postižení xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx.
(x) Používá-li xx satelitní xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx u xxxxxxxxx exponovaných xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx na xxxxxxx pokusu a xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx typy poškození. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Je k xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx uznávanou statistickou xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx možno obsahovat xxxx informace:
- xxxxxxxxx druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxx x toxických xxxxxxxxxx podle pohlaví x xxxxx xxxxx,
- xxxxxx xxx xxxxxx, pokud ji xxx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- popis toxických xxxx jiných xxxxxx,
- xxxx, kdy xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx vývoj,
- spotřeba xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- hematologická xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x jejich xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxxxxx analýz xxxx),
- xxxxxxx nálezy,
- detailní xxxxx xxxxx histopatologických nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, kde je xx možné,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.27. SUBCHRONICKÁ XXXXXXXX ORÁLNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xx, xxxxxx na xxxxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxx po 90 xxx x odstupňovaných xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (xxxxxxxxxxx), x xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxx, která xxxxxx během pokusu, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, se xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Příprava
Xxxxxxx 5 dní xxxx testem xxxx xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx ustájení a xxxxxx, v xxxxxx xxxxx během xxxxxxxxxxx. Xxxx testem se xxxxxx xxxxx dospělá xxxxxxx xxxxxxx přiřadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Testovanou xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx xxx vhodnější xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx také xxxx xxxxxxx orální xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx po xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx, xxxx xxx x xxxx xxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx, je xxxxx xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx druh - xxxxxxxxxx používá xxx: xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx i xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxx xx má x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 3 do 6 xxxxxx x xx xxxxxxx xxx 9 xxxxxx. Provádí-li xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx předběžný xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, v obou xxxxxxxx xx xx xxxxxx stejný xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxx úroveň xxxxx xxxxxx xxxxxxx 8 xxxxxx (4 xxxxxx x 4 xxxxx). Xxxxx xxxxxx xx konci pokusu xxxx xxx takový, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků.
1.2.2.3 Dávkování
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxx kontrolní xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx testované xxxxx xx xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejně xxxx x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx žádné xxxxxxx. Nejnižší xxxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx odhady xxxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxx hodnotu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx by střední xxxxxx dávky xxxx xxxxxxx jen toxický xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Aplikují-li xx xxxx než 3 xxxxxx dávek, xxxx xxx voleny xxx, xxx vyvolaly odstupňované xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx x uhynutí rovněž xxxxxx xxxxxxxx.
Podává-li xx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxx normální xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx-xx xx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx, xxxx se xxxxxx buď xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (x ppm xxxx xx.xx-1 potravy) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx; xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx. Xxxxxx-xx xx látka xxxxx, xxxxxxxxx x kapslích, xxxx xx se xxx xxx xxxxx xxx xx stejnou xxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxxxx intervalech xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx test xxxx předběžný test xxxx dlouhodobým testem, x obou xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Limitní xxxx
Xxxxxxx-xx 90denní xxxx níže xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx xx den (nebo xxxxx xxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxx expozici xxxxxxx, je-li xxxx xxxxx) xxxxx toxické xxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Podává-li xx xxxx toxická xxxxx x potravě, je xxxxx zajistit, xxx xxx xxxxxxxxxx množství xxx další vlastnosti xxxxxxxxx xxxxx nebránily xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
1.2.2.5 Xxxx pozorování
Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx objevení, xxxxxx x trvání. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Popis xxxxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látka 7 xxx x týdnu xx xxxx 90 xxx. Xxxxxx-xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xx za xxxxxxxxxx podávat látku 5 dní v xxxxx.
Pozorování zahrnuje (xxx není na xx xxxxxxx) změny xxxx, srsti, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Příjem xxxxxxx (x xxxxxx xxxx xxx podávání testované xxxxx x xxxxx xxxx) x xxxxxxxx xxxxxx xx zaznamenávají xxxxx.
Xxxxxxx jednou xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx klinická xxxxxxxxx s vhodnými xxxxxxxxxx x minimalizaci xxxxx xxxxxx pro xxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Umírající xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
U xxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxxxx xx obvykle xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenným xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx před podáváním xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, ale xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx zvířata.
(x) Xx xxxxxxx xxxxx, x potom xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx, celkového a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx leukocytů x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, protrombinový xxx (Quickův), xxxxxxxxxx xxx xx počet xxxxxxxxxx.
(c) Xx xxxxxxx xxxxx, a xxxxx xxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x dále xx konci xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx vhodné stanovit xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx jater x ledvin. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx vápník, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (přičemž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx podle živočišného xxxxx x xxxxx), xxxxxxxxxxx transferáza (dříve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx séra) x aspartát xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), ornithin xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx bilirubin x xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx rovnováhy, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx analýzy xxxxx být v xxxxxxx xxxxxxx použity xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxx vzorků krve xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (xx xxxx xxx 24 xxxxx).
(x) Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx jako xxxxx postup, xxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
U xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx zahrnující zevní xxxxxxxxx xxxxxxx těla, xxxxx xxxxxxx otvorů, xxxxx, hrudní x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a varlata xx co nejdříve xx xxxxx zváží xx vlhkém stavu, xxx xx předešlo xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx orgány x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx - x řezech xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx,(xxxxxxxxxx), xxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x vaječníky, xxxxxx, (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), žlučník, jícen, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, močový xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx lymfatické xxxxxx, (samičí mléčná xxxxx), (xxxxxxxx sval), xxxxxxxxx xxxx, (xxx), xxxxxx xxxx x xxxxxx dření, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) x (páteřní xxxxx ve xxxxx xxxxxxxx - krční, xxxxx xxxxxx a xxxxxxx). Tkáně v xxxxxxxxx xx posuzují, xxxxx xx to xxxxxxxxxx podle příznaků xxxxxxxx nebo pokud xxxxxxxxx x cílovým xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx histopatologické vyšetření xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx dávka, x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat x xxxxxxx xxxxxxxxx skupin xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx byla xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxx xx xx xxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx tabulky. X xx xxxx xxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxx poškození x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Výsledky xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x xxxx xxxxx použít xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxx pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, plemeno xxxx xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx dávek (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx) a koncentrace,
- xxxxx o xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx,
- úroveň xxx účinku, xxxxx xx lze xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx xxxxx experimentu, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- popis xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx (zejména xxxxxxxx xxxxxx),
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx příznaky x jejich další xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx výsledky (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx analýz xxxx),
- pitevní xxxxxx,
- detailní xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxxx výsledků, kde xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.28. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX DERMÁLNÍ
(90xxxxx xxxxxxxxx aplikace, xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xx 90 xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pokusných xxxxxx, x to xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx. Během xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx uhynou xxxxx xxxxxx, x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx do xxxxx pokusu, se xxxxxxx.
1.2 Xxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxx xxxx zvířata xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, x xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx. Před xxxxxx xx xxxxxx mladá xxxxxxx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx na xxxxxx pokusných xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nebo oholení xx xxxxxxx opakovat xxxxx týden. Xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx (např. abrazí). Xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx. Xx xxxxx vzít x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx rozhodování x xxxxxxxxx připravované xxxxxx xxxx x x velikosti xxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxx x tuhými xxxxxxx, xxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx zkoušenou látku xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx vhodným vehikulem, xxx xxx zaručen xxxxx xxxxxxx x xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx aplikují xxxxxxxx. Látka xx xxxxxx denně 5 xx 7 xxx x týdnu.
1.2.2 Experimentální xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná zvířata
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx potkany, xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x jiné zvířecí xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx musí xxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xx nemělo xxxxxxxx rozpětí xxxxxxxxx xxxxxx (xxx každé xxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx hodnoty. Xxxxxxx-xx xx subchronický dermální xxxx xxxx předběžný xxxx xxxx dlouhodobým xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx xx xx xxxxxx stejný živočišný xxxx a xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx úroveň xxxxx xxxxxx xxxxxxx 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 xxxxx) se xxxxxxx xxxx. Samice xxxx xxx nullipary x xxxxx být xxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx zvýšit xxxxxxx xxxxx zvířat x xxxxx xxxxxx, která xxxxx zabita xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx skupině (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 xxxxxx (10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx) po xxxx 90 dnů xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, přetrvávání xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxxxxxx
Je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx - xxxxx se použilo xxxxxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx být nejméně 6 xxxxx denně. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx den xx xxxxxxx xxxx. X intervalech xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxx stálá xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x pokusnými. Xxxxxxx-xx xx vehikulum xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx stejným způsobem xxxx pokusným xxxxxxxx, x to xx xxxxxxx množství, xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Nejvyšší hladina xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx jen v xxxxx xxxxx. Nejnižší xxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, má xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx měla vyvolat xxx xxxxxxx xxxxxx xx hranicích zjistitelnosti. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxx 3 hladiny xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx dávky xxxxxx xxx, aby vyvolaly xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx uhynutí xxx xxx nízký, xxxxx xx vyhodnocení xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx podráždění xxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x xxxxxx dávkové xxxxxxx xxxx vést x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Došlo-li x xxxxxxx poškození xxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ukončit a xxxxxxx xxx znova x nižšími koncentracemi.
1.2.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dávky 1000 xx.xx-1 nebo xxxxx xxxxx, xxxxx odpovídá xxxxx expozici člověka, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Doba xxxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxx zaznamenat xxxx xxxxxxx x čas, xx xxxxxx xx xxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Zvířata xx chovají x xxxxxxx xx jednom. Xxxxxxxx xx studované xxxxx xxxxxxx 7 xxx v týdnu xx dobu 90 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxx následné xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxx xx dalších 28 xxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx reparace xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx nejméně 6 hodin denně.
Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx představuje xxx 10 % povrchu xxxx, u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx. Látkou xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx část xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v xx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xx expoziční xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx mulového xxxxxx x xxxxxxxxxx náplasti. Xxxxxxxxx xxxxxx je xxxx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxx obvaz x testovaná látka xxxxxxxx a xxx xx zabránilo xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx látky xx xxxxx použít x xxxxxxxxxx xxx omezení xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx vhodným x xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx.
Xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx, xxx x xxxxxxx, a xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, somatomotorické xxxxxxxx x chování. Xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxxxx týdně x xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx zajistit xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud možno xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx zvířat xxxx xxxx. x důsledku xxxxxxxxxxx, autolýzy tkání xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zvířata, xxxxx přežila, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupin, xxxxxxx. Umírající zvířata x zvířata x xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
X xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xx běžně provádějí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(a) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx oftalmoskopem xxxx rovnocenným přístrojem xx má provést xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxx xxxxxx nejlépe x xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx-xx se xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx pokusu xx xx provést xxxxxxxxxxxxx vyšetření, které xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx dobu srážlivosti, xxxxxxxxxxxxx xxx (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx xxx xx xxxxx trombocytů.
(x) Xx xxxxx pokusu xx má provést xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxx všechny xxxxxx xx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, funkci xxxxx x ledvin. Výběr xxxxxxxxxxxx xxxxx je xxxxx pozorováním způsobu xxxxxx látky. Doporučuje xx xxxxxxxxxx vápník, xxxxxx, chloridy, sodík, xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx (přičemž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxx transamináza xxxx) x aspartátamino xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, methemoglobinu, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx biochemické xxxxxxx mohou být x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx spektra účinků.
(x) Xxxxxxx moči xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Pokud xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxx hematologických x biochemických xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.3.1 Pitva
U xxxxx zvířat xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx prohlídku povrchu xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x xxxxxx dutiny xxxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, ledviny, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Následující xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx médiu x xxxxxxx xx xxxxx pozdější histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx tkáně x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx - x xxxxxx medula/pons, xxxx xxxxx x mozečku, xxxxxxxx xxxxxxx, štítná xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxxx, (průdušnice), xxxxx, xxxxx, xxxxx, (xxxxxx xxxxx), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, nadledviny, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx (xx-xx xxxxxxxx), jícen, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, tenké, xxxxxx a xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx, močový xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx uzliny, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (xxxxxxxx xxxx), periferní xxxx, (oči), (xxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxx), (kost stehenní xxxxxx xxxxxxxxx ploch), (xxxxxxx xxxxx ve xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, střed hrudní x xxxxxxx) x (xxxxx xxxxx). Xxxxx x závorkách se xxxxxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(a) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx normální x exponované kůže, xxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x všech xxxxxx xxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxxx dávka, x u xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx makroskopická xxxxxxxxx.
(x) Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x ostatních xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
(d) Používá-li xx potkanů, plíce xxxxxx xx skupinách x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx zvířat. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx provádět xxxxxxx, xxxx xx xxxx provést xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx skupině x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x orgánech, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skupin.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx být xxx každou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx s xxxxxx x procentuálně xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx statistickou xxxxxxx. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x průběhu pokusu
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx má pokud xxxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
- živočišný xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, krmení,
- podmínky pokusu,
- xxxxxx dávek (xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx použije) a xxxxxxxxxxx,
- údaje x xxxxxxxxx odpovědích xxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxx účinku, xxxxx ji xxx xxxxxxxx,
- doba xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj o xxxxxxx zvířat xx xxxxx sledování,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné xxxxxxxxx,
- oftalmologické xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxxxxxx vyšetření x xxxxxx výsledky (xxxxxx xxxxxxxx případných xxxxxx xxxx),
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx je xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- interpretace xxxxxxxx.
X.29. XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXX
(90xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx xx xxxxxxxxxx)
1. XXXXXX
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Několik xxxxxx xxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx dobu, x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, každá xxxxxxx jedné xxxxxxxxxxx, x xx po 90 xxx. Použije-li xx pro dosažení xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx kontrolní skupinu xxx vehikulum. Během xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx pozorují x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx účinků. Xxxxxxx, která xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xx, která přežijí xx xxxxx xxxxxx, xx pitvají.
1.2 Popis xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Nejméně 5 xxx před xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v podmínkách xxxxx a krmení, x xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Před xxxxxx se zdravá xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx skupin. Pokud xx xxxxx, přidá xx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx vehikulum xxx, xxx v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx užije xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo jiná xxxxxxx, xxxx být x xxxx známo, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Existují-li vhodná xxxxxxxxxx data, je xxxxx je xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Pokusná xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx známy důvody xxxxx xxxx. Pracuje xx xx xxxxxxx xxxxxxxx zvířatech x xxxxx xxxxxxxxx pokusných xxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx nemá variační xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx před xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xxxxxxxx se xx xxxxxx stejný xxxx x xxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx třeba xxxxxx nejméně 20 xxxxxx (10 xxxxx x 10 samců). Xxxxxx musí být xxxxxxxxx x xxxxx xxx březí. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx o počet xxxxxx, která budou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Mimoto xx xxxxx exponovat xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) 20 zvířat (10 xxxxxx každého pohlaví) xx dobu 90 xxx nejvyšší xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx 28 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.3 Expoziční xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xx nejméně xxx skupiny s xxxxxx úrovní xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx - xxxxx xx xxxxxxx - v xxxxxxxxxxx stejné xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx). S xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx účinky, xxx xxxxxxxxxx xxxxx uhynutí xxxx xxx v xxxxx xxxxx. Pokud xxxxxxxx xxxxxx expozice x xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ideálně xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx-xx se xxxx než 3 xxxxxx xxxxxxxxxxx, mají xxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky. Xx xxxxxxx x xxxxxx x střední xxxxxxxxxxx x v kontrolní xxxxxxx xx počet xxxxxxx měl xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx obtížné.
1.2.2.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx 6 xxxxx xx xxxxxxxx rovnováhy xxxxxxxxxxx studované xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx i jiných xxx xxxxxxxx.
1.2.2.5 Expoziční xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 12krát xx xxxxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x rovnoměrné xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx atmosféře. Použije-li xx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx tak, xxx xx nejvíce xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxx inhalační xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx nejvyšší. Xxx xxxxxxxxx stability atmosféry x xxxxxxxxxx boxu xxxxx xx x xxxxxx celkový xxxxx xxxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxx. Je možné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx-xxxxxxx, samotné hlavy xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx minimalizují xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.6 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx denně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx období xxxxxxxx i xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx toxické xxxxxx. Xx třeba xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxx, xx xxxxxx xx xxxxxx x xxxx odezní xxxxxxx účinky.
1.2.3. Popis xxxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx denně, 5 - 7 xxx v xxxxx, xx xxxx 90 xxx. Zvířata x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx k xxxxxxxxxx pozorování, jsou xxxxxxxxxx dalších 28 xxx bez xxxxxxxx, x posouzení xxxxxxxx x xxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx během experimentu xx xxx 22 xX ± 3 xX. Relativní vlhkost xx xxx xxxx 30 % x 70 %, x xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx). Během expozice xx nepodává xxxxxxx xxx xxxx.
Používá xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx provést xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx koncentrací. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx x celém xxxxxxxxxx xxxx xxxx stejné. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx stabilních xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
x) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx).
x) Skutečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx x dýchací xxxx. Xxxxx jedné xxxxxxxx xx nemá xxxxxxxxxxx odchylovat xx xxxxxxx xxxxxxx o xxxx xxx ±15 %. X xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxxxx experimentu mají xxx koncentrace xxx xxxxxxxx, jak xx xx prakticky xxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx je třeba xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx, aby byla xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Během expozic xx xxxx tak xxxxx, xxx je xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic.
x) Xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx
x) Během xxxxxxxx x xx xx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx; xxxxx xxxxx má xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx příznaky xxxxxxxxx xxxxxx x zaznamenávat xxxxxx výskyt, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx, xxx, xxxxxxx, xxxxxxx x krevního xxxxx, xxxxx funkce xxxxxxxxx x centrální xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx. Hmotnosti xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx pravidelnou xxxxxxxx xxxxxx, xxx pokud xxxxx nedocházelo ke xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx. x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx skončení xxxxxx xx všechna xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
U xxxxx xxxxxx xxxxxx kontrolních xx xxxxx provádějí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
(x) Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx má xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx, xxx přinejmenším u xxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxxxx skupin. Xxxxxx-xx xx xxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xx konci xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xx xxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx, koncentrace hemoglobinu, xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x testy xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx čas (Xxxxxxx), xxxxxxxxxx čas či xxxxx xxxxxxxxxx.
(x) Xx xxxxx pokusu xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx krve. Xxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx stanovit xxxxxxxxxxx elektrolytů, metabolismus xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx testů je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, sodík, xxxxxxx, glukózu xx xxxxx (trvání doby xxxxxxxxx xx volí xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x kmene), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (dříve xxxxxxxx-xxxxxxx xxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, celkový bilirubin x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx. Mezi xxxxx charakteristiky, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxx toxikologické xxxxxxxxx, patří xxxxxxxxx: xxxxxx, hormonů, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx x případě potřeby xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků.
(x) Xxxxxxx xxxx xx nevyžaduje xxxx xxxxx xxxxxx, ale xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx pozorované xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx dřívější kontrolní xxxx, xx se xxxxxx xxxxxxxxx hematologických x biochemických xxxxxxxxx xxxxx xxxx začátkem xxxxxxx.
1.2.3.1 Xxxxx
X xxxxx xxxxxx použitých xx xxxxxx xx xxxxxxx pitva xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, všech tělních xxxxxx, xxxxx, xxxxxx x břišní xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx žláza (s xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx vlhkém xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx vhodném médiu x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx histopatologická xxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx postižením, xxxxx (xxxx xx xxxxxxx neporušeny, xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx - xxxxxxxx xxxxxx xx považuje xx xxxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxx, mozek - x řezech xxxxxx/xxxx, xxxx xxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxx, štítná xxxxx/xxxxxxxxx xxxxxxx, tkáň xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, srdce, xxxxx, xxxxxx xxxxx, játra, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx, varlata x xxxxxxxxx, děloha, (přídatné xxxxxxxx xxxxxx), (xxxx), xxxxxxx (xx-xx přítomen), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxx a xxxxx střevo, xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, reprezentativní xxxxxxxxxx uzliny, (xxxxxx xxxxxx xxxxx), (stehenní xxxx), periferní nerv, (xxx), xxxxxx xxxx x kostní dření, (xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ploch), (xxxxxxx xxxxx ve xxxxx xxxxxxxx - xxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxx). Xxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) Xxxxx histopatologické xxxxxxxxx respiračního xxxxxxx x ostatních xxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx zvířat xxxxxxx, xxxxx byla xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x x zvířat kontrolní xxxxxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx.
(x) Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx orgány v xxxxxxxxx dávkových xxxxxxxxx.
(x) Plíce xxxxxx xx xxxxxxxxx s xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx poskytuje xxxxx xxxxxxxxxxx stavu xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xx x zvířat xxxxxx skupin xxxxxx xxxxxxxx rutinně, xxxx xx xxxx provést xxxx xx orgánech, xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x vysokou xxxxxxxxxxx.
(x) Používá-li xx satelitní xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx u ostatních xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx. X xx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx patrný xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx x lézemi, xxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x jednotlivými typy xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xx x xxxx xxxxx xxxxxx kteroukoliv uznávanou xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Zpráva x xxxxxxx pokusu xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx informace:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxx pokusu: Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx, systému xxxxxxxx částic x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx likvidace xxxxxxxxx xxxxxxx x způsobu xxxxxxxx zvířat x xxxxxxxxxxxxxxx boxu, pokud xx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x distribuce xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx o xxxxxxxx xx sestaví xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxxxx xxxx údaje:
a) xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
b) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx,
x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx přiváděné xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx vzduchu),
x) xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx,
x) skutečná xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
x) medián xxxxxxxxx xxxxxx (u xxxxxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx,
- úroveň xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx během xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx údaj x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx byly xxxxxxxxxx jednotlivé abnormální xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx tělesné hmotnosti,
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx popis xxxxx histopatologických xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.30. TESTOVÁNÍ XXXXXXXXX TOXICITY
1. METODIKA
1.1 Princip xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, jedna xxxxx na xxxxxxx, xx větší xxxx xxxxxx zvířat. Xxxxx x po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx pozorována xx xxxxxx sledování xxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx standardních podmínkách xxxxx 5 xxx xxxx započetím xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx zvířata xxxxxxx rozdělena do xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.2 Testovací podmínky
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx. Xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxx je možno xxxxxx x xxxxx xxxxx (hlodavce xxxx xxxx). Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kmenů laboratorních xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx xx nejdříve po xxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx ± 20 % od xxxxxxx. V případě, xx xxxxxxx studii xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx použít stejný xxxx x xxxx x xxxx studiích.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx 40 xxxxxx (20 samic x 20 samců), xxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxx xxxxx. Xxxxx je xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx zvířata xxxx xxxxxxxxxx testu, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx zvířat (xxxxxxxxxx) xx možné xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxx xxx 4 xx xxxxxxx pohlaví xx xxxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx x xxxxxxxxx expozic
Xx třeba xxxxxx xxxxx xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx nadměrné xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx prokazatelné xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx x nízkými xxxxxxx. Výběr xxxxx xx xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx zvířata xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx podávána v xxxxx xxxx xxxx x potravě, je xxxxx xxxxxxxx, xxx x xx měla xxxxxxx stálý xxxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx xxxxxxxxx x každém xxxxxx x xxxxxxxxxx skupině, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx aktivita xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx se xxxxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx, která není xxxxxxxxxx xxx vehikulu.
1.2.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx. Volba způsobu xxxxxx závisí xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x pravděpodobném způsobu xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx aplikace xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx problémy. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx kožního xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx odvozena x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x znalosti xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx
Xxx, kde xx testovaná látka xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx xxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xxxx xxx exponován xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx nebo podanou x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx se měla xxxxx podávat xxxx xxx v týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx pět xxx v týdnu xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx vyvolat "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx v xxxxxx xxx aplikace, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x následné xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx přijatelné.
Xxxxxxxxx xxxxxx
Protože xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx podrobněji xxxxxxxxx o xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, takže xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx ustálení koncentrace xxxx hodin xxxxx xx pět xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), nebo x návaznosti na xxxxxx expozici x xxxxxxxxx, 22 - 24 hodin xxxxx xx xxxx xxx x týdnu (kontinuální xxxxxxxx), x přibližně xxxxxx hodinou pro xxxxxx zvířat denně xx stejnou xxxx xxx, xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. V xxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx fixním xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx x stálou xxxxxxxx xx x xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx delším xxxxxxx xxxxx víkendu.
Xxxxx přerušované xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx cílech xxxxxx x na lidské xxxxxxxx, xxxxx xx xxx simulována. Xxxxxxx, xx třeba vzít x úvahu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Expoziční xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx komorách, xxxxxxx konstrukce xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx hodinu, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx přísun xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx komory xx xxxx xxx xxxxxxxxxx konstrukci, xxx xxx byly xxxxxxxxx xxxxxxxx srovnatelné ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx prostřední. Komory xx xxxx minimalizovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(a) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx;
(b) xxxxxxxxxxx: během xxxxx xxxxxxxx by koncentrace xxxxxxxxx xxxxx neměla xxxxxxx xxxx než 15 % xxxxxxx xxxxxxx;
(x) xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxx udržována v xxxxxxx 22 ± 2 xX x xxxxxxx v xxxxxxxx 30 - 70 % vyjma případů, xxx xx xxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx komory. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx kontrolovány xxxxxxxx;
(x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: měla xx xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx pevných xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx měly xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx atmosféry xxxxx xx odebírají x dýchací zóny xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx měl xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx xx gravimetricky xxxxxxxxx xxxxxx suspendovanému xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx část aerosolu xxxx respirabilní. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx prováděna xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x poté xxxxx xxxxxxx xxx často, xxx bylo možno xxxxxxxx stabilitu distribuce xxxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxx exponována.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx 12 měsíců.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
1.2.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Dodatečná pozorování xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx ztráty zvířat xx studie, xxxx. xxxxx nebo xxxxxxx xx xxxxxxx u xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx, která xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx spolehlivě zachytil xxxxxxx a progrese xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, x xxxx xx xxxxxx minimalizace xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx klinické xxxxxxxx včetně neurologických x očních xxxx x všech xxxxxx, x xxxx případy xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx toxických xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx.
Hmotnost se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx prvních 13 xxxxx období xxxxx x aspoň xxxxxx xx xxxxx xxxxx po xxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x xxxx xxx, xxx je xxxxxxxxx látka xxxxxxxx x pitné xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx x xxx přibližně xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx stav xxxx změny xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. obsah xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx erythrocytů, celkový xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx srážlivosti) xx měla být xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxxxxx x xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, a na xxxxx xx vzorcích xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx nehlodavců xxxx. xx 10 potkanů xx pohlaví z xxxxx xxxxxxx. Xxx xxx xx to xxxxx, vzorky ve xxxxx intervalech by xxxx xxx od xxxxxxxx xxxxxxx. Navíc xx měl být xxxxxxx xxxxxx před xxxxxx od xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx zhoršený xxxxxxxxx xxxx zvířat xxxxx studie, xxx xx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx zvířat ve xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a x xxxxxxx. Pokud xxxx xxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx patologických xxxx naznačí xxxxxxx, xxxxxxx xx x x xxxxxxx x xxxxxx nejblíže xxxxx.
1.2.3.3 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxx 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx intervalech xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxx:
- vzhled xxxx, objem x xxxxxxx x jednotlivých xxxxxx,
- proteiny, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx- xxxxxxxxxxxxx).
1.2.3.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx intervalech x xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx biochemická xxxxxx xx všech nehlodavců x 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx tytéž xxxxxxx ve všech xxxxxxxxxxx. Xx nehlodavců xx xxxxx toho xxxxxxxx xxxxxx před xxxxxx. X těchto xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx x jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
- celková xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- koncentrace xxxxxxxx,
- xxxxx xx funkci xxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx glutamát xxxxxxx xxxxxxxxxxxx1), glutamát xxxxxx xxxxxxxxxxxx2), gamma xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx ledvin, xxxx. xxxxx močoviny v xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx aminotransferáza
2) xxxx xxxxx jako xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
1.2.3.5 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxx během xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x moribundním xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx léze, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx změn s xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx x tkáně xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. To xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx:xxxxx3) (xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, kory xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxx, xxxxx, xxxxx, slinných xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), xxxxxxxxxxx3), jícnu, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, ilea, xxxxxxx střeva, tračníku, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx, slinivky, xxxxx3), akcesorních xxxxxxxxxx xxxxxx, samičí mléčné xxxxx, xxxx, svaloviny, xxxxxxxxxxx xxxxx, míchy (xxxxx, xxxxxx x xxxxxxx), sterna x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx optimální cestou xx konzervaci xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx zásadní pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx speciálních xxxxxxxx, xxxx jsou inhalační xxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxx respirační xxxxx xxxxxx nosu, xxxxxx x hrtanu.
Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xx měly xxx k dispozici xxxx xxxxxxxxxxxxxx vyšetřením, xxxxxxx mohou xxx xxxxxxxxxx významné xxxxxxx.
3) tyto orgány x 10 zvířat xx xxxxxxx x xx skupinu x xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxx a dále xxxxxx xxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx
1.2.3.6 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx tumory x xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Navíc xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
(a) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxxx popisem xxxxx lézí nalezených:
1. x všech xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx utracena xxxxx xxxxxx,
2. x xxxxx zvířat xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx,
(b) xxxxxx xx tkáně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx pravděpodobně xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látkou xxxx xxxxxxxx xxxx ve xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxx, xxx výsledky svědčí xxx xxxxxxxx zkrácení xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx vyvolání xxxxxx, které xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx s xxxxxxxx nižší dávkou xx vyšetří xxxxxxxx xxxxxxxx,
(x) informace x xxxxxxxxx lézí, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x použitém xxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx. xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jsou nezbytné xxx správné xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x zvířat s xxxxxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx. Xxxxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x testu
Xxxxxx x testu xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx informace:
- živočišný xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxx zařízení včetně xxxxxxxxxx, typu, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx boxu, xxxxx xx xxxxxxx. Xxxx xx třeba popsat xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, vlhkosti, x xxx, kde xx xx žádoucí, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxx: xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) a xxxx xx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
(x) xxxxxxx x vlhkost xxxxxxx
(c) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vstupující xx inhalační aparatury xxxxxx objemem xxxxxxx)
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx
(x) xxxxxxxx koncentrace v xxxxxxx xxxx
(x) xxxxxxx velikosti xxxxxx (xx-xx xx xxxxxxxxxx)
- dávkové úrovně (xxxxxx vehikula, je-li xxxxx) x xxxxxxxxxxx
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dávky
- xxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxx
- doba xxxxx během studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx do xxxxx
- xxxxx xxxxxxxxx x jiných xxxxxx
- xxxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx příznak x jeho xxxxx xxxxx
- data x xxxxxxxx potravy x xxxxxxx hmotnosti
- xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx
- testy klinické xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (včetně xxxxxxxx xxxxxxx xxxx)
- xxxxxxx nálezy
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx nálezů
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
- xxxxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.31. XXXXXX XXXXXXXXXXXX - XXXXXXXX X NEHLODAVCI
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává x xxxxxxxxxxxxxx dávkách xxxx xxxxxxxxxxxxx několika xxxxxxxx xxxxxxx pokusných xxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxxxx skupinu, xxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx datem xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx je použita x dalšímu xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx- x xxxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx x velikosti jsou xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5 xxx xxxx započetím xxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Oplozené xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Oplodnění xxxx xxx zajištěno přirozenou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Testovaná látka xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Aplikace xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx organogeneze. Xxx xxxx termínem xxxx xxxxx xxxxxxx hysterektomií x xxxxxxxxx sledování xxxxxxxxxx skeletu a xxxxxxxxx xxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxxxxx zpomaleného xxxxx, xxxxxxxx osifikace x krvácení xx xxxxxx.
1.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Běžně xxxxxxxxxxx druhy jsou xxxxxx, myš, xxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx potkan x xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kmeny. Používaný xxxx by xxxxx xxx nízkou xxxxxxxx x měly xx xxx x xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.2.2 Počet x xxxxxxx
Pro xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx 20 xxxxxxx xxxxxxx, xxxx nebo xxxxxx xxxx 12 xxxxxxx xxxxxxx. Ke sledování xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx dostatečný xxxxx xxxx x xxxxxx.
1.2.2.3 Xxxxx
Je třeba xxxxxx xxxxx xxx xxxxx x jednu xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx, že xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx do xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxx: xxxxx být xxxxxxxxxxx xxx mít xxxx xx reprodukční schopnosti. Xx zvířaty x xxxxxxxxx(xx) skupině(ách) xx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxx xx zvířaty x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx nejvyšší xxxxx xxxxxxxxx látky xx x xxxxxxxx xxxxxxx měla x xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxx xx mírné snížení xxxx, xxx xx xx xxxx jak 10 % xxxxx. Xxxxx úroveň dávek xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx účinky. Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx voleny xxx, xxx byly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
1.2.2.4 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx, xx látka x xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx 1000 xx.xx-1 prokazatelně xxxxxxxx xxxxxxx embryotoxicity xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
1.2.2.5 Xxxx expozice
Xxxxxx xxxx xxxxx xx xxx, kdy je xxxxxxxxxx xxxxxxxxx zátka x/xxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxx). Xxxx xxxxxxxx xx xxxx zahrnovat xxxxxx hlavní organogeneze. Xx xxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 6. xx 15. xxx x xxxxxxx x myši, 6. xx 14. xxx x xxxxxx x 6. xx 18. xxx x xxxxxxx. X případě, xx xx za xxxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxx pozorováno xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xx třeba připočítat x předchozím xxxxxx xxxxx den. Podle xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx jeden xxx xxxx xxxxxxxxxx porodem.
1.2.2.6 Xxxxxx xxxxxxxxxx
Každý xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Další sledování x opatření jsou xxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx stejnou xxxx.
Testovaným samicím xx testovaná xxxxx xxxxxx denně xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx testu. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xx počátku xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vážení. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx třeba ihned xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Samice xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx makroskopicky xxxxxxxx. X xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx porodem. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx období xxxxxxxx, ale xxxxxxx xx komplikacím při xxxxxxxxxxxx výsledků po xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx změny xxxx x xxxxx, xxx x xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x centrálního xxxxxxxxx xxxxxxx, somatomotorické aktivity x xxxxxxx. Každý xxxxx xx xxxxx xxxxx spotřebu xxxxxxx x vážit zvířata.
1.2.3.1 Xxxxx
Xxxxx dojde x xxxxxxx xxxxx xxxx na xxxxx xxxxxx, xx xxxxx x samic makroskopicky xxxxxxxx na morfologické xxxxxxxxx xxxx patologické xxxxx, které xxxxx xxx vliv na xxxxxx březosti. Ihned xx smrti xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x její xxxxx xxxxxxxx x ohledem xx úmrtí xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Obvykle xx xxxxx xxxxx dobu xxxxx xxxxxxx v xxxxxx. X xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx počet xxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx každý zárodek. X potkanů, myší x xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x zhruba xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx abnormity xxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xx xxxxx xxxxx zárodek důkladně xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx je xxxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx testu, xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxx a procento xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x abnormalitami xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx abnormit x xxxxxxxxxxxx x určitým xxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx vhodnou statistickou xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx uznávané xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1. Zpráva x xxxxx
Xxxxxx x testu by xxxx xxxxx možno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- druh, xxxx, xxxxx, xxxxxxxx ustájení, xxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxx (xxxxxx xxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx,
- xxxxx xxx účinku (xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx),
- dobu xxxxx xxxxx studie xxxx zda zvířata xxxxxxx do xxxxx xxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx hmotnosti x xxxxxxxx potravy,
- xxxxx xxxxxxxx x údaje x xxxx (xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx),
- xxxxx x xxxxxxxxx (xxxx/xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x měkkých xxxxx),
- údaje x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx/xxxxx xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x měkkých xxxxx),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.32. TEST XXXXXXXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxxx obvykle xxxx xxx x týdnu, xxxxxxx cestou, několika xxxxxxxx pokusných zvířat, xxxxx dávka xx xxxxxxx, po xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx x po xxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx zvířata denně xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxx tumorů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxxxx podmínkách xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx se mladá xxxxxx zvířata náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Preferovaným xxxxxx je potkan. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx i další xxxxx (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx zvířata x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx laboratorních zvířat. Xxxxxxxx xx xxxx xxx započata co xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xx začátku xxxxxx xx neměl xxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx než ± 20 % od xxxxxxx. V případě, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, je xxxxx použít xxxxxx xxxx a xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Xxxxx a xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx 100 xxxxxx (50 samic x 50 xxxxx) xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Samice xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, počty xx xxxxx zvýšit x xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx před xxxxxx xxxxxx.
1.2.3 Xxxxxxx úrovně x xxxxxxxxx expozic
Xxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx kromě xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Nejvyšší xxxxxxx úroveň by xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xx mírný pokles xxxxxxxx přírůstků (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx jinými xxxxxx xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x délkou života xxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx by neměla xxx nižší xxx 10 % xxxxxx xxxxx. Střední xxxxx/xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx pásmu xxxx xxxxxxx a xxxxxx dávkou.
Volba xxxxxxxxx xxxxxx by xxxx vzít v xxxxx xxxxxxxxx testy x xxxxxx toxicity.
Xxxxxxxx xx provádí xxxxxxx xxxxx. Je-li xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xx potravy, xxxx xx xxx xxxxx k xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Souběžná xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx skupinou, xxxxx expozice xxxxxxxxx xxxxx.
Ve xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nebo xxxxxxx-xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx ani vehikulu.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Tři xxxxxx cesty xxxxxxxx xxxx xxxxxx, dermální x inhalační. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx závisí xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx charakteristikách testované xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx expozice u xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Xxx, kde xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xx-xx požití xxxxx z xxxx, xxxxx může být xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx tomu xxxxxx xxxxxx. Zvířata xxxxx xxxxxx testovanou xxxxx x xxxxxxx, rozpuštěnu x xxxxx xxxx xxxx podanou x xxxxxxx.
Ideálně xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx dní x týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx pět dnů x xxxxx může xxxx k vymizení xxxxxxxx xxxx naopak xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx výsledky x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Nicméně, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx na xxxx může xxx xxxxxxx jako simulace xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx způsob xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx než xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx zde xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx instilace může xxx platnou alternativou xx specifických xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx zvíře xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx ustálení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xx pět xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx v xxxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxx v xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx xxxxx po xxxx xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), x přibližně xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx denně xx xxxxxxx xxxx xxx, xxxxxxxx i pro xxxxxxx expozičního xxxx. X xxxx případech xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx x xxxxxx expozicí xx x xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 hodin xx xxxxx účinků xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx víkendu.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx a xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx, je xxxxx vzít v xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx, výhody xxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxxxxx pití x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx komory
Xxxxxxx xx exponují v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, jejichž xxxxxxxxxx xxxxxxxx dynamický xxxxx pro xxxxxxx 12 xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, aby xxx zajištěn xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, tak xxx xxxx expoziční xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx mírný xxxxxxx x xxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx do okolního xxxxxxxxx. Xxxxxx by xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) Xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx komorou xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
(x) Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxx expozice by xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx.
(x) Xxxxxxx x xxxxxxx: pro xxxxxxxx, xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 22 ± 2 °C a xxxxxxx v xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
(x) Měření velikosti xxxxxx: xxxx by xxx stanovena xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx komor u xxxxxxxx xxxx pevných xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx odebírají x dýchací zóny xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx být xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, kterým je xxxxx xxxxxxxxxx, x xxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx suspendovanému xxxxxxxx, i xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx prováděna xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx tak xxxxx, xxx bylo možno xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx. Xxxx xx měl xxx xxxxxxx x 18 xxxxxxxx x myší x xxxxxx a 24 xxxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx zvířat x delší xxxxx xxxxxx xxxx. x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx ukončení xx xxxx xxx 24 měsíců xxx xxxx a křečky x 30 xxxxxx xxx xxxxxxx. Alternativně, xxxxxxxx takové xxxxxxxxxxx xxxxxx xx přijatelné, xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x nejnižší dávky xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx na 25 %. Při xxxxxxxx testu, xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx. Tam, xxx uhyne xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxx k xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx projevy, xxxxx xx činily xxxxxxxx. Xxx xxxx xxxxx xxxxx negativní xxxxxxxx xxxxx, nesmí xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x žádné xxxxxxx větší než 10 % a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx x myší x xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx zvířat v xxxxxxx zahrnuje xxxxx xxxx x xxxxx, xxx x sliznic, xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx systému, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx kontrola xxxxxx je nutná, xxx se zabránilo xxxxxxx zvířat xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx zvířata xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxx příznaky x xxxxxxxxx xx xxxx být zaznamenány x všech zvířat. Xxxxxxxx pozornost je xxxxx věnovat vývoji xxxxxx: xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx, rozměry, vzhled x xxxxxxxx každého xxxxxxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potravy (x xxxx tam, xxx xx testovaná xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx a xxx xxxxxxxxx ve tříměsíčních xxxxxxxxxxx, xxxxxx by xxxxxxxxx stav nebo xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx nutnost xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxx týdně xxxxx xxxxxxx 13 xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx tomto xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Pokud pozorování xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx x zhoršeném xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx diferenciální xxxxx bílých krvinek.
Xx 12 měsíců, xx 18 měsíců x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx provede xxxxxx nátěr xx xxxxx zvířat. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx tato xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx vyšetří x x xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxx nižší, xxx xx xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxx, která zemřela xxxxx pokusu nebo xxxx utracena, xxxxxxx xx nemocná. Všechny xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx, xxxx léze, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx uchovat.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx měly xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxx možné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření: xxxxx (xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx thymu, xxxxxxx x plíce, xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, pankreas, xxxxxx, děloha, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, kůže, xxxxx, žaludek, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx, xxxxx xxxxxx, xxxxxxx, konečník, xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxx, svalovina xxxxxx, periferní xxxx, xxxxxxx s kostní xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, mícha xx třech xxxxxxxx (xxxxx, xxxxxxx hrudní x bederní) x xxx.
Xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx těchto xxxxx. Xxxxxxxx plic x xxxxxxxxxxx studiích xx zásadní xxx xxxxxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, hltanu x xxxxxx.
1.3.2.3 Histopatologické vyšetření
(x) Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx zvířat, která xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx během testu, x x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx.
(x) Xxxxxxx xxxxxx viditelné xxxx x léze, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx.
(x) Je-li xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx skupinou x xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx, histopatologické xxxxxxxxx se provede x xxxxx orgánu xx xxxxx x x xxxxxxx skupinách.
(x) Xx-xx xxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx podstatně xxxxx xxx u xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxxx nižší xxxxxx.
(x) Je-li xx xxxxxxx s vysokou xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mohly xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, je xxxxx kompletně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. ÚDAJE
Xxxxx xx sumarizují xx xxxxx tabulek, ukazujících xxx xxxxxx testovanou xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, doba xxxxxx xxxxxxxxx a počet xxxxxx x tumory xxx xxxxxxxx. Výsledky xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mohou xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxx
Zpráva o xxxxx bude, pokud xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, dieta,
- podmínky xxxxx: Xxxxx expozičního zařízení xxxxxx konstrukce, typu, xxxxxxx, xxxxxx vzduchu, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx klimatizace, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vycházejícího x xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx používá. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx xx xx žádoucí, stability xxxxxxxxxxx xxxx velikosti xxxxxx aerosolu. Xxxxx x expozici: xx xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx (xxxx. směrodatná xxxxxxxx) x xxxx xx xxxxxxxxx:
(a) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx zařízení,
(x) teplotu x xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx objemem xxxxxxx),
(d) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx použito,
(x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx,
(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (tam xxx xx xxxxxxxxxx),
- xxxxxxx úrovně (včetně xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx a xxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxx během xxxxxx nebo xxx xxxxxxx přežila až xx konce,
- xxxxxx toxických xxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxx,
- popis xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxx pozorován xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx další xxxxx,
- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxx hematologické xxxxx x výsledky,
- xxxxxx patologicko-anatomické,
- detailní popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- statistické xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx metod,
- xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.33. XXXXXXXXXXX XXXX XXXXXXXXX TOXICITY/KARCINOGENITY
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx testu
Cílem xxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxxxxxxxx xx určit xxxxxxxxx a karcinogenní xxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx dlouhodobé xxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxx xx xxxx karcinogenity xxxxxxx alespoň xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxx než xxxxxxxx xxxxx použitá při xxxxx karcinogenity. Zvířata x testu xxxxxxxxxxxxx xxxx zkoumána jak xx obecnou xxxxxxxx, xxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx podává xxxxxxx xxxx dní x xxxxx, vhodnou xxxxxx, několika xxxxxxxx xxxxxxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx. Během x po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx pozorována xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx tumorů.
1.2 Xxxxx xxxxxx
Zvířata se xxxxxxx x pokusných xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx nejméně xxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Před xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx skupin.
1.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx. Na xxxxxxx předchozích xxxxxx xx xxxxx použít x xxxxx druhy (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx zvířata z xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxx co xxxxxxxx xx xxxxxxxxx mláďat. Xx začátku xxxxxx xx neměl rozdíl xx váze zvířat xxxxx xxxx xxx ± 20 % xx xxxxxxx. V xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx orální xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxx druh x xxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.2.2 Počet x xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xx použije xxxxxxx 100 zvířat (50 xxxxx a 50 xxxxx) xx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx by měly xxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx. Xx-xx plánováno xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx zvýší x xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx koncem xxxxxx.
Exponovaná xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx) xxx xxxxxxxxx patologie xxxx, xxx xxxx tumory, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx 20 zvířat xxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx satelitní skupina xxxxxxx by xxxx xxxxxxxxx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
1.2.3 Dávkové xxxxxx a frekvence xxxxxxx
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx zvolí xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx souběžné xxxxxxxxx skupiny. Xxxxxxxx xxxxxxx úroveň xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, jako xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx 10 %), xxx xxxxxxxxxxxxxx změn xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx jinými xxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx interferovat x xxxxxxxxx růstem, vývojem x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx vyvolat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxx než 10 % xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx dávku/dávky xx xxxxx xxxxxxxx xx středním xxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx.
Pro xxxxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx skupiny x xxxxxxxx xxxxxxxxx satelitní xxxxxxx. Xxxxxx dávka xxx exponovaná xxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxxxxxx xxxxxxxx příznaky xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx denně. Xx-xx látka xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx přimíšena xx xxxxxxx, měla by xxx stále k xxxxxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látce.
Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx-xx se xxx xxxxxx aplikaci xxxxxxxxxx, xxxxx biologická aktivita xxxx charakterizována, xxxxxx xx xxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx exponována xxx xxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx hlavní xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx způsobu xxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx x chemických xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx způsobu xxxxxxxx x xxxxxxx.
1.2.5.1 Xxxxxx xxxxxx
Xxx, xxx xx testovaná xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a je-li xxxxxx jedna x xxxx, jimiž může xxx exponován člověk, xxxx se přednost xxxxxx aplikaci, pokud xxxxxx proti xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x potravě, xxxxxxxxxx x pitné xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx v týdnu, xxxxxxx xxxxxxxxx pět xxx x týdnu xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx "abstinenční" xxxxxxxx v xxxxxx xxx aplikace, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x následné xxxxxxxxx. Xxxxxxx, především s xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
1.2.5.2 Xxxxxxxx xxxxxx
Aplikace xxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx hlavní xxxxx xxxxxx u xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx vyvolání xxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2.5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx cestě xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Dlouhodobé expozice xxxxxxx napodobují xxxxxxxxxxxxx xxxxxx expozice, xxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxx po pět xxx x xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx expozici x xxxxxxxxx, 22 - 24 xxxxx denně xx xxxx xxx x týdnu (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx), s přibližně xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxxx xx stejnou xxxx xxx, xxxxxxxx i xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. V obou xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx exponována xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx x xxx, xx x xxxxx xx xxxxx 17 - 18 xxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxx expozice x xxxxx delším xxxxxxx během víkendu.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx studie x xx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Nicméně xx xxxxx vzít x úvahu xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx prostředí mohou xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx a xxxxxx xxxxx expozice a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (a xxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx určité koncentrace xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Expoziční xxxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx konstrukce xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 12 výměn xxxxxxx xx xxxxxx, xxx byl xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx kyslíku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kontrolní x xxxxxxxxx komory xx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, tak xxx byly xxxxxxxxx xxxxxxxx srovnatelné xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx testované látce. Xxxxxx komory xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky do xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xx měly minimalizovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx v xxxxx udržení stabilní xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx zvířat xxxxx xxxxxxxxxx 5 % xxxxxx xxxxxx.
Měření xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(x) xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxx vzduchu xxxxxxx xx xxxx xxx nejlépe kontrolována xxxxxxxxxxx,
(x) xxxxxxxxxxx: xxxxx denní xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx testované xxxxx neměla xxxxxxx xxxx než ± 15 % xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxx x xxxxxxx: xxx xxxxxxxx, xxxxxxx by xxxx být udržována x xxxxxxx 22 ± 2 °C x vlhkost x xxxxxxxx 30 - 70 % xxxxx xxxxxxx, kdy xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x atmosféře komory. Xxx xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
(d) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx: xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx částic x xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Aerosolové xxxxxxx xx měly xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Vzorky xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x dýchací xxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx by xxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx exponováno, x měl by xxxxxxxxxxxxx odpovídat celému xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxx část xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx velikosti xxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx zajistila xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx částic, xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.2.6 Xxxxxx studie
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx zvířete xxxxxxxxx pro xxxx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxx v 18 xxxxxxxx x xxxx a křečků x 24 měsících x xxxxxxx. Xxxxxxx xxx xxxxxxx kmeny xxxxxx s xxxxx xxxxx života resp. x nízkým spontánním xxxxxxxx tumorů, xxxx xxxxxxxx xx měla xxx 24 xxxxxx xxx xxxx x xxxxxx x 30 xxxxxx pro potkany. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx studie xx xxxxxxxxxx, když xxxxx xxxxxxxxxxxxx x nejnižší xxxxx xxxx x xxxxxxxxx skupině klesne xx 25 %. Xxx xxxxxxxx xxxxx, xx kterém xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx posuzuje zvlášť. Xxx, xxx uhyne xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx dávkou xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, nemusí xx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxx bylo xxxxx xxxxx negativní xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (autolýzou, xxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx xxxxxxx) x xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 10 % x xxxxxxx xx xxxxx skupinách nesmí xxx xxxxx xxx 50 % x 18 xxxxxxxx u xxxx a xxxxxx x x 24 xxxxxxxx x potkanů.
Xxxxxxxxx skupiny 20 xxxxxxxxxxx zvířat xxx xxxxx xxxxxxx x 10 připojených xxxxxxxxxxx xxxxxx každého xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx být v xxxxxx xxxxx 12 xxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx plánováno xxxxxxxx xxx, aby umožnilo xxxxxxxx xxxxxxxxx, která xx xxxxx x xxxxxxxxx látce, xx xxxxxxxxxxxxxx projevů stárnutí.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxxxxxxxx
Xxxxx pozorování xxxxxx x klecích xxxxxxxx xxxxx kůže x xxxxx, xxx x xxxxxxx, jakož x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx, autonomního x centrálního xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx aktivity x xxxxxxx.
X xxxxxx exponované xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx) se xxxxxxx x přiměřených xxxxxxxxxxx klinické xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, xxx xx zabránilo ztrátám xxxxxx xx xxxxxx xxxx. v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, autolýzy xxxxx xxxx xxxx v xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx x pitvána.
Xxxxxxxx příznaky xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x očních xxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx tumorů: xxxx xxxxxxxx, lokalizace, xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx viditelného xx xxxxxxxx tumoru xx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx potravy (a xxxx tam, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx) xxxxx xxxxx xxxxxxx 13 týdnů x pak přibližně xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx zdravotní xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxx ukázaly xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx hmotnosti xx zaznamenávají individuálně x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx během xxxxxxx 13 týdnů xxxxxx testu x xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx po xxxxx xxxxxx.
1.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
1.3.2.1 Xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx erythrocytů, xxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxx být xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, šest xxxxxx x poté x xxxxxxxxx šestiměsíčních xxxxxxxxxxx, x xx konci xx vzorcích xxxx xx 10 xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx. Tam xxx xx to xxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx od xxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx zvířat v xxxxxxx xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx během studia, xx xxxxx vyšetřit xxxxxxxxxxxxx xxxxx bílých xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx krvinek xx provede xx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x x xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx x vyšetření xxxxxxxxxxxxx xxxx naznačí xxxxxxx, diferenciál xx xxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, než xx xxxxxx xxxxx.
1.3.2.2 Xxxxxxx moči
Vzorky xxxx xx 10 xxxxxxx každého pohlaví xx xxxxxxx xxx xxxxxxx pokud xxxxx xx stejných zvířat x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx hematologické xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx provedena xxx xx vzorcích xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx na xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx:
- xxxxxx xxxx, objem x hustota u xxxxxxxxxxxx zvířat,
- xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxxxxxx).
1.3.2.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X přibližně xxxxxxxxxxxxxx intervalech x xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxx xxxxxxxxxxx měření xx všech xxxxxxxxxx x 10 potkanů xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx vzorky xxxx xxxxxx. Z těchto xxxxxx xx připravena xxxxxx a jsou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
- celková xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- testy xx xxxxxx xxxxx (xxxx. aktivita xxxxxxx xxxxxxxxx, aktivita xxxxxxxx xxxxxxx transaminázy1), xxxxxxxx xxxxxx transaminázy2), gamma xxxxxxxx transpeptidázy, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx,
- metabolismus xxxxx, např. krevní xxxxxxx xx xxxxx,
- xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxx x xxxx.
1) xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx
2) xxxx xxxxx jako xxxxxx aspartát xxxxxxxxxxxxxxxx
1.3.2.4 Makroskopické xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx pitva xx xxxxxxx x xxxxx zvířat včetně xxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx krvinek. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxx léze, xxxx xxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx by xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxx změn x xxxxxxxxxxxxxxx nálezy.
Xxxxxxx xxxxxx a tkáně xx xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxx xxxx následujících xxxxxx x tkání: xxxxx3) (prodloužené xxxxx/xxxxx, xxxxxxxxx kory, xxxx xxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, thymu, xxxxxxx a plic, xxxxx, aorty, xxxxxxxx xxxx, xxxxx3), xxxxxxx, xxxxxx3), nadledvinek3), xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, slepého xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, lymfatických uzlin, xxxxxxxx, xxxxx3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx orgánů, xxxxxx xxxxxx žlázy, xxxx, xxxxxxxxx, periferního nervu, xxxxx (xxxxx, xxxxxx x bederní), sterna x xxxxxx xxxxx x stehenní xxxxx xxxxxx xxxxxx, x xxx. Xxxxxxxx plic x močového xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx; xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx jsou xxxxxxxxx studie, má xxx xxxxxxxx celý xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, hltanu x xxxxxx.
Xxxx-xx provedena xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx získané x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx být k xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxx patologovi xxxxxxxx xxxxxxx.
3) Xxxx xxxxxx x 10 xxxxxx xx xxxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxx mají být xxxxxxx.
1.3.2.5 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx vyšetření xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxx satelitní skupiny x vysokou dávkou x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx x satelitní xxxxxxx xxxxxxxxxx nevyšší xxxxx xxxxxx patologické změny xxxxxxxxx látkou, vyšetří xx histologicky xxxxxx xxxxxx xxxxx ostatních xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx satelitních xxxxxx x xx všech xxxxxxxxxxxx xxxxxx části xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx jejím xxxxxxxx.
Xxx testování xxxxxxxxxxxxx:
(x) xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx provede v xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, která xxxxxxx xxxx byla xxxxxxxx xxxxx xxxxx x u xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxx;
(b) xxxxxxx xxxxxx viditelné xxxx x léze, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx, se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx;
(x) xx-xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx skupinou s xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx x daném xxxxxx xx tkáni x x dalších skupinách;
(x) xx-xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx podstatně xxxxx xxx x xxxxxxx, měla by xxx kompletně zkoumána x xxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx;
(x) xx-xx xx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx odpověď, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
Údaje xx xxxxxxxxxx xx xxxxx tabulek, ukazujících xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx začátku xxxxx, xxxxx xxxxxx vykazujících xxxxxx xxxxxxxx během xxxxx, xxxx jejich xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx. Výsledky xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Mohou xxx xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxx
Xxxxxx o xxxxx xxxx pokud xxxxx xxxxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx: xxxxx expozičního xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx, xxxxxxx, zdroje xxxxxxx, xxxxxxx xxx vytváření xxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, zneškodňování xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx, pokud xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, x xxx, xxx xx xx žádoucí, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx velikosti xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx x expozici: xx xxxxx tabulky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxx:
(x) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx zařízení,
(x) xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx,
(x) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (celkové xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx inhalační xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vzduchu),
(x) xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx použito,
(x) xxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxx,
(f) xxxxxx xxxxxxxxx částic (xxx xxx relevantní),
- dávkové úrovně (xxxxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxx) x xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx a xxxx xxxxxx,
- xxxx xxxxx xxxxx studie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx do xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- výskyt xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxx ,
- xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx,
- xxxx, xxx xxx pozorován xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx,
- xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x tělesné xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxx nálezy,
- použité hematologické xxxxx x výsledky,
- testy klinické xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx výsledků xxxxxxx moči),
- xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x popisem xxxxxxxxx xxxxx,
- diskuse xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.34. XXXXXXXXXXX XXXXXXXX - XXXXXXXXXXXXXX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Testovaná látka xx xxxxxx několika xxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Samci xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx růstu x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 56 xxx u xxxx x 70 xxx x xxxxxxx), aby xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) dostávají xxxxx xx xxxx alespoň xxxx estrálních xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nepříznivý účinek xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx. Zvířata jsou xxxx připuštěna. X xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxxxxx xxxx pohlaví, x době xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx modifikovat.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx metody
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx testu xx xxxxxx mladá xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx - kontrolní x exponované skupiny. Xxxxxxx xxxx chována xxxxxxx 5 dnů xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx, x xxxxxx budou xxxxx experimentu.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxx x xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx zvířata xxxxx xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx vehikulum xxxx xxxx aditivum, xxxx být x xxxx známo, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx zvířata
1.2.2.1 Xxxxx druhu
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx. Používají xx xxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx a xxxx x/xxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx pohlaví. Xxxxxx x obou skupinách, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx xxx odstavena xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xxxxx exponovaná x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxxxxx xxx 20 xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx dostatečný počet xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnocení xxxxx xxxxx xx plodnost, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx v X xxxxxxxx, xxxxxx, xxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx F1 xx xxxxxx xx xxxxxxx.
1.2.3 Podmínky xxxxx
Xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx zvířata xx xxxxxxx. Před xxxxxxx xx těhotné xxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a je xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.4 Xxxxxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxxxx pro aplikaci xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx zvířata kontrolní xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Pokud testovaná xxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx uvážit xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, spárované xx xx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx v xxxxxxxx xxxxxxx - xxxxx to xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinku - xxxxxxxxx toxicitu, xxx xxxxx uhynutí x xxxxxxxxxx populaci. Střední xxxxx(x) by xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx by xx daly xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx dávka xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinky, xxx x xxxxxx xxx u xxxxxxxxx.
Xxx podání sondou xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx stanoví xxxxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxx zvířete x xxxxxxxxxxxx se každý xxxxx podle xxxxx xxxx. V případě xxxxxxxxx xxxxx dávky xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v 0. xxxx 6. xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxx xxxx
X xxxxxxx xxxxx x nízkou toxicitou, xxxxx se ani xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx se provádět xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pokud xxxxxxxxx xxxxxx ukáže, xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxx toxicity, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxxxx provádět xxxxxx xx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Xxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx samcům xxxxxxxxxx xxxxxxxx (P) xxxxx xx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx deset týdnů xxxx obdobím připouštění (8 xxxxx xxx xxxx). Samci se xxx xxxxxx a xxxxxxx xx konci xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx pokračuje x xxxxxxxx x xxxxx xxx použiti pro xxxxxxxx dalších xxxx x xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx rodičovské xxxxxxxx (X) xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pak xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx připouštění, v xxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx F1 xxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxx dávkovacího xxxxx xxxxx xxxxxxxx o xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. x xxxxxxx xxxxxxxxxxx x/xxxx bioakumulaci.
1.3.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x jeden xxxxx) xxxxx 1 : 2 (jeden xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).
X případě 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x týmž xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx anebo xx dobu 3 xxxxx. Xxxxx ráno xxxx samice vyšetřeny xx přítomnost xxxxxxxx xxxx vaginální zátky. Xxx 0 xxxxxxxxxxx xx definován jako xxx xxxxxx vaginální xxxxx nebo xxxxxxxx.
Xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx neplodnosti xxxx. Xx je možné xxx poskytnutím xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxxx.
1.3.3 Velikost vrhů
Xxxxxxxx použitým xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx možnost xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x své potomstvo xx okamžiku odstavení xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxx se xxxxxxxx vrhů standardizuje, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxx postup: xxxx 1. x 4. xxxx po porodu xx xxxxxxxx všech xxxx upraví vyřazením xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 samců x 4 samic xx xxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, xx možno standardizovat xx xxxx xxxxx, xxxx. 5 samců x 3 samice. Xxxx menší než 8 nelze standardizovat.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé zvíře xx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxx. Významné změny xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx příznaky xxxxxxxx xxxxxx mortality xx xxxxxxxxxxxxx. Příjem xxxxxxx xx xxxx xxxxx jak před, xxx xxxxx doby xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx denně. Xx xxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxx (x vody, xxxxx xx xxxxx xxxxxx v pitné xxxx) ve xxxxxx xxx, xxx je xxxxxxxxx váženo. Rodičovská X xxxxxxx xx xxxx xxxxx den xxxxxxxx a xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx individuálně xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
Doba xxxxxxx xx počítá od xxx 0 xxxxxxxxxxx. Xxxxx vrh se xx xxxxxxxx xx xxxxxx vyšetří x xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx utracená ve xxxxxxx xxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxx mláďata xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx xx zváží xxxx xx porodu, xx 4. x 7. xxx x xxxxx xxxxx týden xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Pozorují xx x zaznamenávají xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx a fyzickém xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx.
1.3.5 Xxxxxxxxx
1.3.5.1 Xxxxx
Xx xxxxxxxx xxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxxxxxxx vyšetří xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx změny xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx vyšetří xx xxxxxxx.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, děloha, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx x cílové xxxxxx všech zvířat xxxxxxxx P xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X případě, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx i x X zvířat ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx vyšetřují xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx již xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx podezřelých z xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx, kde je xxxxxx xxx každou xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx výsledky mají xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx metodou. Xxxx se použít xxxxxxxxxx obecně přijímaná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
3. ZÁVĚREČNÁ XXXXXX
3.1 Xxxxxx o xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx by xxxx xxxxx možno obsahovat xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx xxxxxxxxx zvířat,
- údaje x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx zvířata xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx,
- tabulka uvádějící xxxxxxxx každého xxxx, xxxxxxxxx hmotnost xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx hmotnost potomků,
- xxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, potomstvo x xxxxxxxxxxx růst,
- xxx, xxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx abnormální xxxxxxxx a jejich xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X xxxxxxxx,
- xxxxxxx nálezy,
- xxxxxxxx popis xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx, pokud xx xx xxxxx,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.35. REPRODUKČNÍ XXXXXXXX - DVOUGENERAČNÍ XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Testovaná xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx x odstupňovaných xxxxxxx.
Samci xxxxxxxxxx (X) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku v xxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx cyklu (xxxxxxxxx 56 xxx x xxxx a 70 dnů x xxxxxxx), xxx xxx xxxxxxxx jakýkoliv xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxxxxxxxx látku xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinek testovací xxxxx xx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxx poté xxxxxxxxxx. X době xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx, x době xxxxxxxxx a xxxxxx, xxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx filiální xxxxxxxx F1 v xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx x xx xx doby odstavení X2 xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxx metodu xxxxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Xxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx rozdělena xx dvou xxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx (P) jsou xxxxxxx nejméně 5 xxx xxxx zahájením xxxxxx v xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx, v xxxxxx xxxxx xxxxx experimentu. Xxxxxxxxxx xx testovanou xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx nebo x xxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxx jsou xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx látku dostávají xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx celého testu. Xxxxx xx xxxxxxx x usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx, musí být x nich xxxxx, xx nemají xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx 7 xxx x xxxxx.
1.2.2 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx P xxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx co xx druhu, xxxxx, xxxxxxx x váhy xxxx věku. Plodnost xxxx xxx ověřena x xxxx pohlaví. Xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx zahájením xxxxxxxx.
1.2.3 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx x kontrolní xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx cca 20 březích xxxxx x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxxxx. Cílem xx získat xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx, x tím xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx, růst x xxxxx potomstva xxxxxxxx X1 xx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, a xxxxx jejich xxxxxxxxx xxxxxxxx X2 xx xx odstavení.
1.2.4 Xxxxxxxx xxxxx
Vodu a xxxxxxx dostávají zvířata xx libitum. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx porodních xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xx xxx poskytnut xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx.
1.2.5 Xxxxxxxxx
Použijí xx xxxxxxx tři xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx kontrolní. Pokud xx xxxxxxx pro xxxxxxxx testované látky xxxxxxxxx, pak zvířata xxxxxxxxx skupiny xxxxxxxxx xxxxxxxxx x největším xxxxxxxx objemu. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx snižuje xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx použití xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, spárované xx xx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x ideálním případě, xxxxx to dovolí xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti xxxxx x její biologické xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx populaci. Xxxxxxx dávka(y) xx xxxx(x) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx účinky, xxxxx xx xx xxxx xxxxxxx testované xxxxx, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolávat xxxxx pozorovatelné nepříznivé xxxxxx, xxx x xxxxxx ani x xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxx nebo v xxxxxxxxx xx dávka xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zvířete x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx týden xxxxx xxxxx hmotnosti. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx mohou xxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 0. xxxx 6. xxx od xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.2.6 Limitní xxxx
X xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxxxxxx žádným xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx studie xx xxxxxx dávkových xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xx vysoká xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx toxicitu, nemá xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx úrovních.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
1.3.1 Plán xxxxxx
Denní xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx X začne xx xxxx xxxx až xxxxxx xxxxx, xxxxx xx pětidenní aklimatizaci xx odstavení. U xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx před xxxxxxx připouštění (8 xxxxx pro xxxx). Xxxxx xx xxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx v aplikaci x jsou použiti xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx někdy xxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx samicím rodičovské xxxxxxxx P xxxxx xx pětidenní xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx týdny před xxxxxxx připouštění. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pak xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx připouštění, x xxxx xxxxxxxxx xx do xxxxxxxxx X1 xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx změna xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx x vlastnostech xxxxxxxxx xxxxx, xxxx. o xxxxxxx metabolismu xxxx. x xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx generace X1 xxxxxx xx odstavu x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
1.3.2 Postup při xxxxxxxxxxx
Xx možno xxxxxx párování 1 : 1 (xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx) xxxxx 1 : 2 (xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx).
X xxxxxxx 1 : 1 xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxx ve xxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxx po dobu 3 týdnů. Xxxxx xxxx xxxx samice xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxx. Den 0 xxxxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
Vzhledem x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, zvířata xxxxxxxx F1 xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 11 xxxxx x xxxx x 13 xxxxx x xxxxxxx. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X1 se náhodně xxxxxxx xxxx z xxxxxxx xxxx téže xxxxxxx skupiny. Zvířata xxxxxxxxx xx xxxxxx xx odstavu.
Xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxx x oplodnění, xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx zjistit xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. To xx možné xxx xxxxxxxxxxx další xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx orgánů xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x spermatogenezy.
1.3.3 Xxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx je ponechána xxxxxxx porodit xxxxxxxx x pečovat x xxx potomstvo xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vrhů. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, je xxxxx dodržet následující xxxxxx: xxxx 1. x 4. xxxx xx porodu xx xxxxxxxx xxxxx vrhů xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx 4 samců x 4 xxxxx xx xxx; xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxx xxxxx, xxxx. 5 samců x 3 xxxxxx. Xxxx xxxxx než 8 xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx X2 xx provede xxxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxx
Každé zvíře xx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx za xxx. Xxxxxxxx změny xxxxxxx, příznaky ztíženého xxxx xxxxxxxxxxxxx porodu x xxxxxxx příznaky xxxxxxxx, včetně xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx. Příjem xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xxxx, xxx během xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xx vhodné xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx denně. Xx porodu x x xxxxxxx xxxxxxx xx měří příjem xxxxxxx ve xxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx váženo. Xxxxxxxxxx X x X1 xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x pak xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx individuálně xxx xxxxx dospělé zvíře.
Xxxx xxxxxxx se xxxxxx xx dne 0 těhotenství. Každý xxx se xx xxxxxxxx po porodu xxxxxxx x stanoví xx xxxxx a xxxxxxx mláďat, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx na xxxxx defekty. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx xx xxxxx xxxx xx porodu, ve 4. x 7. xxx x xxxxx xxxxx týden xx xxxxxxxx xxxxxx, kdy xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx se x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x fyzickém xxxxx xxxxx a potomstva.
1.3.5 Xxxxxxxxx.
1.3.5.1 Xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X a X1 xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx nutné xx xxxx uchovávat xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx reprodukci. Xxxxxxx xxxxxxxx X1 xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X2 se xxxxxx xx xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxx úmrtí xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X x X1 makroskopicky xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx změny, xx zvláštní xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Mláďata xxxxxxx xxxx umírající xx xxxxxxx xx defekty.
1.3.5.2 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx xxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx, prostata, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxx X x X1 xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx vyšetřeny v xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx studiích, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x všech X a F1 xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x skupiny xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx vybrána pro xxxxxxxxxxx, x dále x xxxxxx, která xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx, které xxxxxx abnormality u xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xx vyšetří x x zvířat ostatních xxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx makroskopicky xxxxxxxxx. Xxx xxx xxxx xxxxxxx, reprodukční xxxxxx xxxxxx podezřelých x xxxxxxxxxxx se xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
Xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, kde xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx počet xxxxxx na začátku xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, typ xxxx x procento xxxxxx xxxxxxxxx tyto změny.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx zpracovány xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx přijímaná statistická xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Zpráva x xxxxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxx/xxxx použitých xxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx x pohlaví xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx,
- xxxx uhynutí x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx ukončení xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxx hmotnost x xxxxxxx vrhu, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx před xxxxxxxxx,
- toxické x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx, potomstvo a xxxxxxxxxxx xxxx,
- xxx, kdy byly xxxxxxxxxx jednotlivé xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X x X1 xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx je možné,
- xxxxxxx výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
B.36. TOXIKOKINETIKA
1. XXXXXXXX
1.1 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx vhodnou cestou. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx látka xxxx xxx podávána xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx x průběhu stanovené xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Látka xxxx. xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx podle xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx být xxxxxxxxx x "xxxxxxxxxx" xx "značenou" formou xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx použito značení, xxxxxx se xxx, xxx poskytlo xx xxxxxxx informací x xxxxx sloučeniny v xxxxxxxxx.
1.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
1.2.1 Příprava
Zdravá xxxxx zvířata xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nejméně xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx otázek xx xxxx použít xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx zvířat.
1.2.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.2.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx provádějí na xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx druzích. Xxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx uvažovaných xxx xxxxx x xxxxxx toxikologických xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxx.
1.2.2.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 4 zvířat pro xxxxxx jednotlivou xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx přednost určitému xxxxxxx, ale za xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx potřeba xxxxxxxx xxxxxx xx obou xxxxxxxxx. Jestliže jsou xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx pohlaví, xxxxx xx třeba xxxxxxxx 4 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx druhů xxxxxx (xxxxxx xxx xxxxxxxx) xx xxxxx xxxxxx xxxxx počet xxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxx určení xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx brát x xxxxx jak xxxxx zvířat, xxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx bodu, xxx xxxxx xxxxxxxx xxxx, v nichž xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx-xx studován xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx úměrná xxxxxxxx studie.
Zahrnuje-li xxxxxx xxxxx počet xxxxx a sledovaných xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx zvířat xx měla počítat x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx nesmí xxx xxxx xxx 2 zvířata. Velikost xxxxxxx xxxxxx by xxxx být dostatečná xx xx, xxx xxx xxxxx resp. xxxx metabolity xxxxxxxx xxxxxxxxxx charakteristiky xx xxxx xxxxxxx, rovnovážného xxxxx x deplece.
1.2.2.3 Xxxxx
V xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx podání xx xxxx xxx použity xxxxxxx 2 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx to xxx xxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx účinky x xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx toxické xxxxxx.
V případě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx dávek xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx x podávání xxxxxx xxxxx.
1.2.2.4 Způsob xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx aplikace x xx-xx xx xxxxxx x xx xxxxxxx xxxxxxxxx tak, xxx xxxx používány x xxxxxxxxx toxikologických xxxxxxxx. Testovaná xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxxx xx kůži, nebo xxxxxxxx inhalačně xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx užitečné xxx stanovení relativního xxxxxxxxxxx xxx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxx. Navíc xxxxxx po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxx xxx získány xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx v organismu.
Xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xx možnou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx látkou. Xxxxxxxxx xx měla xxx xxxxxx xxxxxxxx rozdílům xx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx, xx-xx testovaná xxxxx xxxxxx sondou xxxx v xxxxxxx, x xxxxxxx přesného xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx-xx xxxxxxxxx látka xxxxxxxx v potravě.
1.2.2.5 Xxxx xxxxxxxxx
Všechna xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x příznaky toxicity x další xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx zaznamenávány xxxxx s xxxxx x jejich xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx.
1.3 Xxxxx xxxxxxx
Po xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx látka xxxxxx xxxxxxxx přiměřeným xxxxx. Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx možno xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx.
1.3.1 Absorpce
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx být xxxxxxx různé xxxxxx x nebo xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx1), a xx např.:
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxx. v xxxx, xxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx akutní xxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx x kontrolní x xxxxxxxx xxxxxxxxxx skupinou,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx testovanou x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x plazmě na xxxx a xxxxxxxxx x daty xxxxxxxxx x referenční xxxxxxx.
1) X této xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx ta, xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx biologickou xxxxxxxxxx dávky.
1.3.2 Xxxxxxxxxx
X xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx 2 xxxxxxxx, x xxxxx pro analýzu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxxx jeden xx xxx:
- xxx xxxxxxx celkotělové xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx informace;
- xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxx x různých časových xxxxxxxxxxx xx zahájení xxxxxxxx.
1.3.3 Xxxxxxxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx moč, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx vzduch, v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx po xxxxxx xxxxx, a xx xxx xx vyloučení 95 % z xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 7 dnů xx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx speciálních xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxx x xxxx xxxxxxx testovaných xxxxxx.
1.3.4 Xxxxxxxxxxxx
X xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx technikami. Xxxx xx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx otázky x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx studií. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vitro xxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx o xxxxxx xxxx metabolismem x xxxxxxxxx látky xxx získat x xxxxxxxxxxxxx studií např. xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, sledováním poklesu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx sloučenin xxxxxxxxxxxx - SH xxxxxxx x nebo xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx.
2. XXXXX
Získané xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx znázorněním.
Pro xxxxxx testovanou skupinu xx xxxxxx xxxxxxx x charakteristiky xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxx, xxxxx, xxxxx x xxxxxxx (pokud xx to xxxxxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxx a rychlost xxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxxx metodami. X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx studované xxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
3.1 Xxxxxx x xxxxxxx pokusu
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx by zpráva x xxxxx měla xxxxxxxxx pokud xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxx xxxx, xxxx, xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx materiálu, jestliže xxx xxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx(x) xxxxxx x xxxxxxx použitá vehikula,
- xxxxxxx x x ostatní xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xx. xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- tabulky xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxx x xxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xx xxxx,
- xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx,
- metody xxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxx,
- diskusi výsledků,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
X.37. POZDNÍ XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX - AKUTNÍ XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Xxx xxxxxxxxx a vyhodnocení xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxx vzít x xxxxx schopnost xxxxxx xxxxxxx látek xxxxxxx specifický xxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx nemůže xxx zjištěn x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X určitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx fosforu xxxx xxxxxxxxxx zpožděné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxx testovány xxxxx xxxxxxx.
Vyšetřovací xxxxx xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx nález x in vitro xxxxxx xxxx není xxxxx považovat xx xxxxx, že xxxxx xxxx neurotoxická.
1.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx látek xxxxxxxxxx x názvu xxxx xxxxxx xxxx "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" xxxxx xxxxxxxxxx neutrální xxxxxxxxx estery, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, fosfonové xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx příslušných xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, nebo xxxx xxxxx, xxxxx xxxxx způsobit xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx látek této xxxxxxx.
Xxxxxx neurotoxicita xx xxxxxxx projevující xx xxxxxx, distální xxxxxxxxxx, změnami x xxxx a periferním xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xxxxxxxx x stárnutím specifické xxxxxxxx - NTE (xxxxxxxxxx xxxxxx esterase) x xxxxxxx xxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx na pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, že v xxxxxxxxxxxxx podmínkách xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx používané xxxxx x xxxxxxx neurotoxickým xxxxxxx xx xxx-x-xxxxxxxxxxx (XXX 78-30-8, EINECS 201-103-5, chemický název: xxxx(2-xxxxxxxxxx)xxxxx kyseliny fosforečné, xxx.: xxx-x-xxxxxxxxxxxx (XXXX).
1.4 Xxxxxxx testovací xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx orálně x xxxxxx xxxxx slepicím, xxxxxxxxx xxxx možnými xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xx xxxx 21 xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx. Biochemické xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx XXX, xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxxxxx, obvykle 24 x 48 xxxxx xx xxxxxx látky. 21 dnů xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 Popis xxxxxx testování
1.5.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx dospělé xxxxxxx bez xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění a xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x x normální xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxx chována x xxxxxxxxxx chovu x xxxxxx, x jakých xxxxx během xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx se dostatečně xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx umožňující xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxx orálně xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx rozpuštěné xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx např. xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx velké xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X nevodných xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vlastnosti.
1.6 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
1.6.1.1 Xxxxxxx zvířata
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx kura domácího (Xxxxxx gallus xxxxxxxxxx) xx xxxx 8 xx 12 xxxxxx. Xxxxxxxxx se plemena x xxxxxxxxxx velikosti x chovají xx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx pohyb.
1.6.1.2 Xxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx použije kontrolní xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx.
V xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx, xxx xxxxx xxxx x xxxx xxxxx xxx utraceno xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xx xxxxx prvý x xxxxx xxx xx xxxxxx) x xxxx přežilo 21denní xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx historie. Xx xxx aspoň šest xxxxxx, xxxxxx se xxxxxx látka xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, tři xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx a xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx prvků xxxxx (xxxx. plemeno, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx).
1.6.1.3 Xxxxx xxxxx
Xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x využitím příslušného xxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxx stanovit xxxxxx, která xxxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx úmrtnost xx v xxxx xxxxxxxxx studii nezbytná xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxx xx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx cholinergní účinky, xxxxxxx xx atropin xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, x kterém xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinky. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx typů xxxxxxxxxxx xxxxx (viz metoda B.1 bis). Xxxxxxxxxx údaje xxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx studii xx xxxx být xx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxx x výsledkům xxxxxxxxx xxxxxx výběru dávky x xxxxxxx xxxxxx xxxxx 2000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx neměly xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx (xxxx) x xx 21 dnech xxx xxxxxxxxxx (xxxx). Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxx xx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx účinky, xx xx xxxxxx xxxx ochrana xxxx xxxxxxxx cholinergními účinky.
1.6.1.4 Xxxxxxx xxxx
Jestliže xxxx s xxxxxx xxxxxxx 2000 mg.kg-1 xxxxxxx hmotnosti, za xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx x látek x xxxxxxxxx strukturou xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx není třeba xxxxxxxx o xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx test xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ještě xxxxx xxxxxx dávky.
1.6.1.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxx xx 21 xxx.
1.6.2 Popis xxxxxxx
Xx xxxxxxxx prostředku, xxxxxxxxxxxxx xxxx úmrtím xx xxxxxxxx akutního xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, je xxxxxxxxx látka xxxxxx x jediné dávce.
1.6.2.1 Xxxxxxxxx pozorování
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx látky. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x průběhu xxxxxxx xxxx xxx x xxx aspoň xxxxxx xxxxx xx xxxx 21 xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx toxicity xx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxx nástupu, xxxx, xxxxxx x xxxxxx abnormálního chování. Xxxxxx xx hodnotí xxxxx xxxxxxx čtyřstupňové xxxxxxxx stupnice x xxxxxxxxxxx se xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx týdně xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx změny xxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jako xxxx. xxxxxxxxxxx po xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx minimálních xxxxxxxxx xxxxxx. Umírající zvířata x zvířata xx xxxxxxxxx x přetrvávajícími xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx.
1.6.2.2 Xxxxxxx hmotnost
Všechny xxxxxxx xx xxxxx xxxxx před xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.6.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxx xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxx skupiny (xx-xx xxxxxxx xxxxxxx) xx usmrtí x xxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx inhibice XXX xx vyjmou xxxxx x xxxxxxxx xxxxx. Xx vhodné xxxxxxxxxxxx xxxx n. xxxxxxxxxxx x analyzovat xxxx xxxx xx xxxxxxxx XXX. Xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx 24 xxxxxxxx x další tři xx 48 hodinách, xxx slepice z xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx 24 xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx klinických xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxx látka xx x organismu xxxxxxxx xxxxx xxxxxx (hodnotí xx xxxxxx cholinergních xxxxxxxx), pak je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx dvakrát xx xxx zvířat, x xx mezi 24 xx 72 xxxxxxxx xx xxxxxx látky.
X xxxxxx vzorků xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx také xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (AChE). Xx xxxx může xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxx XXxX.
1.6.2.4 Xxxxx
Xxxxx u xxxxx zvířat (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx) zahrnuje makroskopické xxxxxxxxx stavu mozku x xxxxx.
1.6.2.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx zvířat (xxxxxxxxxxx pro biochemické xxxxxx) xx histologicky xxxxxxx. Tkáně xx xxxxxx xx xxxx xx použití perfúzních xxxxxxx. Odebírá xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx xxx), prodloužená mícha, xxxxx - xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x horní krční xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x lumbosakrální, z xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx distální xxxx x n. xxxxxxxx (x xxxx xxxxx x m. xxxxxxxxxxxxx) x x n. xxxxxxxxxxx. Řezy xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx a xxxxx.
2. XXXX X XXXXXX ÚDAJŮ
Xxxxxxxxx xxxxxxxx o účincích xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx, histopatologie a xxxxx xxxxxxx) xxxxx xxxxxxxxxx další testování xx xxxxxx neurotoxicitu. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyžadovat xxxxx xxxxxxxxx.
Uvádějí xx údaje pro xxxxxxxxxx zvířata. Xxxxx xx xxxx sestaví xx tabulky. X xx musí být xxx xxxxxx experimentální xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx poškození, xxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx účinky, xxxx x xxxxxx těchto xxxxxxxxx xxxx účinků x procento zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Výsledky xxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxx výskytu, xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx změnami chování, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx x kontrolních xxxxxx.
Číselné xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx statistickou metodou. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxx v xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x pokusu xxxxxxxx tyto informace, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx:
Testovaná zvířata:
- xxxxxxx xxxxxxx;
- xxxxx x xxxxx xxxxxx;
- xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxx.;
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx;
- podrobné xxxxx x způsobu aplikace xxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x xxxxxxx xxxx;
- xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dávek;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, včetně xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx;
- xxxxxxxx xxxxx x podání ochranného xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx;
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx dávkových xxxxxx xxxxxx úmrtnosti;
- xxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxx klinických příznaků (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx);
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxx nálezy;
- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx xxxxx.
Xxxxxxx výsledků
Hodnocení x Xxxxxxxxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx XXXX XX 418.
B.38. XXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX 28DENNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxxxx x vyhodnocení xxxxxxxxx účinků xxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, který nemůže xxx zjištěn x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx testy xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx vyvolat xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx x xx vitro xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Tento 28xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx informace x xxxxxx zdravotním xxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx informace x závislosti xxxxxxxx xx dávce a xxxx xxxxxxxxxx odhad xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nepříznivé xxxxxx. Tato úroveň xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.2 Definice
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxx jako "xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx" patří xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, thioestery xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx, které mohou xxxxxxxx pozdní neurotoxicitu, xxxxxxxxxxx x některých xxxxx této skupiny.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxx x periferním nervu x xxxxxxx počátkem xxxxxx xxxxxxxx, a xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx specifické esterázy - XXX (neuropathy xxxxxx esterase) v xxxxxxx tkáni.
1.3 Xxxxxxx xxxxxxxxx metody
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx denně orálně xxxxxxxx xx xxxx 28 xxx. Zvířata xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, zaznamenává xx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxx 14 xxx xx poslední xxxxx. Xxxxxxxxxxx vyšetření, xxxxxxx xxxxxxxx NTE, xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx vybraných z xxxxx skupiny 24 x 48 xxxxx xx posledním xxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx zbývající xxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx histopatologické xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tkání.
1.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx
1.4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx zdravé xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x s xxxxxxxx xxxxx xx náhodně xxxxxxx do experimentální x kontrolní xxxxxxx. Xxxxxxx 5 xxx xxxx xxxxxxxxx studie xxxx xxxxxxx xxxxxxx x podmínkách xxxxx x xxxxxx, x xxxxxx budou během xxxxxxxxxxx.
Používají xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx slepic x xxxxxx pozorování xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxxx 7 dní x xxxxx, xxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx tobolkami xxxx jinou xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxx je xxxx. xxxxxxxxx olej. Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx velké xxxxx pevných látek x xxxxxxxxxxxx tobolkách xx xx nemusely xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx nebo xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx toxikologické vlastnosti.
1.4.2 Xxxxxxxxxxxxxx podmínky
1.4.2.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (Xxxxxx xxxxxx domesticus) xx xxxx 8 xx 12 měsíců. Xxxxxxxxx xx xxxxxxx o xxxxxxxxxx velikosti a xxxxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxx dovolují xxxxx pohyb.
1.4.2.2 Xxxxx x pohlaví
Xx xxxxx xxxxxx nejméně xxx xxxxxx dávek x xxxxx kontrolní xxxxxxx x vehikulem. X xxxxxxxx aplikace xxxxxxxxx látky se xx xxxxxxx v xxxxxxxxx skupině xxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx.
X každé xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxx x nich xxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx vyšetření (xx xxxxx x každém xx xxxx časových xxxx) x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.3 Xxxxx dávek
Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx výsledkům x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxx x toxicitě xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx úroveň dávky xx xxxxxxx toxické xxxxxx, xxxxxxx příznaky xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, nezpůsobit xxxxx xxxxxxx ani xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx řada xxxxxxxxxxx xxxxx způsobem, xxxxx xxxxxx sledovat xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vyvolat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
1.4.2.4 Xxxxxxx test
Xxxxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxxxx 1000 xx.xx-1 xxxxxxx xxxxxxxxx x xxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx studii, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx toxické xxxxxx x jestliže xxxxx údajů x xxxxx x příbuznou xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx uvažovat x xxxxxx x xxxxxxx xxxxx dávky. Xxxxxxx test xx xxxxxxxxx, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
1.4.2.5 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx zvířata xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx denně po xxxx xxxxxxxx a 14 dnů po xx, xxxx xx xxxxxxxx x xx xxxxx xxxxx xxxxx.
1.4.3 Xxxxx xxxxxxx
Testovaná xxxxx se xxxxxx xxxx xxx x xxxxx xx 28 xxx.
1.4.3.1 Všeobecné xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx nejméně xxxxxx xxxxx po 28 xxx a xxxxxxx 14 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, do xxxxxxxx xxxxx plánu. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx včetně xxxxxxx, typu, stupně x xxxxxx. Pozorování xx xxxxxxxxx abnormality xxxxxxx, xxx xxxx xx xx xx xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx stupnice, xxxxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx dvakrát xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x klecí x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx minimálních xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx zvířata xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bolesti xx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
1.4.3.2 Tělesná xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx těsně před xxxxxx podáním testované xxxxx x xxx xxxxxxx jednou xxxxx.
1.4.3.3 Xxxxxxxxx
Šest xxxxxx xxxxxxx vybraných z xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx skupiny s xxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xx aplikaci xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxx mozek x xxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x. xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx jeho tkáň xx xxxxxxxx XXX. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx slepice z xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx po 24 xxxxxxxx x xxxxx xxx po 48 xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx studie xxxx xxxxxx xxxxxx (např. xxxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxxxx jiná xxxx usmrcení xx xxxxxxxx xxxxxxxx, pak xx xxxxxxxxxx použít xxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx.
U xxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (AChE). Xx xxxx xxxx xxxx xxxxxx spontánní xxxxxxxxxx XXxX, xxx xxxx vést x xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxx XXxX.
1.4.3.4 Xxxxx
Xxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx pro špatný xxxxxxx xxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxx.
1.4.3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx studie) xx xxxxxxxxxxxx vyšetří. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxx za použití xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx: xxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx řez), xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx (řezy xxxxx xx xxxxxxx x horní xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx), z xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx část x n. xxxxxxxx (x jeho xxxxx x x. gastrocnemius) x x x. xxxxxxxxxxx. Xxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx myelin x xxxxx.
Nejprve xx xxxxxxx fixované xxxxx xxxxx xxxxxx kontrolní xxxxxxx x skupiny x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se najdou x zvířat skupiny x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx vyšetření x xx slepicích xx skupin, které xxxxxxx dávku xxxxxxx x nízkou.
2. XXXX X XXXXXX ÚDAJŮ
Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx touto metodou (xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxx) xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Uvádějí xx xxxxx xxx jednotlivá xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx. Z xx xxxx xxx pro xxxxxx experimentální skupinu xxxxxx xxxxx xxxxxx xx počátku pokusu x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx poškození, změny xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxx těchto poškození xxxx xxxxxx a xxxxxxxx zvířat xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Výsledky xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx výskytu, xxxxxxxxxx x korelaci mezi xxxxxxx xxxxxxx, biochemickými x histopatologickými nálezy x xxxxxxx pozorovanými xxxx x testovaných x kontrolních xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vyhodnotit xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx x pokusu obsahuje xxxx xxxxxxxxx, pokud xxxxx být xxxxxxx:
Xxxxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx plemeno,
- xxxxx x xxxxx xxxxxx,
- zdroj, xxxxxxxx xxxxxxxx atd.,
- xxxxxxxxx jednotlivých xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx údaje x xxxxxxxx, stabilitě x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx aplikace xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxx o xxxxxxx x kvalitě xxxx,
- xxxxxxxxxx vybrané xxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx podávaných xxxxx, xxxxxx podrobných xxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx formě xxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx na biochemické xxxxxxxxx, je-li jiná xxx 24 a 48 xxxxx.
Xxxxxxxx:
- údaje x xxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx úmrtnosti,
- úroveň bez xxxxxx (XXXXX),
- xxxxxxxxx, stupeň x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx),
- podrobný xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx výsledky,
- xxxxxxx xxxxxx,
- podrobný xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xx možné.
Xxxxxxx výsledků
Hodnocení x Xxxxxxxxxxxx
4. XXXXXXXXXX
Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx s metodou XXXX TG 419.
B.39. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx
1. METODA
Xxxxxx xx replikací XXXX XX 486, Xxxxxxxxxxx XXX Synthesis (XXX) Xxxx With Xxxxxxxxx Xxxxx Xxxxx Xx Vivo (1997).
1.1 XXXX
Účelem xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxxx, XXX) x savčích xxxxxxxxx xxxxxxx in xxxx je určit xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zvířat (1) (2) (3) (4).
Tento test xx vivo xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx zjišťování xxxxxxxxxxxxx účinků chemických xxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx testu xxxxxxxx xxxxxxxxx XXX x xxxxxxxxx buňkách x xxxx xxxxxxxxx reparaci. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sloučenin; xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX in xxxx.
Xxxxxxxx-xx xxxxxxx x xxx, že xx xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxx test xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (UDS) xx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, které xxxxxxxxxxxx plánovanou (X-xxxx) xxxxxxxx DNA. Xxxxxxxxxxx xx metoda, xxx xxxxx xx autoradiograficky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (3X-XxX). Xxx xxxxx UDS in xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxx xxx xxxxx xx sice xxxx mohou použít, xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Detekce xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx XXX, xxx xxxx x xxxxx poškození xxxxxxxxxx x nahrazeny. Proto xx metoda XXX xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxx repair" (20 - 30 xxxx), xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx "xxxxxxxxxx xxxxxx" (1 - 3 xxxx) xx xxxx xxxxxxx. Dále xxxx xxxxxxxx k xxxxxxx x xxxxxxxx neopravení, xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxx xxxx XXX. Xxxxxx odpovědi XXX xxxxxx xxx x přesnosti xxxxxxx xxxxxxxx. Mimoto xx xxxxx, že mutagen xxxx xxxx s XXX xxxxxxxx, ale xxxxxxxxx DNA xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx, xx XXX xxxx xxxxxxxxxxx x mutagenní aktivitě xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx v celém xxxxxx.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxx x xxxxxxxx: xxx xxxxxxx grain (NNG) xxxxx než xxxxxx, xxxxxx stanovená xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx laboratoř xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxx (NNG): xxxxxxxxxxxxx míra XXX xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx UDS, xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx počtem xxx x xxxxx (XX) x xxxxxxxxx počtem xxx x xxxxxxxxxx (XX): XXX = XX - XX. Xxxxx XXX xx xxxxxxxxxxxx xxx jednotlivé xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx buňky x xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx apod.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX (xxxxxxxxxxx DNA xxxxxxxxx, XXX): xxxxxxx syntéza XXX po xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx vyvolaného chemickou xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.3 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxxxx buňkách xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx DNA xxxxxxxxxxxx xxxxxx poškození xxxxxxxxxx chemickou látkou xxxx xxxxxxxxxx působením. Xxxx vychází xxxxxxx x xxxxxxxxxxx 3H-TdR xx XXX jaterních xxxxx, charakteristických xxxxxx xxxxxx xxxxx x X-xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx 3H-TdR xx xxxxxxx stanoví xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx technika xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x S-fázi, xxxx xx xxxx. xxxxxxxxxxx xxxxxx.
1.4 POPIS XXXXXX
1.4.1 Xxxxxxxx
1.4.1.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxx potkani, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx vhodný savčí xxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxx laboratorní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx zahájení xxxxxx měly být xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx nemají xxxxxxxxxx ± 20 % xxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.4.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx chovu jsou xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxxxx v části X.
Xxxxxxx xx xxxx být 50 - 60 %.
1.4.2.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Zdraví xxxxx dospělí xxxxxxx xx náhodně xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx jednoznačně xxxxxx x po xxxx xxxxxxxxx pěti xxx xx zvířata xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx toho, xxx x xxx xxxx xxxxx umístěny.
1.4.2.2 Xxxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx
Xx-xx testovaná xxxxx x xxxxxx xxxxx x xx-xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxx podáním xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx připraví její xxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xxxx vehikulu. Xxxxxxx xxxxxxxxx látky xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxx podáváním xxxx. Xx xxxxx používat xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x stálosti (xxxxxxxxx) xxxxxxxxx, že xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
1.4.3 Xxxxxxxx xxxxx
1.4.3.1 Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx x používaných xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx-xx xx ne xxxxxx známé xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx jeho xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxxx látkou. Doporučuje xx, xxx xxx xx xx xxxxx, xxxx xx prvním xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx / xxxxxxxxx.
1.4.3.2 Xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx třeba xxx každé xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx pozitivní x negativní (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx. Xx třeba xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxx, xxx xxx očekávat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx zvýšení xxx spontánní xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xx středně xxxxxx odezvě (4). Xxxxx při pozitivní xxxxxxxx xx volí xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx nenapovídaly hodnotiteli xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
Xxxx xxxxxx xxxxxx | Xxxxx | XXX | XXXXXX |
xxxxx x xxxxxxxxx (2-4 xxxxxx) | X-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx | 62-75-9 | 200-249-8 |
xxxxx x xxxxxxxxx (12-16 hodin) | X-2-xxxxxxxxxxxxxxxxx (2-XXX) | 53-96-3 | 200-188-6 |
Xx možno xxxxxx x xxxx vhodné xxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
1.5 POSTUP
1.5.1 Počet x xxxxxxx zvířat
X xxxxx xxxxxxx xxxx xxx minimálně xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx existuje historická xxxxxxxx, pak xxx xxxxxxxx xxxxxxx negativní x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxx.
Pokud x xxxx, kdy xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx expoziční xxxx, xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxx pohlavími xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, je možné xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx jednom pohlaví, xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxx, kde humánní xxxxxxxx testovaných látkám xxxx být pohlavně xxxxxxxxxx, xxx xx xxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx test xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
1.5.2 Xxxxxxxxx schéma
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxx jednorázově.
1.5.3 Dávkování
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx. Nejvyšší xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx vyvolávající xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxx xxxxx ve stejném xxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 50 - 25 % dávky xxxxx.
Látky, xxx x xxxxxxx netoxických xxxxxxx xxxxxxxx specifickou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxx hormony xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xx případ od xxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxx xx zjištění xxxxxxx toxicity, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, je xxxxx ji xxxxxxxxxx x téže laboratoři x xx použití xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxx x hlavní xxxxxx.
Xxxx nejvyšší dávku xxx xxxx definovat xxxxx xxxxxxxxxxxx určité xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxx xxxxx).
1.5.4 Xxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx dávce xxxxxxxxx 2&xxxx;000 mg/kg hmotnosti xxxxxx x jedné xxxxx nebo ve xxxx xxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx pozorovatelné xxxxxxx xxxxxx x jestliže xx xx xxxxxxx xxxxx o strukturně xxxxxxxxxx látkách xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx studie. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx v limitním xxxxx vyšší dávka.
1.5.5 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx látka xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. X odůvodněných xxxxxxxxx mohou být xxxxxxxxxx i xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xx tím mohla xxxxx vystavit xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx objem kapaliny, xxxxx xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, závisí xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx 2 xx/100 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx; xxxxx xxxxx musí xxx zdůvodněné. S xxxxxxxx dráždivých nebo xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx koncentracích xxxxx xxxxxx, xx třeba xxxxxxx koncentrace látky xxx, xxx objem xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx objemová xxxxxxxxxxx.
1.5.6 Příprava xxxxxxxxx xxxxx
Jaterní xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx 12 - 16 xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx další xxxxx (xxxxxxx 2 - 4 xxxxxx po xxxxxx látky), xxxxxx xx xx 12 - 16 xxxxxxxx xxxxxxxxx reakce zjevná. Xx xxxxx xxxxx xxxxxx i xxxx xxxx odběru vzorků, xx-xx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxx kultury xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx obvykle xxxxxxxxx xxxxxxx jater xx xxxx kolagenázou. Xx xxxxx xxxxxxxx, xxx xx čerstvě xxxxxxxxxxx xxxxxxx buňky xxxxx xxxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx. Jaterní xxxxx xx zvířat z xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx (5).
1.5.7 Xxxxxxxxx XXX
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx se po xxxxxxx dobu (např. 3 - 8 xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX. Po xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx( xxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxx obsahujícím xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxx. "xxxx xxxxx"). Xxxxx xx xxx xxxxxxx, xxxxxx x vysuší. Xxx xxxxxxx inkubačních xxxxxxxxxxx xxxxxx xx "xxxx xxxxx" xxxxxxxx. Xxxxxxx x preparáty xx xxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, exponují ve xxx (xxxx. po xxxx jednoho xxxx xxxx xxxxx v xxxxxxxxxx), xxxxxxxx, xxxxxx x počítají xx xxxxxxxxxx stříbrná xxxx. X každého xxxxxxx xx připraví xxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
1.5.8 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx obsahovat xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx UDS xxxxxxxxxx. Mikroskopicky xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxx xx xxxx počítáním xxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxx preparátech x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 100 xxxxx; xxxxx xx buněk xxxx xxx 100 xx xxxxxxx jedince, xxxx xx xxx xxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x X-xxxx, xxx xxxxx xxxxx v X-xxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 3X-XxX do xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx normálních buňkách, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Mimoto se xxxxxxx xxxx shrnou x tabelární formě. Xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx a xxx xx xxxxxxx xxxxx počet "nuclear xxxxx" (XXX) xxxxxxxxx xxxxx CG xx xxxxx XX. Počítají-li xx "xxxxx x xxxxxx", xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx xxxxx určují, xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx mohou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxx xx statistické xxxxx xxxxxxx, xx třeba xx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
2.2 XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ
Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxxxx zahrnují:
pozitivní | (X) hodnoty XXX xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, zdůvodněným xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx | |
xxxx | (XX) xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxxxx než u xxxxxxxx kontroly | |
xxxxxxxxx | (X) xxxxxxx XXX xx xxxxxx/xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx | |
xxxx | (XX) xxxxxxx XXX nejsou xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx. |
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx, že je xxxxx xxxx x xxxxx parametry, xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx jedinci, xxxxx xxxxx - xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxxxxx významnost by xxxx xxxxxx být xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx faktorem.
Většina xxxxxxxxxxx poskytuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xx získaného xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Výsledky xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx XXX se xxxxxxx xxxxxxxxx buňkami xx xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx vyvolává x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx vivo xxxxxxxxx XXX, které xxx xxxxxxx neplánovanou xxxxxxxx XXX xx xxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xxxxxx poškození XXX, xxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xx xxxxx vzít v xxxxx, jaká je xxxxxxxxxxxxxxx, že testovaná xxxxx xxxxxxx širokého xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx pro určitou xxxxxxx xxxx (např. xxxxxxxxx xxxxxxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Zpráva x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx o průběhu xxxxxx je xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxx zvířata:
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx/xxxx,
- xxxxx, xxx x xxxxxxx xxxxxxx,
- původ, xxxxxx xxxxxxxx, strava xxxx.,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zvířat xx xxxxxxx testu, xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x směrodatných xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
- xxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) xxxxxxxx,
- xxxxx xx studie xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx provedena,
- xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x přípravě xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- zdůvodnění xxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx metody k xxxxxxx, že xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx tkáně,
- xxxxxxxx převod xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx/xxxxx vodě (xxx) xx faktickou xxxxx (xx/xx xxxxxxxxx/xxx),
- xxxxxxxxxxx x kvalitě xxxxxxx x vody,
- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x odběru vzorků,
- xxxxxx zjišťování xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx autoradiografická xxxxxx,
- počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx.
Výsledky:
- xxxxxxxx xxxxxxx počtů xxxxxxxxxx xxx v xxxxxxx, xxxxxxxxxx x "xxx xxxxxxx grains" xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx,
- xxxxx dávka-odpověď, xxxxx xx x xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, bylo-li xxxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxx ze xxxxxxxxxx negativních (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- historické údaje x xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx) x pozitivních kontrol xxxxxx rozpětí, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- počet "xxxxx x opravě", byl-li xxxxxxxx,
- xxxxx xxxxx x X-xxxx, xxx-xx xxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx buněk.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Závěry.
Xxxxxx X.39. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Sb. s xxxxxxxxx xx 22.6.2001
X.40. XXXXXXX ÚČINKY XX XXXX
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxx centrum xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxxxxx Xxxxxx xxx xxx Validation of Xxxxxxxxxxx Xxxxxxx, XXXXX, Xxxxx Research Xxxxxx, Xxxxxxxx Commission) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx validní xxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx: xxxx na principu xxxxxx transkutánního elektrického xxxxxx kůže potkana (xxxxxxxxxxxxxx electrical xxxxxxxxxx, XXX) x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx. Validizační xxxxxx XXXXX xxxxxxxxx, že xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx leptajícími x xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx R35, x ostatní xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kůže, X34). Xx xxxxxx xxxxx x postupy xxxx xxxxx; xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xx konkrétních xxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.2 DEFINICE
Poleptání xxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx tkáně xxxx xx aplikaci testované xxxxx.
1.3 REFERENČNÍ LÁTKY
Žádná xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, viz xxxx xxxx. 1.5.3.4 a 1.7.2.3.
1.4 XXXXXXX XXXXXX - TEST XXX XX XXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xx dobu xx 24 hodin xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx odebrané z xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx, xxxxx mají xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x bariérové funkce xxxxxx xxxxxxx.Xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporu (XXX) xxx určitou xxxxxxxx xxxxxxx (5kΩ) (4) (5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx XXX xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. V případě xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx xxx x xxx. (6)) xx xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx test xxxxxx barviva, xxx xx snížil xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků, xxx xx u xxxxxx xxxx chemických xxxxx xxxxxxxxx (2) (7).
1.5 XXXXX XXXXXX - XXXX XXX XX KŮŽI XXXXXXX
1.5.1 Xxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx terčíků xxxx xxxxxxxxx mladí (20 xx 23xxxxx) potkani, Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Malými xxxxxxx xx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx srst x xxxxxxxx x xxxxx plochy. Xxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxxxxx otíráním x xxxxxx xx xxxxxx xx roztoku xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx streptomycinu, penicilinu, xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxx inhibujících xxxx bakterií. Třetí xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx omytí xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx 3 xxx xx použijí. Xxx xxxxxxxx kožních xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx než 31 xxx.
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx usmrtí, sejme xx xxxx z xxxxxxxx plochy x x té se xxxxxxx xxxxxxx přebytečný xxx. Kůže se xxxxxxx xxxx konec xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PTFE) trubice, x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxx xx přetáhne gumový X-xxxxxxx, kterým se xxxx připne, a xxxxxxxxxx xxxx se xxxxxxx. Rozměry trubice x X-xxxxxxx xxxxxxx xxx. 1. Xxxxxx X-xxxxxxx se pak xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx TPFE xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx do xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx hořečnatého (154 xX), xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sponou (xxx. 2).
1.5.3 Xxxxx xxxxxxx
1.5.3.1 Nanesení xxxxxxxxx xxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka x xxxxxxx stavu, xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxx. 2). Xx-xx ve xxxxx xxxxxx, nanese xx xx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxx xxxxxx epidermis, xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx 150 μl xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx se jemně xxxxxxx. Testovaná xxxxx xxxx mít x xxxx maximální xxxxx xxxxxxx. U některých xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx zahřátím xxxxx xx 30 xX, xxx se xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx vždy tři xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx dobu 24 xxxxx (xxx xxx 1.5.3.4) x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx vodovodní xxxx xxxxx maximálně 30 xX tak xxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx proudem vody xxxxx zhruba 30 xX.
1.5.3.2 Měření XXX
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odpor (XXX) xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx střídavý xxxxx (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xx xxxxxxxxxxxxxx). Před měřením xxxxxxxxxxxx odporu xx xxxxx povrchové xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70% xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxx, že xx trubice otočí, x xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 154 xX xxxxxxx xxxxxx hořečnatého. Xxxxxxxxx můstku xx xxxxxxx na obě xxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxxx x kΩ/terčík (xxx. 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x délku holé xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obr. 1. Xxxxxx vnitřní (xxxxx) xxxxxxxxx xx během xxxxxx uloží navrch XXXX trubice xxx, xxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx elektrody. Xxxxxx (xxxxx) elektroda xx xxxxx xx receptorové xxxxxxx tak, aby xxxxxx xx xxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx hranou xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx XXXX trubice (obr. 1), xxxx vzdálenost xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx, xx xx-xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 20 kΩ, může xx xxx důsledek xxxx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx. Xx možno xx xxxxxxx tento povlak xxxxxxxxx, xxxxxxxxx tak, xx xx XXXX xxxxxxx utěsní xxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx 10 xxxxxx xx xxxxxxxxxx, roztok xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx x čerstvým xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx XXX xx akceptována, xxxxx xxxxxxx ze souběžné xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx leží x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx (xX)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 M xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36%)
|
&xxxx;
0,5 - 1,0
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx voda
|
10 – 25
|
1.5.3.3 Xxxxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx aktivní xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Pokud je xxx testování xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) xxxx neutrálních xxxxxxxxxxx xxxxx hodnota XXX xxxxx nebo rovná 5 xΩ, xxx xx této xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx) barviva. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx x výsledky xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx testovanou xxxxxx xx na xxxxxxxxxxx xxxxxx všech terčíků xxxxxx xx 2 xxxxxx xx 150 μx 10% (x/x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X x xxxxxxxxxxx vodě. Xxxxxxx kůže se xxx xxxxxx po xxxx 10 xxxxxx xxxxxxxxx prudkým xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xx nejvýše pokojovou xxxxxxx. Xxx se xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx) barvivo. Každý xxxxxx xxxx se xxx xxxxxxx sejme x XXXX trubice x uloží xx xxxxxxx (xxxx. do 20 xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx 8 xx xxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx po dobu 5 minut xxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxxxxx veškeré xxxxxx xxxxxxxxxxxx (nenavázaného) xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xx nádobek x 5 xx 30 % (w/v) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) x destilované xxxx, kde xx xxxx noc xxxxxxxx xxx teplotě 60 xX. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx vyjmou x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxx po xxxx 8 xxxxx při xxxxxxx 21 xX (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ∼ 175). Vzorek 1 xx xxxxxxxxxxxx xx pak xxxxx 30 % (x/x) xxxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx vodě x xxxxxxxxx xxxxxx 1 x 5 (x/x) (xx. 1 xx xxxxxxxxxxxx + 4 xx roztoku SDS). Xxxxxxx denzita (XX) xxxxxxx se xxxx xxx cca 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx obsahu xxxxxxx
Xxxxx sulforhodaminu B x terčíku xx xxxxxxxx x xxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B xxx 565 xx xxxx 8,7 . 104; molekulová xxxxxxxx = 580). Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx zvlášť x stanoví xx xxxxxxxx xxxxxxx. Průměrná xxxxxxx navázaného xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx za xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx spadají xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx metody. Za xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxx při xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx:
| &xxxx;
Xxxxxxxx
|
&xxxx;
Xxxxx
|
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xx/xxxxxx)
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
10 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
|
&xxxx;
40 - 100
|
| &xxxx;
Xxxxxxxxx
|
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx
|
&xxxx;
15 – 35
|
1.5.3.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxxxxx dobu působení xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxx (xxxx. 2 xxxxxx) xx xxxxxx xxxxxxxxx silně xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx, že xxxx TER xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx některých xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx 2 xxxxxx (2), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx leptajících x xxxxxxxxxxxxx látek xx 24xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x rozměry xxxxxxxx xxxxxxxxx x experimentálním xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx 5 xΩ xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxx aplikaci xxxxxxx xxxxxxxxx zde. Xxxxx xx xx zkušební xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx xxxxxx jiných xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x prahovou xxxxxxx xxxxxxxxxxx řady xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx, jež byly xxxxxxx xxx validační xxxxxx (3).
1.6 XXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX - XXXX X XXXXXXX XXXXXX KŮŽE
Testovaný materiál xx nanáší xxxxxxx xx xxxx xx 4 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pokles xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx například xxxxxx "XXX xxxxxxxxx xxxxx" (MTT = 3-[4,5-xxxxxxxxxxxxxx-2-xx]-2,5 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx) pod prahovou xxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx testu xxxxxxx x předpokladu, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx nebo erozí) x xxxx dostatečně xxxxxxxxxxx, xxx přivodily xxxx xxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx vrstvách.
1.7 XXXXX XXXXXX - XXXX S XXXXXXX XXXXXX XXXX
1.7.1 Modely xxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx kritéria. Model xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx funkce xxxxxxx corneum musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx lze prokázat xxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, o nichž xx xxxxx, že xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx neprocházejí. Model xxxx za definovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky.
Životnost xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxx, xxx xx dalo xxxxx xxxxxxxx mezi látkami xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx. Životnost xxxxx (xxxxxx například velikostí xxxxxxx MTT, xx. XX xxxxxxxx) xx xxxxxxxx látce xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu (xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx) xxxx hodnoty xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx mezí. Xx xxxxx důležité, xxx xxxx prokázáno, xx xxxxxxx xxxxxxxxx model xxxxxxxx mezinárodnímu validačnímu xxxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxx xxxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx-xx xxxxxxxxx látka xxxxxx, xxxxxx xx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxx kůže (xxxxxxxxx xxxxxxxx 25 (μ/cm2). Xx-xx pevná, xxxxxx xx xxx, aby xxxxxxxxx xxxx, a xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xx s xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx. Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx x povrchu xxxx xxxxxxx xxxxx fyziologickým xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X měření xxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx metoda. Xxxxxxxxxx xx používá xxxxxxx XXX, x xxxxx xxxx prokázáno xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky (2). Xxxxxx xxxx se xx dobu 3 xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 mg/ml xxx xxxxxxx 20 - 28 xX. Xxxxxxxxx xxxxx formazanový xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxx XX xxx xxxxxx xxxxx 545 x 595 xx.
1.7.2.3 Doplňující xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx kůže x xxxxxx dodržení xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx. xxxx xx životnost xxxxx xxxxxxxx xxxx. Doporučuje xx metodu i xxxxxxxxx xxxxx okalibrovat xx xxxxxxx řady xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx, že xx xxxxxxx xxxxxx xx použití široké xxxxx látek xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx mezinárodních xxxxxxxxx xxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx musí xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vědecké xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2) a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx vědeckém xxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxx xxxx zveřejněním xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXXXXX XXXXXXXX
1.8.1 Xxxx TER xx xxxx potkana
Hodnoty odporu (x xΩ) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolu x pro případné xxxxxxxxxx referenční xxxxx xx uvádějí v xxxxxxxxx xxxxx, a xx data xxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, průměrné xxxxxxx a x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.8.2 Xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx XX x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxx testovaný xxxxxxxx, xxxxxxxxx a negativní xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx referenční látky xxxxxxx x tabelární xxxxx, a xx xxxx xxx všechny xxxxxxxxx x opakované xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x x nich xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.9 VYHODNOCENÍ X INTERPRETACE VÝSLEDKŮ
1.9.1 Xxxx XXX na xxxx xxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx XXX xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 5 xΩ, xx xxxxx xxxxxxxxxxx. Je-li hodnota XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 kΩ x xxxxxxx se xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (detergent) xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx účinky xx.
X povrchově xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx poskytují hodnoty XXX xxxxxxxxxxxxx 5 xΩ, xxx provést xxxxxxx penetrace barviva. Xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx barviva x xxxxxxx při souběžně xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x 36 % XXx, xx testovaná xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx má xxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx-xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx menší, xx xxxxxxxxx látka xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx účinky xxxx.
1.9.2 Test s xxxxxxx lidské xxxx
Xxxxxxx XX pro xxxxxxxxx xxxxxxxx představuje 100% xxxxxxxxxxxxxxx buněk. X xxxxxx OD pro xxxxxxxxxx zkušební xxxxxx xx vypočte procentuální xxxxxxxxx vůči xxxxxxxxx xxxxxxxx. Hraniční xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, xx těch, xxxxx poleptání xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxx v xxxxxxxxxx xxxxxx jasně xxxxxxxxx předtím, než xx xxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx, xx xx xxxx hraniční xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXX ZPRÁVA
Zpráva x průběhu pokusu
Ve xxxxxx o xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx údaje, xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx; xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxx x xxx xx.
Xxxxxxxx xxxxxx
- xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxxx všech xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx hodnot xxxxxx (xxxx XXX) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx x xxxxxxx lidské xxxx) pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, x to xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx resp. xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a průměrné xxxxxxx;
- xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx 1
Obrázek 2
Xxxxxx X.40. xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x. 208/2001 Xx. x xxxxxxxxx od 22.6.2001
B.41. FOTOTOXICITA - XXXX FOTOTOXICITY 3T3 XXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 XXXX
Xxxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), x xxx xxxxxxx, xx-xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látkám x následně pak xxxxxx, nebo je-li xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx x rámci xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx vitro xxxxxx xx xxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx xxxx testované xxxxx, xxxx ke xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx ultrafialovému x viditelnému xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx výsledkem xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx kombinovaným xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxx testem xx xxxxx zjistit sloučeniny, xxxxx xxxx fototoxické xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx v xxxx, x xxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx topickém xxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x validován x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX/XXXXXX x xxx 1992 - 1997 (1) (2) (3) xxxxxxx xxxxxxx alternativa xx xxxxx vůči xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. V xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx schůze OECD xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx porovnávány x xxxxxxxx účinky xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xx xxxx u xxxxxx x xxxx x xxxx zjištěno, xx tento xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx predikční xxxxxxxxxx. Xxxx není xxxxxxx x xxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx účinky, jež xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx, fotoalergie xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, x xxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxx, reaguje při xxxxx fototoxicity 3X3 XXX in xxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxx uspořádán xxx, xxx xxxxxxxxx hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx přístup xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látek xx xxxxxxxx viz dodatek.
1.2 XXXXXXXX
Xxxxxxxxx: xxxxxxxxx ultrafialového (XX) xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx; měřená xx X/x2 xxxx x XX/xx2.
Xxxxx xxxxxx: množství (= xxxxxxxxx x xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx xxxxxxxxxxx (XXX) xxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (= X x x) xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. X/x2 nebo J/cm2.
Pásma xxxxxxxx délek xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx: podle xxxxxxxxxx XXX (Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx xx X'Xxxxxxxxx) se xxxxxxx xxxxxxxx XXX (315 - 400 xx), UVB (280 - 315 xx) x XXX (100 - 280 xx). Xxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxx: xx xxxxxxx xxxx pásmy XXX a XXX xx xxxxx xxxxxxxx 320 nm x XXX xx xxxxx xxxx xx XX-X1 x XX-X2 x xxxxxxx xxxxxx u 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx: parametr, kterým xx měří xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx populace (xxxx. příjem xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx buňku, xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxx xxxxx xxxxxxxxx měřených xxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx koreluje x celkovým počtem xxxx. xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx.
Xxxxxxxxx životaschopnost (xxxxxxxxx) xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x negativními xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), které prošly xxxxx procedurou testu (xxx + XX xxxx - UV), xxxxx xxx působení xxxxxxxxx látky.
Predikční xxxxx: xxxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxx metodickém návodu xxx test xx xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx XXX x MPE.
PIF (xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx): xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx dvou xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX50) testované látky xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx (-XX) x v xxxxxxxxxxx (+UV) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.
XXX (mean xxxxx effect, xxxxxxx xxxxxxxxx): nová xxxx xxxxxxxx x matematické xxxxxxx xxxxxxxxxxx průběhu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (-XX) x v xxxxxxxxxxx (+XX) xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx), xxxxx vzniká xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx kůže xxxxxx, nebo xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ozářením xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: nižší xxxxxx xxxxx "fototoxicita", xxxxxxxx xx pouze xxxx xxxxxxxxxxxxx reakcí, x xxxx xxxxxxx x xxxx xxxx, xx na xx xxxxxx (topicky xxxx xxxxxx přijatá) xxxxxx xxxxx. Tyto xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx poškození xxxxx (reakce xxxxxxx xxxx xxx nadměrném xxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, která se xxx xxxxxx působení xxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: genotoxická xxxxxx (odezva) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxx, xx byly xxxxx xxxxxxxxx negenotoxické xxxxx XX/XXX xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx opakovanou xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx. Xxxxx je tumorogeneze xxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, mluvíme x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.
1.3 XXXXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx testována při xxxxx studii, xx xxx xxxxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx z látek, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx testu (1) (3) (13).
1.4 XXXXXXX XXXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx u xxxx xxxxx (5) (6) (7) (8), xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx rysem xx xx, že xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx v oblasti xxxxxxxxxx xxxxxx. Podle xxxxxxx xxxxxx fotochemie (Xxxxxxxxxxx-Xxxxxxxx zákon) xxxxxxxx xxxxx fotoreakce dostatečnou xxxxxxxx xxxxxxxxxx kvant. Xxxxx by xx xxxxxxx, xxx se xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx návodu, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxx absorpční xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x XX/XXX xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx XXXX x. 101). Xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxx koeficient xxxxx xxx 10 xxxxx x mol-1 x xx-1, xxxx xxxxx fotoreaktivní potenciál x xxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky xxxxxxxx xxx xxxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxx biologickým xxxxxx (viz dodatek).
1.5 XXXXXXX XXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxx mechanismy, xxxxxxx xxxx absorpce světla (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7), přičemž xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Proto xx xxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxx xx porovnání xxxxxxxxxxxx látky testované x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx necytotoxické dávky XXX/XXX záření. Xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx závislý pokles xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx (neutral xxx, XX) (9), 24 xxxxx po xxxxxxxx testované xxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx Balb/c 3X3 xx kultivují xx xxxx 24 xxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxx kultura xxxxx x xxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx dvě xxxxxxxx xx 96 xxxxxxx s xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx po dobu 1 xxxxxx. Jedna x obou xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XXX/XXX záření x xxxxx 5 X/xx2 XXX (+XX xxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxxxx xx uchovává x xxxxx (-XX experiment). X xxxx xxxxxxxxxx xx pak médium xxxxxxx xxxxxx kultivačním x po xxxxxxx 24 xxxxxxxx kultivace xx xxxxxx inkorporace xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xxx xxxxxx, XXX) xx xxxx 3 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx každou x xxxx koncentrací xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxxxxxx xxxx procento xxxxxx x xxxxxxxxxxx kontrol. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx porovnají xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx (+XX) a x xxxxxxxxxxxxx (-XX) xxxxxx, xxxxxxx na xxxxxx XX50, xx. xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx o 50 % v porovnání x xxxxxxxxxx bez xxxxxxxxx.
1.6 XXXXXXXX JAKOSTI
Citlivost xxxxx xxxx xxxxxx XXX, xxxxxxxxxx xxxxx: x buněk je xxxxx pravidelně provádět xxxxxxxx xxxxxxxxxx vůči xxxxxx XXX. Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx, příští xxx se xxxxxxx xxxxxx XXX x xxxxx 1 - 9 J/cm2 x xxxxx xxx xx xxxxxx NRU xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Buňky xxxxxxx kritéria jakosti, xxxxxxxx xxxxxx životaschopnost xx xxxxxxx xxxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx2 xxxx xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx kontrolních xxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxx. Xxx xxxxxxxx dávce XXX xxxxxx 9 X/xx2 xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx 50 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx uchovávaných v xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx desáté xxxxxx buněk.
Citlivost buněk xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx UVA, xxxxx xxxx: xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jestliže xxxxxxxxx kontroly (xxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx [Earl´s xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, XXXX] s 1 % xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx ethanolu (XxXX) xxxx xxx xxxx vykazují x xxxxxxxxxxx (+XXX) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 80% x xxxxxxxxx x neozářenými xxxxxxx x témž xxxxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxx (-XXX).
Xxxxxxxxxxxxxxx negativních xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (XX540 NRU) xxxxxx x NR xxxxxxxx negativních xxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx 1 x 104 xxxxx nasazených x xxxxx jamce xxxxxx xxxxx dvou xxx xxxxx x normální xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxxxx xxxxxxx XX540 NRU u xxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx 0,2.
Xxxxxxxxx kontrola: xxx xxxxxx testu xx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro je xxxxx provést xxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Při xxxxxxxxx xxxxxx EU/COLIPA xxx xxxx látka xxx pozitivní kontrolu xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (CPZ); xxxxx xx xxxx xxxxx doporučuje. Xxx XXX testovaný xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx vitro xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx akceptovatelnosti: CPZ xxxxxxx (+XXX): EC50 = 0,1 - 2,0 μg/ml, XXX xxxxxxxxx (-XXX): XX50 = 7,0 - 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (PIF), xxx. xxxxx xxxxxxx XX50, xx xxx minimálně 6.
Xxxxx XXX xx xxx xxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx dají xxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx vhodné xxx xxxxxxxxxxxxxxx chemické xxxxxxx xxxx rozpustnosti xxxxxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx dat xxxxxxxxx xxxxxxxxx jako kritéria xxxxxxxxxxxxxxxxx rozsahy hodnot XX50 x XXX xxxx XXX (střední xxxxxxxxx).
1.7 XXXXX METODY
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx buněčná linie xxxxxx fibroblastů Xxxx/x 3X3 klon 31, x xx buď x ATCC xxxx x XXXXX; ta xx proto xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx dají x xxxxxxxx xxxxxx i xxxx buňky xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xx kultivační xxxxxxxx xxxxxx xxxxx jejich xxxxxxxxxxxx xxxxxx; xx xxxx xxxxx prokázat, xx xxxx stejně xxxxxx.
X buněk je xxxxx xxxxxxxxxx kontrolovat, xx nejsou kontaminovány xxxxxxxxxxxx, a smí xx xxxxxx xxx x xxxxxxx, že xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx citlivost xxxxx xxxx XXX záření xxxx s xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx buňky Xxxx/x 3X3 z xxxxxx x nejnižším xxxxxx, pokud xxxxx xxxxxx xxx 100. Xxxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxx XXX xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx postupem kontroly xxxxxxx popsaným x xxxxx metodickém xxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx
Xxx rutinní xxxxxxxxxx xxxxx x během xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. V případě xxxxx Balb/c 3X3 xx xxxxx x XXXX xxxxxxxxx 10 % xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, 4 xX xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxxx xx vlhkém xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 xX / 7,5 % XX2. Xx xxxxxxxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxx zajišťovaly xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxx xxxx. buněčnou linii.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kultur xx nasadí x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiu x xxxxxxxxx jednou se xxxx xxxxxxxx v xxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x kultivačním xxxxx x takové xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxx (xx. xxx xx stanovuje xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 48 xxxxx xx xxxxxxxx) xxxxxxx xx xxxxxxxxxx (xx splynutí v xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx). V případě xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx x 96 xxxxxxx xx doporučuje hustota 1 x 104 xxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxx xxxxxx testovanou xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxx destičky s 96 xxxxxxx, xxxxx xxx procházejí celým xxxxxxxx xx identických xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx (+XXX/XXX) x xxxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxx (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx vitro xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx požadavkem xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x xxxxxxx fototoxikologie xxxxx xxxxx látka, xxx xx x xxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx in xxxx nebo xx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx proto ani xx nutné, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx tento xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.1.5 Xxxxxxxxx xxxxx / xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx x xxxx stabilitě xxxxxxxxx, xx xx xx xxxxxxxxx. Xxxxx je xxxxxxxxxxxxx, xx by xxxxx k xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx příprava xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxx solném xxxxxxx, xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (XXXX) nebo xx xxxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, XXX), xxxxx - xxx xxxxxxx dojít x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx - nesmí obsahovat xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx indikátory xX, xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx omezeně xxxxxxxxx, rozpustí se xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, než xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxx se xxxxx x xxxxxx 1 : 100 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx používá xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 % (x/x) xx xxxxx xxxxxxxxx, tj. xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx testované xxxxx i x xxxxxxxxxxx kontrolách.
Jako xxxxxxxxxxxx xx doporučuje dimethylsulfoxid (XXXX) xxxx ethanol (XxXX). Vhodná mohou xxx x další xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, například xxxxxx, xx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx zvážit xxxxxx xxxxxxxxxx vlastnosti, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, potlačení fototoxického xxxxxx xxxx vychytávání xxxxxxxx.
Xxx xx napomohlo xxxxxxxxxxx, dá xx xxxxxx míchání resp. xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xx 37 oC.
1.7.1.6 Xxxxxxxxx XX světlem / xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxx světelného xxxxxx a správná xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx fototoxicity xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x XXX a xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxxxxx (7) (10), xxxxxx záření UVB xx x tomto xxxxx méně relevantní, xx přímo xxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xx 313 xx x 280 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx pro xxxxx světelného xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxx vlnové xxxxx, xxx testovaná xxxxx xxxxxxxxx, x xxx byla světelná xxxxx (xxxxxxxxxxx za xxxxxxxxxx xxxx) xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx známých xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Dále xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx délky x xxxxx nepatřičně poškozující xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx).
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx pokládají xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx výbojky a xxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx - xx mají xx xxxxxx, že vyzařují xxxx xxxxx a xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx. Jelikož všechny xxxxxxx xxxxxxxxxx emitují xxxxxxxx xxxxxxxx záření XXX, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx záření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxx xx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx složka XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (UVA:UVB ∼ 2 : 1). Xxxxxxx spektrálního xxxxxxxxx filtrovaného záření xxxxxxxxx simulátoru xxxxxxxxx xxx validační xxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xx x xxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxx (iradiance) xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx testem xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxxxx UV-metru xx xxxxx xxxxxxxxxxx, k xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx druhý, xxxxxxxxxx XX-xxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx, xxxx se x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx spektrální xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx světelného zdroje x kontroluje xx xxxxxxxxx širokopásmového XX-xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx; taková xxxxxxxxxxxxx xxxxx vyžaduje xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx zjištěno, že xxxxx XXX xxxxxx 5 X/xx2 xx xxx xxxxx Balb/c 3X3 necytotoxická a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx excitovala x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xx xxxx xxxxx dosáhlo xxxxx 50 minut, xxxx xxx xxxxxxxxx nastavena xx 1,666 mW/cm2. Xxxxxxx-xx xx xxxx xxxxxxx linie nebo xxxx zdroj xxxxxx, xxxx se xxxxx xxxxxx UVA upravit xxx, aby xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx vzorce:
|
dávka xxxxxx (X/xx2) x 100
|
&xxxx; | |
| &xxxx;
x (min) =
|
&xxxx;
________________________
|
&xxxx;
(1 X = 1 X s)
|
|
záření (mW/mc2) x 60
|
&xxxx; |
1.7.2 Podmínky xxxxx
Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx fototoxické xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx nižších, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx četnost xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (13). Xxxxxxx pH xxx xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xX 6,5 - 7,8).
Xxxxxx koncentrací testované xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx (+UVA) a xxx něj (-UVA) xx třeba xxxxxxxx x rámci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx tak, xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Používá xx xxxxxxxxxxxx geometrická xxxx (s xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx).
1.7.3 Xxxxx xxxxxxx
1.7.3.1 Xxxxx den
Připraví xx xxxxxxxx 1 x 105 xxxxx/xx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxxxx jamek 96xxxxxxx mikrotitrační destičky xxx xxxxxxx xxxxxxx xx odpipetuje xx 100 μx xxxxxxxxx xxxxx (= xxxxx xxxxx), xx ostatních xxxxx xx dávkuje xx 100 μl xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx 1 x 105 xxxxx/xx (= 1 x 104 xxxxx xx jamku). Xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx destičky - xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-UVA), xxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx se xxxxxxxx xx dobu 24 xxxxx (7,5 % XX2, 37 xX), xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Tato xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x adherenci xxxxx x jejich xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx inkubaci xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx EBSS/PBS xx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx 100 μx XXXX/XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látku v xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Testovaná xxxxx xx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx inkubují x xxxxx po xxxx 60 xxxxx (7,5 % CO2, 37 xX).
Xxxx xxxxx x XXX (+UVA) xx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxx za xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 50 xxxxx skrz xxxxx xxxxxxxx s 96 xxxxxxx xxxxxxx UVA x xxxxxxxxx 1,7 xX/xx2 (= dávka 5 / cm2). Xxx xxxxxxxxxxx ke xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (-XXX) xx xx xxxx 50 xxxxx (= expoziční xxxx UVA) xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x temném xxxx.
Xxxxxx xx odstraní x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. Poté se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxx (18 - 22 xxxxx) xx xxxxxxxx (7,5 % XX2, 37 xX).
1.7.3.3 Třetí xxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx se xxxxxxxxxx xxx mikroskopem x xxxxxxx xxxxxxxxxx. xxxxxxxxxxx se změny xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx doporučuje, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx při xxxxxxxxxxxxx cytotoxicity xxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx příjmu xxxxxxxxx xxxxxxx (XX)
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX. Xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxx jemným xxxxxxxx. Xxxxx se 100 μl xxxxx x XX x xxxxxxxx xx xxx 37 xX ve xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 7,5 % XX2 xx xxxx 3 xxxxx.
Xx xxxxxxxx se xxxxxx s NR xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX, xxxx xx pak xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx (xx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxx xx přesně 150 μx xxxxxxx xx xxxxxxxx XX (xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ethanol/kyselina xxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxx destičky xx xx dobu 10 xxxxx rychle xxxxxx xx třepačce, xxxxx xx XX z xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xx spektrofometru xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx XX xxx 540 nm xx xxxxxxx slepého xxxxxx xxxx srovnávacího xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. XXXXX) xxx xxxxx analýzu.
2. XXXXX
1.8 XXXXXXX X XXXXXXXX XXXXX
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxx při aplikaci XXX/XXX xxxxxx a xxx ní. Je-li xxxxxxxx cytotoxicita, koncentrační xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxxxxx údaje xxxx xxxxxxxx křivkou. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xx xx definované xxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx x xxxxxxxxxxx xx xxx (-UVA) necytotoxická, xxx xxx ozařování (+XXX) vysoce cytotoxická, xxxx xxxxx x xxxx, xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxx částech xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx. Pokud xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx z xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx (xxx při -XXX, xxx při +UVA), xxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxx rozestupem mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx nejvyšší koncentrace.
Jsou-li xxxxxxxx xxxxxxxx - xxxxxx dělicí xxxx xxxxxxxxxxx modelu - xx xxxxx test xxx xxxxxxx opakovat.
Považuje-li xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, může xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podmínky, aby xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Klíčovou xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky, nejvhodnější xxx jeho xxxxxxxxx xx xxxxxxx těchto xxxxxxxx (spolurozpouštědlo, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx). Lze xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx, xxx xxxx ve xxxx xxxxxxx, xxxx xxx významný vliv xxxxxxxx xxxx.
1.9 ZPRACOVÁNÍ XXXXXXXX
Xxxxx je xx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxx testované xxxxx xxxxxxx k 50 % xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XX (EC50). Xx xxx xxxxxx xxx, že se xx xxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx vhodná xxxxxx xxxxxxxxxx regrese (xxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx regrese) nebo xx xxxxxxx xxxx xxxxxx metoda xxxxxxxxx (14). Než se xxxxxxx EC50 xxxxxxx xxx další xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx XX50 xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx papír (osa x: xxx, osa x: xxxxxx), protože xx xxxx transformaci xxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx xxxxxx xxxxx lineární.
1.10 VYHODNOCENÍ XXXXXXXX (PREDIKČNÍ MODELY)
1.10.1 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 1: xxxxxxxxxxxx faktor (XXX)
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx koncentrace - odezva xxx xx xxxxxxxxxxx (+XXX), xxx xx nepřítomnosti (-XXX) xxxxxx, se xxxxxxxxxxxx xxxxxx (PIF) xxxxxxxx podle vzorce
|
EC50 (-XX)
|
|
| &xxxx;
(x) XXX =
|
&xxxx;
____________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
XXX &xx; 5, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx PIF ≥ 5 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx-xx látka xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX, kdežto xxx -XXX xx necytotoxická, xxxx se XXX xxxxxxxxx, x xxxx xx jedná o xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xx látka má xxxxxxxxxxx potenciál. X xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx tzv. "&xx; PIF", když xx xxxx xxxxxxxxxxxx (-XX) provede xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxx) x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx:
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) > XXX =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
XX50 (+XX)
|
Xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx "&xx; PIF", xxx xxxxx xxxxxxx &xx; 1 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx ani EC50 (-XX), xxx XX50 (+XX), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx cytotoxicitu xx xx nejvyšší zkušební xxxxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx "XXX = *1", xxxx xx charakterizuje xxxxxxxx
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (-XX)
|
| &xxxx;
(x) XXX = *1 =
|
&xxxx;
___________
|
| &xxxx; | &xxxx;
Xxxx (+XX)
|
Xxxxx xx xx xxxxxx xxxxx hodnota "XXX = *1", xxxxxxxxxx xx, xx xxxx xxxxxxxx žádný fototoxický xxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx (x) x (x) je xxxxx xxx predikci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx v úvahu xxxxxxxxxxx, xxxxx se xxx testu xxxxxxx.
1.10.2 Xxxxxxxxx model, verze 2: xxxxxxx fotoefekt (XXX)
Xx xxxxx také xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, vypracovaného xx použití xxx x xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX (15) x xxxxxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxx studie xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx XX xxxxxx (13). V xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XXX x xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx EC50. X tomto xxxxxx xx používá xxxxxxxx "xxxxxxx xxxxxxxxx" (MPE) xxxxxxxx xx porovnání xxxxxx průběhu křivek xxxxxxxxxxx - xxxxxx. Xxx aplikaci modelu XXX byl xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxx vyvinut xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx obdržet zdarma.
1.11 Xxxxxxxxxxxx výsledků
Pozitivní xxxxxxxx xxxxx (XXX ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) ukazuje, xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se x xxxxxx xxxxxxxx dojde xxx xxxxxxxxxxxxx nižších xxx 10 μg/ml, xx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx bude xxxxxxx xxxx fototoxin také xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx in vivo. Xxxxx-xx se pozitivní xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxxx zkušební xxxxxxxxxxx (100 (g/ml), bude xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx schopnosti xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxx spadat xxxxxxxxx x penetraci, xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxx, xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testu, xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx lidské kůže xx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx (XXX < 5 xxxx MPE &xx; 0,1) ukazuje, xx xxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxxxxxx pro použité xxxxx buňky x xxxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxxxx, xxx by xx látka xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx, xx xxxxx xxxx žádný xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx vivo xx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx. X případech, xxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx získány xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx reakce (XX50 + UV x XX50 - XX), xx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (+XX xxx -XX) x xxx omezenou xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx test xxx xxxxx xxxxx xx xx zcela xxxxxx x xxxx xx xx uvažovat x xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxx ex xxxx nebo xx xxxx).
3. XXXXXXXXX XXXXXX
Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxx:
- identifikační xxxxx x xxxxx CAS, xx-xx známo,
- xxxxxxxxx xxxxxx x čistota,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx vlastnosti, jež xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx,
- stabilita x xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx volby xxxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky x xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx médiu (XXXX xxxx XXX).
Xxxxx:
- xxx x zdroj xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx mykoplazmat,
- číslo xxxxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxx záření UVA xxxxxxxxx pomocí ozařovacího xxxxxxxx, xxx xx x testu na xxxxxxxxxxxx 3X XXX xx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - xxxxxxxx před xxxxxxxxxx x po xxx:
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxx (koncentrace XX2, xxxxxxx, vlhkost),
- xxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xx a xx xx).
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - ovlivnění xxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx použijí v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx x xxx xxx,
- v případě xxxxxxx xxxxxxxxxxxx testované xxxxx a absence xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxx x složení xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx),
- xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx (x) - ozařování:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx charakteristika xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx propustnosti/absorpce použitého xxxxxx (xxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x jeho xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx světelného zdroje xx testovaného xxxxxxx,
- xxxxxxxxx UVA (v x X/xx2) xxx xxxx xxxxxxxxxxx,
- xxxx xxxxxxxx XX/XXX záření,
- xxxxx xxxxxx XXX (xxxxxxxxx x xxx) x J/cm2,
- teplota xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxxx pokusu (d) - test XXX:
- xxxxxxx xxxxx s XX,
- xxxx xxxxxxxx x XX,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- podmínky xxxxxxxx XX (xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx délka, při xxxxx se xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx optická xxxxxxx XX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxx (referenční), xxxx-xx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx spektrofotometrii (xxxxxx), xxxxx xxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx životaschopnosti xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx (koncentrace xxxxxxxxx xxxxx νx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxxx experimenty +XXX x -XXX,
- xxxxxxx xxxxxx koncentrace - xxxxxx: xxxxx možnosti xxxxxxx xxxxxx EC50 (+XXX) x EC50 (-XXX),
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx - xxxxxx získaných za xxxxxxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxx - výpočtem xxx fotoiritačního faktoru (XXX) xxxx středního xxxxxxxxxx (XXX),
- klasifikace xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx testu (x) - xxxxxxxx negativní xxxxxxxx:
- absolutní xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx extraktu XX) ozářených x xxxxxxxxxxx xxxxx,
- historické xxxxx xxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- kritéria akceptovatelnosti xxxxx (x) - xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxx:
- xxxxxxx EC50 (+XXX), XX50 (-XXX) x XXX xxxxx použité xxx pozitivní kontrolu,
- xxxxxxxxxx údaje xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx: hodnoty EC50 (+XXX), XX50 (-XXX) x XXX, xxxxxxx x xxxxxxxxxx odchylky.
Diskuse xxxxxxxx.
Xxxxxx.
Xxxxxxx
Xxxxxx X.41. byla xxxxxxx xxxxxxx předpisem x. 208/2001 Sb. x účinností od 22.6.2001
Xxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Sb. xxxxx xxxxxxxxx dnem 1.1.1999.
Ve xxxxx tohoto xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx právním xxxxxxxxx x.:
208/2001 Xx., xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx XX č. 251/98 Xx., xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx chemických xxxxx a přípravků - xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x příští xxxxxxxxxxx
x xxxxxxxxx od 22.6.2001
Xxxxxx xxxxxxx x. 251/98 Xx. xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx č. 443/2004 Sb. x xxxxxxxxx xx 1.8.2004.
Xxxxx jednotlivých xxxxxxxx norem xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx právního xxxxxxxx.
1) §2 xxxx. 8 xxxx. x) xx n) xxxxxx x. 157/1998 Xx., o xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
2) Xxxxx č. 246/1992 Sb., xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xx znění zákonů x. 162/1993 Sb., x. 193/1994 Xx., x. 243/1997 Xx. x x. 30/1998 Xx.
3) Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxx zkoušení xxxxxxxxxx. Xxxxx 4 - xxxx xx xxxxxx (XXXX Guidelines xxx Xxxxxxx xx Xxxxxxxxx. Xxxxxxx 4 - Xxxxxx Xxxxxxx).