Animace načítání

Stránka se připravuje...


Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Právní předpis byl sestaven k datu 31.05.2004.

Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 31.05.2004 do 01.09.2008.


Vyhláška o opatřeních k zabezpečení ochrany proti zavlékání a šíření původce bakteriální kroužkovitosti bramboru a původce bakteriální hnědé hniloby

331/2004 Sb.

Vyhláška

Předmět úpravy §1

Pojmy §2

Průzkum výskytu původce kroužkovitosti a původce hnědé hniloby §3

Opatření při zjištění podezření z výskytu původce kroužkovitosti nebo původce hnědé hniloby §4

Opatření při potvrzení výskytu původce kroužkovitosti nebo původce hnědé hniloby §5

Testování klonově příbuzných partií hostitelských rostlin §6

Opatření proti šíření původce kroužkovitosti a původce hnědé hniloby §7

Testování rozmnožovacího materiálu bramboru §8

Účinnost §9

Příloha č. 1

Příloha č. 2

Příloha č. 3 - Způsob provádění odborného šetření a stanovení rozsahu pravděpodobného zamoření původcem kroužkovitosti nebo původcem hnědé hniloby a rozsahu jejich možného rozšíření a náležitosti oznámení potvrzeného výskytu původce kroužkovitosti nebo původce hnědé hniloby

Příloha č. 4 - Opatření po potvrzení přítomnosti původce kroužkovitosti nebo původce hnědé hniloby

Příloha č. 5 - Požadavky na zneškodňování odpadů při průmyslovém zpracování partie hostitelské rostliny označené za zamořenou podle §5 odst. 1 písm. a) nebo pravděpodobně zamořenou podle §5 odst. 1 písm. b)

Příloha č. 6 - Očista a dezinfekce objektů a předmětů zamořených nebo podezřelých ze zamořeni původcem kroužkovitosti nebo původcem hnědé hniloby

INFORMACE

331
XXXXXXXX
xx xxx 4. xxxxxx 2004
x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx původce bakteriální xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx stanoví xxxxx §88 odst. 2 zákona č. 326/2004 Xx., x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, (xxxx xxx "zákon") x xxxxxxxxx §71 odst. 1 písm. x) xxxxxx:

§1

Předmět xxxxxx

Xxxx xxxxxxxx x souladu s xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx1) xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (Xxxxx) Davis xx al. xxx. xxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx et Xxxxxxxx) Xxxxx xx xx., xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, a Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (Smith) Xxxxxxxx et xx., xxxxxxx bakteriální hnědé xxxxxxx, xxx se

a) xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx,

x) zjistilo místo xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx a

c) xxx xxxxxxxx výskytu se xxxxxxxxx jejich šíření x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.

§2

Xxxxx

Xxx xxxxx této xxxxxxxx se xxxxxx:

x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx - xxxxxxxx Xxxxxxxxxxx michiganensis (Xxxxx) Xxxxx xx xx. ssp. xxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxx) Xxxxx et al.,

b) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx - bakterie Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (Xxxxx) Xxxxxxxx xx xx.,

x) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx -

1. xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx - brambor (Xxxxxxx tuberosum X.) x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxx), u xxxxx xxxx potvrzena xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx v přirozených xxxxxxxxxx,

2. xxxxxxx xxxxx xxxxxxx - xxxxxxx (Xxxxxxx tuberosum X.) x výjimkou xxxxx xxxxxxxx, xxxxx jedlé (Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx X.) xxxxx xxxxx a xxxxx, xxxxx potměchuť (Xxxxxxx xxxxxxxxx X.) x ostatní xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxx), u xxxxx xxxx potvrzena xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx hnědé xxxxxxx v přirozených xxxxxxxxxx,

x) xxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx zaměřený xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti nebo xxxxxxx xxxxx hniloby x xxxxxxx xxxxx xxxx v xxxxxx xxxxxx,

x) vymezovacím průzkumem - průzkum x xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx původcem xxxxx hniloby, x xxxxxx způsobu xxxxxx xxxxxxx a x xxxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx §76 xxxxxx,

x) xxxxxxxxxxxxxx zamořením xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v rostlině, xxxxxxx, xxxxxx, zařízení, xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx x veškerých xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx §11 odst. 1 xxxxxx,

x) možným xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx hnědé xxxxxxx - xxxxxxxxx x xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxx §11 xxxx. 1 xxxxxx,

x) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle §11 xxxx. 1 xxxxxx,

x) xxxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxx vymezené Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx správou (xxxx xxx "rostlinolékařská xxxxxx"), xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx rostlinolékařská xxxxxxxx podle §76 xxxx. 1 xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxx původce hnědé xxxxxxx,

x) xxxxxxxxxxxx zónou - území xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx opatření xxxxx §76 xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxx původce xxxxx hniloby,

k) klonově xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxx rostliny, xxxxx xxxxxxx vegetativním xxxxxxxx x jedné xxxxxxx xxxxxx; přitom xx xx:

1. sesterské xxxxxxx xxxxxxxx partie xxxxxxxx klonově xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx vznikly x témže xxxx xxxxxxxxxxxx množením x xxxxxx rodičovské xxxxxx,

2. xxxxxxxxxxx klonově xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx příbuzným xxxxxxx, xxxxx x ní xxxxxxxxxxxxx vznikly.

§3

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx hniloby

(1) Rostlinolékařská xxxxxx provádí každoročně x xxxxxxx x §10 odst. 1 xxxxxx xxxxxxxxxxxx průzkum xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx hnědé xxxxxxx v rozsahu xxxxx xxxxxxxx 2 xx 7.

(2) Detekčnímu xxxxxxxx xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx a původce xxxxx hniloby xxxxxxxxx

x) xxxxxxxxxxxx materiál xxxxxxxx2) xxxxxxx x Xxxxx xxxxxxxxx v rozsahu xxxxx §8 xxxx. 2,

x) xxxxxxxxx vybrané xxxxxx rozmnožovacího xxxxxxxxx xxxxxxxx2) xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx Evropské xxxx (xxxx jen "xxxxxxx stát"),

c) namátkově xxxxxxx xxxxxx nesadbových xxxxxxx xxxxxxx z Xxxxx republiky a x ostatních členských xxxxx,

x) xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx §5 odst. 1 xxxx. c).

(3) Xxxxxxxxxxxx průzkumu na xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xxxxxxxxx všechny xxxxxx xxxxxxxxxxxxx rostlin xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx hniloby x xxxxxxx xxxxxx hostitelských xxxxxxx vypěstované v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x).

(4) Xxxxxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx dovážených xx xxxxxxx xxxx x vyvážených do xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx

x) xxxxxxx dovážené partie xxxxxxxxxxxxxx materiálu bramboru x namátkově xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,

x) xxxxxxx partie xxxxxxxx xxxxxx k xxxxxx xx třetích xxxx.

(5) Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx podléhají

a) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx,

x) xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x závlaze xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby xxxxxx xxxxxxxxxxxx hostitelských xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx podniků, xxxxx xxxxxxxxxx zpracovávají xxxxx bramboru, xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx.

(6) Xxxxxxxxxxxx průzkumu xxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx potvrzení xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx rostliny, xxxxxxxxx také pěstební xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx tyto xxxxxx pocházejí.

(7) Výskyt xxxxxxx kroužkovitosti x xxxxxxx xxxxx hniloby xx xxxxxxxx

x) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx odebraných x xxxxxxxxx uvedených v xxxxxxxx 2 xxxx. x) x x), xxxxxxxx 3 x x xxxxxxxx 4 xxxx. x) z xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx x odstavci 4 písm. a) x xxxxxxxxxx xxxxxx,

x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx, v xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorků xxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx uvedených x xxxxxxxx 2 xxxx. x) x x),

x) xxxxxxxxxx xxxxxxx rajčete xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx napadení xxxxxxxx hnědé xxxxxxx x případech uvedených x xxxxxxxx 5 xxxx. x),

x) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxx substrátu, xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx uvedeném x xxxxxxxx 5 xxxx. b) x x odstavci 6.

(8) Xxxxxx prohlídky xxxxxx x xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x dobu xxxxxx xxxxxx při xxxxxxxx, xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx 2 až 7, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x §10 xxxx. 1 xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx x biologie xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx x systémům xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx situaci xx výskytu xxxxx xx xxxx rizika xxxxxxxxx původce kroužkovitosti x původce xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xx Xxxxxxxx Státní xxxxxxxxxxxxxxxx správy (xxxx xxx "Xxxxxxx"). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx a určení xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x příloze x. 1 nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx x §10 xxxx. 1 xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx Věstníku.

(9) X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 2 a 4 lze xxxxxx xxxxxx vzorky úředně xxxxxxxx anebo xxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx, pověřenou x xxxx činnosti Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx §71 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx správou podle §72 xxxx. 5 xxxx. x) xxxxxx, xxxxx bude xxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx správy, xx xxxxxx budou xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 8.

(10) Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 2 xx 6 oznamuje xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx odkladu xxxxxxxxx xxxx fyzické osobě, xxxxx xxxxxxx příslušnou xxxxxx bramboru nebo xxxxxxx x xxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx uvádět na xxx nebo ji xxxxxxx xxxx pěstovala, x případě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx2) xxxxxxxx x xxxxxxx také Ústřednímu xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx zemědělskému.

(11) Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx odstavců 2 xx 8 předkládá xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx s §10 xxxx. 5 xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx x. 2 xxxxx X xxxxxxxx xxxxxxxx státům x Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx nepřítomnosti xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx státy. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 2 xx 6 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxx, x xx x xxxxxxx průzkumu x xxxxxxxxxxxxx materiálu bramboru,2) xxxxxxxx pouze xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx 1. xxxx, x ostatních xxxxxxxxx xx 1. xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, se xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx oznámení jsou xxxxxxx.

§4

Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx hniloby

(1) Xx podezření x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx původce hnědé xxxxxxx xx v xxxxxxx x §11 xxxx. 1 xxxxxx xxxxxxxx

x) rostlinolékařskou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx těmito xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx původce xxxxx hniloby pozitivní xxxxxxxx xxxxxxxx screeningového xxxxx xxxxx přílohy č. 1 xxxxxx I xxxxx 1 x xxxxxx XX, xxxx

x) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx testu xxxxxxxxxxx rostlinolékařskou xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x příloze č. 1.

(2) X xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx původce xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x rámci xxxxxxxxx xxxxxxx podle §76 xxxx. 7 zákona x zvláštního právního xxxxxxxx3) xxxxxxx provedení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx §3 xxxx. 8 a xxx dodržení xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x příloze č. 2 xxxxx X, s xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx vyvrátit.

(3) Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx zahájí xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x výskytu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xxxxxxx šetření podle §76 xxxx. 2 xxxxxx za xxxxxx xxxxxxxx původu podezřelého xxxxxxx x x xxxxxxx s §11 xxxx. 1 zákona

a) xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xx kterých xxxx xxxxxxxx vzorky, x xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx rostlinolékařské xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, x

x) nařídí vhodná xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx možného xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x cílem xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx přesunu xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx přesunem xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxx x x objektech xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.

(4) Xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, x případě xxxxxxx xxxxx hniloby, xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx státu xxxx x některém xxxxx členském xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx rostlinolékařské xxxxxx příslušného xxxxxxxxx xxxxx podrobnosti xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx x bude x xxxxx xxxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.

(5) Xxxxx xxxx x xxxxxxxxx x výskytu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, které xxxx xxx původ x České republice xxxx které xxxx Xxxxxx republiku ohrozit, xxxxxxxxxxx Xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx správa xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 2 x 3.

§5

Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx původce xxxxx xxxxxxx

(1) Pokud úřední xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx §3 xxxx. 8 xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx hniloby, xxxxxxxxxxxxxxxx správa x xxxxxxx s §76 xxxx. 2 xxxxxx x s xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx vědeckým xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx hniloby a xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xx trh x xxxxxxxxxxxx zpracování xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

x) xxxxxx xx zamořené xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, sklady xxxx xxxxxx xxxxx x veškeré xxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, x xxxxx xxxxxx xx styku x xxxxxxxx xxxxxxxxxx materiálem, xx xxxxxxx xxx xxxxxx odebrán, x xxxxx nebo místa xxxxxxxx xxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx pěstebního xxxxxxxxx, x xxxxxxx, xx nichž xxxx xxxxxxxx rostliny xxxxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx,

x) provede xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x souladu x xxxxxxxxxxx bodu 1 přílohy č. 3 xxxxxx testování xxxxxxx xxxxxxxxxx partií xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §6 a stanoví x souladu s xxxxxxxxxxx xxxx 2 přílohy č. 3 xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx posklizňového xxxxxxxx, x xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, pěstování, xxxxxxxxxxx x zalévání xxxx xxxx pěstitelské xxxxx xx zamořeným xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x),

x) xxxxxx karanténní xxxxx xx základě xxxxxxxx xxxxxxxxxx předmětů xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a) a xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx stanovení xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx b) x xxxxxxx rozšíření xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx 3 přílohy č. 3.

(2) X případě potvrzení xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx vodu, xxxxxxx vodu xx xxxxxxxx na xxxxxxxxxx x balení brambor x x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx rostliny x xxxxxx xxxxxxxxxxx x doprovodné xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxx zavlažování, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx správa

a) zajistí xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x popřípadě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx lilkovitých xxxxxxxx xxxxxxxxxx x příloze č. 1 xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx,

x) xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testování podle xxxxxxx x) povrchovou xxxx, z xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx zamořenou,

c) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx povrchové xxxx za xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx b) x xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx pravděpodobného zamoření xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx možného xxxxxxxxx podle xxxx 3 přílohy č. 3.

(3) Rostlinolékařská xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x Komisi v xxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxx 4 přílohy č. 3 xxxxxxxxx výskyt xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo původce xxxxx xxxxxxx podle xxxxxxxx 1 písm. x), popřípadě xxxxxxxx 2 xxxx. x), x xxxxx podrobnosti x vymezení karanténního xxxxx x bezpečnostní xxxx xxxxx xxxxxxxx 1 písm. x), xxxxxxxxx odstavce 2 xxxx. x). Podrobnosti x tomto oznámení xxxx xxxxxxx.

(4) Pokud xxxx členský xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx hniloby v xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x Xxxxx republiky x xxxxxxxx xxxxxxxx obdobně xxxxx xxxxxxxx 3, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx odpovídajícím xxxxxxxx x v xxxxxxx x ustanovením xxxxxxxx 1 x 2 xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx pravděpodobného xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, popřípadě xxxxxxxxxxxx xxxx.

(5) Rostlinolékařská xxxxxx stanoví xxxxxxx xxxxxxxx ve Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1 xxxx. x) x xxx xxxxxxxxx rozsahu xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxx, vymezovaných xxxxx xxxxxxxx 1 xxxx. x), xxxxxxxx 2 xxxx. c) a xxxxxxxx 4.

§6

Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

(1) Xxxxxxxxxxxxxxxx správa xxxxxxx xxxxxxxxxxx testování xxxxx §4 xxxx. 2 xxxxx xxxxxxxxxxx partií xxxxxxxxxxxxx rostlin xxxxxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxx, xxxxx byly označeny xx zamořené xxxxx §5 odst. 1 xxxx. x), x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx příbuzné xxxxxx rozmnožovacího xxxxxxxxx, x to v xxxxxxx xxxxxxxxx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxx zdroje xxxxxx a rozsahu xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx.

(2) Xxxxx xxxxxxxx testování xxxxx xxxxxxxx 1 xxxxxxxxxxxxxxxx správa x xxxxxxx xxxxxxx označí xxxxx předměty a xxxxxxx xx zamořené, xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx §5 odst. 1 xxxx. x), x) x x).

§7

Opatření proti xxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti x xxxxxxx hnědé xxxxxxx

(1) Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx s §11 xxxx. 1 xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx §76 odst. 2 xxxxxx:

x) xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 písm. x) xxxxx xxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx x xx xxxxxx způsobem xxxxxxxx x xxxx 1 xxxxxxx č. 4, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx, že xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a že xxxx xxxxxxx požadavky xx zneškodňování odpadů, xxxxxxxxx x příloze x. 5, v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx,

x) partie xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx §5 odst. 1 xxxx. x) xxxxx xxx xxxxxx x xxx dohledem xxxxxxxxxxxxxxxx správy xx x ní naloží xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx 2, xxxxxxxxx 3 xxxxxxx č. 4, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx předem xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx rozšíření xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xx jsou splněny xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, stanovené v xxxxxxx č. 5, x xxxxxxx průmyslového xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, x xxxxx xxxx xxxx partie xx xxxxxxx výsledku xxxxxxxxx xxxxxxx příbuzných xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §6 xxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x),

x) xxxxxxxx, stroje, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx jejich části x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, označené xx xxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 písm. x) nebo xxxxxxxx xxxx pravděpodobně xxxxxxxx xxxxx §5 odst. 1 písm. x), xx xxx xxxxx xxxx podrobí xxxxxx x dezinfekci xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x příloze x. 6 x xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx x předměty xx xxxxxxxx xxx za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,

x) x karanténním xxxxx x xxxxxxxxxxxx zóně, xxxxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. x), xxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 2 xxxx. x), musí xxx provedena opatření xxxxxxxxx x případě xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx x bodě 4 xxxxxxx x. 4 x v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx 5 přílohy x. 4.

(2) Rostlinolékařská xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx §11 odst. 1 xxxxxx přísnější mimořádná xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx původce xxxxx xxxxxxx xxx opatření xxxxxxx v xxxxxxxx 1, xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxxxxx nařízených xxxxx odstavce 1 xxxx. x) xxxxxx xxxxxxxxxxxx území a x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx členským xxxxxx x Komisi xxxxx x registračním číslem xxxxxxxxx povinných osob, xxxxxxxxxxxxxx xxxxx §12 xxxx. 1 zákona.

(3) Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx §76 odst. 4 písm. x) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1 a xxxxxxxx 2 xx xxxxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxx doby xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx.

(4) Přechovávání xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx x §7 xxxx. 1 xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxx diagnostickým účelům, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx §8 xxxx. 1 xxxxxx, xxxxx tím xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx jejich xxxxxxx xxx nevznikne xxxxxx xxxxxx xxxxxx.

§8

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx2) xxxxxxxx

(1) Rozmnožovací xxxxxxxx2) xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx na xxxxx Xxxxx republiky x xxxxxxx xx xxx, musí xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testování, xxxxxxxxxxx v rámci xxxxxxxxxx xxxxxxxx podle §3 xxxx. 2, x rozsahu podle xxxxxxxx 2 x x souladu x §3 xxxx. 8 x 9, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x původce xxxxx hniloby.

(2) Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1 xx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roce xxxxxxx

x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx rozmnožovacího xxxxxxxxx4) bramboru určené x xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx vzorky xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bramboru, xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx2) xxxxxxxx xxxxxxx x České xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x nebo

b) xxxxx byl x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx2) xxxxxxxx xxxxxxx z České xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx

1. xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx4) xxxxxxxx x předstupňů x xxxxxxxxxxxxxxx vzorky všech xxxxxx základního xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bramboru v xxxxxxxxx xxxxxxxxx klonové xxxxxxxxxxx xx zaměřením xx tuto souvislost, xxxx

2. reprezentativní xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx rozmnožovacího xxxxxxxxx xxxxxxxx4) v xxxxxxxxx, x nichž xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx žádná xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx

x) rostliny xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx materiálu xxxxxxxx4) xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx partií xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx ani původce xxxxx hniloby xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx roce xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx2) xxxxxxxx xxxxxxx x České republiky.

§9

Účinnost

Tato xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx:
Xxx. Xxxxx x. x.

Xxxxxxx x. 1 x xxxxxxxx x. 331/2004 Xx.

X. Metody xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

1. Xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxx xxxxx xxxxx
1.1. Xxxxx xx 200 xxxx xxx xxxxxxx xxxxx x pomocí xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nástroje xx odstraní epidermis xxxxx pupkového xxxxx xxxxx hlízy; dezinfekci xxx xxxxxxx xxx, xx se xxxxxxx xxxxx v 70% xxxxxxx etanolu a xxxxxx.
1.2. Pečlivě xx xxxxx xxxx škrabkou xx xxxxxxxx odeberou xxxxxxx výkrojky pletiva x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx zpracovány xx 24 hodin (xxx xxxxxxxx 3) xxxx xxxxxxxxxxxx při -20 °X po xxxx xxxxxxx dvou týdnů.
2. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxx nevykazuje xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx xx, zda z xxxxxxxx pletiv vystupuje xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx sklovitost xxxx průsvitnost xxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxx cévního xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx cévních xx pupkovém konci xxxx xxxx mít xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx normálně. Prvním xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx sloupky xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x cév. Xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. X tomto xxxxxx xxxxx vodivá xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být tyto xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx část prstence, xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxxx infekce xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxx xxxx se x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx od xxxxxxx xxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx objevují xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxxxxxxx okraji. Xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx příznaky xxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxx, xx-xx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kroužkovitosti od xxxxxx xxxxxx bramboru.
3. Xxxxxxxx xxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (IF xxxx) x xxxx xx xxxxx vejcoplodém
3.1. Homogenizují xx xxxxxxx konce xxxx xx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx kroužkovitosti (xxxx. 0,05 X fosfátový xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) xX 7,0) při xxxxxxx xxxxx než 30 °X; xxxxxxxxxx xx xxxxxx netoxický prostředek xxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxxx 1 x 2).
3.2. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx jedním z xxxxxxxxxxxxx postupů (xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx Xxxxxxx, 1984):
X.
x) Odstřeďuje xx při zrychlení xxxxxxx 180 g xx xxxx 10 xxxxx.
x) Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx 4&xxxx;000 x xx xxxx 10 xxx. Xxxxxxxxx xx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
X.
x) Xxxxxxx xx xxxxx xxxx 30 xxx., aby xx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx supernatant, xxxx xx se xxxxxxxx xxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (Whatman Xx 1) umístěný x Buechnerově xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx sebere xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX až xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 35 ml.
c) Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4&xxxx;000 x po xxxx 20 minut.
3.3. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx ve xxxxxxxxx 0,1 M xxxxxxxxxx xxxxx pH 7,2 (Xxxxxxx 2), xxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxx přibližně 1 ml. Xxxxxxxx xx rozdělí xx xxx stejné xxxxx x xxxxx část xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx) zmrazením při -20 °X nebo xxxxxxxxxxx. Xx prokázáno (Xxxxx x Xxx Xxxxxxxxxx, 1987), xx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx sledované bakterie. Xxxxx xxxxxxx lze xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x 10% glycerolu. Xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx na xxx poloviny. Jedna xx xxxxxxx xx XX xxxx x xxxxxxx podle Grama, xxxxx xxx xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx.
3.4. Xx xxxxxxxx nutné, xxx xx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx se týká x sklíček xx XX testy a xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxx xxxxxxx
4.1. Xxxxxxxx Xxxxxxx barvení xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx (5.2.1.) x xxx všechny rozříznuté xxxxx (2), které xxxxxxxx xxxxxxxxxx, hnití xxxx jiné xxxxxxxxx xxxxxxxx. Vzorky xx xxxxx xxxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2. Xxxxxxxx xx Gramovo xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x pokud xxxxx x xxx pletivo xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1.).
4.3. Xxxxxx xx, xxxxx xxxxxx obsahují xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx koryneformní xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx 0,8 až 1,2 µx xxxxxx x 0,4 xx 0,6 µx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx je uvedena x Dodatku 3.
X xxxxxxxxxxx z přirozených xxxxxxx nebo z xxxxxxx izolovaných xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kokovité xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Buňky xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx pleomorfní xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx Xxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, ve xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx "V" xxxx "Y" xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx xxx XX xxxx
5.1. Použije xx antisérum xxxxx xxxxxxx xxxxx kroužkovitosti - ATCC33113 (XXXXX 2137) nebo NCPPB 2140. Xxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx XX xxxx než 1:600. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxxxxx podložní xxxxxxx ke xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx kombinaci bakteriálních xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX). Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX 33113, XXXXX 2137, XXXXX 2140) xx použijí xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx sklíčku. Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx pokud možno xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx infikované xxxxxxx (xxxxxxxx lyofilizací xxxx xxxxxxxxx xxx -20°X) (obr. 2).
5.2. Xxxxxx
5.2.1. Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (101,102,103) xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxx (xxx. 1).
5.2.2. Xx xxxxx vícejamkového xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti (xxxxxxxxx 106 xxxxx/xx) změřený xxxxxxxxxx xxxxx dostačující x xxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 25 µl) (xxx. 1)
Obrázek 1
Sklíčko xx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pufrem (XXX)
xxxxxxxx vzorek xxxxxx xxxxxx
1:10 1:100 1:1000
O X X X X xxxxxx
X O X X O xxxxxxxx vzorku
PBS xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx 2
Xxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxx
X X X X X xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 106/ml
O O X O O xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx
1:200 1:400 1:800 1:1600 1:3200 xxxxxx xxxxxxxx
5.2.4. Naplní xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kroužkovitosti x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 0,01 X XXX xX 7,2 (Xxxxxxx 2), xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1. (Xxxxxxx se XXX xxx kontrolu XXXX.) Pracovní xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx XX. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxxx x xxxxxx ředěními xxxxxxxx, musí se xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, s xxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.2.5. Inkubuje xx ve xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 30 minut, xxxx-xx xxxxxxxx stanoveno jinak.
5.2.6. Xxxxxxx xx opláchne xxxxxxxx 0,01 X XXX xX 7,2. Xxxxxxx xx xx xxxx pěti xxxxx xx xxxxx vždy xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 0,01 X PBS xX 7,2.
5.2.7. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.2.8. Xx xxxxx jamky xx xxxxx konjugát XXXX xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 30 xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.2.9. Opláchne xx a xxxxx xxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.2.10. Xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 5 - 10 xx 0,1 X xxxxxxxxxxx pufru xX 7,6 x xxxxxxxxxx (xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xX xxxxxxxxxxxx xxx 7,6) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (Xxxxxxx 2).
5.2.11. Xxxxxxxx xx pod xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx x XXXX. Xxxxxx xx xxxxxxxx xx 400 xx 1&xxxx;000. Pečlivě xx xxxxxxxxxx jamky x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x pozitivních xxxxxxxxxx x určí xx xxxx. Xxxxxxxx xx fluoreskující xxxxx x jamce x xxxxxxxxx XXXX/XXX x xxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. V nejméně 10 mikroskopových xxxxxx xx xxxx průměrný xxxxx morfologicky typických xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx poli x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx 1 ml xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx 4).
Xxxxxxxx několik xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx.
- X xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx doprovodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx morfologií a xxxxxxx reagující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxx podobnou Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx subsp. xxxxxxxxxxx. X úvahu xx berou pouze xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxx reakcí testují xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx testem xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
- Technický xxxxx xxxxxxxx touto xxxxxxx xx xxxx 103 x 104 buněk/ml xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx x xxxxxx XX xxxxxxxxx buněk na xxxxxxx xxxxxxxxxx limitu xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx mohou xxx xxxxxxxxxx xx testu xx lilku xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx se považuje xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx fluoreskující xxxxx. Xxxx vzorky se xxxxxxxx za "xxxxxxxxxx" xxxxxxxxxx Clavibacter xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xx považuje xx pozitivní x xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx xxxx nalezeny xxxxxxxxxxxx xxxxxxx fluoreskující xxxxx.
Xxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx test x xxxx užitých xxxxxxx, xx xxxxxxxx xx "pravděpodobně xxxxxxxx" xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. sepedonicus.
Test xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxx všechny vzorky xxxxxxxxxx xx pravděpodobně xxxxxxxx.
6. Xxxx na xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx jsou xxxxxxx x Xxxxxxx 5.
6.1 Xxxxxx xxxxx 3.3 xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx 25 xxxxxxx xxxxx vejcoplodého xx xxxx xxx xxxxx (Xxxxxxx 5) xxxxxx x xxxx uvedených xxxxx (6.2, 6.3 xxxx 6.4).
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx I
6.2.1. Xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 10 xx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x vyhloubenou částí x rozměrech 5 xx hloubky, 10 xx xxxxx x 15 xx délky). Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx mezi xxxxxx a xxxx xxxxxx proužek xxxxxxxx xxxxxxxxx fólie. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx gumovým xxxxxx xxxxx bloku.
6.2.2. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx podélný xxxx mírně úhlopříčný xxx dlouhý 0,5 xx 1,0 cm x hluboký přibližně xxxx tři xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.2.3. Xxxxx xx přidrží xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx malířským štětečkem xxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx všechny xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
6.2.4. Xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx aplikovanou xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx 2 mI.
6.3. Xxxxxxxxx xxxxxxx XX
6.3.1. Xx xxxxxx rostliny xxxxxx xxxxx xxxxx xx napipetuje xxxx xxxxxxxxx lístky a xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx 5 xx 10 µl) xxxxxxxxxxxx pelety.
6.3.2. Pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx zářez (x úhlu xxxxxxxxx 5°), xxxxxx 1,0 xx a xxxxxxx xxxxxxxxx jako 2/3 xxxxxxxx xxxxxx, přičemž x řezem xx xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx .
6.3.3. Xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx vazelínou x xxxxxxxx stříkačky.
6.4. Xxxxxxxxx xxxxxxxx stříkačkou
6.4.1. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxxx) xx xxxxxxxx lilku xxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.4.2. Stonky lilku xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx stříkačky x podkožní xxxxxx (xx méně xxx 23X). Peleta xx xxxxxxx xxxx testovací xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx.
6.5. Xxxxxxxxx xx 25 xxxxxxx xxxxxxx inokulační xxxxxxx (6.2, 6.3 xxxx 6.4) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxx xx xx možné x xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx hlíz xxxxxxxx (5.1).
6.6. Xxxxxxxxx se 25 xxxxxxx sterilním 0,05 M PBS xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (6.2, 6.3 xxxx 6.4).
6.7. Xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxx (Dodatek 5) xx xxxx 40 xxx. Pravidelně xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx listů, xxxxx může začít xxxx okrajová nebo xxxxxxxxxxx ochablost (xxxxxx xxxxxxx). Zvadlé xxxxxxx xxxx xxxxx být xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx místa xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx mastně xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx; xxx xxxx xxxx xxxxxx xx objevení xx xxxxxxxx, xxx je xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Rostliny xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Mladé xxxxxxxx xxxxx vejcoplodého xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti než xxxxxx rostliny, proto xx xxxxxxxx používat xxxxxxxx xx fázi xxx listů x xxxx krátce xxxx xx. Vadnutí mohou xxxx xxxxxxxxxx populace xxxxxx bakterií xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxx xxxxx. Patří x xxx Xxxxxxx carotovora xxxxx. xxxxxxxxxx x X. carotovora subsp. xxxxxxxxxxx, Xxxxx exigua xxx. xxxxxxx, xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Tyto xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx rychle xxxxxx xxxx listy xxxx xxxx rostliny.
6.8. Xxxxxxxx xx Xxxxxxx xxxxxxx (4) pro všechny xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx napadení. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx listových xxxxxx x xxxxxxx ze xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx živných xxxxxxx (7). Xxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx 70% etanolem.
6.9. Xx určitých xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx podmínky xxxxxxxxx, xx může xxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx lilku xxxxxxxxxxxx latentní xxxxxxx x xx 40xxxxx xxxxxxxx. Takové xxxxxxx xxxxx xxx za xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx XX xxxx považován xx pozitivní, xx xxxxxxxx xxxxx testování. Xx xxxxx důležité xxxxxxxxxx rychlost růstu xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vejcoplodého s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 0,05 X XXX x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxx xxxxx testování xx xxxxxxx tato xxxxxxxxxx:
6.9.1. Xxxxxxxx xx stonky xxx xxxxxx inokulace x xxxxxxxx se xxxxx.
6.9.2. Stonky se xxxxxxxx x xxxxxxx 0,05 X XXX x xX 7,0, xxx xx uvedeno x bodech 3.1 xx 3.2.
6.9.3. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxx (4) a xxxxx XX (5).
6.9.4. Xxxxx xxxxxxxx pelety xx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx vejcoplodém (6), pokud xx Xxxxxxx xxxxxxx anebo XX xxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti x xxxxxxxx 0,05 X XXX. Xxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx napadení xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxx.
7. Izolace xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxxx (8). Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx náročným xxxxxxxxxx, xx možno xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xx nedoporučuje xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxx (3.3). Xxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx růst xxxxxxx kroužkovitosti a xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx použití x potvrzujícímu testu xxxxxx hostitelské xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx všech xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx vejcoplodého xxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx (4.6). Xxx xx xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx lilku xxxx x bodech 3. x 6.9.
7.1. Xxxxxxx xx suspenze na xxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxx: (složení xxxxxxx x Xxxxxxx 6):
xxxxx xxxxxxxxxx agar (xxxxx xxx subkultury),
kvasničný xxxxxx xxxxxxxxx agar,
živný xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx,
xxxx x xxxxxxxxxxx extraktu x xxxxxxxxxxx solemi.
Inkubuje xx xx xxxx xxxxxxxxx 20 dní xxx xxxxxxx 21 °X.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx 10 dnů xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, vyklenuté, smetanově xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxx čistoty xxxxxxx xx provede xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx okrouhlé, xxxxxx, xxxxxxxx, konvexně xxxxxxxxx, slizovitě tekuté, x rovnými okraji x xxxxxxx xxxx x xxxxxxx 1 - 3 xx
Xxxxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx x nemocných xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx mnohé xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterie se xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. V této xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx kroužkovitosti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx:
XX xxxx (5.1),
xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx,
xxxxxxxx a fyziologické xxxxx (Xxxxxxx 7),
- xxxxxxxx fermentační xxxxx (X/X),
- xxxxxxxxx test,
- xxxx xxx 37 °X,
- xxxxxx ureasy,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- hydrolýza xxxxxx,
- tolerance k 7% xxxxxxx XxXX,
- xxxxxxxx xxxx,
- xxxxxxxxxx xxxx,
- xxxxxx X2X,
- xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx x: xxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx x salicinu,
- Xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx testy xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx známým kmenem xxxxxxx kroužkovitosti. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x inokulem xx xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx agaru.
Pro IF xxxx xxxxxxx populace xxxxx musí být xxxxxxxx na 106 xxxxx/xx. XX xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxx xx lilku xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx buněk xxxxxxxx xx 107 xxxxx/xx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx 10 rostlin xxx xxxxx testovaný organismus, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx známou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxx 20 xxx nastat xxxxxxx xxxxxxx, avšak rostliny, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx, je xxxxx xxxxxxxxx celkem 30 xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxx lilku, xxx xxxxxxxxxxxxxxx 30 °X (Xxxxxxx 5). Xxxxxxxx xx xx 30 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, nemůže xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx formu xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X/X xxxxxxx xxxx xxxxx oxidační
Oxidasa -
Xxxxxxxx +
Xxxxxxx nitrátů -
Xxxxxxxxx ureasy -
Xxxxxx X2X -
Xxxxxx indolu -
Xxxxxxxxx citrátu -
Hydrolýza xxxxxx - xxxx xxxxx
Xxxx xxx 37 °X -
Růst x 7% XxXX -
Hydrolýza xxxxxxxx -
Hydrolýza xxxxxxxx +
Xxxxxx xxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx -
- laktosy - xxxx xxxxx
- xxxxxxxx -
- salicinu -
Xxxxxxx 1
XXXXXXX MACERAČNÍHO XXXXXXX DOPORUČENÉ XXXXXXXXX X SELLAREM, 1976
X X xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XX X (Xxxxxxx & Williams Xxx., xxx. x. 9964-25,
Xxxxxxxx Xxxxx, Essex, Xxxxxxx) 10 xx
xxxxxx Xxxxxx X (ICI Xxx) 0,5 g
pyrofosforečnan xxxxxxxxx 1 x
0,05 X xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) pH 7,0 (xxxxxxx 2) 1 xxxx
Xxxxxxx 2
XXXXX
0,05 X XXX pH 7,0
Xxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxx (2.1.)
Na2HPO4 4,26 g
KH2PO4 2,72 x
XxXX 8,0 x
xxxxxxxxxxx xxxx xx 1 xxxxx
0,01 X XXX xX 7,2
Tento pufr xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx sklíček xxx XX
Xx2XXX412X2X 2,7 x
XxX2XX42X2X 0,4 x
XxXx 8,0 x
xxxxxxxxxxx xxxx xx 1 xxxxx
0,01 X xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxxxx xX 7,6
Tento xxxx xx xxxxxxx x XX xxxxx xxxx krycí xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx fluorescence.
Na2HPO4.12H2O 3,2 x
XxX2XX4.2X2X 0,15 x
xxxxxxxx 50 xx
xxxxxxxxxxx xxxx 100 xx
Xxxxxxx 3
XXXXXXX XXXXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXXXX (DOETSCH, 1981)
Xxxxxx krystalové xxxxxxx
Xxxxxxxx xx 2 x xxxxxxxxxx xxxxxxx x 20 xx 95% xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx 0,8 x št'avelanu amonného x 80 xx xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xxx 1 g
jodid xxxxxxxx 2 x
xxxxxxxxxxx xxxx 300 ml
Společně xx pevné xxxxx xxxxxxxx xxxxxx tloučku x misce. Xxxxxxx xx xx xxxx x xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx:
xxxxxxxx X 2,5 g
95% etanol 100 ml
Zamíchá xx x xxxxx.
Xxxxxxx 1:10 xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx:
1. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx zahřátím.
2. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx violeti a xxxxx 1 xxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxx xx xxxxx xxx tekoucí xxxxx.
4. Xxxxxx xx Xxxxxxxxx xxxxxxx roztokem x nechá xxxxxxx xx dobu 1 xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx.
6. Odbarví xx xxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxxxxx 95% xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xx jemného xxxxxxxxxx xx etanolu na xxxx 30 xxxxxx.
7. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx savým xxxxxxx.
8. Xxxxxx xx xx xxxx 10 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
9. Opláchne xx xxx xxxxxxx xxxxx x vysuší xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx 4
XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XX POZITIVNÍCH XXXXX
Xxxxxx (X) xxxxxxx xxxx xx podložním sklíčku x více jamkami
= πX2/4 (1)
xxx D = xxxxxx pole.
Plocha (x) xxxx objektivu
= πx2/4 (2)
xxx x = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx d xxx xxxxxx měřením, xxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:
x = πx2/X2X2.4 (3)
xxx
x = xxxxxxxxxx xxxx (závisí xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxxxxx xx 8 do 24),
X = xxxxxxxx xxxxxxxxxx (1 xxxx 1,25),
X = xxxxxxxx xxxxxxxxx (100x, 40 x xxx.),
xx xxxxxx (2) x = √ 4x/π
xx vzorce (3) x = xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx [(4x πx2/X2X2.4)/π)] = i/GK (4)
Xxxxxx se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (x). Xxxxxxxx xx xxxxx typických xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx (X).
X = x. X/x
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 1 xx xxxxxx (X)
X = X . X. 1000/x,
xxx x = objem xxxxxx x xxxxx,
xxx F = zřed'ovací faktor xxxxxx.
Xxxxxxx 5
XXXXXXXXX LILKU XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxx se xxxxxx xxxxx vejcoplodého (Solanum xxxxxxxxx cv. Black Xxxxxx) xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Semenáčky x plně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx lístky (10 xx 14 dní) xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx pěstebního substrátu.
Používají xx xxxxxxxx ve xxxx 3 listů, xxx xxxx xxx, xxx xx xxxx xxx tři plně xxxxxxxxx pravé xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxx xxx: 14 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx, pokud xx xxxxx;
xxxxxxx: - xxx: 21 xx 24 °X,
- xxx: 15 °X.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx &xx; 30 °C. Xxxxx xxxxx teploty xxxxxxxxx xx 15 °X, xxxx dojít x xxxxxxxxx chromozomů (xxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxx kořenů xxxxxxx xxxxxxx lze zabránit xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx vejcoplodého odrůdy Xxxxx Xxxxxx xxx xxxxxx xx:
1. XX Xxxxxxxöxx Xxö,
270 50 Xxxxxxxöxx,
Xxxxxxx;
2. HURST Xxxxx Xxx,
Xxxxxx Xxxx,
Xxxxxx,
Xxxxx XX8 2XX,
Xxxxxx;
3. ASGRO Italia Xx X,
Xxxxx Lodi, 23,
Xxxxx;
Xxxxxx
4. KÜPPER
Mitteldeutsche Xxxxx XxxX,
Xxxxxxxxxx 22,
X-37269 Eschwege
Spolková xxxxxxxxx Německo.
Dodatek 6
XXXXX XXX XXXX X XXXXXXX KROUŽKOVITOSTI
Živný agar (XX)
Xxxxxxxxx (Difco) v xxxxxxxxxxx vodě podle xxxxxxxxx xxxxxxx. Sterilizuje xx v xxxxxxxxx xxx 121 °X xx xxxx 15 xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx (XXX)
Xxxxxxxxx (Difco) xxxxxxxxxx 1 % X(+) xxxxxxx (monohydrátu). Xxxxxxxxxxx xx v autoklávu xxx 115 °C xx xxxx 20 xxxxx.
Xxxxxxxx-xxxxxx-xxxxxxxxx xxxx (YPGA)
Kvasnicový xxxxx extrakt (Xxxxx) (x. 0127) 5 x
Xxxxxxxxxxx (Xxxxx) (č. 0118) 5 x
X(+)-xxxxxxx (xxxxxxxxxx) 10 x
Xxxxx xxxxxxxxx (Xxxxx) (x. 0560) 15 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 xxxx
Xxxxxxxxxxx xx 0,5litrové objemy xxxxx v xxxxxxxxx xxx 115 °X xx xxxx 20 xxxxx.
Xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a minerálními xxxxxx (XXX)
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (Xxxxx) 2,0 x
X(+)-xxxxxxx (xxxxxxxxxx) 2,5 x
X2XXX4 0,25 x
XX2XX4 0,25 x
XxXX4 . 7X2X 0,1 g
MnSO4 . X2X 0,015 g
NaCI 0,05 x
XxXX4 . 7X2X 0,0055 x
xxxxx xxxxxxxxx (Difco) 18 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 xxxx
Xxxxxxxxxxx xx 0,5xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx při 115 °X xx dobu 20 xxxxx.
Xxxxxxx 7
NUTRIČNÍ X XXXXXXXXXXXX TESTY XXX XXXXXXXXXXXX KROUŽKOVITOSTI
Všechna xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx 21 °X a xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx nedošlo x xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx xx dobu xxxxxxx 20 xxx.
- Xxxxxxxx fermentační xxxx (Xxxx &xxx; Leifson), 1953 - O/F xxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
XX 0,2 x
XxXX4 . 7H2O 0,2 g
NH4H2PO4 1,0 x
xxxxxxxxxxx (Xxxxx) 1,0 x
xxxxx bactoagar (Xxxxx) 3,0 g
D(+)-glukosa (xxxxxxxxxx) 10,0 g
bromothymolová xxxx 0,03 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 litr
Smíchá xx x xxxxxx xxxxxx 1X KOH xX xx 7,0 xx 7,2.
Xxxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx zkumavek Xxxxx 16 xx x 100 xx (xxxxx 12 xx) po 5 xx x 10 xx.
Xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxx xxx 115 °X xx xxxx 10 xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxx 5xx x 10xx xxxxxxxx xxxxxx kulturou. Xxxxxxxxx xx xxxxx do 10xx xxxxxxxx 1 xx 2xx sterilního xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx.
Xxxxxxxxx xxxxxx:
____________________________________________________________________________________
Xxxxxxxx Xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx
____________________________________________________________________________________
xxxxxxxx/xxxxxxx xxxxx/xxxxx xxxxxxxxxxx
xxxxxxxx/xxxxxxx xxxxx/xxxxx-xxxxxx oxidační
otevřená/zavřená xxxxxxxx/xxxxx-xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx
____________________________________________________________________________________
- Xxxxxxxxx test (Xxxxxx, 1956)
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx:
1% xxxxx roztok xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx- xxxxxxxxxxxxxxx (XXX x. 30386) v xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v 1 xx xxxxxxxx xxxx může xxx xxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxx xxx 5 °X xx xxxx 1 xx 4 xxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x čisté Xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx pomocí xxxxxxxxx xxxxxx rozetře některá x xxxxxxxxxxx kultur x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: Xxxxx 10 xxxxxx se vyvine xxxxxxxxx zbarvení. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx během 10 až 30 xxxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx: Je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x XX xxxxxxx (xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx), xxxxxxx stopy xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx médiu xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx, salicinu, xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx Hugh &xxx; Xxxxxxxxxx X/X médium xxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx do xxxxxxxx xx 5 xx. Xxxxxxxxxxx se v xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 115 °X xx xxxx 10 minut. X roztavenému xxxxxxx xxx 45 °X xx přidá xxxxxxxxx 0,5 ml filtrací xxxxxxxxxxxxxxx 10% xxxxxxx xxxxxxx glycerolu, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: Xxxxx zbarvení xxxxxxxxxxxxx xx žluté xxxxxxxx xxxxxx kyseliny.
- Xxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx třicetiprocentního xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx na xxxxx xxxxxxxx sklíčko a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx zkoumanou xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx v kapce xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
- Xxxxxxxx nitrátreduktasy x xxxxxxxxxxxxx (Bradbury, 1970)
Xxxxxxxxxx xxxxxx:
XXX3 (xxxxxx xxxxxxxx) 1 x
xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxx) 1 x
X2XXX4 5 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 litr
Rozdělí xx xx 10 ml xx 20ml lahviček. Xxxxxxxxxxx se v xxxxxxxxx při xxxxxxx 121 °X xx xxxx 15 xxxxx.
Xxxxxxx X:
X2XX4 8 g
5N xxxxxxxx xxxxxx 1 xxxx
Xxxxxxx B:
naftylamin 5 x
5X xxxxxxxx xxxxxx 1 xxxx
Xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx. Xx 10 x 20 xxxxx se přidá xx xxxxx xxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx činidla, 0,5 xx činidla X x 0,5 xx xxxxxxx X. Xxxxx se xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx reakce: Xxxxxxx reakce
Stadium 1 Xxxxxxx 2
Xxxxx redukce xxxxxxxxx xxxxxxxx červená
Redukce xxxxxxxxx i dusitanu
(pouze xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxx -
Snížení xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
(xxxxxxxxxxxxx - xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (Xxxxxxxx, 1966)
Xxxxxxxx xxxxxx:
xxxxxx xxx oxoid xxxxxxxxxx agar (CM53) 2,4 x
xxxxxxxxxxx xxxx 95 xx
Xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxx při xxxxxxx 121°X xx xxxx 20 minut. Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx na 50 °X x asepticky xx přidá 5 xx xxxxxxxx sterilizovaného 40% vodního xxxxxxx xxxxxxxx (Xxxxx XX20). Xxxxx xx promíchá.
Rozdělí xx xx 6 xx do xxxxxxxxxx xxxxxxxx (16 x 100 mm) x xxxxx ustát x xxxxx poloze na xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx reakce: Xx přítomnosti xxxxxxx xxxxxx xx žlutooranžové xxxxxx barví třešňově xxxxxxx xxxx fuchsinově (xxxxxxxxxxx) xxxxxx.
Xxxxxxxxx citrátu (Xxxxxxxxxxx) (Xxxxxxx, 1947)
xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxx 2503) 23 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 litr
Rozpustí xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xx 6 xx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Sterilizuje xx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 121 °X xx xxxx 15 xxxxx x xxxxx ustát x xxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx změnou xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx červenou.
- Xxxxxx xxxxxxxxxx (Ramamurthi, 1959)
Xxxxxx:
xxxxxxxxxxxx (Xxxxx x. 0123) 10 x
X2XXX4 1 x
XxXX 5 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 litr
Rozpustí xx x xxxxxxx xx 6 xx xx xxxxxxxx 16 x 100 xx. Xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxx při teplotě 115 °X xx xxxx 10 xxxxx.
Xxxxxxxxx xx x xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxx 9511). Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx se po xxxx xxxxxxx 20 xxx.
Xxxxxxxxx reakce: Xxxxxx xxxxxxxxxx (X2X) x xxxxxxxx se projeví xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zbarvení xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxx (Xxxxxxxxxx, 1959)
Médium:
Jako x xxxxx xx X2X.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx olovnatým x xxxxx 1 xx 2 xx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xx protřepe. Xxxxx xx xxxxxx xxxx (xxx xxxxx) x xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx nakloněné xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 0,5 ml činidla xxxxx Xxxxxxx (Merck 9293).
Xxxxxxxxx reakce: Přítomnost xxxxxx xx projeví xxxxxxx červeného zbarvení xx žluté xxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx.
- Růst xxx 37°X (Ramamurthi, 1959)
Xxxxxx:
xxxxxxxxxx (Difco č. 0003) 8 g
destilovaná xxxx 1 xxxx
Xxxxxxxx xx, xxxxxxxx a xxxxxxx po 6 xx xx zkumavek.
Sterilizuje xx v autoklávu xxx xxxxxxx 121 °X xx xxxx 15 minut.
Inokuluje xx x xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx 37 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxx xxxxx.
- Xxxx v 7% chloridu sodném (Xxxxxxxxxx, 1959)
Xxxxxx:
xxxxxxxxxx (Difco x. 0003) 8 x
XxXX 70 g
destilovaná xxxx 1 xxxx
Xxxxxxxx xx, xxxxxxxx a xxxxxxx po 6 xx do xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx x autoklávu xxx teplotě 121 °X xxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxx xxxxx.
- Hydrolýza xxxxxxxx (Xxxxxxxx, Xxxxxx & Xxxxxxx, 1966)
Xxxxxx:
xxxxxxxxxxxxx (Difco x. 0143) 120 x
xxxxxxxxxxx voda 1 xxxx
Xxxxxxxx se, xxxxxxxx x rozdělí po 6 xx do xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 121 °X xx xxxx 15 xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxxx xxx teplotě 5 °X po xxxx 30 xxxxx.
- Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx:
xxxxxxxxx (Difco) (xxxxxxxxx) 1 xxxx
xxxxxxxxx xxxx. xxxxx (Xxxxx č. 0178) 2 g
Rozmíchá xx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 115 °C xx xxxx 10 xxxxx. Rozlije xx xxxxxx. Inokulují xx xxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (10 xx 20 xxx) xx odebere xxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: Hydrolýza xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx pod xxxxxxxxxx xxxxxxxxx bakterií xxxx xxxxx nich, xxxxxxxxx médium xx xxxxx xxxxxxxxx.
- Aktivita xxxxxxxxx xxxxxxxx (Xxxxxx &xxx; Xxxxxxx, 1974)
Médium:
baktopepton (Xxxxx) 10 x
xxxxxxx 1 g
citronan železitý (Xxxxx 3862) 0,05 x
xxxxxxxx xxxxx 1 x
xxxxxxxxxxx voda 1 xxxx
Xxxxxxx se xx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xx 6 xx do zkumavek. Xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxx při xxxxxxx 115 °C xx xxxx 10 xxxxx.
Xxxxxx xx čiré, xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx projeví xxxxxxx xxxxx xxxxx společně x mizením xxxxxxxxxxxx. Xxxx lze prověřit xxxxxx xxxxxxxxxxxx (UV) xxxxx.
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx, X. F., 1970. Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx study xx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxx. Xx. Xxxx., 49, 213 - 218.
Xxxxxxx, I. G., 1984. Xxx xxxxxxxxxx xxx diagnosis xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx from xxxxxxxx potato xxxxxx. XXXX Bull. 14 (2), 147 - 152.
Xxxxxxx, X. N., 1981. Xxxxxxxxxxxxx methods xx xxxxx xxxxxxxxxx. X: Xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, Xxxxxxxx Xxxxxxx xxx Xxxxxxxxxxxx, Xxxxxxxxxx, 21 - 23.
Xxxx, X. Xxxxxxx, X., 1953. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx carbohydrates by xxxxxxx gram-negative bacteria. X. Xxxx., 66, 24 - 26.
Xxxxx, X. X. a X. Xxx Xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxx XX xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx infections (Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xx xxxxxx. XXXX Xxxx., č. 17, 1987, pp. 1 -10.
Kovacs, X., 1956. Identification xx Xxxxxxxxxxx pyocyanea xx xxx oxidace xxxxxxxx. Xxxxxx, Lond., 178, 703.
Xxxxxxxx, X. A., 1966. Xxx plant xxxxxxxxxx coryneform xxxxxxxx. X. xxxx. Xxxx., 29, 114 - 118.
Xxxxxxxx, X. A., X. Billing, A. X. Hayward, 1966. X determinative xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx pathogenic xxxxxxxxxxxx X. appl. Xxxx., 29, 470 - 489.
Xxxxxxxx, R. X. &xxx; P. X., Xxxxxx, 1976. Xxx xxxxxxxxx of xxxxxx xxxx xxx (Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxxx.xx Kotth.) Xxxxx. Et. Xxxxx.) xx xxxxxx xxxxxx. XXXX Xxxx., 6 xxxx. 2, 101 -106.
Xxxxxxxxxx, X. X., 1959. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx some Gram-positive xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxx Xxxxxxxxxxxxxx. Xxx. Xxxxxxx xxxxx. Xxx. Xxx., 366, 52 xx.
Xxxxxxx, X. B. X., 1967. X xxxxx to xxx xxxxxxxxxxxxxx of xxx xxxxxx xx xxxxxxxx. 2. Xxx.,
Xxxxxxx xxx Xxxxxxx Xxxxxxx, Baltimore.
Sneath, X. X. A. &xxx; X. G. Xxxxxxx, 1974. A xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx between laboratories: xxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxx party. Xxxxxxx xxx Leeuwenhoek, 40, 481 - 527.

X. Xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby
V xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxx xx podrobně xxxxxxxxxx xxxxxxxx materiálů x xxxxxx, tzn. živných xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx.
XXXXX 1: Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
1. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxx xxxxx bramboru, xxxxx xxxxxxxx typické xxxxxxxx hnědé xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, a xxx rostliny xxxxxxxx x rajčete, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx příznaky xxxxxxxxxxxxx vadnutí xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx podezření x xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx screeningový xxxx, izolaci původce xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x - xxx xxxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx diagram
 
rostliny xxxxxxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx(1)
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (2)
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
XXXXXXX
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxxx x typickou xxxxxxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxx
&xxxx;
&xxxx;
xx(3)
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxxxxxxx xxxx(x) xxxxxxxxxxxx (4) xxxxx xxxxxxx xxxx Ralstonia xxxxxxxxxxxx + test xxxxxxxxxx(4)
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxx
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xx
&xxxx;
⇒ ⇒
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx neinfikovány xxxxxxxx xxxxx hniloby
 
rostliny xxxx xxxxx xxxx infikovány xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(1) Xxxxx xxxxxxxx xx x Xxxxxx XX.1.
(2) Xxxxxx xxxxxxxxxxxx testy xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx diagnózu.
Vhodnými xxxxx jsou:
- xxxx xx výtok xxxxx xx xxxxxx cévních (xxxxx XX.2.),
- xxxx xx xxxxxxxxxx granulí xxxx-ß -xxxxxxxxxxxxxxx (oddíl XX.2),
- XX-xxxx (xxxxx XXX.2),
- XXXXX-xxxx (xxxxx XXX.3),
- PCR-test (xxxxx XXX.4).
(3) Ačkoli je xxxxxxx původce hnědé xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s typickými xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zakládání xxxxxx ztroskotat. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx původce xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxx. Xx-xx xxxxxxxx test xxxxxxxxx, ale příznaky xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxx je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, x xx přednostně kultivací xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
(4) Čistá kultura xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx identifikována xxxxxxxxx jedním z xxxxx uvedených v xxxxxx XX.4.1 x xxxxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxx II.4.3). Xxxxxxxxx kmenů patogena xxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxx.
2. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx ve xxxxxxxx xxxx bramboru
Postup je xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx pomocí xxxxxxx nebo xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx jsou xxx xxxxxxxxxx xxxxxx doplněny xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a x xxxxxxx xxxxxxx typických xxxxxxx jeho identifikací x xxxxx kultuře.
Postupový xxxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxx xxxx xxxxxxxx (1)
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
XXXXXXXXXXXX(X) TEST(Y) (2)
XX xxxx (3) a xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx živných médiích(4) x nepovinnými xxxxx xxxxx:
XXXXX xxxx (5)
XXX xxxx (6)
Xxxxxxxxxxx test (x) (7)
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxxxxx jeden xxxx xx pozitivní xxxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxxx xxxxxxxxx testy xxxx xxxxxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxx není xxxxxxxxx původcem hnědé xxxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
XXXXXXXX TEST(Y)
selektivní roztěr x/xxxx xxxxxxx (8)
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxx
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xx
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxx xxxx infikován xxxxxxxx xxxxx hniloby
 
 
 
 
 
 
POTVRZOVACÍ TEST(Y)
Identifikace(9) xxxxxxx původce hnědé xxxxxxx + test xxxxxxxxxx (9)
 
 
 
 
 
 
 
ano
 
 
 
ne
 
 
vzorek xxxx xxxxxxxxx původcem xxxxx xxxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx hnědé hniloby
 
 
 
 
 
 
 
Poznámky x postupovému xxxxxxxx:
(1) Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx je 200 xxxx, metoda xx xxxx vhodná i xxx vzorky x xxxx xxx 200 xxxxxxx.
(2) Screeningový(é) xxxx(x)
Xxxxx xxxxx xxxx nemusí xxx dostatečně citlivý xxxx xxxxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
(3) Xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (XX xxxx)
XX test xx xxxxxxxxxx screeningovým testem. Xx xx výhoda xxxxx xxxxx typům xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx u xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx.x původce xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxx xxxxxx xx xxxxx x citlivý test (xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 103 - 104 xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x bramborového xxxxxxxx).
Xxx spolehlivost xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxx antisérum x xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx 2 000 pro xxxxxx xxxxxxxxx) a xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx titru. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. Přímou xxxxxx xxx použít, pokud xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx.
XX xxxx má xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vyhodnocení xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x specifičnosti xxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx morfologie xxxx xx xxxxxxx xxxxx hniloby, které xx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx x okolní xxxx. XX xxxx xxx provádět xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxx-xx podezření xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx by xxx proveden další xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx principu. X takovém případě xx nejvhodnější xxxxxxxxx xx selektivních xxxxxxx xxxxxxx.
(4) Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxxxxxxxx xxxxxx XXXX x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx při této xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxx test na xxxxxx hnilobu. Výsledek xx x xxxxxxxxx xx 3 - 6 dnů po xxxxxxxx xxxxxx. Původce xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxx ho xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xx-xx xxx xxxxxxxxx testu xxxx xxxxxx, musí xxx xxxxxxx části xxxx xxxxxxx připraveny, xxx xxxx vyloučeny xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx, které si xx xxxxxx médiu x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx patogena xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxx špatně xxxx, xxxxxxx xxxxxx živného xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx odlišení xxxxx xxxxxxx od xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx na xxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx jako xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxx negativním výsledku, x xxxx xx xxxxxxxxx, xx k xxxx xxxxx inhibicí xxxxx hniloby xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx odlišného xxxxx, xxx xx diagnóza xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx je x xxxxxxxx xxxxxxxxx IF-test.
(5) XXXXX test
ELISA xxxx xx v xxxxxx xxxx xxxxxxx xxx XX xxxx (xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 104 - 105 baktérií xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x bramborového extraktu). Xx xxxxx a xxxxxx, xxxxx všeobecně xxxxxxx vykazuje falešné xxxxxxxxx xxxxxxxx (křížové xxxxxx) a xxxxxxx xxxxxxxxx výsledky (xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx). Požadavky xx specifičnost xxxxxxxx xxxx neobyčejně xxxxxx. XXXXX xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx screeningový test.
(6) XXX xxxx
XXX xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx, x xxxx xxxx xxx xxxxxx ovlivněn xxxxxxxxx xxxxxxxx extraktu x xxxxxxx xxxx x hlíz, xxxxx xxxxx x falešným xxxxxxxxxx výsledkům testu. Xxxxxxx xxxxxx brambor xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxx. Proto xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx odstraněny. Xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx dojde x xx zředění populací xxxxxxx hnědé xxxxxxx. Xx xxxxx fázích xxxxxxxx vzorku a xxxxx musí xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, které vedou x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Falešně xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx homologním sekvencím x xxxxxx organismů. Xxxxx nelze ani XXX test používat xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx.
(7) Xxxxxxxxxxx testy
Inkubace xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxx. modifikovaný XXXX-xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby. Xxxxx důležitější je xxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xx zředění xxxxxxxxxxxxx inhibitorů XXXXX xxxxx x PCR xxxxx. Původce hnědé xxxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx x obohaceném xxxxxx xxxxxx IF, XXXXX x PCR xxxxx. Xxxxx kultivace x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx doposud x dispozici xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, nelze xx xxxxxx jako xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
(8) Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xxx xxxxxxx xx rostlinách xxxxxxx xxxx xxxxx vejcoplodého. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx podle xxxxx xxxx metody. Bakterie, xxxxx xx xxxxx XXXX xxxxxxxx původce xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
(9) Xxxxxxxxx test(y)
Čistou xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx spolehlivě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx uvedených x xxxxxx XX.4.1 v xxxxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxx II.4.3). Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx, doporučuje xx xxxx u každého xxxxxx případu.
ODDÍL XX: Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx
1. Xxxxxxxx
1.1. Xxxxxxxx xxxxxxxx bramboru xxxxxx xxxxxxxx
1.1.1. Příznaky xx xxxxxxx a xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx u xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx (x xxxx většinou xxxxxx). Xx příčném řezu xxxxxx xxxxx nad xxxx (xxx 2,5 xx) xxxx cévní xxxxxx hnědě xxxxxxxx. Xxxxx často xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxx exsudát, aniž xx bylo nutné xxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx rozříznutého stonku xx vody xx xxxxxx xxxxxx samovolně xxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.1.2. Xxxxxxxx xx hlízách
Na xxxxxxx řezu xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx x xxxx fázi xxxxxxx xxxxxxxxx sklovitě xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxx po několika xxxxxxxx bud' xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx hlízy x xxxxxxxxx xxxxx plochy xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx slizovitý exsudát. Xxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx svazků výrazně xxxxx x xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxxxx stadiu xx xxxxxxx xxxx xx pupkové xxxxx xxxx a x xxxx, což xxxx xx vzniku xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx slupce. X nich xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx sliz, xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxx částice.
1.2. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzhled xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx podmínek xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxx xxx 25 °C xxx xxxxxxxx xxxxxxx vlhkosti) xx xxxxx strana xxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx během xxxxxxxx xxx postižena xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx rostliny. Xx xxxx xxxxxxxxxx podmínek (xxxxxxx půdy xxx 21 °C) se xx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxx xx možno xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx xx viditelným xxxxxx nekrózy xxxxxxxx xxxxxx. Na xxxxxxx xxxx stonku xx xxxxx xxxxxxxx vodivé xxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx bakteriálního xxxxx.
2. Rychlé xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx screeningové xxxxx xxxxxxxx předběžně xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x cévních svazků
V xxxxxxx podezření xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx svazcích xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx: Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxx a řeznou xxxxxx vložíme do xxxxxxxx x vodou. Xxxxxx xxxx xxxxxx x cévních xxxxxx xxxxxxxxx vytékat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Tento xxxxxxx nezpůsobuje xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxx-ß-xxxxxxxxxxxxxxx (PHB)
Granule XXX v buňkách xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nilskou xxxxx X nebo xxxxxxxxx xxxxx X.
Xxxx xxxxxxxxxx xxx roztěr xxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo suspendovaného xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx roztěr xx 48xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx půdě XXXX xxxx XXX (Xxxxxxx 1). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx 2/xxxx 3 a x xxxxxxx xxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxxxx roztěr xxxxxxxxxxxxx kmene. Xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx stranu xxxxxxxxxx sklíčka xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, dokud není xxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxx xxxxx
1. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 1% vodním xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxx 55 °X.
2. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xxxxxx opláchneme pod xxxxxxx xxxxxxxxx vodou. Xxxxxx xxxx vysajeme xxxxx papírem.
3. Xxxxxx xxxxxxxxx 8% xxxxxx xxxxxxxx kyseliny xxxxxx. Xxxxxxxxxx 1 xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxxx pod slabě xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx. Osušíme xxxxx xxxxxxx.
5. Znovu xxxxxxxxx xxxxxx vody. Xxxxxxxxxx xxxxxx sklíčkem.
6. Pozorujeme xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 450 xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx 1:1&xxxx;000.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx zbarvených xxx XXX. Pozorování xxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx, že xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx
1. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,3% roztokem xxxxxxxx xxxxx X x 70% xxxxxxx. Xxxxxxxxxx 10 minut xxx pokojové xxxxxxx.
2. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx oplachujeme xxxxx x vodovodu. Xxxxxxxxxxx xxxx vysušíme xxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx do xxxxxx. Po xxxxxxxx xxxx xxxxxxx savým xxxxxxx. Xxxxx! Xxxxx xx xxxxxx škodlivá xxxxx. Nutno xxxxxxxx x xxxxxxxxx!
4. Xxxxxx xxxxxxxxx 0,5% (xxxxxxxx/xxxxx) xxxxxx roztokem safraninu x xxxxxxx xxx 10 xxxxxx xxxx xxx pokojové xxxxxxx. Xxxxx! Safranin je xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx!
5. Xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx. Osušíme xxxxx papírem. Přiložíme xxxxx sklíčko.
6. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x mikroskopu x xxxxxxxxxxxxx světlem xxx olejovou xxxxxx x při zvětšení 1:1&xxxx;000. Xxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx jsou xxxxx-xxxxx zbarvené. Xxxxxxx xxxxx mají xxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxx
X xxxxxxx xxxxx je vhodný XX xxxx (xxxxx XXX.2), XXXXX xxxx (xxxxx III.3) x XXX test (xxxxx XXX.4).
3. Postup při xxxxxxx
3.1. Xxxxxxxxx slizovitý xxxxxx nebo části xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx svazků bramborové xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx x xxxxx objemu sterilní xxxxxxxxxxx xxxx nebo x 50mM fosfátovém xxxxx x xxxxxxx 5 xx 10 xxxxx stát.
3.2. Připravíme xxxxxxxxx dvě xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (1/10 x 1/100), v xxxxxxx xxxxxxx x xxxx těchto ředění.
3.3. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx médium NA, XXXX x SPA (Xxxxxxx 1) x/xxxx xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (Xxxxxxx 1) x xxxx xx xxxxxxxxxx XXXXxxxxxx (Dodatek 7). Potom xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx plotny. Xxxx xxx užitečné xxxxxxxxx xxxxxxxxxx plotny xxxxxxx xxxxx se zředěnou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 2/xxxx 3 xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3.4. Xxxxxx xxxxxxx xxx teplotě 28 °X xx xxxx 3 xxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxx lze xxxxxxxxx xx 6 xxx, xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx XXXX xxxxx xxxxxxx atypickými x xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxxxx živných xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx virulentní xxxxxxx původce hnědé xxxxxxx perlově bílé, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx, často x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx izoláty xxxxxxx xxxxx hniloby xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx spirálkami xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx formy xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx kolonie.
Na XXXX - xxxxx xxxxxxxxx virulentní xxxxxxx xxxxxxx hnědé hniloby xxxxxx bílé, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx a fluidní xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx středem.
Nevirulentní xxxxx původce hnědé xxxxxxx xxxxxxxxx xx XXXX médiu xxxxxxx xxxx fluidní, xxxxx xxxx celé xxxxxx xx xxxxxxx.
3.5. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx morfologií xxxxxxxxx do čisté xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx médiu. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx přeočkovávání, xxxxx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxxxx xxxx(x)
4.1. Identifikace xxxxxxx xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx minimálně xxxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxx x enzymatické xxxxx
Xxxxxxxxxx: Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx kontrolní xxxxx.
Xxxxxxxxxxx fenotypové xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxx' vždy xxxxxxxx xxxx chybí:
fluorescenční xxxxxxx -
Xxxxxxx XXX +
xxxxxxxx fermentační xxxx X+/X
xxxxxxxx +
oxidáza xxxxx Xxxxxxx +
redukce xxxxxxxxx +
_________________________________________________________________________________
xxxxxxx xxxxxxx +
xxxx xxx 40 °X -
_________________________________________________________________________________
xxxx x 1% XxXX +
xxxx v 2% XxXx -
xxxxxxx-xxxxxxxxxxx -
xxxxxxxxx xxxxxxxx -
xxxxxxxxx xxxxxx -
xxxxxxxxx eskulinu -
xxxxxxxx levanu -
Xxxxx x xxxxxx xxx Xxxxxxx &xxx; Xxxxx (1987).
XX test
Připravíme xxxxxxxx x xxxxxxx 106 xxxxx na xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxx x kontrolního xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx). Xxxxxxxxxx řadu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Použijeme XX xxxxxx (xxxxx XXX.2). XX xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx XX titru pozitivní xxxxxxxx.
XXXXX xxxx
Xxxxxxxxxx suspenzi x xxxxxxx 106 xxxxx xx xxxxx xx z testovací xxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx kmenů). Xxxxxxxxx xxxxxx XXXXX (xxxxx XXX.3). Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx
XXX xxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx x hustotě 106 xxxxx xx xxxxx ml x xxxxxxx x kontrolního xxxxx (kontrolních xxxxx). Xxxxxxxxx xxxxxx PCR (xxxxx III.4). PCR xxxxxxx xxxxxxx musí xxx stejnou xxxxxxxx x stejný xxxx xxxxxxxxxx analýzy enzymů (XXX xxxx) xxxx xx xxxxxxx pozitivní xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx hybridizace in xxxx (FISH)
Připravíme suspenzi x xxxxxxx 106 xxxxx xx xxxxx xx x xxxxxxx x kontrolního xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx). Xxxxxxxxx xxxxxx XXXX (van Xxxxxxxxx xx al., 1995) x XXX xxxxxxxx XXX-1 (Xxxx xx xx., 1993). Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx reakci jako xxxxxxxxx kontrola.
Analýza xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx rozděleny xxxxxxxxxxxxxxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) (Xxxxx, 1992x).
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx necháme xxxx 48 hodin xxx teplotě 28 °X xx tryptikázosójovém xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx FAP (Xxxxx 1991; Xxxxx 1992a, Xxxxx 1992x). Profil xxxxxxx musí být xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx kyseliny xx xxxxxx podmínek xxxx 14:0 3XX, 16:0 2XX, 16:1 2XX x 18:1 2XX.
3.2. Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx kmene xxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx pro každý xxxx případ xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx:
Xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx x xxx xxxxx (Hayward 1964, 1994);
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
1
&xxxx;
2
&xxxx;
3
&xxxx;
4
&xxxx;
5
&xxxx;
Xxxxxxx:
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
- xxxxxxx
&xxxx;
-
&xxxx;
+
&xxxx;
+
&xxxx;
-
&xxxx;
+
&xxxx;
- xxxxxxx
&xxxx;
-
&xxxx;
+
&xxxx;
+
&xxxx;
&xxxx;
+
&xxxx;
- xxxxxxxxx
&xxxx;
-
&xxxx;
+
&xxxx;
+
&xxxx;
-
&xxxx;
+
&xxxx;
- xxxxxxx
&xxxx;
-
&xxxx;
-
&xxxx;
+
&xxxx;
+
&xxxx;
+
&xxxx;
- sorbitu
 
-
 
-
 
+
 
+
 
-
 
- xxxxxxx
&xxxx;
-
&xxxx;
-
&xxxx;
+
&xxxx;
+
&xxxx;
-
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx 2 xxxxxx xx subfenotypy (Xxxxxxx 1994):
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxx 2
&xxxx;
xxxxxx 2-X
&xxxx;
xxxxxx 2-X
&xxxx;
Xxxxxxx :
 
-
 
+
 
+
 
- xxxxxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
- xxxxxxxxx
&xxxx;
+
&xxxx;
-
&xxxx;
+
&xxxx;
- D-ribózy
 
-
 
-
 
+
 
pektinolytická xxxxxxxx
&xxxx;
xxxxx
&xxxx;
xxxxx
&xxxx;
xxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
Xxxxxxxxxxx xxx
Xxxxxx rasy (Xxxxxxxxxxx xx xx., 1962) xx xxxxxxx xx xxxxxxx testů patogenity xx xxxxxxxxxx rajčete xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxx xx hypersensitivní xxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxxx (Xxxxxx xx Xxxxxxxx, 1970):
&xxxx;
xxxxxx x:
&xxxx;
&xxxx;
xxxx (*)
 
 
1
 
2
 
3
 
- xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx
&xxxx;
xxxxxxx
xxxxxxx
xxxxxxx
(48 xxx) x xxxxxxx
(7-8 xxx)
&xxxx;
xxxxx xxxxxx
xxxxx xxxxxx
XX (12 - 24 hod)
 
vadnutí
žádná reakce
chloróza
(2-8 xxx)
&xxxx;
- xxxxxxx tabáku
 
vadnutí
 
 
 
- xxxxx xxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
(*) Xxxx 4 (xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x některých xxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxx 5 (patogenní xxxxx na xxxxxx) xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx reakce xxxxxx xxxxxx být příliš xxxxxxxxxx x místo xxxx xxx xx xxxxxxxxxxx k rase xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx hostitele.
Kulturu xxx dále xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx:
xxxxxxxxxx fingerprintu:
Molekulární xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx:
xxxxxxxx XXXX (Cook xx xx., 1989)
xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX (REP-, ERIC &xxx; XXX-XXX (Xxxxx xx al., 1995; Xxxxx xx al., 1995).
3.3. Test patogenity
Tento xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx diagnózy xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx identifikovaných xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx a pozitivního xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx o hustotě 106 xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx. Poté xxxxxxxxxxx 5 - 10 xxxxxxx xxxxxxx xxxx lilku vejcoplodého xxxxxxx ve stadiu xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxxx XXX.6). Xxxxxxxxxx xx xxx týdny xxx xxxxxxxxx 22 - 28 °X a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxx epinastie, xxxxxxxx, xxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx izolaci xxxxx:
- Xxxxxxxxx část pletiva xx xxxxxx 2 xx xxx místem xxxxxxxxx.
- Rozmělníme a xxxxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx sterilní destilované xxxx xxxx ve xxxxxxxxxx xxxxx 50xX, xxx rozetřeme xx xxxxxx, inkubujeme x xxxx vyhodnotíme xx xxxxxx typických kolonií xxxxx xxxxxxx.
XXXXX XXX: Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xx vzorcích hlíz xxxxxxxx
Xxxxxxxxxx: Standardní velikost xxxxxx xx 200 xxxx. Xxxxxx xx xxxx xxxxxx x xxx xxxxxx x xxxx než 200 xxxxxxx.
1. Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx: Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx postupem xxx xxxxxx i pro xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx, je xxxxx xxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xx 2 týdnů při xxxxxxx 25 - 30 °C, aby xx podpořilo rozmnožení xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx;
- oprat xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx s vhodným xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.1. Čistým x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nástrojem xxxxxxxxxx xxxxxx hlízy xx xxxx xxxxxxx xxxxx, xxx xxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx vyřízneme malý xxxxxxx xxxxxxxx (3 - 5 xx x průměru). Xxxxxx xx třeba xxxx xx xx, xxx xxxxxxxx bylo xxxxxxxxx xx xxxxxxx nevodivých xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx hlíze xx vzorku.
Upozornění: V xxxx fází xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo silnou xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx XX).
1.2 Xxxxxxx části xxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx a neprodleně xxxxxxxxxx. Pokud to xxxx možné, xxxxxx xx xxx skladovány xxxx než 24 xxxxx xxxx při xxxxxxx 4 °X xxxx xxx 72 xxxxx.
1.3 Xxxxxxx části xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x následujících postupů:
1.3.1. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxx objem xxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxxxx 2), xxx xxxxx x xxxxxxxx pupkových xxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx Xxxxxx Xxxxxxx xxxx Xxxxx-Xxxxxx. Je však xxxxx zamezit příliš xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx 15 - 30 minut xxxxx.
1.3.2. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx do vhodné xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxx objem xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx k překrytí xxxxxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx do xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxx 50 - 100 otáčkách xx xxxxxx xx xxxx 4 hodin xxx teplotě 20 - 22 °X xxxx xx xxxx 16 - 24 xxxxx xxx xxxxxxx 4 °X.
1.3.3. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx pevného jednorázového xxxxxxxxxxx xxxxx (např. xxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxx 105 x 150 mm, xxxxxxxxxxxx ozářením).
Pupkové xxxxx xxxx xxxxxxxxxx vhodným xxxxxxxxx, xxxx. kladivem, xx k xxxxx
xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxx množství maceračního xxxxx, xxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx hlíz.
Macerát xxxxxxx 15-30 minut xxxxxx.
1.4. Z takto xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx se bakterie xxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx postupů:
1.4.1. Macerát xxxxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxxxxxxx zkumavky, tuhý xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x nádobě xxxx xxxxx. Xx-xx xxxxx xxxxxxx kalný, xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx pod 10 °X xx xxxx 10 xxxxx xxx odstředivé síle xx xxxxx než 180 x.
Xxxxx macerát xx xxxxxxxxxxx z xxxxxxx odstřeďování odstřeďujeme xx xxxx 15 xxxxx xxx 7&xxxx;000 x nebo 10 xxxxx xxx 10 000 x při xxxxxxx xxx 10 °X.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, abychom xxxxxxxxxx vzniklou xxxxxx.
1.4.2. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přes xxxxxxxxx systém x xxxxxxxxx pórů 40 - 100 µx. Xxxxxxxx posílíme xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx zkumavce.
Filtr xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx odstřeďujeme xx xxxx 15 xxxxx xxx 7&xxxx;000 x xxxx 10 xxxxx xxx 10&xxxx;000 x x při xxxxxxx xxx 10°X.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, abychom xxxxxxxxxx vzniklou peletu.
1.5. Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx v 1 xx xxxxxxxxxx xxxxx (Dodatek 2).
Xxxxxxxxx xx xxx stejné xxxx a xxxxx x xxxx nalijeme xx jedné mikrozkumavky.
Pro xxxx používáme xxx xxxxx mikrozkumavku. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx dobu testu xxx teplotě 4 °X.
Xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 10-25 xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx při xxxxxxx - 18 °X (týdny) xxxx xxx xxxxxxx - 70 °C (xxxxxx).
2. XX test
Použijeme xxxxxxxxx xxx původce xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxx 3/xxxxxx 2. Xxxxxx titr u xxxxxxxx x xxxxxxx 106 xxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx konjugátu xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (FITC) xxxxx doporučení xxxxxxx. Xxxxxx antisérum xx xxxx xxx XX xxxx xxxxxxxxx 1 : 2 000.
Použijeme víceokénkové xxxxxxxx xxxxxxx nejlépe x 10 xxxxxx x průměru xxxxxxx 6 xx.
Xx každé xxxxxxxx xxxxxxx naneseme xxxxxxxx xxxxxxxxx XXXX. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx XXX, xxxxx xxxxxxxx FITC xxxxxx xxxxxxx pozitivní xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx x hustotě 106 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx rasy x xxxxxxx xxxxx hniloby. X každé xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
2.1. Xxxxxxxx xxxxxxx připravíme jedním x následujících xxxxxxx:
2.1.1. Xxx pelety x xxxxxxxxx xxxxx obsahem xxxxxx:
Xxxxxxxx standardní xxxxx (15 µx xxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx 6 xx - x xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx odpovídající xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx okének. Xxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xx obr. 1.
2.1.2. Xxx xxxx xxxxxx:
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx. 1/10, 1/100 x 1/1&xxxx;000 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x peletovém xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (15 µx xxxxxxxxx xxx xxxxxx x průměru 6 xx - x xxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx odpovídající xxxxx xxxxx) xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx naneseme xxxxxxx xx řadu xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx nebo xxx xxxxx xxxxxx, xxx xx znázorněno xx xxx. 2.
2.2. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx sklíčku buď xxxxxxxx, ožehnutím nebo 95% etanolem.
2.3. Postup xxx IF testu
2.3.1. Xxx xxxxxxxx podložního xxxxxxx podle 2.1.1.:
Připravíme xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x XX xxxxx (Xxxxxxx 3):
1/4 xxxxx (T/4), 1/2 xxxxx (X/2), titr (X) x dvojnásobek xxxxx (2X)
2.3.2. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 2.1.2.:
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x XX xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx postupem xxxxx 2.1.1. x 2.3.1.
Standardní xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X = xxxx
&xxxx;
&xxxx;
XXXX
&xxxx;
X/4
&xxxx;
X/2
&xxxx;
X
&xxxx;
2X
&xxxx;
(xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx)
&xxxx;
xxxxxx 1
&xxxx;
∙1
&xxxx;
∙2
&xxxx;
∙3
&xxxx;
∙4
&xxxx;
∙5
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxxxx xxxxxx 1 xxxx xxxxxx 2
&xxxx;
∙6
&xxxx;
∙7
&xxxx;
∙8
&xxxx;
∙9
&xxxx;
∙10
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
Xxxxxxx 2
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx podle 2.1.2. a 2.3.2
&xxxx;
&xxxx;
XXXX
&xxxx;
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxxxx
&xxxx;
xxxxxxxx
&xxxx;
1/10
&xxxx;
1/100
&xxxx;
1/1000
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
(xxxxxxxxx zředění xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx)
&xxxx;
xxxxxx 1
&xxxx;
∙1
&xxxx;
∙2
&xxxx;
∙3
&xxxx;
∙4
&xxxx;
∙5
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxxxx xxxxxx 1 nebo xxxxxx 2
&xxxx;
∙6
&xxxx;
∙7
&xxxx;
∙8
&xxxx;
∙9
&xxxx;
∙10
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
2.3.3. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx savý xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx pokryjeme xxxxxxx(x) antiséra. Xx xxxxxx XXXX naneseme xxxxxxxxx xxxx PBS. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.3.4. Inkubujeme xxxxxxx xx dobu 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
2.3.5. Xxxxx antiséra xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx opatrně xxxxxxxxxx XX xxxxxx. Omýváme 5 xxxxx v xxxxxxx XX xxxxxXxxxx x poté 5 xxxxx x IF xxxxx. (Dodatek 3).
Přebytečnou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
2.3.6. Xxxxxxxx xxxxxxx vyložíme xx xxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx s XXXX xxxxxxxxx ředěním xxxxxxxxx XXXX xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx aplikovaného xxxxxxxx.
2.3.7. Xxxxxxxxxx zakryté xx xxxx 30 minut xxx xxxxxxxx teplotě.
2.3.8. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x podložního xxxxxxx. Xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx v xxxx 2.3.5. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx odstraníme.
2.3.9. Xx každé okénko xxxxxxxxxxxx 5 - 10 µl 0,1 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (Dodatek 3) xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx kapalinu a xxxxxxxxx krycí xxxxxxx.
2.4. Xxxxxxxxx XX testu
Podložní xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx XXXX, xxx xxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxx 500 - 1&xxxx;000x. Xxxxx okénko xxxxxxxxxxxxx prohlížíme ve xxxx navzájem kolmých xxxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolou. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx: Při xxxxxxxxx zbarvení xx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x testovanými xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x kontrolou XXXX. Fluoreskující buňky x kontrolním okénku XXXX xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx konjugátu, xx autofluorescenci xxxx xx kontaminaci. Upozornění: Xxxxx xxxx pozorujeme, xx třeba xxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx fluorescence xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx ředění antiséra. Xx xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx slabou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx bylo xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx (xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX xxxxx).
2.4.1. Xxxxxxxxxxx výsledku XX xxxxx
x) Xxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x charakteristickou xxxxxxxxxx, xx XX xxxx xxxxxxxxx.
x) Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx průměrný počet xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx x vypočteme xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx (hodnota X) resuspendované xxxxxx (Xxxxxxx 4).
Xxxxxxx bakterií x hodnotě xxx 103 xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx považována xx hranici xxxxxxx XX xxxxx,
- u xxxxxx s N &xx; 103 xxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx IF xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- x xxxxxx s X &xx; 103 xxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxx XX xxxxx xxxxxxxx xxxx pozitivní
c) Je-li xxxxxxx vysoký počet (&xx; 105 buněk xx 1 xxxxxxxx) xxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx při xxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxx proveden xxxxx xxxx:
- xxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx biologickém principu xxxx
- xxxxxxxxx IF xxxx, buď s xxxxxx antisérem xxxx x xxxxxxxxxxxxxx zředěním xxxxxx.
3. ELISA xxxx
(xxxxx Xxxxxxxxx-Xxxxxx xx xx., 1995)
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx hniloby, xxxxxxx xxx xxxx 3/xxxxxx 2. Titr xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x hustotě 106 xx 1 ml xxxxx homologního xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXXX-Xxxxxxxx.
Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (XXX).
Xxxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx &xx; 106 xxxxx xx 1 xx x xxxxx xxxxxx xxxx/xxxxxxx původce xxxxx xxxxxxx. Test xxxxxxxxx stejně xxxx x xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xx vzorků xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3.1. Xxxxxxxxxxxx 100 - 200 µx resuspendované xxxxxx xx mikrozkumavky.
Po xxxx xxxx minut xxxxxxxxx při xxxxxxx 100 °C. Xxxxxxxxxxxxx xxx položíme xx xxx.
3.2. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx dvojnásobně silného xxxxxxxxxxxxxx krycího pufru (Xxxxxxx 5). Xxxxxxxxxx.
3.3. Xx nejméně xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xx 100 µx. Xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 °X xxxx xxxx xxx xxx xxxxxxx 4 °X.
3.4. Xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx pufrem (XXX) x Tweenem (Xxxxxxx 5); poslední xxxx xxxxxx xx v xxxxxxx měl xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxx.
3.5. Xxxxxxxxxx vhodné xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxx (Xxxxxxx 5). Do xxxxx xxxx po 100 µx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx při xxxxxxx 37 °X.
3.6. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx odstraníme. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxx (3.4.).
3.7. Připravíme xxxxxx ředění xxxxxxxxx xxxxxxxxx fosfatasy x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxx. Xx xxxxx xxxx 100 µI ředěného xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx hodiny xxx xxxxxxx 37 °C.
3.8. Xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx je xxxxxxx xxxx (3.4., 3.6.).
3.9. Xxxxxxxxxx substrátový alkalický xxxxxx xxxxxxxxx (Dodatek 5). Dáme 100 µx xx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx dobu xxxx 30 xxxxxxxx x 1 hodinou xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
3.10. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 409 xx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ELISA xxxxx:
XXXXX xxxx je xxxxxxxxx xxxxx, xx-xx xxxxxxx xxxxxxx (OD) vzorku &xx; 2 x XX negativní kontroly.
ELISA xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxx (OD) xxxxxx &xx; 2 x OD xxxxxxxxx xxxxxxxx.
4. PCR xxxx
(xxxxx Xxxxx xx xx., 1993)
Xxxxxxxxxx: U xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx v souvislosti x XXX xxxx xxx xxxxxxxxx špičky xxxxx x xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx připravíme xxxxxxxx kmene původce xxxxx xxxxxxx rasy 3/xxxxxx 2 o xxxxxxx 106 xxxxx xx 1 xx . Xxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x vzorku(ů).
4.1. Odpipetujeme 100 µx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx mikrozkumavky.
Alternativně xxx xxx 90 µx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx 10 µx 0,5X NaOH. Xxxxxxx xxxxxxxxxx převracením mikrozkumavky.
4.2. Xxxxxxxxx xx xxxx 4 xxxxx xxx xxxxxxx 100 °X. Xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xx led.
4.3. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, např. 1/10 x 1/100 (x xxxxxxx potřeby x xxxx) ve xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vodě xxxx ultračisté xxxx (XXX).
4.4. Ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx připravíme xxxxxxx xxxx xxx PCR (Xxxxxxx 6) xxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx:
Xxx xxxxxxx xxxxx 50 µx
xxxxxx koncentrace xxxxxxxx konečná
sterilní xxxxxxxxxxx xxxx nebo XXX 30,8µx - 33,8µl
10 x XXX pufr 5,0µx 1 x
x-XXX 1,0µx 0,2 xX
x-XXX 1,0µx 0,2 xX
x-XXX 1,0xx 0,2 mM
d-TTP 1,0µx 0,2 xX
Xxxxxx XXX-1 (20 µX) 2,5µx 1 µx X
Xxxxxx X-2 (20 µX) 2,5µx 1 µx X
Xxx-xxxxxxxxxx (5X/1 µx) 0,2µX 1,0 X
______________________________________________________________
Xxxxxxx xxxxx 45 µx - 48 µx
Xxx xxxx reakcí
Vypočítáme xxxxxxxx každé složky xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx x 45 µl - 48 µx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx XXX.
Xxxxxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx PCR xxxxxxxx na led.
Pro xxxxxxx objem 25 µx:
Xxxxxxxx xxxxxx odpovídajícím xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.5. XXX xxxxxxxxxxx
4.5.1. Nepovinně: Xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolou xxxxxxxx (velmi xxxxxx) xxxxxxxxxx. Do xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx směsí XXX xxxxxxx x xxxxxxxx pořadí 2 - 5 µl xxxxxx, vodní xxxxxxxx x pozitivní kontrolu. Xxxxxxxxxxxxx postavíme do xxxxxxxxxx bloku xxxxxxxxxxxx XXX.
4.5.2. Xxxxxxxxx následující xxxxxxx:
1 xxxxxx
x) 2 xxxxxx xxx teplotě 96 °C; xxxxxxxxxx xxxxxxx
50 cyklů
b) 20 xxxxxx xxx xxxxxxx 94 °X; xxxxxxxxxx
x) 20 xxxxxx při xxxxxxx 68 °C; xxxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxx
x) 30 xxxxxx xxx xxxxxxx 72 °X; xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
1 cyklus
e) 10 xxxxx xxx xxxxxxx 72 °X; xxxxx xxxxxxxxxxxx;
1 xxxxxx
x) xxxxxxxxxx xxx teplotě 4 °C.
Upozornění: Xxxx xxxxxxxxx se vztahují xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx Xxxxx 9600. X xxxxxx termocyklerů xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXX x xxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x), x) x x) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.5.3. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Analyzujeme PCR xxxxxxx. Pokud xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx mikrozkumavky xxx xxxxxxx x xxxxxx xxx xxx teplotě 4 °X a xxx použití xx xxxxx dobu xx xxxxxxxxxx xxx teplotě - 18 °X.
4.6. Xxxxxxx XXX xxxxxxxx
Xxxxxxxxx XXX se xxxxxxxx xxxxxxxxxx gelovou xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx ethidiumbromidem.
4.6.1. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx, že xxxxxxx xxxxxxx povaříme x elektroforetickém xxxx-xxxxxxxxx xxxxx (TAE).
4.6.2. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx asi 50-60 °X, naplníme xx xxxxxxx nalévací xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
4.6.3. Hřeben xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xx pufru XXX xxx, xxx xxx xxxxxx vrstvou xxxxx xxxxxx asi 2 - 3 xx.
4.6.4. Xx Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx 3 µx. Přidáme 12 µx produktu XXX xx xxxxxx, x xxxxxxxxx kontroly nebo xxxxx kontroly x xxxx naplněním xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx pipety. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx být xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x agarózovém xxxx.
4.6.5. Xxxxx v gelu xxxxxxx xxxxxxxx. Do xxxxxxx xxxxx jamky xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx DNA xxxxxx.
4.6.6. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx aparaturu xx xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxx 5-8 V/cm, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebude xxxxxxxx xx vzdálenosti xx 1 cm xx xxxxxx xxxx.
4.6.7. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx aparatury.
Gel opatrně xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx xx dobu 30 - 45 xxxxx x roztoku xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx: Xxx manipulaci x xxxxxxxxxxxxxxxx, který xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, používáme vždy xxxxxxxxxxx rukavice!
4.6.8. Xxxxxxx x gelu vymýváme x xxxxxxxxxxx xxxx xx dobu 10 xx 15 minut.
4.6.9. Xxxxxxxx(x) fragment(y) XXX xxxxxxxxxxxx ultrafialovou transiluminací. XXX xxxxxxx xxxxx xxxxxxx s primery XXX-1 a X-2 xx xxxxx 288 xxxx xxxx. Porovnáme x XXX xxxxxxxx x s xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx: Xxxxx (=xxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxx xxx x xxxxxx případě xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx být test xxxxxxxx.
4.6.10. Xx xxxxxx xxxxxxxxxxx gel xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
4.6.11. Xxxxxxx zesíleného xxxxxxxxx potvrdíme analýzou xxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX).
4.7. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx enzymem (XXX)
4.7.1. 8,5 µx XXX xxxxxxxx (4.5.3.) xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx 1 µx 10x xxxxxxxxxx xxxxx x 0,5 µx xxxxxxxxxxxx enzymu Xxx 11.
4.7.2. Mícháme xxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx stěnách xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kapičky, vzorek xxxxxxx způsobem xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxx 37 °C.
4.7.3. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxxxxxxx jako xxxxxxx (4.6) agarózovou xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxx:
XXX xxxx xx xxxxxxxxx, pokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 288 bp x xxxxx xxxxxxxx byl xxxxxx detekován x xxxxxxxxxxx kontrolního xxxxx xxxxx xxxxxxx.
XXX xxxx xx xxxxxxxxx, jestliže xxx prokázán 288 xx xxxxxxxx x xxxxxxx XXX ukazuje, xx amplifikovaný fragment xx identický s xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kmenem xxxxx hniloby.
5. Test xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx Xxxxxxxxxxx xx al. 1996).
5.1. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, např.:
a) Připravíme xxxxxxxxx dvě desetinná xxxxxx, xxx. 1/10 x 1/100 xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (50 - 100 µx) resuspendované pelety x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx SMSA xxxxxx (Xxxxxxx 7) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx to xxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx 10µl očkem xxxxxxxxx xxxxxx resuspendované xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx sterilizujeme.
b) Xxxxxxxx standardní xxxxx (50 - 100 µx) xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx SMSA médium x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx plamenem xxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx dvě další xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx SMSA.
5.2. Stejnou xxxxxxxxx xxxxxxxxx roztěru xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx původce hnědé xxxxxxx xxxx 3/biovar 2 x xxxxxxx 106 xxxxx v 1 ml xxxx xxxxxxxxx kontrolu xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx XXXX xxxxxx.
5.3. Plotny xxxxxxxxxx xxx teplotě 28 °X. Xx 3 xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Při xxxxxxxxxx nálezu xxxxxxxxxx xxxx xx do 6 xxx. Kolonie xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx jsou xxxxxx xxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx xxxxx je xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx spirálkami.
5.4. Xxxxxxx s charakteristickou xxxxxxxxxx převedeme xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx universálním médiu (Xxxxxxx 1).
5.5. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (oddíl XX.4.1) a kultury xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxx XX.4.3.).
Xxxxxxxxxxx výsledků xxxxx xx selektivním xxxxxx médiu.
Test na xxxxxxxxxxx živném xxxxx xx negativní, pokud xx šesti dnech xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx bakterií xxxx xxxxx nejsou xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby, xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx a že x xxxxxxxxxxx kontrolách xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx původce xxxxx xxxxxxx.
Xxxx na selektivním xxxxxx médiu xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx byly xxxxxxxxx charakteristické xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxxx
(xxxxx Xxxxx, 1988)
6.1. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 10 testovacích xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx lilku xxxxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2. 100 µx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx mezi testované xxxxxxxx. Inokulujeme xxxxxx xxxx xxxxxxxx a xx xxxxxx xxxx xxxx dalších xxxxxxx.
6.3. Xxxxxxx technikou inokulujeme 10 xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx původce xxxxx xxxxxxx xxxx 3/xxxxxx 2 x xxxxxxx 106 buněk x 1 mililitru xxxx pozitivní xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxx xx xxxxxxxxx.
6.4. Xxxxxxxxx rostliny xxxxxxx xxxx xxxx při xxxxxxxxx 22 °C xx 28 °X x xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xx 4 xxxxx. Denně xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx příznaky xxxxxxx, epinastie, xxxxxxxx x (xxxx) xxxxxx.
6.5. X infikovaných xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (oddíl XX). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (oddíl II.4.1.) x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxx XX.4.3.).
6.6. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx nevykazují žádné xxxxxxxx xxxxxxx, zda xxxxxxxx k xxxxxxx xxxxxxx. X každé xxxxxxxxx rostliny odebereme 2 xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxx zřeďovací xxxxxxxxx (xxxxx XXX.5.1.). X xxxxxxx pozitivního nálezu xxxxxxxxxxxxxx čisté kultury x xxxxxxxxxxxxxxxxx morfologií (xxxxx XX.4.1.) x xxxxxxx původce hnědé xxxxxxx xxxxxxxxx provedením xxxxx xxxxxxxxxx (oddíl XX.4.3.).
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxx xx negativní, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx nejsou xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx detekován x xxxxxxxxxxx kontrolách.
Biotest xx xxxxxxxxx, jestliže xxxxxxxxx rostliny xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxx testy
(podle X.X. Xxxxxxxxxxx et xx., 1996)
7.1. Xxxxxxx 100 µl xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx 3 xx modifikovaného xxxxxxx xxxxx XXXX (Dodatek 7).
7.2. xxxxxxxxxx xx xxxx 48 xxxxx, x xxxxxx případě xxxx xx xxxx xxx 72 hodin, xxx xxxxxxx 28 °X, x xx xxx volně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx větrání.
7.3. Upevníme xxxxx mikrozkumavky a xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx XX xxxx (xxxxx xxxxx, xxx 2), xxx ELISA xxxx (tento xxxxx, xxx 3) x/xxxx XXX xxxx (tento xxxxx, bod 4).
8 Xxxx patogenity
Viz xxxxx XX.4.3.
Xxxxxxx 1
Živná xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxx (XX)
xxxxx xxxx (Xxxxx) 23 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 x
X 1xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 0,5 litru xxxxxx xxxxx.
Xxxxx rozpustíme.
Sterilizujeme 15 minut x xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 121 °X.
Xxxxxxxxx na 50 °X. Provedeme xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx-xxxxxx-xxxxxxxxx agar (XXXX)
xxxxxxxxx xxxxxxx (Difco) 5 x
xxxxxxxxxxx (Xxxxx) 5 x
X(+)-xxxxxxx (xxxxxxxxxx) 10 x
xxxxxxxxx (Difco) 15 g
destilovaná voda 1 l
V jednolitrové xxxxx xxxxxxxxxxxx 0,5 xxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx 15 xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 121°X.
Xxxxxxxxx xx 50 °X. Xxxxxxxxx xxxxxx ploten.
Sacharózo-peptonový agar (XXX)
xxxxxxxxx 20 x
xxxxxx 5 x
X2XXX4 0,5 x
XxXX4.7X2X 0,25 g
baktoagar (Xxxxx) 15 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 x
X xxxxxxxxxxxx baňce připravujeme 0,5 xxxxx objemu xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxx potřeby xxxxxxxx xX na 7,2 - 7,4.
Sterilizujeme 15 xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 121 °X.
Xxxxxxxxx xx 50 °X. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx médium
kyseliny xxxxxxxxxx (=xxxxxx xxxxxxxxxx) (Xxxxx) 1 x
xxxxxxxxxxx (Xxxxx) 10 x
xxxxxxxx 5 g
baktoagar (Xxxxx) 15 g
destilovaná xxxx 1 x
X jednolitrové xxxxx xxxxxxxxxxxx 0,5 xxxxx xxxxxx média.
Látky xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx 15 minut x autoklávu xxx xxxxxxx 121 °C.
Ochladíme xx 50 °X.
Xxxxxxx xxxxxxx sterilizovaný vodní xxxxxx trifenyl-tetrazoliumchloridu (Xxxxx) xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 50 xx/x.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx 2
Xxxxxxxx xxx přípravu xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx: 50 xX fosfátový xxxx, xX 7,0
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xx2XXX4 4,26 x
XX2XX4 2,72 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 x
Xxxxx xxxxxxxxxx x zkontrolujeme xX. Podle xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx dobu 15 xxxxx při xxxxxxx 121 °X.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xx doporučuje xxxxxxx 5% xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 40.000 MWT (XXX-40), xxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx amplifikace xxxxxxxxxxxx molekulami x xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx homogenizačních xxxxx xxxxxx Xxxxxx-Xxxxxxx xxxx Xxxxx-Xxxxxx x xxxxxxxx výkrojků xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx deflokulačního prostředku, xxxxxxxxxx xxxxx tvorbě xxxx xxxx antioxidantu.
lubrolové xxxxxx 0,5 g/l
antipěnidlo XX-xxxxxxx 1,0 ml/l
tetrapyrofosfát xxxxx 1,0 x/1
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Přidáváme až xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx: 10 xX fosfátového xxxxx, xX 7,2
Tento pufr xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx
Xx2XXX4 . 12 X2X 2,7 x
XX2XX4 . 2 H2O 0,4 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 x
Xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx pH. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx po xxxx 15 xxxxx xxx xxxxxxx 121 °X.
Xxxxxxx 3
Xxxxxxxx xxx XX xxxx
XX-xxxx: 10 xX roztoku xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx fosfátem (XXX), xX 7,2
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxx ředění xxxxxxxx.
Xx2XXX4 .12 X2X 2,7 x
XX2XX4 . 2 X2X 0,4 x
XxXX 8,0 x
xxxxxxxxxx xxxx 1 x
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx pH. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx dobu 15 xxxxx při xxxxxxx 121 °X.
XX xxxx Xxxxx
Xxxxx pufr se xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx sklíček. K XX pufru xx xxxxxxx 0,1 % Xxxxx.
0,1 X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xX 7,6
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx XX xxxxxxxxxx
xxxxxxx.
Xx2XXX4. 12 X2X 3,2 g
NaH2PO4. 2 X2X 0,15 x
xxxxxxxx 50 ml
destilovaná xxxx 100 ml
Dodatek 4
Xxxxxxxxx xxxxxx kontaminace x XX testu
Plocha (X) xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x více xxxxxx
= πX2/4,
xxxxxxx X = xxxxxx xxxxxx (x).
Xxxxxx (x) xxxx objektivu
= πx2/4,
xxx x = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx (2);
x xxxxxxxxx buď xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:
x = πi2/G2K2 x 4
xxx x = xxxxxxxxxx pole (závisí xx typu xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxx xx 8 xx 24),
X = xxxxxxxx xxxxxxxxxx (1 xxxx 1,25)
X = (100násobné, 40xxxxxxx xxxx.) xxxxxxxx xxxxxxxxx;
xx xxxxxx (2):
x = xxxxxxxxx 4x/π;
xx xxxxxx (3):
x = odmocnina 4x πx2/X2X2 x 4/π = x/XX.
Xxxxxxxx xxxxx typických fluoreskujících xxxxx x jednom xxxx - x.
Xxxxxxxxxx xxxxx typických fluoreskujících xxxxx x celém xxxxxx - X.
X = c X/x
Xxxxxxxxxx xxxxx typických xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx xx xxxxxx (N).
N = C x X x 1000/y,
kde x = xxxxx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
X = xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx 5
Xxxxxxxx xxx ELISA xxxx
Xxxxxxxxxxx uhličitanový xxxxxxxxx xxxx, xX 9,6
Xx2XX3 6,36 g
NaHCO3 11,72 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 x
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xX. Podle xxxxxxx provedeme alikvotaci.
Sterilizujeme x autoklávu xx xxxx 15 minut xxx teplotě 121 °X.
Xxxxx extrakt xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, lze xxxxxx xxxxxxxxx sodný x xxxxxxxx koncentrací 0,2 % xxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx chloridu xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (PBS), xX 7,4
XxXX 80 x
XX2XX4 2 x
Xx2XXX4 x 12 X2X 29 g
KCl 2 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 x
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xX. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx 15 minut xxx teplotě 121 °X.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx - Xxxxx - xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (PBS-T)
10 x PBS 100 xx
10% Xxxxx 20 5 xx
xxxxxxxxxxx xxxx 895 xx
Xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxx (musí xxx xxxxxx xxxxxxx)
10 x XXX 10 xX
xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 44.000 MWT(PVP-44) 2 x
10% Tween 20 0,5 x
xxxxxx mléko 0,5 x
xxxxxxxxxxx voda xx 100 xx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztok fosfatázy, xX 9,8
dietanolamin 97 xx
xxxxxxxxxxx voda 88 xx
Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx XXx xxxxxxxx xx xX 9,8.
Doplníme xxxxxxxxxxxx xxxxx na xxxxx 1 litru.
Přidáme 0,2 x MgCl2.
V xxxxxxx 15 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (5 xx) (Sigma).
Dodatek 6
Materiál xxx PCR xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx primeru
Primer OLI-l 5' - GGGGGTAGCTTGCTACCTGCC-3'
Primer X-2 5'- XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX-3'
xxxxxxxx xxxxxxxxxx viz Xxxx xx xx., 1993.
Xxxxxxx 7
Xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxx živných xxxxx x obohacovací testy
Selektivní xxxxxx XXXX (Engelbrecht, 1994, modifikováno podle Xxxxxxxxxxxx xx xx., 1996)
Xxxxxxxx medium
kaseinový hydrolyzát (Xxxxx) 1 x
xxxxxxxxxxx (Xxxxx) 10 x
xxxxxxxx 5 ml
agar (Xxxxx) 15 x
xxxxxxxxxxx voda 1 l
V xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 0,5 x substrátu.
Látky xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xX. X xxxxxxx xxxxxxx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx hodnotu xX xx 6,5. Xxx xX xxx 7,0 xxxxxxx původce xxxxx hniloby xx xxxxx xxxxxxxxx dobře.
Sterilizujeme x xxxxxxxxx xx xxxx 15 xxxxx xxx teplotě 121 °X.
Xxxxxxxxx xx 50 °X.
Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xx xxxxx Sigma):
krystalová xxxxxx 5 mg/l
polymixin-B-sulfát 100 xx/x (xxx 600&xxxx;000 xxxxxxxx) Sigma P-1004
bacitracin (*) 25 mg/l (xxx 1250 jednotek) Xxxxx B-0125
chloramfenikol 5 xx/x Xxxxx X-3175
xxxxxxxxx-X 0,5 mg/l (xxx 825 xxxxxxxx) Sigma X-3032
xxxxxxxxxxxx xxxx 50 xx/x
Xxxxx rozpustíme x 70% etanolu xx xxxxxxxxxxx uvedené pro xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx látky, jako xx např. polymixin X nebo xxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx zahřát x xxxxxxxxx.
XXXX xxxxx (Xxxxxxxxxxx xx al., 1996)
Xxxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx SMSA, xxxxx xxx agaru.
Naplníme xxxxxxxxx xxxxxxxx 3 xx xx 30 xx xxxxxxxxxxxxx univerzálních xxxxxxxx.
(*) X případě xxxxxxx xxx kontaminaci xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx snížit zvýšením xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 300 ppm, xxxx xx tím xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx hnědé hniloby
Literatura
Buddenhagen, X. X. - Xxxxxxxx, X. - Xxxxxx, X.: Xxxxxxxxxxx xx xxxxx in Xxxxxxxxxxx solanacearum . Xxxxxxxxxxxxxx 52 (1962):726.
Cook, X. - Elizabeth, X. - Sequeira, X.: Xxxxxxx xxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx of xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx DNA xxxxxx xxxx specify xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx Xxxxx-Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx 2 (1989): 113 - 121.
Xxxxxxx, X. X. - XxXxxx, X. X.: Xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx from xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx Xxxxxx Xxxxxxx 72 (1995): 133 - 142.
Xxxxxxxxxxx, J. X. xx xx.: Sensitivity xx xxxxxxxxx methods xxx xxx detection xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (Xxxxx) Xxxxx xx xxxxxx tuber xxxxxxxx. XXXX Xxxxxxxx 26 (1996).
Xxxxxxxxxxx, M. X.: Xxxxxxxxxxxx of x xxxx-xxxxxxxxx medium xxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. XXXXX Xxxxxxxxx Xxxx Xxxxxxxxxx 10 (1994): 3 -5.
Xxxxxxx, X.X.: Xxxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Journal xx Xxxxxxx Bacteriology 27 (1964): 265 -277.
Xxxxxxx, X.X.: Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx solanacearum xxx xxxxxxx xxxxxxxx. In: Xxxxxxxxx Xxxx: the xxxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx agent, Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxx. A. X. Hayward xxx X. X. Xxxxxxx) XXXX Oxford, 1994: 127 - 135.
Xxxxx, X. X.: X xxxxxxxxx method xxx Xxxxxxxxxxx solanacearum xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxx data xx xxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. EPPO Xxxxxxxx 18 (1988): 343 - 351.
Xxxxx, X. X.: Xxxxx- xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx and Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx 14 (1991): 335 - 345.
Xxxxxx, X.: The xxxxxxxxxxxx of xxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx colony xxxxxxxxxx xx x tetrazolium xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx 64 (1954): 293 - 295.
Xxxxxxx, R. X. - Xxxxx, X. X.: Methods for xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. (X. X. Xxxxxx xx.) Blackwell Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, Xxxxxx 1987, 216 s.
Louws, X. X. xx xx.: Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx by xxx-XXX xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx Xanthomonas xxxxxxxxxx pv. vesicatoria. Xxxxxxxxxxxxxx 85 (1995): 528 - 536.
Xxxxxx, X. X. - Xxxxxxxx, L.: Differentiation xx xxxxx of Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx 60 (1970): 838
Mirza, M. X. xx xx.: Xxxxxxxx 16X ribosomal XXX xxxxxxxx oligonucleotide xxxxx against Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. sepedonicus. Xxxxxxxx Xxxxxxx of Xxxxxxxxxxxx 39 (1993): 1029-1034.
Xxxxxxxx-Xxxxx, X. et xx.: Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, the xxxxxxxxx xxxxx xx bacterial xxxx. Xxxx xxx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx 7 (1995): 67 - 79.
Xxxx, S. E. xx xx.: Xxxxxxxxxxxxxxx xx Pseudomonas xxxxxxxxxxxx, X. xxxxxxx, P. xxxxxxxx xxx xxx xxxxx xxxxxxx bacterium xx xxxxxxx 16S xXXX xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx primers xxx sensitive xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx 139 (1993): 1587 - 1594.
Xxxxx, J. J. xx al.: Xxxxxxx xxxxxxxxx of Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (synonym Pseudomonas xxxxxxxxxxxx) xxxx 3 xx Xxxxx. Applied xxx XxxxxxxxxxxxX Xxxxxxxxxxxx 61 (1995): 4262 - 4268.
Xxxxx, X. X.: Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx: Xxxxxxxxxx for xxxxx xxxxxxxxx of xxxxx xxxxxxxxx (xxx. X. X. Xxxxxx xxx L. Xxxxxxxx). Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, Xxxxxx 1992x, x. 76 - 111.
Xxxxx, X. E.: Grouping xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxx other Xxxxxxxxxxx xxx. xxxxx xxxxxxxx xxxxx acid xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx Xxxxxxx xx Systematic Xxxxxxxxxxxx 42 (1992x): 281 - 295.
Xxx Xxxxxxxxx, X. - Xxxxx, X. - Xxxxx, X. X.: Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx xxxx special xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xx-xxxx xxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxx x 16X xXXX xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xüxxxxxxxxxxxxxxxxx 2 (x).

Xxxxxxx x. 2 x xxxxxxxx x. 331/2004 Xx.

X. Rozsah xxxxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx §3 xxxx. 12

Informace x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx §3 xxxx. 12 xxxxxxxx:

x) xxx xxxxxxxxxx výskytu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx hnědé xxxxxxx x porostech, ve xxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx1) (xxxxxxxxx podle kategorií) x xxxxxxx brambory (xxxxxxxxx xx brambory xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx),

- xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x vzorkovaných xxxxxxx x xxxxxxxxx,

- počet x hmotnost (x xxxxxx) xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx partií x XX sklizených nebo xx XX xxxxxxxxxx xxxx,

- xxxx xxxxxx x xxxxx vzorků xxxxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx;

x) xxx zjišťování výskytu xxxxxxx xxxxx hniloby x xxxxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxx kontrolovaných xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (i xxxxx),

- xxxxx odebraných xxxxxx x výsledky xxxxxxxxx;

x) xxx zjišťování xxxxxxx původce xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxxx x rajče, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx lilkovitých x xxxxxxxx xxxxxxxx:

- počet xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx x počet (x xxxxx) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, druh xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxx xxxxxx xxxxxxx - počet x xxxxxxxx vodních xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx vzorky xxxxxxx;

x) xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xx xxxxxxx zdrojích xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

- xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx,

- počet odebraných xxxxxx xxxx, xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x výsledky xxxxxxxxx;

X. Xxxxxxxx testovaných xxxxxx a xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

1. Xxxxxxx-xx podezření x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx pozitivního xxxxxxxx imunofluorescenčního xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x. 1, xxxx xxx xx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx:

- celá xxxxxx xxxxxxx, x xxx xxx xxxxxxx vzorek, xxxx část xxxx xxxxxx x původním xxxxx x xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, x

- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx imunofluorescenční xxxx.

2. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx po dobu xxxxxxx měsíce od xxxxxxxx xxxxxxxx výsledku xxxxx způsobem xxxxxxxxxx x §3 xxxx. 11 xxxxxxxx x xxxxxxx způsobem xxxxxxxxxxxx:

- xxxxxxxx specifikovaný x xxxx 1.,

- vzorek xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx naočkovaných xxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx a

- izolovaná xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

3. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxxx x. 1, x xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxx testování xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xx xx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x. 1. xxxxxxxx x vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx:

- xxxx xxxxxx xxxxxxx, x xxx byl xxxxxxx xxxxxx, nebo xxxx xxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- podle xxxxxxxx xxxxxx rostlin, který xx xxxxxx xxxxxx,

- xxxxxxx xxxxxx suspenzí x další xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxx připravená xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx test),

a uchovány xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

4. X případě xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx výsledku xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x §3 odst. 11, xxxx. v §5 xxxx. 3 x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx 3., xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx lilku xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxx xxxx rostliny, x

- xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

Příloha č. 3 x vyhlášce x. 331/2004 Xx.

Xxxxxx provádění xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx rozsahu xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx hnědé xxxxxxx a rozsahu xxxxxx možného xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výskytu původce xxxxxxxxxxxxxx nebo původce xxxxx xxxxxxx

1. Odborné xxxxxxx podle §5 xxxx. 1 písm. x) je xxxxxxxx xx

- xxxxx xxxxxxxx,

- x xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x rostlinami xxxxxx xxxxxxxx, ve xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kroužkovitosti xxxx xxxxxxxx hnědé xxxxxxx,

- x xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxx nebo sadby xxxxxxx xxxx rostliny, x nichž xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx původcem xxxxx hniloby,

- v xxxx xxxx nebo xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx původce kroužkovitosti xxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §4 xxxx. 3,

- x xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, x x xxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx také xxxxxxx, x xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx zamořeného xxxxx xxxxxxxx, včetně xxxxx xxxxxxxx, kde xxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx použity xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx,

- xx němž byla x závlaze nebo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxx, x něhož xxxx xxxxxxxxx, že je xxxxxxxx původcem hnědé xxxxxxx, nebo xxxxx xx xx zamoření xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xx xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx použita xxxxxxxxx voda ze xxxxxx, používaného x xxxx době x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxx jiné xxxxx xxxxxxxx, u xxxxx bylo xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx hnědé xxxxxxx, xxxx xxxxx je xx zamoření xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxx xxxx xx zaplaveno povrchovou xxxxx zamořenou xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,

x

- xxxxxxxxxx vodu, která xxxx xxxxxxx x xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx, u nichž xxxx xxxxxxxxx, xx xxxx zamořeny xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx tato xxxx xxxx xxxxx produkce xxxxxxxxx.

2. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx pravděpodobného xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x) xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 písm. x),

- xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx hostitelské xxxxxxxx xxxxxxxx xx zamořené xxxxx §5 odst. 1 xxxx. a), xxxxxx těch, xxxxx xxxx společné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, a xx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx smluvního xxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx(-xxx) xxxxxxxx xxxxxxxx(-xxx) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxx(-xxx) xxxxx(-xxx) během xxxxxx, kdy xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. a) xxxxxxxxx x takových xxxxxxxxxx xxxx místech produkce xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx hostitelské xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxxx, dopravní prostředek, xxxxx xxxx xxxx xxxxx x veškeré xxxx xxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xxxxx xxxxxx xx xxxxx s hostitelskými xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 písm. x) xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 12 xxxxxx nebo xxxxxxxx období, xxxxx xx to xxxxxxx xxxxxxxxxx,

- hostitelské rostliny, xxxxx se xxxxxxxx xxxx xxxx x xxxxxxxx xx stavbami xxxx xxxxxxx vyjmenovanými x předcházející odrážce, x xx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx 3 xxxxxxx č. 4,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xx xxxxxxx testování xxxxx §6 xxxxxx xxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. x), a x xxxxxxx rostlinolékařská správa xx základě odborného xxxxxxx xxxxx §76 xxxx. 2 xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx,

- místo xxxxxxxx, xx xxxxxx byly xxxxxxxxxxx rostliny xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx původem ze xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx §5 odst. 2 xxxx. b) za xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vodou, označenou xxxxx §5 xxxx. 2 písm. b) xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

3. Při xxxxxxxxx rozsahu možného xxxxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 písm. x) xx nutno xxxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxxxxxxx míst xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx jiné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxx anebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,

- místo produkce, xx němž jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxxxxxx xxxx existovalo nebezpečí, xx tato xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x) za xxxxxxxx xxxxxxxx hnědé xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 2 xxxx. x) xx xxxxxxxxx xxxxxxxx hnědé xxxxxxx, xxxx které mohou xxx xxxxx povrchovou xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxx zavlažovací xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x povrchovou vodou xxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 2 xxxx. x) xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx hniloby.

4. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 2 xxxxxxxx:

- datum xxxxxxxx podezření z xxxxxxx x potvrzení xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xxxxx §4 x §5, popřípadě xxxxx xxxxxx xxxxxx x rámci xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx §3,

- xxxxxxxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx §21 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx, popř. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, obchodníka nebo xxxxxxx xxxxx §12 xxxx. 1 xxxxxx xxx xxxxxx zásilku, xxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxxxx rostlin, xxxxxxxxx xx zamořenou,

- xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx rozmnožovacího xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxx brambor x x xxxxxxx xxxxxxx xxxx pro partie xxxxxxxxx hostitelských xxxxxxx,

- xxxxx předmětů a xxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxx a rozsah xxxxxxxxxx karanténního území, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx,

- xxxxxxxxxx xxxxxxxx, připravených xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, infikovaných xxxxxxx xxxxx jedlého xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx kultury xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx hniloby ze xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx,

- xxxx údaje x xxxxxxxxxxx xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx nebo původce xxxxx hniloby, xxxxx xx xx Xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx č. 4 x vyhlášce x. 331/2004 Xx.

Xxxxxxxx po xxxxxxxxx přítomnosti xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx původce xxxxx xxxxxxx

1. Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx rostliny xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx

X partií xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx §5 odst. 1 xxxx. x), xxxx xxx naloženo na xxxxxxx nařízení xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx §7 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxxxx x xxxx uvedených xxxxxxx:

x) xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x okamžité xxxxxxxxxxx vhodným materiálem (xxxxxx, sut' apod.) xxx, xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx a x xxxxxxx šíření původce xxxxxxxxxxxxxx ani xxxxxxx xxxxx xxxxxxx; xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx mohou xxx přitom xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, x xxxxx je xxxxxxxxx nebezpečí xxxxxxx xx xxxxxxxxxx využívanou xxxxx půdu nebo xx xxxxxxxxxxx vod xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx půdy;

b) x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx zpracování x xxxxxxxx zařízeních, xxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx teplotě xxxxxxx 75 °X po xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx xxxxxxx hospodářskými zvířaty;

c) x případě xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x okamžité dodávky xxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx účely, xxx němž xxxx xxxxx vystaveny teplotě xxxxxxx 75 °C xx xxxx nejméně xxxxxx xxxxx xxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx na xxxxx Xxxxx republiky, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, který xxxxxxxx xxxxx šíření původce xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxxxx partií xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xx podniků touto xxxxxxx písemně x xxxx účelu xxxxxxxxxxx, x xx na xxxxxxx xxxxxxx, xx x podniku xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx skladovacích xxxxxxx x odvozových xxxxxxx x že xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx odpadů, xxxxxxxxx v xxxxxxx x. 5,

x) x xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx podmínky xxxxxxxxx xxxx x jejich xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx do xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxxxxxxxxxxx správa xxxxxxx xxxxxxxxx podmínky xxxxxxxxxx xxxx použitím xxxxxx opatření x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx vyloučí možnost xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx,

x) xxxx xxxxxxxx, které xxxx předem xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxx hnědé xxxxxxx, xxxxxx opatření xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x odpady.

Opatření xxx xxxx. x) xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx s xxxxxx označenou xxxx xxxxxxxx jen x xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x) xx e). Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s xxxx. x) x e) xxxxxxx rostlinolékařská xxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxx x xxxxxxxx členským xxxxxx. Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxx písmeny x) xx e) xxxxxxxxx xx území xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxx o xxx informuje xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, která xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx rostlinolékařské péče xxxxxxxxxxx členského státu.

2. Xxxxxx xxxxxxxx s xxxxxx hostitelské rostliny xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x), xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx §7 xxxx. 1 xxxx. x) některým x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx:

x) xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxx dodání xx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxx přebalování xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx hniloby xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xx xxxx touto xxxxxxx písemně x xxxx účelu xxxxxxxxxxx, x to na xxxxxxx xxxxxxx, že x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dezinfekce xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a odvozových xxxxxxx x že xxxxxx xxxxxxx požadavky xx zneškodňování odpadů, xxxxxxxxx x příloze x. 5,

x) v xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx jsou xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 75 °X xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, x následné xxxxxxx hospodářskými xxxxxxx;

x) x případě hlíz xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx pro průmyslové xxxx potravinářské účely, xxx němž xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 75 °X xx dobu xxxxxxx xxxxxx minut xxxx, x případě naložení x xxxxxx xx xxxxx České xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx x původce xxxxx xxxxxxx; přesun xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx povolí xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx jen xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx na území Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx na xxxxxxx xxxxxxx, xx x podniku xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx skladovacích xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx zneškodňování xxxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxx x. 5,

x) x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx hlíz xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kukuřicí xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx objemu xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx konkrétní xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx použitím xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx konkrétní postupy, xxxxx vyloučí možnost xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx,

x) xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nařízeno xxxxxx xxxxxxx xxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x písm. x) a x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx Komisi a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx x) až e) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx státu, xxxxxxx xxxxx o xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx správu, xxxxx xxxx informaci xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx státu xxx, xxx xxxx možno xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx nařízeného xxxxxxxx.

3. Ošetření xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx x uloží xx xxxxxx xxxxxxx odpadů x xxxxxxx xx xxxxxx v bodě 1. písm. x) xxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxx nedojde k xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x ochraně xxxxxxx. Xxxxx způsob xx xxxxxxxxxx zejména xxx xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx podezřelé ze xxxxxxxx xxxx zamořené xx xxxxx x xxxxxxx původce kroužkovitosti xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx 1. x 2. xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx do xxxx, xxx lze xxxxxxx x likvidaci xxxxxxxxxx xxxxx rostlin, a xxxxxxxx porost xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx podle xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxx x xxxxxxxx členským xxxxxx.

4. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

4.1. V xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx zahrnuje xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. x), xxxxxxxxxxxxxxxx správa xx potvrzení xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nařídí xxxxx §7 xxxx. 1 xxxx. d), xx xxxxxxxx pozemků x xxxxx xxxxx:

4.1.1. xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx zamořený xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x):

x) xxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx po xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxxxxxx xxxxxxx x musí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx /§76 xxxx. 1 písm. x) bod 2. xxxxxx/

xxxx

xxxx tento pozemek xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx (jetel, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx) a xxxxxx xx nich xxxxxxxx sekáním jako xx xxxxxxxx strniště x xxxx xx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx planě rostoucí xxxxxxxx xxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 2. xxxxxx/;

x) xxx pěstovat xxxxxxx x prvém xxxx, xxxxx následuje xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pod xxxx. x), xxx xxx x xxxxxxxxx, xx

- xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx bylo xx xxxxxxx písemné xxxxxxx xxxxxxxxx pozemku rostlinolékařskou xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx shledán xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx,

- k xxxxxxx xxxx použit xxxxxxxxxxxx materiál1), a

- xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx ke xxxxxxxxx xxxxxx nebo k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. xxxxxx/;

x) xxx po xxxxxxx ostatních xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nařízených x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx bodu 4 x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx jinou hostitelskou xxxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx použije-li rozmnožovací xxxxxxxx1), xxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx2), x xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na tomto xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx správu x xxxxxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx §3 xxxx. 3.

4.1.2. xx xxxxxxx jiném xxx označeném xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx §5 odst. 1 xxxx. x), xx xxxxxx xxx x roce xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx brambor, nesmí xx dobu xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx období xxxxxxxx brambor; /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. xxxxxx/;

4.1.3. xx xxxxxxx xxxxx než xxxxxxxxx xx xxxxxxxx původcem xxxxxxxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 písm. x), xx kterém xxxxx x xxxx xxxxxxxxx výskytu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx pěstován xxxxxxx, xxx ve xxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti, xxxxxxxx brambor, xxx xxx x podmínkou, xx

- xxxxxxxxxxxxxxxx správa xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx šíření xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx rostoucími xxxxxxxxxxxxx rostlinami původce xxxxxxxxxxxxxx, x

- xxxxxxx xxxx určena xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx /§76 odst. 1 písm. a) xxx 1. zákona/;

4.1.4. xxxx xx dobu xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx rostoucí xxxxxxxx xxxxxxxx x jiné xxxxx rostoucí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx původce kroužkovitosti /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 2. xxxxxx/;

4.1.5. musí xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx skladování xxxxxxxxxxxxxx materiálu1) xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. zákona/;

4.1.6. xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x příloze x. 6:

- xxxxxxxxxxx provést xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to nejpozději xx té doby, xxx přijdou do xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) zákona/;

- xxxxxxxx xxxxxx strojů, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxx x xxxxxx předmětů xx xxxxxx xxxxxxx při xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx dobu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx3) /§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 2. xxxxxx/;

- provádět xx xxxx tří xxxxxxx xxxxxxxxxxx období xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx techniky xx xxxxxxxx sklizně x xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx všech strojů, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx, která xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 2. xxxxxx/;

4.1.7. smí x xxxxxxxxx bramboru xx xxxx tří let xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx používat xxx xxxxxxxxxxxx materiál1) /§76 xxxx. 1 písm. x) xxx 1. xxxxxx/;

4.1.8. xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx bramboru xxxx vysazovat xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx /§76 xxxx. 1 písm. x) xxx 1. xxxxxx/;

4.1.9. xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx1) xxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx následujícím xx xxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx byl xxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxxxxx /§76 xxxx. 1 písm. x) xxx 1. zákona/;

4.1.10. xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx zamořené xxx splnění xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. zákona/.

Sklizené xxxxx bramboru xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xx místa xxxxxxxx xx xxxxx Xxxxx republiky x xxxxxx k xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx karanténní xxxxx ihned xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx prohlédnuta x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx prohlídky xxxx xxxxxxx hlíz, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

4.1.11. xxx xxxxxxx rostliny xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. zákona/;

4.1.12. xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nářadí x xxxxxxxxxxxx prostředky, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxx jednoho xxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx toto území xxx řádné xxxxxx x dezinfekce xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx č. 6 /§76 xxxx. 1 xxxx. a) bod 2. xxxxxx/;

4.2. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxx výměna xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xx xxxxxxxxxx šlechtitelů či xxx pěstování xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxx.) xxxxxxxx pozemků:

a) xxxxx xxxxxxxx brambor, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx a dezinfekce xxxxxxxxx objektů, strojů x xxxxxxxx provedené xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx č. 6 /§76 xxxx. 1 xxxx. a) xxxxxx/;

x) xxxx xxxxx pěstování xxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx odvozeného x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx /§76 xxxx. 1 písm. x) xxx I. zákona/.

4.3. Xxxxxxxx xxxxx rostoucích xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx území xxxxx xxxx 4.1.4. xxxx xxxxxxxx pozemků x xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx likvidací těchto xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxx potvrzení xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xx příslušný pozemek xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx /§76 odst. 1 xxxx. x) xxx 2. zákona/.

4.4. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx a xxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx s těmito xxxxxxxxxx nakládá, zejména xxx xxxxxxxxxx očisty x xxxxxxxxxx mechanizace, xxxxx xx využívána x xxxxxxxxx bramboru x xx sklizených xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x jiných místech xxxxxxxx.

4.5. X xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx x xxxxx produkce na xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x nebo xxxxxxx xxxxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 písm. c), xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx §7 odst. 1 xxxx. x), xx xxxxxxxx xxxxxxx x tomto xxxxx xxxx xx xxxx xxx úplných vegetačních xxxxxx xx potvrzení xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx:

x) xxxxxxxx xxxxxxxxxx očistu xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx očistu x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxx x jiných xxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxx, naskladnění x xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx pěstitelské xxxxxx /§76 odst. 1 xxxx. a) xxx 2. xxxxxx/;

x) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx rozmnožovacího xxxxxxxxx xxxxxxxx1) xx xxxxxxxxx xxxxxxx bramboru /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. xxxxxx/;

x) xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx rozmnožovací xxxxxxxx1) /§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 1. xxxxxx/.

5. Xxxxxxxx x karanténním území xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby

5.1. X karanténním xxxxx, xxxxx xxxxxxxx místo xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. x) nebo xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podle §5 xxxx. 2 písm. x), xxxxxxxxxxxxxxxx správa xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx hnědé hniloby xxxxxx xxxxx §7 xxxx. 1 xxxx. x), že xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx:

5.2.1. na pozemku xxxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. a):

a) xxxxx po xxxx xxxx vegetačních xxxxxx xxxxxxxx hostitelské rostliny xxxxxxx hnědé hniloby x jiné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx její xxxxxx, xx. xxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxx části, xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx x na kterých xx xxxxxxx ulpívá xxxxxx (xxxx. xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x kořeny, některé xxxxx xxxx Brassica, xxxxxxxxx, cibulové x xxxxxxxx květiny) /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. xxxxxx/, x musí xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. a) xxx 2. zákona/

nebo

b) xxxx xxxxx xxxxxxx po xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx jako xxxxx xxxx xxxx xx nich pěstovat xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxx na xxxxxx /§76 odst. 1 xxxx. x) xxx 2. xxxxxx/ a x xxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxx xxx pěstovat xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxxxxx xxxxxxx či xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxxx xx na xxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x likvidovat xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx /§76 xxxx. 1 písm. x) xxxxxx/;

x) xxx x xxxxxxx režimu xxxxx xxxx. a) xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx uvedených xxx xxxx. a), ale xxx x xxxxxxxxx, xx

- xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx správou xxxxxxx, xx xxxxxxx byl xxxxxxx prostým xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx rostlin, xxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxxx, a v xxxxxxx pěstování brambor

- xxxx x xxxxxxx xxxxxx rozmnožovací xxxxxxxx1), x

- xxxxxxx xxxx xxxxxx pouze xx xxxxxxxxx účelům nebo x xxxxxxxxxxxx zpracování, x následně smí xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx brambor

- xxxx k xxxxxxx xxxxxx rozmnožovací xxxxxxxx1), x

- xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxxxxxxx zpracování /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. zákona/;

d) smí x případě režimu xxxxx xxxx. x) xxxxxxxx brambor xxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx období, která xxxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx. b), xxx xxx x xxxxxxxxx, xx v xxxxxxx xxxxxxxxx brambor

- xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx materiál1), x

- xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x)xxx 1. xxxxxx/;

x) xxx po xxxxxxx xxxxxxxxx mimořádných xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx území xxxxx xxxx 5 x xx uplynutí odpovídajícího xxxxxxxxx xxxxx poprvé xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxx hostitelskou xxxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx, xxxxx použije-li rozmnožovací xxxxxxxx2), xxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx zákona1), x xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx výskytu xxxxxxx hnědé hniloby xxxxx §3 odst. 3.

x) nesmí xxx xxxxxxxxx umělá xxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx roce potvrzení xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. a) xxx 2. zákona/.

5.2.2. xx xxxxxxx jiném xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x):

x) nesmí ve xxxxxxxxxx xxxxxx následujícím xx xxxxxxxxxx období, x xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx, xxxxxxxx brambor xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx hostitelských xxxxx xxxxxxx /§76 xxxx. 1 písm. x) xxx 2. xxxxxx/;

x) xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx po dobu xxx let následujících xx roce xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx jen rozmnožovací xxxxxxxx1) /§76 odst. 1 písm. a) xxx 2. zákona/;

c) xxxx ihned xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bramboru xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx č. 6 xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx pěstování bramboru xxxx xxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 2. xxxxxx/;

x) smí provádět xxxxxxx xxx xx xxxxxxxxx x pod xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xx vyloučeno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx /§76 odst. 1 xxxx. a) xxx 2. xxxxxx/.

5.3. xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx hlízy xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx /§76 xxxx. 1 písm. x) bod 1. xxxxxx/;

5.4. smí přemisťovat xxxx xxxx území xxxxx partie bramboru, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx původce xxxxx xxxxxxx x partie xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx zamořené xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx /§76 odst. 1 xxxx. x) bod 1. xxxxxx/.

Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx balením xxxxxxxx xxx přímé xxxxxx xx místa xxxxxxxx xx území Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx přemisťovat xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx příslušná xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hnědé hniloby, xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

5.5. xxx xxxxxxx xxxxxxxx bramboru xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx do třetích xxxx, pouze pokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx orgánem xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx země /§76 xxxx. 1 xxxx. a) bod 1. xxxxxx/;

5.6. xxxxx xxxxxxxx zemědělské xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx při pěstování, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxx xx kontaktu xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxx roku xx doby potvrzení xxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx mimo xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx x dezinfekce xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx č. 6 /§76 odst. 1 xxxx. x) xxx 2. xxxxxx/;

5.7. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxx úplná xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxx.) xxxxxxxx xxxxxxx:

x) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx původce xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx rostlinolékařské xxxxxx x eradikaci xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx objektů, xxxxxx x zařízení xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x. 6 /§76 odst. 1 xxxx. x) xxx 2. xxxxxx/;

x) xxxx xxxxx pěstování xxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx získaného x rostlin xxxxxxxxxxx xx xxxxxx původce xxxxx hniloby x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. xxxxxx/;

x) smí xxxxx xxxxxxxxxx porosty xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxxxxx rostlinolékařské xxxxxx x umožní xxxxxxxxxxxxxxxx správě xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x karanténním xxxxx /§76 xxxx. 1 písm. x) xxx 2. xxxxxx/.

5.8. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x karanténním xxxxx xxxxx xxxx 5.2.2. písm. x) xxxx xxxxxxxx pozemků x tomto území xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx správě x před likvidací xxxxxx xxxxxxx musí xxxxxxx jejich xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx. Xxx potvrzení xxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xxx tomto testování xx xxxxxxxxx pozemek xxxxxxxx xx pozemek xxxxxxxx /§76 odst. 1 písm. a) xxx 2. xxxxxx/.

5.9. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nad xxxxxxx a objekty, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xx x těmito xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx očisty a xxxxxxxxxx mechanizace, xxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxxxxx bramboru a xxxxxxx a xx xxxxxxxxxx xxxxxxx bramboru xxxx x jiných xxxxxxx xxxxxxxx.

5.10. X xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxx rozšíření xxxxxxx xxxxx hniloby xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. c), xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx §7 odst. 1 xxxx. x), xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx musí xx dobu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby:

a) xxxxxxxx závěrečnou xxxxxx xxxxxxxxx techniky xx xxxxxxxx sklizně a xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx všech strojů, xxxxxxxxxx prostředků, třídících xxxxx, xxxxx, palet x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, naskladnění a xxxxxxxxxxx, která musí xxx ukončena xxxx xxxxxxxxx nové xxxxxxxxxxx xxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx.x) xxx 2. zákona/;

b) zabezpečit xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx1) xxxxxxxx od xxxxxxxxx xxxxxxx bramboru /§76 xxxx. 1 xxxx. a) xxx 1. xxxxxx/;

x) xxxx x pěstování bramboru xxxxxxxx xxx rozmnožovací xxxxxxxx1) /§76 odst. 1 xxxx. x) xxx 1. xxxxxx/.

5.11. X xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 2 xxxx. x) xx xxxxxxx xxxxxxxx povrchové xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx zóně xxxxxxxx podle §5 xxxx. 2 xxxx. x) xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) xxxxxxx xxxxxxx výskytu xxxxxxx hnědé xxxxxxx, x xxxxxxx potvrzení xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, a xx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vody x xxxxxxxx hostitelských xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx způsobem xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx;

x) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx. xxxxxxx takové podmínky xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxx šíření;

c) x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx zamořených xxxxxxxxx vod z xxxxxxxxxxxx zpracovatelských a xxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx x. 5 x vyhlášce č. 331/2004 Xx.

Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx označené xx xxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. x)

Xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx odpadů xxx průmyslovém xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx1) Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx povolený xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pravděpodobně xxxxxxxx xxxxxx hostitelské xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxxx č. 4 xxxxxxxx 1 písm. x) x xxxxxxxx 2 písm. x) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zneškodňování xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx xxxxxxx hnědé hniloby:

1. Xxxxx odpad xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, bramborové xxxxxx nebo xxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x rostlin xxxxxxx musí být xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx odpadů x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx, xxx' xxxx.). Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx a xxxx xxx xxxxxxx xxx, xxx bylo xxxxx transportu xxxxxxxxx xxxxxxxxx vypadnutí xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxx xxxxx napadené původcem xxxxx xxxxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, x xxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xx povrchových xxx xxxxxxxxxxx x zavlažování xxxxxxxxxx xxxx;

2. Xxxxxxx xxxx při zpracování xxxx brambor x xxxxxxx rajčete

Před zneškodněním xx xxxxx xxxxxxx xxxx, které obsahují xx povrchu pevný xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx nádrže, aby xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx musí být xxxxxxxxxxx postupem uvedeným xxx xxxxx 1.

Xxxxxxx xxxx xx xxx xxxxx

- xxxx vypuštěním xxxxxx po xxxx xxxxxxxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx 70 °C

nebo

- xxxxx xxxxxxxxxx způsobem xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx přijde xx xxxxx xx zemědělskou xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, které xx xxxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx rostlinolékařská xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxx.

Xxxxxxx x. 6 x xxxxxxxx x. 331/2004 Sb.

Očista a xxxxxxxxxx objektů x xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx kroužkovitosti nebo xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx

1. Xxxxxxxxxx xxxxxx objektů x předmětů a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx

Xxxxxxx pevné xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx a xxxx xx xxxxxxxxx (xxxxxxxx, xxxxxxx průmyslovým xxxxxxxxx, xxxxxxxxx vyfoukáním xxxxxxxxxxxxx míst xxxxxx x zařízení stlačeným xxxxxxxx) a zavezou xx xxxxxxx xxxxxx1). Xxx bezpečnější xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx asanovat xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx před xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx vápnem xxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx 5 kg xx 1 m3.

Způsob x místo likvidace xxxx být v xxxxxxx xx zvláštním xxxxxxx xxxxxxxxx1) x xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. Mytí x dezinfekce objektů x předmětů

Jakékoliv aplikaci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx mechanická xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx 1 xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx se objekty, xxxxxx a xxxxxxxx xxxxx tlakovou vodou xx saponátem, xxxxxxxxx xxxxxx vodou x xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx anebo xxxxxxxxxxxxx prostředky, xxxxxxxxx x souladu x xxxxxxxx xxxxx rostlinolékařskou xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

3. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxx

Xxxxxxx se máčením xx dobu xxxxxxx 30 minut xxx xxxxxxx vody 65 °X nebo 15 xxxxx při teplotě xxxx 80 °C.

K xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx stabilní xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, teplota xxxxxxx xxxx musí dosahovat xxxxxxx 80 °C xxx době expozice xxxxxxx 30 minut. Xxx teplotě xxx 100 °C lze xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx 15 xxxxx.

4. Xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx se xxxxxxxxxx při teplotě 120 °C xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx 70 - 80 °X, xxxx xxxxx x xxxxxx xxxx x xxxxx.

Xxxxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxx č. 331/2004 Sb. xxxxx xxxxxxxxx dnem 31.5.2004.

Ve xxxxx xxxxxx právního xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx předpisem x.:

328/2008 Xx., xxxxxx xx mění xxxxxxxx x. 331/2004 Xx., x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx bakteriální kroužkovitosti xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx

x xxxxxxxxx od 2.9.2008

4/2018 Xx., xxxxxx xx xxxx vyhláška x. 331/2004 Xx., o xxxxxxxxxx k zabezpečení xxxxxxx xxxxx zavlékání x xxxxxx původce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx bramboru x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx hniloby, xx xxxxx vyhlášky x. 328/2008 Sb.

s xxxxxxxxx xx 1.2.2018

Xxxxxx xxxxxxx x. 331/2004 Sb. xxx xxxxxx právním xxxxxxxxx č. 378/2025 Sb. x xxxxxxxxx xx 1.1.2026.

Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx právních xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxx derogační xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

1) Xxxxxxxx Xxxx 93/85/XXX ze xxx 4. xxxxx 1985 x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx Xxxx 98/57/XX xx xxx 20. xxxxxxxx 1998 x xxxxxxx proti Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (Xxxxx) Xxxxxxxx xx xx.
Xxxxxxxx Xxxxxx 2006/56/ES xx dne 12. xxxxxx 2006, xxxxxx xx xxxx přílohy xxxxxxxx Xxxx 93/85/XXX.
Xxxxxxxx Xxxxxx 2006/63/ES xx dne 14. xxxxxxxx 2006, kterou xx mění přílohy XX až XXX xxxxxxxx Xxxx 98/57/XX.
2) §2 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx x. 219/2003 Sb., x xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x sadby xxxxxxxxxxx xxxxxxx x x změně xxxxxxxxx xxxxxx, ve znění xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3) §31 xxxx. 2 xxxxxxxx x. 215/2008 Sb., x xxxxxxxxxx proti xxxxxxxxx x rozšiřování xxxxxxxxxx xxxxxxxxx rostlin x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4) §2 xxxx. 1 xxxx. x) zákona x. 219/2003 Xx., o xxxxxxx xx xxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x x změně některých xxxxxx, ve znění xxxxxxxxxx předpisů.
Poznámka k xxxxxxx x. 2
1) §2 xxxx. 1 písm. x) xxxxxx x. 219/2003 Xx., x xxxxxxx do oběhu xxxxx a sadby xxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx předpisů.
Xxxxxxxx x xxxxxxx x. 4
1) Xxxxx č. 86/2002 Sb., o ochraně xxxxxxx a x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxx o xxxxxxx ovzduší), xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2) §7 xxxx. 4 xxxxxx x. 219/2003 Xx., x xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx rostlin x x xxxxx xxxxxxxxx zákonů, ve xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3) §2 xxxx. 1 písm. x) xxxxxx x. 219/2003 Xx., x xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxx pěstovaných xxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx zákonů, xx znění xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4) §19a zákona x. 408/2000 Xx., x xxxxxxx práv x odrůdám xxxxxxx x x xxxxx xxxxxx x. 92/1996 Xx., x odrůdách, xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx rostlin, xx xxxxx pozdějších předpisů, (xxxxx x ochraně xxxx k xxxxxxx), xx xxxxx pozdějších xxxxxxxx.
5) §6 xxxxxx č. 219/2003 Xx., x xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxx některých zákonů, xx xxxxx pozdějších xxxxxxxx.
6) Příloha č. 4 xxxxxxxx x. 215/2008 Xx., x xxxxxxxxxx xxxxx zavlékání a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3) Xxxxxxx xx xxxxxx
- xxxxxx xx ukončení xxxxxx xxxxx na xxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx, xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx po vyskladnění xxxxx partie xxxx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx k xxxxxxx x. 5 x 6
1) Zákon č. 185/2001 Sb., x xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2) Xxxxx č. 86/2002 Sb., x xxxxxxx xxxxxxx x o xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx), ve xxxxx pozdějších xxxxxxxx.