Animace načítání

Stránka se připravuje...


Na co čekáte? Nečekejte už ani minutu.
Získejte přístup na tento text ještě dnes. Kontaktujte nás a my Vám obratem uděláme nabídku pro Vás přímo na míru.

Právní předpis byl sestaven k datu 31.05.2004.

Zobrazené znění právního předpisu je účinné od 31.05.2004 do 01.09.2008.


Vyhláška o opatřeních k zabezpečení ochrany proti zavlékání a šíření původce bakteriální kroužkovitosti bramboru a původce bakteriální hnědé hniloby

331/2004 Sb.

Vyhláška

Předmět úpravy §1

Pojmy §2

Průzkum výskytu původce kroužkovitosti a původce hnědé hniloby §3

Opatření při zjištění podezření z výskytu původce kroužkovitosti nebo původce hnědé hniloby §4

Opatření při potvrzení výskytu původce kroužkovitosti nebo původce hnědé hniloby §5

Testování klonově příbuzných partií hostitelských rostlin §6

Opatření proti šíření původce kroužkovitosti a původce hnědé hniloby §7

Testování rozmnožovacího materiálu bramboru §8

Účinnost §9

Příloha č. 1

Příloha č. 2

Příloha č. 3 - Způsob provádění odborného šetření a stanovení rozsahu pravděpodobného zamoření původcem kroužkovitosti nebo původcem hnědé hniloby a rozsahu jejich možného rozšíření a náležitosti oznámení potvrzeného výskytu původce kroužkovitosti nebo původce hnědé hniloby

Příloha č. 4 - Opatření po potvrzení přítomnosti původce kroužkovitosti nebo původce hnědé hniloby

Příloha č. 5 - Požadavky na zneškodňování odpadů při průmyslovém zpracování partie hostitelské rostliny označené za zamořenou podle §5 odst. 1 písm. a) nebo pravděpodobně zamořenou podle §5 odst. 1 písm. b)

Příloha č. 6 - Očista a dezinfekce objektů a předmětů zamořených nebo podezřelých ze zamořeni původcem kroužkovitosti nebo původcem hnědé hniloby

INFORMACE

331
XXXXXXXX
xx xxx 4. xxxxxx 2004
o xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx původce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx bramboru a xxxxxxx xxxxxxxxxxx hnědé xxxxxxx

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §88 xxxx. 2 xxxxxx x. 326/2004 Xx., x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x x změně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx zákonů, (dále xxx "xxxxx") x xxxxxxxxx §71 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx:

§1

Xxxxxxx úpravy

Tato xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx1) xxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxxxxxx xx xxxxx České republiky xxxxx šíření Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (Xxxxx) Davis xx xx. xxx. xxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx et Xxxxxxxx) Xxxxx et xx., původci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (Smith) Xxxxxxxx xx al., xxxxxxx bakteriální hnědé xxxxxxx, xxx xx

x) xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx,

x) xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx x

x) xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.

§2

Pojmy

Pro xxxxx této xxxxxxxx xx xxxxxx:

x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx - xxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (Xxxxx) Davis et xx. ssp. xxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx xx Kotthoff) Xxxxx et xx.,

x) xxxxxxxx xxxxx hniloby - xxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (Xxxxx) Xxxxxxxx xx al.,

c) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx -

1. původce xxxxxxxxxxxxxx - xxxxxxx (Xxxxxxx xxxxxxxxx X.) x výjimkou xxxxx xxxxxxxx, x ostatní xxxxxxxx x čeledi xxxxxxxxxxx (Solanaceae), u xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx původcem xxxxxxxxxxxxxx x přirozených xxxxxxxxxx,

2. xxxxxxx hnědé xxxxxxx - brambor (Xxxxxxx xxxxxxxxx X.) x xxxxxxxx semen xxxxxxxx, xxxxx jedlé (Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx X.) xxxxx xxxxx x xxxxx, lilek potměchuť (Xxxxxxx dulcamara L.) x ostatní xxxxxxxx x čeledi xxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxx), x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x přirozených xxxxxxxxxx,

x) detekčním xxxxxxxxx - xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx hnědé xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx x určité xxxxxx,

x) xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx - xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx a xxxxxx zamoření původcem xxxxxxxxxxxxxx xxxx původcem xxxxx xxxxxxx, x xxxxxx xxxxxxx šíření xxxxxxx x x xxxxxx hranic xxxxx, xx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx rostlinolékařská xxxxxxxx xxxxx §76 xxxxxx,

x) xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx - xxxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, dopravním xxxxxxxxxx, xxxxxx nebo jejich xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx včetně xxxxxxxxx xxxxxxxxx, podle §11 xxxx. 1 xxxxxx,

x) možným xxxxxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx xxxxxxx xxxxx hniloby - xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx na xxxxxxx, x xxxxxxx anebo x xxxxx, xxxxx §11 odst. 1 xxxxxx,

x) xxxxxxxxx původcem xxxxxxxxxxxxxx nebo původcem xxxxx xxxxxxx - xxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx původce xxxxx xxxxxxx xxxxx §11 xxxx. 1 xxxxxx,

x) xxxxxxxxxxx územím - xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx xxx "rostlinolékařská xxxxxx"), xx které xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx podle §76 xxxx. 1 xxxxxx x xxxxxx potvrzení xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx,

x) bezpečnostní zónou - území xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx správou, xx xxxxx se vztahují xxxxxxxxx rostlinolékařská xxxxxxxx xxxxx §76 zákona x xxxxxx xxxxxxxxx x výskytu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx hniloby,

k) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx - xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx vegetativním xxxxxxxx x jedné xxxxxxx partie; xxxxxx xx xx:

1. xxxxxxxxx xxxxxxx příbuzné xxxxxx xxxxxxxx klonově xxxxxxxx xxxxxx, které vznikly x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxx partie,

2. xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx považuje xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx z xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

§3

Xxxxxxx xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx hniloby

(1) Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx s §10 xxxx. 1 xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x rozsahu xxxxx xxxxxxxx 2 xx 7.

(2) Detekčnímu xxxxxxxx xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podléhají

a) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx2) xxxxxxx z České xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx §8 xxxx. 2,

x) xxxxxxxxx vybrané xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx2) xxxxxxx ze xxxxxxxxx xxxxx Evropské xxxx (xxxx xxx "xxxxxxx stát"),

c) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxx xxxxxxxxx x x ostatních xxxxxxxxx xxxxx,

x) xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx zóně vymezené xxxxx §5 odst. 1 xxxx. x).

(3) Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xxxxxxxxx všechny xxxxxx hostitelských rostlin xxxxxxxx jako podezřelé x výskytu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx hniloby x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx území vymezeném xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x).

(4) Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x původce xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx dovážených xx třetích xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx zemí xxxxxxxxx

x) xxxxxxx xxxxxxxx partie xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bramboru x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx brambor,

b) xxxxxxx partie bramboru xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx xxxx.

(5) Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx podléhají

a) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx k dalšímu xxxxxxxxx,

x) xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx k závlaze xxxxxxxxxxxxx rostlin xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx hostitelských xxxxxxx x xxxxxxx vody xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx průmyslově xxxxxxxxxxxx xxxxx bramboru, xxxxxxxxx xxxx pevné xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx.

(6) Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx nebo potvrzení xxxx xxxxxxx vodní xxxxxx používané k xxxxxxx xxxxxx podezřelých x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx rostliny, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x místech xxxxxxxx, odkud xxxx xxxxxx xxxxxxxxx.

(7) Xxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti x xxxxxxx hnědé xxxxxxx xx xxxxxxxx

x) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx hlíz xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx 2 xxxx. x) x x), xxxxxxxx 3 x x xxxxxxxx 4 xxxx. x) x xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx, v xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxx 4 xxxx. a) x xxxxxxxxxx xxxxxx,

x) xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxx xxxx ve xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorků xxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx 2 xxxx. x) x x),

x) xxxxxxxxxx porostů rajčete xx xxxxxxx dobu x následným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x příznaky napadení xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x případech uvedených x odstavci 5 xxxx. x),

x) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorků xxxx, xxxxxxxxxx substrátu, xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pobřežní xxxxxxxx x xxxxxxx uvedeném x xxxxxxxx 5 xxxx. x) a x xxxxxxxx 6.

(8) Xxxxxx xxxxxxxxx partie x počet, xxxxx, xxxxxxx a dobu xxxxxx xxxxxx při xxxxxxxx, xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx 2 xx 7, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x způsob xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx stanovuje x xxxxxxx s §10 xxxx. 1 xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx x biologie xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx hostitelských xxxxxxx x v závislosti xx xxxxxxxx xxxxxxx xx výskytu xxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x zveřejní xx Xxxxxxxx Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx xxx "Xxxxxxx"). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorků xxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx hnědé xxxxxxx xx xxxxxxx způsobem xxxxxxxxxx x xxxxxxx x. 1 xxxx xxxxxxxxxx rostlinolékařskou xxxxxxx x souladu x §10 xxxx. 1 xxxxxx x xxxxxxxxxxx xx Věstníku.

(9) X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx 2 x 4 lze xxxxxx xxxxxx vzorky xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx Ministerstvem xxxxxxxxxxx xxxxx §71 xxxx. 1 písm. x) xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx správou podle §72 odst. 5 xxxx. x) xxxxxx, xxxxx xxxx zajištěno xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx správy, xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx 8.

(10) Xxxxxxxx xxxxxxxx prováděného xxxxx xxxxxxxx 2 xx 6 oznamuje xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx odkladu xxxxxxxxx xxxx fyzické osobě, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx a nebo xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx na xxx nebo ji xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, x případě rozmnožovacího xxxxxxxxx2) xxxxxxxx x xxxxxxx také Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.

(11) Xxxxxxxxxxx x provádění průzkumu xxxxx odstavců 2 xx 8 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx s §10 xxxx. 5 xxxxxx xxxxxx ročně v xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx x. 2 xxxxx A xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a Xxxxxx xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx hniloby xxxx xxxxxxxxx státy. Xxxxxxxx xxxxxxxx průzkumů xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 2 xx 6 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx jednou xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxx, x xx x xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx,2) xxxxxxxx pouze xxx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx 1. xxxx, v xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 1. xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxx hostitelských xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxx x produkci xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxx.

§4

Xxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti nebo xxxxxxx hnědé hniloby

(1) Xx xxxxxxxxx x xxxxxxx původce kroužkovitosti xxxx původce xxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx x §11 xxxx. 1 xxxxxx xxxxxxxx

x) xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vizuálních xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx přílohy č. 1 xxxxxx X číslo 1 x oddílu XX, xxxx

x) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx jejím xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x příloze č. 1.

(2) V xxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx rostlinolékařská xxxxxx x xxxxx odborného xxxxxxx xxxxx §76 xxxx. 7 xxxxxx x zvláštního právního xxxxxxxx3) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx testování, x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx §3 xxxx. 8 x xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x příloze č. 2 xxxxx X, x xxxxx xxxx podezření xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

(3) Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx zjištění xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx xxxxxxx xxxxx hniloby xxxxxxx xxxxxxx podle §76 odst. 2 xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx podezřelého xxxxxxx x x xxxxxxx s §11 xxxx. 1 zákona

a) xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx, které xxxx podrobeny xxxxxxxx xxx xxxxxxxx rostlinolékařské xxxxxx, xxxxx vylučuje xxxxxxxxxxx xxxxxx rozšíření xxxxxxx kroužkovitosti xxxx xxxxxxx xxxxx hniloby, x

x) nařídí xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx možného xxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx xxxxxxx xxxxx hniloby x cílem xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx partií hostitelských xxxxxxx xx pozemcích x v xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxx, popřípadě x xxxx xxxx xxxxxxx x objekty.

(4) Xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx zamoření xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxx původce xxxxx hniloby, xxxxxxxxxxx xxx původem x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx státě, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx správa xxxxxxxxxx úřední xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx příslušného členského xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx tohoto xxxxxxxxx x xxxx x xxxxx státem vhodným xxxxxxxx spolupracovat.

(5) Xxxxx xxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxx x Xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx Xxxxxx republiku xxxxxxx, xxxxxxxxxxx Česká xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx opatření xxxxx xxxxxxxx 2 x 3.

§5

Opatření při potvrzení xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx

(1) Pokud xxxxxx xxxxxxxxxxx testování xxxxxxxxxx xxxxxx způsobem stanoveným xxxxx §3 xxxx. 8 xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti nebo xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx s §76 xxxx. 2 zákona x x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, biologii xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a původce xxxxx xxxxxxx a xx xxxxxxx pěstování, xxxxxxx xx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

x) xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx prostředky, xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx obalového xxxxxxxxx, z něhož xxx vzorek xxxxxxx, x xxxxx xxxxxx xx xxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxxxx byl xxxxxx odebrán, a xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx pěstebního xxxxxxxxx, a pozemek, xx xxxxx xxxx xxxxxxxx rostliny xxxxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxx odebrán,

b) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx zaměřené xx xxxxxxxx rozsahu xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxx 1 přílohy č. 3 xxxxxx testování xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx rostlin xxxxx §6 x stanoví x xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx 2 přílohy č. 3 rozsah pravděpodobného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x na základě xxxxxxx příbuznosti, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x zalévání xxxx jiné pěstitelské xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo objektem, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x),

x) vymezí xxxxxxxxxx xxxxx xx základě xxxxxxxx zamořených předmětů xxxx objektů podle xxxxxxx x) x xxxxxxxxxxxx xxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx zamoření xxxxx xxxxxxx x) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx 3 přílohy č. 3.

(2) X případě potvrzení xxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx x xxxxxxx xx povrchovou xxxx, xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx x x xxxxxxx xx hostitelské rostliny x xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx, zalévání xxxx zaplavení povrchovou xxxxx mohlo být xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx správa

a) xxxxxxx xxxxxx laboratorní xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorků xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx způsobem xxxxxxxxxx v příloze č. 1 xx vhodných xxxxxxxxx x xxxxx určit xxxxxx xxxxxxxx,

x) označí x xxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxx úředního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a) povrchovou xxxx, x xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx zamořenou,

c) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx zamořenou xxxxx písmene x) x bezpečnostní xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx hnědé xxxxxxx x xxxx možného xxxxxxxxx xxxxx xxxx 3 přílohy č. 3.

(3) Rostlinolékařská xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx členským xxxxxx x Xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx 4 přílohy č. 3 xxxxxxxxx xxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx hniloby xxxxx xxxxxxxx 1 xxxx. x), xxxxxxxxx odstavce 2 písm. b), x xxxxx podrobnosti x vymezení karanténního xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx 1 písm. x), xxxxxxxxx xxxxxxxx 2 xxxx. x). Podrobnosti x xxxxx xxxxxxxx xxxx důvěrné.

(4) Xxxxx xxxx xxxxxxx stát xxxxxxx výskyt xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x Xxxxx republiky x xxxxxxxx xxxxxxxx obdobně xxxxx xxxxxxxx 3, xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx odpovídajícím xxxxxxxx x v xxxxxxx x ustanovením xxxxxxxx 1 x 2 xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx území, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zónu.

(5) Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx úředním xxxxxxxx xx Xxxxxxxx xxxxxx xxx vedení xxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxxxx 1 xxxx. x) x pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 1 xxxx. x), xxxxxxxx 2 xxxx. x) x xxxxxxxx 4.

§6

Xxxxxxxxx klonově xxxxxxxxxx xxxxxx hostitelských xxxxxxx

(1) Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle §4 odst. 2 xxxxx xxxxxxxxxxx partií xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx označeny xx xxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. x), x xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx klonově xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to x xxxxxxx xxxxxxxxx ke xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx hniloby.

(2) Xxxxx xxxxxxxx testování xxxxx xxxxxxxx 1 xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx potřeby označí xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx zamořené, xxxxxxx rozsah xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx území x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx §5 xxxx. 1 písm. x), x) x x).

§7

Xxxxxxxx xxxxx šíření xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx hniloby

(1) Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx s §11 xxxx. 1 xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx §76 xxxx. 2 xxxxxx:

x) xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx označená xx xxxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxx xxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx x xx xxxxxx xxxxxxxx uvedeným x bodě 1 xxxxxxx x. 4, xxxxx rostlinolékařská xxxxxx xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx riziko xxxxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xx xxxx xxxxxxx požadavky xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxx x. 5, x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx partie,

b) xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx zamořená xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxx být sázena x pod xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx x xx xxxxxx xxxxxxxx uvedeným v xxxx 2, popřípadě 3 přílohy x. 4, xxxxx rostlinolékařská xxxxxx xxxxxx xxxxx, xx neexistuje rozpoznatelné xxxxxx xxxxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xx jsou xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxx č. 5, x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx, x pokud xxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx testování xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §6 označena xxxx xxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. x),

x) xxxxxxxx, stroje, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, sklady xxxx xxxxxx části x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, označené xx xxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. x) nebo označené xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx §5 odst. 1 xxxx. x), xx xxx zničí xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx pomocí xxxxxxxx metod uvedených x příloze x. 6 x tím, xx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xx tyto objekty x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxx za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nepovažují,

d) x karanténním území x bezpečnostní zóně, xxxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 písm. x), xxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 2 xxxx. x), musí xxx xxxxxxxxx opatření xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti x xxxx 4 xxxxxxx č. 4 x x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx 5 přílohy x. 4.

(2) Xxxxxxxxxxxxxxxx správa xxxx nařídit xxxxx §11 xxxx. 1 xxxxxx xxxxxxxxx mimořádná xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxx původce xxxxx xxxxxxx xxx opatření xxxxxxx x xxxxxxxx 1, xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, splnitelná x xxxxxx. Podrobnosti o xxxxxx xxxxxxxxxx a x opatřeních xxxxxxxxxx xxxxx odstavce 1 xxxx. x) xxxxxx xxxxxxxxxxxx území x x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx státům x Komisi xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx osob, xxxxxxxxxxxxxx xxxxx §12 xxxx. 1 xxxxxx.

(3) Xxxxxxxxxxxxxxxx správa zruší xxxxx §76 xxxx. 4 písm. x) xxxxxx xxxxxxxxx rostlinolékařská xxxxxxxx nařízená xxxxx xxxxxxxx 1 a xxxxxxxx 2 xx xxxxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx k xxxxxx xxxxxxx.

(4) Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx x xxxxxxx x §7 xxxx. 1 xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxx x vědeckým, šlechtitelským xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx povoluje xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx §8 xxxx. 1 xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx jejich výskytu xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx šíření.

§8

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx2) xxxxxxxx

(1) Xxxxxxxxxxxx materiál2) xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxx České xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxx, musí být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxxxx průzkumu xxxxx §3 xxxx. 2, x rozsahu podle xxxxxxxx 2 x x souladu s §3 odst. 8 x 9, a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x původce xxxxx hniloby.

(2) Testování xxxxx odstavce 1 xx x příslušném xxxxxxxxxx roce xxxxxxx

x) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx4) bramboru xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx x reprezentativní vzorky xxxxx partií rozmnožovacího xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx sklizňovém xxxx x xxxxxx rozmnožovacího xxxxxxxxx2) xxxxxxxx původem x Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx, x xxxx

x) xxxxx byl x xxxxxxxxx uplynulém xxxxxxxxxx xxxx x partii xxxxxxxxxxxxxx materiálu2) xxxxxxxx xxxxxxx z Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx výskyt xxxxxxx hnědé xxxxxxx, xxx

1. rostliny xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx4) xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx rozmnožovacího xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx klonové xxxxxxxxxxx se zaměřením xx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx

2. xxxxxxxxxxxxxxx vzorky xxxxx partií xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bramboru xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx materiálu xxxxxxxx4) x xxxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx klonová xxxxxxxxxx, nebo

c) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx4) xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx všech xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx materiálu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx hniloby nebyl x posledním xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx rozmnožovacího xxxxxxxxx2) xxxxxxxx xxxxxxx x České xxxxxxxxx.

§9

Xxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxx:
Xxx. Xxxxx x. x.

Příloha x. 1 x xxxxxxxx x. 331/2004 Xx.

X. Xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti

1. Xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxx xxxxx hlízy
1.1. Xxxxx xx 200 xxxx xxx xxxxxxx xxxxx x pomocí xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx; dezinfekci xxx provést tak, xx xx xxxxxxx xxxxx x 70% xxxxxxx etanolu x xxxxxx.
1.2. Xxxxxxx se xxxxx nebo xxxxxxxx xx brambory odeberou xxxxxxx výkrojky xxxxxxx x xxxxxxxxx konců xxxxxxx. Xxxxx xx xx xxxxxxx nadbytečná xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx svazky. Po xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx zpracovány do 24 xxxxx (xxx xxxxxxxx 3) xxxx xxxxxxxxxxxx xxx -20 °X po xxxx xxxxxxx dvou týdnů.
2. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx příznaků xxxxxxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx konců xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx xx, xxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx slabá xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx měknutí v xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx svazků xxxxxxx xx xxxxxxxx konci xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx identifikovatelným xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx cévních xxxxxx x xxx xxxxxx xxxxxxxxx hlízy xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vystupující x xxx. Xxxx xxxxx obsahuje xxxxxxx xxxxxxxx. V tomto xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx hnědnout. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxx omezeny xx xxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxxx xxx xxxxxx pupkového xxxxx a mohou xx xxxxxxxx šířit xx xxxx prstenec. X postupem xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxx xxxxxx část xx x xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx části. X pokročilých stadiích xxxxxxx xx objevují xx povrchu xxxxx xxxxxxxxx, často x xxxxxxxxxxxxxx okraji. Druhotná xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx může příznaky xxxxxxxx x xxxx xxx obtížné, xx-xx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx od xxxxxx hnilob bramboru.
3. Xxxxxxxx xxxxxx pro Xxxxxxx barvení, xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (XX xxxx) x xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx
3.1. Xxxxxxxxxxxx xx pupkové xxxxx xxxx xx xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (např. 0,05 M xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) pH 7,0) xxx xxxxxxx xxxxx xxx 30 °X; doporučuje xx xxxxxx netoxický prostředek xxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) x netoxický protipěnový xxxxxxxxxx (Dodatky 1 x 2).
3.2. Xxxxxxxx x homogenátu xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx postupů (xxxxxxxxxxxx xxxxxx extrakce xxxxx Xxxxxxx, 1984):
X.
x) Xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 180 x xx dobu 10 xxxxx.
x) Odstřeďuje xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pod 4&xxxx;000 x xx xxxx 10 xxx. Xxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
X.
x) Xxxxxxx se xxxxx xxxx 30 xxx., aby xx xxxxxxx xxx pletiv. Xxxxxxxxx xx supernatant, xxxx by xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
x) Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx papír (Xxxxxxx Xx 1) umístěný x Buechnerově xxxxxxx xxxxxx vodní xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx xx centrifugačních xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx XXX až xx maximálního xxxxxx xxxxxxxx 35 xx.
x) Xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4 000 x xx dobu 20 xxxxx.
3.3. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxx 0,1 X xxxxxxxxxx pufru xX 7,2 (Xxxxxxx 2), xxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxx přibližně 1 ml. Suspenze xx xxxxxxx na xxx xxxxxx xxxxx x xxxxx část xx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxx) zmrazením xxx -20 °X xxxx xxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx (Xxxxx a Xxx Xxxxxxxxxx, 1987), xx xxxxxxxx může xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x 10% glycerolu. Xxxxx xxxx suspenze xx rozdělí xx xxx poloviny. Jedna xx xxxxxxx xx XX xxxx a xxxxxxx xxxxx Xxxxx, xxxxx xxx test xx xxxxx xxxxxxxxxxx.
3.4. Xx nezbytně xxxxx, xxx xx xx xxxxx xxxxxxxxxxx kontrolami x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx odděleně, xxx xx předešlo xxxxxxxx. Xx se týká x xxxxxxx xx XX xxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxx xxxxxxx
4.1. Xxxxxxxx Xxxxxxx barvení xxx xxxxxxx ředění xxxxxx (5.2.1.) x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2), které xxxxxxxx sklovitost, hnití xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx z xxxxxx napadených pletiv.
4.2. Xxxxxxxx xx Xxxxxxx xxxxxxx xxx známé xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx x pokud xxxxx x pro xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1.).
4.3. Xxxxxx xx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx 0,8 až 1,2 µx xxxxxx a 0,4 xx 0,6 µx široké.
Vhodná xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x Xxxxxxx 3.
X xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx kultur xxxxx převládají xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx jsou xx xxxxxxx živých xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx proměnlivou reakci xxxxx Xxxxx. Buňky xxxx xxxxxxxxxx, ve xxxxxxxxx s charakteristickými xxxxxxxxx xx "X" xxxx "X" xxxxxxxxx xxx dělení kroutivým xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx označovaných xxxx xxxxxxxx a čínská xxxxxxx.
5. Xxxxxx xxx XX xxxx
5.1. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx - XXXX33113 (NCPPB 2137) xxxx NCPPB 2140. Xxxx antisérum xxxx mít xxxxx XX titr xxx 1:600. Xxxxxx se xxxxx xxxxxxxx XXX xx xxxxxxxxx podložní xxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxx nedojde k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (FITC). Xxxxxxxxxx kmeny xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (ATCC 33113, XXXXX 2137, XXXXX 2140) se xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx kontrola xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Na xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx možno xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx přirozeně infikované xxxxxxx (xxxxxxxx lyofilizací xxxx xxxxxxxxx při -20°X) (obr. 2).
5.2. Xxxxxx
5.2.1. Připraví xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (101,102,103) xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx (xxx. 1).
5.2.2. Xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx x každého xxxxxx xxxxxx xxxx suspenze xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (přibližně 106 xxxxx/xx) xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx jamky (xxxxxxxxx 25 µx) (xxx. 1)
Xxxxxxx 1
Sklíčko xx vzorkem a xxxxxxxxxx fosfátovým pufrem (XXX)
xxxxxxxx vzorek xxxxxx xxxxxx
1:10 1:100 1:1000
X X X O X xxxxxx
X X X O O xxxxxxxx vzorku
PBS xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx 2
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
X X X X O původce xxxxxxxxxxxxxx 106/xx
X O X O X xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx
1:200 1:400 1:800 1:1600 1:3200 xxxxxx xxxxxxxx
5.2.4. Xxxxxx xx xxxxxxxxx jamky xxxxxxxxx xxxxxxxx kroužkovitosti v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem 0,01 X PBS xX 7,2 (Xxxxxxx 2), jak je xxxxxxx xx xxxxxxx 1. (Xxxxxxx xx XXX xxx xxxxxxxx XXXX.) Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx XX. Jestliže xx xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, s nímž xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx sklíčka.
5.2.5. Xxxxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx po dobu 30 xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxx jinak.
5.2.6. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx 0,01 X XXX pH 7,2. Xxxxxxx xx xx xxxx xxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 0,01 X XXX pH 7,2.
5.2.7. Xxxxxxx se xxxxxxxx přebytečná vlhkost.
5.2.8. Xx xxxxx xxxxx xx přidá xxxxxxxx XXXX ve xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx ve xxxxx vlhké xxxxxxx xxx pokojové teplotě xx xxxx 30 xxxxx, není-li xxxxxxxx xxxxxxxxx jinak.
5.2.9. Xxxxxxxx xx x xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.2.10. Xx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 5 - 10 xx 0,1 X xxxxxxxxxxx xxxxx xX 7,6 s xxxxxxxxxx (nebo xxxxxxxx xxxxxx o xX xxxxxxxxxxxx pod 7,6) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (Xxxxxxx 2).
5.2.11. Xxxxxxxx se xxx xxxxxxxxxxx, vybaveným xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx s FITC. Xxxxxx je xxxxxxxx xx 400 xx 1&xxxx;000. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xx xxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx x pozitivních xxxxxxxxxx x určí xx titr. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx XXXX/XXX a xxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xx x jamkám testovacích xxxxxx. X nejméně 10 xxxxxxxxxxxxxx polích xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx typických xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx poli x xxxxxxxx jejich xxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxxxx (dodatek 4).
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx imunofluorescenční xxxx.
- X xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx doprovodné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx reagující xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x morfologií xxxxxxxx Xxxxxxxxxxx michiganensis subsp. xxxxxxxxxxx. V xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx buňky s xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx x možnosti xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx vzorky s xxxxxxxxxx imunofluorescenčním xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
- Technický limit xxxxxxxx touto metodou xx xxxx 103 x 104 xxxxx/xx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx x počtem IF xxxxxxxxx buněk na xxxxxxx xxxxxxxxxx limitu xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx kroužkovitosti negativní, xxx mohou xxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx vejcoplodém.
Imunofluorescenční xxxx xx xxxxxxxx xx negativní x xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx se xxxxxxxx xx "xxxxxxxxxx" xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx.
Xxxx na xxxxx není požadován.
Imunofluorescenční xxxx se xxxxxxxx xx pozitivní x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx, x xxxxxxx xxx xxxxxxxxx imunofluorescenční test x xxxx užitých xxxxxxx, se xxxxxxxx xx "xxxxxxxxxxxxx zamořené" xxxxxxxxxx Clavibacter michiganensis xxxxx. xxxxxxxxxxx.
Xxxx na xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6. Test na xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx uvedeny x Dodatku 5.
6.1 Xxxxxx xxxxx 3.3 xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx 25 xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx (Xxxxxxx 5) xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxx (6.2, 6.3 xxxx 6.4).
6.2 Inokulace xxxxxxx I
6.2.1. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxxxxxx x průměru 10 xx je vhodný xxxx pěnového xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 5 xx xxxxxxx, 10 xx xxxxx x 15 xx délky). Xxx každý xxxxxxxxx xxxxxx se mezi xxxxxx x blok xxxxxx proužek xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx místě gumovým xxxxxx xxxxx xxxxx.
6.2.2. Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxx podélný xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx 0,5 xx 1,0 xx x xxxxxxx přibližně xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.2.3. Zářez xx xxxxxxx otevřený xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx do něj xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx pelety. Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx mezi xxxxxxx xxxxxxxxx rostliny xxxxx.
6.2.4. Xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx 2 xX.
6.3. Xxxxxxxxx xxxxxxx XX
6.3.1. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx mezi xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx pravým xxxxxx xxxxx (přibližně 5 xx 10 µx) xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6.3.2. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx sešikmený xxxxx (x xxxx xxxxxxxxx 5°), dlouhý 1,0 xx a hluboký xxxxxxxxx xxxx 2/3 xxxxxxxx stonku, xxxxxxx x xxxxx se xxxxx v místě xxxxx suspendované xxxxxx .
6.3.3. Xxx se xxxxxxx xxxxxxxx vazelínou x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4. Xxxxxxxxx injekční stříkačkou
6.4.1. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxxxx) xx xxxxxxxx lilku xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.4.2. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx inokulujte xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx injekční stříkačky x xxxxxxxx jehlou (xx xxxx xxx 23X). Xxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vejcoplodého.
6.5. Xxxxxxxxx se 25 xxxxxxx stejnou inokulační xxxxxxx (6.2, 6.3 xxxx 6.4) známou xxxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx x kde je xx možné x xxxxxxxx z přirozeně xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (5.1).
6.6. Xxxxxxxxx xx 25 rostlin xxxxxxxxx 0,05 X XXX xxxxxxx inokulační metodou (6.2, 6.3 xxxx 6.4).
6.7. Po xxxxxxxxx xx rostliny nechají xxxxxxxxx xx vhodných xxxxxxxxxx (Dodatek 5) xx dobu 40 xxx. Pravidelně po xxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx kroužkovitosti xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx vadnutí xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxx okrajová nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxx). Xxxxxx xxxxxxx xxxx zprvu xxx xxxxxxxxxxx xxxx strakaté, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Povadlá místa xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Nekrotická xxxxxxx xxxxxx často xxxxx xxxxx okraj. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx; xxx xxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx se xxxxxxxx, xxx je xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Rostliny xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx, proto xx nezbytné xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx x xxxx krátce xxxx xx. Xxxxxxx mohou xxxx xxxxxxxxxx populace xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx v xxxxxx x xxxxxx xxxxx. Xxxxx k xxx Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxx a X. xxxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxx, Phoma exigua xxx. foveata, xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx původcem kroužkovitosti, xxxxxxx xxxxxx vadnou xxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx.
6.8. Připraví xx Xxxxxxx xxxxxxx (4) xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx vejcoplodého xxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxxxx xx části xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx médiích (7). Xxxxx a xxxxxx lilku xxxxxxxxxxxx xx povrchově xxxxxxxxxxx xxxxxxx 70% xxxxxxxx.
6.9. Xx určitých okolností, xxxxxxx pokud xxxxxx xxxxxxx podmínky xxxxxxxxx, xx xxxx xxxx, xx xxxxxxx zůstává x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx dokonce x po 40xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxxxx zakrnělost x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud je XX xxxx xxxxxxxxx xx pozitivní, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xx proto důležité xxxxxxxxxx rychlost xxxxx xxxxx testovacích xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 0,05 M XXX x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxx xxxxx testování xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx:
6.9.1. Xxxxxxxx se xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx x odstraní xx xxxxx.
6.9.2. Xxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxx 0,05 X PBS x xX 7,0, xxx xx xxxxxxx x xxxxxx 3.1 xx 3.2.
6.9.3. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxx (4) x xxxxx XX (5).
6.9.4. Xxxxx xxxxxxxx pelety xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx vejcoplodém (6), xxxxx xx Xxxxxxx barvení xxxxx XX test xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx známá xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti a xxxxxxxx 0,05 X XXX. Xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx nejsou xxxxxxxx napadení xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se vzorek xx xxxxxxxxx.
7. Izolace xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, je-li xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx (8). Xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx náročným xxxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxx x pletiv xxxxxxxxxxxxx příznaky xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterie, x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx izolaci přímo x xxxxxx pletiva xxxxx (3.3). Lilek xxxxxxxxxx xx výtečným xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx pro xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx použití x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx třeba xxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx příznaky napadení (4.6). Xxx xx xx xxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx lilku xxxx x bodech 3. x 6.9.
7.1. Rozetře xx suspenze na xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx: (xxxxxxx uvedena x Dodatku 6):
živný xxxxxxxxxx xxxx (xxxxx xxx subkultury),
kvasničný xxxxxx xxxxxxxxx xxxx,
xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx,
xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx solemi.
Inkubuje xx xx xxxx xxxxxxxxx 20 xxx při xxxxxxx 21 °C.
Původce xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx roste x xxxxxxx vytváří xx 10 xxx xxxxxxx velikosti xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx zaručení xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Typické xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx, slizovitě xxxxxx, x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxxx 1 - 3 xx
Xxxxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx x nemocných xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx je xxxxx xxxxxxxx mnohé xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterie se xxxxx xxxxxxx podobnými xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx:
XX xxxx (5.1),
xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx,
xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx (Dodatek 7),
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx testy (X/X),
- xxxxxxxxx xxxx,
- xxxx xxx 37 °X,
- tvorba xxxxxx,
- xxxxxxxxx eskulinu,
- hydrolýza xxxxxx,
- xxxxxxxxx x 7% xxxxxxx XxXX,
- xxxxxxxx test,
- xxxxxxxxxx xxxx,
- xxxxxx X2X,
- xxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxx x: glycerolu, laktosy, xxxxxxxx a xxxxxxxx,
- Xxxxxxx barvení.
Všechny xxxxx xxxx zahrnovat xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x inokulem ze xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxx. Morfologická xxxxxxxx xx provádějí z xxxxxx z živného xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxx XX xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxx xx 106 xxxxx/xx. XX xxxx xxxx být xxxxxxx xxxxx známé kultury xxxxxxx kroužkovitosti.
Pro xxxx xx lilku xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx buněk upravena xx 107 xxxxx/xx. Xxxxx xx lilku xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx 10 xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx tvořených xxxxxx xxxxxxxx kroužkovitosti x xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx kultur xx xxxx xxxxx 20 xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx napadení xx xxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx 30 xxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx, ale xxxxxxxxxxxxxxx 30 °X (Xxxxxxx 5). Xxxxxxxx xx xx 30 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X/X inertní xxxx slabě xxxxxxxx
Xxxxxxx -
Xxxxxxxx +
Redukce xxxxxxx -
Xxxxxxxxx xxxxxx -
Xxxxxx X2X -
Tvorba indolu -
Xxxxxxxxx citrátu -
Xxxxxxxxx xxxxxx - nebo xxxxx
Xxxx při 37 °X -
Xxxx v 7% XxXX -
Hydrolýza xxxxxxxx -
Hydrolýza xxxxxxxx +
Xxxxxx xxxxxxxx x:
- xxxxxxxxx -
- laktosy - xxxx xxxxx
- xxxxxxxx -
- xxxxxxxx -
Xxxxxxx 1
XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXX X XXXXXXXX, 1976
D X silikonový xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx MS X (Xxxxxxx &xxx; Williams Xxx., xxx. x. 9964-25,
Xxxxxxxx Xxxxx, Essex, Xxxxxxx) 10 xx
xxxxxx Xxxxxx W (XXX Xxx) 0,5 x
xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 1 g
0,05 X fosfátový xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXX) xX 7,0 (xxxxxxx 2) 1 xxxx
Xxxxxxx 2
XXXXX
0,05 M XXX pH 7,0
Tento xxxx xxxx být xxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxx (2.1.)
Xx2XXX4 4,26 x
XX2XX4 2,72 x
XxXX 8,0 g
destilovaná xxxx do 1 xxxxx
0,01 M PBS xX 7,2
Xxxxx pufr xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx pro XX
Xx2XXX412X2X 2,7 x
XxX2XX42X2X 0,4 x
XxXx 8,0 x
xxxxxxxxxxx voda xx 1 xxxxx
0,01 X xxxxxxxxx pufr s xxxxxxxxxx xX 7,6
Tento xxxx xx používá x IF testu xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xx2XXX4.12X2X 3,2 x
XxX2XX4.2X2X 0,15 x
xxxxxxxx 50 ml
destilovaná xxxx 100 xx
Xxxxxxx 3
XXXXXXX XXXXXXX V XXXXXXXXX XXXXXXXXXX (XXXXXXX, 1981)
Xxxxxx krystalové violeti
Rozpustí xx 2 x xxxxxxxxxx xxxxxxx x 20 xx 95% xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx 0,8 x št'avelanu xxxxxxxx x 80 ml xxxxxxxxxxx vody.
Smíchají xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xxx 1 x
xxxxx xxxxxxxx 2 x
xxxxxxxxxxx xxxx 300 ml
Společně xx pevné xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx. Nasypou xx xx xxxx x míchají v xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxx kontrastního xxxxxxx
Xxxxxxx roztok:
safranin O 2,5 g
95% etanol 100 xx
Xxxxxxx xx x uloží.
Ředěním 1:10 xx přípraví pracovní xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx:
1. Xxxxxxxx xx roztěry, vysuší xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx xx sklíčko xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 1 xxxxxx xxxxxxx.
3. Krátce se xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxx xx Xxxxxxxxx xxxxxxx roztokem x xxxxx působit xx dobu 1 xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx savým xxxxxxx.
6. Xxxxxxx se xxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxxxxx 95% xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx ponoří xx jemného xxxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxx 30 xxxxxx.
7. Xxxxxxxx se pod xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxx papírem.
8. Xxxxxx xx xx xxxx 10 x xxxxxxxxxxxx roztokem.
9. Xxxxxxxx xx xxx tekoucí xxxxx x xxxxxx xxxxx papírem.
Grampozitivní xxxxxxxx xx barví xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx barví xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxx 4
XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XX POZITIVNÍCH XXXXX
Xxxxxx (X) jednoho xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x více xxxxxxx
= πX2/4 (1)
xxx X = průměr xxxx.
Xxxxxx (x) pole objektivu
= πx2/4 (2)
xxx x = průměr pole xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx x xxx xxxxxx měřením, xxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:
x = πi2/G2K2.4 (3)
xxx
x = xxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx xx xxxx xxxxxxx mikroskopu x xxxxxxxx se x rozmezí xx 8 do 24),
X = xxxxxxxx xxxxxxxxxx (1 xxxx 1,25),
G = xxxxxxxx xxxxxxxxx (100x, 40 x xxx.),
xx xxxxxx (2) x = √ 4x/π
xx xxxxxx (3) x = xxxxx xxxxxxxxx výrazu [(4x πx2/X2X2.4)/π)] = x/XX (4)
Xxxxxx se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (c). Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxx (X).
X = x. X/x
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx na 1 xx xxxxxx (X)
X = X . X. 1000/y,
kde x = xxxxx pelety x xxxxx,
xxx X = xxxx'xxxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx 5
XXXXXXXXX XXXXX XXXXXXXXXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (Solanum xxxxxxxxx xx. Black Xxxxxx) xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx substrátu. Xxxxxxxxx x plně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx lístky (10 xx 14 xxx) xx přepichují xx xxxxxxxxxx pěstebního xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx ve xxxx 3 listů, xxx mají dva, xxx xx xxxx xxx tři xxxx xxxxxxxxx xxxxx listy.
Lilek xx xxxxxxx xx xxxxxxxx za následujících xxxxxxxx:
xxxxx dne: 14 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx, xxxxx xx xxxxx;
xxxxxxx: - xxx: 21 xx 24 °C,
- xxx: 15 °X.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxx neroste xxx xxxxxxxxx &xx; 30 °X. Xxxxx xxxxx teploty xxxxxxxxx xx 15 °C, xxxx dojít x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx).
Xxxxxxxxx xxxxxx larvami xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx odrůdy Xxxxx Xxxxxx xxx xxxxxx xx:
1. AB Xxxxxxxöxx Frö,
270 50 Xxxxxxxöxx,
Xxxxxxx;
2. XXXXX Xxxxx Xxx,
Xxxxxx Xxxx,
Xxxxxx,
Xxxxx XX8 2XX,
Xxxxxx;
3. ASGRO Xxxxxx Xx X,
Xxxxx Xxxx, 23,
Xxxxx;
Xxxxxx
4. KÜPPER
Mitteldeutsche Samen XxxX,
Xxxxxxxxxx 22,
X-37269 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxx.
Xxxxxxx 6
XXXXX XXX RŮST A XXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxx xxxx (XX)
Xxxxxxxxx (Xxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxx xxx 121 °C xx xxxx 15 xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxx (XXX)
Xxxxxxxxx (Difco) xxxxxxxxxx 1 % X(+) xxxxxxx (xxxxxxxxxxx). Xxxxxxxxxxx xx v autoklávu xxx 115 °X xx xxxx 20 xxxxx.
Xxxxxxxx-xxxxxx-xxxxxxxxx xxxx (YPGA)
Kvasnicový xxxxx xxxxxxx (Xxxxx) (x. 0127) 5 x
Xxxxxxxxxxx (Xxxxx) (č. 0118) 5 x
X(+)-xxxxxxx (xxxxxxxxxx) 10 x
Xxxxx xxxxxxxxx (Difco) (x. 0560) 15 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 litr
Sterilizují xx 0,5xxxxxxx xxxxxx xxxxx x autoklávu xxx 115 °X xx xxxx 20 xxxxx.
Xxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x minerálními xxxxxx (XXX)
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (Xxxxx) 2,0 x
X(+)-xxxxxxx (xxxxxxxxxx) 2,5 g
K2HPO4 0,25 x
XX2XX4 0,25 x
XxXX4 . 7X2X 0,1 x
XxXX4 . X2X 0,015 x
XxXX 0,05 g
FeSO4 . 7X2X 0,0055 x
xxxxx xxxxxxxxx (Xxxxx) 18 x
xxxxxxxxxxx voda 1 xxxx
Xxxxxxxxxxx xx 0,5litrové xxxxxx xxxxx v xxxxxxxxx xxx 115 °X xx dobu 20 xxxxx.
Xxxxxxx 7
NUTRIČNÍ X XXXXXXXXXXXX XXXXX XXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxx 21 °X x po xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxx nedošlo x xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx 20 xxx.
- Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx test (Xxxx &xxx; Leifson), 1953 - X/X xxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx:
XX 0,2 x
XxXX4 . 7X2X 0,2 x
XX4X2XX4 1,0 x
xxxxxxxxxxx (Xxxxx) 1,0 x
xxxxx xxxxxxxxx (Xxxxx) 3,0 x
X(+)-xxxxxxx (monohydrát) 10,0 x
xxxxxxxxxxxxxx modř 0,03 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 litr
Smíchá xx x xxxxxx xxxxxx 1X XXX pH xx 7,0 až 7,2.
Xxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxx 16 xx x 100 xx (objem 12 xx) xx 5 ml x 10 xx.
Xxxxxxxxxxx xx x autoklávu xxx 115 °X po xxxx 10 xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxx 5xx x 10xx zkumavky xxxxxx kulturou. Xxxxxxxxx xx přidá xx 10xx zkumavky 1 xx 2ml sterilního xxxxxxxx parafinu x xxxxxxxx xx.
Xxxxxxxxx reakce:
____________________________________________________________________________________
Zkumavka Xxxxxxxx Interpretace
____________________________________________________________________________________
otevřená/zavřená xxxxx/xxxxx xxxxxxxxxxx
xxxxxxxx/xxxxxxx xxxxx/xxxxx-xxxxxx oxidační
otevřená/zavřená xxxxxxxx/xxxxx-xxxxxx oxidační xxxx xxxxxxx
____________________________________________________________________________________
- Xxxxxxxxx xxxx (Xxxxxx, 1956)
Kovacsovo xxxxxxxxx xxxxxxx:
1% xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx- xxxxxxxxxxxxxxx (XXX x. 30386) x xxxxxxxxxxx xxxx.
Xxxx činidlo xx mělo xxx xxxxxxx připravováno v 1 ml xxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxx x hnědého skla xxx 5 °X xx xxxx 1 xx 4 xxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx filtrační xxxxx v čisté Xxxxxxx misce. Ihned xx xxxxxx platinové xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x živného xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: Během 10 xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx 10 až 30 xxxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx: Xx důležité xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x XX xxxxxxx (xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
- Tvorba xxxxxxxx z xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxx, glycerolu
Připraví xx Xxxx &xxx; Xxxxxxxxxx X/X xxxxxx xxx xxxxxxx. Rozdělí xx xx xxxxxxxx xx 5 xx. Xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 115 °X xx xxxx 10 xxxxx. X roztavenému xxxxxxx xxx 45 °C xx xxxxx xxxxxxxxx 0,5 xx filtrací xxxxxxxxxxxxxxx 10% xxxxxxx xxxxxxx glycerolu, laktosy, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx se promíchá.
Pozitivní xxxxxx: Změna zbarvení xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx tvorbu kyseliny.
- Xxxxxxxxxx test
Kapka třicetiprocentního xxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x kapce xxxxxxxx přítomnost xxxxxxxx.
- Xxxxxxxx nitrátreduktasy x xxxxxxxxxxxxx (Bradbury, 1970)
Xxxxxxxxxx xxxxxx:
XXX3 (xxxxxx dusitanu) 1 x
xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxx) 1 x
X2XXX4 5 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 xxxx
Xxxxxxx se xx 10 xx xx 20ml xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 121 °C xx xxxx 15 xxxxx.
Xxxxxxx X:
X2XX4 8 x
5X xxxxxxxx octová 1 xxxx
Xxxxxxx X:
xxxxxxxxxx 5 x
5X kyselina octová 1 xxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx. Po 10 x 20 xxxxx xx xxxxx xx xxxxx kapce Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, 0,5 ml xxxxxxx X x 0,5 xx xxxxxxx X. Xxxxx xx médium xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx 50 xx zinkového xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx reakce: Xxxxxxx reakce
Stadium 1 Xxxxxxx 2
Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx
(xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx) červená -
Xxxxxxx xxxxxxxxx mimo xxxxxxx
(xxxxxxxxxxxxx - xxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx bezbarvá
Tvorba xxxxxx (Lelliott, 1966)
Xxxxxxxx xxxxxx:
xxxxxx xxx oxoid xxxxxxxxxx xxxx (CM53) 2,4 x
xxxxxxxxxxx xxxx 95 xx
Xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 121°X xx xxxx 20 xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xx 50 °X x xxxxxxxxx xx xxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 40% vodního roztoku xxxxxxxx (Xxxxx XX20). Xxxxx xx promíchá.
Rozdělí xx po 6 xx xx sterilních xxxxxxxx (16 x 100 xx) x xxxxx ustát v xxxxx poloze xx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx reakce: Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx barví xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxxx.
Xxxxxxxxx citrátu (Xxxxxxxxxxx) (Xxxxxxx, 1947)
xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxx 2503) 23 g
destilovaná xxxx 1 xxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx po 6 xx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Sterilizuje xx v xxxxxxxxx xxx teplotě 121 °X po xxxx 15 xxxxx x xxxxx ustát v xxxxx poloze.
Pozitivní xxxxxx: Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx změnou xxxxx xxxxx x oranžové xx červenou.
- Tvorba xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxx, 1959)
Médium:
baktotrypton (Xxxxx x. 0123) 10 x
X2XXX4 1 x
XxXX 5 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 xxxx
Xxxxxxxx xx x xxxxxxx xx 6 ml xx xxxxxxxx 16 x 100 xx. Xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxx xxx teplotě 115 °X xx xxxx 10 xxxxx.
Xxxxxxxxx xx x xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx zavěsí papírek x octanem xxxxxxxxx (Xxxxx 9511). Papírek xx xxxxxx víčkem. Xxxxxxxx se po xxxx xxxxxxx 20 xxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: Xxxxxx xxxxxxxxxx (X2X) z xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
- Tvorba xxxxxx (Xxxxxxxxxx, 1959)
Xxxxxx:
Xxxx x xxxxx na X2X.
Xxxxxxxx xx xxxxxxx x octanem olovnatým x přidá 1 xx 2 ml xxxxxxxxxxxx a jemně xx xxxxxxxx. Nechá xx xxxxxx xxxx (xxx xxxxx) x xxxxxxxx xxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx zkumavky xx xxxxx xxxxxxx 0,5 ml xxxxxxx xxxxx Xxxxxxx (Xxxxx 9293).
Xxxxxxxxx reakce: Přítomnost xxxxxx se projeví xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx vrstvě xxxx xxxxxxxxx x xxxxx frakcí.
- Xxxx xxx 37°C (Ramamurthi, 1959)
Xxxxxx:
xxxxxxxxxx (Difco x. 0003) 8 g
destilovaná xxxx 1 xxxx
Xxxxxxxx xx, xxxxxxxx a xxxxxxx xx 6 xx xx zkumavek.
Sterilizuje xx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 121 °X xx xxxx 15 xxxxx.
Xxxxxxxxx xx x xxxxxxxx xx xxx teplotě 37 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxx xxxxx.
- Xxxx x 7% xxxxxxxx xxxxxx (Xxxxxxxxxx, 1959)
Xxxxxx:
xxxxxxxxxx (Difco x. 0003) 8 x
XxXX 70 g
destilovaná xxxx 1 litr
Rozmíchá xx, xxxxxxxx a xxxxxxx xx 6 xx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx x autoklávu xxx teplotě 121 °X podobu 15 xxxxx.
Xxxxxxxxx reakce: projevy xxxxx.
- Hydrolýza xxxxxxxx (Xxxxxxxx, Biling & Xxxxxxx, 1966)
Médium:
baktoželatina (Difco x. 0143) 120 x
xxxxxxxxxxx voda 1 xxxx
Xxxxxxxx xx, rozpustí x xxxxxxx xx 6 ml do xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxx při xxxxxxx 121 °C xx xxxx 15 xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: Xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx, i xxxx xx uchovávána xxx teplotě 5 °X xx xxxx 30 minut.
- Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx:
xxxxxxxxx (Xxxxx) (roztavený) 1 xxxx
xxxxxxxxx bakt. xxxxx (Difco x. 0178) 2 x
Xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx při xxxxxxx 115 °X xx xxxx 10 xxxxx. Rozlije na xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xx dosažení xxxxxxx xxxxx (10 xx 20 dní) xx odebere xxxx xxxxxxxx kultury x xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx: Hydrolýza xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx pod xxxxxxxxxx koloniemi xxxxxxxx xxxx xxxxx nich, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx.
- Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (Sneath &xxx; Xxxxxxx, 1974)
Xxxxxx:
xxxxxxxxxxx (Xxxxx) 10 x
xxxxxxx 1 x
xxxxxxxx xxxxxxxx (Xxxxx 3862) 0,05 x
xxxxxxxx sodný 1 x
xxxxxxxxxxx voda 1 xxxx
Xxxxxxx xx xx xx rozpuštění x xxxxxxx xx 6 xx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx se v xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 115 °C xx xxxx 10 minut.
Médium xx čiré, ale xxxxxxxxxxx xx modra.
Pozitivní xxxxxx: Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vznikem xxxxx xxxxx společně x mizením fluorescence. Xxxx xxx prověřit xxxxxx xxxxxxxxxxxx (XX) xxxxx.
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx, J. X., 1970. Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx from xxxxxx. Xxx. Pl. Xxxx., 49, 213 - 218.
Xxxxxxx, I. G., 1984. The extraction xxx xxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx from xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx. XXXX Bull. 14 (2), 147 - 152.
Xxxxxxx, X. X., 1981. Xxxxxxxxxxxxx methods xx light microscopy. X: Manual xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, Xxxxxxxx Xxxxxxx xxx Xxxxxxxxxxxx, Xxxxxxxxxx, 21 - 23.
Hugh, X. Leifson, X., 1953. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx fermentative xxxxxx oxidative xxxxxxxxxx xx carbohydrates by xxxxxxx gram-negative bacteria. X. Xxxx., 66, 24 - 26.
Xxxxx, X. X. x X. Van Vaerenbergh. Xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxx XX xxxxxx xxx xxx detection xx xxxxxx ring xxx infections (Conybacterium xxxxxxxxxxx) in xxxxxx. XXXX Xxxx., x. 17, 1987, xx. 1 -10.
Kovacs, X., 1956. Xxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx, Xxxx., 178, 703.
Xxxxxxxx, X. X., 1966. The plant xxxxxxxxxx coryneform bacteria. X. appl. Xxxx., 29, 114 - 118.
Xxxxxxxx, R. A., X. Xxxxxxx, X. X. Hayward, 1966. X xxxxxxxxxxxxx scheme xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx X. appl. Xxxx., 29, 470 - 489.
Xxxxxxxx, X. A. &xxx; X. X., Xxxxxx, 1976. Xxx xxxxxxxxx xx latent xxxx xxx (Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxxx.xx Kotth.) Xxxxx. Et. Xxxxx.) xx potato xxxxxx. XXXX Bull., 6 xxxx. 2, 101 -106.
Xxxxxxxxxx, X. S., 1959. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx Xxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx bacteria xxx xxxxx xxxxxxxxxxxx to xxx Corynebacteria. Xxx. Xxxxxxx xxxxx. Xxx. Xxx., 366, 52 xx.
Xxxxxxx, X. X. X., 1967. A xxxxx xx xxx xxxxxxxxxxxxxx of xxx xxxxxx of bacteria. 2. Xxx.,
Xxxxxxx xxx Xxxxxxx Company, Xxxxxxxxx.
Xxxxxx, X. H. X. &xxx; X. G. Xxxxxxx, 1974. A xxxxx in xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx between xxxxxxxxxxxx: xxxxxx xx Pseudomonas xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxx Xxxxxxxxxxx, 40, 481 - 527.

B. Xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
X dodatcích xx podrobně xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxx, tzn. xxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxxxx x reagencií.
ODDÍL 1: Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
1. Xxxxxxxx xxxxx hniloby

Testovací xxxxxx xx určen xxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx hnědé xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, x xxx xxxxxxxx bramboru x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx typické xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx podezření x jeho xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x - při pozitivním xxxxxx - xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx diagram
 
rostliny xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxx bramboru s xxxxxxxx(1)
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
⇓
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxx screeningové xxxxx (2)
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
⇓
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
XXXXXXX
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
⇓
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
⇓
&xxxx;
&xxxx;
⇓
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxx
&xxxx;
&xxxx;
xx(3)
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
⇓
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxxxxxxx test(y) identifikace (4) čisté xxxxxxx xxxx Ralstonia xxxxxxxxxxxx + xxxx patogenity(4)
 
 
 
 
 
 
⇓
 
⇓
 
 
 
 
 
 
ano
 
 
 
ne
 
⇒ ⇒
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
⇓
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxxxx xxxx hlízy xxxx neinfikovány původcem xxxxx hniloby
 
rostliny xxxx xxxxx xxxx infikovány xxxxxxxx xxxxx hniloby
 
 
 
 
 
 
 
 
Poznámky x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(1) Xxxxx xxxxxxxx xx x Xxxxxx XX.1.
(2) Xxxxxx screeningové testy xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx jsou:
- test xx xxxxx xxxxx xx svazků xxxxxxx (xxxxx XX.2.),
- test xx přítomnost xxxxxxx xxxx-ß -xxxxxxxxxxxxxxx (oddíl XX.2),
- IF-test (xxxxx XXX.2),
- ELISA-test (oddíl XXX.3),
- XXX-xxxx (oddíl XXX.4).
(3) Ačkoli je xxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx x rostlinného xxxxxxxxx x typickými xxxxxxxx metodou xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx xx izolačním xxxxx xxxxxxx nebo inhibovat. Xx-xx xxxxxxxx test xxxxxxxxx, ale příznaky xxxxxxxxxx xxxx typické, xxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, a xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
(4) Čistá xxxxxxx xxxxxxx hnědé hniloby xx spolehlivě identifikována xxxxxxxxx jedním x xxxxx uvedených v xxxxxx XX.4.1 x xxxxxxxxx x testem xxxxxxxxxx (xxxxx XX.4.3). Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx povinné, xxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx pro xxxxx xxxx xxxxxx.
2. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx hnědé xxxxxxx xx vzorcích xxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx bramboru xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx jsou xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx původce hnědé xxxxxxx x x xxxxxxx izolace xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx identifikací x xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxx hlíz xxxxxxxx (1)
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
⇓
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
XXXXXXXXXXXX(X) XXXX(X) (2)
IF xxxx (3) a xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx(4) x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx:
XXXXX test (5)
PCR xxxx (6)
Xxxxxxxxxxx xxxx (x) (7)
&xxxx;
&xxxx;
⇓
&xxxx;
&xxxx;
⇓
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx negativní
 
⇒
 
vzorek xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx hnědé xxxxxxx
&xxxx;
⇓
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
XXXXXXXX TEST(Y)
selektivní xxxxxx x/xxxx xxxxxxx (8)
 
 
 
 
 
⇓
 
 
 
 
kolonie x typickou morfologií
 
 
 
 
 
⇓
 
⇓
 
 
 
 
ano
 
 
 
ne
 
⇒
 
vzorek xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx
&xxxx;
⇓
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
XXXXXXXXXXX XXXX(X)
Xxxxxxxxxxxx(9) xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx + test xxxxxxxxxx (9)
&xxxx;
&xxxx;
⇓
&xxxx;
⇓
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxx
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xx
&xxxx;
⇒
&xxxx;
xxxxxx není xxxxxxxxx xxxxxxxx hnědé xxxxxxx
&xxxx;
⇓
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxx xx infikován xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
(1) Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx 200 xxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxx i xxx xxxxxx x xxxx xxx 200 xxxxxxx.
(2) Xxxxxxxxxxxx(x) xxxx(x)
Xxxxx xxxxx test nemusí xxx xxxxxxxxxx citlivý xxxx spolehlivý x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx vzorku. Xxxxx se doporučuje xxxxxxxx více xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
(3) Xxxxxxxxxxxxxxxxxx test (XX xxxx)
XX test xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xx je xxxxxx xxxxx jiným xxxxx xxxxx, které xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx ověřeny. Xxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx.x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxx (xxxxxxx detekovatelnosti 103 - 104 xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx).
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx pouze antisérum x xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx 2 000 pro xxxxxx antisérum) x xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx jednom zředění xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx metodu xxx použít, pokud xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx x nepřímé xxxxxx.
XX xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx fluorescence, které xxxxxxxxxx o specifičnosti xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx příbuznými xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx morfologie xxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, které xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx hlízy xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx. IF test xxx provádět xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxx existuje-li xxxxxxxxx xx výskyt xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxx proveden xxxxx xxxx spočívající na xxxxx xxxxxxxxxxx principu. X takovém případě xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
(4) Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxxxxxxxx xxxxxx XXXX x xxxxxxxxxxx testování xxxxxxxxxx xxx této xxxxxx se xxxxx x citlivý a xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Výsledek xx x xxxxxxxxx xx 3 - 6 xxx xx xxxxxxxx vzorku. Původce xxxxxxx se xxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxx ho xxxxxx identifikovat. Xx-xx xxx xxxxxxxxx testu xxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx připraveny, xxx byly xxxxxxxxx xxxxxxxxxx baktérie x xxxx, xxxxx xx xx živném xxxxx x hnědou xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxx špatně xxxx, xxxxxxx složky živného xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx hniloby xx xxxxxx baktérií, xxxxx xx xx xxxxx xxxxx vyvíjet. Selektivní xxxxxxxx roztěr xxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, avšak xxx negativním xxxxxxxx, x xxxx je xxxxxxxxx, xx x xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx hniloby xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx testovat xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx je v xxxxxxxx xxxxxxxxx IF-test.
(5) XXXXX test
ELISA xxxx xx v xxxxxx xxxx citlivý než XX xxxx (hranice xxxxxxxxxxxxxxxx 104 - 105 baktérií xx xxxxx xxxxxxxx pelety x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx). Xx xxxxx a xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx vykazuje falešné xxxxxxxxx výsledky (křížové xxxxxx) a falešné xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxx molekulami x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx). Požadavky xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vysoké. XXXXX test xxxxx xxxxxxxx samostatně jako xxxxxx screeningový test.
(6) XXX test
PCR xxxx xx potenciálně xxxxxx xxxxxxx detekční xxxx, x když xxxx xxx snadno xxxxxxxx xxxxxxxxx složkami extraktu x xxxxxxx xxxx x xxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx testu. Xxxxxxx xxxxxx brambor xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx jiné. Xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx x možností xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx x xx zředění xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby. Xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx musí xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx obezřetně, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx vedou x získání xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Falešně xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx homologním xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxx XXX xxxx používat xxxx jediný xxxxxxxxxxxx xxxx.
(7) Xxxxxxxxxxx testy
Inkubace xxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxx extraktu x xxxxxxxxxxxxxxx bujónu, jako xx xxxx. xxxxxxxxxxxx XXXX-xxxxx, umožňuje rozmnožení xxxxxxx xxxxx hniloby. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx x xx zředění xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXXXX xxxxx x XXX xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx lze xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx IF, XXXXX a XXX xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Tyto xxxxxxxxxxx xxxxxx však xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx díky jejich xxxxxxxx potenciálu. Xxxxxxx xx však xxxxxxx x dispozici málo xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, nelze xx xxxxxx xxxx jediné xxxxxxxx xxxxxx.
(8) Biotest
Tento xxxx xx xxxxxxx xxx izolaci původce xxxxx xxxxxxx x xxxxx bramborového xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx rostlině x xxx jej provést xx rostlinách xxxxxxx xxxx lilku vejcoplodého. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx xx médiu XXXX xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx testu neovlivní.
(9) Xxxxxxxxx xxxx(x)
Xxxxxx kulturu xxxxxxx xxxxx hniloby xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx jedním z xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx XX.4.1 x xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx (oddíl XX.4.3). Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx není xxxxxxx, doporučuje xx xxxx u každého xxxxxx xxxxxxx.
XXXXX II: Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx
1. Příznaky
1.1. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx hnědou xxxxxxxx
1.1.1. Xxxxxxxx xx xxxxxxx a stoncích
Prvním xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx listů xxxxx nejteplejších denních xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx vratné (x xxxx xxxxxxxx xxxxxx). Xx příčném xxxx xxxxxx xxxxx nad xxxx (cca 2,5 xx) xxxx xxxxx xxxxxx hnědě xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, slizovitý xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxx rozříznutého xxxxxx xx xxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
1.1.2. Xxxxxxxx xx xxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx x rané fázi xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx prstence xxxxxxx xxxxxx, ze xxxxxxx xx několika xxxxxxxx xxx' xxxxxxxxx xxxx xx lehkém xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx plochy xxxxxx bledý, krémově xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx zbarvení xxxxxxx svazků xxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xx xxxx rozšířit xx xxxxxxxxxxxxxxxxx pletiva. X xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx pupkové části xxxx a x xxxx, což vede xx vzniku xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx na xxxxxx. X xxxx může xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xx nějž xx xxxxxxxx půdní částice.
1.2. Xxxxxxxx napadení xxxxxxx xxxxxx hnilobou
Prvním xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx (xxxxxxx půdy asi 25 °C při xxxxxxxx xxxxxxx vlhkosti) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, což xxxx x úplnému xxxxxxxx rostliny. Xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx půdy xxx 21 °X) se xx stonku může xxxxxx velké množství xxxxxxxxxxx výhonů. Xx xxxxxx je možno xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xxx je xxxxxxxxxx xxxxxx nekrózy vodivých xxxxxx. Na xxxxxxx xxxx xxxxxx je xxxxx zbarvené xxxxxx xxxxxxx, x něhož xxxxxxxx xxxxx bílého xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx testy xxxxxxxx xxxxxxxxx stanovit xxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x následujících xxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx svazků
V xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx hnilobu xxx xxxxxxxxx stanovit diagnózu x v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx patogena x cévních xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx rajčete: Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxx a řeznou xxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxx x vodou. Xxxxxx xxxx xxxxxx x cévních xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx nezpůsobuje xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxx-ß-xxxxxxxxxxxxxxx (XXX)
Xxxxxxx XXX x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby xxxx nejprve zviditelněny xxxxxxxxx nilskou modří X xxxx xxxxxxxxx xxxxx X.
Xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xx 48xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx půdě XXXX nebo XXX (Xxxxxxx 1). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolní roztěry xxxxx xxxxxxx 2/xxxx 3 x x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx několikrát xxxxxx xxxxxxxxxx přes xxxxxx, dokud xxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxx nilskou xxxxx
1. Fixovaný roztěr xxxxxxxxx 1% xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx 10 minut xxx xxxxxxx 55 °X.
2. Barvící roztok xx xxxxx odtéct. Xxxxxx opláchneme xxx xxxxxxx vodovodní xxxxx. Xxxxxx xxxx vysajeme xxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxx xxxxxxxxx 8% xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx 1 xxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
4. Xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx vodou x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxx navlhčíme xxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
6. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 450 nm xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx zvětšení 1:1 000.
Pozorně xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx XXX. Pozorování xxxxxxxxx x při normálním xxxxxx, abychom xx xxxxxxxx, že xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxx původce xxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxx
1. Fixovaný roztěr xxxxxxxxx 0,3% xxxxxxxx xxxxxxxx černě B x 70% etanolu. Xxxxxxxxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
2. Xxxxxxx roztok xxxxxxx xxxxxx. Krátce oplachujeme xxxxx x vodovodu. Xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx do xxxxxx. Xx vytažení xxxx osušíme xxxxx xxxxxxx. Xxxxx! Xxxxx xx zdraví škodlivá xxxxx. Nutno xxxxxxxx x xxxxxxxxx!
4. Xxxxxx xxxxxxxxx 0,5% (xxxxxxxx/xxxxx) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x necháme xxx 10 xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx teplotě. Xxxxx! Xxxxxxxx xx xxxxxx škodlivá látka. Xxxxx pracovat v xxxxxxxxx!
5. Xxxxxxxxxx pod xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx papírem. Přiložíme xxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx x procházejícím světlem xxx olejovou xxxxxx x xxx xxxxxxxx 1:1&xxxx;000. Granule XXX x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx jsou xxxxx-xxxxx xxxxxxxx. Buněčné xxxxx mají barvu xxxxxxx.
Xxxx xxxxx
X xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx XX test (oddíl XXX.2), XXXXX xxxx (xxxxx XXX.3) x XXX test (oddíl XXX.4).
3. Postup xxx xxxxxxx
3.1. Xxxxxxxxx slizovitý xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx bramborové xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx x 50mM fosfátovém xxxxx a xxxxxxx 5 xx 10 xxxxx xxxx.
3.2. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx dvě desetinná xxxxxx suspenze (1/10 x 1/100), v xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxx.
3.3. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx objem xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx XX, XXXX a SPA (Xxxxxxx 1) x/xxxx xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (Xxxxxxx 1) x nebo na xxxxxxxxxx XXXXxxxxxx (Xxxxxxx 7). Xxxxx je xxxxxxx metodou rozetřeme xx plotny. Může xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx plotny xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 2/xxxx 3 xxxxxxx xxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxx kontrolu.
3.4. Xxxxxx xxxxxxx při xxxxxxx 28 °X xx xxxx 3 xxx xxxxxxxxx. Při xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx 6 xxx, xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx bakterií na xxxxx XXXX xxxxx xxxxxxx atypickými a xxxxxxxxx.
Xx xxxxxxxxxxxxx živných xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx perlově xxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx kolonie, xxxxx x charakteristickými xxxxxxxxxx.
Xx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx, nepravidelné xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Nevirulentní xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx kolonie.
Na XXXX - xxxxx xxxxxxxxx virulentní xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx, ploché, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx vytvářejí xx XXXX médiu xxxxxxx xxxx xxxxxxx, které xxxx xxxx růžové xx xxxxxxx.
3.5. Kolonie x charakteristickou morfologií xxxxxxxxx do xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxxx universálním médiu. Xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx přeočkovávání, xxxxx xxxx vést xx ztrátě virulence.
4. Xxxxxxxxxxx xxxx(x)
4.1. Identifikace xxxxxxx xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx původce xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx minimálně xxxxxx z následujících xxxxxxx:
Xxxxxxxx a enzymatické xxxxx
Xxxxxxxxxx: Xx xxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx kontrolní xxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx hnědé hniloby xxxx xxx' xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx:
xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx -
Xxxxxxx XXX +
xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx X+/X
xxxxxxxx +
xxxxxxx podle Xxxxxxx +
xxxxxxx dusičnanů +
_________________________________________________________________________________
xxxxxxx citrátů +
růst xxx 40 °X -
_________________________________________________________________________________
xxxx v 1% XxXX +
xxxx x 2% NaCl -
xxxxxxx-xxxxxxxxxxx -
xxxxxxxxx xxxxxxxx -
hydrolýza xxxxxx -
xxxxxxxxx xxxxxxxx -
xxxxxxxx xxxxxx -
Xxxxx x metody xxx Xxxxxxx & Stead (1987).
XX xxxx
Xxxxxxxxxx suspenzi x xxxxxxx 106 xxxxx na xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx). Xxxxxxxxxx řadu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Použijeme XX xxxxxx (oddíl XXX.2). XX titr xxxxxxx musí odpovídat XX xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
XXXXX xxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx x hustotě 106 xxxxx na xxxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxx a kontrolního xxxxx (kontrolních xxxxx). Xxxxxxxxx xxxxxx ELISA (xxxxx III.3). Extinkční xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx extinkční hodnotě xxxxxxxxx xxxxxxxx
XXX xxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxx 106 xxxxx xx xxxxx ml x xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx (kontrolních xxxxx). Xxxxxxxxx xxxxxx XXX (xxxxx XXX.4). XXX xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx stejnou xxxxxxxx x stejný vzor xxxxxxxxxx xxxxxxx enzymů (XXX xxxx) xxxx xx produkt pozitivní xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx (XXXX)
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx 106 xxxxx na jeden xx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx kmenů). Xxxxxxxxx xxxxxx XXXX (xxx Xxxxxxxxx et xx., 1995) x PCR xxxxxxxx OLI-1 (Xxxx xx xx., 1993). Xxxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxx reakci xxxx xxxxxxxxx kontrola.
Analýza proteinů
Denaturované xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx-X-xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) (Xxxxx, 1992x).
Xxxxxxx xxxxxxxx kyselin
Kulturu x xxxxxxxxx kontrolu xxxxxxx xxxx 48 hodin xxx teplotě 28 °X na xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx a použijeme xxxxxx FAP (Jasen 1991; Xxxxx 1992x, Xxxxx 1992x). Xxxxxx xxxxxxx musí být xxxxxx s profilem xxxxxxxxx kontroly. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx podmínek jsou 14:0 3OH, 16:0 2XX, 16:1 2OH x 18:1 2OH.
3.2. Xxxxxxxxxxxxxxx kmenů
Charakteristika xxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx se ji xxxxxxxx xxx xxxxx xxxx případ xxx xxxxxxx xxxxxxx jednoho x xxxxxxxxxxxxx xxxxx:
Xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx biovary xxxxx schopnosti vytvářet xxxxxxxx xx tří xxxxxxxx x xxx xxxxx (Xxxxxxx 1964, 1994);
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
1
&xxxx;
2
&xxxx;
3
&xxxx;
4
&xxxx;
5
&xxxx;
Xxxxxxx:
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
- maltózy
 
-
 
+
 
+
 
-
 
+
 
- xxxxxxx
&xxxx;
-
&xxxx;
+
&xxxx;
+
&xxxx;
&xxxx;
+
&xxxx;
- xxxxxxxxx
&xxxx;
-
&xxxx;
+
&xxxx;
+
&xxxx;
-
&xxxx;
+
&xxxx;
- mannitu
 
-
 
-
 
+
 
+
 
+
 
- xxxxxxx
&xxxx;
-
&xxxx;
-
&xxxx;
+
&xxxx;
+
&xxxx;
-
&xxxx;
- xxxxxxx
&xxxx;
-
&xxxx;
-
&xxxx;
+
&xxxx;
+
&xxxx;
-
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
Xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx 2 xxxxxx xx xxxxxxxxxxx (Hayward 1994):
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxx 2
 
biovar 2-X
&xxxx;
xxxxxx 2-X
&xxxx;
Xxxxxxx :
&xxxx;
-
&xxxx;
+
&xxxx;
+
&xxxx;
- trehalózy
 
 
 
 
- xxxxxxxxx
&xxxx;
+
&xxxx;
-
&xxxx;
+
&xxxx;
- X-xxxxxx
&xxxx;
-
&xxxx;
-
&xxxx;
+
&xxxx;
xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
&xxxx;
xxxxx
&xxxx;
xxxxx
&xxxx;
xxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
Xxxxxxxxxxx xxx
Xxxxxx xxxx (Xxxxxxxxxxx xx al., 1962) xx provádí xx xxxxxxx testů xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x na rostlinách xxxxxx a také xxxxxx na xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (XX) xx xxxxxxx tabáku (Xxxxxx xx Xxxxxxxx, 1970):
 
reakce x:
&xxxx;
&xxxx;
xxxx (*)
&xxxx;
&xxxx;
1
&xxxx;
2
&xxxx;
3
&xxxx;
- rostlin xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx
&xxxx;
xxxxxxx
xxxxxxx
xxxxxxx
(48 xxx) x xxxxxxx
(7-8 xxx)
&xxxx;
xxxxx reakce
žádná xxxxxx
XX (12 - 24 hod)
 
vadnutí
žádná xxxxxx
xxxxxxxx
(2-8 xxx)
&xxxx;
- rostlin xxxxxx
&xxxx;
xxxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
- xxxxx tabáku
 
 
 
 
 
 
 
(*) Xxxx 4 (patogenní xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx) x xxxx 5 (patogenní xxxxx xx xxxxxx) xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx rasy xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx tabáku xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxx lze xx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx hostitele.
Kulturu xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx:
xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx provádět:
analýzou XXXX (Xxxx xx xx., 1989)
xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX (REP-, XXXX &xxx; XXX-XXX (Xxxxx xx al., 1995; Xxxxx xx xx., 1995).
3.3. Xxxx patogenity
Tento xxxx slouží x xxxxxxxxx xxxxxxxx původce xxxxx hniloby x x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
X xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x hustotě 106 xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx 5 - 10 rostlin xxxxxxx xxxx lilku xxxxxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx (oddíl XXX.6). Inkubujeme xx xxx xxxxx při xxxxxxxxx 22 - 28 °C x xxxxxx xxxxxxxxx vzdušné xxxxxxxx x denně xxxxxxxxxxx. Xxxxxx pozor xx výskyt xxxxxxx x nebo xxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxxxxxx charakteristické xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx takto:
- Xxxxxxxxx xxxx pletiva xx stonku 2 xx xxx xxxxxx xxxxxxxxx.
- Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx 50xX, xxx xxxxxxxxx na xxxxxx, inkubujeme a xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx kolonií xxxxx hniloby.
ODDÍL XXX: Xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxx: Standardní xxxxxxxx xxxxxx xx 200 xxxx. Xxxxxx xx xxxx vhodný i xxx xxxxxx s xxxx xxx 200 xxxxxxx.
1. Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx: Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx získanou xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx i xxx xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti.
Pokud xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx, xx xxxxx před xxxxxxxxxx:
- xxxxxx xxxxxx inkubovat xx xxxx xx 2 týdnů xxx xxxxxxx 25 - 30 °C, aby xx podpořilo rozmnožení xxxxxxx populací xxxxxxx xxxxx xxxxxxx;
- oprat xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx x vhodným xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Hlízy xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
1.1. Xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx hlízy xx xxxx pupkové xxxxx, tak xxx xxxx xxxxx vodivá xxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx xx pupkovém xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx (3 - 5 xx x průměru). Xxxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxxxx bylo xxxxxxxxx xx xxxxxxx nevodivých xxxxxx. Toto xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx: X xxxx xxxx můžeme xxxxx důkladně xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo silnou xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx XX).
1.2 Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx do xxxxxxxx xxxxxx x neprodleně xxxxxxxxxx. Pokud xx xxxx xxxxx, xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxx 24 xxxxx nebo při xxxxxxx 4 °X xxxx xxx 72 xxxxx.
1.3 Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx:
1.3.1. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx vhodné xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (Dodatek 2), aby došlo x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx hlíz.
Kousky xxxxxxxxxx xx do úplné xxxxxxxxxxxx x xxxxxx Xxxxxx Xxxxxxx xxxx Xxxxx-Xxxxxx. Je však xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx 15 - 30 minut xxxxx.
1.3.2. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx x překrytí xxxxxxxxx xxxxx hlíz.
Nádobu xxxx do xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxx 50 - 100 otáčkách xx xxxxxx po xxxx 4 xxxxx xxx xxxxxxx 20 - 22 °X xxxx xx dobu 16 - 24 xxxxx xxx teplotě 4 °X.
1.3.3. Pupkové xxxxx xxxx vložíme xx pevného xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxx
Xxxxxxxxx, xxxxxxx 105 x 150 xx, xxxxxxxxxxxx ozářením).
Pupkové xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, např. kladivem, xx x xxxxx
xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx maceračního xxxxx, xxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx 15-30 xxxxx xxxxxx.
1.4. Z takto xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx:
1.4.1. Macerát xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, tuhý xxxxxx xxxxxx ponecháme x xxxxxx nebo xxxxx. Xx-xx slitý xxxxxxx xxxxx, odstřeďujeme xxx xxxxxxx xxx 10 °X xx xxxx 10 minut xxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx 180 x.
Xxxxx xxxxxxx xx supernatant x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx 15 xxxxx při 7 000 x nebo 10 xxxxx xxx 10&xxxx;000 x xxx xxxxxxx xxx 10 °C.
Supernatant xxxxxxxx xxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx peletu.
1.4.2. Xxxxxxx přefiltrujeme přes xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx pórů 40 - 100 µx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx pufrem.
Filtrát odstřeďujeme xx xxxx 15 xxxxx při 7&xxxx;000 x xxxx 10 xxxxx xxx 10 000 x a xxx xxxxxxx xxx 10°X.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, abychom xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
1.5. Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x 1 ml xxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxxxx 2).
Xxxxxxxxx xx dva xxxxxx xxxx x každý x xxxx xxxxxxxx xx jedné xxxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxx používáme xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx extraktu xxxxxxxxxx xx xxxx testu xxx teplotě 4 °X.
Xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 10-25 xxxxxxxxxx xxxxxxx sterilního xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx. Skladujeme xxx xxxxxxx - 18 °X (xxxxx) xxxx xxx xxxxxxx - 70 °X (xxxxxx).
2. XX xxxx
Xxxxxxxxx antisérum xxx původce xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx pro xxxx 3/xxxxxx 2. Xxxxxx xxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx 106 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx zředěním konjugátu xxxxxxxxxxxxxxx isothiokyanátu (XXXX) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx XX xxxx xxxxxxxxx 1 : 2 000.
Použijeme xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx sklíčko xxxxxxx x 10 xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 6 xx.
Xx xxxxx xxxxxxxx sklíčko naneseme xxxxxxxx konjugátu XXXX. Xxxx xx měl xxx opakován x xxxxxxxxx PBS, xxxxx xxxxxxxx FITC xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx x hustotě 106 xxxxx xx xxxxxxxx některého xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx hnědé xxxxxxx. X každé sérii xxxxxxxxx použijeme xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
2.1. Podložní xxxxxxx připravíme xxxxxx x následujících xxxxxxx:
2.1.1. Xxx xxxxxx s xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (15 µx xxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx 6 mm - x větších xxxxxx xx nutno xxxxxx xxxxxxxxxxxx větší xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxx druhý xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx na xxx. 1.
2.1.2. Xxx xxxx xxxxxx:
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx. 1/10, 1/100 x 1/1&xxxx;000 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (15 µl xxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx 6 xx - x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx odpovídající xxxxx xxxxx) resuspendované xxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx řadu okének. Xxxxxxxxx xxxx může xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx na xxx. 2.
2.2. Kapky xxxxxxx vyschnout. Xxxxxxxxxxx xxxxx fixujeme xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx, ožehnutím xxxx 95% xxxxxxxx.
2.3. Postup xxx XX xxxxx
2.3.1. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx podle 2.1.1.:
Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x IF xxxxx (Xxxxxxx 3):
1/4 xxxxx (X/4), 1/2 xxxxx (X/2), xxxx (X) x xxxxxxxxxxx xxxxx (2T)
2.3.2. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx sklíčka xxxxx 2.1.2.:
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x XX pufru. Pracovní xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx s optimální xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx 2.1.1. x 2.3.1.
Xxxxxxxxxx xxxxxx resuspendované pelety
T = xxxx
&xxxx;
&xxxx;
XXXX
&xxxx;
X/4
&xxxx;
X/2
&xxxx;
X
&xxxx;
2X
&xxxx;
(xxxxxxxxxxx zředění xxxxxxxx)
&xxxx;
xxxxxx 1
&xxxx;
∙1
&xxxx;
∙2
&xxxx;
∙3
&xxxx;
∙4
&xxxx;
∙5
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxxxx vzorku 1 xxxx xxxxxx 2
&xxxx;
∙6
&xxxx;
∙7
&xxxx;
∙8
&xxxx;
∙9
&xxxx;
∙10
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
Xxxxxxx 2
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx podle 2.1.2. a 2.3.2
&xxxx;
&xxxx;
XXXX
&xxxx;
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxxxx
&xxxx;
xxxxxxxx
&xxxx;
1/10
&xxxx;
1/100
&xxxx;
1/1000
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
(xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx peletu)
 
vzorek 1
&xxxx;
∙1
&xxxx;
∙2
&xxxx;
∙3
&xxxx;
∙4
&xxxx;
∙5
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
&xxxx;
xxxxxxxx xxxxxx 1 xxxx xxxxxx 2
 
∙6
 
∙7
 
∙8
 
∙9
 
∙10
 
 
 
 
 
 
2.3.3. Xxxxxxxx xxxxxxx vyložíme na xxxxx savý xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx okénka xxxxxxxxx xxxxxxx(x) xxxxxxxx. Xx xxxxxx FITC xxxxxxxx xxxxxxxxx pufr XXX. Xxxxx antiséra xxxxxxxx xx xxxxxx musí xxxxxxxxx objemu xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.3.4. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 30 xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx.
2.3.5. Xxxxx antiséra xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x podložní xxxxxxx xxxxxxx opláchneme XX xxxxxx. Omýváme 5 minut x xxxxxxx XX xxxxxXxxxx x xxxx 5 xxxxx v XX xxxxx. (Xxxxxxx 3).
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx odstraníme.
2.3.6. Xxxxxxxx sklíčka xxxxxxxx xx xxxxx savý xxxxx.
Xxxxxxxxx okénka x xxxxxx x XXXX xxxxxxxxx xxxxxxx konjugátu XXXX použitým xxx xxxxxxxxx titru. Objem xxxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxx odpovídat xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.3.7. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 30 minut xxx xxxxxxxx teplotě.
2.3.8. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx sklíčka. Xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx 2.3.5. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx pečlivě odstraníme.
2.3.9. Xx xxxxx okénko xxxxxxxxxxxx 5 - 10 µl 0,1 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (Dodatek 3) xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx krycí sklíčko.
2.4. Xxxxxxxxx XX xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx prohlížíme xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx vhodnými xxx xxxxxxxx XXXX, xxx xxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxx 500 - 1&xxxx;000x. Xxxxx okénko xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xx obvodu.
Nejprve xxxxxxxxxx xxxxxxxx sklíčka x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Buňky xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxx plně xxxxxxxx. Upozornění: Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx test xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx prohlížíme xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk x xxxxxxxx x xxxxxxxxx XXXX. Xxxxxxxxxxxxx buňky x kontrolním okénku XXXX xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx vazbu xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx: Xxxxx xxxx pozorujeme, xx třeba xxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx jasně xxxxxxxxxxxxx xxxxx x charakteristickou xxxxxxxxxx původce hnědé xxxxxxx. Intenzita xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx pozitivnímu xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx slabou fluorescencí xxxxxxxx ohled, ledaže xx bylo takových xxxxx přítomno velmi xxxxx (xxx vyhodnocení xxxxxxxx XX testu).
2.4.1. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX xxxxx
x) Nejsou-li xxxxxxxx xxxxx fluoreskující xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx morfologií, xx XX test xxxxxxxxx.
x) Xxxx-xx xxxxxxxx xxxxx fluoreskující xxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx morfologií, xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxx mililitr (xxxxxxx X) resuspendované pelety (Xxxxxxx 4).
Xxxxxxx xxxxxxxx x hodnotě asi 103 buněk xx xxxxx mililitr resuspendované xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx detekce XX xxxxx,
- x xxxxxx s X &xx; 103 xxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxxx pelety se xxxxxxxx XX xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx,
- x xxxxxx x X &xx; 103 xxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx XX xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx
x) Je-li xxxxxxx xxxxxx počet (&xx; 105 xxxxx xx 1 xxxxxxxx) xxxxxxx xxxx slabě xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx antiséra, měl xx xxx xxxxxxxx xxxxx test:
- xxx xxxx založený xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx principu xxxx
- opakovaný XX xxxx, xxx x xxxxxx antisérem xxxx x desetinásobným zředěním xxxxxx.
3. XXXXX xxxx
(xxxxx Xxxxxxxxx-Xxxxxx et al., 1995)
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxxx pro xxxx 3/xxxxxx 2. Titr xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx 106 xx 1 xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx používat xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx NUNC-Polysorb.
Do testu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (XXX).
Xxxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxx &xx; 106 xxxxx na 1 xx x xxxxx xxxxxx xxxx/xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x vzorku, xxxxx xxxxxxxx od vzorků xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3.1. Xxxxxxxxxxxx 100 - 200 µx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx.
Xx xxxx čtyř xxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx 100 °X. Xxxxxxxxxxxxx xxx položíme xx xxx.
3.2. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx dvojnásobně xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pufru (Xxxxxxx 5). Xxxxxxxxxx.
3.3. Xx xxxxxxx dvou xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xx 100 µx. Xx dobu xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx 37 °X xxxx xxxx xxx xxx xxxxxxx 4 °X.
3.4. Xxxxxxxx z xxxxx zcela xxxxxxxxxx. Xxxxx vymyjeme xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (PBS) x Xxxxxxx (Dodatek 5); xxxxxxxx mycí xxxxxx xx x xxxxxxx měl xxxxxx xxxxxxx 5 xxxxx.
3.5. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) pufru (Xxxxxxx 5). Do xxxxx xxxx xx 100 µx ředěného antiséra. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx při xxxxxxx 37 °C.
3.6. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Jamky xxxxxxxx xxxxxxx způsobem, xxx xx xxxxxxx xxxx (3.4.).
3.7. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx fosfatasy x xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxx. Xx xxxxx dáme 100 µI xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx dobu xxxxx xxxxxx při xxxxxxx 37 °X.
3.8. Xxxxxxxx z jamek xxxxx odstraníme. Xxxxx xxxxxxxx stejným xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxx (3.4., 3.6.).
3.9. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx alkalický xxxxxx fosfatasy (Xxxxxxx 5). Dáme 100 µx xx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx 30 xxxxxxxx x 1 xxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxx teplotě.
3.10. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 409 nm.
Vyhodnocení xxxxxxxx XXXXX xxxxx:
XXXXX xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xx-xx xxxxxxx xxxxxxx (OD) vzorku &xx; 2 x XX xxxxxxxxx xxxxxxxx.
XXXXX xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx, xx xx xxxxxxx hustota (XX) xxxxxx &xx; 2 x XX negativní xxxxxxxx.
4. XXX xxxx
(xxxxx Xxxxx xx xx., 1993)
Xxxxxxxxxx: U xxxxx xxxxx přípravy xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x souvislosti x PCR xxxx xxx xxxxxxxxx špičky xxxxx x filtrem.
Jako xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx kmene xxxxxxx xxxxx xxxxxxx rasy 3/xxxxxx 2 x xxxxxxx 106 xxxxx xx 1 ml . Xxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jako x xxxxxx(x).
4.1. Xxxxxxxxxxxx 100 µx resuspendované xxxxxx do xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxx xxx 90 µx resuspendované xxxxxx xx mikrozkumavky, xxxxx xxxxxxxx 10 µl 0,5X XxXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx převracením mikrozkumavky.
4.2. Xxxxxxxxx xx xxxx 4 xxxxx xxx xxxxxxx 100 °X. Xxxxxxxxxxxxx xxx ihned xxxxxxxxxx xx led.
4.3. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx. 1/10 a 1/100 (x případě xxxxxxx x xxxx) xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx ultračisté vodě (XXX).
4.4. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx reakční xxxx pro XXX (Xxxxxxx 6) tak, xx xxxxxxxxx následující xxxxxx v tomto xxxxxx:
Xxx xxxxxxx xxxxx 50 µl
složka koncentrace xxxxxxxx konečná
sterilní xxxxxxxxxxx xxxx xxxx UPW 30,8µx - 33,8µx
10 x XXX xxxx 5,0µx 1 x
d-ATP 1,0µx 0,2 mM
d-CTP 1,0µx 0,2 xX
x-XXX 1,0xx 0,2 xX
x-XXX 1,0µx 0,2 mM
Primer XXX-1 (20 µM) 2,5µx 1 µx X
Xxxxxx X-2 (20 µX) 2,5µl 1 µx M
Taq-polymeráza (5X/1 µx) 0,2µX 1,0 X
______________________________________________________________
Xxxxxxx xxxxx 45 µx - 48 µx
Xxx xxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx každé xxxxxx xxx xxxxxxxxxx počet xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx x 45 µl - 48 µx směsi xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx PCR.
Mikrozkumavky x xxxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxx na led.
Pro xxxxxxx objem 25 µx:
Xxxxxxxx xxxxxx odpovídajícím xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.5. XXX xxxxxxxxxxx
4.5.1. Xxxxxxxxx: Mikrozkumavky x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (velmi krátce) xxxxxxxxxx. Do mikrozkumavek x reakční xxxxx XXX xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx 2 - 5 µx xxxxxx, vodní kontrolu x pozitivní xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx XXX.
4.5.2. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
1 cyklus
a) 2 xxxxxx xxx xxxxxxx 96 °X; denaturace xxxxxxx
50 cyklů
b) 20 xxxxxx xxx xxxxxxx 94 °X; xxxxxxxxxx
x) 20 sekund při xxxxxxx 68 °X; xxxxxxxxx (xxxxxxx) primerů
d) 30 sekund xxx xxxxxxx 72 °X; xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
1 xxxxxx
x) 10 xxxxx xxx xxxxxxx 72 °X; xxxxx prodlužování;
1 xxxxxx
x) xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4 °X.
Xxxxxxxxxx: Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Perkin Xxxxx 9600. U xxxxxx termocyklerů xx xxxxxxxx xxxxx vrstva xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx zkumavkách PCR x nebo změna xxxxxx kroku b), x) a x) x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.5.3. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx. Analyzujeme XXX xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx ihned, xxxxxxx mikrozkumavky xxx xxxxxxx x xxxxxx xxx xxx teplotě 4 °X a xxx xxxxxxx za xxxxx xxxx je xxxxxxxxxx při xxxxxxx - 18 °X.
4.6. Xxxxxxx PCR produktu
Fragmenty XXX xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x obarvením xxxxxxxxxxxxxxxx.
4.6.1. Xxxxxxxxxx xxxxxx agarózový xxx tak, xx xxxxxxx opatrně xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx tris-octanovém xxxxx (TAE).
4.6.2. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxx 50-60 °X, xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx hřeben. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
4.6.3. Xxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xx xxxxx XXX xxx, xxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx 2 - 3 mm.
4.6.4. Xx Parafilm xxxxxxxx xxxxx nanášecího pufru x xxxxxx 3 µx. Xxxxxxx 12 µx produktu XXX xx vzorků, x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx zamícháme xxxxxx xxxxxxx do xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx mohou xxx xxxxxxxx x závislosti xx kapacitě xxxxx x agarózovém xxxx.
4.6.5. Xxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxx jamky xxxx pro porovnání xxxxxxxxx XXX xxxxxx.
4.6.6. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx sítě. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 5-8 X/xx, pokud xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nacházet xx xxxxxxxxxxx xx 1 cm od xxxxxx xxxx.
4.6.7. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x namáčíme xxx po xxxx 30 - 45 xxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx: Xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx silně xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx!
4.6.8. Xxxxxxx x xxxx vymýváme x xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx 10 xx 15 minut.
4.6.9. Xxxxxxxx(x) xxxxxxxx(x) DNA xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx transiluminací. XXX xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx XXX-1 x X-2 xx délku 288 xxxx xxxx. Xxxxxxxxx x XXX markerem x x xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx: Xxxxx (=negativní) xxxxxxxx xxxx xxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx pozitivní, xxxx xxx xxxx xxxxxxxx.
4.6.10. Xx účelem xxxxxxxxxxx xxx případně xxxxxxxxxxxxxxx.
4.6.11. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx potvrdíme xxxxxxxx xxxxxxxxxxx enzymem (XXX).
4.7. Xxxxxxx restrikčním xxxxxxx (XXX)
4.7.1. 8,5 µx XXX xxxxxxxx (4.5.3.) xxxx do xxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx 1 µx 10x xxxxxxxxxx xxxxx a 0,5 µx xxxxxxxxxxxx xxxxxx Xxx 11.
4.7.2. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx xxxxxx. Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kapičky, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx odstředíme x xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxx hodinu xxx xxxxxxx 37 °X.
4.7.3. Xxxxxxxxxx fragment XXX xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx (4.6) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxx:
XXX test xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 288 xx x xxxxx fragment byl xxxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kmene xxxxx xxxxxxx.
XXX xxxx xx pozitivní, jestliže xxx xxxxxxxx 288 xx xxxxxxxx x xxxxxxx REA xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx identický x xxxxxxxxxx kontrolním xxxxxx xxxxx xxxxxxx.
5. Test xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx Xxxxxxxxxxx xx al. 1996).
5.1. Xxxx xx provádí xxxxxxx xxxxxxxxx technikou xxxxxxx, xxxx.:
x) Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx desetinná xxxxxx, xxx. 1/10 x 1/100 nebo xxxx resuspendované pelety x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (50 - 100 µx) resuspendované xxxxxx x každého xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXXX xxxxxx (Xxxxxxx 7) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx se xx xxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx 10µx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxx plamenem sterilizujeme.
b) Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (50 - 100 µx) xxxxxxxxxxxxxx pelety xxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXXX xxxxxx x xxxxxxxxx tyčinkou xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXXX.
5.2. Xxxxxxx xxxxxxxxx technikou xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xxxx 3/xxxxxx 2 x xxxxxxx 106 buněk x 1 xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx SMSA xxxxxx.
5.3. Plotny inkubujeme xxx teplotě 28 °X. Xx 3 xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Při xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xx 6 xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx izolátů xxxxxxx xxxxx hniloby xxxx xxxxxx bílé, xxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxx zabarvený s xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
5.4. Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx universálním xxxxx (Xxxxxxx 1).
5.5. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (oddíl XX.4.1) x xxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx patogenity (Xxxxx XX.4.3.).
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx médiu.
Test xx xxxxxxxxxxx živném médiu xx xxxxxxxxx, pokud xx šesti xxxxx xxxxx izolovat xxxxx xxxxxxx bakterií xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx kolonie xxxxxxx xxxxx hniloby, xx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxx jiných xxxxxxxx x xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx charakteristické xxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx.
Xxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx byly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxxx
(xxxxx Janse, 1988)
6.1. Xxx xxxxx vzorek xxxxxxxxx 10 xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx semenáčků xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx po dobu 24 xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2. 100 µx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxxxxxx xxxxxxxx. Inokulujeme xxxxxx xxxx xxxxxxxx x xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx.
6.3. Xxxxxxx technikou inokulujeme 10 xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kmene původce xxxxx hniloby xxxx 3/xxxxxx 2 x xxxxxxx 106 xxxxx x 1 xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx kontrolu x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx negativní xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxx od xxxxxxxxx.
6.4. Xxxxxxxxx rostliny xxxxxxx xxxx xxxx při xxxxxxxxx 22 °X xx 28 °X x xxx xxxxxx xxxxxxxxx vzdušné xxxxxxxx xx xx 4 xxxxx. Xxxxx rostliny xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx x (xxxx) xxxxxx.
6.5. X infikovaných xxxxxxx xxxxxxxxx izolaci (xxxxx XX). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x charakteristickou xxxxxxxxxx (xxxxx XX.4.1.) x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxx XX.4.3.).
6.6. X případě xxxxxxx přezkoumáme x xxxx testovaných xxxxxxx, xxx nevykazují žádné xxxxxxxx infekce, xxx xxxxxxxx x infekci xxxxxxx. Z xxxxx xxxxxxxxx rostliny xxxxxxxxx 2 xx nad xxxxxx xxxxxxxxxx 1 xx xxxxxx úsek xxxxxx. Xxxxxxxx části xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxx zřeďovací xxxxxxxxx (xxxxx XXX.5.1.). V xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxx II.4.1.) a xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (xxxxx XX.4.3.).
Xxxxxxxxxxx výsledku biotestu:
Biotest xx negativní, jestliže xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx původcem xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xxx detekován x xxxxxxxxxxx kontrolách.
Biotest xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx původcem xxxxx xxxxxxx.
7. Obohacovací xxxxx
(xxxxx X.X. Xxxxxxxxxxx et xx., 1996)
7.1. Vložíme 100 µl xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx do 3 xx modifikovaného xxxxxxx xxxxx SMSA (Xxxxxxx 7).
7.2. xxxxxxxxxx po xxxx 48 xxxxx, x žádném případě xxxx xx xxxx xxx 72 hodin, xxx teplotě 28 °X, x xx xxx xxxxx nasazeném xxxxx mikrozkumavky xx xxxxxx xxxxxxx.
7.3. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx množství xxx XX test (xxxxx xxxxx, xxx 2), pro XXXXX xxxx (xxxxx xxxxx, xxx 3) x/xxxx XXX xxxx (xxxxx xxxxx, bod 4).
8 Xxxx xxxxxxxxxx
Xxx xxxxx XX.4.3.
Xxxxxxx 1
Xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx původce hnědé xxxxxxx
Xxxxx agar (XX)
xxxxx xxxx (Xxxxx) 23 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 x
X 1xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 0,5 litru xxxxxx xxxxx.
Xxxxx rozpustíme.
Sterilizujeme 15 minut x xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 121 °X.
Xxxxxxxxx xx 50 °X. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx-xxxxxx-xxxxxxxxx agar (XXXX)
xxxxxxxxx xxxxxxx (Difco) 5 x
xxxxxxxxxxx (Xxxxx) 5 x
X(+)-xxxxxxx (xxxxxxxxxx) 10 x
xxxxxxxxx (Xxxxx) 15 g
destilovaná xxxx 1 x
X xxxxxxxxxxxx xxxxx připravujeme 0,5 xxxxx objemu xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx 15 xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 121°X.
Xxxxxxxxx na 50 °X. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx-xxxxxxxxx xxxx (XXX)
xxxxxxxxx 20 x
xxxxxx 5 x
X2XXX4 0,5 x
XxXX4.7X2X 0,25 x
xxxxxxxxx (Xxxxx) 15 g
destilovaná xxxx 1 l
V xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 0,5 litru xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxx potřeby xxxxxxxx xX xx 7,2 - 7,4.
Sterilizujeme 15 xxxxx x xxxxxxxxx xxx teplotě 121 °X.
Xxxxxxxxx na 50 °X. Provedeme rozliv xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx médium
kyseliny xxxxxxxxxx (=kasein xxxxxxxxxx) (Xxxxx) 1 g
baktopepton (Xxxxx) 10 x
xxxxxxxx 5 x
xxxxxxxxx (Xxxxx) 15 g
destilovaná voda 1 x
X jednolitrové xxxxx xxxxxxxxxxxx 0,5 xxxxx xxxxxx média.
Látky xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx 15 minut x xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 121 °X.
Xxxxxxxxx xx 50 °C.
Přidáme xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (Xxxxx) xx xx dosažení xxxxxxx xxxxxxxxxxx 50 xx/x.
Xxxxxxxxx rozliv ploten.
Dodatek 2
Xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx: 50 xX fosfátový xxxx, xX 7,0
Xxxxx xxxx xx používá pro xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xx2XXX4 4,26 x
XX2XX4 2,72 g
destilovaná xxxx 1 x
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xX. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx alikvotaci.
Sterilizujeme x xxxxxxxxx xx xxxx 15 minut xxx xxxxxxx 121 °X.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx PCR xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx 5% xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 40.000 MWT (XXX-40), xxx xx xxxxxx xxxxxx inhibice xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx molekulami v xxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx pomocí Waring-Blender xxxx Ultra-Turrax k xxxxxxxx xxxxxxxx pletiva xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx deflokulačního xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxxxxx.
xxxxxxxxx xxxxxx 0,5 x/x
xxxxxxxxxxx XX-xxxxxxx 1,0 xx/x
xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx 1,0 g/1
Autoklávujeme xxxxxxxx. Xxxxxxxxx až xx dosažení žádané xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxx: 10 xX xxxxxxxxxxx xxxxx, xX 7,2
Tento xxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx
Xx2XXX4 . 12 X2X 2,7 g
KH2PO4 . 2 X2X 0,4 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 x
Xxxxx rozpustíme x xxxxxxxxxxxxx xX. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx 15 xxxxx xxx teplotě 121 °X.
Xxxxxxx 3
Xxxxxxxx pro XX test
IF-pufr: 10 xX xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx fosfátem (XXX), xX 7,2
Xxxxx xxxx xx používá xxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx2XXX4 .12 X2X 2,7 x
XX2XX4 . 2 X2X 0,4 x
XxXX 8,0 x
xxxxxxxxxx xxxx 1 x
Xxxxx rozpustíme x xxxxxxxxxxxxx pH. Xxxxx potřeby provedeme xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx 15 xxxxx xxx xxxxxxx 121 °X.
XX xxxx Xxxxx
Xxxxx xxxx xx xxxxxxx x omytí xxxxxxxxxx xxxxxxx. X XX xxxxx xx xxxxxxx 0,1 % Xxxxx.
0,1 X glycerin xxxxxxxxx xxxxxxxx, xX 7,6
Xxxxx xxxx se xxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx na okénkách XX podložního
sklíčka.
Na2HPO4. 12 X2X 3,2 g
NaH2PO4. 2 H2O 0,15 x
xxxxxxxx 50 ml
destilovaná xxxx 100 xx
Xxxxxxx 4
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x XX testu
Plocha (X) xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx sklíčku x xxxx okénky
= πX2/4,
xxxxxxx X = xxxxxx xxxxxx (x).
Xxxxxx (x) xxxx xxxxxxxxx
= πx2/4,
xxx x = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx (2);
x xxxxxxxxx buď xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:
x = πx2/X2X2 x 4
xxx x = xxxxxxxxxx xxxx (xxxxxx xx xxxx okuláru xxxxxxxxxx a může xxx hodnotu od 8 do 24),
X = xxxxxxxx koeficient (1 xxxx 1,25)
G = (100xxxxxxx, 40xxxxxxx xxxx.) zvětšení objektivu;
ze xxxxxx (2):
x = xxxxxxxxx 4x/π;
xx xxxxxx (3):
x = odmocnina 4x πx2/X2X2 x 4/π = x/XX.
Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx - x.
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxx - X.
X = x X/x
Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx (X).
X = C x X x 1000/y,
kde x = xxxxx xxxxxx xx okénku xxxxxxxxxx sklíčka
F = xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx 5
Xxxxxxxx xxx XXXXX xxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, pH 9,6
Na2CO3 6,36 g
NaHCO3 11,72 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 x
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx pH. Podle xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx 15 xxxxx xxx xxxxxxx 121 °X.
Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, lze přidat xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,2 % jako xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (PBS), xX 7,4
XxXX 80 x
XX2XX4 2 g
Na2HPO4 x 12 X2X 29 g
KCl 2 x
xxxxxxxxxxx xxxx 1 x
Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xX. Podle xxxxxxx xxxxxxxxx alikvotaci.
Sterilizujeme x autoklávu po xxxx 15 minut xxx xxxxxxx 121 °X.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx - Xxxxx - xxxxxxxxx fosforečnanem (PBS-T)
10 x PBS 100 xx
10% Xxxxx 20 5 xx
xxxxxxxxxxx voda 895 xx
Xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxx (xxxx xxx xxxxxx čerstvý)
10 x XXX 10 xX
xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 44.000 XXX(XXX-44) 2 x
10% Tween 20 0,5 g
sušené mléko 0,5 g
destilovaná xxxx xx 100 xx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztok xxxxxxxxx, xX 9,8
xxxxxxxxxxxx 97 xx
xxxxxxxxxxx voda 88 xx
Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx XXx xxxxxxxx xx xX 9,8.
Doplníme xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx 1 xxxxx.
Xxxxxxx 0,2 x MgCl2.
V xxxxxxx 15 ml xxxxxxx xxxxxxxxxx 2 tablety xxxxxxxxxxx fosfatázy (5 xx) (Sigma).
Dodatek 6
Xxxxxxxx xxx PCR xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx OLI-l 5' - XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX-3'
Xxxxxx X-2 5'- CCCACTGCTGCCTCCCGTAGGAGT-3'
potřebné xxxxxxxxxx xxx Xxxx xx al., 1993.
Xxxxxxx 7
Xxxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxxx živných médií x xxxxxxxxxxx testy
Selektivní xxxxxx XXXX (Xxxxxxxxxxx, 1994, xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xx xx., 1996)
Xxxxxxxx xxxxxx
xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxx) 1 x
xxxxxxxxxxx (Xxxxx) 10 x
xxxxxxxx 5 ml
agar (Xxxxx) 15 x
xxxxxxxxxxx voda 1 x
X litrové xxxxx připravíme xxxxx 0,5 x substrátu.
Látky xxxxxxxxxx x zkontrolujeme xxxxxxx xX. X xxxxxxx xxxxxxx před xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xX xx 6,5. Xxx pH xxx 7,0 xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx dobře.
Sterilizujeme x autoklávu xx xxxx 15 minut xxx xxxxxxx 121 °X.
Xxxxxxxxx na 50 °X.
Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přidáme následující xxxxx (všechny od xxxxx Xxxxx):
xxxxxxxxxx xxxxxx 5 xx/x
xxxxxxxxx-X-xxxxxx 100 xx/x (xxx 600&xxxx;000 xxxxxxxx) Sigma P-1004
bacitracin (*) 25 xx/x (xxx 1250 xxxxxxxx) Xxxxx B-0125
chloramfenikol 5 xx/x Xxxxx C-3175
penicilin-G 0,5 xx/x (xxx 825 jednotek) Xxxxx X-3032
xxxxxxxxxxxx xxxx 50 xx/x
Xxxxx xxxxxxxxxx v 70% etanolu xx xxxxxxxxxxx uvedené xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx, xxxx xx např. xxxxxxxxx X xxxx xxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXXX xxxxx (Xxxxxxxxxxx xx al., 1996)
Xxxxxxxx xxxx u xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx SMSA, avšak xxx xxxxx.
Xxxxxxxx alikvotní xxxxxxxx 3 xx xx 30 ml xxxxxxxxxxxxx univerzálních xxxxxxxx.
(*) X případě xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 300 xxx, xxxx xx xxx bylo xxxxxxxxx ovlivněno xxxxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx, X. X. - Xxxxxxxx, L. - Xxxxxx, A.: Xxxxxxxxxxx xx races in Xxxxxxxxxxx solanacearum . Xxxxxxxxxxxxxx 52 (1962):726.
Xxxx, X. - Elizabeth, X. - Sequeira, X.: Xxxxxxx diversity xx Pseudomonas xxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xx restriction xxxxxxxx xxxxxx polymorphism xxxx XXX xxxxxx xxxx specify xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx Xxxxx-Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx 2 (1989): 113 - 121.
Xxxxxxx, X. X. - XxXxxx, X. X.: Xxxxxxxxxx xx Clavibacter michiganensis xxxxx. sepedonicus xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx Xxxxxx Journal 72 (1995): 133 - 142.
Xxxxxxxxxxx, X. G. xx al.: Xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx methods xxx the xxxxxxxxx xx Pseudomonas xxxxxxxxxxxx (Xxxxx) Smith in xxxxxx xxxxx xxxxxxxx. XXXX Xxxxxxxx 26 (1996).
Xxxxxxxxxxx, X. X.: Xxxxxxxxxxxx xx x xxxx-xxxxxxxxx xxxxxx for xxx xxxxxxxxx and xxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. XXXXX Xxxxxxxxx Xxxx Xxxxxxxxxx 10 (1994): 3 -5.
Hayward, X.X.: Characteristics xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx 27 (1964): 265 -277.
Xxxxxxx, X.X.: Systematic xxx phylogeny xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx. In: Xxxxxxxxx Xxxx: xxx xxxxxxx xxx xxx xxxxxxxxx agent, Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxx. X. X. Hayward and X. X. Hartman) XXXX Oxford, 1994: 127 - 135.
Xxxxx, X. D.: X xxxxxxxxx xxxxxx xxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx potato xxxxxx xxx xxxx xxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxx specificity. XXXX Xxxxxxxx 18 (1988): 343 - 351.
Xxxxx, X. X.: Xxxxx- xxx intraspecific xxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx solanacearum xxxxxxx xxxxx whole xxxx xxxxx acid xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx 14 (1991): 335 - 345.
Xxxxxx, A.: Xxx xxxxxxxxxxxx of xxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Phytopathology 64 (1954): 293 - 295.
Xxxxxxx, X. X. - Stead, X. X.: Methods xxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. (T. X. Xxxxxx xx.) Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Publications, Xxxxxx 1987, 216 x.
Xxxxx, X. X. et xx.: Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx-XXX fingerprinting xx xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx. xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx 85 (1995): 528 - 536.
Lozano, X. X. - Xxxxxxxx, X.: Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xx Xxxxxxxxxxx solanacearum by x leaf xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx 60 (1970): 838
Xxxxx, X. X. xx al.: Xxxxxxxx 16S xxxxxxxxx XXX targeted oligonucleotide xxxxx against Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. sepedonicus. Xxxxxxxx Journal xx Xxxxxxxxxxxx 39 (1993): 1029-1034.
Xxxxxxxx-Xxxxx, X. et xx.: Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, the xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx. Xxxx and Xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx 7 (1995): 67 - 79.
Xxxx, X. E. xx al.: Xxxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx solanacearum, X. xxxxxxx, X. xxxxxxxx and xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx partial 16X xXXX xxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx detection xx polymerase xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx of Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx 139 (1993): 1587 - 1594.
Xxxxx, X. J. xx xx.: Xxxxxxx xxxxxxxxx of Burkholderia xxxxxxxxxxxx (synonym Pseudomonas xxxxxxxxxxxx) xxxx 3 xx Kenya. Applied xxx XxxxxxxxxxxxX Microbiology 61 (1995): 4262 - 4268.
Xxxxx, X. X.: Techniques xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx: Techniques xxx xxxxx xxxxxxxxx of xxxxx xxxxxxxxx (xxx. X. X. Xxxxxx xxx X. Xxxxxxxx). Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, Xxxxxx 1992a, x. 76 - 111.
Stead, X. X.: Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx Xxxxxxxxxxx xxx. using xxxxxxxx xxxxx acid xxxxxxxx. International Xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx 42 (1992b): 281 - 295.
Xxx Beuningen, X. - Xxxxx, X. - Janse, X. X.: Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx michiganensis subsp. xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx to fluorescent xx-xxxx xxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxx a 16S xXXX xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xüxxxxxxxxxxxxxxxxx 2 (x).

Příloha x. 2 x xxxxxxxx č. 331/2004 Sb.

A. Xxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxxxx výskytu xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx hniloby xxxxx §3 xxxx. 12

Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx x původce xxxxx xxxxxxx xxxxx §3 xxxx. 12 xxxxxxxx:

x) xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti x xxxxxxx xxxxx hniloby x xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx x v xxxxxxxxx bramboru:

- xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx1) (xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx na brambory xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx),

- xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x vzorkovaných xxxxxxx x xxxxxxxxx,

- počet x xxxxxxxx (x xxxxxx) xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx partií v XX xxxxxxxxxx xxxx xx XX xxxxxxxxxx xxxx,

- xxxx xxxxxx x počet xxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx hlíz x xxxxxxxx xxxxxxxxx;

x) xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxx xxxxxxxxxxxxxx podniků,

- xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx rostlin (x xxxxx),

- xxxxx odebraných xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx;

x) xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx hostitelských xxxxxxx xxx je xxxxxxx x xxxxx, včetně xxxxxxxxxxxxx rostlin z xxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx:

- počet xxxxxxxxxxxxxx podniků, xxxx x xxxxx (x xxxxx) prohlédnutých xxxxxxx,

- xxxxx odebraných vzorků xxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxx hnědou xxxxxxx - počet x xxxxxxxx vodních xxxxxx, xxxxx byly xxxxxxxxx xxxxxx rostlin;

d) xxx zjišťování výskytu xxxxxxx hnědé hniloby xx vodních zdrojích xxxxxxxxxxx k závlaze xxxxxxxxxxxxx rostlin x x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx brambory:

- xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx, doba xxxxxx, druh provedených xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx;

X. Xxxxxxxx testovaných xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxx testování

1. Xxxxxxx-xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx testu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, provedeného xxxxx xxxxxxx uvedeného v xxxxxxx x. 1, xxxx být xx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx tohoto xxxxxxxx xxxxxx postupem xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx:

- celá xxxxxx xxxxxxx, z níž xxx xxxxxxx vzorek, xxxx část této xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x etiketou, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, x

- veškeré xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx.

2. X případě xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xx dobu xxxxxxx xxxxxx od xxxxxxxx oznámení xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx stanoveným x §3 xxxx. 11 xxxxxxxx x xxxxxxx způsobem konzervovány:

- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxx 1.,

- xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx naočkovaných xxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx x

- xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

3. Xxxxxxx-xx podezření x xxxxxxx původce hnědé xxxxxxx na základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxxx č. 1, x xx xxxxx xxxxxxxxx případech, xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx být až xx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx tohoto xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx podle xxxxxxx x. 1. xxxxxxxx a vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx:

- xxxx xxxxxx xxxxxxx, x xxx xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxx partie x xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxx, xx-xx xx xxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx xxxxxx rostlin, xxxxx xx xxxxxx zůstal,

- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxx materiál, xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx),

x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

4. X případě xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx měsíce xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx způsobem xxxxxxxxxx x §3 xxxx. 11, popř. x §5 odst. 3 x xxxxxxx způsobem xxxxxxxxxxxx:

- materiál specifikovaný x bodě 3., xxxxxxxx vzorek xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx, naočkovaných xxxxxxxxx x hlízy xxxx xxxxxxxx, x

- xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby.

Příloha x. 3 x xxxxxxxx č. 331/2004 Xx.

Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx pravděpodobného xxxxxxxx původcem xxxxxxxxxxxxxx xxxx původcem xxxxx xxxxxxx a rozsahu xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx

1. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x) xx xxxxxxxx xx

- xxxxx xxxxxxxx,

- x xxxx byly xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx bramboru, xxx xxxx klonově příbuzné x rostlinami xxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx hnědé xxxxxxx,

- x němž byly xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx rajčete xxxxxxx x xxxx partie xxxxx xxxx sadby xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,

- v xxxx xxxx nebo xxxx pěstovány rostliny xxxxxxxx, x x xxxxxxx původce xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx §4 xxxx. 3,

- x xxxx byly xxxx xxxx pěstovány rostliny xxxxxxxx, x x xxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx také xxxxxxx, x xxxxx leží x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx produkce, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, kde xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx použity xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx,

- xx xxxx xxxx x xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx zdroje, x xxxxx bylo xxxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- na němž xxxx k xxxxxxx xxxx postřiku xxxxxxx xxxxxxxxx voda ze xxxxxx, používaného x xxxx xxxx x xxxxxxx xxxx postřiku xxxx xxx xxxx xxxxx produkce, u xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xx je zamořeno xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx xx xx zamoření xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,

x

- xxxxxxxxxx vodu, xxxxx xxxx xxxxxxx k xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx xxxx místa xxxxxxxx, x xxxxx xxxx xxxxxxxxx, že xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxx tato xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

2. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx hnědé xxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x) xx nutno xxxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxxxxxx rostliny xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, označené xx xxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x),

- místo xxxxxxxx xxxx xxxxxxx s xxxxxxx pěstitelským xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx za zamořené xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x), xxxxxx těch, které xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x vybavení x xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx používány xxxxxxxxxx xxxxxx, x xx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx smluvního xxxxxxxx,

- hostitelské rostliny xxxxxxxxx x xxxxx(-xxx) xxxxxxxx xxxxxxxx(-xxx) x xxxxxxxxxxxxx odrážce xxxx xxxxxxxxxxx se x xxxxxxx(-xxx) místě(-ech) xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx rostliny xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x) nacházely x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx místech xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxx,

- xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx,

- xxxxxxxx, xxxxxx, dopravní xxxxxxxxxx, xxxxx nebo jeho xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx přijít xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx označenými xx xxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 písm. x) xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 12 měsíců xxxx xxxxxxxx xxxxxx, pokud xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx rostliny, xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxx v xxxxxxxx xx stavbami xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, x to xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxxxxx x bodě 3 xxxxxxx x. 4,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx §6 xxxxxx klonový xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 písm. x), x u xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx správa xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx podle §76 xxxx. 2 zákona xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx, xx kterém xxxx xxxxxxxxxxx rostliny xxxxxxx x předchozí xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx nebo k xxxxxxxxxxx původem xx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 2 xxxx. b) xx xxxxxxxx xxxxxxxx hnědé xxxxxxx,

- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, označenou xxxxx §5 xxxx. 2 xxxx. x) xx zamořenou xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

3. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx možného xxxxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx původce xxxxx xxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x) xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxxxxxxx míst produkce, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx či jiné xxxxxxxxxxx rostliny,

- xxxxx xxxxxxx xxxxx užívání xxxxxxxx skladovaných xxxxxxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx, xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx rostliny xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxxxxxx xxxx existovalo xxxxxxxxx, xx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxx, na xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx pěstovány bezprostředně xxxxx povrchové vody xxxxxxxx podle §5 xxxx. 2 xxxx. x) xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx hniloby, xxxx které xxxxx xxx touto xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx,

- xxxxx xxxxxxxxxx zavlažovací nádrž, xxxxx je xxxxxxx x povrchovou xxxxx xxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 2 xxxx. x) xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

4. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx výskytu xxxxxxx kroužkovitosti xxxx xxxxxxx hnědé hniloby xxxxx §5 xxxx. 2 zahrnuje:

- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle §4 x §5, popřípadě xxxxx xxxxxx vzorků x xxxxx provádění xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx §3,

- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx §21 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx §12 xxxx. 1 zákona xxx každou xxxxxxx, xxxxxxx nebo partii xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx zamořenou,

- xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx uznaného rozmnožovacího xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx brambor a x případě xxxxxxx xxxx pro partie xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx rostlin,

- xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxx a rozsah xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx území, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zóny,

- xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx sklíček, infikovaných xxxxxxx lilku jedlého xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx kultury xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx původce xxxxx hniloby xx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx provedeno xxxxxxxxx xxxxxxxxx jejich přítomnosti,

- xxxx údaje x xxxxxxxxxxx výskytu původce xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, pokud xx xx Komise xxxxxx.

Příloha x. 4 x xxxxxxxx x. 331/2004 Xx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxx původce xxxxx xxxxxxx

1. Způsob xxxxxxxx s xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx zamořenou

S xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, označenou xx zamořenou podle §5 xxxx. 1 xxxx. x), xxxx xxx naloženo xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx §7 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxxxx x xxxx uvedených xxxxxxx:

x) xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx, xxx' xxxx.) xxx, aby nemohlo xxxxx xx xxxxxxx xxxx a x xxxxxxx šíření původce xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx; xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx hniloby xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxx takové skládky, x nichž je xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx půdu nebo xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx půdy;

b) x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx zpracování v xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx nejméně 75 °X po xxxx xxxxxxx deseti xxxxx, a následné xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx;

x) x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx prostřednictvím xxxxx x okamžité xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx průmyslové xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx němž jsou xxxxx xxxxxxxxx teplotě xxxxxxx 75 °C xx xxxx xxxxxxx xxxxxx minut xxxx, x případě xxxxxxxx x partií xx xxxxx České republiky, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, schváleným xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, který vylučuje xxxxx šíření xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx hniloby; xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx povolí xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx jen xx podniků xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx účelu schválených, x to xx xxxxxxx xxxxxxx, xx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx skladovacích xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx a že xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx x. 5,

x) x xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx silážováním xx silážní kukuřicí xx podmínky xxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx silážované xxxxxxxx; xxxxxxxxxxxxxxxx správa xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx před xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx vyloučí xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx,

x) xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx rostlinolékařskou xxxxxxx x xxx kterém xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx správou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx.

Xxxxxxxx xxx písm. x) xx možné použít x naložení s xxxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxx xxx x xxxxxxx, kdy nebylo xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x) až x). Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxx. x) x e) xxxxxxx rostlinolékařská správa xxxxxxxxxx Komisi x xxxxxxxx členským státům. Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx x) xx x) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx rostlinolékařskou xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

2. Xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

X partií hostitelské xxxxxxxx, xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x), musí xxx xxxxxxxx na xxxxxxx nařízení rostlinolékařské xxxxxx xxxxx §7 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx:

x) xxxxxxxxx xxxx bramboru xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxx přebalování xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxx podezřelých xx zamoření xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx povolí xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xx xxxx touto xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, x xx na xxxxxxx ověření, že x podniku xxxxxxx xxxxxx dezinfekce skladovacích xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx x že xxxxxx splňuje xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx odpadů, xxxxxxxxx x příloze x. 5,

x) v xxxxxxx hlíz xxxxxxxx xxxxxxx zpracování x xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx jsou hlízy xxxxxxxxx xxxxxxx nejméně 75 °X po xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx xxxxxxx hospodářskými xxxxxxx;

x) x případě hlíz xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx přímé x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx tepelné xxxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx teplotě xxxxxxx 75 °X xx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx nebo, x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx na xxxxx Xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx takovým xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, schváleným xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx vylučuje xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxx; přesun xxxxxx xxxxxxxxxxx ze xxxxxxxx povolí rostlinolékařská xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxx správou xxxxxxx x xxxx xxxxx na xxxxx Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx ověření, xx x xxxxxxx funguje xxxxxx dezinfekce xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxx x. 5,

x) x xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx podmínky xxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx rozvrstvení xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx; xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx před xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx konkrétní xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx,

x) xxxx xxxxxxxx, které xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx správou x xxx xxxxxx xxxxxxxxxx rozpoznatelné xxxxxx xxxxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx podmínek xxx xxxxxxxxxxx naložení s xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x písm. x) x x) xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx správa xxxxxxxxxx Xxxxxx x xxxxxxxx členským xxxxxx. Xxxxx má xxx xxxxxxxx xxx písmeny x) xx x) xxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxx o xxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx státu xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx plněním nařízeného xxxxxxxx.

3. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x posklizňových xxxxxx rostlin

Všechny rostliny xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xx xxxxxxxx z xxxxxxx nebo objektu x xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx x xxxx 1. písm. x) xxxx xxxxx způsobem, xxxxxx nedojde x xxxxxxxx zákonných ustanovení x ochraně xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx rostliny xxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx možno v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx uvedených x xxxxxx 1. x 2. xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx doby, xxx lze xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx tohoto xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx Komisi x ostatním členským xxxxxx.

4. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx území po xxxxxxxxx xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx

4.1. X xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx označené xx zamořené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. x), rostlinolékařská správa xx potvrzení xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti nařídí xxxxx §7 xxxx. 1 xxxx. x), xx xxxxxxxx pozemků x xxxxx xxxxx:

4.1.1. xx pozemku xxxxxxxxx xx zamořený xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 písm. x):

x) nesmí po xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx po xxxx potvrzení xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti pěstovat xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 2. xxxxxx/

xxxx

xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx úhor xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx (xxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxx na nich xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx x musí xx xxxx vyhledávat x xxxxxxxxxxx xxxxx rostoucí xxxxxxxx xxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 2. xxxxxx/;

x) xxx xxxxxxxx xxxxxxx x prvém xxxx, xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx. x), xxx xxx x podmínkou, xx

- xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxx na xxxxxxx písemné žádosti xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx byl xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx bramboru,

- k xxxxxxx xxxx použit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx1), x

- xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx konzumním xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx zpracování /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. xxxxxx/;

x) xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx území xxxxx bodu 4 x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx rotačního cyklu xxxxxx na tomto xxxxxxx xxxxxxxx brambor xxxx jinou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx použije-li rozmnožovací xxxxxxxx1), který xxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx zákona2), x xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx správu v xxxxxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxx provést xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti podle §3 xxxx. 3.

4.1.2. xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x), xx kterém xxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx období xxxxxxxx brambor; /§76 xxxx. 1 písm. x) bod 1. xxxxxx/;

4.1.3. xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx zamořený xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. x), na xxxxxx xxxxx x roce xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx brambor, xxx xx vegetačním xxxxxx, které xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxxx, xx

- xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx planě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx, a

- sklizeň xxxx určena xxxxx xx konzumním xxxxxx xxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx /§76 odst. 1 písm. x) xxx 1. zákona/;

4.1.4. xxxx po xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx rostoucí rostliny xxxxxxxx x jiné xxxxx rostoucí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 2. zákona/;

4.1.5. xxxx xxxxxxxxxx oddělenou xxxxxxxxxx x oddělené xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx materiálu1) xxxxxxxx xx ostatních rostlin xxxxxxxx /§76 xxxx. 1 písm. x) xxx 1. xxxxxx/;

4.1.6. xxxx způsobem xxxxxxxx x xxxxxxx x. 6:

- jednorázově xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx se zamořenou xxxxxx anebo x xxxxxx pravděpodobně xxxxxxxxx, x xx nejpozději xx té xxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxx x jinými xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx rostlin /§76 xxxx. 1 xxxx. x) zákona/;

- xxxxxxxx očistu xxxxxx, xxxxxxxxxx prostředků, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxx x xxxxxx předmětů xx xxxxxx xxxxxxx při xxxxxx hlíz xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx3) /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 2. xxxxxx/;

- xxxxxxxx po xxxx xxx úplných xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx výskytu původce xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx techniky xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx očistu x xxxxxxxxxx xxxxx strojů, xxxxxxxxxx prostředků, xxxxxxxxx xxxxx, obalů, palet x xxxxxx předmětů xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx, která xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx /§76 xxxx. 1 písm. x) xxx 2. xxxxxx/;

4.1.7. xxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx jen xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx1) /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. xxxxxx/;

4.1.8. nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx vysazovat xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx /§76 odst. 1 písm. x) xxx 1. zákona/;

4.1.9. xxxxx xxxxxx rozmnožovací xxxxxxxx1) xxxxxxxx ani xxx xxxxxxx xxxxxxx xx vegetačním období xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx období, v xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx /§76 odst. 1 xxxx. x) xxx 1. zákona/;

4.1.10. xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx území pouze xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx shledány xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx označené rostlinolékařskou xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx pravděpodobně zamořené xxx splnění xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx /§76 xxxx. 1 písm. x) xxx 1. xxxxxx/.

Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx balením xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx území Xxxxx republiky a xxxxxx k použití xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxxxxxxx xxxx karanténní xxxxx ihned xx xxxxxx úředního vzorku, xxxxx byla xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx sklizně rostlinolékařskou xxxxxxx xx výskyt xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx, s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

4.1.11. smí xxxxxxx xxxxxxxx bramboru xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx podmínky, xxxxxxxxx xxxxxxx rostlinolékařské xxxx xxxxxxxxxx země /§76 xxxx. 1 xxxx. a) xxx 1. xxxxxx/;

4.1.12. xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nářadí x mechanizační xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx pěstování, xxxxxxx, posklizňové xxxxxx, xxxxxxxx x skladování xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx kontaktu xx xxxxxxxxxx partiemi, xx xxxx xxxxxxx xxxx xx doby xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx toto xxxxx xxx řádné xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx uvedeným x xxxxxxx č. 6 /§76 xxxx. 1 xxxx. a) xxx 2. zákona/;

4.2. Při xxxxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. ve xxxxxxxxxx šlechtitelů xx xxx pěstování xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x pod.) xxxxxxxx xxxxxxx:

x) nesmí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x. 6 /§76 xxxx. 1 xxxx. x) zákona/;

b) xxxx další pěstování xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x rostlin testovaných xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx s negativním xxxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx X. xxxxxx/.

4.3. Xxxxxxxx planě xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxx 4.1.4. musí xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx likvidací xxxxxx xxxxxxx musí xxxxxxx xxxxxx xxxxxx testování xx xxxxxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx. Při xxxxxxxxx xxxxxxx původce xxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xx příslušný xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx /§76 odst. 1 písm. x) xxx 2. xxxxxx/.

4.4. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx a xxxxxxx, xx kterých se xxxxxxx či xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx x xxxxxx xxxxxxxxxx nakládá, zejména xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x dezinfekce xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x jiných xxxxxxx xxxxxxxx.

4.5. X xxxxxxxxxxxx xxxx, vymezené v xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx možného xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx §5 odst. 1 písm. c), xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx §7 odst. 1 písm. x), xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx území xxxx xx xxxx xxx xxxxxxx vegetačních xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kroužkovitosti:

a) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx techniky po xxxxxxxx sklizně a xxxxxxxxxx očistu x xxxxxxxxxx xxxxx strojů, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx, xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxx musí xxx xxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx /§76 xxxx. 1 písm. x) xxx 2. xxxxxx/;

x) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx rozmnožovacího xxxxxxxxx xxxxxxxx1) xx xxxxxxxxx xxxxxxx bramboru /§76 xxxx. 1 písm. x) xxx 1. xxxxxx/;

x) musí k xxxxxxxxx xxxxxxxx používat xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx1) /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. zákona/.

5. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx

5.1. X karanténním xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx označené za xxxxxxxx původcem xxxxx xxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 xxxx. x) xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podle §5 xxxx. 2 xxxx. x), xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xxxxxx podle §7 xxxx. 1 písm. x), xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx:

5.2.1. xx pozemku xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx hnědé xxxxxxx xxxxx §5 odst. 1 xxxx. x):

x) xxxxx xx xxxx xxxx vegetačních období xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx x jiné rostliny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx její xxxxxx, tj. xxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx x na kterých xx sklizni xxxxxx xxxxxx (např. rostliny xxxxxx x pěstování x xxxxxx, některé xxxxx xxxx Brassica, xxxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx) /§76 xxxx. 1 písm. x) xxx 1. xxxxxx/, x xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx hostitelské xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 2. zákona/

nebo

b) xxxx xxxxx xxxxxxx po xxxxx tři xxxxxxxxx xxxxxx udržovat xxxx xxxxx úhor xxxx xx nich pěstovat xxxxxxxxx, často xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx či xxxxx xx xxxxxx /§76 odst. 1 xxxx. a) xxx 2. xxxxxx/ x x xxxxxxx xxxx xxxxxx xx něm xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx přežití či xxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx, a xxxx xx xx xxx x xxxxxxx těchto xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx rostliny xxxxxx xxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx/;

x) xxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. x) xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pod xxxx. x), ale xxx s podmínkou, xx

- během xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx bylo xx základě xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx ověřeno, xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx rostlin xxxxxxxx, xxxxxxx x jiných xxxxxxxxxxxxx rostlin, xxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxxx, x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx

- xxxx x výsadbě xxxxxx rozmnožovací xxxxxxxx1), x

- xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx ke xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx zpracování, x xxxxxxxx xxx xxxxxxxx brambor xxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxx rotace xxxxxx xxxxxxxxx rostlinolékařskou xxxxxxx x v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx

- xxxx x výsadbě xxxxxx rozmnožovací xxxxxxxx1), x

- xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx zpracování /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. xxxxxx/;

x) smí x xxxxxxx xxxxxx xxxxx písm. b) xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx v prvním xxxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pod xxxx. x), xxx xxx s podmínkou, xx x xxxxxxx xxxxxxxxx brambor

- xxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx materiál1), x

- xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x)xxx 1. xxxxxx/;

x) xxx xx splnění xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rostlinolékařských xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx území podle xxxx 5 x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx brambor xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx-xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx2), který xxx xxxxxx uznán podle xxxxxxxxxx xxxxxx1), x xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx hostitelských xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx informovat xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx výskytu xxxxxxx xxxxx hniloby xxxxx §3 xxxx. 3.

x) xxxxx xxx xxxxxxxxx umělá xxxxxxx xx xxxx pěti xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx potvrzení xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. a) xxx 2. zákona/.

5.2.2. xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx původcem xxxxx xxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 1 písm. x):

x) xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx vegetačním xxxxxx, x xxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx výskyt xxxxxxx hnědé hniloby, xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx x musí xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx rostoucí xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx /§76 odst. 1 písm. a) xxx 2. zákona/;

b) xxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxx xxx let následujících xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx1) /§76 xxxx. 1 xxxx. a) xxx 2. zákona/;

c) xxxx xxxxx xx xxxxxxxx výskytu xx xx xxxx prvého xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bramboru xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx každoročně xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x. 6 xxxxxxx stroje x xxxxxxxxxx xxxxxxxx používané xxx xxxxxxxxx bramboru xxxx xxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 2. xxxxxx/;

x) smí xxxxxxxx xxxxxxx jen xx xxxxxxxxx x pod xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx správy xx předpokladu, xx xx vyloučeno xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 2. xxxxxx/.

5.3. nesmí xxxxxxxxx xxxxxxx hlízy xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx sazečů /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 1. xxxxxx/;

5.4. smí xxxxxxxxxxx xxxx toto xxxxx xxxxx partie xxxxxxxx, xxxxx byly úředním xxxxxxxxxxxx testováním xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx rostlinolékařskou xxxxxxx xxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx zamořené xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x nařízeném xxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 1. zákona/.

Sklizené xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xx místa xxxxxxxx xx území Xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxx bez xxxxxxxxxxx jako konzumní xxxxxxxx xxx přemisťovat xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx partie xxxxxxxxxxx v době xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx příznaků xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx řezu xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

5.5. xxx xxxxxxx rostliny bramboru xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx pokud xxxxx xxxxxxxx úřední xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx orgánem xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx země /§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 1. xxxxxx/;

5.6. xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx nářadí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx, které přišly xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, po xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxx potvrzení xxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx bez řádné xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx uvedeným x příloze x. 6 /§76 odst. 1 písm. x) xxx 2. xxxxxx/;

5.7. Xxx potvrzení původce xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx možná úplná xxxxxx xxxxxxxxxx substrátu (xxxx. xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx či xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x pod.) uživatel xxxxxxx:

x) xxxxx pěstovat xxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, pokud xxxxxxx xxx xxxxxxxxx rostlinolékařské xxxxxx x eradikaci xxxxxxx xxxxx hniloby, xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx x dezinfekce xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx uvedeným x xxxxxxx č. 6 /§76 odst. 1 xxxx. x) bod 2. xxxxxx/;

x) xxxx xxxxx pěstování xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxxxx materiálu získaného x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx /§76 xxxx. 1 písm. x) bod 1. xxxxxx/;

x) xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx bramboru xxxx xxxxxxx jen xx souhlasem xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v karanténním xxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 2. zákona/.

5.8. Xxxxxxxx xxxxx rostoucích xxxxxxx bramboru xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxx 5.2.2. xxxx. x) xxxx uživatel pozemků x tomto xxxxx xxxxxxx rostlinolékařské správě x před xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx hniloby. Xxx xxxxxxxxx výskytu xxxxxxx hnědé hniloby xxx xxxxx testování xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx /§76 xxxx. 1 xxxx. x) xxx 2. zákona/.

5.9. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxx, xx kterých xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx bramboru a xxxxxxx nebo xx x těmito rostlinami xxxxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx očisty a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx využívána x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

5.10. V xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx x místě produkce xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxx rozšíření xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx §5 odst. 1 xxxx. x), rostlinolékařská xxxxxx nařídí podle §7 odst. 1 xxxx. d), xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxx musí xx dobu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx výskytu xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:

x) xxxxxxxx závěrečnou xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx sklizně x xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx strojů, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, třídících xxxxx, xxxxx, palet x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, naskladnění x xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx nové xxxxxxxxxxx xxxxxx /§76 odst. 1 xxxx.x) xxx 2. xxxxxx/;

x) xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx rozmnožovacího xxxxxxxxx1) bramboru od xxxxxxxxx rostlin bramboru /§76 xxxx. 1 xxxx. x) bod 1. zákona/;

c) musí x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx rozmnožovací xxxxxxxx1) /§76 odst. 1 xxxx. x) xxx 1. xxxxxx/.

5.11. X karanténním území, xxxxxxxxx xxxxx §5 xxxx. 2 xxxx. x) xx základě xxxxxxxx xxxxxxxxx vody xx zamořenou původcem xxxxx xxxxxxx xxxx x bezpečnostní zóně xxxxxxxx podle §5 xxxx. 2 písm. x) xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, x případě xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, x xx vzorkováním a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx rostlinolékařskou xxxxxxx;

x) xxxxxxx kontrolu zavlažovacích xxxxxxx x popř. xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zavlažování xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx hnědé xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx;

x) x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx vod xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxxxx x bramborami.

Příloha x. 5 x vyhlášce x. 331/2004 Xx.

Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. x) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle §5 xxxx. 1 xxxx. x)

Xxxxxx x xxxxx zneškodňování xxxxxx xxx průmyslovém xxxxxxxxxx xxxxxx hostitelské xxxxxxxx xxxx xxx x xxxxxxx xx zvláštním xxxxxxx xxxxxxxxx1) Rostlinolékařskou xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx zamořené xxxx pravděpodobně zamořené xxxxxx hostitelské xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx účely xxxxx xxxxxxx č. 4 xxxxxxxx 1 xxxx. x) x odstavce 2 xxxx. x) xxxx xxxxxxxx následující xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxx šíření xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:

1. Xxxxx odpad xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x rostlin rajčete

Vyhozené xxxxx xxxxxxxx, bramborové xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx x jiný xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xx řízené xxxxxxx odpadů x xxxxxxxx převrstveny vhodným xxxxxxxxxx (xxxxxx, xxx' xxxx.). Odpad xxxx xxx xxxxxxxx přímo xx skládku a xxxx xxx xxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxx přitom xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, x nichž xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx zemědělsky xxxxxxxxxx xxxxx xxxx nebo xx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x zavlažování xxxxxxxxxx xxxx;

2. Odpadní xxxx při xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx

Xxxx zneškodněním xx xxxxx xxxxxxx xxxx, xxxxx obsahují xx xxxxxxx pevný xxxxxxxx materiál, přefiltrovat xxxx odvést xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxx vody xxxxxxxxx xxxxxxxxx zbaveny. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx postupem xxxxxxxx xxx xxxxx 1.

Odpadní xxxx je xxx xxxxx

- xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx 70 °X

xxxx

- jinak xxxxxxxxxx způsobem xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxx riziko, xx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx vodními xxxxxx, které xx xxxxx xxx používány x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx; podrobnosti x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx správa xxxxxxxx xxxxxxxx státům x Xxxxxx.

Xxxxxxx č. 6 x xxxxxxxx x. 331/2004 Xx.

Xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xx zamořeni xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx hniloby

1. Xxxxxxxxxx očista xxxxxxx x předmětů a xxxxxxxxx nečistot x xxxxxx

Xxxxxxx xxxxx nečistoty, xxxxxx xxxxxxx a xxxx se xxxxxxxxx (xxxxxxxx, vysátím xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx strojů x xxxxxxxx stlačeným xxxxxxxx) x zavezou xx xxxxxxx xxxxxx1). Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vhodné materiál xxxxxx asanovat podle xxxx xxxxxxxxx postupu xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxx zeminou prosypat xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx vápnem x xxxxxxxx 5 xx xx 1 x3.

Xxxxxx x místo xxxxxxxxx xxxx být v xxxxxxx se zvláštním xxxxxxx xxxxxxxxx1) a xxxx je schválit xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

2. Mytí x xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx

Xxxxxxxxx aplikaci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx bodu 1 xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxxxx tlakovou xxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx. Poté xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx kroužkovitosti xxxx původci xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx prostředky, xxxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx technologickým xxxxxxxx.

3. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 65 °X xxxx 15 xxxxx xxx teplotě xxxx 80 °X.

X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 80 °X xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 minut. Xxx xxxxxxx xxx 100 °X xxx xxxx xxxxxxxx snížit xx 15 xxxxx.

4. Xxxxxxxxxx zeminy a xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx 120 °X xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxx 70 - 80 °X, xxxx xxxxx x xxxxxx xxxx x xxxxx.

Informace

Právní xxxxxxx č. 331/2004 Xx. nabyl xxxxxxxxx xxxx 31.5.2004.

Ve xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x.:

328/2008 Sb., kterým xx xxxx xxxxxxxx x. 331/2004 Xx., x opatřeních k xxxxxxxxxxx ochrany xxxxx xxxxxxxxx x šíření xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a původce xxxxxxxxxxx hnědé hniloby

s xxxxxxxxx od 2.9.2008

4/2018 Xx., kterým xx xxxx vyhláška x. 331/2004 Sb., o xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx původce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x původce xxxxxxxxxxx xxxxx hniloby, xx xxxxx vyhlášky x. 328/2008 Xx.

x účinností xx 1.2.2018

Právní předpis x. 331/2004 Xx. xxx zrušen právním xxxxxxxxx č. 378/2025 Sb. x xxxxxxxxx xx 1.1.2026.

Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x odkazech není xxxxxxxxxxxxx, pokud xx xxxx xxxxxx derogační xxxxx shora uvedeného xxxxxxxx xxxxxxxx.

1) Směrnice Xxxx 93/85/XXX xx xxx 4. xxxxx 1985 x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx kroužkovitosti xxxxxxxx.
Směrnice Rady 98/57/XX xx dne 20. xxxxxxxx 1998 x xxxxxxx proti Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (Xxxxx) Xxxxxxxx et xx.
Xxxxxxxx Xxxxxx 2006/56/ES xx xxx 12. xxxxxx 2006, kterou xx mění xxxxxxx xxxxxxxx Rady 93/85/EHS.
Xxxxxxxx Komise 2006/63/XX xx dne 14. xxxxxxxx 2006, kterou xx mění xxxxxxx XX xx XXX xxxxxxxx Xxxx 98/57/XX.
2) §2 xxxx. 1 xxxx. x) xxxxxx x. 219/2003 Sb., x xxxxxxx do xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3) §31 xxxx. 2 vyhlášky x. 215/2008 Sb., x xxxxxxxxxx proti xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx rostlin x rostlinných xxxxxxxx.
4) §2 xxxx. 1 xxxx. x) zákona č. 219/2003 Xx., x xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, ve xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Poznámka k xxxxxxx x. 2
1) §2 xxxx. 1 písm. x) xxxxxx x. 219/2003 Xx., x xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x x změně xxxxxxxxx xxxxxx, ve xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Poznámky x xxxxxxx x. 4
1) Zákon č. 86/2002 Sb., x xxxxxxx xxxxxxx x o xxxxx některých xxxxxxx xxxxxx (xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx), ve xxxxx pozdějších xxxxxxxx.
2) §7 xxxx. 4 xxxxxx x. 219/2003 Xx., x xxxxxxx do xxxxx xxxxx x xxxxx pěstovaných xxxxxxx x o xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3) §2 odst. 1 xxxx. b) xxxxxx č. 219/2003 Xx., o uvádění xx oběhu xxxxx x xxxxx pěstovaných xxxxxxx a o xxxxx některých zákonů, xx znění xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
4) §19a zákona x. 408/2000 Xx., x xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxx x o xxxxx xxxxxx č. 92/1996 Xx., o xxxxxxxx, xxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx rostlin, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, (xxxxx o xxxxxxx xxxx x xxxxxxx), xx znění xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
5) §6 xxxxxx x. 219/2003 Xx., x uvádění xx xxxxx xxxxx x sadby xxxxxxxxxxx xxxxxxx a x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6) Příloha č. 4 xxxxxxxx č. 215/2008 Xx., x opatřeních xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx organismů xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
3) Xxxxxxx xx xxxxxx
- xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx;
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, obalů, xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxxxx xxxxx partie xxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxx.
Poznámka k xxxxxxx x. 5 x 6
1) Zákon č. 185/2001 Sb., x xxxxxxxx, xx znění xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2) Xxxxx č. 86/2002 Sb., x ochraně xxxxxxx x o xxxxx některých xxxxxxx xxxxxx (zákon x xxxxxxx ovzduší), xx xxxxx xxxxxxxxxx předpisů.